BRPI0617369A2 - compostos para tratamento de fibrilaÇço auricular - Google Patents
compostos para tratamento de fibrilaÇço auricular Download PDFInfo
- Publication number
- BRPI0617369A2 BRPI0617369A2 BRPI0617369-1A BRPI0617369A BRPI0617369A2 BR PI0617369 A2 BRPI0617369 A2 BR PI0617369A2 BR PI0617369 A BRPI0617369 A BR PI0617369A BR PI0617369 A2 BRPI0617369 A2 BR PI0617369A2
- Authority
- BR
- Brazil
- Prior art keywords
- formula
- receptor
- atrial fibrillation
- antagonist
- calcium
- Prior art date
Links
- 206010003658 Atrial Fibrillation Diseases 0.000 title claims abstract description 64
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 title claims abstract description 22
- 239000005557 antagonist Substances 0.000 claims abstract description 50
- 239000003814 drug Substances 0.000 claims abstract description 10
- 241000124008 Mammalia Species 0.000 claims abstract description 5
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 claims abstract description 5
- 238000011282 treatment Methods 0.000 claims description 17
- LRFVTYWOQMYALW-UHFFFAOYSA-N 9H-xanthine Chemical group O=C1NC(=O)NC2=C1NC=N2 LRFVTYWOQMYALW-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 7
- 229940123702 Adenosine A2a receptor antagonist Drugs 0.000 claims description 7
- 239000002467 adenosine A2a receptor antagonist Substances 0.000 claims description 7
- 108700013585 MSX2 Proteins 0.000 claims description 5
- 230000002265 prevention Effects 0.000 claims description 5
- FWLDDFYHEQMIGG-MDZDMXLPSA-N 3-(3-hydroxypropyl)-8-[(e)-2-(3-methoxyphenyl)ethenyl]-7-methyl-1-prop-2-ynylpurine-2,6-dione Chemical compound COC1=CC=CC(\C=C\C=2N(C=3C(=O)N(CC#C)C(=O)N(CCCO)C=3N=2)C)=C1 FWLDDFYHEQMIGG-MDZDMXLPSA-N 0.000 claims description 4
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 claims description 3
- LIZOFKWBNVAHPD-UHFFFAOYSA-N 2h-triazolo[4,5-d]triazine Chemical group C1=NN=NC2=C1NN=N2 LIZOFKWBNVAHPD-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- XSJMOLCRLLDSFM-UHFFFAOYSA-N 2h-triazolo[4,5-f]quinoxaline Chemical group C1=CC2=NC=CN=C2C2=NNN=C21 XSJMOLCRLLDSFM-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- OGEBRHQLRGFBNV-RZDIXWSQSA-N chembl2036808 Chemical group C12=NC(NCCCC)=NC=C2C(C=2C=CC(F)=CC=2)=NN1C[C@H]1CC[C@H](N)CC1 OGEBRHQLRGFBNV-RZDIXWSQSA-N 0.000 claims description 2
- 125000002270 phosphoric acid ester group Chemical group 0.000 claims 1
- 101150051188 Adora2a gene Proteins 0.000 abstract description 49
- 230000001746 atrial effect Effects 0.000 abstract description 14
- 210000004413 cardiac myocyte Anatomy 0.000 abstract description 8
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 abstract description 6
- 229940079593 drug Drugs 0.000 abstract description 6
- 241000282412 Homo Species 0.000 abstract description 3
- 230000008901 benefit Effects 0.000 abstract description 3
- 230000001575 pathological effect Effects 0.000 abstract description 3
- 230000007246 mechanism Effects 0.000 abstract description 2
- 108050000203 Adenosine receptors Proteins 0.000 abstract 1
- 102000009346 Adenosine receptors Human genes 0.000 abstract 1
- 239000011575 calcium Substances 0.000 description 47
- OYPRJOBELJOOCE-UHFFFAOYSA-N Calcium Chemical compound [Ca] OYPRJOBELJOOCE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 42
- 229910052791 calcium Inorganic materials 0.000 description 42
- OIRDTQYFTABQOQ-KQYNXXCUSA-N adenosine Chemical compound C1=NC=2C(N)=NC=NC=2N1[C@@H]1O[C@H](CO)[C@@H](O)[C@H]1O OIRDTQYFTABQOQ-KQYNXXCUSA-N 0.000 description 24
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 22
- 238000000034 method Methods 0.000 description 22
- 230000002269 spontaneous effect Effects 0.000 description 22
- 102000005962 receptors Human genes 0.000 description 20
- 108020003175 receptors Proteins 0.000 description 20
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 18
- PAOANWZGLPPROA-RQXXJAGISA-N CGS-21680 Chemical compound O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](C(=O)NCC)O[C@H]1N1C2=NC(NCCC=3C=CC(CCC(O)=O)=CC=3)=NC(N)=C2N=C1 PAOANWZGLPPROA-RQXXJAGISA-N 0.000 description 14
- 239000002126 C01EB10 - Adenosine Substances 0.000 description 12
- 229960005305 adenosine Drugs 0.000 description 12
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 11
- 206010003119 arrhythmia Diseases 0.000 description 10
- 210000000107 myocyte Anatomy 0.000 description 9
- 102000008130 Cyclic AMP-Dependent Protein Kinases Human genes 0.000 description 8
- 108010049894 Cyclic AMP-Dependent Protein Kinases Proteins 0.000 description 8
- LOKCTEFSRHRXRJ-UHFFFAOYSA-I dipotassium trisodium dihydrogen phosphate hydrogen phosphate dichloride Chemical compound P(=O)(O)(O)[O-].[K+].P(=O)(O)([O-])[O-].[Na+].[Na+].[Cl-].[K+].[Cl-].[Na+] LOKCTEFSRHRXRJ-UHFFFAOYSA-I 0.000 description 8
- 239000012528 membrane Substances 0.000 description 8
- 239000002953 phosphate buffered saline Substances 0.000 description 8
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 8
- 210000001519 tissue Anatomy 0.000 description 8
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 7
- 230000006793 arrhythmia Effects 0.000 description 7
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 7
- 230000001404 mediated effect Effects 0.000 description 7
- 241000283707 Capra Species 0.000 description 6
- UTLPKQYUXOEJIL-UHFFFAOYSA-N LSM-3822 Chemical compound N1=CC=2C3=NC(C=4OC=CC=4)=NN3C(N)=NC=2N1CCC1=CC=CC=C1 UTLPKQYUXOEJIL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 230000004913 activation Effects 0.000 description 6
- 210000002072 atrial myocyte Anatomy 0.000 description 6
- 239000000872 buffer Substances 0.000 description 6
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 description 6
- 238000003119 immunoblot Methods 0.000 description 6
- 239000002609 medium Substances 0.000 description 6
- 235000018102 proteins Nutrition 0.000 description 6
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 6
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 6
- 210000001908 sarcoplasmic reticulum Anatomy 0.000 description 6
- 230000004936 stimulating effect Effects 0.000 description 6
- -1 MSX-2 phosphoric acid ester Chemical class 0.000 description 5
- 208000018737 Parkinson disease Diseases 0.000 description 5
- 229940121359 adenosine receptor antagonist Drugs 0.000 description 5
- 238000013459 approach Methods 0.000 description 5
- 238000004624 confocal microscopy Methods 0.000 description 5
- 238000010790 dilution Methods 0.000 description 5
- 239000012895 dilution Substances 0.000 description 5
- 201000010099 disease Diseases 0.000 description 5
- 230000001965 increasing effect Effects 0.000 description 5
- 239000011505 plaster Substances 0.000 description 5
- 239000000296 purinergic P1 receptor antagonist Substances 0.000 description 5
- 239000000018 receptor agonist Substances 0.000 description 5
- 229940044601 receptor agonist Drugs 0.000 description 5
- 230000002441 reversible effect Effects 0.000 description 5
- 230000033764 rhythmic process Effects 0.000 description 5
- 241000894007 species Species 0.000 description 5
- 230000009424 thromboembolic effect Effects 0.000 description 5
- LCTONWCANYUPML-UHFFFAOYSA-N Pyruvic acid Chemical compound CC(=O)C(O)=O LCTONWCANYUPML-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 230000003042 antagnostic effect Effects 0.000 description 4
- 230000001419 dependent effect Effects 0.000 description 4
- 239000000539 dimer Substances 0.000 description 4
- 230000006870 function Effects 0.000 description 4
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 4
- 230000009467 reduction Effects 0.000 description 4
- 238000011160 research Methods 0.000 description 4
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 description 4
- JKMHFZQWWAIEOD-UHFFFAOYSA-N 2-[4-(2-hydroxyethyl)piperazin-1-yl]ethanesulfonic acid Chemical compound OCC[NH+]1CCN(CCS([O-])(=O)=O)CC1 JKMHFZQWWAIEOD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- QKNYBSVHEMOAJP-UHFFFAOYSA-N 2-amino-2-(hydroxymethyl)propane-1,3-diol;hydron;chloride Chemical compound Cl.OCC(N)(CO)CO QKNYBSVHEMOAJP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- GFFGJBXGBJISGV-UHFFFAOYSA-N Adenine Chemical class NC1=NC=NC2=C1N=CN2 GFFGJBXGBJISGV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 102000007471 Adenosine A2A receptor Human genes 0.000 description 3
- 108010085277 Adenosine A2A receptor Proteins 0.000 description 3
- 239000012103 Alexa Fluor 488 Substances 0.000 description 3
- BSYNRYMUTXBXSQ-UHFFFAOYSA-N Aspirin Chemical compound CC(=O)OC1=CC=CC=C1C(O)=O BSYNRYMUTXBXSQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- IAZDPXIOMUYVGZ-UHFFFAOYSA-N Dimethylsulphoxide Chemical compound CS(C)=O IAZDPXIOMUYVGZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 239000007995 HEPES buffer Substances 0.000 description 3
- 241000283973 Oryctolagus cuniculus Species 0.000 description 3
- 208000006011 Stroke Diseases 0.000 description 3
- 229960001138 acetylsalicylic acid Drugs 0.000 description 3
- 239000004480 active ingredient Substances 0.000 description 3
- 239000000556 agonist Substances 0.000 description 3
- 210000000170 cell membrane Anatomy 0.000 description 3
- 210000002837 heart atrium Anatomy 0.000 description 3
- 238000010166 immunofluorescence Methods 0.000 description 3
- 239000003112 inhibitor Substances 0.000 description 3
- 230000003834 intracellular effect Effects 0.000 description 3
- 229940083747 low-ceiling diuretics xanthine derivative Drugs 0.000 description 3
- 239000000178 monomer Substances 0.000 description 3
- 230000002107 myocardial effect Effects 0.000 description 3
- 239000008194 pharmaceutical composition Substances 0.000 description 3
- 230000000144 pharmacologic effect Effects 0.000 description 3
- 229920000642 polymer Polymers 0.000 description 3
- 230000002829 reductive effect Effects 0.000 description 3
- 239000000725 suspension Substances 0.000 description 3
- MPLHNVLQVRSVEE-UHFFFAOYSA-N texas red Chemical compound [O-]S(=O)(=O)C1=CC(S(Cl)(=O)=O)=CC=C1C(C1=CC=2CCCN3CCCC(C=23)=C1O1)=C2C1=C(CCC1)C3=[N+]1CCCC3=C2 MPLHNVLQVRSVEE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 238000002560 therapeutic procedure Methods 0.000 description 3
- 230000001052 transient effect Effects 0.000 description 3
- 239000003981 vehicle Substances 0.000 description 3
- PJVWKTKQMONHTI-UHFFFAOYSA-N warfarin Chemical compound OC=1C2=CC=CC=C2OC(=O)C=1C(CC(=O)C)C1=CC=CC=C1 PJVWKTKQMONHTI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 229960005080 warfarin Drugs 0.000 description 3
- UUUHXMGGBIUAPW-UHFFFAOYSA-N 1-[1-[2-[[5-amino-2-[[1-[5-(diaminomethylideneamino)-2-[[1-[3-(1h-indol-3-yl)-2-[(5-oxopyrrolidine-2-carbonyl)amino]propanoyl]pyrrolidine-2-carbonyl]amino]pentanoyl]pyrrolidine-2-carbonyl]amino]-5-oxopentanoyl]amino]-3-methylpentanoyl]pyrrolidine-2-carbon Chemical compound C1CCC(C(=O)N2C(CCC2)C(O)=O)N1C(=O)C(C(C)CC)NC(=O)C(CCC(N)=O)NC(=O)C1CCCN1C(=O)C(CCCN=C(N)N)NC(=O)C1CCCN1C(=O)C(CC=1C2=CC=CC=C2NC=1)NC(=O)C1CCC(=O)N1 UUUHXMGGBIUAPW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229940127600 A2A receptor antagonist Drugs 0.000 description 2
- 102000010825 Actinin Human genes 0.000 description 2
- 108010063503 Actinin Proteins 0.000 description 2
- IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N Atomic nitrogen Chemical compound N#N IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229940127291 Calcium channel antagonist Drugs 0.000 description 2
- 208000024172 Cardiovascular disease Diseases 0.000 description 2
- 108091006146 Channels Proteins 0.000 description 2
- 206010012289 Dementia Diseases 0.000 description 2
- WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N Glucose Natural products OC[C@H]1OC(O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N 0.000 description 2
- DHMQDGOQFOQNFH-UHFFFAOYSA-N Glycine Chemical compound NCC(O)=O DHMQDGOQFOQNFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 108010001336 Horseradish Peroxidase Proteins 0.000 description 2
- 102000004016 L-Type Calcium Channels Human genes 0.000 description 2
- 108090000420 L-Type Calcium Channels Proteins 0.000 description 2
- 101100024551 Mus musculus Msx3 gene Proteins 0.000 description 2
- 102000004270 Peptidyl-Dipeptidase A Human genes 0.000 description 2
- 108090000882 Peptidyl-Dipeptidase A Proteins 0.000 description 2
- 241000700159 Rattus Species 0.000 description 2
- 239000007983 Tris buffer Substances 0.000 description 2
- XSQUKJJJFZCRTK-UHFFFAOYSA-N Urea Chemical compound NC(N)=O XSQUKJJJFZCRTK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000003416 antiarrhythmic agent Substances 0.000 description 2
- 238000003556 assay Methods 0.000 description 2
- 230000033228 biological regulation Effects 0.000 description 2
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 2
- AIYUHDOJVYHVIT-UHFFFAOYSA-M caesium chloride Chemical compound [Cl-].[Cs+] AIYUHDOJVYHVIT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- RYYVLZVUVIJVGH-UHFFFAOYSA-N caffeine Chemical compound CN1C(=O)N(C)C(=O)C2=C1N=CN2C RYYVLZVUVIJVGH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 210000003169 central nervous system Anatomy 0.000 description 2
- 238000005119 centrifugation Methods 0.000 description 2
- 230000004087 circulation Effects 0.000 description 2
- 230000008045 co-localization Effects 0.000 description 2
- 238000012217 deletion Methods 0.000 description 2
