CN117882709A - 用于液体真菌孢子制剂的新型载液 - Google Patents
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Abstract
本发明涉及一种液体制剂,其包含至少一种所定义的乙氧基化和/或丙氧基化的有机液体和真菌孢子,以及一种用于防治植物中或植物上的植物病原性真菌、昆虫和/或线虫,用于增强植物生长或用于增加植物产量或根部健康的方法,所述方法包括将有效量的根据本发明的液体制剂或液体组合物施用于所述植物或植物正在生长或意欲生长的场所。
Description
本申请是2019年7月10日提交的申请号为201980046454.3、发明名称为“用于液体真菌孢子制剂的新型载液”的中国发明专利申请的分案申请。
无论是用于对抗各种真菌或昆虫害虫还是用于改善植物健康,生物防治剂(BCA)在植物保护领域中都变得越来越重要。尽管也可获得可用作生物防治剂的病毒,但在该领域中使用主要是基于细菌和真菌的BCA。基于真菌的生物防治剂的最突出的形式是称为分生孢子以及芽生孢子的无性孢子,但其他真菌繁殖体也可为有前景的药剂,例如(微)菌核、子囊孢子、担子孢子、厚垣孢子或菌丝段。
与许多基于细菌的孢子(例如芽孢杆菌孢子)不同,许多真菌孢子不那么健壮,并且已证明难以以满足商业产品需要(特别是在一定温度下的可接受的储存稳定性)的形式提供真菌孢子。
然而,由于许多因素有助于最终制剂的功效,例如生物防治剂的性质、温度稳定性和保存期限以及制剂在应用中的作用,提供生物防治剂的合适制剂仍然构成挑战。
合适的制剂是活性成分和惰性成分的均匀且稳定的混合物,其使最终产品更简单、更安全、且更有效地应用于靶标。
生物防治剂的常用制剂包括WP,其为一种微粉化成粉末形式并通常在水中分散后作为悬浮颗粒施用的固体制剂,和WG,其为一种由在水中崩解和分散后施用的颗粒组成的制剂。WG产品的颗粒具有0.2至4mm范围内的不同颗粒。水分散性颗粒可以通过附聚、喷雾干燥或挤出技术形成。WP制剂很容易制备,但它们粉尘多。此外,它们在现场不容易给药。WG制剂对使用者而言更容易处理,并且粉尘含量通常低于WP制剂。
液体制剂的实例为SC,其为一种固体活性成分在流体中的水基悬浮液,通常在使用前用水稀释。另一种液体制剂类型为EC,其为一种活性成分与表面活性剂如乳化剂在水不溶性有机溶剂中的溶液,当添加到水中时其会形成乳液。
在生物防治剂的实验和商业制剂中已经使用了大量的助剂(formulant)(对于更详细的描述和列表,参见Schisler等人,Phytopathology,第94卷,第11期,2004)。通常,助剂可以分组为载体(填充剂、增量剂)或改善所配制的生物质的化学、物理、生理或营养特性的助剂。
由于真菌分生孢子的脆弱特性,基于真菌活性物的BCA在室温或高于室温的温度下在更长的时间段内的稳定性、特别是储存稳定性是特别的挑战。像许多活的生物一样,处于其休眠状态的真菌分生孢子对环境影响敏感,例如水、空气(氧气)、温度、辐射等。一些因素可能会触发萌发,而其他因素可能会对孢子活力具有不利影响。为了排除水,通常使用油如矿物(石蜡)油或植物油制备液体真菌孢子制剂。这些油中的许多为真菌生物提供了一定的保存期限,然而,基于油的制剂需要乳化剂,所述乳化剂通常在长时间内和/或在高温下对孢子活力具有不利影响。
生物防治剂的制剂的实例记载于Torres等人,2003,J Appl Microbiol,94(2),第330-9页)。然而,很明显,仅在4℃下保留超过70%的生物防治剂(例如真菌孢子)的活力4个月的制剂不适于在现场每日使用。相反,期望即使在不可能冷藏的条件下,生物防治剂的制剂也具有足够的保存期限。
