BRPI1014924B1

BRPI1014924B1 - Hidrogel injetável permitindo uma suplementação em glicerol na pele a longo prazo, seu processo de fabricação e kit

Info

Publication number: BRPI1014924B1
Application number: BRPI1014924-4A
Authority: BR
Inventors: Gavard Molliard Samuel; Vinchon Cyrille
Original assignee: Anteis Sa
Priority date: 2009-05-26
Filing date: 2010-05-14
Publication date: 2018-07-03
Also published as: WO2010136694A2; AU2010252816A1; PL2435101T3; EP2435101B1; WO2010136694A3; FR2945949A1; JP2012527926A; BRPI1014924A2; EP2435101A2; ES2406158T3; US9623150B2; US20120108674A1; AU2010252816B2; FR2945949B1; JP5904936B2

Description

(54) Título: HIDROGEL INJETÁVEL PERMITINDO UMA SUPLEMENTAÇÃO EM GLICEROL NA PELE A LONGO PRAZO, SEU PROCESSO DE FABRICAÇÃO E KIT (51) Int.CI.: A61L 27/20; A61L 27/52 (30) Prioridade Unionista: 26/05/2009 FR 09 53452 (73) Titular(es): ANTEIS SA (72) Inventor(es): SAMUEL GAVARD MOLLIARD; CYRILLE VINCHON

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Relatório Descritivo da Patente de Invenção para HIDROGEL INJETÁVEL PERMITINDO UMA SUPLEMENTAÇÃO EM GLICEROL NA PELE A LONGO PRAZO, SEU PROCESSO DE FABRICAÇÃO E KIT.

A presente invenção refere-se a um hidrogel injetável, permitindo 5 uma suplementação em glicerol na pele a longo prazo.

A invenção refere-se também ao processo e a utilização no domínio da dermatologia do hidrogel mencionado.

O glicerol, molécula endógena, é um tri-hidróxi álcool que tem um papel chave na pele. O glicerol endógeno exerce notadamente um papel maior na hidratação da pele, na elasticidade cutânea e no reparo da barreira epidérmica (Jornal Britânico de Dermatologia, 159 (1): 23-24 julho de 2008, Fluhr, J. W.; Darlenski, R. *; Surber).

As ações benéficas diversas do glicerol sobre a epiderme incluem notadamente a hidratação do stratum corneum (camada mais superficial da pele), a função barreira da pele, as propriedades mecânicas da pele, a proteção contra os estímulos irritantes e a aceleração do processo de cicatrização de feridas (Jornal Britânico de Dermatologia, 159 (1): 23-24 julho de 2008, Fluhr, J. W.; Darlenski, R. *; Surber).

A partir do estado da técnica, sabe-se também que a aplicação tópica de produtos contendo glicerol melhora as propriedades da pele nas doenças caracterizadas por xerosis e por uma barreira epidérmica deteriorada, como é o caso na dermatite atópica.

Além disso, com a idade, observa-se uma diminuição da quantidade de glicerol na pele.

Na base do conjunto desses elementos, deduz-se que uma suplementação em glicerol é benéfica para a pele.

É por isso que numerosos cosméticos possuem glicerol em sua composição. Assim, por uma aplicação uma a duas vezes por dia, a pele se beneficia dos efeitos positivos do glicerol. Todavia, essa solução implica um tratamento tópico diário da pele.

Como a utilização de um cosmético, a injeção na pele de uma solução aquosa de glicerol permite se beneficiar dos efeitos positivos do gliPetição 870180027491, de 05/04/2018, pág. 7/14

2/12 cerol a prazo muito curto. Com efeito, a quase totalidade do glicerol injetado migra rapidamente da zona de injeção para o stratum comeum, depois é eliminada da superfície da pele por lavagem diária. Assim, a ação benéfica do glicerol é apenas pontual (PNAS, 100(12): 7360-7365, junho 2003, Hara, . M.W.; Verkmán, A.S. / Jornal de Investigação Dermatológica, 125: 288-293, 2005, Choi, H.C).

Soluções injetáveis de glicerol, contendo o ácido hialurônico (HA), são descritas na técnica anterior. Essas soluções, por suas características viscoelásticas, parecem permitir uma liberação retardada do glicerol.

