BRPI0719092A2 - Compostos do tipo tetra-hidorciclopenta[b]indol como moduladores de receptores de androgênio - Google Patents

Description

Relatório Descritivo da Patente de Invenção para "COMPOS- TOS DO TIPO TETRA-HIDROCICLOPENTA[b]INDOL COMO MODULA- DORES DE RECEPTORES DE ANDROGÊNIO".

Campo Técnico da Invenção A presente invenção refere-se a compostos do tipo tetra-

hidrociclopent[b]indol, ou sais farmaceuticamente aceitáveis dos mesmos, que são úteis como agentes terapêuticos, a composições farmacêuticas compreendendo os compostos ou sais, a métodos de uso dos compostos ou sais para tratar distúrbios em pacientes, e a intermediários e processos úteis na síntese dos compostos. Antecedentes da Invenção

Androgênios esteroidais endógenos exercem uma profunda in- fluência em diversas funções fisiológicas. Os efeitos dos androgênios este- roidais (por exemplo testosterona e 5a-di-hidrotestosterona (DHT)) são me- diados pelo receptor de androgênio (AR) e podem ser caracterizados como de natureza anabólica ou androgênica. Subsequente à ligação do androgê- nio, o AR sofre uma alteração conformacional e em seguida transloca-se para o núcleo da célula onde ele se liga a seqüências de DNA específicas chamadas de elementos de resposta do androgênio (AREs) para iniciar ou reprimir a transcrição de genes alvo. Os efeitos anabólicos (isto é, formado- res de tecido) dos androgênio incluem aumento da massa e força muscula- res, ao passo que os efeitos androgênicos (isto é, masculinizantes) incluem o desenvolvimento de características sexuais secundárias no homem tais como os tecidos reprodutores internos (isto é, próstata e vesícula seminal), a genitália externa (pênis e escroto), libido, e padrões de crescimento de pelo.

As reduções nos níveis de androgênio que podem ocorrer com a idade são associadas a efeitos sérios tanto no homem quanto na mulher. Por exemplo, à medida que os homens envelhecem e os níveis de testotes- tona diminuem, os ossos enfraquecem, os riscos de diabetes e doenças car- diovasculares aumentam, e a proporção de massa muscular para gordura diminui. Nas mulheres, os baixos níveis plasmáticos de testosterona circu- lante são associados à libido diminuída, cansaço inexplicável, falta total de bem-estar, e uma perda de densidade mineral óssea nas mulheres pós- menopáusicas. Clinicamente, a principal aplicação da terapia com androgê- nio é no tratamento de hipogonadismo em homens. Significativamente, a terapia de reposição de androgênio em homens hipogonádicos também mostrou diminuir a reabsorção óssea e aumentar a massa óssea. Outras indicações para as quais androgênios vêm sendo clinicamente usados inclu- em o tratamento de puberdade atrasada em meninos, anemia, osteoporose primária, e doenças com atrofia muscular. Além disso, a terapia de reposição de androgênio vem sendo recentemente usada em homens envelhecendo e para a regulação da fertilidade masculina. Em mulheres, a terapia com an- drogênio vem sendo usada clinicamente para o tratamento de disfunção se- xual ou Iibido reduzida.

No entanto, a terapia com androgênio apresenta limitações. Por exemplo, efeitos colaterais indesejados da terapia com androgênio esteroidal incluem estimulação do crescimento da próstata e vesículas seminais. Além disso, estimulação de tumores de próstata e elevações em antígeno especí- fico para próstata (PSA) (uma indicação de risco de câncer de próstata au- mentado) foram associados ao uso de androgênios. Ademais, foi descoberto que preparações de androgênios esteroidais não modificados e modificados experimentam degradação rápida no fígado levando à pobre biodisponibili- dade oral e curta duração de atividade subsequente à administração paren- teral, variações nos níveis plasmáticos, hepatotoxicidade, ou reatividade cru- zada com outros receptores de hormônios esteroides (por exemplo, o recep- tor de glicocorticóides (GR), o receptor de mineralocorticóides (MR), e o o receptor de progesterona (PR)). Além disso, nas mulheres, o uso de andro- gênios esteroidais pode levar ao hirsutismo ou à virilização.

Por conseguinte, permanece na técnica a necessidade de alter- nativas para a terapia com androgênio esteroidal que possuam as proprie- dades farmacológicas benéficas dos androgênios esteroidais, porém com uma probabilidade ou incidência reduzida das limitações típicas associadas à terapia com androgênio esteroidal. Os recentes esforços para identificar substitutos adequados para os androgênios esteroidais concentraram-se em identificar moduladores de receptores de androgênio seletivos para tecidos (SARMs) que apresentam um perfil de atividade diferenciado em tecidos an- drogênicos. Em particular, tais agentes de preferência apresentam atividade agonista para androgênio em tecidos anabólicos tais como músculo ou osso, mas ainda são agonistas apenas parciais ou mesmo antagonistas em outros tecidos androgênicos tais como a próstata ou as vesículas seminais.

Portanto, constitui um objetivo da presente invenção oferecer Iigandos de AR não-esteroidais que possuam atividade agonista para andro- gênios. Mais particularmente, constitui um objetivo oferecer agonistas não- esteroidais para androgênio que se ligam ao AR com maior afinidade em relação aos outros receptores de hormônios esteroides. Ainda mais particu- larmente, constitui um objetivo oferecer moduladores de receptores de an- drogênio seletivos para tecidos (SARMs) que apresentam atividade agonista para androgênio nos músculos ou ossos, porém atividade agonista apenas parcial, atividade antagonista parcial ou atividade antagonista em tecidos androgênicos tais como a próstata ou as vesículas seminais.

As referências a seguir oferecem exemplos do atual estado da técnica referente à presente invenção:

Brown, Endocrinologyi2004); 145(12): 5417-5419 oferece uma recapitulação de moduladores de receptores de androgênio seletivos não- esteroidais.

Cadilla et ai, Curr. Top. Med. Chem (2006); 6(3): 245-270 ofere- ce uma recapitulação de moduladores de receptores de androgênio.

Segai et a/., Expert Opin. Investig. Drugs (2006); 15(4); 377-387 oferece uma recapitulação de moduladores de receptores de androgênio.

O Pedido Internacional Copendente PCT/US2006/024122 apre- senta compostos à base de tetra-hidrocarbazol como moduladores de recep- tores de androgênio. Sumário da Invenção A presente invenção refere-se à descoberta de que certos com-

postos à base de tetra-hidrociclopenta[b]indol, definidos pela fórmula (I) a- baixo, possuem perfis de atividade particulares que sugerem que eles são úteis no tratamento de distúrbios sensíveis à terapia com androgênio este- roidal. Por conseguinte, a presente invenção oferece um composto de fórmu- la (I):

C-N^

n" ^ I

CH,

If

Fórmula (I)

em que, R/S;

o centro de carbono "C*" pode estar na configuração R, S ou

R1 representa ciano, -CH=NOCH3, -OCHF2, ou -OCF3; R2 representa -COR2a ou -SO2R2b;

R2a representa (CrC4)alquila, (Ci-C4)alcóxi, ciclopropila, ou -

NRaRb;

R2b representa (CrC4)alquila, ciclopropila, ou -NRaRb; Ra e Rb cada um independentemente representam em cada o- corrência H ou (Ci-C4)alquil; e

R3 representa um grupo heteroarila selecionado do grupo que consiste em piridinila, pirimidinila, pirazinila, piridazinila, tiazolila, isotiazolila, e tiadiazolila, cada um deles sendo opcionalmente substituído com 1 ou 2 substituintes independentemente selecionados do grupo que consiste em metila, etila, bromo, cloro, flúor, -CHF2, -CF3, hidróxi, amino, e -NHCH2CO2H, ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo. Em uma outra modalidade, a presente invenção oferece um mé-

todo para o tratamento de hipogonadismo, densidade ou massa óssea redu- zida, osteoporose, osteopenia, massa ou força muscular reduzida, sarcope- nia, declínio funcional associado à idade, puberdade atrasada em meninos, anemia, disfunção sexual masculina ou feminina, disfunção erétila, Iibido reduzida, depressão, ou letargia, que compreende administrar a um paciente com necessidade do mesmo uma quantidade eficaz de um composto de fórmula (I), ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo. Como um aspecto mais particular, a presente invenção oferece um método para trata- mento de densidade ou massa óssea reduzida, osteoporose, osteopenia, or massa ou força muscular reduzida.

Além disso, a presente invenção oferece o uso de um composto de fórmula (I), ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, como um agente para o tratamento de hipogonadismo, densidade ou massa óssea reduzida, osteoporose, osteopenia, massa ou força muscular reduzida, sar- copenia, declínio funcional associado à idade, puberdade atrasada em me- ninos, anemia, disfunção sexual masculina ou feminina, disfunção erétila, Iibido reduzida, depressão, ou letargia. Mais particularmente, a invenção ofe- rece o uso de um composto de fórmula (I), ou um sal farmaceuticamente a- ceitável do mesmo, como um agente para o tratamento de densidade ou massa óssea reduzida, osteoporose, osteopenia, ou massa ou força muscu- lar reduzida. Além disso, a presente invenção oferece um composto de fór- mula (I), ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, para uso em terapia.

Em uma outra modalidade, a presente invenção oferece o uso de um composto de fórmula (I), ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo para a produção de um medicamento para o tratamento de hipogo- nadismo, densidade ou massa óssea reduzida, osteoporose, osteopenia, massa ou força muscular reduzida, sarcopenia, declínio funcional associado à idade, puberdade atrasada em meninos, anemia, disfunção sexual mascu- lina ou feminina, disfunção erétila, Iibido reduzida, depressão, ou letargia. Mais particularmente, a presente invenção oferece o uso de um composto de fórmula (I) para a produção de um medicamento para o tratamento de densi- dade ou massa óssea reduzida, osteoporose, osteopenia, ou massa ou força

muscular reduzida.

Além disso, a presente invenção oferece uma composição far- macêutica compreendendo um composto de fórmula (I), ou um sal farmaceu- ticamente aceitável do mesmo, em combinação com um ou mais veículos, diluentes, ou excipientes farmaceuticamente aceitáveis. Mais particularmen- te, a presente invenção oferece uma composição farmacêutica para o trata- mento de densidade ou massa óssea reduzida, osteoporose, osteopenia, ou massa ou força muscular reduzida, compreendendo um composto de fórmu- la (I), ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, em combinação com um ou mais veículos, diluentes ou excipientes farmaceuticamente acei- táveis.

A presente invenção também abrange novos intermediários e

processos úteis para a síntese de um composto de fórmula (I). Descrição Detalhada da Invenção

A presente invenção refere-se a novos compostos à base de tetra-hidro-ciclopentaindol, dados pela fórmula (I) neste relatório. Como comprovado por testes in vitro e in vivo, os compostos de fórmula (I) exem- plificados possuem perfis de atividade que sugerem que eles têm utilidade no tratamento de distúrbios sensíveis à terapia com androgênio esteroidal. Em particular, os compostos de fórmula (I) exemplificados são Iigandos de AR potentes que agonizam o receptor de androgênio. Além disso, os com- postos de fórmula (I) exemplificados ligam-se seletivamente ao Ar em rela- ção a cada um de MR, GR, e PR.

Acredita-se que o composto de fórmula (I), ou um sal farmaceu- ticamente aceitável do mesmo, é útil no tratamento de distúrbios tipicamente tratados com terapia com androgênio. Portanto, métodos para o tratamento de distúrbios sensíveis à terapia com androgênio constituem uma modalida- de importante da presente invenção. Tais distúrbios incluem hipogonadismo, densidade ou massa óssea reduzida, osteoporose, osteopenia, massa ou força muscular reduzida, sarcopenia, declínio funcional associado à idade, puberdade atrasada em meninos, anemia, disfunção sexual masculina ou feminina, disfunção erétila, Iibido reduzida, depressão, e letargia. Distúrbios mais particulares para os quais se acredita que os compostos de fórmula (I) são úteis incluem densidade ou massa óssea reduzida, osteoporose, osteo- penia, ou massa ou força muscular reduzida.

A presente invenção também se refere a solvatos do composto de fórmula (I) ou sais farmaceuticamente aceitáveis dos compostos de fór- mula (I). Assim sendo, quando usado nesta invenção o termo "fórmula (I)", ou qualquer compostos de fórmula (I) particular, inclui em seu significado qualquer sal farmaceuticamente aceitável e qualquer solvato do composto ou do sal farmaceuticamente aceitável do mesmo. Exemplos de sais farma- ceuticamente aceitáveis e métodos para sua preparação são bastante co- nhecidos pelos especialistas na técnica. Vide, por exemplo, Stahl et ai, "Handbook of Pharmaceutical Salts: Properties, Selection and Use," VCHA/WiIey-VCH, (2002); Gould, P.L., "Salt selection for basic drugs," Inter- national Journal of Pharmaceutics1 33: 201-217 (1986); Berge et ai, "Phar- maceutical Salts," Journal of Pharmaceutical Sciences, 66, No. 1, (Janeiro 1977); e Bastin et ai "Salt Selection and Optimization Procedures for Phar- maceutical New Chemical Entities," Organic Process Research and Devel- opment, 4: 427-435 (2000).

Os compostos da presente invenção têm um ou mais centros quirais e podem, portanto, existir em várias configurações estereoisoméri- cas. Como uma conseqüência desses centros quirais os compostos da pre- sente invenção podem ocorrer como racematos, misturas de enantiômeros, e como enantiômeros individuais assim como diastereômeros e misturas de diastereômeros. Exceto quando especificado neste relatório, todos os race- matos, enantiômeros, e diastereômeros estão dentro do escopo da presente invenção. Os enantiômeros dos compostos fornecidos pela presente inven- ção podem ser resolvidos, por exemplo, pelo especialista na técnica usando técnicas tradicionais tais como aquelas descritas por J. Jacques, et ai, Έ- nantiomers, Racemates1 and Resolutions", John Wiley & Sons, Inc., 1981, assim como as técnicas oferecidas nos Esquemas e Exemplos constantes neste relatório.

Os termos "R" e "S" são usados neste relatório da maneira co-

mumente usada em química orgânica para indicar as configurações especí- ficas de um centro quiral, os termos "(±)" ou "RS" referem-se a uma configu- ração de um centro quiral compreendendo um racemato. Uma lista parcial de prioridade e uma discussão da estereoquímica está contida em "Nomen- clature of Organic Compounds: Principies and Practice", (J.H. Fletcher, et ai, eds., 1974).

Os estereoisômeros e enantiômeros específicos dos compostos de fórmula I podem ser preparados pelo especialista na técnica utilizando técnicas e processos bastante conhecidos, tais como aqueles descritos por Eliel & Wilen, "Stereochemistry of Organic Compounds", John Wiley & Sons, Inc., 1994, Capítulo 7; Separation of Stereoisomers, Resolution, Racemizati- on; e por Collet & Wilen, "Enantiomers, Racemates, and Resolutions", John Wiley & Sons, Inc., 1981. Por exemplo, estereoisômeros e enantiômeros es- pecíficos podem ser preparados por sínteses estereoespecíficas usando ma- teriais de partida enantiomericamente e geometricamente puros, ou materi- ais de partida enantiomericamente ou geometricamente enriquecidos. Além disso, os estereoisômeros e enantiômeros específicos podem ser resolvidos e recuperados por técnicas tais como cromatografia em fases estacionárias quirais, resolução enzimática ou recristalização fracionada dos sais de adi- ção formados pelos reagentes usados para aquela finalidade.

Conforme usado neste relatório o termo "(Ci-C4)alquila" refere- se a uma cadeia alifática, saturada, monovalente, reta ou ramificada, de 1 a 4 átomos de carbono.

Conforme usado neste relatório, o termo "(CrC^alcóxi" refere- se a um átomo de oxigênio contendo uma cadeia alifática, saturada, mono- valente, reta ou ramificada, de 1 a 4 átomos de carbono. Conforme usado neste relatório, os termos "halo", "halogeneto",

ou "Hal" refere-se um átomo de cloro, bromo, iodo ou flúor, a menos que de outra forma especificado.

Como será observado pelo especialista na técnica, algumas das porções heteroaril dos compostos de fórmula (I) podem existir como i- sômeros posicionais e como formas tautoméricas. A presente invenção con- templa todos os isômeros posicionais, formas tautoméricas individuais, as- sim como qualquer combinação dos mesmos nos nomes das porções hete- roaril dos compostos de fórmula I.

A designação " ■ " refere-se a uma ligação que se projeta para a frente e fora do plano da ppina.

A designação " .......... " refere-se a uma ligação que se projeta

para trás e fora do plano da ppina. A designação " "refere-se a uma ligação que existe como uma mistura de ligações que se projetam para a frente e para trás e fora do plano da ppina.

Como observado pelo especialista na técnica, distúrbios fisioló- gicos podem ser estar presentes como uma condição "crônica", ou como um episódio "agudo". O termo "crônica", conforme usado neste relatório, signifi- ca uma condição de progresso lento e longa duração. Assim sendo, uma condição crônica é tratada quando ela é diagnosticada e o tratamento conti- nuado durante o curso da doença. Ao contrário, o termo "aguda" significa um evento ou crise exacerbada, de curta duração, seguida de um período de remissão. Portanto, o tratamento de distúrbios contempla tanto eventos agu- dos como condições crônicas. Em um evento agudo, o composto é adminis- trado no aparecimento dos sintomas e descontinuado quando os sintomas desaparecem. Como descrito acima, uma condição crônica é tratada durante todo o curso da doença.

Conforme usado neste relatório o termo "paciente" refere-se a um mamífero humano ou não humano tal como cachorro, gato, vaca, maca- co, cavalo, porco, ou carneiro. Deve ficar entendido, no entanto, que um pa- ciente particular ao qual um composto de fórmula (I), ou um sal farmaceuti- camente aceitável do mesmo, pode ser administrado é um ser humano.

O termo "tratando" (ou "tratar" ou "tratamento") conforme usado neste relatório inclui proibir, prevenir, restringir, retardar, interromper, ou re- verter a evolução ou a severidade de um sintoma ou distúrbio. Assim sendo, os métodos desta invenção abrangem uso tanto terapêutico quanto profiláti- co.

Os compostos da presente invenção podem ser formulados co- mo parte de uma composição farmacêutica. Assim sendo, uma composição farmacêutica compreendendo um composto de fórmula (I), ou um sal farma- ceuticamente aceitável do mesmo, em combinação com um veículo, diluente ou excipiente farmaceuticamente aceitável constitui uma modalidade impor- tante da invenção. Exemplos de composições farmacêuticas e métodos para sua preparação são bastante conhecidos na literatura. Vide, por exemplo, REMINGTON: THE SCIENCE AND PRACTICE OF PHARMACY (A. Gen- naro, et ai, eds., 19th ed., Mack Publishing (1995)). Composições ilustrativos compreendendo compostos de fórmula (I) incluem, por exemplo: um com- posto de fórmula (I) em suspensão com carboximetil celulose sódica a 1%, polissorbato 80 a 0,25%, e Antifoam 1510™ a 0,05% (Dow Corning); e um composto de fórmula (I) em suspensão com metilcelulose a 0,5%, Iauril sul- fato de sódio a 0,5%, e a Antifoam 1510 0,1% em HCI 0,01 N (pH final cerca de 2,5-3). Uma composição preferida da presente invenção compreende um composto de fórmula (I), ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, formulado em uma cápsula ou comprimido. Um composto de fórmula (I), ou uma composição compreendendo um composto de fórmula (I) pode ser ad- ministrado por qualquer via que torne o composto biodisponível, incluindo as vias oral e parenteral.

O especialista na técnica vai perceber que o tamanho de partícu- Ia pode afetar a dissolução in vivo de um agente farmacêutico que, por sua vez, pode afetar a absorção do agente. "Tamanho de partícula" conforme usado neste relatório, refere-se ao diâmetro de uma partícula de um agente farmacêutico determinado por técnicas convencionais tais como espalha- mento de luz laser, difração de laser, espalhamento Mie, fracionamento por fluxo, campo e sedimentação, espectroscopia de fótons, entre outras. Onde os agentes farmacêuticos têm uma solubilidade pobre, partículas de tama- nho pequeno ou reduzido podem ajudar a dissolução e, por conseguinte, aumentar a absorção do agente. Amidon et aí., Pharm. Research, 12; 413- 420 (1995). Métodos para reduzir ou controlar o tamanho de partícula são convencionais e incluem moagem, trituração por via úmida, micronização, entre outras. Um outro método para controlar o tamanho de partícula envol- ve preparar o agente farmacêutico em uma nanossuspensão. Uma modali- dade particular da presente invenção compreende um composto de fórmula (I), ou uma composição farmacêutica compreendendo um composto de fór- mula (I), onde o referido composto tem um tamanho de partícula médio infe- rior a cerca de 20 μηι ou um tamanho de partícula d90 (isto é, o tamanho máximo de 90% das partículas) inferior a cerca de 50 μηι. Uma modalidade mais particular compreende um composto de fórmula I tendo um tamanho de partícula médio inferior a cerca de 10 μηπ ou um tamanho de partícula d90 inferior a cerca de 30 μηη.

Conforme usado neste relatório o termo "quantidade eficaz" refe- re-se à quantidade ou dose de um composto de fórmula (I) que, mediante a administração de uma dose ou de várias doses a um paciente, proporciona o efeito desejado no paciente sob diagnóstico ou tratamento. Uma quantidade eficaz pode ser facilmente determinada pelo médico de diagnóstico assisten- te, como especialista na técnica, considerando inúmeros fatores tais como a espécie de mamífero; seu tamanho, idade, e estado geral de saúde; a doen- ça específica envolvida; o grau ou severidade da doença; a resposta do pa- ciente individual; o composto particular administrado; o modo de administra- ção; as características de biodisponibilidade da preparação administrada; o regime de dose selecionado; e o uso de quaisquer medicamentos concomi- tantes.

Quando usados em conjunto com os métodos e usos da presen- te invenção, os compostos e as composições da presente invenção podem ser administrados isolados, ou em combinação com agentes terapêuticos convencionais usados para tratar o distúrbio ou condição particular. Onde os compostos ou as composições da presente invenção são usados como parte de uma combinação, o composto ou a composição compreendendo a fórmu- la (I) podem ser administrado separadamente ou como parte de uma formu- lação compreendendo o agente terapêutico com o qual ele deve ser combi- nado.

Terapia combinada para perda óssea, osteoporose. ou osteopenia:

Agentes terapêuticos convencionais para o tratamento de osteo- porose podem ser vantajosamente combinados com os compostos de fórmu- la (I), ou com composições compreendendo um composto de fórmula (I). Agentes convencionais para o tratamento de osteoporose incluem terapias de reposição hormonal tais como estrogênio eqüino conjugado (Premarin™), estrogênio sintético conjugado (Cenestin™), estrogênio esterificado (Estra- tab™ ou Menest™), estropiato (Ogen™ ou Ortho-est™); assim como prepa- rações transdérmicas de estradiol tais como Alora™, Climara™, Estra- derm™, e Vivelle™. Formulações de estrogênio-progestina combinados tam- bém se encontram disponíveis para o tratamento de osteoporose incluindo Prempro™ (estrogênio eqüino e acetato de medroxiprogesterona conjuga- dos), Premphase™ (estrogênio eqüino e norgestimato conjugados), Ortho- Prefest™ (estradiol e norgestimato), Femhrt™ (etinil estradiol e acetato de noretindrona), e Combipatch™ (estradiol e acetato de noretindrona trans- dérmicos). Outros tratamentos convencionais para osteoporose que podem ser combinados com os compostos ou as composições da presente inven- ção incluem bisfosfonatos tais como alendronato (Fosamax™), risedronato (Actonel™), e pamidronato (Aredia™); moduladores seletivos de receptores de estrogênio (SERMs) tais como raloxifeno (Evista™); calcitonina (Calci- mar™ ou Miacalcin™); hormônio paratireóideo (Forteo™); cálcio; Vitamina D; diuréticos (para reduzir a excreção de Ca2+); fluoreto; e androgênios (por exemplo testosterona ou 5a-di-hidrotestosterona).