Kim等人,2010年(J.S.Kim,Y.H.Je,J.Y.Roh,Journal of IndustrialMicrobiology&Biotechnology 2010,第37卷(第4期),第419页及其后页)公开了与分散在水中相比,当分散在油(大豆油、玉米油、棉籽油、石蜡油、油酸甲酯)中时,真菌玫烟色棒束孢(Isaria fumosorosea)的分生孢子在50℃下进行2和8小时热处理的过程中表现出改善的稳定性。
Mbarga等人,2014(Biological Control 2014,第77卷,第15页及其后页)发现,与将分生孢子分散在水中相比,在大豆油中用不同的乳化剂配制的棘孢木霉(Trichodermaasperellum)表现出改善的保存期限。
其他液体,例如乙氧基化三硅氧烷(例如Break-Thru S240),是合适的替代品并例如与淡紫拟青霉(P.Lilacinum)(参见WO2016/050726)提供稳定的制剂,然而,这种三硅氧烷的制备以及因此产品本身的制备是昂贵的。
含有真菌孢子的油基悬浮液是本领域已知的。用于这种目的的油的典型实例为例如植物油、石蜡油或芳族烃。WO 2015/069708 A1记载了基于石蜡油与最高达35%的乳化剂的微生物的液体制剂,所述乳化剂在塑料表面上产生较少的残留物。US2007/0141032 A1记载了基于含有干燥剂的石蜡油和最高达10%的乳化剂的微生物的制剂。
US20140143909 A1记载了表面活性剂在含有真菌孢子的液体或固体组合物中作为“任选组分”或助剂的一般用途。
表面活性剂还用于水基制剂。例如,US2006/0247150和US 2011/0033436A1记载了水基制剂,其还包含微生物和各种非离子、阴离子、阳离子和两性表面活性剂。
由于上述缺点,仍然需要用于基于真菌活性物的生物防治剂的简单、易于处理的的制剂。在其他性能中,这类制剂应理想地在制剂浓缩物中提供良好的物理稳定性;表现出适当的随时间变化的保存期限,特别是在高温(20℃或更高)下;并且提供良好的水混溶性或悬浮性。
如上所述,除了油或有机硅以外的有机流体可用于提供基于真菌孢子的BCA的稳定农业化学制剂的优先性仅非常小。已知乙氧基化和/或丙氧基化的表面活性剂具有乳化性能,因此这些化合物经常用作采用典型量的乳化剂。出人意料地发现,当用作主要载体时,在高温下储存(在30℃和更高的温度下8周)后,大量不同的乙氧基化和/或丙氧基化-乙氧基化的流体提供了良好至优异的孢子活力。
因此,第一方面,本发明涉及一种液体制剂,其包含至少一种选自以下的乙氧基化和/或丙氧基化的有机液体和真菌孢子:
a)具有3-10个环氧乙烷单元的乙氧基化脂肪酸甘油三酯,其中所述脂肪酸甘油三酯选自蓖麻油和植物油;
b)以下通式的嵌段共聚物
H-O-[CH2-CH2-O-]a1-[CH2-CH(CH3)-O]b-[CH2-CH2-O-]a2-H其中a1、a2和b彼此独立地具有1至10的平均值;或其中a1和a2彼此独立地具有1至20的平均值,并且b具有15至35的平均值;以及
c)以下通式的聚合物
X-O-[CH2-CH(CH3)-O]m-[CH2-CH2-O-]n-Y
其中X和Y独立地选自氢;具有1-24个碳原子的支链或直链烷基;以及具有2-24个碳原子的支链或直链羰基,其为饱和或部分不饱和的,任选地带有羟基官能团;
其中m为0至10的平均数;
其中n为0至40、优选0至30、更优选0至20、最优选0至15或甚至0至10的平均数;其中m+n不为零
或a)至c)任一混合物。
在本发明范围内的真菌孢子包括称为分生孢子以及芽生孢子的无性孢子,还包括其他真菌繁殖体,例如子囊孢子、担子孢子、厚垣孢子。(微)菌核虽然不是严格意义上的孢子,但也可以加入本发明的液体制剂中。
