BRPI0618326A2

BRPI0618326A2 - composto ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, composição farmacêutica, e, uso de um composto

Info

Publication number: BRPI0618326A2
Application number: BRPI0618326-3A
Authority: BR
Inventors: Ronald Palin; Colin Alasdair Gray
Original assignee: Organon Nv
Priority date: 2005-11-08
Filing date: 2006-11-06
Publication date: 2011-08-23
Also published as: EP1948650B1; ES2344751T3; AU2006311036A1; EP1948650A1; CN101351463A; JP2009514928A; WO2007054474A1; ATE469148T1; CA2627260A1; DE602006014576D1

Abstract

COMPOSTO OU UM SAL FARMACEUTICAMENTE ACEITáVEL DO MESMO, COMPOSIçãO FARMACêUTICA, E, USO DE UM COMPOSTO A invenção refere-se a derivados de 2-(benzimidazol- 1 -il)-N- (4~feni1tiazo1-2-il)aceta1TLida tendo a fórmula geral (I) em que R~ 1~ é H, (C~ 1-4~)alquila, (C~ 1-4~)alquilóxi ou halogênio; R~ 2~ representa 1-3 substituintes selecionados dentre H, (C~ 1-4~)alquila (opcionalmente substituído com 1 ou mais halogênios), (C~ 1-4~)alquilóxi (opcionalmente substituído com 1 ou mais halogênios), halogênio, CF~ 3~ ou ciano; ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo; a composições farmacêuticas compreendendo o mesmo e ao uso dos referidos derivados de 2-(benzimidazol- 1-il)-N-(4-feniltiazol-2-il)acetamida no tratamento de distúrbios mediados por TRPV1.

Description

"COMPOSTO OU UM SAL FARMACEUTICAMENTE ACEITÁVEL DOMESMO, COMPOSIÇÃO FARMACÊUTICA, E, USO DE UMCOMPOSTO"

A presente invenção refere-se a derivados de 2-(benzimidazol-l-il)-N-(4-feniltiazol-2-il)acetamida, a composições farmacêuticascompreendendo os mesmos e ao uso destes derivados de 2-(benzimidazol-l-il)-N-(4-feniltiazol-2-il)acetamida no tratamento de distúrbios relacionadoscom TRPV1.

O receptor de vanilóide (VR1 ou TRPV1), um canal de cátionligado ao ligando não seletivo, pertencendo à família de canal de receptortransiente (família TRP) de canais de cátion, é altamente expressado nostérminos periféricos de neurônios sensoriais de diâmetro pequeno inervandomuitos tecidos incluindo a pele, bexiga, vias aéreas e trato gastrointestinal.Mais especificamente, os receptores de TRPVl estão localizados em umsubconjunto Αδ e fibras C, os aferentes comumente associados comnocicepção ((Mezey et al., Proc. Natl. Acad. Sei. 97, 3655-3660, 2000). Acaracterização deste canal ao nível molecular identificou o mesmo como oalvo da capsaicina vanilóide, o constituinte pungente principal das pimentastipo malagueta (Caterina et al., Nature 389, 816-824, 1997). De fato, asensibilidade a capsaicina foi usada durante muitos anos como um marcadorda atividade de nociceptor. Estes, nociceptores polimodais são ativados porestímulos nocivos múltiplos incluindo químicos, mecânicos e térmicos. Oestudo das propriedades funcionais de TRPVl demonstrou que este receptorcompartilha muitas propriedades comuns a nociceptores incluindo a ativaçãopor estímulos térmicos (> 43 °C) e químicos (incluindo capsaicina eendovanilóides como metabólitos de N-araquidonoil-dopamina (NADA) e delipoxigenase), assim como a sensibilização e ativação por acidificação. Alémdisso, os mediadores inflamatórios (incluindo ATP e bradiquinina) foramdemonstrados para sensibilizar funcionalmente TRPVl in vitro. Estaevidência sugere que TRPl tem um papel integrante na detecção polimodal deestímulos nocivos e contribui para a transdução de respostas dolorosasinflamatórias e potencialmente também dano ao tecido periférico (estudadoem Di Marzo et al, Curr. Opin. Neurobiol. 12, 372-279, 2002).

Um papel para TRPVl na detecção de estímulos dolorosos étambém deduzido de dados em camundongos de nocaute de genes. Oscamundongos nulos para TRPVl mostram desenvolvimento atenuado dehiperalgesia térmica comportamental após um insulto inflamatório. (Caterinaet al., Science 288, 306-313, 2000, Davis et al., Nature 405, 183-187, 2000).Os neurônios sensoriais de diâmetro pequeno destes animais tambémmostram respostas alteradas a estímulos térmicos e ácido. Além disso, aexpressão e/ou atividade funcional alteradas de TRPVl foi demonstrada apósinflamação e dano aos nervos em modelos animais (Amaya et al., Brian Res.963, 190-196, 2003, Rashid et al., J. Pharm. Exp. Ther. 304, 940-948, 2003,Hong & Wiley, J. Biol. Chem. 280, 618-627, 2005).

