BRPI0612568A2

BRPI0612568A2 - inibidores de cisteìna protease

Info

Publication number: BRPI0612568A2
Application number: BRPI0612568-9A
Authority: BR
Inventors: Matt Tozer; Urszula Grabowska; David Tickle; Kevin Parkes
Original assignee: Midivir Ab
Priority date: 2005-07-07
Filing date: 2006-07-06
Publication date: 2010-11-30
Also published as: CA2610817A1; EP1899336A1; GB0513839D0; CN101258153A; US20090023747A1; AU2006268752A1; JP2009500376A; WO2007006716A1; MX2008000201A

Abstract

INIBIDORES DE CISTEINA PROTEASE Composto, da fórmula II, onde um de R' e R² é halo e o outro é H ou halo; R³ e cadeia C~1~-C~5~ linear ou ramificada, opcionalmente fluorada, alquila ou -CH~2~CR^5^ cicloalquila C~3 ~-C~4~; R^4^ é H; R^5^ é H, alquila C~1 1 C~2 ~, haloalquila C~1~-C~2, hidró- xi, O alquila C1-C2, flúor; R6 é um carbociclo ou heterociclo estável, opcionalmente substituido, monociclico ou bicícli- co, onde o ou cada anel possui 4, 5 ou 6 átomos e O a 3 he- tero átomos selecionados de S, O e N; Rb é haloalquila C¹- C^4^; R^5^ é H ou alquila C~1~-C~4~; e sais farmaceuticamente aceitáveis, hidratos e N-óxidos dos mesmos possuindo utilidade notratamento de transtornos caracterizados por expressão ina- propriada ou ativação da catepsina K, tais como, osteoporo- se, osteoartrite, artrite reumatóide ou metástase óssea.

Description

"INIBIDORES DE CISTEÍNA PROTEASE"

Campo da Invenção

A invenção se refere aos inibidores de cisteinaproteases, especialmente aqueles da superfamilia da papaina.

A invenção provê novos compostos úteis na profilaxia ou tra-tamento de transtornos extenuantes do desequilíbrio das pro-teases fisiológicas, tais como, catepsina K.

Descrição da Técnica Correlata

A superfamilia da papaina das cisteina proteases éamplamente distribuída em diversas espécies incluindo os ma-míferos, invertebrados, protozoários, plantas e bactérias.Várias enzimas de catepsina de mamíferos incluindo catepsi-nas B, F, Η, K, L, O e S foram atribuídas a essa superfami-lia, e a regulação inadequada de sua atividade vem sendo im-plicada em vários transtornos metabólicos incluindo artrite,distrofia muscular, inflamação, glomerulonefrite e invasãode tumor. Enzimas semelhantes a catepsina patogênica incluemas gingipaínas bacterianas, as falcipaínas malarianas I, II,III e seqüências e cisteina proteases de Pneumocystis cari-nii, Trypanosoma cruzei e brucei, Crithidia fusiculata, S-chistosoma spp.

A regulação inadequada da catepsina K vem sendoimplicada em vários transtornos incluindo osteoporose, doen-ças gengivais, tais como, gengivite e periodontite, doençade Paget, hipercalcemia de processos malignos e doença ósseametabólica. Em vista de seus níveis elevados de condroclas-tros do sinóvio osteoartrítico, a catepsina K está implicadanas doenças caracterizadas por cartilagem excessiva ou de-gradação da matriz, tais como, osteoartrite e artrite reuma-tóide. Células neoplásticas metastáticas tipicamente expres-sam altos níveis de enzimas proteolíticas que degradam a ma-triz circundante e a inibição da catepsina pode assim auxi-liar no tratamento de neoplasias.

0 Pedido de Patente Internacional númeroW002057270 revela os compostos da fórmula I:

onde UVWXY corresponde amplamente ao P3 e P3 dos inibidoresde cisteína proteína dipeptídeo, Z é entre outros, O, S, me-tileno ou -NR-, R1 é alquila, alquilarila, etc. e Pl e Qlsão cada um, metileno, opcionalmente substituído com váriascadeias de carbono e grupos cíclicos. Alega-se que os com-postos são úteis para o tratamento de infecções por protozo-ários, tais como, tripanossomas. Não existe revelação espe-cífica de isoésteres haloalquila da ligação de amida P2/P3.

Nós descobrimos agora que a introdução de um átomode halogênio em uma posição de anel específica, em conjuntocom halogenação da ligação P3/P2, produz inibidores potentesda catepsina K.

Breve Descrição da Invenção

De acordo com a invenção, são providos compostosda fórmula II:<formula>formula see original document page 4</formula>

onde:

um de R1 e R2 é halo e o outro é H ou halo;

R3 é cadeia C1-C5 linear ou ramificada, opcional-mente fluorada, alquila o -CH2CR5 alquila C3-C4;

R4 é H;

R5 é H, alquila Ci-C2, haloalquila C1-C2, hidróxi, 0alquila Ci-C2, flúor;

R6 é um carbociclo ou heterociclo estável, opcio-nalmente substituído, monocíclico ou bicíclico, onde o oucada anel possui 4, 5 ou 6 átomos e 0 a 3 hetero átomos se-lecionados de S, OeNe onde os substituintes opcionaiscompreendem 1 a 3 elementos selecionados de R7;

R7 é independentemente selecionado de halo, oxo,nitrila, nitro, alquila Ci-C4, -XNRdRe, -XNReR8, -NReXR8,NH2CO-, X-R8, X-O-R8, -O-X-R8, X-C (=0) R8, X-(C=O) NRdR8, X-NReC (=0) R8, X-NHSOmR8, X-S(=0)mR8, X-C (=0) OR8, X-NReC (=0) OR8;

R8 é independentemente H, alquila Ci-C4, cicloal-quila C3-C6, pirrolidinila, piperidinila, morfolinila, tio-morfolinila, piperazinila, indolinila, piranila, tiopirani-la, furanila, tienila, pirrolila, oxazolila, isoxazolila,tiazolila, imidazolila, piridinila, pirimidinila, pirazini-la, indolila, fenila, qualquer um dos quais sendo opcional-mente substituído com até 3 elementos selecionados de R9;

R9 é independentemente selecionado de hidroxila,XR10, -XNRdRe, -XNReR10, -NRe alquila Ci-C4 R10, ciano, -S(=0)mRe, carbóxi, oxo, alquila Ci-C4, haloalquila Ci-C4, al-cóxi Ci-C4, alcanoila Ci-C4, carbamoila;

R10 é cicloalquila C3-C6, pirrolidinila, piperidi-nila, morfolinila, tiomorfolinila, piperazinila, indolinila,piranila, tiopiranila, furanila, tienila, pirrolila, oxazo-lila, isoxazolila, tiazolila, imidazolila, piridinila, piri-midinila, pirazinila, indolila, fenila, qualquer um dosquais é substituído com alquila Ci-C4, halo, hidróxi, alcóxiC1-C4,

X é independentemente uma ligação ou alquileno C1-C4;

Ra é independentemente H, alquila Ci-C4 ouCH3C(=0);

Rb é haloalquila C1-C4;

Rc é H, alquila C1-C4;

Rd é independentemente H, alquila Ci-C4 ouCH3C(=0);

Re é independentemente H, alquila Ci-C4; ou

Rd e Re em conjunto com o átomo de N ao qual elesestão anexados formam um anel de morfolina, piperidina, pi-perazina ou pirrolidina opcionalmente substituídos com R9;

m é independentemente 0, 1 ou 2;

ou um sal farmaceuticamente aceitável, hidrato ouN-óxido do mesmo.Sem de qualquer modo desejar estar ligado a qual-quer teoria, ou a atribuição de modos de ligação de tentati-va para variáveis especificas, PI, P2 e P3 como usados aquisão providos apenas como conveniência e possuem seus signi-ficados convencionais e indicam aquelas porções do inibidorque acredita-se preencham os subsitios SI, S2 e S3 respecti-vamente das enzimas, onde Sl é adjacente ao sitio de cliva-gem e S3 afastado do sitio de clivagem.

Preferivelmente, a estereoquimica do grupo Pl éconforme ilustrada na estrutura parcial que se segue:

<formula>formula see original document page 6</formula>

Preferivelmente, o halogênio de R1 e/ou R2 é cloroe mais preferivelmente flúor. É correntemente preferido queR2 seja halo, especialmente flúor e R1 seja H, porém a in-venção se estende aos compostos onde R1 é halo, especialmen-te F e R2 é H ou R1 e R2 são cada um F.

Será apreciado que o grupo Pl pode existir nasformas alternativas, tais como:<formula>formula see original document page 7</formula>

e a invenção se estende a todas tais formas alternativas.

Preferivelmente, a estereoquímica do grupo P2 cor-responde a um aminoácido L conforme ilustrado na estruturaparcial que se segue:

<formula>formula see original document page 7</formula>

porém a invenção também se estende aos isômeros D.

A invenção também inclui todos os isômeros e enan-tiômeros em outros centros quirais.

Grupos P2 correntemente preferidos incluem aquelesonde R4 é H e onde R3 é iso-butila ou homo-t-butila, isto é,-CH2C(CH3)3, conforme mostrado a seguir:

<formula>formula see original document page 7</formula>

Modalidades adicionais para R3 quando R4 é H inclu-em aqueles com a estrutura parcial:<formula>formula see original document page 8</formula>

onde R5 é conforme definido acima.

Convenientemente, R5 é H, definindo assim uma ca-deia lateral de ciclobutilmetila em P2.

Valores representativos para R5 incluem metila,hidroxila, fluormetila, difluormetila ou trifluormetila.Consequentemente, os valores favorecidos da cadeia lateralde P2 incluem:

<formula>formula see original document page 8</formula>

especificamente aqueles refletindo um aminoácido L.

Os grupos P2 correntemente preferidos incluem:<formula>formula see original document page 9</formula>

É correntemente preferido que o Ra ilustrado nafórmula II seja H.

Grupos haloalquila preferidos para Rb incluem ha-lometila, tais como, fluormetila, difluormetila e preferi-velmente trifluormetila.

Tipicamente, Rc e H e R6 é um sistema de anel desustentação livre conforme mostrado na estrutura parcial:

<formula>formula see original document page 9</formula>

onde R6 por questões de ilustração e exemplificado com umafenila substituída e Rb é trifluormetila.

Preferivelmente, o composto da invenção compreendeuma pureza enantiomérica alta, tal como, mais de 80%, prefe-rivelmente mais de 95%, tal como tão grande quanto 97% daestereoconfiguração S no carbono portanto haloalquila Rb. Aestrutura parcial abaixo representa um enantiômero S típicocom Rb como trifluormetila e Rc como H:

<formula>formula see original document page 10</formula>

Retornando agora à fórmula II, tipicamente R6 é umanel monocíclico com 5 ou especialmente 6 átomos no anel ouuma estrutura de anel bicíclica compreendendo um anel de 6elementos fundido ao anel de 4, 5 ou 6 elementos.

Grupos R6 típicos incluem heterociclos saturadosou insaturados ou carbociclos saturados ou insaturados,qualquer um dos quais sendo opcionalmente substituído con-forme descrito acima. Variantes ilustrativas incluem ciclo-alquila C3-8, fenila, benzila, tetraidronaftila, indenila,indanila, heterociclila, tal como, de azepanila, azocanila,pirrolidinila, piperidinila, morfolinila, tiomorfolinila,piperazinila, indolinila, piranila, tetraidropiranila, te-traidrotiopiranila, tiopiraila, furanila, tetraidrofuranila,tienila, pirrolila, oxazolila, isoxazolila, tiazolila, imi-dazolila, piridinila, pirimidinila, pirazinila, piridazini-la, tetrazoila, pirazolila, indolila, benzofuranila, benzo-tienila, benzimidazolila, benztiazolila, benzoxazolila, ben-zisoxazolila, quinolinila, tetraidroquinolinila, isoquinoli-nila, tetraidroisoquinolinila, quinazolinila, tetraidroqui-nazolinila e quinoxalinila, quaisquer um dos quais pode sersubstituído conforme descrito acima.O heterociclo saturado assim inclui radicais, taiscomo, pirrolinila, pirrolidinila, pirazolinila, pirazolidi-nila, pirazolidinila, piperidinila, morfolinila, tiomorfoli-nila, piranila, tiopiranila, piperazinila, indolinila, aze-tidinila, tetraidropiranila, tetraidrotiopiranila, tetrai-drofuranila, hexaidropirimidinila, hexaidropiridazinila,1,4,5,6-tetraidropirimidinilamina, diidro-oxazolila, 1,2-tiazinanil-1,1-dióxido, 1,2,6-tiadiazinanil-l,1-dióxido, i-sotiazolidinil-1,1-dióxido e imidazolidinil-2,4-diona, con-siderando-se que o heterociclo insaturado inclui radicais,tais como, furanila, tienila, pirrolila, oxazolila, tiazoli-la, imidazolila, pirazolila, isoxazolila, isotiazolila, oxa-diazolila, triazolila, tetrazolila, tiadiazolila, piridini-la, piridazinila, pirimidinila, pirazinila, indolizinila,indolila, isoindolila. Em cada caso, o heterociclo pode sercondensado com um anel fenila para formar um sistema de anelbiciclico.

Grupos R6 monociclicos preferidos incluem piridilasubstituída, pirimidila substituída, fenila substituída, es-pecificamente fenila substituída com um grupo cíclico, talcomo, pirrolidina-l-il, piperidina-l-il, 4-metilpiperidin-l-il, 4-(piperidin-3-ilmetil)-piperidin-l-il, morfolin-4-il,4-metilpiperazin-l-il, 2-morfolin-4-il-etilamino, 2-morfolin-4-il-etilóxi, l-pirid-2-ilmetilamino, piperazin-1-il, piperid-4-il ou N-piperazinila, N-substituído com Ra oupiperidin-l-il que é 4-substituído com -NRaRb. Uma fenilaR6 é convenientemente substituída na posição 3 ou 4 (para oumeta), por exemplo com tal grupo cíclico.Substituintes cíclicos alternativos para um R6 mo-nociclico (tal como fenila) incluem grupos arila, tais como,fenila ou um grupo heteroarila de 5 ou 6 elementos, tais co-mo, tiofeno, furila, triazol, tiazol, diazol, pirazol oupirrolidina. Substituintes cíclicos favorecidos nesse con-texto incluem tiazol-2-il, pirid-3-il e especialmente pirid-2-il, tien-2-il ou tiazol-5-il. Esse substituintê cíclico(isto é, R7) é tipicamente ligado diretamente a tais espé-cies R6 (isto é, X é uma ligação) porém pode também, por e-xemplo, compreender um espaçador amina, tal como, -NH-,N(Me), -CH2NH, -CH2N(Me)-, um espaçador alquila C1-C3, talcomo -CH2-Ou um espaçador alquilóxi C1-C3, tal como, etilóxi.

Qualquer dos substituintes cíclicos para R6 no pa-rágrafo imediatamente precedente pode ser substituído con-forme descrito acima, com R10. Por exemplo, um grupo R7 hete-rociclo, tal como, tiazolila pode ser substituído com alqui-la C1-C4, tal como metila.

Preferivelmente, qualquer um dos substituintes cí-clicos para R6 nos dois parágrafos imediatamente precedentespode propriamente ser substituído com um grupo cíclico (istoé, R7 compreende uma fração R9) tipicamente um grupo hetero-cíclico saturado, tal como, piperidina, piperazina ou morfo-lina, o qual grupo cíclico saturado sendo opcionalmentesubstituído, por exemplo, com alquila Ci-C3, flúor, diflúor,alquilóxi Ci-C3 ou alquilóxi C^3 alquila Ci-3. Conforme pro-vido na definição de R7, esse grupo cíclico saturado (istoé, R9) pode ser espaçado do grupo R6 por X (por exemplo, al-quila C1-3) , amina (por exemplo, -NH-) , amida, sulfonamida,etc. porém é tipicamente ligado diretamente ou via metileno.

Grupos R9 representativos, de acordo com o pará-grafo imediatamente precedente incluem heterociclos, taiscomo, pirrolidina-l-il, piperidina-l-il, 4-metilpiperidin-l-il, 4-(piperidin-3-ilmetil)-piperidin-l-il, morfolin-4-il,4-metilpiperazin-l-il, 2-morfolin-4-il-etilamino, 2-morfolin-4-il-etilóxi, l-pirid-2-ilmetilamino, piperazin-1-il, piperid-4-il ou N-piperazinila, N-substituido com Ra oupiperidin-l-il que é 4-substituído com -NRaRb.

Substituintes R9 correntemente preferidos incluempiperazin-4-il 4-substituído, tal como, 4-metil-piperazin-4-il ou 4-metiloxietil-piperazin-4-il, piperid-l-ilmetil que éopcionalmente 4-substituído com flúor ou diflúor ou morfoli-nilmetila.

Substituintes preferidos alternativos para um R6monocíclico (tal como fenila) incluem -NRaRb, -CH2NRaRb, al-quila Ci-C4 linear ou ramificada ou -OR9.

Substituintes preferidos alternativos para um R6monocíclico (tal como fenila) incluem grupos compreendendofrações não básicas, tais como, halo, hidroxila, carbóxi,haloalquila C1-C4, alquilóxi C1-C4 e aqueles da fórmula:

-S(=0)m alquila C1-C4, -S(=0)m cicloalquila C3-C6 ouum grupo cicloalquila substituído com carbamoila com a es-trutura parcial:<formula>formula see original document page 14</formula>

onde Rg é H alquila Ci-C4 ou ciclopropila, Rh é H, alquilaC1-C4; ou Rg e Rh em conjunto com o átomo N ao qual eles es-tão anexados definem pirrolidina, morfolina, piperidina, pi-perazina ou N-metilpiperazina.

Grupos R6 representativos incluem:

<table>table see original document page 14</column></row><table>

Grupos R6 adicionalmente representativos incluem:

<formula>formula see original document page 14</formula>

especialmente

onde Rq e Rq' são independentemente selecionados de H, al-quila Ci-C4 ou alcanoila Ci-C4 ou em conjunto definem um anelinsaturado de 5-7 elementos, tal como, piperidina, piperazi-na ou morfolina, que pode por sua vez, ser substituída comgrupos correspondendo a R10, especificamente alquila Ci-C4,flúor ou diflúor.

Correntemente, os grupos R6 preferidos incluem:

<table>table see original document page 15</column></row><table>

Grupos biciclicos representativos para R6 incluemnaftilenila, especialmente anftilen-2-il;

benzo[1,3]dioxolil, especialmente ben-zo [1,3]dioxol-5-il,

benzofuranil, especialmente benzofuran-2-il e es-pecialmente benzofuranila substituída alcóxi Ci-Cô, mais es-pecificamente 5-(éster etóxi t-butila do ácido 2-piperazin-4-carboxilico)benzofuran-2-il,

5-(2-morfolino-4-il-etóxi)-benzofuran-2-il, 5- (2-piperazin-l-il-etóxi)benzofuran-2-il, 5-(2-cicloexil-etóxi)-benzofuran-2-i1;

7-metóxi-benzofuran-2-il, 5-metóxi-benzofuran-2-il, 5,6-dimetóxi-benzofuran-2-il, especialmente benzofurani-Ia substituída com halogênio, mais especialmente 5-flúor-benzofuran-2-il, 5,6-diflúor-benzofuran-2-il, especialmentebenzofuranila substituída com alquila Ci_6, mais especifica-mente 3-metil-benzofuran-2-il; benzo[b]tiofenila, especial-mente benzo[b]tiofen-2-il;

especialmente benzo[b]tiofenila substituída comalcóxi Ci-C6, mais especificamente 5,6-dimetóxi-benzo[b]tiofen-2-il, quinolinila, especialmente quinolin-2-il, quinolin-3-il, quinolin-4-il, quinolin-6-il e quinolin-S-i1;

quinoxalinila, especialmente quinoxalin-2-il;1, 8-naftiridinila, especialmente 1,8-naftiridin-2-ila;

indolila, especialmente indol-2-il, especialmenteindol-6-il, indol-5-il, especialmente indolila substituídacom alquila Ci-Cg, mais especialmente N-metlindol-2-il;

furo [3,2-b]piridinila, especialmente furo[3,2-b]piridin-2-il e furo[3,2-b]piridinila substituída com al-• quila Ci-Cç, especialmente 3-metil-furo[3,2-b]bipiridin-2-il;

tieno[3,2-b]tiofeno, especialmente tieno [3,2-b]tiofeno-2-il, mais especificamente tieno[3,2-b]tiofeno-2-il substituído com alquila Ci_6, mais especificamente 5-t-butil-3-metiltieno[3, 2-b]tiofeno-2-il.

Grupos R6 favorecidos incluem anéis bicíclicos,tais como, naftila, quinoloila, benzofuranila, benzotienila,indolila e indolinila, especificamente quando a ligação épara a posição 2 do anel. Substituintes favorecidos para umgrupo R6 biciclico incluem pirrolidina-l-il, piperidina-1-il, 4-metilpiperidin-l-il, 4-(piperidin-3-ilmetil)-piperidin-l-il, morfolin-4-il, 4-metilpiperazin-l-il, 2-morfolin-4-il-etilamino, 2-morfolin-4-il-etilóxi, l-pirid-2-ilmetilamino, piperazin-l-il, piperid-4-il ou N-piperazinil,N-substituido com Ra ou piperidin-l-il que é 4-substituídacom -NRaRb. Substituintes especialmente preferidos, especi-ficamente em conjunto com benzofuranila incluem 2-morfolin-4-il-etilóxi e N-metil-piperidin-4-ilóxi e aqueles definidosabaixo.

Um grupo R6 biciclico correntemente favorecido ébenzotiazol, benzofurila ou benzoxazolila opcionalmentesubstituído incluindo aqueles onde o substituinte é -OR9 ou-NRbR9. Por exemplo, grupos R6 favorecidos incluem benzofur-2-il, substituído ou não substituído na posição 3 com alqui-Ia Ci-C4, tal como, metila ou haloalquila Ci-C4, tal como,trifluormetila e/ou substituído na posição 5 com um hetero-ciclo saturado, tal como, piperidina, piperazina ou morfoli-na, que é opcionalmente substituída com alquila C1-C3 e/ouespaçada da benzofurila por óxi, metilóxi ou etilóxi. GruposR6 especificamente favorecidos assim incluem:<table>table see original document page 18</column></row><table>

Retornando à fórmula II em geral:

X é tipicamente metileno ou especialmente uma li-gação.

alquila Cl-Cn onde η é 4, sozinha ou dentro de ex-pressões de compostos, tais como, alcóxi Ci-C4, inclui, me-tila, etila, n-propila, iso-propila, n-butila, iso-butila,sec-butila, t-butila, ciclopropila, metilciclopropila e se-melhantes, estendida de um modo semelhante, para outros va-lores de n. Por exemplo, alquila C5 inclui homo-t-butila (-CH2C(CH3)3).

Haloalquila significa um grupo alquila conformedefinido acima, onde pelo menos um átomo de carbono porta 1a 3 átomos de halogênio, preferivelmente átomos de flúor.Grupos haloalquila representativos incluem fluormetila, di-fluormetila, trifluormetila, 2-fluoretila, 2,2-difluoretila,2,2,2-trifluoretila e semelhantes.

Compostos favorecidos da invenção incluem aquelaspermutações formadas pela seleção independente de um elemen-to P3, P2 e Pl de cada uma das Tabelas A, B e C.Grupos Pl da Tabela A

<table>table see original document page 19</column></row><table>

Grupos P2 da Tabela B

<table>table see original document page 19</column></row><table>

Grupos P3 da Tabela C

<table>table see original document page 19</column></row><table><table>table see original document page 20</column></row><table><table>table see original document page 21</column></row><table><table>table see original document page 22</column></row><table>

Aspectos adicionais da invenção incluem uma compo-sição farmacêutica compreendendo um composto conforme defi-nido acima e um veículo ou diluente farmaceuticamente acei-tável para o mesmo.

Um aspecto adicional é o uso de um composto con-forme definido acima na fabricação de um medicamento para otratamento de transtornos mediados por catepsina K, tais como :

Osteoporose,

Doenças gengivais, tais como, gengivite e perio-dontite,

Doença de Paget,

Hipercalcemia de processo maligno

Doença óssea metabólica

Doenças caracterizadas por cartilagem excessiva oudegradação da matriz, tais como, osteoartrite e artrite reu-matóide,

Canceres dos ossos incluindo neoplasia, Dor.

Acredita-se que a invenção seja de utilidade espe-cifica contra osteoporose, osteoartrite, artrite reumatóidee/ou metástases ósseas.

Os compostos da invenção podem formar sais queconstituem um aspecto adicional da invenção. Sais farmaceu-ticamente apropriados dos compostos da Fórmula II incluemsais de ácidos orgânicos, especialmente ácidos carboxílicos,incluindo porém não limitado ao acetato, trifluoracetato,lactato, gliconato, citrato, tartrato, maleato, malato, pan-totenato, isetionato, adipato, alginato, aspartato, benzoa-to, butirato, digliconato, ciclopentanato, glicoeptanato,glicerofofato, oxalato, heptanoato, hexanoato, fumarato, ni-cotinato, palmoato, pectinato, 3-fenilpropionato, picrato,pivalato, proprionato, tartrato, lactobionato, pivolato,canforato, undecanoato e succinato, ácidos sulfônicos orgâ-nicos, tais como, metanossulfonato, etanossulfonato, 2-hidroxietano sulfonato, canforssulfonato, 2-naftalenossulfonato, benzenossulfonato, p-clorobenzenossulfonato e p-toluenossulfonato; e ácidos inor-gânicos, tais como, clorídrico, bromídrico, iodrídico, sul-fato, bissulfato, hemissulfato, tiocianato, perssulfato, á-cidos fosfórico e sulfônico. Os compostos da fórmula II po-dem ser, em alguns casos, isolados como o hidrato. Os hidra-tos são tipicamente preparados por recristalização de umamistura solvente aquosa/orgânica usando solventes orgânicos,tais como, dioxina, tetraidrofurano ou metanol.

