JP5603327B2 - テトラヒドロシクロペンタ［ｂ］インドールアンドロゲン受容体調節物質 - Google Patents

Description

本発明は、テトラヒドロシクロペンタ［ｂ］インドールアンドロゲン受容体調節物質に関する。

内因性ステロイドのアンドロゲン類（例えば、テストステロンおよび５α−ジヒドロテストステロン（ＤＨＴ））は、多くの生理学的機能に対して絶大な影響を与える。臨床的には、アンドロゲン療法は、男性の性腺機能低下症の処置において使用されている。意義深いことに、性腺機能低下症の男性におけるアンドロゲン置換療法はまた、骨吸収の減少および骨量の増加を示している。アンドロゲン類が臨床的に使用される他の適応症としては骨粗しょう症や筋肉消耗疾患が挙げられる。さらに、アンドロゲン置換療法は、老齢の男性において男性の生殖能力を調節するために近年使用されている。女性において、アンドロゲン療法は、性機能障害または性欲減退の処置のために臨床的に使用されている。

しかしながら、アンドロゲン療法には制約がある。例えば、ステロイド性アンドロゲン療法の好ましくない副作用として、前立腺や精嚢の成長刺激が挙げられる。加えて、前立腺腫瘍の刺激および前立腺特異抗原（ＰＳＡ）の上昇（増大した前立腺癌リスクの指標）はアンドロゲンの使用に関連している。さらに、ステロイド性アンドロゲン類の調製物は、低い経口バイオアベイラビリティや非経口投与後の活性の短い持続時間につながる肝臓における急速な分解を受けること、血漿中濃度の変動、肝毒性、または他のステロイド性ホルモン受容体（例えば、糖質コルチコイド受容体（ＧＲ）、鉱質コルチコイド受容体（ＭＲ）、およびプロゲステロン受容体（ＰＲ））との交差反応性が見出されている。さらに、女性において、ステロイド性アンドロゲン類の使用は、多毛症または男性化の原因となり得る。

したがって、当分野において、ステロイド性アンドロゲン療法の代わるものが必要である。好ましくは、そのような代替案は、ステロイド性アンドロゲン類の有益な薬理学的性質を有するが、ステロイド性アンドロゲン療法に伴う典型的な制約の可能性または頻度は減少する。したがって、本発明の目的は、アンドロゲンアゴニスト活性を有する非ステロイド性ＡＲリガンドを提供することである。より具体的には、他のステロイド性ホルモン受容体と比べてより大きな親和性でＡＲに結合する非ステロイド性アンドロゲンアゴニストを提供することが目的である。さらにより具体的には、筋肉または骨においてアンドロゲンアゴニスト活性を示すが、前立腺または精嚢のような男性ホルモン組織においては不完全なアゴニスト活性、不完全なアンタゴニスト活性、またはアンタゴニスト活性しか示さない、組織選択的アンドロゲン受容体調節物質（ＳＡＲＭ）を提供することが目的である。

以下は、当分野の現状の例である：Ｃａｄｉｌｌａら、Ｃｕｒｒ．Ｔｏｐ．Ｍｅｄ．Ｃｈｅｍ，２００６年，６（３），ｐ．２４５−２７０には、アンドロゲン受容体調節物質の概説であり；Ｓｅｇａｌら、Ｅｘｐｅｒｔ Ｏｐｉｎ．Ｉｎｖｅｓｔｉｇ．Ｄｒｕｇｓ，２００６年，１５（４），ｐ．３７７−３８７は、アンドロゲン受容体調節物質の概説であり；同時係属出願国際特許出願ＰＣＴ／ＵＳ０７／８３７４５は、アンドロゲン受容体調節物質としてテトラヒドロシクロペンタ［ｂ］インドール化合物を開示し；そして国際公開第２００７／８３７４５号パンフレットは、アンドロゲン受容体調節物質としてテトラヒドロカルバゾール類を開示する。

本発明は、以下の式（Ｉ）によって定義されるような、特定のテトラヒドロシクロペンタ［ｂ］インドール化合物に関し、それは、それらがステロイド性アンドロゲン療法に反応する障害の処置において有用であることを示唆するインビトロ試験およびインビボ試験において活性の特定のプロフィールを有する。したがって、本発明は、式（Ｉ）：

[式中、
Ｒは、以下

からなる群から選択される置換基を表す］
で示される化合物、またはその製薬的に許容し得る塩を提供する。

別の実施形態において、本発明は、必要とする患者に、式（Ｉ）の化合物またはその製薬的に許容し得る塩の有効量を投与することを含む、性腺機能低下症、骨量または骨密度の減少、骨粗しょう症、骨減少症、筋肉量または筋力の減少、男性または女性の性機能障害、勃起障害、または性欲減退を処置または予防する方法を提供する。具体的な態様として、本発明は、骨量または骨密度の減少、骨粗しょう症、骨減少症、筋肉量または筋力の減少、または勃起障害を処置または予防するための方法を提供する。より具体的な態様として、本発明は、運動不足、不使用、または外傷によって引き起こされる骨量または骨密度の減少、骨粗しょう症、骨減少症、筋肉量または筋力の減少、あるいは勃起障害を処置または予防するための方法を提供する。

さらに、本発明は、性腺機能低下症、骨量または骨密度の減少、骨粗しょう症、骨減少症、筋肉量または筋力の減少、男性または女性の性機能障害、勃起障害、または性欲減退の処置または予防における使用のための、式（Ｉ）の化合物またはその製薬的に許容し得る塩を提供する。より具体的には、本発明は、骨量または骨密度の減少、骨粗しょう症、骨減少症、筋肉量または筋力の減少、または勃起障害の処置または予防における使用のための、式（Ｉ）の化合物またはその製薬的に許容し得る塩を提供する。さらにより具体的には、本発明は、運動不足、不使用、または外傷によって引き起こされる骨量または骨密度の減少、骨粗しょう症、骨減少症、筋肉量または筋力の減少、あるいは勃起障害の処置または予防における使用のための、式（Ｉ）の化合物またはその製薬的に許容し得る塩を提供する。さらに、本発明は、治療において使用するための、式（Ｉ）の化合物またはその製薬的に許容し得る塩を提供する。

別の実施形態において、本発明は、性腺機能低下症、骨量または骨密度の減少、骨粗しょう症、骨減少症、筋肉量または筋力の減少、男性または女性の性機能障害、勃起障害、または性欲減退の処置または予防のための医薬の製造のための、式（Ｉ）の化合物またはその製薬的に許容し得る塩の使用を提供する。より具体的には、本発明は、骨量または骨密度の減少、骨粗しょう症、骨減少症、筋肉量または筋力の減少、または勃起障害の処置または予防のための医薬の製造のための、式（Ｉ）の化合物の使用を提供する。さらにより具体的には、本発明は、運動不足、不使用、または外傷によって引き起こされる骨量または骨密度の減少、骨粗しょう症、骨減少症、筋肉量または筋力の減少、あるいは勃起障害の処置または予防のための医薬の製造のための、式（Ｉ）の化合物の使用を提供する。

さらに、本発明は、式（Ｉ）の化合物またはその製薬的に許容し得る塩を、１以上の製薬的に許容し得る担体、希釈剤、または賦形剤と組み合わせて含む医薬組成物を提供する。より具体的には、本発明は、式（Ｉ）の化合物またはその製薬的に許容し得る塩を、一以上の製薬的に許容し得る担体、希釈剤、または賦形剤と組み合わせて含む、骨量または骨密度の減少、骨粗しょう症、骨減少症、筋肉量または筋力の減少、または勃起障害の処置のための医薬組成物を提供する。さらにより具体的には、本発明は、運動不足、不使用、または外傷によって引き起こされる骨量または骨密度の減少、骨粗しょう症、骨減少症、筋肉量または筋力の減少、あるいは勃起障害の処置のための医薬組成物を提供する。

本発明はまた、式（Ｉ）の化合物の合成に有用な新規の中間体および製造方法を包含する。

本発明はまた、式（Ｉ）の化合物の製薬的に許容し得る塩に関する。製薬的に許容し得る塩およびそれらの調製のための方法の例は、十分に当業者の知識の範囲内である。さらに、本発明はまた、式（Ｉ）の化合物または式（Ｉ）の化合物の製薬的に許容し得る塩の溶媒和物に関する。本明細書中で用語「式（Ｉ）」または式（Ｉ）の任意の具体的な化合物が使用される場合、その化合物の任意の溶媒和物をその意味の範囲内に含む。

式（Ｉ）の化合物は、１つ以上のキラル中心を有し得、したがって、特定の立体異性配置で存在し得る。用語「Ｒ」および「Ｓ」は、キラル中心の特定の配置を示すために有機化学において一般的に使用されるように本明細書中で使用される。用語「（±）」または「ＲＳ」は、ラセミ化合物を含むキラル中心の配置を示す。立体化学の優先権の部分的列挙および議論は、「Ｎｏｍｅｎｃｌａｔｕｒｅ ｏｆ Ｏｒｇａｎｉｃ Ｃｏｍｐｏｕｎｄｓ：Ｐｒｉｎｃｉｐｌｅｓ ａｎｄ Ｐｒａｃｔｉｃｅ」，（Ｊ．Ｈ．Ｆｌｅｔｃｈｅｒら編、１９７４）に記載されている。Ｘ線分析およびキラル−ＨＰＬＣ保持時間との相関。

式Ｉの化合物の特定の立体異性体および鏡像異性体は、ＥｌｉｅｌおよびＷｉｌｅｎによる「Ｓｔｅｒｅｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ ｏｆ Ｏｒｇａｎｉｃ Ｃｏｍｐｏｕｎｄｓ」，Ｊｏｈｎ Ｗｉｌｅｙ ＆ Ｓｏｎｓ，Ｉｎｃ．，１９９４，第７章；Ｓｅｐａｒａｔｉｏｎ ｏｆ Ｓｔｅｒｅｏｉｓｏｍｅｒｓ，Ｒｅｓｏｌｕｔｉｏｎ，Ｒａｃｅｍｉｚａｔｉｏｎ；およびＣｏｌｌｅｔおよびＷｉｌｅｎによる「Ｅｎａｎｔｉｏｍｅｒｓ，Ｒａｃｅｍａｔｅｓ，ａｎｄ Ｒｅｓｏｌｕｔｉｏｎｓ」，Ｊｏｈｎ Ｗｉｌｅｙ ＆ Ｓｏｎｓ，Ｉｎｃ．，１９８１によって開示されるような周知の技術およびプロセスを利用する当業者によって調製することができる。例えば、特定の立体異性体および鏡像異性体は、鏡像異性的および幾何的に純粋な、あるいは鏡像異性的または幾何的に富化された出発物質を使用して立体特異的な合成によって調製することができる。さらに、特定の立体異性体および鏡像異性体は、キラル固定相でのクロマトグラフィー、酵素的分解、付加塩の分別再結晶化、ならびに本明細書中のスキームおよび実施例において提供される技術によって分解および回収することができる。

記号「

」は、頁の平面の外に前方に突出する結合を示す。

記号「

」は、頁の平面の外に後方に突出する結合を示す。

記号「

」は、頁の平面の外に、前方および後方の両方に突出する結合の混合物として存在する結合を示す。

本明細書中で使用される用語「患者」は、ヒト、あるいはイヌ、ネコ、ウシ、サル、ウマまたはヒツジのような非ヒト哺乳動物を示す。より具体的には、用語「患者」はヒトを示す。本明細書中で使用される用語「処置すること」（あるいは「処置する」または「処置」）は、既存の症状または障害の進行または重篤度を、妨げること、抑えること、遅滞させること、停止させること、または逆転させることを含む。本明細書中で使用される用語「予防すること」（あるいは「予防する」または「予防」）は、症状または障害の発生または出現を、妨げること、抑えること、または阻害することを示す。当業者によって理解されるように、生理学的な障害は、「慢性的な」状態として、または「急性の」エピソードとして存在し得る。したがって、障害の処置は、急性の事象および慢性の状態の両方を意図する。急性の事象において、化合物は、症状の開始時に投与され、そして症状が消失するときに中止され、一方、慢性の状態は、疾患の全経過を通じて処置される。

本発明の化合物は、医薬組成物の一部として処方され得る。そのようなものとして、式（Ｉ）の化合物またはその製薬的に許容し得る塩を、製薬的に許容し得る担体、希釈剤、または賦形剤と組み合わせて含む医薬組成物は、本発明の重要な実施形態である。医薬組成物およびそれらの調製のための方法の例は、当分野において周知である。式（Ｉ）の化合物、または式（Ｉ）の化合物を含む組成物は、経口経路および非経口経路を含む、化合物を生物学的に利用可能にする任意の経路によって投与され得る。

本明細書で使用される用語「有効量」は、患者への単回または複数回の投薬の際に、診断または処置下の患者に所望の効果を提供する、式（Ｉ）の化合物の量または投薬量を示す。有効量は、当業者として、哺乳動物の種；その大きさ、年齢、および一般的健康状態；関連する特定の疾患；疾患の度合いまたは重篤度；個々の患者の反応；投与された特定の化合物；投与の様式；投与された調製物のバイオアベイラビリティ特性；選択された投薬レジメ；ならびに何らかの併用薬の使用のような多くの因子を考慮することにより、担当の診断医によって容易に決定されることができる。

本発明の化合物および組成物は、単独で、または特定の障害を処置するために使用される従来の治療剤と組み合わせて、投与され得るかまたは薬剤において使用され得る。本発明の化合物または組成物が組み合わせの一部として使用される場合、式（Ｉ）を含む化合物または組成物は、別個に、または組み合わせられるべき治療剤を含む処方物の一部としてのいずれかで投与され得る。

特に、勃起障害の処置のための従来の治療剤は、式（Ｉ）の化合物または式（Ｉ）の化合物を含む組成物と有利に組み合わせられ得る。勃起障害の処置のための従来の薬剤は、５型ホスホジエステラーゼ（ＰＤＥ５）阻害剤であるタダラフィル（Ｃｉａｌｉｓ（商標））、クエン酸シルデナフィル（Ｖｉａｇｒａ（商標））、および塩酸バルデナフィル（Ｌｅｖｉｔｒａ（商標））を含む。したがって、本発明はまた、必要とする患者に、式（Ｉ）の化合物またはその製薬的に許容し得る塩の有効量を、タダラフィル、クエン酸シルデナフィル、および塩酸バルデナフィルからなる群から選択される薬剤と組み合わせて投与することを含む、勃起障害を処置または予防する方法を提供する。より具体的には、本発明は、必要とする患者に、式（Ｉ）の化合物またはその製薬的に許容し得る塩の有効量を、Ｃｉａｌｉｓ（商標）、Ｖｉａｇｒａ（商標）、およびＬｅｖｉｔｒａ（商標）からなる群から選択される薬剤と組み合わせて投与することを含む、勃起障害を処置または予防する方法を提供する。

本発明は、（ａ）式（Ｉ）の化合物；（ｂ）タダラフィル、クエン酸シルデナフィル、および塩酸バルデナフィルからなる群から選択される勃起障害の処置のために慣習的な一以上の同時投与される薬剤；および任意選択的に（ｃ）製薬的に許容し得る担体、希釈剤、または賦形剤を含む、併用治療処方物をさらに提供する。より具体的には、本発明は、（ａ）式（Ｉ）の化合物；（ｂ）Ｃｉａｌｉｓ（商標）、Ｖｉａｇｒａ（商標）、およびＬｅｖｉｔｒａ（商標）からなる群から選択される勃起障害の処置のために慣習的な一以上の同時投与される薬剤；および任意選択的に（ｃ）製薬的に許容し得る担体、希釈剤、または賦形剤を含む、併用治療処方物を提供する。

（発明の特定の態様）
以下の列挙は、式（Ｉ）の化合物についての特定の置換基および特定の可変基のいくつかの分類を設定する。そのような特定の置換基または可変基を有する式（Ｉ）の化合物、ならびにそのような化合物を利用する方法および使用が本発明の特定の態様を表すことは理解されるだろう。

したがって、本発明の特定の態様は、式（Ｉ）の化合物であり、式中：
（ａ）Ｒは、

を表し；または
（ｂ）Ｒは、

を表し；または
（ｃ）Ｒは、

を表し；または
（ｄ）Ｒは、

を表し；または
（ｅ）Ｒは、

を表し；または
（ｆ）Ｒは、

を表す。

さらに、本発明の最も具体的な実施形態は、本明細書中に例示される式（Ｉ）の化合物、さらにより具体的には化合物［（Ｓ）−７−シアノ−４−（（２Ｒ，３Ｓ）−３−ヒドロキシ−１−メチル−ピロリジン−２−イルメチル）−１，２，３，４−テトラヒドロ−シクロペンタ［ｂ］インドール−２−イル］−カルバミン酸イソプロピルエステル、［（Ｓ）−７−シアノ−４−（３−フルオロ−２−ヒドロキシベンジル）−１，２，３，４−テトラヒドロシクロペンタ［ｂ］インドール−２−イル］−カルバミン酸イソプロピルエステル、［（Ｓ）−７−シアノ−４−（２−ヒドロキシ−ベンジル）−１，２，３，４−テトラヒドロ−シクロペンタ［ｂ］インドール−２−イル］−カルバミン酸イソプロピルエステル、および［（Ｓ）−７−シアノ−４−（５−フルオロ−２−ヒドロキシ−ベンジル）−１，２，３，４−テトラヒドロ−シクロペンタ［ｂ］インドール−２−イル］カルバミン酸イソプロピルエステルによって提供される。