Todavia, injetadas na pele, essas soluções não permitindo uma suplementação do glicerol a longo prazo (suplementação em um período de no máximo uma semana). Com efeito, o ácido hialurônico é metabolizado no meio da pele em uma semana (Wenner-Gren International seríes; The Chemistry, biology and medicai applications of hialuronan and its derívatives, Laurent,

T.C.).

Por conseguinte, não existe no estado da técnica um hidrogel injetável que permita uma liberação progressiva e a longo prazo de glicerol na pele.

A invenção tem assim por finalidade propor um novo hidrogel in20 jetável que apresenta numerosas qualidades e que evita uma parte dos inconvenientes mencionados acima.

Para isso, a invenção se refere a um hidrogel injetável compreendendo, em peso, em um fluído veículo fisiologicamente aceitável: 0,01 a 5% de glicerol e 0,1 a 5% de um biopolímero de ácido hialurônico reticulado ou de um de seus sais, em relação ao peso total do hidrogel, caracterizado pelo fato de o ácido hialurônico ou um de seus sais ser reticulado por formação de ligações covalentes entre as cadeias desse biopolímero com o auxílio de moléculas bi- ou polifuncionais, esse hidrogel injetável sendo esterilizado ao calor úmido e apresentando um Tanõ à freqüência de 1 Hz inferior ou igual a 1,10.

O parâmetro Tanõ é um parâmetro reológico usual que se define como a tangente do ângulo de fase, esse ângulo de fase sendo a diferença

3/12 de fase entre o esforço e a deformação quando de um teste reológico oscilatório. A tangente do ângulo de fase permite caracterizar as propriedades viscoelásticas de um gel, notadamente à base de um ácido hialurônico reticulado como foi demonstrado na publicação de Falcone (Journal of biomedical . material Research, pari A. janeiro de 2008, Falcone, S.J.; Berg, R.A.). Para um gel à base de um ácido hialurônico reticulado, o parâmetro Tanõ é verdadetramente a correlacionar com a remanência do gel na pele, isto é, sua presença no nível do local de injeção.

De maneira inteiramente surpreendente, um hidrogel à base de 10 0,01 a 5% de glicerol e de 0,1 a 5% de ácido hialurônico reticulado com formação de ligações covalente, seguida de uma esterilização ao calor úmido, hidrogel possuindo propriedades visco-elásticas, tais que Tanõ à freqüência de 1 Hz é inferior ou igual a 1,10 permite:

- consideravelmente aumentar a duração de liberação do glicerol 15 na pele em relação a um gel à base de glicerol e de ácido hialurônico não reticulado esterilizado ao calor úmido (tipo gel com glicerol descrito na técnica anterior) (ver o exemplo comparativo 2);

- significativamente aumentar a duração de liberação do glicerol na pele em relação a um gel à base de glicerol e de ácido hialurônico reticu20 lado não esterilizado ao calor úmido (ver o exemplo comparativo I);

- significativamente aumentar a remanência, isto é, a presença do gel no nível do local de injeção, em relação a um gel à base de glicerol e de ácido hialurônico reticulado não esterilizado ao calor úmido (ver o exemplo comparativo 1).

Essa quádrupla seleção: reticulação covalente do ácido hialurônico a uma concentração adaptada, presença de glicerol a uma concentração adaptada, esterilização ao calor úmido a uma temperatura suficientemente elevada e obtenção de um gel que possui propriedades viscoelásticas particulares permite obter um hidrogel injetável com glicerol que tem uma remanência de vários meses e uma capacidade de liberação do glicerol na pele em um longo período. Assim, pela combinação das características particulares do hidrogel injetável, de acordo com a invenção, o glicerol é purifi4/12 cado progressivamente fora do gel em um longo período, permitindo assim à pele se beneficiar de uma suplementação em glicerol no decorrer do tempo a longo prazo.

De acordo com a invenção, a concentração em glicerol está 5 . compreendida entre 0,01 a 5% em peso, de preferência, de 0,5% a 2,5% em relação ao peso total do hidrogel. Além de 5% em peso, o hidrogel possui uma Osmolaridade muito elevada, o torna inadaptado para uma injeção da pele.

De acordo com a invenção, a concentração em-ácido hialurônico 10 reticulado ou de um de seus sais está compreendida entre 0,1 e 5% em peso, de preferência, entre 0,5% a 3% em relação ao peso total do hidrogel.

De acordo com a invenção, o hidrogel possui um Tanõ à frequência de 1 Hz é inferior ou igual a 1,10. De preferência, o hidrogel possui um Tanõ à freqüência de 1 Hz é inferior ou igual a 0,80.