- 230000037430 deletion Effects 0.000 description 2
- 238000011161 development Methods 0.000 description 2
- 230000018109 developmental process Effects 0.000 description 2
- 230000010339 dilation Effects 0.000 description 2
- ZYVZWCILYQDHNU-TTWKNDKESA-L disodium;3-[8-[(e)-2-(3-methoxyphenyl)ethenyl]-7-methyl-2,6-dioxo-1-prop-2-ynylpurin-3-yl]propyl phosphate Chemical compound [Na+].[Na+].COC1=CC=CC(\C=C\C=2N(C=3C(=O)N(CC#C)C(=O)N(CCCOP([O-])([O-])=O)C=3N=2)C)=C1 ZYVZWCILYQDHNU-TTWKNDKESA-L 0.000 description 2
- 238000013195 electrical cardioversion Methods 0.000 description 2
- 239000000839 emulsion Substances 0.000 description 2
- 239000006274 endogenous ligand Substances 0.000 description 2
- 230000003511 endothelial effect Effects 0.000 description 2
- 238000009472 formulation Methods 0.000 description 2
- 239000008103 glucose Substances 0.000 description 2
- 238000003384 imaging method Methods 0.000 description 2
- 230000002401 inhibitory effect Effects 0.000 description 2
- 238000002347 injection Methods 0.000 description 2
- 239000007924 injection Substances 0.000 description 2
- QWTDNUCVQCZILF-UHFFFAOYSA-N isopentane Chemical compound CCC(C)C QWTDNUCVQCZILF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 230000004807 localization Effects 0.000 description 2
- 210000001577 neostriatum Anatomy 0.000 description 2
- 239000000546 pharmaceutical excipient Substances 0.000 description 2
- 239000013641 positive control Substances 0.000 description 2
- 230000003389 potentiating effect Effects 0.000 description 2
- 229940107700 pyruvic acid Drugs 0.000 description 2
- 230000001105 regulatory effect Effects 0.000 description 2
- 210000002966 serum Anatomy 0.000 description 2
- 238000002415 sodium dodecyl sulfate polyacrylamide gel electrophoresis Methods 0.000 description 2
- 230000000638 stimulation Effects 0.000 description 2
- 125000001424 substituent group Chemical group 0.000 description 2
- 239000000758 substrate Substances 0.000 description 2
- 238000001356 surgical procedure Methods 0.000 description 2
- 208000024891 symptom Diseases 0.000 description 2
- CBXCPBUEXACCNR-UHFFFAOYSA-N tetraethylammonium Chemical compound CC[N+](CC)(CC)CC CBXCPBUEXACCNR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 230000001225 therapeutic effect Effects 0.000 description 2
- 238000001890 transfection Methods 0.000 description 2
- 238000012546 transfer Methods 0.000 description 2
- LENZDBCJOHFCAS-UHFFFAOYSA-N tris Chemical compound OCC(N)(CO)CO LENZDBCJOHFCAS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 230000024883 vasodilation Effects 0.000 description 2
- 230000002861 ventricular Effects 0.000 description 2
- 150000003930 2-aminopyridines Chemical class 0.000 description 1
- IORPOFJLSIHJOG-UHFFFAOYSA-N 3,7-dimethyl-1-prop-2-ynylpurine-2,6-dione Chemical compound CN1C(=O)N(CC#C)C(=O)C2=C1N=CN2C IORPOFJLSIHJOG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 101710169336 5'-deoxyadenosine deaminase Proteins 0.000 description 1
- JZSMPSCWNAYWOI-UHFFFAOYSA-N 6-(furan-2-yl)-7h-purin-2-amine Chemical class C=12NC=NC2=NC(N)=NC=1C1=CC=CO1 JZSMPSCWNAYWOI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- PVQIFUSIKBYPTG-UHFFFAOYSA-N 6-(furan-2-yl)purine-2,6-diamine Chemical class C12=NC=NC2=NC(N)=NC1(N)C1=CC=CO1 PVQIFUSIKBYPTG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- MSBFTZNWTMZHRK-CMDGGOBGSA-N 8-[(e)-2-(3-bromophenyl)ethenyl]-3,7-dimethyl-1-prop-2-ynylpurine-2,6-dione Chemical compound N=1C=2N(C)C(=O)N(CC#C)C(=O)C=2N(C)C=1\C=C\C1=CC=CC(Br)=C1 MSBFTZNWTMZHRK-CMDGGOBGSA-N 0.000 description 1
- MSJODEOZODDVGW-UHFFFAOYSA-N 9-chloro-2-(2-furanyl)-[1,2,4]triazolo[1,5-c]quinazolin-5-amine Chemical compound N=1N2C(N)=NC3=CC=C(Cl)C=C3C2=NC=1C1=CC=CO1 MSJODEOZODDVGW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 101150046889 ADORA3 gene Proteins 0.000 description 1
- 229930024421 Adenine Natural products 0.000 description 1
- 102000007470 Adenosine A2B Receptor Human genes 0.000 description 1
- 108010085273 Adenosine A2B receptor Proteins 0.000 description 1
- 102000055025 Adenosine deaminases Human genes 0.000 description 1
- IPWKGIFRRBGCJO-IMJSIDKUSA-N Ala-Ser Chemical compound C[C@H]([NH3+])C(=O)N[C@@H](CO)C([O-])=O IPWKGIFRRBGCJO-IMJSIDKUSA-N 0.000 description 1
- 208000024827 Alzheimer disease Diseases 0.000 description 1
- ITPDYQOUSLNIHG-UHFFFAOYSA-N Amiodarone hydrochloride Chemical compound [Cl-].CCCCC=1OC2=CC=CC=C2C=1C(=O)C1=CC(I)=C(OCC[NH+](CC)CC)C(I)=C1 ITPDYQOUSLNIHG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 102000008873 Angiotensin II receptor Human genes 0.000 description 1
- 108050000824 Angiotensin II receptor Proteins 0.000 description 1
- 208000032845 Atrial Remodeling Diseases 0.000 description 1
- 241000415005 Calcodes Species 0.000 description 1
- 102000000844 Cell Surface Receptors Human genes 0.000 description 1
- 108010001857 Cell Surface Receptors Proteins 0.000 description 1
- 102000029816 Collagenase Human genes 0.000 description 1
- 108060005980 Collagenase Proteins 0.000 description 1
- 102000001045 Connexin 43 Human genes 0.000 description 1
- 108010069241 Connexin 43 Proteins 0.000 description 1
- KDXKERNSBIXSRK-RXMQYKEDSA-N D-lysine Chemical compound NCCCC[C@@H](N)C(O)=O KDXKERNSBIXSRK-RXMQYKEDSA-N 0.000 description 1
- 239000006144 Dulbecco’s modified Eagle's medium Substances 0.000 description 1
- 208000000059 Dyspnea Diseases 0.000 description 1
- 206010013975 Dyspnoeas Diseases 0.000 description 1
- 208000005189 Embolism Diseases 0.000 description 1
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 description 1
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 description 1
- 241001331845 Equus asinus x caballus Species 0.000 description 1
- DJBNUMBKLMJRSA-UHFFFAOYSA-N Flecainide Chemical compound FC(F)(F)COC1=CC=C(OCC(F)(F)F)C(C(=O)NCC2NCCCC2)=C1 DJBNUMBKLMJRSA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- OZLGRUXZXMRXGP-UHFFFAOYSA-N Fluo-3 Chemical compound CC1=CC=C(N(CC(O)=O)CC(O)=O)C(OCCOC=2C(=CC=C(C=2)C2=C3C=C(Cl)C(=O)C=C3OC3=CC(O)=C(Cl)C=C32)N(CC(O)=O)CC(O)=O)=C1 OZLGRUXZXMRXGP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- WSFSSNUMVMOOMR-UHFFFAOYSA-N Formaldehyde Chemical compound O=C WSFSSNUMVMOOMR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 102000003688 G-Protein-Coupled Receptors Human genes 0.000 description 1
- 108090000045 G-Protein-Coupled Receptors Proteins 0.000 description 1
- 239000004471 Glycine Substances 0.000 description 1
- 108091006065 Gs proteins Proteins 0.000 description 1
- 208000032843 Hemorrhage Diseases 0.000 description 1
- 206010020608 Hypercoagulation Diseases 0.000 description 1
- 208000032382 Ischaemic stroke Diseases 0.000 description 1
- LPHGQDQBBGAPDZ-UHFFFAOYSA-N Isocaffeine Natural products CN1C(=O)N(C)C(=O)C2=C1N(C)C=N2 LPHGQDQBBGAPDZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- CKLJMWTZIZZHCS-REOHCLBHSA-N L-aspartic acid Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC(O)=O CKLJMWTZIZZHCS-REOHCLBHSA-N 0.000 description 1
- 102000003505 Myosin Human genes 0.000 description 1
- 108060008487 Myosin Proteins 0.000 description 1
- 239000002033 PVDF binder Substances 0.000 description 1
- 206010033557 Palpitations Diseases 0.000 description 1
- 229930040373 Paraformaldehyde Natural products 0.000 description 1
- 208000031481 Pathologic Constriction Diseases 0.000 description 1
- 102000004160 Phosphoric Monoester Hydrolases Human genes 0.000 description 1
- 108090000608 Phosphoric Monoester Hydrolases Proteins 0.000 description 1
- 241001088162 Primula auricula Species 0.000 description 1
- 235000006894 Primula auricula Nutrition 0.000 description 1
- 208000028017 Psychotic disease Diseases 0.000 description 1
- WTKZEGDFNFYCGP-UHFFFAOYSA-N Pyrazole Chemical class C=1C=NNC=1 WTKZEGDFNFYCGP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229930001406 Ryanodine Natural products 0.000 description 1
- 238000000692 Student's t-test Methods 0.000 description 1
- 238000003639 Student–Newman–Keuls (SNK) method Methods 0.000 description 1
- 229930006000 Sucrose Natural products 0.000 description 1
- CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N Sucrose Chemical compound O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@]1(CO)O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1 CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N 0.000 description 1
- 208000001435 Thromboembolism Diseases 0.000 description 1
- 229920004890 Triton X-100 Polymers 0.000 description 1
- 239000013504 Triton X-100 Substances 0.000 description 1
- 230000005856 abnormality Effects 0.000 description 1
- 230000009471 action Effects 0.000 description 1
- 230000003213 activating effect Effects 0.000 description 1
- 239000000654 additive Substances 0.000 description 1
- 229960000643 adenine Drugs 0.000 description 1
- 239000002671 adjuvant Substances 0.000 description 1
- 239000000443 aerosol Substances 0.000 description 1
- 230000008484 agonism Effects 0.000 description 1
- 125000003172 aldehyde group Chemical group 0.000 description 1
- 150000001345 alkine derivatives Chemical class 0.000 description 1
- 150000001412 amines Chemical class 0.000 description 1
- 229960005260 amiodarone Drugs 0.000 description 1
- 238000000540 analysis of variance Methods 0.000 description 1
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 1
- 238000004873 anchoring Methods 0.000 description 1
- 230000008485 antagonism Effects 0.000 description 1
- 239000003146 anticoagulant agent Substances 0.000 description 1
- 229940127219 anticoagulant drug Drugs 0.000 description 1
- 239000000427 antigen Substances 0.000 description 1
- 102000036639 antigens Human genes 0.000 description 1
- 108091007433 antigens Proteins 0.000 description 1
- 239000003963 antioxidant agent Substances 0.000 description 1
- 239000007864 aqueous solution Substances 0.000 description 1
- 230000002763 arrhythmic effect Effects 0.000 description 1
- 210000001367 artery Anatomy 0.000 description 1
- 235000003704 aspartic acid Nutrition 0.000 description 1
- 230000002238 attenuated effect Effects 0.000 description 1
- 230000009286 beneficial effect Effects 0.000 description 1
- OQFSQFPPLPISGP-UHFFFAOYSA-N beta-carboxyaspartic acid Natural products OC(=O)C(N)C(C(O)=O)C(O)=O OQFSQFPPLPISGP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000004071 biological effect Effects 0.000 description 1
- 208000034158 bleeding Diseases 0.000 description 1
- 230000000740 bleeding effect Effects 0.000 description 1
- 239000002981 blocking agent Substances 0.000 description 1
- 230000017531 blood circulation Effects 0.000 description 1
- 210000001772 blood platelet Anatomy 0.000 description 1
- 210000004204 blood vessel Anatomy 0.000 description 1
- 210000004556 brain Anatomy 0.000 description 1
- 229960001948 caffeine Drugs 0.000 description 1
- VJEONQKOZGKCAK-UHFFFAOYSA-N caffeine Natural products CN1C(=O)N(C)C(=O)C2=C1C=CN2C VJEONQKOZGKCAK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000001506 calcium phosphate Substances 0.000 description 1
- 229910000389 calcium phosphate Inorganic materials 0.000 description 1
- 235000011010 calcium phosphates Nutrition 0.000 description 1
- 230000003185 calcium uptake Effects 0.000 description 1
- 239000002775 capsule Substances 0.000 description 1
- 239000004202 carbamide Substances 0.000 description 1
- BVKZGUZCCUSVTD-UHFFFAOYSA-N carbonic acid Chemical compound OC(O)=O BVKZGUZCCUSVTD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000000747 cardiac effect Effects 0.000 description 1
- 206010061592 cardiac fibrillation Diseases 0.000 description 1
- 238000007675 cardiac surgery Methods 0.000 description 1
- 238000013153 catheter ablation Methods 0.000 description 1
- 230000021164 cell adhesion Effects 0.000 description 1
- 238000004113 cell culture Methods 0.000 description 1
- WRXAWLLASUJMMD-UHFFFAOYSA-N chembl17302 Chemical compound N1=CC=2C3=NC(C=4OC=CC=4)=NN3C(N)=NC=2N1CC1=CC=C(F)C=C1 WRXAWLLASUJMMD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000002038 chemiluminescence detection Methods 0.000 description 1
- 229960002424 collagenase Drugs 0.000 description 1
- 239000000039 congener Substances 0.000 description 1
- 230000037011 constitutive activity Effects 0.000 description 1
- 230000009091 contractile dysfunction Effects 0.000 description 1
- 238000013270 controlled release Methods 0.000 description 1
- 208000029078 coronary artery disease Diseases 0.000 description 1
- 230000002596 correlated effect Effects 0.000 description 1
- 230000000875 corresponding effect Effects 0.000 description 1
- 210000004748 cultured cell Anatomy 0.000 description 1
- 210000004292 cytoskeleton Anatomy 0.000 description 1
- 230000006378 damage Effects 0.000 description 1
- 238000007405 data analysis Methods 0.000 description 1
- 230000034994 death Effects 0.000 description 1
- 238000005034 decoration Methods 0.000 description 1
- 230000003247 decreasing effect Effects 0.000 description 1
- 230000006735 deficit Effects 0.000 description 1
- 230000003111 delayed effect Effects 0.000 description 1
- 238000003391 densitometric scan Methods 0.000 description 1
- 230000003831 deregulation Effects 0.000 description 1
- 238000003745 diagnosis Methods 0.000 description 1
- 239000003085 diluting agent Substances 0.000 description 1
