BRPI0806632A2

BRPI0806632A2 - composto, composição farmacêutica, método para o tratamento de uma condição selecionada a partir do grupo constituìdo de proliferação celular anormal, inflamação, asma e artrite

Info

Publication number: BRPI0806632A2
Application number: BRPI0806632-9A
Authority: BR
Inventors: Michael J Roberts; Simon Pedder
Original assignee: Chelsea Therapeutics Inc
Priority date: 2007-01-19
Filing date: 2008-01-18
Publication date: 2011-09-06
Also published as: US7951812B2; NZ578549A; WO2008089390A1; AU2008206161A1; CN101652366A; MX2009007478A; US20110152276A1; CA2674698A1; KR20090113295A; JP2010516694A; EP2125818A1; US20080214585A1

Abstract

COMPOSTO, COMPOSIçAO FARMCêUTICA, MéTODO PARA O TRATAMENTO DE UMA CONDIçãO SELECIONADA A PARTIR DO GRUPO CONSTITUìDO DE PROLIFERAçAO CELULAR ANORMAL, INFLAMAçãO, ASMA E ARTRITE. A presente invenção é direcionada para os compostos de antifolato com a estrutura em que: X é CHR~ 9~ ou NR~ 9~; Y~ 1~, Y~ 2~, e Y~ 3~ são independentemente O ou S; V~ 1~ e V~ 2~ são independentemente O, S ou NZ; Z é H, alquila opcionalmente substituida, alquenila opcionalmente substituída, alquinila ou alcarila opcionalmente substituída; R~ 1~ e R~ 2~ são independentemente H, alquila opcionalmente substituída, alquenila opcionalmente substituída, alquinila ou alquarila opcionalmente substituída; R~ 3~ é H, alquila opcionalmente substituída, alquenila opcionalmente substituída, alquinila opcionalmente substituída, alcóxi, hidroxila, ou halo opcionalmente substituído; e R~ 4~, R~ 5~, R~ 6~, R~ 7~, R~ 8~, e R~ 9~ são independentemente H, alquila opcionalmente substituida, alquenila opcionalmente substituída, alquinila, acila, -C(O)-alquila, -C(O)-alquenila, ou -C(O)-alquinila opcionalmente substituída; bem como ésteres, amidas, sais, solvatos, enantiómeros e pró-fármacos farmaceuticamente aceitáveis destes. Os compostos são úteis em composições farmacêuticas e em métodos de tratamento de várias doenças, incluindo a proliferaão celular anormal, doenças inflamatórias, asma e artrite.

Description

COMPOSTO, POMPOSICAO FARMACEUTICA, METOSO PARA O TRATAMENTO DE UMA CONDICAO SELECIONADA A PARTIR DO GRUPO CONSTITUIDO DE PROLIDERACAO CELULAR ANORMAL, INFLAMACAO, ASMA E ARTRITE

CAMPO DA INVENCAO

A presente invenção é direcionada ao composto farmaceuticamente ativo e especificamente para o novo composto de antifolato clássico.

HISTORICAO DA INVENCAO

O ácido fólico é uma vitamina B solúvel em água conhecido pelo nome sistemático de ácido N-[4(2-amino-4- hidroxi-pteridina-6-ilmetilamino)-benzoil]-L(+)- glutâmico e com a estrutura apresentada abaixo na Fórmula (1)

<formula>formula see original document page 2</formula>

Como visto na Fórmula (1) , a estrutura de ácido fólico pode ser geralmente descrita como sendo formada por anel de pteridina, um agrupamento de ácido para- aminobenzóico e um agrupamento de glutamato. O ácido fólico e seus derivados são necessários para o metabolismo e crescimento, principalmente na participação da síntese de timidilato, aminoácidos e purina do corpo. Os derivados do ácido fólico, assim como ocorrem naturalmente os folatos, são conhecidos por terem efeitos bioquímicos comparáveis ao ácido fólico. 0 ácido fólico é conhecido por ser derivatizado através de hidrogenação, como no anel 1,4-diazino, ou sendo metilado, formaldeído dilatado, ou ponte, em que a substituição é geralmente em posições N5 ou N10. Os folatos foram estudados para eficácia em diversas utilizações incluindo a redução na gravidade ou incidência de malformações congênitas, doenças cardíacas, acidente vascular cerebral (AVC), perda de memória e demência relacionadas à idade.

Os compostos de antifolato, como folatos, são estruturalmente similares ao ácido fólico, no entanto os compostos de antifolato agem para afetar o metabolismo do ácido fólico. Uma revisão de antifolatos é apresentada pelo Takamoto (1996) The Oncologist, 1:68-81, aqui incorporado a título de referência. Um grupo específico de antifolatos, os chamados "antifolatos clássicos," é caracterizado pela presença de uma cadeia lateral de ácido p-aminobenzoil glutâmico do ácido fólico ou um derivado daquela cadeia lateral. Outro grupo de

antifolatos, os chamados "antifolatos não clássicos", é caracterizado pela ausência específica do grupo p- aminobenzoil glutâmico. Como os antifolatos têm um efeito fisiológico que é oposto ao efeito do ácido fólico, os antifolatos foram apresentados para expor funções fisiológicas úteis, assim como a capacidade de destruir células cancerosas, causando apoptose. Os monoglutamilatos de folato e monoglutamilatos de antifolato são transportados através de membranas celulares na forma reduzida ou não reduzida pelos transportadores específicos para essas formas respectivas. A expressão destes sistemas de transporte varia com as condições do tipo de célula e célula de crescimento. Depois de inserir células com mais folatos, e muitos antifolatos, são modificadas pela poliglutamilação, onde um resíduo de glutamato é ligado a um segundo resíduo de glutamato no grupo carbóxilo α através de uma ligação de peptídeo. Isto leva à formação de poli-L-i-glutamilatos, geralmente através da adição de três a seis resíduos de glutamato. As enzimas que atuam sobre os folatos têm maior afinidade para as formas poliglutamiladas. Portanto, os folatos poliglutamilados geralmente apresentam um longo tempo de retenção no interior da célula.

Uma via intacta de enzima de folato é importante para manter a síntese de novo de blocos de construção de DNA, bem como muitos importantes aminoácidos. Os alvos do antifolato incluem as diversas enzimas envolvidas no metabolismo do folato, incluindo (i) dihidrofolato redutase (DHFR), (ii) timidilato sintetase (TS), (iii) síntese de folilpoliglutamil; e (iv) glicinamida ribonucleotídeo transformilase (GARFT) e aminoimidazol carboxamida ribonucleotídeo transformilase (Aicart). O transportador de folato reduzido (RFC), que é uma glicoproteína transmembrana, desempenha um papel ativo no caminho de folato que transporta folato reduzido nas células de mamíferos, através do mecanismo mediado por transportador (em oposição ao mecanismo mediado por receptor). O RFC também transporta os antifolatos, como o metotrexato. Portanto, mediar a capacidade do RFC para agir pode afetar a habilidade das células de captação de folatos reduzidos.

Os folatos poliglutamilados podem agir como cofatores enzimáticos, já que os antifolatos poliglutamilados geralmente agem como inibidores de enzima. Além disso, as interferências no metabolismo do folato impedem a síntese de novo de DNA e de alguns aminoácidos, permitindo assim a citotoxicidade seletiva de antifolato. 0 metotrexato, a estrutura da qual é apresentada na Fórmula (2), é um antifolato que apresentou uso em tratamento de câncer, especialmente o tratamento de leucemia aguda, linfoma não-Hodgkin, câncer da mama, câncer de cabeça e pescoço, cório carcinoma, sarcoma osteogênico e câncer da bexiga.

<formula>formula see original document page 5</formula> Nair et al. {J. Med. Chem. (1991) 34:222-227), aqui incorporado a título de referência, demonstrou que a poliglutamilação dos antifolatos clássicos não era essencial para a atividade antitumoral e pode até ser indesejável em que a poliglutamilação pode levar a uma perda da atividade farmacológica do fármaco e especificidade do alvo. Isto foi seguido pela descoberta de numerosos antifolatos clássicos não- poliglutamilatáveis. Consulte Nair et al. (1998) Proc. Amer. Assoc. Câncer Research 39:431, aqui incorporado a título de referência. Um grupo particular de antifolatos não-poliglutamilatáveis é caracterizado por um grupo de metilideno (ou seja, a =CH2 substituinte), na 4-posição do agrupamento do glutamato. A presença deste grupo químico tem sido apresentada para afetar a atividade biológica do composto de antifolato. Consulte Nair et al. (1996) Cellular Pharmacology 3:29, aqui incorporado a título de referência.

Outros derivados do ácido fólico também foram estudados na busca de antifolatos com o aumento da estabilidade metabólica permitindo doses menores e administração menos freqüentes ao paciente. Por exemplo, uma dideaza (ou seja, com base na quinazolina) analógica foi apresentada para evitar hidroxilação fisiológica no sistema dos anéis de pteridina. Além disso, a substituição do átomo de nitrogênio de amina secundária opcionalmente substituído com um átomo de carbono tem sido apresentado para proteger as ligações vizinhas de clivagem fisiológica. Um exemplo de um antifolato que tem substituição de carbono do nitrogênio de amina secundária é o ácido 4- amino-4-deoxi-10-deazapteroil-i-metileno glutâmico - mais normalmente referido como MDAM - a estrutura da qual é apresentada na Formula (3).

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O L-enantiômero do MDAM tem sido apresentado para mostrar um aumento na atividade fisiológica. Consulte a U.S. Patent Nº. 5.550.128, aqui incorporada a título de referência. Outro exemplo de um antifolato clássico destinado à estabilidade metabólica que é ZD1694, apresentada na Fórmula (4).

<formula>formula see original document page 7</formula>

Um grupo de antifolato composto de acordo com a estrutura apresentada na Fórmula (5) combina várias das características moleculares descritas acima, e este grupo de compostos é conhecido pelos nomes MobileTrexate, Mobile Trex, Mobiltrex ou M-Trex.

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Conforme apresentado na Fórmula (5), M-Trex engloba um grupo de compostos onde X pode ser CH2, CHCH3, CH(CH2CH3), NH, ou NCH3. Conforme apresentado na U.S. Patent No. 5.912.251, aqui incorporada a título de referência, as espécies M-Trex onde X=CH2 apresentaram atividade para o tratamento da proliferação celular anormal, distúrbios de inflamação e doenças autoimunes. Este composto, que é apresentado na Fórmula (6), é conhecido por diversos nomes, incluindo os seguintes: ácido 2-{4-[2-(2,4-diamino-quinazolina-6-il)-etil]- benzoilamina}-4-metilideno-pentanedioico; gama metileno glutamato 5,8,10-trideaza aminopterina; e 5,8-dideaza MDAM. O composto da Fórmula (6) é não- poliglutamilatável, não-hidroxilatável e capaz de afetar o metabolismo do folato. O composto também tem apresentado eficácia em matar um grande número de células de leucemia humana e células tumorais sólidas humana em cultura em concentrações terapeuticamente relevantes, e ainda apresentou atividade como um agente anti- inflamatório em um modelo animal de asma. <formula>formula see original document page 9</formula>

A eficácia dos antifolatos como compostos farmacêuticos resulta de outros fatores além da inércia metabólica, como descritos acima. As várias enzimas envolvidas no metabolismo do ácido fólico no organismo apresentam uma escolha de alvos de inibição aos antifolatos. Em outras palavras, é possível que os antifolatos variam conforme a(s) qual(ais) enzima(s) que inibem. Por exemplo, alguns antifolatos inibem principalmente dihidrofolato redutase (DHFR), enquanto outros antifolatos inibem principalmente timidilato sintetase (TS), glicinamida ribonucleotídeo formiltransferase (GARFT), ou aminoimidazol carboxamida ribonucleotídeo transformilase, enquanto ainda outros antifolatos inibem combinações destas enzimas. Esta "escolha" de inibição da enzima é ilustrada na Figura 1.

Os antifolatos podem variar substancialmente em sua eficácia e especificidade. Além disso, existe uma necessidade contínua de aperfeiçoamento do antifolato, tais como níveis de toxicidade reduzida, o aumento da vida útil, e a facilidade de distribuição aos locais alvo no corpo. Como é difícil prognosticar com confiabilidade o âmbito completo das propriedades fisiológicas em avanços de teste de cada composto atual, também mantém uma necessidade para os aperfeiçoamentos no projeto do antifolato.

RESUMO DA INVENÇÃO

A presente invenção apresenta novos compostos de antifolato clássico com propriedades melhoradas. A invenção também apresenta composições farmacêuticas que compreendem tais compostos e métodos para sintetizar esses compostos. A invenção apresenta ainda métodos de tratamento para várias doenças e condições, incluindo, mas não se limitando a, proliferação celular anormal, asma e outras doenças inflamatórias, e artrite reumatoide e outras doenças autoimunes.

Em uma modalidade, a presente invenção é direcionada aos novos compostos de antifolato clássico com a estrutura apresentada na Fórmula (7)

<formula>formula see original document page 10</formula>

em que:

X é CHR9 ou NR9;

Yi, Y2, e Y3 são independentemente O ou S; V1 e V2 são independentemente 0, S ou NZ; Z é H, alquila opcionalmente substituída, alquenila opcionalmente substituída, alquinila ou alcarila opcionalmente substituída; R1 e R2 são independentemente H, alquila opcionalmente substituída, alquenila opcionalmente substituída, alquinila ou alquarila opcionalmente substituída; R3 é H, alquila opcionalmente substituída, alquenila opcionalmente substituída, alquinila opcionalmente substituída, alcóxi, hidroxila, ou halo opcionalmente substituído; e R4, R5, R6, R7, Rs/ e R9 são independentemente H, alquila opcionalmente substituída, alquenila opcionalmente substituída, alquinila, acila, -C(O)-alquila, -C(O)- alquenila, ou -C(O)-alquinila opcionalmente substituída; bem como ésteres, amidas, sais, solvatos, enantiômeros e pró-fármacos farmaceuticamente aceitáveis destes.

Em certas modalidades, os compostos apresentados de acordo com a invenção têm um terminal que é substancialmente um agrupamento de glutamato. Por exemplo, os compostos podem ser de acordo com a Fórmula (8)

<formula>formula see original document page 11</formula> em que:

X é CHR9 ou NR9;

R3 é H, alquila opcionalmente substituída, alquenila opcionalmente substituída, alquinila opcionalmente substituída, alcóxi, hidroxila, ou halo opcionalmente substituído; e

R4, R5, R6, R7, Ra, e R9 são independentemente H, alquila opcionalmente substituída, alquenila opcionalmente substituída, alquinila, acila, -C(O)-alquila, -C(O)- alquenila, ou -C(O)-alquinila opcionalmente substituída; bem como ésteres, amidas, sais, solvatos, enantiômeros e pró-fármacos farmaceuticamente aceitáveis destes. Em certas modalidades, os compostos apresentados de acordo com a invenção têm um terminal que é substancialmente um agrupamento de diamino- pirrolopirimidina. Por exemplo, os compostos podem ser de acordo com a Fórmula (10)

<formula>formula see original document page 0</formula>

em que:

X é CHR9 ou NR9;

Y1, Y 2, e Y3 são independentemente O ou S; V1, e V2 são independentemente O, S ou NZ; Z é Hf alquila opcionalmente substituída, alquenila opcionalmente substituída, alquinila ou alcarila opcionalmente substituída;

R1 e R2 são independentemente H, alquila opcionalmente substituída, alquenila opcionalmente substituída, alquinila ou alquarila opcionalmente substituída; R3 é H, alquila opcionalmente substituída, alquenila opcionalmente substituída, alquinila opcionalmente substituída, alcóxi, hidroxila, ou halo opcionalmente substituído; e

R9 é H, alquila opcionalmente substituída, alquenila opcionalmente substituída, alquinila, acila, -C(O)- alquila, -C(O)-alquenila, ou -C(O)-alquinila opcionalmente substituída; bem como ésteres, amidas, sais, solvatos, enantiômeros e pró-fármacos farmaceuticamente aceitáveis destes.

Em uma modalidade, a invenção apresenta compostos de acordo com a Fórmula (11)

<formula>formula see original document page 13</formula>

ou ésteres, amidas, sais, solvatos, enantiômeros e pró- fármacos farmaceuticamente aceitáveis destes. Em determinadas modalidades, os novos compostos de antifolato estão na forma de sais farmaceuticamente aceitáveis. Em particular, os compostos podem ser na forma de um sal de metais alcalinos. Em uma modalidade específica/ a presente invenção é direcionada a um composto de antifolato de acordo com a Fórmula (12), que está sob a forma de um sal dissódico ou um enantiômero deste.

<formula>formula see original document page 14</formula>

De acordo com outra modalidade, a presente invenção é direcionada para composições farmacêuticas que compreendem um ou mais compostos aqui apresentados. Por exemplo, a invenção apresenta uma composição farmacêutica que compreende um composto de acordo com a Fórmula (7). Em uma modalidade particular, a invenção apresenta composições farmacêuticas que compreendem o composto de acordo com a Fórmula (7) em que X é CH2, Y1, Y2, e Y3 são O, V1 e V2 são O, R1 e R2 são H, R3 é H, R4 é H, R5 é H, R6 éH, R7 é H, e R8 é H. Ainda em outras modalidades, as composições farmacêuticas da invenção incluem compostos como descritos aqui que se encontram sob a forma de um sal pharmaceuticamente aceitável, tal como um sal dos metais alcalinos, particularmente um sal dissódico. Em outras modalidades, a invenção apresenta composições farmacêuticas que compreendem um ou mais compostos conforme descritos aqui, em combinação com um ou mais ingredientes ativos.