式（Ｉ）の化合物は、当分野で公知の様々な手順ならびに以下のスキーム、調製物、および実施例において記載される手順によって調製され得る。しかしながら、以下の議論は、決して本発明の範囲を限定することを意図しない。例えば、記載された経路の各々に対する特定の合成工程は、様々な方法で組み合わせられて、または、様々なスキームからの工程と併せてられて、式（Ｉ）のさらなる化合物を調製し得る。

特に記載しない限り、置換基は、既に定義された通りである。試薬および出発物質は、当業者が容易に利用可能であるか、あるいは、有機化学および複素環化学の標準的な技術から選択される手順、公知の構造的に類似する化合物の合成と同様の技術、および任意の新規手順を含む、以下の実施例において記載される手順によって作製され得る。本明細書中で使用される場合、以下の用語は次の意味を有する：「ＭｅＯＨ」は、メタノールを示し；「ＥｔＯＨ」は、エタノールを示し；「ｉ−ＰｒＯＨ」は、イソプロパノールを示し；「ＥｔＯＡｃ」は、酢酸エチルを示し；「ＤＭＦ」は、ジメチルホルムアミドを示し；「ＤＭＳＯ」は、メチルスルホキシドを示し；「ＮＭＰ」は、１−メチル−２−ピロリジノンを示し；「ＴＦＡ」は、トリフルオロ酢酸を示し；「ＴＨＦ」は、テトラヒドロフランを示し；「ＤＥＡＤ」は、アゾジカルボン酸ジエチルを示し；「ＤＩＡＤ」は、ジイソプロピルジアゾジカルボン酸を示し；「ＮＢＳ」は、Ｎ−ブロモコハク酸イミドを示し；「ｔ−ＢＯＣ」または「ｂｏｃ」は、ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニルを示し；「ＴＢＤＭＳ」は、ｔ−ブチルジメチルシリルを示し；そして「Ｐｔｇ」は、保護基を示す。

式（５）の中間体の形成を、スキーム１に示すような反応に従って実行することができる。

スキーム１の工程Ａにおいて、シクロペンテノンを、マイケル付加においてフタルイミドと反応させて、（Ｒ，Ｓ）−２−（３−オキソ−シクロペンチル）−イソインドール−１，３−ジオン（１）を得る。反応は、容量で１０／１の割合のメタノール／２Ｎ Ｎａ_２ＣＯ_３中、好ましくは室温にて、Ｏ．Ｎｏｗｉｔｚｋｉら、Ｔｅｔｒａｈｅｄｒｏｎ １９９６，５２，１１７９９−１１８１０によって記載される条件と同様の条件を使用して実施する。生成物を、水の添加によって単離し、（１）を白色固体として得る。

工程Ｂにおいて、（Ｒ，Ｓ）−２−（３−オキソ−シクロペンチル）−イソインドール−１，３−ジオン（１）を、典型的なフィッシャーインドール合成において４−シアノ−フェニルヒドラジンと反応させて、式（２）のテトラヒドロシクロペンタ［ｂ］インドールを得る。当業者は、プロトンおよびルイス酸の両方を含む、フィッシャーインドール合成を生じさせる様々な酸性条件が存在することを認識するだろう。好ましい条件は、ジオキサン中の氷酢酸と４Ｎ ＨＣｌの混合物を、約５０℃〜溶媒の還流温度の温度で、約４時間〜２４時間使用する。生成物を、水の添加後の生じた固体の濾過によって単離する。固体を、メタノール中で超音波分解して、十分な純度の物質を得る。あるいは、反応を、約２当量〜４当量の量で、塩化亜鉛のようなルイス酸を使用して行う。工程Ｂについての他の好ましい条件は、エタノールを還流温度で約４時間〜２４時間使用する。生成物を単離し、反応混合物の濾過後の濾液のシリカゲルクロマトグラフィーによって精製し得る。

スキーム１の工程Ｃにおいて、式（２）のテトラヒドロシクロペンタ［ｂ］インドールのフタルイミド基を、ヒドラジンまたはヒドラジン水和物で開裂して、式（３）のアミノテトラヒドロシクロペンタ［ｂ］インドールを、Ｍ． Ａｌａｊａｒｉｎら（Ｅｕｒ．Ｊ．Ｏｒｇ．Ｃｈｅｍ．２００２，４２２２−４２２７）によって記載されるような条件を使用して得る。反応は、容量で約５．５／１の割合のテトラヒドロフラン／エタノールの溶媒混合物中、０℃〜５０℃の温度にて、好ましくは約室温にて、４時間〜７２時間進める。生じたフタルヒドラジンを濾過によって除去し、生成物を濾液の濃縮によって単離する。それを、当分野において公知の技術を使用してクロマトグラフィーによって精製し得る。

スキーム１の工程Ｄにおいて、式（３）のラセミアミノテトラヒドロシクロペンタ［ｂ］インドールを、式（４）のキラル（Ｓ）−アミノテトラヒドロシクロペンタ［ｂ］インドールへと分解する。アミンをエタノールのような適切な溶媒中に溶解し、Ｄ−ピログルタミン酸の塩として再結晶化させる。塩の単離後、式（４）の遊離塩基を、水中での溶解および濃アンモニア水を使用してｐＨを９にする調整によって得る。生じた固体を濾過して、比旋光度：［ａ］_Ｄ ^２５−６８．３°（ＭｅＯＨ）の、（Ｓ）−２−アミノ−１，２，３，４−テトラヒドロ−シクロペンタ［ｂ］インドール−７−カルボニトリル（４）を得る。

工程Ｅにおいて、式（４）のアミンをクロロギ酸イソプロピルでアシル化して、当分野で周知の条件を使用して式（５）のカルバミン酸塩を得る。アミンを、テトラヒドロフラン、トルエン、ジクロロエタンまたはジクロロメタン、Ｎ−メチルピロリジノン、またはＮ，Ｎ−ジメチルホルムアミド、あるいはそれらの混合物のような不活性溶媒中で、トリエチルアミンまたはジイソプロピルエチルアミンのような過剰の有機アミン塩基と混合する。好ましい条件は、クロロギ酸イソプロピルの存在下で、ジクロロメタン中のジイソプロピルエチルアミンを、約０℃〜４０℃の温度で１時間〜７２時間使用する。生成物を、水およびジエチルエーテルの添加した後、撹拌し、生じた固体の回収によって単離する。生成物が適切な有機溶媒中に十分に溶解性である場合、それを抽出技術によって単離し得る。

あるいは、工程Ｆによって示されるように、式（３）のラセミアミンを、当分野において一般的な条件を使用して式（６）のｔ−ブトキシカルボニル（ｂｏｃ）保護アミンとして保護する。工程Ｇにおいて、ラセミ混合物を、次いで、キラルクロマトグラフィーを使用して分解して、式（７）の（Ｓ）鏡像異性体を得る。ｂｏｃ基を、次いで、ＨＣｌまたはＴＦＡでの典型的な酸性条件を使用して除去して、式（４）のキラルアミンを得る。

スキーム２に、式（５）の中間体についての代替的合成手順を示す。

スキーム２の工程Ａにおいて、（Ｒ，Ｓ）−２−（３−オキソ−シクロペンチル）−イソインドール−１，３−ジオン（１）を、典型的なフィッシャーインドール合成において４−ブロモフェニルヒドラジン塩酸塩と反応させる。好ましい条件は、氷酢酸を約５０℃〜８０℃で２時間〜２４時間使用する。

工程Ｂにおいて、式（８）のテトラヒドロシクロペンタ［ｂ］インドールのフタルイミド基をヒドラジンまたはヒドラジン水和物で開裂して、式（９）のアミノテトラヒドロシクロペンタ［ｂ］インドールを得る。好ましい条件は、容量で約２０／１の割合で混合したテトラヒドロフラン／エタノールを約４０℃〜７０℃の温度で１時間〜１２時間使用する。生じたフタルヒドラジンを濾過によって除去し、生成物を濾液の濃縮によって単離する。

スキーム２の工程Ｃにおいて、式（９）のアミンをｔ−ｂｏｃ基で保護して、式（１０）の保護アミンを得る。好ましい条件は、ＮａＨＣＯ_３のような無機塩基の存在下で、ＴＨＦまたはジオキサンのような不活性溶媒中で二炭酸ジ−ｔｅｒｔ−ブチルを使用する。工程Ｄにおいて、式（１０）のラセミｔ−ｂｏｃ物質を、キラルＨＰＬＣを使用して分解して、式（１１）の（Ｓ）鏡像異性体を得る。

工程Ｅにおいて、式（１１）の（Ｓ）ブロモカルバミン酸を、式（５）のニトリルへと変換する。反応を、酢酸亜鉛またはギ酸亜鉛、シアン化亜鉛、および亜鉛末の混合物の存在下でＮ，Ｎ’−ジメチルアセトアミドのような不活性溶媒中で行う。１，１’−ビス（ジフェニルホスフィノ）フェロセン）塩化パラジウム（ＩＩ）のようなパラジウム触媒を使用する。反応物を、約８０℃〜１２０℃で約２時間〜２４時間加熱する。

工程Ｆにおいて、ｂｏｃ基を、ＨＣｌ／ジオキサンまたはＴＦＡのような典型的な酸性条件を使用して除去して、式（４）のキラルアミンを得（スキーム１を参照のこと）、それを次いで、スキーム１の工程Ｅに記載されるようにクロロギ酸イソプロピルでアシル化して、式（５）のカルバミン酸を得る。

あるいは、スキーム２の工程Ｇにおいて、式（８）のテトラヒドロシクロペンタ［ｂ］インドールのフタルイミド基を、ヒドラジンまたはヒドラジン水和物で開裂して、工程Ｂにおいて既に記載したように式（９）のアミノテトラヒドロシクロペンタ［ｂ］インドールを得る。続いて、生じた遊離アミンを、エタノール中でｐ−トルエンスルホン酸塩へと変換する。

工程Ｈにおいて、式（１３）のラセミアミノテトラヒドロシクロペンタ［ｂ］インドールトシラート塩を遊離化し、生じた遊離アミンをジベンジル−Ｄ−酒石酸を使用して分解して、式（１４）の（Ｓ）−アミノテトラヒドロシクロペンタ［ｂ］インドールの酒石酸塩を得る。塩形成を、好ましくはエタノールと水の溶媒混合物中で約１時間〜６時間還流させながら行い、その後冷却して、所望の鏡像異性体を得る。

工程Ｉにおいて、式（１４）の塩を遊離塩基に中和し、次いで、アシル化して、式（１５）のカルバミン酸を得る。塩を水酸化ナトリウム溶液のような無機塩基で中和する。遊離塩基を、不活性溶媒中のジイソプロピルエチルアミンまたはテトラヒドロフランとメチルｔ−ブチルエーテルの溶媒混合物のような有機アミンの存在下での、抽出後のクロロギ酸イソプロピルでのアシル化によって得る。

スキーム２の工程Ｊにおいて、式（１５）のブロモカルバミン酸を、工程Ｅについて既に記載されるように式（５）のニトリルへと変換する。

式（２０ａ、２０ｂ、または２０ｃ）の本発明の化合物の形成を、スキーム３に示すような反応に従って実行することができる。

スキーム３の工程Ａにおいて、式（５）のシアノテトラヒドロシクロペンタ［ｂ］インドールを、式（１６）のアルキルメシラートでアルキル化して、式（１７）のアルキル化テトラヒドロシクロペンタ［ｂ］インドールを得る。反応を、ヨウ化カリウムを添加しながら、炭酸セシウムのような無機塩基の存在下で、ＤＭＦのような不活性溶媒中で進める。反応を、約５０℃〜１００℃の温度で約８時間〜７２時間進める。

スキーム３の工程Ｂにおいて、式（１７）のピロリジンのヒドロキシル基のキラリティーを、（３Ｓ）から（３Ｒ）へと変換する。キラル変換を、光延反応を使用して行い、式（１８）のクロロアセトキシピロリジンを得る。当業者は、当分野において利用される様々な光延条件が存在することを認識するだろう。例えば、式（１７）のアルコールを、ＴＨＦ、ＣＨ_２Ｃｌ_２、またはトルエンのような好適な無水溶媒中に溶解し、Ｍｅ_３Ｐ、Ｂｕ_３Ｐ、またはＰｈ_３Ｐのようなトリアルキル−またはトリアリールホスフィンおよびＤＥＡＤまたはＤＩＡＤのようなジアルキルアゾ−ジカルボン酸塩で処理する。

工程Ｃにおいて、式（１８）の３Ｒ−クロロアセトキシピロリジンを、式（１９ａ）の３Ｒ−ヒドロキシピロリジンに加水分解する。加水分解を、水酸化リチウムのような無機塩基を使用して、メタノールのような溶媒中で、０℃〜５０℃で４時間〜２４時間達成する。工程Ｄにおいて、ｂｏｃ保護基を、ジオキサン中のＴＦＡまたは好ましくは４Ｎ ＨＣｌのような酸性条件を使用して除去して、式（１９ｂ）の３Ｓ−ヒドロキシピロリジンを得る。

スキーム３の工程Ｅにおいて、式（１９ａまたは１９ｂ）のヒドロキシピロリジンを、還元的アミノ化条件を使用してアルキル化して、式（２０ａ、２０ｂ、または２０ｃ）のＮ−アルキルピロリジンを得る。反応を、ナトリウムトリアセトキシボロヒドリドのような還元試薬を使用して、ＴＨＦ、ジクロロメタン、または好ましくはクロロホルムのような不活性溶媒中で、約０℃〜５０℃で８時間〜２４時間行う。式（２０ａ、２０ｂ、または２０ｃ）の化合物を提供するために使用するアルデヒドは、ホルムアルデヒドまたはアセトアルデヒドのいずれかであることができる。

（２Ｒ，３Ｓ）−３−ヒドロキシ−２−メタンスルホニルオキシメチル−ピロリジン−１−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル（１６）を、本明細書中に記載される方法に類似の方法によって、または当分野において確立された手順を使用することによって容易に調製することができる。例えば、３−ヒドロキシ−Ｌ−プロリンを、ｂｏｃで保護して、（２Ｓ，３Ｓ）−１−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−３−ヒドロキシピロリジン−２−カルボン酸を得ることができる。カルボン酸をアルコールへと還元し、続いて式（１６）のメシラートへと変換する。

式（２４ａおよび２４ｂ）の本発明の化合物の形成を、スキーム４に示すような反応に従って実行することができる。

スキーム４の工程Ａにおいて、式（５）のシアノテトラヒドロシクロペンタ［ｂ］インドールを、式（２１ａおよび２１ｂ）のアルキルメシラートでアルキル化して、式（２２ａおよび２２ｂ）のアルキル化テトラヒドロシクロペンタ［ｂ］インドールを得る。式（２１ａおよび２１ｂ）のアルキルメシラートを、２つのトランス鏡像異性体の混合物として使用する。アルキル化を、上記のスキーム３の工程Ａにおいて記載された条件と同様に実施する。

工程Ｂにおいて、ｂｏｃ保護基を、ジオキサン中のＴＦＡまたは好ましくは４Ｎ ＨＣｌのような酸性条件を使用して除去する。

スキーム４の工程Ｃにおいて、式（２３ａおよび２３ｂ）のヒドロキシプロリンを、スキーム３の工程Ｅについて既に記載したような還元的アミノ化条件を使用してアルキル化して、式（２４ａおよび２４ｂ）のようなトランス鏡像異性体の混合物を得る。鏡像異性体を、キラルクロマトグラフィーを使用して分離することができる。

トランス−３−ヒドロキシ−２−メタンスルホニルオキシメチル−３−メチル−ピロリジン−１−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル（２１ａおよび２１ｂ）を、本明細書中に記載される方法に類似の方法によって、または当分野において確立された手順を使用することによって容易に調製することができる。例えば、トランス−２−ベンジルオキシメチル−３−メチル−ピロリジン−３−オールを、適切な２，３−アジリジン−１−オールのワンポット変換によって得ることができる（Ｊ．Ｓｃｈｏｍａｋｅｒ ａｎｄ Ｓ．Ｂｈａｔｔａｃｈａｒｊｅｅ，Ｊ．Ａｍ．Ｃｈｅｍ．Ｓｏｃ．，２００７，１２９，１９９６−２００３）。次いで、ピロリジノールの窒素をｔ−ｂｏｃで保護し、ベンジル基を水素化によって除去する。生じたアルコールをメシラート化して、式（２１ａおよび２１ｂ）のトランス鏡像異性体を得る。

