BR112021000728A2 - Fluidos carreadores para formulações de esporo fúngico líquido - Google Patents
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Abstract
fluidos carreadores para formulações de esporo fúngico líquido. a presente invenção refere-se a uma preparação líquida compreendendo pelo menos um éster carboxílico como definido e esporos fúngicos e um método para controle de fungos fitopatogênicos, insetos e/ou nematódeos em ou sobre uma planta, para realçar o crescimento de uma planta ou para aumentar o rendimento da planta ou a saúde da raiz compreendendo aplicar uma quantidade eficaz da preparação líquida ou da composição líquida de acordo com a invenção a uma referida planta ou a um locus onde plantas estão crescendo ou pretende-se cultivá-las.
Description
Relatório Descritivo da Patente de Invenção para “FLUIDOS CARREADORES PARA FORMULAÇÕES DE ESPORO FÚNGICO LÍQUIDO”.
[0001] Os agentes de controle biológico (BCAs) tornam-se cada vez mais importantes na área de proteção de plantas, seja para combater várias pragas de fungos ou insetos ou para melhorar a saúde das plantas. Embora também estejam disponíveis viroses que podem ser usadas como agentes de controle biológico, principalmente BCAs baseados em bactérias e fungos são usados nesta área. A forma mais proeminente de agentes de controle biológico baseados em fungos são os esporos assexuados chamados conídios, bem como blastósporos, mas também outros propágulos fúngicos podem ser agentes promissores, tais como fragmentos de (micro)esclerócio, ascósporos, basidiósporos, clamidósporos ou de hifas.
[0002] Ao contrário de muitos esporos baseados em bactérias, tal como esporos de bacilos, muitos esporos de fungos são menos robustos e provou ser difícil fornecer esporos de fungos em uma forma que atenda às necessidades de produtos comerciais, em particular estabilidade de armazenamento aceitável em certas temperaturas.
[0003] O fornecimento de formulações adequadas para agentes de controle biológico, todavia, ainda representa um desafio devido aos muitos fatores que contribuem para a eficácia da formulação final, tal como a natureza do agente de controle biológico, estabilidade térmica e vida de prateleira bem como efeitos da formulação na aplicação.
[0004] As formulações adequadas são misturas homogêneas e estáveis de ingredientes ativos e inertes que tornam o produto final mais simples, seguro e eficaz para aplicar a um alvo.
[0005] As formulações comumente usadas para agentes de controle biológico incluem WP, uma formulação sólida micronizada na forma de pó e normalmente aplicada como partículas suspensas após a dispersão em água, e WG, uma formulação que consiste em grânulos a serem aplicados após desintegração e dispersão em água. Os grânulos de um produto WG têm partículas distintas na faixa de 0,2 a 4 mm. Os grânulos dispersíveis em água podem ser formados por técnicas de aglomeração, secagem por pulverização ou extrusão. As formulações de WP são produzidas com bastante facilidade, mas são empoeiradas. Além disso, elas não são fáceis de dosar no campo. As formulações WG são mais fáceis de manusear para o usuário e, em geral, têm menor teor de poeira do que as formulações WP.
[0006] Um exemplo para uma formulação líquida é SC, uma suspensão à base de água de ingrediente ativo sólido em um fluido normalmente destinado à diluição com água antes do uso. Outro tipo de formulação líquida é EC, uma solução de ingrediente ativo combinado com tensoativos como, por exemplo, agentes emulsificantes em um solvente orgânico insolúvel em água que formará uma emulsão quando adicionado à água.
[0007] Um enorme número de formulantes tem sido utilizado em formulações experimentais e comerciais de agentes de controle biológico (para uma descrição e lista mais detalhadas, veja Schisler et al., Phytopathology, Vol 94, No. 11, 2004). Geralmente, os formulantes podem ser agrupados como carreadores (enchimentos, extensores) ou formulantes que melhoram as propriedades químicas, físicas, fisiológicas ou nutricionais da biomassa formulada.
[0008] Estabilidade, particularmente estabilidade de armazenamento de BCAs com base em ativos fúngicos durante um longo período de tempo em temperaturas iguais ou superiores à temperatura ambiente é um desafio particular devido à natureza delicada dos conídios fúngicos. Como muitos organismos vivos, os conídios fúngicos em seu estado dormente são sensíveis às influências ambientais como, por exemplo, água, ar (oxigênio),
temperatura, irradiação e etc. Alguns fatores podem desencadear a germinação, enquanto outros podem ter efeitos prejudiciais para a viabilidade do esporo. Para excluir a água, óleos como óleos minerais brancos (parafínicos) ou óleos vegetais são normalmente usados para preparar formulações líquidas de esporos de fungos. Muitos desses óleos fornecem alguma vida de prateleira para organismos fúngicos. Os óleos vegetais são de origem natural e são essencialmente triglicerídeos de ácido carboxílico mistos compostos por glicerina e ácidos graxos C12-C18 saturados e insaturados; eles também contêm quantidades variáveis de ceras naturais. As composições dos óleos vegetais são variáveis e dependem de uma série de fatores como variedades de plantas, fatores ambientais (por exemplo, solo, nutrientes) e clima, para citar apenas alguns. Assim, uma qualidade e composição constantes são difíceis de alcançar ao longo de vários anos e/ou geografias. Outro fator limitante no uso industrial de óleos vegetais é que todos esses óleos são suscetíveis a se tornarem rançosos, isto é, quando exposto ao ar, luz, umidade ou por ação bacteriana, isso resulta em odor desagradável, formação descontrolada de resíduos poliméricos e a liberação de ácidos graxos livres que promovem ainda mais a decomposição de uma forma autocatalítica. Portanto, medidas preventivas, tal como exclusão de luz, oxigênio, temperaturas elevadas e contaminação microbiana indesejada são necessárias e contramedidas como o uso de antioxidantes, eliminadores de radicais ou biocidas devem ser aplicadas para garantir a estabilidade das composições à base de óleo vegetal.
[0009] Um exemplo para uma formulação de um agente de controle biológico é descrito em Torres et al., 2003, J Appl Microbiol, 94(2), pp: 330-9). No entanto, é claro que uma formulação que preserva a viabilidade do agente de controle biológico, por exemplo,
esporos de fungos, de mais de 70% por 4 meses a 4 graus °C, não é adequada para o uso diário no campo. Em vez disso, é desejável que as formulações de agentes de controle biológico tenham uma vida de prateleira suficiente, mesmo em condições onde o armazenamento a frio não é possível.
[0010] Kim et al., 2010 (J.S. Kim, Y.H. Je, J. Y. Roh, Journal of Industrial Microbiology & Biotechnology 2010, vol 37 (edição 4), pp, 419ff) divulgam que conídios do fungo Isaria fumosorosea apresentam estabilidade melhorada durante um tratamento térmico de 2 e 8 horas a 50 °C quando dispersos em óleos (soja, milho, caroço de algodão, óleo de parafina, oleato de metila) em comparação com a dispersão em água.
[0011] Mbarga et al., 2014 (Biological Control 2014, vol. 77, pp.15ff) descobriram que Trichoderma asperellum fórmulado em óleo de soja com diferentes emulsionantes apresenta vida de prateleira melhorada em comparação a uma dispersão de conídios em água.
[0012] Outros líquidos como, por exemplo, trisiloxanos etoxilados (por exemplo, Break-Thru S240) são alternativas adequadas e fornecem preparações estáveis, por exemplo, com P. Lilacinum (BioAct®, veja WO2016/050726), entretanto, fabricação de tais trisiloxanos e, portanto, dos próprios produtos são caros.
[0013] EP 1 886 570 A2 descreve uma formulação agroquimicamente ativa de esporos microbianos compreendendo um certo éster e um tensoativo. Os valores absolutos para estabilidade sugerem boas viabilidades, entretanto, a estabilidade geral não é particularmente alta, como pode ser mostrado pela comparação de viabilidades relativas: as viabilidades dos esporos após armazenamento por 8 semanas a 40 °C caem para níveis tão baixos quanto 5,86% (Tabela 1, formulação 4). WO 2009/126473 A1 descreve uma formulação à base de água contendo bactérias e certos aditivos não aquosos miscíveis em água e/ou imiscíveis em água. WO 2016/189329 A1 descreve o uso de ácidos graxos e derivados de ácidos graxos em combinação com certas espécies de fungos. Begonya Vicedo et al. (Archives of Microbiology, vol. 184, no. 5, p. 316ff) descreve um diácido carboxílico parcialmente esterificado (isto é, monoetiléster de ácido adípico, ou AAME) para controlar doenças causadas por Boytritis sp.
[0014] Com as desvantagens descritas acima, ainda há a necessidade de receitas de formulação simples e fáceis de manusear para agentes de controle biológico com base em ativos fúngicos. Entre outras propriedades, tais formulações devem idealmente fornecer uma boa estabilidade física no concentrado de formulação, exibem uma vida de prateleira adequada ao longo do tempo, em particular a temperaturas elevadas (20 °C ou mais), e proporcionam boa miscibilidade ou suspensibilidade da água.
[0015] Como discutido acima, há apenas muito pouca precedência de que fluidos orgânicos diferentes de óleos ou organossilicones podem ser usados para fornecer preparações agroquímicas estáveis de BCAs à base de esporos de fungos. Surpreendentemente, foi descoberto que um grande número de ésteres carboxílicos líquidos forneceu boa a excelente viabilidade de esporos após armazenamento em temperaturas elevadas (5 semanas a 30 °C e além).
[0016] Consequentemente, em um primeiro aspecto, a presente invenção se refere a uma preparação líquida compreendendo pelo menos um éster carboxílico composto por uma porção de ácido carboxílico e uma porção de álcool como representado na fórmula I
Fórmula I
[0017] em que o referido éster carboxílico não é um triglicerídeo de ácido carboxílico encontrado em óleos vegetais;
[0018] e esporos de fungos. O fungo deve ser um fungo que exerce um efeito benéfico nas plantas.
[0019] Em conexão com a presente invenção, o éster carboxílico pode ser isolado de fontes naturais ou produzido por qualquer método conhecido na técnica que não esteja limitado à esterificação do respectivo ácido carboxílico e álcool subjacente à porção de ácido carboxílico e a porção de álcool de acordo com a Fórmula I. Em vez disso, o uso dos termos “porção de ácido carboxílico” e “porção de álcool” serve para esclarecer e definir a estrutura dos ésteres carboxílicos de acordo com a invenção. Quando combinadas, ambas as porções criam um grupo éster sob eliminação formal de H 2O. Consequentemente, a porção de ácido carboxílico também pode ser definida como o radical X-(C=O)- de um ácido carboxílico, e a porção de álcool pode ser definida como o radical YO- de um álcool. Tal definição também é referida como "derivada de" em conexão com a presente invenção. De preferência, o ácido carboxílico subjacente à porção de ácido carboxílico é um monoácido ou poliácido carboxílico conforme definido mais abaixo e o álcool subjacente à porção de álcool é um monoálcool ou um poliálcool como definido mais abaixo.
[0020] O éster carboxílico, conforme usado na presente invenção, não é um triglicerídeo de ácido carboxílico encontrado em óleos vegetais. Esses triglicerídeos de ácido carboxílico compreendem glicerol ligado a ácidos graxos, em que o termo "ácido graxo" se refere a ácidos carboxílicos lineares com 12 a 18 átomos de carbono. Tais óleos vegetais compreendem, por exemplo, e preferivelmente consistem naqueles que são líquidos em temperatura ambiente, tal como óleo de milho, óleo de girassol, óleo de soja, óleo de colza, óleo de amendoim, óleo de semente de algodão, óleo de farelo de arroz, óleo de cártamo, óleo de oliva, óleo de linhaça e óleo de rícino. A pessoa versada está ciente de quais triglicerídeos de ácido carboxílico podem ser encontrados em óleos vegetais. Uma definição de óleos vegetais pode ser encontrada em https://en.wikipedia.org/wiki/Vegetable_oil (como em 20 de julho de 2018), e um resumo de tais triglicerídeos de ácido carboxílico pode ser encontrado em http://www.dgfett.de/material/fszus.php (como em 20 de julho de 2018).
[0021] Além da exceção acima, em uma modalidade, o éster carboxílico como usado na presente invenção, em particular o éster carboxílico de acordo com a), não é um éster de ácido carboxílico composto por porções de ácido carboxílico C14-C18 e uma porção de álcool com base em metanol. Em outra modalidade, o éster carboxílico de acordo com a) não é um éster de ácido carboxílico composto de porções de ácido carboxílico C14-C18 e uma porção de álcool com base em etanol. Em uma modalidade particular, o éster carboxílico de acordo com a) não é um éster de ácido carboxílico composto de porções de ácido carboxílico C14-C18 e uma porção de álcool com base em metanol ou etanol. Esses ésteres carboxílicos também são referidos como óleos de sementes metilados ou etilados e, em algumas modalidades, não estão expressamente incluídos no escopo da presente invenção.
[0022] Os esporos de fungos no âmbito da presente invenção compreendem esporos assexuados denominados conídios bem como blastósporos, mas também outros propágulos fúngicos tais como ascósporos, basidiósporos, clamidósporos. O (micro)esclerócio, embora não sendo esporos em sentido estrito, pode também ser adicionado à preparação líquida de acordo com a invenção. De preferência, os esporos de fungos são aqueles de um fungo benéfico para as plantas, conforme descrito abaixo.
[0023] É preferível que os esporos de fungos sejam conídios.
[0024] Em uma modalidade, o referido pelo menos um éster carboxílico é composto por, contém ou pode ser obtido a partir de a) uma porção de monoácido carboxílico e uma porção de monoálcool b) pelo menos uma porção de monoácido carboxílico e uma porção de poliálcool e/ou c) uma porção de poliácido carboxílico e pelo menos uma porção de monoálcool;
[0025] em que a referida porção de monoálcool é uma porção de monoálcool C1-C24 ramificado, linear, cíclico, acíclico ou parcialmente cíclico, saturado ou parcialmente insaturado;
[0026] em que a referida porção de monoácido carboxílico é uma porção de monoácido carboxílico C2-C24 ramificado, linear, cíclico, acíclico ou parcialmente cíclico, saturado ou parcialmente insaturado, opcionalmente carregando pelo menos uma funcionalidade OH;
[0027] em que a referida porção poliálcool é uma porção poliálcool C2-C20 ramificada, linear, cíclica, acíclica ou parcialmente cíclica, saturada ou parcialmente insaturada di-, tri-, tetra-, penta- e/ou hexavalente C2-C20; e
[0028] em que a referida pelo menos uma porção de poliácido carboxílico é uma porção de poliácido carboxílico C2-C20 ramificado, linear, cíclico, acíclico ou parcialmente cíclico, saturado ou parcialmente insaturado, possuindo opcionalmente pelo menos uma funcionalidade OH.
[0029] Em conexão com a presente invenção, o termo "poliácido carboxílico" compreende ácidos carboxílicos com dois ou mais grupos carboxila. O subsequente, dentro do escopo da presente invenção são ácidos dicarboxílicos, ácidos tricarboxílicos e ácidos tetracarboxílicos.
[0030] A preparação líquida pode compreender misturas dos ésteres carboxílicos de acordo com qualquer um de a) a c), por exemplo, a) e b), a) e c) ou b) e c). Também podem ser utilizadas misturas de todos os três de a), b) e c).
[0031] Misturas de qualquer um de a) e b) podem estar presentes em relações que variam de 1:100 a 100:1, preferivelmente em relações que variam de 1: 50 a 50:1, mais preferivelmente em misturas que variam de 1:25 a 25:1, tal como 1:20, 1:15, 1:10, 1:5, 1:2, 1:1, 2:1, 5:1, 10:1, 15:1 ou 20:1. Ainda outra modalidade preferida compreende misturas de qualquer um de a) e b) em relações que variam de 1:20 a 1:1, ou em relações que variam de 1:1 a 20:1.
[0032] Misturas de qualquer um de a) e c) podem estar presentes em relações que variam de 1:100 a 100:1, preferivelmente em relações que variam de 1: 50 a 50:1, mais preferivelmente em misturas que variam de 1:25 a 25:1, tais como 1:20, 1:15, 1:10, 1:5, 1:2, 1:1, 2:1, 5:1, 10:1, 15:1 ou 20:1. Ainda outra modalidade preferida compreende misturas de qualquer um de a) e c) em relações que variam de 1:20 a 1:1, ou em relações que variam de 1:1 a 20:1.
[0033] Misturas de qualquer um de b) e c) podem estar presentes em relações que variam de 1:100 a 100:1, preferivelmente em relações que variam de 1: 50 a 50:1, mais preferivelmente em misturas que variam de 1:25 a 25:1, tal como 1:20, 1:15, 1:10, 1:5, 1:2, 1:1, 2:1, 5:1, 10:1, 15:1 ou 20:1. Ainda outra modalidade preferida compreende misturas de qualquer um de b) e c) em relações que variam de 1:20 a 1:1, ou em relações que variam de 1:1 a 20:1.
[0034] As misturas de qualquer um de a) e b) e c) podem estar presentes em faixas de qualquer 1:1:100 a 100:100:1, ou de 1:100:1 a 100:1:100, ou de 100:1:1 a 1:100:100, respectivamente, preferivelmente em relações que variam de 1:1:50 a 50:50:1, ou de 1:50:1 a 50:1:50, ou de 50:1:1 a 1:50:50, mais preferivelmente em misturas que variam de 1:1:25 a 25: 25:1, ou de 1: 25:1 a 25:1: 25, ou de 25:1:1 a 1: 25: 25, tal como 1:20:1, 1:15:1, 1:10:1, 1:5:1, 1:1:1, 20:1:1, 15:1:1, 10:1:1, 5:1:1, 1:1:20, 1:1:15, 1:1:10, 1:1:5, 5:20:1, 5:15:1, 5:10:1, 1:20:5, 1:15:5, 1:10:5, 20:1:5, 15:1:5, 10:1:5, 20:5:1, 15:5:1, 10:5:1, 1:5:20, 1:5:15, 1:5:10, 5:1:20, 5:1:15, ou 5:1:10. Ainda outra modalidade preferida compreende misturas de qualquer um de a) e b) e c) em relações que variam de 1:20:1 a 1:1:1, ou em relações que variam de 20:1:1 a 1:1:1, ou em relações que variam de 1:1:20 a 1:1:1.
[0035] Em uma modalidade, qualquer um de a), b) e/ou c) é uma mistura de ésteres composta por mais de uma porção de monoálcool, poliálcool, monácido carboxílico ou poliácido carboxílico diferente. Por exemplo, a mistura de acordo com a) pode compreender mais de um monoácido carboxílico diferente e/ou porção de monoálcool, a mistura de acordo com b) pode compreender mais de um monoácido carboxílico diferente e/ou porção de poliálcool e/ou a mistura de acordo com c) pode compreender mais do que em diferentes poliácido carboxílico e/ou porção de monoálcool.
[0036] A preparação líquida, em modalidades particulares, pode compreender uma mistura de diferentes porções de monoálcool, poliálcool, monácido carboxílico ou poliácido carboxílico como descrito acima e uma mistura de diferentes subgrupos a) a c).