De preferência, a massa molecular do ácido hialurônico ou um de seus sais (antes da reticulação) está compreendida entre 1000 Da e 10 x 10⁶ Da, de preferência, 500 000 e 4 x 10⁶ Da.

De acordo com a invenção, a reticulação é feita por moléculas bi- ou polifuncionais escolhidas, por exemplo, dentre os epóxidos, os epi20 halo-hidrinas e a divinil sulfona, sobre o ácido hialurônico não reticulado ou já reticulado com ou sem um ou vários outros poli-sacarídeos de origem natural. Por exemplo, o reticulante utilizado é o butano diol diglicidil éter (BDDE) ou a divinil sulfona (DVS).

De acordo com um modo particular da invenção, o gel pode também compreender outros polímeros biocompatíveis (como os polisacarídeos de origem natural) e/ou outras substâncias farmacologicamente ativas (como a lidocaína, um anestésico local) ou não farmacologicamente ativas (como as vitaminas ou os sais minerais) que têm efeitos positivos sobre o organismo ou sobre o hidrogel.

De acordo com a invenção, esse hidrogel é esterilizado ao calor úmido.

Vantajosamente, a esterilização é feita a uma temperatura supe5/12 rior a 100°C. Preferencialmente, a esterilização é feita a uma temperatura superior ou igual a 121°C.

Por exemplo, um dos seguintes ciclos de esterilização pode ser utilizado: 131°C durante 1 min / 130°C durante 3 min / 125°C durante 7 min / . 1-21 °C durante 20 min ou 121 °C durante 10 min.

A presente invenção tem também por objeto um processo de fabricação de um hidrogel injetável, tal como descrito acima, compreendendo as etapas que consistem em:

a) preparar uma primeira mistura que compreende pelo menos

0,1 a 5% em peso de um biopolímero de ácido hialurônico reticulado ou de um de seus sais por formação de ligações covalentes entre as cadeias desse biopolímero com o auxílio de moléculas bi- ou polifuncionais;

b) acrescentar antes, no decorrer ou depois da reticulação do biopolímero de ácido hialurônico ou de um de seus sais, quando da etapa a),

0,01% a 5% em peso de glicerol, de modo a formar uma mistura homogênea;

c) colocar o gel assim obtido sob a forma pronta para o uso;

d) esterilizar o produto ao calor úmido.

O glicerol pode, com efeito, ser acrescentado no gel à base de 20 ácido hialurônico reticulado no decorrer da fabricação do gel à base de ácido hialurônico reticulado, isto é, na etapa a) antes da ou durante a reticulação do gel à base de ácido hialurônico ou simplesmente ao final da etapa a): após a reticulação do biopolímero.

Quando desse processo de fabricação de um hidrogel injetável, 25 a temperatura de esterilização é superior a 100°C.

De preferência, a esterilização é feita a uma temperatura superior ou igual a 121 °C.

Em particular, quando do processo de fabricação do hidrogel, a esterilização é feita seguindo um dos seguintes ciclos: 131°C durante 1 min /

130°C durante 3 min / 125°C durante 7 min / 121°C durante 20 min ou 121°C durante 10 min.

O gel assim obtido possui características reológicas tais que

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Tanõ à frequência de 1 Hz é inferior ou igual a 1,10 e, preferencialmente, inferior ou igual a 0,80.

Uma finalidade da presente invenção se refere também a um kit que se apresenta sob a forma de seringa e contendo o hidrogel injetável, tal . como descrita acima.

De acordo com uma variante de realização do kit, este pode se apresentar sob a forma de um recipiente ou frasco contendo o hidrogel injetável, de acordo com a invenção, e apto a ser coletado com o auxílio de uma seringa de injeção.

A presente invenção se refere também à utilização de um hidrogel injetável, de acordo com a invenção, ou do kit tal como descrito acima, para melhorar as características químicas, físicas e mecânicas da pele dos mamíferos.

Em particular, a presente invenção se refere também à utilização de um hidrogel injetável mencionado ou do kit tal como descrito antes, para preencher as rugas ou ruguinhas e/ou criar volume e/ou hidratar a pele e/ou relançar a atividade celular epidérmica e/ou manter propriedades mecânicas de firmeza e de elasticidade da pele e/ou manter os estímulos epidérmicos e dérmicos e/ou para estimular a atividade antioxidante da derme e/ou preve20 nir o envelhecimento cutâneo e/ou acelerar o processo de cicatrização das feridas.

