BR112021000324A2 - Fluidos carreadores para formulações de esporo fúngico líquido - Google Patents

Abstract

"FLUIDOS CARREADORES PARA FORMULAÇÕES DE ESPORO FÚNGICO LÍQUIDO". A presente invenção refere-se a uma preparação líquida compreendendo pelo menos um líquido orgânico etoxilado e/ou propoxilado como definido e esporos fúngicos e um método para controle de fungos fitopatogênicos, insetos e/ou nematódeos em ou sobre uma planta, para realçar o crescimento de uma planta ou para aumentar o rendimento da planta ou a saúde da raiz compreendendo aplicar uma quantidade eficaz da preparação líquida ou da composição líquida de acordo com a invenção à referida planta ou a um locus onde plantas estão crescendo ou pretende-se cultivá-las.

Description

Relatório Descritivo da Patente de Invenção para "FLUIDOS CARREADORES PARA FORMULAÇÕES DE ESPORO FÚNGICO LÍQUIDO".

[0001] Os agentes de controle biológico (BCAs) tornam-se cada vez mais importantes na área de proteção de plantas, seja para combater várias pragas de fungos ou insetos ou para melhorar a saúde das plantas. Embora também estejam disponíveis viroses que podem ser usadas como agentes de controle biológico, principalmente BCAs baseados em bactérias e fungos são usados nesta área. A forma mais proeminente de agentes de controle biológico baseados em fungos são os esporos assexuados chamados conídios, bem como blastósporos, mas também outros propágulos fúngicos podem ser agentes promissores, tal como (micro)esclerócio, ascósporos, basidiósporos,clamidósporos ou fragmentos de hifas.

[0002] Ao contrário de muitos esporos baseados em bactérias, tal como esporos de bacilos, muitos esporos de fungos são menos robustos e provou ser difícil fornecer esporos de fungos em uma forma que atenda às necessidades de produtos comerciais, em particular estabilidade de armazenamento aceitável em certas temperaturas.

[0003] O fornecimento de fórmulas adequadas para agentes de controle biológico, todavia, ainda representa um desafio devido aos muitos fatores que contribuem para a eficácia da formulação final, tal como a natureza do agente de controle biológico, estabilidade térmica e vida de prateleira bem como efeitos da formulação na aplicação.

[0004] As formulações adequadas são misturas homogêneas e estáveis de ingredientes ativos e inertes que tornam o produto final mais simples, seguro e eficaz para aplicar a um alvo.

[0005] As formulações comumente usadas para agentes de controle biológico incluem WP, uma formulação sólida micronizada na forma de pó e normalmente aplicada como partículas suspensas após a dispersão em água, e WG, uma formulação que consiste em grânulos a serem aplicados após desintegração e dispersão em água. Os grânulos de um produto WG têm partículas distintas na faixa de 0,2 a 4 mm. Os grânulos dispersíveis em água podem ser formados por técnicas de aglomeração, secagem por pulverização ou extrusão. As formulações de WP são produzidas com bastante facilidade, mas são empoeiradas. Além disso, eles não são fáceis de dosar no campo. As formulações WG são mais fáceis de manusear para o usuário e, em geral, têm menor teor de poeira do que as formulações WP.

[0006] Um exemplo para uma formulação líquida é SC, uma suspensão à base de água de ingrediente ativo sólido em um fluido normalmente destinado à diluição com água antes do uso. Outro tipo de fórmulas líquidas é EC, uma solução de ingrediente ativo combinado com tensoativos como, por exemplo, agentes emulsificantes em um solvente orgânico insolúvel em água que formará uma emulsão quando adicionado à água.

[0007] Um número enorme de formulantes tem sido utilizado em fórmulas experimentais e comerciais de agentes de controle biológico (para uma descrição e lista mais detalhadas, veja Schisler et al., Phytopathology, Vol 94, No. 11, 2004). Geralmente, os formulantes podem ser agrupados como carreadores (enchimentos, extensores) ou formulantes que melhoram as propriedades químicas, físicas, fisiológicas ou nutricionais da biomassa formulada.

[0008] Estabilidade, particularmente estabilidade de armazenamento de BCAs com base em ativos fúngicos durante um longo período de tempo em temperaturas iguais ou superiores à temperatura ambiente é um desafio particular devido à natureza delicada dos conídios fúngicos. Como muitos organismos vivos, os conídios fúngicos em seu estado dormente são sensíveis às influências ambientais como, por exemplo, água, ar (oxigênio),

temperatura, irradiação e etc. Alguns fatores podem desencadear a germinação, enquanto outros podem ter efeitos prejudiciais para a viabilidade do esporo. A fim de excluir a água, óleos como óleos minerais brancos (parafínicos) ou óleos vegetais são normalmente usados para preparar formulações de esporos de fungos líquidas. Muitos desses óleos fornecem alguma vida de prateleira para organismos fúngicos, entretanto, preparações à base de óleos requerem emulsificantes que muitas vezes têm efeitos prejudiciais na viabilidade dos esporos por um longo tempo e/ou em temperaturas elevadas.

[0009] Um exemplo para uma formulação de um agente de controle biológico é descrito em Torres et al., 2003, J Appl Microbiol, 94(2), pp: 330-9). No entanto, é claro que uma formulação que preserva a viabilidade do agente de controle biológico, por exemplo, esporos de fungos, de mais de 70% por 4 meses a 4 graus °C, não é adequado para o uso diário no campo. Em vez disso, é desejável que as formulações de agentes de controle biológico tenham uma vida de prateleira suficiente, mesmo em condições onde o armazenamento a frio não é possível.

[0010] Kim et al., 2010 (J.S. Kim, Y.H. Je, J. Y. Roh, Journal of Industrial Microbiology & Biotechnology 2010, vol 37 (edição 4), pp, 419ff) divulgam que conídios do fungo Isaria fumosorosea apresentam estabilidade melhorada durante um tratamento térmico de 2 e 8 horas a 50°C quando dispersos em óleos (soja, milho, caroço de algodão, óleo de parafina, oleato de metila) em comparação com a dispersão em água.

[0011] Mbarga et al., 2014 (Biological Control 2014, vol. 77, pp.15ff) constataram que Trichoderma asperellum formulado em óleo de soja com diferentes emulsificantes mostra melhora na vida de prateleira em comparação a uma dispersão de conídios na água.

[0012] Outros líquidos como, por exemplo, trisiloxanos etoxilados (por exemplo, Break-Thru S240) são alternativas adequadas e fornecem preparações estáveis, por exemplo, com P. Lilacinum (BioAct®, ver WO2016/050726), entretanto, fabricação de tais trisiloxanos e, portanto, dos próprios produtos são caros.

[0013] As suspensões à base de óleo contendo esporos de fungos são conhecidas na técnica. Exemplos típicos de óleos usados para tais fins são, por exemplo, óleos vegetais, óleos de parafina ou hidrocarbonetos aromáticos. WO 2015/069708 A1 descreve fórmulas líquidas de microbianos à base de óleo de parafina juntamente com até 35% de emulsificantes que causam menos resíduos em superfícies de plástico. US 2007/0141032 A1 descreve fórmulas de micróbios com base em óleos de parafina contendo um agente de secagem e até 10% de emulsificantes.

[0014] US 20140143909 A1 descreve o uso geral de tensoativos como "componentes opcionais" ou coformulantes em composições líquidas ou sólidas contendo esporos de fungos.

[0015] Além disso, os tensoativos são usados para preparações à base de água. Por exemplo, US 2006/0247150 e US 2011/0033436 A1 descrevem formulações à base de água que também compreendem microbianos e vários tensoativos não iônicos, aniônicos, catiônicos e anfotéricos.

[0016] Com as desvantagens descritas acima, ainda há a necessidade de receitas de formulação simples e fáceis de manusear para agentes de controle biológico com base em ativos fúngicos. Entre outras propriedades, tais formulações devem idealmente fornecer uma boa estabilidade física no concentrado de formulação, exibem uma vida de prateleira adequada ao longo do tempo, em particular em temperaturas elevadas (20°C ou mais), e proporcionam boa miscibilidade ou suspensibilidade da água.

[0017] Como discutido acima, há apenas muito pouca precedência de que fluidos orgânicos diferentes de óleos ou organossilicones podem ser usados para fornecer preparações agroquímicas estáveis de BCAs à base de esporos de fungos. Os tensoativos etoxilados e/ou propoxilados são conhecidos por terem propriedades emulsificantes e, portanto, esses compostos são frequentemente usados como emulsionantes empregando quantidades típicas. Surpreendentemente, foi descoberto que um grande número de diferentes fluidos etoxilados e/ou propoxilados-etoxilados forneceram viabilidade de esporos de boa a excelente após armazenamento em temperaturas elevadas (8 semanas a 30 °C e além) quando usado como carreador principal.

[0018] Consequentemente, em um primeiro aspecto, a presente invenção se refere a uma preparação líquida compreendendo pelo menos um líquido orgânico etoxilado e/ou propoxilado que é selecionado do grupo que consiste de a) triglicerídeos de ácidos graxos etoxilados com 3 a 10 unidades de óxido de etileno, em que os triglicerídeos de ácidos graxos são selecionados do grupo que consiste de óleo de mamona e óleos vegetais; b) um copolímero em bloco da fórmula geral H-O-[CH2-CH2-O-]a1-[CH2-CH(CH3)-O]b-[CH2-CH2-O- ]a2-H onde a1, a2 e b têm, independentemente um do outro, um valor médio entre 1 e 10; ou onde a1 e a2 têm, independentemente um do outro, um valor médio entre 1 e 20 e b tem um valor médio entre 15 e 35; e c) um polímero da fórmula geral X-O-[CH2-CH(CH3)-O]m-[CH2-CH2-O-]n-Y em que X e Y são independentemente selecionados a partir de hidrogênio, alquila ramificada ou linear com 1 a 24 átomos de carbono e carbonila ramificada ou linear com 2 a 24 átomos de carbono, saturada ou parcialmente insaturada, opcionalmente carregando funcionalidade de hidroxila; em que m é um número médio entre 0 e 10; em que n é um número médio entre 0 e 40, preferivelmente entre 0 e 30, mais preferivelmente entre 0 e 20; mais preferivelmente entre 0 e 15 ou mesmo entre 0 e 10; em que m + n não é zero ou uma mistura de qualquer um de a) a c); e esporos de fungos.

[0019] Os esporos de fungos no âmbito da presente invenção compreendem esporos assexuados chamados conídios bem como blastósporos, mas também outros propágulos fúngicos tais como ascósporos, basidiósporos, clamidósporos. O (micro)esclerócio, embora não sendo esporos em sentido estrito, também pode ser adicionado à preparação líquida de acordo com a invenção.

[0020] Misturas de qualquer um de a) e b) podem estar presentes em relações que variam de 1:100 a 100:1, preferivelmente em relações que variam de 1: 50 a 50:1, mais preferivelmente em misturas que variam de 1:25 a 25:1, tal como 1:20, 1:15, 1:10, 1:5, 1:2, 1:1, 2:1, 5:1, 10:1, 15:1 ou 20:1. Ainda outra modalidade preferida compreende misturas de qualquer um de a) e b) em relações que variam de 1:20 a 1:1, ou em relações que variam de 1:1 a 20:1.

[0021] Misturas de qualquer um de a) e c) podem estar presentes em relações que variam de 1:100 a 100:1, preferivelmente em relações que variam de 1: 50 a 50:1, mais preferivelmente em misturas que variam de 1:25 a 25:1, tal como 1:20, 1:15, 1:10, 1:5, 1:2, 1:1, 2:1, 5:1, 10:1, 15:1 ou 20:1. Ainda outra modalidade preferida compreende misturas de qualquer um de a) e c) em relações que variam de 1:20 a 1:1, ou em relações que variam de 1:1 a 20:1.

[0022] Misturas de qualquer um de b) a c) podem estar presentes em relações que variam de 1:100 a 100:1, preferivelmente em relações que variam de 1: 50 a 50:1, mais preferivelmente em misturas que variam de 1:25 a 25:1, tal como 1:20, 1:15, 1:10, 1:5, 1:2, 1:1, 2:1, 5:1, 10:1, 15:1 ou 20:1. Ainda outra modalidade preferida compreende misturas de qualquer um de b) e c) em relações que variam de 1:20 a 1:1, ou em relações que variam de 1:1 a 20:1.

[0023] As misturas de qualquer um de a) e b) e c) podem estar presentes em faixas de qualquer 1:1:100 a 100:100:1, ou de 1:100:1 a 100:1:100, ou de 100:1:1 a 1:100:100, respectivamente, preferivelmente em relações que variam de 1:1:50 a 50:50:1, ou de 1:50:1 a 50:1:50, ou de 50:1:1 a 1:50:50, mais preferivelmente em misturas que variam de 1:1:25 a 25: 25:1, ou de 1: 25:1 a 25:1: 25, ou de 25:1:1 a 1: 25: 25, tal como 1:20:1, 1:15:1, 1:10:1, 1:5:1, 1:1:1, 20:1:1, 15:1:1, 10:1:1, 5:1:1, 1:1:20, 1:1:15, 1:1:10, 1:1:5, 5:20:1, 5:15:1, 5:10:1, 1:20:5, 1:15:5, 1:10:5, 20:1:5, 15:1:5, 10:1:5, 20:5:1, 15:5:1, 10:5:1, 1:5:20, 1:5:15, 1:5:10, 5:1:20, 5:1:15, ou 5:1:10. Ainda outra modalidade preferida compreende misturas de qualquer um de a) e b) e c) em relações que variam de 1:20:1 a 1:1:1, ou em relações que variam de 20:1:1 a 1:1:1, ou em relações que variam de 1:1:20 a 1:1:1.

[0024] É preferível que os esporos de fungos sejam conídios.

[0025] Em uma modalidade preferida, os referidos triglicerídeos de ácidos graxos etoxilados de acordo com a) são derivados de óleos vegetais selecionados do grupo que consiste em óleo de girassol, óleo de colza, óleo de soja, óleo de milho, óleo de coco e óleo de palma. Para uma revisão da composição dos referidos óleos vegetais, consulte http://www.dgfett.de/material/fszus.php.

[0026] Em outra modalidade preferida, os referidos triglicerídeos de ácidos graxos etoxilados de acordo com a) são derivados de óleo de rícino. Exemplos selecionados de óleos de rícino etoxalizados são,

por exemplo, Lucramul CO08 (óleo de rícino etoxilato 8EO) e Etocas 10 (óleo de rícino etoxilato 10EO) que são particularmente preferidos.

[0027] Quanto ao líquido orgânico etoxilado e propoxilado de acordo com b), este é preferivelmente selecionado do grupo constituído pelos Copolímeros de Bloco da fórmula H-O-[CH2-CH2-O- ]a1-[CH2-CH(CH3)-O]b-[CH2-CH2-O-]a2-H onde a1 e a2 têm, independentemente um do outro, valor médio entre 1 e 20 e b tem valor médio entre 15 e 35. Mais preferivelmente, o referido líquido orgânico etoxilado e propoxilado é selecionado do grupo de Copolímeros de Bloco onde a1 e a2 têm, independentemente um do outro, um valor médio de entre 1 e 16 e onde b tem um valor médio entre 20 e 30. O referido líquido orgânico etoxilado e propoxilado de acordo com b) preferivelmente tem um peso molar médio entre cerca de 1000 e cerca de 3000 g/mol, mais preferivelmente entre cerca de 1500 g/mol e cerca de 3000 g/mol, mais preferivelmente entre cerca de 2000g/mol e cerca de 3000 g/mol.

[0028] Por exemplo, para Copolímeros de Bloco com um valor médio de a1 e a2 entre 3 e 16 e um valor médio de b entre 25 e 35, o peso molecular médio pode variar entre cerca de 2.000 e cerca de

3.000 g/mol. Para Copolímeros de Bloco com um valor médio de a1 e a2 entre 2 e 12 e um valor médio de b entre 15 e 25, o peso molecular médio pode variar entre cerca de 1400 e cerca de 2200 g/mol. Para Copolímeros de Bloco com um valor médio de a1 e a2 entre 1 e 12 e um valor médio de b entre 10 e 20, o peso molecular médio pode variar entre cerca de 1000 e cerca de 2000 g/mol.

[0029] Exemplos selecionados para líquido orgânico etoxilado e propoxilado de acordo com b) são representados por Synperonic PE/L62, Synperonic PE/ L64 e Synperonic PE/L44 que são particularmente preferidos.

[0030] Em outra modalidade, o líquido orgânico etoxilado e propoxilado de acordo com b) é preferivelmente selecionado a partir do grupo que consiste de Copolímeros de Bloco da fórmula H-O-[CH2- CH2-O-]a1-[CH2-CH(CH3)-O]b-[CH2-CH2-O-]a2-H onde a1, a2 e b têm, independentemente um do outro, um valor médio entre 1 e 8. Mais preferivelmente, o referido Copolímero de Bloco tem uma quantidade média de 2 a 8 unidades de óxido de propileno e 2 a 12 unidades de óxido de etileno, em que a1 e a2 podem, independentemente um do outro, ter um valor não superior a 12 no total. Ainda mais preferivelmente, o referido Copolímero de Bloco tem uma quantidade média de 2 a 6 unidades de óxido de propileno e 2 a 8 unidades de óxido de etileno, onde a1 e a2 podem, independentemente um do outro, ter um valor não superior a 8 no total.

