BRPI0801803A2 - combinação de substáncias para o tratamento de doenças infecciosas bacterianas, parasitárias, fungais e virais compreendendo a associação de um imunomodulador e substáncias com ação antibacteriana, antiparasitária, antifungal ou antiviral - Google Patents

Abstract

COMBINAçãO DE SUBSTáNCIAS PARA O TRATAMENTO DE DOENçAS INFECCIOSAS BACTERIANAS, PARASITáRIAS, FUNGAIS E VIRAIS COMPREENDENDO A ASSOCIAçãO DE UM IMUNOMODULADOR E SUBSTáNCIAS COM AçãO ANTIBACTERIANA, ANTIPARASITáRIA, ANTIFUNGAL OU ANTIVIRAL. Consistindo em uma combinação ou associação de substâncias destinada ao tratamento de doenças causadas por microorganismos patogênicos intracelulares, sejam facultativos ou cstritos, baseada na utilização de uma substância com atividade imunomoduladora, combinada ou associada à pelo menos uma outra substância com ação antimicrobiana. De acordo com a invenção, a combinação ou associação de substâncias é utilizada no tratamento de doenças bacterianas, parasitárias, fungais e virais. Os componentes da combinação ou associação de substâncias do presente invento, ou seja, o imunomodulador (agregado proteico de anidrido de fosfolinoleato-paímítoleato de amónio e magnésio) e pelo menos uma outra substância que possua atividade antimicrobiana, tanto podem ser administrados conjuntamente ou simultaneamente ou consecutivamente ou sequencialmente, por qualquer via que seja apropriada de acordo com a natureza fisica, química, propriedades farmacológicas e das características de solubilidade dos componentes da combinação ou associação, em quantidades suficientes para destruir os microorganismos nos animais ou seres humanos.

Description

COMBINAÇÃO DE SUBSTÂNCIAS PARA O TRATAMENTO DE DOENÇASINFECCIOSAS BACTERIANAS, PARASITÁRIAS, FUNGAIS E VIRAISCOMPREENDENDO A ASSOCIAÇÃO DE UM IMUNOMODULADOR ESUBSTÂNCIAS COM AÇÃO ANTIBACTERIANA, ANTIPARASITÁRIA,ANTIFUNGAL E ANTIVIRAL.

BREVE APRESENTAÇÃO

Uma nova combinação de substâncias destinada ao tratamento de doenças infecciosasconsistindo na utilização de uma associação ou combinação de uma substância comatividade imunomoduladora e de ao menos uma outra substância com açãoantimicrobiana é disponibilizada. De acordo com a invenção, esta combinação éutilizada no tratamento de infecções ou doenças bacterianas, parasitárias, fungais evirais.

"BACKGROUND" DA INVENÇÃO - DOENÇAS CAUSADAS PORPARASITOS INTRACELULARES - PAPEL DO SISTEMA IMUNOLÓGICO -ESTRATÉGIAS TERAPÊUTICAS E EXEMPLOS DOS TRATAMENTOSEXISTENTES NO ESTADO DA TÉCNICA.

As doenças infecciosas causadas por micróbios ou microorganismos intracelulares,facultativos ou estritos, entre os quais se incluem representantes dos gêneros dasbactérias, protozoários, fungos e vírus, para muitas das quais ainda não se conseguiuobter vacinas ou medicamentos eficazes que possam ser disponibilizadas em amplaescala, persistem como um flagelo desafiador para a espécie humana.

Como característica singular, estes microrganismos de gêneros e espécies tão diversassão parasitos intracelulares na maior parte do seu ciclo vital, sendo denominados nestecaso microorganismos intracelulares facultativos ou ainda denominadosmicroorganismos intracelulares estritos, quando possuírem ou apresentarem ciclo vitaltotalmente decorrido no interior das células do organismo hospedeiro, como ocorre nocaso dos vírus e algumas outras espécies de parasitos patogênicos.

São também denominados microorganismos ou patógenos oportunistas, poisadicionalmente possuem a capacidade de sobreviver por longos períodos no interior decélulas e tecidos inclusive nas células de defesa como por exemplo nos macrófagos, e àpartir destes locais de refúgio no organismo hospedeiro, aproveitar-se de oportunidadesfavoráveis a sua multiplicação, tais como situações ou estados de imunidade deficienteno organismo do hospedeiro, para então irromper de forma devastadora efreqüentemente letal.

No caso da tuberculose humana, uma doença causada por uma bactéria ou micobactériadenominada Mycobacterium tuberculosis (M.tuberculosis) que é um representantetípico de microorganismo de ciclo de vida intracelular; estima-se que vários milhões depessoas sejam infectadas anualmente, ocasionando mais de um milhão de mortes. (DyeC, Scheele S, Dolin P, Pathania V, RaviglioneMC. Consensus statement. Global burdenof tuberculosis: estimated incidence, prevalence, and mortality by country. WHO globalsurveillance and monitoring project. (JAMA 1999 Aug 18; 282 (7): 677-86).

Embora existam medicamentos para a terapia de tuberculose, os tratamentos existentessão complexos e de longa duração, envolvendo a combinação obrigatória de váriosmedicamentos com ação direta contra os parasitos, que devem ser administrados por aomenos quatro meses ou mais, diminuindo apreciavelmente a adesão dos pacientes aosesquemas terapêuticos em uso. Adicionalmente, o fenômeno do aparecimento de formasresistentes de parasitos aos medicamentos e esquemas de tratamento em uso, vemcomplicando ainda mais uma situação de saúde pública que já era grave, em relação àtuberculose. A baixa taxa de sucesso relativo dos medicamentos e esquemas detratamento em uso corrente, e ainda o aparecimento de formas resistentes de parasites,aumentam o desafio representado pela tuberculose e por outras doenças infecciosas,também causadas por microorganismos intracelulares.

A Malária, é uma outra doença infecciosa de impacto mundial, igualmente relacionada aparasites intracelulares, no caso os do gênero Plasmodium, sendo considerada a doençaparasitária mais importante no mundo. É endêmica em 91 países, estimando-se aocorrência de 300 a 500 milhões de casos de infecção por ano. As formas graves demalária ocorrem principalmente nas regiões tropicais. É a sétima causa de morte, comcerca de 2 milhões de óbitos anuais e o seu controle persiste como um problemaprioritário de saúde pública. (The World Health Report 1996, WHO, Geneva, 1997) e(World malária situation in 1994. Wkly Epidemiol Rec 1997 ; 36:269-75 ; 37:277-83 ;38:285-90).

Para o tratamento da malária além das medidas puramente profiláticas, tal como ocombate aos insetos-vetor, existe uma variedade de medicamentos e procedimentos emuso e propostos, que incluem desde a utilização de substâncias com atuação diretacontra os parasites (antimaláricos), imunização ou vacinação e finalmente, utilização daImunoterapia, que no atual estado da técnica, baseia-se na administração aos pacientesinfectados de alguns tipos de citoquinas, principalmente os denominados Interferons.

Os principais problemas para o combate a malária ocorrem, pelo lado das medidasprofiláticas, pelo aparecimento de variedades dos vetores da doença, principalmentemosquitos do gênero Anopheles, que progressivamente se tornam resistentes aosinseticidas e ainda problemas ambientais sérios, associados ao seu uso indiscriminado.O tratamento das várias formas da malária tem seu sucesso dificultado também pelaocorrência de sérios efeitos colaterais dos medicamentos antimaláricos de uso corrente,e ainda limitações de sua utilização em várias situações tais como a gravidezconcomitante à infecção, disseminação de variedades resistentes de protozoários efinalmente, pela inexistência de vacinas realmente eficazes.

A lepra ou hanseníase é uma outra doença infecciosa igualmente causada pormicrorganismos intracelulares, no caso também uma micobatéria, a Mycobacteriumleprae (M.leprae), pertencente ao mesmo gênero da M. Tuberculosis. A M.leprae afetanervos e pele, com danos severos. Ela é endêmica em certos países tropicais, e emparticular na Ásia e apesar de avanços no seu tratamento, esta doença está longe de serconsiderada sob controle, afetando ainda grandes contingentes humanos, segundo dadosda Organização Mundial da Saúde. (World Health Organization Global Strategy forfurtherreducing the leprosy burden and sustaining leprosy control activities: plan period:2006-2010. (Geneva (SWT): WHO; 2005).

AM. leprae, tal como a M. tuberculosis, é de crescimento extremamente lento quandocomparado com o de outras bactérias.O sistema imunológico muitas vezes é capaz dereagir eficazmente as micobactérias, levando a formação de granulomas. O tipo dereação do sistema imunológico ao M. leprae é extremamente importante na progressãoda lepra, já que esta micobactéria é igualmente capaz de sobreviver à fagocitose e,portanto é capaz de multiplicar-se dentro dos macrófagos, tal como o M. tuberculosis.Se houver uma reação do tipo infiamatório por parte do sistema imunológico, comformação de granulomas e a com destruição dos macrófagos infectados, a doença torna-se quase benigna, pois é pouco apta a progredir, ocasionando a denominada lepratuberculóide.Em caso contrário, ou seja, sem a ocorrência de uma reação do tipo inflamatório não háformação de granulomas e a bactéria pode disseminar-se, surgindo à lepra típica, oulepra lepromatosa. O tratamento existente para a lepra clínica, está baseado em umacombinação ou associação de antibióticos e sulfas, para a maximizar a eficácia e evitaro aparecimento de variedades resistentes ao tratamento. A Organização Mundial daSaúde (OMS) recomenda a associação de três medicamentos: A dapsona(diaminodifenilsulfona), a rifampicina (um antibiótico do grupo das rifamidas) e aclofazimina (Tintura lipossolúvel de riminofenazina).

O tempo de tratamento típico para doentes de lepra oscila entre 6 e 24 meses, sendo osproblemas apontados para o tratamento, a sua longa duração, o que dificulta a adesão depacientes ao tratamento, bem como a ocorrência de alguns severos efeitos colaterais,causados pelos medicamentos.

Outro tipo de microrganismo intracelular, com mecanismos de infecção e sobrevivênciano hospedeiro, similares aos da M.tuberculosis, M.avium e M.leprae, é a Listeriamonocytogenes (L.monocytogenes), causadora da Listeriose.

A Listeriose é a denominação de um grupo geral de manifestações clínicas causadaspela bactéria L. Monocytogenes, que incluem septicemia, meningite, encefalite, infecçãocervical ou intra-uterina em gestantes, as quais podem provocar aborto ou nascimentoprematuro. Outros danos podem ocorrer como endocardite, lesões hepáticas e em outrosórgãos, abscessos internos ou externos, e lesões cutâneas graves. A taxa de letalidade dadoença em recém-nascidos é de 30%; em adultos é de 35%; em torno de 11% parapacientes menores de 40 anos e 63% para pacientes acima de 60 anos. Quando ocorresepticemia associada à infecção por L.monocytogenes, a taxa de mortalidade é de 50% ecom meningite pode chegar a 70%.O tratamento recomendado no estado da técnica e nem sempre eficaz, baseia-se nautilização de antibióticos como penicilinas ou ampicilinas, utilizadas isoladamente ouem combinação com aminoglicosídeos, tais como a Amicacina. As cefalosporinas nãosão efetivas. Observaram-se recentemente casos de resistência da L.monocytogenes aantibióticos do grupo das tetraciclinas.

Finalmente como micoorganismos ou parasitas intracelulares estritos, têm-se os vírus,que ocasionam doenças de grande impacto em animais e seres humanos. Os tratamentosdas viroses, animais ou humanas, baseiam-se principalmente na vacinação preventiva,disponível apenas para umas poucas espécies de vírus. Para os casos em que ainda nãofoi possível o desenvolvimento de uma vacina eficaz ou ainda quando já infectado ohospedeiro, o tratamento disponível no estado da técnica, consiste na utilização dealguns tipos de compostos, com ação antiviral, que serão citados no decorrer dopresente.

Um aperfeiçoamento relativamente recente e que vem se popularizando para otratamento clínico das viroses e alguns outros tipos de doenças infecciosas, é baseado nautilização conjunta de citoquinas de origem exógena, que atuam comoimunoestimuladores ou imunomoduladores, como é o caso dos Interferon-alfa (IFN-alfa), Interferon-beta (IFN-beta), Interferon-gama (IFN-gama) e a Interleucina-2 (IL-2),que são utilizado em combinação ou associação com outros compostos, como, porexemplo, compostos antivirais.

Os denominados Interferons, são todos proteínas naturais produzidas por algumascélulas do sistema imunológico dos animais superiores, principalmente os denominadoslinfócitos T e algumas outras poucas células especializadas, em resposta à presença dedesafios de agentes considerados estranhos ao organismo hospedeiro, tais como vírus,parasitas e células tumorais. Os Interferons são situados em termos de categorizaçãoquímica, como uma categoria das glicoproteínas, denominada citoquinas. No atualestado da técnica, a sua obtenção de fontes externas ao organismo, ou fontes exógenas,é conseguida através de técnicas de cultura celular e/ou tecnologias de DNArecombinante e ainda seus alguns derivados, como o denominado Interferon-peguiladosão obtidos através de técnicas de semi-síntese química. Os denominados Interferons,no estado da arte, são utilizados para o tratamento de alguns tipos de câncer, terapiaadjuvante para algumas doenças infecciosas, incluindo-se as viroses, e nestes casos,normalmente associados a medicamentos com ação direta contra os micróbios oumicrorganismos patógenos, tais como compostos antivirais e alguns outros compostos,como será detalhadamente exposto no decorrer do presente.

Uma das justificativas científicas para o uso desta associação medicamentosa citada, é ade que o imunomodulador (Interferon) irá atuar indiretamente contra os microrganismosintracelulares, reforçando a ação do sistema imunológico, por exemplo, atrasando oudiminuindo as taxas de replicação viral e por esta via aumentando a chance de sucessodo tratamento com os outros medicamentos, eventualmente utilizados em associação,possuindo estes últimos citados, uma atuação direta contra os microorganismos.Entretanto a utilização na prática clínica de citoquinas de origem exógena, utilizadascomo imunomoduladores, tais como o Interferon-alfa, Interferon-gama e a Interleucina-2, esbarram em sérios problemas, que vão da ocorrência de efeitos colateraissignificativos ao seu custo proibitivo para a maioria dos pacientes. Adicionalmente,quando utilizados isoladamente na prática clínica, citoquinas utilizadas comoimunomoduladores, tais como o Interferon-alfa, o Interferon-gama e a Interleucina-2,não apresentam resultados animadores contra vírus e outros agentes infecciosos.No atual estado da técnica, apesar dos avanços da ciência e da medicina, ainda nãoexiste nenhuma forma de tratamento que seja completamente eficaz para uma grandevariedade de gêneros de patógenos intracelulares, particularmente dos vírus, seja atravésde medicamentos ou finalmente de vacinas, depois de instaurada a infecção.

O SISTEMA IMUNE E SUA ATUAÇÃO NA DEFESA DO HOSPEDEIRO CONTRAPATÓGENOS INTRACELULARES-TIPOS DE RESPOSTA EVIUNOLÓGICA

É de conhecimento geral que a resposta imune tem papel fundamental na defesa contraagentes infecciosos e se constitui no principal impedimento para a ocorrência deinfecções disseminadas, habitualmente associadas com alto índice de mortalidade. Étambém conhecido o fato de que para a quase totalidade das doenças infecciosas, onúmero de indivíduos expostos à infecção é bem superior ao dos que apresentam adoença, indicando que a maioria dos sistemas vivos, incluído o gênero humano, temcondições de destruir esses microorganismos e impedir a progressão da infecção.

Esta capacidade de defesa citada é proporcionada pelo sistema imune (Janeway CA Jr. -How the immune system protects the host from infection. - Microbes Infect. 2001;3:1167-71).

Entre as várias populações celulares que compõem o sistema imune, tambémdenominado sistema imunológico, destacam-se as células T4, também denominadoslinfócitos T4 ou ainda linfócitos T-Helper. Os Linfócitos T4 são considerados oscontroladores de toda a resposta imunológica.

Os Linfócitos T4 são responsáveis pelo combate a invasões, atuando principalmenteatravés de liberação de citoquinas, e ainda ativando ou inibindo todas as outras célulasdo sistema imunológico, para que venham a desempenhar suas funções específicas nadefesa do hospedeiro contra agentes invasores tais como vírus, protozoários, fungos ebactérias.

TIPOS DE RESPOSTA IMUNOLÓGICA - PRINCIPAIS CARACTERÍSTICASAgindo na defesa do organismo, as células T4 são responsáveis por desencadear doistipos básicos de resposta imunológica; conhecidas até o presente estado da técnica e quesão conhecidas como resposta imunológica do tipo TH1 e resposta imunológica do tipoTH2.

A denominada resposta imunológica do tipo TH-1, também denominada respostainflamatória, caracteriza-se tipicamente pela produção de citoquinas típicas, tais como aInterleucina-2 (IL-12), Interferon-gama (IFN-gama) e Fatores de Necrose Tumoral(TNF) pelas células do sistema imunológico. Por meio desta resposta citada, ocorreativação dos macrófagos, da fagocitose e finalmente dos mecanismos citotóxicos dosmacrófagos, levando a uma extensa destruição das zonas infectadas. A denominadaresposta imunológica do tipo TH-1, é bastante eficaz na eliminação dos patógenosintracelulares estritos e facultativos, tais como vírus, bactérias, protozoários e fungos.Atua também contra diversas espécies de tumores malignos.

A denominada resposta imunológica do tipo TH-2, caracteriza-se pela secreção deoutros tipos de citoquinas, tais como a IL-4 e IL-5 pelas células do sistemaimunológico. Caracteriza-se pelo estimulo da produção de anticorpos pelos linfócitosB., sendo eficaz contra organismos que circulem no sangue, ou microrganismosextracelulares, tais como bactérias extracelulares e algumas espécies de parasitos.

O SISTEMA IMUNE - MECANISMOS E SITUAÇÕES FACILITADORAS DASOBREVIVÊNCIA E INFECCÀO DOS AGENTES PATOGÊNICOSApesar da reconhecida eficiência do sistema imunológico no combate e controle demicroorganismos invasores, ao longo da evolução conjunta com os mamíferos, entreeles a espécie humana, diversos tipos de microorganismos intracelulares facultativos ouestritos conseguiram estabelecer mecanismos de sobrevivência, através dos quaisbloqueiam ou tornam menos eficaz a resposta imunológica do organismo hospedeiro,principalmente a resposta imunológica do tipo TH-1. Infortunadamente, esta capacidadede reduzir a eficácia do sistema imunológico do hospedeiro, que representa uma formade adaptação evolucionária e de sobrevivência altamente especializada e eficaz para osmicroorganismos ou agentes infecciosos, pode tornar-se desastrosa para o hospedeiro,entre eles os seres humanos. Pois a persistência do microorganismo no organismo,possibilitada pela inibição ou bloqueio do sistema imunológico do hospedeiro, podelevar com freqüência às doenças crônicas ou morte.

Portanto, durante o processo de introduzir-se visando infectar rapidamente todo oorganismo do hospedeiro, o que caracteriza a denominada fase de infecção aguda ouainda para garantir a viabilidade de uma longa permanência no organismo,caracterizando a denominada infecção crônica, os microorganismos intracelularesfacultativos ou estritos usualmente dependem basicamente da ocorrência e/oumanutenção de um estado de imunidade deficiente no hospedeiro.

Este estado de imunidade defectiva ou deficiente, que é altamente propícia àcolonização por patógenos intracelulares, tais como o M.tuberculosis, M.leprae,M.avium e L.monocytogenes, por exemplo, está basicamente relacionado à diminuiçãoou supressão da resposta imunológica do tipo TH-1 do hospedeiro, que é tambémdenominada resposta inflamatória.Esta condição de resposta imune defectiva ou bloqueada no organismo hospedeirocitada, tanto pode ser causada pela atuação direta do microorganismo patógenos, ouainda estar associada a outras causas e condições orgânicas concomitantes oupreexistentes à infecção, o que irá adicionalmente ampliar ainda mais as chances desucesso deste tipo de agentes patógenos.

Como exemplo de disfunção imunológica causada diretamente pelos patógenos, pode-secitar a ineficácia relativa de componentes do sistema imunológico, nos casos deinfecção por microorganismos intracelulares típicos, tais como as espéciesM.tuberculosis, M.leprae eL.monocytogen.es.

Esta disfunção citada pode ser associada diretamente à atuação dos parasitos, queatravés de vários e complexos mecanismos são capazes de ocasionar a redução daprodução ou liberação endógena de citoquinas do hospedeiro, tais como o Interferon-gama, o que leva à disfunção ou inaptidão funcional de componentes vitais do sistemade defesa do hospedeiro, como os macrófagos, por exemplo, que são dependentes deativação por estas citoquinas. (J. Gong et al., Infec. and Imm., Mar. 1996, Vol. 64, No.3. p. 913-918).

Esta condição de disfunção imunológica pode ser verificada também para outrasenfermidades, causada por outros tipos de microrganismos intracelulares, como amalária, para a qual existem fartas evidências, relatadas na literatura, de que umadepressão na resposta imunológica do tipo TH-1, à qual se relaciona uma significativadeficiência na produção de Interferon-gama endógeno, está também associada a umcurso mais severo da doença.

Outros exemplos de situações de deficiência imunológica concomitante ou preexistenteà infecção por microorganismos patógenos e, portanto facilitadoras de sua disseminaçãono hospedeiro, podem ocorrer associadas a outras patologias ou situações; tais comoquadros clínicos de Diabetes mellitus e ainda, na Síndrome de imunodeficiênciaadquirida (AIDS).

Por exemplo, durante o curso da infecção pelo HIV, a secreção pelo organismoinfectado pelo vírus HIV, das citoquinas envolvidas no desencadeamento da respostaimunológica do tipo TH-1, tais como a Interleucina-2 (IL-2) e Interferon antiviral (IFN-gama) está geralmente diminuída (S. Crowe et al., Antiv. Chemistry & Chem. 12:133-150 Review), causando imunodeficiência grave, que é atribuída principalmente aoprogressivo bloqueio da resposta do tipo TH-1. Isto ocasiona o aparecimentodisseminado das denominadas infecções oportunistas, causadas por microrganismos queaté então eram eficazmente mantidos sob controle pelo sistema imunológico, ou seja,atuando contra este tipo de microorganismos, através da resposta imunológica do tipoTH-1.

Outras situações onde a citada resposta imunológica está diminuída ou virtualmentesuprimida, por causas externas, ocorrem freqüentemente nos casos de pacientes emtratamento com quimioterapia, radioterapia ou ainda em uso de corticosteróides e outrosmedicamentos com efeitos imunodepressores e/ou imunossupressores, e por esta razãosão também especialmente propícias à disseminação dos microorganismosintracelulares.

Tendo em vista este conjunto de fatos e informações, pode-se afirmar portanto, que oponto comum para todos os gêneros e espécies de patógenos intracelulares facultativosou estritos, tais como as bactérias ou micobactérias (M. Tuberculosis, M. Leprae,M.avium, e L.monocytogenes), protozoários (Plasmodium sp, Leishmania sp,), fungos(Cândida sp, Criptosporidium sp) e diversas classes e tipos de vírus é sua reconhecidadependência, da necessidade da existência de uma condição ou estado de imunidadedefectiva, também denominado estado de deficiência imunológica, no organismo dohospedeiro, para permitir e/ou facilitar sua instalação, permanência e multiplicação.

UTILIZAÇÃO DE IMUNOMODULADORES NO TRATAMENTO DEPATÓGENOS INTRACELULARES - UTILIZAÇÃO DO INTERFERON EXÓGENO

Tendo em vista a comum dependência dos diversos gêneros e espécies de parasitosintracelulares facultativos ou estritos, de uma situação de imunidade defectiva oudeficiência imunológica, para o pleno sucesso de sua implantação e multiplicação nohospedeiro, elaborou-se ao longo do tempo no estado da técnica da Medicina, umaestratégia terapêutica baseada na Imunoterapia, isto é, a utilização clínica de compostoscom capacidade de atuação e/ou estimulação do sistema imune, para tentar reverter ouminimizar a citada deficiência imunológica e por esta via, habilitar ou reabilitar oorganismo a combater mais eficazmente os microorganismos invasores.Para tanto, empregam-se na prática clínica algumas substâncias capazes de atuar nosistema imunológico do hospedeiro infectado (imunomoduladores ) que estão relatadasno estado da técnica e serão detalhadas no presente.

Resumidamente, esta estratégia de combate a microorganismos intracelulares envolve autilização de substâncias capazes de atuar na estimulação do sistema imunológico, paraque este por sua vez combata os patógenos invasores, ou seja, trata-se de uma estratégiade ataque indireto aos patógenos intracelulares.

Uma das mais conhecidas substâncias desta classe são os Interferons, aos quais sãoatribuídas propriedades de inibir a processos de síntese de patógenos intracelulares,entre eles os vírus. Existem vários tipos de Interferons, citando-se entre eles os tiposalfa (IFN-alfa), beta (IFN-beta) e gama (IFN-gama), todos com propriedadesimunomoduladoras, que estão sob investigação para utilização em várias patologias.

Estes diversos tipos de Interferons são utilizados ou estão sob investigação para tentarestimular o sistema imunológico dos pacientes, visando a sua utilização como terapiastambém para doenças causadas por patógenos intracelulares, como por exemplo, aTuberculose.

Como já dito anteriormente, durante o curso da infecção pelo HIV-1 (AIDS), a secreçãode citoquinas do tipo TH-1, tais como a Interleucina-2 (IL-2) e interferon antiviral —IFN-(gama) está geralmente diminuída (S. Crowe et al., Antiv. Chemistry & Chem.12:133-150 Review), levando ao aparecimento progressivo de diversos tipos deinfecções causadas por microrganismos intracelulares ou oportunistas, que até entãoeram eficazmente mantidos sob controle pelo sistema imunológico.

Por conta disto, tendo em vista a similaridade dos mecanismos facilitadores da infecçãoda maioria dos parasites intracelulares, entre eles os causadores da tuberculose, ou seja,a sua capacidade de produzir ou aproveitar-se de situações de imunodeficiência nohospedeiro, a administração de alguns tipos de Interferons de origem exógena,utilizados como imunomoduladores, entre eles o Interferon-gama, tem sido tentada compropósitos terapêuticos, visando aumentar a resposta imunológica do tipo TH-1, empacientes com tuberculose, tanto os infectados, como os não-infectados pelo HIV.

A justificativa para aplicação do Interferon-gama de origem exógena, neste tipo depacientes, deve-se ao fato de que tal citoquina sabidamente é capaz de estimular aresposta imunológica do tipo TH-1, levando a reativação dos macrófagos e assimampliando ou restaurando ao menos parcialmente, os mecanismos imunológicos dohospedeiro, e conseqüentemente capacitando o sistema imune a atuar mais eficazmentecontra os patógenos.

No estado da técnica, encontram-se alguns exemplos destas tentativas, relatando aadministração terapêutica de interferon-gama de origem exógena em pacientes co-infectados pelo HIV e Tuberculose, em conjunto com outros medicamentos,ocasionando uma relativa melhora nas condições imunológicas e clínicas (A. Yola et al.,Retrovirology 2006; 3 (Suppl 1): S38).

Resultados semelhantes foram obtidos, quando o interferon-gama de origem exógenafoi utilizado como adjuvante a tratamento de pacientes com tuberculose, não infectadospelo HIV, mas apresentando infecção crônica por parasitos (M.tuberculosis) resistentesà quimioterapia antituberculose padrão, (Suarez-Mendez et al. BMC Infect. Dis. 2004;4:44).

No caso das hepatites virais dos tipos B e C, a utilização de Interferon-alfa exógeno,utilizado em conjunto com antivirais, representa no estado da técnica uma das poucasalternativas terapêuticas existentes, sendo largamente utilizada.

Embora a Imunoterapia, principalmente com a utilização de citoquinas de fontesexternas ou em outros termos, de origem exógena, tais como o Interferon-alfa eInterferon-gama e outras citoquinas menos comuns, represente uma estratégiapromissora para o tratamento de doenças infecciosas causadas por patógenosintracelulares, a utilização na prática deste tipo de terapia, esbarra em sérios obstáculose limitações.

Citando-se entre os maiores problemas para a utilização ampla deste tipo de terapia, oelevado custo do tratamento e o freqüente aparecimento de graves efeitos colaterais, oque muitas vezes ocasionam o abandono do tratamento com Interferons de origemexógena.

Para o Interferon-alfa, bem como para os demais tipos, os efeitos colaterais maiscomuns são a ocorrência de sintomas gripais, fadiga intensa, insônia, depressão, anemia,dores reumáticas, disfúnção da tireóide, alterações neuropsiquiátricas, retinopatia,alterações auditivas e gastrintestinais, que dependendo da severidade podem levar adescontinuação do tratamento.

Adicionalmente, consolidou-se no estado da técnica médica, o entendimento de que aadministração isolada de Interferon-alfa e/ou Interferon-gama de origem exógena, namaioria das vezes, são ineficazes contra os agentes infecciosos, sendo necessário àutilização conjunta de outras substâncias em associação aos mesmos, para tentaraumentar a eficácia terapêutica dos tratamentos. (Reichard et al. Lancet. 1998; 351:83-87; Poynard et al. Lancet. 1998; 352:1426-1432; McHutchison et al. New EnglandJournal of Medicine. (1998; 339:1485-1492).

DA INVENÇÃO

Em vista destes fatos, e problemas associados à utilização de citoquinas e Interferonsorigem exógena, como exposto, ainda que em combinação com outros medicamentos,uma nova e promissora e inovador terapia seria utilizar produtos ou medicamentos quepossuíssem capacidade de induzir a produção endógena ou autóloga de Interferon-gamae outras substâncias para aumentar ou reativar a capacidade de reação do sistemaimunológico frente aos microorganismos intracelulares patogênicos, nestescompreendendo-se as bactérias, micobactérias, protozoários, fungos e vírus.

O presente invento precisamente irá utilizar como um dos seus componentes acapacidade de um imunomodulador específico, ou seja, um composto conhecido oucaracterizado no estado da técnica, como sendo um agregado protéico de anidrido defosfolinoleato-palmitoleato de amônio e magnésio (PI - 0305373-3, USPTO 10/978,683 e EPA 0426250.3.2405) e que conforme relatado no estado da técnica, possui estapropriedade essencial de induzir a produção endógena ou autóloga de Interferon-gama eoutras substâncias, ocasionando um aumento da capacidade de ação e/ou reação dosistema imunológico do hospedeiro e consequentemente capacitando-o à enfrentar maiseficazmente quadros infecciosos e patológicos ocasionados por microorganismospatogênicos, sejam facultativos ou estritos. Este composto imunomodulador de interessepara o presente, esta relatado no estado da técnica citado, caracterizando-se porcompreender essencialmente um agregado protéico de anidrido de fosfolinoleato-palmitoleato de amônio e magnésio, com peso molecular de 320.000 Dalton (320 kDa),que na análise química mostrou a presença de 11,6 ± 4,0% de lipídeos totais, sendo 22,7± 5,0% de ácido palmitoleico, 42,9 ± 2,0% de ácido linoleico e 32,0 ± 3,0% de ácidolinoleico oxidado, 20,1 ± 0,9% de íons Mg, 10,0 ± 3,3% de íons amônio, 45,2 ± 2,7% defosfato e 0,49 ± 0,01% de proteínas; a proteína encontra-se distribuída percentualmenteda seguinte maneira; Asp 7,19%; Thr 3,56%; Ser 7,56%; Glu 8,53%; Pro 0,5%; Gly9,69%; Ala 7,46%; Vai 1,0%; Met 4,38%, Isoleu 2,54%, Leu 3,03%, Tyr 0,5%, Phe1,0%, His 2,83%; Lys 3,56%, Trp 1,3% e Arg 35,2%. Este referido compostoimunomodulador, de acordo com o estado da técnica, é capaz de induzir a produçãoendógena de Interferon-gama e outras substâncias-chave para o bom funcionamento ouampliação da capacidade de reação do sistema imunológico. Estas propriedades citadas,que são fundamentais para ativar e/ou restaurar o sistema imunológico para que estepossa combater microorganismos intracelulares com maior eficácia, serão aproveitadasem um nova combinação de substâncias, destinada ao tratamentode doenças causadaspor micróbios ou microorganismos intracelulares estritos ou facultativos.Esta combinação de substâncias que é o objeto da invenção, até o presente, não estácontido, previsto ou relatado no estado da técnica e dele não podendo ser inferido,conforme será demonstrado no presente.

