BRPI0613555A2

BRPI0613555A2 - derivados de tiazóis como ativador de ampk

Info

Publication number: BRPI0613555A2
Application number: BRPI0613555-2A
Authority: BR
Inventors: Vijay Kumar Potluri; Saibal Kumar Das; Pradip Kumar Sasmal; Javed Iqbal; Parimal Misra; Ranjan Chakrabarti; Rashmi Talwar
Original assignee: Reddys Lab Ltd Dr; Reddys Lab Inc Dr
Priority date: 2005-07-04
Filing date: 2006-06-30
Publication date: 2011-01-18
Also published as: US8080668B2; WO2007005785B1; IL188398A0; EP1907369A4; JP2009500351A; WO2007005785A1; CN101273022A; AU2006265675A1; EP1907369A1; NO20080629L; EA200800240A1; US20070015665A1; CA2614098A1

Abstract

DERIVADOS DE TIAZOIS COMO ATIVADOR DE AMPK O presente pedido fornece derivados de tiazol inéditos que são úteis como ativadores de proteína quinase ativada por 5'-monofosfato de adenosina e composições farmacêuticas que contêm tais compostos.

Description

DERIVADOS DE TIAZÓIS COMO ATIVADOR DE AMPK

CAMPO DA INVENÇÃO

O presente pedido fornece derivados de tiazol inéditosque são ativadores de proteína quinase ativada por 51 -monofosfato de adenosina e composições farmacêuticas quecontêm tais compostos.

FUNDAMENTOS DA INVENÇÃO

Acredita-se que ativadores de proteína quinase ativadapor 51-monofosfato de adenosina (proteína quinase ativadapor AMP) ou (AMPK) tenham um papel fundamental na regulaçãodo metabolismo de carboidratos e gorduras em mamíferos,incluindo seres humanos. Os resultados finais da ativaçãode AMPK podem incluir a inibição da gliconeogênesehepática, síntese de colesterol e triglicerídeo no fígado,aumento do transporte muscular de glicose e sensibilidade àinsulina e oxidação de ácido graxo no músculo e fígado.

SUMÁRIO

De acordo com um aspecto, o presente pedido fornece umcujo composto é uma espécie livre e/ou um sal ou umsolvato ou um hidrato farmaceuticamente aceitável deste, emque

Ra é escolhido de hidróxi, (Ci-C5) perf luoralquil, (C1-C5)acil, aril, heterocicloalquil, heteroaril, arilóxi,alquilariloxi, -O-(Ci-C5) alquilaril, -S-(Ci-C5) alquil, -S-(Ci-C5) perf luoralquil, -S-aril ou -S-(Ci-C5) alquilaril;Rb é -OR1, em que Ri é hidrogênio ou (Ci - Ce)alquil;B é escolhido independentemente de -CH2, -CH(CH3)-, -C(CH3)2- e -C(CH3)(C2H5)-; e

m varia entre 0 e 2, inclusive.

Em outro aspecto, o presente pedido fornece compostosque possuem a fórmula (II) :

<formula>formula see original document page 3</formula>

cujo composto é uma espécie livre e/ou um sal ou umsolvato ou um hidrato farmaceuticamente aceitável deste, emque

Ra é escolhido de (Ci-C5) perf luoralqui 1, (Ci-C5) alquil,(Ci-C5)acil, aril, heterocicloalquil, heteroaril, arilóxi,alquilariloxi, -S-(Ci-C5) alquil, -S-(C1-C5)Perfluoralquil,-S-aril ou -S-(Ci-C5) alquilaril; e

Rb é -ORi, em que Ri é hidrogênio ou (Ci-C8) alquil.De acordo com outro aspecto, o presente pedido tambémfornece um derivado de tiazol, o composto possuindo afórmula (I):

<formula>formula see original document page 3</formula>

cujo composto é uma espécie livre e/ou um sal ou umsolvato ou um hidrato farmaceuticamente aceitável, em que

Ra é escolhido de flúor, cloro, bromo, (Ci-C5) perf luoralcoxi, (Ci-C5) alquil, e -XRc, em que X éoxigênio ou enxofre, e Rc é hidrogênio, (Ci-C5) alquil, (Ci-C5) perf luoralquil, aril ou (Ci-C5) alquilaril ί-Rb é -ORi, em que Ri é hidrogênio ou (Ci-C8) alquil ;B é escolhido independentemente de -CH2, -CH(CH3)-, -C(CH3)2- e-C (CH3) (C2H5)-; e

m varia entre 0 e 2, inclusive, cujo derivado detiazol tem potencial para proteína quinase ativada por AMP(AMPK).

Outro aspecto do presente pedido fornece compostos quepossuem a fórmula (II):

<formula>formula see original document page 4</formula>

Ra é (Ci-C5) perf luoralcoxi, (Ci-C5) alquil e -XRc, em queX é oxigênio ou enxofre, e Rc é hidrogênio, (Ci-C5) alquil,(Ci-C5) perf luoralqui 1, aril ou (Ci-C5) alquilaril; e

Rb é -ORi, em que Ri é hidrogênio ou (Ci-C5) alquil;

cujo derivado de tiazol tem potencial para proteínaquinase ativada por AMP.

De acordo com outro aspecto, o presente pedido fornecederivados de tiazol inéditos de fórmula (I) e da fórmula(II) que possuem um potencial para AMPK que é de pelo menoscerca de 75%-95% em células musculares esqueléticas L6 e depelo menos cerca de 65%-95% em células hepáticas HepG2 dehepatoma. São fornecidas várias modalidades e variantes.

De acordo com outro aspecto, o presente pedido fornececompostos da fórmula (I) e da fórmula (II) que possuem umpotencial para AMPK que é de pelo menos cerca de 75% emcelulas musculares esqueleticas L6 e de pelo menos cerca de65% em celuals hepaticas HepG2 de hepatoma.

Em outro aspecto, o presente pedido fornece compostos da formula (I) e da formula (II) que possuem um potencial para AMPK que e de pelo menos cerca de 85% em celulasmuscualres esquesleticas L6 e de pelo menos cerca de 86% emceluals hepaticas HepG2 de hepatomea.

De acrodo com outro aspecto, o presente pedido fornececompostos da formula (I) e da formula (II) que possuem umcelulas hepaticas HepG2 de hepatoma.derivados de tiazol do presente pedido e um ou maisexcipientes farmaceuticamente aceitáveis.

Ainda em outro aspecto, o presente pedido fornececomposições farmacêuticas que compreendem um ou maisderivados de tiazol do presente pedido e um ou maisexcipientes farmaceuticamente aceitáveis.

DESCRIÇÃO DETALHADA

Para descrever o pedido, certos termos aqui utilizadospossuem os seguintes significados:

O termo "composto" é usado para representar umamolécula de estrutura química identificável, única. Umcomposto pode existir como uma espécie livre. Além disso, aforma de espécie livre do composto pode formar vários sais,normalmente com ácidos ou bases externos.

0 termo "derivado" é usado como um termo comum para aforma de espécie livre do composto e todos os seus sais.

Dessa forma, a linguagem da citação "um derivado, que é umaespécie livre e/ou um sal do composto da fórmula [I]" éusada para definir um gênero que compreende os compostos deespécie livre da fórmula específica e todos os sais doscompostos da fórmula específica. O uso do termo "e/ou" visaa indicar que, para um composto de certa estrutura química,uma citação a um "derivado" cobre a forma de espécie livree todos os seus sais, bem como as misturas das formas deespécie livre e das formas de sal. 0 termo "saisfarmaceuticamente aceitáveis" visa significar sais que sãoadequados para uso em produtos farmacêuticos humanos ouanimais. 0 uso do termo "farmaceuticamente aceitável" nãovisa a limitar as citações às substâncias ("derivados")encontradas apenas fora do corpo.Na descrição dos compostos, uma nomenclatura e umaterminologia específicas são utilizadas ao longo dadescrição para se referir a vários grupos e substituintes.

A descrição "Cx-Cy" refere-se a uma cadeia de átomos decarbono ou um esqueleto carbocíclico que contém de χ a yátomos, inclusive. A faixa designada de átomos de carbonopode se referir independentemente ao número de átomos decarbono na cadeia ou no esqueleto cíclico, ou à porção deum substituinte maior na qual a cadeia ou o esqueleto estáincluído. Por exemplo, a citação " (Ci-C5) alquil" refere-see um grupo alquil que possui uma cadeia de carbonos de 1 a5 átomos de carbono, inclusive de 1 e 5. As cadeias deátomos de carbono dos grupos e substituintes aqui descritose reivindicados podem ser saturadas ou insaturadas, decadeia linear ou ramificada, substituídas ou nãosubstituídas.