a)和b)任一混合物可以以1:100至100:1的比值存在,优选以1:50至50:1的比值存在,更优选以1:25至25:1如1:20、1:15、1:10、1:5、1:2、1:1、2:1、5:1、10:1、15:1或20:1的混合物存在。又一个优选实施方案包含比值为1:20至1:1或比值为1:1至20:1的a)和b)任一混合物。
a)和c)任一混合物可以以1:100至100:1的比值存在,优选以1:50至50:1的比值存在,更优选以1:25至25:1如1:20、1:15、1:10、1:5、1:2、1:1、2:1、5:1、10:1、15:1或20:1的混合物存在。又一个优选实施方案包含比值为1:20至1:1或比值为1:1至20:1的a)和c)任一混合物。
b)至c)任一混合物可以以1:100至100:1的比值存在,优选以1:50至50:1的比值存在,更优选以1:25至25:1如1:20、1:15、1:10、1:5、1:2、1:1、2:1、5:1、10:1、15:1或20:1的混合物存在。又一个优选实施方案包含比值为1:20至1:1或比值为1:1至20:1的b)和c)任一混合物。
a)和b)和c)任一混合物可分别以1:1:100至100:100:1,或1:100:1至100:1:100,或100:1:1至1:100:100的范围存在,优选以1:1:50至50:50:1,或1:50:1至50:1:50,或50:1:1至1:50:50的比值存在,更优选以1:1:25至25:25:1,或1:25:1至25:1:25,或25:1:1至1:25:25,例如1:20:1、1:15:1、1:10:1、1:5:1、1:1:1、20:1:1、15:1:1、10:1:1、5:1:1、1:1:20、1:1:15、1:1:10、1:1:5、5:20:1、5:15:1、5:10:1、1:20:5、1:15:5、1:10:5、20:1:5、15:1:5、10:1:5、20:5:1、15:5:1、10:5:1、1:5:20、1:5:15、1:5:10、5:1:20、5:1:15或5:1:10的混合物存在。又一个优选的实施方案包含比值为1:20:1至1:1:1,或比值为20:1:1至1:1:1,或比值为1:1:20至1:1:1的a)和b)和c)任一混合物。
优选真菌孢子为分生孢子。
在一个优选的实施方案中,根据a)的所述乙氧基化脂肪酸甘油三酯衍生自植物油,所述植物油选自向日葵油、菜籽油、大豆油、玉米油、椰子油和棕榈油。关于所述植物油的组成的综述,请参见http://www.dgfett.de/material/fszus.php。
在另一个优选的实施方案中,根据a)的所述乙氧基化脂肪酸甘油三酯衍生自蓖麻油。乙氧基化蓖麻油的所选实例为例如Lucramul CO08(蓖麻油乙氧基化物8EO)和Etocas10(蓖麻油乙氧基化物10EO),它们是特别优选的。
关于根据b)的乙氧基化和丙氧基化的有机液体,其优选选自式H-O-[CH2-CH2-O-]a1-[CH2-CH(CH3)-O]b-[CH2-CH2-O-]a2-H的嵌段共聚物,其中a1和a2彼此独立地具有1至20的平均值,并且b具有15至35的平均值。更优选地,所述乙氧基化和丙氧基化的有机液体选自嵌段共聚物,其中a1和a2彼此独立地具有1至16的平均值,并且其中b具有20至30的平均值。根据b)的所述乙氧基化和丙氧基化的有机液体的平均分子量优选为约1000至约3000g/mol,更优选为约1500g/mol至约3000g/mol,更优选为约2000g/mol至约3000g/mol。
