BRPI0003478B1

BRPI0003478B1 - Use of cosmetic makeup to reduce hair growth, hair follicle size, hair shaft size and / or hair pigmentation

Info

Publication number: BRPI0003478B1
Application number: BRPI0003478A
Authority: BR
Inventors: Jonathan Miller; Jue-Chen Liu; Miri Seiberg; Stanley S Shapiro
Original assignee: Johnson & Johnson
Priority date: 1999-07-27
Filing date: 2000-07-27
Publication date: 2015-12-15
Also published as: AU4885500A; AU2008212016A1; AU2008212016B2; BR0003478A; TW592718B; AU2005211577A1

Abstract

patente de invenção: <b>"redução do desenvolvimento de pêlos, do tamanho do folículo capilar e do veio capilar e da pigmentação capilar"<d>. a presente invenção refere-se a métodos e composições efetivas para a redução do desenvolvimento de pêlos. mais especificamente, a presente invenção é dirigida a métodos para alteração da taxa de desenvolvimento dos pêlos, redução do tamanho do folículo capilar e do veio capilar e redução da pigmentação do veio capilar, através da aplicação tópica de extratos botânicos contendo atividade inibitória de protease de serina e, em particular, extratos de soja tal como leite de soja ou misturas e formulações dos acima, combinados com outros ingredientes ativos tais como isoflavonas.<b> "reduction of hair development, hair follicle and hair shaft size and hair pigmentation" <d>. The present invention relates to methods and compositions effective for reducing hair development. more specifically, the present invention is directed to methods for altering hair development rate, reducing hair follicle and hair shaft size and reducing hair shaft pigmentation by topically applying botanical extracts containing protease inhibitory activity of serine and in particular soy extracts such as soymilk or mixtures and formulations of the above combined with other active ingredients such as isoflavones.

Description

Relatório Descritivo da Patente de Invenção para "USO DA COMPOSIÇÃO COSMÉTICA PARA REDUZIR CRESCIMENTO DE CABELO, TAMANHO DE FOLÍCULO CAPILAR, TAMANHO DO VEIO CAPILAR E/OU PIGMENTAÇÃO DE CABELO".Report of the Invention Patent for "USING COSMETIC COMPOSITION TO REDUCE HAIR GROWTH, HAIR LEAF SIZE, HAIR SIZE AND / OR HAIR PIGMENTATION".

Campo da Invenção A presente invenção refere-se a métodos e composições efetivas para a redução do desenvolvimento de pêlos. Mais especifícarnente, a presente invenção é dirigida a métodos para alteração da taxa de desenvolvimento dos pêlos, redução do tamanho do folículo capilar e do veio capilar e redução da pigmentação do veio capilar, através da aplicação tópica de extratos botânicos contendo atividade inibitória de protease de serina e, em particular, extratos de soja tal como leite de soja ou misturas e formulações dos acima, combinados com outros ingredientes ativos tais como isoflavonas. Antecedentes da Invenção Uma função principal dos pêlos nos mamíferos é proporcionar proteção ambientai. Contudo, essa função há muito foi esquecida em seres humanos, nos quais os pêlos são mantidos ou removidos essencial mente por razoes sociais e cosméticas.Field of the Invention The present invention relates to methods and compositions effective for reducing hair development. More specifically, the present invention is directed to methods for altering hair development rate, reducing hair follicle and hair shaft size and reducing hair shaft pigmentation by topically applying botanical extracts containing protease inhibitory activity. serine and in particular soy extracts such as soymilk or mixtures and formulations of the above combined with other active ingredients such as isoflavones. Background of the Invention A major function of mammalian hair is to provide environmental protection. However, this function has long been forgotten in humans, in which hair is kept or removed essentially for social and cosmetic reasons.

Muitos procedimentos são usados para remover os pêlos inde-sejados, incluindo barbeamento, eletrólise, pinçamento, terapias com laser e luz e injeção de anti-andrógenos terapêuticos. Esses métodos convencionais possuem suas desvantagens. O barbeamento, por exemplo, pode resultar em talhos e cortes na superfície da pele, pode levar à percepção de um aumento na taxa de re-desenvolvimento dos cabelos e também pode levar à sensação indesejável de "barba por fazer". Embora a eletrofore-se possa manter uma área livre de pêlos indesejados durante um período prolongado de tempo, o processo é, muitas vezes, caro e doloroso e ainda pode resultar em cicatrizes. O pinçamento não somente causa dor e desconforto, mas ele também resulta frequentemente em uma remoção deficiente de pêlos curtos. Muitos efeitos colaterais indesejados, tal como efeitos sobre a muscularidade, com frequência acompanham o uso de anti-andrógenos. Por essas razoes, métodos melhores para a redução do des- envolvimento de pêlos são necessários. A pseudofolliculitis barbae é um distúrbio inflamatório dos pêlos, mais comumente encontrado na área da barba. As pápulas foliculares infla-matórias resultam quando as pontas dos pêlos penetram na pele ao invés de passarem através do orifício folicular. Esse processo é extremamente comum no homem negro devido ao fato de seus pêlos serem freqüente-mente crespos, saindo da pele em um ângulo agudo. O barbeamento rente, particularmente com uma lâmina de navalha, predispõe os mesmos a pseudofolliculitis barbae. O tratamento mais efetivo disponível é deixar que os pêlos se desenvolvam bem além da superfície da pele. Tal tratamento, muitas vezes, não é desejado. O hirsutismo é uma condição relativamente frequente que afeta cerca de 4% das mulheres. O hirsutismo facial, muitas vezes, interfere com as atividades pessoais e de trabalho e a remoção temporária dos pêlos é um componente principal no tratamento de pacientes com hirsutismo. O barbeamento é o método temporário usado com mais freqüência para os pêlos faciais, uma vez que o pinçamento, aplicação de cera e depilatórios são mais difíceis de tolerar e deve-se tomar cuidado para evitar a foliculite, pigmentação e formação de cicatrizes. Máscaras cosméticas são usualmente utilizadas para ocultar cortes e pêlos em crescimento e a eletroforese e termólise podem ser usadas para remoção permanente de pêlos quando permissível.Many procedures are used to remove unwanted hair, including shaving, electrolysis, clamping, laser and light therapies, and therapeutic anti-androgen injection. These conventional methods have their disadvantages. Shaving, for example, can result in nicks and cuts on the surface of the skin, may lead to an increased rate of hair re-development and may also lead to an undesirable "shave" sensation. Although electrophoresis can maintain an area free of unwanted hair for an extended period of time, the process is often expensive and painful and can still result in scarring. Pinching not only causes pain and discomfort, but it also often results in poor short hair removal. Many unwanted side effects, such as effects on muscularity, often accompany the use of antiandrogens. For these reasons, better methods for reducing hair development are needed. Pseudofolliculitis barbae is an inflammatory hair disorder most commonly found in the beard area. Inflammatory follicular papules result when the tips of the hair penetrate the skin rather than passing through the follicular orifice. This process is extremely common in black men because their hair is often curly and protrudes from the skin at an acute angle. Close shaving, particularly with a razor blade, predisposes them to pseudofolliculitis barbae. The most effective treatment available is to let the hair grow well beyond the surface of the skin. Such treatment is often not desired. Hirsutism is a relatively common condition that affects about 4% of women. Facial hirsutism often interferes with personal and work activities, and temporary hair removal is a major component in treating patients with hirsutism. Shaving is the most commonly used temporary method for facial hair, since clamping, waxing and depilatory are more difficult to tolerate and care should be taken to avoid folliculitis, pigmentation and scarring. Cosmetic masks are usually used to hide growing hair and cuts and electrophoresis and thermolysis can be used for permanent hair removal when permissible.

Uma alternativa ou abordagem complementar desejada para a remoção de pêlos, seria um método para reduzir o desenvolvimento de pêlos, reduzir o tamanho do folículo capilar e do veio capilar e reduzir a pigmentação do veio capilar. Tal abordagem reduziría a visibilidade do pêlo existente, tornando-o mais macio e mais suave. Quando combinado com outros métodos de remoção de pêlos, tal método intensificaria e prolongaria o efeito de remoção e reduziría a necessidade e freqüência de remoção dos pêlos. O uso a longo prazo de tal abordagem poderia levar a um desenvolvimento atenuado de pêlos macios com pigmentação reduzida, que são menos visíveis e não requer o uso de outros métodos de remoção. 0 desenvolvimento reduzido dos pêlos é desejado na área da axila (fossa axillaris) onde desodorantes e anti-transpirantes são usados a fim de controlar o odor contido dentro dos pêlos axilares. Seria desejado ter produtos para uso na axila, os quais combinam atividades de desodorante ou anti-transpirante com atividade reduzida de desenvolvimento dos pêlos.A desired alternative or complementary approach to hair removal would be a method of reducing hair development, reducing the size of the hair follicle and hair shaft and reducing hair shaft pigmentation. Such an approach would reduce the visibility of existing hair, making it softer and smoother. When combined with other hair removal methods, this method would intensify and prolong the hair removal effect and reduce the need and frequency of hair removal. Long-term use of such an approach could lead to attenuated development of reduced pigmented soft hair, which is less visible and does not require the use of other removal methods. Reduced hair development is desired in the area of the armpit (fossa axillaris) where deodorants and antiperspirants are used to control the odor contained within the axillary hair. It would be desirable to have products for use in the armpit which combine deodorant or antiperspirant activities with reduced hair development activity.

Os pêlos do tipo africano são únicos em sua morfologia com um veio capilar encaracolado com variações no diâmetro. Essa estrutura complexa do veio capilar cria a necessidade de produtos e procedimentos especializados de tratamento a fim de assegurar que os pêlos do tipo africano mantenham as propriedades cosméticas desejadas. É desejado ter produtos que reduzem essa complexidade e tornam os pêlos do tipo Africano mais passíveis de tratamento, melhorando sua aparência.African-type hair is unique in its morphology with a curly capillary shaft with variations in diameter. This complex structure of the hair shaft creates the need for specialized treatment products and procedures to ensure that African-type hair retains the desired cosmetic properties. It is desired to have products that reduce this complexity and make African-type hair more treatable, improving its appearance.

Seria desejável proporcionar um método para alterar química ou naturalmente o desenvolvimento dos pêlos, o tamanho do folículo capilar e do veio capilar e da pigmentação do veio capilar, o qual não ocasiona efeitos colaterais indesejados ao usuário.It would be desirable to provide a method for chemically or naturally altering hair development, hair follicle and hair shaft size, and hair shaft pigmentation, which does not cause unwanted side effects to the wearer.

