BR112021008155A2

BR112021008155A2 - formulação farmacêutica aquosa

Info

Publication number: BR112021008155A2
Application number: BR112021008155-0A
Authority: BR
Inventors: Jheng-Gang Yang; Wen-Cheng Chang; Jiung-Liang Liu
Original assignee: Richter Gedeon Nyrt.
Priority date: 2018-10-31
Filing date: 2019-10-24
Publication date: 2021-08-10
Also published as: EP3873437A1; US20210393783A1; KR20210094552A; MA54095A; EP3873437A4; JP2022506042A; CA3117245A1; JP2024041791A; JP7411652B2; AU2019372568A1; WO2020088346A1; MX2021005015A; IL282343A

Abstract

FORMULAÇÃO FARMACÊUTICA AQUOSA. São providas uma formulação farmacêutica aquosa que compreende um anticorpo específico para o receptor de interleucina (IL)-6 (por exemplo, Tocilizumabe) e uma quantidade eficaz de histidina para estabilizar o anticorpo. A dita histidina está presente na formulação farmacêutica aquosa em uma concentração de 50 mM a 200 mM de modo a atingir o efeito estabilizante.

Description

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FORMULAÇÃO FARMACÊUTICA AQUOSA REFERÊNCIA CRUZADA A PEDIDOS RELACIONADOS

[001] Este pedido reivindica a prioridade do Pedido de Patente Provisório N°. US 62/753.084, depositado em 31 de outubro de 2018, o qual é incorporado ao presente documento em sua totalidade a título de referência.

ANTECEDENTES DA INVENÇÃO

1. CAMPO DA INVENÇÃO

[002] A presente descrição refere-se em geral ao campo das formulações farmacêuticas. Mais especificamente, a presente descrição se refere a uma composição farmacêutica aquosa que compreende um anticorpo específico para o receptor de interleucina (IL)-6, como Tocilizumabe, e uma quantidade eficaz de histidina para estabilizar o anticorpo.

2. DESCRIÇÃO DA TÉCNICA RELACIONADA

[003] Ao longo da última década, a terapia a base de proteínas surgiu como um dos principais impulsionadores do crescimento na indústria farmacêutica, na qual os anticorpos monoclonais se tornaram o segmento de drogas proteicas de crescimento mais rápido em todo o mundo. Apesar do sucesso em biotecnologia, adicionalmente existem desafios intratáveis no desenvolvimento da terapia com anticorpos. Ao contrário das moléculas pequenas (por exemplo, compostos), que podem ser administrados por via oral, transdérmica e/ou pulmonar, os anticorpos terapêuticos são tipicamente administrados por injeção. Considerando as limitações de tamanho, complexidade fisiológica e biodisponibilidade, os anticorpos injetados devem ser preparados em altas concentrações. No entanto, as proteínas em altas concentrações são instáveis e propensas à degradação (como desaminação), agregação e/ou precipitação que por sua vez diminui a capacidade de fabricação e complica a liberação de anticorpos.

[004] Com a finalidade de manter a pureza e estabilidade da terapia de anticorpos de alta concentração, diferentes estabilizantes (por exemplo,

2 / 22 glicerol, glicose, galactose, xilitol, sorbitol, manitol, sacarose, trealose, sulfato de sódio, sulfato de potássio, tensoativos iônicos ou não iônicos, alcoóis poli- hídricos, polietilenoglicol e/ou dimetilsulfóxido (DMSO)) precisam ser adicionados à solução tampão. No entanto, a composição complexa do medicamento pode resultar na dificuldade do processo de fabricação e gestão da qualidade, além de aumentar o risco de reações adversas ao fármaco.

[005] Tendo em vista o exposto, existe na técnica relacionada a necessidade de uma formulação aquosa mais simples e mais estável que compreende alta concentração de anticorpo.

SUMÁRIO

[006] O seguinte apresenta um sumário simplificado da descrição a fim de prover uma compreensão básica ao leitor. Este sumário não é uma ampla visão geral da descrição e não destina-se nem a identificar elementos chave ou críticos da presente invenção, nem delinear o escopo da presente invenção. Seu único propósito é apresentar alguns conceitos descritos no presente documento de uma forma simplificada como um prelúdio para a descrição mais detalhada que é apresentada a seguir.

[007] Conforme incorporado e amplamente descrito no presente documento, um aspecto da descrição é direcionado a uma formulação farmacêutica aquosa que compreende um anticorpo e histidina para estabilizar o anticorpo. De acordo com as modalidades da presente descrição, o anticorpo se liga ao receptor de interleucina (IL)-6 e a histidina está presente na formulação farmacêutica aquosa a uma concentração de 50 mM a 200 mM.

[008] De acordo com modalidades preferidas da presente descrição, a histidina está presente na formulação farmacêutica aquosa na concentração de 50 mM a 150 mM. Preferivelmente, a histidina está presente na formulação farmacêutica aquosa na concentração de 60 mM a 130 mM. Com mais preferência, a histidina está presente na formulação farmacêutica aquosa na concentração de 60 mM a 125 mM.

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[009] De acordo com determinadas modalidades da presente descrição, o anticorpo Tocilizumabe está presente na formulação farmacêutica aquosa a uma concentração de 0,1 a 300 mg/ml. Em um exemplo de trabalho, o Tocilizumabe está presente na formulação farmacêutica aquosa na concentração de 180 mg/ml.

[0010] Opcionalmente, a formulação farmacêutica aquosa da presente descrição pode compreender adicionalmente um tensoativo que está presente na formulação farmacêutica aquosa em uma concentração de 0,01 a 0,05% em peso/volume (p/v). De acordo com um exemplo específico, o tensoativo é polissorbato e está presente na formulação farmacêutica aquosa a uma concentração de 0,03% (p/v).

[0011] Ainda opcionalmente, a formulação farmacêutica aquosa da presente descrição pode compreender adicionalmente um aminoácido que está presente na formulação farmacêutica aquosa a uma concentração de 1 mM a 150 mM, em que o aminoácido é selecionado a partir do grupo que consiste em lisina, aspartato, prolina, fenilalanina, alanina, treonina, leucina, asparagina, glutamato, glutamina, serina, triptofano, arginina, metionina e valina. De acordo com algumas modalidades da presente descrição, a formulação farmacêutica aquosa compreende 70 mM de lisina, treonina, serina, prolina, valina ou alanina.

[0012] De acordo com certas modalidades, a formulação farmacêutica aquosa tem um pH de 5,0 a 6,5.