Em outras palavras, o imunomodulador (agregado protéico de anidrido defosfolinoleato-palmitoleato de amônio e magnésio), na presente invenção, terá o papelde induzir ou auxiliar o desencadeamento de uma potente resposta imunológica,também denominada resposta imunológica do tipo TH-1, também denominada respostainfiamatória, que pode ser causada ou desencadeada ao nível do organismo dohospedeiro, através de mecanismos mediados por citoquinas, tais como a IL-12 e IFN-gama, quando em face de microorganismos invasores. Sabidamente, esta respostaimunológica do tipo TH-1 em termos biológicos, ocasiona a ativação dos macrófagos eda fagocitose e finalmente dos mecanismos citotóxicos dos citados macrófagos,resultando em uma extensa destruição das zonas infectadas e obviamente também dosmicróbios ou parasites invasores, como resultado final deste processo.

Por estas razões o desencadeamento de uma resposta imunológica do tipo TH-1 tambémdenominada resposta infiamatória, por parte do hospedeiro é considerada vital naeliminação dos patógenos intracelulares estritos e facultativos, tais como vírus,bactérias, fungos e protozoários e inversamente, quando esta resposta imunológica dotipo TH-1 no organismo hospedeiro é deficiente ou está bloqueada, tal situação facilita amultiplicação e permanência no organismo, dos citados parasites.

No presente invento, esta capacidade de desencadeamento de uma potente respostaimunológica do tipo TH-1, fundamental para o combate e controle de microorganismospatógenos, será fornecida pela presença específica do imunomodulador (agregadoprotéico de anidrido de fosfolinoleato-palmitoleato de amônio e magnésio) como umdos componentes-chave do da invenção.

Portanto um dos componentes da presente invenção, o imunomodulador (agregadoprotéico de anidrido de fosfolinoleato-palmitoleato de amônio e magnésio), pode sercaracterizado em termos de atuação, como possuidor de uma ação indireta contra osmicroorganismos, pois primordialmente sua atuação se verificará no sistemaimunológico, quando este estiver afetado ou bloqueado pela ação dos microrganismosou outras condições patológicas.

Adicionalmente, por razões que serão detalhadamente expostas no presente, a presenteinvenção, além do imunomodulador (agregado protéico de anidrido de fosfolinoleato-palmitoleato de amônio e magnésio) deverá sempre conjugar ou associar outrassubstâncias, estas com ação direta contra os microrganismos, para possibilitar um efeitosinergístico, causado pela combinação ou associação de componentes citados, contra osmicroorganismos infecciosos de interesse.

Portanto, no presente invento, a capacidade do imunomodulador (agregado protéico deanidrido de fosfolinoleato-palmitoleato de amônio e magnésio), de induzir uma potenteresposta imunológica do tipo TH-1, estará adicionalmente combinada ou associada coma capacidade antiparasitária, antibacteriana, antifungal, antiviral de diversas classes desubstâncias, que tenham capacidade de atuação direta contra os microorganismos eagentes patogênicos, possibilitando uma ação sinergística, diversa e mais potente que aatuação isolada das substâncias componentes da combinação ou associação.

Embora a idéia da combinação de citoquinas provenientes de uma fonte externa ouexógena, notadamente o Interferon-alfa, com medicamentos de ação direta contra ospatógenos, não seja nova, citando-se exemplificativamente a combinação do Interferon-alfa com um antiviral, por exemplo, o composto denominado Ribavirin; não pertence ouestá descrito no estado da técnica, uma combinação de substâncias destinada aotratamento de doenças infecciosas que consista na utilização específica doimunomodulador (agregado protéico de anidrido de fosfolinoleato-palmitoleato deamônio e magnésio), que é utilizado no presente invento, para desencadear umaprodução interna ou endógena de citoquinas, que são as substâncias-chave envolvidasno desencadeamento dos processos imunológicos responsáveis pela defesa contraparasitos e agentes infecciosos (resposta imunológica do tipo TH-1) e que estejaadicionalmente combinado ou associado à utilização conjunta com outros tipos ouclasses de medicamentos, estes últimos com ação direta contra os patógenos.O imunomodulador (agregado protéico de anidrido de fosfolinoleato-palmitoleato deamônio e magnésio) portanto, na combinação ou associação de compostos oumedicamentos que caracteriza o invento, será o responsável específico pela indução daprodução endógena de Interferon-gama e outras substâncias-chave para ativação oureativação do sistema imunológico, ou em outras palavras, com a finalidade dedesencadear uma resposta imunológica do Tipo TH-1 no organismo do hospedeiroinfectado, e será sempre utilizado em combinação ou associação a outras substâncias,estas últimas com ação direta contra microorganismos.

A combinação ou associação deste imunomodulador específico (agregado protéico deanidrido de fosfolinoleato-palmitoleato de amônio e magnésio), com outras substâncias,estas com atuação direta contra microorganismos infecciosos, representa umacombinação de substâncias ou invento inteiramente novo, distinto, não relatadoanteriormente no estado da técnica e dele não podendo ser simplesmente inferido, sendoseus efeitos notavelmente diversos e mais eficazes do que a utilização isolada doscomponentes, como será exposto no presente.

Qualquer espécie animal pode ser tratada com a associação da presente invenção.Embora o objetivo principal ou campo de aplicação pretendidos do presente inventoseja o tratamento de seres humanos, no entanto, a invenção e sua utilização prática nãopodem ser limitadas somente a esta espécie.

Sem a necessidade de informações adicionais, pode-se afirmar que qualquer pessoaversada na arte, com o auxílio apenas das informações e dos exemplos de utilizaçãoprática que serão fornecidos no presente, estará capacitada a entender e utilizar oinvento na sua extensão plena.

Os exemplos práticos de aplicação do invento, constantes da presente aplicação, serãofornecidos em caráter meramente ilustrativo e não limitam ou pretendem limitar emnenhum momento o campo de aplicação da invenção ou sua extensão. Quando julgadonecessário, serão citadas no presente, as patentes e publicações relacionadas ao invento,bem como fornecida a nomenclatura adotada pela International Union of Pure andApplied Chemistry (IUPAC) para denominação de compostos químicos, quandodisponível, para facilitar a compreensão do relatório, porém de igual forma, nãolimitando ou pretendendo-se limitar de nenhuma forma o campo de aplicação dainvenção ou sua extensão.

MODELOS ANIMAIS UTILIZADOS PARA ESTUDOS DE INFECCÂO PORPARASITAS INTRACELULARES - LISTERIA MONOCYTOGENES - AUTILIZAÇÃO DO IMUNOMODULADOR - A INVENÇÃO

Entre os diversos modelos experimentais clássicos destinados ao estudo dosmecanismos das infecções causadas por parasitos intracelulares estritos ou facultativosdestaca-se o modelo baseado na infecção de animais experimentais pela bactériaLis teria monocytogenes (L.monocytogenes), que é um microorganismo intracelularpatogênico, pelo fato deste microorganismo possuir em comum com todos os outrosparasitos intracelulares facultativos ou estritos, um mecanismo de infecção esobrevivência do organismo hospedeiro, baseado na sua capacidade de aproveitar-se desituações de resposta imune defectiva ou deficiência imunológica.

A inoculação experimental de L.monocytogenes induz letalidade dose-dependente emratos. Este modelo de infecção consagrado, é utilizado há décadas para o estudo deinfecção bacteriana intracelular e também para estudos de imunidade mediada porcélulas na presença destas infecções. (Tripathy S.P. & Mackaness G.B. 1969. The effectof cytotoxic agents on the primary response to Listeria monocytogenes. J. Exp. Med.130:1-16).

Por estas razões citadas, o modelo experimental de infecção por L.monocytogenes,mostra-se igualmente apto para o estudo e desenvolvimento de novos compostos oumedicamentos, especialmente para medicamentos ou compostos que possam atuar ouinfluenciar na resposta imunológica do organismo, frente às infecções microbianas.

Decorre daí, que os medicamentos ou compostos, especialmente os que atuem nosistema imunológico e que se mostrarem eficazes nestes experimentos, contra aL.monocytogenes, podem ter os resultados extrapolados para tratamento de infecçõescausadas por outros gêneros e espécies de microorganismos intracelulares, posto queestes possuem mecanismos infecciosos similares aos da L monocytogenes.

Em outros termos, compostos com capacidade de atuação no sistema imunológicoeficazes contra a L.monocytogenes, podem ser considerados para vir a integrar ou fazerparte de terapias, sejam estas preventivas ou curativas, a serem utilizados tambémcontra outros tipos de parasitos intracelulares, como M.tuberculosis, M.avium, M.lepraee Plasmodium sp, Leishamania sp, fungos oportunistas como, por exemplo, os daespécie Cândida sp. e finalmente de viroses, ocorrendo isoladamente ou em presença deco-infecção com outros microorganismos.

Pois todos estes tipos ou variedades de parasitos citados, são igualmente dependentespara viabilizar a sua presença ou permitir a colonização do organismo, tais como aL.monocytogenes, da existência ou manutenção de uma condição imunológicadisfuncional ou insuficiente no hospedeiro, que por sua vez está associada ou pode serrelacionado à deficiências ou insuficiência da resposta imunológica do tipo TH-1, doorganismo hospedeiro, frente aos patógenos.

Esta condição citada, pode ser preexistente, concomitante ou subseqüente à presençados microrganismos, sendo consensualmente aceito no estado da técnica, que se tratade evento necessário e/ou facilitador para a sobrevivência e disseminação no organismodos agentes patogênicos.

Portanto, os medicamentos ou esquemas terapêuticos que atuem para a promoção oupara o restabelecimento de uma resposta imune mais eficiente, serão potencialmenteúteis para serem empregados em esquemas terapêuticos contra uma ampla gama degêneros e espécies de microorganismos, entre eles os citados acima.

Precisamente este foi o ponto de partida para selecionar um imunomodulador, emparticular e especificamente, o imunomodulador (agregado protéico de anidrido defosfolinoleato-palmitoleato de amônio e magnésio) como um dos componentes dacomposição ou associação de compostos ou medicamentos, que caracteriza o presenteinvento.No estado da técnica, ou seja, nos pedidos de patente PI - 0305373-3, e ainda emUSPTO 10/978, 683 e finalmente em EPA 0426250.3.2405, encontram-se informaçõesde que o imunomodulador (agregado protéico de anidrido de fosfolinoleato-palmitoleatode amônio e magnésio) que é um dos componentes do presente invento, além depropriedades antineoplásicas, possui adicionalmente a capacidade de protegerparcialmente animais experimentais contra a infecção por dose letal deL. monocytogenes.

A bactéria L.monocytogenes, como já dito anteriormente, é um microorganismooportunista, de ciclo de vida predominantemente intracelular e que apresenta ummecanismo de infecção que é comum e típico do diversos gêneros, espécies e tipos deparasitos intracelulares de interesse para o presente invento, ou seja; todos dependemigualmente da ocorrência de uma resposta imunológica do tipo TH-1 deficiente nohospedeiro, como condição facilitadora de sua propagação e viabilidade no organismo.

Embora o mecanismo de atuação do imunomodulador (agregado protéico de anidrido defosfolinoleato-palmitoleato de amônio e magnésio), um dos componentes-chave daassociação de medicamentos, que é o objeto da presente invenção, não esteja aindacompletamente elucidado, suas propriedades de indução de uma potente respostaimunológica do tipo TH-1, com aumento na produção de IL-2, Interferon-gama e outrassubstâncias-chave para estimular este tipo de resposta imunológica, em face de eventosque podem ser correlacionados com deficiências do sistema imune, tais como câncer efinalmente infecção por patógenos intracelulares, tais como a L.monocytogenes, sãonotórias e estão relatadas no estado da técnica. (Patente brasileira - PI - 0305373-3,USPTO 10/978, 683 e EPA 0426250.3.2405).ESTADO DA TÉCNICA - PI - 0305373-3. USPTO 10/978.683 e EPA0426250.3.2405- UTILIZAÇÃO DO IMUNOMODULADOR EM LISTERIOSEEm PI - 0305373-3, USPTO 10/ 978, 683 e EPA 0426250.3.2405, encontramosexemplos do efeito do imunomodulador (agregado protéico de anidrido defosfolinoleato-palmitoleato de amônio e magnésio) contra a bactéria L.monocytogenes,com sobrevivência de cerca de 30% a 40% dos animais experimentais tratados com oproduto, estando associado tal efeito biológico nos animais, principalmente com oaumento da produção de Interferon-gama e Interleucina-2 endógenos, embora tal efeitoprotetor, se apresente com limitações, quando o imunomodulador (agregado protéico deanidrido de fosfolinoleato-palmitoleato de amônio e magnésio) é utilizado de formaisolada.

Encontra-se no estado da técnica, em PI - 0305373-3, USPTO 10/978, 683 e EPA0426250.3.2405, portanto, indicações seguras de que a utilização específica doimunomodulador (agregado protéico de anidrido de fosfolinoleato-palmitoleato deamônio e magnésio) é também capaz de induzir um aumento na produção de IL-2 eIFN-gama em animais experimentais infectados por L.monocytogenes, ou em outrostermos, de induzir no organismo do hospedeiro uma resposta do tipo inflamatória,também conhecida como resposta imunológica do Tipo TH-1, considerada no estado daarte, como sendo de fundamental importância para combater todos os microorganismosintracelulares facultativos ou estritos, e que por esta razão, foi deliberadamenteselecionado como um dos componentes-chave do presente invento.

Estas informações, já conhecidas no estado da técnica, ou seja, contidas era PI -0305373-3, USPTO 10/978,683 e EPA 0426250.3.2405, não deixam dúvidas de que oimunomodulador (agregado protéico de anidrido de fosfolinoleato-palmitoleato deamônio e magnésio) possui a capacidade de estimular uma potente resposta do tipoinflamatório, também denominada resposta imunológica do tipo TH-1, sendo que estetipo de resposta imunológica é fundamental para capacitar o organismo para combater ainfecções causadas por microrganismos intracelulares, entre eles as espécies de especialinteresse para o presente invento.

Porém esta capacidade de imunoproteção proporcionada pela utilização doimunomodulador (agregado protéico de anidrido de fosfolinoleato-palmitoleato deamônio e magnésio), somente consegue proteger parcialmente os animais, já que umaporcentagem relativamente baixa dos animais experimentais infectados por patógenosintracelulares, no caso a L.monocytogenes, sobrevive, segundo está relatado em PI -0305373-3 USPTO 10/978, 683 e EPA 0426250.3.2405, quando o imunomodulador(agregado protéico de anidrido de fosfolinoleato-palmitoleato de amônio e magnésio) éutilizado de forma isolada.

Estes dados do estado da técnica citado, relatando a ineficácia relativa doimunomodulador (agregado protéico de anidrido de fosfolinoleato-palmitoleato deamônio e magnésio ) contra um parasito intracelular típico (L.monocytogenes) quandoeste composto é utilizado isoladamente não são surpreendentes ou representam umconhecimento novo.

A ineficácia relativa da utilização de compostos imunomoduladores em geral, quandoestes são utilizados de forma isolada para combater infecções causadas pormicroorganismos intracelulares, é um fato científico reconhecido e bem documentado.

Como exemplo, citamos a notória ineficácia da utilização do Interferon-alfa de origemexógena, que é utilizado como um imunomodulador no tratatamento de infecções virais,como por exemplo, na terapia da Hepatite C, quando utilizado isoladamente. Na práticaclínica visando ao tratamento da Hepatite C, tal deficiência da atividade dos Interferonsde origem exógena somente pôde ser minimizada, através do uso em conjugação ouassociação com outras substâncias, estas com ação antiviral que são adicionadas ouassociadas quando do uso do Interferon-alfa de origem exógena. (Reichard et al. Lancet.1998; 351:83-87; Poynard et al. Lancet. 1998; 352:1426-1432; McHutchison et al. NewEngland Journal of Medicine. (1998; 339:1485-1492). Por conta destas notóriasdeficiências relatadas para a utilização isolada do Interferon-alfa exógeno no tratamentoda Hepatite C, a Food and Drug Administration (FDA), que é o órgão do governo norte-americano para o registro de novos medicamentes, somente liberou o Interferon-alfapara tratamento de pacientes com Hepatite C, no ano de 1998, após ensaios clínicosdemonstrarem que a sua utilização em combinação ou associação com um antiviral nocaso o Ribavirin (l-j8-D-ribofuranosil-l,2,4-triazol-3-carboxamida), apresentavaresultados bastante superiores quando comparados à sua utilização isolada, notratamento de pacientes desta doença.

Portanto, quando se utiliza a combinação do interferon-alfa com medicamentos comação direta contra parasites, como, por exemplo, a combinação do Interferon-alfa deorigem exógena e do antiviral Ribavirin (l-j8-D-ribofuranosil-l, 2,4-triazol-3-carboxamida) e a referida combinação ou associação mencionada é especificamenteutilizada contra o vírus da Hepatite C pode-se esperar obter resultados clínicos muitosuperiores à utilização isolada dos compostos.

No presente invento optou-se também pela associação de um imunomoduladorespecífico, que é caracterizado quimicamente como sendo um agregado protéico deanidrido de fosfolinoleato-palmitoleato de amônio e magnésio que está relatado noestado da técnica em PI - 0305373-3, USPTO 10/ 978, 683 e EPA 0426250.3.2405,com outras substâncias ou medicamentos, estas últimas com capacidade de atuaçãodireta contra os microorganismos, tais como antibióticos, quimioterápicos, antivirais, eoutras substâncias, como será detalhadamente explanado no presente.

O imunomodulador (agregado protéico de anidrido de fosfolinoleato-palmitoleato deamônio e magnésio) é obtido na sua forma final, como um composto de forma cristalinaapto a ser utilizado, para os propósitos do presente invento, através da fermentação dofungo da espécie Aspergillus oryzae (A.oryzae) em meio de cultura apropriada, tal comorelatado no estado da técnica em PI - 0305373-3, USPTO 10/ 978, 683 e EPA0426250.3.2405.

A NOVA ESTRATÉGIA TERAPÊUTICA UTILIZADA NO PRESENTE INVENTO

O presente invento, no entanto irá diferir substancialmente das terapias ou estratégiasterapêuticas existentes que dependam da utilização de citoquinas de origem exógena,citando-se notadamente os Interferon, que são utilizados em combinação com outrassubstâncias, e como tal estão relatadas no estado da técnica, e esta diferença oferecevantagens clínicas, imunológicas e econômicas, conforme se explanará detalhadamenteno presente.

Pois, ao invés de se utilizar uma citoquina, tal como o Interferon de origem exógena porsuas capacidades imunomoduladoras ou outro produto com propriedades semelhantes etambém de origem exógena, adotou-se uma estratégia terapêutica totalmente inovadoracomo fundamento spara o presente invento, qual seja:

O presente invento utiliza um produto específico que é capaz de estimular a produçãoendógena de interferon-gama e outras substâncias de interesse para o bomfuncionamento do sistema imunológico, e que adicionalmente será combinado ouassociado a outros medicamentos, estes últimos possuidores de uma ação direta contraos microorganismos intracelulares ou oportunistas, o que representa uma novacombinação ou associação de substâncias não descritas ou contidas no estado datécnica.

A combinação ou associação no invento, de um composto imunomodulador específicocom outras substâncias, como, por exemplo, compostos com ação antibacteriana,antiparasitária, antifungal, antiviral, estes últimao por sua vez, capazes de atuardiretamente contra microorganismos, tem a finalidade de maximizar o efeito terapêuticoda combinação ou associação.

Pois esta combinação ou associação de compostos que caracteriza o presente invento,proporciona um ataque por dupla via aos microrganismos agressores, ou seja,possibilita um ataque indireto, pela via da imunomodulacão. proporcionada pelapresença do imunomodulador específico (agregado protéico de anidrido defosfolinoleato-palmitoleato de amônio e magnésio) na combinação de substâncias quecaracteriza o invento e ainda permite adicionalmente uma via de ataque direto,representado pela presença das outras substâncias combinadas ou associadas aoimunomodulador, e portanto, somam-se os efeitos dos componentes, atuandoconjuntamente e de forma muito mais ampla e potente (sinergia), contra osmicroorganismos patógenos.

Em outros termos, no presente invento, a utilidade ou papel desempenhado peloimunomodulador específico (agregado protéico de anidrido de fosfolinoleato-palmitoleato de amônio e magnésio) é atuar como um indutor e/ou estimulador daprodução de Interferon-gama endógeno e adicionalmente estimular ou modular aprodução de outras substâncias com atuação no sistema imunológico e por esta viasendo capaz de ampliar ou amplificar ou restaurar a resposta imunológica dohospedeiro, frente a microorganismos patogênicos, ou seja, ampliar ou amplificar ourestaurar a denominada resposta imunológica do tipo TH-1.

A utilização deliberada de tal tipo de produto, especificamente a substânciacaracterizada no estado da técnica como um agregado protéico de anidrido defosfolinoleato-palmitoleato de amônio e magnésio, como um dos componentes-chave dapresente invenção, não é trivial, ocasional ou aleatória.

Pois a utilização do um imunomodulador específico, que está descrito no estado datécnica, como um agregado protéico de anidrido de fosfolinoleato-palmitoleato deamônio e magnésio não só maximiza a eficácia do presente invento, pelodesencadeamento de uma potente resposta imunológica do tipo TH-1, mas ofereceoutras surpreendentes e notáveis vantagens em relação aos outros medicamentos ouassociações de medicamentos de uso corrente, que estão fundamentados na utilização deInterferons e algumas outras citoquinas, todos de de origem exógena, como adjuvantesterapêuticos.

Entre estas vantagens destaca-se uma especialmente importante, qual seja, aminimização de oportunidades de ocorrência de efeitos colaterais no decorrer do uso doinvento no tratamento de infecções na prática, o que que é possibilitada pela presençaespecífica do imunomodulador (agregado protéico de anidrido de fosfolinoleato-palmitoleato de amônio e magnésio) como componente-chave no invento, destinado ainduzir a produção endógena de citoquinas, entre elas o IFN-gama, implicandoconsequentemente na ativação ou reativação de uma resposta imunológica do tipo TH-1.

Ou seja, esta escolha deliberada do imunomodulador específico (agregado protéico deanidrido de fosfolinoleato-palmitoleato de amônio e magnésio) como um componente-chave do presente invento permite eliminar ou minimizar em muito a necessidade deadministração de Interferons ou outras citoquinas sintéticas de origem exógena, notratamento de infecções causadas por patogenos intracelulares, resultando em umasubstancial diminuição de chances da ocorrência de sérios efeitos colaterais, já que estesefeitos indesejáveis,estão freqüentemente associados à introdução no organismo deprodutos de origem externa ou exógena, entre elas as citoquinas citadas.

Portanto, o imunomodulador (agregado protéico de anidrido de fosfolinoleato-palmitoleato de amônio e magnésio) foi especifica e deliberadamente selecionado parautilização no presente invento, não só porque a sua presença como componente-chaveno invento, permite desencadear e/ou ou restaurar uma potente resposta imunológica dotipo TH-1 no organismo quando utilizado no tratamento de processos infecciosos, masadicionalmente, porque esta presença no invento, permite eliminar ou minimizar anecessidade de administração de Interferons ou outras citoquinas de origem exógena, notratamento de infecções causadas por patogenos intracelulares, resultando em umasubstancial diminuição de chances da ocorrência de sérios efeitos colaterais, quesabidamente estão associados à introdução no organismo de produtos de origem externaou exógena em geral e de citoquinas de origem exógena em particular.Pois a combinação de substâncias do presente invento utiliza uma substância específicaque é o imumodulador (agregado protéico de anidrido de fosfolinoleato-palmitoleato deamônio e magnésio), comprovadamente capaz de estimular a produção destassubstancias entre elas o Interferon-gama, pelo próprio organismo do hospedeiro ou emoutros termos, produção endógena de citoquinas, entre elas o Interferon (Interferon-gama).

Para qualquer profissional versado no estado da técnica, as vantagens da utilização desubstâncias ou produtos de origem autóloga ou endógena ao invés de se utilizar dasmesmas substâncias ou similares ou análogos, mas obtidas de fontes de origemexógena, em tratamentos ou procedimentos terapêuticos, em termos de diminuição dapossibilidade de ocorrência de reações alérgicas e outros sérios efeitos colaterais, sãoevidentes, indiscutíveis e não demandam maiores explicações adicionais.

No presente invento, partindo-se do conhecimento da capacidade de imunomodulaçãodo imunomodulador (agregado protéico de anidrido de fosfolinoleato-palmitoleato deamônio e magnésio) que já está descrito no estado da técnica e ainda do conhecimentoda possibilidade da utilização terapêutica dos Interferons de origem exógena entre elesos Interferon-alfa e Interferon-gama como adjuvantes, associado à utilização de outrassubstâncias, estas com com ação direta contra microrganismos, chegou-se a umacombinação de substâncias para o tratamento de doenças infecciosas, diferindo estacombinação, substancialmente, de outras combinações de medicamentos relatadas noestado da arte.

O imunomodulador (agregado protéico de anidrido de fosfolinoleato-palmitoleato deamônio e magnésio) passa a ter ou desempenhar um papel semelhante ao que eradesempenhado pelos Interferons de origem exógena, nas combinações ou associaçõesmedicamentosas conhecidas até agora no estado da arte e citadas no presente, porémcom as evidentes vantagens decorrentes de ser capaz de induzir a formação endógena deinterferon-gama e outras substâncias chave para o bom funcionamento do sistemaimunológico.

Adicionalmente o presente invento, ao prescindir da utilização de citoquinas, como oInterferon e outras, obtidas de origem exógena, ainda permite obter vantagenseconômicas, ainda que indiretamente, ou seja, pela diminuição de oportunidades deocorrência de efeitos colaterais sérios, habitualmente associados ao uso em pacientes decitoquinas de origem exógena, que freqüentemente demandam adicionalmente outrostratamentos ou procedimentos médicos bastante onerosos em termos econômicos, parasua correção ou minimização.

Por todas estas razões, a combinação de substâncias que caracteriza a presenteinvenção, ou seja, a combinação do imunomodulador (agregado protéico de anidrido defosfolinoleato-palmitoleato de amônio e magnésio), que se mostra capaz de induzir aprodução endógena de interferon-gama e outras substâncias, ocasionando odesencadeamento, amplificação ou restauração da denominada resposta imunológica dotipo TH-1, e que será combinado ou associado a outros compostos, estes últimos comatuação direta contra microorganismos intracelulares, não somente disponibiliza umanova, distinta e eficaz invenção para o tratamento de doenças infecciosas, não relatadoou contido no estado da técnica e dele não podendo ser simplesmente inferido, comoainda o referidoinvento, é dotado de notáveis e surpreendentes vantagens biológicas,terapêuticas e econômicas em relação as outras associações de medicamentos, dedoenças infecciosas anteriormente relatados no estado da arte, que dependem dautilização de interferon e/outras citoquinas de origem exógena.

E para que se possa entender o presente invento na maior amplitude possível, apresenta-se a seguir alguns exemplos práticos de sua utilização frente a diversos tipos e classesrepresentativas dos microorganismos de interesse, com explanação dos mecanismosinfecciosos destes patógenos e adicionalmente de outras substâncias ou associações atéentão existentes no estado da técnica contra estes agentes infecciosos, paracomparativamente auxiliar o entendimento das vastas possibilidades e vantagenspossibilitadas pelo invento, para o tratamento de doenças infecciosas.

EXEMPLO PRÁTICO DA UTILIZAÇÃO DO INVENTO EM LISTERIOSEForam realizados dois experimentos, utilizando-se a infecção experimental porL.monocytogenes em animais, sendo que no primeiro deles procurou-se somente avaliaro tipo de resposta imunológica, produzida pelo imunomodulador (agregado protéico deanidrido de fosfolinoleato-palmitoleato de amônio e magnésio), em animais inoculadoscom L.monocytogenes. e tratados com o imunomodulador citado, isoladamente.

Os dados deste primeiro experimento estão contidos na Tabela L-l em anexo, que fazparte integrante do presente.

Em um segundo experimento, utilizando-se a presente invenção, comparado aosesquemas terapêuticos até então existentes, busca-se avaliar a sua eficácia para ospropósitos do presente. Os dados deste segundo experimento estão contidos na TabelaL-2 em anexo, que faz parte integrante do presente.

Porém tais exemplos são dados em caráter meramente exemplificativo e, portanto, nãolimitando ou pretendendo-se limitar de nenhuma forma o campo de aplicação dainvenção ou sua extensão.

1° Experimento - Avaliação do tipo de resposta imunológica induzido pela utilização doimunomodulador (Tabela L-l)

Neste primeiro experimento, procurou-se apenas avaliar e quantificar o efeito doimunomodulador (agregado protéico de anidrido de fosfolinoleato-palmitoleato deamônio e magnésio) sobre a resposta imunológica de animais submetidos à infecçãoexperimental por bactérias, no caso a L.monocytogenes, que anteriormente estavamrelatados no estado da técnica, ou seja, em PI - 0305373-3 USPTO 10/978, 683 e EPA0426250.3.2405, como sendo uma resposta imunológica do Tipo TH-1. Todos osvalores a seguir mencionados, estão contidos e expressos na Tabela L-l. que faz parteintegrante do presente relatório.Neste primeiro experimento, portanto, camundongos BALB/c (n= 10) foram tratadoscom doses de 5 mg/kg do imunomodulador (agregado protéico de anidrido defosfolinoleato-palmitoleato de amônio e magnésio), aplicado isoladamente, nos 7 diasanteriores a inoculação por via i.p, de uma dosagem sub-letal de 2x104 bactérias(L.monocytogenes) por animal.

Todos animais deste experimento foram sacrificados aos 48 e 72 horas após a infecção,para avaliação qualitiativa e qunatitativa das citoquinas dos tipos TH-1 e TH-2 (IL-2,IFN-gama, IL-4, IL-10). As citoquinas foram quantificadas através da técnica sandwich-ELISA (Enzyme-Linked Immunosorbent Assay) Kit, sendo quantificadas nosobrenadante de culturas de células de baço, estimuladas com Concanavalina A (Con-A). A determinação qualitativa do tipo de citoquinas produzidas no experimento,permitirá identificar não só identificar o ocorrência de eum feito eventual no sistemaimunológico, mas ainda permitirá identificar qual o tipo de resposta imunológicaenvolvida, sabendo-se que a resposta imunológica do tipo TH-1 é caracterizadafundamentalmente pela produção de citoquinas específicas, tais como o IFN-gama e IL-2, principalmente.

Resultados: A utilização do imunomodulador (agregado protéico de anidrido defosfolinoleato-palmitoleato de amônio e magnésio) isoladamente, no primeiroexperimento, mostrou-se foi capaz de aumentar os níveis de IL-2, mesmo nos animaisnão inoculados (controles), enquanto nos animais inoculados com L.monocytogenes,verifica-se uma adicional elevação de IFN-gama e IL-2 nas 48 horas e 72 horas após ainoculação bacteriana, em relação aos controles (Tabela L-l). Os níveis de IL-4 e IL-10entretanto, se mantiveram inalterados no decorrer do experimento (Tabela L-l).Portanto conclui-se que nos animais tratados previamente com o imunomodulador(agregado protéico de anidrido de fosfolinoleato-palmitoleato de amônio e magnésio ) einfectados com L.monocytogenes, verifica-se uma elevação adicional dos níveis deIFN-gama e IL-2, enquanto os níveis de IL-4 e IL-10 se mantêm inalterados (Tabela L-l}. Este primeiro experimento, utilizando o modelo experimental de infecção porL.monocytogenes, permite comprovar que o efeito biológico da utilização doimunomodulador (agregado protéico de anidrido de fosfolinoleato-palmitoleato deamônio e magnésio) frente a patógenos intracelulares, no caso a L.monocytogenes, podeser realmente e claramente correlacionado a uma indução ou aumento da respostaimunológica do tipo TH-1, já que esta é caracterizada precisamente pela produção noorganismo ou endógenamente, destas citoquinas típicas, ou seja, Interferon-gama (IFN-gama) e Interleucina-2 (IL-2).

