BRPI0814725B1

BRPI0814725B1 - Uso da composição antiviral

Info

Publication number: BRPI0814725B1
Application number: BRPI0814725-6A
Authority: BR
Inventors: Kalyana Sundram; Mohd Basri bin Wahid; Ravigadevi Sambanthamurthi; Yew Ali Tan
Original assignee: Malaysian Palm Oil Board
Priority date: 2007-07-23
Filing date: 2008-07-23
Publication date: 2021-05-11
Also published as: BRPI0814725B8; CN101815516B; US20100278943A1; BRPI0814725A2; WO2009014417A3; CN101815516A; US10130672B2; WO2009014417A2; EP2182937A4; MY184667A; US20130131158A1; EP2182937A2; EP2182937B1

Abstract

composição antiviral, refere-se à composição enriquecida com, mas não limitada a, antioxidantes fenólicos obtidos do óleo de palma, e, mais especificamente, a presente invenção refere-se à composição que aumenta a imunidade em geral e, mais importante, contra as infecções relacionadas pelo vírus da imunodeficiência humana (hiv) e hcv. conseqüentemente, a composição que contém os ditos compostos do óleo de palma pode inibir eficazmente vários vírus, fornecendo mais uma prova de que os compostos do óleo de palma são um dos fármacos antivirais de amplo espectro.

Description

CAMPO DA INVENÇÃO

[001] A presente invenção refere-se ao uso de uma composição enriquecida com, mas não limitada a, antioxidantes fenólicos obtidos de um extrato botânico da solução vegetal concentrada do óleo de palma obtido por trituração, e mais especificamente, a presente invenção refere-se a uma composição usada para fortalecer a imunidade em geral e, mais importante, contra as infecções relacionadas ao Vírus de lmunodeficiência Humana (HIV).

ANTECEDENTES DA INVENÇÃO

[002] Durante a década passada, as pesquisa científicas produziram um número crescente de provas de que os extratos crus de plantas podem proporcionar moléculas para fármacos destinados ao tratamento de uma variedade de doenças críticas. Conseqüentemente, muito progresso foi feito nessa direção a fim de determinar e, portanto, proporcionar uma solução de origem natural para doenças. Em plantas, os fenólicos e flavonóides são os produtos mais abundantes e ubíquos do metabolismo secundário das plantas. Em condições normais, os mesmos são frequentemente utilizados pelas plantas como mecanismo de defesa contra a predação pelos animais. Além disso, os estudos recentes começaram a examinar e elevar o papel da agricultura no contexto de aumento da imunidade contra doenças.

[003] Uma de tais doenças numerosas que pode ser considerada como o maior desafio no campo da ciência médica é o AIDS o qual, conforme se sabe de modo geral, é causado pelo vírus HIV (Vírus da lmunodeficiência Humana), que provoca distúrbios no sistema imunológico. Evidentemente, muitos perderam suas vidas a esta doença. Atualmente, grandes pesquisas foram realizadas para determinar fármacos adequados para o tratamento da AIDS. Naturalmente, os fármacos derivados de plantas que compreendem fenólicos e antioxidantes são uma das categorias de medicamentos mais utilizados e, portanto, considerados na possibilidade de tratamento da AIDS.

[004] O vírus HIV que causa a AIDS pertence ao grupo dos retrovírus dos vírus. Os retrovírus são comuns na natureza e podem ser classificados de acordo com as propriedades biológicas, morfológicas e tamanho do genoma. Os retrovírus são caracterizados pela presença da enzima transcriptase reversa nos vírions. A transcriptase reversa é necessária para o tipo único de multiplicação dos retrovírus. Após entrar na célula, o ARN viral não revestido é transcrito para o ADN de duas cadeias, o qual, então, é incorporado ao ADN da célula hospedeira como provírus. A transcriptase reversa é necessária para a síntese do ADN proviral inicial e, portanto, é o alvo primário da terapia antiretroviral, inclusive a AIDS.

[005] A arte anterior, cujos objetivos são semelhantes, compreende composições ayurvédicas que incluem as quantidades pré-determinadas dos extratos de plantas e composições que consistem de urna combinação de plantas e ervas medicinais conhecidas, por exemplo, ginseng, Radix Astragali e semelhantes. Além disso, outras soluções compreendem os compostos farmaceuticamente ativos que possuem inibidores.