[0013] Muitas das características e vantagens auxiliares da presente descrição serão melhor compreendidas com referência à seguinte descrição detalhada considerada em conexão com as figuras anexas.

BREVE DESCRIÇÃO DOS DESENHOS

[0014] A presente descrição será melhor compreendida a partir da seguinte descrição detalhada lida à luz dos desenhos anexos, onde: A Figura 1 representa as percentagens de pureza (Painel (a)),

4 / 22 espécies de alto peso molecular (HMW, Painel (b)) e espécies de baixo peso molecular (LMW, Painel (c)) de formulações contendo concentrações especificadas de histidina de acordo com o Exemplo 2.1 da presente descrição, em que as formulações foram submetidas a 0 ciclo de congelamento-descongelamento (F/T 0), 5 ciclos de congelamento- descongelamento (F/T 5) ou 10 ciclos de congelamento-descongelamento (F/T 10); e A Figura 2 representa as percentagens de espécies de alto peso molecular (HMW, Painel (a)), pureza (Painel (b)) e espécies de baixo peso molecular (LMW, Painel (c)) de formulações contendo concentrações especificadas de histidina de acordo com o Exemplo 2.2 da presente descrição, em que as formulações foram submetidas a 2-8°C, 25°C ou 40°C por 0 semanas (0W), 2 semanas (2W) ou 4 semanas (4W).

DESCRIÇÃO DETALHADA DA INVENÇÃO

[0015] A descrição detalhada provida a seguir em relação aos desenhos anexos pretende ser uma descrição dos presentes exemplos e não se destina a representar as únicas formas nas quais o presente exemplo pode ser construído ou usado. A descrição apresenta as funções do exemplo e a sequência de etapas para construir e operar o exemplo. No entanto, as mesmas funções e sequências ou equivalentes podem ser realizadas por diferentes exemplos. I. Definição

[0016] Por conveniência, certos termos empregados na especificação, exemplos e reivindicações anexas são reunidos aqui. A menos que definido de outra forma no presente documento, as terminologias científicas e técnicas empregadas na presente descrição devem ter os significados que são comumente compreendidos e usados por aqueles versados na técnica. Além disso, a menos que exigido de outra forma pelo contexto, será entendido que os termos singulares incluirão as formas no plural do mesmo e os termos no

5 / 22 plural incluirão o singular. Especificamente, conforme usado aqui e nas reivindicações, as formas singulares “um” e “uma” incluem a referência no plural, a menos que o contexto indique claramente o contrário. Além disso, conforme usado aqui e nas reivindicações, os termos “pelo menos um” e “um ou mais” têm o mesmo significado e incluem um, dois, três ou mais.

[0017] Apesar de as faixas numéricas e parâmetros que estabelecem o amplo escopo da invenção serem aproximações, os valores numéricos apresentados nos exemplos específicos são relatados com a maior precisão possível. Qualquer valor numérico, no entanto, contém inerentemente certos erros necessariamente resultantes do desvio padrão encontrado nas respectivas medições de teste. Além disso, como usado neste documento, o termo “cerca de” geralmente significa dentro de 10%, 5%, 1% ou 0,5% de um determinado valor ou faixa. Alternativamente, o termo “cerca de” significa dentro de um erro padrão aceitável da média quando considerado por um versado na técnica. Exceto nos exemplos operacionais/de trabalho, ou a menos que de outra forma expressamente especificado, todas as faixas numéricas, quantidades, valores e porcentagens, como aquelas para quantidades de materiais, durações de tempos, temperaturas, condições operacionais, proporções de quantidades e semelhantes das mesmas descritas neste documento devem ser entendidas como modificadas em todos os casos pelo termo “cerca de”. Por conseguinte, a menos que indicado em contrário, os parâmetros numéricos estabelecidos na presente descrição e reivindicações anexas são aproximações que podem variar conforme desejado. No mínimo, cada parâmetro numérico deve ser interpretado à luz do número de dígitos significativos relatados e aplicando técnicas de arredondamento comuns.

[0018] O termo “formulação farmacêutica”, como usado no presente documento, refere-se a formulações que estão em uma forma para permitir que a atividade biológica do ingrediente ativo (por exemplo, o anticorpo) seja eficaz e não contenha componentes adicionais tóxicos para os indivíduos aos

6 / 22 quais a formulação seria administrada. O termo “formulação farmacêutica” inclui uma composição farmaceuticamente aceitável para administração a um indivíduo (por exemplo, um humano) e/ou para fins de pesquisa. A administração ao indivíduo pode incluir, sem limitação, tópica, sublingual, retal, vaginal, transcutânea, subcutânea, oral, inalada, intranasal, pulmonar, intravenosa, enteral ou parenteral. De acordo com certas modalidades da presente descrição, a presente formulação farmacêutica é administrada por via subcutânea ao indivíduo.

[0019] O termo “anticorpo” é usado no sentido mais amplo e cobre especificamente anticorpos monoclonais, anticorpos policlonais, anticorpos multiespecíficos (por exemplo, anticorpos biespecíficos) e fragmentos de anticorpos, desde que exibam a atividade biológica desejada, isto é, para ligarem-se especificamente a um antígeno (por exemplo, o receptor de IL-6) quando reconhece preferencialmente seu antígeno alvo em uma mistura complexa de proteínas e/ou outras moléculas. De acordo com certas modalidades do presente pedido, o anticorpo desta invenção é um anticorpo monoclonal que reconhece especificamente o receptor de IL-6. Os anticorpos são tipicamente tetrâmeros de moléculas de imunoglobulina. No entanto, o anticorpo na presente invenção pode alternativamente existir em uma variedade de formas, incluindo, por exemplo, fragmento variável (Fv), fragmento variável de cadeia única (scFv), fragmento de ligação ao anticorpo (Fab) e F(ab)2, bem como anticorpo de cadeia única e anticorpo humanizado. Um anticorpo pode ser quimérico, humanizado, humano e/ou maturado por afinidade.

[0020] O termo “aminoácido”, como usado no presente documento, refere-se a aminoácidos naturais e/ou não naturais ou sintéticos. Quando os aminoácidos não são designados como D- ou L-aminoácidos, o aminoácido é um L-aminoácido ou pode ser um D- ou L- aminoácido, a menos que o contexto exija um isômero específico. Além disso, a notação aqui usada para

7 / 22 os aminoácidos são aquelas abreviaturas comumente usadas na técnica.