Portanto, uma formulação para terapia combinada no tratamento da osteoporose compreende:

Componente (A1): um composto de fórmula (I); Componente (A2): um ou mais co-agentes que são convencio- nais para o tratamento de osteoporose selecionados do grupo que consiste em Premarin™, Cenestin™, Estratab™, Menest™, Ogen™, Ortho-est™, Alo- ra™, Climara™, Estraderm™, Vivelle™, Prempro™, Premphase™, Ortho- Prefest™, Femhrt™, Combipatch™, Fosamax™), Actonel™, Aredia™); Evis- ta™; Calcimar™, Miacalcin™, Forteo™, cálcio, Vitamina D, diuréticos, fluore- to, testosterona, e 5a-di-hidrotestosterona; e opcionalmente

Componente (A3): um veículo, diluente ou excipiente farmaceu- ticamente aceitável.

Aspectos Particulares da Invenção

A lista a seguir relaciona vários grupamentos de substituintes particulares e variáveis particulares para os compostos de fórmula (I). Ficará entendido que os compostos de fórmula (I) tendo tais substituintes ou variá- veis particulares, assim como métodos e usos que empregam tais compos- tos, representam aspectos particulares da presente invenção.

Portanto, um aspecto particular da presente invenção é um

2 3

composto onde o composto de fórmula (I) é um composto onde ReR têm qualquer um dos valores definidos neste relatório, e: (a) R1 representa ciano, -CH=NOCH3, ou -OCF3; ou

(b) R1 representa ciano ou -CH=NOCH3; ou

(c) R1 representa ciano; ou

(d) R1 representa -CH=NOCH3.

Aspectos particulares adicionais da presente invenção são um

1 3

composto onde o composto de fórmula (I) é um composto onde ReR têm qualquer um dos valores definidos neste relatório, e:

(a) R2 representa -COR2a ou -SO2R2b onde R2a representa (Ci- C4)alquila, (Ci-C4)alcóxi, ciclopropila, ou -N(CH3)2 e R2b representa (Ci- C4)alquila, ciclopropila, -N(CH3)2 ou -N(C2H5)2; ou (b) R2 representa -COR2a ou -SO2R2b onde R2a representa etila,

isopropila, metóxi, etóxi, propóxi, isopropóxi, isobutóxi, ter-butóxi, ciclopropi- la, ou -N(CH3)2 e R2b representa metila, etila, propila, ciclopropila, -N(CH3)2 ou -N(C2H5)2; ou

(c) R2 representa -COR2a, onde R2a representa etila, isopropila, metóxi, etóxi, propóxi, isopropóxi, isobutóxi, ter-butóxi, ciclopropila, ou -

N(CH3)2; ou

(d) R2 representa -COR2a, onde R2a representa isopropila, etóxi,

isopropóxi, ou ciclopropil; ou

(e) R2 representa -COR2a, onde R2a representa isopropóxi; ou

(f) R2 representa -SO2R2b, onde R2b representa metila, etila, pro-

pila, ciclopropila, -N(CH3)2 ou -N(C2H5)2; ou

(g) R2 representa -SO2R2b, onde R2b representa ciclopropil ou -

N(CH3)2; ou

(h) R2 representa -SO2R2b, onde R2b representa -N(CH3)2.

Aspectos particulares adicionais da presente invenção são um

composto onde o composto de fórmula (I) é um composto onde R1 e R3 têm qualquer um dos valores definidos neste relatório, e: (a) R2 representa -COR2a e o centro de carbono "C*" está na configuração S; ou

(b) R2 representa -SO2R2b e o centro de carbono "C*" está na configuração R

Aspectos particulares adicionais da presente invenção são um

composto onde o composto de fórmula (I) é um composto onde R1 e R2 têm qualquer um dos valores definidos neste relatório, e:

(a) R3 representa um grupo heteroarila selecionado do grupo que consiste em piridinila, pirimidinila, pirazinila, piridazinila, tiazolila, isotiazolila,

e tiadiazolila, cada um deles sendo opcionalmente substituído com 1 ou 2 substituintes independentemente selecionados do grupo que consiste em metila, bromo, cloro, flúor, -CHF2, hidróxi, amino, e -NHCH2CO2H; ou

(b) R3 representa 6-flúor-piridin-2-ila, piridin-2-ila, 3-hidróxi- piridin-2-ila, 6-difluorometil-piridin-2-ila, 2-amino-piridin-3-ila, 2-

carboximetilamino-piridin-3-ila, pirimidin-4-ila, pirimidin-2-ila, 2-cloro- pirimidin-4-ila, tiazol-4-ila, 2-metil-tiazol-4-ila, 2-cloro-tiazol-4-ila, tiazol-2-ila, tiazol-5-ila, 4-Amino-tiazol-5-ila, pirazin-2-ila, 5-metil-pirazin-2-ila, 3-cloro- pirazin-2-ila, 6-metil-pirazin-2-ila, 3-amino-pirazin-2-ila, 3-metil-pirazin-2-ila, piridazin-3-ila, 5-bromo-isotiazol-3-ila, isotiazol-3-ila, 4,5-dicloro-isotiazol-3-

ila, ou [1,2,5]tiadiazol-3-il;

(c) R3 representa 6-flúor-piridin-2-ila, piridin-2-ila, 3-hidróxi- piridin-2-ila, 6-difluorometil-piridin-2-ila, 2-amino-piridin-3-ila, 2- carboximetilamino-piridin-3-ila, tiazol-4-ila, 2-metil-tiazol-4-ila, 2-cloro-tiazol- 4-ila, tiazol-2-ila, tiazol-5-ila, 4-amino-tiazol-5-ila, pirazin-2-ila, 5-metil-pirazin-

2-ila, 3-cloro-pirazin-2-ila, 6-metil-pirazin-2-ila, 3-amino-pirazin-2-ila, ou 3-

metil-pirazin-2-il;

(d) R3 representa 6-flúor-piridin-2-ila, piridin-2-ila, 2-amino-piridin-

3-ila, tiazol-5-ila, ou 4-amino-tiazol-5-il; ou

(e) R3 representa piridin-2-ila, 2-amino-piridin-3-ila, tiazol-5-ila,

ou 4-amino-tiazol-5-il.

Um aspecto mais particular da presente invenção é um compos- to onde o composto de fórmula (I), é um composto onde, o centro de carbono "C*" está na configuração S quando R2 re- presenta -COR2a and na configuração R quando R2 representa -SO2R2b; R1 representa ciano ou -CH=NOCH3;

R2 representa -COR2a ou -SO2R2b onde R2a representa (Ci- C4)alquila, (CrC4)alcóxi, ciclopropila, ou -N(CH3)2 e R2b representa (Ci- C4)alquila, ciclopropila, -N(CH3)2 ou -N(C2H5)2; e

R3 representa um grupo heteroaril selecionado do grupo que consiste em piridinila, pirimidinila, pirazinila, piridazinila, tiazolila, isotiazolila, e tiadiazolila, cada um deles sendo opcionalmente substituído com 1 ou 2 substituintes independentemente selecionados do grupo que consiste em metila, bromo, cloro, flúor, -CHF2, hidróxi, amino, and -NHCH2CO2H;

Um aspecto ainda mais particular da presente invenção é um composto onde o composto de fórmula (I), é um composto onde,

o centro de carbono "C*" está na configuração S quando R2 re- presenta -COR2a and na configuração R quando R2 representa -SO2R2b; R1 representa ciano ou -CH=NOCH3;

R2 representa -COR2a ou -SO2R2b onde R2a representa etila, iso- propila, metóxi, etóxi, propóxi, isopropóxi, isobutóxi, ter-butóxi, ciclopropila, ou -N(CH3)2 e R2b representa metila, etila, propila, ciclopropila, -N(CH3)2 ou -N(C2H5)2; e

R3 representa 6-flúor-piridin-2-ila, piridin-2-ila, 3-hidróxi-piridin-2- ila, 6-difluorometil-piridin-2-ila, 2-amino-piridin-3-ila, 2-carboximetilamino- piridin-3-ila, pirimidin-4-ila, pirimidin-2-ila, 2-cloro-pirimidin-4-ila, tiazol-4-ila, 2-metil-tiazol-4-ila, 2-cloro-tiazol-4-ila, tiazol-2-ila, tiazol-5-ila, 4-amino-tiazol- 5-ila, pirazin-2-ila, 5-metil-pirazin-2-ila, 3-cloro-pirazin-2-ila, 6-metil-pirazin-2- ila, 3-amino-pirazin-2-ila, 3-metil-pirazin-2-ila, piridazin-3-ila, 5-bromo- isotiazol-3-ila, isotiazol-3-ila, 4,5-dicloro-isotiazol-3-ila, ou [1,2,5]tiadiazol-3- ila;

Um aspecto ainda mais particular da presente invenção é um composto onde o composto de fórmula (I), é um composto onde,

o centro de carbono "C*" está na configuração S quando R2 re- presenta -COR2a and na configuração R quando R2 representa -SO2R2b; R1 representa ciano;

R2 representa -COR2a ou -SO2R2b onde R2a representa isopropi- Ia1 etóxi, isopropóxi, ou ciclopropil; e R2b representa ciclopropil ou -N(CH3)2; e

R3 representa 6-flúor-piridin-2-ila, piridin-2-ila, 2-amino-piridin-3-

ila, tiazol-5-ila, ou 4-amino-tiazol-5-il.

Um aspecto ainda mais particular da presente invenção é um composto onde o composto de fórmula (I), é um composto onde,

o centro de carbono "C*" está na configuração S quando R2 re- presenta -COR2a and na configuração R quando R2 representa -SO2R2b;

R1 representa ciano;

R2 representa -COR2a ou -SO2R2b onde R2a representa isopropó- xi e R2b representa -N(CH3)2; e

R3 representa piridin-2-ila, 2-amino-piridin-3-ila, tiazol-5-ila, ou 4-

amino-tiazol-5-ila.

Aspectos particulares adicionais da presente invenção são ofe- recidos pelos compostos de fórmula l(a) e fórmula l(b) abaixo. Ficará enten- dido que os compostos de fórmula l(a) e fórmula l(b), assim como métodos e usos que empregam tais compostos, representam outros aspectos particula- res da presente invenção.

Portanto, um aspecto particular da presente invenção é ofereci- do pela fórmula l(a)

IiIN H

N'

I

CH3 k

Fórmula l(a)

em que,

R1 representa ciano, -CH=NOCH3, ou -OCF3; R2a representa (CrC4)alquila, (CrC4)alcóxi, ciclopropila, ou -

N(CH3)2; e

R3 representa um grupo heteroaril selecionado do grupo que consiste em piridinila, pirimidinila, pirazinila, piridazinila, tiazolila, isotiazolila, e tiadiazolila, cada um deles sendo opcionalmente substituído com 1 ou 2 substituintes independentemente selecionados do grupo que consiste em metila, bromo, cloro, flúor, -CHF2, hidróxi, amino, e -NHCH2CO2H.

Ainda mais particular é um composto de fórmula l(a), onde

R1 representa ciano ou -CH=NOCH3;

R2a representa etila, isopropila, metóxi, etóxi, propóxi, isopropóxi, isobutóxi, ter-butóxi, ciclopropila, ou -N(CH3)2; e

R3 representa 6-flúor-piridin-2-ila, piridin-2-ila, 3-hidróxi-piridin-2- ila, 6-difluorometil-piridin-2-ila, 2-amino-piridin-3-ila, 2-carboximetilamino- piridin-3-ila, pirimidín-4-ila, pirimidin-2-ila, 2-cloro-pirimidin-4-ila, tiazol-4-ila, 2-metil-tiazol-4-ila, 2-cloro-tiazol-4-ila, tiazol-2-ila, tiazol-5-ila, 4-amino-tiazol- 5-ila, pirazin-2-ila, 5-metil-pirazin-2-ila, 3-cloro-pirazin-2-ila, 6-metil-pirazin-2- ila, 3-amino-pirazin-2-ila, 3-metil-pirazin-2-ila, piridazin-3-ila, 5-bromo- isotiazol-3-ila, isotiazol-3-ila, 4,5-dicloro-isotiazol-3-ila, ou [1,2,5]tiadiazol-3- ila.

Um outro aspecto particular é oferecido pela fórmula l(a), onde

R1 representa ciano;

R2a representa isopropila, isopropóxi, etóxi, ou ciclopropil; e R3 representa 6-flúor-piridin-2-ila, piridin-2-ila, 2-amino-piridin-3-

ila, tiazol-5-ila, ou 4-amino-tiazol-5-il.

Como mencionado, um outro aspecto particular da presente in- venção é oferecido pela fórmula l(b)

- - Xr

IN O

N'

I

CH7

U

R

•R

.2b

Fórmula l(b>)

em que,

R1 representa ciano ou -CH=NOCH3;

R2b representa (Ci-C4)alquila, ciclopropila, -N(CH3)2 ou

N(C2H5)2; e R3 representa um grupo heteroaril selecionado do grupo que consiste em piridinila, pirimidinila, pirazinila, piridazinila, tiazolila, isotiazolila, and tiadiazolila, cada um deles sendo opcionalmente substituído com 1 ou 2 substituintes independentemente selecionados do grupo que consiste em metila, bromo, cloro, flúor, -CHF2, hidróxi, amino, e -NHCH2CO2H.

Ainda mais particular é um composto de fórmula l(b), onde R1 representa ciano ou -CH=NOCH3;

R2b representa metila, etila, propila, ciclopropila, -N(CH3)2 ou -

N(C2H5)2; e

R3 representa isotiazol-3-ila, 6-flúor-piridin-2-ila, piridin-2-ila, 2-

amino-piridin-3-ila, pirazin-2-ila, tiazol-4-ila, tiazol-2-ila, tiazol-5-ila, 4-amino- tiazol-5-ila, ou [1,2,5]tiadiazol-3-ila.

Um outro aspecto particular é oferecido pela fórmula l(b), onde R1 representa ciano; R2b representa ciclopropil ou -N(CH3)2; e

R3 representa tiazol-4-ila, tiazol-2-ila, tiazol-5-ila, ou 4-amino-

tiazol-5-ila.

Além disso, ficará entendido que um aspecto mais particular da presente invenção é oferecido pelos compostos de fórmula (I) oferecidos neste relatório, mais particularmente o composto éster isopropílico do ácido

(S)-(7-ciano-4-piridin-2-ilmetil-1,2,3,4-tetra-hidro-ciclopenta[ò]indol-2-il)- carbâmico; éster isopropílico do ácido (S)-(7-ciano-4-tiazol-5-ilmetil-1,2,3,4- tetra-hidro-ciclopenta[b]indol-2-il)-carbâmico; éster isopropílico do ácido (S)-

[4-(2-amino-piridin-3-ilmetil)-7-ciano-1,2,3,4-tetra-hidro-ciclopenta[ò]indol-2-

il]-carbâmico; (f?)-N'-[4-(4-amino-tiazol-5-ilmetil)-7-ciano-1,2,3,4-tetra-hidro- ciclopenta[ò]indol-2-il]-N,N-dimetilsulfamida; ou éster isopropílico do ácido

(S)-[4-(4-amino-tiazol-5-ilmetil)-7-ciano-1,2,3,4-tetra-hidro-ciclopenta[fe]indol-

2-il]-carbâmico.

Os compostos da presente invenção podem ser preparados quimicamente, por exemplo, seguindo os caminhos de síntese apresentados nos Esquemas, Intermediários, e Exemplos abaixo. Entretanto, a discussão a seguir não pretende ser Iimitativa do escopo da presente invenção de for- ma alguma. Por exemplo, as etapas de síntese específicas para cada um dos caminhos descritos podem ser combinadas de diferentes maneiras, ou junto com etapas de esquemas diferentes, para preparar compostos de fór- mula (I) adicionais.

Os substituintes, a menos que de outra forma indicado, são co-

mo anteriormente definidos. Os reagentes e os materiais de partida encon- tram-se facilmente disponíveis para o especialista na técnica. Outros reagen- tes e materiais de partida necessários podem ser feitos por procedimentos que são selecionados de técnicas tradicionais da química orgânica e hetero- cíclica, técnicas que são análogas às sínteses de compostos estruturalmente semelhantes, e dos procedimentos descritos nos Exemplos abaixo, inclusive quaisquer procedimentos novos.

Esquema I O

P- °

,X .alquila EtapaA EtapaB ^

(1) (2)

JL^H Etapa C R3-^l-I _^ (XrepresentahaIo)

(4) <5)

Step E

Etapa D

(3)

H

(7)

O Esquema I descreve métodos para fazer R3-CH2-X ou R3-CH2- OMs, para serem usados em subsequentes alquilações de compostos à ba- se de tetra-hidrociclopenta[b]indol.

No esquema I, Etapa A, o álcool de fórmula (2) é obtido por re- dução de um éster de fórmula (1). O éster é obtido, se necessário, a partir do ácido carboxílico via o cloreto de ácido usando métodos bastante conheci- dos na literatura, tais como com cloreto de oxalila. Numerosos métodos para reduzir ésteres carboxílicos para álcoois são bastante conhecidos pelos es- pecialistas na técnica e podem ser encontrados no texto de R.C. Larock em "Comprehensive Organic Transformations", VCH Publishers, 1989, pp. 549 - 551. O método preferido é redução com borohidreto de lítio em um solvente aprótico tal como tetra-hidrofurano a uma temperatura que varia da tempera- tura ambiente até a temperatura de refluxo por cerca de 1 a 48 horas.

No esquema I, Etapa B1 um álcool de fórmula (2) é convertido

em um éster de ácido metanossulfônico de fórmula (3). O álcool é combina- do com uma base orgânica tal como trietilamina ou di-isopropiletilamina e tratado com cloreto de metanossulfonila em um solvente inerte tal como di- clorometano. A reação é mantida a uma temperatura de O0C à temperatura ambiente por um tempo de 15 minutos a 4 horas. O produto é isolado por técnicas extrativas conhecidas pelo especialista na técnica.

No esquema I, Etapa C1 um composto de fórmula (4), onde R3 é heteroarila, é halogenado para dar um halogeneto de alquila de fórmula (5). O composto de fórmula (4) é tratado como um iniciador de radicais livres tal como peróxido de benzoil ou 1,1'-azobisisobutironitrila ou 1,1'- azobis(ciclohexanocarbonitrila) em tetracloreto de carbono ou acetato de etila com N-clorossuccinimida ou N-bromossuccinimida com ou sem irradia- ção proveniente de um luz UV. O método preferido é tratamento com 1,1'- azobis(ciclohexanocarbonitrila) ou 1,1'-azobisisobutironitrila e N- bromossuccinimida a uma temperatura de cerca da temperatura ambiente à temperatura de refluxo de tetracloreto de carbono, por cerca de 4 a 48 horas. O produto pode ser então purificado usando técnicas tradicionais tais como filtração dos componentes insolúveis, seguida de cromatografia sobre sílica gel.

Alternativamente no esquema I, Etapa C, um heteroarilmetil de

fórmula (4) pode ser clorado para dar um cloreto de alquila, onde X é Cl, u- sando ácido tricloroisocianúrico. A reação é realizada em um solvente inerte tal como clorofórmio e refluxada por 4 a 72 horas. O produto é isolado por filtração através de um chumaço de sílica, seguida de cromatografia. No esquema I, Etapa D, uma formil piridina de fórmula (6) é con-

vertida em uma difluorometilpiridina de fórmula (7) usando trifluoreto de bis- (2-metoxietil)aminoenxofre. A reação é realizada em um solvente inerte, tal como diclorometano por 4 a 24 horas e em seguida resfriada bruscamente em uma solução saturada de NaHCO3. O produto é então isolado por técni- cas extrativas comuns.

No esquema I, Etapa E1 a difluorometil piridina de fórmula (7) é convertida em um brometo de alquil de fórmula (5) (X é Br) como anterior- mente descrito no esquema I, Etapa C.

Esquema Il

No esquema II, Etapa A, ciclopentenona (8) é reagida com ftali- mida em uma adição de Michael para dar a (±)-2-(3-oxo-ciclopentil)-isoindol- 1,3-diona (9). A reação é realizada em metanol/2N Na2CO3 em uma propor- ção de 10/1 em volume de preferência à temperatura ambiente usando con- dições semelhantes àquelas descritas por O. Nowitzki, et. al. em Tetrahe- dron 1996, 52, 11799-11810. 0 produto é isolado por adição de água e (9) é obtido como um sólido branco. No esquema II, Etapa B, a (±)-2-(3-oxo-ciclopentil)-isoindol-1,3-

diona (9) é reagida com uma fenil hidrazina de fórmula (10) em uma síntese de indol de Fischer típica para dar um tetra-hidrociclopenta[b]indol de fórmu- la (11). O especialista na técnica vai reconhecer que existem várias condi- ções ácidas para efetuar a síntese de indol de Fischer, que incluem ácidos de prótons e ácidos de Lewis. As condições preferidas utilizam uma mistura de ácido acético glacial com HCI 4 N em dioxano, a uma temperatura de 50°C à temperatura de refluxo do solvente, por cerca de 4 a 24 horas. O produto é isolado por adição de água seguida de filtração do sólido resultan- te. O sólido é sonicado em metanol para dar um material de pureza suficien- te. Alternativamente, a reação é efetuada usando um ácido de Lewis1 tal co- mo cloreto de zinco, em uma quantidade de cerca de 2 a 4 equivalentes.

Outras condições preferidas para a Etapa B utilizam etanol à temperatura de refluxo por cerca de 4 a 24 horas. O produto é isolado e po- de ser purificado por filtração da mistura reacional, seguida de cromatografia sobre sílica gel do filtrado.

No esquema II, Etapa C, o grupo ftalimida de fórmula (11) é cli- vado com hidrazina ou hidrato de hidrazina para dar um aminotetra- hidrociclopenta[b]indol de fórmula (12) usando as condições descritas por M. Alajarín, et al (Eur; J. Org. Chem. 2002, 4222-4227). As condições preferidas utilizam tetra-hidrofurano/etanol em uma mistura de cerca de 5,5/1 em volu- me a uma temperatura de 0 a 50°C, de preferência à cerca da temperatura ambiente, por 4 a 72 horas. A ftalhidrazida resultante é removida por filtração e o produto é isolado por concentração do filtrado e pode ser subseqüente- mente purificado por cromatografia usando técnicas conhecidas na literatura.