[0037] Em uma modalidade preferida, a referida porção de monoálcool é derivada de um monoálcool C1-C20 ramificado, linear, saturado ou parcialmente insaturado. Monoálcoois exemplares e preferenciais são selecionados do grupo que consiste em metanol, etanol, 1-propanol, 2-propanol, 1-butanol, 2-butanol, isobutanol, 1- pentanol, 1-hexanol, 1-heptanol, 2-etilhexan-1-ol, álcool caprílico, álcool pelargônico, álcool isononílico, álcool cáprico, undecanol, álcool laurílico, tridecanol, isotridecanol, álcool miristílico, pentadecanol, álcool cetílico, álcool palmitoleílico, heptadecanol, álcool estearílico, álcool oleílico, nonadecanol, eicosanol, e opcionalmente misturas de qualquer um dos anteriores. Monoálcoois mais preferidos compreendem metanol, etanol, 1-propanol, 2-propanol, 1-butanol, 2- butanol, isobutanol, 1-pentanol, 1-hexanol, 1-heptanol, 2-etilhexan-1- ol, álcool caprílico, álcool pelargônico, álcool isononílico, álcool cáprico, álcool laurílico, tridecanol, isotridecanol, álcool miristílico, álcool cetílico, álcool palmitoleílico, álcool estearílico, álcool oleílico e, opcionalmente, misturas de qualquer um dos anteriores.
[0038] Em outra modalidade preferida, a referida pelo menos uma porção de monoácido carboxílico é derivada de um monoácido carboxílico C2-C20 ramificado, linear, saturado ou parcialmente insaturado. Monoácidos carboxílicos exemplificativos e preferidos compreendem ácido acético, ácido propiônico, ácido butírico, ácido valérico, ácido caproico, ácido caprílico, ácido cáprico, ácido láurico, ácido mirístico, ácido palmítico, ácido esteárico, ácido isoestárico, ácido oleico, ácido linoleico, ácido α-linolênico, ácido ricinólico e, opcionalmente, misturas de qualquer um dos anteriores.
[0039] Em uma modalidade preferida, a pelo menos uma porção de poliálcool é derivada de um poliálcool selecionado do grupo que consiste em glicol, 1,3-propandiol, 1-4-butandiol, 1,5-pentandiol, 1,6- hexandiol, ciclo-hexan-1,2-diol, isosorbido, 1,2-propandiol, neopentilglicol, glicerol, trimetilolpropano, pentaeritritol e álcoois de açúcar de acordo com a fórmula HOCH2(CHOH)nCH2OH(n=2,3 ou 4) e, opcionalmente, misturas dos mesmos. Exemplos de álcoois de açúcar compreendem etilenoglicol, glicerol, eritrol, treitol, arabitol, xilitol, ribitol, manitol, sorbitol, galactitol, fucitol, iditol, inositol, volemitol, isomalte, maltitol, lactitol, poliglicol, maltetractolitol, maltotolitol, maltotolitol e sorbitano. Os álcoois de açúcar preferidos são o sorbitol e o sorbitano. Os poliálcoois mais preferidos são 1,2-propandiol, neopentilglicol, glicerol, 1,3-propandiol, trimetilolpropano e sorbitano e, opcionalmente, suas misturas. Os poliálcoois ainda mais preferidos são 1,2-propandiol, glicerol, 1,3-propandiol e sorbitano e, opcionalmente, misturas dos mesmos.
[0040] Em outra modalidade preferida, a referida pelo menos uma porção de poliácido carboxílico é derivada de um poliácido carboxílico selecionado do grupo que consiste em (i) um ácido dicarboxílico C2-C10 linear, saturado ou parcialmente insaturado (ii) um ácido dicarboxílico C5-C6 cíclico, e (iii) ácido cítrico e seus derivados O-acetilados, como ácido cítrico o-acetil.
[0041] Exemplos preferidos não limitativos do referido pelo menos um poliácido carboxílico compreendem ácido 1,2-ciclo- hexanodicarboxílico, ácido oxálico, ácido malônico, ácido maleico, ácido fumárico, ácido sucínico, ácido 2-hidroxissucínico, ácido glutárico, ácido adípico, ácido pimélico, ácido cítrico o-acetil e ácido cítrico. Como pode ser visto a partir dos exemplos, ácido 1,2-ciclo- hexanodicarboxílico, ácido adípico, ácido cítrico o-acetil e ácido glutárico, dos quais ácido 1,2-ciclo-hexanodicarboxílico, ácido adípico e ácido cítrico o-acetil foram testados com sucesso de acordo com a presente invenção, são os mais preferidos.
[0042] O pelo menos um monoácido carboxílico ou pelo menos um poliácido carboxílico a ser compreendido no éster carboxílico de acordo com a invenção pode ter pelo menos uma funcionalidade OH.
[0043] O pelo menos um poliálcool que dá origem à porção de poliálcool como compreendido em certas modalidades do referido pelo menos um éster carboxílico de acordo com b) pode ser parcialmente ou totalmente esterificado. Em outras palavras, o poliálcool pode ser esterificado em um ou mais de seus grupos OH funcionais até todos os grupos OH funcionais presentes na porção de poliálcool resultante. Consequentemente, em uma porção de poliálcool compreendendo três grupos OH funcionais, tais como glicerol, um ou dois ou todos os três grupos OH podem ser esterificados com um monoácido carboxílico para formar um éster carboxílico de acordo com b), e em uma porção de poliálcool compreendendo dois grupos OH funcionais, tal como 1,3- propandiol, um ou ambos os grupos OH podem ser esterificados com um monoácido carboxílico para formar um éster carboxílico de acordo com b).
[0044] Quanto ao éster carboxílico de acordo com a), é preferivelmente composto por pelo menos uma porção de ácido carboxílico C2-C20 ramificado, linear, saturado ou parcialmente insaturado e pelo menos uma porção monoálcool C1-C20 ramificado, linear, saturado ou parcialmente insaturado.
[0045] Preferivelmente, o número de átomos de C no éster carboxílico de acordo com a) faixas entre 13 e 28.
[0046] De preferência, o monoálcool que forma a porção de álcool de acordo com a) é selecionado a partir do grupo que consiste em metanol, etanol, 1-propanol, 2-propanol, 1-butanol, 2-butanol, isobutanol, 1-pentanol, 1-hexanol, 1-heptanol, 2-etilhexan-1-ol, álcool caprílico, álcool pelargônico, álcool isononílico, álcool cáprico, undecanol, álcool laurílico, tridecanol, isotridecanol, álcool miristílico, pentadecanol, álcool cetílico, álcool palmitoleílico, heptadecanol, álcool estearílico, álcool oleílico, nonadecanol, eicosanol e, opcionalmente, misturas de qualquer um dos anteriores.
[0047] No éster carboxílico de acordo com a), a referida porção de monoácido carboxílico é preferivelmente derivada de um monoácido carboxílico selecionado do grupo que consiste em ácido acético, ácido propiônico, ácido butírico, ácido valérico, ácido caproico, ácido caprílico, ácido cáprico, ácido láurico, ácido mirístico, ácido palmítico, ácido esteárico, ácido isostárico, ácido oleico, ácido linoleico, ácido α- linolênico, ácido ricinólico e, opcionalmente, misturas de qualquer um dos anteriores. Mais preferivelmente, em particular com os monoácidos carboxílicos como acima, a porção de monoálcool correspondente é derivada de um monoálcool selecionado do grupo que consiste em metanol, etanol, 1-propanol, 2-propanol, 1-butanol, 2- butanol, isobutanol, 1-pentanol, 1-hexanol, 1-heptanol, 2-etilhexan-1- ol, álcool caprílico, álcool pelargônico, álcool isononílico, álcool cáprico, álcool laurílico, tridecanol, isotridecanol, álcool miristílico, álcool cetílico, álcool palmitoleílico, álcool estearílico, álcool oleílico e, opcionalmente, misturas de qualquer um dos anteriores. Em uma modalidade mais preferida, os óleos de sementes metilados e/ou etilados como listados acima não estão incluídos no escopo da presente invenção.
[0048] Ésteres carboxílicos particularmente preferidos de acordo com a) compreendem uma porção de monoácido carboxílico derivado de um monoácido carboxílico selecionado do grupo que consiste em ácido acético, ácido propiônico, ácido butírico, ácido valérico, ácido caproico, ácido caprílico e ácido cáprico e, opcionalmente, misturas dos mesmos e uma porção de monoálcool derivada de um monoálcool selecionado do grupo que consiste em álcool laurílico, tridecanol, isotridecanol, álcool miristílico, álcool cetílico, álcool palmitoleoil, álcool estearílico, álcool oleílico e, opcionalmente, misturas dos mesmos.
[0049] Outros ésteres carboxílicos particularmente preferidos de acordo com a) compreendem uma porção de monoácido carboxílico derivado de um monoácido carboxílico selecionado do grupo que consiste em ácido láurico, ácido mirístico, ácido palmítico, ácido esteárico, ácido oleico, ácido linolênico, ácido α-linolênico, ácido ricinólico e, opcionalmente, misturas dos mesmos, e uma porção de monoálcool derivada de um monoálcool selecionado do grupo que consiste em metanol, etanol, 1-propanol, 2-propanol, 1-butanol, 2- butanol, isobutanol, 1-pentanol, 1-hexanol, 1-heptanol, 2-etilhexan-1- ol, álcool caprílico, álcool pelargônico, álcool isononílico, álcool cáprico e, opcionalmente, misturas dos mesmos. Em uma modalidade mais preferida, os óleos de sementes metilados e/ou etilados como listados acima não estão incluídos no escopo da presente invenção.
[0050] Como mostrado nos exemplos, ésteres carboxílicos de acordo com a) que são laurato de 2-etil-hexila, palmitato de 2- etilhexila, oleato de 2-etilhexila, metiléster de ácido ricinólico e pentil éster de ácido propiônico mostraram exercer o efeito estabilizador de acordo com da invenção e são, portanto, particularmente preferidos.
[0051] Ésteres carboxílicos preferidos de acordo com b) compreendem uma porção de monoácido carboxílico derivado de um monoácido carboxílico selecionado do grupo que consiste em ácido acético, ácido propiônico, ácido butírico, ácido valérico, ácido caproico, ácido caprílico, ácido cáprico, ácido láurico, ácido mirístico, ácido palmítico, ácido esteárico, ácido isostárico, ácido oleico, ácido linoleico, ácido α-linolênico, ácido ricinólico e, opcionalmente, misturas dos mesmos, e uma porção de poliálcool derivada de um poliálcool selecionado do grupo que consiste em 1,2-etandiol, 1,3-propandiol, 1- 4-butandiol, 1,5-pentandiol, 1,6-hexandiol, ciclo-hexan-1,2-diol, isosorbid, 1,2-propandiol, neopentilglicol, glicerol, pentaeritritol, trimetilolpropano, álcoois de açúcar e, opcionalmente, misturas dos mesmos.
[0052] Em uma modalidade mais preferida, no referido pelo menos um éster carboxílico de acordo com b), a referida porção de monoácido carboxílico é derivada de um monoácido carboxílico C2-C6 ramificado, linear, cíclico, acíclico ou parcialmente cíclico, saturado ou parcialmente insaturado, opcionalmente carregando pelo menos uma funcionalidade OH, preferivelmente uma porção de monoácido carboxílico C2 a C5. Nesta modalidade preferida, é ainda mais preferido que a porção de poliálcool correspondente seja derivada de 1,2-propandiol, neopentilglicol, glicerol, 1,3-propandiol, trimetilolpropano e sorbitano e, opcionalmente, misturas dos mesmos. Mesmo os poliálcoois mais preferidos são 1,2-propandiol, glicerol, 1,3- propandiol e sorbitano e, opcionalmente, misturas dos mesmos.
[0053] Em uma modalidade mais preferida alternativa, no referido pelo menos um éster carboxílico de acordo com b), a referida porção de monoácido carboxílico é derivada de um monoácido carboxílico selecionado do grupo que consiste em ácido acético, ácido propiônico, ácido butírico, ácido valérico, ácido caproico e, opcionalmente, misturas dos mesmos, e a referida porção de poliálcool é derivada de um poliálcool selecionado do grupo que consiste em neopentilglicol, pentaeritritol, trimetilolpropano e, opcionalmente, misturas dos mesmos.
[0054] Em outra modalidade mais preferida que pode opcionalmente ser combinada com as modalidades imediatamente acima da presente modalidade, no referido pelo menos um éster carboxílico de acordo com b), a referida porção de poliálcool é uma porção de poliálcool cíclico ou parcialmente cíclico, saturado ou parcialmente insaturado C2-C20-divalente, C3-C20-trivalente, C4-C20- tetravalente, C-5-C20-pentavalente ou C6-C20-hexavalente; ou um poliálcool da seguinte fórmula II
Fórmula II
[0055] em que n é um número inteiro entre 0 e 4,
[0056] em que R1 e R2 são independentes um do outro, hidrogênio ou hidróxi,
[0057] em que R2 é C1-C9 alquila se n=1 e R1=OH.
[0058] Alternativa mais preferida de ésteres carboxílicos de acordo com b) compreendem uma porção de monoácido carboxílico derivado de um monoácido carboxílico selecionado do grupo que consiste em ácido acético, ácido propiônico, ácido butírico, ácido valérico, ácido caproico, ácido caprílico, ácido cáprico, ácido láurico, ácido mirístico, ácido palmítico, ácido esteárico, ácido isostárico, ácido oleico, ácido linoleico, ácido α-linolênico, ácido ricinólico e, opcionalmente, misturas dos mesmos, e uma porção de poliálcool derivada de um poliálcool selecionado do grupo que consiste em 1,2-etandiol, 1,3-propandiol, 1- 4-butandiol, 1,5-pentandiol, 1,6-hexandiol, ciclo-hexan-1,2-diol, isosorbid, 1,2-propandiol, glicerol, álcoois de açúcar e, opcionalmente, misturas dos mesmos.
[0059] Preferivelmente, o número de átomos de C no éster carboxílico de acordo com b) varia entre 9 e 60 átomos de carbono, mais preferivelmente entre 9 e 40.
[0060] Em uma modalidade particularmente preferida dos ésteres carboxílicos de acordo com b), a referida porção de poliálcool é derivada de um C2-C20-divalente cíclico ou parcialmente cíclico, saturado ou parcialmente insaturado, C3-C20-trivalente, C4-C20- tetravalente, Poliálcool C5-C20-pentavalente ou C6-C20-hexavalente.
Aqui, é ainda mais preferido que a referida porção de poliálcool cíclico ou parcialmente cíclico seja derivada de um álcool de açúcar, conforme descrito acima, isto é, compreendendo etileno glicol, glicerol, eritrol, treitol, arabitol, xilitol, ribitol, manitol, sorbitol, galactitol, fucitol, iditol, inositol, volemitol, isomalte, maltitol, lactitol, maltotriol, maltotetraitol, poliglicitol e sorbitano.
[0061] Porções de poliálcool particularmente preferidas compreendidas nos ésteres carboxílicos de acordo com b) são derivados de 1,2-etandiol, 1,2-propandiol, neopentilglicol, 1,3- propandiol e sorbitano e, opcionalmente, misturas dos mesmos. Por exemplo, para glicerol como poliálcool, ácido acético, ácido propiônico, ácido butírico, ácido valérico, ácido caproico, ácido caprílico e ácido cáprico e, opcionalmente, misturas dos mesmos como monoácido carboxílico para formar a porção ácido carboxílico são especialmente preferidos. Para diacetilglicerol como poliálcool, ácido acético, ácido propiônico, ácido butírico, ácido valérico, ácido caproico, ácido caprílico, ácido cáprico, ácido láurico, ácido mirístico, ácido palmítico, ácido esteárico, ácido isostárico, ácido oleico, ácido linoleico, ácido α- linolênico e ácido ricinólico e, opcionalmente, misturas dos mesmos como ácido carboxílico formando a porção ácido carboxílico são especialmente preferidos. Outro conjunto de particularmente ésteres carboxílicos preferidos de acordo com b) são derivados de neopentilglicol, trimetilolpropano e porções de poliálcool de pentaeritritol e ácido acético como porção de monoácido carboxílico.
[0062] Em conexão com todas as modalidades relacionadas aos ésteres carboxílicos de acordo com b), é geralmente preferido que se a porção de poliálcool for derivada de neopentilglicol, a porção de monoácido carboxílico não seja derivada de ácido cáprico e/ou se a porção de poliálcool é derivada de pentaeritrol, a porção de monoácido carboxílico não é derivada de ácido 2-etilhexanoico e/ou se a porção de poliálcool é derivada de trimetilpropano, a porção de monoácido carboxílico não é derivada de ácido n-octadecanoico.
[0063] Mais preferivelmente, em relação aos ésteres carboxílicos de acordo com b), desde que a porção de poliálcool seja derivada de neopentilglicol, trimetilpropano ou pentaeritrol, a porção de ácido carboxílico não é derivada de monoácidos carboxílicos com 7 a 18 átomos de carbono.
[0064] Como mostrado nos exemplos, ésteres carboxílicos de acordo com b) que são propilenoglicol dicaprilato, propilenoglicol dicaprato, neopentil glicol dicocoato, triacetato de glicerol, tri- isostearato de trimetilolpropano, tricocoato de trimetilolpropano, tricaprilato de glicerol, tricaprato de glicerol, diacetato de monoglicerídeo de ácido carboxílico C12-C18 (ácidos carboxílicos C12-C18 formando o grupo dos ácidos graxos), Tricaprilato de trimetilolpropano, tricaprato de trimetilolpropano, trioleato de trimetilolpropano e trioleato de sorbitano demonstraram exercer o efeito estabilizador de acordo com a invenção e são, portanto, particularmente preferidos.
[0065] Quanto ao éster carboxílico de acordo com c), a referida porção de poliácido carboxílico é preferivelmente derivada de ácidos dicarboxílicos C2-C10 lineares, saturados ou parcialmente insaturados, ácidos dicarboxílicos C5-C6 cíclicos e ácido cítrico o- acetil e, opcionalmente, misturas dos mesmos. Mais preferivelmente, a referida porção de poliácido carboxílico é derivada de um poliácido carboxílico selecionado do grupo que consiste em ácidos dicarboxílicos C3-C8 lineares saturados, ácido 1,2-ciclo- hexanodicarboxílico e ácido cítrico o-acetil e, opcionalmente, misturas dos mesmos. Ainda mais preferivelmente, a referida porção de poliácido carboxílico é derivada de um poliácido carboxílico selecionado do grupo que consiste em ácido 1,2-ciclo-
hexanedicarboxílico, ácido glutárico, ácido adípico e ácido cítrico o- acetil e, opcionalmente, misturas dos mesmos. Em outra modalidade mais preferida, a referida porção de poliácido carboxílico é derivada de um poliácido carboxílico selecionado do grupo que consiste em ácido 1,2-ciclo-hexanodicarboxílico, ácido glutárico e ácido cítrico o-acetil e, opcionalmente, misturas dos mesmos.
[0066] Preferivelmente, o número de átomos de C no éster carboxílico de acordo com c) varia entre 10 e 40, mais preferido entre 10 e 30, e ainda mais preferido entre 10 e 20.
[0067] Alternativamente ou em adição às modalidades acima que caracterizam a porção de poliácido carboxílico no éster carboxílico de acordo com c), a porção de monoálcool no éster carboxílico de acordo com c) é derivada de um monoálcool selecionado do grupo que consiste em metanol, etanol, 1-propanol, 2-propanol, 1-butanol, 2- butanol, isobutanol, pentan-1-ol, pentan-2-ol, pentan-3-ol, 2- metilbutan-1-ol, 2-metilbutan-2-ol, 3-metilbutan-1-ol, 3-metilbutan-2-ol, 2,2-dimetilpropan-1-ol, 1-hexanol, 1-heptanol, 2-etilhexan-1-ol, álcool caprílico, álcool pelargônico, álcool isononílico, álcool cáprico, álcool laurílico, tridecanol, isotridecanol, álcool miristílico, álcool cetílico, álcool palmitoleoil, álcool estearílico, álcool oleílico e, opcionalmente, misturas dos mesmos.
