BR112019013673A2

BR112019013673A2 - composição farmacêutica aquosa de anticorpo anti-tnfa monoclonal recombinante

Info

Publication number: BR112019013673A2
Application number: BR112019013673A
Authority: BR
Inventors: Ekaterina Aleksandrovna LOMKOVA; Aleksandr Olegovich IAKOVLEV; Victoriya Olegovna Shitikova; Anastasiya Mikhajlovna RYAKHOVSKAYA; Dmitry Valentinovich MOROZOV
Original assignee: Joint Stock Company Biocad
Priority date: 2016-12-30
Filing date: 2017-12-29
Publication date: 2020-01-28
Also published as: JP2020506955A; NI201900072A; MX2019007911A; JOP20190162A1; EP3563867A1; WO2018124948A8; CR20190316A; EP3563867A4; PE20191550A1; KR20190104043A; ECSP19048656A; AU2017384942A1; ZA201904305B; PH12019501530A1; CL2019001818A1; WO2018124948A1

Abstract

composição farmacêutica aquosa de anticorpo anti-tnfa monoclonal recombinante a invenção refere-se a composições farmacêuticas aquosas melhoradas de um anticorpo monoclonal recombinante ao tnfa, e a um método para produzir a mesma. a presente invenção diz igualmente respeito à utilização de composições farmacêuticas aquosas melhoradas de um anticorpo monoclonal recombinante ao tnfa para tratar doenças mediadas pelo tnfa. a invenção proposta permite prevenir a instabilidade físico-química expressa na formação de agregados e fragmentos de proteínas ou na modificação de proteínas em uma solução, além de prevenir a instabilidade durante o congelamento/degelo, agitação e mistura.

Description

COMPOSIÇÃO FARMACÊUTICA AQUOSA DE ANTICORPO ANTI-TNFA MONOCLONAL RECOMBINANTE.

CAMPO DA INVENÇÃO [1] A presente refere-se à farmacologia médica e se refere particularmente a uma composição farmacêutica aquosa de anticorpos humanos que ligam ou neutralizam especificamente TNFa, e seu uso.

ANTECEDENTES DA INVENÇÃO [2] Atualmente, O fator de necrose tumoral alfa (TNFa) é uma citocina mamífera de ocorrência natural produzida por vários tipos de células, incluindo monócitos e macrófagos, em resposta à endotoxina ou outros estímulos. TNFa é um importante mediador de reações inflamatórias, imunológicas e f isiopatológicas (Grell, M., et al. (1995) Célula, 83: 793802) .

[3] TNFa solúvel é formado pela divagem de uma proteína transmembrana precursora (Kriegler, et al. (1988) Célula 53:

45-53), e Polipeptídios secretados de 17 kilodaltons (kDa) agregado para formar complexos homotriméricos solúveis (Smith, et al. (1987), J. Biol. Química. 262: 6951-6954; Butler, et al. (1986), Nature 320:584; Old (1986), Science 230: 630).

Estes complexos ligam-se depois a receptores encontrados numa variedade de células. A ligação produz uma série de efeitos pró-inflamatórios, incluindo (i) a liberação de outras citocinas pró-inflamatórias como a interleucina (IL) -6, IL-8 e IL-1, (ii) liberação de metaloproteinases matriz, e (iii)

Petição 870190061378, de 01/07/2019, pág. 8/283

2/106 regulação positiva da expressão da molécula de adesão endotelial, ampliando ainda mais a cascata inflamatória e imune, atraindo leucócitos para tecidos extravasculares.

[4] Há muitos distúrbios associados ao aumento dos níveis de TNFa. Por exemplo, a expressão TNFa mostrou ser regulada em várias doenças humanas, incluindo doenças crônicas como artrite reumatoide (AR), distúrbios inflamatórios intestinais, incluindo a doença de Crohn e colite ulcerativa, sepse, insuficiência cardíaca congestiva, asma e esclerose múltipla. TNFa também é referido como uma citocina pró-inflamatória.

[5] Fisiologicamente, TNFa também está associado à proteção contra infecções particulares (Cerami. et al. (1988), Immunol. Today 9:28). TNFa é liberado por macrófagos que foram ativados por lipopolissacarídeos de bactérias Gram-negativas. Como tal, TNFa parece ser um mediador endógeno muito importante envolvido no desenvolvimento e na patogênese do choque endotóxico associado à sepse bacteriana.

[6] Adalimumabe (Humira®, AbbVie, Inc.) é um anticorpo monoclonal humano recombinante IgGl específico para TNF humano. Este anticorpo também é conhecido como D2E7. O Adalimumabe é constituído por 1,330 aminoácidos, descrito e patenteado em US 6090382 (WO9729131), pelo que a descrição do Adalimumabe é integralmente incorporada por referência. O Adalimumabe é tipicamente produzido pela tecnologia de DNA recombinante em um sistema de expressão celular de mamíferos, como, por exemplo, células hamster chinesas. O Adalimumabe

Petição 870190061378, de 01/07/2019, pág. 9/283

3/106 liga-se especificamente ao TNF e neutraliza as funções biológicas do TNF, bloqueando a sua interação com os receptores TNF p55 e p75 numa superfície celular.

[7] Múltiplas formulações de Adalimumabe são conhecidas na arte (ver, por exemplo, W02004016016286 e W02012065072).

[8] WO2004016016286 descreve uma composição liquida para a estabilização de anticorpos usados para tratar TNFa doenças mediadas por um anticorpo, como Adalimumabe, um sistema tampão, Polisorbato e agentes de isotonicidade em solução, por exemplo, manitol e cloreto de sódio. A composição utiliza um tampão citrato fosfato (Humira formulação 1) . A formulação acima tem uma série de desvantagens: 1) Estabilidade coloidal insuficiente do anticorpo em concentrações elevadas, 2) Estabilidade insuficiente em condições de stress térmico e 3) Agregação durante a armazenagem a longo prazo.

[9] W0201202065072 descreve uma composição liquida para a estabilização de anticorpos utilizados para tratar doenças mediadas por TNFa que incluem um anticorpo, como Adalimumabe, bem como manitol, Polisorbato 80 (Humira formulação 2) . A formulação acima tem uma série de desvantagens: 1) instabilidade acentuada de congelamento e descongelamento, e 2) baixa temperatura de agregação.

[10] Assim, há a necessidade de fornecer um novo medicamento que inclua um anticorpo de ligação TNFa, como o Adalimumabe.

[11] A invenção diz respeito a composições aquosas estáveis, incluindo Adalimumabe, que permitem a sua armazenagem a longo

Petição 870190061378, de 01/07/2019, pág. 10/283

4/106 prazo e têm também uma boa tolerância ao congelamentodescongelamento e ao stress térmico.

[12] RESUMO DA INVENÇÃO [13] Num dos seus aspectos, a presente invenção diz respeito a uma composição farmacêutica aquosa para administração intravenosa, subcutânea ou intramuscular que inclui um anticorpo anti-TNFa monoclonal recombinante, um agente tampão à base de ions de acetato (ou sistema tampão), trealose ou prolina, ou uma combinação destas substâncias ou trealose e arginina, Polisorbato 20, Polisorbato 80 ou Poloxamer 188, ou uma combinação destes.

[14] Em algumas formas de realização da composição, o anticorpo monoclonal recombinante anti-TNFa é Adalimumabe.

[15] Em algumas formas de realização da composição,a concentração de anticorpos monoclonais é de 50 a 200 mg/mL.

[16] Em algumas formas de realização da composição,a concentração da solução tampão acetato é de 1 a 100 mM.

[17] Em algumas formas de realização, o pH da composição é de 4 a 7.

[18] Em algumas formas de realização da composição,a concentração de trealose é de 25 a 150 mg/mL.

[19] Em algumas formas de realização da composição,a concentração de prolina é de 5 a 40 mg/mL.

[20] Em algumas formas de realização da composição,a concentração de arginina é de 0,05 a 1,0 mg/mL.

[21] Em algumas formas de realização da composição,a

Petição 870190061378, de 01/07/2019, pág. 11/283

5/106 concentração de Polisorbato 20 é de 0,05 mg/mL a 10 mg/mL.

[22] Em algumas formas de realização da composição, a concentração de Polisorbato 80 é de 0,05 mg/mL a 10 mg/mL.

[23] Em algumas formas de realização da composição, a concentração de Poloxamer 188 é de 0,05 mg/mL a 10 mg/mL.

[24] Em algumas formas de realização da composição, o anticorpo monoclonal recombinante anti-TNFa é Adalimumabe.

[25] Em algumas formas de realização, a composição compreende de 50 a 150 mg/mL de Adalimumabe, 0,436 mg/mL de acetato de sódio tri-hidratado, 80 mg/mL de trealose dihidratada, ácido acético glacial até pH 5,5, 0,5 mg/mL de Polisorbato 80.

[26] Em algumas formas de realização, a composição compreende de 50 a 150 mg/mL de Adalimumabe, 0,436 mg/mL de acetato de sódio tri-hidratado, 80 mg/mL de trealose dihidratada, 0,1 mg/mL de cloridrato de arginina, ácido acético glacial até pH 5,5, 0,5 mg/mL de Polisorbato 80.

[27] Em algumas formas de realização, a composição compreende de 50 a 150 mg/mL de Adalimumabe, 0,436 mg/mL de acetato tri-hidratado de sódio, 27 mg/mL de prolina, ácido acético glacial até pH 5,5, 0,5 mg/mL de Polisorbato 80.

[28] Em algumas formas de realização, a composição compreende de 50 a 150 mg/mL de Adalimumabe, 0,436 mg/mL de acetato tri-hidratado de sódio, 40 mg/mL de trealose dihidratada, 13,5 mg/mL de prolina, ácido acético glacial até pH 5,5, 0,5 mg/mL de Polisorbato 80.

Petição 870190061378, de 01/07/2019, pág. 12/283

6/106 [29] Em algumas formas de realização, a composição compreende de 50 a 200 mg/mL do anticorpo monoclonal anti-TNFa recombinante, de 0,4 a 1.2 mg/mL de acetato de sódio trihidratado, de 25 a 150 mg/mL de trealose e/ou de 5 a 40 mg/mL de prolina ou de 25 a 150 mg/mL de trealose, e de 0,05 a 1,0 mg/mL de arginina, ácido acético glacial até pH 5,0 a 6,0, de 0,1 mg/mL a 1 mg/mL de Polisorbato 80.

[30] Em algumas formas de realização, a composição compreende de 50 a 200 mg/mL do anticorpo monoclonal anti-TNFa recombinante, de 0,4 a 1.2 mg/mL de acetato de sódio trihidratado, de 25 a 150 mg/mL de trealose e/ou de 5 a 40 mg/mL de prolina ou de 25 a 150 mg/mL de trealose, e de 0,05 a 1,0 mg/mL de arginina, ácido acético glacial até pH 5,5, de 0,1 mg/mL a 1 mg/mL de Polisorbato 20.

[31] Em algumas formas de realização da composição, o anticorpo monoclonal recombinante anti-TNFa é Adalimumabe.

[32] Em algumas formas de realização, a composição compreende de 50 a 150 mg/mL de Adalimumabe, 0,436 mg/mL de acetato de sódio tri-hidratado, 80 mg/mL de trealose dihidratada, ácido acético glacial até pH 5,5, 0,5 mg/mL de Polisorbato 20.

[33] Em algumas formas de realização, a composição compreende de 50 a 150 mg/mL de Adalimumabe, 0,436 mg/mL de acetato de sódio tri-hidratado, 80 mg/mL de trealose dihidratada, 0,1 mg/mL de cloridrato de arginina, ácido acético glacial até pH 5,5, 0,5 mg/mL de Polisorbato 20.

Petição 870190061378, de 01/07/2019, pág. 13/283

7/106 [34] Em algumas formas de realização, a composição compreende de 50 a 150 mg/mL de Adalimumabe, 0,436 mg/mL de acetato tri-hidratado de sódio, 27 mg/mL de prolina, ácido acético glacial até pH 5,5, 0,5 mg/mL de Polisorbato 20.

[35] Em algumas formas de realização, a composição compreende de 50 a 150 mg/mL de Adalimumabe, 0,436 mg/mL de acetato tri-hidratado de sódio, 40 mg/mL de trealose dihidratada, 13,5 mg/mL de prolina, ácido acético glacial até pH 5,5, 0,5 mg/mL de Polisorbato 20.

[36] Em algumas formas de realização, a composição compreende de 50 a 200 mg/mL do anticorpo monoclonal anti-TNFa recombinante, de 0,4 a 1.2 mg/mL de acetato de sódio trihidratado, de 25 a 150 mg/mL de trealose e/ou 5 a 40 mg/mL de prolina ou de 25 a 150 mg/mL de trealose, e de 0,05 a 1,0 mg/mL de arginina, ácido acético glacial até pH 5,0 a 6,0, de 0,1 mg/mL a 1 mg/mL de Poloxamer 188.

[37] Em algumas formas de realização da composição, o anticorpo monoclonal recombinante anti-TNFa é Adalimumabe.

[38] Em algumas formas de realização, a composição compreende de 50 a 150 mg/mL de Adalimumabe, 0,436 mg/mL de acetato de sódio tri-hidratado, 80 mg/mL de trealose dihidratada, ácido acético glacial até pH 5,5, 1 mg/mL de Poloxamer 188.

[39] Em algumas formas de realização, a composição compreende de 50 a 150 mg/mL de Adalimumabe, 0,436 mg/mL de acetato de sódio tri-hidratado, 80 mg/mL de trealose

Petição 870190061378, de 01/07/2019, pág. 14/283

8/106 dihidratada, 0,1 mg/mL de cloridrato de arginina, ácido acético glacial até pH 5,5, 1 mg/mL de Poloxamer 188.

[40] Em algumas formas de realização, a composição compreende de 50 a 150 mg/mL de Adalimumabe, 0,436 mg/mL de acetato tri-hidratado de sódio, 27 mg/mL de prolina, ácido acético glacial até pH 5,5, 1 mg/mL de Poloxamer 188.

[41] Em algumas formas de realização, a composição compreende de 50 a 150 mg/mL de Adalimumabe, 0,436 mg/mL de acetato tri-hidratado de sódio, 40 mg/mL de trealose dihidratada, 13,5 mg/mL de prolina, ácido acético glacial até pH 5,5, 1 mg/mL de Poloxamer 188.

[42] Em um aspecto, a presente invenção refere-se a um método de tratamento de doenças mediadas por TNFa que consiste em administrar uma quantidade efetiva das composições descritas acima.

[43] Em algumas formas de realização do método de tratamento, é selecionada uma doença mediada por TNFa de artrite reumatoide ativa (moderada a grave), artrite psoriásica ativa, espondilite anquilosante ativa, psoriase em placas crônica (moderada a grave), (moderada a grave) colite ulcerativa, espondiloartrose axial, hidradenite supurativa, artrite idiopática juvenil, doença de Crohn (moderada ou grave), uveite, artrite associada à entesite ativa.

[44] Em um aspecto, a presente invenção está relacionada ao uso das composições acima para o tratamento de doenças mediadas por TNFa

Petição 870190061378, de 01/07/2019, pág. 15/283

9/106 [45] Em algumas formas de realização de uso, uma doença é selecionada de artrite reumatoide ativa (moderada a grave), artrite psoriásica ativa, espondilite anquilosante ativa, psoriase crônica (moderada a grave) em placas, colite ulcerativa (moderada a grave), espondiloartrose axial, [46] hidradenite supurativa, artrite idiopática juvenil (moderada ou grave), doença de Crohn, uveíte, artrite associada a entesite ativa.

[47] Num dos seus aspectos, a presente invenção diz respeito a um método de obtenção das composições supra, o método que consiste na adição de agentes-tampão de acetato a uma fase aquosa, seguida, por qualquer ordem, da adição dos seguintes componentes: um osmólito e/ou um agente estabilizador selecionado do grupo da trealose, prolina ou uma combinação destes; um anticorpo monoclonal recombinante anti-TNFa; uma substância tensoativa selecionada do grupo do Polisorbato 20, Polisorbato 80, Poloxamer 188, ou uma combinação destes.

BREVE DESCRIÇÃO DOS DESENHOS [48] Fig. 1. Dependência da densidade óptica em soluções a 400 nm da concentração de PEG 6000 após preparação.

[49] Fig. 2. Dependência da densidade óptica em soluções a

400 nm da concentração de PEG 6000 após preparação.

[50] Fig. 3. Dependência da densidade óptica em soluções a 400 nm da concentração de PEG 6000 após preparação.

[51] Fig. 4. Ponto de agregação de Adalimumabe em solução tampão acetato, pH 5.0. Tag 74.0°C. Cinzento escuro: Média Z,

Petição 870190061378, de 01/07/2019, pág. 16/283

10/106 nm, cinza claro: intensidade, kcps.

[52] Fig. 5. Ponto de agregação do Adalimumabe na solução tampão citrato, pH 5,0.

[53] Tag 69.5°C. Cinzento escuro: Média Z, nm, cinza claro: intensidade, kcps.

[54] Fig. 6. Ponto de agregação de Adalimumabe em solução tampão de histidina, pH 5.0. Tag 69.5°C. Cinzento escuro:

Média Z, nm, cinza claro: intensidade, kcps.

[55] Fig. 7. Ponto de agregação de Adalimumabe em solução tampão fosfato, pH 5.0. Tag 71.0°C. Cinzento escuro: Média Z, nm, cinza claro: intensidade, kcps.

[56] Fig. 8. Ponto de agregação do Adalimumabe na formulação de Humira 1, pH 5,0. Tag 69.5°C. Cinzento escuro: Média Z, nm, cinza claro: intensidade, kcps.

DIVULGAÇÃO DA INVENÇÃO [57] Definições e métodos gerais [58] Os termos utilizados na presente especificação têm geralmente o seu significado comum na técnica, no contexto da invenção e no contexto específico em que cada termo é utilizado. Abaixo, ou em outro lugar aqui, certos termos usados para descrever a invenção são definidos para fornecer ao profissional uma orientação adicional para descrever a invenção. Sinônimos para alguns termos são fornecidos. Uma descrição de um ou mais sinônimos não exclui a utilização de outros sinônimos. O uso de exemplos em qualquer parte desta especificação, incluindo exemplos de qualquer termo aqui

Petição 870190061378, de 01/07/2019, pág. 17/283

11/106 descrito, é apenas ilustrativo e não se destina a limitar o escopo e o significado da invenção ou de qualquer assunto exemplificado. A invenção não se limita a várias formas de realização dadas na presente especificação.

[59] Salvo definição em contrário, todos os termos técnicos e científicos utilizados no presente documento têm o mesmo significado que os comumente entendidos por um dos conhecimentos correntes da arte a que pertence esta invenção. Em caso de conflito, o presente documento, incluindo as definições, será controlado.

[60] O termo Adalimumabe é sinônimo do ingrediente farmacêutico ativo do Humira®, bem como da proteína considerada ou destinada como variante Biossimilar ou biomelhorada da mesma. Adalimumabe é um anticorpo monoclonal IgGl recombinante humano específico para TNF humano. Adalimumabe também é conhecido como D2E7. O Adalimumabe compreende duas cadeias leves, cada uma com uma massa molecular de aproximadamente 24 kDa e duas cadeias pesadas IgGl, cada uma com uma massa molecular de aproximadamente 4 9 kDa. Cada cadeia leve consiste em 214 resíduos de aminoácidos e cada cadeia pesada consiste em 451 resíduos de aminoácidos. Assim, o Adalimumabe consiste em 1330 aminoácidos. O termo Adalimumabe também se destina a incluir as chamadas variantes biossimilares ou biosmelhoradas da proteína Adalimumabe usadas no Humira® disponível comercialmente. Por exemplo, uma variante do Humira® comercial pode ser aceitável para o FDA

Petição 870190061378, de 01/07/2019, pág. 18/283

12/106 quando tem essencialmente o mesmo efeito farmacológico que o Humira® comercialmente disponível, embora possa apresentar certas propriedades físicas, como um perfil de glicosilação e um perfil de base ácida, que podem ser semelhantes, se não idênticas, ao Humira®.

[61] Para efeitos do presente pedido, o termo Adalimumabe também inclui o Adalimumabe com pequenas modificações na estrutura dos aminoácidos (incluindo supressões, adições e/ou substituições de aminoácidos) ou nas propriedades de glicosilação e no perfil de base ácida, que não afetam significativamente a função do polipeptídio. O termo Adalimumabe inclui todas as formas e formulações de Humira®, inclui, mas não limita as formulações concentradas, formulações injetáveis prontas para uso; formulações reconstituídas com água, álcool e/ou outros ingredientes, e outros.

[62] O termo humano TNFa, que também conhecido como hTNFa ou hTNF, ou TNFa, se refere a uma citocina humana que existe como uma forma secretada de 17 kDa e uma forma associada à membrana de 26 kDa, cuja forma biologicamente ativa é composta de um trímero de moléculas de 17 kDa não ligadas entre si. A estrutura de TNFa é descrita mais adiante, por exemplo, em Pennica, D., et al. (1984) Nature 312:724-729; Davis, J. M., et al. (1987) Biochemistry 2 6:1322-132 6; e Jones, E. Y., et al. (1989) Nature 338:225-228. O termo humano rhTNFa destinase a incluir o termo humano recombinante TNFa, que pode ser

Petição 870190061378, de 01/07/2019, pág. 19/283

13/106 preparado por métodos de expressão recombinante padrão ou comprado comercialmente (Sistemas de P&D, catálogo. No. 210TA, Minneapolis, Minn.).

[63] Como usado aqui, o termo anticorpo se refere a moléculas do tipo imunoglobulina compostas por quatro cadeias de polipeptidios, duas cadeias pesadas (H) e duas cadeias leves (L) interconectadas por ligações internas de dissulfeto. Cada cadeia pesada consiste de uma região variável de cadeia pesada (abreviada aqui como HCVR ou VH) e uma região constante de cadeia pesada. A região da constante de cadeia pesada consiste em três dominios, CHI, CH2 e CH3. Cada cadeia leve consiste de uma região variável de cadeia leve (abreviada aqui como LCVR ou VL) e uma região constante de cadeia leve. A região constante da cadeia de luz consiste em um dominio, CL. As regiões VH e VL podem ainda ser subdivididas em regiões de hipervariabilidade, denominadas regiões determinantes da complementaridade (CDRs), intercaladas com regiões mais conservadas, denominadas regiões-quadro (RFs). Cada VH e VL consiste de três CDRs e quatro FRs, dispostos de N-terminus a C-terminus na seguinte ordem: FR1, CDR1, FR2, CDR2, FR3, CDR3, FR4. Em uma forma de realização da invenção, a formulação compreende um anticorpo com sequências de CDR1, CDR2 e CDR3 semelhantes às descritas em U.S. Pat. N.°s 6090382; 6258562 e 8216583 .