O termo "alquil," seja ele usado isoladamente ou comouma parte de outro grupo, refere-se a um grupo ou umsubstituinte que inclui uma cadeia de átomos de carbono. Ascadeias de átomos de carbono dos grupos alquil aquidescritos e reivindicados podem ser saturadas ouinsaturadas, de cadeia linear ou ramificada, substituídasou não substituídas. Em um exemplo não limitante, "Ci-C5alquil" significa um grupo alquil que possui uma cadeia decarbonos com 1 a 5 átomos de carbono, inclusive, cujocarbono pode ser saturado ou insaturado, de cadeia linearou ramificada, substituído ou não substituído. 0 termo"perfluoralquil" é usado para representar um grupo alquilno qual todos os átomos de hidrogênio foram substituídospor átomos de flúor como, por exemplo, em trifluormetil.O termo "aril", seja ele usado isoladamente ou comoparte de um grupo substituinte, significa um radicalcarbocíclico aromático derivado de um hidrocarbonetoaromático. Exemplos não limitantes de um radical "aril"incluem fenil, naftil, difenil, fluorfenil,metoxietilfenil, difluorfenil, benzil, benzoiloxifenil,carboetoxifenil, acetilfenil, etoxifenil, fenoxifenil,hidroxifenil, carboxifenil, trifluormetilfenil, tolil,xilil e dimetil-carbamilfenil. Os grupos "aril" doscompostos aqui descritos podem ser substituídos porsubstituição independente de 1 a 3 dos átomos de hidrogêniono esqueleto aromático carbocíclico com substituintes queincluem, sem limitação, halogênio, -0H, -CN, mercapto,nitro, amino, amino substituído, (C1-C6)alquil, (Ci-C6)alcóxi, (Ci-C6) alquiltio, (Ci-C6) alquilamino, (Ci-C6) alquil halogenado, formil, (Ci-C6) acil, (Ci-C6) alcoxiacil, e (Ci-C6) acilamido, (Ci-C5) perf luoralquil,(Ci-C5) perf luoralcoxi.

O termo "heteroaril", seja ele usado isoladamente oucomo parte de um grupo substituinte, é usado pararepresentar um radical aromático cíclico que possui decinco a dez átomos no anel, dos quais pelo menos um átomono anel é um heteroátomo, ou seja, não é um átomo decarbono. Um exemplo é quando há de 1 a 4 heteroátomos naestrutura do anel selecionados de S, OeN. 0 radical podeser ligado ao resto da molécula através de qualquer um dosátomos do anel. Exemplos não limitantes de grupos"heteroaril" incluem piridinil, piridazinil, imidazolil,pirimidinil, pirazolil, triazolil, pirazinil, quinolil,isoquinolil, tetrazolil, furil, tienil, isoxazolil,tiazolil, oxazolil, isotiazolil, pirrolil, indolil,benzimidazolil, benzofuranil, cinolinil, indazolil,indolizinil, ftalazinil, triazinil, isoindolil, purinil,oxadiazolil, tiadiazolil, furazanil, benzofurazanil,benzotiofenil, benzotriazolil, benzotiazolil, benzoxazolil,quinazolinil, quinoxalinil, naftiridinil, diidroquinolil,tetrahidroquinolil, diidroisoquinolil,tetrahidroisoquinolil, benzofuril, furopiridinil,pirrolopirimidinil e azaindolil. Os grupos heteroaril doscompostos aqui descritos e/ou reivindicados podem sersubstituídos por substituição independente de 1 a 3 átomosde hidrogênio do esqueleto aromático com substituintes queincluem, sem limitação halogênio, -0H, -CN, mercapto,nitro, amino, substituído amino, (Ci-C6) alquil, (C1-C6)alcóxi, (C1-C6) alquiltio, (Ci-C6) alquilamino, halogenado(Ci-C6) alquil, formil, (Ci-C6) acil, (C1-C6Jalcoxiacil, (C1-C6) acilamido, aril, (C1-C5Jalquilaril, (C1-C5) perfluoralquil, (C1-C5)Perfluoralquilaril e haloaril.

0 termo "haloaril" é usado para representar um grupoformado por um grupo aril substituído por um átomo dehalogênio, em que o grupo aril é como definido acima ehalogênio é usado para representar flúor, cloro, bromo ouiodo; um exemplo de tal grupo é clorofenil. 0 átomo dehalogênio no anel aril pode estar presente na posição orto,meta ou para do anel.

0 termo "perfluoralquilaril" é usado para representarum grupo formado por um grupo aril substituído com grupoperfluoralquil, em que os grupos aril e perfluoralquil sãocomo definidos acima. Um exemplo de tal grupo étrifluormetilfenil. 0 grupo perfIuor no anel aril podeestar presente na posição orto, meta ou para do anel.

0 termo "acil" usado quando um ou mais dos átomos decarbono do alquil terminal ou átomos no anel de carbono doanel aril são substituídos por um ou mais radicaiscarbonil, engloba especificamente monoalquilcarboni1, porexemplo, metilcarbonil, etilcarbonil e outros mais,arilcarbonil, por exemplo, benzoil e outros mais. O termoacil também inclui o grupo formil.

O termo "alquilaril" é usado para representar um grupocomposto por um radical aril e uma cadeia de carbonos queconecta o radical aril ao resto da molécula, por exemplo,grupo benzil.

0 termo "heterocicloalquil", seja ele usadoisoladamente ou como parte de um grupo substituinte, éusado para representar um radical não aromático cíclico quepossui de cinco a dez átomos no anel, dos quais pelo menosum átomo no anel é heteroátomo, ou seja, não é um átomo decarbono. Um exemplo é quando há de 1 a 4 heteroátomos naestrutura do anel selecionados de S, OeN. Exemplos nãolimitantes de um grupo heterocicloalquil são aziridinil,azetidinil, pirrolidinil, piperidinil, azepinil,piperazinil, 1,2,3,6-tetrahidropiridinil, oxiranil,oxetanil, tetrahidrofuranil, tetrahidrotienil,tetrahidropiranil, tetrahidrotiopiranil, morfolino,tiomorfolino, tioxanil, pirrolinil, indolinil, 2H-piranil,4H-piranil, dioxanil, 1,3-dioxolanil, pirazolinil,diidropiranil, diidrotienil, diidrofuranil, pirazolidinil,imidazolinil, imidazolidinil, 3-azabiciclo[3.1.0]hexanil,3-azabiciclo[4.1.0]heptanil, quinolizinil, quinuclidinil,1,4-dioxaspiro[4.5]decil, 1,4-dioxaspiro[4.4]nonil, 1,4-dioxaspiro[4.3]octil e 1,4-dioxaspiro[4.2]heptil.

Exemplos de grupo heterocicloalquil de 5 ou 6 membrosformados por R2 e R3 são anel morfolino, anel tiomorfolinoe outros mais.

A menos que especificado de forma diferente, entende-se que a definição de qualquer substituinte ou variável emuma localização em particular em uma molécula sejaindependente de suas definições em outros locais daquelamolécula. Entende-se que substituintes e padrões desubstituição nos compostos deste pedido podem serselecionados por aqueles habilitados na técnica para ofornecimento de compostos que são quimicamente estáveis eque podem ser facilmente sintetizados por metodologiasconhecidas na técnica, bem como pelos métodos aquiapresentados.

Um grupo pode ser citado de forma geral ou maisespecificamente, como desejado. Por exemplo, um grupocontendo uma cadeia de carbonos com uma ligação duplacarbono-carbono pode ser descrito como alquil ou alquenil,como desejado. Outro exemplo não limitante, um grupocontendo uma cadeia de carbonos com um substituinte cloropode ser descrito como alquil ou alquil halogenado, comodesejado.

Uma "composição" pode conter um composto ou umamistura de compostos. Uma "composição farmacêutica" équalquer composição útil ou potencialmente útil na produçãode resposta fisiológica em um indivíduo no qual essacomposição farmacêutica é administrada. 0 termo"farmaceuticamente aceitável", com relação aos excipientes,é usado para definir substâncias atóxicas geralmenteadequadas para uso em produtos farmacêuticos humanos ouanimais.

As percentagens de potencial de ativação de AMPK nestaespecificação são calculadas com relação ao ativador deAMPK já existente metformina. As percentagens são obtidasnormalizando-se os valores obtidos em concentrações nafaixa de 2 μΜ a 10 μΜ com a de metformina, considerando-seos valores obtidos para metformina em concentrações de 2 mMcomo 100%. No entanto, as percentagens de potencial deativação de AMPK também podem ser calculadas com relação aoutros ativadores de AMPK conhecidos.