Sumário da Invenção De acordo com a presente invenção, descobriu-se composições e métodos para realizar alterações no desenvolvimento dos pêlos de mamíferos, no tamanho do folículo capilar e do veio capilar e na pigmentação capilar através da aplicação tópica à pele de um mamífero de uma quantidade efetiva de uma composição topicamente ativa compreendendo inibidores de protease, extratos botânicos e, em particular, extratos de legumino-sas incluindo, mas não limitado a, leite de soja, durante um período de tempo suficiente para alterar o desenvolvimento dos pêlos, o tamanho do folículo capilar e do veio capilar e a pigmentação capilar. Tais composições topicamente ativas podem ser ainda combinadas com outros ingredientes ativos incluindo, mas não limitado a, isoflavonas sintéticas ou que ocorrem naturalmente, a fim de intensificar os efeitos desejados sobre o desenvolvimento e pigmentação dos pêlos.SUMMARY OF THE INVENTION In accordance with the present invention, compositions and methods for effecting changes in mammalian hair development, hair follicle and hair shaft size and hair pigmentation have been discovered by topically applying to a mammalian skin a effective amount of a topically active composition comprising protease inhibitors, botanical extracts, and in particular legume extracts including, but not limited to, soymilk for a period of time sufficient to alter hair development, size hair follicle and hair shaft and hair pigmentation. Such topically active compositions may be further combined with other active ingredients including, but not limited to, naturally occurring or synthetic isoflavones in order to enhance the desired effects on hair development and pigmentation.

As composições e métodos da presente invenção proporcionam um meio único conveniente para retardar o desenvolvimento dos pêlos, o tamanho do folículo capilar e do veio capilar e a pigmentação capilar, através do uso de inibidores da protease de serina, extratos botânicos da família das leguminosas e, em particular, mas não limitado a, leite de soja, contendo atividade inibitória de protease de serina e suas combinações com isoflavonas.The compositions and methods of the present invention provide a convenient single means for retarding hair development, hair follicle and hair shaft size and hair pigmentation through the use of serine protease inhibitors, legume family botanical extracts and , in particular, but not limited to, soy milk containing serine protease inhibitory activity and combinations thereof with isoflavones.

Breve Descrição dos Desenhos O arquivo da presente patente contém pelo menos uma foto tirada a cores. Cópias da presente patente com foto(s) colorida(s) serão proporcionadas pelo Patent and Trademark Office quando requerido e pagamento dos tributos necessários. A invenção será mais completamente compreendida e as vantagens adicionais se tornarão evidentes quando referência é feita à descrição detalhada a seguir da invenção e aos desenhos em anexo, nos quais: Figura 1: Uma fotografia de pêlo de camundongo C57BI/6 de controle e tratado com leite de soja (ampliação máxima).Brief Description of the Drawings The file of the present patent contains at least one color photo. Copies of this patent with color photo (s) will be provided by the Patent and Trademark Office when required and payment of necessary taxes. The invention will be more fully understood and further advantages will become apparent when reference is made to the following detailed description of the invention and the accompanying drawings in which: Figure 1: A control-treated and treated C57BI / 6 mouse hair photograph soy milk (maximum magnification).

Figura 2: Seções histológicas de folículos capilares de camundongo C57BI/6 de controle e tratado com leite de soja no quarto dia do ciclo capilar.Figure 2: Histological sections of control C57BI / 6 mouse hair follicles treated with soy milk on the fourth day of the hair cycle.

Figura 3: Seções histológicas de folículos capilares de camundongo C57BI/6 de controle e tratado com leite de soja no sétimo dia do ciclo capilar, ampliações mínima e máxima.Figure 3: Histological sections of control C57BI / 6 mouse hair follicles treated with soy milk on the seventh day of the hair cycle, minimum and maximum magnifications.

Figura 4: Seções histológicas de folículos capilares de camundongo C57BI/6 de controle e tratado com leite de soja no décimo oitavo dia do ciclo capilar.Figure 4: Histological sections of control C57BI / 6 mouse hair follicles treated with soy milk on the eighteenth day of the hair cycle.

Figura 5: Seções histológicas de folículos capilares de camundongo C57BI/6 de controle e tratado com leite de soja no vigésimo primeiro dia do ciclo capilar.Figure 5: Histological sections of control C57BI / 6 mouse hair follicles treated with soy milk on the 21st day of the hair cycle.

Figura 6: Seções histológicas de folículos capilares de camundongo C3H de controle, tratado com leite de soja e proteínas derivadas de leite de soja (ampliação máxima) no sétimo dia do ciclo capilar.Figure 6: Histological sections of control C3H mouse hair follicles treated with soy milk and soy milk-derived proteins (maximum magnification) on the seventh day of the hair cycle.

Figura 7: Seções histológicas de folículos capilares de camundongo C3H de controle, tratado com leite de soja e proteínas derivadas de leite de soja (ampliação mínima) no sétimo dia do ciclo capilar.Figure 7: Histological sections of control C3H mouse hair follicles treated with soy milk and soy milk-derived proteins (minimum magnification) on the seventh day of the hair cycle.

Figura 8: Seções histológicas de folículos capilares de camun-dongo C3H de controle e tratado com feite de soja no vigésimo primeiro dia do ciclo capilar.Figure 8: Histological sections of capillary follicles of control and soybean-treated C3H mouse on the 21st day of the hair cycle.

Figura 9: Uma fotografia de pêlo de camundongo C3H de controle e tratado com proteínas derivadas de leite de soja (ampliação máxima).Figure 9: A photograph of control C3H mouse hair treated with soy milk protein (maximum magnification).

Figura 10: Seções histológicas de folículos capilares de camundongo C57BI/6 de controle e tratado com proteínas derivadas de leite de soja (ampliação máxima) no oitavo dia do ciclo capilar.Figure 10: Histological sections of control C57BI / 6 mouse hair follicles treated with soy milk-derived proteins (maximum magnification) on the eighth day of the hair cycle.

Figura 11: Um gráfico demonstrando a atividade inibitória de tripsina do leite de soja.Figure 11: A graph showing the trypsin inhibitory activity of soy milk.

Figura 12: Mancha de Western de peles de camundongo C57BI/6 no decorrer do ciclo capilar, demonstrando níveis reduzidos de tíro-sinase e TRP-1, em seguida ao tratamento com leite de soja.Figure 12: Western blot of C57BI / 6 mouse skins throughout the hair cycle, demonstrating reduced levels of tyrosine and TRP-1 following treatment with soy milk.

Figura 13: Fotografias de lados da face humana tratada com leite de soja e não tratadas, tratadas com leite de soja diariamente durante quatro semanas.Figure 13: Photographs of sides of the human face treated with soybean milk and untreated, treated with soybean milk daily for four weeks.

Figura 14: Análise quantitativa das dimensões do folículo capilar com e sem tratamento com leite de soja.Figure 14: Quantitative analysis of hair follicle dimensions with and without soy milk treatment.

Figura 15: Fotografia dos pêlos da perna humana em seguida à cinco semanas de tratamento com leite de soja em uma das pernas.Figure 15: Photograph of human leg hair following five weeks of soymilk treatment on one leg.

Figura 16: fotografias de pêlo de camundongo C57BI/6 de controle, tratado com leite de soja e com leite de soja enriquecido com isoflavo-na (ampliação máxima).Figure 16: Photographs of control C57BI / 6 mouse hair, treated with soy milk and isoflavo-enriched soy milk (maximum magnification).

Figura 17: Seções histológicas de peles de camundongo C57BI/6 de controle, tratado com leite de soja e com leite de soja enriquecido com isoflavona no décimo quinto dia do ciclo capilar, documentando a espessura e a cor dos veios capilares.Figure 17: Histological sections of control C57BI / 6 mouse skins treated with soy milk and isoflavone-enriched soy milk on the fifteenth day of the hair cycle, documenting the thickness and color of the hair veins.

Figura 18: Fotografia de pêlo de camundongo C57BI/6 após três semanas de tratamento com várias formulações de leite de soja e isoflavo-nas.Figure 18: Photograph of C57BI / 6 mouse hair after three weeks of treatment with various formulations of soy milk and isoflavones.

Descrição Detalhada das Concretizações Preferidas Conforme usado aqui, "mamífero" deverá significar qualquer membro "dos animais vertebrados superiores compreendendo a classe Mammalia", conforme descrito no Webster’s Medicai Desk Dictionary 407 (1986) e inclui, mas não está limitado a, seres humanos. Conforme usado aqui, "(%, peso/volume)" deverá significar gramas de um determinado componente por 100 ml da composição total.Detailed Description of Preferred Embodiments As used herein, "mammal" shall mean any member of "upper vertebrate animals comprising the Mammalia class", as described in Webster's Medical Desk Dictionary 407 (1986) and includes, but is not limited to, humans. As used herein, "(%, weight / volume)" shall mean grams of a given component per 100 ml of the total composition.

Agentes topicamente ativos adequados para uso na composição da presente invenção incluem inibidores de protease e extratos naturais de plantas tendo atividade inibitória de protease e misturas dos mesmos. Inibidores ae protease preferidos são inibidores da protease de serina e, em particular, o Inibidor da Tripsina de Soja ("STI") e o Inibidor de Bowman Birk derivado de soja ("BBI"). Extratos botânicos preferidos são da família das leguminosas e, em particular, extratos de soja, tal como leite de soja. De preferência, os inibidores de protease estão presentes em uma quantidade, baseado sobre o volume total da composição da presente invenção, de cerca de 0,0001% (peso/volume) a cerca de 20% (peso/volume) e mais preferivelmente de cerca de 0,001% (peso/volume) a cerca de 5% (peso/volume). De preferência, os extratos botânicos aquosos tal como leite de soja estão presentes em uma quantidade de 10-99% (volume/volume) e mais preferivelmente de 50-99% (volume/volume).Topically active agents suitable for use in the composition of the present invention include protease inhibitors and natural plant extracts having protease inhibitory activity and mixtures thereof. Preferred protease inhibitors are serine protease inhibitors, and in particular Soybean Trypsin Inhibitor ("STI") and Soy-derived Bowman Inhibitor ("BBI"). Preferred botanical extracts are from the legume family, and in particular soy extracts such as soy milk. Preferably, protease inhibitors are present in an amount, based on the total volume of the composition of the present invention, from about 0.0001% (weight / volume) to about 20% (weight / volume) and most preferably from about 0.0001%. about 0.001% (weight / volume) to about 5% (weight / volume). Preferably, aqueous botanical extracts such as soymilk are present in an amount of 10-99% (volume / volume) and more preferably 50-99% (volume / volume).