A presente invenção apresenta ainda vários métodos de tratamento que compreendem a administração de um ou mais compostos de acordo com a invenção, isoladamente ou em combinação com um ou mais ingredientes ativos. Em certas modalidades, a invenção apresenta métodos para as condições de tratamento tais como a proliferação celular anormal, inflamação, artrite e asma. Assim, a invenção apresenta um método para o tratamento de uma condição selecionada a partir do grupo que consiste de proliferação celular anormal, inflamação, asma e artrite, onde o método compreende administrar para um indivíduo que necessita de tratamento uma quantidade de um composto de acordo com a invenção terapeuticamente eficaz para o tratamento de proliferação celular anormal, inflamação, asma ou artrite.

BREVE DESCRIÇÃO DOS DESENHOS

Tendo assim descrito a invenção em termos gerais, as referências serão agora feitas para os desenhos anexos, que não são necessariamente desenhados à escala, e em que:

FIG. 1 é uma representação esquemática da via metabólica dos compostos do folato e a interação com os folatos clássicos poliglutamilatáveis. DESCRIÇÃO DETALHADA

A invenção agora será descrita mais detalhadamente a seguir através de referência a várias modalidades. Estas modalidades são apresentadas de forma que estas descrições serão completas, e transmitirão plenamente o âmbito da invenção para os elementos versados na técnica. Na realidade, a invenção pode ser representada em muitas formas diferentes e não deve ser entendida como limitada às modalidades aqui enunciadas, mas sim que estas modalidades são apresentadas para que essas descrições possam satisfazer requisitos legais aplicáveis. Conforme utilizado no relatório descritivo, bem como nas reivindicações acrescentadas, a forma singular "um", "uma", "a", incluem o plural referente a menos que o contexto determine claramente de outra forma.

A presente invenção apresenta novos antifolatos clássicos e métodos de preparação dos mesmos. Esses novos compostos podem ser usados em composições farmacêuticas, diretamente, ou sob a forma de seus ésteres, amidas, sais, solvatos ou pró-fármacos farmaceuticamente ativos. Os novos compostos são úteis no tratamento de uma série de condições e doenças, especialmente para o tratamento da proliferação celular anormal, inflamação, artrite ou asma.

I. Definições O termo "antifolato metabolicamente inerte" conforme utilizado aqui que significa os compostos que são (i) análogos do ácido fólico capazes de interromper ou afetar o metabolismo do folato e (ii) não-poliglutamilatáveis.

Em certas modalidades, o termo pode significar compostos que são também (iii) não-hidroxilatáveis.

O termo "metal alcalino" conforme utilizado aqui que significa elementos do Grupo IA e incluem especialmente sódio, lítio e potássio; o termo "sal de metais alcalinos", conforme utilizado aqui que significa um composto iônico onde o agrupamento de cátion do composto compreende um metal alcalino, especialmente sódio, lítio ou potássio.

O termo "alquila" conforme utilizado aqui que significa grupos saturados de hidrocarboneto linear, ramificado ou cíclico. Em uma modalidade particular, a alquila refere-se aos grupos que compreendem de 1 a 10 átomos de carbono ("C1-10 alquila"). Em outras modalidades, a alquila refere-se aos grupos que compreendem de 1 a 8 átomos de carbono ( "C1-8 alquila"), 1 a 6 átomos de carbono ( "C1-6 alquila"), ou 1 a 4 átomos de carbono ("C1-4 alquila"). Em uma modalidade específica, a alquila refere-se à metil, trifluorometil, etil, propil, isopropil, ciclopropil, butil, isobutil, t- butil, pentil, ciclopentil, isopentil, neopentil, hexil, isohexil, ciclohexil, ciclohexilmetil, 3-metilpentil, 2,2-dimetibutil, e 2,3-dimetilbutil. A alquila substituída refere-se à alquila substituída com um ou mais agrupamentos selecionados a partir do grupo que consiste de halo (por exemplo, Cl, F, Br e I) ; alquila halogenada (por exemplo, CF3, 2-Br-etil, CH2F, CH2Cl, CH2CF3, ou CF2CF3; hidróxila; amino; carboxilato; carboxamido; alquilamino; arilamino; alcóxi; arilóxi; nitro, azido; ciano; tio; ácido sulfônico; sulfato; ácido fosfônico; fosfato e fosfonato.

O termo "alquenila" conforme utilizado aqui que significa agrupamento de alquila em que ao menos uma ligação saturada de C-C é substituída por uma ligação dupla. Em modalidades particulares, a alquenila refere- se aos grupos que compreendem de 1 a 10 átomos de carbono ("C1-10 alquila"). Em outras modalidades, a alquila refere-se aos grupos que compreendem de 1 a 8 átomos de carbono ( "C1-8 alquila"), 1 a 6 átomos de carbono ( "C1-6 alquila"), ou 1 a 4 átomos de carbono ("C1-4 alquila").

Em modalidades específicas, a alquenila pode ser vinil, allil, 1-propenil, 2-propenil, 1-butenil, 2-butenil, 3- butenil, 1-pentenil, 2-pentenil, 3-pentenil, 4-pentenil, 1-hexenil, 2-hexenil, 3-hexenil, 4-hexenil ou 5-hexenil.

O termo "alquinila" conforme utilizado aqui que significa agrupamento de alquila em que ao menos uma ligação saturada de C-C é substituída por uma ligação dupla. Em modalidades particulares, a alquinila refere-se aos grupos que compreendem de 1 a 10 átomos de carbono ("C1-10 alquinila"). Em outras modalidades, a alquila refere-se aos grupos que compreendem de 1 a 8 átomos de carbono ( "Ci-s alquinila"), 1 a 6 átomos de carbono ( "C1- 6 alquinila"), ou 1 a 4 átomos de carbono ("C1-4 alquinila"). Em modalidades específicas, a alquinila pode ser etinil, 1-propinil, 2-propinil, 1-butinil, 2- butinil, 3-butinil, 1-pentinil, 2-pentinil, 3-pentinyil, 4-pentinil, 1 - hexyinil, 2 -hexinyil, 3-hexinil, 4- hexinil ou 5-hexinil.

0 termo "alcóxi" conforme utilizado aqui significa grupos de alquila de cadeia ramificada e linear ligados por um átomo de oxigênio (ou seja, -O-alquila), onde alquila é conforme descrita acima. Em modalidades particulares, o alcóxi refere-se aos grupos com ligação de oxigênio que compreendem de 1 a 10 átomos de carbono ("C1-10 alcóxi"). Em outras modalidades, o alcóxi refere- se aos grupos de ligação de oxigênio que compreendem de 1 a 8 átomos de carbono ( "C1-8 alcóxi"), 1 a 6 átomos de carbono ( "C1-6 alcóxi")/ ou 1 a 4 átomos de carbono ("C1-4 alcóxi").

O termo "halo" ou "halogêneo" conforme utilizado aqui que significa flúor, cloro, bromo ou iodo.

O termo "arila" conforme utilizado aqui que significa um monocíclico estável biciclo, ou anel de carbono tricíclico de até 8 membros, em cada anel, onde ao menos um anel é aromático como definido pela regra 4n+2 de Hückel. Os exemplos de grupos arila de acordo com a invenção que incluem fenil, naftila, tetrahidronaftil e bifenila. 0 grupo arila pode ser substituído por uma ou mais agrupamentos selecionados a partir do grupo que constitui de hidroxila, amino, alquilamino, arilamino, alcóxi, ariloxi, nitro, ciano, ácido sulfônico, sulfato, ácido fosfônico, fosfato ou fosfonato.

Os termos "aralquila" e "arilalquila" conforme utilizados aqui que significam iam grupo arila como definido acima ligado à molécula através de um grupo alquila acima definido.

Os termos "alcarila" e "alquilarila" conforme utilizados aqui que significam um grupo alquila como definido acima ligado à molécula através de um grupo arila como definido acima.

O termo "acila" conforme utilizado aqui que significa éster de ácido carboxílico em que o agrupamento não-carbonila do grupo éster é selecionado a partir de alquila linear, ramificada ou cíclica ou alquila inferior; alcoxialquila incluindo metoximetila; aralquila incluindo benzila; ariloxialquila tais como fenoximetila; arila incluindo fenila opcionalmente substituída com halogênio, C1-C6 alquila ou C1-C6 alcóxi; ésteres sulfonatos como a alquila ou aralquila sulfonila incluindo metanesulfonila; mono, di, ou éster trifosfato; tritila ou monometoxitritila; benzila substituída; trialquilsilila tal como dimetil-t-butilsilil ou difenilmetilsilil. Os grupos arila nos ésteres otimamente compreendem um grupo fenila. O termo "amino" conforme utilizado aqui que significa um agrupamento representado pela estrutura NR2, e inclui as aminas primárias e aminas secundárias e terciárias substituídas por alquila (ou seja, alquilamino). Assim, R2 pode representar dois átomos de hidrogênio, dois agrupamentos, ou agrupamento de um átomo de hidrogênio e um agrupamento de alquila.

Os termos "alquilamino" e "arilamino" conforme utilizados aqui significam um grupo amino que tem uma ou duas alquilas ou arilas substituintes, respectivamente.

O termo "análogo", conforme utilizado aqui significa um composto em que um ou mais átomos individuais ou grupos funcionais foram substituídos, com um outro átomo ou um funcional diferente, geralmente dando origem a um composto com propriedades semelhantes.

O termo "derivado", conforme utilizado aqui significa um composto que é formado a partir de um composto similar inicial anexando uma outra molécula ou átomo ao composto inicial. Além disso, os derivados, de acordo com a invenção, abrangem um ou mais compostos formados a partir de um composto precursor pela adição de um ou mais átomos ou moléculas ou através da combinação de dois ou mais compostos precursores.

O termo "pró-fármaco", conforme utilizado aqui que significa qualquer composto que, quando administrado a um mamífero, é convertido inteiro ou em partes a um composto da invenção.

O termo "metabólito ativo" conforme utilizado aqui significa um composto fisiologicamente ativo que resulta do metabolismo de um composto da invenção, ou um pró- fármaco do mesmo, quando tais compostos ou pró-fármaco é administrado a um mamífero.

O termo "quantidade terapeuticamente eficaz" ou "dose terapeuticamente eficaz", conforme utilizado aqui é intercambiável e significa uma concentração de composto de acordo com a invenção, ou uma variante biologicamente ativa deste, suficiente para obter o efeito terapêutico desejado de acordo com os métodos de tratamento descritos aqui.

O termo "transportador farmaceuticamente aceitável ", conforme utilizado aqui significa um transportador que é convencionalmente utilizado na técnica para facilitar a armazenagem, administração, e/ou o efeito de cura de um agente biologicamente ativo.

O termo "administração intermitente ", conforme utilizado aqui significa uma administração de dose terapêutica eficaz de uma composição de acordo com a invenção, seguido por um período de tempo de interrupção, que é seguida por uma outra administração de uma dose terapeuticamente eficaz, e assim por diante. O termo "agente antiproliferativo", conforme utilizado aqui significa um composto que diminui a hiperproliferação de células.

O termo "proliferação celular anormal", conforme

utilizado aqui significa uma doença ou uma condição caracterizada pelo crescimento inadequado ou multiplicação de um ou mais tipos de células em relação ao crescimento desse tipo de célula ou tipos em um indivíduo que não sofre dessa doença ou condição.

O termo "câncer", conforme utilizado aqui significa uma doença ou condição caracterizada por crescimento anormal, descontrolado de células que podem se espalhar localmente ou através da corrente sangüínea e sistema linfático para outras partes do corpo. O termo inclui tanto câncer de formação de tumor ou não-tumorais, e inclui vários tipos de câncer, tais como tumores primários e metástases tumorais.

O termo "tumor", conforme utilizado aqui significa uma massa anormal de células dentro de um organismo multicelular que resulta da excessiva divisão celular que é descontrolada e progressiva, também chamada de uma neoplasia. Um tumor pode ser benigno ou maligno.

O termo "distúrbios fibróticos", conforme utilizado aqui significa fibrose e outras complicações médicas de fibrose, que resultam em um todo ou em partes, à proliferação de fibroblastos. O termo "artrite", conforme utilizado aqui significa um distúrbio inflamatório que afeta articulações que podem ser infecciosas, autoimune ou de origem traumática.

II. Compostos

Os compostos da presente invenção compreendem os antifolatos metabolicamente inertes. Tal como foi conhecido na técnica, os antifolatos são compostos que interferem com diferentes fases do metabolismo do folato. Assim, os compostos da invenção podem ser utilizados principalmente em preparações farmacêuticas úteis para o tratamento de doenças e condições relacionadas ou susceptíveis de serem tratadas por interrupção do metabolismo do folato, ou outros mecanismos biológicos relacionados ao metabolismo do folato.

Em uma modalidade, os novos compostos da presente invenção incluem compostos com a estrutura apresentada na Fórmula (7),

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em que:

X é CHR9 ou NR9; Y1, Y2, e Y3 são independentemente 0 ou S; V1 e V2 são independentemente 0, S ou NZ;

Z é H, alquila opcionalmente substituída, alquenila opcionalmente substituída, alquinila ou alcarila opcionalmente substituída;

R4, R5, R6, R7, R8, e R9 são independentemente H, alquila opcionalmente substituída, alquenila opcionalmente substituída, alquinila, acila, -C(0)-alquila, -C(O)- alquenila, ou -C(O)-alquinila opcionalmente substituída; bem como ésteres, amidas, sais, solvatos, enantiômeros e pró-fármacos farmaceuticamente aceitáveis destes.

Em uma outra modalidade, os novos compostos da presente invenção incluem compostos com a estrutura apresentada na Fórmula (8),

<formula>formula see original document page 25</formula> em que:

X é CHR9 OU NR9;

R4, R5, R6, R7, Rs/ e R9 são independentemente H, alquila opcionalmente substituída, alquenila opcionalmente substituída, alquinila, acila, -C(0)-alquila, -C(O)- alquenila, ou -C(0)-alquinila opcionalmente substituída; bem como ésteres, amidas, sais, solvatos, enantiômeros e pró-fármacos farmaceuticamente aceitáveis destes.

Ainda em uma outra modalidade, os novos compostos da 15 presente invenção incluem compostos com a estrutura apresentada na Fórmula (9),

<formula>formula see original document page 26</formula>

em que:

Y1, Y2, e Y3 são independentemente 0 ou S;

Vi e V2 são independentemente 0, S ou NZ;

Z é H, alquila opcionalmente substituída, alquenila opcionalmente substituída, alquinila ou alcarila opcionalmente substituída; R1 e R2 são independentemente H, alquila opcionalmente substituída, alquenila opcionalmente substituída, alquinila ou alquarila opcionalmente substituída; e R4, R5, R6, R7, R8, e Rs são independentemente H, alquila opcionalmente substituída, alquenila opcionalmente substituída, alquinila, acila, -C(0)-alquila, -C(O)- alquenila, ou -C(O)-alquinila opcionalmente substituída; bem como ésteres, amidas, sais, solvatos, enantiômeros e pró-fármacos farmaceuticamente aceitáveis destes.

Ainda em uma outra modalidade, os novos compostos da presente invenção incluem compostos com a estrutura apresentada na Fórmula (10) ,

<formula>formula see original document page 27</formula>

em que:

X é CHR9 ou NR9;

Y1, Y2, e Y3 são independentemente 0 ou S;

Vi e V2 são independentemente 0, S ou NZ;

Z é H, alquila opcionalmente substituída, alquenila opcionalmente substituída, alquinila ou alcarila opcionalmente substituída; R1 e R2 são independentemente H, alquila opcionalmente substituída, alquenila opcionalmente substituída, alquinila ou alquarila opcionalmente substituída; R3 é H, alquila opcionalmente substituída, alquenila opcionalmente substituída, alquinila opcionalmente substituída, alcóxi, hidroxila, ou halo opcionalmente substituído; e

R9 é H, alquila opcionalmente substituída, alquenila opcionalmente substituída, alquinila, acila, -C(O)- alquila, -C(O)-alquenila, ou -C(0)-alquinila

opcionalmente substituída; bem como ésteres, amidas, sais, solvatos, enantiômeros e pró-fármacos

farmaceuticamente aceitáveis destes.

Em relação às fórmulas (7) - (10), exemplos preferidos de X incluem -CH2-, -NH-, -CH(C1-6 alquila)-, -N(C1-6 alquila)- -CH (C(O)-C1-6 alquila)-, e -N(C(O)-C1-6 alquila)-; exemplos preferidos de Z incluem H e C1-S alquila; exemplos preferidos de Ri e R2 incluem independentemente H e C1-6 alquila; exemplos preferidos de R3 incluem H, C1-6 alquila, hidroxila, e halo; e exemplos preferidos de R4, R5, R6, R7, Rse R9 incluem independentemente H, C1-6 alquila, e -C(0)-C1-6 alquila, em que cada C1-6 alquila pode ser opcionalmente substituída com um ou mais halo(por exemplo, Cl, F, Br e I); alquila halogenada (por exemplo, CF3, 2-Br-etil, CH2F, CH2Cl, CH2CF3, ou CF2CF3; hidroxila; amino; carboxilato; carboxamido; alquilamino; arilamino; alcóxi; ariloxi; nitro, azido; ciano; tio; ácido sulfônico; sulfato; ácido fosfônico; fosfato e fosfonato. Em uma modalidade particular, a presente invenção apresenta um novo compostos de antifolato clássico com a estrutura apresentada na Fórmula (11), pode ser aqui mencionado como CHL-003. O asterisco na Fórmula (11) indica um átomo quiral. Quanto mais detalhadamente descrito abaixo, este ponto de quiralidade pode ser o foco para a preparação de formas enantiomericamente purificadas do composto. Na ausência de identificação específica de uma forma enantiomericamente purificada, o composto seria esperado para estar na forma racêmica.