[64] Um anticorpo ou uma porção de ligação de antigenos pode fazer parte de uma molécula de imunoadesão maior, formada pela

Petição 870190061378, de 01/07/2019, pág. 20/283

14/106 associação covalente ou não covalente do anticorpo ou porção de anticorpo com uma ou mais outras proteínas ou peptídios. Exemplos de tais moléculas de imunoadesão incluem o uso da região central da estreptavidina para fazer uma molécula tetramérica scFv (Kipriyanov, S. M, et al. (1995) Human

Antibodies and Hybridomas 6:93-101) e uso de um resíduo de cisterna, um peptídio marcador e uma C-terminal de etiqueta de poli-histidina para fazer moléculas bivalentes e biotiniladas scFv (Kipriyanov, S. M., et al. (1994) Mol. Imunol. 31:10471058) . A partir de anticorpos inteiros, podem preparar-se porções de anticorpos, tais como fragmentos de Fab e F(ab')2 de anticorpos inteiros, utilizando métodos convencionais, tais como a digestão com papaína ou pepsina, respectivamente. Além disso, anticorpos, porções de anticorpos e moléculas de imunoadesão podem ser obtidos usando técnicas de DNA recombinante padrão, conforme descrito neste documento.

[65] Como usado aqui, o termo anticorpo isolado refere-se a um anticorpo que é substancialmente livre de outros anticorpos com diferentes especificidades antigênicas (por exemplo, um anticorpo isolado que se liga especificamente a TNFa está substancialmente livre de anticorpos que se ligam especificamente a outros antígenos que não TNFa). No entanto, um anticorpo isolado que se liga especificamente a TNFa pode ter reatividade cruzada a outros antígenos, como TNFa moléculas de outras espécies. Além disso, um anticorpo isolado pode estar substancialmente isento de outros materiais

Petição 870190061378, de 01/07/2019, pág. 21/283

15/106 celulares e/ou químicos.

[66] O termo anticorpo anti-TNFa refere-se a um anticorpo anti-TNFa humano conforme descrito aqui, bem como descrito no US Pat. N.°s 6090382; 6258562; 6509015; 7223394 e 6509015. O termo anticorpo anti-TNFa usado na invenção é um anticorpo anti-TNFa ou um fragmento dele, incluindo infliximabee (Remicade®, Johnson and Johnson, descrito na Patente US N.° 5656272); CDP571 (anticorpo monoclonal humanizado anti-TNFalfa IgG4); CDP870 (fragmento de anticorpo monoclonal humanizado anti-TNF-alfa); anti-TNF dAb (Peptech); CNTO148 (golimumabe; Centocor, ver WO 02/12502 e U.S. 521.206 e U.S. 7250165); e Adalimumabe (HUMIRA® Abbott Laboratories, um mAb anti-TNF humano, descrito no US 6090382 como D2E7) . Anticorpos anti-TNF adicionais que podem ser usados na invenção estão descritos nas patentes americanas N.°s 6593458; 6498237; 6451983; e 6448380. Em outra forma de realização, o inibidor TNFa é uma proteína de fusão TNF, por exemplo, etanercepte (Enbrel®, Amgen; descrito em WO 91/03553 e WO 09/406476). Em outra forma de realização, o inibidor TNFa é uma proteína de ligação TNF recombinante (r-TBP-I) (Serono).

[67] Entende-se por armazenagem a longo prazo ou estabilidade a longo prazo, que uma composição farmacêutica pode ser armazenada durante três meses ou mais, seis meses ou mais e, de preferência, durante um ano ou mais, de preferência com um período mínimo de conservação estável de pelo menos dois anos. Em geral, os termos armazenamento a longo prazo e

Petição 870190061378, de 01/07/2019, pág. 22/283

16/106 estabilidade a longo prazo incluem ainda períodos de armazenamento estáveis que são pelo menos comparáveis ou melhores do que o período de armazenamento estável normalmente exigido para as formulações comerciais de Adalimumabe atualmente disponíveis, sem perdas de estabilidade que tornariam a formulação inadequada para a aplicação farmacêutica a que se destina. O armazenamento a longo prazo também é entendido como significando que a composição farmacêutica é armazenada como um líquido a 2 a 8°C ou congelada, por exemplo, a -18°C ou menos. Também se contempla que a composição pode ser congelada e descongelada mais de uma vez .

[68] Entende-se por estado estável, relativamente à armazenagem a longo prazo, que a Adalimumabe contida nas composições farmacêuticas não perde mais de 20%, ou mais preferencialmente 15%, ou mesmo mais preferencialmente 10%, e mais preferencialmente 5% da sua atividade relativa à atividade da composição no início da armazenagem.

[69] O termo excipiente ou aditivo é aqui utilizado para descrever qualquer ingrediente que não os anteriormente descritos na presente invenção.

[70] O termo açúcar refere-se aos monossacáridos, dissacarídeos e polissacáridos ou suas misturas. Exemplos de açúcares incluem, mas não estão limitados a, sacarose, trealose, glicose, dextrose e outros.

[71] O termo poliol aqui utilizado refere-se a um

Petição 870190061378, de 01/07/2019, pág. 23/283

17/106 excipiente com múltiplos grupos hidroxilos e inclui álcoois e

ácidos	açucarados. Exemplos	de polióis	incluem, mas	não se
limitam	a, manitol, sorbitol	e outros.
[72]	0 termo tampão,	composição	do tampão,	agente

tampão, tal como aqui utilizado, refere-se a uma composição adicionada que permite a uma formulação de anticorpos líquidos resistir a alterações no pH, tipicamente pela ação dos seus componentes conjugados ácido-base. Quando é feita referência a uma concentração de um tampão, pretende-se que essa concentração represente a concentração molar total do ácido livre ou da forma de base livre do tampão. Exemplos de tampões conhecidos na arte e que podem ser encontrados na literatura incluem, mas não se limitam a, histidina, citrato, succinato, acetato, fosfato, solução tampão fosfatada, tampão citratofosfato, tampão à base de trometamina e semelhantes, ou misturas adequadas deles.

[73] Os termos agente tônico ou tônico, bem como osmólito ou agente osmótico aqui utilizados, referem-se a um excipiente que pode ajustar a pressão osmótica de uma preparação líquida de anticorpos. Em certas formas de realização, o agente tônico pode ajustar a pressão osmótica da preparação líquida de anticorpos para isotônica, de modo a que a preparação de anticorpos seja fisiologicamente compatível com as células do tecido corporal do indivíduo. Em mais uma forma de realização, o agente tônico pode contribuir para uma melhoria da estabilidade dos anticorpos aqui descritos.

Petição 870190061378, de 01/07/2019, pág. 24/283

18/106

Uma preparação isotônica é uma preparação que tem a pressão osmótica equivalente à do sangue humano. As preparações isotônicas geralmente têm uma pressão osmótica de cerca de 250 a 350 mOsm. O termo hipotônico descreve uma preparação com uma pressão osmótica inferior à do sangue humano. Assim, o termo hipertônico é usado para descrever uma preparação que tem uma pressão osmótica acima da do sangue humano. A isotonicidade pode ser medida utilizando, por exemplo, um osmômetro do tipo pressão de vapor ou congelação de gelo. O agente tônico pode apresentar-se sob a forma Enantiômero (por exemplo, L- ou D-Enantiômero) ou racémica; sob a forma de isómeros, tais como alfa ou beta, incluindo alfa, alfa; ou beta, beta; ou alfa, beta; ou beta, alfa, alfa; sob a forma de ácido livre ou de base livre; sob a forma salgada; sob a forma hidratada (por exemplo, mono-hidratada) ou anidra.

[74] A expressão substância tensoativa (também designada por tensoativo ou detergente ou SAS), aqui utilizada, referese a um excipiente que pode alterar a tensão superficial de uma preparação líquida de anticorpos. Em certas formas de realização, a substância tensoativa reduz a tensão superficial da preparação líquida de anticorpos. Noutras formas de realização, a substância tensoativa pode contribuir para melhorar a estabilidade coloidal ou a solubilidade de qualquer anticorpo presente na preparação. A substância tensoativa pode reduzir a agregação da preparação de anticorpos resultante e/ou minimizar a formação de partículas na preparação e/ou

Petição 870190061378, de 01/07/2019, pág. 25/283

19/106 reduzir a adsorção. A substância tensoativa pode também melhorar a estabilidade do anticorpo durante e após um ciclo de congelação/degelo e durante a agitação. As substâncias tensoativas podem ser iônicas ou não-iônicas. Exemplos de substâncias não-iônicas tensoativas que podem ser incluídas nas formulações da presente invenção incluem, por exemplo, poli(óxido de etileno) alquila, poliglucosídeo de alquila (por exemplo, acetato de octila e decil glicosídeo), álcoois gordos tais como álcool cetílico e álcool oleílico, Cocamida MEA, Cocamida DEA e Cocamida TEA. As substâncias tensoativas nãoiônicas específicas que podem ser incluídas nas formulações da presente invenção incluem, por exemplo, Polisorbatos como o Polisorbato 20 (Tween 20), Polisorbato 28, Polisorbato 40, Polisorbato 60, Polisorbato 65, Polisorbato 80 (Tween 80), Polisorbato 81 e Polisorbato 85; Poloxâmeros como o Poloxamer 188 (Kolliphor P188), Poloxamer 407; polietilenopolipropilenoglicol; ou polietilenoglicol (PEG), copolímeros de etileno-etileno-etilenoglicol e propilenoglicol (PEG), copolímeros de etileno-etileno-etilenoglicol e propilenoglicol (e.g., pluronics PF68, etc.).

[75] O termo liofilizado, tal como utilizado no presente documento, refere-se a uma preparação que foi submetida a um processo conhecido na arte da liofilização, envolvendo a congelação da preparação e a subsequente remoção do gelo do conteúdo congelado.

[76] O termo aminoácido, tal como utilizado no presente

Petição 870190061378, de 01/07/2019, pág. 26/283

20/106 documento, designa um aminoácido (um aminoácido livre, ou seja, não um aminoácido numa sequência de peptídios ou proteínas). Os aminoácidos utilizados na presente invenção incluem, entre outros, arginina, glicina, lisina, histidina, ácido glutâmico, ácido aspártico, isoleucina, leucina, alanina, fenilalanina, triptofano, serina, cisterna, metionina e prolina.

[77] Por composição farmacêutica entende-se uma composição constituída por um anticorpo da invenção e, pelo menos, um dos componentes selecionados do grupo, constituído por excipientes, solventes, diluentes, transportadores, aditivos, agentes de distribuição, agentes de libertação, tais como conservantes, estabilizadores, emulsionantes, emulsionantes, suspensivos, espessantes, reguladores de libertação prolongada, cuja escolha e proporção dependem da natureza e do método de administração e dosagem. Exemplos de agentes de suspensão incluem álcool isoestearílico etoxilado, polioxietileno, sorbitol e éster de sorbitol, celulose microcristalina, metahidróxido de alumínio, bentonita, ágarágar e tragacanto, e suas misturas. A proteção da ação do microrganismo pode ser fornecida com múltiplos agentes antibacterianos e antifúngicos, por exemplo, como parabenos, clorobutanol, ácido sórbico e similares. A composição pode também incluir agentes isotônicos, por exemplo, açúcares, cloreto de sódio e similares. A ação prolongada da composição pode ser fornecida com agentes que retardam a absorção do

Petição 870190061378, de 01/07/2019, pág. 27/283

21/106 agente ativo, por exemplo, monoestearato de alumínio e gelatina. Entre os excipientes, solventes, diluentes e agentes de entrega adequados incluem-se, por exemplo, água, etanol, poliálcoois e suas misturas, óleos vegetais (como o azeite) e ésteres orgânicos injetáveis (como o oleato de etila). Exemplos de excipientes incluem lactose, açúcar de leite, citrato de sódio, carbonato de cálcio, fosfato de cálcio e similares. Uma composição farmacêutica para administração oral, sublingual, transdérmica, intramuscular, intravenosa, subcutânea, tópica ou retal do agente ativo, isoladamente ou em combinação com outro agente ativo, pode ser administrada a animais e humanos em uma forma de dosagem unitária como uma mistura com portadores farmacêuticos convencionais. As formas adequadas de dosagem unitária incluem formas parenterais, implantes e sistemas transdérmicos.

[78] Um medicamento (preparação) é uma substância (ou mistura de substâncias sob a forma de uma composição farmacêutica) sob a forma de comprimidos, cápsulas, pós, liofilizados, injeções, infusões, pomadas e outras formas de dosagem acabada destinadas a restaurar, corrigir ou alterar funções fisiológicas em seres humanos e animais e a proporcionar tratamento e prevenção de doenças, diagnóstico, anestesia, contracepção, cosmetologia e outras.

[79] Tratar, tratar e tratamento referem-se a um método para aliviar ou eliminar um distúrbio biológico e/ou pelo menos um dos sintomas que o acompanham. Como usado aqui,

Petição 870190061378, de 01/07/2019, pág. 28/283

22/106 aliviar uma doença, desordem ou condição significa reduzir a gravidade e/ou frequência da doença, desordem ou sintomas da condição. Além disso, as referências a tratamento neste documento incluem referências a terapias curativas, paliativas e preventivas.

[80] Em um aspecto, o sujeito a ser tratado ou o paciente é um mamifero, preferencialmente um sujeito humano. 0 sujeito acima pode ser homem ou mulher de qualquer idade.

[81] 0 termo desordem denota qualquer condição que pode ser melhorada pelo tratamento de acordo com a invenção. A definição deste termo inclui perturbações ou doenças crônicas e agudas, incluindo condições patológicas, que predispõem o mamifero a essa perturbação. Exemplos não limitativos das doenças a tratar incluem tumores benignos e malignos; leucemias e malignidades linfóides, em particular, cancro da mama, ovário, estômago, endométrio, glândula salivar, pulmão, rim, cólon, tireoide, pâncreas, próstata ou bexiga; distúrbios neurais, gliais, astrociticos, hipotálamos e outros distúrbios glandulares, macrófagos, epiteliais, estromais e blastocoélicos; distúrbios inflamatórios, antigênicos e imunológicos. A desordem preferida a ser tratada de acordo com a invenção são as doenças autoimunes.

[82] Os termos resposta imune, resposta autoimune, inflamação autoimune referem-se a, por exemplo à ação dos linfócitos, das células que apresentam antigenos, das células fagocitárias, dos granulócitos e das macromoléculas solúveis

Petição 870190061378, de 01/07/2019, pág. 29/283

23/106 produzidas pelas células acima referidas ou pelas células do figado (incluindo anticorpos, citocinas e complemento que resultam da destruição ou eliminação seletiva, do corpo humano, de patógenos, células ou tecidos invasivos infectados com agentes patogênicos, células cancerosas ou, em casos de autoimunidade ou inflamação patológica, células ou tecidos humanos normais).

[83] O termo doença autoimune, tal como aqui utilizado, significa doença ou perturbação não maligna que ocorre e é dirigida contra os próprios antigenos (auto) e/ou tecidos de um indivíduo.

[84] Esta definição abrange, mas não se limita, à artrite reumatoide, artrose, artrite juvenil crônica, artrite séptica, artrose de Lyme, artrite psoriásica, artrite reativa, espondiloartropatia, lúpus eritematoso sistêmico, doença de Crohn, colite ulcerativa, doença inflamatória intestinal, diabetes mellitus, tireoidite, asma, doenças alérgicas, psoriase, dermatite atópica, esclerodermia, reação enxerto versus hospedeiro, rejeição de transplante, doenças imunológicas agudas ou crônicas associadas ao transplante, sarcoidose, doença de Kawasaki, doença de Graves, sindrome nefrótica, sindrome de fadiga crônica, granulomatose de Wegener, púrpura de Henoch-Schónlein, vasculite renal microscópica, hepatite ativa crônica, uveita, choque séptico, sindrome do choque tóxico, sindrome séptica, caquexia, sindrome da imunodeficiência adquirida, mielite transversa

Petição 870190061378, de 01/07/2019, pág. 30/283

24/106 aguda, córnea de Huntington, doença de Parkinson, doença de Alzheimer, acidente vascular cerebral, cirrose biliar primária, anemia hemolitica, sindrome do desconforto respiratório agudo do adulto, alopecia, alopecia focal, artropatia soronegativa, artropatia, Sindrome de Reiter, artropatia psoriásica, artropatia associada à colite ulcerativa, alergias atópicas, doenças autoimunes bolhosas, pênfigo vulgar, pênfigo foliáceo, doença penfigoide, IgAs lineares, anemia hemolitica autoimune, anemia hemolitica Coombs-positiva, anemia maligna, anemia maligna juvenil maligna, artrite, hepatite A esclerosante primária, hepatite autoimune criptogênica, doença fibrosante pulmonar, alveolite fibrosante criptogênica, doenças pulmonares intersticiais pósinflamatórias, pneumonite intersticial, pneumonia eosinofilica crônica, doenças pulmonares intersticiais pós-infecciosas, artrose, hepatite autoimune, hepatite autoimune tipo 1 (hepatite autoimune clássica ou lipóide), hepatite autoimune tipo 2, osteoartrite, colangite esclerosante primária, psoriase tipo 1, psoriase tipo 2, leucopenia idiopática, neutropenia autoimune, doenças renais NOS, glomerulonefrite, vasculite renal microscópica, lúpus eritematoso discóide, NOSfertilidade idiopática ou masculina, [autoimunidade ao esperma], todos os subtipos de esclerose múltipla, oftalmia simpática, hipertensão pulmonar secundária associada à doença do tecido conjuntivo, sindrome de Goodpasture, manifestação pulmonar de poliarterite nodosa, febre reumática aguda,

Petição 870190061378, de 01/07/2019, pág. 31/283

25/106 espondilite reumatoide, espondilite anquilosante, doença de Still, esclerose sistêmica, síndrome de Sjogren, doença de Takayasu, trombocitopenia autoimune, trombocitopenia essencial, tiroidite autoimune, hipertireoidismo, doença de Hashimoto, hipotiroidismo atrófico autoimune, mixedema primário, uveíte facogenica, vasculite primária, vitiligo, doenças hepáticas agudas, doenças hepáticas crônicas, alergias, asma, doenças mentais (incluindo síndrome depressiva e esquizofrenia), doenças mediadas do tipo Th2 e Thl, conjuntivite, dermatite de contato alérgica, rinite alérgica, deficiência de Alfa-1 antitripsina, deficiência de alfa-I, esclerose lateral amiotrófica, anemia, fibrose cística, doenças associadas à terapia com citocinas, doenças desmielinizantes, dermatite, iridociclites/uveítes/neurites oftálmicas, lesão por reperfusão de isquemia, acidente vascular cerebral isquêmico, artrite reumatoide juvenil, enteropatia autoimune, perda auditiva autoimune, síndrome linfoproliferativa autoimune, miocardite autoimune, insuficiência ovariana precoce autoimune e blefarite. O anticorpo também pode tratar qualquer combinação dos distúrbios listados acima.

[85] Como usado aqui, o termo transtorno em que a atividade TNFa é prejudicial inclui doenças e outros transtornos em que a presença de TNFa em um sujeito que sofre do transtorno tem sido mostrado para ser ou é suspeito de ser responsável pela fisiopatologia do transtorno ou um fator que contribui para um

Petição 870190061378, de 01/07/2019, pág. 32/283

26/106 agravamento do transtorno. Assim, um transtorno no qual a atividade de TNFa é prejudicial é um transtorno no qual a inibição da atividade de TNFa é esperada para aliviar os sintomas e/ou a progressão do transtorno. Tais distúrbios podem ser detectados, por exemplo, por um aumento na concentração de TNFa no fluido biológico de um indivíduo que sofre da distúrbio (por exemplo, um aumento na concentração de TNFa no soro, plasma, líquido sinovial e similares do indivíduo) que pode ser detectado, por exemplo, usando um anticorpo anti-TNFa como descrito acima. Há muitos exemplos de distúrbios em que a atividade de TNFa é prejudicial. O uso de anticorpos e fragmentos de anticorpos apropriados ao distúrbio no tratamento de distúrbios específicos é discutido mais adiante:

[86] A. Sepse [87] O fator de necrose tumoral tem um papel estabelecido na fisiopatologia da sepse, com efeitos biológicos que incluem hipotensão, supressão miocárdica, síndrome de vazamento vascular, necrose orgânica, estimulação da liberação de mediadores secundários tóxicos e ativação da cascata de coagulação (ver, por exemplo, a seguir), Moeller A., et al. (1990), Cytokine 2:162-169; Patente US No. 5231024 Moeller et at.; Patente EP No. 260610 BI Moeller A.; Tracey K.J. e Cerami A. (1994) Annu. Rev. Med. 45:491-503; Russel D. e Thompson R.C. (1993) Curr. Opinião. Biotecnologia. 4:714-721) . Correspondentemente, os anticorpos humanos e fragmentos de

Petição 870190061378, de 01/07/2019, pág. 33/283

27/106 anticorpos de acordo com a invenção podem ser usados para tratar a sepse em qualquer de suas manifestações clinicas, incluindo choque séptico, choque endotóxico, sepse causada por bactérias Gram-negativas e sindrome do choque tóxico.

[88] Além disso, para o tratamento da sepse, os anticorpos anti-TNFa e fragmentos de anticorpos de acordo com a invenção podem ser coadministrados com um ou mais agentes terapêuticos que podem aliviar ainda mais a sepse, como um inibidor da interleucina-1 (descrito em Publicações PCT Nos. WO 92/16221 e WO 92/17583), interleucina-6 de citocinas (ver, por exemplo, a publicação PCT n.° WO 93/11793) ou um antagonista do fator de ativação plaquetário (ver, por exemplo, o pedido de patente europeia n.° EP 374 510) . Outros métodos de terapia combinada para o tratamento da sepse são discutidos abaixo na subseção III .

[89] Além disso, em uma forma de realização preferida, anticorpos anti-TNFa e fragmentos de anticorpos de acordo com a invenção são administrados a um humano de um subgrupo de pacientes com sepse com uma concentração sérica ou plasmática de IL-6 acima de 500 pg/mL e mais preferencialmente 1000 pg/mL

durante	o	tratamento (ver	Publicação PCT	N°	WO	95/20978 Daum,
L., et	al.	) ·
[90]	B.	Doenças autoimunes
[91]	Foi demonstrado	que o fator	de	ne	crose tumoral
desempenha	um papel na	fisiopatologia	de	uma	variedade de

doenças autoimunes. Por exemplo, TNFa também esteve envolvido

Petição 870190061378, de 01/07/2019, pág. 34/283

28/106 na ativação da inflamação tecidual e causou destruição articular na artrite reumatoide (ver, por exemplo, Moeller A. et al. (1990), Cytokine 2:162-169; Patente US No. 5231024

Moeller et al. ; Patente EP No. 260610 BI Moeller A.; Tracey K.J. e Cerami A., supra; final W.P. e Dayer J.M. (1995) ath. Rheum. 38:151-160; Fava R.A. et al. (1993) Clin. Exp. Imunol. 94:261-266). TNFa também tem estado envolvido na promoção da morte de células ilhotas e na formação de resistência à insulina na diabetes (ver, por exemplo, Tracey e Cerami, supra; publicação PCT n.° WO 94/08609). TNFa também esteve envolvido na formação de citotoxicidade para oligodendrócitos e na indução de placas inflamatórias na esclerose múltipla (ver, por exemplo, Tracey e Cerami, supra). Anticorpos antihTNFa murinos quiméricos e humanizados foram testados clinicamente para o tratamento da artrite reumatoide (ver, por exemplo, Elliot M.J. et al. (1994); Lancet 344:1125-1127;

Elliot M.J. et al. (1994) Lancet 344:1105-1110; Rankin E.C. et al. (1995) Br. J. Rheumatol. 34:334-342).