Descobriu-se, inesperadamente, que quando agentes topicamente ativos tal como descrito acima e, em particular, leite de soja ou formulações contendo leite de soja, são enriquecidos com isoflavonas e, em particular, isoflavonas derivadas de soja, o efeito inibitório sobre o desenvolvimento dos pêlos, dimensões dos pêlos e pigmentação capilar, é intensificado. De preferência, as isoflavonas estão presentes nos extratos botânicos aquosos tal como leite de soja em uma quantidade de 0,000005-15% (volume/volume) e mais preferivelmente de 0,00001-10% (volume/volume).It has been unexpectedly found that when topically active agents as described above, and in particular soymilk or formulations containing soymilk, are enriched with isoflavones and in particular soy-derived isoflavones, the inhibitory effect on development hair, hair size and hair pigmentation is intensified. Preferably, isoflavones are present in aqueous botanical extracts such as soy milk in an amount of 0.000005-15% (volume / volume) and more preferably 0.00001-10% (volume / volume).

Se os parâmetros de distribuição do agente cosmético ou farmacêutico topicamente ativo assim requererem, a composição topicamente ativa da presente invenção ainda pode ser compreendida de um veículo cosmético ou farmaceuticamente aceitável capaz de funcionar como um sistema de distribuição a fim de possibilitar a penetração do agente topica-mente ativo no folículo capilar e na pele. A composição farmacêutica ou cosmética pode ser opcionalmente combinada com outros ingredientes tais como umidificadores, adju-vantes cosméticos, anti-oxidantes, agentes de despigmentação, agentes para modelagem de cabelos, tensoativos para loções de bronzear, agentes de espumação, condicionadores, umectantes, fragrâncias, corantes, visco-sificadores, agentes de tamponamento, conservantes e semelhantes e misturas dos mesmos. Esses serão combinados em uma quantidade, a qual não afete a atividade inibitória de protease de serina, de forma a produzir produtos cosméticos ou farmacêuticos tais como, não exclusivamente, essências, cremes, loções, pastas, géis, pós, emplastros ou injetáveis e semelhantes para a redução do desenvolvimento dos pêlos, do tamanho dos pêlos e da pigmentação capilar.If the delivery parameters of the topically active cosmetic or pharmaceutical agent so require, the topically active composition of the present invention may still be comprised of a cosmetic or pharmaceutically acceptable carrier capable of functioning as a delivery system to enable penetration of the topical agent. It is active in the hair follicle and skin. The pharmaceutical or cosmetic composition may optionally be combined with other ingredients such as humidifiers, cosmetic adjuvants, antioxidants, depigmenting agents, hair styling agents, tanning surfactants, foaming agents, conditioners, humectants, fragrances. , dyes, viscomers, buffering agents, preservatives and the like and mixtures thereof. These will be combined in an amount, which does not affect serine protease inhibitory activity, to produce cosmetic or pharmaceutical products such as, but not limited to, essences, creams, lotions, pastes, gels, powders, patches or injectables and the like. to reduce hair development, hair size and hair pigmentation.

As composições da presente invenção podem ser aplicadas antes de, concorrentemente com ou após outros ingredientes ativos ou composições para intensificar seu efeito. Por exemplo, as composições da presente invenção podem ser aplicadas junto com um ou mais produtos, cuja finalidade é facilitar a remoção dos pêlos ou remover realmente os pêlos, reduzir a visibilidade dos pêlos, melhorar o estilo dos pêlos ou melhorar o tratamento dos pêlos. As composições da presente invenção podem ser aplicadas topicamente antes de, durante ou em seguida à remoção dos pêlos. Elas podem ser aplicadas topicamente concorrentemente com um ou mais do seguinte grupo: agentes depilatórios, xampu, condicionador de cabelos, gel para modelagem, produtos para cuidados com os cabelos, produtos depilatórios à base de cera, produtos para barbear, produtos para a remoção de pêlos, produtos pós-barba, desodorante, anti-transpirante, ele-trólise, remoção dos pêlos à laser, remoção dos pêlos induzida pela luz, aditivos para banho ou máscaras.The compositions of the present invention may be applied prior to, concurrently with or after other active ingredients or compositions to enhance their effect. For example, the compositions of the present invention may be applied together with one or more products, the purpose of which is to facilitate hair removal or actually remove hair, reduce hair visibility, improve hair styling or improve hair treatment. The compositions of the present invention may be applied topically before, during or after hair removal. They can be applied topically concurrently with one or more of the following group: depilatory agents, shampoo, hair conditioner, styling gel, hair care products, wax-based depilatory products, shaving products, hair removal products hair, aftershave, deodorant, antiperspirant, electrolysis, laser hair removal, light-induced hair removal, bath additives or masks.

As composições da presente invenção podem ser aplicadas diariamente durante pelo menos quatro a oito semanas, pelo que um efeito so- bre a aparência dos pêlos poderá ser observado. A aplicação pode ser continuada tanto quanto desejado a fim de manter a condição dos pêlos. A aplicação diária à face pode aliviar a condição de pseudofolliculitis barbae e/ou hirsutismo; a aplicação à área da axila pode reduzir o desenvolvimento de pêlos sob os braços e a aplicação à cabeça e aos cabelos pode ajudar no tratamento e condicionamento dos cabelos do tipo Africano. A composição farmacêutica ou cosmética topicamente ativa deverá ser aplicada em uma quantidade efetiva para efetuar as alterações no desenvolvimento dos pêlos de mamíferos, no tamanho do folículo capilar e do veio capilar e na pigmentação do veio capilar. Conforme usado aqui, "quantidade efetiva" deverá significar uma quantidade suficiente para abranger a região da superfície da pele onde um retardo do desenvolvimento dos pêlos e da pigmentação dos pêlos e tamanho reduzido dos pêlos são desejados. De preferência, a composição é aplicada à superfície da pele de modo que, baseado sobre um cm quadrado da superfície da pele, de cerca de 2 μΙ/cm2 a cerca de 500 μΙ/cm2 do agente topicamente ativo, está presente quando um retardo no desenvolvimento dos pêlos, do tamanho dos pêlos e da pigmentação dos pêlos, é desejado.The compositions of the present invention may be applied daily for at least four to eight weeks, so an effect on hair appearance may be observed. Application may be continued as long as desired in order to maintain the condition of the hair. Daily application to the face may relieve the condition of pseudofolliculitis barbae and / or hirsutism; application to the armpit area can reduce underarm hair development and application to the head and hair can aid in the treatment and conditioning of African-type hair. The topically active pharmaceutical or cosmetic composition should be applied in an amount effective to effect changes in mammalian hair development, hair follicle and hair shaft size, and hair shaft pigmentation. As used herein, "effective amount" shall mean an amount sufficient to encompass the region of the skin surface where a delay in hair development and hair pigmentation and reduced hair size are desired. Preferably, the composition is applied to the skin surface such that, based on a square cm of skin surface, from about 2 μΙ / cm2 to about 500 μΙ / cm2 of the topically active agent, is present when a delay in the hair development, hair size and hair pigmentation is desired.

Descobriu-se, inesperadamente, que quando agentes topicamente ativos, tal como leite de soja ou leite de soja enriquecido com isofla-vona, são topicamente aplicados~à· pele de um animal, um retardo significativo no desenvolvimento dos pêlos, no4amanho do folículo capilar e veio capilar e na pigmentação do veio capilar-, foi obtido. Acredita-se ainda que, uma vez que o ciclo de desenvolvimento dos pêlos com relação aos seres humanos é, muitas vezes, mais lento do que o ciclo de desenvolvimento dos pêlos com relação aos camundongos, ainda é provável que o retardo no desenvolvimento dos pêlos em seres humanos seja consideravelmente mais duradouro do que em camundongos. A invenção divulgada de modo ilustrativo aqui pode, adequadamente, ser praticada na ausência de qualquer componente, ingrediente ou etapa a qual não é especificamente divulgada aqui. Muitos exemplos são apresentados abaixo a fim de ilustrar adicionalmente a natureza da inven- ção e a maneira de realizá-la. Contudo, a invenção não deve ser considerada como estando limitada aos detalhes dos mesmos.Unexpectedly, it has been found that when topically active agents, such as soy milk or isoflavone-enriched soy milk, are topically applied to the skin of an animal, a significant retardation in hair development at the size of the hair follicle and capillary shaft and in the pigmentation of the capillary shaft, was obtained. It is further believed that since the human hair development cycle is often slower than the mouse hair development cycle, the delay in hair development is still likely to be delayed. in humans is considerably longer lasting than in mice. The invention illustratively disclosed herein may suitably be practiced in the absence of any component, ingredient or step which is not specifically disclosed herein. Many examples are given below to further illustrate the nature of the invention and how to carry it out. However, the invention should not be construed as being limited to the details thereof.

Exemplos EXEMPLO 1: Depilacão de Indivíduos de Teste no Sistema com Camun-dongo Camundongos C57BI/6 ou C3H (machos e fêmeas) foram obtidos de Charles River (Kingston, NY) com 8-10 semanas de idade e estavam na fase estacionária (telógeno) de seus respectivos ciclos capilares. O desenvolvimento dos pêlos foi induzido através de depilação com cera (pinça-mento) de cada dorso do animal respectivo de acordo com o procedimento apresentado em Stern e outros, "Glucocorticoid Effect on Hair Growth Initia-tion: A Reconsideration", 6 Skin Pharmacol., 125-134 (1993). Em camundongos C57BI/6 e C3H, 8-10 semanas de idade, a fase de desenvolvimento (anágeno) começa sincronicamente em todos os folículos capilares no momento da depilação. Conforme ilustrado na Tabela 1, as seguintes observações foram feitas no local de indução: Tabela 1: Observações no Local de Indução Dias pós-inducão Observações morfológicas e histoiógicas no local de indução 1 -2 (anágeno precoce) Nenhum folículo começa a se desenvolver 3 a 4 Folículos capilares foram completamente desenvolvidos, mas os veios capilares ainda não eram visíveis 7 a 8 (anágeno posterior) Cada camundongo tinha a pele muito escura; seus veios capilares são histologi-camente visíveis 11-12 Os veios capilares começaram a penetrar através da epiderme 14 Cada camundongo estava coberto com pêlos curtos 19 A regressão do folículo (catágena) foi ob- servada histologicamente 21 a 25 O folículo capilar retorna à fase estacioná- ria 0 folículo capilar retorna à fase estacionária conforme mostrado na Tabela 1, o desenvolvimento dos pêlos era visível muitos dias após a depilação conforme a pele rosa do animal começava a escurecer. Isso se deve, provavelmente, à pigmentação dos pêlos no veio uma vez que os ca-mundongos C57BI/6 e C3H continham melanócitos somente nos folículos capilares e não na epiderme dorsal. Um padrão similar de desenvolvimento de pêlos foi documentado em nosso pedido internacional N° PCT/US 97/11033, quando depilação química usando-se produtos comercialmente disponíveis foi realizada.Examples EXAMPLE 1: Depilation of Test Subjects in the Mouse System C57BI / 6 or C3H mice (male and female) were obtained from Charles River (Kingston, NY) at 8-10 weeks of age and were in the stationary phase (telogen). ) of their respective hair cycles. Hair development was induced by waxing (tweezing) each back of the respective animal according to the procedure presented in Stern et al, "Glucocorticoid Effect on Hair Growth Initiation: A Reconsideration", 6 Skin Pharmacol ., 125-134 (1993). In C57BI / 6 and C3H mice, 8-10 weeks old, the developmental phase (anagen) begins synchronously in all hair follicles at the time of depilation. As shown in Table 1, the following observations were made at the induction site: Table 1: Induction Site Observations Post Induction Days Morphological and histological observations at the induction site 1 -2 (early anagen) No follicles begin to develop 3 a 4 Hair follicles were fully developed, but the capillary veins were not yet visible 7 to 8 (posterior anagen) Each mouse had very dark skin; its capillary veins are histologically visible 11-12 The capillary veins began to penetrate through the epidermis 14 Each mouse was covered with short hair 19 The follicle (catagen) regression was observed histologically 21 to 25 The capillary follicle returns to the phase stationary The hair follicle returns to the stationary phase as shown in Table 1, hair development was visible many days after depilation as the pink skin of the animal began to darken. This is probably due to hair pigmentation in the vein since the C57BI / 6 and C3H mice contained melanocytes only in the hair follicles and not in the dorsal epidermis. A similar pattern of hair development was documented in our international application No. PCT / US 97/11033, when chemical depilation using commercially available products was performed.