No esquema II, Etapa D, uma amina de fórmula (12) é acilada com o cloreto de ácido, cloroformiato, dialquildicarbonato, ou cloreto de car- bamoil apropriados para dar uma amida, carbamato, ou uréia de fórmula (13), onde R2 é C(O)R2a, usando condições bastante conhecidas pelos es- pecialistas na técnica. A amina é combinada com um excesso de uma base tipo amina orgânica tal como trietilamina ou di-isopropiletilamina em um sol- vente inerte tal como tetra-hidrofurano, dicloroetano ou diclorometano, N- metilpirrolidinona, ou Ν,Ν-dimetilformamida, ou uma misturas dos mesmos. As condições preferidas utilizam di-isopropiletilamina em diclorometano na presença, por exemplo, de isopropilcloroformiato a uma temperatura de 0 a 40°C por 1 a 72 horas. O produto é isolado por adição de água e éter dietíli- co, seguida de agitação e coleta do sólido resultante. Se o produto for sufici- entemente solúvel em um solvente orgânico apropriado, ele pode ser isolado por técnicas extrativas e em seguida suspendido em um solvente orgânico adequado, tal como heptano, e isolado por filtração.

Será percebido pelo especialista na técnica que aminas tais co- mo aquelas de fórmula (12) freqüentemente são armazenadas e manusea- das de forma mais adequada como um intermediário de fórmula (13), com a amina adequadamente protegida, tal como com um grupo f-butoxicarbonil (BOC), onde R2a é O-f-butila, ou por formação de um sal de adição de ácido.

O grupo BOC é posteriormente removido e a amina é acilada para fazer a amida ou o carbamato desejados dos compostos da presente invenção.

No esquema II, Etapa E, um tetra-hidrociclopenta[b]indol de fór- mula (13) é alquilado com R3CH2-X1 onde X é Cl ou Br, ou R3CH2OSO2Me (vide Esquema I), para dar um tetra-hidrociclopenta[b]indol de fórmula (14). As condições preferidas utilizam Cs2CO3, em um solvente inerte tal como DMF, DMSO, ou A/-metilpirrolidinona, a uma temperatura de 20 a 100 °C, mas de preferência a uma temperatura de 45 a 60 °C, por 2 a 24 horas. O produto é isolado por técnicas extrativas conhecidas na literatura e purificado por cromatografia sobre sílica gel. Alternativamente, a alquilação pode ser efetuada usando uma base forte tal como hidreto de sódio, hidreto de potás- sio, bis(trimetilsilil)amida de potássio ou bis(trimetilsilil)amida de sódio, em um solvente inerte tal como dimetilformamida, /V-metilpirrolidinona, ou tetra- hidrofurano. As condições preferidas utilizam hidreto de sódio em dimetilfor- mamida a uma temperatura de 0 a 80°C por 4 a 48 horas. O produto alquila- do de fórmula (14) é isolado por técnicas extrativas e cromatográficas co- nhecidas pelos especialistas na técnica. Esquema Ill No esquema III, Etapa A, um tetra-hidrociclopenta[b]indol de fórmula (15) ou fórmula (17) é alquilado com R3CH2X1 onde X é Cl, Br, ou com R3 CH2OSO2Me1 da maneira descrita para o Esquema Il1 Etapa E , para dar um tetra-hidrociclopentano indol de fórmula (16) ou (18).

No esquema III, Etapa Β, o grupo ftalimida de fórmula (16) é cli-

vado com hidrato de hidrazina ou hidrazina para dar um aminotetra- hidrociclopenta[b]indol de fórmula (19) da maneira descrita para o Esquema Il1 Etapa C.

Alternativamente, no esquema Ill1 Etapa C1 um aminotetra- hidrociclopenta[b]indol de fórmula (19) pode ser gerado a partir da desprote- ção da amina f-butoxicarbonil (BOC) protegida de fórmula (18). As condições comuns de desproteção para remover um grupo BOC são bastante conheci- das pelos especialistas na técnica e podem ser encontradas no texto de T. W. Green & P. G. M. Wuts em "Protective Groups in Organic Synthesis", John Wiley & Sons1 Inc., 1991, 328-330. As condições preferidas utilizam cloreto de hidrogênio 4 M em dioxano a uma temperatura de cerca de O a 50°C por cerca de 10 minutos a 24 horas.

No esquema III, Etapa D, a amina de fórmula (19) é convertida em uma sulfamida ou sulfonamida de fórmula (20) por reação com o cloreto de sulfamoíla ou sulfonila correspondente, respectivamente, em um solvente apropriado tal como clorofórmio ou diclorometano a 50-60 0C usando uma base tal como trietilamina, base de Hunig ou 1,4-diazabiciclo[2.2.2]-octano (DABCO). As condições preferidas utilizam clorofórmio com DABCO como base.

Alternativamente, (14) pode ser preparado como mostrado no

esquema III, Etapa E, por reação do cloreto de ácido, cloroformiato, ou clore- to de carbamoil apropriados com uma amina de fórmula (19), essencialmen- te da maneira descrita no esquema II, Etapa D. Esquema IV No esquema IV, Etapa A, um tetra-hidrociclopenta[b]indol de fórmula (21) é alquilado da maneira descrita no esquema II, Etapa E para dar o tetra-hidro-ciclopenta[b]indol substituído de fórmula (22).

No esquema IV, Etapa B, uma nitrila de fórmula (21) ou (22), é

catalisador à base de alumínio-níquel em uma mistura solvente de

água/ácido fórmico variando de uma proporção de 1/10 a 1/2. O ácido fórmico usado pode ser 98, 96 ou 88%. A reação é realizada a uma temperatura que varia da temperatura ambiente à temperatura de refluxo do solvente, por cerca de 2 a 48 horas. O produto é isolado por adição de um solvente prótico tal como metanol, seguido de filtração e concentração do filtrado. O resíduo é ainda purificado por técnicas extrativas comuns tais co- mo com solução de bicarbonato de sódio e acetato de etila para dar o aldeí- do, ou por sonicação com etanol, e usado em purificação posterior. Alternativamente, no esquema IV, Etapa B, quando R2 é ter-

butoxicarbonil (BOC), então a nitrila de fórmula (21) ou (22) é reduzida u- sando condições não ácidas, tais como com um agente redutor do tipo hidre- to metálico, por exemplo com hidreto de di-isobutilalumínio. A reação é efe- tuada em um solvente inerte, tal como diclorometano, com adição de hidreto de di-isobutilalumínio, seguido de acetato de etila e agitada por 30 minutos a 2 horas à temperatura ambiente. A reação é agitada com tartarato de sódio aquoso a 20% por 1 hora e em seguida isolada usando técnicas extrativas.

No esquema IV, Etapa D, um aldeído de fórmula (23) ou (25) é convertido em uma metoxima de fórmula (25) ou (26), respectivamente. O aldeído é tratado com o sal de cloridrato de metoxiamina em etanol ou me- tanol a uma temperatura de 0 a 100°C por cerca de 2 a 24 horas, de prefe- rência à temperatura ambiente por uma hora, na presença de uma base, tal como carbonato de potássio, carbonato de sódio ou hidróxido de sódio. O produto é isolado por concentração e trituração do produto em água. Alterna- tivamente a reação é diluída com acetato de etila, isolada usando técnicas extrativas, e pode ser subseqüentemente purificada usando técnicas tradi- cionais tais como cromatografia. No esquema IV, Etapa E, um metoxima tetra-hidrociclopentano

indol de fórmula (25) é alquilado para dar o metoxima tetra-hidrociclopentano indol N-substituído de fórmula (26) da maneira descrita no esquema II, Etapa E.

Determinação da Atividade Biológica: Conforme usado neste relatório, "KcT refere-se à constante de

dissociação de equilíbrio para o complexo ligando-receptor; "K" refere-se à constante de dissociação de equilíbrio para o complexo fármaco-receptor, e é uma indicação da concentração de fármaco que vai se ligar à metade dos sítios de ligação em equilíbrio; "IC50" refere-se à concentração de um agen- te que produz 50% da resposta inibitória máxima possível para aquele agen- te ou, alternativamente, à concentração de um agente que produz 50% de deslocamento da ligação do ligando ao receptor; "EC50" refere-se à concen- tração de um agente que produz 50% da resposta inibitória máxima possível para aquele agente; e "ED50" refere-se à dose de um agente terapêutico administrado que produz 50% da resposta máxima para aquele agente. Ensaio de ligação ao receptor nuclear do hormônio esteroide:

Lisados celulares de células HEK293 de rim embriônico humano superexpressando GR (receptor de glucocorticoide), AR (receptor de andro- gênio), MR (receptor de mineralocorticoide), ou PR (receptor de progestero- na) humanos são usados para os ensaios de ligação por competição de re- ceptor-ligando para determinar os valores de Ki.

Em resumo, os ensaios de ligação por competição de receptores esteroides são efetuados em um tampão contendo 20 mM de tampão Hepes (pH = 7,6), 0,2 mM de EDTA, 75 mM de NaCI1 1,5 mM de MgCI2, 20% de glicerol, 20 mM de molibdato de sódio, 0,2 mM de DTT (ditiotreitol), 20 μ9/ηηΙ_ de aprotinina e 20 μο/ηηΙ. de leupeptina. Tipicamente, ensaios de Iiga- ção por competição de receptores esteroides incluem Iigandos radiomarca- dos, tais como [3H]-dexametasona 0,3 nM para ligação a GR, [3H]- metiltrienolona 0,36 nM para ligação a AR, [3H]-aldosterona 0,25 nM para ligação a MR, e [3H]-metiltrienolona 0,29 nM para ligação a PR, e 20 μg de Iisado 293-GR, 22 μg de Iisado 293-AR, 20 μg de Iisado 293-MR ou 40 μg de Iisado 293-PR por compartimento. Os ensaios são tipicamente realizados em um formato de 96 compartimentos. Os compostos de teste para competição são adicionados em várias concentrações variando de cerca de 0,01 nM a μΜ. A ligação inespecífica é determinada anticorpo presença de dexame- tasona 500 nM para ligação a GR, aldosterona 500 nM para ligação a MR, ou 500 metiltrienolona nM para ligação a AR e PR. As reações de ligação (140 μΙ_) são incubadas por uma noite a 4°C, em seguida 70 μΙ de tampão carvão vegetal-dextrana frio (contendo por 50 ml de tampão de ensaio, 0,75 g de carvão vegetal e 0,25 g de dextrana) são adicionados à cada reação. As placas são misturadas por 8 minutos em um agitador orbital a 4 °C. As placas são então centrifugadas a 3.000 rpm a 4 0C por 10 minutos. Uma alí- quota de 120 μΙ_ da mistura da reação de ligação é então transferida para uma outra placa de 96 compartimentos e 175 \iL de líquido de cintilação Wallac Optiphase Hisafe 3™ são adicionados a cada compartimento. As pla- cas são vedadas e agitadas vigorosamente em um agitador orbital. Depois de uma incubação de 2 horas, as placas são lidas em um contador Wallac Microbeta.

Os dados são usados para calcular um IC50 estimado e a per- centagem de inibição a 10 μΜ. O Kd para [3H]-dexametasona para ligação a GR, [3H]-metiltrienolona para ligação a AR, [3H]-aldosterona para ligação a MR, ou [3H]-metiltrienolona para ligação a PR, é determinado por ligação de saturação. Os valores de IC50 para os compostos são convertidos em Ki usando a equação de Cheng-Prusoff. Seguindo um protocolo essencialmente como descrito acima, os compostos exemplificados da presente invenção apresentam um Ki no en- saio de ligação a AR de < 500nM. De preferência, os compostos da presente invenção apresentam um Ki no ensaio de ligação a AR de < 100nM, e mais preferivelmente < 50nM. Além disso, os compostos exemplificados da pre- sente invenção se ligam seletivamente AR (Ki mais baixo) em relação a cada um de MR humano, GR humano, e PR humano.

Para demonstrar a capacidade dos compostos da presente in- venção para modular a atividade de receptores de hormônios esteroides (is- to é, seja agonizar, agonizar parcialmente, antagonizar parcialmente, ou an- tagonizar), são efetuados bioensaios que detectam a modulação funcional da expressão do gene alvo em células transitoriamente transfectadas com uma proteína receptora nuclear e uma construção elemento de resposta hormonal-gene repórter. Os solventes, reagentes, e Iigandos empregados no ensaio funcional encontram-se facilmente disponíveis em fontes comerciais, ou podem ser preparados pelo especialista na técnica. Ensaio funcional da modulação de receptores nucleares de hormônios este- roides:

Células HEK293 de rim embriônico humano são transfectadas com receptor de hormônios esteroides e plasmídios de gene repórter usando o reagente de transfecção Fugene™ (Roche Diganostics). Em resumo, o plasmídio repórter contendo duas cópias da probasina ARE (elemento de resposta a androgênio 5'GGTTCTTGGAGTACT3' (SEQ ID N°: 1)) e do pro- motor para TK (timidina quinase) a montante do cDNA repórter de luciferase, é transfectado em células HEK293 com um plasmídio expressando constitu- tivamente o receptor de androgênio humano (AR) usando o promotor para CMV viral (citomegalovírus). O plasmídio repórter contendo duas cópias de GRE (elemento de resposta a glucocorticoide 5'TGTACAGGATGTTCT'3 (SEQ ID N°: 2)) e o promotor para TK a montante do cDNA repórter de Iuci- ferase é transfectado com um plasmídio expressando constitutivamente seja um receptor para glucocorticoide humano (GR), um receptor para mineralo- corticoide humano (MR), ou um receptor para progesterona humano (PR) usando o promotor para CMV viral. As células são transfectados em balões de T150 cm em meio DMEM com 5% de soro bovino fetal (FBS) reduzido com carvão vegetal. Depois de uma noite de incubação, as células transfec- tadas são tripsinizadas, plaqueadas em pratos de 96 compartimentos em meio DMEM contendo 5% de FBS reduzido com carvão vegetal, incubadas por 4 horas e em seguida expostas a várias concentrações de compostos de teste variando de cerca de 0,01 nM a 10 μΜ. No modo antagonista para os ensaios, concentrações baixas de agonista para cada receptor respectivo são adicionadas ao meio (0,25 nM de dexametasona para GR, 0,3 nM de metiltrienolona para AR, 0,05 nM de promegestona para PR e 0,05 nM de aldosterona para MR). Depois de 24 horas de incubação com os compostos de teste, as células são Iisadas e a atividade de Iuciferase é determinada usando técnicas tradicionais.

Os dados são ajustados a uma curva logística de ajuste de qua- tro parâmetros para determinar os valores de EC50. A eficácia percentual (compostos com respostas máximas saturadas) ou a estimulação máxima percentual (compostos com respostas máximas que não saturam) são de- terminadas em relação à estimulação máxima obtida com os seguintes ago- nistas de referência: 100 nM de metiltrienolona para o ensaio com AR, com 30 nM de promegestona para o ensaio com PR, com 30 nM de aldosterona para o ensaio com MR e com 100 nM de dexametasona para o ensaio com GR. Os valores de IC50 podem ser determinados de maneira semelhante usando os dados do ensaio no modo antagonista. No modo antagonista, as percentagens de inibição são determinadas comparando-se a atividade do composto de teste na presença de uma concentração baixa do agonista (0,25 nM de dexametasona para GR, 0,3 nM de metiltrienolona para AR, 0,05 nM de promegestona para PR e 0,05 nM de aldosterona para MR) à resposta produzida pela mesma concentração baixa do agonista na ausên- cia do composto de teste. Ensaio com C2C12 AR/ARE repórter:

Como um indicador de atividade agonista em tecido muscular, o ensaio com C2C12 AR/ARE repórter é realizado. Em resumo, células C2C12 de mioblasto de camundongo são co-transfectadas usando o reagente Fu- gene™. Um plasmídio repórter contendo um GRE/ARE (elemento de respos- ta a glicocorticoide/ elemento de resposta a androgênio 5'TGTACAGGATGTTCT'3 (SEQ ID NO:3) e um promotor para TK a montan- te do cDNA repórter de Iuciferase é transfectado com um plasmídio expres- sando constitutivamente um receptor para androgênio humano (AR) usando o promotor para CMV viral. As células são transfectados em balões de T150 cm em meio DMEM com 4% ou 10% de soro bovino fetal (FBS). Depois de 5 horas de incubação, as células transfectadas são tripsinizadas, plaqueadas em pratos de 96 compartimentos em meio DMEM contendo 10% de FBS reduzido com carvão vegetal, incubadas por 2 horas e em seguida expostas a várias concentrações de compostos de teste variando de cerca de 0,01 nM a 10 μΜ. Depois de 48 horas de incubação com os compostos, as células são Iisadas e a atividade de Iuciferase é determinada usando técnicas tradi- cionais. Os dados são ajustados a uma curva logística de ajuste de quatro parâmetros para determinar os valores de EC50. A eficácia % é determinada versus a estimulação máxima obtida com 10nM de metiltrienolona.

Ensaios funcionais de modulação de receptores hormonais nu- cleares de hormônios esteroides semelhantes àqueles descritos acima po- dem ser facilmente criados pelo especialista na técnica. Seguindo um proto- colo essencialmente da maneira descrita acima, os compostos exemplifica- dos da presente invenção apresentam um EC50 no ensaio com C2C12 AR/ARE repórter de < 1000 nM. De preferência, os compostos da presente invenção apresentam um EC50 no ensaio com C2C12 AR/ARE repórter de < 100 nM, e mais preferivelmente < 50nM. Modelo in vivo de eficácia e seletividade:

Ratos machos Wistar (12 semanas de idade) são castrados (go- nadectomizados ou "GDX") de acordo com procedimentos aprovados (Char- les River Labs) e deixados definhar por oito semanas. Também são prepa- rados camundongos pseudo-operados de idade semelhante. (Camundongos pseudo-operados são animais que foram expostos aos mesmos procedimen- tos cirúrgicos que os animais castrados com a diferença de que seus testícu- Ios não foram removidos.) Os animais são alojados em um recinto de tempe- ratura controlada (24°C) com um ciclo invertido de 12 horas de luz/escuridão (escuridão 10:00/22:00) e água e comida ficam disponíveis ad libitum.

Para demonstrar a eficácia in vivo, os compostos da presente invenção são administrados diariamente por gavagem oral ou por injeção subcutânea a ratos castrados de vinte semanas de idade (peso corporal de cerca de 400-450 g). Os animais são randomizados com base no peso cor- poral antes de receberem um rastro de teste ("test slot"), de modo que os pesos corporais iniciais de todos os grupos de tratamento variam dentro de 5%. Os compostos de teste são administrados aos animais usando veículos convencionais. Por exemplo, 1% de carboximetilcelulose sódica (CMC) + 0,25% de Tween 80 em H2O estéril pode ser usado para administração oral e 6% de álcool etílico (EtOH) + 94% de ciclodexitrana (CDX) pode ser usado para injeções subcutâneas. Ratos pseudo-operados tratados com veículo apenas são usados como controles positivos do tratamento ao passo que ratos castrados tratados somente com veículo são usados como controle negativo do tratamento.

Os animais de teste são medicados durante um período de duas semanas, por via oral ou subcutânea, com, por exemplo, 0,3, 1, 3, 10 ou 30 mg/kg/dia de um composto da presente invenção. Depois de duas semanas de tratamento, como um indicador de atividade, o peso molhado do músculo Levator Ani (LA) no grupo de teste é determinado e comparado com o peso molhado do Levator Ani do grupo de controle castrado tratado somente com veículo. Os pesos molhados dos músculos obtidos tanto no grupo de teste como no grupo tratado com somente veículo são normalizados em relação ao peso corporal total. Como um indicador da atividade seletiva para tecido, o peso molhado da vesícula seminal (SV) dos animais de teste é igualmente comparado com o peso molhado das vesículas seminais do grupo pseudo- operado e tratado com somente veículo. Mais uma vez, os pesos molhados das vesículas obtidas do grupo de teste e do grupo tratado com somente veículo normalizados em relação ao peso corporal total.

Além do peso molhado do Levator Ani, a tíbia esquerda dos ra- tos é isolada durante a necrópsia e depois de descobrir a epífise, o tecido mole que envolve o osso é removido com cuidado. Esta amostra é então colocada em uma solução contendo 0,2% de colagenase em tampão Tris (pH 7,5). A excisão enzimática resultante da camada perióstica externa é imediatamente submetida a um ensaio para determinar a atividade de fosfa- tase alcalina, um indicador de atividade anabólica do osteoblasto/osso. Em resumo, 30 μΙ de amostra são colocados em um epitubo contendo 200 μΙ de tampão de substrato para-nitrofenil fosfato (PNPP) (Pierce Cat N0 37621). Fosfatase alcalina purificada (Sigma Cat. N0 P4252) é usada para fazer uma

curva padrão, e as amostras são lidas em uma leitora de placa a Abs 405 pa- ra determinar a atividade da fosfatase alcalina perióstica (PALP). Os resulta- dos obtidos tanto do grupo de teste como do grupo tratado somente com veículo podem ser normalizados em relação ao peso corporal total.

Os valores da eficácia percentual (% Eff.) podem ser determina-

dos da seguinte maneira:

% Eff. = ((Peso molhado do LA ou SV ou atividade de PALP no animal de teste / peso corporal total do animal de teste) / (Peso molhado do LA ou SV ou atividade de PALP no animal de controle / peso corporal total

do animal de controle)) X 100.

Seguindo os procedimentos essencialmente da maneira descrita

acima, o composto do Exemplo 74 apresenta a seguinte atividade no modelo in vivo de rato acima mencionado de eficácia e seletividade:

Dose (mg/Kg/d), via Peso do LA % Eficácia versus controle (GDX) (ANOVA, p<0,05) Peso do SV % Eficácia verses controle (pseudo) (ANOVA, p<0,05) PALP % Eficácia versus controle (GDX) (ANOVA, p<0,05) 3 , po 134 6 95 10, po 195 8 116 30, po 186 14 107

p.o. = via de administração oral LA = músculo Ieviator ani; SV = vesícula seminal GDX = gonadectomizados Modelos in vivo de distúrbios associados à perda óssea:

Para demonstrar que os compostos da presente invenção têm capacidade para tratar distúrbios associados à perda óssea, tais como oste- oporose ou osteopenia, outros modelos animais bastante conhecidos pelos especialistas na técnica podem ser empregados. Exemplos de tais modelos podem ser encontrados em Y. L. Ma et ai, Japanese Journal of Bone and Mineral Metabolism 23 (Suppl.): 62-68 (2005); Y.L. Ma et ai, Endocrinology 144: 2008-2015 (2003); e K. Hanada et ai, Bioi Pharm. Buli 26(11): 1563- 1569 (2003). Mencionamos em particular o Modelo de Osteopenia por Defi- ciência em Estrogênio induzida por Ovariectomia em Rata, e o Modelo de Osteopenia por Deficiência em Androgênio induzida por Orquidectomia em Rato.