Os N-óxidos dos compostos da fórmula (I) podem serpreparados por métodos conhecidos dos versados na técnicacomum. Por exemplo, N-óxidos podem ser preparados por trata-mento de uma forma não oxidada do composto da fórmula (I)com um agente de oxidação (por exemplo, ácido trifluorpera-cético, ácido permaléico, ácido perbenzóico, ácido peracéti-co, ácido meta-cloroperoxibenzóico ou semelhantes) em umsolvente orgânico inerte apropriado (por exemplo, um hidro-carboneto halogenado, tal como, diclorometano) em aproxima-damente 0°C. Alternativamente, os N-óxidos dos compostos dafórmula (I) podem ser preparados do N-óxido de um materialde partida apropriado.Os compostos da fórmula (I) na forma não oxidadapodem ser preparados de N-óxidos dos compostos da fórmula(I) por tratamento com um agente de redução (por exemplo,enxofre, dióxido de enxofre, trifenil fosfina, boroidreto delitio, boroidreto de sódio, bicloreto de fósforo, tribrometoou semelhantes) em um solvente orgânico inerte apropriado(por exemplo, acetonitrila, etanol, dioxano aquoso ou seme-lhantes) a 0 a 800C.

Os compostos da fórmula (II) podem ser preparadoscomo seus estereoisômeros individuais por reação de uma mis-tura racêmica do composto com um agente de decomposição op-ticamente ativo para formar um par de compostos diastereoi-soméricos, separação dos diastereômeros e recuperação do e-nantiômero opticamente puro. Embora a decomposição dos enan-tiômeros possa ser realizada usando derivados diastereoméri-cos dos compostos da fórmula (I), complexos dissociáveis sãopreferidos (por exemplo, sais cristalinos; sais diastereoi-soméricos). Diastereômeros possuem propriedades físicas dis-tintas (por exemplo, pontos de fusão, pontos de ebulição,solubilidades, reatividade, etc.) e podem se prontamente se-parados por tirar-se vantagens dessas diferenças. Os diaste-reômeros podem ser separados por cromatografia, por exemplo,HPLC ou, preferivelmente, por técnicas de separa-ção/decomposição com base nas diferenças na solubilidade. Oenantiômero opticamente puro é então recuperado, juntamentecom o agente de decomposição, por qualquer meio prático quenão resulte em racemização. Uma descrição mais detalhada dastécnicas aplicáveis à decomposição dos estereoisômeros doscompostos a partir de sua mistura racêmica pode ser encon-trada em Jean Jacques Andre Collet, Samuel H. Wilen, Enanti-omers, Racemates and Resolutions, John Wiley & Sons, Inc.(1981).

Será apreciado que a invenção se estende aos pro-medicamentos, solvatos, complexos e outras formas de libera-ção de um composto da fórmula II in vivo.

Embora seja possível para o agente ativo ser admi-nistrado sozinho, é preferível apresentar o mesmo como partede uma formulação farmacêutica. Tal formulação compreenderáo agente ativo definido acima, em conjunto com um ou maisveículos/excipientes mais aceitáveis e opcionalmente outrosingredientes terapêuticos. 0(s) veículo(s) deve ser aceitá-vel no sentido de ser compatível com os outros ingredientesda formulação e não prejudicial ao receptor.

As formulações incluem aquelas apropriadas paraadministração retal, nasal, tópica (incluindo bucal e sub-lingual), vaginal ou parenteral (incluindo subcutânea, in-tramuscular, intravenosa e intradérmica), porém preferivel-mente a formulação é uma formulação administrada oralmente.As formulações podem ser convenientemente apresentadas emforma de dosagem unitária, por exemplo, comprimidos e cápsu-las de liberação prolongada, e podem ser preparadas porquaisquer métodos bem conhecidos na arte farmacêutica.

Tais métodos incluem a etapa de colocar em associ-ação ao gente ativo definido acima e o veículo. Em geral, asformulações são preparadas por associação uniforme e íntimado agente ativo com os veículos líquidos ou veículos sólidosfinamente divididos ou ambos, e então se necessário, confor-mando o produto. A invenção se estende aos métodos para pre-paração de uma composição farmacêutica compreendendo um com-posto da Fórmula II ou seu sal farmaceuticamente aceitávelem conjunto ou associado ao veiculo ou transportador farma-ceuticamente aceitável. Se a fabricação das formulações far-macêuticas envolve mistura intima de excipientes farmacêuti-cos e o ingrediente ativo na forma de sal, então é freqüen-temente preferido usar excipientes que sejam de natureza di-ferente da básica, isto é, tanto ácida quanto neutra.

Formulações para administração oral na presenteinvenção podem ser apresentadas como unidades separadas,tais como, cápsulas ou comprimidos, cada um contendo umaquantidade predeterminada do agente ativo; como um pó ougrânulos como uma solução ou suspensão do agente ativo em umliquido aquoso ou não aquoso; ou como uma emulsão liquida deóleo-em-água ou uma emulsão liquida de água-em-óleo e comouma torta, etc.

Com relação às composições para administração oral(por exemplo, comprimidos e cápsulas), o termo veiculo apro-priado inclui veículos, tais como, excipientes comuns, porexemplo, agentes de ligação, por exemplo, xarope, acácia,gelatina, sorbitol, tragacanto, polivinilpirrolidona (Povi-dona), metilcelulose, etilcelulose, carboximetilcelulose desódio, hidroxipropilmetilcelulose, sacarose e amido; cargase veículos, por exemplo, amido de milho, gelatina, lactose,sacarose, celulose microcristalina, caulim, mani"tol, fofatode dicálcio, cloreto de sódio e ácido algínico; e lubrifi-cantes tais como, estearato de magnésio, estearato de sódioe outros estearatos metálicos, ácido esteárico de estearatode glicerol, fluido de silicone, ceras de talco, óleos e sí-Iica coloidal. Agentes aromatizantes, tais como, hortelã,óleo de gualtéria, aromatizante de cereja ou semelhante po-dem também ser usados. Pode ser desejável adicionar um agen-te corante para fabricação da forma de dosagem prontamenteindentificável. Os comprimidos também podem ser revestidospelos métodos bem conhecidos na arte.

Um comprimido pode ser fabricado por compressão oumoldagem, opcionalmente com um ou mais ingredientes acessó-rios. Os comprimidos prensados podem ser preparados por com-pressão em uma máquina apropriada do agente ativo em umaforma de escoamento livre, tal como, um pó ou grânulos, op-cionalmente misturados com um ligante, lubrificante, diluen-te inerte, preservante, agente ativo em superfície ou dis-persante. Os comprimidos moldados podem ser fabricados pormoldagem em uma máquina apropriada de uma mistura do compos-to em pó umectada com um diluente líquido inerte. Os compri-midos podem ser opcionalmente revestidos ou classificados epodem ser formulados de modo a prover uma ligação lenta oucontrolada do agente ativo.

Outras formulações apropriadas para administraçãooral incluem pastilhas compreendendo o agente ativo em umabase aromatizada, geralmente sacarose e acácia ou tragacan-to; pastilhas compreendendo o agente ativo em uma base iner-te, tal como, gelatina e glicerina; ou sacarose e acácia eenxágües bucais compreendendo o agente ativo em um veículolíquido apropriado.

A dosagem apropriada para os compostos ou formula-ções da invenção dependerá da indicação e do paciente e éprontamente determinada por experiências convencionais comanimais. As dosagens provendo concentrações intracelulares(para inibição das proteases fisiológicas da superfamília dapapaína) da ordem de 0,01-100 μΜ, mais preferivelmente 0,01-10 μΜ, tais como, 0,1-25 μΜ são tipicamente desejáveis e po-dem ser obtidas.

Os compostos da invenção são preparados por umavariedade de químicas de fase sólida e solução

Os compostos são tipicamente preparados como blo-cos de construção refletindo as frações de PI, P2 e P3 doinibidor do produto final. Sem desejar estar ligado a qual-quer teoria, ou a atribuição dos modos de ligação de tenta-tiva para variáveis específicas, os conceitos de noção dePI, P2 e P3 conforme usados aqui, são providos apenas porconveniência e possuem substancialmente seus significadosSchlecter & Berger convencionais e indicam aquelas porçõesdo inibidor que se acredita preencham os subsítios SI, S2 eS3 respectivamente da enzima, onde Sl é adjacente ao sítiode clivagem e S3 afastado do sítio de clivagem. Os compostosdefinidos pela fórmula I se encontram dentro do escopo dainvenção, independente do modo de ligação.

Falando de modo geral, o bloco de construção Plserá um 6-flúor-3-oxo-hexaidro-furo[3,2-]pirrol protegido N,P2 será um aminoácido protegido N, considerando-se que P3compreende tipicamente um grupo de capeamento, tal como,fração de heteroarila ou aroila substituída, ligada ao P2através da ligação de carbono substituída com Rb-haloalquila.

Os blocos de construção individuais adequadamenteprotegidos podem primeiro ser preparados e subseqüentementeacoplados, isto é, P2+P1 P2-P1. Alternativamente, os pre-cursores dos blocos de construção podem ser acoplados emconjunto e modificados em um estágio posterior da síntese daseqüência inibidora. Os blocos de construção adicionais,precursores dos blocos de construção ou fragmentos maiorespré-fabricados da estrutura desejada, podem então ser aco-plados à cadeia em crescimento, por exemplo, R3-E-P2* + Pl-> R3-E-P2-P1 ou R3-E* + P2-P1 -> R3-E-P2-P1, onde * indicauma forma ativada.

Formação de uma ligação de peptídeo, isto é, aco-plamento pode ser realizada usando procedimentos de acopla-mento padrão, tais como, método de azida, método de anidridodo ácido carboxílico-carbônico misturado (cloroformato deisobutila), método de carbodiimida (dicicloexilcarbodiimida,diisopropilcarbodiimida ou carbodiimida solúvel em água),método do éster ativo (éster p-nitrofenila, éster N-hidroxisuccínico imido), método do reagente K Woodward, mé-todo de carbonildiimidazol, reagentes fosforosos ou métodosde redução de oxidação. Alguns desses métodos (especialmenteo método da carbodiimida) podem ser melhorados por adição 1-hidroxibenzotriazol ou 4-DMAP. Essas reações de acoplamentopodem ser realizadas tanto na fase de solução (fase líquida)quanto sólida.

Mais explicitamente, a etapa de acoplamento envol-ve o acoplamento deidrativo de uma carboxila livre de um re-agente com o grupo amino livre do outro reagente na presençade um agente de acoplamento para formar uma união de ligaçãoamida. As descrições de tais agentes de acoplamento são en-contradas nos livros texto de química de peptídeo em geral,por exemplo, M. Bodanszky, "Peptide Chemistry", 2a ediçãorevisada, Springer-Verla g, Berlim, Alemanha, (1993) dora-vante simplesmente referido como Bodanszky, o conteúdo domesmo sendo incorporado aqui como referência. Exemplos deagentes de acoplamento apropriados são N,N'-dicicloexilcarbodiimida, 1-hidroxibenzotriazol na presençade Ν,N1-dicicloexilcarbodiimida ou N-etil-N'-[3 dimetilami-no)propil]carbodiimida. Um agente de acoplamento útil e prá-tico é o hexafluorfosfato de fosfônio (benzotriazol-l-ilóxi)tris(dimetilamino) disponível comercialmente, tanto propria-mente quanto na presença de 1-hidroxibenzotriazol ou 4-DMAP.Outro agente de acoplamento prático e útil é o tetrafluorbo-rato de 2- (lH-benzotriazol-l-il)-Ν, Ν, Ν',Ν'-tetrametilurônio comercialmente disponível. Ainda outro a-gente de acoplamento prático e útil é o hexaf luorfosfato de0-(7-azabenzotrizol-l-il)-Ν, Ν,N1,N'-tetrametilurônio dispo-nível comercialmente.

A reação de acoplamento é conduzida em um solventeinerte, por exemplo, diclorometano, acetonitrila ou dimetil-formamida. Um excesso de uma amina terciária, por exemplo,diisopropiletilamina, N-metilmorfolina, N-metilpirrolidinaou 4-DMAP é adicionada para manter a mistura de reação em umpH de cerca de 8. A temperatura da reação varia geralmenteentre O0C e 50°C e o tempo de reação varia geralmente entre15 minutos e 24 horas.

Os grupos funcionais dos aminoácidos não naturaisconstituintes geralmente devem ser protegidos durante as re-ações de acoplamento para evitar formação de ligações inde-sejáveis. Os grupos de proteção que podem ser usados sãolistados em Greene, "Protective Groups in Organic Chemis-try", John Wiley & Sons, New York (1981) e "The Peptides:Analysis, Syn.thesis, Biology", volume 3, Academic Press, NewYork (1981), doravante referido simplesmente como Greene, asrevelações dos quais são incorporadas aqui como referência.

0 grupo alfa-carboxila do resíduo de término C égeralmente protegido como um éster que pode ser clivado parafornecer o ácido carboxílico. Grupos de proteção que podemser usados incluem 1) ésteres alquila, tais como, metila,trimetilssilila e t-butila, 2) ésteres aralquila, tais como,benzila e benzila substituída, ou 3) ésteres que podem serclivados por base branda ou dispositivos redutivos tais co-mo, ésteres tricloroetila e fenacila.

0 grupo alfa-amino de cada aminoácido a ser aco-plado é tipicamente protegido-N. Qualquer grupo de proteçãoconhecido na técnica pode ser usado. Exemplos de tais gruposincluem: 1) grupos acila tais como, formila, trifluoraceti-la, ftalila e p-toluenossulfonila; 2) grupos carbamato aro-máticos, tais como, benziloxicarbonila (Cbz ou Z) e bensilo-xicarbonilas substituídas e 9-fluorenilmetiloxicarbonila(Fmoc); 3) grupos carbamato alifático, tais como, t-butiloxicarbonila (Boc), etoxicarbonila, diisopropilmetoxi-carbonila e aliloxicarbonila; 4) grupos carbamato alquilacíclicos, tais como, ciclopentiloxicarbonila e adamantiloxi-carbonila; 5) grupos alquila, tais como, trifenilmetila ebenzila; 6) trialquilssilila, tais como, trimetilssilila; e7) grupos contendo tiol, tais como, as feniltiocarbonila editiasuccinoila. O grupo de proteção alfa-amino preferido étanto Boc quanto Fmoc. Muitos derivados de aminoácido apro-priadamente protegidos para síntese de peptídeo se encontramcomercialmente disponíveis.

O grupo de proteção alfa amino é tipicamente cli-vado antes da próxima etapa de acoplamento. Quando o grupoBOC é usado, os métodos de escolha são ácido trifluoracéti-co, puro ou em diclorometano ou HCl em dioxano ou em acetatode etila. O sal de amônio resultante é então neutralizadotanto antes do acoplamento quanto in situ com soluções bási-cas, tais como, tampões aquosos ou aminas terciárias em di-clorometano ou acetonitrila ou dimetilformamida. Quando ogrupo Fmoc é usado, os reagentes de escolha são piperidinaou piperidina substituída em dimetilformamida, porém qual-quer amina secundária pode ser usada. A desproteção é reali-zada a uma temperatura entre O0C e a temperatura ambientegeralmente de 20-22°C.

Qualquer um dos aminoácidos natural ou não naturalpossuindo funcionalidades de cadeia lateral tipicamente seráprotegido durante a preparação do peptídeo usando qualquerum dos grupos descritos acima. Os versados na arte aprecia-rão que a seleção e uso dos grupos de proteção apropriadospara essas funcionalidades de cadeia lateral dependerá doaminoácido e presença de outros grupos de proteção no peptí-deo. Na seleção de tais grupos de proteção é desejável que ogrupo não seja removido durante a desproteção e acoplamentodo grupo alfa-amino.

Por exemplo, quando Boc é usado como grupo de pro-teção alfa-amino, os grupos de proteção de cadeia lateralque se seguem são apropriados: frações p-toluenossulfonila(tosila) podem ser usadas para proteger a cadeia lateral deamino dos aminoácidos, tal como, Lys e Arg; acetamidometila,benzila (Bn), ou frações t-butilssulfonila podem ser usadaspara proteger a cadeia lateral de cisteina contendo sulfito;(Bn) éteres podem ser usados para proteger as cadeias late-rais de serina, treonina ou hidroxiprolina contendo hidróxi;e os ésteres benzilicos podem ser usados para proteger ascadeias laterais de ácido aspártico e ácido glutâmico con-tendo carbóxi.

Quando Fmoc é escolhido para a proteção da alfa-amina, geralmente os grupos de proteção à base de butila sãoaceitáveis. Por exemplo, Boc pode ser usado para lisina earginina, éter t-butila para serina, treonina e hidroxipro-lina e éster t-butila para ácido aspártico e ácido glutâmi-co. A fração de trifenilmetila (tritila) pode ser usada paraproteger a cadeia lateral da cisteina contendo sulfito.

Uma vez que a seqüência inibidora esteja completa,quaisquer grupos de proteção são removidos de qualquer mododitado pela escolha dos grupos de proteção. Esses procedi-mentos são bem conhecidos dos versados na arte.

0 primeiro estágio em uma síntese dos compostos dafórmula geral II é tipicamente a preparação na solução de umbloco de construção Pl funcionalizado. Podem ser usadas di-ferentes nomenclaturas de compostos de acordo com a presenteinvenção. Para conveniência, a nomenclatura do carboidratoserá usada aqui de modo geral. Um esquema típico na direçãode um grupo Pl bicíclico inicia com a proximidade do anel deum intermediário apropriadamente protegido que está disponí-vel em 4 etapas de 1,2:5,6-di-O-isopropilideno-D-alofuranose, descrito por Mayer zum Reckendorf, Chem. Ber.101 (1968), 3802-3807, fornecendo um precursor da estereo-química 3S, 4R.

<formula>formula see original document page 35</formula>

Esquema 1. a) H2, Pd/C, metanol, b) cloroformatode benzila, piridina, diclorometano

No Esquema 1, o grupo azida do derivado 1 é redu-zido, por exemplo, por hidrogenação catalítica usando palá-dio sobre carvão ou outros catalisadores apropriados, em umsolvente apropriado, tal como, um álcool, como etanol ou me-tanol dentro da amina livre. 0 nitrogênio nucleófilo obtidoreage espontânea ou opcionalmente na presença de uma baseapropriada semelhante, tal como, trietil amina ou acetato desódio, com a posição C-6 formando um biciclo-5,5. 0 grupoabandonador em C-6 não está limitado aos ésteres sulfonato,porém também outros grupos abandonadores, tais como, halogê-nio seriam usados através de toda a síntese dos compostos deacordo com a presente invenção. A redução do resíduo de azi-da em uma amina também seria realizada por outros métodosconhecidos na literatura, tais como, tratamento do derivadode azida com uma trialquil ou triarilfosfina seguido por hi-drólise do derivado de imina formado. Após o fechamento doanel, a amina pode ser N protegida, com um grupo de proteçãoapropriado, tal como, carbamato, como carbamato de benzilado composto 3 ou qualquer outro grupo de proteção semelhanteque normalmente não seja clivado com ácido. Grupos de prote-ção apropriados podem ser encontrados em: Protective groupsin organic chemistry, 3a edição, 1999, Theodora W. Greeneand Peter G. M. Wuts (Wiley & Sons).

Para um biciclo 3R,4S, uma abordagem semelhanteseria usada partindo de 3-azido-3-desóxi-l,2:5,6-di-0-isopropilideno-D-gulofuranose que pode ser preparada confor-me descrito em Tetrahedron Asymmetry, 10 (1999) 1855-1859.Esse intermediário pode então ser tratado conforme descritono Esquema 2.<formula>formula see original document page 37</formula>

Esquema 2. a) ácido acético aquoso. b) cloreto dep-toluenossulfonila, piridina, DCM. c) H2, Pd/C, metanol, b)cloroformato de benzila, piridina, diclorometano.

O composto 4 pode ser tratado com um ácido brando,tal como, ácido acético diluído ou semelhante, que pode hi-drolisar seletivamente o 5,6-acetal do composto 4, para ob-ter um diol. O álcool primário pode ser seletivamente reagi-do com um cloreto de alquila ou arilssulfonila como o clore-to de p-toluenossulfonila para fornecer o composto 5. O gru-po azida do derivado 5 é reduzido por exemplo, por hidroge-nação catalítica usando paládio sobre carvão ou outros cata-lisadores apropriados, em um solvente apropriado, tal como,um álcool, como etanol ou metanol na amina livre. 0 nitrogê-nio nucleófilo obtido reage espontânea ou opcionalmente napresença de uma base apropriada semelhante, tal como, trie-til amina ou acetato de sódio, com a posição C-6 formando umbicíclo-5,5 que pode ser protegido N com um grupo de prote-ção apropriado, tal como, seu carbamato de benzila (Cbz) pa-ra fornecer o composto 6.Alternativamente, 3-azido-3-desóxi-l,2:5, 6-di-O-isopropilideno-D-idofuranose (Buli. Chem. Soe. Japão, 57,1(1984), 237-241) seria um material de partida apropriadopara o 3R, 4S biciclo de acordo com o Esquema 3.

<formula>formula see original document page 38</formula>

Esquema 3. a) ácido acético aquoso. b) cloreto dep-toluenossulfonila, piridina, DCM. c) H2, Pd/C, metanol, b)cloroformato de benzila, piridina, diclorometano.

O composto 6 pode ser tratado com um ácido brando,tal como, ácido acético diluído ou semelhante, que pode hi-drolizar seletivamente o 5,6-acetal do composto 6, para ob-ter um diol. 0 álcool primário pode ser seletivamente reagi-do com um cloreto de alquila ou arilssulfonila como o clore-to de p-toluenossulfonila para fornecer o composto 7. 0 gru-po azida do derivado 7 é reduzido por exemplo, por hidroge-nação catalítica usando paládio sobre carvão ou outros cata-lisadores apropriados, em um solvente apropriado, tal como,um álcool, como etanol ou metanol na amina livre. 0 nitrogê-nio nucleófilo obtido reage espontânea ou opcionalmente napresença de uma base apropriada semelhante, tal como, trie-til amina ou acetato de sódio, com a posição C-6 formando umbicíclo-5,5 que pode ser protegido N com um grupo de prote-ção apropriado, tal como, seu carbamato de benzila (Cbz) pa-ra fornecer o composto 8.

0 fechamento do anel não está limitado aos subs-tratos conhecidos acima, porém seria também aplicável aosderivados conforme ilustrado no Esquema 4.

<formula>formula see original document page 39</formula>

Esquema 4. a) redução da azida em uma amina segui-do por fechamento do anel. b) proteção da amina.

Rx no Esquema 4 pode ser escolhido de metila, tri-fluormetila, p-metilfenila ou resíduos semelhantes presentesnos haletos de alquilssulfonila prontamente disponíveis,preferivelmente um Rx em volume, apropriado para reação re-gioseletiva no álcool primário de um diol conforme descritoem Chem. Ber. 101 (1968), 3802-3807. R1' e R2" são R1 e R2conforme definido. Pg seria um grupo de proteção apropriado,tal como, carbamato, como o carbamato de benzila ou qualquergrupo de proteção semelhante que não seja normalmente cliva-do com ácido.

Substratos adicionais para a reação de fechamentode anel seriam compostos ilustrados no Esquema 5.

<formula>formula see original document page 40</formula>

Esquema 5. a) redução da azida em uma amina segui-do por fechamento do anel. b) proteção da amina (opcional).

Rx no Esquema 5 pode ser escolhido de metila, tri-fluormetila, p-metilfenila ou resíduos semelhantes presentesnos haletos de alquilssulfonila prontamente disponíveis,preferivelmente um Rx em volume, apropriado para reação re-gioseletiva no álcool primário de um diol conforme descritoem Chem. Ber. 101 (1968), 3802-3807. R1' e R2' são R1 e R2conforme definido. Ry seria um grupo de proteção hidrogênioou uma hidroxila, preferivelmente um grupo de proteção dotipo éter. Preferivelmente, Ry é hidrogênio. PG seria umgrupo de proteção N apropriado, tal como, um carbamato, paraderivados no Esquema 5, Ry é tipicamente hidrogênio.

Outras metodologias para obter um 5,5-biciclo sãoreveladas por G. Lin e Z. Shi, Tetrahedron, 53, 4, 1369-1382, 1997.

A modificação adicional do composto 5,5-biciclicoobtida no esquema 1 é ressaltada no Esquema 6.

<formula>formula see original document page 41</formula>

Esquema 6. a) brometo de benzila, hidreto de só-dio, DMF. b) BF3-Et2O, Et3SiH, DCM. c) H2, Pd/C, Boc2O, 1:1EtOAc-EtOH. d) piridina, anidrido acético, e) H2, Pd/C, EtO-AcO composto 9 é protegido com um grupo de proteçãoestável de ácido apropriado, tal como, éter metilico substi-tuído, especificamente um éter benzílico, por tratamento demono-ol 9 com uma base, tal como, hidreto de sódio ou hidró-xido de sódio em um solvente aprótico, tal como, N,N-dimetilformamida (DMF) na presença do agente alquilante de-sejado, tal como, haleto de benzila, especificamente brometode benzila. 0 material obtido pode então ser reduzido nocomposto 10 de acordo com os métodos descritos por G.J. E-wing e M. J. Robins, Org. Lett. 1, 4, 1999, 635-636, ou pe-las referências aqui. Preferivelmente, a redução é realizadacom excesso de eterato trifluoreto de boro, na presença deum agente de redução, tal como, trialquilssilano, especifi-camente com excesso de trietilssilano em um solvente nãoprótico apropriado, tal como, diclorometano. Hidrogenaçãocatalítica do composto 10 usando por exemplo, paládio sobrecarvão em um solvente apropriado ou mistura de solvente, talcomo, acetato de etila-etanol em uma atmosfera de hidrogê-nio, na presença de dicarbonato di-t-butila, seguido portratamento do produto com anidrido acético em piridina, for-nece o intermediário 11. Quando da hidrogenação catalíticarepetida, conforme descrito acima, é obtido o mono-ol 12.

