EA046015B1

EA046015B1 - Водная фармацевтическая композиция анти-il17a антитела и ее применение

Info

Publication number: EA046015B1
Application number: EA202192723
Authority: EA
Inventors: Екатерина Валерьевна Черняева; Екатерина Александровна Ломкова; Антонина Васильевна Артемьева; Анна Викторовна Еремеева; Роман Алексеевич Иванов; Анастасия Михайловна Ряховская; Виктория Олеговна Шитикова; Александр Олегович Яковлев; Дмитрий Валентинович Морозов
Original assignee: Закрытое Акционерное Общество "Биокад"
Priority date: 2019-04-02
Filing date: 2020-04-02
Publication date: 2024-01-31

Description

Область техники

Настоящее изобретение относится к водным композициям для анти-1Ь17а антител и, в частности, к водным композициям для анти-IL17a антител, содержащих вариабельный домен VHH и вариабельный домен VL, которые могут быть использованы в качестве лекарственного средства для лечения IL-17A- опосредованных заболеваний.

Уровень техники

Антитела, также именуемые как иммуноглобулины (Ig), - это растворимые гликопротеины крови и тканевой жидкости, играющие ключевую роль в системе гуморального иммунитета у позвоночных. Антитела синтезируются В-лимфоцитами в ответ на чужеродные биологические и химические вещества (антигены) разнообразной структуры. Благодаря высокой специфичности и высокой аффинности связывания с определенным антигеном, а также возможности возникновения антител к неограниченному репертуару антигенов, антитела и их производные являются одними из наиболее важных реагентов для использования в фундаментальных и прикладных медицинских исследованиях.

Канонические антитела представляют собой крупные (~150 кДа - IgG) мультимерные белки, содержащие две идентичные тяжелые Н-цепи (один вариабельный VH-домен, три константных CH1-, CH2-, CH3-домена и шарнирный участок между СН1- и CH2-доменами) и две идентичные легкие L-цепи (состоящие из вариабельного VL-домена, и константного CL-домена). Четырехцепочечная молекула объединена посредством нековалентных и ковалентных (дисульфидных) связей между цепями. При помощи протеазы папаин молекулу антитела можно расщепить на два фрагмента: Fab (Fragment antigen binding, антиген связывающий фрагмент) и Fc (Fragment crystallizable, фрагмент, способный к кристаллизации). Соответственно одна область молекулы антител (Fab) определяет ее антигенную специфичность, а другая (Fc) осуществляет эффекторные функции, которые направлены на элиминацию антигена. Домены СН1 и СН2 Н-цепи разделены шарнирной областью, от которой зависит подвижность Fab-фрагмента и взаимодействие IgG молекулы с IgG эффекторными рецепторами, расположенными на клетках. СН2 домен содержит участки связывания как FcY рецепторов, опосредующих клеточную активацию (ADCC и ADCP), так и молекул системы комплемента (CDC). Кроме того, в этом домене находится сайт, являющийся местом присоединения углеводов для всех изотипов иммуноглобулинов. CH3-домен в значительной степени определяет стабильность димера IgG, и взаимодействует с FcRn рецептором на поверхности клеток, определяя фармакокинетические свойства антител и их метаболизм, и распределение внутри организма. Комбинация антигенсвязывающих участков (CDR-Complementarity Determining Regions) вариабельного домена тяжелой цепи (VH) и вариабельного домена легкой цепи (V_L) формирует участок связывания антигена, в то время как каркасные регионы вариабельных доменов и константные домены непосредственно не участвуют в распознавании антигена. Минимизированной Fab-производной для классических антител является одноцепочечная конструкция, в которой вариабельные домены тяжелой и легкой цепей соединены линкерной последовательностью (scFv).

Важным открытием явилось обнаружение в крови представителей семейства Camelidae (верблюды, ламы, викуньи) в значительном количестве специфических неканонических антител с упрощенной структурой. Такие антитела (тяжелоцепочечные, heavy chain antibody, HCAb) состоят из димера только одной укороченной тяжелой цепи (без СН1-домена), а легкая цепь при этом полностью отсутствует. Антиген-связывающий участок HCAb формируется лишь одним вариабельным доменом тяжелой цепи (V_HH), который непосредственно связан через шарнирную область с Fc-доменом. Часто V_HH обозначают термином однодоменное антитело, нанотело, мини-антитело или наноантитело. Как оказалось, такая монодоменная структура в изолированном виде, кроме малых размеров (12-15 кДа), обладает рядом преимуществ перед классическими IgG антителами, а именно агрегационной, химической и термической стабильностью. Антитела VHH можно эффективно клонировать и экспрессировать в бактериальных и дрожжевых клетках. Обладая такими свойствами, они получили технологическое развитие как в терапевтическом направлении, развиваемом компанией Ablynx, так и области лабораторной и промышленной хроматографии (афинные сорбенты Capture Select).

Тяжелоцепочечные антитела (HCAb), состоящие из димера только тяжелой цепи иммуноглобулина, впервые обнаружены при электрофоретическом анализе иммуноглобулинов в сыворотке крови различных представителей семейства верблюдовых. Относительная доля HCAb варьирует от примерно 15-25% (всех IgG) у лам и викуний до примерно 60-80% у верблюдов

Предполагается, что неканонические антитела (HCAb), по крайней мере, в случае верблюдовых, представляют собой результат относительно недавней эволюции генов канонических антител. Два константных домена тяжелых цепей, СН2 и СН3, в случае HCAb и канонических антител высококонсервативны. В составе антител HCAb домен, соответствующий первому константному СН1-домену классических антител, отсутствует. Геном одногорбого верблюда (вид Dromedary) содержит кластер из примерно пятидесяти VH- и сорока VHH-генеративных генов, за которыми располагаются множественные гены D-сегментов, J-сегментов и гены константных участков (ί'.'μ. Су, Ce, Ca). Очевидно, что некоторые из Сγ-генов предназначены для формирования HCAb (мутация приводит к потере СН1-домена), в то время как остальные - для формирования канонических антител (с сохраняемым СН1-доменом). Одни и те же

- 1 046015 гены сегментов D и J могут случайным образом соединяться как с одним из VH-генов, так и с одним из VHH-генов. Это указывает на то, что гены VH и VHH находятся в одном и том же локусе.

Организация вариабельных доменов неканонических антител (VHH) и вариабельных доменов (VH) классических антител весьма сходна, т.к. у человека VH-домены подкласса IgG3 имеют высоко выраженную гомологию с VH и VHH верблюдовых. В обоих случаях V-домены состоят из четырех консервативных каркасных участков (FR), которые окружают три гипервариабельных участка, определяющих комплементарность (CDR). Также в обоих случаях формируется типичная для V-домена иммуноглобулина пространственная 3D структура из двух β-слоев, один из которых состоит из четырех аминокислотных цепочек и второй - из пяти. В этой структуре все три гипервариабельных участка кластеризуются с одной стороны V-домена, где они участвуют в распознавании антигена и располагаются в петлях, соединяющих β-структуры. Однако имеются и важные отличия, связанные с функционированием VHH в формате одного домена. Так, CDR1 и CDR3 VHH заметно увеличены. Часто в гипервариабельных участках VHH обнаруживаются цистеиновые остатки сразу в двух участках (чаще всего в CDR1 и CDR3, реже в CDR2 и CDR3). При исследовании кристаллических структур VHH показано, что эти цистеиновые остатки формируют дисульфидные связи, и это дополнительно стабилизирует структуру петель данного антитела. Наиболее явный и воспроизводимый отличительный признак VHH представлен четырьмя заменами гидрофобных аминокислотных остатков на гидрофильные во втором каркасном участке (Val37Phe, Gly44Glu, Leu45Arg, Trp47Gly, согласно нумерации Kabat). Этот каркасный участок у VH-домена высококонсервативен, обогащен гидрофобными аминокислотными остатками и особо важен при образовании связи с вариабельным доменом V_L легкой цепи. В этом аспекте VHH-домен сильно отличается: указанные замены гидрофобных аминокислот на гидрофильные делают невозможной ассоциацию VHH и V_L. Эти замены также объясняют обычно высокую растворимость VHH (наноантитела) при его получении в виде рекомбинантного белка.

Репертуары возможных паратопов (антиген-связывающих частей антитела) HCAb и канонических антител, по-видимому, могут заметно отличаться. Так как эти два типа антител сосуществуют в одном организме, то можно предполагать, что они не конкурируют, а взаимно дополняют друг друга. Например, не раз отмечалось, что оба типа антител могут возникать параллельно, взаимоисключающе или в разных соотношениях, по отношению к разным эпитопам антигенного материала при иммунизации одного и того же животного. Несмотря на предполагаемое меньшее разнообразие возможных паратопов у однодоменных антител по сравнению с каноническими двухдоменными антителами, много публикаций убедительно продемонстрировали, что HCAb могут быть получены против самых разнообразных эпитопов весьма широкого спектра антигенов. Очевидно, этому способствуют увеличенные участки CDR1 и CDR3. Следует также отметить удивительно большое (в сравнении с V-доменами классических антител) число соматических гипермутаций в V_HH, накапливающихся, по-видимому, в процессе аффинного созревания антител в ходе иммунизации. Рентгеноструктурный анализ показал, что антиген-связывающие петлевые участки VHH способны образовывать необычные для классических V-доменов структуры. Если в случае VH- и VL-доменов классических антител все шесть CDR-участков вносят более или менее одинаковый вклад в связывание антигена, то в случае VHH обычно для формирования паратопа более важен CDR3-участок. Показано, что CDR3-участок в VHH (но не в VH или VL) может образовывать необычные длинные пальцеобразные выступающие структуры, которые могут углубляться в структуру антигена, в частности распознавать активные сайты ферментов. Малыми размерами антиген-связывающего участка V_HH и его способностью формировать необычные выступающие паратопы объясняется возможность получения HCAb, способных распознавать недоступные для классических антител эпитопы (например, при образовании антител, являющихся эффективными ингибиторами ферментов).

При всем своем высоком потенциале уникальной в сравнении с классическими IgG антителами специфичности использование монодоменных VHH для терапевтического применения в ряде случаев ограничено из-за быстрого выведения этой малой молекулы из организма. Существует ряд решений по улучшению фармакокинетики VHH структур, которые включают использование химической конъюгации с ПЭГ (PEG) и ковалентное соединение с полипептидом, опосредующим уменьшенный клиренс (такой как сывороточный альбумин человека (HSA) и Fc-слитые белки, период полувыведения которых составляет до трех недель). Также показано успешное применение малых пептидов, присоединяемых с помощью методов рекомбинантной технологии к V_HH и способных к высокоаффинному нековалентному взаимодействию с этими же компонентами (HSA и IgG) в крови человека. Однако технологичность и иммуногенность этих подходов остается пока неясной и находится только на стадии проверки применимости как в клинических исследованиях, так и на более ранних стадиях исследований.

Кроме того, наибольшее ограничение при применении антител в качестве медицинских препаратов накладывает агрегационная и химическая стабильность, аффинность и иммуногенность. Поскольку большинство моноклональных антител в настоящее время получают на основе мышиных, регулярное применение таких антител у пациентов приводит к развитию иммунного ответа на терапию антителами (например, аллергические реакции). Такие типы иммунного ответа могут повлечь за собой, в конечном итоге, потерю эффективности по меньшей мере и в худшем случае к возможным тяжелым анафилакти

- 2 046015 ческим реакциям. С другой стороны, агрегационно или химически нестабильные терапевтические антитела при хранении препарата ухудшают его терапевтические свойства и могут усиливать иммуногенность при введении в людям-пациентам.

В связи с вышесказанным, актуальным является создание антител на основе антител VHH, которые имели бы (по сравнению с известными ранее антителами) улучшенные функциональные и терапевтические свойства, в частности повышенную агрегационную, химическую и термостабильность, и улучшенную аффинность, и в то же время отличались бы легкостью и простотой получения в промышленно значимых масштабах.

Из предшествующего уровня техники известны различные конструкции антител, содержащие VHH домен.

В публикации РСТ/ЕР 2008/066368 описаны антитела, которые содержат отдельные вариабельные домены, связанные с Fc-фрагментом. В качестве вариабельных доменов могут быть использованы нанотела, при этом Fc-фрагмент получен из антитела типа IgE. Указанные домен и Fc-фрагмент могут соединяться через линкер, расположенный в шарнирной области.

В заявке на патент US 2009/0202979 раскрыты антитела, включающие полностью или часть антител V_HH, непосредственно соединенные с константными частями человеческих антител.

Также известны аминокислотные замены, влияющие на физико-химические и биологические свойства антител.

Например, в заявке US 2011/0028348 описаны вариабельные домены тяжелых цепей, в которых введены аминокислотные замены в позициях 35, 45, 47, 93-100 и 100а для повышения гидрофильности получаемого антитела.

К настоящему времени разработаны методы оптимизации структуры изолированных VHH и VH монодоменов, уменьшающие их иммуногенность и улучшающие агрегационную стабильность.

Так, Vincke и соавторы обнаружили, что замены Glu-49^Gly и Arg-50^Leu в характерных аминокислотах приводят к получению отдельного домена, который является более стабильным, но при этом менее растворимым. Другие замены в каркасном участке FR-2 Phe-42^-Val и Gly/Ala-52^Trp критично влияют на аффинность антитела к антигену вследствие переориентации петли Н3, повышая константу его кинетической диссоциации в 6-10 раз (6,85-10-31/с). При замене Phe-42^-Val наблюдалось снижение стабильности получаемых антител. Замена Gly-49 и Leu-50 в VH последовательности приводила к снижению стабильности домена, в то время как гуманизация по Glu-49 и Arg-50 в VHH позволяла получить стабильные вариабельные домены.

Из литературы также известно, что при наличии коротких HCDR3 областей, нивелирующих экранирующий эффект конформации классических VHH, и внесении VH-характерной замены Trp-47 на Gly-47 и замен Tyr-37 на Val-37, Glu-44 на Gly-44 и Arg-45 на Leu-45, изолированные VHH-домены могут восстанавливать способность к связыванию с VL-доменом.

Связь между повышением аггрегационной стабильности терапевтических антител классической IgG структуры и снижением их иммуногенности была продемонстрирована во многих исследованиях и суммирована в обзоре Hermeling et al., 2004. Однако не было обнаружено антител, имеющих в своем составе домены VHH, но связанных с вариабельными доменами легких цепей в составе полноразмерных IgG человека.

Таким образом, существует необходимость в создании нового формата антител, которые при этом обладали бы повышенной стабильностью и аффинностью, отличались хорошей экспрессией и имели бы низкую иммуногенность.

Кроме того, ранее не описано подходов к созданию подобных молекул, которые легко получать и которые имеют улучшенную агрегационную стабильностью, повышенную аффинность и высокий уровень экспрессии в клеточных культурах млекопитающих, и водной композиции для таких антител.

Сущность изобретения

В настоящем изобретении раскрыты водные фармацевтические композиции антител, содержащие VHH-производные, которые присоединены к вариабельным доменам легких цепей полноразмерного человеческого IgG, тем самым образуя конструкцию, которая (как следствие, имеет низкую иммуногенность) имеет улучшенную агрегационную стабильность, повышенную аффинность по сравнению с традиционным человеческим антителом как с тяжелой цепью с вариабельным доменом VH (вместо вариабельного домена VHH), так и с легкой цепью с вариабельным доменом VL, а также структуру терапевтического моноклонального антитела. Более конкретно, настоящее изобретение относится к таким антителам, которые являются специфическими по отношению к Ш17а.

В настоящем изобретении раскрыта водная фармацевтическая композиция, подходящая для парентерального введения субъекту для ингибирования активности белка Ш17а, содержащую фармацевтически эффективное количество анти-[L17a антитела, содержащего домен VHH-производного и вариабельный домен VL.

Как описано в заявке на патент № PCT/RU2015/000163, включенной в настоящий документ посредством ссылки, было показано, что анти-IL17a антитело, включающее как домен VHH, так и вариабельный

- 3 046015 домен VL (именуемое в настоящем документе антитела по изобретению), обладает повышенной аффинностью и стабильностью по отношению к IL17;i по сравнению с рекомбинантными человеческими анти-IL17a антителами с интегрированными кассетами иммуноглобулина человека, такими как секукинумаб. В этой связи было бы полезно вводить водную композицию с антителом по изобретению пациенту с IL-17a-опосредованным заболеванием. Примерами трех областей, определяющих комплементарность (CDR), домена VHH анти-IL17a антитела, отвечающих за связывание с IL-17a, могут быть те, которые соответствуют SEQ ID NO: 1,2,3.

Однако в силу структурных различий между человеческими антителами, такими как секукинумаб, и антителами по изобретению, водные композиции, подходящие для секукинумаба и родственных антител, необязательно подходят для антител по изобретению. Например, антитела по настоящему изобретению содержат вариабельный домен VHH, объединенный с вариабельным доменом VL легкой цепи, где антитела человека, такие как секукинумаб, имеют тяжелую цепь с вариабельным доменом VH, объединенным с тремя константными доменами, причем тяжелый домен присоединен к легкой цепи. Таким образом, существуют значительные структурные различия в размере, весе и конфигурации между антителами по изобретению и антителами, основанными на антителах человека, такими как секукинумаб. Данные различия могут влиять на правильный выбор подходящих водных фармацевтических композиций для каждого из антител. Водная фармацевтическая композиция, подходящая для секукинумаба, необязательно может подходить для водной фармацевтической композиции для антитела по настоящему изобретению, такого как нетакимаб. Дополнительное испытание, как подробно описано в данном документе, требовалось для определения подходящих водных фармацевтических композиций для антител по изобретению.

В связи с этим, будет полезно определить подходящие водные фармацевтические композиции для антител по изобретению, которые обеспечивают достаточную коллоидную стабильность, термическую стабильность, уменьшают агрегацию антител и гомогенность антител в композиции.

Таким образом, настоящее изобретение относится к определению подходящих водных фармацевтических композиций для антител по изобретению.

Примером антитела по изобретению является нетакимаб (также именуемый в настоящем документе как BCD-085). Нетакимаб представляет собой гуманизированное моноклональное антитело IgG со средневесовой молекулярной массой около 149 кДа, которое является специфическим по отношению к IL17a человека. Препарат также известен под торговой маркой Aleira. Нетакимаб имеет тяжелую цепь с мутантным гуманизированным вариантом VHH-домена. Тяжелая цепь насчитывает 455 аминокислот (SEQ ID NO: 5). Нетакимаб имеет легкую каппа-цепь человека, насчитывающую 215 аминокислот (SEQ ID NO: 6).

Другое антителом к IL17a по настоящему изобретению, которое подходит для водных фармацевтических композиций, описанных в настоящем документе, включает домен VHH с 3 CDR-участками, соответствующими SEQ ID NO: 1, 2, 3 соответственно, и в некоторых примерах вариабельный VL домен, соответствующий SEQ ID NO: 4.

Широким аспектом настоящего изобретения является водная фармацевтическая композиция, подходящая для парентерального введения субъекту для ингибирования активности белка IL17a. Водная фармацевтическая композиция может включать фармацевтически эффективное количество анти-IL17a антитела, содержащего домен VHH-производного и вариабельный домен VL; буферный агент на основе гистидина; и эффективное количество спирта на основе сахара в качестве осмотического агента.

В некоторых вариантах осуществления анти-IL17a антитело может содержать домен VHH-производного и вариабельный домен VL, где домен VHH-производного может быть напрямую связан с вариабельным доменом VL.

В некоторых вариантах осуществления домен VHH-производного анти-IL17a антитела может содержать 3 гипервариабельные области HCDR1, HCDR2 и HCDR3, где

HCDR1 может содержать аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 1;

HCDR2 может содержать аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 2;

HCDR3 может содержать аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 3; и где вариабельный домен VL анmи-IL17a антитела может содержать аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 4.

В некоторых вариантах осуществления анти-IL17a антитело может представлять собой нетакимаб.

В некоторых вариантах осуществления нетакимаб может быть в количестве от 5 до 150 мг/мл.

В некоторых вариантах осуществления нетакимаб может быть в количестве от 10 до 100 мг/мл.

В некоторых вариантах осуществления нетакимаб может быть в количестве от 10 до 70 мг/мл.

В некоторых вариантах осуществления нетакимаб может быть в количестве 40 мг/мл.

В некоторых вариантах осуществления нетакимаб может быть в количестве 60 мг/мл.

В некоторых вариантах осуществления нетакимаб может быть в количестве 70 мг/мл.

В некоторых вариантах осуществления спирт на основе сахара может представлять собой маннит.

В некоторых вариантах осуществления маннит может быть в количестве 25-60 мг/мл.

В некоторых вариантах осуществления маннит может быть в количестве 50-60 мг/мл.

В некоторых вариантах осуществления маннит может быть в количестве 54,5 мг/мл.

- 4 046015

В некоторых вариантах осуществления подходящее количество буферного агента на основе гистидина может быть добавлено для доведения рН до примерно от 5,5 до 6,5.

В некоторых вариантах осуществления буферный агент может состоять из L-гистидина в количест ве от 0,4 до 1,6 мг/мл; и L-гистидина гидрохлорид моногидрата в количестве от 0,4 до 1,6 мг/мл.

В некоторых вариантах осуществления водная фармацевтическая композиция может дополнительно включать подходящий солюбилизатор.

В некоторых вариантах осуществления солюбилизатор может представлять собой полоксамер 188.

В некоторых вариантах осуществления полоксамер 188 может быть в количестве, которое больше 0 мг/мл, но равно или меньше 1 мг/мл.

В соответствии с другим широким аспектом настоящего изобретения предлагается водная фармацевтическая композиция, подходящая для парентерального введения субъекту для ингибирования активности белка IL17a. Водная фармацевтическая композиция может включать

Анти-ПЛ7а антитело, содержащее домен производного и вариабельный домен Vp L-гистидин

L-Γистидина гидрохлорид моногидрат Маннит

Пол оксамер 188 pH 6.0 ±0.5

10-70 мг/мл

0.4 мг/мл

54.5 мг/мл

0-1 мг/мл

В некоторых вариантах осуществления указанный домен VHH-производного указанного анти-IL17a антитела может включать 3 гипервариабельные области HCDR1, HCDR2 и HCDR3, где

HCDR3 может содержать аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 3; и где вариабельный домен VL указанного анти-IL17a антитела может содержать аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 4.

В соответствии с другим широким аспектом предлагается водная фармацевтическая композиция, подходящая для парентерального введения субъекту для ингибирования активности белка IL17a, при этом указанная водная фармацевтическая композиция может включать

Нетакимаб 40 мг/мл

L-гистидин 0.4 мг/мл

L-Гистидина гидрохлорид моногидрат 0.4 мг/мл

Маннит 54.5 мг/мл

Полоксамер 188 0- 1 мг/мл pH 6.0 ±0.5

В соответствии с другим широким аспектом настоящего изобретения предлагается водная фармацевтическая композиция, подходящая для парентерального введения субъекту для ингибирования активности белка IL17a. Водная фармацевтическая композиция может включать фармацевтически эффективное количество анти-IL17a антитела, содержащего домен VHH-производного и вариабельный домен VL; буферный агент на основе ацетата; и дисахарид в качестве осмотического агента.

В некоторых вариантах осуществления указанный домен VHH-производного указанного анти-IL17a антитела может содержать 3 гипервариабельные области HCDR1, HCDR2 и HCDR3, где

В некоторых вариантах осуществления нетакимаб может быть в количестве от 10 до 120 мг/мл.

В некоторых вариантах осуществления нетакимаб может быть в количестве 100 мг/мл.

В некоторых вариантах осуществления нетакимаб может быть в количестве 120 мг/мл.

В некоторых вариантах осуществления дисахарид может представлять собой трегалозу.

В некоторых вариантах осуществления трегалоза может быть добавлена в композицию в виде дигидрата трегалозы в количестве от 50 до 120 мг/мл.

В некоторых вариантах осуществления трегалоза может быть добавлена в композицию в виде дигидрата трегалозы в количестве 50 мг/мл.

В некоторых вариантах осуществления трегалоза может быть добавлена в композицию в виде ди

- 5 046015 гидрата трегалозы в количестве 80 мг/мл.

В некоторых вариантах осуществления буферный агент на основе ацетата может содержать от 0,4 до 1,8 мг/мл натрия ацетат тригидрата; и подходящее количество уксусной кислоты для доведения рН композиции до 4,0-6,0 включительно.

В некоторых вариантах осуществления водная композиция может дополнительно включать подходящий солюбилизатор.

В некоторых вариантах осуществления полоксамер 188 может быть в количестве, которое больше 0 мг/мл и равно или меньше 1,0 мг/мл.

Анти-ПЛ7а антитело, содержащее домен производного и вариабельный домен

Натрия ацетат тригидрат

Трегалозы дигидрат

Полоксамер 188

Уксусная кислота лед.

pH 5.0 ±0.5

НН10 - 120 мг/мл 0.44-1.74 мг/мл 80-100 мг/мл 0-1 мг/мл до pH 5.0

В некоторых вариантах осуществления указанный домен VHH-производного указанного анти-IL17a антитела может содержать 3 гипервариабельные области HCDR1, HCDR2 и HCDR3:

В соответствии с другим широким аспектом предлагается водная фармацевтическая композиция, подходящая для парентерального введения субъекту для ингибирования активности белка IL17a, при этом указанная водная композиция может включать Нетакимаб 60 мг/мл

Натрия ацетат тригидрат 1.74 мг/мл

Трегалозы д/г 80 мг/мл

Уксусная кислота лед. до pH 5.0 pH 5.0 ±0.5

В соответствии с другим широким аспектом предлагается водная фармацевтическая композиция, подходящая для парентерального введения субъекту для ингибирования активности белка IL17a, при этом указанная водная композиция может включать Нетакимаб

Натрия ацетат тригидрат

Трегалозы д/г

Полоксамер 188

Уксусная кислота лед.

pH 5.0 ±0.5 мг/мл 1.74 мг/мл 80 мг/мл 0.5 мг/мл до pH 5.0

В соответствии с другим широким аспектом предлагается водная фармацевтическая композиция, подходящая для парентерального введения субъекту для ингибирования активности белка IL17a, при этом указанная водная композиция может включать

Нетакимаб

Натрия ацетат тригидрат Трегалозы д/г

Полоксамер 188 Уксусная кислота лед. pH 5.0 ±0.5 мг/мл

1.74 мг/мл мг/мл мг/мл до pH 5.0

- 6 046015

Нетакимаб

Натрия ацетат тригидрат

Трегалозы д/г

Пол оксамер 188

Уксусная кислота лед.

pH 5.0 ±0.5

120 мг/мл 1.74 мг/мл 80 мг/мл 0-1 мг/мл до pH 5.0

Нетакимаб 120 мг/мл

Натрия ацетат тригидрат 1.74 мг/мл

Трегалозы д/г 80 мг/мл

Уксусная кислота лед. до pH 5.0 pH 5.0 ±0.5

В соответствии с другим широким аспектом предлагается водная фармацевтическая композиция, подходящая для парентерального введения субъекту для ингибирования активности белка IL17a, при этом указанная водная композиция может включать Нетакимаб 120 мг/мл

Натрия ацетат тригидрат 1.74 мг/мл

Трегалозы д/г 80 мг/мл

Пол оксамер 188 0.5 мг/мл

Уксусная кислота лед. до pH 5.0 pH 5.0 ±0.5

Нетакимаб 120 мг/мл

Натрия ацетат тригидрат 1.74 мг/мл

Трегалозы д/г 80 мг/мл

Пол оксамер 188 1 мг/мл

Уксусная кислота лед. до pH 5.0 pH 5.0 ±0.5

В соответствии с другим широким аспектом предлагается применение композиции, как определено в настоящем документе, для лечения IL17a-опосредованного заболевания.

В некоторых вариантах осуществления IL17a-опосредованное заболевание может быть одним из, где IL17a-опосредованное заболевание или расстройство может быть выбрано из ревматоидного артрита, ювенильного ревматоидного артрита, ювенильного ревматоидного артрита с системным началом, остеоартрита, ювенильного хронического артрита, псориатического артрита, реактивного артрита, серонегативного артрита, полиартикулярного ювенильного идиопатического артрита, энтезит-ассоциированного артрита; энтезита; спондилоартропатии, аксиального спондилоартрита; болезни Бехчета; воспалительного заболевания кишечника, болезни Крона, язвенного колита; астмы, аллергических нарушений, атопической аллергии; ихтиоза; красного волосистого питириаза; папулопустулезной розацеи; гангренозной пиодермии; гнойного гидраденита; псориаза, псориатической артропатии, псориаза I типа, псориаза II типа, бляшечного псориаза; дерматита, атопического дерматита, аутоиммунного дерматита, дерматологических состояний; системного склероза; трансплантации, болезни трансплантат против хозяина, отторжения трансплантата, острого или хронического иммунного заболевания, связанного с трансплантацией органа, острого иммунного заболевания, связанного с трансплантатом, хронического иммунного заболевания, связанного с трансплантатом, отторжения трансплантата тонкой кишки, отторжения трансплантата поджелудочной железы, отторжения трансплантата любого органа или ткани, отторжения трансплантата сердца, отторжения трансплантата хряща, отторжения почечного трансплантата, отторжения трансплантата печени, отторжения аллотрансплантата, отторжения кожного аллотрансплантата, отторжения гетеротрансплантата любого органа или ткани, отторжения костного трансплантата, отторжения трансплантата костного мозга (ВМТ), отторжения трансплантата паращитовидной железы; эрозии костей; саркоидоза, атеросклероза, болезни Вегенера, микроскопического полиангиита с поражением почек, увеита, факогенного увеита, неинфекционного увеита, кахексии, острого поперечного миелита, первичного билиарного цирроза, аутоиммунного полигландулярного синдрома I и II типа, синдрома Шмидта, острого респираторного дистресс-синдрома; артропатии, серонегативной артропатии, артропатии, связанной с неспецифическим язвенным колитом, синдрома Рейтера, энтеропатического синовита, атероматоза/коронарного склероза, аутоиммунного буллезного заболевания, пузырчатки, листовидной пузырчатки, линейного IgA-зависимого буллезного дерматоза, аутоиммунной гемолитической анемии, гигантоклеточного артериита, первичного склерозирующего гепатита, криптогенного аутоиммунного гепатита, криптогенного фиброзирующего альвеолита, системной склеродермии, связанной с интерстициальной болезнью легких, ревматоидного артрита, связанного с интерстициальной болезнью легких,

- 7 046015 системной красной волчанки, связанной с болезнью легких, дерматомиозита/полимиозита, связанного с болезнью легких, синдрома Шегрена, связанного с болезнью легких, анкилозирующего спондилита, связанного с болезнью легких, васкулита, диффузного легочного васкулита, первичного васкулита, фиброза, болезни легких с инфильтрацией лимфоцитов, аутоиммунного гепатита, аутоиммунного гепатита I типа (классический аутоиммунный или люпоидный гепатит), аутоиммунного гепатита II типа (связанного с антителом к LKM), аутоиммунной гипогликемии, остеоартроза, первичного склерозирующего холангита, эритематоза; системной красной волчанки, дискоидной красной волчанки, волчаночного нефрита; рассеянного склероза (все типы), симпатической офтальмии, легочной гипертензии, вторичной для болезни соединительной ткани, синдрома Гудпасчера, легочных проявлений узелкового полиартериита, острой ревматической атаки, ревматоидного спондилита, болезни Стилла, системной склеродермии, склеродермической болезни, склеродермии, болезни/артериита Такаясу; аутоиммунной тромбоцитопении, идиопатической тромбоцитопении; аутоимунного тиреоидита, гипертиреоидизма, аутоиммуннго гипотериоза (болезни Хашимото), аутоиммунного атрофического гипотиреоидизма; витилиго, острых заболеваний печени, хронических заболеваний печени, холестаза, заболеваний, опосредованных Th2 типом и Th1 типом, злокачественных опухолей, таких как рак легких, рак молочной железы, рак желудка, рак мочевого пузыря, колоректальный рак, рак поджелудочной железы, карцинома поджелудочной железы, рак яичников, рак предстательной железы и злокачественные новообразования гематопоэтической системы (лейкоз и лимфомы), острого лейкоза, острого лимфобластного лейкоза, острого миелоидного лейкоза, аденокарциномы, В-клеточной лимфомы, лимфомы Беркитта, воспалительных ответов на искусственное кровообращение, хронического миелоцитарного лейкоза (ХМЛ), хронических воспалительных патологий, хронического лимфоцитарного лейкоза (ХЛЛ), ректоколитическая карцинома (карциномы ободочной и прямой кишки), кистозного фиброза, злокачественной лимфомы, злокачественного гистиоцитоза, злокачественной меланомы, множественной миеломы, неходжкинских лимфом, рака носоглотки, солидных опухолей, волосатклеточного лейкоза, болезни Ходжкина, саркомы, миелодиспластического синдрома, связанных с цитокиновой терапией нарушений, демиелинизирующих заболеваний, воспалительного демиелинизирующего заболевания, легочного фиброза, идиопатического легочного фиброза, обычной интерстициальной пневмонии, иридоциклита/увеита/оптического неврита, лимфедемы, смешанного заболевания соединительных тканей, моноклональной гаммапатии, хронических болезней легких, развившихся в неонатальном периоде, нефрита, нефротических, нейродегенеративных нарушений, остеопороза, паранеопластического синдрома/гиперкальциемии, связанной со злокачественной опухолью, феномена и болезни Рейно, изменений кожи, синдрома системной воспалительной реакции, тромбоцитопении, токсических эффектов, крапивницы, острого коронарного синдрома, болезни Стилла, развившейся у взрослых, апластической анемии, коронарного склероза, атопической экземы; аутоиммунного расстройства, связанного со стрептококковой инфекцией, аутоиммунной энтеропатии, аутоиммунной потери слуха, аутоиммунного лимфопролиферативного синдрома (ALPS), аутоиммунного миокардита, аутоиммунной преждевременной недостаточности яичников; целиакии, шейного спондилеза, клинически изолированного синдрома (КИС) с риском рассеянного склероза, многоформной эритемы, тяжелой многоформной эритемы, пемфигоида, буллезного пемфигоида, рубцового пемфигоида, пемфигоида слизистых оболочек, гестационного пемфигоида, ирита, кератита, болезни двигательных нейронов, гепатита ни А, ни В, оптического неврита, олигоартикулярного ЮИА, узелкового полиартериита, полихондрита, полиоза, полимиозита, рецидивирующего оптического нейромиелита, ревматической болезни сердца, синдрома SAPHO (синовит, акне, пустулез, гиперостоз, остеит), вторичного амилоидоза, анкилозирующего спондилита, синдром системного воспалительного ответа, краниального артериита и артропатии, связанной с иерсинией или сальмонеллой.

В соответствии с другим широким аспектом предлагается способ лечения ГЬ17а-опосредованного заболевания, включающий введение фармацевтически эффективного количества водной фармацевтической композиции, как определено в настоящем документе.

В соответствии с другим широким аспектом настоящего изобретения предлагается способ получения водной фармацевтической композиции, подходящей для парентерального введения субъекту для ингибирования активности белка IL17a. Способ включает комбинирование фармацевтически эффективного количества анти-[L17a антитела, содержащего домен VHH-производного и вариабельный домен VL с буферным агентом на основе гистидина; и эффективного количества маннита в качестве осмотического агента.

В соответствии с другим широким аспектом предлагается способ получения водной фармацевтической композиции, подходящей для парентерального введения субъекту для ингибирования активности белка IL17a, содержащий комбинирование фармацевтически эффективного количества анmи-IL17a антитела, содержащего домен VHH-производного и вариабельный домен VL с буферным агентом на основе ацетата; и эффективного количества трегалозы в качестве осмотического агента.

В некоторых вариантах осуществления полоксамер 188 может быть добавлен в качестве солюбилизатора.

- 8 046015

В соответствии с другим широким аспектом предлагается способ лечения псориаза, включающий введение пациенту, нуждающемуся в таком лечении, дозы 40 мг нетакимаба один раз в неделю в течение недели 0, 1, 2, 4, 6, 8, 10.

В некоторых вариантах осуществления способ может включать, после введения дозы нетакимаба на неделе 10, последующее введение дозы 40 мг нетакимаба один раз каждые четыре недели.

В некоторых вариантах осуществления способ может включать, после введения дозы нетакимаба на неделе 10, последующее введение дозы 40 мг нетакимаба один раз каждые две недели.

В соответствии с другим широким аспектом предлагается способ лечения псориаза, включающий введение пациенту, нуждающемуся в таком лечении, дозы 80 мг нетакимаба один раз в неделю в течение недели 0, 1, 2, 4, 6, 8, 10.

В соответствии с другим широким аспектом предлагается способ лечения псориаза, включающий введение пациенту, нуждающемуся в таком лечении, дозы 80 мг нетакимаба один раз в неделю в течение недели 0, 1, 2, 6, 10.

В некоторых примерах способ может включать, после введения дозы нетакимаба на неделе 10, последующее введение дозы 80 мг нетакимаба один раз каждые четыре недели.

В некоторых примерах способ может включать, после введения дозы нетакимаба на неделе 10, последующее введение дозы 80 мг нетакимаба один раз каждые две недели.

В соответствии с другим широким аспектом предлагается способ лечения псориаза, включающий введение пациенту, нуждающемуся в таком лечении, дозы 80 мг нетакимаба один раз в неделю в течение недели 0, 1, 2, 4, 6, 8, 10, 12.

В некоторых вариантах осуществления способ может включать, после введения дозы 80 мг нетакимаба на неделе 12, последующее введение дозы 80 мг нетакимаба один раз каждые четыре недели.

В некоторых вариантах осуществления способ может включать, после введения дозы 80 мг нетакимаба на неделе 12, последующее введение дозы 80 мг нетакимаба один раз каждые две недели.

В некоторых вариантах осуществления способ может включать, после введения дозы 80 мг нетакимаба на неделе 12, последующее введение дозы 80 мг нетакимаба один раз каждые четыре недели в течение следующих 12 недель.

В некоторых вариантах осуществления способ может включать, после введения дозы 80 мг нетакимаба на неделе 12, последующее введение дозы 80 мг нетакимаба один раз каждые две недели в течение следующих 12 недель.

В некоторых вариантах осуществления способ может включать введение нетакимаба в соответствии со следующей схемой приема препарата:

1) введение дозы 80 мг нетакимаба один раз в неделю в течение недели 0, 1, 2, 4, 6, 8, 10, 12;

2) введение дозы 80 мг нетакимаба один раз каждые две недели в течение следующих 12 недель после этого;

3) введение дозы 80 мг нетакимаба один раз каждые четыре недели после этого.

3) введение дозы 80 мг нетакимаба один раз каждые две недели после этого.

2) введение дозы 80 мг нетакимаба один раз каждые четыре недели в течение следующих 12 недель после этого;

В некоторых вариантах осуществления доза 80 мг нетакимаба может быть введена двумя инъекциями, содержащими 40 мг нетакимаба.

В соответствии с другим широким аспектом предлагается способ лечения псориаза, включающий введение пациенту, нуждающемуся в таком лечении, дозы 120 мг нетакимаба один раз в неделю в течение недели 0, 1, 2, 4, 6, 8, 10.

В соответствии с другим широким аспектом предлагается способ лечения псориаза, включающий введение пациенту, нуждающемуся в таком лечении, дозы 120 мг нетакимаба один раз в неделю в течение недели 0, 1, 2, 6, 10.