- AFABGHUZZDYHJO-UHFFFAOYSA-N dimethyl butane Natural products CCCC(C)C AFABGHUZZDYHJO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229940042399 direct acting antivirals protease inhibitors Drugs 0.000 description 1
- 208000035475 disorder Diseases 0.000 description 1
- 238000004090 dissolution Methods 0.000 description 1
- 208000002173 dizziness Diseases 0.000 description 1
- IXTMWRCNAAVVAI-UHFFFAOYSA-N dofetilide Chemical compound C=1C=C(NS(C)(=O)=O)C=CC=1CCN(C)CCOC1=CC=C(NS(C)(=O)=O)C=C1 IXTMWRCNAAVVAI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229960002994 dofetilide Drugs 0.000 description 1
- 229960003638 dopamine Drugs 0.000 description 1
- 239000002552 dosage form Substances 0.000 description 1
- 238000004043 dyeing Methods 0.000 description 1
- 230000001614 effect on membrane Effects 0.000 description 1
- 210000002889 endothelial cell Anatomy 0.000 description 1
- 239000003623 enhancer Substances 0.000 description 1
- 229940088598 enzyme Drugs 0.000 description 1
- 230000005284 excitation Effects 0.000 description 1
- 230000002600 fibrillogenic effect Effects 0.000 description 1
- 229960000449 flecainide Drugs 0.000 description 1
- 238000001502 gel electrophoresis Methods 0.000 description 1
- 239000011521 glass Substances 0.000 description 1
- 238000005469 granulation Methods 0.000 description 1
- 230000003179 granulation Effects 0.000 description 1
- 230000012010 growth Effects 0.000 description 1
- 230000010247 heart contraction Effects 0.000 description 1
- 208000019622 heart disease Diseases 0.000 description 1
- 210000005003 heart tissue Anatomy 0.000 description 1
- 208000018578 heart valve disease Diseases 0.000 description 1
- 150000002391 heterocyclic compounds Chemical class 0.000 description 1
- 230000000971 hippocampal effect Effects 0.000 description 1
- 210000005260 human cell Anatomy 0.000 description 1
- 230000003027 hypercoagulation Effects 0.000 description 1
- 208000015210 hypertensive heart disease Diseases 0.000 description 1
- 210000003016 hypothalamus Anatomy 0.000 description 1
- 230000001900 immune effect Effects 0.000 description 1
- 230000002055 immunohistochemical effect Effects 0.000 description 1
- 238000003364 immunohistochemistry Methods 0.000 description 1
- 230000001939 inductive effect Effects 0.000 description 1
- 238000001802 infusion Methods 0.000 description 1
- 108091006086 inhibitor proteins Proteins 0.000 description 1
- 238000001361 intraarterial administration Methods 0.000 description 1
- 238000007918 intramuscular administration Methods 0.000 description 1
- 238000007912 intraperitoneal administration Methods 0.000 description 1
- 238000001990 intravenous administration Methods 0.000 description 1
- 229940125425 inverse agonist Drugs 0.000 description 1
- 210000005248 left atrial appendage Anatomy 0.000 description 1
- 210000005246 left atrium Anatomy 0.000 description 1
- 230000000670 limiting effect Effects 0.000 description 1
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 1
- 210000004698 lymphocyte Anatomy 0.000 description 1
- 238000012423 maintenance Methods 0.000 description 1
- 239000011159 matrix material Substances 0.000 description 1
- 229960001962 mefloquine Drugs 0.000 description 1
- 230000002503 metabolic effect Effects 0.000 description 1
- 239000003068 molecular probe Substances 0.000 description 1
- 230000004220 muscle function Effects 0.000 description 1
- MRWXACSTFXYYMV-FDDDBJFASA-N nebularine Chemical compound O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@H]1N1C2=NC=NC=C2N=C1 MRWXACSTFXYYMV-FDDDBJFASA-N 0.000 description 1
- 230000017074 necrotic cell death Effects 0.000 description 1
- 210000004498 neuroglial cell Anatomy 0.000 description 1
- 230000002644 neurohormonal effect Effects 0.000 description 1
- 210000002569 neuron Anatomy 0.000 description 1
- 230000003957 neurotransmitter release Effects 0.000 description 1
- 210000000440 neutrophil Anatomy 0.000 description 1
- 229910052757 nitrogen Inorganic materials 0.000 description 1
- 238000011457 non-pharmacological treatment Methods 0.000 description 1
- 210000001009 nucleus accumben Anatomy 0.000 description 1
- 210000000956 olfactory bulb Anatomy 0.000 description 1
- 230000003204 osmotic effect Effects 0.000 description 1
- TWSBAXMNNPCGAC-UHFFFAOYSA-N oxido(3-oxobutan-2-ylidene)oxidanium Chemical compound CC(=O)C(C)=[O+][O-] TWSBAXMNNPCGAC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000001991 pathophysiological effect Effects 0.000 description 1
- 239000013610 patient sample Substances 0.000 description 1
- 210000004197 pelvis Anatomy 0.000 description 1
- 239000000137 peptide hydrolase inhibitor Substances 0.000 description 1
- 230000010412 perfusion Effects 0.000 description 1
- 230000002093 peripheral effect Effects 0.000 description 1
- 230000002688 persistence Effects 0.000 description 1
- 238000011458 pharmacological treatment Methods 0.000 description 1
- 230000026731 phosphorylation Effects 0.000 description 1
- 238000006366 phosphorylation reaction Methods 0.000 description 1
- 239000006187 pill Substances 0.000 description 1
- 150000004885 piperazines Chemical class 0.000 description 1
- 238000002264 polyacrylamide gel electrophoresis Methods 0.000 description 1
- 229920002981 polyvinylidene fluoride Polymers 0.000 description 1
- 239000000843 powder Substances 0.000 description 1
- 238000011533 pre-incubation Methods 0.000 description 1
- 238000001556 precipitation Methods 0.000 description 1
- 108090000765 processed proteins & peptides Proteins 0.000 description 1
- 239000000651 prodrug Substances 0.000 description 1
- 229940002612 prodrug Drugs 0.000 description 1
- JWHAUXFOSRPERK-UHFFFAOYSA-N propafenone Chemical compound CCCNCC(O)COC1=CC=CC=C1C(=O)CCC1=CC=CC=C1 JWHAUXFOSRPERK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229960000203 propafenone Drugs 0.000 description 1
- 230000000644 propagated effect Effects 0.000 description 1
- 230000003331 prothrombotic effect Effects 0.000 description 1
- 210000003492 pulmonary vein Anatomy 0.000 description 1
- 239000002212 purine nucleoside Substances 0.000 description 1
- 239000003379 purinergic P1 receptor agonist Substances 0.000 description 1
- 238000003653 radioligand binding assay Methods 0.000 description 1
- 229940044551 receptor antagonist Drugs 0.000 description 1
- 239000002464 receptor antagonist Substances 0.000 description 1
- 239000003087 receptor blocking agent Substances 0.000 description 1
- 230000001172 regenerating effect Effects 0.000 description 1
- 230000004044 response Effects 0.000 description 1
- JJSYXNQGLHBRRK-SFEDZAPPSA-N ryanodine Chemical compound O([C@@H]1[C@]([C@@]2([C@]3(O)[C@]45O[C@@]2(O)C[C@]([C@]4(CC[C@H](C)[C@H]5O)O)(C)[C@@]31O)C)(O)C(C)C)C(=O)C1=CC=CN1 JJSYXNQGLHBRRK-SFEDZAPPSA-N 0.000 description 1
- 239000000523 sample Substances 0.000 description 1
- 210000002235 sarcomere Anatomy 0.000 description 1
- XMXGGIWSFRIOKL-UHFFFAOYSA-N sch-63390 Chemical compound N1=CC=2C3=NC(C=4OC=CC=4)=NN3C(N)=NC=2N1CCCC1=CC=CC=C1 XMXGGIWSFRIOKL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 201000000980 schizophrenia Diseases 0.000 description 1
- 210000002955 secretory cell Anatomy 0.000 description 1
- 210000002460 smooth muscle Anatomy 0.000 description 1
- 239000007787 solid Substances 0.000 description 1
- ZBMZVLHSJCTVON-UHFFFAOYSA-N sotalol Chemical compound CC(C)NCC(O)C1=CC=C(NS(C)(=O)=O)C=C1 ZBMZVLHSJCTVON-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229960002370 sotalol Drugs 0.000 description 1
- 210000000952 spleen Anatomy 0.000 description 1
- 238000007619 statistical method Methods 0.000 description 1
- 230000036262 stenosis Effects 0.000 description 1
- 208000037804 stenosis Diseases 0.000 description 1
- 239000011550 stock solution Substances 0.000 description 1
- 238000007920 subcutaneous administration Methods 0.000 description 1
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 1
- 239000005720 sucrose Substances 0.000 description 1
- 239000006228 supernatant Substances 0.000 description 1
- 238000013268 sustained release Methods 0.000 description 1
- 239000012730 sustained-release form Substances 0.000 description 1
- 238000003786 synthesis reaction Methods 0.000 description 1
- 239000006188 syrup Substances 0.000 description 1
- 235000020357 syrup Nutrition 0.000 description 1
- 229940066771 systemic antihistamines piperazine derivative Drugs 0.000 description 1
- 239000003826 tablet Substances 0.000 description 1
- 229940124597 therapeutic agent Drugs 0.000 description 1
- 210000001541 thymus gland Anatomy 0.000 description 1
- 230000036962 time dependent Effects 0.000 description 1
- 238000010361 transduction Methods 0.000 description 1
- 230000026683 transduction Effects 0.000 description 1
- 238000011269 treatment regimen Methods 0.000 description 1
- SMUCKGNXNFHMNW-UHFFFAOYSA-N triazolo[1,5-a][1,3,5]triazine Chemical compound C1=NC=NC2=CN=NN21 SMUCKGNXNFHMNW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- QORWJWZARLRLPR-UHFFFAOYSA-H tricalcium bis(phosphate) Chemical compound [Ca+2].[Ca+2].[Ca+2].[O-]P([O-])([O-])=O.[O-]P([O-])([O-])=O QORWJWZARLRLPR-UHFFFAOYSA-H 0.000 description 1
- 238000009966 trimming Methods 0.000 description 1
- 238000011870 unpaired t-test Methods 0.000 description 1
- 230000003827 upregulation Effects 0.000 description 1
- 210000004509 vascular smooth muscle cell Anatomy 0.000 description 1
- 238000005406 washing Methods 0.000 description 1
Classifications
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
- A61K31/33—Heterocyclic compounds
- A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
- A61K31/41—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having five-membered rings with two or more ring hetero atoms, at least one of which being nitrogen, e.g. tetrazole
- A61K31/42—Oxazoles
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
- A61K31/33—Heterocyclic compounds
- A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
- A61K31/435—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom
- A61K31/47—Quinolines; Isoquinolines
- A61K31/4709—Non-condensed quinolines and containing further heterocyclic rings
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
- A61K31/33—Heterocyclic compounds
- A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
- A61K31/495—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with two or more nitrogen atoms as the only ring heteroatoms, e.g. piperazine or tetrazines
- A61K31/498—Pyrazines or piperazines ortho- and peri-condensed with carbocyclic ring systems, e.g. quinoxaline, phenazine
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
- A61K31/33—Heterocyclic compounds
- A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
- A61K31/495—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with two or more nitrogen atoms as the only ring heteroatoms, e.g. piperazine or tetrazines
- A61K31/505—Pyrimidines; Hydrogenated pyrimidines, e.g. trimethoprim
- A61K31/519—Pyrimidines; Hydrogenated pyrimidines, e.g. trimethoprim ortho- or peri-condensed with heterocyclic rings
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
- A61K31/33—Heterocyclic compounds
- A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
- A61K31/495—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with two or more nitrogen atoms as the only ring heteroatoms, e.g. piperazine or tetrazines
- A61K31/505—Pyrimidines; Hydrogenated pyrimidines, e.g. trimethoprim
- A61K31/519—Pyrimidines; Hydrogenated pyrimidines, e.g. trimethoprim ortho- or peri-condensed with heterocyclic rings
- A61K31/52—Purines, e.g. adenine
- A61K31/522—Purines, e.g. adenine having oxo groups directly attached to the heterocyclic ring, e.g. hypoxanthine, guanine, acyclovir
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
- A61K31/33—Heterocyclic compounds
- A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
- A61K31/53—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with three nitrogens as the only ring hetero atoms, e.g. chlorazanil, melamine
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P9/00—Drugs for disorders of the cardiovascular system
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P9/00—Drugs for disorders of the cardiovascular system
- A61P9/06—Antiarrhythmics
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Public Health (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- Cardiology (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Heart & Thoracic Surgery (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
- Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
- Acyclic And Carbocyclic Compounds In Medicinal Compositions (AREA)
- Organic Low-Molecular-Weight Compounds And Preparation Thereof (AREA)
- Saccharide Compounds (AREA)
- Heterocyclic Carbon Compounds Containing A Hetero Ring Having Oxygen Or Sulfur (AREA)
Abstract
<B>COMPOSTOS PATA TRATAMENTO DE FIBRILA.ÇçO AURICULAR<D>A presente invenção se refere a antagonistas do receptor de adenosina A~ 2A~, de utilidade na preparação de medicamentos contra fibrilação auricular em mamíferos, incluindo os seres humanos. Foi descoberto que o receptor de adenosina A2A está presente nos cardiomiácitos auriculares humanos e participa nos mecanismos patológicos fundamentais da fibrilação auricular. Uma vantagem de se utilizar os antagonistas de A~ 2A~ em relação a outros agentes conhecidos na técnica é que os antagonistas de A2A são especificamente dirigidos a pacientes com fibrilação auricular.