[0068] Em uma modalidade preferida do éster carboxílico de acordo com c), a referida porção de poliácido carboxílico é derivada de ácido dicarboxílico C3-C8 linear e a porção de monoálcool é derivada de um monoálcool C1-C5.
[0069] Em outra modalidade preferida do éster carboxílico de acordo com c), a referida porção de poliácido carboxílico é derivada de ácidos dicarboxílicos e tricarboxílicos cíclicos e a porção de monoálcool é derivada de um C1-C24monoálcool.
[0070] Em todas as modalidades relativas aos ésteres carboxílicos de acordo com c), é particularmente preferido que se a porção de poliácido carboxílico é derivada de ácido adípico, a porção de monoálcool não é derivada de álcool isodecílico ou álcool 2- heptilundecílico. Em outra modalidade particularmente preferida, os ésteres carboxílicos de acordo com c) não são derivados de ácido adípico e porções de monoálcool com 6 a 18 átomos de carbono.
[0071] Alternativamente ou em adição às modalidades acima que caracterizam os ésteres carboxílicos de acordo com c), a porção de monoálcool em combinação com porções de poliácido carboxílico linear é selecionada a partir do grupo que consiste em metanol, etanol, 1-propanol, 2-propanol, 1-butanol, 2-butanol e isobutanol.
[0072] Como outra alternativa ou em adição às modalidades acima que caracterizam os ésteres carboxílicos de acordo com c), a porção de monoálcool em combinação com ácidos dicarboxílicos C5-C6 cíclicos e ácido cítrico o-acetil ou suas misturas é selecionada a partir do grupo que consiste em metanol, etanol, 1-propanol, 2-propanol, 1- butanol, 2-butanol, isobutanol, 1-hexanol, 1-heptanol, 2-etilhexan-1-ol, álcool caprílico, álcool pelargônico, álcool isononílico, álcool cáprico, álcool laurílico, tridecanol, isotridecanol, álcool miristílico, álcool cetílico, álcool palmitoleoil, álcool estearílico, álcool oleílico e, opcionalmente, misturas dos mesmos.
[0073] Como mostrado nos exemplos, ésteres carboxílicos de acordo com c) que são di-isononil éster de ácido 1,2-ciclo-hexano dicarboxílico, adipato de di-n-butila, adipato de di-isopropila e tributil éster de ácido cítrico o-acetil demonstraram exercer o efeito estabilizador de acordo com a invenção e são, portanto, particularmente preferidos.
[0074] Conforme mostrado nos exemplos do presente pedido, verificou-se que os fluidos compreendendo ésteres carboxílicos, conforme descrito aqui, têm um efeito estabilizador de acordo com a invenção, enquanto outros fluidos estruturalmente semelhantes não apresentam este efeito. Considerando que o requerente não deseja ser limitado por qualquer teoria científica, acredita-se que certos motivos estruturais de fluidos, como ésteres de ácido carboxílico de baixo peso molecular e ésteres de ácido carboxílico que fornecem um alto poder de solvente, não são adequados para fornecer um efeito estabilizado. Assim, ésteres de ácido carboxílico de acordo com a) tendo menos de 12 átomos de carbono, preferivelmente menos de 9 átomos de carbono, mais preferivelmente menos de 6 átomos de carbono, tais como ésteres de ácido carboxílico derivados de combinações de ácidos carboxílicos selecionados do grupo que consiste em ácido acético, ácido propiônico, ácido butírico, ácido pentanoico ou ácido hexanoico com monoálcoois selecionados do grupo que consiste em metanol, etanol, 1-propanol, 2-propanol, 1- butanol, 2-butanol, isobutanol, 1-pentanol, e 1-hexanol não são considerados como estando de acordo com esta invenção. Exemplos não limitativos para ésteres de ácido carboxílico de baixo peso molecular não de acordo com a invenção são acetato de metila, acetato de etila, acetato de 1-propila, acetato de 2-propila, acetato de butila, propionato de metila, propionato de etila, propionato de propila, butirato de metila, butirato etila e pentanoato de metila. Em contraste, os ésteres de ácido carboxílico, conforme definido nas reivindicações, têm um efeito estabilizador nos esporos de fungos.
[0075] No decorrer da presente invenção, foi surpreendentemente descoberto que certos líquidos, conforme definidos neste documento, são adequados para aumentar a estabilidade de armazenamento de esporos de fungos. Em outras palavras, esporos de fungos presentes na preparação líquida de acordo com a invenção exibem uma taxa de germinação melhorada após um determinado tempo em comparação com esporos de fungos presentes em uma formulação diferente ou na forma pura.
[0076] Em conexão com a presente invenção, uma “taxa de germinação melhorada” refere-se a uma taxa de germinação de estruturas ou órgãos fúngicos dormentes, preferivelmente esporos fúngicos, que é pelo menos 10% maior do que aquele de estruturas ou órgãos fúngicos dormentes, como esporos não tratados de acordo com o procedimento da presente invenção, mas tratados igualmente de outra forma (“esporos de controle”), preferivelmente pelo menos 20%, mais preferivelmente pelo menos 30% ou pelo menos 40% e mais preferivelmente pelo menos 50% superior até pelo menos 2 semanas após a produção dos referidos esporos, ou seja, depois de terminar o período de resfriamento. Em outras palavras, “taxa de germinação melhorada” significa uma taxa de germinação de pelo menos 110% daquela dos esporos de controle, preferivelmente pelo menos 120%, mais preferivelmente pelo menos 130% ou pelo menos 140% e mais preferivelmente pelo menos 150% ou superior até pelo menos 2 semanas após a produção dos referidos esporos. Preferivelmente, a referida taxa de germinação melhorada ainda é visível ou mesmo aumentada até pelo menos 3 meses após a produção, mais preferivelmente pelo menos 4 meses e mais preferivelmente pelo menos 6 meses após a produção, como pelo menos 8 meses, pelo menos 10 meses ou mesmo 12 meses ou mais. Consequentemente, é preferido que a taxa de germinação de esporos tratados de acordo com a invenção seja pelo menos 200% dos esporos de controle 3 meses após a produção dos referidos esporos. Em outra modalidade preferida, a taxa de germinação é de pelo menos 300% ou pelo menos 400%, mais preferivelmente pelo menos 500% dos esporos de controle 6 meses após a produção dos referidos esporos. A taxa de germinação, neste contexto, denota a capacidade dos esporos de germinar após um determinado tempo. % taxa de germinação consequentemente significa a porcentagem de esporos que é capaz de germinar após um determinado tempo. Os métodos de medição da taxa de germinação são bem conhecidos na técnica. Por exemplo, os esporos são espalhados na superfície de um meio de ágar e a proporção de esporos em desenvolvimento de tubos germinativos é determinada microscopicamente após a incubação em temperaturas de crescimento apropriadas (Oliveira et al., 2015. Um protocolo para determinação da viabilidade conidial dos entomopatógenos fúngicos Beauveria bassiana e Metarhizium anisopliae de produtos comerciais. Journal of Microbiological Methods 119; pp: 44-52, e referências nele).
[0077] Em uma modalidade particular, a invenção fornece uma preparação líquida que compreende 0,1 a 40% de esporos de fungos, preferido 2,5 a 30%, mais preferido 5 a 25%, tal como 10 a 20%, até 99,9% de pelo menos uma éster carboxílico definido acima, preferido 70 a 97,5%, mais preferido 75 a 95%; tal como 80 a 90%, 0 a 20% de tensoativos (por exemplo, dispersantes emulsificantes); preferido 0 a 15%, mais preferido 0,1 a 10%; 0 a 10% de modificadores de reologia, por exemplo, sílicas pirogênicas, atapulgitas, preferivelmente 0 a 7%, mais preferivelmente 0,5 a 5%; 0 a 5% de cada antiespumante, antioxidantes, corantes preferidos 0 a 3%, mais preferido 0,1 a 0,5% de cada.
[0078] Em particular, é preferível que a preparação líquida compreenda ainda um tensoativo para resultar em uma fórmula miscível em água que, após diluição com a quantidade adequada de água, pode ser aplicada no campo.
[0079] BCAs são organismos vivos em uma forma dormente.
Consequentemente, as formulações compreendendo uma baixa concentração de água ou mesmo sendo essencialmente isentas de água são um tipo de formulação preferencial para BCAs. Por outro lado, certos BCAs também podem ser formulados em um maior teor de água. Se a água estiver presente, tal água virá principalmente de água livre residual no pó de esporo seco ou traços de água em outros formulantes. Consequentemente, concentrações de água entre 0 e 8% são possíveis devido a esses fatos, cuja faixa então cairia na definição de “essencialmente livre de água”. Preferivelmente, a concentração de água varia entre 0 e 6%, mais preferivelmente entre 0 e 4% como entre 2 e 4%. Consequentemente, as concentrações de água exemplares incluem 2%, 3%, 4%, 5% e 6%.
[0080] Embora se acredite que na preparação líquida de acordo com a invenção o referido pelo menos um éster carboxílico pode estar presente em quantidade inferior, é preferido que esteja presente em uma quantidade de pelo menos 50 % em peso. Geralmente, o referido pelo menos um éster carboxílico pode estar presente em uma concentração de até 99,9%, preferivelmente em uma faixa de 70 % em peso e 97,5 % em peso, mais preferivelmente entre 75 % em peso e 95%, mais preferivelmente entre 80 % em peso e 90 % em peso.
[0081] A preparação líquida de acordo com a invenção é preferivelmente miscível em água. O termo “miscível em água” indica que os referidos líquidos resultam em uma mistura homogênea se combinados na proporção de 1:200 de fluido e água, preferivelmente na proporção de 1:100, mais preferivelmente na proporção de 1:50. A fim de atingir a miscibilidade em água, a preparação líquida preferivelmente compreende ainda um tensoativo como descrito acima.
[0082] Qualquer espécie de fungo pode ser aplicada para a presente invenção. É, no entanto, preferido que os referidos esporos fúngicos sejam de uma espécie fúngica que tem um efeito benéfico na planta, tal como uma espécie fúngica eficaz como agente de controle biológico na proteção das plantas ou como agente promotor da saúde das plantas. Mais preferivelmente, o referido fungo é um fungo filamentoso.
[0083] Fungos filamentosos, como a pessoa versada bem sabe, se distinguem das leveduras devido à sua tendência a crescer em uma forma filamentosa multicelular na maioria das condições, em contraste com o crescimento principalmente unicelular de células de levedura elípticas ou ovais.
[0084] O referido pelo menos um fungo filamentoso pode ser qualquer fungo que exerça um efeito positivo sobre as plantas, como um efeito protetor ou de promover o crescimento da planta. Consequentemente, o referido fungo pode ser um fungo entomopatogênico, um fungo nematófago, um fungo que promove o crescimento de plantas, um fungo ativo contra patógenos de plantas, como bactérias ou patógenos de plantas fúngicos, ou um fungo com ação herbicida.
[0085] NRRL é a abreviatura de Agricultural Research Service Culture Collection, uma autoridade depositária internacional para fins de depósito de cepas de microrganismos sob o tratado de Budapeste sobre o reconhecimento internacional do depósito de microrganismos para fins de procedimento de patente, tendo o endereço Centro Nacional de Pesquisa de Utilização Agrícola, Serviço de Pesquisa Agrícola, Departamento de Agricultura dos EUA, 1815 North University Street, Peroira, Illinois 61604, EUA.
[0086] ATCC é a abreviatura de American Type Culture Collection, uma autoridade depositária internacional para fins de depósito de cepas de microrganismos sob o tratado de Budapeste sobre o reconhecimento internacional do depósito de microrganismos para fins de procedimento de patente, tendo o endereço ATCC Patent Depository, 10801 University Blvd., Manassas, VA 10110 EUA.
[0087] Apenas alguns fungos com atividade herbicida seletiva são conhecidos, tal como F2.1 Phoma macrostroma, em particular cepa 94-44B; F2.2 Sclerotinia minor, em particular cepa IMI 344141 (por exemplo, Sarritor pela Agrium Advanced Technologies); F2.3 Colletotrichum gloeosporioides, em particular cepa ATCC 20358 (por exemplo, Collego (também conhecido como LockDown) pela Agricultural Research Initiatives); F2.4 Stagonospora atriplicis; ou F2.5Fusarium oxysporum, diferentes cepas das quais são ativas contra diferentes espécies de plantas, por exemplo, a erva Striga hermonthica (Fusarium oxysproum formae specialis strigae).
[0088] Espécies exemplares de fungos que apoiam, promovem ou estimulam o crescimento/saúde das plantas são E2.1 Talaromyces flavus, em particular cepa V117b; E2.2 Trichoderma atroviride, em particular cepa CNCM I-1237 (por exemplo, Esquive® WP da Agrauxine, FR), cepa SC1 descrita em Pedido Internacional No. PCT/IT2008/000196), cepa no. V08/002387, cepa no. NMI No. V08/002388, cepa no. NMI No. V08/002389, cepa no. NMI No. V08/002390, cepa LC52 (por exemplo, Sentinel da Agrimm Technologies Limited), cepa kd (por exemplo, T-Gro da Andermatt Biocontrol), e/ou cepa LUI32 (por exemplo, Tenet da Agrimm Technologies Limited); E2.3 Trichoderma harzianum, em particular cepa ITEM 908 ou T-22 (por exemplo, Trianum-P da Koppert); E2.4 Myrothecium verrucaria, em particular cepa AARC-0255 (por exemplo, DiTera™ da Valent Biosciences); E2.5 Penicillium bilaii, em particular cepa ATCC 22348 (por exemplo, JumpStart® da Acceleron BioAg), e/ou cepa ATCC20851; E2.6 Pythium oligandrum, em particular cepas DV74 ou M1 (ATCC 38472; por exemplo, Polyversum da Bioprepraty, CZ); E2.7 Rhizopogon amylopogon (por exemplo, compreendido em
Myco-Sol da Helena Chemical Company); E2.8 Rhizopogon fulvigleba (por exemplo, compreendido em Myco-Sol da Helena Chemical Company); E2.9 Trichoderma harzianum, em particular cepa TSTh20, cepa KD, produto Eco-T da Plant Health Products, ZA ou cepa 1295- 22; E2.10 Trichoderma koningii; E2.11 Glomus aggregatum; E2.12 Glomus clarum; E2.13 Glomus deserticola; E2.14 Glomus etunicatum; E2.15 Glomus intraradices; E2.16 Glomus monosporum; E2.17 Glomus mosseae; E2.18 Laccaria bicolor; E2.19 Rhizopogon luteolus; E2.20 Rhizopogon tinctorus; E2.21 Rhizopogon villosulus; E2.22 Scleroderma cepa; E2.23 Suillus granulatus; E2.24 Suillus punctatapies; E2.25 Trichoderma virens, em particular cepa GL-21; E2.26 Verticillium albo-atrum (formalmente V. dahliae), em particular cepa WCS850 (CBS 276.92; por exemplo, Dutch Trig da Tree Care Innovations); E2.27 Trichoderma viride, , por exemplo, cepa B35 (Pietr et al., 1993, Zesz. Nauk. A R w Szczecinie 161: 125-137) e E2.28 Purpureocillium lilacinum (anteriormente conhecida como Paecilomyces lilacinus) cepa 251 (AGAL 89/030550; por exemplo, BioAct da Bayer CropScience Biologics GmbH).
[0089] Em uma modalidade mais preferida, as cepas de fungos tendo um efeito benéfico na saúde e/ou crescimento das plantas são selecionadas de Talaromyces flavus, cepa VII7b; Trichoderma harzianum cepa KD ou cepa em produto Eco-T da Plant Health Products, SZ; Myrothecium verrucaria cepa AARC-0255; Penicillium bilaii cepa ATCC 22348; Pythium oligandrum cepa DV74 ou M1 (ATCC 38472); Trichoderma viride cepa B35;Trichoderma atroviride cepa CNCM I-1237, e Purpureocillium lilacinum (anteriormente conhecida como Paecilomyces lilacinus) cepa 251 (AGAL 89/030550).
[0090] Em uma modalidade ainda mais preferida, as cepas de fungos tendo um efeito benéfico na saúde e/ou crescimento das plantas são selecionadas de Penicillium bilaii cepa ATCC 22348,
Trichoderma viride, por exemplo, cepa B35, Trichoderma atroviride cepa CNCM I-1237 e Purpureocillium lilacinum (anteriormente conhecida como Paecilomyces lilacinus) cepa 251 (AGAL 89/030550).
[0091] Fungos bactericidamente ativos são, por exemplo, A2.2 Aureobasidium pullulans, em particular blastósporos de cepa DSM14940; A2.3 Aureobasidium pullulans, em particular blastósporos de cepa DSM 14941 ou misturas de blastósporos de cepas DSM14940 e DSM14941; A2.9 Scleroderma citrinum.
[0092] Fungos ativos contra patógenos fúngicos são, por exemplo, B2.1 Coniothyrium minitans, em particular cepa CON/M/91-8 (No. de Acesso DSM-9660; por exemplo, Contans® da Bayer CropScience Biologics GmbH); B2.2 Metschnikowia fructicola, em particular cepa NRRL Y-30752; B2.3 Microsphaeropsis ochrace, em particular cepa P130A (Depósito ATCC 74412); B2.4 Muscodor albus, em particular cepa QST 20799 (No. de Acesso NRRL 30547); B2.5 Trichoderma harzianum rifai, em particular cepa KRL-AG2 (também conhecida como cepa T-22, /ATCC 208479, por exemplo, PLANTSHIELD T-22G, Rootshield®, e TurfShield da BioWorks, US) e cepa T39 (por exemplo, Trichodex® da Makhteshim, US); B2.6 Arthrobotrys dactyloides; B2.7 Arthrobotrys oligospora; B2.8 Arthrobotrys superba; B2.9 Aspergillus flavus, em particular cepa NRRL 21882 (por exemplo, Afla-Guard® da Syngenta) ou cepa AF36 (por exemplo, AF36 da Arizona Cotton Research e Protection Council, US); B2.10 Gliocladium roseum (também conhecida como Clonostachys rosea f. rosea), em particular cepa 321U da Adjuvants Plus, cepa ACM941 como descrita em Xue (Eficácia de Clonostachys rosea cepa ACM941 e tratamentos de sementes com fungicida para controlar o complexo de podridão radicular da ervilha, Can Jour Plant Sci 83(3): 519-524), cepa IK726 (Jensen DF, et al. Desenvolvimento de um agente de biocontrole para o controle de doença de planta com especial ênfase sobre o antagonista fúngico comercial próximo Cloostachys rosea cepa "IK726"; Australas Plant Pathol. 2007;36:95–101), cepa 88-710 (WO2007/107000), cepa CR7 (WO2015/035504) ou cepas CRrO, CRM e CRr2 descritas em WO2017109802; B2.11 Phlebiopsis (ou Phlebia ou Peniophora) gigantea, em particular cepa VRA 1835 (ATCC 90304), cepa VRA 1984 (DSM16201), cepa VRA 1985 (DSM16202), cepa VRA 1986 (DSM16203), cepa FOC PG B20/5 (IMI390096), cepa FOC PG S.P log6 (IMI390097), cepa FOC PG SP log5 (IMI390098), cepa FOC PG BU3 (IMI390099), cepa FOC PG BU4 (IMI390100), cepa FOC PG 410.3 (IMI390101), cepa FOC PG 97/1062/116/1.1 (IMI390102), cepa FOC PG B22/SP1287/3.1 (IMI390103), cepa FOC PG SH1 (IMI390104) e/ou cepa FOC PG B22/SP1190/3.2 (IMI390105) (Os produtos Phlebiopsis são, por exemplo, Rotstop® da Verdera e FIN, PG-Agromaster®, PG-Fungler®, PG-IBL®, PG-Poszwald® e Rotex® da e-nema, DE); B2.12 Pythium oligandrum, em particular cepa DV74 ou M1 (ATCC 38472; por exemplo, Polyversum da Bioprepraty, CZ); B2.13 Scleroderma citrinum; B2.14 Talaromyces flavus, em particular cepa V117b; B2.15 Trichoderma asperellum, em particular cepa ICC 012 da Isagro ou cepa SKT-1 (por exemplo, ECO- HOPE® da Kumiai Chemical Industry), cepa T34 (por exemplo, ASPERELLO® da Biobest Group NV e T34 BIOCONTROL® pela Biocontrol Technologies S.L., ES); B2.16 Trichoderma atroviride, em particular cepa CNCM I-1237 (por exemplo, Esquive® WP da Agrauxine, FR), cepa SC1 descrito no Pedido Internacional No.