- 9 046015

В некоторых вариантах осуществления способ может включать, после введения дозы нетакимаба на неделе 10, последующее введение дозы 120 мг нетакимаба один раз каждые четыре недели.

В некоторых вариантах осуществления способ может включать, после введения дозы нетакимаба на неделе 10, последующее введение дозы 120 мг нетакимаба один раз каждые две недели.

В соответствии с другим широким аспектом предлагается способ лечения псориаза, включающий введение пациенту, нуждающемуся в таком лечении, дозы 120 мг нетакимаба один раз в неделю в течение недели 0, 1, 2, 4, 6, 8, 10, 12.

В некоторых вариантах осуществления способ может включать, после введения дозы нетакимаба на неделе 12, последующее введение дозы 120 мг нетакимаба один раз каждые четыре недели.

В некоторых вариантах осуществления способ может включать, после введения дозы нетакимаба на неделе 12, последующее введение дозы 120 мг нетакимаба один раз каждые две недели.

В некоторых вариантах осуществления способ может включать, после введения дозы 120 мг нетакимаба на неделе 12, последующее введение дозы 120 мг нетакимаба один раз каждые четыре недели в течение следующих 12 недель.

В некоторых вариантах осуществления способ может включать, после введения дозы 120 мг нетакимаба на неделе 12, последующее введение дозы 120 мг нетакимаба один раз каждые две недели в течение следующих 12 недель.

1) введение дозы 120 мг нетакимаба один раз в неделю в течение недели 0, 1, 2, 4, 6, 8, 10, 12;

2) введение дозы 120 мг нетакимаба один раз каждые две недели в течение следующих 12 недель после этого;

3) введение дозы 120 мг нетакимаба один раз каждые четыре недели после этого.

3) введение дозы 120 мг нетакимаба один раз каждые две недели после этого.

2) введение дозы 120 мг нетакимаба один раз каждые четыре недели в течение следующих 12 недель после этого;

В некоторых вариантах осуществления доза 120 мг нетакимаба может быть введена тремя инъекциями, содержащими 40 мг нетакимаба.

В некоторых вариантах осуществления доза 120 мг нетакимаба может быть введена двумя инъекциями, содержащими 60 мг нетакимаба.

В некоторых вариантах осуществления нетакимаб может быть введен путем подкожной инъекции.

В некоторых вариантах осуществления нетакимаб может быть введен путем внутривенной инъекции.

В некоторых вариантах осуществления псориаз может представлять собой бляшечный псориаз.

В соответствии с другим широким аспектом предлагается способ лечения псориатического артрита, включающий введение пациенту, нуждающемуся в таком лечении, дозы 120 мг нетакимаба один раз в неделю в течение недели 0, 1, 2, 4, 6, 8, 10.

В соответствии с другим широким аспектом предлагается способ лечения псориатического артрита, включающий введение пациенту, нуждающемуся в таком лечении, дозы 120 мг нетакимаба один раз в неделю в течение недели 0, 1, 2, 6, 10.

В соответствии с другим широким аспектом предлагается способ лечения псориатического артрита, включающий введение пациенту, нуждающемуся в таком лечении, дозы 120 мг нетакимаба один раз в неделю в течение недели 0, 1, 2, 4, 6, 8, 10, 12.

- 10 046015

В соответствии с другим широким аспектом предлагается способ лечения анкилозирующего спондилоартрита, включающий введение пациенту, нуждающемуся в таком лечении, дозы 40 мг нетакимаба один раз в неделю в течение недели 0, 1, 2.

В некоторых вариантах осуществления способ может включать, после введения дозы нетакимаба на неделе 2, последующее введение дозы 40 мг нетакимаба один раз каждые две недели.

В соответствии с другим широким аспектом предлагается способ лечения анкилозирующего спондилоартрита, включающий введение пациенту, нуждающемуся в таком лечении, дозы 40 мг нетакимаба один раз в неделю в течение недели 0, 1, 2, 4, 6, 8, 10, 12.

В некоторых вариантах осуществления способ может включать, после введения дозы нетакимаба на неделе 12, последующее введение дозы 40 мг нетакимаба один раз каждые две недели.

В соответствии с другим широким аспектом предлагается способ лечения анкилозирующего спондилоартрита, включающий введение пациенту, нуждающемуся в таком лечении, дозы 80 мг нетакимаба один раз в неделю в течение недели 0, 1, 2.

В некоторых вариантах осуществления способ может включать, после введения дозы нетакимаба на неделе 2, последующее введение дозы 80 мг нетакимаба один раз каждые две недели.

В соответствии с другим широким аспектом предлагается способ лечения анкилозирующего спондилоартрита, включающий введение пациенту, нуждающемуся в таком лечении, дозы 80 мг нетакимаба один раз в неделю в течение недели 0, 1, 2, 4, 6, 8, 10, 12.

В некоторых вариантах осуществления способ может включать, после введения дозы 80 мг нетакимаба на неделе 12, введение дозы 80 мг нетакимаба один раз каждые две недели, начиная с недели 16.

В некоторых вариантах осуществления способ может включать, после введения дозы 80 мг нетакимаба на неделе 12, последующее введение дозы 120 мг нетакимаба один раз каждые две недели, начиная с недели 16.

В соответствии с другим широким аспектом предлагается способ лечения анкилозирующего спондилоартрита, включающий введение пациенту, нуждающемуся в таком лечении, дозы 120 мг нетакимаба один раз в неделю в течение недели 0, 1, 2.

В некоторых вариантах осуществления способ может включать, после введения дозы нетакимаба на неделе 2, последующее введение дозы 120 мг нетакимаба один раз каждые две недели.

В соответствии с другим широким аспектом предлагается способ лечения анкилозирующего спондилоартрита, включающий введение пациенту, нуждающемуся в таком лечении, дозы 120 мг нетакимаба один раз в неделю в течение недели 0, 1, 2, 4, 6, 8, 10, 12.

В некоторых вариантах осуществления способ может включать, после введения дозы 120 мг нетакимаба на неделе 12, последующее введение дозы 80 мг нетакимаба один раз каждые две недели, начиная с недели 16.

В некоторых вариантах осуществления способ может включать, после введения дозы 120 мг нетакимаба на неделе 12, последующее введение дозы 120 мг нетакимаба один раз каждые две недели, начиная с недели 16.

В соответствии с другим широким аспектом предлагается фармацевтическая композиция, подходящая для введения субъекту для ингибирования активности белка IL17a, при этом фармацевтическая ком

- 11 046015 позиция содержит на каждый 1 мл фармацевтической композиции:

Нетакимаб 40 мг/мл

Гистидина гидрохлорид моногидрат 0.4 мг/мл

L-гистидин 0.4 мг/мл маннит 54.5 мг/мл вода для инъекций до 1.0 мл

В соответствии с другим широким аспектом предлагается способ лечения псориаза, включающий введение пациенту фармакологически эффективного количества фармацевтической композиции, как описано в настоящем документе.

В некоторых вариантах осуществления может быть введено 1 мл фармацевтической композиции.

В некоторых вариантах осуществления 1 мл фармацевтической композиции может быть введен один раз в неделю в течение недели 0, 1, 2, 4, 6, 8, 10.

В некоторых вариантах осуществления способ может включать, после введения дозы нетакимаба на неделе 10, последующее введение 1-миллилитровых доз нетакимаба один раз каждые четыре недели.

В некоторых вариантах осуществления способ может включать, после введения дозы нетакимаба на неделе 10, последующее введение 1-миллилитровых доз нетакимаба один раз каждые две недели.

В некоторых вариантах осуществления может быть введено 2 мл фармацевтической композиции.

В некоторых вариантах осуществления 2 мл фармацевтической композиции может быть введено один раз в неделю в течение недели 0, 1, 2, 4, 6, 8, 10.

В некоторых вариантах осуществления 2 мл фармацевтической композиции может быть введено один раз в неделю в течение недели 0, 1, 2, 6, 10.

В некоторых вариантах осуществления способ может включать, после введения дозы нетакимаба на неделе 10, последующее введение 2-миллилитровых доз нетакимаба один раз каждые четыре недели.

В некоторых вариантах осуществления способ может включать, после введения дозы нетакимаба на неделе 10, последующее введение 2-миллилитровых доз нетакимаба один раз каждые две недели.

В некоторых вариантах осуществления 2 мл фармацевтической композиции может быть введено один раз в неделю в течение недели 0, 1, 2, 4, 6, 8, 10, 12.

В некоторых вариантах осуществления способ может включать, после введения дозы нетакимаба на неделе 12, последующее введение 2-миллилитровых доз нетакимаба один раз каждые четыре недели.

В некоторых вариантах осуществления способ может включать, после введения дозы нетакимаба на неделе 12, последующее введение 2-миллилитровых доз нетакимаба один раз каждые две недели.

В некоторых вариантах осуществления способ может включать, после введения 2-миллилитровых доз нетакимаба на неделе 12, последующее введение 2-миллилитровых доз нетакимаба один раз каждые четыре недели в течение следующих 12 недель.

В некоторых вариантах осуществления способ может включать, после введения 2-миллилитровых доз нетакимаба на неделе 12, последующее введение 2-миллилитровых доз нетакимаба один раз каждые две недели в течение следующих 12 недель.

В некоторых вариантах осуществления способ может включать введение фармацевтической композиции в соответствии со следующей схемой приема препарата:

1) введение 2 мл фармацевтической композиции один раз в неделю в течение недели 0, 1, 2, 4, 6, 8, 10, 12;

2) введение 2 мл фармацевтической композиции один раз каждые две недели в течение следующих 12 недель после этого;

3) введение 2 мл фармацевтической композиции один раз каждые четыре недели после этого.

3) введение 2 мл фармацевтической композиции один раз каждые две недели после этого.

2) введение 2 мл фармацевтической композиции один раз каждые четыре недели в течение следующих 12 недель после этого;

- 12 046015

В некоторых вариантах осуществления 2 мл может быть доставлено с помощью шприца в виде двух отдельных доз по 1 мл.

В некоторых вариантах осуществления шприц может представлять собой заранее заполненный шприц.

В некоторых вариантах осуществления может быть введено 3 мл фармацевтической композиции.

В некоторых вариантах осуществления 3 мл фармацевтической композиции может быть введено один раз в неделю в течение недели 0, 1, 2, 4, 6, 8, 10.

В некоторых вариантах осуществления 3 мл фармацевтической композиции может быть введено один раз в неделю в течение недели 0, 1, 2, 6, 10.

В некоторых вариантах осуществления способ может включать, после введения дозы нетакимаба на неделе 10, введение 3-миллилитровых доз нетакимаба один раз каждые четыре недели.

В некоторых вариантах осуществления способ может включать, после введения дозы нетакимаба на неделе 10, последующее введение 3-миллилитровых доз нетакимаба один раз каждые две недели.

В некоторых вариантах осуществления 3 мл фармацевтической композиции может быть введено один раз в неделю в течение недели 0, 1, 2, 4, 6, 8, 10, 12.

В некоторых вариантах осуществления способ может включать, после введения дозы нетакимаба на неделе 12, последующее введение 3-миллилитровых доз нетакимаба один раз каждые четыре недели.

В некоторых вариантах осуществления способ может включать, после введения дозы нетакимаба на неделе 12, последующее введение 3-миллилитровых доз нетакимаба один раз каждые две недели.

В некоторых вариантах осуществления способ может включать, после введения 3-миллилитровых доз нетакимаба на неделе 12, последующее введение 3-миллилитровых доз нетакимаба один раз каждые четыре недели в течение следующих 12 недель.

В некоторых вариантах осуществления способ может включать, после введения 3-миллилитровых доз нетакимаба на неделе 12, последующее введение 3-миллилитровых доз нетакимаба один раз каждые две недели в течение следующих 12 недель.

1) введение 3 мл фармацевтической композиции один раз в неделю в течение недели 0, 1, 2, 4, 6, 8, 10, 12;

2) введение 3 мл фармацевтической композиции один раз каждые две недели в течение следующих 12 недель после этого;

3) введение 3 мл фармацевтической композиции один раз каждые четыре недели после этого.

3) введение 3 мл фармацевтической композиции один раз каждые две недели после этого.

2) введение 3 мл фармацевтической композиции один раз каждые четыре недели в течение следующих 12 недель после этого;

В некоторых вариантах осуществления 3 мл может быть доставлено с помощью шприца в виде трех отдельных доз по 1 мл.

В некоторых вариантах осуществления фармацевтическая композиция может быть введена внутримышечно.

- 13 046015

В некоторых вариантах осуществления фармацевтическая композиция может быть введена подкожно.

В некоторых вариантах осуществления фармацевтическая композиция может быть введена внутривенно.

В соответствии с другим широким аспектом предлагается способ лечения псориатического артрита, включающий введение пациенту фармакологически эффективного количества фармацевтической композиции, как описано в настоящем документе.

В некоторых вариантах осуществления способ может включать, после введения дозы нетакимаба на неделе 10, последующее введение 3-миллилитровых доз нетакимаба один раз каждые четыре недели.

В соответствии с другим широким аспектом предлагается способ лечения анкилозирующего спондилоартрита, включающий введение пациенту фармакологически эффективного количества фармацевтической композиции, как описано в настоящем документе.

В некоторых вариантах осуществления 1 мл фармацевтической композиции может быть введен один раз в неделю в течение недели 0, 1, 2.

В некоторых вариантах осуществления способ может включать, после введения дозы нетакимаба на неделе 2, последующее введение 1-миллилитровых доз нетакимаба один раз каждые две недели.

В некоторых вариантах осуществления 1 мл фармацевтической композиции может быть введен один раз в неделю в течение недели 0, 1, 2, 4, 6, 8, 10, 12.

В некоторых вариантах осуществления способ может включать, после введения дозы нетакимаба на неделе 12, последующее введение 1-миллилитровых доз нетакимаба один раз каждые две недели.

В некоторых вариантах осуществления 2 мл фармацевтической композиции может быть введено один раз в неделю в течение недели 0, 1, 2.

В некоторых вариантах осуществления способ может включать, после введения дозы нетакимаба на неделе 2, последующее введение 2-миллилитровых доз нетакимаба один раз каждые две недели.

В некоторых вариантах осуществления способ может включать, после введения 2-миллилитровой дозы нетакимаба на неделе 12, последующее введение 2-миллилитровых доз нетакимаба один раз каждые две недели, начиная с недели 16.

В некоторых вариантах осуществления способ может включать, после введения 2-миллилитровой дозы нетакимаба на неделе 12, последующее введение 3-миллилитровых доз нетакимаба один раз каждые две недели, начиная с недели 16.

В некоторых вариантах осуществления 2 мл может быть доставлено с помощью шприца в виде двух

- 14 046015 отдельных доз по 1 мл.

В некоторых вариантах осуществления 3 мл фармацевтической композиции может быть введено один раз в неделю в течение недели 0, 1, 2.

В некоторых вариантах осуществления способ может включать, после введения дозы нетакимаба на неделе 2, последующее введение 3-миллилитровых доз нетакимаба один раз каждые две недели.

В некоторых вариантах осуществления способ может включать, после введения 3-миллилитровой дозы нетакимаба на неделе 12, последующее введение 2-миллилитровых доз нетакимаба один раз каждые две недели, начиная с недели 16.

В некоторых вариантах осуществления способ может включать, после введения 3-миллилитровой дозы нетакимаба на неделе 12, последующее введение 3-миллилитровых доз нетакимаба один раз каждые две недели, начиная с недели 16.

В соответствии с другим широким аспектом предлагается фармацевтическая композиция, подходящая для введения субъекту для ингибирования активности белка IL17a, при этом фармацевтическая композиция содержит на каждый 1 мл фармацевтической композиции:

Нетакимаб	60.0 мг
натрия ацетат тригидрат	1.74 мг
трегалозы дигидрат	80 мг
полоксамер (Kolliphor) 188	0.5 мг
ледяная уксусная кислота	до pH 5.0
вода для инъекций	до 1.0 мл

- 15 046015

В некоторых вариантах осуществления способ может включать введение дозы нетакимаба на неделе 12, последующее введение 2-миллилитровых доз нетакимаба один раз каждые четыре недели в течение следующих 12 недель.

В некоторых вариантах осуществления способ может включать, после введения дозы нетакимаба на неделе 12, последующее введение 2-миллилитровых доз нетакимаба один раз каждые две недели в течение следующих 12 недель.

1) введение 3-миллилитровых доз нетакимаба один раз в неделю в течение недели 0, 1, 2, 4, 6, 8, 10, 12;

2) введение 2-миллилитровых доз нетакимаба один раз каждые две недели в течение следующих 12 недель после этого;

3) введение 2-миллилитровых доз нетакимаба один раз каждые четыре недели после этого.

1) введение 2-миллилитровых доз нетакимаба один раз в неделю в течение недели 0, 1, 2, 4, 6, 8, 10, 12;

3) введение 2-миллилитровых доз нетакимаба один раз каждые две недели после этого.

2) введение 2-миллилитровых доз нетакимаба один раз каждые четыре недели в течение следующих 12 недель после этого;

В некоторых вариантах осуществления шприц может представлять собой заранее заполненный

- 16 046015 шприц.

В соответствии с другим широким аспектом предлагается применение нетакимаба для лечения псориаза в дозах 40 мг нетакимаба, который вводится один раз в неделю в течение недели 0, 1, 2, 4, 6, 8 и 10.

В соответствии с другим широким аспектом предлагается применение нетакимаба для лечения псориаза в дозах 40 мг нетакимаба, который вводится один раз в неделю в течение недели 0, 1, 2, 4, 6, 8, 10 и один раз каждые четыре недели после этого.

В соответствии с другим широким аспектом предлагается применение нетакимаба для лечения псориаза в дозах 40 мг нетакимаба, который вводится один раз в неделю в течение недели 0, 1, 2, 4, 6, 8, 10 и один раз каждые две недели после этого.

В соответствии с другим широким аспектом предлагается применение нетакимаба для лечения псориаза в дозах 80 мг нетакимаба, который вводится один раз в неделю в течение недели 0, 1, 2, 4, 6, 8 и 10.

В соответствии с другим широким аспектом предлагается применение нетакимаба для лечения псориаза в дозах 80 мг нетакимаба, который вводится один раз в неделю в течение недели 0, 1, 2, 4, 6, 8, 10 и один раз каждые четыре недели после этого.

В соответствии с другим широким аспектом предлагается применение нетакимаба для лечения псориаза в дозах 80 мг нетакимаба, который вводится один раз в неделю в течение недели 0, 1, 2, 4, 6, 8, 10 и один раз каждые две недели после этого.

В соответствии с другим широким аспектом предлагается применение нетакимаба для лечения псориаза в дозах 80 мг нетакимаба, который вводится один раз в неделю в течение недели 0, 1, 2, 6 и 10.

В соответствии с другим широким аспектом предлагается применение нетакимаба для лечения псориаза в дозах 80 мг нетакимаба, который вводится один раз в неделю в течение недели 0, 1, 2, 6, 10 и один раз каждые четыре недели после этого.

- 17 046015

В соответствии с другим широким аспектом предлагается применение нетакимаба для лечения псориаза в дозах 80 мг нетакимаба, который вводится один раз в неделю в течение недели 0, 1, 2, 6, 10 и один раз каждые две недели после этого.

В соответствии с другим широким аспектом предлагается применение нетакимаба для лечения псориаза в дозах 80 мг нетакимаба, который вводится один раз в неделю в течение недели 0, 1, 2, 4, 6, 8, 10, 12.

В соответствии с другим широким аспектом предлагается применение нетакимаба для лечения псориаза в дозах 80 мг нетакимаба, который вводится один раз в неделю в течение недели 0, 1, 2, 4, 6, 8, 10, 12 и один раз каждые четыре недели после этого.

В соответствии с другим широким аспектом предлагается применение нетакимаба для лечения псориаза в дозах 80 мг нетакимаба, который вводится один раз в неделю в течение недели 0, 1, 2, 4, 6, 8, 10, 12 и один раз каждые две недели после этого.

В соответствии с другим широким аспектом предлагается применение нетакимаба для лечения псориаза в дозах 80 мг нетакимаба, который вводится один раз в неделю в течение недели 0, 1, 2, 4, 6, 8, 10, 12 и один раз каждые четыре недели в течение следующих 12 недель после этого.

В соответствии с другим широким аспектом предлагается применение нетакимаба для лечения псориаза в дозах 80 мг нетакимаба, который вводится один раз в неделю в течение недели 0, 1, 2, 4, 6, 8, 10, 12 и один раз каждые две недели в течение следующих 12 недель после этого.

В соответствии с другим широким аспектом предлагается применение нетакимаба для лечения псориаза в дозах 80 мг нетакимаба, который вводится в соответствии со следующей схемой приема препарата:

В некоторых вариантах осуществления каждая из доз 80 мг нетакимаба может быть введена двумя инъекциями, содержащими 40 мг нетакимаба.

В соответствии с другим широким аспектом предлагается применение нетакимаба для лечения псориаза в дозах 120 мг нетакимаба, которые вводятся один раз в неделю в течение недели 0, 1, 2, 4, 6, 8 и 10.

В соответствии с другим широким аспектом предлагается применение нетакимаба для лечения псориаза в дозах 120 мг нетакимаба, который вводится один раз в неделю в течение недели 0, 1, 2, 4, 6, 8 и 10 и один раз каждые четыре недели после этого.

В соответствии с другим широким аспектом предлагается применение нетакимаба для лечения псориаза в дозах 120 мг нетакимаба, которые вводятся один раз в неделю в течение недели 0, 1, 2, 4, 6, 8 и 10 и один раз каждые две недели после этого.

В соответствии с другим широким аспектом предлагается применение нетакимаба для лечения псориаза в дозах 120 мг нетакимаба, которые вводятся один раз в неделю в течение недели 0, 1, 2, 6, 10.

В соответствии с другим широким аспектом предлагается применение нетакимаба для лечения псориаза в дозах 120 мг нетакимаба, которые вводятся один раз в неделю в течение недели 0, 1, 2, 6, 10 и один раз каждые четыре недели после этого.

В соответствии с другим широким аспектом предлагается применение нетакимаба для лечения псориаза в дозах 120 мг нетакимаба, который вводится один раз в неделю в течение недели 0, 1, 2, 6, 10 и один раз каждые две недели после этого.

В соответствии с другим широким аспектом предлагается применение нетакимаба для лечения псориаза в дозах 120 мг нетакимаба, который вводится один раз в неделю в течение недели 0, 1, 2, 4, 6, 8, 10, 12.

- 18 046015

В соответствии с другим широким аспектом предлагается применение нетакимаба для лечения псориаза в дозах 120 мг нетакимаба, который вводится один раз в неделю в течение недели 0, 1, 2, 4, 6, 8, 10, 12 и один раз каждые четыре недели после этого.

В соответствии с другим широким аспектом предлагается применение нетакимаба для лечения псориаза в дозах 120 мг нетакимаба, который вводится один раз в неделю в течение недели 0, 1, 2, 4, 6, 8, 10, 12 и один раз каждые две недели после этого.

В соответствии с другим широким аспектом предлагается применение нетакимаба для лечения псориаза в дозах 120 мг нетакимаба, который вводится один раз в неделю в течение недели 0, 1, 2, 4, 6, 8, 10, 12 и один раз каждые четыре недели в течение следующих 12 недель после этого.

В соответствии с другим широким аспектом предлагается применение нетакимаба для лечения псориаза в дозах 120 мг нетакимаба, который вводится один раз в неделю в течение недели 0, 1, 2, 4, 6, 8, 10, 12 и один раз каждые две недели в течение следующих 12 недель после этого.

В соответствии с другим широким аспектом предлагается применение нетакимаба для лечения псориаза в дозах 120 мг нетакимаба, который вводится в соответствии со следующей схемой приема препарата:

В некоторых вариантах осуществления каждая из доз 120 мг нетакимаба может быть введена тремя инъекциями, содержащими 40 мг нетакимаба.

В некоторых вариантах осуществления каждая из доз 120 мг нетакимаба может быть введена двумя инъекциями, содержащими 60 мг нетакимаба.

В соответствии с другим широким аспектом предлагается применение нетакимаба для лечения псориатического артрита в дозах 120 мг нетакимаба, который вводится один раз в неделю в течение недели 0, 1, 2, 4, 6, 8, 10.

В соответствии с другим широким аспектом предлагается применение нетакимаба для лечения псориатического артрита в дозах 120 мг нетакимаба, который вводится один раз в неделю в течение недели 0, 1, 2, 4, 6, 8, 10 и один раз каждые четыре недели после этого.

В соответствии с другим широким аспектом предлагается применение нетакимаба для лечения псориатического артрита в дозах 120 мг нетакимаба, который вводится один раз в неделю в течение недели 0, 1, 2, 4, 6, 8, 10 и один раз каждые две недели после этого.

В соответствии с другим широким аспектом предлагается применение нетакимаба для лечения псориатического артрита в дозах 120 мг нетакимаба, который вводится один раз в неделю в течение недели 0, 1, 2, 6 и 10.

В соответствии с другим широким аспектом предлагается применение нетакимаба для лечения псориатического артрита в дозах 120 мг нетакимаба, который вводится один раз в неделю в течение недели 0, 1, 2, 6, 10 и один раз каждые четыре недели после этого.

- 19 046015

В соответствии с другим широким аспектом предлагается применение нетакимаба для лечения псориатического артрита в дозах 120 мг нетакимаба, который вводится один раз в неделю в течение недели 0, 1, 2, 6, 10 и один раз каждые две недели после этого.

В соответствии с другим широким аспектом предлагается применение нетакимаба для лечения псориатического артрита в дозах 120 мг нетакимаба, который вводится один раз в неделю в течение недели 0, 1, 2, 4, 6, 8, 10, 12.

В соответствии с другим широким аспектом предлагается применение нетакимаба для лечения псориатического артрита в дозах 120 мг нетакимаба, который вводится один раз в неделю в течение недели 0, 1, 2, 4, 6, 8, 10, 12 и один раз каждые четыре недели после этого.

В соответствии с другим широким аспектом предлагается применение нетакимаба для лечения псориатического артрита в дозах 120 мг нетакимаба, который вводится один раз в неделю в течение недели 0, 1, 2, 4, 6, 8, 10, 12 и один раз каждые две недели после этого.

В соответствии с другим широким аспектом предлагается применение нетакимаба для лечения анкилозирующего спондилоартрита в дозах 40 мг нетакимаба, который вводится один раз в неделю в течение недели 0, 1, 2.

В соответствии с другим широким аспектом предлагается применение нетакимаба для лечения анкилозирующего спондилоартрита в дозах 40 мг нетакимаба, который вводится один раз в неделю в течение недели 0, 1, 2 и один раз каждые две недели после этого.

В соответствии с другим широким аспектом предлагается применение нетакимаба для лечения анкилозирующего спондилоартрита в дозах 40 мг нетакимаба, который вводится один раз в неделю в течение недели 0, 1, 2, 4, 6, 8, 10, 12.

В соответствии с другим широким аспектом предлагается применение нетакимаба для лечения анкилозирующего спондилоартрита в дозах 40 мг нетакимаба, который вводится один раз в неделю в течение недели 0, 1, 2, 4, 6, 8, 10, 12 и один раз каждые две недели после этого.

В соответствии с другим широким аспектом предлагается применение нетакимаба для лечения анкилозирующего спондилоартрита в дозах 80 мг нетакимаба, который вводится один раз в неделю в течение недели 0, 1, 2.

В соответствии с другим широким аспектом предлагается применение нетакимаба для лечения анкилозирующего спондилоартрита в дозах 80 мг нетакимаба, который вводится один раз в неделю в течение недели 0, 1, 2 и один раз каждые две недели после этого.

В соответствии с другим широким аспектом предлагается применение нетакимаба для лечения анкилозирующего спондилоартрита в дозах 80 мг нетакимаба, который вводится один раз в неделю в течение недели 0, 1, 2, 4, 6, 8, 10, 12.

В соответствии с другим широким аспектом предлагается применение нетакимаба для лечения анкилозирующего спондилоартрита в дозах 80 мг нетакимаба, который вводится один раз в неделю в течение недели 0, 1, 2, 4, 6, 8, 10, 12 и один раз каждые две недели после этого.

В соответствии с другим широким аспектом предлагается применение нетакимаба для лечения анкилозирующего спондилоартрита в дозах 80 мг нетакимаба, который вводится один раз в неделю в течение недели 0, 1, 2, 4, 6, 8, 10, 12 и, начиная с недели 16, в дозах 80 мг нетакимаба, который вводится один раз каждые две недели после этого.

В соответствии с другим широким аспектом предлагается применение нетакимаба для лечения анкилозирующего спондилоартрита в дозах 80 мг нетакимаба, который вводится один раз в неделю в течение недели 0, 1, 2, 4, 6, 8, 10, 12 и, начиная с недели 16, в дозах 120 мг нетакимаба, который вводится один раз каждые две недели после этого.

В соответствии с другим широким аспектом предлагается применение нетакимаба для лечения анкилозирующего спондилоартрита в дозах 120 мг нетакимаба, который вводится один раз в неделю в течение недели 0, 1, 2.

В соответствии с другим широким аспектом предлагается применение нетакимаба для лечения анкилозирующего спондилоартрита в дозах 120 мг нетакимаба, который вводится один раз в неделю в течение недели 0, 1, 2 и один раз каждые две недели после этого.

В соответствии с другим широким аспектом предлагается применение нетакимаба для лечения анкилозирующего спондилоартрита в дозах 120 мг нетакимаба, который вводится один раз в неделю в течение недели 0, 1, 2, 4, 6, 8, 10, 12.

В соответствии с другим широким аспектом предлагается применение нетакимаба для лечения ан

- 20 046015 килозирующего спондилоартрита в дозах 120 мг нетакимаба, который вводится один раз в неделю в течение недели 0, 1, 2, 4, 6, 8, 10, 12 и один раз каждые две недели после этого.

В соответствии с другим широким аспектом предлагается применение нетакимаба для лечения анкилозирующего спондилоартрита в дозах 120 мг нетакимаба, который вводится один раз в неделю в течение недели 0, 1, 2, 4, 6, 8, 10, 12 и, начиная с недели 16, в дозах 80 мг нетакимаба, который вводится один раз каждые две недели после этого.

В соответствии с другим широким аспектом предлагается применение нетакимаба для лечения анкилозирующего спондилоартрита в дозах 120 мг нетакимаба, который вводится один раз в неделю в течение недели 0, 1, 2, 4, 6, 8, 10, 12 и, начиная с недели 16, в дозах 120 мг нетакимаба, который вводится один раз каждые две недели после этого.

В соответствии с другим широким аспектом предлагается применение фармацевтической композиции, содержащей на каждый 1 мл фармацевтической композиции:

Нетакимаб 40.0 мг

Гистидина гидрохлорид моногидрат 0.4 мг

L-Гистидин 0.4 мг маннит 54.5 мг вода для инъекций до 1.0 мл для ингибирования активности белка 1117а у субъекта. В некоторых вариантах осуществления 1 мл фармацевтической композиции может содержаться в шприце.

В некоторых вариантах осуществления 2 мл фармацевтической композиции может содержаться в шприце.

В некоторых вариантах осуществления применение препарата может быть предназначено для лечения псориаза.

В некоторых вариантах осуществления применение для лечения псориаза может осуществляться путем введения субъекту 1-миллилитровой дозы фармацевтической композиции.

В некоторых вариантах осуществления применение для лечения псориаза может осуществляться путем введения субъекту 1-миллилитровой дозы фармацевтической композиции один раз в неделю в течение недели 0, 1, 2, 4, 6, 8, 10.

В некоторых вариантах осуществления применение для лечения псориаза может осуществляться путем введения субъекту 1-миллилитровой дозы фармацевтической композиции один раз в неделю в течение недели 0, 1, 2, 4, 6, 8, 10 и один раз каждые четыре недели после этого.

В некоторых вариантах осуществления применение для лечения псориаза может осуществляться путем введения субъекту 1-миллилитровой дозы фармацевтической композиции один раз в неделю в течение недели 0, 1, 2, 4, 6, 8, 10 и один раз каждые две недели после этого.

В некоторых вариантах осуществления применение для лечения псориаза может осуществляться путем введения субъекту 2-миллилитровой дозы фармацевтической композиции.

В некоторых вариантах осуществления применение для лечения псориаза может осуществляться путем введения субъекту 2-миллилитровой дозы фармацевтической композиции один раз в неделю в течение недели 0, 1, 2, 4, 6, 8, 10.

В некоторых вариантах осуществления применение для лечения псориаза может осуществляться путем введения субъекту 2-миллилитровой дозы фармацевтической композиции один раз в неделю в течение недели 0, 1, 2, 4, 6, 8, 10 и один раз каждые четыре недели после этого.

В некоторых вариантах осуществления применение для лечения псориаза может осуществляться путем введения субъекту 2-миллилитровой дозы фармацевтической композиции один раз в неделю в течение недели 0, 1, 2, 4, 6, 8, 10 и один раз каждые две недели после этого.

В некоторых вариантах осуществления применение для лечения псориаза может осуществляться путем введения субъекту 2-миллилитровой дозы фармацевтической композиции один раз в неделю в течение недели 0, 1, 2, 6, 10.

В некоторых вариантах осуществления применение для лечения псориаза может осуществляться путем введения субъекту 2-миллилитровой дозы фармацевтической композиции один раз в неделю в течение недели 0, 1, 2, 6, 10 и один раз каждые четыре недели после этого.

В некоторых вариантах осуществления применение для лечения псориаза может осуществляться путем введения субъекту 2-миллилитровой дозы фармацевтической композиции один раз в неделю в течение недели 0, 1, 2, 6, 10 и один раз каждые две недели после этого.

В некоторых вариантах осуществления применение для лечения псориаза может осуществляться

- 21 046015 путем введения субъекту 2-миллилитровой дозы фармацевтической композиции один раз в неделю в течение недели 0, 1, 2, 4, 6, 8, 10, 12.

В некоторых вариантах осуществления применение для лечения псориаза может осуществляться путем введения субъекту 2-миллилитровой дозы фармацевтической композиции один раз в неделю в течение недели 0, 1, 2, 4, 6, 8, 10, 12 и один раз каждые четыре недели после этого.

В некоторых вариантах осуществления применение для лечения псориаза может осуществляться путем введения субъекту 2-миллилитровой дозы фармацевтической композиции один раз в неделю в течение недели 0, 1, 2, 4, 6, 8, 10, 12 и один раз каждые две недели после этого.

В некоторых вариантах осуществления применение для лечения псориаза может осуществляться путем введения субъекту 2-миллилитровой дозы фармацевтической композиции один раз в неделю в течение недели 0, 1, 2, 4, 6, 8, 10, 12 и один раз каждые четыре недели в течение 12 недель после этого.

В некоторых вариантах осуществления применение для лечения псориаза может осуществляться путем введения субъекту 2-миллилитровой дозы фармацевтической композиции один раз в неделю в течение недели 0, 1, 2, 4, 6, 8, 10, 12 и один раз каждые две недели в течение 12 недель после этого.

В некоторых вариантах осуществления применение для лечения псориаза может осуществляться путем введения субъекту 2-миллилитровой дозы фармацевтической композиции в соответствии со следующей схемой применения препарата:

В некоторых вариантах осуществления каждая из доз 2 мл фармацевтической композиции может быть введена с помощью шприца в виде двух отдельных доз по 1 мл.

В некоторых вариантах осуществления применение для лечения псориаза может осуществляться путем введения субъекту 3-миллилитровой дозы фармацевтической композиции.

В некоторых вариантах осуществления применение для лечения псориаза может осуществляться путем введения субъекту 3-миллилитровой дозы фармацевтической композиции один раз в неделю в течение недели 0, 1, 2, 4, 6, 8, 10.

В некоторых вариантах осуществления применение для лечения псориаза может осуществляться путем введения субъекту 3-миллилитровой дозы фармацевтической композиции один раз в неделю в течение недели 0, 1, 2, 4, 6, 8, 10 и один раз каждые четыре недели после этого.

В некоторых вариантах осуществления применение для лечения псориаза может осуществляться путем введения субъекту 3-миллилитровой дозы фармацевтической композиции один раз в неделю в течение недели 0, 1, 2, 4, 6, 8, 10 и один раз каждые две недели после этого.

- 22 046015 путем введения субъекту 3-миллилитровой дозы фармацевтической композиции один раз в неделю в течение недели 0, 1, 2, 6, 10.

В некоторых вариантах осуществления применение для лечения псориаза может осуществляться путем введения субъекту 3-миллилитровой дозы фармацевтической композиции один раз в неделю в течение недели 0, 1, 2, 6, 10 и один раз каждые четыре недели после этого.

В некоторых вариантах осуществления применение для лечения псориаза может осуществляться путем введения субъекту 3-миллилитровой дозы фармацевтической композиции один раз в неделю в течение недели 0, 1, 2, 6, 10 и один раз каждые две недели после этого.

В некоторых вариантах осуществления применение для лечения псориаза может осуществляться путем введения субъекту 3-миллилитровой дозы фармацевтической композиции один раз в неделю в течение недели 0, 1, 2, 4, 6, 8, 10, 12.

В некоторых вариантах осуществления применение для лечения псориаза может осуществляться путем введения субъекту 3-миллилитровой дозы фармацевтической композиции один раз в неделю в течение недели 0, 1, 2, 4, 6, 8, 10, 12 и один раз каждые четыре недели после этого.

В некоторых вариантах осуществления применение для лечения псориаза может осуществляться путем введения субъекту 3-миллилитровой дозы фармацевтической композиции один раз в неделю в течение недели 0, 1, 2, 4, 6, 8, 10, 12 и один раз каждые две недели после этого.

В некоторых вариантах осуществления применение для лечения псориаза может осуществляться путем введения субъекту 3-миллилитровой дозы фармацевтической композиции один раз в неделю в течение недели 0, 1, 2, 4, 6, 8, 10, 12 и один раз каждые четыре недели в течение 12 недель после этого.

В некоторых вариантах осуществления применение для лечения псориаза может осуществляться путем введения субъекту 3-миллилитровой дозы фармацевтической композиции один раз в неделю в течение недели 0, 1, 2, 4, 6, 8, 10, 12 и один раз каждые две недели в течение 12 недель после этого.

В некоторых вариантах осуществления применение для лечения псориаза может осуществляться путем введения субъекту 3-миллилитровой дозы фармацевтической композиции в соответствии со следующей схемой применения препарата:

3) введение 3 мл фармацевтической композиции нетакимаба один раз каждые четыре недели после этого.

В некоторых вариантах осуществления каждая из доз 3 мл фармацевтической композиции может быть введена с помощью шприца в виде трех отдельных доз по 1 мл.

- 23 046015

В некоторых вариантах осуществления применение препарата может быть предназначено для лечения псориатического артрита.

В некоторых вариантах осуществления применение для лечения псориатического артрита может осуществляться путем введения субъекту 1-миллилитровой дозы фармацевтической композиции.

В некоторых вариантах осуществления применение для лечения псориатического артрита может осуществляться путем введения субъекту 3-миллилитровой дозы фармацевтической композиции.

В некоторых вариантах осуществления применение для лечения псориатического артрита может осуществляться путем введения субъекту 3-миллилитровой дозы фармацевтической композиции один раз в неделю в течение недели 0, 1, 2, 4, 6, 8, 10.

В некоторых вариантах осуществления применение для лечения псориатического артрита может осуществляться путем введения субъекту 3-миллилитровой дозы фармацевтической композиции один раз в неделю в течение недели 0, 1, 2, 4, 6, 8, 10 и один раз каждые четыре недели после этого.