<formula>formula see original document page 29</formula>

Vários processos para sintetizar compostos de antifolato são apresentados em U.S. Patent No. 4.996.207, U.S. Patent No. 5.550.128, U.S. Patent No. 5.593.999, Abraham et al. (1991) J. Med. Chem. 34:222-227, e Rosowsky et al. (1991) J. Med. Chem. 34:203-208, todos os que estão aqui incorporados a título de referência. Como iim exemplo de um método de síntese, os compostos de acordo com a Fórmula (11), podem ser preparados de acordo com o Esquema de Reação I, apresentada abaixo, onde X é um halogênio. Esquema de Reação I

<formula>formula see original document page 30</formula>

III. Variantes Biologicamente Ativas

As variantes biologicamente ativas dos compostos estabelecidos acima são especialmente também englobadas pela invenção. Essas variantes devem manter a atividade geral biológica dos compostos originais, no entanto, a presença de atividades adicionais não necessariamente limitaria o seu uso na presente invenção. Essa atividade pode ser avaliada utilizando métodos de ensaio padrão e bioensaios reconhecíveis pelo inventor versado no campo como normalmente sendo útil para a identificação de tal atividade.

De acordo com uma modalidade da invenção, as variantes adequadas biologicamente ativas consistem de um ou mais análogos ou derivados dos compostos descritos acima. Na realidade, um único composto, tal como aquele descrito acima, pode dar origem a uma família inteira de análogos ou derivados com atividade similar, e, portanto, com função de acordo com a presente invenção. Do mesmo modo, um único composto, tal como descrito acima, pode representar um único membro da família de uma classe maior de compostos úteis de acordo com a presente invenção. Assim, a presente invenção engloba totalmente não só os compostos descritos acima, mas os análogos e derivados desses compostos, especialmente aqueles identificados através de métodos normalmente conhecidos na técnica e reconhecíveis para o inventor versado. Os compostos apresentados aqui podem conter centros de quiralidade, que podem ser tanto da configuração (R) ou (S) , ou podem consistir de uma mistura dos mesmos. Assim, a presente invenção também inclui os estereoisômeros dos compostos descritos aqui, quando aplicáveis, individualmente ou misturados em qualquer proporção. Os estereoisômeros podem incluir, mas não estão limitados às misturas e combinações desses enantiômeros, diastereômeros e racêmica. Estes

estereoisômeros podem ser preparados e separados utilizando técnicas convencionais, quer por reação de materiais primários de enantiomérica, ou por separação de isômeros dos compostos da presente invenção. Os isômeros podem incluir isômeros geométricos. Exemplos de isômeros geométricos incluem, mas não estão limitados aos isômeros eis ou trans através de uma ligação dupla. Outros isômeros são contemplados entre os compostos da presente invenção. Os isômeros podem ser utilizados, quer em forma pura ou em mistura com outros isômeros dos compostos descritos aqui. Vários métodos são conhecidos na técnica para preparar formas oticamente ativas e determinar a atividade. Esses métodos incluem testes padrão descritos aqui, outros testes similares, que são bem conhecidos na técnica. Exemplos de métodos que podem ser utilizados para obter isômeros óticos dos compostos de acordo com a presente invenção incluem os seguintes. i) a separação física dos cristais em que cristais macroscópicos do enantiômeros individuais são separados manualmente. Esta técnica pode ser utilizada especialmente quando os cristais dos enantiômeros separados existem (ou seja, o material é um conglomerado), e os cristais são visualmente distintos; ii) a cristalização simultânea em que os enantiômeros individuais são cristalizados separadamente a partir de uma solução de racemato, possível apenas quando o último é um conglomerado no estado sólido; iii) as resoluções enzimáticas em que a separação parcial ou completa de um racemato em virtude das diferentes taxas de reação para os enantiômeros com uma enzima; iv) a síntese enzimática assimétrica, uma técnica da síntese em que pelo menos, uma etapa da síntese utiliza uma reação enzimática para obter um precursor sintético enantiomericamente puro ou enriquecido do enantiômero desejado;

v) a síntese química assimétrica em que o desejado enantiômero é sintetizado a partir de um precursor aquiral sob condições que produzem assimetria (ou seja, quiralidade) no produto, que pode ser alcançada utilizando catalisadores quirais ou auxiliares quirais;

vi) as separações de diastereômero em que um composto racêmico é reagido com um reagente enantiomericamente puro (o auxiliar quiral), que converte os enantiômeros individuais para diastereômeros. Os diastereômeros resultantes então são separados por cromatografia ou cristalização em virtude de suas diferenças estruturais agora mais distintas e os auxiliares quirais posteriormente removidos para obter o desejado enantiômero;

vii) as transformações assimétricas de primeira e segunda ordem em que os diastereômeros a partir do racemato equilibrado obtêm uma preponderância na solução do diastereômero do enantiômero desejado ou quando a cristalização preferencial do diastereômero do desejado enantiômero interrompe o equilíbrio para que eventualmente, em princípio, todo o material é convertido para o diastereômero cristalino do enantiômero desejado.

O enantiômero desejado é, então, liberado das diastereômeros;

viii) as resoluções cinéticas compreendem resolução parcial ou completa de um racemato (ou de uma nova resolução de um composto parcialmente resolvido) em virtude da desigualdade das taxas de reação dos enantiômeros com um reagente quiral, não-racêmico ou catalisador em condições cinéticas;

ix) a síntese enantioespecifica de precursores não- racêmicos em que o enantiômero desejado é obtido a partir

de matérias-primas não-quirais e onde a integridade estereoquímica não está ou apenas está minimamente comprometida com o decorrer da síntese;

x) a cromatografia líquida quiral em que os enantiômeros de um racemato são separados em uma fase móvel líquida em

virtude de suas diferentes interações com uma fase estacionária. A fase estacionária pode ser feita de material quiral ou a fase móvel pode conter um material quiral adicional para provocar as diferentes interações; xi) a cromatografia gasosa quiral em que o racemato é volatilizado e os enantiômeros são separados em virtude de suas diferentes interações na fase móvel gasosa com uma coluna que contém uma fase fixa de adsorvente quiral não-racêmica;

xii) a extração com solventes quirais em que os enantiômeros são separados em virtude de dissolução preferencial de um enantiômero em um determinado solvente quiral; e

xiii) o transporte através das membranas quirais em que

um racemato é colocado em contato com uma fina barreira

da membrana. A barreira normalmente separa dois fluidos miscíveis, um contendo o racemato, e uma força motriz, como concentração ou pressão diferencial que causa transporte preferencial através da barreira da membrana.

A separação ocorre como resultado da natureza não racêmica quiral da membrana que permite passar apenas um enantiômero do racemato.

Os compostos de antifolato da invenção podem ser apresentados em uma forma enantiomericamente enriquecida, como uma mistura de enantiômeros em que um enantiômero é apresentado em excesso (determinado como uma fração molar ou fração de peso). Excesso de enantiomérico é entendido para existir quando uma substância química compreende dois enantiômeros do mesmo composto e um enantiômero é apresentado em maior quantidade do que o outro enantiômero. Ao contrário das misturas racêmicas, essas misturas apresentarão uma rede de rotação ótica. Com o conhecimento da rotação específica da mistura e da rotação específica do enantiômero puro, o excesso enantiomérico (abreviadamente "ee") pode ser determinado por métodos conhecidos. A determinação direta das quantidades de cada enantiômero presentes na mistura é possível com a espectroscopia de RMN e cromatografia de coluna quiral.

Referindo-se a Fórmula (11), os compostos da invenção podem ser apresentados na forma racêmica ou enantiomericamente purificados para o isômero (R) ou (S). O exemplo 2 abaixo descreve a síntese do isômero enantiomericamente purificado (S) do composto da Fórmula (12). O exemplo 3 descreve a síntese da forma racêmica do composto da Fórmula (11).

Em modalidades específicas, os compostos da invenção podem incluir um composto de antifolato com uma pureza enantiomérica de um único enantiômero de pelo menos cerca de 75% Em outras modalidades, o composto de antifolato da invenção tem uma pureza enantiomérica ao menos cerca de 80%, ao menos cerca de 85%, ao menos cerca de 90%, ao menos cerca de 95%, ao menos cerca de 96%, ao menos cerca de 97%, ao menos cerca de 98%, ao menos cerca de 99%, ou ao menos cerca de 99,5%. Em uma modalidade, os compostos da invenção incluem um composto de antifolato com tal pureza enantiomérica para o isômero (S). Em uma modalidade, os compostos da invenção incluem um composto de antifolato com tal pureza enantiomérica para o isômero (R). Em uma modalidade específica, a invenção engloba o composto de sal de dissódico de ácido (S)-N-{4-[2-(2,4- diamino-7H-pirrolo [2,3-d] pirimidina-5-il) etil ] benzoil} -4- metileno-L-glutâmico.

Os compostos descritos aqui também podem ser na forma de um éster, amida, sal, solvato, pró-fármaco ou metabólito, desde que mantenha a atividade farmacológica, de acordo com a presente invenção. Os ésteres, amidos, sais, solvatos, pró-fármacos e outros derivados dos compostos da presente invenção podem ser preparados de acordo com os métodos geralmente conhecidos na técnica, como, por exemplo, os métodos descritos por J. March, Advanced Organic Chemistry (Química Orgânica Avançada): Reações, Mecanismos e Estruturas, 4a Ed. (Nova York: Wiley- Interscience, 1992), aqui incorporado a título de referência.

Os exemplos de sais farmaceuticamente aceitáveis dos compostos úteis de acordo com a invenção incluem sais de adição de ácido. Os sais de ácidos não-farmaceuticamente aceitáveis, porém, podem ser úteis, por exemplo, na preparação e purificação dos compostos. Os sais de adição de ácido adequado de acordo com a presente invenção incluem ácidos orgânicos e inorgânicos. Os sais preferidos incluem aqueles formados a partir dos ácidos hiclorídrico, hidrobrômico, sulfúrico, fosfórico, cítrico, tartárico, lático, pirúvico, acético, succínico, fumárico, maleico, oxalacético, metanossulfônico, etanesulfônico, p-toluenesulfônico, benzesulfônico e isetiônico. Outras sais de adição de ácido úteis incluem ácido propiônico, ácido glicólico, ácido oxálico, ácido málico, ácido malônico, ácido benzoico, ácido cinâmico, ácido mandélico, ácido salicílico e similares. O exemplo especificado de sais farmaceuticamente aceitáveis incluem, mas não estão limitados aos sulfatos, pirosulfatos, bissulfatos, sulfitos, bisulfitos, fosfatos, monohidrogenfosfatos, dihidrogenfosfatos, metafosfatos, pirofosfatos, cloretos, brometos, iodetos, acetatos, propionatos, decanoatos, caprilatos, acrilatos, formatos, isobutiratos, caproatos, heptanoatos, propiolatos, oxalatos, malonatos, succinatos, suberatos, sebacatos, fumaratos, maleatos, butina-1 ,4-dioatos, hexina-1 ,6-dioatos, benzoatos, clorobenzoatos, metilbenzoatos, dinitrobenzoatos, hidroxibenzoatos, metoxienzoatos, ftalatos, sulfonatos, xilenesulfonatos, fenilacetatos, fenilpropionates, fenilbutiratos, citratos, lactatos, i-hidroxibutiratos, glicolatos, tartaratos, metanesulfonatos, propanesulfonatos, naftaleno-l-sulfonatos, naftaleno-2-sulfonatos, e mandelatos.

Um sal por adição de ácido pode ser reconvertido para a base livre por tratamento com uma base adequada. A preparação de sais básicos de agrupamento de ácido que pode esta presente em um composto útil de acordo com a presente invenção que pode ser preparado de forma semelhante usando uma base farmaceuticamente aceitável, como o hidróxido de sódio, hidróxido de potássio, hidróxido de amônio, hidróxido de cálcio, trietilamina ou similares.

Os ésteres dos compostos de acordo com a presente invenção podem ser preparados através da funcionalização de hidroxila e/ou grupos de carboxila que podem estar presentes na estrutura molecular do composto. As amidas e pró-fármacos também podem ser preparados usando técnicas conhecidas àquelas versadas na técnica. Por exemplo, as amidas podem ser preparadas a partir de ésteres, utilizando reagentes adequados de amina, ou podem ser preparadas a partir de anidrido ou um ácido ou cloreto de ácido pela reação com amônia ou uma amina alquila inferior. Além disso, os ésteres e as amidas de compostos da invenção podem ser feitas pela reação com um agente de carbonilação (por exemplo, formiato etílico, anidrido acético, cloreto de metoxiacetil, cloreto de benzoíla, isocianato de metila, cloroformato de atila, cloreto de metanosulfonila) e uma base apropriada (por exemplo, 4-dimetilaminopiridina, piridina, trietilamina, carbonato de potássio) em um solvente orgânico adequado (por exemplo, tetraidrofurano, acetona, metanol, piridina, N, N-dimetilformamida), em uma temperatura de 0 °C a 60 °C. Os pró-fármacos são normalmente preparados pela ligação covalente de um agrupamento, o que resulta em um composto que é terapeuticamente inativo até que seja modificado por um sistema metabólico do indivíduo.

Os exemplos de solvatos farmaceuticamente aceitáveis que incluem, mas não estão limitados aos compostos de acordo com a invenção em combinação com água, isopropanol, etanol, metanol, DMSO, acetato de etila, ácido acético ou etanolamina.

No caso das composições sólidas, entendem-se que os compostos utilizados nas composições da invenção podem existir em diferentes formas. Por exemplo, os compostos podem existir em formas estáveis e formas cristalinas metastáveis e formas amorfas e isotrópicas, de todos os que se destinem a ser do âmbito da presente invenção. Se um composto útil de acordo com a invenção é uma base, o desejado sal pode ser preparado por qualquer método adequado conhecido na técnica, incluindo o tratamento da base livre com um ácido inorgânico, como o ácido hidroclorídrico, ácido hidrobrômico, ácido sulfúrico, ácido nítrico, ácido acético, ácido fosfórico e similares, ou com um ácido orgânico, como o ácido acético, ácido maleico, ácido succínico, ácido mandélico, ácido fumárico, ácido malônico, ácido pirúvico, ácido oxálico, ácido glicólico, ácido salicílico, ácidos piranosidil, como ácido glucurônico e ácido galaturônico, ácidos de alfa-hidróxi como ácido cítricô e ácido tartárico, aminoácidos como o ácido aspártico e ácido glutâmico, ácidos aromáticos como o ácido benzoico e cinâmico, ácidos sulfônicos como ácido p-toluenesulfônico ou ácido etanesulfônico ou similares.

Se um composto da invenção é um ácido, o desejado sal pode ser preparado por qualquer método adequado conhecido na técnica, incluindo o tratamento do ácido livre, com uma base orgânica ou inorgânica, como uma amina (primária, secundária ou terciária), um metal alcalino ou hidróxido de metal de terra alcalina ou similar. Os exemplos ilustrativos de sais adequados incluem sais orgânicos derivados de aminoácidos como a glicina e arginina, amônia, aminas primárias, secundárias e terciárias, e aminas cíclicas tais como piperidina, morfolina e piperazina, e derivados de sais inorgânicos de sódio, cálcio, potássio, magnésio, manganês, ferro, cobre, zinco, alumínio e lítio.

Em uma modalidade particular, um composto de antifolato de acordo com a invenção que está na forma de um sal. Por exemplo, o composto pode ser um composto de acordo com a Fórmula (7), Fórmula (9), ou Fórmula (10), em que uma ou todos de Ri, R2, e Z são substituídos por uma adequada formação de sal de cátion. De preferência, o sal é um sal de metal alcalino, especialmente de sódio ou potássio Em modalidades específicas, o sal é um sal de dissódio Um sal de dissódio particularmente preferido útil na composição farmacêutica da invenção é apresentado abaixo na Fórmula (12) . Naturalmente, entendem-se que outros agrupamentos catiônicos, especialmente outros metais alcalinos, podem ser utilizados no composto do sal. Por exemplo, em uma modalidade particular, a invenção compreende um sal de potássio do composto de acordo com a Fórmula (11) . Um método para a síntese do composto da Fórmula (12) é descrito abaixo no Exemplo 2. <formula>formula see original document page 41</formula>

Em uma modalidade específica, o composto da Fórmula (12) é apresentado na forma enantiomericamente purificada (S). Em especial, a invenção engloba o sal dissódico de ácido (S) -N-{4-[2-(2,4-diamino-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidina-5- il) etil]benzoil}-4-metileno-L-glutâmico (pode ser aqui mencionado como CHLl007).