PCT/IT2008/000196), cepa 77B (T77 da Andermatt Biocontrol), cepa no.
V08/002387, cepa NMI no.
V08/002388, cepa NMI no.
V08/002389, cepa NMI no.
V08/002390, cepa LC52 (por exemplo, Sentinel da Agrimm Technologies Limited), cepa LUI32 (por exemplo, Tenet pela Agrimm Technologies Limited), cepa ATCC 20476 (IMI 206040), cepa T11 (IMI352941/CECT20498), cepa SKT-1 (FERM P-
16510), cepa SKT-2 (FERM P-16511), cepa SKT-3 (FERM P-17021); B2.17 Trichoderma harmatum; B2.18 Trichoderma harzianum, em particular, cepa KD, cepa T-22 (por exemplo, Trianum-P da Koppert), cepa TH35 (por exemplo, Root-Pro pela Mycontrol), cepa DB 103 (por exemplo, T-Gro 7456 pela Dagutat Biolab); B2.19 Trichoderma virens (também conhecida como Gliocladium virens), em particular cepa GL- 21 (por exemplo, SoilGard pela Certis, US); B2.20 Trichoderma viride, em particular cepa TV1 (por exemplo, Trianum-P pela Koppert), cepa B35 (Pietr et al., 1993, Zesz.
Nauk.
A R w Szczecinie 161: 125-137); B2.21 Ampelomyces quisqualis, em particular cepa AQ 10 (por exemplo, AQ 10® pela CBC Europe, Itália); B2.22 Fungo de Arkansas 18, ARF; B2.23 Aureobasidium pullulans, em particular blastósporos de cepa DSM14940, blastósporos de cepa DSM 14941 ou misturas de blastósporos de cepas DSM14940 e DSM 14941 (por exemplo, Botector® pela bio-ferm, CH); B2.24 Chaetomium cupreum (por exemplo, BIOKUPRUM TM pela AgriLife); B2.25 Chaetomium globosum (por exemplo, Rivadiom pela Rivale); B2.26 Cladosporium cladosporioides, em particular cepa H39 (pela Stichting Dienst Landbouwkundig Onderzoek); B2.27 Dactylaria candida; B2.28 Dilophosphora alopecuri (por exemplo, Twist Fungus); B2.29 Fusarium oxysporum, em particular cepa Fo47 (por exemplo, Fusaclean pela Natural Plant Protection); B2.30 Gliocladium catenulatum (Synonym: Clonostachys rosea f. catenulate), em particular cepa J1446 (por exemplo, Prestop ® pela Lallemand); B2.31 Lecanicillium lecanii (formalmente conhecida como Verticillium lecanii), em particular conidia de cepa KV01 (por exemplo, Vertalec® pela Koppert/Arysta); B2.32 Penicillium vermiculatum; B2.33 Trichoderma gamsii (formalmente T. viride), em particular cepa ICC080 (IMI CC 392151 CABI, por exemplo, BioDerma pela AGROBIOSOL DE MEXICO, S.A.
DE C.V.); B2.34 Trichoderma polysporum, em particular cepa IMI
206039 (por exemplo, Binab TF WP pela BINAB Bio-Innovation AB, Sweden); B2.35 Trichoderma stromaticum (por exemplo, Tricovab pela Ceplac, Brazil); B2.36 Tsukamurella paurometabola, em particular cepa C-924 (por exemplo, HeberNem®); B2.37 Ulocladium oudemansii, em particular cepa HRU3 (por exemplo, Botry-Zen® pela Botry-Zen Ltd, NZ); B2.38 Verticillium albo-atrum (formalmente V. dahliae), em particular cepa WCS850 (CBS 276.92; por exemplo, Dutch Trig pela Tree Care Innovations); B2.39 Muscodor roseus, em particular cepa A3-5 (No. de Acesso NRRL 30548); B2.40 Verticillium chlamydosporium; B2.41 misturas de Trichoderma asperellum cepa ICC 012 e Trichoderma gamsii cepa ICC 080 (produto conhecido como, por exemplo, BIO-TAMTM da Bayer CropScience LP, US), B2.42 Simplicillium lanosoniveum e B2.43 Trichoderma fertile (por exemplo, produto TrichoPlus da BASF).
[0093] Em uma modalidade preferida, o agente de controle biológico com atividade fungicida é selecionado a partir de Coniothyrium minitans, em particular cepa CON/M/91-8 (No. de Acesso DSM-9660) Aspergillus flavus, cepa NRRL 21882 (disponível como Afla-Guard® da Syngenta) e cepa AF36 (disponível como AF36 da Arizona Cotton Research e Protection Council, US); Gliocladium roseum cepa 321U, cepa ACM941, cepa IK726, cepa 88-710 (WO2007/107000), cepa CR7 (WO2015/035504); Gliocladium catenulatum cepa J1446; Phlebiopsis (ou Phlebia ou Peniophora) gigantea, em particular as cepas VRA 1835 (ATCC 90304), VRA 1984 (DSM16201), VRA 1985 (DSM16202), VRA 1986 (DSM16203), FOC PG B20/5 (IMI390096), FOC PG SP log6 (IMI390097), FOC PG SP log5 (IMI390098), FOC PG BU3 (IMI390099), FOC PG BU4 (IMI390100), FOC PG 410,3 (IMI390101), FOC PG 97/1062/116/1,1 (IMI390102), FOC PG B22/SP1287/3,1 (IMI390103), FOC PG SH1 (IMI390104), FOC PG B22/SP1190/3,2 (IMI390105) (disponível como
Rotstop® da Verdera e FIN, PG-Agromaster®, PG-Fungler®, PG- IBL®, PG-Poszwald®, e Rotex® da e-nema, DE); Pythium oligandrum, cepa DV74 ou M1 (ATCC 38472) (disponível como Polyversum da Bioprepraty, CZ); Talaromyces flavus, cepa VII7b; Ampelomyces quisqualis, em particular cepa AQ 10 (disponível como AQ 10® pela CBC Europe, Itália); Gliocladium catenulatum (Sinônima: Clonostachys rosea f. catenulate) cepa J1446, Cladosporium cladosporioides, por exemplo, cepa H39 (pela Stichting Dienst Landbouwkundig Onderzoek), Trichoderma virens (também conhecida como Gliocladium virens), em particular cepa GL-21 (por exemplo, SoilGard pela Certis, US), Trichoderma atroviride cepa CNCM I-1237, cepa 77B, cepa LU132 ou cepa SC1, tendo No. de Acesso CBS 122089, Trichoderma harzianum cepa T-22 (por exemplo, Trianum-P da Andermatt Biocontrol ou Koppert), Trichoderma asperellum cepa SKT- 1, tendo No. de Acesso FERM P-16510 ou cepa T34, Trichoderma viride cepa B35 e Trichoderma asperelloides JM41R (No. de Acesso NRRL B-50759).
[0094] Em uma modalidade mais preferida, a espécie de fungo com atividade fungicida é selecionada a partir de Coniothyrium minitans, em particular cepa CON/M/91-8 (No. de Acesso DSM-9660) (disponível como Contans® da Prophyta, DE); Gliocladium roseum cepa 321U, cepa ACM941, cepa IK726; Gliocladium catenulatum, em particular cepa J1446; e Trichoderma virens (também conhecida como Gliocladium virens), em particular cepa GL-21. As referidas espécies fúngicas também podem preferivelmente ser Coniothyrium minitans cepa CON/M/91-8 (No. de Acesso DSM-9660) ou Gliocladium catenulatum cepa J1446 ou Trichoderma atroviride cepa CNCM I-1237 ou Trichoderma viride cepa B35.
[0095] Dentro dos fungos fungicidamente ativos, o gênero Trichoderma, em particular as espécies Trichoderma viride e
Trichoderma atroviride, são especialmente preferidas. Essas incluem Trichoderma atroviride cepa CNCM I-1237; Trichoderma atroviride cepa SC1, tendo No. de Acesso CBS 122089, WO 2009/116106 e Patente Norte Americana No. 8,431,120 (da Bi-PA); Trichoderma atroviride cepa 77B; Trichoderma atroviride cepa LU132; Trichoderma viride cepa B35. Particularmente preferidos são Trichoderma atroviride cepa CNCM I-1237 e Trichoderma viride cepa B35.
[0096] A referida espécie de fungo pode ser um fungo entomopatogênico.
[0097] Fungos ativos contra insetos (fungos entomopatogênicos) incluem C2.1 Muscodor albus, em particular cepa QST 20799 (No. de Acesso NRRL 30547); C2.2 Muscodor roseus em particular cepa A3-5 (No. de Acesso NRRL 30548); C2.3 Beauveria bassiana, em particular cepa ATCC 74040 (por exemplo, Naturalis® da Intrachem Bio Italia); cepa GHA (No. de Acesso ATCC74250; por exemplo, BotaniGuard Es e Mycotrol-O da Laverlam International Corporation); cepa ATP02 (No. de Acesso DSM 24665); cepa PPRI 5339 (por exemplo, BroadBand™ da BASF); cepa PPRI 7315, cepa R444 (por exemplo, Bb-Protec da Andermatt Biocontrol), cepas IL197, IL12, IL236, IL10, IL131, IL116 (todas referenciadas em Jaronski, 2007. Use of Entomopathogenic Fungi in Biological Pest Management, 2007: ISBN: 978-81-308-0192- 6), cepa Bv025 (veja, por exemplo, Garcia et al. 2006. Manejo Integrado de Plagas y Agroecología (Costa Rica) No. 77); cepa BaGPK; cepa ICPE 279, cepa CG 716 (por exemplo, BoveMax® da Novozymes); C2.4 Hirsutella citriformis;C2.5 Hirsutella thompsonii (por exemplo, Mycohit e ABTEC da Agro Bio-tech Research Centre, IN); C2.6 Lecanicillium lecanii (formalmente conhecida como Verticillium lecanii), em particular conídios de cepa KV01 (por exemplo, Mycotal® e Vertalec® da Koppert/Arysta), cepa DAOM198499 ou cepa DAOM216596; C2.9 Lecanicillium muscarium (formalmente Verticillium lecanii), em particular cepa VE 6/CABI(=IMI) 268317/CBS102071/ ARSEF5128 (por exemplo, Mycotal da Koppert); C2.10 Metarhizium anisopliae var acridum, por exemplo, ARSEF324 da GreenGuard pela Becker Underwood, US ou isolado IMI 330189 (ARSEF7486; por exemplo, Green Muscle pela Biological Control Products); C2.11 Metarhizium brunneum, por exemplo, cepa Cb 15 (por exemplo, ATTRACAP® da BIOCARE); C2.12 Metarhizium anisopliae, por exemplo, cepa ESALQ 1037 (por exemplo, da Metarril® SP Organic), cepa E-9 (por exemplo, da Metarril® SP Organic), cepa M206077, cepa C4-B (NRRL 30905), cepa ESC1, cepa 15013-1 (NRRL 67073), cepa 3213-1 (NRRL 67074), cepa C20091, cepa C20092, cepa F52 (DSM3884/ ATCC 90448; por exemplo, BIO 1020 pela Bayer CropScience e talbém, por exemplo, Met52 pela Novozymes) ou cepa ICIPE 78; C2.15 Metarhizium robertsii 23013-3 (NRRL 67075); C2.13 Nomuraea rileyi; C2.14 Paecilomyces fumosoroseus (new: Isaria fumosorosea), em particular cepas Apopka 97 (disponível como PreFeRal da Certis, USA), Fe9901 (disponível como NoFly da Natural industries, USA), ARSEF 3581, ARSEF 3302, ARSEF 2679 (ARS Coleção de culturas de fungos entomopatogênicos, Ithaca, EUA), IfB01 (Centro Chinês para Coleta de Cultura Tipo CCTCC M2012400), ESALQ1296, ESALQ1364, ESALQ1409 (ESALQ: Universidade de São Paulo (Piracicaba, SP, Brazil)), CG1228 (EMBRAPA Recursos Genéticos e Biotecnologia (Brasília, DF, Brazil)), KCH J2 (Dymarska et al., 2017; PLoS one 12(10)): e0184885), HIB-19, HIB-23, HIB-29, HIB- 30 (Gandarilla-Pacheco et al., 2018; Rev Argent Microbiol 50: 81-89), CHE-CNRCB 304, EH-511/3 (Flores-Villegas et al., 2016; Parasites & Vectors 2016 9:176 doi: 10.1186/s13071-016-1453-1), CHE-CNRCB 303, CHE-CNRCB 305, CHE-CNRCB 307 (Gallou et al., 2016; biologia fúngica 120 (2016) 414-423), EH-506/3, EH-503/3, EH-520/3, PFCAM, MBP, PSMB1 (Centro Nacional de Controle Biológico, Mexico;
Castellanos-Moguel et al., 2013; Revista Mexicana De Micologia 38: 23-33, 2013), RCEF3304 (Meng et al., 2015; Genet Mol Biol. 2015 Jul- Sep; 38(3): 381-389), PF01-N10 (CCTCC No. M207088), CCM 8367 (Coleção Tcheca de Microorganismos, Brno), SFP-198 (Kim et al., 2010; Wiley Online: DOI 10.1002/ps.2020), K3 (Yanagawa et al., 2015; J Chem Ecol. 2015; 41(12): 118-1126), CLO 55 (Ansari Ali et al., 2011; PLoS One. 2011; 6(1): e16108. DOI: 10.1371/journal.pone.0016108), IfTS01, IfTS02, IfTS07 (Dong et al. 2016 / PLoS ONE 11(5): e0156087. doi:10.1371/journal.pone.0156087), P1 (Centro de Pesquisa Sun Agro Biotech, Índia), If-02, If-2.3, If-03 (Farooq e Freed, 2016; DOI:
10.1016/j.bjm.2016.06.002), Ifr AsC (Meyer et al., 2008; J. Invertebr. Pathol. 99:96–102. 10.1016/j.jip.2008.03.007), PC-013 (DSMZ 26931), P43A, PCC (Carrillo-Pérez et al., 2012; DOI 10.1007/s11274-012- 1184-1), Pf04, Pf59, Pf109 (KimJun et al., 2013; Mycobiology 2013 Dec; 41(4): 221-224), FG340 (Han et al., 2014; DOI:
10.5941/MYCO.2014.42.4.385), Pfr1, Pfr8, Pfr9, Pfr10, Pfr11, Pfr12 (Angel-Sahagún et al., 2005; Journal of Insect Science), Ifr531 (Daniel e Wyss, 2009; DOI 10.1111/j.1439-0418.2009.01410.x), IF-1106 (Laboratório de Ecologia e Biocontrole de Insetos, Shanxi Agricultural University), I9602, I7284 (Hussain et al. 2016, DOI:10.3390/ijms17091518), I03011 (Patente Norte Americana 4618578), CNRCB1 (Centro Nacional de Referência de Controle Biológico (CNRCB), Colima, México), SCAU-IFCF01 (Nian et al., 2015; DOI: 10.1002/ps.3977), PF01-N4 (Centro de Pesquisa em Engenharia de Controle Biológico, SCAU, Guangzhou, P. R. China) Pfr-612 (Instituto de Biotecnologia (IB-FCB-UANL), México), Pf-Tim, Pf-Tiz, Pf- Hal, Pf-Tic (Chan-Cupul et al. 2013, DOI: 10.5897/AJMR12.493); C2.15 Aschersonia aleyrodis; C2.16 Beauveria brongniartii (por exemplo, Beaupro da Andermatt Biocontrol AG); C2.17 Conidiobolus obscurus; C2.18 Entomophthora virulenta (por exemplo, Vektor da
Ecomic); C2.19 Lagenidium giganteum; C2.20 Metarhizium flavoviride; C2.21 Mucor haemelis (por exemplo, BioAvard da Indore Biotech Inputs & Research); C2.22 Pandora delphacis; C2.23 Sporothrix insectorum (por exemplo, Sporothrix Es da Biocerto, BR); e C2.24 Zoophtora radicans.
[0098] Em uma modalidade preferencial, as cepas de fungos com efeito inseticida são selecionadas de C2.3 Beauveria bassiana cepa ATCC 74040; cepa GHA (No. de Acesso ATCC74250); cepa ATP02 (No. de Acesso DSM 24665); cepa PPRI 5339; cepa PPRI 7315, cepa R444, cepas IL197, IL12, IL236, IL10, IL131, IL116; cepa BaGPK; cepa ICPE 279, cepa CG 716; C2.6 Lecanicillium lecanii (formalmente conhecida como Verticillium lecanii), em particular conídios de cepa KV01, cepa DAOM198499 ou cepa DAOM216596; C2.9 Lecanicillium muscarium (formalmente Verticillium lecanii) cepa VE 6 / CABI(=IMI) 268317/ CBS102071/ ARSEF5128; C2.10 Metarhizium anisopliae var acridum cepa ARSEF324 ou isolado IMI 330189 (ARSEF7486); C2.11 Metarhizium brunneum cepa Cb 15; C2.12 Metarhizium anisopliae cepa ESALQ 1037, cepa E-9, cepa M206077, cepa C4-B (NRRL 30905), cepa ESC1, cepa 15013-1 (NRRL 67073), cepa 3213-1 (NRRL 67074), cepa C20091, cepa C20092, cepa F52 (DSM3884/ ATCC 90448) ou cepa ICIPE 78; C2.14 Paecilomyces fumosoroseus (novo: Isaria fumosorosea) cepa Apopka 97, Fe9901, ARSEF 3581, ARSEF 3302, ARSEF 2679, IfB01 (Centro Chinês para Coleta de Cultura Tipo CCTCC M2012400), ESALQ1296, ESALQ1364, ESALQ1409, CG1228, KCH J2, HIB-19, HIB-23, HIB-29, HIB-30, CHE- CNRCB 304, EH-511/3, CHE-CNRCB 303, CHE-CNRCB 305, CHE- CNRCB 307, EH-506/3, EH-503/3, EH-520/3, PFCAM, MBP, PSMB1, RCEF3304, PF01-N10 (CCTCC No. M207088), CCM 8367, SFP-198, K3, CLO 55, IfTS01, IfTS02, IfTS07, P1, If-02, If-2.3, If-03, Ifr AsC, PC- 013 (DSMZ 26931), P43A, PCC, Pf04, Pf59, Pf109, FG340, Pfr1, Pfr8,
Pfr9, Pfr10, Pfr11, Pfr12, Ifr531, IF-1106, I9602, I7284, I03011 (Patente Norte Americana 4618578), CNRCB1, SCAU-IFCF01, PF01-N4, Pfr- 612, Pf-Tim, Pf-Tiz, Pf-Hal e Pf-Tic.; e C2.16 Beauveria brongniartii (por exemplo, Beaupro da Andermatt Biocontrol AG).