[006] Apesar disso, na arte anterior, frequentemente, quando os inibidores são os compostos principais, há circunstâncias em que os vírus desenvolvem a resistência contra esses inibidores e, portanto, derrotam o propósito dos compostos em si, o que pode ser considerado como a desvantagem principal no uso de inibidores para interromper a propagação do dito vírus.

[007] O exemplo da composição relativa ao tratamento da AIDS é revelado na United States Patent Number 5529778 - Composição Ayurvédica para Prevenção e Tratamento da AIDS, gripe, tuberculose e outras Deficiências Imunológicas e o Processo de Preparação da Mesma (Surendra Ruhatgi et ai.), que sugere a composição que contém os isolados e extratos de uma variedade de ervas, sendo que as ditas ervas compreendem Phyllantus niruri, Tinosfora cordifolia, phyllantus emblica, Terrninalia beleria e Terminalia cherbulia. Conseqüentemente, a dita composição estimula as funções fisiológicas do corpo no tratamento da AIDS. É evidente que o composto essencial da presente invenção é os extratos ou isolados da multiplicidade de ervas que é diferente dos compostos essenciais da presente invenção.

[008] Além disso, numerosos esforços foram feitos e pesquisas conduzidas para obter os fármacos antivirais eficazes de amplo espectro. Porém, nenhum fármaco antiviral foi desenvolvido com sucesso para tratamento de infecções virais mistas, que também seja não tóxico. Considerando o efeito temível de infecções virais mistas que levam à AIDS, se faz necessário o desenvolvimento de fármacos antivirais eficazes de amplo espectro, não tóxicos.

[009] Quanto aos derivados vegetais, os estudos anteriores revelaram que os óleos de coco podem proporcionar a função significante de efeitos antivirais. De acordo com a sua revelação, o conteúdo do ácido láurico que é transformado em monolaurino no corpo humano ou animal pode proporcionar a habilidade de eliminar os vírus, inclusive HIV, herpes, citomegalovírus, gripe e uma variedade de bactérias patogênicas.

[010] Mais um exemplo importante de uma planta que possui as propriedades extremamente benéficas para a saúde é a palmeira. O óleo de palma contém os compostos que podem ser considerados altamente eficazes no tratamento de várias doenças. Recentes descobertas relativas às propriedades benéficas dos fenólicos e antioxidantes para a saúde os quais são encontrados, principalmente, no óleo de palma, incluem a provisão do tratamento do câncer e eliminação dos problemas de pele.

[011] A presente invenção proporciona uma nova abordagem ao uso do óleo de palma, especialmente, ao tratamento da AIDS, usando a composição que aumenta a imunidade contra a infecção pelo HIV.

[012] Conseqüentemente, o objetivo primário da presente invenção é proporcionar uma composição baseada no extrato botânico da solução vegetal concentrada do óleo de palma obtida por trituração, a fim de aumentar a imunidade contra a infecção pelo vírus HIV e, portanto, proporcionar o tratamento da AIDS.

[013] Portanto, o outro objetivo da presente invenção é proporcionar uma composição aperfeiçoada e o método para a produção da composição antiviral de amplo espectro que não seja tóxica.

[014] Mais um objetivo da presente invenção é proporcionar a composição aperfeiçoada e a formulação para a produção da composição que contém antioxidantes e fenólicos obtidos do óleo de palma, livre de reações adversas de fármacos quimicamente preparados no paciente que os usa.

[015] Mais um objetivo da presente invenção é proporcionar a composição e a formulação para a produção da composição que contém, mas não é limitada a, antioxidantes e fenólicos do extrato vegetal da solução concentrada vegetal do óleo de palma obtido por trituração que possui efeitos antivirais.

RESUMO DA INVENÇÃO

[016] A presente invenção refere-se ao uso de uma composição antiviral que compreende os antioxidantes extraídos da solução vegetal concentrada do óleo de palma obtido por trituração e inibe as infecções pelo HIV.

[017] A composição da presente invenção pode ser proporcionada com veículos farmaceuticamente aceitáveis.