Modelo de Osteopenia por Deficiência em Estrogênio induzida por Ovariec- tomia:

Ratas Sprague Dawley virgens de seis meses de idade (Harlan

Industries, Indianapolis IN), pesando cerca de 220 g, são alojadas com a- cesso ad Iibitum à comida (TD 89222 com 0,5% de cálcio e 0,4% de fósforo, Teklad, Madison, Wl) e água. Ovariectomias (Ovx) bilaterais são realizadas nos animais (exceto para os controles pseudo-operados) e em seguida ran- domizados em grupos de tratamento de 7-8 ratos por grupo. Cada ensaio contém tipicamente pelo menos 2 grupos de controles, que incluem contro- les com pseudo-ovariectomia (pseudo) e controles ovariectomizados (Ovx) tratados com veículo. As ratas Ovx são deixadas perder osso por 1 mês para estabelecer a osteopenia antes do tratamento com o composto de teste. Os compostos de teste são administrados por via oral por gavagem aos animais Ovx durante 8 semanas. Como controle positivo, PTH humano recombinante (1-38) (cerca de 10ug/kg/d, por via subcutânea) pode ser dado a um subgru- po de animais Ovx. Depois de terminado o protocolo de teste, tomografia computadorizada quantitativa (QCT, Norland/Stratec, Fort Atkinson, Wl) é usada para analisar a densidade mineral óssea volumétrica (BMD, mg/cc) da vértebra lombar L-5 e do fêmur. Análises biomecânicas da flexão em três pontos no eixo médio femoral e da carga de rutura no fêmur proximal são realizadas usando uma máquina para teste mecânico de materiais (modelo: 661.18c-01, MTS Corp, Minneapolis, MN) e analisadas usando o software TestWorks 4® (MTS Corp.).

Model of Androgen Deficiencv Osteopenia induced bv Orchidectomy: Ratos Sprague Dawley de seis meses de idade (Harlan Industri-

es, Indianapolis IN), pesando cerca de 485 g, são alojados com acesso ad Iibitum à comida (TD 89222 com 0,5% de cálcio e 0,4% de fósforo, Teklad, Madison, Wl) e água. Orquidectomias (Orx) bilaterais são realizadas nos a- nimais (exceto para os controles pseudo-operados) e em seguida randomi- zados em grupos de tratamento de 7-8 ratos por grupo. Cada ensaio contém tipicamente pelo menos 2 grupos de controles, que incluem controles com pseudo-orquidectomia (pseudo) e controles orquidectomizados (Orx) trata- dos com veículo. Os ratos Ovx são deixados perder osso por 2 meses para estabelecer a osteopenia antes de iniciado o tratamento com o composto de teste. Os compostos de teste são administrados por via oral por gavagem aos animais Ovx durante 8 semanas. Como controle positivo, PTH humano recombinante (1-38) (cerca de 10ug/kg/d, por via subcutânea) pode ser dado a um subgrupo de animais Orx. Depois de terminado o protocolo de teste, a BMD da vértebra e do fêmur, assim como as análises biomecânicas do fê- mur podem ser realizadas da maneira descrita acima para o modelo de rata ovariectomizada.

(Vide genericamente, Ma et ai, JBMR 17:2256-2264 (2002), e Turner et ai, Bone [Review] 14:595-608 (1993)).

Como será observado pelo especialista na técnica, os protocolos dos modelos animais descritos acima podem ser facilmente adaptados para uso junto com os compostos e métodos da presente invenção.

As preparações e os exemplos a seguir ilustram ainda a inven- ção e representam a síntese típica dos compostos de fórmula (I), incluindo quaisquer compostos novos, como descrito acima de modo geral. Os rea- gentes e os materiais de partida encontram-se facilmente disponíveis para o especialista na técnica, ou podem ser sintetizados por ele. Deve ficar enten- dido que as Preparações e os Exemplos são dados a título ilustrativo e não limitativo, e que várias modificações podem ser feitas pelo especialista na técnica.

Conforme usado neste relatório, "TLC" refere-se à cromatografia em camada fina; "HPLC" refere-se à cromatografia líquida de alta eficiência;

"GC/MS" refere-se à cromatografia gasosa-espectroscopia de massa; "LC- ES/MS" refere-se à cromatografia líquida-espectroscopia de massa por s- pray de elétrons; "Rf" refere-se a fator de retenção; "Rt" ou "TR" refere-se a tempo de retenção; "ô"refere-se à parte por milhão a jusante de tetrametilsi- lano; "TFA" refere-se a ácido trifluoroacético; "THF" refere-se a tetra- hidrofurano; "DMF" refere-se à Ν,Ν-dimetilformamida; "DMSO" refere-se di- metil sulfóxido; "MTBE" refere-se a éter ter-butil metílico; "PPh3" refere-se à trifenilfosfina; "DEAD" refere-se dietil azodicarboxilato; "Pd-C" refere-se a paládio sobre carvão; NaBH(OAc)3 refere-se a triacetoxiborohidreto de sódio; "Bn" refere-se a benzil; "BnNH2" refere-se à benzil amina; "MeOH" refere-se a metanol; "EtOH" refere-se a etanol; "EtOAc" refere-se a acetato de etila; "NBS" refere-se à N-bromossuccinimida; AIBN refere-se à 2,2- azobisisobutironitrila; "ee" refere-se a excesso enantiomérico.

A rotação ótica é determinada por técnicas tradicionais tal como o uso de polarímetro. A configuração R ou S dos compostos da invenção pode ser determinada por técnicas tradicionais tais como análise de raios-X com tempo de retenção de HPLC quiral.

Em geral, os nomes para os compostos da presente invenção são fornecidos por ChemDraw® versão 7.0.1. Intermediário 1 (±)-2-(3-Oxo-ciclopentilVisoindol-1.3-dione

Misturar ciclopentenona (100 g, 1,2 mol) e ftalimida (170 g, 1,2 mmol) em MeOH (900 mL) e agitar por 18 horas à temperatura ambiente. Agitar vigorosamente com um agitador mecânico e adicionar Na2CO3 aquoso 2 M (80 mL). Depois de aproximadamente 2 horas, formar-se-á um precipí- tado branco e grosso. Agitar à temperatura ambiente por 48 horas. Recolher o sólido branco por filtração a vácuo e enxaguar com metanol. Suspender o sólido em água (300 mL) e agitar por 3 horas. Recolher o sólido e secar em um forno a vácuo a 40 0C por uma noite para dar 195 g (71%) do composto do título como um sólido branco. 1H RMN (DMSO-cfe) δ 7,85-7,77 (m, 4H), 4,90 (m, 1H), 2,67 (ddd, 1H, J=18,5, 6,2, 1,3 Hz), 2,54 (dd, 1H, J=18,5, 9,2 Hz), 2,45 (m, 1H), 2,32-2,21 (m, 3H); MS (m/z): 230 (M+1, fraco).

Intermediário 2

(±)-2-(1,3-Dioxo-l ,3-di-hidro-isoindol-2-il)-1.2.3.4-tetra-hidro- ciclopentafblindol-7-carbonitrila

Misturar (±)-2-(3-oxo-ciclopentil)-isoindol-1,3-diona (12,7 g, 55,3 mmols) e 4-cianofenilhidrazina-HCI (8,53 g, 50,3 mmol) em HOAc (200 mL) e HCI dioxano 4N (50 mL). Usando agitação mecânica, aquecer a reação até 90 0C por 18 horas, e em seguida adicionar HCI dioxano 4N adicional (20 mL). Aquecer a reação até 100 0C por 18 horas. Diluir a mistura reacional com água (600 mL) e recolher um sólido preto por filtração a vácuo. Sonicar o sólido com MeOH (200 mL), e em seguida recolher e secar em um forno a vácuo para dar 10,94 g (66%) de um sólido cinza-castanho. MS (m/z): 328 (M+1), 326 (M-1). Intermediário 3

(±)-2-(7-Trifluorometóxi-1,2.3.4-tetra-hidro-ciclopentaffc1indol-2-il)-isoindol- 1,3-dionano

Misturar cloridrato de (4-trifluorometóxi-fenil)-hidrazina (1,5 g,

6,56 mmols) e (±)-2-(3-oxo-ciclopentil)-isoindol-1,3-diona em EtOH (20 mL) e aquecer até o refluxo por 14 horas. Concentrar a mistura reacional a vácuo e diluir o resíduo com Et2O (150 mL). Colocar a mistura em um banho ultras- sônico por 10 minutos, e em seguida remover um sólido por filtração. Con- centrar o filtrado para dar o produto bruto. Purificar o material sobre sílica gel (120 g) usando 10-60% EtOAc/hexanos para dar 520 mg (22%) do composto do título como um sólido amarelo. 1H-RMN (DMSO-cfe) δ 11,22 (s, 1H), 7,85 (m, 4H), 7,38 (d, 1H, J = 8,8 Hz), 7,28 (d, 1H, J = 1,3 Hz), 6,96 (dd, 1H, J = 8,8, 1,3 Hz), 5,41 (m, 1H), 3,38-3,11 (m, 4H). Intermediário 4

(±V2-Amino-1.2.3.4-tetra-hidro-ciclopenta[blindol-7-carbonitrila

Em um balão de fundo redondo e três gargalos, equipado com um agitador mecânico, preparar uma mistura de THF (3100 ml) e etanol (550 ml). A esta mistura adicionar 2-(1,3-dioxo-1,3-di-hidro-isoindol-2-il)-1,2,3,4- tetra-hidro-ciclopenta[b]indol-7-carbonitrila bruta (170 g, 0,52 mol) e agitar por 15 minutos. Adicionar hidrato de hidrazina (90 ml, 1,9 mol) e agitar a mis- tura à temperatura ambiente por 16 horas. Verificar por LC/MS para confir- mar que não há material de partida remanescente. Filtrar a reação bruta a vácuo e lavar o sólido com THF (2 χ 200 ml_). Recolher os licores-mãe e re- mover o solvente a vácuo.

to grande, 1,5" de altura) usando (2 M NH3/MeOH)/CH2CI2 (3-10%). Recolher as frações contendo produto e remover o solvente. Adicionar acetonitrila (180 ml) e refluxar a mistura por 15 minutos e em seguida resfriar para a temperatura ambiente. Recolher um sólido castanho por filtração e secar a vácuo por uma noite a 40 0C para dar o composto do título racêmico, 55 g (60%). GC-MS: 198 (M+), 196 (M-);

mica ou continuar a síntese com material racêmico e efetuar uma separação por prep-HPLC quiral dos compostos finais. Intermediário 4a

(S)-2-amino-1.2,3,4-tetra-hidro-ciclopentafb1indol-7-carbonitrila

um condensador, adicionar etanol (945 ml) e (±)-2-amino-1,2,3,4-tetra-hidro- ciclopenta[ò]indol-7-carbonitrila (40 g, 0,203 mmol). Agitar a mistura e aque- cer até 60-65 0C até ser obtida solução completa. Adicionar ácido D- piroglutâmico (28,4 g, 0,192 mmol) e água (55 ml). Aquecer a mistura até o refluxo por 20 minutos. Resfriar para 40-45 0C durante 90 minutos. Agitar a 40-45 0C por uma hora, e em seguida resfriar para 24 0C durante 2 horas. Agitar a esta temperatura por mais duas horas. Isolar um sólido cristalino por filtração e lavar com uma mistura de EtOH/água (95:5) (3 χ 50 mL). Secar o

Purificar por filtração através de sílica gel (chumaço de SiO2 mui-

NOTA: Neste ponto ou separar os enantiômeros da amina racê-

H

Em um balão de 2 litros equipado com um agitador mecânico e sólido a vácuo a 50 0C por uma noite para dar 23 g de sal de ácido piroglu- tâmico.

Isolamento da base livre: Adicionar o sal de ácido piroglutâmico á água (150 mL) e agitar até ser obtida solução completa. Filtrar através de um chumaço de terra diatomácea. Recolher a solução aquosa e ajustar o pH em 9 adicionando amônia concentrada aquosa. Recolher um sólido esbran- quiçado por filtração e secar a vácuo a 50 0C por uma noite para dar 13,5 g (35%) de (S)-2-amino-1,2,3,4-tetra-hidro-ciclopenta[ò]indol-7-carbonitrila, = 94%ee (coluna, Chiracel OJ (4,6 χ 250 mm; 10 μητι); solvente, 20% E- tOH/(0,2% dimetiletilamina/hexanos), verificado contra mistura racêmica). Rotação específica: [a]D25 -68,3° (MeOH). Intermediário 4b

(RV2-amino-1.2,3.4-tetra-hidro-ciclopenta[b1indol-7-carbonitrila

Preparar o composto do título essencialmente da maneira des- crita para o Intermediário 4a, empregando ácido L-piroglutâmico. O produto (97% ee) tem um resultado de rotação específica: [a]D25 +63° (EtOH). Intermediário 5

(±)-7-Trifluorometóxi-1,2.3.4-tetra-hidro-ciclopentaffelindol-2-ilamina

Preparar essencialmente da maneira descrita para o Intermediá- rio 4, usando (±)-2-(7-trifluorometóxi-1,2,3,4-tetra-hidro-ciclopenta[ò]indol-2- il)-isoindol-1,3-dionano. MS (m/z): 257 (M+1), 255 (M-1). Intermediário 6

Éster isopropílico do ácido (±)-(7-Ciano-1.2.3.4-tetra-hidro-ciclopentafblindol- 2-ih-carbâmico

Em uma atmosfera de nitrogênio, misturar (±)-2-amino-1,2,3,4-

tetra-hidro-ciclopenta[b]indol-7-carbonitrila (7,0 g, 35,5 mmols) com di- isopropiletilamina (7,4 mL, 42,6 mmol) em CH2CI2 (70 mL). Adicionar cloro- formiato de isopropila (1,0 M em tolueno, 42,6 mL, 42,6 mmols) e agitar por uma noite à temperatura ambiente. Diluir com água (100 mL) e éter etílico (50 mL), agitar por 10 min e recolher o sólido. Depois de secar, obter 7,42 g (61%) do composto do título como um sólido pardo. MS (m/z): 284 (M+1), 282 (M-1). Preparar os intermediários na Tabela 1 essencialmente da ma- neira descrita para a preparação do Intermediário 6 usando o cloreto de áci- do apropriado, cloroformiato, ou dicarbonato de dialquila, com trietilamina e di-isopropiletilamina como base intercambiavelmente.

Tabela 1

Interme- diário Nome químico MS (m/z) 7 (±)-N-(7-Ciano-1,2,3,4-tetra-hidro- ciclopenta[b]indol-2-il)-isobutiramida 268 (M+1) 266 (M-1) 8 (7-ciano-1,2,3,4-tetra-hidro-ciclopenta[b]indol- 2-il)-amida do ácido (±)- Ciclopropanocarboxílico 266 (M+1) 264 (M-1) 9 éster ter-butílico do ácido (±)-(7-Ciano-1,2,3,4- tetra-hidro-ciclopenta[ò]indol-2-il)-carbâmico No data éster isopropílico do ácido (±)-(7- Trifluorometóxi-1,2,3,4-tetra-hidro- ciclopenta[6]indol-2-il)-carbâmico 343 (M+1) 11 éster etílico do ácido (±)-(7-Ciano-1,2,3,4-tetra- hidro-ciclopenta[6]indol-2-il)-carbâmico 270 (M+1) 268 (M-1) 12 (7-ciano-1,2,3,4-tetra-hidro-ciclopenta[fc]indol- 2-il)-amida do ácido (R)- Ciclopropanoca rboxílico Sem dados 13 (7-ciano-1,2,3,4-tetra-hidro-ciclopenta[ò]indol- 2-il)-amida do ácido (S)- Ciclopropanocarboxí- Iico Sem dados 14 éster isopropílico do ácido (R)-(7-Ciano- 1,2,3,4-tetra-hidro-ciclopenta[ò]indol-2-il)- carbâmico 284 (M+1) 282 (M-1) éster isopropílico do ácido (S)-(7-Ciano- 1,2,3,4-tetra-hidro-ciclopenta[ò]indol-2-il)- carbâmico 284 (M+1) 282 (M-1) 16 éster ter-butílico do ácido (R)-(7-Ciano-1,2,3,4- tetra-hidro-ciclopenta[ò]indol-2-il)-carbâmico 296 (M-1) 17* éster ter-butílico do ácido (S)-(7-Ciano-1,2,3,4- tetra-hidro-ciclopenta[ò]indol-2-il)-carbâmico No data

*Alternativamente, obter o Intermediário 17 por cromatografia quiral do In- termediário 9. Intermediário 18

(±)-N-í7-(Metoxiimino-metil)-1.2.3.4-tetra-hidro-ciclopentaròlindol-2-il1-

isobutiramida

Misturar (±)-N-[7-ciano-1,2,3,4-tetra-hidro-ciclopenta[ò]indol-2-il]- isobutiramida (5 g, 18,7 mmols) e catalisador à base de Al-Ni (15 g) em á- gua/ácido fórmico a 96%, 1/10 (110 mL). Refluxar por 18 horas, adicionar catalisador à base de Al-Ni (13 g) e refluxar por mais 5 horas. Resfriar e dilu- ir com MeOH e remover os inorgânicos por filtração. Concentrar o filtrado, adicionar EtOH (200 mL) e sonicar por 15 minutos. Filtrar o material insolúvel e à solução de aldeído bruto adicionar O-metoxiamina-HCI (120 mmol) dis- solvido em água (25 mL) e basificar a mistura (pH = 9-12) com NaOH 5,0 N. Agitar à temperatura ambiente por 18 horas e remover a maior parte do sol- vente à pressão reduzida. Misturar o resíduo com água e sonicar por 30 mi- nutos. Isolar 4,39 g de um sólido castanho. Purificar o material sobre sílica gel usando 30-100% EtOAc/hexano para dar 530 mg (10%) do composto do título como um sólido amarelo pálido. MS (m/z): 300 (M+1), 298 (M-1). Intermediário 19

(ffl-N-r7-(Metoxiimino-metin-1.2.3.4-tetra-hidro-ciclopentarò1indol-2-in-2,2-

dimetil-propionamida Combinar diclorometano (15 ml) e éster ter-butílico do ácido (R)-

[7-ciano-1,2,3,4-tetra-hidro-ciclopenta[ò]indol-2-il]-carbâmico (2 g, 6,73 mmols)e agitar por 10 minutos em uma atmosfera de nitrogênio à temperatu- ra ambiente. Adicionar hidreto de di-isobutilalumínio (solução 1 M em cloreto de metileno, 14,1 ml; 14,1 mmols) em gotas durante 15 minutos. Adicionar acetato de etila (30 mL) à mistura reacional e agitar à temperatura ambiente por 1 hora. Adicionar uma solução aquosa a 20% de tartarato de sódio (30 mL) e agitar por 1 hora à temperatura ambiente. Separar a camada orgânica e extrair a camada aquosa com acetato de etila (2x15 mL). Combinar e se- car (Na2SO4) as camadas orgânicas, filtrar e concentrar para dar 2,2 g de éster ter-butílico do ácido [(R)-7-formil-1,2,3,4-tetra-hidro-ciclopenta[b]indol- 2-il]-carbâmico. Purificar por cromatografia sobre sílica gel usando cloreto de metileno/acetona (95/5) para dar 1,3 g (64%). MS (m/z): 301 (M+1). A um balão de fundo redondo de 100 ml adicionar éster ter- butílico do ácido [(/?)-7-formil-1,2,3,4-tetra-hidro-ciclopenta[6]indol-2-il]- carbâmico (1,00 g; 3,33 mmols), etanol (10 ml), carbonato de potássio (552 mg, 4 mmols), e cloridrato de O-metilhidroxilamina (334 mg; 4,0 mmols). Agi- tar a mistura à temperatura ambiente por 1 hora. Remover o solvente a vá- cuo e adicionar água (15 mL). Agitar a misturar por 30 minutos e filtrar para dar 790 mg (72%). MS (m/z): 330 (M+1). Intermediário 20 2-Bromometil-6-flúor-piridina Adicionar NBS (35,6 g, 0,20 mole) a uma solução de 6-flúor-2-

metil piridina (20 mL, 0,19 mol) em EtOAc (400 mL) à temperatura ambiente. Quando a temperatura atingir 45°C, adicionar AIBN (400 mg, 2,4 mmols). Aquecer a mistura a 65 0C por 6 horas, e em seguida resfriar para a tempe- ratura ambiente e adicionar hexano (1 L). Remover o precipitado branco por filtração e lavar o sólido com hexano/EtOAc (1:1). Lavar o filtrado com pe- quenas quantidades de Na2S2O3 aquoso, NaHCO3, e salmoura. Secar os orgânicos (Na2SO4), filtrar, e em seguida remover a maior do solvente a vá- cuo à temperatura ambiente. Transferir a solução restante para uma instala- ção de destilação. Remover o solvente restante por destilação à pressão atmosférica, seguido do material de partida não reagido a 80 mm (p.e. cerca de 70 0C; 11,2 g) e em seguida do produto título a 1 mm (p.e. cerca de 75 0C; 12,1 g, 32%). RMN (300 MHz; CDCI3): 7,82 (1H; dd); 7,35 (1H; dd); 6,90 (1H; dd); 4,50 (2H; s). Intermediário 21 2-(3-Bromometil-piridin-2-in-isoindol-1.3-diona

Preparar o composto do título usando o método descrito por Goswami, S.; et al. J. Am. Chem. Soe. 1989, 111, 3425-3426 e como exem- plificado por Graczyk, P. W02004013139, 2004, partindo de 2-amino-3- picolina e anidrido itálico, seguido de bromação com NBS, para dar o produ- to com 33% de rendimento como um sólido branco. MS (m/z): 317, 319 (M+1).

Intermediário 22 3-Bromometil-isotiazol

Preparar 3-metilisotiazol a partir de cloridrato de 5-amino-3-metil isotiazol comercialmente disponível pelo procedimento de Buttimore, D.; et al. J. Chem. Soe. 1963, 2032-2039. Refluxar uma mistura de 3-metilisotiazol (3,61 g, 36,6 mmol), N-bromosuccinimida (6,8 g, 38,2 mmol) e 1,1- azobis(ciclohexanocarbonitrila) (0,18 g , 0,73 mmol) em CCI4 (100 ml_) por 18 horas. Resfriar e remover a succinimida subproduzida por filtração. Con- centrar o filtrado e purificar usando cromatografia sobre sílica gel com EtO- Ac/hexano(1/5) para dar 2,78 g (42,9%) do produto. 1H RMN (400 MHz, CD- Cl3) δ 8,63 (d, J= 5,1 Hz, 1H), 7,34 (d, J= 5,1 Hz, 1H), 4,59(s, 2H). Intermediário 23 5-Bromo-3-bromometil-isotiazol

Preparar 5-bromo-3-metilisotiazol de acordo com o método de Adams, A.; Slack, R. J. Chem. Soe. 1959, 3061-3072. Preparar o composto do título essencialmente da maneira descrita para o Intermediário 22 usando NBS e 5-bromo-3-metilisotiazol. Intermediário 24

2-Bromometil-6-difluorometil-piridina

Adicionar lentamente trifluoreto de bis-(2- metoxietil)aminoenxofre (9,2 ml_, 50 mmols) a 6-metil-2- piridinacarboxaldeído (2,6 g, 21,5 mmols) em CH2CI2 (25 ml_). Depois de 18 horas, despejar cautelosamente em um béquer contendo NaHCO3 saturado (300 ml_). Sacudir com água/CH2CI2 e separar. Secar a camada orgânica (Na2SO4) e concentrar para dar 2,11 g de um óleo castanho. Purificar sobre sílica gel (50% EtOAc/hexano) para dar 1,16 g (38%) de 2-metil-6- difluorometil-piridina como um óleo amarelo-pardo. Dissolver (1,0 g, 7 mmols) em CCI4 (30 ml_) e adicionar NBS (1,2 g, 6,8 mmol) e AIBN (100 mg). Refluxar por 4 horas, filtrar e concentrar. Purificar o resíduo resultante sobre sílica gel usando 5-10% EtOAc/hexano durante 30 minutos para dar 670 mg (43%). GC/MS 221 +223. Intermediário 25 2-Clorometil-3-cloropirazina Preparar o composto do título usando o procedimento de clora- ção essencialmente da maneira descrita por Jeromin, G. E.; et ai., DE3519364, 1986, e Russell, M. G. N.; et al. J. Med. Chem. 2005, 48, 1367- 1383. Dissolver 2-metil-3-cloropirazina (24,3 g, 189 mmols) em CHCI3 (100 mL). Adicionar benzamida (100 mg, 0,8 mmol) e aquecer até o refluxo. Ao refluxo, adicionar ácido tricloroisocianúrico sólido (17,6 g, 75,6 mmol) e con- tinuar a refluxar por 96 horas. Resfriar e filtrar através de 200 g de sílica gel, eluindo com cloreto de metileno. Purificar por cromatografia sobre sílica gel usando um gradiente de 35% clorofórmio/hexano a 60% clorofórmio/hexano durante uma hora. Obter o composto do título como um óleo incolor, 5,39 g de composto do título puro e 9,4 g que é >70% do produto desejado. 1H- RMN (CDCI3) δ 8,50 (d, 1H, J = 2,2 Hz), 8,37 (d, 1H, J = 2,6 Hz), 4,80 (s, 2H), 2,50 (s, 3H); GC/MS M = 162+164.