A presente invenção também inclui pró-fármacos e metabólitos ativos dos compostos da invenção. Qualquer um dos compostos descritos aqui pode ser administrado como uma pró-fármaco para alimentar a atividade, biodisponibilidade ou a estabilidade do composto ou de outra forma modificar as propriedades do composto. Os exemplos típicos de pró-fármacos incluem compostos que têm grupos de proteção biologicamente lábeis em um agrupamento funcional do composto ativo. Os pró-fármacos incluem compostos que podem ser oxidados, reduzidos, aminados, deaminado, hidroxilados, dehidroxilado, hidrolisado, dehidrolizado, alquilados, dealquilado, acilatado, deacilatado, fosforilado, e/ou defosforilado para produzir o composto ativo. Em modalidades preferidas, os compostos da presente invenção possuem atividades anti-proliferativas contra células anormalmente de proliferação ou que são metabolizadas de um composto que apresentam essas mesmas atividades. 0. número de ligantes de pró-fármaco é reconhecido. Em geral, alquilação, acilação ou outra modificação lipofíIica de um ou mais heteroátomos do composto, como uma amina livre ou resíduo de ácido carboxílico, reduz a polaridade e permite a passagem nas células. Os exemplos de grupos substituintes que podem substituir um ou mais átomos de hidrogênio sobre a amina livre e/ou agrupamento cie ácido carboxílico, mas não estão limitados aos seguintes: arila; esteroides; carboidratos (incluindo os açúcares), 1,2-diacilglicerol; álcoois; acila (incluindo acila inferior); alquila (incluindo alquila inferior); sulfonato éster (incluindo alquila ou arilalquila sulfonil, tais como metanesulfonil e benzila, onde o grupo fenil é opcionalmente substituído com um ou mais substituintes, conforme apresentado na definição de uma arila dada aqui); arilsulfonila opcionalmente substituída; lipídios (incluindo os fosfolipídios); fosfotidilcolina; fosfocolina; resíduos ou derivados de amonoácido; resíduos ou derivados de acila aminoácido; peptideo; colesterois; ou outros grupos de saída farmaceuticamente aceitável, quando administrados em vivo, apresentam o amina livre e/ou agrupamento de ácido carboxílico. Qualquer um destes pode ser usado em combinação com os compostos apresentados para alcançar um efeito desejado. IV. Composições Farmacêuticas

Embora seja possível para o composto individual utilizado na composição da presente invenção para ser administrado na forma química bruta, é preferível para os compostos ser apresentados como uma composição farmacêutica. Sendo assim, há um ou mais compostos apresentados pelas composições farmacêuticas da presente invenção. Como tal, as composições da presente invenção compreendem os compostos farmaceuticamente ativos, como descritos acima, ou ésteres, amidas, sais, solvatos, análogos, derivados ou pró-fármacos farmaceuticamente aceitáveis destes. Além disso, as composições de inventividade podem ser preparadas e apresentadas em uma variedade de combinações. Por exemplo, a composição pode incluir uma única composição que contém todos os ingredientes ativos. Alternadamente, a composição pode incluir várias composições que compreendem ingredientes ativos separados, mas destinados a ser administrados simultaneamente, em sucessão ou na proximidade imediata do tempo.

Os compostos da invenção podem ser preparados e apresentados juntamente com um ou mais de seus transportadores farmaceuticamente aceitáveis, e opcionalmente, outros ingredientes terapêuticos. Os transportadores devem ser aceitáveis na medida em que são compatíveis com quaisquer outros ingredientes da composição e não prejudiciais ao seus receptores. Um transportador também pode reduzir quaisquer efeitos colaterais do agente. Esses transportadores são conhecidos na técnica. Consulte, Wang et al. (1980) J. Parent. Drug Assn. 34(6):452-462, aqui incorporados a título de referência.

As composições da presente invenção podem incluir as composições de liberação pulsátil, liberação demorada, liberação prolongada, liberação controlada, curto prazo, início rápido e término rápido, desde que as composições alcancem a administração de um composto como descrito aqui. Consulte Remington's Pharmaceutical Sciences (18° ed. ; Mack Publishing Company, Eaton, Pensilvânia, 1990), aqui incorporado a título de referência.

As composições farmacêuticas de acordo com a presente invenção são adequadas para diferentes modos de apresentação, incluindo administração por via oral, parenteral (incluindo a via intravenosa, intramuscular, subcutânea, intradérmica, intra-articular, intra- sinovial, intratecal, intra-arterial, intracardíaca, subcutânea, intraorbital, intracapsular, intraespinhal, intrastemal e transdérmica), tópica (incluindo dérmica, bucal e sublingual), vaginal, uretral e administração retal. A administração também pode ser através de spray nasal, implante cirúrgico, pintura interna cirúrgicas, bomba de infusão, ou através de catéter, stent, balão ou outro dispositivo de entrega. O modo de administração mais útil e/ou benéfico pode variar, em especial, dependendo da condição do receptor e do distúrbio a ser tratado.

As composições farmacêuticas podem ser convenientemente disponibilizadas em uma forma de dosagem de unidade, em que tais composições podem ser preparadas por quaisquer dos métodos geralmente conhecidos nas técnicas farmacêuticas. Geralmente, esses métodos de preparação incluem combinando (por vários métodos) os compostos ativos da invenção com um adequado transportador ou outro adjuvante, que pode ser constituído por um ou mais ingredientes. A combinação das substâncias ativas com um ou mais dos adjuvantes é então tratada fisicamente para apresentar a composição de forma adequada para a distribuição (por exemplo, para moldar um comprimido ou formar uma suspensão aquosa).

As composições farmacêuticas de acordo com a presente invenção adequada para dosagem oral podem assumir várias formas, tais como comprimidos, cápsulas, pílulas e pastilhas (incluindo rápida dissolução ou efervescentes), cada um contendo uma determinada quantidade do agente ativo. As composições também podem ser na forma de um pó ou granulada, uma solução ou suspensão em uma solução aquosa ou não-aquosa e, como uma emulsão líquida (óleo em água e água em óleo) . Os agentes ativos podem também ser apresentados como um bolo, eletuário ou pasta. Geralmente entendem-se que os métodos de preparação das formas de dose acima são geralmente conhecidos na técnica, e por qualquer método que seria adequado para a preparação das respectivas formas farmacêuticas para uso na distribuição das composições de acordo com a presente invenção.

Em uma modalidade, o composto pode ser administrado por via oral em combinação com um veículo farmaceuticamente aceitável, como um diluente inerte ou um transportador comestível. As composições orais podem ser colocadas em capsulas gelatinosas moles ou cápsulas duras, podem ser compactadas em comprimidos ou podem ser incorporadas diretamente com os alimentos da dieta do paciente. A percentagem da composição e preparações podem ser variadas, no entanto serão obtidas a quantidade de substância em tais composições terapeuticamente úteis, preferencialmente em um nível de dose eficaz.

As cápsulas duras contendo os compostos podem ser feitas usando um composto fisiologicamente degradável, tal como gelatina. Essas cápsulas duras incluem os compostos, e podem ainda incluir outros ingredientes, incluindo, por exemplo, um diluente sólido inerte, como carbonato de cálcio, fosfato de cálcio ou caulim. As cápsulas moles gelatinosas contendo os compostos podem ser feitas usando um composto fisiologicamente degradável, tal como gelatina. Essas cápsulas moles gelatinosas que compreendem os compostos, podem ser misturadas com água ou uma média de óleo, como óleo de amendoim, parafina líquida ou óleo de oliva.

Os comprimidos sublinguais são fabricados para se dissolverem muito rapidamente. Os exemplos dessas composições incluem tartarato de ergotamina, dinitrato de isosorbido e isoproterenol HCL. As composições desses comprimidos contêm, além do fármaco, vários excipientes solúveis, como a lactose, sacarose em pó, dextrose e manitol. As formas sólidas de dosagem da presente invenção podem opcionalmente ser revestidas, e os exemplos de revestimento de materiais adequados incluem, mas não estão limitados aos polímeros de celulose (como o ftalato de acetato de celulose, hidroxipropilcelulose, hidroxipropilmetilcelulose, ftalato de hidroxipropilmetilcelulose e acetato succinato de hidroxipropilmetilcelulose), ftalato de acetato de polivinilo, polímeros e copolímeros de ácido acrílico e resinas de metacrílico (como aquelas disponíveis comercialmente sob o nome comercial EUDRAGIT®) zeina, goma laca e polissacarídeos.

As composições em pó e gr anuladas de uma preparação farmacêutica da invenção podem ser preparadas usando métodos conhecidos. Essas composições podem ser administradas diretamente a um paciente, ou utilizadas na preparação de novas formas de dosagem, como comprimidos, cápsulas, ou preparar uma suspensão aquosa ou oleosa ou solução por adição a isto de um veículo aquoso ou oleoso. Cada uma dessas composições pode ainda incluir um ou mais aditivos, tais como agentes de dispersão ou umidificantes, agentes de suspensão e conservantes. Os excipientes complementares (por exemplo, agentes enchedores, aromatizantes ou corantes) também podem ser incluídos nessas composições.

As composições líquidas da composição farmacêutica da invenção que são adequadas para administração por via oral podem ser preparadas, embaladas e vendidas ou sob a forma líquida ou na forma de um produto seco destinado à reconstituição com água ou outro veículo adequado antes da sua utilização.

Um comprimido contém um ou mais compostos de acordo com a presente invenção que pode ser fabricado por qualquer processo padrão prontamente conhecido em uma habilidade na técnica, como por exemplo, por moldagem ou compressão, opcionalmente com um ou mais adjuvantes ou ingredientes Complexos de Coordenação de Platina, tais como, Cisplatina (cis-DDP) Carboplatina (testículos, ovários, bexiga, cabeça e pescoço, pulmão, tireoide, útero, endométrio, neuroblastoma, sarcoma osteogênico) ; Antracenediona, tais como Mixtozantrone (leucemia granulocítica aguda, da mama); Ureia Substituída, tais como hidroxiureia (leucemia granulocítica crônica, policitemia vera, trombocitose essencial, melanoma maligno); derivados de Metilidrazina, tais como, Procarbazina (N-metilidrazina, MIH) (doença de Hodgkin) ; Supressores Adrenocorticais, tais como, Mitotano (o, p'- DDD) (córtex adrenal), Aminoglutetimida (mama); Adrenocorticosteroides, tais como, a prednisona ( leucemia linfocítica aguda e crônica, Iinfornas não- Hodgkin, doença de Hodgkin, mama); Progestinas, tais como, Hidroxprogesterona caproato, acetato de Medroxiprogesterona, acetato de megestrol (endométrio, mama), Esteroides, tais como, incluir fosfato dissódico de betametasona e acetato de betametasona.

Os exemplos representativos e não limitantes de hormônios e antagonistas adequados para utilização em combinação com os compostos da presente invenção incluem, mas não estão limitados ao: Dietilstibestrol Etinil estradiol (mama, próstata); Antiestrógeno: Tamoxifena (mama); Andrógenos: Fluxomiesterona Propionato de Testosterona (mama); Antiandrógeno: Flutamida (próstata); Análogo do hormônio de liberação da Gonadotropina: Leuprolido (próstata). Outros hormônios incluem acetato de medroxiprogesterona, estradiol, acetato de megestrol, de cálcio, lactose, celulose, caulim, manitol, cloreto de sódio, amido seco e açúcar em pó. Os surfatantes adequados para utilização na composição de acordo com a presente invenção podem ser agentes aniônicos, catiônicos, anfotéricos ou agentes ativos de superfície não-iônica. Os estabilizantes podem ser incluídos nas composições para inibir ou diminuir reações que levam à decomposição dos agentes ativos, tais como as reações oxidativas.

As formas de dosagem sólidas podem ser formuladas de modo que proporciona a liberação demorada dos agentes ativos, tais como através da aplicação de um revestimento. Os revestimentos de liberação demorada são conhecidos na técnica, e as formas de dosagem que contêm isso podem ser preparadas por qualquer método conhecido adequado. Esses métodos geralmente incluem que, após a preparação da forma de dosagem sólida (por exemplo, um comprimido ou pílula), é aplicada uma composição de revestimento de liberação demorada. A aplicação pode ser através de métodos, como o revestimento por pulverização, revestimento de leito flutuante, a utilização de uma drageadeira, ou similar. Materiais para uso como um revestimento de liberação demorada pode ser poliméricos, tais como material celulósico (por exemplo, ftalato de butirato de celulose, ftalato de hidroxipropilmetilcelulose e carboximetil etilcelulose) e polímeros e copolímeros de ácido acrílico, ácido metacrílico e ésteres destes.

As formas de dosagem sólidas de acordo com a presente invenção também podem ser de libertação prolongada (ou seja, libera os agentes ativos durante um longo período de tempo) , e podem ou não ser também de libertação demorada. As composições de liberação prolongada são conhecidas na técnica e são geralmente preparadas por dispersar um fármaco dentro de uma matriz de um material gradual degradáveis ou hidrolisável, como um plástico insolúvel, um polímero hidrofílico ou um composto gorduroso. Alternativamente, uma forma de dosagem sólida pode ser revestida com esse material.

As composições para administração parenteral incluem soluções de injeção estéril aquosas e não aquosas, que podem ainda conter outros agentes, tais como antioxidantes, tampões, bacteriostáticos e solutos, que tornam as composições isotônicas com o sangue do receptor. As composições podem incluir suspensões estéreis aquosas e não aquosas, que contêm agentes de suspensão e agentes espessantes. Essas composições para administração parenteral podem ser apresentadas nos recipientes de dose unitária ou múltiplas doses, tais como, por exemplo, ampolas e frascos fechados, e podem ser armazenados em uma condição de congelamento-seco (liofilizado) que requer apenas a adição do transportador líquido estéril, por exemplo, água (por injeção), imediatamente antes da utilização. As soluções extemporâneas de injeção e suspensões podem ser preparadas a partir de pós, grânulos, comprimidos estéreis do tipo descrito anteriormente.

As composições de acordo com a presente invenção podem ser também administradas transdermicamente, onde os agentes ativos são incorporados em uma estrutura laminada (geralmente referida como "patches" (adesivos)) que é adaptada para permanecer em contato com a epiderme do receptor por um longo período de tempo. Normalmente, esses patches estão disponíveis como patches "fármaco-em- adesivo" de camada única ou patches de múltiplas-camada onde os agentes ativos estão contidos em uma camada separada da camada adesiva. Ambos os tipos de patches também contêm normalmente uma camada de proteção que deve ser removida antes de aplicar sobre a pele do receptor. Os patches de fármaco transdérmico também podem ser compostos de um receptáculo que sustenta a camada de proteção que é separada da pele do receptor por uma camada de membrana semipermeável e adesiva. A

apresentação de fármacos transdérmicos pode ocorrer através de difusão passiva ou pode ser facilitado utilizando eletrotransporte ou iontoforese. As composições para apresentação retal das composições da presente invenção incluem supositórios retais, cremes, pomadas e líquidos. Os supositórios podem ser

apresentados como agentes ativos em associação com um transportador geralmente conhecido na técnica, tais como o polietileno glicol. Essas formas de dosagem podem ser designadas para desintegrar rapidamente ou durante um longo período de tempo, e o tempo de desintegração completa pode variar de um curto espaço de tempo, como cerca de 10 minutos, para um período de tempo prolongado, como cerca de 6 horas.

As composições tópicas podem ser sob qualquer forma adequada e prontamente conhecidas na técnica para entrega de agentes ativos à superfície do corpo, incluindo dérmica, bucal e sublingual. Os exemplos típicos de composições tópicas incluem pomadas, cremes, géis, pastas, e soluções. As composições para a administração tópica na boca também incluem pastilhas.

Em certas modalidades, os compostos e composições revelados aqui podem ser apresentados através de iam dispositivo médico. Essa apresentação pode ser

geralmente insertável ou através de qualquer dispositivo médico implantável, incluindo, mas não limitados às sondas, cateteres, cateter balão, shunts, ou bobinas. Em uma modalidade, a presente invenção apresenta dispositivos médicos, como sondas, a superfície da qual é revestida com um composto ou composição conforme descrito aqui. 0 dispositivo médico da presente invenção pode ser usado, por exemplo, em qualquer aplicação para tratamento, prevenção, ou que afetem o curso de uma doença ou condição, tais como as apresentadas aqui. Em outra modalidade da invenção, a composição farmacêutica compreende um ou mais compostos descritos aqui que é administrado intermitentemente. A

administração da dose terapêutica eficaz pode ser obtida de forma contínua, como por exemplo, com uma composição de liberação prolongada, ou pode ser obtida de acordo com a administração diária pretendida, como por exemplo, com uma, duas, três ou mais administrações por dia. Pelo "período de suspensão" destina-se uma interrupção da liberação prolongada contínua ou administração diária da composição. 0 período de suspensão pode ser mais longo ou mais curto do que o período da liberação prolongada continua ou administração diária. Durante o período de suspensão, o nível dos componentes da composição no tecido relevante é substancialmente inferior ao nível máximo obtido durante o tratamento. O tempo do período de suspensão preferido depende da concentração da dose efetiva e a forma de composição utilizada. O período de suspensão pode ser ao menos 2 dias, 4 dias ou ao menos 1 semana. Em outras modalidades, o período de suspensão é de pelo menos 1 mês, 2 meses, 3 meses, 4 meses ou mais.

Quando uma composição de liberação prolongada é utilizada, o período de suspensão deve ser prolongado considerando o maior tempo de permanência da composição do corpo. Alternativamente, a freqüência de administração da dose efetiva da composição de liberação prolongada pode ser reduzida em conformidade com isso.

Uma programação intermitente de administração de uma composição da invenção que pode continuar até o efeito terapêutico desejado, e conforme o tratamento da doença ou distúrbio, seja alcançado.

A administração da composição de acordo com a invenção compreende administrar um composto único farmaceuticamente ativo como descrito aqui; administrar um composto farmaceuticamente ativo como descrito aqui com um ou mais compostos farmaceuticamente ativos descritos aqui, ou administrar um ou mais compostos farmaceuticamente ativos descritos aqui em combinação com um ou mais compostos farmaceuticamente ativos (ou seja, a coadministração). Assim, é reconhecido que os compostos farmaceuticamente ativos nas composições da invenção podem ser administrados em uma combinação fixa (ou seja, uma única composição farmacêutica que contém ambos os materiais ativos). Alternativamente, os compostos

farmaceuticamente ativos podem ser administrados em simultâneo (ou seja, composições separadas administradas ao mesmo tempo). Em outra modalidade, os compostos farmaceuticamente ativos são administrados seqüencialmente (ou seja, a administração de um ou mais compostos farmaceuticamente ativos seguida por administração separada ou de um ou mais compostos farmaceuticamente ativos). Uma das habilidades na técnica reconheceu que a maioria do método preferido de administração permitirá o efeito terapêutico desejado. O fornecimento de uma quantidade terapeuticamente eficaz de uma composição de acordo com a invenção pode ser obtida através da administração de uma dose terapeuticamente eficaz da composição. Assim, em uma modalidade, uma quantidade terapeuticamente eficaz é uma quantidade eficaz para tratar uma quantidade anormal de proliferação celular. Em outra modalidade, uma quantidade terapeuticamente eficaz é uma quantidade eficaz para tratar a inflamação. Ainda em outra modalidade, uma quantidade terapeuticamente eficaz é uma quantidade eficaz para tratar a artrite. Ainda em outra modalidade, uma quantidade terapeuticamente eficaz é uma quantidade eficaz para tratar a asma.