Um flúor pode ser introduzido no composto 12 e ocomposto bicíclico então é desprotegido N de acordo com oEsquema 7.<formula>formula see original document page 43</formula>

Esquema 7. a) Deoxo-f Iuor(R), diclorometano. b) me-tóxido de sódio metanólico. c) ácido 1:1 diclorometa-no :trifluoracético

O composto 13 pode ser tratado com um agente defluoração, tal como, [trifluoreto de bis-(2-metoxietil) aminoenxofre (Deoxo-Fluor<R)) ou com agentes defluoração semelhantes, tais como, trifluoreto de dietilami-noenxofre (DAST) que fornecem o produto 14 com inversão deconfiguração em C-5. O composto 14 é então desacetilado portratamento, por exemplo, com metóxido de sódio metanólico ouquaisquer soluções alcalinas com uma base inorgânica, talcomo, hidróxido de sódio ou carbonato de sódio, seguido pordesproteção N usando condições ácidas, tais como, soluçõesde ácido diclorometano-trifluoracético ou outros métodos quepoderiam ser encontrados em: Protective Groups in OrganicChemistry, 3a edição, 1999, Theodora W. Greene e Peter G. M.Wuts (Wiley & Sons).Alternativamente, o flúor epimérico pode ser obti-do por tratamento do derivado 9 acima de acordo com o Esquema 8.

<formula>formula see original document page 44</formula>

Esquema 8. a) diisopropilazodicarboxilato, ácidobenzóico, PPh3, THF. b) metóxido de sódio metanólico. c)brometo de benzila, hidreto de sódio, DMF. d) BF3-Et2O,Et3SiH, diclorometano. e) H2, Pd/C, Boc2O, 1:1 EtOAc-EtOH. f)piridina, anidrido acético. g) H2, Pd/C, EtOAc. h) Deoxo-fluorÍR), diclorometano. i) metóxido de sódio metanólico. j)ácido 1:1 diclorometano:trifluoracético.

A inversão de configuração em C-5 pode ser reali-zada por reação do composto 16 em condições Mitsunobo, quefornecem um éster benzoato. A hidrólise do éster com metó-xido de sódio metanólico seguida por tratamento do mono-olcom brometo de benzila provê epimero protegido de benzila

17. As etapas de reação d-j no Esquema 8 são conforme des-critas para os Esquemas 6 e 7.

Uma rota adicional para um "derivado diflúor" ondeR1 e R2 são flúor é mostrada no Esquema 9.

<formula>formula see original document page 45</formula>Esquema 9. a) brometo de benzila, hidreto de só-dio, DMF. b) Et3SiH, BF3-Et2O ou trifluormetanossulfonato detrimetilssilila, DCM. c) H2, Pd/C, Boc2O, EtOAc-EtOH. d)cloreto de benzoila, piridina, DCM. e) H2, Pd/C, EtOAc. f)Bu2SnO, tolueno, refluxo. g) brometo de benzila, fluoreto decésio, DMF. h) periodinano Dess-Martin. i) Deoxo-fIuor(R> outrifluoreto de dietilaminoenxofre, DCM. j) metóxido de sódiometanólico. k) H2, Pd/C EtOAc. 1) cloreto de p-toluenossulfonila, piridina, DCM. M) DCM, ácido trifluoracé-tico, n) trietilamina, diclorometano.

A síntese do bloco de construção Pl pode ser ini-ciada do composto 21 (3-azido-desóxi-l,2-0-isopropilideno-D-alofuranose) que é descrito por Mayer zum Reckendorf, Chem.Ber. 101 (1968), 2802-3807. 0 tratamento do composto 21 comum agente de benzilação semelhante ao brometo de benzila oucloreto de benzila na presença de uma base, tal como, hidre-to de sódio ou hidróxido de sódio em um solvente polar apró-tico, tal como, N,N-dimetilformamida fornece o derivado 22.0 composto 22 é então tratado com um trialquil silano, talcomo, trietil silano, com um excesso de um ácido de Lewis,tal como, eterato trifluoreto de boro ou trifluormetanossul-fonato de trimetilssilila, em um solvente aprótico, tal co-mo, diclorometano. A azida resultante pode então ser reduzi-da seletivamente por hidrogenação catalítica empregando, porexemplo, Paládio sobre carbono, na presença de carbonato dedi-t-butila para obter o composto 23. Alternativamente, aazida seria reduzida com outros métodos conhecidos da lite-ratura, tais como, trifenilfosfina-água, seguido por prote-ção fornecendo um carbaraato apropriado. A fim de evitar osproblemas com a regioseletividade nas etapas que se seguem.0 composto 23 seria tratado com um agente de acilação, talcomo, cloreto de acila ou anidrido de ácido, tal como, clo-reto de benzoila, em base orgânica pura, tal como, piridinaou trietil amina, ou em uma mistura de um solvente aprótico,tal como, diclorometano e uma base para fornecer o composto24. A hidrogenação catalitica do composto 24, conforme des-crito acima, fornece o diol 25. A benzilação seletiva no ál-cool primário do composto 25 pode ser realizada por váriosmétodos conhecidos na literatura. No Esquema 9, o diol é re-fluxado com óxido de dibutil estanho em um solvente apropri-ado, tal como, tolueno, para formar um acetal de estanho. 0acetal de estanho pode então ser reagido com um pequeno ex-cesso de brometo de benzila e fluoreto de césio em DMF for-necendo o composto 2 6 desejado. A oxidação de 2 6 com um a-gente de oxidação apropriado, tal como, periodinano Dess-Martin em diclorometano, converte o álcool secundário nocomposto ceto 27, apropriado para conversão no difluoreto28. Isso pode ser realizado por tratamento do composto 27com um excesso de agente de fluoração, tal como, Deoxo-Fluor(R> ou com trifluoreto de dietilaminoenxofre (DAST) , emum solvente aprótico, tal como, diclorometano ou 1,2-dicloroetano. O éster de benzoato do composto 28 pode serclivado com álcali, tal como, metóxido de sódio metanólico,seguido por desbenzilação usando hidrogenação catalitica,para obter diol 29. A introdução seletiva de um éster sulfo-nato no álcool primário pode ser realizada por tratamento docomposto 29 com um pequeno excesso de cloreto de alquila ouarilssulfonila na presença de uma base, tal como, piridina,no solvente apropriado, tal como, diclorometano, adição doagente de sulfonilação a temperatura reduzida e aumentandolentamente até a temperatura ambiente, o que fornece mono-ol30. O tratamento do composto 30 sob condições ácidas, taiscomo, misturas de diclorometano-ácido trifluoracético liberaa amina e o tratamento do produto com uma base, tal como,trietil amina, promove o fechamento do anel interno o quefornece o bloco de construção 31.

Rotas alternativas para 5,5-biciclos são mostradas

<formula>formula see original document page 48</formula>

Esquema 10. a) agente de fluoração. b) redução deamina ou desproteção N, opcionalmente seguida por proteçãoN. c) agente de redução.

No esquema 10, um derivado, tal como, composto 32(disponível conforme descrito acima ou com os métodos bemconhecidos na arte) com os substituintes em C-3 e C-4 na re-nos Esquemas 10 e 11.lação eis, Lg sendo um grupo abandonador, tal como, halogê-nio ou éster sulfonato, e com R igual a uma azida ou um ni-trogênio protegido com um grupo de proteção N apropriado,pode ser tratado com um agente de fluoração, tal como men-cionado acima, produzindo o composto 33. Quando da liberaçãoda amina mascarada tanto com redução da azida ou por um mé-todo de desproteção apropriado, a amina realizaria um ataqueintramolecular em C-6 produzindo um 5,5-biciclo com estrutu-ra 34, que poderia opcionalmente ser protegido N (Pg = grupode proteção ou hidrogênio) . A redução de C-I com um agentede redução apropriado, tal como descrito acima ou com um a-gente de redução semelhante forneceria o bloco de construção

No Esquema 11 é ilustrada uma rota alternativa pa-ra o diflúor-5,5-biciclo.

<formula>formula see original document page 49</formula>

Esquema 11. a) oxidação, b) agente de fluoração.

c) redução de azida ou desproteção N, opcionalmente seguidapor proteção N. d) agente de redução.No esquema 11, o composto 36 (disponível conformedescrito acima ou com métodos bem conhecidos na arte) com ossubstituintes em C-3 e C-4 na relação eis, Lg sendo um grupoabandonador, tal como, halogênio ou éster sulfonato, e com Rigual a uma azida ou um nitrogênio protegido com um grupo deproteção apropriado, pode ser oxidado com uma reação do tipoSwern ou outros métodos apropriados que fornecem o composto37. O tratamento do composto 37, de acordo com o Esquema 11,com um excesso de agente de fluoração, tal como mencionadoacima, fornece o composto 38. Quando da liberação da aminamascarada de 38 tanto com redução da azida quanto por ummétodo de desproteção apropriado, a amina realizaria um ata-que intramolecular em C-β produzindo um 5,5-biciclo com es-trutura 39, que poderia opcionalmente ser protegido N (Pg =grupo de proteção ou hidrogênio) . A redução de C-I com umagente de redução apropriado, tal como descrito acima ou comum agente de redução semelhante forneceria o bloco de cons-trução 40.

Uma rota conveniente para os compostos onde R1 ouR2 é um halogênio, tal como cloro, é ilustrada no Esquema 12.<formula>formula see original document page 51</formula>

Esquema 12. a) cloreto de tionila. b) raetóxido desódio metanólico, c) diclorometano-ácido trifluoracético1:1. d) cloreto de tionila, piridina.

0 bloco de construção Pl é tipicamente alongadocom o aminoácido natural ou não natural P2 (ou o bloco deconstrução P3+P2) por solução convencional ou químicas defase sólida, tais como aquelas ressaltadas ou exemplificadasa seguir ou reveladas no WOOO/69855 ou W002/057270. GruposP2 e P3 são tanto comercialmente disponíveis como enantiôme-ros ou decompostos de racemato ou obtidos usando transforma-ções químicas simples conhecidas de um versado na arte. Porexemplo, ácido 4-(metil-piperazina-l-il)-benzóico pode serobtido usando química de Buchwald (S.L. Buchwald & J.P. Wol-fe, Journal of Organic Chemistry, 2000, 65, 1144) e elabora-do subseqüentemente. Outros núcleos P3, tais como, ácido 4-(l-piperidin-4-il)benzóico são preparados de l-(4-fenil-piperidina-l-il)-etanona usando uma reação de acilação Frie-del-Crafts e subseqüentemente elaborada usando transforma-ções químicas padrão conhecidas dos versados na arte. Alter-nativamente, outras frações P3, tais como, ácido 5— [2- (4 —morfolinil)etóxi]-2-benzofuran-2-carboxilico, são preparadausando reações de Mitsunobu na fase sólida, conforme deta-lhado por L.S.Richter & T. R. Gadek em Tetrahedron Lett.,1994, 35, 4705.

<formula>formula see original document page 52</formula>

fórmula II

1. Desproteção N

2. alquilaçáo (ou outra adição de grupo de capeamento R6-haloalquila)Esquema 13. Alongamento típico de uma cetona cíclica

Alternativamente, o bloco de construção Pl como ahidroxila pode ser alongado e subseqüentemente oxidado, con-forme mostrado no Esquema 14.<formula>formula see original document page 53</formula>

Esquema 14. Alongamento típico de um bloco deconstrução Pl hidroxilado

O cap P3 é tipicamente alongado por reação de umcomposto intermediário da fórmula:<formula>formula see original document page 54</formula>

onde R6 e Rc são conforme definidos acima e LG é um grupoabandonador convencional, tal como, trifluormetanossulfonatoe semelhantes, com o bloco de construção P1/P2 desprotegidoN mostrado acima. A reação é realizada em um solvente orgâ-nico apropriado, incluindo porém não limitado aos solventesorgânicos halogenados, tais como, cloreto de metileno, 1,2-dibromoetano e semelhantes, solventes etéreos, tais como,éter dietila, tetraidrofurano, acetonitrila ou solventes a-romáticos, tais como, benzeno, tolueno, xileno e semelhantesou misturas dos mesmos e opcionalmente na presença de umabase orgânica ou inorgânica. Preferivelmente, a base orgâni-ca é trietilamina, piridina, N-metilmorfolina, colidina, di-isopropiletilamina e semelhantes. Preferivelmente, a baseinorgânica é carbonato de césio, carbonato de sódio, bicar-bonato de sódio e semelhantes. A reação é opcionalmente rea-lizada na presença de um agente de secagem, tal como, crivosmoleculares. Preferivelmente, a reação é realizada a tempe-ratura ambiente. 0 intermediário pode ser preparado pelosmétodos conhecidos na arte. Por exemplo, um composto onde R6é fenila ou 4-fluorfenila, Rb é trifluormetila e Rc é hidro-gênio pode ser prontamente preparado de 2,2,2 trifluoraceto-fenona ou 2, 2, 2,4 1-tetrafluoracetona respectivamente e dis-ponível comercialmente, por redução do grupo ceto em um gru-po alcoólico por agente de redução apropriado, tal como, bo-roidreto de sódio, hidreto de alumínio lítio e semelhantes.O solvente usado depende do tipo de agente de redução. Porexemplo, quando boroidreto de sódio é usado a reação é rea-lizada em um solvente orgânico alcoólico, tal como, metanol,etanol e semelhantes. Quando hidreto de alumínio litio é u-sado a reação é realizada em um solvente etéreo, tal como,tetraidrofurano e semelhantes. A reação de 2,2,2-triflúor-1-feniletanol ou 2,2,2-triflúor-1-(4-fluorfenil)etanol com a-nidrido tríflico provê o composto desejado. O intermediárioenriquecido quiralmente pode ser obtido por redução da ace-tofenona halogenada correspondente com um agente de reduçãoapropriado, tal como, catecolborano ou complexo BH3-DMS, napresença de um catalisador apropriado, tal como, (A ou cata-lisador (R) CBS ou (A ou (R)-, um -dif enil-2-pirrolidina-metanol na presença de BBN.

Em um modo correspondente, o intermediário da fórmula:

<formula>formula see original document page 55</formula>

pode ser reagido com o bloco de construção P2 pro-tegido com carbóxi, que é subseqüentemente desprotegido ealongado com o bloco de construção Pl conforme descrito aqui

Alternativamente, o intermediário descrito acima e reagido:<formula>formula see original document page 56</formula>

LG é um grupo abandonador apropriado, tal como,trifluormetanossulfonato e PG um grupo de proteção hidroxilaapropriado, tal como, trialquilssilila e semelhantes, de a-cordo com as condições de reação descritas acima. A hidroxi-etilamida protegida O resultante é oxidada no ácido carboxi-Iico correspondente e se acopla ao bloco de construção Plconforme descrito a seguir. Os grupos de proteção hidroxilaapropriados e condições de reação para colocar os mesmos eremover os mesmos podem ser encontrados em Greene, T.W.; eWuts, P. G. M. Protecting Groups in Organic Synthesis; JohnWiley & Sons, Inc. 1999. A hidroxietilamina P2 pode ser pre-parada dos aminoácidos naturais e não naturais corresponden-tes por métodos bem conhecidos na arte. Alguns de tais pro-cedimentos são descritos na Publicação de Pedido PCT númeroWO 03/075836, a revelação a qual é incorporada aqui como re-ferência em sua totalidade.

Alternativamente, os compostos onde E é -CRbRc-podem ser preparados por reação de um composto da fórmula:

<formula>formula see original document page 56</formula>

Onde R6 é um grupo cíclico, conforme definido aci-ma e Rb é halometila, preferivelmente trifluormetila combloco de construção P2 protegido carbóxi, desprotegido N ouo bloco de construção P1/P2 ressaltado acima sob condiçõesde reação de aminação redutiva. A reação é realizada na pre-sença de um agente de desidratação apropriado, tal como, Ti-Cl4, sulfato de magnésio, trifluoracetato de isopropila, napresença de uma base, tal como, diisopropiletilamina, piri-dina e semelhantes e em um solvente orgânico apropriado, talcomo, cloreto de metileno para fornecer uma imina. A imina éreduzida com um agente de redução apropriado, tal como, bo-roidreto de sódio, cianoboroidreto de sódio e semelhantes emum solvente apropriado, tal como, metanol, etanol e seme-lhantes.

Alternativamente, os compostos onde E é -CRbRc-podem ser preparados por reação do haloalquilaldeído com umaamina conforme mostrada a seguir:

<formula>formula see original document page 57</formula>

R5, R5', R6 e Rb são conforme definidos acima. Acondensação do haloalquiladeido com um aminoetanol (prepara-do por redução do aminoácido 5/5' alfa correspondente com umagente de redução apropriado, tal como, hidreto de alumíniolitio e semelhantes sob condições bem conhecidas na arte),utilizando aparelho Dean Stark provê a amina ciclica ilus-trada, que mediante reação com um reagente de Grignard dafórmula R6MgX (onde X é halo) ou um reagente organolitio dafórmula R6LiI provê a hidroxietilamida ilustrada. A oxidaçãoda hidroxietilamida com um agente de oxidação apropriado,tal como, reagente de oxidação Jones ou H5I06/Cr03, e seme-lhantes, então provê o bloco de construção P3/P2 que é alon-gado no terminal C com o bloco de construção Pl e oxidadoconforme necessário.

Conforme descrito acima, o alongamento é tipica-mente realizado na presença de um agente de acoplamento a-propriado, por exemplo, benzotriazol-1-iloxitrispirrolidinofosfônio hexafluorfosfato (PyBOP), 0-benzotriazol-l-il-N,Ν,N',N1-tetrametilurônio hexafluorfosfa-to (HBTU), 0-(7-azabenzotriazol-l-il)-1,1,3,3-tetrametil-urônio hexafluorfosfato (HATU), cloridrato de 1—(3—dimetilaminopropil)-3-etilcarbodiimida (EDC) ou 1,3-dicicloexil carbodiimida (DCC), opcionalmente na presença de1-hidroxibenzotriazol (HOBT), e uma base, tal como, N,N-diisopropiletilamina, trietilamina, N-metilmorfolina e seme-lhantes. A reação é tipicamente realizada a 20 a 30°C, pre-ferivelmente a cerca de 25°C e requer 2 a 24 horas para es-tar completa. Os solventes de reação apropriados são solven-tes orgânicos inertes, tais como, solventes orgânicos halo-genados (por exemplo, cloreto de metileno, clorofórmio e se-melhantes) , acetonitrila, N,N-dimetilformamida, solventeseterais, tais como, tetraidrofurano, dioxano e semelhantes.Alternativamente, a etapa de acoplamento de alon-gamento acima pode ser realizada primeiro pela conversão dobloco de construção P3/P2 em um derivado de ácido ativo, talcomo, éster succinimida e então reagindo com a amina PI. Areação requer, tipicamente, 2 a 3 horas para ficar completa.

As condições utilizadas nessa reação dependem da natureza doderivado de ácido ativo. Por exemplo, se for um cloreto deácido derivado de 4, a reação será realizada na presença deuma base apropriada (por exemplo, trietilamina, diisopropi-letilamina, piridina, e semelhantes). Solventes de reaçãoapropriados são solventes orgânicos polares, tais como, ace-tonitrila, N,N-dimetilformamida, diclorometano ou quaisquermisturas apropriadas dos mesmos.

0 método acima pode também ser usado para prepararcompostos onde Rc é diferente de hidrogênio, utilizando oprocedimento descrito acima, porém substituindo R6COH comuma cetona da fórmula R6RbCO e então tratando a amina cícli-ca resultante com RcLi/RcMgX, seguido por oxidação para for-necer o ácido livre. 0 ácido livre é então condensado de a-cordo com as condições descritas acima.

Ficará claro a um versado na arte que, os compos-tos onde E é CRbRc podem também ser preparados como se segue:<formula>formula see original document page 60</formula>

Especificamente, a proteção O convencional do ami-noetanol descrito acima seguida por reação com o haloalqui-lemiacetal, provê o composto haloalquilimina ilustrado, queé tratado com um composto de litio orgânico da fórmula R6Li,onde R6 é conforme definido acima. A remoção do grupo deproteção oxigênio provê a hidroxietilamida descrita no es-quema de reação imediatamente precedente, que no modo cor-respondente, é oxidada no ácido carboxílico e alongada como bloco de construção PI. Grupos de proteção de oxigênioapropriados e condições de reação para colocar os mesmos eremover os mesmos podem ser encontrados em Greene, T.W.; andWuts, P. G. M.; Protecting Groups in Organic Synthesis; JohnWiley & Sons, Inc. 1999.

Alternativamente, um composto onde E é CRbRc e R6é arila ou heteroarila pode ser preparado conforme ilustradoa seguir:

<formula>formula see original document page 60</formula>

Especificamente, o hemiacetal haloalquila descritoacima é reagido com o bloco de construção P2 protegido pararender o intermediário 2-(1-hidroximetilamino)acetato ilus-trado. A reação é realizada na presença de uma quantidadecatalitica de um ácido, tal como, ácido p-toluenossulfônicoe em um solvente hidrocarboneto aromático, tal como, tolue-no, benzeno e semelhantes.

O tratamento do intermediário 2-(l-hidroximetilamino)acetato com R6H sob condições de reaçãoFriedel-Crafts/BF3. EtT2O provê o bloco de construção P3/P2protegido carbóxi que é alongado conforme descrito acima. Demodo semelhante, o haloalquilemiacetal pode ser reagido combloco de reação P2/P1 e oxidado na cetona, conforme necessário .

O termo "grupo de proteção N" ou "protegido N"conforme usado aqui se refere aos grupos destinados a prote-ger o término N de um aminoácido ou peptideo ou a protegerum grupo amino contra reações indesejáveis durante procedi-mentos sintéticos. Os grupos de proteção N usados de modogeral são revelados em Greene, "Protective Groups in OrganicSynthesis" (John Wiley & Sons, New York, 1981), que é destaforma incorporado como referência. Os grupos de proteção Nincluem grupos acila, tais como, formila, acetila, propioni-la, pivaloila, t-butilacetila, 2-cloroacetila, 2-bromoacetila, trifluoracetila, tricloroacetila, ftalila, o-nitrofenoxiacetila, α-clorobutirila, benzoila, 4-clorobenzoila, 4-bromobenzoila, 4-nitrobenzoila, e semelhan-tes; grupos sulfonila, tais como, benzenossulfonila, p-toluenossulfonila, e semelhantes, grupos de formação de car-bamato, tais como, benziloxicarbonila, p-clorobenziloxicarbonila, p-metoxibenziloxicarbonila, p-nitrobenziloxicarbonila, 2-nitrobenziloxicarbonila, p-bromobenziloxicarbonila, 3, 4-dimetoxibenziloxicarbonila, A-metoxibenziloxicarbonila, 2-nitro-4,5-dimetoxibenziloxicarbonila, 3,4,5-trimetoxibenziloxicarbonila, 1- (p-bifenilil)-1-metilethoxicarbonila, a, a-dimetil-3,5-dimetoxibenziloxicarbonila, benzidriloxicarbonila, t-butoxicarbonila, diisopropilmetoxicarbonila, isopropiloxi-carbonila, etoxicarbonila, metoxicarbonila, aliloxicarboni-la, 2,2,2-tricloroetoxicarbonila, fenoxicarbonila, A-nitrofenoxicarbonila, fluorenil-9-metoxicarbonila, ciclopen-tiloxicarbonila, adamantiloxicarbonila, cicloexiloxicarboni-la, feniltiocarbonila e semelhantes; grupos alquila, taiscomo, benzila, trifenilmetila, benziloximetila e semelhan-tes; e grupos silila, tais como, trimetilsilila e semelhan-tes. Grupos de proteção N favorecidos incluem formila, ace-tila, benzoila, pivaloila, t-butilacetila, fenilssulfonila,benzila, t-butoxicarbonila (BOC) e benziloxicarbonila (Cbz).

Grupos de proteção hidróxi e/ou carbóxi são tambémextensivamente revistos em Greene ibid e incluem ésteres,tais como, metila, éteres metila substituídos, tais como,metoximetila, metiltiometila, benziloximetila, t-butoximetila, 2-metoxietoximetila e semelhante, éteres sili-la, tais como, trimetilssilila (TMS), t-butildimetilssilila(TBDMS) tribenzilssilila, trifenilssilila, t-butildifenilssilil triisopropil silila e semelhantes, éteresetila substituídos, tais como, 1-etoximetila, 1-metil-l-metoxietila, t-butila, alila, benzila, p-metoxibenzila, di-fenilmetila, trifenilmetila e semelhantes, grupos aralquila,tais como, tritila e derivados de pixila (9-hidróxi-9-fenilxanteno, especialmente o cloreto). Grupos de proteçãohidróxi incluem ésteres, tais como, formato, benzilformato,cloroacetato, metoxiacetato, fenoxiacetato, pivaloato, ada-mantoato, mesitoato, benzoato e semelhantes. Os grupos deproteção hidróxi carbonato incluem metila, vinila, alila,cinamila, benzila e semelhantes.