Em uma modalidade, o presente pedido fornece umcomposto que possui a fórmula (I):

<formula>formula see original document page 12</formula>

Ra é escolhido de hidróxi, (C1-C5)Perfluoralquil, (Ci-C5)acil, aril, heterocicloalquil, heteroaril, arilóxi,alquilariloxi, -0- (Ci-C5) alquilaril, -S-(C1-C5) alquil, -S-(Ci-C5) perf luoralquil, -S-aril ou -S-(Ci-C5) alquilaril;

Rb é -ORi, em que Ri é hidrogênio ou (Ci-C8) alquil;

B é escolhido independentemente de -CH2, -CH(CH3)-,C(CH3)2- e -C(CH3)(C2H5)-; e

m varia entre 0 e 2, inclusive

Em outra modalidade, o presente pedido fornececompostos que possuem a fórmula (II):<formula>formula see original document page 13</formula>

Ra é escolhido de (Ci-C5) perf luoralquil, (Ci-C5) alquil,(Ci-C5)acil, aril, heterocicloalquil, heteroaril, arilóxi,alquilariloxi, -S-(Ci-C5) alquil, -S-(Ci-C5) perf luoralquil, -S- aril ou -S- (Ci-C5) alquilaril; e

Rb é -ORi, em que Ri é hidrogênio ou (Ci-C8) alquil.

Em outra modalidade, o presente pedido fornece umcomposto que possui a fórmula (!):

<formula>formula see original document page 13</formula>

Ra é escolhido de flúor, cloro, bromo, (Ci-C5) perf luoralcoxi, (Ci-C5) alquil, e -XRc, em que X éoxigênio ou enxofre, e Rc é hidrogênio, (Ci-C5) alquil, (Ci-C5) perf luoralquil, aril ou (Ci-C5) alquilaril;

Rb é -ORi, em que Ri é hidrogênio ou (Ci-C8) alquil ;

B é escolhido independentemente de -CH2, -CH(CH3)-, -C(CH3)2- e -C(CH3)(C2H5)-; e

m varia entre 0 e 2, inclusive,

cujo derivado de tiazol tem potencial para proteínaquinase ativada por AMP (AMPK).Em outra modalidade, o presente pedido fornececompostos que possuem a fórmula (II):

<formula>formula see original document page 14</formula>

(Ci-C5) perf luoralcoxi, (Ci-C5) alquil, e o grupo daestrutura -XRc, em que X é oxigênio ou enxofre, e Rc éhidrogênio, (Ci-C5) alquil, (Ci-C5) perf luoralquil, aril ou(Ci-C5) alquilaril; e

Rb é -ORi, em que Ri é hidrogênio ou (Ci-C8) alquil ;

cujo derivado de tiazol tem potencial para proteínaquinase ativada por AMP.

De acordo com outra modalidade, o presente pedidofornece compostos da fórmula (I) e da fórmula (II) quepossuem um potencial para AMPK que é de pelo menos cerca de75%-95% em células musculares esqueléticas L6 e de pelomenos cerca de 65%-95% em células hepáticas HepG2 dehepatoma. De acordo com outra modalidade, o presente pedidofornece compostos da fórmula (I) e da fórmula (II) quepossuem um potencial para AMPK que é de pelo menos cerca de75% em células musculares esqueléticas L6 e de pelo menoscerca de 65% em células hepáticas HepG2 de hepatoma.

De acordo com outra modalidade, o presente pedidofornece compostos da fórmula (I) e da fórmula (II) quepossuem um potencial para AMPK que é de pelo menos cerca de85% em células musculares esqueléticas L6 e de pelo menoscerca de 85% em células hepáticas HepG2 de hepatoma.

De acordo com outra modalidade, o presente pedidofornece compostos da fórmula (I) e da fórmula (II) quepossuem um potencial para AMPK que é de pelo menos cerca de90% em células musculares esqueléticas L6 e de pelo menoscerca de 90% em células hepáticas HepG2 de hepatoma.

Outra modalidade do presente pedido fornece compostosde fórmula (II), em que Ra é (Ci-C5) perf luoralquil.

Em outra modalidade, o presente pedido fornece umderivado de tiazol da fórmula (II) , em que Ra étrifluormetil.

Outra modalidade do presente pedido fornece compostosde formula (III) :

<formula>formula see original document page 15</formula>

em que R1 é hidrogênio ou (C1-C3Jalquil.

Outra modalidade do presente pedido fornece compostosde fórmula (I) , em que Ra tiazolil.

Outra modalidade do presente pedido fornece compostosde formula (I), em que Ra e tiazolil que possui a estrutura

<formula>formula see original document page 15</formula>

em que R2 é escolhido de halogênio, (Ci-C5) perf luoralquil, (Ci-C5) alquil, (Ci-C5) alquilaril, aril,haloaril e (Ci-C5) perf luoralquilaril.

Outra modalidade do presente pedido fornece compostosde fórmula (I) , em que Ra é um grupo heterocicloalquil quepossui a estrutura -NR3R4, em que R3 e R4 juntos com o átomode nitrogênio do grupo -NR3R4 formam um anelheterocicloalquil de 5 ou 6 membros que pode opcionalmenteconter um ou dois heteroátomos adicionais selecionados deoxigênio, enxofre ou nitrogênio.

Outra modalidade do presente pedido fornece compostosde fórmula (I), em que o referido grupo heterocicloalquil émorfolinil.

Outra modalidade do presente pedido fornece o derivadode tiazol de fórmula (!), que tem a estrutura

<formula>formula see original document page 16</formula>

<formula>formula see original document page 17</formula>

De acordo com outra modalidade, o presente pedidofornece derivados de tiazol inéditos de fórmula (I) quepossuem potencial para ativação de AMP quinase.

De acordo com outra modalidade, o presente pedidofornece derivados de tiazol inéditos de fórmula (I) quepossuem um potencial para ativação de AMP quinase de pelomenos cerca de 75%-90% em células musculares esqueléticasL6 e de pelo menos cerca de 60%-90% em células hepáticasHepG2 de hepatoma.

De acordo com outra modalidade, o presente pedidofornece o composto de fórmula (I) como definido namodalidade acima, em que Ra é (Ci-C5) perfluoralquil.

Outra modalidade do presente pedido fornece um métodode ativação de AMPK em indivíduos humanos ou animais, oreferido método compreendendo a administração ao referidoindivíduo de uma quantidade eficaz do derivado de tiazol docomposto de fórmula (I).

Outra modalidade do presente pedido fornece umacomposição farmacêutica que compreende uma quantidadeterapeuticamente eficaz de um composto de fórmula (I) emcombinação com um veículo farmaceuticamente adequado.

Outra modalidade do presente pedido fornece umacomposição farmacêutica que compreende um ou mais derivadosde tiazol do composto de fórmula (I) e um ou maisexcipientes farmaceuticamente aceitáveis.

Outra modalidade do presente pedido fornece umacomposição farmacêutica que compreende um ou mais derivadosde tiazol do composto de fórmula (II) e um ou maisexcipientes farmaceuticamente aceitáveis.

De acordo com outra modalidade, o presente pedidofornece um derivado de tiazol, que é uma espécie livre e/ouum sal farmaceuticamente aceitável do composto da fórmula(I).

Exemplos específicos de fórmula (!) incluem, mas não selimitam:

<table>table see original document page 18</column></row><table><table>table see original document page 19</column></row><table><table>table see original document page 20</column></row><table><table>table see original document page 21</column></row><table><table>table see original document page 22</column></row><table>

Os compostos de fórmula (I) podem ser preparados daforma mostrada nos esquemas de preparação seguintes ou porqualquer outro meio conhecido.

Os compostos de fórmula (I) assim preparados podem serisolados e purificados da mistura de reação por meiosconhecidos, incluindo, sem limitação, extração de solvente,concentração, neutralização, filtração, cristalização,recristalização, cromatografia em coluna, cromatografialíquida de alto rendimento e recristalização, para gerar umproduto de interesse altamente purificado.

Os compostos do presente pedido e sais destes podemser preparados pela aplicação de vários métodos sintéticoscom a utilização das características em função do esqueletofundamental ou do tipo dos substituintes deste. Métodos deprodução representativos serão ilustrados a seguir. Todosos outros símbolos são como definidos anteriormente.