[92] Os anticorpos humanos e os fragmentos de anticorpos de acordo com a invenção podem ser utilizados para tratar doenças autoimunes, nomeadamente as associadas à inflamação, incluindo a artrite reumatoide, espondilite reumatoide, osteoartrite e artrite gotosa, alergia, esclerose múltipla, diabetes autoimune, uveite autoimune e sindrome renal. Tipicamente, o fragmento de anticorpo ou de anticorpo é administrado de forma sistêmica, embora, para certas doenças, a administração local

Petição 870190061378, de 01/07/2019, pág. 35/283

29/106 do anticorpo ou fragmento de anticorpo num local de inflamação possa ser benéfica (por exemplo, administração local nas articulações em artrite reumatoide ou aplicação tópica em úlceras diabéticas, isoladamente ou em combinação com um derivado do ciclohexano-ilideno, conforme descrito na publicação PCT n.° WO 93/19751). O fragmento de anticorpo e de anticorpo de acordo com a invenção pode também ser utilizado com um ou mais agentes terapêuticos adicionais utilizados no tratamento de doenças autoimunes, conforme descrito na subsecção III.

[93] C. Doenças Infecciosas [94] O fator de necrose tumoral tem sido envolvido na produção de efeitos biológicos observados em uma variedade de doenças infecciosas. Por exemplo, TNFa tem estado envolvido no desenvolvimento de inflamação cerebral, trombose capilar e infarto na malária. TNFa também tem estado envolvido no desenvolvimento da inflamação cerebral, no colapso da barreira hematoencefálica de indução, no desenvolvimento da síndrome do choque séptico e na ativação do infarto venoso na meningite. TNFa também tem estado envolvido na indução da caquexia, estimulação da proliferação viral e formação de lesões do sistema nervoso central na síndrome da imunodeficiência adquirida (SIDA). Correspondentemente, os anticorpos e fragmentos de anticorpos de acordo com a invenção podem ser usados no tratamento de doenças infecciosas, incluindo meningite bacteriana (ver, por exemplo, o pedido de patente

Petição 870190061378, de 01/07/2019, pág. 36/283

30/106 europeia n° EP 585 705), malária cerebral, complexo relacionado com a SIDA e SIDA (aC) (ver, por exemplo, o pedido de patente europeia n° EP 230 574), bem como infecção por citomegalovirus secundária a transplantes (ver, por exemplo, Fietze, E..., et al. (1994) Transplante 58:675-680). Os anticorpos e fragmentos de anticorpos de acordo com a invenção também podem ser usados para aliviar sintomas associados a doenças infecciosas, incluindo febre e mialgias devido à infecção (como influenza) e caquexia secundária à infecção (por exemplo, secundária à AIDS ou aC).

[95] D. Transplante [96] O fator de necrose tumoral tem sido considerado como um mediador chave na rejeição de enxertos e na doença enxerto versus hospedeiro (DECH) e na formação de uma reação adversa que foi observada quando o anticorpo OKT3 do rato, direcionado

contra o complexo CD3 do	receptor de células T, é	utilizado
para inibir a	rejeição	de	transplantes renais	(ver,	por
exemplo, Eason	J.D. et	al.	(1995) Transplante 5	9:300-	-305;
Suthanthiran M.	e Strom	T.	B) . (1994) New Engl.	J.	Med.

331:365-375). Correspondentemente, os anticorpos e fragmentos de anticorpos de acordo com a invenção podem ser usados para inibir a rejeição de transplantes, incluindo rejeições de aloenxertos e xenógrafos, e para inibir a DECH. Embora o anticorpo ou fragmento de anticorpo possa ser usado isoladamente, de preferência em combinação com um ou mais outros agentes que inibem a resposta imunológica contra o

Petição 870190061378, de 01/07/2019, pág. 37/283

31/106 aloenxerto ou inibem a DECH. Por exemplo, em uma forma de realização, o anticorpo ou fragmento de anticorpo da invenção é usado em combinação com um ou mais anticorpos direcionados a outros alvos envolvidos na regulação das respostas imunes, como as moléculas de superfície celular CD25 (interleucina-2 receptor-β), CDlla (LFA-1), CD54 (ICAM-1), CD4, CD45, CD28/CTLA4, CD80 (B7-1) e/ou CD86 (B7-2) . Em mais uma forma de realização, o anticorpo ou fragmento de anticorpo de acordo com a invenção é usado em combinação com um ou mais agentes imunossupressores gerais, como a ciclosporina A ou FK506.

[97] E. Malignidades [98] O fator de necrose tumoral tem sido envolvido na indução da caquexia, na estimulação do crescimento tumoral, no aumento do potencial metastático e no desenvolvimento de citotoxicidade em neoplasias malignas. Correspondentemente, os anticorpos e fragmentos de anticorpos de acordo com a invenção são usados no tratamento de neoplasias malignas, para inibir o crescimento tumoral ou metástase e/ou para aliviar a caquexia secundária a neoplasias malignas. O anticorpo ou fragmento de anticorpo pode ser administrado sistemicamente ou topicamente no local do tumor.

[99] F. Transtornos Pulmonares [100] 0 fator de necrose tumoral tem estado envolvido na fisiopatologia da sindrome do desconforto respiratório do adulto (aDS) , incluindo a estimulação da ativação leucocitária endotelial, a direção da citotoxicidade para pneumócitos e a

Petição 870190061378, de 01/07/2019, pág. 38/283

32/106 indução da sindrome do vazamento vascular. Correspondentemente, os anticorpos e fragmentos de anticorpos de acordo com a invenção podem ser usados para tratar vários distúrbios pulmonares, incluindo sindrome da angústia respiratória do adulto (ver, por exemplo, Publicação PCT No. WO 91/04054), pulmão de choque, doença inflamatória pulmonar crônica, sarcoidose pulmonar, fibrose pulmonar e silicose. O fragmento de anticorpo e de anticorpo de acordo com a invenção pode ser administrado com um ou mais agentes terapêuticos adicionais utilizados no tratamento dos distúrbios pulmonares, conforme descrito na subseção III abaixo.

[101] G. Transtornos intestinais [102] O fator de necrose tumoral tem estado envolvido na fisiopatologia de distúrbios inflamatórios intestinais (ver, por exemplo, Tracy K.J., et al. (1986) Science 234:470-474; Sun X-M., et al. (1988) J. Clin. Investir. 81:1328-1331; MacDonald T.T., et al. (1990) Clin. Exp. Imunol. 81: 301-305) . Anticorpos anti-TNFa Murino quimérico foram testados clinicamente para o tratamento da doença de Crohn (van Dullemen H.M. et al.(1995) Gastroenterology 109:129-135). O anticorpo humano ou fragmento de anticorpo de acordo com a invenção também pode ser usado para tratar distúrbios intestinais, como a doença inflamatória intestinal idiopática, que inclui duas sindromes, doença de Crohn e colite ulcerativa. O fragmento de anticorpo e de anticorpo de acordo com a invenção também pode ser administrado com um ou mais

Petição 870190061378, de 01/07/2019, pág. 39/283

33/106

agentes	terapêuticos	adicionais utilizados no	tratamento	de
distúrbios	intestinais, conforme	descrito na	subseção	III
abaixo.
[103]	H.	Distúrbios	Cardíacos
[104]	Os	anticorpos	ou fragmentos	de anticorpos	de acordo	com

a invenção também podem ser usados para tratar várias doenças cardíacas, incluindo isquemia cardíaca (ver, por exemplo, EP 453 898) e insuficiência cardíaca (amiocardia) (ver, por exemplo, publicação PCT No. WO 94/20139).

[105] I. Outros [106] Os anticorpos ou fragmentos de anticorpos de acordo com a invenção também podem ser usados para tratar vários distúrbios nos quais a atividade TNFa é prejudicial. Exemplos de outras doenças e desordens em que a atividade TNFa está envolvida na fisiopatologia, e que podem ser tratadas usando o anticorpo ou fragmento de anticorpo de acordo com a invenção, incluem desordens ósseas inflamatórias e doença de reabsorção óssea (ver, por exemplo, Bertolini D.R., et al. (1986) Nature

319:516-518; Konig A., et al. (1988) J. Bone Miner. Res.

3.621-627; Lerner U.H. e Ohiin A. (1993) J. Bone Miner. Res. 8:147-155; e Shanka G. e Stern P.H. (1993) Bone 14:871-876), hepatite, incluindo hepatite alcoólica (ver por exemplo, McClain C.J. e Cohen D.A. (1989) Hepatology 9:349-351; Felver M.E. et al. (1990) Alcohol Clin. Exp. Res. 14:255-259; e

Hansen J. et al. (1994) Hepatologia 20:461-474), hepatite viral (Sheron N. et al. (1991) J. Hepatol. 12:241-245; e

Petição 870190061378, de 01/07/2019, pág. 40/283

34/106

Hussain M.J. et al. (1994) J. Clin. Pathol. 47:1112-1115), e hepatite fulminante; distúrbios de coagulação (ver, por exemplo, van der Poli T. et al. (1990) N. Engl. J. Med. 322:1622-1627; van der Poli T. et al. (1991) Prog. Clin. Biol. Res. 367:55-60; queimaduras (ver, por exemplo, Giroir B.P. et al. (1994) Am. J. Physiol. 267:H118-124; Liu X.S. et al. (1994) Burns 20:40-44), lesão de reperfusão (ver, por exemplo, Scales W.E. et al. (1994) Am. J. Physiol. 26:1122-1127;

Serrick C. et al. (1994) Transplantation 58:1158-1162; Yao Y.M. et al. (1995) Resuscitation 29:157-168), formação de queloide (veja por exemplo, McCauley R. L et al. (1992) J. Clin. Imunol. 12:300-308), formação de tecido cicatricial; hipertermia; doença periodontal; obesidade e toxicidade por radiação.

[107] A quantidade terapêutica eficaz é considerada como a quantidade de agente terapêutico administrada durante o tratamento que irá aliviar até certo ponto um ou mais sintomas da doença a ser tratada.

[108] O termo administração crônica refere-se à administração continua (a longo prazo) do(s) agente(s) em oposição ao modo de administração aguda (a curto prazo), de modo a manter o efeito terapêutico inicial (atividade) por um período de tempo alargado.

[109] A administração intermitente refere-se ao tratamento que não é realizado consecutivamente sem interrupção, mas sim cíclico por natureza.

Petição 870190061378, de 01/07/2019, pág. 41/283

35/106 [110] Na presente especificação e nas seguintes afirmações, a menos que o contexto exija o contrário, as palavras ter, incluir e compreender, ou suas variações, tais como ter, ter, incluir, incluir, compreender ou incluir devem ser entendidas como a inclusão de um número inteiro ou grupo de números inteiros declarado, mas não a exclusão de qualquer outro número inteiro ou grupo de números inteiros.

DESCRIÇÃO DETALHADA DA INVENÇÃO [111] Composição aquosa [112] A presente invenção refere-se a novas e melhoradas composições aquosas, que podem opcionalmente ser liofilizadas, compreendendo uma quantidade adequada de um anticorpo antiTNFa monoclonal recombinante em um tampão adequado, um ou mais agentes estabilizadores apropriados e outros excipientes selecionados a partir de substâncias tensoativas e agentes isotônicos apropriados. Esta composição impede a formação de agregados proteicos (anticorpos) e mantém a eficácia e estabilidade do composto terapêutico durante um periodo de tempo desejável.

[113] Adalimumabe e infliximabe são exemplos de um anticorpo monoclonal anti-TNFa recombinante. Infliximabe é um exemplo de um anticorpo quimérico. Adalimumabe é um exemplo de um anticorpo humano. Numa forma de realização preferida, os anticorpos utilizados na composição são anticorpos humanos. Numa forma de realização mais preferida, os anticorpos utilizados na composição são anticorpos humanos anti-humanos

Petição 870190061378, de 01/07/2019, pág. 42/283

36/106

TNFa Em mais uma forma de realização, a composição compreende D2E7 e uma combinação de D2E7 com outros anticorpos. O anticorpo D2E7, conhecido genericamente como Adalimumabe, com sua alta afinidade para ligação a TNFa, baixa cinética de dissociação e alta capacidade de neutralização. Adalimumabe está disponível no mercado farmacêutico sob a marca Humira®. Os nomes Adalimumabe e D2E7 utilizados em toda a presente especificação representam o mesmo anticorpo monoclonal humano. O anticorpo monoclonal é Adalimumabe ou uma porção ligada ao antígeno.

[114] Em algumas formas de realização, os anticorpos monoclonais recombinantes anti-TNFa ou porções de ligação de antígenos estão geralmente presentes em uma quantidade terapêutica de até 200 mg/mL. Em uma forma de realização preferida, a quantidade terapêutica é cerca de 1 mg/mL a cerca de 150 mg/mL. Em uma forma de realização mais preferida, a quantidade terapêutica é cerca de 1 mg/mL a cerca de 100 mg/mL. Em uma forma de realização mais preferida, a quantidade terapêutica é cerca de 50 mg/mL a cerca de 100 mg/mL. Em uma forma de realização ainda mais preferida, a quantidade terapêutica é de aproximadamente 100 mg/mL.

[115] A composição aquosa em questão compreende uma solução tampão adequada em combinação com outros excipientes farmaceuticamente aceitáveis que estabilizam a preparação farmacêutica. As soluções tampão adequadas que podem ser utilizadas são selecionadas a partir do grupo conhecido na

Petição 870190061378, de 01/07/2019, pág. 43/283

37/106 arte e que pode ser encontrado na literatura. Numa única forma de realização, as soluções tampão adequadas incluem, mas não se limitam a, um agente tampão à base de íons de acetato (ou sistema tampão). Numa forma de realização preferida, o tampão adequado inclui um tampão de acetato. Em uma forma de realização ainda mais preferida, o tampão de acetato é selecionado a partir de trihidrato de acetato de sódio combinado com ácido acético.

[116] As soluções tampão são geralmente utilizadas em concentrações de cerca de 1 mM a cerca de 100 mM. Em uma forma de realização preferida, a concentração do tampão é cerca de 1 mM a cerca de 50 mM. Em uma forma de realização mais preferida, a concentração do tampão é cerca de 1 mM a cerca de 20 mM. Em uma forma de realização ainda mais preferida, a concentração do tampão é cerca de 5 mM.

[117] Em algumas formas de realização, o trihidrato de acetato de sódio está presente numa quantidade de até 1,2 mg/mL. Em uma forma de realização preferida, a quantidade de trihidrato de acetato de sódio é cerca de 0,4 mg/mL a cerca de 1,2 mg/mL. Em uma forma de realização mais preferida, a quantidade de trihidrato de acetato de sódio é cerca de 0,4 mg/mL a cerca de 0,5 mg/mL. Em uma forma de realização mais preferida, a quantidade de trihidrato de acetato de sódio é de 0,436 mg/mL.

[118] A composição liquida mantém o pH entre 4,0 e cerca de 7,0, dependendo do anticorpo monoclonal utilizado. Em uma

Petição 870190061378, de 01/07/2019, pág. 44/283

38/106 forma de realização preferida, o tampão utilizado mantém o pH da composição na faixa de cerca de 4,5 a 6,0. Em uma forma de realização mais preferida, o pH é mantido em cerca de 5,0 a 6,0. Em uma forma de realização mais preferida, o pH é mantido em cerca de 5,5.

[119] A referida composição aquosa compreende substâncias tensoativas apropriadas que são excipientes farmaceuticamente aceitáveis utilizados para proteger as composições proteicas de vários efeitos de stress, tais como agitação, cisalhamento, alta temperatura, congelação etc. As substâncias tensoativas adequadas incluem, mas não se limitam a, Polisorbatos ou Poloxameros, ou uma combinação de Polisorbato e Poloxamer. Numa forma de realização preferida, a substância tensoativa adequada é o Polisorbato. Em uma forma de realização preferida, a substância tensoativa apropriada é o Poloxamer. Em uma forma de realização preferida, a substância tensoativa apropriada é uma combinação de Polisorbato e Poloxamer. Numa forma de realização mais preferida, Polisorbato é Polisorbato 20 ou Polisorbato 80 (também distribuído sob a marca comercial Tween ® 20 ou Tween ® 80) . Em uma forma de realização mais preferida, Poloxamer é Poloxamer 188 (também distribuído sob a marca registrada Kolliphor P188®). Noutro modo de forma de realização preferido, a substância tensoativa adequada é uma combinação de Polisorbato 20 / Polisorbato 80 e Poloxamer 188.

[120] Em algumas formas de realização, o Polisorbato 20 está presente numa quantidade de até 10 mg/mL. Em uma forma de

Petição 870190061378, de 01/07/2019, pág. 45/283

39/106 realização preferida, a quantidade de Polisorbato 20 é cerca de 0,05 mg/mL a cerca de 10 mg/mL. Em uma forma de realização mais preferida, a quantidade de Polisorbato 20 é cerca de 0,1

mg/mL a cerca de 1 mg/mL.	Numa forma	de	realização	mais
preferida,	a quantidade	de	Polisorbato	20	é cerca de	0,5
mg/mL.
[121] Em	algumas formas	de	realização, o	Polisorbato 80	está

presente numa quantidade de até 10 mg/mL. Em uma forma de realização preferida, a quantidade de Polisorbato 80 é cerca de 0,05 mg/mL a cerca de 10 mg/mL. Em uma forma de realização mais preferida, a quantidade de Polisorbato 80 é cerca de 0,1

mg/mL a cerca de	1 mg/mL.	Numa forma	de realização	mais
preferida,	a quantidade	de	Polisorbato	80 é cerca de	0,5
mg/mL.
[122] Em	algumas	formas	de	realização,	o Poloxamer 188	está

presente numa quantidade de até 10 mg/mL. Em uma forma de realização preferida, a quantidade de Poloxamer 188 é cerca de 0,05 mg/mL a cerca de 10 mg/mL. Em uma forma de realização mais preferida, a quantidade de Poloxamer 188 é cerca de 0,1 mg/mL a cerca de 1 mg/mL. Numa forma de realização mais preferida, a quantidade de Poloxamer 188 é cerca de 0,5 mg/mL.

[123] Em algumas formas de realização, a combinação de Polisorbato 20 / Polisorbato 80 e Poloxamer 188 é Polisorbato 8 0 numa quantidade de até 10 mg/mL e Poloxamer 188 numa quantidade de até 10 mg/mL. Em uma forma de realização preferida, a quantidade de Poloxamer 188 é cerca de 0,05 mg/mL

Petição 870190061378, de 01/07/2019, pág. 46/283

40/106 a cerca de 10 mg/mL e a quantidade de Polisorbato 20 /

Polisorbato 80 é cerca de 0,05 mg/mL a cerca de 10 mg/mL. Em

uma forma	de	realização	mais preferida, a	quantidade	de
Poloxamer	188	é cerca de	0,1 mg/mL a cerca	de 1 mg/mL	e a
quantidade	de	Polisorbato	20 / Polisorbato 80	é cerca de	0,1

mg/mL a cerca de 1 mg/mL. Numa forma de realização mais preferida, a quantidade de Polisorbato 20 / Polisorbato 80 é cerca de 0,5 mg/mL e a quantidade de Poloxamer 188 é cerca de 1,0 mg/mL.

[124] A composição aquosa compreende um ou mais agentes estabilizadores apropriados que são excipientes farmaceuticamente aceitáveis e protegem o ingrediente farmaceuticamente ativo da degradação quimica e/ou fisica durante a fabricação, armazenamento e uso. Em uma forma de realização, os agentes estabilizadores incluem, entre outros, aminoácidos, oligossacarideos ou derivados apropriados ou misturas destes. Em outra forma de realização preferida, o agente estabilizador apropriado é a trealose. Em outra forma de realização preferida, o agente estabilizador apropriado é a prolina. Em outra forma de realização preferida, o agente estabilizador apropriado é uma combinação de trealose e prolina. Em outra forma de realização preferida, o agente estabilizador apropriado é uma combinação de trealose e arginina.

[125] Em outra forma de realização, os oligossacarideos que também podem ser usados como agentes estabilizadores incluem a

Petição 870190061378, de 01/07/2019, pág. 47/283

41/106 trealose.

[126] Em algumas formas de realização, a trealose está presente numa quantidade de até 150 mg/mL. Em uma forma de realização preferida, a quantidade de trealose é cerca de 25 mg/mL a cerca de 150 mg/mL. Em uma forma de realização mais preferida, a quantidade de trealose é cerca de 50 mg/mL a cerca de 100 mg/mL. Em uma forma de realização mais preferida, a quantidade de trealose dihidratada é cerca de 80 mg/mL.

[127] Em outra forma de realização, a combinação de trealose e arginina é selecionada como agente estabilizador. Em algumas formas de realização, a trealose está presente em uma quantidade de até 150 mg/mL e a arginina em uma quantidade de até 1,0 mg/mL. Em uma corporificação preferida, a quantidade de trealose é cerca de 25 mg/mL a cerca de 150 mg/mL, e a quantidade de arginina é de 0,05 a 1,0 mg/mL. Em uma corporificação mais preferida, a quantidade de trealose é cerca de 50 mg/mL a cerca de 100 mg/mL, e a quantidade de arginina é de 0,05 a 0,2 mg/mL. Em uma forma de realização mais preferida, a quantidade de trealose dihidratada é cerca de 80 mg/mL, e a quantidade de cloridrato de arginina é cerca de 0,1 mg/mL.

[128] Em outra dessas formas de realização, um aminoácido que pode ser usado como agente estabilizador é a prolina.

[129] Em algumas formas de realização, a prolina está presente em uma quantidade de até 4 0 mg/mL. Em uma forma de realização preferida, a quantidade de prolina é cerca de 5

Petição 870190061378, de 01/07/2019, pág. 48/283

42/106 mg/mL a cerca de 40 mg/mL. Em uma forma de realização mais preferida, a quantidade de prolina é cerca de 20 mg/mL a cerca de 35 mg/mL. Em uma forma de realização mais preferida, a quantidade de prolina é cerca de 27 mg/mL.