Descrição Detalhada das Modalidades

Várias modalidades da invenção serão descritas a-ra apenas por meio de ilustração, com referência aos Exem-plos que se seguem.

Exemplo 1

Elaboração do bloco de construção Pl

Etapa a)

<formula>formula see original document page 63</formula>Uma mistura de 54 (5,2 g, 13,0 mmol), paládio so-bre carbono (10%, Acros, 0,66 g) em metanol foi hidrogenadaem pressão ligeiramente positiva. O hidrogênio foi alterado3 vezes em um período de 1 hora, após TLC (éter de petróleo-acetato de etila 7:3 e diclorometano-metanol 9:1, colorindocom molibdato de amônio-sulfato de cério) o que indicou con-versão completa do material de partida em um ponto ativo nãoUV maior que colore AMC, e alguns pontos de movimento maio-res, mais fracos (diclorometano-metanol 9:1) . A mistura dereação foi então filtrada através de Celite e concentrada oque forneceu o composto bruto 55. A uma suspensão do resíduoem diclorometano (60 mL) e piridina (3,2 mL, 40 mmol) a 0°Cfoi adicionado benzilcloroformato (0,93 mL, 6,5 mmol). Amistura de reação foi agitada a temperatura ambiente por 2horas após o que, piridina adicional (3 mL) e benzilcloro-formato (0,8 mL) foi adicionado a 0°C. A mistura de reaçãofoi então agitada a temperatura ambiente por toda a noite,então diluída com diclorometano (100 mL) , lavada sucessiva-mente com 1 M ácido sulfúrico aquoso (2 χ 50 mL) e 1 M car-bonato hidrogenado de sódio aquoso (1 χ 50 mL) , então seca(sulfato de sódio), filtrada e concentrada sobre sílica.

Cromatografia flash (diâmetro: 4 cm, IMC-gel: 50 g, eluentede vedação: acetato de etila em éter petróleo 1:4) do resí-duo empregando acetato de etila em éter petróleo 1:4 (350mL), 2:3 (250 mL), 1:1 (250 mL), 3:2 (250 mL) e 3:1 (150 mL)forneceu o composto 56 como um xarope espumado (2,71 g, 8,1mmol, 62% em 2 etapas) após secagem em vácuo por toda a noite.Dados NMR (400 MHz, CDCl3): 1H, 1,33, 1,52 (2s, 6H,C(CH3)2), 2,34 (2d, 1H,-0H), 3,04 (m, 1H, H-6a) , 3,97 (m,1H, H-6b), 4,19 (m, 1H, H-5), 4,33 (m, 1H, H3), 4,68, 4,84(2d, 1H, H-2), 4,79 (t, 1H, H4), 5, 08-5,24 (m, 2H, CH2Ph),5,86 (br s, 1H, H-l), 7,30-7,42 (m, 5H, Ar-H).

Etapa b)

<formula>formula see original document page 65</formula>

A uma suspensão agitada de hidreto de sódio (60%em óleo mineral, Aldrich, 0,34 g, 8,4 mmol) e composto 56(2,17 g, 6,47 mmol) em dimetilformamida (30 mL) foi adicio-nado brometo de benzila (0,81 mmol, 6,8 mmol) durante 5 mi-nutos. Após agitação por 1 hora (TLC: acetato de etila eméter petróleo 2:3), metanol (aproximadamente 2 mL) foi adi-cionado para destruir reagente em excesso, então imediata-mente dividido entre acetato de etila (180 mL) e água (150mL). A camada orgânica foi lavada com água (3 χ 100 mL) , en-tão seca (sulfato de sódio) , filtrada e concentrada sobresilica. Cromatografia flash (diâmetro: 4 cm, IMC-gel: 40 g,eluente de vedação: acetato de etila em éter petróleo 1:4)do resíduo empregando acetato de etila em éter petróleo 1:4(100 mL), 3:7 (250 mL) e 2:3 (250 mL) forneceu um xarope in-color (2,7 g, 6,35 mmol, 98%) após secagem em vácuo por todaa noite.Dados NMR (400 MHz, CDCl3): 1H, 1,31 (s, 3H,C(CH3) (CH3) ) , 1,51 (d, 3H, C(CH3)(CH3)), 3,29 (m, lH,H-6a),3,78-3,96 (m, 2H, H-5 e H-6b), 4,22 (dd, 1H, H3), 4,64, 4,84(2 Μ, 4H, H-2, H-4 e CH2Ph), 5, 07-5,22 (m, 1H, CH2Ph), 5,94(m, 1H, H-I), 7,28-7,39 (m, 10H, Ar-H).

Etapa c)

<formula>formula see original document page 66</formula>

A uma solução agitada do composto 7 (2,635 g, 6,19mmol) em diclorometano (28 mL) e trietil silano (9,9 mL,61,9 mmol) a O0C foi adicionado eterato de borotrifluoreto(7,9 mL, 61,9 mmol) em uma porção. A mistura de reação foientão agitada a temperatura ambiente por 24 horas (TLC: éterde petróleo-acetato de etila 4:1 e acetato de etila-tolueno3:2), então 1 M carbonato hidrogenado de sódio aquoso (40mL) e algum carbonato hidrogenado de sódio sólido foi cuida-dosamente adicionado até o borbulhamento parar. A misturaresultante foi dividida entre diclorometano (100 mL) e água(100 mL). A camada orgânica foi lavada com 1 M carbonato hi-drogenado de sódio aquoso (1 χ 100 mL) e salmoura (1 χ 100mL) , então seca (sulfato de sódio), filtrada e concentradasobre silica. Cromatografia flash (diâmetro: 4 cm, IMC-gel:48 g, eluente de vedação: acetato de etila-tolueno 3:2) doresíduo empregando acetato de etila em tolueno 3:2 (750 mL)forneceu um xarope duro incolor (1,38 g, 3,74 mmol, 60%) decerca 85-90% de pureza de acordo com TLC. LR-MS: Calculadopara C2IH24NO5: 370, 2. Encontrado: 370, 0 [M+H] .

Etapa d)

Uma mistura de composto 58 (1,38 g, 3,74 mmol),paládio sobre carbono (Acros, 10%, 0,12 g) e dicarbonato dedi-t-butila (0,82 g, 3,7 mmol) em acetato de etila (50 mL)foi hidrogenada em pressão em excesso leve. O hidrogênio foialterado 2 vezes por um período de 1 hora e a reação foi mo-nitorada por LC-MS. Após 1 hora, paládio sobre carbono adi-cional (0,1 g) foi acrescentado e a mistura de reação foitratada com hidrogênio por 1 hora a mais. A mistura de rea-ção foi então filtrada através de Celite e concentrada. Oresíduo foi tratado com 2:1 piridina-anidrido acético (18mL) por toda a noite, e então concentrado. 0 resíduo foi re-dissolvido em diclorometano (60 mL) e foi lavado sucessiva-mente com IM ácido sulfúrico aquoso (2 χ 40 mL) e 1 M carbo-nato hidrogenado de sódio aquoso (1 χ 40 mL) , e então seco(sulfato de sódio) filtrado e concentrado. Cromatografiaflash (diâmetro: 3 cm, IMC-gel: 20 g, eluente de vedação:acetato de etila em tolueno 1:4) do resíduo (dissolvido emtolueno-acetato de etila 4:1 ) empregando acetato de etilaem tolueno 1:4 (200 mL) e 1:3 (150 mL) forneceu um xaropeincolor (1,13 g, 3,0 mmol, 80%) após secagem em vácuo portoda a noite.

Dados de NMR (400 MHz, CDCl3): 1H, 1,45 (s, 9H,C(CH3)3), 2,08 (s, 3H, COCH3), 3,10 (m, lH,H-6a), 3,74-3,99(m, 3H, H-la, H-5 e H-6b), 4,11 (m, 1H, H-lb), 4,16-4,74 (m,4H H-3, H-4 e CH2Ph), 5,31 (m, 1H, H-2), 7, 28-7, 40 (m, 5H,Ar-H).

Etapa e)

<formula>formula see original document page 68</formula>

Uma mistura de composto 60 (1, 08 g, 2,86 mmol) epaládio sobre carbono (10%, 0,15 g) em acetato de etila (30mL) foi hidrogenada em pressão em excesso leve por 2 horas(TLC: tolueno-acetato de etila 4:1 e 1:1 ), então filtradaatravés de Celite e concentrada. A mistura foi concentradade diclorometano (3 χ 10 mL) , então dissolvida em diclorome-tano e à solução foi adicionado trifluoreto de bis-(2-metoxietil) aminoenxofre (50% em THF, 2,12 mL, 2 eq.) a 0°C.

Após agitação a temperatura ambiente por toda a noite, maistrifluoreto de bis(2-metoxietil)aminoenxofre (50% em THF, 2mL) foi adicionado e a mistura de reação foi agitada a tem-peratura ambiente por mais uma noite (TLC: tolueno-acetatode etila 1:1, coloração com ninidrina), então 1 M carbonatohidrogenado de sódio aquoso foi adicionado cuidadosamenteaté o borbulhamento parar. A mistura resultante foi diluídacom diclorometano (50 mL) , e a camada orgânica foi lavadauma vez com 1 M carbonato hidrogenado de sódio aquoso (40mL), então seca (sulfato de sódio), filtrada e concentrada.Cromatografia flash (diâmetro: 3 cm, Sílica: 25 g, eluentede vedação: tolueno-acetato de etila 4:1) do resíduo (dis-solvido em tolueno-acetato de etila 4:1 ) empregando tolue-no-acetato de etila 4:1 forneceu o composto 62 (0,49 g, 1,7mmol, 59 %) como um xarope incolor após secagem em vácuo portoda a noite. Algum material de partida e intermediário deenxofre poderiam ser recuperados da mistura de reação.

LR-MS: Calculado para C9Hi3FNO5: 234, 1. Encontrado:234,0 [M+2H-t-Butil].

Exemplo 2

Alongamento com um P2 típico

Etapa a)

<formula>formula see original document page 69</formula>

A uma solução do composto 62 (0,49 g, 1,7 mmol) emmetanol (9,5 mL) foi adicionado 0,5 M metóxido de sódio me-tanólico (1 mL), então agitado a temperatura ambiente por30minutos (TLC: Tolueno-acetato de etila 3:2, coloração nini-drina). Dowex W X 8 lavado com metanol (malha 50-100, forma-H+) foi cuidadosamente adicionado (pH foi monitorado por pH-papel) até neutralidade, então a mistura foi filtrada e con-centrada. 0 resíduo foi dissolvido em diclorometano e ácidotrifluoracético foi adicionado a 0°C. A mistura de reaçãofoi então agitada a temperatura ambiente por 55 minutos(TLC: diclorometano-metanol 9:1, coloração ninidrina), entãoconcentrada. Cromatografia de coluna (diâmetro: 2 cm, síli-ca: 15 g, eluente de vedação: diclorometano-metanol 95:5) doresíduo (dissolvido em diclorometano-metanol 95:5) empregan-do metanol em diclorometano 5:95 (150 mL) , 7:93 (100 mL) e1:9 (200 mL) forneceu um xarope duro que cristalizou median-te assentamento (0,39 g, 1,50 mmol, 88%).

Dados NMR (400 MHz, DMS0-d6): 1H, 3,34,3,44 (2 dd,1H, H-6a), 3,60-3,70 (m, 2H, H-Ia e H-6b), 3,89 (dd, 1H, H-lb), 4,15 (d, 1H, H-3), 4,51 (Br s, 1H, H-2), 4,76 (dd, 1H,H-4) , 5,26 (dd, 2Jh,f = 48,3 Hz, H-5)

Etapa b)

A uma solução agitada do composto 64 (0,34 g, 1,30mmol), cloridrato de N-etil-N1 -(3-dimetilaminopropil)carbodiimida (0,28 g, 1,43 mmol), hidratode 1-hidroxibenzotriazol (0,22 g) e monoidrato de N- (t-butoxicarbonil)-L-Ieucina (0,34 g, 1,37 mmol) em DMF (10 mL)foi adicionada trietilamina (0,54 mL, 3,9 mmol), então agi-tada a temperatura ambiente por 24 horas. A mistura de rea-ção foi dividida entre 10% ácido citrico aquoso (30 mL) eacetato de etila (10 mL) . A camada de água foi extraída comacetato de etila (3 χ 10 mL), então a camada orgânicas foramcombinadas, e lavadas sucessivamente com água (1 χ 20 mL) e1 M carbonato hidrogenado de sódio aquoso (3 χ 20 mL), entãosecas (sulfato de sódio), filtradas e concentradas sobre sí-Iica. Cromatografia flash com acetato de etila em éter pe-tróleo (40-60%, eluição escalonada do gradiente) do resíduoforneceu 15 (0,35 g, 0,98 mmol, 75%) como um sólido amorfo,incolor.

LR-MS: Calculado para Ci3H22FN2O5: 305, 1. Encontra-do: 305,1 [M+2H-t-Butil].

Exemplo 3

Oxidação em Pl cetona

Esse exemplo mostra oxidação de um composto Pl hi-droxilado P3+P2.

<formula>formula see original document page 71</formula>

A uma solução agitada do composto 66 (0,10 g, 0,25mmol) em diclorometano (4 mL) a temperatura ambiente foi a-dicionado periodinano de Dess-Martin (0,12 g, 0,28 mmol).

Após agitação por 90 minutos, a mistura de reação foi diluí-da com diclorometano (10 mL) , lavada com 1:1 IM carbonatohidrogenado de sódio aquoso-tiossulfato de sódio aquoso a10% (4 χ 10 mL) , então seca (sulfato de sódio), filtrada econcentrada sobre silica. Cromatografia flash com acetato deetila em éter petróleo (50-60%, eluição escalonada do gradi-ente) do resíduo forneceu 67 (0, 072 g, 0,18 mmol, 71%) comouma espuma incolor. 0 composto 67 foi obtido como uma mistu-ra de isômeros geométricos (rotâmeros) e seus hidratos.

LR-MS: Calculado para C2IH24FN2O5: 403, 2. Encontra-do: 403, 0 [M+H] . Uma amostra de cetoformas de 67 em NMR foiobtida como se segue: 5 mg do composto 67 (mistura de isôme-ros geométricos e formas de hidrato com a razão: hidra-to/ceto 6:4) foram dissolvidos em DMS0-d6, então aquecidosaté 100°C no aparelho de NMR e permitidos que reagissem a500C quando a NMR indicou apenas quantidades de traço dasformas de hidrato e a razão dos rotâmeros foi de 2:1.

Dados NMR (500 MHz, DMSO-d6, 50°C) : 1H, 0,90-1,04(m, 4 χ CH3, formas maiores e menores), 1, 39-1, 82 (m, 2 χCH2CH9CH3) 2 e 2 χ CH2CH(CH3)2, formas maiores e menores), 3,56(m, H-6a, menor), 3,82 (m, H-6a, maior), 3,97-4,25 (m, 4 χH-l, formas maiores e menores e H-6b, menor), 4,37 (dd, H-6b, maior), 4,62 (d, H-3, menor), 4,79 (m, H, maior), 4,84(d, H-3, maior), 4,94 (m, H-4, maior, 5,12 (m, H-4, menor),5,15-5,34 (m, H-5 maior e H-5 menor, H menor, Jh,f maior = 49,1Hz, JH,F menor = 49,4 Hz) 7,35 (t, 1H, Ar-H), 7,47 (t, 1H, AR-H) , 7, 57-7, 70 (m, 2H, Ar-H), 7,78 (d, 1H, Ar-H), 8,18 (d, -NH, menor), 8,70 (d, -NH, maior).

Exemplo 4Um epimero Pl alternativo

Etapa a)

<formula>formula see original document page 73</formula>

A uma solução agitada do composto (60) (1,58 g,4,19 mmol) em metanol (20 mL) foi adicionada uma solução de0,5 M metóxido de sódio em metanol (5 mL) a temperatura am-biente, então a mesma foi agitada por 40 minutos. A misturade reação foi então neutralizada com Dowex 50 WX 8 (formaH+) , filtrada, adicionada trietilamina até apresentar alca-linidade leve, então concentrada e concentrada de tolueno (2χ 20 mL). A uma solução agitada do resíduo e imidazol (0,43g, 6,28 mmol) em DMF (10 mL) a O0C foi adicionado t-Butildimetilclorossilano (0,76 g, 5,02 mmol), então a mesmafoi agitada a temperatura ambiente por toda a noite. A mis-tura de reação foi então diluída com acetato de etila (100mL), lavada sucessivamente com ácido cítrico aquoso a 10% (3χ 50 mL) e 1 M carbonato hidrogenado de sódio aquoso (3 χ 50mL) , seca (sulfato de sódio), filtrada e concentrada sobresílica. Cromatografia de coluna (eluição escalonada do gra-diente, acetato de etila em tolueno, 5-20%) do resíduo for-neceu o intermediário completamente protegido como um xarope(1,86 g). Uma mistura de paládio sobre carbono (Aldrich 10%,0,28 g) e o intermediário obtido acima (1,80 g, 4,00 mmol)em acetato de etila (40 mL) foi hidrogenada em pressão leve-mente excessiva por 1 hora, então filtrada através de celitee concentrada. 0 material cristalizou mediante secagem emvácuo para fornecer 72 como agulhas (1,34 g, 90%).

Dados de NMR (400 MHz, CDCl3): 1H, delta 0,14 (m6H, Si(CH3)2), 0,90 (m, 9H, SiC(CH3)3), 1,48 (m, 9H, C(CH3)3),2,53 (m, 1H, OH), 2,78 (dd, 1H, -H-6a), 3,67-4,05 (m, 3H, H-1A, H-IB e H-6B), 4,05-4,21 (m, 2H, H-3 e H-5) 4,35-4,50 (2brs, 1H, H-2), 4,57 (m, 1H, H-4).

ETAPA B)

<formula>formula see original document page 74</formula>

A uma solução agitada de (72) (1,068 g, 2,97mmol), ácido benzóico (0,50 g, 4,46 mmol) e trifenilfosfina(1,17 g, 4,46 mmol) em THF (15 mL) a 0°C foi adicionada go-ta a gota uma solução de azodicarboxilato de diisopropila(0,88 mL, 4,46 mmol) em THF (5 mL) durante 20 minutos. Amistura de reação foi então agitada a temperatura ambientepor toda a noite, então concentrada sobre silica. Cromato-grafia flash do resíduo empregando éter de petróleo-acetatode etila 9:1 como eluente, forneceu um xarope incolor (1,34 g, 97%).

Dados NMR (400 MHz, CDC13) : 1H, delta 0,08-0,21(m, 6H, Si (Cii3) 2)/ 0,90 (s, 9H, SiC(Cii3)S)/ 1, 42-1, 56 (m, 9H,C(CH3)3), 3,48 (m, 1H, H-6A) , 3,70-4,01 (m, 3H, H-!A, H-1B,H-6B menor e maior) 4,21, 4,30 (2d, 1H, H-3), 4,44-4,56 (2brs, 1H, H-2) 4,72 (m, 1H, H-4), 5,34 (d, 1H, H-5), 7,45 (t,2H, Ar-H), 7,58 (t, 1H, Ar-H, 8,00 (d, 2H, Ar-H).

Etapa c)

<formula>formula see original document page 75</formula>

A uma solução agitada de (73) (1,34 g, 2,89 mmol)em metanol (6 mL) foi adicionada uma solução de 0,5 M metó-xido de sódio em metanol (6 mL) a temperatura ambiente, en-tão a mesma foi agitada por 15 minutos. A mistura de reaçãofoi então neutralizada com Dowex 50 WX 8 (forma H+) e fil-trada. A solução obtida foi adicionada uma solução obtida demodo semelhante ao acima, partindo de (II) (0,187 g, 0,40mmol), então concentrada. Cromatografia flash do resíduo em-pregando tolueno-acetato de etila 3:2 como eluente forneceu74 como um xarope incolor que cristalizou mediante secagemem vácuo (1,091 g, 92%).Dados NMR (400 MHz, CDCl3) : 1H, delta 0,06-0,20(m, 6H, Si(CH3)2), 0,89 (s, 9H, SiC(CH3) 3), 1, 42-1, 54 (m, 9H,C(CH3)3), 2,03 (brs, 1H, OH), 3,28 (dd, 1H, H-6A) , 3,53-3,79(m, 3H, H-1A, H-1B, Η-βΒ) , 4,19 e 4, 34-4, 56 (2m, 4H, H-2),H-3, H-4 e H-5).

Etapa d)

<formula>formula see original document page 76</formula>

A uma solução agitada de (74) (0,428 g, 1,19mmol) em diclorometano (10 mL) em um frasco revestido comTeflon foi adicionado Deoxofluor (50% em THF, 0,53 mL) atemperatura ambiente, o que resultou em leve aumento natemperatura. A mistura de reação foi agitada a temperaturaambiente por 72 horas, então diluída com diclorometano (20mL), lavada com 1 M carbonato hidrogenado de sódio aquoso (2χ 20 mL) , seca (sulfato de sódio), filtrada e concentradasobre sílica. Cromatografia flash do resíduo empregando éterde petróleo-acetato de etila 9:1 como eluente forneceu (IV)como um óleo incolor (0,118 g, 27%).

Dados NMR (400 MHz, CDC13) : 1H, delta 0,08-0,20(m, 6H, Si (CH3)2), 0,89 (s, 9H, SiC(CH3)3), 1, 42-1, 53 (m, 9H,C(CH3)3), 3,26 e 3,36 (2dd, 1H, H-6A) , 3,64 (m, 1H, H-!A),3, 73-4, 04 (m, 3H, H-1B, H-6B) , 4,20 (dd, 1H, H-3*), 4,40,4,51 (2 s, 1Η, Η-2), 4,69 (m, 1Η, Η-4*) 7, 86, 4, 98 (2 brs,1Η, Η-5). * poderia haver intercâmbio.

Etapa e)

<formula>formula see original document page 77</formula>

A uma solução agitada de (75) (0, 229 g, 0,63mmol) em THF (8 mL) foi adicionado 1 M fluoreto de tetrabu-tilamônio em THF (0,70 mL), então agitado a temperatura am-biente por 40 minutos. A mistura de reação foi então concen-trada sobre silica. Cromatografia de coluna do resíduo em-pregando tolueno-acetato de etila 1:1 como eluente forneceu75 como um xarope duro, incolor (0,150 g, 96%) .

Dados NMR (400 MHz, CDC13): 1H, delta 1,46 (m, 9HC(CH3)3), 2,70 (d, 0, 3H, OH-menor) , 3,26-3, 46 (m, 1,7H, H-6ae OH-maior), 3,75-4,04 (m, 3H, H-1A, H-IB e H-6B), 4,29,4,34 (2d, 1H, H-3* menor e maior), 4,43, 4,50 (2 brs, 1H, H-2 menor e maior), 4,74 (m, 1H, H-4*), 4,89, 5,02 (2 brs, 1H,H-5).

Etapa f)<formula>formula see original document page 78</formula>

A uma solução de (75) (0,099 g, 0,40 mmol) em di-clorometano (2 mL) a O0C, foi adicionado ácido trifluoracé-tico (2 mL), então agitado a temperatura ambiente por 35 mi-nutos, então concentrada e concentrada de tolueno (3x5mL) . A uma suspensão do resíduo, hidrato de 1-hidroxibenzotrazol (0, 067 g, 0,44 mmol), N-etil-N'-(3-dimetilaminopropil) carbodiimida χ HCl (0, 084 g, 0,44 mmol)e monoidrato de N-(t-Butoxicarbonil)-L-Ieucina (0,105 g,0,42 mmol) em DMF (4 mL) foi adicionada trietilamina (0,17mL, 1,2 mmol), então agitada a temperatura ambiente por to-da a noite. A reação foi então concentrada para metade dovolume, diluída com acetato de etila (25 mL) , lavada suces-sivamente com ácido cítrico aquoso a 10% (3 χ 15 mL) , e 1 Mcarbonato hidrogenado de sódio aquoso (3 χ 15 mL) , seca(sulfato de sódio), filtrada e concentrada. Cromatografia decoluna do resíduo empregando acetato de etila-tolueno 3:2forneceu (76) como um xarope duro, incolor (0,137 g, 95%).

Dados NMR (400 MHz, CDC13, sinal selecionado) : 1H, delta0,89, 1,01 (m, 6H, C(CH)2), 4, 98, 5, 07 (2 dd, 1H, H-5 maiore H-5 menor).

LR-MS: Calculado para Ci7H30FN2O5: 361,2. Encontra-do: 361,1 [M+H].LR-MS: Calculado para C2IH26FN2O5: 405, 2. Encontra-do: 405,1 [M+H].

O bloco de construção P2-P1 é acoplado com um gru-po de capeamento haloalquilado e o grupo hidróxi Pl oxidadopara a cetona, conforme mostrado no composto modelo acima.

Exemplo 5

Novo bloco de construção P2

<formula>formula see original document page 79</formula>

*(+)-1,2-bis(2S,5S)-dietilfosfonolanbenzeno (ciclooctadie-no)ródio (l)triflato

Ester etilico do ácido 1-metil-ciclobutanocarboxíIico 1 foi preparado de ciclobutanocarbo-xilato de etila pelo método descrito em J. Am. Chem. Soe,Vol. 103 N0 2 1981 436-442.

Éster etilico do ácido 1-metila-ciclobutanocarboxilico 1 (1 eq. ) foi agitado sob uma atmos-fera de nitrogênio a O0C em THF anidro. A essa solução foiadicionado, em porções, hidreto de alumínio litio (1,5 eq. )e a suspensão foi agitada a temperatura ambiente por 3 ho-ras. A mistura de reação foi resfriada em gelo, tratada com1 M HCl (aquoso) e agitada a O0C por 20 minutos. A soluçãofoi passada através de uma almofada de celite e o filtradoextraído com éter dietílico. As fases orgânicas foram secassobre MgSO4, filtradas e concentradas em vácuo para fornecer(1-metil-ciclobutil)-metanol, 2.