式（２７）の本発明の化合物の形成を、スキーム５に示すような反応に従って実行することができる。

スキーム５の工程Ａにおいて、式（５）のシアノテトラヒドロシクロペンタ［ｂ］インドールを、式（２５）のハロゲン化ベンジルまたはハロゲン化ピリジルメチルでアルキル化して、式（２６）のアルキル化テトラヒドロシクロペンタ［ｂ］インドールを得る。フェニル環またはピリジル環を、ヒドロキシル官能基で置換し、それを当分野で公知の保護基（Ｐｔｇ）、例えば、メチルエーテルまたはシリルエーテルのような保護基で保護する。アルキル化を、上記のスキーム３の工程Ａで記載されるような条件と同様に実施する。

工程Ｂにおいて、保護基を除去して、式（２７）のフェノールまたはヒドロキシピリジンを得る。例えば、メチルエーテルを、ジクロロメタンのような不活性溶媒中での、約−２０℃〜２５℃の温度で三臭化ホウ素との反応によって遊離ヒドロキシルへと変換する。あるいは、シリル保護基を、フッ化セシウムまたは好ましくはテトラブチルアンモニウムフルオリドのような試薬を使用してフッ化物アニオンで除去することができる。

式（２５）のハロゲン化ベンジルを、本明細書中に記載される方法に類似の方法によって、または当分野において確立された手順を使用することによって容易に調製することができる。例えば、フルオロまたはジフルオロ２−ヒドロキシベンズアルデヒドを、ヨードメタンでアルキル化して、２−メトキシベンズアルデヒドを提供することができる。ベンズアルデヒドを、対応するベンジルアルコールへと還元して、次いで、式（２５）の（クロロメチル）−２メトキシベンゼン（ここで、Ｘ＝ＣｌおよびＰｔｇ＝Ｍｅである）へと変換することができる。あるいは、フルオロまたはジフルオロ２−メチルフェノールを、ｔ−ブチルジメチルクロロシランでシリル化して、続いてＮ−ブロモコハク酸イミドとの反応により、式（２５）の臭化ベンジル（ここで、Ｘ＝ＢｒおよびＰｔｇ＝ＴＢＤＭＳである）を得ることができる。２−（クロロメチル）−３−メトキシピリジンを、ＰＯＣｌ_３での塩素化によって３−メトキシ−２−ピコリンから得ることができる。

生物学的活性の決定
インビトロおよびインビボでの試験によって証明されるように、式（Ｉ）の例示的化合物は、それらがステロイド性アンドロゲン療法に反応する障害の処置において有用性を有することを示唆する活性のプロフィールを有する。特に、式（Ｉ）の実施例１〜１０および１２の例示的化合物は、アンドロゲン受容体をアゴナイズする強力なＡＲリガンドである。さらに、式（Ｉ）の実施例１〜１０および１２の例示的化合物は、ＭＲ、ＧＲ、およびＰＲの各々に比べてＡＲに選択的に結合する。

本明細書中で使用される場合、「Ｋ_ｄ」は、リガンド−受容体複合体についての平衡解離定数を示し；「Ｋ_ｉ」は、薬物−受容体複合体についての平衡解離定数を示し、かつ、平衡状態で結合部位の半数に結合する薬物の濃度の指標であり；「Ｋ_ｂ」は、アンタゴニスト−受容体複合体についての平衡解離定数を示し；「ＩＣ５０」は、薬剤について考えられうる最大阻害応答の５０％を生じる薬剤の濃度、あるいは、受容体へのリガンド結合を５０％置換する薬剤の濃度を示し；「ＥＣ５０」は、薬剤について考えられうる最大応答の５０％を生じる薬剤の濃度を示し；そして「ＥＤ５０」は、薬剤についての最大応答の５０％を生じる、投与された治療剤の投薬量を示す。

ステロイドホルモン核受容体結合アッセイ：
ヒトＭＲ（鉱質コルチコイド受容体）、ＧＲ（糖質コルチコイド受容体）、ＡＲ（アンドロゲン受容体）、またはＰＲ（プロゲステロン受容体）を過剰発現するヒト胎児腎臓ＨＥＫ２９３細胞からの細胞溶解物を、受容体−リガンド競合結合アッセイのために使用して、Ｋ_ｉ値を決定する。典型的な手順は以下に記載する。

簡単に言うと、ステロイド受容体競合結合アッセイを、２０ｍＭ ＨＥＰＥＳ緩衝液（ｐＨ＝７．６）、０．２ｍＭ ＥＤＴＡ、７５ｍＭ ＮａＣｌ、１．５ｍＭ ＭｇＣｌ_２、２０％グリセロール、２０ｍＭモリブデン酸ナトリウム、０．２ｍＭ ＤＴＴ（ジチオスレイトール）、２０μｇ／ｍＬアプロチニン、および２０μｇ／ｍＬロイペプチンを含有する緩衝液（アッセイ緩衝液）中で行う。典型的には、ステロイド受容体結合アッセイは、１ウェル毎に、放射線標識されたリガンド（例えば、ＭＲ結合について０．２５ｎＭ［^３Ｈ］−アルドステロン、ＧＲ結合について、０．３ｎＭ［^３Ｈ］−デキサメタゾン、ＡＲ結合について０．３６ｎＭ［^３Ｈ］−メチルトリエノロン、およびＰＲ結合について０．２９ｎＭ［^３Ｈ］−メチルトリエノロン）、および２０μｇ ２９３−ＭＲ溶解物、２０μｇ ２９３−ＧＲ溶解物、２２μｇ ２９３−ＡＲ溶解物、または４０μｇ ２９３−ＰＲ溶解物のいずれかを含む。アッセイは、典型的には９６ウェル形式で行う。競合する試験化合物を、約０．０１ｎＭ〜１０μＭの範囲の種々の濃度で添加する。非特異的結合を、ＭＲ結合について５００ｎＭアルドステロン、ＧＲ結合について５００ｎＭデキサメタゾン、またはＡＲおよびＰＲ結合について５００ｎＭメチルトリエノロンの存在下で決定する。結合反応物（１４０μＬ）を、４℃で一晩インキュベートし、次いで、７０μＬの冷チャコールデキストラン緩衝液（５０ｍＬのアッセイ緩衝液毎に０．７５ｇの炭と０．２５ｇのデキストランを含有する）を、各反応物に添加する。プレートを、４℃で、オービタルシェーカー上で８分間混合する。プレートを、次いで、１０分間４℃で、３，０００ｒｐｍで遠心分離する。結合反応混合物の１２０μＬのアリコートを、次いで、別の９６ウェルプレートに移し、１７５μＬのＷａｌｌａｃ Ｏｐｔｉｐｈａｓｅ Ｈｉｓａｆｅ ３（商標）シンチレーション液を各ウェルに添加する。プレートを密封し、オービタルシェーカー上で激しく撹拌する。２時間のインキュベーション後、プレートを、Ｗａｌｌａｃ Ｍｉｃｒｏｂｅｔａ計数器で読み取る。

データを用いて推定ＩＣ５０および１０μＭでの阻害率を計算する。ＭＲ結合についての［^３Ｈ］−アルドステロン、ＧＲ結合についての［^３Ｈ］−デキサメタゾン、ＡＲ結合についての［^３Ｈ］−メチルトリエノロン、またはＰＲ結合についての［^３Ｈ］−メチルトリエノロンに対するＫｄを、飽和結合によって決定する。化合物に対するＩＣ５０値を、Ｃｈｅｎｇ−Ｐｒｕｓｏｆｆ方程式を使用してＫｉに変換する。

本質的に上記に記載されるようなプロトコールに従って、実施例１〜１０および１２の化合物は、５００ｎＭ以下のＡＲ結合アッセイにおけるＫ_ｉを表示する。具体的には、実施例１、２、６、および９の化合物は、それぞれ、約５１ｎＭ、１１ｎＭ、１３ｎＭ、および０．８ｎＭのＡＲ結合アッセイにおけるＫｉを表示し、したがって、本発明の範囲内の化合物が、ヒトＡＲの強力なリガンドであることを実証する。

ステロイド核ホルモン受容体調節の機能アッセイ：
アンドロゲンは、アンドロゲン受容体との相互作用を通してその生理学的効果を発揮する。ＡＲへのアンドロゲンの細胞質結合の後、リガンド受容体複合体は、それがＤＮＡ上のホルモン応答エレメントに結合して標的遺伝子の発現を開始する細胞核に移行する。アンドロゲンの効果は、本来は同化作用またはアンドロゲン作用として特徴づけられ得る。アンドロゲンの同化（すなわち、組織構築）効果は、筋肉量および筋力、ならびに骨量の増加を含み、一方、アンドロゲン（すなわち、男性化）効果は、内部生殖組織（すなわち、前立腺および精嚢）、外部生殖器（陰茎および陰嚢）、性欲、発毛パターンのような、男性の二次性徴の発達を含む。

本発明の化合物がステロイドホルモン受容体の活性を調節する（すなわち、アゴナイズする、部分的にアゴナイズする、部分的にアンタゴナイズする、またはアンタゴナイズする）能力を実証するために、核受容体タンパク質およびホルモン応答エレメント−受容体遺伝子構築物で一時的にトランスフェクトされた細胞における標的遺伝子発現の機能的調節を検出するバイオアッセイを実施する。機能アッセイにおいて利用される溶媒、試薬、およびリガンドは、商業的供給源から容易に入手可能であり、または、当業者によって調製することができる。以下に、核ホルモン受容体機能アッセイのための典型的な手順を記載する。

Ａ．核ホルモン受容体パネルスクリーン
ヒト胎児腎臓ＨＥＫ２９３細胞を、Ｆｕｇｅｎｅ（商標）のような好適なトランスフェクション試薬を使用して、ステロイドホルモン受容体および受容体遺伝子プラスミドでトランスフェクトする。簡単に言うと、ルシフェラーゼレポーターｃＤＮＡの上流のプロバシン（ｐｒｏｂａｓｉｎ）ＡＲＥおよびＴＫ（チミジンキナーゼ）プロモーターの２つのコピーを含有するレポータープラスミドを、ウイルス性ＣＭＶ（サイトメガロウイルス）プロモーターを使用して、ヒトアンドロゲン受容体（ＡＲ）を構成的に発現するプラスミドと共にＨＥＫ２９３細胞中にトランスフェクトする。ルシフェラーゼレポーターｃＤＮＡの上流のＧＲＥおよびＴＫプロモーターの２つのコピーを含有するレポータープラスミドを、ウイルス性ＣＭＶプロモーターを使用して、ヒト糖質コルチコイド受容体（ＧＲ）、ヒト鉱質コルチコイド受容体（ＭＲ）、またはヒトプロゲステロン受容体（ＰＲ）のいずれかを構成的に発現するプラスミドと共にトランスフェクトする。細胞を、Ｔ１５０ｃｍフラスコにおいて５％活性炭処理済（ｃｈａｒｃｏａｌ−ｓｔｒｉｐｐｅｄ）ウシ胎仔血清（ＦＢＳ）を有するＤＭＥＭ培地中でトランスフェクトする。一晩のインキュベーション後、トランスフェクトされた細胞をトリプシン処理し、９６ウェル皿において５％活性炭処理済ＦＢＳを含有するＤＭＥＭ培地中に平板培養し、４時間インキュベートし、次いで、約０．０１ｎＭ〜１０μＭの範囲の種々の濃度の試験化合物に曝露する。アッセイのためのアンタゴニスト様式において、各々の受容体に対して低濃度のアゴニストを培地に添加する（ＭＲについて０．０８ｎＭのアルドステロン、ＧＲについて０．２５ｎＭのデキサメタゾン、ＡＲについて０．６６ｎＭのメチルトリエノロン、およびＰＲについて０．０８ｎＭのプロメゲストン）。試験化合物との２４時間のインキュベーション後、細胞を溶解し、標準的な技術を使用してルシフェラーゼ活性を決定する。

データを、ＥＣ５０値を決定するために４パラメータフィットのロジスティック曲線に当てはめる。有効性率（飽和最大応答を有する化合物）または最大刺激率（飽和していない最大応答を有する化合物）を、以下の参照アゴニストで得られた最大刺激と比較して決定する：ＭＲアッセイについて３０ｎＭのアルドステロン、ＡＲアッセイについて１００ｎＭのメチルトリエノロン、ＰＲアッセイについて３０ｎＭのプロメゲストン、およびＧＲアッセイについて１００ｎＭのデキサメタゾン。ＩＣ５０値を、アンタゴニスト様式アッセイのデータを使用して同様に決定する。アンタゴニスト様式において、阻害率を、低濃度のアゴニスト（ＭＲについて０．０８ｎＭのアルドステロン、ＧＲについて０．２５ｎＭのデキサメタゾン、ＡＲについて０．６６ｎＭのメチルトリエノロン、およびＰＲについて０．０８ｎＭのプロメゲストン）の存在下での試験化合物の活性を、試験化合物が存在しない同じ低濃度のアゴニストによって生成される応答と比較することによって決定する。

Ｂ．Ｃ２Ｃｌ２ ＡＲ／ＡＲＥレポーターアッセイ：
筋肉組織におけるアゴニスト活性の指標として、Ｃ２Ｃｌ２ ＡＲ／ＡＲＥレポーターアッセイを実施する。簡単に言うと、マウス筋芽Ｃ２Ｃｌ２細胞を、Ｆｕｇｅｎｅ（商標）試薬を使用して同時トランスフェクトする。ルシフェラーゼレポーターｃＤＮＡの上流のＧＲＥ／ＡＲＥ（糖質コルチコイド応答エレメント／アンドロゲン応答エレメント）およびＴＫプロモーターを含有するレポータープラスミドを、ウイルス性ＣＭＶプロモーターを使用して、ヒトアンドロゲン受容体（ＡＲ）を構成的に発現するプラスミドと共にトランスフェクトする。細胞を、Ｔ１５０ｃｍ^２フラスコにおいて４％活性炭処理済ウシ胎仔血清（ＦＢＳ）を有するＤＭＥＭ培地中でトランスフェクトする。５時間のインキュベーション後、トランスフェクトされた細胞をトリプシン処理し、９６ウェル皿において４％活性炭処理済ＦＢＳを含有するＤＭＥＭ培地中に平板培養し、２時間インキュベートし、次いで、約０．０１ｎＭ〜１０μＭの範囲の種々の濃度の試験化合物に曝露する。試験化合物との４８時間のインキュベーション後、細胞を溶解し、標準的な技術を使用してルシフェラーゼ活性を決定する。データを、ＥＣ５０値を決定するために４パラメータフィットのロジスティック曲線に当てはめる。有効性率を、１０ｎＭメチルトリエノロンで得られた最大刺激に対して決定する。

上記に記載されるアッセイと類似のステロイドホルモン核ホルモン受容体調節の機能アッセイは、当業者によって容易に設計されることができる。本質的に上記に記載されるようなプロトコールに従って、実施例１〜１０および１２の化合物は、２０００ｎＭ以下のＣ２Ｃｌ２ ＡＲ／ＡＲＥレポーターアッセイにおけるＥＣ５０を表示する。具体的には、実施例１、２、６、および９の化合物は、それぞれ、約２０、１．０、０．３、および０．３のＣ２Ｃｌ２ ＡＲ／ＡＲＥレポーターアッセイにおけるＥＣ５０を表示し、したがって、本発明の範囲内の化合物が、ヒトＡＲのアゴニストであることを実証する。

有効性および選択性のモデル：
雄性Ｓｐｒａｇｕｅ Ｄａｗｌｅｙラット（２４週齢）を、認可された手順に従って去勢し（性腺摘出、または「ＧＤＸ」）、８週間消耗させる。週齢を合わせたシャム操作マウスもまた準備する。動物を、温度管理した部屋（２４℃）において、逆転させた１２時間の明／暗サイクルかつ水および食餌を自由に利用可能にして飼育する。

動物を、試験枠に属させる前に体重に基づいて無作為化する。本発明の化合物を、無菌Ｈ_２Ｏ中の１％カルボキシメチルセルロース（ＣＭＣ）ナトリウム＋０．２５％Ｔｗｅｅｎ８０＋０．０５％ＡｎｔｉＦｏａｍ（登録商標）のような慣習的な賦形剤を使用して、去勢した３２週齢のラット（体重約４５０ｇ〜５００ｇ）に、経口栄養法によって毎日投与する。賦形剤のみで処置したシャム操作ラットを、処置陽性コントロールとして使用し、一方、賦形剤のみによって処置した去勢ラットを、処置陰性コントロールとして使用する。

試験動物に、例えば、０．３、１、２、３、または６ｍｇ／ｋｇ／日の本発明の化合物を、２週間または８週間の期間にわたり毎日投薬する。処置期間後に、動物を犠牲にし、各試験群における肛門挙（ＬＡ）筋および球海綿体筋の湿重量を決定し、去勢した賦形剤のみのコントロール群からの肛門挙筋および球海綿体筋の湿重量と比較する（秤量後、球海綿体筋を、以下に記載されるように一酸化窒素合成ｍＲＮＡの測定において後で使用するために液体窒素中で急速冷凍する）。組織選択的活性の指標として、試験動物からの前立腺の湿重量を、去勢した、賦形剤のみの群からの前立腺の湿重量と同様に比較し得る。