[130] Em algumas formas de realização, a combinação de trealose e prolina é trealose em uma quantidade de até 150 mg/mL e prolina em uma quantidade de até 4 0 mg/mL. Em uma forma de realização preferida, a quantidade de trealose é cerca de 25 mg/mL a cerca de 150 mg/mL, e a quantidade de prolina é cerca de 5 mg/mL a cerca de 4 0 mg/mL. Em uma forma de realização mais preferida, a quantidade de trealose é cerca de 20 mg/mL a cerca de 50 mg/mL, e a quantidade de prolina é cerca de 10 mg/mL a cerca de 2 0 mg/mL. Em uma forma de realização mais preferida, a quantidade de trealose dihidratada é cerca de 40 mg/mL e a quantidade de prolina é cerca de 13,5 mg/mL.

[131] Em algumas formas de realização, a composição aquosa compreende de 50 a 200 mg/mL do anticorpo monoclonal anti-TNFa recombinante, de 0,4 a 1.2 mg/mL de acetato de sódio trihidratado, de 25 a 150 mg/mL de trealose e/ou de 5 a 40 mg/mL de prolina ou de 25 a 150 mg/mL de trealose, e de 0,05 a 0,5 mg/mL de arginina, ácido acético glacial até pH 5,0 a 6,0, de 0,1 mg/mL a 1 mg/mL de Polisorbato 20. Em uma forma de realização preferida da composição aquosa, o anticorpo monoclonal recombinante anti-TNFa é Adalimumabe. Em uma forma de realização mais preferida, a composição compreende de 50 a

Petição 870190061378, de 01/07/2019, pág. 49/283

43/106

150 mg/mL de Adalimumabe, 0,436 mg/mL de acetato de sódio trihidratado, 80 mg/mL de trealose dihidratada, ácido acético glacial até pH 5,5, 0,5 mg/mL de Polisorbato 20. Em uma forma de realização mais preferida, a composição compreende de 50 a 150 mg/mL de Adalimumabe, 0,436 mg/mL de acetato de sódio trihidratado, 80 mg/mL de trealose dihidratada, 0,1 mg/mL de cloridrato de arginina, ácido acético glacial até pH 5,5, 0,5 mg/mL de Polisorbato 20. Em uma forma de realização mais preferida, a composição compreende de 50 a 150 mg/mL de Adalimumabe, 0,436 mg/mL de acetato tri-hidratado de sódio, 27 mg/mL de prolina, ácido acético glacial até pH 5,5, 0,5 mg/mL de Polisorbato 20. Em uma forma de realização mais preferida, a composição compreende de 50 a 150 mg/mL de Adalimumabe, 0,436 mg/mL de acetato tri-hidratado de sódio, 40 mg/mL de trealose dihidratada, 13,5 mg/mL de prolina, ácido acético glacial até pH 5,5, 0,5 mg/mL de Polisorbato 20.

[132] Em algumas formas de realização, a composição aquosa compreende de 50 a 200 mg/mL do anticorpo monoclonal anti-TNFa recombinante, de 0,4 a 1.2 mg/mL de acetato de sódio trihidratado, de 25 a 150 mg/mL de trealose e/ou de 5 a 40 mg/mL de prolina ou de 25 a 150 mg/mL de trealose, e de 0,05 a 0,5 mg/mL de arginina, ácido acético glacial até pH 5,0 a 6,0, de 0,1 mg/mL a 1 mg/mL de Polisorbato 80. Em uma forma de realização preferida da composição aquosa, o anticorpo monoclonal recombinante anti-TNFa é Adalimumabe. Em uma forma de realização mais preferida, a composição compreende de 50 a

Petição 870190061378, de 01/07/2019, pág. 50/283

44/106

150 mg/mL de Adalimumabe, 0,436 mg/mL de acetato de sódio trihidratado, 80 mg/mL de trealose dihidratada, ácido acético glacial até pH 5,5, 0,5 mg/mL de Polisorbato 80. Em uma forma de realização mais preferida, a composição compreende de 50 a 150 mg/mL de Adalimumabe, 0,436 mg/mL de acetato de sódio trihidratado, 80 mg/mL de trealose dihidratada, 0,1 mg/mL de cloridrato de arginina, ácido acético glacial até pH 5,5, 0,5 mg/mL de Polisorbato 80. Em uma forma de realização mais preferida, a composição compreende de 50 a 150 mg/mL de Adalimumabe, 0,436 mg/mL de acetato tri-hidratado de sódio, 27 mg/mL de prolina, ácido acético glacial até pH 5,5, 0,5 mg/mL de Polisorbato 80. Em uma forma de realização mais preferida, a composição compreende de 50 a 150 mg/mL de Adalimumabe, 0,436 mg/mL de acetato tri-hidratado de sódio, 40 mg/mL de trealose dihidratada, 13,5 mg/mL de prolina, ácido acético glacial até pH 5,5, 0,5 mg/mL de Polisorbato 80.

[133] Em algumas formas de realização, a composição aquosa compreende de 50 a 200 mg/mL do anticorpo monoclonal anti-TNFa recombinante, de 0,4 a 1.2 mg/mL de acetato de sódio trihidratado, de 25 a 150 mg/mL de trealose e/ou 5 a 40 mg/mL de prolina ou de 25 a 150 mg/mL de trealose, e de 0,05 a 0,5 mg/mL de arginina, ácido acético glacial até pH 5,0 a 6,0, de 0,1 mg/mL a 1 mg/mL de Poloxamer 188. Em uma forma de realização preferida, o anticorpo monoclonal anti-TNFa recombinante é Adalimumabe. Em uma forma de realização mais preferida, a composição compreende de 50 a 150 mg/mL de

Petição 870190061378, de 01/07/2019, pág. 51/283

45/106

Adalimumabe, 0,436 mg/mL de acetato de sódio tri-hidratado, 80 mg/mL de trealose dihidratada, ácido acético glacial até pH 5,5, 1 mg/mL de Poloxamer 188. Em uma forma de realização mais preferida, a composição compreende de 50 a 150 mg/mL de Adalimumabe, 0,436 mg/mL de acetato de sódio tri-hidratado, 80 mg/mL de trealose dihidratada, 0,1 mg/mL de cloridrato de arginina, ácido acético glacial até pH 5,5, 1 mg/mL de

Poloxamer 188. Em uma forma de realização mais preferida, a composição compreende de 50 a 150 mg/mL de Adalimumabe, 0,436 mg/mL de acetato tri-hidratado de sódio, 27 mg/mL de prolina, ácido acético glacial até pH 5,5, 1,0 mg/mL de Poloxamer 188. Em uma forma de realização mais preferida, a composição compreende de 50 a 150 mg/mL de Adalimumabe, 0,436 mg/mL de acetato tri-hidratado de sódio, 40 mg/mL de trealose dihidratada, 13,5 mg/mL de prolina, ácido acético glacial até pH 5,5, 1,0 mg/mL de Poloxamer 188.

[134] Além disso, a referida composição pode incluir adicionalmente um ou mais excipientes apropriados que sejam bem conhecidos dos especialistas na arte.

[135] As composições acima são adequadas para administração intravenosa, subcutânea ou intramuscular.

[136] Em algumas formas de realização, a composição do liquido mantém a estabilidade de armazenamento para o efeito de que não há mais processos de agregação de proteínas ou modificações em comparação com a medida de estabilidade no momento zero.

Petição 870190061378, de 01/07/2019, pág. 52/283

46/106

[137]	Métodos	de	tratamento e	utilização de uma	composição
aquosa
[138]	Noutro	caso, a invenção	diz respeito a um	método	de
tratamento de	um	mamífero que	inclui a administração a	um

mamífero de uma quantidade terapêutica eficaz da composição farmacêutica da invenção em que o mamífero pode ter uma doença ou perturbação que pode ser tratada eficazmente com Adalimumabe.

[139] Numa forma de realização preferida, o mamífero é um humano.

[140] As doenças ou afecções que podem ser tratadas com as composições fornecidas incluem, como exemplos não limitativos, artrite reumatoide ativa (moderada a grave), artrite psoriásica ativa, espondilite anquilosante ativa, psoríase crônica (moderada a grave) em placas, (moderada a grave) colite ulcerativa, espondiloartrose axial, hidradenite supurativa, artrite idiopática juvenil, (moderada ou grave) doença de Crohn, uveíte, artrite associada à entesite ativa. Outras doenças ou distúrbios que podem ser tratados com as composições da presente invenção incluem aquelas descritas nas Patentes US n.°s 6090382 e 8216583, cujas partes relevantes são aqui incorporadas por referência.

[141] As composições farmacêuticas fornecidas podem ser administradas a um indivíduo que necessite de tratamento por injeção sistêmica, por exemplo por injeção intravenosa ou subcutânea, ou por injeção intramuscular, ou por injeção ou

Petição 870190061378, de 01/07/2019, pág. 53/283

47/106 aplicação num local relevante, por exemplo por injeção direta ou aplicação direta no local quando o local é exposto durante a cirurgia, ou por aplicação tópica.

[142] Num dos casos, a invenção diz respeito a um método de tratamento e/ou prevenção da artrite reumatoide que consiste em administrar a um mamífero que dela necessite uma quantidade terapêutica eficaz de uma das composições Adalimumabe previstas.

[143] A quantidade terapêutica efetiva de Adalimumabe nas composições fornecidas depende da condição a ser tratada, da gravidade da condição, da terapia prévia, do histórico médico do paciente e da resposta ao agente terapêutico. Uma dose apropriada pode ser ajustada de acordo com o julgamento do médico assistente para que possa ser administrada ao paciente de uma só vez ou através de múltiplas administrações.

[144] Em uma forma de realização, a quantidade efetiva de Adalimumabe por dose adulta é cerca de 1 a 500 mg/m2, ou cerca de 1 a 200 mg/m2, ou cerca de 1 a 40 mg/m2, ou cerca de 5 a 25 mg/m2.

[145]	Em	alternativa,	pode	ser administrada	uma dose fixa,
cuja quant	idade pode variar	entre 2 e 500 mg/dose, 2 a 100
mg/dose	ou	cerca de 10 a	80 mg/dose.
[146]	Se	a dose deve	ser	administrada mais	de uma vez por
semana,	o	intervalo de	dose	exemplar é igual	ou inferior aos

intervalos de dose acima mencionados, e é preferencialmente administrada duas ou mais vezes por semana numa gama de dose

Petição 870190061378, de 01/07/2019, pág. 54/283

48/106 de 25 a 100 mg/dose.

[147] Noutro caso, uma dose aceitável para administração por injeção compreende 80 a 100 mg/dose ou, em alternativa, 80 mg por dose.

[148]	A	dose	pode ser	administrada	semanalmente,
quinzenalmente ou	separada por	várias semanas	(por exemplo, de
2 a 8) .
[149]	Em	uma	forma de	realização, o	Adalimumabe é

administrado na dose de 40 mg por uma única injeção subcutânea (SC) .

[150] Em alguns casos, é possível melhorar o estado do paciente administrando uma dose de até 100 mg da composição farmacêutica uma a três vezes por semana durante um período de pelo menos três semanas. Para atingir o nível de melhoria desejado, pode ser necessário um tratamento por períodos mais longos. Para doenças crônicas incuráveis, o regime de tratamento pode ser continuado indefinidamente. Para pacientes pediátricos (idade de 4 a 17 anos), um regime de tratamento adequado pode incluir a administração de uma dose de 0,4 mg/kg a 4 mg/kg de Adalimumabe uma ou mais vezes por semana.

[151] Em outra forma de realização, as formulações farmacêuticas da invenção podem ser preparadas em uma formulação a granel, e como tal, os componentes da composição farmacêutica estão presentes nas quantidades mais elevadas do que seria necessário para a administração e são diluídos adequadamente antes da administração.

Petição 870190061378, de 01/07/2019, pág. 55/283

49/106 [152] As composições farmacêuticas podem ser administradas como um único agente terapêutico ou em combinação com agentes terapêuticos adicionais, conforme necessário. Assim, em uma forma de realização, os métodos fornecidos para tratar e/ou prevenir são usados em combinação com a administração de uma quantidade terapêutica eficaz de outro agente ativo. O outro agente ativo pode ser administrado antes, durante ou após a administração das composições farmacêuticas da invenção. O outro agente ativo pode ser administrado como parte da composição fornecida ou, em alternativa, como uma formulação separada.

[153] A administração das composições farmacêuticas fornecidas pode ser realizada de várias formas, incluindo parenteral, oral, bucal, nasal, retal, intraperitoneal, intradérmica, transdérmica, subcutânea, intravenosa, intraarterial, intra cardiaca, intraventricular, intracraniana, intratraqueal, intratecal, injeção intramuscular, injeção intravitrea e aplicação tópica.

[154] As composições farmacêuticas da presente invenção são particularmente úteis para administração parenteral, ou seja, subcutânea, intramuscular, intravenosa, intraperitoneal, intramedular, intra-articulária, intra-sinovial e/ou intratecal. A administração parenteral pode ser realizada por injeção em bolus ou infusão continua. As composições farmacêuticas para injeção podem apresentar-se sob a forma de dosagem unitária, por exemplo, mas não se limitam a ampolas,

Petição 870190061378, de 01/07/2019, pág. 56/283

50/106 frascos, seringas pré-carregadas ou em recipientes multidose com um conservante adicionado. Além disso, uma série de abordagens recentes de administração de medicamentos foram desenvolvidas, e as composições farmacêuticas da presente invenção são adequadas para administração por esses novos métodos, por exemplo, Inject-ease®, Genject®, injetores como GenPen® e dispositivos sem agulha como MediJector® e BioJector®. A composição farmacêutica da presente invenção também pode ser adaptada aos modos de administração ainda não descobertos. Ver também Langer, 1990, Science, 249:1527-1533.

[155] As composições farmacêuticas fornecidas também podem ser formuladas como uma preparação de depósito. Estas formulações de longa duração podem ser administradas por implante (por exemplo, por via subcutânea ou intramuscular) ou por injeção intramuscular. Assim, por exemplo, as formulações podem ser modificadas utilizando materiais poliméricos ou hidrofóbicos adequados (por exemplo, como uma emulsão num óleo aceitável) ou resinas de permuta iônica, ou como derivados moderadamente solúveis, por exemplo, como um sal moderadamente solúvel.

[156] As composições farmacêuticas podem, se desejado, ser fornecidas em um frasco, embalagem ou dispositivo dispensador, que pode conter uma ou mais formas de dosagem unitária compreendendo o principio ativo. Numa única forma de realização, o dispositivo dispensador pode incluir uma seringa constituída por uma única dose de um liquido pronto para

Petição 870190061378, de 01/07/2019, pág. 57/283

51/106 injeção. A seringa pode ser acompanhada da instrução de administração.

[157] Em outra forma de realização, a presente invenção fornece um kit ou recipiente contendo uma composição farmacêutica aquosa da invenção. A concentração de polipeptídio na composição farmacêutica aquosa pode variar em uma ampla faixa, mas geralmente dentro da faixa de aproximadamente 1 a cerca de 200 mg/mL da formulação aquosa. O kit também pode ser acompanhado pelas instruções de utilização.

[158] Método de produção [159] Um método de obtenção das composições supra consiste na adição de agentes-tampão de acetato a uma fase aquosa seguida da adição, por qualquer ordem, dos seguintes componentes: um osmólito e/ou um agente estabilizador selecionado do grupo de trealose, prolina ou uma combinação destes; um anticorpo monoclonal anti-TNFa recombinante; uma substância tensoativa selecionada do grupo de Polisorbato 20, Polisorbato 80, Poloxamer 188 ou uma combinação destes.

TÉCNICAS [160] 1. Determinação da Concentração de Proteínas em Amostras de Teste.

[161] A concentração de proteína foi determinada por espect rof otomet ria UV com comprimento de onda de 280 nm em placas de espectrofotometria UV.

[162] Cada amostra foi diluída com solução apropriada de

Petição 870190061378, de 01/07/2019, pág. 58/283

52/106 placebo até uma concentração de ~ 0,5 mg/mL. 150pL da amostra diluída foi colocado em um poço da placa de espectrofotometria UV. A densidade óptica das soluções de placas foi medida utilizando um leitor de placas no comprimento de onda de 280 nm. A solução apropriada de placebo foi utilizada como solução de referência.

[163] A concentração de proteína (C) em mg/mL foi calculada pela seguinte fórmula:

[164] C=[A₂8o*b] / (e*l) [165] A₂8o é o valor da densidade óptica no comprimento de onda de 280 nm;

[166] e é o valor de extinção da proteína de estudo;

[167] b é a razão total de diluição da amostra;

[168] 1 é a espessura da camada por poço de placa; para 150μί, 1 = 0,42 cm.

[169] 2. Substituição de Tampão e Concentração de Amostra.

[170] Diafiltração e concentração das amostras foram realizadas em células de concentração de Stirred Cell (Millipore) sob pressão.

[171] 3. Agregação PEG.

[172] Preparação de soluções PEG 6000.

[173] Foi preparada uma solução de PEG 6000 com uma concentração em massa de 20-25% na formulação do aditivo de estudo. As soluções resultantes foram filtradas através de um filtro Durapore 0.45pm.

[174] A quantidade calculada da amostra, a solução aditiva e

Petição 870190061378, de 01/07/2019, pág. 59/283

53/106 a solução 20-25% de PEG 6000 foram transferidas para placas de espectrofotometria UV de 96 poços, de modo que a concentração de PEG6000 por poço foi de 0 a 18%, e a concentração de proteína por poço foi de 1 mg/mL. Todas as soluções resultantes em poços foram bem misturadas por pipetagem.

[175] Em seguida, o grau de turbidez da solução foi avaliado visualmente e a densidade óptica das soluções foi medida em um comprimento de onda de 400 nm. Quanto menos estável for a amostra, menor será a concentração de PEG 6000, formando agregados visíveis (opalescência). O grau de turbidez da solução também foi avaliado após um ou mais dias após a preparação da solução.

[176] 4. Homogeneidade da proteína e determinação do ponto de agregação usando a técnica de difusão de luz dinâmica (DLS).

[177] A determinação da homogeneidade da amostra do estudo foi realizada em um Zetasizer Nano ZSP no modo de medição de tamanho. Para isso, 0,05 mL da solução foi colocado em uma cubeta plástica descartável sem poeira.

[178] Modelo analítico: Análise de proteínas.

[179] Manter a temperatura durante 30 segundos antes da medição.

[180] Em cada ponto, uma média de 13 medições em 3 réplicas.

[181] A determinação do ponto de agregação proteica do estudo foi realizada no Zetasizer Nano ZSP. Para este efeito, a solução foi colocada numa cuveta sem pó de quartzo, que foi gradualmente aquecida no instrumento enquanto mede

Petição 870190061378, de 01/07/2019, pág. 60/283

54/106 continuamente a intensidade da luz dispersa no modo de medição de tendência de temperatura.

[182] Modelo analítico: Análise de proteínas.

[183] Tendência de temperatura, mod: Ponto de agregação de proteínas. De 50 a 85°C na fase de aquecimento de 1,5°C.

[184] Manter a temperatura durante 30 segundos antes da medição.

[185] Em cada ponto, uma média de 15 medições em 1 replicação.

[186] Foi traçada uma tendência de temperatura utilizando o software do instrumento, que calcula automaticamente o ponto de agregação de proteínas (ponto de agregação).

[187] 5. Determinação da estabilidade térmica pela técnica Thermostress 50°C.

[188] As amostras de teste foram divididas em 2 partes e colocadas em tubos separados: 1 tubo para cada formulação foi armazenado num frigorífico a +4°C, as restantes foram colocadas numa incubadora e incubadas a 50°C durante o tempo especificado. Ao completar o período de aquecimento, os tubos foram retirados da incubadora, mantidos à temperatura ambiente por cerca de 15 minutos e submetidos à análise de acordo com a especificação.

[189] 6. Determinação da estabilidade coloidal pela técnica de Shake-Test .

[190] As amostras foram divididas em 2 partes de 200pL cada e colocadas em frascos de vidro, 1 frasco de cada formulação foi

Petição 870190061378, de 01/07/2019, pág. 61/283

55/106 armazenado na geladeira a + 4°C, o restante foi colocado em um termo agitador e agitado a 800 rpm a 2-8°C pelo tempo especificado. Ao completar a tensão, os tubos foram retirados

do termo agitador e :	submetidos à	análise de	acordo com	a
especificação.
[191] 7. Determinação	da estabilidade coloidal	por técnica	de
crioconcentração.
[192] As amostras de	teste foram	divididas	em 2 partes	e

colocadas em tubos poliméricos: 1 tubo para cada formulação foi armazenado em uma geladeira a +4°C, o restante foi colocado em uma câmara de congelamento e armazenado a menos 16 a 20°C pelo tempo especificado. Ao completar a tensão, os tubos foram retirados da câmara de congelamento, deixados em repouso à temperatura ambiente até que o conteúdo estivesse completamente descongelado, as soluções foram misturadas com misturador Vortex e submetidas à análise de acordo com a especificação.

[193] 8. Determinação da Pureza da Amostra pela Técnica de Cromatografia Liquida de Alto Desempenho (SE-HPLC) de Exclusão de Tamanho.

[194] Coluna: Tosoh TSK-GelG3000SWXL 7,8 mm ID x 30 cm, cat.

# 08541.

[195] Temperatura da coluna: 25 °C.

[196] Caudal de fase móvel: 0,7 mL/min.

[197] Volume injetado: 20pL.

[198] Concentração da amostra: 5 mg/mL.

Petição 870190061378, de 01/07/2019, pág. 62/283

56/106 [199] Comprimento de onda do detector: 220 nm.

[200] Tempo de eluição: 23 min.

[201] Fase móvel: Hidrofosfato dissódico anidro: 7,1 mg/mL; cloreto de sódio: 17,54 mg/mL.

[202] pH da fase móvel foi ajustado para 7,0 com ácido ortofosfórico.

[203] 9. Determinação do perfil ácido-base da amostra usando o instrumento Caliper LabChip GX II.

[204] 9.1. Preparação da amostra.

[205] As amostras foram diluidas para uma concentração de 1 mg/mL. 2pL da solução de 5 mg/mL de carboxipeptidase B (CpB) foi adicionado a 200pL da solução resultante. Foi agitada e incubada durante 2 horas a 37°C. As amostras de teste foram dialisadas contra três mudanças de água em tubos centrifugados Amicon Ultra e concentradas a 2 mg/mL.

[206] 9.2. Preparação da solução de trabalho.

[207] As soluções de trabalho e uma placa com as amostras do ensaio foram preparadas de acordo com o procedimento do fabricante utilizando o kit de rotulagem de variantes de carga de proteina HT.

[208] 9.3. Preparação do chip.