В некоторых вариантах осуществления применение для лечения псориатического артрита может осуществляться путем введения субъекту 3-миллилитровой дозы фармацевтической композиции один раз в неделю в течение недели 0, 1, 2, 4, 6, 8, 10 и один раз каждые две недели после этого.

В некоторых вариантах осуществления применение для лечения псориатического артрита может осуществляться путем введения субъекту 3-миллилитровой дозы фармацевтической композиции один раз в неделю в течение недели 0, 1, 2, 6, 10.

В некоторых вариантах осуществления применение для лечения псориатического артрита может осуществляться путем введения субъекту 3-миллилитровой дозы фармацевтической композиции один раз в неделю в течение недели 0, 1, 2, 6, 10 и один раз каждые четыре недели после этого.

В некоторых вариантах осуществления применение для лечения псориатического артрита может осуществляться путем введения субъекту 3-миллилитровой дозы фармацевтической композиции один раз в неделю в течение недели 0, 1, 2, 6, 10 и один раз каждые две недели после этого.

В некоторых вариантах осуществления применение для лечения псориатического артрита может осуществляться путем введения субъекту 3-миллилитровой дозы фармацевтической композиции один раз в неделю в течение недели 0, 1, 2, 4, 6, 8, 10, 12.

В некоторых вариантах осуществления применение для лечения псориатического артрита может осуществляться путем введения субъекту 3 -миллилитровой дозы фармацевтической композиции один раз в неделю в течение недели 0, 1, 2, 4, 6, 8, 10, 12 и один раз каждые четыре недели после этого.

В некоторых вариантах осуществления применение для лечения псориатического артрита может осуществляться путем введения субъекту 3-миллилитровой дозы фармацевтической композиции один раз в неделю в течение недели 0, 1, 2, 4, 6, 8, 10, 12 и один раз каждые две недели после этого.

В некоторых вариантах осуществления применение препарата может быть предназначено для лечения анкилозирующего спондилоартрита.

В некоторых вариантах осуществления применение для лечения анкилозирующего спондилоартрита может осуществляться путем введения субъекту 1-миллилитровой дозы фармацевтической композиции.

В некоторых вариантах осуществления применение для лечения анкилозирующего спондилоартрита может осуществляться путем введения субъекту 1-миллилитровой дозы фармацевтической композиции один раз в неделю в течение недели 0, 1, 2.

В некоторых вариантах осуществления применение для лечения анкилозирующего спондилоартрита может осуществляться путем введения субъекту 1-миллилитровой дозы фармацевтической композиции один раз в неделю в течение недели 0, 1, 2 и один раз каждые две недели после этого.

В некоторых вариантах осуществления применение для лечения анкилозирующего спондилоартрита может осуществляться путем введения субъекту 1-миллилитровой дозы фармацевтической композиции один раз в неделю в течение недели 0, 1, 2, 4, 6, 8, 10, 12.

- 24 046015

В некоторых вариантах осуществления применение для лечения анкилозирующего спондилоартрита может осуществляться путем введения субъекту 1-миллилитровой дозы фармацевтической композиции один раз в неделю в течение недели 0, 1, 2, 4, 6, 8, 10, 12 и один раз каждые две недели после этого.

В некоторых вариантах осуществления применение для лечения анкилозирующего спондилоартрита может осуществляться путем введения субъекту 2-миллилитровой дозы фармацевтической композиции.

В некоторых вариантах осуществления применение для лечения анкилозирующего спондилоартрита может осуществляться путем введения субъекту 2-миллилитровой дозы фармацевтической композиции один раз в неделю в течение недели 0, 1, 2.

В некоторых вариантах осуществления применение для лечения анкилозирующего спондилоартрита может осуществляться путем введения субъекту 2-миллилитровой дозы фармацевтической композиции один раз в неделю в течение недели 0,1,2 и один раз каждые две недели после этого.

В некоторых вариантах осуществления применение для лечения анкилозирующего спондилоартрита может осуществляться путем введения субъекту 2-миллилитровой дозы фармацевтической композиции один раз в неделю в течение недели 0, 1, 2, 4, 6, 8, 10, 12.

В некоторых вариантах осуществления применение для лечения анкилозирующего спондилоартрита может осуществляться путем введения субъекту 2-миллилитровой дозы фармацевтической композиции один раз в неделю в течение недели 0, 1, 2, 4, 6, 8, 10, 12 и один раз каждые две недели после этого.

В некоторых вариантах осуществления применение для лечения анкилозирующего спондилоартрита может осуществляться путем введения субъекту 2-миллилитровой дозы фармацевтической композиции один раз в неделю в течение недели 0, 1, 2, 4, 6, 8, 10, 12 и, начиная с недели 16, путем введения 2-миллилитровой дозы фармацевтической композиции, которая вводится один раз каждые две недели после этого.

В некоторых вариантах осуществления применение для лечения анкилозирующего спондилоартрита может осуществляться путем введения 2-миллилитровой дозы фармацевтической композиции, которая вводится один раз в неделю в течение недели 0, 1, 2, 4, 6, 8, 10, 12 и, начиная с недели 16, путем введения 3-миллилитровой дозы фармацевтической композиции, которая вводится один раз каждые две недели после этого.

В некоторых вариантах осуществления применение для лечения анкилозирующего спондилоартрита может осуществляться путем введения субъекту 3-миллилитровой дозы фармацевтической композиции.

В некоторых вариантах осуществления применение для лечения анкилозирующего спондилоартрита может осуществляться путем введения субъекту 3-миллилитровой дозы фармацевтической композиции один раз в неделю в течение недели 0, 1, 2.

В некоторых вариантах осуществления применение для лечения анкилозирующего спондилоартрита может осуществляться путем введения субъекту 3-миллилитровой дозы фармацевтической композиции один раз в неделю в течение недели 0,1,2 и один раз каждые две недели после этого.

В некоторых вариантах осуществления применение для лечения анкилозирующего спондилоартрита может осуществляться путем введения субъекту 3-миллилитровой дозы фармацевтической композиции один раз в неделю в течение недели 0, 1, 2, 4, 6, 8, 10, 12.

В некоторых вариантах осуществления применение для лечения анкилозирующего спондилоартрита может осуществляться путем введения субъекту 3-миллилитровой дозы фармацевтической композиции один раз в неделю в течение недели 0, 1, 2, 4, 6, 8, 10, 12 и один раз каждые две недели после этого.

В некоторых вариантах осуществления применение для лечения анкилозирующего спондилоартрита может осуществляться путем введения субъекту 3-миллилитровой дозы фармацевтической композиции один раз в неделю в течение недели 0, 1, 2, 4, 6, 8, 10, 12 и, начиная с недели 16, путем введения 3миллилитровой дозы фармацевтической композиции, которая вводится один раз каждые две недели после этого.

В некоторых вариантах осуществления применение для лечения анкилозирующего спондилоартрита может осуществляться путем введения субъекту 3-миллилитровой дозы фармацевтической композиции один раз в неделю в течение недели 0, 1, 2, 4, 6, 8, 10, 12 и, начиная с недели 16, путем введения 2-миллилитровой дозы фармацевтической композиции, которая вводится один раз каждые две недели после этого.

В некоторых вариантах осуществления фармацевтическая композиция может быть введена под

- 25 046015 кожно.

Нетакимаб 60.0 мг натрия ацетат тригидрат 1.74 мг трегалозы дигидрат 80 мг полоксамер (Kolliphor) 188 0.5 мг ледяная уксусная кислота до pH 5.0 вода для инъекций до 1.0 мл для ингибирования активности белка IL17a у субъекта.

В некоторых вариантах осуществления 1 мл фармацевтической композиции может содержаться в шприце.

В некоторых вариантах осуществления применение для лечения псориаза может осуществляться путем введения субъекту 2-миллилитровой дозы фармацевтической композиции один раз в неделю в течение недели 0, 1, 2, 4, 6, 8, 10, 12.

- 26 046015 путем введения субъекту 2-миллилитровой дозы фармацевтической композиции один раз в неделю в течение недели 0, 1, 2, 4, 6, 8, 10, 12 и один раз каждые четыре недели в течение 12 недель после этого.

3) введение 2 мл фармацевтической композиции нетакимаба один раз каждые четыре недели после этого.

В некоторых вариантах осуществления применение для лечения псориатического артрита может осуществляться путем введения субъекту 2-миллилитровой дозы фармацевтической композиции.

В некоторых вариантах осуществления применение для лечения псориатического артрита может осуществляться путем введения субъекту 2-миллилитровой дозы фармацевтической композиции один раз в неделю в течение недели 0, 1, 2, 4, 6, 8, 10.

В некоторых вариантах осуществления применение для лечения псориатического артрита может осуществляться путем введения субъекту 2-миллилитровой дозы фармацевтической композиции один раз в неделю в течение недели 0, 1, 2, 4, 6, 8, 10 и один раз каждые четыре недели после этого.

В некоторых вариантах осуществления применение для лечения псориатического артрита может осуществляться путем введения субъекту 2-миллилитровой дозы фармацевтической композиции один раз в неделю в течение недели 0, 1, 2, 4, 6, 8, 10 и один раз каждые две недели после этого.

В некоторых вариантах осуществления применение для лечения псориатического артрита может

- 27 046015 осуществляться путем введения субъекту 2-миллилитровой дозы фармацевтической композиции один раз в неделю в течение недели 0, 1, 2, 6, 10.

В некоторых вариантах осуществления применение для лечения псориатического артрита может осуществляться путем введения субъекту 2-миллилитровой дозы фармацевтической композиции один раз в неделю в течение недели 0, 1, 2, 6, 10 и один раз каждые четыре недели после этого.

В некоторых вариантах осуществления применение для лечения псориатического артрита может осуществляться путем введения субъекту 2-миллилитровой дозы фармацевтической композиции один раз в неделю в течение недели 0, 1, 2, 6, 10 и один раз каждые две недели после этого.

В некоторых вариантах осуществления применение для лечения псориатического артрита может осуществляться путем введения субъекту 2-миллилитровой дозы фармацевтической композиции один раз в неделю в течение недели 0, 1, 2, 4, 6, 8, 10, 12.

В некоторых вариантах осуществления применение для лечения псориатического артрита может осуществляться путем введения субъекту 2-миллилитровой дозы фармацевтической композиции один раз в неделю в течение недели 0, 1, 2, 4, 6, 8, 10, 12 и один раз каждые четыре недели после этого.

В некоторых вариантах осуществления применение для лечения псориатического артрита может осуществляться путем введения субъекту 2-миллилитровой дозы фармацевтической композиции один раз в неделю в течение недели 0, 1, 2, 4, 6, 8, 10, 12 и один раз каждые две недели после этого.

- 28 046015

В соответствии с другим широким аспектом предлагается применение для лечения анкилозирующего спондилоартрита может осуществляться путем введения субъекту 2-миллилитровой дозы указанной фармацевтической композиции, содержащей 120 мг нетакимаба, один раз в неделю в течение недели 0, 1, 2, 4, 6, 8, 10, 12 и, начиная с недели 16, путем введения 2-миллилитровой дозы фармацевтической композиции, содержащей 80 мг нетакимаба, которая вводится один раз каждые две недели после этого.

В соответствии с другим широким аспектом предлагается применение для лечения анкилозирующего спондилоартрита может осуществляться путем введения субъекту 2-миллилитровой дозы указанной фармацевтической композиции, содержащей 80 мг нетакимаба, один раз в неделю в течение недели 0, 1, 2, 4, 6, 8, 10, 12 и, начиная с недели 16, путем введения 2-миллилитровой дозы фармацевтической композиции, содержащей 120 мг нетакимаба, которая вводится один раз каждые две недели после этого.

Краткое описание чертежей

Изобретение станет более понятным из последующего подробного описания вариантов осуществления настоящего изобретения со ссылкой на прилагаемые чертежи, где фиг. 1 представляет собой график, иллюстрирующий зависимость оптической плотности растворов при 400 нм, как функция, от концентрации ПЭГ в примерных композициях анти-[Е17а антитела с различными буферными агентами;

фиг. 2 представляет собой график, иллюстрирующий зависимость оптической плотности растворов при 400 нм, как функция, от концентрации ПЭГ в примерных композициях анти-1Ь17а антитела с различными концентрациями гистидина и/или различным рН;

фиг. 3 представляет собой график, иллюстрирующий зависимость оптической плотности растворов при 400 нм, как функцию, от концентрации ПЭГ в примерных композициях анти-1Ь17а антитела с различными осмотическими агентами; и фиг. 4 представляет собой график, иллюстрирующий зависимость оптической плотности растворов при 400 нм, как функцию, от концентрации ПЭГ в примерных композициях анти-1Ь17а антитела с различными солюбилизаторами и/или концентрациями солюбилизаторов;

фиг. 5 представляет собой график, иллюстрирующий долю пациентов в каждой группе исследования, которые достигли PASI75 к неделе 12 лечения (исследование BCD-085-2);

фиг. 6 представляет собой график, иллюстрирующий долю пациентов в каждой группе исследования, которые достигли PASI75 к неделе 4, 8 и 12 лечения (исследование BCD-085-2);

фиг. 7 представляет собой график, иллюстрирующий значение процентного улучшения индекса PASI относительно исходного уровня на неделе 4, 8 и 12 лечения (исследование BCD-085-2);

фиг. 8 представляет собой график, иллюстрирующий значение процентного улучшения индекса NAPSI относительно исходного уровня на неделе 12 лечения (исследование BCD-085-2);

фиг. 9 представляет собой график, иллюстрирующий профиль концентрации нетакимаба после первой инъекции и показывающий срединные и межквартильные диапазоны, минимальные и максимальные значения (исследование BCD-085-2);

фиг. 10 представляет собой график, иллюстрирующий профиль концентрации нетакимаба после нескольких инъекций и показывающий срединные и межквартильные диапазоны, минимальные и максимальные значения (исследование BCD-085-2);

фиг. 11 представляет собой график, иллюстрирующий дизайн исследования (исследование BCD-085-2ext);

фиг. 12 представляет собой график, иллюстрирующий долю пациентов, достигших PASI 75 после одного года лечения (неделя 38 исследования BCD-085-2ext);

фиг. 13 представляет собой график, иллюстрирующий долю пациентов, достигших PASI90 после 52 недель лечения (38 недель исследования BCD-085-2ext);

фиг. 14 представляет собой график, иллюстрирующий долю пациентов, достигших PASI100 после 52 недель лечения (38 недель исследования BCD-085-2ext);

фиг. 15 представляет собой график, иллюстрирующий долю пациентов, достигших индекса sPGA 0-1 после 52 недель лечения (38 недель исследования BCD-085-2ext);

фиг. 16 представляет собой график, иллюстрирующий долю пациентов, достигших индекса sPGA 0 (чистая кожа) после 52 недель лечения (38 недель исследования BCD-085-2ext);

фиг. 17 представляет собой график, иллюстрирующий план исследования (исследование BCD-085-7);

- 29 046015 фиг. 18 представляет собой график, иллюстрирующий определение PASI 75/90/100 и sPGA 0-1 (ITT-популяция, n=213) (исследование BCD-085-7);

фиг. 19 представляет собой график, иллюстрирующий относительное изменение, выраженное в баллах PASI, на неделе 8 и 12 (визит 6 и 8) в группе ITT-популяции (n=213) (исследование BCD-085-7);

фиг. 20 представляет собой график, иллюстрирующий изменение значений выраженности зуда (по шкале VAS) относительно исходных характеристик на неделе 1 и 12 (визит 2 и 8) в группе ITT-популяции (n=213) (исследование BCD-085-7);

фиг. 21 представляет собой график, иллюстрирующий изменение значений, выраженное в баллах DLQI на неделе 8 и 12 (визит 6 и 8) в группе ITT-популяции (n=213) (исследование BCD-085-7);

фиг. 22 представляет собой график, иллюстрирующий изменение значений, выраженное в баллах NAPSI на неделе 12 (N=131) (на фигуре показано срединное значение) (исследование BCD-085-7).

фиг. 23 представляет собой график, иллюстрирующий долю пациентов, достигших ACR 20/50/70 (среди больных псориатическим артритом, n=15) (исследование BCD-085-7);

фиг. 24 представляет собой график, иллюстрирующий долю пациентов с ответом ASAS20 во время исследования (исследование BCD-085-3);

фиг. 25 представляет собой график, иллюстрирующий долю пациентов с ответами ASAS20, ASAS40 и ASAS5/6 во время исследования (исследование BCD-085-3);

фиг. 26 представляет собой график, иллюстрирующий фармакокинетику после введения единичной дозы (исследование BCD-085-3);

фиг. 27 представляет собой график, иллюстрирующий фармакокинетику после введения нескольких доз (исследование BCD-085-3);

фиг. 28 представляет собой график, иллюстрирующий дизайн исследования (исследование BCD-085-3ext);

фиг. 29 представляет собой график, иллюстрирующий долю положительно отвечающих на проводимое лечение пациентов согласно индексу ASAS20 (неделя 16);

фиг. 30 представляет собой график, иллюстрирующий основные второстепенные критерии оценки (среднее значение изменения относительно исходных характеристик на неделе 16);

фиг. 31 представляет собой график, иллюстрирующий среднее значение изменения относительно исходных характеристик в баллах МРТ;

фиг. 32 представляет собой график, иллюстрирующий общую оценку боли в спине, определенную в пределах 16 недель исследования ASTERA (средние значения) (* Р<0.05 для сравнения с плацебо);

фиг. 33 представляет собой график, иллюстрирующий изменение уровня по шкалам BASDAI, BASFI и QoL на неделе 16 (значения).

Подробное описание

Определения.

Моноклональное антитело, как используется в данной заявке, относится к антителу, полученному из ламы, химерному антителу, гуманизированному антителу или полностью человеческому антителу, если в данной заявке не указано иное. Моноклональные антитела по изобретению могут быть получены с использованием, например, рекомбинантных технологий, технологий фагового дисплея, синтетических технологий или комбинаций таких технологий или других технологий, хорошо известных из уровня техники.

Моноклональное антитело относится к антителу, полученному из единой копии или клона, включая, например, любой эукариотический, прокариотический или фаговый клон, а не к способу его получения. Моноклональное антитело может быть интактным антителом (содержащим полный или полноразмерный Fc-участок), по существу интактным антителом, частью или фрагментом антитела, содержащими антиген связующую часть, например Fab-фрагмент, Fab'-фрагмент или F(ab')2-фрагмент из ламы или химерного, гуманизированного или человеческого антитела. Fab''-фрагмент содержит вариабельный и константный домен легкой цепи, и вариабельный домен и первый константный домен (СН1) тяжелой цепи. F(ab')2-фрагменты антитела содержат пару Fab-фрагментов, которые в основном ковалентно связаны возле их С-концов остатками шарнирных цистеинов. Другие химические связывания фрагментов антител также хорошо известны из уровня техники.

Кроме того, моноклональное антитело, как используется в данной заявке, может быть одноцепочечным Fv-фрагментом, который может быть получен путем связывания с ДНК, кодирующей VHH и V_L, с линкерной последовательностью. До тех пор, пока белок сохраняет способность специфического или предпочтительного связывания с мишенью (например, эпитоп или антиген), он относится к термину антитело. Антитела могут быть гликозилированными, или не быть таковыми, и входят в рамки изобретения.

Термин производное или вариант антитела в контексте данной заявки относится к молекуле, аминокислотная последовательность которой отличается от аминокислотной последовательности родительского антитела путем добавления, делеции и/или замещения одного или более аминокислотных остатков в последовательности родительского антитела. В предпочтительном варианте осуществления антитело содержит по крайней мере одну аминокислотную (например, от одной до приблизительно десяти и предпочтительно 2, 3, 4, 5, 6, 7 или 8 замен) замену в FR- или CDR-участках родительского антитела.

- 30 046015

Идентичность или гомологичность относительно последовательности вариантного антитела определена в данной заявке как процент аминокислотных остатков в последовательности вариантного антитела, идентичный остаткам родительского антитела, после выравнивания последовательностей и введения разрывов, при необходимости, для достижения максимального процента идентичности последовательности.

Производное (от родительского) антитела сохраняет способность связывать антиген или предпочтительно эпитоп, с которым связывается родительское антитело или предпочтительно имеет по крайней мере одно свойство или биологическую активность, которая превосходит аналогичные свойства родительского антитела. Например, антитело предпочтительно обладает большей агрегационной стабильностью или сильной аффинностью связывания, улучшенными фармакокинетическими свойствами или повышенной способностью ингибировать биологическую активность антигена, чем родительское антитело.

Термин VHH-производное в контексте данной заявки относится к производным VHH-антител, чья аминокислотная последовательность отличается от аминокислотной последовательности родительского VHH-антитела путем замещения одного или более аминокислотных остатков в последовательности родительского антитела. В предпочтительном из вариантов осуществления VHH-антитело содержит по крайней мере одну аминокислотную (например, от одной до приблизительно двадцати и предпочтительно 2, 3, 4, 5, 6, 7 или 8) замену в FR- или CDR-участках родительского антитела.

Производное антитело сохраняет способность связывать тот же антиген или предпочтительно эпитоп, с которым связывается родительское антитело или предпочтительно имеет по крайней мере одно свойство или биологическую активность, которая превосходит аналогичные свойства родительского антитела. Например, антитело предпочтительно обладает большей агрегационной стабильностью или сильной аффинностью связывания, улучшенными фармакокинетическими свойствами или повышенной способностью ингибировать биологическую активность антигена, чем родительское антитело.

Родительское VHH-антитело, или исходное VHH-антитело, или дикое VHH-антитело в контексте данной заявки относится к VHH-антителу, выделенному из иммунизированного или неиммунизированного животного семейства верблюдовых и кодированному аминокислотной последовательностью, которая используется для получения VHH-варианта. Родительское антитело может иметь каркасную последовательность происхождения из семейства верблюдовых (в отношении вариабельного домена V_HH), но предпочтительно каркасная последовательность вариабельного домена легкой цепи имеет полностью или, по существу, человеческое происхождение.

Родительское, или исходное, или дикое антитело в контексте данной заявки представляет собой антитело, кодированное аминокислотной последовательностью, которая используется для получения варианта. Родительское антитело может иметь каркасную последовательность происхождения из семейства верблюдовых (в отношении вариабельного домена VHH), но предпочтительно каркасная последовательность вариабельного домена легкой цепи имеет полностью или, по существу, человеческое происхождение.

Термин специфически связывает, как используется в данной заявке, относится к той ситуации, при которой один участник пары специфического связывания не связывает в значительной степени молекулы, отличные от его партнера(ов) по специфическому связыванию. Термин также применим, когда, например, антигенсвязывающий домен антитела по изобретению является специфическим по отношению к конкретному эпитопу, который переносится рядом антигенов, в таком случае специфическое антитело, имеющее антигенсвязывающий домен, будет способно к специфическому связыванию различных антигенов, несущих эпитоп. Соответственно моноклональное антитело по изобретению специфически связывается с IL-17 человека (IL-17A), в то время как оно специфически не связывается с человеческими IL-17B, IL-17C, IL-17D, IL-17E. Более того, моноклональное антитело по изобретению специфически связывает IL-17 человека и IL-17 макаки-крабоеда, но специфически не связывает IL-17 крысы или IL-17 мыши.

Термин предпочтительно связывает, как используется в данной заявке, относится к такой ситуации, в которой антитело связывает специфический антиген по крайней мере приблизительно на 20% больше, предпочтительно по крайней мере приблизительно на 50% и в 2, 20, 50 или 100 раз больше, чем оно связывает иной антиген в соответствии с измерениями, проведенными по методикам, известным из уровня техники (например, конкурентный анализ ELISA или KD измерения при помощи прибора Octet). Антитело может предпочтительно связывать один эпитоп в пределах антигена, а не другой эпитоп в пределах того же самого антигена. Соответственно антитело по изобретению предпочтительно связывает IL-17 человека, но не IL-17 кролика.

Термин эпитоп относится к той части молекулы, которая способна распознаваться и связываться с антителом в одном или более антигенсвязывающих участках антитела. Эпитопы часто состоят из химически активных поверхностных групп молекул, таких как аминокислоты или сахарные боковые цепи, и обладают определенными 3-D характеристиками. Под ингибирующим эпитопом и/или нейтрализующим эпитопом подразумевается эпитоп, который в контексте интактной антигенной молекулы и при связывании антителом, специфическим к эпитопу, приводит к утрате или к уменьшению биологической активности молекулы или организма, который содержит молекулу, in vivo или in vitro.

Термин эпитоп, как используется в данной заявке, кроме того, относится к части полипептида, ко

- 31 046015 торая обладает антигенной и/или иммуногенной активностью у животного, предпочтительно млекопитающего, например мыши или человека. Термин антигенный эпитоп, как используется в данной заявке, является частью полипептида, с которой может специфически связываться антитело, определенная любым способом, хорошо известным из уровня техники, например при помощи традиционного иммунного анализа. Антигенные эпитопы не обязательно должны быть иммуногенными, но могут также быть имуногенными. Иммуногенный эпитоп, как используется в данной заявке, определяется как часть полипептида, который вызывает ответ антитела у животного, как устанавливается любым способом, известным из уровня техники. Нелинейный эпитоп или конформационный эпитоп содержат несмежные полипептиды (или аминокислоты) в пределах антигенного протеина, с которым антитело, специфическое к эпитопу, связывается.

Выражения функциональная активность или функциональная характеристика или термины биологическая активность или активность по отношению к антителу по изобретению используются в данной заявке как взаимозаменяемые и включают, но не ограничиваются приведенными, эпитоп/антигенную аффинность и специфичность, способность нейтрализовать или быть антагонистом IL-17 in vivo или in vitro, IC50, стабильность антитела и иммуногенные свойства антитела in vivo. Остальные идентифицируемые из уровня техники биологические свойства или характеристики антитела включают, например, перекрестную реактивность (т.е. с нечеловеческими гомологами пептида-мишени или с другими белками или мишенями) и способность сохранять высокие уровни экспрессии протеина в клетках млекопитающих. Вышеуказанные свойства или характеристики могут наблюдаться, измеряться или оцениваться с использованием методик известного уровня техники, включая, но не ограничиваясь ими, анализ ELISA, конкурентный анализ ELISA, анализ при помощи Octet, анализы нейтрализации in vitro или in vivo без ограничений, рецепторное связывание, продуцирование и/или секрецию цитокина или фактора роста, сигнальную трансдукцию и иммуногистохимию срезов тканей, полученных из различных источников, включая человека, примата или любой другой источник.

Популяция моноклональных антител, как используется в настоящем документе, относится к гомогенной или по существу гомогенной популяции антител (т.е. по крайней мере приблизительно 96%, но более предпочтительно по крайней мере приблизительно 97 или 98% или еще более предпочтительно по крайней мере 99% антител в популяции будут конкурировать в анализе ELISA за тот же антиген или эпитоп, или более предпочтительно антитела являются идентичными в аминокислотной последовательности).

Полноразмерное антитело, существующее в природе, представляет собой молекулу иммуноглобулина, которая состоит из четырех полипептидных цепей (две тяжелые (Н) цепи (приблизительно 50-70 кДа при полной длине) и две легкие (L) цепи (приблизительно 25 кДа при полной длине)), связанных дисульфидными мостиками. Аминоконцевая часть каждой цепи включает вариабельный домен из приблизительно 100-110 или более аминокислот, которые отвечают за связывание антигена. Карбоксиконцевая часть каждой цепи определяет константный участок, главным образом, отвечающий за функцию эффектора. Легкие цепи классифицируют как каппа или лямбда, и они характеризуются специфичным константным участком. Каждая легкая цепь состоит из вариабельного участка N-концевой легкой цепи (в данной заявке VL или VK) и константного участка легкой цепи, состоящего из одного домена (CL или CK). Тяжелые цепи классифицируют как гамма (γ), дельта (δ), альфа (α), мю (μ) или эпсилон (ε), и они определяют изотип антитела, такой как IgG, IgM, IgA, IgD и IgE соответственно, и несколько из них могут быть дополнительно разделены на подклассы (изотипы), такие как, IgG1, IgG2, IgG3, IgG4, IgA1 и IgA2. Каждый тип тяжелой цепи характеризуется конкретным константным участком Fc. Каждая тяжелая цепь состоит из вариабельного участка N-концевой тяжелой цепи (в данной заявке VH) и константного участка СН (тяжелой цепи). Константный участок тяжелой цепи состоит из трех доменов (CH1, CH2 и СН3) для IgG, IgD и IgA и 4 доменов (СН1, СН2, СН3 и СН4) для IgM и IgE. Вариабельные домены VH, VHH и V_L могут быть дополнительно разделены на участки гипервариабельности (гипервариабельные участки, CDR), чередующиеся с более консервативными каркасными участками (FR). Каждый вариабельный домен состоит из трех CDR и четырех FR, расположенных в следующем порядке от N-конца к С-концу: FR1, CDR1, FR2, CDR2, FR3, CDR3 и FR4.

В данной заявке 3 CDR тяжелых цепей обозначены как HCDR1, HCDR2 и HCDR3, а 3 CDR легких цепей обозначены как LCDR1, LCDR2 и LCDR3. CDRs содержат большинство остатков, которые образуют специфические взаимодействия с антигеном. Нумерацию и позиционирование CDR-аминокислотных остатков осуществляют по Kabat номенклатуре.

Термин антиген относится к мишени антигена, против которой антитело может быть реактивным, используется в контексте данной заявки в своем традиционном понятии, как его используют специалисты в данной области техники, и включает, среди прочих, полипептиды, пептиды, полисахариды, гликопротеины, полинуклеотиды (например, ДНК), или химические антигены, рецепторы, интерлейкины. Интерлейкины могут включать в себя интерлейкины разных групп, в т.ч. интерлейкин 1 (альфа и бета), интерлейкин 2, интерлейкин 3, интерлейкин 4, интерлейкин 5, интерлейкин 6, интерлейкин 7, интерлейкин 8, интерлейкин 9, интерлейкин 10, интерлейкин 11, интерлейкин 17, интерлейкин 18, интерлейкин 33.

Термин антиген также может использоваться для описания материала, используемого для имму

- 32 046015 низации животных (например, лам) при продуцировании антител согласно изобретению. В этом контексте антиген может иметь более широкое значение и может охватывать очищенные формы антигена и также неочищенные или не полностью выделенные или очищенные препараты антигена, такие как, например, клетки, лизаты клеток или супернатанты, фракции клеток, например клеточные мембраны и т.д. с добавлением гаптенов, конъюгированных с соответствующим носителем белка. Антиген, используемый в процессе иммунизации, не обязательно означает антиген, структурно идентичный мишени антигена, с которым в результате антитело согласно изобретению может связываться. Как правило, антиген, используемый для иммунизации, может представлять собой усеченный вариант мишени антигена, например фрагмент, содержащий иммуногенный эпитоп. Более подробные характеристики антигенов, используемых для иммунизации, описаны в литературе и могут быть хорошо известны специалисту в данной области техники.

Вариабельные участки каждой из пар легкая/тяжелая цепь образуют антиген-связывающие сайты антитела. Таким образом, интактное IgG антитело имеет два сайта связывания. За исключением бифункциональных или биспецифических антител два сайта связывания являются одинаковыми. Как используется в данной заявке, антигенсвязывающая часть, или антигенсвязывающий участок, или антигенсвязывающий домен относятся, взаимозаменяемо, к такой части молекулы антитела, которая содержит аминокислотные остатки, взаимодействующие с антигеном и обуславливающие специфичность и аффинность антитела по отношению к антигену. Такая часть антитела включает каркасные аминокислотные остатки, необходимые для поддержания надлежащей конформации антиген-связывающих остатков.

Предпочтительно CDR антигенсвязывающего участка VHH или весь антиген-связывающий участок антитела по настоящему изобретению полностью происходит от семейства верблюдовых или по существу происходит от семейства верблюдовых, содержит определенные аминокислотные остатки, измененные, например замещенные разными аминокислотными остатками (см., например, табл. 6) с тем, чтобы улучшить конкретные свойства антитела, например KD, koff, IC50. Предпочтительно каркасные участки антитела по изобретению имеют происхождение от семейства верблюдовых или человека или по существу человеческое происхождение (по крайней мере на 80, 85, 90, 95, 96, 97, 98 или 99% человеческое происхождение) и соответствуют номенклатуре Kabat.

Фрагмент антитела может представлять собой фрагмент антитела или фрагмент антитела, имеющий активность полноразмерного антитела. Указанный фрагмент антитела может представлять собой F(ab')2, F(ab)2, Fab', Fab Fv и scFv.

Интерлейкин 17, или также IL-17 или IL-17A, является гомодимерным белком с массой 20-30 кДа. Ген IL-17A человека кодирует 155-аминокислотный протеин, который имеет 19-аминокислотную сигнальную последовательность и 136-аминокислотный зрелый сегмент. Аминокислотная последовательность IL-17A человека на 80, 63 и 58% идентична аминокислотным последовательностям кролика, мыши и крысы, соответственно. Аминокислотная последовательность IL-17A человека на 97% идентична последовательности интерлейкина-17А макаки-крабоеда.

Термин антитело при употреблении в отношении анти-[к-17 моноклонального антитела по настоящему изобретению (далее по тексту - антитело по настоящему изобретению), как используется в данной заявке, относится к моноклональному антителу.

Термин ингибировать или нейтрализовать, как используется в данной заявке, по отношению к функциональной активности антитела по изобретению, означает способность в значительной степени препятствовать, предотвращать, ограничивать, замедлять, прекращать, уменьшать или обращать, например, развитие или тяжесть того, что ингибируют, включая, но не ограничиваясь вышеприведенными, биологическую активность (например, активность IL-17) или свойство, заболевание или состояние. Ингибирование или нейтрализация активности IL-17 в результате связывания антитела по изобретению с IL-17 составляет предпочтительно по крайней мере приблизительно 20, 30, 40, 50, 60, 70, 80, 90, 95% или выше.

Термин выделенный или изолированный при использовании по отношению к нуклеиновой кислоте или белковому препарату (например, антителу) относится к молекуле нуклеиновой кислоты или белковой молекуле, которые идентифицируют и отделяют по крайней мере от одного контаминантного вещества, с которым она обычно связана в природном источнике. Предпочтительно выделенное антитело является антителом, которое по существу не содержит другие антитела, обладающие отличительной антигенной специфичностью (например, фармацевтические композиции согласно настоящему изобретению содержат выделенное антитело, которое специфически связывает IL-17A и по существу не содержит антитела, которые специфически связывают антигены, отличные от IL-17A).

Термины Kabat номенклатура или номенклатура по Kabat применяются в данной заявке к системе нумерации аминокислотных остатков, которые являются более вариабельными (т.е. гипервариабельными), чем остальные аминокислотные остатки в вариабельных участках тяжелой и легкой цепи антитела (Kabat et al., Ann.N.Y., Acad. Sci., 190:382-93 (1971); Kabat et al., Sequences of Proteins of Immunol ogical Interest, Fifth Edition, U.S. Department of Health and Human Services, NIH Publication № 91-3242 (1991)).

Полинуклеотид является функционально связанным, если он имеет функциональные связи с дру

- 33 046015 гим полинуклеотидом. Например, промотор или энхансер функционально связаны с кодирующей последовательностью, если они влияют на транскрипцию последовательности. Полипептид функционально связан с другим полипептидом, если полинуклеотиды, кодирующие их, связаны функционально, предпочтительно, если они находятся в той же открытой рамке считывания.

Термин специфическое связывание между антителом и мишенью антигена(ом) относится к иммунологической специфичности. Антитело может специфически связываться с мишенью антигена, если оно связывает эпитоп на антигене в большей степени, чем другие эпитопы на антигене. Специфическое связывание не исключает кросс-реактивность с другими антигенами, несущими сходные эпитопы антигенов.

VL домены в антителах, согласно изобретению, могут быть типа VL лямбда, или типа VL каппа. Термин VL домен относится к обоим изотипам VK лямбда и VL каппа, которые содержат одну или более аминокислотных замен, инсерций или делеций.

Термин фармацевтическая композиция относится к композиции и/или составу, содержащему антитело согласно изобретению в терапевтически эффективном количества и эксцепиенты (носители, разбавители, наполнители, растворители и другие эксцепиенты, например).

Термин применение или способ лечения относится к возможности применения антитела согласно изобретению или фармацевтической композиции, его содержащей, для лечения, облегчения течения заболеваний, для ускорения ремиссии, снижения частоты рецидивов вследствие заболеваний или нарушений, опосредуемых рецепторами, с которыми может связываться антитело согласно изобретению.

Примерные варианты осуществления

Настоящее изобретение относится к подходящим водным фармацевтическим композициям для анти-IL17a антитела, включающего домен VHH-производного и вариабельный домен V_L, такого как нетакимаб. Одна водная фармацевтическая композиция может содержать буфер на основе гистидина и маннит в качестве осмотического агента. Полоксамер 188 может быть добавлен в качестве солюбилизатора. Еще одна водная фармацевтическая композиция может содержать буфер на основе ацетата и трегалозу в качестве осмотического агента. Полоксамер 188 может быть добавлен в качестве солюбилизатора.

Буфер на основе гистидина может быть образован за счет комбинирования L-гистидина с гистидина гидрохлорид моногидратом или, дополнительно, с соляной кислотой или другими кислотами. Следует понимать, что хотя в качестве соли для буфера на основе гистидина можно использовать гистидина гидрохлорид моногидрат, для буфера на основе гистидина можно использовать любую другую соль на основе гистидина, не отступая при этом от идей настоящего изобретения.

Буфер на основе ацетата может быть образован за счет комбинирования уксусной кислоты с натрия ацетат тригидратом. Следует понимать, что хотя в качестве соли для буфера на основе ацетата можно использовать натрия ацетат тригидрат, для буфера на основе ацетата можно использовать любую другую ацетатную соль, например, ацетат калия, не отступая при этом от идей настоящего изобретения.

Кроме того, композиция по настоящему изобретению может дополнительно включать один или несколько других подходящих эксципиентов, которые хорошо известны специалистам в данной области.

Указанные выше композиции подходят для парентерального введения, такого как внутривенное, подкожное, интрадермальное, внутриартериальное, интратекальное, внутрибрюшинное, внутрисуставное и/или внутримышечное введение.

В некоторых вариантах осуществления жидкая фармацевтическая композиция исполнена так, что она стабильна при хранении в том смысле, что не происходит каких-либо дальнейших процессов агрегации белка или его модификаций по сравнению с показателем стабильности в нулевой временной точке.

Способы лечения и применение водной композиции.

В другом варианте осуществления настоящее изобретение относится к способу лечения млекопитающего, включающему введение млекопитающему терапевтически эффективного количества фармацевтических композиций по настоящему изобретению, где у млекопитающего может присутствовать заболевание или нарушение, которые можно эффективно лечить анти-IL17a антителами по настоящему изобретению.

В предпочтительном варианте осуществления млекопитающее представляет собой человека.