Em humanos, a exposição intradérmica a capsaicina levaprimeiro à sensação de dor de queimadura devido à excitação neuronal,seguido por um período de duração longa de analgesia que é umaconseqüência, como se acredita, de dessenssibilização funcional (estudado emBley, Exp. Opin Investig Drugs. 13, 1445-1456, 2004). Isto leva aodesenvolvimento de agonistas de TRPVl como compostos analgésicos empotencial. No entanto, estes compostos sofrem de vários problemas incluindodor e sensação de queimadura na aplicação inicial. Mais recentemente, osantagonistas de TRPVl incluindo capsazepina (Walker et al., J. Pharm. Exp.Ther. 304, 56- 62, 2003) e BCTC (Pomonis et al., J. Phar. Exp. Ther. 306,387-393, 2004) foram mostrados como sendo ativos em vários modelos deanimais pré-clínicos de dor inflamatória e neuropática.

Além de um papel na transdução de dor, também se tem umaevidência crescente para um papel para TRPVl na regulação de funçãoaferente e eferente de nervos sensoriais e a função de células não neuronais.De fato, função alterada da bexiga, com uma maior freqüência de contraçõesde bexiga que não esvaziam, de baixa amplitude, e um aumento na capacidadeda bexiga foram observados em camundongos KO TRPVl (Birder et al., Nat.Neurosci. 5, 856-860, 2002). Isto pode envolver TRPVl neuronal e TRPVlexpressado em células uroepiteliais. Assim, existe uma evidência clara parasugerir que agentes modulando a atividade de TRPVl terão utilidade nãosomente em estados de dor e outras doenças envolvendo inflamação mastambém em condições envolvendo hiperatividade de fibras sensoriaisprimárias (por exemplo super-atividade da bexiga e incontinência depremência.)

Os derivados de 2(benzimidazol-l-il)acetamida foramdescritos nos pedidos de patente internacional WO 2004/100865 e WO2006/033620 (AstraZeneca AB) como inibidores de receptor de TRPVl eutilizáveis no tratamento de distúrbios mediados por TRPV1, como notratamento de distúrbios de dor aguda e crônica, dor neuropática aguda ecrônica, dor inflamatória aguda e crônica, e doenças respiratórias. Permanecea necessidade de compostos adicionais que são utilizáveis no tratamento dedistúrbios mediados por TRPVl.

Para este objetivo, a presente invenção provê derivados de 2-(benzimidazol-l-il)-N-(4-feniltiazol-2-il)acetamida tendo a fórmula geral I

<formula>formula see original document page 4</formula>

Fórmula I

em que

R1 é H, (C1-4)alquila, (Ci-4)alquilóxi ou halogênio;R2 representa 1-3 substituintes selecionados dentre H,(Ci_4)alquila (opcionalmente substituído com 1 ou mais halogênios),(Ci_4)alquilóxi (opcionalmente substituído com 1 ou mais halogênios),halogênio, CF3 ou ciano; ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo;

com a exclusão de

2-(benzimidazol-1 -il)-N-(4-feniltiazol-2-il)-acetamida;

2-(benzimidazol-1 -il)-N-[4-(4-clorofenil)tiazol-2-il]-acetamida;

2-(benzimidazol-1 -il)-N-[4-(4-bromofenil)tiazol-2-il]-acetamida;

2-(benzimidazol-1 -il)-N-[4-(4-metilfenil)tiazol-2-il]-acetamida; e

2-(benzimidazol-1 -il)-N-[4-(4-metoxifenil)tiazol-2-il]-acetamida.

Os compostos excluídos referem-se às descrições dos mesmospor S. C. Sharma (Indian J. Chem 4, 33 - 36, 1966) como anestésicos locais.

O termo (C1-4)alquila como usado na definição de fórmula Isignifica um grupo alquila ramificado ou não ramificado tendo de 1-4 átomosde carbono, como butila, isobutila, butila terciária, propila, isopropila, etila emetila.

Nos termos (C1-4)alquilóxi, (C1-4)alquila tem o significadocomo definido acima.

O termo halogênio significa F, Cl, Br ou I. Os halogêniospreferidos são Cl e F.

Existe uma preferência para os derivados de 2-(benzimidazol-1 -il)-N-(4-feniltiazol-2-il)acetamida de fórmula I, em que R1 é H.