[209] A preparação do chip e do tubo com tampão foi realizada de acordo com o procedimento do fabricante, utilizando soluções tampão do kit de tampão da variante de carga proteica.

[210] 0 inicio do ensaio é uma operação padrão. Ensaio da

Petição 870190061378, de 01/07/2019, pág. 63/283

57/106

Variante de Carga de Proteína 68s.

[211] 10. Determinação da pureza da amostra utilizando o instrumento Caliper Labchip GX II em condições redutoras e não redutoras.

[212] 10.1. Preparação da amostra do ensaio.

[213] 700pL do amortecedor expresso da amostra da proteína do HT do amortecedor suplementado com 24.5pL de 1M DTT para o amortecedor sob circunstâncias reduzindo e 24.5pL de 1M IAM para o amortecedor sob condições não redutora foi usado para preparar desnaturação e reduzir soluções. As amostras foram diluídas a uma concentração de 2 mg/mL. Dois micróbios foram preparados para cada amostra - 35pL de tampão de desnaturação foi adicionado a um, 35pL de tampão de redução foi adicionado a outro. As amostras foram desnaturadas a 100°C por 5 minutos. Os tubos foram vortexados, então 70pL de água foi adicionada a cada tubo e misturada. 44pL de cada amostra foi transferido para uma placa de 96 poços para análise.

[214] 10.2. Preparação de soluções de trabalho e carregamento de cavacos.

[215] A solução de trabalho e a preparação do chip foram realizadas de acordo com um procedimento padrão usando o Kit de Reagentes Expresso de Proteína HT. O início do ensaio é uma operação padrão. Ensaio HT Proteína Express 200.

[216] 11. Determinação do perfil de ácido-base da amostra usando HPLC de Troca-Iônica (IE).

Petição 870190061378, de 01/07/2019, pág. 64/283

58/106

Coluna:	DIONEX ProPack WCX-10 4 mm x 250 mm (biociência Tosoh, Japão)
Pré-coluna:	Dionex ProPack WCX-10G
Fase móvel:	Eluente A: 0.01 M Ácido 2-(N- morfolino)etanossulfônico (TABELA), pH 6, 0
Eluente B:	0.01 M TABELA, 0.4 M Cloreto de sódio, pH 5.5
Volume injetado:	40pL
Taxa de fluxo:	0,5 mL/min
Temperatura da coluna:	25°C
Temperatura do amostrador automático:	5°C
Comprimento de onda de detecção:	2 80 nm
Gradiente:	Fase A 95 - 0 - 95 %

[217] 12. Determinação da Pureza por Eletroforese em Gel de Poliacrilamida (PAGE) sob Condições Redutoras e Não Redutoras.

[218] O PAG foi preparado na presença de dodecilsulfato de sódio em placas de vidro consistindo de uma camada concentradora de 4% de PAGE e uma camada separadora: 12,5% PAG para condições redutoras, 8% PAG para condições não redutoras.

[219] A câmara de eletroforese foi montada e instalada de acordo com o manual operacional do dispositivo de eletroforese vertical. As amostras foram preparadas diluindo as amostras com água purificada até uma concentração final de 1 mg/mL. Tomou-se um volume equivalente a 40 pg e os espécimes preparados da amostra teste foram misturados numa proporção de 3:1 (v/v) com uma solução tampão de aplicação da amostra

Petição 870190061378, de 01/07/2019, pág. 65/283

59/106 contendo 2-mercaptoetanol (condições redutoras) e não contendo 2-mercaptoetanol (condições não redutoras), misturados. As soluções resultantes foram incubadas a uma temperatura de (99 ± 1) °C durante 3 minutos (amostras contendo 2-mercaptoetanol) e a uma temperatura de (99 ± 1) °C durante 1 minuto (amostras não contendo 2-mercaptoetanol) . As soluções foram resfriadas à temperatura ambiente, misturadas e transferidas para os poços de PAG sob a camada de solução tampão de execução.

[220] A eletroforese foi executada num modo de corrente continua utilizando um sistema de arrefecimento a água. Os parâmetros da fonte de alimentação foram definidos da seguinte forma: quando a frente do corante passava pelo gel de empilhamento, a tensão era de 110 V. Uma vez que a frente do corante entrou no gel de corrida inferior de 5 a 7 mm, a tensão foi aumentada para 180 V. A fonte de alimentação foi desligada quando a frente do corante atingiu o limite inferior do gel.

[221] Terminada a eletroforese, os géis foram separados dos vidros e as proteínas foram fixadas com a solução de fixação por 16 a 18 horas à temperatura ambiente. Além disso, os géis foram corados (em solução de ácido azul 83) e lavados até uma visão clara das bandas. Os géis foram analisados. A pureza e impurezas nas amostras de teste foram avaliadas usando o software GelPro.

[222] 13. Determinação de atividade específica.

[223] A atividade específica da amostra foi avaliada pela

Petição 870190061378, de 01/07/2019, pág. 66/283

60/106 capacidade de se ligar especificamente e neutralizar TNFa, que por sua vez tem um efeito citotóxico e causa a morte da cultura var WEHI-13 (fibrossarcoma, Mus musculus), uma variante da cultura que tem sensibilidade aumentada para TNFa na presença de actinomicina D. O preparo da amostra foi realizado utilizando-se uma estação robótica TecanEvo 200, RPMI1640, 2 mM Gin, 10% FBS, 2,5 pg/mL de actinomicina D, 5 pg/mL de gentamicina foram utilizados como meio de quantificação.

[224] A amostra de anticorpo teste foi diluída para 50 pg/mL com um passo de diluição não superior a 20 e colocada na estação robótica. Usando o TecanEvo200, três diluições independentes de RS e IS na faixa de 10.000 a 0,5 ng/mL foram preparadas em placas de cultura, 500 pg/mL de solução de TNFa foram adicionados às diluições preparadas. A mistura resultante foi agitada e incubada em temperatura ambiente por 1 hora.

[225] Após a incubação, (0,5 ±0,1) x 106 células/mL de suspensão de células var. As placas foram colocadas em uma incubadora de CO2 e incubadas à temperatura de (37 ± 1)°C, 5% de CO2 em ar umidificado por 20-24 h.

[226] No final do período de incubação, o corante vital Alamar Blue foi adicionado às placas de cultura e as placas foram incubadas nas mesmas condições até o desenvolvimento da cor. A intensidade de fluorescência foi avaliada em um comprimento de onda de excitação/emissão de 544/590 nm usando

Petição 870190061378, de 01/07/2019, pág. 67/283

61/106 um dispositivo de leitura Infinite M200Pro. As curvas de intensidade de fluorescência versus concentração de proteínas foram plotadas usando o software Magellan 7.2; o alinhamento paralelo das curvas resultantes foi avaliado. A atividade específica relativa das amostras para ensaio foi determinada como a amostra de referência ED50 para a razão ED50 da amostra para ensaio, expressa em percentagem.

[227] Os seguintes exemplos são fornecidos para a melhor compreensão da invenção. Estes exemplos são fornecidos apenas para fins ilustrativos e não devem ser interpretados como limitando de forma alguma o âmbito da invenção.

[228] Todas as publicações, patentes e pedidos de patente citados nesta especificação estão aqui incluídos por referência. Embora a invenção acima tenha sido descrita com algum detalhe a título de ilustração e exemplo para fins de clareza, como será apreciado por aqueles qualificados na arte baseada no ensino aqui revelado, certas mudanças e modificações podem ser feitas sem se afastar do espírito e do escopo das formas de realização fechadas da invenção.

EXEMPLOS [229] Exemplo 1. Seleção da Natureza da Solução Tampão.

[230] Formulações de Estudo.

[231] Quat ro soluções tampão foram selecionadas para este estudo, e as formulações originais da preparação Humira (para formulações com conteúdo proteico de 50 mg/mL e 100 mg/mL) foram usadas como controle.

Petição 870190061378, de 01/07/2019, pág. 68/283

62/106

Humira 1	Hidrofosfato dissódico di-hidratado: 1,530 mg/mL Di-hidrofosfato de sódio di-hidratado: 0,860 mg/ mL Manitol:12,0 mg/mL Ácido citrico mono-hidratado: 1,305 mg/mL Polisorbato 80: 1,0 mg/mL Citrato de sódio: 0,305 mg/mL Cloreto de sódio: 6,165 mg/mL Hidróxido de sódio: até pH 5.2
Humira 2	Manitol: 42,0 mg/mL Polisorbato 80: 1,0 mg/mL
Acet, pH 5, 0	Acetato de sódio tri-hidratado: 0,436 mg/mL Ácido acético glacial: até pH 5.0
Cit, pH 5,0	Citrato de sódio di-hidratado: 0,932 mg/mL Ácido citrico anidro: 0,352 mg/mL
Seu, pH 6.0	L-histidina: 0,40 mg/mL Cloridrato de histidina mono-hidratado: 0,40 mg/ mL
PB, pH 6,0	Di-hidrofosfato de sódio mono-hidratado: 1,21 mg/ mL Fosfato de sódio anidro: 0,17 mg/mL

[232] 1.1 Determinação da Estabilidade Coloidal por Agregação de PEG.

[233] O teste de agregação do PEG foi realizado em triplicata para cada amostra. A análise foi realizada de acordo com o procedimento 3. Os dados sobre a densidade óptica média das soluções são apresentados no quadro 1. Os resultados também são mostrados na Fig. 1.

Petição 870190061378, de 01/07/2019, pág. 69/283

63/106 [234] Tabela 1. A densidade óptica média das soluções após a preparação.

PEG 6000, %	0 %	2 %	4 %	6 %	8 %
Acet, pH 5,0	0.0597	0.0519	0.0531	0.0593	0.0590
Cit, pH 5,0	0.0582	0.0620	0.0620	0.0639	0.6261
Seu, pH 6.0	0.0583	0.0615	0.0621	0.0634	0.0637
PB, pH 6,0	0.0598	0.0619	0.0654	0.0656	0.0712
Humira 1	0.0563	0.0583	0.0594	0.0614	0.3005
Humira 2	0.0605	0.0579	0.0608	0.0834	0.0845
PEG 6000, %	10 %	12 %	14 %	16 %	18 %
Acet, pH 5,0	0.0598	0.0502	0.0513	0.0591	0.0608
Cit, pH 5,0	1.0340	1.4279	1.4765	1.3668	1.4133
Seu, pH 6.0	0.0664	0.0781
PB, pH 6,0	0.9003	1.3453		lllliglili
Humira 1	0.9315	1.1182	1.3925	1.3980	1 ♦ 41-2 0
Humira 2	0.0685	0.0673	0.0658	0.0803
Há agregado visível

[235] 1.2 Determinação da estabilidade térmica pelo ponto de agregação de proteínas usando a técnica de dispersão de luz dinâmica (DLS).

[236] A análise foi realizada de acordo com o procedimento 4. Os resultados são apresentados na Tabela 2 e na Fig. 4-8.

[237] 1.3 Determinação da estabilidade térmica sob exposição a longo prazo usando o método Thermostress 50°C.

[238] A análise foi realizada de acordo com o procedimento 5.

Os resultados são apresentados na Tabela 2.

[239] 1.4 Resultados.

Petição 870190061378, de 01/07/2019, pág. 70/283

64/106 [240] Tabela 2. Resumo da seleção da natureza da solução tampão.

Formulação	Tensão térmica 50°C, 24 h	Agregação visível no PEG 6000 %. (tipo SP)	Ponto de agregação, °C (DLS)
Aumento das impurezas, %. (SE-HPLC)	Aumento do número de fragmentos, %. (SE-HPLC)
Concentração
	5 mg/mL	1 mg/mL
de proteínas
Acet, pH 5,0
Cit, pH 5,0
Seu, pH 6.0	0.75		14
PB, pH 6,0	0.55	0.11	10	71.0
Humira 1	0.38	0.15
Humira 2

resultados negativos resultados médios [241] 1.5 Conclusões do Exemplo 1.

[242] Com base nos resultados deste estudo, recomenda-se a formulação de armazenamento (excluindo aditivos adicionais):

Acet, pH 5,0

Acetato de sódio tri-hidratado: 0,436 mg/mL

Ácido acético glacial: até pH 5.0 [243] A presente formulação mostrou as melhores propriedades estabilizantes entre todas as amostras de teste: o menor aumento de impurezas durante o estresse térmico (0,02% a par da formulação de Humira 2), a ausência de agregação a 18% PEG

Petição 870190061378, de 01/07/2019, pág. 71/283

65/106

6000, e a maior temperatura de agregação (74°C).

[244] Adalimumabe com formulação de Humira 1 tem uma estabilidade térmica inferior à da formulação recomendada. Minima estabilidade coloidal e térmica foi observada para a formulação baseada em solução tampão citrato 5 mM com pH de 5, 0 .

[245] Exemplo 2. Composição pH e otimização da capacidade tampão.

[246] Com base nos resultados da primeira parte do estudo, Adalimumabe mostrou a melhor estabilidade na solução tampão acetato com pH 5,0. De acordo com o estado da técnica, a maioria das patentes e pedidos de patente de composições farmacêuticas compostas por Adalimumabe protegem soluções com pH de 4,0 a 8,0. Assim, o objetivo desta seção foi estudar a possibilidade de obter composições estáveis compreendendo ions acetato com pH inferior a 4.

[247] Formulações de Estudo.

Abreviatura	Concentração, mM	PH
Acet 5 mM pH 6	5	6.0
Acet 5 mM pH 5,5	5	5.5
Acet 5 mM pH 5	5	5.0
Acet 5 mM pH 4	5	4.0
Acet 5 mM pH 3,75	5	3.75
Acet 5 mM pH 3,5	5	3.5
Acet 10 mM pH 6	10	6.0
Acet 10 mM pH 5,5	10	5.5
Acet 10 mM pH 5	10	5.0

Petição 870190061378, de 01/07/2019, pág. 72/283

66/106

Acet 10 mM pH 4	10	4.0
Acet 10 mM pH 3,75	10	3.75
Acet 10 mM pH 3,5	10	3.5
Acet 20 mM pH 6	20	6.0
Acet 20 mM pH 5,5	20	5.5
Acet 20 mM pH 5	20	5.0
Acet 20 mM pH 4	20	4.0
Acet 20 mM pH 3,75	20	3.75
Acet 20 mM pH 3,5	20	3.5

[248] 2.	1. Determinação da	Estabilidade	Coloidal	por
Agregação	de PEG.
[249] 0	teste	de agregação	do PEG foi	realizado	em
triplicata	para	cada amostra.	A análise foi	realizada	de

acordo com o procedimento 3. Os dados sobre a densidade óptica média das soluções são apresentados no quadro 3. Os resultados também são mostrados na Fig. 2.

[250] Tabela 3. Densidade óptica média (400 nm) das soluções após preparação.

PEG 6000, %	Acet 5 mM pH 6	Acet 5 mM pH 5,5	Acet 5 mM pH 5	Acet 5 mM pH 4	Acet 5 mM pH 3,75
0 %	0.0341	0.0344	0.0299	0.0303	0.0312
6 %	0.0346	0.0341	0.0293	0.0294	0.0290
8 %	0.0344	0.0342	0.0290	0.0291	0.0295
10 %	0.0346	0.0331	0.0298	0.0298	0.0297
12 %	0.0348	0.0338	0.0302	0.0313	0.0319
14 %	0.0361	0.0346	0.0313	0.0327	0.0331
16 %	0.0359	0.0341	0.0341	0.0331	0.0333
18 %	0.0348	0.0350	0.0308	0.0308	0.0310

Petição 870190061378, de 01/07/2019, pág. 73/283

67/106

PEG 6000, %	Acet 5 mM pH 3,5	Acet 10 mM pH 6	Acet 10 mM pH 5,5	Acet 10 mM pH 5	Acet 10 mM pH 4
0 %	0.0285	0.0365	0.0314	0.0289	0.0290
6 %	0.0288	0.0315	0.0316	0.0316	0.0296
8 %	0.0289	0.0355	0.0322	0.0312	0.0289
10 %	0.0296	0.0344	0.0331	0.0299	0.0296
12 %	0.0358	0.0371	0.0318	0.0303	0.0295
14 %	0.0327	0.0367	0.0316	0.0313	0.0326
16 %	0.0329	0.0346	0.0316	0.0339	0.0334
18 %	0.0310	0.0344	0.0355	0.0307	0.0314

[251] Tabela 3. Densidade óptica média (400 nm) das soluções após preparação -continuação.

PEG 6000, %	Acet 10 mM pH 3,75	Acet 10 mM pH 3,5	Acet 10 mM pH 3,5	Acet 2 0 mM pH 6	Acet 2 0 mM pH 5,5
0 %	0.0281	0.0292	0.0292	0.0344	0.0310
6 %	0.0292	0.0288	0.0288	0.0346	0.0322
8 %	0.0299	0.0337	0.0337	0.0381	0.0328
10 %	0.0295	0.0306	0.0306	0.0346	0.0316
12 %	0.0319	0.0321	0.0321	0.0346	0.0318
14 %	0.0309	0.0331	0.0331	0.0398	0.0320
16 %	0.0306	0.0320	0.0320	0.0361	0.0310
18 %	0.0313	0.0313	0.0313	0.0356	0.0311
PEG 6000, %	Acet 2 0 mM pH 5	Acet 2 0 mM pH 4	Acet 2 0 mM pH 3,75	Acet 2 0 mM pH 3,5	—
0 %	0.0295	0.0289	0.0289	0.0289	—
6 %	0.0289	0.0304	0.0294	0.0285	—
8 %	0.0292	0.0307	0.0296	0.0298	—

Petição 870190061378, de 01/07/2019, pág. 74/283

68/106

10 %	0.0295	0.0291	0.0302	0.0312	—
12 %	0.0300	0.0308	0.0301	0.0308	—
14 %	0.0322	0.0312	0.0315	0.0306	—
16 %	0.0325	0.0321	0.0315	0.0320	—
18 %	0.0322	0.0321	0.0324	0.0362	—

[252] 2.2. Determinação da estabilidade térmica sob exposição a longo prazo usando o método Thermostress 50°C.

[253] A análise foi realizada de acordo com o procedimento 5.

[254] 2.3. Determinação da estabilidade coloidal pela técnica de Shake-Test.

[255] A análise foi realizada de acordo com o procedimento 6.

[256] 2.4. Determinação da estabilidade coloidal por técnica de crioconcentração.

[257] A análise foi realizada de acordo com o procedimento 7.

[258] O quadro 4 apresenta um resumo da situação, no qual são demonstradas as medidas de qualidade da amostra antes e depois do stress térmico, do ensaio de agitação e da crioconcentração.

[259] 2.5. Resultados.

[260] Tabela 4. Resumo das medidas de qualidade da amostra antes e depois do stress.

	Controle de entrada
PH placebo	pH após diálise	Δ pH após diálise	Proteína C, mg/mL	Turbidez, DO 400 nm
Tipo SP
5 mM acet pH 6,0	6.00	6.10		10	0.0506
10 mM acet pH 6,0	6.00	6.06		10	0.0531

Petição 870190061378, de 01/07/2019, pág. 75/283

69/106

20 mM acet pH 6,0	6.00	6.04		10	0.0511
5 mM acet pH 5,5	5.50	5.60		10	0.0513
10 mM acet pH 5,5	5.50	5.53		10	0.0531
20 mM acet pH 5,5	5.50	5.51		10	0.0514
5 mM acet pH 5,0	5.00	5.15		10	0.0504
10 mM acet pH 5,0	5.00	5.12		10	0.0501
20 mM acet pH 5.0	5.00	5.09		10	0.0488
5 mM acet pH 4,0	4.00	4.35		10	0.0446
10 mM acet pH 4,0	4.00	4.22	0.22	10	0.0471
20 mM acet pH 4,0	4.00	4.20	0.20	10	0.0489
5 mM acet pH 3,75	3.75	4.04	0.29	10	0.0504
10 mM acet pH 3,75	3.75	4.01	0.26	10	0.0501
20 mM acet pH 3,75	3.75	3.95	0.20	10	0.0473
5 mM acet pH 3,5	3.50	3.90		10	0.0511
10 mM acet pH 3,5	3.50	3.84		10	0.0476
20 mM acet pH 3,5	3.50	3.79	0.29	10	0.0492

Resultados resultados negativos

médios/dados de base [261] Tabela 5.

	Tensão térmica 50°C, 96 h
Δ pH*	Variação da pureza*, %,	Turbidez , 400 nm	Perfil ácidobase Δ abs. %**
SE-HPLC	Caliper EP, vermelho	Caliper EP, não vermelho	Tipo SP	Calibrador
5 mM acet pH 6,0
10 mM acet pH 6,0					32.34
20 mM acet pH 6,0			-2.09		33.09
5 mM acet pH 5,5				^llj
10 mM acet pH 5,5
20 mM acet pH 5,5			-2.33
5 mM acet pH 5,0			Bi

Petição 870190061378, de 01/07/2019, pág. 76/283

70/106

10 mM acet pH 5,0		-2.06
20 mM acet pH 5.0 5 mM acet pH 4,0 10 mM acet pH 4,0	1111111111 IgMi -2.0° -2.57	-2.67 -2.55	ΙΙΜΙΜΜΙΙ^Μ
20 mM acet pH 4,0	iSiiiil -2.85
5 mM acet pH 3,75	Éiiiili -3.32
10 mM acet pH 3,75	ÍM~³·⁰⁹	-2.62	30.85
20 mM acet pH 3,75		-2.36	30.95
5 mM acet pH 3,5
10 mM acet pH 3,5
20 mM acet pH 3,5

[262] Tabela 5 - continuação.

	Teste de agitação 800 rpm, 96 h
Δ pH*	Variação da pureza*, %.	Turbidez, DO 400 nm	Perfil ácidobase Δ abs. %**
SE- HPLC	Cali— per EP, vermelho .	Cali-per EP, não vermelho .	Tipo SP	Calibrador
5 mM acet pH 6,0
10 mM acet pH 6,0						3.41
20 mM acet pH 6,0						3.98
5 mM acet pH 5,5
10 mM acet pH 5,5
20 mM acet pH 5,5

10 mM acet pH 5,0	mm	-0.50	111111111¾			3.22
20 mM acet pH 5.0		-0.51		llll·
5 mM acet pH 4,0	Iiiiíi			i P.. 05	II
10 mM acet pH 4,0						3.44
20 mM acet pH 4,0
5 mM acet pH 3,75				-1.41

Petição 870190061378, de 01/07/2019, pág. 77/283

71/106 mM acet pH 3,75 mM acet pH 3,75 mM acet pH 3,5 mM acet pH 3,5 mM acet pH 3,5

[263] Tabela 5 - continuação.