Os dados da Tabela L-l. comprovam que o imunomodulador (agregado protéico deanidrido de fosfolinoleato-palmitoleato de amônio e magnésio), é capaz de ocasionar ouamplificar uma forte resposta imunológica do tipo TH-1, com um aumento ouestimulação expressivo da produção endógena de Interferon - gama e outros citoquinasenvolvidas no desencadeamento deste tipo específico de resposta imunológica, napresença de infecção por um microorganismo intracelular patogênico típico, no caso aL. monocytogenes.

A indução ou o desencadeamento ou finalmente restauração de uma respostaimunológica do tipo TH-1 na presença de infecção por patógenos, é considerada noestado da técnica, como de fundamental importância no combate e controle de todos osmicrorganismos intracelulares patogênicos, facultativos ou estritos, incluindo-se asbactérias, protozoários, fungos e vírus.Esta propriedade citada, é de especial importância para as finalidades do presenteinvento e uma das razões para a escolha deliberada e específica do imunomodulador(agregado protéico de anidrido de fosfolinoleato-palmitoleato de amônio e magnésio ),como um componente-chave do invento.

Discussão e extrapolação dos resultados experimentais

Sabendo-se que uma resposta imunológica do Tipo TH-1, diminuída ou bloqueada pormecanismos relacionados aos próprios patógenos ou ainda encontrados nos estados dedeficiência imunológica ocasionados por outras patologias ou condições, é umacondição especialmente importante para permitir ou facilitar a colonização dohospedeiro, para todas as espécies de microorganismos intracelulares facultativos ouestritos, e inversamente a presença ou desencadeamento de uma resposta imunológicado tipo TH-1 eficaz, é impeditiva ou obstaculizadora da infecção por tais tipos depatógenos, os dados obtidos neste experimento (Tabela L-l) permitem a visualização degrandes possibilidades para a utilização prática do imunomodulador (agregado protéicode anidrido de fosfolinoleato-palmitoleato de amônio e magnésio, em esquemasterapêuticos, para o tratamento de uma grande diversidade de doenças infecciosascausadas por microorganismos intracelulares facultativos e estritos.

Esta foi uma das razões para sua escolha para integrar o presente invento, como umcomponente-chave e invariável, conforme será detalhadamente explanado no presente .

2° Experimento - Avaliação prática de eficácia

Este segundo experimento foi precisamente realizado para demonstrar a utilidade evantagens na prática, da presente invenção, ou seja, da combinação ou associação doimunomodulador com outras substâncias com ação direta contra os parasites,utilizando-se novamente a infecção por L.monocytogenes, porém utilizando umainoculação de quantidade ou dose letal de parasitos nos animais neste segundoexperimento.

Todos os valores aqui mencionados estão contidos e expressos na Tabela L-2, emanexo, que faz parte integrante do presente relatório.

Neste segundo experimento (Tabela L-2). 5 lotes de camundongos BALB/c (n= 10 porlote) foram individualmente inoculados com uma dose letal de L.monocytogenescorrespondendo a 2x106 bactérias, por via intraperitonial (i.p.) e tratados com oimunomodulador (agregado protéico de anidrido de fosfolinoleato-palmitoleato deamônio e magnésio) utilizado isoladamente, e ainda com antibióticos ( Rifampicina +Gentamicina), utilizados sem a presença do imunomodulador, e finalmente com o acombinação ou associação de substâncias que caracteriza a presente invenção, ou seja,utilizando-se uma associação dos antibióticos citados, utilizados de maneira combinadaou associada com o imunomodulador (agregado protéico de anidrido de fosfolinoleato-palmitoleato de amônio e magnésio), para aferir comparativamente as potencialidadesde cada terapia.

Um grupo controle foi tratado também por via intraperitonial, somente com soluçãosalina.

Os animais foram medicados com o imunomodulador em dose única e com as outrassubstâncias durante 5 dias e a seguir, foi interrompida a aplicação, e a partir daí, osanimais foram apenas acompanhados diariamente, para verificação de seu estado geral econtagem de sobreviventes.

Todos os animais foram seguidos por 30 dias. O critério adotado para análise daefetividade terapêutica dos compostos utilizados isoladamente e em associação, foi àverificação do percentual de sobreviventes, ao final do experimento.Discussão e extrapolação dos resultados

O presente invento, qual seja, a utilização do imunomodulador (agregado protéico deanidrido de fosfolinoleato-palmitoleato de amônio e magnésio), combinado ouassociado com pelo menos uma substância que possua ação direta contra o patógenos oumicroorganismo intracelular (Tabela L-2. Grupos B (80% sobreviventes) e Grupo C(80%) sobreviventes1) claramente apresentou em relação aos controles (0%sobreviventes), um efeito sinergístico, muito diverso e superior, em termos desobrevivências dos animais, que a utilização isolada das substâncias (Tabela L-2.

Grupos A (30% sobreviventes), D(40% sobreviventes)), seja para a utilização isolada doimunomodulador (Grupo A-Imunomodulador-dose única - 30% sobreviventes), sejapara a combinação de antibacterianos, sem a presença do imunomodulador(Rifampicina + Gentamicina- x 5 dias - 40% sobreviventes) aumentando notavelmentea taxa de sobrevivência dos animais que foram submetidos à inoculação de umadosagem mortal de parasites (L.monocytogenes) em relação aos controles.

Nos grupos tratados com a combinação do imunomodulador ( agregado protéico deanidrido de fosfolinoleato-palmitoleato de amônio e magnésio ) e antibióticos (TabelaL-2. Grupo B e C) embora o percentual de sobreviventes seja o mesmo (80% desobreviventes); no grupo B. em que se utilizou a combinação ou associação doimunomodulador e de dois antibióticos, ou seja, de Rifampicina e Gentamicina (TabelaL-2. Grupo B). os animais aparentemente apresentaram alguns sinais de umarecuperação clínica mais rápida, do que quando o imunodulador foi associado à apenasuma substância com atividade antibacteriana, o que poderia ser atribuído ou associado auma taxa de eliminação dos parasites ainda mais eficientes, propiciada no experimento,pela utilização de dois antibióticos, ao invés de apenas um antibacteriano ou antibiótico,juntamente com o imunomodulador.

Isto não interfere com a utilidade ou alcance do presente invento, pois nada impedeevidentemente que mais de uma substância com ação direta seja utilizado no presenteinvento, em combinação ou associação ao imunomodulador, na prática clínica, desdeque sempre mantido como componente-chave, o imunomodulador (agregado protéicode anidrido de fosfolinoleato-palmitoleato de amônio e magnésio) para as finalidadesdo presente invento.

As conseqüências práticas destas evidências experimentais (Tabela L-2) sãoimediatamente perceptíveis para qualquer profissional versado no estado da técnica,permitindo-se comprovar através de um exemplo prático, a efetividade e utilidade dopresente invento, que poderá ser utilizado contra os mais diversos tipos demicrorganismos patógenos intracelulares, facultativos ou estritos, além daL. monocytogenes.

Adicionalmente, ainda se está disponibilizando pelo presente invento, uma nova e útilcombinação de substâncias destinadas ao tratamento específico para infecções causadaspela bactéria L.monocytogenes, ou seja, a doença denominada Listeriose, nas suas váriasformas clínicas, já que a mesma bactéria, utilizada nos experimentos, ataca tambémseres humanos, causando graves problemas na área de saúde como já exposto nopresente.

Para a plena eficácia do presente invento, seja visando a sua utilização de formagenérica contra microorganismos intracelulares facultativos ou estritos, seja sendoutilizado especificamente no tratamento da Listeriose, entretanto, é indispensável que oimunomodulador (agregado protéico de anidrido de fosfolinoleato-palmitoleato deamônio e magnésio) esteja sempre presente na combinação ou associação demedicamentos, que caracteriza o invento, variando ou podendo livremente variar,apenas a substância ou substâncias com atuação direta contra os parasitos oumicroorganismos, que evidentemente pode ser desde uma única substância ouigualmente uma associação ou combinação de várias substâncias deste tipo.

Obviamente, o presente invento, poderá ser extrapolado para utilização na prática nocombate de uma variedade muito extensa de microorganismos intracelularesfacultativos ou estritos, já que em comuns todos estes patógenos, possuem mecanismosinfecciosos semelhantes a L.monocytogenes como já afirmado e ainda será explanadodetalhadamente no presente pedido.

Já que a condição básica e comum para a colonização dos organismos dos hospedeirospor tais tipos de patógenos, tal como para a L.monocytogenes, é fortemente influenciadaou facilitada por uma situação de imunidade defectiva, que por sua vez pode serdiretamente relacionada a uma resposta imunológica do tipo TH-1 ineficiente, seja porcausas relacionadas à própria atividade dos microorganismos, seja por outras doençasou condições patológicas ou por ambas; a utilização terapêutica do presente invento seráespecialmente indicada e útil.

Na combinação de substâncias que caracteriza o presente invento, o imunomodulador(agregado protéico de anidrido de fosfolinoleato-palmitoleato de amônio e magnésio)possivelmente exerce um efeito indireto nos microorganismos, ou seja, seu efeitopoderia ser atribuído ou estar associado a uma ampliação da resposta imunológica dotipo TH-1 do hospedeiro, o que está demonstrado na Tabela L-l. permitindo aoorganismo combater mais eficazmente a infecção, o que está demonstrado pelasinformações e dados da Tabela L-2.Possivelmente este possível efeito indireto do imunomodulador, no presente invento, émuito ampliado ou maximizado pela atuação direta contra os patógenos, proporcionadapelas outras substâncias com ação direta contra os patógenos, empregadas emcombinação ou associação , sendo o efeito terapêutico resultante, diverso e muitosuperior à mera utilização destes outros componentes considerados de forma isolada ouainda do imunomodulador utilizado isoladamente, como está demonstrado ecomprovado pelos dados da Tabela - L 2.

Porém, a utilidade prática do presente invento ou sua essência, não dependem doseventuais mecanismos de ação dos compostos isolados ou considerados em conjunto,que já sejam conhecidos no estado da técnica, ou que venham a ser conhecidos nofuturo, tratando-se de exemplos e hipóteses que estão sendo propostos no presente parafinalidades meramente explicativas, não podendo ser utilizados como argumento paralimitar ou restringir o alcance ou utilidade da presente invenção de nenhuma forma.

EXTRAPOLAÇÃO DA UTILIDADE DO PRESENTE INVENTO PARA OUTROSGÊNEROS E TIPOS DE BACTÉRIAS E PATÓGENOS INTRACELULARES -OUTROS EXEMPLOS PRÁTICOS

Como já amplamente exposto no presente e também representando um entendimentoconsensual no atual estado da técnica, uma das principais características em comum detodos os microorganismos intracelulares patogênicos, é a sua reconhecida capacidade desobreviver no organismo hospedeiro, aproveitando-se para tanto de condições ouestados de imunidade diminuída ou suprimida.

Como alguns exemplos típicos de tais espécies de microorganismos de especialinteresse para o presente, citam-se entre outras, as bactérias da espécie M. tuberculosis,causadora da tuberculose, a M.avium causadora de devastadoras infecções neurológicase sistêmicas em pacientes imunodeprimidos, a M. leprae, causadora da lepra e também aL. monocytogenes, causadora da Listeriose.

Em condições normais, a resposta esperada em termos de atuação do organismohospedeiro frente as micobactérias de forma geral e nos exemplos citados em particular,consistiria basicamente na ativação das células TCD4+ (linfócitos T4), ocasionando àsecreção de Interferon-gama, o que por sua vez ativaria os macrófagos, aumentando afagocitose e finalmente levando à produção aumentada de oxido nítrico (NO) por partedos macrófagos ativados, ocasionando a destruição das bactérias.

Esta resposta típica do organismo, frente a invasores intracelulares patogênicos, éconhecida em termos de nomenclatura, como imunidade adaptativa ou ainda comoresposta imunológica do tipo inflamatório ou finalmente, como resposta imunológica dotipo TH-1.

No entanto no caso da classe ou gênero particular qual seja, das micobactérias, da quaisa M.tuberculosis é uma representante típica, com freqüência, os microorganismosmuitas vezes conseguem lograr a vigilância do sistema imunológico, e se manter viáveisno organismo, refugiados em vários órgãos e tecidos, principalmente no interior dosmacrófagos, caracterizando-se neste caso, a infecção crônica.

Evidentemente, estes microorganismos existentes em forma latente no organismo oucom atividade reduzida, podem a qualquer momento rapidamente multiplicar-se emformas ativas e infectantes, na ocorrência adicional de outras condições que afetem oudeprimam ainda mais o sistema imunológico do hospedeiro, por exemplo, a ocorrênciade diabetes mellitus.

Isto ocorre ainda na denominada Síndrome de Imunodeficiência Adquirida (AIDS) efinalmente outras situações de imunodeficiência, que ocorrem ou são causadas comoefeito colateral e indesejado, no curso de tratamentos clínicos que se utilizem de terapiascitotóxicas e/ou imunossupressoras.

Esta capacidade dos parasites de permanecer de forma latente ou ainda de infectarcronicamente o organismo hospedeiro, muitas vezes está associada à capacidade dosparasites intracelulares de ocasionar eles mesmo uma produção defectiva de Interferon-gama endógeno (Gong JH et al. "Interleukin-10 Downregulates Mycobacteriumtuberculosis-Induced Thl Responses and CTLA-4 Expression". Infection and Immunity1996, 3: 64; 913-8), o que leva ao bloqueio ou ineficácia relativa ou finalmentedisfunção progressiva dos mecanismos desencadeadores da resposta imune (respostaimunológica do Tipo TH-1), posto que muitos destes mecanismos são dependentes daativação por Interferon-gama.

Estas características singulares das micobactérias e de outros patógenos intracelularesfacultativos ou estritos, são adicionalmente apontadas como um dos principais fatoresresponsáveis pela sua reconhecida resistência aos tratamentos existentes.

Já que o efeito do imunomodulador (agregado protéico de anidrido de fosfolinoleato-palmitoleato de amônio e magnésio) combinado ou associado com outras substâncias,estas com atuação direta contra L.monocytogenes, se mostrou altamente eficaz contraeste microrganismo intracelular patógeno, utilizou-se experimentalmente a combinaçãoou associação do imunomodulador (agregado protéico de anidrido de fosfolinoleato-palmitoleato de amônio e magnésio) com um medicamento-padrão com ação direta, emum novo experimento.

Este experimento irá demonstrar através de um exemplo prático, a atuação específicado presente invento, contra o parasito causador da tuberculose (M.tuberculosis), porsuas características de ciclo de vida e mecanismos infecciosos similares àL.monocytogenes, o que está bem estabelecido no estado da técnica (Gong JH et al."Interleukin-10 Downregulates Mycobacterium tuberculosis-Induced Thl Responsesand CTLA-4 Expression". Infection and Immunity 1996, 3: 64; 913-8.) e aindaadicionalmente permitirá estabelecer a validade da utilização do presente invento, parao tratamento de outras espécies de micobactérias e microorganismos intracelularesfacultativos ou estritos em geral.

Pois não se pode perder de vista, que além de estabelecer a validade ou utlidade dapresente invenção no tratamento específico da Tuberculose, que é ocasionada pelabactéria M.tuberculosis, os resultados de tais experimentos a serem detalhados adianteno presente, podem igualmente ser extrapolados para estabelecer a validade da presenteinvenção, também contra outras micobactérias de grande interesse em saúde, de formageral.

Já que estas micobactérias, tais como a M.leprae e M.avium, além de pertencem aomesmo gênero da M.tuberculosis, igualmente compartilham de mecanismos similaresde infecção e colonização do hospedeiro do mesmo tipo do relatado anteriormente paraa L.monocytogenes, ou seja, todos estes microorganismos intracelulares são altamentedependentes da ocorrência de uma resposta imunológica do tipo TH-1 defectiva oubloqueada, para facilitar a sua permanência e disseminação no organismo dohospedeiro, como relatado no estado da técnica.

Para finalidades de demonstração das possibilidades práticas da utilização da presenteinvenção, especificamente contra a M.tuberculosis, após uma breve apresentação doestado da técnica no tratamento da tuberculose, será fornecido um exemplo de aplicaçãoprática do invento, utilizando animais infectados por este parasito.Tal exemplo prático de utilização do invento, entretanto, será apresentado no presentecom finalidades meramente ilustrativas e exemplificativas, sem que em nenhummomento se pretenda limitar ou se que se possa reduzir o campo de aplicação dopresente invento.

Estado da técnica no tratamento da tuberculose - Utilização de substâncias com açãodireta contra a M.tuberculosis

As principais substâncias com atuação direta contra parasites causadores da tuberculose{M.tuberculosis) conhecidas até o momento, podem ser divididas de acordo com seumodo de atuação nos diversos componentes das micobactérias, nos seguintes grupos:

Grupo 1 - Inibidores de parede celular bacteriana (ex: isoniazida, etambutol,etionamida, cicloserina);

Grupo 2 - Inibidores de síntese de ácidos nucléicos bacterianos (ex: rifampicina,quinolonas);

Grupo 3 - Inibidores de síntese protéica bacteriana (ex: estreptomicina, kanamicina);

Grupo 4 - Inibidores de metabolismo energético da membrana bacteriana (ex:pirazinamida).

As drogas ou combinações de drogas antibacterianas existentes até o momento paracombater a micobactérias causadora da Tuberculose são especialmente aptas paraatacar bactérias que estejam em processo ativo de crescimento ou multiplicação,atuando principalmente como sumarizado acima, através da inibição de processoscelulares bacterianos, por exemplo, interferindo em processos responsáveis pelabiogênese da parece celular e ainda replicação do DNA bacteriano.

Isto significa que as drogas de uso corrente são caracterizadas por uma eficiente açãobactericida, mas tendo em contrapartida uma fraca ou deficiente ação esterilizante,entendendo-se capacidade esterilizante, como sendo a capacidade de uma substânciapara destruir ou incapacitar bactérias que estejam em fase de lento crescimento e/ou dereduzido metabolismo celular, o que tipicamente ocorre nas fases de vida intracelular daM.tuberculosis e outras micobactérias.

Por conta destas deficiências nos tratamentos utilizados contra as micobactérias emgeral e da M.tuberculosis em particular, além da reconhecida capacidade da bactéria deiludir o sistema imunológico e/ou aproveitar-se de situações de deficiênciaimunológicado hospedeiro, estes tipos de bactérias logram persistir no hospedeiro,mesmo após o tratamento utilizando associação da isoniazida (INH), associada aquinolonas/fluorquinolonas e/ou ainda Pirazinamida (PZA), e mesmo, quandoadicionalmente se acrescenta ao uso da isoniazida (INH), a utilização conjunta deformas injetáveis de outros antibacterianos tais como kanamicina, amicacina oucapreomicina.

Estado da técnica no tratamento da Tuberculose - Utilização de substâncias, com efeito.indireto contra M.tuberculosis -A Pmunoterapia e as vantagens da utilização da presenteinvenção.

As características biológicas da infecção por M. Tuberculosis, conjugada as deficiênciasnotórias nos tratamentos da tuberculose com os medicamentos citados anteriormente,tornam particularmente difícil erradicar este tipo de microorganismo nos pacientes.

A permanência de formas latentes ou ocultas no interior de células de defesa dohospedeiro, da M.tuberculosis nos hospedeiros, locais que usualmente não são atingidospelos medicamentos existentes, implica que a doença nas suas formas clínicas podereaparecer ou reativar-se de forma avassaladora, decorridos muitos anos da data dainfecção primária ou do final de tratamento eventual, levando ao aparecimento datuberculose em suas manifestações clínicas típicas, quando algum episódio ou doençasubseqüente ocasionar um quadro de imunidade defectiva, como, por exemplo, ocorrenos casos de diabetes mellitus ou presença de infecção pelo vírus HIV ou AIDS.

Por conta destes fatos, à expansão da epidemia de AIDS, particularmente nos países emdesenvolvimento, não surpreendentemente, associou-se a uma explosão do número decasos de Tuberculose, estando relacionada ainda ao aparecimento de variedades debactérias cada vez mais resistentes aos tratamentos.

A Imunoterapia, portanto, representa um caminho lógico e promissor para tentar atacara doença, visando com sua utilização, restaurar-se ao menos parcialmente osmecanismos de defesa imunológica do hospedeiro, principalmente a respostaimunológica do tipo TH-1, para que o sistema imunológico pudesse recuperar ouaumentar a capacidade de reagir às micobactérias.

Encontram-se na literatura representativa do atual estado da técnica, vários relatos deque esta estratégia citada, ou seja, a Imunoterapia pode ter efeitos benéficos notratamento clínico da Tuberculose, utilizando-se da aplicação de Interferons de origemexógena, tais como o Interferon-alfa e Interferon-gama (A. Yola et al., Retrovirology2006; 3 (Suppl 1): S38), Suarez-Mendez et al. BMC Infect. Dis. (2004; 4: 44) comoadjuvantes terapêuticos.

Apesar dos avanços possibilitados pela Imunoterapia adjuvante para o tratamento daTuberculose, com a utilização de Interferons de origem exógena, esta modalidade detratamento ainda se encontra muito limitada por problemas de custo e ocorrência desérios efeitos colaterais, para a maioria dos pacientes, como já explanado no presente.

No entanto, como o sucesso ou insucesso da colonização do organismo hospedeiro peloM.tuberculosis, como para todos os outros patógenos intracelulares facultativos ouestritos, é altamente dependente do comportamento da resposta imunológica do tipoTH-1, a utilização de uma combinação de substâncias que utilize ou contenha comoparte integrante, um imunomodulador específico com capacidade de influenciar estetipo de resposta, no próprio organismo do hospedeiro como é o caso da presenteinvenção, isto sem dúvida representará o surgimento de uma nova e eficaz arma para ocombate aos microorganismos infecciosos no estado da técnica.

E como vantagem adicional, a adoção do presente invento, contra as infecções causadaspor micobactérias, notadamente a M.tuberculosis, permitirá evitar ou minimizar em aocorrência de efeitos colaterais adversos nos usuários finais, que são comuns nascombinações ou associações medicamentosas relatados no estado da técnica, quedependem da utilização de Interferons de origem exógena.

Como outra vantagem, a presente invenção, permitirá acrescentar uma maior eficáciaaos tratamentos já existentes, pela associação ou combinação do imunodulador aoscompostos já em uso, ou seja, aumentando a eficácia dos medicamentos de uso corrente,o que evidentemente poderá permitir considerar redução em suas dosagens e tempos deduração da terapia, o que poderá resultar em benefícios econômicos adicionais, pela viada diminuição dos custos associados à uma menor utilização destes outrosmedicamentos.

E finalmente, tais efeitos benéficos, possibilitados pela utilização do invento na prática,poderão se estender à diminuição do número de episódios de efeitos colaterais nospacientes e/ou minimizando sua severidade, posto que o número de ocorrências ouseveridade destes eventos colaterais, obviamente guardam uma relação direta com amagnitude das dosagens de medicamentos utilizadas, bem como da extensão temporalde sua utilização.Para finalidades de demonstração das possibilidades práticas da utilização da presenteinvenção, que consiste na combinação do imunomodulador descrito no estado da artecomo um agregado protéico de anidrido de fosfolinoleato-palmitoleato de amônio emagnési,o com pelo menos um medicamento com ação direta contra o M.tuberculosis,apresenta-se o exemplo abaixo, com a utilização de um modelo animal, com finalidadesmeramente ilustrativas e exemplifícativas, sem que em nenhum momento se pretendalimitar ou se que se possa reduzir o campo de aplicação do presente invento.

EXEMPLO DE UTILIZAÇÃO NA PRÁTICA DA PRESENTE INVENÇÃO EMTUBERCULOSE

Infecção experimental por M.tuberculosis em camundongos-variedade C57BL/6 -Todos os valores e resultados aqui mencionados e outros dados de interesse, estãocontidos e expressos na Tabela T. que faz parte integrante do presente relatório.

Infecção - 3 xlO6 organismos viáveis de M.tuberculosis- ErdmanProcedimento experimental: grupos de 8 camundongos machos da variedade C57BL/6foram infectados por via intravenosa, através da veia caudal, com aproximadamente 3xlO6 organismos viáveis de M.tuberculosis - variedade Erdman, suspensos em 0,3 mlde meio de cultura apropriado para microbactéria (meio 7H10).

O tratamento inicia-se 1 semana após a infecção. O período de observação nesteexperimento é de 4 semanas.

Um grupo de animais infectados e não-tratados é sacrificado após 2 semanas da data dainfecção ( controles iniciais). Um segundo grupo de animais infectados e não-tratadossão sacrificados ao final do experimento (controles tardios).

Os animais tratados com as substâncias ativas são igualmente sacrificados apenas aofinal do experimento (4 semanas).Como exemplo de substância com ação direta contra o M.tuberculosis, utilizou-se noexperimento a Isoniazida ou INH (piridina-4-carbohidrazide) e como imunomoduladorespecífico, foi utilizado o agregado protéico de anidrido de fosfolinoleato-palmitoleatode amônio e magnésio.

Administrou-se 25 mg/kg de Isoniazida (INH) aos animais por gavagem (0,2 ml),diariamente por 4 semanas em 1 dos grupos.

O imunomodulador (agregado protéico de anidrido de fosfolinoleato-palmitoleato deamônio e magnésio) foi administrado por via intraperitonial (i.p.) suspenso em soluçãoestéril de salina (NaCl - 0,9%) em duas dosagens:

a) Uma dosagem de 5 mg/kg, aplicada diariamente, também por 4 semanas e b) umadosagem de 100 mg/kg em uma única dose, aplicada por via intraperitonial.

Foram utilizados 6 grupos de animais no total.

Para teste comparativo de eficácia neste experimento, dois destes grupos receberamapenas o imunomodulador agregado protéico de anidrido de fosfolinoleato-palmitoleatode amônio e magnésio e dois grupos receberam o imunomodulador agregado protéicode anidrido de fosfolinoleato-palmitoleato de amônio e magnésio e uma substância comação direta contra o M.tuberculosis, no caso a Isoniazida (INH).

Os demais grupos remanescentes, ou seja, o grupo controle (controle-inicial) e o grupocontrole (controle-tardio) receberam apenas solução salina (NaCl 0,9%).

Determinação da carga bacilar e avaliação da eficácia de medicamentos

Os baços e pulmões dos animais tratados e não tratados foram removidosassepticamente e homogenatos destes tecidos, foram plaqueados em meio Agar - 7H10para crescimento bacteriano e posterior determinação da Carga bacilar.As placas foram incubadas a 37° C por 4 semanas e a seguir determinou-se a Cargabacilar, dos grupos de animais tratados e não tratados.

A denominada Carga bacilar, é obtida ou determinada através da contagem numérica deUnidades formadoras de colônias de M.tuberculosis (UFC) nestas placas e expressas emlog.10.

A variação do número de Unidades Formadoras de Colônias (UFC) ou em outrostermos, da Carga bacilar, para este tipo de experimento, está diretamente relacionadacom a maior ou menor eficácia dos esquemas terapêuticos empregados e , portantorepresenta um parâmetro muito utilizado para avaliação da eficácia de novas terapias etratamentos.

Esta avaliação de eficácia de medicamentos e esquemas terapêuticos consisteessencialmente, portanto, em medir a carga bacilar, avaliada pela contagem do numerede unidades formadoras de colônias (UFC)] em meio de cultura sólido ( meio Agar7H10), e relacioná-la ao medicamento ou esquema de tratamento correspondente.

RESULTADOS E DISCUSSÃO:

A utilização do antibacteriano Isoniazida -INH (Tabela T. Grupo O e doimunomodulador (agregado protéico de anidrido de fosfolinoleato-palmitoleato deamônio e magnésio) isoladamente (Tabela T. Grupo D e Grupo E) apresentaramresultados semelhantes em relação à inibição dos microorganismos, medidos pelacontagem de UFC ( carga bacilar).

Entretanto, a utilização do presente invento, ou seja, a utilização da combinação doantibacteriano (INH) ao imunomodulador (agregado protéico de anidrido defosfolinoleato-palmitoleato de amônio e magnésio), demonstrou possuir um marcadoefeito sinergístico, que pode ser avaliado pela significativa redução da contagem decolônias de M.tuberculosis (UFC) pós-tratamento (Tabela T, Grupo F e Grupo G\quando comparada aos controles e aos animais que receberam tratamento apenas comsubstâncias citadas, utilizadas forma isolada.

CONCLUSÃO

A utilização do INH de forma isolada (Tabela T. Grupo O mostrou uma significativaredução nas colônias de M.Tuberculosis em relação aos controles iniciais e controlestardios ( Tabela T, Grupo A e Grupo B).

No entanto, apenas quando se utilizou o composto da presente invenção, isto é acombinação de ao menos uma substância com ação direta contra o M.tuberculosis, nocaso o antibacteriano Isoniazida (INH) associado com um imunomodulador específico,(agregado protéico de anidrido de fosfolinoleato-palmitoleato de amônio e magnésio), acombinação ou associação demonstrou possuir um pronunciado efeito sinergístico,medido pela redução da contagem de colônias de M.tuberculosis pós-tratamento,completamente distinta e nitidamente superior à utilização dos medicamentos de formaisolada, tanto do imunomodulador, como do antibacteriano Isoniazida-INH (Tabela T.Grupo F e Grupo G).

Além de representar uma nova modalidade de tratamento, muito mais poderosa que autilização das terapias isoladas, seja do imunomodulador, seja do antibacteriano, autilização do presente invento, que está baseado na utilização de um imunomoduladorcombinado ou associado a antibacterianos, permite adicionalmente considerarreduções no tempo de terapia necessário para controlar a infecção por M.tuberculosis,e/ou ainda na quantidade de medicamentos a serem utilizados para tanto, o que poderepresenta um fator crítico para aumentar a adesão dos pacientes aos tratamentosantituberculosos.EXTRAPOLAÇÃO DOS RESULTADOS PARA O TRATAMENTO DE OUTRASDOENÇAS INFECCIOSAS COM ENVOLVIMENTO DE MICOBACTÉRIAS

Além da utilização contra M.tuberculosis, a presente invenção pode ser plenamenteutilizada contra infecções causadas por microrganismos das espécies M.leprae,M.avium, e outros patógenos intracelulares.

Pois estes microrganismos, além de pertencerem ao mesmo gênero do M.tuberculosistêm exatamente o mesmo mecanismo de infecção e colonização do organismohospedeiro, que a M.tuberculosis, ou seja; todos dependem para a sua viabilidade noorganismo hospedeiro, da ocorrência de uma condição orgânica de imunidade defectivaou diminuída, que pode ser correlacionada a reduzida produção de interferon-gama, ouseja, de uma resposta do tipo TH-1 defectiva ou suprimida.

Esta diminuição dos níveis de Interferon-gama e da resposta imunológica associada aesta condição no organismo do hospedeiro, ou seja resposta imunológica do tipo TH-1,pode ser ocasionada pelos próprios microrganismos e ainda ocorrer nos casos em que aimunidade esteja diminuída ou suprimida por outras patologias e condições, como, porexemplo, verifica-se no caso de pacientes diabéticos, em curso de tratamento porquimioterapia e/ou radioterapia e finalmente no caso da AIDS, exemplificando-se deforma não exaustiva. Para todos estes casos, o presente invento será também indicado eeficaz.

O que irá variar na utilização na prática do presente invento será o tipo de medicamentoou substâncias com ação direta a ser selecionado para utilização conjunta ou associadacom o imunomodulador, permanecendo, no entanto constante o imunomodulador nacombinação ou associação de medicamentos, ou seja, será sempre o produtocaracterizado no atual estado da técnica, como um agregado proteico de anidrido defosfolinoleato-palmitoleato de amônio e magnésio.

Assim para tratamento da tuberculose, a combinação de substâncias que caracteriza apresente invenção deverá sempre associar ou utilizar o imunomodulador (agregadoproteico de anidrido de fosfolinoleato-palmitoleato de amônio e magnésio) com pelomenos uma substância com ação direta contra os parasites desta enfermidade,selecionadas dos grupos com os seguintes mecanismos de ação, aqui citadas em umarelação não exaustiva: Inibidores de parede celular bacteriana (ex: isoniazida,etambutol, etionamida, cicloserina), inibidores de síntese de ácidos nucléicos (ex:rifampicina, quinolonas), inibidores de síntese protéica (ex: estreptomicina,kanamicina), inibidores de metabolismo energético da membrana bacteriana (ex:pirazinamida), nada impedindo obviamente que mais de uma destas substâncias sejaselecionada para uso conjunto ou associado com o imunomodulador.