Preparar os Intermediários 26-29 seguindo essencialmente o procedimento descrito para o Intermediário 25 usando 2,3-dimetilpirazina, 2- cloro-4-metilpiridina, 2-metiltiazol, e 3-metilpiridazina. _

Intermediário número Nome químico 26 2-Clorometil-3-metil-pirazina 27 2-Cloro-4-clorometil-piridina 28 2-Clorometiltiazol 29 3-Clorometil-piridazina Preparar os Intermediários 30 e 31 seguindo essencialmente o procedimento descrito por Newkome, G. R.; et al. Synthesis 1984, 676-679, usando 2-metilpirazina e 2,5-dimetilpirazina e N-clorossuccinimida (NCS). 2-Clorometilpirazina 31 2-Clorometil-5-metil-pirazina

Intermediário 32

Ácido Π.2.51Tiadiazol-3-carboxílico

Preparar o composto do título de acordo com o procedimento de Weinstock, L. M.; et al. J. Org. Chem. 1967, 32, 2823-2828. Intermediário 33 Π.2.51Tiadiazol-3-ilmetanol Misturar ácido [1,2,5]tiadiazol-3-carboxílico (6,00 g, 46,1 mmols) e cloreto de oxalil (11,7 g, 8,04 mL, 92,2 mmols) em CH2CI2 (150 mL). A esta suspensão heterogênea, adicionar 10 gotas de DMF e agitar à temperatura ambiente. A mistura reacional vai borbulhar e gradativamente ficar translúci- da em uma hora. Depois de uma hora, concentrar a mistura reacional a vá- cuo para dar o cloreto de ácido como um óleo castanho.

Dissolver o cloreto de ácido em EtOH (50 mL) e agitar à tempe- ratura ambiente por uma hora, e em seguida concentrar a vácuo para dar o éster etílico como um óleo castanho. Dissolver o éster etílico em THF (100 mL) e adicionar LiBH4 (so-

lução 2,0 M em THF, 46,1 mL, 92,2 mmols). Agitar a mistura reacional à temperatura ambiente por 18 horas. Despejar a mistura reacional em NH4CI aquoso (400 mL) e extrair em EtOAc (3 χ 150 mL). Secar os orgânicos (Mg- SO4) e concentrar a vácuo para dar 4,41 g de produto bruto como um óleo amarelo. Purificar sobre sílica gel (40 g) usando 30% EtOAc/hexanos para dar 3,71 g (69%) do composto do título como um óleo amarelo. 1H-RMN (CDCI3) δ 8,59 (s, 1H), 5,00 (s, 2H). Intermediário 34

Γ1.2.51tiadiazol-3-ilmetil éster do ácido metanossulfônico Preparar o composto do título de acordo com o procedimento de

Yamamoto, H.; et al. Bioorg. Med. Chem. 2001, 9, 465-475. Intermediário 35

3-Hidroximetil-4.5-dicloroisotiazol

Adicionar LiBH4 (2,0 M em THF, 10 mL, 20 mmols) a uma solu- ção de éster metílico do ácido 4,5-dicloro-isotiazol-3-carboxílico (2,1 g, 10 mmols) in THF (60 mL). Agitar à temperatura ambiente por uma hora e em seguida resfriar para 0 °C. Resfriar bruscamente e com cautela a mistura reacional com água (10 mL), e em seguida NH4CI aquoso saturado (50 mL). Extrair em EtOAc (100 mL), e em seguida secar (MgSO4), filtrar, e concen- trar os orgânicos para dar 540 mg de produto bruto como um xarope laranja. Purificar o xarope sobre sílica gel (40 g) usando 5-30% EtOAc/hexanos para dar 310 mg (17%) do composto do título como um sólido branco. 1H-RMN (DMSO-de) δ 5,55 (t, 1H, J= 5,9 Hz), 4,52 (d, 2H, J=6,2 Hz).

Intermediário 36

2-Cloro-4-hidroximetiltiazol

Preparar éster etílico do ácido 2-cloro-tiazol-4-carboxílico essen- cialmente da maneira descrita por Erlenmeyer, H.; et al. Helv. Chim. Acta 1944, 27, 1432-1436. Preparar o composto do título seguindo essencialmen- te o procedimento descrito para o Intermediário 35, usando éster etílico do ácido 2-cloro-tiazol-4-carboxílico. MS (m/z): 150 (M+1); 1H-RMN (CDCI3) δ 7,16 (t, 1H, J = 1,0 Hz), 4,75 (d, 2H, J= 0,9 Hz), 2,48 (s, 1H). Intermediário 37

Éster etílico do ácido 2-Amino-5-metil-tiazol-4-carboxílico

Preparar o composto do título de acordo com o procedimento de Hénichart, J.-P.; et al. Heterocycles 1991, 32, 693-701. Intermediário 38 Éster etílico do ácido 5-Metil-tiazol-4-carboxílico

Em um balão de fundo redondo com 3 gargalos misturar éster etílico do ácido 2-amino-5-metil-tiazol-4-carboxílico (62,9 g, 338 mmols) e THF (630 mL). Aquecer até o refluxo e tratar a mistura reacional com nitrito de isoamila (52,6 g, 60,1 mL, 449 mmols) em gotas. Ao terminar a adição, agitar a reação ao refluxo por 1 hora, e em seguida concentrar a mistura re- acional por rotavaporização (hi-vac) para dar 70 g de produto bruto como um óleo laranja grosso. Purificar sobre sílica gel (400 g, 20-45% EtO- Ac/hexanos) para dar 39,47 g (68%) do composto do título como um sólido amarelo. LC-ES/MS m/z 172 (M+1), Tr = 1,5 min. Intermediário 39

Éster etílico do ácido 5-Bromometil-tiazol-4-carboxílico

Aquecer até o refluxo uma mistura de éster etílico do ácido 5- metil-tiazol-4-carboxílico (4,87 g, 28,5 mmols) e N-bromosuccinimida (5,06 g, 28,5 mmols) em CCI4 (100 mL) por irradiação com uma lâmpada solar de tungstênio de 275 watt. Depois de 3 horas, resfriar para a temperatura ambi- ente e remover um sólido pardo por filtração. Concentrar o filtrado por rota- vaporização para dar 6,42 g de produto como um óleo laranja. Purificar so- 10

15

20

bre sílica gel [115 g, 0-15% (2M NH3/MeOH)/(1:1 CH2CI2/hexanos)] para dar 3,61 g (51%) do composto do título como um sólido amarelo. LC-ES/MS m/z 250, 252 (M+1), Tr = 2,0 min (86%). Material de partida: m/z 172 (M+1), Tr =1,7 min (14%). Exemplo 1

(±)-N-í7-Ciano-4-(6-flúor-piridin-2-ilmetil)-1,2.3.4-tetra-hidrociclo- pentarfelindol-2-illisobutiramida

isobutiramida (6,28 g, 18,8 mmols), 6-flúor-2-bromometilpiridina (3,93 g, 20,7 mmol), e Cs2CO3 (12,25 g, 37,6 mmols) em DMF (25 mL). Aquecer a reação a 50°C por 18 horas. Resfriar, diluir com EtOAc, e lavar com água (3 χ 200 mL). Secar a camada orgânica (MgSO4) e concentrar para dar 7,1 g de ma- terial bruto. Purificar por cromatografia sobre sílica gel (5-20% EtO- Ac/CH2CI2). Obter 4,0 g (56%) de um sólido amarelo-pardo. MS (m/z): 377 (M+1), 375 (M-1). Exemplo 1a & 1b

(R)- e (S)-N-f7-Ciano-4-(6-flúor-piridin-2-ilmetil)-1.2,3.4-tetra-hidro- ciclopentarblindol-2-ill-isobutiramida

Separar os enantiômeros do Exemplo 1 por cromatografia quiral

usando Chiralpak AD-H (MeOH).

Isômero 1 (R): 1,67 g 99% ee, HPLC: Rt= 3,44 (96,5%), 1H-RMN (DMSO-cfe) δ 8,22 (d, 1H, J = 7,5 Hz), 7,96-7,88 (m, 2H), 7,62 (d, 1H, J = 8,3 Hz), 7,38 (dd, 1H, J = 8,4, 1,8 Hz), 7,07 (td, 2H, J = 10,9, 3,9 Hz), 5,44 (dd, 2H, J = 19,2, 16,5 Hz), 4,86 (m, 1H), 3,28-3,12 (m, 2H), 2,69-2,61 (m, 2H),

2,32 (m, 1H), 0,97 (t, 6H,J = 6,4 Hz).

Isômero 2 (S): 1,45 g 98,9% ee, HPLC: Rt =3,44 min (100%), 1H- RMN (DMSO-Ci6) é idêntico aquele do Isômero 1.

F

Misturar (±)-N-(7-ciano-1,2,3,4-tetra-hidro-ciclopenta[ò]indol-2-il)- Exemplo 2

Éster isopropílico do ácido (±)-(7-Ciano-4-pirimidin-4-ilmetil-1.2.3.4-tetra- hidrociclopentarfr1indol-2-il)-carbâmico

em CH2Cb (12 mL), adicionar N,N-di-isopropiletilamina (475 mg, 640 μί, 3,68 mmols) e resfriar para 0 0C em uma atmosfera de nitrogênio. Adicionar cloreto de metanossulfonil (275 mg, 186 μΙ_, 2,40 mmols) e esquentar até a temperatura ambiente. Depois de agitar à temperatura ambiente por 1 hora, carregar a mistura reacional em um cartucho de extração de fase sólida Va- rian ChemEIut CE1005 (código do protudo da Varian 12198006) que fora pré-tratado com água (2 mL). Eluir CH2CI2 (30 mL) através do cartucho, re- colher e concentrar o eluente orgânico. Adicionar DMF ao eluente, e concen- trar a vácuo para dar uma solução do mesilato em DMF. A esta solução, adi- cionar éster isopropílico do ácido (±)-(7-ciano-1,2,3,4-tetra- hidrociclopenta[ò]indol-2-il)-carbâmico (495 mg, 1,75 mmol), Cs2CO3 (1,14 g, 3,5 mmols), e DMF (10 mL). Aquecer a mistura até 50 0C por 18 horas em um frasco vedado. Diluir a reação com EtOAc (100 mL) e lavar os orgânicos com água (3 χ 60 mL). Secar a camada orgânica em MgS04, filtrar, e con- centrar para dar 631 mg do produto bruto como um óleo vermelho. Purificar o óleo em 40 g sílica gel [40-90% EtOAc/(1:1 CH2CI2/hexanos)] para dar 487 mg (74%) do composto do título como um sólido branco. LCMS 92% @ 4,34 min (m/z): 376 (M + 1), 374 (M - 1), 420 (M + HCO2-). Exemplo 3

Éster isopropílico do ácido (S)-7-(Ciano-4-tiazol-5-ilmetil-1,2,3,4-tetra-hidro- ciclopentatólindol^-iD-carbâmico

NL ^N

A uma suspensão de pirimidin-4-ilmetanol (250 mg, 2,27 mmols) Adicionar N,N-di-isopropiletilamina (2,39 g, 3,2 mL, 18,5 mmols) e cloreto de metanossulfonil (1,27 g, 864 μΙ_, 11,1 mmols) a uma solução fria (0 °C) de 5-(hidroximetil)tiazol (1,22 g, 10,6 mmols) em CH2CI2 (50 mL) em uma atmosfera de nitrogênio. Agitar a reação à temperatura ambiente por 18 horas. Adicionar água (30 mL), separar as camadas, e secar os orgânicos em MgSO4. Filtrar e adicionar DMF (10 mL) à camada orgânica. Concentrar a vácuo deixando uma solução do mesilato em DMF. A esta solução, adicio- nar mais DMF (40 mL), éster isopropílico do ácido (S)-7-(ciano-1,2,3,4-tetra- hidro-ciclopenta[ò]indol-2-il)-carbâmico (2,50 g, 8,82 mmols), e Cs2CO3 (5,57 g, 17,6 mmols). Agitar à temperatura ambiente por 72 horas. Diluir a mistura reacional com EtOAc (300 mL), lavar os orgânicos com água (3 χ 130 mL), e em seguida salmoura (100 mL). Secar (MgSO4)1 filtrar, e concentrar os orgâ- nicos para dar 3,8 g de produto bruto como um óleo amarelo. Purificar sobre sílica gel [120 g, 30-60% EtOAc/(1:1 CH2CI2/hexanos)] para dar 2,22 g (66%) do composto do título como um sólido branco. LCMS 100% @ 4,46 min (m/z) 381 (M+H), 425 (M+HC02").

Usar o procedimento descrito acima no Exemplo 2 ou 3 to para converter os seguintes álcoois nos mesilatos: 2-hidroximetilpirimidina, 3- hidroximetil-4,5-dicloroisotiazol, 2-cloro-4-hidroximetiltiazol, 2-hidroxmetiltia- zol, e 5-hidroximetiltiazol.

Usando o 1,2,3,4-tetra-hidrociclopenta[jfc>]indol apropriadamente substituído, preparar os Exemplos 4 - 53 e os Intermediários 40-41, na Ta- bela 2, essencialmente de acordo com os procedimentos descritos nos E- xemplos 1 e 2, usando o halogeneto de heteroarilmetil ou mesilato de hete- roarilmetil apropriados, que foram descritos acima ou se encontram comerci- almente disponíveis. Preparar material quiral a partir do 1,2,3,4-tetra- hidrociclopenta[b]indol quiral correspondente preparado acima ou separar o material racêmico essencialmente da maneira descrita no Exemplo 1a e 1b. Tabela 2

Exemplo Nome químico MS (m/z) 4 éster isopropílico do ácido (R)-[7-Ciano-4-(6- flúor-piridin-2-ilmetil)-1,2,3,4-tetra-hidro- ciclopenta[ò]indol-2-il]-carbâmico 393 (M+1) éster isopropílico do ácido (S)-[7-Ciano-4-(6- flúor-piridin-2-ilmetil)-1,2,3,4-tetra-hidro- ciclopenta[ib]indol-2-il]-carbâmico 393 (M+1) 6* éster isopropílico do ácido (±)-[7-Ciano-4-(3- hidróxi-piridin-2-ilmetil)-1,2,3,4-tetra-hidro- ciclopenta[jb]indol-2-il]-carbâmico 391 (M+1) 7 éster etílico do ácido (±)-(7-Ciano-4-piridin-2- ilmetil-1,2,3,4-tetra-hidro-ciclopenta[b]indol-2- il)-carbâmico 361 (M+1) 8 éster isopropílico do ácido (±)-[7-Ciano-4-(6- difIuorometil-piridin-2-ilmetil)-1,2,3,4-tetra- hidro-ciclopenta[ib]indol-2-il]-carbâmico 425 (M+1) 9 éster isopropílico do ácido (±)-(7-Ciano-4- tiazol-4-i Imetil-1,2,3,4-tetra-h id ro- ciclopenta[ò]indol-2-il)-carbâmico 381 (M+1), 425 (M + HCO2") éster isopropílico do ácido (±)-[7-Ciano-4-(2- metil-tiazol-4-ilmetil)-1,2,3,4-tetra-hidro- ciclopenta[ò]indol-2-il]-carbâmico 395 (M+1), 439 (M + HCO2") 11 éster isopropílico do ácido (±)-(7-Ciano-4- pirimidin-2-ilmetil-1,2,3,4-tetra-hidro- ciclopenta[ó]indol-2-il)-carbâmico 376 (M+1) 12 éster isopropílico do ácido (±)-[4-(6-Flúor- piridin-2-ilmetil)-7-trifluorometóxi-1,2,3,4- tetra-hidro-ciclopenta[ò]indol-2-il]-carbámico 452 (M+1), 496 (M + HCO2") 13 éster isopropílico do ácido (±)-(7-Ciano-4- pirazin-2-ilmetil-1,2,3,4-tetra-hidro- ciclopenta[ib]indol-2-il)-carbâmico 376 (M+1), 420 (M + HCO2") 14** éster etílico do ácido (R)-(7-Ciano-4-piridin-2- ilmetil-1,2,3,4-tetra-hidro-ciclopenta[b]indol-2- il)-carbâmico 361 (M+1) Exemplo Nome químico MS (m/z) 15** éster etílico do ácido (S)-(7-Ciano-4-piridin-2- ilmetiM,2,3,4-tetra-hidro-ciclopenta[b]indol-2- il)-carbâmico 361 (M+1) 16 éster etílico do ácido (±)-(7-Ciano-4-tiazol-4- ilmetil-1,2,3,4-tetra-hidro-ciclopenta[ò]indol-2- il)-carbâmico 367 (M+1), 411 (M + HCO2") 17 éster isopropílico do ácido (±)-(7-Ciano-4- piridazin-3-ilmetil-1,2,3,4-tetra-hidro- ciclopenta[ó]indol-2-il)-carbâmico 367 (M+1), 411 (M + HCO2") 18 éster etílico do ácido (±)-(7-Ciano-4-pirazin- 2-ilmetil-1,2,3,4-tetra-hidro-ciclopenta[b]indol- 2-il)-carbâmico 367 (M+1), 411 (M + HCO2") 19 éster isopropílico do ácido (±)-[4-(5-Bromo- isotiazol-3-ilmetil)-7-ciano-1,2,3,4-tetra-hidro- ciclopenta[ò]indol-2-il]-carbâmico 459, 461 (M+1) éster isopropílico do ácido (±)-(7-Ciano-4- isotiazol-3-ilmetil-1,2,3,4-tetra-hidro- ciclopenta[6]indol-2-il)-carbâmico 381 (M+1) 21 éster isopropílico do ácido (±)-[4-(2-Cloro- tiazol-4-ilmetil)-7-ciano-1,2,3,4-tetra-hidro- ciclopenta[/)]indol-2-il]-carbâmico 415 (M+1), 459 (M + HCO2") 22 éster isopropílico do ácido (R)-(7-Ciano-4- pirazin-2-ilmetil-1,2,3,4-tetra-hidro- ciclopenta[ò]indol-2-il)-carbâmico 376 (M+1), 420 (M + HCO2") 23 éster isopropílico do ácido (S)-(7-Ciano-4- pirazin-2-ilmetil-1,2,3,4-tetra-hidro- ciclopenta[b]indol-2-il)-carbâmico 376 (M+1), 420 (M + HCO2") 24 éster isopropílico do ácido (R)-(7-Ciano-4- tiazol-4-ilmetil-1,2,3,4-tetra-hidro- ciclopenta[6]indol-2-il)-carbâmico 381 (M+1), 425 (M + HCO2") éster isopropílico do ácido (S)-(7-Ciano-4- tiazol-4-ilmetil-1,2,3,4-tetra-hidro- ciclopenta[ó]indol-2-il)-carbâmico 381 (M+1), 425 (M + HCO2") 26 éster isopropílico do ácido (R)-(7-Ciano-4- pirimidin-4-itmetil-1,2,3,4-tetra-hidro- ciclopenta[ò]indol-2-il)-carbâmico 376 (M+1), 374 (M-1) Exemplo Nome químico MS (m/z) 27 éster isopropílico do ácido (S)-(7-Ciano-4- pirimidin-4-ilmetil-1,2,3,4-tetra-hidro- ciclopenta[ib]indol-2-il)-carbâmico 376 (M+1), 374 (M-1) 28 éster isopropílico do ácido (±)-[7-Ciario-4-(3- metil-pirazin-2-ilmetil)-1,2,3,4-tetra-hidro- ciclopenta[ò]indol-2-il]-carbâmico 390 (M+1), 412 (M+Na) 29 éster isopropílico do ácido (±)-[4-(2-Cloro- pirimidin-4-ilmetil)-7-ciano-1,2,3,4-tetra-hidro- ciclopenta[ò]indol-2-il]-carbâmico 410 (M+1) éster isopropílico do ácido (±)-[7-Ciano-4- (4,5-dicloro-isotiazol-3-ilmetil)-1,2,3,4-tetra- hidro-ciclopenta[ò]indol-2-il]-carbâmico 449 (M+1) 447 (M-1) 31 éster isopropílico do ácido (±)-(7-Ciano-4- tiazol-2-ilmetil-1,2,3,4-tetra-hidro- ciclopenta[ò]indol-2-il)-carbâmico 381 (M+1), 403 (M+Na) 32 éster isopropílico do ácido (±)-(7-Ciano-4- tiazol-5-ilmetil-1,2,3,4-tetra-hidro- ciclopenta[ò]indol-2-il)-carbâmico 381 (M+1), 425 (M + HCO2") 33 éster isopropílico do ácido (±)-[4-(3-Cloro- pirazin-2-ilmetil)-7-ciano-1,2,3,4-tetra-hidro- ciclopenta[ò]indol-2-il]-carbâmico 410 (M+1), 408 (M-1) 34 éster isopropílico do ácido (±)-(7-Ciano-4- [1,2,5]tiadiazol-3-ilmetil-1,2,3,4-tetra-hidro- ciclopenta[ò]indol-2-il)-carbâmico 382 (M+1) éster isopropílico do ácido (±)-[7-Ciano-4-(6- metil-pirazin-2-ilmetil)-1,2,3,4-tetra-hidro- ciclopenta[ò]indol-2-il]-carbâmico 390 (M+1) 36 éster ter-butílico do ácido (±)-(7-Ciano-4- pirazin-2-ilmetil-1,2,3,4-tetra-hidro- ciclopenta[ò]iridol-2-il)-carbâmico 390,2 (M+1) 37 éster ter-butílico do ácido (±)-(7-Ciano-4- isotiazol-3-ilmetil-1,2,3,4-tetra-hidro- ciclopenta[Jb]indol-2-il)-carbâmico 395 (M+1) 38 éster isopropílico do ácido (S)-(7-Ciano-4- isotiazol-3-ilmetil-1,2,3,4-tetra-hidro- ciclopenta[ò]indol-2-il)-carbâmico 381 (M+1), 425 (M + HCO2") Exemplo Nome químico MS (m/z) 39 éster isopropílico do ácido (S)-(7-Ciano-4- tiazol-2-ilmetil-1,2,3,4-tetra-hidro- ciclopenta[6]indol-2-il)-carbâmico 381 (M+1), 425 (M + HCO2") 40 éster isopropílico do ácido (S)-(7-Ciano-4- [1,2,5]tiadiazol-3-ilmetil-1,2,3,4-tetra-hidro- ciclopenta[ò]indol-2-il)-carbâmico 382 (M+1), 426 (M + HCO2") 41 éster ter-butílico do ácido (R)-(7-Ciano-4- isotiazol-3-ilmetil-1,2,3,4-tetra-hidro- ciclopenta[ó]indol-2-il)-carbâmico 395 (M+1) 42 éster ter-butílico do ácido (S)-(7-Ciano-4- isotiazol-3-ilmetil-1,2,3,4-tetra-hidro- ciclopenta[ó]indol-2-il)-carbâmico 395 (M+1) 43** éster etílico do ácido (S)-(7-Ciano-4-isotiazol- 3-ilmetil-1,2,3,4-tetra-hidro-ciclopenta[£]indol- 2-il)-carbâmico 367 (M+1) 44 éster isopropílico do ácido (S)-(7-Ciano-4- tiazol-5-ilmetil-1,2,3,4-tetra-hidro- ciclopenta[ò]indol-2-il)-carbâmico 381 (M+1), 425 (M+ HCO2") 45 éster isopropílico do ácido (S)-[4-(5-Bromo- isotiazol-3-ilmetil)-7-ciano-1,2,3,4-tetra-hidro- ciclopenta[6]indol-2-il]-carbâmico 459, 461 (M+1) 46 éster ter-butílico do ácido (R)-[4-(6-Flúor- piridin-2-ilmetil)-7-(metoxiimino-metil)-1,2,3,4- tetra-hidro-ciclopenta[b]indol-2-il]-carbâmico 439 (M+1) 47 éster isopropílico do ácido (S)-[4-(3-Cloro- pirazin-2-ilmetil)-7-ciano-1,2,3,4-tetra-hidro- ciclopenta[ò]indol-2-il]-carbâmico 410 (M+1), 408 (M-1) 48** éster etílico do ácido (S)-(7-Ciano-4- [1,2,5]tiadiazol-3-ilmetil-1,2,3,4-tetra-hidro- ciclopenta[6]indol-2-il)-carbâmico 403 (M+1) 49 [7-ciano-4-(6-flúor-piridin-2-ilmetil)-1,2,3,4- tetra-hidro-ciclopenta[ò]indol-2-il]-amida do ácido (±)-Ciclopropanocarboxílico 375 (M+1) 50 (±)-N-(7-Ciano-4-piridin-2-ilmetil-1,2,3,4-tetra- hidro-ciclopenta[b]indol-2-il)-isobutiramida 359 (M+1) 51 (±)-N-[4-(6-Flúor-piridin-2-ilmetil)-7- (metoxiimino-metil)-1,2,3,4-tetra-hidro- ciclopenta[t»]indol-2-il]-isobutiramida 409 (M+1) Exemplo Nome químico MS (m/z) 52 [7-ciano-4-(6-flúor-piridin-2-ilmetil)-1,2,3,4- tetra-hidro-ciclopenta[/b]indol-2-il]-amida do ácido (R)-CiclopropanocarboxiIico 375 (M+1), 419 (M + HCO2") 53 [7-ciano-4-(6-flúor-piridin-2-ilmetil)-1,2,3,4- tetra-hidro-ciclopenta[ô]indol-2-il]-amida do ácido (S)-CiclopropanocarboxiIico 375 (M+1), 419 (M + HCO2") Intermedi- ário 40 éster isopropílico do ácido (S)-{7-Ciano-4-[2- (1,3-dioxo-1,3-di-hidro-isoindol-2-il)-piridin-3- ilmetil]-1,2,3,4-tetra-hidro-ciclopenta[b]indol- 2-il}-carbâmico 520 (M+1) Intermedi- ário 41*** éster etílico do ácido 5-((S)-7-Ciano-2- isopropoxicarbonilamino-2,3-di-hidro-1H- ciclopenta[b]indol-4-ilmetil)-tiazol-4- carboxílico LC-ES/MS m/z 453 (M+1), 451 (M-1), Tr = 2,4 min