A invenção será melhor compreendida e outras finalidades, detalhes, características e vantagens desta aparecerão mais claramente com a leitura da descrição seguinte de exemplos de realização, com referência às figuras anexadas, nas quais:

- a figura 1 representa uma curva, mostrando a percentagem de variação da concentração em glicerol nas camadas superficiais da epiderme de dois géis: gel A (gel que não sofreu esterilização ao calor úmido) e gel B (de acordo com a invenção) no decorrer do tempo em semanas;

- da mesma forma, a figura 2 representa uma curva, mostrando a percentagem de variação da concentração em glicerol nas camadas superficiais da epiderme de dois géis: gel B (de acordo com a invenção) e gel C

7/12 (gel à base de ácido hialurônico não reticulado) no decorrer do tempo em semanas.

Exemplo de realização

Um exemplo de preparo de um hidrogel é proposto a fim de ilus5 . trar a invenção, mas em nenhum caso ele limita o alcance da invenção.

3,5 g de hialuronato de sódio (MM = 2,2.10⁶ Da) são acrescentados em 25 ml de uma solução de NaOH a 1% (m/m). Tudo é deixado em repouso, durante uma hora, depois misturado com espátula durante 10 minutos. A reação de reticulação é então atraída por acréscimo de 263 pl de butano diol diglicidil éter (BDDE) e tudo é misturado com espátula durante 10 minutos. A mistura reacional é introduzida em um banho-maria a 50°C durante duas horas. A mistura é reajustada ao pH fisiológico com o auxílio de HCl 1N. O volume é ajustado a 116 ml com o auxílio de uma solução tamponada com pH = 7.

O gel assim obtido é em seguida dialisado durante 24 horas (celulose regenerada, limite de separação: MM = 60 kDa) contra uma solução tamponada com pH = 7, a fim de eliminar o reticulante residual.

1,7% (m/m) de glicerol é acrescentado no gel à base de ácido hialurônico reticulado, depois a mistura é homogeneizada durante 15 minu20 tos com espátula.

O gel é em seguida introduzido nas seringas de vidro de 1 ml.

A concentração total em hialuronato de sódio é medida em 2,1% (m/m).

A concentração total em glicerol é medida a 1,68% (m/m).

O pH do gel é medido a 7,02 e sua osmolaridade a 308 mOsm/kg.

A medida de biocontaminação inicial é inferior a 10 CFU/g.

A metade das seringas obtidas constitui o hidrogel A.

A outra metade das seringas obtidas é esterilizada ao calor úmi30 do, segundo um ciclo [131°C, 1 minuto]. Essas seringas constituem um hidrogel B, segundo a invenção.

As propriedades reológicas dos hidrogéis são estudadas com o

8/12 auxílio de um reômetro AR1000 (TA instrumentos) com uma geometria plana de 40 mm, um entreferro de 100 μ e uma temperatura de análise de 25°C.

Para o hidrogel A o valor medido do parâmetro viscoelástico

Tanõ (a 1 Hz) é igual a 0,51.

. . Para o hidrogel Β, o valor medido do parâmetro viscoelástico

Tanõ (a 1 Hz) é igual a 0,67.

Teste comparativo 1 entre o hidrogel A e o hidrogel B (de acordo com a invenção) do exemplo acima.

Testes in vivo sobre coelho.

Sobre um mesmo coelho, quatro injeções intradérmicas calibradas de 0,2 ml do hidrogel A e quatro injeções intradérmicas calibradas de 0,2 ml do hidrogel B (hidrogel, de acordo com a invenção) foram efetuadas.

A t = 0, constata-se a presença de uma pápula no nível de cada local da injeção, prova da presença do gel sobre o local injetado. O diâ15 metro de cada pápula é medido com o auxílio de uma base com deslize, depois a superfície média inicial de uma pápula é calculada para o hidrogel A e para o hidrogel B.

A t = 3 meses, constata-se sempre a presença da totalidade dessas pápulas para os dois tipos de hidrogéis injetáveis (as pápulas têm uma superfície média superior a % da superfície média inicial das quatro pápulas do hidrogel A ou das 4 pápulas do hidrogel B).