[0099] Em uma modalidade mais preferida, cepas de fungos com efeito inseticida são selecionados de C2.3 Beauveria bassiana cepa ATCC 74040; cepa GHA (No. de Acesso ATCC74250); cepa ATP02 (No. de Acesso DSM 24665); cepa PPRI 5339; cepa PPRI 7315 e/ou cepa R444; C2.6 Lecanicillium lecanii (formalmente conhecida como Verticillium lecanii), conídios de cepa KV01, cepa DAOM198499 ou cepa DAOM216596; C2.9 Lecanicillium muscarium (formalmente Verticillium lecanii), em particular cepa VE 6 / CABI(=IMI) 268317/ CBS102071/ ARSEF5128; C2.10 Metarhizium anisopliae var acridum cepa ARSEF324 ou isolado IMI 330189 (ARSEF7486); C2.11 Metarhizium brunneum cepa Cb 15; C2.12 Metarhizium anisopliae cepa F52 (DSM3884/ ATCC 90448); C2.14 Paecilomyces fumosoroseus (novo: Isaria fumosorosea) cepa Apopka 97 e Fe9901, e C2.16 Beauveria brongniartii (por exemplo, Beaupro da Andermatt Biocontrol AG).
[00100] É ainda mais preferido que o referido microrganismo fúngico seja uma cepa da espécie Isaria fumosorosea. Cepas preferidas de Isaria fumosorosea são selecionados do grupo que consiste em Apopka 97, Fe9901, ARSEF 3581, ARSEF 3302, ARSEF 2679, IfB01 (Centro Chinês para Coleta de Cultura Tipo CCTCC M2012400), ESALQ1296, ESALQ1364, ESALQ1409, CG1228, KCH J2, HIB-19, HIB-23, HIB-29, HIB-30, CHE-CNRCB 304, EH-511/3, CHE-CNRCB 303, CHE-CNRCB 305, CHE-CNRCB 307, EH-506/3, EH-503/3, EH-520/3, PFCAM, MBP, PSMB1, RCEF3304, PF01-N10 (CCTCC No. M207088), CCM 8367, SFP-198, K3, CLO 55, IfTS01, IfTS02, IfTS07, P1, If-02, If-2.3, If-03, Ifr AsC, PC-013 (DSMZ 26931),
P43A, PCC, Pf04, Pf59, Pf109, FG340, Pfr1, Pfr8, Pfr9, Pfr10, Pfr11, Pfr12, Ifr531, IF-1106, I9602, I7284 , I03011 (Patente Norte Americana 4618578), CNRCB1, SCAU-IFCF01, PF01-N4, Pfr-612, Pf- Tim, Pf-Tiz, Pf-Hal, Pf-Tic.
[00101] É mais preferido que a referida cepa de Isaria fumosorosea seja selecionada de Apopka 97 e Fe9901. Uma cepa particularmente preferida é APOPKA97.
[00102] São também particularmente preferidos fungos entomopatogênicos do gênero Metarhizium spp.. O gênero Metahrizium compreende diversas espécies algumas das quais foram recentemente reclassificadas (para uma visão geral, veja Bischoff et al., 2009; Mycologia 101 (4): 512-530). Membros do gênero Metarhizium compreendem M. pingshaense, M. anisopliae, M. robertsii, M. brunneum (estes quatro são também referidos como complexo Metarhizium anisopliae), M. acridum, M. majus, M. guizouense, M. Lepidiotae, M.Globosum e M. rileyi (previamente conhecido como Nomuraea rileyi). Destes, M. anisopliae, M. robertsii, M. brunneum, M. acridum e M. rileyi são ainda mais preferidos, enquanto aqueles de M. brunneum são mais preferidos.
[00103] Cepas exemplares pertencendo à Metarhizium spp. que são também especialmente preferidas são Metarhizium acridum ARSEF324 (produto GreenGuard por BASF) ou IMI 330189 isolado (ARSEF7486; por exemplo, Green Muscle por Biological Control Products); cepa Cb 15 Metarhizium brunneum (por exemplo, ATTRACAP® de BIOCARE), ou cepa F52 (DSM3884/ATCC 90448; por exemplo, BIO 1020 por Bayer CropScience e também, por exemplo, Met52 por Novozymes); cepas do complexo Metarhizium anisopliae, cepa ESALQ 1037 ou cepa ESALQ E-9 (ambas de Metarril® WP Organic), cepa M206077, cepa C4-B (NRRL 30905), cepa ESC1, cepa 15013-1 (NRRL 67073), cepa 3213-1 (NRRL 67074),
cepa C20091, cepa C20092, ou cepa ICIPE 78. Mais preferidos são F52 isolados (também conhecido como Met52) que infectam principalmente larvas de besouro e que foram originalmente desenvolvidos para o controle de Otiorhynchus sulcatus. e ARSEF324 que é usado comercialmente no controle de gafanhotos. Produtos comerciais com base no F52 isolado são subculturas do F52 isolado individual e são representados em diversas coleções de cultura incluindo: Julius Kühn-Institute para Biological Control (previamente o BBA), Darmstadt, Alemanha: [como M.a. 43]; HRI, UK: [275-86 (acrônimos V275 ou KVL 275)]; KVL Denmark [KVL 99-112 (Ma 275 ou V 275)]; Bayer, Alemanha [DSM 3884]; ATCC, USA [ATCC 90448]; USDA, Ithaca, USA [ARSEF 1095]. Formulações concentradas granulares e emulsificáveis com base neste isolado foram desenvolvidas por diversas companhias e registradas na UE e América do Norte (EUA e Canadá) para uso contra gorgulho-da- videira-preta em plantas ornamentais e frutos macios, outro coleoptero, flores ocidentais em plantas ornamentais em estufas e percevejos em relva.
[00104] Beauveria bassiana é produzida em massa e usada para gerenciar uma ampla variedade de pragas de insetos incluindo moscas brancas, tripes, afídeos e gorgulhos. Cepas preferidas de Beauveria bassiana incluem cepa ATCC 74040; cepa GHA (Acesso No. ATCC74250); cepa ATP02 (Acesso No. DSM 24665); cepa PPRI 5339; cepa PPRI 7315, cepas IL197, IL12, IL236, IL10, IL131, IL116, cepa Bv025; cepa BaGPK; cepa ICPE 279, cepa CG 716; ESALQPL63, ESALQ447 e ESALQ1432, CG1229, IMI389521, NPP111B005, Bb-147. É mais preferido que cepas de Beauveria bassiana incluam cepa ATCC 74040 e cepa GHA (Acesso No. ATCC74250). A preparação líquida de acordo com qualquer umas das reivindicações 1 a 17, em que referida espécie fúngica é um fungo nematicida ativo.
[00105] Espécies fúngicas nematicidas ativas incluem D2.1 Muscodor albus, em particular cepa QST 20799 (Acesso No. NRRL 30547); D2.2 Muscodor roseus, em particular cepa A3-5 (Acesso No. NRRL 30548); D2.3 Purpureocillium lilacinum (previamente conhecido como Paecilomyces lilacinus), em particular cepa 251 de P. lilacinum (AGAL 89/030550; por exemplo, BioAct de Bayer CropScience Biologics GmbH), cepa 580 (BIOSTAT® WP (ATCC No. 38740) por Laverlam), cepa no produto BIO-NEMATON® (T.Stanes and Company Ltd.), cepa no produto MYSIS® (Varsha Bioscience and Technology India Pvt Ltd.), cepa no produto BIOICONEMA® (Nico Orgo Maures, India), cepa no produto NEMAT® (Ballagro Agro Tecnologia Ltda, Brazil), e a cepa no produto SPECTRUM PAE L® (Promotora Tecnica Industrial, S.A. DE C.V., México); D2.4 Trichoderma koningii; D2.5 Harposporium anguillullae; D2.6 Hirsutella minnesotensis; D2.7 Monacrosporium cionopagum; D2.8 Monacrosporium psychrophilum; D2.9 Myrothecium verrucaria, em particular cepa AARC-0255 (por exemplo, DiTeraTM by Valent Biosciences); D2.10 Paecilomyces variotii, cepa Q-09 (por exemplo, Nemaquim® de Quimia, MX); D2.11 Stagonospora phaseoli (por exemplo, de Syngenta); D2.12 Trichoderma lignorum, em particular cepa TL-0601 (por exemplo, Mycotric de Futureco Bioscience, ES); D2.13 Fusarium solani, cepa Fs5; D2.14 Hirsutella rhossiliensis; D2.15 Monacrosporium drechsleri; D2.16 Monacrosporium gephyropagum; D2.17 Nematoctonus geogenius; D2.18 Nematoctonus leiosporus; D2.19 Neocosmospora vasinfecta; D2.20 Paraglomus sp, em particular Paraglomus brasilianum; D2.21 Pochonia chlamydosporia (também conhecido como Vercillium chlamydosporium), em particular var. catenulata (IMI SD 187; por exemplo, KlamiC de The National Center of Animal and Plant Health (CENSA), CU); D2.22 Stagonospora heteroderae; D2.23
Meristacrum asterospermum, e D2.24 Duddingtonia flagrans.
[00106] Em uma modalidade mais preferida, cepas fúngicas com efeito nematicida são selecionadas de Purpureocillium lilacinum, em particular esporos de cepa 251 de P. lilacinum (AGAL 89/030550); Harposporium anguillullae; Hirsutella minnesotensis; Monacrosporium cionopagum; Monacrosporium psychrophilum; Myrothecium verrucaria, cepa AARC-0255; Paecilomyces variotii; Stagonospora phaseoli (comercialmente disponível de Syngenta); e Duddingtonia flagrans.
[00107] Em uma modalidade ainda mais preferida, cepas fúngicas com efeito nematicida são selecionadas de Purpureocillium lilacinum, em particular esporos de cepa 251 de P. Lilacinum (AGAL 89/030550); e Duddingtonia flagrans. Mais preferivelmente, referida cepa fúngica com efeito nematicida é da espécie Purpureocillium lilacinum, em particular cepa 251 de P. lilacinum.
[00108] O micro-organismo fúngico produzindo esporos e agindo como agente de controle biológico e/ou promotor de crescimento de planta é cultivado ou fermentado de acordo com métodos conhecidos na técnica ou como descrito nesta aplicação em um substrato apropriado, por exemplo, por fermentação submersa ou fermentação em estado sólido, por exemplo, usando um dispositivo e método como divulgado em WO2005/012478 ou WO1999/057239.
[00109] Embora propágulos fúngicos específicos, tal como microsclerotia (veja, por exemplo, Jackson and Jaronski (2009). Produção de microescleródios do entomopatógeno fúngico Metarhizium anisopliae e seu potencial para uso como agente de biocontrole para insetos que vivem no solo; Mycological Research 113, pp.842-850) pode ser produzida por técnicas de fermentação líquida, é preferido que as estruturas ou órgãos dormentes de acordo com a presente invenção sejam produzidas por fermentação em estado sólido. Técnicas de fermentação em estado sólido são bem conhecidas na técnica (para uma visão geral veja Gowthaman et al.,
2001. Appl Mycol Biotechnol (1), p. 305-352).
[00110] Após fermentação, os esporos fúngicos podem ser separados do substrato. O substrato povoado com os esporos fúngicos é secado preferivelmente antes de qualquer etapa de separação. O micro-organismo ou esporos fúngicos podem ser secados por meio de, por exemplo, liofilização, secagem a vácuo ou secagem por pulverização após separação. Métodos para preparação de esporos secos são bem conhecidos na técnica e incluem secagem em leito fluidizado, secagem por pulverização, secagem a vácuo e liofilização. Conídios podem ser secados em 2 etapas: Para conídios produzidos por fermentação em estado sólido primeiro o substrato de cultura coberto de conídio é secadoantes de colher os conídios do substrato de cultura seco, obtendo assim um pó de conídios puro. Em seguida o pó de conídio é secado também usando secagem a vácuo ou liofilização antes de armazenar ou formular.
[00111] A preparação líquida de acordo com a invenção pode também compreender pelo menos uma substância selecionada do grupo de tensoativos, modificadores de reologia, agentes antiespumantes, antioxidantes e corantes.
[00112] Tensoativos não iônicos e/ou aniônicos são todas as substâncias deste tipo que podem normalmente ser empregadas em agentes agroquímicos. Tensoativos não iônicos possíveis são selecionados dos grupos de copolímeros de bloco de óxido de polietileno-óxido de polipropileno, mono-, di- e/ou triglicerídeos etoxilados onde óleo de rícino etoxilado ou óleos vegetais etoxilados podem ser mencionados a título de exemplo, éteres de polietileno glicol de álcoois ramificados ou lineares, produtos de reação de ácidos graxos ou álcoois de ácido graxo com óxido de etileno e/ou óxido de propileno, além disso, alquilaril etoxilatos ramificados ou lineares, onde óxido de polietileno-ésteres de ácido graxo de sorbitano pode ser mencionadoa título de exemplo. Dos exemplos mencionados acima, classes selecionadas podem ser opcionalmente fosfatadas e neutralizadas com bases. Tensoativos aniônicos possíveis são todas as substâncias deste tipo que podem normalmente ser empregadas em agentes agroquímicos. Metal alcalino, metal terroso alcalino e sais de amônio de ácidos alquilsulfônicos ou alquilfosfóricos bem como ácidos alquilarilsulfônicos ou alquilarilfosfóricos são preferidos. Um outro grupo preferido de tensoativos aniônicos ou auxiliares de dispersão são metais alcalinos, metais terrosos alcalinos e sais de amônio de ácidos poliestirenossulfônicos, sais de ácidos polivinilsulfônicos, sais de ácidos alquilnaftaleno sulfônicos, sais de produtos de condensação de ácido naftalenossulfônico-formaldeído, sais de produtos de condensação de ácido naftalenossulfônico, ácido fenolsulfônico e formaldeído, e sais de ácido lignossulfônico. Um outro grupo preferido de tensoativos aniônicos ou auxiliares de dispersão são metais alcalinos, metais terrosos alcalinos e sais de amônio de sarcosinatos ou tauratos. Faixas adequadas de tensoativos na preparação líquida de acordo com a invenção compreendem 0 a 20%, preferivelmente 0 a 15%, mais preferivelmente 0,5 a 10%.
[00113] Modificadores de reologia, também conhecido como espessante, agente anti-aglomerante, modificador de viscosidade ou agente estruturante, podem ser adicionados a presente formulação, por exemplo, a fim de prevenir (irreversível) sedimentação. Modificadores de reologia are preferivelmente derivados de minerais. Estes agentes de controle reológico fornecem estabilidade a longo prazo quando a formulação está em repouso ou em armazenamento. Compostos adequados são modificadores reológicos selecionados do grupo que consiste em partículas de sílica hidrofóbica e hidrofílica defumada e precipitada, argilas gelificadas incluindo bentonita,
hectorita, laponita, atapulgita, sepiolita, esmectita, ou bentonita hidrofobicamente/organofílica modificada. Faixas adequadas de modificador de reologia na preparação líquida de acordo com a invenção compreendem 0 a 10%, preferivelmente 0 a 7%, mais preferivelmente 0,5 a 5%.
[00114] Na medida em que não definido de outra forma, % no presente pedido refere-se a % de peso.
[00115] A fim de dispersar sílicas ou espessantes de argila em um determinado fluido uma determinada mistura de fluido de alto cisalhamento é desejável para formar um gel, uma vez que é conhecida na técnica.
[00116] Principais produtores globais para sílicas hidrofílicas ou hidrofilizadas defumadas (pirogênicas) são Evonik (nome comercial Aerosil®), Cabot Corporation (nome comercial Cab-O-Sil®), Wacker Chemie (faixa de produto HDK), Dow Corning, e OCI (Konasil®). Outras classes de modificadores de reologia adequados são sílicas precipitadas, e principais produtores globais são Evonik (nomes comerciais Sipernat® ou Wessalon®), Rhodia (Tixosil) e PPG Industries (Hi-Sil).
[00117] Outras classes de exemplos adequados para modificadores de reologia são espessantes de argila. Espessantes de argila são geralmente silicatos em camadas micronizados que podem ser espessantes eficazes para uma ampla faixa de aplicações. Eles são tipicamente empregados em sua forma não hidrofobizada ou hidrofobizada. A fim de torná-los dispersíveis em solventes não aquosos, a superfície de argila é geralmente tratada com sais de amônio quaternários. Estas argilas modificadas são conhecidas como espessantes de argila organo-modificados. Opcionalmente, pequenas quantidades de álcoois de baixo peso molecular ou água podem ser empregadas como ativadores. Exemplos para tais modificadores de reologia com base em argila incluem argilas de esmectita, bentonita, hectorita, atapulgita, seipiolita ou montmorilonita. Modificadores reológicos preferidos (b) são, por exemplo, argilas de hectorita organicamente modificadas tais como Bentone® 38 e SD3. Argilas de bentonita organicamente modificada, tais como Bentone® 34, SD1 e SD2, sepiolita organicamente modificada tal como Pangel® B20, sílica hidrofílica tal como Aerosil® 200, sílica hidrofóbica tal como Aerosil® R972, R974 e R812S, atapulgita tal como Attagel® 50,
[00118] Outra classe de exemplos adequados para modificadores de reologia são modificadores reológicos orgânicos com base em óleo de rícino hidrogenado modificado (tri-hidroxiestearina) ou derivados de óleo de rícino orgânico tais como Thixcin® R e Thixatrol® ST. Propriedades físicas de modificadores de reologia selecionados Nome Companhia Descrição geral Propriedades CAS- No. comercial físicas ® Bentone 38 Elementis Derivado orgânico Densidade: 1,7 12001-31- 3 Specialties, de uma argila de g/cm 9 US hectorita Bentone® Elementis Derivado orgânico Densidade: 1,6 SD-3 Specialties, de uma argila de g/cm3 US hectorita Tamanho de partícula (dispersa): <1m Bentone® 34 Elementis Derivado orgânico Densidade: 1,7 68953-58- Specialties, de uma argila de g/cm3 2 US bentonita Bentone® Elementis Derivado orgânico Densidade: 89749-77- SD-1 Specialties, de uma argila de 1,47 g/cm3 9 US bentonita Bentone® Elementis Derivado orgânico Densidade: 89749-78- 3 SD-2 Specialties, de uma argila de 1,62 g/cm 0 US bentonita
Pangel® B20 Tolsa S.A., Sepiolita 63800-37- ES organicamente 3 modificada ® * Sipernat Evonik Dióxido de silicone BET: 190 m2/g 112926- 22S Industries amorfo precipitado Tamanho 00-8 AG, DE médio de partícula primária: 12 nm Aerosil® 200 Evonik Sílica defumada * BET: 200 m2/g 112945- Industries hidrofílica Tamanho 52-5 AG, DE médio de 7631-86-9 partícula primária: 12 nm Aerosil® R Evonik Sílica defumada * BET: 90 a 130 68611-44- 2 972 / R972V Industries hidrofílica m /g 9 AG, DE Aerosil® R Evonik Sílica defumada * BET: 150 a 68611-44- 974 Industries hidrofílica 190 m2/g 9 AG, DE Aerosil® R Evonik Sílica defumada * BET: 260 ± 30 68909-20- 812S Industries hidrofílica m2/g 6 AG, DE Attagel® 50 BASF AG, Argila de atapulgita: Densidade: > 14808-60- 3 DE (Mg,Al)5Si8O204H2O 1,0 g/cm 7 Tamanho médio de partícula: 9 m Thixcin® R Elementis derivado orgânico Densidade: 38264-86- Specialties, de óleo de rícino 1,02 g/cm3 7
US Thixatrol® Elementis derivado orgânico Densidade: 51796-19- ST Specialties, de óleo de rícino, 1,02 g/cm3 1 US Octadecanamida
[00119] Em uma modalidade preferida, a concentração de agente de controle reológica está na faixa de 0 a 10% de peso, por exemplo, de 1 a 7 ou 3 a 6% de peso. Em particular, a concentração de agente de controle reológico pode ser 0, 0,5, 1, 1,5, 2, 2,5, 3, 4, 5, 6, 7, 8 ou 9% em peso e essencialmente depende das propriedades físicas do agente de controle biológico bem como aquela do líquido veículo. Em geral, a concentração de agente de controle reológica na formulação de acordo com a invenção pode também depender do agente de controle biológico.