[0031] Nesta modalidade, o referido líquido orgânico etoxilado e propoxilado de acordo com b) preferivelmente tem um peso molar médio entre cerca de 150 e cerca de 1500 g/mol, mais preferivelmente entre cerca de 150 g/mol e cerca de 1200 g/mol, mais preferivelmente entre cerca de 200g/mol e cerca de 1000 g/mol e ainda mais preferivelmente entre cerca de 200 e cerca de 700 g/mol.

[0032] Por exemplo, para um valor médio de a1, a2 e b independentemente um do outro entre 1 e 10, o peso molecular médio pode variar entre cerca de 150 e cerca de 1500 g/mol. Para um valor médio de a1, a2 e b independentemente um do outro entre 1 e 8, o peso molecular médio pode variar entre cerca de 150 e cerca de 1200 g/mol. Para Copolímeros de Bloco com uma quantidade média de 2 a 8 unidades de óxido de propileno e 2 a 12 unidades de óxido de etileno, onde a1 e a2 podem, independentemente um do outro, ter um valor não superior a 12 no total, o peso molecular médio pode variar entre cerca de 200 g/mol e cerca de 1000 g/mol. Para Copolímeros de Bloco com uma quantidade média de 2 a 6 unidades de óxido de propileno e 2 a 8 unidades de óxido de etileno, onde a1 e a2 podem, independentemente um do outro, ter um valor não superior a 8 no total, o peso molecular médio pode variar entre cerca de 200 e cerca de 700 g/mol.

[0033] Nesta modalidade, é mais preferido que no referido líquido orgânico etoxilado e propoxilado de acordo com b), a1 e a2 tenham independentemente um do outro um valor entre 1 a 4 e b tenha um valor entre 2 a 6.

[0034] Em uma modalidade preferida, no polímero de c), X é alquila ramificada ou linear com 1 a 18 átomos de carbono ou carbonila ramificada ou linear com 2 a 18 átomos de carbono, saturado ou parcialmente insaturado, e Y é hidrogênio, ou alquila ramificada ou linear com 1 a 6 átomos de carbono ou carbonila ramificada ou linear com 2 a 6 átomos de carbono, saturada ou parcialmente insaturada. Por motivos de clareza, o especialista está ciente de que grupos alquila ramificados ou carbonila só podem existir com pelo menos 3 átomos de carbono.

[0035] Em uma modalidade preferencial alternativa, no polímero de c), X é hidrogênio, ou alquila ramificada ou linear com 1 a 6 átomos de carbono (para fins de clareza em todo o presente pedido, as porções ramificadas têm que ter pelo menos 3 átomos de carbono), ou carbonila ramificada ou linear com 2 a 6 átomos de carbono, saturada ou parcialmente insaturada, opcionalmente carregando funcionalidade de hidroxila e Y é alquila ramificada ou linear com 1 a 18 átomos de carbono ou carbonila ramificada ou linear com 2 a 18 átomos de carbono, saturada ou parcialmente insaturada, opcionalmente carregando funcionalidade hidroxila. Em uma modalidade preferida, no polímero de c) m + n está entre 1 e 30, mais preferivelmente entre 1 e 20, mais preferivelmente entre 1 e 15. Em uma modalidade preferida alternativa, m está em uma faixa entre 1 e 9 e n está em uma faixa de

0 e 6, ou m está em uma faixa de 0 e 5 e n está em uma faixa de 3 e

10. Em ainda outra modalidade preferida, m está em uma faixa de 1 a 5 onde n é igual a zero, ou n é em uma faixa de 4 e 10, onde m é igual a zero.

[0036] No que precede, carbonila refere-se à alquilcarbonila, alquenilcarbonila, alquinilcarbonila conforme definido abaixo.

[0037] Como mostrado nos exemplos do presente pedido, verificou-se que fluidos com peso molecular bastante baixo ainda tinham o efeito estabilizador de acordo com a invenção, enquanto outros fluidos estruturalmente semelhantes com um peso molecular bastante baixo não apresentam este efeito. Considerando que o requerente não deseja ser limitado por qualquer teoria científica, acredita-se que certos motivos estruturais de fluidos, como a combinação de cadeias alquila bastante pequenas junto com um certo número de unidades de óxido de etileno, não são adequados para estabilizar esporos de fungos, mas resultam no oposto. Surpreendentemente, esse comportamento não é observado quando as mesmas pequenas cadeias de alquila são combinadas com um certo número de unidades de óxido de propileno. Consequentemente, em outra modalidade preferida, no polímero de c), se m for igual a zero o peso molecular (MW) do referido pelo menos um líquido orgânico etoxilado é maior ou igual a 190 unidades de massa, mais preferivelmente maior ou igual a 205 unidades de massa, ainda mais preferivelmente maior ou igual a 220 unidades de massa, como pelo menos 235 unidades de massa.

[0038] Embora a pessoa versada na técnica seja capaz de definir quais líquidos se enquadram no escopo da presente invenção, é preferido que o referido líquido orgânico etoxilado e/ou propoxilado de acordo com c) seja selecionado a partir do grupo que consiste em polietilenoglicóis, tais como Pluriol E300 (polietilenoglicol-300); álcoois etoxilados, tais como Atplus 245 (álcool etoxilado), Berol 050 (álcool C12-C16 etoxilado linear, 3EO), Berol 260 (C9-C11 álcool etoxilado, 4EO), Ecosurf EH3 (Trietilenglicol-mono-octiléter C1803), Lucramulato- álcool C18ho , 3EO), Lucramul L05 (álcoois etoxilados C12-C18, 5EO), Lutensol AO3 (álcoois etoxilados lineares e ramificados C13-15, 3EO), Lutensol AO7 (Álcoois etoxilados lineares e ramificados em C13-15, 7EO), éter monobutiléter trietilenoglicol; diéteres de óxido de mono- /polietileno, tais como Tetraglyme (diéter de tetraetilenglicol); éster-éter de óxido de mono-/polietileno, como Arlatone TV (Sorbitol- Heptaoleato, 40EO), n-Butildiglicolacetato, Tween 20 (monolaurato de sorbitol etoxilado, 20EO), Tween-80 (mono-oleato de sorbitol etoxilado,20EO), Tween-85 (mono-oleato de sorbitol etoxilado, 20EO); ácidos carboxílicos etoxilados, tais como Alcamuls A (Mono-oleato de Polietilenoglicol), Radiasurf 7402 (Mono-oleato de Polietilenoglicol- 200), Radiasurf 7403 (Mono-oleato de Polietilenoglicol-400), Radiasurf 7423 (Monolaurato de Polietilenoglicol-400); di-ésteres de óxido de mono-/polietileno, tais como Radiasurf 7442 (dioleato de polietilenoglicol-400); polipropilenoglicóis, como Dipropilenoglicol; álcoois propoxilados, tal como Dowanol DPM (Dipropileno Glicol monometil éter); diéteres de óxido de mono/polipropileno, tais como dimetil éter dipropileno glicol ; éter-éster de óxido mono/polipropileno, tal como acetato de metil éter de dipropileno glicol; ácidos carboxílicos propoxilados; di-ésteres de óxido de mono/polipropileno, tais como diacetato de propilenglicol; álcool propoxilato-etoxilatos, tais como Atlas G-5002L (álcool propoxilato-etoxilato), Lucramul HOT 5902 (álcool propoxilato-etoxilato); ácido carboxílico propoxilato-etoxilato; éter de propoxilato-etoxilato de ácido carboxílico, tal como Leofat OC0503M (ácido graxo, propoxilado-etoxilado, ácido graxo de Metila de extremidade tamponada.

Metila de extremidade tamponada, propoxilada-etoxilada).

[0039] Em outra modalidade preferida e adicionando ao acima, álcoois etoxilados butilcarbitol, butilcellosolve, hexilcellosolve, metoxitriglicol e propilcellosolve não estão dentro do escopo dos líquidos de acordo com c). No decurso da presente invenção, foi surpreendentemente descoberto que certos líquidos, conforme definidos neste documento, estão adequados para aumentar a estabilidade de armazenamento de esporos de fungos. Em outras palavras, esporos de fungos presentes na preparação líquida de acordo com a invenção exibem uma taxa de germinação melhorada após um determinado tempo em comparação com esporos de fungos presentes em uma formulação diferente ou na forma pura.

[0040] Se não for indicado de outra forma, o termo "%", conforme usado ao longo do presente pedido refere-se a % em peso (peso).

[0041] Em conexão com a presente invenção, uma "taxa de germinação melhorada" refere-se a uma taxa de germinação de estruturas ou órgãos fúngicos dormentes, preferivelmente esporos de fungos, que é pelo menos 10% maior do que aquele de estruturas ou órgãos fúngicos dormentes, como esporos não tratados de acordo com o procedimento da presente invenção, mas tratados igualmente de outra forma ("esporos de controle"), preferivelmente pelo menos 20%, mais preferivelmente pelo menos 30% ou pelo menos 40% e mais preferivelmente pelo menos 50% superior até pelo menos 2 semanas após a produção dos referidos esporos, ou seja, depois de terminar o período de resfriamento. Em outras palavras, "taxa de germinação melhorada" significa uma taxa de germinação de pelo menos 110% daquela dos esporos de controle, preferivelmente pelo menos 120%, mais preferivelmente pelo menos 130% ou pelo menos 140% e mais preferivelmente pelo menos 150% ou superior até pelo menos 2 semanas após a produção dos referidos esporos. Preferivelmente, a referida taxa de germinação melhorada ainda é visível ou mesmo aumentada até pelo menos 3 meses após a produção, mais preferivelmente pelo menos 4 meses e mais preferivelmente pelo menos 6 meses após a produção, como pelo menos 8 meses, pelo menos 10 meses ou mesmo 12 meses ou mais. Consequentemente, é preferido que a taxa de germinação de esporos tratados de acordo com a invenção seja pelo menos 200% dos esporos de controle 3 meses após a produção dos referidos esporos. Em outra modalidade preferida, a taxa de germinação é de pelo menos 300% ou pelo menos 400%, mais preferivelmente pelo menos 500% dos esporos de controle 6 meses após a produção dos referidos esporos. A taxa de germinação, neste contexto, denota a capacidade dos esporos de germinar após um determinado tempo. % da taxa de germinação consequentemente significa a porcentagem de esporos que é capaz de germinar após um determinado tempo. Os métodos de medição da taxa de germinação são bem conhecidos na técnica. Por exemplo, os esporos são espalhados na superfície de um meio de ágar e a proporção de esporos em desenvolvimento de tubos germinativos é determinada microscopicamente após a incubação em temperaturas de crescimento apropriadas (Oliveira et al., 2015. Um protocolo para determinação da viabilidade conidial dos entomopatógenos fúngicos Beauveria bassiana e Metarhizium anisopliae de produtos comerciais. Journal of Microbiological Methods 119; pp: 44-52, e referências nele).

[0042] Em uma modalidade particular, a invenção fornece uma preparação líquida que compreende 0,1 a 40% de esporos de fungos, preferencialmente 2,5 a 30%, mais preferido 5 a 25%, como 10 a 20%, até 99,9% de um líquido orgânico etoxilado e/ou propoxilado como definido acima, de preferência 70 a 97,5%, mais preferencialmente 75 a 95%; tal como 80 a 90%,

0 a 10% de tensoativos (por exemplo, dispersantes emulsificantes); preferido 0 a 8%, mais preferido 0,1 a 5%; 0 a 10% de modificadores de reologia, por exemplo, sílicas pirogênicas, atapulgitas, preferivelmente 0 a 7%, mais preferivelmente 0,5 a 5%; 0 a 5% de cada antiespumante, antioxidantes, corantes preferidos 0 a 3%, o mais preferido 0,1 a 0,5% de cada.

[0043] Desde que não definido de outra forma, o termo "alquila" refere-se a radicais hidrocarbonetos saturados de cadeia linear ou ramificada, tal como (C1-C18)-, (C1-C6)-, ou (C1-C4)- alquila. Exemplos: metila, etila, propila, 1-metil-etil, butila e etc.

[0044] Exemplos (mas não limitados a): (C1 C6)alquila, tal como metila, etila, propila, 1-metiletila, butila, 1-metilpropila, 2-metilpropila, 1,1-dimetiletila, pentil, 1-metilbutila, 2-metilbutila, 3-metilbutila, 1,1- dimetilpropila, 1,2-dimetilpropila, 2,2-dimetilpropila, 1-etilpropila, hexila, 1-metilpentila, 2-metilpentila, 3-metilpentila, 4-metilpentila, 1,1-di- metilbutila, 1,2-dimetilbutila, 1,3-dimetilbutila, 2,2-dimetilbutila, 2,3-di- metilbutila, 3,3-dimetilbutila, 1-etilbutila, 2-etilbutila, 1,1,2- trimetilpropila, 1,2,2-trimetilpropila, 1-etil-1-metilpropila, e 1-etil-2- metilpropila.

[0045] Contanto que não definido de outra forma, o termo "alquenila" refere-se a radicais hidrocarbonetos insaturados de cadeia linear ou ramificada compreendendo pelo menos uma ligação dupla, tal como (C2-C18)-, (C2-C6)- ou (C2-C4)-alquenila. Exemplos: etenila, 1-propenila, 3-butenila etc.

[0046] Exemplos (mas não limitados a): (C2 C6)alquenila, tal como etenila, 1-propenila, 2-propenila, 1-metiletenila, 1-butenila, 2-butenila, 3-butenila, 1-metil-1-propenila, 2-metil-1-propenila, 1-metil-2-propenila, 2-metil-2-propenila, 1-pentenila, 2-pentenila, 3-pentenila, 4-pentenila, 1-metil-1-butenila, 2-metil-1-butenila, 3-metil-1-butenila, 1-metil-2-

butenila, 2-metil-2-butenila, 3-metil-2-butenila, 1-metil-3-butenila, 2- metil-3-butenila, 3-metil-3-butenila, 1,1-dimetil-2-propenila, 1,2-dimetil- 1-propenila, 1,2-dimetil-2-propenila, 1-etil-1-propenila, 1-etil-2- propenila, 1-hexenila, 2-hexenila, 3-hexenila, 4-hexenila, 5-hexenila, 1- metil-1-pentenila, 2-metil-1-pentenila, 3-metil-1-pentenila, 4-metil-1- pentenila, 1-metil-2-pentenila, 2-metil-2-pentenila, 3-metil-2-pentenila, 4-metil-2-pentenila, 1-metil-3-pentenila, 2-metil-3-pentenila, 3-metil-3- pentenila, 4-metil-3-pentenila, 1-metil-4-pentenila, 2-metil-4-pentenila, 3-metil-4-pentenila, 4-metil-4-pentenila, 1,1-dimetil-2-butenila, 1,1-di- metil-3-butenila, 1,2-dimetil-1-butenila, 1,2-dimetil-2-butenila, 1,2-di- metil-3-butenila, 1,3-dimetil-1-butenila, 1,3-dimetil-2-butenila, 1,3-di- metil-3-butenila, 2,2-dimetil-3-butenila, 2,3-dimetil-1-butenila, 2,3-di- metil-2-butenila, 2,3-dimetil-3-butenila, 3,3-dimetil-1-butenila, 3,3-di- metil-2-butenila, 1-etil-1-butenila, 1-etil-2-butenila, 1-etil-3-butenila, 2- etil-1-butenila, 2-etil-2-butenila, 2-etil-3-butenila, 1,1,2-trimetil-2- propenila, 1-etil-1-metil-2-propenila, 1-etil-2-metil-1-propenila, e 1-etil- 2-metil-2-propenila.

[0047] Contanto que não definido de outra forma, o termo "alcóxi" (alquil-O-) refere-se a radicais alquila ligados à estrutura por meio de um átomo de oxigênio (-O-), tal como (C1-C18 -, ( C1-C6)- ou (C1-C4)- alcóxi. Exemplos: metóxi, etóxi, propóxi, 1-metiletóxi, etc.

[0048] Exemplos (mas não limitados a): (C1-C6)-alcóxi, tal como metóxi, etóxi, propóxi, 1-metiletóxi, butóxi, 1-metilpropóxi, 2-metil- propóxi, 1,1-dimetiletóxi, pentóxi, 1-metilbutóxi, 2-metilbutóxi, 3-metil- butóxi, 1,1-dimetilpropóxi, 1,2-dimetilpropóxi, 2,2-dimetilpropóxi, 1-etil- propóxi, hexóxi, 1-metilpentóxi, 2-metilpentóxi, 3-metilpentóxi, 4-metil- pentóxi, 1,1-dimetilbutóxi, 1,2-dimetilbutóxi, 1,3-dimetilbutóxi, 2,2-di- metilbutóxi, 2,3-dimetilbutóxi, 3,3-dimetilbutóxi, 1-etilbutóxi, 2-etilbutóxi, 1,1,2-trimetilpropóxi, 1,2,2-trimetilpropóxi, 1-etil-1-metilpropóxi, e 1-etil- 2-metilpropóxi.

[0049] Da mesma forma, desde que não definido de outra forma, os termos "alquenóxi" e "alquinóxi" referem-se a radicais alquenila ou, respectivamente, alquinila ligados à estrutura por meio de -O- tal como (C2-C18)-, ( C2-C6)- ou (C2-C4)-alquenóxi ou, respectivamente, (C3- C10)-, (C3-C6)- ou (C3-C4)-alquinóxi.

[0050] Desde que não definido de outra forma, o termo "alquilcarbonila" (alquil-C(=O)-) refere-se a radicais alquila ligados à estrutura por meio de -C(=O)- tal como (C1-C18)-, (C1-C6)- ou (C1- C4)-alquilcarbonila. O número de átomos de C, portanto, refere-se ao radical alquila dentro do grupo alquilcarbonila.