Uma vez que o ciclo capilar de murino varia não somente entre os gêneros, mas também dentre animais individuais, o estado do ciclo capilar foi analisado em cada animal no estudo. Uma amostra de pele de 2 cm por 1 cm foi isolada de cada camundongo com tesouras, fixada com uma solução de formalina tamponada a 10% tendo um pH de cerca de 6,9 - 7,1 a 25 °C (Stephens Scientific) e, então, transformada em um bloco de parafina de acordo com procedimentos bem conhecidos. O bloco sofreu, então, uma microtomia e seções foram coradas com corante H&E ou Fontana-Mason. As seções foram examinadas histologicamente de forma a verificar a fase do ciclo capilar, o tamanho do folículo capilar e do veio capilar e o nível de pigmentação capilar, usando-se procedimentos bem conhecidos na técnica. O comprimento dos pêlos foi analisado visualmente e através do uso de um microscópio de dissecação de baixa ampliação (x8).Since the murine capillary cycle varies not only between genders but also among individual animals, the state of the capillary cycle was analyzed in each animal in the study. A 2 cm by 1 cm skin sample was isolated from each mouse with scissors, fixed with a 10% buffered formalin solution having a pH of about 6.9 - 7.1 at 25 ° C (Stephens Scientific) and It is then transformed into a paraffin block according to well known procedures. The block then underwent a microtomy and sections were stained with H&E or Fontana-Mason stain. The sections were examined histologically to verify the phase of the hair cycle, the size of the hair follicle and the hair shaft and the level of hair pigmentation using procedures well known in the art. The hair length was analyzed visually and using a low magnification dissecting microscope (x8).

Esse Exemplo, bem como aquele descrito em nosso pedido internacional N° PCT/US 97/11033, mostra que o ciclo do desenvolvimento dos pêlos com relação aos camundongos C57BI/6 e C3H dura cerca de 25 dias e relata sincronismo similar do desenvolvimento do veio e do folículo capilar, a despeito do método usado para depilação. EXEMPLO 2: Preparo de leite de soja e formulações de leite de soja Uma forma de fazer leite de soja é embeber as sementes de soja em água desionizada ou purificada durante muitas horas e triturar as mesmas após elas terem sido completamente hidratadas, com a adição de pequenas quantidades de água. (O processo de trituração permite que o leite de soja seja extraído). Após coleta, o leite de soja pode ser filtrado a fim de remover quaisquer partes residuais da casca seca. O leite de soja usado nas formulações descritas abaixo pode ser leite de soja fresco conforme descrito acima ou pode ser feito de pó de soja e água. O pó de soja é triturado de sementes de soja e pode também ser liofilizado, pulverizado a seco ou congelado a seco e o leite de soja resultante pode ou não ser filtrado. Tal leite de soja preparado pode ter de cerca de 1 a cerca de 90% em peso de pó de soja. Outro exemplo é o uso de pó de leite de soja, feito de leite de soja liofilizado pulverizado a seco ou congelado a seco, com a adição de água e finalizado com ou sem filtração ou homogeneização. Outros métodos de extração de soja também poderíam ser usados a fim de criar os ingredientes ativos nas formulações descritas abaixo. Por exemplo, os ingredientes ativos poderíam ser extraídos de sementes de soja trituradas usando-se misturas de etanol/água, seguido pela remoção do etanol do extrato, de uma forma tal que a atividade inibitória de protease de serina da soja fosse mantida e de preferência de modo que o STI da proteína permanecesse intacto.This Example, as well as that described in our international application No. PCT / US 97/11033, shows that the hair development cycle with respect to C57BI / 6 and C3H mice lasts about 25 days and reports similar spindle development timing. and the hair follicle, regardless of the method used for hair removal. EXAMPLE 2: Soymilk Preparation and Soymilk Formulations One way to make soymilk is to soak the soybean seeds in deionized or purified water for many hours and grind them after they have been completely hydrated with the addition of small amounts of water. (The shredding process allows soy milk to be extracted). After collection, soymilk can be filtered to remove any residual parts of the dried rind. The soy milk used in the formulations described below may be fresh soy milk as described above or may be made from soy powder and water. The soybean powder is ground from soybean seeds and may also be lyophilized, dry-sprayed or dry-frozen and the resulting soybean milk may or may not be filtered. Such prepared soy milk may have from about 1 to about 90% by weight of soy powder. Another example is the use of soymilk powder, made from dry-sprayed or dry-frozen lyophilized soymilk, with the addition of water and finished with or without filtration or homogenization. Other soy extraction methods could also be used to create the active ingredients in the formulations described below. For example, the active ingredients could be extracted from ground soybean seeds using ethanol / water mixtures, followed by removal of ethanol from the extract, such that the soybean serine protease inhibitory activity was preferably maintained. so that the STI of the protein remained intact.

Os produtos de soja úteis na presente invenção podem ser produzidos de todas as espécies de soja, a despeito de sua origem geográfica, exposição ao sol, tempo de colheita e semelhantes. Contudo, gêneros, origens geográficas ou condições de desenvolvimento específicas poderíam ser preferidas. Por exemplo, mas não limitado a, gêneros de soja particularmente ricos em seu teor de Inibidor de Tripsina de Soja (STI) ou seu teor de isoflavona, ou condições de desenvolvimento que resultem em um enriquecimento do STI ou isoflavona na soja, poderíam ser preferidos. Deve ser observado que os produtos de soja úteis nas composições da presente invenção possuem um odor distinto, o qual pode ser tolerável em algumas culturas, mas é indesejado em outras. Se necessário, o odor das composições da presente invenção pode ser reduzido através do uso de produtos de soja derivados de gêneros específicos de soja conhecidos por produzirem um odor reduzido incluindo, mas não limitado a, sementes deficientes de lipoxigenase-2 e aquelas tendo um perfil modificado com relação ao açúcar e semelhantes. Um processo para reduzir os níveis de oxigênio na for- mulação também pode reduzir o odor. Vários agentes de disfarce ou fra-grâncias também podem ser usados a fim de disfarçar o odor.Soy products useful in the present invention can be produced from all soy species, regardless of their geographical origin, sun exposure, harvest time and the like. However, specific genres, geographical origins or developmental conditions might be preferred. For example, but not limited to, soybeans particularly rich in their Soybean Trypsin Inhibitor (STI) content or isoflavone content, or developmental conditions that result in STI or isoflavone enrichment in soybeans, could be preferred. . It should be noted that soy products useful in the compositions of the present invention have a distinct odor which may be tolerable in some crops but undesirable in others. If necessary, the odor of the compositions of the present invention may be reduced by the use of soy products derived from specific soy genera known to produce a reduced odor including, but not limited to, lipoxygenase-2 deficient seeds and those having a profile. modified with respect to sugar and the like. A process to reduce oxygen levels in the formulation can also reduce odor. Various masking agents or fragrances may also be used to mask odor.

As composições da presente invenção também podem compreender tensoativos, umidificadores, umectantes, condicionadores, fragrân-cias, corantes, conservantes, anti-oxidantes, agentes de despigmentação, agentes para remoção de pêlos, agentes anti-envelhecimento, bronzeado-res, agentes de espumação, adjuvantes cosméticos, agentes de tampona-mento ou misturas dos mesmos.The compositions of the present invention may also comprise surfactants, humidifiers, humectants, conditioners, fragrances, dyes, preservatives, antioxidants, depigmenting agents, hair removal agents, anti-aging agents, tanning agents, foaming agents. , cosmetic adjuvants, buffering agents or mixtures thereof.

As composições da presente invenção podem ser deixadas sobre a pele durante um período suficiente para efetuar as alterações. Por exemplo, as composições da presente invenção podem ser aplicadas à pele em um tratamento diário durante pelo menos cerca de quatro semanas, mais preferivelmente a composição deverá ser aplicada diariamente durante pelo menos oito semanas.The compositions of the present invention may be left on the skin for a period sufficient to effect the changes. For example, the compositions of the present invention may be applied to the skin in a daily treatment for at least about four weeks, more preferably the composition should be applied daily for at least eight weeks.

Outro método de acordo com a presente invenção é um método para reduzir ou prevenir a pseudofolliculitis barbae. A aplicação diária da composição da presente invenção pode reduzir ou prevenir essa condição. As composições da presente invenção também podem ser aplicadas diariamente à área da axila a fim de reduzir o desenvolvimento dos pêlos. Além disso, as composições da presente invenção podem ser aplicadas diariamente aos cabelos para condicionar e melhorar o tratamento dos cabelos do tipo Africano.Another method according to the present invention is a method for reducing or preventing pseudofolliculitis barbae. Daily application of the composition of the present invention may reduce or prevent this condition. The compositions of the present invention may also be applied daily to the armpit area to reduce hair development. In addition, the compositions of the present invention may be applied daily to hair to condition and improve treatment of African-type hair.