Já para o caso específico da lepra, doença causada por também uma microbactéria, nocaso a M.leprae, o presente invento também poderá ser utilizado, variando no esquemaapenas o medicamentos com ação direta contra os parasites, e, portanto, caso específicoda lepra, deverão serem utilizados antibióticos e sulfas isoladamente ou combinados,citando-se exemplificativamente a diaminodifenilsulfona (dapsona), antibióticos dogrupo das rifamidas (rifampicina) e riminofenazina (clofazimina), em uma enumeraçãonão exaustiva, mantido sempre o imunomodulador (agregado proteico de anidrido defosfolinoleato-palmitoleato de amônio e magnésio). Para o caso da M.avium deverãoser considerados, exemplificativamente, para utilização em conjunto ou associação como imunomodulador (agregado proteico de anidrido de fosfolinoleato-palmitoleato deamônio e magnésio), medicamentos com ação direta contra estes agente patogênicoespecífico, tais como antibacterianos (Claritromicina, Azitromicina, Etambutol) e aindaantiparasitários como a Rifampicina ou Rifabutina, em uma enumeração não exaustiva.

O mesmo esquema ou combinação do imunomodulador com outras substâncias deveráser igualmente empregado para o tratamento de outros microorganismos intracelularespatogênicos, tais como protozoários fungos e vírus, variando na combinação ouassociação apenas as substâncias, com efeito direto contra os micróbios ou parasitascitados, de acordo com a infecção ou doença a ser tratada.

MALÁRIA - EXEMPLO PRÁTICO DA UTILIZAÇÃO DA PRESENTE INVENÇÃO- IMUNOMODULADOR ASSOCIADO A ANTIMALÁRICOS

Para finalidades de demonstração das possibilidades práticas da utilização da presenteinvenção, contra outro tipo de microorganismo intracelular patógeno, desta feita,tratando-se de protozoários da espécie Plasmodium, causadores da malária em animaise seres humanos, após uma breve apresentação do estado da técnica no tratamento destadoença, será fornecido um exemplo de aplicação prática do invento, utilizando animaisinfectados experimentalmente com Plasmodium.

No caso dos protozoários da espécie Plasmodium, causadores da malária em animais eseres humanos, também se verifica a mesma situação de dependência ou deaproveitamento de falhas ou deficiência funcionais do sistema de defesa imunológica dohospedeiro para o sucesso ou permanência da infecção, o que é uma característica típicados microorganismos intracelulares em geral.

A dependência dos microorganismos do gênero Plasmodium da ocorrência decondições ou situações de resposta do tipo imunológica do tipo TH-1 deficiente oubloqueada por mecanismos de defesa dos parasitos ou por outras causas, situação estaque por sua vez é influenciada ou dependente dos níveis de IFN-gama (Ifn-gama)produzidos pelo hospedeiro em presença de micróbios invasores, entre eles osprotozoários tais como os Plasmodium s,p está bem estabelecida no estado da técnica.Citando-se particularmente para o caso dos protozoários causadores da malária,experimentos e relatos publicados no estado da técnica, que estabelecem uma fortecorrelação entre a imunoproteção obtida em animais experimentalmente infectados comPlasmodium sp, com a administração nos mesmos de Interferon-gama de origemexógena. (Shear H L et al., J. Immunol. (1989; 143:2038-2044).

A partir destes conhecimentos relatados no estado da técnica, a Imunoterapia,principalmente com a administração de citoquinas, principalmente do Interferon-gama(IFN-gama) de origem exógena, visando o desencadeamento de uma respostaimunológica do tipo TH-1 contra os parasites ou protozoários causadores da malária,passou a ser considerada uma opção terapêutica valiosa.

Conseqüentemente, combinações ou associações medicamentosas utilizandoprincipalmente o IFN-gama de origem exógena, e sempre utilizado em conjugação ouassociação com outras substâncias, estas últimas com ação direta contra os parasites dogênero Plasmodium, tem sido proposto e experimentalmente utilizado, ainda que deforma limitada, no tratamento de casos de malária em seres humanos.

Portanto, tem-se por estabelecido no estado da técnica, que os parasites intracelularesou protozoários da gênero Plasmodium, causadores da malária, como todos os outrosmicroorganismos intracelulares facultativos ou estritos, igualmente possuemmecanismos influenciadores e/ou dependentes de uma condição de deficiênciaimunológica, notadamente de uma resposta imunológica do tipo TH-1 no organismo dohospedeiro, para facilitar a sua propagação e permanência no organismo do hospedeiro,como todos os outros microorganismos intracelulares facultativos e estritos.E, portanto, igualmente poderão ser combatidos pslo presente invento, conforme seráexposto com exemplo de aplicação prática a seguir, após uma breve e necessáriaapresentação do estado da técnica para o tratamento da malária.

Estado da técnica no Tratamento da malária

As principais substâncias com atuação direta contra parasites causadores da malária,conhecidas até o momento, podem ser divididas de acordo com sua natureza oucomposição química, em substâncias que apresentam na sua fórmula os seguintesgrupos ou grupamentos químicos, a seguir discriminados:

Grupo 1 - grupo 9 - aminoacridinas (ex: mepacrina);

Grupo 2 - grupo 4 - aminoquinolinas (ex: cloroquina, hidroxicloroquina,amodiaquina);

Grupo 3 - grupo 8- aminoquinolinas (ex: primaquina, quinocida);

Grupo 4 - grupo biguanidas (ex: cloroproguanil, cicloguanil, proguanil);

Grupo 5 - grupo diaminopirimidinas (ex: piretamina);

Grupo 6 - grupo sais de quinino;

Grupo 7 - grupo sulfas (ex: sulfonamidas, sulfanilamidas, dapsona);

Grupo 8 - antibióticos (ex: tetraciclinas);

Grupo 9 - inibidores de protease (ex: saquinavir, ritonavir, lopinavir).

Grupo 10 - artemisina e derivados (ex: extratos naturais da Artemisia annua ou seusderivados sintéticos),

Grupo 11 - citoquinas exógenas (interferon-alfa- IFN-alfa, interferon-gama -IFN-gama).

Entretanto, a utilização destas substâncias isoladamente ou em combinação umas comas outras, não tem permitido evitar o desenvolvimento de variedades resistentes deparasitos ao longo do tempo de uso e adicionalmente muitas destas substânciasapresentam sérios efeitos colaterais ou ainda somente são efetivas em concentraçõestóxicas (Peters, W, Br. Med. Buli. 38:187-192, (1982); Young et al., Am. J. Trop. Med.Hyg. 10:317-320 (1961); Bygbjerg, et al., Lancet 1:21-26 (1983); Schmidt, L. H.,Antimicrob. Agents Chemother 16:475-485 (1979); Bruce-Chwatt, L. J. Essentialmalariology, W. Heinemann Medicai Books Ltd., London, (1980)).

Tendo em vista a resistência cada vez maior dos parasitos, como citado, diversascombinações destas substâncias, tem sido utilizadas, mas a utilização destascombinações não só não logrou solucionar o problema do aparecimento de variedadesresistentes de parasitos, como adicionalmente notou-se um agravamento dascomplicações clínicas, associada a efeitos colaterais com a utilização das combinaçõesem tratamentos de malária. (Hurwitz et al., Lancet 1:1068-70 (1981); Phillips et al.,Lancet 1:300-302 (1984); Bjorkman et al. Trans. R. Soe. Trop. Med. Hyg. 84:177-180(1990)).

No presente invento, conforme se verificará através de um exemplo de sua utilização napratica, igualmente verificou-se que sua a utilização, ou seja, da combinação ouassociação do imunomodulador (imunomodulador agregado proteico de anidrido defosfolinoleato-palmitoleato de amônio e magnésio) e de pelo menos uma substânciaque possua ação antiprotozoárica (antimalárica) direta, foi igualmente capaz deproduzir um potente efeito sinergístico, diverso e mais poderoso que o efeito dassubstâncias utilizadas isoladamente, contra os parasitos ou protozoários da espéciePlasmodium sp.

Isto confirma a validade do presente invento não só para o caso da malária,especificamente, porém indica de forma segura, que o mesmo é igualmente eficazcomo uma terapia genérica para outros microorganismos intracelulares entre eles, outrosprotozoários intracelulares, tais como os da espécies Leishmania sp, causadores daLeishmaniose em animais seres humanos, pois também estes, como no caso dosparasitos causadores da malária {Plasmodium sp) são sabidamente dependentes de umaresposta do tipo TH-1 deprimida ou deficiente, para se manterem viáveis no organismohospedeiro.

Portanto, a presente invenção não só permite estabelecer uma nova combinação ouassociação de substancias para o tratamento de doenças causadas por microrganismosintracelulares, entre eles os protozoários de uma forma geral, como ainda permitedisponibilizar fornecer uma terapia específica para o tratamento da infecção da malária,consistindo da administração no animal ou paciente humano infectados por parasitos dogênero Plasmodium, de quantidades efetivas do imunomodulador (imunomoduladoragregado proteico de anidrido de fosfolinoleato-palmitoleato de amônio e magnésio),combinado ou associado a pelo menos uma das substâncias contendo ao menos um dosgrupos químicos citados anteriormente, com ação antiparasitária ou antimalárica direta.E para dar um exemplo prático da utilização do presente invento no tratamento damalária, são oferecidos a seguir exemplos de sua utilização em um modelo animalbastante utilizado no estado da arte para estudo de malária.

Estes exemplos, no entanto são apresentados com finalidade meramente ilustrativa, semem que nenhum momento se pretenda ou se possa minimizar, restringir ou limitar ocampo de atuação do invento.

Malária- modelo de infecção -

Todos os valores aqui mencionados estão contidos e expressos na Tabela M, que fazparte integrante do presente relatório.Em todos os experimentos a seguir, grupos de camundongos fêmeas da linhagemC57BL/ 6 (n = 6), com 8 a 10 semanas de idade foram utilizados. Os animais foraminfectados experimentalmente com parasitos causadores de malária, da variedadePlasmodium chabaudi (P.chabaudi), o que foi realizado através de injeçãointraperitonial de 4 x IO6 eritrócitos infectados (EI) suspensos em solução tamponada(PBS).

Os animais foram observados diariamente, a partir da infecção, para mensuração dotempo de sobrevivência. O período total de observação foi de 21 dias.

A partir do terceiro dia e até o quinto dia após a infecção, lâminas contendo amostras(esfregaços) sangüíneas dos animais foram preparadas e coradas através das técnicas decoloração da Hematoxilina e Eosina e da técnica de Giemsa e a seguir examinadas aomicroscópio ótico para determinação da parasitemia, através da contagem doseritrócitos parasitados.

A quantificação da parasitemia para este experimento está expressa em percentuais decélulas sangüíneas infectadas.

Nos animais sobreviventes, o percentual de parasitemia foi também determinado aofinal do experimento (dia 21).

Animais controles

Os animais do grupo controle, infectados com a mesma quantidade de parasitos demalária (4 x 106 eritrócitos infectados) que os animais tratados, receberam apenassolução-tampão (PBS).

Sobrevivência dos animais controle

Todos os animais do grupo controle morreram em um período médio de 8 dias apósinfecção. (Tabela M, Grupo A)Parasitemia

A parasitemia atingiu níveis máximos para o grupo controle (Tabela M. grupo A").

Tratamento com cloroquina utilizada isoladamente

Grupos de 6 animais infectados por via i,.p., com P. Chabaudi (4 x IO6 eritrócitosinfectados) foram tratados apenas com Cloroquina (7-cloro-4-(4-dietilamina-l-metilbutilamina)-quinolina) nas dosagens de 15 mg/kg - dose alta ( Tabela M. GrupoB) ,7,5 mg/kg - dose média (Tabela M. Grupo O e 5 mg/kg-dose baixa-1 (Tabela M.Grupo D) e 2 mg/kg-dose baixa 2 (Tabela M, Grupo E) aplicadas nos animais, atravésde uma dose única por via intraperitonial diluída em solução-tampão( PBS).

Sobrevivência

Os animais controles receberam apenas solução-tampão (PBS). Os animais controlesmorreram em um tempo médio de 8 dias pós-infecção. (Tabela M. Grupo A).No grupo dos animais tratados com dose alta de Cloroquina (15 mg/kg, Grupo B), todosos animais infectados com P.chabaudi sobreviveram até o final do experimento. (TabelaM. Grupo B).

Parasitemia -

Observou-se baixo grau de parasitemia para todos os animais do grupo B (17%- dia 5-Tabela M-Grupo B). Entretanto ao final do experimento, ainda havia parasitemiaremanescente para estes animais (8% - dia 21 - Tabela M. Grupo B).

Comparativamente, no grupo de dose média (Cloroquina-7,5 mg/kg,), 2 dos 6 animaisinoculados com P.chabaudi sobreviveram. (Tabela M. Grupo O.

Todos os animais, inoculados com P.chabaudi, dos grupos tratados com Cloroquina-dose baixa 1- ( 5 mg/kg) , (Tabela M -Grupo D) e Cloroquina -dose baixa (2 mg/kg),(Tabela M-Grupo E) morreram após a infecção.Estabelecimento da dosagem terapêutica mínima da Cloroquina no experimentoEnquanto verificou-se um significativo aumento no tempo de sobrevida em relação aoscontroles, ( 2 dias ) para o grupo que recebeu a Cloroquina-dose baixa 1 (5 mg/kg),(Tabela M -Grupo D), não ocorreu nenhuma diferença significativa no tempo desobrevida em relação aos controles ( Tabela M, Grupo A), para o grupo que recebeu aCloroquina-dose baixa 2(2 mg/kg ). (Tabela M, Grupo E).

Portanto esta dosagem citada de Cloroquina, ou seja, a dosagem de 5 mg/kg utilizadaneste experimento em particular (Tabela M-Grupo D), claramente representará adosagem terapêutica mínima, para todos os experimentos citados no presente, já que areferida dosagem (5 mg/kg) está situada no limite inferior da eficácia da Cloroquinapara inibição de P.chabaudi, nos animais experimentais.

Tratamento com o imunomodulador utilizado isoladamente

Grupos de 6 animais, infectados com P.chabaudi através de injeção intraperitonial de 4x IO6 eritrócitos infectados (EI) suspensos em solução tamponada (PBS), foramtratados apenas com o Imunomodulador (imunomodulador agregado proteico deanidrido de fosfolinoleato-palmitoleato de amônio e magnésio ) utilizado em dosagensde 5 mg/kg por 5 dias (Tabela M, Grupo F) e 100 mg/kg em dose única (Tabela M.Grupo FD. diluído em solução salina (NaCl, 0,9%) por via intraperitonial (i.p.),iniciando-se a aplicação do imunomodulador, 1 dia após a infecção.

Sobrevivência -

No grupo dos animais tratados com a dose única (100 mg/kg) e com as doses repetidas(5 mg/kg x 5 dias) do imunomodulador (imunomodulador agregado proteico de anidridode fosfolinoleato-palmitoleato de amônio e magnésio), verificou-se um significativoaumento do tempo de sobrevivência de 3 dias em relação aos animais controles. (TabelaM. Grupos F e G).

Porém, não ser logrou obter a sobrevivência dos animais tratados apenas com oimunomodulador até o final do experimento. (Tabela M. Grupos FeG) para estas duasdosagens.

Parasitemia -

Embora significativamente tenha sido reduzida a parasitemia (Tabela M. Grupos FeG)não se logrou obter a eliminação da parasitemia.

Tratamento com o imunomodulador (agregado proteico de anidrido de fosfolinoleato-palmitoleato de amônio e magnésio) associado ao antimalárico (cloroquina) -

Tabela M (Grupos H e D

Dois grupos de 6 animais (Grupo I e Grupo H) foram tratados nas dosagens de 100mg/kg do imunomodulador em dose única , (Tabela M, Grupo I) e ainda com dosesrepetidas de 5 mg/kg (Tabela M. Grupo H) por 5 dias com o imunomodulador, sendoutilizado conjuntamente com a Cloroquina, esta última sendo administrada em doseúnica de 5 mg/kg, por via intraperitonial (i.p.), para os dois grupos. Ou seja, utilizou-sea dose mínima eficaz de Cloroquina (5 mg/kg), para P.chabaudi, como estabelecidaneste experimento (Tabela M. Grupo D).

Sobrevivência -

O efeito sinergístico, possibilitado pela associação do imunomodulador (agregadoproteico de anidrido de fosfolinoleato-palmitoleato de amônio e magnésio) e doantiparasitário (Cloroquina) foi surpreendente e notável, pois nesta dosagem, em quenão se verificava qualquer efeito curativo relevante, tanto para o imunomodulador(Tabela M. Grupos F e G), como para a Cloroquina nestas dosagens citadas, (Tabela M,Grupo D), ocorreu a sobrevivência de todos os animais. (Tabela M. Grupos H e D.

Parasitemia -

A parasitemia mostrou-se fortemente inibida para os dois grupos tratados com oImunomodulador e Cloroquina, (Tabela M. Grupos H e D mostrando-se no 5o (quinto)dia com 80 % de inibição para o grupo tratado diariamente com 5 mg/kg deImunomodulador e 5 mg/kg de Cloroquina (Tabela M. Grupo H) e com cerca de 85%de inibição no grupo tratado com 100 mg/kg de imunomodulador (dose única) e 5mg/kg de Cloroquina (Tabela M, Grupo D em relação aos controles. (Tabela M, Grupo A).

Adicionalmente se verificou ao final do experimento (21° dia) que a parasitemia nosanimais tratados com a combinação do imunomodulador (agregado proteico de anidridode fosfolinoleato-palmitoleato de amônio e magnésio) e da Cloroquina foi totalmenteeliminada, pois uma verificação efetuada nestes animais aos 21° dias após a infecçãomostrou que estavam totalmente livres de parasitos no sangue. ( Tabela M grupos H e D-

O experimento no modelo animal ( infecção experimental por P.chabaudi) comprovaque o invento da presente invenção, ou seja, a associação do imunomodulador(agregado proteico de anidrido de fosfolinoleato-palmitoleato de amônio e magnésio)com pelo menos uma substância de ação antiparasitária direta contra Plasmodium sp.,representa uma nova e potente terapia, com resultado prático muito superior àscapacidades terapêuticas de cada dos medicamentos, quando utilizados isoladamente.Isto representa não só um aumento da potência terapêutica, com pronunciado efeitosinergístico, pela utilização no presente invento, como ainda possibilita considerar naprática, significativas reduções das doses dos antimaláricos a serem empregados nasaplicações clinicas, desde que empregado o presente invento.

Pois conforme se verifica pela (Tabela M, Grupos H e D, a utilização do presenteinvento, mostra efeito terapêutico, também com a utilização de baixa dosagem doantimalárico (Cloroquina - dose baixa 1- 5mg/kg), ou seja, apenas quando a Cloroquinafoi utilizada de forma associada com o imunomodulador (agregado proteico de anidridode fosfolinoleato-palmitoleato de amônio e magnésio), fato que anteriormente ao uso dopresente invento, não se verificava (Tabela M. Grupo D). Na prática, portanto, autilização do presente invento em malária, permitirá considerar ou permitir a utilizaçãode doses menores dos compostos antimaláricos,ou seja, utilizando dosagens em que osmesmos não seriam efetivos, tal como indicado no experimento com animais (TabelaM, Grupos H e D.

Conseqüentemente a possibilidade da ocorrência de efeitos colaterais ou sua severidade,que estão intimamente associados à magnitude da dosagem utilizada dos antimaláricos,na prática médica, podem ser diminuídas através da utilização da presente invenção naterapia da malária, pois a utilização do presente invento, possibilitará utilizar na terapiados pacientes, menores doses e/ou em intervalos de tempo menores, dos produtos comação direta contra os parasitos da malária. Isto proporciona evidentes ganhosterapêuticos e econômicos, tornando a utilização específica do presente invento, muitoconveniente e apta a combater parasitos infecciosos do gênero Plasmodium sp.,causador de malária clinica em animais e seres humanos.

Conseqüentemente o presente invento que consiste na combinação ou associação doimunomodulador (agregado proteico de anidrido de fosfolinoleato-palmitoleato deamônio e magnésio) e de ao menos substância, com efeito, ou propriedade antimalárica,representa uma nova e útil invenção para o tratamento da malária, não compreendida oudescrita no estado da técnica até o presente momento.

Esta invenção consiste em uma combinação ou associação de compostos para otratamento da malária causada pelos protozoários do gênero Plasmodium,compreendendo essencialmente a administração em animais ou seres humanosinfectados, de uma combinação ou associação do imunomodulador (agregado proteicode anidrido de fosfolinoleato-palmitoleato de amônio e magnésio) e de pelo menos umasubstância que possua atividade antiprotozoárica (antimalárica) selecionado do grupo desubstâncias químicas que possuam na sua fórmula os grupos: 1)9- aminoacridinas (ex:mepacrina), 2) grupo 4 - aminoquinolinas (ex: cloroquina, hidroxicloroquina,amodiaquina), 3) - grupo 8- aminoquinolinas (ex : primaquina, quinocida), 4)grupobiguanidas (ex: cloroproguanil, cicloguanil, proguanil), 5) grupo diaminopirimidinas(ex: piretamina), 6) grupo sais de quinino, 7) grupo sulfas ou sulfonas (ex:sulfonamidas, sulfanilamidas, dapsona), 8) - antibióticos (ex: tetraciclinas), 9) -Inibidores de protease (ex: saquinavir, ritonavir, lopinavir), 10 - artemisina e derivados(ex: extratos naturais da Artemisia annua ou seus derivados sintéticos).Os componentes da combinação ou associação de medicamentos do presente invento,ou seja, o imunomodulador (agregado proteico de anidrido de fosfolinoleato-palmitoleato de amônio e magnésio) e de pelo menos uma substância que possuaatividade antiprotozoárica (antimalárica) selecionado do grupo de substâncias químicascitadas anteriormente e de forma não exaustiva, podem ser administrados tantoconjuntamente ou simultaneamente ou consecutivamente ou seqüencialmente, porqualquer via que seja apropriada de acordo com a natureza química e das característicasde solubilidade dos componentes, em quantidades suficientes para destruir os parasitosda malária dos animais ou seres humanos.

As substâncias ativas da combinação ou associação seja o imunomodulador (agregadoproteico de anidrido de fosfolinoleato-palmitoleato de amônio e magnésio), sejam osantimaláricos, podem se apresentar ou ser fornecidas para uso tanto separadamente,como associadas em forma de partes-conjugada, quando possível, como ainda em formade formas sólidas ou soluções, em formas farmacêuticas micro encapsuladas, emlipossomos ou em sistemas separados para administração e finalmente em formasinjetáveis e orais.

Para a preparação de uma forma simples de administração das substâncias da presenteinvenção, por exemplo, o imunomodulador (agregado proteico de anidrido defosfolinoleato-palmitoleato de amônio e magnésio) pode ser preparado para seradministrado com a utilização de quaisquer soluções aquosas conhecidas no estado datécnica ou opcionalmente utilizando-se excipientes, suspensões, transportadores e/ousubstâncias estabilizantes conhecidas na técnica.

E igualmente o mesmo se aplica às substâncias que se pretenda utilizar em conjuntocom o imunomodulador (agregado proteico de anidrido de fosfolinoleato-palmitoleatode amônio e magnésio) para as finalidades da presente invenção.

Exemplificativamente, uma solução para administração para o propósito da presenteinvenção, pode ser preparada suspendendo-se o imunomodulador (agregado proteico deanidrido de fosfolinoleato-palmitoleato de amônio e magnésio) em água para injeçãoestéril e altamente purificada ou ainda utilizando-se solução salina estéril e tamponada(com pH de 7 a 7,5).Exemplificativamente, um exemplo de antimalárico para ser utilizado na combinação ouassociação de substâncias que caracteriza a presente invenção, poderá ser a Cloroquina,administrada conjuntamente ao imunomodulador, porém com a Cloroquina,administrada por via oral ao paciente.

Qualquer espécie animal pode ser tratada de malária com a presente invenção. Oobjetivo principal é o tratamento de seres humanos, no entanto, a invenção não pode serlimitada somente a esta espécie.

UTILIZAÇÃO DA PRESENTE INVENÇÃO PARA O TRATAMENTO CONTRA ALEISHMANIOSE

Além da utilização contra protozoários do gênero Plasmodium sp., e de outrosmicroorganismos intracelulares anteriormente citados, a presente invenção poderá sertambém ser plenamente utilizado contra infecções causadas por protozoários do gêneroLeishmania, incluindo as espécies L. donovani, L. infantum, e L. Chagasi, L. major, L.tropica, L. aethiopica, L. mexicana, L. braziliensis L. peruviana, L. guyanensis, L.amazonensis.

Já que estes microrganismos citados, além de serem igualmente protozoários de vidaintracelular na maior parte de seu ciclo vital, compartilham com o gênero Plasmodiumum mesmo mecanismo de infecção e colonização do organismo hospedeiro, ou seja,dependem igualmente de uma condição orgânica de baixa imunidade relacionada àreduzida produção de interferon-gama ou em outros termos, de uma respostaimunológica do tipo TH-1 defectiva ou suprimida, para facilitar a sua viabilidade oupermanência no organismo do hospedeiro.

Esta diminuição dos níveis de Interferon-gama e eficiência da resposta imunológicaassociada a esta condição, ou seja, resposta imunológica do tipo TH-1, pode serocasionada pelos próprios microrganismos do gênero Leihsmania e ainda ocorrer noscasos em que a imunidade esteja diminuída ou finalmente suprimida por outraspatologias e condições, como, por exemplo, verifica-se no caso da AIDS, aonde apresença de co-infecção por protozoários da espécie Leishmania sp, apresenta-se comformas clínicas da doença especialmente graves.

Tratamento da leishmaniose - estado da arte

No estado da arte, os tratamentos existentes para a leishmaniose, tanto na formacutânea, como na forma visceral da doença, estão fundamentalmente baseados nautilização de compostos antimoniais com ação direta contra os protozoários, tal como oantimoniato de N-metil-glucamina, compostos antiparasitários como a Pentamidina,antibióticos como a Anfotericina. B, Paramomicina, derivados da alquilfosfocolina taiscomo a Mitelfosina (2-(hexadecoxy-oxido-phosphoryl) oxyethyl-trimethyl-azanium).

Uma evolução importante e relativamente recente no estado da técnica para otratamento da Leishmaniose é a utilização da Imunoterapia adjuvante, utilizando-se paraesta finalidade, a combinação ou associação de Interferon-gama de origem exógena ecompostos antimoniais (PHILLIPS, M. A. E STANLEY, S. L. Drugs Used in theChemotherapy of Protozoal Infections: Amebiasis, Giardiasis, Trichomoniasis,Trypanosomiasis, Leishmaniasis, and Other Protozoal Infections. In: BRUNTON, L.,LAZO, J., PARCKER, K. Goodman & Gilman's The Pharmacological Basis ofTherapeutics, llth ed., McGraw-Hill, New York, 2006), (Pearson, R.D., Sousa, A.Q.,Jeronimo, S.M.B. Leishmania species: Visceral (Kala-Azar), Cutaneous, and MucosalLeishmaniasis. In: Mandell, G.L., Bennett, J.E., Dolin, R.D. Mandell, Douglas andBennetfs Principies and Practice of Infectious Diseases, 5th ed., Philadelphia,Churchill-Livingstone, 2000). A justificativa para utilização da Imunoterapia com autilização do IFN-gama de origem exógena como adjuvante terapêutico nos casos deinfecção por Leishmania sp, repousa no entendimento já consolidado no estado da arte,de que uma estimulação da resposta imunológica do tipo TH-1, que se busca amplificarou reativar pela administração do IFN-gama de origem exógena, é especialmentedesejável, pois ocasiona a ativação ou reativação dos macrofagos no organismohospedeiro, habilitando-os a destruir eficazmente os protozoários da Leismania nasformas intracelulares. O principal obstáculo para a utilização ampla da Imunoterapiaadjuvante, com administração de IFN-gama de origem exógena para o tratamento dosinfectados por Leismania sp, não obstante a sua boa resposta terapêutica, é seu custoproibitivo para a maioria dos pacientes.

Portanto, o presente invento, será especialmente indicado também para o tratamentoespecífico da leishmaniose, nas formas cutânea ou visceral, tendo em vista acomprovada capacidade do imunomodulador (agregado proteico de anidrido defosfolinoleato-palmitoleato de amônio e magnésio) de desencadear uma potenteresposta imunológica do tipo TH-1, com produção endógena de Interferon-gama noorganismo do hospedeiro. O que irá variar Na combinação de substâncias quecaracteriza o presente invento, na prática, será o tipo de medicamento ou substânciascom ação direta contra os microrganismos intracelulares causadores da leishamaniose,que serão selecionados para emprego em combinação ou associação, mantido sempre oimunomodulador, na combinação ou associação de medicamentos.

Ou seja, o imunomodulador (agregado proteico de anidrido de fosfolinoleato-palmitoleato de amônio e magnésio) será sempre um componente obrigatório nopresente invento, também para o tratamento da leshmaniose.Assim para tratamento clínico da leishmaniose, nas formas cutânea ou visceral, apresente invenção irá essencialmente utilizar o imunomodulador (agregado proteico deanidrido de fosfolinoleato-palmitoleato de amônio e magnésio), combinado ouassociado com pelo menos uma substância com ação direta contra os parasitos destaenfermidade.

Portanto para as finalidades do presente invento, quando a combinação de substânciasque caracteriza a invenção, for utilizada no tratamento específico das infecções causadaspor Leishmania sp, o imunomodulador (agregado proteico de anidrido de fosfolinoleato-palmitoleato de amônio e magnésio) deverá sempre ser combinado ou associado com osseguintes compostos e substancias aqui citadas em uma relação não exaustiva:compostos antimoniais, tal como o antimoniato de N-metil-glucamina, compostosantiparasitários como a Pentamidina, antibióticos como a Anfotericina B,Paramomicina, derivados da alquilfosfocolina, como a Mitelfosina (2-(hexadecoxy-oxido-phosphoryl) oxyethyl-trimethyl-azanium).

Os componentes da combinação ou associação de medicamentos do presente invento,ou seja, o imunomodulador (agregado proteico de anidrido de fosfolinoleato-palmitoleato de amônio e magnésio) e pelo menos uma substância que possua atividadeantiparasitária selecionado do grupo de substâncias químicas citadas anteriormente,tanto podem ser administrados conjuntamente ou simultaneamente ou consecutivamenteou seqüencialmente, por qualquer via que seja apropriada de acordo com a naturezaquímica e das características de solubilidade dos componentes, em quantidadessuficientes para destruir os parasitas da Leishmaniose nos animais ou seres humanos.As substâncias ativas da combinação ou associação seja o imunomodulador (agregadoproteico de anidrido de fosfolinoleato-palmitoleato de amônio e magnésio), sejam osantiparasitários, podem se apresentar ou ser fornecidas para uso tanto separadamente,como associadas em forma de partes-conjugada, quando possível, como ainda em formade formas sólidas ou soluções, em formas farmacêuticas micro encapsuladas, emlipossomos ou em sistemas separados para administração e finalmente em formasinjetáveis e orais.

Para a preparação de uma forma simples de administração das substâncias da presenteinvenção, por exemplo, o imunomodulador (agregado proteico de anidrido defosfolinoleato-palmitoleato de amônio e magnésio) pode ser preparado para seradministrado, com a utilização de quaisquer soluções aquosas conhecidas no estado daarte ou opcionalmente utilizando-se excipientes, suspensões, transportadores e/ousubstâncias estabilizantes conhecidas na técnica.

E igualmente o mesmo se aplica às substâncias que se pretenda utilizar em conjuntocom o imunomodulador agregado proteico de anidrido de fosfolinoleato-palmitoleato deamônio e magnésio para as finalidades da presente invenção.

Exemplificativamente, uma solução para administração para o propósito da presenteinvenção, pode ser preparada suspendendo-se o imunomodulador (agregado proteico deanidrido de fosfolinoleato-palmitoleato de amônio e magnésio) em água para injeçãoestéril e altamente purificada ou ainda utilizando-se solução salina estéril e tamponada(com pH de sete a 7,5).

Exemplificativamente, um exemplo de antiparasitário para ser administradoconjuntamente poderá ser a Anfotericina B, administrada conjuntamente aoimunomodulador, porém esta última, administrada por via endovenosa ao paciente.Qualquer espécie animal pode ser tratada de Leishmaniose com a presente invenção. Oobjetivo principal é o tratamento de seres humanos, no entanto, a invenção não pode serlimitada somente a esta espécie.

