JP2021088548A - 安定な水性抗体製剤 - Google Patents

Abstract

【課題】本発明は、抗体の医薬製剤の分野に関する。具体的には、本発明は、安定な液体抗体製剤およびその医薬調製物および使用に関する。【解決手段】本発明は、抗組織因子経路インヒビター（ＴＦＰＩ）抗体の水性製剤によって例示される。【選択図】なし

Description

関連出願の相互参照
この出願は、２０１９年１１月１３日に出願された米国仮出願第６２／９３４，７８１号および２０２０年９月２２日に出願された第６３／０８１，４０９号の利益を主張し、これらは参照によりその全体が本明細書に組み込まれる。

配列表の参照
この出願は、ＥＦＳ−Ｗｅｂを介して電子的に提出されており、電子的に送信された．ｔｘｔ形式の配列表を含んでいる。この．ｔｘｔファイルは、２０２０年１０月１３日に作成された４２，５５０バイトのサイズの「ＰＣ７２５４１Ａ＿Ｓｅｑ＿Ｌｉｓｔｉｎｇ＿ＳＴ２５．ｔｘｔ」というファイル名の配列表を含んでいる。この．ｔｘｔファイルに含まれる配列のリストは明細書の一部であり、参照によりその全体が本明細書に組み込まれる。

本発明は、抗体の医薬製剤の分野に関する。具体的には、本発明は、安定な液体抗体製剤およびその医薬調製物および使用に関する。

治療的または予防的使用を目的とした抗体製剤は、使用前の保管および輸送中の一定期間にわたる変性、脱アミド化、酸化または凝集の影響によるタンパク質の活性または構造上の完全性の喪失を防ぐために安定剤を必要とする。これらの問題は、治療的投与にしばしば望まれる高濃度の抗体において悪化する。多数の製剤オプションが利用可能であるが、１つのアプローチまたは系が全てのタンパク質に適しているわけではない（例えば、Ｗａｎｇら、Ｊ．Ｐｈａｒｍ Ｓｃｉ．９６：１〜２６頁（２００７年）を参照）。

抗体製剤の開発における主な目標は、抗体、溶解性、安定性、およびその抗原結合の効力を維持することである。抗体が生物学的に活性を維持するためには、製剤は、抗体の抗原結合アミノ酸の少なくともコアのコンフォメーションの完全性を維持する必要がある。静脈内注射または皮下注射に使用する前に滅菌濾過を必要とし、投与経路を制限する溶液中の凝集体および微粒子を避けることも特に望ましい。塩、界面活性剤、ｐＨ、および糖などの張性剤は、凝集または変性の問題を克服するために使用され得る。タンパク質の変性と抗原結合活性の喪失を回避するために、抗体調製物の調合は、とりわけこれらの因子の注意深い選択を必要とする。したがって、溶液中の高濃度の生物活性抗体を安定に支持し、静脈内、眼内、硝子体内、動脈内、髄腔内、脳室内、尿道内、胸骨内、頭蓋内、筋肉内、骨内、腹腔内、皮内または皮下注射を含む非経口投与に適した安定な水性抗体製剤が必要である。

組織因子経路インヒビター（ＴＦＰＩ）抗体は、血友病ＡおよびＢなどの血液凝固障害または出血性疾患の治療および予防に有用であることが示されている（例えば、ＵＳ２０１７／００７３４２８を参照）。液体抗体製剤は当技術分野で知られているが（例えば、ＷＯ２００６／０９６４９１、ＷＯ２０１０／０３２２２０、ＷＯ２０１３／１８６７１９、ＵＳ２００９／０１１０６８１、ＵＳ２０１７／０３６０９２９、およびＵＳ２０１８／００００９３３を参照）、血液凝固障害または出血性疾患に苦しむ患者の医学的ニーズを満たすために、ＴＦＰＩ抗体の安定な水性製剤を提供する必要がある。

本明細書で引用される全ての刊行物、特許、および特許出願は、個々の刊行物、特許、および特許出願が参照により本明細書に組み込まれることが具体的かつ個別に示された場合と同程度に、あらゆる目的のためにその全体が参照によりそのように組み込まれる。組み込まれた文献および同様な資料の１つまたは複数が、定義された用語、用語の使用法、説明された技法などを含むがこれらに限定されない点につき、本願と異なるか矛盾する場合、本願が優先される。

ＵＳ２０１７／００７３４２８ ＷＯ２００６／０９６４９１ ＷＯ２０１０／０３２２２０ ＷＯ２０１３／１８６７１９ ＵＳ２００９／０１１０６８１ ＵＳ２０１７／０３６０９２９ ＵＳ２０１８／００００９３３ 米国特許第４，８１６，５６７号 ＷＯ９９／５８５７２ 米国特許第５，８０７，７１５号 米国特許第５，８６６，６９２号 米国特許第６，３３１，４１５号 米国特許第５，５３０，１０１号 米国特許第５，６９３，７６１号 米国特許第５，６９３，７６２号 米国特許第５，５８５，０８９号 米国特許第６，１８０，３７０号 欧州特許公開第０５１９５９６号 ＰＣＴ公開番号第ＷＯ９９／５８５７２号 英国特許出願第９８０９９５１．８号 米国特許第６，１８０，３７７号 米国特許第６，０５４、２９７号 米国特許第５，９９７，８６７号 米国特許第５，８６６，６９２号 米国特許第６，２１０，６７１号 米国特許第６，３５０，８６１号 ＰＣＴ公開番号ＷＯ０１／２７１６０ ＰＣＴ／ＩＢ２０１９／０５８５９７ ＵＳ６２／８０２，４０１ ＵＳ６２／７４４，４８１ ＷＯ２０１７／０２９５８３ ＷＯ２０１０／０１７１９６ ＷＯ２０１１／１０９４５２ ＷＯ２０１４／１４４５７７ ＷＯ２０１０／０７２６８７ ＷＯ２０１２／００１０８７ ＷＯ２０１４／１４０２４０ ＷＯ２０１５／００７８８０

Ｗａｎｇら、Ｊ．Ｐｈａｒｍ Ｓｃｉ．９６：１〜２６頁（２００７年） Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｃｌｏｎｉｎｇ：Ａ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ Ｍａｎｕａｌ、第２版（Ｓａｍｂｒｏｏｋら、１９８９年）Ｃｏｌｄ Ｓｐｒｉｎｇ Ｈａｒｂｏｒ Ｐｒｅｓｓ Ｏｌｉｇｏｎｕｃｌｅｏｔｉｄｅ Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ（Ｍ．Ｊ．Ｇａｉｔ編、１９８４年）、Ｍｅｔｈｏｄｓ ｉｎ Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｂｉｏｌｏｇｙ，Ｈｕｍａｎａ Ｐｒｅｓｓ Ｃｅｌｌ Ｂｉｏｌｏｇｙ：Ａ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ Ｎｏｔｅｂｏｏｋ（Ｊ．Ｅ．Ｃｅｌｌｉｓ編、１９９８年）Ａｃａｄｅｍｉｃ Ｐｒｅｓｓ Ａｎｉｍａｌ Ｃｅｌｌ Ｃｕｌｔｕｒｅ（Ｒ．Ｉ．Ｆｒｅｓｈｎｅｙ編、１９８７年） Ｉｎｔｒｏｄｕｃｔｉｏｎ ｔｏ Ｃｅｌｌ ａｎｄ Ｔｉｓｓｕｅ Ｃｕｌｔｕｒｅ（Ｊ．Ｐ．ＭａｔｈｅｒおよびＰ．Ｅ．Ｒｏｂｅｒｔｓ、１９９８年）Ｐｌｅｎｕｍ Ｐｒｅｓｓ Ｃｅｌｌ ａｎｄ Ｔｉｓｓｕｅ Ｃｕｌｔｕｒｅ：Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ Ｐｒｏｃｅｄｕｒｅｓ（Ａ．Ｄｏｙｌｅ，Ｊ．Ｂ．ＧｒｉｆｆｉｔｈｓおよびＤ．Ｇ．Ｎｅｗｅｌｌ編、１９９３〜１９９８年）Ｊ．Ｗｉｌｅｙ ａｎｄ Ｓｏｎｓ Ｍｅｔｈｏｄｓ ｉｎ Ｅｎｚｙｍｏｌｏｇｙ（Ａｃａｄｅｍｉｃ Ｐｒｅｓｓ，Ｉｎｃ．） Ｈａｎｄｂｏｏｋ ｏｆ Ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔａｌ Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ（Ｄ．Ｍ．ＷｅｉｒおよびＣ．Ｃ．Ｂｌａｃｋｗｅｌｌ編） Ｇｅｎｅ Ｔｒａｎｓｆｅｒ Ｖｅｃｔｏｒｓ ｆｏｒ Ｍａｍｍａｌｉａｎ Ｃｅｌｌｓ（Ｊ．Ｍ．ＭｉｌｌｅｒおよびＭ．Ｐ．Ｃａｌｏｓ編、１９８７年） Ｃｕｒｒｅｎｔ Ｐｒｏｔｏｃｏｌｓ ｉｎ Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｂｉｏｌｏｇｙ（Ｆ．Ｍ．Ａｕｓｕｂｅｌら編、１９８７年） ＰＣＲ：Ｔｈｅ Ｐｏｌｙｍｅｒａｓｅ Ｃｈａｉｎ Ｒｅａｃｔｉｏｎ，（Ｍｕｌｌｉｓら編、１９９４年） Ｃｕｒｒｅｎｔ Ｐｒｏｔｏｃｏｌｓ ｉｎ Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ（Ｊ．Ｅ．Ｃｏｌｉｇａｎら編、１９９１年） Ｓｈｏｒｔ Ｐｒｏｔｏｃｏｌｓ ｉｎ Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｂｉｏｌｏｇｙ（Ｗｉｌｅｙ ａｎｄ Ｓｏｎｓ、１９９９年） Ｉｍｍｕｎｏｂｉｏｌｏｇｙ（Ｃ．Ａ．ＪａｎｅｗａｙおよびＰ．Ｔｒａｖｅｒｓ、１９９７年） Ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ（Ｐ．Ｆｉｎｃｈ、１９９７年） Ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ：ａ ｐｒａｃｔｉｃａｌ ａｐｐｒｏａｃｈ（Ｄ．Ｃａｔｔｙ編、ＩＲＬ Ｐｒｅｓｓ、１９８８〜１９８９年） Ｍｏｎｏｃｌｏｎａｌ ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ：ａ ｐｒａｃｔｉｃａｌ ａｐｐｒｏａｃｈ（Ｐ．ＳｈｅｐｈｅｒｄおよびＣ．Ｄｅａｎ編、Ｏｘｆｏｒｄ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ Ｐｒｅｓｓ、２０００年） Ｕｓｉｎｇ ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ：ａ ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ ｍａｎｕａｌ（Ｅ．ＨａｒｌｏｗおよびＤ．Ｌａｎｅ（Ｃｏｌｄ Ｓｐｒｉｎｇ Ｈａｒｂｏｒ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ Ｐｒｅｓｓ、１９９９年） Ｔｈｅ Ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ（Ｍ．ＺａｎｅｔｔｉおよびＪ．Ｄ．Ｃａｐｒａ編、Ｈａｒｗｏｏｄ Ａｃａｄｅｍｉｃ Ｐｕｂｌｉｓｈｅｒｓ、１９９５年） Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ’ｓ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ｓｃｉｅｎｃｅｓ、第１８版、Ａ．Ｇｅｎｎａｒｏ編、Ｍａｃｋ Ｐｕｂｌｉｓｈｉｎｇ Ｃｏ．、ペンシルベニア州イーストン、１９９０年 Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ，Ｔｈｅ Ｓｃｉｅｎｃｅ ａｎｄ Ｐｒａｃｔｉｃｅ ｏｆ Ｐｈａｒｍａｃｙ、第２０版、Ｍａｃｋ Ｐｕｂｌｉｓｈｉｎｇ、２０００年 ＣｈｏｔｈｉａおよびＬｅｓｋ、Ｊ Ｍｏｌ Ｂｉｏｌ １９６（４）：９０１〜９１７頁、１９８７年 Ｊｏｈｎｓｏｎ＆Ｗｕ、２０００、Ｎｕｃｌｅｉｃ Ａｃｉｄｓ Ｒｅｓ．、２８：２１４〜８頁 Ｃｈｏｔｈｉａら、１９８６年、Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．、１９６：９０１〜１７頁 Ｃｈｏｔｈｉａら、１９８９年、Ｎａｔｕｒｅ、３４２：８７７〜８３頁 Ｍａｒｔｉｎら、１９８９年、Ｐｒｏｃ Ｎａｔｌ Ａｃａｄ Ｓｃｉ（ＵＳＡ）、８６：９２６８〜９２７２頁 「ＡｂＭＴＭ，Ａ Ｃｏｍｐｕｔｅｒ Ｐｒｏｇｒａｍ ｆｏｒ Ｍｏｄｅｌｉｎｇ Ｖａｒｉａｂｌｅ Ｒｅｇｉｏｎｓ ｏｆ Ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ」、英国オックスフォード；Ｏｘｆｏｒｄ Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ，Ｌｔｄ． Ｓａｍｕｄｒａｌａら、１９９９年、ＰＲＯＴＥＩＮＳ，Ｓｔｒｕｃｔｕｒｅ，Ｆｕｎｃｔｉｏｎ ａｎｄ Ｇｅｎｅｔｉｃｓ Ｓｕｐｐｌ．、３：１９４〜１９８頁「Ａｂ Ｉｎｉｔｉｏ Ｐｒｏｔｅｉｎ Ｓｔｒｕｃｔｕｒｅ Ｐｒｅｄｉｃｔｉｏｎ Ｕｓｉｎｇ ａ Ｃｏｍｂｉｎｅｄ ＨｉｅｒａｒｃｈｉｃａｌＡｐｐｒｏａｃｈ」 ＭａｃＣａｌｌｕｍら、１９９６年、Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．、５：７３２〜４５頁 Ｍａｋａｂｅら、２００８年、Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｂｉｏｌｏｇｉｃａｌ Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ、２８３：１１５６〜１１６６頁 ＫｏｈｌｅｒおよびＭｉｌｓｔｅｉＮ，１９７５年、Ｎａｔｕｒｅ ２５６：４９５頁 ＭｃＣａｆｆｅｒｔｙら、１９９０年、Ｎａｔｕｒｅ ３４８：５５２〜５５４頁 Ｗｉｎｔｅｒら、Ｎａｔｕｒｅ ３４９：２９３〜２９９頁（１９９１年）、 Ｌｏｂｕｇｌｉｏら、Ｐｒｏｃ．Ｎａｔ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ ８６：４２２０〜４２２４頁（１９８９年） Ｓｈａｗら、Ｊ Ｉｍｍｕｎｏｌ．１３８：４５３４〜４５３８頁（１９８７年） Ｂｒｏｗｎら、Ｃａｎｃｅｒ Ｒｅｓ．４７：３５７７〜３５８３頁（１９８７年） Ｒｉｅｃｈｍａｎｎら、Ｎａｔｕｒｅ ３３２：３２３〜３２７頁（１９８８年） Ｖｅｒｈｏｅｙｅｎら、Ｓｃｉｅｎｃｅ ２３９：１５３４〜１５３６頁（１９８８年） Ｊｏｎｅｓら、Ｎａｔｕｒｅ ３２１：５２２〜５２５頁（１９８６年） Ｄａｕｇｈｅｒｔｙら、Ｎｕｃｌ．Ａｃｉｄｓ Ｒｅｓ．１９：２４７１〜２４７６頁（１９９１年） Ｃａｃｅｃｉら（１９８４年、Ｂｙｔｅ ９：３４０〜３６２頁） Ｗｏｎｇ＆Ｌｏｈｍａｎ（１９９３年、Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ ９０：５４２８〜５４３２頁）

組織因子経路インヒビター（ＴＦＰＩ）抗体（抗ＴＦＰＩ抗体としても知られる）を含む、貯蔵寿命が延長された安定な水性医薬製剤が提供される。高ＴＦＰＩ抗体濃度を有する本発明の製剤は安定であり（例えば、低レベルの％ＨＭＭＳ（高分子量種）、％ＬＭＭＳ（低分子量種）、％フラグメント、および酸化を有する）、したがって、非経口投与に適していることが実証される。

本明細書に開示および例示されるのは、組織因子経路インヒビター（ＴＦＰＩ）に結合する抗体（その抗原結合フラグメントを含む）の製剤である。当業者は、日常的な実験のみを使用して、本明細書に記載の本発明の特定の態様に対する多くの同等物を認識または確認することができるであろう。そのような同等物は、以下の態様（Ｅ）に包含されることが意図されている。

Ｅ１．約１５ｍｇ／ｍＬから約２５０ｍｇ／ｍＬの組織因子経路インヒビター（ＴＦＰＩ）に特異的に結合する抗体、緩衝液、ポリオール、界面活性剤、およびキレート剤を含む製剤であって、約５．０から約６．０のｐＨを有する製剤。

Ｅ２．約１５ｍｇ／ｍＬから約２５０ｍｇ／ｍＬの組織因子経路インヒビター（ＴＦＰＩ）のクニッツドメイン２（Ｋ２）中のエピトープに特異的に結合する抗体、緩衝液、ポリオール、界面活性剤、およびキレート剤を含む製剤であって、製剤が約５．０から約６．０のｐＨを有し、エピトープが配列番号２の番号付けに基づき残基Ｉｌｅ１０５、Ａｒｇ１０７、およびＬｅｕ１３１を含む製剤。

Ｅ３．緩衝液が、酢酸塩、コハク酸塩、グルコン酸塩、クエン酸塩、ヒスチジン、酢酸、リン酸塩、リン酸、アスコルビン酸塩、酒石酸、マレイン酸、グリシン、乳酸塩、乳酸、アスコルビン酸、イミダゾール、重炭酸塩および炭酸、コハク酸、安息香酸ナトリウム、安息香酸、グルコン酸塩、エデト酸塩、酢酸塩、リンゴ酸塩、イミダゾール、トリス、リン酸塩、およびそれらの混合物からなる群から選択される、Ｅ１〜Ｅ２のいずれか１つに記載の製剤。

Ｅ４．緩衝液がヒスチジンである、Ｅ３に記載の製剤。
Ｅ５．緩衝液がコハク酸塩である、Ｅ３に記載の製剤。
Ｅ６．緩衝液の濃度が約０．１ｍＭから約１００ｍＭである、Ｅ１〜Ｅ５のいずれか１つに記載の水性製剤。

Ｅ７．緩衝液の濃度が約１ｍＭから約４０ｍＭまたは約１０ｍＭから約４０ｍＭである、Ｅ６に記載の製剤。
Ｅ８．緩衝液の濃度が約１０ｍＭ、約２０ｍＭまたは約４０ｍＭである、Ｅ７に記載の製剤。

Ｅ９．緩衝液の濃度が約２０ｍＭである、Ｅ８に記載の製剤。
Ｅ１０．ポリオールが、マンニトール、トレハロース、ソルビトール、エリスリトール、イソマルト、ラクチトール、マルチトール、キシリトール、グリセロール、ラクチトール、プロピレングリコール、ポリエチレングリコール、イノシトール、フルクトース、グルコース、マンノース、スクロース、ソルボース、キシロース、ラクトース、マルトース、スクロース、デキストラン、プルラン、デキストリン、シクロデキストリン、可溶性デンプン、ヒドロキシエチルデンプン、水溶性グルカン、またはそれらの混合物からなる群から選択される、Ｅ１〜Ｅ９のいずれか１つに記載の製剤。

Ｅ１１．ポリオールがスクロースまたはトレハロースである、Ｅ１０に記載の製剤。
Ｅ１２．ポリオールの濃度が約１ｍｇ／ｍＬから約３００ｍｇ／ｍＬである、Ｅ１〜Ｅ１１のいずれか１つに記載の製剤。

Ｅ１３．ポリオールの濃度が約１ｍｇ／ｍＬから約１２０ｍｇ／ｍＬ、約５０ｍｇ／ｍＬから約１２０ｍｇ／ｍＬ、または約６０ｍｇ／ｍＬから約１１０ｍｇ／ｍＬである、Ｅ１２に記載の製剤。

Ｅ１４．ポリオールの濃度が約６４ｍｇ／ｍＬ、約８５ｍｇ／ｍＬ、または約１０６ｍｇ／ｍＬである、Ｅ１３に記載の製剤。
Ｅ１５．ポリオールの濃度が約８５ｍｇ／ｍＬである、Ｅ１〜Ｅ１４に記載の製剤。

Ｅ１６．界面活性剤が、ポリソルベート、ポロキサマー、トリトン、ドデシル硫酸ナトリウム、ラウリル硫酸ナトリウム、オクチルグリコシドナトリウム、ラウリル−スルホベタイン、ミリスチル−スルホベタイン、リノレイル−スルホベタイン、ステアリル−スルホベタイン、ラウリル−サルコシン、ミリスチル−サルコシン、リノレイル−サルコシン、ステアリル−サルコシン、リノレイル−ベタイン、ミリスチル−ベタイン、セチル−ベタイン、ラウロアミドプロピル−ベタイン、コカミドプロピル−ベタイン、リノールアミドプロピル−ベタイン、ミリスタミドプロピル−ベタイン、パルミドプロピル−ベタイン、イソステアラミドプロピル−ベタイン、ミリスタミドプロピル−ジメチルアミン、パルミドプロピル−ジメチルアミン、イソステアラミドプロピル−ジメチルアミン、メチルココイル−タウレートナトリウム、メチルオレイル−タウレート二ナトリウム、ジヒドロキシプロピルＰＥＧ５リノールアンモニウムクロリド、ポリエチレングリコール、ポリプロピレングリコール、ポリソルベート２０、ポリソルベート２１、ポリソルベート４０、ポリソルベート６０、ポリソルベート６１、ポリソルベート６５、ポリソルベート８０、ポリソルベート８１、ポリソルベート８５、ＰＥＧ３３５０、およびそれらの混合物からなる群から選択される、Ｅ１〜Ｅ１５のいずれか１つに記載の製剤。

Ｅ１７．界面活性剤がポリソルベート８０である、Ｅ１６に記載の製剤。
Ｅ１８．界面活性剤の濃度が約０．０１ｍｇ／ｍＬから約１０ｍｇ／ｍＬ、約０．０５ｍｇ／ｍＬから約５ｍｇ／ｍＬ、約０．１ｍｇ／ｍＬから約１ｍｇ／ｍＬ、または約０．１ｍｇ／ｍｌから約０．５ｍｇ／ｍＬである、Ｅ１〜Ｅ１７のいずれか１つに記載の製剤。

Ｅ１９．界面活性剤の濃度が約０．１ｍｇ／ｍｌ、約０．２ｍｇ／ｍＬ、または約０．３ｍｇ／ｍＬである、Ｅ１８に記載の製剤。
Ｅ２０．界面活性剤の濃度が約０．２ｍｇ／ｍＬである、Ｅ１９に記載の製剤。

Ｅ２１．製剤が界面活性剤（例えば、ポリソルベート８０）を含まない、Ｅ１〜Ｅ２０のいずれか１つに記載の製剤。
Ｅ２２．キレート剤が、エチレンジアミン四酢酸（ＥＤＴＡ）、ジエチレントリアミン五酢酸５（ＤＴＰＡ）、ニトリロトリ酢酸（ＮＴＡ）、Ｎ−２−アセトアミド−２−イミノ二酢酸（ＡＤＡ）、ビス（アミノエチル）グリコールエーテル、Ｎ，Ｎ，Ｎ’，Ｎ’−四酢酸（ＥＧＴＡ）、トランス−ジアミノシクロヘキサン四酢酸（ＤＣＴＡ）、グルタミン酸、およびアスパラギン酸、Ｎ−ヒドロキシエチルイミノ二酢酸（ＨＩＭＤＡ）、Ｎ，Ｎ−ビス−ヒドロキシエチルグリシン（ビシン）およびＮ−（トリスヒドロキシメチルメチル）１０グリシン（トリシン）、グリシルグリシン、デオキシコール酸ナトリウム、エチレンジアミン、プロピレンジアミン、ジエチレントリアミン、トリエチレンテトラアミン（トリエン）、エデト酸二ナトリウム二水和物（またはＥＤＴＡ二ナトリウム二水和物またはＥＤＴＡ二ナトリウム塩）、ＥＤＴＡカルシウム、シュウ酸、リンゴ酸、クエン酸、クエン酸一水和物、およびクエン酸三ナトリウム−二水和物、８−ヒドロキシキノレート、アミノ酸、ヒスチジン、システイン、メチオニン、ペプチド、ポリペプチド、およびタンパク質、およびそれらの混合物からなる群から選択される、Ｅ１〜Ｅ２１のいずれか１つに記載の製剤。

Ｅ２３．キレート剤がエデト酸二ナトリウム二水和物である、Ｅ２２に記載の製剤。
Ｅ２４．キレート剤の濃度が約０．０１ｍｇ／ｍＬから約５０ｍｇ／ｍＬ、約０．０１ｍｇ／ｍＬから約１０ｍｇ／ｍＬ、約０．０１からｍｇ／ｍＬから約１ｍｇ／ｍＬ、または約０．０２ｍｇ／ｍＬから約０．０８ｍｇ／ｍＬである、Ｅ１〜Ｅ２３のいずれか１つに記載の製剤。

Ｅ２５．キレート剤の濃度が約０．０３８ｍｇ／ｍＬ、約０．０５ｍｇ／ｍＬ、または約０．０６３ｍｇ／ｍＬである、Ｅ２４に記載の製剤。
Ｅ２６．キレート剤の濃度が約０．０５ｍｇ／ｍＬである、Ｅ２５に記載の製剤。

Ｅ２７．製剤が約５．０から６．６または約５．２から６．４のｐＨを有する、Ｅ１〜Ｅ２６のいずれか１つに記載の製剤。
Ｅ２８．製剤が約５．２、５．８または６．４のｐＨを有する、Ｅ２７に記載の製剤。

Ｅ２９．製剤が約５．５または５．８のｐＨを有する、Ｅ２７に記載の製剤。
Ｅ３０．抗体がＴＦＰＩのクニッツドメイン１（Ｋ１）に結合しない、Ｅ１〜Ｅ２９のいずれか１つに記載の製剤。