A t = 6 meses, constata-se que as pápulas formadas com o hidrogel B, de acordo com a invenção, estão ainda presentes (as pápulas têm uma superfície média superior a % da superfície média inicial das 4 pápulas do hidrogel B), enquanto que as pápulas obtidas com o hidrogel A não são quase mais visíveis (as pápulas têm uma superfície média inferior a % da superfície média inicial das 4 pápulas do hidrogel A).

O hidrogel B, de acordo com a invenção, possui, portanto, uma remanência significativamente superior àquela do hidrogel A.

Por outro lado, uma medida da concentração em glicerol nas camadas superficiais do coelho, no nível de cada pápula obtida, foi efetuada uma vez por semana durante no máximo 10 semanas. Para cada gel estu9/12 dado e para cada tempo estudado, uma média das concentrações em glicerol dosadas é calculada. As evoluções da concentração em glicerol dosada no decorrer do tempo para o hidrogel A e para o hidrogel B são comparadas (ver figurai).

. Constata-se uma cinética de liberação do glicerol na pele mais rápida para o hidrogel A do que para o hidrogel B, de acordo com a invenção. ·

Teste comparativo 2 entre o hidrogel B (de acordo com a invenção) do exemplo acima e um hidrogel à base de ácido hialurônico não reticulado e de glicerol, esterilizado no calor úmido (hidrogel C descrito abaixo:

Seja um gel constituído de 1,7% (m/m) de glicerol e de 2,1% (m/m) de ácido hialurônico não reticulado (MM = 2,2.10⁶ Da) em uma solução tamponada com pH = 7. Após enchimento em seringas de vidro de 1 ml, o gel é esterilizado ao calor úmido segundo um ciclo [131°C, 1 minuto]. Es15 sas seringas constituem o hidrogel C.

As propriedades reológicas do hidrogel C são estudadas com o auxílio de um reômetro AR1000 (TA instrumetos) com uma geometria plana de 40 mm, um entreferro de 1000 mícrons e uma temperatura de análise de 25°C.

Para o hidrogel C, o valor medido do parâmetro viscoelástico

Tanõ (a 1 Hz) é igual a 0,64.

Testes in vivo em coelho

Em um mesmo coelho que para o teste comparativo precedente, quatro injeções intradérmicas calibradas de 0,2 ml do hidrogel C foram fei25 tas.

A t = 0, constata-se a presença de uma pápula no nível de cada local de injeção, prova da presença do gel sobre local injetado. O diâmetro de cada pápula é medido com o auxílio de uma base com deslize, depois a superfície média inicial de uma pápula é calculada para o hidrogel C.

A t = 1 semana, constata-se que as pápulas obtidas com hidrogel C não são quase mais visíveis (as pápulas têm uma superfície média inferior a % da superfície média inicial das 4 pápulas do hidrogel C).

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A t = 2 semanas, constata-se que a totalidade das pápulas obtidas com o hidrogel C não são mais visíveis.

O hidrogel B, de acordo com a invenção, possui, portanto, uma remanência consideravelmente superior àquela do hidrogel C.

. . Por outro lado, uma medida da concentração em glicerol nas camadas superficiais da epiderme do coelho, no nível de cada pápula obtida, foi efetuada após 1, 2, 3, e 4 semanas. Para cada tempo estudado, uma média das concentrações em glicerol dosadas é calculada. As evoluções da concentração em glicerol dosada no decorrer do tempo para o hidrogel C e para o hidrogel B são comparadas (ver figura 2).

Constata-se uma cinética de liberação do glicerol na pele consideravelmente mais rápida para o hidrogel C do que para o hidrogel B, segundo a invenção.

Constata-se assim uma verdadeira sinergia entre o ácido hialu15 rônico reticulado e o glicerol, após esterilização ao calor úmido na formulação, segundo a invenção. A presença de glicerol na formulação, de acordo com a invenção, permite aumentar significativamente sua remanência, isto é, o tempo de permanência do gel no nível do local de injeção, e, portanto, por conseguinte, permite aumentar também a liberação do glicerol na pele no decorrer do tempo.

Assim, o gel à base de glicerol e de ácido hialurônico reticulado por formação de ligações covalentes que sofreram uma esterilização ao calor úmido e possuindo propriedades viscoelásticas, tanto que Tanõ a frequência de 1 Hz é inferior ou igual a 1,10 permite uma liberação progressiva e sobre o longo prazo de glicerol na pele. O glicerol e o ácido hialurônico reticulado agem em sinergia, quando são associados, segundo a presente invenção. Isto pode se explicar pelo fato de a esterilização ao calor úmido, nas condições da invenção, permitir uma ativação térmica do glicerol e/ou do ácido hialurônico reticulado, o que permitiría melhor afinidade HA reticulado30 glicerol e, por conseguinte, uma liberação sobre o mais longo prazo do glicerol na pele (em relação a um gel não esterilizado ao calor úmido).