FUNGOS- UTILIZAÇÃO DA PRESENTE INVENÇÃO - DVÍUNOMODULADORASSOCIADO A ANTIFUNGAIS. RESPOSTA IMUNE A FUNGOS

O principal mecanismo de defesa dos organismos superiores contra fungos édesempenhado pelos fagócitos, que destroem os microorganismos citados, por meio daprodução de NO e de outros componentes secretados por essas células. Adicionalmente,há participação de IFN-gama, aumentando a função de neutrófilos e macrófagos, nãohavendo evidências de atividade citotóxica por células T CD8+.

Portanto, pacientes que apresentam neutropenia, ou seja, contagem de neutrófilos nosngue periférico menor que 500 neutrófilos/mm3 ou que tenham deficiência daimunidade celular, não surpreendentemente, cursam com freqüência com micosesrecorrentes e ocasionalmente desenvolvem formas graves e profundas. Embora umgrande número de espécie de fungos possa causar doenças no homem, a maioria delescausa doença limitada, sem maiores repercussões clínicas.

Destaca-se entre os fungos que estão mais comumente associados com morbidade aCândida albicans, o Criptococcus neoformans e o Paracoccidiodis braziliensis. Apesarde a infecção por C. albicans causar habitualmente infecções leves e sem maioresconseqüências, pacientes infectados com HIV não apresentam somente alta prevalênciada infecção por C. albicans, mas também formas disseminadas e sistêmicas desteparasito, com envolvimento de esôfago, estômago e intestino, sendo comuns infecçõesrecorrentes, levando freqüentemente à morte destes pacientes.Em crianças que apresentam alteração na resposta imune celular e distúrbios endócrinosmúltiplos, o quadro raro de candidíase mucocutânea crônica é descrito. Nessas criançasobservam-se igualmente uma marcada diminuição da resposta imunológica do tipo TH-1, acompanhada de lesões cutâneas, mucosas e ungueais graves, ocasionadas por fungospertencentes à espécie Cândida sp.

A despeito de a candidíase vaginal ser extremamente freqüente e sem maioresconseqüências, no entanto cerca de 5% das mulheres em idade reprodutiva apresentamum quadro de candidíase vaginal recorrente, associado nestes casos à ausência ou abaixos níveis de IFN-gama.

Por estas razões, a Imunoterapia, visando amplificar ou restaurar uma adequada respostaimunológica do tipo TH-1, representará uma opção terapêutica genérica e benéfica paraeste tipo de pacientes, tanto para os portadores de imunidade defectiva em geral, eespecialmente para os casos específicos de pacientes que apresentem quadros severos deneutropenia (menos de 500 neutrófilos/mm3) e finalmente nos portadores de HIV/AIDS.

Conseqüentemente, pelas razões já amplamente explanados no presente, a Imunoterapia,será especialmente indicada para estes pacientes e ocasiões, ainda mais quando adotadaespecificamente a presente invenção, que combina as vantagens da Imunoterapia,adicionado ao efeito sinergístico proporcionado pela presença na combinação ouassociação, de outras substâncias com ação direta contra os microorganismos patógenos.

Tal efeito sinergístico, se deve tanto pela capacidade de aumento da produção endógenade Interferon-gama e, portanto de reforço da resposta imunológica do tipo TH-1,proporcionada pelo uso do imunomodulador, que é um componente-chave do presenteinvento, como ainda pelo fato do presente invento , poder agregar, combinar ou associaroutras substâncias, estas últimas com ação direta contra os parasitos em questão, aserem utilizadas de forma conjunta ou associada com o imunomodulador.

Estado da técnica no tratamento das infecções fungais - medicamentos com ação diretacontra os microrganismos da espécie Cândida sp.

O tratamento de escolha das infecções sistêmicas por patógenos da espécie Cândida spe outros fungos, com substâncias com ação direta contra os microrganismos, pode serrealizado com medicações nas formas injetáveis ou orais, compreendendo o uso desubstâncias como antibióticos do grupo da Anfotericina B, ou com compostos queapresentem o grupamento Azol, e seus derivados, como por exemplo, o fluconazol e oitraconazol, enquanto o tratamento das infecções superficiais é feito pela aplicação deantimicóticos tópicos como nistatina, clotrimazol, miconazol entre outros produtos comação antifungal.

Exemplo da utilização prática da presente invenção no tratamento de infecção fungaicrônica - Candidíase -pacientes de AIDS.

A seguir apresenta-se um exemplo prático de utilização da presente invenção, em umexperimento envolvendo pacientes com AIDS e apresentando candidíase cutâneacrônica. Pacientes com AIDS apresentam com freqüência formas graves de candidíasecutânea, que podem vir a acometer outros órgãos além da pele, muitas vezesocasionando a morte do indivíduo. Os dados de interesse para o presente são mostradosna Tabela C abaixo, que também faz parte integrante do presente relatório.

Estes exemplos de utilização, no entanto são apresentados com finalidade meramenteilustrativa, sem em que nenhum se pretenda ou se possa minimizar, restringir ou limitaro campo de atuação do invento.Para avaliar a eficácia da presente invenção, ele foi utilizado em um estudo com 20pacientes portadores de HIV/AIDS, 10 homens e 10 mulheres com manifestaçõescrônicas de candidíase cutânea, causada por parasitos da espécie Cândida sp. com oimunomodulador (agregado proteico de anidrido de fosfolinoleato-palmitoleato deamônio e magnésio) utilizado em associação a antifungais (Fluconazol).

Como critério de comparação, foram utilizado os dados de outros 20 pacientes, sendo10 homens e 10 mulheres que foram medicados apenas com medicação antifungal eque, portanto não fizeram uso concomitante do imunomodulador, associado aoantifungal.

Os pacientes foram seguidos por seis meses e o critério adotado para avaliaçãocomparativa dos tipos de tratamentos, foi o tempo de recidiva, isto é, o tempo paraeventual retorno de manifestações de candidíase nos pacientes medicados, contado apartir da data inicial da remissão dos sintomas, para cada paciente individual.A medicação antifungal, com efeito, direto contra a Cândida sp de escolha e utilizadapara todos os pacientes foi o Fluconazol, utilizado por via oral (400 mg/dia/5 dias).

O Fluconazol (C13H12F2N60), é uma substância com ação antifungal pertencente àclasse química dos derivados do grupamento azol (triazólicos). Seu mecanismo de açãoantifungal está ligado à inibição da síntese de compostos esteróides necessários àsobrevivência dos parasitos.

O imunomodulador (agregado proteico de anidrido de fosfolinoleato-palmitoleato deamônio e magnésio) foi utilizado por via intramuscular, na dosagem de 10 mg/dia por 5dias, suspenso em solução salina estéril (NaCl-0.9%) para injeção, para todos ospacientes e pelo mesmo tempo de duração.

Resultados e Discussão -Embora todos os pacientes tenham respondido também à medicação antifungal(Fluconazol), quando utilizada isoladamente, verificou-se nos pacientes que fizeram usoda presente invenção, ou seja, da combinação ou associação do imunomodulador(agregado proteico de anidrido de fosfolinoleato-palmitoleato de amônio e magnésio)com pelo menos uma substância, com efeito, direto contra o agente infeccioso, no casoum antifungal (Fluconazol) uma melhor resposta terapêutica, avaliada pelo tempomédio de recidiva de sintomas. (Tabela C).

Para os pacientes que fizeram uso da presente invenção, o tempo decorrido para recidivados sintomas, praticamente triplicou. (Tabela O. Nenhum dos pacientes neste estudorelatou qualquer efeito colateral adverso que possa ser associado a utilização dopresente invento.

Não foi possível obter-se a remissão definitiva dos sintomas da candidíase por setratarem de pacientes com AIDS, ou seja, com sistema imunológico já afetado de formaduradoura.

No entanto, a presente invenção, apresentou um efeito sinergístico quando oimunomodulador (agregado proteico de anidrido de fosfolinoleato-palmitoleato deamônio e magnésio) é utilizado em combinação ou associação com antifungais, empacientes portadores de infecção fungai crônica. (Tabela C).

Nada impede que a presente invenção seja também utilizado em pacientes portadoresde infecção fungai, que não esteja associada a AIDS e obviamente com efeitos ouresultados mais duradouros.

Portanto o presente invento oferece uma nova e útil combinação de substâncias para otrtatamento de doenças fungais, ocasionadas por fungos das espécies Cândida sp,Criptococus sp, Paracoccidiodis sp. etc, destinado a pacientes imunodeprimidos emgeral, tais como pacientes com AIDS, por exemplo, e ainda para pacientes sem quadrosde imunodepressão.

Seja para tratamento clínico específico da candidíase e ainda de outras infecções fungaisem geral, a presente invenção irá sempre associar ou utilizar o imunomodulador (agregado proteico de anidrido de fosfolinoleato-palmitoleato de amônio e magnésio)com pelo menos uma substância com ação direta contra os parasitos desta enfermidade,ou seja, o imunomodulador associado com os seguintes compostos e substancias aquicitadas em uma relação não exaustiva: antiparasitários como o Fluconazol e demaisderivados do grupamento químico azol (triazólicos), antibióticos como a Anfotericina.

Be antiparasitários, tais como a Pentamidina.

Os componentes da combinação ou associação de medicamentos do presente invento,ou seja, o imunomodulador (agregado proteico de anidrido de fosfolinoleato-palmitoleato de amônio e magnésio) e de pelo menos uma substância que possuaatividade antifungal selecionado do grupo de substâncias químicas citadasanteriormente, podem ser administrados tanto conjuntamente ou simultaneamente ouconsecutivamente ou seqüencialmente, por qualquer via que seja apropriada de acordocom a natureza química e das características de solubilidade dos componentes, emquantidades suficientes para destruir os parasitos nos animais ou seres humanos.As substâncias ativas seja o imunomodulador, seja o antiparasitário, podem seapresentar ou ser fornecidas para uso tanto separadamente, como associadas em formade partes-conjugada, quando possível, como ainda em forma de formas sólidas ousoluções, em formas farmacêuticas micro encapsuladas, em lipossomos ou em sistemasseparados para administração e finalmente em formas injetáveis e orais.Para a preparação de uma forma simples de administração das substâncias da presenteinvenção, por exemplo, o imunomodulador (agregado proteico de anidrido defosfolinoleato-palmitoleato de amônio e magnésio) pode ser preparado para seradministrado com a utilização de quaisquer soluções aquosas conhecidas no estado daarte ou opcionalmente utilizando-se excipientes, suspensões, transportadores e/ousubstâncias estabilizantes conhecidas na técnica.

E igualmente o mesmo se aplica às substâncias que se pretenda utilizar em conjuntocom o imunomodulador (agregado proteico de anidrido de fosfolinoleato-palmitoleatode amônio e magnésio) para as finalidades da presente invenção.

Exemplificativamente, uma solução para administração para o propósito da presenteinvenção, pode ser preparada suspendendo-se o imunomodulador (agregado proteico deanidrido de fosfolinoleato-palmitoleato de amônio e magnésio) em água para injeçãoestéril e altamente purificada ou ainda utilizando-se solução salina estéril e tamponada.

Exemplificativamente, um exemplo de antifungal para ser administrado conjuntamentepoderá ser o Fluconazol, sendo administrado por via oral ao paciente.

Qualquer espécie animal pode ser tratada de Candidíase ou outras infecções fungaiscom a presente invenção. O objetivo principal é o tratamento de seres humanos, noentanto, a invenção não pode ser limitada somente a esta espécie.

VIROSES - UTILIZAÇÃO DA PRESENTE INVENÇÃO - IMUNOMODULADORASSOCIADO A ANTIVIRAIS RESPOSTA IMUNE NAS INFECÇÕES VIRAIS

A despeito dos múltiplos mecanismos de defesa contra os vírus dos organismos vivos,as doenças virais continuam a representar uma das mais importantes doençasinfecciosas causadas por microorganismos intracelulares, associadas com a mortalidadeda população. Na fase inicial das infecções virais, o combate e controle dessas infecçõesno hospedeiro, é feito principalmente pelos interferons tipo I (IFN-alfa e IFN-gama),pelos macrófagos e pelas células NK.

Os denominados Interferons são citoquinas produzidos por células infectadas por vírus(linfócitos) em presença de agentes invasores e ainda de células neoplásicas e auxiliama desencadear e amplificar a resposta imunológica do organismo hospedeiro. Odenominado Interferon-gama (IFN-gama), produzido no organismo principalmentepelos linfócitos (Linfócitos-T) tem o importante papel ou função, entre outras, no casode combate a micróbios invasores em geral e no caso específico das infecções virais, deocasionar a ativação dos macrófagos, para que estes ataquem os microorganismosinvasores, levando a destruição direta dos micróbios e vírus, através de mecanismoscitotóxicos e também das células NK (células citotóxicas naturais), as quais têmcapacidade de destruir diretamente as células infectadas, o que em muitos casos lograinterromper o ciclo de replicação viral.

Adicionalmente, outra citoquina, a denominada Interleucina-2 (IL-2) possui tambémuma participação importante na fase inicial das infecções causadas por micróbiosinvasores, entre eles os vírus, sendo produzida por macrófagos e outras célulasapresentadoras de antígenos, estimulando as células NK do hospedeiro a exercercitotoxicidade e a produzir mais IFN-gama (IFN-gama), que por sua vez aumenta opotencial microbicida dos macrófagos e assim sucessivamente, para a final eliminar osagentes invasores.

Estado da técnica no tratamento de viroses

Até o presente, a mais bem sucedida estratégia de defesa contra vários tipos de víruscontinua baseada na prevenção, através do desenvolvimento de vacinas específicas, quesão os únicos agentes terapêuticos conhecidos, que são efetivamente capazes de dar umaresposta eficiente e duradoura para as infecções virais.

As vacinas são responsáveis pela virtual erradicação de algumas patologias virais dedevastadoras conseqüências para a raça humana, entre elas a varíola e a poliomielite.afortunadamente para grande parte das variedades virais, por diversas razões, não seconseguiu até o presente estado da técnica, o desenvolvimento e disponibilizarão devacinas eficazes, citando-se como exemplos, os vírus causadores de Hepatite C e herpescutâneo e genital.

No estado da técnica alguns compostos com ação direta contra os microorganismos(antivirais) são parcialmente eficazes contra vários tipos de vírus, citando-se o caso dogênero Herpesviridae, para os quais o tratamento clinico atual se limita ao Acycvlovir esuas variações.

No caso da AIDS, causada pelo HIV, que é um retrovirus (vírus dotado de RNA), otratamento específico contra o vírus HIV, baseia-se na associação do emprego de váriostipos de substâncias, com efeito, antiviral direto ( anti-HIV), que embora não consigama eliminação do vírus HIV, permitem algum grau de controle e retardamento dainfecção, embora à custa de sérios efeitos colaterais e elevados custos de tratamento, oque torna o tratamento virtualmente impraticável para grande número dos infectados.

No estado da arte, como terapia antiretroviral específica, ou anti-HIV, são utilizados oscompostos: AZT (1-[(2R,4S,5S)- 4-azido-5-(hydroxymethyl) oxolan-2-yl]- 5-methyl-pyrimidine-2,4-dione ou C10H13N5O4), o Ribavirin (l-(p-D-Ribofuranosil) - 1H-1,2,4-triazol-3-carboxamida), inibidores de transcriptase reversa (Abacavir, Didanosina(DDI), Lamivudina (3TC), Estavudina, Tenofovir, Zidovudina (AZT), Zalcitabina)inibidores de protease viral (Atazanavir, Darunavir, Fosemprenavir, Lopinavir,Nelfinavir, Ritonavir, Saquinavir, Tipranavir, Amprenavir, Indinavir)), os inibidores detranscriptase reversa não-nucleosídeos (Efavirens, Nevirapine, Etravine, Rilvipirine,Loviride, Delarvine), citados no presente para finalidades explicativas, em umaenumeração não exaustiva.

No tratamento específico de alguns tipos de viroses, uma evolução no estado da artemédica importante, principalmente no caso das Hepatites B e C, está representada pelautilização de Interferons de origem exógena (Interferon-alfa), que são associados aoutras substâncias, estas últimas com ação antiviral direta, resultando em umamodalidade terapêutica para o tratamento desta doença, atualmente em uso corrente na Medicina.

Neste tipo de terapia, a utilização conjunta do Interferon-alfa de origem exógena e doantiviral, além da ação antiviral principal, visa ainda que de forma secundária, atrasar asíntese de novas cópias virais, por tempo suficiente para permitir que outrosmecanismos imunes possam combater ou ainda eliminar o vírus do organismo dohospedeiro ao longo do tempo.

Entretanto a utilização do interferon-alfa exógeno com pelo menos uma substância comação antiviral direta, como por exemplo, o 1-(P-D-Ribofuranosil) -lH-l,2,4-triazol-3-carboxamida (Ribavirin), como utilizado para tratamento das complicações ocasionadaspelo vírus causador da Hepatite C, esbarra na prática em sérios problemas, comoocorrência de graves efeitos colaterais, e o alto custo do tratamento, eventos estes quelevam grande número de pacientes a não utilizar a terapia citada ou ainda a abandoná-la prematuramente.

Infeccão viral modelo - Punta toro vírus - Protocolo experimentalPara avaliar a efetividade da presente invenção também para terapia de doenças virais,utilizou-se o modelo da infecção experimental em camundongos, pelo Punta Toro vírus,que é um vírus RNA pertencente à família Bunyviridae, que afeta animais e sereshumanos, sendo estreitamente relacionado com os vírus causadores de febreshemorrágicas, entre eles os vírus causadores da febre africana do vale Rift (AfricanRift valley fever) e da febre virótica da mosca (Sandfiy fever viruses), responsáveis pordoenças de conseqüências fatais para animais e seres humanos.

O Punta toro vírus produz em animais experimentais, uma doença sistêmica de rápidaevolução, cujos marcadores clínicos típicos são a hepatopatia e necrose do fígado,seguida da morte dos animais infectados, constituindo-se em um modelo experimentalbastante utilizado pelo National Institute for Alergic and Infectious Diseases (NIADI)para avaliação de novas terapias antivirais.

O antiviral Ribavirin (l-(P-D-Ribofuranosil) -lH-l,2,4-triazol-3-carboxamida), que noestado da arte, representa um dos antivirais com maior espectro de atuação clínica, foiinicialmente avaliado em experimentos com animais, utilizando o modelo do Punta torovírus por Sidwell et al. (Antim. Agents and Chem. Mar. 1988, p. 331-336) e a partirdestes resultados, este composto citado, passou a ser cada vez mais empregado comoterapia em infecções causadas por vírus RNA e DNA, isoladamente ou em associaçãocom Interferon-alfa de origem exógena.

No atual estado da técnica, como citado, está bem estabelecido que o compostoRibavirin apresenta também atividade contra diversas outras classes e tipos de virusimportantes, além do Punta Toro vírus, incluindo-se os vírus da influeza aviaria (gripeaviaria), hepatite B, pólio, rubéola, varíola, vírus das febres hemorrágicas, hantavírus,febre amarela, flavivirus (hepatite C, vírus do oeste do Nilo e dengue).No atual estado da técnica, o l-(P-D-Ribofuranosil)-lH-l,2,4-triazol-3-carboxamida(Ribavirin), como citado, é o único antiviral utilizado com algum grau de eficácia parao tratamento clínico de seres humanos, afetados pelas doenças denominada hepatitesvirais ( Hepatite B e Hepatite C), sendo usualmente associado no Interferon-alfa deorigem exógena no tratamento de pacientes acometidos destas infecções. A utilizaçãodo Interferon-alfa de origem exógena em combinação com um composto antiviral(Ribavirin) no tratamento de viroses, tais como Hepatite B e Hepatite C, visaproporcionar uma maneira de ataque indireto aos microorganismos patógenos, pela viada Imunomodulação, enquanto o antiviral (Ribavirin) estaria agindo diretamente nosmicrorganismos. Entretanto a utilização do interferon-alfa de origem exógena com pelomenos uma substância com ação antiviral, como por exemplo, o Ribavirin, comoutilizado para tratamento clinico de pacientes portadores de viroses, esbarra na práticaem sérios problemas, como a ocorrência de graves efeitos colaterais, que em muitasocasiões, forçam o abandono prematuro do tratamento por grande número de pacientes.

O imunomodulador (agregado proteico de anidrido de fosfolinoleato-palmitoleato deamônio e magnésio), que é um dos componentes-chave do presente invento quecomprovadamente possui propriedades imunomoduladoras, não só se mostra capaz deproduzir uma forte resposta imunológica do tipo TH-1 no hospedeiro, propriedade estaespecialmente importante no combate e controle das infecções virais, como ainda écapaz de produzir Interferon (IFN-gama) na esfera do próprio organismo dohospedeiro, ou seja, é capaz de estimular a produção endógena de citoquinas, entre elaso Interferon com reconhecidas capacidades imunomoduladoras associadas a controle demicroorganismos intracelulares patógenos, entre eles os vírus, ao nível do organismodo hospedeiro. Como anteriormente citado e ora reiterado, é um fato bem estabelecidono estado da técnica da Imunologia, que a produção de substâncias, com efeito,biológico, pelo próprio organismo para propósitos terapêuticos, ao invés de se recorrerao uso das mesmas ou de análogos sintéticos, obtidos de fontes externas para osmesmos fins, é sempre preferível, pois permite evitar inumeráveis problemas causadospor reação do sistema imunológico do paciente às substâncias de origem exógena.

Portanto, o imunomodulador (agregado proteico de anidrido de fosfolinoleato-palmitoleato de amônio e magnésio) que tem capacidade de induzir uma potenteresposta imunológica do tipo TH-1 no hospedeiro, com produção endógena decitoquinas, entre elas o Interferon com propriedades antivirais e imunomoduladoras(Interferon-gama) pode ser considerado para substituir com vantagem o Interferon-alfade origem exógena em esquemas terapêuticos para tratamento em geral de infecçõesvirais, entre elas a Hepatite C e Hepatite B em particular, desde que continue oimunomodulador (agregado proteico de anidrido de fosfolinoleato-palmitoleato deamônio e magnésio) a ser combinado ou associado à pelo menos uma substância comação antiviral direta. Esta substância com ação antiviral direta, tanto pode ser oRibavirin ou várias outras substâncias descritas no estado da arte ou ainda por seremdisponibilizadas, utilizadas forma isolada ou em combinação, tudo dependendo do tipode vírus a ser enfrentado.

A substituição do Interferon-alfa de origem exógena, especificamente peloimunomodulador (agregado proteico de anidrido de fosfolinoleato-palmitoleato deamônio e magnésio), para ser utilizado como um dos componentes-chave de umacombinação de substâncias para o tratamento de doenças infecciosas, com a finalidadede induzir uma potente resposta imunológica do tipo TH-1, incluindo a produçãoendógena de Interferon (IFN-gama) e outras substâncias que atuam no sistemaimunológico do hospedeiro, sem dúvida significa disponibilizar para uso uma nova eefetiva terapia contra micróbios ou microorganismos intracelulares patógenos, estritosou facultativos, entre eles os vírus, não descrito ou compreendido no estado da técnica edele não podendo ser deduzido ou inferido. E para demonstrar de maneira prática autilidade do presente invento, também no tratamento de infecções virais, o mesmomodelo da infecção experimental por Punta Toro vírus (PTV), citado no estado datécnica para testar-se a eficácia do Ribavirin como antiviral, foi igualmente escolhidopara testar a combinação de substâncias que caracteriza a presente invenção, ou seja, oimunomodulador (agregado proteico de anidrido de fosfolinoleato-palmitoleato deamônio e magnésio), combinado ou associado com pelo menos uma substância comação antiviral, no caso, utilizando-se a mesma substância, ou seja, o 1-(P-D-Ribofuranosil) -lH-l,2,4-triazol-3-carboxamida (Ribavirin).

Assim sendo, animais experimentais, no caso camundongos da linhagem C57BL/6,foram infectados com Punta Toro vírus e submetidos a duas experiências, nas quaisforam utilizados o Imunomodulador da presente invenção (agregado proteico deanidrido de fosfolinoleato-palmitoleato de amônio e magnésio) e o antiviral (Ribavirin)de forma isolada e de forma conjunta ou em associação, para avaliação da eficáciacomparativa dos tratamentos.

Além destas experiências em animais infectados por Punta toro vírus, serão dadosexemplos da utilização da presente invenção, ou seja, a combinação ou associação doimunomodulador (agregado proteico de anidrido de fosfolinoleato-palmitoleato deamônio e magnésio) e de pelo menos uma substância com ação antiviral em sereshumanos, portadores de outras infecções virais.Entretanto tais experimentos serão apresentados no presente de maneira meramenteilustrativa e não pretendem de modo algum limitar ou restringir o campo de atuação dopresente invento.

Ou seja, a presente invenção poderá ser extrapolada, proposta ou utilizada para os maisdiversos tipos de infecções virais, além dos exemplos citados na presente aplicação, jáque a resposta do organismo do hospedeiro frente a qualquer infecção viral semprepoderá ser auxiliada ou complementada pela combinação ou associação de compostosou medicamentos que se constitui no objeto do presente invento.

No presente invento, uma das substâncias, ou seja, o imunomodulador tem a funçãoespecífica de estimular a produção de substâncias que estimulem ou modulem o sistemaimunológico, já que esta ativação do sistema imune representa a primeira linha dedefesa contra agentes virais e infecciosos e o outro produto da associação, ou seja, oantiviral terá a função específica de atacar diretamente os vírus.

Assim o que irá variar na prática clínica para os diversos tipos de viroses, será ocomposto com ação antiviral, mantido, porém na combinação ou associação demedicamentos, que se constitui o objeto da presente invenção, sempre o mesmocomposto com ação imunomoduladora, ou seja, o composto denominado agregadoproteico de anidrido de fosfolinoleato-palmitoleato de amônio e magnésio, parapossibilitar um efeito sinergístico, que será superior a atividade dos compostos quandoutilizados de forma isolada.

EXEMPLO PRÁTICO DA UTILIZAÇÃO DA PRESENTE INVENCÃO-MODELOEXPERIMENTAL - INFECÇÃO VIRAL POR PUNTA TORO VÍRUS (P.T. V).EXPERIMENTO 1 - Utilização do composto com ação antiviral e imunomoduladoragregado proteico de anidrido de fosfolinoleato-palmitoleato de amônio e magnésio deforma isolada.

Neste primeiro experimento, grupos de camundongos fêmeas da linhagem C57BL/6 de8 semanas (n=15) foram tratados com várias doses do imunomodulador (agregadoproteico de anidrido de fosfolinoleato-palmitoleato de amônio e magnésio) e com pelomenos uma substância com ação antiviral direta, caso do experimento, utilizou-se oantiviral Ribavirin (1 -(P-D-Ribofuranosil)-1H-1,2,4-triazol-3 -carboxamida).Ambos os compostos foram neste primeiro experimento utilizados de forma isolada, eigualmente dissolvidos em solução salina e aplicados por via i.p. nos animais.

Os animais foram inoculados com 1.3 x IO4 CCID50- (doses infectantes de culturacelular) de vírus (Punta toro vírus - variedade Adornes).

O imunomodulador (agregado proteico de anidrido de fosfolinoleato-palmitoleato deamônio e magnésio) foi aplicado por via i.p. em várias dosagens (5 mg/kg, 10 mg/kg e100 mg/kg), administradas em dose única, todas igualmente aplicadas decorridas 24horas da infecção viral.

O antiviral Ribavirin na dosagem de 50 mg/kg, foi administrado 2 vezes ao dia, durante5 dias, iniciando-se a primeira dose nas 4 horas anteriores à infecção viral.De cada grupo tratado, tanto com o Ribavirin quanto do grupo tratado apenas com oimunomodulador (agregado proteico de anidrido de fosfolinoleato-palmitoleato deamônio e magnésio), 5 animais foram sacrificados no terceiro dias após infecção, comremoção de seus fígados, que foram pesados e analisados para estabelecimento de umaescala de parâmetros de dano hepático.Esta escala, obtida através de inspeção visual da descoloração dos fígados dos animaisvaria de 0 (zero) para fígado sem apresentar descoloração (fígado integro ou com graumínimo de dano) até 4 (quatro), para fígado com descoloração máxima (fígado com omáximo grau de dano hepático).

Também se coletou soro de animais tratados neste experimento para determinação deenzimas hepáticas.

O marcador utilizado para determinação dano hepático é a Alanina aminotransferase(ALT), que é uma enzima citoplasmática, encontrada primariamente em hepatócitos,sendo considerada um marcador específico de dano hepático.

Portanto no caso dos experimento, os níveis de Alanina aminotransferase, irão indicar ograu de dano hepático ou ainda o grau relativo de hepatoproteção, quando consideradosos diversos tipos de tratamento entre si.

A quantificação da carga viral destes animais também foi obtida, através da análise dosoro e homogenatos de fígado.

Os remanescentes animais (n= 10) de cada grupo foram observados até o vigésimoprimeiro dia após infecção, para determinação da sobrevivência. Adicionalmente 3animais não infectados e não tratados, do mesmo tipo e lote dos animais experimentais(animais testemunhas) também foram igualmente analisados para o estabelecimento deparâmetros basais.

Os resultados deste experimento, aonde se utiliza apenas o imunomodulador (agregadoproteico de anidrido de fosfolinoleato-palmitoleato de amônio e magnésio) e umasubstância com ação antiviral, aplicados de forma isolada são mostrados de formaesquemática na Tabela A.EXPERIMENTO 2 - Utilização da presente invenção -imunomodulador (agregadoproteico de anidrido de fosfolinoleato-palmitoleato de amônio e magnésio) e compostocom ação antiviral direta (Ribavirin")utilizados em associação.

Neste segundo experimento, grupos de camundongos fêmeas da linhagem C57BL/6 de8 semanas (n= 15) foram tratados com a associação de substâncias da presenteinvenção ou seja, foram tratados com o imunomodulador (agregado proteico de anidridode fosfolinoleato-palmitoleato de amônio e magnésio), associado a aplicação de pelomenos uma substância com ação antiviral, no caso utilizando-se como substanciaantiviral também o Ribavirin (l-(P-D-Ribofuranosil) -lH-l,2,4-triazol-3-carboxamida).

Como grupos controle, foram utilizados animais tratados unicamente com soluçãosalina.

Os animais deste segundo experimento foram igualmente inoculados com a mesmacarga viral do primeiro experimento, ou seja, foram utilizadas 1.3 x IO4 CCID50 - (dosesinfectantes de cultura celular) de vírus {Punta toro vírus - variedade Adames).

O imunomodulador (agregado proteico de anidrido de fosfolinoleato-palmitoleato deamônio e magnésio) foi aplicado por via i.p., apenas na dosagem de 10 mg/kgadministrada em dose única, decorridas 24 horas da infecção viral.

O antiviral Ribavirin na dosagem de 2 mg/kg, foi administrado 1 vez ao dia, durante 5dias, por via i.p., aplicando-se a primeira dose nas 24 horas posteriores à infecçãoviral.

Na primeira aplicação, as duas substâncias foram aplicadas conjuntamente nos animais.Após este período de tempo apenas o antiviral Ribavirin seguiu sendo aplicado nosanimais, por mais 4 dias.Os mesmos parâmetros utilizados no primeiro experimento, para avaliação dassubstâncias consideradas isoladamente foram utilizados para avaliação do efeito dacombinação dos medicamentos, sendo igualmente utilizado um grupo de animais nãoinfectados para obtenção de parâmetros basais.

Os dados e resultado deste experimento, aonde se utiliza o presente invento, ou seja, aassociação do imunomodulador (agregado proteico de anidrido de fosfolinoleato-palmitoleato de amônio e magnésio) e ao menos uma substância com ação antiviral sãomostrados de forma integral na Tabela B.

Resultados e discussão

Analisando-se os dados da Tabela A. observa-se que a dosagem 100 mg/kg doimunomodulador (agregado proteico de anidrido de fosfolinoleato-palmitoleato deamônio e magnésio), aplicado em dose única, conseguiu proporcionar níveis adequadosde proteção aos camundongos infectados com PTV. O antiviral (Ribavirin), aplicadotambém em alta dosagem (50 mg/kg) duas vezes ao dia, por 5 dias igualmente protegeueficazmente os animais infectados por PTV (Tabela A).