Ｅ３１．エピトープが、配列番号２の番号付けに基づき、残基Ｃｙｓ１０６、Ｇｌｙ１０８、Ｃｙｓ１３０、Ｌｅｕ１３１、およびＧｌｙ１３２をさらに含む、Ｅ２〜Ｅ３０のいずれか１つに記載の製剤。

Ｅ３２．エピトープが、配列番号２の番号付けに基づき、Ａｓｐ１０２、Ａｒｇ１１２、Ｔｙｒ１２７、Ｇｌｙ１２９、Ｍｅｔ１３４、およびＧｌｕ１３８をさらに含む、Ｅ２〜Ｅ３１のいずれか１つに記載の製剤。

Ｅ３３．エピトープが、配列番号２の番号付けに基づき、Ｅ１００、Ｅ１０１、Ｐ１０３、Ｙ１０９、Ｔ１１１、Ｙ１１３、Ｆ１１４、Ｎ１１６、Ｑ１１８、Ｑ１２１、Ｃ１２２、Ｅ１２３、Ｒ１２４、Ｆ１２５、Ｋ１２６、およびＬ１４０を含まない、Ｅ２〜Ｅ３２のいずれか１つに記載の製剤。

Ｅ３４．エピトープが、配列番号２の番号付けに基づき、Ｄ３１、Ｄ３２、Ｐ３４、Ｃ３５、Ｋ３６、Ｅ１００、Ｅ１０１、Ｐ１０３、Ｙ１０９、Ｋ１２６、およびＧ１２８を含まない、Ｅ２〜Ｅ３２のいずれか１つに記載の製剤。

Ｅ３５．抗体が、以下を含む重鎖可変領域（ＶＨ）を含む、Ｅ１〜Ｅ３４のいずれか１つに記載の製剤：
（ａ）配列番号１３のアミノ酸配列を含むＶＨ相補性決定領域１（ＣＤＲ−Ｈ１）；
（ｂ）配列番号１４のアミノ酸配列を含むＶＨ相補性決定領域２（ＣＤＲ−Ｈ２）；および
（ｃ）配列番号１５のアミノ酸配列を含むＶＨ相補性決定領域３（ＣＤＲ−Ｈ３）。

Ｅ３６．抗体が、配列番号１６、１８、および２０からなる群から選択されるアミノ酸配列と少なくとも９０％、少なくとも９５％、または少なくとも９９％同一のアミノ酸配列を含むＶＨを含む、Ｅ１〜Ｅ３５のいずれか１つに記載の製剤。

Ｅ３７．抗体が、配列番号１６、１８、および２０からなる群から選択されるアミノ酸配列を含むＶＨを含む、Ｅ１〜Ｅ３６のいずれか１つに記載の製剤。
Ｅ３８．抗体が、配列番号１６のアミノ酸配列を含むＶＨを含む、Ｅ１〜Ｅ３７のいずれか１つに記載の製剤。

Ｅ３９．抗体が、配列番号１８のアミノ酸配列を含むＶＨを含む、Ｅ１〜Ｅ３７のいずれか１つに記載の製剤。
Ｅ４０．抗体が、配列番号２０のアミノ酸配列を含むＶＨを含む、Ｅ１〜Ｅ３７のいずれか１つに記載の製剤。

Ｅ４１．抗体が、以下を含む軽鎖可変領域（ＶＬ）を含む、Ｅ１〜Ｅ４０のいずれか１つに記載の製剤：
（ａ）配列番号８のアミノ酸配列を含むＶＬ相補性決定領域１（ＣＤＲ−Ｌ１）；
（ｂ）配列番号９のアミノ酸配列を含むＶＬ相補性決定領域２（ＣＤＲ−Ｌ２）；および
（ｃ）配列番号１０のアミノ酸配列を含むＶＬ相補性決定領域３（ＣＤＲ−Ｌ３）。

Ｅ４２．抗体が、配列番号１１と少なくとも９０％、少なくとも９５％、または少なくとも９９％同一のアミノ酸配列を含むＶＬを含む、Ｅ１〜Ｅ４１のいずれか１つに記載の製剤。

Ｅ４３．抗体が、配列番号１１のアミノ酸配列を含むＶＬを含む、Ｅ１〜Ｅ４２のいずれか１つに記載の製剤。
Ｅ４４．抗体が、配列番号１７のアミノ酸配列を含む重鎖を含む、Ｅ１〜Ｅ４３のいずれか１つに記載の製剤。

Ｅ４５．抗体が、配列番号１９のアミノ酸配列を含む重鎖を含む、Ｅ１〜Ｅ４３のいずれか１つに記載の製剤。
Ｅ４６．抗体が、配列番号２１のアミノ酸配列を含む重鎖を含む、Ｅ１〜Ｅ４３のいずれか１つに記載の製剤。

Ｅ４７．抗体が、配列番号１２のアミノ酸配列を含む軽鎖を含む、Ｅ１〜Ｅ４６のいずれか１つに記載の製剤。
Ｅ４８．抗体が、以下を含む、Ｅ１〜Ｅ４７のいずれか１つに記載の製剤：
（ｉ）以下を含む重鎖可変領域（ＶＨ）：（ａ）配列番号１３のアミノ酸配列を含むＶＨ相補性決定領域１（ＣＤＲ−Ｈ１）；（ｂ）配列番号１４のアミノ酸配列を含むＶＨ相補性決定領域２（ＣＤＲ−Ｈ２）；および（ｃ）配列番号１５のアミノ酸配列を含むＶＨ相補性決定領域３（ＣＤＲ−Ｈ３）；ならびに（ｉｉ）以下を含む軽鎖可変領域（ＶＬ）：（ａ）配列番号８のアミノ酸配列を含むＶＬ相補性決定領域１（ＣＤＲ−Ｌ１）；（ｂ）配列番号９のアミノ酸配列を含むＶＬ相補性決定領域２（ＣＤＲ−Ｌ２）；および（ｃ）配列番号１０のアミノ酸配列を含むＶＬ相補性決定領域３（ＣＤＲ−Ｌ３）。

Ｅ４９．抗体が、配列番号１８のアミノ酸配列を含むＶＨ、および配列番号１１のアミノ酸配列を含むＶＬを含む、Ｅ４８に記載の製剤。
Ｅ５０．抗体が、ＡＴＣＣアクセッション番号ＰＴＡ−１２２３２９の下で寄託されたプラスミド中に存在するインサートによってコードされるＶＨ配列を含む、Ｅ１〜Ｅ４９のいずれか１つに記載の製剤。

Ｅ５１．抗体が、ＡＴＣＣアクセッション番号ＰＴＡ−１２２３２８の下で寄託されたプラスミド中に存在するインサートによってコードされるＶＬ配列を含む、Ｅ１〜Ｅ５０のいずれか１つに記載の製剤。

Ｅ５２．抗体が、ＡＴＣＣアクセッション番号ＰＴＡ−１２２３２９の下で寄託されたプラスミド中に存在するインサートによってコードされる配列、およびＡＴＣＣアクセッション番号ＰＴＡ−１２２３２８の下で寄託されたプラスミド中に存在するインサートによってコードされる配列を含む、Ｅ１〜Ｅ５１のいずれか１つに記載の製剤。

Ｅ５３．抗体が、配列番号１９のアミノ酸配列を含む重鎖を含み、かつ、配列番号１２のアミノ酸配列を含む軽鎖を含む、Ｅ１〜Ｅ５２のいずれか１つに記載の製剤。
Ｅ５４．抗体が、配列番号１６のアミノ酸配列を含むＶＨ、および配列番号１１のアミノ酸配列を含むＶＬを含む、Ｅ４８に記載の製剤。

Ｅ５５．抗体が、配列番号１７のアミノ酸配列を含む重鎖を含み、かつ、配列番号１２のアミノ酸配列を含む軽鎖を含む、Ｅ５４に記載の製剤。
Ｅ５６．抗体が、配列番号２０のアミノ酸配列を含むＶＨ、および配列番号１１のアミノ酸配列を含むＶＬを含む、Ｅ４８に記載の製剤。

Ｅ５７．抗体が、配列番号２１のアミノ酸配列を含む重鎖を含み、かつ、配列番号１２のアミノ酸配列を含む軽鎖を含む、Ｅ５６に記載の製剤。
Ｅ５８．抗体が、配列番号２３のアミノ酸配列を含む重鎖を含み、かつ、配列番号２２のアミノ酸配列を含む軽鎖を含む、Ｅ１、Ｅ３〜Ｅ２９のいずれか１つに記載の製剤。

Ｅ５９．抗体が、配列番号２５のアミノ酸配列を含む重鎖を含み、かつ、配列番号２４のアミノ酸配列を含む軽鎖を含む、Ｅ１、Ｅ３〜Ｅ２９のいずれか１つに記載の製剤。
Ｅ６０．抗体が、少なくとも２５時間、少なくとも２９時間、少なくとも３０時間、少なくとも３５時間、少なくとも４０時間、少なくとも５０時間、少なくとも５５時間、少なくとも６０時間、少なくとも６５時間、少なくとも７０時間、少なくとも７５時間、少なくとも８０時間、少なくとも８５時間、少なくとも９０時間、少なくとも９５時間、少なくとも１００時間、少なくとも１０５時間、少なくとも１１０時間、少なくとも１１５時間、少なくとも１２０時間、または少なくとも１２５時間の血清半減期を有する、Ｅ１〜Ｅ５９のいずれか１つに記載の製剤。

Ｅ６１．抗体が、約５×１０^−７Ｍから約５×１０^−１１Ｍの結合親和性（Ｋ_Ｄ）を有する、Ｅ１〜Ｅ６０のいずれか１つに記載の製剤。
Ｅ６２．抗体が、静脈内バイオアベイラビリティと比較して、少なくとも１０％、少なくとも１５％、少なくとも２０％、少なくとも２５％、少なくとも３０％、少なくとも３５％、少なくとも４０％、少なくとも５０％、少なくとも５５％、少なくとも６０％、少なくとも６５％、少なくとも７０％、少なくとも７５％、少なくとも８０％、少なくとも８５％、少なくとも９０％、少なくとも９５、または少なくとも９９％の皮下（ＳＣ）バイオアベイラビリティを有する、Ｅ１〜Ｅ６１のいずれか１つに記載の製剤。

Ｅ６３．抗体の濃度が、約２０ｍｇ／ｍＬ、２５ｍｇ／ｍＬ、５０ｍｇ／ｍＬ、７５ｍｇ／ｍＬ、１００ｍｇ／ｍｌ、１２５ｍｇ／ｍｌ、１５０ｍｇ／ｍＬ、１７５ｍｇ／ｍＬ、２００ｍｇ／ｍｌ、２２５ｍｇ／ｍｌ、または２５０ｍｇ／ｍＬである、Ｅ１〜Ｅ６２のいずれか１つに記載の製剤。

Ｅ６４．約１５０ｍｇ／ｍＬの組織因子経路インヒビター（ＴＦＰＩ）のクニッツドメイン２（Ｋ２）中のエピトープに特異的に結合する抗体、約２０ｍＭのコハク酸塩またはヒスチジン緩衝液；約８５ｍｇ／ｍＬのスクロースまたはトレハロース；約０．２ｍｇ／ｍＬのポリソルベート８０またはポリソルベート２０；約０．０５ｍｇ／ｍＬのエデト酸二ナトリウム二水和物またはエチレンジアミン四酢酸（ＥＤＴＡ）を含む水性製剤であって、ここで、抗体が、配列番号１８のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域、および配列番号１１のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域を含み、製剤が、約５．５または５．８のｐＨを有する、製剤。

Ｅ６５．１５０ｍｇ／ｍＬの組織因子経路インヒビター（ＴＦＰＩ）のクニッツドメイン２（Ｋ２）中のエピトープに特異的に結合する抗体、２０ｍＭのヒスチジン緩衝液、８５ｍｇ／ｍＬのスクロース、０．２ｍｇ／ｍＬのポリソルベート８０、０．０５ｍｇ／ｍＬのエデト酸二ナトリウム二水和物を含む医薬製剤であって、ここで、抗体が、配列番号１８のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域および配列番号１１のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域を含み、製剤が、５．８のｐＨを有する、製剤。

Ｅ６６．１５０ｍｇ／ｍＬの組織因子経路インヒビター（ＴＦＰＩ）のクニッツドメイン２（Ｋ２）中のエピトープに特異的に結合する抗体、２０ｍＭのヒスチジン緩衝液、８５ｍｇ／ｍＬのスクロース、０．２ｍｇ／ｍＬのポリソルベート８０、０．０５ｍｇ／ｍＬのエデト酸二ナトリウム二水和物を含む医薬製剤であって、ここで、抗体が、配列番号１９のアミノ酸配列を含む重鎖を含み、かつ、配列番号１２のアミノ酸配列を含む軽鎖を含み、製剤が、５．８のｐＨを有する、製剤。

Ｅ６７．約５０ｍｇ／ｍＬから約２５０ｍｇ／ｍＬの組織因子経路インヒビター（ＴＦＰＩ）のクニッツドメイン２（Ｋ２）中のエピトープに特異的に結合する抗体、２０ｍＭのヒスチジン緩衝液、８５ｍｇ／ｍＬのスクロース、０．２ｍｇ／ｍＬのポリソルベート８０、０．０５ｍｇ／ｍＬのエデト酸二ナトリウム二水和物を含む医薬製剤であって、ここで、抗体が、配列番号２３のアミノ酸配列を含む重鎖を含み、かつ、配列番号２２のアミノ酸配列を含む軽鎖を含み、製剤が、５．８のｐＨを有する、製剤。

Ｅ６８．約５０ｍｇ／ｍＬから約２５０ｍｇ／ｍＬの組織因子経路インヒビター（ＴＦＰＩ）のクニッツドメイン２（Ｋ２）中のエピトープに特異的に結合する抗体、２０ｍＭのヒスチジン緩衝液、８５ｍｇ／ｍＬのスクロース、０．２ｍｇ／ｍＬのポリソルベート８０、０．０５ｍｇ／ｍＬのエデト酸二ナトリウム二水和物を含む医薬製剤であって、ここで、抗体が、配列番号２５のアミノ酸配列を含む重鎖を含み、かつ、配列番号２４のアミノ酸配列を含む軽鎖を含み、製剤が、５．８のｐＨを有する、製剤。

Ｅ６９．１５０ｍｇ／ｍＬの組織因子経路インヒビター（ＴＦＰＩ）のクニッツドメイン２（Ｋ２）中のエピトープに特異的に結合する抗体、１０ｍＭのヒスチジン緩衝液、６４ｍｇ／ｍＬのスクロース、０．１ｍｇ／ｍＬのポリソルベート８０、０．０３８ｍｇ／ｍＬのエデト酸二ナトリウム二水和物を含む医薬製剤であって、ここで、抗体が、配列番号１８のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域、および配列番号１１のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域を含み、製剤が、６．４のｐＨを有する、製剤。

Ｅ７０．１５０ｍｇ／ｍＬの組織因子経路インヒビター（ＴＦＰＩ）のクニッツドメイン２（Ｋ２）中のエピトープに特異的に結合する抗体、４０ｍＭのヒスチジン緩衝液、１０６ｍｇ／ｍＬのスクロース、０．３ｍｇ／ｍＬのポリソルベート８０、０．０６３ｍｇ／ｍＬのエデト酸二ナトリウム二水和物を含む医薬製剤であって、ここで、抗体が、配列番号１８のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域、および配列番号１１のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域を含み、製剤が、５．２のｐＨを有する、製剤。

Ｅ７１．１５０ｍｇ／ｍＬの組織因子経路インヒビター（ＴＦＰＩ）のクニッツドメイン２（Ｋ２）中のエピトープに特異的に結合する抗体、１０ｍＭのヒスチジン緩衝液、６４ｍｇ／ｍＬのスクロース、０．１ｍｇ／ｍＬのポリソルベート８０、０．０３８ｍｇ／ｍＬのエデト酸二ナトリウム二水和物を含む医薬製剤であって、ここで、抗体が、配列番号１８のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域、および配列番号１１のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域を含み、製剤が、５．２のｐＨを有する、製剤。

Ｅ７２．１５０ｍｇ／ｍＬの組織因子経路インヒビター（ＴＦＰＩ）のクニッツドメイン２（Ｋ２）中のエピトープに特異的に結合する抗体、２０ｍＭのヒスチジン緩衝液、８５ｍｇ／ｍＬのスクロース、０．０５ｍｇ／ｍＬのエデト酸二ナトリウム二水和物を含む医薬製剤であって、ここで、抗体が、配列番号１８のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域、および配列番号１１のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域を含み、製剤が、５．８のｐＨを有する、製剤。

Ｅ７３．製剤が、界面活性剤（例えば、ポリソルベート８０）を含まない、Ｅ７２に記載の医薬製剤。
Ｅ７４．製剤が、（例えば、約−２０℃、約５℃、約２５℃、または約４０℃で）少なくとも約１か月、約３か月、約４か月、約６か月、約１２か月、約２４か月、約３６か月、約４８か月、または約６０か月の貯蔵寿命を有する、Ｅ１〜Ｅ７３のいずれか１つに記載の製剤。

Ｅ７５．製剤が水性製剤である、Ｅ１〜Ｅ７４のいずれか１つに記載の製剤。
Ｅ７６．製剤が医薬製剤である、Ｅ１〜Ｅ７５のいずれか１つに記載の製剤。
Ｅ７７．出血時間を短縮する方法であって、それを必要とする対象に、Ｅ１〜Ｅ７６のいずれか１つに記載の治療有効量の製剤を投与するステップを含む方法。

Ｅ７８．血液凝固における障害または出血性障害を治療または予防する方法であって、それを必要とする対象に、Ｅ１〜Ｅ７６のいずれか１つに記載の治療有効量の製剤を投与するステップを含む方法。

Ｅ７９．血友病Ａ、ＢまたはＣを治療または予防する方法であって、それを必要とする対象に、Ｅ１〜Ｅ７６のいずれか１つに記載の治療有効量の製剤を投与するステップを含む方法。

Ｅ８０．フォンウィルブランド病（ｖＷＤ）を治療または予防する方法であって、それを必要とする対象に、Ｅ１〜Ｅ７６のいずれか１つに記載の治療有効量の製剤を投与するステップを含む方法。

Ｅ８１．ＴＦＰＩの活性を低下させる方法であって、それを必要とする対象に、Ｅ１〜Ｅ７６のいずれか１つに記載の治療有効量の製剤を投与するステップを含む方法。
Ｅ８２．対象が、血液凝固における障害または出血性障害に罹患しているか、または罹患しやすい、Ｅ７７〜Ｅ８１のいずれか１つに記載の方法。

Ｅ８３．対象が、血友病Ａ、Ｂ、またはＣに罹患しているか、または罹患しやすい、Ｅ７７〜Ｅ８２のいずれか１つに記載の方法。
Ｅ８４．対象が、血友病ＡまたはＢに罹患しているか、または罹患しやすい、Ｅ７７〜Ｅ８３のいずれか１つに記載の方法。

Ｅ８５．対象が、フォンウィルブランド病（ｖＷＤ）に罹患しているか、または罹患しやすい、Ｅ７７〜Ｅ８２のいずれか１つに記載の方法。
Ｅ８６．対象が、血小板障害に罹患しているか、または罹患しやすい、Ｅ７７〜Ｅ８２のいずれか１つに記載の方法。

Ｅ８７．対象が、第ＶＩＩ因子欠乏症に罹患しているか、または罹患しやすい、Ｅ７７〜８２のいずれか１つに記載の方法。
Ｅ８８．対象が、第ＸＩ因子欠乏症に罹患しているか、または罹患しやすい、Ｅ７７〜Ｅ８２のいずれか１つに記載の方法。

Ｅ８９．凝固剤を対象に投与するステップをさらに含む、Ｅ７７〜Ｅ８８のいずれか１つに記載の方法。
Ｅ９０．凝固剤が、第ＶＩＩａ因子、第ＶＩＩＩ因子、第ＩＸ因子、トラネキサム酸およびバイパス剤（例えば、ＦＥＩＢＡ）からなる群から選択される、Ｅ８９に記載の方法。

Ｅ９１．Ｅ７７〜Ｅ９０のいずれか１つに記載の方法における、Ｅ１〜Ｅ７６のいずれか１つの製剤の使用。
Ｅ９２．Ｅ７７〜Ｅ９０のいずれか１つに記載の方法において使用するための、Ｅ１〜Ｅ７６のいずれか１つに記載の製剤。

Ｅ９３．１５０ｍｇ／ｍＬの組織因子経路インヒビター（ＴＦＰＩ）のクニッツドメイン２（Ｋ２）中のエピトープに特異的に結合する抗体、２０ｍＭのヒスチジン緩衝液、８５ｍｇ／ｍＬのスクロース、０．２ｍｇ／ｍＬのポリソルベート８０、０．０５ｍｇ／ｍＬのエデト酸二ナトリウム二水和物を含む、Ｅ７７〜Ｅ９０のいずれかに記載の方法において使用するための製剤であって、ここで、抗体が、配列番号１９のアミノ酸配列を含む重鎖を含み、かつ、配列番号１２のアミノ酸配列を含む軽鎖を含み、製剤が、５．８のｐＨを有する、製剤。

Ｅ９４．１５０ｍｇ／ｍＬの組織因子経路インヒビター（ＴＦＰＩ）のクニッツドメイン２（Ｋ２）中のエピトープに特異的に結合する抗体、２０ｍＭのヒスチジン緩衝液、８５ｍｇ／ｍＬのスクロース、０．２ｍｇ／ｍＬのポリソルベート８０、０．０５ｍｇ／ｍＬのエデト酸二ナトリウム二水和物からなる医薬製剤であって、ここで、抗体が、配列番号１９のアミノ酸配列を含む重鎖を含み、かつ、配列番号１２のアミノ酸配列を含む軽鎖を含み、製剤が、５．８のｐＨを有する、製剤。

本明細書に開示されるのは、組織因子経路インヒビター（ＴＦＰＩ）抗体を含む、延長された貯蔵寿命を有する安定な水性医薬製剤である。本出願は、ヒスチジン緩衝液を含み、ｐＨ５．８を有する製剤が、高濃度のＴＦＰＩ抗体を安定して支持するという発見に基づいている。

特に、ｐＨ５．８のヒスチジン緩衝水性製剤中に保存された抗ＴＦＰＩ抗体は、サイズ排除高速液体クロマトグラフィー（ＳＥ−ＨＰＬＣ）を使用して％高分子量種（％ＨＭＭＳ）により評価した場合、低い分解レベルを有することが実証された（表１を参照）。例えば、５±３℃という意図された保管条件において、抗ＴＦＰＩ抗体は最大２４か月間安定であり、分解はほとんどまたはまったく観察されなかった（％ＨＭＭＳの範囲は０．５から０．９）。４０℃／７５％ＲＨの熱ストレス保管条件では、いくらかの分解が観察されたが（％ＨＭＭＳは１か月（すなわち、４週間）で０．９から１．２の範囲であり、３か月（すなわち、１２週間）で１．５から２．４の範囲であった）、この分解は、抗ＶＥＧＦ抗体などの他のＩｇＧ１抗体で観察されたものよりも少ないものであった（表９を参照；ＵＳ２０１８／００００９３３の表１１から得られた抗ＶＥＧＦ抗体のデータ）。特に、４０℃で１か月（すなわち、４週間）、ｐＨ５．８のヒスチジン緩衝製剤中に保存された抗ＶＥＧＦ抗体の高分子量種（％ＨＭＭＳ）の量は３．１（抗ＴＦＰＩ抗体の０．９から１．２と比較）であり、３か月間（すなわち、１２週間）保存されたものは５．６（抗ＴＦＰＩ抗体の１．５から２．４と比較）であった。したがって、ｐＨ５．８のヒスチジン緩衝製剤は、抗ＶＥＧＦ抗体と比較して、分解を遅らせ、凝集体形成を減少させ、抗ＴＦＰＩ抗体の安定性を改善する。この結果は驚くべきものであり、予想外であった。

したがって、一つの側面において、提供されるのは、約１５ｍｇ／ｍＬから約２５０ｍｇ／ｍＬの組織因子経路インヒビター（ＴＦＰＩ）抗体、緩衝液、ポリオール、界面活性剤、キレート剤を含む製剤であって、約５．０から約６．０のｐＨを有する製剤である。例えば、いくつかの態様において、提供されるのは、約１５ｍｇ／ｍＬから約２５０ｍｇ／ｍＬのＴＦＰＩ抗体（例えば、抗ＴＦＰＩ抗体）、約１ｍＭから約４０ｍＭの緩衝液（例えば、ヒスチジン緩衝液）、約１ｍｇ／ｍＬから約３００ｍｇ／ｍＬのポリオール（例えば、スクロース）、約０．０１ｍｇ／ｍＬから約１０ｍｇ／ｍＬの界面活性剤（例えば、ポリソルベート８０）、約０．０１ｍｇ／ｍＬから約５０．０ｍｇ／ｍＬのキレート剤（例えば、エデト酸二ナトリウム二水和物）を含む製剤であって、約５．０から約６．０のｐＨを有する製剤である。いくつかの態様において、抗体濃度は、約１５ｍｇ／ｍＬから約２５０ｍｇ／ｍＬである。他の態様では、抗体濃度は、約１００ｍｇ／ｍＬ、約１１５ｍｇ／ｍＬ、約１５０ｍｇ／ｍＬまたは１５８ｍｇ／ｍＬである。