[0021] Como usado no presente documento, o termo “estabilizar” refere-se a uma melhoria na estabilidade de um anticorpo (por exemplo, o anticorpo anti-IL6R da presente descrição), que é necessário para se aproximar ou atingir um estado estável. Mais especificamente, o termo “estabilizar” refere-se a fazer ou manter um anticorpo em um estado estável, firme ou constante e/ou manter o anticorpo em cerca de um determinado nível ou nível substancialmente não flutuante, sobre uma determinada qualidade ou qualidade substancialmente não flutuante e/ou sobre uma determinada quantidade ou quantidade substancialmente não flutuante. O termo “estabilizar” inclui, por exemplo, suprimir uma diminuição na atividade e/ou função do anticorpo no caso em que o anticorpo é armazenado na solução por um período de tempo predeterminado. II. Descrição da Invenção

[0022] A presente descrição é direcionada a uma formulação farmacêutica aquosa que compreende um anticorpo específico para o receptor de IL-6, isto é, um anticorpo anti-IL6R; e uma quantidade eficaz de histidina para estabilizar o anticorpo.

[0023] Em geral, o anticorpo da presente formulação farmacêutica pode ser produzido por qualquer método conhecido pelo versado na técnica; por exemplo, por meio de imunização ou protocolo de vacinação (ou seja, iniciando uma resposta imune em um animal pela administração de um polipeptídeo de interesse (por exemplo, o receptor de IL-6) ao animal seguido de isolamento e purificação do anticorpo assim produzido), células de hibridoma (ou seja, cultivar células de hibridoma para produzir e secretar o anticorpo no meio de cultura) e tecnologia de DNA recombinante (ou seja, introduzir um vetor de expressão contendo um polinucleotídeo que codifica o anticorpo ou um fragmento do anticorpo em uma célula de modo a expressar o anticorpo ou o fragmento do mesmo na célula).

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[0024] De acordo com certas modalidades da presente descrição, o anticorpo da presente formulação farmacêutica é Tocilizumabe, que é produzido pela tecnologia de DNA recombinante. Nessas modalidades, as cadeias pesadas e leves do Tocilizumabe assim produzido compreendiam respectivamente as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 1 e 2.

[0025] De acordo com as modalidades da presente descrição, a histidina está presente na formulação farmacêutica aquosa a uma concentração de 50 mM a 200 mM de modo a atingir o efeito estabilizante; por exemplo, 50, 51, 52, 53, 54, 55, 56, 57, 58, 59, 60, 61, 62, 63, 64, 65, 66, 67, 68, 69, 70, 71, 72, 73, 74, 75, 76, 77, 78, 79, 80, 81, 82, 83, 84, 85, 86, 87, 88, 89, 90, 91, 92, 93, 94, 95, 96, 97, 98, 99, 100, 101, 102, 103, 104, 105, 106, 107, 108, 109, 110, 111, 112, 113, 114, 115, 116, 117, 118, 119, 120, 121, 122, 123, 124, 125, 126, 127, 128, 129, 130, 131, 132, 133, 134, 135, 136, 137, 138, 139, 140, 141, 142, 143, 144, 145, 146, 147, 148, 149, 150, 151, 152, 153, 154, 155, 156, 157, 158, 159, 160, 161, 162, 163, 164, 165, 166, 167, 168, 169, 170, 171, 172, 173, 174, 175, 176, 177, 178, 179, 180, 181, 182, 183, 184, 185, 186, 187, 188, 189, 190, 191, 192, 193, 194, 195, 196, 197, 198, 199, ou 200 mM. Preferivelmente, a histidina está presente na formulação farmacêutica aquosa na concentração de 50 mM a 150 mM. Preferivelmente, a histidina está presente na formulação farmacêutica aquosa na concentração de 60 mM a 130 mM. Com mais preferência, a histidina está presente na formulação farmacêutica aquosa na concentração de 60 mM a 125 mM.

[0026] O anticorpo está presente na formulação farmacêutica aquosa a uma concentração de 0,1 a 300 mg/ml; como, 0,1, 0,2, 0,3, 0,4, 0,5, 0,6, 0,7, 0,8, 0,9, 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 15, 20, 25, 30, 35, 40, 45, 50, 55, 60, 65, 70, 75, 80, 85, 90, 95, 100, 105, 110, 115, 120, 125, 130, 135, 140, 145, 150, 155, 160, 165, 170, 175, 180, 185, 190, 195, 200, 205, 210, 215, 220, 225, 230, 235, 240, 245, 250, 255, 260, 265, 270, 275, 280, 285, 290, 295, ou 300

9 / 22 mg/ml. Preferivelmente, o anticorpo está presente na formulação farmacêutica aquosa a uma concentração de 1 a 240 mg/ml. Mais preferivelmente, o anticorpo está presente na formulação farmacêutica aquosa a uma concentração de 100 a 220 mg/ml. De acordo com alguns exemplos de trabalho, o anticorpo está presente na formulação farmacêutica aquosa a uma concentração de 180 mg/ml.

[0027] A formulação farmacêutica aquosa da presente descrição tem um pH de 5,0 a 6,5, isto é, o valor do pH da presente formulação farmacêutica pode ser 5,0, 5,1, 5,2, 5,3, 5,4, 5,5, 5,6, 5,7, 5,8, 5,9, 6, 6,1, 6,2, 6,3, 6,4, ou 6,5. De acordo com uma modalidade, a presente formulação farmacêutica tem um pH de 5,0. De acordo com uma outra modalidade, a presente formulação farmacêutica tem um pH de 5,4. De acordo adicionalmente com outra modalidade, a presente formulação farmacêutica tem um pH de 5,7. De acordo adicionalmente com outra modalidade, a presente formulação farmacêutica tem um pH de 6,0.

[0028] Basicamente, a formulação farmacêutica aquosa da presente descrição é formulada em uma forma líquida para infecção (injeção) intravenosa, cutânea ou subcutânea, por exemplo, na forma de uma solução aquosa apirogênica, parenteralmente aceitável. A preparação parenteral pode ser acondicionada em ampolas, seringas ou frascos de dose múltipla feitos de vidro ou plástico. Dependendo dos objetivos desejados, o anticorpo da presente formulação farmacêutica aquosa pode ser formulado com um tensoativo, estabilizante, tampão ou outros aditivos (por exemplo, conservante ou antioxidante) conhecidos pelos versados na técnica.