Processo 1<formula>formula see original document page 23</formula>

O composto de fórmula (Ia) foi convertido em umcomposto de fórmula (Ib) na presença de tiofosgeno,piridina e solvente, em que todos os símbolos são definidoscomo anteriormente. 0 solvente usado na reação pode serselecionado de diclorometano, dicloroetano, piridina,clorofórmio, tetraclorometano, etilacetato, metanol,etanol, isopropanol, n-propanol, butanol, acetona,acetonitrila, dimetilformamida, dimetilsulfóxido,tetrahidrofurano, água e outros mais, ou uma misturadestes. A reação pode ser realizada em uma temperaturaentre cerca de -IO0C a cerca de 45°C. A duração da reaçãopode ser mantida por um período de aproximadamente 5minutos a cerca de 3 horas, por exemplo, cerca de 3 0minutos.

O composto de fórmula (Ib) foi convertido em umcomposto de fórmula (Ic) na presença de amônia ou soluçãoaquosa de amônia e solvente, em que todos os símbolos sãodefinidos como anteriormente. O solvente usado na reaçãopode ser selecionado de diclorometano, dicloroetano,piridina, clorofórmio, tetraclorometano, etilacetato,metanol, etanol, isopropanol, n-propanol, butanol, acetona,acetonitrila, dimetilformamida, dimetilsulfóxido,tetrahidrofurano, água e outros mais, ou uma misturadestes. A reação pode ser realizada em uma temperaturaentre cerca de 10°C a cerca de 65°C. A duração da reaçãopode ser mantida por um período de aproximadamente 1 hora acerca de 10 horas, por exemplo, cerca de 6 horas.O composto da fórmula (Ie) foi obtido por reação docomposto de fórmula (Ic) com o composto de fórmula (Id) napresença de solvente, em que X representa um gruporetirante, por exemplo, um átomo de halogênio, p-toluenossulfonato, metanossulfonato, trifluormetanosulfonato ou outros mais, R1 é selecionado de alquil com 1a 5 átomos de carbono, em que exemplos não limitantesincluem metil, etil, n-propil, isopropil ou n-butil, e osoutros símbolos são como definidos anteriormente. Osolvente usado na reação pode ser selecionado dediclorometano, dicloroetano, piridina, clorofórmio,tetraclorometano, etilacetato, metanol, etanol,isopropanol, n-propanol, butanol, acetona, acetonitrila,dimetilformamida, dimetilsulfóxido, tetrahidrofurano, águae outros mais, ou uma mistura destes. A reação pode serrealizada em uma temperatura entre cerca de 40°C a cerca de150°C. A duração da reação pode ser mantida por um períodode aproximadamente 6 horas a cerca de 18 horas, porexemplo, cerca de 12 horas.

A hidrólise do composto de fórmula (Ie) gerou ocomposto de fórmula (If), em que todos os símbolos sãodefinidos como anteriormente. 0 solvente usado na reaçãopode ser selecionado de diclorometano, dicloroetano,piridina, clorofórmio, tetraclorometano, etilacetato,metanol, etanol, isopropanol, n-propanol, butanol, acetona,acetonitrila, dimetilformamida, dimetilsulfóxido,tetrahidrofurano, água e outros mais, ou uma misturadestes. A hidrólise pode ser realizada na presença de ácidoou base, por exemplo, na presença de base, por exemplo,hidróxido de sódio, hidróxido de potássio, carbonato desódio, carbonato de potássio e outros mais. A reação podeser realizada em uma temperatura entre cerca de 250C acerca de 75°C. A duração da reação pode ser mantida por umperíodo de aproximadamente 25 minutos a cerca de 3 horas,por exemplo, cerca de 4 5 minutos.

0 composto de fórmula (If) foi convertido em compostode fórmula (Ig) na presença de NH2-Rc, em que todos ossímbolos são definidos como anteriormente. 0 solvente usadona reação pode ser selecionado de diclorometano,dicloroetano, piridina, clorofórmio, tetraclorometano,etilacetato, metanol, etanol, isopropanol, n-propanol,butanol, acetona, acetonitrila, dimetilformamida,dimetilsulfóxido, tetrahidrofurano, água e outros mais, ouuma mistura destes. A reação pode ser realizada em umatemperatura entre cerca de 25°C a cerca de 75°C. A duraçãoda reação pode ser mantida por um período deaproximadamente 1 hora a cerca de 5 horas, por exemplo,cerca de 2 horas.

Processo 2

O composto de fórmula (Ia) foi convertido em umcomposto de fórmula (Ib) na presença de tiofosgeno epiridina, em que todos os símbolos são definidos comoanteriormente. O solvente usado na reação pode serselecionado de diclorometano, dicloroetano, piridina,clorofórmio, tetraclorometano, etilacetato, metanol,etanol, isopropanol, n-propanol, butanol, acetona,acetonitrila, dimetilformamida, dimetilsulfóxido,tetrahidrofurano, água e outros mais, ou uma misturadestes. A reação pode ser realizada em uma temperaturaentre cerca de -IO0C a cerca de 45°C. A duração da reaçãopode ser mantida por um período de aproximadamente 5minutos a cerca de 2 horas, por exemplo, cerca de 3 0minutos.

O composto de fórmula (Ib) foi convertido em umcomposto de fórmula (Ic) na presença de amônia ou soluçãoaquosa de amônia, em que todos os símbolos são definidoscomo anteriormente. 0 solvente usado na reação pode serselecionado de diclorometano, dicloroetano, piridina,clorofórmio, tetraclorometano, etilacetato, metanol,etanol, isopropanol, n-propanol, butanol, acetona,acetonitrila, dimetilformamida, dimetilsulfóxido,tetrahidrofurano, água e outros mais, ou uma misturadestes. A reação pode ser realizada em uma temperaturaentre cerca de 10°C a cerca de 45°C. A duração da reaçãopode ser mantida por um período de aproximadamente 1 hora acerca de 10 horas, por exemplo, cerca de 6 horas.

0 composto de fórmula (Ie) foi obtido por reação docomposto de fórmula (Ic) com o composto de fórmula (Id), emque X representa um grupo retirante, por exemplo, um átomode halogênio, p-toluenossulfonato, metanossulfonato,trifluormetano sulfonato ou outros mais, Ri é selecionadode alquil com 1 a 5 átomos de carbono, em que exemplos nãolimitantes incluem metil, etil, n-propil, isopropil ou n-butil, e os outros símbolos são como definidosanteriormente. 0 solvente usado na reação pode serselecionado de diclorometano, dicloroetano, piridina,clorofórmio, tetraclorometano, etilacetato, metanol,etanol, isopropanol, n-propanol, butanol, acetona,acetonitrila, dimetilformamida, dimetilsulfóxido,tetrahidrofurano, água e outros mais, ou uma misturadestes. A reação pode ser realizada em uma temperaturaentre cerca de IO0C a cerca de 45°C. A duração da reaçãopode ser mantida por um período de aproximadamente 1 hora acerca de 10 horas, por exemplo, cerca de 6 horas.

A hidrólise do composto de fórmula (Ie) gerou ocomposto de fórmula (If), em que todos os símbolos são comodefinidos anteriormente. 0 solvente usado na reação podeser selecionado de diclorometano, dicloroetano,tetraclorometano, etilacetato, isopropanol, n-propanol,butanol, piridina, clorofórmio, metanol, etanol, acetona,acetonitrila, dimetilformamida, dimetilsulfóxido,tetrahidrofurano, água e outros mais, ou uma misturadestes. A hidrólise pode ser realizada na presença de ácidoou base, por exemplo, na presença de base, por exemplo,hidróxido de sódio, hidróxido de potássio e outros mais. Areação pode ser realizada em uma temperatura entre cerca de250C a cerca de 65°C. A duração da reação pode ser mantidapor um período de aproximadamente 25 minutos a cerca de 2horas, por exemplo, cerca de 4 5 minutos.

Processo 3

<formula>formula see original document page 27</formula>

0 composto de fórmula (Ia) foi convertido em umcomposto de fórmula (Ib) na presença de tiofosgeno epiridina, em que todos os símbolos são definidos comoanteriormente. 0 solvente usado na reação pode serselecionado de diclorometano, dicloroetano, piridina,clorofórmio, tetraclorometano, etilacetato, metanol,etanol, Isopropanol, n-propanol, butanol, acetona,acetonitrila, dimetilformamida, dimetilsulfóxido,tetrahidrofurano, água e outros mais, ou uma misturadestes. A reação pode ser realizada em uma temperaturaentre cerca de -IO0C a cerca de 45°C. A duração da reaçãopode ser mantida por um período de aproximadamente 5minutos a cerca de 2 horas, por exemplo, cerca de 3 0minutos.