Description
"COMPOSTOS PATA TRATAMENTO DE FIBRILAÇÃO AURICULAR"
A presente invenção está correlacionada ao campoda medicina humana e veterinária e, especificamente, acompostos para o tratamento de doenças cardiovasculares, emparticular, para o tratamento de fibrilação auricular.Estado da Técnica
A fibrilação auricular é a arritmia cardíaca amais comum e está substancialmente associada com amorbidade e a mortalidade. Sua incidência e predominânciaestão aumentando e representam um crescimento no pesoclínico e econômico (a predominância atual é de 2% dapopulação geral). Além dos sintomas clínicos graves, taiscomo, palpitação, vertigem, dispnéia e outros, a fibrilaçãoauricular é o principal fator de risco de derrame isquêmicona população de mais de 75 anos de idade. Além disso, afibrilação é responsável por 5% das admissões hospitalarespor doenças cardiovasculares. Em aproximadamente 90% doscasos, a fibrilação auricular ocorre na presença de outrasdoenças cardíacas, como a doença cardíaca hipertensiva, aparada cardíaca congestiva ou as doenças das válvulascardíacas. Em somente 10% dos casos, a fibrilação auricularocorre na ausência de anomalias cardíacas (fibrilaçãoauricular do "lone") . Três formas da fibrilação auricularpodem ser diferenciadas: (1) fibrilação auricularparoxística, caracterizada por episódios próprios dafibrilação auricular com durações que variam de segundos adias; (2) fibrilação auricular persistente, que duraindefinidamente, até ser cessada por intervenções médicas;(3) fibrilação auricular permanente, que não pode serrevertida por cardioversão farmacológica ou elétrica.
Estudos têm mostrado que a fibrilação auricularresulta de múltiplas microondas elétricas reentrantes, quese movem aleatoriamente em torno da auricula. Estasmicroondas são iniciadas pelos disparadores elétricos,situados geralmente nas extensões miocárdicas, que seestendem da auricula esquerda até próximo de 5-6 cm dasveias pulmonares. Uma vez iniciada a fibrilação auricular,são produzidas mudanças na auricula (remodelação auricular)que afetam as suas propriedades elétricas, mecânicas emetabólicas, responsáveis pela persistência da arritmia. Ocontrole da taxa ventricular na presença de fibrilaçãoauricular é elevado e se tal controle não puder serreduzido com tratamento médico, irá ocorrer uma dilataçãoventricular e prejuízo da função sistólica, que se conhece,geralmente, como taquicardiomiopatia. O acidente vascularcerebral ("derrame") e o tromboembolismo constituem a causaprincipal da mortalidade e morbidez associadas com afibrilação auricular e a base patofisiológica desta é umestado protrombótico ou de hipercoagulação em associaçãocom anomalias da circulação sangüínea (por exemplo, estaseauricular) e de dano endotelial ou endocárdico.
Como em outras sub-especialidades na cardiologia,progressos importantes foram feitos no diagnóstico e notratamento de arritmias cardíacas durante as últimas quatrodécadas. Apesar de muitos avanços, a cura real de arritmiascardíacas e a prevenção da morte arritmica súbita ocorremem uma minoria de pacientes. Hoje em dia, a terapia dafibrilação auricular abrange a redução de sintomascorrelacionados à fibrilação auricular, a prevenção decomplicações tromboembólicas, e o término da arritmiaquando isto é possível.
Em geral, existem duas abordagens no enfoque dotratamento da fibrilação auricular: a) controle da arritmiaem si; e b) redução do risco tromboembólico (consultar,M.B. Iqbal e outros, "Recent developments in atrialfibrilation"; British Medicai Journal, 2005, Vol. 330, pp.238-43). 0 controle da arritmia é dirigido para o controledo ritmo (restauração e manutenção do ritmo sinusal) e ocontrole da velocidade. Farmacologicamente, o controle doritmo e da velocidade se realiza com fármacosantiarrítmicos (agentes antiarrítmicos de classe I e III).Exemplos destes que são usados atualmente incluem,flecainida, propafenona, amiodarona, dofetilida, ibutilidae sotalol. 0 controle do ritmo e da velocidade por meiosnão-farmacológicos se realiza com cardioversão elétrica,marca-passos auriculares, desfibrilador auricularimplantável, ablação de cateter de radiofreqüência eprocedimento cirúrgico de Maze.
A redução do risco tromboembólico e assim, aprevenção de derrame, é de importância capital naestratégia do tratamento. Farmacologicamente, a aspirina ea varfarina são recomendados para a maioria dos pacientes,para prevenir a formação de trombos auriculares e deepisódios tromboembólicos. Os dados apresentados nasexperimentações clinicas com pacientes de risco elevadomostram que a varfarina é melhor que a aspirina para evitarderrames, porém, o risco de hemorragia principalmente comvarfarina é de duas vezes daquele com aspirina. Em qualquercaso, o tratamento à base de anticoagulante precisa serindividualizado com base na idade, na co-morbidez e nascontra-indicações. A redução do risco tromboembólicomediante procedimentos não-farmacológicos se consegueatualmente através da obliteração do apêndice auricularesquerdo ou através de cateter (procedimento em fase depesquisa).
Pesquisas recentes têm destacado novas abordagenspara as estratégias de tratamento farmacológico e não-farmacológico. Os agentes mais promissores são osinibidores da enzima conversora de angiotensina (ACE) e osagentes bloqueadores dos receptores de angiotensina II. Osinibidores de protease, fosfatase com suficienteseletividade e especificidade ou os antioxidantes, podemigualmente oferecer estratégias terapêuticas novas parareduzir ou inverter as mudanças estruturais, a dilataçãoauricular e a disfunção contráctil. Entretanto, o problemado tratamento da fibrilação auricular está ainda longe deum resultado satisfatório.
Divulgação da Invenção
Os presentes inventores encontraram um grupo bemconhecido de compostos farmacêuticos, a saber, osantagonistas do receptor da adenosina A2a, de utilidade paraa preparação de medicamentos contra a fibrilação auricularem mamíferos, incluindo os seres humanos.
A invenção se originou da surpreendente descobertade que o receptor da adenosina A2a está presente noscardiomiócitos da aurícula humana e participa nosmecanismos patológicos fundamentais da fibrilaçãoauricular. Em particular, os presentes inventoresencontraram que a expressão da espécie homodimérica doreceptor de adenosina A 2A, que é a espécie funcional namembrana plasmática, está supra-regulada nos pacientes comfibrilação auricular. Experimentos eletrofisiológicosmostraram que a ativação do receptor de adenosina A2A emmiócitos auriculares destes pacientes conduz a aumentosmediados pela proteína cinase-A de liberações espontâneasde cálcio do retículo sarcoplásmico, medidas como ondas docálcio.
Além disso, utilizando duas diferentes abordagensexperimentais (captação de imagens de cálcio por técnicaconfocal e técnica de sujeição de emplastro), os presentesinventores encontraram que os antagonistas do receptor daadenosina A2a reduzem a freqüência elevada da onda de cálcioencontrada na fibrilação auricular. De fato, osantagonistas do receptor da adenosina A2a não apenasrevertem o efeito estimulador do agonista nas ondas decálcio, como também reduzem a freqüência basal da onda decálcio. Tomados juntos, estes resultados sugerem que umadesrregulação mediada pelo receptor de adenosina A2a dosfluxos de cálcio intracelular contribui para a complexaremodelação elétrica da auricula que fibrila. Estes fatostransformam antagonistas do receptor da adenosina A2a emagentes terapêuticos seletivos para tratamento dafibrilação auricular.
Anteriormente, e na forma do estudo mais próximoda pesquisa, os inventores tinham descrito que somente osmiócitos auriculares direitos isolados de pacientes comepisódios da fibrilação auricular exibiam uma liberaçãoespontânea mais freqüente de Ca2+ do reticulo sarcoplásmicodo que os miócitos de pacientes livres desta arritmia(consultar, L. Hove-Madsen e outros, "Atrial fibrillationis associated with increased spontaneous calcium releasefrom the sarcoplasmic reticulum in human atrial myocites";Circulation, 2004, vol. Setembro, pp. 1358-63).
Conseqüentemente, a presente invenção se refere aouso de um antagonista do receptor da adenosina A2A para apreparação de um medicamento para a prevenção e/outratamento da fibrilação auricular em um mamífero,incluindo um ser humano. Daqui em diante, o termo"antagonista do receptor de adenosina A2a" será chamado de"antagonista de A2a" e o termo "receptor de adenosina A2A"de "receptor A2A". Este aspecto da invenção podealternativamente ser formulado como um método para aprevenção e/ou tratamento da fibrilação auricular,antagonizando os receptores de A2a, cujo método compreende aadministração a um mamífero (preferivelmente um serhumano), com tal necessidade, de uma quantidade efetiva deum antagonista de A2a junto com quantidades apropriadas dediluentes ou veículos aceitáveis.
Uma vantagem de se usar antagonistas de A2a comrelação a outros agentes conhecidos na técnica, é que osantagonistas de A2a são dirigidos especificamente apacientes com fibrilação auricular. Assim, a expressão dosreceptores diméricos funcionais de A2a é baixa nos pacientescom tamanho de aurícula normal e sem história prévia defibrilação auricular, enquanto que a expressão de espéciesdiméricas do receptor é fortemente supra-regulada nospacientes com fibrilação auricular. Ao contrário, outrosagentes atualmente empregados, atuam de forma mais amplasobre receptores ou canais que regulam de forma críticamúltiplas funções em uma variedade de células. Assim, osantagonistas de cálcio não apenas reduzem a sobrecarga docálcio mediante inibição dos canais de cálcio tipo L, comotambém reduzem a contração cardíaca. Além disso, os canaisde cálcio tipo L também regulam a função do músculo liso edas células secretoras, com os conseqüentes efeitossecundários indesejados dos antagonistas de cálcio.
Receptor A2a
A adenosina é um nucleosídeo de purina produzidopor todas as células metabolicamente ativas do corpo. Aadenosina exerce seus efeitos através de quatro subtiposdiferentes do receptor de superfície celular: A1, A2A, A2B eA3, que pertencem à superfamília de receptores acoplados àproteína G. O par A1 e A3 se acopla à proteína inibidora G,enquanto que o par A2a e A2b se acopla à proteínaestimuladora G. Os receptores de A2a são encontradosprincipalmente no cérebro, tanto nos neurônios como nascélulas gliais (nivel máximo no estriado e núcleoaccumbens, nível médio a elevado no bulbo olfatório eregiões do hipotálamo e hipocampo). No estriado, o receptorA2A regula a liberação e a função dos neurotransmissores(consultar, H. Kase e outros, "Progress in pursuit oftherapeutic A2a antagonists: the adenosine A2A receptorselective antagonist KW 6002: research and developmenttoward a novel nondopaminergic therapy for Parkinson'sdisease"; Neurologia, 2003, Vol. 61, pp. 97-100). Nostecidos periféricos, sabe-se que os receptores de A2a seencontram presentes nas plaqueta, neutrófilos, baço, timo,células endoteliais e vasculares do músculo liso, onde seinduz uma potente vasodilatação coronária que permite aavaliação da perfusão miocárdica nos pacientes com doençacardíaca coronária (consultar,, Z. Gao e outros, "Novelshort-acting A2a adenosine receptor agonists for coronaryvasodilatation: inverse relationship between affinity andduration of action of A2a agonists"; J. Pharmacol. Exp.Ther., 2001, Vol. 298, pp. 209-18). Entretanto, o receptorA2a, até o momento, nunca foi localizado em cardiomiócitosde aurícula humana.
Compostos Adequados para Tratamento da Fibrilação Auricular
Em geral, um antagonista é uma molécula que seliga ao receptor sem ativar o receptor. Compete com osligandos endógenos e/ou o(s) substrato(s) para os locais deligação do receptor e, assim, inibe a habilidade doreceptor de traduzir um sinal intracelular em resposta àunião do ligando endógeno. Um antagonista funciona dediversas maneiras. Pode se ligar ou seqüestrar a adenosinacom suficientes afinidade e especificidade, para interferirsubstancialmente, bloquear ou, de outro modo, impedir aligação da adenosina ao receptor A2a, desse modo, inibindo,suprimindo ou causando a cessação da atividade biológicamediada pela adenosina.
0 receptor A2a nos cardiomiócitos e na ausência deligando endógeno, apresenta uma atividade basal. Estaatividade pode se dever a uma atividade constitutiva doreceptor ou à ativação do receptor pela adenosina endógena.Nesta situação, o tratamento da fibrilação auricular podeser realizado reduzindo esta atividade basal mediante usode um antagonista ou um agonista inverso. Alguns dosantagonistas de A2a da invenção podem apresentar agonismoinverso.
De acordo com a localização conhecida e a funçãodo receptor A2A, os antagonistas de A2a têm sido usados atéaqui contra a doença de Parkinson e outras doenças doSistema Nervoso Central (SNC) (esquizofrenia, demênciasenil, como a doença de Alzheimer, psicose de origemorgânica, etc.). Entre essas doenças, a principal é adoença de Parkinson.
Cada antagonista de A2a é contemplado para serutilizado dentro das finalidades da presente invenção.Muitos compostos diferentes foram investigados intensamentecomo antagonistas de A2ht que poderiam ser classificados emduas grandes famílias: derivados do xantina e heterociclosnão derivados de xantina.