Nos animais tratados com o imunomodulador (agregado proteico de anidrido defosfolinoleato-palmitoleato de amônio e magnésio isoladamente, nas dosagens de 10mg/kg e 1 mg/kg (Tabela A) não se visualizou um impacto significativo na infecção porPTV, comparados aos animais aos quais se aplicou somente salina (controles) - (Tabela A)).

O antiviral (Ribavirin) quando utilizado em baixas dosagens, ou seja, inferiores a 4,7mg/kg, é igualmente inefetivo contra a infecção por PTV, conforme reportado naliteratura (Sidwell, R. W., J. H. Huffman, B. B. Barnett, and D. Y. Pifat. 1988. In vitroand in vivo Phlebovirus inhibition by ribavirin. Antimicrob Agents Chemother 32:331-336).

Em relação a outros parâmetros da doença que foram avaliados em grupos decamundongos infectados por PTV e tratados em paralelo, com a utilização doimunomodulador isoladamente, apenas mínimas quantidades de vírus puderam serobservadas nos homogenatos de fígado, com exceção dos animais tratados com doses de10 mg/kg e 1 mg/kg, porém estes dados são apenas sugestivos, uma vez queestatisticamente estas diferenças não foram julgadas significativas. (Tabela A).Por outro lado, em relação a carga viral medida no soro dos animais tratados apenascom o imunomodulador (agregado proteico de anidrido de fosfolinoleato-palmitoleatode amônio e magnésio), verificou-se uma redução da carga viral sistêmica em relaçãoaos animais controle (salina) apenas em altas dosagens, uma vez que apenas a dosagemde 100 mg/kg, conseguiu reduziu a carga viral em quantidades apreciáveis enquanto quenos animais tratados apenas com o Imunomodulador nas dosagens de 10 mg/kg e 1m/kg, a carga viral avaliada no soro dos mesmos, não se mostrou significativamentediminuída em relação aos controles. (Tabela A).

Em relação aos parâmetros indicativos de dano hepático (escala de descoloração eníveis de ALT), a utilização isolada do imunomodulador (agregado proteico de anidridode fosfolinoleato-palmitoleato de amônio e magnésio) nas dosagens de 10 mg/kg e 100mg/kg evidenciou uma leve amenização no grau do dano hepático causado pelainfecção por PTV, (Tabela A).

Estes resultados são também indicativos de que quando utilizado em altas dosagens oimunomodulador é capaz de reduzir levemente o dano hepático causado pela infecçãoviral, possivelmente por mecanismos imunomodulatórios.Conclusões:

No primeiro experimento, as dosagens de 100 mg/kg do imunomodulador (agregadoproteico de anidrido de fosfolinoleato-palmitoleato de amônio e magnésio)administradas isoladamente, por via i.p. decorridas 24 horas pós-infecção, mostraramum significativo efeito imunoprotetor, protegendo todos os animais da morte ocasionadapela infecção por PTV. (Tabela A).

Esta mesma dosagem do Imunomodulador (100 mg/kg) também conseguiu reduzir acarga viral sistêmica e mostrou ser capaz de reduzir o dano hepático, avaliado peladescolação do órgão. (Tabela A).

Quando utilizado em baixas dosagens (1 mg/kg e 10 mg/kg) de forma isolada oimunomodulador (agregado proteico de anidrido de fosfolinoleato-palmitoleato deamônio e magnésio), não mostrou uma atividade significativa para estes parâmetroscitados. (Tabela A).

No primeiro experimento o antiviral (Ribavirin) utilizado de forma isolada em altasdoses (100 mg/kg/dia x 5 dias) também mostrou impacto significativo nos parâmetrosde avaliação da doença causada pela infecção por PTV, ou seja, carga viral e danohepático (Tabela A).

O antiviral (Ribavirin) entretanto, quando utilizado em baixas dosagens (inferiores a4,7 mg/kg), não é efetivo contra a infecção por PTV, conforme reportado na literatura(Sidwell, R. W., J. H. Huffman, B. B. Barnett, and D. Y. Pifat. 1988. In vitro and invivo Phlebovirus inhibition by ribavirin. Antimicrob Agents Chemother 32:331-336).

Entretanto quando se utilizou a presente invenção, ou seja, a combinação doimunomodulador (agregado proteico de anidrido de fosfolinoleato-palmitoleato deamônio e magnésio), com o antiviral ( Ribavirin) no modelo de infecção por PTV osresultados foram surpreendentes, notáveis e sinergísticos (Tabela B), pois seobservaram efeitos de sobrevivência e imunoproteção nos animais, totalmente distintose superiores dos efeitos observados com os compostos utilizados de forma isolada.O efeito terapêutico da combinação de medicamentos, ou seja, o imunomodulador(agregado proteico de anidrido de fosfolinoleato-palmitoleato de amônio e magnésio)com pelo menos uma substância ativa antiviral, no caso o Ribavirin é sinergístico enitidamente superior a utilização dos compostos de forma isolada.Além disso, a combinação do imunomodulador (agregado proteico de anidrido defosfolinoleato-palmitoleato de amônio e magnésio) e de pelo menos uma substânciacom ação antiviral, na presente invenção, apresenta notáveis efeitos terapêuticos nosparâmetros de infecção (carga viral, ALT e hepatoproteção) em dosagens bastanteinferiores (2 mg;/kg- Tabela B) às doses mínimas apontadas como efetivas para oantiviral, no caso o Ribavirin (Tabela B). ou seja, a presente invenção, possibilitaobterem-se efeitos na infecção viral por PTV, utilizando-se dosagem bastante inferior àdosagem de 4,7 mg/kg para o antiviral (Ribavirin), que é a sua dosagem efetiva mínima,como reportada na literatura (Antimicrob Agents Chemother 32:331-336).Em relação ao uso isolado do imunomodulador (agregado proteico de anidrido defosfolinoleato-palmitoleato de amônio e magnésio), a presente invenção, ou seja, oimunomodulador combinado ou associado ao antiviral, possibilita também, obter-senotáveis melhorias nos efeitos terapêuticos em relação aos parâmetros de sobrevivência,níveis de carga viral, hepatoproteção dos animais submetidos à infecção por PTV,medida pelos níveis de ALT e descoloração hepática.

Comprovadamente os resultados obtidos para a utilização da presente invenção , ouseja, pela combinação de medicamentos, representada pelo imunomodulador (agregadoproteico de anidrido de fosfolinoleato-palmitoleato de amônio e magnésio) e pelomenos por uma substancia com ação antiviral (Tabela B) são nitidamente superiorespara a dosagem de 10 mg/kg do imunomodulador (agregado proteico de anidrido defosfolinoleato-palmitoleato de amônio e magnésio) em relação aos parâmetros dautilização destas substâncias, seja do imunomodulador, que na dosagem de 10 mg/kg,quando utilizado isoladamente não apresentava resultados satisfatórios contra a infecçãopor Punta toro virus ( Tabela A), seja do antiviral, quando utilizados de forma isolada(Tabela A).

A utilização da presente invenção, qual seja, a combinação ou associação doimunomodulador (agregado proteico de anidrido de fosfolinoleato-palmitoleato deamônio e magnésio), com pelo menos uma substância com ação antiviral direta, no casoo Ribavirin, será eficaz não somente no tratamento da infecção específica causada porPunta toro vírus.

Como adicionalmente a combinação ou associação de substâncias que caracteriza opresente invento, será eficaz, quando empregado em conjunto ou em associação comeste antiviral em particular, por decorrência lógica, ou seja, para todos os gêneros etipos de vírus para os quais o Ribavirin é particularmente capaz de atuar de maneiradireta, como ocorre, por exemplo, nos casos dos vírus causadores das Hepatites virais (Hepatite B e Hepatite C) em seres humanos.

E finalmente podem os resultados dos experimentos citados no presente, seremextrapolados para outros tipos de viroses, da forma mais ampla e genérica possível eainda utilizando-se de outros antivirais, que não o Ribavirin para serem consideradospara uso conjunto ou associado com o imunomodulador, dependendo do caso concreto aser enfrentado ou tratado.Isto irá ocorrer porque os vírus, como todos os microrganismos intracelulares estritosou facultativos, podem ser mais eficazmente combatidos por uma atuação eficiente daresposta imunológica do Tipo TH-1 do hospedeiro. Esta amplifícação ou restauração daresposta imunológica de interesse no combate das infecções virais (respostaimunológica do tipo TH-1), com a utilização do presente invento, sempre será possívelna prática, correndo por conta de seu componente invariável, no caso oimunomodulador (agregado proteico de anidrido de fosfolinoleato-palmitoleato deamônio e magnésio). O que irá variar será a substância ou substâncias com açãoantiviral direta a serem empregadas em conjunto ou associados ao imunomodulador(agregado proteico de anidrido de fosfolinoleato-palmitoleato de amônio e magnésio).Portanto, dependendo do tipo de virus a ser enfrentado, o Ribavirin poderá e deverá sersubstituído no presente invento, por outros compostos com ação antiviral direta contraos vírus, na combinação ou associação de medicamentos, conforme o caso concreto.

Dado a eficácia da presente invenção, ou seja, a combinação ou associação doimunomodulador (agregado proteico de anidrido de fosfolinoleato-palmitoleato deamônio e magnésio) e de pelo menos uma substância com ação antiviral, em modelosexperimentais, a seguir são apresentados outros exemplos de sua utilização em outrostipos de viroses de grande importância, que ocorrem também seres humanos, comexemplos práticos de aplicação do invento em pacientes com Hepatite C (HCV) epacientes portadores de infecção herpética (Herpes sp). No entanto, tais experimentossão apresentados de maneira meramente ilustrativa e não se pretendendo ou se podendode modo algum, limitar-se o campo de atuação do presente invento.

TRATAMENTO DA HEPATITE C - ESTADO DA TÉCNICA E EXEMPLOUTILIZAÇÃO PRÁTICA DA PRESENTE INVENÇÃO -No atual estado da técnica, a combinação ou associação de um imunomodulador(Interferon-alfa) de origem exógena, com uma substância com ação antiviral direta, nocaso o Ribavirin, é a única alternativa terapêutica contra a infecção causada pelo vírusda denominada Hepatite C, embora com as limitações já citadas ao longo do presente.

Para efeitos de uma demonstração na prática, da presente invenção, esta foi avaliada emum ensaio piloto de curta duração com 5 pacientes portadores do vírus causador daHepatite C (HCV), de ambos os sexos, diagnosticada através de sorologia especifica(PCR - qualitativo e quantitativo), como portadores do HCV subtipo I-b, que nãoresponderam satisfatoriamente ou suportaram o tratamento padrão, ou seja, àcombinação de Interferon-alfa e um composto com ação antiviral direta (Ribavirin) eforam então avaliados em relação ao presente invento, com o interferon-alfa utilizadoanteriormernte, sendo substituído pelo imunomodulador (agregado proteico de anidridode fosfolinoleato-palmitoleato de amônio e magnésio), ou seja, administrado emconjunto, mantido o mesmo composto antiviral, no caso o Ribavirin.

Os dados deste experimento estão integralmente contidos na Tabela H em anexo, quefaz parte integrante do presente pedido.

Para todos os casos, foi utilizada uma mesma dosagem diária de 500 mg domedicamento com ação antiviral direta (Ribavirin) administrado na sua forma oral euma dose semanal de 25 mg do Imunomodulador (agregado proteico de anidrido defosfolinoleato-palmitoleato de amônio e magnésio), este aplicado por via intramuscular,com o produto suspenso em solução salina estéril (NaCl 0,9%), para todos os pacientesparticipantes, com o tratamento interrompendo-se ao final de 12 meses (360 dias-Tabela H)

Foram realizadas avaliações clinicas e laboratoriais periódicas dos pacientesA avaliação laboratorial para a carga viral (HCV) utilizou o método da reação da cadeiapolimerase (PCR-quantitativo), medida a carga viral no nível inicial (basal), aos 240dias e 360 dias (final).

Para a avaliação de parâmetros hepáticas, as transaminases ALT ou TGP e AST ouTGO e Gama GT foram dosadas no soro a cada 120 dias.

Como parâmetros de avaliação renal foram utilizados as dosagens séricas de creatinina.

Estes exames foram também repetidos a cada 4 meses, após os exames basais, até ofinal do ensaio (360 dias).

RESULTADOS E DISCUSSÃO

Todos os pacientes concluíram o ciclo de tratamento, tolerando bem a terapiacombinada ou associada, sendo que apenas dois dos pacientes (pacientes A e D - Tabela

H) relataram leve dor e desconforto no local de aplicação da injeção doimunomodulador (agregado proteico de anidrido de fosfolinoleato-palmitoleato deamônio e magnésio), evento que, no entanto não forçou a uma interrupção dotratamento, o que mostra a segurança de uso da presente invenção, sem a ocorrência deefeitos colaterais significativos ao longo de todo o experimento.

As queixas clinicas comuns a todos os pacientes por época do seu período de admissãono experimento, foram relatos de dores musculares e fadiga, que podem estarrelacionadas como sintomas associados à infecção viral.

Estas sintomas relatados ou seja, dores reumáticas e fadiga, progressivamentedesapareceram durante o período de utilização do presente invento.

O mais notável achado laboratorial observado foi uma queda abrupta nos valores dacarga viral, em relação aos valores basais, para todos os pacientes (Tabela H).Estas quedas da carga viral para os pacientes que fizeram uso do presente invento,foram acompanhadas em geral, pela melhora relativa nos valores das transaminaseshepáticas ( Tabela H - valores de ALT ou TGP e AST ou TGO e Gama GT), medidasem relação aos valores basais, o que indica hepatoproteção, tal como igualmente severificou quando se utilizou o presente invento, no modelo de infecção experimentalpor Punta Toro vírus (PTV).

CONCLUSÃO

Os dados clínicos e laboratoriais do breve ensaio clinico aqui relatado dão indicaçõesseguras de que a presente invenção, ou seja, a combinação ou associação de ao menosuma substância com atuação direta contra vírus, no caso o antiviral Ribavirin e doimunomodulador (agregado proteico de anidrido de fosfolinoleato-palmitoleato deamônio e magnésio) pode ser utilizada com segurança e eficácia para o tratamento deviroses e ainda, também para o tratamento específico de pacientes infectados pelosvírus causadores da Hepatite C, com evidentes vantagens em relação aos outros tipos decompostos ou associações medicamentosas eventualmente existentes no estado da arte.

EXEMPLO DE UTILIZAÇÃO PRÁTICA DA PRESENTE INVENÇÃO -TRATAMENTO DA INFECÇÃO HERPÉTICA

A denominada infecção herpética é uma doença causada pelo Herpes vírus sp, maishabitualmente encontrada ou causada por dois tipos de Herpes vírus: O tipo 1 (HSV-I) eo tipo 2 (HSV-II), que são os responsáveis mais comuns das infecções ocorrentes emseres humanos. Habitualmente o primeiro tipo (HSV-I) ocasiona o denominado herpesnão genital (atinge principalmente face e tronco) e o segundo tipo (HSV-II), ocasiona odenominado herpes genital que é uma doença sexualmente transmissível.A forma mais comum de infecção herpética, causada geralmente pelo tipo 1 (HSV-I) é oherpes cutâneo, que aparece em lábios, desencadeada pela exposição solar, infecções,traumas mecânicos, stress emocional.

A transmissão é dada principalmente por contato pessoal ou contato de mucosas e asmanifestações clínicas estão relacionadas ao estado imunológico do paciente, podendoapresentar-se desde lesões de caráter benigno, até quadros muito graves, nos pacientescom depressão imunológica causada por vários fatores.

O período de incubação viral varia de 4 a 5 dias. A infecção primária típica pode evoluircom febre e prostração acompanhada de quadros clínicos benignos como a estomatite,até quadros mais graves com erupção vesiculosa associada à febre alta, adenopatias ecomprometimento do estado geral do paciente.

Em pacientes imunosuprimidos, os quadros de infecção herpética podem assumirformas particularmente graves, eventualmente levando a morte nos casos em que ocorreinfecção sistêmica.

A infecção pelo tipo 2 (HSV-II), ou herpes genital, apresenta-se clinicamente na formade vesículas dolorosas agrupadas que aparecem na região genital. Surgem de 5 a 10 diasapós contato e podem ser acompanhadas de febre, normalmente evoluindo em 2semanas.

Como outros representantes também encontrados da espécie Herpes sp , além do HSV-Ie HSV-II, encontram-se os seguintes vírus: Varicela zoster vírus (VZV ou HSV-III), eEpstein-Barr vírus (EBV) e todos estão associados também a manifestações clínicas emseres humanos, principalmente em situações em que a resposta imune encontra-sediminuída.

ESTADO DA TÉCNICA NO TRATAMENTO DA INFECÇÃO HERPÉTICAO estado da técnica no tratamento das infecções herpéticas baseia-se quase queexclusivamente na utilização do antiviral sistêmico, denominado 2-amino-l,9-dihidro-9-[(2-hidroxiethoxi)methil]-6H-Purina-6-l, ou ainda Acicloguanosina, Acycvlovir ouainda Aciclovir, administrado usualmente em doses de 200 mg, 4 a 5 vezes ao dia,durante 7 a 10 dias, por via oral e ainda por via endovenosa, esta utilizada para quadrosgraves da doença.

O Acyclovir é indicado para o tratamento para todos os tipos de vírus do gênero Herpessp: Herpes simplex vírus I (HSV-I), Herpes simplex vírus II (HSV-II), Varicela zostervirus (VZV), Epstein-Barr virus (EBV).

O Acyclovir pode ser encontrado em formulações para uso oral, tópico, tais comocremes e bisnagas e ainda em formulações para uso injetável.

O tratamento com Acyclovir geralmente não cura infecção herpética de mododefinitivo, o que implica na ocorrência de freqüentes recidivas. Os principais efeitoscolaterais associados ao Acyclovir são episódios de vômitos e diarréia.

Os virus do tipo Herpes sp. como os outros parasitos intracelulares em geral, sãointimamente dependentes do estado de funcionalidade do sistema imune do hospedeiro,para sua disseminação. Ou seja, usualmente aproveitam-se de situações de baixaimunidade ou de episódios de deficiência imunológica para disseminar-se e permanecerno organismo de forma latente ou crônica e inversamente são controlados peloorganismo do hospedeiro ou eliminados, nos casos de um sistema imunológicofuncional.

Portanto a presente invenção será especialmente útil no tratamento das infecçõesherpéticas, por permitir conjugar ou associar o efeito de um imunomodulador, que écapaz de ocasionar uma potente resposta imunológica do tipo TH-1, com umasubstância de ação direta contra os vírus.

Para dar um exemplo da eficácia da presente invenção, ou seja, a combinação ouassociação do imunomodulador (agregado proteico de anidrido de fosfolinoleato-palmitoleato de amônio e magnésio) e de pelo menos uma substância com açãoantiviral, a seguir são apresentados exemplos de sua utilização em pacientes portadoresde manifestações clínicas de herpes (infecções herpéticas).

Mas tais experimentos e exemplos são apresentados de maneira meramente ilustrativa enão se pretendendo ou podendo de modo algum, se limitar o campo de atuação dopresente invento.

A presente invenção ou seja, a utilização do imunomodulador (agregado proteico deanidrido de fosfolinoleato-palmitoleato de amônio e magnésio) conjugado a outrasubstância com ação direta contra os microorganismos, no caso o Acyclovir, foiavaliado em 30 pacientes, portadores de lesões herpéticas recorrentes, ou seja, infecçãoherpética em forma crônica, sendo 20 deles portadores de herpes cutâneo e 10portadores de lesões herpéticas genitais.

Os pacientes deste estudo clinico foram acompanhados durante 1 ano.

Em uma primeira fase, os pacientes foram tratados apenas com o tipo de terapiaexistente no estado da arte, ou seja, a utilização isolada de uma substância com açãoantiviral direta, no caso o Acyclovir.

Todos os pacientes nesta fase foram medicados apenas com Acyclovir, por via oral,sendo fixado o tratamento em 3 doses diárias de 200 mg do antiviral, durante 10 dias,para todos os pacientes.O tempo médio de recorrência das manifestações clínicas da infecção, observado para oconjunto de pacientes, quando medicados apenas com o Aciclovir, foi de cerca de 2meses, nesta fase.

Em uma segunda fase, para efeito de comparação, neste grupo de 30 pacientes,escolheu-se através de procedimento aleatório, 10 pacientes portadores de herpescutâneo e 5 pacientes portadores de herpes genital, perfazendo 15 pacientes no total,para serem submetidos a combinação de substâncias que caracteriza presente invento.Os demais 15 pacientes foram medicados da forma habitual, ou seja, com 3 dosesdiárias de 200 mg do antiviral (Aciclovcir), durante 10 dias.

Nesta segunda fase, em 15 pacientes especialmente selecionados, utilizou-se acombinação de substâncias que caracteriza a presente invenção, ou seja, oimunomodulador (agregado proteico de anidrido de fosfolinoleato-palmitoleato deamônio e magnésio), que foi aplicado em dose única de 20 mg/paciente, por viaintramuscular, diluído em solução salina estéril para injeção, utilizado em associaçãocom o antiviral Acyclovir, este por via oral, em 3 doses de 200 mg/dia, durante 10 dias.

Verificou-se que nos 15 pacientes medicados apenas com o antiviral (Aciclovir), otempo médio de recidiva dos sintomas continuou a repetir o padrão habitual para estespacientes, ou seja, com ciclo de repetição médio de 2 meses.

Para os 15 pacientes submetidos a combinação de substâncias que caracteriza a presenteinvenção, ou seja, a associação do imunomodulador ( agregado proteico de anidrido defosfolinoleato-palmitoleato de amônio e magnésio), com o antiviral os resultados foramos seguintes:a) Dos 10 pacientes portadores de manifestação cutânea da doença, 5 deles, ou seja,50% dos casos não relataram nenhuma recorrência clínica da doença no período deobservação de 1 ano após tratamento com a terapia combinada.

b) Dos demais 5 pacientes deste grupo, portadores da forma cutânea, ocorreu recidiva,porém o tempo médio de recidiva foi de 8 meses.

c) Dos pacientes portadores da forma genital, nenhum deles relatou qualquer recorrênciadurante um ano de seguimento clinico, após a utilização da presente invenção.

Nenhum paciente relatou qualquer efeito adverso que possa ser associado à utilização dapresente invenção, durante o ensaio clínico ou após sua interrupção, ou seja, durante operíodo remanescente de observação.

O que indica que o presente invento é seguro para uso clínico e não apresenta efeitoscolaterais adversos.

Claramente o presente invento mostra-se nitidamente superior as terapias até entãoexistentes no estado da arte para o tratamento da infecção herpética, ou seja, utilizaçãoisolada de compostos antivirais.

Portanto o presente invento disponibiliza também uma nova terapia para o tratamentodas infecções especificamente causadas pelos vírus do gênero Herpes, ou seja,infecções causadas por vírus das espécies Herpes simplex vírus I (HSV-I), Herpessimplex virus II (HSV-II), Varicela zoster virus (VZV), Epstein-Barr virus (EBV), quesão subtipos ou espécies pertencentes ao gênero citado.

Vírus da Imunodeficiência Humana (HIV/AIDS) - Utilização da presente invenção emdoenças oportunistas associadas ao HIV/AIDS e causadas por microorganimosoportunistas.O vírus HIV infecta predominantemente as células TCD4+ e a destruição dessas célulaspode ocorrer pelo efeito citopático do vírus. Sendo a célula TCD4+ uma das maisimportantes na cooperação da resposta imune, a diminuição numérica e a alteração desua função, levam progressivamente a uma supressão da resposta imunológica, o queque por sua vez ocasiona um conjunto de manifestações clínicas e quadros de doenças einfecções causadas por patógenos oportunistas, condição esta que é denominadaSindrome da Imunodeficiência Adquirida ou AIDS.

Essa imunodeficiência progressiva, segundo os dados representativos do atual estado datécnica, está associada predominantemente com a diminuição dos níveis de Interleucina-2 (IL-2) e Interferon-gama (IFN-gama), ou seja, criando as condições para umadepressão progressiva da resposta do tipo inflamatório ou resposta imunológica do tipoTH-1. (S. Crowe et al., Antiv. Chemistry & Chemother. 12:133-150 Review).Por essa razão, não surpreendentemente, em pacientes com Aids, as principais infecçõesoportunistas estão relacionadas a agentes intracelulares patogênicos, facultativos ouestritos, tais como: M. tuberculosis, M.avium, P. carinii sp, Citomegalovírus,Herpesvirus sp. Hepatite B vírus, Hepatite C virus, C. albicans sp, e Criptosporidiumsp, que em condições de funcionamento normal do sistema imunológico, seriameficazmente combatidos e/ou mantidos sob controle por este tipo de respostaimunológica citada, ou seja, resposta do tipo TH-1.

Conseqüentemente, as doenças associadas a estes parasites citados, todos elesmicroorganismos intracelulares de vida facultativa ou estrita, e altamente dependentesde uma resposta imunológica do tipo TH-1 deprimida ou defectiva para facilitar a suapermanência e colonização no organismo do hospedeiro, tiveram um crescimentoexponencial no rastro da epidemia de HIV-AIDS.Por exemplo, a tuberculose é a principal co-infecção e causa da mortalidade associada àAIDS nos países africanos.

A malária, associada ou não à tuberculose, em pacientes portadores de HIV ou comAIDS, vem sendo relatada como uma infecção cada vez mais encontrada,principalmente na África.

A Leishmaniose dos tipos cutâneo e visceral também é relatada ocorrendoconcomitantemente em casos de AIDS, ocorrendo em formas clínicas especialmentegraves, quando acomete este tipo específico de pacientes imunodeprimidos.Finalmente, as viroses, notadamente as manifestações clínicas associadas à presença deherpes sp, citomegalovírus sp, vírus das Hepatites B e C, são co-infecções comuns eapresentam-se também em formas graves neste tipo de pacientes.Embora uma ligação causai direta entre microrganismos intracelulares, tais com maláriae tuberculose, viroses e patógenos oportunistas e a velocidade de progressão para AIDSnão tenha sido ainda definitivamente estabelecida, existem substanciais evidenciassugerindo que estes patógenos podem interagir e modificar a patogêneses de cadadoença.

Uma conseqüência importante deste fato é que o tratamento das infecções causadas porestes microorganismos intracelulares nos portadores de HIV, poderá adicionalmenteocasionar, além melhora da condição clinica associada à um controle ou gerenciamentomais eficiente destas infecções citadas, também uma diminuição ou retardamento daprogressão para AIDS, nestes pacientes.

Esta é mais uma importante razão para que se disponibilizem novas formas maiseficazes de tratamento que possibilitem não só o combate direto aos microrganismosoportunistas, mas ainda que permitam que se possa eliminar ou atenuarconcomitantemente a imunodeficiência facilitadora de sua proliferação, amplificando ourestaurando ainda que parcialmente a denominada resposta imunológica do tipo TH-1. oque será possibilitado pela utilização do presente invento, em pacientesimunodeprimidos em geral e especificamente na imunodeficiência associada aoHIV/AIDS, como será exposto.

A presente invenção, será especialmente adequada também para a utilização específicaem pacientes portadores de HIV e AIDS, co-infectados por patógenos intracelulares eoportunistas, pelas seguintes razões:

A) É do conhecimento geral no estado da técnica, que durante o curso da progressão dainfecção pelo HIV, a resposta imunológica do tipo TH-1, vai sendo progressivamentediminuída, deixando o organismo dos pacientes especialmente vulneráveis à infecção ecolonização por parte de microrganismos oportunistas, entre eles os parasitos emicrorganismos intracelulares, citados no presente.

B) Está experimentalmente demonstrado no presente, inclusive através de exemplospráticos, que utilização do imunomodulador (agregado proteico de anidrido defosfolinoleato-palmitoleato de amônio e magnésio) tem capacidade de atuar naamplificação e/ou restabelecimento da resposta imunológica do tipo TH-1, em presençade infecção por microorganismos intracelulares, o que é fundamental para o controledestas infecções e microorganismos (vide Tabela- L-l)

C) Está experimentalmente demonstrado no presente, inclusive através de váriosexperimentos práticos, que o presente invento é especialmente útil no tratamento deinfecções causadas por patógenos intracelulares, tais como Listeria sp (Tabela L-l eTabela L-2). M.tuberculosis (Tabela T). viroses em modelos animais tais como Puntatoro virus (Tabelas A e B), e ainda Hepatite C (Tabela B) e Herpes vírus sp efinalmente no controle de fungos oportunistas da espécie Cândida sp (Tabela O, emanimais experimentais e pacientes humanos, inclusive em pacientes com AIDS, (Tabela Ç).

Pelo conjunto das razões citadas em A, B e C, é de simples entendimento para qualquerprofissional versado no estado da técnica médica, que o presente invento, não somenteserá útil ou eficaz para o tratamento de patógenos intracelulares como os citados, empacientes não imunodeprimidos ou aptos imunológicamente, mas ainda, será igualmentee especialmente útil para o tratamento destas infecções para pacientes imunodeprimidosde um modo geral e especialmente nos pacientes especificamente portadores deimunodeficiências associadas ao HIV e AIDS, ou seja, para o tratamento de infecçõesoportunistas causadas por microorganismos das espécies M.tuberculosis, M.avium,M.leprae, L.monocytogenes, Plasmodium sp, Leishmania sp, virus RN A e DNA, taiscomo Punta toro virus, Herpes sp e virus causadores da Hepatite B e C e finalmentefungos das espécies Criptosporidium sp e Cândida sp, em uma enumeração nãoexaustiva, quando ocorrentes nos pacientes imunodeficientes em geral e ainda nosportadores de imunodeficiências especificamente associadas ao HIV e AIDS.

Pois o presente invento, além de permitir o combate direto aos microorganismospatogênicos, o que é possiblitado pela presença das substâncias com ação direta contraos patógenos, ainda permite adicionalmente amplificar e/ou restaurar a denominadaresposta imunológica do tipo TH-1, pela invariável presença na combinação ouassociação de medicamentos que caracteriza o invento, do imunomodulador específico(agregado proteico de anidrido de fosfolinoleato-palmitoleato de amônio e magnésio).

No caso destas infecções em presença de HIV e/ou AIDS, para as finalidades dapresente invenção, os medicamentos preconizados para o controle destas infecçõesoportunistas individualmente consideradas, ou seja, antibacterianos, antiparasitários,antifungais, antivirais, e outros, em uma enumeração não exaustiva, deverão tambémobrigatoriamente continuar a ser utilizados.

Adicionalmente no caso especifico de terapia de pacientes com HIV/AIDS, compostoscom ação antiretroviral (anti-HIV) também deverão ser considerados para uso emconjunto com os outros medicamentos, sempre mantido na combinação ou associação, oimunomodulador (agregado proteico de anidrido de fosfolinoleato-palmitoleato deamônio e magnésio).

Como exemplos de substâncias com atividades antivirais ou efeito antiviral (Anti-HIV)direto, para serem utilizados no presente invento para o caso específico dos portadoresde HIV e AIDS, sem que se exclua no mesmo a presença também dos outros tipos demedicamentos (antibacterianos, antiparasitários, antifungais), entre os quais podem-secitar o AZT (1-[(2R,4S,5S)- 4-azido-5-(hydroxymethyl) oxolan-2-yl]- 5-methyl-pyrimidine-2,4-dione ou C10H13N5O4), o Ribavirin , inibidores de transcriptasereversa (Abacavir, Didanosina (DDI), Lamivudina (3TC), Estavudina, Tenofovir,Zidovudina (AZT), Zalcitabina) inibidores de protease viral (Atazanavir, Darunavir,Fosemprenavir, Lopinavir, Nelfinavir, Ritonavir, Saquinavir, Tipranavir, Amprenavir,Indinavir), os inibidores de transcriptase reversa não-nucleosídeos (Efavirens,Nevirapine, Etravine, Rilvipirine, Loviride, Delarvine), em uma enumeração nãoexaustiva e outros medicamentos com ação antiviral direta, existentes ou que venham aser disponibilizado.

Porém a utilização do imunomodulador (agregado proteico de anidrido defosfolinoleato-palmitoleato de amônio e magnésio), sempre será obrigatória einvariável, para que ocorra a plena eficácia da presente invenção, inclusive notratamento deste tipo específico de pacientes.