[018] As terapias combinatórias que envolvem inibidores da protease do HIV e inibidores da transcriptase reversa do HIV são a pedra angular das terapias atualmente recomendadas para infecções pelo HIV. De acordo com uma modalidade da presente invenção, o extrato botânico da solução vegetal concentrada obtido do óleo de palma por trituração assim como suas frações purificadas possuem uma ação inibitória potente contra a protease do HIV e a transcriptase reversa assim como contra a protease da Hepatite C (HCV).

[019] Além disso, a presente invenção refere-se ao uso da quantidade terapeuticamente eficaz da composição na preparação do medicamento, a fim de aumentar a imunidade e para inibir as infecções pelo HIV e pelo HVC no paciente, em que a composição pode ser administrada por via oral ou como suplemento ou junto com aditivos.

[020] O termo "fenólicos"refere-se a uma classe de compostos agrupados conforme sua estrutura química, que, nesta invenção, são extraídos da solução vegetal concentrada do óleo de palma obtido por trituração.

[021] O termo "flavonóides"refere-se a substâncias químicas que ocorrem naturalmente em plantas, que, nesta invenção, são extraídas da solução vegetal concentrada do óleo de palma obtido por trituração.

DESCRIÇÃO DETALHADA DA PRESENTE INVENÇÃO

[022] Conforme mencionado acima, a presente invenção proporciona o uso de uma composição baseada em, mas não restringida a, antioxidantes e fenólicos obtidos a partir da solução vegetal concentrada do óleo de palma obtido por trituração, que aumenta a imunidade contra a infecção pelo vírus HIV e, portanto, pode ser usada no tratamento da AIDS.

[023] Conseqüentemente, o objetivo da presente invenção é proporcionar urna composição antiviral de amplo espectro que compreenda, mas não se limite a, antioxidantes e fenólicos obtidos a partir da solução vegetal concentrada do óleo de palma obtido por trituração. Basicamente, a composição compreende antioxidantes, ácidos fenólicos e flavonóides, e a dita composição é usada em fármacos a fim de proporcionar imunidade contra e, portanto, no tratamento de infecções virais mistas.

[024] A preparação das formulações da composição de acordo com a presente invenção é descrita em detalhes mediante os exemplos de experiências. No entanto, a presente invenção não se limita a esses exemplos.

METODOLOGIA E MODELOS DE ENSAIOS EXTRAÇÃO

[025] De acordo com a modalidade preferida da presente invenção, o método e a preparação da composição antiviral compreendem os passos de isolação dos compostos principais. Os compostos principais ou o extrato da composição da presente invenção podem ser preparados de várias maneiras adequadas que, porém, não devem ser consideradas como as que limitam o escopo da invenção, mas apenas como meramente ilustrativas. Os extratos isolados compreendem de modo geral compostos fenólicos, ácidos de frutas, açúcares de frutas e glicerol obtidos da solução vegetal concentrada do óleo de palma obtido por trituração e as formulações preparadas que contêm esses extratos. Os métodos de isolação incluem, mas não se limitam a, filtração, destilação, cristalização e cromatografia rápida. A exigência principal à isolação é que as amostras devem ser altamente puras e concentradas. O método de isolação preferido de acordo com a presente invenção é filtração por membrana, usando peneiras moleculares separadas. O filtrado resultante (extrato botânico) é separado mais uma vez, utilizando a cromatografia rápida.

[026] O dito método de isolação pode consistir de extração do produto do óleo de palma cru com a taxa de produção pré-determinada.

[027] Os extratos biologicamente ativos da solução vegetal concentrada de palma utilizada nesta invenção podem ser preparados por qualquer meio capaz de extrair compostos fenólicos da solução vegetal concentrada, usando as técnicas de extração padrão ou técnicas conforme descrito na US Patent Application No. 20030031740 (Sambanthamurthi, Tan e Sundram 2004). Tais extrações incluem, mas não se limitam a, etanol, metanol, acetona, acetato de etila e butanol.

[028] Além do uso direto do extrato, também é possível usar frações diferentes dos compostos fenólicos do óleo de palma. O que constitui a quantidade eficaz do extrato ou de sua parte ativa dependerá da pureza do extrato.