一般的技法
本発明の実施には、他に示されない限り、当技術分野の技術の範囲内である分子生物学（組換え技術を含む）、微生物学、細胞生物学、生化学および免疫学の従来的な技術を使用する。このような手法は、Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｃｌｏｎｉｎｇ：Ａ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ Ｍａｎｕａｌ、第２版（Ｓａｍｂｒｏｏｋら、１９８９年）Ｃｏｌｄ Ｓｐｒｉｎｇ Ｈａｒｂｏｒ Ｐｒｅｓｓ；Ｏｌｉｇｏｎｕｃｌｅｏｔｉｄｅ Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ（Ｍ．Ｊ．Ｇａｉｔ編、１９８４年）、Ｍｅｔｈｏｄｓ ｉｎ Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｂｉｏｌｏｇｙ，Ｈｕｍａｎａ Ｐｒｅｓｓ；Ｃｅｌｌ Ｂｉｏｌｏｇｙ：Ａ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ Ｎｏｔｅｂｏｏｋ（Ｊ．Ｅ．Ｃｅｌｌｉｓ編、１９９８年）Ａｃａｄｅｍｉｃ Ｐｒｅｓｓ；Ａｎｉｍａｌ Ｃｅｌｌ Ｃｕｌｔｕｒｅ（Ｒ．Ｉ．Ｆｒｅｓｈｎｅｙ編、１９８７年）；Ｉｎｔｒｏｄｕｃｔｉｏｎ ｔｏ Ｃｅｌｌ ａｎｄ Ｔｉｓｓｕｅ Ｃｕｌｔｕｒｅ（Ｊ．Ｐ．ＭａｔｈｅｒおよびＰ．Ｅ．Ｒｏｂｅｒｔｓ、１９９８年）Ｐｌｅｎｕｍ Ｐｒｅｓｓ；Ｃｅｌｌ ａｎｄ Ｔｉｓｓｕｅ Ｃｕｌｔｕｒｅ：Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ Ｐｒｏｃｅｄｕｒｅｓ（Ａ．Ｄｏｙｌｅ，Ｊ．Ｂ．ＧｒｉｆｆｉｔｈｓおよびＤ．Ｇ．Ｎｅｗｅｌｌ編、１９９３〜１９９８年）Ｊ．Ｗｉｌｅｙ ａｎｄ Ｓｏｎｓ；Ｍｅｔｈｏｄｓ ｉｎ Ｅｎｚｙｍｏｌｏｇｙ（Ａｃａｄｅｍｉｃ Ｐｒｅｓｓ，Ｉｎｃ．）；Ｈａｎｄｂｏｏｋ ｏｆ Ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔａｌ Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ（Ｄ．Ｍ．ＷｅｉｒおよびＣ．Ｃ．Ｂｌａｃｋｗｅｌｌ編）；Ｇｅｎｅ Ｔｒａｎｓｆｅｒ Ｖｅｃｔｏｒｓ ｆｏｒ Ｍａｍｍａｌｉａｎ Ｃｅｌｌｓ（Ｊ．Ｍ．ＭｉｌｌｅｒおよびＭ．Ｐ．Ｃａｌｏｓ編、１９８７年）；Ｃｕｒｒｅｎｔ Ｐｒｏｔｏｃｏｌｓ ｉｎ Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｂｉｏｌｏｇｙ（Ｆ．Ｍ．Ａｕｓｕｂｅｌら編、１９８７年）；ＰＣＲ：Ｔｈｅ Ｐｏｌｙｍｅｒａｓｅ Ｃｈａｉｎ Ｒｅａｃｔｉｏｎ，（Ｍｕｌｌｉｓら編、１９９４年）；Ｃｕｒｒｅｎｔ Ｐｒｏｔｏｃｏｌｓ ｉｎ Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ（Ｊ．Ｅ．Ｃｏｌｉｇａｎら編、１９９１年）；Ｓｈｏｒｔ Ｐｒｏｔｏｃｏｌｓ ｉｎ Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｂｉｏｌｏｇｙ（Ｗｉｌｅｙ ａｎｄ Ｓｏｎｓ、１９９９年）；Ｉｍｍｕｎｏｂｉｏｌｏｇｙ（Ｃ．Ａ．ＪａｎｅｗａｙおよびＰ．Ｔｒａｖｅｒｓ、１９９７年）；Ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ（Ｐ．Ｆｉｎｃｈ、１９９７年）；Ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ：ａ ｐｒａｃｔｉｃａｌ ａｐｐｒｏａｃｈ（Ｄ．Ｃａｔｔｙ編、ＩＲＬ Ｐｒｅｓｓ、１９８８〜１９８９年）；Ｍｏｎｏｃｌｏｎａｌ ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ：ａ ｐｒａｃｔｉｃａｌ ａｐｐｒｏａｃｈ（Ｐ．ＳｈｅｐｈｅｒｄおよびＣ．Ｄｅａｎ編、Ｏｘｆｏｒｄ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ Ｐｒｅｓｓ、２０００年）；Ｕｓｉｎｇ ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ：ａ ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ ｍａｎｕａｌ（Ｅ．ＨａｒｌｏｗおよびＤ．Ｌａｎｅ（Ｃｏｌｄ Ｓｐｒｉｎｇ Ｈａｒｂｏｒ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ Ｐｒｅｓｓ、１９９９年）；Ｔｈｅ Ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ（Ｍ．ＺａｎｅｔｔｉおよびＪ．Ｄ．Ｃａｐｒａ編、Ｈａｒｗｏｏｄ Ａｃａｄｅｍｉｃ Ｐｕｂｌｉｓｈｅｒｓ、１９９５年）などの文献で詳しく説明されている。

定義
以下の用語は、特に示さない限り、以下の意味を有すると理解されるべきである：用語「単離された分子」または「精製された分子」（分子が例えば、ポリペプチド、ポリヌクレオチド、または抗体である場合）は、その起源または派生源によって、（１）本来の状態でそれに付随する天然の関連成分と関連していない、（２）同じ種からの他の分子を実質的に含まない、（３）異なる種の細胞によって発現される、または（４）自然界においては生じない、分子である。したがって、化学的に合成された分子、またはそれが天然に由来する細胞とは異なる細胞系で発現された分子は、その天然の関連成分から「単離」されていることになる。分子はまた、当技術分野で周知の精製技術を使用して単離することにより、天然関連成分を実質的に含まないようにされうる。分子の純度または均一性は、当技術分野で周知の多くの手段によってアッセイされうる。例えば、ポリペプチド試料の純度は、当技術分野で周知の技術を使用してポリペプチドを視覚化するために、ポリアクリルアミドゲル電気泳動およびゲルの染色を使用してアッセイされうる。特定の目的のために、ＨＰＬＣまたは精製のための当技術分野で周知の他の手段を使用することによって、より高い分解能が提供されうる。

本明細書で使用される場合、抗体に関連する「製剤」という用語は、抗体の生物学的活性が有効となることを可能にするような形態の抗体調製物を記述することが意図されている。

「医薬組成物」または「医薬製剤」という用語は、薬学的に許容される担体／賦形剤と組み合わせた抗体の調製物を指す。本明細書で使用される場合、「水性製剤」は、成分として水を含む製剤を指す。

「薬学的に許容される担体／賦形剤」（ビヒクル、添加剤）は、使用される有効成分の有効量を提供するために対象に安全に投与され得るものである。本明細書で使用される「賦形剤」または「担体」という用語は、薬物のための希釈剤、ビヒクル、防腐剤、結合剤または安定剤として一般的に使用される不活性物質を指す。そのような担体を含む組成物は、周知の従来的な方法によって調合される（例えば、Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ’ｓ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ｓｃｉｅｎｃｅｓ、第１８版、Ａ．Ｇｅｎｎａｒｏ編、Ｍａｃｋ Ｐｕｂｌｉｓｈｉｎｇ Ｃｏ．、ペンシルベニア州イーストン、１９９０年；およびＲｅｍｉｎｇｔｏｎ，Ｔｈｅ Ｓｃｉｅｎｃｅ ａｎｄ Ｐｒａｃｔｉｃｅ ｏｆ Ｐｈａｒｍａｃｙ、第２０版、Ｍａｃｋ Ｐｕｂｌｉｓｈｉｎｇ、２０００年を参照）。本明細書で使用される場合、「希釈剤」という用語は、薬学的に許容される（ヒトへの投与に対して安全かつ非毒性の）溶媒を指し、本明細書に記載の製剤の調製に有用である。例示的な希釈剤は、滅菌水および注射用静菌水（ＢＷＦＩ）を含むが、これらに限定されない。

「抗体」は、免疫グロブリン分子の可変領域に位置する少なくとも１つの抗原認識部位を介して、炭水化物、ポリヌクレオチド、脂質、ポリペプチドなどの標的に特異的に結合することができる免疫グロブリン分子である。本明細書で使用される場合、この用語は、完全なポリクローナル抗体またはモノクローナル抗体だけでなく、特に明記しない限り、特異的結合について完全な抗体と競合するその抗原結合フラグメント／部分、抗原結合部分を含む融合タンパク質、および抗原認識部位を含む免疫グロブリン分子の他の改変構成を包含する。抗原結合部分は、例えば、Ｆａｂ、Ｆａｂ’、Ｆ（ａｂ’）２、Ｆｄ、Ｆｖ、ドメイン抗体（ｄＡｂ、例えば、サメおよびラクダ抗体）、相補性決定領域（ＣＤＲ）を含むフラグメント、一本鎖可変フラグメント抗体（ｓｃＦｖ）、マキシボディ、ミニボディ、イントラボディ、ダイアボディ、トリアボディ、テトラボディ、ｖ−ＮＡＲおよびｂｉｓ−ｓｃＦｖ、およびポリペプチドへの特異的抗原結合を与えるのに十分な免疫グロブリンの少なくとも一部を含むポリペプチドを含む。抗体は、ＩｇＧ、ＩｇＡ、またはＩｇＭ（またはそれらのサブクラス）などの任意のクラスの抗体を含み、特定のクラスのものである必要はない。免疫グロブリンは、その重鎖の定常領域の抗体アミノ酸配列に応じて、異なるクラスに割り当てられ得る。免疫グロブリンには、ＩｇＡ、ＩｇＤ、ＩｇＥ、ＩｇＧ、およびＩｇＭの５つの主要なクラスがあり、これらのいくつかは、例えば、ＩｇＧ１、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３、ＩｇＧ４、ＩｇＡ１、およびＩｇＡ２といったサブクラス（アイソタイプ）にさらに分類されうる。免疫グロブリンの異なるクラスに対応する重鎖定常領域は、それぞれアルファ、デルタ、イプシロン、ガンマ、およびミューと呼ばれる。異なるクラスの免疫グロブリンのサブユニット構造と三次元構成は、周知である。

抗体の「可変領域」は、抗体軽鎖の可変領域または抗体重鎖の可変領域を単独で、または組み合わせで指す。当技術分野で知られているように、重鎖および軽鎖の可変領域はそれぞれ、超可変領域としても知られる３つの相補性決定領域（ＣＤＲ）によって連結された４つのフレームワーク領域（ＦＲ）からなり、抗体の抗原結合部位の形成に寄与する。特にＣＤＲの外側（すなわち、フレームワーク領域内）のアミノ酸残基の置換を伴う対象可変領域のバリアントが望まれる場合、適切なアミノ酸置換、好ましくは保存的アミノ酸置換が、対象可変領域と同じカノニカルクラスのＣＤＲ１およびＣＤＲ２配列を含む他の抗体の可変領域と、対象可変領域とを比較することによって同定され得る（ＣｈｏｔｈｉａおよびＬｅｓｋ、Ｊ Ｍｏｌ Ｂｉｏｌ １９６（４）：９０１〜９１７頁、１９８７年）。

特定の態様において、ＣＤＲの明確な描写および抗体の結合部位を含む残基の同定は、抗体の構造を解明すること、および／または抗体−リガンド複合体の構造を解明することによって達成される。特定の態様では、それは、Ｘ線結晶学などの当技術分野で知られている様々な技法のいずれかによって達成され得る。特定の態様では、ＣＤＲ領域を特定または見積もるために、様々な分析方法が使用され得る。特定の態様では、ＣＤＲ領域を特定または見積もるために、様々な分析方法が使用され得る。そのような方法の例は、Ｋａｂａｔ定義、Ｃｈｏｔｈｉａ定義、ＡｂＭ定義、コンタクト定義、およびコンフォメーション定義を含むが、これらに限定されない。

Ｋａｂａｔ定義は、抗体中の残基に番号を付けるための基準であり、通常、ＣＤＲ領域を同定するために使用される。例えば、Ｊｏｈｎｓｏｎ＆Ｗｕ、２０００、Ｎｕｃｌｅｉｃ Ａｃｉｄｓ Ｒｅｓ．、２８：２１４〜８頁を参照。Ｃｈｏｔｈｉａ定義は、Ｋａｂａｔ定義に似ているが、Ｃｈｏｔｈｉａ定義は特定の構造ループ領域の位置を考慮に入れている。例えば、Ｃｈｏｔｈｉａら、１９８６年、Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．、１９６：９０１〜１７頁；Ｃｈｏｔｈｉａら、１９８９年、Ｎａｔｕｒｅ、３４２：８７７〜８３頁を参照。ＡｂＭ定義は、抗体構造をモデル化するＯｘｆｏｒｄ Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｇｒｏｕｐによって作成されたコンピュータープログラムの統合スイートを使用する。例えば、Ｍａｒｔｉｎら、１９８９年、Ｐｒｏｃ Ｎａｔｌ Ａｃａｄ Ｓｃｉ（ＵＳＡ）、８６：９２６８〜９２７２頁；「ＡｂＭ^ＴＭ，Ａ Ｃｏｍｐｕｔｅｒ Ｐｒｏｇｒａｍ ｆｏｒ Ｍｏｄｅｌｉｎｇ Ｖａｒｉａｂｌｅ Ｒｅｇｉｏｎｓ ｏｆ Ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ」、英国オックスフォード；Ｏｘｆｏｒｄ Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ，Ｌｔｄ．を参照。ＡｂＭ定義は、Ｓａｍｕｄｒａｌａら、１９９９年、ＰＲＯＴＥＩＮＳ，Ｓｔｒｕｃｔｕｒｅ，Ｆｕｎｃｔｉｏｎ ａｎｄ Ｇｅｎｅｔｉｃｓ Ｓｕｐｐｌ．、３：１９４〜１９８頁の「Ａｂ Ｉｎｉｔｉｏ Ｐｒｏｔｅｉｎ Ｓｔｒｕｃｔｕｒｅ Ｐｒｅｄｉｃｔｉｏｎ Ｕｓｉｎｇ ａ Ｃｏｍｂｉｎｅｄ ＨｉｅｒａｒｃｈｉｃａｌＡｐｐｒｏａｃｈ」に記述されるものなどの知識データベースとａｂ ｉｎｉｔｉｏ法の組み合わせを使用して、一次配列から抗体の三次構造をモデル化する。コンタクト定義は、利用可能な複雑な結晶構造の分析に基づく。例えば、ＭａｃＣａｌｌｕｍら、１９９６年、Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．、５：７３２〜４５頁を参照。本明細書においてＣＤＲの「コンフォメーション定義」と呼ばれる別のアプローチでは、ＣＤＲの位置は、抗原結合にエンタルピー的に寄与する残基として同定されうる。例えば、Ｍａｋａｂｅら、２００８年、Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｂｉｏｌｏｇｉｃａｌ Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ、２８３：１１５６〜１１６６頁を参照。なお、他のＣＤＲ境界定義は、上記のアプローチの１つに厳密には従わない場合があり、特定の残基または残基のグループが抗原結合に有意に影響を与えないという予測または実験結果に照らして、短縮または延長され得るものの、それにもかかわらず、ＫａｂａｔのＣＤＲの少なくとも一部とは重複するであろう。本明細書で使用される場合、ＣＤＲは、アプローチの組み合わせを含む、当技術分野で知られている任意のアプローチによって定義されるＣＤＲを指しうる。本明細書で使用される方法は、これらのアプローチのいずれかに従って定義されたＣＤＲを利用しうる。複数のＣＤＲを含む任意の所与の態様について、ＣＤＲは、Ｋａｂａｔ、Ｃｈｏｔｈｉａ、拡張、ＡｂＭ、コンタクト、および／またはコンフォメーション定義のいずれに従って定義されてもよい。

当技術分野で知られているように、抗体の「定常領域」は、抗体軽鎖の定常領域または抗体重鎖の定常領域を単独で、または組み合わせで指す。
本明細書で使用される場合、「モノクローナル抗体」は、実質的に均質である抗体、すなわち、集団を構成する個々の抗体が、少量で存在しうる天然に発生する可能性のある変異を除いて同一である抗体の集団から得られる抗体を指す。モノクローナル抗体は、非常に特異的であり、単一の抗原部位に対して向けられている。さらに、通常、異なる決定基（エピトープ）に対して向けられた異なる抗体を含む、ポリクローナル抗体調製物とは対照的に、各モノクローナル抗体は、抗原上の単一の決定基に対して向けられている。「モノクローナル」という修飾語は、実質的に均一な抗体集団から得られる抗体の特徴を示し、特定の方法による抗体の産生を必要とすると解釈されるべきではない。例えば、本発明に従って使用されるモノクローナル抗体は、ＫｏｈｌｅｒおよびＭｉｌｓｔｅｉｎ，１９７５年、Ｎａｔｕｒｅ ２５６：４９５頁によって最初に記述されたハイブリドーマ法によって作製されても、または米国特許第４，８１６，５６７号に記載されているような組換えＤＮＡ法によって作製されてもよい。モノクローナル抗体はまた、例えば、ＭｃＣａｆｆｅｒｔｙら、１９９０年、Ｎａｔｕｒｅ ３４８：５５２〜５５４頁に記載されている技術を使用して生成されたファージライブラリーから単離されてもよい。

「ヒト抗体」は、ヒトによって産生される抗体のアミノ酸配列に対応するアミノ酸配列を有するもの、および／または本明細書に開示されるヒト抗体を作製するための技術のいずれかを使用して作製されたものである。ヒト抗体のこの定義は、非ヒト抗原結合残基を含むヒト化抗体を特異的に除外する。本明細書で使用される場合、「ヒト抗体」という用語は、ヒト生殖系列免疫グロブリン配列に由来する可変および定常領域を有する抗体を含むことが意図される。ヒト抗体のこの定義は、少なくとも１つのヒト重鎖ポリペプチドまたは少なくとも１つのヒト軽鎖ポリペプチドを含む抗体を含む。本発明のヒト抗体は、例えばＣＤＲ、特にＣＤＲ３中に、ヒト生殖系列免疫グロブリン配列によってコードされないアミノ酸残基（例えば、ｉｎ ｖｉｔｒｏでのランダムまたは部位特異的な突然変異誘発またはｉｎ ｖｉｖｏでの体細胞突然変異によって導入される変異）を含みうる。しかしながら、本明細書で使用される「ヒト抗体」という用語は、マウスなどの別の哺乳動物種の生殖系列に由来するＣＤＲ配列がヒトフレームワーク配列上に移植された抗体を含むことは意図されない。

「キメラ抗体」という用語は、可変領域配列がマウス抗体に由来し、定常領域配列はヒト抗体に由来する抗体など、可変領域配列が１つの種に由来し、定常領域配列が別の種に由来する抗体を指すことが意図される。

本明細書で使用される場合、「ヒト化」抗体は、非ヒト免疫グロブリンに由来する最小限の配列を含むキメラ免疫グロブリン、免疫グロブリン鎖、またはそれらのフラグメント（Ｆｖ、Ｆａｂ、Ｆａｂ’、Ｆ（ａｂ’）２または他の抗体の抗原結合性サブ配列など）である非ヒト（例えば、マウス）抗体の形態を指す。好ましくは、ヒト化抗体は、レシピエントの相補性決定領域（ＣＤＲ）由来の残基が、所望の特異性、親和性、および能力を有するマウス、ラット、またはウサギなどの非ヒト種（ドナー抗体）のＣＤＲ由来の残基で置き換えられているヒト免疫グロブリン（レシピエント抗体）である。場合により、ヒト免疫グロブリンのＦｖフレームワーク領域（ＦＲ）残基が、対応する非ヒト残基に置き換えられる。さらに、ヒト化抗体は、レシピエント抗体にも、移入されるＣＤＲまたはフレームワーク配列にも見出されないが、抗体の性能をさらに洗練および最適化するために含まれる残基を含みうる。一般に、ヒト化抗体は、ＣＤＲ領域の全てまたは実質的に全てが、非ヒト免疫グロブリンのものに対応し、ＦＲ領域の全てまたは実質的に全てが、ヒト免疫グロブリンコンセンサス配列のものである、少なくとも１つ、典型的には２つの可変ドメインの実質的に全てを含む。ヒト化抗体はまた、最適には、免疫グロブリン定常領域またはドメイン（Ｆｃ）の少なくとも一部、典型的にはヒト免疫グロブリンのものも含む。好ましいものは、ＷＯ９９／５８５７２に記載されているように修飾されたＦｃ領域を有する抗体である。他の形態のヒト化抗体は、元の抗体と比較して変更された１つまたは複数のＣＤＲ（ＣＤＲ Ｌ１、ＣＤＲ Ｌ２、ＣＤＲ Ｌ３、ＣＤＲ Ｈ１、ＣＤＲ Ｈ２、またはＣＤＲ Ｈ３）を有し、これらは、元の抗体の１つまたは複数のＣＤＲに「由来する」１つまたは複数のＣＤＲとも呼ばれる。

モノクローナル抗体をヒト化するための４つの一般的なステップがある。これらは：（１）出発抗体の軽鎖および重鎖可変ドメインのヌクレオチドおよび予測されるアミノ酸配列の決定、（２）ヒト化抗体の設計、すなわち、ヒト化プロセス中に使用する抗体フレームワーク領域の決定、（３）実際のヒト化方法／技術、および（４）ヒト化抗体のトランスフェクションおよび発現である。例えば、米国特許第４，８１６，５６７号、第５，８０７，７１５号；第５，８６６，６９２号；第６，３３１，４１５号；第５，５３０，１０１号；第５，６９３，７６１号；第５，６９３，７６２号；第５，５８５，０８９号；および第６，１８０，３７０号を参照されたい。

げっ歯類Ｖ領域または改変されたげっ歯類Ｖ領域およびヒト定常ドメインに融合したそれらの関連する相補性決定領域（ＣＤＲ）を有するキメラ抗体を含む、非ヒト免疫グロブリンに由来する抗原結合部位を含む多くの「ヒト化」抗体分子が記述されている。例えば、Ｗｉｎｔｅｒら、Ｎａｔｕｒｅ ３４９：２９３〜２９９頁（１９９１年）、Ｌｏｂｕｇｌｉｏら、Ｐｒｏｃ．Ｎａｔ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ ８６：４２２０〜４２２４頁（１９８９年），Ｓｈａｗら、Ｊ Ｉｍｍｕｎｏｌ．１３８：４５３４〜４５３８頁（１９８７年）、およびＢｒｏｗｎら、Ｃａｎｃｅｒ Ｒｅｓ．４７：３５７７〜３５８３頁（１９８７年）を参照。他の参考文献は、適切なヒト抗体定常ドメインとの融合の前に、ヒト支持フレームワーク領域（ＦＲ）に移植されたげっ歯類ＣＤＲを記載している。例えば、Ｒｉｅｃｈｍａｎｎら、Ｎａｔｕｒｅ ３３２：３２３〜３２７頁（１９８８年）、Ｖｅｒｈｏｅｙｅｎら、Ｓｃｉｅｎｃｅ ２３９：１５３４〜１５３６頁（１９８８年）、およびＪｏｎｅｓら、Ｎａｔｕｒｅ ３２１：５２２〜５２５頁（１９８６年）を参照。別の参考文献は、組換え的に修飾したげっ歯類フレームワーク領域によって支持されるげっ歯類ＣＤＲについて記載している。例えば、欧州特許公開第０５１９５９６号を参照。これらの「ヒト化」分子は、ヒトレシピエントにおけるげっ歯類抗ヒト抗体分子の治療用途の期間と有効性を制限する、これらの部分に対する望ましくない免疫応答を最小限に抑えるように設計されている。例えば、抗体定常領域は、免疫学的に不活性となる（例えば、補体溶解を引き起こさない）ように改変され得る。例えば、ＰＣＴ公開番号第ＷＯ９９／５８５７２号；英国特許出願第９８０９９５１．８号を参照。利用されうる他の抗体ヒト化方法は、Ｄａｕｇｈｅｒｔｙら、Ｎｕｃｌ．Ａｃｉｄｓ Ｒｅｓ．１９：２４７１〜２４７６頁（１９９１年）および米国特許第６，１８０，３７７号；第６，０５４、２９７号；第５，９９７，８６７号；第５，８６６，６９２号；第６，２１０，６７１号；および第６，３５０，８６１号；およびＰＣＴ公開番号ＷＯ０１／２７１６０に開示されている。

本明細書で使用される場合、「組換え抗体」という用語は、組換え法によって調製、発現、作出または単離されたあらゆる抗体、例えば、宿主細胞にトランスフェクトされた組換え発現ベクターを使用して発現された抗体、組換えコンビナトリアルヒト抗体ライブラリーから単離された抗体、ヒト免疫グロブリン遺伝子を遺伝子導入した動物（例えば、マウス）から単離された抗体、または組換えヒト抗体がｉｎ ｖｉｔｒｏ変異誘発に供され得る、調製された抗体を含むことが意図される。

「エピトープ」という用語は、抗体の１つまたは複数の抗原結合領域で抗体によって認識され、結合されることができる分子の部分を指す。エピトープはしばしば、アミノ酸や糖側鎖などの分子の表面群からなり、特定の３次元構造特性と特定の電荷特性を有している。いくつかの態様において、エピトープは、タンパク質エピトープであり得る。タンパク質エピトープは、直鎖状または立体構造的であり得る。直鎖状エピトープでは、タンパク質と相互作用性分子（抗体など）との間の相互作用の全てのポイントが、タンパク質の一次アミノ酸配列に沿って直鎖状に生じる。「非直鎖状エピトープ」または「立体構造的エピトープ」は、エピトープに特異的な抗体が結合する抗原性タンパク質内の隣接しないポリペプチド（またはアミノ酸）を含む。本明細書で使用される「抗原性エピトープ」という用語は、当技術分野で周知の任意の方法、例えば、従来的なイムノアッセイによって決定される、抗体が特異的に結合できる抗原の一部として定義される。いったん抗原上の所望のエピトープが決定されれば、例えば、本明細書に記載の技術を使用して、そのエピトープに対する抗体を生成することが可能である。あるいは、発見プロセス中に、抗体の生成および特徴付けによって、望ましいエピトープに関する情報が明らかにされうる。この情報から、次に、同じエピトープへの結合について、抗体を競合的にスクリーニングすることが可能である。これを達成するためのアプローチは、ＴＦＰＩへの結合について、例えば、抗体が抗原への結合について競合する、互いに競合または交差競合する抗体を見つけるために、競合および交差競合試験を実施することである。

「アンタゴニスト抗体」という用語は、標的に結合し、その標的の生物学的効果を防止または低減する抗体を指す。いくつかの態様において、この用語は、抗体が結合する標的、例えば、ＴＦＰＩが生物学的機能を発揮するのを減少させる抗体を表し得る。