８週間の処置期間を使用する、本質的に上記に記載されるプロトコールに従って、実施例２の化合物を用いた実験では以下の結果が得られた：シャム（賦形剤のみ）は、約０．２５５ｇの平均ＬＡ湿重量、約８２４．５ｍｇの平均前立腺湿重量、および約０．９３ｇの平均球海綿体筋湿重量を示し；去勢／賦形剤のみの動物は、約０．０９４ｇの平均ＬＡ湿重量、約１０３．８ｍｇの平均前立腺湿重量、および約０．３６２ｇの平均球海綿体筋湿重量を示し；０．３ｍｇ／ｋｇの試験群は、約０．１３７ｇの平均ＬＡ湿重量、約７２．４ｍｇの平均前立腺湿重量、および約０．４７６ｇの平均球海綿体筋湿重量を示し；１．０ｍｇ／ｋｇの試験群は、約０．１８２ｇの平均ＬＡ湿重量、約１０２．８ｍｇの平均前立腺湿重量、および約０．５８２ｇの平均球海綿体筋湿重量を示し；３．０ｍｇ／ｋｇの試験群は、約０．２０５ｇの平均ＬＡ湿重量、約１４７．４ｍｇの平均前立腺湿重量、および約０．６９８ｇの平均球海綿体筋湿重量を示し；そして、６．０ｍｇ／ｋｇの試験群は、約０．２６４ｇの平均ＬＡ湿重量、約２７１．８ｍｇの平均前立腺湿重量、および約０．９５５ｇの平均球海綿体筋湿重量を示した。

したがって、実施例２の化合物での処置は、去勢したコントロール群と比較して、肛門挙筋および球海綿体筋重量において投与量依存性の増加を生じた。

勃起活性のインビトロアッセイ
一酸化窒素合成／サイクリックグアノシン一リン酸（ＮＯＳ／ｃＧＭＰ）経路は、勃起活性のために重要である。ＮＯＳ発現は、一酸化窒素（ＮＯ）生成をもたらし、それは、次いで、グアニリルシクラーゼの活性化を通じてｃＧＭＰ生成を促進する。ｃＧＭＰは、肉体的な平滑筋の弛緩を媒介するプロテインキナーゼＧ（ＰＫＧ）活性を促進して、陰茎の勃起を促す。証拠は、実験的動物モデルにおける陰茎海綿体においてＮＯＳアイソフォームの発現および活性を制御することにおけるアンドロゲンの役割を支持している。Ｔｒａｉｓｈら、Ｅｕｒｏｐｅａｎ Ｕｒｏｌｏｇｙ，５２；５４−７０（２００７）。したがって、ＮＯＳアイソフォームの発現を増加することができるアンドロゲン受容体調節物質は、陰茎の勃起活性を制御する役割を有すると考えられる。

本発明の化合物のＮＯＳアイソフォームの発現を上方制御する能力を決定するために、以下のインビトロ法を利用することができる。

ＲＮＡは、有効性および選択性のモデルについて本質的に上記に記載するように準備し投薬した去勢Ｓｐｒａｇｕｅ Ｄａｗｌｅｙラットから解剖時に得た凍結球状（ｂｕｌｂｏｕｓ）組織および陰茎海綿体組織から単離する。ｃＤＮＡは、製造者の使用説明書に従い大容量ｃＤＮＡキットを使用して、２μｇのＲＮＡから合成する。

次いで、リアルタイム定量ＰＣＲを、蛍光ＴａｑＭａｎ（登録商標）方法（Ａｐｐｌｉｅｄ Ｂｉｏｓｙｓｔｅｍｓ）に従い実施する。Ａｓｓａｙｓ−ｏｎ−Ｄｅｍａｎｄ（商標）（Ａｐｐｌｉｅｄ Ｂｉｏｓｙｓｔｅｍｓ）プローブを、ラットの上皮一酸化窒素合成転写産物（ｅＮＯＳ）について使用し、一方、プローブを、プローブデザイナーソフトウェア（Ａｐｐｌｉｅｄ Ｂｉｏｓｙｓｔｅｍｓ）を使用して、ラットのニューロン一酸化窒素合成の陰茎特異的アイソフォーム（ｐｎＮＯＳ）について設計する。プローブを、ｐｎＮＯＳに特異的なラットのニューロン一酸化窒素合成遺伝子（ｐｎＮＯＳ）の１０２ｂｐ領域におよぶように設計する（２８６５位〜２９６７位）。ＭＧＢ（商標）プライマー配列は、５’ＣＣＧＧＡＡＣＣＣＴＴＧＣＧＴＴＴ３’（配列番号１）（順方向）および５’ＣＡＧＡＣＴＧＴＧＧＧＣＴＴＣＡＧＡＧＴＣＡ３’（配列番号２）（逆方向）であり、プローブ配列は、５’ＣＣＣＧＴＡＡＡＧＧＧＣＣＴ３’（配列番号３）（ＦＡＭ ＮＦＱ）である。ＰＰＩＢ転写産物のためのＡｓｓａｙｓ−ｏｎ−Ｄｅｍａｎｄ（商標）プローブセットを、内部コントロールとして使用する。ＰＣＲを、以下のサーモサイクラー条件で、ＡＢＩ Ｐｒｉｓｍ ７７００ Ｓｅｑｕｅｎｃｅ Ｄｅｔｅｃｔｉｏｎ Ｓｙｓｔｅｍ上で実施する：５０℃で２分間、９５℃で１０分間、ならびに９５℃で３０秒間と６０℃で１分間を４０サイクル。全ての反応は３回行う。

本質的に本明細書中に記載される手順を使用して、実施例２の化合物は、８週間の期間にわたり処置した去勢Ｓｐｒａｇｕｅ Ｄａｗｌｅｙラットから得られた球海綿体筋組織における陰茎の一酸化窒素合成（ｐｎＮＯＳ）ｍＲＮＡの投与量依存性の増大を示す。具体的には、０．３ｍｇ／ｋｇ試験群は、コントロールの約９７％のｐｎＮＯＳ発現を示し；１．０ｍｇ／ｋｇ試験群は、コントロールの約９３％のｐｎＮＯＳ発現を示し；３．０ｍｇ／ｋｇ試験群は、コントロールの約１５３％のｐｎＮＯＳ発現を示し；そして６．０ｍｇ／ｋｇ試験群は、コントロールの約２４８％のｐｎＮＯＳ発現を示した。

さらに、別のコホートにおいて、実施例２の化合物は、２週間の期間にわたり２ｍｇ／ｋｇ／日で処置した去勢Ｓｐｒａｇｕｅ Ｄａｗｌｅｙラットから得られた陰茎海綿体組織における上皮の一酸化窒素合成（ｅＮＯＳ）ｍＲＮＡの増大を示す。具体的には、試験群におけるｅＮＯＳ発現は、コントロールの約１５９％であった。

筋肉量または筋力の減少は、骨折あるいは股関節部または膝の置換後の運動不足または不使用の結果として生じ得る。本発明の化合物の、運動不足、不使用、または外傷によって誘発される筋肉量または筋力の低下を処置または予防する能力を決定するために、以下の動物モデルを利用することができる。

運動不足によって誘発される筋力低下のモデル
雄性１２週齢のＩＣＲマウスの後肢を、ギプスを肢に取り付けることによる足底屈様式で運動不足する。運動不足後の７日間、マウスを様々な期間本発明の化合物の毎日の投与で処置する。ギプス有りおよび無しのコントロール動物を、様々な期間賦形剤で同様に処置する。処置プロトコールの終わりに、マウスを犠牲にし、ギプスをした腓腹筋の湿重量を決定し、個々の処置群を賦形剤コントロール群と比較する。概して、Ａｍ．Ｊ．Ｅｎｄｏｃｒｉｎｏｌ．Ｍｅｔａｂ．２８９：９６９−９８０（２００５）を参照のこと。

筋肉の損傷および外傷のモデル
雄性ＩＣＲマウスを８週齢で去勢し、さらなる８週間の間消耗させる。マウスを個々にケージに入れ、１２時間の明／暗サイクル、２２℃で、食餌および水に自由にアクセスできる状態で維持する。マウスをイソフルオラン（１〜５％）で麻酔し、右の腓腹筋に１０μＭの心臓毒性（ｎａｊａ ｎａｊａ ａｔｒａ；Ｓｉｇｍａ Ａｌｄｒｉｃｈ）の１００μＬを左右両方に注射して、筋肉損傷を誘発する。動物は麻酔から回復し、５分以内に通常の活動を再開する。注射後の５日目に、動物を様々な投与量の本発明の化合物で処置する。注射後の１４日目に、処置されたマウスを安楽死させ、秤量し、腓腹筋組織を注射していない脚（反対側コントロール）と心臓毒性注射をした脚の両方から回収する。筋肉の重量を、注射せずかつ非処置のコントロールに適合させて、外傷からの回復率を確立する。

本発明の化合物が、骨粗しょう症または骨減少症のような骨量の減少と関連する障害を処置する能力を有することを実証するために、当分野において周知の他の動物モデルを利用することができる。そのようなモデルの例は、Ｙ．Ｌ．Ｍａら、Ｊａｐａｎｅｓｅ Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｂｏｎｅ ａｎｄ Ｍｉｎｅｒａｌ Ｍｅｔａｂｏｌｉｓｍ ２３（Ｓｕｐｐｌ．）：６２−６８（２００５）；Ｙ．Ｌ．Ｍａら、Ｅｎｄｏｃｒｉｎｏｌｏｇｙ １４４：２００８−２０１５（２００３）；およびＫ．Ｈａｎａｄａら、Ｂｉｏｌ．Ｐｈａｒｍ．Ｂｕｌｌ．２６（１１）：１５６３−１５６９（２００３）に記載されている。具体的に、卵巣摘出によって誘発されるエストロゲン欠乏骨減少症の雌性ラットモデルおよび精巣摘除によって誘発されるアンドロゲン欠乏骨減少症の雄性ラットモデルについて記載されている。

卵巣摘出によって誘発されるエストロゲン欠乏骨減少症のモデル：
６カ月齢の、約２２０ｇ重量の未性交Ｓｐｒａｇｕｅ Ｄａｗｌｅｙ雌性ラットを、食餌および水に自由にアクセスできる状態で飼育する。両側の卵巣摘出（Ｏｖｘ）を、（シャム操作コントロールを除く）動物に実施し、１群あたり７〜８匹のラットの処置群に無作為化する。各アッセイは、シャム−卵巣摘出コントロール（Ｓｈａｍ）および賦形剤で処置した卵巣摘出コントロール（Ｏｖｘ）を含む、少なくとも２セットのコントロールを典型的に包含する。Ｏｖｘラットを、試験化合物での処置の前に骨減少症を確立するために、１カ月間骨を減少させる。試験化合物を、８週間Ｏｖｘ動物に栄養法によって経口投与する。陽性コントロールとして、組換えヒトＰＴＨ（１〜３８）（約１０μｇ／ｋｇ／日、皮下）を、Ｏｖｘ動物のサブセットに与えてもよい。試験プロトコールの完了後に、定量的コンピュータ断層撮影（ＱＣＴ）を使用して、腰椎Ｌ−５および大腿骨の容積骨塩密度（ＢＭＤ、ｍｇ／ｃｃ）を分析する。大腿骨骨幹中央部の３点曲げの生体力学的分析および近位大腿骨に対する障害の負荷を、材料機械試験機を使用して実施し、ＴｅｓｔＷｏｒｋｓ ４（登録商標）ソフトウェアを使用して分析する。

精巣摘除によって誘発されるアンドロゲン欠乏骨減少症のモデル：
６カ月齢の、約４８５ｇ重量のＳｐｒａｇｕｅ Ｄａｗｌｅｙ雄性ラットを、食餌および水に自由にアクセスできる状態で飼育する。両側の精巣摘除（Ｏｒｘ）を、（シャム操作コントロールを除く）動物に実施し、１群あたり７〜８匹のラットの処置群に無作為化する。各アッセイは、シャム−精巣摘除コントロール（Ｓｈａｍ）および賦形剤で処置した精巣摘除コントロール（Ｏｒｘ）を含む、少なくとも２セットのコントロールを典型的に包含する。Ｏｒｘラットを、試験化合物での処置の前に骨減少症を確立するために、２カ月間骨を減少させる。試験化合物を、８週間Ｏｒｘ動物に栄養法によって経口投与する。陽性コントロールとして、組換えヒトＰＴＨ（１〜３８）（約１０μｇ／ｋｇ／日、皮下）を、Ｏｒｘ動物のサブセットに与えてもよい。試験プロトコールの完了後に、卵巣摘出雌性ラットモデルについて上記で記載されるように、椎骨および大腿骨のＢＭＤ、ならびに大腿骨の生体力学的分析を実施することができる（概して、Ｍａら、ＪＢＭＲ １７：２２５６−２２６４（２００２）、およびＴｕｒｎｅｒら、Ｂｏｎｅ［概説］１４：５９５−６０８（１９９３）を参照のこと）。

当業者によって理解されるように、上記に記載される動物モデルプロトコールは、本発明の化合物および方法に関して使用するために容易に適合させることができる。

以下の調製例および実施例は、本発明をさらに例示し、かつ、概して上記に記載されるような任意の新規化合物を含む、式（Ｉ）の化合物の一般的な合成を表す。試薬および出発物質は、当業者が容易に入手可能であり、または当業者が容易に合成することができる。調製例および実施例は例示のために記載するものであり、限定のために記載するものではないこと、および様々な変更が当業者によってなされ得ることは理解されるべきである。本発明の化合物のＲ配置またはＳ配置は、Ｘ線分析およびキラルＨＰＬＣ保持時間での補正のような標準的な技術によって決定され得る。本発明の化合物の名称は、概して、ＩＳＩＳ Ｄｒａｗアドイン用のＡｕｔｏｎｏｍ ２０００によって得られる。

調製例１
（Ｒ，Ｓ）−２−（３−オキソ−シクロペンチル）−イソインドール−１，３−ジオン

機械撹拌器で激しく撹拌しながら、２Ｍの含水Ｎａ_２ＣＯ_３（７９ｍＬ、０．１５８ｍｏｌ）を、ＭｅＯＨ（８８６ｍＬ）中のシクロペンテノン（１００ｇ、１．２２ｍｏｌ）とフタルイミド（１８０ｇ、１．２２ｍｏｌ）のスラリーに加える。およそ２時間後、粘稠な白色沈殿物が形成する。混合物を室温で２４時間撹拌する。白色固体を、真空濾過によって回収し、メタノール（１Ｌ）で洗い流す。固体を、水（１Ｌ）中に懸濁させ、３時間撹拌する。固体を回収し、４０℃の真空オーブン中で一晩乾燥させて、白色固体として１９８ｇ（７１％）の標題化合物を得る。１Ｈ ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄ６） δ ７．８５−７．７７（ｍ，４Ｈ），４．９０（ｍ，１Ｈ），２．６７（ｄｄｄ，１Ｈ，Ｊ＝１８．５，６．２，１．３Ｈｚ），２．５４（ｄｄ，１Ｈ，Ｊ＝１８．５，９．２Ｈｚ），２．４５（ｍ，１Ｈ），２．３２−２．２１（ｍ，３Ｈ）；ＥＳ／ＭＳ ｍ／ｚ ２３０（Ｍ＋１，弱）。注記：生成物は、塩基水溶液での処置の際に逆マイケル反応を容易に受けるだろう。

調製例２
（Ｒ，Ｓ）−２−（７−ブロモ−１，２，３，４−テトラヒドロ−シクロペンタ［ｂ］インドール−２−イル）−イソインドール−１，３−ジオン

５Ｌフラスコにおいて、（Ｒ，Ｓ）−２−（３−オキソ−シクロペンチル）−イソインドール−１，３−ジオン（２９５．３ｇ、１．２９ｍｏｌ）、４−ブロモフェニルヒドラジン−ＨＣｌ（２８７．９ｇ、１．２９ｍｏｌ）および氷酢酸（３Ｌ）を、機械的に撹拌しながら混合する。反応物を５時間還流させ、室温まで冷却する。反応物を、急速に撹拌しながら水（４Ｌ）中に注ぐ。固体を真空濾過によって回収し、水（４Ｌ）で洗浄し、３０分間風乾する。固体を、ＭｅＯＨ（７００ｍＬ）でスラリーにし、真空濾過によって回収し、ＭｅＯＨ（１００ｍＬ）で洗い流す。灰色固体を２時間風乾し、次いで、５０℃の真空オーブンにおいて一晩乾燥させて、黒ずんだ固体として４１４．６７ｇ（８４％）の標題化合物を得る。ＥＳ／ＭＳ ｍ／ｚ（^７９Ｂｒ／^８１Ｂｒ）３８１／３８３［Ｍ＋Ｈ］^＋。