Em uma modalidade particular da invenção, oantagonista de A2a é um derivado de xantina ou um salfarmaceuticamente aceitável do mesmo. Diferentessubstituintes em diversas posições, como também, análogosazo- ou desazo- ou outros análogos heterocíclicos do anelda purina ou derivados/análogos tri- ou tetracíclicos,podem ter atividade antagonistica similar de A2a. Entre osderivados do xantina, a estrutura preferida comum a algunscompostos é a estrutura de 1,3,7-trialquil-8-estiril-xantina. Em uma modalidade preferida, o antagonista de A2a éum composto selecionado do grupo que consiste deteobromina, conhecido como DMPX (fórmula 1) ; KF 17 837(fórmula 2); istradefilina, conhecido como o KW 6002(fórmula 3); p-sulfoestiril-DMPX (fórmula 4); BS-DMPX(fórmula 5); MSX-2 (fórmula 6); CSC (fórmula 7); "amina dexantina congênere" (XAC, fórmula 8); e MSX-3.
Em uma modalidade mais preferida, o antagonista deA2a é KW 6002. Este composto está agora sob ensaios da faseclínica III para a doença de Parkinson. Em uma outramodalidade preferida, o antagonista de A2a é MSX-2. Em umaoutra modalidade preferida, o antagonista de A2a é MSX-3, oéster de ácido fosfórico de MSX-2, ou ainda uma pró-drogade MSX-2.<formula>formula see original document page 12</formula>
Outros compostos de xantina conhecidos porapresentar atividade antagonística ao receptor A2a sãodescritos, por exemplo, nas Patentes U.S. Nos. 5.484.920,5.587.378, 5.543.415 e na Patente EP 1016407A1.
Em uma outra modalidade particular da invenção, oantagonista de A2a é um heterociclo não derivado de xantina.Os antagonistas típicos de adenosina A2a não derivados dexantina podem ser derivados da adenina e representarderivados da adenina no sentido mais amplo, incluindo oscompostos mono-, di-, tri- e tetracíclicos contendodiversos substituintes. Foram identificados adicionaiscompostos heterocíclicos não derivados da adenina, quepossuem atividade antagonistica de A2a. São conhecidosalguns compostos de 2-aminopiridina que exibem antagonismopara o receptor A2a (por exemplo, citados nos documentos depatentes WO 02/14282, WO 01/25210), e também são conhecidosalguns compostos de 9-aminopirimidina (por exemplo, citadosna Patente U.S. No. 2001/0027196).
Numa modalidade preferida, o antagonista de A2a éselecionado do grupo que consiste de SCH 58261 (fórmula 9);ANR-8 2 (fórmula 10); ZM 241385 (fórmula 11); SCH 63390(fórmula 12), CGS 15943 (fórmula 13), 8FB-PTP (fórmula 14);VER-6623 (também conhecido como V2006, fórmula 15); (-)R,S-mefloquina (fórmula 16); e 7FB-PTP (fórmula 17). Em umamodalidade mais preferida, o antagonista de A2a entre ogrupo de compostos não derivados de xantina é VER-6623.
Outros compostos preferidos como antagonistas deA2a incluem o derivado do pirazolopirimidina de fórmula 18;o derivado do triazoloquinoxalina de fórmula 19; o derivado9-substituído de 2-amino-6-furil-adenina de fórmula 20; eos derivados de triazolotriazina de fórmulas 21, 22 e 23.<formula>formula see original document page 14</formula><formula>formula see original document page 15</formula><formula>formula see original document page 16</formula>
Outros antagonistas de A2A de triazolopirimidinasão divulgados, por exemplo, nos documentos de patentes WO2004/029056, WO 95/01356, U.S. 5.565.460, WO 97/05138, WO98/52568, WO 01/92264 e PCT/US 02/32630. Especificamente,os compostos substituídos de pirazol[4,3-e]-1,2,4-triazolo-[1,5-c]pirimidina são descritos no documento de patente WO2005/054245, e Patentes U.S. Nos. 2004/220194 e2003/212059.
Outros exemplos específicos de antagonistasapropriados de A2a incluem os compostos divulgados nasseguintes patentes, pedidos de patente e artigos: WO95/01356, U.S. No. 6.630.475, U.S. No. 5.935.964, WO03/032996, WO 03/048165, WO 03/048164, WO 03/048163, WO2005/042500, WO 2005/058883, WO 2005/040151, WO2005/039572, WO 2004/092177, U.S. No. 2004/138235, WO2004/019949, WO 02/14282, WO 2004/016605, WO 03/082873,U.S. No. 5.484.920, U.S. No. 5.703.085, WO 92/06976, WO94/01114, U.S. No. 5565460, WO 98/42711, WO 00/7201, WO99/43678, WO 99/26627, WO 01/92264, WO 99/35147, WO00/13682, WO 00/13681, WO 00/69464, WO 01/40230, WO01/02409, WO 01/02400, EP 1054012, WO 01/62233, WO01/17999, WO 01/80893, WO 02/14282, WO 01/97786, WO01/16134, WO 00/73307, U.S. No. 2005/043315, U.S. No.2003/149060, Baraldi e outros, "Recent developments in thefield of A2a and A3 adenosine receptor antagonists",European Journal of Medicinal Chemistry, 2003, vol. 38, pp.367-82; E. Ongini, e outros, "Selective adenosine A2Areceptor antagonists", Farmaco, 2001, vol. 56, pp. 87-90;C.E. Müller e outros, "A2a Adenosine receptor antagonists -future drugs for Parkinson's disease?", Drugs of theFuture, 2000, vol. 25, pp. 1043-52; L.J. Knutsen e outros,"KW-6002 (Kyowa Hakko Kogyo) , Curr. Opin. Investig. Drugs,2001, vol. 2, pp. 668-73; B. Cacciari e outros, "Medicinalchemistry of A2a adenosine receptor antagonists", Curr. Top.Med. Chemf 2003, vol. 3, pp. 403-11; G. Yao e outros,"Synthesis of alkyne derivatives of novel triazolopyrazineas A2a adenosine receptor antagonists", Bioorg. Med. Chem.Lett., 2005, vol. 15, pp. 511-5; E. Kiselgof e outros,derivatives of 6-(2-furanyl)-9H-purin-2-amine as A2aadenosine antagonists", Bioorg. Med. Chem. Lett., 2005,vol. 15, pp. 2119-22; S.M. Weiss e outros, "Discovery ofnonxanthine adenosine A2a receptor antagonists for thetreatment of Parkinson's disease", Neurology, 2003, vol. 61(Supp. 6), pp. S101-6; C.B. Vu e outros, "Novel diaminoderivatives of [ 1,24]triazolo[1,5-a] [1,3,5]triazine aspotent and selective adenosine A2a receptor antagonists", J.Med. Chem., 2005, vol. 48, pp. 2009-18; C.B. Vu e outros,"Piperazine derivatives of [ 1,2,4]triazolo[1, 5-a] [1,3,5]triazine as potent and selective adenosine A2areceptor antagonists", J. Med. Chem., 2004, vol. 47, pp.4291-9.
Um especialista versado na técnica saberá se umcomposto é um bom antagonista de A2a para a finalidade dainvenção. Por exemplo, existem na técnica métodosapropriados para se avaliar se um composto é um bomantagonista de A2a. Um exemplo é o método baseado em umensaio de ligação de radioligando descrito nas seções[0226] - [0240] do Pedido de Patente 2004/0138235.
Prefere-se, para o tratamento da fibrilaçãoauricular, que o antagonista de A2A seja seletivo para oreceptor A2a. Todos os antagonistas de A2a descritos acimasão seletivos para o receptor A 2A, mas o grau deseletividade é diferente entre eles. As seletividades podemtambém diferir um pouco entre diferentes espécies (porexemplo, ratos, seres humanos).
Os antagonistas de A2a são preparados por métodosconhecidos, conforme descrito nas patentes e nos pedidos depatentes mencionados.
Composições Farmacêuticas e Administração
Em termos de tratamento, uma quantidade efetiva serefere àquela quantidade de ingrediente ativo que ésuficiente para proporcionar um resultado clinico benéficoou desejado: para aliviar, melhorar, estabilizar, reverterou retardar a progressão da doença ou distúrbio, oureduzir, de outra maneira, as conseqüências patológicas dadoença ou distúrbio. A quantidade efetiva é determinadageralmente por um médico, caso a caso.Conquanto que o composto ativo, para uso de acordocom a invenção em terapia, possa ser administrado sob aforma de um composto químico bruto, prefere-se introduzir oingrediente ativo, opcionalmente, sob a forma de um salfisiologicamente aceitável em uma composição farmacêutica,juntamente com um ou mais adjuvantes, excipientes,veículos, tampões, diluentes e/ou outros auxiliaresfarmacêuticos habituais. Os componentes podem seradministrados em doses únicas ou doses múltiplas, porquaisquer meios de administração aceitáveis de agentes deutilidade ou agentes similares, incluindo as rotas retal,oral, intranasal e transdérmica, por injeção intra-arterial, intravenosa, intraperitoneal, parenteral,intramuscular, subcutânea, oral, tópica, como inalante, ouatravés de um dispositivo impregnado ou revestido, tal comoum stent, por exemplo, ou um polímero de formato cilíndricointroduzido na artéria.
Um modo de administração preferido é o modo pelavia parental, particularmente, por injeção. As formas deadministração por injeção incluem as suspensões aquosas ouoleosas, ou as emulsões, assim como, as soluções aquosasestéreis. A administração oral é uma outra via deadministração preferida. A composição farmacêutica pode seapresentar sob a forma de comprimidos, pílulas, pós,elixires, suspensões, emulsões, soluções, xaropes,aerossóis, cápsulas, etc.
As composições da invenção podem ser formuladaspara proporcionar uma rápida liberação, sustentada ou deação retardada do ingrediente ativo, após a administraçãoao paciente, mediante uso de procedimentos conhecidos natécnica. Os sistemas de liberação controlada de fármacopara administração oral incluem sistemas de bomba osmóticae sistemas de dissolução que contêm reservatóriosrevestidos de polímero ou formulações com uma matriz defármaco-polimero. Uma outra formulação para uso nos métodosda presente invenção emprega dispositivos de liberaçãotransdérmica ("emplastros"). Esses emplastros transdérmicospodem ser usados para proporcionar a infusão contínua oudescontínua dos compostos em quantidades controladas.
As composições são formuladas, preferivelmente, emuma forma de dosagem única. A dosagem depende da natureza eda gravidade da doença, e sua determinação se faz de acordocom os critérios do médico.
A menos que definidos de outra maneira, todos ostermos técnicos e científicos usados têm o mesmosignificado que o comumente compreendido por umespecialista na matéria a que esta invenção pertence.
Durante toda a descrição e as reivindicações, a palavra"compreende" e suas variações, como "compreendendo", nãosão pretendidas de excluir outras características,aditivos, componentes, ou etapas técnicas. 0 resumo dopedido de patente é aqui incorporado como referência. Osobjetivos, vantagens e as características adicionais dainvenção tornar-se-ão evidentes para os especialistasversados na técnica após o exame da presente descrição oupoderão ser aprendidos pela prática da presente invenção.Os seguintes exemplos e desenhos são fornecidos a titulo deilustração e não pretendidos de ser limitativos da presenteinvenção.
Breve Descrição dos Desenhos
Figura 1: Supra-regulação da expressão do receptor A2a nospacientes com fibrilação auricular.
Figura 2: A estimulação por agonista do receptor A2A incluiem pacientes com fibrilação auricular, um aumentodependente de PKA da liberação espontânea do cálcio doreticulo sarcoplásmico.
Figura 3: Os antagonistas de A2a reduzem a liberaçãoespontânea basal de cálcio do reticulo sarcoplásmico empacientes com fibrilação auricular. Experimentos quemostram INCx espontâneo em um potencial mantido a -80 mV.
Descrição Detalhada de Modalidades ParticularesDescrição Detalhada dos Desenhos
A figura Ia mostra miócitos frescos isolados daauricula direita humana, que foram duplamente tingidos como anti-receptor A2a (quadros 1, 4, 7 e 10) e anti-miosina(2), anti-a-actinina (5), anti-connexina-43 (8) ou anti-receptor rianodina (anti-RyR) (11). A superposição dasimagens de dupla imunofluorescência (quadros 3, 6, 9 e 12)revelou a co-localização do receptor A2a com α-actinina e adistribuição sobreposta do receptor A2a com o receptor derianodina (RyR).
A figura IB mostra membranas celulares de célulasHEK transfectadas transitoriamente com o receptor humano deA2a (controle positivo, C+) e membranas auriculares decoração humano obtidas de indivíduos com ritmo sinusal(SINUS) ou com fibrilação auricular (AF), resolvidas porSDS-PAGE e immunoblot, usando um anticorpo de coelho anti-receptor A2a- "Di" significa dímero e "Mo" significamonômero.
A figura IC mostra a Varredura ou EscaneamentoDensitométrico Relativa (RDS) do immunoblot do Figura 1B. Aquantidade total do receptor A2A (monômero mais dímero) émostrada em barras pretas. As quantidades relativas demonômero do receptor A2a (barras brancas) e de dímero(barras cinzentas) são normalizadas usando a soma total doreceptor A2a (dímero mais monômero) em cada raia.
Na figura 2A, o INcx espontâneo foi medido com opotencial da membrana mantido em -80 mV antes (controle),durante (CGS) e após (lavagem, W) da exposição de ummiocardiócito em 200 nM de CGS 21680. As barras em escalahorizontais e verticais correspondem, respectivamente, a 30s e 100 pA.
A figura 2B mostra a dependência em relação aotempo do efeito estimulador de CGS 21680 no número decorrentes espontâneas da troca Na-Ca (contadas como eventosem cada varredura de 30 s, e/s) . A linha grossa situadasobre as barras indica o período de aplicação de CGS 21680.