エピトープに「優先的に結合する」または「特異的に結合する」（本明細書で交換可能に使用される）抗体は、当技術分野でよく理解されている用語であり、そのような特異的または優先的結合を決定する方法もまた、当技術分野では周知である。分子は、代替の細胞または物質に対するよりも、特定の細胞または物質に対して、より頻繁に、より迅速に、より長い持続時間および／または、より高い親和性で反応または会合する場合、「特異的結合」または「優先的結合」を示すと言われる。抗体が他の物質に結合するよりも高い親和性、結合力で、より容易に、および／またはより長い持続時間、結合する場合、それは標的に「特異的に結合」または「優先的に結合」する。例えば、ＴＦＰＩエピトープに特異的または優先的に結合する抗体は、他の配列に結合するよりも、より高い親和性、結合力で、より容易に、および／またはより長い持続時間、このエピトープ配列に結合する抗体である。また、この定義を読むことにより、例えば、第１の標的に特異的または優先的に結合する抗体（または部分またはエピトープ）は、第２の標的に特異的または優先的に結合しても、しなくてもよいことも理解される。したがって、「特異的結合」または「優先的結合」は、排他的結合を（含んでもよいが）必ずしも要しない。一般には、必ずしもそうとは限らないが、結合への言及は優先的な結合を意味する。

目的の分子に特異的に結合する抗体またはペプチドを選択するために、様々なアッセイ形式が使用されうる。例えば、固相ＥＬＩＳＡ免疫アッセイ、免疫沈降、Ｂｉａｃｏｒｅ（商標）（ＧＥ Ｈｅａｌｔｈｃａｒｅ、ニュージャージー州ピスカタウェイ）、ＫｉｎＥｘＡ、蛍光活性化セルソーティング（ＦＡＣＳ）、Ｏｃｔｅｔ（商標）（ＦｏｒｔｅＢｉｏ、Ｉｎｃ．、カリフォルニア州メンローパーク）およびウエスタンブロット分析は、抗原または受容体と特異的に反応する抗体、または同族のリガンドまたは結合パートナーと特異的に結合するそのリガンド結合部分を同定するために使用されうる多くのアッセイの一部である。典型的には、特異的または選択的な反応は、バックグラウンドシグナルまたはノイズの少なくとも２倍、より典型的にはバックグラウンドの１０倍超、さらにより典型的にはバックグラウンドの５０倍超、より典型的にはバックグラウンドの１００倍超、さらにより典型的にはバックグラウンドの５００倍超、さらにより典型的にはバックグラウンドの１０００倍超、そしてさらにより典型的にはバックグラウンドの１０，０００倍超となる。また、平衡解離定数（Ｋ_Ｄ）が７ｎＭ以下の場合、抗体は抗原に「特異的に結合」すると言われる。

「結合親和性」という用語は、本明細書では、２つの分子、例えば、抗体またはそのフラグメントと抗原との間の非共有相互作用の強度の尺度として使用される。「結合親和性」という用語は、一価の相互作用（固有の活性）を説明するために使用される。

一価の相互作用を介した２つの分子、例えば、抗体またはそのフラグメントと抗原との間の結合親和性は、解離定数（Ｋ_Ｄ）の決定によって定量化されうる。次に、Ｋ_Ｄは、例えば、表面プラズモン共鳴（ＳＰＲ）法（Ｂｉａｃｏｒｅ）を使用して、複合体の形成および解離の動力学を測定することによって決定され得る。一価複合体の会合および解離に対応する速度定数は、それぞれ、結合速度定数ｋ_ａ（またはｋ_ｏｎ）および解離速度定数ｋ_ｄ（またはｋ_ｏｆｆ）と呼ばれる。Ｋ_Ｄは、式Ｋ_Ｄ＝ｋ_ｄ／ｋ_ａによって、ｋ_ａおよびｋ_ｄに関連付けられる。解離定数の値は、周知の方法によって直接的に決定することができ、例えば、Ｃａｃｅｃｉら（１９８４年、Ｂｙｔｅ ９：３４０〜３６２頁）に記載されているような方法によって、複雑な混合物についてさえ計算され得る。例えば、Ｋ_Ｄは、Ｗｏｎｇ＆Ｌｏｈｍａｎ（１９９３年、Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ ９０：５４２８〜５４３２頁）によって開示されたものなどのダブルフィルターニトロセルロースフィルター結合アッセイを使用して確立されうる。例えば、ＥＬＩＳＡ、ウエスタンブロット、ＲＩＡ、およびフローサイトメトリー分析、および本明細書の他の箇所に例示される他のアッセイを含む、標的抗原に対する抗体などのリガンドの結合能力を評価するための他の標準的なアッセイが、当技術分野において知られている。抗体の結合動態および結合親和性はまた、例えばＢｉａｃｏｒｅ（商標）システムまたはＫｉｎＥｘＡを使用することにより、表面プラズモン共鳴（ＳＰＲ）などの当技術分野で知られている標準的なアッセイによっても評価され得る。

その標的に特異的に結合する抗体は、その標的に高い親和性で結合しうる、すなわち、上記のように低いＫ_Ｄを示し、より低い親和性で他の非標的分子に結合しうる。例えば、抗体は、１×１０^−６Ｍ以上、より好ましくは１×１０^−５Ｍ以上、より好ましくは１×１０^−４Ｍ以上、より好ましくは１×１０^−３Ｍ以上、さらにより好ましくは１×１０^−２Ｍ以上のＫ_Ｄで、非標的分子に結合しうる。本発明の抗体は、好ましくは、別の非ＴＦＰＩ分子への結合に対する親和性よりも少なくとも２倍、１０倍、５０倍、１００倍、２００倍、５００倍、１，０００倍、または１０，０００倍以上の親和性で、その標的に結合することができる。

本明細書で使用される場合、抗体の「免疫特異的」結合は、抗体の抗原結合部位とその抗体によって認識される特異的抗原との間で起こる抗原特異的結合相互作用を指す（すなわち、抗体はＥＬＩＳＡまたは他のイムノアッセイにおいてタンパク質と反応し、無関係のタンパク質とは検出可能に反応しない）。

抗体に関して本明細書で使用される「競合する」という用語は、第一の抗体またはその抗原結合部分が、第二の抗体またはその抗原結合部分の結合と十分に類似した方法でエピトープに結合し、第一の抗体とその同族のエピトープとの結合の結果が、第二の抗体の非存在下での第一の抗体の結合と比較して、第二の抗体の存在下において検出可能に減少することを意味する。代替的に、第一の抗体の存在下において第二の抗体のそのエピトープへの結合も検出可能に減少する場合もあり得るが、そうである必要はない。すなわち、第一の抗体は、そのエピトープへの第二の抗体の結合を阻害することができるが、その第二の抗体は、そのそれぞれのエピトープへの第一の抗体の結合を阻害しない。しかしながら、各抗体が他の抗体とその同族のエピトープまたはリガンドとの結合を検出可能に阻害する場合、同程度、または多かれ少なかれ程度の差はあれ、抗体はそれぞれのエピトープの結合について互いに「交差競合」すると言われる。競合抗体と交差競合抗体の両方が本発明に包含される。そのような競合または交差競合が生じるメカニズム（例えば、立体障害、コンフォメーション変化、または共通のエピトープもしくはその一部への結合）に関係なく、当業者は、本明細書で提供される教示に基づいて、そのような競合および／または交差競合する抗体が、本明細書に開示される方法に包含され、有用となり得ることを認識するであろう。

本明細書で使用される場合、「組織因子経路インヒビターまたはＴＦＰＩ」という用語は、ＴＦＰＩの活性の少なくとも一部を保持する任意の形態のＴＦＰＩおよびそのバリアントを指す。ＴＦＰＩは、プロテアーゼインヒビターを含む多価クニッツドメインである。ヒト、マウス、カニクイザル、ウサギ、およびラットのＴＦＰＩの例示的な配列が表２０に提供される。ヒトＴＦＰＩは、ＴＦＰＩ−αおよびＴＦＰＩ−βの２つの主要な形態を有する細胞外糖タンパク質である。２７６アミノ酸のグリコシル化タンパク質（分子量４３ｋＤ）であるＴＦＰＩアルファは、ＴＦＰＩの最も大きな形態であり、３つのクニッツ様ドメインと塩基性カルボキシ末端領域からなる。選択的スプライシングは、クニッツドメイン１（Ｋ１）とクニッツドメイン２（Ｋ２）を含むが、クニッツドメイン３（Ｋ３）と塩基性領域を欠いた代替的なＣ末端部分を含むＴＦＰＩ−βを生成する。ＴＦＰＩ−βは、グリコシルホスファチジルイノシトール（ＧＰＩ）アンカーによる翻訳後修飾によって細胞膜に固定される。

ＴＦＰＩの主な標的は、凝固カスケードの開始段階における重要な因子であるプロテアーゼの第Ｘａ因子（ＦＸａ）と第ＶＩＩａ因子（ＦＶＩＩａ）である。生化学的分析は、Ｋ２がＦＸａのインヒビターである一方、Ｋ１がＦＶＩＩａ−組織因子複合体を阻害することを明らかにしている。Ｋ３の役割は、直接的なプロテアーゼ阻害活性を持たないように見えることから、不明であるが、補因子プロテインＳの認識部位として機能する可能性がある。ＴＦＰＩ−αに固有のＣ末端ドメインは、血小板表面上のプロトロンビナーゼの認識に関与している可能性がある。

クニッツドメイン１（Ｋ１）は、配列番号２のアミノ酸残基２６〜７６に対応し、クニッツドメイン２（Ｋ２）は、配列番号２の残基９１〜１４７に対応している。他のＴＦＰＩホモログ、アイソフォーム、バリアント、またはフラグメントからのＫ１およびＫ２ドメインが、配列番号２に対する配列アラインメントまたは構造アラインメントによって同定され得る。

本開示のＴＦＰＩは、任意の適切な生物に由来しうる任意の天然に生じる形態のＴＦＰＩを含む。例えば、ＴＦＰＩは、ヒト、マウス、ラット、非ヒト霊長類、ウシ、ヒツジ、イヌ、ネコ、またはブタのＴＦＰＩなど、哺乳動物のＴＦＰＩでありうる。特定の態様では、ＴＦＰＩはヒトＴＦＰＩである。ＴＦＰＩは、ＴＦＰＩの成熟形態（すなわち、適切な細胞内で翻訳後プロセシングを受けたＴＦＰＩタンパク質）でありうる。そのような成熟ＴＦＰＩタンパク質は、例えば、グリコシル化されていてもよい。

本開示のＴＦＰＩは、天然に生じるＴＦＰＩに由来する任意の機能的フラグメントまたはバリアントを含む。ＴＦＰＩの機能的フラグメントは、第Ｘａ因子（ＦＸａ）を阻害する能力、ＦＶＩＩａ−組織因子複合体の活性を阻害する能力、および／または凝固または止血の負の調節因子として機能する能力など、ＴＦＰＩの活性を保持するＴＦＰＩの任意の要素または部分であり得る。例えば、機能的フラグメントは、ＴＦＰＩのＫ１ドメイン、Ｋ２ドメイン、またはＫ１ドメインとＫ２ドメインの両方などのクニッツドメインを含みうる。

機能的バリアントは、天然に生じるＴＦＰＩと比較して、１つ以上の変異を含むが、それでも、第Ｘａ因子（ＦＸａ）を阻害する能力、またはＦＶＩＩａ−組織因子複合体の活性を阻害する能力などの天然に生じるＴＦＰＩの活性を保持し得る。例えば、バリアントは、配列番号１、配列番号２、配列番号３、配列番号４、配列番号５、配列番号６、または配列番号７に記載された配列と少なくとも６０％、７０％、８０％、８５％、９０％、９１％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９７％、９８％または９９％同一であるといった、様々な程度の配列同一性を配列番号１、２、３、４、５、６、または７に対して有しうる。

本発明のＴＰＦＩフラグメント、バリアント、アイソフォームおよびホモログは、本明細書に記載されるように、重要なエピトープ残基（ＴＦＰＩ−２３およびＴＦＰＩ−１０６抗体が使用される場合、Ｉｌｅ１０５、Ａｒｇ１０７、およびＬｅｕ１３１など）を維持すべきである。さらに、ＴＦＰＩは、ＴＦＰＩのＫ２ドメインの５以上、８以上、１０以上、１２以上、または１５以上の表面アクセス可能残基を含みうる。表面アクセス可能残基は、４０％を超える相対的アクセス可能性を有する残基である。

例えば、ＴＦＰＩのＫ２ドメイン（例えば、配列番号２を参照）の場合、以下のアミノ酸残基は、４０％を超える相対的アクセス可能性を有している：９４〜９５、９８、１００〜１１０、１１８〜１２１、１２３〜１２４、１３１、１３４、１３８〜１４２および１４４〜１４５。ＴＦＰＩは、これらの残基のうち５以上、８以上、１０以上、１２以上、または１５以上を含むＴＦＰＩのフラグメントなど、これらの残基のうち５以上、８以上、１０以上、１２以上、または１５以上を含みうる。

ＴＦＰＩにおける特定のアミノ酸残基の位置は、配列番号２（ヒトＴＦＰＩα Ｋ１Ｋ２Ｋ３）に従って番号付けられる。しかしながら、本発明は、配列番号２に限定はされない。他のＴＦＰＩホモログ、アイソフォーム、バリアント、またはフラグメントからの対応する残基は、当技術分野で知られている配列アラインメントまたは構造アラインメントに従って同定され得る。例えば、アラインメントは、手作業で、またはＣｌｕｓｔａｌＷ２もしくは「ＢＬＡＳＴ２Ｓｅｑｕｅｎｃｅｓ」などの周知の配列アラインメントプログラムをデフォルトのパラメータを用いて使用して行われ得る。例えば、配列番号２のＡｒｇ１０７は、マウスＴＦＰＩ Ｋ１Ｋ２（配列番号４）のＡｒｇ１０４に対応する。

本明細書で使用される場合、「ＴＦＰＩアンタゴニスト抗体」（交換可能に「ＴＦＰＩ抗体」または「抗ＴＦＰＩ抗体」とも呼ばれる）は、ＴＦＰＩに結合し、ＴＦＰＩの生物学的活性および／またはＴＦＰＩシグナリングにより媒介される下流の経路を阻害することができる抗体を指す。ＴＦＰＩアンタゴニスト抗体は、リガンド結合および／またはＴＦＰＩへの細胞応答の誘発などの、ＴＦＰＩシグナル伝達によって媒介される下流の経路を含む、ＴＦＰＩの生物学的活性を遮断、拮抗、抑制または低減する（有意にそうすることを含む）抗体を包含する。本発明の目的のために、「ＴＦＰＩアンタゴニスト抗体」という用語は、以前に同定された全ての用語、タイトル、および機能状態および特徴を包含し、それにより、ＴＦＰＩ自体、ＴＦＰＩの生物活性（その血液凝固のあらゆる側面を媒介する能力を含むがそれに限定されない）、または生物学的活性の結果が、意味のある程度に実質的に無効化、減少、または中和されることが明確に理解されるであろう。いくつかの態様において、ＴＦＰＩアンタゴニスト抗体は、ＴＦＰＩに結合し、ＴＦＰＩが組織因子（ＴＦ）／第ＶＩＩａ因子複合体に結合すること、および／またはその阻害を防止する。他の態様において、ＴＦＰＩ抗体は、ＴＦＰＩに結合し、ＴＦＰＩが第Ｘａ因子に結合すること、および／またはその阻害を防止する。ＴＦＰＩアンタゴニスト抗体の例は、本明細書中に提供されている。

薬物、製剤、化合物、または医薬組成物の「有効量」は、標的となる病的状態の緩和または軽減などの臨床結果を含む、有益なまたは望ましい結果をもたらすのに十分な量である。有効量は、１回または複数回の投与で投与され得る。本発明の目的では、有効量の薬物、化合物、または医薬組成物は、標的とされる病的状態を治療、改善、またはその強度を低減するのに十分な量である。臨床的な文脈において理解されるように、有効量の薬物、化合物、または医薬組成物は、別の薬物、化合物、または医薬組成物と組み合わせて達成されても、されなくてもよい。したがって、「有効量」は、１つまたは複数の治療剤を投与する状況で考慮されてもよく、単一の薬剤は、１つまたは複数の他の薬剤と組み合わせて望ましい結果が達成されうるか、達成される場合、有効量で与えられると見なされうる。

「治療有効量」は、所望の治療結果を達成するために必要な投与量および期間において有効な量を指し、これは、抗ＴＦＰＩ抗体の文脈においては、標的化された病的状態、例えば、血友病Ａ、Ｂ、またはＣなどの出血性障害の治療または予防的阻止を含む。投与量の値は、緩和されるべき状態の重症度によって変化しうることに留意されたい。任意の特定の対象について、特定の投与計画は、個々の必要性および組成物を投与する者または投与を監督する者の専門的判断に従って経時的に調整されるべきであり、本明細書に記載の投与範囲は例示的なものに過ぎず、特許請求された組成物の範囲または実施を制限することを意図するものではないことをさらに理解されたい。同様に、抗体または抗体部分の治療有効量は、個体の病状、年齢、性別、および体重などの因子、個体において所望される応答を誘発する抗体または抗体部分の能力、および抗体製剤の所望の投与経路に応じて変化しうる。治療有効量はまた、抗体または抗体部分の毒性または有害効果が、治療上の有益な効果によって凌駕される量でもある。

抗ＴＦＰＩ抗体の治療有効量は、例えば、２０１９年１０月９日に出願されたＰＣＴ／ＩＢ２０１９／０５８５９７（ＵＳ６２／８０２，４０１およびＵＳ６２／７４４，４８１に対する優先権を主張）に記載されており、その全体が本明細書に組み込まれる。いくつかの態様において、治療有効量は、約３００ｍｇの初期用量と、それに続く約１５０ｍｇのその後の毎週（すなわち、週に１回）の用量を含む。いくつかの態様において、治療有効量は、約１５０ｍｇの初期用量と、その後の約１５０ｍｇの毎週（すなわち、週に１回）の用量を含む。いくつかの態様において、治療有効量は、約３００ｍｇの初期用量と、その後の約３００ｍｇの毎週（すなわち、週に１回）の用量を含む。いくつかの態様において、治療有効量は、約４５０ｍｇの初期用量と、その後の毎週（すなわち、週に１回）の約４５０ｍｇの用量を含む。

本明細書で使用される場合、「治療」という用語は、治療的処置と予防的または防止的手段の両方を指し、その目的は、標的となる病的状態（例えば、抗体による治療から利益が得られるであろう任意の状態）を予防または減速（軽減）することである。これは、問題となっている障害に哺乳動物をかかりやすくする病的状態を含む、慢性および急性の障害または疾患を含む。治療が必要な者は、すでにその状態にある者、その状態になりやすい者、またはその状態を予防する必要がある者を含む。本明細書で使用される場合、「治療」は、以下の１つまたは複数を含むがこれらに限定されない、有益なまたは所望される臨床結果を得るためのアプローチである：重症度の軽減、病的状態に関連する１つまたは複数の症状の緩和を含む。

本明細書で使用される場合、治療の目的のための「対象」または「個人」という用語は、任意の対象を含み、好ましくは、標的の病的状態（例えば、血友病）の治療を必要とする対象である。予防の目的では、対象は任意の対象であり、好ましくは、標的となる病的状態を発症するリスクがあるか、または発症する素因がある対象である。「対象」という用語は、生物、例えば、原核生物および真核生物を含むことが意図される。対象の例は、哺乳動物、例えば、ヒト、イヌ、ウシ、ウマ、ブタ、ヒツジ、ヤギ、ネコ、マウス、ウサギ、ラット、およびトランスジェニック非ヒト動物を含む。本発明の特定の態様では、対象はヒトである。

本明細書で使用される場合、本明細書で交換可能に使用される「ポリヌクレオチド」または「核酸」という用語は、リボヌクレオチドまたはデオキシヌクレオチドのいずれかのヌクレオチドのポリマー形態、またはいずれかの型のヌクレオチドの修飾形態を意味し、一本鎖および二本鎖の形態でありうる。「ポリヌクレオチド」または「核酸」配列は、特に明記しない限り、その相補体を包含する。本明細書で使用される場合、「単離されたポリヌクレオチド」または「単離された核酸」という用語は、ゲノム、ｃＤＮＡ、または合成起源のポリヌクレオチド、またはそれらのいくつかの組み合わせを意味し、その起源または派生源のために、単離されたポリヌクレオチドは以下のうちの１つから３つを有する：（１）「単離されたポリヌクレオチド」が自然界に見出されるポリヌクレオチドの全部または一部に関連していない、（２）自然界においては連結されていないポリヌクレオチドに作動可能に連結されている、または（３）より大きな配列の一部として自然界においては生じない。

本明細書における「約」の付いた値またはパラメータへの言及は、その値またはパラメータ自体に向けられた態様を含む（そして記述する）。例えば、「約Ｘ」に言及している記述は、「Ｘ」の記述を含む。数値範囲は、範囲を定義する数値を含んでいる。一般的に言えば、「約」という用語は、変数の示された値と、示された値の実験誤差内（例えば、平均の９５％信頼区間内）または示された値の１０％以内のいずれか大きい方の範囲内である変数のあらゆる値を指す。

本発明の側面または態様がマーカッシュ形式または他の択一的な群の観点から記述される場合、本発明は、全体として列挙された群全体だけでなく、群の各要素を個別に、また、主群の全ての可能な下位群を包含し、１つまたは複数の群の要素を欠いた主群も包含する。本発明はまた、特許請求された発明における群の要素のいずれか１つまたは複数の明示的な除外も想定している。

本発明の要素またはその好ましい態様を導入する際、冠詞「ａ（一つの）」、「ａｎ（一つの）」、「ｔｈｅ（前記）」および「ｓａｉｄ（前記）」は、１つまたは複数の要素が存在することを意味することが意図される。「ｃｏｍｐｒｉｓｉｎｇ（含む）」、「ｃｏｍｐｒｉｓｅ（含む）」、「ｃｏｍｐｒｉｓｅｓ（含む）」、「ｉｎｃｌｕｄｉｎｇ（含む）」および「ｈａｖｉｎｇ（有する）」という用語は、包括的であることが意図され、列挙された要素以外の追加の要素が存在しうることを意味する。態様が「ｃｏｍｐｒｉｓｉｎｇ（含む）」という言葉で本明細書において記載されている場合は常に、「ｃｏｎｓｉｓｔｉｎｇ ｏｆ（からなる）」および／または「ｃｏｎｓｉｓｔｉｎｇ ｅｓｓｅｎｔｉａｌｌｙ ｏｆ（から本質的になる）」の観点で記載される類似の態様もまた提供されることが理解される。

特に定義されない限り、本明細書中で使用される全ての技術的および科学的な用語は、本発明が属する当該技術分野の当業者によって一般に理解されるのと同じ意味を有する。矛盾がある場合は、定義を含め、本明細書が優先するものとする。文脈によって別段要求されない限り、単数形の用語は複数形を含み、複数形の用語は単数形を含むものとする。

例示的な方法および材料が本明細書において記載されるが、本明細書に記載のものと類似または同等の方法および材料もまた、本発明の実施または試験に使用され得る。材料、方法、および実施例は例示にすぎず、限定することを意図しない。

抗ＴＦＰＩ抗体製剤
本出願は、ヒスチジン緩衝液を含み、ｐＨ５．８を有する製剤が、抗ＶＥＧＦ抗体などの他のＩｇＧ１抗体と比較して、抗ＴＦＰＩ抗体の分解を遅らせ、凝集体形成を減少させ、安定性を改善するという驚くべき予想外の観察に基づいている。

したがって、一つの側面において、本明細書において提供されるのは、約１５ｍｇ／ｍＬから約２５０ｍｇ／ｍＬの組織因子経路インヒビター（ＴＦＰＩ）抗体、緩衝液、ポリオール、界面活性剤、キレート剤を含む製剤であって、約５．０から約６．０のｐＨを有する製剤である。いくつかの態様において、製剤は、約１５ｍｇ／ｍＬから約２５０ｍｇ／ｍＬの組織因子経路インヒビター（ＴＦＰＩ）のクニッツドメイン２（Ｋ２）中のエピトープに特異的に結合する抗体、緩衝液、ポリオール、界面活性剤、キレート剤を含む製剤であって、製剤が約５．０から約６．０のｐＨを有し、エピトープが配列番号２の番号付けに基づき、残基Ｉｌｅ１０５、Ａｒｇ１０７、およびＬｅｕ１３１を含む製剤である。本明細書に記載の製剤は、（例えば、約−７０℃、約−２０℃、約５℃、約２５℃または約４０℃において）好ましくは少なくとも約１か月、約４か月、約６か月、約１２か月、約２４か月、約３６か月、約４８か月、または約６０か月の長期にわたる貯蔵寿命を有する。

いくつかの態様では、製剤は、少なくとも１つのＴＦＰＩアンタゴニスト抗体（すなわち、抗ＴＦＰＩ抗体）を含む。例示的なＴＦＰＩアンタゴニスト抗体は、ＷＯ２０１７／０２９５８３、ＷＯ２０１０／０１７１９６、ＷＯ２０１１／１０９４５２、ＷＯ２０１４／１４４５７７、ＷＯ２０１０／０７２６８７、ＷＯ２０１２／００１０８７、ＷＯ２０１４／１４０２４０、およびＷＯ２０１５／００７８８０に記載されているものを含むが、これらに限定されず、これらのそれぞれは、参照によりその全体が本明細書に組み込まれる。

いくつかの態様では、ＴＦＰＩアンタゴニスト抗体は、ＴＦＰＩ １０６（ＰＦ−０６７４１０８６としても知られる）、ＴＦＰＩ−２３、ＴＦＰＩ−１０７、コンシズマブ（ｍＡｂ−２０２１、ｈｚ４Ｆ３６としても知られる）、２Ａ８および２Ａ８−２００（例えば、ＵＳ２０１７００７３４２８を参照）からなる群から選択される。

いくつかの態様では、２つ以上の抗体が存在しうる。少なくとも１つ、少なくとも２つ、少なくとも３つ、少なくとも４つ、少なくとも５つ、またはそれ以上の異なる抗体が存在し得る。一般に、２つ以上の異なる抗体は、互いに悪影響を及ぼさない相補的な活性を有する。１つまたは複数の抗体はまた、抗体の有効性を増強および／または補完するのに役立つ他の薬剤と組み合わせても使用され得る。