[029] De acordo com a presente invenção e com o propósito de comparação, os extratos são preparados, de preferência, em forma líquida e seca, conforme demonstrado na Figura 2 da presente invenção.

METODOLOGIAS METODOLOGIA DE CROMATOGRAFIA RÁPIDA

[030] O extrato botânico da solução vegetal concentrada do óleo de palma obtido por trituração, conforme descrito na US Patent Application No. 20030031740 (Sambanthamurthi, Tan e Sundram 2004), foi parcialmente purificado usando a cromatografia rápida e cromatografia líquida prepatória a alta pressão, usando, entre outros, o Sistema Avançado de Purificação de Proteínas adquirido da Waters, USA. O extrato foi injetado na coluna e, então, eluído com o gradiente de metanol, com variação de 0% a 100%. Os compostos fenólicos foram aluídos de acordo com sua solubilidade em metanol.

[031] As amostras das frações diferentes acumuladas foram concentradas, usando o concentrador a vácuo (Oiigo Prep modelo OP120 adquirido da Savant, USA).

MÉTODO DETALHADO DE CROMATOGRAFIA RÁPIDA

[032] Quatro ml do extrato foram injetados na coluna cromatográfica rápida (C18; 20 g/10 ml adquiridos da Jones Chromatography, USA). A taxa de fluxo foi ajustada para 5 ml/min. A coluna foi eluída com água durante 5 minutos. Então, o gradiente linear de metanol (0-1 00%) foi aplicado durante 25 minutos. A coluna foi eluída durante mais 5 minutos com etanol de 100% para garantir a remoção completa da amostra da coluna. Os eluados foram coletados e levados para tubos de ensaio (2,5 mL em cada tubo de ensaio) e examinados quanto ao conteúdo fenólico. O contéudo fenólico nas amostras foi expresso em xg do equivalente de ácido gálico (GAE) por mL da amostra ou em partes por milhão (ppm) do GAE. Os eluados foram agrupados em quatro frações, conforme demonstrado na Figura 1.

Metodologia Ensaio de Transcriptase Reversa: Determinação do Inibidor

[033] O sistema de ensaio preferido para a análise da atividade de replicação do vírus da imunodeficiência humana (HIV) em relação à partícula associada de acordo com a presente invenção é o sistema de Transcriptase Reversa. De acordo com os estudos no campo relevante, a atividade viral pode ser determinada mediante o Ensaio de Transcriptase Reversa. Assim, a inibição da transcriptase reversa é indicativa da atividade antiviral e, mais especificamente, da atividade contra o HIV quando a tarnscriptase reversa do HIV é usada no ensaio.

[034] Dois Kits comerciais diferentes de Transcriptase Reversa foram usados para confirmar as propriedades contra o HIV do extrato botânico da solução vegetal concentrada do óleo de palma obtido por trituração.

Ensaio de Transcriptase Reversa RocheT, Colorimétrico

[035] O ensaio imunológico colorimétrico de enzimas determina quantitativamente a atividade da transcriptase reversa antiviral mediante a incorporação de dUTP marcado com digoxigenina e biotina ao ADN. O Ensaio de Transcriptase Reversa, Colorimétrico faz uso da habilidade da transcriptase reversa de sintetizar o ADN, começando com o poli híbrido (A) de molde/iniciador x oligo(dT)15. Os nucleotídeos marcados com digoxigenina e biotina a uma razão otimizada são incorporados em uma e a mesma molécula do ADN que é recém sintetizado pela TR. A detecção e quantificação do ADN sintetizado como o parâmetro para a atividade da TR segue o protocolo do teste ELISA sanduíche: o ADN marcado com biotina se liga à superfície dos módulos da placa do microfiltro (MTP) que foi previamente revestida com estreptavidina.