[0051] Da mesma forma, desde que não definido de outra forma, os termos "alquenilcarbonila" e "alquinilcarbonila" referem-se a alquenila ou, respectivamente, radicais alquinila ligados a estrutura por meio de -C(=O)- tal como (C2-C18 )-, (C2-C6)- ou (C2-C4) - alquenilcarbonila ou, respectivamente, (C2-C10)-, (C2-C6)- ou (C2- C4)-alquinilcarbonila. O número de átomos de C, portanto, refere-se ao alquenila ou, respectivamente, radical alquinila dentro do grupo alquenilcarbonila ou, respectivamente, alquinilcarbonila.

[0052] Contanto que não definido de outra forma, o termo "alcoxicarbonila" (alquil-O-C(=O)-) refere-se a radicais alquila ligados a estrutura por meio de -OC(=O)- tal como (C1-C18)-, (C1-C6)- ou (C1- C4)-alcoxicarbonila. O número de átomos de C, portanto, refere-se ao radical alquila dentro do grupo alcoxicarbonila.

[0053] Da mesma forma, desde que não definido de outra forma, os termos "alquenoxicarbonila" e "alquinoxicarbonila" referem-se a alquenila ou, respectivamente, radicais alquinila ligados a estrutura por meio de –OC(=O)- tal como (C2-C10 )-, (C2-C6)- ou (C2-C4)- alquenoxicarbonila ou, respectivamente, (C3-C10)-, (C3-C6)- ou (C3- C4)-alquinoxicarbonila. O número de átomos de C, portanto, refere-se ao radical alquenila ou, respectivamente, alquinila dentro do grupo alquenoxicarbonila ou, respectivamente, alquinoxicarbonila.

[0054] Contanto que não definido de outra forma, o termo "alquilcarbonilóxi" (alquil-C(= O)-O-) se refere a radicais alquila ligados a estrutura por meio de -C(= O)-O- tal como (C1-C10)-, (C1-C6)- ou (C1-C4)-alquil-carbonilóxi. O número de átomos de C, portanto, refere- se ao radical alquila dentro do grupo alquilcarbonilóxi.

[0055] Da mesma forma, desde que não definido de outra forma, os termos "alquenilcarbonilóxi" e "alquinilcarbonilóxi" referem-se a alquenila ou, respectivamente, radicais alquinila ligados a estrutura por meio de -C(=O)-O- tal como (C2-C10)-, (C2-C6)- ou (C2-C4)- alquenilcarbonilóxi ou, respectivamente, (C2-C10)-, (C2-C6)- ou (C2- C4)-alquinilcarbonilóxi. O número de átomos de C, portanto, se refere ao radical alquenila ou, respectivamente, alquinila dentro do grupo alquenilcarbonilóxi ou, respectivamente, alquinilcarbonilóxi.

[0056] Em uma modalidade preferida, a composição de acordo com a presente invenção é essencialmente livre de água. BCAs são organismos vivos em uma forma dormente. Consequentemente, as formulações compreendendo uma baixa concentração de água ou mesmo sendo essencialmente isentas de água são um tipo de formulação preferencial para BCAs. Por outro lado, certos BCAs também podem ser formulados em maiores teores de água. Se a água estiver presente, tal água virá principalmente de água livre residual no pó de esporo seco ou traços de água em outros formulantes. Consequentemente, concentrações de água entre 0 e 12% em peso, preferivelmente 0 e 8% em peso são possíveis devido a esses fatos, faixa essa que então se enquadraria na definição de "essencialmente isento de água". Ou seja, o termo "essencialmente isento de água" refere-se a uma concentração de água na composição de 12% ou menos, preferivelmente 8% em peso ou menos. Mais preferivelmente, a concentração de água varia entre 0 e 6%, mais preferivelmente entre

0 e 4% como entre 2 e 4% em peso. Consequentemente, as concentrações de água exemplares incluem 2% em peso, 3% em peso, 4% em peso, 5% em peso e 6% em peso.

[0057] Embora se acredite que na preparação líquida de acordo com a invenção o referido líquido orgânico etóxilado e/ou propoxilado possa estar presente em menor quantidade, como pelo menos 40% em peso, é preferível que esteja presente em uma quantidade de pelo menos 50% em peso. Geralmente, o referido líquido orgânico etóxilado e/ou propoxilado pode estar presente em uma concentração de até 99,9% em peso, preferivelmente em uma faixa de 70% em peso e 97,5% em peso, mais preferivelmente entre 75% em peso e 95% em peso, mais preferivelmente entre 80% em peso e 90% em peso.

[0058] A preparação líquida de acordo com a invenção é preferivelmente miscível em água. O termo "miscível em água" indica que os referidos líquidos estão resultando em uma mistura homogênea se combinados na proporção de 1:200 de fluido e água, preferivelmente na proporção de 1:100, mais preferivelmente na proporção de 1:50.

[0059] Em uma modalidade preferida, a composição é essencialmente isenta de óleo. Em conexão com a presente invenção, um óleo deve ser definido como qualquer líquido que seja essencialmente não miscível em água ou auto-emulsionável em água, por exemplo, óleos parafínicos, triglicerídeos de ácidos graxos, monoésteres de ácidos graxos, certos óleos de silicone, solventes aromáticos ou outros solventes orgânicos imiscíveis em água. O termo "essencialmente livre de petróleo" refere-se a um teor de petróleo de 5% em peso ou menos, preferivelmente 4 % em peso ou menos, ainda mais preferivelmente 3 % em peso ou menos e mais preferivelmente 2 % em peso ou menos tal como 1 % em peso, 0,1 % em peso, 0,05 % em peso ou ainda 0,01 % em peso. Não se pode excluir que a composição da presente invenção contenha traços de óleo devido ao processo de produção dos seus ingredientes. A fórmula da presente invenção não contém óleo, exceto para tais traços.

[0060] Qualquer espécie de fungo pode ser aplicada para a presente invenção. É, no entanto, preferido que os referidos esporos de fungos sejam de uma espécie de fungo que tem um efeito benéfico nas plantas, como uma espécie de fungo que é eficaz como agente de controle biológico na proteção de plantas ou atua como um agente promotor da saúde das plantas, como auxiliar ou promover o crescimento da planta e/ou a saúde da planta. Mais preferivelmente, o referido fungo é um fungo filamentoso.

[0061] Os fungos filamentosos, tal como a pessoa versada bem sabe, se distinguem das leveduras por causa de sua tendência a crescer em uma forma filamentosa multicelular na maioria das condições, em contraste com o crescimento principalmente unicelular de células de levedura ovais ou elípticas.

[0062] O referido pelo menos um fungo filamentoso pode ser qualquer fungo que exerça um efeito positivo sobre as plantas, como um efeito protetor ou de promover o crescimento da planta. Consequentemente, o referido fungo pode ser um fungo entomopatogênico, um fungo nematófago, um fungo que promove o crescimento de plantas, um fungo ativo contra patógenos de plantas, como bactérias ou patógenos de plantas fúngicos, ou um fungo com ação herbicida.

[0063] NRRL é a abreviatura de Agricultural Research Service Culture Collection, uma autoridade depositária internacional para fins de depósito de cepas de microrganismos sob o tratado de Budapeste sobre o reconhecimento internacional do depósito de microrganismos para fins de procedimento de patente, tendo o endereço Centro Nacional de Pesquisa de Utilização Agrícola, Serviço de Pesquisa

Agrícola, Departamento de Agricultura dos EUA, 1815 North University Street, Peroira, Illinois 61604 EUA.

[0064] ATCC é a abreviatura de American Type Culture Collection, uma autoridade depositária internacional para fins de depósito de cepas de microrganismos sob o tratado de Budapeste sobre o reconhecimento internacional do depósito de microrganismos para fins de procedimento de patente, tendo o endereço ATCC Patent Depository, 10801 University Blvd., Manassas, VA 10110 EUA.

[0065] Apenas alguns fungos com atividade herbicida seletiva são conhecidos, tal como F2.1 Phoma macrostroma, em particular cepa 94-44B; F2.2 Sclerotinia minor, em particular cepa IMI 344141 (por exemplo, Sarritor pela Agrium Advanced Technologies); F2.3 Colletotrichum gloeosporioides, em particular cepa ATCC 20358 (por exemplo, Collego (também conhecida como LockDown) pela Agricultural Research Initiatives); F2.4 Stagonospora atriplicis; ou F2.5 Fusarium oxysporum, diferentes cepas das quais são ativas contra diferentes espécies de plantas, por exemplo, a erva Striga hermonthica (Fusarium oxysproum formae specialis strigae).

[0066] Espécies exemplares de fungos que apoiam, promovem ou estimulam o crescimento/saúde das plantas são E2.1 Talaromyces flavus, em particular cepa V117b; E2.2 Trichoderma atroviride, em particular cepa CNCM I-1237 (por exemplo, Esquive® WP da Agrauxine, FR), cepa SC1 descrita no Pedido Internacional No. PCT/IT2008/000196), cepa no. V08/002387, cepa no. NMI No. V08/002388, cepa no. NMI No. V08/002389, cepa no. NMI No. V08/002390, cepa LC52 (por exemplo, Sentinel da Agrimm Technologies Limited), cepa kd (por exemplo, T-Gro da Andermatt Biocontrol), e/ou cepa LUI32 (por exemplo, Tenet da Agrimm Technologies Limited); E2.3 Trichoderma harzianum, em particular cepa ITEM 908 ou T-22 (por exemplo, Trianum-P da Koppert); E2.4

Myrothecium verrucaria, em particular cepa AARC-0255 (por exemplo, DiTera™ da Valent Biosciences); E2.5 Penicillium bilaii, em particular cepa ATCC 22348 (por exemplo, JumpStart® da Acceleron BioAg), e/ou cepa ATCC20851; E2.6 Pythium oligandrum, em particular cepas DV74 ou M1 (ATCC 38472; por exemplo, Polyversum da Bioprepraty, CZ); E2.7 Rhizopogon amylopogon (por exemplo, compreendido em Myco-Sol da Helena Chemical Company); E2.8 Rhizopogon fulvigleba (por exemplo, compreendido em Myco-Sol da Helena Chemical Company); E2.9 Trichoderma harzianum, em particular cepa TSTh20, cepa KD, produto Eco-T da Plant Health Products, ZA ou cepa 1295- 22; E2.10 Trichoderma koningii; E2.11 Glomus aggregatum; E2.12 Glomus clarum; E2.13 Glomus deserticola; E2.14 Glomus etunicatum; E2.15 Glomus intraradices; E2.16 Glomus monosporum; E2.17 Glomus mosseae; E2.18 Laccaria bicolor; E2.19 Rhizopogon luteolus; E2.20 Rhizopogon tinctorus; E2.21 Rhizopogon villosulus; E2.22 Scleroderma cepa; E2.23 Suillus granulatus; E2.24 Suillus punctatapies; E2.25 Trichoderma virens, em particular cepa GL-21; e E2.26 Verticillium albo-atrum (formalmente V. dahliae), em particular cepa WCS850 (CBS 276.92; por exemplo, Dutch Trig da Tree Care Innovations); E2.27 Trichoderma viride, por exemplo, cepa B35 (Pietr et al., 1993, Zesz. Nauk. A R w Szczecinie 161: 125-137) e E2.28 Purpureocillium lilacinum (anteriormente conhecida como Paecilomyces lilacinus) cepa 251 (AGAL 89/030550; por exemplo, BioAct da Bayer CropScience Biologics GmbH).

[0067] Em uma modalidade mais preferida, as cepas de fungos tendo um efeito benéfico na saúde e/ou crescimento das plantas são selecionadas de Talaromyces flavus, cepa VII7b; Trichoderma harzianum cepa KD ou cepa em produto Eco-T da Plant Health Products, SZ; Myrothecium verrucaria, em particular cepa AARC-0255; Penicillium bilaii, cepa ATCC 22348; e Pythium oligandrum, cepa DV74 ou M1 (ATCC 38472); Trichoderma viride cepa B35; Trichoderma atroviride cepa CNCM I-1237, e Purpureocillium lilacinum (anteriormente conhecida como Paecilomyces lilacinus) cepa 251 (AGAL 89/030550).

[0068] Em uma modalidade ainda mais preferida, as cepas de fungos tendo um efeito benéfico na saúde e/ou crescimento das plantas são selecionados de Penicillium bilaii cepa ATCC 22348,Trichoderma viride, por exemplo, cepa B35, Trichoderma atroviride cepa CNCM I-1237 e Purpureocillium lilacinum (anteriormente conhecida como Paecilomyces lilacinus) cepa 251 (AGAL 89/030550).

[0069] Fungos bactericidamente ativos são, por exemplo: A2.2 Aureobasidium pullulans, em particular blastósporos de cepa DSM14940; A2.3 Aureobasidium pullulans, em particular blastósporos de cepa DSM 14941ou misturas de blastósporos de cepas DSM14940 and DSM14941; A2.9 Scleroderma citrinum.

[0070] Fungos ativos contra patógenos fúngicos são, por exemplo, B2.1 Coniothyrium minitans, em particular cepa CON/M/91-8 (No. de Acesso DSM-9660; por exemplo, Contans® da Bayer CropScience Biologics GmbH); B2.2 Metschnikowia fructicola, em particular cepa NRRL Y-30752; B2.3 Microsphaeropsis ochrace, em particular cepa P130A (depósito ATCC 74412); B2.4 Muscodor albus, em particular cepa QST 20799 (No. de Acesso NRRL 30547); ; B2.5 Trichoderma harzianum rifai, em particular cepa KRL-AG2 (também conhecida como cepa T-22, /ATCC 208479, por exemplo, PLANTSHIELD T-22G, Rootshield®, e TurfShield da BioWorks, US) e cepa T39 (por exemplo, Trichodex® da Makhteshim, US); B2.6 Arthrobotrys dactyloides; B2.7 Arthrobotrys oligospora; B2.8 Arthrobotrys superba; B2.9 Aspergillus flavus, em particular cepa NRRL 21882 (por exemplo, Afla-Guard® da Syngenta) ou cepa AF36 (por exemplo, AF36 da Arizona Cotton

Research e Protection Council, US); B2.10 Gliocladium roseum (também conhecida como Clonostachys rosea f. rosea), em particular cepa 321U da Adjuvants Plus, cepa ACM941 como descrita em Xue (Eficácia de Clonostachys rosea cepa ACM941 e tratamentos de sementes com fungicida para controlar o complexo de podridão radicular da ervilha, Can Jour Plant Sci 83(3): 519-524), cepa IK726 (Jensen DF, et al.

Desenvolvimento de um agente de biocontrole para o controle de doença de planta com especial ênfase sobre o antagonista fúngico comercial próximo Cloostachys rosea cepa "IK726"; Australas Plant Pathol. 2007;36:95–101), cepa 88-710 (WO2007/107000), cepa CR7 (WO2015/035504) ou cepas CRrO, CRM e CRr2 descrição em WO2017109802; B2.11 Phlebiopsis (ou Phlebia ou Peniophora) gigantea, em particular cepa VRA 1835 (ATCC 90304), cepa VRA 1984 (DSM16201), cepa VRA 1985 (DSM16202), cepa VRA 1986 (DSM16203), cepa FOC PG B20/5 (IMI390096), cepa FOC PG SP log6 (IMI390097), cepa FOC PG SP log5 (IMI390098), cepa FOC PG BU3 (IMI390099), cepa FOC PG BU4 (IMI390100), cepa FOC PG 410.3 (IMI390101), cepa FOC PG 97/1062/116/1.1 (IMI390102), cepa FOC PG B22/SP1287/3.1 (IMI390103), cepa FOC PG SH1 (IMI390104) e/ou cepa FOC PG B22/SP1190/3.2 (IMI390105) (Os produtos Phlebiopsis são, por exemplo, Rotstop® da Verdera e FIN, PG-Agromaster®, PG-Fungler®, PG-IBL®, PG-Poszwald® ande Rotex® da e-nema, DE); B2.12 Pythium oligandrum, em particular cepa DV74 ou M1 (ATCC 38472; por exemplo, Polyversum da Bioprepraty, CZ); B2.13 Scleroderma citrinum; B2.14 Talaromyces flavus, em particular cepa V117b; B2.15 Trichoderma asperellum, em particular cepa ICC 012 da Isagro ou cepa SKT-1 (por exemplo, ECO- HOPE® da Kumiai Chemical Industry), cepa T34 (por exemplo, ASPERELLO® da Biobest Group NV e T34 BIOCONTROL® pela Biocontrol Technologies S.L., ES); B2.16 Trichoderma atroviride, em particular cepa CNCM I-1237 (por exemplo, Esquive® WP da Agrauxine, FR), cepa SC1 descrito no Pedido Internacional No.

PCT/IT2008/000196), cepa 77B (T77 da Andermatt Biocontrol), cepa no.

V08/002387, cepa NMI no.

V08/002388, cepa NMI no.

V08/002389, cepa NMI no.

V08/002390, cepa LC52 (por exemplo, Sentinel da Agrimm Technologies Limited), cepa LUI32 (por exemplo, Tenet pela Agrimm Technologies Limited), cepa ATCC 20476 (IMI 206040), cepa T11 (IMI352941/ CECT20498), cepa SKT-1 (FERM P- 16510), cepa SKT-2 (FERM P-16511), cepa SKT-3 (FERM P-17021); B2.17 Trichoderma harmatum; ; B2.18 Trichoderma harzianum, em particular, cepa KD, cepa T-22 (por exemplo, Trianum-P da Koppert), cepa TH35 (por exemplo, Root-Pro pela Mycontrol), cepa DB 103 (por exemplo, T-Gro 7456 pela Dagutat Biolab); B2.19 Trichoderma virens (também conhecida como Gliocladium virens), em particular cepa GL- 21 (por exemplo, SoilGard pela Certis, US); B2.20 Trichoderma viride, em particular cepa TV1(por exemplo, Trianum-P pela Koppert), cepa B35 (Pietr et al., 1993, Zesz.