0 composto de fórmula (Ib) foi convertido em umcomposto de fórmula (Ic) na presença de amônia ou soluçãoaquosa de amônia, em que todos os símbolos são definidoscomo anteriormente. 0 solvente usado na reação pode serselecionado de diclorometano, dicloroetano, piridina,clorofórmio, tetraclorometano, etilacetato, metanol,etanol, isopropanol, n-propanol, butanol, acetona,acetonitrila, dimetilformamida, dimetilsulfóxido,tetrahidrofurano, água e outros mais, ou uma misturadestes. A reação pode ser realizada em uma temperaturaentre cerca de IO0C a cerca de 45°C. A duração da reaçãopode ser mantida por um período de aproximadamente 1 hora acerca de 10 horas, por exemplo, cerca de 6 horas.

0 composto da fórmula (Ie) foi obtido por reação docomposto de fórmula (Ic) com o composto de fórmula (Id), emque X representa um grupo retirante, por exemplo, um átomode halogênio, p-toluenossulfonato, metanossulfonato,trifluormetano sulfonato ou outros mais, Ri é selecionadode alquil com 1 a 5 átomos de carbono, em que exemplos nãolimitantes incluem metil, etil, n-propil, isopropil ou n-butil, e os outros símbolos são como definidosanteriormente. O solvente usado na reação pode serselecionado de diclorometano, dicloroetano, piridina,clorofórmio, tetraclorometano, etilacetato, metanol,etanol, isopropanol, n-propanol, butanol, acetona,acetonitrila, dimetilformamida, dimetilsulfóxido,tetrahidrofurano, água e outros mais, ou uma misturadestes. A reação pode ser realizada em uma temperaturaentre cerca de IO0C a cerca de 45°C. A duração da reaçãopode ser mantida por um período de aproximadamente 1 hora acerca de 10 horas, por exemplo, cerca de 6 horas.

Os exemplos e os procedimentos experimentais seguintessão meramente ilustrativos, e os compostos do presentepedido não se limitam às modalidades seguintes em qualquercaso. Aqueles habilitados na técnica podem implementar opresente pedido no máximo alterando-se de forma variada,não somente os exemplos seguintes, mas também asreivindicações da presente especificação, e tais alteraçõesestão incluídas nas reivindicações da presenteespecificação.

Exemplo 1

Síntese de ãcido [2-(4-trifluormetil-fenilamino)-tiazol-4-il]-acético

<formula>formula see original document page 29</formula>

Etapa (i) : Preparação de l-Isotiocianato-4-trifluormetil-benzeno<formula>formula see original document page 30</formula>

Tiofosgeno (5 ml) foi adicionado em porções a umasolução agitada de 4-trifluormetil-fenilamina (10 gramas) epiridina (12,5 ml) em diclorometano (2 litros) a 0°C. Areação foi mantida na mesma temperatura por 3 0 minutos. Amistura de reação foi então diluída com diclorometano elavada várias vezes com uma solução saturada de sulfato decobre, seguido por água, seca sobre sulfato de sódio eevaporando, para gerar o produto bruto, que foiadicionalmente purificado por passagem através de umacoluna de sílica gel, para gerar o produto puro (11gramas).

Ponto de fusão: 45-47°C.

MS: 204 (M++l) ; 1H RMN (CDCl3): 7,62 (d, J = 7,6 Hz,

2H) , 7,32 (d, J = 7,6 Hz, 2H) ; IR (cm-1) : 3.442,2.925, 2.099, 1.654, 1.327, 1.126, 1.067.

Etapa (ii): Preparação de (4-trifluormetil-fenil)tiouréia

<formula>formula see original document page 30</formula>

Uma solução de l-isotiocianato-4-trifluormetil-benzeno(5 gramas) , obtida na etapa (i) , em acetona (10 ml) , foiadicionada à amônia aquosa agitada (100 ml). A solução foiagitada em torno de 25-35°C por cerca de 6 horas. 0 sólidoobtido foi filtrado e seco e usado para reaçõesposteriores.

Ponto de fusão: 136-139°C.

MS: 221 (M++l) ; 1H RMN (DMS0-d6) 10,03 (s, 1H) , 7,78(br m, 6H) ; IR (cm"1): 3.458, 3.282, 3.184, 1.628,1.524, 1.325, 1.122.

Etapa (iii) : Preparação de éster etílico de ácido [2-(4-trifluormetil fenilamino)-tiazol-4-il]-acético

<formula>formula see original document page 31</formula>

Éster etílico de ácido 4-cloro-3-oxo-butírico foiadicionado a uma suspensão de (4-trifluormetil-fenil)-tiouréia (3 gramas), obtida na etapa (ii) , em etanol (20ml), e refluído por cerca de 12 horas. A mistura de reaçãofoi resfriada, e o sólido obtido foi filtrado e seco, paragerar o produto puro (4,1 gramas).

Ponto de fusão: 172-175°C.

MS: 331 (M++l) ; 1H RMN (DMSOds) 10,85 (br, 1H) , 7,81(d, J = 8,8 Hz), 6,64 (d, J = 8,8 Hz, 1H) , 6,80, (s,1H) , 4,11 (q, J = 7,2 Hz, 2H) , 3,68 (s, 2H) , 1,21 (t,J = 7,2 Hz, 3H) ; IR (cm-1): 3.442, 2.924, 1.730,1.608, 1.569, 1.327, 1.196, 1.131.

Etapa (iv): Preparação de ácido [2-(4-trifluormetil-fenilamino)-tiazol-4-il]-acético

<formula>formula see original document page 31</formula>

Éster etílico de ácido [2-(4-trifluormetil-fenilamino)-tiazol-4-il]-acético (4 gramas), obtido naetapa (iii), foi dissolvido em etanol mínimo, e hidróxidode sódio 10% (30 ml) foi adicionado e agitado a cerca de25-35°C por cerca de 45 minutos. A mistura de reação foientão diluída com água e neutralizada com ácido cítricoaquoso saturado. 0 sólido precipitado foi filtrado, lavadocom água e seco, para gerar o produto (3,2 gramas).Ponto de fusão: 169-171°C.

MS: 303 (M++l) , 259 (M+-CO2); 1H RMN (DMS0-d6) : 12,33(br, 1H) , 10,56 (br, 1H) , 7,78 (d, J = 8,4 Hz, 2H) ,7,64 (d, J = 8,4 Hz, 2H), 6,76 (s, 1H), 3,59 (s, 1H);IR (cm-1): 3.001, 1.687, 1.435.

Os compostos dos Exemplos 1-a a 1-r, fornecidos naTabela 1 abaixo, foram preparados de acordo com a formadescrita no Exemplo 1:

TABELA 1

Os exemplos apresentados na tabela abaixo foramobtidos definindo-se os vários grupos/valores para Ra, Rb,B e m na fórmula geral abaixo:

<table>table see original document page 32</column></row><table><table>table see original document page 33</column></row><table><table>table see original document page 34</column></row><table><table>table see original document page 35</column></row><table><table>table see original document page 36</column></row><table><table>table see original document page 37</column></row><table><table>table see original document page 32</column></row><table>

Exemplo (1-s):

Ácido [2-(4-hidróxi-fenilamino)-tiazol-4-il]-acético

Ácido [2-(4-benzilóxi-fenilamino)-tiazol-4-il]-acético(1,0 grama), obtido no Exemplo 1-f, foi dissolvido em ácidotrifluoracético (5 ml) e refluído por cerca de 1 hora. 0ácido trifluoracético foi removido à vácuo, e o produto foicristalizado por etanol.

Ponto de fusão: 150-152°C.MS: 251 (M++l).1H RMN (DMSO-ds) : 12,40 (br, 1H) , 9,79 (br, 1H) , 9,09(br, 1H), (7,33 9d, J = 8,8 Hz, 2H), 6,71 (d, J = 8,4Hz, 2H), 6,51 (s, 1H), 3,49 (s, 2H).

IR (cm-1): 3.114, 2.750, 1.629, 1.370.

Exemplo 2

Preparação de ácido 2-(4-Trifluormetil-fenilamino)-tiazol4-carboxxlico

<formula>formula see original document page 39</formula>

Ester etllico de ácido 3-bromo-2-oxo-propiônico (0,59ml) foi adicionado a uma suspensão de (4-trifluormetil-fenil)-tiouréia (1 grama) obtida na etapa (ii) do Exemplo1, em etanol (20 ml), e refluída por cerca de 12 horas. Amistura de reação foi resfriada, e o sólido obtido foifiltrado e dissolvido em uma quantidade mínima de etanol.