[036] No próximo passo, um anticorpo para digoxigenina, conjugado com a peroxidase (anti-DIG-POD), se liga ao ADN marcada com a digoxigenina. No passo final, adiciona-se o ABTS, substrato da peroxidase. A enzima da peroxidase catalisa a clivagem do substrato, produzindo um produto colorido de reação. A absorbância das amostras pode ser determinada, usando o leitor da placa de titulação (ELISA) e é diretamente correlacionada ao nível da atividade da TR na amostra. Para a quantificação do efeito inibitório do extrato botânico, a transcriptase reversa, recombinante do HIV-1, foi usada em conjunto com o Ensaio de Transcriptase Reversa, Colorimétrica. O ensaio foi realizado de acordo com as instruções do fabricante. (Cat. No. 1 468 120)

[037] Conseqüentemente, o extrato foi preparado em várias concentrações em ambas as formas, tanto aquosa como seca. As quatro frações da cromatografia rápida também foram preparadas nas concentrações variáveis. Em relação à Figura 2 da presente invenção, ambos os extratos aquoso e secado demonstraram a ação inibitória significante contra a transcriptase reversa do HIV-1. A atividade dependia da dose em ambos os extratos aquoso e secado a 1500 ppm do equivalente de ácido gálico, demonstrando mais de 90% de inibição da atividade conforme observado na redução da absorbância nessas concentrações.

[038] A ação inibitória das quatro frações da cromatografia rápida é demonstrada na Figura 3. As Frações 3 e 4 demonstraram o efeito inibitório mais alto. Estas frações possuem o teor mais alto de cinamatos e catequina. A Fração 2 que é rica em ácido p-hidroxibenzóico também demonstrou o efeito inibitório significante. O efeito inibitório do extrato do óleo de palma foi comparado com os outros extratos fenólicos como extratos de sementes de uva e vinagreira (GSE). Os resultados são demonstrados na Figura 4. O extrato de sementes de uva não teve efeito inibitório algum sobre a atividade da transcriptase reversa. Porém, a vinagreira demonstrou a atividade a 2000 ppm do equivalente de ácido gálico.

Fig.2: Atividade da Transcriptase Reversa em Várias Concentrações do Extrato Botânico da Solução Concentrada do Óleo de Palma Obtido por Trituração com relação ao Equivalente do Ácido Gálico.

Fig.3: Atividade da Transcriptase Reversa de Várias Frações dos Extratos ricos em Fenólicos do Óleo de Palma.

Fig.4: Atividade da Transcriptase Reversa com Extratos do Óleo de Palma e outros Extratos Fenólicos

Kit de Ensaio de Transcriptase Reversa de Sondas Moleculares EnzChek R (E- 22064)

[039] O Ensaio de Transcriptase Reversa de Sondas Moleculares EnzChek R usa o reagente de quantificação do dsADN de Pico Verde que detecta de modo preferencial o dsADN ou heteroduplexos do ARN-ADN sobre os ácidos nucléicos de uma cadeia só ou nucleotídeos livres. Neste ensaio a transcriptase reversa gera heteroduplexos longos de ARN-ADN a partir de uma mistura de um molde de poli (A) comprido, o iniciador oligo-dT e DTTP. Então, os heteroduplexos formados de ARN-ADN são detectados pelo reagente de Pico Verde. Para determinar a atividade inibitória contra a atividade da transcriptase reversa, uma quantidade estabelecida de transcriptase reversa é incorporada ao ensaio e a redução da atividade-quantificada. O protocolo detalhado da experiência foi realizado de acordo com as instruções do fabricante.

Fig. 5: Atividade da Transcriptase Reversa em Várias Concentrações dos Extratos do Óleo de Palma.

[040] Os resultados desse método demonstraram mais uma vez a ação inibitória potente contra a atividade da transcriptase reversa. Com 1.000 ppm do equivalente de ácido gálico, a atividade da transcriptase reversa foi quase inibida. Mesmo com as concentrações baixas de até 250 ppm, a inibição da atividade de transcriptase reversa foi de cerca de 80%.

[041] Nos sistemas virais, as proteases são enzimas que ajudam na maturação das outras proteínas virais, tornando-as funcionais. Por exemplo, sem funcionamento da protease, o HIV não amadurecerá de modo adequado e, portanto, não poderá fazer cópias de si mesmo e infetar outras células. Isso também vale para outros vírus como o vírus da Hepatite C (HCV).