O composto ativo é incluído na composição farmacêutica em uma quantidade suficiente para fornecer a um paciente uma quantidade terapêutica de um composto da invenção in vivo, na ausência de efeitos tóxicos graves. A concentração de composto ativo na composição do fármaco dependerá da absorção, inativação e taxas de excreção do fármaco, bem como outros fatores conhecidos dos versados na técnica. É ainda entende-se que, para um indivíduo particular, administração especifica de dosagem deverá ser ajustada ao longo do tempo, de acordo com a necessidade do indivíduo e do julgamento profissional da pessoa que administra ou supervisiona a administração das composições, e que as taxas de dosagem enunciadas aqui são apenas para exemplos e não se destinam a limitar o âmbito ou a prática da composição reivindicada. O ingrediente ativo pode ser administrado de uma só vez, ou pode ser dividido em um número de doses menores que devem ser administradas em diferentes intervalos de tempo.

Uma quantidade terapeuticamente eficaz de acordo com a invenção pode ser determinada com base no peso corporal do receptor. Por exemplo, em uma modalidade, uma quantidade terapeuticamente eficaz de um ou mais compostos da invenção está na faixa de cerca de 0,1 pg/kg do peso corporal cerca de 5 mg/kg de peso corporal por dia. Alternativamente, uma quantidade terapeuticamente eficaz pode ser descrita em termos de uma dose fixa. Portanto, em outra modalidade, uma quantidade terapeuticamente eficaz de um ou mais compostos da invenção está na faixa em cerca de 0,01 mg de cerca de 500 mg por dia. Certamente, entende-se que essa quantidade pode ser dividida em um número menor de doses administradas ao longo do dia. A taxa de dosagem eficaz de sais e pró-fármacos farmaceuticamente aceitáveis pode ser calculada com base no peso da precursor nucleosídeo a ser entregue. Se um sal ou pró-fármaco exibe atividade em si, a dose efetiva pode ser estimada como acima utilizando o peso do sal ou pró-fármaco, ou por outros meios conhecidos para aqueles versados na técnica. É contemplado que as composições da invenção compreendem um ou mais compostos descritos aqui que serão administrados em quantidades terapeuticamente eficazes de um mamífero, de preferência um humano. Uma dose eficaz de um composto ou composição para o tratamento de qualquer uma das doenças ou condições descritas aqui pode ser prontamente determinada através da utilização de técnicas convencionais, e. observando os resultados obtidos em circunstâncias análogas. A quantidade efetiva das composições seria esperada para variar de acordo com o peso, sexo, idade e histórico clínico do paciente. Evidentemente, outros fatores também poderiam influenciar a quantidade efetiva da composição a ser entregue, incluindo mas não limitando, a doença específica envolvida, o grau de envolvimento ou a gravidade da doença, a resposta individual de cada paciente, o composto especificadamente administrado, o modo de administração, as características de biodisponibilidade da preparação administrada, a administração selecionada e o uso de medicação concomitante. 0 composto é administrado preferencialmente por um período de tempo suficiente para aliviar os sintomas indesejáveis e os sinais clínicos associados com a condição de ser tratados. Os métodos para determinar a eficácia e a dose são conhecidos por aqueles versados na técnica. Consulte, por exemplo, Isselbacher et al. (1996) Harrison's Principies of Internai Medicine 13 ed. , 1814-1882, aqui incorporado a título de referência. V. Combinações de Agente Ativo

No tratamento de várias doenças ou condições de acordo com a invenção, os compostos apresentados aqui podem ser administrados em diferentes combinações. Por exemplo, em uma modalidade, uma composição de acordo com a invenção pode compreender um único composto descrito aqui. Em outra modalidade, uma composição pode incluir dois ou mais compostos de acordo com a invenção. Ainda em outras modalidades, uma composição de acordo com a invenção pode incluir um ou mais compostos descritos aqui com um ou mais outros compostos conhecidos com propriedades terapêuticas. Por exemplo, os compostos descritos aqui podem ser administrados com um ou mais compostos de redução de toxicidade (por exemplo, ácido fólico ou leucovorina). Em outras modalidades, os compostos descritos aqui podem ser administrados com um ou mais compostos conhecidos como um agente antiartrítico, antibiótico, antifúngico ou antiviral.

Esses compostos podem ser também apresentados em combinação ou alternância com os compostos da invenção. Nas modalidades particulares, os compostos da invenção podem ser apresentados em combinação com um ou mais compostos selecionados a partir dos grupos descritos a seguir.

Na descrição anterior, certos compostos úteis em combinação com os compostos da presente invenção podem ser descritos em referência para determinadas doenças ou condições normalmente tratado usando os compostos conhecidos. A descoberta de tais doenças ou condições não se destina a limitar o âmbito da invenção e, principalmente, não limita as doenças ou condições que podem ser tratadas utilizando as combinações apresentadas aqui. Pelo contrário, tais doenças ou condições exemplificadas são fornecidas apenas para ilustrar os tipos de doenças e condições normalmente tratadas com os compostos adicionais.

Os compostos da presente invenção em certas modalidades, podem ser utilizados em combinação ou alternância com agentes antiproliferativos. Os doenças proliferativas são atualmente tratadas por uma variedade de classes de compostos que inclui agentes alquilantes, antimetabólitos, produtos naturais, enzimas, modificadores de resposta biológica, agentes diversos, radiofarmacêuticos (por exemplo, identificados de Y-90 aos hormônios ou anticorpos), hormônios e antagonistas. Qualquer dos agentes antiproliferativos relacionado abaixo ou qualquer outro desses princípios e agentes terapêuticos, como descrito, por exemplo em, DeVita, VT, Jr., Hellmann, S., Rosenberg, SA; Câncer: Principies & Practice of Oncology, 5a ed., Lippincott-Raven Publishers (1997), pode ser utilizado em combinação com os compostos da presente invenção.

Os exemplos representativos e não limitantes de agentes antiangiogêneses adequados para utilização em combinação com os compostos da presente invenção incluem, mas não estão limitados ao ácido retinoide e derivados, 2- metoxiestradiol, proteína ANGIOSTATIN™, proteína ENDO S TATIΝ™, suramina, esqualamina, tecido inibidor da metaloproteinase-I, tecido inibidor de metaloproteinase- 2, plasminogênio ativador inibidor-1, plasminogênio ativador inibidor-2, derivado do inibidor da cartilagem, paclitaxel, fator 4 plaquetário, sulfato de protamina (clupeina), derivados sulfatados da quitina (elaborado a partir de caranguejo rainha), complexo peptidoglicano de sulfatadas de polissacárido (SP-PG), estaurosporina, moduladores do metabolismo da matriz, incluindo, por exemplo, análogos da prolina (I-azetidina-2-ácido carboxílico (LACA), cis-hidroxiprolina), d, 1- 3,4- dehidroprolina, tiaprolina, alfa, alfa-dipiridil, beta- aminopropionitrila fumarato, 4-propil-5-(4-piridinil) -2 (3H)-oxazolina, metotrexato, mitoxantrona, heparina, interferons, 2 macroglobulina-soro , chimp-3, cimostatina, beta-ciclodextrina tetradecasulfato, eponemicina, fumagilina, auro tiomalato de sódio, D- penicilamina (CDPT), beta-l-anticolagenase-soro, alfa-2- antiplasmina, bisantrene, lobenzarit dissódio, N-(2 carboxifenil-4-ácido cloroantronilica dissódio ou "PCC", talidomida, esteroides angostaticos, cargboxinaminolmidazola, tais como inibidores da metaloproteinase BB94. Outros agentes antiangiogêneses incluem anticorpos, de preferência de anticorpos monoclonais contra estes fatores de crescimento angiogênicos: bFGF, aFGF, FGF-5 , isoformas VEGF, VEGF-C, HGF/SF e Ang-I/Ang-2. Ferrara N. e Alitalo, K. "Clinicai application of angiogenic growth factors and their inhibitors" (1999) Nature Medicine 5:1359-1364.

Os exemplos representativos e não limitantes de agentes alquilantes adequados para utilização em combinação com os compostos da presente invenção incluem, mas não estão limitados às Mostardas Nitrogenada, tais como Mecloretamina (doença de Hodgkin, linfomas não-Hodgkin), Ciclofosfamida, Ifosfamida (leucemias linfocíticas agudas e crônicas, doença de Hodgkin e Iinfornas de não-Hodgkin, mieloma múltiplo, neuroblastoma, mama, ovário, pulmão, tumor de Wilms, útero, testículos, sarcomas de tecidos moles), Melfalan (L-sarcolisina) (mieloma múltiplo, mama, ovário), clorambucil (leucemia linfocítica crônica, macroglobulinemia primária, doença de Hodgkin, Iinfornas não-Hodgkin), Etileniminas e Metilmelaminas, tais como, Hexametilmelamina (ovário), Tiotepa (bexiga, mama, ovário), Sulfonatos de Alquila, tais como, Busulfan (leucemia granulocítica crônica), Nitrosoureas, tais como Carmustina (BCNU) (doença de Hodgkin, Iinfornas não- Hodgkin, tumor cerebral primário, mieloma múltiplo, melanoma maligno), Lomustina (CCNU) (doença de Hodgkin, Iinfomas não-Hodgkin, tumor cerebral primário, tumor do pulmão de células pequenas) Semustina (metil-CCNU) (tumor cerebral primário, estômago, cólon), Estreptozocina (STR) (Insulinoma pancreática maligna, carcinoina maligna, Triazenos, tais como, Dacarbazina (DTIC dimetiltriazenoimidazola-carboxamida) (melanoma maligno, doença de Hodgkin, sarcomas de tecidos moles). Os exemplos representativos e não limitantes de agentes antimetabólitos adequados para utilização em combinação com os compostos da presente invenção incluem, mas não estão limitados aos análogos de ácido fólico, tais como, metotrexato (ametopterina) (leucemia linfocítica aguda, coriocarcinoma, micose fungoide, mama, cabeça e pescoço, pulmão, sarcoma osteogênico), Análogos de Pirimidina, tais como Fluorouracila (5-fluorouracila - 5-FU) Floxuridina (fluorodeoxiuridina - FUdR) (mama, cólon, estômago, pâncreas, ovário, cabeça e pescoço, bexiga, lesões cutâneas pré malignas) (tópica), Citarabina (citosina arabinosideo) (granulocítico aguda e leucemia linfoide aguda), Análogos de Purina e Inibidores Relacionados, tais como, Mercaptopurina (6-mercaptopurina - 6-MP) (linfocítica aguda, leucemia granulocítica aguda e granulocítica crônica), Tioguanina (6-tioguanina - TG) (leucemia granulocítica crônica, linfocítica crônica e granulocítica aguda), Pentostatina (2'-deoxicioformicina) (leucemia de células cabeludas, micose fungoide, leucemia linfocítica crônica), Vinca Alcalóides, tais como, vinblastina (VLB) (doença de Hodgkin, linfomas não- Hodgkin, mama, testículo), Vincristina (leucemia linfocítica aguda, neuroblastoma, tumor de Wilms, rabdomiossarcoma, doença de Hodgkin, linfomas não- Hodgkin, pequenas células pulmonares),

Epipodofilotoxinas, tais como Etoposídeo (testículos, pequenas células pulmonares e outras do pulmão, mama, doença de Hodgkin, linfomas não-Hodgkin, leucemia aguda granulocíticos, sarcoma de Kaposi) , Teniposídeo (testículos, pequenas células pulmonares e outras do pulmão, mama, doença de Hodgkin e linfomas não- Hodgkin, leucemia aguda granulocíticos, sarcoma de Kaposi). Os exemplos representativos e não limitantes de agentes citotóxicos adequados para utilização em combinação com os compostos da presente invenção incluem, mas não estão limitados à: doxorubicina, carmustina (BCNU), lomustina (CCNU), citarabinaUSP, ciclofosfamida, sódio fosfato estramucina, altretamina, hidroxiurea, ifosfamida, procarbazina, mitomicina, busulfan, ciclofosfamida, mitoxantrone, carboplatina, cisplatina, interferon alfa- 2a recombinante, paclitaxei, teniposídeo e estreptozoci.

Os exemplos representativos e não limitantes de produtos naturais adequados para utilização em combinação com os compostos da presente invenção incluem, mas não estão limitados aos: Antibióticos, tais como, Dactinomicina (actinonmicina D) (coriocarcinoma, tumor rabdomiosarcoma de Wilms, testículos, sarcoma de Kaposi), Daunorrubicina (daunomicina - rubidomicina) (leucemias granulocíticas aguda e linfocíticas agudas), Doxorrubicina (tecidos moles, osteogênico, e outros sarcomas, doença de Hodgkin e linfornas não-Hodgkin, leucemias agudas, mama, tireoide geniturinária, pulmão, estômago, neuroblastoma) , Bleomicina (testículo, cabeça e pescoço, pele e esôfago pulmão e trato geniturinário, doença de Hodgkin, Iinfornas não-Hodgkin), Plicamicina (mitramicina) (testículos, hipercalcemia maligna), Mitomicina (mitomicina C) (estômago, útero, cólon, mama, pâncreas, bexiga, cabeça e pescoço), enzimas, tais como, a L-asparaginase (leucemia linfocítica aguda), Modificadores de Resposta Biológica, tais como, interferon-alfa (leucemia de células cabeludas, sarcoma de Kaposi, melanoma, carcinoides, células renais, ovário, bexiga, Iinfornas não Hodgkin, micose fungoide, mieloma múltiplo, leucemia granulocítica crônica).

Os agentes adicionais que podem ser utilizados em combinação ou alternância com os compostos e composições apresentados aqui incluem, mas não estão limitados aos: Complexos de Coordenação de Platina, tais como, Cisplatina (cis-DDP) Carboplatina (testículos, ovários, bexiga, cabeça e pescoço, pulmão, tireoide, útero, endométrio, neuroblastoma, sarcoma osteogênico) ; Antracenediona, tais como Mixtozantrone (leucemia granulocítica aguda, da mama); Ureia Substituída, tais como hidroxiureia (leucemia granulocítica crônica, policitemia vera, trombocitose essencial, melanoma maligno); derivados de Metilidrazina, tais como, Procarbazina (N-metilidrazina, MIH) (doença de Hodgkin) ; Supressores Adrenocorticais, tais como, Mitotano (o, p'- DDD) (córtex adrenal), Aminoglutetimida (mama); Adrenocorticosteroides, tais como, a prednisona ( leucemia linfocítica aguda e crônica, Iinfornas não- Hodgkin, doença de Hodgkin, mama); Progestinas, tais como, Hidroxprogesterona caproato, acetato de Medroxiprogesterona, acetato de megestrol (endométrio, mama), Esteroides, tais como, incluir fosfato dissódico de betametasona e acetato de betametasona.

Os exemplos representativos e não limitantes de hormônios e antagonistas adequados para utilização em combinação com os compostos da presente invenção incluem, mas não estão limitados ao: Dietilstibestrol Etinil estradiol (mama, próstata); Antiestrógeno: Tamoxifena (mama); Andrógenos: Fluxomiesterona Propionato de Testosterona (mama); Antiandrógeno: Flutamida (próstata); Análogo do hormônio de liberação da Gonadotropina: Leuprolido (próstata). Outros hormônios incluem acetato de medroxiprogesterona, estradiol, acetato de megestrol, acetato de octreotida, dietilestilbestrol difosfato, testolactona e acetato de goserelina.

Os compostos da presente invenção também podem ser utilizados em combinação ou alternância com agentes terapêuticos utilizados para tratar a artrite. Os exemplos de tais agentes incluem, mas não estão limitados aos seguintes:

Os fármacos anti-inflamatórios não-esteroidais (AINEs), tais como cilcooxigenase-2 (COX-2) inibidores, aspirina (ácido acetilsalicílico), ibuprofeno, cetoprofeno, naproxeno e;

Os analgésicos, como acetaminofeno, analgésicos opioides e fentanil transdérmico;

Os modificadores de resposta biológica, tais como o etanercept, infliximab, adalimumab, anakinra, abatacept, tiruximab, certolizumab pegole e tocilizumab;

Os corticos teroides ou esteroides, tais como glicocorticoides (GC), fluticasona, budesonida, prednisolona, hidrocortisona, adrenalina, Aldosterona, Acetato de Cortisona, Desoximetasona, Dexametasona, Fluocortolone, Hidrocortisona, Meprednisona, metilprednisolona, prednisolona, prednisona, Prednilideno, Procionídeo, Rimexolone e Córtex Suprarrenal;

Os fármacos antirreumáticos modificadores de doença (DMARDs), tais como a hidroxicloroquina, ciclosfosfamida, clorambucil, auro composto auranofina, sulfassalazina, minociclina, ciclosporina, agonistas e antagonistas receptor toll-like, inibidores da quinase (por exemplo, p38 MAPK) imunossupressores e fator de necrose tumoral (TNF) bloqueadores (por exemplo, etanercept, infliximab e adalimumab); As medicações de fibromialgia, como a amitriptilina, fluoxetina, duloxetina, Milnacipran, cilobenzaprina, tramadol, gabapentina, pregabalina e inibidores de dupla reabsorção;

As medicações de osteoporose, tais como estrogênios, hormônios paratireoides, bifosfonatos, moléculas receptoras seletivos e agentes de formação óssea; As medicações para gota, tais como o alopurinol, probenecida, losartan, e fenofibrato; As medicações de psoríase, tal como acitretina, e Os tratamentos tópicos, tais como NSAIDs e capsaicina tópica. Os compostos da presente invenção também podem ser utilizados em combinação ou alternância com agentes terapêuticos utilizados para tratar a asma. Os exemplos de tais agentes incluem, mas não estão limitados aos seguintes: Os antialérgicos, tais como cromolina sódica e fumarato de cetotifeno; Os anti-inflamatórios, como NSAIDs e anti-inflamatórios esteroides (por exemplo, dipropionato de beclometasona, budesonida, dexametasona fosfato de sódio, flunisolida, propionato de fluticasona e triancinolona acetonida); Os anticolinérgicos, tais como o brometo de ipratrópio, beladona alcalóides, atropina e brometo de oxitropium; As anti-histaminas, tais como clorfeniramina, bromfeniramina, difenidramina, clemastina, dimenidrinato, cetirizina, hidroxizina, meclizina, fexofenadina, loratadina e enadina;

Os agonistas adrenérgicos &2 (agonistas beta), tais como albutamol, terbutalina, epinefrina, metaproterenol, brometo de ipratrópio, éfedra (fonte de alcalóides), efedrina e psuedoefedrina;

Os antagonistas de receptores de leucotrienos, tais como zafirlukast e zileuton Montelukast;

As xantinas (broncodilatadores), tais como a teofilina, difilina e oxtrifilina;

Outros agentes antiasmáticos, tais como xantinas, metilxantinas, oxitrifilina, aminofilina, inibidores da fosfodiesterase tais como zardaverina, antagonistas do cálcio tal como a nifedipina e ativadores de potássio, tais como cromacalima; e

Os agente(s) profilático(s), tais como cromoglicato de sódio, Cromolin sódio, nedocromil e cetotifeno.