Clorocromato de piridínio (1,25 eq. ) e o mesmo pe-so de celite foram absorvidos como suspensão no diclorometa-no anidro. A isso foi adicionada, gota a gota, uma soluçãodo composto 2 (1 eq. ) em diclorometano anidro e a misturaheterogênea resultante foi agitada a temperatura ambientepor 3 horas. A mistura de reação foi passada através de umaalmofada de sílica, eluindo com 19:1 isohexanos: acetato deetila para fornecer 1-metilciclobutanocarboxaldeído, 3.

0 composto 3 (1 eq. ) foi dissolvido com agitaçãoem diclorometano anidro, e a isso foi adicionado éster tri-metílico de Boc-fosfoglicina (0,5 eq.) e 1,8-diazabiciclo[5,4,0]undec-7-eno (1,2 eq.). A solução resul-tante foi agitada a temperatura ambiente sob nitrogênio portoda a noite. A mistura de reação foi dividida entre diclo-rometano e sucessivamente IM HCl aquoso, NaHCO3 saturado,aquoso e NaCl saturado, aquoso. A camada orgânica foi secasobre MgSO4, filtrada e concentrada em vácuo. 0 óleo resul-tante foi purificado por cromatografia de coluna flash, elu-indo com metanol em diclorometano a 1%, para fornecer éstermetílico do ácido 2-tert-butoxicarbonilamino-3-(1-metil-ciclobutil) -acrílico, 4.O composto 4 foi dissolvido em metanol anidro edesgaseifiçado com nitrogênio. ( + )-1, 2-bis(2S,5S)-dietilfosfonolanbenzeno (ciclooctadieno)ródio (1) triflatofoi adicionado e a desgaseificação continuou por mais 10 mi-nutos. A reação foi agitada sob atmosfera de hidrogênio (400kPa) por 48 horas. A solução foi concentrada em vácuo e pu-rificada por cromatografia flash, eluindo com diclorometano,para fornecer éster metilico do ácid© 2S-t-butoxicarbonilamino-3-(1-metil-ciclobutil)-propiônico, 5 .

HPLC tempo de retenção de 5,88 minutos (monitoradoem 215 e 254 nm).

HPLC usando Synergy Max RP 8 0 μπ\, coluna de 50 χ4,6 mm, 10 gradiente 90% da solução B de 6 minutos (solu-ção A = 0,1% TFA em água e solução B = 10% de A em acetoni-trila) em razão de fluxo de 2 mL/min.

MS [M+H}+ 272,08 (20%) [M-Boc+H]+ 172,06 (100%)

Ionização em electrospray, eluindo com tampão deacetonitrila/formato de amônio.

1H NMR (400 MHz, CDCl3. 4,88-4,79 (1H, m) 4,33-4,27(1H, m) 3,71 (3H, s) 1, 98-1, 62 (8H, m) 1,42 (9H, s) 1,22(3H, S)

Exemplo 6

Ácido (S)-2-[(S)-I-(4-Bromo-fenil)-2,2,2-triflúor-etilamino]-4-metil-pentanóico<formula>formula see original document page 82</formula>

O composto título é preparado conforme mostrado emLi, C. S. e outros, Bioorg. Med. Cheia. Lett. 2006, 16, 1985.

Exemplo 7

(S) -4-Isobutil-2-trifluormetil-oxazolidina

<formula>formula see original document page 82</formula>

O composto título é preparado conforme mostrado emIshii, A. e outros, Sinlett 1997, 1381.

Exemplo 8

[(S)-1-(t-Butil-dimetil-silaniloximetil)-3-metil-butil]-[2,2,2-triflúor-et-(E)-illdeno]-aminaO composto título é preparado conforme mostrado emLi, C. S. e outros Bioorg. Med. Chem. Lett. 2006, 76, 1985.

Exemplo 9

Cloreto de (3R,3aR,6S,6aS)-6-Flúor-3-hidróxi-hexaidro-furo [3, 2-Jb] pirrol-4-io

<formula>formula see original document page 83</formula>

0 composto titulo é preparado por desproteção dobloco de construção do Exemplo 1 e tratamento com ácido clo-rídrico.

Exemplo 10

(S)-2-[1-(4-Bromo-fenil)-2,2,2-triflúor-etilamino]-4-metil-pentan-l-ol

<formula>formula see original document page 83</formula>

A uma solução agitada do 1,4 dibromobenzeno (1,79g, 7,61 mmol) em THF seco (5 mL) sob N2 a -78°C foi adicio-nado, gota a gota, 1,6 M de butil lítio em hexanos (4,5 mL,7,61 mmol). A solução resultante foi agitada por mais 20 mi-nutos a -1Q°C após o que uma solução de (S)-4-isobutil-2-trifluorometil-oxazolidina (0,5 g, 2,54 mmol) em THF seco(5 mL) foi adicionada, gota a gota, à solução de aril litio.

Agitação continuou por mais uma hora a -78 °C. A mistura dereação foi saturada com 5 mL de 2M solução de ácido clorí-drico e a mistura deixada aquecer para temperatura ambiente.A solução foi basificada com 10 mL de hidróxido de sódio e asolução resultante foi extraída com acetato de etila (2 χ30mL) e as frações orgânicas combinadas foram seca (MgSO4) econcentradas em vácuo. O produto foi purificado por cromato-grafia de coluna flash (acetato de etila:iso-hexano 1:4) pa-ra render o produto título como um óleo amarelo (0,620 g,53%) que é uma mistura 2:1 de diasterisômeros. MS M + H 355,Tempo de retenção 4,9 e 5,1 minutos 10-90 MeCN:0,05% TFA de6 minutos, Gradiente Coluna C12 de Fase Inversa, diâmetrointerno 50 mm * 4,6 mm.

Exemplo 11

(S)-4-Metil-2-[2,2,2-triflúor-1-(4metanossulfonil-bifenil-4-il)-etilamino]-pentan-l-ol

<formula>formula see original document page 84</formula>A uma solução agitada de (S)-2-[1-(4-bromo-fenil)-2,2,2-triflúor-etilamino]-4-metil-pentan-l-ol (0,1 g, 0,28mmol) em DMF (5 mL) foi adicionado ácido (4-metano sulfonilfenil) borônico (0,067 g, 0,34 mmol), solução de carbonatode sódio (0, 090 g, 0,85 mmol em 5 mL de água) e cloreto de[1,11-bis(difenilfosfino)ferroceno]paládio (II) complexo 1:1com CH2CI2 (0, 023 g, 0,03 mmol). A solução resultante foiaquecida a 80°C por 60 minutos. A mistura de reação foi dei-xada resfriar para temperatura ambiente e diluída com CH2Cl2(20 mL). Os orgânicos foram separados, secos (MgSO4)) e con-centrados em vácuo. 0 produto foi purificado por cromatogra-fia de coluna flash (iso-hexano: acetato de etila, gradiente5-66%) para render o produto título como um sólido amarelo(0, 087 g, 53%) que é uma mistura 2:1 de diasterisômeros.

Tempo de retenção 4,2 e 4,3 minutos, 10-90 MeCN:0,05% TFA 6minutos, Gradiente Coluna C12 de Fase Inversa, diâmetro in-terno 50 mm * 4,6 mm.

Exemplo 12

Ácido (S)-4-Metil-2-[(S)-2,2,2-triflúor-1-(4'metanossulfonil-bifenil-4-il)-etilamino]-pentanóico e ácido(S)-4-Metil-2-[(R)-2,2, 2-triflúor-1-(4'-metanossulfonil-bifenil-4-il)-etilamino]-pentanóico

<formula>formula see original document page 85</formula>A uma suspensão agitada de ácido periódico (5,7 g,4,19 itimo 1) em acetonitrila (55 mL) foi adicionado óxido decromo (VI) (11 mg, 0,011 mmol) e água (0,25 mL). A suspensãoresultante foi agitada várias horas a temperatura ambiente eentão resfriada para 0°C em um banho de gelo e (S)-4-metil-2-[2,2,2-triflúor-l-(41-metanossulfonil-bifenil-4-il)-etilamino]-pentan-l-ol (1,8 g, 4,19 mmol) foi adicionado,gota a gota, em 10 mL de acetonitrila, a agitação continuoua 0°C por mais 30 minutos. A reação foi derramada em soluçãoacidificada de Na2HP04 (12,0 g em 200 mL de água ajustadospara pH 3 com HCl concentrado) e então extraída com éter di-etílico (3 χ 100 mL), os extratos orgânicos combinados foramlavados consecutivamente com salmoura (1 χ 100 mL) , soluçãode sulfito hidrogenado de sódio (1 χ 100 mL) e salmoura (1 χ100 mL). 0 extrato orgânico foi seco (Na2SO4) e concentradopara fornecer o produto título como um óleo amarelo (1,3 g,53%) que é uma mistura 2:1 de diasterisômeros. Tempo de re-tenção 4,2 e 4,4 minutos, 10-90 MeCN:0,05% TFA, 6 minutos,Gradiente Coluna C12 de Fase Inversa, diâmetro interno 50 mm4,6 mm. A mistura diastereomérica dos produtos foi adicio-nalmente purificada por prep-HPLC [Phenomenex Sinergi Ci2 10μιη, coluna de 10 χ 150 mm, gradiente de 30->90% de 15 minu-tos da solução B (solução A= 0,1% TFA em água e solução B =10% A em acetonitrila) em razão de fluxo de 18 mL/minuto]para render os dois diasteroisômeros separados do compostotítulo como sólido brancos em uma razão 2:1, ácido (S)-4-Metil-2-[(S)-2,2,2-triflúor-l-(4'-metanossulfonil-bifenil-4-il)-etilamino]-pentanóico (0,192 g) M + H 444, ácido (S)-4-Metil-2-[(R)-2,2,2-triflúor-1-(4 ' -metanossulfonil-bifenil-4-il)-etilamino]-pentanóico (0,120 g) M + H 444.

Exemplo 13

(S)-1-((3R,3aR,6S, 6aS)-6-Flúor-3-hidroxi-hexaidro-furo [3, 2-Jb]pirrol-4-il) -4 -metil-2- [ (R) -2,2,2-triflúor-1-(4' -metanossulfonil-bifenil-4-il)-etilamino]-pentan-l-ona

<formula>formula see original document page 87</formula>

A uma solução agitada de cloreto de(3R,3aR,6S,6aS)-6-flúor-3-hidróxi-hexaidro-furo[3,2-b] pirrol-4-io (0,05 g, 0,30 mmol) em CH2Cl2 (2 mL) e ácido(S)-4-metil-2-[(R)-2, 2, 2-triflúor-1-(41-metanossulfonilbifenil-4-il)-etilamino]-pentanóico (0,120 g, 0,27 mmol)foi adicionado dicicloexil carbodiimida (0,12 g, 0,54 mmol)e diisopropil etil amina (0,047 mL, 0,27 mmol). A soluçãoresultante foi agitada a temperatura ambiente por 60 minu-tos. A reação foi então filtrada através de Celite e entãoos organismos lavados com 2M HCl (1x2 mL), NaHCO3 saturado(1x2 mL) , secos (MgSO4) e concentrados em vácuo. 0 produtofoi purificado por cromatografia de coluna flash (iso-hexano:acetato de etila, gradiente de 25-100%) para render oproduto titulo como uma espuma branca (0,061 g, 39%) , M + H573, Tempo de retenção 5,8 minutos 10-90 MeCN:0,05% TFA 6minutos, Gradiente Coluna C12 de Fase Inversa diâmetro in-terno 50 mm * 4,6 mm.

Exemplo 13A

(S)-1-((3R, 3aR, 6S, 6aS)-6-flúor-3-hidroxi-hexaidro-furo[3,2-b]pirrol-4-il)-4-metil-2-[(S)-2,2,2-triflúor-1- (4'-metanossulfonil-bifenil-4-il) -etilamino]-pentan-l-ona

<formula>formula see original document page 88</formula>

A uma solução agitada de cloreto de(3R,3aR,6S,6aS)-6-flúor-3-hidróxi-hexaidro-furo[3,2-b] pirrol-4-io (0,08 g, 0,47 mmol) em CH2Cl2 (2 mL) e ácido(S)-4-metil-2-[(S)-2,2, 2-triflúor-1-(41-metanossulfonil-bifenil-4-il)-etilamino]-pentanóico (0,19 g, 0,43 mmol) foiadicionado dicicloexil carbodiimida (0,18 g, 0,86 mmol) ediisopropil etil amina (0,074 mL, 0,43 mmol). A solução re-sultante foi agitada a temperatura ambiente por 60 minutos.

A reação foi então filtrada através de Celite e então os or-gânicos lavados com 2M HCl (1x2 mL), NaHC03 saturado (lx 2mL) , secos (MgSCU) e concentrados em vácuo. 0 produto foipurificado por cromatografia de coluna flash (iso-hexano:acetato de etila, gradiente de 25-100%) para render oproduto titulo como uma espuma branca (0,072 g, 29%), M + H573, Tempo de retenção 5,8 minutos, 10-90 MeCN:0,05% TFA 6minutos, Gradiente Coluna C12 de Fase Inversa diâmetro in-terno 50 mm * 4,6 mm.

Exemplo 14

(3aS,6S,6aS)-6-Flúor-4-{(S)-4-metil-2-[(S)-2,2,2-triflúor-1-(4'-metanossulfoni1-bifenil-4-il)-etilamino] -pentanoil} - tetraidro-furo [3, 2-Jb] pirrol-3-ona

A uma solução agitada de (S)-1-((3R,3aR,6S,6aS)-6-flúor-3-hidróxi-hexaidro-furo[3, 2-b] pirrol-4-il)-4-metil-2-[(S)-2,2,2-triflúor-1-(41-metanossulfonil-bifenil-4-il) -etilamino]-pentan-l-ona (0,072 g, 0,13 mmol) em CH2Cl2 (5mL) foi adicionado periodinano de Dess Martin (0,11 g, 0,25mmol). A solução resultante foi agitada a temperatura ambi-ente por 2 horas. A mistura de reação foi diluída com CH2Cl2(20 mL) lavada com NaHCO3 saturado (2 χ 10 mL) , seca (MgSO4)e concentrada em vácuo. 0 produto foi purificado por prep-HPLC [Phenomenex Sinergi Ci2 10 μιη coluna de 10 χ 150 mm,gradiente de 30->90% de 15 minutos da solução B (solução A =0,1% TFA em água e solução B = 10% A em acetonitrila) em ra-zão de fluxo de 18 mL/minuto] para render do composto títulocomo um sólido branco (0, 038 g, 52%) como uma mistura comseu hidrato de cetona. MS M + H 571 , M + H2O + H 58 9. Tempode retenção 5,5 e 5,9 minutos, 10-90 MeCN:0,05% TFA 6 minu-tos, Gradiente Coluna C12 de Fase Inversa, diâmetro interno50 mm * 4,6 mm.

Exemplo 15

(3aS,6S,6aS)-6-Flúor-4-{(S)-4-metil-2-[(R)-2,2,2-triflúor-1-(4'-metanossulfonil-bifenil-4-il)-etilamino]-pentanoil} - tetraidro-furo [3, 2-Jb] pirrol-3-ona

<formula>formula see original document page 90</formula>

A técnica descrita no Exemplo 14 foi aplicada a(S) -1- ( (3R, 3aR,6S,6aS)-6-flúor-3-hidróxi-hexaidro-furo[3,2-b]pirrol-4-il)-4-metil-2-[(R)-2,2,2-triflúor-1- (4 * -metanossulfonil-bifenil-4-il)-etilamino]-pentan-l-ona (0,061g, 0,11 mmol). 0 produto foi purificado por prep-HPLC [Phe-nomenex Sinergi Ci2 10 μιη, coluna de 10 χ 150 mm, gradientede 30->90% de 15 minutos da solução B (solução A = 0,1% TFAem água e solução B = 10% A em acetonitrila) em razão defluxo de 18 mL/minuto] para obter o composto titulo (0,021g, 34%) como uma mistura com seu hidrato cetona. MS M + H571, M + H2O + H 58 9. Tempo de retenção 5,3 e 5,8 minutos10-90 MeCN:0,05% TFA 6 minutos, Gradiente Coluna C12 de FaseInversa, diâmetro interno 50 mm * 4,6 mm.

Exemplo 16(S)-2-[(S)-1-(4-Bromo-feni1-2,2,2-triflúor-etilamino]-1-((3R,3aR,6S,6aS)-6-flúor-3-hidróxi-hexaidro-furo[3,2-b]pirrol-4-il)-4-metil-pentan-l-ona

<formula>formula see original document page 91</formula>

A uma solução agitada de cloreto de(3R,3aR,6S,6aS)-6-flúor-3-hidróxi-hexaidro-furo[3,2-b]pirrol-4-io; (2,250 g, 12,25 mmol) em DMF (40 mL) e ácido(S)-2-[(S)-1-(4-brorno-feni1)-2,2,2-triflúor-etilamino]-4-metil-pentanóico (4,1 g, 11,14 mmol) foi adicionado HATU(5,08 g, 13,36 mmol) e diisopropil etil amina (5,8 mL,33,41 mmol). A solução resultante foi agitada a temperaturaambiente por toda a noite então concentrada em vácuo. 0 re-síduo foi então disperso em água (50 mL) e extraído com ace-tato de etila (2 χ 150 mL) . As frações orgânicas combinadasforam lavadas com solução de bicarbonato de sódio saturada(1 χ 100 mL) , e seca sobre sulfato de magnésio e concentra-da. 0 produto foi purificado por cromatografia de colunaflash (iso-hexano:acetato de etila, gradiente 5-66%) pararender o produto título como um óleo amarelo (2,95 g, 53%)MS M + H 497, Tempo de retenção 5,8 minutos 10-90 MeCN:0,05%TFA 6 minutos, Gradiente Coluna C12 de Fase Inversa, diâme-tro interno 50 mm * 4,6 mm.Exemplo 17

(S)-1-((3R,3aR,6S, 6aS)-6-Flúor-3-hidroxi-hexaidro-furo[3,2-b])lpirrol-4-il-4-metil-2-[(S)-2,2,2-triflúor-1-(3'-metanossulfonil-bifenil-4-il)-etilamino]-pentan-l-ona

<formula>formula see original document page 92</formula>

A uma solução agitada de (S)-2-[(S)-1-(4-bromo-fenil)-2,2,2-triflúor-etilamino] -1-((3R, 3aR,6S,6aS)-6-flúor-3-hidróxi-hexaidro-furo[3, 2-b] pirrol-4-il)-4-metil-pentan-l-ona (0,1 g, 0,20 mmol) em DMF (1 mL) foi adicionado ácido(3-metanossulfonil fenil) borônico (0, 044 g, 0,22 mmol), 2Msolução de carbonato de sódio (1 mL) e cloreto de [1,1'-bis(difenilfosfino)ferroceno] paládio (II) complexo 1:1 comCH2CI2 (0,016 g, 0,02 mmol). A solução resultante foi veda-da em um tubo e aquecida em um microondas a 160°C por 5 mi-nutos. A mistura de reação foi deixada resfriar para tempe-ratura ambiente e diluída com CH2Cl2IH2O (1:1, 10 mL). Os or-gânicos foram separados, secos (MgSO4) e concentrados em vá-cuo. 0 produto foi purificado por cromatografia de colunaflash (iso-hexano: acetato de etila, gradiente 5-66%) pararender o produto título como um óleo amarelo (0, 048 g, 42%) .MS M + H 573. Tempo de retenção 5,4 minutos, 10-90MeCN:0,05% TFA, Gradiente de 6 minutos Coluna C12 de FaseInversa, diâmetro interno 50 mm * 4,6 mm.

Exemplo 18

(3aS,6S,6aS)-6-Flúor-{(S)-4-metil-2-[(S)-2,2,2-triflúor-1-(3'-metanossulfonil-bifenil-4-il)-etilamino]-pentanoil}-tetraidro-furo[3,2-b]pirrol-3-ona

<formula>formula see original document page 93</formula>

A técnica descrita no Exemplo 14 foi aplicada a(S)-1-((3R,3aR,6S,6aS)-6-flúor-3-hidróxi-hexaidro-furo [3,2-jb]pirrol-4-il) -4-meti 1-2- [(S) -2, 2, 2-triflúor-1- (3 ' -metanossulfonil-bifenil-4-il)-etilamino]-pentan-l-ona (0,048g, 0,11 mmol). O produto foi purificado por cromatografiade coluna flash (iso-hexano: acetato de etila, gradiente 5-66%) para fornecer o composto titulo (0,013 g, 29%) como umamistura com seu hidrato de cetona. MS M + H 571, M + H2O + H589. Tempo de retenção 4,2 e 4,7 minutos 10-90 MeCN:0,05%TFA, 6 minutos, Gradiente Coluna C12 de Fase Inversa, diâme-tro interno 50 mm * 4,6 mm.

Exemplo 19

(S)-I-((3R,3aR,6S,6aS)-6-Flúor-3-hidróxi-hexaidro-furo[3,2-b]pirrol-4-il)-4-metil-2-[(S)-2,2,2-triflúor-1- (4'-flúor-bifenil-4-il)-etilamino]-pentan-l-ona<formula>formula see original document page 94</formula>

A técnica descrita no Exemplo 17 foi aplicada a(S)-2- [ (S)-1-(4-bromo-fenil)-2,2,2-triflúor-etilamino]-1-((3R,3aR,6S,6aS)-6-flúor-3-hidróxi-hexaidro-furo[3,2-b] pirrol-4-il)-4-metil-pentan-l-ona (0,15 g, 0,30 ramol) eácido 4-fluorofenil borônico. 0 produto foi purificado porcromatografia de coluna flash (iso-hexano: acetato de etila,gradiente 5-66%) para render o produto titulo como um óleo(0,069 g, 45%). MS M + H 513. Tempo de retenção 5,6 minutos,30-90 MeCN:0,05% TFA, 6 minutos, Gradiente Coluna C12 de Fa-se Inversa, diâmetro interno 50 mm * 4,6 mm.

Exemplo 20

(3aS,6S,6aS)-6-Flúor-{ (S)-4-metil-2-[(S)-2,2,2-triflúor-1-(4'-flúor-bifenil-4-il)-etilamino]-pentanoil}-tetraidro-furo[3,2-b]pirrol-3-ona

<formula>formula see original document page 94</formula>A técnica descrita no Exemplo 14 foi aplicada a(S)-1-((3R,3aR,6S,6aS)-6-flúor-3-hidróxi-hexaidro-furo[3,2-Jb] pirrol-4-il) -4-metil-2- [ (S) -2, 2, 2-trif lúor-1- (4 '-flúor-bifenil-4-il)-etilamino]-pentan-1 -ona (0,069 g, 0,13 mmol).

O produto foi purificado por prep-HPLC [Phenomenex SinergiCi2 10 μιτι, coluna de 10 χ 150 mm, 30->90%, gradiente de 15minutos da solução B (solução A = 0,1% TFA em água e soluçãoB = 10% A em acetonitrila) em razão de fluxo de 18mL/minuto] para obter o composto titulo, sólido branco(0, 036 g, 34%) como uma mistura com seu hidrato de cetona.MS M + H 511, M + H2O + H 529. Tempo de retenção 5,5 e 6,0minutos 30-90 MeCN:0,05% T FA, 6 minutos, Gradiente ColunaC12 de Fase Inversa, diâmetro interno 50 mm * 4,6 mm.

Exemplo 21

4'-{(S)-2,2,2-Triflúor-1-[(S)-1-((3R,3aR,6S,6aS)-6-flúor-3-hidróxi-hexaidro-furo[3, 2-b]pirrol-4-carbonil)-3-metil-butilamino]-etil)-bifenil-4-carbonitrila

<formula>formula see original document page 95</formula>

A técnica descrita no Exemplo 17 foi aplicada a(S)-2-[(S)-1-(4-bromo-fenil)-2, 2, 2-triflúor-etilamino]-1-((3R,3aR,6S,6aS)-6-flúor-3-hidróxi-hexaidro-furo[3,2-b]pirrol-4-il)-4-metil-pentan-l-ona (0,15 g, 0,30 mmol) eácido 4-ciano fenil borônico. O produto foi purificado porcromatografia de coluna flash (iso-hexano: acetato de etila,gradiente 5-66%) para render o produto titulo como um óleo(0,054 g, 35%). MS M + H 513. Tempo de retenção 5,2 minutos,30-90 MeCN:0,05% TFA, Gradiente de 6 minutos Coluna C12 deFase Inversa, diâmetro interno 50 mm * 4,6 mm.