Conforme mostrado em nosso Pedido de Patente co-pendente U.S. (Registro do Advogado No. JBP 430), numerosas formulações baseadas em leite de soja poderíam ser usadas, a fim de reduzir a pigmentação. Todas essas formulações poderíam também ser usadas, a fim de reduzir o desenvolvimento dos pêlos. Alguns exemplos particularmente preferidos de formulações de leite de soja e formulações de leite de soja contendo isofla-vonas são mostrados na tabela 2 abaixo. Um exemplo para um preparado de isoflavonas que podería ser usado na presente invenção é Flavosterone SE da Ichimaru, Japão, a qual contém cerca de 0,1% de isoflavonas puras. Em todas essas formulações, o leite de soja poderia ser substituído pelas quantidades apropriadas de pó de soja ou pó de leite de soja e água.As shown in our co-pending U.S. Patent Application (Lawyer Registration No. JBP 430), numerous soymilk-based formulations could be used in order to reduce pigmentation. All of these formulations could also be used to reduce hair development. Some particularly preferred examples of soy milk formulations and isoflavones-containing soy milk formulations are shown in table 2 below. An example for an isoflavone preparation that could be used in the present invention is Flavosterone SE from Ichimaru, Japan, which contains about 0.1% pure isoflavones. In all of these formulations, soymilk could be substituted for the appropriate amounts of soymilk or soymilk powder and water.

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(D =5 C(D = 5 C

‘•M c o o ο «ra ο ro _c c o o EXEMPLO 3: Preparo de Composições Topicamente Ativas Contendo Inibidores de Protease Derivados de Soia Inibidor de tripsina de soja (STI) e Inibidor de Bowman-Birk (BBI) da Sigma-Aldrich Corporation, foram misturados em uma solução salina tamponada com fosfato a 0,1M (PBS, Gibco-BRL, Gaithersburg, MA), pH de 7,4, em concentrações de 1% a 0,001% (peso/volume). Quatro volumes das soluções resultantes foram, então, misturados com 1 volume de veículo em lipossomas (100 mg/ml), os quais foram preparados por meio dos métodos descritos em Niemiec e outros, de forma a proporcionar a composição topicamente ativa. Preparados de lipossomas não iônicos, tais como aqueles divulgados em Niemiec e outros, "Influence of Nonionic Lipossomal Compo-sition On Topical Delivery of Peptide Drugs Into Pilosebaceous Units: An In Vivo Study Using the Hamster Ear Model", 12 Pharm. Res. 1184-88 (1995) ("Niemiec"), o qual é incorporado aqui por referência em sua totalidade, são bem conhecidos na técnica e são descritos em nosso Pedido de Patente U.S. (Registro de Advogado N° JBP 430). Lipossomas de GDL foram preparados conforme apresentado em Niemiec e outros, acima, com exceção das seguintes alterações: a formulação lipossômica não iônica continha glicerol dilaurato (Emulsynt GDL, ISP Van Dyk)/colesterol (Croda)/polioxietileno-10-estearil éter (Brij76, ICI)/polioxietileno-9-lauril éter, como em uma proporção de 37,5:12,5:33,3:16,7. PBS ou tampão de Hepes, 0,05M, pH de 7,4 (Gibco-BRL de Gaithersburg, MD) foi usado como a fase aquosa no preparo dos lipossomas. EXEMPLO 4: Leite de Soia Retarda o Desenvolvimento dos Pêlos e Reduz o Tamanho do Folículo Capilar e do Veio Capilar e a Pigmentação do Veio Capilar Camundongos C57BI/6 foram induzidos a um novo ciclo capilar conforme descrito no Exemplo 1 e tratados diariamente com leite de soja. Os animais foram observados diariamente com relação a seu padrão de desenvolvimento de pêlos e as biópsias da pele foram tomadas pontos de tempo importantes do ciclo capilar. Como um resultado do tratamento com leite de soja, o desenvolvimento dos pêlos do camundongo tratado foi retar- dado e seus pêlos eram visivelmente mais finos e mais macios ao toque. Os camundongos tratados não mostravam escurecimento da pele nos dias 7-8 do ciclo capilar, conforme esperado, e os veios capilares não eram visíveis nos dias 11-12 como nos animais de controle. Em média, o ciclo capilar dos camundongos tratados com leite de soja foi retardado em 3-6 dias. A Figura 1 é uma foto da peie dos camundongos, mostrando a diferença na aparência, cor, tamanho e espessura dos pêlos em seguida ao tratamento com leite de soja. O exame histológico de amostras da pele que sofreu biópsia confirmou essas observações. Conforme mostrado na Figura 2 através de coloração de Fontana-Mason (F&M), no quarto dia do ciclo capilar o foiículo capilar não tratado está completamente desenvolvido, conforme esperado, contendo todas as camadas celulares e depósito de pigmento. Em contraste, a amostra tratada com leite de soja (mostrada na mesma magnitude), mostra um foiículo capilar menor e não completamente desenvolvido, com nenhum depósito de pigmento. A Figura 3 mostra dois grupos de seções histológicas coradas com F&M, de ampliação maior e menor. Essas seções são do sétimo dia do ciclo capilar. O painel superior mostra que a pele tratada com leite de soja possui folículos capilares menores, mais curtos e menos pigmentados do que o controle não tratado. O painel inferior mostra uma ampliação maior dos folículos, ainda demonstrando a diferença no tamanho do foiículo capilar e do veio capilar e da pigmentação em seguida ao tratamento com leite de soja. A Figura 4 mostra uma ampliação menor de seções de pele coradas com F&M no décimo oitavo dia do ciclo capilar. Nessa magnitude, é óbvio que o tratamento com leite de soja resulta em um tamanho reduzido do foiículo capilar, o que leva a um comprimento e espessura reduzidos do veio capilar e a um depósito de pigmento total reduzido dentro dos folículos tratados. A Figura 5 mostra seções da pele no vigésimo primeiro dia do ciclo capilar, com duas ampliações. O painel superior demonstra que os i animais de controle estavam no estágio de catágena, quando os folículos capilares estão regredindo. Os folículos tratados com leite de soja, por outro lado, já tinham completado o estágio de catágena, uma vez que eles são mostrados em telógeno, no estágio estacionário. Isso indica que não somente o ciclo capilar foi retardado em seguida ao tratamento com leite de soja, ele estava prematuramente terminado. O painel inferior demonstra o folículo de controle em catágena e o folículo mais curto tratado com leite de soja em telógeno (estacionário) usando-se uma ampliação maior.EXAMPLE 3: Preparation of Topically Active Compositions Containing Soy-Derived Protease Inhibitors Soybean Trypsin Inhibitor (STI) and Bowman-Birk Inhibitor (BBI) were mixed in a 0.1 M phosphate buffered saline (PBS, Gibco-BRL, Gaithersburg, MA), pH 7.4, at concentrations of 1% to 0.001% (weight / volume). Four volumes of the resulting solutions were then mixed with 1 volume of liposome vehicle (100 mg / ml), which were prepared by the methods described in Niemiec and others to provide the topically active composition. Nonionic liposome preparations, such as those disclosed in Niemiec et al., "Influence of Nonionic Liposomal Composition on Topical Delivery of Peptide Drugs In Pilosebaceous Units: An In Vivo Study Using the Hamster Ear Model", 12 Pharm. Res. 1184-88 (1995) ("Niemiec"), which is incorporated herein by reference in its entirety, are well known in the art and are described in our U.S. Patent Application (Lawyer Registration No. JBP 430). GDL liposomes were prepared as presented in Niemiec and others above, except for the following changes: the nonionic liposomal formulation contained glycerol dilaurate (Emulsynt GDL, ISP Van Dyk) / cholesterol (Croda) / polyoxyethylene-10-stearyl ether (Brij76). (ICI) / polyoxyethylene-9-lauryl ether as in a ratio of 37.5: 12.5: 33.3: 16.7. PBS or 0.05M Hepes buffer, pH 7.4 (Gibco-BRL from Gaithersburg, MD) was used as the aqueous phase in liposome preparation. EXAMPLE 4: Soy Milk Slows Hair Development and Reduces Hair Follicle and Capillary Vein Size and Hair Vein Pigmentation C57BI / 6 mice were induced into a new hair cycle as described in Example 1 and treated daily with Soy. The animals were observed daily for their hair development pattern and skin biopsies were taken important time points of the hair cycle. As a result of soymilk treatment, the hair development of the treated mouse was slowed and its hair was noticeably thinner and softer to the touch. The treated mice did not show skin darkening on days 7-8 of the capillary cycle, as expected, and the capillary veins were not visible on days 11-12 as in control animals. On average, the capillary cycle of mice treated with soy milk was delayed by 3-6 days. Figure 1 is a photo of the mouse skin showing the difference in hair appearance, color, size and thickness following soymilk treatment. Histological examination of biopsied skin samples confirmed these observations. As shown in Figure 2 by Fontana-Mason (F&M) staining, on the fourth day of the hair cycle the untreated hair follicle is fully developed as expected, containing all cell layers and pigment deposition. In contrast, the sample treated with soymilk (shown in the same magnitude) shows a smaller and not fully developed capillary foramen with no pigment deposits. Figure 3 shows two groups of major and minor magnification F&M stained histological sections. These sections are from the seventh day of the hair cycle. The top panel shows that soy milk-treated skin has smaller, shorter, and less pigmented hair follicles than the untreated control. The lower panel shows a larger enlargement of the follicles, further demonstrating the difference in capillary foramen size and capillary shaft size and pigmentation following soymilk treatment. Figure 4 shows a minor magnification of F&M stained skin sections on the eighteenth day of the hair cycle. Of this magnitude, it is obvious that soymilk treatment results in reduced capillary foramen size, which leads to reduced capillary shaft length and thickness and reduced total pigment deposition within the treated follicles. Figure 5 shows sections of the skin on the twenty-first day of the hair cycle, with two magnifications. The upper panel demonstrates that the control animals were in the catagen stage when the hair follicles are regressing. The follicles treated with soy milk, on the other hand, had already completed the catagen stage, as they are shown in telogen at the stationary stage. This indicates that not only was the hair cycle delayed following soymilk treatment, it was prematurely terminated. The lower panel shows the control follicle in catagen and the shorter follicle treated with telogen (stationary) soymilk using a larger magnification.