Заболевания или нарушения, которые можно лечить предложенными в настоящем документе композициями состоят из без ограничения ревматоидного артрита, ювенильного ревматоидного артрита, ювенильного ревматоидного артрита с системным началом, остеоартрита, ювенильного хронического артрита, псориатического артрита, реактивного артрита, серонегативного артрита, полиартикулярного ювенильного идиопатического артрита, энтезит-ассоциированного артрита; энтезита; спондилоартропатии, аксиального спондилоартрита; болезни Бехчета; воспалительного заболевания кишечника, болезни Крона, язвенного колита; астмы, аллергических нарушений, атопической аллергии; ихтиоза; красного волосистого питириаза; папулопустулезной розацеи; гангренозной пиодермии; гнойного гидраденита; псориаза, псориатической артропатии, псориаза I типа, псориаза II типа, бляшечного псориаза; дерматита, атопического дерматита, аутоиммунного дерматита, дерматологических состояний; системного склероза; трансплантации, болезни трансплантат против хозяина, отторжения трансплантата, острого или хронического иммунного заболевания, связанного с трансплантацией органа, острого иммунного заболе

- 34 046015 вания, связанного с трансплантатом, хронического иммунного заболевания, связанного с трансплантатом, отторжения трансплантата тонкой кишки, отторжения трансплантата поджелудочной железы, отторжения трансплантата любого органа или ткани, отторжения трансплантата сердца, отторжения трансплантата хряща, отторжения почечного трансплантата, отторжения трансплантата печени, отторжения аллотрансплантата, отторжения кожного аллотрансплантата, отторжения гетеротрансплантата любого органа или ткани, отторжения костного трансплантата, отторжения трансплантата костного мозга (ВМТ), отторжения трансплантата паращитовидной железы; эрозии костей; саркоидоза, атеросклероза, болезни Вегенера, микроскопического полиангиита с поражением почек, увеита, факогенного увеита, неинфекционного увеита, кахексии, острого поперечного миелита, первичного билиарного цирроза, аутоиммунного полигландулярного синдрома I и II типа, синдрома Шмидта, острого респираторного дистресссиндрома; артропатии, серонегативной артропатии, артропатии, связанной с неспецифическим язвенным колитом, синдрома Рейтера, энтеропатического синовита, атероматоза/коронарного склероза, аутоиммунного буллезного заболевания, пузырчатки, листовидной пузырчатки, линейного IgA-зависимого буллезного дерматоза, аутоиммунной гемолитической анемии, гигантоклеточного артериита, первичного склерозирующего гепатита, криптогенного аутоиммунного гепатита, криптогенного фиброзирующего альвеолита, системной склеродермии, связанной с интерстициальной болезнью легких, ревматоидного артрита, связанного с интерстициальной болезнью легких, системной красной волчанки, связанной с болезнью легких, дерматомиозита/полимиозита, связанного с болезнью легких, синдрома Шегрена, связанного с болезнью легких, анкилозирующего спондилита, связанного с болезнью легких, васкулита, диффузного легочного васкулита, первичного васкулита, фиброза, болезни легких с инфильтрацией лимфоцитов, аутоиммунного гепатита, аутоиммунного гепатита I типа (классический аутоиммунный или люпоидный гепатит), аутоиммунного гепатита II типа (связанного с антителом к LKM), аутоиммунной гипогликемии, остеоартроза, первичного склерозирующего холангита, эритематоза; системной красной волчанки, дискоидной красной волчанки, волчаночного нефрита; рассеянного склероза (все типы), симпатической офтальмии, легочной гипертензии, вторичной для болезни соединительной ткани, синдрома Гудпасчера, легочных проявлений узелкового полиартериита, острой ревматической атаки, ревматоидного спондилита, болезни Стилла, системной склеродермии, склеродермической болезни, склеродермии, болезни/артериита Такаясу; аутоиммунной тромбоцитопении, идиопатической тромбоцитопении; аутоимунного тиреоидита, гипертиреоидизма, аутоиммунного гипотериоза (болезнь Хашимото), аутоиммунного атрофического гипотиреоидизма; витилиго, острых заболеваний печени, хронических заболеваний печени, холестаза, заболеваний, опосредованных Th2 типом и Th1 типом, злокачественных опухолей, таких как рак легких, рак молочной железы, рак желудка, рак мочевого пузыря, колоректальный рак, рак поджелудочной железы, карцинома поджелудочной железы, рак яичников, рак предстательной железы и злокачественные новообразования гематопоэтической системы (лейкоз и лимфомы), острого лейкоза, острого лимфобластного лейкоза, острого миелоидного лейкоза, аденокарциномы, В-клеточной лимфомы, лимфомы Беркитта, воспалительных ответов на искусственное кровообращение, хронического миелоцитарного лейкоза (ХМЛ), хронических воспалительных патологий, хронического лимфоцитарного лейкоза (ХЛЛ), ректоколитическая карцинома (карциномы ободочной и прямой кишки), кистозного фиброза, злокачественной лимфомы, злокачественного гистиоцитоза, злокачественной меланомы, множественной миеломы, неходжкинских лимфом, рака носоглотки, солидных опухолей, волосатклеточного лейкоза, болезни Ходжкина, саркомы, миелодиспластического синдрома, связанных с цитокиновой терапией нарушений, демиелинизирующих заболеваний, воспалительного демиелинизирующего заболевания, легочного фиброза, идиопатического легочного фиброза, обычной интерстициальной пневмонии, иридоциклита/увеита/оптического неврита, лимфедемы, смешанного заболевания соединительных тканей, моноклональной гаммапатии, хронических болезней легких, развившихся в неонатальном периоде, нефрита, нефротических, нейродегенеративных нарушений, остеопороза, паранеопластического синдрома/гиперкальциемии, связанной со злокачественной опухолью, феномена и болезни Рейно, изменений кожи, синдрома системной воспалительной реакции, тромбоцитопении, токсических эффектов, крапивницы, острого коронарного синдрома, болезни Стилла, развившейся у взрослых, апластической анемии, коронарного склероза, атопической экземы; аутоиммунного расстройства, связанного со стрептококковой инфекцией, аутоиммунной энтеропатии, аутоиммунной потери слуха, аутоиммунного лимфопролиферативного синдрома (ALPS), аутоиммунного миокардита, аутоиммунной преждевременной недостаточности яичников; целиакии, шейного спондилеза, клинически изолированного синдрома (КИС) с риском рассеянного склероза, многоформной эритемы, тяжелой многоформной эритемы, пемфигоида, буллезного пемфигоида, рубцового пемфигоида, пемфигоида слизистых оболочек, гестационного пемфигоида, ирита, кератита, болезни двигательных нейронов, гепатита ни А, ни В, оптического неврита, олигоартикулярного ЮИА, узелкового полиартериита, полихондрита, полиоза, полимиозита, рецидивирующего оптического нейромиелита, ревматической болезни сердца, синдрома SAPHO (синовит, акне, пустулез, гиперостоз, остеит), вторичного амилоидоза, анкилозирующего спондилита, синдром системного воспалительного ответа, краниального артериита и артропатии, связанной с иерсинией или сальмонеллой.

Дополнительные заболевания или нарушения, которые можно лечить композициями по настоящему

- 35 046015 изобретению, включают заболевания, описанные в патенте PCT/RU2015/000163, соответствующие части которых включены в настоящий документ в качестве ссылки.

Предоставляемые фармацевтические композиции можно вводить нуждающемуся в лечении индивидууму посредством системной инъекции, например, посредством внутривенной или подкожной, или внутримышечной инъекции; или посредством инъекции или нанесения на соответствующий участок, например, посредством прямой инъекции или прямого нанесения на участок, когда участок доступен при хирургическом вмешательстве; или посредством местного применения.

В одном из вариантов осуществления изобретение относится к способу лечения и/или профилактики аксиального спондилита, включающему введение нуждающемуся в этом млекопитающему терапевтически эффективного количества одной из приведенных композиций анти-IL17a антител по данному изобретению.

В одном варианте осуществления настоящее изобретение относится к способу лечения и/или профилактики анкилозирующего спондилита, включающему введение нуждающемуся в этом млекопитающему терапевтически эффективного количества одной из приведенных композиций анти-IL17a антител по данному изобретению.

В одном варианте осуществления настоящее изобретение относится к способу лечения и/или профилактики псориаза, включающему введение нуждающемуся в этом млекопитающему терапевтически эффективного количества одной из приведенных композиций анти-IL17a антител по данному изобретению.

В одном варианте осуществления настоящее изобретение относится к способу лечения и/или профилактики вульгарного псориаза или бляшечного псориаза, включающему введение нуждающемуся в этом млекопитающему терапевтически эффективного количества одной из приведенных композиций анти-IL17a антител по данному изобретению.

В одном варианте осуществления настоящее изобретение относится к способу лечения и/или профилактики псориаза ногтей, включающему введение нуждающемуся в этом млекопитающему терапевтически эффективного количества одной из приведенных композиций анти-IL17a антител по данному изобретению.

В одном варианте осуществления настоящее изобретение относится к способу лечения и/или профилактики псориаза половых органов, включающему введение нуждающемуся в этом млекопитающему терапевтически эффективного количества одной из приведенных композиций анти-IL17a антител по данному изобретению.

В одном варианте осуществления настоящее изобретение относится к способу лечения и/или профилактики псориаза кожи головы, включающему введение нуждающемуся в этом млекопитающему терапевтически эффективного количества одной из приведенных композиций анти-IL17a антител по данному изобретению.

В одном варианте осуществления настоящее изобретение относится к способу лечения и/или профилактики ладонно-подошвенного псориаза, включающему введение нуждающемуся в этом млекопитающему терапевтически эффективного количества одной из приведенных композиций анти-IL17a антител по данному изобретению.

В одном варианте осуществления настоящее изобретение относится к способу лечения и/или профилактики пустулезного псориаза, включающему введение нуждающемуся в этом млекопитающему терапевтически эффективного количества одной из приведенных композиций анти-IL17a антител по данному изобретению.

В одном варианте осуществления настоящее изобретение относится к способу лечения и/или профилактики псориатического артрита, включающему введение нуждающемуся в этом млекопитающему терапевтически эффективного количества одной из приведенных композиций анти-IL17a антител по данному изобретению.

В одном варианте осуществления настоящее изобретение относится к способу лечения и/или профилактики буллезного пемфигоида, включающему введение нуждающемуся в этом млекопитающему терапевтически эффективного количества одной из приведенных композиций анти-IL17a антител по данному изобретению.

В одном варианте осуществления настоящее изобретение относится к способу лечения и/или профилактики гангренозной пиодермии, включающему введение нуждающемуся в этом млекопитающему терапевтически эффективного количества одной из приведенных композиций анти-IL17a антител по данному изобретению.

Терапевтически эффективное количество анти-IL17a антител по настоящему изобретению, и водных композиций, включающих анти-IL17a антител по настоящему изобретению, в предлагаемых составах зависит от состояния, подлежащего лечению, тяжести состояния, предшествующей терапии и истории болезни пациента и ответу на терапевтическое средство. Подходящую дозу можно регулировать по решению лечащего врача так, что ее можно вводить пациенту один раз или посредством нескольких введений.

В одном из вариантов осуществления эффективное количество анти-IL17a антитела на дозу для пациента составляет приблизительно от 0,01 до 10 мг на килограмм веса тела, или приблизительно от

- 36 046015

0,01 до 5 мг на килограмм веса тела, или приблизительно от 0,01 до 4 мг на килограмм веса тела, или приблизительно 0,05-3 мг на килограмм веса тела, или приблизительно 0,05 мг на килограмм веса тела, или приблизительно 0,25 мг на килограмм веса тела, или приблизительно 0,825 мг на килограмм веса тела, или приблизительно 1,25 мг на килограмм веса тела, или приблизительно 1,75 мг на килограмм веса тела, или приблизительно 2,25 мг на килограмм веса тела, или приблизительно 3 мг на килограмм веса тела.

Частота введения доз обычно может быть примерно два раза в неделю, или один раз в неделю, или примерно один раз каждые 2 недели, или примерно один раз каждые 4-8 недель, или примерно один раз каждые 10 недель, или примерно один раз в месяц или примерно один раз каждые 3 месяца.

Если дозу следует вводить более одного раза в неделю, иллюстративный диапазон доз является таким же, как указанные выше диапазоны доз или менее, и ее предпочтительно вводят два или более раз в неделю с диапазоном доз 5-240 мг/дозу.

В другом варианте осуществления приемлемая доза для введения посредством инъекции может содержать 5-300 мг/дозу, или может содержать 40, или 50, или 60 мг на одну дозу; или может содержать 70, или 80, или 90, или 100 мг на одну дозу; или может содержать 110, или 120, или 130, или 140 мг на одну дозу; или может содержать 150, или 160, или 170, или 180 мг на одну дозу; или может содержать 190, или 200, или 210, или 220 мг на одну дозу; или может содержать 230, или 240, или 250, или 260 мг на одну дозу; или может содержать 270, или 280, или 290 мг на одну дозу.

Доза может быть доставлена посредством одной или более одной инъекции.

Доза может быть доставлена посредством одной, двух или трех инъекций. Одна инъекция может содержать 1 или 2 мл раскрытой в настоящем документе композиции.

В одном варианте осуществления анти-IL17a антител по настоящему изобретению могут быть введены в дозе 40 мг посредством одной (п/к) инъекции.

В одном варианте осуществления анти-IL17a антител по настоящему изобретению могут быть введены в дозе 60 мг посредством одной инъекции.

В одном варианте осуществления анти-IL17a антител по настоящему изобретению могут быть введены в дозе 70 мг посредством одной инъекции.

В одном варианте осуществления анти-IL17a антител по настоящему изобретению могут быть введены в дозе 80 мг посредством одной инъекции.

В одном варианте осуществления анти-IL17a антител по настоящему изобретению могут быть введены в дозе 80 мг посредством двух инъекций по 40 мг.

В одном варианте осуществления анти-IL17a антител по настоящему изобретению могут быть введены в дозе 100 мг посредством одной инъекции.

В одном варианте осуществления анти-IL17a антител по настоящему изобретению могут быть введены в дозе 120 мг посредством одной инъекции.

В одном варианте осуществления анти-IL17a антител по настоящему изобретению могут быть введены в дозе 120 мг посредством двух инъекций по 60 мг.

В некоторых случаях улучшения состояния пациента можно добиться посредством лечения в течение продолжительного периода времени. Для неизлечимых хронических состояний схему лечения можно продолжать бессрочно.

В другом варианте осуществления фармацевтические композиции по настоящему изобретению можно получать в виде нерасфасованного состава и по существу компоненты фармацевтической композиции присутствуют в количествах выше, чем может требоваться для введения, и их соответствующим образом разбавляют до введения.

Альтернативно фармацевтическая композиция может быть заморожена, высушена распылением, либо лиофилизирована и восстановлена перед применением в подходящем стерильном носителе. Лиофилизация может быть выполнена с использованием способов, известных в данной области техники, которые включают в себя различные шаги, такие как замораживание, отжиг, первичная и вторичная сушка.

Фармацевтические композиции можно вводить в виде одного терапевтического средства или в комбинации с дополнительными терапевтическими средствами по мере необходимости. Таким образом, в одном варианте осуществления предлагаемые способы лечения и/или профилактики используют в комбинации с введением терапевтически эффективного количества другого активного средства. Другое активное средство можно вводить до, в течение или после введения фармацевтических композиций по настоящему изобретению. Другое активное средство можно вводить как часть предлагаемой композиции или альтернативно в виде отдельного состава.

Введение предлагаемых фармацевтических композиций можно проводить различными способами, включая парентеральное, пероральное, буккальное, назальное, ректальное и местное введение. Парентеральное введение может включать, без ограничения, трансдермальное, подкожное, внутривенное, внутриартериальное, внутрибрюшинное, интрадермальное, внутрисердечное, внутрижелудочковое, внутричерепное, внутритрахеальное, интратекальное введение, внутримышечную инъекцию, внутривитреальную инъекцию.

Фармацевтические композиции по настоящему изобретению особенно пригодны для парентераль

- 37 046015 ного введения, т.е. подкожно, внутримышечно, внутривенно, интраперитонеально, в спинной мозг, в суставы, интрасиновиально и/или интратекально. Парентеральное введение можно проводить посредством болюсной инъекции или непрерывной инфузии. Фармацевтические композиции для инъекций могут находиться в стандартной лекарственной форме, например, в ампулах, флаконах, преднаполненных шприцах или в контейнерах с несколькими дозами с добавленным консервантом, но не ограничиваясь этим. Кроме того, разработан ряд недавних подходов к доставке лекарственного средства, и фармацевтические композиции по настоящему изобретению подходят для введения этими новыми способами, например, BD Physioject™, Inject-ease®, Genject®, ручки-инжекторы, такие как GenPen®, и безыгольные устройства, такие как MediJector®40 и BioJector®. Фармацевтическую композицию по настоящему изобретению также можно адаптировать для еще не открытых способов введения.

Также см. Langer, 1990, Science, 249:1527-1533.

Предлагаемые фармацевтические композиции также можно формулировать в качестве депопрепарата. Такие длительно действующие составы можно вводить посредством имплантации (например, подкожно или внутримышечно) или посредством внутримышечной инъекции. Таким образом, например, составы можно модифицировать с использованием подходящих полимерных или гидрофобных материалов (например, в виде эмульсии в приемлемом масле), или ионообменных смол, или в виде умеренно растворимых производных, например, в виде умеренно растворимой соли.

Фармацевтические композиции при желании можно предоставлять во флаконе, упаковке или в устройстве-распределителе, которые могут содержать одну или несколько стандартных лекарственных форм, содержащих активный ингредиент. В одном варианте осуществления устройство-распределитель может содержать шприц, содержащий однократную дозу жидкого состава, готового к инъекции. Шприц может сопровождаться инструкцией по введению.

В другом варианте осуществления настоящее изобретение относится к набору или контейнеру, содержащим водную фармацевтическую композицию по изобретению. Концентрация полипептида в водной фармацевтической композиции может варьировать в широком диапазоне, но, как правило, в пределах диапазона приблизительно от 1 мг/мл до приблизительно 200 мг/мл водного состава. Набор также может сопровождаться инструкциями по применению.

Способ получения вышеуказанных композиций включает добавление в водную фазу ацетатных буферных агентов, с последующим добавлением, в любой последовательности, следующих компонентов: осмолитика, выбранного из дисахаридов (таких как трегалоза, сахароза или их комбинация), анти-IL17a антитела, содержащего содержащего домен VHH-производного и вариабельный домен VL, и/или солюбилизатора, выбранного из группы: полисорбат 20, полисорбат 80, полоксамер 188 или их комбинация.

Способ получения вышеуказанных композиций включает добавление в водную фазу гистидиновых буферных агентов, с последующим добавлением, в любой последовательности, следующих компонентов: осмолитика, выбранного из спиртов на основе сахара (таких как маннит, сорбит или их комбинация), анти-IL17a антитела, содержащего содержащего домен VHH-производного и вариабельный домен VL, и/или солюбилизатора, выбранного из группы: полисорбат 20, полисорбат 80, полоксамер 188 или их комбинация.

Пример исследования

Ниже представлен пример исследования по определению реагентов и их концентраций для получения водной композиции анти-IL17a антител по настоящему изобретению, таких как нетакимаб.

Подразумевается, что описанные в настоящем документе эксперименты и способы относятся к анти-IL17a антителу по настоящему изобретению, такому как нетакимаб, с вариабельным доменом VHH и вариабельным доменом VL. Примеры подходящих антител описаны в заявке на патент № PCT/RU2015/000163.

Подразумевается, что хотя иллюстративные исследования и примеры, представленные в настоящем документе, относятся к нетакимабу, который рассматривается в качестве иллюстративного антитела, указанные иллюстративные исследования и примеры могут быть применены и к другому антителу по настоящему изобретению, не отходя при этом от идей настоящего изобретения (например, в частности в виду структурных сходств антител по настоящему изобретению, вариабельный домен VHH, соединенный с вариабельным доменом V_L).

Исследования и примеры, представленные в настоящем документе, предназначены исключительно для иллюстративных целей, которые демонстрируют подходимость определенных компонентов, используемых в водных композициях анmи-IL17a антитела по настоящему изобретению. Подразумевается, что средний специалист в данной области техники может использовать и другие способы, не отступая при этом от идей настоящего изобретения.

Подходимость водных композиций по настоящему изобретению была испытана посредством иллюстративных способов, описанных в настоящем документе.

Способ 1. Получение стабильных составов анти-ГЕ17 антитела.

Приготовление образцов антитела с концентрацией 10 мг/мл осуществляли в концентрационных ячейках Stirred Cell (Millipore) под давлением. Для этого антитело в исходном составе помещали в ячей

- 38 046015 ку, при непрерывном перемешивании белок концентрировали под потоком сжатого воздуха до концентрации 10 мг/мл, после чего добавляли в ячейку не менее чем 10 кратный объем водного раствора с целевым составом, включающим буферные агенты, осмотические агенты и, если необходимо, дополнительные водорастворимые стабилизаторы. По завершении процесса диафильтрации антитело концентрировали до концентрации около 12-20 мг/мл, выгружали из ячейки, определяли точную концентрацию белка методом УФ-спектрофотометрии. Затем к образцу вносили соответствующий раствор плацебо для получения раствора с целевой концентрацией белка 10±0,5 мг/мл.

Получение образцов белка с концентрацией более 40 мг/мл проводили в кассетах Pellicon (Millipore) в режиме тангенциального потока. Для этого антитело в исходном составе помещали в емкость для диафильтрации, концентрировали белок до концентрации 40-100 мг/мл, после чего к системе подключали подачу не менее чем 10 кратного объема раствора с целевым составом, содержащим буферные агенты, осмотические агенты и, если необходимо, дополнительные водорастворимые стабилизаторы. Допускается добавление концентрата осмотических агентов и водорастворимых стабилизаторов после завершения диафильтрации. По завершении процесса диафильтрации антитело концентрировали до концентрации, превышающей целевую, выгружали из системы и определяли точную концентрацию белка. Затем к образцу добавляли соответствующий раствор плацебо для получения раствора с целевой концентрацией белка.

При получении составов, содержащих солюбилизаторы, концентраты поверхностно-активных веществ добавляли к антителу после завершения диафильтрации и концентрирования при финальном разведении антитела раствором плацебо до целевой концентрации.

Перед асептичным наполнением в конечный контейнер (например, стеклянный или полимерный сосуд, флакон или шприц) раствор антитела фильтровали через мембрану с размером пор 0,22 мкм.

Способ 2. Определение концентрации белка в исследуемых образцах.

Концентрацию белка определяли с помощью метода УФ- спектрофотометрии при длине волны 280 нм в УФ-прозрачных планшетах.

Каждый образец разводили раствором соответствующего плацебо до концентрации примерно 0.5 мг/мл. В лунку планшета для УФ-спектрофотометрии помещали 150 мкл разведенного образца. Измеряли оптическую плотность помещенных в планшет растворов на планшетном спектрофотометре при длине волны 280 нм. В качестве раствора сравнения использовали соответствующий раствор плацебо.

Концентрацию белка (С) в мг/мл рассчитывали по формуле _ А(28О) *

С = ε * I

А₂₈₀ - значение оптической плотности при длине волны 280 нм;

s - коэффициент экстинкции исследуемого белка;

b - суммарный коэффициент разведения образца;

l - толщина слоя в лунке планшета;

для 150 мкл l=0.42 см.

Способ 3. ПЭГ-агрегация.

Готовили раствор ПЭГ 6000 с массовой концентрацией 20-25% в исследуемом составе эксципиентов. Итоговые растворы фильтровали через фильтр Durapore 0.45 мкм.

В 96-луночные планшеты для УФ-спектрофотометрии переносили расчетное количество образца, раствора вспомогательных веществ и 20-25% раствора ПЭГ 6000 так, чтобы в ряде лунок была концентрация ПЭГ6000 от 0 до 18%, а концентрация белка в каждой лунке составляла 1 мг/мл. Все полученные в лунках растворы хорошо перемешивали, пипетированием.

После этого оценивали степень мутности растворов визуально, а также измеряли оптическую плотность растворов при длине волны 400 нм.

Осаждение белка в присутствии ПЭГ связано с эффектом замещения объема, т.е. белок стерически вытесняется из регионов растворителя полимером. Это приводит к концентрированию белка до тех пор, пока не будет превышена его растворимость и не выпадет осадок. Чем менее стабилен образец, тем при меньшей концентрации ПЭГ 6000 он будет образовывать видимые агрегаты (опалесценцию).

Способ 4. Определение коллоидной стабильности методом шейк-тест.

Исследуемые образцы разделяли на 2 части по 200 мкл и помещали в стеклянные виалы, по 1 виале на каждый состав закладывали в холодильник на хранение при 2-8°C, остальные устанавливали в шейкер и шейкировали со скоростью 800 об./мин при температуре 2-8°C в течение указанного времени. После окончания стресса пробирки встряхивали на вортексе и передавали на анализ.

Способ 5. Определение коллоидной стабильности методом криоконцентрирования.

Исследуемые образцы разделяли на 2 части и помещали в пластиковые виалы: по 1 виале на каждый состав закладывали в холодильник на хранение при 2-8°C, остальные устанавливали в морозильную камеру и хранили при температуре минус 16-20°C в течение указанного времени. После окончания стресса пробирки убирали из морозильной камеры, выдерживали при комнатной температуре до полного оттаивания содержимого, перемешивали растворы с помощью вортекса и передавали на анализ.

Способ 6. Определение термической стабильности методом термостресс.

- 39 046015

Исследуемые образцы разделяли на 2 части и помещали в отдельные стеклянные виалы: по 1 виале на каждый состав закладывали в холодильник на хранение при 2-8°C, остальные устанавливали в термостат и инкубировали при необходимой температуре в течение указанного времени. После окончания прогрева виалы убирали из термостата, выдерживали при комнатной температуре около 15 мин и передавали на анализ.

Способ 7. Определение гомогенности и точки агрегации белка с помощью метода динамического светорассеяния (DLS).

Определение гомогенности исследуемых образцов осуществляли на приборе Zetasizer Nano ZSP в режиме измерения Size. Для этого 0.5 мл раствора помещали в обеспыленную одноразовую пластиковую кювету.

Аналитическая модель: Protein analysis.

Выдерживание при температуре перед началом измерения 30 с.

В каждой точке среднее значение по 13 измерениям в 3 повторностях.

Определение точки агрегации исследуемых белков осуществляли на приборе Zetasizer Nano ZSP. Для этого раствор помещали в кварцевую обеспыленную кювету, которую постепенно нагревали в приборе при постоянном измерении интенсивности рассеянного света в режиме измерения Temperature trend.

Аналитическая модель: Protein analysis.

Режим Temperature trend, mod: Protein aggregation point. От 50 до 85°C при шаге нагрева 1°C.

Выдерживание при температуре перед началом измерения 60 с. В каждой точке среднее значение по 15 измерениям в 1 повторности.

Строили температурный тренд с помощью ПО прибора, которое и автоматически рассчитывает точку агрегации белка (Aggregation point).

Способ 8. Определение гомогенности образцов с помощью метода эксклюзионной (Э) высокоэффективной жидкостной хроматографии (ВЭЖХ).

Затем определяли гомогенность образцов с помощью метода высокоэффективной жидкостной хроматографии (ВЭЖХ) со следующими характеристиками.

Колонка Tosoh TSK-GelG3000SWXL 7.8 мм IDx30 см, кат. № 08541.

Температура колонки: 25°C.

Скорость потока подвижной фазы: 0.7 мл/мин.

Объем вкола: 10 мкл.

Концентрация образца: 5 мг/мл.

Длина волны детектора: 220 нм.

Продолжительность элюирования: 25 мин.

Подвижная фаза: динатрия гидрофосфат б/в 7.1 мг/мл.

Натрия хлорид 17.54 мг/мл.

рН подвижной фазы доводили до 7.0 ортофосфорной кислотой.

Изменение чистоты после стресса рассчитывали по формуле

Δ=(доля основного пика после стресса-доля основного пика до стресса)

Способ 9. Определение кислотно-щелочного профиля образцов с помощью ионно-обменной (ИО) ВЭЖХ.

Затем определяли кислотно-щелочной профиль образцов с помощью метода ионно-обменной (ИО) ВЭЖХ со следующими характеристиками.

Колонка ProPac WCX-10 Analytical, 4x250 мм.

Предколонка Pro Рас WCX-10G, 4x50 мм.

Температура колонки: 25°C.

Скорость потока подвижной фазы: 0.7 мл/мин.

Объем вкола: 50 мкл.

Концентрация образца: 1 мг/мл.

Длина волны детектора: 280 нм.

Продолжительность элюирования: 60 мин.

Подвижная фаза.

Элюент А: 20 мМ 2-(№морфолино)этансульфоновая кислота (MES), рН 6.0.

Элюент Б: 20 мМ 2-(№морфолино)этансульфоновая кислота (MES), 400 мМ NaCl, рН 6.0.

Градиент фазы А: 87-0-90%.

Абсолютное изменение кислотно-щелочного профиля после стресса рассчитывали по формуле Δ=|содержание кислых фракций до стресса-содержание кислых фракций после стресса|+|содержание доминирующей фракции до стресса-содержание доминирующей фракции после стресса|+|содержание щелочных фракций до стресса-содержание щелочных фракций после стресса|

Способ 10. Определение низкомолекулярных примесей методом гель-электрофореза в полиакриламидном геле (ПААГ) (SDS-PAGE) в редуцирующих и нередуцирующих условиях.

Готовили полиакриламидный гель (ПААГ) в стеклянных пластинах в присутствии натрия додецил

- 40 046015 сульфата, состоящие из концентрирующего слоя - 4% ПААГ и разделяющего слоя: в редуцирующих условиях - 12.5% ПААГ, в нередуцирующих условиях - 8 % ПААГ.

Собирали и устанавливали электрофорезную камеру в соответствии с инструкцией по эксплуатации прибора для проведения вертикального электрофореза. Пробы готовили, разводя образцы очищенной водой до конечной концентрации 1 мг/мл. Отбирали объем, эквивалентный 40 мкг и смешивали подготовленные пробы исследуемого образца в соотношении 3:1 (объем/объем) с буферным раствором для нанесения образцов 4-кратным, содержащим 2-меркаптоэтанол (редуцирующие условия) и не содержащим 2-меркаптоэтанол (нередуцирующие условия), перемешивали. Полученные растворы инкубировали при температуре (99±1)°C в течение 3 мин (образцы, содержащие 2-меркаптоэтанол) и при температуре (99±1)°C в течение 1 мин (образцы, не содержащие 2-меркаптоэтанол). Растворы охлаждали до комнатной температуры, перемешивали и наносили в лунки ПААГ под слой электродного буферного раствора.

Электрофорез проводили в режиме постоянного тока, используя систему водяного охлаждения. Задавали параметры работы источника питания: при прохождении фронта красителя через концентрирующий гель напряжение тока составляло 110 В. После вхождения фронта красителя в нижний разделяющий гель на 5-7 мм напряжение тока увеличивали до 180 В. Источник питания отключали, когда фронт красителя достиг нижней границы геля.

После окончания электрофореза гели отделяли от стекол и проводили фиксацию белков в фиксирующем растворе в течение 16-18 ч при комнатной температуре. Затем проводили окрашивание гелей (в растворе кислотном синем 83) и отмывку до получения четкой визуализации полос. Гели сканировали. Чистоту и примеси в испытуемых образцах оценивали с помощью программного обеспечения GelPro.

Способ 11. Определение специфической активности.

Специфическую активность образцов моноклонального анти-П.17 антитела оценивали по способности специфично связывать белок IL17a и нейтрализовать IL17a-зависимую продукцию IL6 клетками НТ1080. Суспензию клеток НТ1080 добавляли в культуральные планшеты в объеме 50 мкл/лунку. Инкубировали планшеты 5-6 ч при 37°C, 5% СО₂. При помощи роботизированной станции Freedom Evo готовили серийные разведения стандартного и исследуемого образцов, смешивали их с раствором IL17a+TNFa, инкубировали 1 ч при комнатной температуре. После инкубации смесь переносили в культуральные планшеты в объеме 50 мкл/лунку. Инкубировали планшеты 16-18 ч при 37°C, 5% СО₂. Все описанные выше процедуры проводили в асептичных условиях.

Детекцию уровня IL17a-зависимой продукции IL6 проводили при помощи ИФА-анализа, с использованием набора ELISA для определения концентрации IL6 Human IL-6 DuoSet ELISA, R&D System, США, кат. № DY206.

С помощью программного обеспечения Magellan 7.2 строили четырехпараметровые кривые зависимости среднего значения оптической плотности от концентрации белка для растворов стандартного образца и испытуемого образцов, расположенных на одном планшете.

Относительную специфическую активность испытуемого образца в процентах (RP) рассчитывали по формуле

RP = ^EDx^st -100%.

ED^jest где ED₅₀st - значение половинной эффективной дозы стандартного образца, нг/мл;

ED₅₀test - значение половинной эффективной дозы испытуемого образца, нг/мл.

За конечный результат принимали среднее значение относительной специфической активности, рассчитанное по 3 независимым определениям (определенное на 3-х разных культуральных планшетах).

Примеры

Пример 1. Выбор буферного раствора.

В настоящем иллюстративном исследовании выбраны два четыре типовых буферных раствора для антител по настоящему изобретению, пригодных для, например, парентерального, в том числе подкожного введения. Исследуемые составы (на 1 мл) следующие.

- 41 046015

Обозначение	Состав
5 мМ Acet, pH 5.0	Нетакимаб 2.°.^ тт ζ , ч 0.44 мг Натрия ацетат тригидрат (т/г) Уксусная кислота лед. _{тт с} „ ' до pH 5.0
4.5 мМ His, pH 6.0	Нетакимаб 10 мг L-гистидин 0.4 мг L-гистидина гидрохлорид 0.4 мг моногидрат (м/г)
5 мМ РВ, pH 6.0	Нетакимаб 10 мг Натрия дигидрофосфат 0.59 мг моногидрат (м/г) Натрия гидрофосфат безводный 0.10 мг (б/в)
5 мМ Cit, pH 5.0	Нетакимаб 10 мг Натрия цитрата дигидрат (д/г) 0.93 мг Лимонная кислота безводная 0.35 мг (б/в)

Определение коллоидной стабильности методом ПЭГ-агрегации.

Результаты представлены в табл. 1 и на фиг. 1.

вом и ацетатном буферных растворах. Композиция на основе фосфата и цитрата была исключена из дальнейшего исследования, т.к. агрегация при 12% ПЭГ является неудовлетворительным показателем при разработке концентрированной ГЛФ для подкожного введения. На основании полученных результатов для дальнейшей разработки выбраны ацетатный и гистидиновый буферные растворы.

Пример 2. Разработка состава вспомогательных веществ анти-ТЫ? на основе гистидинового буферного раствора.

Оптимизация рН и ионной силы буферного раствора.

Исследуемые составы (на 1 мл)

4.5 мМ His, pH 6.0	Нетакимаб L-гистидин L-гистидина гидрохлорид м/г	10 мг 0.4 мг 0.4 мг
IOmMHis, pH 6.0	Нетакимаб L-гистидин L-гистидина гидрохлорид м/г	10 мг 0.9 мг 0.9 мг
20 мМ His, pH 6.0	Нетакимаб L-гистидин L-гистидина гидрохлорид м/г	10 мг 1.8 мг 1.8 мг
IOmMHis, pH 5.5	Нетакимаб L-гистидин L-гистидина гидрохлорид м/г	10 мг 0.46 мг 1.48 мг
IOmMHis, pH 6.5	Нетакимаб L-гистидин L-гистидина гидрохлорид м/г	10 мг 1.16 мг 0.54 мг

Результаты представлены в табл. 2 и на фиг. 2. Изменение рН и концентрации гистидина не оказывает влияния на коллоидную стабильность и теоретическую растворимость белка.

- 42 046015

Таблица 2

Данные средней оптической плотности растворов

Наименование образца / Концентрация ПЭГ	0 %	6%	8%	10 %	12 %	14 %	16 %	18%
4.5 мМ His, pH 6.0	0,0528	0.0690	0.0576	0.0611	0.0576	0.0625	0.0572	0.0651
10 мМ His, pH 6.0	0,0596	0.0665	0.0610	0.0663	0.0616	0.0662	0.0597	0.0673
20 мМ His, pH 6.0	0.0576	0.0595	0.0624	0.0673	0.0649	0.0658	0.0676	0.0626
10 мМ His, pH 5.5	0.0573	0.0584	0.0623	0.0637	0.0683	0.0638	0.0686	0.0619
10 мМ His, pH 6.5	0.0586	0.0534	0.0629	0.0655	0.0683	0.0619	0.0643	0.0677

Определение термической стабильности и температуры агрегации белка.

Таблица 3

Сводные результаты

Исследуемые образцы	Изменение чистоты, %	Суммарное изменение кислотно-щелочного профиля, %	Изменение pH	Температура агрегации, °C
Термостресс 50°C, 48 ч
эвэжх	иовэжх		DLS
4.5 мМ His, pH 6.0	-(>.42	ИИМИМИИИИММИ	6 0	МИИИИИИ
10 мМ His, pH 6.0	-о. 4	14.33	(>.14	75
20 MMHis, pH 6.0	-1 24	16.70		72
10 мМ His, pH 5.5	-I) “S	14.62		74
10 MMHis, pH 6.5	-О ч	15.83	6.5 ί	74

Положительный / лучший результат

Средний результат

Отрицательный / худший результат

Экспериментально подтверждено, что увеличение буферной емкости гистидинового буферного раствора приводит к снижению термической стабильности анти-П.17 антитела. При этом снижение соот ношения гистидин/гистидина гидрохлорид до 0.4 мг/мл/0.4 мг/мл не приводит к заметному сдвигу рН после диафильтрации и термостресса. Увеличение рН буферного раствора до 6.5 незначительно снижает термическую стабильность белка, стабильность анти-И.17 в диапазоне рН 5.5-6.0 не имеет значимых раз личий.

Для дальнейшей разработки допустим следующий состав плацебо (на 1 мл):

L-гистидин 0.4 мг

L-гистидина гидрохлорид м/г 0.4 мг pH 6.0 ±0.5

Выбор осмотического агента.

В качестве осмолитика выбраны четыре типовых вспомогательных веществ.

При выборе их концентрации учтены ограничения при парентеральном введении. Исследуемые составы (на 1 мл) следующие.____________________________________________________________

Hisbuf. + TRE pH 6.0	Нетакимаб L-гистидин L-Γистидина гидрохлорид моногидрат Трегалозы дигидрат	10 мг 0.4 мг 0.4 мг 100 мг
Hisbuf. + SUC pH 6.0	Нетакимаб L-гистидин L-Γистидина гидрохлорид моногидрат Сахароза	10 мг 0.4 мг 0.4 мг 100 мг
Hisbuf. + MAN pH 6.0	Нетакимаб L-гистидин L-Γистидина гидрохлорид моногидрат Маннит	10 мг 0.4 мг 0.4 мг 54.5 мг
Hishut.+ SORB pH 6.0	Нетакимаб L-гистидин Гистидина гидрохлорид моногидрат Сорбитол	10 мг 0.4 мг 0.4 мг 54.5 мг

Результаты представлены в табл. 4 и на фиг. 3.

- 43 046015

Таблица 4

Данные средней оптической плотности растворов
Наименование образца / Концентрация ПЭГ	0%	6%	8%	10%	12%	14%	16%	18%
His + TRE	0.0574	0.0633	0.0636	0.0676	0.0714	0.0741	0.0794	0.0868
His + SUC	0.0527	0.0607	0.0643	0.0687	0.0742	0.0816	0.0914	0.0946
His + MAN	0.0485	0.0535	0.0597	0.0622	0.0676	0.074	0.0799	0.0847
His + SORB	0.0515	0.0610	0.0639	0.0705	0.0818	0.0893	0.0953	0.0935

Результаты определения термической стабильности и температуры агрегации белка представлены в табл. 5.