[0029] Em uma modalidade opcional, a formulação farmacêutica aquosa da presente descrição compreende ainda um tensoativo. A concentração do tensoativo na presente formulação farmacêutica varia preferivelmente entre 0,01 a 0,05% (p/v), por exemplo, 0,01%, 0,02%, 0,03%, 0,04% ou 0,05%. Os tensoativos não limitantes adequados para serem

10 / 22 empregados na presente formulação farmacêutica incluem, sem limitação, polissorbato (por exemplo, polissorbato 20, polissorbato 40, polissorbato 60 e polissorbato 80), polioxietileno, óleo de rícino hidrogenado, polioxietilenoglicol óleo de rícino hidrogenado, polioxietilenoglicol óleo de rícino hidrogenado, estearato de polioxietileno, diestearato de polioxietileno, oleato de polioxietileno, oleato de polioxietileno, dioleato de polioxietileno, álcool oleila de polioxietileno, álcool estearila de polioxietileno, álcool cetearila de polioxietileno, copolímeros de polioxietileno-polioxipropileno, co-polímeros de polioxietileno-polioxipropileno, co-polímeros em bloco e uma combinação dos mesmos. De acordo com um exemplo específico, o tensoativo é polissorbato (por exemplo, polissorbato 80) que está presente na presente formulação farmacêutica a uma concentração de 0,03% (p/v).

[0030] De acordo com uma modalidade alternativa da presente descrição, além da histidina, a formulação farmacêutica aquosa da presente descrição compreende ainda um aminoácido selecionado do grupo que consiste em lisina (Lys, L), aspartato (Asp, D), prolina (Pro, P), fenilalanina (Phe, F), alanina (Ala, A), treonina (Thr, T), leucina (Leu, L), asparagina (Asn, N), glutamato (Glu, E), glutamina ( Gln, Q), serina (Ser, S), triptofano (Trp, W), arginina (Arg, R), metionina (Met, M), histidina (His, H) e valina (Val, V). De acordo com as modalidades preferidas da presente descrição, o dito aminoácido está presente na formulação farmacêutica aquosa a uma concentração de 1 mM a 150 mM, por exemplo, 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 15, 20, 25, 30, 35, 40, 45, 50, 55, 60, 65, 70, 75, 80, 85, 90, 95, 100, 105, 110, 115, 120, 125, 130, 135, 140, 145 ou 150 mM. Em um exemplo específico, a formulação farmacêutica aquosa compreende 70 mM de lisina, treonina, serina, prolina, valina ou alanina.

[0031] Adicional ou alternativamente, a formulação farmacêutica aquosa da presente descrição pode compreender ainda um estabilizante, por exemplo, glicose, galactose, xilitol, sorbitol, manitol, sacarose, trealose e etc.,

11 / 22 que está presente na formulação farmacêutica aquosa a uma concentração de 1 a 10% (p/v), por exemplo, 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9 ou 10%. De acordo com um exemplo da presente descrição, a formulação farmacêutica aquosa compreende 3% de sacarose.

[0032] De acordo com as modalidades da presente descrição, o anticorpo é formulado em um tampão, que pode ser um tampão de acetato, tampão de succinato, tampão de citrato, tampão de histidina, tampão de fosfato, tampão de tris(hidroximetil)aminometano (Tris) ou uma combinação dos mesmos. A concentração do tampão na presente formulação farmacêutica varia preferivelmente entre 5 a 250 mM; ou seja, a concentração do tampão pode ser 5, 6, 7, 8, 9, 10, 15, 20, 25, 30, 35, 40, 45, 50, 55, 60, 65, 70, 75, 80, 85, 90, 95, 100, 105, 110, 115, 120, 125, 130, 135, 140, 145, 150, 155, 160, 165, 170, 175, 180, 185, 190, 195, 200, 205, 210, 215, 220, 225, 230, 235, 240, 245 ou 250 mM. De acordo com uma modalidade da presente descrição, o tampão é o tampão de histidina. De acordo com outra modalidade da presente descrição, o tampão é o tampão de acetato.

[0033] De acordo com certas modalidades da presente descrição, após armazenamento a 25°C por 4 ou 8 semanas, a pureza do anticorpo na presente formulação farmacêutica é superior a 98%, ou seja, mais de 98% da forma monomérica do anticorpo é retido. De acordo com modalidades alternativas da presente descrição, após armazenamento a 40°C por 4 semanas, a pureza do anticorpo na presente formulação farmacêutica é superior a 95%, ou seja, mais de 95% da forma monomérica do anticorpo é retido. De acordo com algumas modalidades da presente descrição, após armazenamento a 40°C por 8 semanas, a pureza do anticorpo na presente formulação farmacêutica é superior a 92%, ou seja, mais de 92% da forma monomérica do anticorpo é retido.

[0034] De acordo com certas modalidades da presente descrição, o anticorpo da formulação farmacêutica aquosa da presente invenção é

12 / 22 distinguido por ter menos de 5% de formação de agregado conforme determinado por cromatografia de exclusão por tamanho-cromatografia líquida de alta performance (SEC-HPLC) após 8 semanas de armazenamento a 40°C. De acordo com modalidades alternativas da presente descrição, o anticorpo da formulação farmacêutica aquosa da presente invenção é distinguido por ter menos de 3% de formação de agregado conforme determinado por SEC-HPLC após 8 semanas de armazenamento a 40°C. De acordo com algumas modalidades da presente descrição, o anticorpo da formulação farmacêutica aquosa da presente invenção é distinguido por ter menos de 2% de formação de agregado conforme determinado por SEC- HPLC após 4 semanas de armazenamento a 40°C.

[0035] Os seguintes Exemplos são providos para elucidar certos aspectos da presente invenção e para ajudar os versados na técnica na prática desta invenção. Estes Exemplos não devem, de forma alguma, ser considerados como limitando o escopo da invenção. Sem elaboração adicional, acredita-se que um versado na técnica pode, com base na descrição do presente documento, usar a presente invenção em toda a sua extensão. Todas as publicações citadas neste documento são incorporadas a título de referência em sua totalidade.

EXEMPLO Materiais e Métodos Proteína Tocilizumabe IgG

[0036] O anticorpo anti-IL6R, proteína Tocilizumabe IgG, usado nas formulações foi expresso em células CHO. As células CHO cultivadas em um biorreator de 2.000 litros, e o processo em batelada alimentada foi conduzido. A proteína Tocilizumabe IgG gerada pelo processo acima foi purificada por uma série padrão de etapas de cromatografia conhecidas na técnica, incluindo cromatografia por afinidade, cromatografia de troca iônica e cromatografia de modo misto. A filtração de fluxo foi realizada adicionalmente para concentrar

13 / 22 a proteína purificada acima usando membrana de ultrafiltração, uma diafiltração foi conduzida para trocar o tampão selecionado.