いくつかの態様では、抗体は、組織因子経路インヒビター（ＴＦＰＩ）のクニッツドメイン２（Ｋ２）中のエピトープに特異的に結合し、そのエピトープは、配列番号２の番号付けに基づき、残基Ｉｌｅ１０５、Ａｒｇ１０７、およびＬｅｕ１３１を含んでいる。いくつかの態様において、抗ＴＦＰＩ抗体は、ＴＦＰＩのクニッツドメイン１（Ｋ１）には結合しない。いくつかの態様では、エピトープは、配列番号２の番号付けに基づき、残基Ｃｙｓ１０６、Ｇｌｙ１０８、Ｃｙｓ１３０、Ｌｅｕ１３１、およびＧｌｙ１３２をさらに含む。いくつかの態様において、エピトープは、配列番号２の番号付けに基づき、Ａｓｐ１０２、Ａｒｇ１１２、Ｔｙｒ１２７、Ｇｌｙ１２９、Ｍｅｔ１３４、およびＧｌｕ１３８をさらに含む。いくつかの態様では、エピトープは、配列番号２の番号付けに基づき、Ｅ１００、Ｅ１０１、Ｐ１０３、Ｙ１０９、Ｔ１１１、Ｙ１１３、Ｆ１１４、Ｎ１１６、Ｑ１１８、Ｑ１２１、Ｃ１２２、Ｅ１２３、Ｒ１２４、Ｆ１２５、Ｋ１２６、およびＬ１４０を含まない。いくつかの態様では、エピトープは、配列番号２の番号付けに基づき、Ｄ３１、Ｄ３２、Ｐ３４、Ｃ３５、Ｋ３６、Ｅ１００、Ｅ１０１、Ｐ１０３、Ｙ１０９、Ｋ１２６、およびＧ１２８を含まない。

いくつかの態様において、抗体は、以下を含む重鎖可変領域（ＶＨ）を含む：
（ａ）配列番号１３のアミノ酸配列を含むＶＨ相補性決定領域１（ＣＤＲ−Ｈ１）；
（ｂ）配列番号１４のアミノ酸配列を含むＶＨ相補性決定領域２（ＣＤＲ−Ｈ２）；および
（ｃ）配列番号１５のアミノ酸配列を含むＶＨ相補性決定領域３（ＣＤＲ−Ｈ３）。

いくつかの態様において、抗体は、配列番号１６、１８、および２０からなる群から選択されるアミノ酸配列と少なくとも９０％、少なくとも９５％、または少なくとも９９％同一のアミノ酸配列を含むＶＨを含む。いくつかの態様では、抗体は、配列番号１６、１８、および２０からなる群から選択されるアミノ酸配列を含むＶＨを含む。いくつかの態様では、抗体は、配列番号１６のアミノ酸配列を含むＶＨを含む。いくつかの態様では、抗体は、配列番号１８のアミノ酸配列を含むＶＨを含む。いくつかの態様では、抗体は、配列番号２０のアミノ酸配列を含むＶＨを含む。

いくつかの態様において、抗体は、以下を含む軽鎖可変領域（ＶＬ）を含む：
（ａ）配列番号８のアミノ酸配列を含むＶＬ相補性決定領域１（ＣＤＲ−Ｌ１）、（ｂ）配列番号９のアミノ酸配列を含むＶＬ相補性決定領域２（ＣＤＲ−Ｌ２）、および（ｃ）配列番号１０のアミノ酸配列を含むＶＬ相補性決定領域３（ＣＤＲ−Ｌ３）。

いくつかの態様では、抗体は、配列番号１１と少なくとも９０％、少なくとも９５％、または少なくとも９９％同一のアミノ酸配列を含むＶＬを含む。いくつかの態様では、抗体は、配列番号１１のアミノ酸配列を含むＶＬを含む。

いくつかの態様では、抗体は、配列番号１７のアミノ酸配列を含む重鎖を含む。いくつかの態様では、抗体は、配列番号１９のアミノ酸配列を含む重鎖を含む。いくつかの態様では、抗体は、配列番号２１のアミノ酸配列を含む重鎖を含む。いくつかの態様では、抗体は、配列番号１２のアミノ酸配列を含む軽鎖を含む。

いくつかの態様では、抗体は以下を含む：
（ｉ）以下を含む重鎖可変領域（ＶＨ）：（ａ）配列番号１３のアミノ酸配列を含むＣＤＲ−Ｈ１、（ｂ）配列番号１４のアミノ酸配列を含むＣＤＲ−Ｈ２、および（ｃ）配列番号１５のアミノ酸配列を含むＣＤＲ−Ｈ３、および
（ｉｉ）以下を含む軽鎖可変領域（ＶＬ）：（ａ）配列番号８のアミノ酸配列を含むＣＤＲ−Ｌ１、（ｂ）配列番号９のアミノ酸配列を含むＣＤＲ−Ｌ２、および（ｃ）配列番号１０のアミノ酸配列を含むＣＤＲ−Ｌ３。

いくつかの態様では、抗体は、配列番号１８のアミノ酸配列を含むＶＨ、および配列番号１１のアミノ酸配列を含むＶＬを含む。いくつかの態様では、抗体は、配列番号１９のアミノ酸配列を含む重鎖を含み、かつ、配列番号１２のアミノ酸配列を含む軽鎖を含む。

本発明の例示的な抗体は、２０１５年７月２２日に米国２０１１０−２２０９バージニア州マナサス市ユニバーシティブールバード１０８０１のアメリカンタイプカルチャーコレクションに寄託された。ＡＴＣＣアクセッション番号ＰＴＡ−１２２３２９を有するプラスミドベクターｍＡｂ−ＴＦＰＩ−１０６ＶＨは、抗体ＴＦＰＩ−１０６の重鎖可変領域をコードするＤＮＡインサートを含み、また、ＡＴＣＣアクセッション番号ＰＴＡ−１２２３２８を有するプラスミドベクターｍＡｂ−ＴＦＰＩ−１０６ＶＬは、抗体ＴＦＰＩ−１０６の軽鎖可変領域をコードするＤＮＡインサートを含んでいる。

いくつかの態様では、抗体は、配列番号１６のアミノ酸配列を含むＶＨ、および配列番号１１のアミノ酸配列を含むＶＬを含む。いくつかの態様では、抗体は、配列番号１７のアミノ酸配列を含む重鎖を含み、かつ、配列番号１２のアミノ酸配列を含む軽鎖を含む。

いくつかの態様では、抗体は、配列番号２０のアミノ酸配列を含むＶＨ、および配列番号１１のアミノ酸配列を含むＶＬを含む。いくつかの態様では、抗体は、配列番号２１のアミノ酸配列を含む重鎖を含み、かつ、配列番号１２のアミノ酸配列を含む軽鎖を含む。

いくつかの態様では、抗体は、配列番号２３のアミノ酸配列を含む重鎖を含み、かつ、配列番号２２のアミノ酸配列を含む軽鎖を含む。いくつかの態様では、抗体は、配列番号２５のアミノ酸配列を含む重鎖を含み、かつ、配列番号２４のアミノ酸配列を含む軽鎖を含む。

いくつかの態様では、抗体は、少なくとも２５時間、少なくとも２９時間、少なくとも３０時間、少なくとも３５時間、少なくとも４０時間、少なくとも５０時間、少なくとも５５時間、少なくとも６０時間、少なくとも６５時間、少なくとも７０時間、少なくとも７５時間、少なくとも８０時間、少なくとも８５時間、少なくとも９０時間、少なくとも９５時間、少なくとも１００時間、少なくとも１０５時間、少なくとも１１０時間、少なくとも１１５時間、少なくとも１２０時間、または少なくとも１２５時間の血清半減期を有する。いくつかの態様において、抗体は、少なくとも２５時間、少なくとも２９時間、または少なくとも３０時間の血清半減期を有する。いくつかの態様において、抗体は、少なくとも２９時間の血清半減期を有する。いくつかの態様において、抗体は、少なくとも３０時間の血清半減期を有する。いくつかの態様において、抗体は、少なくとも１１５時間、少なくとも１２０時間、または少なくとも１２５時間の血清半減期を有する。

いくつかの態様では、抗体は、約５×１０^−７Ｍから約５×１０^−１１Ｍの結合親和性（Ｋ_Ｄ）を有する。いくつかの態様では、抗体は、約１×１０^−８Ｍから約１×１０^−１０Ｍ（０．１から１０ｎｍ）のＫ_Ｄを有する。いくつかの態様では、抗体は、１ｎＭ以下、５００ｐＭ以下、２５０ｐＭ以下、２００ｐＭ以下、１００ｐＭ以下、５０ｐＭ以下、２０ｐＭ以下、または１０ｐＭ以下のＫ_Ｄを有する。いくつかの態様では、抗体は、低ｐＭ範囲（すなわち、１００ｐＭ以下）のＫ_Ｄを有さない。いくつかの側面において、Ｋ_Ｄは表面プラズモン共鳴によって測定される。いくつかの側面において、表面プラズモン共鳴は、Ｂｉａｃｏｒｅを使用して測定されうる。いくつかの側面において、ＳＰＲは、捕捉された抗体と液相のヒトＴＦＰＩを用いて、Ｂｉａｃｏｒｅを使用して測定されうる。

いくつかの側面において、抗体の皮下バイオアベイラビリティは、静脈内バイオアベイラビリティと比較して少なくとも１０％でありうる。いくつかの側面において、抗体の皮下バイオアベイラビリティは、静脈内バイオアベイラビリティと比較して少なくとも１５％でありうる。いくつかの側面において、抗体の皮下バイオアベイラビリティは、静脈内バイオアベイラビリティと比較して少なくとも２０％でありうる。いくつかの側面において、抗体の皮下バイオアベイラビリティは、静脈内バイオアベイラビリティと比較して少なくとも２５％でありうる。いくつかの側面において、抗体の皮下バイオアベイラビリティは、静脈内バイオアベイラビリティと比較して少なくとも２７％でありうる。いくつかの側面において、抗体の皮下バイオアベイラビリティは、静脈内バイオアベイラビリティと比較して少なくとも３０％でありうる。いくつかの側面において、抗体の皮下バイオアベイラビリティは、静脈内バイオアベイラビリティと比較して少なくとも３５％でありうる。いくつかの側面において、抗体の皮下バイオアベイラビリティは、静脈内バイオアベイラビリティと比較して少なくとも４０％でありうる。いくつかの側面において、抗体の皮下バイオアベイラビリティは、静脈内バイオアベイラビリティと比較して少なくとも５０％でありうる。いくつかの側面において、抗体の皮下バイオアベイラビリティは、静脈内バイオアベイラビリティと比較して少なくとも６０％でありうる。いくつかの側面において、抗体の皮下バイオアベイラビリティは、静脈内バイオアベイラビリティと比較して少なくとも７０％でありうる。いくつかの側面において、抗体の皮下バイオアベイラビリティは、静脈内バイオアベイラビリティと比較して少なくとも８０％でありうる。いくつかの側面において、抗体の皮下バイオアベイラビリティは、静脈内バイオアベイラビリティと比較して少なくとも９０％でありうる。いくつかの側面において、抗体の皮下バイオアベイラビリティは、静脈内バイオアベイラビリティと比較して少なくとも９９％でありうる。

抗体は、約０．１ｍｇ／ｍＬから約２５０ｍｇ／ｍＬ、約１５ｍｇ／ｍＬから２５０ｍｇ／ｍＬ、約２０ｍｇ／ｍＬから約１７５ｍｇ／ｍＬ、または約２５ｍｇ／ｍＬから約１６０ｍｇ／ｍＬまでの範囲の濃度で製剤中に存在しうる。例えば、いくつかの態様において、抗体の濃度は、約０．５ｍｇ／ｍＬ、約１ｍｇ／ｍＬ、約２ｍｇ／ｍＬ、約２．５ｍｇ／ｍＬ、約３ｍｇ／ｍＬ、約３．５ｍｇ／ｍＬ、約４ｍｇ／ｍＬ、約４．５ｍｇ／ｍＬ、約５ｍｇ／ｍＬ、約５．５ｍｇ／ｍＬ、約６ｍｇ／ｍＬ、約６．５ｍｇ／ｍＬ、約７ｍｇ／ｍＬ、約７．５ｍｇ／ｍＬ、約８ｍｇ／ｍＬ、約８．５ｍｇ／ｍＬ、約９ｍｇ／ｍＬ、約９．５ｍｇ／ｍＬ、約１０ｍｇ／ｍＬ、約１１ｍｇ／ｍＬ、約１２ｍｇ／ｍＬ、約１３ｍｇ／ｍＬ、約１４ｍｇ／ｍＬ、約１５ｍｇ／ｍＬ、約１６ｍｇ／ｍＬ、約１７ｍｇ／ｍＬ、約１８ｍｇ／ｍＬ、約１９ｍｇ／ｍＬ、約２０ｍｇ／ｍＬ、約２１ｍｇ／ｍＬ、約２２ｍｇ／ｍＬ、約２３ｍｇ／ｍＬ、約２４ｍｇ／ｍＬ、約２５ｍｇ／ｍＬ、約２６ｍｇ／ｍＬ、約２７ｍｇ／ｍＬ、約２８ｍｇ／ｍＬ、約２９ｍｇ／ｍＬ、約３０ｍｇ／ｍＬ、約３１ｍｇ／ｍＬ、約３２ｍｇ／ｍＬ、約３３ｍｇ／ｍＬ、約３４ｍｇ／ｍＬ、約３５ｍｇ／ｍＬ、約３６ｍｇ／ｍＬ、約３７ｍｇ／ｍＬ、約３８ｍｇ／ｍＬ、約３９ｍｇ／ｍＬ、約４０ｍｇ／ｍＬ、約４１ｍｇ／ｍＬ、約４２ｍｇ／ｍＬ、約４３ｍｇ／ｍＬ、約４４ｍｇ／ｍＬ、約４５ｍｇ／ｍＬ、約４６ｍｇ／ｍＬ、約４７ｍｇ／ｍＬ、約４８ｍｇ／ｍＬ、約４９ｍｇ／ｍＬ、約５０ｍｇ／ｍＬ、約５１ｍｇ／ｍＬ、約５２ｍｇ／ｍＬ、約５３ｍｇ／ｍＬ、約５４ｍｇ／ｍＬ、約５５ｍｇ／ｍＬ、約５６ｍｇ／ｍＬ、約５７ｍｇ／ｍＬ、約５８ｍｇ／ｍＬ、約５９ｍｇ／ｍＬ、約６０ｍｇ／ｍＬ、約７０ｍｇ／ｍＬ、約８０ｍｇ／ｍＬ、約９０ｍｇ／ｍＬ、約１００ｍｇ／ｍＬ、約１０１ｍｇ／ｍＬ、約１０２ｍｇ／ｍＬ、約１０２．５ｍｇ／ｍＬ、約１０３ｍｇ／ｍＬ、約１０３．５ｍｇ／ｍＬ、約１０４ｍｇ／ｍＬ、約１０４．５ｍｇ／ｍＬ、約１０５ｍｇ／ｍＬ、約１０５．５ｍｇ／ｍＬ、約１０６ｍｇ／ｍＬ、約１０６．５ｍｇ／ｍＬ、約１０７ｍｇ／ｍＬ、約１０７．５ｍｇ／ｍＬ、約１０８ｍｇ／ｍＬ、約１０８．５ｍｇ／ｍＬ、約１０９ｍｇ／ｍＬ、約１０９．５ｍｇ／ｍＬ、約１１０ｍｇ／ｍＬ、約１１１ｍｇ／ｍＬ、約１１２ｍｇ／ｍＬ、約１１３ｍｇ／ｍＬ、約１１４ｍｇ／ｍＬ、約１１５ｍｇ／ｍＬ、約１１６ｍｇ／ｍＬ、約１１７ｍｇ／ｍＬ、約１１８ｍｇ／ｍＬ、約１１９ｍｇ／ｍＬ、約１２０ｍｇ／ｍＬ、約１２１ｍｇ／ｍＬ、約１２２ｍｇ／ｍＬ、約１２３ｍｇ／ｍＬ、約１２４ｍｇ／ｍＬ、約１２５ｍｇ／ｍＬ、約１２６ｍｇ／ｍＬ、約１２７ｍｇ／ｍＬ、約１２８ｍｇ／ｍＬ、約１２９ｍｇ／ｍＬ、約１３０ｍｇ／ｍＬ、約１３１ｍｇ／ｍＬ、約１３２ｍｇ／ｍＬ、約１３３ｍｇ／ｍＬ、約１３４ｍｇ／ｍＬ、約１３５ｍｇ／ｍＬ、約１３６ｍｇ／ｍＬ、約１３７ｍｇ／ｍＬ、約１３８ｍｇ／ｍＬ、約１３９ｍｇ／ｍＬ、約１４０ｍｇ／ｍＬ、約１４１ｍｇ／ｍＬ、約１４２ｍｇ／ｍＬ、約１４３ｍｇ／ｍＬ、約１４４ｍｇ／ｍＬ、約１４５ｍｇ／ｍＬ、約１４６ｍｇ／ｍＬ、約１４７ｍｇ／ｍＬ、約１４８ｍｇ／ｍＬ、約１４９ｍｇ／ｍＬ、約１５０ｍｇ／ｍＬ、約１５１ｍｇ／ｍＬ、約１５２ｍｇ／ｍＬ、約１５３ｍｇ／ｍＬ、約１５４ｍｇ／ｍＬ、約１５５ｍｇ／ｍＬ、約１５６ｍｇ／ｍＬ、約１５７ｍｇ／ｍＬ、約１５８ｍｇ／ｍＬ、約１５９ｍｇ／ｍＬ、約１６０ｍｇ／ｍＬ、約１７０ｍｇ／ｍＬ、約１８０ｍｇ／ｍＬ、約１９０ｍｇ／ｍＬ、約２００ｍｇ／ｍＬ、約２１０ｍｇ／ｍＬ、約２２０ｍｇ／ｍＬ、約２３０ｍｇ／ｍＬ、約２４０ｍｇ／ｍＬ、または約２５０ｍｇ／ｍＬである。いくつかの態様において、製剤中の抗体の濃度は、約１００ｍｇ／ｍＬ、約１１５ｍｇ／ｍＬ、約１５０ｍｇ／ｍＬ、または約１５８ｍｇ／ｍＬである。いくつかの態様では、製剤中の抗体の濃度は、１５０ｍｇ／ｍＬである。いくつかの態様では、製剤中の抗体の濃度は１５５ｍｇ／ｍＬである。いくつかの態様では、製剤中の抗体の濃度は、１５８ｍｇ／ｍＬである。

本発明によれば、緩衝液（例えば、ヒスチジンまたはコハク酸緩衝液）は、注射の際の痛みまたはアナフィラキシー様副作用のリスクを低減するために生理学的ｐＨに近いｐＨを製剤に提供し、また、増強された抗体の安定性および凝集、酸化および断片化に対する耐性を提供する。

緩衝液は、例えば、酢酸塩、コハク酸塩（例えば、コハク酸二ナトリウム六水和物）、グルコン酸塩、クエン酸塩、ヒスチジン、酢酸、リン酸塩、リン酸、アスコルビン酸塩、酒石酸、マレイン酸、グリシン、乳酸塩、乳酸、アスコルビン酸、イミダゾール、重炭酸塩および炭酸、コハク酸、安息香酸ナトリウム、安息香酸、グルコン酸塩、エデト酸塩、酢酸塩、リンゴ酸塩、イミダゾール、トリス、リン酸塩、およびそれらの混合物であり得るが、これらに限定はされない。いくつかの態様では、緩衝液はヒスチジンまたはコハク酸塩である。いくつかの態様において、コハク酸緩衝液は、コハク酸二ナトリウム六水和物（塩基性形態）および／またはコハク酸またはそれらの混合物を含む。好ましくは、緩衝液はヒスチジンであり、ヒスチジン緩衝液は、Ｌ−ヒスチジン、Ｌ−ヒスチジン一塩酸塩（Ｌ−ヒスチジン一塩酸塩一水和物および／またはＬ−ヒスチジン塩酸塩一水和物とも呼ばれる）またはそれらの混合物を含む。

緩衝液の濃度は、約０．１ミリモル（ｍＭ）から約１００ｍＭの範囲であり得る。好ましくは、緩衝液の濃度は、約０．５ｍＭから約５０ｍＭ、さらに好ましくは約１ｍＭから約３０ｍＭ、より好ましくは約１ｍＭから約２５ｍＭである。好ましくは、緩衝液の濃度は、約１ｍＭ、約２ｍＭ、約３ｍＭ、約４ｍＭ、約５ｍＭ、約６ｍＭ、約７ｍＭ、約８ｍＭ、約９ｍＭ、約１０ｍＭ、約１１ｍＭ、約１２ｍＭ、約１３ｍＭ、約１４ｍＭ、約１５ｍＭ、約１６ｍＭ、約１７ｍＭ、約１８ｍＭ、約１９ｍＭ、約２０ｍＭ、約２１ｍＭ、約２２ｍＭ、約２３ｍＭ、約２４ｍＭ、約２５ｍＭ、約３０ｍＭ、約３５ｍＭ、約４０ｍＭ、約４５ｍＭ、約５０ｍＭ、約５５ｍＭ、約６０ｍＭ、約６５ｍＭ、約７０ｍＭ、約７５ｍＭ、約８０ｍＭ、約８５ｍＭ、約９０ｍＭ、約９５ｍＭ、または約１００ｍＭである。いくつかの態様において、緩衝液は、約２０ｍＭの濃度のヒスチジンである。いくつかの態様において、緩衝液は、約２０ｍＭの濃度のコハク酸塩である。

緩衝液の濃度はまた、約０．０１ｍｇ／ｍＬから約３０ｍｇ／ｍＬ、約０．１ｍｇ／ｍＬから約５ｍｇ／ｍＬ、または約０．５ｍｇ／ｍＬから約４ｍｇ／ｍＬの範囲でもあり得る。例えば、緩衝液の濃度は、約０．０１ｍｇ／ｍＬ、０．０２ｍｇ／ｍＬ、０．０３ｍｇ／ｍＬ、約０．０４ｍｇ／ｍＬ、約０．０５ｍｇ／ｍＬ、約０．０６ｍｇ／ｍＬ、約０．０７ｍｇ／ｍＬ、０．０８ｍｇ／ｍＬ、０．０９ｍｇ／ｍＬ、約０．１０ｍｇ／ｍＬ、０．１１ｍｇ／ｍＬ、０．１２ｍｇ／ｍＬ、０．１３ｍｇ／ｍＬ、約０．１４ｍｇ／ｍＬ、約０．１５ｍｇ／ｍＬ、約０．１６ｍｇ／ｍＬ、約０．１７ｍｇ／ｍＬ、０．１８ｍｇ／ｍＬ、０．１９ｍｇ／ｍＬ 約０．２０ｍｇ／ｍＬ、約０．２５ｍｇ／ｍＬ、約０．３ｍｇ／ｍＬ、約０．４ｍｇ／ｍＬ、約０．５ｍｇ／ｍＬ、約０．６ｍｇ／ｍＬ、約０．７ｍｇ／ｍＬ、約０．８ｍｇ／ｍＬ、約０．９ｍｇ／ｍＬ、約１．０ｍｇ／ｍＬ、約２．０ｍｇ／ｍＬ、約３．０ｍｇ／ｍＬ、約４．０ｍｇ／ｍＬ、約５．０ｍｇ／ｍＬ、約６．０ｍｇ／ｍＬ、約７．０ｍｇ／ｍＬ、約８．０ｍｇ／ｍＬ、約９．０ｍｇ／ｍＬ、約１０．０ｍｇ／ｍＬ、約１１．０ｍｇ／ｍＬ、約１２．０ｍｇ／ｍＬ、約１３．０ｍｇ／ｍＬ、約１４．０ｍｇ／ｍＬ、約１５．０ｍｇ／ｍＬ、約１６．０ｍｇ／ｍＬ、約１７．０ｍｇ／ｍＬ、約１８．０ｍｇ／ｍＬ、約１９．０ｍｇ／ｍＬ、約２０ｍｇ／ｍＬ、約２１．０ｍｇ／ｍＬ、約２２．０ｍｇ／ｍＬ、約２３．０ｍｇ／ｍＬ、約２４．０ｍｇ／ｍＬ、約２５．０ｍｇ／ｍＬ、約２６．０ｍｇ／ｍＬ、約２７．０ｍｇ／ｍＬ、約２８．０ｍｇ／ｍＬ、約２９．０ｍｇ／ｍＬ、または約３０ｍｇ／ｍＬである。いくつかの態様では、製剤は、約０．５〜５．０ｍｇ／ｍＬのヒスチジン緩衝液を含む。いくつかの態様では、緩衝液は、約０．１〜１．５ｍｇ／ｍＬのＬ−ヒスチジンおよび約１〜３ｍｇ／ｍＬのＬ−ヒスチジン一塩酸塩を含むヒスチジン緩衝液である。いくつかの態様では、緩衝液は、１．１２ｍｇ／ｍＬのＬ−ヒスチジンおよび２．６７ｍｇ／ｍＬのＬ−ヒスチジン一塩酸塩を含むヒスチジン緩衝液である。いくつかの態様では、緩衝液は、約０．５〜５．０ｍｇ／ｍＬのコハク酸二ナトリウム六水和物および約０．１〜１．０ｍｇ／ｍＬのコハク酸を含むコハク酸緩衝液である。いくつかの態様では、緩衝液は、約４．０８ｍｇ／ｍＬのコハク酸二ナトリウム六水和物および約０．５８ｍｇ／ｍＬのコハク酸を含むコハク酸緩衝液である。いくつかの態様では、緩衝液は、約２．３６２ｍｇ／ｍＬのコハク酸を含むコハク酸緩衝液である。