Таблица 5 _______________________________Сводные результаты_______________________________

Исследуемые образцы	Изменение чистоты, %	Суммарное изменение кислотно-щелочного профиля, %	Температура агрегации, °C
Термостресс 50°С, 48 ч
ЭВЭЖХ	ИО ВЭЖХ	DLS
His + TRE	-0,73	16.31	72
His + SUC	-0.54	16.21	71
His + MAN	НВИИИИ\|Ш\|	НИ\|И\|11\|\|\|ИИ\|\|\|Н\|\|\|И\|И	~⁴
His + SORB	-Ϊ 4S	1*>4<»	71
^Положительный / лучший „ , „ ЩИ з _a Средний результат Οι ριιцательныи / худший результат

Все предложенные составы обеспечивают достаточную термическую и коллоидную стабильность белка. Тем не менее состав с маннитом обладает хорошими термостабилизирующими свойствами, т.к. за 48 ч термостресса прирост примесей белка в этом составе при анализе методом Э ВЭЖХ, а также суммарное изменения профиля изоформ составили минимальное значение среди всех полученных.

На основании полученных данных в качестве фармацевтической композиции допустим для применения следующий состав плацебо:

L-гистидин 0.4 мг/мл

L-гистидина гидрохлорид м/г 0.4 мг/мл

Маннит 54.5 мг/мл pH 6.0 ±0.5

Выбор солюбилизатора и оптимизация его содержания.

Для снижения уровня агрегации концентрированной формы моноклонального анти-ТЬ17 антитела ассмотрено использование солюбилизаторов полисорбат 80 и полоксамер 188. Исследуемые составы (на 1 мл) следующие.____________________________________________________________________

	Нетакимаб	10 мг
His + MAN pH 6.0	L-гистидин	0.4 мг
L-гистидина гидрохлорид м/г	0.4 мг
	Маннит	54.5 мг
	Нетакимаб	10 мг
	L-гистидин	0.4 мг
His+ MAN + 0.1 PS80 pH 6.0	L-гистидина гидрохлорид м/г	0.4 мг
	Маннит	54.5 мг
	Полисорбат 80	0.1 мг
	Нетакимаб	10 мг
	L-гистидин	0.4 мг
His+ MAN + 0.2 PS80 pH 6.0	L-гистидина гидрохлорид м/г	0.4 мг
	Маннит	54.5 мг
	Полисорбат 80	0.2 мг
His+ MAN + 0.5 PS80 pH 6.0	Нетакимаб	10 мг
L-гистидин	0.4 мг

- 44 046015

	L-гистидина гидрохлорид м/г Маннит Полисорбат 80	0.4 мг 54.5 мг 0.5 мг
His+ MAN+ 1.0PS80 pH 6.0	Нетакимаб L-гистидин L-гистидина гидрохлорид м/г Маннит Полисорбат 80	10 мг 0.4 мг 0.4 мг 54.5 мг 1.0 мг
His+ MAN + 0.1 пол оксамер pH 6.0	Нетакимаб L-гистидин L-гистидина гидрохлорид м/г Маннит Полоксамер 188	10 мг 0.4 мг 0.4 мг 54.5 мг 0.1 мг
His+ MAN + 1.0 полоксамер pH 6.0	Нетакимаб L-гистидин L-гистидина гидрохлорид м/г Маннит Полоксамер 188	10 мг 0.4 мг 0.4 мг 54.5 мг 1.0 мг

Затем определяли коллоидную стабильность методом ПЭГ-агрегации растворов. Результаты представлены в табл. 6 и на фиг. 4.

Таблица 6

Наименование образца / Концентрация ПЭГ	0%	6%	8%	10%	12%	14%	16%	18%
His + MAN	0.0494	0.0517	0.0529	0.0549	0.0680	0.0612	0.0649	0.0746
His + MAN+ 0.1 PS80	0.0483	0.0520	0.0537	0.0552	0.0635	0.0603	0.0628	0.0687
His + MAN + 0.2 PS80	0.0524	0.0551	0.0578	0.0591	0.0583	0.0642	0.0736	0.0802
His + MAN + 0.5 PS80	0.0526	0.0551	0.0557	0.0570	0.0710	0.0692	0.0701	0.0721
His + MAN + 1.0 PS80	0.0512	0.0576	0.0583	0.0572	0.0638	0.0653	0.0687	0.0734
His + MAN+ 0.1 полоксамер	0.0534	0.0539	0.0576	0.0582	0.0639	0.0663	0.0658	0.0740
His + MAN + 1.0 полоксамер	0.0514	0.0534	0.0581	0.0522	0.0611	0.0678	0.0619	0.0730

Затем определяли термическую стабильность и температуру агрегации белка; результаты представлены в табл. 7.

Таблица 7

Сводные результаты

Исследуемые образцы	Суммарное изменение Изменение чистоты, % кислотно-щелочного профиля, %	Температура агрегации, °C
Термостресс 50°С, 48 ч
ЭВЭЖХ	ИО ВЭЖХ	DLS
His + MAN	...	15.67
His + MAN+ 0.1 PS80	-0.53 %	15.91	72
His + MAN+ 0.2 PS80	-2.72 %	15.92	72
His+ MAN +0.5 PS80	-3.03 %	15.78
His+MAN + 1.0 ESSO		16.30
His + MAN + 0.1 полоксамер	ИНИМИИИ1	15.55	1И111ННВ1
His+ MAN + 1.0 полоксамер		16.87	72

»оложительный / лучший ~ „ '3 льтат Средний результат

Отрицательный / худший результат

Показано негативное влияние полисорбата 80 на агрегационную стабильность анти-11.17 антитела. С увеличением содержания этого поверхностно-активного вещества в составе увеличивается прирост примесей в ходе термостресса при анализе методом Э ВЭЖХ. Содержание полоксамера 188 в составе анти-П.17 антитела не оказывает значимого влияния на стабильность антитела. Кислотно-щелочной профиль исследуемого белка значимо не зависит от содержания поверхностно-активных веществ.

- 45 046015

На основании результатов исследования для лекарственной формы допустим следующий состав плацебо, представленный в качестве примера:

L-гистидин 0.4 мг/мл

L-гистидина гидрохлорид м/г 0.4 мг/мл

Маннит 54.5 мг/мл

Полоксамер 188 0- 1.0 мг/мл pH 6.0 ±0.5

Пример 3. Разработка состава вспомогательных веществ anti IL17 на основе ацетатного буферного раствора.

Далее была исследована оптимизация рН и ионной силы буферного раствора.

Готовили следующие исследуемые составы (на 1 мл)._____________________

5 мМ Acet, pH 5.0	Нетакимаб Натрия ацетат тригидрат Уксусная кислота лед.	10 мг 0.44 мг до pH 5.0
10 мМ Acet, pH 5.0	Нетакимаб Натрия ацетат тригидрат Уксусная кислота лед.	10 мг 0.87 мг до pH 5.0
20 мМ Acet, pH 5.0	Нетакимаб Натрия ацетат тригидрат Уксусная кислота лед.	10 мг 1.74 мг до pH 5.0
20 мМ Acet, pH 4.0	Нетакимаб Натрия ацетат тригидрат Уксусная кислота лед.	10 мг 0.98 мг до pH 4.5
20 мМ Acet, pH 6.0	Нетакимаб Натрия ацетат тригидрат Уксусная кислота лед.	10 мг 2.31 мг to pH 5.5

В примере 2 показано, что рН, буферная емкость раствора не оказывают значимого влияния на результаты ПЭГ-агрегации, поэтому в примере 3 для ацетатного буферного раствора результаты этого эксперимента не приведены.

Затем определяли термическую стабильность и температуру агрегации белка, результаты представлены в табл. 8.

Таблица 8

Сводные результаты образцов до и после стрессов

Исследуемые образцы	Изменение чистоты, %	Суммарное изменение кислотно-щелочного профиля, %	Изменение pH	Температура агрегации, °C
Термостресс 50°С, 48 ч
ЭВЭЖХ	ИО ВЭЖХ		DLS
5 мМ Acet, pH 5.0	ММВИ^Н\|	14.74	5.23	74
10 мМ Acet, pH 5.0	ИИИИМ	14.68	5.18	74
20 мМ Acet, pH 5.0	-0 11	15.81	5.01
20 мМ Acet, pH 4.0	-0 18	15.07	4.52	74
20 мМ Acet, pH 6.0	-0 15	15.23	5.56

Средний результат :льный / худший результат (оложительный / лучший езультат

Экспериментально подтверждено, что увеличение буферной емкости стабилизирует рН ацетатного буферного раствора, однако не оказывает значимого влияния на термическую стабильность анти-И.17 антитела. Также показано, что исследуемый белок стабилен в диапазоне рН 4.5-5.5.

Для дальнейшей разработки допустим состав плацебо (на 1 мл): Натрия ацетат тригидрат 1.74 мг

Уксусная кислота лед. до pH 5.0 ± 1.0

Выбор осмотического агента.

В настоящем исследовании выбрано четыре типовых осмолитика. При выборе концентрации осмо литиков учтены ограничения при возможном парентеральном введении.

- 46 046015

Г отовили следующие исследуемые составы (на 1 мл).

Обозначение	Состав
20 мМ ACET+TRE	Нетакимаб 10 мг Натрия ацетат тригидрат 1.74 мг Трегалозы д/г 100 мг Уксусная кислота лед. до pH 5.0
20 мМ ACET+SUC	Нетакимаб 10 мг Натрия ацетат тригидрат 1.74 мг Сахароза 100 мг Уксусная кислота лед. до pH 5.0
20 мМ ACET+MAN	Нетакимаб 10 мг Натрия ацетат тригидрат 1.74 мг Маннит 54.5 мг Уксусная кислота лед. до pH 5.0
20 мМ ACET+SORB	Нетакимаб 10 мг Натрия ацетат тригидрат 1.74 мг Сорбитол 54.5 мг Уксусная кислота лед. до pH 5.0
20 мМ ACET+PROL	Нетакимаб 10 мг Натрия ацетат тригидрат 1.74 мг L-пролин 27 мг Уксусная кислота лед. до pH 5.0

Таблица 9

№	Белок, мг/мл	Обозначение состава	Изменение чистоты, %	Суммарное изменение кислотно-щелочного профиля по модулю, %
Термостресс 50°С, 96 ч
эвэжх	ИО ВЭЖХ
1	10	Acet+Tre	-	_________________________22 90____________________ \|
2	10	Acet+Suc	- :
3	10	Acet+Man		26.18
4	10	Acet+Sorb	-0.29	25.52
5	10	Acet+Prol	-0.44	111ИИИ11ИЯИИ1^Д^ОЯ1111Я11ЯИИ11И1

Отрицательный / худший результат

Положительный / лучший результат

Средний результат

По результатам настоящего исследования следующий допустимый иллюстративный состав плацебо (без учета дополнительных вспомогательных веществ):

Натрия ацетат тригидрат Трегалозы дигидрат Уксусная кислота лед.

1.74 мг/мл 100 мг/мл до pH 5.0

Данный состав показал хорошие стабилизирующие свойства в ходе термостресса при 50°C, шейктеста и заморозки среди исследуемых образцов. У него отмечено наименьшее изменение чистоты при помощи Э ВЭЖХ после стрессирования и приемлемые показатели изменения кислотно-щелочного профиля образцов.

Выбор стабилизаторов.

С целью получения стабильной лекарственной формы с максимальной концентрацией анти-ГЫ7 антитела скрининг стабилизаторов проводили для образцов в концентрации белка 60, 100 и 120 мг/мл. Для обеспечения физиологичности раствора с учетом вклада белка и других стабилизаторов в осмоляльность содержание трегалозы дигидрата было снижено до 80 или 50 мг/мл.

В качестве раствора сравнения использовали разработанные в примере 2 составы, содержащие гистидин. Однако максимальная концентрация, в которой удалось получить стабильный раствор с гистидином, была ограничена 70 мг/мл.

Ввиду повышенной агрегации при термострессе высококонцентрированных растворов белков в данном разделе температура термостресса была снижена, что было скомпенсировано увеличением про должительности термостатирования.

- 47 046015

Готовили следующие исследуемые составы (на 1 мл).

Обозначение	Состав
4.5 мМ His + маннит	Нетакимаб L-гистидин Маннит	40, 60, 70 мг 0.4 мг 54.5 мг
4.5 мМ His + маннит	Нетакимаб L-гистидин Маннит Полоксамер 188	40, 60, 70 мг 0.4 мг 54.5 мг 1.0 мг
20 мМ ацетат 80 трегалоза	Нетакимаб Натрия ацетат тригидрат Уксусная кислота лед.	60, 100, 120 мг 1.74 мг до pH 5.0
20 мМ ацетат 80 трегалоза 0.5 Пол оксамер 188	Нетакимаб Натрия ацетат тригидрат Трегалозы д/г Полоксамер 188 Уксусная кислота лед.	60, 100, 120 мг 1.74 мг 80 мг 0.5 мг до pH 5.0
20 мМ ацетат 80 трегалоза 1.0 Пол оксамер 188	Нетакимаб Натрия ацетат тригидрат Трегалозы д/г Полоксамер 188 Уксусная кислота лед.	60, 100, 120 мг 1.74 мг 80 мг 1.0 мг до pH 5.0
20 мМ ацетат 80 трегалоза 0.5 Полисорбат 20	Нетакимаб Натрия ацетат тригидрат Трегалозы д/г Полисорбат 20 Уксусная кислота лед.	60, 100, 120 мг 1.74 мг 80 мг 0.5 мг до pH 5.0
20 мМ ацетат 80 трегалоза НРБ 10	Нетакимаб Натрия ацетат тригидрат	60, 100, 120 мг 1.74 мг

- 48 046015

	Трегалозы д/г циклодекстрин НРВ Уксусная кислота лед.	80 мг 10 мг до pH 5.0
	Нетакимаб	60, 100, 120 мг
20 мМ ацетат 80 трегалоза НРВ20	Натрия ацетат тригидрат Трегалозы д/г НРВ циклодекстрин	1.74 мг 80 мг 20 мг
	Уксусная кислота лед.	до pH 5.0
	Нетакимаб	60, 100, 120 мг
20 мМ ацетат 80 трегалоза 5 мМ метионин	Натрия ацетат тригидрат Трегалозы д/г L-метионин	1.74 мг 80 мг 0.746 мг
	Уксусная кислота лед.	до pH 5.0
	Нетакимаб	60, 100, 120 мг
20 мМ ацетат 80 метионин 10 мМ метионин	Натрия ацетат тригидрат Трегалозы д/г L-метионин	1.74 мг 80 мг 1.492 мг
	Уксусная кислота лед.	до pH 5.0
	Нетакимаб	60, 100, 120 мг
20 мМ ацетат 80 трегалоза 20 мМ метионин	Натрия ацетат тригидрат Трегалозы д/г L-метионин	1.74 мг 80 мг 2.984 мг
	Уксусная кислота лед.	до pH 5.0
	Нетакимаб	60, 100, 120 мг
20 мМ ацетат 50 трегалоза 3 NaCl	Натрия ацетат тригидрат Трегалозы д/г	1.74 мг 50 мг
Натрия хлорид	3 мг
	Уксусная кислота лед.	до pH 5.0
	Нетакимаб	60, 100, 120 мг
20 мМ ацетат 50 трегалоза 100 мМ глицин	Натрия ацетат тригидрат Трегалозы д/г Глицин	1.74 мг 50 мг 7.507 мг
	Уксусная кислота лед.	до pH 5.0
	Нетакимаб	60, 100, 120 мг
	Натрия ацетат тригидрат	1.74 мг
20 мМ ацетат 50 трегалоза	Трегалозы д/г	50 мг
100 мМ глицин +10 мМ мет	Глицин	7.507 мг
	L-метионин	1.492 мг
	Уксусная кислота лед.	до pH 5.0
	Нетакимаб	60, 100, 120 мг
20 мМ ацетат 50 трегалоза 100 мМ лизин	Натрия ацетат тригидрат Трегалозы д/г Лизин моногидрат-L	1.74 мг 50 мг 16.42 мг
	Уксусная кислота лед.	до pH 5.0
	Нетакимаб	60, 100, 120 мг
20 мМ ацетат 50 трегалоза 100 мМ серин	Натрия ацетат тригидрат Трегалозы д/г Серин-L	1.74 мг 50 мг 10.91 мг
	Уксусная кислота лед.	до pH 5.0
20 мМ ацетат 50 трегалоза	Нетакимаб	60, 100, 120 мг
100 мМ гуанидин	Натрия ацетат тригидрат	1.74 мг
гидрохлорид	Трегалозы д/г	50 мг

- 49 046015

	Гуанидин гидрохлорид Уксусная кислота лед.	9.55 мг до pH 5.0
20 мМ ацетат 50 25 мМ лейцин	трегалоза	Нетакимаб Натрия ацетат тригидрат Трегалозы д/г Лейцин-L Уксусная кислота лед.	60, 100, 120 мг 1.74 мг 50 мг 3.28 мг до pH 5.0
20 мМ ацетат 50 трегалоза 5 мМ триптофан	Нетакимаб Натрия ацетат тригидрат Трегалозы д/г Триптофан-L Уксусная кислота лед.	60, 100, 120 мг 1.74 мг 50 мг 1.02 мг до pH 5.0
20 мМ ацетат 50 100 мМ глутамат	трегалоза	Нетакимаб Натрия ацетат тригидрат Трегалозы д/г Глутамат натрия Уксусная кислота лед.	60, 100, 120 мг 1.74 мг 50 мг 16.91 мг до pH 5.0
20 мМ ацетат 50 100 мМ гидрохлорид	трегалоза аргинина	Нетакимаб Натрия ацетат тригидрат Трегалозы д/г L-Аргинин гидрохлорид Уксусная кислота лед.	60, 100, 120 мг 1.74 мг 50 мг 21.07 мг до pH 5.0
20 мМ ацетат 50 трегалоза 50 мМ глутамат 50 мМ аргинин	Нетакимаб Натрия ацетат тригидрат Трегалозы д/г Глутамат натрия L-Аргинин гидрохлорид Уксусная кислота лед.	60, 100, 120 мг 1.74 мг 50 мг 8.46 мг 10.53 мг до pH 5.0

Таблица 10

Сводные результаты Э ВЭЖХ образцов до и после стрессов

№	Белок, мг/мл	Обозначение состава	Изменение содержания мономера, Э ВЭЖХ, %
Термо-стресс, 42°С, 96 ч	Термо-стресс 42°С, 10 дней	Термо-стресс, 37°С, 1 нед.	Термо-стресс, 37°С, 2 нед.
Составы на основе гистидинового буферного раствора (4.5 мМ)
1	40	54.5 мг/мл маннит	-П.68	-1 2ι>	-о 2	-0 зц
2	60	-0 84	-2 mi	-1 И.	-1 1
3	70	-1	о	-1 23	-> (Г
4	40	54.5 мг/мл маннит + 1.0 мг/мл полоксамер	-0.55	-1 22	-и 65	-0 29
5	60	-И 38	-l.u.3	-1.28	-1.54
6	70	-1.72	-3.38	-1.39	-1.98
Составы на основе ацетатного буферного раствора (20 мМ)
7	60	80 мг/мл трегалозы д/г	-II 1 1	-1 50	-о 18	-и 56
8	80 мг/мл трегалозы д/г + 0.5 мг/мл полоксамер			ННИШиИ\|\|
9	80 мг/мл трегалозы д/г + 1 мг/мл полоксамер
10 11	50 мг/мл трегалозы д/г 100 мМ Gly 50 мг/мл трегалозы д/г 10 MMMeth	ИИИ^иИВн	и^ИНп	Βι^ΗΜΗη	и\|миН^н\|
12	50 мг/мл трегалозы д/г 100 мМ глутамат		-2 '8	\|·Μ№\|μΒ	ИИНИмНи
13	50 мг/мл трегалозы д/г 50 мМ глутамат 50 мМ аргинин	-одз	-3 82 -2 9б		-1 зх -1181
14	100	80 мг/мл трегалозы д/г
15	80 мг/мл трегалозы д/г 0.5 мг/мл полоксамер 188		-з 54	И\|ИиН\|\|
16	80 мг/мл трегалозы д/г + 1 мг/мл полоксамер	\|НИВИ\|И\|Ии	-2 чч	^шИ\|Н\|ИН
17	80 мг/мл трегалозы д/г 0.5 мг/мл Polysorbate 20	-1,43	-4.46	-1.94
18	30 мг/мл трегалозы д/г 10 мг/мл НРБ циклодекстрин	-1,11	-3.38	-1.67	-1.84
19	80 мг/мл трегалозы д/г 20 мг/мл НРБ циклодекстрин	-1,37	-3.22	-1.72
20	80 мг/мл трегалозы д/г 5 мМ метионин	Н\|МИ\|НИНВ	л 46	-1.88
21	80 мг/мл трегалозы д/г 10 мМ метионин		ИМИмНН\|	-1.63	мНиНИи

- 50 046015

22		80 мг/мл трегалозы д/г 20 мМ метионин	ВИННН ·³’⁷⁰	-2 пи	-2 '4
23	50 мг/мл трегалозы д/г 3 мг/мл NaCl	-2.9	-6 34
24	50 мг/мл трегалозы д/г 100 мМ глицин	-1 О	-3 45	-2 '11	щищин
25	50 мг/мл трегалозы д/г 100 mH глицин +10 мМ метионин	-1 4'	иияяии	-2 04
26	50 мг/мл трегалозы д/г 100 мМ лизин	-4.58	\|Д\|\|\|ИД\|\|И\|		-4 0
27	50 мг/мл трегалозы д/г 100 мМ Serine	-1 2		-2 2	НИНИ·
29	50 мг/мл трегалозы д/г 100 мМ гуанидина гидрохлорид	-5.84	-8 118	-4'4	-' ς-
29	50 мг/мл трегалозы д/г 25 мМ лейцин	ницмц	-' 8<.	-2	-2 1‘>
30	50 мг/мл трегалозы д/г 5 мМ триптофан	-1 4	-3 38	ННИи	-1 8'1
31	100	50 мг/мл трегалозы д/г 100 мМ глутамат	-1 *»2	Д1И^М\|ИИ\|\|	-2 42	-1
32	50 мг/мл трегалозы д/г 100 мМ аргинина гидрохлорид	ииииии	\|\|\|\|И^М\|\|\|\|\|	-4 26	-5 58
33	50 мг/мл трегалозы д/г 50 мМ глутамат 50 мМ аргинин		-6 94	-2	-3 84
34	120	30 мг/мл трегалозы д/г	-1128	-4.13	-1 8<.	-1 94
35	80 мг/мл трегалозы д/г + 0.5 мг/мл полоксамер	ВНИИ\|И	нинщв	НЩ\|Щи	ининв
36	80 мг/мл трегалозы д/г + 1 мг/мл полоксамер	ИИ\|ЩН	иННЩЦ	ЩИИИ\|	НИНИ·
37	50 мг/мл трегалозы д/г 100 мМ Gly	-2 32	НИМИ\|	-1 1'	-2 29
за	50 мг/мл трегалозы д/г 10 мМ метионин	-2 45	НЩНН\|	ИНВНН	-2 39
39	50 мг/мл трегалозы д/г 100 мМ глутамат	!\|\|ДД1И\|И\|	-о 18	-1 88	-2 69
40	50 мг/мл трегалозы д/г 50 мМ глутамат 50 мМ аргинин	НИИ···		-1 18	-3 73

Методом Э ВЭЖХ подтверждено, что в диапазоне концентраций aHTu-IL17 антитела по изобретению 60-120 мг/мл хорошие стабилизирующие свойства проявляют составы с трегалозой дигидратом и полоксамером 188. Также отмечено стабилизирующее действие L-метионина и глицина на исследуемый белок при термострессе. Состав на основе гистидинового буферного раствора обладает меньшей растворимостью, но достаточной термической стабильностью для дальнейшего использования.

Выбор стабилизаторов.

С целью подтверждения стабильности анти-IL17a антитела по изобретению в рекомендованных составах образцы закладывали на ускоренное хранение при +37°C. На этом этапе составы исследовали по таким показателям качества, как специфическая активность, низкомолекулярные примеси, кислотнощелочной профиль, чистота. Результаты представлены в табл. 11.

- 51 046015

Таблица 11

Образец	Индикатор качества	Норма	Концентрация белка, мг/мл	Входной контроль	2 нед. при 37°С	4 нед. при 37°С	Изменение спустя 4 недели
Состав плацебо:	pH	6.0 ±0.5	40	6.17	-	6.11	-0,05
L-Гистидин 0.4 мг/мл L-Гистидина гидрохлорид моногидрат 0.4 мг/мл Маннит 54.5 мг/мл
60	6.17	-	6.15	-0.02
70	6.18	-	6.14	-0.04
Чистота, Э ВЭЖХ (содержание агрегата верхнее значение, содержание мономера нижнее значение)	Не менее 95%	40	97.02	96.72	95.60	-1.42
60	97.22	95.46	94.28	-2.94
70	97.31	94.95	93.67	-3.64
SDS-PAGE	Не менее 95% в редуцирующих условиях	40	95.66	95.26	94.37	-1.29
60	95.64	95.10	93.71	-1.93
70	95.70	94.58	94.25	-1,45
Не менее 90% в нередуцирующих условиях	40	95.90	94.15	92.32	-3.58
60	95.88	93.67	92.00	-3,88 .
70	95.12	93.68	92.09	-3.03
Кислотнощелочной профиль, ИО ВЭЖХ	-	40	12.64	17.02	22.30	23.54
75.99	70.39	64.22
11.37	12.59	13.48
60	12.90	19.20	23.01	24.18
75.20	69.28	63.11
11.9	11.52	13.88
70	12.88	20.02	23.40	25.18
75.46	66.32	62.87
11.66	13.66	13.73
Активность	80 - 125 % контрольного образца	40	111	-	102	-9
60	109	-	98	-11
70	105	-	96	-9
Состав плацебо:	pH	6.0 ±0.5	40	6.15	-	6.13	-0.02
L-Гистидин 0.4 мг/мл L-Гистидина гидрохлорид моногидрат 0.4 мг/мл Маннит 54.5 мг/мл Полоксамер 188 1 мг/мл
60	6.20	-	6.18	-0.02
70	6.22	-	6.16	-0.06
Чистота, Э ВЭЖХ (содержание агрегата верхнее значение, содержание мономера нижнее значение)	Не менее 95%	40	97.11	96.16	95.44	-1.67
60	97.28	95.12	94.69	-2.59
70	97.52	94.29	93.89	-3.63

- 52 046015

Состав плацебо:

Натрия ацетат тригидрат 1.74 мг/мл

Уксусная кислота до pH 5.0

Трегалозы дигидрат 80 мг/мл

SDS-PAGE	Не менее 95% в редуцирующих условиях	40	95.23	94.76	94.12	-1,11
60	95.39	95.02	93.48	-1.91
70	95.42	94.67	94.12	-1.30
Не менее 90% в нередуцирующих условиях	40	95.64	94.87	92.75	-2.89
60	95.43	93.58	92.49	-2.94
70	95.29	93.45	92.19	-3.10
Кислотнощелочной профиль, ИО ВЭЖХ	-	40	12.32	17.02	21.69	21.98
75.68	70.39	64.69
12.00	12.59	13.62
60	12.09	19.20	23.44	24.42
75.31	69.26	63.10
12.60	11.52	13.46
70	12.40	20.02	24.09	27.18
75.76	66.32	62.17
11.84	13.66	13.74
Активность	80 - 125 % контрольного образца	40	100	-	96	-4
60	102	-	92	-10
70	106	-	94	-12
pH	6.0 ±0.5	60	5.21	-	5.24	0.03
100	5.34	-	5.40	0.06
120	5.34	-	5.41	0.07
Чистота, Э ВЭЖХ (содержание агрегата верхнее значение, содержание мономера нижнее значение)	Не менее 95%	60	95.98	95.41	96.22	0.25
100	95.96	95.16	94.15	-1,81
120	95.48	94.04	93.97	-1.51
SDS-PAGE	Не менее 95% в редуцирующих условиях	60	95.57	95.13	94.60	-0,97
100	95.30	94.99	94.58	-0.72
120	95.44	95.26	94.58	-0.86
Не менее 90% в нередуцирующих условиях	60	95.31	95.06	94.58	-0,73
100	95.42	94.77	94.46	-0.94
120	95.67	94.23	94.21	-1.46
Кислотнощелочной профиль, ИО ВЭЖХ	-	60	13.33	20.34	22.63	26.60
76.17	66.32	62.87
10.50	13.34	14.30

- 53 046015

Состав плацебо:

Натрия ацетат тригидрат 1.74 мг/мл

Уксусная кислота до pH 5.0

Трегалозы д/г мг/мл

Полоксамер 188 1 мг/мл

		100	13.38	20.94	23.10	27.78
76.01	65.23	62.12
10.61	13.83	14.78
120	13.12	21.00	22.11	32.38
75.19	64.91	59.00
11.69	14.09	18.69
Активность	80 - 125 % контрольного образца	60	98	-	95	-3
100	99	-	92	-7
120	104	-	97	-7
pH	6.0 ±0.5	60	5.21	-	5.28	0.07
100	5.33	-	5.41	0.08
120	5.32	-	5.42	0.10
Чистота, Э ВЭЖХ (содержание агрегата верхнее значение, содержание мономера нижнее значение)	Не менее 95%	60	95.98	96.02	96.04	0. 07
100	95.98	94.89	93.83	-2.15
120	95.98	94.71	94.00	-1.97
SDS-PAGE	Не менее 95% в редуцирующих условиях	60	94.98	94.58	94.21	-0,77
100	94.89	94.60	94.37	-0.52
120	95.35	95.10	94.37	-0.98
Не менее 90% в нередуцирующих условиях	60	95,01	93.54	92.91	-2.10
100	94.58	93.15	92.06	-2.52
120	95.55	94.34	93.66	-1.89
Кислотнощелочной профиль, ИО ВЭЖХ	-	60	13.56	20.34	22.99	28.02
76.02	65.03	62.01
10.42	14.63	15.00
100	13.49	19.98	23.67	30.90
76.45	65.24	61.00
10.06	14.78	15.13
120	13.52	22.10	23.78	35.16
75.69	64.19	58.11
10.79	13.71	18.11
Активность	80 - 125 % контрольного образца	60	108	-	101	-7
100	103	-	97	-6
120	ПО	-	99	-11

В результате ускоренного старения образцов в течение 1 месяца при +37°C доказано сохранение гомогенности и специфической активности анти-П.17 антитела по изобретению в следующих иллюстративных допустимых составах хранения:

Анти-1Ы7 антитело

L-гистидин

L-Γистидина гидрохлорид моногидрат Маннит

Пол оксамер 188 pH 6.0 ±0.5

10-70 мг/мл

0.4 мг/мл

54.5 мг/мл

0-1 мг/мл

- 54 046015

Анти-1Ы7 антитело

Натрия ацетат тригидрат Трегалозы д/г Полоксамер 188 Уксусная кислота лед. pH 5.0 ±0.5

- 120 мг/мл 0.44 - 1.74 мг/мл 80- 100 мг/мл 0-1 мг/мл до pH 5.0

При том что изобретение было описано со ссылкой на предпочтительные варианты осуществления, следует понимать, что можно прибегнуть к изменениям и модификациям, как очевидно для специалистов в данной области техники. Подобные изменения и модификации следует рассматривать в рамках и объеме притязаний настоящего изобретения.

Выше были подробно описаны иллюстративные, неограничивающие примеры осуществления настоящего изобретения со ссылкой на сопроводительные чертежи. Данное детальное описание приведено просто для того, чтобы ознакомить специалиста в данной области техники с дополнительными деталями практической реализации предпочтительных аспектов настоящих идей, и не ограничивает объема данного изобретения. Кроме того, каждый из дополнительных признаков и идей, раскрытых выше по тексту и ниже по тексту, могут быть использованы по отдельности или в совокупности с другими признаками или идеями.

Более того, комбинации отличительных признаков и шагов, раскрытых в нижеприведенном детальном описании, также, как и эксперементальные примеры, могут быть необязательными для практической реализации изобретения в самом широком смысле, и приведены только для того, чтобы подробно описать конкретные примеры для настоящего изобретения. Более того, отличительные признаки описанных выше конкретных примеров и независимые и зависимые пункты формулы изобретения, приведенные в данном изобретении, можно комбинировать способами, которые конкретно и непосредственно не указаны, с целью реализации дополнительных целесообразных вариантов осуществления настоящего изобре тения.

Дополнительные примеры исследований.

Были проведены дополнительные примеры исследований с использованием различных фармацевтических композиций, включая анти-IL17a антитело, как описано здесь (например, нетакимаб), для лечения различных заболеваний, опосредованных IL17a. Типовые фармацевтические композиции, используемые для данных исследований, охарактеризованы в табл. 11.1.

Таблица 11.1

К од K'. llllliriCCK'Ol о нее. le.ioBiiniBi	IIOK'SI шипя	Теранов тнч ескне до 1ы. Ml	<1>а ш	Составил 1 м.1 раствора
BCD-085-2	бляшечный псориаз	40, 80, 120	II	моноклональное анти-1Ы7 антитело 40.0 мг, гистидина гидрохлорид моногидрат 0.4 мг, L-гистидин 0.4 мг, маннит 54.5 мг, вода для инъекций до 1.0 мл
BCD-085-2ext	бляшечный псориаз	80, 120
BCD-085-3	анкилозирующий спондилит	40, 80, 120
BCD-085-3ext	анкилозирующий спондилит	80, 120
BCD-085-7, BCD-085-4	бляшечный псориаз	120	III	моноклональное анти-1Ы7 антитело 60.0 мг, натрия ацетат тригидрат 1.74 мг, трегалозы дигидрат 80 мг, полоксамер (Kolliphor) 188 0.5 мг, ледяная уксусная кислота до pH 5.0 вода для инъекций до 1.0 мл
BCD-085-5	анкилозирующий спондилит	120
BCD-085-8	псориатический артрит	120

В некоторых примерах 80 мг вводили 2-мя шприцами (по 1 мл каждый, 40 мг BCD-085), в других примерах 120 мг вводили 3-мя шприцами (по 1 мл каждый, 40 мг BCD-085) или 120 мг вводили 2-мя шприцами (по 1 мл каждый, 60 мг BCD-085).

Было показано, что различные дозы фармацевтических композиций и/или препарата Нетакимаб, охарактеризованные в табл. 11.1, являются подходящими для лечения соответствующих заболеваний, опосредованных IL17a, как описано в табл. 11.1, и при соблюдении схемы приема препарата, подробно описанной далее в данном документе. Фактически различные дозы/схемы приема препарата Нетакимаб и его фармацевтических композиций, как описано здесь, могут быть использованы для лечения участника исследования.

Результаты примеров исследований представлены здесь.

Пример 4. Использование препарата Нетакимаб в различных дозах для лечения бляшечного псориаза (БП), исследование с целью подтверждения правильности концепции (исследование BCD-085-2).

Дизайн клинического исследования.

Исследование BCD-085-2 представляет собой двойное слепое рандомизированное многоцентровое плацебо-контролируемое клиническое исследование II фазы у пациентов с бляшечным псориазом от умеренной до тяжелой степени тяжести. Первичная цель заключалась в том, чтобы найти эффективную и

- 55 046015 безопасную дозу препарата BCD-085 для многократных инъекций у пациентов с бляшечным псориазом от умеренной до тяжелой степени тяжести. Оценка фармакокинетики и иммуногенности были включены во второстепенные цели исследования.

Исследуемая группа представлена взрослыми пациентами (в возрасте от 18 до 65 лет включительно) с бляшечным псориазом от умеренной до тяжелой степени тяжести, диагностированным не менее чем за 6 месяцев до проведения скрининга, с исходным уровнем ППТ (площади поверхности тела), покрытой псориазом >10%, индексом тяжести поражения псориазом 12 или выше, тяжестью заболевания по шкале sPGA 3 или более, которые являются кандидатами на проведение системной или фототерапии или прошли безрезультатно предыдущую биологическую терапию. Пациентам, использовавшим моноклональные антитела ранее, было разрешено участвовать (за исключением использования ингибиторов IL17/IL17R в предыдущий период) после окончания соответствующих периодов вымывания.

120 Пациентов были распределены по группам случайным образом (в соотношении 1:1:1:1) в 4 группы лечения: 1) BCD-085 40 мг; 2) BCD-085 80 мг; 3) BCD-085 120 мг; и 4) плацебо. В исследовании BCD-085-2 использовали препарат BCD-085 в дозе 40 мг/1 мл в предварительно заполненных шприцах. BCD-085/плацебо использовали в 1-ый день на 0, 1, 2, 4, 6, 8 и 10 неделях лечения. С целью заслепления пациенты в группах, принимающих дозы по 40 и 80 мг, получали по 2 или 1 инъекции плацебо подкожно (по 1 мл каждая) соответственно. Пациенты в контрольной группе получали 3 инъекции плацебо подкожно (каждая инъекция объемом 1,0 мл). В целях обеспечения безопасности пациенты наблюдались до 14-й недели.

Гипотеза исследования заключалась в том, что препарат BCD-085 обладает более высокой эффективностью по сравнению с плацебо у пациентов с бляшечным псориазом от умеренной до тяжелой степени тяжести. Граничный критерий эффективности (δ) составил 0,1 (10%), ошибка 1-го рода (α) -5% (0,05), ошибка 2-го рода (β) 20% (0,2) и мощность 80%. Основным критерием оценки в этом исследовании была доля пациентов, которые достигли значения индекса PASI75 к 12-й неделе лечения. Достижение PASI 75 определялось как снижение значения PASI минимум на 75% к 12 неделе лечения по сравнению с исходным уровнем. Второстепенные критерии оценки включают оценку индексов PASI 50 и PASI 90, sPGA 0-1, процентное улучшение показателей PASI, ППТ и состояния ногтевых пластин по индексу NAPSI, снижения выраженности зуда по шкале VAS (мм), оценку качества жизни QoL (опросники SF-36 и DLQI). Критерии эффективности оценивались на 0, 4, 8 и 12 неделях лечения. Критерии безопасности включали частоту возникновения нежелательных явлений (НЯ), серьезных нежелательных явлений (СНЯ), НЯ 3-4 степени в соответствии с критериями СТСАЕ 4.03, частоту раннего прекращения исследования из-за возникновения НЯ. Оцениваемые фармакокинетические критерии включали стандартные фармакокинетические параметры (C_min, AUC(_0-168), AUC(_0-672), T_max, T1/2, Vd, K_el, CL). Анализ иммуногенности включал определение частоты связывания и нейтрализации антител к препарату BCD-085 после многократных инъекций лекарственного средства.

Результаты исследования.

Группы были сопоставимы между собой по демографическим и исходным характеристикам (табл. 12).