調製例３
（Ｒ，Ｓ）−７−ブロモ−１，２，３，４−テトラヒドロ−シクロペンタ［ｂ］インドール−２−イルアミン

ＴＨＦ（１０００ｍＬ）およびＥｔＯＨ（１５０ｍＬ）中の（Ｒ，Ｓ）−２−（７−ブロモ−１，２，３，４−テトラヒドロ−シクロペンタ［ｂ］インドール−２−イル）−イソインドール−１，３−ジオン（１５０ｇ、３９３ｍｍｏｌ）の溶液に、ヒドラジン一水和物（３５．０ｇ、３４．０ｍＬ、６９９ｍｍｏｌ）を加える。反応混合物を、室温で１８時間、次いで、５５℃で２時間、機械的撹拌で撹拌すると、反応物は非常に粘性になり、ＴＨＦ（４２５ｍＬ）およびＥｔＯＨ（７５ｍＬ）を加える。５５℃での加熱をさらに２時間続ける。反応物を室温に冷却し、珪藻土を通して濾過し、ＴＨＦで洗い流し、乾燥するまで濃縮する。残渣をトルエンおよびＥｔＯＨと混合し、乾燥するまで再度濃縮する。生成物を高真空下に３時間置き、固体として９４ｇ（９５％）の標題化合物を得る。ＬＣ−ＥＳ／ＭＳ ｍ／ｚ（^７９Ｂｒ／^８１Ｂｒ）２５１／２５３［Ｍ＋Ｈ］^＋，Ｔ_Ｒ＝１．１４分。

調製例４
（（Ｒ，Ｓ）−７−ブロモ−１，２，３，４−テトラヒドロ−シクロペンタ［ｂ］インドール−２−イル）−カルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル

ＴＨＦ（８００ｍＬ）およびＮａＨＣＯ_３飽和水溶液（２００ｍＬ）中の（Ｒ，Ｓ）−７−ブロモ−１，２，３，４−テトラヒドロ−シクロペンタ［ｂ］インドール−２−イルアミン（８１．５ｇ、３２５ｍｍｏｌ）の混合物を、二炭酸ジ−ｔｅｒｔ−ブチル（８０．３ｇ、３５７ｍｍｏｌ）で何度かに分けて処理し、室温で１時間撹拌する。反応物を、ＥｔＯＡｃ（３００ｍＬ）および塩水（１００ｍＬ）で希釈する。層を分離し、有機層をＭｇＳＯ_４で乾燥させ、濾過し、黒ずんだ油状の固体になるまで濃縮する。固体を、ＣＨ_２Ｃｌ_２（４００ｍＬ）と混合し、氷浴中で冷却し、濾過する。固体をＣＨ_２Ｃｌ_２およびヘキサンで洗い流して、固体として２８．１ｇ（３４％）の標題化合物を回収する。さらなる７８．８ｇ（６０％）の標題化合物を、濾液を濃縮することおよびクロマトグラフィー（１Ｌのシリカゲル、濃縮されたＣＨ_２Ｃｌ_２溶液として充填され、３０％のヘキサン／ＣＨ_２Ｃｌ_２、１００％のＣＨ_２Ｃｌ_２、次いで、３％のＥｔＯＡｃ／ＣＨ_２Ｃｌ_２で溶出する）によって得る。^１Ｈ−ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３） δ ７．９８−７．９１（ｍ，１Ｈ），７．５４（ｓ，１Ｈ），７．２５（ｓ，２Ｈ），７．２０−７．１５（ｍ，２Ｈ），５．０５−５．０２（ｍ，２Ｈ），３．３７−３．２９（ｍ，２Ｈ），２．７７−２．７０（ｍ，１Ｈ），２．６２−２．５７（ｍ，１Ｈ），１．４６（ｓ，９Ｈ）。

調製例５
（（Ｓ）−７−ブロモ−１，２，３，４−テトラヒドロ−シクロペンタ［ｂ］インドール−２−イル）−カルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル

（（Ｒ，Ｓ）−７−ブロモ−１，２，３，４−テトラヒドロ−シクロペンタ［ｂ］インドール−２−イル）−カルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル（６３５ｇ、１８１０ｍｍｏｌ）を、まず冷Ｅｔ_２Ｏで粉砕し、次いで、キラルＨＰＬＣ（カラム：Ｃｈｉｒａｌｃｅｌ ＯＪ ８×３２ｃｍ；溶離剤：１００％ ＭｅＯＨ）によって精製して、黄褐色固体として３１０ｇの標題化合物（第２溶出異性体）を得る。キラルＨＰＬＣ ＯＪ−Ｈ，１００％ ＭｅＯＨ，２５０ｎｍでのＵＶ検出 Ｔ_Ｒ＝７．６分，９７．８％ｅｅ。

調製例６
（（Ｓ）−７−シアノ−１，２，３，４−テトラヒドロ−シクロペンタ［ｂ］インドール−２−イル）−カルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル

以下の試薬を、１００℃で１８時間、ＤＭＦ（２５０ｍＬ）中で一緒に撹拌する：（（Ｓ）−７−ブロモ−１，２，３，４−テトラヒドロ−シクロペンタ［ｂ］インドール−２−イル）−カルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル（５０．０ｇ、１４２ｍｍｏｌ）、シアン化亜鉛（１１．９ｇ、９９．７ｍｍｏｌ）、酢酸亜鉛（５．２２ｇ、２８．５ｍｍｏｌ）、１，１’−ビス（ジフェニルホスフィノ）フェロセン）塩化パラジウム（ＩＩ）（Ｐｄ（ｄｐｐｆ）_２Ｃｌ_２）（１．７４ｇ、２．１４ｍｍｏｌ）、および亜鉛（３．７２ｇ、５６．９ｍｍｏｌ）。反応物を乾燥するまで濃縮し、水と酢酸エチルとの間で分割する。有機物を水および塩水で洗浄し、次いで、濃縮して固体を得る。固体を２つの等量の部分で以下のようにシリカゲル（１６００ｍＬ）上でクロマトグラフする：ＣＨ_２Ｃｌ_２中の溶液として充填し、ＣＨ_２Ｃｌ_２（３Ｌ）中の２％ ＥｔＯＡｃ、次いで、ＣＨ_２Ｃｌ_２中の５％ ＥｔＯＡｃで溶出する。生成物を２つのカラムから回収して、白色固体として２９ｇ（６９％）の標題化合物を得る。^１Ｈ−ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３） δ ８．３９（ｓ，１Ｈ），７．７４（ｓ，１Ｈ），７．３４（ｄ，Ｊ＝１．８Ｈｚ，２Ｈ），５．０５−４．９６（ｍ，２Ｈ），３．３７−３．２５（ｍ，２Ｈ），２．８０−２．６３（ｍ，２Ｈ），１．４６（ｓ，９Ｈ）。

調製例７
（（Ｓ）−７−シアノ−１，２，３，４−テトラヒドロ−シクロペンタ［ｂ］インドール−２−イル）−カルバミン酸イソプロピルエステル

（（Ｓ）−７−シアノ−１，２，３，４−テトラヒドロ−シクロペンタ［ｂ］インドール−２−イル）−カルバミン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル（１０ｇ、３３．６３ｍｍｏｌ）を、１，４−ジオキサン（１０２ｍＬ）中に溶解し、室温で、４Ｍ ＨＣｌ／ジオキサン（１０２ｍＬ）で処理する。１８時間後、固体を濾別し、Ｅｔ_２Ｏ（５０ｍＬ）で洗浄し、次いで、真空中で乾燥する。

固体を、ジクロロメタン（１６８ｍＬ）中でスラリーにし、室温で、ジイソプロピルエチルアミン（９．１３ｇ、１２．３ｍＬ、７０．１ｍｍｏｌ）およびクロロギ酸イソプロピル（トルエン中１．０Ｍ、３４．０ｍＬ、３４．０ｍｍｏｌ）で処理する。４時間後、反応物を水（５０ｍＬ）で処理し、濃縮して、生成物の水性スラリーを得る。反応物を水（５００ｍＬ）でさらに希釈し、超音波浴中で１５分間超音波分解する。黄褐色固体を濾別し、真空中４０℃で乾燥する。固体を、Ｅｔ_２Ｏ（１００ｍＬ）中でスラリーにし、超音波浴中で１０分間超音波分解し、濾過し、Ｅｔ_２Ｏ（５０ｍＬ）で洗浄し、次いで、真空中で乾燥して、黄褐色固体として８．２０ｇ（８６％収率）の標題化合物を得る。ＬＣ−ＥＳ／ＭＳ ｍ／ｚ ２８４ ［Ｍ＋Ｈ］^＋，２８２［Ｍ−Ｈ］⁻，Ｔ_Ｒ＝２．２０分；^１Ｈ−ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ−ｄ_６） δ １１．４４（ｓ，１Ｈ），７．７８（ｓ，１Ｈ），７．５２（ｄ，Ｊ＝７．５Ｈｚ，１Ｈ），７．３９（ｄ，Ｊ＝８．４Ｈｚ，１Ｈ），７．２８（ｄｄ，Ｊ＝１．８，８．４Ｈｚ，１Ｈ），４．７７−４．６３（ｍ，２Ｈ），３．１８−３．０４（ｍ，２Ｈ），２．７０（ｄｄ，Ｊ＝６．２，１５．８Ｈｚ，１Ｈ），２．５８（ｄｄ，Ｊ＝６．２，１４．５Ｈｚ，１Ｈ），１．１３（ｄ，Ｊ＝６．２Ｈｚ，６Ｈ）。

調製例８
（２Ｓ，３Ｓ）−１−（ｔｅｒｔ−ブトキシカルボニル）−３−ヒドロキシピロリジン−２−カルボン酸

メタノール（１００ｍＬ）中のトランス−３−ヒドロキシ−Ｌ−プロリン（５ｇ、３７．５６ｍｍｏｌ）の懸濁液を、室温で、ジイソプロピルエチルアミン（６．５５ｍＬ、３７．５６ｍｍｏｌ）、続いて二炭酸ジ−ｔ−ブチル（８．８７ｇ、３９．４４ｍｍｏｌ）で処理する。生じた懸濁液を、均質な溶液にしながら２時間室温で撹拌する。溶媒を真空中で除去し、残渣を酢酸エチル（１２０ｍＬ）中に溶解する。有機溶液を、１Ｎ 含水塩化水素で洗浄する。水層を捨て、有機層を塩水で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥し、濃縮し、真空下で乾燥して、８．０ｇ（９０％）の標題化合物を得る。^１Ｈ ＮＭＲ（３００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３） δ １２．６０（ｓ，ｂｒ，１Ｈ），５．４０（ｓ，ｂｒ，１Ｈ），４．２０−４．１２（ｍ，１Ｈ），３．８７（ｄ，Ｊ＝６．４Ｈｚ，１Ｈ），３．２５−３．４２（ｍ，２Ｈ），１．９０−１．７５（ｓ，ｂｒ，１Ｈ），１．７４−１．６５（ｓ，ｂｒ，１Ｈ），１．３０（ｄ，Ｊ＝７．１Ｈｚ，９Ｈ）。

調製例９
（２Ｒ，３Ｓ）−ｔｅｒｔ−ブチル−３−ヒドロキシ−２−（ヒドロキシメチル）ピロリジン−１−カルボン酸塩

テトラヒドロフラン（１３０ｍＬ）中の３−ヒドロキシ−ピロリジン−１，２−ジカルボン酸１−ｔｅｒｔ−ブチルエステル（１３．２９ｇ、５７．４７ｍｍｏｌ）の溶液を、ボラン−硫化メチル複合体（１６．０６ｍＬ、１７２．４１ｍｍｏｌ）で滴下して処理し、室温で一晩撹拌する。混合物を氷水浴において５℃に冷却し、気体の発生が止まるまで、３Ｎ 塩化水素水溶液（５ｍＬ）で滴下して処理する。生じた懸濁液を３０分間さらに撹拌し、白色固体が溶解するまで、５Ｎ 水酸化ナトリウム水溶液で希釈する。これを酢酸エチル（３×１００ｍＬ）で抽出する。有機層を水（２×１００ｍＬ）および塩水で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥し、濾過し、乾燥するまで濃縮する。生じた油を真空下で乾燥して、１０．０３ｇ（８０％）の標題化合物を得る。ＬＣ−ＥＳ／ＭＳ ｍ／ｚ ４５７．２［２Ｍ＋Ｎａ］^＋，Ｔ_Ｒ＝１．５９分。

調製例１０
（２Ｒ，３Ｓ）−３−ヒドロキシ−２−メタンスルホニルオキシメチル−ピロリジン−１−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル

トルエン（５０ｍＬ）中の（２Ｒ，３Ｓ）−ｔｅｒｔ−ブチル３−ヒドロキシ−２−（ヒドロキシメチル）ピロリジン−１−カルボン酸塩（５．０４ｇ、２３．２０ｍｍｏｌ）およびジブチルオキソスタンナン（７．０７ｇ、２７．８４ｍｍｏｌ）の懸濁液を、１３０℃の油浴で２時間還流する。混合物を、氷浴中で３０分間０℃に冷却し、塩化メタンスルホニル（２．１５ｍＬ、２７．８４ｍｍｏｌ）ですぐに処理する。反応物を、０℃で３０分間撹拌し、次いで、混合物を一晩室温までゆっくりと温める。溶液を濃縮し、生じた残渣を、酢酸エチル：ヘキサン（８：２）で溶出する中圧液体クロマトグラフィーによって精製する。純粋な生成物を含有する画分を合わせ、濃縮して、標題化合物として６．１４ｇ（９６％）の濃厚な油を得る。ＬＣ−ＥＳ／ＭＳ ｍ／ｚ ３１８．２［Ｍ＋Ｎａ］^＋，Ｔ_Ｒ＝２．３４分。

調製例１１
（２Ｒ，３Ｓ）−２−（（Ｓ）−７−シアノ−２−イソプロポキシカルボニルアミノ−２，３−ジヒドロ−１Ｈ−シクロペンタ［ｂ］インドール−４−イルメチル）−３−ヒドロキシ−ピロリジン−１−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル

ジメチルホルムアミド（５０ｍＬ）中の（（Ｓ）−７−シアノ−１，２，３，４−テトラヒドロ−シクロペンタ［ｂ］インドール−２−イル）−カルバミン酸イソプロピルエステル（１．５０ｇ、５．２９ｍｍｏｌ）、（２Ｒ，３Ｓ）−３−ヒドロキシ−２−メタンスルホニルオキシ−メチル−ピロリジン−１−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル（３．１３ｇ、１０．５９ｍｍｏｌ）、炭酸セシウム（３．４５ｇ、１０．５９ｍｍｏｌ）、およびヨウ化カリウム（８８ｍｇ、５２９μｍｏｌ）の混合物を、６０℃の油浴中で２日間加熱する。室温に冷却した後、反応物を酢酸エチル（１２０ｍＬ）で希釈し、水（３×１００ｍＬ）および塩水で洗浄する。有機部分を硫酸ナトリウムで乾燥し、濾過し、乾燥するまで濃縮する。生じた残渣を、酢酸エチル：クロロホルム（２：８）で溶出する中圧液体クロマトグラフィーによって精製する。純粋な生成物を含有する画分を合わせ、濃縮して、１．５９ｇ（６２％）の標題化合物を得る。ＬＣ−ＥＳ／ＭＳ ｍ／ｚ ５０５．２［Ｍ＋Ｎａ］^＋，Ｔ_Ｒ＝３．９７分。

調製例１２
（２Ｒ，３Ｒ）−３−（２−クロロ−アセトキシ）−２−（（Ｓ）−７−シアノ−２−イソプロポキシカルボニルアミノ−２，３−ジヒドロ−１Ｈ−シクロペンタ［ｂ］インドール−４−イルメチル）−ピロリジン−１−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル

テトラヒドロフラン（２０ｍＬ）中の（２Ｒ，３Ｓ）−２−（（Ｓ）−７−シアノ−２−イソプロポキシカルボニルアミノ−２，３−ジヒドロ−１Ｈ−シクロペンタ［ｂ］インドール−４−イルメチル）−３−ヒドロキシ−ピロリジン−１−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル（９５０ｍｇ、１．９７ｍｍｏｌ）、クロロ酢酸（２２７ｍｇ、２．３６ｍｍｏｌ）、およびトリフェニルホスフィン（６２６ｍｇ、２．３６ｍｍｏｌ）の混合物を、室温で、ジエチルアゾジカルボン酸塩（３７４μＬ、２．３６ｍｍｏｌ）で滴下して処理する。反応混合物を、一晩撹拌する。反応物を酢酸エチル（５０ｍＬ）で希釈し、次いで、水および塩水で洗浄する。有機部分を硫酸ナトリウムで乾燥し、濃縮する。生じた残渣を、酢酸エチル：ヘキサン（１：１）で溶出する中圧液体クロマトグラフィーによって精製する。純粋な生成物を含有する画分を合わせ、濃縮して、０．５９ｇ（５４％）の標題化合物を得る。ＬＣ−ＥＳ／ＭＳ ｍ／ｚ ５８１．０［Ｍ＋Ｎａ］^＋，Ｔ_Ｒ＝４．４６分。