EXEMPLO 5: Os efeitos do leite de soja sobre o desenvolvimento, tamanho e pigmentação dos pêlos são reproduzíveis em camundongos C3HEXAMPLE 5: The Effects of Soymilk on Hair Development, Size and Pigmentation Are Reproducible in C3H Mice

De forma a verificar que os efeitos do leite de soja sobre o desenvolvimento dos pêlos não é específico aos camundongos C57BI/6, repete-se o experimento descrito no Exemplo 4 usando-se o camundongo C3H de pêlos marrons (Agouti). Os resultados desses experimentos foram similares visual e histologicamente. O leite de soja retardou o desenvolvimento dos pêlos e o tamanho do folículo capilar e do veio capilar e o depósito de pigmento nos camundongos C3H. A análise histológica confirmou essas observações visuais. Conforme mostrado no painel superior da Figura 6, usando-se coloração de F&M, no sétimo dia do ciclo capilar os folículos tratados com leite de soja são menores e acumulam menos pigmento do que os controles não tratados. O painel superior da Figura 7 (coloração de F&M) mostra uma ampliação menor das mesmas seções de pele, demonstrado os folículos menos espessos e menos pigmentados em seguida ao tratamento com leite de soja. A Figura 8 mostra seções de pele coradas com F&M no vigésimo primeiro dia do ciclo capilar. Conforme mostrado com relação aos camundongos C57BI/6, em seguida ao tratamento com leite de soja, o ciclo capilar termina prematuramente. Os folículos tratados com leite de soja estão no estado estacionário, ao passo que os folículos de controle não tratados ainda estão em catágena. EXEMPLO 6: Os efeitos do leite de soia e inibidores de protease de serina derivados de soia sobre o desenvolvimento, tamanho e pigmentação dos pêlos Em uma busca por um mecanismo para explicar o efeito do leite de soja sobre o desenvolvimento dos pêlos, testa-se o efeito dos inibidores de protease de serina derivados de leite de soja, STI e BBI, Mostrou-se anteriormente que essas proteínas induzam à despigmentação da pele, através de alteração da via PAR-2 (Pedido de Patente U.S., Documento de Procuração N° JBP 430), Os experimento descritos no Exemplo 4 foram repetidos usando-se STI, BBI e leite de soja. O STI e BBI foram usados em um veículo de PBS-lipossoma conforme descrito no Exemplo 3. Observações visuais no decorrer do ciclo capilar confirmaram que o STI e BBI poderíam retardar o desenvolvimento dos pêlos e reduzir o tamanho do folículo capilar e do veio capilar, similarmente ao leite de soja (veja fotos dos pêlos na Figura 9). Usando-se elevadas concentrações de STI ou BBI, o efeito sobre o desenvolvimento e pigmentação dos pêlos foi substancial. A análise histológica confirmou essas descobertas. Conforme mostrado na Fig. 6, no sétimo dia do ciclo capilar, 1 % de STI e 1 % de BBI reduzem o tamanho do folículo capilar e do veio capilar e a pigmentação do veio capilar em camundongos C3H. A Figura 7 mostra seções em uma ampliação menor do mesmo dia no ciclo capilar, demonstrando folículos capilares e veios capilares menores e pigmentação reduzida, com relação ao controle não tratado, com tratamento por leite de soja, STI ou BBI. A Figura 10 mostra que o STI e o BBI têm o mesmo efeito nos camundongos C57BI/6 também, demonstrando folículos menores e menos pigmentados. Tomado conjuntamente, esse exemplo mostra que o STI e o BBI são inibidores de protease de serina derivados de soja, encontrados no leite de soja, que poderíam retardar o desenvolvimento dos pêlos, reduzir o tamanho do folículo capilar e do veio capilar e reduzir a pigmentação dos pêlos. O STI e o BBI poderíam representar uma parte dos ingredientes do leite de soja que afeta o desenvolvimento dos pêlos.In order to verify that the effects of soy milk on hair development is not specific to C57BI / 6 mice, the experiment described in Example 4 is repeated using the brown hair C3H mouse (Agouti). The results of these experiments were visually and histologically similar. Soymilk retarded hair development and hair follicle and hair shaft size and pigment deposition in C3H mice. Histological analysis confirmed these visual observations. As shown in the upper panel of Figure 6, using F&M staining, on the seventh day of the hair cycle, soy milk-treated follicles are smaller and accumulate less pigment than untreated controls. The upper panel of Figure 7 (F&M staining) shows a smaller magnification of the same sections of skin, showing the less thick and less pigmented follicles following soymilk treatment. Figure 8 shows F&M-stained skin sections on the twenty-first day of the hair cycle. As shown for C57BI / 6 mice following treatment with soymilk, the hair cycle ends prematurely. The follicles treated with soy milk are in a steady state, while the untreated control follicles are still in catagen. EXAMPLE 6: The Effects of Soya Milk and Soil-Derived Serine Protease Inhibitors on Hair Development, Size, and Pigmentation In a search for a mechanism to explain the effect of soy milk on hair development, we tested the effect of soy milk-derived serine protease inhibitors, STI and BBI, These proteins have previously been shown to induce skin depigmentation by altering the PAR-2 pathway (US Patent Application, Proxy Document No. JBP 430), The experiments described in Example 4 were repeated using STI, BBI and soy milk. STI and BBI were used in a PBS-liposome vehicle as described in Example 3. Visual observations throughout the hair cycle confirmed that STI and BBI could slow hair development and reduce the size of the hair follicle and capillary shaft. similar to soy milk (see pictures of hair in Figure 9). Using high concentrations of STI or BBI, the effect on hair development and pigmentation was substantial. Histological analysis confirmed these findings. As shown in Fig. 6, on the seventh day of the hair cycle, 1% STI and 1% BBI reduce hair follicle and hair shaft size and hair shaft pigmentation in C3H mice. Figure 7 shows sections at a smaller magnification of the same day in the capillary cycle, demonstrating capillary follicles and smaller capillary veins and reduced pigmentation relative to untreated control with soybean milk, STI or BBI treatment. Figure 10 shows that STI and BBI have the same effect on C57BI / 6 mice as well, demonstrating smaller and less pigmented follicles. Taken together, this example shows that STI and BBI are soy-derived serine protease inhibitors found in soy milk that could slow hair development, reduce hair follicle and hair shaft size and reduce pigmentation. of the hair. STI and BBI could represent a part of soymilk ingredients that affect hair development.

De forma a sustentar a hipótese de que o STI e o BBI no leite de soja estão envolvidos nos efeitos sobre o desenvolvimento dos pêlos descritos acima, testa-se o leite de soja com relação à sua atividade inibitória de protease de serina. Um ensaio enzimático foi realizado usando-se ’Έη-zchek", um sistema de teste fluorescente de digestão de protease feito pela Molecular Probes de Eugene, OR. Usando-se 100 unidades de tripsina (da Sigma Chemicals, St. Louis, MO), o sistema de teste produziu leitura por fluorescência de cerca de 1100 unidades. Essa reação foi inibida com concentrações crescentes de STI, conforme esperado de um inibidor de tripsina conhecido. Diluições em série de leite de soja foram testadas nesse ensaio e verificou-se que inibem a atividade da tripsina. Conforme mostrado na Figura 11,o leite de soja exerce atividade inibitória de tripsina similar a cerca de 0,2% de STI puro. Isso sugere que o leite de soja poderia exercer seu efeito sobre o desenvolvimento dos pêlos, pelo menos em parte, pelo STI ou BBI. EXEMPLO 7: Q leite de soia induz alterações na expressão da tirosinase e TRP-1 As análises histológicas das amostras de pele tratadas com leite de soja descritas nos exemplos acima mostram redução drástica no depósito de pigmento dentro do folículo capilar. A fim de compreender ainda o mecanismo da despigmentação induzida pelo leite de soja, estuda-se a tirosinase, a enzima chave na melonogênese e a Proteína-1 Relacionada à Tirosinase (TRP-1), a enzima que estabiliza a tirosinase. Camundongos C57BI/6 e C3H foram tratados conforme descrito acima e amostras foram coletadas no decorrer do estudo para análise da proteína. A extração de proteína e análise por mancha de Western foram realizadas usando-se procedimentos padrões, tal como aquele descrito em Current Protocols in Cell Biology, Editado por Juan S. Bonifacino e outros, Capítulo 6: Electrophore-sis and Immunoblotting, Copyright 1999 por John Wiley & Sons, Inc., o qual é incorporado aqui por referência em sua totalidade. Um exemplo de tal estudo é mostrado na Figura 12.In order to support the hypothesis that STI and BBI in soy milk are involved in the effects on hair development described above, soy milk is tested for its serine protease inhibitory activity. An enzymatic assay was performed using 'Έη-zchek ", a fluorescent protease digestion test system by Molecular Probes of Eugene, OR. Using 100 trypsin units (from Sigma Chemicals, St. Louis, MO) , the test system produced fluorescence reading of about 1100 units. This reaction was inhibited with increasing STI concentrations as expected from a known trypsin inhibitor. Serial dilutions of soy milk were tested in this assay and it was found that inhibit trypsin activity. As shown in Figure 11, soymilk exerts trypsin inhibitory activity similar to about 0.2% pure STI. This suggests that soymilk could exert its effect on hair development, at least in part by STI or BBI EXAMPLE 7: Q Soymilk Induces Changes in Tyrosinase Expression and TRP-1 Histological Analyzes of Soymilk-Treated Skin Samples Described in the Examples Above show a dramatic reduction in the pigment deposit within the hair follicle. In order to further understand the mechanism of soy milk-induced depigmentation, tyrosinase, the key enzyme in melonogenesis, and tyrosinase-related protein-1 (TRP-1), the enzyme that stabilizes tyrosinase, are studied. C57BI / 6 and C3H mice were treated as described above and samples were collected during the study for protein analysis. Protein extraction and Western blot analysis were performed using standard procedures as described in Current Protocols in Cell Biology, Edited by Juan S. Bonifacino et al., Chapter 6: Electrophore-sis and Immunoblotting, Copyright 1999 by John Wiley & Sons, Inc., which is incorporated herein by reference in its entirety. An example of such a study is shown in Figure 12.

Quantidades iguais de proteínas extraídas da pele foram submetidas à prova com o anticorpo antitirosinase "anti PEP1" e com o anticor- po anti-TRP-1 "anti PEP7", os quais são descritos em Jimenez M., Ka-meyama K., Maloy W.L., Tomita Y. E Hearing V., Mammalian tyrosinase: biosynthesis, Processing and modulation by melanocyte stimuiating hormo-ne, Proc. Natl. Acad. Sei. USA (1988), 65: 3830-34 e Jimenez Μ., K., Maloy W.L. e Hearing V., Specific Identification of an authentic tyrosinase clone, J. Biol. Chem. (1989), 264: 3397-3403, os quais são incorporados aqui por referência em sua totalidade.Equal amounts of protein extracted from the skin were tested with the "anti PEP1" anti-tyrosinase antibody and the "anti PEP7" anti-TRP-1 antibody, which are described in Jimenez M., Ka-meyama K., Maloy WL, Tomita Y. and Hearing V., Mammalian Tyrosinase: Biosynthesis, Processing and Modulation by Melanocyte Stimulating Hormo-ne, Proc. Natl. Acad. Know. USA (1988), 65: 3830-34 and Jimenez, K., Maloy W.L. and Hearing V., Specific Identification of an authentic tyrosinase clone, J. Biol. Chem. (1989), 264: 3397-3403, which are incorporated herein by reference in their entirety.