- 56 046015

Таблица 12

Исходные ха	рактеристики пациентов (исследование BCD-085-2)
Параметр	BCD-085 40 mi (11=30)	BCD-085 80 mi (11=30)	BCD-085 120 mi (11=28)	Плацебо (11=26)
Возраст (годы), медиана FIQR1	41,50 [32.00-50.00]	35,00 [29.00-45.00]	45,00 [35.00-54.00]	41,50 [32.00-48.00]
Индекс массы тела (кг/м²), медиана [IQR]	25,81 [23.7-28.09]	26.85 [23.62-29.59]	29.72 [24.15-31.94]	24.95 [22.95-30.12]
Мужской пол, кол-во (%)	23 (76.67%)	19 (63.33%)	22 (78.57%)	15 (57.69%)
Продолжительность заболевания (месяцы), медиана [IQR]	178 [76.00-224.00]	137 [73.00-187.00]	137 [46.00-191.00]	112 [69.00-211.00]
Индекс PASI, медиана [IQR]	25,7 [17.4-30.7]	21.9 [17.4-28.2]	23.55 [16.4-30.6]	26.4 [17.8-31.1]
BSA %, медиана [IQR]	31 [18-39]	23.05 [17.5-36]	31.8 [21.9-40]	31 [16-38]
Индекс sPGA, медиана (IQR1	4 [3-4]	4 [3-4]	4 [3-4]	4 [3-4]
Предшествующее применение системных глюкокортикоидов, колво (%)	6 (20%)	4 (14.33%)	4 (14.29%)	3 (11.54%)
Предшествующее применение фототерапии, кол-во (%)	21 (70%)	19 (63%)	19 (67.86%)	20 (76.92%)
Предшествующее биологическое лечение, кол-во (%)	1 (3.33%)	1 (3.33%)	1 (3.57%)	0 (0.00%)
Примечание: IQR - межквартильный диапазон

Популяция для оценки эффективности включала 114 пациентов. Шесть из 120 выбранных случайным образом субъектов не были включены в исследование по оценке эффективности по следующим причинам: Досрочно завершили участие в исследовании до введения первой дозы (1 пациент в группе BCD-085 в дозе по 80 мг и 2 пациента в группе BCD-085 в дозе по 120 мг), нарушили критерии включения/исключения (1 пациент в группе BCD-085 в дозе по 40 мг) и нарушили схему приема препарата (2 пациента в группе плацебо). Анализ показал, что препарат BCD-085 во всех испытанных дозах превосходит плацебо у пациентов с бляшечным псориазом типа от умеренной до тяжелой степени тяжести. Более 90% пациентов в группе с самой высокой дозой (120 мг) реагировали на лечение. Основные результаты эффективности действия представлены в табл. 13, фиг. 5, 6, 7.

Таблица 13

Сравнительная оценка частоты клинических ответов PASI75 к 12 неделе лечения (исследование BCD-085-2)

1 pymia	. Iei<apci венный пренара i	Доля папистов. .loci in iиiix PASI 75. n (<.)	p- значение
1 (n=30)	BCD-085 (40 мг)	24 (80.0%)	pi<0.0001 рг<0.0001
2 (n=30)	BCD-085 (80 мг)	25 (83.33%)
3 (n=28)	BCD-085 (120 мг)	26 (92.86%)
4 (n=26)	Плацебо	6(23.08%)

Примечание: 1 - двусторонний точный вариант критерия Фишера; 2 - тест

Х²с поправкой Йейтса.

Чтобы доказать зафиксированную в протоколе гипотезу о том, что препарат BCD-085 превосходит плацебо, были рассчитаны 95% ДИ для разницы в соотношениях достижения PASI 75 (были проведены индивидуальные парные сравнения для группы плацебо по сравнению с каждой группой BCD-085). Гипотеза принималась, если нижняя граница предполагаемого 95% ДИ для разницы в соотношениях достижения PASI 75 была выше предварительно установленной границы клинически не значимых различий (δ) в 10% (0,10). Результаты представлены в табл. 14.

Таблица 14

Сравнительная оценка частоты ответов PASI75 к 12 неделе лечения (исследование BCD-085-2)

Разница в достижении \.i\ чтения но индексу PASI 75 '	Довершелы1ый и । терка, ι ¹->5⁰ «>	р-значсние ¹
Группы 1 и 5	56.92%	[31.72%; 82.13%]	<0.0001
Группы 2 и 4	60.25%	[35.69%; 84.83%]	<0.0001
Руппы 3 и 4	69.78%	[47.28%; 92.28%]	<0.0001
Примечание: 1	- двусторонний /²тест с поправкой Йейтса.

Данная таблица показывает, что нижние границы 95% ДИ для всех парных сравнений (плацебо по сравнению с препаратом BCD-085) выходят за пределы предварительно заданного граничного критерия

- 57 046015 эффективности. Таким образом, гипотеза о том, что препарат BCD-085 превосходит плацебо при лечении пациентов с бляшечным псориазом от умеренной до тяжелой степени тяжести, была принята, и основная цель клинического исследования была достигнута. Следует отметить, что более высокая эффективность препарата BCD-085 над плацебо была доказана для всех испытанных доз (40, 80 и 120 мг). Динамическая оценка процентного улучшения показателей PASI 75 и PASI по сравнению с исходным показателем продемонстрировала явные результаты с 4 недели лечения (фиг. 6, 7).

Индекс PASI90 был зарегистрирован у 66,7, 60,0, 78,6% пациентов, принимающих препарат BCD-085, соответственно в отличие от 19,2% для группы плацебо к 12 неделе лечения (р<0,0001 для групп 1, 2, 3 по сравнению с группой плацебо). Кроме того, у 83,3, 90,0, 89,3% пациентов, принимающих препарат BCD-085, достигнута чистая или почти чистая кожа (sPGA 0/1) в группах 1, 2, 3 соответственно в отличие от 30,8% для группы плацебо (р<0,0001 для групп 1, 2, 3 по сравнению с группой плацебо) к 12 неделе лечения. Среднее снижение в процентах пораженной ППТ к 12 неделе лечения составило 92,2% в группе 1 (диапазон от 70,2 до 100%), 94,8% в группе 2 (диапазон от 62,9 до 100%), 97,8% в группе 3 (диапазон от 67,7 до 100%) в отличие от 27,1% для группы плацебо (диапазон от 0 до 69,7%), р<0,0001 для групп 1, 2, 3 в отличие от группы плацебо.

BCD-085 также показал значительную эффективность при лечении псориаза ногтей (фиг. 8). Численность популяции для оценки псориаза ногтей составила 66 пациентов (другие пациенты не имели признаков псориаза ногтей в течение периода исследования). Среднее процентное изменение в баллах NAPSI к 12 неделе лечения: 25% в группе 1 (диапазон от 0 до 44,8%), 43,4% в группе 2 (диапазон от 18,6 до 78,6%), 73,1% в группе 3 (диапазон от 50 до 81,7%) по сравнению с 0 для группы плацебо (диапазон от -9,3 до 0%), р=0,0002 для группы 1, 2, 3 соответственно по сравнению с группой плацебо.

Оценка качества жизни (QoL) показала, что показатель DLQI со временем значительно уменьшился, что указывает на улучшение качества жизни (QoL) в группах BCD-085, и не изменился в группе плацебо. Доказано, что препарат BCD-085 оказался эффективнее плацебо, и основная цель исследования была достигнута. Хотя не было никаких различий между тремя дозами препарата BCD-085 для большинства конечных показателей, лучший результат по общему уменьшению признаков/симптомов псориаза было обнаружено в группе с дозой 120 мг препарата BCD-085.

Фармакокинетика.

После однократного введения дозы 40, 80 и 120 мг препарата BCD-085 в сыворотке крови в течение 0,5-4 ч после введения дозы обнаруживался Нетакимаб. Его концентрация со временем изменялась одинаково для всех доз. Изменения концентрации лекарственного препарата Нетакимаб были пропорциональны введенной дозе. Наблюдалась медленная абсорбция с постепенным линейным увеличением концентрации препарата BCD-085 в сыворотке с максимумом, наблюдаемым к концу 1-й недели лечения. Более высокие дозы (80 и 120 мг) характеризовались более высоким значением C_max и AUC(_0-i₆₈) по сравнению с дозой 40 мг (фиг. 9).

Абсорбция за длительный промежуток времени привела к Cmax препарата BCD-085 через 144 [78-168] ч после введения дозы, что близко ко времени введения второй инъекции. Отсутствие конечного периода полувыведения BCD-085 после однократного введения дозы в этом испытании показало, что невозможно рассчитать такие параметры PK, как AUC(_0-M), T1/2 и Kel, поэтому данные для этих конечных показателей не представлены.

При повторных инъекциях препарата BCD-085 в дозах 40, 80 и 120 мг минимальная концентрация в сыворотке крови была довольно высокой (>60% C_max) и была достигнута до введения второй инъекции препарата BCD-085. При повторных введениях препарат BCD-085 накапливался в сыворотке крови, а его концентрация увеличивалась в 1,8-3,6 раза. Введение более высоких доз (80 и 120 мг) демонстрирует более высокий индукционный потенциал по сравнению с дозой 40 мг, поскольку для достижения концентраций около C_max-mult требуется меньше инъекций (фиг. 10).

Безопасность.

Анализ безопасности проводился с учетом всех пациентов, которые получили по крайней мере одну дозу препарата BCD-085 (n=117, табл. 15). По крайней мере, одно НЯ/СНЯ было зарегистрировано у 45,16% пациентов (группа 1), 36,67% пациентов (группа 2), 25,00% пациентов (группа 3) и 39,29% пациентов (группа 4) (р=0,443). Связанные с лечением НЯ были оценены у 19,35% пациентов в группе 1, у 10,00% пациентов в группе 2, у 7,14% пациентов в группе 3 иу 10,71% пациентов в группе 4 (р=0,534). Не сообщалось о наличии НЯ 4-й степени и о СНЯ. Ни один пациент не должен был прекратить исследуемое лечение из-за возникновения НЯ/СНЯ. НЯ 3 степени были зарегистрированы у 3,23% пациентов в группе 1, 3,33% пациентов в группе 2, 3,57% пациентов в группе 3 и 7,14% пациентов в группе 4 (р=0,872, двухсторонний точный критерий Фишера). Наиболее распространенными НЯ были нейтропения, острые инфекции дыхательных путей, повышение артериального давления и повышение уровня печеночных трансаминаз. Большинство НЯ были слабо-выраженными. Только одна очаговая реакция (степень 1) была обнаружена в группе 1 (BCD-085, 40 мг).

- 58 046015

Таблица 15

Обобщенные данные по безопасности (исследование BCD-085-2)

11араме р	BCD-085. 40 mi	BCD-085. 80 mi	BCD-085. 120 mi	Нланебо (п=28)	p-niil'ICIIlIC
	(11=31 >	(11=30)	(11=28(
Какие-либо и сжс лате л ь и ыс явления (НЯ)	14 (45.16%)	1 1 ,!.-%,!	7 (25.00%)	1 1 1_х'о 2'Л,п	0,443
Какие-либо серьезные нежелательные явления (СНЯ)	НЕТ
Нежелательные явления, относящиеся к терапии	6 (19.35%)	3 (10.00%)	2(7.14%)	3 (10.71%)	0.534
нежелательные явления со степенью токсичности 3	1 (3.23%)	1 (3.33%)	1 (3.47%)	2 (7.14%)	0.872
нежелательные явления со степенью токсичности 4	НЕТ
Реакции на участке введения	1 (3.23%)	0	о	о	1.000
Отмена терапии из-за возникновения НЯ или СНЯ	НЕТ
Типичные нежелательные явления
Нейтропения	4 (12.90%)	2 (6.67%)	1 (3.57%)	1 (3.57%)	0.539
Инфекция верхних дыхательных путей	3 (9.68%)	1 (3.33%)	1 (3.57%)	1 (3.57%)	0.721
Повышение гаммаглютамилтрансферазы (ГГТ) в сыворотке	0	3 (10.00%)	1 (3.57%)	2(7.14%)	0.291

Иммуногенность.

Популяция для оценки иммуногенности включала из 117 пациентов (тех, кто получил по крайней мере одну инъекцию исследуемого продукта и предоставил по крайней мере два образца крови для анализа, один из которых был взят перед введением первой дозы в день 1, неделя 0). Образцы крови брали на неделе 0 до введения инъекции и на 14-й неделе лечения. Оценка иммуногенности не выявила наличия каких-либо связывающих антител против препарата BCD-085 ни у одного пациента.

Заключение.

Анализ показал, что препарат BCD-085 во всех испытанных дозах превосходит плацебо. Наибольшая эффективность была показана для дозы 120 мг: 92,86% пациентов достигли PASI75 к 12 неделе лечения (по сравнению с 23,08% в группе, получавшей плацебо, двусторонний 95% ДИ составляет [47,28; 92,28%], р<0,0001, критерий хи-квадрат с коррекцией Йейтса). Токсичность препарата BCD-085 была умеренной: частота НЯ не различалась между группами (включая плацебо), наиболее частыми типами НЯ были отклонения лабораторных показателей от нормы 1 -2 степени и повышение кровяного давления. Не наблюдалось случаев СНЯ, преждевременного прекращения участия в исследовании из-за соображений безопасности, формирования антител к лекарственному препарату.

Пример 5. Длительное применение лекарственного средства Нетакимаб у пациентов с бляшечным псориазом от умеренной до тяжелой степени тяжести (исследование BCD-085-2ext).

План исследования.

Исследование BCD-085-2ext - это многоцентровое открытое расширенное исследование фазы II эффективности и безопасности препарата BCD-085 в дозе 80 и 120 мг у пациентов с бляшечным псориазом от умеренной до тяжелой степени тяжести, которые завершили исследование BCD-085-2 в соответствии с протоколом. Основной задачей было оценить эффективность и безопасность поддерживающей терапии (до 1 года) при использовании препарата BCD-085.

Если суммировать продолжительность последующего наблюдения в основном исследовании BCD-085-2 (14 недель) и его фазу продления BCD-085-2ext (42 недели), общее время наблюдения за одним субъектом в обоих исследованиях составило 56 недель (около 1 года).

Популяция пациентов и план исследования.

В данное исследование были включены 103 пациента, которые завершили исследование BCD-085-2 в соответствии с протоколом. Пациенты, достигшие PASI 50 и менее (не ответившие на лечение) после исследования BCD-085-2, получали препарат BCD-085 подкожно в дозе 120 мг по схеме Q2W (BCD-085 назначается один раз каждые 2 недели), пациенты, которые достигли улучшения PASI 50 и более, получали препарат BCD-085 подкожно в дозе 80 мг по схеме Q2W. После 6 месяцев лечения пациенты, достигшие PASI 100, были переведены с режима BCD-085 Q2W на режим BCD-085 Q4W (препарат BCD-085 назначается один раз каждые четыре недели) в тех же дозах. Пациенты, которые не достигли PASI 100, считались слабыми респондерами (пациенты со слабым клиническим ответом), они продолжали получать ту же дозу препарата BCD-085 по схеме Q2W до конца исследования (фиг. 11).

В течение 12 недель исследования BCD-085-2ext пациенты получали лечение по схеме Q2W в двух группах:

группа 1: BCD-085 в дозе 80 мг;

группа 2: BCD-085 в дозе 120 мг.

Поскольку схема приема препарата Q4W был введена после 6 месяцев лечения (12 недель исследо

- 59 046015 вания BCD-085-2ext), пациенты были распределены на 4 группы: группа 1: BCD-085 в дозе 120 мг (Q2W/Q4W); группа 2: BCD-085 в дозе 80 мг (Q2W/Q4W); группа 3: BCD-085 в дозе 120 мг (Q2W); группа 4: BCD-085 в дозе 80 мг (Q2W).

В исследовании BCD-085-2 использованы базовые характеристики. Основным критерием оценки была доля пациентов, которые достигли PASI 75 к 38-й неделе настоящего исследования (или 52-й неделе, если учитывать участие в основном исследовании BCD-085-2). Второстепенные критерии оценки включают оценку показателей PASI 90, PASI 100 и sPGA 0-1. Основные критерии эффективности оценивались на 12- и 38-й неделе исследования BCD-085-2ext (на 24- и 52-й неделе лечения). Параметры иммуногенности включали частоту связывания и нейтрализации антител к препарату BCD-085 после одного года лечения (неделя 56).

В исследовании приняли участие 86 пациентовиз Российской Федерации и 17 пациентов из Республики Беларусь.

Результаты.

Эффективность.

Основным критерием эффективности данного исследования была доля пациентов, которые достигли PASI 75 к 38-й неделе настоящего исследования (или 52-й неделе, если учитывать участие в основном исследовании BCD-085-2). Достижение PASI 75 было определено как улучшение показателя PASI по меньшей мере на 75% к 38-й неделе лечения по сравнению с исходным значением до начала терапии препаратом BCD-085 (при скрининге для исследования BCD-085-2). Эффективность оценивали в популяции ITT (в анализ эффективности включены все больные, даже выбывшие и не получившие полный курс лечения, общая численность популяции, n=103).

Анализ показал, что доля пациентов, которые достигли PASI 75 после 1 года лечения препаратом BCD-085, составила 98,06% (включая пациентов без клинического ответа на терапию- пациентов, которые не достигли PASI 50 на момент включения в фазу дополнительного лечения).

Данные оценки эффективности после 6 месяцев исследуемого лечения (т.е. 12 недель исследования BCD-085-2ext) получены в двух группах пациентов, которые получали препарат BCD-085 в дозах 80 и 120 мг.

Данные оценки эффективности после 1 года лечения (т.е. после 38 недель исследования BCD-0852ext) получены в 4 группах:

группа 1: BCD-085 в дозе 120 мг (Q2W/Q4W);

группа 2: BCD-085 в дозе 80 мг (Q2W/Q4W),;

группа 3: BCD-085 в дозе 120 мг (Q2W);

группа 4: BCD-085 в дозе 80 мг (Q2W).

В данном исследовании были соотнесены две подгруппы: подгруппа, очень чувствительная к исследуемому лечению (группы 1 и 2, где пациенты получали препарат BCD-085 по схеме Q2W, а затем, после 12 недели, по схеме Q4W, n=45) и подгруппа пациентов, ответная реакция которых на лечение была медленнее, (группы 3 и 4, где пациенты получали препарат BCD-085 по схеме Q2W на протяжении всего исследования; n=58).

Результаты оценки PASI 75 в популяции ITT представлены в табл. 16 и фиг. 12.

Таблица 16

Доля пациентов, достигших PASI 75 после одного года лечения (38-я неделя исследования BCD-085-2ext) (исследование BCD-085-2ext)

1 руина лечения	Доля нацистов, лосин iihix PASI 75 к 38 неделе '(один юл лечения)	Р-шачеппе ¹
помер
Общая численность пациентов, п=103	101	98,06	-
Группа 1, п=6	6	100	1,000
Группа 2, п=39	38	97,44
Группа 3,п=21	20	95,24	0,3621
Группа 4, п=37	37	100
¹ - двусторонний точный вариант критерия Фишера.

¹ Момент времени - 38 недель - в исследовании BCD-085-2ext равен 52 неделям, если его суммировать с продолжительностью предыдущего исследования BCD-085-2 (здесь и далее).

Сравнение в подгруппе пациентов, более чувствительных к терапии (группы 1 и 2), показало отсутствие значительных различий (р=1000, точный двусторонний критерий Фишера) между дозами 80 и 120 мг BCD-085. Тем не менее эффективность была самой высокой с случае приема препарата BCD-085 в дозе 120 мг (группа 1): 100% пациентов достигли PASI75.

Сравнение в подгруппе пациентов, менее чувствительных к терапии (группы 3 и 4), также показало отсутствие существенных различий. Группа 3 показала более низкий уровень ответа на проводимое лечение, потому что она включала наиболее тяжелых пациентов, которые не имели минимального ответа

- 60 046015 (PASI 50) при включении в фазу дополнительного лечения и не достигли PASI 100 после 12 недель дополнительного исследования. Тем не менее 95,24% пациентов в этой группе достигли PASI 75, что подтверждает высокую эффективность терапии даже у респондеров с замедленным ответом на проводимое лечение.

Оценка потери ответа к действию препарата после одного года лечения.

Известно, что биологическая терапия псориаза с использованием ингибиторов TNF-альфа связана с потерей ответа к действию препарата в течение времени. Как было показано, моноклональные антитела к интерлейкину-17 имеют высокий уровень эффективности в течение длительного времени. Для подтверждения этого факта была оценена потеря ответа к действию препарата у пациентов, получавших BCD-085 в течение одного года. Доля пациентов со снижением значения PASI 75/90/100 после 1 года терапии сравнивалась со значением PASI 75/90/100 на 12 неделе исследования BCD-085-2 среди пациентов, получавших препарат BCD-085 в обоих исследованиях (n=77). Эта группа не включала пациентов, получавших плацебо во время исследования BCD-085-2.

Таблица 17

Доля пациентов со снижением ответа PASI 75/90/100 после одного года лечения (исследование BCD-085-2ext)

1 руины	Доля iiamieiiioB с noiepeii oiBeia на 38 неделе (52 nc.ie.ui лечения)
Абсолютная величина
PASI 75
п=77	2	2,60
Группа 2,п=33	1	3,03
Группа 3, п=13	1	7,69
Группа 4, п=31	0	0
PASI 90
п=77	3	3,90
Группа 2,п=33	1	3,03
Группа 3, п=13	0	0
Группа 4, п=31	4	12,90
PASI 100
п=77	7	9,09
Группа 2,п=33	6	18,18
Группа 3, п=13	0	0
Группа 4, п=31	1	3,23
В группе 1 все пациенты получали плацебо в течение основного периода.

Как видно из представленной выше табл. 17, потеря ответа к действию препарата была обнаружена у немногих пациентов. Отсутствие результата в достижении PASI90 наблюдались в основном в группе 4 (у 12,9% пациентов), где субъекты получали препарат BCD-085 80 мг по схеме Q2W. Снижение значения PASI 100 наблюдалось главным образом в группе 2 (18,18%), где пациенты получали 80 мг BCD-085 по схеме Q2W/Q4W.

Снижение значения PASI 75 было зарегистрировано только у 2 пациентов (2,6%) от общей популяции (n=77, без пациентов, получавших плацебо в основном исследовании). Это показывает, что у большинства пациентов сохранялся устойчивый ответ при длительном лечении препаратом BCD-085. Случаи снижения значения PASI 90/100 в группах, получавших BCD-085 в дозе 80 мг, могут свидетельствовать о том, что эта доза была недостаточно эффективной.

Был изучен эффект перехода от более частой схемы приема лекарственного средства (Q2W) к менее частой (Q4W) на поддержание клинического ответа. Данный параметр оценивался с использованием доли пациентов в группах 1 и 2 (n=45), у которых сохранялось значение PASI 100 к концу периода наблюдения (табл. 18).

Таблица 18

Доля пациентов, у которых наблюдалось сохранение/снижение PASI 100 после смены схемы приема (Q2W/Q4W) (BCD-085-2ext Study)

1 pvniia	Доля iiamieiiioB. \ коюрых сохранялось шачеппе PASI 1 (κι	Доля iiamieiiioB со снижением шачения PASI 100	Р- значение¹
Абсолют а я величина		Абсолют а я величина	о/
η = 45 (пациенты групп 1 и 2)	38	84,44	7	15,56	-
Группа 1, п=6	6	100	0	0	0,5686
Группа 2,п=39	32	82,05	7	17,95
¹ - двусторонний точный вариант критерия Фишера

В группе 1 отсутствовали пациенты (пациенты, получавшие BCD-085 в дозе 120 мг по схеме Q2W/Q4W) со снижением ответной реакции PASI 100 к концу дополнительного исследования, и у

- 61 046015

17,95% пациентов наблюдалось снижение ответной реакции PASI 100 в группе 2 (пациенты, получавшие BCD-085 в дозе 80 мг по схеме Q2W/q4). Таким образом, применение препарата BCD-085 в дозе 120 мг по схеме Q4W позволило поддерживать более высокое значение ответной реакции на лечение у большего количества пациентов, чем применение препарата BCD-085 в дозе 80 мг с той же частотой дозирования.

Оценка эффективности препарата BCD-085 после 6 месяцев лечения (12 недель исследования BCD-085-2ext).

В табл. 19 представлены данные об эффективности на 12 неделе исследования BCD-085-2ext (т.е. через 6 месяцев включения в предыдущее исследование BCD-085-2 и начала лечения в рамках исследования) в популяции ITT (n=103). Сравнение проводилось в двух группах в зависимости от дозы BCD-085, полученной в течение первых 12 недель исследования BCD-085-2ext (80 или 120 мг).

Таблица 19

Доля пациентов, достигших значения PASI 75 после 6 месяцев лечения (исследование BCD-085-2ext)

1 руина лечения	Досол ιοί пая величина	0/ 0	Р- шачеппе¹
Доля пациентов, достигших PASI 75 к 12 неделе (после 6 месяцев лечения)
Общая численность пациентов, п=103	92	89,32	-
группа дозы 80 мг, п=76	75	98,68	<0.0001
группа дозы 120 мг, п=27	17	62,96
Доля пациентов, достигших значения PASI 90 к 12 неделе (после 6 месяцев лечения)
Общая численность пациентов, п=103	63	61,17	-
группа дозы 80 мг, п=76	56	73,68	<0.0001
группа дозы 120 мг, п=27	7	25,93
Доля пациентов, достигших значения PASI 100 к 12 неделе (после 6 месяцев лечения)
Общая численность пациентов, п=103	45	43,69
группа дозы 80 мг, п=76	39	51,32	0,0167
группа дозы 120 мг, п=27	6	22,22
¹ - двусторонний точный вариант критерия Фишера.

Тяжесть заболевания по шкале sPGA на уровне 0-1 (чистая или почти чистая кожа) была достигнута на 87,38% после 6 месяцев терапии (табл. 20).

Таблица 20

Доля пациентов, которые достигли показателя sPGA на уровне 0-1 после 6 месяцев лечения (BCD-085-2ext Study)

1 \|П она лечения	номер		Р- Hia4ciHie ¹
Доля пациентов, достигших показателя sPGA 0-1 к 12 неделе (после 6 месяцев лечения)
Общая численность пациентов, п=103	90	87.38	-
группа дозы 80 мг, п=76	73	96.05	<0.0001
группа дозы 120 мг, п=27	17	62,96

Данные показывают, что доля пациентов с PASI75/90/100 и значением sPGA 0-1 через 12 недель в исследовании BCD-085-2ext была значительно ниже при использовании препарата BCD-085 в дозе 120 мг. Эти различия объясняются отсутствием самого низкого значения ответа (PASI 50) у пациентов в группе BCD-085 в дозе 120 мг при включении в исследование BCD-085-2ext, т.е. у них было наиболее тяжелое состояние в начале исследования и реакция на лечение развивалась медленнее.

Оценка эффективности препарата BCD-085 после одного года лечения.

К концу дополнительного исследования PASI 90/100 был достигнут у 92,23/59,22% пациентов в популяции ITT (n=103), соответственно (табл. 21, фиг. 13, 14).

- 62 046015

Таблица 21

Доля пациентов, которые достигли PASI 90 и PASI 100 после одного года лечения (38 недель исследования BCD-085-2ext)

1 р\ пна лечения	номер	%	Р-шачепне¹
Доля пациентов, достигших PASI 90 к 38 неделе (один год лечения)
Общая численность пациентов, п=103	95	92,23	-
Группа 1, п=6	6	100	1,000¹
Группа 2, п=39	38	97,44
Группа 3,п=21	17	80,95	0,241¹
Группа 4, п=37	34	91,89
Доля пациентов, достигших PASI 100 к 38 неделе (один год лечения)
Общая численность пациентов, п=103	61	59,22
Группа 1, п=6	6	100	0,5686¹
Группа 2, п=39	32	82,05
Группа 3,п=21	7	33,33	0,6439²
Группа 4, п=37	16	43,24
¹ - двусторонний точный вариант критерия Фишера;² - тест с поправкой Йейтса/².

Самый высокий уровень ответа на лечение был показан в группе 1, где все субъекты достигли PASI 90/100. Никаких существенных различий между группами (группы 1 и 2, группы 3 и 4) не было обнаружено ни по одному параметру.

После одного года лечения показатель тяжести заболевания sPGA 0-1 были достигнут у 95,15% пациентов, а показатель sPGA 0 (чистая кожа) был достигнут у 59,22% пациентов (табл. 22, фиг. 15, 16).

Таблица 22

Доля пациентов, которые достигли показателя sPGA 0-1 и sPGA 0 (чистая кожа) после 52 недель лечения (38 недель исследования BCD-085-2ext) руина лечения_________| Aoco.iioi пая велipiιиia |________»________| Р-'.наченпе I

Доля пациентов, достигших показателя sPGA на уровне 0-1 к 38 неделе (52 недели лечения)
Общая численность пациентов, п=103	98	95,15	-
Группа 1, п=6	6	100	1,000
Группа 2, п=39	38	97,44
Группа 3,п=21	20	95,24	1,000
Группа 4, п=37	34	91,89
Доля пациентов, достигших показателя sPGA на уровне 0 к 38 неделе (52 недели лечения)
Общая численность пациентов, п=103	61	59,22	-
Группа 1, п=6	6	100,00	0,5719
Группа 2, п=39	31	79,49
Группа 3,п=21	7	33,33	0,4135
Группа 4, п=37	17	45,95
¹ - двусторонний точный вариант критерия Фишера.

Наилучшие результаты для оценки sPGA были отмечены у пациентов, получавших препарат BCD-085 в дозе 120 мг по схеме Q2W/Q4W.

Безопасность.

Анализ безопасности проводился с учетом всех пациентов, которые получили по крайней мере одну дозу препарата BCD-085 (n=103, табл. 23).

Независимо от дозы и схемы приема, препарат BCD-085 показал благоприятный профиль безопасности, который не отличался между группами.

За исследуемый период, по крайней мере, один случай НЯ/СНЯ был зарегистрирован у 36,89% пациентов (38 из 103): 33,33% пациентов в группе 1 (2 из 6), 35,90% пациентов в группе 2 (14 из 39), 38,10% пациентов в группе 3 (8 из 21) и 37,84% пациентов в группе 4 (14 из 37) (р=1,0000, точный критерий Фишера).

- 63 046015

Обобщенные данные по безопасности (исследование BCD-085-2ext)

Таблица 23

	Общая ЧИС. ICHI IOC II. напнсн1ов	Группа
1 (п=6)	2 (11=39 )	3(п=21)	4 (11=3⁷)
II	%		”''о	II		II	%	η	%
Любое НЯ/СНЯ	38	36,89	2	33.33	14	35. 90	8	38.10	14	37.84
Р-значение ¹			1,0000
Нежелательные явления, относящиеся к терапии	6	5.83	0	0	4	10.26	1	4.76	1	2.70
Р-значение ¹			0,6542
Любое СНЯ	1	0.97	0	0	1	2.56	0	0	0	0
Р-значение ¹			1,0000
СНЯ, относящиеся к	Нет
терапии
НЯ, степень тяжести 3/4	5	4,85	1	16. 67	2	5.13	0	0	2	5.41
Р-значение ¹			0,3528
НЯ 3/4 степени тяжести, связанные с терапией	5	4,85	1	16. 67	2	5.13	0	0	2	5.41
Р-значение ¹			1,0000
Очаговые реакции	Нет
Отмена терапии изза возникновения НЯ или СНЯ

Примечание:¹ - двусторонний точный вариант критерия Фишера.

Случаи НЯ/СНЯ, связанные с исследуемой терапией, были зарегистрированы у 5,83% пациентов (6/103): четыре пациента в группе 2 (10,26%), один пациент в группе 3 (4,76%) и один пациент в группе 4 (2,70%) (р=0,6542, двусторонний точный критерий Фишера).

В ходе исследования у одного пациента из группы 2 (2,56%) были зарегистрированы два случая СНЯ, не связанные с исследуемой терапией: левосторонний обструктивный пиелонефрит (почечнокаменная болезнь) и острый панкреатит. В обоих случаях критерием серьезности была госпитализация. НЯ степени 3/4, не связанные с исследуемой терапией, были зарегистрированы у 4,85% пациентов (5/103): один пациент в группе 1, два пациента в группе 2 и 4 и ни один в группе 3.

Наиболее распространенными НЯ были лимфоцитоз, повышение показателей функциональной печеночной пробы, повышение уровня непрямого билирубина и повышение артериального давления (табл. 24).

НЯ были в основном слабовыраженными или умеренными (класс 1/2 согласно шкале СТСАЕ 4.03).

Таблица 24

Наиболее частые НЯ (более 1 случая на руку) (BCD-085-2ext Study)

О 1 К. lOIICIIIIC	Группа 1 (и = 6)	Группа 2 (и = 39)	Группа 3 (п = 21)	Группа 4 (11 =37)	Рзначенпе 1
¹¹	%		%		%	N	%
Нарушения кровяной и лимфатической системы
Лимфоцитоз (2 степень тяжести)	0	0.00	2	5.13	0	0.00	1	2.70	0.8287
Нарушения со стороны печени и желчевыводящих путей
Повышение АЛТ (общее кол-во)	0	0.00	0	0.00	0	0.00	5	13.51	0.0434
Степень 1	0	0.00	0	0.00	0	0.00	4	10.81	0.1018
Степень 2	0	0.00	0	0.00	0	0.00	1	2.70	0.6214
Повышение ACT (степень 1)	0	0.00	0	0.00	2	9.52	1	2.70	0.2127
Повышение ГГТ (общее кол-во)	0	0.00	4	10.26	1	4.76	2	5.41	0.7992
Степень 1	0	0.00	1	2.56	0	0.00	1	2.70	1,0000
Степень 2	0	0.00	2	5.13	1	4.76	1	2.70	1,0000
Степень 3	0	0.00	1	2.56	0	0.00	0	0.00	1,0000
Повышение непрямого билирубина (степень 2)	0	0.00	2	5.13	0	0.00	0	0.00	0.4215
Сердечно-сосудистые нарушения
Повышение кровяного давление (общее кол-во)	0	0.00	0	0.00	2	9.52	3	8.11	0.1613
Степень 2	0	0.00	0	0.00	2	9.52	1	2.70	0.2127
Степень 3	0	0.00	0	0.00	0	0.00	2	5.41	0.2804
Примечание: ¹ - точный вариант критерия Фишера.

- 64 046015

Неблагоприятные явления 3 степени, за исключением 2-х случаев повышения артериального давления (группа 4: 5,41%) были зарегистрированы как единичные события: повышение диастолического АД у 1 пациента из группы 2 (2,56%), повышение ГГТФ у 1 пациента из группы 2 (2,56%); деформирующий остеоартроз правого коленного сустава и двусторонний гонартроз (псориатическая артропатия, болевой синдром) у 1 пациента из группы 1 (16,67%).

Случаев отмены терапии из-за возникновения НЯ или СНЯ не зарегистрировано.

Никаких очаговых реакций, связанных с приемом исследуемого препарата, не было зарегистрировано.

В течение периода исследования не было зафиксировано случаев воспалительного заболевания кишечника или кандидоза при длительном применении препарата BCD-085. Чтобы оценить риск увеличения частоты возникновения НЯ при длительном использовании препарата BCD-085, уровень заболеваемости НЯ с поправкой на экспозицию (EAIR) оценивали в ходе исследования BCD-085-2ext (42 недели) и сравнивали с показателем во время исследования BCD-085- 2 (14 недель). Были учтены данные пациентов, которые получали BCD-085 в дозе 80 и 120 мг (табл. 25).

Таблица 25

Уровень заболеваемости НЯ с поправкой на экспозицию в исследовании BCD-085-2ext по сравнению с исследованием BCD-085-2 (исследование BCD-085-2ext)

.Ιο ia. mi	ко	120	SO	120
1 lapanci 1»	К'о. iipieci и о с. lx чаек но нремя iicc.ie кем 01 о нерно οι. η	Ч ас i о I а г.ернфп ни рова и ны\ с.lyiacit	К'о. iipiccih о с. \|хчаен но нремя iicc.ie \|хем 01 о нерно ia. η	Час· οι а всрнфнпиронан ны\ с.iviaen	К'о. iipiccih о с. \|хчаен но нремя iicc.ie ιχ ем 01 о нерно ia. η	Часниа всрнфин пропан ны\ с. пчасв	К'о. iipiccih о с. пчаен но нремя iiee.ie ixexi 01 о нерно ia. η	Час ιοι a нсрнфнннрован ιιι.ιι с.IIчаев
НЯ СПЯ	11	12-1	-	i.i.S51	28	1.1.4211	111	0.4233
Родственн ое НЯ/СНЯ	3	0.3429	2	0.2449	4	0.0602	1	0.0423
НЯ 3-4 степени тяжести	1	0.1143	1	0.1224	2	0.0301	2	0.0847
НЯ, относяще еся к исследум ой терапии, 3-4 степени тяжести	1	0.1143	0	0.0000	0	0.0000	0	0

Уровень заболеваемости НЯ/СНЯ с поправкой на экспозицию составил 1,2571 и 0,8571 НЯ на 1 пациента в год для препарата BCD-085 в дозе 80 и 120 мг соответственно во время исследования BCD-085-2 и 0,4211 и 0,4233 НЯ на 1 пациента в год для препарата BCD-085 в дозе 80 и 120 мг соответственно во время исследования BCD-085-2ext. Таким образом, встречаемость НЯ/СНЯ не увеличилась в течение периода дополнительного исследования. Полученные результаты позволяют утверждать, что длительное применение препарата БЦД-085 в дозе 80 и 120 мг возможно без риска увеличения частоты возникновения нежелательных явлений.

Иммуногенность.

Анализ иммуногенности проводился на основании данных, полученных от 101 пациента, которые получили по крайней мере одну дозу препарата BCD-085, начиная с 0-й недели настоящего исследования, и не пропустил/потерял/испортил образцы сыворотки, взятые в любой день 42-й недели исследования BCD-085- 2-ext.

Анализ иммуногенности не выявил наличия связывающих антител после 42 недель проведения исследования BCD-085-2ext (т.е. 56 недель с начала проведения исследования BCD-085-2).

Заключение.

Высокая эффективность препарата BCD-085 при длительном применении была установлена на основании следующих данных: у 98,06% пациентов было достигнуто значительное клиническое улучшение протекания псориаза независимо от дозы и схемы применения препарата BCD-085.

Наибольшая эффективность была отмечена у пациентов, которые получали препарат BCD-085 в дозе 120 мг по схеме Q2W/Q4W: к концу исследования BCD-085-2ext 100% этих пациентов достигли PASI 100 и показателя sPGA на уровне 0-1.

В популяции пациентов, получавших препарат BCD-085 в течение 1 года (во время предыдущего исследования BCD-085-2 и текущего исследования BCD-085-2ext), снижение PASI 75 наблюдалось только у 2,6% участников исследования. Случаи снижения значения PASI90/100 чаще наблюдались в группах, участники исследования в которых получали препарат BCD-085 в дозе 80 мг, что показывает о недостаточной эффективности данной дозировки.

- 65 046015

Среди пациентов, которые были переведены с Q2W на Q4W с использованием BCD-085 (схема приема Q2W/Q4W), лучший результат был показан для BCD-085 в дозе 120 мг, и ни у одного из пациентов не наблюдалось снижение ответа PASI 100.

Таким образом, общий анализ продемонстрировал высокую эффективность препарата BCD-085 при длительном применении у пациентов с бляшечным псориазом от умеренной до тяжелой степени тяжести, предыдущее стандартное лечение которых оказалось неэффективным. Было продемонстрировано, что препарат BCD-085 можно использовать реже (один раз в месяц) после 6 месяцев лечения, если применять его в дозе 120 мг.

Пример 6. Применение препарата Нетакимаб согласно стандартной и низкочастотной схемам приема у пациентов с бляшечным псориазом от умеренной до тяжелой степени тяжести (исследование BCD-085-7).

План клинического исследования.

BCD-085-7 - это продолжающееся двойное слепое многоцентровое плацебо- контролируемое исследование III фазы у пациентов с бляшечным псориазом от умеренной до тяжелой степени тяжести. Цель исследования - оценить эффективность и безопасность препарата BCD-085, вводимого один раз каждые четыре недели (схема Q4W), по сравнению с препаратом BCD-085, вводимым один раз каждые 2 недели (схема Q2W).