[00120] Agentes antiespumantes podem ser adicionados a presente formulação a fim de prevenir formação de espuma após diluição com água. Agentes antiespumantes adequadas são, por exemplo, óleos parafínicos, óleos vegetais, óleos de silicone (por exemplo, Silcolapse 411, Silcolapse 454, Silcolapse 482 de Solvay; Silfoam SC1132, Silfoam SC132 de Wacker; Xiameter ACP-0100 de Dow) ou emulsões de óleo de silicone aquoso (por exemplo, SAG30, SAG 1572 / Momentive, Silcolapse 426R, Silcolapse 432 / Solvay; Silfar SE4 / Wacker; Antifoam 8830 / Harcros Chemicals). Em uma modalidade preferida a concentração de agentes antiespumantes está na faixa de 0 a 0,5% de peso, por exemplo, de 0,1 a 0,3% de peso. Em particular, a concentração de agente antiespumante pode ser 0, 0,1, 0,2, 0,3, 0,4 ou 0,5% em peso ou qualquer valor intermediário.
[00121] Antioxidantes podem ser adicionados a presente formulação a fim de prevenir ou retardar processos de degradação oxidativa. Antioxidantes adequados são, por exemplo, terc-butil- hidroxiquinona (TBHQ), butil-hidroxitoluol (BHT), butil-hidroxianisol (BHA), palmitato ascorbila, acetato de tocoferila, estearato de ascorbila ou o grupo de carotinoides (, por exemplo, beta-carotina) ou galatos (por exemplo, galato de etila, galato de propila, galato de octila, galato de dodecila). Em uma modalidade preferida a concentração de antioxidantes está na faixa de 0 a 0,5% de peso, por exemplo, de 0,1 a 0,3 % de peso. Em particular, a concentração de antioxidantes pode ser 0, 0,1, 0,2, 0,3, 0,4 ou 0,5% em peso ou qualquer valor intermediário.
[00122] Corantes que podem ser usados incluem pigmentos inorgânicos, exemplos sendo óxido de ferro, óxido de titânio e Azul de Prússia, e corantes orgânicos, tais como corantes de alizarina, corantes azo e corantes de metal de ftalocianina.
[00123] Em um aspecto diferente, a presente invenção refere-se a uma composição líquida compreendendo a preparação líquida de acordo com a invenção.
[00124] A presente invenção também se refere a um método para controle de fungos fitopatogênicos, insetos e/ou nematódeos em ou em sobre uma planta, para realçar o crescimento de uma planta ou para melhorar a saúde da planta, incluindo produção de planta ou crescimento de raiz compreendendo aplicação de uma quantidade eficaz da preparação líquida ou da composição líquida de acordo com a invenção como descrito acima para referida planta ou para um locus onde plantas estão crescendo ou destinadas a crescer.
[00125] O termo “saúde da planta” geralmente compreende vários tipos de melhorias de plantas que não estão conectadas ao controle de pestes ou fitopatógenos. Por exemplo, propriedades vantajosas que podem ser mencionadas são características de cultivo melhoradas, incluindo: emergência, rendimento da colheita, teor de proteína, teor de óleo, teor de amido, sistema radicular mais desenvolvido, melhor crescimento da raiz, melhor manutenção do tamanho da raiz, melhor eficácia da raiz, melhor tolerância ao estresse (por exemplo, contra a seca, calor, sal, UV, água, frio), etileno reduzido (produção reduzida e/ou inibição de recepção), aumento de perfilhamento, aumento na altura da planta, lâmina foliar maior, menos folhas basais mortas,
perfilhos mais fortes, cor da folha mais verde, teor de pigmento, atividade fotossintética, menos entrada necessária (tais como fertilizantes ou água), menos sementes necessárias, perfilhos mais produtivos, floração precoce, maturidade precoce do grão, menos verso da planta (alojamento), aumento do crescimento do rebento, aumento do vigor da planta, aumento do estande da planta e germinação precoce e melhor.
[00126] Saúde da planta melhorada preferivelmente se refere a características de planta melhoradas incluindo: produção da colheita, sistema radicular mais desenvolvido (melhor crescimento da raiz), manutenção do tamanho da raiz, melhoria na eficácia da raiz, aumento do perfilhamento, aumento na altura da planta, maior lâmina foliar, menos folhas basais mortas, perfilhos mais fortes, folha de cor mais verde, atividade fotossintética, perfilhos mais produtivos, maior vigor da planta e maior estande de planta.
[00127] Em relação a presente invenção, saúde da planta melhorada preferivelmente especialmente se refere a propriedade da planta melhoradas selecionada deprodução da colheita, sistema radicular mais desenvolvido, melhor crescimento radicular, melhor manutenção do tamanho da raiz, melhoria da eficácia da raiz, aumento do perfilhamento e aumento da altura da planta.
[00128] O efeito de uma composição de acordo com a presente invenção na saúde da planta como definido aqui pode ser determinado comparando plantas que são cultivadas sob as mesmas condições ambientais, em que uma parte das referidas plantas é tratada com uma preparação líquida de acordo com a presente invenção e outra parte das referidas plantas não é tratada com uma preparação líquida de acordo com a presente invenção. Em vez disso, a outra parte não é tratada ou tratada com um placebo (ou seja, uma aplicação sem uma preparação líquida de acordo com a invenção tal como uma aplicação sem todos os ingredientes ativos (ou seja, sem um agente de controle biológico como descrito aqui).
[00129] A preparação líquida de acordo com a presente invenção pode ser aplicada de qualquer maneira desejada, tal como na forma de um revestimento de sementes, rega de solo, e/ou diretamente no sulco e/ou como um spray foliar e aplicada pré-emergência, pós- emergência ou ambos. Em outras palavras, a preparação líquida pode seraplicada à semente, à planta ou às frutas e vegetais colhidos ou ao solo em que a planta está crescendo ou onde se deseja cultivar (local de crescimento da planta). Métodos de aplicação habituais incluem, por exemplo, imersão, pulverização, atomização, irrigação, evaporação, polvilhamento, nebulização, difusão, formação de espuma, pintura, espalhamento, rega (encharcamento) e irrigação por gotejamento.
[00130] Todas as plantas e partes de planta podem ser tratadas de acordo com a invenção. Aqui, plantas devem ser entendidas como significando todas as plantas e partes de planta tais como plantas selvagens ou plantações desejadas e indesejadas (incluindo plantas cultivadas de ocorrência natural), plantas que podem ser tratadas de acordo com a invenção incluem as seguintes plantas de cultivo principais: milho, soja, alfafa, algodão, girassol, sementes oleaginosas de Brassica tais como Brassica napus (por exemplo, canola, colza), Brassica rapa, B. juncea (por exemplo, (campo) mostarda) e Brassica carinata, Arecaceae sp. (por exemplo, óleo de palma, coco), arroz, trigo, beterraba sacarina, cana-de-açúcar, aveia, centeio, cevada, painço e sorgo, triticale, linho, nozes, uvas e videiras e várias frutas e vegetais de vários táxons botânicos, por exemplo, Rosaceae sp. (por exemplo, frutas em pomo, como maçãs e pêras, mas também frutas com caroço, tais como damascos, cerejas, amêndoas, ameixas e pêssegos, e frutas vermelhas tais como morangos, framboesas,
groselha vermelha e preta e groselha), Ribesioidae sp., Juglandaceae sp., Betulaceae sp., Anacardiaceae sp., Fagaceae sp., Moraceae sp., Oleaceae sp. (por exemplo, oliveira), Actinidaceae sp., Lauraceae sp. (por exemplo, abacate, canela, cânfora), Musaceae sp. (por exemplo, bananeiras e plantações), Rubiaceae sp. (por exemplo, café), Theaceae sp. (por exemplo, chá), Sterculiceae sp., Rutaceae sp. (por exemplo, limões, laranjas, tangerinas e toranjas); Solanaceae sp. (por exemplo, tomate, batata, pimenta, pimentão, beringela, tabaco), Liliaceae sp., Compositaesp. (por exemplo, alface, alcachofra e chicória – incluindo chicória raiz, endívia ou chicória comum), Umbelliferae sp. (por exemplo, cenoura, salsa, aipo e aipo-rábano), Cucurbitaceae sp. (por exemplo, pepinos – incluindo pepinos, abóboras, melancias, cabaças e melões), Alliaceaesp. (por exemplo, alhos e cebolas), Cruciferae sp. (por exemplo, repolho branco, repolho roxo, brócolis, couve-flor, couve de Bruxelas, pak choi, couve-rábano, rabanete, raiz-forte, agrião e couve chinesa), Leguminosae sp. (por exemplo, amendoim, ervilha, lentilha e feijão – , por exemplo, feijão comum e favas), Chenopodiaceae sp. (por exemplo, Acelga, beterraba forrageira, espinafre, beterraba), Linaceae sp. (por exemplo, cânhamo), Cannabeacea sp. (por exemplo, cannabis), Malvaceaesp. (por exemplo, quiabo, cacau), Papaveraceae (por exemplo, papoula), Asparagaceae (por exemplo, aspargo); plantas úteis e plantas ornamentais no jardim e nas florestas incluindo relva, gramado, grama e Stevia rebaudiana; e em cada caso, tipos geneticamente modificados destas plantas.
[00131] Plantas cultivadas podem ser plantas que podem ser obtidos por métodos convencionais de melhoramento e otimização ou por métodos de engenharia biotecnológica e genética ou combinações destes métodos, incluindo as plantas transgênicas e incluindo as variedades de planta que podem ou não pode ser protegido por direitos de propriedade varietal. As plantas devem ser entendidas como significando todos os estágios de desenvolvimento, tais como sementes, mudas, plantas jovens (imaturas) até plantas maduras. As partes da planta devem ser entendidas como todas as partes e órgãos das plantas acima e abaixo do solo, tal como broto, folha, flor e raiz, dados exemplos sendo folhas, agulhas, talos, caules, flores, corpos de fruto, frutas e sementes, e também tubérculos, raízes e rizomas. Partes de plantas também incluem plantas colhidas ou partes de plantas colhidas e material de propagação vegetativo e generativo, por exemplo, mudas, tubérculos, rizomas, estacas e sementes.
[00132] Tratamento de acordo com a invenção das plantas e partes de planta com a preparação líquida ou a composição compreendendo referida preparação líquida é realizado diretamente ou permitindo que os compostos atuem no entorno, ambiente ou espaço de armazenamento pelos métodos de tratamento habituais, por exemplo, por imersão, pulverização, evaporação, nebulização, dispersão, pintura, injeção e, no caso de material de propagação, em particular no caso de sementes, também pela aplicação de um ou mais revestimentos.
[00133] Como já mencionado acima, é possível tratar todas as plantas e suas partes de acordo com a invenção. Em uma modalidade preferida, espécies de plantas selvagens e cultivares de plantas, ou aquelas obtidas por métodos convencionais de melhoramento biológico, tais como cruzamento ou fusão de protoplastos, e também partes dos mesmos, são tratadas. Em uma outra modalidade preferida, plantas transgênicas e cultivares de plantas obtidas por métodos de engenharia genética, se apropriado em combinação com métodos convencionais (organismos geneticamente modificados), e partes dos mesmos são tratadas. Os termos “partes” ou “partes de plantas” ou “partes de planta” foram explicados acima. A invenção é usada com preferência particular para tratar plantas dos respectivos cultivares comercialmente habituais ou aqueles que estão em uso. Cultivares de plantas devem ser entendidas como significando plantas com novas propriedades ("características") e que foram obtidos por melhoramento convencional, por mutagênese ou por técnicas de DNA recombinante. Elas podem ser cultivares, variedades, bio- ou genótipos.
[00134] Plantas transgênicas ou cultivares de planta (aquelas obtidas por engenharia genética) que devem ser tratadas com preferência de acordo com a invenção incluem todas as plantas que, através da modificação genética, receberam material genético que conferem propriedades úteis vantajosas particulares ("características") a essas plantas. Exemplos de taispropriedades são melhor crescimento da planta, maior tolerância a altas ou baixas temperaturas, maior tolerância à seca ou aos níveis de água ou salinidade do solo, melhor desempenho de floração, colheita mais fácil, amadurecimento acelerado, maiores rendimentos, maior qualidade e/ou maior valor nutricional dos produtos colhidos, melhor tempo de armazenamento e/ou processabilidade dos produtos colhidos. Exemplos adicionais e particularmente enfatizados de tais propriedades são aumento da resistência das plantas contra pragas animais e microbianas, tais como contra insetos, aracnídeos, nematódeos, ácaros, lesmas e caracóis devido, por exemplo, às toxinas formadas nas plantas, em particular aquelas formadas nas plantas pelo material genético de Bacillus thuringiensis (por exemplo, pelos genes CryIA(a), CryIA(b), CryIA(c), CryIIA, CryIIIA, CryIIIB2, Cry9c Cry2Ab, Cry3Bb e CryIF e também combinações dos mesmos), além disso, aumentaram a resistência das plantas contra fungos fitopatogênicos, bactérias e/ou vírus devido, por exemplo, à resistência sistêmica adquirida (SAR), sisteminas, fitoalexinas, eliciadores e também genes de resistência e proteínas e toxinas correspondentemente expressas, e também aumentaram a tolerância das plantas a certos compostos herbicidamente ativos, por exemplo, imidazolinonas, sulfonilureias, glifosatos ou fosfinotricina (por exemplo, o gene "PAT"). Os genes que conferem as características desejadas em questão também podem estar presentes em combinações com um outro mas plantas transgênicas. Exemplos de plantas transgênicas que podem ser mencionadas são as plantas de cultivo importantes, tais como os cereais (trigo, arroz, triticale, cevada, centeio, aveia), milho, soja, batata, beterraba sacarina, cana-de-açúcar, tomate, ervilha e outros tipos de vegetais, algodão, tabaco, colza e também fruteiras (com as frutas maçãs, pêras, frutas cítricas e uvas), com particular ênfase sendo dada ao milho, soja, trigo, arroz, batata, algodão, cana-de-açúcar, tabaco e colza. As características que são particularmente enfatizadas são o aumento da resistência das plantas a insetos, aracnídeos, nematódeos e lesmas e caracóis.
[00135] Além disso, a presente invenção refere-se ao uso da preparação líquida ou a composição líquida de acordo com a invenção como agente de proteção de plantas ou para promover o vigor das plantas e/ou saúde da planta.
[00136] Os seguintes exemplos ilustram a presente invenção de uma forma não limitante. Materiais Nome Descrição química Fornecedor CAS-No. Tipo comercial Radia 7127 Laurato de 2-etil- Oleon 20292-08-4 Monoálcool- hexila Monoácido a) Radialube Oleato de 2-etil- Oleon 26399-02-2 Monoálcool- 7130 / Radia hexila Monoácido 7331 a) Radia 7081 Metiléster de ácido Oleon 141-24-2 Monoálcool- ricinólico Monoácido a)
Pentil Pentil éster de ácido Sigma- 624-54-4 Monoálcool- Propionate propiônico Aldrich Monoácido a) Radia 7208 Dicaprilato/ caprato Oleon 68583-51-7 Diálcool- de propileno glicol Monoácido b) Radialube Dicocoato de Oleon 68038-32-4 Diálcool- 7302 neopentilglicol Monoácido b) Triacetin Triacetato de Sigma- 102-76-1 Triálcool- glicerina Aldrich Monoácido b) Radia 7380 Tri-isoestearato de Oleon 68541-50-4 Triálcool- trimetilolpropano Monoácido b) Radialube Tricocoato de Oleon 85566-29-6 Triálcool- 7359 trimetilolpropano Monoácido b) Miglyol 812 Tricaprilato/Caprato Sasol 73398-61-5 Triálcool- de glicerina Monoácido b) Radia 7909 Diacetato de Oleon Triálcool- monoglicerídeo de Monoácido ácido graxo b) Radia 7368 Tricaprilato/Caprato Oleon 11138-60-6 Triálcool- de trimetilolpropano Monoácido b) Radialube Trioleato de Oleon 57675-44-2 Triálcool- 7361 trimetilolpropano Monoácido b) Radiasurf Trioleato de Oleon 26266-58-0 Poliálcool- 7355 sorbitano Monoácido b)
Agnique Di-isononil éster de BASF 166412-78- Monoálcool- AE829 ácido dicarboxílico de 8 Diácido c) 1,2-ciclo-hexano Adimoll DB Adipato de di-n-butila LanXess 105-99-7 Monoálcool- Diácido c) Crodamol DA Adipato de di- Croda 6938-94-9 Monoálcool- isopropila Diácido c) Acetyltributil Tributil éster de ácido Sigma- 77-90-7 Monoálcool- citrate cítrico O-acetílico Aldrich Triácido c) MERO EC® Ésteres auto- Bayer AG comparação emulsionáveis de óleo de colza Break-Thru Trisiloxano Evonik 134180-76- comparação S240 modificado com 0 poliéter Catenex T121 Óleo mineral branco Shell 64742-54-7 comparação Exemplo I (Purpureocillium lilacinum)
[00137] 3 g de pó de esporo puro de Purpureocillium lilacinum foram transferidos para um recipiente de formulação (recipiente de mistura IKA Tipo DT-20 com ferramenta de dispersão para Ultra Turrax) usando uma colher estéril. 12 mL de fluido foram adicionados ao respectivo recipiente de formulação e dispersos usando controle de unidade de tubo ultra turrax durante 1 minuto a 3000 rpm; mudança de direção após 30 segundos. Após isso 2,8 mL foram transferidos em quatro garrafas de amostra (Frasconete Wheaton Serum, Tipo I) deixando espaço aéreo e firmemente fechada usando tampas crimpada (Macherey – Nagel tipo N 13). Posteriormente todas as garrafas de amostra foram transferidas para um conjunto de incubadora a 30 °C e armazenados durante um determinado tempo.
[00138] Em intervalos irregulares uma amostra foi recuperada do local de armazenamento e analisada para viabilidade do esporo. Para este propósito, as amostras originais foram completamente homogeneizadas. Alíquotas de 0,25 g ou 250 µL de cada amostra foram transferidas para tubos falcon de 50 mL. Os tubos foram preenchidos até 25 g usando uma solução aquosa estéril contendo 2% de Tween 80 e homogeinizados em vórtice para alcançar a primeira etapa de diluição (diluição de 1:100). Esta diluição foi usada para diluição adicional e manchamento em ágar.