Conforme mostrado na Figura 12, a expressão das proteínas tirosinase e TRP-1 é drasticamente afetada pelo tratamento com leite de soja. Os níveis de tirosinase e TRP-1 são reduzidos e a duração da expressão é diminuída. Esses dois fatores afetam a pigmentação capilar como um todo, a qual é reduzida devido ao nível reduzido e à duração mais curta da melonogênese. EXEMPLO 8: O leite de soia reduz o comprimento e espessura dos pêlos faciais humanos Um homem individual com pêlos faciais escuros que se barbeia diariamente foi tratado do lado direito de sua face com leite de soja, imediatamente após o barbear, durante cinco semanas. Pela terceira semana e mais acentuadamente pela quarta semana, os pêlos do lado tratado eram visualmente mais suaves e mais macios ao toque. Fotos digitais em diferentes ampliações foram tomadas no decorrer do período de tratamento usando-se Hi-Scope. Essas fotos demonstram claramente o tamanho e espessura reduzidos dos veios capilares no lado tratado. Um exemplo de tais fotos é mostrado na figura 13, demonstrando a diferença na espessura e densidade do veio capilar em quatro semanas de tratamento. Uma vez que ambos os lados da face foram barbeados ao mesmo tempo e as fotos de ambos os lados foram tomadas ao mesmo tempo, a diferença no comprimento do pêlo facial indica uma taxa de desenvolvimento mais lenta na área tratada. A Figura 14 mostra uma análise por imagem computadorizada do comprimento, espessura e área total do pêlo facial, em seguida a quatro semanas de tratamento com leite de soja. Todas as imagens foram analisa- das com o software Image Pro Plus 3.0 (Média Cybemetics, Silver Spring, MD). Os dados são apresentados como a média de 180 veios capilares de cada lado da face, com o desvio padrão (SigmaPlot® 5.0, SPSS Science, Chicago, IL). Análise estatística foi realizada usando-se o software Sig-maStat® 2.0 (SPSS Science), demonstrando uma diferença estatística significativa em todos os parâmetros medidos em seguida ao tratamento com leite de soja. EXEMPLO 9: O leite de soia reduz o comprimento e espessura dos pêlos da perna humana Os pêlos foram depilados com cera em duas áreas simétricas da parte mediana das pernas, abaixo dos joelhos, em um indivíduo. Uma das pernas foi tratada diariamente, durante quatro semanas, com leite de soja. Observações visuais indicam um desenvolvimento mais lento dos pêlos sobre o local tratado. Os veios capilares foram reduzidos em número e eram mais curtos e mais finos do que aqueles do local não tratado, conforme mostrado na Figura 15. Essas observações ainda confirmam o efeito do leite de soja sobre o desenvolvimento dos pêlos. Os Exemplos 8 e 9 confirmam que o efeito do leite de soja sobre o desenvolvimento dos pêlos humanos não está relacionado ao método de remoção dos pêlos ou à parte do corpo que está sendo tratada. EXEMPLO 10: Formulações de leite de soia enriquecidas com isoflavonas são preferidas às formulações de leite de soia na redução do desenvolvimento e pigmentação dos pêlos Os experimentos descritos no Exemplo 4 foram repetidos usando-se duas formulações descritas na Tabela 2 acima, Essência de Leite de Soja 23, a qual é uma formulação baseada em leite de soja e Essência de Leite de Soja 30, a qual é idêntica à Essência de Leite de Soja 23, exceto com relação à adição de 5% de um extrato de isoflavonas a 0,1%. Conforme mostrado na figura 16, os camundongos tratados com a Essência de Leite de Soja 23 mostram desenvolvimento reduzido dos pêlos e uma aparência mais agradável dos pêlos. Esse efeito foi mais acentuado com o uso da Essência de Leite de Soja 30, demonstrando que as formulações de leite de soja enriquecidas com isoflavonas são superiores às formulações de leite de soja na redução do desenvolvimento dos pêlos. A Figura 17 mostra seções histológicas da pele dos camundongos tratados, no décimo quinto dia do tratamento. Os veios capilares documentados nessas seções demonstram claramente a redução nas dimensões do veio capilar, o nível reduzido de pigmentação dentro do veio capilar e a maciez crescente do veio capilar em seguida aos tratamentos com Essência de Leite de Soja. EXEMPLO 11: Formulações de leite de soia enriquecidas com isoflavonas são preferidas às formulações de isoflavona as quais são efetivas na redução do desenvolvimento e pigmentação dos pêlos Os experimentos descritos no Exemplo 4 foram repetidos usando-se as formulações descritas na Tabela 2 acima, de Essência de Leite de Soja com ou sem concentrações crescentes de isoflavonas. Essas formulações de essência de soja eram comparáveis às formulações similares, apenas onde o componente de leite de soja foi substituído por água. Esses três grupos de formulações (Essência de soja, isoflavonas, essência de soja contendo isoflavonas adicionais) foram preparadas a fim de testar a possibilidade de que as isoflavonas poderíam ser suficientes no que se refere ao efeito observado sobre o desenvolvimento dos pêlos. A Figura 18 mostra os pêlos do camundongo C57BI/6 em seguida a três semanas de tratamento tópico, conforme descrito no Exemplo 4. Os camundongos de controle não tratados e os camundongos tratados com placebo tinham pêlos longos e menos "ordenados". A Essência de Leite de Soja 23 reduz o desenvolvimento dos pêlos e leva a uma aparência mais agradável, conforme descrito anteriormente no presente pedido. As formulações de Essência de Leite de Soja contendo 1, 5 e 10% de extrato contendo isoflavonas a 0,1% resultaram em um efeito superior sobre o desenvolvimento dos pêlos. Contudo, as formulações contendo isoflavonas mas nenhum leite de soja demonstraram um efeito mais leve e não tão superior como quando combinadas com leite de soja. Esse exemplo demonstra que as formulações de leite de soja contendo isoflavona poderíam reduzir o desenvolvimento dos pêlos, Esse exemplo ainda demonstra que as formulações de leite de soja contendo iso- flavonas reduz o desenvolvimento dos pêlos em um grau maior do que as formulações contendo isoflavonas apenas. EXEMPLO 12: As formulações de essência de soia afetam o desenvolvimento dos pêlos humanos A eficácia e potencial irritaíivo das essências de leite de soja 23 e 30 comparadas a uma formulação com placebo foram examinados em um teste de quatro semanas controlado com placebo às cegas com doze julgadoras fêmeas na pré-menopausa com idades de 29 a 45 anos através de avaliações pelo investigador do estudo, auto-avaliação pelas julgadoras e análise de imagem por Hi-Scope. As julgadoras assinaram um Consentimento Informado e foram instruídas acerca dos procedimentos e expectativas do estudo e foram solicitadas a se depilarem naquela noite. Na visita de base do dia seguinte, duas loções de teste foram distribuídas a cada julgadora (Dia 1), uma loção com placebo e Essência de Leite de Soja 23 ou 30. As loções foram aleatoriamente distribuídas na perna direita ou na perna esquerda. As loções de teste e o placebo foram usados sobre as pernas respectivas durante o decorrer do estudo com nenhuma outra loção sendo usada sobre a parte inferior das pernas. As julgadoras foram instruídas a aplicar as loções de teste duas vezes ao dia, de manhã e à noite e também foram instruídas a tentar não depilar a parte inferior de suas pernas até após cada avaliação semanal, Nos dias de avaliação, o investigador inspecionou visualmente as pernas das julgadores com relação a quaisquer sinais clínicos de irritação e comparou as pernas com relação à atenuação do desenvolvimento dos pêlos. Questionários de auto-avaliação foram completados pelas julgadoras em cada ponto de tempo de avaliação (semanas 1, 2, 3 e 4). Além disso, imagens por Hi-Scope (2,5 cm de diâmetro para cada imagem, KH-2400R, Hirox) foram obtidas em cada ponto de tempo usando-se uma lente MX-MACROZ (Hirox).As shown in Figure 12, the expression of protein tyrosinase and TRP-1 is dramatically affected by soymilk treatment. Tyrosinase and TRP-1 levels are reduced and the duration of expression is decreased. These two factors affect overall hair pigmentation, which is reduced due to the reduced level and shorter duration of melonogenesis. EXAMPLE 8: Soymilk Reduces the Length and Thickness of Human Facial Hair An individual man with daily dark shaving facial hair was treated on the right side of his face with soy milk immediately after shaving for five weeks. By the third week and most markedly by the fourth week, the hair on the treated side was visually softer and softer to the touch. Digital photos at different magnifications were taken over the treatment period using Hi-Scope. These photos clearly demonstrate the reduced size and thickness of the capillary veins on the treated side. An example of such photos is shown in figure 13, demonstrating the difference in capillary shaft thickness and density at four weeks of treatment. Since both sides of the face were shaved at the same time and photos on both sides were taken at the same time, the difference in facial hair length indicates a slower rate of development in the treated area. Figure 14 shows a computerized image analysis of the length, thickness and total area of the facial hair following four weeks of soymilk treatment. All images were analyzed with Image Pro Plus 3.0 software (Cybemetics Average, Silver Spring, MD). Data are presented as the average of 180 capillary veins on each side of the face, with standard deviation (SigmaPlot® 5.0, SPSS Science, Chicago, IL). Statistical analysis was performed using Sig-maStat® 2.0 software (SPSS Science), demonstrating a statistically significant difference in all parameters measured following soymilk treatment. EXAMPLE 9: Soymilk Reduces the Length and Thickness of Human Leg Hair The hair was waxed in two symmetrical areas of the median leg below the knees in an individual. One leg was treated daily for four weeks with soy milk. Visual observations indicate slower hair development on the treated site. The capillary veins were reduced in number and were shorter and thinner than those from the untreated site, as shown in Figure 15. These observations further confirm the effect of soy milk on hair development. Examples 8 and 9 confirm that the effect of soy milk on human hair development is unrelated to the method of hair removal or the body part being treated. EXAMPLE 10: Isoflavone-Enriched Soymilk Formulations are Preferred to Soymilk Formulations in Reducing Hair Growth and Pigmentation The experiments described in Example 4 were repeated using two formulations described in Table 2 above. Soybean 23, which is a formulation based on soymilk and Soymilk Essence 30, which is identical to Soymilk Essence 23, except for the addition of 5% of an isoflavone extract at 0.1 %. As shown in Figure 16, mice treated with Soymilk Essence 23 show reduced hair development and a more pleasing hair appearance. This effect was more pronounced with the use of Soymilk Essence 30, demonstrating that isoflavone-enriched soymilk formulations are superior to soymilk formulations in reducing hair development. Figure 17 shows histological sections of the skin of treated mice on the fifteenth day of treatment. The capillary veins documented in these sections clearly demonstrate the reduction in capillary shaft dimensions, the reduced level of pigmentation within the capillary shaft, and the growing softness of the capillary shaft following Soymilk Essence treatments. EXAMPLE 11: Isoflavone-enriched soy milk formulations are preferred to isoflavone formulations which are effective in reducing hair growth and pigmentation. The experiments described in Example 4 were repeated using the Essence Table 2 formulations above. of Soymilk with or without increasing concentrations of isoflavones. These soybean essence formulations were comparable to similar formulations only where the soymilk component was replaced by water. These three groups of formulations (Soybean Essence, Isoflavones, Soybean Essence Containing Additional Isoflavones) were prepared in order to test the possibility that isoflavones might be sufficient with regard to the observed effect on hair development. Figure 18 shows C57BI / 6 mouse hair following three weeks of topical treatment as described in Example 4. Untreated control mice and placebo-treated mice had long, less "ordered" hair. Soymilk Essence 23 reduces hair development and leads to a more pleasing appearance as described earlier in this application. Soymilk Essence formulations containing 1, 5 and 10% extract containing 0.1% isoflavones resulted in a superior effect on hair development. However, formulations containing isoflavones but no soy milk demonstrated a lighter effect and not as superior as when combined with soy milk. This example demonstrates that isoflavone-containing soymilk formulations could reduce hair development. This example further demonstrates that isoflavone-containing soymilk formulations reduce hair development to a greater degree than isoflavone-only formulations. . EXAMPLE 12: Soap Essence Formulations Affect Human Hair Development The efficacy and irritative potential of soy milk essences 23 and 30 compared to a placebo formulation were examined in a twelve-week blind placebo controlled trial with twelve Premenopausal female judges aged 29 to 45 years through study investigator evaluations, judges self-evaluation, and Hi-Scope image analysis. The judges signed an Informed Consent and were instructed about the study's procedures and expectations and were asked to shave that night. At the baseline visit the next day, two test lotions were distributed to each judge (Day 1), a placebo lotion and Soymilk Essence 23 or 30. Lotions were randomly distributed on the right leg or the left leg. Test lotions and placebo were used on the respective legs during the course of the study with no other lotions being used on the lower legs. The judges were instructed to apply the test lotions twice a day, morning and evening and were also instructed to try not to shave their lower legs until after each weekly assessment. On the assessment days, the investigator visually inspected the judges' legs with respect to any clinical signs of irritation and compared their legs with regard to attenuation of hair development. Self-assessment questionnaires were completed by the judges at each evaluation time point (weeks 1, 2, 3 and 4). In addition, Hi-Scope images (2.5 cm diameter for each image, KH-2400R, Hirox) were obtained at each time point using an MX-MACROZ (Hirox) lens.