Nauk.

A R w Szczecinie 161: 125-137); B2.21 Ampelomyces quisqualis, em particular cepa AQ 10 (por exemplo, AQ 10® pela CBC Europe, Itália); B2.22 Fungo de Arkansas 18, ARF; B2.23 Aureobasidium pullulans, em particular blastósporos de cepa DSM14940, blastósporos de cepa DSM 14941 ou misturas de blastósporos de cepas DSM14940 e DSM 14941 (por exemplo, Botector® pela bio-ferm, CH); B2.24 Chaetomium cupreum (por exemplo, BIOKUPRUM TM pela AgriLife); B2.25 Chaetomium globosum (por exemplo, Rivadiom pela Rivale); B2.26 Cladosporium cladosporioides, em particular cepa H39 (pela Stichting Dienst Landbouwkundig Onderzoek); B2.27 Dactylaria candida; B2.28 Dilophosphora alopecuri (por exemplo, Twist Fungus); B2.29 Fusarium oxysporum, em particular cepa Fo47 (por exemplo, Fusaclean pela Natural Plant Protection); B2.30 Gliocladium catenulatum (Sinônimo:

Clonostachys rosea f. catenulate), em particular cepa J1446 (por exemplo, Prestop ® pela Lallemand); B2.31 Lecanicillium lecanii (formalmente conhecida como Verticillium lecanii), em particular conídios de cepa KV01 (por exemplo, Vertalec® pela Koppert/Arysta); B2.32 Penicillium vermiculatum; B2.33 Trichoderma gamsii (formalmente T. viride), em particular cepa ICC080 (IMI CC 392151 CABI, por exemplo, BioDerma pela AGROBIOSOL DE MEXICO, S.A. DE C.V.); B2.34 Trichoderma polysporum, em particular cepa IMI 206039 (por exemplo, Binab TF WP pela BINAB Bio-Innovation AB, Sweden); B2.35 Trichoderma stromaticum (por exemplo, Tricovab pela Ceplac, Brazil); B2.36 Tsukamurella paurometabola, em particular cepa C-924 (por exemplo, HeberNem®); B2.37 Ulocladium oudemansii, em particular cepa HRU3 (por exemplo, Botry-Zen® pela Botry-Zen Ltd, NZ); B2.38 Verticillium albo-atrum (formalmente V. dahliae), em particular cepa WCS850 (CBS 276.92; por exemplo, Dutch Trig pela Tree Care Innovations); B2.39 Muscodor roseus, em particular cepa A3-5 (No. de Acesso NRRL 30548); B2.40 Verticillium chlamydosporium; B2.41 mixtures de Trichoderma asperellum cepa ICC 012 e Trichoderma gamsii cepa ICC 080 (produto conhecido como, por exemplo, BIO-TAM™ da Bayer CropScience LP, US), B2.42 Simplicillium lanosoniveum e B2.43 Trichoderma fertile (por exemplo, produto TrichoPlus da BASF).

[0071] Em uma modalidade preferida, o agente de controle biológico com atividade fungicida é selecionado a partir de Coniothyrium minitans, em particular cepa CON/M/91-8 (No. de Acesso DSM-9660) Aspergillus flavus, cepa NRRL 21882 (disponível como Afla-Guard® da Syngenta) e cepa AF36 (disponível como AF36 da Arizona Cotton Research e Protection Council, US); Gliocladium roseum cepa 321U, cepa ACM941, cepa IK726, cepa 88-710 (WO2007/107000), cepa CR7 (WO2015/035504); Gliocladium catenulatum cepa J1446; Phlebiopsis (ou Phlebia ou Peniophora) gigantea, em particular as cepas VRA 1835 (ATCC 90304), VRA 1984 (DSM16201), VRA 1985 (DSM16202), VRA 1986 (DSM16203), FOC PG B20/5 (IMI390096), FOC PG SP log6 (IMI390097), FOC PG SP log5 (IMI390098), FOC PG BU3 (IMI390099), FOC PG BU4 (IMI390100), FOC PG 410.3 (IMI390101), FOC PG 97/1062/116/1.1 (IMI390102), FOC PG B22/SP1287/3.1 (IMI390103), FOC PG SH1 (IMI390104), FOC PG B22/SP1190/3.2 (IMI390105) (disponível como Rotstop® da Verdera e FIN, PG-Agromaster®, PG-Fungler®, PG- IBL®, PG-Poszwald®, e Rotex® da e-nema, DE); Pythium oligandrum, cepa DV74 ou M1 (ATCC 38472) (disponível como Polyversum da Bioprepraty, CZ); Talaromyces flavus, cepa VII7b; Ampelomyces quisqualis, em particular cepa AQ 10 (disponível como AQ 10® pela CBC Europe, Itália); Gliocladium catenulatum (Sinônima: Clonostachys rosea f. catenulate) cepa J1446, Cladosporium cladosporioides, por exemplo, cepa H39 (pela Stichting Dienst Landbouwkundig Onderzoek), Trichoderma virens (também conhecida como Gliocladium virens), em particular cepa GL-21 (por exemplo, SoilGard pela Certis, US), Trichoderma atroviride cepa CNCM I-1237, cepa 77B, cepa LU132 ou cepa SC1, tendo No. de Acesso CBS 122089, Trichoderma harzianum cepa T-22 (por exemplo, Trianum-P da Andermatt Biocontrol ou Koppert), Trichoderma asperellum cepa SKT- 1, tendo No. de Acesso FERM P-16510 ou cepa T34, Trichoderma viride cepa B35 e Trichoderma asperelloides JM41R (No. de Acesso NRRL B-50759).

[0072] Em uma modalidade mais preferida, a espécie de fungo com atividade fungicida é selecionada a partir de Coniothyrium minitans, em particular cepa CON/M/91-8 (No. de Acesso DSM-9660) (disponível como Contans® da Prophyta, DE); Gliocladium roseum cepa 321U, cepa ACM941 ou cepa IK726; Gliocladium catenulatum cepa J1446; Trichoderma virens (também conhecida como Gliocladium virens) cepa GL-21. As referidas espécies fúngicas também podem preferivelmente ser Coniothyrium minitans cepa CON/M/91-8 (No. de Acesso DSM-9660) ou Gliocladium catenulatum cepa J1446 ou Trichoderma atroviride cepa CNCM I-1237 ou Trichoderma viride cepa B35.

[0073] Dentro dos fungos fungicidamente ativos, o gênero Trichoderma, em particular as espécies Trichoderma viride e Trichoderma atroviride, são especialmente preferidas. Essas incluem Trichoderma atroviride cepa CNCM I-1237; Trichoderma atroviride cepa SC1, tendo No. de Acesso CBS 122089, WO 2009/116106 e Patente Norte Americana No. 8.431.120 (da Bi-PA); Trichoderma atroviride cepa 77B; Trichoderma atroviride cepa LU132; Trichoderma viride cepa B35. Particularmente preferidos são Trichoderma atroviride cepa CNCM I-1237 e Trichoderma viride cepa B35.

[0074] A referida espécie de fungo pode ser um fungo entomopatogênico.

[0075] Fungos ativos contra insetos (fungos entomopatogênicos) incluem C2.1 Muscodor albus, em particular cepa QST 20799 (No. de Acesso NRRL 30547); C2.2 Muscodor roseus em particular cepa A3-5 (No. de Acesso NRRL 30548); C2.3 Beauveria bassiana, em particular cepa ATCC 74040 (por exemplo, Naturalis® da Intrachem Bio Italia); cepa GHA (No. de Acesso ATCC74250; por exemplo, BotaniGuard Es e Mycotrol-O da Laverlam International Corporation); cepa ATP02 (No. de Acesso DSM 24665); cepa PPRI 5339 (por exemplo, BroadBand™ da BASF); cepa PPRI 7315, cepa R444 (por exemplo, Bb-Protec da Andermatt Biocontrol), cepas IL197, IL12, IL236, IL10, IL131, IL116 (todas referenciadas em Jaronski, 2007. Use of Entomopathogenic Fungi in Biological Pest Management, 2007: ISBN: 978-81-308-0192-6), cepa Bv025 (veja, por exemplo, Garcia et al.

2006. Manejo Integrado de Plagas y Agroecología (Costa Rica) No. 77); cepa BaGPK; cepa ICPE 279, cepa CG 716 (por exemplo, BoveMax® da Novozymes); C2.4 Hirsutella citriformis;C2.5 Hirsutella thompsonii (por exemplo, Mycohit e ABTEC da Agro Bio-tech Research Centre, IN); C2.6 Lecanicillium lecanii (formalmente conhecida como Verticillium lecanii), em particular conídios de cepa KV01 (por exemplo, Mycotal® e Vertalec® da Koppert/Arysta), cepa DAOM198499 ou cepa DAOM216596; C2.9 Lecanicillium muscarium (formalmente Verticillium lecanii), em particular cepa VE 6/ CABI(=IMI) 268317/ CBS102071/ ARSEF5128 (por exemplo, Mycotal da Koppert); C2.10 Metarhizium anisopliae var acridum, por exemplo, ARSEF324 da GreenGuard pela Becker Underwood, US ou isolado IMI 330189 (ARSEF7486; por exemplo, Green Muscle pela Biological Control Products); C2.11 Metarhizium brunneum, por exemplo, cepa Cb 15 (por exemplo, ATTRACAP® da BIOCARE); C2.12 Metarhizium anisopliae, por exemplo, cepa ESALQ 1037 (por exemplo, da Metarril® SP Organic), cepa E-9 (por exemplo, da Metarril® SP Organic), cepa M206077, cepa C4-B (NRRL 30905), cepa ESC1, cepa 15013-1 (NRRL 67073), cepa 3213-1 (NRRL 67074), cepa C20091, cepa C20092, cepa F52 (DSM3884/ ATCC 90448; por exemplo, BIO 1020 pela Bayer CropScience e também, por exemplo, Met52 pela Novozymes) ou cepa ICIPE 78; C2.15 Metarhizium robertsii 23013-3 (NRRL 67075); C2.13 Nomuraea rileyi; C2.14 Paecilomyces fumosoroseus (nova: Isaria fumosorosea), em particular cepas Apopka 97 (disponível como PreFeRal da Certis, USA), Fe9901 (disponível como NoFly da Natural industries, USA), ARSEF 3581, ARSEF 3302, ARSEF 2679 (ARS Coleção de culturas fúngicas entomopatogênicas, Ithaca, USA), IfB01 (Centro Chinês para Coleta de Cultura Tipo CCTCC M2012400), ESALQ1296, ESALQ1364, ESALQ1409 (ESALQ: Universidade de São Paulo (Piracicaba, SP, Brazil)), CG1228

(EMBRAPA Recursos Genéticos e Biotecnologia (Brasília, DF, Brazil)), KCH J2 (Dymarska et al., 2017; PLoS one 12(10)): e0184885), HIB-19, HIB-23, HIB-29, HIB-30 (Gandarilla-Pacheco et al., 2018; Rev Argent Microbiol 50: 81-89), CHE-CNRCB 304, EH-511/3 (Flores-Villegas et al., 2016; Parasites & Vectors 2016 9:176 doi: 10.1186/s13071-016- 1453-1), CHE-CNRCB 303, CHE-CNRCB 305, CHE-CNRCB 307 (Gallou et al., 2016; biologia fúngica 120 (2016) 414-423), EH-506/3, EH-503/3, EH-520/3, PFCAM, MBP, PSMB1 (Centro Nacional de Controle Biológico, México; Castellanos-Moguel et al., 2013; Revista Mexicana De Micologia 38: 23-33, 2013), RCEF3304 (Meng et al., 2015; Genet Mol Biol. 2015 Jul-Sep; 38(3): 381-389), PF01-N10 (CCTCC No. M207088), CCM 8367 (Coleção Tcheca de Micro- organismos, Brno), SFP-198 (Kim et al., 2010; Wiley Online: DOI

10.1002/ps.2020), K3 (Yanagawa et al., 2015; J Chem Ecol. 2015; 41(12): 118-1126), CLO 55 (Ansari Ali et al., 2011; PLoS One. 2011; 6(1): e16108. DOI: 10.1371/journal.pone.0016108), IfTS01, IfTS02, IfTS07 (Dong et al. 2016 / PLoS ONE 11(5): e0156087. doi:10.1371/journal.pone.0156087), P1 (Centro de Pesquisa Sun Agro Biotech, Índia), If-02, If-2.3, If-03 (Farooq and Freed, 2016; DOI:

10.1016/j.bjm.2016.06.002), Ifr AsC (Meyer et al., 2008; J. Invertebr. Pathol. 99:96–102. 10.1016/j.jip.2008.03.007), PC-013 (DSMZ 26931), P43A, PCC (Carrillo-Pérez et al., 2012; DOI 10.1007/s11274-012- 1184-1), Pf04, Pf59, Pf109 (KimJun et al., 2013; Mycobiology 2013 Dec; 41(4): 221-224), FG340 (Han et al., 2014; DOI:

10.5941/MYCO.2014.42.4.385), Pfr1, Pfr8, Pfr9, Pfr10, Pfr11, Pfr12 (Angel-Sahagún et al., 2005; Journal of Insect Science), Ifr531 (Daniel e Wyss, 2009; DOI 10.1111/j.1439-0418.2009.01410.x), IF-1106 (Laboratório de Ecologia e Biocontrole de Insetos, Shanxi Agricultural University), I9602, I7284 (Hussain et al. 2016, DOI:10.3390/ijms17091518), I03011 (Patente Norte Americana

4618578), CNRCB1 (Centro Nacional de Referencia de Controle Biológico (CNRCB), Colima, México), SCAU-IFCF01 (Nian et al., 2015; DOI: 10.1002/ps.3977), PF01-N4 (Centro de Pesquisa em Engenharia de Controle Biológico, SCAU, Guangzhou, P. R. China) Pfr-612 (Instituto de Biotecnologia (IB-FCB-UANL), México), Pf-Tim, Pf-Tiz, Pf- Hal, Pf-Tic (Chan-Cupul et al. 2013, DOI: 10.5897/AJMR12.493); C2.15 Aschersonia aleyrodis; C2.16 Beauveria brongniartii (por exemplo, Beaupro da Andermatt Biocontrol AG); C2.17 Conidiobolus obscurus; C2.18 Entomophthora virulenta (por exemplo, Vektor da Ecomic); C2.19 Lagenidium giganteum; C2.20 Metarhizium flavoviride; C2.21 Mucor haemelis (por exemplo, BioAvard da Indore Biotech Inputs & Research); C2.22 Pandora delphacis; C2.23 Sporothrix insectorum (por exemplo, Sporothrix Es da Biocerto, BR); C2.24 Zoophtora radicans.

[0076] Em uma modalidade preferencial, as cepas de fungos com efeito inseticida são selecionadas de C2.3 Beauveria bassiana cepa ATCC 74040; cepa GHA (No. de Acesso ATCC74250); cepa ATP02 (No. de Acesso DSM 24665); cepa PPRI 5339; cepa PPRI 7315, cepa R444, cepas IL197, IL12, IL236, IL10, IL131, IL116; cepa BaGPK; cepa ICPE 279, cepa CG 716; C2.6 Lecanicillium lecanii (formalmente conhecida como Verticillium lecanii), em particular conídios de cepa KV01, cepa DAOM198499 ou cepa DAOM216596; C2.9 Lecanicillium muscarium (formalmente Verticillium lecanii) cepa VE 6 / CABI(=IMI) 268317/ CBS102071/ ARSEF5128; C2.10 Metarhizium anisopliae var acridum cepa ARSEF324 ou isolado IMI 330189 (ARSEF7486); C2.11 Metarhizium brunneum cepa Cb 15; C2.12 Metarhizium anisopliae, por exemplo, cepa ESALQ 1037, cepa E-9, cepa M206077, cepa C4-B (NRRL 30905), cepa ESC1, cepa 15013-1 (NRRL 67073), cepa 3213- 1 (NRRL 67074), cepa C20091, cepa C20092, cepa F52 (DSM3884/ ATCC 90448) ou cepa ICIPE 78; C2.14 Paecilomyces fumosoroseus

(nova: Isaria fumosorosea) cepa Apopka 97, Fe9901, ARSEF 3581, ARSEF 3302, ARSEF 2679, IfB01 (Centro Chinês para Coleta de Cultura Tipo CCTCC M2012400), ESALQ1296, ESALQ1364, ESALQ1409, CG1228, KCH J2, HIB-19, HIB-23, HIB-29, HIB-30, CHE- CNRCB 304, EH-511/3, CHE-CNRCB 303, CHE-CNRCB 305, CHE- CNRCB 307, EH-506/3, EH-503/3, EH-520/3, PFCAM, MBP, PSMB1, RCEF3304, PF01-N10 (CCTCC No. M207088), CCM 8367, SFP-198, K3, CLO 55, IfTS01, IfTS02, IfTS07, P1, If-02, If-2.3, If-03, Ifr AsC, PC- 013 (DSMZ 26931), P43A, PCC, Pf04, Pf59, Pf109, FG340, Pfr1, Pfr8, Pfr9, Pfr10, Pfr11, Pfr12, Ifr531, IF-1106, I9602, I7284, I03011 (Patente Norte Americana 4618578), CNRCB1, SCAU-IFCF01, PF01-N4, Pfr- 612, Pf-Tim, Pf-Tiz, Pf-Hal e Pf-Tic.; e C2.16 Beauveria brongniartii (por exemplo, Beaupro da Andermatt Biocontrol AG).