Os compostos especificamente preferidos da invenção são:

- 2-benzimidazol-l-il-N-[4-(3,5-dicloro-2-metóxi-fenil)-tiazol-2-il]-acetamida;2-benzimidazol-1-il-N-[4-(3,4-difluorofenil)-tiazol-2-il]-acetamida;

2-benzimidazol-1-il-N-[4-(5-cloro-4-metil-2-metóxi-fenil)-tiazol-2-il]-acetamida;

-2-benzimidazol-1-il-N-[4-(3-clorofenil)-tiazol-2-il]-acetamida;

2-benzimidazol-1-il-N-[4-(3,4-diclorofenil)-tiazol-2-il]-acetamida;

2-benzimidazol-1-il-N-[4-(4-t-butil-fenil)-tiazol-2-il]-acetamida;

-2-benzimidazol-1-il-N-[4-(3-metil-4-clorofenil)-tiazol-2-il]-acetamida;

2-benzimidazol-1-il-N-[4-(3-fluorofenil)-tiazol-2-il]-acetamida;

-2-benzimidazol-1-il-N-[4-(3-metil-4-fluorofenil)-tiazol-2-il]-acetamida;

-2-benzimidazol-1-il-N-[4-(3-cloro-4-fluorofenil)-tiazol-2-il]-acetamida;

-2-benzimidazol-1-il-N-[4-(3,5-dicloro-2-metoxifenil)-tiazol-2-il]-acetamida;

-2-benzimidazol-1-il-N-[4-(4-trifluorometilfenil)-tiazol-2-il]-acetamida;

2-benzimidazol-1-il-N-[4-(2,4-diclorofenil)-tiazol-2-il]-acetamida;

-2-benzimidazol-1-il-N-[4-(2,4-dimetilfenil)-tiazol-2-il]-acetamida; e

2-benzimidazol-1-il-N-[4-(4-difluorometoxifenil)-tiazol-2-il]-acetamida ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo.

Os derivados de 2-(benzimidazol-1-il)-N-(4-feniltiazol-2-il)acetamida da invenção podem ser preparados por métodos bem conhecidosna técnica da química orgânica.

Esquema I.

<formula>formula see original document page 7</formula>

Em uma via geral ilustrativa para os compostos da presenteinvenção, como mostrado no esquema I, o intermediário de ácido (1H-benzimidazol-l-il) acético 2 pode ser preparado a partir de benzimidazol, umabase desprotonante apropriada como terc-butóxido de potássio e alquilandocom a nitrila apropriada como bromoacetonitrila em um solvente apropriadocomo etanol (J. Das et al. Bioorganic and Medicinal Chemistry Letters 15(2),337- 343, 2005). A nitrila 1 pode então ser hidrolisada para o ácido desejadocom 18% de ácido clorídrico, como bem conhecido do versado na técnica.Várias formas de sal deste intermediário podem ser formadas como o salcloridrato e trietilamina. O ácido carboxílico de fórmula 2 ou suas formas desal (como cloridrato ou trietilamina) pode ser convertido para amida defórmula 3 via sua conversão em uma forma ativada isto é, uma acil azida portratamento com difenilfosforilazida (DPPA), um cloreto de acila portratamento com cloreto de tionila ou o éster ativado por tratamento comhexafluorofosfato de 0-(7-azabenzotriazol-1 -il)-N,N,N',N'-tetrametilurônio(HATU) e ainda tratamento com a amina apropriada H2N-Ari-Ar2 de fórmula4 (J. Am. Chem. Soe, vol. 108, n°. 22, 6950 - 6960, 1986), em que -Ar1-Ar2representa apropriadamente 4-feniltiazol-2-ila substituída.

Métodos alternativos de aminas de copulação de fórmula 4para o ácido 2 incluem, mas não são limitados ao uso de reagentes decopulação de peptídeos como 1,3-dicilohexilcarbodiimida (DCC), 1,3-diisopropilcarbodiimida (DIC) ou hexafluorofosfato debromotripiirolidinofosfônio (PyBroP). Os solventes apropriados são solventespolares apróticos como dimetilformamida (DMF) ou acetonitrila apesar deoutros solventes poderem ser usados. As bases como as aminas terciárias, porexemplo, trietilamina, podem ser usadas assim como as basesheteroaromáticas, por exemplo, piridina. A temperatura pode estar entre O a100°C usando aquecimento convencional ou microondas e o tempo de reaçãoentre 1 h e 30 h. Os compostos alvos de fórmula 3 podem existir em váriasformas de sal como cloridrato e sais de ácido trifluoroacético.

Os intermediários de amina representados pela fórmula 4podem ser preparados usando uma variedade de métodos conhecidos doversado na técnica, sendo um descrito no esquema II. Alfa bromo cetonas defórmula 5 podem ser convertidas no aminotiazol 6 com tiouréia usandoquímica padrão, descrita por J. Brienholt et al., J. Heterocyclic Chemistry 38,569, 2001.

Esquema II:

<formula>formula see original document page 8</formula>

Os sais farmaceuticamente aceitáveis dos derivados de 2-(benzimidazol-1-il)-N-(4-feniltiazol-2-il)acetamida da invenção podem serobtidos por tratamento de uma base livre de um composto de fórmula I comum ácido mineral como ácido clorídrico, ácido bromídrico, ácido fosfórico eácido sulfurico, ou um ácido orgânico como, por exemplo, ácido ascórbico,ácido cítrico, ácido tartárico, ácido láctico, ácido maleico, ácido malônico,ácido fumárico, ácido oxálico, ácido glicólico, ácido succínico, ácidopropiônico, ácido acético e ácido metanossulfônico.