調製例１３
［（Ｓ）−７−シアノ−４−（（２Ｒ，３Ｒ）−３−ヒドロキシ−ピロリジン−２−イルメチル）−１，２，３，４−テトラヒドロ−シクロペンタ［ｂ］インドール−２−イル］−カルバミン酸イソプロピルエステル塩酸塩

ＭｅＯＨ（２ｍＬ）中の（２Ｒ，３Ｒ）−３−（２−クロロ−アセトキシ）−２−（（Ｓ）−７−シアノ−２−イソプロポキシカルボニルアミノ−２，３−ジヒドロ−１Ｈ−シクロペンタ［ｂ］インドール−４−イルメチル）−ピロリジン−１−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル（５００ｍｇ、８９４．４μｍｏｌ）の溶液を、２Ｎ ＬｉＯＨ溶液（２ｍＬ）で処理し、懸濁液を室温で４時間撹拌する。懸濁液を、酢酸エチル（６０ｍＬ）で希釈し、水および塩水で洗浄する。有機部分を硫酸ナトリウムで乾燥し、濾過し、濃縮する。残渣（０．３９ｇ）を、１０ｍＬのＭｅＯＨ（１０ｍＬ）中に溶解し、１，４−ジオキサン溶液（１０ｍＬ）中の４Ｎ ＨＣｌで処理する。溶液を２時間撹拌し、真空中で濃縮して、０．３７ｇ（９２％）の標題化合物を得る。ＬＣ−ＥＳ／ＭＳ ｍ／ｚ ３８３．２［Ｍ＋Ｈ］^＋，Ｔ_Ｒ＝１．８６分。

調製例１４
トランス−２−ベンジルオキシメチル−３−ヒドロキシ−３−メチル−ピロリジン−１−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル

無水メタノール（１００ｍＬ）中のトランス−１−ベンゼンスルホニル−２−ベンジルオキシメチル−３−メチル−ピロリジン−３−オール（１３．４２ｇ、３５．７４ｍｍｏｌ）（Ｊ．ＳｃｈｏｍａｋｅｒおよびＳ．Ｂｈａｔｔａｃｈａｒｊｅｅ，Ｊ．Ａｍ．Ｃｈｅｍ．Ｓｏｃ．，２００７，１２９，１９９６−２００３）の溶液を、屑状マグネシウム（５．２６ｇ、２１４．４ｍｍｏｌ）で処理し、水浴中で４５分間超音波分解する。生じた濁った懸濁液を４０℃の油浴中で２０時間撹拌する。シリカゲル（３０ｍＬ）を反応混合物に加えて、懸濁液が混合可能になるまでメタノール（５０ｍＬ）で希釈する。懸濁液を３０分間撹拌し、濃縮する。残渣を真空下で一晩乾燥する。シリカ残渣を、クロロホルム：メタノール：アンモニア水（９０：９：１）で溶出するＤＡＳＩ（登録商標）カートリッジに充填した。開始するトランス−１−ベンゼンスルホニル−２−ベンジルオキシメチル−３−メチル−ピロリジン−３−オール（４．０ｇ）を、所望の脱保護された物質（５．４７ｇ）と同様に得る。脱保護された物質をテトラヒドロフラン（２０ｍＬ）中に溶解し、二炭酸ジ−ｔ−ブチル（５．７ｇ、２６．１ｍｍｏｌ）で処理する。溶液を１時間撹拌し、濃縮する。残渣を、酢酸エチル（１００ｍＬ）で希釈し、０．５Ｎ 含水水酸化ナトリウム（５０ｍＬ）および塩水で洗浄する。有機部分を硫酸ナトリウムで乾燥し、濾過し、濃縮する。生じた残渣を、酢酸エチル：ヘキサン（１：１）で溶出する中圧液体クロマトグラフィーによって精製する。純粋な生成物を含有する画分を合わせ、濃縮して、８．１５ｇ（７１％）の標題化合物を得る。ＬＣ−ＥＳ／ＭＳ ｍ／ｚ ３４４．２［Ｍ＋Ｎａ］^＋，Ｔ_Ｒ＝３．７１分。

調製例１５
トランス−３−ヒドロキシ−２−ヒドロキシメチル−３−メチル−ピロリジン−１−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル

メタノール（１００ｍＬ）中のトランス−３−ヒドロキシ−２−ヒドロキシメチル−３−メチル−ピロリジン−１−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル（８．１２ｇ、２５．２６ｍｍｏｌ）の溶液を、５％パラジウム炭素（５０％湿分、３ｇ、２８．１９ｍｍｏｌ）で処理し、３５０ｋＰａで一晩水素化する。触媒を濾過によって除去し、濾液を濃縮する。生じた油を真空下で乾燥して、５．８ｇ（９９％）の標題化合物を得る。ＧＣ−ＭＳ ｍ／ｚ ２３１［Ｍ］^＋。

調製例１６
トランス−３−ヒドロキシ−２−メタンスルホニルオキシメチル−３−メチル−ピロリジン−１−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル

ジクロロメタン（１００ｍＬ）中のトランス−３−ヒドロキシ−２−メタンスルホニルオキシメチル−３−メチル−ピロリジン−１−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル（２．６９ｇ、１１．６３ｍｍｏｌ）およびトリエチルアミン（１．７８ｍＬ、１２．７９ｍｍｏｌ）の混合物をアセトニトリル／ドライアイス浴（−４０℃）中で３０分間冷却し、塩化メタンスルホニル（９４５．２１μＬ、１２．２１ｍｍｏｌ）ですぐに処理する。溶液を１時間−４０℃で撹拌し、ジクロロメタン（５０ｍＬ）および水（１００ｍＬ）を含有する分液漏斗中に注ぐ。有機溶液を水および塩水で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥し、濾過し、濃縮する。残渣を、酢酸エチル：ヘキサン（８：２）で溶出する中圧液体クロマトグラフィーによって精製する。純粋な生成物を含有する画分を合わせ、濃縮して、３．３０ｇ（９１％）の標題化合物を得る。ＬＣ−ＥＳ／ＭＳ ｍ／ｚ ６４０．６［２Ｍ＋Ｎａ］^＋，Ｔ_Ｒ＝２．２７分。

調製例１７
トランス−２−（（Ｓ）−７−シアノ−２−イソプロポキシカルボニルアミノ−２，３−ジヒドロ−１Ｈ−シクロペンタ［ｂ］インドール−４−イルメチル）−３−ヒドロキシ−３−メチル−ピロリジン−１−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル

ジメチルホルムアミド（４０ｍＬ）中の（（Ｓ）−７−シアノ−１，２，３，４−テトラヒドロ−シクロペンタ［ｂ］インドール−２−イル）−カルバミン酸イソプロピルエステル（２．００ｇ、７．０６ｍｍｏｌ）、トランス−３−ヒドロキシ−２−メタンスルホニルオキシメチル−３−メチル−ピロリジン−１−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル（３．２８ｇ、１０．５９ｍｍｏｌ）、炭酸セシウム（５．１１ｇ、１５．５３ｍｍｏｌ）、およびヨウ化カリウム（１１８ｍｇ、７０５．９μｍｏｌ）の混合物を、６０℃の油浴中で４８時間、アルゴン雰囲気下で撹拌する。生じた懸濁液を室温に冷却し、酢酸エチル（１２０ｍＬ）で希釈し、次いで水（３×１００ｍＬ）および塩水で洗浄する。有機部分を硫酸ナトリウムで乾燥し、濾過し、乾燥するまで濃縮する。生じた残渣を、酢酸エチル：ヘキサン（１：１）で溶出する中圧液体クロマトグラフィーによって精製する。純粋な生成物を含有する画分を合わせ、濃縮して、２．５ｇ（７１％）の標題化合物を得る。ＬＣ−ＥＳ／ＭＳ ｍ／ｚ ５１９．２［Ｍ＋Ｎａ］^＋，Ｔ_Ｒ＝３．７７，３．８１分。

調製例１８
３−フルオロ−２−メトキシ−ベンズアルデヒド

Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（３０ｍＬ）中の３−フルオロサリチルアルデヒド（３．５２ｇ、２５．１２ｍｍｏｌ）および炭酸セシウム（２０．４６ｇ、６２．８１ｍｍｏｌ）の混合物を、ヨードメタン（３．１３ｍＬ、５０．２ｍｍｏｌ）で処理し、窒素下で２時間、室温で撹拌する。反応混合物を、ジエチルエーテル（１５０ｍＬ）で希釈し、０．５Ｍ塩酸（２×１５０ｍＬ）で洗浄する。有機部分を、無水硫酸ナトリウムで乾燥し、濾過し、濃縮して、透明の油として３．４２ｇ（８８％）の標題化合物を得る。^１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３） δ ７．５９（ｄ，１Ｈ），７．３２（ｄｄ，１Ｈ），７．０４（ｍ，１Ｈ），４．０４（ｓ，３Ｈ）。

調製例１９
（３−フルオロ−２−メトキシフェニル）メタノール

メタノール（２０ｍＬ）中の３−フルオロ−２−メトキシ−ベンズアルデヒド（３．４１ｇ、２２．１ｍｍｏｌ）の溶液に、水素化ホウ素ナトリウム（１．００ｇ、２６．６ｍｍｏｌ）を滴下してゆっくりと加える。反応物を、窒素下で一晩、室温で撹拌する。反応物を、ジエチルエーテルで希釈し、水で２回洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥し、濾過し、濃縮して、透明の無色油として３．０２ｇ（８７％）の標題化合物を得る。^１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３） δ ７．０９−６．９２（ｍ，３Ｈ），４．６５（ｄ，２Ｈ），３．９７（ｓ，３Ｈ），２．１４（ｔ，１Ｈ，ＯＨ）。

調製例２０
１−（クロロメチル）−３−フルオロ−２−メトキシベンゼン

ジクロロメタン（２０ｍＬ）中の（３−フルオロ−２−メトキシフェニル）メタノール（３．０２ｇ、１９．３ｍｍｏｌ）およびトリエチルアミン（６．７４ｍＬ、４８．４ｍｍｏｌ）の溶液を、室温で、塩化メタンスルホニル（２．９９ｍＬ、３８．７ｍｍｏｌ）でゆっくりと処理し、窒素下で３時間撹拌する。反応物を、ジエチルエーテルで希釈し、０．５Ｍ 塩酸で２回洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥し、濾過し、濃縮して、黄色油として標題の化合物を得る（２．７１ｇ、８０％）。^１Ｈ ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３） δ ７．１５−６．９３（ｍ，３Ｈ），４．６１（ｓ，２Ｈ），４．００（ｓ，３Ｈ）。

調製例２１
（Ｓ）−７−シアノ−４−（３−フルオロ−２−メトキシベンジル）−１，２，３，４−テトラヒドロシクロペンタ［ｂ］インドール−２−イルカルバミン酸イソプロピルエステル

Ｎ，Ｎ−ジメチルホルムアミド（１０ｍＬ）中の（Ｓ）−７−シアノ−１，２，３，４−テトラヒドロシクロペンタ［ｂ］インドール−２−イルカルバミン酸イソプロピルエステル（１．５０ｇ、５．２９ｍｍｏｌ）および１−（クロロメチル）−３−フルオロ−２−メトキシベンゼン（１．１１ｇ、６．３５ｍｍｏｌ）の溶液を、室温で、炭酸セシウム（２．５９ｇ、７．９４ｍｍｏｌ）で処理し、窒素下で一晩撹拌する。反応混合物を、水およびエーテル／ヘキサンで希釈する。溶液から生じる白色の固体を濾過し、水、エーテル、ヘキサンで洗い流し、真空下で５０℃で４８時間乾燥して、白色固体として標題化合物を得る（２．１８ｇ、９８％）。ＬＣ−ＥＳ／ＭＳ ｍ／ｚ ４２２．２［Ｍ＋Ｈ］^＋，Ｔ_Ｒ＝４．５７分。

調製例２２
［（Ｓ）−７−シアノ−４−（２−メトキシ−ベンジル）−１，２，３，４−テトラヒドロ−シクロペンタ［ｂ］インドール−２−イル］−カルバミン酸イソプロピルエステル

ＤＭＦ（４０ｍＬ）中の（（Ｓ）−７−シアノ−１，２，３，４−テトラヒドロ−シクロペンタ［ｂ］インドール−２−イル）−カルバミン酸イソプロピルエステル（２．０ｇ、７．０６ｍｍｏｌ）および炭酸セシウム（３．２２ｇ、９．８８ｍｍｏｌ）の混合物を、２−メトキシベンジルクロリド（１．１６ｇ、７．４１ｍｍｏｌ）で処理する。反応物を、５０℃で１８時間加熱する。反応物を、室温に冷却し、水（３００ｍＬ）で希釈する。白色固体を回収し、水で洗浄する。固体を、４０℃の真空オーブンで乾燥する。乾燥後、２．８０ｇ（９８％）の生成物を、白色固体として得る。ＬＣ−ＥＳ／ＭＳ ｍ／ｚ ４０４［Ｍ＋Ｈ］^＋，Ｔ_Ｒ＝２．８３分。

調製例２３
ｔｅｒｔ−ブチル−（４−フルオロ−２−メチル−フェノキシ）−ジメチル−シラン

ｔ−ブチルジメチルクロロシラン（１４．３４ｇ、９３．２４ｍｍｏｌ）を、ジメチルホルムアミド（１００ｍＬ）中の４−フルオロ−２−メチルフェノール（１０．００ｇ、７７．７０ｍｍｏｌ）および１Ｈ−イミダゾール（１３．３２ｇ、１９４．２４ｍｍｏｌ）と合わせ、室温で一晩撹拌する。反応物を、エーテル（２００ｍＬ）で希釈し、水（２×１００ｍＬ）および塩水で洗浄する。有機部分を、硫酸ナトリウムで乾燥し、濾過し、濃縮して、１８．９ｇ（１００％）の標題化合物を得る。ＧＣ−ＥＳ ｍ／ｚ ２４０［Ｍ］^＋，Ｔ_Ｒ＝４．０６分。

調製例２４
（２−ブロモメチル−４−フルオロ−フェノキシ）−ｔｅｒｔ−ブチル−ジメチル−シラン

四塩化炭素（５０ｍＬ）中のｔｅｒｔ−ブチル−（４−フルオロ−２−メチル−ベンジル）−ジメチル−シラン（６．２０ｇ、２５．７９ｍｍｏｌ）およびＮ−ブロモコハク酸イミド（４．７５ｇ、２６．３１ｍｍｏｌ）の混合物を、９０℃の油浴において１０分間還流し、過酸化ベンゾイル（６４ｍｇ、２５８μｍｏｌ）で処理する。生じた懸濁液を、２時間還流し、室温に冷却する。固体を濾過によって除去し、濾液を真空中で濃縮する。生じた残渣をＲｅａｄｙＳｅｐ（登録商標）カートリッジ（２５ｇ）に充填し、ヘキサン（３００ｍＬ）で溶出して、透明の油として６．４ｇ（７８％）の標題化合物を得る。ＧＣ−ＥＳ ｍ／ｚ （^７９Ｂｒ）３１８［Ｍ］^＋，Ｔ_Ｒ＝５．０６分。

調製例２５
（Ｓ）−４−（（３−ブロモピリジン−４−イル）メチル）−７−シアノ−１，２，３，４−テトラヒドロシクロペンタ［ｂ］インドール−２−イルカルバミン酸イソプロピルエステル

ジメチルホルムアミド（２０ｍＬ）中の３−ブロモ−４−（クロロメチル）ピリジン（３．１６ｇ、１１．５ｍｍｏｌ）、（（Ｓ）−７−シアノ−１，２，３，４−テトラヒドロ−シクロペンタ［ｂ］インドール−２−イル）−カルバミン酸イソプロピルエステル（２．５０ｇ、８．８２ｍｍｏｌ）、および炭酸セシウム（４．３１ｇ、１３．２ｍｍｏｌ）の混合物を、室温で、窒素下で一晩撹拌する。反応混合物を、次いで、酢酸エチル、ジクロロメタン、および水で希釈する。有機相を分離し、水で２回洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥し、濾過し、真空中で濃縮して、茶色の油を得る（約４．７５ｇ）。その油をヘキサンで２回、次いでエーテルで２回粉砕する。それを、次いで、３０％〜６０％の酢酸エチル／ヘキサンで溶出するフラッシュクロマトグラフィーで精製して、灰白色の固体を得る（３．２３ｇ、８１％）。ＬＣ−ＥＳ／ＭＳ ｍ／ｚ （^７９Ｂｒ／^８１Ｂｒ）４５３．０／４５５．０［Ｍ＋Ｈ］^＋。