* Bromidrato de 2-Bromometil-3-hidroxipiridina encontra-se comercialmente disponíveis na Lancaster Synthesis.

** Obter o exemplo mostrado por separação quiral do produto racêmico, de acordo com o procedimento apresentado para o Exemplo 1a, 1b. *** Efetuar a reação à temperatura ambiente. Procedimento Alternativo para o Intermediário 40

Éster isopropílico do ácido ((S)-7-Ciano-4-r2-(1.3-dioxo-1.3-di-hidro-isoindol- 2-in-piridin-3-ilmetil1-1.2.3.4-tetra-hidro-ciclopentafb1indol-2-ilVcarbâmico

Vr^r-CT VfChira'

Qjl

ohj

Dissolver éster isopropílico do ácido (S)-(7-ciano-1,2,3,4-tetra- hidro-ciclopenta[b]indol-2-il)-carbâmico (20 g, 70,59 mmols; ee >98%, 2o i- sômero em Chiracel OJ, 0,2% DMEA em Hexano/EtOH [80:20]) em dimetil sulfóxido (160 mL) e adicionar 2-(3-bromometil-piridin-2-il)-isoindol-1,3-diona (29,8 g, 84,71 mmols). Agitar a mistura até ser obtida uma solução límpida. Adicionar carbonato de césio (46,4 g, 141,18 mmols) e dimetilaminopiridina (875,5 mg, 7,06 mmol) em uma porção. Agitar a mistura resultante a 22/24 0C por 2 horas. Adicionar a mistura à água (1,4 L). Agitar a suspensão resul- tante por 30 minutos e filtrar. Lavar a torta resultante com água (100 ml). Dissolver o sólido molhado isolado em diclorometano (750 ml_) e separar a camada orgânica. Lavar a camada orgânica com salmoura e evaporar o sol- vente orgânico. Purificar o material resultante por cromatografia sobre sílica gel, eluindo com hexanos/acetona/CH2CI2 (3/1/1) para obter 24 g (58%). MS (m/z): 520 (M+1). Exemplo 54

Éster isopropílico do ácido (S)-r4-(2-Amino-piridin-3-ilmetil)-7-ciano-1.2,3.4- tetra-hidro-ciclopentafblindol-2-ill-carbâmico

dioxo-1,3-di-hidro-isoindol-2-il)-piridin-3-ilmetil]-1,2,3,4-tetra-hidro-

ciclopenta[fe]indol-2-il}-carbâmico (2,12 mmols, 1100 mg de material bruto) em uma mistura de THF ( 22 mL) e etanol ( 4 mL) e agitar por 15 minutos. Adicionar hidrato de hidrazina 0,5 mL, 10 mmols) e agitar a mistura à tempe- ratura ambiente por 18 horas. Filtrar a vácuo a reação bruta e lavar o sólido com THF (50 mL). Recolher o filtrado e remover o solvente a vácuo. Purificar o resíduo resultante por cromatografia sobre sílica gel (50-100% acetato de etila/CH2CI2) para dar 110 mg (13%) do composto do título. MS (m/z): 390 (M+1).

Procedimento alternativo: Dissolver éster isopropílico do ácido (S)-{7-ciano-4-[2-(1,3-dioxo-

1,3-di-hidro-isoindol-2-il)-piridin-3-ilmetil]-1,2,3,4-tetra-hidro- ciclopenta[ò]indol-2-il}-carbâmico (20 g; 34,64 mmols) em tetra-hidrofurano

Combinar éster isopropílico do ácido (S)-{7-ciano-4-[2-(1,3- (170 mL) e etanol (30 mL). Adicionar mono-hidrato de hidrazina (3,37 mL, 69,29 mmols) usando uma bomba de seringa durante 30 minutos. Agitar a mistura a 22/24 0C por 3 horas e em seguida filtrar. Lavar a torta com mais tetra-hidrofurano (50 ml). Evaporar os licores-mãe combinados e purificar o resíduo resultante por cromatografia sobre sílica gel eluindo com diclorome- tano/(2M NH3 em metanol/) (98:2). Combinar as frações contendo produto puro e evaporar o solvente. Secar o sólido até obter um peso constante e em seguida adicionar etanol (50 mL). Aquecer a mistura até o refluxo até ocorrer dissolução completa e em seguida deixar esfriar para a temperatura ambien- te por uma noite. Filtrar o sólido e filtrar a vácuo até obter um peso constante para dar 11,45 g (84%) do composto do título. MS (m/z): 390 (M+1). HPLC quiral: ee > 98% (Isômero 1, Chiralpak AD, EtOH/O.2% dimetiletilamina). Intermediário 42

(±)-2-(1.3-Dioxo-l .3-di-hidro-isoindol-2-il)-4-(6-flúor-piridin-2-ilmetil)-1,2,3,4- tetra-hidro-ciclopentaífclindol-7-carbonitrila

F

Dissolver (±)-2-(1,3-dioxo-1,3-di-hidro-isoindol-2-il)-1,2,3,4-tetra- hidro-ciclopenta[b]indol-7-carbonitrila (6,88 g, 21,0 mmol) e 2-bromometil-6- flúor-piridina (3,99 g, 21,0 mmol) em DMF (80 mL). Adicionar carbonato de césio (7,51 g, 23,1 mmol, 1,10 equivalente) e agitar a mistura reacional à temperatura ambiente em uma atmosfera de nitrogênio por 48 horas. Diluir a reação com acetato de etila, lavar com água (3*), secar em sulfato de sódio anidro, filtrar, e concentrar para obter um semissólido (8,10 g). Purificar o produto bruto em uma coluna com 120 g de sílica gel eluindo com 0 a 100% acetato de etila/hexanos para obter 6,7 g de um sólido pardo/castanho. Sus- pender o produto em éter (100 mL) à temperatura ambiente por uma noite. Filtrar o sólido, enxaguar com éter, e secar em alto vácuo para obter o com- posto do título como um sólido pardo (5,70 g, 62%). LCMS 437,1 (M+1). Intermediário 43 (±)-2-(1.3-Dioxo-l .3-di-hidro-isoindol-2-il)-4-piridin-2-ilmetil-1.2.3.4-tetra- hidro-ciclopentaíò1indol-7-carbonitrila

Aquecer uma mistura de 2-(1,3-dioxo-1,3-di-hidro-isoindol-2-il)- 1,2,3,4-tetra-hidro-ciclopenta[ib]indol-7-carbonitrila (5 g, 15,3 mmols) em DMF (25 ml) até 40 °C. Adicionar carbonato de césio (10,4 g, 32,4 mmols) e bromidrato de 2-bromometilpiridina (4,05 g, 16 mmols). Agitar a mistura a 40 0C por 24 horas. Adicionar a mistura à água (250 ml_) e agitar por 1 hora. Filtrar os sólidos e secar o material recolhido a vácuo. Adicionar o sólido ao etanol (25 mL) e refluxar por 30 minutos. Resfriar a mistura para 22 0C e fil- trar. Secar o sólido a vácuo para obter um peso constante para dar 4,8 g (75%) do composto do título. MS (m/z): 419 (M+1). Intermediário 44

(±V2-Amino-4-(6-flúor-piridin-2-ilmetil)-1,2.3.4-tetra-hidro-ciclopentaífe1indol-

7-carbonitrila

F

Dissolver (±)-2-(1,3-dioxo-1,3-di-hidro-isoindol-2-il)-4-(6-flúor- piridin-2-ilmetil)-1,2,3,4-tetra-hidro-ciclopenta[jb]indol-7-carbonitrila (5,31 g, 12,2 mmols) em etanol (15 mL)/tetra-hidrofurano (85 mL). Adicionar mono- hidrato de hidrazina (4,43 ml, 91,2 mmols, 7,50 equivalentes) e agitar à tem- peratura ambiente em uma atmosfera de nitrogênio por uma noite. Diluir com acetato de etila (150 ml), remover os sólidos brancos por filtração, lavar a camada orgânica com carbonato de potássio a 10% duas vezes, secar em sulfato de sódio anidro, filtrar, e concentrar para obter o composto do título como um óleo laranja (3,42 g, 91%). LCMS 307,0 (M+1), 305,0 (M-1). Intermediário 45

Cloridrato_de_(±)-2-Amino-4-piridin-2-ilmetil-1,2,3.4-tetra-hidro-

ciclopenta[ò1indol-7-carbonitrila

N

HCl

Adicionar 2-(1,3-dioxo-1,3-di-hidro-isoindol-2-il)-4-piridin-2-ilmetil- 1,2,3,4-tetra-hidro-ciclopenta[b]indol-7-carbonitrila (77 g, 184 mmols) a THF (1,3 L) e etanol (230 mL). Agitar a mistura por 10 minutos e e em seguida adicionar mono-hidrato de hidrazina (20 mL, 400 mmol). Agitar a mistura a 22 0C por 16 horas. Filtrar a mistura e evaporar os licores-mãe. Dissolver o resíduo em diclorometano (300 mL). Adicionar uma solução de cloreto de hidrogênio 4M em dioxano (50 mL) e agitar a mistura por 2 horas. Filtrar e secar o sólido isolado a vácuo para obter um peso constante para dar 54 g (90%) do composto do título. MS (m/z): 289 (M+1). Preparar os seguintes ésteres ter-butílicos do ácido carbâmico

quiral, Intermediários 46-51 na Tabela 3, usando o Intermediário 16 e alquilar o halogeneto de heteroarilmetil ou mesilato de heteroarilmetil apropriados, essencialmente da maneira descrita nos procedimentos do Exemplo 1 e E- xemplo 2. Tabela 3

Intermediário Nome químico MS (m/z) 46 éster ter-butílico do ácido (R)-(7-Ciano-4- [1,2,5]tiadiazol-3-ilmetil-1,2,3,4-tetra- hidro-ciclopenta[ò]indol-2-il)-carbâmico 396 (M+1) 47 éster ter-butílico do ácido (R)-(7-Ciano-4- tiazol-4-ilmetil-1,2,3,4-tetra-hidro- ciclopenta[b]indol-2-il)-carbâmico 395 (M+1) Intermediário Nome químico MS (m/z) 48 éster ter-butílico do ácido (R)-(7-Ciano-4- tiazol-2-ilmetil-1,2,3,4-tetra-hidro- ciclopenta[ò]indol-2-il)-carbâmico 395 (M+1) 49 éster ter-butílico do ácido (R)-(7-Ciano-4- tiazol-5-i Imeti I-1,2,3,4-tetra-h id ro- ciclopenta[ò]indol-2-il)-carbâmico 395 (M+1) 50 éster ter-butílico do ácido (R)-{7-Ciano-4- [2-(1,3-dioxo-1,3-di-hidro-isoindol-2-il)- piridin-3-ilmetil]-1,2,3,4-tetra-hidro- ciclopenta[b]indol-2-il}-carbâmico 534 (M+1) 51 éster etílico do ácido (R)-5-(2-ter- Butoxica rbonilamino-7-ciano-2,3-di-hidro- 1H-ciclopenta[b]indol-4-ilmetil)-tiazol-4- carboxílico 467 (M+1)

Intermediário 52

Dicloridrato de (R)-2-Amino-4-isotiazol-3-ilmetil-1.2.3.4-tetra-hidro- ciclopentarfrlindol-7-carbonitrila

Agitar uma suspensão de éster ter-butílico do ácido (R)-(7-ciano- 4-isotiazol-3-ilmetil-1,2,3,4-tetra-hidro-ciclopenta[ib]indol-2-il)-carbâmico (1,16 g, 3,19 mmols) em HCI 4M em dioxano (20 mL) por 2 horas à temperatura ambiente, e em seguida concentrar a vácuo. Secar o resíduo a vácuo por

uma noite a 40°C. MS (m/z): 295 (M+1).

Preparar as seguintes aminas, Intermediários 53-59 listados na

Tabela 4, essencialmente da maneira descrita no procedimento para o In- termediário 52, usando o éster ter-butílico do ácido (7-ciano-4-hetero- arilmetil-1,2,3,4-tetra-hidro-ciclopenta[ò]indol-2-il)-carbâmico apropriado. Iso- lar as aminas como sais de cloridrato ou dicloridrato. Tabela 4

Intermediá- rio Nome químico MS (m/z) 53 (±)-2-Amino-4-pirazin-2-ilmetil-1,2,3,4-tetra- hidro-ciclopenta[ò]indol-7-carbonitrila 290 (M+1) 54 (f?)-2-Amino-4-[1,2,5]tiad iazol-3-ilmetil-1,2,3,4- tetra-hidro-ciclopenta[b]indol-7-carbonitrila 296 (M+1) 55 (f?)-2-Amino-4-tiazol-4-ilmetil-1,2,3,4-tetra- hidro-ciclopenta[ò]indol-7-carbonitrila 295 (M+1) 56 (f?)-2-Amino-4-tiazol-2-ilmetil-1,2,3,4-tetra- hidro-ciclopenta[ò]indol-7-carbonitrila 295 (M+1) 57 (R)-2-Amino-4-tiazol-5-ilmetil-1,2,3,4-tetra- hidro-ciclopenta[)b]indol-7-carbonitrila Sem dados 58 (R)-2-Amino-4-[2-(1,3-dioxo-1,3-di-hidro- isoindol-2-il)-piridin-3-ilmetil]-1,2,3,4-tetra- hidro-ciclopenta[ò]indol-7-carbonitrila 434 (M+1) 59 éster etílico do ácido (R)-5-(2-Amino-7-ciano- 2,3-dihdro-1H-ciclopenta[ib]indol-4-ilmetil)- tiazol-4-carboxílico 367 (M+1)

Exemplo 55

(±)-3-r7-Ciano-4-(6-flúor-piridin-2-ilmetin-1.2.3.4-tetra-hidro- ciclopentafò1indol-2-il1-1.1 -dimetil-ureia

F

A uma solução de (±)-2-amino-4-(6-flúor-piridin-2-ilmetil)-1,2,3,4-

tetra-hidro-ciclopenta[ò]indol-7-carbonitrila (70 mg, 0,23 mmol) e di- isopropiletilamina (0,35 mmol, 61 μΙ_) em diclorometano (1 mL) adicionar clo- reto de N,N-dimetilcarbamoil (0,35 mmol, 32 μΙ_) e agitar à temperatura am- biente por uma noite. Carregar a solução em sílica gel e purificar por croma- tografia em coluna (0-100% acetato de etila/diclorometano) para obter o composto do título. LCMS 378,1 (M+1). Exemplo 56 Éster isopropílico do ácido (±)-(7-Ciano-4-piridin-2-ilmetil-1.2.3,4-tetra-hidro- ciclopentarblindol-2-iO-carbâmico

•v^rrVr

Il η yj o '

A uma solução de (±)-2-amino-4-piridin-2-ilmetil-1,2,3,4-tetra- hidro-ciclopenta[ò]indol-7-carbonitrila (2,32 g, 8,05 mmols) e di- isopropiletilamina (9,65 mmols, 1,68 mL) em diclorometano (10 mL) adicio- nar isopropilcloroformiato (8,86 mmols, 8,9 mL) e agitar à temperatura ambi- ente por uma noite. Diluir com acetato de etila e lavar com uma solução de K2CO3 a 10% (2χ). Secar a porção orgânica em Na2SO4, filtrar, e concentrar para obter 3,3 g. Purificar por cromatografia em coluna (0-100% acetato de etila/diclorometano) para obter 2,48 g (82%) do produto racêmico. LCMS 375,2 (M+1). Procedimento alternativo:

Adicionar cloridrato de (±)2-amino-4-piridin-2-ilmetil-1,2,3,4-tetra- hidro-ciclopenta[b]indol-7-carbonitrila (35 g, 108 mmol) a uma mistura de di- clorometano (350 mL) e piridina (70 mL). Agitar a mistura em uma atmosfera de nitrogênio e resfriar para 5 °C. Adicionar cloroformiato de isopropila (solu- ção 1M em tolueno, 162 mL, 162 mmol). Remover o banho de gelo e agitar a mistura a 22 °C. Depois de 16 horas evaporar o solvente. Adicionar o resí- duo resultante à água (350 mL) e agitar 2 horas. Filtrar e secar o sólido reco- Ihido a vácuo a 45 0C. Adicionar o sólido a acetato de etila (400 mL) e aque- cer a mistura até o refluxo. Em seguida resfriar para 22 0C e filtrar o sólido. Adicionar o sólido molhado a acetato de etila (200 mL) e aquecer até o reflu- xo por 30 minutos. Resfriar a mistura para 22 0C durante uma hora e em se- guida resfriar para 0-5 0C durante 5 minutos. Filtrar a mistura e secar o sóli- do isolado a vácuo para obter um peso constante para dar 23 g (62%) do composto do título. MS (m/z): 374 (M+1). Exemplo 56a & 56b

Éster isopropílico do ácido (R)- e (SU7-Ciano-4-piridin-2-ilmetil-1,2,3,4-tetra- hidro-ciclopentaífo1indol-2-il)-carbâmico

Separar os enantiômeros do Exemplo 56 por cromatografia qui- ral preparatória usando uma coluna Chiralpak AD (8 χ 33 cm), eluindo com 100% EtOH a 375 mL/min e 250 nm. Isômero 1 (R): 1,14 g, 99,9% ee (con- dições analíticas: coluna Chiralpak AD-H, eluindo com 100% EtOH/0,2% di- metiletilamina; LCMS 375,2 (M+1). Isômero 2 (S): 1,67 g, 99,4% ee; LCMS 375,2 (M+1).