Os compostos da invenção podem existir em formas nãosolvatada assim como solvatada com solventes farmaceuticamente aceitáveiscomo água, etanol e outros. Em geral, as formas solvatadas são consideradasequivalentes às formas não solvatadas para os fins da invenção.

Alguns dos derivados de 2-(benzimidazol-l-il)-N-(4-feniltiazol-2-il)acetamida de fórmula I e seus sais podem conter pelo menosum centro de quiralidade, e existir, assim, como estereoisômeros, incluindoenantiômeros e diastereômeros. A presente invenção inclui osestereoisômeros anteriormente mencionados dentro de seu escopo e cada umdos enantiômeros ReS individuais dos compostos de fórmula I e seus sais,substancialmente livres, isto é, associados com menos que 5%,preferivelmente menos que 2%, em particular menos que 1% do outroenantiômero, e misturas de tais enantiômeros em quaisquer proporçõesincluindo as misturas racêmicas contendo quantidades substancialmenteiguais dos dois enantiômeros. Métodos para síntese assimétrica ou separaçãoquiral, pelo que os estereoisômeros puros são obtidos, são bem conhecidos natécnica, por exemplo, síntese com indução quiral ou partindo de substratosquirais comercialmente disponíveis, ou separação de estereoisômeros, porexemplo, usando cromatografia em meio quiral ou por cristalização com umcontra-íon quiral.

A presente invenção ainda provê as composiçõesfarmacêuticas compreendendo um derivado de 2-(benzimidazol-l-il)-N-(4-feniltiazol-2-il)acetamida de acordo com a fórmula geral I, ou um salfarmaceuticamente aceitável do mesmo, em mistura com auxiliaresfarmaceuticamente aceitáveis, e opcionalmente outros agentes terapêuticos. Otermo "aceitável" significa ser compatível com os outros ingredientes dacomposição e não deletério para os recipientes dos mesmos. As composiçõesincluem, por exemplo, as apropriadas para administração oral, sublingual,subcutânea, intravenosa, epidural, intratecal, intramuscular, transdérmica,pulmonar, local, ou retal, e outras, todas em formas de dosagem unitária paraadministração.Para administração oral, o ingrediente ativo pode serapresentado como unidades discretas, como comprimidos, cápsulas, pós,granulados, soluções, suspensões, e outros. Para administração parental, acomposição farmacêutica da invenção pode ser apresentada em recipientes dedose unitária ou de múltiplas doses, por exemplo, líquidos de injeção emquantidades predeterminadas, por exemplo, em frascos vedados e ampolas, etambém pode ser armazenada em uma condição secada por congelamento(liofilizada) requerendo somente a adição de veículo líquido estéril, porexemplo, água, antes do uso.

Misturado com tais auxiliares farmaceuticamente aceitáveis,por exemplo, como descrito na referência padrão, Gennaro, A. R. et al.,Remington: The Science and Practice of Pharmaey (20a. edição, LippincottWilliams & Wilkins, 2000, ver especialmente parte 5: PharmaceuticalManufacturing), o agente ativo pode ser comprimido em unidades dedosagem sólida, como pílulas, comprimidos, ou ser processado em cápsulas,supositórios ou curativos. Por meio de líquidos farmaceuticamente aceitáveis,o agente ativo pode ser aplicado como uma composição fluida, por exemplo,como uma preparação de injeção, na forma de uma solução, suspensão,emulsão, ou como uma pulverização, por exemplo, uma pulverização nasal.

Para fazer unidades de dosagem sólida, o uso de aditivosconvencionais como cargas, colorantes, aglutinantes poliméricos e outros écontemplado. Em geral, qualquer aditivo farmaceuticamente aceitável que nãointerfere com a função dos compostos ativos pode ser usado. Os veículosapropriados com os quais o agente ativo da invenção pode ser administradocomo composições sólidas incluem lactose, amido, derivados de celulose eoutros, ou misturas dos mesmos, usados em quantidades apropriadas. Paraadministração parental, suspensões aquosas, soluções salinas isotônicas esoluções injetáveis estéreis podem ser usadas, contendo agentes dispersantesfarmaceuticamente aceitáveis e/ou agentes umectantes, como propileno glicolou butileno glicol.

A invenção ainda inclui uma composição farmacêutica, comoaqui acima descrito, em combinação com material de embalagem apropriadopara a referida composição, o referido material de embalagem incluindoinstruções para o uso da composição para o uso como aqui acima descrito.

Os derivados de 2-(benzimidazol-l-il)-N-(4-feniltiazol-2-il)acetamida da invenção foram verificados como tendo propriedadesantagonísticas para o receptor de vanilóide, como medido por um teste deinfluxo de cálcio funcional usando uma linhagem de células de ovário deHamster chinês em que um receptor de VRl recombinante humano foiestavelmente expressado. Métodos para construir tais linhagens de célulasrecombinantes são bem conhecidos na técnica (Sambrook et al., MolecularCloning: a Laboratory Manual, Cold Spring Harbor Laboratory Press, ColdSpring Harbor, última edição).