[0037] As cadeias pesadas e leves da proteína Tocilizumabe assim produzida compreendiam respectivamente as sequências de aminoácidos de SEQ ID NOs: 1 e 2. Teste de Estresse Térmico

[0038] O estresse térmico, conhecido como teste de aceleração de calor, foi aplicado nas formulações de teste. Em resumo, a formulação contendo 180 mg/ml de anticorpo anti-IL6R (proteína Tocilizumabe IgG) e o componente especificado (por exemplo, histidina) foram submetidos a 2-8°C, 25°C ou 40°C de incubação por 0, 2, 4 ou 8 semanas. A pureza de cada formulação de teste foi analisada por cromatografia por exclusão de tamanho- cromatografia líquida de alta performance (SEC-HPLC). Teste de Estresse de Congelamento e Descongelamento

[0039] A tensão de congelamento-descongelamento foi aplicado nas formulações de teste. O processo foi realizado pelo congelamento da formulação contendo 180 mg/ml de anticorpo anti-IL6R (proteína Tocilizumabe IgG) e o componente especificado (por exemplo, histidina) a - 80°C por pelo menos 8 horas e, subsequentemente, descongelamento a temperatura ambiente. O ciclo de congelamento e descongelamento foi repetido 5 ou 10 vezes consecutivamente. Em seguida, a pureza de cada formulação de teste foi analisada por SEC-HPLC. SEC-HPLC

[0040] A SEC-HPLC foi empregada para monitorar a agregação e fragmentação da proteína e determinar a pureza da proteína Tocilizumabe. Cada amostra foi diluída com tampão de formulação para uma concentração final de 10 mg/ml e submetida a análise por HPLC. Os parâmetros de HPLC experimentais foram resumidos na Tabela 1. Tabela 1 Parâmetros para análise de HPLC

14 / 22 Fase móvel Tampão de fosfato no pH de cerca de 7,0 Tampão de lavagem ddH2O Tampão de armazenamento 10% de Metanol Coluna TSKGEL® G3000 SWXL Coluna de Guarda cartuchos SECURITYGUARDTM Temperatura da coluna Ambiente Vazão ≦ 1 ml/min Tempo de execução ≦ 1 hora Comprimento de onda do detector 280 nm cerca de 200 µg do anticorpo Anti-IL6R Quantidade da amostra injetada (Tocilizumabe) Perfil de gradiente Isocrático

[0041] O pico principal mostrado no perfil SEC representou o monômero da proteína Tocilizumabe, o pré-pico representou a formação de agregado de alto peso molecular (HMW) da proteína Tocilizumabe que tem risco de induzir a resposta imune após ser introduzida no corpo humano, e o pós-pico representou o fragmento degradado de baixo peso molecular (LMW) da proteína Tocilizumabe. Em geral, o pico principal foi proporcional à pureza e estabilidade da formulação. Exemplo 1 Efeito dos aminoácidos na estabilidade do Tocilizumabe

[0042] Para avaliar a influência dos aminoácidos na estabilização da proteína IgG, o anticorpo anti-receptor IL6, Tocilizumabe, foi dissolvido em água a uma concentração de cerca de 180 mg/ml e um valor de pH de 5 com a adição de 40 mM de aspartato (Asp), prolina (Pro), fenilalanina (Phe), alanina (Ala), treonina (Thr), leucina (Leu), asparaginas (Asn), glutamato (Glu), glutamina (Gln), serina (Ser), triptofano (Trp), arginina (Arg), histidina (His) ou valina (Val). As amostras preparadas foram armazenadas a 40°C ou 25°C por 4 semanas, seguido pela análise de SEC-HPLC. Os resultados foram resumidos respectivamente nas Tabelas 2 e 3. Tabela 2 Análise de SEC-HPLC de formulações contendo aminoácidos adicionais após armazenamento a 40°C por 4 semanas Aumenta o HMW Aumenta o Pico principal LMW Aumenta o Aminoácido Pico Principal (%) HMW (%) (%) (%) LMW (%) (%) Asp 2,58 1,33 93,47 -5,17 3,95 3,84 Pro 2,19 0,95 94,05 -4,61 3,77 3,67 Phe 2,45 1,25 93,29 -5,41 4,26 4,16 Ala 2,30 1,03 94,22 -4,41 3,48 3,37 Thr 2,41 1,17 93,80 -4,85 3,80 3,70 Leu 2,68 1,44 93,21 -5,44 4,11 4,01

15 / 22 Asn 2,40 1,20 93,39 -5,31 4,21 4,11 Glu 2,61 1,43 93,09 -5,63 4,30 4,19 Gln 2,54 1,37 93,51 -5,22 3,94 3,84 Ser 2,34 1,18 93,82 -4,92 3,85 3,75 Trp 3,15 2,00 92,40 -6,36 4,45 4,35 Arg 2,21 1,03 93,90 -4,82 3,89 3,79 His 1,96 0,78 94,00 -4,72 4,05 3,94 Val 2,32 1,10 94,06 -4,62 3,62 3,51 Tabela 3 Análise de SEC-HPLC de formulações contendo aminoácidos adicionais após armazenamento a 25°C por 4 semanas Aumenta o HMW Aumenta o Pico principal LMW Aumenta o Aminoácido Pico Principal (%) HMW (%) (%) (%) LMW (%) (%) Asp 1,55 0,30 98,18 -0,46 0,26 0,15 Pro 1,37 0,13 98,38 -0,28 0,26 0,16 Phe 1,35 0,15 98,40 -0,30 0,25 0,15 Ala 1,46 0,19 98,30 -0,33 0,24 0,13 Thr 1,37 0,13 98,39 -0,26 0,24 0,14 Leu 1,45 0,21 98,30 -0,35 0,25 0,15 Asn 1,34 0,14 98,40 -0,30 0,26 0,16 Glu 1,43 0,25 98,30 -0,42 0,28 0,17 Gln 1,40 0,23 98,34 -0,39 0,26 0,16 Ser 1,34 0,18 98,40 -0,34 0,26 0,16 Trp 1,14 -0,01 98,60 -0,16 0,26 0,16 Arg 1,32 0,14 98,42 -0,30 0,26 0,16 His 1,12 -0,06 98,62 -0,10 0,26 0,15 Val 1,41 0,19 98,34 -0,34 0,25 0,14

[0043] Os dados da Tabela 2 indicaram que após 4 semanas de armazenamento a 40°C, a formulação contendo prolina, alanina, treonina, serina, arginina, histidina ou valina teve menos redução de monômero (% de pico principal) em comparação com as formulações contendo outros aminoácidos. A formulação contendo histidina, arginina, prolina, alanina ou valina exibiu menos agregados de HMW (% HMW; His: 1,96%, Arg: 2,21%, Pro: 2,19%, Ala: 2,30%, Val: 2,32%) e menos aumento de agregação (aumento no HMW %; His: 0,78%, Arg: 1,03%, Pro: 0,95%, Ala: 1,03%, Val: 1,10%) do que as formulações contendo outros aminoácidos (Tabela 2). A formulação que contém triptofano teve os agregados de maior HMW (HMW % de Trp: 3,15%) e aumento de agregação (aumento no HMW % de Trp: 2,0%) (Tabela 2), e foi especulado que o triptofano não melhoraria a estabilidade do anticorpo anti-IL6R na formulação quando submetido a estresse térmico.