[042] A inibição da atividade de protease é indicativa da atividade antiviral. Os inibidores da Protease são medicamentos que bloqueiam o funcionamento da enzima protease. Sem a protease funcional, os HIV e HCV são incapazes de amadurecer e, portanto, não conseguem fazer cópias de si mesmo, diminuindo assim as cargas virais carregadas pela AIDS e HCV.

[043] Três Kits comerciais diferentes do Ensaio de Protease foram usados para confirmar as propriedades antivirais do extrato botânico da solução vegetal concentrada do óleo de palma obtido por trituração.

Ensaio de Protease do HCV Enzolyte TM 620

[044] O Kit do Ensaio de Protease EnzolyteTM 620 que é otimizado para detectar a atividade da protease NS3/4A do vírus da hepatite C foi usado para testar o efeito inibitório do extrato. A protease NS3/4A do vírus da hepatite C é necessária para clivagem da poli proteína viral não estrutural nos locais NS3- NS4A, NS4A-NS4B, NS4B-NS5A. Três locais de clivagem são essenciais para a maturação das proteínas virais. Esta protease é um dos alvos-chave para o desenvolvimento dos medicamentos contra o HCV.

[045] O kit utilizou o substrato do peptídeo de transferência de energia por ressonância fluorescente (FRET) Hilyte FluorTM TRIQXLTM 610 que podia ser monitorado a Ex/Em=591 nm/622nm após clivagem proteolítica. No peptídeo da FRET, a fluorescência de Hilye FluorT foi suprimida pelo QXLTM610. Após a clivagem em dois fragmentos separados pela protease NS3/4A do HCV, a fluorescência de Hilye Flúor foi recuperada e rmnitorada com excitação/emissão= 591/622. Deste modo, os inibidores reduziram a fluorescência.

[046] O protocolo detalhado da experiência foi realizado de acordo com as instruções do fabricante.

[047] O controle positivo refere-se ao ensaio de protease sem inibidores alguns. Todos os extratos demonstraram a ação inibitória da protease significativamente mais alta se comparada com o inibidor comercial (inibidor) 1 o fornecido junto com o kit.

Fig.6. Atividade da Protease NS3/4A do Virus da Hepatite C na Presença do Extrato Botânico do Óleo de Palma obtido por trituração (fil1 k), Frações 3 e 4 e a preparação comercial de chá preto, tudo com concentrações da solução estoque a 1000 ppm.

O Ensaio de Protease do HIV Sensolyte™ 520

[048] O kit do Ensaio do HIV Sensolyte™ 520 usado com o novo substrato do peptídeo FRET que incluiu Hilyte Fluor™ 488 (fluoróforo) e QXL ™ 520 (supressor) para medir a atividade da enzima. No peptídeo intato da FRET, a fluorescência de Hilyte Fluor™ 488 foi suprimida pelo QXL ™ 520. Após a clivagem do peptídeo da FRET pela protease do HIV, a fluorescência de Hilyte Fluor™ 488 foi recuperada e monitorada com excitação/emissão = 490 nm/520 nm.

[049] O protocolo detalhado da experiência foi realizado de acordo com as instruções do fabricante.

[050] Como no ensaio da protease do HCV, o extrato vegetal da solução vegetal do óleo de palma obtido por trituração demonstrou a ação inibitória contra a protease do HIV significativamente mais alta.

Fig. 7. Atividade da Protease NS3/4A do Vírus da Hepatite C na Presença do Extrato Botânico do Óleo de Palma obtido por trituração (fiI 1 k), Frações 3 e 4 e a preparação comercial de chá preto (Chá) a 1.000 (1k) ou 2.000 (2k) ppm da solução estoque.

Ensaio da Protease EnzChek

[051] O Kit do Ensaio de Protease EnzChek com Sondas Moleculares foi usado para testar mais uma vez a ação inibitória da protease dos extratos do óleo de palma. O kit usou o ensaio baseado na fluorescência para detectar as metalo-, sulfidrila e serina proteases. O kit continha os derivados de caseína que foram pesadamente marcados com os corantes BODIPY FL fluorescente verde insensível a pH ou BODIPY TR-X fluorescente vermelho, resultando na supressão quase completa da fluorescência do conjugado. A hidrólise catalisada pela protease liberou os peptídeos marcados com corantes BODIPY FL or BODIPY TR-X altamente fluorescentes. O aumento da fluorescência foi medido no leitor de microplaca. Desse modo, os inibidores diminuíam a fluorescência. A ação inibitória dos extratos botânicos da solução vegetal concentrada do óleo de palma obtido por trituração assim como as frações parcialmente purificadas em várias proteases inclusive, mas sem se limitar a, quimotripsina (serina protease). A Elastase (metaloprotease) da Pepsina (protease ácida) foi examinada usando o Ensaio da Protease EnzChek.