Os compostos da invenção são assim utilizáveis no tratamentode distúrbios mediados por TRPV1, como no tratamento de distúrbios de doraguda e crônica, dor neuropática aguda e crônica, dor inflamatória aguda ecrônica, e doenças respiratórias. Os compostos da invenção podem seradministrados a humanos em uma quantidade suficiente durante uma extensãosuficiente de tempo para aliviar os sintomas. Ilustrativamente, níveis dedosagem para humanos podem estar na faixa de 0,001-50 mg por kg de pesodo corpo, preferivelmente em uma dosagem de 0,01-20 mg por kg de peso do corpo.

A invenção é ilustrada pelos seguintes exemplos.

Exemplo 1.

2-Benzimidazol-1-il-N-[4-[4-cloro-fenin-tiazol-2-il-acetamida.

A: (1 H-benzimidazol-1 -il) acetonitrila.

A uma solução resfriada em gelo de benzimidazol (10 g, 0,085mol) em N,N-dimetil-formamida seca (500 mL) foi adicionado terc-butóxidode potássio (9,6 g, 0,085 mol) em porções. A mistura foi agitada emtemperatura ambiente durante 1 h então bromoacetonitrila (6 mL, 0,086 mol)foi adicionada em uma porção e agitada durante 3 h. A mistura foi entãoresfriada bruscamente com dióxido de carbono sólido seguido por água e osorgânicos separados. Os orgânicos foram lavados ainda com água (100 mL x5), e salmoura (100 mL x 1) combinados e secados (Na2SO4), filtrados eevaporados até secura. O resíduo foi passado através de uma coluna de sílicagel eluindo com diclorometanoietanol (1% até 6% de etanol) para dar umsólido amarelo (12 g, 89%). 1H RMN (400 MHz, CDCl3) δ ppm 5,08 (2H, s),7,36 - 7,43 (2H, m), 7,47 (1H, d, J = 7,4 Hz), 7,85 (1H, d, J = 7,2 Hz), 7,93(1H, s).

B: Acido (1H-benzimidazol-1-il) acético (sal cloridrato).(lH-benzimidazol-l-il) acetonitrila (35 g, 0,23 mol) (exemplo1A) foi dissolvida em 18% de ácido clorídrico (500 mL) e aquecida a refluxodurante 5 h. A solução foi então evaporada até secura sob pressão reduzidausando acetonitrila como um co-solvente para remover azeotropicamente todoo solvente. Foram adicionados acetona e o (NH4Cl) sólido filtrado e lavadoscom acetona. O filtrado foi então deixado permanecer frio durante 24 h e oscristais de tom marrom claro coletados e secados (45 g, 100%). 1H RMN (400MHz, CD3OD) δ ppm 5,47 (2H, s), 7,68 - 7,70 (2H, m), 7,88 - 7,92 (2H, m),9,51 (1 H, s). MS (ES) m/z 177,4 [M+H]+.

C: 2-Benzimidazol-1 -Η-Ν-Γ4-( 4-cloro-fenil)-tiazol-2-il-acetamida.

A uma solução de ácido (1 H-benzimidazol-1-il) acético (1 g,5,68 mmol) (exemplo 1B) em A^jV-dimetilformamida (25 ml) foi adicionadocloreto de tionila (0,4 ml, 5,56 mmol) em gotas e a mistura de reação agitadaem temperatura ambiente durante 1 h. 2-Amino-4-(4-clorofenil)tiazol (1,15 g,5,46 mmol) e piridina (4 ml) foram então adicionados na mistura de reação eagitados em temperatura ambiente durante 17 h. A mistura de reação foi entãoconcentrada a vácuo e diclorometano foi adicionado e transferido para umfunil de separação onde os orgânicos foram lavados com d ácido clorídrico0,1 M e uma solução de hidróxido de amônio a 10%. As camadas orgânicasforam combinadas e lavadas com cloreto de sódio aquoso saturado, secadas(Mg2SO4), filtradas e concentradas a vácuo. O resíduo foi então purificadopor cromatografia de coluna usando sílica e eluindo com 0-10% de metanolem diclorometano, dando o composto titular (93,7 mg, 4,5%). 1H RMN (400MHz, DMSOd6) δ ppm 5,34 (2H, s), 7,19 - 7,27 (2H, m), 7,51 (1H, d, J =8,5 Hz), 7,59 (1 H, d, J = 7,2 Hz), 7,68 (1 H, d, J = 7,1 Hz), 7,71 (1 H, s), 7,93(2H, d, J = 8,5 Hz), 8,25 (1 H, s), 12,79 (1 H, s). MS (ES) m/z: 369,0 [M+H].

Exemplo 2.