Solução de hidróxido de sódio 10% (10 ml) foi adicionada eagitada a cerca de 25-35°C por cerca de 12 horas. A misturade reação foi então diluída com água e acidificada comsolução saturada de ácido cítricô. 0 sólido precipitado foifiltrado, lavado com água e seco, para gerar o produto(0,65 grama).

Ponto de fusão: 255-259°C.

MS: 288 (M+); 1H RMN (DMS0-d6) 12,3 (br, 1H) , 10,8 (s,

1H), 7,9-7,8 (m, 3H) 7,7-7,6 (m, 2H);

IR (cm"1): 3.442, 1.722, 1.331.

Os compostos dos Exemplos 2-a a 2-d, fornecidos naTabela 2 abaixo, foram preparados de acordo com a formadescrita no Exemplo 2:

Os exemplos apresentados na tabela abaixo foram

TABELA 2obtidos definindo-se os vários grupos/valores para Ra, Rb em na fórmula geral abaixo:

<table>table see original document page 40</column></row><table><table>table see original document page 41</column></row><table>

Os compostos dos Exemplos 3-a a 3-e, fornecidos naTabela 3 abaixo, foram preparados de acordo com a formadescrita no Exemplo 1, utilizando-se o material de partidaadequado.

TABELA 3

<table>table see original document page 41</column></row><table><table>table see original document page 42</column></row><table><table>table see original document page 43</column></row><table>

Os símbolos nas tabelas possuem os seguintessignificados:

Ex - significa número do Exemplo;

Dados - significam propriedades físico-químicas;

RMN - é o espectro de ressonância magnética nuclear;

MS - são espectros de massa;

IR - é espectroscopia infravermelha;

iPr - é isopropil.

Sais farmaceuticamente aceitáveis do presente pedidoincluem sais com bases inorgânicas, sais com basesorgânicas, sais com ácidos inorgânicos, sais com ácidosorgânicos e sais com aminoácidos básicos ou ácidos.

Exemplos de sais com bases inorgânicas incluem, semlimitação, sais de metal alcalino, tais como sal de sódio esal de potássio, sais de metal alcalino terroso, tais comosal de cálcio e sal de magnésio, além de sal de alumínio esal de amônio. Exemplos de sais com bases orgânicas incluemaqueles que são formados com trimetilamina, trietilamina,piridina, picolina, etanolamina, dietanolamina,trietanolamina, diciclohexilamina e Ν,N1-dibenzil-etilenediamina. Exemplos de sais com ácidos inorgânicosincluem, sem limitação, aqueles que são formados com ácidoclorídrico, ácido hidrobrômico, ácido nítrico, ácidosulfúrico e ácido fosfórico. Exemplos de sais com ácidosorgânicos incluem aqueles que são formados com ácidofórmico, ácido acético, ácido trifluoracético, ácidofumárico, ácido oxálico, ácido tartárico, ácido maléico,ácido cítrico, ácido succínico, ácido málico, ácidometanossulfônico, ácido benzenossulfônico e ácido p-toluenossulfônico. Exemplos de sais com aminoácidos básicosincluem aqueles que são formados com arginina, lisina eornitina. Exemplos ideais de sais com aminoácidos ácidosincluem aqueles que são formados com ácido aspártico eácido glutâmico.

Um pró-fármaco do composto de fórmula (I) refere-se aum composto capaz de se converter no composto de fórmula(I) pela ação de enzimas, ácido gástrico e outros mais, sobcondições fisiológicas in vivo. Especificamente, umcomposto capaz de se converter no composto de fórmula (I)através, por exemplo, de (a) oxidação enzimática, reduçãoe/ou hidrólise ou (b) hidrólise por ácido gástrico.

Exemplos de um pró-fármaco do composto de fórmula (I)incluem:

(A) compostos obtidos quando um grupo amino docomposto de fórmula (I) é acilado, alquilado oufosforilado, tais como aqueles obtidos quando um grupoamino do composto de fórmula (I) é eicosanoilado,alanilado, pentilaminocarbonilado, (5-metil-2-oxo-1, 3-dioxolen-4-il)metoxicarbonilado, tetrahidro-furanilado,tetrahidropiranilado, pirrolidilmetilado,pivaloiloximetilado ou terc-butilado;

(B) compostos obtidos quando um grupo hidróxi docomposto de fórmula (I) é acilado, alquilado, fosforiladoou boratado, tais como aqueles obtidos quando um grupohidróxi do composto de fórmula (I) é acetilado,palmitoilado, propanoilado, pivaloilado, succinilado,fumalilado, alanilado, dimetilaminometilcarbonilado outetrahidro-piranilado; e

(C) compostos obtidos quando um grupo carboxil docomposto de fórmula (I) é esterificado ou amidado, taiscomo aqueles obtidos quando um grupo carboxil do compostode fórmula (I) é etil esterificado, fenil esterificado,carboximetil esterificado, dimetilaminometil esterificado,pivaloiloximetil esterificado, etoxicarboniloxietilesterificado, ftalidil esterificado, (5-metil-2-oxo-l,3-dioxolen-4-il)metil esterificado, ciclohexiloxicarboniletilesterificado ou metilamidado. Esses compostos podem serpreparados a partir do composto de fórmula (I) de uma formaconhecida.

Os compostos do presente pedido são úteis comoativadores de AMP quinase. O sistema AMPK é o alvo provávelpara compostos antidiabéticos conhecidos como, por exemplo,metformina. O recrutamento aumentado do sistema desinalização de AMPK, tanto por excesso de ativadores quantopor ativadores farmacêuticos, pode ter efeitos benéficos.Espera-se que a ativação in vivo de AMPK tenha efeitosbenéficos profundos. Espera-se que, no fígado, a expressãodiminuída de enzimas gliconeogênicas reduza a saída deglicose hepática e melhore a homeostasia global da glicose.

Além disso, espera-se que tanto a inibição direta quanto aexpressão reduzida de enzimas cruciais no metabolismolipídico levem à diminuição da síntese de ácido graxo ecolesterol e ao aumento da oxidação de ácido graxo. Espera-se que a estimulação de AMPK no músculo esquelético aumentea captação de glicose e a oxidação de ácido graxo,resultando em uma melhora da homeostasia da glicose.Espera-se também que, em função de uma redução no acúmulointra-miócito de triglicerídeos, a estimulação leve a umamelhora da ação da insulina.

0 potencial de ativação de AMPK dos compostos defórmula (I) foi avaliado com a utilização de uma abordagemde ELISA baseada em células. Células de músculo esqueléticoL6 e células hepáticas HepG2 de hepatoma foram cultivadaspor 4 8 horas, antes da adição de fármaco em váriasconcentrações. Vinte e quatro horas mais tarde, as célulasforam fixadas e as placas de ELISA foram desenvolvidas deacordo com um protocolo-padrão com o uso de anticorpo p-AMPK específico.

Teste ELISA:

Várias linhagens celulares, tais como HepG2 e L6,foram reavivadas de estoques de glicerol (ATCC). As célulasforam mantidas em um frasco de cultura T 75 contendo meio(DMEM + soro fetal de bezerro 10%) . Ao alcançarem umaconfluência de 70% a 80%, as células eram semeadas em umaplaca de 96 poços em uma densidade de 10 χ IO3 células porpoço em meio DMEM + FCS 10%. As placas eram então incubadasa 370C com CO2 5% por 4 8 horas. Foram preparadas váriasconcentrações de fármacos em DMSO e elas foram diluídas atéa concentração necessária com o meio, e incubadas a 370Ccom CO2 5% por 24 horas. As células foram fixadas comformaldeído 4% em PBS por 30 minutos a 25-35°C, e lavadastrês vezes com PBS contendo Triton X-100 0,1%. A peroxidaseendógena foi extinta com H2O2 0,6% em PBS-T por 30 minutos,e lavada três vezes em PBS-T. As células foram entãobloqueadas com FCS 10% em PBS-T por 1 hora. As célulasforam incubadas por 8-12 horas com várias concentrações deanticorpo primário em PBS-T contendo BSA 5% a 4°C, seguidopor lavagem três vezes com PBS-T por 5 minutos e incubaçãocom um anticorpo secundário (conjugado HRP 1:500 em PBS-Tcom BSA 5%) por 1 hora a 25-35°C. As células foram lavadastrês vezes com PBS-T por 5 minutos e duas vezes com PBS, eincubadas com 100 μΐ de solução de desenvolvimento de corTMB/H2O2 por 15 minutos. A reação foi interrompida com 50μΐ de 1 M de H2SO4. A placa era então lida a 460 nM com ouso de uma leitora de placas de ELISA.