[0044] No entanto, os dados da Tabela 3 mostraram que não houve

16 / 22 diferenças significativas no aumento de agregados e fragmentos (aumento no HMW% e aumento no LMW%) entre as formulações de teste após armazenamento a 25°C por 4 semanas. Supostamente, as amostras armazenadas em temperatura ambiente podem levar mais tempo para exibir a tendência de estabilidade observada na condição de armazenamento de 40°C.

[0045] Em conclusão, em comparação com outros aminoácidos, a formulação de anticorpo contendo 40 mM de histidina tem a menor perda de pureza (perda de monômero), agregados de HMW e aumento de agregação. Os dados sugeriram que o desempenho da histidina para estabilizar o anticorpo anti-IL6R na formulação foi o melhor entre os diferentes aminoácidos e foi ainda melhor do que a arginina, que é um dos estabilizantes usados na formulação comercial contendo Tocilizumabe. Exemplo 2 Efeito da concentração de histidina na estabilidade do Tocilizumabe

[0046] Para avaliar a influência da concentração de histidina na estabilidade da proteína IgG, 180 mg/ml de Tocilizumabe foi formulado em diferentes concentrações (incluindo 10, 20, 40, 60, 80, 100, 125, 150 e 200 mM) de tampão de histidina em um valor de pH de 6,0 com a adição de 0,03% (p/v) de polissorbato 80. As formulações assim preparadas foram respectivamente submetidas a estresse de congelamento-descongelamento (0, 5 ou 10 ciclos) e estresse térmico (2-8°C, 25°C ou 40°C por 0, 2 ou 4 semanas) seguido pela análise de SEC-HPLC para determinar a pureza de Tocilizumabe. Os dados foram representados respectivamente nas Figuras 1 e

2.

2.1 Análise de estresse de congelamento-descongelamento

[0047] Como mostrado nos painéis (a) e (b) da Figura 1, o monômero de Tocilizumabe (% de pureza) aumentou com o aumento da concentração de histidina, e as espécies de alto peso molecular (HMW%) diminuíram com o aumento da concentração de histidina não importa se antes ou depois do

17 / 22 tratamento com 5 ciclos ou 10 ciclos de estresse de congelamento- descongelamento. Além disso, não houve diferenças significativas com as espécies de baixo peso molecular entre as amostras com diferentes concentrações de histidina após o tratamento com 5 ciclos ou 10 ciclos de estresse de congelamento-descongelamento (Painel (c) da Figura 1).

[0048] Ao analisar a quantidade de HMW e LMW formados em cada formulação de teste, foi observada uma correlação positiva entre a pureza e a concentração do tampão de histidina, indicando o efeito protetor da histidina na pureza do Tocilizumabe. Além disso, o tampão de histidina inibiu a formação de espécies de alto peso molecular, em vez de espécies de baixo peso molecular, em 5 ou 10 ciclos de estresse de congelamento- descongelamento (Painéis (b) e (c) da Figura 1). Estes resultados demonstraram claramente o efeito da concentração de histidina nas variantes do tamanho da proteína formadas sob estresse de congelamento- descongelamento.

2.2 Análise de estresse térmico

[0049] Como mostrado no Painel (a) da Figura 2, com o aumento da concentração de tampão de histidina, a formação de espécies de alto peso molecular (ou agregados) (HMW%) foi diminuída e a pureza foi aumentada gradualmente, e o armazenamento a 40°C induziu significativamente mais geração de espécies de alto peso molecular do que o armazenamento a 2-8°C e 25°C.

[0050] Também foi verificado que quando as amostras foram armazenadas a 40°C durante 4 semanas, a formulação contendo 125 mM de tampão de histidina teve o menor número de espécies de alto peso molecular e maior pureza de proteína. No entanto, como a concentração de histidina até 150 mM e 200 mM, as espécies (ou fragmentos) de baixo peso molecular (LMW%) aumentaram e a pureza da proteína diminuiu (Painéis (b) e (c) da Figura 2).

18 / 22

[0051] Os resultados dos Exemplos 2.1 e 2.2 demonstraram que o aumento da concentração de histidina contida na formulação pode inibir a formação de agregados e melhorar a estabilidade do Tocilizumabe. No entanto, quando as formulações foram armazenadas em alta temperatura, a concentração de histidina maior que 150 mM pode induzir a geração de fragmentos. Exemplo 3 Efeito da histidina em combinação com outros aminoácidos na estabilidade de Tocilizumabe

[0052] Para avaliar o efeito da histidina em combinação com aminoácidos diferentes de arginina e metionina na estabilidade do anticorpo, 180 mg/ml de Tocilizumabe foi formulado em tampão de histidina de alta concentração (80 mM) a pH 6,0 com a adição de 0,03% de polissorbato 80 (p/v, servindo como um tensoativo), e outro aminoácido com a concentração de 70 mM selecionado de histidina, lisina, treonina, serina, prolina, valina e alanina foi adicionado à formulação. As formulações de teste foram submetidas ao teste de aceleração de calor (armazenadas a 25°C ou 40°C por 8 semanas) e, em seguida, analisadas por SEC-HPLC. Os dados foram resumidos respectivamente nas Tabelas 4 e 5. Tabela 4 Análise de SEC-HPLC de formulações contendo a concentração especificada de aminoácido após armazenamento a 25°C por 8 semanas Aumenta o Soma de Aumenta o Pico principal Soma de Aumenta o Amostra Pico Principal HMW (%) HMW (%) (%) LMW (%) LMW (%) (%) 80H 1,37 0,60 98,30 -0,81 0,33 0,20 80H-70His 1,22 0,48 98,46 -0,68 0,33 0,20 (150H) 80H-70Lys 1,29 0,54 98,39 -0,73 0,32 0,19 80H-70Thr 1,34 0,59 98,33 -0,79 0,33 0,21 80H-70Ser 1,33 0,58 98,34 -0,79 0,33 0,21 80H-70Pro 1,30 0,54 98,37 -0,75 0,33 0,21 80H-70Val 1,35 0,60 98,31 -0,82 0,34 0,22 80H-70Ala 1,34 0,59 98,33 -0,80 0,33 0,21 80H: A formulação que contém 80 mM de histidina. 80H-70His: A formulação que contém 150 mM de histidina. 80H-70Lys: A formulação que contém 80 mM de histidina e 70 mM de lisina. 80H-70Thr: A formulação que contém 80 mM de histidina e 70 mM de treonina. 80H-70Ser: A formulação que contém 80 mM de histidina e 70 mM de serina. 80H-70Pro: A formulação que contém 80 mM de histidina e 70 mM de prolina. 80H-70Val: A formulação que contém 80 mM de histidina e 70 mM de valina.