2-Benzimidazol-1-il-N-r4-('3,5-dicloro-2-metóxi-fenil)-tiazol-2-ill-acetamida

A: 4-(3,5-Dicloro-2-metóxi-fenilVtiazol-2-ilamina2-Bromo-1-(3,5-dicloro-2-metóxi-fenil)-etanona (200 mg,0,746 mmol), tiouréia (100 mg, 1,3 mmol) em etanol (2 ml) e aquecidos a1650C durante 300 s em um microondas EXP Emrys optimizer. O solventevolátil foi removido e o resíduo dissolvido em água e ajustado a pH 7 comhidróxido de sódio. A mistura aquosa foi extraída com acetato de etila (3 x 5020 mL), e evaporada até secura para dar um resíduo oleoso. Isto foi então usadosem outra purificação na próxima etapa.

B: 2-Benzimidazol-1-il-N-i4-(3,5-dicloro-2-metóxi-fenilVtiazol-2-il]-acetamida

Acido (1H-benzimidazol-1-il) acético (50 mg, 0,28 mmol)(exemplo IB) foi dissolvido em tolueno e N,N-dimetilformamida. Trietilamina(0,03 ml, 0,42 mmol) então adicionada seguido por difenil fosforil azida(DPPA) (0,07 ml, 0,36 mmol) e agitada em temperatura ambiente durante 24h. 4-(3,5-Dicloro-2-metóxi-fenil)-tiazol-2-ilamina (57 mg, 0,21 mmol)(exemplo 2A) foi então adicionada em uma porção e a mistura agitada durante24 h em temperatura ambiente. A mistura foi evaporada até secura e DMSO(1 mL) adicionado antes da purificação por LCMS preparativo para dar umresíduo oleoso (8,9 mg, 7%). 1H RMN (400 MHz, CD3OD) δ ppm 3,81 (3 h,s), 5,34 (2H, s), 7,29 - 7,36 (3 h, m), 7,42 (1H, d, J = 2,5 Hz), 7,53 (1H, d, J =7,2 Hz), 7,72 (1H, d, J = 7,1 Hz), 8,06 (1H, d, J = 2,6 Hz), 8,25 (1H, s). MS(ES) m/z: 434,3 [M+H].

Exemplo 3.

2-Benzimidazol-1-il-N-[4-(3,4-difluorofenin-tiazol-2-il]-acetamida

A: 4-(3,4-Difluorofenil)tiazol-2-ilamina

Preparada seguindo o método no exemplo 2A usando 2-bromo-3,4-difluoro-acetofenona (4,4 g, 0,018 mol) em vez de 2-bromo-1-(3,5-dicloro-2-metóxi-fenil)-etanona. O produto foi isolado como um sólidobranco (3,7g, 93%) 1H RMN (400 MHz, CDCl3) δ ppm 5,01 (2H, brs), 6,67(1H, s), 7,15 (1H, dd,J= 8,4 e 18,5 Hz), 7,47 - 7,50 (1H, m), 7,57 - 7,62 (1H,m). MS (ES) m/z: 213,3 [M+H].

B: 2-Benzimidazol-1-il-N-[4-(3,4-difluorofenil)tiazol-2-il]-acetamida

Ácido (1H-benzimidazol-1-il) acético (3,1 g, 0,017 mol)(exemplo 1B) foi dissolvido em acetato de etila. Trietilamina (9 ml, 0,064mmol) então adicionada, seguido por 4-(3,4-difluoro-fenil)-tiazol-2-ilamina(exemplo 3A) (3,7g, 0,017mol) e agitada em temperatura ambiente durante 1h. Uma solução de anidrido propilfosfônico a 50 % em peso em acetato deetila (PPA) (10,8 ml, 0,017mol) foi então adicionada em gotas e a mistura25 agitada durante 24 h em temperatura ambiente. A mistura foi então divididaentre acetato de etila e uma solução de carbonato de sódio e lavada comcarbonato de sódio (3 χ 100 mL). Os orgânicos foram combinados, secados(MgSO4), filtrados e evaporados até secura. O sólido foi então triturado commetanol para dar um sólido branco (3,1 g, 48%). 1H RMN (400 MHz,CD3OD) δ ppm 5,65 (2Η, s), 7,28 (1Η, dd, J= 8,4 e 18,9 Hz), 7,47 (1Η, s),7,66 - 7,74 (3Η, m), 7,79 - 7,84 (1Η, m), 7,88 - 7,94 (2Η, m), 9,49 (1Η, s).MS (ES) m/z\ 371,2 [Μ+Η].

Exemplo 4

Determinação da atividade in vitro

A atividade funcional de compostos no receptor de TRPVl foideterminada usando um teste de influxo de Ca à base de Flexstation II daMolecular Devices, empregando um corante fluorescente sensível a Ca euma linhagem de células CHO estavelmente expressando TRPVl humano(VR1).

Os compostos de teste foram preparados como solução decarga em DMSO e testados para atividade sobre várias unidades Iog (na faixade 100 μΜ - 100 pM). Os compostos foram ainda diluídos em tampão de testecomo necessário para a determinação de IC50.