Nenhuma julgadora saiu do estudo por qualquer razão relacionada aos produtos. Nenhum sinal de irritação foi visto em qualquer uma das julgadoras do estudo em qualquer ponto de tempo, nem qualquer irritação relatada quando auto-avaliado pelas julgadoras em qualquer ponto de tem- po durante ο estudo.No judge has left the study for any product-related reasons. No signs of irritation were seen in any of the trial judges at any point in time, nor were any irritations reported when self-rated by the judges at any point in time during the study.

Para fins de contagem de pêlos de todos os pêlos, incluindo "pêlos crescendo", foram contados no campo de 2,5 cm determinado para cada julgadora em cada ponto de tempo. Os resultados mostraram uma diminuição na contagem de pêlos da parte inferior das pernas na semana 5 no que se refere à Essência de Leite de Soja 30 e na semana 4 no que se refere à Essência de Leite de Soja 23. As pernas tratadas com placebo não mostraram uma alteração na contagem média de pêlos nas pernas no decorrer do estudo, embora os desvios padrões fossem grandes. A taxa de desenvolvimento foi calculada dividindo-se a extensão de tempo (em dias) desde a última vez que a julgadora se depilou, pelo comprimento médio dos pêlos das pernas para aquela julgadora, o qual foi calculado a partir de imagens de Hi-Scope usando-se análise por Image Pro Plus para cada julgadora em cada local de teste. Os resultados são documentados na Tabela 3, demonstrando que ambos os tratamentos com as Essências de leite de soja 23 e 30 resultaram em uma taxa reduzida de desenvolvimento dos pêlos comparada ao placebo.For hair count purposes all hairs, including "growing hair", were counted in the 2.5 cm field determined for each judge at each time point. Results showed a decrease in lower leg hair count at Week 5 for Soymilk Essence 30 and Week 4 for Soymilk Essence 23. Legs treated with placebo did not showed a change in the average leg hair count over the course of the study, although the standard deviations were large. The rate of development was calculated by dividing the length of time (in days) since the judge last shaved by the average leg hair length for that judge, which was calculated from Hi-Scope images. using Image Pro Plus analysis for each judge at each test site. The results are documented in Table 3, demonstrating that both treatments with Soymilk Essences 23 and 30 resulted in a reduced rate of hair development compared to placebo.

Tabela 3: Taxas médias de desenvolvimento dos pêlos da perna em seguida ao tratamento com Essência de Leite de Soja ou placebo_________________ Os resultados dos questionários de auto-avaliação das julgado- ras mostraram que as julgadoras sentiram que as loções de teste atenuaram o desenvolvimento dos pêlos e conferiram uma sensação macia aos pêlos da perna, comparadas à loção com placebo. As julgadoras sentiram uma sensação de pêlos menos grossos e menos ásperos. A maioria das julgadoras acreditou que as loções de teste atenuaram o desenvolvimento dos pêlos das pernas ou alteraram a textura dos pêlos de modo que eles pareciam mais macios e menos grossos. Análise por Hi-Scope ainda demonstrou que o re-desenvolvimento dos pêlos em seguida ao tratamento com Essência de Leite de Soja 23 ou 30 pareceu se desenvolver na mesma direção e era mais uniforme com relação ao formato, textura e aparência. Em contraste, os pêlos que se desenvolveram novamente sobre as pernas tratadas com placebo se desenvolveram em diferentes direções, diferindo em comprimento, ângulo de desenvolvimento e espessura.Table 3: Average rates of leg hair development following treatment with Soymilk Essence or placebo_________________ The results of the judges' self-assessment questionnaires showed that the judges felt that the test lotions attenuated their hair development. and gave a soft feeling to the leg hair compared to the placebo lotion. The judges felt a sensation of less thick and less harsh hair. Most judges believed that the test lotions attenuated the development of leg hair or altered the texture of the hair so that it looked softer and less thick. Hi-Scope analysis further demonstrated that hair re-development following treatment with Soymilk Essence 23 or 30 appeared to develop in the same direction and was more uniform in shape, texture and appearance. In contrast, hair that developed back on the placebo treated legs developed in different directions, differing in length, angle of development and thickness.

Esse Exemplo demonstra claramente o efeito das formulações de leite de soja no retardo e redução do desenvolvimento dos pêlos e possibilita o desenvolvimento de pêlos mais macios, menos grossos e mais tratados e direcionalmente organizados.This Example clearly demonstrates the effect of soymilk formulations on retarding and reducing hair development and enables the development of softer, less coarse, more treated and directionally organized hair.

Claims

Use of a cosmetic composition comprising: (i) 0.0001% (weight / volume) to 20% (weight / volume) based on the total volume of the cosmetic composition of at least one serine protease inhibiting active agent wherein the agent is derived from soybeans; (ii) 0.0001% (volume / volume) to 0.1% (volume / volume) of one or more isoflavones; (iii) a cosmetically acceptable vehicle; and (iv) surfactants, humidifiers, humectants, conditioners, fragrances, dyes, preservatives, antioxidants, depigmenting agents, hair removal agents, anti-aging agents, tanning agents, foaming agents, cosmetic adjuvants, buffering agents or mixtures thereof. same, characterized in that it is to reduce hair growth, reduce hair follicle size, reduce hair shaft size and / or reduce hair pigmentation, wherein the cosmetic composition is applied topically at least once a day for at least seven days from the beginning of a hair cycle to the hair follicle.

Use according to claim 1, characterized in that at least one serine protease inhibiting active agent is present in an amount based on the total volume of the topically active composition of about 0.001% (weight / volume). ) at about 5% (weight / volume).

Use according to claim 1 or 2, characterized in that the cosmetic composition is in the form of a liquid, cream, gel, paste, powder, essence, mousse, emulsion, film patch or spray.

Use according to any one of claims 1 to 3, characterized in that the serine protease inhibiting active agent is derived from soymilk, soybean extract, soybean paste, soybean powder, soybean milk powder. soy or mixtures thereof.

Use according to claim 4, characterized in that the cosmetic composition comprises from about 1 to about 99% by weight of soy powder, soy milk powder or a mixture thereof.

Use according to any one of claims 1 to 3, characterized in that the serine protease inhibiting active agent is derived from a fraction of soymilk, soybean extract, soybean paste, soybean powder, of soymilk or mixtures thereof.

Use according to claim 6, characterized in that the cosmetic composition comprises from about 0.0001 to about 20% by weight soybean trypsin inhibitor.

Use according to any one of claims 1 to 7, characterized in that the cosmetic composition further comprises liposomes.

Use according to claim 8, characterized in that the cosmetic composition comprises glycerol dilaurate, cholesterol, polyoxyethylene-10-stearyl ether and polyoxyethylene-9-lauryl ether.

Use according to claim 1, characterized in that the cosmetic composition comprises from about 1 to about 99% by weight of soymilk, from about 0.1 to about 20% by weight of emulsion. -sifier and preservatives in an effective amount.

Use according to claim 1, characterized in that the cosmetic composition comprises from about 0.5 to about 20% by weight of soy powder or soy milk powder, from about 0.1 to about about 20% by weight of emulsifier and preservatives in an effective amount.

Use according to any one of claims 1 to 11, characterized in that the cosmetic composition is applied topically before or after hair removal.

Use according to any one of claims 1 to 11, characterized in that the cosmetic composition is applied topically during hair removal.

Use according to any one of claims 1 to 13, characterized in that said cosmetic composition is applied topically together with at least one of depilatory agents, shampoo, hair conditioner, styling gel, care products. hair removal, wax depilatory products, shaving products, hair removal products, aftershave, deodorant, antiperspirant, electrolysis, laser hair removal, light-induced hair removal, bath additives or masks.

Use according to any one of claims 1 to 14, characterized in that it further comprises leaving the cosmetic composition on the skin for a period sufficient to effect the changes.