A figura 2C mostra como o antagonista de A2A, ZM241385 (1 μΜ) foi capaz de reverter o efeito estimulador de200 nM de CGS 21680 sobre o INCx espontâneo. As barras emescala horizontais e verticais correspondem,respectivamente, a 30 s e 100 pA.A figura 2D é um resumo do efeito de CGS noscardiomiócitos de 8 pacientes de controle (sem fibrilaçãoauricular) e 11 pacientes com fibrilação auricular. 0 testede T de emparelhamento foi usado para avaliar o efeito deCGS 21680 e os valores de ρ são indicados sobre as barras.IncxF significa a freqüência de Incx-
A figura 2E mostra que a adição 10 μΜ de H-89eliminou o efeito estimulador de 200 nM de CGS 21680 em 5pacientes. O teste ANOVA mostra um efeito significativo dotratamento na freqüência de ondas (p=0,001) e um pós-testeproporcionou um valor de p=0,03 para CGS versus o controle,p=0,002 para CGS versus CGS+H-89 e p=0,05 para CGS+H-89versus o controle.
Na figura 3A, o antagonista de receptor A2a, SCH58261 (50 nM) causou uma redução reversível da freqüênciaespontânea INcx nas amostras de pacientes com fibrilaçãoauricular. As barras em escala horizontais e verticaiscorrespondem, respectivamente, a 30 s e 100 pA.
Na figura 3B, os antagonistas de A2A reduzem afreqüência de ondas de cálcio espontâneas (WF), medida porcaptação de imagens de cálcio por procedimento confocal(quadro esquerdo, n=6) ou pela técnica de sujeição deemplastro (quadro direito, n=7) . Os efeitos de 50 nM de ZM241385 e de SCH 58261 foram comparados e agrupados. Osignificado estatístico usando o teste T não-emparelhadopara experiências de procedimento confocal e o teste T comemparelhamento para experiências de procedimento desujeição de emplastro é mostrado sobre as barras.Expressão e Localização do Receptor A2A na Aurícula HumanaDireita
A presença do receptor A2A em cardiomiócitos daauricula direita humana foi investigada mediante oprocedimento de immunoblot. Os resultados mostraram que oreceptor A2A estava presente na aurícula humana direita eque tanto a forma monomérica, como a forma dimérica, sãoexpressas neste tecido, sendo a forma dimérica minoritárianas amostras provenientes de aurícula com ritmo sinusal. Alocalização do receptor A2a no miocárdio auricular foiestudada por microscopia confocal em amostras tomadas emdobro com anticorpos dirigidos contra o receptor A2A,miosina, α-actinina, connexina-43 ou o receptor derianodina (RyR). O receptor A2a foi expresso de acordo comum padrão de bandas transversais ao eixo da fibramiocárdica e se co-localizou ao nível da linha Z dosarcômero com a aproteína de cito-esqueleto de a-actinina.A distribuição do receptor A2A foi quantitativamente similarnas amostras dos pacientes com e sem fibrilação auricular.
Supra-regulação da Expressão do Receptor A2A em Pacientescom Fibrilação Auricular
Os miócitos auriculares isolados mantiveram opadrão de bandas do receptor A2a, assim como, a co-localização com α-actinina e a distribuição sobreposta como RyR, manifestada nas amostras de tecido auricular(conforme a figura 1A). Não se observaram diferenças noscardiomiócitos de pacientes com e sem fibrilação auricular(dados não mostrados). Os níveis de proteínacorrespondentes ao receptor A2a, medidos pelo procedimentode immunoblot, foram marcadamente superiores nos pacientescom fibrilação auricular (conforme as figuras 1B-1C) e,interessantemente, a espécie dimérica do receptor A2a, que éa forma funcional presente na superfície celular, estavanotadamente elevada na fibrilação auricular (conforme afigura 1C). Não se observaram diferenças significativas nosvasos sangüíneos. Conseqüentemente, estes resultados, nãoapenas demonstraram pela primeira vez a expressão doreceptor A2R em miócitos auriculares humanos, como, também,a sua supra-regulação, principalmente na formahomodimérica, em pacientes com fibrilação auricular.
Estimulação por Agonistas dos Receptores R2r Induz umAumento Dependente de PKA na Liberação Espontânea do Cálciodo Retículo Sarcoplásmico (SR) em Pacientes com FibrilaçãoAuricular
0 efeito dos agonistas do receptor R2r naliberação espontânea de cálcio do SR foi analisado emmiócitos auriculares isolados de pacientes com ritmosinusal e em pacientes com fibrilação auricular. Foramanalisadas tanto a liberação local do cálcio não-propagado(faíscas de cálcio) como a liberação regenerativa do cálciodo SR (ondas de cálcio). A pré-incubação com o agonista CGS21680 do receptor R2r (200 nM) , aumentou o número de ondasde cálcio nos pacientes com fibrilação auricular, mas nãonaqueles sem a arritmia.
Para determinar se o efeito do CGS 21680 naliberação espontânea de cálcio do SR é secundário a umefeito no potencial da membrana, foi utilizada a técnica desujeição de emplastro, para manter o potencial da membranaem -80 mV. Isto não impediu que o CGS 21680 aumentasse deforma reversível o número de ondas de liberação espontâneade cálcio, medidas como correntes de troca Na-Ca (Incx)ativada por elas (conforme as figuras 2A e 2B) . Certamente,esta abordagem confirmou o efeito estimulador significativodo CGS 21680 nos pacientes com fibrilação auricular(conforme a figura 2D) . Conseqüentemente, o aumento naliberação espontânea de cálcio do SR, induzido pelo CGS21680 é devido a uma regulação dependente do receptor A2a naatividade de RyR. O efeito específico de CGS 21680 foirevertido pelos dois antagonistas seletivos de A2a, ZM241385 (conforme a figura 2C) e SCH 58261.
Uma vez que o receptor A2A está acoplado àproteínas Gs, sua ativação mediada por agonistas deveaumentar os níveis de cAMP, que, por sua vez, leva àativação de PKA e à fosforilação de RyR. Para testar se oreceptor A2a exerce seu efeito através de uma ativação dePKA mediada por cAMP, foi utilizado o inibidor seletivo dePΚΑ, H-89. O efeito estimulador de CGS 21680 nos miócitosdos pacientes com fibrilação auricular foi eliminado peloH-89 (conforme a figura 2E), confirmando que a regulação daliberação espontânea de cálcio do SR dependente do receptorA2a é, de fato, mediada pela ativação de PKA. De maneirainteressante, o H-89 não somente eliminou o efeito de CGS21680, como também reduziu a liberação espontânea de cálcioem um nível significativamente inferior ao nível basalexistente antes da aplicação do CGS 21680. A análise dasondas e faíscas de cálcio mediante microscopia confocalconfirmou a dependência de PKA na liberação espontânea decálcio mediada pelo receptor A2a-
Bloqueio dos Receptors A2a Reduz o Nível Basal de LiberaçãoEspontânea de Cálcio do SR
A existência de um tono basal de cAMP em miócitosauriculares humanos foi reivindicada nos estudos damodulação neuro-hormonal de correntes de cálcio do tipo L.A observação dos inventores de que um agente bloqueador dePKA, o H-89, reduz a freqüência de ondas de cálcio abaixodo nível basal, deve ser interpretada como a existência deum tono basal de cAMP, dependente do receptor A2a, nosmiócitos auriculares humanos. Em conformidade com isto, osantagonistas seletivos do receptor A2A, SCH 58261 ou ZM241385, aplicados à células de pacientes com fibrilaçãoauricular que mostram um elevado nível basal de liberaçãode cálcio do SR, reduziram significativamente a freqüênciadas ondas de cálcio medidas por microscopia confocal oupela técnica de sujeição de emplastro (conforme mostrado nafigura 3).
Amostras Humanas
Amostras de tecido cardíaco de um total de 54pacientes que se submeteram à cirurgia cardíaca foramusadas neste estudo. Embora as amostras de tecido auricularconsistissem de tecido que seria rejeitado normalmentedurante a cirurgia, a permissão para que as mesmas fossemusadas neste estudo foi obtida de cada paciente. 0 estudofoi aprovado pelo comitê ético do hospital de Sant Pau(Barcelona, Espanha).
Dezessete dos 54 pacientes tiveram uma história defibrilação auricular, enquanto os pacientes restantes seencontraram livres desta arritmia. Vinte e cinco pacientesnão tiveram nenhuma fibrilação auricular, mas apresentaramdilatação auricular esquerda (diâmetro da auricula esquerda> 40 milímetros). 0 número de pacientes usados na sérieexperimental específica é indicado quando pertinente. Ospacientes tratados com antagonistas de Ca2+ foram excluídosdo estudo. Uma outra medicação de paciente não foiconsiderada, caso pudesse influenciar significativamente osparâmetros medidos. Nos estudos imunoistoquímicos, seutilizou um total de 8 pacientes com fibrilação auricular(diâmetro da auricula esquerda: 53,8 ±6,8 mm). Quinze (15)pacientes sem dilatação auricular e nenhuma história defibrilação auricular serviram de controle (diâmetro daauricula esquerda: 36,5 ± 3,4 mm).
Anticorpos
Os anticorpos principais utilizados foram osseguintes: anticorpo policlonal VC21-Ab anti-receptor A2apurificado por afinidade; o VC21-Ab foi desenvolvido contraum peptídeo que corresponde ao segundo ciclo intracelulardo receptor A2a; anticorpo anti-receptor A2a de coelho (clonePA1-042, Affinity BioReagents, Golden, CO, USA); anticorpode rato anti-miosina muscular (clone NOQ7.5.4D, ChemiconInternational, Temecula, Califórnia, USA); anticorpo derato anti-a-actinina (clone EA-53, Sigma Aldrich ChemicalCo., St Louis, MO, USA); anticorpo de rato anti-connexina-43 (clone 2, Transduction Laboratories, Lexington, KY,USA) ; anticorpo anti-receptor de rianodina (clone C3-33,Calbiochem, San Diego, Califórnia, EUA). Os anticorpossecundários usados foram: IgG de cabra anti-rato conjugadocom ALEXAFLUOR 488® (1/1000); IgG de cabra anti-coelhoconjugado com TEXAS RED® (1/2000) (Molecular Probes,Eugene, OR, USA); IgG de cabra anti-coelho conjugado comperoxidase de rábano (1/60000) (Pierce Chemical Co., Rockford, IL, USA) e IgG do coelho anti-rato (1: 2000)(Dako, Glostrup, Dinamarca).
Obtenção de Miócitos
Os miócitos foram isolados de amostras de tecidoauricular humanas através do protocolo descrito previamente(consultar, L. Hove-Madsen e outros "Atrial fibrillation isassociated with increased spontaneous calcium release fromthe sarcoplasmic reticulum in human atrial myocytes",Circulation, 2004, Vol. 110, pp. 1358-63). Resumidamente,as amostras foram lavadas, cortadas em partes pequenas emuma solução livre de cálcio que continha 30 mM de monoximade butanodiona (BDM), e foram incubadas à temperatura de35°C em uma solução livre de Ca2+ que continha 0,5 mg/mL decolagenase (tipo Worthington - 2,318 u/mg) e 0,5 mg/mL deproteinase (tipo Sigma XXIV, 11 u/MG de sólido). Após 45minutos, o tecido foi removido da solução enzimática e ascélulas foram desagregadas na solução livre de Ca2+ com aajuda de uma pipeta de Pasteur. 0 tecido restante foidigerido (3x15 minutos) em um meio fresco, livre de cálcio,que continha 0,4 mg/mL de colagenase. As soluções quecontinham as células desagregadas foram centrifugadas em600 rpm durante 1 minuto, novamente suspensas na soluçãolivre de cálcio e o cálcio foi então adicionadogradualmente até uma concentração de 1 mM. Somente ascélulas alongadas com estrias transversais transparentes esem granulações foram usadas nos experimentos.
Controle Positivo: Cultura Celular e Transfecção
As células HEK-293 foram cultivadas em um meio daDulbecco's modificado por Eagle (DMEM, Sigma AldrichChemical Co.)· As células foram transfectadastemporariamente com o DNA que codifica o receptor A2A humano(consultar, M. Canais e outros "Adenosine A2A-dopamine D2receptor-receptor heteromerization: qualitative andquantitative assessment by fluorescence and bioluminescenceenergy transfer", J. Biol. Chem., 2003, Vol. 278, pp.46741-9) mediante precipitação com fosfato de cálcio. Ascélulas foram colhidas 24 ou 48 horas após a transfecção.Liberação Espontânea de Cálcio do SR
Os sinais de cálcio (faíscas e ondas de cálcio)foram detectados em células carregadas de fluo-3, usando ummicroscópio confocal de varredura a laser (Leica TCS SP2AOBS, Alemanha) . A solução experimental continha (em mM) :NaCl, 136; KCl, 4; NaH2PO4, 0,33; NaHCO3, 4; CaCl2, 2; MgCl2,1,6; HEPES, 10; glicose, 5; ácido pirúvico, 5 (pH = 7,4). Aemissão de fluorescência foi detectada entre 500 e 650 nm,com excitação em 488 nm atenuada para 1-5%. As faíscas eondas de cálcio foram medidas em condições de repouso,durante 2 χ 10,24 s, em uma velocidade de varredura de 1kHz. As faíscas de cálcio foram detectadas como um aumentona quantidade de sinal de uma seção de 3 μπι, através docentro de uma faísca de cálcio, sem nenhum aumentodetectável na seção de 3 μπι adjacente. Um incremento, naquantidade de sinal em duas ou mais seções de 3 μπιadjacentes foi considerado uma onda de cálcio. A amplitudede cada faísca de cálcio e sua vida média foramdeterminados a partir de um ajuste exponencial da fase dedecaimento do sinal transitório da faísca de cálcio. Afreqüência da faísca de cálcio foi determinada para cadauma das células e normalizada conforme o comprimento dacélula varrida.