As células CHO-Kl, expressando estavelmente VRl humanorecombinante, sob o controle de um proporção de CMV, foram semeadas(30.000 células/cavidade) em placas de teste de placas de 96 cavidades pretas,de fundo transparente, (Costar) 24 h antes do teste. As células foram mantidasa 37°C/5% CO2 em meio de crescimento normal (meio de Eagles modificadopor Dulbecco (DMEM/Nut. Mix. F-12 GLUTA- MAX-I (1:1) comPYRIDOXINE) suplementado com 10% soro de clone fetal II e 0,4 mg/ mlG418, todos da Invitrogen). Antes do teste, as células foram lavadas uma vezcom tampão de teste (150 μΐ, solução salina tamponada com Hepes, pH 7,4,suplementado com 10 mM glicose, 2 mM CaCl2, 1 mM MgCl2 e 0,5 mMProbenicid). As células foram então incubadas no escuro com 100 μΐ 5 μΜFluo-3AM (Calbiochem) preparadas em tampão de teste durante lha 37°C/5% CO2. O corante em excesso foi removido por lavagem das células duasvezes mais com tampão, antes da pré-incubação (10 min, RT) com umaconcentração apropriada de composto de teste ou tampão sozinho. Asrespostas de VRl foram avaliadas após adição, no Flexstation II, de agonista(Capsaicina) em uma concentração de ECgo e influxo de Ca avaliado pormedida da emissão de fluorescência (488 nm/525 nm). As respostas efluorescência de linha de base foram medidas durante aproximadamente 20 s (16 leituras em intervalos de 1,28 s) antes da adição de capsaicina. Osaumentos de emissão de fluorescência após adição de capsaicina forammedidas por mais 40 s (31 leituras a intervalos de 1,28 s). As respostas foramregistradas como fluorescência Max-Min. A inibição induzida por antagonistade aumentos mediados por TRPVl em [Ca2+] intracelular foi avaliada comrelação ás cavidades da mesma placa à qual capsaicina foi adicionada naausência de antagonista (isto é, pré-incubação em tampão sozinho). Osvalores de IC50 típicos, medidos no teste in vitro, descritos acima, são 3 μΜou menos. Para várias formas de realização da invenção, o IC50 foi verificadocomo estando abaixo de 100 nM.

Exemplo 5 - Teste de formalina para antinocicepção

Os efeitos antinociceptivos de compostos de teste foramdeterminados no teste de pata de formalina em camundongos. Este modeloavalia as respostas comportamentais aos estímulos nocivos, contínuos,gerados por tecido danificado. A injeção de solução diluída de formalina emuma pata de trás do camundongo produz duas fases distintas decomportamento nociceptivo em várias espécies (Dubuisson e Dennis, Pain, 4(2) 161-174, 1977). O primeiro período começa imediatamente após a injeçãocom formalina e dura 4-5 minutos. A fase inicial é seguida por um período de10-15 minutos de comportamento quiescente, após o que uma segunda fase decomportamento nociceptivo ocorre. Esta fase continua por mais 20-30minutos. Em camundongos, o registro do tempo gasto lambendo ou mordendoa pata injetada é o método mais comum de avaliação comportamental.

Os camundongos ICR machos (22-30 g, n = 6-10 por dose)foram habituados a seu meio de teste por sua colocação, sozinhos, em caixasde observação Perspex transparentes durante 1 h antes da administração dofármaco no dia da experiência. A solução de formalina, 0,3% em soluçãosalina estéril, foi preparada como uma solução nova diariamente. Oscompostos de teste, dissolvidos em 5% solutol em água e foram administradosintravenosamente (i.v.). 10 ml. kg"1, 5 minutos antes da injeção subcutânea nasuperfície dorsal de uma pata traseira de 20 μl de solução de formalina. Onúmero de contagens de comportamento nociceptivo demonstrado para cadaanimal foi então medido usando um sistema automatizado. O comportamentonociceptivo foi medido durante dois períodos de tempo após injeção deformalina; 0-5 minutos (fase 1) e 20-30 minutos (fase 2). Os valores deED50 foram calculados para cada composto para cada uma das duas fases delamber usando um ajuste de regressão não linear, curva de resposta a dosesigmodal (Xifit, IDDB s).

Um ED50 típico na fase II do teste de formalina é 50 μmol/kgou menos. Para vários derivados de 2-(benzimidazol-l-il)-N-(4-feniltiazol-2-il)acetamida da invenção, o ED50 foi verificado como estando abaixo de 15μmol/kg.