As percentagens de ativação de AMPK para várioscompostos são apresentadas na tabela abaixo (aspercentagens de potencial de ativação de AMPK são obtidasnormalizando-se os valores obtidos na concentração de 10 μΜcom aquela de metformina considerando-se os valores obtidospara metformina em concentrações de 2 mM como 100%).

<table>table see original document page 47</column></row><table><table>table see original document page 48</column></row><table>

As composições farmacêuticas do presente pedido podemser preparadas por mistura, e estão adaptadas adequadamentepara administração oral, parenteral ou tópica e, como tal,podem estar na forma de comprimidos, cápsulas, preparaçõesorais líquidas, pós, grânulos, pílulas, pastilhas, pósreconstituíveis, soluções ou suspensões injetáveis e parainfusão, supositórios e dispositivos transdérmicos.

Solvatos dos derivados de tiazol do presente pedidopodem ser preparados por métodos convencionais, tais comodissolução do derivado de tiazol em solventes como água,metanol, etanol e outros mais.

Hidratos dos derivados de tiazol do presente pedidonecessitam da presença de água em algum estágio; a águapode ser adicionada como um co-solvente no processo. Noentanto, também é possível fornecer água suficiente para aformação de hidrato realizando-se a reação com exposição àumidade atmosférica, ou com o uso de solventes não anidros.

Os comprimidos e as cápsulas para administração oralsão normalmente apresentados em uma dose unitária, e contêmexcipientes convencionais, tais como agentes ligantes,enchimentos, diluentes, agentes de formação de comprimidos,lubrificantes, desintegrantes, corantes, flavorizantes eagentes umidificantes. Os comprimidos podem ser revestidosde acordo com métodos conhecidos na técnica.

Enchimentos adequados para uso incluem celulose,manitol, lactose e outros agentes similares. Desintegrantesadequados incluem amido, polivinilpirrolidona e derivadosde amido, tais como sódio amido glicolato. Lubrificantesadequados incluem, por exemplo, estearato de magnésio.

Agentes umidificantes farmaceuticamente adequados incluemlauril toluenossulfonato de sódio.

Composições orais sólidas podem ser preparadas pormétodos convencionais, tais como mistura, enchimento,formação de comprimidos e outros mais. Podem ser utilizadasoperações repetidas de mistura para distribuir o agenteativo por todas essas composições com o emprego de grandesquantidades de enchimentos. Essas operações são,evidentemente, convencionais na técnica.

Preparações orais líquidas podem estar na forma de,por exemplo, suspensões aquosas ou oleosas, soluções,emulsões, xaropes ou elixires, ou podem ser apresentadascomo um produto seco para reconstituição com água ou outroveículo adequado, antes da utilização. Essas preparaçõeslíquidas podem conter aditivos convencionais, tais comoagentes de suspensão, por exemplo, sorbitol, xarope, metilcelulose, gelatina, hidroxietilcelulose, carboximetilcelulose, gel de estearato de alumínio ou gordurashidrogenadas comestíveis; agentes emulsificantes, porexemplo, Iecitina, monooleato de sorbitano, ou acácia;veículos não aquosos (que podem incluir óleos comestíveis),por exemplo, óleo de amêndoas, óleo de coco f racionado,ésteres oleosos, tais como ésteres de glicerina, propilenoglicol, ou álcool etílico; conservantes, por exemplo, p-hidroxibenzoato de metila ou propila ou ácido sórbico; e,se desejado, agentes flavorizantes ou corantesconvencionais.

Para administração parenteral, formas de dosagemunitária fluidas são preparadas através de um composto dopresente pedido e um veículo estéril. 0 composto,dependendo do veículo e da concentração, pode tanto sersuspenso quanto dissolvido. Soluções parenterais sãopreparadas normalmente dissolvendo-se o composto ativo emum veículo e realizando-se esterilização por filtração,antes de serem colocadas em um frasco adequado ou ampola eserem lacradas. Vantajosamente, adjuvantes, por exemplo,anestésico local, conservantes e agentes de tamponamento,também podem ser dissolvidos no veículo. Para aumentar aestabilidade, a composição pode ser congelada após sercolocada no frasco e a água removida sob vácuo.

Suspensões parenterais são preparadas substancialmenteda mesma forma, exceto que o composto ativo é suspenso noveículo em vez de ser dissolvido e é esterilizado porexposição ao óxido de etileno, antes de ser suspenso noveículo estéril. Vantajosamente, um tensoativo ou agenteumidificante é incluxdo na composição para facilitar adistribuição uniforme do composto ativo.

Claims

1. Derivado de tiazol caracterizado por ser umcomposto da fórmula (I) <formula>formula see original document page 51</formula> e/ou um sal farmaceuticamente aceitável ou um solvato ouum hidrato do mesmo, ondeRa é escolhido de hidroxi, perfluoroalquil (C1-C5), deacila (C1-C5), arila, heterocicloalquil, heteroaril,ariloxi, alquilariloxi, -O- alquilaril (C1-C5), -S- alquil(C1-C5) , -S- perf luoroalquil (C1-C5) , -S- aril ou -S-alquilaril (C1-C5);Rb é - ORi, onde Rl é hidrogênio ou alquil (C1-C8) ;B é escolhido independentemente de -CH2, -CH(CH3)-,-C(CH3)2- e -C(CH3)(C2H5)-; em varia entre O e 2, inclusive.

2. Derivado de tiazol, de acordo com a reivindicação-1, caracterizado pelo fato do composto ter a fórmula (II): <formula>formula see original document page 51</formula> que composto é uma espécie livre, e/ou um salfarmaceuticamente aceitável ou um solvato ou um hidrato domesmo, ondeRa é escolhido do perfluoroalquil (C1-C5), acil (Cl-C5), arila, do heterocicloalquil, heteroaril, ariloxi,alquilariloxi, -S- alquil (C1-C5), -S-perfluoroalquil (Cl-C5), -S-arila ou -S- alquilaril(C1-C5); eRb é -ORl, onde Rl é hidrogênio ou alquil (C1-C8).

3. Derivado de tiazol, de acordo com a reivindicação-2, caracterizado pelo fato do Ra ser perf luoroalquil (Cl-C5).

4. Derivado de tiazol, de acordo com a reivindicação-3, caracterizado pelo fato do Ra ser trif luromethyl.

5. Derivado de tiazol, de acordo com a reivindicação-4, caracterizado pelo fato do composto ter a fórmula (III): <formula>formula see original document page 52</formula> onde Rl é hidrogênio ou alquil (C1-C3).

6. Derivado de tiazol, de acordo com a reivindicação-1, caracterizado pelo fato do Ra ser tiazolila que tem aestrutura <formula>formula see original document page 52</formula> R2 que está sendo escolhido do halogênio, (Cl-C5)perfluoroalquil, alquil (C1-C5), (C1-C5)alquilaril,arila, haloaril e perfluoroalquilaril (C1-C5).

7. Derivado de tiazol, de acordo com a reivindicação-1, caracterizado pelo fato Ra ser heterocycloalkyl que tema estrutura -NR3R4, onde R3 e R4, junto com o átomo donitrogênio do grupo - NR3R4, dá forma a um grupo de 5- oude heterocicloalquil 6-memtaered.

8. Derivado de tiazol, de acordo com a reivindicação-7, caracterizado pelo fato do grupo do heterocicloalquil émorfolinil,

9. Pró-fármaco de éster do derivado de tiazol dareivindicação 1 de acordo com a fórmula (I), caracterizadopelo fato de Rl ser hidrogênio.

10. Pró-fármaco de éster do derivado de tiazol dareivindicação 5 de acordo com a fórmula (III),caracterizado pelo fato de Rl ser hidrogênio.