[00139] Não todas as amostras bem misturadas ou totalmente misturadas em 2% de Tween 80. Para estas amostras, um método alternativo de dispersão/diluição foi aplicado onde a fase oleosa foi retirada dos esporos primeiro: 0,25 g ou 250 µL de amostra são pesados em um tubo Eppendorf de 2 mL, e 0,5 mL de 2% de Tween 80 é adicionado, e a mistura é transferida para uma centrífuga Eppendorf onde ela é centrifugada durante 1 minuto a 10,000 rpm. O sobrenadante (= fase oleosa superior) é descartado usando uma pipeta. Posteriormente 250 µL de Breakthru S 240 foram adicionados e os esporos foram bem dispersos. 250 µL ou 0,25 g de cada amostra foram transferidos para um tubo Falcon de 50 mL estéril. Os tubos foram preenchidos até 25 g usando uma solução aquosa estéril contendo 2% de Tween 80 e homogeinizados em vórtice para alcançar a primeira etapa de diluição (diluição de 1:100). Esta diluição foi usada para diluição adicional e manchamento em ágar.
[00140] Para avaliação de taxa de germinação de esporo prepare uma diluição de 1:30000 com base na diluição de 1:100 alcançada por diluição automatizada múltipla (robô de pipetagem, placa de 96 cavidades). Posteriormente placas de ágar de 12 x 12 cm foram tomadas e manchadas com 10 vezes 5µL de cada amostra usando uma pipeta com 12 canais automatizada. Espere até que o líquido seja absorvido pelo ágar e transfira a placa de ágar para uma incubadora e incube a 25°C durante 17 horas. Abra a placa e coloque-a sob o microscópio. Escolha aleatoriamente uma área por mancha e registre o número de esporos germinados e não germinados que estão dentro do campo designado. Pelo menos 200 esporos por amostra necessitam ser avaliados. Se necessário, conte mais de um campo por mancha.
[00141] Os resultados de viabilidades de esporo são fornecidos na Tabela I.
Viabilidade do esporo [%] Classe após 2 após 5 a 6 após 2 após 3 após 1 mês # Líquido do no dia 1 semanas (12 semanas (35 meses (51 a meses (87 a (27 a 28 dias) Líquido a 15 dias) a 40 dias) 55 dias) 92 dias)
1 Propionato de Pentila a 99,1 94,6 16,1 2 Radia 7081 a n/a# 94,7 95,8 88,6 3 Radia 7127 a 99,1 99,0 98,3 88,4 40,6* 4 Radia 7331 a n/a# 97,9 95,9 85,9 5 Radialube 7130 a n/a# 98,5 94,3 87,9
60/69 6 Radia 7208 b n/a# 95,7 98,3 92,9 7 Radia 7368 b 98,6 96,9 89,6 8 Radia 7380 b 96,5 89,3 86,0 9 Radia 7909 b 98,1 96,5 78,5
10 Radialube 7302 b 99,1 94,7 83,1
11 Radialube 7359 b 58,0# 60,6# 87,8 87,5 87,3*
12 Radialube 7361 b n/a# 97,2 92,3 85,4
13 Radiasurf 7355 b 98,3 96,4 64,1 14 Triacetina b 98,3 97,9 96,2 90,8 69,4*
15 Acetiltributilcitrato c 98,9 98,0 87,5 16 Adimoll DB c 98,9 97,5 89,8 17 Agnique AE829 c n/a# 97,3 96,5 89,8 18 Crodamol DA c 98,2 94,3 95,0 68,2 51,3* $ 19 Breakthru S240 90,5 91,8 85,8 76,8 7,4* 20 Mero EC® $ 93,9 89,4 4,5 Tabela I. *= tomado após 7 meses de armazenamento; # = dificuldades para dispersar em água para avaliação; $ = exemplos comparativos Discussão: Viabilidade do esporo diretamente após fabricação das amostras (dia 1) é geralmente igual ou superior a
61/69 90% para a grande maioria de todos os fluidos testados.
Fluidos de acordo com a invenção exibem uma viabilidade do esporo de aproximadamente 70% ou mais após armazenamento durante 2 ou 3 meses a 30°C, respectivamente.
Fluidos selecionados foram armazenados durante 7 meses a 30°C e exibem uma viabilidade do esporo de aproximadamente 40% ou mais após armazenamento (Tabela I, entradas 3,11,14,18,19). BreakThru S240 foi previamente descrito como um fluido superior para hospedar esporos fúngicos.
Para comparação, BreakThru S240 (Tabela I, entrada 19) fornece ~77% de viabilidade do esporo após 2 meses de armazenamento e aproximadamente 7% após 7 meses de armazenamento sob as determinadas condições de teste.
Mero EC ® (Tabela I, entrada 20), que é um aditivo tankmix que serve como um exemplo comparativo para óleos de semente metilados auto-emulsionantes, exibiu apenas uma viabilidade marginal do esporo de aproximadamente 5% após 3 meses de armazenamento.
Exemplo II (Isaria fumosorosea)
[00142] 1,5 g de pós de esporo puro de I. fumosorosea foram transferidos para um recipiente de formulação (recipiente de mistura IKA tipo DT-20 com ferramenta de dispersão para Ultra Turrax) usando uma colher estéril. 13,5 mL de fluido foram adicionados ao respectivo recipiente de formulação e dispersos usando controle de unidade de tubo ultra turrax durante 1 minuto a 3000 rpm; mudança de direção após 30 segundos. Após isso 2,8 mL foram transferidos em quatro garrafas de amostra (Frasconete Wheaton Serum, Tipo I) deixando pouco espaço aéreo e firmemente fechado usando tampas de crimpagem (Macherey – Nagel tipo N 13). Posteriormente todas as garrafas de amostra foram transferidas para um conjunto de incubadora a 30 °C e armazenadas durante um determinado tempo.
[00143] Em intervalos irregulares uma amostra foi recuperada do local de armazenamento e analisada para viabilidade do esporo. Portanto as amostras originais foram completamente homogeneizadas. Alíquotas de 0,25 g ou 250 µL de cada amostra foram transferidas para tubos falcon de 50 mL. Os tubos foram preenchidos até 25 g usando uma solução aquosa estéril contendo 2% de Tween 80 e homogeinizados em vórtice para alcançar a primeira etapa de diluição (diluição de 1:100). Esta diluição foi usada para diluição adicional e manchamento em ágar.
[00144] Nem todas as amostras bem misturadas ou misturadas totalmente em 2% de Tween 80. Para estas amostras, um método alternativo de dispersão/diluição foi aplicado onde a fase oleosa é retirada dos esporos primeiro: 0,25 g ou 250 µL de amostra foram pesados em um tubo Eppendorf de 2 mL, e 0,5 mL de 2% de Tween 80 foi adicionado, e a mistura foi transferida para uma centrífuga Eppendorf onde ela foi centrifugada durante 1 minuto a 10,000 rpm. O sobrenadante (= fase oleosa superior) foi descartado usando uma pipeta. Posteriormente 250 µL de Breakthru S 240 foram adicionados e os esporos foram bem dispersos. 250 µL ou 0,25 g de cada amostra foram transferidos para um tubo Falcon de 50 mL estéril. Os tubos foram preenchidos até 25 g usando uma solução aquosa estéril contendo 2% de Tween 80 e homogeinizados em vórtice para alcançar a primeira etapa de diluição (diluição de 1:100). Esta diluição foi usada para diluição adicional e manchamento em ágar.
[00145] Para avaliação de taxa de germinação de esporo prepare uma diluição de 1:15000 com base na diluição de 1:100 alcançada por diluição automatizada múltipla (robô de pipetagem, placa de 96 cavidades). Posteriormente placas de ágar de 12 x 12 cm são tomadas e manchadas com 10 vezes 5 µL de cada amostra usando uma pipeta com 12 Canais automatizada. Espere até que líquido seja absorvido pelo ágar e transfira a placa de ágar para uma incubadora e incube a 23°C durante 16 horas. Abrir a placa e colocar ela sob o microscópio. Escolha aleatoriamente uma área por mancha e registre o número de esporos germinados e não germinados que estão dentro do campo designado. Pelo menos 200 esporos por amostra necessitam ser avaliados. Se necessário, conte mais de um campo por mancha. Os resultados de viabilidades de esporo são fornecidos na Tabela II. viabilidade do esporo [%] após 1 mês após 7 meses # Líquido no dia 1 (27 dias) (210 dias) 1 Catenex T 121$ 91,8 60,5 64,2 2 Adimoll DB 89,5 66,6 60,0 3 Triacetin 90 84,0 69,1 $ 4 Breakthru S240 90,9 78,7 69,6 Tabela II; $ = exemplos comparativos Discussão: Viabilidade do esporo diretamente após fabricação dos esporos (dia 1) é geralmente cerca de 90% para todos os fluidos testados. Fluidos de acordo com a invenção exibem uma viabilidade do esporo de aproximadamente 60% ou mais após armazenamento durante 7 meses a 30°C (Tabela II, entradas 2, 3) e portanto, igual ao nível de desempenho dos exemplos de comparação, ou seja, BreakThru S240 e Catenex T 121 (Tabela 2 entradas 1, 4). Exemplo III (Beauveria Bassiana)
[00146] 1,5 g de pó de esporo puro de Beauveria bassiana foram transferidos para um vaso de formulação (recipiente de mistura IKA tipo DT-20 com ferramenta de dispersão para Ultra Turrax) usando uma colher estéril. 13,5 mL de fluido foram adicionados ao respectivo recipiente de formulação e dispersos usando controle de unidade de tubo ultra turrax durante 1 minuto a 3000 rpm; mudança de direção após 30 segundos. Após isso 2,8 mL foram transferidos em quatro garrafas de amostra (Frasconete Wheaton Serum, Tipo I) deixando pouco espaço aéreo e firmemente fechado usando tampas de crimpagem (Macherey – Nagel tipo N 13). Posteriormente todas as garrafas de amostra foram transferidas para um conjunto de incubadora a 30 °C e armazenadas durante um determinado tempo.
[00147] Em intervalos regulares uma amostra foi recuperada do local de armazenamento e analisada para viabilidade do esporo. Portanto as amostras originais foram completamente homogeneizadas. Alíquotas de 0,25 g ou 250 µL de cada amostra são transferidas para tubos falcon de 50 mL. Os tubos foram preenchidos até 25 g usando uma solução aquosa estéril contendo 2% de Tween 80 e homogeinizados em vórtice para alcançar a primeira etapa de diluição (diluição de 1:100). Esta diluição foi usada para diluição adicional e manchamento em ágar.
[00148] Não todas as amostras bem misturadas ou misturadas totalmente em 2% de Tween 80. Para estas amostras, um método alternativo de dispersão/diluição foi aplicado onde a fase oleosa é retirada dos esporos primeiro: 0,25 g ou 250 µL de amostra são pesados em um tubo Eppendorf de 2 mL, e 0,5 mL de 2% de Tween 80 é adicionado, e a mistura é transferida para uma centrífuga Eppendorf onde ela é centrifugada durante 1 minuto a 10.000 rpm. O sobrenadante (= fase oleosa superior) é descartado usando uma pipeta. Posteriormente 250 µL de Breakthru S 240 são adicionados e os esporos são bem dispersos. 250 µL ou 0,25 g de cada amostra são transferidos para um tubo Falcon de 50 mL estéril. Os tubos foram preenchidos até 25 g usando uma solução aquosa estéril contendo 2% de Tween 80 e homogeinizados em vórtice para alcançar a primeira etapa de diluição (diluição de 1:100). Esta diluição é usada para diluição adicional e manchamento em ágar.
[00149] Para avaliação de taxa de germinação de esporo prepare uma diluição de 1:15000 com base na diluição de 1:100 alcançada por diluição automatizada múltipla (robô de pipetagem, placa de 96 cavidades). Posteriormente placas de ágar de 12 x 12 cm são tomadas e manchadas com 10 vezes 5 µL de cada amostra usando uma pipeta com 12 Canais automatizada. Espere até que o líquido seja absorvido pelo ágar e transfira a placa de ágar para uma incubadora e incube a 20°C durante 17 horas. Abra a placa e coloque-a sob o microscópio. Escolha aleatoriamente uma área por mancha e registre o número de esporos germinados e não germinados que estão dentro do campo designado. Pelo menos 200 esporos por amostra necessitam ser avaliados. Se necessário, conte mais de um campo por mancha. Os resultados de viabilidades de esporo são fornecidos na Tabela III. viabilidade do esporo [%] após 2 após 5 # Líquido no dia 1 semanas (14 semanas (35 dias) dias) 1 Radia 7127 91,3 76,3 68,4 2 Radia 7331 91,5 81,4 66,3 3 Adimoll DB 87 66,1 37,7
4 Agnique AE829 89,7 74,9 57,8 5 Radialube 7302 84,2 68,4 52,7 6 Radiasurf 7355 n/a# 71,3 60,4 7 Radia 7208 86,9 66,8 52,7 8 Radia 7368 90,6 80,8* 9 Triacetina 89,3 58,6 31,6 10 Radia 7909 75,1 11,5 18,1 11 Acetiltributilcitrato 85,5 76,7 58,8 12 Miglyol 812 90,9 74,1 49,0 13 Breakthru S240$ 53,1 27,6 19,6 * # Tabela III ; = tomado após 21 dias de armazenamento; = $ dificuldades para dispersar em água para avaliação; = exemplo comparativo Discussão: Viabilidade do esporo diretamente após fabricação das amostras (dia 1) é geralmente alta e na maioria dos casos em ou acima de 75%, em muitos casos ainda mais perto de ou acima de 90% sob as determinadas condições de teste. Entre os exemplos de acordo com a invenção estão fluidos selecionados que exibem uma viabilidade do esporo de aproximadamente 30% ou mais após armazenamento durante 5 semanas ou mais a 30°C. Muitos fluidos ainda fornecem uma viabilidade do esporo de ~50% ou mais, em alguns casos ainda ~60% ou mais (Tabela III, entradas 1, 2, 4, 6, 11) Para comparação, BreakThru S240 fornece apenas aproximadamente 53% de viabilidade do esporo no dia 1 e aproximadamente 20% após 5 semanas de armazenamento (Tabela III, entrada 13). Exemplo IV: Penicillium bilaii
[00150] 1,5 g de pó de esporo puro de Penicillium bilaii foram transferidos para um vaso de formulação (Recipiente de mistura IKA Tipo DT-20 com ferramenta de dispersão para Ultra Turrax) usando uma colher estéril. 13,5 mL de fluido foram adicionados ao respectivo recipiente de formulação e dispersos usando controle de unidade de tubo ultra turrax durante 1 minuto a 3000 rpm; mudança de direção após 30 segundos. Após isso 2,8 mL foram transferidos em quatro garrafas de amostra (Frasconete Wheaton Serum, Tipo I) zdeixando pouco espaço aéreo e firmemente fechado usando tampas de crimpagem (Macherey – Nagel tipo N 13). Posteriormente todas as garrafas de amostra foram transferidas para um conjunto de incubadora a 30°C e armazenadas durante um determinado tempo.
[00151] Em intervalos regulares uma amostra foi recuperada do local de armazenamento e analisada para viabilidade do esporo. Portanto as amostras originais foram completamente homogeneizadas. Alíquotas de 0,25 g ou 250 µL de cada amostra são transferidas para tubos falcon de 50 mL. Os tubos foram preenchidos até 25 g usando uma solução aquosa estéril contendo 2% de Tween 80 e homogeinizados em vórtice para alcançar a primeira etapa de diluição (diluição de 1:100). Esta diluição foi usada para diluição adicional e manchamento em ágar.
[00152] Nem todas as amostras bem misturadas ou misturadas totalmente em 2% de Tween 80. Para estas amostras, um método alternativo de dispersão/diluição foi aplicado onde a fase oleosa é retirada dos esporos primeiro: 0,25 g ou 250 µL de amostra são pesados em um tubo Eppendorf de 2 mL, e 0,5 mL de 2% de Tween 80 é adicionado, e a mistura é transferida para uma centrífuga Eppendorf onde ela é centrifugada durante 1 minuto a 10,000 rpm. O sobrenadante (= fase oleosa superior) é descartado usando uma pipeta. Posteriormente 250 µL de Breakthru S 240 são adicionados e os esporos são bem dispersos. 250 µL ou 0,25 g de cada amostra são transferidas para um tubo Falcon de 50 mL estéril. Os tubos foram preenchidos até 25 g usando uma solução aquosa estéril contendo 2% de Tween 80 e homogeinizados em vórtice para alcançar a primeira etapa de diluição (diluição de 1:100). Esta diluição é usada para diluição adicional e manchamento em ágar.
[00153] Para avaliação de taxa de germinação de esporo prepare uma diluição de 1:15000 com base na diluição de 1:100 alcançada por diluição automatizada múltipla (robô de pipetagem, placa de 96 cavidades). Posteriormente placas de ágar de 12 x 12 cm são tomadas e manchadas com 10 vezes 5µL de cada amostra usando uma pipeta com 12 Canais automatizada. Espere até que líquido seja absorvido pelo ágar e transfira a placa de ágar para uma incubadora e incube a 20°C durante 17 horas. Abra a placa e coloque-a sob o microscópio. Escolha aleatoriamente uma área por mancha e registre o número de esporos germinados e não germinados que estão dentro do campo designado. Pelo menos 200 esporos por amostra necessitam ser avaliados. Se necessário, conte mais de um campo por mancha. Os resultados de viabilidades de esporo são fornecidos na Tabela IV. viabilidade do esporo [%] inicial (1 a 2 6 semanas@30°C 3 meses @30°C (83 Nº Líquido dias) (41 a 43 dias) a 85 dias) 1 Acetiltributilcitrato 98,4 83,8 60,6 2 Adimoll DB 97,5 90,8 75,5 3 Breakthru S240$ 61,3 38,5 20,2 4 Agnique AE829 95,3 89,4 71,9 5 Radia 7127 97,1 96 77,9 6 Radia 7208 92,6 91,7 75,9 7 Radia 7331 97,1 91,4 75,7 8 Radia 7368 98,1 91,6 74,4 9 Radia 7909 90,6 75,6 42,0 10 Radialube 7302 94,5 86,1 70,2 11 Triacetina 92,9 83,2 57,6 Tabela IV; $ = exemplo comparativo Discussão:
[00154] Viabilidade do esporo diretamente após fabricação das amostras (dia 1) é geralmente alta e em ou acima de 90%. Exemplos de acordo com a invenção exibem uma viabilidade do esporo de aproximadamente 42% ou mais após armazenamento durante aproximadamente 3 meses a 30°C.
Em muitos casos os fluidos estão exibindo uma variabilidade de esporo ainda maior de aproximadamente 70% ou mais (Tabela IV, entradas 2, 4-8, 10). Para comparação, Break-Thru S240 fornece apenas 20% de viabilidade do esporo após armazenamento sob condições determinadas aqui (Tabela IV entrada 3).