Sujeição de Emplastro
A corrente de entrada transitória de intercâmbioNa-Ca associada às ondas de cálcio foi quantificada naconfiguração de emplastro perfurado, utilizando um softwarede controle de amplificador de sujeição de emplastro (EPC10, HEKA, Alemanha). A resistência da pipeta foi de 1,5-4ΜΩ. Os experimentos foram realizados à temperatura ambientee começaram quando a resistência do sistema se tornouestável e diminuiu para menos de 5 vezes da resistência dapipeta. A solução extracelular continha (em mM): NaCl, 127;tetraetilamônio (TEA), 5; HEPES, 10; NaHCO3, 4; NaH2PO4,0, 33; glicose, 10; ácido pirúvico, 5; CaCl2, 2; MgCl2, 1,8(pH = 7,4). A solução da pipeta continha (em mM) : ácidoaspártico, 109; CsCl, 47; Mg2ATP, 3; MgCl2, 1;Na2fosfocreatina, 5; Li2GTP, 0,42; HEPES, 10; e 250 μg/mL deanfotericina Β, (pΗ = 7,2). O agonista do receptor Α2Ά, CGS21860, os antagonistas ZM 241385 e SCH 58261, e o inibidorde proteína cinase A (PKA), H-89, foram dissolvidos em DMSOe mantiveram-se como soluções conservadas em estoque de 10mM. O teor de cálcio liberável por cafeína foi determinadopela exposição transitória das células em 10 mM de cafeína.A corrente de intercâmbio Na-Ca resultante foi convertidaem pmoles (10^18 mol) de cálcio liberado do SR, supondo umaestequiometria 3 Na+ : 1Ca2+ para o trocador Na-Ca.
Análise de Dados e Estatística
As experiências de determinação de cálcio por meiode técnicas eletrofisiológicas e de microscopia confocalforam realizadas sem conhecimento dos dados clínicos dospacientes. Foi feita a média das faíscas de Ca2+ e das ondasde Ca2+ quantificadas nas células do mesmo paciente. A menosque indicado em contrário, os valores médios de cadapaciente foram usados para a análise estatística e foramexpressos como média ± S.E.M. O conjunto de dados foitestado quanto à normalidade. O teste T de Student foiusado para avaliar se as diferenças eram estatisticamentesignificativas para cada efeito específico. O teste deANOVA foi usado para comparar os múltiplos efeitos e o pós-teste de Student-Newman-Keuls foi usado para avaliar osignificado de efeitos específicos.
Preparação da Membrana
As membranas foram obtidas por centrifugação apóso rompimento das células com um homogeneizador tipoPolytron (Kinematica, rotor PTA 20TS, nível de ajuste 5,três períodos de 15 s) em uma solução refrigerada em gelode sacarose 0,32 M que continha 5 mM de Tris-HCl (pH 7,4;tampão A) . Os restos celulares foram separados porcentrifugação a 1000 χ g durante 30 minutos à temperaturade 4°C (3500 rpm em um rotor 75Ti). O sobrenadante foicentrifugado a 26000 χ g durante 30 minutos à temperaturade 4°C (20000 rpm em um rotor 75Ti) e o resíduo foinovamente suspenso no tampão A, incubado à temperatura de37°C durante 30 minutos e centrifugado nas mesmascondições. O resíduo foi novamente suspenso em KCl 0,3 M,agitado à temperatura de 40C durante a noite, centrifugadoa 26000 χ g durante 30 minutos à temperatura de 4°C (20000rpm em rotor 75Ti) e lavado uma vez com o tampão A,conforme descrito acima. O resíduo final (fração damembrana) foi novamente suspenso em Tris-HCl 50 mM econgelado à temperatura de -80°C. A suspensão de membranasde células HEK transfectadas foi obtida conforme descritoanteriormente (consultar, C. Herrera, e outros, "AdenosineA2B receptors behave as an alternative anchoring protein forcell surface adenosine deaminase in lymphocytes andcultured cells", Mol. Pharmacol., 2001, Vol. 59, pp. 127-34). A proteína foi quantificada pelo método do ácidobicinconínico (Pierce Chemical Co.).
Eletroforese em gel e imunoblot As membranas de células humanas ou de células HEKtransfectadas transitoriamente foram tratadas com o tampãode SDS-PAGE (uréia, 8M; SDS, 2%; DTT, IOOmM; Tris, 375 mM;pH 6,8) com aquecimento à temperatura de 37°C durante 2horas e as proteínas foram decompostas por eletroforese emgel de poliacrilamida (10%). As proteínas foramtransferidas para membranas de PVDF usando um sistema detransferência semi-seco e o procedimento de immunoblot serealizou com o anticorpo indicado em cada caso e,subseqüentemente, com IgG de cabra anti-coelho conjugadocom peroxidase de rábano (1/60.000). As bandas ou faixasimunorreativas foram desenvolvidas usando um kit dedetecção por quimioluminescência (SuperSignal, substrato daWest Pico Chemiluminiscent, Pierce).
Tingimento Imunológico
Para testes de imunoistoquímica, o tecido humanofoi embebido em OCT e congelado em isopentano refrigeradopor nitrogênio líquido. Seções de oito micrômetros foramcortadas em um criostato refrigerado à temperatura de-18°C. As seções foram coletadas em lâminas de SUPERFROSTPLUS® (BDH Chemicals Ltd., Poole, Reino Unido), secadas aoar e armazenadas à temperatura de -70°C. Para testes deimunofluorescência, as seções foram obstruídas durante 30minutos em um meio de soro de mula a 10% em tampão salinode Tris (TBS) (NaCl 150 mM/Tris-HCl 50 mM, pH de 7,5). Aslâminas foram incubadas com o anticorpo anti-receptor A2Apurificado por afinidade (VC21, 25 μg/mL) e com osanticorpos anti-a-actinina (diluição 1:500), anti-miosina(2 μg/mL), anti-connexina-43 (2,5 μg/mL) e o anti-receptorde rianodina (6,5 μg/mL) durante 1 hora à temperaturaambiente e, depois, lavadas três vezes por 10 minutos emTBS. Os IgG de cabra anti-rato conjugado com ALEXA FLUOR488® e o IgG da cabra anti-coelho conjugado com TEXAS RED®foram aplicados na dissolução do bloqueio em uma diluiçãode 1:2000. As seções foram lavadas e depois montadas em ummeio de imunofluorescência VECTASHIELD® (Vetor LaboratoriesInc., Burlingame, CA, USA). Para os testes deimunocitoquimica, miócitos cardíacos humanos recém-isoladosforam plaqueados em lamelas de vidro de 24 mm, revestidascom poli-D-lisina. Após a adesão das células, os miócitosforam lavados com tampão de fosfato salino (PBS) e foramfixados com para-formaldeído a 2% em PBS durante 20 minutosà temperatura ambiente. As células foram lavadas com PBS eincubadas com glicina 0,1 M durante 5 minutos, de modo abloquear os grupos de aldeído. Após o lavagem com PBS, osmiócitos foram permeabilizados com Triton-X-100 a 0,2% emPBS durante 15 minutos. As células foram depois lavadas comPBS, bloqueadas durante 30 minutos com soro de cavalo a 10%sob a temperatura ambiente e incubadas com os seguintesanticorpos primários: anti-receptor A2a policlonal (10μg/mL), anti-a-actinina (diluição de 1:500), anti-miosina(diluição de 1:500) e anti-connexina-43 (diluição de 1:150)durante uma hora à temperatura ambiente. Em seguida, foramlavadas três vezes com PBS e tingidas com anticorpo anti-rato conjugado com ALEXA FLUOR 4 88® e/ou o anticorpo anti-coelho conjugado com TEXAS RED®. Finalmente, as célulasforam lavadas novamente por três vezes e montadas em ummeio VECTASHIELD®. As observações de microscopia confocalforam feitas com um microscópio de varredura confocal alaser, Leica TCS 4D (Leica Lasertechnik GmbH, Heidelberg,Alemanha).
Claims (11)
1. Uso de um antagonista do receptor de adenosinaA2a, caracterizado pelo fato de que o referido uso sedestina à preparação de um medicamento para prevenção e/outratamento de fibrilação auricular em um mamífero,incluindo o ser humano.
2. Uso, de acordo com a reivindicação 1,caracterizado pelo fato de que o antagonista de Δ2Α é umderivado de xantina ou um sal farmaceuticamente aceitáveldo mesmo.
3. Uso, de acordo com a reivindicação 2,caracterizado pelo fato de que o antagonista de A2a é umcomposto selecionado do grupo que consiste daqueles queapresentam as seguintes fórmulas:<formula>formula see original document page 36</formula><formula>formula see original document page 37</formula>
4. Uso, de acordo com a reivindicação 3,caracterizado pelo fato de que Ό.-antagonista de A2a é ocomposto de fórmula (3), conhecido·também como KW 6002.
5. Uso, de acordo com a reivindicação 3,caracterizado pelo fato de que o antagonista de A2a é ocomposto de fórmula (6), conhecido também como MSX-2.
6. Uso, de acordo com a reivindicação 2,caracterizado pelo fato de que o antagonista de A2a é oéster de ácido fosfórico do composto de fórmula (6),conforme definido na reivindicação 3.
7. Uso, de acordo com a reivindicação 1,caracterizado pelo fato de que o antagonista de A2a é umderivado de pirazolopirimidina.
8. Uso, de acordo com a reivindicação 1,caracterizado pelo fato de que o antagonista de A2a é umderivado de triazoloquinoxalina.
9. Uso, de acordo com a reivindicação 1,caracterizado pelo fato de que o antagonista de A2a é umderivado de triazolotriazina.
10. Uso, de acordo com a reivindicação 1,caracterizado pelo fato de que o antagonista de A2a é umcomposto selecionado do grupo que consiste daqueles queapresentam as seguintes fórmulas:<formula>formula see original document page 39</formula><formula>formula see original document page 40</formula>
11. Uso, de acordo com a reivindicação 10,caracterizado pelo fato de que o antagonista de A2a é ocomposto de fórmula (15), conhecido também como VER-6623.
Applications Claiming Priority (3)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| ESP200502545 | 2005-10-14 | ||
| ES200502545A ES2273599B1 (es) | 2005-10-14 | 2005-10-14 | Compuestos para el tratamiento de la fibrilacion auricular. |
| PCT/ES2006/000564 WO2007045705A2 (es) | 2005-10-14 | 2006-10-10 | Compuestos para el tratamiento de la fibrilación auricular |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| BRPI0617369A2 true BRPI0617369A2 (pt) | 2011-07-26 |
Family
ID=37962872
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| BRPI0617369-1A BRPI0617369A2 (pt) | 2005-10-14 | 2006-10-10 | compostos para tratamento de fibrilaÇço auricular |
Country Status (13)
| Country | Link |
|---|---|
| US (1) | US8012973B2 (pt) |
| EP (1) | EP1949903B8 (pt) |
| JP (1) | JP2009511551A (pt) |
| CN (1) | CN101325956B (pt) |
| AT (1) | ATE553763T1 (pt) |
| AU (1) | AU2006303240B2 (pt) |
| BR (1) | BRPI0617369A2 (pt) |
| CA (1) | CA2626020A1 (pt) |
| DK (1) | DK1949903T3 (pt) |
| ES (2) | ES2273599B1 (pt) |
| MX (1) | MX2008004886A (pt) |
| RU (1) | RU2445099C2 (pt) |
| WO (1) | WO2007045705A2 (pt) |
Families Citing this family (7)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| BR122021026652B1 (pt) * | 2011-10-17 | 2022-08-23 | F. Hoffmann-La Roche Ag | Método in vitro para diagnosticar fibrilação atrial intermitente, uso de uma troponina cardíaca e dispositivo para diagnosticar fibrilação atrial intermitente |
| CZ305625B6 (cs) * | 2014-05-06 | 2016-01-13 | Vysoká škola chemicko- technologická v Praze | Kofein-8-hydrazony jako nová cytostatika pro léčbu onkologických onemocnění |
| WO2017008205A1 (en) * | 2015-07-10 | 2017-01-19 | Merck Sharp & Dohme Corp. | Substituted aminoquinazoline compounds as a2a antagonist |
| US11066413B2 (en) * | 2017-03-07 | 2021-07-20 | Guangzhou Maxinovel Pharmaceuticals Co., Ltd. | Aminopyrimidine five-membered heterocyclic compound, and intermediate, preparation method, pharmaceutical composition and application thereof |
| KR20210033444A (ko) | 2018-06-04 | 2021-03-26 | 엑스사이언티아 엘티디 | 아데노신 수용체 길항제로서 피라졸로피리미딘 화합물 |
| CN108864114B (zh) | 2018-06-04 | 2020-11-06 | 应世生物科技(南京)有限公司 | 选择性a2a受体拮抗剂 |
| EP4146341A4 (en) * | 2020-05-06 | 2024-06-26 | Ohio State Innovation Foundation | COMPOSITIONS AND METHODS FOR THE TREATMENT OF ATRIAL FIBROBITRAGE |
Family Cites Families (62)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US599387A (en) * | 1898-02-22 | Cabinet | ||
| US4772607A (en) * | 1986-05-20 | 1988-09-20 | Warner-Lambert Company | Dialkenyl derivatives of xanthine, pharmaceutical compositions and methods of use therefor |
| US4780464A (en) * | 1986-12-08 | 1988-10-25 | Warner-Lambert Company | (1,2,4)triazolo(4,3-a)quinoxaline-4-amines |