В исследовании BCD-085-7 используется состав 60 мг/1 мл BCD-085 в предварительно заполненных шприцах. Способ введения - подкожные инъекции 2-мя предварительно заполненными шприцами (2 инъекции подкожно в течение 15 мин). В настоящее время исследование продолжается, имеются результаты первых 12 недель лечения.

Популяция пациентов и дизайн клинического исследования.

Популяция пациентов включает 213 пациентов с бляшечным псориазом от умеренной до тяжелой степени тяжести (PASI> 10, BSA>10 и sPGA>3) в возрасте 18 лет и старше, которые соответствовали другим критериям приемлемости. В исследование не включены пациенты, ранее получавшие лечение моноклональными антителами, связывающиеся с IL17 (или рецептором IL17), и пациенты, ранее принимавшие 2 или более лекарственных средств, содержащих моноклональные антитела или их фрагменты. После скринингового обследования пациенты были случайным образом разделены в соотношении 2:2:1 на 3 группы: 1) группа BCD-085, схема приема Q2W; 2) группа BCD-085, схема приема Q4W; и 3) группа плацебо. Пациенты получали препарат BCD-085/плацебо согласно слепому методу в течение 12 недель. Группа 1 получала препарат BCD-085 в дозе 120 мг в 0, 1, 2 недели, затем в 4, 6, 8, 10 недели. Группа 2 получала препарат BCD-085 в дозе 120 мг на 0, 1, 2 неделях, затем на 6, 10 неделях (с целью заслепления на 4 и 8 неделях пациенты получали плацебо). Пациенты из группы 3 получали плацебо на 0, 1, 2, 4, 6, 8, 10 неделях лечения. На 12-й неделе лечения с помощью PASI 75 был оценен основной критерий, и лечение было выведено из стадии применения слепого метода.

Начиная с 14-й недели все пациенты 1- и 2-й групп будут получать препарат BCD-085 по схеме Q4W до 50-й недели. Все пациенты из группы 3 (плацебо) будут получать препарат BCD-085 на 12, 13, 14 неделях лечения, а затем каждые 4 недели, начиная с 14 недели и до 50 недели. Начиная с 54-й недели только респонденты (достигшие PASI75 и более на 52-й неделе) продолжат лечение в дополнительном исследовании по схеме Q4W, начиная с 54-й недели. Пациенты из групп 1 и 2 будут получать препарат BCD-085 до 154 недели, а пациенты из группы 3 будут получать препарат BCD-085 до 166 недели. Период наблюдения для всех пациентов составляет 4 недели (фиг. 17).

Основным критерием оценки является доля пациентов в каждой группе исследования, которые достигли PASI 75 к 12 неделе исследования. Второстепенные критерии оценки включают оценку индексов PASI 50 и PASI 90, sPGA 0-1, процентное улучшение показателей PASI, ППТ и состояния ногтевых пластин по индексу NAPSI, снижения выраженности зуда по шкале VAS (мм), оценку дерматологического индекса качества жизни QoL (опросник DLQI). Исследование BCD-085-7 включает оценку состояния при псориатическом артрите (ПА) путем оценки ответа ACR20/50/70 согласно критериям американской коллегии ревматологии (среди пациентов с активным ПА в начале исследования). Критерии эффективности оцениваются на 0, 8, 12, 24, 42 и 52 неделях исследования в основной период и на 62, 74, 86, 98, 110, 122, 134, 146 и 154 неделях лечения препаратом BCD- 085 в период открытого дополнительного исследования. Критерии безопасности включают частоту возникновения нежелательных явлений (НЯ), СПЯ, НЯ 3-4 степени в соответствии с критериями СТСАЕ 4.03, показатели раннего прекращения исследования из-за возникновения НЯ. Параметры иммуногенности включают частоту связывания и нейтрализации антител к препарату BCD-085 на 0, 12, 24 и 54 неделях исследования в основной период и на 86, 98, 110, 134, 154 неделях лечения BCD-085 в период открытого дополнительного периода (OLE-период).

Исследование BCD-085-7 было основано на последовательном проведении тестирования гипотез: при любой схеме приема препарат BCD-085 обладает более высокой эффективностью, чем плацебо; критерий эффективности (δ) 0 (0%), ошибка I типа 0,025, ошибка II типа 80%; препарат BCD-085 при схеме приема Q4W имеет не меньшую эффективность по сравнению со схемой приема Q2W; критерий эффективности (δ)-0,2038 (-20,38%), ошибка I типа 0,05 (уровень значимости при двустороннем критерии),

- 66 046015 ошибка II типа 80%.

Проверка гипотезы о превосходстве.

Статистическая гипотеза о том, что препарат BCD-085 превосходит по эффективности плацебо, была последовательно проверена путем сравнения нижней границы 95% доверительного интервала для различия в доле пациентов с PASI 75 к 12 неделе лечения в группе BCD-085 Q2W и группе плацебо, затем в группе BCD-085 Q4W и группе плацебо с предварительно заданным граничным критерием эффективности (8,0%).

Результаты.

Эффективность оценивали в 2 популяциях пациентов: ITT-популяция с использованием метода NRI (n=213) и РР-популяция (группа пациентов, завершивших участие в исследовании в соответствии с протоколом) (n=210). Два пациента прекратили участие в исследовании досрочно, и один пациент выбыл из наблюдения до 12 недели.

Группы не различались между собой по демографическим и исходным характеристикам (табл. 26, 27).

Таблица 26

Демографические и исходные характеристики пациентов (исследование BCD-085-7)

IhipiiMcip	1И 1)-ОХ5 Q2W (п=Х5)	1И 1)-0Х5 Q4W (п=Х4)	11. laneoo (11=44)	P-Miii ченне
Визраы (1иды), медиана [IQR]	42 [35 - 49]	41.5 [32-53]	39 [33-53]	0.9344¹
Масса тела (кг), медиана [IQR]	87.3 [75-96.1]	89.5 [78-98]	83.5 [70-95]	0.3078¹
Рост (см), медиана [IQR]	178 [170-184]	176 [168-182]	175.5 [168-180]	0.6110²
Индекс массы тела (кг/м²), медиана [IQR]	27.9 [24.5-31.5]	28.5 [25.5-32.5]	27.1 [24.2-30.0]	0.3958¹
Женщины (%)	22 (22.58)	26(30.95)	9 (20.45)	0.4319³
Мужчины (%)	63(74.12)	58(69.05)	35 (79.55)
детородный потенциал у женщин (%)	13 (59.09)	18(69.23)	4 (44.44)	0.4114⁴
Продолжительность заболевания (месяцы), медиана [IQR]	120 [36-204]	111 [36- 183]	100 [34- 193]	0.8727¹
BSA, %	20 [13-42]	22 [14.5-43]	22.5 [13-44]	0.9136¹
Индекс PASI	18.4 [14.2-27]	17.9 [15.1-28.6]	19.7 [16.3-29.4]	0.3469¹
Индекс NAPSI	7 [0-29]	14 [2-28]	14 [0-37]	0.5001¹
Индекс sPGA	3 [3-4]	4 [3-4]	4 [3-4]	0.1210¹
Оценка зуда (по шкале VAS)	47 [27-67]	48 [27-71]	45.5 [23 - 70]	0.961¹
Оценки депрессий Бека, баллы	6 [2-9]	6 [2-11]	6.5 [2-10]	0.7388¹
Показатель DLQI	13 [10-20]	13 [9-18]	15 [9-20]	0.7450²
Псориатический артрит в анамнезе, и (%)	6 (7.06)	10(11.9)	2(4.55)	0.3478⁴
Псориатический артрит на момент осмотра, и (%)	6 (7.06)	7 (8.33)	2(4.55)	0.7883⁴

критерий Крускала-Уоллиса,² — дисперсионный анализ,³— тест с поправкой Йейтса Х2,⁴ - точный вариант критерия Фишера.

- 67 046015

Таблица 27

Предшествующее лечение псориаза (исследование BCD-085-7)

Предшсс1 вующая терапия	BCD-085 Q2W (п=85)	BCD-085 Q4W (n=84)	Плацебо (n=44)	Р-чначение
	%	-....:. _n :.. ,	%	: : П ^: .	%
Моноклональные антитела и ингибиторы янус-киназы	5	5.88	6	7.14	1	2.27	0.6389²
• Адалимумаб	3	3.53	2	2.38	1	2.27	1.0000²
• Инфликсимаб	0	0,00	1	1.19	0	0.00	0.6009²
• Устекинумаб	0	0.00	2	2.38	0	0.00	0.1963²
• Гуселькимаб	1	1.18	0	0.00	0	0.00	1.0000²
• Тофацитиниб	1	1.18	1	1.19	0	0.00	1.0000²
ГКС	23	27.06	32	38.10	16	36.36	0.2802¹
• Системнное применение	10	11.76	8	9.52	5	11.36	0.8820²
• Местное применение	15	17.65	22	26.19	12	27.27	0.3149¹
Другие системные методы лечения	22	25.88	29	34.52	21	47.73	0.0447¹
• Метотрексат	17	20.00	24	28.57	19	43.18	0.0212¹
• Циклоспорин А	4	4.71	3	3.57	1	2.27	0.9032²
• Апремиласт	1	1.18	0	0.00	0	0.00	1.0000²
• Ацетрин	1	1.18	3	3.57	0	0.00	0.4366²
Фототерапия	47	55.29	50	59.52	30	68.18	0.3677¹

Note:¹ - Критерий Х2 Пирсона с поправкой Йетса;² - Точный тест Фишера

Результаты исследования эффективности (первые 12 недель).

Разница в доле отвечающих на проводимое лечение пациентов согласно индексу PASI 75 на 12 неделе составила 77,65% (BCD-085 Q2W и плацебо) с 95% ДИ [67,07; 88,23%] (Р<0,0001, точный критерий Фишера) и 83,33% (BCD-085 Q4W и плацебо) с 95% ДИ [73,63; 93,03%] (Р<0,0001, точный критерий Фишера). Результаты свидетельствуют о том, что нижние границы 95% ДИ для групп BCD-085 Q4W и BCD-085 Q2W (73,63 и 67,07% соответственно) превышают граничный критерий эффективности (0%). Таким образом, обе схемы приема препарата BCD-085 у пациентов с бляшечным псориазом от умеренной до тяжелой степени тяжести были эффективнее по сравнению с приемом плацебо.

В соответствии со статистическими методами, использованными для оценки эффективности, была проверена гипотеза исследования о не уступающей эффективности препарата BCD-085 при приеме один раз каждые 4 недели по сравнению с приемом препарата BCD-085 один раз каждые 2 недели, сравнением нижней границы 95% доверительного интервала для выявления различия в соотношении пациентов с индексом PASI 75 на 12 неделе между приемом препарата BCD-085 согласно схеме Q4W и приемом препарата BCD-085 согласно схеме Q2W с предварительно заданным пределом неполноценности (δ), равным -20,38%.

Расхождение в доле пациентов с PASI 75 на 12 неделе между группами, принимающими препарат BCD-085 по схеме Q4W и BCD-085 по схеме Q2W составила 5,68 с 95% ДИ [-7,41; 18,78%] (Р=0,4603, критерий Пирсона с поправкой Йейтса χ2). Нижняя граница 95% ДИ (-7,41%) находится в пределах предварительно установленной границы в -20,38%. Данный факт свидетельствует о том, что эффективность приема препарата BCD-085 через каждые 4 недели не уступала эффективности приема препарата BCD-085 через каждые 2 недели (табл. 28).

Таблица 28

Оценка основного критерия (PASI75 на 12 неделе) с 95% ДИ (ITT-популяция, n=213) (исследование BCD-085-7)

группа	PASI 75 на неделе 12. n=213	P-iiianeiine	. (.оверит, ibiibiii шнервал 95%
X	ⁿ/n
BCD-005 Q2W (85)	66	77.65	0.4603¹	-7.41; 18.78]¹
BCD-085 Q4W (84)	70	83.33
Плацебо(44)	0	0	0.0001² <0.0001³	67.07; 88.23]² 73.63; 93.03]³

Q4W (критерий хи-квадрат с коррекцией Йейтса), ²BCD-085 Q2W против плацебо (точный вариант критерия Фишера), ³BCD-085 Q4W против плацебо (точный вариант критерия Фишера)

Сравнение второстепенных критериев оценки эффективности (доля пациентов, которые достигли индексов PASI 75, PASI 90, PASI 100, sPGA 0-1, относительного изменения, выраженного в баллах PASI, снижения выраженности зуда по шкале VAS, улучшения состояния ногтевых пластин по индексу NAPSI, изменения качества жизни согласно опроснику DLQI, критериев Американской коллегии ревматологии 20/50/70, снижения симптоматики у пациентов с псориатическим артритом) подтвердило результаты, полученные после оценки основного критерия (табл. 29, фиг. 18-23).

- 68 046015

Эффективность препарата BCD-085 в исследовании BCD-085-7 на 8 и 12 неделе лечения (ITT-популяция, n=213)

Таблица 29

Критерий оценки	1 руина	1 le.ie. io 8	Педеля 12
PASI75	BCD-085 Q2W (85)	50	58.82	66	77.65
BCD-085 Q4W (84)	50	59.52	70	83.33
Плацебо (44)	0	0	0	0
р-значение	1.0000¹ <0.0001² <0.0001³	0.4603¹ <0.0001² <0.0001³
PASI90	BCD-085 Q2W (85)	31	36.47	47	55.29
BCD-085 Q4W (84)	33	39.29	47	55.95
Плацебо (44)	0	0	0	0
р-значение	0.8269¹ <0.0001² <0.0001³	1.0000¹О.ООО²<0.0001³
PASI 100	BCD-085 Q2W (85)	16	18.82	25	29.41
BCD-085 Q4W (84)	16	19.05	28	33.33
	Плацебо (44)	0	0	0	0
р-значение	1.0000¹ 0.0012² 0.0012³	0.7013¹ <0.0001² <0.0001³
SPGA 0-1	BCD-085 Q2W (85)	48	56.47	69	81.18
BCD-085 Q4W (84)	51	60.71	67	79.76
Плацебо (44)	1	2.27	1	2.27
	р-значение	0.6864¹ <0.0001² <0.0001³	0.9698¹ <0.0001² <0.0001³

^CD-OSS Q2W против BCD-085 Q4W (критерий хи-квадрат с коррекцией Йейтса), ²BCD-085 Q2W против плацебо (точный вариант критерия Фишера), ³BCD- 085 Q4W против плацебо (точный вариант критерия Фишера)

Результаты исследования безопасности (первые 12 недель).

Применение препарата BCD-085 в течение 12 недель исследования характеризовалось хорошей переносимостью и продемонстрировало благоприятный профиль безопасности (табл. 30). Во время исследования не зафиксировано случаев преждевременного прекращения участия в исследовании из-за соображений безопасности. Очаговая реакция была обнаружена у одного пациента (2,27%) в группе плацебо (покраснение в месте инъекции). Случаев неожиданной токсичности не наблюдалось.

В группе BCD-085 Q4W был зарегистрирован один случай СНЯ (пневмония), имеющий отношение к проводимому лечению, 3-й степени в соответствии с критериями СТСАЕ 4.03. Нейтропения 3 степени наблюдалась у 1 пациента из группы BCD-085 Q2W, а повышенный уровень креатинина наблюдался у 1 пациента в группе плацебо. Другие НЯ были слабовыраженными или умеренными. По частоте регистрации НЯ между группами отсутствовали статистически значимые различия (табл. 31).

Таблица 30

Оценка результатов безопасности лекарственного средства после 12 недель леченття (исследование BCD-085-7)

llapaneip	BCD-085 Q2W (11=85)	BCD-085 Q4W (11=84)	11. laneoo (11=44)	р-шачеппе
\		η	о	11	η
Доля пациентов, у которых развились НЯ	15	17,65	14	16, 67	8	18,18	0,9735¹
Доля пациентов, у которых развились СНЯ	0	0,00	1	1,19	0	0,00	0,60092²
Доля пациентов, у которых развились НЯ 3-4 степени тяжести	1	1,18	1	1,19	1	2,27	1,0000²
Доля пациентов, у которых с реакциями в месте инъекции	0	0,00	0	0,00	1	2,27	0,2066²
Доля пациентов, которые прекратили исследуемое лечение из-за возникновения НЯ / СНЯ.	0	0,00	0	0,00	0	0,00	1,0000²

¹ -X² критерий Пирсона с коррекцией Йейтса,² - точный вариант критерия Фишера.

- 69 046015

Таблица 31

Профиль безопасности после 12 недель лечения (исследование BCD-085-7)

11сже. ia io. ibiioe явленно	BCD-085 Q2W (11=85)	BCD-085 Q4W (11=84)	11.1 а небо (11=44)	ршачение
%			%	λ
Сердечно-сосудистые заболевания
Повышенное артериальное давление (2 ст.)	0	0,00 %	1	1,19%	0	0,00 %	0,60¹
Повышенное систолическое артериальное давление (2 ст.)	1	1,18%	0	0,00 %	0	0,00 %	1,00¹
Повышенное диастолическое артериальное давление (2 ст.)	0	0,00 %	1	1,19%	0	0,00 %	0,60¹
Признаки очаговой ишемии миокарда на ЭКГ (1 ст.)	1	1,18%	0	0,00 %	0	0,00 %	1,00¹
Инфекционные заболевания
Инфекция верхних дыхательных путей (2 ст.)	0	0,00 %	0	0,00 %	1	2,27 %	0,21¹
Инфекция верхних дыхательных путей (2 ст.)	0	0,00 %	0	0,00 %	1	2,27 %	0,2 Г
Фолликулярный тонзиллит (2 ст.)	1	1,18%	0	0,00 %	0	0,00 %	1,00¹
Пневмония (3 ст.)	0	0,00 %	1	1,19%	0	0,00 %	0,60¹
Инфекция мочевыводящих путей (2 ст.)	1	1,18%	0	0,00 %	0	0,00 %	1,00¹
Заболевания кожи и подкожной клетчатки
Эритема (1 ст.)	0	0,00 %	0	0,00 %	1	2,27 %	0,21¹
Экзема (2 ст.)	1	1,18%	0	0,00 %	0	0,00 %	1,00¹
Общие реакции и реакции на инъекцию
Инъекционная реакция: головокружение (1 ст.)	1	1,18%	1	1,19%	0	0,00 %	1,00¹
Боли в области живота (2 ст.)	0	0,00 %	1	1,19%	0	0,00 %	0,60¹
Лабораторные отклонения
Гипергемоглобинемия (2 ст.)	1	1,18%	0	0,00 %	0	0,00 %	1,00¹
Тромбоцитопения (1 ст.)	0	0,00 %	1	1,19%	0	0,00 %	0,60¹
Лейкопения (общее кол-во)	1	1,18%	2	2,38 %	0	0,00 %	0,6 Г
• 1 ст.	0	0,00 %	1	1,19%	0	0,00 %	0,60¹
• 2 ст.	1	1,18 %	1	1,19 %	0	0,00 %	1,00¹
Нейтропения (общее кол-во)	3	3,53 %	1	1,19 %	0	0,00 %	0,54¹
• 2 ст.	2	2,35 %	1	1,19 %	0	0,00 %	0,80¹
• 3 ст.	1	1,18 %	0	0,00 %	0	0,00 %	1,00¹
Лимфоцитоз (2 ст.)	1	1,18 %	0	0,00 %	1	2,27 %	0,68¹
Гипербилирубинемия (2 ст.)	4	4,71 %	2	2,38 %	1	2,27 %	0,70¹
Повышение активности ACT (2 ст.)	1	1,18 %	1	1,19 %	0	0,00 %	1,00¹
Повышение активности АЛТ (2 ст.)	1	1,18 %	0	0,00 %	0	0,00 %	1,00¹
Гиперхолестеролемия (2 ст.)	1	1,18 %	1	1,19 %	0	0,00 %	1,00¹
Гипергликемия (2 ст.)	0	0,00 %	3	3,57 %	0	0,00 %	0,17¹
Повышение сывороточного креатинина (3 ст.)	0	0,00 %	0	0,00 %	1	2,27 %	0,2 Г
Протеинурия (общее кол-во)	1	1,18 %	0	0,00 %	2	4,55 %	0,11¹
• 1 ст.	1	1,18 %	0	0,00 %	1	2,27 %	0,68¹
• 2 ст.	0	0,00 %	0	0,00 %	1	2,27 %	0,2 Г
Τι	завмы
Тепловой ожог (1 ст.) \|0	0,00% \|0 \|0,00 % \|1 \|2,27 % 10,21¹
¹ - точный вариант критерия Фишера.

Результаты исследования иммуногенности (первые 12 недель).

Анализ иммуногенности проводился на основании данных, полученных от 209 пациентов, которые получили по крайней мере одну дозу исследуемого препарата и предоставили по крайней мере два образца крови для проведения анализа, один из которых был взят перед введением первой дозы в день 1, неделя 0 (85 пациентов в группе приема препарата BCD- 085 по схеме Q2W, 81 пациент в группе приема препарата BCD-085 по схеме Q4W и 43 пациента в группе плацебо, n=209). Образцы крови брали на неделе 0 до введения инъекции и на 12-й неделе лечения.

Таблица 32

Оценка иммуногенности через 12 недель лечения (исследование BCD-085-7)

	BCD-085 Q2W	BCD-085 Q4W	11. laneoo	р-значенпе ¹
(11=85)	(п=81)	(n=43)
\	О	η	О	\	п
Доля пациентов с ВАЬ	1	1,18	0	0	0	0	1,000
Доля пациентов с NAb	не определено
¹ - точный вариант критерия Фишера.

Оценка иммуногенности показала наличие связывающих антител у одного пациента из группы при

- 70 046015 ема препарата BCD-085 по схеме Q2W после 12 недель лечения. Нейтрализующая активность не была обнаружена (табл. 32).

Заключение.

83,3 и 77,7% Пациентов из групп BCD-085-Q4W, BCD-085-Q2W достигли PASI75 к 12 неделе лечения (р=0,46 для BCD-085-Q4W по сравнению с BCD-085-Q2W) по сравнению с 0% в группе плацебо (р<0,0001), показатель sPGA (0-1) был достигнут у 79,8, 81,2 и 2,27% пациентов в группах BCD-085-Q4W, BCD-085-Q2W и плацебо соответственно. Неблагоприятные явления (НЯ) были зарегистрированы: у 17,7, 16,7 и 18,2% пациентов в группах BCD-085-Q4W, BCD-085-Q2W, плацебо (р=1,0) соответственно. В группе BCD-085-Q4W был зарегистрирован один случай СНЯ 3-ей степени (пневмония) (согласно критериям СТСАЕ 4.03), связанный с проводимым лечением. Нейтропения 3 степени наблюдалась у 1 пациента из группы BCD-085-Q2W, а повышенный уровень креатинина наблюдался у 1 пациента в группе плацебо. Другие НЯ были слабовыраженными или умеренными (наиболее часто регистрировались отклонения лабораторных показателей от нормы), в группах приема препарата BCD-085 не наблюдалось очаговых реакций. Связывающие антитела к наркотическим препаратам были обнаружены у одного пациента (1,18%, группа BCD-085-Q2W). Нейтрализующих антител не обнаружено.

Пример 7. Эффективность препарата Нетакимаб при стандартных и низкочастотных схемах приема при лечении псориатического артрита (ПА), дополнительное исследование для подтверждения концепции (BCD-085-7).

Дизайн клинического исследования.

В исследовании BCD-085-7, описанном в примере 6, оценивалась эффективность препарата Нетакимаб по сравнению с плацебо в ограниченной популяции пациентов с псориатическим артритом в начале исследования. Конечным показателем для оценки псориатического артрита в течение этого периода была доля пациентов (с пациентами с псориатическим артритом), которые достигли 20, 50, 70% снижения симптоматики согласно критериям Американской коллегии ревматологии (ACR 20/50/70) к 12 неделе лечения. Данный параметр оценивался путем определения количества опухших/болезненных суставов 66/68, функциональной активности (HAQ-DI, оцениваемой пациентом), оценки активности заболевания (оцениваемой врачом и пациентом), оценки боли пациента (VAS), и определение маркеров воспаления (CRP и ESR).

Результаты.

Популяция для оценки псориатического артрита включала 15 пациентов (6 в группе BCD-085 Q2W, 7 в группе BCD-085 Q4W и 2 в группе плацебо). Один пациент (группа BCD-085 Q4W), включенный в эту популяцию (случ. Идентификационный номер 10-131), был отозван на 7-м визите (неделя 10), т.е. до оценки на 8-м визите (неделя 12). Этого пациента отнесли к категории без клинического ответа на проводимое лечение.

Таблица 33

Доля пациентов, достигших 20% снижения симптоматики согласно критериям Американской коллегии ревматологии (ACR 20) (среди пациентов с псориатическим артритом, n=15)

1 р\ ппа лечения	Доля iiaiuieinoB. лосин шп\ 2<)о снижения сими ι ома ι икн coi.iacuo кртерпям Кмерпканскоп ко. i.iei ни ревмаю.101 пи (ACR 20) при посещении 8 (неделя 12). η 15	Р- ’.пачение
Aoco.noi пая величина	о
Группа BCD-085, принимающая препарат по схеме Q2W, п=6	5	83,33	1,0001¹
Группа BCD-085, принимающая препарат по схеме Q4W, п=7	6	85,71
Группа плацебо, п=2	0	0	0,10712² 0,08333³

¹ Сравнение группы BCD-085 Q2W с группой BCD-085 Q4W (точный тест Фишера), ²Сравнение группы BCD-085 Q2W с группой плацебо (точный тест Фишера), ³ Сравнение группы BCD-085 Q4W с группой плацебо (точный тест Фишера)

- 71 046015

Таблица 34

Доля пациентов, достигших 50% снижения симптоматики согласно критериям Американской коллегии ревматологии (ACR 50) (среди пациентов с псориатическим артритом, n= 15)

1 р\ ина лечения	Доля папистов, лосин тих 5о^1,<> снижения сими। ома । ики coi ласно кртерням Кмерпкапскоп ko.i.ici ни ревмаю.101 пн ( \CR 5()) при iioceiiieiiini X (педеля 12). η 15	Р- ’.наченпе
Aoco.iioi пая величина	°.»
Группа BCD-085, принимающая препарат по схеме Q2W, п=6	3	50	0,59211¹
Группа BCD-085, принимающая препарат по схеме Q4W, п=7	2	28,57
Группа плацебо, п=2	0	0	0,46432²1,0003³
¹ Сравнение группы BCD-085 Q2W с группой BCD-085 Q4W (точный тест Фишера), ²Сравнение группы BCD-085 Q2W с группой плацебо (точный тест Фишера), ³ Сравнение группы BCD-085 Q4W с группой плацебо (точный тест Фишера)

Таблица 35

Доля пациентов, достигших 70% снижения симптоматики согласно критериям Американской коллегии ревматологии (ACR 70) (среди пациентов с псориатическим артритом, n=15)

1 руина лечения	Доля папистов. досι ιιι ιιπιχ 70% снижения ci 1миjома11ικιi coi.iacuo кртерням Американской ko.i.ici ни ревмаю.101 ιπι ( ACR 70) при посещении 8 (неделя I2).n 15	Р-шачеппе
Aoco.iioiпая величина	0/ о
Группа BCD-085, принимающая препарат по схеме Q2W, п=6	1	16,67	1,0001¹
Группа BCD-085, принимающая препарат по схеме Q4W, п=7	1	14,29
Группа плацебо, п=2	0	0	1,0002² 1,0003³

Заключение.

Анализ пациентов с псориатическим артритом (n=15) показал, что показатель ACR 20 к 12-й неделе лечения был достигнут у 83,33, 85,71 и 0% пациентов в группе BCD-085 Q2W, группе BCD-085 Q4W и группе плацебо соответственно (табл. 33, фиг. 23). Показатель ACR 50 был достигнут у 50, 28,57 и 0% пациентов в группе BCD-085 Q2W, группе BCD-085 Q4W и группе плацебо соответственно (табл. 34, фиг. 23). Показатель ACR 70 был достигнут у 16,67, 14,29 и 0% пациентов в группе BCD-085 Q2W, группе BCD-085 Q4W и группе плацебо соответственно (табл. 35, фиг. 23). Оценка на 12 неделе лечения не показала существенных различий между группами по любому параметру. Причиной этого может быть небольшая численность пациентов или слишком раннее проведение оценочных мероприятий. Однако ответная реакция по критерию ACR 20 демонстрирует выраженную положительную динамику почти у всех пациентов с псориатическим артритом, получавших препарат BCD-085.

Пример 8. Применение препарата Нетакимаб в разных дозах для лечения анкилозирующего спондилита (АС), исследование с целью подтверждения правильности концепции (BCD-085-3).

План клинического исследования.

BCD-085-3 (NCT02763111) - двойное слепое рандомизированное многоцентровое исследование II фазы у пациентов с анкилозирующим спондилитом в стадии обострения. Основной целью было установить терапевтически эффективную и безопасную дозу препарата BCD-085, которую можно вводить в виде многократных инъекций пациентам с анкилозирующим спондилитом в стадии обострения.

Популяция пациентов и план клинического исследования.

В исследование были включены 88 пациентов с анкилозирующим спондилитом в стадии обострения в возрасте от 18 до 65 лет включительно, которым диагностировали АС (измененные критерии НьюЙорка, 1984), уровня 4 по шкале BASDAI или выше, с неадекватным ответом на НПВП, принимавшимися на протяжении не менее 3 месяцев до проведения скрининга, которые соответствовали другим критериям приемлемости. В исследование не были включены пациенты, ранее получавшие лечение моноклональными антителами, связывающимся с IL17 (или рецептором IL17), и пациенты, ранее получавшие

- 72 046015 лечение 2-мя или более терапевтическими моноклональными антителами. После обследования пациенты были распределены по группам случайным образом в соотношении 1:1:1:1 на 4 группы: 1) BCD-085 в дозе 40 мг; 2) BCD-085 в дозе 80 мг; 3) BCD-085 в дозе 120 мг; и 4) плацебо. BCD-085/плацебо использовали в 1-ый день на 0, 1, 2, 4, 6, 8, 10 и 12 неделях. С целью заслепления пациенты в группах, принимающих дозы по 40 мг и 80 мг получали по 2 или 1 инъекции плацебо подкожно (по 1 мл каждая) соответственно. Пациенты в контрольной группе получали 3 инъекции плацебо подкожно (каждая инъекция объемом 1,0 мл). Плацебо, использованное во всех трех группах, имело сходный состав, который включает вспомогательные вещества из лекарственной формы препарата BCD-085. Пациенты наблюдались до 16 недели.

Гипотеза исследования заключалась в том, что препарат BCD-085 превосходит плацебо по эффективности воздействия у пациентов с анкилозирующим спондилитом в стадии обострения. Граничный критерий эффективности (δ) составил 0,1 (10%), ошибка 1-го рода (α) -5% (0,05), ошибка 2-го рода (β) 20% (0,2) и мощность 80%.

Основным критерием оценки является доля пациентов в каждой группе исследования, которые достигли критерия улучшения ASAS20 75 к 16 неделе исследования. Второстепенные критерии оценки включают оценку критериев улучшения ASAS40 и ASAS5/6, среднее изменение по сравнению с исходным уровнем по шкале BASDAI, BASMI, MASES, BASFI, ASDAS-CRP и расширение грудной клетки, изменение 24-часовой болевой шкалы и средней концентрации С-реактивного белка, а также оценку качества жизни (QoL). Основные критерии эффективности оценивались на 0, 4, 8, 12 и 16 неделях. Критерии безопасности включали частоту возникновения нежелательных явлений (НЯ), серьезных нежелательных явлений (СНЯ), НЯ 3-4 степени в соответствии с критериями СТСАЕ 4.03, частоту раннего прекращения исследования из-за возникновения НЯ. Оцениваемые фармакокинетические критерии включали стандартные фармакокинетические параметры (Cmin, AUC(_0-168), AUC(_0-672), Tmax, Т1/2, Vd, Kel, CL). Анализ иммуногенности включал определение частоты связывания и нейтрализации антител к препарату BCD-085 после многократных инъекций лекарственного средства.

Результаты.

Группы не различались между собой по демографическим и исходным характеристикам (табл. 36).

Таблица 36

Исходные характеристики пациентов (исследование BCD-085-3)

Параметр	1)(1)-085 40 мг Х=22	1)(1)-085 80 мг Х=22	1)(1)-085 120 мг Х=22	Плацебо Х=22
Возраст (годы), медиана [IQR]	40.0 [33.0-44.0]	34.0 [31.0-36.0]	38.0 [35.0-44.0]	41.0 [32.0-47.0]
Мап, п (%)	17 [77.27]	19 [86.36]	22 [100.0]	15 [68.18]
Масса тела (кг), медиана [IQR]	75.5 [61.0-93.0]	79.0 [63.0-86.1]	79.1 [71.5-85.0]	81.3 [75.0-90.0]
Продолжительность AS (месяцы), медиана [IQR]	26.5 [11-75]	37.5 [20-56]	46.5 [13-96]	26.5 [10-48]
Боль в спине, общий показатель (по шкале 0-10), медиана [IQR]	7.5 [6-8]	7 [6-8]	7 [6-8]	7 [6-7]
BASDAI, общий показатель, медиана [IQR]	6.45 [5.4-7.4]	6.7 [5.8-7.1]	6.45 [4.7-7.3]	5.95 [5.1-7]
BASFI, общий показатель, медиана [IQR]	5.9 [4.3-7.2]	5.95 [4.5-6.9]	5.55 [3.9-6.8]	6 [4-6.7]
BASMI, общий показатель, медиана [IQR]	4.65 [3.2-5.2]	4.5 [2.8-5.1]	4.15 [3.5-5.4]	4.55 [3.3-5.1]
Расширение грудной клетки, см, медиана [IQR]	3.5 [3-4]	3.5 [2-4]	3 [3-4]	3 [3-5]
Предшествующее применение anti-TNFa, п(%)	4 [18.18]	2 [9.09]	3 [13.64]	4 [18.18]
Примечание: IQR - межквартильный диапазон

В качестве основного показателя эффективности была установлена доля отвечающих на проводимое лечение пациентов согласно индексу ASAS20 на 16 неделе. Во всех группах принимающих препарат BCD-085 доля отвечающих на проводимое лечение пациентов согласно индексу ASAS20 на 16-й неделе была выше 70%, в то время как в группе плацебо только около 40% пациентов относятся к отвечающим на проводимое лечение.

Анализ показал, что препарат BCD-085 в дозах 80 и 120 мг превосходит по эффективности плацебо у пациентов с анкилозирующим спондилитом в стадии обострения. Результаты достижения критерия ASAS20 показаны ниже. Чтобы доказать зафиксированную в протоколе гипотезу о том, что препарат

- 73 046015

BCD-085 превосходит по эффективности плацебо, были рассчитаны 95% ДИ для разницы в пропорциях достижений критерия ASAS20 (были проведены индивидуальные парные сравнения для группы плацебо по сравнению с каждой группой BCD-085). Гипотеза принималась, если нижняя граница предполагаемого 95% ДИ для разницы в соотношениях достижения ASAS 20 была выше предварительно установленной границы клинически не значимых различий (δ) в 10% (0,10). Результаты представлены в табл. 37.

Таблица 37

Разница в количественных соотношениях показателя ASAS20 (исследование BCD-085-3)

Рашина в дос ι нжепнн AS.AS2O	. 1оверп ι ельнын шперва. ι 95%	р-шаченпе ¹
Группы 1 и 4	29.87%	[1.69%; 58.05%]	0.0472
Группы 2 и 4	38.96%	[12.36%; 65.56%]	0.0082
Группы 3 и 4	48.05%	[23.71%; 72.39%]	0.0008

Примечание: 1 - двусторонний Х2 тест

Табл. 37 указывает на то, что нижние границы 95% ДИ для парных сравнений (плацебо и препарат BCD-085) между группами 2, 4 и группами 3, 4 выходят за пределы предварительно заданного критерия эффективности. Таким образом, гипотеза о том, что препарат BCD-085 превосходит плацебо при лечении пациентов с анкилозирующим спондилитом в стадии обострения, была принята, и основная цель клинического исследования была достигнута. Следует отметить, что более высокая эффективность препарата BCD-085 над плацебо было доказано для испытанных доз 80 и 120 мг.

Показатель ASAS20 на 12 неделе был зарегистрирован у 72,73% пациентов в группе 1, 81,82% в группе 2 и 90,91% в группе 3 против 23,1%, получавших плацебо (р=0,0043 для групп 1, 2, 3 против плацебо, фиг. 24).

Таблица 38

Доля пациентов с ответами ASAS20, ASAS40 и ASAS5/6 во время исследования (исследование BCD-085-3)

1 руина	ASAS2O η (%)	ASAS4O η (%)	ASAS5/6 η (%)	Р-шаченпе 1
Неделя 4
1 (п=22)	16 (72.73%)	9 (40.91%)	10 (45.45%)	/<=0.0039 Р;=0.0246 /<=0.0024
2(п=22)	17 (77.27%)	14(63.64%)	12 (54.55%)
3 (п=22)	18 (81.82%)	11 (50.00%)	13 (59.09%)
4 (п=21)	7 (33.33%)	4 (19.05%)	2 (9.52%)
Неделя 8
1 (п=22)	14 (63.64%)	9 (40.91%)	11 (50.0%)	/<=0.0140 /<=0.0593 /<=0.0007
2 (п=22)	16 (72.73%)	13 (59.09%)	12 (54.55%)
3 (п=22)	17 (77.27%)	10(45.45%)	11 (50.0%)
4 (п=21)	7 (33.33%)	4(19.05%)	1 (4.76%)
Неделя 12
1 (п=22)	16 (72.73%)	12 (54.55%)	12 (54.55%)	/<=0.0214 /<=0.0069 /<=0.0809
2 (п=22)	16 (72.73%)	13 (59.09%)	12 (54.55%)
3 (п=22)	19 (86.36%)	15 (68.18%)	13 (59.09%)
4 (п=21)	9 (42.86%)	4 (19.05%)	5 (23.81%)
Неделя 16
1 (п=22)	16 (72.73%)	9 (40.91%)	11 (50.0%)	/<=0.0043 Рз= 0.0004 /<=0.0027
2 (п=22)	18 (81.82%)	14 (63.64%)	12 (54.55%)
3 (п=22)	20 (90.91%)	16 (72.73%)	15 (68.18%)
4 (п=21)	9 (42.86%)	3 (14.29%)	3 (14.29%)
Примечание: 1 - двусторонний точный вариант критерия Фишера / двусторонний х2 тест; Р2 — оценка ASAS20; РЗ - оценка ASAS40; Р4 - оценка ASAS 5/6 *Группа 1: BCD-085 40 мг; Группа 2 - BCD-085 80 мг ; Группа 3 - BCD-085 120 мг; Группа 4 - плацебо)

Результаты показателей ASAS20, ASAS40, ASAS 5/6 представлены в табл. 38 (фиг. 25).

Процентная доля пациентов, достигших критерия ASAS20, ASAS40, ASAS 5/6, был выше в группах BCD-085, особенно в группе с дозой 120 мг. Другие второстепенные показатели изменялись аналогичным образом: все группы BCD-085 продемонстрировали лучшую ответную реакцию на проводимое лечение по сравнению с группой плацебо. Все второстепенные показатели показали значительное улучшение ко времени проведения второго контроля по сравнению с скринингом. Достигнутая ответная реакция на проводимое лечение сохранялась на протяжении всего периода исследования.