いくつかの態様では、ポリオールは、例えば、限定はされないが、約６００ｋＤ未満（例えば、約１２０から約４００ｋＤの範囲）の分子量を有し得、糖（例えば、還元および非還元性糖またはそれらの混合物、糖類または炭水化物）、糖アルコール、糖酸、または塩またはそれらの混合物を含む複数のヒドロキシル基を含む。非還元糖の例は、スクロース、トレハロース、およびそれらの混合物を含むが、これらに限定はされない。いくつかの態様において、ポリオールは、マンニトール、トレハロース、ソルビトール、エリスリトール、イソマルト、ラクチトール、マルチトール、キシリトール、グリセロール、ラクチトール、プロピレングリコール、ポリエチレングリコール、イノシトール、またはそれらの混合物である。他の態様では、ポリオールは、例えば、限定はされないが、単糖、二糖または多糖、あるいは前述のいずれかの混合物であり得る。糖類または炭水化物は、例えば、限定はされないが、フルクトース、グルコース、マンノース、スクロース、ソルボース、キシロース、ラクトース、マルトース、スクロース、デキストラン、プルラン、デキストリン、シクロデキストリン、可溶性デンプン、ヒドロキシエチルデンプン、水溶性グルカン、またはそれらの混合物であり得る。

いくつかの態様では、ポリオールは、マンニトール、トレハロース、ソルビトール、エリスリトール、イソマルト、ラクチトール、マルチトール、キシリトール、グリセロール、ラクチトール、プロピレングリコール、ポリエチレングリコール、イノシトール、フルクトース、グルコース、マンノース、スクロース、ソルボース、キシロース、ラクトース、マルトース、スクロース、デキストラン、プルラン、デキストリン、シクロデキストリン、可溶性デンプン、ヒドロキシエチルデンプン、水溶性グルカン、またはそれらの混合物からなる群から選択される。いくつかの態様では、ポリオールは、スクロースまたはトレハロースである。いくつかの態様では、ポリオールはスクロースである。

製剤中のポリオールの濃度は、約１ｍｇ／ｍＬから約３００ｍｇ／ｍＬ、約１ｍｇ／ｍＬから約２００ｍｇ／ｍＬ、または約１ｍｇ／ｍＬから約１２０ｍｇ／ｍＬの範囲である。好ましくは、製剤中のポリオールの濃度は、約５０ｍｇ／ｍＬから約１２０ｍｇ／ｍＬ、約６０ｍｇ／ｍＬから約１１０ｍｇ／ｍＬ、または約８０ｍｇ／ｍＬから約９０ｍｇ／ｍＬである。例えば、製剤中のポリオールの濃度は、約０．５ｍｇ／ｍＬ、約１ｍｇ／ｍＬ、約２ｍｇ／ｍＬ、約２．５ｍｇ／ｍＬ、約３ｍｇ／ｍＬ、約３．５ｍｇ／ｍＬ、約４ｍｇ／ｍＬ、約４．５ｍｇ／ｍＬ、約５ｍｇ／ｍＬ、約５．５ｍｇ／ｍＬ、約６ｍｇ／ｍＬ、約６．５ｍｇ／ｍＬ、約７ｍｇ／ｍＬ、約７．５ｍｇ／ｍＬ、約８ｍｇ／ｍＬ、約８．５ｍｇ／ｍＬ、約９ｍｇ／ｍＬ、約９．５ｍｇ／ｍＬ、約１０ｍｇ／ｍＬ、約１１ｍｇ／ｍＬ、約１２ｍｇ／ｍＬ、約１３ｍｇ／ｍＬ、約１４ｍｇ／ｍＬ、約１５ｍｇ／ｍＬ、約１６ｍｇ／ｍＬ、約１７ｍｇ／ｍＬ、約１８ｍｇ／ｍＬ、約１９ｍｇ／ｍＬ、約２０ｍｇ／ｍＬ、約２１ｍｇ／ｍＬ、約２２ｍｇ／ｍＬ、約２３ｍｇ／ｍＬ、約２４ｍｇ／ｍＬ、約２５ｍｇ／ｍＬ、約２６ｍｇ／ｍＬ、約２７ｍｇ／ｍＬ、約２８ｍｇ／ｍＬ、約２９ｍｇ／ｍＬ、約３０ｍｇ／ｍＬ、約３１ｍｇ／ｍＬ、約３２ｍｇ／ｍＬ、約３３ｍｇ／ｍＬ、約３４ｍｇ／ｍＬ、約３５ｍｇ／ｍＬ、約３６ｍｇ／ｍＬ、約３７ｍｇ／ｍＬ、約３８ｍｇ／ｍＬ、約３９ｍｇ／ｍＬ、約４０ｍｇ／ｍＬ、約４１ｍｇ／ｍＬ、約４２ｍｇ／ｍＬ、約４３ｍｇ／ｍＬ、約４４ｍｇ／ｍＬ、約４５ｍｇ／ｍＬ、約４６ｍｇ／ｍＬ、約４７ｍｇ／ｍＬ、約４８ｍｇ／ｍＬ、約４９ｍｇ／ｍＬ、約５０ｍｇ／ｍＬ、約５１ｍｇ／ｍＬ、約５２ｍｇ／ｍＬ、約５３ｍｇ／ｍＬ、約５４ｍｇ／ｍＬ、約５５ｍｇ／ｍＬ、約５６ｍｇ／ｍＬ、約５７ｍｇ／ｍＬ、約５８ｍｇ／ｍＬ、約５９ｍｇ／ｍＬ、約６０ｍｇ／ｍＬ、約６５ｍｇ／ｍＬ、約７０ｍｇ／ｍＬ、約７５ｍｇ／ｍＬ、約８０ｍｇ／ｍＬ、約８１ｍｇ／ｍＬ、約８２ｍｇ／ｍＬ、約８３ｍｇ／ｍＬ、約８４ｍｇ／ｍＬ、約８５ｍｇ／ｍＬ、約８６ｍｇ／ｍＬ、約８７ｍｇ／ｍＬ、約８８ｍｇ／ｍＬ、約８９ｍｇ／ｍＬ、約９０ｍｇ／ｍＬ、約９１ｍｇ／ｍＬ、約９２ｍｇ／ｍＬ、約９３ｍｇ／ｍＬ、約９４ｍｇ／ｍＬ、約９５ｍｇ／ｍＬ、約９６ｍｇ／ｍＬ、約９７ｍｇ／ｍＬ、約９８ｍｇ／ｍＬ、約９９ｍｇ／ｍＬ、約１００ｍｇ／ｍＬ、約１０１ｍｇ／ｍＬ、約１０２ｍｇ／ｍＬ、約１０３ｍｇ／ｍＬ、約１０４ｍｇ／ｍＬ、約１０５ｍｇ／ｍＬ、約１０６ｍｇ／ｍＬ、約１０７ｍｇ／ｍＬ、約１０８ｍｇ／ｍＬ、約１０９ｍｇ／ｍＬ、約１１０ｍｇ／ｍＬ、約１１１ｍｇ／ｍＬ、約１１２ｍｇ／ｍＬ、約１１３ｍｇ／ｍＬ、約１１４ｍｇ／ｍＬ、約１１５ｍｇ／ｍＬ、約１１６ｍｇ／ｍＬ、約１１７ｍｇ／ｍＬ、約１１８ｍｇ／ｍＬ、約１１９ｍｇ／ｍＬ、約１２０ｍｇ／ｍＬ、約１２１ｍｇ／ｍＬ、約１２２ｍｇ／ｍＬ、約１２３ｍｇ／ｍＬ、約１２４ｍｇ／ｍＬ、約１２５ｍｇ／ｍＬ、約１２６ｍｇ／ｍＬ、約１２７ｍｇ／ｍＬ、約１２８ｍｇ／ｍＬ、約１２９ｍｇ／ｍＬ、約１３０ｍｇ／ｍＬ、約１３１ｍｇ／ｍＬ、約１３２ｍｇ／ｍＬ、約１３３ｍｇ／ｍＬ、約１３４ｍｇ／ｍＬ、約１３５ｍｇ／ｍＬ、約１３６ｍｇ／ｍＬ、約１３７ｍｇ／ｍＬ、約１３８ｍｇ／ｍＬ、約１３９ｍｇ／ｍＬ、約１４０ｍｇ／ｍＬ、約１４１ｍｇ／ｍＬ、約１４２ｍｇ／ｍＬ、約１４３ｍｇ／ｍＬ、約１４４ｍｇ／ｍＬ、約１４５ｍｇ／ｍＬ、約１４６ｍｇ／ｍＬ、約１４７ｍｇ／ｍＬ、約１４８ｍｇ／ｍＬ、約１４９ｍｇ／ｍＬ、または約１５０ｍｇ／ｍＬである。

いくつかの態様では、ポリオールは、約１ｍｇ／ｍＬから約３００ｍｇ／ｍＬ、約１ｍｇ／ｍＬから約２００ｍｇ／ｍＬ、または約１ｍｇ／ｍＬから約１２０ｍｇ／ｍＬの濃度のスクロースである。好ましくは、製剤中のスクロースの濃度は、約５０ｍｇ／ｍＬから約１２０ｍｇ／ｍＬ、約６０ｍｇ／ｍＬから約１１０ｍｇ／ｍＬ、または約８０ｍｇ／ｍＬから約９０ｍｇ／ｍＬである。いくつかの態様では、製剤中のスクロースの濃度は約８５ｍｇ／ｍＬである。いくつかの態様では、製剤中のスクロースの濃度は約８４ｍｇ／ｍＬである。いくつかの態様では、製剤中のスクロースの濃度は約９０ｍｇ／ｍＬである。いくつかの態様では、ポリオールは、約８４ｍｇ／ｍＬまたは約８５ｍｇ／ｍＬまたは約９０ｍｇ／ｍＬの濃度のトレハロースである。

本発明において使用される界面活性剤は、液体抗体製剤の表面張力を変化させ得る。特定の態様では、界面活性剤は、液体抗体製剤の表面張力を低下させる。さらに他の態様では、界面活性剤は、製剤中のいずれかの抗体の安定性の改善に寄与し得る。界面活性剤はまた、製剤化された抗体の凝集も低減させ（例えば、輸送および貯蔵中）、かつ／または製剤中の微粒子の形成も最小限に抑え、かつ／または吸着（例えば、容器への吸着）も低減させ得る。例えば、界面活性剤はまた、凍結／解凍サイクル中およびその後の抗体の安定性も改善させ得る。界面活性剤は、例えば、ポリソルベート、ポロキサマー、トリトン、ドデシル硫酸ナトリウム、ラウリル硫酸ナトリウム、オクチルグリコシドナトリウム、ラウリル−スルホベタイン、ミリスチル−スルホベタイン、リノレイル−スルホベタイン、ステアリル−スルホベタイン、ラウリル−サルコシン、ミリスチル−サルコシン、リノレイル−サルコシン、ステアリル−サルコシン、リノレイル−ベタイン、ミリスチル−ベタイン、セチル−ベタイン、ラウロアミドプロピル−ベタイン、コカミドプロピル−ベタイン、リノレアミドプロピル−ベタイン、ミリスタミドプロピル−ベタイン、パルミドプロピル−ベタイン、イソステアラミドプロピル−ベタイン、ミリスタミドプロピル−ジメチルアミン、パルミドプロピル−ジメチルアミン、イソステアラミドプロピル−ジメチルアミン、メチルココイル−タウレートナトリウム、メチルオレイル−タウレート二ナトリウム、ジヒドロキシプロピルＰＥＧ５塩化リノールアンモニウム、ポリエチレングリコール、ポリプロピレングリコール、およびそれらの混合物であり得るが、これらに限定はされない。界面活性剤は、例えば、限定はされないが、ポリソルベート２０、ポリソルベート２１、ポリソルベート４０、ポリソルベート６０、ポリソルベート６１、ポリソルベート６５、ポリソルベート８０、ポリソルベート８１、ポリソルベート８５、ＰＥＧ３３５０およびそれらの混合物であり得る。

界面活性剤の濃度は、一般に、約０．０１ｍｇ／ｍＬから約１０ｍｇ／ｍＬ、約０．０１ｍｇ／ｍＬから約５．０ｍｇ／ｍＬ、約０．０１ｍｇ／ｍＬから約２．０ｍｇ／ｍＬ、約０．０１ｍｇ／ｍＬから約１．５ｍｇ／ｍＬ、約０．０１ｍｇ／ｍＬから約１．０ｍｇ／ｍＬ、約０．０１ｍｇ／ｍＬから約０．５ｍｇ／ｍＬ、約０．０１ｍｇ／ｍＬから約０．４ｍｇ／ｍＬ、約０．０１ｍｇ／ｍＬから約０．３ｍｇ／ｍＬ、約０．０１ｍｇ／ｍＬから約０．２ｍｇ／ｍＬ、約０．０１ｍｇ／ｍＬから約０．１５ｍｇ／ｍＬ、約０．０１ｍｇ／ｍＬから約０．１ｍｇ／ｍＬ、約０．０１ｍｇ／ｍＬから約０．０５ｍｇ／ｍＬ、約０．１ｍｇ／ｍＬから約１ｍｇ／ｍＬ、約０．１ｍｇ／ｍＬから約０．５ｍｇ／ｍＬ、または約０．１ｍｇ／ｍＬから約０．３ｍｇ／ｍＬの範囲である。さらに好ましくは、界面活性剤の濃度は、約０．０５ｍｇ／ｍＬ、約０．０６ｍｇ／ｍＬ、約０．０７ｍｇ／ｍＬ、約０．０８ｍｇ／ｍＬ、約０．０９ｍｇ／ｍＬ、約０．１ｍｇ／ｍＬ、約０．１５ｍｇ／ｍＬ、約０．２ｍｇ／ｍＬ、約０．３ｍｇ／ｍＬ、約０．４ｍｇ／ｍＬ、約０．５ｍｇ／ｍＬ、約０．６ｍｇ／ｍＬ、約０．７ｍｇ／ｍＬ、約０．８ｍｇ／ｍＬ、約０．９ｍｇ／ｍＬ、または約１ｍｇ／ｍＬである。

いくつかの態様において、ポリソルベートは、約０．１ｍｇ／ｍＬから約０．３ｍｇ／ｍＬの範囲の濃度、例えば、０．２ｍｇ／ｍＬのポリソルベート８０である。
本発明において使用されるキレート剤は、本発明の製剤における還元酸素種の形成を低下させ、酸性種（例えば、脱アミド化）の形成を低下させ、抗体凝集を低下させ、かつ／または抗体断片化を低下させ、かつ／または抗体酸化を低下させる。例えば、キレート剤は、金属イオンに対して少なくとも１つの結合（例えば、共有結合、イオン結合、またはその他）を形成し、そうでなければ不安定性を促進しうる種と錯体を形成する安定剤として作用する多座配位子であり得る。

いくつかの態様において、キレート剤は、アミノポリカルボン酸、ヒドロキシアミノカルボン酸、Ｎ−置換グリシン、２−（２−アミノ−２−オキソクチル）アミノエタンスルホン酸（ＢＥＳ）、デフェロキサミン（ＤＥＦ）、クエン酸、ナイアシンアミド、およびデオキシコレートおよびそれらの混合物からなる群から選択され得る。いくつかの態様では、キレート剤は、エチレンジアミン四酢酸（ＥＤＴＡ）、ジエチレントリアミン五酢酸５（ＤＴＰＡ）、ニトリロトリ酢酸（ＮＴＡ）、Ｎ−２−アセトアミド−２−イミノ二酢酸（ＡＤＡ）、ビス（アミノエチル）グリコールエーテル、Ｎ，Ｎ，Ｎ’，Ｎ’−四酢酸（ＥＧＴＡ）、トランス−ジアミノシクロヘキサン四酢酸（ＤＣＴＡ）、グルタミン酸、およびアスパラギン酸、Ｎ−ヒドロキシエチルイミノ二酢酸（ＨＩＭＤＡ）、Ｎ，Ｎ−ビス−ヒドロキシエチルグリシン（ビシン）およびＮ−（トリスヒドロキシメチルメチル）１０グリシン（トリシン）、グリシルグリシン、デオキシコール酸ナトリウム、エチレンジアミン、プロピレンジアミン、ジエチレントリアミン、トリエチレンテトラアミン（トリエン）、エデト酸二ナトリウム二水和物（またはＥＤＴＡ二ナトリウム二水和物またはＥＤＴＡ二ナトリウム塩）、ＥＤＴＡカルシウム、シュウ酸、リンゴ酸、クエン酸、クエン酸一水和物、およびクエン酸三ナトリウム−二水和物、８−ヒドロキシキノレート、アミノ酸、ヒスチジン、システイン、メチオニン、ペプチド、ポリペプチド、およびタンパク質、およびそれらの混合物からなる群から選択される。いくつかの態様では、キレート剤は、エデト酸二カリウム、エデト酸二ナトリウム、エデト酸カルシウム二ナトリウム、エデト酸ナトリウム、エデト酸三ナトリウム、およびエデト酸カリウム、またはそれらの混合物を含むが、これらに限定されない、ＥＤＴＡの塩からなる群から選択され；デフェロキサミン（ＤＥＦ）の適切な塩は、メシル酸デフェロキサミン（ＤＦＭ）である。本発明で使用されるキレート剤は、可能な場合には、化合物の遊離酸または遊離塩基形態または塩形態として、また、化合物または対応する塩の無水、溶媒和または水和形態として存在し得る。

いくつかの態様では、キレート剤はＥＤＴＡである。いくつかの態様では、キレート剤はＥＤＴＡの塩である。いくつかの態様では、キレート剤はエデト酸二ナトリウム二水和物である。

キレート剤の濃度は、一般に、約０．０１ｍｇ／ｍＬから約５０ｍｇ／ｍＬ、約０．１ｍｇ／ｍＬから約１０．０ｍｇ／ｍＬ、約５ｍｇ／ｍＬから約１５．０ｍｇ／ｍＬ、約０．０１ｍｇ／ｍＬから約１．０ｍｇ／ｍＬ、約０．０２ｍｇ／ｍＬから約０．５ｍｇ／ｍＬ、約０．０２５ｍｇ／ｍＬから約０．０７５ｍｇ／ｍＬの範囲である。さらに好ましくは、キレート剤の濃度は、一般に、約０．０１ｍＭから約２．０ｍＭ、約０．０１ｍＭから約１．５ｍＭ、約０．０１ｍＭから約０．５ｍＭ、約０．０１ｍＭから約０．４ｍＭ、約０．０１ｍＭから約０．３ｍＭ、約０．０１ｍＭから約０．２ｍＭ、約０．０１ｍＭから約０．１５ｍＭ、約０．０１ｍＭから約０．１ｍＭ、約０．０１ｍＭから約０．０９ｍＭ、約０．０１ｍＭから約０．０８ｍＭ、約０．０１ｍＭから約０．０７ｍＭ、約０．０１ｍＭから約０．０６ｍＭ、約０．０１ｍＭから約０．０５ｍＭ、約０．０１ｍＭから約０．０４ｍＭ、約０．０１ｍＭから約０．０３ｍＭ、約０．０１ｍＭから約０．０２ｍＭ、約０．０２から、または約０．０５ｍＭから約０．０１ｍＭの範囲である。好ましくは、キレート剤の濃度は、約０．０１ｍｇ／ｍＬ、約０．０２ｍｇ／ｍＬ、約０．０２５ｍｇ／ｍＬ、約０．０３ｍｇ／ｍＬ、約０．０４ｍｇ／ｍＬ、約０．０５ｍｇ／ｍＬ、約０．０６ｍｇ／ｍＬ、約０．０７ｍｇ／ｍＬ、約０．０７５ｍｇ／ｍＬ、約０．０８ｍｇ／ｍＬ、約０．０９ｍｇ／ｍＬ、約０．１０ｍｇ／ｍＬ、または約０．２０ｍｇ／ｍＬであり得る。さらに好ましくは、キレート剤の濃度は、約０．０２５ｍｇ／ｍＬ、約０．０３ｍｇ／ｍＬ、約０．０３５ｍｇ／ｍＬ、約０．０４ｍｇ／ｍＬ、約０．０４５ｍｇ／ｍＬ、約０．０５ｍｇ／ｍＬ、約０．０５５ｍｇ／ｍＬ、約０．０６ｍｇ／ｍＬ、約０．０６５ｍｇ／ｍＬ、約０．０７ｍｇ／ｍＬ、または約０．０７５ｍｇ／ｍＬである。最も好ましくは、キレート剤の濃度は約０．０５ｍｇ／ｍＬである。

いくつかの態様において、キレート剤は、約０．０５ｍｇ／ｍＬの濃度のエデト酸二ナトリウム二水和物である。いくつかの態様では、キレート剤は、約０．０５ｍｇ／ｍＬの濃度のエチレンジアミン四酢酸（ＥＤＴＡ）である。

いくつかの態様では、ｐＨは、約ｐＨ５．０から約６．６の範囲、好ましくは約ｐＨ５．０から６．５または約５．０から６．０の間、最も好ましくはｐＨ５．２から５．８の間であり得る。いくつかの態様では、本発明の製剤のｐＨは、約ｐＨ５．２、５．３、５．４、５．５、または５．６のいずれか１つと約ｐＨ６．５、６．４、６．３、６．２、６．１、６．０、５．９、５．８または５．７のいずれか１つとの間から選択される範囲内であり得る。いくつかの態様において、ｐＨは、約ｐＨ５．０、５．１、５．２、５．３、５．４、５．５、５．６、５．７、５．８、５．９、６．０、６．１、６．２、６．３、６．４、６．５、６．６、６．７、６．８、６．９、７．０、７．１、７．２、７．３、７．４または７．５のいずれかのｐＨ値から選択され得る。いくつかの態様では、ｐＨはｐＨ５．８＋／−０．５であり、いくつかの態様では、ｐＨはｐＨ５．８＋／−０．３である。

いくつかの態様では、製剤は防腐剤を含み得る。好ましくは、防腐剤は、フェノール、ｍ−クレゾール、ベンジルアルコール、塩化ベンザルコニウム、塩化ベンザルトニウム、フェノキシエタノールおよびメチルパラベンから選択される。

防腐剤の濃度は、一般に、約０．００１ｍｇ／ｍＬから約５０ｍｇ／ｍＬ、約０．００５ｍｇ／ｍＬから約１５．０ｍｇ／ｍＬ、約０．００８ｍｇ／ｍＬから約１２．０ｍｇ／ｍＬ、または約０．０１ｍｇ／ｍＬから約１０．０ｍｇ／ｍＬの範囲である。好ましくは、防腐剤の濃度は、約０．１ｍｇ／ｍＬ、０．２ｍｇ／ｍＬ、０．３ｍｇ／ｍＬ、約０．４ｍｇ／ｍＬ、約０．５ｍｇ／ｍＬ、約０．６ｍｇ／ｍＬ、約０．７ｍｇ／ｍＬ、０．８ｍｇ／ｍＬ、０．９ｍｇ／ｍＬ 約１．０ｍｇ／ｍＬ、２．０ｍｇ／ｍＬ、３．０ｍｇ／ｍＬ、約４．０ｍｇ／ｍＬ、約５．０ｍｇ／ｍＬ、約６．０ｍｇ／ｍＬ、約７．０ｍｇ／ｍＬ、８．０ｍｇ／ｍＬ、９．０ｍｇ／ｍＬ 約９．１ｍｇ／ｍＬ、約９．２ｍｇ／ｍＬ、９．３ｍｇ／ｍＬ、９．４ｍｇ／ｍＬ、９．５ｍｇ／ｍＬ、９．６ｍｇ／ｍＬ、９．７ｍｇ／ｍＬ、９．８ｍｇ／ｍＬ、９．９ｍｇ／ｍＬ、１０．０ｍｇ／ｍＬであり得る。最も好ましくは、防腐剤の濃度は、約０．１ｍｇ／ｍＬまたは９．０ｍｇ／ｍＬである。

いくつかの態様では、製剤は防腐剤を含まない。
いくつかの態様において、抗体は、モノクローナル抗体、ポリクローン抗体、抗体フラグメント（例えば、Ｆａｂ、Ｆａｂ’、Ｆ（ａｂ’）２、Ｆｖ、Ｆｃ、ＳｃＦｖなど）、キメラ抗体、二重特異性抗体、ヘテロコンジュゲート抗体、一本鎖（ＳｃＦｖ）、それらの変異体、抗体部分を含む融合タンパク質（例えば、ドメイン抗体）、ヒト化抗体、ヒト抗体、および抗体のグリコシル化バリアント、抗体のアミノ酸配列バリアント、および共有修飾抗体を含む、必要な特異性の抗原認識部位を含む免疫グロブリン分子の他の改変された構成からなる群から選択され得る。抗体は、マウス、ラット、ヒト、または任意の他の起源のもの（キメラまたはヒト化抗体を含む）でありうる。いくつかの態様において、抗体はヒトのものである。好ましくは、抗体は単離され、さらに好ましくは、それは実質的に純粋である。抗体が抗体フラグメントである場合、これは好ましくは、元の抗体の機能的特徴、すなわち、リガンド結合および／またはアンタゴニストもしくはアゴニスト活性を保持している。

いくつかの態様において、抗体重鎖定常領域は、ＩｇＧ、ＩｇＭ、ＩｇＤ、ＩｇＡ、およびＩｇＥなどの任意の型の定常領域；およびＩｇＧ１、ｌｇＧ２、ＩｇＧ３、ＩｇＧ４などの任意のアイソタイプに由来しうる。好ましくは、抗体はＩｇＧ１抗体である。

本発明のさらなる側面によれば、以下を含むか、またはそれらからなる製剤が提供される：約１５ｍｇ／ｍＬから約２５０ｍｇ／ｍＬの組織因子経路インヒビター（ＴＦＰＩ）抗体；約１ｍＭから約１００ｍＭの緩衝液；約１ｍｇ／ｍＬから約３００ｍｇ／ｍＬのポリオール；約０．０１ｍｇ／ｍＬから約１０ｍｇ／ｍＬの界面活性剤；約０．０１ｍｇ／ｍＬから約５０．０ｍｇ／ｍＬのキレート剤；ここで、製剤は、約５．０から約６．０のｐＨを有する。いくつかの態様では、抗体は、（ｉ）以下を含む重鎖可変領域（ＶＨ）：（ａ）配列番号１３のアミノ酸配列を含むＶＨ相補性決定領域１（ＣＤＲ−Ｈ１）；（ｂ）配列番号１４のアミノ酸配列を含むＶＨ相補性決定領域２（ＣＤＲ−Ｈ２）；および（ｃ）配列番号１５のアミノ酸配列を含むＶＨ相補性決定領域３（ＣＤＲ−Ｈ３）；ならびに（ｉｉ）以下を含む軽鎖可変領域（ＶＬ）：（ａ）配列番号８のアミノ酸配列を含むＶＬ相補性決定領域１（ＣＤＲ−Ｌ１）；（ｂ）配列番号９のアミノ酸配列を含むＶＬ相補性決定領域２（ＣＤＲ−Ｌ２）；および（ｃ）配列番号１０のアミノ酸配列を含むＶＬ相補性決定領域３（ＣＤＲ−Ｌ３）を含む。いくつかの態様では、抗ＴＦＰＩ抗体は、配列番号１８のアミノ酸配列を含むＶＨ領域、および配列番号１１のアミノ酸配列を含むＶＬ領域を含む。いくつかの態様において、抗ＴＦＰＩ抗体は、ＴＦＰＩ−１０６（ＰＦ−０６７４１０８６またはマルスタシマブとしても知られる）である。いくつかの態様において、緩衝液はヒスチジン緩衝液であり、ポリオールはスクロースまたはトレハロースであり、界面活性剤はポリソルベート（例えば、ポリソルベート８０）であり、かつ／またはキレート剤はＥＤＴＡまたはエデト酸二ナトリウム二水和物である。いくつかの態様では、緩衝液はヒスチジン緩衝液であり、ポリオールはスクロースであり、界面活性剤はポリソルベート８０であり、そしてキレート剤はエデト酸二ナトリウム二水和物である。