CONCLUSÕES FINAIS

Portanto pelas razões e exemplos citados no presente, comprovou-se que a presenteinvenção representa e disponibiliza uma nova e eficaz terapia para patógenosintracelulares, sejam estes facultativos ou estritos, compreendendo bactérias,micobactérias, protozoários, fungos e finalmente dos vírus, que não está compreendidaou relatada no estado da técnica.

Comprovou-se também que a presente invenção representa e disponibiliza uma nova eeficaz terapia específica de tratamento para patógenos intracelulares facultativos ouestritos, tais como bactérias da espécie L.monocytogenes, espécie causadora da doençadenominada Listeriose, bactérias ou micobactérias da espécie M.tuberculosis, espéciecausadora da doença denominada Tuberculose, protozoários do gênero Plasmodium,causadores da doença denominada Malária, fungos da espécie Cândida, espéciecausadora da doença denominada Candidíase, vírus da gênero Bunyviridae (Punta torovirus), causadores das doenças denominadas Febres hemorrágicas, vírus da espécieHerpes, espécie causadora das doenças denominadas Infecções herpéticas, vírus daespécie Flaviridae, espécie causadora da doença denominada Hepatite C.

Comprovou-se também que a presente invenção poderá ser indicada para todos ospacientes acometidos de infecção por micróbios ou microorganismos intracelularesestritos ou facultativos de um modo geral, e ainda ser indicada para utilização nos casosde infecções oportunistas causadas por estes citados patógenos associados a condiçõesde imunodeficiência do organismo hospedeiro, ou seja, nos casos de imunodeficiênciascausadas por outros processos patológicos em geral ou ocorrentes no curso de outrostratamentos e terapias e finalmente no caso de imunodeficiências especificamenteassociadas à infecção pelo HIV e AIDS.

Qualquer espécie animal pode ser tratada com a presente invenção.Embora o objetivo principal ou campo de aplicação pretendidos do presente inventoseja o tratamento de seres humanos, no entanto, o alcance da invenção e a sua utilizaçãoprática não podem ser limitados somente a esta espécie.

As substâncias ativas, seja o imunomodulador (agregado proteico de anidrido defosfolinoleato-palmitoleato de amônio e magnésio), sejam as outras substâncias, comefeito direto contra os parasites a serem utilizadas em conjunto com o imunomodulador(agregado proteico de anidrido de fosfolinoleato-palmitoleato de amônio e magnésio),para os propósitos da presente invenção, podem se apresentar ou ser fornecidas para usotanto separadamente, como associadas em forma de partes-conjugadas, quando possível,como ainda em forma de formas sólidas ou soluções, em formas farmacêuticas microencapsuladas, em lipossomos ou em sistemas separados para administração e finalmenteem formas farmacêuticas injetáveis e orais.

DOSAGENS - POSOLOGIA-ESOUEMAS DE TRATAMENTO UTILIZANDO AINVENÇÃO- COMPONENTE FIXO E COMPONENTES VARIÁVEIS

No presente, estão mencionadas diversas maneiras de utilização das substâncias ativas aserem utilizadas no presente invento, tanto para o imunomodulador (agregado proteicode anidrido de fosfolinoleato-palmitoleato de amônio e magnésio) como para as outrassubstâncias, a serem utilizadas em combinação ou associação.

Estas maneiras de utilização ou combinação dos componentes utilizados no presenteinvento, tanto foram citadas no presente de maneiras quantitativas, com no caso dasvárias dosagens utilizadas nos vários experimentos com animais e seres humanos, eainda duração temporal de tratamento; como de maneiras qualitativas, nos mesmosexperimentos, como por exemplo, no caso de esquemas de tratamento, tipos particularesdas outras substâncias a serem escolhidas ou selecionadas para utilização emcombinação ou associação com o imunomodulador (agregado proteico de anidrido defosfolinoleato-palmitoleato de amônio e magnésio), e finalmente utilização de uma oumais substâncias de ação direta, que podem ser também combinadas ou associadas entresi e ao imunomodulador (agregado proteico de anidrido de fosfolinoleato-palmitoleatode amônio e magnésio).

Porém tais exemplos são meramente exemplificativos e não podem ser tomados emmomento algum de forma restritiva ou que venham a limitar o campo de aplicação doinvento.

As dosagens dos componentes do presente invento, as posologias, os esquemas detratamento envolvendo as substâncias ativas, seus tipos e quantidades, bem como aduração dos tratamentos, a serem utilizadas na prática médica, seja do componenteinvariável da combinação ou associação que é o imunomodulador (agregado proteico deanidrido de fosfolinoleato-palmitoleato de amônio e magnésio), ou dos componentesvariáveis da associação, ou seja, dos demais medicamentos com ação direta contra osmicróbios ou microorganismos, a serem utilizados em combinação ou associação aoimunomodulador ou entre si, não podem ser estabelecidos e fixados a priori e de formainvariável.

As quantidades físicas de medicamentos, ou seja, suas dosagens, a posologia dosmesmos, ou seja, dos esquemas ou seqüências de tratamento e/ou duração dos mesmos,e outras informações referentes ao seu uso prático, contidos no presente e citados nosdiversos experimentos com animais e seres humanos, são informações que visampropósitos meramente explicativos.

Pois como é de imediato entendimento para qualquer pessoa versada no estado datécnica, é fato sabido e incontestável, que as dosagens quantitativas dos medicamentos,a posologia de medicamentos e outros aspectos relacionados ao seu uso prático, aqualquer tempo podem ser livremente estabelecidas e fixadas em uma quase infinitasérie de combinações e variações que ocorrem na prática médica e de forma empírica,tudo dependendo do caso concreto e ainda das condições clínicas dos pacientes a seremtratados.

Portanto estes parâmetros citados, que estão ligados ao uso prático do presente invento,poderão e deverão ser objeto de ajustes e modificações quantitativas e qualitativasconforme o caso e patologia a ser tratada e a qualquer tempo, sem que isto implique ousignifique qualquer mudança na natureza ou utilidade ou ainda alcance do invento, oque é de simples e imediata compreensão por qualquer pessoa versada no estado da artemédica.

Adicionalmente é de simples e imediata compreensão para qualquer pessoa versada noestado da arte, que os componentes da combinação ou associação de medicamentos dopresente invento, seja o imunomodulador (agregado proteico de anidrido defosfolinoleato-palmitoleato de amônio e magnésio) e pelo menos uma outra substânciaque possua atividade direta contra os patógenos, sendo que estas podem serselecionadas do grupo de substâncias químicas tais como antibacterianos,antituberculosos, antimaláricos, antiparasitários, antifungais, antivirais, em umaenumeração não exaustiva, podem ser administrados tanto conjuntamente ousimultaneamente ou consecutivãmente ou seqüencialmente, por qualquer via que sejaapropriada de acordo com a natureza química e das características de solubilidade doscomponentes, em quantidades suficientes para destruir os parasitas da enfermidade deinteresse, tanto nos animais como nos seres humanos conforme o caso.

Nada impede obviamente que mais de uma substância com ação ativa contra patógenosseja utilizada conjuntamente com o imunomodulador (imunomodulador agregadoproteico de anidrido de fosfolinoleato-palmitoleato de amônio e magnésio), tudodependendo na prática, da caso concreto a ser enfrentado.O que será sempre mantido noinvento será o imunomodulador (imunomodulador agregado proteico de anidrido defosfolinoleato-palmitoleato de amônio e magnésio).

As substâncias ativas da combinação ou associação seja o imunomodulador (agregadoproteico de anidrido de fosfolinoleato-palmitoleato de amônio e magnésio), sejam asdemais substâncias ou compostos com atuação direta contra os microrganismospatogênicos, podem se apresentar ou ser fornecidas para uso tanto separadamente, comoassociadas em forma de partes-conjugadas, quando possível, como ainda em forma deformas sólidas ou soluções, em formas farmacêuticas micro encapsuladas, emlipossomos ou em sistemas separados para administração e finalmente em formasinjetáveis e orais.

Para a preparação de uma forma simples de administração de uma das substâncias dapresente invenção, por exemplo, o imunomodulador (agregado proteico de anidrido defosfolinoleato-palmitoleato de amônio e magnésio), pode ser preparado para seradministrado, com a utilização de quaisquer soluções aquosas conhecidas no estado datécnica ou opcionalmente utilizando-se excipientes, suspensões, transportadores e/ousubstâncias estabilizantes conhecidas na técnica.E igualmente o mesmo se aplica para as outras substâncias que se pretenda utilizar emconjunto com o imunomodulador (agregado proteico de anidrido de fosfolinoleato-palmitoleato de amônio e magnésio) para as finalidades da presente invenção.Exemplificativamente, uma solução ou composição para ser utilizada na prática para opropósito da presente invenção, ou seja, tratamento de infecções, pode ser preparadasuspendendo-se o imunomodulador ( agregado proteico de anidrido de fosfolinoleato-palmitoleato de amônio e magnésio) em água para injeção estéril e altamente purificadaou ainda utilizando-se solução salina estéril e tamponada (com pH de 7 a 7,5),utilizando-se para os outros componentes, os meios mais apropriados, de acordo comsua natureza química e farmacológica existentes no estado da arte ou que venham a sercriados e disponibilizados.

O imunomodulador (agregado proteico de anidrido de fosfolinoleato-palmitoleato deamônio e magnésio), é obtido através da fermentação do fungo da espécie Aspergillusoryzae (A.oryzae) em meio de cultura apropriado, tal como relatado no estado da arteem PI - 0305373-3, USPTO 10/ 978, 683 e EPA 0426250.3.2405.

As outras substâncias ativas que deverão ser utilizadas para os propósitos da presenteinvenção, em conjugação com o imunomodulador (agregado proteico de anidrido defosfolinoleato-palmitoleato de amônio e magnésio) podem ser obtidas através de todasas fontes e métodos de produção relatados para cada classe ou tipo conhecidas ourelatadas no estado da técnica.

Para as finalidades do presente invento, sempre o imunomodulador (agregado proteicode anidrido de fosfolinoleato-palmitoleato de amônio e magnésio), deverá serespecificamente utilizado ou estar presente na combinação ou associação, como é desimples compreensão, enquanto que as outras substâncias ativas a serem utilizadas,estas com ação direta contra os parasitos, podem variar em espécie, tipo, qualidade equantidade de acordo com as necessidades específicas da doença ou organismosenvolvidos. As outras substâncias ativas, estas com ação direta contra os diversospatogenos, são citadas no presente, apenas como exemplos específicos das diversasclasses de produtos existentes no atual estado da técnica, tais como antibióticos,antibacterianos, antituberculosos, antivirais, antifungais, em uma classificação ouenumeração não exaustiva. Nada impede que outras substâncias com ação direta contraos parasitos, não citadas expressamente no presente como integrantes do estado datécnica ou que venham ainda a serem descobertas e disponibilizadas, sejam utilizadasou venham a ser propostas para serem utilizadas para as finalidades do presente invento,desde que o imunomodulador (agregado proteico de anidrido de fosfolinoleato-palmitoleato de amônio e magnésio) continue a ser utilizado ou mantido na associaçãoou combinação, para que esta continue a produzir os efeitos desejados. Oimunomodulador (imunomodulador agregado proteico de anidrido de fosfolinoleato-palmitoleato de amônio e magnésio) que deverá sempre ser utilizado ou mantido nacombinação ou associação para as finalidades do presente invento, está contido erelatado no estado da arte em PI - 0305373-3. USPTO 10/ 978. 683 e EPA0426250.3.2405. sendo caracterizado por compreender essencialmente um agregadoproteico de anidrido de fosfolinoleato-palmitoleato de amônio e magnésio, com pesomolecular de 320.000 Dalton ( 320 KDa), que na análise química mostrou a presença de11,6 ± 4,0% de lipídeos totais, sendo 22,7 ± 5,0% de ácido palmitoleico, 42,9 ± 2,0% deácido linoleico e 32,0 ± 3,0% de ácido linoleico oxidado, 20,1 ± 0,9% de íons Mg, 10,0± 3,3% de íons amônio, 45,2 ± 2,7% de fosfato e 0,49 ± 0,01% de proteínas; a proteínaencontra-se distribuída percentualmente da seguinte maneira; Asp 7,19%; Thr 3,56%;Ser 7,56%; Glu 8,53%; Pro 0,5%; Gly 9,69%; Ala 7,46%; Vai 1,0%; Met 4,38%, Isoleu2,54%, Leu 3, 03%, Tyr 0,5%, Phe 1,0%, His 2,83%; Lys 3,56%, Trp 1,3% e Arg35,2%.0 método de produção do imunomodulador (agregado proteico de anidrido defosfolinoleato-palmitoleato de amônio e magnésio), utilizado para as finalidades dopresente invento está igualmente contido e relatado no estado da arte em PI - 0305373-3USPTO 10/ 978, 683 e EPA 0426250.3.2405, compreendendo essencialmente autilização do fungo Aspergillus oryzae (A.oryzae) para a produção do compostoimunomodulador que especificamente foi selecionado para ser utilizado para asfinalidades do presente invento.

Sem a necessidade de informações adicionais, pode-se afirmar que qualquer pessoaversada na arte, com o auxílio apenas das informações e explicações contidas nopresente, está capacitada a entender e utilizar o invento na sua extensão plena.

Tabela A - Efeito do imunomodulador e do antiviral utilizados deforma isolada - Infecção viral - Punta toro vírus (variedade Adames)

<table>table see original document page 119</column></row><table>Tabela A <table>table see original document page 120</column></row><table>

LEGENDAS

Imunomodulador = Agregado proteico de anidrido de fosfolinoleato-palmitoleato deamônio e magnésio

Ribavirin = l-(f}-D-Ribofuranosil) -lH-l,2,4-triazol-3-carboxamida).

a Tempo médio de vida dos animais.

b Determinado no dia 3 da infecção ; 5 animais/grupo em tratamento (4 animais para ogrupo tratado com Ribavirin )c Log 10 ( Carga viral) - 50% da dose infectante de cultura celular (CCIDsoVO.l g defígado ou ml de soro. Percentagem de animais apresentando vírus detectáveis sãoindicados entre parênteses ().

d Alanina aminotransferase (ALT): medida por unidades internacionais/litro (Ul/litro)e Escore = (0) (fígado normal) até 4 (descoloração máxima).

*P< 0.05; **P< 0.01; ***P< 0.001 comparados com animais tratados unicamente comsalina (controles)

tabela b - Efeito do imunomodulador e do antiviral utilizados emassociação -Infecção viral - Punta toro vírus (variedade Adames)

<table>table see original document page 121</column></row><table>Tabela B

<table>table see original document page 122</column></row><table>

LEGENDAS

Imunomodulador = Agregado proteico de anidrido de fosfolinoleato-palmitoleato deamônio e magnésio

Ribavirin = l-fl}-D-Ribofuranosil) -lH-l,2,4-triazol-3-carboxamida).

a Tempo médio de vida dos animais .

b Determinado no dia 3 da infecção ; 5 animais/grupo em tratamentoc Logi0 (Carga viral) - 50% da dose infecíante de cultura celular (CCID50)/0.1

g de fígado ou ml de soro. Percentagem de animais apresentando virusdetetáveis são indicados entre parênteses ().

d Alanina aminotransferase (ALT) : medida por unidades internacionais/litro(Ul/litro)

e Escore = (0) (fígado normal) até 4 (descoloração máxima ).

*P< 0.05; **P< 0.01; ***p< 0.001 comparados com animais tratados unicamente comsalina (controles).

Tabela C

Pacientes portadores de Candidíase cutâneaImunomodulador =10 mg/dia x 5 dias.i.m.

Antifungal = Fluconazol = 400 mg/dia x 5 dias.v.o

<table>table see original document page 122</column></row><table>TABELA L -1

INFECCÀO EXPERIMENTAL POR L.MONOCYTOGENES-DOSAGEM DE CITOOUINAS

Animais = camundongos BALB/c, machos com idade de 5 semanasInóculo bacteriano = 2xl04 bactérias (L.monocytogenes)/ viaintraperitonial/animal

n = 10 animais por grupo

Dosagens. tempo e vias de administração :

Imunomodulador: 5 mg/kg/dia/animal (i.p.). nos 7 dias anteriores a inoculaçãode 2x104 bactérias (L.monocytogenes) / animal

Imunomodulador: agregado proteico de anidrido de fosfolinoleato-palmitoleato deamônio e magnésio

Abreviações

IFN-y = Interferon-gama

11-2 = Interleucina-2

11-4 = Interleucina-4

11-10 = Interleucina-10

Controle Infectac [os 48 h Infectados 72 h Tabela L-1 <table>table see original document page 124</column></row><table><table>table see original document page 125</column></row><table>

TABELA L -2 -INFECCÂO EXPERIMENTAL PORL.MONOCYTOGENES- AVALIAÇÃO COMPARATIVA DECOMPOSTOS

Animais = camundongos BALB/c, machos com idade de 5 semanasInóculo bacteriano = 2xl06 bactérias ( L.monocytogenes)/ via intraperitonial

n = 10 animais por grupo

Tipo de composto- dosagens, tempo e vias de administração :

Imunomodulador : agregado proteico de anidrido de fosfolinoleato-palmitoleato deamônio e magnésioImunomodulador- 100 mg/kg (dose única), via i.p.

Rifampicina - 2 mg/kg - 5 dias - via oral

Gentamicina - 2mg/kg -5 dias - via oral

Salina - 1 ml -5 dias - via i.p.

Tabela L-2 - Tratamentos e posologia

<table>table see original document page 126</column></row><table>

TABELA M - INFECÇÃO EXPERIMENTAL POR MALÁRIAINFECÇÃO EXPERIMENTAL POR P.CHABAUDI - AVALIAÇÃOCOMPARATIVA DE COMPOSTOS

Animais = camundongos C57BL/6 - fêmeas

N = 6 animais por grupo

Infecção: Plasmodium chabaudi {P.chabaudi)- 4 x IO6 eritrócitos infectados (EI) viaintraperitonial (i.p.)

Tabela M

<table>table see original document page 126</column></row><table><table>table see original document page 127</column></row><table>

TABELA T

INFECCÀO EXPERIMENTAL POR M.TUBERCULOSIS- AVALIAÇÃOCOMPARATIVA DE COMPOSTOS

Animais: camundongos-variedade C57BL/6N= 8 animais/grupo

Infecção - 3 xl06 organismos viáveis de M.tuberculosis -Erdman

Via de infecção: intravenosa (i.v. - veia caudal)

INH = Isoniazida (piridina-4-carbohidrazide)

Imunomodulador = agregado proteico de anidrido de fosfolinoleato-palmitoleatode amônio e magnésio

<table>table see original document page 127</column></row><table><table>table see original document page 128</column></row><table>

Tabela H - Tratamento de pacientes portadores de HCVDosagens (todos os pacientes):

Agregado proteico de anidrido de fosfolinoleato-palmitoleato deamônio e magnésio = 25 mg x 1 dose semanal, via i.m.Ribavirin = 500 mg/dia, via oral (v.o.)

Parâmetros laboratoriais

TABELA H - PACIENTE (A) SEXO (M) IDADE (40) BASAL

<table>table see original document page 128</column></row><table>TABELA H -PACIENTE (C) SEXO (F) IDADE (46)

<table>table see original document page 129</column></row><table>

Valores de referência (VR)

Carga viral (PCR -Quantitativo) - VR - indetetável - limite inferior de detecção - 60 UITransaminases:

<table>table see original document page 129</column></row><table><table>table see original document page 130</column></row><table>

Abreviações utilizadas

HCV = Hepatite C vírus

VR = valores de referência

AST/TGO = transaminase glutaminica oxalacética ou transferase amino aspartate

ALT/TGP = amino alanine transferase ou gama glutamyl transpeptidaseGAMA - GT = gama-glutamiltransferase

NOMENCLATURA DE COMPOSTOS QUÍMICOS E DADOSRELACIONADOS

IUPAC = International Union of Pure and Applied Chemistry

ANTIVIRAISAciclovir ou Acyclovir

Nomenclatura (IUPAC): 2-amino-9-[(2-hydroxyethoxy)methyl]-3,9-dihydro-6//-purin-6-one

Fórmula molecular: C8H11N503

Amprenavir

Nomenclatura (IUPAC): tetrahydrofuran-3-yl [3-[(4-aminophenyl)sulfonyl- (2-methylpropyl) amino] -l-benzyl-2- hydroxy-propyl] arninomethanoate

Fórmula molecular: C25H35N306SAtazanavir

Nomenclatura (IUPAC): methyl A^-[(15)-l-[[[(25,35)-2-hydroxy-3-[[(25)-2-(methoxycarbonylamino)-3,3-dimethyl-butanoyl]amino]-4-phenyl-butyl]-[(4-pyridin-2-ylphenyl)methyl]amino]carbamoyl]-2,2-dimethyl-propyl]carbamate.

Fórmula molecular : C38H52N607

Darunavír

Nomenclatura (UPAC): [(l/?,55,6/?)-2,8-dioxabicyclo[3.3.0]oct-6-yl] JV-[(2S,3£)-4- [(4-aminophenyl)sulfonyl- (2-methylpropyl)amino]-3-hydroxy-1 -phenyl- butan-2-yl]carbamate

Fórmula molecular : C27H37N307S

Indtnavir

Nomenclatura (IUPAC) : l-[2-hydroxy-4- [(2-hydroxy-2,3-dihydro- lH-inden-l-yl)carbamoyl]-5-phenyl-pentyl]-4- (pyridin-3-ylmethyl)-A/-tert-butyl-piperazine-2-carboxamide

Fórmula molecular: C36H47N504

Nelfinavir

Nomenclatura (IUPAC): 2-[2-hydroxy-3-(3-hydroxy-2-methyl-benzoyl) amino-4-phenylsulfanyl-butyl] -N-tert-butyl- l,2,3,4,4a,5,6,7,8,8a- decahydroisoquinoline-3-carboxamide

Fórmula molecular: C32H45N304S

Lopinavir

Nomenvclatura (IUPAC): (25)-7V-[(2S,4S,5S)-5-{[2-(2,6-dimethylphenoxy)acetyl] amino} -4-hydroxy-1,6-diphenyl-hexan-2-yl]-3 -methyl-2-(2-oxo-1,3 -diazinan-1 -yl)butanamideFórmula molecular: C37H48N405

Ritonavir

Nomenclatura (IUPAC): l,3-thiazol-5-ylmethyl [3-hydroxy-5- [3-methyl-2-[methyl-[(2-propan-2-yl-l,3-thiazol- 4-yl)methyl] carbamoyl] amino-butanoyl] amino-1,6-diphenyl-hexan-2-yl] aminoformate

Fórmula molecular: C37H48N605S2

Saquinavir

Nomenclatura (IUPAC): JV-[l-benzyl-2-hydroxy-3- [3-(tert-butylcarbamoyl)-l,2,3,4,4a,5, 6,7,8,8a- decahydroisoquinolin-2-yl]-propyl]- 2-quinolin-2-ylcarbonylamino-butanediamide

Fórmula molecular : C38H50N6O5

Tipranavir

Nomenclatura (IUPAC): R-(R* i?*)]-AA-[3-[l-[5,6-dihydro-4- hydroxy-2-oxo-6-(2-phenylethyl)-6-propyl-2H-pyran-3-yl] propyl]phenyl]-5-(trifluoromethyl)-2-pyridinesulfonamide

Fórmula molecular: C31H33F3N205S

Zidovudina (AZT)

Nomenclatura (IUPAC: 1-[(2R,4S,5S)- 4-azido-5-(hydroxymethyl) oxolan-2-yl]- 5-methyl-pyrimidine-2,4-dione

Fórmula molecular: C10H13N5O4

ANTIBIÓTICOS-ANTIMICOBACTERIANOS-ANTIFUNGAIS-

ANTIPARASITÁRIOS

Anfotericína BNomenclatura (IUPAC): (1R-(1R*,3S*,5R*,6R*,9R*,11R*,15S*,16R*,17R*,18S*,19E,21E,23E,25E,27E,29E,31E,33R*,35S*,36R*,37S*))-33-((3-Amino-3,6-dideoxy-beta-D-mannopyranosyl)oxy)-1,3,5,6,9,11,17,37-octahydroxy-15,16,18-trimethyl-13 -oxo-14,3 9-dioxabicyclo(3 3.3.1 )nonatriaconta-19,21,23,25,27,29,31 -heptaene-36-carboxylic acid

Fórmula molecular: C47H75N017

Azitromicina

Nomeclatura (R7PAC): 9-deoxy-9a-aza-9a-methyl-9a- homoerythromycin

Fórmula molecular: C38H72N2012

Clofazimina

Nomenclatura (IUPAC): N,5-bis(4-chlorophenyl)-3-propan-2-yliminophenazin-2-amine

Fórmula molecular: C27H22C12N4

Cicloserina

Nomenclatura (IUPAC): D-4-amino-3-isoxazolidona

Fórmula molecular: C3H6N202

Claritromicína

Nomenclatura (IUPAC): 6-(4-dimethylamino-3-hydroxy- 6-methyl-tetrahydropyran-2-yl) oxy-14-ethyl-12,13-dihydroxy- 4-(5-hydroxy-4-methoxy-4,6- dimethyl-tetrahydropyran-2-yl) oxy-7-methoxy-3,5,7,9,ll, 13-hexamethyl-l-oxacyclotetradecane-2,10-dione

Fórmula molecular: C38H69N013

Dapsona

Nomenclatura (IUPAC): 4,4'sulfonyldianilineFórmula molecular: C12H12N202SDoxiciclina

Nomenclatura (IUPAC): (2Z,4S,4aR,5S,5aR,6R,12aS)-2-(amino-hydroxy-methylidene)-4-dimethylamino-5,10,11,12a-tetrahydroxy-6-methyl-4a,5,5a,6-tetrahydro-4H-tetracene-1,3,12-trione

Fórmula molecular : C22H24N208

Etambutol

Nomenclatura (IUPAC): 2-[2-(l -hydroxybutan-2-ylamino)ethylamino]butan-l -ol

Fórmula estrutural: C10H24N2O2

Isoniazida (INH)

Nomenclatura (IUPAC): piridina-4-carbohidrazide

Fórmula molecular: C6H7N30

Miltefosina

Nomenclatura (IUPAC): 2-(hexadecoxy-oxido-phosphoryl)oxyethyl-trimethyl-azaniumFórmula molecular: C21H46NO4P

Nistatina

Nomenclatura (IUPAC): 20-(4-amino-3,5-dihydroxy-6-methyl-oxan-2-yl) oxy-4,22,24,28,29,32,34, 36-octahydroxy-2,3,5-trimethyl-26, 38-dioxo-l-oxacyclooctatriaconta-6,8,12,14,16,18-hexaene-23-carboxylic acid

Fórmula molecular: C47H75N017

Rifabutína

Nomenclatura (IUPAC):

(9S, 12E, 14S, 15R, 16S, 17R, 18R, 19R, 20S, 21S, 22E, 24Z)-6,16, 18,20-Tetrahydroxy-1 "-isobutyl-14-methoxy-7,9,15,17,19,21,25-hepta-methyl-spiro[9,4-(epoxypentadeca[ 1,11,13]trienimino)-2H-furo-[2',3':7,8]-naphth[l ,2-d]irnidazol-2,4'-piperidin]-5,10,26-(3H,9H)-trione 16-acetate

Fórmula molecular: C46H62N4011

Rifampicina

Nomenclatura(IUPAC): 5,6,9,17,19,2 l-Hexahydroxy-23-methoxy-2,4,12,16,18,20,22-heptamethyl-8-[AH4-methyl-1 -piperazinyl)formimidoyl]-2,7-(epoxypentadeca[l,l l,13]trienimino)-naphtho[2,l-è]furan-l,l l(2//)-dione 21-acetate

Fórmula molecular: C43H58N4012

Kanamicina

Nomenclatura (IUPAC): 2-(aminomethyl)- 6-[4,6-diamino-3- [4-amino-3,5-dihydroxy-6-(hydroxymethyl) tetrahydropyran- 2-yl]oxy-2-hydroxy-cyclohexoxy]-tetrahydropyran-3,4,5-triol

Fórmula molecular: C18H36N4011

Pirazinamida (PZA)

Nomenclatura (IUPAC): pyrazine-2-carboxamide

Fórmula molecular: C5H5N30

Tetraciclina

Nomenclatura (IUPAC): 2Z,4S,4aS,6S, 12aS)-2-(amino-hydroxy-methylidene)-4-dimethylamino-6,10,11,12a-tetrahydroxy-6-methyl-4,4a,5,5a-tetrahydrotetracene-1,3,12-trione

Fórmula molecular: C22H24N208

ANTIPARASITÁRIOS-ANTIMALÁRICOS

AmodiaquinaNomenclatura (IUPAC): 4-[(7-chloroquinolin-4-yl)amino]-2-diethylaminomethyl)phenol

Fórmula molecular: C20H22C1N3O

Cloroquina

Nomenclatura (IUPAC): 7V'-(7-chloroquinolin-4-yl)-A/y/V-diethyl-pentane-1,4-Diamine

Fórmula molecular: C18H26C1N3

Hidroxicloroquína

Nomenclatura(IUPAC): 2-[4-[(7-chloroquinolin-4-yl)amino]pentyl-ethylamino]ethanol

Fórmula molecular: Cl 8H26C1N30

Mepacrina (Quinacrina)

Nomeclatura (IUPAC): N'-(6-chloro-2-methoxyacridin-9-yl)-N,N-diethylpentane-1,4-diamine

Fórmula molecular: C23H30C1N3O

Primaquína

Nomenclatura(IUPAC): AT-(6-methoxyquinolin-8-yl)pentane-l ,4-diamine

Fórmula molecular: C15H21N30

Piremetamina (Cloridina)

Nomenclatura (IUPAC): 5-(4-chlorophenyl)-6-ethylpyrimidine-2,4-diamineFórmula molecular : C12H13C1N4

Paramomicína

Nomenclatura (IUPAC): (2R,3S,4R,5R,6S)-5-amino-6-[(lR,2R,3S,4R,6S)-4,6-diamino-24(2S,3R,4S,5R)-4-[(2R3R,4R,5S,6S)-3-amino-6-(aminomethyl)-4,5-dihydroxyoxan-2-yl]oxy-3-hydroxy-5-(hydroxymethyl) oxolan-2-yl]oxy-3-hydroxycyclohexyl]oxy-2-(hydroxymethyl)oxane-3,4-diol

Fórmula molecular: C23H45N5014

Sulfonamida

Nomenclatura (IUPAC): 4-fluorobenzenesulfonamide

Fórmula molecular: C6H6FN02S

Sulfadoxina

Nomenclatura(IUPAC): 4-amino-N-(5,6-dimethoxypyrimidin-4-yl)benzenesulfonamide

Fórmula molecular: C12H14N404S

Sulfapiridina (IUPAC): 4-amino-N-pyridin-2-ylbenzenesulfonamide

Fórmula molecular: Cl 1H11N302S

Sulfacetamída

Nomenclatura(IUPAC): N-(4-aminophenyl)sulfonylacetamide

Fórmula molecular: C8H10N2O3S

Sulfanílamida

Nomenclatura(IUPAC): 4-aminobenzenesulfonamide

Fórmula molecular: C6H8N202S

Sulfametoxazol

Nomenclatura (IUPAC): 4-amino-A^-(5-methylisoxazol-3-yl)-benzenesulfonamide

Fórmula molecular: C10H11N303S

Trimetoprin

Nomenclatura (IUPAC): 5-(3,4,5-trimethoxybenzyl)pyrimidine-2,4-diamine

Fórmula molecular: C14H18N4Q3imunomodulador.es

Interferon-alfa

Nomenclatura (IUPAC): Human interferon alfa-2a (Interferon humano alfa-2a)

Fórmula molecular: C860H1353N227O255S9

Interferon-beta

Nomenclatura (IUPAC): Human interferon beta (Interferon humano beta)

Fórmula-molecular: C908H1408N246O252S7

Interferon-gama

Nomenclatura (IUPAC): Human interferon gamma-lb (Interferon humano gama-lb)

Fórmula-molecular: C761H1206N214O225S3

Agregado proteico de anidrido de fosfolinoleato-palmitoleatode amônio e magnésio

Nomenclatura proposta (1 *): Agregado proteico de anidrido defosfolinoleato-palmitoleato de amônio e magnésio