Primeiro camimho alternativo para 56(b): éster isopropílico do ácido (S)-(7-

Ciano-4-piridin-2-ilmetil-1.2,3^-tetra-hidro-ciclopentafò1indol-2-il)-carbâmico

H

O

rNYor

o I

Adicionar éster isopropílico do ácido (S)-7-ciano-1,2,3,4-tetra-

hidro-ciclopenta[ò]indol-2-il)-carbâmico (Intermediário 15) (13 g, 41,3 mmol) a DMF (100 mL) e esquentar a solução até 40 °C. Adicionar carbonato de césio (42 g, 129 mmol) em uma porção e agitar a mistura por 30 minutos a 40 °C. Adicionar bromidrato de 2-bromometilpiridina 21 g, 83 mmols) aos poucos durante 4 horas. Agitar a mistura a 40 0C por 18 horas. Adicionar a mistura à água fria (1 L) a uma temperatura de 0 a 5 0C e agitar por 30 minu- tos. Isolar o sólido por filtração e secar a vácuo até obter um peso constante. Passar a material por um chumaço de sílica gel eluindo com CH2CI2/EtOAc (7/3). Combinar as frações contendo o produto e evaporar o solvente para dar um sólido castanho pálido. Recristalizar a partir de acetato de etila para dar 15,3 g (77%) do composto do títulos. LC/MS (m/z) 375 (M+1). Segundo caminho alternativo para 56b:

(condições de HPLC - coluna: Zorbax® SB-Fenila, Resolução Rápida, 4,6 χ 75 mm, 3,5 microns; solvente: 10% acetonitrila/ 90% água com 0,05% TFA; UV at 230 nm)

Etapa 1: Éster ter-butílico do ácido (±)-(7-Ciano-1.2.3.4-tetra-hidro- ciclopentarò1indol-2-il)-carbâmico

Equipar um balão de fundo redondo de 12 I com 3 gargalos e com agitação suspensa, um termoelemento, um funil de adição, uma entrada de nitrogênio, e um banho de resfriamento. Carregar o balão com (±)-2-(1,3- dioxo-1,3-di-hidro-isoindol-2-il)-1,2,3,4-tetra-hidro-ciclopenta[ib]indol-7- carbonitrila (500 g, 1,53 moles) e THF (5 L). Agitar a suspensão resultante à temperatura ambiente. Adicionar mono-hidrato de hidrazina (185,6 mL, 3,82 moles) em uma lenta corrente a partir de um funil de adição durante 10 mi- nutos. Agitar a mistura resultante à temperatura ambiente por uma noite (cerca de 18 horas). Adicionar água fria ao banho e carregar o funil de adi- ção com di-f-butil dicarbonato (875,1 g, 4,01 moles; previamente derretido até ficar líquido). Adicionar à mistura reacional durante 2 horas, mantendo a temperatura do pote abaixo de 30°C. Depois de 15 minutos, analisar por HPLC para verificar consumo completo da amina intermediária. Filtrar a mis- tura reacional por um chumaço de polipropileno em um filtro de mesa ("table- top filter") de aço inoxidável, e lavar a torta de filtrado resultante com acetato de etila (2 χ 1 L). Concentrar o filtrado a vácuo para remover a maior parte da THF. Purificar a mistura resultante (cerca de 1 I) através de um chumaço de sílica gel (4 Kg Kieselgel-60), eluindo com acetato de etila. Concentrar o eluente recuperado a vácuo até deixar um óleo escuro. Adicionar heptano (2 L) e acetato de etila (350 mL) e centrifugar o conteúdo em um evaporador giratório à temperatura ambiente por 2 horas. Adicionar gelo ao banho e cen- trifugar a suspensão resultante a 5 0C por mais 2 horas. Filtrar os sólidos, enxaguar com 90/10 heptano/acetato de etila (2 χ 500 mL) e secar a vácuo a °C. Obter o composto do título como um sólido pardo claro com 91,6% de rendimento.

Etapa 2: Éster ter-butílico do ácido (±V (7-Ciano-4-piridin-2-ilmetil-1,2,3,4- tetra-hidro-ciclopentafdlindol-2-ilVcarbâmico

Equipar um balão de 20 I e saída inferior com agitação suspen- sa, um termoelemento, e uma entrada de nitrogênio. Carregar o balão com éster ter-butílico do ácido (±)-(7-ciano-1,2,3,4-tetra-hidro-ciclopenta[ó]indol-2- il)-carbâmico (500 g, 1,68 moles) e diclorometano (5 L). Começar a agitação e adicionar sulfato ácido de tetra n-butilamônio (58,9 g, 0,168 mol) seguido de bromidrato de 2-(bromometil)piridina (510,4 g, 2,02 moles). Adicionar á- gua desionizada (2 L) seguida de uma solução NaOH a 50% (445,3 mL, 8,41 moles). Agitar a mistura resultante vigorosamente por uma noite (cerca de 12 horas). Interromper a agitação, deixar as camadas separarem, e descar- tar a camada aquosa (superior). Lavar os orgânicos com água desionizada (3x4 L), secar em sulfato de sódio, e concentrar a vácuo até deixar cerca de 500 mL. Purificar o material bruto através de um chumaço de sílica gel (7 Kg Keiselgel 60) usando 1:1 acetato de etila/heptano como eluente. Concen- trar o eluente a vácuo para dar 560 gramas do composto do título como um sólido esbranquiçado (81,4%). Etapa 3: Éster ter-butílico do ácido (R)- and (S)- (7-Ciano-4-piridin-2-ilmetil- 1,2,3,4-tetra-hidro-ciclopentafb1indol-2-il)-carbâmico

Usar o método de HPLC quiral analítico a seguir para analisar os enantiômeros: coluna 4,6 χ 150 mm Chiralpak AD-H (Quiral Technologies), fase móvel 20:80:0,2 acetonitrila/etanol desnaturado grau 3A/dimetiletilamina, taxa de fluxo 0,6 mL/min, detecção UV @ 255 nm. O enantiômero 1 elui em 4,0 minutos e o enantiômero 2 elui em 5,2 minutos. Uma impureza a 8% (255 nm) elui em 3,6 minutos. Purificar o éster ter- butílico do ácido (±)- (7-ciano-4-piridin-2-ilmetil-1,2,3,4-tetra-hidro- ciclopenta[ò]indol-2-il)-carbâmico (528 g) por HPLC quiral preparatória usan- do as seguintes condições: coluna 8 χ 33 cm Chiralpak AD, mesma fase móvel que a analítica, taxa de fluxo 375 mL/min, detecção UV a 270 nm. Dissolver 108 g de amostra na fase móvel a uma concentração de 75 mg/mL final. Carregar 4,0 g/injeção com a fração de enantiômero 1 eluindo entre 3,5-5,5 minutos e com a fração de enantiômero eluindo entre 6-10 minutos. Ajustar o tempo de operação final em 7,5 min/injeção com amontoamento parcial do perfil do enantiômero 2 eluindo logo depois de cada injeção para reduzir o consumo de solvente. Purificar os 420 g restantes através de um chumaço de sílica usando sílica gel Merck 9385 60 Angstrom malha 230- 400, eluindo com um sistema solvente 1:2:7 diclorometano/heptano/éter me- til t-butílico. Usar um chumaço de sílica de 3,5 kg com filtração a vácuo a 140 g de amostra/chumaço. O racemato começa a emergir depois de 5 vo- lumes de coluna. Usar 100% de éter metil t-butílico seguidos de 100% de acetona para forçar a saída do resto do racemato do chumaço. Obter um total de 358,5 g de racemato puro 98+% desta maneira. Resolver este mate- rial como descrito acima por HPLC quiral preparatória. Obter 208,8 g (99,9% ee) de enantiômerol (isômero R) e 197 g (99,6% ee) de enantiômerol 2 (i- sômero S).

Etapa 4: Cloridrato de (S)-2-Amino-4-piridin-2-ilmetil-1.2.3.4-tetra-hidro- ciclopenta[ò1indol-7-carbonitrila

uma manta de aquecimento, uma agitador de ar, uma sonda de temperatura, uma entrada de nitrogênio, e um funil de adição. Carregar o balão com éster ter-butílico do ácido (S)-(7-ciano-4-piridin-2-ilmetil-1,2,3,4-tetra-hidro- ciclopenta[í>]indol-2-il)-carbâmico (85,0 g, 0,22 moles), e EtOH (850 mL). A- dicionar HCI concentrado (180 mL, 2,20 moles) em uma porção. Aquecer a solução resultante até 45-50 0C e agitar por 90 minutos, e depois disso ana- Iisar por HPLC para indicar consumo completo do material de partida. Trans- ferir a mistura para um balão de Buchi1 diluir com água desionizada (595 mL), e concentrar a vácuo para remover o EtOH. Adicionar EtOAc em duas porções (2 χ 170 mL) e reextrair para remover tanto o EtOAc quanto o EtOH residual. Transferir o concentrado aquoso para um balão de reação de 5 L, e resfriar para 10-15 °C. Enquanto mantendo a temperatura da reação a < 30 °C, ajustar o pH da solução em 11 - 12 pela adição em gotas de NaOH 5 M (950 mL). Extrair a mistura resultante com CH2CI2 (1300 mL, 800 mL). Lavar os extratos de CH2CI2 combinados com água desionizada (500 mL), secar em Na2SO4, e concentrar a vácuo para dar o composto do título como um

sólido verde claro (65,0 g, 103 %).

Etapa 5: Éster isopropílico do ácido (S)-(7-Ciano-4-piridin-2-ilmetil-1,2.3,4- tetra-hidro-ciclopentaffolindol-2-ilVcarbâmico

Equipar um balão de fundo redondo de 3 I com 3 gargalos com

H

Equipar um balão de reação de 2 L com um banho de resfria- mento, um agitador de ar, uma sonda de temperatura, e um funil de adição. Carregar o balão com cloridrato de (S)-2-amino-4-piridin-2-ilmetil-1,2,3,4- tetra-hidro-ciclopenta[ò]indol-7-carbonitrila (62,8 g, 0,218 moles), DMF (188 mL), e trietilamina (33,4 ml_, 0,240 mol). Resfriar a solução resultante para 0 0C usando um banho de gelo/acetona. Enquanto mantendo a temperatura a <10 °C, adicionar cloroformiato de isopropila (218 mL, 0,218 mol, 1 M em tolueno) em gotas via um funil de adição. Quando a adição está completa, remover o banho de resfriamento foi removido e deixar a mistura esquentar até a temperatura ambiente. Depois de 1 hora, analisar por HPLC para indi- car que a reação está completa, e despejar a mistura em uma solução de água desionizada (1256 mL) e EtOAc (1884 mL). Separar as camadas, filtrar a camada orgânica, e lavar mais uma vez com uma solução 1:1 de á- gua:salmoura, e em seguida secar em Na2S04. Concentrar a vácuo a 55 0C até cerca de 15 volumes, e deixar o resultante esfriar para a temperatura ambiente, dando um precipitado branco. Adicionar heptano (628 mL) e agitar por 20 minutos. Concentrar novamente a mistura até cerca de 15 volumes. Filtrar os sólidos, lavar com heptano, e secar para dar o composto do título como um sólido branco macio (68,9 g, 84,5%). 1H RMN (500 MHz, DMSO- cfe), δ 8,49 (dd, 1H), 7,86 (d, 1H, J = 1,5), 7,71-7,75 (m, 1H), 7,60 (d, 1H, J = 9,0), 7,57 (d, 1H, J = 9,0), 7,36 (dd, 1H), 7,28-7,26 (m, 1H), 7,14 (d, 1H, J=7,5), 5,44 (s, 2 H), 4,79-4,72 (m, 1H), 4,71-4,66 (m, 1H), 3,22-3,20 (m, 1H), 3,16-3,12 (m, 1 H), 2,73-2,66 (m, 2 H), 1,16 (dd, 6 H). Exemplo 57

(R)-N'-f7-Ciano-4-(isotiazol-3-ilmetil)-1,2,3.4-tetra-hidro-ciclopentaíiblindol-2- in-N,N-dimetilsulfamida

Misturar sal de dicloridrato de (/?)-2-amino-4-isotiazol-3-ilmetil- 1,2,3,4-tetra-hidro-ciclopenta[b]indol-7-carbonitrila (1,0 g, 2,72 mmols), trieti- Iamina (0,76 mL, 5,44 mmols), e 1,4-diazabiciclo[2,2,2]octano (0,52 g, 4,63 mmols) em CHCI3 (80 mL) e aquecer em um banho de óleo até a temperatu- ra interna atingir 54 °C. Adicionar uma solução de cloreto de dimetilsulfamoil (0,35 mL, 3,26 mmols) em CHCI3 (10 mL) em gotas à mistura reacional via o funil de adição em uma atmosfera de nitrogênio durante 30 minutos. Agitar a mistura resultante por mais uma hora a 54°C e em seguida resfriar para a temperatura ambiente. Diluir com CH2CI2 (150 mL), lavar a camada orgânica com NaHCO3Saturado, secar (Na2SO4), filtrar, e concentrar a vácuo. Purificar usando cromatografia sobre sílica gel com EtOAc/hexano(8/2) para dar 0,82 g (75%) do composto do título. 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ 9,03 (s, 1H), 7,88 (s, 1H), 7,74 (d, J = 5,0 Hz1 1H), 7,64 (d, J = 5,1 Hz, 1H), 7,38 (d, J = 5,0 Hz, 1H), 7,17(s, 1H), 5,52 (s, 2H), 4,52-4,40 (m, 2H), 3,31-3,18 (m, 2H), 2,62 (s, 6H).

Usando a 4-(heteroarilmetil)-1,2,3,4-tetra-hidro-ciclopenta[ò]-

indol-2-ilamina racêmica ou quiral apropriada, preparar os Exemplos 58-89 e Intermediários 60-61 na Tabela 5, usando cloroformiato ou cloreto de ácido apropriado (essencialmente de acordo com o procedimento descrito no E- xemplo 56) ou o cloreto de sulfonil ou sulfamoil apropriado (essencialmente de acordo com o procedimento descrito no Exemplo 57).

Tabela 5

Exem- plo Nome químico Estrutura MS (m/z) 58 éster isopropílico do ácido (±)-[7-Ciano-4-(6- flúor-piridin-2-ilmetil)- 1,2,3,4-tetra-hidro- ciclopenta[b]indol-2-il]- carbâmico ■v^t-AY irvy^ ° vTp F 393 (M+1) Exem- plo Nome químico Estrutura MS (m/z) 59 éster etílico do ácido (±)-[7-Ciano-4-(6-flúor- piridin-2-ilmetil)- 1,2,3,4-tetra-hidro- ciclopenta[b]indol-2-il]- carbâmico F 379 (M+1) 60 éster propílico do ácido (±)-[7-Ciano-4-(6-flúor- piridin-2-ilmetil)- 1,2,3,4-tetra-hidro- ciclopenta[b]indol-2-il]- carbâmico F 393 (M+1) 61 éster etílico do ácido (±)-(7-Ciano-4-piridin-2- ilmetil-1,2,3,4-tetra- hidro- ciclopenta[jfc>]indol-2-il)- carbâmico H η ^ Y^rAJ o 361 (M+1) 62 éster metílico do ácido (±)-[7-Ciano-4-(6-flúor- piridin-2-ilmetil)- 1,2,3,4-tetra-hidro- ciclopenta[jfc)]indol-2-il]- carbâmico H η ^WTf^ F 365 (M+1) 63 éster isobutílico do áci- do (±)-[7-Ciano-4-(6- flúor-piridin-2-ilmetil)- 1,2,3,4-tetra-hidro- ciclopenta[ò]indol-2-il]- carbâmico F 407 (M+1) 64 éster isobutílico do áci- do (±)-(7-Ciano-4- piridin-2-ilmetil-1,2,3,4- tetra-hidro- ciclopenta[jb]indol-2-il)- carbâmico 389 (M+1) Exem¬ Nome químico Estrutura MS plo (m/z) 65* éster isobutílico do áci¬ 0 Chiral 389 do (S)-(7-Ciano-4- (M+1) piridin-2-ilmetil-1,2,3,4- tetra-hidro- ciclopenta[ib]indol-2-il)- carbâmico 66* éster isobutílico do áci¬ [I I )--- Chiral 389 do (R)-(7-Ciano-4- (M+1) piridin-2-ilmetil-1,2,3,4- tetra-hidro- ciclopenta[ò]indol-2-il)- carbâmico 67* éster isobutílico do áci¬ ° Chiral 407 do (R)-[7-Ciano-4-(6- F (M+1) flúor-piridin-2-ilmetil)- 1,2,3,4-tetra-hidro- ciclopenta[à]indol-2-il]~ carbâmico CO éster isobutílico do áci¬ -V___y~T''BTT0^ 407 CO do (S)-[7-Ciano-4-(6- WU 0 (M+1) flúor-piridin-2-ilmetil)- [I I Chiral 1,2,3,4-tetra-hidro- vTp ciclopenta[ò]indol-2-il]- F carbâmico 69 (±)-N-[7-Ciano-4-(6- H ,0 385 flúor-piridin-2-ilmetil)- F (M+1) 1,2,3,4-tetra-hidro- ciclopenta[ò]indol-2-il]- metanossulfonamida 70 (±)-N'-[7-Ciano-4-(6- o 414 flúor-piridin-2-ilmetil)- F (M+1) 1,2,3,4-tetra-hidro- 412 (M- ciclopenta[ò]indol-2-il]- 1) N,N-dimetilsulfamida Exem¬ Nome químico Estrutura MS plo (m/z) 71 [7-ciano-4-(6-flúor- H9 ^ ^ 413 piridin-2-ilmetil)- F (M+1) 1,2,3,4-tetra-hidro- ciclopenta[ifc>]indol-2-il]- amida do ácido (±)- Propano-1-sulfônico 72 [7-ciano-4-(6-flúor- η 9 411 piridin-2-ilmetil)- 1TQ (M+1) 1,2,3,4-tetra-hidro- F 409 (M- ciclopenta[ò]indol-2-il]- 1) amida do ácido (±)- Ciclopropanossulfônico 73 [7-ciano-4-(6-flúor- η 9. 399 piridin-2-ilmetil)- F (M+1) 1,2,3,4-tetra-hidro- 397 ciclopenta[b]indol-2-il]- (M-1) amida do ácido (±)- Etanossulfônico 74 (f?)-N'-[7-Ciano-4-(6- H 0 414 flúor-piridin-2-ilmetil)- M ^ -N-O / (M+1) 1,2,3,4-tetra-hidro- 0 412 (M- ciclopenta[ò]indol-2-il]- Chiral 1) N,N-dimetilsulfamida "-Q F 75 (S)-N'-[7-Ciano-4-(6- H ,0 414 flúor-piridin-2-ilmetil)- Chiral (M+1) 1,2,3,4-tetra-hidro- '-Q 412 (M- ciclopenta[ò]indol-2-il]- F 1) N,N-dimetilsulfamida 76 (±)-N'-[7-Ciano-4- H ,0 396 (piridin-2-ilmetil)- 1O (M+1) 1,2,3,4-tetra-hidro- 394 (M- ciclopenta[jt>]indol-2-il]- 1) N,N-dimetilsulfamida Exem¬ Nome químico Estrutura MS plo (m/z) 77 (±)-N'-[7-Ciano-4-(6- H ,O 442 flúor-piridin-2-ilmetil)- 0 ^ (M+1) 1,2,3,4-tetra-hidro- wQ 440 (M- ciclopenta[jb]indol-2-il]- F 1) N,N-dietilsulfamida 78 (7-ciano-4-piridin-2- H ,0 393 ilmetil-1,2,3,4-tetra- iTW 0 (M+1) hidro- 391 ciclopenta[ò]indol-2-il)- (M-1) amida do ácido (±)- Ciclopropanossulfônico 79* [7-ciano-4-(6-flúor- H ,0 411 piridin-2-ilmetil)- ° (M+1) 1,2,3,4-tetra-hidro- N Chiral 409 (M- ciclopenta[jb]indol-2-il]- --d 1) amida do ácido (R)- Ciclopropanossulfônico 80* [7-ciano-4-(6-flúor- H 0 411 piridin-2-ilmetil)- /γ"Ν'?Ύ (M+1) 1,2,3,4-tetra-hidro- Il Chiral 409 (M- ciclopenta[ò]indol-2-il]- N 1) amida do ácido (S)- «d Ciclopropanossulfônico 81 (±)-N'-[7-Ciano-4- Hm* κ 397 (pirazin-2-ilmetil)- N-S-N (M+1) 1,2,3,4-tetra-hidro- M ciclopenta[/?]indol-2-il]- N N,N-dimetilsulfamida 82* (R)-N'-[7-Ciano-4- H O 396 (piridin-2-ilmetil)- Y^Y^J o \ (M+1) 1,2,3,4-tetra-hidro- \í^^N Chiral ciclopenta[ò]indol-2-il]- "O N,N-dimetilsulfamida Exem¬ Nome químico Estrutura MS plo (m/z) 83* (7-ciano-4-piridin-2- H ,0 393 ilmetil-1,2,3,4-tetra- 0 (M+1) hidro- N Chiral ciclopenta[í)]indol-2-il)- amida do ácido (R)- Ciclopropanossulfônico 84* (R)-N'-[7-Ciano-4- H n κ 397 (pirazin-2-ilmetil)- N-S-N (M+1) 1,2,3,4-tetra-hidro- iVvCi °v ciclopenta[b]indol-2-il]- Il I / ^ Chiral N,N-dimetilsulfamida N 85 (R)-N'-(7-Ciano-4- H η* κ 402 tiazol-4-ilmetil-1,2,3,4- N-S-N (M+1) tetra-hidro- I Chiral ciclopenta[b]indol-2-il)- N,N-dimetilsulfamida 86 (R)-N'-(7-Ciano-4- H li κ 402 tiazol-2-ilmetil-1,2,3,4- n. /VT"' (M+1) tetra-hidro- I /"^ Chiral ciclopenta[ò]indol-2-il)- N,N-dimetilsulfamida 87 (f?)-N'-(7-Ciano-4- H 9 κ 402 tiazol-5-ilmetil-1,2,3,4- [I I / ^ Chiral (M+1) tetra-hidro- N ciclopenta[b]indol-2-il)- N,N-dimetilsulfamida 88 (f?)-N'-(7-Ciano-4- Hi? κ 403 [1,2,5]tiadiazol-3- N-S-N (M+1) ilmetil-1,2,3,4-tetra- V<r0 δ ' hidro- Chiral ciclopenta[b]indol-2-il)- N-S N,N-dimetilsulfamida Exem¬ Nome químico Estrutura MS plo (m/z) 89 (±)-N-[7-Ciano-4-(6- "-Q 363 flúor-piridin-2-ilmetil)- F (M+1) 1,2,3,4-tetra-hidro- ciclopenta[b]indol-2-il]- propionamida Inter¬ (R)-N'-{7-Ciano-4-[2- H / 541 mediᬠ(1,3-dioxo-1,3-di-hidro- N-S-N (M+1) rio 60 isoindol-2-il)-piridin-3- lVrr^f ° ' ilmetil]-1,2,3,4-tetra- Il I Chiral hidro- Vn^n ciclopenta[b]indol-2-il}- Ó N,N-dimetilsulfamida Inter¬ éster etílico do ácido H ° / 474 mediᬠ(R)-5-{2- N-S-N (M+1) rio 61 [(dimetilamino)- VVv sulfonil]-amino-7-ciano- [I I )--- Chiral 2,3-dihdro-1H- O ciclopenta[ò]indol-4- ilmetil}-tiazol-4- carboxílico * Obter o exemplo mostrado por separação quiral do produto racêmico, es- sencialmente de acordo com o procedimento descrito para o Exemplo 56a, 56b.

Exemplo 90

(R)-N'-í4-(2-Amino-piridin-3-ilmetil)-7-ciano-1.2.3,4-tetra-hidro- ciclopenta[fc1indol-2-ill- N.N-dimetilsulfamida

Preparar o composto do título essencialmente usando o proce- dimento descrito no Exemplo 54, usando (R)-N'-{7-ciano-4-[2-(1,3-dioxo-1,3- di-hidro-isoindol-2-il)-piridin-3-ilmetil]-1,2,3,4-tetra-hidro-cicIopenta[ò]indol-2- il)-N,N-dimetilsulfamida para obter 0,13 g ( 61%) de produto. MS (m/z): 411,0 (M+1).