Além disso, os exemplos de agentes ativos não limitantes que podem ser utilizados em combinação ou alternância com os compostos da presente invenção que incluem agentes antipsoríase, agentes anti-inflamatória de doença intestinal (anti-IBD), agentes antidoença pulmonar obstrutiva crônica (anti -DPOC), agentes antiesclerose múltipla.

Vl. Artigos de Fabricação

A presente invenção também inclui um artigo de fabricação apresentando uma composição que compreende um ou mais compostos descritos aqui. 0 artigo de fabricação pode conter um ou mais dos compostos descritos aqui, em combinação com um ou mais agentes terapêuticos. O artigo de fabricação pode incluir um frasco ou outro recipiente que contém uma composição adequada para a utilização de acordo com a presente invenção, juntamente com qualquer transportador, tanto em forma seca ou liquida. Em particular, o artigo de fabricação pode compreender um kit incluindo um recipiente com uma composição de acordo com a invenção. Nesse kit, a composição pode ser entregue em uma variedade de combinações. Por exemplo, a composição pode incluir uma única composição que contém todos os ingredientes ativos. Como alternativa, quando mais de um ingrediente ativo é fornecido, a composição pode incluir múltiplas doses, compreendendo cada um ou mais ingredientes ativos, sendo as doses destinadas à administração, em combinação, em sucessão, ou na proximidade imediata do tempo. Por exemplo, as doses poderiam ser de formas sólidas (por exemplo, comprimidos, cápsulas, pílulas ou similar) ou formas líquidas (por exemplo, frascos), cada um composto por um único ingrediente ativo, mas sendo apresentados em cartelas, sacos ou similares, para a administração em combinação química.

O artigo de fabricação também inclui instruções para a realização do método da invenção. Essas instruções podem ser de várias formas, tais como uma etiqueta no recipiente, uma inserção incluídas em uma caixa na qual o recipiente é embalado, ou uma variedade de formatos legíveis de computador. As instruções também podem ser impressas na caixa em que o frasco é embalado. As instruções contém informações tais como a informação de dosagem e administração suficiente para permitir que o indivíduo ou a iam profissional no campo para administrar a composição farmacêutica. Prevê-se que iam profissional no campo engloba qualquer médico, enfermeiro, técnico, cônjuge ou profissional da saúde que possa administrar a composição. A composição farmacêutica também pode ser autoadministrada pelo indivíduo.

VII. Métodos de Tratamento

Como anteriormente observado, os antifolatos podem variar quanto ao processo metabólico dependente de folato inibido aqui, e muitos antifolatos agem em uma variedade de enzimas. O pemetrexed (também conhecido como ALIMTA ® ou ácido L-glutâmico, N-[4 - [2 - (2-amino-4 ,7-dihidro- 4-oxo-lH-pirrolo [2,3-d] pirimidina-5 - il) etil] benzoil-, sal dissódico, heptahidratado) é um exemplo de um antifolato, para atuar em várias enzimas e tem a estrutura apresentada na Fórmula (13). 0 pemetrexed é conhecido para exibir atividade antineoplásica através da inibição TS, DHFR e GARFT.

<formula>formula see original document page 68</formula>

A timidilato sintetase (TS) é uma enzima de taxa de limitação em biossíntese do deoxinucleotídeo da pirimidina de novo e, portanto, é freqüentemente alvo de estratégias quimioterapêuticas. Em síntese do DNA, a TS desempenha um papel central na metilação redutora de deoxiuridina-5'-monofosfato (dUMP) para desoxitimidina- 5'-monof osfato (dTMP) . Assim, a inibição da TS leva diretamente à diminuição dos dTMP e, posteriormente, do 2'-desoxitimidina-5'-trifosfato (dTTP) , um precursor essencial para o DNA. Isto indiretamente resulta em um acúmulo de 2'-deoxiuridina-5'-trifosfato (dUTP) e, portanto, leva então o chamado de "menos morte da timina" devido à misincorporation de dUTP no DNA e subsequente excisão catalisada por uracil-DNA glicosilase, o que causa danos do DNA. Tanto este danos ao DNA e o desequilíbrio observado no dTTP/dUTP podem induzir eventos posteriores, levando a apoptose (morte celular).

A dihidrofolato redutase (DHFR) catalisa a redução dependente de NADPH-de 7,8-dihidrofolato (FHD ou H2F) para 5, 6,7,8-tetrahidrofolato (THF ou H4F). Assim, a DHFR é necessária para manter níveis intracelulares de THF, um cofator essencial no percurso da síntese de purinas, timidilato e vários aminoácidos.

A glicinamida ribonucleotídeo formiltransferase (GARFT) é uma enzima dependente de folato na biossíntese de novo das purinas caminho crítico para a divisão celular e proliferação. Especificamente, a GARFT catalisa a formação de purinas a partir da reação de 10- formiltetrahidrofolato (10-FTHF) para THF. A inibição da GARFT resulta em uma diminuição nos níveis intracelulares de purinas, que, por sua vez, inibe a síntese de DNA e RNA. Em última análise, a interrupção da síntese de DNA e RNA pela inibição da GARFT resulta em morte celular. O efeito antiproliferativo associado com a inibição da GARFT torna um alvo especialmente oportuno para fármacos antitumorais.

Os antifolatos, tal como pemetrexed, podem ser transportados em células por mecanismos tais como o sistema transportador de folato reduzido e o sistema transportador de proteína ligadora do folato da membrana. Uma vez na célula, o pemetrexed é convertido para formas de poliglutamilato por sintase de poliglutamato. As formas de poliglutamilato são retidas nas células e são inibidoras da TS e GARFT. A poliglutamilação é um processo dependente de concentração e tempo que ocorre em células tumorais e, em menor grau, nos tecidos normais. Os metabólitos poliglutamilados têm uma meia-vida intracelular aumentada, resultando em ação prolongada do fármaco em células malignas.

Em muitos casos, a ação ampla contra as múltiplas enzimas pode não ser desejável. Por exemplo, o pemetrexed inibe a DHFR, TS e GARFT. Como descrito acima, a inibição de TS e GARFT está fortemente relacionada com a morte celular, assim, a necessidade de recorrer inibidores de TS e GARFT como fármacos antitumorais. No entanto, a capacidade dos fármacos, tais como o pemetrexed, induz a apoptose que aumenta a toxicidade do fármaco (ou seja, a morte de células saudáveis, bem como células tumorais).

A função de compostos, tal como o pemetrexed, como inibidor da TS e GARFT surge da poliglutamilação do composto dentro da célula. De acordo com a presente invenção, foi determinado que os compostos que não são poliglutamilatáveis necessariamente não funcionam como um inibidor da TS ou um inibidor da GARFT. No entanto, a inibição da poliglutamilação geralmente não afeta a capacidade de um composto de funcionar como um inibidor da DHFR. Por exemplo, o pemetrexed foi demonstrado ter a inibição da DHFR equivalente, em comparação com as formas de poliglutamato de pemetrexed.

Como visto nas Fórmulas (7) através da (11), os compostos da invenção compreendem um grupo 4-metilideno no agrupamento do metileno glutamato dos compostos. Isso também pode ser referido como uma gama de agrupamento de metileno glutamato. A presença do grupo metileno torna os compostos inventivos não-poliglutamilatáveis. Assim, os compostos da invenção são específicos para inibição da DHFR (ou seja, não inibi a TS ou GARFT, devido à ausência de células no interior da poliglutamilação). Essa especificidade é desejável oferecer tratamentos mais específicos, evitando ou reduzindo a toxicidade e minimizando os efeitos colaterais mais normalmente associados com os compostos, tal como o pemetrexed, que atuam sobre outras enzimas, tais como a TS e GARFT.

Os compostos da presente invenção são especialmente úteis no tratamento de diversas condições em que a interrupção do metabolismo do ácido fólico é benéfica para o tratamento de um sintoma da doença ou condição geral. Assim, em outras modalidades, a presente invenção é direcionada aos métodos de tratamento de várias doenças ou condições. Nas modalidades particulares, a invenção apresenta métodos de tratamento de doenças ou condições conhecidas ou descobertas para ser tratáveis por interrupção do metabolismo de ácido fólico. Em outras modalidades, a invenção apresenta métodos de tratamento de várias doenças ou condições através da inibição da DHFR. Nas modalidades particulares, tal inibição da DHFR é seletiva. Em particular, a inibição específica da DHFR inclui a inibição da DHFR sem inibição da TS ou GARFT. Nas modalidades específicas, a invenção apresenta métodos de tratamento de condições, tais como a proliferação celular anormal, inflamação (incluindo doença inflamatória intestinal) , artrite (principalmente artrite reumatoide), psoríase e asma.

A. Proliferação Celular Anormal

A proliferação celular anormal tem-se mostrado ser a raiz de muitas doenças e condições, incluindo os transtornos de câncer e não-câncer que apresentam uma ameaça grave para a saúde. Geralmente, o crescimento das células anormais, como em um tumor, excede e é descoordenado com as das células normais. Além disso, o crescimento anormal de células tumorais geralmente persiste em uma forma anormal (isto é, excessiva) após a cessação dos estímulos que causou a anomalia no crescimento das células. Um tumor benigno é caracterizado por células que mantêm as suas características diferenciadas e não se dividem de uma maneira completamente descontrolada. Um tumor benigno é geralmente localizado e não-metastático. Um tumor maligno (ou seja, câncer) é caracterizado por células que são indiferenciadas, não respondem aos sinais de controlo do crescimento do organismo, e se multiplicam de uma maneira descontrolada. Os tumores malignos são invasivos e capazes de metástase. O tratamento de doenças ou condições de proliferação celular anormal inclui métodos de risco de morte, inibindo ou retardando o desenvolvimento ou o aumento no tamanho de um corpo ou população de células anormalmente proliferativas (incluindo tumores ou desenvolvimento cancerosos), reduzindo o número de células na população de células anormalmente proliferativas, ou evitando a propagação das células anormalmente proliferativas para outros locais anatômicos, bem como reduzir o tamanho de um crescimento anormal das células proliferativas. O termo "tratamento" não significa necessariamente que implica em uma cura ou uma abolição completa do transtorno da proliferação celular anormal. A prevenção da proliferação celular anormal inclui métodos que torna lento, demora, controla, ou diminuir a probabilidade de incidência ou o aparecimento de distúrbios de proliferação celular anormal, em comparação ao que poderia ocorrer na ausência de tratamento.

A proliferação celular anormal, notavelmente hiperproliferação, pode ocorrer como um resultado de uma ampla variedade de fatores, incluindo a mutação genética, infecção, exposição a toxinas, doenças autoimunes e indução de tumores malignos ou benignos. Os distúrbios da hiperprolif eração celular incluem, mas não estão limitados às doenças da pele, doenças dos vasos sangüíneos, doenças cardiovasculares, doenças fibróticas, doenças mesangiais, doenças autoimunes, rejeição de enxerto-versus-hospedeiro, tumores e cânceres.

Os tipos representativos, não limitantes de doenças de proliferação celular anormal não-neoplástica que podem ser tratados com a presente invenção incluem: pele, como psoriase, eczema, queratose, carcinoma basocelular, carcinoma espinocelular e doenças do sistema cardiovascular, como hipertensão e vasculo-oclusivas (por exemplo, aterosclerose, trombose e reestenose); doenças proliferativas dos vasos sangüíneos, tais como doenças vacinogênica (formação) e angiogênicas (espalhamento) que resultam em doenças de proliferação anormal dos vasos sangüíneos, como antiogeneses; e doenças relacionadas com o sistema endócrino, tal como os estados resistentes de insulina incluindo obesidade e diabetes melito (tipos 1 e 2).

As composições e os métodos da presente invenção também são úteis para o tratamento de doenças inflamatórias associadas com a proliferação de células anormal não-neoplásicas. Estas incluem, mas não estão limitadas às doenças inflamatórias intestinais (DII), artrite reumatoide (AR), esclerose múltipla (EM), glomerulonefrite proliferativa, lúpus eritematoso, esclerodermia, arterite temporal, tromboangiites obliterante, síndrome da mucocutânea linfonodal, asma, hospedeiro versus enxerto, tireoidite, doença de Graves, hiperatividade das vias aéreas induzida por antígeno, eosinofilia pulmonar, síndrome de Guillain-Barré, rinite alérgica, miastenia gravis, vírus-T linfotrópico humano do tipo 1-mielopatia associada, encefalite pelo vírus herpes simples, miopatias inflamatórias, aterosclerose e síndrome de Goodpasture.

Em uma determinada modalidade, os compostos da presente invenção são úteis no tratamento da psoriase. A psoriase é uma doença imune-mediada da pele caracterizada pela estimulação crônica de células T por células apresentadoras de antígeno (APC) que ocorre na pele. Os vários tipos de psoríase incluem, por exemplo, placa psoríase (ou seja, psoríase vulgares), psoríase pustulosa, psoríase gutata, psoríase inversa, psoríase eritrodérmica, artrite psoriática, psoríase do couro cabeludo e psoríase das unhas. Os tratamentos sistêmicos comuns para psoríase incluem metotrexato, ciclosporina e cretinoides orais, mas a sua utilização é limitada pela toxicidade. Até 40% dos pacientes com psoríase também desenvolvem artrite psoriástica (Kormeili T et al. Br J Dermatol. (2004) 151 (1):3-15).

Em outras modalidades, os compostos da presente invenção são úteis no tratamento de doenças proliferativas dos vasos sangüíneos, incluindo doenças vacinogênicas (formação) e angiogênicas (espalhamento) que resultam em proliferação anormal dos vasos sangüíneos. Outras doenças proliferativas dos vasos sangüíneos incluem artrite e doenças oculares tal como a retinopatia diabética. A neovascularização anormal também está associada com os tumores sólidos. Em uma determinada modalidade, os compostos da presente invenção são úteis no tratamento de doenças associadas à angiogénese descontrolada. As doenças representativas, não limitantes de angiogénese anormal incluem artrite reumatoide, isquemia e reperfusão relacionadas com edema cerebral e lesão, isquemia cortical, hiperplasia e hipervascularidade avariana, (síndrome dos ovários policísticos), endometriose, psoríase, retinopatia diabética e outras doenças oculares angiogênicas, tais como a retinopatia da prematuridade (retrolental fibroplástica), degeneração macular, rejeição de enxerto de córnea, glaucoma neuroscular e síndrome de Oster Webber. Os cânceres associados com a proliferação celular sangüínea anormal incluem hemangioendoteliomas, hemangiomas e o sarcoma de Kaposi.

Em outras modalidades, os compostos da presente invenção são úteis no tratamento de doenças do sistema cardiovascular que envolvem proliferação celular anormal. Essas doenças incluem, por exemplo, hipertensão, vasculo- oclusivas (por exemplo, a aterosclerose, trombose e reestenose após angioplastia), síndromes coronarianas agudas (tais como angina instável, infarto do miocárdio, cardiomiopatias isquêmicas e não isquêmicas, cardiomiopatia pós-MI e fibrose miocárdica) , e cardiomiopatia com indução de substância.

A lesão vascular pode resultar também em proliferação celular de músculo liso vascular e endotelial. As lesões podem ser causadas por eventos traumáticos ou intervenções (por exemplo, angioplastia, enxerto vascular, anastomose, transplantes de órgãos) (Clowes A et al. Vasc AJ. Surg (1991) 13:885). A restenose (por exemplo, coronária, carótida e lesões cerebrais) é a principal complicação do sucesso da angioplastia por balão das artérias coronárias. Acredita-se que é causada pela liberação de fatores de crescimento como um resultado das lesões mecânicas às células endoteliais do revestimento das artérias coronárias. Outras condições ateroscleróticas que podem ser tratadas ou prevenidas por meio da presente invenção incluem doenças das paredes arteriais que envolvem proliferação de células musculares lisas vasculares e/ou endoteliais, incluindo as complicações da diabetes, glomeruloscleroses diabéticas e retinopatia diabética.