[0077] Em uma modalidade mais preferida, cepas de fungos com efeito inseticida são selecionados de C2.3 Beauveria bassiana cepa ATCC 74040; cepa GHA (No. de Acesso ATCC74250); cepa ATP02 (No. de Acesso DSM 24665); cepa PPRI 5339; cepa PPRI 7315 e/ou cepa R444; C2.6 Lecanicillium lecanii (formalmente conhecida como Verticillium lecanii), conídios de cepa KV01, cepa DAOM198499 ou cepa DAOM216596; C2.9 Lecanicillium muscarium (formalmente Verticillium lecanii), em particular cepa VE 6 / CABI(=IMI) 268317/ CBS102071/ ARSEF5128; C2.10 Metarhizium anisopliae var acridum cepa ARSEF324 ou isolado IMI 330189 (ARSEF7486); C2.11 Metarhizium brunneum cepa Cb 15; C2.12 Metarhizium anisopliae cepa ESALQ 1037, cepa E-9, cepa M206077, cepa C4-B (NRRL 30905), cepa ESC1, cepa 15013-1 (NRRL 67073), cepa 3213-1 (NRRL 67074), cepa C20091, cepa C20092, cepa F52 (DSM3884/ ATCC 90448) ou cepa ICIPE 78; C2.14 Paecilomyces fumosoroseus (nova: Isaria fumosorosea) cepa Apopka 97 e Fe9901, e C2.16 Beauveria brongniartii (por exemplo, Beaupro da Andermatt Biocontrol AG).

[0078] É ainda mais preferido que o referido microrganismo fúngico seja uma cepa da espécie Isaria fumosorosea. Cepas preferidas de Isaria fumosorosea são selecionadas do grupo que consiste de Apopka 97, Fe9901, ARSEF 3581, ARSEF 3302, ARSEF 2679, IfB01 (Centro Chinês para Coleta de Cultura Tipo CCTCC M2012400), ESALQ1296, ESALQ1364, ESALQ1409, CG1228, KCH J2, HIB-19, HIB-23, HIB-29, HIB-30, CHE-CNRCB 304, EH-511/3, CHE-CNRCB 303, CHE-CNRCB 305, CHE-CNRCB 307, EH-506/3, EH-503/3, EH-520/3, PFCAM, MBP, PSMB1, RCEF3304, PF01-N10 (CCTCC No. M207088), CCM 8367, SFP-198, K3, CLO 55, IfTS01, IfTS02, IfTS07, P1, If-02, If-2.3, If-03, Ifr AsC, PC-013 (DSMZ 26931), P43A, PCC, Pf04, Pf59, Pf109, FG340, Pfr1, Pfr8, Pfr9, Pfr10, Pfr11, Pfr12, Ifr531, IF-1106, I9602, I7284, I03011 (Patente Norte Americana 4618578), CNRCB1, SCAU-IFCF01, PF01-N4, Pfr-612, Pf-Tim, Pf-Tiz, Pf-Hal, Pf-Tic.

[0079] É mais preferido que a referida cepa de Isaria fumosorosea seja selecionada a partir de Apopka 97 e Fe9901. Uma cepa particularmente preferida é APOPKA97.

[0080] São também particularmente preferidos fungos entomopatogênicos do gênero Metarhizium spp. O gênero Metahrizium compreende diversas espécies algumas das quais foram recentemente reclassificadas (para uma visão geral, veja Bischoff et al., 2009; Mycologia 101 (4): 512-530). Membros do gênero Metarhizium compreendem M. pingshaense, M. anisopliae, M. robertsii, M. brunneum (estes quatro são também referidos como complexo Metarhizium anisopliae), M. acridum, M. majus, M. guizouense, M. Lepidiotae, M. Globosum e M. rileyi (previamente conhecido como Nomuraea rileyi). Destes, M. anisopliae, M. robertsii, M. brunneum, M. acridum e M. rileyi são ainda mais preferidos, enquanto aqueles de M. brunneum são mais preferidos.

[0081] Cepas exemplares pertencendo a Metarhizium spp. que são também especialmente preferidas são Metarhizium acridum ARSEF324 (produto GreenGuard por BASF) ou isolado IMI 330189 (ARSEF7486; por exemplo, Green Muscle by Biological Control Products); cepa Cb 15 de Metarhizium brunneum (por exemplo, ATTRACAP® de BIOCARE), ou cepa F52 (DSM3884/ATCC 90448; por exemplo, BIO 1020 por Bayer CropScience e também, por exemplo, Met52 por Novozymes); cepas do complexo Metarhizium anisopliae cepa ESALQ 1037 ou cepa ESALQ E-9 (ambas de Metarril® WP Organic), cepa M206077, cepa C4-B (NRRL 30905), cepa ESC1, cepa 15013-1 (NRRL 67073), cepa 3213-1 (NRRL 67074), cepa C20091, cepa C20092, ou cepa ICIPE 78. Mais preferidos são isolado F52 (também conhecido como Met52) que infecta principalmente larvas de besouro e que foi originalmente desenvolvido para controle de Otiorhynchus sulcatus. e ARSEF324 que é comercialmente usado em controle de gafanhotos. Produtos comerciais com base no F52 isolado são subculturas do F52 isolado individual e são representadas em diversas coleções de cultura incluindo: Julius Kühn-Institute for Biological Control (anteriormente o BBA), Darmstadt, Alemanha: [como M.a. 43]; HRI, UK: [275-86 (acrônimos V275 ou KVL 275)]; KVL Denmark [KVL 99-112 (Ma 275 ou V 275)]; Bayer, Alemanha [DSM 3884]; ATCC, USA [ATCC 90448]; USDA, Ithaca, USA [ARSEF 1095]. Formulações de concentrado emulsificáveis e granulares com base neste isolado foram desenvolvidas por diversas companhias e registras na UE e América do Norte (EUA e Canadá) para uso contra gorgulho-da-videira-preta em plantas ornamentais e frutos macios, outro Coleoptero, flores ocidentais em plantas ornamentais em estufas e percevejos em relva.

[0082] Beauveria bassiana é produzida em massa e usada para gerenciar uma ampla variedade de pestes de insetos incluindo moscas brancas, tripes, afídeos e gorgulhos. Cepas preferidas de Beauveria bassiana incluem cepa ATCC 74040; cepa GHA (Acesso No. ATCC74250); cepa ATP02 (Acesso No. DSM 24665); cepa PPRI 5339; cepa PPRI 7315, cepas IL197, IL12, IL236, IL10, IL131, IL116, cepa Bv025; cepa BaGPK; cepa ICPE 279, cepa CG 716; ESALQPL63, ESALQ447 e ESALQ1432, CG1229, IMI389521, NPP111B005, Bb-147. É mais preferido que cepas Beauveria bassiana incluam cepa ATCC 74040 e cepa GHA (Acesso No. ATCC74250). A preparação líquida de acordo com qualquer uma de reivindicações 1 a 17, em que referida espécie fúngica é um fungo nematicidamente ativo.

[0083] Espécies fúngica nematicidamente ativa incluem D2.1 Muscodor albus, em particular cepa QST 20799 (Acesso No. NRRL 30547); D2.2 Muscodor roseus, em particular cepa A3-5 (Acesso No. NRRL 30548); D2.3 Purpureocillium lilacinum (previamente conhecido como Paecilomyces lilacinus), em particular cepa 251 de P. lilacinum (AGAL 89/030550; por exemplo, BioAct de Bayer CropScience Biologics GmbH), cepa 580 (BIOSTAT® WP (ATCC No. 38740) by Laverlam), cepa no produto BIO-NEMATON® (T.Stanes and Company Ltd.), cepa no produto MYSIS®(Varsha Bioscience and Technology India Pvt Ltd.), cepa no produto BIOICONEMA®(Nico Orgo Maures, India), cepa no produto NEMAT®(Ballagro Agro Tecnologia Ltda, Brazil), e a cepa no produto SPECTRUM PAE L®(Promotora Tecnica Industrial, S.A. DE C.V., Mexico); D2.4 Trichoderma koningii; D2.5 Harposporium anguillullae; D2.6 Hirsutella minnesotensis; D2.7 Monacrosporium cionopagum; D2.8 Monacrosporium psychrophilum; D2.9 Myrothecium verrucaria, em particular cepa AARC-0255 (por exemplo, DiTeraTM por Valent Biosciences); D2.10 Paecilomyces variotii, cepa Q-09 (por exemplo, Nemaquim® de Quimia, MX); D2.11 Stagonospora phaseoli (por exemplo, de Syngenta); D2.12

Trichoderma lignorum, em particular cepa TL-0601 (por exemplo, Mycotric de Futureco Bioscience, ES); D2.13 Fusarium solani, cepa Fs5; D2.14 Hirsutella rhossiliensis; D2.15 Monacrosporium drechsleri; D2.16 Monacrosporium gephyropagum; D2.17 Nematoctonus geogenius; D2.18 Nematoctonus leiosporus; D2.19 Neocosmospora vasinfecta; D2.20 Paraglomus sp, em particular Paraglomus brasilianum; D2.21 Pochonia chlamydosporia (também conhecido como Vercillium chlamydosporium), em particular var. catenulata (IMI SD 187; por exemplo, KlamiC de The National Center of Animal and Plant Health (CENSA), CU); D2.22 Stagonospora heteroderae; D2.23 Meristacrum asterospermum e D2.24 Duddingtonia flagrans.

[0084] Em uma modalidade mais preferida, cepas fúngicas com efeito nematicida são selecionadas de Purpureocillium lilacinum, em particular esporos de P. lilacinum cepa 251 (AGAL 89/030550); Harposporium anguillullae; Hirsutella minnesotensis; Monacrosporium cionopagum; Monacrosporium psychrophilum; Myrothecium verrucaria, cepa AARC-0255; Paecilomyces variotii; Stagonospora phaseoli (comercialmente disponível de Syngenta); e Duddingtonia flagrans.

[0085] Em uma modalidade ainda mais preferida, cepas fúngicas com efeito nematicida são selecionadas de Purpureocillium lilacinum, em particular esporos de cepa 251 de P. lilacinum (AGAL 89/030550); e Duddingtonia flagrans. Mais preferivelmente, referida cepa fúngica com efeito nematicida é da espécie Purpureocillium lilacinum, em particular cepa 251 de P. lilacinum.

[0086] O micro-organismo fúngico produzindo esporos e agindo como agente de controle biológico e/ou promotor de crescimento de planta é cultivado ou fermentado de acordo com métodos conhecidos na técnica ou como descrito nesta aplicação em um substrato apropriado, por exemplo, por fermentação submersa ou fermentação em estado sólido, por exemplo, usando um dispositivo e método como divulgado em WO2005/012478 ou WO1999/057239.

[0087] Embora propágulos fúngicos específicos tais como microsclerotia (veja, por exemplo, Jackson and Jaronski (2009). Produção de microsclerotia entomopatógeno fúngico Metarhizium anisopliae e seu potencial para uso como um agente de biocontrole para insetos que vivem no solo; Mycological Research 113, pp.842- 850) pode ser produzidos por técnicas de fermentação líquida, é preferido que as estruturas ou órgãos dormentes de acordo com a presente invenção sejam produzidas por fermentação em estado sólido. Técnicas de fermentação em estado sólido são bem conhecidas na técnica (para uma visão geral, veja Gowthaman et al.,

2001. Appl Mycol Biotechnol (1), p. 305-352).

[0088] Após fermentação, os esporos fúngicos podem ser separados do substrato. O substrato populado com os esporos fúngicos é secado preferivelmente antes de qualquer etapa de separação. O micro-organismo ou esporos fúngicos podem ser secados por meio de, por exemplo, liofilização, secagem a vácuo ou secagem por pulverização após a separação. Métodos para preparação de esporos secos são bem conhecidos na técnica e incluem secagem em leito fluidizado, secagem por pulverização, secagem a vácuo e liofilização. Conídios podem ser secados em 2 etapas: Para conídios produzidos por fermentação em estado sólido primeiro o substrato de cultura coberto de conídio é secado antes de colher os conídios do substrato de cultura seco, obtendo assim um pó de conídios puro. Em seguida o pó de conídio é secado também usando secagem a vácuo ou liofilização antes de armazenar ou formular.

[0089] A preparação líquida de acordo com a invenção pode também compreender pelo menos uma substância selecionada do grupo de tensoativos, modificadores de reologia, agentes antiespumantes, antioxidantes e corantes.

[0090] Tensoativos não iônicos e/ou aniônicos são todas as substâncias deste tipo que podem normalmente ser empregadas em agentes agroquímicos. Tensoativos não iônicos possíveis são selecionadas dos grupos decopolímeros de bloco de óxido de polietileno-óxido de polipropileno, éteres de polietileno glicol de álcoois ramificados ou lineares, produtos de reação de ácidos graxos ou álcoois de ácido graxo com óxido de etileno e/ou óxido de propileno, além disso, etoxilatos de alquila ramificados ou lineares e etoxilatos de alquilaril, onde óxido de polietileno-ésteres de ácido graxo de sorbitano pode ser mencionado a título de exemplo. Dos exemplos mencionados acima classes selecionadas podem ser opcionalmente fosfatadas e neutralizadas com bases. Tensoativos aniônicos possíveis são todas as substâncias deste tipo que podem normalmente ser empregadas em agentes agroquímicos. Metal alcalino, metal alcalinoterroso e sais de amônio de ácidos alquilsulfônicos ou alquilfosfórico bem como ácidos alquilarilsulfônicos ou alquilarilfosfóricos são preferidos. Um outro grupo preferido de tensoativos aniônicos ou auxiliares de dispersão são metais alcalinos, metais terrosos alcalinos e sais de amônio de ácidos poliestirenosulfônico, sais de ácidos polivinilsulfônicos, sais de ácidos alquilnaftaleno sulfônicos, sais de produtos de condensação de ácido naftalenossulfônico-formaldeído, sais de produtos de condensação de ácido naftalenossulfônico, ácido fenolsulfônico e formaldeído, e sais de ácido lignossulfônico.

[0091] Modificadores de reologia, também conhecidos como espessante, agente anti-aglomerante, modificador de viscosidade ou agente estruturante, podem ser adicionados a presente formulação, por exemplo, a fim de prevenir (irreversível) sedimentação. Modificadores de reologia são preferivelmente derivados de minerais. Estes agentes de controle reológico fornecem estabilidade a longo prazo quando a formulação está em repouso ou em armazenamento. Compostos adequados são modificadores reológicos selecionados do grupo que consiste em partículas de sílica defumada e precipitada hidrofílica e hidrofobizada, argilas gelificadas incluindo bentonita, hectorita, laponita, atapulgita, sepiolita, esmectita, ou bentonita hidrofobicamente modificada/organofílica. Faixas adequadas de modificador de reologia na preparação líquida de acordo com a invenção compreendem 0 a 10%, preferivelmente 0 a 7%, mais preferivelmente 0,5 a 5%.

[0092] Na medida em que não definido de outra forma, % no presente pedido refere-se a % em peso.

[0093] A fim de dispersar sílicas ou espessantes de argila em uma determinada mistura de fluido de alto cisalhamento é desejável para formar um gel, uma vez que é conhecida na técnica.

[0094] Principais produtores globais para sílicas hidrofílicas ou hidrofobizadas defumadas (pirogênicas) são Evonik (nome comercial Aerosil®), Cabot Corporation (nome comercial Cab-O-Sil®), Wacker Chemie (faixa de produto HDK), Dow Corning, e OCI (Konasil®). Outra classe de modificadores de reologia adequados são sílicas precipitadas, e principais produtores globais são Evonik (nomes comerciais Sipernat® ou Wessalon®), Rhodia (Tixosil) e PPG Industries (Hi-Sil).