Intermediário 62

Ácido_5-((S)-7-Ciano-2-isopropoxicarbonilamino-2,3-di-hidro-1H-

ciclopenta[blindol-4-ilmetil)-tiazol-4-carboxílico

Chiral H

'"Vo

Tratar uma mistura de éster etílico do ácido 5-((S)-7-ciano-2- isopropoxicarbonilamino-2,3-di-hidro-1H-ciclopenta[ò]indol-4-ilmetil)-tiazol-4- carboxílico (3,745 g, 8,28 mmol) em EtOH (100 ml_) e THF (40 mL) com Li- 10 OH 5 M (8,3 mL, 41,4 mmol) e agitar à temperatura ambiente por 18 horas. Adicionar HCI 5 N (9 mL) levando o pH até 2. Concentrar a mistura reacional por rotavaporização, extrair em EtOAc (3 x 330 mL), secar os orgânicos (MgSO4), filtrar, e concentrar para dar 3,86 g (>100%) de ácido 5-((S)-7- ciano-2-isopropoxicarbonilamino-2,3-di-hidro-1H-ciclopenta[ò]indol-4-ilmetil)- 15 tiazol-4-carboxílico como um sólido amarelo pálido. LC-ES/MS m/z 425 (M+1), 423 (M-H), Tr = 2,3 min.

Preparar o composto a seguir essencialmente da maneira des- crita para o Intermediário 62.

Intermediário ácido (R)-5-{2-[(dimetilamino)-sulfonil]- MS m/z 63 amino-7-ciano-2,3-dihdro-1 H- 446 (M+1) ciclopenta[b]indol-4-ilmetil}-tiazol-4- carboxílico Intermediário 64

Éster isopropílico do ácido {(S)-7-Ciano-4-f4-(2-trimetilsilanil- etoxicarbonilamino)-tiazol-5-ilmetil1-1.2,3,4-tetra-hidro-ciclopentaffo1indol-2-il}- carbâmico 10

Adicionar lentamente difenilfosforilazida (5,45 g, 4,27 mL, 19,8 mmols) a uma mistura em refluxo de ácido 5-((S)-7-ciano-2- isopropoxicarbonilamino-2,3-di-hidro-1H-ciclopenta[jb]indol-4-ilmetil)-tiazoI-4- carboxílico (3,82 g, 9,00 mmols), ΕίβΝ (2,00 g, 2,76 mL, 19,8 mmols), e 2- (trimetilsilil)-etanol (10 mL, 8,25 g, 69,8 mmols) em tolueno (270 mL). Conti- nuar ao refluxo por 3 horas, e em seguida resfriar para a temperatura ambi- ente. Concentrar a mistura reacional para dar 14,85 g brutos. Purificar sobre sílica gel (115 g) usando 20-60% EtOAc/hexanos para dar 4,06 g (84%) do produto como um sólido amarelo. LC-ES/MS m/z 562 (M+Na), 538 (M-H), Tr = 3,1 min.

Preparar o composto a seguir essencialmente da maneira des- crita para o Intermediário 64.

Intermediᬠ2-trimetilsilanil-etil éster do ácido (R)-{5-[2- MS m/z rio 65 (dimetilarnino)sulfonil-amino-7-ciano-2,3- 559 (M-1) dihdro-1H-ciclopenta[b]indol-4-ilmetil]-tiazol-4- il}-carbâmico Exemplo 91

Éster isopropílico do ácido IYS)-4-(4-Amino-tiazol-5-ilmetiO-7-ciano-1,2.3,4- tetra-hidro-ciclopentaíòlindol-2-in-carbâmico

H

'N

r

O

Tratar uma mistura de éster isopropílico do ácido {(S)-7-ciano-4- [4-(2-trimetilsilanil-etoxicarbonilamino)-tiazol-5-ilmetil]-1,2,3,4-tetra-hidro- ciclopenta[)b]indol-2-il}-carbâmico (3,98 g, 7,37 mmols) em THF (40 mL) com fluoreto de tetrabutilamônio (1,0 M em THF1 14,74 mL, 14,74 mmols) e a- quecer até 50 °C. Resfriar para a temperatura ambiente depois de 40 minu- tos, diluir com água (40 mL), e evaporar o THF a vácuo. Remover um sólido por filtração da suspensão aquosa resultante e secar a vácuo a 40 0C para 5 dar 2,43 g de produto como um sólido pardo. Dissolver o produto em 250 ml de EtOAc em ebulição, e em seguida concentrar até um volume de cerca de 100 mL. Adicionar 50 mL de hexanos, e em seguida resfriar a mistura para - 26 0C em um frigorífico por uma noite. Recolher o sólido e secar a vácuo a 40 0C para dar 1,74 g (60%) do produto como um sólido castanho. LC- 10 ES/MS 396 (M+1), Tr = 2,2 minutos.

Exemplo 92

(f?)-N'-í4-(4-amino-tiazol-5-ilmetil)-7-ciano-1.2.3.4-tetra-hidro-

ciclopentarfolindol-2-in-N.N-dimetilsulfamida

Hi?/

N-S-N

Il \

O

Chiral

H2N

Preparar o composto do título essencialmente da maneira des- 15 crita para Exemplo 91, usando 2-trimetilsilanil-etil éster do ácido (ft)-{5-[2- (dimetilamino)sulfonil-amino-7-ciano-2,3-dihdro-1/-/-ciclopenta[b]indol-4- ilmetil]-tiazol-4-il}-carbâmico e aquecendo a reação a 60 0C por 3 horas. De- pois de esfriar para a temperatura ambiente diluir a reação com acetato de etila (200 mL) e lavar com água e salmoura. Secar a porção orgânica em 20 sulfato de sódio, filtrar, e concentrar. Purificar por cromatografia sobre sílica gel (100% EtOAc a 5%MeOH/EtOAc) para obter 0,94 g (60%). LCMS 417,0 (M+1).

Intermediário 66

Éster isopropílico do ácido (S)-(7-Formil-4-piridin-2-ilmetil-1.2,3.4-tetra-hidro- ciclopentaífc1indol-2-il)-carbâmico

Dissolver éster isopropílico do ácido (S)-(7-ciano-4-piridin-2- ilmetil-1,2,3,4-tetra-hidro-ciclopenta[ò]indol-2-il)-carbâmico (200 mg, 0,53 mmol) em ácido fórmico a 88% (10 ml) e água (1 mL). Adicionar catalisador à base de alumínio-níquel (50/50 % em peso) e aquecer a 90 0C por 24 ho- ras. Adicionar água (1 mL) e aquecer por mais 24 horas. Depois de esfriar para a temperatura ambiente, adicionar metanol e remover o catalisador por 5 filtração através de Celite®. Diluir com acetato de etila e basificar até pH = 10 usando carbonato de potássio a 10%. Separar as fases e lavar a fase orgânica com carbonato de potássio a 10%. Secar a porção orgânica em sulfato de sódio anidro, filtrar, e concentrar para obter o composto do título como um óleo laranja (181 mg, 91%). Usar o produto bruto sem manipulação 10 posterior. MS (m/z): 378,2 (M+1).

Exemplo 93

Éster isopropílico do ácido (S)-r7-(Metoxiimino-metil)-4-piridin-2-ilmetil-

1.2.3.4-tetra-hidro-ciclopentaíb1indol-2-in-carbâmico

ilmetil-1,2,3,4-tetra-hidro-ciclopenta[ò]indol-2-il)-carbâmico (181 mg, 0,48 mmol) em metanol (10 mL) e hidróxido de sódio 1,0 N (2,4 ml, 2,4 mmols). Adicionar cloridrato de metoxiamina (120 mg, 1,44 mmol) e agitar à tempera- tura ambiente por uma noite. Diluir com acetato de etila, lavar com carbonato de potássio a 10%, secar em sulfato de sódio anidro, filtrar, e concentrar.

Purificar o produto bruto em uma coluna com 12 g de sílica gel eluindo com 30% acetato de etila/diclorometano para obter o composto do título puro (53 mg, 27%). LCMS 407,1 (M+1).

mente de acordo com os procedimentos descritos para o Intermediário 66 e o Exemplo 93, partindo da nitrila apropriada.

Dissolver éster isopropílico do ácido (S)-(7-formil-4-piridin-2-

Preparar as oximas, Exemplos 94-101, na Tabela 6, essencial- Tabela 6

Exemplo Nome químico MS m/z 94 éster etílico do ácido (S)-[7-(Metoxiimino- 393 (M+1) metil)-4-piridin-2-ilmetil-1,2,3,4-tetra-hidro- ciclopenta[ó]indol-2-il]-carbâmico 95 éster isopropílico do ácido (S)-[4-lsotiazol-3- 413 (M+1) ilmetil-7-(metoxiimino-metil)-1,2,3,4-tetra- hidro-ciclopenta[jb]indol-2-il]-carbâmico 96 éster etílico do ácido (S)-[4-lsotiazol-3-ilmetil- 399 7-(metoxiimino-metil)-1,2,3,4-tetra-hidro- (M+1) ciclopenta[b]indol-2-il]-carbâmico 97 (R)-N'-[4-lsotiazol-3-ilmetil-7-(metoxiimino- 434 (M+1) metil)-1,2,3,4-tetra-hidro-ciclopenta[ò]indol-2- il]-N,N-dimetilsulfamida 98 (f?)-N'-[7-(Metoxiimino-metil)-4-tiazol-2-ilmetil- 434 (M+1) 1,2,3,4-tetra-hidro-ciclopenta[ò]indol-2-il]-N,N- dimetilsulfamida 99 (/?)-N'-[4-(6-Flúor-piridin-2-ilmetil)-7- 446 (M+1) (metoxiimino-metil)-1,2,3,4-tetra-hidro- ciclopenta[b]indol-2-il]-N,N-dimetilsulfamida 100 (R)-N'-[7-(Metoxiimino-metil)-4-pirazin-2- 429 (M+1) ilmetil-1,2,3,4-tetra-hidro-ciclopenta[jb]indol-2- il]-N,N-dimetilsulfamida 101 (R)-N'-[7-(Metoxiimino-metil)-4-piridin-2- 428 (M+1) ilmetil-1,2,3,4-tetra-hidro-ciclopenta[ò]indol-2- 426 (M-1) il]-N,N-dimetilsulfamida Exemplo 102

Éster isopropílico do ácido (±)-[4-(3-Amino-pirazin-2-ilmetil)-7-ciano-1,2,3,4- tetra-hidro-ciclopentaf£>lindol-2-il1-carbâmico Em um frasco com tampa de rosca, dissolver éster isopropílico

do ácido (±)-[4-(3-cloro-pirazin-2-ilmetil)-7-ciano-1,2,3,4-tetra-hidro- ciclopenta[b]indol-2-il]-carbâmico (30 mL, 0,073 mmol) em 1-metil-2- pirrolidinona (NMP) (0,5 mL) e resfriar para -78 °C. Condensar NH3 na mistu- ra reacional (1 mL), vedar o vaso de reação, e esquentar até a temperatura 10 ambiente durante 24 horas. Aquecer a reação até 50 0C por 18 horas, e em seguida a 80 0C por 72 horas. Resfriar a reação em um banho de gelo seco. Abrir cuidadosamente o vaso de reação e deixar ο NH3 líquido evaporar. Dissolver o resíduo em EtOAc (50 mL) e lavar os orgânicos com água (3 * 20 mL). Secar os orgânicos (MgSO4)1 filtrar, e concentrar para dar 27 mg de produto bruto como um filme incolor. Purificar sobre 4 g de sílica gel [50- 5 100% EtOAc/(1:1 CH2CI2/hexanos)] para dar 8 mg (28%) do composto do título como um filme incolor. LCMS 100% @ 4,23 min m/z 391 (Μ + H), 389 (M-H).

Exemplo 103

Éster isopropílico do ácido (S)-[4-(3-Amino-pirazin-2-ilmetil)-7-ciano-1,2.3.4- tetra-hidro-ciclopentafblindol-2-ill-carbâmico

ilmetil)-7-ciano-1,2,3,4-tetra-hidro-ciclopenta[/b]indol-2-il]-carbâmico (8,89 g, 21,7 mmols) em NMP (36 mL) e distribuir a mistura uniformemente entre três frascos de reator de micro-ondas de 10-20 mL. Resfriar cada vaso de reação 15 para 0°C e borrifar com NH3 anidro por 15 minutos. Vedar cada vaso e a- quecer até 200 0C por 1 hora em um reator de micro-ondas. Combinar as misturas reacionais com água (500 mL) e sonicar por 20 minutos. Remover um sólido pardo por filtração, e em seguida dissolver o sólido em EtOAc (500 mL). Secar os orgânicos (MgSO4), filtrar, e concentrar até um volume de 10 20 mL. Diluir os orgânicos com MeOH (20 mL) e CH2CI2 (10 mL) e absorver em sílica gel a vácuo. Purificar sobre sílica gel (340 g) usando 1-10% (2 M NH3/MeOH)/(1:1 CH2CI2/hexanos) para dar 1,50 g (18%) do composto do título como um sólido amarelo. MS (m/z) 391 (M +1), 389 (M-1). Reunir e concentrar as frações contendo produto impuro (1,2 g), e purificar mais uma 25 vez sobre sílica gel (80 g) usando 3-8% (2 M NH3/MeOH)/(1:1 CH2CI2/hexanos) para dar uma segunda colheita (503 mg, 6%) do composto do título como um sólido amarelo.

Dissolver éster isopropílico do ácido (S)-[4-(3-cloro-pirazin-2- Exemplo 104

Ácido_[3-((S)-7-Ciano-2-isopropoxicarbonilamino-2,3-di-hidro-1/-/-

ciclopenta[fo1indol-4-ilmetil)-piridin-2-ilamino1-acético

)rc

O

Dissolver éster isopropílico do ácido [(S)-4-(2-amino-piridin-3- 5 ilmetil)-7-ciano-1,2,3,4-tetra-hidro-ciclopenta[ò]indol-2-il]-carbâmico (253 mg,

0,650 mmol) em EtOH (25 mL). Adicionar peneiras moleculares de 3Á e mo- no-hidrato de ácido glioxílico (239 mg, 2,60 mmol), e em seguida agitar a 40- 110 0C por 18 horas sob hidrogênio (408 kPa (4,22 (60 psi, 4,08 bar). Filtrar a reação através de um chumaço de terra diatomácea e lavar o catalisa- 10 dor/peneiras com THF (50 mL). Combinar o filtrado e concentrar a vácuo para deixar um óleo amarelo. Triturar com água (30 mL) e sonicar a suspen- são aquosa resultante por 5 minutos. Remover um sólido pardo por filtração e secar a vácuo. Triturar o sólido com Et2O (5 mL) e sonicar a suspensão por 30 minutos. Filtrar para obter 190 mg (65%) do produto como um sólido 15 pardo. LCMS 100% @ 3,99 min mlz 448 (Μ + H), 446 (Μ - H). LISTAGEM DE SEQUfiNCIA <110> Gavardinas, Konstantinos

Green, Jonathan Edward Jadhav, Frabhakar Kondaji Matthewsf Donald Paul

<120> COMPOSTOS DO TIPO TETRA-HIDROCICLOPENTA [b] INDOL COMO MODULADORES

DE RECEPTORES DE ANDROGÊNIO <130> P-17142

<160> 3

<170> PatentIn versão 3.3

<210> 1 <211> 15

<212> DNA

<213> Artificial

<220>

<223> Construção sintética

<400> 1

ggttcttgga gtact 15

<210> 2

<211> 15

<212> DNA

<213> Artificial <220>

<223> Construção sintética

<400> 2

tgtacaggat gttct

<210> 3

<211> 15

<212> DNA

<213> Artificial <220>

<223> Construção sintética <400> 3

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Claims (20)

1. Composto de fórmula (I): <formula>formula see original document page 84</formula> Formula (I) em que, o centro de carbono "C*" pode estar na configuração R, S ou R/S; R1 representa ciano, -CH=NOCH3, -OCHF2, ou -OCF3; R2 representa -COR2a ou -SO2R2b; R2a representa (Ci-C4)alquila, (Ci-C4)alcóxi, ciclopropila, ou -NRaRb; R2b representa (Ci-C4)alquila, ciclopropila, ou -NRaRb; Ra e Rb cada um independentemente representam em cada o- corrência H ou (Ci-C4)alquil; e R3 representa um grupo heteroaril selecionado do grupo que consiste em piridinila, pirimidinila, pirazinila, piridazinila, tiazolila, isotiazolila, e tiadiazolila, cada um deles sendo opcionalmente substituído com 1 ou 2 substituintes independentemente selecionados do grupo que consiste em metila, etila, bromo, cloro, flúor, -CHF2, -CF3, hidróxi, amino, e -NHCH2CO2H; ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo.

2. Composto ou sal de acordo com a reivindicação 1, em que R1 representa ciano, ou -CH=NOCH3.

3. Composto ou sal de acordo com a reivindicação 2, em que R1 representa ciano.

4. Composto ou sal de acordo com qualquer uma das reivindica- ções 1 a 3, em que R2a representa (CrC4)alquila, (Ci-C4)alcóxi, ciclopropila, ou N(CH3)2 e R2b representa (CrC4)alquila, ciclopropila, -N(CH3)2 ou - N(C2H5)2.

5. Composto ou sal de acordo com a reivindicação 4, em que R2 representa -COR2a e R2a representa etila, isopropila, metóxi, etóxi, propóxi, isopropóxi, isobutóxi, ter-butóxi, ciclopropila, ou -N(CH3)2.

6. Composto ou sal de acordo com a reivindicação 5, em que R2a representa isopropóxi.

7. Composto ou sal de acordo com a reivindicação 4, em que R2 representa SO2R2b e R2b representa metila, etila, propila, ciclopropila, - N(CH3)2 ou -N(C2H5)2.

8. Composto ou sal de acordo com a reivindicação 7, em que R2b representa -N(CH3)2.

9. Composto ou sal de acordo com qualquer uma das reivindica- ções 1 a 6, em que R2 representa -COR2a e o centro de carbono "C*" está na configuração S.

10. Composto ou sal de acordo com qualquer uma das reivindi- cações 1 a 4, 7, ou 8, em que R2 representa -SO2R2b e o centro de carbono "C*" está na configuração R.

11. Composto ou sal de acordo com qualquer uma das reivindi- cações 1 a 10, em que R3 representa um grupo heteroarila selecionado do grupo que consiste em piridinila, pirimidinila, pirazinila, piridazinila, tiazolila, isotiazolila, e tiadiazolila, cada um deles sendo opcionalmente substituído com 1 ou 2 substituintes independentemente selecionados do grupo que consiste em metila, bromo, cloro, flúor, CHF2, hidróxi, amino, e - NHCH2CO2H.

12. Composto ou sal de acordo com a reivindicação 11, em que R3 representa 6-flúor-piridin-2-ila, piridin-2-ila, 3-hidróxi-piridin-2-ila, 6- difluorometil-piridin-2-ila, 2-amino-piridin-3-ila, 2-carboximetilamino-piridin-3- ila, tiazol-4-ila, 2-metil-tiazol-4-ila, 2-cloro-tiazol-4-ila, tiazol-2-ila, tiazol-5-ila, 4-amino-tiazol-5-ila, pirazin-2-ila, 5-metil-pirazin-2-ila, 3-cloro-pirazin-2-ila, 6- metil-pirazin-2-ila, 3-amino-pirazin-2-ila, ou 3-metil-pirazin-2-ila.

13. Composto ou sal de acordo com a reivindicação 12, em que R3 representa piridin-2-ila, 2-amino-piridin-3-ila, tiazol-5-ila, ou 4-amino- tiazol-5-ila.

14. Composto ou sal de acordo com a reivindicação 1, em que o centro de carbono "C*" está na configuração S quando R2 re- presenta -COR2a e na configuração R quando R2 representa -S02R2b; R1 representa ciano ou -CH=NOCH3; R2a representa etila, isopropila, metóxi, etóxi, propóxi, isopropóxi, ísobutóxi, ter-butóxi, ciclopropila, ou N(CH3)2; e R2b representa metila, etila, propila, ciclopropila, -N(CH3)2 ou -N(C2H5)2; e R3 representa 6-flúor-piridin-2-ila, piridin-2-ila, 3-hidróxi-piridin-2- ila, 6-difluorometil-piridin-2-ila, 2-amino-piridin-3-ila, 2-carboximetilamino- piridin-3-ila, pirimidin-4-ila, pirimidin-2-ila, 2-cloro-pirimidin-4-ila, tiazol-4-ila, 2-metil-tiazol-4-ila, 2-cloro-tiazol-4-ila, tiazol-2-ila, tiazol-5-ila, 4-amino-tiazol- 5-ila, pirazin-2-ila, 5-metil-pirazin-2-ila, 3-cloro-pirazin-2-ila, 6-metil-pirazin-2- ila, 3-amino-pirazin-2-ila, 3-metil-pirazin-2-ila, piridazin-3-ila, 5-bromo- isotiazol-3-ila, isotiazol-3-ila, 4,5-dicloro-isotiazol-3-ila, ou [1,2,5]tiadiazol-3- ila.

15. Composto selecionado do grupo que consiste em éster iso- propílico do ácido (S)-(7-ciano-4-piridin-2-ilmetil-1,2,3,4-tetra-hidro- ciclopenta[b]indol-2-il)-carbâmico; éster isopropílico do ácido (S)- (7-ciano-4- tiazol-5-ilmetil-1,2,3,4-tetra-hidro-ciclopenta[b]indol-2-il)-carbâmico; éster i- sopropílico do ácido (S)-[4-(2-amino-piridin-3-ilmetil)-7-ciano-1,2,3,4-tetra- hidro-ciclopenta[b]indol-2-il]-carbâmico; (/?)-N'-[4-(4-amino-tiazol-5-ilmetil)-7- ciano-1,2,3,4-tetra-hidro-ciclopenta[b]indol-2-il]-N,N-dimetilsulfamida; e éster isopropílico do ácido (S)-[4-(4-amino-tiazol-5-ilmetil)-7-ciano-1,2,3,4-tetra- hidro-ciclopenta[b]indol-2-il]-carbâmico, ou um sal farmaceuticamente acei- tável do mesmo.

16. Composto ou sal de acordo com a reivindicação 15, que é éster isopropílico do ácido (S)-(7-ciano-4-piridin-2-ilmetil-1,2,3,4-tetra-hidro- ciclopenta[b]indol-2-il)-carbâmico.

17. Composto ou sal de acordo com qualquer uma das reivindi- cações 1 a 16, para uso no tratamento de hipogonadismo, massa ou densi- dade óssea reduzida, osteoporose, osteopenia, massa ou força muscular reduzida, sarcopenia, declínio funcional associado à idade, puberdade atra- sada em meninos, anemia, disfunção sexual masculina ou feminina, disfun- ção erétila, Iibido reduzida, depressão, ou letargia.

18. Uso de um composto ou sal como definido em qualquer uma das reivindicações 1 a 16 para a produção de um medicamento para o tra- tamento de hipogonadismo, massa ou densidade óssea reduzida, osteopo- rose, osteopenia, massa ou força muscular reduzida, sarcopenia, declínio funcional associado à idade, puberdade atrasada em meninos, anemia, disfunção sexual masculina ou feminina, disfunção erétila, Iibido reduzida, depressão, ou letargia.

19. Uso de acordo com a reivindicação 18, para a produção de um medicamento para o tratamento de massa ou densidade óssea reduzida, osteoporose, osteopenia, ou massa ou força muscular reduzida.

20. Composição farmacêutica compreendendo um composto ou sal de acordo com qualquer uma das reivindicações 1-16 em combinação com um ou mais veículos, diluentes, ou excipientes farmaceuticamente acei- táveis.