Fórmula molecular (*2): (Ci8H35Mg2N02iP5)39i (C326H6i40i63N2o4S2)o.i6

Composição química: 11,6 ± 4,0% de lipídeos totais, sendo 22,7 ± 5,0% de ácidopalmitoleico, 42,9 ± 2,0% de ácido linoleico e 32,0 ± 3,0% de ácido linoleico oxidado,20,1 ± 0,9% de íons Mg, 10,0 ± 3,3% de íons amônio, 45,2 ± 2,7% de fosfato e 0,49 ±0,01% de proteínas; a proteína encontrando-se distribuída percentualmente da seguintemaneira; Asp 7,19%; Thr 3,56%; Ser 7,56%; Glu 8,53%; Pro 0,5%; Gly 9,69%; Ala7,46%; Vai 1,0%; Met 4,38%, Isoleu 2,54%, Leu 3,03%, Tyr 0,5%, Phe 1,0%, His2,83%; Lys 3,56%, Trp 1,3% e Arg 35,2%

Peso molecular: 320.000 Dalton (320 kDa)

Observações1 * Nomenclatura (IUPAC) ainda não disponível

2* Fórmula molecular ou empírica proposta, com base nas informações dos:

PI - 0305373-3, USPTO 10/978, 683 e EPA 0426250.3.2405

Claims (15)

1.) "COMBINAÇÃO DE SUBSTÂNCIAS PARA O TRATAMENTO DEDOENÇAS INFECCIOSAS B ACTERI AN AS, PARASITÁRIAS, FUNGAIS EVIRAIS COMPREENDENDO A ASSOCIAÇÃO DE UM IMUNOMODULADORE SUBSTÂNCIAS COM AÇÃO ANTIBACTERIANA, ANTIPARASITÁRIA,ANTIFUNGAL OU ANTIVIRAL" caracterizado essencialmente por ser umacombinação de substâncias para tratar infecções causadas por microorganismosintracelulares, sejam facultativos ou estritos, compreendendo o gênero Micobacterium,que inclui as espécies M. tuberculosis, M. africanum, M. bovis, M.bovis BCG, M.canetti e M. microti, M.caprae e M. Pinnipedii que causam a doença denominadaTuberculose em seres humanos e animais e ainda a espécie M.avium, causadora dasdoenças denominadas Linfoadenite tuberculosa e ainda Septicemia em seres humanos eanimais e ainda a espécie M.leprae que causa a doença denominada Hanseníase ouLepra em seres humanos, bactérias da espécie Listeria monocytogenes, que causam adoença denominada Listeriose em seres humanos e animais, protozoários do gêneroPlasmodium que inclui as espécies. P. falciparum, P. vivax, P. malariae, P. ovale, P.berghei, P.knowlesi, P.vinckei, P. cynomologi, P. chabaudi, P. Yoellii que causam adoença denominada Malária em seres humanos e animais, protozoários do gêneroLeishmania, incluindo as espécies L. donovani, L. infantum, e L. chagasi, L. major, L.tropica, L. aethiopica, L. mexicana, L. braziliensis e L. peruviana, L. guyanensis, L.Amazonensis, que causam a doença denominada Leishmaniose em animais e sereshumanos, fungos das espécies Cândida sp. que causam a doença denominadaCandidíase em animais e seres humanos, Criptococus sp. que causam a doençadenominada Criptosporidíase em animais e seres humanos, Paracoccidioides sp, quecausa a doença denominada Paracoccidioidomicose em animais e seres humanos, vírussensíveis à ação dos Interferon-alfa e Interferon-gama, compreendendo os gênerosBunyviridae (Punta toro virus e African Rift Valey Fever), Influeza aviaria (gripeaviaria), pólio, rubéola, varíola, virus das febres hemorrágicas, hantavírus, febreamarela, Hepadnavírus (Hepatite B), Flaviridae (Hepatite C virus, virus do oeste doNilo e Dengue), Herpesvirus (Herpes simplex - HSV-I e Herpes simplex II - HSV-II,Herpes Virus III ou Varicela zoster sp. e Citomegalovírus sp.), Papilomavirus, quecausam diversas doenças em animais e seres humanos, compreendendo essencialmentea administração no hospedeiro infectado, de uma combinação ou associação desubstâncias, que obrigatoriamente sempre contará com a presença de umimunomodulador específico (agregado proteico de anidrido de fosfolinoleato-palmitoleato de amônio e magnésio), que adicionalmente será combinado ou associadoà pelo menos uma outra substância que possua atividade antimicrobiana direta contra osmicroorganismos de interesse, ou seja; substâncias ou compostos com atividades ouefeitos antibacterianos, antiparasitários, antiprotozoáricos, antifungais, antivirais,selecionados de espécies e grupos químicos tais como: Inibidores de parede celularbacteriana (isoniazida, etambutol, etionamida, cicloserina), Inibidores de síntese deácidos nucléicos (rifampicina, quinolonas), Inibidores de síntese protéica(estreptomicina, kanamicina), Inibidores de metabolismo energético da membranabacteriana (pirazinamida), a dapsona (diaminodifenilsulfona) - a clofazimina (Tinturalipossolúvel de riminofenazina ), compostos antibacterianos como a claritromicina,azitromicina, rifabutina, penicilinas, ampicilinas, tetraciclinas, amicacina e aindaaminoglicosídeos, compostos que possuam atividade antiprotozoárica selecionada nosgrupos químicos, seguintes: 1) grupo-aminoacridinas (mepacrina), 2) grupo-aminoquinolinas (cloroquina, hidroxicloroquina, amodiaquina), 3) grupo 8-aminoquinolinas (primaquina, quinocida), 4) grupo-biguanidas ( cloroproguanil,cicloguanil, proguanil), 5) grupo-diaminopirimidinas (piretamina), 6) grupo-sais dequinino, 7) grupo-sulfas ou sulfonas: (sulfonamidas, sulfanilamidas, dapsona), 8)grupo-antibióticos (tetraciclinas), 9)grupo-inibidores de protease (saquinavir, ritonavir,lopinavir), 10) grupo - artemisina e derivados (extratos naturais daArtemisia annua ouseus derivados sintéticos), compostos que apresentem o grupo químico antimônio(compostos antimoniais tal como o antimoniato de N-metil-glucamina), antiparasitário(pentamidina), compostos antibióticos (anfotericina B, paramomicina), derivados daalquilfosfocolina, como a Mitelfosina (2-(hexadecoxy-oxido-phosphoryl)oxyethyl-trimethyl-azanium), com atividade antifungal selecionadas de grupos químicos queapresentem o grupamento azol, e seus. (derivados (fluconazol, itraconazol, clotrimazol,miconazol), antiparasitários ( pentamidina) e ainda antibióticos (anfotericina B,nistatina)e finalmente compostos que apresentem ação antiviral direta, compreendendoo Acyclovir, o AZT (1-[(2R, 4S, 5S)- 4-azido-5-(hydroxymethyl) oxolan-2-yl]- 5-methyl-pyrimidine-2,4-dione ou C10H13N5O4), o Ribavirin, inibidores de transcriptasereversa (Abacavir, Didanosina (DDI), Lamivudina (3TC), Estavudina, Tenofovir,Zidovudina (AZT), Zalcitabina) inibidores de protease viral (Atazanavir, Darunavir,Fosemprenavir, Lopinavir, Nelfinavir, Ritonavir, Saquinavir, Tipranavir, Amprenavir,Indinavir) ), inibidores de transcriptase reversa não-nucleosídeos (Efavirens,Nevirapine, Etravine, Rilvipirine, Loviride, Delarvine) mencionados de uma forma nãoexaustiva, sendo que todas estas substâncias citadas podem também ser utilizadas nopresente invento, de forma isolada, ou adicionadas ou associadas ou combinadas entresi, e finalmente os componentes, do invento, seja o imunomodulador (agregado proteicode anidrido de fosfolinoleato-palmitoleato de amônio e magnésio) e as outrassubstâncias que devam a ele ser associadas, podem ainda ser administradosconjuntamente, simultaneamente, consecutivamente, ou seqüencialmente, emquantidades suficientes para destruir os microorganismos intracelulares facultativos ouestritos.

2.) "COMBINAÇÃO DE SUBSTÂNCIAS PARA O TRATAMENTO DEDOENÇAS INFECCIOSAS BACTERIANAS, PARASITÁRIAS, FUNGAIS EVIRAIS COMPREENDENDO A ASSOCIAÇÃO DE UM IMUNOMODULADORE SUBSTÂNCIAS COM AÇÃO ANTIBACTERIANA, ANTIPARASITÁRIA,ANTIFUNGAL OU ANTIVIRAL", de acordo com a reivindicação 1 caracterizadospelos referidos tratamentos serem através do imunomodulador ( agregado proteico deanidrido de fosfolinoleato-palmitoleato de amônio e magnésio) que é definido como umagregado proteico de anidrido de fosfolinoleato-palmitoleato de amônio e magnésio,com peso molecular de 320.000 Dalton (320 kDa), que na análise química mostrou apresença de 11,6 ± 4,0% de lipídeos totais, sendo 22,7 ± 5,0% de ácido palmitoleico,-42,9 ± 2,0% de ácido linoleico e 32,0 + 3,0% de ácido linoleico oxidado, 20,1 ± 0,9%de íons Mg, 10,0 ± 3,3% de íons amônio, 45,2 ± 2,7% de fosfato e 0,49 ± 0,01% deproteínas; a proteína encontrando-se distribuída percentualmente da seguinte maneira;Asp 7,19%; Thr 3,56%; Ser 7,56%; Glu 8,53%; Pro 0,5%; Gly 9,69%; Ala 7,46%; Vai-1,0%; Met 4,38%, Isoleu 2,54%, Leu 3,03%, Tyr 0,5%, Phe 1,0%, His 2,83%; Lys-3,56%, Trp 1,3% e Arg 35,2%.

3.) "COMBINAÇÃO DE SUBSTÂNCIAS PARA O TRATAMENTO DEDOENÇAS INFECCIOSAS BACTERIANAS, PARASITÁRIAS, FUNGAIS EVIRAIS COMPREENDENDO A ASSOCIAÇÃO DE UM IMUNOMODULADORE SUBSTÂNCIAS COM AÇÃO ANTIBACTERIANA, ANTIPARASITÁRIA,ANTIFUNGAL OU ANTIVIRAL", de acordo com as reivindicações 1 e 2caracterizado por ser uma combinação de substâncias para tratar especificamente asinfecções da Tuberculose, causadas especificamente por bactérias do gêneroMycobacterium sp, incluindo as espécies M. tuberculosis, M. africanum, M. bovis,M.bovis BCG, M. canetti e M. microti, M.caprae e M. pinnipedii que causam infecçõeshumanas e também em animais, compreendendo essencialmente a administração nohospedeiro infectado, de uma combinação ou associação de um imunomodulador (ocomposto da reivindicação 2) e adicionalmente ao menos uma outra substância quepossua atividade antimicrobiana ou antibacteriana direta e atuando através de modos deatuação tais como: Inibidores de parede celular bacteriana (isoniazida, etambutol,etionamida, cicloserina), Inibidores de síntese de ácidos nucléicos (rifampicina,quinolonas), Inibidores de síntese protéica (estreptomicina, kanamicina), Inibidores demetabolismo energético da membrana bacteriana (pirazinamida), em enumeração nãoexaustiva, sendo que estas substâncias citadas podem também ser utilizadas de acordocom o presente invento de forma isolada ou associados ou combinadas entre si, sendoque os componentes destas combinações podem ser administrados conjuntamente,simultaneamente, consecutivamente, ou seqüencialmente em quantidades suficientespara destruir os parasitos de tuberculose.

4.) "COMBINAÇÃO DE SUBSTÂNCIAS PARA O TRATAMENTO DEDOENÇAS INFECCIOSAS BACTERIANAS, PARASITÁRIAS, FUNGAIS EVIRAIS COMPREENDENDO A ASSOCIAÇÃO DE UM IMUNOMODULADORE SUBSTÂNCIAS COM AÇÃO ANTIBACTERIANA, ANTIPARASITÁRIA,ANTIFUNGAL OU ANTIVIRAL" de acordo com as reivindicações 1 e 2caracterizado por ser uma combinação de substâncias para o tratamento especifico daListeriose, causada por bactérias da espécie Listeria monocytogenes, compreendendoessencialmente a administração ao hospedeiro de uma combinação ou associação de umimunomodulador (o composto da reivindicação 2) e adicionalmente ao menos uma outrasubstância que possua atividade antibacteriana direta, selecionada do grupo dosprodutos com atividade antibiótica ou antibacteriana, tais como, penicilinas,ampicilinas, tetraciclinas, amicacina e ainda aminoglicosídeos, em uma enumeração nãoexaustiva, sendo que os componentes destas combinações podem ser administradosconjuntamente, simultaneamente, consecutivamente, ou seqüencialmente emquantidades suficientes para destruir, os parasitos causadores da Listeriose.

5.) "COMBINAÇÃO DE SUBSTÂNCIAS PARA O TRATAMENTO DEDOENÇAS INFECCIOSAS BACTERIANAS, PARASITÁRIAS, FUNGAIS EVIRAIS COMPREENDENDO A ASSOCIAÇÃO DE UM IMUNOMODULADORE SUBSTÂNCIAS COM AÇÃO ANTIBACTERIANA, ANTIPARASITÁRIA,ANTIFUNGAL OU ANTIVIRAL" de acordo com as reivindicações 1 e 2caracterizado por ser uma combinação de substâncias para tratar infecçõesespecificamente causada por protozoários do gênero Plasmodium, causadores damalária incluindo as causadas pelas espécies P. falciparum, P. vivax, P. malariae, P.ovale, P. berghei, P. knowlesi, P. vinckei, P. cynomologi, P. chabaudi, P. yoellii, quecausam infecção humanas e também em animais, compreendendo essencialmente aadministração no hospedeiro de uma combinação ou associação de um imunomodulador(o composto da reivindicação 2) e adicionalmente ao menos uma outra substância quepossua atividade antimalárica selecionada nos grupos químicos seguintes: 1) grupo-aminoacridinas (mepacrina), 2) grupo-aminoquinolinas (cloroquina, hidroxicloroquina,amodiaquina), 3) grupo 8.-aminoquinolinas (primaquina, quinocida), 4) grupo-biguanidas (cloroproguanil, cicloguanil, proguanil), 5) grupo-diaminopirimidinas(piretamina), 6) grupo-sais de quinino, 7) grupo-sulfas ou sulfonas: (sulfonamidas,sulfanilamidas, dapsona), 8) grapo-antibióticos (tetraciclinas), 9)grupo-inibidores deprotease (saquinavir, ritonavir, lopinavir), 10) grupo - artemisina e derivados (extratosnaturais da Artemisia annua ou seus derivados sintéticos), em uma enumeração nãoexaustiva sendo que os componentes desta combinação ou associação podem seradministrados conjuntamente, simultaneamente, consecutivamente, ou seqüencialmenteem quantidades suficientes para destruir os parasitos de malária que infestam oseritrócitos.

6.) "COMBINAÇÃO DE SUBSTÂNCIAS PARA O TRATAMENTO DEDOENÇAS INFECCIOSAS BACTERIANAS, PARASITÁRIAS, FUNGAIS EVIRAIS COMPREENDENDO A ASSOCIAÇÃO DE UM IMUNOMODULADORE SUBSTÂNCIAS COM AÇÃO ANTIBACTERIANA, ANTIPARASITÁRIA,ANTIFUNGAL OU ANTTVIRAL" de acordo com as reivindicações 1 e 2caracterizado por ser uma combinação de substancias para tratar infecções, nas formascutânea e visceral, causadas especificamente por protozoários do gênero Leishmaniaincluindo as espécies L. donovani, L. infantum, e L. chagasi, L. major, L. tropica, L.aethiopica, L. mexicana, L. braziliensis e L. peruviana, L. guyanensis, L. amazonensis,que causam infecções humanas e também em animais compreendendo essencialmente aadministração no hospedeiro infectado, de uma combinação ou associação de umimunomodulador (o composto da reivindicação 2) e adicionalmente ao menos uma outrasubstância que possua atividade antimicrobiana ou antiprotozoárica selecionadas entreas variedades ou tipos de compostos que apresentem o grupo químico antimônio(compostos antimoniais). Tal como o antímoniato de N-metil-(glucamina),antiparasitários (pentamidina), compostos antibióticos (anfotericina B, paramomicina),derivados da alquilfosfocolina, como a Mitelfosina (2-(hexadecoxy-oxido-phosphoryl)oxyethyl-trimethyl-azanium), sendo que os componentes desta combinaçãoou associação podem ser administrados tanto conjuntamente, simultaneamente,consecutivamente, ou seqüencialmente em quantidades suficientes para destruir osparasites da Leishmania.

7.) "COMBINAÇÃO DE SUBSTÂNCIAS PARA O TRATAMENTO DEDOENÇAS INFECCIOSAS BACTERIANAS, PARASITÁRIAS, FUNGAIS EVIRAIS COMPREENDENDO A ASSOCIAÇÃO DE UM IMUNOMODULADORE SUBSTÂNCIAS COM AÇÃO ANTIBACTERIANA, ANTIPARASITÁRIA,ANTIFUNGAL OU ANTIVIRAL" de acordo com as reivindicações 1 e 2caracterizado por ser uma combinação de substancias para tratar infecções virais,causadores de doenças em animais e seres humanos, compreendendo os gênerosBunyviridae (Punta toro virus e African Rift Valey Fever), Influeza aviaria (gripeaviaria), pólio, rubéola, varíola, virus das febres hemorrágicas, hantavírus, febreamarela, Hepadnavírus (Hepatite B), Flaviridae (Hepatite C virus, virus do oeste doNilo e dengue), Herpesvirus (Herpes simplex - HSV-I e Herpes simplex II - HSV-II,Herpes Virus III ou Varicela zoster sp). e Citomegalovírus sp.), Papiloma vírus,compreendendo essencialmente a administração no hospedeiro de uma combinação ouassociação de um imunomodulador (o composto da reivindicação 2) e adicionalmenteao menos uma outra substância que possua atividade antiviral direta tais comoexemplificativamente se cita o Acyclovir, o AZT (1-[(2R, 4S, 5S)- 4-azido-5-(hydroxymethyl) oxolan-2-yl]- 5-methyl-pyrimidine-2,4-dione ou C10H13N5O4), oRibavirin, inibidores de transcriptase reversa (Abacavir, Didanosina (DDI), Lamivudina(3TC), Estavudina, Tenofovir, Zidovudina (AZT), Zalcitabina) inibidores de proteaseviral (Atazanavir, Darunavir, Fosemprenavir, Lopinavir, Nelflnavir, Ritonavir,Saquinavir, Tipranavir, Amprenavir, Indinavir) ), inibidores de transcriptase reversanão-nucleosídeos (Efavirens, Nevirapine, Etravine, Rilvipirine, Loviride, Delarvine) emuma enumeração não exaustiva, sendo que os componentes desta combinação ouassociação podem ser administrados tanto conjuntamente, simultaneamente,consecutivamente, ou seqüencialmente em quantidades suficientes para destruir osvírus sensíveis.

8.) "COMBINAÇÃO DE SUBSTÂNCIAS PARA O TRATAMENTO DEDOENÇAS INFECCIOSAS BACTERIANAS, PARASITÁRIAS, FUNGAIS EVIRAIS COMPREENDENDO A ASSOCIAÇÃO DE UM IMUNOMODULADORE SUBSTÂNCIAS COM AÇÃO ANTIBACTERIANA, ANTIPARASITÁRIA,ANTIFUNGAL OU ANTIVIRAL" de acordo com as reivindicações 1 e 2caracterizado por ser uma combinação de substancias para tratar especificamente adenominada Hepatite B, em seres humanos, causada por virus do gênero Hepadnavírus,compreendendo, essencialmente a administração no hospedeiro de uma combinação ouassociação de um imunomodulador ( o composto da reivindicação 2) e adicionalmenteao menos uma outra substância que possua atividade antiviral direta, tais como oRibavirin, inibidores de protease viral (Atazanavir, Darunavir, Fosemprenavir,Lopinavir, Nelflnavir, Ritonavir, Saquinavir, Tipranavir, Amprenavir, Indinavir), emuma enumeração não exaustiva sendo que os componentes desta combinação ouassociação podem ser administrados tanto conjuntamente, simultaneamente,consecutivamente, ou seqüencialmente em quantidades suficientes para destruir osvírus.

9.) "COMBINAÇÃO DE SUBSTÂNCIAS PARA O TRATAMENTO DEDOENÇAS INFECCIOSAS BACTERIANAS, PARASITÁRIAS, FUNGAIS EVIRAIS COMPREENDENDO A ASSOCIAÇÃO DE UM IMUNOMODULADORE SUBSTÂNCIAS COM AÇÃO ANTIBACTERIANA, ANTIPARASITÁRIA,ANTIFUNGAL OU ANTIVIRAL" de acordo com as reivindicações 1 e 2caracterizado por ser uma combinação de substancias para tratar especificamente adenominada Hepatite C, em seres humanos, causada por virus do gênero Flavivirus,compreendendo essencialmente a administração no hospedeiro de uma combinação ouassociação de um imunomodulador ( o composto da reivindicação 2) e adicionalmenteao menos uma outra substância que possua atividade antiviral direta, tais como oRibavirin, os inibidores de protease viral (Atazanavir, Darunavir, Fosemprenavir,Lopinavir, Nelfinavir, Ritonavir, Saquinavir, Tipranavir, Amprenavir, Indinavir), emuma enumeração não exaustiva sendo que os componentes desta combinação ouassociação podem ser administrados tanto conjuntamente, simultaneamente,consecutivamente, ou seqüencialmente em quantidades suficientes para destruir osvírus.

10.) "COMBINAÇÃO DE SUBSTÂNCIAS PARA O TRATAMENTO DEDOENÇAS INFECCIOSAS BACTERIANAS, PARASITÁRIAS, FUNGAIS EVIRAIS COMPREENDENDO A ASSOCIAÇÃO DE UM IMUNOMODULADORE SUBSTÂNCIAS COM AÇÃO ANTIBACTERIANA, ANTIPARASITÁRIA,ANTIFUNGAL OU ANTIVIRAL" de acordo com as reivindicações 1 e 2caracterizado por ser uma combinação de substancias para tratar especificamente adenominada infecção herpética, causada por virus do gênero Herpesvirus, incluindo asespécies Herpes simplex virus I (HSV-1), Herpes simplex virus II (HSV-2), Varicelazoster virus (VZV ou HSV-III), Epstein-Barr virus (EBV), causadores de infecções emseres humanos, compreendendo essencialmente a administração no hospedeiro de umacombinação ou associação de um imunomodulador ( o composto da reivindicação 2) eadicionalmente ao menos uma outra substância que possua atividade antiviral direta, taiscomo o Acyclovir, inibidores de protease viral (Atazanavir, Darunavir, Fosemprenavir,Lopinavir, Nelfinavir, Ritonavir, Saquinavir, Tipranavir, Amprenavir, Indinavir), emuma. enumeração não exaustiva sendo que os componentes desta combinação ouassociação podem ser administrados tanto conjuntamente, simultaneamente,consecutivamente, ou seqüencialmente em quantidades suficientes para destruir osvírus.

11.) "COMBINAÇÃO DE SUBSTÂNCIAS PARA O TRATAMENTO DEDOENÇAS INFECCIOSAS BACTERIANAS, PARASITÁRIAS, FUNGAIS EVIRAIS COMPREENDENDO A ASSOCIAÇÃO DE UM IMUNOMODULADORE SUBSTÂNCIAS COM AÇÃO ANTIBACTERIANA, ANTIPARASITÁRIA,ANTIFUNGAL OU ANTIVIRAL" de acordo com as reivindicações 1 e 2caracterizado por ser uma combinação de substancias para tratar especificamente asdenominadas febres hemorrágicas, causadas por virus do gênero Bunyviridae (Puntatoro virus e African Rift Valey Fever), causadores desta doença em animais e sereshumanos, compreendendo essencialmente a administração no hospedeiro de umacombinação ou associação de um imunomodulador ( o composto da reivindicação 2) eadicionalmente ao menos uma outra substância que possua atividade antiviral direta, taiscomo o Ribavirin, os inibidores de protease viral (Atazanavir, Darunavir,Fosemprenavir, Lopinavir, Nelfinavir, Ritonavir, Saquinavir, Tipranavir, Amprenavir,Indinavir), em uma enumeração não exaustiva sendo que os componentes destacombinação ou. associação podem ser administrados tanto conjuntamente,simultaneamente, consecutivamente, ou seqüencialmente em quantidades suficientespara destruir os vírus.

12.) "COMBINAÇÃO DE SUBSTÂNCIAS PARA O TRATAMENTO DEDOENÇAS INFECCIOSAS BACTERIANAS, PARASITÁRIAS, FUNGAIS EVIRAIS COMPREENDENDO A ASSOCIAÇÃO DE UM IMUNOMODULADORE SUBSTÂNCIAS COM AÇÃO ANTIBACTERIANA, ANTIPARASITÁRIA,ANTIFUNGAL OU ANTIVIRAL" de acordo com as reivindicações 1 e 2caracterizado por ser uma combinação de substancias para tratamento de infecçõescausadas por microorganismos ou fungos do tipo Cândida sp, Cândida sp, Criptococussp, Paracoccidiodis s.p, causadores de doenças denominadas Micoses, em animais eseres humanos, compreendendo essencialmente a administração no hospedeiroinfectado, de uma combinação ou associação de um imunomodulador ( o composto dareivindicação 2) e adicionalmente ao menos uma outra substância que possua atividadeantifungal selecionadas de grupos químicos de compostos que apresentem ogrupamento azol, e seus derivados (fluconazol, itraconazol,clotrimazol, miconazol),antiparasitários ( pentamidina) e ainda antibióticos (anfotericina B, nistatina), em umaenumeração não exaustiva, sendo que os componentes desta combinação ou associaçãopodem ser administrados conjuntamente, simultaneamente, consecutivamente, ouseqüencialmente em quantidades suficientes para destruir os parasitos causadores dasinfecções fungais.

13.) "COMBINAÇÃO DE SUBSTÂNCIAS PARA O TRATAMENTO DEDOENÇAS INFECCIOSAS BACTERIANAS, PARASITÁRIAS, FUNGAIS EVIRAIS COMPREENDENDO A ASSOCIAÇÃO DE UM IMUNOMODULADORE SUBSTÂNCIAS COM AÇÃO ANTIBACTERIANA, ANTIPARASITÁRIA,ANTIFUNGAL OU ANTJVIRAL" de acordo com as reivindicações 1 e 2caracterizado por ser uma combinação de substancias para o tratamento especifico deinfecções causadas especificamente por microorganismos ou fungos do tipo Cândidasp., causadores da doença denominada Candidíase em animais e seres humanos,compreendendo essencialmente a administração no hospedeiro infectado, de umacombinação ou associação de um imunomodulador ( o composto da reivindicação 2) eadicionalmente ao menos uma outra substância que possua atividade antifungalselecionadas de grupos químicos de compostos que apresentem o grupamento azol, eseus derivados (fluconazol, itraconazol,clotrimazol, miconazol), antiparasitários (pentamidina) e ainda antibióticos (anfotericina B, nistatina), em uma enumeração nãoexaustiva, sendo que os componentes desta combinação ou associação podem seradministrados conjuntamente, simultaneamente, consecutivamente, ou seqüencialmenteem quantidades suficientes para destruir os parasites causadores da candidíase.

14.) "COMBINAÇÃO DE SUBSTÂNCIAS PARA O TRATAMENTO DEDOENÇAS INFECCIOSAS BACTERIANAS, PARASITÁRIAS, FUNGAIS EVIRAIS COMPREENDENDO A ASSOCIAÇÃO DE UM IMUNOMODULADORE SUBSTÂNCIAS COM AÇÃO ANTD3ACTERIANA, ANTIPARASITÁRIA,ANTIFUNGAL OU ANTIVIRAL" de acordo com as reivindicações 1 e 2caracterizado por ser uma combinação de substâncias para tratar especificamenteinfecções em portadores de imunodefíciências causadas ou relacionadas ao vírus HIVe/ou AIDS, quando estas infecções oportunistas forem causadas por micobactérias taiscomo exemplificativamente se pode citar o M. tuberculosis, M. africanum, M. bovis,M.bovis BCG, M.Avium, e ainda bactérias tais como a L.monocytogenes, e aindaprotozoários do gênero Plasmodium, incluindo as espécies P. falciparum, P. vivax, P.malariae, P. ovale, P. berghei, P. knowlesi, P. vinckei, P. cynomologi, P. chabaudi, P.Yoellii, protozoários do gênero Leishmania, incluindo as espécies L. donovani, L.infantum, e L. Chagasi, L. major, L. tropica, L. aethiopica, L. mexicana, L. braziliensise L. Peruviana, L. guyanensis, L. amazonensis, outros protozoários oportunistas como oP.carinii, e ainda infecções causadas por fungos das espécies Cândida sp, Cândida sp,Criptococus sp, Paracoccidiodis sp, e finalmente infecções causadas pelas famílias devírus sensíveis a ação do Interferon-gama e Interferon-alfa, compreendendo os gênerosBunyviridae (Punta toro virus e African Rift Valey Fever), Hepadnavírus (Hepatite B),Flaviridae (Hepatitis C virus), Herpesvirus (Herpes simplex - HSV-I e Herpes simplexII - HSV-II, Herpes Virus III ou Varicela zoster sp.e Citomegalovírus sp.)e Papilomavírus, compreendendo essencialmente a administração no hospedeiro de umacombinação ou associação de um imunomodulador (o composto da reivindicação 2) eadicionalmente ao menos uma outra substância que possua atividade antibacteriana,antiviral, antiparasitária ou antifungal, em uma enumeração não exaustiva, sendo que oscomponentes desta combinação ou associação podem ser administrados tantoconjuntamente, simultaneamente, consecutivamente, ou seqüencialmente emquantidades suficientes para destruir os microorganismos e parasitos.

15.) "COMBINAÇÃO DE SUBSTÂNCIAS PARA O TRATAMENTO DEDOENÇAS INFECCIOSAS BACTERIANAS, PARASITÁRIAS, FUNGAIS EVIRAIS COMPREENDENDO A ASSOCIAÇÃO DE UM IMUNOMODULADORE SUBSTÂNCIAS COM AÇÃO ANTIBACTERIANA, ANTIPARASITÁRIA,ANTIFUNGAL OU ANTIVIRAL" de acordo com as reivindicações 1 e 2caracterizado por ser uma combinação de substancias para tratar especificamente asinfecções em portadores de imunodeficiências, ocasionadas por outras causas que não ainfecção pelo vírus HIV, quando estas infecções estiverem associadas a micobactérias eoutros agentes infecciosos oportunistas, tais como exemplificativamente se pode citar oM. tuberculosis, M. africanum, M. bovis, M.bovis BCG, M.leprae, M.Avium,L.monocytogenes, protozoários do gênero Plasmodium, incluindo as espécies P.falciparum, P. vivax, P. malariae, P. ovale, P. berghei, P. knowlesi, P. vinckei, P.cynomologi, P. chabaudi, P. yoellii e ainda infecções causadas por protozoários dogênero Leishmania, incluindo as espécies L. donovani, L. infantum, e L. Chagasi, L.major, L. tropica, L. aethiopica, L. mexicana, L. braziliensis e L. Peruviana, L.guyanensis, L. amazonensis, outros protozoários oportunistas como o P.carinii e aindainfecções causadas por fungos das espécies Cândida sp, Cândida sp, Criptococus sp,Paracoccidiodis sp, e finalmente vírus, incluindo os gêneros, Bunyviridae (Punta torovirus e African Rift Valey Fever ), Hepadnavírus ( Hepatite B), Flaviridae ( HepatitisC virus), Herpesvirus ( Herpes simplex - HSV-I e Herpes simplex II - HSV-II, HerpesVirus III ou Varicela zoster sp.e Citomegalovírus sp.), Papiloma vírus, compreendendoessencialmente a administração no hospedeiro de uma combinação ou associação de umimunomodulador (o composto da reivindicação 2) e adicionalmente ao menos uma outrasubstância que possua atividade antibacteriana, antiviral, antiparasitária ou antifungal,em uma enumeração não exaustiva, sendo que os componentes desta combinação ouassociação podem ser administrados tanto conjuntamente, simultaneamente,consecutivamente, ou seqüencialmente em quantidades suficientes para destruir osmicroorganismos e parasites.