[0095] Outra classe de exemplos adequados para modificadores de reologia são espessantes de argila. Espessantes de argila são geralmente silicatos em camadas micronizados que podem ser espessantes eficazes para uma ampla faixa de aplicações. Eles são tipicamente empregados em sua forma não hidrofobizada ou hidrofobizada. A fim de torná-los dispersíveis em solventes não aquosos, a superfície de argila é geralmente tratada com sais de amônio quaternários. Estas argilas modificadas são conhecidas como espessantes de argila organo-modificados. Opcionalmente, pequenas quantidades de álcoois de baixo peso molecular ou água podem ser empregadas como ativadores. Exemplos para tais modificadores de reologia com base em argila incluem argilas de esmectita, bentonita, hectorita, atapulgita, seipiolita ou montmorilonita. Modificadores reológicos preferidos (b) são, por exemplo, argilas de hectorita organicamente modificadas tais como Bentone® 38 e SD3. Argilas de bentonita organicamente modificadas, tais como Bentone® 34, SD1 e SD2, sepiolita organicamente modificada tais como Pangel® B20, sílica hidrofílica tal como Aerosil® 200, sílica hidrofobizada tal como Aerosil® R972, R974 e R812S, atapulgita tal como Attagel® 50, Outra classe de exemplos adequados para modificadores de reologia são modificadores reológicos orgânicos com base em óleo de rícino hidrogenado modificado (tri-hidroxiestearina) ou derivados de óleo de rícino orgânico tais como Thixcin® R e Thixatrol® ST. Propriedades físicas de modificadores de reologia selecionados Nome Companhia Descrição geral Propriedades CAS- No. comercial físicas Bentone® Elementis Derivado orgânico de Densidade: 1,7 12001-31- 38 Specialties, uma argila de hectorita g/cm3 9

US Bentone® Elementis Derivado orgânico de Densidade: 1,6 SD-3 Specialties, uma argila de hectorita g/cm3 US Tamanho de partícula (dispersa): <1m Bentone® Elementis Derivado orgânico de Densidade: 1,7 68953-58- 34 Specialties, uma argila de g/cm3 2 US bentonita Bentone® Elementis Derivado orgânico de Densidade: 1,47 89749-77- SD-1 Specialties, uma argila de g/cm3 9 US bentonita Bentone® Elementis Derivado orgânico de Densidade: 1,62 89749-78- SD-2 Specialties, uma argila de g/cm3 0 US bentonita

Pangel® Tolsa S.A., Sepiolita 63800-37- B20 ES organicamente 3 modificada Sipernat® Evonik Dióxido de silicone *BET: 190 m2/g 112926- 22S Industries amorfo precipitado Tamanho médio 00-8 AG, DE de partícula primária: 12 nm Aerosil® Evonik Sílica defumada *BET: 200 m2/g 112945- 200 Industries hidrofílica Tamanho médio 52-5 AG, DE de partícula 7631-86-9 primária: 12 nm Aerosil® R Evonik Sílica defumada *BET: 90-130 m2/g 68611-44- 972 / Industries hidrofobizada 9 R972V AG, DE Aerosil® R Evonik Sílica defumada *BET: 150-190 68611-44- 974 Industries hidrofobizada m2/g 9 AG, DE Aerosil® R Evonik Sílica defumada *BET: 260 ± 30 68909-20- 812S Industries hidrofobizada m2/g 6 AG, DE Attagel® 50 BASF AG, Argila de atapulgita: Densidade: > 1,0 14808-60- 3 DE (Mg,Al)5Si8O204H2O g/cm 7 Tamanho médio de partícula: 9 m Thixcin® R Elementis derivado orgânico de Densidade: 1,02 38264-86- Specialties, óleo de rícino g/cm3 7

US Thixatrol® Elementis derivado orgânico de Densidade: 1,02 51796-19- ST Specialties, óleo de rícino, g/cm3 1 US Octadecanamida

[0096] Em uma modalidade preferida a concentração de agente de controle reológico está na faixa de 0 a 10% em peso, por exemplo, de 1 a 7 ou 3 a 6% em peso. Em particular, a concentração de agente de controle reológico pode ser 0, 0,5, 1, 1,5, 2, 2,5, 3, 4, 5, 6, 7, 8 ou 9% em peso e essencialmente depende das propriedades físicas do agente de controle biológico bem como aquelas do líquido veículo. Em geral, a concentração de agente de controle reológico na formulação de acordo com a invenção pode também depender do agente de controle biológico.

[0097] Agentes antiespumantes podem ser adicionados à presente formulação a fim de prevenir formação de espuma após diluição com água. Agentes antiespumantes adequados são, por exemplo, óleos parafínicos, óleos vegetais, óleos de silicone (por exemplo, Silcolapse 411, Silcolapse 454, Silcolapse 482 de Solvay; Silfoam SC1132, Silfoam SC132 de Wacker; Xiameter ACP-0100 de Dow) ou emulsões de óleo de silicone aquoso (por exemplo, SAG30, SAG 1572 / Momentive, Silcolapse 426R, Silcolapse 432 / Solvay; Silfar SE4 / Wacker; Antifoam 8830 / Harcros Chemicals). Em uma modalidade preferida a concentração de agentes antiespumantes está na faixa de 0 a 0,5% em peso, por exemplo, de 0,1 a 0,3% em peso. Em particular, a concentração de agente antiespumante pode ser 0, 0,1, 0,2, 0,3, 0,4 ou 0,5% em peso ou qualquer valor intermediário.

[0098] Antioxidantes podem ser adicionados a presente formulação a fim de prevenir ou retardar processos de degradação oxidativa. Antioxidantes adequados são, por exemplo, terc-butil- hidroxiquinona (TBHQ), butil-hidroxitoluol (BHT), butil-hidroxianisol (BHA), palmitato de ascorbila, acetato de tocoferila, estearato de ascorbila ou o grupo de carotinoides (por exemplo, beta-carotina) ou galatos (por exemplo, galato de etila, galato de propila, galato de octila, galato de dodecila).

[0099] Corantes que podem ser usados incluem pigmentos inorgânicos, exemplos sendo óxido de ferro, óxido de titânio e Azul de Prússia, e corantes orgânicos, tais como corantes de alizarina, corantes de azo e corantes de ftalocianina de metal.

[00100] Em um aspecto diferente, a presente invenção refere-se a uma composição líquida compreendendo a preparação líquida de acordo com a invenção.

[00101] A presente invenção também se refere a um método para controle de fungos fitopatogênicos, insetos e/ou nematódeos em ou sobre uma planta, para realçar o crescimento de uma planta ou para melhorar a saúde da planta, incluindo produção de planta ou crescimento de raiz compreendendo aplicar uma quantidade eficaz da preparação líquida ou da composição líquida de acordo com a invenção como descrito acima a referida planta ou a um locus onde plantas estão crescendo ou destinadas a serem cultivadas.

[00102] O termo "saúde da planta" geralmente compreende vários tipos de melhorias de plantas que não estão conectados ao controle de pestes ou fitopatógenos. Por exemplo, propriedades vantajosas que podem ser mencionadas são características de cultivo melhoradas, incluindo: emergência, rendimento da colheita, teor de proteína, teor de óleo, teor de amido, sistema radicular mais desenvolvido, melhor crescimento da raiz, melhor manutenção do tamanho da raiz, melhor eficácia da raiz, melhor tolerância ao estresse (por exemplo, contra a seca, calor, sal, UV, água, frio), etileno reduzido (produção reduzida e/ou inibição de recepção), aumento de perfilhamento, aumento na altura da planta, lâmina foliar maior, menos folhas basais mortas, perfilhos mais fortes, cor da folha mais verde, teor de pigmento, atividade fotossintética, menos entrada necessária (tais como fertilizantes ou água), menos sementes necessárias, perfilhos mais produtivos, floração precoce, maturidade precoce do grão, menos verso da planta (alojamento), aumento do crescimento do rebento, aumento do vigor da planta, aumento do estande da planta e germinação precoce e melhor.

[00103] Saúde da planta melhorada preferivelmente se refere a características de planta melhoradas incluindo: produção da colheita, sistema radicular mais desenvolvido (melhor crescimento da raiz), manutenção do tamanho da raiz, melhoria na eficácia da raiz, aumento do perfilhamento, aumento na altura da planta, maior lâmina foliar, menos folhas basais mortas, perfilhos mais fortes, folha de cor mais verde, atividade fotossintética, perfilhos mais produtivos, maior vigor da planta e maior estande de planta.

[00104] Em relação a presente invenção, saúde da planta melhorada preferivelmente especialmente se refere às propriedades melhoradas da planta selecionada de produção da colheita, sistema radicular mais desenvolvido, melhor crescimento radicular, melhor manutenção do tamanho da raiz, melhoria da eficácia da raiz, aumento do perfilhamento e aumento da altura da planta.

[00105] O efeito de uma composição de acordo com a presente invenção sobre a saúde da planta como definido aqui pode ser determinado por plantas de comparação que são cultivadas sob as mesmas condições ambientais, em que uma parte das referidas plantas é tratada com uma preparação líquida de acordo com a presente invenção e outra parte das referidas plantas não é tratada com uma preparação líquida de acordo com a presente invenção. Em vez disso, a outra parte não é tratada ou tratada com um placebo (ou seja, uma aplicação sem uma preparação líquida de acordo com a invenção tal como uma aplicação sem todos os ingredientes ativos (ou seja, sem um agente de controle biológico como descrito aqui).

[00106] A preparação líquida de acordo com a presente invenção pode ser aplicada de qualquer maneira desejada, tal como na forma de um revestimento de sementes, rega de solo, e/ou diretamente no sulco e/ou como um spray foliar e aplicada pré-emergência, pós- emergência ou ambos. Em outras palavras, a preparação líquida pode ser aplicada à semente, à planta ou às frutas e vegetais colhidos ou ao solo em que a planta está crescendo ou onde se deseja cultivar (local de crescimento da planta). Métodos de aplicação habituais incluem, por exemplo, imersão, pulverização, atomização, irrigação, evaporação, polvilhamento, nebulização, difusão, formação de espuma, pintura, espalhamento, rega (encharcamento) e irrigação por gotejamento.

[00107] Todas as plantas e partes de planta podem ser tratadas de acordo com a invenção. Aqui, plantas devem ser entendidas como significando todas as plantas e partes de planta tais como plantas selvagens ou plantações desejadas e indesejadas (incluindo plantas cultivadas de ocorrência natural),

[00108] Plantas que podem ser tratadas de acordo com a invenção incluem as seguintes plantas de cultivo principais: milho, soja, alfafa, algodão, girassol, sementes oleaginosas de Brassica tais como Brassica napus (por exemplo, canola, colza), Brassica rapa, B. juncea (por exemplo, (campo) mostarda) e Brassica carinata, Arecaceae sp. (por exemplo, óleo de palma, coco), arroz, trigo, beterraba sacarina, cana-de-açúcar, aveia, centeio, cevada, painço e sorgo, triticale, linho, nozes, uvas e videiras e várias frutas e vegetais de vários táxons botânicos, por exemplo, Rosaceae sp. (por exemplo, frutas em pomo, como maçãs e pêras, mas também frutas com caroço, tais como damascos, cerejas, amêndoas, ameixas e pêssegos, e frutas vermelhas tais como morangos, framboesas, groselha vermelha e preta e groselha), Ribesioidae sp., Juglandaceae sp., Betulaceae sp., Anacardiaceae sp., Fagaceae sp., Moraceae sp., Oleaceae sp. (por exemplo, oliveira), Actinidaceae sp., Lauraceae sp. (por exemplo, abacate, canela, cânfora), Musaceae sp. (por exemplo, bananeiras e plantações), Rubiaceae sp. (por exemplo, café), Theaceae sp. (por exemplo, chá), Sterculiceae sp., Rutaceae sp. (por exemplo, limões, laranjas, tangerinas e toranjas); Solanaceae sp. (por exemplo, tomate, batata, pimenta, pimentão, beringela, tabaco), Liliaceae sp., Compositae sp. (por exemplo, alface, alcachofra e chicória – incluindo chicória raiz, endívia ou chicória comum), Umbelliferae sp. (por exemplo, cenoura, salsa, aipo e aipo-rábano), Cucurbitaceae sp. (por exemplo, pepinos – incluindo pepinos, abóboras, melancias, cabaças e melões), Alliaceae sp. (por exemplo, alhos e cebolas), Cruciferae sp.

(por exemplo, repolho branco, repolho roxo, brócolis, couve-flor, couve de Bruxelas, pak choi, couve-rábano, rabanete, raiz-forte, agrião e couve chinesa), Leguminosae sp. (por exemplo, amendoim, ervilha, lentilha e feijão – , por exemplo, feijão comum e favas), Chenopodiaceae sp. (por exemplo, Acelga, beterraba forrageira, espinafre, beterraba), Linaceae sp. (por exemplo, cânhamo), Cannabeacea sp. (por exemplo, cannabis), Malvaceae sp. (por exemplo, quiabo, cacau), Papaveraceae (por exemplo, papoula), Asparagaceae (por exemplo, aspargo); plantas úteis e plantas ornamentais no jardim e nas florestas incluindo relva, gramado, grama e Stevia rebaudiana; e em cada caso, tipos geneticamente modificados destas plantas.

[00109] Plantas cultivadas podem ser plantas que podem ser obtidas por métodos convencionais de melhoramento e otimização ou por métodos de engenharia biotecnológica e genética ou combinações destes métodos, incluindo as plantas transgênicas e incluindo as variedades de planta que podem ou não podem ser protegidas por direitos de propriedade varietal. As plantas devem ser entendidas como significando todos os estágios de desenvolvimento, tais como sementes, mudas, plantas jovens (imaturas) até plantas maduras. As partes da planta devem ser entendidas como todas as partes e órgãos das plantas acima e abaixo do solo, tal como broto, folha, flor e raiz, dados exemplos sendo folhas, agulhas, talos, caules, flores, corpos de fruto, frutas e sementes, e também tubérculos, raízes e rizomas. Partes de plantas também incluem plantas colhidas ou partes de plantas colhidas e material de propagação vegetativo e generativo, por exemplo, mudas, tubérculos, rizomas, estacas e sementes.

[00110] Tratamento de acordo com a invenção das plantas e partes de planta com a preparação líquida ou a composição compreendendo referida preparação líquida é realizado diretamente ou permitindo que os compostos atuem no entorno, ambiente ou espaço de armazenamento pelos métodos de tratamento habituais, por exemplo, por imersão, pulverização, evaporação, nebulização, dispersão, pintura, injeção and, no caso de material de propagação, em particular no caso de sementes, também pela aplicação de um ou mais revestimentos.

[00111] Como já mencionado acima, é possível tratar todas as plantas e suas partes de acordo com a invenção. Em uma modalidade preferida, espécies de plantas selvagens e cultivares de plantas, ou aquelas obtidas por métodos convencionais de melhoramento biológico, tal como cruzamento ou fusão de protoplastos, e também partes dos mesmos, são tratadas. Em uma outra modalidade preferida, plantas transgênicas e cultivares de plantas obtidas por métodos de engenharia genética, se apropriado em combinação com métodos convencionais (organismos geneticamente modificados), e partes das mesmas são tratadas. O termo "partes" ou "partes das plantas" ou "partes de planta" foi explicado acima. A invenção é usada com preferência particular para tratar plantas das respectivas cultivares comercialmente habituais ou aquelas que estão em uso. Cultivares de plantas devem ser entendidas como significando plantas com novas propriedades ("características") e que foram obtidas por melhoramento convencional, por mutagênese ou por técnicas de DNA recombinante. Elas podem ser cultivares, variedades, bio- ou genótipos.

[00112] Plantas transgênicas ou cultivares de planta (aquelas obtidas por engenharia genética) que devem ser tratadas com preferência de acordo com a invenção incluem todas as plantas que, através da modificação genética, material genético recebido que confere propriedades úteis vantajosas particulares ("características") a essas plantas. Exemplos de tais propriedades são melhor crescimento da planta, maior tolerância a altas ou baixas temperaturas, maior tolerância à seca ou aos níveis de água ou salinidade do solo, melhor desempenho de floração, colheita mais fácil, amadurecimento acelerado, maiores rendimentos, maior qualidade e/ou maior valor nutricional dos produtos colhidos, melhor tempo de armazenamento e/ou processabilidade dos produtos colhidos.

Exemplos adicionais e particularmente enfatizados de tais propriedades são o aumento da resistência das plantas contra pragas animais e microbianas, tais como contra insetos, aracnídeos, nematódeos, ácaros, lesmas e caracóis devido, por exemplo, à toxinas formadas nas plantas, em particular aquelas formadas nas plantas pelo material genético de Bacillus thuringiensis (por exemplo, pelos genes CryIA(a), CryIA(b), CryIA(c), CryIIA, CryIIIA, CryIIIB2, Cry9c Cry2Ab, Cry3Bb e CryIF e também combinações dos mesmos), além disso, aumentou a resistência das plantas contrafungos fitopatogênicos, bactérias e/ou vírus devido, por exemplo, à resistência sistêmica adquirida (SAR), sisteminas, fitoalexinas, eliciadores e também genes de resistência e proteínas e toxinas correspondentemente expressas, e também aumentaram a tolerância das plantas a certos compostos herbicidamente ativos, por exemplo, imidazolinonas, sulfonilureias, glifosatos ou fosfinotricinas (por exemplo, o gene "PAT"). Os genes que conferem as características desejadas em questão também podem estar presentes em combinações com um outro nas plantas transgênicas.

Exemplos de plantas transgênicas que podem ser mencionadas são as plantas de cultivo importantes, tais como os cereais (trigo, arroz, triticale, cevada, centeio, aveia), milho, soja, batata, beterraba sacarina, cana-de-açúcar, tomate, ervilha e outros tipos de vegetais, algodão, tabaco, colza e também fruteiras (com as frutas maçãs, pêras, frutas cítricas e uvas), com particular ênfase sendo dada ao milho, soja, trigo, arroz, batata, algodão, cana-de- açúcar, tabaco e colza.

As características que são particularmente enfatizadas são o aumento da resistência das plantas a insetos, aracnídeos, nematódeos e lesmas e caracóis.

[00113] Além disso, a presente invenção refere-se ao uso da preparação líquida ou da composição líquida de acordo com a invenção como agente de proteção de plantas ou para promover o vigor das plantas e/ou saúde da planta.