É importante precisar colocar claramente em evidência a perti11/12 nência da invenção:

- que um gel à base de ácido hialurônico (não reticulado) com glicerol, esterilizado ao calor úmido (tipo de gel descrito na técnica anterior),não permite assegurar uma liberação do glicerol na pele no longo prazo, sua duração de liberação é com efeito inferior a aproximadamente 1 semana;

- que um gel à base de ácido hialurônico reticulado, de maneira covalente com glicerol, não esterilizado ao calor úmido, não permite obter resultados equivalentes à formulação, de acordo com a invenção (duração de liberação do glicerol na pele significativamente mais curta);

_t - que um gel à base de ácido hialurônico reticulado, de maneira covalente com glicerol, possuindo propriedades reológicas, tais que Tanõ à freqüência de 1 Hz é superior a 1,10 não possui um caráter visco-elástico adaptado e/ou uma remanência suficiente para se obterem resultados equi15 valentes à formulação, de acordo com a invenção. A duração de liberação do glicerol na pele é, com efeito, significativamente mais curto.

É importante também precisar que esses elementos não podiam ser deduzidos pelo técnico no assunto.

Com efeito, o técnico no assunto sabe que a reticulação de um gel à base de ácido hialurônico permite aumentar a remanência desse gel na pele. Todavia, considerando-se a baixa massa molecular do glicerol (MM = 92 g/mol) e da baixa concentração em ácido hialurônico no gel (concentração inferior a 5% em peso), o técnico pode facilmente supor que a molécula de glicerol vai facilmente migrar no meio do gel (volume estérico do gel indu25 zido pelo ácido hialurônico insuficiente para prender o glicerol no gel) e, por conseguinte, que o glicerol vai rapidamente ser liberado na pele. O técnico pode também facilmente supor que a reticulação do ácido hialurônico vai modificar pouco a cinética de liberação do glicerol na pele em relação a um gel à base de ácido hialurônico não reticulado, pois a pontagem das cadeias de ácido hialurônico não gera um aumento considerável do volume estérico no meio do gel.

Em outros termos, o técnico no assunto não podia pressagiar

12/12 que a combinação [glicerol + ácido hialurônico reticulado por formação de ligações covalentes + esterilização ao calor úmido + propriedades viscoelásticas particulares] permitiría uma liberação progressiva do glicerol na pele em longo prazo.

. Embora a invenção tenha sido descrita com relação a um modo particular de realização, é evidente que ela não está ilimitada e que ela compreende todos os equivalentes técnicos dos meios descritos, assim como suas combinações, caso estas entrem no âmbito da invenção.

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Claims

REIVINDICAÇÕES

1. Hidrogel injetável compreendendo, em peso, em um fluído veículo fisiologicamente aceitável: 0,01 a 5% de glicerol e 0,1 a 5% de um biopolímero de ácido hialurônico reticulado ou de um de seus sais, em

5 relação ao peso total do hidrogel, caracterizado pelo fato de o ácido hialurônico ou um de seus sais ser reticulado por formação de ligações covalentes entre as cadeias desse biopolímero com o auxílio de moléculas bi- ou polifuncionais, esse hidrogel injetável sendo esterilizado ao calor úmido e apresentando um Tanõ à frequência de 1 Hz inferior ou igual a 1,10.

10 2. Hidrogel injetável, de acordo com a reivindicação 1, caracterizado pelo fato de que o glicerol está presente a uma concentração em peso que vai de 0,5 a 2,5% em relação ao peso total do hidrogel.

3. Hidrogel injetável, de acordo com a reivindicação 1 ou 2, caracterizado pelo fato de que o ácido hialurônico ou um de seus sais está

15 presente a uma concentração em peso que vai de 0,5 a 3% em relação ao peso total do hidrogel.

4. Hidrogel injetável, de acordo com uma das reivindicações 1 a

3, caracterizado pelo fato de que o parâmetro Tanõ à frequência de 1 Hz é inferior ou igual a 0,80.