	Congelamento -20 ° C, descongelação + 25 ° C
Δ pH*	Variação da pureza*, %, %.
SE-HPLC	Caliper ΞΡ, vermelho.	Caliper ΞΡ, não vermelho.
5 mM acet pH 6,0				«1«
10 mM acet pH 6,0
20 mM acet pH 6,0		-1.23
5 mM acet pH 5,5
10 mM acet pH 5,5
20 mM acet pH 5,5
5 mM acet pH 5,0
10 mM acet pH 5,0				+ 1.09
20 mM acet pH 5.0
5 mM acet pH 4,0		-1.29	Í.........................................................................................
10 mM acet pH 4,0		-1.77
20 mM acet pH 4,0		-1.62
5 mM acet pH 3,75		-1.49	-1.74
10 mM acet pH 3,75		-1.76	-1.68
20 mM acet pH 3,75				+ 1.03
5 mM acet pH 3,5		-1.22
10 mM acet pH 3,5		-1.97	-1.59
20 mM acet pH 3,5		-2.98	-1.13	+ 1.02

[264] Tabela 5. Continuação.

Congelamento -20 ° C, descongelação + 25

Petição 870190061378, de 01/07/2019, pág. 78/283

72/106

	Turbidez, DO 400 nm	Perfil ácido-base Δ abs. %**
Tipo SP	Calibrador
5 mM acet pH 6,0
10 mM acet pH 6,0
20 mM acet pH 6,0		4.11
5 mM acet pH 5,5
10 mM acet pH 5,5
20 mM acet pH 5,5		4.01
5 mM acet pH 5,0
10 mM acet pH 5,0		4.46
20 mM acet pH 5.0
5 mM acet pH 4,0
10 mM acet pH 4,0
20 mM acet pH 4,0		4.54
5 mM acet pH 3,75
10 mM acet pH 3,75
20 mM acet pH 3,75		4.70
5 mM acet pH 3,5
10 mM acet pH 3,5		6.83
20 mM acet pH 3,5		4.88

[265] * A mudança foi calculada pela fórmula Δ =(Valor depois da tensão - Valor antes da tensão) ** A mudança absoluta foi calculada pela fórmula Δ =|Conteúdo da fração ácida antes do stress - Conteúdo da fração ácida depois do stress| + |Conteúdo da fração básica antes do stress - Conteúdo da fração básica após o stress| + |Conteúdo da fração dominante antes da tensão - Conteúdo da fração dominante após a tensão|.

Petição 870190061378, de 01/07/2019, pág. 79/283

73/106

[266] 2	. 6. Conclu	sões do	Exemplo	2 .
[267]	0 estudo	mostrou	que a	presença de	Adalimumabe	em
soluções	ácidas de	placebo	leva a	um aumento	significativo	no
nível de	pH. Além	disso,	composições com pH	inferior a	5, 0
demonstraram baixa	estabilidade	durante a	diálise (baixa
pureza no calibrador Labchip sob condições	de redução)	e
estresse	térmico	(baixa	pureza	após estresse em todos	os

métodos de ensaio utilizados).

[268] A amostra mais estável entre todas as estudadas é a de Adalimumabe em solução tampão de acetato 5 mM com pH de 5,0 a 6,0. Eles demonstraram uma mudança mínima na pureza e no perfil ácido-base durante as tensões. Para criar uma composição de Adalimumabe, no entanto, é possível usar soluções com uma capacidade de buffer maior.

[269] Exemplo 3. Seleção de agentes osmóticos e estabilizadores.

[270] Com base nos resultados da primeira parte do estudo,

Adalimumabe mostrou a melhor estabilidade na solução tampão acetato com pH 5,0-6,0. A formulação com pH 5,5 foi usada como base para a seleção do osmólito e agente estabilizador.

[271] Formulações de Estudo.

Humira 1

Hidrofosfato dissódico di-hidratado: 1,530 mg/mL Di-hidrofosfato de sódio di-hidratado: 0,860 mg/mL Manitol: 12,0 mg/mL Ácido cítrico mono-hidratado: 1,305 mg/mL Polisorbato 80: 1,0 mg/mL Citrato de sódio di-hidratado: 0,305 mg/mL

Petição 870190061378, de 01/07/2019, pág. 80/283

74/106

	Cloreto de sódio: 6,165 mg/mL Hidróxido de sódio: até pH 5.2
Humira 2	Manitol: 42,0 mg/mL Polisorbato 80: 1,0 mg/mL
Acet, pH 5,5	Acetato de sódio trihidratadoO ,436 mg/mL Ácido acético glacial: até pH 5.5
Acet + NaCl, pH 5,5	Acetato de sódio tri-hidratado: 0,436 mg/mL Ácido acético glacial: até pH 5.5 Cloreto de sódio: 9 mg/mL
Acet + Tre, pH 5,5	Acetato de sódio tri-hidratado: 0,436 mg/mL Ácido acético glacial: até pH 5.5 Trealose di-hidratada: 100 mg/mL
Acet + Suc, pH 5,5	Acetato de sódio tri-hidratado: 0,436 mg/mL Ácido acético glacial: até pH 5.5 Sacarose: 100 mg/mL
Acet + Manitol, pH 5,5	Acetato de sódio tri-hidratado: 0,436 mg/mL Ácido acético glacial: até pH 5.5 Manitol: 50 mg/mL
Acet + Sorb, pH 5,5	Acetato de sódio tri-hidratado: 0,436 mg/mL Ácido acético glacial: até pH 5.5 Sorbitol: 50 mg/mL
Acet + lOOmM Gly , pH 5,5	Acetato de sódio tri-hidratado: 0,436 mg/mL Ácido acético glacial: até pH 5.5 Glicina: 7,5 mg/mL
Acet + 50 mM Arg, pH 5,5	Acetato de sódio tri-hidratado: 0,436 mg/mL Ácido acético glacial: até pH 5.5 Cloridrato de arginina: 10,5 mg/mL
Acet + 10 mM Meth, pH 5,5	Acetato de sódio tri-hidratado: 0,436 mg/mL Ácido acético glacial: até pH 5.5 Metionina: 1,5 mg/mL
Acet + 250 mM Prol, pH 5,5	Acetato de sódio tri-hidratado: 0,436 mg/mL Ácido acético glacial: até pH 5.5 L-Proline: 27,0 mg/mL
Acet + 10 mM EDTA, pH 5,5	Acetato de sódio tri-hidratado: 0,436 mg/mL Ácido acético glacial: até pH 5.5 EDTA sal dissódico di-hidratado: 3,72 mg/mL
Acet + lOOmM Lys, pH 5,5	Acetato de sódio tri-hidratado: 0,436 mg/mL Ácido acético glacial: até pH 5.5 Lisina: 14,6 mg/mL

Petição 870190061378, de 01/07/2019, pág. 81/283

75/106

Acet + lOOmM Guan, pH 5,5	Acetato de sódio tri-hidratado: 0,436 mg/mL Ácido acético glacial: até pH 5.5 Cloridrato de Guanidina: 9,55 mg/mL
Acet + lOOmM Glu, pH 5,5	Acetato de sódio tri-hidratado: 0,436 mg/mL Ácido acético glacial: até pH 5.5 Glicose mono-hidratada: 19,82 mg/mL
Acet + lOOmM Lact, pH 5,5	Acetato de sódio tri-hidratado: 0,436 mg/mL Ácido acético glacial: até pH 5.5 Lactose mono-hidratada: 36,03 mg/mL
Acet + lOOmM Manose, pH 5,5	Acetato de sódio tri-hidratado: 0,436 mg/mL Ácido acético glacial: até pH 5.5 Manose: 18,02 mg/mL
Acet + Tre + 0. Cyst, pH 5,5	Acetato de sódio tri-hidratado: 0,436 mg Ácido acético glacial: até pH 5.5 Trealose di-hidratada: 100 mg Cloridrato de cisteina mono-hidratado: 0,088 mg
Acet + Tre + 2. Cyst, pH 5,5	Acetato de sódio tri-hidratado: 0,436 mg Ácido acético glacial: até pH 5.5 Trealose di-hidratada: 100 mg Cloridrato de cisteina mono-hidratado: 0,44 mg
Acet + lOmM Cyst, pH 5,5	Acetato de sódio tri-hidratado: 0,436 mg/mL Ácido acético glacial: até pH 5.5 Cloridrato de cisteina mono-hidratado: 1,76 mg/mL
Acet + Tween 20 0,5, pH 5,5	Acetato de sódio tri-hidratado: 0,436 mg/mL Ácido acético glacial: até pH 5.5 Polisorbato 20: 0,5 mg/mL
Acet + Tween 20 1,0, pH 5,5	Acetato de sódio tri-hidratado: 0,436 mg/mL Ácido acético glacial: até pH 5.5 Polisorbato 20: 1,0 mg/mL
Acet + Tween 80 0,5, pH 5,5	Acetato de sódio tri-hidratado: 0,436 mg/mL Ácido acético glacial: até pH 5.5 Polisorbato 80: 0,5 mg/mL
Acet + Tween 80 1,0, pH 5,5	Acetato de sódio tri-hidratado: 0,436 mg/mL Ácido acético glacial: até pH 5.5 Polisorbato 80: 1,0 mg/mL
Acet + Pol.188 0,5, pH 5,5	Acetato de sódio tri-hidratado: 0,436 mg/mL Ácido acético glacial: até pH 5.5 Poloxamer 188: 0,5 mg/mL

Petição 870190061378, de 01/07/2019, pág. 82/283

76/106

Acet +

Pol.188 1,0, pH 5,5

Acetato de sódio tri-hidratado: 0,436 mg/mL

Ácido acético glacial: até pH 5.5

Poloxamer 188: 1,0 mg/mL

[272] 3.	1. Determinação da	Estabilidade	Coloidal	por
Agregação	de PEG.
[273] 0	teste	de agregação	do PEG foi	realizado	em
triplicata	para	cada amostra.	A análise foi	realizada	de

acordo com o procedimento 3. Os dados sobre a densidade óptica média das soluções são apresentados na Tabela 6. Os resultados também são mostrados na Fig. 3.

[274] Tabela 6. A densidade óptica média das soluções de

Adalimumabe após a preparação.

PEG, %	0.5 Tween 2 0	1 Tween 2 0	0.5 Tween 8 0	1 Tween 8 0	0.5 Pol.188	1 Pol.188
0%	0.0648	0.0638	0.0714	0.0733	0.0588	0.0599
6%	0.0632	0.0654	0.0687	0.0755	0.0552	0.0566
8%	0.0620	0.0658	0.0654	0.0769	0.0590	0.0565
10%	0.0674	0.0670	0.0700	0.0776	0.0644	0.0669
12%	0.0649	0.0671	0.0704	0.0754	0.0650	0.0673
14%	0.0660	0.0709	0.0704	0.0819	0.0668	0.0710
16%	0.0663	0.0703	0.1049	0.1479	0.0687	0.0660
18%	0.0674	0.0707	0.1230	0.1681	0.0689	0.0773
PEG, %	NaCl	Tre	Mann	Sorb	Suc	Gly
0%	0.0737	0.0599	0.0699	0.0599	0.0621	0.0611
6%	0.0570	0.0638	0.0664	0.0614	0.0649	0.0613
8%	0.0622	0.0661	0.0652	0.0582	0.0646	0.0646
10%	0.2339	0.0630	0.0600	0.0615	0.0696	0.0682
12%	ΙΙΙΙΙΙΙβ	0.0663	0.0637	0.0611	0.0700	0.0710
14%	llllllll·	0.0733	0.0633	0.0618	0.0727	0.0726

Petição 870190061378, de 01/07/2019, pág. 83/283

77/106

16%	1.2339	0.0660	0.0620	0.0623	0.0733	0.0739
18%	lllllll·	0.0621	0.0658	0.0620	0.0760	0.0777

[275] Tabela 6. A densidade óptica média das soluções de

Adalimumabe após a preparação - continuação

PEG, %	Arg	Meth	Prol	EDTA	Lys
0%	0.0863	0.0581	0.0650	0.0561	0.0698
6%	0.0613	0.0567	0.0696	0.0573	0.0697
8%	0.0614	0.0620	0.0722	0.0584	0.0723
10%	0.0700	0.0676	0.0734	IlIliO	0.0765
12%	0.0687	0.0645	0.0798		0.0855
14%	0.0769	0.0657	0.0837	lllllll·
16%	0.9483	0.0676	0.0863		llgOIIIBfBglilii
18%	1.2383	0.0775	0.0869	lllllilO	IgggiiBBBiigggiii

[276] Tabela 6. A densidade óptica média das soluções de

Adalimumabe após a preparação - continuação

PEG, %	Guan	Glu	Lact	Manose	lOCyst
0%	0.0636	0.0529	0.0693	0.0582	0.0616
6%	0.0525	0.0565	0.0610	0.0601	0.0650
8%	0.0606	0.0563	0.0623	0.0613	0.0670
10%	0.0565	0.0573	0.0650	0.0633	0.0733
12%	0.2242	0.0593	0.0663	0.0612	0.0708
14%	0.9060	0.0611	0.0663	0.0638	0.0836
16%	lllllilO	0.0618	0.0668	0.0630	0.0758
18%	11111111·	0.0585	0.0673	0.0657	0.0728
	Há agregação	visível

Petição 870190061378, de 01/07/2019, pág. 84/283

78/106 [277] Tabela 6. A densidade óptica média das soluções de Adalimumabe após a preparação - continuação [278] 3.2. Determinação da estabilidade térmica pelo ponto de agregação de proteínas usando a técnica de dispersão de luz dinâmica (DLS).

[279] A análise foi realizada de acordo com o procedimento 4.

[280] 3.3. Determinação da estabilidade térmica sob exposição a longo prazo usando o método Thermostress 50°C.

[281] A análise foi realizada de acordo com o procedimento 5.

[282] 3.4. Resultados.

[283] Tabela 7. Resumo das medidas de qualidade da amostra antes e depois do stress.

Tensão térmica 50°C, 72 h

Proteína C, mg/mL

Alteração na pureza, %*

Aumento de fragmentos, %*

Perfil

Turbiácidodez, base Δ

400 nm abs. %**

CalibraSE-HPLC dor

Labchip

Humira 1

Humira 2

Acet

Acet + NaCl

Acet + Tre

Acet + Suc

Acet + Manitol

Acet + Sorb

Acet + lOOmM Gly

Petição 870190061378, de 01/07/2019, pág. 85/283

79/106

Acet + 50 mM Arg	5	-1.31	^1,15
Acet + 10 mM Meth	5			16.27
Acet + 250 mM Prol	5			15.43
Acet + 10 mM EDTA	5	-1.24	*°·⁷²
Acet + lOOmM Lys	5		1·^·	17.67
Acet + lOOmM Guan	5			17.51
Acet + lOOmM Glu	5	-1.60	1.5 4
Acet + lOOmM Lact	5	-1.86	i.6o ΙιιιιιιΙιιιιΙι
Acet + lOOmM Manose	5	-1.73	JJlliSlii
Acet + 0. Cyst	5			-
Acet + 2. Cyst	5			-
Acet + lOmM Cyst	5			-
Acet + Tween 20 0,5	5	-		19.25
Acet + Tween 20 1.0	5			20.72
Acet + Tween 80 0,5	5			19.52
Acet + Tween 80 1.0	5			17.36
Acet + Koll 0.5	5			17.65
Acet + Koll 1.0	5			19.46

[284] Tabela 7. Resumo das medidas de qualidade da amostra antes e depois do stress - continuação.

	Temperatura de agregação, °C
Humira 1
Humira 2	72.5
Acet	74.0
Acet + NaCl
Acet + Tre
Acet + Suc	74.0
Acet + Manitol

Agregado em % PEG 6000	Conclusão


16

Petição 870190061378, de 01/07/2019, pág. 86/283

80/106

Acet +	Sorb	lie
Acet +	lOOmM Gly	74.0
Acet +	50 mM Arg		16
Acet +	10 mM Meth		^1^·
Acet +	250 mM Prol	74.0
Acet +	10 mM EDTA
Acet +	lOOmM Lys		14
Acet +	lOOmM Guan		12
Acet +	lOOmM Glu	74.0
Acet +	lOOmM Lact	74.0
Acet +	lOOmM Manose	74.0
Acet +	0. Cyst	-	-
Acet +	2. Cyst	-	-
Acet +	lOmM Cyst	-
Acet +	Tween 20 0,5	74.0***
Acet +	Tween 20 1.0	74.0***
Acet +	Tween 80 0,5	72.5***
Acet +	Tween 80 1.0	72.5***
Acet +	Koll 0.5	74.0
Acet +	Koll 1.0	74.0

	resultados		resultados		resultados médios/
	positivos		negativos		dados de base

[285] * A mudança foi calculada pela fórmula Δ =(Valor depois da tensão - Valor antes da tensão) ** A mudança absoluta foi calculada pela fórmula Δ =|Conteúdo da fração ácida antes do stress - Conteúdo da fração ácida depois do stress| + |Conteúdo da fração básica antes do stress-Conteúdo da fração básica após o stress| + |Conteúdo da fração dominante antes da tensão - Conteúdo da fração dominante após a tensão| [286] *** Há uma agregação marcada no aquecimento (melhora

Petição 870190061378, de 01/07/2019, pág. 87/283

81/106 dramática no tamanho das partículas e na intensidade da luz dispersa > 10.000 kcps).

[287] 3.5. Conclusões do Exemplo 3.

[288] Com base nos resultados do presente estudo, aditivos promissores para as composições de adalimumabe são a trealose dihidratada, glicina, prolina, metionina e cloridrato de arginina. Polisorbato 80, Polisorbato 20, Poloxamer 188 foram tomadas como substâncias tensoativas para o rastreio final da composição farmacêutica.

[289] Cloreto de sódio, arginina, EDTA, lisina, guanidina têm um impacto adverso na estabilidade coloidal do adalimumabe.

[290] O cloreto de sódio, a lisina e a guanidina têm um impacto adverso na estabilidade térmica do adalimumabe. A presença de cisterna na formulação leva à fragmentação completa do anticorpo. Uma mudança no perfil proteico ácidobase foi notada quando o aditivo EDTA foi adicionado à formulação.

[291] Exemplo 4. Seleção Final da Composição Farmacêutica.

[292] Com base nos resultados da terceira parte do estudo, a trealose dihidrato, glicina, prolina, metionina e cloridrato de arginina foram escolhidos como aditivos promissores. Polisorbato 80, Polisorbato 20, Poloxamer 188 foram tomadas como substâncias tensoativas para o rastreio final da composição farmacêutica.

[293] Formulação do estudo (mg/mL).

Petição 870190061378, de 01/07/2019, pág. 88/283

82/106

#	Solução tampão	Proteína conc.	Trealose dihidratada	L-prolina	glicina
1		15	Formulação Humira 1 (ver ponto 1)
2		15	Formulação Humira 2 (ver ponto 1)
3	Buffer de acetato, pH 5.5	15	80
4	15	80
5	15	80
6	15	80
7	15	80
8	15	80
9	15	80
10	15	80
11	15	80
12	15	80
13	15	80
14	Buffer de acetato, pH 5.5	15	80
15	15	80
16	15	80
17	15	80
18	15	80
19	15	80
20	15	80
21	15		27
22	15		27
23	15		27
24	15		27
25	15		27
26	15		27
27	15		27

Petição 870190061378, de 01/07/2019, pág. 89/283

83/106

28
29
30
31
32
33
34
35
36
37
38
39
40
41
42
43
44
45
46
47
48
49
50

15
15
15
15
15
15
15
15
15
15
15
15
15
15
15
15
15
15

53.3

26.7

8.0

13.5

9.0

[294] Formulação do estudo (mg/mL) - continuação

#	Metionina	Polisorbato 80	Polisorbato 20	Poloxamer 188	Cloridrato de arginina
1		Formulação Humira 1 (ver	ponto 1)

Petição 870190061378, de 01/07/2019, pág. 90/283

84/106

2	Formulação Humira 2 (ver ponto 1)
3
4		0.1
5		0.5
6		1.0
7			0.1
8			1.0
9				0.1
10				0.5
11				1.0
12					0.5
13		0.1			0.5
14		0.5			0.5
15		1.0			0.5
16			0.1		0.5
17			1.0		0.5
18				0.1	0.5
19				0.5	0.5
20				1.0	0.5
21
22		0.1
23		0.5
24		1.0
25			0.1
26			1.0
27				0.1
28				0.5
29				1.0
30
31		0.1

Petição 870190061378, de 01/07/2019, pág. 91/283

85/106

32		0.5
33		1.0
34			0.1
35			1.0
36				0.1
37				0.5
38				1.0
39	1.5
40	1.5	0.1
41	1.5	0.5
42	1.5	1.0
43	1.5		0.1
44	1.5		1.0
45	1.5			0.1
46	1.5			0.5
47	1.5			1.0
48
49
50

[295] 4.1. Determinação da estabilidade térmica sob exposição a longo prazo usando o método Thermostress 50°C.

[296] A análise foi realizada de acordo com o procedimento 5.

[297] 4.2. Determinação da estabilidade coloidal pela técnica de Shake-Test.

[298] A análise foi realizada de acordo com o procedimento 6.

[299] 4.3. Determinação da estabilidade coloidal por técnica de crioconcentração.

[300] A análise foi realizada de acordo com o procedimento 7.

Petição 870190061378, de 01/07/2019, pág. 92/283

86/106 [301] Nos quadros 8 e 9 é apresentado um resumo, onde são demonstradas as medidas de qualidade da amostra antes e depois do stress térmico, do ensaio de agitação e da crioconcentração.

[302] Resultados.

[303] Tabela 8. Resumo sobre SE-HPLC e espectrofotometria UV das amostras antes e depois do estresse.

#	Formulação aditiva, mg/mL
Anti- TNFa	Trealose dihidratada	L-prolina	Glicina	Metio- nina	Polisorbato 80	Polisorbato 20	Poloxamer 188	Cloridrato de arginina
1	15	Formulação Humira 1 (ver ponto 1)
2	15	Formulação Humira 2 (ver ponto 1)
3	15	80
4	15	80				0.1
5	15	80				0.5
6	15	80				1.0
7	15	80					0.1
8	15	80					1.0
9	15	80						0.1
10	15	80						0.5
11	15	80						1.0
12	15	80							0.1
13	15	80				0.1			0.1
14	15	80				0.5			0.1
15	15	80				1.0			0.1
16	15	80					0.1		0.1
17	15	80					1.0		0.1
18	15	80						0.1	0.1

Petição 870190061378, de 01/07/2019, pág. 93/283

87/106

19	15	80						0.5	0.1
20	15	80						1.0	0.1
21	15		27
22	15		27			0.1
23	15		27			0.5
24	15		27			1.0
25	15		27				0.1
26	15		27				1.0
27	15		27					0.1
28	15		27					0.5
29	15		27					1.0
30	15		8.0	7.5
31	15		8.0	7.5		0.1
32	15		8.0	7.5		0.5
33	15		8.0	7.5		1.0
34	15		8.0	7.5			0.1
35	15		8.0	7.5			1.0
36	15		8.0	7.5				0.1
37	15		8.0	7.5				0.5
38	15		8.0	7.5				1.0
39	15		27		1.5
40	15		27		1.5	0.1
41	15		27		1.5	0.5
42	15		27		1.5	1.0
43	15		27		1.5		0.1
44	15		27		1.5		1.0
45	15		27		1.5			0.1
46	15		27		1.5			0.5
47	15		27		1.5		1.0
48	15	40	13.5

Petição 870190061378, de 01/07/2019, pág. 94/283

88/106

49	15	53.3	9.0
50	15	26.7	18				o:·:·:·:·:·:·:·:·:·:·:·:·:·:·:·:·:·:·:·:·

[304] Tabela 8. Resumo sobre SE-HPLC e espectrofotometria UV das amostras antes e depois do estresse - continuação.