11. Derivado de tiazol, de acordo com a reivindicação-1, caracterizado por ter a estrutura

12. Derivado de tiazol, de acordo com a reivindicação-1, caracterizado por ter a estrutura

13. Derivado de tiazol, de acordo com a reivindicação-1, caracterizado por ter a estrutura <formula>formula see original document page 53</formula>

14. Derivado de tiazol, de acordo com a reivindicação-1, caracterizado por ter a estrutura

15. Derivado de tiazol, de acordo com a reivindicação-1, caracterizado por ter a estrutura <formula>formula see original document page 54</formula>

16. Derivado de tiazol, de acordo com a reivindicação-1, caracterizado por ter a estrutura <formula>formula see original document page 54</formula>

17. Derivado de tiazol, caracterizado por ser umcomposto da fórmula (I): <formula>formula see original document page 54</formula> e/ou um sal farmaceuticamente aceitável ou um solvato ou umhidrato, ondeRa é escolhido de hydroxy, o perfluoroalkyl (C1-C5),(C1-C5) o acyl, arilo, heterocycl?alkyl, heteroaryl,aryloxy, alkylaryloxy, fluoro?hloro, bromo, (Cl-C5)perfluoroalkoxy, alkyl (C1-C5), e o grupo da estrutura -XRc. onde X é oxigênio ou enxofre, e Rb estão o hidrogênio,o alkyl (C1-C5), o perfluoroalkyl (C1-C5) , o arilo ou oalkylaryl (C1-C5),Rb é - ORl, onde Rl é hidrogênio ou alkyl (C1-C8);B é escolhido independentemente - CH2, - de CH(CH3) -e - C (CH3) 2 -, - C (CH3) (C2H5) -; em varia entre O e 2, inclusive;que derivado do tiazol Ampère-ativou a atividade dokinase de proteína ao menos de aproximadamente 75% - 95% empilhas do músculo esqueletal do músculo L6 . e ao menosaproximadamente 65% - 95% em pilhas do hepatoma-músculoHep-G2 como determinadas assaying em uma pilha baseou oassay do imuno.

18. Derivado de tiazol, de acordo com a reivindicação-17, caracterizado pelo fato do potencial ativado ampèredito do kinase de proteína é ao menos aproximadamente 75%em pilhas do músculo L6 esqueletal e ao menos deaproximadamente 65% em pilhas hep do fígado do hepatoma G2.

19. Derivado de tiazol, de acordo com a reivindicação-17, caracterizado pelo fato do ampère dito ativou aproteína, potencial do kinase é ao menos aproximadamente85% em pilhas do músculo L6 esqueletal e ao menos deaproximadamente 85% em pilhas hep do fígado do hepatoma G2,

20. Derivado de tiazol, de acordo com a reivindicação-17, caracterizado pelo fato do ampère dito aotivated opotencial do kinase de proteína é ao menos aproximadamente-90% em pilhas do músculo L6 esqueletal e ao menos deaproximadamente 90% em pilhas hep do fígado do hepatoma G2.

21. Derivado de tiazol, de acordo com a reivindicação-17, caracterizado pelo fato do composto tem a fórmula (II): <formula>formula see original document page 56</formula> ondeRa é escolhido (C1-C5)perfluoroalkyl, acyl (C1-C5),arilo, heterocycloalkyl, heteroaryl, aryloxy, alkylaryloxy,- alkyl do s (C1-C5) , - S-(C1-C5) do perf luoroalkyl, - S-arilo ou - alkylaryl de S-(Cl- C5); eRb é - ORl, onde Rl é hidrogênio ou alkyl (C1-C8),

22. Derivado de tiazol, de acordo com a reivindicação-21, caracterizado pelo fato do potencial ativado ampèredito do kinase de proteína é ao menos aproximadamente 75%em pilhas do músculo L6 esqueletal e ao menos deaproximadamente 65% em pilhas hep do fígado do hepatoma G2.

23. Derivado de tiazol, de acordo com a reivindicação-21, caracterizado pelo fato do potencial ativado ampèredito do kinase de proteína é ao menos aproximadamente 85%em pilhas do músculo L6 esqueletal e ao menos deaproximadamente 85% em pilhas hep do fígado do hepatoma G2.

24. Derivado de tiazol, de acordo com a reivindicação-21, caracterizado pelo fato do potencial ativado ampèredito do kinase de proteína é ao menos aproximadamente 90%em pilhas do músculo L6 esqueletal e ao menos deaproximadamente 90% em pilhas hep do fígado do hepatoma G2.

25. Método de ativar a kinase de proteína Ampère-ativado (AMPK) no sujeito humano ou animal, caracterizadopor compreender a administração do sujeito com umaquantidade eficaz do derivado do tiazol da reivindicação-21.

26. Composição farmacêutica caracterizada porcompreender um ou mais derivados de tiazol da reivindicação-1 e um ou mais excipientes farmaceuticamente aceitáveis.

27. Composição farmacêutica caracterizada porcompreender um ou mais derivados de tiazol da reivindicaçãoe um ou mais excipientes farmaceuticamente aceitáveis.

28. Composição farmacêutica caracterizada porcompreender um ou mais derivados de tiazol da reivindicação-2 e um ou mais excipientes farmaceuticamente aceitáveis.

29. Pró-fármaco de éster do derivado de tiazol dareivindicação 1 de acordo com a reivindicação 2 de acordocom a fórmula (II) , caracterizado pelo fato de Rl serhidrogênio.

30. Composição farmacêutica caracterizada porcompreender um ou mais derivados de tiazol da reivindicação-17 e um ou mais excipientes farmaceuticamente aceitáveis.

31. Composição farmacêutica caracterizada porcompreender um ou mais derivados de tiazol da reivindicação-21 e um ou mais excipientes farmaceuticamente aceitáveis.

32. Derivado de tiazol, de acordo com a reivindicação-21, caracterizado pelo fato de Rn ser (Cl-C5)perfluoroalquil.

33. Derivado de tiazol, de acordo com a reivindicação-34, caracterizado pelo fato de ra ser triflurometil,

34. Derivado de tiazol, de acordo com a reivindicação-35, caracterizado pelo fato de composto dito tem a fórmula(III) : <formula>formula see original document page 57</formula>onde Rl é hidrogênio ou alkyl (C1-C3).

35. Derivado de tiazol, de acordo com a reivindicação-1, caracterizado pelo fato do derivado do tiazol Ampère-ativou o potencial do kinase de proteína.

36. Derivado de tiazol, de acordo com a reivindicação-35, caracterizado pelo fato do potencial ativado ampèredito do kinase de proteína é ao menos aproximadamente 75% --95% em pilhas do esqueletal-músculo do músculo L6 e aomenos aproximadamente 65% - 95% em pilhas do hepatoma-músculo Hep-G2.

37. Derivado de tiazol, de acordo com a reivindicação-35, caracterizado pelo fato do potencial ativado ampèredito do kinase de proteína é ao menos aproximadamente 75%em pilhas do músculo L6 esqueletal e ao menos deaproximadamente 65% em pilhas hep do fígado do hepatoma G2.

38. Derivado de tiazol, de acordo com a reivindicação-35, caracterizado pelo fato do potencial ativado ampèredito do kinase de proteína é ao menos aproximadamente 85%em pilhas do músculo L6 esqueletal e ao menos deaproximadamente 85% em pilhas hep do fígado do hepatoma G2.

39. Derivado de tiazol, de acordo com a reivindicação-35, caracterizado pelo fato do potencial ativado ampèredito do kinase de proteína é ao menos aproximadamente 90%em pilhas do músculo L6 esqueletal e ao menos deaproximadamente 90% em pilhas hep do fígado do hepatoma G2.

40. Método de ativar a kinase de proteína Ampère-ativado (AMPK) no sujeito humano ou animal, caracterizadopor compreender a administração ao sujeito com umaquantidade eficaz do derivado do tiazol da reivindicação 1.

41. Derivado de tiazol, de acordo com a reivindicação-35, caracterizado pelo fato do derivado do tiazol Ampère-ativou o potencial do kinase de proteína.

42. Derivado de tiazol, de acordo com a reivindicação-41, caracterizado pelo fato do potencial ativado ampèredito do kinase de proteína é ao menos aproximadamente 75% --95% em pilhas do esqueletal-músculo do músculo L6 e aomenos aproximadamente 65% - 95% em pilhas do hepatoma-músculo Hep-G2.

43. Derivado de tiazol, de acordo com a reivindicação-41, caracterizado pelo fato do potencial ativado ampèredito do kinase de proteína é ao menos aproximadamente 75%em pilhas do músculo L6 esqueletal e ao menos deaproximadamente 65% em pilhas hep do fígado do hepatoma G2.

44. Derivado de tiazol, de acordo com a reivindicação-41, caracterizado pelo fato do potencial ativado ampèredito do kinase de proteína é ao menos aproximadamente 85%dentro Pilhas do músculo L6 esqueletal e ao menos deaproximadamente 85% em pilhas hep do fígado do hepatoma G2.

45. Derivado de tiazol, de acordo com a reivindicação-41, caracterizado pelo fato do potencial ativado ampèredito do kinase de proteína é ao menos aproximadamente 90%dentro Pilhas do músculo L6 esqueletal e ao menos deaproximadamente 90% em pilhas hep do fígado do hepatoma G2.

46. Método de ativar a kinase de proteína Ampère-ativado (AMPK) no sujeito humano ou animal, caracterizadopor compreender a administração ao sujeito com umaquantidade eficaz do derivado do tiazol da reivindicação 5.