Exemplo 22

4'-{(S)-2,2,2-Triflúor-l-[(S)-1-((3aS,6S,6aS)-6-flúor-3-oxo-hexaidro-furo[3, 2-b]pirrol-carbonil)-3-metil-butilamino]-etil}-bifenil-4-carbonitrila '

<formula>formula see original document page 96</formula>

A técnica descrita no Exemplo 14 foi aplicada a4'-{(S)-2,2,2-triflúor-l-[(S)-1-((3aS,6S,6aS)-6-flúor-3-oxo-hexaidro-furo[3,2-d]pirrol-4-carbonil)-3-metil-butilamino]-etil}-bifenil-4-carbonitrila (0,054 g, 0,13 mmol). 0 produ-to foi purificado por prep-HPLC [Phenomenex Sinergi C12 10μm, coluna de 10 χ 150 mm, 30->90% gradiente de 15 minutosda solução B (solução A= 0,1% TFA em água e solução B = 10%A em acetonitrila) em razão de fluxo de 18 mL/minuto] paraobter o composto titulo, sólido branco (0,026 g, 34%) comouma mistura com seu hidrato de cetona. MS M + H 518, M + H2O+ H 536. Tempo de retenção 5,1 e 5,6 minutos 30-90MeCN:0,05% TFA, 6 minutos, Gradiente Coluna C12 de Fase In-versa, diâmetro interno 50 mm * 4,6 mm.Exemplo 23

(S)-I-((3R,3aR,6S,6aS)-6-Flúor-3-hidróxi-hexaidro-furo [3, 2-Jb]pirrol-4-il) -4-metil-2- [(S) -2, 2 , 2-trif lúor-1- (4 ' -trifluorometil-bifenil-4-il) -etilamino]-pentan-l-ona

<formula>formula see original document page 97</formula>

A técnica do Exemplo 17 foi aplicada a (S)-2-[(S)-1-(4-bromo-fenil)-2,2,2-triflúor-etilamino]-1-((3R,3aR,6S,6aS)-6-flúor-3-hidróxi-hexaidro-furo [3,2-jb] pirrol-4-il)-4-metil-pentan-l-ona (0,15 g, 0,30 mmol) eácido 4-trifluorofenil borônico. 0 produto foi purificadopor cromatografia de coluna flash (iso-hexano: acetato deetila, gradiente 5-66%) para render o produto titulo como umóleo (0,086 g, 51%). MS M + H 563. Tempo de retenção 5,9 mi-nutos, 30-90 MeCN:0,05% TFA Gradiente de 6 minutos ColunaC12 de Fase Inversa, diâmetro interno 50 mm * 4,6 mm.

Exemplo 24

(3aS,6S,6aS)-6-Flúor-4-{ (S)-4-metil-2-[(S)-2,2,2-triflúor-1-(4'-trifluorometil-bifenil-4-il)-etilamino]-pentanoil}-tetraidro-furo[3,2-b]pirrol-3-ona<formula>formula see original document page 98</formula>

A técnica descrita no Exemplo 14 foi aplicada a(S)-I- ( (3R,3aR,6S,6aS)-6-flúor-3-hidróxi-hexaidro-furo[3,2-d] pirrol-4-il)-4-metil-2-[(S)-2,2,2-triflúor-1-(41 -trifluorometil-bifenil-4-il)-etilamino]-pentan-l-ona (0, 086g, 0,15 mmol). O produto foi purificado por prep-HPLC [Phe-nomenex Sinergi C12 10 μπι coluna 10 χ 150, 30->90% gradientede 15 minutos da solução B (solução A = 0,1% TFA em água esolução B = 10% A em acetonitrila) em razão de fluxo de 18mL/minuto] para obter o composto titulo, sólido branco(0, 056 g, 66%) como uma mistura com seu hidrato de cetona.MS M + H 561, M + H2O + H 579. Tempo de retenção 6,0 e 6,5minutos 30-90 MeCN:0,05% TFA, Gradiente de 6 minutos ColunaC12 de Fase Inversa, diâmetro interno 50 mm * 4,6 mm.

Exemplo 2 5

(S)-1-((3R,3aR,6S,6aS)-6-Flúor-3-hidróxi-hexaidro-furo[3,2-h]pirrol-4-il)-4-metil-2-[(S)-2,2,2-triflúor-1- (2 ' -flúor-bifenil-4-il)-etilamino]-pentan-l-ona<formula>formula see original document page 99</formula>

A técnica descrita no Exemplo 17 foi aplicada a(S)-2-[(S)-1-(4-bromo-fenil) -2,2, 2-triflúor-etilamino]-1-((3R,3aR,6S,6aS)-6-flúor-3-hidróxi-hexaidro-furo[3,2-b] pirrol-4-il)-4-metil-pentan-l-ona (0,13 g, 0,26 mmol) eméter dimetilico:etanol (1:1, 1 mL) e ácido 2-fluorfenila bo-rônico. O produto foi purificado por cromatografia de colunaflash (iso-hexano: acetato de etila, gradiente 5-66%) pararender o produto titulo como um óleo (0,05 g, 38%). MS M + H513. Tempo de retenção 5,4 minutos, 30-90 MeCN:0,05% TFAGradiente de 6 minutos Coluna C12 de Fase Inversa, diâmetrointerno 50 mm * 4,6 mm.

Exemplo 2 6

(3aS,6S,6aS)-6-Flúor-{(S)-4-metil-2-[(S)-2,2,2-triflúor-1-(2'-flúor-bifenil-4-il)-etilamino]-pentanoil}-tetraidro-furo[3,2-b]pirrol-3-ona

<formula>formula see original document page 99</formula>A técnica descrita no Exemplo 14 foi aplicada a(S)-1-((3R,3aR,6S,6aS)-6-flúor-3-hidróxi-hexaidro-furo[3,2-b]pirrol-4-il)-4-metil-2-[(S)-2, 2, 2-triflúor-1-(2'-flúor-bifenil-4-il)-etilamino]-pentan-l-ona (0,05 g, 0,10 mmol).

O produto foi purificado por prep-HPLC [Phenomenex SinergiCi2 10 fxm coluna de 10 χ 150 mm, 30->90% gradiente de 15 mi-nutos da solução B (solução A = 0,1% TFA em água e solução B= 10% A em acetonitrila) em razão de fluxo de 18 mL/minuto]para obter o composto titulo, sólido branco (0,036 g, 72%)como uma mistura com seu hidrato de cetona. MS M + H 511, M+ H2O + H 529. Tempo de retenção 5,5 e 6,0 minutos 30-90MeCN:0,05% TFA, Gradiente de 6 minutos Coluna C12 de FaseInversa, diâmetro interno 50 mm * 4,6 mm.

Exemplo 27

(S)-1-((3R, 3aR, 6S, 6aS)-6-Flúor-3-hidróxi-hexaidro-furo [3,2-jb]pirrol-4-il) -4-meti 1-2- [(S) -2 , 2, 2-triflúor-1- (4 ' -metilssulfanil-bifenil-4-il) -etilamino]-pentan-l-ona

<formula>formula see original document page 100</formula>

A técnica descrita no Exemplo 17 foi aplicada a(S)-2-[(S)-1-(4-bromo-fenil)-2,2,2-triflúor-etilamino]-1-((3R,3aR,6S,6aS)-6-flúor-3-hidróxi-hexaidro-furo[3,2-d] pirrol-4-il)-4-metil-pentan-l-ona (0,13 g, 0,26 mmol) eméter dimetíIico:etanol (1:1, 1 mL) e ácido 4 metiltiofenilborônico. 0 produto foi purificado por cromatografia de co-luna flash (iso-hexano: acetato de etila, gradiente 5-66%)para render o produto titulo como um óleo (0,07 g, 50%) . MSM + H 541. Tempo de retenção 5,8 minutos 30-90 MeCN:0,05%TFA Gradiente de 6 minutos Coluna C12 de Fase Inversa, diâ-metro interno 50 mm * 4,6.

Exemplo 28

(3aS,6S,6aS)-6-Flúor-{ (S)-4-metil-2-[(S)-2,2,2-triflúor-1-(4'-metilssulfanil-bifenil-4-il)-etilamino]-pentanoil}-tetraidro-furo[3, 2-b]pirrol-3-ona

<formula>formula see original document page 101</formula>

A técnica descrita no Exemplo 14 foi aplicada a(S)-1-((3R,3aR,6S,6aS)-6-flúor-3-hidróxi-hexaidro-furo [3,2-b]pirrol-4-il)-4-meti1-2-[(S)-2,2,2-triflúor-1- (4'-metilssulfanil-bifenil-4-il)-etilamino]-pentan-1 -ona (0,07g, 0,13 mmol). 0 produto foi purificado por prep-HPLC [Phe-nomenex Sinergi C12 10 μτη coluna de 10 χ 150 mm, 30->90%gradiente de 15 minutos da solução B (solução A= 0,1 % TFAem água e solução B = 10% A em acetonitrila) em razão defluxo de 18 mL/minuto] para obter o composto titulo, sólidobranco (0, 007 g, 10%) como uma mistura com seu hidrato decetona. MS M + H 539, M + H2O + H 557. Tempo de retenção 5,7& 6,3 minutos 30-90 MeCN:0,05% TFA, Gradiente de 6 minutosColuna Cl2 de Fase Inversa, diâmetro interno 50 mm * 4,6 mm.

Exemplo 2 9

(3aS,6S,6aS)-6-Flúor-((S)-4-metil-2-[(S)-2,2,2-triflúor-1-(4'-metilssulfóxido-bifenil-4-il)-etilamino] -pentanoil}-tetraidro-furo[3, 2-b]pirrol-3-ona

<formula>formula see original document page 102</formula>

A técnica descrita no Exemplo 14 foi aplicada a(S)-I-((3R,3aR,6S,6aS)-6-flúor-3-hidróxi-hexaidro-furo [3,2-b]pirrol-4-il)-4-metil-2-[(S)-2,2,2-triflúor-1- (4 ' -metilssulfanil-bifenil-4-il) -etilamino]-pentan-l-ona (0,07g, 0,13 mmol). 0 produto foi purificado por prep-HPLC [Phe-nomenex Sinergi Ci2 10 μιτι coluna de 10 χ 150 mm, 30->90%gradiente de 15 minutos da solução B (solução A = 0,1% TFAem água e solução B = 10% A em acetonitrila) em razão defluxo de 18 mL/minuto] para obter o composto titulo, sólidobranco (0, 027 g, 39%) como uma mistura com seu hidrato decetona. MS M + H 555, M + H2O + H 573. Tempo de retenção 3,9e 4,5 minutos 30-90 MeCN:0,05% TFA, Gradiente de 6 minutosColuna C12 de Fase Inversa, diâmetro interno 50 mm * 4,6 mm.

Exemplo 30(S)-1- ( (3R,3aR,6S, 6aS)-6-Flúor-3-hidróxi-hexaidro-furo [3, 2-b] pirrol-4-il) - 4-meti 1-2- [(S) -2, 2, 2-trif lúor-1- (4 ' -metóxi-bifenil-4-il)-etilamino]-pentan-l-ona

<formula>formula see original document page 103</formula>

A técnica descrita no Exemplo 17 foi aplicada a(S) -2- [ (S)-1-(4-bromo-fenil) -2, 2, 2-triflúor-etilamino]-1-( (3R, 3aR,6S,6aS)-6-flúor-3-hidróxi-hexaidro-furo[3,2-b] pirrol-4-il)-4-metil-pentan-l-ona (0,13 g, 0,26 mmol) eméter dimetilico:etanol (1:1, 1 mL) e ácido 4 metoxifenil bo-rônico. O produto foi purificado por cromatografia de colunaflash (iso-hexano: acetato de etila, gradiente 5-66%) pararender o produto titulo como um óleo (0, 049 g, 36%). MS M +H 525. Tempo de retenção 5,6 minutos 30-90 MeCN:0,05% TFAGradiente de 6 minutos Coluna C12 de Fase Inversa, diâmetrointerno 50 mm * 4,6 mm.

Exemplo 31

(3aS,6S,6aS)-6-Flúor-{ (S) -4-metil-2-[(S)-2,2, 2-triflúor-1-(4'-metóxi-bifenil-4-il)-etilamino]-pentanoil}-tetraidro-furo[3,2-b]pirrol-3-ona<formula>formula see original document page 104</formula>

A técnica descrita no Exemplo 14 foi aplicada a(S)-I- ( (3R,3aR,6S,6aS)-6-flúor-3-hidróxi-hexaidro-furo[3,2-jb]pirrol-4-il) -4-meti 1-2- [ (S)-2,2,2-triflúor-1-(41 -metóxi-bifenil-4-il)-etilamino]-pentan-l-ona (0,049 g, 0,09 mmol).

O produto foi purificado por prep-HPLC [Phenomenex SinergiCi2 10 μπι coluna de 10 χ 150 mm, 30->90% gradiente de 15 mi-nutos da solução B (solução A = 0,1% TFA em água e solução B= 10% A em acetonitrila) em razão de fluxo de 18 mL/minuto]para obter o composto titulo, sólido branco (0,033 g, 68%)como uma mistura com seu hidrato de cetona. MS M + H 523, M+ H2O + H 541. Tempo de retenção 5,3 e 5,9 minutos 30-90MeCN:0,05% TFA, Gradiente de 6 minutos Coluna C12 de FaseInversa, diâmetro interno 50 mm * 4,6 mm.

Exemplo 32

(S)-1-((3R,3aR,6S, 6aS)-6-Flúor-3-hidróxi-hexaidro-furo[3,2-b]pirrol-4-il)-4-meti1-2-[(S)-2,2,2-triflúor-1- (4 ' -metil-bifenil-4-il)-etilamino]-pentan-l-ona<formula>formula see original document page 105</formula>

A técnica descrita no Exemplo 17 foi aplicada a(S)-2- [(S)-1-(4-bromo-fenil) -2,2, 2-triflúor-etilamino]-1-( (3R,3aR,6S,6aS)-6-flúor-3-hidróxi-hexaidro-furo[3,2-b]pirrol-4-il)-4-metil-pentan-l-ona (0,13 g, 0,26 mmol) eméter dimetilico:etanol (1:1, 1 mL) e ácido 4 metilfenil bo-rônico. O produto foi purificado por cromatografia de colunaflash (iso-hexano: acetato de etila, gradiente 5-66%) pararender o produto titulo como um óleo (0,051 g, 38%). MS M +H 509. Tempo de retenção 5,8 minutos 30-90 MeCN:0,05% TFAGradiente de 6 minutos Coluna C12 de Fase Inversa, diâmetrointerno 50 mm * 4,6 mm.

Exemplo 33

(3aS,6S,6aS)-6-Flúor-{ (S)-4-metil-2-[(S)-2,2,2-triflúor-1-(4'-metil-bifenil-4-il)-etilamino]-pentanoil}-tetraidro-furo[3,2-b]pirrol-3-ona

<formula>formula see original document page 105</formula>A técnica descrita no Exemplo 14 foi aplicada a(S)-1-( (3R,3aR,6S,6aS)-6-flúor-3-hidróxi-hexaidro-furo[3,2-b]pirrol-4-il)-4-meti1-2-[(S)-2,2,2-triflúor-1-(4'-metil-bifenil-4-il)-etilamino]-pentan-1 -ona (0,05 g, 0,10 mmol).

O produto foi purificado por prep-HPLC [Phenomenex SinergiCi2 10 μπ\ coluna de 10 χ 150 mm, 30->90% gradiente de 15 mi-nutos da solução B (solução A = 0,1% TFA em água e solução B= 10% A em acetonitrila) em razão de fluxo de 18 mL/minuto]para obter o composto titulo, sólido branco (0,033 g, 66%)como uma mistura com seu hidrato de cetona. MS M + H 507, M+ H2O + H 525. Tempo de retenção 5,8 e 6,4 minutos 30-90MeCN:0,05% TFA, Gradiente de 6 minutos Coluna C12 de FaseInversa, diâmetro interno 50 mm * 4,6 mm.

Exemplo 34

[ (S)-1-(3-Bromo-fenil-2, 2, 2-triflúor-etil-[(S)-1-(t-butil-dimetil-silaniloximetil)-3-metil-butill-amina

<formula>formula see original document page 106</formula>

A uma solução agitada de 1,3 dibromobenzeno (9,1g, 38,53 mmol) em THF seco (100 mL) sob N2 a -78°C foi adi-cionado gota a gota 1,6 M de butil litio em hexanos (24,1mL, 38,53 mmol). A solução resultante foi agitada por maisminutos a -78°C após o que, uma solução de [(S)-l-(t-butil-dimetil-silaniloximetil)-3-metil-butil]-[2,2,2-triflúor-et-(E)-ilideno]-amina (4,0 g, 12,84 mmol) em THFseco (10 mL) foi adicionada gota a gota à solução de arillí-tio. A agitação continuou por mais uma hora a -78 °C. A mis-tura de reação foi saturada com 50 mL de 2M solução de ácidocloridrico e a mistura deixada aquecer para temperatura am-biente. A solução foi basifiçada com 100 mL de hidróxido desódio e a solução resultante foi extraída com acetato de e-tila (2 χ 100 mL) e as frações orgânicas combinadas foramsecas (MgSO4) e concentradas em vácuo. 0 produto foi purifi-cado por cromatografia de coluna C18 de fase inversa(H20:MeCN, gradiente 50-100%) para render o produto títulocomo um óleo amarelo (2,55 g, 42%) MS M + H 468, Tempo deretenção 8,3 minutos 50-97 MeCN:0,05% TFA Gradiente de 6 mi-nutos Coluna C12 de Fase Inversa, diâmetro interno 50 mm * 4,6 mm.

Exemplo 35

(S)-2-[(S)-I-(3-Bromo-fenil)-2,2,2-triflúor-etilamino]-4-metil-pentan-l-ol

<formula>formula see original document page 107</formula>

A uma solução agitada do [(S)-1-(3-bromo-fenil)-2,2,2-triflúor-etil]-[(S)-1-(t-butil-dimetil-silaniloximetil)-3-metil-butil]-amina (2,55 g, 5,4 mmol) emmetanol (60 mL) foi adicionado ácido clorídrico concentrado(1 mL) e aquecida por 18 horas a 0°C. A reação foi deixadaresfriar e concentrou em vácuo. O produto foi purificado porcromatografia de coluna flash (iso-hexano: acetato de etila,Gradiente 1-33%) para render o produto titulo como um óleoamarelo (1,57 g, 82%). MS M + H 354. Tempo de retenção 4,1minutos 30-97 MeCN:0,05% TFA Gradiente de 6 minutos ColunaC12 de Fase Inversa, diâmetro interno 50 mm * 4,6 mm.

Exemplo 36

Ácido (S)-2-[(S)-I-(3-Bromo-fenil)-2,2,2-triflúor-etilamino]-4-metil-pentanóico

<formula>formula see original document page 108/formula>

A uma suspensão agitada de ácido periódico (11,5g, 50,82 mmol) em acetonitrila (100 mL) foi adicionado oxi-do de cromo (VI) (23 mg, 0, 023 mmol) e água (0,25 mL) . Asuspensão resultante foi agitada por várias horas a tempera-tura ambiente e então resfriada a 0°C em um banho de gelo e(S)-2-[(S)-1-(3-bromo-fenil)-2, 2, 2-triflúor-etilamino]-4-metil-pentan-l-ol (1,5 g, 4,19 mmol) foi adicionado, gota agota em 10 mL de acetonitrila, a agitação continuou a 0°Cpor mais 30 minutos. A reação foi derramada em solução deNa2HPO4 (12,0 g em 200 mL de água ajustada para pH 3 com HClconcentrado) e então extraída com éter dietílico (3 χ 100mL), os extratos orgânicos combinados foram lavados consecu-tivamente com salmoura (1 χ 100 mL) , solução de sulfito hi-drogenado de sódio (1 χ 100 mL) e salmoura (1 χ 100 mL) . Oextrato orgânico foi seco (Na2SO4) e concentrado para forne-cer o produto titulo como um óleo amarelo (1,3 g, 85%) MS M+ H 368, Tempo de retenção 5,0 minutos 30-97 MeCN:0,05% TFAGradiente de 6 minutos Coluna C12 de Fase Inversa, diâmetrointerno 50 mm * 4,6 mm.

Exemplo 37

(S)-2-[(S)-1-(3-Bromo-feni1-2,2,2-triflúor-etilamino]-1-((3R,3aR,6S, 6aS)-6-flúor-3-hidróxi-hexaidro-furo[3,2-b]pirrol-4-il)-4-metil-pentan-l-ona

<formula>formula see original document page 109</formula>

A uma solução agitada de cloreto de(3R,3aR,6S,6aS)-6-flúor-3-hidróxi-hexaidro-furo[3,2-b] pirrol-4-io (0,71 g, 3,88 mmol) em DMF (10 mL) e ácido(S)-2-[(S)-1-(3-bromo-fenil)-2,2,2-triflúor-etilamino]-A-metil-pentanóico (1,3 g, 3,53 mmol) foi adicionado HATU(1,6 g, 4,24 mmol) e diisopropil etil amina (1,8 mL, 10,59mmol). A solução resultante foi agitada a temperatura ambi-ente por toda a noite então concentrada em vácuo. 0 resíduofoi então disperso em água (50 mL) e extraído com acetato deetila (2 χ 150 mL) . As frações orgânicas combinadas foramlavadas com solução de bicarbonato de sódio saturada (1 χ100 mL), e secas sobre sulfato de magnésio e concentradas. Oproduto foi purificado por cromatografia de coluna C18 defase inversa (H2O:acetonitrila, gradiente 30-90%) para ren-der o produto titulo como um óleo amarelo (0,96 g, 55%) MS M+ H 497, Tempo de retenção 4,7 minutos 30-90 MeCN:0,05% TFAGradiente de 6 minutos Coluna C12 de Fase Inversa, diâmetrointerno 50 mm * 4,6 mm.

Exemplo 38

(S)-I-((3R,3aR,6S, 6aS)-6-Flúor-3-hidróxi-hexaidro-furo[3,2-jb]pirrol-4-il) - 4-metil-2- [(S) -2, 2,2-triflúor-1- (4 ' -metil-bifenil-3-il)-etilamino]-pentan-1-ona

<formula>formula see original document page 110</formula>

A uma solução agitada de (S)-2-[(S)-1-(3-bromo-fenil)-2,2,2-triflúor-etilamino]-1-((3R, 3aR,6S,6aS)-6-flúor-3-hidróxi-hexaidro-furo[3, 2-b]pirrol-4-il)-4-metil-pentan-l-ona (0,15 g, 0,30 mmol) em éter dimetílico: etanol (1:1, 1mL) foi adicionado ácido 4-metilssulfonil fenil borônico(0, 044 g, 0,22 mmol), 2M solução de carbonato de sódio (1mL) e tetracis(trifenilfosfina)paládio(0) suportado por po-límero (0,15 g, 0,015 mmol). A solução resultante foi ve-dada em um tubo e aquecida em um microondas a 160°C por 5minutos. A mistura de reação foi deixada resfriar para tem-peratura ambiente e diluída com CH2Cl2: H2O (1:1, 10 mL) efiltrada. Os orgânicos foram separados, secos (MgSO4) e con-centrados em vácuo. 0 produto foi purificado por cromatogra-fia de coluna flash (iso-hexano: acetato de etila, gradiente5-66%) para render o produto título como um óleo límpido(0,071 g, 48%). MS M + H 509. Tempo de retenção 5,5 minutos10-90 MeCN:0,05% TFA Gradiente de 6 minutos Coluna C12 deFase Inversa, diâmetro interno 50 mm * 4,6 mm.

Exemplo 39

(3aS,6S,6aS)-6-Flúor-{(S)-4-metil-2-[ (S)-2,2,2-triflúor-1-(4'-metil-bifenil-3-il)-etilamino]-pentanoil}-tetraidro-furo[3,2-b]pirrol-3-ona

<formula>formula see original document page 111/formula>

A técnica descrita no Exemplo 14 foi aplicada a(S)-I-((3R,3aR,6S,6aS)-6-flúor-3-hidróxi-hexaidro-furo[3,2-b]pirrol-4-il)-4-meti1-2-[(S)-2, 2, 2-triflúor-1-(4'-metil-bif enil-3-il)-etilamino]-pentan-1 -ona (0,072 g, 0,14mmol). 0 produto foi purificado por prep-HPLC [PhenomenexSinergi Ci2 10 μπι coluna de 10 χ 150 mm, 30->90% gradientede 15 minutos da solução B (solução A = 0,1% TFA em água esolução B = 10% A em acetonitrila) em razão de fluxo de 18mL/minuto] para obter o composto título, sólido branco(0, 033 g, 46%) como uma mistura com seu hidrato de cetona.MS M + H 507, M + H2O + H 525. Tempo de retenção 5,9 e 6,6minutos 30-90 MeCN:0,05% TFA, Gradiente de 6 minutos ColunaC12 de Fase Inversa, diâmetro interno 50 mm * 4,6 mm.

Exemplo 40

(S)-1-((3R,3aR,6S, 6aS)-6-Flúor-3-hidróxi-hexaidro-furo[3,2-b]pirrol-4-il)-4-metil-2-[(S)-2,2,2-triflúor-1- ( 4'-metanossulfonil-bifenil-3-il) -etilamino]-pentan-l-ona

<formula>formula see original document page 112</formula>

A técnica descrita no Exemplo 38 foi aplicada a(S)-2- [ (S)-1-(3-Bromo-fenil) -2,2, 2-triflúor-etilamino]-1-((3R,3aR,6S,6aS)-6-flúor-3-hidróxi-hexaidro-furo[3,2-b] pirrol-4-il)-4-metil-pentan-l-ona (0,15 g, 0,30 mmol) eácido 4 metilssulfonilfenil borônico. O produto foi purifi-cado por cromatografia de coluna flash (iso-hexano: acetatode etila, gradiente de 5-100%) para render o produto titulocomo um óleo (0,07 g, 41%). MS M + H 573. Tempo de retenção4,3 minutos 30-90 MeCN:0,05% TFA Gradiente de 6 minutos Co-luna C12 de Fase Inversa, diâmetro interno 50 mm * 4,6 mm.