調製例２６
（Ｓ）−４−（（４−クロロ−３−メトキシピリジン−２−イル）メチル）−７−シアノ−１，２，３，４−テトラヒドロシクロペンタ［ｂ］インドール−２−イルカルバミン酸イソプロピルエステル

ジメチルホルムアミド（５ｍＬ）中の（Ｓ）−イソプロピル７−シアノ−１，２，３，４−テトラヒドロシクロペンタ［ｂ］インドール−２−イルカルバミン酸塩（６８０ｍｇ、２．４０ｍｍｏｌ）および４−クロロ−２−（クロロメチル）−３−メトキシピリジン（５５３ｍｇ、２．８８ｍｍｏｌ）の溶液に、炭酸セシウム（１．１７ｇ、３．６０ｍｍｏｌ）を加え、混合物を室温で一晩撹拌する。反応混合物を水で希釈し、ベージュ色固体を濾過する。それを水で洗い流し、次いで、真空オーブン中で、５０℃で４８時間乾燥して、灰色固体を得る（９７０ｍｇ、９２％）。ＬＣ−ＥＳ／ＭＳ ｍ／ｚ ４３９．０［Ｍ＋Ｈ］^＋。

調製例２７
（Ｓ）−４−（（３−メトキシピリジン−２−イル）メチル）−７−シアノ−１，２，３，４−テトラヒドロシクロペンタ［ｂ］インドール−２−イルカルバミン酸イソプロピルエステル

メタノール（１５０ｍＬ）中の（Ｓ）−イソプロピル４−（（４−クロロ−３−メトキシピリジン−２−イル）メチル）−７−シアノ−１，２，３，４−テトラヒドロシクロペンタ［ｂ］インドール−２−イルカルバミン酸塩（１２．５３ｇ、２８．５５ｍｍｏｌ）および１０％炭素上パラジウム（１．００ｇ）の混合物を、室温で一晩、５０ｐｓｉで水素化する。１０％炭素上パラジウム（１．２ｇ）の新しいバッチを、水（約２ｍＬ）中でスラリーにし、反応混合物に加え、それを、室温で一晩水素化（５０ｐｓｉ）する。触媒を濾別し、溶液を減圧下で濃縮して、淡黄色固体を得る。固体を、エーテルで２回粉砕し、高真空下で乾燥し、黄色固体を得る（１０．８０ｇ、９４％）。ＬＣ−ＥＳ／ＭＳ ｍ／ｚ ４０５．２［Ｍ＋Ｈ］^＋。

実施例１
［（Ｓ）−７−シアノ−４−（（２Ｒ，３Ｓ）−３−ヒドロキシ−ピロリジン−２−イルメチル）−１，２，３，４−テトラヒドロ−シクロペンタ［ｂ］インドール−２−イル］−カルバミン酸イソプロピルエステル

メタノール（２０ｍＬ）中の（２Ｒ，３Ｓ）−２−（（Ｓ）−７−シアノ−２−イソプロポキシカルボニルアミノ−２，３−ジヒドロ−１Ｈ−シクロペンタ［ｂ］インドール−４−イルメチル）−３−ヒドロキシ−ピロリジン−１−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル（０．５０ｇ、１．０４ ｍｍｏｌ）の溶液を、１，４−ジオキサン（２０ｍＬ）中の４Ｎ 塩化水素で処理し、室温で３時間撹拌し、濃縮する。残渣を、酢酸エチル（２００ｍＬ）中に懸濁させ、２Ｎ 水酸化ナトリウム水溶液（２０ｍＬ）で処理する。有機層を、塩水で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥し、濃縮する。生じた残渣を、メタノール：クロロホルム（５：９５）で溶出する中圧液体クロマトグラフィーによって精製する。純粋な生成物を含有する画分を合わせ、濃縮して、０．３８ｇ（９６％）の標題化合物を得る。ＬＣ−ＥＳ／ＭＳ／ＭＳ ｍ／ｚ ３８３．２［Ｍ＋Ｈ］^＋，Ｔ_Ｒ＝１．８６分。

実施例２
［（Ｓ）−７−シアノ−４−（（２Ｒ，３Ｓ）−３−ヒドロキシ−１−メチル−ピロリジン−２−イルメチル）−１，２，３，４−テトラヒドロ−シクロペンタ［ｂ］インドール−２−イル］−カルバミン酸イソプロピルエステル

エタノール（２０ｍＬ）中の（２Ｒ，３Ｓ）−２−（（Ｓ）−７−シアノ−２−イソプロポキシカルボニルアミノ−２，３−ジヒドロ−１Ｈ−シクロペンタ［ｂ］インドール−４−イルメチル）−３−ヒドロキシ−ピロリジン−１−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル（３．１０ｇ、６．４２ｍｍｏｌ）の溶液を、１，４−ジオキサン（２０ｍＬ）中の４Ｎ 塩化水素で処理し、室温で３時間撹拌する。生じた溶液を、真空中で濃縮し、酢酸エチル（２００ｍＬ）中に懸濁し、２Ｎ 含水水酸化ナトリウム（７０ｍＬ）で処理する。有機層を塩水で洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥し、濃縮する。生じた残渣を、クロロホルム（１００ｍＬ）中に溶解し、ホルムアルデヒド（１．４５ｍＬ、１９．２７ｍｍｏｌ）およびナトリウムトリアセトキシボロヒドリド（４．２５ｇ、１９．２７ｍｍｏｌ）で処理する。生じた懸濁液を、室温で一晩撹拌する。懸濁液を、飽和二炭酸ナトリウム溶液（４０ｍＬ）で処理し、３０分間撹拌する。生じた懸濁液をジクロロメタン（１００ｍＬ）で希釈し、水（３×１００ｍＬ）および塩水で洗浄する。有機部分を硫酸ナトリウムで乾燥し、濾過し、乾燥するまで濃縮する。生じた残渣を、メタノール：クロロホルム（５：９５）で溶出する中圧液体クロマトグラフィーによって精製する。純粋な生成物を含有する画分を合わせ、濃縮して、１．６ｇ（６３％）の標題化合物を得る。ＬＣ−ＥＳ／ＭＳ ｍ／ｚ ３９７．２［Ｍ＋Ｈ］^＋，Ｔ_Ｒ＝１．７８分。

実施例３
［（Ｓ）−７−シアノ−４−（（２Ｒ，３Ｓ）−３−ヒドロキシ−１−エチル−ピロリジン−２−イルメチル）−１，２，３，４−テトラヒドロ−シクロペンタ［ｂ］インドール−２−イル］−カルバミン酸イソプロピルエステル

アセトニトリル（２０ｍＬ）中の［（Ｓ）−７−シアノ−４−（（２Ｒ，３Ｓ）−３−ヒドロキシ−ピロリジン−２−イルメチル）−１，２，３，４−テトラヒドロ−シクロペンタ［ｂ］インドール−２−イル］−カルバミン酸イソプロピルエステル（３００ｍｇ、７８４．４μｍｏｌ）の溶液を、アセトアルデヒド（１．０ｍＬ、１７．８０ｍｍｏｌ）およびナトリウムトリアセトキシボロヒドリド（５２０ｍｇ、２．３５ｍｍｏｌ）で処理し、室温で一晩撹拌する。懸濁液を、飽和二炭酸ナトリウム溶液（４０ｍＬ）で処理し、３０分間撹拌する。生じた懸濁液を、ジクロロメタン（１００ｍＬ）で希釈し、水（３×１００ｍＬ）および塩水で洗浄する。有機部分を硫酸ナトリウムで乾燥し、濾過し、乾燥するまで濃縮する。生じた残渣を、メタノール：クロロホルム（５：９５）で溶出する中圧液体クロマトグラフィーによって精製する。純粋な生成物を含有する画分を合わせ、濃縮して、０．１ｇ（３１％）の標題化合物を得る。ＬＣ−ＥＳ／ＭＳ ｍ／ｚ １４４．２［Ｍ＋Ｈ］^＋，Ｔ_Ｒ＝１．９４分。

実施例４
［（Ｓ）−７−シアノ−４−（（２Ｒ，３Ｒ）−３−ヒドロキシ−１−メチル−ピロリジン−２−イルメチル）−１，２，３，４−テトラヒドロ−シクロペンタ［ｂ］インドール−２−イル］−カルバミン酸イソプロピルエステル

アセトニトリル（５０ｍＬ）中の［（Ｓ）−７−シアノ−４−（（２Ｒ，３Ｒ）−３−ヒドロキシ−ピロリジン−２−イルメチル）−１，２，３，４−テトラヒドロ−シクロペンタ［ｂ］インドール−２−イル］−カルバミン酸イソプロピルエステル塩酸塩（３８０ｍｇ、９０７．１μｍｏｌ）の溶液を、固体の大半が溶解するまでメタノール（５ｍＬ）で処理し、次いで、ホルムアルデヒド（１３６．３μＬ、１．８１ｍｍｏｌ）およびナトリウムトリアセトキシボロヒドリド（４００．５ｍｇ、１．８１ｍｍｏｌ）で処理する。反応物を、室温で一晩撹拌する。飽和二炭酸水溶液（５０ｍＬ）を加え、３０分間撹拌する。混合物を酢酸エチル（１２０ｍＬ）で希釈し、生じた懸濁液を水（３×１００ｍＬ）および塩水で洗浄する。有機部分を硫酸ナトリウムで乾燥し、濾過し、乾燥するまで濃縮する。残渣を、メタノール：クロロホルム （５：９５）で溶出する中圧液体クロマトグラフィーで精製する。純粋な生成物を含有する画分を合わせ、濃縮して、０．２ｇ（６１％）の標題化合物を得る。ＬＣ−ＥＳ／ＭＳ ｍ／ｚ ３９７．２［Ｍ＋Ｈ］^＋，Ｔ_Ｒ＝１．８７分。

実施例５
［（Ｓ）−７−シアノ−４−（トランス−３−ヒドロキシ−１−メチル−３−メチル−ピロリジン−２−イルメチル）−１，２，３，４−テトラヒドロ−シクロペンタ［ｂ］インドール−２−イル］−カルバミン酸イソプロピルエステル（ラセミ化合物）

１，４−ジオキサン（１５ｍＬ）およびメタノール（２ｍＬ）中のトランス−２−（（Ｓ）−７−シアノ−２−イソプロポキシカルボニルアミノ−２，３−ジヒドロ−１Ｈ−シクロペンタ［ｂ］インドール−４−イルメチル）−３−ヒドロキシ−３−メチル−ピロリジン−１−カルボン酸ｔｅｒｔ−ブチルエステル（２．５０ｇ、５．０３ｍｍｏｌ）の混合物を、１，４−ジオキサン（１５ｍＬ）中の４Ｎ 塩化水素で処理し、室温で３時間撹拌する。反応物は、赤みを帯びた溶液との白色固体懸濁液となる。懸濁液を濃縮し、残渣をアセトニトリル（３０ｍＬ）中に懸濁し、３０％ ホルムアルデヒド水溶液（１．１３ｍＬ、１５．１０ｍｍｏｌ）およびナトリウムトリアセトキシボロヒドリド（３．３３ｇ、１５．１０ｍｍｏｌ）で処理する。生じた懸濁液を、一晩撹拌する。懸濁液を、飽和含水二炭酸ナトリウムで処理し、３０分間撹拌する。懸濁液を、酢酸エチル（１２０ｍＬ）で希釈し、それを水（３×１００ｍＬ）および塩水で洗浄する。有機部分を、硫酸ナトリウムで乾燥し、濾過し、乾燥するまで濃縮する。残渣を、酢酸エチル：ヘキサン（１：１）で溶出する中圧液体クロマトグラフィーによって精製する。純粋な生成物を含有する画分を合わせ、濃縮して、１．７５ｇ（８４％）の標題化合物を得る。ＬＣ−ＥＳ／ＭＳ ｍ／ｚ ４１１．２［Ｍ＋Ｈ］^＋，Ｔ_Ｒ＝１．９６分。

実施例６および７
［（Ｓ）−７−シアノ−４−（トランス−３−ヒドロキシ−１−メチル−３−メチル−ピロリジン−２−イルメチル）−１，２，３，４−テトラヒドロ−シクロペンタ［ｂ］インドール−２−イル］−カルバミン酸イソプロピルエステルの異性体１および異性体２
［（Ｓ）−７−シアノ−４−（トランス−３−ヒドロキシ−１−メチル−３−メチル−ピロリジン−２−イルメチル）−１，２，３，４−テトラヒドロ−シクロペンタ［ｂ］インドール−２−イル］−カルバミン酸イソプロピルエステル（ラセミ化合物）（２．１５ｇ、５．２４ｍｍｏｌ）を、アセトニトリル：メタノール：ジメチルエチルアミン（３０：７０：０．２）で１ｍＬ／分で溶出し、２２５ｎｍで検出する、ｃｈｉｒａｌｐａｋ（登録商標）ＡＤ−Ｈ、４．６×１５０ｍｍカラムで分離する。回収ピーク＃１は、２．０分〜２．５分であり、ピーク＃２は、４．０分〜７．０分である。純粋な生成物を含有する画分を合わせ、濃縮して、０．９２６ｇ（４３％）の異性体１および０．８２２ｇ（３８％）の異性体２を得る。

実施例８
［（Ｓ）−７−シアノ−４−（３−フルオロ−２−ヒドロキシベンジル）−１，２，３，４−テトラヒドロシクロペンタ［ｂ］インドール−２−イル］−カルバミン酸イソプロピルエステル

ジクロロメタン（５０ｍＬ）中の（Ｓ）−イソプロピル７−シアノ−４−（３−フルオロ−２−メトキシベンジル）−１，２，３，４−テトラヒドロシクロペンタ［ｂ］インドール−２−イルカルバミン酸塩（１．８８ｇ、４．４６ｍｍｏｌ）の溶液に、ジクロロメタン（１３．４ｍＬ、１３．４ｍｍｏｌ）中の１Ｍ 三臭化ホウ素を０℃で加え、一晩撹拌する。反応物を、わずかに湿らせたアセトニトリルで急冷する。揮発性物質を、減圧下で除去し、残渣を高真空下で乾燥する。それを、次いで、クロロホルム中の５％酢酸エチルでカラムクロマトグラフィーによって精製して、黄色固体を得る。固体を、最少量のジクロロメタン中に懸濁し、室温で静置する。白色固体が生じる。それらを濾過して、ジクロロメタンで手短に洗い流す。母液を濃縮し、手順を残渣について３回繰り返す。白色固体を合わせて、標題化合物を得る（１．１７ｇ、６４％）。ＬＣ−ＥＳ ｍ／ｚ ４０８．２［Ｍ＋Ｈ］^＋，Ｔ_Ｒ＝４．０８分。

実施例９
［（Ｓ）−７−シアノ−４−（２−ヒドロキシ−ベンジル）−１，２，３，４−テトラヒドロ−シクロペンタ［ｂ］インドール−２−イル］−カルバミン酸イソプロピルエステル

ジクロロメタン（３７ｍＬ）中の［（Ｓ）−７−シアノ−４−（２−メトキシ−ベンジル）−１，２，３，４−テトラヒドロ−シクロペンタ［ｂ］インドール−２−イル］−カルバミン酸イソプロピルエステル（１．５０ｇ、３．７２ｍｍｏｌ）の０℃溶液に、ＢＢｒ_３（ジクロロメタン中１．０Ｍ、１１．２ｍＬ、１１．２ｍｍｏｌ）を加える。反応物を室温まで温め、１８時間撹拌する。反応物を、飽和含水ＮＨ_４Ｃｌで急冷する。水（７０ｍＬ）を加え、粗製物をジクロロメタン（７５ｍＬ）およびＥｔＯＡｃ（２×７５ｍＬ）で抽出する。合わせた有機物をＮａ_２ＳＯ_４で乾燥し、濾過し、濃縮する。粗製物を、シリカゲル（４０ｇ、３０％ ＥｔＯＡｃ／ヘキサン）上で精製し、次いで、シリカゲル（４０ｇ、５％ アセトニトリル／ジクロロメタン）上で再精製して、約９０％純粋な１．００ｇの生成物を得る。

反応を１．７７ｇ（４．３８ｍｍｏｌ）に対して繰返し、同じ様式で進める。粗製物を、前の実験からの９０％純粋な生成物と合わせ、合わせた生成物を、シリカゲル（２４０ｇ、２：３３：６５ ＭｅＯＨ／ジクロロメタン／ヘキサン）上で精製して、白色固体として９９１ｍｇ（２つの反応について合わせた収率３７％）の標題化合物を得る。^１Ｈ−ＮＭＲ（４００ＭＨｚ，ＣＤＣｌ_３） δ ７．７０（ｓ，１Ｈ），７．３３（ｄ，Ｊ＝８．８Ｈｚ，１Ｈ），７．２７−７．２３（ｍ，１Ｈ），７．１２−７．０８（ｍ，１Ｈ），６．７９−６．７１（ｍ，３Ｈ），６．１４−６．１１（ｍ，１Ｈ），５．１９（ｓ，２Ｈ），５．０５−４．９７（ｍ，１Ｈ），４．９３−４．８０（ｍ，２Ｈ），３．３０−３．２３（ｍ，２Ｈ），２．６９−２．６２（ｍ，２Ｈ），１．２１（ｔ，Ｊ＝５．９Ｈｚ，６Ｈ）。