| WO1992006976A1 (fr) | 1990-10-18 | 1992-04-30 | Kyowa Hakko Kogyo Co., Ltd. | Derive de xanthine |
| GB9124968D0 (en) * | 1991-11-25 | 1992-01-22 | Ici Plc | Chemical process |
| US5484920A (en) | 1992-04-08 | 1996-01-16 | Kyowa Hakko Kogyo Co., Ltd. | Therapeutic agent for Parkinson's disease |
| JP2928386B2 (ja) | 1992-07-08 | 1999-08-03 | 協和醗酵工業株式会社 | うつ病治療剤 |
| IT1264901B1 (it) | 1993-06-29 | 1996-10-17 | Schering Plough S P A | Analoghi eterociclici di 1,2,4-triazolo(15-c)pirimidine ad attivita' antagonista per il recettore a2 dell'adenosina |
| CA2144330A1 (en) | 1993-07-27 | 1995-02-09 | Fumio Suzuki | A therapeutic agent for parkinson's disease |
| US5736528A (en) * | 1993-10-28 | 1998-04-07 | University Of Florida Research Foundation, Inc. | N6 -(epoxynorborn-2-yl) adenosines as A1 adenosine receptor agonists |
| US5703085A (en) | 1994-02-23 | 1997-12-30 | Kyowa Hakko Kogyo Co., Ltd. | Xanthine derivatives |
| IT1277392B1 (it) | 1995-07-28 | 1997-11-10 | Schering Plough S P A | Analoghi eterociclici di 1,2,4-triazolo(1,5-c]pirimidine ad attivita' antagonista per il recettore a2a dell'adenosina |
| US6051578A (en) * | 1996-02-12 | 2000-04-18 | Pfizer Inc. | Pyrazolopyrimidines for treatment of CNS disorders |
| US6060478A (en) * | 1996-07-24 | 2000-05-09 | Dupont Pharmaceuticals | Azolo triazines and pyrimidines |
| DE69820866T2 (de) | 1997-03-24 | 2004-12-30 | Kyowa Hakko Kogyo Co., Ltd. | [1,2,4]TRIAZOLO[1,5-c]PYRIMIDIN-DERIVATE |
| IT1291372B1 (it) | 1997-05-21 | 1999-01-07 | Schering Plough S P A | Uso di analoghi eterociclici di 1,2,4-triazolo (1,5-c) pirimidine per la preparazione di medicamenti utili per il trattamento delle malattie |
| ATE325610T1 (de) | 1997-09-05 | 2006-06-15 | Kyowa Hakko Kogyo Kk | Xanthinderivative zur behandlung von hirnischämie |
| AU1251499A (en) | 1997-11-26 | 1999-06-15 | Cerebrus Limited | (-)-mefloquine to block purinergic receptors and to treat movement or neurodegenerative disorders |
| EP1300147A1 (en) | 1998-01-05 | 2003-04-09 | Eisai Co. Ltd | Purine compounds and adenosine A2 receptor antagonist as preventive or therapeutic agent for diabetes mellitus |
| AU2639299A (en) | 1998-02-24 | 1999-09-15 | Kyowa Hakko Kogyo Co. Ltd. | Remedies/preventives for parkinson's disease |
| DE19930558A1 (de) | 1998-07-24 | 2000-01-27 | Marquardt Gmbh | Elektrischer Schalter |
| EP1109801A1 (en) * | 1998-09-04 | 2001-06-27 | The Procter & Gamble Company | Substituted dihydrobenzopyrans useful as antiarrhythmic agents |
| GB9819384D0 (en) | 1998-09-04 | 1998-10-28 | Cerebrus Ltd | Chemical compounds II |
| GB9819382D0 (en) | 1998-09-04 | 1998-10-28 | Cerebrus Ltd | Chemical compounds I |
| AU4431000A (en) | 1999-05-12 | 2000-12-05 | Fujisawa Pharmaceutical Co., Ltd. | Novel use |
| US6545002B1 (en) | 1999-06-01 | 2003-04-08 | University Of Virginia Patent Foundation | Substituted 8-phenylxanthines useful as antagonists of A2B adenosine receptors |
| GB9915437D0 (en) | 1999-07-01 | 1999-09-01 | Cerebrus Ltd | Chemical compounds III |
| NZ516260A (en) | 1999-07-02 | 2004-08-27 | Eisai Co Ltd | Fused imidazole compounds and remedies for diabetes mellitus |
| JP3347691B2 (ja) * | 1999-07-05 | 2002-11-20 | プロクター、エンド、ギャンブル、ファーマスーティカルズ、インコーポレーテッド | 抗不整脈及び抗細動剤として有用な新規４−オキソ環式尿素類 |
| NZ517546A (en) | 1999-08-31 | 2003-10-31 | Univ Vanderbilt | Selective antagonists of A2B adenosine receptors |
| US6355653B1 (en) | 1999-09-06 | 2002-03-12 | Hoffmann-La Roche Inc. | Amino-triazolopyridine derivatives |
| DE19947154A1 (de) | 1999-10-01 | 2001-10-04 | Bayer Ag | Substituierte 2-Thio-3,5-dicyano-4-aryl-6-aminopyridine und ihre Verwendung |
| US6194366B1 (en) | 1999-11-16 | 2001-02-27 | Esc, Inc. | Post chemical-mechanical planarization (CMP) cleaning composition |
| AUPQ441499A0 (en) | 1999-12-02 | 2000-01-06 | Fujisawa Pharmaceutical Co., Ltd. | Novel compound |
| US6258793B1 (en) * | 1999-12-03 | 2001-07-10 | Cv Therapeutics, Inc. | N6 heterocyclic 5′ modified adenosine derivatives |
| MY125533A (en) * | 1999-12-06 | 2006-08-30 | Bristol Myers Squibb Co | Heterocyclic dihydropyrimidine compounds |
| EP1261327B1 (en) | 2000-02-25 | 2005-04-27 | F.Hoffmann-La Roche Ag | Adenosine receptor modulators |
| NZ521633A (en) | 2000-04-26 | 2005-01-28 | Eisai Co Ltd | Use of an adenosine A2 or A2b recpetor antagonist for promoting bowel movement |
| TWI288137B (en) | 2000-05-26 | 2007-10-11 | Schering Corp | Adenosine A2a receptor antagonists |
| KR100571161B1 (ko) | 2000-06-21 | 2006-04-17 | 에프. 호프만-라 로슈 아게 | 벤조티아졸 유도체 |
| NZ523998A (en) | 2000-08-11 | 2005-07-29 | Eisai Co Ltd | 2-aminopyridine compounds and use thereof as drugs |
| GB0100620D0 (en) * | 2001-01-10 | 2001-02-21 | Vernalis Res Ltd | Chemical cokpounds V |
| MXPA04003474A (es) | 2001-10-15 | 2004-07-30 | Schering Corp | Imidazo (4,3-e)-1,2,4-triazolo(1,5-c) pirimidinas como antagonistas del receptor de adenosina a2a. |
| US6599901B1 (en) * | 2001-11-19 | 2003-07-29 | Hoffman-La Roche Inc. | Pyridone substituted benzothiazole derivatives |
| US6875772B2 (en) | 2001-11-30 | 2005-04-05 | Schering Corporation | [1,2,4]-Triazole bicyclic adeonsine A2a receptor antagonists |
| PE20030739A1 (es) | 2001-11-30 | 2003-08-28 | Schering Corp | Antagonistas del receptor de adenosina a2a |
| CA2468649C (en) | 2001-11-30 | 2009-03-10 | Schering Corporation | Adenosine a2a receptor antagonists |
| EP1456209B1 (en) | 2001-12-18 | 2007-02-28 | Cv Therapeutics, Inc. | A2a adenosine receptor antagonists |
| US20050043315A1 (en) | 2002-01-02 | 2005-02-24 | Hideo Tsutsumi | Aminopyrimidine compounds, processes for their preparation and pharmaceutical compositions containing them |
| ES2208063B1 (es) | 2002-04-01 | 2005-10-01 | Almirall Prodesfarma, S.A. | Nuevos derivados de la 4-(pirrolopirimidin-6-il)bencenosulfonamida. |
| AU2002950853A0 (en) | 2002-08-19 | 2002-09-12 | Fujisawa Pharmaceutical Co., Ltd. | Aminopyrimidine compound and pharmaceutical use thereof |
| EA008339B1 (ru) | 2002-08-30 | 2007-04-27 | Киова Хакко Когио Ко., Лтд. | Способы лечения пациентов, страдающих синдромом усталых ног или связанными с ним заболеваниями |
| CA2500228A1 (en) | 2002-09-24 | 2004-04-08 | Kyowa Hakko Kogyo Co., Ltd. | [1,2,4]-triazolo[1,5-c]pyrimidine derivative |
| CN101310724A (zh) | 2002-12-19 | 2008-11-26 | 先灵公司 | 腺苷A2a受体拮抗剂的应用 |
| MXPA05010293A (es) * | 2003-03-27 | 2005-11-17 | Pfizer Prod Inc | 4-amino[1,2,4]triazolo[4,3-a]quinoxalinas sustituidas. |
| WO2004092177A1 (en) | 2003-04-09 | 2004-10-28 | Biogen Idec Ma Inc. | Triazolopyrazines and methods of making and using the same |
| PT1622912E (pt) | 2003-04-23 | 2009-08-17 | Schering Corp | Antagonistas 2-alcinil- e 2-alcenilpirazolo-[4,3-b]-1,2,4- triazolo-[1,5-c]-pirimidina do receptor a2a da adenosina |
| DK1673354T3 (da) | 2003-10-03 | 2009-07-27 | Ortho Mcneil Janssen Pharm | Arylindenopyridiner og arylindenopyrimidiner og deres anvendelse som adenosin-A2a-receptorantagonister |
| TW200524887A (en) | 2003-10-27 | 2005-08-01 | Lundbeck & Co As H | N-thiazol-2-yl-benzamide derivatives |
| EP1678160A1 (en) | 2003-10-27 | 2006-07-12 | Astellas Pharma Inc. | Pyrazine derivatives and pharmaceutical use thereof |
| JP2007513091A (ja) | 2003-12-01 | 2007-05-24 | シェーリング コーポレイション | 置換された５−アミノ−ピラゾロ−［４，３−ｅ］−１，２，４−トリアゾロ［１，５−ｃ］ピリミジンを調製するための方法 |
| UA83101C2 (en) | 2003-12-15 | 2008-06-10 | Алмирал Аг | 2,6-bisheteroaryl-4-aminopyrimidines as adenosine receptor antagonists |
-
2005
- 2005-10-14 ES ES200502545A patent/ES2273599B1/es active Active
-
2006
- 2006-10-10 RU RU2008118995/15A patent/RU2445099C2/ru not_active IP Right Cessation
- 2006-10-10 WO PCT/ES2006/000564 patent/WO2007045705A2/es active Application Filing
- 2006-10-10 MX MX2008004886A patent/MX2008004886A/es active IP Right Grant
- 2006-10-10 US US12/090,115 patent/US8012973B2/en not_active Expired - Fee Related
- 2006-10-10 AT AT06830873T patent/ATE553763T1/de active
- 2006-10-10 ES ES06830873T patent/ES2386377T3/es active Active
- 2006-10-10 AU AU2006303240A patent/AU2006303240B2/en not_active Ceased
- 2006-10-10 DK DK06830873.3T patent/DK1949903T3/da active
- 2006-10-10 CA CA002626020A patent/CA2626020A1/en not_active Abandoned
- 2006-10-10 CN CN200680046601XA patent/CN101325956B/zh not_active Expired - Fee Related
- 2006-10-10 EP EP06830873A patent/EP1949903B8/en not_active Not-in-force
- 2006-10-10 JP JP2008535047A patent/JP2009511551A/ja active Pending
- 2006-10-10 BR BRPI0617369-1A patent/BRPI0617369A2/pt not_active IP Right Cessation
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| ES2386377T3 (es) | 2012-08-20 |
| ES2273599A1 (es) | 2007-05-01 |
| MX2008004886A (es) | 2009-03-02 |
| CN101325956B (zh) | 2012-02-29 |
| ATE553763T1 (de) | 2012-05-15 |
| EP1949903A2 (en) | 2008-07-30 |
| US20090312332A1 (en) | 2009-12-17 |
| RU2008118995A (ru) | 2009-11-20 |
| WO2007045705A2 (es) | 2007-04-26 |
| EP1949903B8 (en) | 2012-05-23 |
| AU2006303240A1 (en) | 2007-04-26 |
| RU2445099C2 (ru) | 2012-03-20 |
| US8012973B2 (en) | 2011-09-06 |
| JP2009511551A (ja) | 2009-03-19 |
| EP1949903B1 (en) | 2012-04-18 |
| CN101325956A (zh) | 2008-12-17 |
| DK1949903T3 (da) | 2012-07-30 |
| CA2626020A1 (en) | 2007-04-26 |
| AU2006303240B2 (en) | 2012-07-12 |
| ES2273599B1 (es) | 2008-06-01 |
| WO2007045705A3 (es) | 2007-06-14 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| RU2294762C2 (ru) | Фармацевтическая композиция, промотирующая дефекацию | |
| BRPI0617369A2 (pt) | compostos para tratamento de fibrilaÇço auricular | |
| CN101704799B (zh) | 靶向兰诺定受体渗漏的新颖抗心律失常和心力衰竭药物及其应用 | |
| JP2012144539A (ja) | Ｂｃｒ−ａｂｌ／ｃ−ｋｉｔ／ｐｄｇｆ−ｒｔｋ阻害剤を含む、がんの処置用の組合せ剤 | |
| JP2010529205A (ja) | 脳血管れん縮の予防用薬物送達システム | |
| CA2471846A1 (en) | Pharmaceutical compositions comprising a multifunctional phosphodiesterase inhibitor and an adenosine uptake inhibitor | |
| US8604045B2 (en) | Pyrimidylaminobenzamide derivatives for treatment of neurofibromatosis | |
| Chen et al. | Stachydrine hydrochloride alleviates pressure overload-induced heart failure and calcium mishandling on mice | |
| US20090048173A1 (en) | Use Of Dipyridamole For Treatment Of Resistance To Platelet Inhibitors | |
| US20220362251A1 (en) | Treatment of tachycardia | |
| PT1476192E (pt) | Métodos e composições para tratar condições hierproliferativas | |
| Andersson et al. | New directions for erectile dysfunction therapies | |
| Pietrangelo et al. | Characterization of specific GTP binding sites in C2C12 mouse skeletal muscle cells | |
| Mills | Vasoconstriction and vasodilation in erectile physiology | |
| US20060030556A1 (en) | Neurokinin-1 receptor antagonists for the treatment of conditions responsive to testosterone elevation, including testosterone deficiency | |
| US20120015968A1 (en) | Use of pyrimidylaminobenzamide derivatives for the treatment of disorders mediated by the leucine zipper-and sterile alpha motif-containing kinase (zak) | |
| Fixler et al. | Opposing effects of endothelin-1 on C-type natriuretic peptide actions in rat cardiomyocytes | |
| Wang et al. | ADAMTS-1 expression in rat myocardium after ischemic preconditioning: age-associated differences | |
| de Oliveira | Adenosine receptors in mesenteric arteries adventitia: evidence for a nuclear location | |
| De Mello | 7 CEL CELL TO CELL COMMUNICATION IN THE FAILING HEART |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| B08F | Application dismissed because of non-payment of annual fees [chapter 8.6 patent gazette] |
Free format text: REFERENTE A 8A ANUIDADE. |
|
| B08K | Patent lapsed as no evidence of payment of the annual fee has been furnished to inpi [chapter 8.11 patent gazette] |
Free format text: REFERENTE AO DESPACHO 8.6 PUBLICADO NA RPI 2275 DE 12/08/2014. |