Exemplo 41

(3aS,6S,6aS)-6-Flúor-{ (S)-4-metil-2-[(S)-2,2,2-triflúor-1-(4'-metanossulfonil-bifenil-3-il)-etilamino]-pentanoil}tetraidro-furo[3,2-b]pirrol-3-ona<formula>formula see original document page 113</formula>

A técnica descrita no Exemplo 14 foi aplicada a(S)-1-((3R,3aR,6S,6aS)-6-flúor-3-hidróxi-hexaidro-furo [3,2-jb]pirrol-4-il) -4-metil-2- [(S) -2,2,2-triflúor-1-(4' -metanossulfonil-bifenil-3-il)-etilamino]-pentan-l-ona (0, 07g, 0,12 mmol). O produto foi purificado por prep-HPLC [Phe-nomenex Sinergi Ci2 10 um coluna de 10 χ 150 mm, 30->90%gradiente de 15 minutos da solução B (solução A = 0,1 % TFAem água e solução B = 10% A em acetonitrila) em razão defluxo de 18 mL/minuto] para obter o composto titulo, sólidobranco (0, 027 g, 39%) como uma mistura com seu hidrato decetona. MS M + H 571 , M + H2O + H 589. Tempo de retenção5,2 e 5,4 minutos 30-90 MeCN:0,05% TFA, Gradiente de 6 minu-tos Coluna C12 de Fase Inversa, diâmetro interno 50 mm * 4,6 mm.

Exemplo 42

(S)-I-((3R,3aR,6S,6aS)-6-Flúor-3-hidróxi-hexaidro-furo [3, 2-£>]pirrol-4-il) -4-metil-2- [ (S) -2, 2, 2-trif lúor-1- (3 ' -metanossulfonil-bifenil-3-il)-etilamino]-pentan-l-ona<formula>formula see original document page 114</formula>

A técnica descrita no Exemplo 38 foi aplicada a(S)-2-[(S)-1-(3-bromo-fenil)-2,2, 2-triflúor-etilamino]-1-((3R,3aR,6S,6aS)-6-flúor-3-hidróxi-hexaidro-furo[3,2-b] pirrol-4-il)-4-metil-pentan-l-ona (0,15 g, 0,30 mmol) eácido 3 metilssulfonil fenil borônico. 0 produto foi purifi-cado por cromatografia de coluna flash (iso-hexano: acetatode etila, gradiente de 5-100%) para render o produto titulocomo um óleo (0,1 g, 60%). MS M + H 573. Tempo de retenção4,4 minutos 30-90 MeCN:0,05% TFA Gradiente de 6 minutos Co-luna C12 de Fase Inversa, diâmetro interno 50 mm * 4,6 mm.

Exemplo 4 3

(3aS,6S,6aS)-6-Flúor-{(S)-4-metil-2-[(S)-2,2,2-triflúor-1-(3'-metanossulfonil-bifenil-3-il)-etilamino]-pentanoil}-tetraidro-furo[3,2-b]pirrol-3-ona

<formula>formula see original document page 114</formula>

A técnica descrita no Exemplo 14 foi aplicada a(S)-I-((3R,3aR,6S,6aS)-6-flúor-3-hidróxi-hexaidro-furo[3,2-b] pirrol-4-il) -4-metil-2- [(S) -2, 2, 2-trif lúor-1- (3 ' -metanossulfonil-bifenil-3-il) -etilamino]-pentan-l-ona (0,1g, 0,18 mmol). O produto foi purificado por prep-HPLC [Phe-nomenex Sinergi Ci2 10 μπι coluna de 10 χ 150 mm, 30->90%gradiente de 15 minutos da solução B (solução A = 0,1% TFAem água e solução B = 10% A em acetonitrila) em razão defluxo de 18 mL/minuto] para obter o composto titulo, sólidobranco (0,051 g, 51%) como uma mistura com seu hidrato decetona. MS M + H 571, M + H2O + H 589. Tempo de retenção 5,3e 5,5 minutos 30-90 MeCN:0,05% TFA, Gradiente de 6 minutosColuna C12 de Fase Inversa, diâmetro interno 50 mm * 4,6 mm.

Exemplo 44

(S)-1-((3R, 3aR, 6S, 6aS)-6-Flúor-3-hidroxi-hexaidro-furo[3,2-jb]pirrol-4-il) -4-meti 1-2- [(S) -2, 2, 2-trif lúor-1- (2 ' -flúor-bifenil-3-il)-etilamino]-pentan-1-ona

<formula>formula see original document page 115</formula>

A técnica descrita no Exemplo 38 foi aplicada a(S)-2-[(S)-1-(3-bromo-fenil) -2,2,2-triflúor-etilamino]-1-((3R,3aR,6S,6aS)-6-flúor-3-hidróxi-hexaidro-furo[3,2-b] pirrol-4-il)-4-metil-pentan-l-ona (0,15 g, 0,30 mmol) eácido 2-fluorfenila borônico. 0 produto foi purificado porcromatografia de coluna flash (iso-hexano: acetato de etila,gradiente 5-66%) para render o produto titulo como um óleo(0,11 g, 69%). MS M + H 513. Tempo de retenção 5,1 minutos30-90 MeCN:0,05% TFA Gradiente de 6 minutos Coluna C12 deFase Inversa, diâmetro interno 50 mm * 4,6 mm.

Exemplo 45

(3aS,6S,6aS)-6-Flúor-{(S)-4-metil-2-[(S)-2,2,2-triflúor-1-(2'-flúor-bifenil-3-il)-etilamino]-pentanoil}-tetraidro-furo[3,2-b]pirrol-3-ona

<formula>formula see original document page 116</formula>

A técnica descrita no Exemplo 14 foi aplicada a(S)-1-((3R,3aR,6S,6aS)-6-flúor-3-hidróxi-hexaidro-furo[3,2-b]pirrol-4-il) -4-meti 1-2- [ (S) -2, 2, 2-triflúor-1- (2 ' -flúor-bifenil-3-il)-etilamino]-pentan-l-ona (0,11 g, 0,21 mmol). Oproduto foi purificado por prep-HPLC [Phenomenex Sinergi C1210 μιη coluna de 10 χ 150 mm, 30->90% gradiente de 15 minutosda solução B (solução A= 0,1% TFA em água e solução B = 10%A em acetonitrila) em razão de fluxo de 18 mL/minuto] paraobter o composto titulo, sólido branco (0,054 g, 51%) comouma mistura com seu hidrato de cetona. MS M + H 511, M + H2O+ H 529. Tempo de retenção 5,4 e 6,1 minutos 30-90MeCN:0,05% TFA, Gradiente de 6 minutos Coluna C12 de FaseInversa, diâmetro interno 50 mm * 4,6 mm.

Exemplo 46(S)-1-((3R,3aR,6S,6aS)-6-Flúor-3-hidróxi-hexaidro-furo [3, 2-Jb]pirrol-4-il) - 4-metil-2- [ (S) -2, 2, 2-trif lúor-1- (3-piridin-4-il-fenil)-etilamino]-pentan-l-ona

<formula>formula see original document page 117</formula>

A técnica descrita no Exemplo 38 foi aplicada a(S)-2-[(S)-1-(3-bromo-fenil)-2,2, 2-triflúor-etilamino]-1-((3R,3aR,6S,6aS)-6-flúor-3-hidróxi-hexaidro-furo[3,2-b] pirrol-4-il)-4-metil-pentan-l-ona (0,15 g, 0,30 mmol) eácido 4-piridil borônico. O produto foi purificado por cro-matografia de coluna flash (iso-hexano: acetato de etila,gradiente de 5-100%) para render o produto titulo como umóleo (0,071 g, 47%). MS M + H 496. Tempo de retenção 3,7 mi-nutos 30-90 MeCN: 10 mm (NH3)2CO3 Gradiente de 6 minutos Co-luna C12 de Fase Inversa, diâmetro interno 50 mm * 4,6 mm.

Exemplo 47

(3aS,6S,6aS)-6-Flúor-4-((S)-4-metil-2-[(S)-2,2,2-triflúor-1-(3-piridin-4-il-fenil)-etilamino]-pentanoil}-tetraidro-furo[3,2-b]pirrol-3-ona

<formula>formula see original document page 117</formula>A técnica descrita no Exemplo 14 foi aplicada a(S)-1-((3R,3aR,6S,6aS)-6-flúor-3-hidróxi-hexaidro-furo[3,2-b] pirrol-4-il)-4-metil-2-[(S)-2, 2, 2-triflúor-1-(3-piridin-4-il-fenil)-etilamino]-pentan-1 -ona (0,071 g, 0,14 mmol). Oproduto foi purificado por prep-HPLC [Phenomenex Sinergi Ci210 μπι coluna de 10 χ 150 mm, 30->90% gradiente de 15 minutosda solução B (solução A = 0,1% TFA em água e solução B = 10%A em acetonitrila) em razão de fluxo de 18 mL/minuto] paraobter o composto titulo, sólido branco (0,008 g, 11%) comouma mistura com seu hidrato de cetona. MS M + H 494, M + H2O+ H 512. Tempo de retenção 4,0 e 4,6 minutos 30-90 MeCN: 10mm (NH3) 2C03, Gradiente de 6 minutos Coluna C12 de Fase In-versa, diâmetro interno 50 mm * 4,6 mm.

Exemplo 48

1-(4-Bromo-tiazol-2-il)-4-metil-piperazina

<formula>formula see original document page 118</formula>

O composto titulo foi preparado conforme mostradoem Palmer e outros, J. Med. Chem. 2005, 48, 7520-7534.

Exemplo 49

Éster benzilico do ácido (3R,3aR,6S,6aS)-6-Flúor-3-hidróxi-hexaidro-furo[3,2-b]pirrol-4-carboxílico<formula>formula see original document page 119</formula>

O composto titulo é preparado por desprote-ção/proteção convencional do bloco de construção do Exemplo 1.

Exemplo 50

Éster isopropilico do ácido (S)-2-[(S)-1-(4-Bromo-fenil)-2,2,2-triflúor-etilamino]-4-metil-pentanóico

<formula>formula see original document page 119</formula>

A uma solução agitada do ácido (S)-2-[ (S)-1-(4-bromo-fenil)-2,2,2-triflúor-etilamino]-4-metil-pentanóico(1,80 g, 4,9 mmol) em álcool isopropilico (100 mL) foi adi-cionado ácido sulfúrico concentrado (2 mL). A solução resul-tante foi aquecida a 80°C por 4 horas. A mistura de reaçãofoi deixada resfriar, concentrada em vácuo e o óleo resul-tante disperso em CH2CI2 (100 mL) lavado com NaHCC>3 saturado(2 χ 50 mL) , seco (MgSCU) e concentrado em vácuo para rendero composto titulo como um óleo marrom (1,77 g, 88%). MS M +H 412. Tempo de retenção 6,6 minutos 30-97 MeCN:0,05% TFAGradiente de 6 minutos Coluna C12 de Fase Inversa, diâmetrointerno 50 mm * 4,6 mm.

2,2,2-triflúor-l-r4-(4,4,5, 5-tetrametil-[1,3,2]dioxaborolan-2-il)-fenil]-etilamino)-pentanóico

<formula>formula see original document page 120</formula>

A uma solução agitada do éster isopropilico do á-cido (S)-2-[(S)-1-(4-bromo-fenil)-2,2, 2-triflúor-etilamino]-4-metil-pentanóico (2,2 g, 5,36 ramol) em DMF (30 mL) foiadicionado bis (pinacolato) borano (2,0 g, 8,04 ramol), ace-tato de potássio (l,6g 16,1 mmol) e cloreto de [1,1'-bis(difenilfosfino)ferroceno]paládio (II) complexo 1:1 comCH2Cl2 (0,438 g, 0,54 mmol). A solução resultante foi veda-da em um tubo e aquecida em um microondas a 160°C por 20 mi-nutos. A mistura de reação foi deixada resfriar para tempe-ratura ambiente e filtrada através de uma coluna curta desilica com acetato de etila (500 mL) . A solução resultantefoi concentrada em vácuo e o produto bruto foi purificadopor cromatografia de coluna C18 de fase inversa (H2O: MeCN,gradiente 50-100%) para render o composto titulo como um ó-leo marrom (0, 920 g, 38%). MS M + H 458. Tempo de retenção

Exemplo 51

Éster isopropilico do ácido (S)-4-Metil-2-{ (S) -4,6 minutos 70-97 MeCN:0,05% TFA Gradiente de 6 minutos Co-luna C12 de Fase Inversa, diâmetro interno 50 mm * 4,6 mm.

Exemplo 52

Éster isopropílico do ácido (S)-4-Metil-2-( (S) -2,2,2-triflúor-l-{4-[2-(4-metil-piperazin-l-il)-tiazol-4-il]-fenil}-etilamino)pentanóico

<formula>formula see original document page 121</formula>

A uma solução agitada do éster isopropílico do á-cido (S)-4-metil-2-{ (S)-2, 2, 2-triflúor-1-[4-(4,4,5,5-tetrametil-[1,3,2]dioxaborolan-2-il)-fenil]-etilamino } -pentanóico (0,72 g, 1,57 mmol) em DMFrH2O (1:1, 20 mL) foiadicionada 1-(4-bromo-thiazol-2-il)-4-metil-piperazina (0,5g, 1,89 mmol), carbonato de sódio (0,2 g 1,89 mmol) e clo-reto de [1, 11 -bis(difenilfosfino)ferroceno] paládio (II)complexo 1:1 com CH2Cl2 (0,129 g, 0,16 mmol) . A solução re-sultante foi vedado em um tubo e aquecido em um microondas a160°C por 20 minutos. A mistura de reação foi deixada res-friar e diluída com CH2Cl2 (100 mL) . A fase orgânica foi se-parada, seca (MgSO4) e concentrada em vácuo. O produto brutofoi purificado por cromatografia de coluna flash (acetato deetila:MeOH, 9:1) para render o produto titulo como um sólidovermelho escuro (0,150 g, 13%). MS M + H 513. Tempo de re-tenção 4,0 minutos 50-97 10 mm (NH3) 2C03:MeCN Gradiente de 6minutos Coluna C12 de Fase Inversa, diâmetro interno 50 mm *4,6 mm.

Exemplo 53

Cloreto de hidrogênio, ácido (S)-4-Metil-2-( (S)-2,2,2-triflúor-l-{4-[2-(4-metil-piperazin-l-il)-tiazol-4-il]-fenil}-etilamino)-pentanóico

<formula>formula see original document page 122</formula>

A uma mistura agitada de 2M ácido clorídrico e di-oxano (1:1, 10 mL) foi adicionado éster isopropílico do áci-do (S)-4-metil-2-((S) -2, 2, 2-triflúor-1-{4-[2-(4-metil-piperazin-l-il) -tiazol-4-il]-fenil}-etilamino)-pentanóico(0,15 g, 0,29 mmol) . A solução foi então aquecida por 20horas a IOO0C e então concentrada em vácuo à secura parafornecer o composto título como um sólido marrom escuro(0,14 g, 98%) que foi usado sem qualquer purificação adicio-nal. MS M-H 469.

Exemplo 54

Éster benzílico do ácido (3aS,6S,6aS)-6-Flúor-3-oxo-hexaidro-furo[3,2-b]pirrol-4-carboxílico

<formula>formula see original document page 123</formula>

A uma solução agitada do éster benzilico do ácido(3R, 3aR,6S, 6aS)-6-flúor-3-hidróxi-hexaidro-furo[3,2-b] pirrole-4-carboxí Iico (1,25 g, 4,44 ramol), em CH2CI2 (50mL) foi adicionado periodinano de Dess-Martin (2,1 g, 4,44mmol). A solução resultante foi agitada a temperatura ambi-ente por 2 horas. A mistura de reação foi saturada com umamistura de NaHCO3 saturado e solução de Na2S2O3 a 10% (1:1,100 mL) e a fase orgânica seca (MgSO4) e concentrada em vá-cuo. 0 produto bruto foi purificado por cromatografia de co-luna flash (iso-hexano:acetato de etila 1:1) para fornecer ocomposto titulo como um óleo claro (1,15 g, 92%) . MS M + H280, TLC Rf 0,2 (iso-hexano:acetato de etila 1:2)

Exemplo 55

Éster benzilico do ácido (3aS,6S,6aS)-6-Flúor-3,3-dimetóxi-hexaidro-furo[3, 2-b]pirrol-4-carboxíIico<formula>formula see original document page 124</formula>

A uma solução agitada do éster benzílico do ácido(3aS,6S,6aS)-6-flúor-3-oxo-hexaidro-furo[3,2-b]pirrol-4-carboxilico (1,15 g, 4,1 mmol) em metanol (10 mL) foi adi-cionado ortoformato de trimetila (5 mL) e ácido p-toluenosulfônico (0,02 g) . A solução resultante foi agitada a 60°Cpor 3 horas e então deixada resfriar e concentrar em vácuo.O produto bruto foi purificado por cromatografia de colunaflash (iso-hexano:acetato de etila, gradiente 5-66%) parafornecer o composto titulo como um óleo límpido (1,07 g,80%). MS M + H 326, TLC Rf 0,2 (iso-hexano:acetato de etila1:4).

Exemplo 56

(3aS,6S,6aS)-6-Flúor-3,3-dimetóxi-hexaidro-furo[3,2-d]pirrol

<formula>formula see original document page 124</formula>

Uma solução de éster benzílico do ácido(3aS,6S,6aS)-6-flúor-3,3-dimetóxi-hexaidro-furo[3,2-b]pirrol-4-carboxílico (0,07 g, 0,22 mmol) em metanol (10mL) foi passado através de um cartucho contendo Pd/C a 10%(10 mg) em um hidrogenador H-Cube em uma taxa de fluxo de 1mL/minuto. A solução resultante foi concentrada para forne-cer o produto titulo como um óleo límpido (0,042 g, 99%). MSM + H 192.

Exemplo 57

(S)-I-((3aS,6S,6aS)-6-Flúor-3,3-dimetóxi-hexaidro-furo [3,2-jb]pirrol-4-il) -4-meti 1-2- ( (S) -2, 2, 2-triflúor-1- (4-[2- (4-metil-piperazin-l-il) -tiazol-4-ill-fenil)-etilamino)-pentan-l-ona

<formula>formula see original document page 125</formula>

A uma solução agitada de (3aS,6S,6aS)-6-Flúor-3,3-dimetóxi-hexaidro-furo[3,2-b]pirrol (0,084 g, 0,44 mmol) emDMF (10 mL) e cloreto de hidrogênio, ácido (S)-4-metil-2-( (S)-2,2,2-triflúor-1-{4-[2-(4-metil-piperazin-l-il)-tiazol-4-il]-fenil}-etilamino)-pentanóico (0,14 g, 0,29 mmol) foiadicionado HATU (0,17 g, 0,44 mmol) e diisopropil etil ami-na (0,15 mL, 0,88 mmol). A solução resultante foi agitada atemperatura ambiente por toda a noite então concentrada emvácuo. 0 resíduo foi então disperso em CH2CI2 (20 mL) e la-vado com solução saturada de bicarbonato de sódio (1 χ 10mL) , seco sobre sulfato de magnésio e concentrado. O produtofoi purificado por cromatografia de coluna C18 de fase in-versa (H2Oracetonitrila, gradiente 30-90%) para render ocomposto título como um óleo marrom claro (0,39 g, 55%) MS M+ H 644, Tempo de retenção 4,7 minutos 30-97 10 mm(NH3)2CO3IMeCN Gradiente de 6 minutos Coluna C12 de Fase In-versa, diâmetro interno 50 mm * 4,6 mm.

Exemplo 58

(3aS,6S,6aS)-6-Flúor-[(S)-4-metil-2-((S)-2,2,2-triflúor-1-{4-[2-(4-metil-piperazin-l-il)-tiazol-4-il]-fenil}-etilamino)-pentanoil] - tetraidro-furo[3,2-b]pirrol-3-ona

<formula>formula see original document page 126</formula>

A uma solução agitada de (S)-1-( (3aS,6S,6aS)-6-flúor-3,3-dimetóxi-hexaidro-furo[3, 2-b]pirrol-4-il)-4-metil-2- ( (S)-2,2,2-triflúor-l-{4-[2-(4-metil-piperazin-l-il)-tiazol-4-il]-fenil}-etilamino)-pentan-l-ona (0,04 g, 0,062mmol) em ácido acético triflúor (1,8 mL) foi adicionada água(0,2 mL) . A solução resultante foi agitada por 24 horas atemperatura ambiente. A mistura de reação foi diluida comCH2CI2 (5 mL) e a mistura de solvente evaporada empregandoum fluxo de gás N2. 0 produto bruto foi então redissolvidoem CH2CI2 e neutralizado com solução 2M Na2CC>3 (1 mL) , a ca-mada orgânica foi separada e concentrada em vácuo. 0 produtobruto foi purificado por prep-HPLC [Phenomenex Sinergi C1210 μm coluna de 10 χ 150 mm, 30->90% gradiente de 15 minutosda solução B (solução A = 10 mm (NH3)2CO3 em água e solução B= 10% A em acetonitrila) para fornecer o produto titulo comoum sólido branco (0,01 g, 27%), como uma mistura com seu hi-drato de cetona. MS M + H 598, M + H2O + H 616. Tempo de re-tenção 3,2 e 3,8 minutos 30-97 10 mm (NH3) 2C03:MeCN Gradien-te de 6 minutos Coluna Ci2 de Fase Inversa, diâmetro interno50 mm 4,6 mm.

Exemplo 59

Ácido_(S)-2-[1-(4-Bromo-fenil)-2,2,2-triflúor-etilamino]-4-metil-pentanóico

<formula>formula see original document page 127</formula>

A uma suspensão agitada de ácido periódico (11,6g, 50,82 mmol) em acetonitrila (100 mL) foi adicionado óxidode cromo (VI) (23 mg, 0,023 mmol) e água (0,5 mL) . A sus-pensão resultante foi agitada várias horas a temperatura am-biente e então resfriada para 0°C em um banho de gelo e (S)-2-[1-(4-bromo-fenil)-2, 2, 2-triflúor-etilamino]-4-metil-pentan-l-ol (1,5 g, 4,23 mmol) foi adicionado, gota a gota,em 10 mL de acetonitrila, a agitação continuou a 0°C pormais 30 minutos. A reação foi derramada em solução acidifi-cada de Na2HPO4 (12,0 g em 200 mL de água ajustada para pH 3com HCl concentrado) e então extraída com éter dietílico (3χ 100 mL) , os extratos orgânicos combinados foram lavadosconsecutivamente com salmoura (1 χ 100 mL) , solução de sul-fito hidrogenado de sódio (1 χ 100 mL) e salmoura (1 χ 100mL). 0 extrato orgânico foi seco (Na2SO4) e concentrado parafornecer o composto título como um óleo amarelo (1,61 g,97%) que é uma mistura 2:1 de diasterisômeros. MS M + H 368.Tempo de retenção 5,2 minutos 10-90 MeCN:0,05% TFA Gradientede 6 minutos Coluna C12 de Fase Inversa, diâmetro interno 50mm * 4,6 mm.

Exemplo 60

(S)-2-[1-(4-Bromo-fenil)-2,2,2-triflúor-etilamino] -1-((3R,3aR,6S, 6aS) -6-flúor-3-hidroxi-hexaidro-furo [3,2-jb]pirrol-4-il) - 4-metil-pentan-l-ona

<formula>formula see original document page 128</formula>A uma solução agitada de cloreto de(3R,3aR,6S,6aS)-6-flúor-3-hidróxi-hexaidro-furo[3,2-b]pirrol-4-io; (0,09 g, 0,60 mmol) em CH2Cl2 (2 mL) e ácido(S)-2-[1-(4-Bromo-fenil)-2, 2, 2-triflúor-etilamino]-4-metil-pentanóico (0,2 g, 0,54 mmol) foi adicionado DCC (0,22 g,1,09 mmol) e diisopropil etil amina (0,1 mL, 0,54 mmol). Asolução resultante foi agitada a temperatura ambiente portoda a noite, então filtrada através de celite e concentradaem vácuo. O produto foi purificado por cromatografia de co-luna flash (iso-hexano:acetato de etila, 1:1) para render ocomposto titulo como um sólido amarelo (0,155, 58%) MS M + H497, Tempo de retenção 5,8 minutos 10-90 MeCN:0,05% TFA Gra-diente de 6 minutos Coluna C12 de Fase Inversa, diâmetro in-terno 50 mm * 4,6 mm.

Exemplo 61

(3aS,6S,6aS)-6-Flúor-4-{ (S) -4-metil-2- [2,2,2-triflúor-1-(3'-metanossulfonil-bifenil-4-il)-etilamino] -pentanoil}-tetraidro-furo[3,2-b]pirrol-3-ona

<formula>formula see original document page 129</formula>

A técnica descrita no Exemplo 14 foi aplicada a(S)-1-((3R,3aR,6S, 6aS)-6-flúor-3-hidróxi-hexaidro-furo[3,2-b]pirrol-4-il)-4-metil-2-[2 , 2, 2-triflúor-1-(3'-metanossulfonil-bifenil-4-il)-etilamino]-pentan-l-ona (0,120g, 0,27 mmol). 0 produto foi purificado por prep-HPLC [Phe-nomenex Sinergi Ci2 10 μπ\ coluna de 10 χ 150, 30->90% gradi-ente de 15 minutos da solução B (solução A = 0,1% TFA em á-gua e solução B = 10% A em acetonitrila) em razão de fluxode 18 mL/minuto] para obter o composto titulo, sólido branco(0, 036 g, 34%) como uma mistura com seu hidrato de cetona.MS M + H 495, M + H2O + H 513. Tempo de retenção 5,9 e 6,4minutos 10-90 MeCN:0,05% TFA, Gradiente de 6 minutos ColunaC12 de Fase Inversa, diâmetro interno 50 mm * 4,6 mm.

Exemplos Biológicos

Determinação da atividade proteolitica, cataliticade catepsina K

Ensaios convenientes para catepsina K são realiza-dos usando enzima recombinante humana, tal como aquela des-crita em PDB.

ID Padrão BC016058; mRNA; HUM; 1699 BP.

DE Catepsina K Homo sapiens (picnodisostose), RNAm(clone DNAc MGC:23107)

RX MEDLINE; RX PUBMED; 12477932.