Em outras modalidades, os compostos da presente invenção são úteis no tratamento de doenças de proliferação celular anormal relacionadas ao sistema endócrino. Essas doenças incluem, por exemplo, a estados resistentes à insulina, incluindo obesidade, diabetes melito (tipos 1 e 2), retinopatia diabética, degeneração macular associada à diabetes, diabetes gestacional, intolerância à glicose, síndrome do ovário policístico, osteoporose, osteopenia, e envelhecimento acelerado dos tecidos e órgãos, incluindo a síndrome de Werner.

Em outras modalidades, os compostos da presente invenção são úteis no tratamento de doenças de proliferação celular anormal do sistema urogenital. Estas incluem, por exemplo, edometriose, hiperplasia benigna da próstata, eiomioma, doença renal policística e nefropatia diabética.

Em outras modalidades, os compostos da presente invenção são úteis no tratamento das doenças fibróticas. As condições médicas que envolvem fibroses que inclui indesejáveis aderência tecidual resultantes de cirurgias ou ferimentos. Os exemplos não-limitante de doenças fibrosadas incluem cirrose hepática e transtorno celular proliferativo mesangial. Ainda em outras modalidades, a proliferação celular anormal dos tecidos conjuntivos e articulações podem ser tratadas de acordo com a presente invenção. Tais doenças incluem, por exemplo, fenômeno/doença de Raynaud, síndrome de Sjogren, esclerose sistêmica, lúpus eritematoso sistêmico, vasculitides, espondilite anquilosante, osteoartrite, artrite reativa, artrite psoriática e fibromialgia. Em certas modalidades, as doenças de proliferação celular anormal do sistema pulmonar também podem ser tratadas de acordo com a presente invenção. Estas doenças incluem, por exemplo, asma, doença pulmonar obstrutiva crônica (DPOC), doença reativa das vias aéreas, fibrose pulmonar e hipertensão pulmonar. Outras doenças, incluindo um componente proliferativo celular anormal que pode ser tratado de acordo com a invenção incluem síndrome de Behcet, doença fibrocística da mama, fibroadenoma, síndrome de fadiga crônica, síndrome do desconforto respiratório agudo (SDRA), cardiopatia isquêmica, síndrome pós-diálise, leucemia, síndrome de imunodeficiência adquirida, vasculite lipídico histiocitose, choque séptico, pólipose familiar do intestino, como a síndrome de Gardner. Também incluído no âmbito de doenças que podem ser tratada pelas composições e métodos da presente invenção são doenças hiperproliferativas de vírus-induzido, por exemplo, doença de vírus induzido do papiloma humano (por exemplo, as lesões causadas pela infecção pelo vírus do papiloma humano), doença de vírus induzido de Epstein-Barr, formação de cicatriz, verrugas genitais, verrugas cutâneas e similares.

Os compostos da presente invenção são mais úteis no tratamento de doenças e condições de proliferação celular anormal, incluindo diversos tipos de câncer, tais como tumores primários e metástases tumorais. Os tipos específicos, não limitantes de tumores benignos que podem ser tratados de acordo com a presente invenção incluem hemangiomas, adenomas hepatocelulares, hemangiomas cavernosos, hiperplasia nodular focai, neuromas acústicos, neurofibroma, adenoma dueto biliar, cistanoma dueto biliar, fibromas, lipomas, leiomiomas, mesotelioma, teratoma, mixomas, hiperplasia nodular regenerativa, tracomas e granulomas piogênicas.

Os cânceres tratáveis representativos, não limitantes de acordo com a invenção incluem o câncer da mama, câncer de pele, câncer de ossos, câncer de próstata, câncer do fígado, câncer de pulmão, câncer cerebral, câncer de laringe, vesícula, pâncreas, reto, paratireoide, tireoide, adrenal, tecido neural, cabeça e pescoço, cólon, estômago, brônquios, rins, carcinoma basocelular, carcinoma da célula escamosa de ambos os tipo de papilar e ulceração, carcinoma metastático da pele, osteosarcoma, sarcoma de Ewing, retículo sarcoma da célula, mieloma, tumor de células gigantes, tumor do pulmão de células pequenas, cálculo biliar, tumor de células ilhotas, tumor cerebral primário, linfocítica aguda e crônica e tumores granulocíticos, leucemia de células cabeluda, adenoma, hiperplasia, carcinoma medular, feocromocitoma, neuromas da mucosa, gangloneuroma intestinal, tumor do nervo hiperplástico da córnea, tumor do hábitos do marfanoid, tumor de Wilm, seminoma, tumor ovariano, tumor leiomiomater, displasia cervical e carcinoma in situ, neuroblastoma, retinoblastoma, sarcoma dos tecidos moles, carcinoides malignos, lesão tópica da pele, micose fungoide, rabdomiossarcoma, sarcoma de Kaposi, osteogênico e outros sarcomas, hipercalcemia maligna, tumor de células renais, policitemia vera, adenocarcinoma, glioblastoma multiforma, leucemias, linfomas, melanomas malignos, carcinoma epidermoide e outros carcinomas e sarcomas.

Os compostos da presente invenção também são úteis na prevenção ou tratamento de respostas proliferativas associadas com transplante de órgãos que contribuem para rejeições ou outras complicações. Por exemplo, as respostas proliferativas podem ocorrer durante o transplante do coração, pulmão, fígado, rim e outros órgãos ou sistemas orgânicos.

B. Inflamação

Os compostos da presente invenção também são úteis no tratamento de doenças caracterizadas por inflamação.

As doenças e condições que tem componentes inflamatórias significativos são ubíquos e incluem, por exemplo, doenças da pele, doenças intestinais, certas doenças neurológicas degenerativas, artrite, doenças autoimunes e uma variedade de outras doenças. Algumas destas doenças possuem tanto um componente inflamatório e de proliferação, como descrito acima. Em determinadas modalidades os compostos são utilizados no tratamento de doenças inflamatórias intestinais (DII), doença de Crohn (DC) , colite ulcerativa (CU), doença pulmonar obstrutiva crônica (DPOC), sarcoidose ou psoríase. Os compostos apresentados também são úteis no tratamento de outras doenças inflamatórias, por exemplo, doenças alérgicas, doenças da pele, rejeição de transplante, pos- es treptocócica e insuficiência renal autoimune, choque séptico, síndrome da resposta inflamatória sistêmica (SRIS), síndrome do desconforto respiratório adulto (SARA), envenenamento, lúpus eritematoso, tireoidite de Hashimoto, anemia hemolítica autoimune, diabetes melito insulino dependente, e febre reumática, doença inflamatória pélvica (PID), conjuntivite, dermatite e bronquite.

As doenças inflamatórias intestinais (DII), incluem várias condições inflamatórias crônicas, incluindo a doença de Crohn (DC) e colite ulcerativa (CU). Ambos as CD e CU são consideradas " idiopáticas" porque sua etiologias são desconhecidas. Embora a doença de Crohn e colite ulcerativa compartilham muitos sintomas (por exemplo, diarréia, dor abdominal, febre, fadiga), colite ulcerosa é limitado ao cólon em que a doença de Crohn pode envolver qualquer segmento do trato gastrointestinal. Ambas as doenças podem envolver manifestações extras, incluindo a artrite, doenças do olho (por exemplo, episclerite e irite), doenças da pele (por exemplo, eritema nodoso e pioderma gangrenoso) , complicações urinárias, cálculos biliares e anemia. Os derrames cerebral, retina trombos e embolia pulmonar não são incomuns, porque muitos pacientes estão em um estado de hipercoagulabi1idade.

Em um determinada modalidade, os compostos da presente invenção, incluindo os sais, ésteres e pró-fármacos farmaceuticamente aceitáveis, são úteis no tratamento de doença inflamatória intestinal. Em uma modalidade preferida, a doença inflamatória intestinal é a doença de Crohn.

A Doença Pulmonar Obstrutiva Crônica ou DPOC, é caracterizada por uma limitação de fluxo de ar não totalmente reversível que é progressiva e associada a uma reação inflamatória anormal dos pulmões. É uma das doenças respiratórias mais comuns de adultos, uma das principais causas de morbilidade crônica e mortalidade, e representa um importante encargo econômico e social a nível mundial (Pauwels R A. Lancet. (2004) 364 (9434) :613-20)). Outras denominações para a doença incluem, por exemplo, Doença das Vias Aéreas Obstrutiva Crônicas, (COAD), Doença Pulmonar Obstrutiva Crônica, (DPOC) , Limitação das Vias Aéreas Crônicas, (CAL ou CAFL) e Obstrução Crônica ao Fluxo de Ar (COA).

A DPOC é caracterizada pela inflamação crônica das vias aéreas, parênquima e vasculatura pulmonar. A inflamação envolve uma multiplicidade de células, mediadores, e efeitos inflamatórios. Os mediadores incluem, por

exemplo, proteases, oxidantes e peptídeos tóxicos. Ao longo do tempo, a inflamação prejudica os pulmões e leva a alterações patológicas características da DPOC. As manifestações da doença incluem tanto a bronquite crônica e enfisema. A bronquite crônica tem uma longa inflamação das vias aéreas, que produz uma grande quantidade de muco, causando sibilos e infecções. Ela é considerada crônica quando um indivíduo tem tosse e muco, em uma base regular durante pelo menos três meses em um ano e dois anos consecutivos. 0 enfisema é uma doença que destrói o alveolae e/ou bronchae, causando os sacos aéreos que tornam-se alargados, tendo dificuldade de respirar. 0 mais comum em pacientes com DPOC é a forma de enfisema centrolobular. Em um determinada modalidade, os compostos da presente invenção são úteis no tratamento da doença pulmonar obstrutiva crônica.

A sarcoidose é mais uma doença inflamatória crônica associada com a proliferação. celular anormal. A sarcoidose é uma doença multissistêmica granulomatosa onde os granulomas são criados pelos brotamentos angiogênicos capilares apresentando um constante fornecimento de células inflamatórias.

Tal como referido anteriormente, a inflamação também desempenha um importante papel na patogênese de doenças cardiovasculares, incluindo reestenose, aterosclerótica complicações decorrentes da ruptura da placa, isquemia tecidual grave e insuficiência cardíaca. As alterações inflamatórias na parede arterial, por exemplo, são consideradas para empenhar um papel importante no desenvolvimento da aterosclerose e restenose (Ross R. N Engl J Med. (1999) 340: 115-126). A inflamação local ocorre na formação das placas que também contribui para o enfraquecimento da cápsula fibrosa da placa avançada, resultando em ruptura da placa e síndromes coronarianas agudas (Lind L. Aterosclerose. (2003) 169 (2) :203-14). A esclerose múltipla (EM) é uma doença crônica, muitas vezes debilitante autoimune que acomete o sistema nervoso central. A EM é caracterizada por inflamação que resulta quando o corpo direciona anticorpos e glóbulos brancos contra as proteínas na bainha de mielina, material gorduroso que isola os nervos no cérebro e medula espinhal. O resultado pode ser múltiplas áreas de cicatrização (esclerose), o que retarda ou bloqueia a coordenação muscular, sensação visual e outros sinais nervosos. Em um determinada modalidade, os compostos da presente invenção são úteis no tratamento da esclerose múltipla.

Os inflamatórios mostraram-se associados com a patogênese das doenças neurológicas, incluindo a doença de Parkinson e Alzheimer (Mirza B. et al. Neuroscience (2000) 95 (2) :425-32; Gupta A. Int J Clin Pract. (2003 ) 57 (1) :36-9; Ghatan E. et al. Neuroscience (2000) 95 (2):425-32; Gupta A. Int J Clin Pract. (2003) 57(1):36-9; Ghatan E. et al. Neurosci Biobehav Rev. (1999) 23 (5) : 615-33) .

A presente invenção também é útil no tratamento de, por exemplo, doenças alérgicas, rinite alérgica, pele, rejeição de transplante, insuficiência renal autoimunes e pós-estreptocócica, choque séptico, síndrome da resposta inflamatória sistêmica (SRIS), síndrome do desconforto respiratório adulto (SARA) , envenenamento, lúpus eritematoso, miastenia gravis, doença de Graves, tireoidite de Hashimoto, anemia hemolítica autoimune, diabetes melito insulino dependente, glomerulonefrite e febre reumática, doença inflamatória pélvica (PID), conjuntivite, dermatite, bronquite e rinite. C. Asma

Os compostos apresentados aqui podem ser utilizados no tratamento da asma. Nos últimos anos, tornou-se claro que a principal patologia subjacente da asma é a inflamação dos tecidos das vias aéreas (Lemanke (2002) Pediatrics 109 (2):368-372; Nagayama et al. (1995)

Pediatr Allergy Immunol. 6:204-208). A asma é associada a uma vasta gama de sintomas e sinais, incluindo chiado, tosse, aperto no peito, falta de ar e produção de escarro. A inflamação das vias aéreas é uma característica fundamental da patogênese da asma e suas manifestações clínicas. As células inflamatórias, incluindo os mastócitos, eosinófilos e linfócitos e, ainda estão presentes nas vias respiratórias dos pacientes jovens com asma moderada.

A inflamação também desempenha um papel nos distúrbios de doenças respiratórias, com ou sem asma. A asma é, por vezes, classificada pelos desencadeadores que podem causar um episódio de asma (ou ataque de asma) ou coisas que fazem piorar a asma em certos indivíduos, como a asma ocupacional, asma induzida por exercício, asma noturna ou asma esteroide resistente. Assim, os compostos da invenção também podem ser utilizados no tratamento de distúrbios respiratórios em geral.

D. Artrite e Osteoartrite

Mais de 40 milhões de americanos sofrem de artrite nas suas diversas formas, que inclui mais de 100 tipos de doenças reumáticas (ou seja, doenças que afetam as articulações, músculos e tecido conjuntivo, o que torna ou suporta várias estruturas do corpo, incluindo os tendões, cartilagens, vasos sangüíneos e órgãos internos). Os tipos representativos de artrite incluem reumatoide (como reumatismo de tecidos moles e reumatismo não-articulares), fibromialgia, fibrosites, reumatismo muscular, dor miofascial, epicondilite do úmero, ombro congelado, síndrome de Tietze, fascite, tendinite, tenossinovite, bursite), juvenil crônica, espondiloartropatias (espondilite anquilosante), osteoartrite, hiperuricemia e artrite associada com gota aguda, gota crônica e lúpus eritematoso sistêmico.

A artrite hipertrófica ou osteoartrite é a forma mais comum de artrite e é caracterizada pela perda progressiva do conjunto da cartilagem. A osteoartrite é comum nas pessoas com mais de 65 anos, mas pode aparecer décadas anteriores. A perda progressiva da cartilagem faz com que os ossos se esfreguem uns contra os outros, causando dor e perda de movimento. Nos últimos anos, houve crescente evidência de que a inflamação desempenha um papel importante na osteoartrose. Quase um terço dos pacientes submetidos à cirurgia de substituição das articulações para osteoartrite (OA) apresentou inflamação grave no líquido sinovial que envolve e protege as articulações. Em uma modalidade, os compostos da presente invenção são úteis no tratamento da osteoartrite.

A segunda forma mais comum de artrite é artrite reumatoide. É uma doença autoimune que pode afetar todo o corpo, causando fraqueza, fadiga, perda de apetite e dores musculares. Normalmente, a idade de início é muito mais cedo do que osteoartrite, idades entre 20 e 50. A inflamação começa no revestimento sinovial e pode se espalhar por toda articulação. Em outra modalidade, os compostos da presente invenção são úteis no tratamento da artrite reumatoide.

EXPERIMENTAL

A presente invenção será agora descrita com referência específica aos diversos exemplos. Os exemplos a seguir não têm a intenção de ser uma limitação da invenção e são bastante especialmente apresentados como modalidades de exemplos.

EXEMPLO 1

Atividade Inibitória da Enzima dos Compostos de Antifolato

Os novos compostos de antifolato de acordo com a invenção, designados aqui CHL-003 e CHLl007, foram preparados para ser utilizados em diversos ensaios de atividade enzimática. As fórmulas para CHL-003 e CHL1007 estão apresentadas acima nas fórmulas (11) e (12), e os métodos desta síntese são apresentados nos exemplos a seguir. 0 CHL1007 é o (S) enantiômero do sal dissódico e CHL-003 está em uma forma racêmica. A atividade de CHL- 003 e CHL1007 contra diferentes enzimas utilizando os ensaios de atividade enzimática foi avaliada em relação aos conhecidos antifolatos metotrexato, aminopterina e Mobiltrex.

A potência inibitória contra DHFR em células de leucemia humana CEM-CCRF foi avaliada através da pré- incubação DHFR na presença de NADPH classificado com cinco concentrações de análogo para 3 minutos a 37 aC, iniciando a reação por adição de DHFR e quantitação residual da atividade de DHFR. A concentração do inibidor correspondente a 50% da atividade relativa (IC50) , em nM para os compostos é apresentado abaixo na Tabela 1.

Tabela 1

<table>table see original document page 88</column></row><table>

A potência inibitória contra TS nas células de leucemia de T-linfotrópico humano foi avaliada através da introdução de até cinco concentrações classificadas de compostos em mistura de reação, iniciando a reação por adição de TS e quantitação restante da atividade de TS. O IC50 em μΜ para os compostos é apresentada abaixo na Tabela 2. Tabela 2

<table>table see original document page 89</column></row><table>

Os dois sistemas de transportes são responsáveis pela captação de folatos reduzidos e antifolatos em células humanas: o transportador de folato reduzido (RFC) e família (FBP) da proteína ligadora do folato. 0 RFC é o mais amplamente distribuído e é geralmente considerado o principal mecanismo de transporte e folatos e antifolatos reduzidos. Desde que as células CCRF-CEM expressam apenas o RFC, a interação deste transportador com vários compostos podem ser medidos por sua potência como inibidores de afluxo de [3H] MTX.