- 74 046015

Фармакокинетика.

После однократного введения препарата BCD-085 в дозе 40, 80 и 120 мг, лекарственное средство обнаруживалось в сыворотке в течение 0,5-4 ч после введения дозы препарата. Его концентрация со временем изменялась одинаково для всех доз (фиг. 26). Изменения концентрации препарата BCD-085 были пропорциональны введенной дозе. Показатели Cmax и AUC(₀.₁₆₈) имели сильные дозозависимые эффекты.

Последующее использование препарата BCD-085 привело к постепенному увеличению его концентрации без явных признаков кумуляции (фиг. 27).

Безопасность.

Анализ безопасности включал всех пациентов, которые получили по крайней мере одну дозу препарата BCD-085 (n=88, табл. 39). По крайней мере, один случай возникновения НЯ/СНЯ был зарегистрирован у 45,45% пациентов (группа 1), 27,27% пациентов (группа 2), 18,18% пациентов (группа 3) и 31,82% пациентов (группа 4) (р=0,298). Связанные с лечением НЯ были оценены у 22,73% пациентов в группе 1, у 18,18% пациентов в группе 2, у 4,55% пациентов в группе 3 и у 22,73% пациентов в группе 4 (р=0,354). НЯ 3-4 степени были зарегистрированы у 4,55% пациентов в группах 1 и 4, у 9,09% в группе 2. Наиболее распространенными НЯ были нейтропения, повышение нижнего артериального давления. Большинство НЯ были слабо-выраженными. О наличии очаговых реакций не сообщалось.

Один пациент выбыл из клинического исследования преждевременно из-за возникновения НЯ, это произошло в группе приема препарата BCD-085 в дозе 80 мг. Серьезных нежелательных явлений, очаговых реакций и летальных исходов не было зарегистрировано.

Таблица 39

Обобщенные данные по безопасности (исследование BCD-085-3)

Переменные	BCD-085 40 mi Х=22	BCD-085 80 mi Х=22	В( 1)-085 120 mi Х=22	Плапебо Х=22	ршаченне ¹
По меньшей мере 1 НЯ	11 (5и.ии)	0 (27.27)	4 (18.18)	7 (31.82)	и.183
По меньшей мере 1 ТНЯ	5 (22.73)	4 (18.18)	1 (4.55)	5 (22.73)	0.354
Тяжелое НЯ	1 (4.55)	2 (9.09)	0	1 (4.55)	0.900
Тяжелое ТНЯ	0	1 (4.55)	0	1 (4.55)	1.00
Выход из исследования изза возникновения НЯ	0	1 (4.55)	0	0	1.00
Перечень тяжелых НЯ
Анемия (степень 3)	0	0	0	1 (4.55)	1.00
Нейтропения (степень 4)	0	1 (4.55)	0	0	1.00
Эрозивный колит (степень 3)	0	1 (4.55)	0	0	1.00
Эписклерит (степень 3)	1 (4.55)	0	0	0	1.00

Иммуногенность.

Популяция для оценки иммуногенности состояла из 85 пациентов (тех, кто получил по крайней мере одну инъекцию исследуемого препарата и предоставил по крайней мере два образца крови для анализа, один из которых был взят перед введением первой дозы в день 1, неделя 0). Забор образцов крови осуществлялся на неделе 0 до введения инъекции, на 8-ой и на 16-ой неделе лечения. Оценка иммуногенности не выявила наличия каких-либо связывающих антител против препарата BCD-085 ни у одного пациента.

Заключение.

Лечение препаратом BCD-085 приводит к значительному улучшению всех симптомов АС по сравнению с введением плацебо. Препарат BCD-085 в дозе 120 мг проявлял наиболее выраженный эффект. Данный препарат хорошо переносился во всех дозах без различий с плацебо в профилях безопасности.

Пример 9. Длительное применение лекарственного средства Нетакимаб у пациентов с анкилозирующим спондилитом (исследование BCD-085-3ext).

Дизайн клинического исследования.

Исследование BCD-085-3ext - это многоцентровое открытое расширенное исследование фазы II эффективности и безопасности препарата BCD-085 в дозе 80 и 120 мг у пациентов с анкилозирующим спондилитом, которые завершили исследование BCD-085-3 в соответствии с протоколом. Основной задачей было оценить эффективность и безопасность поддерживающей терапии (до 1 года) при использовании препарата BCD-085. Исследование завершено, результаты проанализированы.

Если суммировать продолжительность последующего наблюдения в основном исследовании BCD-085-2 (16 недель) и его фазу продления BCD-085-2ext (40 недель), общее время наблюдения за 1 субъектом в обоих исследованиях составило 56 недель, (около 1 года) (фиг. 28).

В данное исследование был включен 81 пациент, которые завершили исследование BCD-085-3 в

- 75 046015 соответствии с протоколом. Пациенты, которые не достигли показателя ASAS20 (не ответившие на лечение) после исследования BCD-085-3, получали препарат BCD-085 в дозе 120 мг по схеме Q2W до 1 года, пациенты, которые достигли показателя ASAS20 после исследования BCD-085-3, получали препарат BCD-085 в дозе 80 мг по схеме Q2W до 1 года.

Во время исследования BCD-085-2ext пациенты получали лечение в двух группах:

группа 1: BCD-085 в дозе 80 мг;

группа 2: BCD-085 в дозе 120 мг.

Основным критерием оценки была доля пациентов в каждой группе исследования, которые достигли критерия ASAS20 на 36 неделе исследования BCD-085-ext. Второстепенные критерии оценки включают оценку критериев ASAS40 и ASAS5/6, среднее изменение по сравнению с исходным уровнем по шкале BASDAI, BASMI, MASES, BASFI, ASDAS-CRP и расширение грудной клетки, изменение 24-часовой болевой шкалы, а также оценку качества жизни (QoL). Основные критерии эффективности оценивались на 12, 24 и 36 неделе исследования BCD-085-2ext (на 28, 40 и 52 неделях лечения). Критерии безопасности включали частоту возникновения нежелательных явлений (НЯ), серьезных нежелательных явлений (СНЯ), НЯ 3-4 степени в соответствии с критериями СТСАЕ 4.03, частоту раннего прекращения исследования из-за возникновения НЯ. Параметры иммуногенности включали частоту связывания и нейтрализации антител к препарату BCD-085 после одного года лечения (неделя 40 исследования BCD-085-3ext).

Результаты.

В целом по результатам оценки эффективности было установлено длительная (более года) терапия препаратом BCD-085 обеспечивает высокую эффективность, сохраняющуюся во времени;

длительное использование препарата BCD-085 не было связано с высокими показателями потери эффективности;

использование исследуемого препарата в дозе 120 мг позволяет добиться ответа на терапию большему количеству пациентов, включая пациентов, у которых применение препарата BCD-085 в течение 16 недель не приводило к появлению клинического ответа.

Оценка ответа по критериям ASAS (ASAS20/40, ASAS5/6) показала, что более 70% пациентов в каждый момент времени открытого дополнительного исследования достигали соответствующего ответа на терапию независимо от используемой дозы. Кроме того, доля пациентов, достигших критерия ASAS20 на 52 неделе открытого дополнительного исследования, составила 79,01% (86,42% по методу использования последнего документированного значения). Доля пациентов, достигших ASAS40 в течение одного года терапии, составила 71,60% (77,78% по методу использования последнего документированного значения).

Оценка других показателей в общей популяции пациентов (n=81) продемонстрировала наличие сходной тенденции для всех параметров: на фоне использования препарата BCD-085 наблюдалось выраженное, статистически значимое улучшение всех симптомов АС, которое сформировалась до первой оценочной точки в течение расширенной фазы (неделя 28) и оставалась неизменной до конца исследования (табл. 40).

Таблица 40

Основные данные анализа эффективности, полученные из исследования BCD-085-3ext (независимо от схемы приема)

11а раме ι р	BCD-08 Исходные характернсι шеи	>-3 Педеля 16	11еде. 1я 28	BCD-085-Зех 11еде. 1я 40	11еде. (я 52	р¹ siia'iemie
Показатель BASDAI	6,3	2,9	2,1	2,2	2,25	<0,0001
Показатель BASMI	4,5	3,6	3,4	3,2	3	<0,0001
Показатель MASES	3	0	0	0	0	<0,0001

- 76 046015

Дыхательная экскурсия	3	4	4	4	4	<0,0001
Показатель BASFI	5,9	3,2	2,2	2,3	1,9	<0,0001
Показатель ASDAS-CRP	3,92	2,25	1,83	1,825	1,845	<0,0001
SF-36 (физический компонент)	31,2	39,5	41,6	н/д	43, 9	<0,0001
SF-36 (психологический компонент)	40,5	49,4	53,4	н/д	54,1	<0,0001
Оценка боли, ЦРШ (NRS)	7	3	2	2	2	<0,0001
Оценка никталгии, ЦРШ (NRS)	7	2	2	2	1	<0,0001
Примечание: тест Фридмана

Таким образом, можно сделать вывод, что лечение препаратом BCD-085 приводит к значительному улучшению большинства симптомов АС, которое формируется в основном в течение первого месяца после начала терапии и сохраняется в течение года лечения.

Оценка потери достигнутого эффекта при увеличении продолжительности терапии.

Анализ динамики ответов критерия ASAS20/40 не выявил тенденции к снижению ответной реакции во время открытого дополнительного исследования. В целом потеря ответной реакции на проводимое лечение была отмечена у 4,76% пациентов.

Данные о долгосрочной эффективности применения препарата BCD-085 в дозах 80 и 120 мг.

Длительное использование препарата BCD-085 в максимальной дозе 120 мг приводит к высокой эффективности у пациентов, у которых не было достаточного эффекта лечения в течение первых 16 недель. В конце периода открытого дополнительного исследования ответные реакции по критериям ASAS20/40, ASAS5/6 были достигнуты у 63,16, 52,66 и 52,66% пациентов соответственно.

Для других второстепенных показателей было показано наличие аналогичной динамики в течение продолжительного периода времени (табл. 41).

Таблица 41

Основные параметры эффективности препарата BCD-085 в дозах 80 и 120 мг в рамках исследований фазы 2 (BCD-085-3 и BCD-085-3ext)

1 (араметр	BCD-O85-3	BCD-085-ЗеМ	Р¹значение
Педеля 16	Неделя 2S	Неделя 40	Неделя 52
Показатель BASDAI	BCD-O85 80 мг	2.45	1.У	2	1.9	<0.0001
BCD-085 120 мг	5.8	3.3	3	3.2	<0.0001
Показатель BASMI	BCD-085 80 мг	3,25	3.1	3	2.8	<0.0001
BCD-085 120 мг	5.2	4	4	4	0.0002
Показатель MASES	BCD-085 80 мг	0	0	0	0	0.0003
BCD-085 120 мг	1	0		0	0.0007
Дыхательная экскурсия	BCD-085 80 мг	4	4.5	4	4	0.1759
BCD-085 120 мг	4	4	4	4	0.3012
Показатель BASFI	BCD-085 80 мг	2.3	1.95	1.8	1.5	<0.0001
BCD-085 120 мг	5.8	4	4	3.2	<0.0001
ASDAS-CRP балл	BCD-085 80 мг	2.135	1.695	1.65	1.61	<0.0001
BCD-085 120 мг	3.77	2.48	2.45	2.5	<0.0001
SF-36 (физический компонент)	BCD-085 80 мг	40.1	42.95	н/д	44.6	0.0018
BCD-085 120 мг	34.2	36.9	н/д	38.3	0.1504
SF-36 (психологический компонент)	BCD-085 80 мг	50.80	53.35	н/д	54.6	0.0477
BCD-085 120 мг	43.5	54	н/д	50.3	0.0032
Оценка боли ЦРШ (NRS)	BCD-085 80 мг	3	2	2	2	<0.0001
BCD-085 120 мг	7	3	3	3	<0.0001
Оценка боли ЦРШ (NRS)	BCD-085 80 мг	2	1.5	1	1	<0.0001
BCD-085 120 мг	5	3	3	3	0.0001

Примечание: ¹ - тест Фридмана; дисперсионный анализ повторяющихся наблюдений

Данные свидетельствуют о том, что у пациентов из группы 1 (80 мг) при включении в исследование BCD-085-3ext наблюдались низкие значения всех основных показателей активности анкилозирующего спондилита (16-я неделя исследования BCD-085-3). Дальнейшее использование препарата у них привело к стабилизации эффекта (средние значения большинства показателей шли на плато).

Пациенты из группы 2 (120 мг) характеризовались изначально более высокими значениями всех ос

- 77 046015 новных показателей при включении в исследование (в 1,5-2 раза выше, чем в группе 80 мг), что связано с недостаточностью ASAS20 в предыдущие 16 недель лечения в основном исследовании. Использование препарата BCD-085 в дозе 120 мг в период открытого дополнительного исследования приводит к выраженному и статистически значимому снижению показателей BASDAI, BASFI, BASMI и оценке болевых ощущений. Таким образом, индекс BASDAI, который отражает активность анкилозирующего спондилита, в этой группе составил «3,2, что соответствует неактивной стадии заболевания. В соответствии с рекомендациями ASAS-EULAR2016 изменения в баллах ASDAS>1,1 и BASDAI баллов >2 считаются клинически значимыми. Данные, представленные в таблице выше, указывают на наличие этих изменений в группе 120 мг BCD-085, что подтверждает значимость эффектов.

Безопасность.

Анализ безопасности проводился с учетом всех пациентов, которые получили по крайней мере одну дозу препарата BCD-085 в рамках исследования BCD-085-3ext (n=81).

В целом, по крайней мере, один случай НЯ был зарегистрирован у 40,74% (33) участников, в то время как связанные с лечением НЯ были представлены у 28,40% (23) пациентов. В течение всего периода исследования не наблюдалось ни одного случая возникновения СНЯ, НЯ 4 степени тяжести или смерти (табл. 42).

Во время исследования BCD-085-3ext было зарегистрировано два случая досрочного выбывания из исследования из-за возникновения НЯ (микробная экзема, положительный анализ крови на туберкулез).

Таблица 42

Основные данные анализа безопасности лекарственного средства, полученные в ходе исследования BCD-085-3ext

Описание οι κ.ιοιιοιιιιιί	Доля iiamieiiiOB (η 81)
Любое НЯ	33 (40.74%)
Любое СНЯ	0 (0.00%)
НЯ, связанные с проводимым лечением	23 (28.40%)
НЯ 3 степени тяжести	4 (4.94%)
НЯ 3 степени тяжести, связанные с проводимым лечением	2 (2.47%)
Очаговые реакции	1 (1.23%)
Выход из исследования из-за возникновения НЯ	2 (2.47%)

Большинство НЯ были представлены единичными случаями на протяжении всего исследования. Зарегистрированные НЯ относились главным образом к инфекционным заболеваниям, нарушениям со стороны крови и лимфатической системы, а также к нарушениям функционирования печени и желчевыводящих путей. Реже встречались сердечно-сосудистые расстройства.

Зарегистрированные НЯ, в том числе связанные с проводимым лечением, в основном были слабовыраженными и умеренными (1-2 степени в соответствии с критериями СТСАЕ 4.03), что позволяет сделать вывод о том, что препарат BCD-085 показал благоприятный профиль безопасности. Было четыре пациента с НЯ высокой степени тяжести, такими как нейтропения, повышенный уровень GGT, острая инфекцией верхних дыхательных путей и повышенное кровяное давление. Два случая повышения артериального давления (3 степени), зарегистрированные у одного пациента, потребовали проведение медикаментозной терапии и были устранены без последствий.

Вероятность возникновения НЯ рассматривалась на основе известных профилей безопасности других ингибиторов IL-17 и данных предыдущих клинических исследований BCD-085 (BCD-=85-1, BCD-085-2, BCD-085-2ext и BCD-085-3. В исследовании BCD-085-3ext было зарегистрировано единственное неожиданное НЯ - парестезия лица. Тем не менее расстройства нервной системы, сопровождаемые нарушением чувствительности (паралич лицевого нерва, радикулит) были описаны ранее для препаратов Секукинумаб и Иксекизумаб, что может указывать на некоторую вероятность возникновения такого НЯ у пациентов, получавших лечение IL-17-ингибиторами.

Была зарегистрирована серия случаев возникновения НЯ, которая представляет собой интерес как часть оценки безопасности терапевтических моноклональных антител в целом и ингибиторов интерлейкина-17 в частности.

Два случая положительного анализа крови на туберкулез были зарегистрированы при наличии нормальной рентгенограммы грудной клетки и без каких-либо других признаков активного туберкулеза.

Был выявлен один случай развития микоза 2-й стадии (кандидоз пищевода) (1,23%). Данное НЯ было вылечено без последствий в рамках проведения стандартной терапии.

Согласно представленному протоколу, не было зарегистрировано проявления такого НЯ как анкилозирующий спондилит. В связи с этим необходимо отметить случай возникновения иридоциклита, интерпретируемого исследователями как проявление анкилозирующего спондилита и не зарегистрированный в качестве НЯ. Иридоциклит был вылечен без последствий в рамках проведения стандартной терапии.

Учитывая путь введения препарата BCD-085 (подкожные инъекции), ожидалось развитие очаговых реакций. Доля пациентов с очаговыми реакциями составила 1,23% (2 очаговых реакции были зарегист

- 78 046015 рированы у одного пациента, представленные гиперемией, отеком, зудом, болью и образованием очагового инфильтрата), что указывает на низкую частоту возникновения этого неблагоприятного явления.

В течение всего периода исследования не наблюдалось случаев образования антител к наркотическим веществам.

Таким образом, использование препарата BCD-085 в течение всего года у пациентов с АС демонстрирует благоприятный профиль безопасности и хорошую переносимость. Данный препарат характеризуется низкой вероятностью возникновения очаговых реакций, СНЯ, частота возникновения НЯ не увеличивалась за время проведения терапии. Сравнение с имеющимися данными о безопасности других моноклональных антител против интерлейкина-17 (секукинумаб, икекизумаб) указывает на сопоставимость их профилей безопасности.

Заключение.

Было показано, что длительное использование препарата BCD-085 в дозе 120 мг позволило достичь ответа на проводимое лечение даже у пациентов с запоздалой ответной реакцией (у которых не был достигнут показатель ASAS20 на 16 неделе), например, после 1 года лечения показатели ASAS20/40 и ASAS5/6 были получены у 63,16, 52,66 и 52,66% пациентов соответственно. Анализ безопасности показал, что длительное применение BCD-085 хорошо переносилось пациентами, анализ иммуногенности не выявил каких-либо случаев формирования антител к лекарственному препарату.

Пример 10. Эффективность препарата Нетакимаба при лечении пациентов с анкилозирующим спондилитом (исследование BCD-085-5).

Дизайн клинического исследования.

BCD-085-5 - это продолжающееся двойное слепоемногоцентровое плацебо-контролируемое исследование III фазы у пациентов с анкилозирующим спондилитом в стадии обострения. Основной целью исследования является оценка эффективности и безопасности препарата BCD-085 по сравнению с плацебо при лечении пациентов с анкилозирующим спондилитом в стадии обострения.

В исследовании BCD-085-5 используется 60 мг/1 мл препарата BCD-085 в предварительно заполненных шприцах. Способ введения - подкожные инъекции 2-мя предварительно заполненными шприцами (2 инъекции подкожно в течение 15 мин) на 0, 1, 2 неделях и затем каждую вторую неделю в течение 3 лет лечения.

В исследование были включены 228 пациентов с анкилозирующим спондилитом в стадии обострения, в возрасте от 18 до 65 лет включительно, которые соответствовали критериям приемлемости. Пациентам должен быть поставлен диагноз анкилозирующий спондилит в соответствии с измененными Нью-Йоркскими критериями (1984), как минимум за 3 месяца до подписания ФИС (форма информированного согласия). В исследование не были включены пациенты, ранее получавшие лечение моноклональными антителами, связывающимся с IL17 (или рецептором IL17), и пациенты, ранее получавшие лечение 2-мя или более препаратами с антителами против TNF-альфа. После обследования пациенты были распределены по группам случайным образом в соотношении 1:1 на 2 группы: 1) BCD-085 в дозе 120 мг; и 2) плацебо. Пациенты получали препарат BCD-085/плацебо согласно слепому методу в 1-ый день на 0, 1, 2, 4, 6, 8, 10, 12 и 14 неделях. Начиная с 16-й недели лечения исследование является открытым, пациенты из обеих групп начинают получать препарат BCD-085 в дозе 120 мг по схеме Q2W (за исключением респондеров из группы плацебо: пациенты, достигшие критерия ASAS20 на 14-й неделе в этой группе, исключаются из исследования). По завершении процедур контрольного приема на 154-й неделе (170-я неделя для пациентов, первоначально рандомизированных в группу плацебо) пациенты проходят последующее 4-недельное наблюдение для оценки безопасности.

Результаты.

Представлены данные за первые 16 недель.

Характеристики пациентов на исходном уровне были сходными в группах лечения. Средний возраст в начале исследования составил 39,14±9,99 года, 75,88% пациентов были мужчинами, а средняя продолжительность симптомов составила 4,3±4,48 года. Все пациенты имели АС в стадии обострения (среднее значение показателя BASDAI: 6,21±1,55), 76,8% пациентов не получали никакого биологического лечения. На 16 неделе ответ по критерию ASAS40 был выше в группе принимающих препарат BCD-085 по сравнению с группой принимающих плацебо: 40,35 и 2,63% пациентов соответственно (95% ДИ для разницы в частоте ответов по критериям ASAS40 составил [27,37; 48,07%] (р<0,0001, фиг. 29). Более высокая эффективность препарата BCD-085 была также подтверждена сравнением всех других второстепенных показателей эффективности (фиг. 30); улучшение значений показателей BASDAI, MASES и BASFI стало значительным с 4 недели и значения оставались низкими на протяжении данного исследования.

На момент включения в исследование обе группы были сопоставимы по шкале Berlin spine score (4,18±4,58 в группе BCD-085 против 4,19±4,32 в группе плацебо) и по шкале SPARCC (5,67±8,33 в группе BCD-085 против 5,23±7,86 в группе плацебо) (р>0,05). Анализ данных к 16-й неделе лечения показал, что в группе BCD-085 наблюдалось значительное снижение отека костного мозга при непосредственном

-

Claims

сравнении с группой, получавшей плацебо: к 16-й неделе среднее изменение по сравнению с исходным уровнем по шкале Berlin spine score составляло -2,16±2,87 в группе BCD-085 по сравнению с -0,30±1,55 в группе плацебо (р<0,0001), а среднее изменение по сравнению с исходным уровнем по шкале SPARCC было -3,80±6,68 в группе BCD-085 по сравнению с -1,82±4,12 в группе плацебо (р<0,01, фиг. 31).

На 1-й неделе разница в общей оценке боли в спине между исследуемыми группами стала статистически значимой (фиг. 32). На 16 неделе использование препарата BCD-085 сопровождается статистически значимым улучшением по сравнению с исходным уровнем показателя BASDAI (-2,8 против 0,2, р<0,0001), BASFI (-0,9 против 0,9, р<0,0001) и физическом компоненте SF36 (6,3 против - 2,6, р<0,0001) (фиг. 33). На 16 неделе ответная реакция, оцениваемая по шкале WPAI (Нарушение трудоспособности и повседневной деятельности) в группе BCD-085 значительно отличалась в лучшую сторону по сравнению с группой плацебо (табл. 43).

Таблица 43

Изменение показателя WPAT на 16 неделе (медианты: верхний и нижний квартили)

1lapa.xie । р В('1)-О85 (п=114) Плацебо (ιι=Ι 14)

Исходные характерно икп 1 вменении οι посте. ιι>ιιο исходных характерце шк к педеле 16 Исходные характерно икн 11{менен1В1 т посте, ικιιο исходных характерно ик к педеле 16 % пропущенное рабочее время по состоянию здоровья 0 [0; 18.4] 0[-11,1;0] 0 [0; 15.8] 0 [0; 29.9] % нарушение трудоспособности по состоянию здоровья 50 [30; 70] -80 [-40; 0] 50 [40; 70] 10 [-10; 20] % общее нарушение трудоспособности по состоянию здоровья 55.1 [40; 84] -15.6 [-40; 0] 60 [50; 75] 1.2 [-10.3; 20] % нарушение повседневной деятельности по состоянию здоровья 60 [40; 80] -20 [-40; -10] 60 [50; 70] 0 [-10; 20]

Безопасность лекарственного средства.

Большинство зарегистрированных нежелательных явлений (НЯ) и связанных с лечением нежелательных явлений (СЛНЯ) были слабовыраженными/умеренными (табл. 44). Наиболее часто встречающимися НЯ были анемия, нейтропения и повышение уровня АЛТ. Одно серьезное неблагоприятное явление (СНЯ), не связанное с проводимым лечением (перелом кости, который требовал хирургического вмешательства), было зарегистрировано в группе NTK.

Таблица 44

Обобщенные данные по безопасности лекарственного средства

Доля папистов с Группа ; ршачепне

BCD-O85 (η 114) 1 l.iaiieoo (η 114)

Любое НЯ/СНЯ 33.33% (38) 25.44% (29) 0,245

СЛНЯ 17.54% (20) 14.04% (16) 0,586

Любое СНЯ 0.88% (1) 0 1,00

НЯ 3-4 степени тяжести 2.63% (3) 3.51% (4) 1,00

СЛНЯ 3-4 степени тяжести 1.75% (2) 1.75% (2) 1,00

Очаговые реакции 1.75% (2) 0.88% (1) 1,00

Препарат Нетакимаб вплоть до дозы 120 мг (например, дозы, предлагаемые в настоящем документе) представляет собой хорошо переносимое лекарственное средство с благоприятным профилем безопасности, которое приводит к снижению обострения АС вплоть до улучшения функционального состояния, подвижности аксиального скелета, снижению МРТ-признаков воспаления и улучшению качества жизни.

ФОРМУЛА ИЗОБРЕТЕНИЯ

1. Водная фармацевтическая композиция, подходящая для парентерального введения субъекту для ингибирования активности белка TL17a, содержащая нетакимаб в количестве от 5 до 150 мг/мл;

буферный агент на основе гистидина; и маннит в количестве 25-60 мг/мл в качестве осмотического агента, где указанный буферный агент состоит из

L-гистидина в количестве от 0,4 до 1,6 мг/мл; и гистидина гидрохлорид моногидрата в количестве от 0,4 до 1,6 мг/мл.

- 80 046015
2. Водная фармацевтическая композиция по любому из пп.1, где указанный нетакимаб находится в количестве от 10 до 100 мг/мл.
3. Водная фармацевтическая композиция по п.1, где указанный нетакимаб находится в количестве 40 мг/мл.
4. Водная фармацевтическая композиция по п.1, где указанный нетакимаб находится в количестве 60 мг/мл.
5. Водная фармацевтическая композиция по п.1, где указанный нетакимаб находится в количестве 70 мг/мл.
6. Водная фармацевтическая композиция по п.1, где указанный маннит находится в количестве 50-60 мг/мл.
7. Водная фармацевтическая композиция по любому из пп.1-6, где подходящее количество буферного агента на основе гистидина добавляют для доведения рН до примерно от 5,5 до 6,5.
8. Водная фармацевтическая композиция по любому из пп.1-7, дополнительно содержащая подходящий солюбилизатор.
9. Водная фармацевтическая композиция по п.8, где указанный солюбилизатор представляет собой полоксамер 188.
10. Водная фармацевтическая композиция по п.9, где указанный полоксамер 188 находится в количестве, которое больше 0 мг/мл, но равно или меньше 1 мг/мл.
11. Водная фармацевтическая композиция по п.10, где

а) указанный полоксамер 188 находится в количестве 0,5 мг/мл; или

б) указанный полоксамер 188 находится в количестве 1 мг/мл.
12. Водная фармацевтическая композиция, подходящая для парентерального введения субъекту для ингибирования активности белка IL17a, содержащая нетакимаб в количестве 40 мг/мл;

L-гистидин в количестве 0,4 мг/мл;

L-гистидина гидрохлорид моногидрат в количестве 0,4 мг/мл;

маннитол в количестве 54,5 мг/мл;

полоксамер 188 в количестве 1 мг/мл;

рН 6.0±0.5.
13. Водная фармацевтическая композиция, подходящая для парентерального введения субъекту для ингибирования активности белка IL17a, содержащая нетакимаб в количестве от 5 до 150 мг/мл;

буферный агент на основе ацетата; и дигидрата трегалозы в количестве от 50 до 120 мг/мл в качестве осмотического агента, где буферной агент на основе ацетата состоит из натрия ацетат тригидрата в количестве от 0,4 до 1,8 мг/мл; и подходящего количества уксусной кислоты для доведения рН указанной композиции до 4,0-6,0 включительно.
14. Водная композиция по п.13, где указанный нетакимаб находится в количестве от 10 до 120 мг/мл.
15. Водная фармацевтическая композиция по п.13, где указанный нетакимаб находится в количестве 60 мг/мл.
16. Водная фармацевтическая композиция по любому из п.13, где указанный нетакимаб находится в количестве 100 мг/мл.
17. Водная фармацевтическая композиция по п.13, где указанный нетакимаб находится в количестве 120 мг/мл.
18. Водная фармацевтическая композиция по п.13, где указанную трегалозу добавляют в указанную композицию в виде дигидрата трегалозы в количестве 50 или 80 мг/мл.
19. Водная фармацевтическая композиция по любому из пп.13-18, дополнительно содержащая подходящий солюбилизатор.
20. Водная фармацевтическая композиция по п.19, где указанный солюбилизатор представляет собой полоксамер 188.
21. Водная фармацевтическая композиция по п.20, где указанный полоксамер 188 находится в количестве от более 0 мг/мл до равно или менее 1 мг/мл.
22. Водная фармацевтическая композиция, подходящая для парентерального введения субъекту для ингибирования активности белка IL17a, содержащая нетакимаб в количестве 60 мг/мл;

тригидрат ацетата натрия в количестве 1,74 мг/мл;

дигидрат трегалозы в количестве 80 мг/мл;

ледяная уксусная кислота - до рН 5,0;

рН 5.0±0.5.
23. Водная фармацевтическая композиция, подходящая для парентерального введения субъекту для

- 81 046015 ингибирования активности белка IL17a, содержащая нетакимаб в количестве 60 мг/мл;

тригидрат ацетата натрия в количестве 1,74 мг/мл;

дигидрат трегалозы в количестве 80 мг/мл;

полоксамер 188 в количестве 0-1 мг/мл;

ледяная уксусная кислота - до рН 5,0;

рН 5.0±0.5.
24. Водная фармацевтическая композиция по п.23, где

а) указанный полоксамер 188 находится в количестве 0,5 мг/мл; или

б) указанный полоксамер 188 находится в количестве 1 мг/мл.
25. Водная фармацевтическая композиция, подходящая для парентерального введения субъекту для ингибирования активности белка IL17a, содержащая нетакимаб в количестве 120 мг/мл;

тригидрат ацетата натрия в количестве 1,74 мг/мл;

дигидрат трегалозы в количестве 80 мг/мл;

ледяная уксусная кислота - до рН 5,0;

рН 5.0±0.5.
26. Водная фармацевтическая композиция, подходящая для парентерального введения субъекту для ингибирования активности белка IL17a, содержащая нетакимаб в количестве 120 мг/мл;

тригидрат ацетата натрия в количестве 1,74 мг/мл;

дигидрат трегалозы в количестве 80 мг/мл;

полоксамер 188 в количестве 0-1 мг/мл;

ледяная уксусная кислота - до рН 5,0;

рН 5.0±0.5.
27. Водная фармацевтическая композиция по п.26, в которой

а) указанный полоксамер 188 находится в количестве 0,5 мг/мл; или

б) указанный полоксамер 188 находится в количестве 1 мг/мл.
28. Применение водной фармацевтической композиции по любому из пп.1-27 для лечения IL17 a-опосредованного заболевания.
29. Применение по п.28, где IL17a-опосредованное заболевание или нарушение выбрано из ревматоидного артрита, ювенильного ревматоидного артрита, ювенильного ревматоидного артрита с системным началом, остеоартрита, ювенильного хронического артрита, псориатического артрита, реактивного артрита, серонегативного артрита, полиартикулярного ювенильного идиопатического артрита, энтезитассоциированного артрита; энтезита; спондилоартропатии, аксиального спондилоартрита; болезни Бехчета; воспалительного заболевания кишечника, болезни Крона, язвенного колита; астмы, аллергических нарушений, атопической аллергии; ихтиоза; красного волосистого питириаза; папулопустулезной розацеи; гангренозной пиодермии; гнойного гидраденита; псориаза, псориатической артропатии, псориаза I типа, псориаза II типа, бляшечного псориаза; дерматита, атопического дерматита, аутоиммунного дерматита, дерматологических состояний; системного склероза; трансплантации, болезни трансплантат против хозяина, отторжения трансплантата, острого или хронического иммунного заболевания, связанного с трансплантацией органа, острого иммунного заболевания, связанного с трансплантатом, хронического иммунного заболевания, связанного с трансплантатом, отторжения трансплантата тонкой кишки, отторжения трансплантата поджелудочной железы, отторжения трансплантата любого органа или ткани, отторжения трансплантата сердца, отторжения трансплантата хряща, отторжения почечного трансплантата, отторжения трансплантата печени, отторжения аллотрансплантата, отторжения кожного аллотрансплантата, отторжения гетеротрансплантата любого органа или ткани, отторжения костного трансплантата, отторжения трансплантата костного мозга (ВМТ), отторжения трансплантата паращитовидной железы; эрозии костей; саркоидоза, атеросклероза, болезни Вегенера, микроскопического полиангиита с поражением почек, увеита, факогенного увеита, неинфекционного увеита, кахексии, острого поперечного миелита, первичного билиарного цирроза, аутоиммунного полигландулярного синдрома I и II типа, синдрома Шмидта, острого респираторного дистресс-синдрома; артропатии, серонегативной артропатии, артропатии, связанной с неспецифическим язвенным колитом, синдрома Рейтера, энтеропатического синовита, атероматоза/коронарного склероза, аутоиммунного буллезного заболевания, пузырчатки, листовидной пузырчатки, линейного IgA-зависимого буллезного дерматоза, аутоиммунной гемолитической анемии, гигантоклеточного артериита, первичного склерозирующего гепатита, криптогенного аутоиммунного гепатита, криптогенного фиброзирующего альвеолита, системной склеродермии, связанной с интерстициальной болезнью легких, ревматоидного артрита, связанного с интерстициальной болезнью легких, системной красной волчанки, связанной с болезнью легких, дерматомиозита/полимиозита, связанного с болезнью легких, синдрома Шегрена, связанного с болезнью легких, анкилозирующего спондилита, связанного с болезнью легких, васкулита, диффузного легочного васкулита, первичного васкули

- 82 046015 та, фиброза, болезни легких с инфильтрацией лимфоцитов, аутоиммунного гепатита, аутоиммунного гепатита I типа (классический аутоиммунный или люпоидный гепатит), аутоиммунного гепатита II типа (связанного с антителом к LKM), аутоиммунной гипогликемии, остеоартроза, первичного склерозирующего холангита, эритематоза; системной красной волчанки, дискоидной красной волчанки, волчаночного нефрита; рассеянного склероза (все типы), симпатической офтальмии, легочной гипертензии, вторичной для болезни соединительной ткани, синдрома Гудпасчера, легочных проявлений узелкового полиартериита, острой ревматической атаки, ревматоидного спондилита, болезни Стилла, системной склеродермии, склеродермической болезни, склеродермии, болезни/артериита Такаясу; аутоиммунной тромбоцитопении, идиопатической тромбоцитопении; аутоимунного тиреоидита, гипертиреоидизма, аутоиммунного гипотериоза (болезнь Хашимото), аутоиммунного атрофического гипотиреоидизма; витилиго, острых заболеваний печени, хронических заболеваний печени, холестаза, заболеваний, опосредованных Th2 типом и Th1 типом, злокачественных опухолей, таких как рак легких, рак молочной железы, рак желудка, рак мочевого пузыря, колоректальный рак, рак поджелудочной железы, карцинома поджелудочной железы, рак яичников, рак предстательной железы и злокачественные новообразования гематопоэтической системы (лейкоз и лимфомы), острого лейкоза, острого лимфобластного лейкоза, острого миелоидного лейкоза, аденокарциномы, В-клеточной лимфомы, лимфомы Беркитта, воспалительных ответов на искусственное кровообращение, хронического миелоцитарного лейкоза (ХМЛ), хронических воспалительных патологий, хронического лимфоцитарного лейкоза (ХЛЛ), карциномы ободочной и прямой кишки (ректоколитическая карцинома), кистозного фиброза, злокачественной лимфомы, злокачественного гистиоцитоза, злокачественной меланомы, множественной миеломы, неходжкинских лимфом, рака носоглотки, солидных опухолей, волосатклеточного лейкоза, болезни Ходжкина, саркомы, миелодиспластического синдрома, связанных с цитокиновой терапией нарушений, демиелинизирующих заболеваний, воспалительного демиелинизирующего заболевания, легочного фиброза, идиопатического легочного фиброза, обычной интерстициальной пневмонии, иридоциклита/увеита/оптического неврита, лимфедемы, смешанного заболевания соединительных тканей, моноклональной гаммапатии, хронических болезней легких, развившихся в неонатальном периоде, нефрита, нефротических, нейродегенеративных нарушений, остеопороза, паранеопластического синдрома/гиперкальциемии, связанной со злокачественной опухолью, феномена и болезни Рейно, синдрома системной воспалительной реакции, тромбоцитопении, токсических эффектов, крапивницы, острого коронарного синдрома, болезни Стилла, развившейся у взрослых, апластической анемии, коронарного склероза, атопической экземы; аутоиммунного расстройства, связанного со стрептококковой инфекцией, аутоиммунной энтеропатии, аутоиммунной потери слуха, аутоиммунного лимфопролиферативного синдрома (ALPS), аутоиммунного миокардита, аутоиммунной преждевременной недостаточности яичников; целиакии, шейного спондилеза, клинически изолированного синдрома (КИС) с риском рассеянного склероза, многоформной эритемы, тяжелой многоформной эритемы, пемфигоида, буллезного пемфигоида, рубцового пемфигоида, пемфигоида слизистых оболочек, гестационного пемфигоида, ирита, кератита, болезни двигательных нейронов, гепатита ни А, ни В, оптического неврита, олигоартикулярного ЮИА, узелкового полиартериита, полихондрита, полиоза, полимиозита, рецидивирующего оптического нейромиелита, ревматической болезни сердца, синдрома SAPHO (синовит, акне, пустулез, гиперостоз, остеит), вторичного амилоидоза, анкилозирующего спондилита, синдрома системного воспалительного ответа, краниального артериита и артропатии, связанной с иерсинией или сальмонеллой.
30. Способ получения водной фармацевтической композиции, подходящей для парентерального введения субъекту для ингибирования активности белка IL17a, содержащий комбинирование фармацевтически эффективного количества нетакимаба с буферным агентом на основе гистидина; и эффективным количеством маннита в качестве осмотического агента.
31. Способ получения водной фармацевтической композиции, подходящей для парентерального введения субъекту для ингибирования активности белка IL17a, содержащий комбинирование фармацевтически эффективного количества нетакимаба с буферным агентом на основе ацетата; и эффективным количеством трегалозы в качестве осмотического агента.

-