20 5. Hidrogel injetável, de acordo com uma das reivindicações 1 a

4, caracterizado pelo fato de que a massa molecular do ácido hialurônico ou de um de seus sais está compreendida entre 1000 Da e 10 x 10⁶ Da, de preferência, 500 000 e 4 x 10⁶ Da.

6. Hidrogel injetável, de acordo com uma das reivindicações 1 a

25 5, caracterizado pelo fato de que a reticulação é feita por moléculas bi- ou polifuncionais escolhidas, por exemplo, dentre os epóxidos, os epi-halohidrinas e a divinil sulfona, sobre o ácido hialurônico não reticulado ou já reticulado com ou sem um ou vários outros poli-sacarídeos de origem natural. Por exemplo, o reticulante utilizado pode ser o butanodiol diglicidil

30 éter (BDDE) ou a divinil sulfona (DVS).

7. Hidrogel injetável, de acordo com uma das reivindicações 1 a 6, caracterizado pelo fato de o gel compreender pelo menos um outro

Petição 870180027491, de 05/04/2018, pág. 8/14
2/3 polímero biocompatível e/ou pelo menos uma substância farmacologicamente ativa e/ou pelo menos uma substância não farmacologicamente ativa que tem efeitos positivos sobre o organismo ou sobre o hidrogel.

5 8. Processo de fabricação de um hidrogel injetável, caracterizado pelo fato de que compreende as seguintes etapas:

a) preparar uma primeira mistura que compreende pelo menos 0,1 a 5% em peso de um biopolímero do ácido hialurônico reticulado ou de um de seus sais por formação de ligações covalentes entre as cadeias

10 desse biopolímero com o auxílio de moléculas bi- ou polifuncionais;

b) acrescentar antes, no decorrer ou depois da reticulação do biopolímero de ácido hialurônico ou de um de seus sais, quando da etapa a), 0,01% a 5% em peso de glicerol, de modo a formar uma mistura homogênea;

15 c) colocar o gel assim obtido sob a forma pronta para o uso;

d) esterilizar o produto ao calor úmido.

9. Processo de fabricação de um hidrogel injetável, de acordo com a reivindicação 8, caracterizado pelo fato de que a temperatura de esterilização é superior a 100°C.

20 10. Processo de fabricação de um hidrogel injetável, de acordo com a reivindicação 8 ou 9, caracterizado pelo fato de que a esterilização é feita a uma temperatura superior ou igual a 121°C.

11. Processo de fabricação de um hidrogel injetável, de acordo com qualquer uma das reivindicações 8 a 10, caracterizado pelo fato de que

25 a esterilização é feita, seguindo-se um dos seguintes ciclos: 131°C durante 1 min / 130°C durante 3 min / 125°C durante 7 min / 1 21°C durante 20 min ou 121°C durante 10 min.

12. Processo de fabricação de um hidrogel injetável, de acordo com qualquer uma das reivindicações 8 a 11, caracterizado pelo fato de que

30 o gel obtido possui um Tanõ a frequência de 1 Hz inferior ou igual a 1,10, preferencialmente inferior ou igual a 0,80.

13. Kit, caracterizado pelo fato de que se apresenta sob a forma

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3/3 de seringa e contendo o hidrogel injetável, como definido em qualquer uma das reivindicações 1 a 7.

14. Kit, caracterizado pelo fato de que se apresenta sob a forma de um recipiente ou frasco e contendo o hidrogel injetável, como definido em
5 qualquer uma das reivindicações 1 a 7, e apto a coletá-lo com o auxílio de uma seringa de injeção.

15. Hidrogel injetável, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 7, ou kit, de acordo com qualquer uma das reivindicações 13 a 14, caracterizado pelo fato de que é aplicado para melhorar as
10 características químicas, físicas e mecânicas da pele de mamíferos.

16. Hidrogel injetável, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 7, ou kit, de acordo com qualquer uma das reivindicações 13 a 14, caracterizado pelo fato de que é aplicado para preencher as rugas ou ruguinhas e/ou criar volume e/ou hidratar a pele e/ou relançar a atividade
15 celular epidérmica e/ou manter propriedades mecânicas de firmeza e de elasticidade da pele e/ou manter os estímulo epidérmico e dérmico e/ou para estimular a atividade antioxidante da derme e/ou prevenir o envelhecimento cutâneo e/ou acelerar o processo de cicatrização das feridas.

Petição 870180027491, de 05/04/2018, pág. 10/14

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