[00114] Os seguintes exemplos ilustram a presente invenção de uma forma não limitante. Materiais e métodos Lista de fluidos veículo: Tipo de Nome CAS-No. Descrição Fornecedor fluido Atlas Propoxilato-etoxilato de G5002L 99821-01-9 álcool Croda c) CAS 9004-96- Mono-oleato de Alkamuls A 0 polietilenoglicol Solvay c) CAS 54846- Sorbitol-Heptaoleato, Arlatone TV 79-6 40EO Croda c) Atplus 245 Etoxilato de álcool Croda c) c) Álcool etoxilado linear Berol 050 68551-12-2 C12-C16, 3EO, HLB 8 Akzo-Nobel Álcool etoxilado C9-C11 c) Berol 260 4EO, HLB 10,5 Akzo-Nobel Monobutiléter de Butilcarbitol 112-34-5 dietilenoglicol Dow - Butilcellosolv e 111-76-2 Etilenglicolmonobutiléter Dow - Dietilenglicolmonoetil - Carbitol CAS 111-90-0 éter Dow Dipropylene c) glycol 110-98-5 ABCR Dipropylene Dimetil éter de c) glycol DME 111109-77-4 dipropileno glicol Sigma-Aldrich Dipropylene c) glycol metil ether acetate 88917-22-0 Sigma-Aldrich Dowanol Monometil éter de c) DPM dipropileno glicol Dow

Dowanol Monometil éter de c) TPM 25498-49-1 tripropileno glicol Dow Trietilenglicol- Ecosurf EH3 64366-70-7 monooctiléter Dow c) Óleo de rícino etoxilado Etocas 10 61791-12-6 10EO, HLB 6,6 Croda a) Hexilcellosol Etilenglicolmono- ve 112-25-4 hexiléster Dow - Ácido graxo, Metil tampado na Leofat extremidade OC0503M propoxilado-etoxilado Lion Chemical c) Lucramul Etoxilado de óleo de CO08 61791-12-6 rícino 8EO Levaco a) Lucramul Propoxilato-etoxilato de c) HOT 5902 64366-70-7 álcool Levaco Lucramul Álcoois etoxilados C12- c) L03 68213-23-0 C18, 3EO Levaco Lucramul Álcoois etoxilados C12- c) L05 68213-23-0 C18 ,5EO Levaco Álcoois etoxilados Lutensol lineares e ramificados c) AO3 157627-86-6 em C13-15, 3EO BASF Álcoois etoxilados Lutensol lineares e ramificados c) AO7 157627-86-7 em C13-15, 7EO BASF Methoxytrigly Monometil éter de col 112-35-6 trietilenglicol Sigma-Aldrich -

Acetato de 2-(2- n- etoxietoxi)etila; acetato Butildiglycola de monoetil éter de cetat dietileno glicol 112-15-2 Sigma-Aldrich c)

Pluriol E300 25322-68-3 Polietilenglicol- 300 BASF c) Propylcelloso Etilenglicolmonopropilét lve 2807-30-9 er Sigma-Aldrich Propylenglyc c) ol Diacetat 623-84-7 Sigma-Aldrich Radiasurf Mono-oleato de c) 7402 polietilenoglicol-200 Oleon Radiasurf Mono-oleato de c) 7403 9004-96-0 polietilenoglicol-400 Oleon Monolaurato de c) Radiasurf polietilenoglicol-400 7423 9004-81-3 Oleon

Radiasurf Dioleato de c) 7442 9005-07-6 polietilenoglicol-400 Oleon Copolímero de bloco, Synperonic 40% de EO, MW ~2200 PE/L 44 g/mol Croda b) Copolímero de bloco, b) Synperonic 20% de EO, MW ~2500 PE/L 62 g/mol Croda Copolímero de bloco, b) Synperonic 40% de EO, MW ~2900 PE/L 64 g/mol Croda Trietilenglyco l- monobutileth Monobutiléter de er 143-22-6 trietilenglicol Aldrich c) Diéter de Tetraglyme 143-24-8 tetraetilenglicol Sigma-Aldrich c) monolaurato de sorbitol Tween 20 9005-64-5 etoxilado, 20EO Croda c) Mono-oleato de sorbitol Tween 80 9005-65-6 etoxilado, 20EO Croda c) trioleato de sorbitol Tween 85 9005-70-3 etoxilado, 20EO Croda c) Exemplo I (P.lilacinum)

[00115] 3 g de pó de esporo puro de cepa 251 de P. lilacinum foram transferidos para um vaso de formulação (Recipiente de mistura IKA Tipo DT-20 com ferramenta de dispersão para Ultra Turrax) usando uma colher estéril. 12 mL de fluido foram adicionados ao respectivo recipiente de formulação e dispersos usando controle de unidade de tubo ultra turrax durante 1 minuto a 3000 rpm; mudança de direção após 30 segundos. Após isso 2,8 mL foram transferidos em quatro garrafas de amostra (Frasconete Wheaton Serum, Tipo I) deixando pouco espaço aéreo e firmemente fechado usando tampas de crimpagem (Macherey – Nagel tipo N 13). Posteriormente todas as garrafas de amostra foram transferidas para um conjunto de incubadora a 30 °C e armazenadas durante um determinado tempo.

[00116] Em intervalos irregulares uma amostra foi recuperada do local de armazenamento e analisada para viabilidade do esporo.

Portanto as amostras originais foram completamente homogeneizadas. Alíquotas de 0,25 g ou 250 µL de cada amostra são transferidas para tubos falcon de 50 mL. Os tubos foram preenchidos até 25 g usando uma solução aquosa estéril contendo 2% de Tween 80 e homogeinizados em vórtice para alcançar a primeira etapa de diluição (diluição de 1:100). Esta diluição é usada para diluição adicional e manchamento em ágar.

[00117] Para avaliação de taxa de germinação de esporo prepare uma diluição de 1:30.000 com base na diluição de 1:100 alcançada por diluição automatizada múltipla (robô de pipetagem, placa de 96 cavidades). Posteriormente placas de ágar de 12 x 12 cm são tomadas e manchadas com 10 vezes 5µL de cada amostra usando uma pipeta com 12 Canais automatizada. Espere até que líquido seja absorvido pelo ágar e transfira a placa de ágar para uma incubadora e incube a 25°C durante 17 horas. Abra a placa e coloque-a sob o microscópio. Escolha aleatoriamente uma área por mancha e registre o número de esporos germinados e não germinados que estão dentro do campo designado. Pelo menos 200 esporos por amostra necessitam ser avaliados. Se necessário, conte mais de um campo por mancha.

[00118] Os resultados de viabilidades de esporo são fornecidos na Tabela I. viabilidade do esporo [%] Nº Líquido no após 2 após após 5 após 6 após após após dia semana 1 mês semana semana 2 3 7 1 s (12 a (27 a s (35 s (40 mese mese mese 15d) 28 dias) dias) s (51 s (87 s (210 dias) a 55 a 92 dias) dias) dias) 1 Atlas G5002L * 97,4 96,0 90,7 2 Atplus 245 64,3 56,6 58,1 44,1 3 Berol 050 96,1 89,1 92,7 66,9 59,1 4 Berol 260 79,0 83,7 83,9 73,7 5 Butilcarbitol# 92,7 62,1 10,8 3,2 0,6 6 Butilcellosolve# 68,1 35,8 22,4 7 Dipropileno glicol 95,0 94,5 85,4

8 Dowanol DPM 91,0 95,3 93,3 74,7 9 Dowanol DPMA 99,1 93,0 35,7 10 Dowanol PGDA 98,8 98,2 88,4 11 Dowanol TPM 85,4 94,3 95,6 84,5 12 Ecosurf EH3 93,1 80,1 64,4 13 Etocas 10 * 97,0 97,2 97,8 14 Hexilcellosolve# 79,5 27,4 6,0 15 Leofat OC0503M 96,2 96,0 93,5 16 Lucramul CO08 98,7 91,9 86,3 17 Lucramul HOT 86,5 86,0 66,2 5902 18 Lucramul L03 99,0 90,1 86,3 19 Lucramul L05 97,5 89,2 71,2 20 Metoxitriglicol# 83,3 55,3 19,9 21 n- 93,2 89,3 82,7 Butildiglicolaceta to 22 Proglyde DMM 98,8 96,0 75,4 23 Propylcellosolve 76,2 8,1 0,6 # 24 Radiasurf 7402 96,7 83,6 64,8 34,7 25 Radiasurf 7403 98,6 98,3 98,9 93,7 78,3 26 Radiasurf 7423 90,8 91,4 93,8 79,7 36,9 27 Radiasurf 7442 98,7 96,5 98,2 96,8 88,3 28 Synperonic PE/L 94,5 94,2 53,4 44 29 Synperonic PE/L 97,1 96,9 95,3 91,6 61,4 62 30 Synperonic PE/L 96,5 92,3 64,8 64 31 Monobutiléter de 77,5 57,5 50,8 trietilenoglicol 32 Tetraglima 97,2 97,6 94,8 93,2 83,5 33 Breakthru S240$ 90,5 91,8 85,8 76,8 37,3 7,4 Tabela I; * Amostra não pode ser avaliada por razões técnicas; $ controle, valores médios de 6 ensaios; # não de acordo com a invenção. Discussão:

[00119] Dos resultados descritos na Tabela I torna-se evidente que nem todos os fluidos são adequados para fornecer boa viabilidade de esporo após armazenamento. Viabilidade do esporo diretamente após fabricação das amostras (dia 1) é geralmente alta e na maioria dos casos em ou acima de 80%, em muitos casos ainda acima de 90%.

Certos fluidos que não pertencem ao escopo desta invenção exibem um declínio acentuado em viabilidade do esporo ainda no dia 1 após preparação das amostras e ainda mais após armazenamento sob determinadas condições (Tabela I, entradas 5, 6, 14, 20, 23). BreakThru S240 foi previamente descrito como um fluido superior para hospedar esporos fúngicos. Sob as determinadas condições de teste BreakThru S240 (Tabela I, entrada 33) fornece ~77% de viabilidade do esporo após 2 meses de armazenamento e ~7% após 7 meses de armazenamento. Entre os exemplos de acordo com a invenção estão fluidos selecionados que exibem uma viabilidade do esporo de aproximadamente 53% ou mais após armazenamento durante 2 ou 3 meses, respectivamente. Em muitos casos, viabilidades de esporo de aproximadamente 80% ou mais foram detectáveis (Tabela I, entradas 1, 7,10, 11, 13, 15, 16, 18, 21, 26, 29). Para fluidos selecionados viabilidade do esporo excepcional foi encontrada ainda após armazenamento durante 7 meses a 30°C (Tabela I, entradas 25, 27, 32). Exemplo II (Isaria fumosorosea)

[00120] Método 1: 1,5 g de pó de esporo puro Isaria fumosorosea foram transferidos para um recipiente de formulação (Recipiente de mistura IKA Tipo DT-20 com ferramenta de dispersão para Ultra Turrax) usando uma colher estéril. 13,5 mL de fluido foram adicionados ao respectivo recipiente de formulação e dispersos usando controle de unidade de tubo ultra turrax durante 1 minuto a 3000 rpm; mudança de direção após 30 segundos. Após isso 2,8 mL foram transferidos em quatro garrafas de amostra (Frasconete Wheaton Serum, Tipo I) deixando pouco espaço aéreo e firmemente fechado usando tampas de crimpagem (Macherey – Nagel tipo N 13). Posteriormente todas as garrafas de amostra foram transferidas para um conjunto de incubadora a 30 °C e armazenadas durante um determinado tempo.

[00121] Em intervalos regulares uma amostra foi recuperada do local de armazenamento e analisada para viabilidade do esporo. Portanto as amostras originais foram completamente homogeneizadas. Alíquotas de 0,25 g ou 250 µL de cada amostra são transferidas para tubos falcon de 50 mL. Os tubos foram preenchidos até 25 g usando uma solução aquosa estéril contendo 2% de Tween 80 e homogeinizados em vórtice para alcançar a primeira etapa de diluição (diluição de 1:100). Esta diluição é usada para diluição adicional e manchamento em ágar.

[00122] Para avaliação de taxa de germinação de esporo uma diluição de 1:15000 com base na diluição de 1:100 alcançada por diluição automatizada múltipla (robô de pipetagem, placa de 96 cavidades) foi preparada. Posteriormente placas de ágar de 12 x 12 cm foram tomadas e manchadas com 10 vezes 5 µL de cada amostra usando uma pipeta com 12 Canais automatizada. Após todo o líquido ser absorvido por ágar, as placas foram incubadas a 23°C durante 16 horas.

[00123] Método 2: 0,5 g de pó de esporo puro Isaria fumosoresea foram transferidos para um frasco Erlenmeyer usando uma colher estéril. 24,5 mL de fluido foram dispersos usando Ultra-Turrax (IKA; Tipo T 25 D) durante 1 minuto a 3,000 rpm. Após isso, 2,0 mL foram transferidos em 20 garrafas de amostra (Frasconete Wheaton Serum, Tipo I) deixando pouco espaço aéreo e firmemente fechado usando tampas de crimpagem (Macherey – Nagel tipo N 13). Posteriormente todas as garrafas de amostra foram transferidas para um conjunto de incubadora a 30 °C e armazenadas durante um determinado tempo.

[00124] Em intervalos regulares uma amostra foi recuperada do local de armazenamento e analisada para viabilidade do esporo. Para este propósito, as amostras originais foram completamente homogeneizadas. Alíquotas de 0,5 g de cada amostra foram transferidas para um frasco Erlenmeyer de 100 mL. Os frascos foram preenchidos até 50 g usando uma solução aquosa estéril contendo 0,1 % de Break Thru® S240 (Evonik, Industries) e homogeinizados em um agitador magnético (Thermo Fisher Scientific: Cimarec ™) pelo menos durante 15 minutos com 750 rpm para alcançar a primeira etapa de diluição (diluição de 1:100). Esta diluição foi usada para diluição adicional.

[00125] Nem todas as amostras bem misturadas ou misturadas totalmente em 0,1 % de Break Thru S240. Para estas amostras, 500 µL de Neo-wett (Kwizda Agro GmbH) e/ou uma quantidade pequena de (ponta de faca) Metaupon® -OMT (LEUNA Tenside GmbH) foram também adicionados à solução aquosa.

[00126] Após homogeneização 1 mL foram transferidos para um tubo de 1,5 mL e foram centrifugados durante 15 minutos a 14,000 rpm (Thermo Fisher Scientific, Tipo Megafuge 8R). O sobrenadante (= fase superior) foi descartado usando uma pipeta. Os tubos foram preenchidos até 1 mL usando uma solução aquosa estéril contendo 0,1% de Neo-wett e homogeinizados em vórtice.

[00127] Para avaliar a viabilidade fúngica, foi usado um método com base em citometria de fluxo.

[00128] Os resultados de viabilidades de esporo são fornecidos na Tabela II. viabilidade do esporo [%] após 2 após 7 após 1 mês Nº Líquido no dia 1 semanas meses Método (27 dias) (~14 dias) (210 dias) 1 Butilcarbitol# 19,1 0,5 2,4 1 2 Carbitol# 78,0 13,7 12,0 2 3 Alkamuls A 94,4 93,0 90,7 2 4 Arlatone TV 97,0 71,7 66,7 2 5 Dowanol DPMA 87,7 63,6 31,4 1

6 Dowanol TPM 88,0 65,4 52,6 1 6a Dowanol TPM 82,0 59,0 2 7 Etocas 10 93,7 82,9 75,1 1 7a Etocas 10 93,8 92,0 88,8 2 8 Lucramul HOT 5902 93,0 32,0 2 9 Lutensol AO3 95,8 93,6 84,6 2 10 Lutensol AO7 94,4 92,8 82,9 2 11 Pluriol E300 96,0 87,0 45,0* 2 Diacetato de 12 Propilenglicol 97,0 53,0 2 13 Radiasurf 7402 92,5 11,6 1,1 1 13a Radiasurf 7402 89,9 20,5 15,8 2 14 Radiasurf 7403 94,0 76,2 79,3 1 14a Radiasurf 7403 89,0 86,0 92,0 2 15 Radiasurf 7423 86,7 58,0 42,3 2 16 Radiasurf 7442 89,4 72,1 58,1 1 16a Radiasurf 7442 87,4 69,6 66,3 2 17 Tween 20 98,6 98,9 (98,1**) 2 18 Tween 80 96,2 76,4 72,0 2 19 Tween 85 98,9 98,0 96,1*** 2 20 Synperonic PE/L 62 91,6 72,8 74,9 1 21 Breakthru S240$ 90,9 78,7 69,6 1 Tabela II: viabilidade do esporo de I. Fumosorosea após armazenamento; # não de acordo com a invenção; controle de $; * após 3 meses; ** após armazenamento durante 2 semanas a 40°C, *** após 6 meses Discussão:

[00129] Viabilidade do esporo diretamente após fabricação das amostras (dia 1) é geralmente alta e na maioria dos casos em ou acima de 90% com a exceção de Butilcarbitol e Carbitol (Tabela II, entrada 1,2) que foram usados como padrão negativo (ou seja, não de acordo com a invenção). Como demonstrados com alguns exemplos (Tabela 2, entradas 6/6a, 7/7a, 13/13a, 14/14a, 16/16a) ambos os métodos para determinação de viabilidade do esporo fornecem resultados comparáveis. Entre os exemplos de acordo com a invenção estão fluidos selecionados que exibem uma viabilidade do esporo de aproximadamente 60% ou mais após armazenamento durante 1 mês (Tabela II, entradas 3-7, 9-12, 14, 16,-1-20) ou aproximadamente 50% ou mais após armazenamento durante 7 meses a 30°C (Tabela 2 entradas 6, 7, 14, 16, 19, 20). Exemplo III (Beauveria Bassiana)

[00130] 1,5 g de pó de esporo puro de Beauveria Bassiana foram transferidos para um vaso de formulação (Recipiente de mistura IKA Tipo DT-20 com ferramenta de dispersão para Ultra Turrax) usando uma colher estéril. 13,5 mL de fluido foram adicionados ao respectivo recipiente de formulação e dispersos usando controle de unidade de tubo ultra turrax durante 1 minuto a 3000 rpm; mudança de direção após 30 segundos. Após isso 2,8 mL foram transferidos para quatro garrafas de amostra Frasconete Wheaton Serum, Tipo I) deixando pouco espaço aéreo e firmemente fechadas usando tampas de crimpagem (Macherey – Nagel tipo N 13). Posteriormente todas as garrafas de amostra foram transferidas para um conjunto de incubadora a 30°C e armazenadas durante um determinado tempo.