#	Alteração na pureza SE-HPLC, %*	Turbidez, DO 400 nm
Tensão térmica, 50°C,120 h	Congelamento -18°C, descongelar + 25°C	Teste de agitação 120 h	Teste de agitação 120 h	Congelamento -18°C, descongelar +25°C
1	1 .' 2
2		7. d 9
3
4
5
6
7
8
9
10
11
12
13
14
15
16
17				Í····
18
19
20
21					o. ζί4ο$
22

Petição 870190061378, de 01/07/2019, pág. 95/283

89/106

resultados positivos resultados negativos resultados médios/ dados de base [305] Tabela 9. Resumo do perfil ácido-base das amostras no instrumento LabChip e da homogeneidade utilizando a técnica de

Petição 870190061378, de 01/07/2019, pág. 96/283

90/106 espalhamento dinâmico de luz antes e depois do stress.

#	Formulação aditiva, mg/mL
ant TNF α	Crealos e di- lidrata da	L- prolina	Glicina	Metionina	Poli- sorbato 80	Poli- sorbato 20	Poloxamer 188	Cloridrato de arginina
1	15	Formulação Humira 1 (ver ponto 1)
2	15	Formulação Humira 2 (ver ponto 1)
3	15	80
4	15	80				0.1
5	15	80				0.5
6	15	80				1.0
7	15	80					0.1
8	15	80					1.0
9	15	80						0.1
10	15	80						0.5
11	15	80						1.0
12	15	80							0.1
13	15	80				0.1			0.1
14	15	80				0.5			0.1
15	15	80				1.0			0.1
16	15	80					0.1		0.1
17	15	80					1.0		0.1
18	15	80						0.1	0.1
19	15	80						0.5	0.1
20	15	80						1.0	0.1
21	15		26.5
22	15		26.5			0.1
23	15		26.5			0.5
24	15		26.5			1.0

Petição 870190061378, de 01/07/2019, pág. 97/283

91/106

25	15		26.5				0.1
26	15		26.5				1.0
27	15		26.5					0.1
28	15		26.5					0.5
29	15		26.5					1.0
30	15		8.0	7.5
31	15		8.0	7.5		0.1
32	15		8.0	7.5		0.5
33	15		8.0	7.5		1.0
34	15		8.0	7.5			0.1
35	15		8.0	7.5			1.0
36	15		8.0	7.5				0.1
37	15		8.0	7.5				0.5
38	15		8.0	7.5				1.0
39	15		26.5		1.5
40	15		26.5		1.5	0.1
41	15		26.5		1.5	0.5
42	15		26.5		1.5	1.0
43	15		26.5		1.5		0.1
44	15		26.5		1.5		1.0
45	15		26.5		1.5			0.1
46	15		26.5		1.5			0.5
47	15		26.5		1.5			1.0
48	15	40	13.5
49	15	53.3	9.0
50	15	26.7	18

[306] Tabela 9. Resumo do perfil ácido-base das amostras no instrumento LabChip e da homogeneidade utilizando a técnica de espalhamento dinâmico de luz antes e depois do stress

Petição 870190061378, de 01/07/2019, pág. 98/283

92/106 continuação .

#	Homogeneidade DLS, % (por intensidade)	Homogeneidade DLS após tensões, % de	Variação total do perfil ácido-base, em módulo***, %.
Tensão térmica, 50°C, 120 h	Teste de agitação 120 h	Congelamento -18°C, descongelar +25°C	Tensão térmica, +50°C 120 h	Teste de agitação 120 h	Congelamento -18°C, descongelar +25°C
1		99.6			llllillllllli
2	98.8	96.0			29.55	lliil	2.88
3			93.3		11	2.88	lllll···
4			93.6		27.26
5			94.8		28.27
6			96.9		27.64
7			97.0
8		98.5	98.8
9			98.6				3.55
10			95.1
11		97.6	98.9
12			99.0		24.88		3.10
13
14
15	99.4
16					28.10
17
18						2.30	3.68
19
20			90.0
21
22							2.49
23
24			95.8
25
26		98.5
27						2.74	4.67
28
29
30					24.87	2.90	2.91
31				i···^	29.76	2.78
32					31.09
33					29.96
34	e				27.30
35					32.39
36					31.69	2.49

Petição 870190061378, de 01/07/2019, pág. 99/283

93/106

37				29.55
38				30.00
39				28.52
40				28.41
41				28.16
42			94.6	28.56
43			92.0	33.88
44			88.4	30.46
45			95.4
46			92.7
47
48			90.7	26.85
49				26.58	4.37
50				26.73	5.87
	resultados positivos	llllll resultados lllll negativos	resultados médios / dados de base

[307] * A modificação foi calculada pela fórmula Δ =(Valor depois da tensão - Valor antes da tensão)** A mudança absoluta foi calculada pela fórmula Δ =|Conteúdo da fração ácida antes do stress - Conteúdo da fração ácida depois do stress| + |Conteúdo da fração básica antes do stress-Conteúdo da fração básica após o stress| + |Conteúdo da fração dominante antes da tensão - Conteúdo da fração dominante após a tensão|.

[308] Conclusões do Exemplo 4.

[309] 0 estudo mostrou que o adalimumabe na formulação Humira 1 é o mais termolábil entre todas as amostras de teste. Thermostress a 50°C por 120 horas leva ao aumento máximo de impurezas (1,2%) no SE-HPLC, e à mudança máxima no perfil ácido-base (a mudança absoluta total de todas as frações é mais de 33% no instrumento LabChip Caliper). A estabilidade coloidal da amostra na formulação Humira 1 é comparável às

Petição 870190061378, de 01/07/2019, pág. 100/283

94/106 formulações alternativas.

[310] A formulação Humira 2 tem uma estabilidade térmica comparável com uma das formulações alternativas (perda de pureza durante o estresse térmico de 0,38%). Entretanto, após a descongelação do adalimumabe na presente formulação, há uma agregação acentuada da proteina: o aumento dos agregados na HPLC de Exclusão de Tamanho é superior a 7%, o que torna o preparo inutilizável em caso de congelamento acidental. Verificou-se igualmente um aumento acentuado das impurezas após a congelação com a utilização de DLS.

[311] Formulações alternativas baseadas na solução tampão acetato com a adição de uma série de aditivos mostraram boa estabilidade térmica e coloidal durante as tensões. O HPLC de Exclusão de Tamanho não mostrou diferença no aumento de impurezas nas presentes formulações. Também não houve efeito significativo das substâncias tensoativas na estabilidade do adalimumabe na concentração de 15 mg/mL.

[312] A análise das amostras estressadas usando DLS mostrou que a presença de cloridrato de arginina na formulação reduz o aumento da impureza durante o teste de agitação, e a presença de metionina aumenta o acúmulo de impureza durante a agitação.

[313] Mudanças mínimas no perfil ácido-base foram notadas nas formulações 12-29 (formulações contendo trealose e cloridrato de arginina, e também contendo L-prolina). Com base nos resultados do presente estudo, formulações promissoras para adalimumabe são:

Petição 870190061378, de 01/07/2019, pág. 101/283

95/106

Acetato de sódio tri-hidratado: 0,436 mg/mL Ácido acético glacial: até pH 5.0- 6.0 Trealose di-hidratada: 80 mg/mL	Acetato de sódio tri-hidratado: 0,436 mg/mL Ácido acético glacial: até pH 5.0-6.0 Trealose di-hidratada: 80 mg/mL Polisorbato 20 / Polisorbato 80 / Poloxamer 188: 0.5 - 1,0 mg/mL
Acetato de sódio tri-hidratado: 0,436 mg/mL Ácido acético glacial: até pH 5.0- 6.0 Trealose di-hidratada: 80 mg/mL Cloridrato de arginina: 0,1 mg/mL	Acetato de sódio tri-hidratado: 0,436 mg/mL Ácido acético glacial: até pH 5.0-6.0 Trealose di-hidratada: 80 mg/mL Cloridrato de arginina: 0,1 mg/mL Polisorbato 20 / Polisorbato 80 / Poloxamer 188: 0,5 - 1,0 mg/mL
Acetato de sódio tri-hidratado: 0,436 mg/mL Ácido acético glacial: até pH 5.0- 6.0 L-Proline: 27 mg/mL	Acetato de sódio tri-hidratado: 0,436 mg/mL Ácido acético glacial: até pH 5.0-6.0 L-Proline: 27 mg/mL Polisorbato 20 / Polisorbato 80 / Poloxamer 188: 0,5 - 1,0 mg/mL

[314] Exemplo 5. Confirmação da Composição Farmacêutica Final de Adalimumabe em Alta Concentração.

[315] Para confirmar a estabilidade das composições farmacêuticas recomendadas, o adalimumabe na concentração de 50 mg/mL, 100 mg/mL e 150 mg/mL foi exposto a um estresse térmico a 50°C por 6 dias.

[316] Formulações de Estudo.

#	Solução tampão	Proteína conc.	Trealose di-hidratada	L— prolina	Polisorbato 80	Polisorbato 20	Poloxamer 188	Arginina Hidrocloreto
1	Buffer	50	Formulação Humira 1 (ver ponto	D

Petição 870190061378, de 01/07/2019, pág. 102/283

96/106

2	de acetato, pH 5.0- 6.0		Formulação Humira 2 (ver ponto 1)
3	80		0.5			0.1
4	80		1.0			0.1
5	80			0.5		0.1
6	80			1.0		0.1
7	80				0.5	0.1
8	80				1.0	0.1
9	80		0.5		0.5	0.1
10		27	0.5
11		27	1.0
12		27		0.5
13		27		1.0
14		27			0.5
15		27			1.0
16		27	0.5		0.5
17	100	Formulação Humira 1 (ver ponto 1)
18	Formulação Humira 2 (ver ponto 1)
19	80		0.5			0.1
20	80		1.0			0.1
21	80			0.5		0.1
22	80			1.0		0.1
23	80				0.5	0.1
24	80				1.0	0.1
25	80		0.5		0.5	0.1
26		27	0.5
27		27	1.0
28		27		0.5
29		27		1.0
30		27			0.5
31		27			1.0
32		27	0.5		0.5
33	Buffer de	150	Formulação Humira 1 (ver ponto 1)
34	Formulação Humira 2 (ver ponto 1)

Petição 870190061378, de 01/07/2019, pág. 103/283

97/106

35	acetato,	80		0.5			0.1
37	pH 5.0-	80		1.0			0.1
38	6.0	80			0.5		0.1
39		80			1.0		0.1
40		80				0.5	0.1
41		80				1.0	0.1
42		80		0.5		0.5	0.1
43			27	0.5
44			27	1.0
45			27		0.5
46			27		1.0
47			27			0.5
48			27			1.0
49			27	0.5		0.5

[317] 5.1. Determinação da estabilidade térmica sob exposição a longo prazo usando o método Thermostress 50°C.

[318] A análise foi realizada de acordo com o procedimento 5.

[319] 5.2. Resultados.

[320] Tabela 10. Resumo das amostras concentradas com pH 5,0 antes e depois das tensões.

Formulação

SE HPLC

IE HPLC

Teor de mono— mero, %.

Mudança na pureza após estresse térmico, 50°C 144 h*

Teor de fração, %.

Variação total do perfil ácido— base, em módulo***, %.

#

Proteína conc.

Trealose dl— hidra—

L—pro— lina

Poli— sorba— to 80

Poli— sorba— to 20

Polo— xamer 188

Argi— nina Hidro— cloreto

ácido

base

Alca- lino

Petição 870190061378, de 01/07/2019, pág. 104/283

98/106

		tada
1	50	Formulação Humira 1 (ver ponto 1)	99.85	®®ί%®Ο®®	11.30	86.90	1.80	61.87
2	Formulação Humira 2 (ver ponto 1)	99.85	1.65	11.19	87.16	1.66	61.66
3	80		0.5			0.1	99.30		11.48	86.88	1.65	64.49
4	80		1.0			0.1	99.04	1.62	9.59	88.92	1.49
5	80			0.5		0.1	99.38	1.79	11.46	86.85	1.69	62.11
6	80			1.0		0.1	99.34	1.72	11.89	86.80	1.31	63.01
7	80				0.5	0.1	99.48		11.02	87.38	1.60	63.66
8	80				1.0	0.1	99.45	1.62	11.02	87.58	1.40	64.68
9	80		0.5		0.5	0.1	99.35	1.66	11.09	86.97	1.94	63.79
10		27	0.5				99.29	1.76	11.27	87.19	1.55	62.47
11		27	1.0				99.93	1.81	11.43	87.03	1.54	62.11
12		27		0.5			99.44	1.69	11.41	87.18	1.41	62.46
13		27		1.0			99.65	1.79	11.98	86.53	1.49	62.41
14		27			0.5		99.41	1.72	11.95	86.42	1.63
15		27			1.0		99.22		11.40	87.15	1.44	62.77
16	:_::_::_::_::_::_::_::_::_::_::_::_::_::_::_::_::_::	27	0.5		0.5		99.03	1.79	11.46	87.00	1.54	64.66
17	100	Formulação Humira 1 (ver ponto 1)	99.75	®®2®S9®S®	11.63	86.41	1.96	111·
18	Formulação Humira 2 (ver ponto 1)	99.84	2.26	11.20	87.10	1.70	61.30
19	80		0.5			0.1	99.26	2.01	10.63	87.77	1.60	64.94
20	80		1.0			0.1	99.90	2.48	9.55	89.06	1.40	69.09
21	80			0.5		0.1	99.30	2.06	11.46	87.04	1.50	65.03
22	80			1.0		0.1	99.10	2.09	11.98	86.39	1.63	65.87
23	80				0.5	0.1	99.38	2.01	11.15	87.25	1.61	63.18
24	80				1.0	0.1	99.29	2.36	10.85	87.57	1.58	65.63
25	80		0.5		0.5	0.1	99.41	2.46	11.86	86.98	1.16	63.64
26	:_::_::_::_::_::_::_::_::_::_::_::_::_::_::_::_::_::	27	0.5				99.08	2.21	11.21	87.31	1.48	62.43
27		27	1.0				99.95		10.62	87.82	1.57
28		27		0.5			99.43	2.62	11.41	86.93	1.66	64.13
29		27		1.0			99.46	2.49	11.32	86.90	1.78	63.89

Petição 870190061378, de 01/07/2019, pág. 105/283

99/106

30		2	7		0.5	li® 99.28	2.48	10.99	87.31	1.71	62.47
31	2	7		1.0	.................. 99.33	βΒΒί	11.52	87.08	1.40
32	2	7 0.5		0.5	.................. 99.38	2.31	10.46	87.79	1.75	62.48
33	150	Formulação Humira 1 (ver ponto 1)	99.88		11.45	86.73	1.82
34	Formulação Humira 2 (ver ponto 1)	99.72	2.81	11.19	87.16	1.65
35	80	⁰ · ⁵		0	.1 99.09		10.75	87.64	1.61	63.48
37	80	¹ · o		0	.1 99.92		11.28	87.01	1.71
38	80		0.5	o	.1 99.24		11.28	87.25	1.47
39	80		1.0	o	.1 99.16	2.80	10.73	87.75	1.52	64.32
40	⁸⁰			0.5 0	.1 99.74	2.89	11.39	86.92	1.69	64.11
41	⁸⁰			1.0 0	.1 99.12	2.80	11.74	86.80	1.46	63.79
42	⁸⁸	0.5		0.5 0	.1 99.20	2.79	11.79	86.52	1.69	64.39
43	2	7 0.5			99.88		11.28	87.10	1.63	IÍIJÍÍÍèi
44	²	7 1.0			99.61		11.35	87.07	1.58
45	2	7	0.5		99.46	2.71	11.49	86.78	1.73	63.44
46	²	7	1.0		99.42	2.83	11.13	86.99	1.88	63.79
47	²			o - 5	99.12		10.91	87.27	1.82
48	²	7		¹ · ⁰	99.12		11.30	87.14	1.57
49	²	7 0.5	:_::_::_::_::_::_::_::_::_::_::_::_::_::_::_::_:	0 · ⁵	99.42	2.80	11.98	86.56	1.46

[321] Tabela 10. Resumo das amostras concentradas com pH 5,0 antes e depois das tensões - continuação.

	Eletroforese em gel de poliacrilamida	Atividade espec.
Teor de monómero, %.	Mudança na pureza após estresse térmico, 50°C, 144 h*	Atividade antes do stress	Valor após estresse térmico, 50°C, 144 h
#	Vermelho.	Não vermelho.	Vermelho.	Não vermelho.
1	98.46	94.64	-1.68	llllllgOõBBOOOOOOOOOOO	96	92
2	98.73	94.89	-1.46	-3.4 8	97	95
3	97.99	94.16	-1.46		94	92
4	-0.99	-2.4 6	93
5	-1.41	-3.19	91

Petição 870190061378, de 01/07/2019, pág. 106/283

100/106

6			-1.37	-3.4 9		90
7	-1.31	-3.10	91
8	-1.67	-3.7 9	91
9	-1.78	-3.91	90
10	98.10	94.78	-1.46	-3.4 9	96	97
11	-1.78	-2.41	96
12	-1.41	-2.4 6	94
13	-1.29	-3.01	93
14	-1.29	-2.64	94
15	-1.38		95
16	-1.43	-3.14	93
17	97.95	94.10	-1.46	llllllgOõBBiiiiii	98	99
18	98.26	94.74	-1.68	-3.15	99	õõõõõõõõõõõõõõõBBõõõõõõõõõõõõõõõ
19	98.38	94.11	-1.54	iiiiiiiiiiiiiiiil	98	91
20	-1.82	-4.52	84
21	-2.06	-4.61	89
22	-2.21	-4.13	84
23	-2.27	-4.06	81
24	-2.57	-4.2 8	86
25	-2.66	-4.4 9	88
26	98.35	94.09	-3.09	-4.25	97	91
27	-2.68	-3.44	87
28	-2.64	-3.4 6	89
29	-1.89	-3.4 9	88
30	-1.44		89
31			89
32	-1.98	-3.01	86
33	98.29	94.64	-1.92	í:. í:i	99	98
34	98.43	94.06	-1.75		99	101
35	98.32	94.85	-1.82	-4.13	98	113
37	-2.00	-6.09	98
38	-2.2 8	-4.34	99
39	-2.7 0	-4.24	97
40	-2.2 0	-4.11	94
41	-2.67	-4.06	93
42	-2.7 8	-4.08	96
43	98.45	94.14	-3.13		97	86
44	-2.92		88
45	-2.01		89
46	-2.03		87
47	-1.45		86
48	-2.08		92
49	-2.35		91

Petição 870190061378, de 01/07/2019, pág. 107/283

101/106

resultados positivos resultados negativos resultados médios / dados de base [322] A modificação foi calculada pela fórmula Δ =(Valor depois da tensão - Valor antes da tensão) ** A mudança absoluta foi calculada pela fórmula Δ = |Conteúdo da fração ácida antes do stress - Conteúdo da fração ácida depois do stress| + |Conteúdo da fração básica antes do stress-Conteúdo da fração básica após o stress| + |Conteúdo da fração dominante antes da tensão - Conteúdo da fração dominante após a tensão|.

[323] Tabela 11. Resumo das amostras concentradas com pH 6,0 antes e depois das tensões.

	Formulação	SE HPLC
Teor de monómero, %.	Mudança na pureza após estresse térmico, 50°C 144 h*
#	Proteína conc.	Trealose di— hidratada	L— prolina	Poli— sorbato 80	Poli— sorbato 20	Polo— xamer 188	Arginina Hidro— cloreto
1	50	Formulação Humira 1 (ver ponto 1)	99.85	lililllie
2	Formulação Humira 2 (ver ponto 1)	99.85	1.65
50	80		0.5			0.1	99.31	1.66
51	80		1.0			0.1	99.41	1.74
52	80			0.5		0.1	99.64	1.61
53	80			1.0		0.1	99.41
54	80				0.5	0.1	99.29	1.56
55	80				1.0	0.1	99.56	1.59
56	80		0.5		0.5	0.1	99.16	1.67
57		27	0.5				99.64

Petição 870190061378, de 01/07/2019, pág. 108/283

102/106

58			27	1.0				99.67	1.88
59	27	o:·:·:·:·:·:·:·:·:·:·:·:·:·:·:·:·:·:·:·:·	0.5			99.73	1.62
60	27		1.0		o:·:·:·:·:·:·:·:·:·:·:·:·:·:·:·:·:·:·:·:·:·:·:·:	99.48
61	27			0.5		99.35	1.89
62	27			1.0	99.47	1.85
63	27	0.5		0.5	99.58	1.74
17	100	Formulação Humira 1 (ver ponto 1)	99.75
18	Formulação Humira 2 (ver ponto 1)	99.84	2.26
64	80		0.5			0.1	99.31	2.34
65	80		1.0			0.1	99.26	2.41
66	80			0.5		0.1	99.64	2.43
67	80		o:·:·:·:·:·:·:·:·:·:·:·:·:·:·:·:·:·:·:·:·	1.0		0.1	99.53
68	80				0.5	0.1	99.16
69	80				1.0	0.1	99.60
70	80		0.5		0.5	0.1	99.22	2.06
71		27	0.5		o:·:·:·:·:·:·:·:·:·:·:·:·:·:·:·:·:·:·:·:·		99.18	2.24
72		27	1.0				99.67	2.16
73		27		0.5			99.48	2.19
74		27		1.0		o:·:·:·:·:·:·:·:·:·:·:·:·:·:·:·:·:·:·:·:·:·:·:·:	99.49
75		27		o:·:·:·:·:·:·:·:·:·:·:·:·:·:·:·:·:·:·:·:·	0.5		99.56	2.09
76		27			1.0		99.62	2.22
77		27	0.5		0.5	99.44	2.37
33	150	Formulação Humira 1 (ver ponto 1)	99.88
34	Formulação Humira 2 (ver ponto 1)	99.72	2.81
78	80		0.5			0.1	99.18	2.87
79	80		1.0			0.1	99.25	2.66
80	80			0.5		0.1	99.35	2.28
81	80			1.0		0.1	99.41
82	80				0.5	0.1	99.64	2.44
83	80		o:·:·:·:·:·:·:·:·:·:·:·:·:·:·:·:·:·:·:·:·		1.0	0.1	99.12	2.57
84	80		0.5		0.5	0.1	99.16	2.14

Petição 870190061378, de 01/07/2019, pág. 109/283

103/106

27	0.5				99.26	5.49
27	1.0				99.61
27		0.5			99.34	2.91
27		1.0			99.55	2.60
27			0.5		99.16	2.58
27		:3:3::::::::::::::::::::::::::::::5::	1.0	o:·:·:·:·:·:·:·:·:·:·:·:·:·:·:·:·:·:·:·:·:·:·:·:	99.20	2.78
27	0.5		0.5		99.44	2.43

[324] Tabela 11. Resumo das amostras concentradas com pH 6,0 antes e depois das tensões - continuação.