A potência inibitória da aminopterina, Mobiltrex e CHL- 003 contra captação de RFC de células de leucemia humana CCRF-CEM foi avaliada pela inibição da captação pelas células intactas de 2 μΜ [3HJMTX (portanto a aminopterina foi avaliada em vez de metotrexato) . 0 IC50 in nM"1 para os compostos é apresentado abaixo na Tabela 3.

Tabela 3

<table>table see original document page 89</column></row><table> Os dados acima ilustrara a seletividade do novos antifolatos na inibição da enzima. Como visto na Tabela 1 a Tabela 3, o CHL-003 apresenta boa atividade contra DHFR (IC50 valores medidos na variação de nM) , mas mostra menor atividade contra TS (IC50 valores medidos em boas condições na variação de μΜ). Os testes similares indicaram que o CHL-003 apresentou pouca atividade contra AICART ou GARFT (IC50 valores >50 μΜ) . Como anteriormente observado, essa seletividade na atividade pode ser itil para melhorar a atividade contra as condiques especvficas, evitando efeitos colaterais indesejáveis. O inventivo antifolato CHL-003 tambim apresenta muito boa atividade contra a captaηγo de RFC, e de maneira surpreendente e significativamente supera tanto a aminopterina e Mobiltrex.

EXEMPLO 2

Síntese dos CHL1007

O composto (CHLl007) de sal dissódico de (S)-N-{4- [2- (2 , 4-diamino-7H-pirrolo [2 , 3-c?]pirimidina-5- il)etil]benzoil}-4-metileno-ácido L-glutâmico foi sintetizado a partir do comercial etil-4-iodobenzoato e (S)-dietil-2-amino-4-metilenepentanedionato hidroclorido em oito etapas em> 99% de pureza, conforme determinado por HPLC.

Etapa 1 Uma mistura de etil-4-iodobenzoato (180 g, 0,65 mol), alil álcool (67 mL, 0,98 mol), NaHCO3 (137 g, 1,63 mol), Pd(OAc)2 (4,39 g, 0,02 mol), e n-Bu4NBr (210 g, 0,652 mol) em tolueno (1,5 L) foi agitado em refluxo durante cinco horas. A reação misturada foi filtrada através do material de filtração CELITE®, lavada com EtOAc, e o filtrado foi lavado com água (duas lavagens com 500 mL de água de cada) e uma solução salina salmoura (500 mL). A fase orgânica foi concentrada e o resíduo foi purificado por cromatografia flash em sílica com EtOAc e éter de petróleo em uma proporção de 1:6. Um óleo incolor foi recuperado para o uso na próxima etapa. O esquema geral da reação é apresentado abaixo para a Etapa 1.

<formula>formula see original document page 91</formula>

Etapa 2

O produto da Etapa 1 (193,4 g, 0,94 mol) foi combinado com o paraformaldeído (28 g, 0,94 mol), N- etilbenzotiazolium brometo (46 g, 0,19 mol), Et3N (26 mL, 0,19 mol), e 4 peneiras moleculares 4 Angstrom em EtOH (1,7 L) e agitado em refluxo durante 24 horas. A reação misturada foi concentrada e o resíduo foi purificado por cromatografia flash em sílica com EtOAc e éter de petróleo, em uma proporção de 1:2 para fornecer produto da reação. 0 esquema geral da reação é apresentado abaixo para a Etapa 2. <formula>formula see original document page 92</formula>

Etapa 3

Uma solução de produto de reação da Etapa 2 (46 g, 0,19 mol) em MeOH (560 mL) foi combinada com a mistura de malonitrila (12,6 g, 0,19 mol) e Et3N (26 mL, 0,19 mol) em MeOH (190 mL) , e a solução resultante foi agitada em temperatura ambiente por 24 horas. 0 produto sólido foi coletado por filtração, lavado com MeOH, e seco produzindo um produto de reação sólido branco. 0 esquema geral da reação é apresentado abaixo para a Etapa 3.

<formula>formula see original document page 92</formula>

Etapa 4

O produto da reação da aminonitrila da Etapa 3 (20 g, 70 mmol) foi adicionado a uma solução de base livre de guanidina (109 mmol, de 10,4 g de cloridrato de guanidina e 7,7 g (109 mmol) de NaOEt) em ETOH anidro (600 mL) , e a mistura foi agitada em refluxo durante 48 horas. A reação misturada foi concentrada e o resíduo foi purificado por cromatografia flash em sílica, com 6% de água em acetona como eluente para formar o produto de reação. O esquema geral da reação é apresentado abaixo para a Etapa 4.

<formula>formula see original document page 93</formula>

Uma solução de 0,7 g de NaOH em 35 ml de água foi adicionado a uma mistura do produto de reação da Etapa 4 (5,55 g, 17,1 mmol) em MeOH (73 mL) , e a mistura foi aquecida sob refluxo durante 2 horas. A reação misturada foi então resfriada em temperatura ambiente, acidificada com AcOH (1,2 mL) para formar um precipitado ao qual foi acrescentada água (100 mL) . 0 precipitado foi então filtrado, lavado com água (150 mL) , e seco. 0 esquema geral da reação é apresentado abaixo para a Etapa 5.

<formula>formula see original document page 93</formula>

O HOBt χ H2O (1,52 g, 11,2 mmol) e dicloreto de etileno (EDC) (2,15 g, 11,2 mmol) foram adicionados a uma solução do produto de reação da Etapa 5 (3,34 g, 11,2 mmol) em DMF (70 mL) e agitado durante dez minutos. (S)- dietil-2-amino-4-x metilenepentanedionato χ HCl (2,85 g, 11,2 mmol) (pureza enantiomérica de 99,8%) e Et3N (3,12 mL, 22,5 mmol) foram adicionados, e a reação misturada foi agitada por duas horas . Após resfriamento ao ambiente, a reação misturada foi diluída com água (350 mL) e extraída com diclorometano. Os extratos orgânicos foram combinados, lavados com solução salina salmoura, secos sobre Na2S04 e concentrados. 0 produto bruto foi recristalizado de tolueno, filtrado, lavado com Et2O, e seco em vácuo fornecendo o produto da reação sólido branco. O esquema geral da reação é apresentado abaixo para a Etapa 6.

<formula>formula see original document page 94</formula>

Etapa 7

Para uma suspensão de um produto de reação da Etapa 6 (3,6 g, 7,28 mmol) em acetonitrila (85 mL) foi adicio] j N NaOH (aq. ) (85 mistura foi agitada por 16 horas. Em seguida, 2 N HCl foi adicionado para alcançar pH 5-6. 0 precipitado branco formado foi filtrado, lavado com água e acetonitrila e seco sob vácuo para fornecer um produto sólido amarelo. 0 esquema geral da reação é apresentado abaixo para a Etapa 7. <formula>formula see original document page 95</formula>

Etapa 8

Uma solução de NaOH (0,42 g, 10,5 mmol) em água (20 mL) foi adicionado para uma suspensão de um produto de reação da Etapa 7 (2,29 g, 5,23 mmol) e (40 mL) , e a mistura foi agitada por um hora. A reação misturada foi concentrada, acetonitrilo (20 mL) foi adicionado, e a conseqüente suspensão foi agitada durante a noite. 0 precipitado foi filtrado e seco sob vácuo fornecendo 2,45 g (97% de rendimento) do produto de reação sólido branco com> 99% de pureza tal como avaliado por HPLC em 254 nm. O esquema geral da reação é apresentado abaixo para a Etapa 8.

<formula>formula see original document page 95</formula>

A utilização de enantiomericamente puro (S)-dietil- 2-amino-4-metilenepentanedionato na Etapa 6 é particularmente útil para a preparação de um produto final que é também enantiomericamente puro. Na presente síntese, o produto formado é enantiomericamente puro para o (S) isômero.

EXEMPLO 3

Síntese dos CHL-003

O composto (CHL-003) N- {4-[2-(2,4-diamino-7H- pirrolo[2,3-d]pirimidina-5-il)etil]benzoil}-4-metilene- ácido glutâmico foi sintetizado a partir de comercial etil-4-iodobenzoato e dietil-2-amino-4- metilenepentanedionato hidroclorido em oito etapas em> 99% de pureza, conforme determinado por HPLC. As Etapas 1-5, 7 e 8 foram seguidas conforme descrito acima no Exemplo 2. A Etapa 6, conforme descrito abaixo, utilizado a forma racêmica de dietil-2-amino-4-x metilenepentanedionato χ HCl em vez do (S) isômero

Na Etapa 6, HOBt χ H2O (1,52 g, 11,2 mmol) e DCE (2,15 g, 11,2 mmol) foram adicionados a uma solução do produto de reação da Etapa 5 (3,34 g, 11,2 mmol) em DMF (70 mL) e agitado durante dez minutos. 0 dietil-2-amino- 4-x metilenepentanedionato χ HCl (2,85 g, 11,2 mmol) e Et3N (3,12 mL, 22,5 mmol) foram adicionados, e a reação misturada foi agitada por duas horas. Após resfriamento ao ambiente, a reação misturada foi diluída com água (350 mL) e extraída com diclorometano. Os extratos orgânicos foram combinados, lavados com solução salina salmoura, secos sobre Na2S04 e concentrados. 0 produto bruto foi recristalizado de tolueno, filtrado, lavado com Et2O, e seco em vácuo fornecendo o produto da reação sólido branco.

Muitas modificações e outras modalidades das invenções estabelecidas aqui relembradas para um versado na técnica que essas invenções relacionadas com o benefício dos ensinamentos apresentados nas descrições anteriores. Portanto, entende-se que as invenções não estão limitadas às modalidades específicas apresentadas e que as modificações e outras modalidades se destinem a ser incluídas no âmbito das reivindicações anexas. Embora os termos específicos que são empregados aqui, são utilizados somente em um sentido genérico e descritivo, e não para efeitos de limitação.

Claims

1. Composto caracterizado por ser de acordo com a seguinte fórmula <formula>formula see original document page 98</formula> em que: X é CHR9 ou NR9; Y1, Y2, e Y3 são independentemente 0 ou S; V1 e V2 são independentemente 0, S ou NZ; Z é H, alquila opcionalmente substituída, alquenila opcionalmente substituída, alquinila ou alcarila opcionalmente substituída; R1 e R2 são independentemente H, alquila opcionalmente substituída, alquenila opcionalmente substituída, alquinila ou alquarila opcionalmente substituída; R3 é H, alquila opcionalmente substituída, alquenila opcionalmente substituída, alquinila opcionalmente substituída, alcóxi, hidroxila, ou halo opcionalmente substituído; e R4, R5, Rõ/ R7, Rs, e R9 são independentemente H, alquila opcionalmente substituída, alquenila opcionalmente substituída, alquinila, acila, -C(0)-alquila, -C(O)- alquenila, ou -C(0)-alquinila opcionalmente substituída; ou éster, amida, sal, solvato, enantiômero e pró-fármaco farmaceuticamente aceitáveis destes.

2. Composto de acordo com a reivindicação 1, caracterizado pelo fato de que o composto está na forma de um sal farmaceuticamente aceitável.

3. Composto de acordo com a reivindicação 2, caracterizado pelo fato de que o composto está na forma de um sal de metal alcalino.

4. Composto de acordo com a reivindicação 3, caracterizado pelo fato de que o composto está na forma de um sal de dissódio.

5. Composto de acordo com a reivindicação 2, caracterizado pelo fato de que um ou mais de Ri, R2, e Z são substituídos por uma formação de sal de cátion.

6. Composto de acordo com a reivindicação 5, caracterizado pelo fato de que a formação de sal de cátion compreende um sal de metal alcalino.

7. Composto de acordo com a reivindicação 2, caracterizado pelo fato de que Vi e V2 são 0, e Ri e R2 são substituídos por uma formação de sal de cátion.

8. Composto de acordo com a reivindicação 7, caracterizado pelo fato de que a formação de sal de cátion compreende um sal de metal alcalino.

9. Composto de acordo com a reivindicação caracterizado por ter a seguinte fórmula <formula>formula see original document page 100</formula> em que: X é CHR9 OU NR9; R3 é H, alquila opcionalmente substituída, alquenila opcionalmente substituída, alquinila opcionalmente substituída, alcóxi, hidroxila, ou halo opcionalmente substituído; e R4, R5, R6, R7, Rs, e R9 são independentemente H, alquila opcionalmente substituída, alquenila opcionalmente substituída, alquinila, acila, -C(O)-alquila, -C(O)- alquenila, ou -C(O)-alquinila opcionalmente substituída; ou éster, amida, sal, solvato, enantiômero e pró-fármaco farmaceuticamente aceitáveis destes.

10. Composto de acordo com a reivindicação 9, caracterizado pelo fato de que o composto está na forma de um sal farmaceuticamente aceitável.

11. Composto de acordo com a reivindicação 10, caracterizado pelo fato de que o composto está na forma de um sal de metal alcalino.

12. Composto de acordo com a reivindicação 11, caracterizado pelo fato de que o composto está na forma de um sal de dissódio.

13. Composto de acordo com a reivindicação caracterizado por ter a seguinte fórmula <formula>formula see original document page 101</formula> em que: X é CHR9 ou NR9; Y1, Y2, e Y3 são independentemente O ou S; V1 e V2 são independentemente O, S ou NZ; Z é H, alquila opcionalmente substituída, alquenila opcionalmente substituída, alquinila ou alcarila opcionalmente substituída; R1 e R2 são independentemente H, alquila opcionalmente substituída, alquenila opcionalmente substituída, alquinila ou alcarila opcionalmente substituída; R3 é H, alquila opcionalmente substituída, alquenila opcionalmente substituída, alquinila opcionalmente substituída, alcóxi, hidroxila, ou halo opcionalmente substituído; e R9 é Η, alquila opcionalmente substituída, alquenila opcionalmente substituída, alquinila, acila, -C(O)- alquila, -C(O)-alquenila, ou -C(O)-alquinila opcionalmente substituída; ou éster, amida, sal, solvato, enantiômero e pró-fármaco farmaceuticamente aceitáveis destes.

14. Composto de acordo com a reivindicação 13, caracterizado pelo fato de que o composto está na forma de um sal farmaceuticamente aceitável.

15. Composto de acordo com a reivindicação 14, caracterizado pelo fato de que o composto está na forma de um sal de metal alcalino.

16. Composto de acordo com a reivindicação 15, caracterizado pelo fato de que o composto está na forma de um sal de dissódio.

17. Composto de acordo com a reivindicação 14, caracterizado pelo fato de que um ou mais de Ri, R2, e Z são substituídos por uma formação de sal de cátion.

18. Composto de acordo com a reivindicação 17, caracterizado pelo fato de que a formação de sal de cátion compreende um sal de metal alcalino.

19. Composto de acordo com a reivindicação 14, caracterizado pelo fato de que Vi e V2 são 0, e Ri e R2 são substituídos por uma formação de sal de cátion.

20. Composto de acordo com a reivindicação 19, caracterizado pelo fato de que a formação de sal de cátion compreende um sal de metal alcalino.

21. Composto de acordo com a reivindicação caracterizado por ter a seguinte fórmula <formula>formula see original document page 103</formula> ou éster, amida, sal, solvato, enantiômero e pró-fármaco farmaceuticamente aceitáveis destes.

22. Composto de acordo com ' a reivindicação 21, caracterizado pelo fato de que o composto está na forma de \om sal farmaceuticamente aceitável.

23. Composto de acordo com a reivindicação 22, caracterizado pelo fato de que o composto está na forma de um sal de metal alcalino.

24. Composto de acordo com a reivindicação 22, caracterizado pelo fato de que o composto está na forma de um sal de dissódio.

25. Composto de acordo com a reivindicação 24 caracterizado por ter a fórmula <formula>formula see original document page 104</formula> ou um enantiômero deste.

26. Composto de acordo com a reivindicação 21, caracterizado pelo fato de que o composto é enantiomericamente puro para o (S) enantiômero.

27. Composto de acordo com a reivindicação 26, caracterizado pelo fato de que o composto tem uma pureza enantiomérica de ao menos cerca de 80%.

28. Composto de acordo com a reivindicação 26, caracterizado pelo fato de que o composto tem uma pureza enantiomérica de ao menos cerca de 95%.

29. Composto de acordo com a reivindicação 21, caracterizado pelo fato de que o composto é enantiomericamente puro para o (R) enantiômero.

30. Composto de acordo com a reivindicação 29, caracterizado pelo fato de que o composto tem uma pureza enantiomérica de ao menos cerca de 80%.

31. Composto de acordo com a reivindicação 29, caracterizado pelo fato de que o composto tem uma pureza enantiomérica de ao menos cerca de 95%.

32. Composto de acordo com a reivindicação 25, caracterizado pelo fato de que o composto é enantiomericamente puro para o (S) enantiômero.

33. Composto de acordo com a reivindicação 32, caracterizado pelo fato de que o composto tem uma pureza enantiomérica ao menos cerca de 80%.

34. Composto de acordo com a reivindicação 32, caracterizado pelo fato de que o composto tem uma pureza enantiomérica de ao menos cerca de 95%.

35. Composto de acordo com a reivindicação 25, caracterizado pelo fato de que o composto é enantiomericamente puro para o (R) enantiômero.

36. Composto de acordo com a reivindicação 35, caracterizado pelo fato de que o composto tem uma pureza enantiomérica de ao menos cerca de 80%.

37. Composto de acordo com a reivindicação 35, caracterizado pelo fato de que o composto tem uma pureza enantiomérica de ao menos cerca de 95%.

38. Composição farmacêutica caracterizada por compreender um composto de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 37 e um transportador farmaceuticamente aceitável.

39. Método para o tratamento de uma condição selecionada a partir do grupo constituído de proliferação celular anormal, inflamação, asma e artrite, o referido método caracterizado por compreender a administração a um indivíduo em necessidade de tratamento uma quantidade terapeuticamente eficaz de um composto de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 37.