いくつかの態様では、本明細書に開示される抗ＴＦＰＩ抗体薬剤物質の製剤は、エチレン酢酸ビニル単一材料（ＥＶＡＭ）製品の接触面を備えた滅菌エチレン酢酸ビニル（ＥＶＡ）バッグ中に保存されうる。いくつかの態様では、本明細書に開示される抗ＴＦＰＩ抗体薬剤物質の製剤は、滅菌された高密度ポリエチレンボトル（ＨＤＰＥ）中に保存されうる。いくつかの態様では、本明細書に開示される抗ＴＦＰＩ抗体薬剤物質の製剤は、ステンレス鋼容器中に保存されうる。いくつかの態様では、本明細書に開示される抗ＴＦＰＩ抗体医薬品の製剤は、滅菌されたバイアルまたはプレフィルドシリンジ（ＰＦＳ）中に保存されうる。いくつかの態様において、本明細書に開示される抗ＴＦＰＩ抗体医薬品の製剤は、プレフィルドペン（ＰＦＰ）中に保存されうる。

本発明のさらなる側面によれば、以下を含むか、またはそれらからなる製剤が提供される：約１００ｍｇ／ｍＬ、約１１０ｍｇ／ｍＬ、約１１５ｍｇ／ｍＬ、約１２０ｍｇ／ｍＬ、約１３０ｍｇ／ｍＬ、約１４０ｍｇ／ｍＬ、約１５０ｍｇ／ｍＬ、約１５８ｍｇ／ｍＬ、約１６０ｍｇ／ｍＬ、または約２００ｍｇ／ｍＬの組織因子経路インヒビター抗体（例えば、ヒト抗ＴＦＰＩ抗体）；約１ｍＭから約１００ｍＭの緩衝液；約１ｍｇ／ｍＬから約３００ｍｇ／ｍＬのポリオール；約０．０１ｍｇ／ｍＬから約１０ｍｇ／ｍＬの界面活性剤；約０．０１ｍｇ／ｍＬから約１．０ｍｇ／ｍＬのキレート剤；ここで、製剤は、約５．０から約６．０のｐＨを有する。いくつかの態様では、抗体は、（ｉ）以下を含む重鎖可変領域（ＶＨ）：（ａ）配列番号１３のアミノ酸配列を含むＶＨ相補性決定領域１（ＣＤＲ−Ｈ１）；（ｂ）配列番号１４のアミノ酸配列を含むＶＨ相補性決定領域２（ＣＤＲ−Ｈ２）；および（ｃ）配列番号１５のアミノ酸配列を含むＶＨ相補性決定領域３（ＣＤＲ−Ｈ３）；ならびに（ｉｉ）以下を含む軽鎖可変領域（ＶＬ）：（ａ）配列番号８のアミノ酸配列を含むＶＬ相補性決定領域１（ＣＤＲ−Ｌ１）；（ｂ）配列番号９のアミノ酸配列を含むＶＬ相補性決定領域２（ＣＤＲ−Ｌ２）；および（ｃ）配列番号１０のアミノ酸配列を含むＶＬ相補性決定領域３（ＣＤＲ−Ｌ３）を含む。いくつかの態様において、抗ＴＦＰＩ抗体は、ＴＦＰＩ−１０６（ＰＦ−０６７４１０８６またはマルスタシマブとしても知られる）である。

本発明のさらなる側面によれば、以下を含むか、またはそれらからなる製剤が提供される：約５０ｍｇ／ｍＬから約１６０ｍｇ／ｍＬの組織因子経路インヒビター抗体（例えば、ヒト抗ＴＦＰＩ抗体）；約２０ｍＭの緩衝液；約１ｍｇ／ｍＬから約１２０ｍｇ／ｍＬのポリオール；約０．１ｍｇ／ｍＬから約０．３ｍｇ／ｍＬの界面活性剤；約０．０２５ｍｇ／ｍＬから約０．０７５ｍｇ／ｍＬのキレート剤；ここで、製剤は、約５．０から約６．０のｐＨを有する。いくつかの態様では、抗体は、（ｉ）以下を含む重鎖可変領域（ＶＨ）：（ａ）配列番号１３のアミノ酸配列を含むＶＨ相補性決定領域１（ＣＤＲ−Ｈ１）；（ｂ）配列番号１４のアミノ酸配列を含むＶＨ相補性決定領域２（ＣＤＲ−Ｈ２）；および（ｃ）配列番号１５のアミノ酸配列を含むＶＨ相補性決定領域３（ＣＤＲ−Ｈ３）；ならびに（ｉｉ）以下を含む軽鎖可変領域（ＶＬ）：（ａ）配列番号８のアミノ酸配列を含むＶＬ相補性決定領域１（ＣＤＲ−Ｌ１）；（ｂ）配列番号９のアミノ酸配列を含むＶＬ相補性決定領域２（ＣＤＲ−Ｌ２）；および（ｃ）配列番号１０のアミノ酸配列を含むＶＬ相補性決定領域３（ＣＤＲ−Ｌ３）を含む。いくつかの態様では、抗ＴＦＰＩ抗体は、配列番号１８のアミノ酸配列を含むＶＨ領域、および配列番号１１のアミノ酸配列を含むＶＬ領域を含む。いくつかの態様において、抗ＴＦＰＩ抗体は、ＴＦＰＩ−１０６（ＰＦ−０６７４１０８６またはマルスタシマブとしても知られる）である。いくつかの態様では、緩衝液はヒスチジン緩衝液であり、ポリオールはスクロースであり、キレート剤はエデト酸二ナトリウム二水和物であり、かつ／または界面活性剤はポリソルベート８０である。いくつかの態様では、抗体の濃度は、１００ｍｇ／ｍＬ、１１５ｍｇ／ｍＬ、１５０ｍｇ／ｍＬまたは１５８ｍｇ／ｍＬである。

いくつかの態様では、以下を含むか、またはそれらからなる水性製剤が提供される：約１５０ｍｇ／ｍＬの組織因子経路インヒビター抗体（例えば、ヒト抗ＴＦＰＩ抗体）；約２０ｍＭのヒスチジン緩衝液；約８５ｍｇ／ｍＬのスクロース；約０．２ｍｇ／ｍＬのポリソルベート８０；約０．０５ｍｇ／ｍＬのエデト酸二ナトリウム二水和物；ここで、製剤は約５．８のｐＨを有する。いくつかの態様では、抗体は、（ｉ）以下を含む重鎖可変領域（ＶＨ）：（ａ）配列番号１３のアミノ酸配列を含むＶＨ相補性決定領域１（ＣＤＲ−Ｈ１）；（ｂ）配列番号１４のアミノ酸配列を含むＶＨ相補性決定領域２（ＣＤＲ−Ｈ２）；および（ｃ）配列番号１５のアミノ酸配列を含むＶＨ相補性決定領域３（ＣＤＲ−Ｈ３）；ならびに（ｉｉ）以下を含む軽鎖可変領域（ＶＬ）：（ａ）配列番号８のアミノ酸配列を含むＶＬ相補性決定領域１（ＣＤＲ−Ｌ１）；（ｂ）配列番号９のアミノ酸配列を含むＶＬ相補性決定領域２（ＣＤＲ−Ｌ２）；および（ｃ）配列番号１０のアミノ酸配列を含むＶＬ相補性決定領域３（ＣＤＲ−Ｌ３）を含む。いくつかの態様では、抗ＴＦＰＩ抗体は、配列番号１８のアミノ酸配列を含むＶＨ領域、および配列番号１１のアミノ酸配列を含むＶＬ領域を含む。いくつかの態様では、抗ＴＦＰＩ抗体は、配列番号１９のアミノ酸配列を含む重鎖、および配列番号１２のアミノ酸配列を含む軽鎖を含む。いくつかの態様において、抗ＴＦＰＩ抗体は、ＴＦＰＩ−１０６（ＰＦ−０６７４１０８６またはマルスタシマブとしても知られる）である。

いくつかの態様では、本明細書に記載の製剤は、（例えば、−２０℃、５℃、２５℃、または４０℃において）少なくとも約１か月、約３か月、約６か月、約１２か月、約１８か月、約２４か月、約３０か月、約３６か月、約４２か月、約４８か月または約６０か月以上の貯蔵寿命を有する。例えば、いくつかの態様では、本発明の製剤は、（例えば、−２０℃、５℃、２５℃、または４０℃において）少なくとも約１か月、約３か月、約６か月、７か月、８か月、９か月、１０か月、１１か月、１２か月、１３か月、１４か月、１５か月、１６か月、１７か月、１８か月、１９か月、２０か月、２１か月、２２か月、２３か月、２４か月、２５か月、２６か月、２７か月、２８か月、２９か月、３０か月、３１か月、３２か月、３３か月、３４か月、３５か月、３６か月、３７か月、３８か月、３９か月、４０か月、４１か月、４２か月、４３か月、４４か月、４５か月、４６か月、４７か月、４８か月、４９か月、５０か月、５１か月、５２か月、５３か月、５４か月、５５か月、５６か月、５７か月、５８か月、５９か月、または６０か月の貯蔵寿命を有する。いくつかの態様では、本明細書に記載の製剤は、５±３℃で少なくとも約２４か月の貯蔵寿命を有する。

いくつかの態様では、本明細書に記載の製剤は、４０℃／７５％ＲＨで最大１か月、２か月、３か月、４か月、５か月、または６か月、（例えば、サイズ排除ＨＰＬＣによる測定で）約７％未満のＨＭＭＳを有する。いくつかの態様では、本明細書に記載の製剤は、４０℃で最大１か月、２か月、または３か月、（例えば、サイズ排除ＨＰＬＣによる測定で）約３％未満のＨＭＭＳを有する。いくつかの態様では、本明細書に記載の製剤は、４０℃で最大１か月、（例えば、サイズ排除ＨＰＬＣによる測定で）約２％未満のＨＭＭＳを有する。

いくつかの態様では、本明細書に記載の製剤は、５±３℃で最大２４か月、（例えば、サイズ排除ＨＰＬＣによる測定で）約２％未満のＨＭＭＳを有する。いくつかの態様では、本明細書に記載の製剤は、５±３℃で最大１か月、２か月、３か月、４か月、５か月、６か月、１２か月、１８か月または２４か月、（例えば、サイズ排除ＨＰＬＣによる測定で）約１％未満のＨＭＭＳを有する。いくつかの態様では、本明細書に記載の製剤は、５±３℃で最大２４か月、（例えば、還元キャピラリーゲル電気泳動による測定で）約２％未満のフラグメントを有する。

特に明記しない限り、本明細書に列挙されている濃度は、周囲条件、すなわち、２５℃、大気圧における濃度である。
抗ＴＦＰＩ抗体製剤の使用方法
本明細書に記載の製剤は、治療的処置方法を含むが、それに限定されない様々な用途において有用である。治療方法は、本発明の製剤を、それを必要とする対象に投与することを含む。

本発明の製剤の例示的な治療用途は、それを必要とする対象における出血時間の短縮、血液凝固の障害または血液障害（例えば、血友病Ａ、血友病Ｂ、血友病Ｃ、フォンウィルブランド病（ｖＷＤ）、第ＶＩＩ因子欠乏症、第ＶＩＩＩ因子、第ＩＸ因子、または第ＸＩ因子欠乏症）の治療または予防、血小板減少症の治療または予防、および血小板障害（血小板の機能または数の障害）の治療または予防を含む。本明細書に記載の製剤はまた、止血不能の出血（例えば、外傷および出血性脳卒中などの適応症における止血不能の出血）を治療するためにも使用されうる。本明細書に記載の製剤は、予防的処置（例えば、手術前の出血を処置または予防するため）にも使用されうる。

特に、本明細書に記載の製剤は、凝固の欠陥もしくは欠如または凝固障害を治療するために使用され得る。例えば、本明細書に記載の製剤は、ＴＦＰＩとＦＸａとの相互作用を低減または阻害するために、またはＴＦ／ＦＶＩＩａ／ＦＸａ活性のＴＦＰＩ依存的阻害を低減するために使用されうる。

したがって、いくつかの態様では、対象は、以下のような血液凝固の障害または血液障害に罹患しているか、または罹患しやすい：いくつかの態様において、対象は、血友病Ａ、ＢまたはＣに罹患しているか、または罹患しやすい。いくつかの態様において、対象は、血友病ＡまたはＢに罹患しているか、または罹患しやすい。いくつかの態様において、対象は、血友病Ａに罹患しているか、または罹患しやすく、凝固第ＶＩＩＩ因子に対する中和抗体（すなわち、インヒビター）を有している。いくつかの態様において、対象は、血友病Ｂに罹患しているか、または罹患しやすく、凝固第ＩＸ因子に対する中和抗体（すなわち、インヒビター）を有している。いくつかの態様において、対象は、血友病Ｃに罹患しているか、または罹患しやすく、凝固第ＸＩ因子に対する中和抗体（すなわち、インヒビター）を有している。いくつかの態様では、対象は、フォンウィルブランド病（ｖＷＤ）に罹患しているか、または罹患しやすい。いくつかの態様では、対象は、血小板障害に罹患しているか、または罹患しやすい。いくつかの態様では、対象は、第ＶＩＩ因子欠乏症に罹患しているか、または罹患しやすい。いくつかの態様では、対象は、第ＸＩ因子欠乏症に罹患しているか、または罹患しやすい。

本明細書に記載のＴＦＰＩアンタゴニスト抗体または抗原結合部分を含む製剤は、凝固剤と組み合わせて使用されうる。本発明は、凝固剤と本発明の製剤との別々の、同時の、または連続的な投与を提供する。いくつかの態様では、本明細書に記載の製剤は、凝固剤をさらに含む。凝固剤の例は、第ＶＩＩａ因子、第ＶＩＩＩ因子、第ＩＸ因子、トラネキサム酸およびバイパス剤（例えば、抗インヒビター凝固剤複合体またはＦＥＩＢＡ）を含むが、これらに限定されない。

いくつかの態様では、出血時間を短縮するための薬剤を製造するための本発明の製剤の使用が提供される。
いくつかの態様において、本発明の製剤は、対象の血流中、筋肉中、組織中、脂肪中、または内臓中に直接投与され得る。非経口投与に適した手段は、静脈内、眼内、硝子体内、動脈内、腹腔内、髄腔内、脳室内、尿道内、胸骨内、頭蓋内、筋肉内、骨内、皮内および皮下を含む。非経口投与に適した器具は、ニードル（マイクロニードル、マイクロプロジェクション、可溶性ニードルおよび他の微細孔形成技術を含む）インジェクター、無針インジェクターおよび注入技術を含む。いくつかの態様において、本発明の製剤は、対象に静脈内投与または皮下投与される。いくつかの態様において、本発明の製剤は、対象に皮下投与される。いくつかの態様において、本発明の製剤は、対象に静脈内投与される。

いくつかの態様において、本発明の製剤の投与パターンは、１週間に１回、２週間に１回、３週間に１回、４週間に１回、５週間に１回、６週間に１回、７週間に１回、８週間に１回、９週間に１回、１０週間に１回、１５週間に１回、２０週間に１回、２５週間に１回、または２６週間に１回の用量の製剤の投与を含む。いくつかの態様において、本明細書に記載の製剤は、１か月に１回、２か月に１回、３か月に１回、４か月に１回、５か月に１回、または６か月に１回投与される。いくつかの態様において、本明細書に記載の製剤は、毎日または毎週（すなわち、週に１回）投与される。この治療法の進行は、従来的な技術およびアッセイによって容易にモニターされる。投与計画は、時間とともに変化し得る。

いくつかの態様において、本明細書に記載の製剤は、約３００ｍｇの初期抗体用量で投与され、その後、それに続く毎週（すなわち、週に１回）約１５０ｍｇの用量で投与される。いくつかの態様では、本明細書に記載の製剤は、約１５０ｍｇの抗体用量で毎週（すなわち、週に１回）投与される。いくつかの態様では、本明細書に記載の製剤は、約３００ｍｇの抗体用量で毎週（すなわち、週に１回）投与される。いくつかの態様では、本明細書に記載の製剤は、約４５０ｍｇの抗体用量で毎週（すなわち、週に１回）投与される。

本発明の目的のために適切な薬剤の投与量は、使用する抗体、治療される疾患の種類と重症度、薬剤が予防目的と治療目的のどちらで投与されるか、以前の治療、患者の病歴と薬剤に対する反応、および主治医の裁量に依存するであろう。通常、臨床医は、望ましい結果を達成する投与量に達するまで、薬剤を投与する。投与量は経験的に決定されうる。

以下の実施例は、例示のみを目的として提供されており、本発明の範囲を限定することを意図するものでは決してない。実際、本明細書中に示され、記述されているものに加えて、本発明の様々な改変は、前述の説明から当業者に明らかであり、添付の特許請求の範囲内に収まるであろう。

実施例

抗ＴＦＰＩ抗体の安定性試験
この実施例は、高密度ポリエチレン（ＨＤＰＥ）ボトル、バイアル、およびプレフィルドシリンジ中における抗ＴＦＰＩ抗体を含む製剤の安定性を示す。

１００ｍｇ／ｍＬ、１１５ｍｇ／ｍＬ、および１５０ｍｇ／ｍＬの抗ＴＦＰＩ抗体をｐＨ５．８の２０ｍＭヒスチジン、８５ｍｇ／ｍＬスクロース、０．０５ｍｇ／ｍＬエデト酸二ナトリウム二水和物、０．２ｍｇ／ｍＬポリソルベート８０中に調製した。この実施例において、使用される抗ＴＦＰＩ抗体は、配列番号１８のアミノ酸配列を有する重鎖可変領域、および配列番号１１のアミノ酸配列を有する軽鎖可変領域を有している。

１１５ｍｇ／ｍＬの抗ＴＦＰＩ抗体をＨＤＰＥボトルに充填し、−２０±５℃および５±３℃で少なくとも３か月（すなわち、１２週間）保管した。
１００ｍｇ／ｍＬおよび１５０ｍｇ／ｍＬの抗ＴＦＰＩ抗体をＩ型ガラスバイアルに充填し、コーティングされたストッパーで密封し、アルミニウムシールで蓋をして、５±３℃、２５℃／６０％相対湿度（ＲＨ）、および４０℃／７５％相対湿度（ＲＨ）で、少なくとも３か月間（すなわち、１２週間）、逆向きにして保管した。さらに、１５０ｍｇ／ｍＬの抗ＴＦＰＩ抗体も２．２５ｍＬおよび１ｍＬのＩ型ガラスプレフィルドシリンジ（ＰＦＳ）に充填し、コーティングされたプランジャーストッパーで栓をして、５±３℃、２５℃／６０％ＲＨ、および４０℃／７５％ＲＨで、少なくとも３か月間（すなわち、１２週間）、水平の向きにして保管した。

次に、タンパク質分解をモニターするために日常的に使用される品質属性についてサンプルを分析した。例えば、分析は、高分子量種（ＨＭＭＳ）を評価するためのサイズ排除高速液体クロマトグラフィー（ＳＥ−ＨＰＬＣ）、純度と断片化を評価するための還元および非還元キャピラリーゲル電気泳動（ＣＧＥ）、ならびに酸性種、塩基性種、主要種などの電荷の不均一性を評価するためのイメージキャピラリー等電点電気泳動（ｉＣＥ）からなっていた。また、分析は、阻害アッセイを使用した抗ＴＦＰＩ抗体の相対的効力の評価も含んでいた。

公定法および非公定法を含む特定の分析手順を使用して、抗ＴＦＰＩ抗体の特性、純度、および相対的効力を評価した。分析手順の説明を以下に示す。結果は表１〜８にまとめられている。

外観（透明度および着色）：現行のヨーロッパ薬局方の手順、Ｐｈ．Ｅｕｒ．２．２．１およびＰｈ．Ｅｕｒ．２．２．２にそれぞれ従って、透明度と着色について薬剤物質を評価する。

ｐＨ：現行のＵＳＰ手順＜７９１＞に従って、薬剤物質のｐＨを分析する。
ＵＶによるタンパク質濃度：分光光度計を使用し、２８０ｎｍでの吸光度を用いて、試験サンプルの濃度を決定する。濃度の計算には、ＰＦ−０６７４１０８６（以下に示す）の比吸収係数または吸収率（ａ２８０）を使用する。
ａ２８０ ＝ １．４５ｍＬ ｍｇ^−１ ｃｍ^−１
イメージキャピラリー等電点電気泳動（ｉＣＥ）：電荷の不均一性を評価するために、イメージキャピラリー等電点電気泳動（ｉＣＥ）法を使用する。ｉＣＥは、電界の影響下で両性電解質によって生成されるｐＨ勾配の電荷差に基づきタンパク質種を分離し、生成物の電荷の不均一性をモニターするために使用される。タンパク質電荷種は、ＤＣ電圧下でキャピラリー内に集束し、キャピラリー全体のイメージングにより２８０ｎｍにおいて検出される。

サイズ排除ＨＰＬＣ（ＳＥ−ＨＰＬＣ）：ＳＥ−ＨＰＬＣ法は、生成物の純度を決定するために使用される。試験サンプルを希釈し、サイズ排除カラムに注入する。高分子量種（ＨＭＭＳ）とモノマーの含有量は、全てのタンパク質関連ピークの総面積の割合として報告される。

還元キャピラリーゲル電気泳動（ＣＧＥ）：この方法は、還元タンパク質の純度を決定するために使用される。サンプルをＳＤＳで変性させ、還元剤の存在下で加熱する。タンパク質は重鎖と軽鎖に還元され、ふるい分け媒体を含むキャピラリーで電気泳動的に分離され、ＵＶ分光法を使用して検出される。分離は、分離された重鎖と軽鎖およびサイズが合致する不純物の定量を可能とする。純度は、重鎖と軽鎖の合計の割合として報告される。

非還元キャピラリーゲル電気泳動（ＣＧＥ）：この方法は、完全なタンパク質の純度を決定するために使用される。サンプルをＳＤＳで変性させ、アルキル化剤の存在下で加熱する。タンパク質は、ふるい分け媒体を含むキャピラリーで電気泳動的に分離され、ＵＶ分光法を使用して検出される。分離は、分離された完全なＩｇＧおよびサイズが合致する不純物の定量を可能とする。純度はＩｇＧの割合として報告される。

リシルエンドプロテイナーゼ（Ｌｙｓ−Ｃ）マッピング：この方法は、メチオニン残基を含むＦｃペプチドに局在する抗ＴＦＰＩ抗体中の酸化率を決定するために使用される。リシルエンドプロテイナーゼ（Ｌｙｓ−Ｃ）を使用して、抗ＴＦＰＩ抗体のサンプルをペプチド断片へと消化する。得られたペプチド断片を逆相ＨＰＬＣによって分離する。Ｆｃ−ペプチドと酸化されたＦｃ−ペプチドの分離は、抗ＴＦＰＩ抗体の酸化率を測定し、モニターすることを可能とする。

阻害アッセイによる生物活性：阻害アッセイ法は、ＰＦ−０６７４１０８６のｉｎ ｖｉｔｒｏ生物活性を評価するために使用される。阻害アッセイは、ＰＦ−０６７４１０８６がＴＦＰＩ：ＦＸａ複合体の形成を阻害して、遊離のヒト凝固因子Ｘａ（ＦＸａ）の増加をもたらすことができ、ひいては、凝固活性に利用可能な遊離のＦＸａをもたらすことを示す。

ＴＦＰＩはマイクロタイタープレートに加えられる。ＰＦ−０６７４１０８６参照物質の希釈液と試験サンプルをマイクロタイタープレートに加えて、抗体がその標的に結合できるようにする。次に、ＦＸａをマイクロタイタープレートに追加し、ＰＦ−０６７４１０８６により結合しておらず、ＴＦＰＩ：ＦＸａ複合体を形成する、利用可能なＴＦＰＩに結合させる。遊離のＦＸａは、発色基質のスペクトロザイムＦＸａを使用して検出する。基質添加後、比色反応を分光光度法で測定する。

データ分析の方法は、非線形曲線フィッティングおよび標準曲線とサンプル曲線との間の平行関係の評価を含む。サンプルの力価は、平行曲線間のＩＣ５０のシフトから決定される。ＰＦ−０６７４１０８６あたりの単位で表されるサンプルの比活性は、１ミリグラム（ｍｇ）の参照物質に割り当てられた単位数を相対力価の値に掛けることによって計算される。

この試験のデータは、高濃度（１００ｍｇ／ｍＬ〜１５０ｍｇ／ｍＬ）の抗ＴＦＰＩ抗体が、２０ｍＭヒスチジン、８５ｍｇ／ｍＬスクロース、０．０５ｍｇ／ｍＬエデト酸二ナトリウム二水和物、０．２ｍｇ／ｍＬポリソルベート８０、ｐＨ５．８の製剤中で安定であることを示している。結果はまた、異なる容器／閉鎖系（ＨＤＰＥボトル、バイアル、ＰＦＳ）が、抗ＴＦＰＩ抗体の安定性に影響を与えないことも示している。

この試験では、５±３℃の意図された保管条件、２５℃／６０％ＲＨの加速保管条件、および４０℃／７５％ＲＨの熱ストレス保管条件を評価した。５±３℃の長期保管条件では、抗ＴＦＰＩ抗体は、最大２４か月間安定であることが示され、製品の品質属性に有意差は観察されなかった。