DR RZPD; IRALp962G1234.

DR SWISS-PROT; P43235.

A catepsina recombinante K pode ser expressa emuma variedade de sistemas de expressão comercialmente dispo-níveis incluindo sistemas E.coli, Pichia e Baculovirus.

A enzima purificada foi ativada por remoção dapro-seqüência por métodos convencionais.

As condições de ensaio padrão para a determinaçãode constantes cinéticas utilizaram um substrato de peptídéofluorgênico, tipicamente H-D-Ala-Leu-Lis-AMC, e foram deter-minadas tanto em 100 mM Mes/Tris, pH 7,0 contendo 1 mM deEDTA e 10 mM de 2-mercaptoetanol ou 100 mM de fosfato Na, 1mM de EDTA, 0,1% PEG 4000 pH 6,5 ou 100 mM de acetato deNa , pH 5,5 contendo 5 mM de EDTA e 20 mM de cisteina, emcada caso opcionalmente com IM de DTT como estabilizador. Aconcentração de enzima empregada foi de 5 nM. A solução desubstrato de estoque foi preparada em 10 mM de DMSO. Classi-ficações foram realizadas em concentração de substrato fixade 60 μΜ e estudos cinéticos detalhados com diluições duplasde substrato de 250 μΜ. A concentração de DMSO total no en-saio foi mantida abaixo de 3%. Todos os ensaios foram condu-zidos em temperatura ambiente. A fluorescência do Produto(excitação a 390 nm, emissão a 460 nm) foi monitorada com umleitor de placa fluorescente Labsistems Fluoroskan Ascent.As curvas de progresso do produto foram geradas por 15 minu-tos seguindo a geração do produto AMC.

Determinação da Catepsina S Ki

O ensaio utiliza catepsina humana S expressa combaculovirus e o substrato fluorescente boc-Val-Leu-Lys-AMCdisponível na Bachem em um formato de placa de 384 poços,onde 7 compostos de teste podem ser testados em paralelo comum controle positivo compreendendo um comparador de inibidorde catepsina S conhecido.

Diluições de Substrato

280 μL/poço de DMSO a 12,5% são adicionados às fi-leiras B-H de duas colunas de uma placa de polipropileno de96 poços de profundidade. 70 μL/poço de substrato são adi-cionados à fileira A. 2 χ 250 μίνροςο de tampão de ensaio(100 mM fosfato de Na, 100 mM NaCl, pH 6,5) são adicionadosà fileira A, misturados e diluídos duplamente ascendentemen-te na placa para a fileira H.

Diluições do Inibidor

100 μL/ροςο do tampão de ensaio são adicionados àscolunas 2-5 e 7-12 de 4 fileiras de uma placa de polipropi-leno de fundo em V de 96 poços. 200 μL/poço de tampão de en-saio são adicionados às colunas 1 e 6.

O primeiro composto de teste preparado em DMSO éadicionado à coluna 1 da fileira superior, tipicamente em umvolume que forneça entre 10 e 30 vezes a Ki grosseira. A Kigrosseira é calculada de uma operação preliminar na qual 10μL/poço de 1 mM boc-VLK-AMC (diluição a 1/10 de 10 mM de es-toque em DMSO diluído no ensaio tampão) são dispensados nasfileiras B a H e 20 μL/poço para fileira A de uma placa deMicrofluor™ de 96 poços. 2 μΐι de cada 10 mM do composto deteste são adicionados a um poço separado em uma fileira A,as colunas 1-10. Adição de 90 μΐϋ de tampão de ensaio conten-do 1 mM DTT e 2 nM de catepsina S para cada poço das filei-ras B-H e 180 μΙ. para a fileira A. Mistura da fileira H eleitura no espectrofotômetro fluorescente. As leituras sãodados de Prisma ajustados para equação de inibição competi-tiva, ajuste de S = 100 μΜ e Km = 100 μΜ para obter uma es-timativa de Ki, até um máximo de 100 μΜ.

O segundo composto de teste é adicionado à coluna6 da fileira superior, a terceira coluna 1 da segunda filei-ra, etc. 1 μL; do comparador foi adicionado à coluna 6 da fi-leira inferior. A coluna 1 foi misturada e diluída duplamen-te na coluna 5. A coluna 6 foi misturada e diluída duplamen-te na coluna 10.

Empregando uma pipeta de escalonamento múltiplo de8 canais ajustada para 5 χ 10 foram distribuídos 10μL/ροςο do substrato para a placa de ensaio de 384 poços. Aprimeira coluna da placa de diluição de substrato foi dis-tribuída para todas as colunas da placa de ensaio iniciandona fileira A. O espaçamento de ponta da pipeta de múltiploscanais saltará corretamente as fileiras alternadas. A segun-da coluna foi distribuída para todas as colunas iniciando nafileira B.

Empregando uma pipeta de escalonamento múltiplo de12 canais ajustada para 4 χ 10 μΐ,, foram distribuídos 10μL/poço do inibidor para a placa de ensaio de 384 poços. Aprimeira fileira da placa de diluição de inibidor foi dis-tribuída para todas as fileiras alternadas da placa de en-saio iniciando em Al. O espaçamento de ponta da pipeta demúltiplos canais saltará corretamente as fileiras alterna-das. De modo semelhante, as segunda, terceira e quartais co-lunas foram distribuídas para fileiras alternadas e colunasiniciando em A2, Bl e B2 respectivamente.

20 mL de tampão de ensaio foram misturados com 20μL IM DTT. Catepsina S foi adicionada suficientemente parafornecer a concentração final de 2 mM.

Empregando um distribuidor, tal como, Multidrop384, foram adicionados 30 μΐί/ροςο a todos os poços da placade ensaio e leitura no espectrofotômetro fluorescente, talcomo um Ascent.

Leituras fluorescentes, (excitação e comprimentosde onda de emissão de 390 nm e 4 60 nm, respectivamente, a-juste empregando filtros de faixa de passagem) refletindo aextensão de clivagem de enzima do substrato fluorescente,não obstante o inibidor, são ajustados em razão linear paracada poço.

Os dados ajustados para todos os poços para cadainibidor são ajustados para a equação de inibição competiti-va empregando SigmaPlot 2000 para determinar os valores deV, Km e Ki.

Catepsina L Ki

O procedimento acima com as emendas que se seguemé empregado para a determinação de Ki para catepsina L.

A enzima é catepsina L humana disponível comerci-almente (por exemplo, Calbiochem). 0 substrato é H-D-Val-Leu-Lys-AMC disponível da Bahcem. 0 tampão de ensaio é 10 mMde acetato de sódio, 1 mM EDTA, pH 5,5). 0 estoque de DMSO(10 mM em DMSO a 100%) é diluído a 10% em tampão de ensaio.A enzima é preparada em concentração de 5 nM em tampão deensaio, mais 1 "mM de ditiotreitol imediatamente antes do u-so. 2 μL de 10 mM inibidor constituído em DMSO a 10% sãodispensados na fileira A. 10 μL de 50 μΜ de substrato (= di-luição de 1/200 de estoque 10 mM em DMSO, diluído em tampãode ensaio).

Estudos de InibiçãoInibidores em potencial são classificados usando oensaio acima com concentrações variáveis do composto de tes-te. As reações foram iniciadas por adição da enzima às solu-ções tamponadas do substrato e inibidor. Os valores Ki foramcalculados de acordo com a equação 1.

<formula>formula see original document page 135</formula>

onde Vo é a velocidade de reação, V é a velocidade máxima, Sé a concentração de substrato com constante de Michaelis deKw, e I é a concentração do inibidor.

Compostos representativos da invenção foram ensai-ados quanto a potência e seletividade de K nos ensaios aci-ma. Observe que os dados das catepsinas LeS estão em mi-cromols, considerando-se que os compostos são tão potentescontra catepsina K que os resultados são apresentados em na-nomols.

<table>table see original document page 135</column></row><table>Fica claro que os compostos da invenção são muitopotentes contra catepsina K, porém também com seletividadede pelo menos cem vezes contra as cisteina proteases proxi-mamente relacionadas as catepsinas L e S. Adicionalmente, oscompostos possuem tipicamente boa permeabilidade (conformemedido abaixo) e outras proteínas DMPK.

Permeabilidade

Esse exemplo mede o transporte dos inibidores a-través das células do canal gastroentérico humano. 0 ensaioutiliza as células Caco-2 conhecidas com um número de passa-gem entre 40 e 60.

Transporte Apical para Basolateral

De modo geral, cada composto será testado em 2-4poços. Os poços basolaterais e apicais conterão 1,5 mL e 0,4mL de tampão de transporte (TB) , respectivamente, e a con-centração padrão das substâncias testadas é de 10 μΜ. Adi-cionalmente, todas as soluções de teste e tampões conterão1% de DMSO. Antes do experimento, as placas de transportesão pré-revestidas com meio de cultura contendo 10% de soropor 30 minutos para evitar a ligação não específica ao mate-rial plástico. Após 21 a 28 dias em cultura nos suportes defiltro, as células são lidas quanto aos experimentos de per-meabilidade.

A placa de transporte número 1 compreende 3 filei-ras de 4 poços cada. A fileira 1 é denominada lavagem, a fi-leira 2 "30 minutos" e a fileira 3 "60 minutos". A placa detransporte número 2 compreende 3 fileiras de 4 poços, umadenominada fileira 4 "90 minutos", fileira 5 "120 minutos ea fileira restante sem designação.

O meio de cultura para poços apicais é removido eas inserções são transferidas para a fileira de lavagem (nú-mero 1) em uma placa de transporte (placa número 1) fora as2 placas sem inserções, que já foram preparadas com 1,5 mLde tampão de transporte (HBSS, 25 mm HEPES, pH 7,4) nas fi-leiras 1 a 5. Em uma classificação A->B, o TB no poço baso-lateral também contém 1% de Albumina de Soro Humano.

0,5 mL de tampão de transporte (HBSS, 25 mm MES,pH 6,5) foi adicionado às inserções e as monocamadas de cé-lula equilibradas no sistema de tampão de transporte por 30minutos a 370C em um agitador Polimix. Após ser equilibradopara o sistema de tampão, o valor de resistência elétricatransepitelial (TEER) é medido em cada poço por um instru-mento de barra de corte EVOM. Os valores TEER estão geral-mente entre 400 a 1.000 Q por poço (depende do número depassagens utilizadas).

O tampão de transporte (TB, pH 6,5) é removido dolado apical e a inserção é transferida para a fileira de 30minutos (número 2) e 425 μΐ; de TB fresco (pH 6,5), incluindoa substância de teste são adicionados ao poço apical (doa-dor). As placas são incubadas em um agitador Polymix a 37 0Ccom uma viscosidade de agitação de aproximadamente 150 a 300rpm.

Após 30 minutos de incubação na fileira 2, as in-serções serão movidas para novos poços basolaterais pré-aquecidos (receptor) a cada 30 minutos; fileira 3 (60 minu-tos), 4 (90 minutos) e 5 (120 minutos).

Amostras de 25 μL serão retiradas da solução api-cal após ~2 minutos e ao final do experimento. Essas amos-tras representam amostras doadoras do inicio e do final doexperimento.

300 μL serão retirados dos poços basolaterais (re-ceptores) em cada ponto de tempo programado e o valor poste-rior de TEER é medido ao final do experimento. Acetonitrilaserá adicionada a todas as amostras coletadas, a uma concen-tração final de 50% nas amostras. As amostras coletadas se-rão armazenadas a -20°C até análise por HPLC ou LC-MS.

Transporte Basolateral para Apical

De modo geral, cada composto será testado em 2-4poços. Os poços basolateral e apical conterão 1,55 mL e 0,4mL de TB, respectivamente, e a concentração padrão das subs-tâncias testadas é de 10 μΜ. Adicionalmente, todas as solu-ções de teste e tampões conterão DMSO a 1%. Antes do experi-mento, as placas de transporte são pré-revestidas com meiode cultura contendo soro a 10% por 30 minutos para evitarligação não especifica ao material plástico.

Após 21 a 28 dias em cultura nos suportes de fil-tro, as células estão prontas para experimentos de permeabi-lidade. 0 meio de cultura dos poços apicais é removido e asinserções são transferidas para uma fileira de lavagem (nú-mero 1) em uma nova placa sem inserções (placa de transpor-te).A placa de transporte compreende 3 fileiras de 4poços. A fileira 1 é denominada "lavagem" e a fileira 3 é a"fileira experimental". A fileira de transporte foi prepara-da anteriormente com 1,5 mL de TB (pH 7,4) na fileira de Ia-vagem número 1 e com 1,55 mL TB (pH 7,4) incluindo a subs-tância de teste, na fileira experimental número 3 (lado doador).

Tampão de transporte, 0,5 mL (HBSS, 25 mm MES, pH6,5) é adicionado às inserções na fileira número 1 e as mo-nocamadas de célula são equilibradas no sistema de tampão detransporte por 30 minutos, a 37°C em um agitador Polymix.Após ser equilibrado para o sistema de tampão, o valor deTEER é medido em cada poço por um instrumento de barra decorte EVOM.

O tampão de transporte (TB, pH 6,5) é removido dolado apical e a inserção é transferida para fileira 3 e 400μL de TB fresco, pH 6,5 são adicionados às inserções. Após30 minutos, 250 μL são retirados do poço apical (receptor) esubstituídos por tampão de transporte fresco. Após isso, a-mostras de 250 mL serão retiradas e substituídas pelo tampãode transporte seco a cada 30 minutos, até o final do experi-mento a 120 minutos e finalmente um valor posterior de TEERé medido ao final do experimento. Amostras de 25 μL serãoretiradas do compartimento basolateral (doador) após ~2 mi-nutos e ao final do experimento. Essas amostras representamamostras doadoras do início e do final do experimento.

Acetonitrila será adicionada a todas as amostrascoletadas, a uma concentração final de 50% nas amostras. Asamostras coletadas serão armazenadas a -20°C, até análise deHPLC ou LC-MS.

Cálculo

Determinação da fração cumulativa absorvida, FAcum,versus tempo. FAcum é calculada de:

<formula>formula see original document page 140</formula>

onde CRi é a concentração de receptor ao final do intervaloi e CDi é a concentração de doador no começo do intervalo i.Uma relação linear seria obtida.

A determinação dos coeficientes de permeabilidade(Paapr cm/s) é calculada de:

<formula>formula see original document page 140</formula>

onde k é a razão de transporte (min-1) definida como a in-clinação obtida pela regressão linear da fração cumulativaabsorvida (FAcum) como uma função do tempo (min) , VR é o vo-lume na câmara receptora (mL) e A é a área do filtro (cm2).

Compostos de Referência

<table>table see original document page 140</column></row><table><table>table see original document page 141</column></row><table>

Todas citações referidas a esse pedido, incluindopatentes e pedidos de patente, são incorporadas aqui comoreferência em sua extensão mais ampla possível.

Através de todo relatório descritivo e das reivin-dicações que se seguem, a menos que o contexto requeira deoutra forma, a palavra "compreende" e variações tais como,"compreendem" e "compreendendo" serão entendidas como impli-cando na inclusão de um inteiro declarado, etapa, grupo deinteiros ou grupo de etapas, porém não para a exclusão dequalquer outro inteiro, etapa, grupo de inteiros ou grupo deetapas.

Claims

1. Composto, da fórmula II,<formula>formula see original document page 142</formula>CARACTERIZADO pelo fato de que:um de R1 e R2 é halo e o outro é H ou halo;R3 é cadeia C1-C5 linear ou ramificada, opcional-mente fluorada, alquila o -CH2CR5 cicloalquila C3-C4;R4 é H;R5 é H, alquila Ci-C2, haloalquila Ci-C2, hidróxi, 0alquila Ci-C2, flúor;R6 é um carbociclo ou heterociclo estável, opcio-nalmente substituído, monocíclico ou bicíclico, onde o oucada anel possui 4, 5 ou 6 átomos e 0 a 3 hetero átomos se-lecionados de S, OeNe onde os substituintes opcionaiscompreendem 1 a 3 elementos selecionados de R7;R7 é independentemente selecionado de halo, oxo,nitrila, nitro, alquila C1-C4, -XNRdRe, -XNReR8, -NReXR8,NH2CO-, X-R8, X-O-R8, -O-X-R8, X-C (=0) R8, X-(C=O) NRdR8, X-NReC (=0) R8, X-NHSOmR8, X-S(=0)mR8, X-C (=0) OR8, X-NReC (=0) OR8;R8 é independentemente H, alquila C1-C4, cicloal-quila C3-C6, pirrolidinila, piperidinila, morfolinila, tio-morfolinila, piperazinila, indolinila, piranila, tiopirani-la, furanila, tienila, pirrolila, oxazolila, isoxazolila,tiazolila, imidazolila, piridinila, pirimidinila, pirazini-la, indolila, fenila, qualquer um dos quais sendo opcional-mente substituído com até 3 elementos selecionados de R9;R9 é independentemente selecionado de hidroxila,XR10, -XNRdRe, -XNReR10, -NRe alquila Ci-C4 R10, ciano, -S(=0)mRe, carbóxi, oxo, alquila Ci-C4, haloalquila Ci-C4, al-cóxi Ci-C4, alcanoila Ci-C4, carbamoila;R10 é cicloalquila C3-C6, pirrolidinila, piperidi-nila, morfolinila, tiomorfolinila, piperazinila, indolinila,piranila, tiopiranila, furanila, tienila, pirrolila, oxazo-lila, isoxazolila, tiazolila, imidazolila, piridinila, piri-midinila, pirazinila, indolila, fenila, qualquer um dosquais é substituído com alquila Ci-C4, halo, hidróxi, alcóxiCi-C4, ciano, -S(=0)mRe, haloalquila Ci~4;X é independentemente uma ligação ou alquileno Ci-C4;Ra é independentemente H, alquila Ci-C4 ouCH3C (=O) ;Rb é haloalquila C1-C4;Rc é H, alquila Ci-C4; ou Rc em conjunto com R6 e oátomo de carbono ao qual estão anexados formam um carbocicloou heterociclo conforme definido para R6;Rd é independentemente H, alquila Ci-C4 ouCH3C (=0);Re é independentemente H, alquila Ci-C4; ouRd e Re em conjunto com o átomo de N ao qual elesestão anexados formam um anel de morfolina, piperidina, pi-perazina ou pirrolidina opcionalmente substituídos com R9;m é independentemente 0, 1 ou 2;ou um sal farmaceuticamente aceitável, hidrato ouN-óxido do mesmo.

2. Composto, de acordo com a reivindicação 1,CARACTERIZADO pelo fato de que a estereoquímica é conformeilustrada na estrutura parcial a seguir:<formula>formula see original document page 144</formula>

3. Composto, de acordo com a reivindicação 1,CARACTERIZADO pelo fato de que a estereoquímica é conformeilustrada na estrutura parcial a seguir:<formula>formula see original document page 144</formula>

4. Composto, de acordo com a reivindicação 1,CARACTERIZADO pelo fato de que Rb é trifluormetila e a este-reoquímica é conforme ilustrada na estrutura parcial a seguir :<formula>formula see original document page 145</formula>

5. Composto, de acordo com a reivindicação 1,CARACTERIZADO pelo fato de que R2 é flúor e R1 é H.

6. Composto, de acordo com a reivindicação 1,CARACTERIZADO pelo fato de que R3 é alquila de cadeia rami-ficada Ci-C4.

7. Composto, de acordo com a reivindicação 6,CARACTERIZADO pelo fato de que R3 é iso-butila.

8. Composto, de acordo com a reivindicação 1,CARACTERIZADO pelo fato de que o Ra ilustrado na fórmula IIé H.

9. Composto, de acordo com a reivindicação 1,CARACTERIZADO pelo fato de que R9 é fenila substituída.

10. Composto, de acordo com a reivindicação 9,CARACTERIZADO pelo fato de que o substituinte compreende -NRdRe, -CH2NRdRe, -NReR9, -NReXR9, alquila Ci-C4 linear ouramificada ou -OR9.

11. Composto, de acordo com a reivindicação 10,CARACTERIZADO pelo fato de que o substituinte compreende -NH-CH2 fenila, -NHCH2 piridila ou -NH-fenila, onde cada anelfenila ou piridila é substituído com alquila Ci-C4, -NRaRb,-NRbR8 ou -NRb alquila Ci~4 R8.

12. Composto, de acordo com a reivindicação 9,CARACTERIZADO pelo fato de que o substituinte compreende ci-cloalquila C3-C6, pirrolidinila, piperidinila, morfolinila,tiomorfolinila, piperazinila, indolinila, piranila, tiopira-nila, furanila, tienila, pirrolila, oxazolila, isoxazolila,tiazolila, imidazolila, piridinila, pirimidinila, pirazini-la, indolila, fenila, qualquer um dos quais sendo opcional-mente substituído com R9.

13. Composto, de acordo com a reivindicação 12,CARACTERIZADO pelo fato de que o substituinte é selecionadode indolinila, piranila, tiopiranila, furanila, tienila,pirrolila, oxazolila, isoxazolila, tiazolila, imidazolila,piridinila, pirimidinila, pirazinila, indolila, qualquer umdos quais sendo opcionalmente substituído com R9.

14. Composto, de acordo com a reivindicação 13,CARACTERIZADO pelo fato de que o substituinte é tiazolila, 5-metil-tiazolila ou tienila, quaisquer um dos quais opcio-nalmente substituído com R9.

15. Composto, de acordo com a reivindicação 14,CARACTERIZADO pelo fato de que o substituinte é tiazol-4-il, 5-metiltiazol-4-il ou tien-2-il, qualquer um dos quais sendoopcionalmente substituído com R9.

16. Composto, de acordo com a reivindicação 15,CARACTERIZADO pelo fato de que a tiazolila, 5-metiltiazolilaou tienila é substituída com morfolinila, morfolinilmetil-,piperidinila, piperidinilmetil-, piperazinila, piperazinil-metila, qualquer uma sendo substituída com alquila Ci_3, flú-or, diflúor ou alquila Ci-3 -0-alquila Ci-3.

17. Composto, de acordo com a reivindicação 16,CARACTERIZADO pelo fato de que o substituinte para a tiazo-lila, 5-metiltiazolila ou tienila é piperid-4-ila que ésubstituída com metila, piperazinila que é N substituída comalquila C1-3 ou metiloxietil- ou piperid-l-ilmetil- que não ésubstituída ou substituída 4 com flúor ou diflúor.

18. Composto, de acordo com a reivindicação 10,CARACTERIZADO pelo fato de que o substituinte compreende umanel de morfolina, piperidina ou piperazina, opcionalmentesubstituído com R9.

19. Composto, de acordo com a reivindicação 18,CARACTERIZADO pelo fato de que compreende piperid-4-il ou Ν-piperazinila, N substituído com Ra ou piperidin-l-il que é 4substituído com NRdRe.

20. Composto, de acordo com a reivindicação 1,CARACTERIZADO pelo fato de que R6 é benzotiazolila, benzofu-ranila, 3-metilbenzofuranila ou benzoxazoila, qualquer umadas quais sendo opcionalmente substituída com um ou dois R7.

21. Composto, de acordo com a reivindicação 20,CARACTERIZADO pelo fato de que um tal substituinte é -OR8, -OXR8, -NReR8 ou -NReXR8.

22. Composto, de acordo com a reivindicação 21,CARACTERIZADO pelo fato de que R8 é piperid-4-il, piperazin-1-il ou piperidin-l-il ou morfolino, qualquer um dos quaissendo substituído com alquila Ci-C3.

23. Composto, de acordo com a reivindicação 22,CARACTERIZADO pelo fato de que o substituinte opcional paraR6 é N-morfoliniletilóxi, N-morfolinilmetilóxi, N-metilpiperid-4-ilóxi ou N-metilmorfolin-3-ilmetilóxi.

24. Composto, de acordo com a reivindicação 1,CARACTERIZADO pelo fato de que o substituinte opcional R9 éselecionado de hidróxi, XR10, -XNRdRe, -XNReR10, -NRe alquilaCi-C4 R10, -ciano, carbóxi, oxo, alquila Ci-C4, alcóxi Ci-C4,alcanoila Ci-C4 ou carbamoila.

25. Composição farmacêutica, CARACTERIZADA pelofato de que compreende um composto conforme definido emqualquer uma das reivindicações 1 a 24 e um veiculo farma-cêuticamente aceitável ou diluente para o mesmo.

26. Uso de um composto, de acordo com qualquer umadas reivindicações 1 a 24, na fabricação de um medicamentopara o tratamento de transtornos, CARACTERIZADO pelo fato deque possui expressão inapropriada ou ativação da catepsina K.

27. Uso, de acordo com a reivindicação 26,CARACTERIZADO pelo fato de que o transtorno é selecionado de:osteoporose,doenças gengivais, tais como, gengivite e perio-dontite,doença de Paget,hipercalcemia de processo malignodoença óssea metabólicadoenças caracterizadas por cartilagem excessiva oudegradação da matriz, tais como, osteoartrite e artrite reu-matóide,canceres dos ossos incluindo neoplasia,dor.

28. Composto, de acordo com qualquer uma das rei-vindicações 1 a 24, CARACTERIZADO pelo fato de que é parauso como um medicamento.

29. Composto, de acordo com qualquer uma das rei-vindicações 1 a 24, para emprego no tratamento ou prevençãode um transtorno, CARACTERIZADO pelo fato de que possui ex-pressão inapropriada ou ativação da catepsina K.

30. Método, para tratamento ou prevenção de umtranstorno, CARACTERIZADO pelo fato de que possui expressãoinapropriada ou ativação da catepsina K compreendendo a ad-ministração de uma quantidade segura e eficaz de um compos-to, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 24, aum indivíduo que precise.