[00131] Em intervalos regulares uma amostra foi recuperada do local de armazenamento e analisada para viabilidade do esporo. Portanto as amostras originais foram completamente homogeneizadas. Alíquotas de 0,25 g ou 250 µL de cada amostra são transferidas para tubos falcon de 50 mL. Os tubos foram preenchidos até 25 g usando uma solução aquosa estéril contendo 2% de Tween 80 e homogeinizados em vórtice para alcançar a primeira etapa de diluição (diluição de 1:100). Esta diluição é usada para diluição adicional e manchamento em ágar.

[00132] Para avaliação de taxa de germinação de esporo prepare uma diluição de 1:15000 com base na diluição de 1:100 alcançada por diluição automatizada múltipla (robô de pipetagem, placa de 96 cavidades). Posteriormente placas de ágar de 12 x 12 cm são tomadas e manchadas com 10 vezes 5 µL de cada amostra usando uma pipeta com 12 canais automatizada. Espere até que líquido seja absorvido pelo ágar e transfira a placa de ágar para uma incubadora e incube a 20°C durante 17 horas. Abra a placa e coloque-a sob o microscópio. Escolha aleatoriamente uma área por mancha e registre o número de esporos germinados e não germinados que estão dentro do campo designado. Pelo menos 200 esporos por amostra necessitam ser avaliados. Se necessário, conte mais de um campo por mancha. Os resultados de viabilidades de esporo são fornecidos na Tabela III. viabilidade do esporo [%] após 2 após 3 após 5 no dia No Líquido semanas semanas semanas 1 (14 dias) (21 dias) (35 dias) 1 Atlas G5002L 91,9 72,4 2 Berol 050 88,7 78,7 3 Berol 260 86,0 72,4 4 Butilcarbitol 53,3 0,8 5 Dipropileno glicol 64,0 52,8 51,7 6 Proglyde DMM 88,4 48,0 21,8 7 Dowanol DPM 83,9 61,0 36,6 8 Dowanol TPM 63,9 19,0 15,5 9 Etocas 10 90,6 81,5 10 Leofat OC0503M 88,1 82,5 11 Lucramul HOT 5902 80,1 71,1 12 Metoxitriglicol 79,7 12,3 1,5 13 Dowanol PGDA 90,6 51,6 14 Radiasurf 7403 81,4 77,3 72,3 15 Radiasurf 7442 85,9 33,2 16 Synperonic PE/L 62 89,0 66,1 17 Synperonic PE/L 64 87,8 70,0 Tabela III; # não de acordo com a invenção Discussão:

[00133] Viabilidade do esporo diretamente após fabricação das amostras (dia 1) é geralmente alta e na maioria dos casos em ou acima de 80%, em muitos casos ainda acima de 90%. Fluidos que não caem dentro do escopo desta invenção exibem um declínio acentuado em viabilidade do esporo após armazenamento sob determinadas condições (Tabela III, entradas 4, 12). Entre os exemplos de acordo com a invenção estão fluidos selecionados que exibem uma viabilidade do esporo de aproximadamente 50% ou mais após armazenamento durante 3 semanas ou mais a 30°C (Tabela III, entradas 1, 2, 3, 5, 9, 10, 14, 17) Exemplo IV: Penicillium Bilaii

[00134] 1,5 g de pó de esporo puro de Penicillium bilaii (ATCC 20851) foram transferidos para um vaso de formulação (Recipiente de mistura IKA Tipo DT-20 com ferramenta de dispersão para Ultra Turrax) usando uma colher estéril. 13,5 mL de fluido foram adicionados ao respectivo recipiente de formulação e dispersos usando controle de unidade de tubo ultra turrax durante 1 minuto a 3000 rpm; mudança de direção após 30 segundos. Após isso 2,8 mL foram transferidos em quatro garrafas de amostra (Frasconete Wheaton Serum, Tipo I) deixando pouco espaço aéreo e firmemente fechado usando tampas de crimpagem (Macherey – Nagel tipo N 13). Posteriormente todas as garrafas de amostra foram transferidas para um conjunto de incubadora a 30°C e armazenadas durante um determinado tempo.

[00135] Em intervalos regulares uma amostra foi recuperada do local de armazenamento e analisada para viabilidade do esporo. Portanto as amostras originais foram completamente homogeneizadas. Alíquotas de 0,25 g ou 250 µL de cada amostra são transferidas para tubos falcon de 50 mL. Os tubos foram preenchidos até 25 g usando uma solução aquosa estéril contendo 2% de Tween 80 e homogeinizados em vórtice para alcançar a primeira etapa de diluição (diluição de 1:100). Esta diluição é usada para diluição adicional e manchamento em ágar.

[00136] Para avaliação de taxa de germinação de esporo prepare uma diluição de 1:15000 com base na diluição de 1:100 alcançada por diluição automatizada múltipla (robô de pipetagem, placa de 96 cavidades). Posteriormente placas de ágar de 12 x 12 cm são tomadas e manchadas com 10 vezes 5 µL de cada amostra usando uma pipeta com 12 canais automatizada. Espere até que líquido seja absorvido pelo ágar e transfira a placa de ágar para uma incubadora e incube a 20°C durante 17 horas. Abra a placa e colocar ela sob o microscópio. Escolha aleatoriamente uma área por mancha e registre o número de esporos germinados e não germinados que estão dentro do campo designado. Pelo menos 200 esporos por amostra necessitam ser avaliados. Se necessário, conte mais de um campo por mancha. Os resultados de viabilidades de esporo são fornecidos na Tabela IV. viabilidade do esporo [%] inicial (1 a 2 6 semanas@30°C 3 meses@30°C No Líquido dias) (41 a 43 dias) (83 a 85 dias) 1 Atlas G5002L 95,1 76,3 55,8 2 Berol 050 65,7 50,9 37,7 3 Berol 260 51,4 27,2 20 4 Breakthru S240# 53,1 27,6 19,6 5 Dipropileno glicol 83,8 44,1 29,5 6 Dipropileno glicol DME 54,6 29,6 10,5 7 Dowanol PGDA 93,6 69,3 36,4 8 Dowanol TPM 67,2 7,6 2,8 9 Etocas 10 97,2 78,8 65,9 10 Leofat OC0503M 93,4 73,3 64,1 11 Lucramul HOT 5902 45,8 27,8 20 12 Metoxitriglicol 74,3 43,1 30,3 13 Radiasurf 7355 * 78,9 40,4 14 Radiasurf 7403 78,1 66,8 61,8

15 Radiasurf 7442 96,7 91 76,5 16 Synperonic PE/L 62 98,4 84,1 61,4 17 Synperonic PE/L 64 83,5 68 51,3 18 Tween 85 99,0 92,0$ Tabela IV; * Amostra não pode ser avaliada por razões técnicas; # controle; $ após 2 meses Discussão:

[00137] Viabilidade do esporo diretamente após fabricação das amostras (dia 1) é bastante variável; na maioria dos casos, a viabilidade é igual ou superior a 50%, em casos selecionados, ainda acima 90%. Entre os exemplos de acordo com a invenção estão fluidos selecionados que exibem uma viabilidade do esporo de aproximadamente 50% ou mais após armazenamento durante aproximadamente 3 meses a 30°C (Tabela IV, entradas 1, 10,11,15- 17). Em muitos casos a viabilidade do esporo em fluidos selecionados é acima daquela de Break-Thru S240 usado como controle após armazenamento durante aproximadamente 3 meses a 30°C, ou seja, acima de aproximadamente 20%. Alguns fluidos fornecem viabilidade inferior do esporo sob condições determinadas aqui.

Claims (29)

REIVINDICAÇÕES

1. Preparação líquida essencialmente livre de água, caracterizada pelo fato de que compreende: (i) pelo menos um líquido orgânico etoxilado e/ou propoxilado, que é selecionado do grupo que consiste em: (a) triglicerídeos de ácido graxo etoxilado com 3 a 10 unidades de óxido de etileno em que os triglicerídeo de ácido graxo são selecionados do grupo que consiste em óleo de rícino e óleos vegetais; (b) um copolímero em bloco da Fórmula Geral H-O-[CH2-CH2-O-]a1-[CH2-CH(CH3)-O]b-[CH2-CH2-O-]a2-H na qual a1 e a2 apresentam, independentemente um do outro, um valor médio entre 1 e 20, e b apresenta um valor médio entre 15 e 35; (c) um polímero da Fórmula Geral X-O-[CH2-CH(CH3)-O]m-[CH2-CH2-O-]n-Y na qual X e Y são independentemente selecionados dentre: hidrogênio alquila ramificada ou linear com 1 a 24 átomos de carbono, e carbonila ramificada ou linear com 2 a 24 átomos de carbono, saturada ou parcialmente insaturada, opcionalmente carreando funcionalidade de hidroxila; m é um número médio entre 0 e 10; n é um número médio entre 0 e 40, sendo que m+n não é zero ou uma mistura de qualquer um de (a) a (c); e (ii) esporos fúngicos.

2. Preparação líquida, de acordo com reivindicação 1,

caracterizada pelo fato de que os referidos triglicerídeos de ácido graxo etoxilado de acordo com (a) são óleos vegetais selecionados do grupo que consiste em óleo de girassol, óleo de colza, óleo de soja, óleo de milho, óleo de coco e óleo de palma.

3. Preparação líquida, de acordo com reivindicação 1, caracterizada pelo fato de que os referidos triglicerídeos de ácido graxo etoxilado de acordo com (a) são óleos de rícino.

4. Preparação líquida, de acordo com reivindicação 1, caracterizada pelo fato de que o referido líquido orgânico etoxilado e propoxilado de acordo com (b) é selecionado do grupo que consiste em Copolímeros de Bloco com um peso molar médio entre cerca de 1000 e cerca de 3000 g/mol e sendo que a1 e a2 têm independentemente um do outro um valor médio entre 1 e 20 e b tem um valor médio entre 15 e 35.

5. Preparação líquida, de acordo com reivindicação 1 ou 4, caracterizada pelo fato de que o referido líquido orgânico etoxilado e propoxilado de acordo com (b) é selecionado do grupo que consiste em Copolímeros de Bloco com um peso molar médio entre cerca de 1500 e cerca de 3000 g/mol e sendo que a1 e a2 têm independentemente um do outro um valor médio entre 10 e 15 e b tem um valor médio entre 20 e 30.

6. Preparação líquida, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1, 4 e 5, caracterizada pelo fato de que o referido líquido orgânico etoxilado e propoxilado de acordo com (b) é selecionado do grupo que consiste em Copolímero em Bloco com um peso molecular médio entre cerca de 2000 e cerca de 3000 g/mol e sendo que a1 e a2 têm independentemente um do outro um valor médio entre 3 e 16 e b tem um valor médio entre 25 e 35; e Copolímero em Bloco com um peso molecular médio entre cerca de 1400 e cerca de 2200 g/mol e sendo que a1 e a2 apresentam,

independentemente um do outro, um valor médio entre 2 e 12, e b apresenta um valor médio entre 15 e 25.

7. Preparação líquida, de acordo com reivindicação 1, caracterizada pelo fato de que no polímero de (c): X é alquila ramificada ou linear com 1 a 18 átomos de carbono ou carbonila ramificada ou linear com 2 a 18 átomos de carbono, saturada ou parcialmente insaturada, opcionalmente carreando funcionalidade de hidroxila, e Y é hidrogênio ou alquila ramificada ou linear com 1 a 6 átomos de carbono ou carbonila ramificada ou linear com 2 a 6 átomos de carbono, saturada ou parcialmente insaturada, opcionalmente carreando funcionalidade de hidroxila.

8. Preparação líquida, de acordo com reivindicação 1, caracterizada pelo fato de que no polímero de (c): X é alquila ramificada ou linear com 1 a 6 átomos de carbono ou carbonila ramificada ou linear com 1 a 6 átomos de carbono, saturada ou parcialmente insaturada, opcionalmente carreando funcionalidade de hidroxila, e Y é alquila ramificada ou linear com 1 a 18 átomos de carbono ou carbonila ramificada ou linear com 2 a 18 átomos de carbono, saturada ou parcialmente insaturada, opcionalmente carreando funcionalidade de hidroxila.

9. Preparação líquida, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1, 7 e 8, caracterizada pelo fato de que no polímero de (c) m+n está entre 1 e 30.

10. Preparação líquida, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 e 7 a 9, caracterizada pelo fato de que no polímero de (c) m+n está preferivelmente entre 1 e 20.

11. Preparação líquida, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 e 7 a 10, caracterizada pelo fato de que no polímero de (c) m+n está preferivelmente entre 1 e 15.

12. Preparação líquida, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 e 7 a 11, caracterizada pelo fato de que, no polímero de (c), se m igual a zero o peso molecular (MW) do referido pelo menos um líquido orgânico etoxilado é maior do que ou igual a 190 unidades de massa.

13. Preparação líquida, de acordo com reivindicação 12, caracterizada pelo fato de que se m é igual a zero, o peso molecular (MW) de referido pelo menos um líquido orgânico etoxilado é maior do que ou igual a 205 unidades de massa.

14. Preparação líquida, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 e 7 a 13, caracterizada pelo fato de que o referido líquido orgânico etoxilado e/ou propoxilado de acordo com (c) é selecionado do grupo que consiste em óxido de polietileno, álcoois etoxilados, diéteres de óxido de mono/polietileno, éter-éster de óxido de mono/polietileno, ácidos carboxílicos etoxilados, diésteres de óxido de mono/polietileno, óxido de polipropileno, álcoois propoxilados, diéteres de óxido mono/polipropileno, éter-éster de óxido mono/polipropileno, ácidos carboxílicos propoxilados, diésteres de óxido de mono/polipropileno, propoxilato-etoxilatos de álcool, proproxilato-etoxilatos de ácido carboxílico e éteres de propoxilato- etoxilato de ácido carboxílico.

15. Preparação líquida, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 14, caracterizada pelo fato de que o referido líquido orgânico etoxilado e/ou propoxilado está presente em uma quantidade de pelo menos 40% em peso, preferivelmente pelo menos 50% em peso.

16. Preparação líquida, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 15, caracterizada pelo fato de que é miscível em água.

17. Preparação líquida, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 16, caracterizada pelo fato de que os referidos esporos fúngicos são de uma espécie fúngica que é eficaz como agente de controle biológico na proteção da planta ou agente de promoção de saúde da planta.

18. Preparação líquida, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 17, caracterizada pelo fato de que a referida espécie fúngica é um fungo entomopatogênico.

19. Preparação líquida, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 17, caracterizada pelo fato de que a referida espécie fúngica é um fungo nematicidamente ativo.

20. Preparação líquida, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 19, caracterizada pelo fato de que a referida espécie fúngica é selecionada do grupo que consiste em Isaria fumosorosea, Penicillium bilaii, Metarhizium anisopliae, Purpureocillium lilacinum, Coniothyrium minitans, Beauveria bassiana e Clonostachys rosea.

21. Preparação líquida, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 20, caracterizada pelo fato de que ainda compreende pelo menos uma substância selecionada do grupo de tensoativos, modificadores de reologia, agentes antiespumantes, antioxidantes e corantes.

22. Preparação líquida, de acordo com reivindicação 21, caracterizada pelo fato de que o referido modificador de reologia é selecionado do grupo que consiste em sílica fumegada (hidrofóbica/hidrofílica) ou precipitada, sílica de origem natural, modificadores de reologia com base em atapulgita, argilas organo- modificadas, e misturas dos mesmos.

23. Preparação líquida, de acordo com reivindicação 22, caracterizada pelo fato de que o referido modificador de reologia é sílica fumegada.

24. Preparação líquida, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 23, caracterizada pelo fato de que compreende 0,1 a 40% em peso de esporos fúngicos, até 99,9% de pelo menos um líquido orgânico etoxilado e/ou propoxilado como definido em qualquer uma das reivindicações 1 a 16 e 0 a 10% em peso de pelo menos um tensoativo e/ou modificador de reologia.

25. Composição líquida, caracterizada pelo fato de que compreende a preparação líquida, como definida em qualquer uma das reivindicações 1 a 24.

26. Método para controle de fungos fitopatogênicos, insetos e/ou nematódeos em ou sobre uma planta, para realçar o crescimento de uma planta ou para aumentar o rendimento da planta ou a saúde da raiz, caracterizado pelo fato de que compreende aplicar uma quantidade eficaz da preparação líquida ou da composição líquida, como definida em qualquer uma das reivindicações 1 a 25, à referida planta ou para um local sendo que plantas estão crescendo ou pretende-se cultivá-las.

27. Uso de uma preparação líquida ou de uma composição líquida, como definida em qualquer uma das reivindicações 1 a 25, caracterizado pelo fato de que é como agente de proteção da planta ou para promover o vigor da planta e/ou saúde da planta.

28. Uso de uma preparação líquida, como definida em qualquer uma das reivindicações 1 a 24, caracterizado pelo fato de que é para preparação de uma composição líquida para controle de fungos fitopatogênicos, insetos e/ou nematódeos em ou sobre uma planta, para melhorar o crescimento de uma planta ou para aumentar o rendimento vegetal ou a saúde das raízes.

29. Plantas, partes de plantas e/ou sementes resistentes a pragas, caracterizadas pelo fato de que compreendem plantas, partes de plantas e/ou sementes revestidas com uma preparação líquida, como definida em qualquer uma das reivindicações 1 a 24, ou uma composição líquida, como definida na reivindicação 25.