実施例１０
［（Ｓ）−７−シアノ−４−（５−フルオロ−２−ヒドロキシ−ベンジル）−１，２，３，４−テトラヒドロ−シクロペンタ［ｂ］インドール−２−イル］カルバミン酸イソプロピルエステル

ジメチルホルムアミド（１５ｍＬ）中の（（Ｓ）−７−シアノ−１，２，３，４−テトラヒドロ−シクロペンタ［ｂ］インドール−２−イル）−カルバミン酸イソプロピルエステル（１．１５ｇ、４．０６ｍｍｏｌ）および炭酸セシウム（１．６０ｇ、４．８７ｍｍｏｌ）の混合物を、−４０℃（ドライアイス浴）で３０分間撹拌し、（２−ブロモメチル−４−フルオロ−フェノキシ）−ｔｅｒｔ−ブチル−ジメチル−シラン（１．５６ｇ、４．８７ｍｍｏｌ）で処理する。反応物を、−４０℃（ドライアイス浴）で５時間撹拌し、室温まで６時間温める。生じた懸濁液を、酢酸エチル（１２０ｍＬ）で希釈し、水（３×１００ｍＬ）および塩水で洗浄する。有機部分を硫酸ナトリウムで乾燥し、濾過し、乾燥するまで濃縮する。生じた残渣を、酢酸エチル：ヘキサン（１：１）で溶出する中圧液体クロマトグラフィーによって精製する。純粋な生成物を含有する画分を合わせ、濃縮して０．６ｇのシリル保護物質を得る。それを、テトラヒドロフラン（１０ｍＬ）中に溶解し、テトラブチルアンモニウムフルオリド溶液（１Ｍ、５ｍＬ）を室温で加える。混合物を１時間撹拌し、濃縮する。残渣を、酢酸エチル（１００ｍＬ）で希釈し、水および塩水で洗浄する。有機部分を硫酸ナトリウムで乾燥し、濃縮する。生じた残渣を、アセトニトリル：ジクロロメタン（８：９２）で溶出する中圧液体クロマトグラフィーによって精製する。純粋な生成物を含有する画分を合わせ、濃縮する。白色固体を得、アセトニトリルで再結晶化して、０．３５ｇ（２１％）の標題化合物を得る。ＬＣ−ＥＳ ｍ／ｚ ４０８．２［Ｍ＋Ｈ］^＋，Ｔ_Ｒ＝４．０９分。

実施例１１
（Ｓ）−７−シアノ−４−（（３−ヒドロキシピリジン−４−イル）メチル）−１，２，３，４−テトラヒドロシクロペンタ［ｂ］インドール−２−イルカルバミン酸イソプロピルエステル

水（５０ｍＬ）および１，４−ジオキサン（５０ｍＬ）中の（Ｓ）−４−（（３−ブロモピリジン−４−イル）メチル）−７−シアノ−１，２，３，４−テトラヒドロシクロペンタ［ｂ］インドール−２−イルカルバミン酸イソプロピルエステル（３．８１ｇ、７．０５ｍｍｏｌ）、水酸化カリウム（１．３４ｇ、２３．９ｍｍｏｌ）、２−ジ−ｔｅｒｔ−ブチルホスフィノ−３，４，５，６−テトラメチル−２’，４’，６’−トリイソプロピル−１，１’−ビフェニル（２３０ｍｇ、４７９μｍｏｌ）、トリス（ジベンジリデンアセトン）ジパラジウム（１１０ｍｇ、１２０μｍｏｌ）の混合物を、１００℃で１時間加熱する。トリス（ジベンジリデンアセトン）ジパラジウム（１１０ｍｇ、１２０μｍｏｌ）および２−ジ−ｔｅｒｔ−ブチルホスフィノ−３，４，５，６−テトラメチル−２’，４’，６’−トリイソプロピル−１，１’−ビフェニル（２３０ｍｇ、４７９μｍｏｌ）を加え、混合物を、３時間加熱する。反応物を、水およびジクロロメタンで希釈する。層を、次いで、分離し、水層をジクロロメタンで２回洗浄する。水性部分を、５Ｍ ＨＣｌの数滴でｐＨ１〜２に酸性化し、次いで、炭酸カリウムでｐＨ７に中和する。酢酸エチルを加え、二層を濾過する。有機層を分離し、無水硫酸ナトリウムで乾燥し、濾過し、真空中で濃縮して、茶色の残渣を得る。残渣を、エーテルで２回粉砕し、真空下で乾燥する。それを、次いで、クロロホルム中の１％〜６％メタノールで溶出するフラッシュクロマトグラフィーによって精製して、純粋でない生成物を得る（約２．８ｇ）。それを、分取超臨界液体クロマトグラフィー（カラム：エチルピリジン ２０×１５０ｍｍ（Ｐｒｉｎｃｅｔｏｎ Ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｙ，Ｉｎｃ．）；流速：３５℃および１００ｐｓｉで、７０ｍＬ／分；溶離剤：５％〜５０％ＭｅＯＨと０．１％イソプロピルアミン：二酸化炭素）によって精製して、白色固体として標題化合物を得る（５４８ｍｇ、２０％）。ＬＣ−ＥＳ／ＭＳ ｍ／ｚ ３９１．２［Ｍ＋Ｈ］^＋，Ｔ_Ｒ＝２．６３分。

実施例１２
（Ｓ）−７−シアノ−４−（（３−ヒドロキシピリジン−２−イル）メチル）−１，２，３，４−テトラヒドロシクロペンタ［ｂ］インドール−２−イルカルバミン酸イソプロピルエステル

（Ｓ）−４−（（３−メトキシピリジン−２−イル）メチル）−７−シアノ−１，２，３，４−テトラヒドロシクロペンタ［ｂ］インドール−２−イルカルバミン酸イソプロピルエステル（４．５９ｇ、１１．４ｍｍｏｌ）およびピリジン塩酸塩（２１．０ｇ、１８２ｍｍｏｌ）を、あらかじめ加熱した油浴（１７０℃）に浸漬した７５ｍＬ密封容器中で、マグネティックスターラーで混合する。固体はおよそ３０秒以内に融解し、それを６０分間撹拌する。混合物を室温に冷却し、別のフラスコに移し、テトラヒドロフラン（１００ｍＬ）および水（１００ｍＬ）中に溶解する。炭酸カリウム（４０ｇ）を何度かに分けてゆっくりと加え、５分間の撹拌後、トルエン（３４．０ｍＬ、３４．０ｍｍｏｌ）中のクロロギ酸イソプロピルの１Ｍ溶液を室温で加える。溶媒の部分を減圧下で除去し、残渣をジクロロメタンおよび酢酸エチルで希釈する。茶色の不溶性残渣を濾別し、相を分離する。有機相を１０％炭酸カリウムで１回洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥し、濾過し、真空中で濃縮して、茶色の泡状物を得る。泡状物を、メタノール（２０ｍＬ）中に溶解し、２Ｍ 水酸化ナトリウム（１０ｍＬ）を加え、反応物を室温で１時間撹拌する。溶媒を減圧下で除去する。残渣を、０．５Ｍ ＨＣｌ／ＥｔＯＡｃ／ＣＨＣｌ_３中に溶解し、二相を濾過する。それを、次いで、５％炭酸カリウムでｐＨ７〜８に酸性化する。相を分離し、有機層を５％炭酸カリウムで１回洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥し、濾過し、真空中で濃縮して、橙色の泡状物を得る。泡を、１０％〜４０％酢酸エチル／クロロホルムで溶出するシリカフラッシュクロマトグラフィーによって精製して、赤色固体を得る（３．３３ｇ）。固体を、０．５Ｍ 水酸化ナトリウム（３０ｍＬ）中に溶解する。水層をジクロロメタンで２回洗浄し、有機層を捨てる。水層を、５Ｍ 塩酸でｐＨ４〜５に調整する。灰白色／黄色固体が溶液から生じる。ｐＨを炭酸カリウムで８〜９に調整し、黄色固体を濾過によって回収し、１時間風乾する。それを、次いで、最少量のアセトニトリル中に懸濁し、濾過し、最少量のアセトニトリルで洗い流す。母液を濃縮し、手順を２回繰り返して、白色粉末を得、それを高真空下で一晩乾燥して、白色固体として標題化合物を得る（１．４５ｇ、３３％）。ＬＣ−ＥＳ／ＭＳ ｍ／ｚ ３９１．２［Ｍ＋Ｈ］^＋，Ｔ_Ｒ＝３．３２分。

実施例１２の代替的合成：
調製例２７
（３−アリルオキシ−ピリジン−２−イル）−メタノール

ヒドロキシ−２−（ヒドロキシメチル）ピリジン塩酸塩（５０ｇ、３３９．６ｍｍｏｌ）とメタノール （２５０ｍＬ）を窒素下で合わせ、２２℃に冷却する。激しく撹拌した混合物に、ＭｅＯＨ（１７０．８ｍＬ、７４７．２ｍｍｏｌ）中の４．５Ｍ ナトリウムメトキシドを加える。混合物を室温で２時間撹拌し、次いで、溶媒を蒸発させる。生じた物質をＤＭＳＯ（２５０ｍＬ）中に溶解し、臭化アリル（４１ｇ、３３９．６ｍｍｏｌ）を加え、混合物を室温で１８時間撹拌する。反応混合物を水（８００ｍｌ）に加え、塩化メチレン（３×８０ｍＬ）で抽出する。有機部分を合わせ、硫酸ナトリウムで乾燥し、濾過し、溶媒を蒸発して、標題化合物を得る（３４．４ｇ、６２％）。ＬＣ−ＥＳ／ＭＳ ｍ／ｚ １６６．１［Ｍ＋Ｈ］^＋。

調製例２８
３−アリルオキシ−２−クロロメチル−ピリジン

（３−アリルオキシ−ピリジン−２−イル）−メタノール（３４ｇ、２０５．８ｍｍｏｌ）を、窒素下でジクロロメタン（３４０ｍＬ）中に溶解し、トリエチルアミン（３４．４ｍＬ、２４７ｍｍｏｌ）を２２℃で加える。混合物を水浴中で室温に温め、温度を３０℃未満に保ちながら塩化メタンスルホニル（１６．７ｍＬ、２１６ｍｍｏｌ）を加える。反応物を、室温で一晩撹拌する。水（５００ｍＬ）を加え、混合物を１０分間撹拌する。有機部分を分離し、飽和ＮａＨＣＯ_３の溶液（１００ｍＬ）で洗浄する。有機部分を硫酸ナトリウムで乾燥し、濾過し、溶媒を蒸発させる。生じた残渣を真空下で一定の重量になるまで乾燥して、標題化合物を得る（２９ｇ、７９％）。ＬＣ−ＥＳ／ＭＳ ｍ／ｚ：１８４．６［Ｍ＋Ｈ］^＋。

調製例２９
［（Ｓ）−４−（３−アリルオキシ−ピリジン−２−イルメチル）−７−シアノ−１，２，３，４−テトラヒドロ−シクロペンタ［ｂ］インドール−２−イル］−カルバミン酸イソプロピルエステル

（（Ｓ）−７−シアノ−１，２，３，４−テトラヒドロ−シクロペンタ［ｂ］インドール−２−イル）−カルバミン酸イソプロピルエステル（２５ｇ、８８．２ｍｍｏｌ）を、窒素下でジメチルホルムアミド（１５０ｍＬ）に溶解する。炭酸セシウム（５７．５ｇ、１７６．５ｍｍｏｌ）および３−アリルオキシ−２−クロロメチル−ピリジン（１６．２ｇ、８８．２ｍｍｏｌ）を連続して加える。反応混合物を、４０℃で１６時間撹拌する。反応物を室温に冷却して、水（１２５０ｍＬ）に加える。１時間の撹拌した後、淡いクリーム色の固体を濾過する。粗物質を、ｉ−ＰｒＯＨからの再結晶化によって精製し、次いで、一定の重量になるまで真空下で乾燥して、標題化合物を得る（３２ｇ；８４％）。ＬＣ−ＥＳ／ＭＳ ｍ／ｚ：４３１．２［Ｍ＋Ｈ］^＋。

実施例１２ａ
［（Ｓ）−７−シアノ−４−（３−ヒドロキシ−ピリジン−２−イルメチル）−１，２，３，４−テトラヒドロ−シクロペンタ［ｂ］インドール−２−イル］−カルバミン酸イソプロピルエステル

［（Ｓ）−４−（３−アリルオキシ−ピリジン−２−イルメチル）−７−シアノ−１，２，３，４−テトラヒドロ−シクロペンタ［ｂ］インドール−２−イル］−カルバミン酸イソプロピルエステル（４０ｇ、８７．３ｍｍｏｌ）と１，４−ジオキサン（４００ｍＬ）を合わせて、混合物を窒素中で１時間バブリングすることによって脱気する。次いで、トリエチルアミン（２４．４ｍＬ、１７４．７ｍｍｏｌ）およびギ酸（６．６０ｍＬ、１７４．７）を加え、混合物を窒素下で８０℃で加熱する。窒素雰囲気を維持しながら、テトラキス（トリフェニルホスフィン）パラジウム（１．０２ｇ、０．８７ｍｍｏｌ）を加える。反応物を８０℃で３時間加熱し、次いで、室温に冷却する。反応物を、珪藻土のパッドを通して濾過する。濾液を蒸発させ、粗物質を真空下で乾燥して、茶色の固体を得る。固体をＮＭＰ（１００ｍＬ）中に溶解し、次いで、水（１．２Ｌ）に加える。淡いクリーム色の固体を濾過によって回収し、真空下で一晩乾燥して、４１ｇの粗物質を得る。物質を、アセトニトリルから再結晶化によって精製し、次いで、真空下で一定の重量になるまで乾燥して、標題化合物を得る（２９．５ｇ、８６％）。ＬＣ−ＥＳ／ＭＳ ｍ／ｚ：３９１．１［Ｍ＋Ｈ］^＋。

Claims (12)

1. 式（Ｉ）：
   

   

   
   [式中、Ｒは以下
   

   

   
   からなる群から選択される置換基を表す］
   で示される化合物またはその製薬的に許容し得る塩。
2. Ｒが、
   

   

   
   を表す、請求項１に記載の化合物または塩。
3. Ｒが、
   

   

   
   を表す、請求項２に記載の化合物または塩。
4. Ｒが、
   

   

   
   を表す、請求項１に記載の化合物または塩。
5. Ｒが、
   

   

   
   を表す、請求項４に記載の化合物または塩。
6. ［（Ｓ）−７−シアノ−４−（（２Ｒ，３Ｓ）−３−ヒドロキシ−１−メチル−ピロリジン−２−イルメチル）−１，２，３，４−テトラヒドロ−シクロペンタ［ｂ］インドール−２−イル］−カルバミン酸イソプロピルエステル、［（Ｓ）−７−シアノ−４−（３−フルオロ−２−ヒドロキシベンジル）−１，２，３，４−テトラヒドロシクロペンタ［ｂ］インドール−２−イル］−カルバミン酸イソプロピルエステル、［（Ｓ）−７−シアノ−４−（２−ヒドロキシ−ベンジル）−１，２，３，４−テトラヒドロ−シクロペンタ［ｂ］インドール−２−イル］−カルバミン酸イソプロピルエステル、および［（Ｓ）−７−シアノ−４−（５−フルオロ−２−ヒドロキシ−ベンジル）−１，２，３，４−テトラヒドロ−シクロペンタ［ｂ］インドール−２−イル］カルバミン酸イソプロピルエステルからなる群から選択される請求項１に記載の化合物、またはその製薬的に許容し得る塩。
7. 治療において使用するための、請求項１〜６のいずれか１項に記載の化合物または塩。
8. 骨量または骨密度の低減、骨粗しょう症、骨減少症、筋肉量もしくは筋力の低減、または勃起障害の処置または予防において使用するための、請求項１〜６のいずれか１項に記載の化合物または塩。
9. 勃起障害を処置または予防するための、請求項８に記載の化合物または塩。
10. 骨量または骨密度の低減、骨粗しょう症、骨減少症、筋肉量もしくは筋力の低減、または勃起障害の処置のための薬剤の製造のための、請求項１〜６のいずれか１項に記載の化合物または塩の使用。
11. 請求項１〜６のいずれか１項に記載の化合物または塩を、１種以上の製薬的に許容し得る担体、希釈剤または賦形剤と組み合わせて含む医薬組成物。
12. タダラフィル、クエン酸シルデナフィルおよび塩酸バルデナフィルからなる群から選択される化合物をさらに含む、請求項１１に記載の組成物。