19 / 22 80H-70Ala: A formulação que contém 80 mM de histidina e 70 mM de alanina.

Tabela 5 Análise de SEC-HPLC de formulações contendo a concentração especificada de aminoácido após armazenamento a 40°C por 8 semanas Aumenta o Soma de Aumenta o Pico principal Soma de Aumenta o Amostra Pico Principal HMW (%) HMW (%) (%) LMW (%) LMW (%) (%) 80H 2,09 1,32 92,8 -6,31 5,12 4,99 80H-70His 1,91 1,17 92,91 -6,23 5,18 5,05 (150H) 80H-70Lys 2,00 1,25 92,89 -6,23 5,11 4,98 80H-70Thr 2,04 1,29 92,77 -6,35 5,19 5,07 80H70Ser 2,13 1,38 92,7 -6,43 5,17 5,05 80H-70Pro 1,95 1,19 92,78 -6,34 5,27 5,15 80H-70Val 2,05 1,30 92,81 -6,32 5,16 5,04 80H-70Ala 2,07 1,32 92,76 -6,37 5,18 5,06 80H: A formulação que contém 80 mM de histidina. 80H-70His: A formulação que contém 150 mM de histidina. 80H-70Lys: A formulação que contém 80 mM de histidina e 70 mM de lisina. 80H-70Thr: A formulação que contém 80 mM de histidina e 70 mM de treonina. 80H-70Ser: A formulação que contém 80 mM de histidina e 70 mM de serina. 80H-70Pro: A formulação que contém 80 mM de histidina e 70 mM de prolina. 80H-70Val: A formulação que contém 80 mM de histidina e 70 mM de valina. 80H-70Ala: A formulação que contém 80 mM de histidina e 70 mM de alanina.

[0053] Os resultados das Tabelas 4 e 5 indicaram que não houve diferenças significativas no aumento dos fragmentos (aumento em LMW%) entre as formulações de teste e as formulações compreendendo tampão de histidina 80 mM sozinho e tampão de histidina 80 mM com a adição de 70 mM treonina, serina 70 mM, valina 70 mM ou alanina 70 mM tiveram perda de pureza semelhante (ou seja, a porcentagem de aumento do Pico Principal (%)) e geração de agregados (aumenta HMW (%)) após a aceleração por calor. Além disso, a formulação contendo 70 mM de lisina ou prolina em de 80 mM de tampão de histidina exibiu menor perda de pureza e aumento em HMW (%), e a formulação de teste contendo 150 mM de histidina (80 mM de tampão de histidina com 70 mM de adição de histidina) teve a menor perda de pureza e o mínimo aumento de HMW (%) após estar sujeito a 8 semanas de armazenamento a 25°C (aumento do pico principal (%): - 0,68%; aumento de HMW (%): 0,48%) e 40°C (aumento do pico principal (%): - 6,23%; aumento de HMW (%): 1,17%).

[0054] Conforme a tendência observada no Exemplo 2.2, quanto maior a concentração de histidina adicionada na formulação líquida, menor a

20 / 22 perda de monômero e o aumento de agregado do anti-IL6R Ab. É determinado que o anticorpo anti-IL6R pode ser armazenado de forma estável na formulação que compreende histidina com uma concentração não inferior a 30 mM sem adicionar outro estabilizante ou aminoácidos, como arginina ou metionina. Exemplo 4 Efeito da histidina e lisina na estabilidade do Tocilizumabe no tampão de acetato

[0055] Para esclarecer ainda mais o efeito estabilizante da histidina na estabilidade da proteína em condição de baixo pH, 180 mg/ml de Tocilizumabe foi dissolvido no tampão de acetato no pH 5,4 com ou sem a adição de aminoácido selecionado a partir de 1,5% de histidina HCl (78 mM de histidina, ID da amostra: A1.5H3S), 2,5% histidina HCl (130 mM de histidina, ID da amostra: A2.5H), 1,5% lisina HCl (82,1 mM de lisina, ID da amostra: A1.5L3S), ou 2,5% lisina HCl (136,9 mM de lisina, ID da amostra: A2.5L) na presença do excipiente de 0,03% (p/v) de polissorbato 80, em que as formulações contendo 1,5% de aminoácido (ou seja, A1.5L3S e A1.5H3S) foram ainda adicionadas com 3% de sacarose como o estabilizante. Formulações sem adição de aminoácidos (ID da amostra: A e A3S) serviram como grupo de controle no experimento. Estas formulações preparadas foram submetidas a 8 semanas de armazenamento a 25°C ou 40°C e depois foram analisadas por SEC-HPLC. Os resultados foram resumidos respectivamente nas Tabelas 6 e 7. Tabela 6 Análise de SEC-HPLC de formulações contendo a concentração especificada de aminoácido após armazenamento a 25°C por 8 semanas Aumenta o Aumenta o Pico principal Aumenta o HMW% Pico Principal LMW % HMW (%) % LMW % % A 2,66 0,92 97,06 -1,09 0,28 0,18 A3S 2,29 0,96 97,46 -1,12 0,26 0,17 A25L 1,61 0,67 98,13 -0,83 0,27 0,18 A15L3S 1,67 0,70 98,07 -0,87 0,26 0,17 A25H 1,07 0,33 98,64 -0,53 0,29 0,20 A15H3S 1,16 0,38 98,56 -0,57 0,27 0,18 A: A formulação sem qualquer aminoácido e sacarose. A3S: A formulação que contém sacarose a 3%.