Claims

1. Composto ou um sal farmaceuticamente aceitável domesmo, caracterizado pelo fato de ser derivado de 2-(benzimidazol-l-il)-N-(4-feniltiazol-2-il)acetamida tendo a fórmula geral I:<formula>formula see original document page 18</formula>em queR1 é H, (C1-4)alquila, (C1-4)alquilóxi ou halogênio;R2 representa 1-3 substituintes selecionados dentre H, (C1--4)alquila (opcionalmente substituído com 1 ou mais halogênios), (C1--4)alquilóxi (opcionalmente substituído com 1 ou mais halogênios), halogênio,CF3 ou ciano;com a exclusão de-2-(benzimidazol-1-il)-N-(4-feniltiazol-2-il)-acetamida;-2-(benzimidazol-1-il)-N-[4-(4-clorofenil)tiazol-2-il]-acetamida;-2-(benzimidazol-1-il)-N-[4-(4-bromofenil)tiazol-2-il]-acetamida;-2-(benzimidazol-l-il)-N-[4-(4-metilfenil)tiazol-2-il]-acetamida; e-2-(benzimidazol-1-il)-N-[4-(4-metoxifenil)tiazol-2-il]-acetamida.

2. Composto sendo derivado de 2-(benzimidazol-l-il)-N-(4-feniltiazol-2-il)acetamida de acordo com a reivindicação 1, caracterizado pelofato de que R1 é H.

3. Composto sendo derivado de 2-(benzimidazol-l-il)-N-(4-feniltiazol-2-il)acetamida de acordo com a reivindicação 1 ou 2, caracterizadopelo fato de que R2 representa 1-3 substituintes selecionados dentre (C1--4)alquila, CF3, metóxi, cloro e fluoro.

4. Composto ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmosendo derivado de 2-(benzimidazol-1-il)-N-(4-feniltiazol-2-il)acetamida deacordo com a reivindicação 1, caracterizado pelo fato de ser selecionadodentre:-2-benzimidazol-1-il-N-[4-(3,5-dicloro-2-metóxi-fenil)-tiazol--2-il]-acetamida;-2-benzimidazol-1-il-N-[4-(3,4-difluorofenil)-tiazol-2-il]-acetamida;-2-benzimidazol-1-il-N-[4-(5-cloro-4-metil-2-metóxi-fenil)-tiazol-2-il]-acetamida;-2-benzimidazol-1-il-N-[4-(3-clorofenil)-tiazol-2-il]-acetamida;-2-benzimidazol-1-il-N-[4-(3,4-diclorofenil)-tiazol-2-il]-acetamida;-2-benzimidazol-1 -il-N-[4-(4-t-butil-fenil)-tiazol-2-il]-acetamida;- 2-benzimidazol-1-il-N-[4-(3-metil-4-clorofenil)-tiazol-2-il]-acetamida;-2-benzimidazol-1-il-N-[4-(3-fluorofenil)-tiazol-2-il]-acetamida;- 2-benzimidazol-1-il-N-[4-(3-metil-4-fluorofenil)-tiazol-2-il]-acetamida;-2-benzimidazol-1-il-N-[4-(3-cloro-4-fluorofenil)-tiazol-2-il]-acetamida;-2-benzimidazol-1-il-N-[4-(3,5-dicloro-2-metoxifenil)-tiazol--2-il]-acetamida;- 2-benzimidazol-1 -il-N-[4-(4-trifluorometilfenil)-tiazol-2-il]-acetamida;-2-benzimidazol-1-il-N-[4-(2,4-diclorofenil)-tiazol-2-il]-acetamida;-2-benzimidazol-l-il-N-[4-(2,4-dimetilfenil)-tiazol-2-il]-acetamida;e-2-benzimidazol-1 -il-N- [4-(4-difluorometoxifenil)-tiazol-2-il]-acetamida.

5. Composto sendo derivado de 2-(benzimidazol-l-il)-N-(4-feniltiazol-2-il)acetamida de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a-4, caracterizado pelo fato de ser para uso em terapia.

6. Composição farmacêutica, caracterizada pelo fato decompreender um derivado de 2-(benzimidazol-l-il)-N-(4-feniltiazol-2-il)acetamida como definido em qualquer uma das reivindicações 1 a 4 emmistura com auxiliares farmaceuticamente aceitáveis.

7. Uso de um composto, caracterizado pelo fato de ser napreparação de um medicamento para o tratamento de distúrbios mediados porTRPV1, o composto sendo derivado de 2-(benzimidazol-l-il)-N-(4-feniltiazol-2-il)acetamida de fórmula I, incluindo-2-(benzimidazol-1 -il)-N-(4-feniltiazol-2-il)-acetamida;-2-(benzimidazol-1 -il)-N-[4-(4-clorofenil)tiazol-2-il]-acetamida;-2-(benzimidazol-1 -il)-N-[4-(4-bromofenil)tiazol-2-il]-acetamida;-2-(benzimidazol-1 -il)-N-[4-(4-metilfenil)tiazol-2-il]-acetamida; e-2-(benzimidazol-1 -il)-N- [4-(4-metoxifenil)tiazol-2-il]-acetamida,

8. Uso de acordo com a reivindicação 7, caracterizado pelofato de que o medicamento é para o tratamento de distúrbios de dor crônica,dor neuropática aguda e crônica, dor inflamatória aguda e crônica, e doençasrespiratórias.