	IE HPLC	Eletroforese em gel de poliacrilamida	Atividade espec.
Teor de fração, %.	Variação total do perfil ácidobase, em módulo***	Teor de monómero, %.	Mudança na pureza após estresse térmico, 50°C, 144 h*	Atividade antes do stress	Valor após estresse térmico, 50°C, 144 h
#	ácido	base	Alca- lino	Verme- lho .	Não vermelho .	Verme- lho .	Não vermelho .
1	11.30	86.90	1.80	61.87	98.46	94.64	-1.68		96	92
2	11.19	87.16	1.66	61.66	98.73	94.89	-1.46	-3.48	97	95
50	11.38	86.47	2.15	61.44	97.66	94.06	-1.66	-2.41	94	92
51	11.46	86.99	1.55	62.01	-1.45	-3.08	88
52	11.84	87.01	1.15	64.21	-1.11	-2.49	94
53	11.35	86.86	1.79	64.26	-1.65	-2.77	96
54	11.65	86.88	1.47	61.87	-1.82	-2.09	89
55	11.98	86.79	1.23	61.94	-1.97	-2.67	91
56	11.71	87.16	1.13	61.81	-1.19	-2.48	96
57	11.22	87.19	1.59		98.02	94.41	M	-2.37	95	95
58	11.64	86.68	1.68	62.11		-2.48	94
59	11.58	86.63	1.79	63.53	-1.19	-2.61	89
60	11.27	87.15	1.58		-1.41	-2.00	96
61	11.34	86.81	1.85		-1.06	-3.09	91
62	11.65	87.09	1.26	61.01	IliMit	-2.14	90
63	11.82	87.14	1.04		-1.23	-2.90	93
17	11.63	86.41	1.96		97.95	94.10	-1.46		98	99

Petição 870190061378, de 01/07/2019, pág. 110/283

104/106

11.20

87.10

1.70

61.30

98.26

94.74

-1.68

-3.15

11.55

86.65

1.80

69.84

-1.35

11.64

86.84

1.52

66.44

-1.82

11.20

86.69

2.11

62.59

-2.31

11.68

86.72

1.60

61.49

98.12

94.66

-2.4 8

11.54

86.69

1.77

61.48

-2.64

11.20

86.51

2.29

62.03

-2.41

11.28

87.12

1.60

62.07

-2.37

-3.49

-3.69

-3.17

-3.76

-3.19

11.62

87.30

1.08

61.34

11.59

86.88

1.53

61.55

86.84

1.75

86.70

1.70

86.90

1.84

11.73

11.45

11.19

11.52

11.68

11.97

11.50

11.64

11.63

11.80

11.68

11.91

11.54

11.67

86.66

86.58

86.73

87.16

86.88

86.57

86.69

86.81

86.76

86.58

86.59

86.74

86.59

86.44

86.58

86.93

86.97

86.77

1.93

1.69

1.82

1.65

1.68

1.91

1.63

1.22

1.80

1.92

1.77

1.63

1.51

1.96

1.49

1.56

resultados positivos [325] depois

63.18

61.89

63.11

62.59

63.00

62.41

63.49

61.18

1.61

1.88

61.27

61.08

98.32

94.21

-3.11

-2.22

-2.4 6

-3.49

-2.80

-3.85

-1.42

-3.41

-1.49

-3.11

98.29

98.43

98.13

98.04

94.64

-1.92

94.06

101

94.54

94.10

-1.75

-2.08

-4.41

-4.09

-2.14

-2.62

-2.33

-2.57

-2.60

-2.13

-1.87

-2.06

-2.74

-1.73

-2.13

62.54

		-2
	resultados
	negativos

. oi

-4.44

-4.14

-4.16

-4.90

-4.16

-3.37

resultados médios / dados de base modificação foi calculada pela fórmula da tensão

Valor antes da tensão) absoluta foi calculada pela fórmula

Δ =|Conteúdo ácida antes do stress

-Conteúdo da fração ácida da =(Valor mudança fração depois do stress | + |Conteúdo da fração básica antes do stress-Conteúdo

Petição 870190061378, de 01/07/2019, pág. 111/283

105/106

da fração básica	após	o stress	+	Conteúdo da fração
dominante antes da	tensão	- Conteúdo	da	fração dominante após
a tensão .
[326] Conclusões	gerais
[327] A triagem	para a	composição	farmacêutica estável de

adalimumabe foi realizada em várias etapas: seleção da natureza da solução tampão, seleção do pH e capacidade tampão da solução, seleção do osmólito e do agente estabilizador, seleção da composição farmacêutica final e confirmação da composição farmacêutica final de adalimumabe de alta concentração.

[328] Durante a investigação, a estabilidade térmica e coloidal do adalimumabe em mais de 90 formulações foram estudadas utilizando os seguintes métodos: Agregação PEG, ensaio de agitação, descongelamento, congelação, tensão térmica com análise subsequente do grau de turbidez (espectrofotometria UV) , pureza (exclusão de HPLC, dispersão dinâmica de luz e Eletroforese em gel, incluindo a utilização do LabChip, sistema Caliper) e perfil de base ácida (LabChip, Caliper e HPLC de permuta iônica).

[329] O estudo mostrou uma baixa estabilidade térmica da formulação original da preparação Humira (Humira 1), utilizada na preparação comercial com concentração de adalimumabe de 50 mg/mL, em comparação com as formulações da presente invenção.

[330] O experimento mostrou o impacto significativo dos processos de congelamento e descongelamento na agregação de

Petição 870190061378, de 01/07/2019, pág. 112/283

106/106 adalimumabe na formulação original da preparação Humira (Humira 2), usada na preparação comercial de adalimumabe 100 mg/mL, em comparação com as formulações da presente invenção.

[331] As composições farmacêuticas de adalimumabe baseadas em solução tampão acetato de pH 5,0 a 6,0 suplementadas com trealose dihidratada, cloridrato de arginina, prolina e substâncias tensoativas do grupo Polisorbato 20, Polisorbato 80 e Poloxamer 188 apresentam maior estabilidade térmica e coloidal em concentrações de 50-150 mg/mL em relação às formulações originais e são objeto da presente invenção.

[332] A formulação aditiva ideal de adalimumabe foi selecionada para soluções com pH 5,5. A estabilidade do adalimumabe nas formulações com pH entre 5,0 e 6,0 foi confirmada nas amostras com concentrações de proteínas de 50, 100 e 150 mg/mL.

[333] O processo de preparação das composições farmacêuticas da presente invenção com a concentração de adalimumabe de 150 mg/mL permite concentrar até 200 mg/mL sem perda da qualidade da proteína para posterior diluição após a adição de SAS e lavagem do dispositivo de ultrafiltração após a concentração.

Claims

REIVINDICAÇÕES [1] . COMPOSIÇÃO FARMACÊUTICA AQUOSA DE ANTICORPO ΑΝΤΙ-TNFA

MONOCLONAL RECOMBINANTE, para administração intravenosa ou subcutânea, caracterizado por compreender: um anticorpo monoclonal recombinante antiTNFa; um agente tampão à base de ions de acetato (ou sistema tampão); trealose e/ou prolina, ou trealose e arginina, e; polissorbato 20, polissorbato 80 ou poloxamer 188, ou uma combinação destes.
[2] . COMPOSIÇÃO FARMACÊUTICA AQUOSA DE ANTICORPO ΑΝΤΙ-TNFA

MONOCLONAL RECOMBINANTE, de acordo com a reivindicação 1, caracterizado por o anticorpo monoclonal antiTNFa recombinante ser adalimumabe.
[3] . COMPOSIÇÃO FARMACÊUTICA AQUOSA DE ANTICORPO ΑΝΤΙ-TNFA

MONOCLONAL RECOMBINANTE, de acordo com as reivindicações de 1 a 2, caracterizado por a concentração de anticorpos monoclonais ser de 50 a 200 mg/mL.
[4]. COMPOSIÇÃO FARMACÊUTICA AQUOSA DE ANTICORPO ANTI-TNFA

MONOCLONAL RECOMBINANTE, de acordo com a reivindicação 1, caracterizado por a concentração da solução tampão acetato ser de 1 a 100 mM.
[5] . COMPOSIÇÃO FARMACÊUTICA AQUOSA DE ANTICORPO ANTI-TNFA

MONOCLONAL RECOMBINANTE, de acordo com a reivindicação 1, caracterizado por o pH da composição ser de 4 a 7.
[6] . COMPOSIÇÃO FARMACÊUTICA AQUOSA DE ANTICORPO ANTI-TNFA

MONOCLONAL RECOMBINANTE, de acordo com a reivindicação 1, caracterizado por a concentração de trealose ser de 25 a 150 mg/mL.
[7] . COMPOSIÇÃO FARMACÊUTICA MONOCLONAL RECOMBINANTE, de caracterizado por a concentração

AQUOSA DE ANTICORPO ANTI-TNFA acordo com a reivindicação 1, de prolina ser de 5 a 40 mg/mL.

Petição 870190061378, de 01/07/2019, pág. 114/283

2/7
[8] . COMPOSIÇÃO FARMACÊUTICA AQUOSA DE ANTICORPO ΑΝΤΙ-TNFA

MONOCLONAL RECOMBINANTE, de acordo com a reivindicação 1, caracterizado por a concentração de trealose ser de 25 a 150 mg/mL e a concentração de arginina ser de 0,05 a 0,5 mg/mL.
[9] . COMPOSIÇÃO FARMACÊUTICA AQUOSA DE ANTICORPO ΑΝΤΙ-TNFA

MONOCLONAL RECOMBINANTE, de acordo com a reivindicação 1, caracterizado por a concentração de polissorbato 20 variar entre 0,05 mg/mL e 10 mg/mL.
[10] . COMPOSIÇÃO FARMACÊUTICA AQUOSA DE ANTICORPO ΑΝΤΙ-TNFA

MONOCLONAL RECOMBINANTE, de acordo com a reivindicação 1, caracterizado por a concentração de polissorbato 80 variar entre 0,05 mg/mL e 10 mg/mL.
[11] . COMPOSIÇÃO FARMACÊUTICA AQUOSA DE ANTICORPO ΑΝΤΙ-TNFA

MONOCLONAL RECOMBINANTE, de acordo com a reivindicação 1, caracterizado por a concentração de poloxamer 188 variar entre 0,05 mg/mL e 10 mg/mL.
[12] . COMPOSIÇÃO FARMACÊUTICA AQUOSA DE ANTICORPO ΑΝΤΙ-TNFA

MONOCLONAL RECOMBINANTE, de acordo com a reivindicação 1, caracterizado por compreender: de 50 a 200 mg/mL do anticorpo monoclonal antiTNFa recombinante; de 0,4 a 1,2 mg/mL de trihidrato de acetato de sódio; de 25 a 150 mg/ml de trealose e/ou de 5 a 40 mg/ml de prolina; de 25 a 150 mg/mL de trealose e de 0,05 a 0,5 mg/mL de arginina; ácido acético glacial até pH 5,0 a 6,0, e; de 0,1 mg/mL a 1 mg/mL de Polissorbato 80.
[13] . COMPOSIÇÃO FARMACÊUTICA AQUOSA DE ANTICORPO ΑΝΤΙ-TNFA

MONOCLONAL RECOMBINANTE, de acordo com a reivindicação 12, caracterizado por o anticorpo monoclonal antiTNFa recombinante ser o adalimumabe.
[14]. COMPOSIÇÃO FARMACÊUTICA AQUOSA DE ANTICORPO ANTI-TNFA

MONOCLONAL RECOMBINANTE, de acordo com a reivindicação 12, caracterizado por compreender: de 50 a 150 mg/mL de adalimumabe;

Petição 870190061378, de 01/07/2019, pág. 115/283

3/Ί

0,436 mg/mL de trihidrato de acetato de sódio;

8 0 mg/mL de trealose di-hidratada; ácido acético glacial até pH 5,5, e; 0,5 mg/mL de polissorbato 80.
[15] . COMPOSIÇÃO FARMACÊUTICA AQUOSA DE ANTICORPO ANTI-TNFA

MONOCLONAL RECOMBINANTE, de acordo com a reivindicação 12, caracterizado por compreender: de 50 a 150 mg/mL de adalimumabe; 0,436 mg/mL de trihidrato de acetato de sódio; 80 mg/mL de trealose di-hidratada e 0,1 mg/mL de cloridrato de arginina; ácido acético glacial até pH 5,5, e; 0,5 mg/mL de Polissorbato 80.
[16] . COMPOSIÇÃO FARMACÊUTICA AQUOSA DE ANTICORPO ANTI-TNFA

MONOCLONAL RECOMBINANTE, de acordo com a reivindicação 12, caracterizado por compreender: de 50 a 150 mg/mL de adalimumabe;

0,436 mg/mL de trihidrato de acetato de sódio; 27 mg/mL de prolina; ácido acético glacial até pH 5,5, e; 0,5 mg/mL de polissorbato 80.
[17] . COMPOSIÇÃO FARMACÊUTICA AQUOSA DE ANTICORPO ANTI-TNFA

MONOCLONAL RECOMBINANTE, de acordo com a reivindicação 12, caracterizado por compreender: de 50 a 150 mg/mL de adalimumabe; 0,436 mg/mL de trihidrato de acetato de sódio; 40 mg/mL de trealose di-hidratada; 13,5 mg/mL de prolina; ácido acético glacial até pH 5,5, e; 0,5 mg/mL de polissorbato 80.
[18] . COMPOSIÇÃO FARMACÊUTICA AQUOSA DE ANTICORPO ANTI-TNFA

MONOCLONAL RECOMBINANTE, de acordo com a reivindicação 1, caracterizado por compreender: de 50 a 200 mg/mL do anticorpo monoclonal antiTNFa recombinante; de 0,4 a 1,2 mg/mL de trihidrato de acetato de sódio; de 25 a 150 mg/ml de trealose e/ou de 5 a 40 mg/ml de prolina, ou de 25 a 150 mg/mL de trealose e de 0,05 a 0,5 mg/mL de arginina; ácido acético glacial até pH 5,0 a 6,0, e; de 0,1 mg/mL a 1 mg/mL de polissorbato 20.
[19] .

COMPOSIÇÃO FARMACÊUTICA AQUOSA DE ANTICORPO ANTI-TNFA

MONOCLONAL RECOMBINANTE, de acordo com a reivindicação 18,

Petição 870190061378, de 01/07/2019, pág. 116/283

0./Ί caracterizado por o anticorpo monoclonal antiTNFa recombinante ser adalimumabe.
[20] . COMPOSIÇÃO FARMACÊUTICA AQUOSA DE ANTICORPO ANTI-TNFA

MONOCLONAL RECOMBINANTE, de acordo com a reivindicação 18, caracterizado por compreender: de 50 a 150 mg/mL de adalimumabe; 0,436 mg/mL de trihidrato de acetato de sódio; 80 mg/mL de trealose di-hidratada; ácido acético glacial até pH 5,5, e; 0,5 mg/mL de polissorbato 20.
[21] . COMPOSIÇÃO FARMACÊUTICA AQUOSA DE ANTICORPO ANTI-TNFA

MONOCLONAL RECOMBINANTE, de acordo com a reivindicação 18, caracterizado por compreender: de 50 a 150 mg/mL de adalimumabe; 0,436 mg/mL de trihidrato de acetato de sódio; 80 mg/mL de trealose di-hidratada e 0,1 mg/mL de cloridrato de arginina; ácido acético glacial até pH 5,5, e; 0,5 mg/mL de Polissorbato 20.
[22] . COMPOSIÇÃO FARMACÊUTICA AQUOSA DE ANTICORPO ANTI-TNFA

MONOCLONAL RECOMBINANTE, de acordo com a reivindicação 18, caracterizado por compreender: de 50 a 150 mg/mL de adalimumabe; 0,436 mg/mL de trihidrato de acetato de sódio; 27 mg/mL de prolina; ácido acético glacial até pH 5,5, e; 0,5 mg/mL de polissorbato 20.
[23] . COMPOSIÇÃO FARMACÊUTICA AQUOSA DE ANTICORPO ANTI-TNFA

MONOCLONAL RECOMBINANTE, de acordo com a reivindicação 18, caracterizado por compreender: de 50 a 150 mg/mL de adalimumabe; 0,436 mg/mL de trihidrato de acetato de sódio; 40 mg/mL de trealose di-hidratada; 13,5 mg/mL de prolina; ácido acético glacial até pH 5,5, e; 0,5 mg/mL de Polissorbato 20.
[24] . COMPOSIÇÃO FARMACÊUTICA AQUOSA DE ANTICORPO ANTI-TNFA

MONOCLONAL RECOMBINANTE, de acordo com a reivindicação 1, caracterizado por compreender: de 50 a 200 mg/mL do anticorpo monoclonal antiTNFa recombinante; de 0,4 a 1,2 mg/mL de trihidrato de acetato de sódio; de 25 a 150 mg/mL de trealose e/ou 5 a 40 mg/mL de prolina; de 25 a 150 mg/mL de trealose e de 0,05 a 0,5

Petição 870190061378, de 01/07/2019, pág. 117/283

5/7 mg/mL de arginina; ácido acético glacial até pH 5,0 a 6,0, e; de 0,1 mg/mL a 1 mg/mL de Poloxamer 188.
[25] . COMPOSIÇÃO FARMACÊUTICA AQUOSA DE ANTICORPO ΑΝΤΙ-TNFA

MONOCLONAL RECOMBINANTE, de acordo com a reivindicação 24, caracterizado por o anticorpo monoclonal antiTNFa recombinante ser o adalimumabe.
[26] . COMPOSIÇÃO FARMACÊUTICA AQUOSA DE ANTICORPO ANTI-TNFA

MONOCLONAL RECOMBINANTE, de acordo com a reivindicação 24, caracterizado por compreender: de 50 a 150 mg/mL de adalimumabe;

0,436 mg/mL de trihidrato de acetato de sódio; 80 mg/mL de trealose di-hidratada; ácido acético glacial até pH 5,5, e; 1,0 mg/mL de Poloxamer 188.
[27] . COMPOSIÇÃO FARMACÊUTICA AQUOSA DE ANTICORPO ANTI-TNFA

MONOCLONAL RECOMBINANTE, de acordo com a reivindicação 24, caracterizado por compreender: de 50 a 150 mg/mL de adalimumabe;

0,436 mg/mL de trihidrato de acetato de sódio; 80 mg/mL de trealose di-hidratada e 0,1 mg/mL de cloridrato de arginina; ácido acético glacial até pH 5,5, e; 1,0 mg/mL de poloxamer 188.
[28] . COMPOSIÇÃO FARMACÊUTICA AQUOSA DE ANTICORPO ANTI-TNFA

MONOCLONAL RECOMBINANTE, de acordo com a reivindicação 24, caracterizado por compreender: de 50 a 150 mg/mL de adalimumabe;

0,436 mg/mL de trihidrato de acetato de sódio; 27 mg/mL de prolina; ácido acético glacial até pH 5,5, e; 1,0 mg/mL de poloxamer 188.
[29] . COMPOSIÇÃO FARMACÊUTICA AQUOSA DE ANTICORPO ANTI-TNFA

MONOCLONAL RECOMBINANTE, de acordo com a reivindicação 24, caracterizado por compreender: de 50 a 150 mg/mL de adalimumabe;

0,436 mg/mL de trihidrato de acetato de sódio; 40 mg/mL de trealose di-hidratada; 13,5 mg/mL de prolina; ácido acético glacial até pH 5,5, e; 1,0 mg/mL de Poloxamer 188.

Petição 870190061378, de 01/07/2019, pág. 118/283

6/1
[30] . COMPOSIÇÃO FARMACÊUTICA AQUOSA DE ANTICORPO ANTI-TNFA

MONOCLONAL RECOMBINANTE, de acordo com as reivindicações de 1 a 29, caracterizado por o método de tratamento de doenças mediadas por TNFa incluir a administração de uma quantidade eficaz da composição.
[31] . COMPOSIÇÃO FARMACÊUTICA AQUOSA DE ANTICORPO ANTI-TNFA

MONOCLONAL RECOMBINANTE, de acordo com a reivindicação 30, caracterizado por o método em que a doença mediada por TNFa ser selecionada a partir do grupo de: artrite reumatoide ativa (moderada a grave); artrite psoriásica ativa; espondilite anquilosante ativa; psoriase em placas crônica (moderada a grave); (moderada a grave) colite ulcerosa; espondilartrose axial; Hidradenite supurativa ativa; artrite idiopática juvenil; (moderada ou grave) Doença de Crohn; uveíte, e; artrite associada a entesite ativa.
[32] . COMPOSIÇÃO FARMACÊUTICA AQUOSA DE ANTICORPO ANTI-TNFA

MONOCLONAL RECOMBINANTE, de acordo com as reivindicações de 1 a 29, caracterizado por o tratamento de doenças mediadas por TNFa
[33] . COMPOSIÇÃO FARMACÊUTICA AQUOSA DE ANTICORPO ANTI-TNFA MONOCLONAL RECOMBINANTE, de acordo com a reivindicação 32, caracterizado por a doença ser selecionada a partir do grupo de: artrite reumatoide ativa (moderada a grave); artrite psoriásica ativa; espondilite anquilosante ativa; psoriase em placas crônica (moderada a grave); (moderada a grave) colite ulcerosa; espondilartrose axial; Hidradenite supurativa ativa; artrite idiopática juvenil; (moderada ou grave) Doença de Crohn; uveíte, e; artrite associada a entesite ativa.
[34] . COMPOSIÇÃO FARMACÊUTICA AQUOSA DE ANTICORPO ANTI-TNFA

MONOCLONAL RECOMBINANTE, de acordo com as reivindicações de 1 a 29, caracterizado por compreender a adição de agentes tamponadores

Petição 870190061378, de 01/07/2019, pág. 119/283

7/7 de acetato a uma fase aquosa seguida da adição, por qualquer ordem, dos seguintes componentes: um osmólito e/ou um agente estabilizador escolhido entre os grupos de trealose, prolina, arginina ou uma combinação destes grupos.