２５℃／６０％ＲＨで３か月後、および４０℃／７５％ＲＨで１か月後には、％ＨＭＭＳにわずかな増加が観察される。４０℃／７５％ＲＨで３か月後には、分解が観察されたが、その規模は、抗ＶＥＧＦ抗体などの他のＩｇＧ１抗体で見られるものよりも小さい。表９は、抗ＴＦＰＩ抗体と抗ＶＥＧＦ抗体に関する４０℃／７５％ＲＨのデータにおける％ＨＭＭＳを比較している。各抗体の％ＨＭＭＳを定量するために、適格な製品に固有のＳＥ−ＨＰＬＣ法が使用された。

分解は見られるものの、抗ＴＦＰＩ抗体は、ｐＨ５．８の２０ｍＭヒスチジン、８５ｍｇ／ｍＬスクロース、０．０５ｍｇ／ｍＬエデト酸二ナトリウム二水和物、０．２ｍｇ／ｍＬポリソルベート８０の製剤中において、２５℃／６０％ＲＨで最大２４か月間、また、４０℃／７５％ＲＨで１２か月間、活性を維持する。

抗ＴＦＰＩ抗体の製剤ロバスト性安定性試験
この実施例は、標的製剤（対照製剤）中における１５０ｍｇ／ｍＬの抗ＴＦＰＩ抗体、および高もしくは低賦形剤レベルおよびｐＨで製剤化された抗ＴＦＰＩ抗体の安定性を例証する。評価した製剤は表１０に示されている。各成分の濃度は、分析試験により確認した。この実施例において、使用される抗ＴＦＰＩ抗体（ＴＦＰＩ−１０６）は、配列番号１８のアミノ酸配列を有する重鎖可変領域、および配列番号１１のアミノ酸配列を有する軽鎖可変領域を有している。

製剤は、５±３℃の意図された保管条件、２５℃／６０％ＲＨの加速保管条件、および４０℃／７５％ＲＨの熱ストレス保管条件で６か月間保管された。次に、本明細書に記載の方法を使用して、タンパク質分解をモニターするために日常的に使用される品質属性についてサンプルを分析した。例えば、分析は、高分子量種（ＨＭＭＳ）を評価するためのサイズ排除高速液体クロマトグラフィー（ＳＥ−ＨＰＬＣ）、純度と断片化を評価するための還元および非還元キャピラリーゲル電気泳動（ＣＧＥ）、ならびに酸性種、塩基性種、主要種などの電荷の不均一性を評価するためのイメージキャピラリー等電点電気泳動（ｉＣＥ）からなっていた。また、分析は、阻害アッセイを使用した抗ＴＦＰＩ抗体の相対的効力の評価も含んでいた。公定法および非公定法を含む特定の分析手順を使用して、抗ＴＦＰＩ抗体の特性、純度、および相対的効力を評価した。結果は表１１〜１９にまとめられている。

表１１〜１９に示され、以下に説明されるデータは、高賦形剤もしくは低賦形剤またはｐＨレベルのいずれかを含む抗ＴＦＰＩ抗体製剤が、いずれのリアルタイム安定性条件下でも６か月後に安定であることを示している。

外観
２〜８℃および２５℃で６か月間保管した後（表１８）、ほとんどの製剤（Ａ〜Ｅ）で、色、透明度、および可視粒子に有意な変化は観察されなかった。２〜８℃および２５℃で６か月間保管した後、ＰＳ８０を含まない製剤Ｆでは可視微粒子の有意な増加が観察された。

４０℃で６か月間保管した後、全ての製剤（Ａ〜Ｆ）で溶液の色に有意な変化が観察された。この結果は、以前の安定性試験に基づき、加速ストレス条件で保管した場合に予想されるものである。これらの効果は、標的製剤と比較して、より高い賦形剤濃度を含む製剤ＣおよびＥで最も顕著であった。溶液の透明度に大きな変化は観察されなかった。製剤Ａ〜Ｅの場合、時折、可視粒子が観察されたが、これらはサンプルの取り扱いに起因する可能性がある。４０℃で６か月後、ＰＳ８０を含まない製剤Ｆで可視粒子の有意な増加が観察されたが、その増加は２〜８℃および２５℃の保管条件よりも急激ではないことがみとめられた。この所見は、ＰＳ８０を医薬品製剤に含めることの重要性を強調している。

ｐＨ
２〜８℃、２５℃、および４０℃で６か月間保管した後（表１１）、全ての製剤（Ａ〜Ｆ）でｐＨの有意な変化は観察されなかった。

ＵＶによるタンパク質濃度
２〜８℃、２５℃、および４０℃で６か月間保管した後（表１２）、タンパク質濃度は１５０ｍｇ／ｍＬ±１５ｍｇ／ｍＬの仕様内にとどまっていた。ほとんどの製剤および保管条件で、タンパク質濃度のわずかな増加が観察されたが、これは、アッセイのばらつきに起因する可能性がある。

サイズ排除クロマトグラフィー（ＳＥ−ＨＰＬＣ）
２〜８℃で６か月間保管した後（表１３）、全ての製剤（Ａ〜Ｆ）で％ＨＭＭＳおよび％モノマーに有意な変化は観察されなかった。低分子量種に対応するピークは、２〜８℃における保管中に、全ての製剤にわたって一貫した観察が得られない点が注目された。

２５℃で６か月間保管した後、％ＨＭＭＳと％ＬＭＭＳの両方で１〜２％のわずかな増加と、それに対応する％モノマーの減少が全ての製剤（Ａ〜Ｆ）で観察された。全ての％ＨＭＭＳの結果が、５％の受け入れ基準を下回ったままであった。

４０℃で６か月間保管した後、％ＨＭＭＳと％ＬＭＭＳの有意な増加と、それに対応する％モノマーの減少が全ての製剤（Ａ〜Ｆ）で観察された。製剤Ｂ（低賦形剤／高ｐＨ）およびＣ（高賦形剤／低ｐＨ）は、％モノマーの最大の減少、約２０％を示した。これらの結果は、以前の安定性試験に基づく加速ストレス条件において予想されるものである。

非還元キャピラリーゲル電気泳動（ｎｒＣＧＥ）
２〜８℃で６か月間保管した後（表１４）、％ＩｇＧ、％フラグメント、および％その他には、全ての製剤（Ａ〜Ｆ）で有意な変化は観察されなかった。

２５℃で６か月間保管した後、全ての製剤（Ａ〜Ｆ）で２〜３％のフラグメントのわずかな増加とそれに対応する％ＩｇＧの減少が観察された。％その他に有意な変化は観察されなかった。

４０℃で６か月間の保存後には、全ての製剤（Ａ〜Ｆ）で、２５％を超えるフラグメントの有意な増加とそれに対応する％ＩｇＧの減少が観察された。３０％超という％フラグメントの最大の増加は、製剤Ｂ（低賦形剤／高ｐＨ）およびＣ（高賦形剤／低ｐＨ）で観察された。この結果は、ＳＥ−ＨＰＬＣの結果と一致している。％その他のわずかな増加が、全ての製剤で観察された。

還元キャピラリーゲル電気泳動（ｒＣＧＥ）
２〜８℃で６か月間保管した後（表１５）、％重鎖＋軽鎖（ＨＣ＋ＬＣ）、％フラグメント、および％その他には、全ての製剤（Ａ〜Ｆ）で有意な変化は観察されなかった。

２５℃で６か月間保管した後、全ての製剤（Ａ〜Ｆ）で１〜２％のフラグメントのわずかな増加とそれに対応する％ＨＣ＋ＬＣの減少が観察された。製剤ＢおよびＥについてのみ、１％のその他のわずかな増加が観察された。

４０℃で６か月間の保存後には、全ての製剤（Ａ〜Ｆ）で、およそ１０％のフラグメントの有意な増加とそれに対応する％ＨＣ＋ＬＣの減少が観察された。％フラグメントの最大の増加は、製剤Ｃ（高賦形剤／低ｐＨ）で観察された。ほとんどの製剤（Ａ、Ｃ、Ｄ、およびＦ）は、その他の２〜３％のわずかな増加を示した。対照的に、製剤ＢおよびＥでは、７〜８％の％その他の有意な増加が観察された。

等電点キャピラリー電気泳動（ｉＣＥ）
２〜８℃で６か月間保管した後（表１６）、％酸性のわずかな増加とそれに対応する％主要種の減少が全ての製剤（Ａ〜Ｆ）で観察されたが、％塩基性種の有意な変化は観察されなかった。

２５℃で６か月間保管した後、全ての製剤で１０〜２０％の酸性種の有意な増加とそれに対応する％主要種の減少が観察された。ほとんどの製剤にわたって、塩基性種の２〜３％のわずかな増加が観察された。高ｐＨ製剤のＢおよびＥは、％酸性種の最大の増加である約１８％を示した。この所見は、他に詳細に記述されているアスパラギンの脱アミド化のｐＨ依存性によって説明されうる。^９
４０℃で６か月間保管した後、全ての製剤で約６０％の酸性種の有意な増加とそれに対応する％主要種の減少が観察された。％酸性種の最大の増加は、製剤Ｅで観察されたが、これは、アスパラギン脱アミド化のｐＨ依存性によって説明されうる。Ｔ＝０とＴ＝６か月のサンプルを比較すると、全ての製剤において％塩基性種の正味の減少が観察された。

メチオニン酸化
２〜８℃で６か月間保管した後（表１７）、％ＭｅｔＯｘの有意な変化は、全ての製剤（Ａ〜Ｆ）で観察されなかった。２５℃で６か月間保管した後、全ての製剤（Ａ〜Ｆ）で１〜２％のＭｅｔＯｘのわずかな増加が観察された。４０℃で６か月間保管した後には、全ての製剤で、約１０％のＭｅｔＯＸの有意な増加が観察された。約２０％という％ＭｅｔＯＸの最大の増加は、製剤Ｃ（高賦形剤／低ｐＨ）で観察された。

阻害バイオアッセイ
２〜８℃および２５℃で６か月間保管した後（表１９）、全ての製剤で、相対力価の有意な変化は観察されなかった。４０℃で６か月間保管した後、製剤Ａ、Ｃ、Ｄ、およびＥで相対力価の低下傾向が観察されたが、全ての結果が許容基準内にとどまっていた。

したがって、分解が観察されるものの、抗ＴＦＰＩ抗体は、全ての製剤において、２５℃／６０％ＲＨの加速保管条件、および４０℃／７５％ＲＨの熱ストレス保管条件において６か月間活性を維持する（表１９）。

撹拌試験
撹拌試験は、１ｍＬの製剤Ａ〜Ｆを１ｍＬの固定針を有する長いシリンジに充填することによって行った。次に、シリンジに４８時間の撹拌ストレスをかけた。撹拌試験は、シリンジを水平方向に配置し、３００ｒｐｍに設定したオービタルシェーカーを使用して撹拌して、周囲室温（約２２℃）で実施した。時間ゼロ（Ｔ０）の対照は、振盪ストレスに曝されていなかった。

３００ｒｐｍで４８時間撹拌した後、全ての製剤（Ａ〜Ｆ）において、ＳＥ−ＨＰＬＣ、ｎｒＣＧＥ、ｒＣＧＥ、ｉＣＥ、およびメチオニン酸化による有意な変化は観察されなかった。ＰＳ８０を含まない製剤Ｆで可視粒子の有意な増加が観察され、ＤＰ製剤におけるＰＳ８０の重要性が確認された。ほとんどの製剤（Ａ〜Ｅ）で、外観の変化は観察されなかった。

結論
この試験の目的は、設計領域を確立し、製品の品質が製剤組成と撹拌の変動に対してロバストであることを実証することであった。２〜８℃の意図された保管温度において、６か月の保管後、ほとんどの製剤（Ａ〜Ｅ）について、製剤の変動性はＤＰの安定性に最小限の影響しか与えなかった。ＰＳ８０を含まない製剤（Ｆ）では、可視粒子および顕微鏡で見える視粒子の有意な増加が観察され、ＤＰ製剤におけるＰＳ８０の重要性が確認された。２５℃と４０℃では、製品品質の変化が２５℃で３か月、４０℃では１か月から観察されたが、これは、以前の安定性試験に基づき、加速ストレス条件下において予想されることである。４０℃での保管の結果は、タンパク質凝集が設計領域の隅（ＢおよびＣ）で最大に達し、また、脱アミド化が高ｐＨ（ＢおよびＥ）で最大に達することを示唆している。ＰＳ８０を含まない製剤Ｆを除いて、全ての製剤が撹拌ストレスに対するロバスト性を示した。これらの結果は、プロセスで予想される範囲外の賦形剤レベルの変動に対するＤＰのロバスト性を示している。評価された製剤は、標的賦形剤レベルを含む製剤（対照製剤Ａ）と同等であり、よって、製剤のロバスト性を示している。

上記の個々のセクションで言及されている本発明の様々な特徴および態様は、適宜、必要な変更を加えて、他のセクションに適用される。したがって、あるセクションにおいて特定されている特徴は、適宜、他のセクションで特定されている特徴と組み合わせられうる。特許、特許出願、論文、教科書、および引用された配列アクセッション番号を含む、本明細書で引用された全ての参考文献、およびそこに引用された参考文献は、参照によりその全体が本明細書に組み込まれる。組み込まれた文献および同様な資料の１つまたは複数が、定義された用語、用語の使用法、説明された技法などを含むがこれらに限定されない点につき、本願と異なるか矛盾する場合、本願が優先される。

Claims (36)

1. 約１５ｍｇ／ｍＬから約２５０ｍｇ／ｍＬの組織因子経路インヒビター（ＴＦＰＩ）のクニッツドメイン２（Ｋ２）中のエピトープに特異的に結合する抗体、緩衝液、ポリオール、界面活性剤、およびキレート剤を含む製剤であって、製剤が約５．０から約６．０のｐＨを有し、エピトープが、配列番号２の番号付けに基づき、残基Ｉｌｅ１０５、Ａｒｇ１０７、およびＬｅｕ１３１を含む、製剤。
2. 緩衝液がヒスチジンまたはコハク酸緩衝液である、請求項１に記載の製剤。
3. 緩衝液の濃度が約０．１ｍＭから約１００ｍＭである、請求項１または２に記載の製剤。
4. ポリオールがスクロースである、請求項１〜３のいずれか一項に記載の製剤。
5. ポリオールの濃度が約１ｍｇ／ｍＬから約３００ｍｇ／ｍＬである、請求項１〜４のいずれか一項に記載の製剤。
6. 界面活性剤がポリソルベートである、請求項１〜５のいずれか一項に記載の製剤。
7. ポリソルベートがポリソルベート８０（ＰＳ８０）である、請求項６に記載の製剤。
8. 界面活性剤の濃度が約０．０１ｍｇ／ｍＬから約１０ｍｇ／ｍＬである、請求項１〜７のいずれか一項に記載の製剤。
9. キレート剤がエデト酸二ナトリウム二水和物またはエチレンジアミン四酢酸（ＥＤＴＡ）である、請求項１〜８のいずれか一項に記載の製剤。
10. キレート剤の濃度が約０．０１ｍｇ／ｍＬから約１．０ｍｇ／ｍＬである、請求項１〜９のいずれか一項に記載の製剤。
11. 抗体が、
    （ｉ）以下を含む重鎖可変領域（ＶＨ）：（ａ）配列番号１３のアミノ酸配列を含むＶＨ相補性決定領域１（ＣＤＲ−Ｈ１）；（ｂ）配列番号１４のアミノ酸配列を含むＶＨ相補性決定領域２（ＣＤＲ−Ｈ２）；および（ｃ）配列番号１５のアミノ酸配列を含むＶＨ相補性決定領域３（ＣＤＲ−Ｈ３）；ならびに
    （ｉｉ）以下を含む軽鎖可変領域（ＶＬ）：（ａ）配列番号８のアミノ酸配列を含むＶＬ相補性決定領域１（ＣＤＲ−Ｌ１）；（ｂ）配列番号９のアミノ酸配列を含むＶＬ相補性決定領域２（ＣＤＲ−Ｌ２）；および（ｃ）配列番号１０のアミノ酸配列を含むＶＬ相補性決定領域３（ＣＤＲ−Ｌ３）
    を含む、請求項１〜１０のいずれか一項に記載の製剤。
12. 抗体が、配列番号１８のアミノ酸配列を含むＶＨ、および配列番号１１のアミノ酸配列を含むＶＬを含む、請求項１〜１１のいずれか一項に記載の製剤。
13. 抗体が、ＡＴＣＣアクセッション番号ＰＴＡ−１２２３２９の下で寄託されたプラスミド中に存在するインサートによってコードされるＶＨ配列、およびＡＴＣＣアクセッション番号ＰＴＡ−１２２３２８の下で寄託されたプラスミド中に存在するインサートによってコードされるＶＬ配列を含む、請求項１〜１２のいずれか一項に記載の製剤。
14. 抗体が、配列番号１９のアミノ酸配列を含む重鎖を含み、かつ、配列番号１２のアミノ酸配列を含む軽鎖を含む、請求項１〜１３のいずれか一項に記載の製剤。
15. 約１５ｍｇ／ｍＬから約２５０ｍｇ／ｍＬの組織因子経路インヒビター（ＴＦＰＩ）のクニッツドメイン２（Ｋ２）中のエピトープに特異的に結合する抗体、
    約１ｍＭから約４０ｍＭの緩衝液；
    約１ｍｇ／ｍＬから約１２０ｍｇ／ｍＬのポリオール；
    約０．０１ｍｇ／ｍＬから約１ｍｇ／ｍＬの界面活性剤；
    約０．０１ｍｇ／ｍＬから約１．０ｍｇ／ｍＬのキレート剤
    を含む製剤であって、
    ここで、
    製剤は、約５．０から約６．０のｐＨを有し、
    エピトープは、配列番号２の番号付けに基づき、残基Ｉｌｅ１０５、Ａｒｇ１０７、およびＬｅｕ１３１を含む、製剤。
16. 約１５ｍｇ／ｍＬから約２５０ｍｇ／ｍＬの組織因子経路インヒビター（ＴＦＰＩ）のクニッツドメイン２（Ｋ２）中のエピトープに特異的に結合する抗体、
    約１ｍＭから約４０ｍＭの緩衝液；
    約１ｍｇ／ｍＬから約１２０ｍｇ／ｍＬのポリオール；
    約０．０１ｍｇ／ｍＬから約１ｍｇ／ｍＬの界面活性剤；
    約０．０１ｍｇ／ｍＬから約１．０ｍｇ／ｍＬのキレート剤
    を含む製剤であって、
    ここで、
    製剤は、約５．０から約６．０のｐＨを有し、
    抗体は、（ｉ）以下を含む重鎖可変領域（ＶＨ）：（ａ）配列番号１３のアミノ酸配列を含むＶＨ相補性決定領域１（ＣＤＲ−Ｈ１）；（ｂ）配列番号１４のアミノ酸配列を含むＶＨ相補性決定領域２（ＣＤＲ−Ｈ２）；および（ｃ）配列番号１５のアミノ酸配列を含むＶＨ相補性決定領域３（ＣＤＲ−Ｈ３）；ならびに（ｉｉ）以下を含む軽鎖可変領域（ＶＬ）：（ａ）配列番号８のアミノ酸配列を含むＶＬ相補性決定領域１（ＣＤＲ−Ｌ１）；（ｂ）配列番号９のアミノ酸配列を含むＶＬ相補性決定領域２（ＣＤＲ−Ｌ２）；および（ｃ）配列番号１０のアミノ酸配列を含むＶＬ相補性決定領域３（ＣＤＲ−Ｌ３）を含む、製剤。
17. 抗体の濃度が約１００ｍｇ／ｍＬ、約１１５ｍｇ／ｍＬ、約１５０ｍｇ／ｍＬ、または約１５８ｍｇ／ｍＬである、請求項１〜１６のいずれか一項に記載の製剤。
18. １５０ｍｇ／ｍＬの組織因子経路インヒビター（ＴＦＰＩ）のクニッツドメイン２（Ｋ２）中のエピトープに特異的に結合する抗体、２０ｍＭのヒスチジン緩衝液、８５ｍｇ／ｍＬのスクロース、０．２ｍｇ／ｍＬのポリソルベート８０、０．０５ｍｇ／ｍＬのエデト酸二ナトリウム二水和物を含む医薬製剤であって、ここで、抗体が、配列番号１８のアミノ酸配列を含む重鎖可変領域、および配列番号１１のアミノ酸配列を含む軽鎖可変領域を含み、製剤が、５．８のｐＨを有する、医薬製剤。
19. １５０ｍｇ／ｍＬの組織因子経路インヒビター（ＴＦＰＩ）のクニッツドメイン２（Ｋ２）中のエピトープに特異的に結合する抗体、２０ｍＭのヒスチジン緩衝液、８５ｍｇ／ｍＬのスクロース、０．２ｍｇ／ｍＬのポリソルベート８０、０．０５ｍｇ／ｍＬのエデト酸二ナトリウム二水和物を含む医薬製剤であって、ここで、抗体が、配列番号１９のアミノ酸配列を含む重鎖を含み、かつ、配列番号１２のアミノ酸配列を含む軽鎖を含み、製剤が、５．８のｐＨを有する、医薬製剤。
20. １５０ｍｇ／ｍＬの組織因子経路インヒビター（ＴＦＰＩ）のクニッツドメイン２（Ｋ２）中のエピトープに特異的に結合する抗体、２０ｍＭのヒスチジン緩衝液、８５ｍｇ／ｍＬのスクロース、０．２ｍｇ／ｍＬのポリソルベート８０、０．０５ｍｇ／ｍＬのエデト酸二ナトリウム二水和物を含む医薬製剤であって、ここで、抗体が、配列番号１７のアミノ酸配列を含む重鎖を含み、かつ、配列番号１２のアミノ酸配列を含む軽鎖を含み、製剤が、５．８のｐＨを有する、医薬製剤。
21. １５０ｍｇ／ｍＬの組織因子経路インヒビター（ＴＦＰＩ）のクニッツドメイン２（Ｋ２）中のエピトープに特異的に結合する抗体、２０ｍＭのヒスチジン緩衝液、８５ｍｇ／ｍＬのスクロース、０．２ｍｇ／ｍＬのポリソルベート８０、０．０５ｍｇ／ｍＬのエデト酸二ナトリウム二水和物を含む医薬製剤であって、ここで、抗体が、配列番号２１のアミノ酸配列を含む重鎖を含み、かつ、配列番号１２のアミノ酸配列を含む軽鎖を含み、製剤が、５．８のｐＨを有する、医薬製剤。
22. 約５０ｍｇ／ｍＬから約２５０ｍｇ／ｍＬの組織因子経路インヒビター（ＴＦＰＩ）のクニッツドメイン２（Ｋ２）中のエピトープに特異的に結合する抗体、２０ｍＭのヒスチジン緩衝液、８５ｍｇ／ｍＬのスクロース、０．２ｍｇ／ｍＬのポリソルベート８０、０．０５ｍｇ／ｍＬのエデト酸二ナトリウム二水和物を含む医薬製剤であって、ここで、抗体が、配列番号２３のアミノ酸配列を含む重鎖を含み、かつ、配列番号２２のアミノ酸配列を含む軽鎖を含み、製剤が、５．８のｐＨを有する、医薬製剤。
23. 約５０ｍｇ／ｍＬから約２５０ｍｇ／ｍＬの組織因子経路インヒビター（ＴＦＰＩ）のクニッツドメイン２（Ｋ２）中のエピトープに特異的に結合する抗体、２０ｍＭのヒスチジン緩衝液、８５ｍｇ／ｍＬのスクロース、０．２ｍｇ／ｍＬのポリソルベート８０、０．０５ｍｇ／ｍＬのエデト酸二ナトリウム二水和物を含む医薬製剤であって、ここで、抗体が、配列番号２５のアミノ酸配列を含む重鎖を含み、かつ、配列番号２４のアミノ酸配列を含む軽鎖を含み、製剤が、５．８のｐＨを有する、医薬製剤。
24. 製剤が５±３℃で少なくとも約２４か月の貯蔵寿命を有する、請求項１〜２３のいずれか一項に記載の製剤。
25. 製剤が、４０℃／７５％ＲＨで最大１か月、２か月、３か月、４か月、５か月、または６か月間、（例えば、サイズ排除ＨＰＬＣによる測定で）約７％未満のＨＭＭＳを有する、請求項１〜２３のいずれか一項に記載の製剤。
26. 製剤が、４０℃で最大１か月、２か月、または３か月間、（例えば、サイズ排除ＨＰＬＣによる測定で）約３％未満のＨＭＭＳを有する、請求項１〜２３のいずれか一項に記載の製剤。
27. 製剤が、４０℃で最大１か月間、（例えば、サイズ排除ＨＰＬＣによる測定で）約２％未満のＨＭＭＳを有する、請求項１〜２３のいずれか一項に記載の製剤。
28. 出血時間を短縮する方法であって、それを必要とする対象に、治療有効量の請求項１〜２７のいずれか一項に記載の製剤を投与するステップを含む方法。
29. 血液凝固における障害または出血性障害を治療または予防する方法であって、それを必要とする対象に、治療有効量の請求項１〜２７のいずれか一項に記載の製剤を投与するステップを含む方法。
30. 血友病Ａ、ＢまたはＣを治療または予防する方法であって、それを必要とする対象に、治療有効量の請求項１〜２７のいずれか一項に記載の製剤を投与するステップを含む方法。
31. フォンウィルブランド病（ｖＷＤ）を治療または予防する方法であって、それを必要とする対象に、治療有効量の請求項１〜２７のいずれか一項に記載の製剤を投与するステップを含む方法。
32. ＴＦＰＩの活性を低下させる方法であって、それを必要とする対象に、治療有効量の請求項１〜２７のいずれか一項に記載の製剤を投与するステップを含む方法。
33. 製剤が対象に皮下または静脈内投与される、請求項２８〜３２のいずれか一項に記載の方法。
34. 対象がヒトである、請求項２８〜３３のいずれか一項に記載の方法。
35. 対象における出血性障害の治療のための薬剤の製造のための、請求項１〜２７のいずれか一項に記載の製剤の使用。
36. 対象における血友病Ａ、Ｂ、またはＣの治療のための薬剤の製造のための、請求項１〜２７のいずれか一項に記載の製剤の使用。