21 / 22 A2.5L: A formulação que contém 2,5% (cerca de 136,9 mM) de lisina HCl e 0% de sacarose. A1.5L3S: A formulação que contém 1,5% (cerca de 82,1 mM) de lisina HCl e 3% de sacarose. A2.5H: A formulação que contém 2,5% (cerca de 130 mM) de histidina HCl e 0% de sacarose. A1.5H3S: A formulação que contém 1,5% (cerca de 78 mM) de histidina HCl e 3% de sacarose.

Tabela 7 Análise de SEC-HPLC de formulações contendo a concentração especificada de aminoácido após armazenamento a 40°C por 8 semanas Aumenta o Aumenta o Pico principal Aumenta o HMW% Pico Principal LMW % HMW (%) % LMW % % A 3,66 1,92 92,04 -6,11 4,30 4,20 A3S 3,32 1,99 92,21 -6,37 4,47 4,38 A25L 2,59 1,65 92,76 -6,20 4,64 4,55 A15L3S 2,52 1,55 93,34 -5,60 4,15 4,06 A25H 1,76 1,02 93,05 -6,12 5,19 5,10 A15H3S 1,85 1,07 93,45 -5,68 4,69 4,60 A: A formulação sem qualquer aminoácido e sacarose. A3S: A formulação que contém sacarose a 3%. A2.5L: A formulação que contém 2,5% de lisina HCl (igual a 136,9 mM de lisina) e 0% de sacarose. A1.5L3S: A formulação que contém 1,5% de lisina HCl (igual a 82,1 mM de lisina) e 3% de sacarose. A2.5H: A formulação que contém 2,5% de histidina HCl (igual a 130 mM de histidina) e 0% de sacarose. A1.5H3S: A formulação que contém 1,5% de histidina HCl (igual a 78 mM de histidina) e 3% de sacarose.

[0056] Os dados das Tabelas 6 e 7 indicaram que as formulações de teste contendo 1,5% e 2,5% de histidina HCl (ou seja, A1.5H3S e A2.5H) tiveram o menor aumento de agregados de alto peso molecular (aumento de HMW%) e perda de monômero (aumento do pico principal %) após o armazenamento por 8 semanas a 25°C, e também teve o menor aumento de agregados de alto peso molecular (aumento de HMW%) após o armazenamento por 8 semanas a 40°C em comparação com outras amostras. Além disso, as formulações contendo 2,5% de histidina HCl (isto é, A2.5H; igual a 130 mM de histidina) tiveram o menor aumento de agregados de alto peso molecular (aumento de HMW%) entre todas as formulações de teste. No entanto, os resultados na Tabela 7 também indicaram que as formulações de teste contendo 2,5% de histidina HCl (ou seja, A2.5H) tiveram maior aumento de fragmentos de baixo peso molecular (aumento de LMW%) do que outras contendo lisina HCl ou sem a adição de aminoácido após ser submetido a um armazenamento de 8 semanas a 40°C. Isso sugeriu que a alta concentração de histidina no tampão de acetato em baixo nível de pH pode induzir a geração de fragmentos do anticorpo anti-IL6R, Tocilizumabe.

[0057] Diante do exposto, é descrito que a alta concentração de

22 / 22 histidina em tampão de acetato com baixo nível de pH pode proteger o anticorpo anti-IL6R contra a agregação de proteína causada pelo estresse térmico, mas induzir o aumento de fragmentos enquanto isso.

[0058] Será entendido que a descrição acima das modalidades é dada a título de exemplo apenas e que várias modificações podem ser feitas por aqueles versados na técnica. A especificação, exemplos e dados acima fornecem uma descrição completa da estrutura e uso de modalidades exemplificativas da invenção. Embora várias modalidades da invenção tenham sido descritas acima com um certo grau de particularidade, ou com referência a uma ou mais modalidades individuais, aqueles versados na técnica podem fazer inúmeras alterações nas modalidades descritas sem se afastar do espírito ou escopo desta invenção.

Claims

REIVINDICAÇÕES

1. Formulação farmacêutica aquosa, caracterizada pelo fato de que compreende, um anticorpo que se liga ao receptor de interleucina (IL)-6, e histidina que estabiliza o anticorpo; em que, a histidina está presente na formulação farmacêutica aquosa na concentração de 50 mM a 200 mM.

2. Formulação farmacêutica aquosa de acordo com a reivindicação 1, caracterizada pelo fato de que a histidina está presente na formulação farmacêutica aquosa na concentração de 50 mM a 150 mM.

3. Formulação farmacêutica aquosa de acordo com a reivindicação 2, caracterizada pelo fato de que a histidina está presente na formulação farmacêutica aquosa na concentração de 60 mM a 125 mM.

4. Formulação farmacêutica aquosa de acordo com a reivindicação 1, caracterizada pelo fato de que o anticorpo é Tocilizumabe.

5. Formulação farmacêutica aquosa de acordo com a reivindicação 4, caracterizada pelo fato de que o Tocilizumabe está presente na formulação farmacêutica aquosa a uma concentração de 0,1 a 300 mg/ml.

6. Formulação farmacêutica aquosa de acordo com a reivindicação 5, caracterizada pelo fato de que o Tocilizumabe está presente na formulação farmacêutica aquosa na concentração de 180 mg/ml.

7. Formulação farmacêutica aquosa de acordo com a reivindicação 1, caracterizada pelo fato de que compreende adicionalmente um tensoativo que está presente na formulação farmacêutica aquosa a uma concentração de 0,01 a 0,05% (p/v).

8. Formulação farmacêutica aquosa de acordo com a reivindicação 7, caracterizada pelo fato de que o tensoativo é polissorbato, e está presente na formulação farmacêutica aquosa a uma concentração de 0,03% (p/v).

9. Formulação farmacêutica aquosa de acordo com a reivindicação 1, caracterizada pelo fato de que compreende adicionalmente um aminoácido que está presente na formulação farmacêutica aquosa a uma concentração de 1 mM a 150 mM, em que o aminoácido é selecionado a partir do grupo que consiste em lisina, aspartato, prolina, fenilalanina, alanina, treonina, leucina, asparagina, glutamato, glutamina, serina, triptofano, arginina, metionina e valina.

10. Formulação farmacêutica aquosa de acordo com a reivindicação 9, caracterizada pelo fato de que a formulação farmacêutica aquosa compreende 70 mM de lisina, treonina, serina, prolina, valina ou alanina.

11. Formulação farmacêutica aquosa de acordo com a reivindicação 1, caracterizada pelo fato de que a formulação farmacêutica aquosa tem um pH de 5,0 a 6,5.