Claims (46)
1. Preparação líquida, caracterizada pelo fato de que compreende pelo menos um éster carboxílico composto de uma porção de ácido carboxílico e uma porção de álcool, sendo que referido éster carboxílico é diferente de um triglicerídeo de ácido carboxílico de óleos vegetais, e esporos fúngicos de um fungo exercendo um efeito benéfico nas plantas, sendo que referido pelo menos um éster carboxílico contém a) uma porção de monoácido carboxílico e uma porção de monoálcool b) pelo menos uma porção de monoácido carboxílico e uma porção de poliálcool ou c) uma porção de poliácido carboxílico e pelo menos uma porção de monoálcool; sendo que referida porção de monoálcool é uma porção de C1-C24 monoálcool ramificada, linear, cíclica, acíclica ou parcialmente cíclica, saturada ou parcialmente insaturada; sendo que referida porção de monoácido carboxílico é uma porção de C2-C24 monoácido carboxílico ramificada, linear, cíclica, acíclica ou parcialmente cíclica, saturada ou parcialmente insaturada, opcionalmente carregando pelo menos uma funcionalidade de OH; sendo que referida porção de poliálcool é uma porção de C2-C20 poliácool ramificada, linear, cíclica, acíclica ou parcialmente cíclica, saturada ou parcialmente insaturada di-, tri-, tetra-, penta- ou hexavalente; e sendo que referida porção de poliácido carboxílico é uma porção de C2-C20 poliácido carboxílico ramificada, linear, cíclica, acíclica ou parcialmente cíclica, saturada ou parcialmente insaturada.
2. Preparação líquida, de acordo com a reivindicação 1, caracterizada pelo fato de que qualquer um de (a), (b) e/ou (c) é uma mistura de ésteres composta de mais de uma porção de monoálcool diferente, porção de poliálcool, porção de monoácido carboxílico ou porção de poliácido carboxílico.
3. Preparação líquida, de acordo com a reivindicação 1 ou 2, caracterizada pelo fato de que compreende uma mistura de ésteres carboxílicos de acordo com qualquer um de (a) a (c).
4. Preparação líquida, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 3, caracterizada pelo fato de que a referida porção de monoálcool é derivada de um C1-C20 monoálcool ramificado, linear, saturado ou parcialmente insaturado.
5. Preparação líquida, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 4, caracterizada pelo fato de que a referida pelo menos uma porção de monoálcool é derivada de um monoálcool selecionado do grupo que consiste em metanol, etanol, 1-propanol, 2- propanol, 1-butanol, 2-butanol, isobutanol, 1-pentanol, 1-hexanol, 1- heptanol, 2-etil-hexan-1-ol, álcool caprílico, álcool pelargônico, álcool isononílico, álcool cáprico, undecanol, álcool laurílico, tridecanol, isotridecanol, álcool miristílico, pentadecanol, álcool cetílico, álcool palmitoleílico, heptadecanol, álcool estearílico, álcool oleílico, nonadecanol, eicosanol, e misturas dos mesmos.
6. Preparação líquida, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 5, caracterizada pelo fato de que a referida pelo menos uma porção de monoálcool é derivada de um monoálcool selecionado do grupo que consiste em metanol, etanol, 1-propanol, 2- propanol, 1-butanol, 2-butanol, isobutanol, 1-pentanol, 1-hexanol, 1- heptanol, 2-etil-hexan-1-ol, álcool caprílico, álcool pelargônico, álcool isononílico, álcool cáprico, álcool laurílico, tridecanol, isotridecanol, álcool miristílico, álcool cetílico, álcool palmitoleílico, álcool estearílico, álcool oleílico e misturas dos mesmos.
7. Preparação líquida, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 6, caracterizada pelo fato de que a referida pelo menos uma porção de monoácido carboxílico é derivada de um C2- C20 ácido carboxílico ramificado, linear, saturado, ou parcialmente insaturado.
8. Preparação líquida, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 7, caracterizada pelo fato de que a referida pelo menos uma porção de monoácido carboxílico é derivada de um monoácido carboxílico selecionado do grupo que consiste em ácido acético, ácido propiônico, ácido butírico, ácido valérico, ácido caproico, ácido caprílico, ácido cáprico, ácido láurico, ácido mirístico, ácido palmítico, ácido esteárico, ácido isoesteárico, ácido oleico, ácido linoleico, ácido α-linolênico, ácido ricinólico e misturas dos mesmos.
9. Preparação líquida, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 8, caracterizada pelo fato de que a referida pelo menos uma porção de poliálcool é derivada de um poliálcool selecionado do grupo que consiste em glicol, 1,3-propandiol, 1-4- butandiol, 1,5-pentandiol, 1,6-hexandiol, ciclo-hexan-1,2-diol, isossorbeto, 1,2-propandiol, neopentilglicol, glicerol, trimetilolpropano, pentaeritritol e álcoois de açúcar.
10. Preparação líquida, de acordo com a reivindicação 9, caracterizada pelo fato de que o referido pelo menos um poliálcool é selecionado do grupo que consiste em 1,2-propandiol, neopentilglicol, glicerol, 1,3-propandiol, trimetilolpropano e sorbitano.
11. Preparação líquida, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 10, caracterizada pelo fato de que a referida pelo menos uma porção de poliácido carboxílico é derivada de um poliácido carboxílico selecionado do grupo que consiste em (a) um ácido dicarboxílico C2-C10 linear, saturado ou parcialmente insaturado (b) um ácido C5-C6 dicarboxílico cíclico, e
(c) ácido cítrico e seus derivados O-acetilados, tal como ácido cítrico O-acetílico.
12. Preparação líquida, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 11, caracterizada pelo fato de que a referida pelo menos uma porção de poliácido carboxílico é derivada de um ácido carboxílico selecionado do grupo que consiste em ácido 1,2-ciclo- hexanodicarboxílico, ácido oxálico, ácido malônico, ácido maleico, ácido fumárico, ácido sucínico, ácido 2-hidróxi sucínico, ácido glutárico, ácido adípico, ácido pimélico, ácido cítrico O-acetílico e ácido cítrico.
13. Preparação líquida, de acordo com a reivindicação 12, caracterizada pelo fato de que a referida pelo menos uma porção de poliácido carboxílico é derivada de um poliácido carboxílico selecionado do grupo que consiste em ácido 1,2-ciclo- hexanodicarboxílico, ácido glutárico, ácido adípico e ácido cítrico O- acetílico.
14. Preparação líquida, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 13, caracterizada pelo fato de que a referida pelo menos uma porção de monoácido carboxílico ou pelo menos uma porção de poliácido carboxílico carrega pelo menos uma funcionalidade de OH.
15. Preparação líquida, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 14, caracterizada pelo fato de que a referida pelo menos uma porção de poliálcool de referido pelo menos um éster carboxílico de acordo com (b) é parcialmente ou totalmente esterificada.
16. Preparação líquida, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 14, caracterizada pelo fato de que o referido pelo menos um éster carboxílico de acordo com (a) é composto de pelo menos uma porção de C2-C20 monoácido carboxílico ramificada,
linear, saturada, ou parcialmente insaturada e pelo menos uma porção de C1-C20 monoálcool ramificada, linear, saturada ou parcialmente insaturada.
17. Preparação líquida, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 14 e 16, caracterizada pelo fato de que o referido pelo menos um éster carboxílico de acordo com (a) compreende entre 13 e 28 átomos de carbono.
18. Preparação líquida, de acordo com a reivindicação 1, 16 ou 17, caracterizada pelo fato de que a referida porção de monoácido carboxílico é derivada de um monoácido carboxílico selecionado do grupo que consiste em ácido acético, ácido propiônico, ácido butírico, ácido valérico, ácido caproico, ácido caprílico, ácido cáprico, ácido láurico, ácido mirístico, ácido palmítico, ácido esteárico, ácido isoesteárico, ácido oleico, ácido linoleico, ácido α-linolênico, ácido ricinólico e misturas dos mesmos.
19. Preparação líquida, de acordo com a reivindicação 18, caracterizada pelo fato de que a referida porção de monoálcool é derivada de um monoálcool selecionado do grupo que consiste em metanol, etanol, 1-propanol, 2-propanol, 1-butanol, 2-butanol, isobutanol, 1-pentanol, 1-hexanol, 1-heptanol, 2-etil-hexan-1-ol, álcool caprílico, álcool pelargônico, álcool isononílico, álcool cáprico, álcool laurílico, tridecanol, isotridecanol, álcool miristílico, álcool cetílico, álcool palmitoleílico, álcool estearílico, álcool oleílico e misturas dos mesmos.
20. Preparação líquida, de acordo com a reivindicação 18 ou 19, caracterizada pelo fato de que a referida porção de monoácido carboxílico é derivada de um monoácido carboxílico selecionado do grupo que consiste em ácido acético, ácido propiônico, ácido butírico, ácido valérico, ácido caproico, ácido caprílico and ácido cáprico e referida porção de monoálcool é derivada de um monoálcool selecionado do grupo que consiste em álcool laurílico, tridecanol, isotridecanol, álcool miristílico, álcool cetílico, álcool palmitoleílico, álcool estearílico e álcool oleílico.
21. Preparação líquida, de acordo com a reivindicação 18 ou 19, caracterizada pelo fato de que a referida porção de monoácido carboxílico é derivada de um monoácido carboxílico selecionado do grupo que consiste em ácido láurico, ácido mirístico, ácido palmítico, ácido esteárico, ácido oleico, ácido linoleico, ácido α-linolênico, ácido ricinólico e a referida porção de monoálcool é derivada de um monoálcool selecionado do grupo que consiste em metanol, etanol, 1- propanol, 2-propanol, 1-butanol, 2-butanol, isobutanol, 1-pentanol, 1- hexanol, 1-heptanol, 2-etil-hexan-1-ol, álcool caprílico, álcool pelargônico, álcool isononílico e álcool cáprico.
22. Preparação líquida, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 21, caracterizada pelo fato de que referido éster carboxílico é selecionado do grupo que consiste em laurato de 2-etil- hexila, palmitato de 2-etil-hexila, oleato de 2-etil-hexila, metiléster de ácido ricinólico e pentil éster de ácido propiônico.
23. Preparação líquida, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 12, caracterizada pelo fato de que no referido pelo menos um éster carboxílico de acordo com (b), a referida porção de monoácido carboxílico é derivada de um monoácido carboxílico selecionado do grupo que consiste em ácido acético, ácido propiônico, ácido butírico, ácido valérico, ácido caproico, ácido caprílico, ácido cáprico, ácido láurico, ácido mirístico, ácido palmítico, ácido esteárico, ácido isoesteárico, ácido oleico, ácido linoleico, ácido α-linolênico e ácido ricinólico e referida porção de poliálcool é derivada de um poliálcool selecionado do grupo que consiste em 1,2-etandiol, 1,3- propandiol, 1-4-butandiol, 1,5-pentandiol, 1,6-hexandiol, ciclo-hexan- 1,2-diol, isossórbido, 1,2-propandiol, neopentilglicol, glicerol,
pentaeritritol, trimetilolpropano e álcoois de açúcar.
24. Preparação líquida, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 12 e 23, caracterizada pelo fato de que no referido pelo menos um éster carboxílico de acordo com (b), a referida porção de monoácido carboxílico é uma porção de C2-C6 monoácido carboxílico ramificada, linear, cíclica, acíclica ou parcialmente cíclica, saturada ou parcialmente insaturada, opcionalmente carregando pelo menos uma funcionalidade de OH, preferivelmente uma porção de C2 a C5 monoácido carboxílico.
25. Preparação líquida, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 12, 23 e 24, caracterizada pelo fato de que no referido pelo menos um éster carboxílico de acordo com (b), a referida porção de poliálcool é uma porção de poliálcool C2-C20 divalente, C3-C20- trivalente, C4-C20-tetravalente, C5-C20-pentavalente ou C6-C20- hexavalente cíclica ou parcialmente cíclica, saturada ou parcialmente insaturada; ou um poliálcool da seguinte Fórmula II na qual n é um inteiro entre 0 e 4, R1 e R2 são independentes um do outro, hidrogênio ou hidróxido, e R2 é C1-C9 alquila, se n=1 e R1=OH
26. Preparação líquida, de acordo com a reivindicação 25, caracterizada pelo fato de que a referida porção de poliálcool C2-C20- divalente, C3-C20-trivalente, C4-C20-tetravalente, C5-C20-
pentavalente ou C6-C20-hexavalente cíclica ou porção de poliálcool parcialmente cíclica, saturada ou parcialmente insaturada é derivada de um álcool de açúcar.
27. Preparação líquida, de acordo com a reivindicação 26, caracterizada pelo fato de que o referido álcool de açúcar é selecionado do grupo que consiste em etileno glicol, propileno glicol, glicerol, eritrol, treitol, arabitol, xilitol, ribitol, manitol, sorbitol, galactitol, fucitol, iditol, inositol, volemitol, isomalte, maltitol, lactitol, maltotriol, maltotetraitol, poliglicitol e sorbitano.
28. Preparação líquida, de acordo com qualquer uma das reivindicações 23 a 27, caracterizada pelo fato de que a referida porção de poliálcool é derivada de um poliálcool selecionado do grupo que consiste em 1,2-etandiol, 1,2-propandiol, neopentilglicol, 1,3- propandiol, trimetilolpropano e sorbitano.
29. Preparação líquida, de acordo com a reivindicação 23, caracterizada pelo fato de que o referido poliálcool é glicerol e referido monoácido carboxílico é selecionado do grupo que consiste em ácido acético, ácido propiônico, ácido butírico, ácido valérico, ácido caproico, ácido caprílico e/ou ácido cáprico ou misturas dos mesmos.
30. Preparação líquida, de acordo com a reivindicação 23, 25 ou 27, caracterizada pelo fato de que o referido éster carboxílico é composto de diacetilglicerol esterificado com ácido acético, ácido propiônico, ácido butírico, ácido valérico, ácido caproico, ácido caprílico, ácido cáprico, ácido láurico, ácido mirístico, ácido palmítico, ácido esteárico, ácido isoesteárico, ácido oleico, ácido linoleico, ácido α-linolênico e ácido ricinólico.
31. Preparação líquida, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 3 e 23 a 28, caracterizada pelo fato de que o referido éster carboxílico é selecionado do grupo que consiste em dicaprilato de propileno glicol, dicaprato de propileno glicol, dicocoato de neopentilglicol, triacetato de glicerol, tri-isostearato de trimetilolpropano, tricocoato de trimetilolpropano, tricaprilato de glicerol, tricaprato de glicerol, diacetato de monoglicerídeo de C12-C18 ácido carboxílico, tricaprilato de trimetilolpropano, tricaprato de trimetilolpropano, trioleato de trimetilolpropano e trioleato de sorbitano.
32. Preparação líquida, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 6, 11 a 14 e 19, caracterizada pelo fato de que em referido pelo menos um éster carboxílico de acordo com (c), referida porção de poliácido carboxílico é derivada de ácido cítrico de ácidos dicarboxílicos C2-10, ácidos dicarboxíliccos C5-C6 linear, saturado ou parcialmente insaturado, cíclico e seus derivados O-acetilados.
33. Preparação líquida, de acordo com a reivindicação 32, caracterizada pelo fato de que a referida porção de monoálcool é derivada de um monoálcool selecionado do grupo que consiste em metanol, etanol, 1-propanol, 2-propanol, 1-butanol, 2-butanol, isobutanol, pentan-1-ol, pentan-2-ol, pentan-3-ol, 2-metilbutan-1-ol, 2- metilbutan-2-ol, 3-metilbutan-1-ol, 3-metilbutan-2-ol, 2,2-dimetilpropan- 1-ol, 1-hexanol, 1-heptanol, 2-etil-hexan-1-ol, álcool caprílico, álcool pelargônico, álcool isononílico, álcool cáprico, álcool laurílico, tridecanol, isotridecanol, álcool miristílico, álcool cetílico, álcool palmitoleílico, álcool estearílico e álcool oleílico.
34. Preparação líquida, de acordo com a reivindicação 33, caracterizada pelo fato de que a referida porção de monoálcool é derivada de um monoálcool selecionado do grupo que consiste em metanol, etanol, 1-propanol, 2-propanol, 1-butanol, 2-butanol, isobutanol, pentan-1-ol, pentan-2-ol, pentan-3-ol, 2-metilbutan-1-ol, 2- metilbutan-2-ol, 3-metilbutan-1-ol, 3-metilbutan-2-ol e 2,2- dimetilpropan-1-ol.
35. Preparação líquida, de acordo com qualquer uma das reivindicações 32 a 34, caracterizada pelo fato de que a referida porção de poliácido carboxílico é derivada de um poliácido carboxílico selecionado do grupo que consiste em ácido 1,2-ciclo- hexanodicarboxílico, ácido glutárico, ácido adípico e ácido cítrico O- acetílico.
36. Preparação líquida, de acordo com qualquer uma das reivindicações 32 a 35, caracterizada pelo fato de que o referido éster carboxílico é selecionado do grupo que consiste em di-isononil éster de ácido 1,2-ciclo-hexano dicarboxílico, adipato de di-n-butila, adipato de di-isopropila e tributil éster de ácido cítrico O-acetílico.
37. Preparação líquida, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 36, caracterizada pelo fato de que os referidos esporos fúngicos são de uma espécie fúngica que é eficaz como agente de controle biológico na proteção da planta ou agente de promoção de saúde da planta.
38. Preparação líquida, de acordo com a reivindicação 37, caracterizada pelo fato de que a referida espécie fúngica é um fungo entomopatogênico.
39. Preparação líquida, de acordo com a reivindicação 37 ou 38, caracterizada pelo fato de que a referida espécie fúngica é um fungo nematicidamente ativo.
40. Preparação líquida, de acordo com qualquer uma das reivindicações 37 a 39, caracterizada pelo fato de que a referida espécie fúngica é selecionada do grupo que consiste em Isaria fumosorosea, Penicillium bilaii, Metarhizium anisopliae, Purpureocillium lilacinum, Coniothyrium minitans, Beauveria bassiana e Clonostachys rosea.
41. Preparação líquida, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 40, caracterizada pelo fato de que compreende ainda pelo menos uma substância selecionada do grupo que consiste em tensoativos, modificadores de reologia, agentes antiespumantes,
antioxidantes e corantes.
42. Composição líquida, caracterizada pelo fato de que compreende a preparação líquida, como definida em qualquer uma das reivindicações 1 a 41.
43. Método para controle de fungos fitopatogênicos, insetos e/ou nematódeos em ou sobre uma planta, para realçar o crescimento de uma planta ou para aumentar o rendimento da planta ou a saúde da raiz, caracterizada pelo fato de que compreende aplicar uma quantidade eficaz da preparação líquida, como definida em qualquer uma das reivindicações 1 a 41, ou da composição líquida, como definida na reivindicação 42, à referida planta ou um local onde plantas estão crescendo ou que se pretende cultivá-las.
44. Uso de uma preparação líquida, como definida em qualquer uma das reivindicações 1 a 41, ou da composição líquida, como definida na reivindicação 42, caracterizado pelo fato de que é como agente de proteção de plantas ou para promover o vigor das plantas e/ou saúde da planta.
45. Uso da preparação líquida, como definida em qualquer uma das reivindicações 1 a 41, caracterizado pelo fato de que é para preparação de uma composição líquida para controle de fungos fitopatogênicos, insetos e/ou nematoides dentro ou sobre uma planta, para melhorar o crescimento de uma planta ou para aumentar o rendimento vegetal ou a saúde das raízes.
46. Plantas, partes de plantas e/ou sementes resistentes a pragas, caracterizadas pelo fato de que compreendem plantas, partes de plantas e/ou sementes revestidas com uma preparação líquida, como definida em qualquer uma das reivindicações 1 a 41, ou com uma composição líquida, como definida na reivindicação 42.
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