[052] O protocolo detalhado da experiência foi realizado de acordo com as instruções do fabricante. A ação inibitória significante foi observada em todos os casos e as Fig. 8 (A e B) demonstram os resultados obtidos usando os derivados da quimotripsina e caseína da protease, marcados com o corante BODIPY FL fluorescente verde como substrato.

Fig.8A. Atividade da Protease na Presença do Extrato Botânico do Óleo de Palma Obtido por Trituração (til 2000 ppm) Fração 3 (F31k) e Fração 4(F41k), tudo a 2000ppm da solução estoque. O controle positivo refere-se ao ensaio de protease sem inibidores alguns. O inibidor refere-se ao inibidor comercial fornecido junto com o kit.

[053] O extrato botânico do óleo de palma e as frações parcialmente purificadas demonstraram a ação inibitória da protease significativamente mais alta se comparada com o inibidor comercial (inibidor) fornecido junto com o kit.

[054] Os experimentos conduzidos usando cinco metodologias diferentes demonstraram que as composições que contêm, mas não se limitam a, os compostos fenólicos do dito óleo de palma podem inibir com eficácia de vários vírus, comprovando mais uma vez que os compostos do óleo de palma são um dos medicamentos antivirais de amplo espectro.

Fig.8B. Atividade da protease na Presença do Extrato Botânico do Óleo de Palma Obtido por Trituração (Fil 2000 ppm) Fração 3 (F31k) e Fração 4 (F41k), tudo a 2000 ppm da solução estoque. O controle positivo refere-se ao ensaio de protease sem inibidores alguns. O inibidor refere-se ao inibidor comercial fornecido junto com o kit.

[055] Além disso, os resultados indicam que os extratos de vinagreira e chá também possuem a ação inibitória contra a transcriptase reversa sugerindo que os extratos de palma podem ser usados por si só ou em combinação com os extratos de vinagreira e chá para se obter a função antiviral. As terapias atuais de HIV e HCV são freqüentemente contra-indicadas ou mal toleradas, enfatizando a necessidade de drogas mais seguras e mais eficazes. Os extratos botânicos da solução vegetal concentrada do óleo de palma obtido por trituração assim como as frações parcialmente purificadas demonstraram a inibição forte contra a transcriptase reversa e protease e protease do HCV in vitro e, portanto, são potencialmente úteis para o desenvolvimento das terapias antivirais futuras, inclusive as terapias do vírus da hepatite C (HCV).

DOSAGEM E ADMINISTRAÇÃO

[056] De acordo com a modalidade preferida da presente invenção, os compostos da presente invenção podem ser formulados em uma ampla variedade de veículos e formas de administração oral, podendo ser em forma de comprimidos, cápsulas, soluções, emulsões, xaropes ou suspensões. Não obstante, a composição da presente invenção poderá ser eficaz quando usada junto com um ou mais aditivos em proporções convencionais.

[057] A invenção acima foi descrita em alguns detalhes usando os exemplos; porém, para os peritos em arte será evidente que alterações e modificações podem ser feitas dentro do escopo das reivindicações em anexo.

Claims

1. USO de quantidade terapeuticamente eficaz de composição que compreende extratos da solução vegetal do óleo de palma obtidos por um processo de moagem do óleo de palma, caracterizado por ser na preparação do medicamento para prevenir as infecções pelo HIV e HCV no paciente que precise dele.

2. USO de acordo com a reivindicação 1, caracterizado pelo fato de que a composição pode ser administrada por via oral ou como suplemento.

3. USO de acordo com a reivindicação 1, caracterizado pelo fato de que a composição pode ser administrada junto com aditivos.