例如,对于a1和a2的平均值为3至16并且b的平均值为25至35的嵌段共聚物,平均分子量的范围可为约2000至约3000g/mol。对于a1和a2的平均值为2至12并且b的平均值为15至25的嵌段共聚物,平均分子量的范围可为约1400至约2200g/mol。对于a1和a2的平均值为1至12并且b的平均值为10至20的嵌段共聚物,平均分子量的范围可为约1000至约2000g/mol。
根据b)的乙氧基化和丙氧基化的有机液体的所选实例的代表为Synperonic PE/L62、Synperonic PE/L64和Synperonic PE/L44,它们是特别优选的。
在另一个实施方案中,根据b)的乙氧基化和丙氧基化的有机液体优选选自式H-O-[CH2-CH2-O-]a1-[CH2-CH(CH3)-O]b-[CH2-CH2-O-]a2-H的嵌段共聚物,其中a1、a2和b彼此独立地具有1至8的平均值。更优选地,所述嵌段共聚物具有(平均)2至8个环氧丙烷单元和2至12个环氧乙烷单元,其中a1和a2可彼此独立地具有总计不超过12的值。甚至更优选地,所述嵌段共聚物具有(平均)2至6个环氧丙烷单元和2至8个环氧乙烷单元,其中a1和a2可彼此独立地具有总计不超过8的值。
在该实施方案中,根据b)的所述乙氧基化和丙氧基化的有机液体的平均分子量优选为约150至约1500g/mol,更优选为约150g/mol至约1200g/mol,更优选为约200g/mol至约1000g/mol,甚至更优选为约200至约700g/mol。
例如,对于a1、a2和b的平均值彼此独立地为1至10而言,平均分子量的范围可为约150至约1500g/mol。对于a1、a2和b的平均值彼此独立地为1至8而言,平均分子量的范围可为约150至约1200g/mol之间。对于具有平均量为2至8个环氧丙烷单元和2至12个环氧乙烷单元的嵌段共聚物,其中a1和a2可彼此独立地具有总计不超过12的值,平均分子量的范围可为约200g/mol至约1000g/mol。对于具有平均量为2至6个环氧丙烷单元和2至8个环氧乙烷单元的嵌段共聚物,其中a1和a2可彼此独立地具有总计不超过8的值,平均分子量的范围可为约200至约700g/mol。
在该实施方案中,最优选在根据b)的所述乙氧基化和丙氧基化的有机液体中,a1和a2的值彼此独立地为1至4,并且b的值为2至6。
在一个优选的实施方案中,在c)的聚合物中,X为具有1-18个碳原子的支链或直链烷基,或具有2-18个碳原子的支链或直链羰基,其为饱和或部分不饱和的;并且Y为氢,或具有1-6个碳原子的支链或直链烷基,或具有2-6个碳原子的支链或直链羰基,其为饱和或部分不饱和的。为了清楚起见,技术人员知道支链烷基或羰基仅可以在至少3个碳原子的情况下存在。
在一个替代的优选实施方案中,在c)的聚合物中,X为氢,或具有1-6个碳原子的支链或直链烷基(为了清楚起见,在本申请中,支链部分必须具有至少3个碳原子),或具有2-6个碳原子的支链或直链羰基,其为饱和或部分不饱和的,任选地带有羟基官能团;并且Y为具有1-18个碳原子的支链或直链烷基,或具有2-18个碳原子的支链或直链羰基,其为饱和或部分不饱和的,任选地带有羟基官能团。在一个优选的实施方案中,在c)的聚合物中,m+n为1至30,更优选为1至20,最优选为1至15。在一个替代的优选实施方案中,m的范围为1至9且n的范围为0至6,或m的范围为0至5且n的范围为3至10。在又一个优选的实施方案中,m的范围为1至5,其中n等于零,或者n的范围为4至10,其中m等于零。
在上文中,羰基是指如下所定义的烷基羰基、烯基羰基、炔基羰基。
如本申请的实施例中所示,发现具有相当低分子量的流体仍然具有根据本发明的稳定作用,而其他具有相当低分子量的在结构上相似的流体没有表现出该作用。尽管申请人不希望受到任何科学理论的束缚,但据信流体的某些结构基序(例如相当小的烷基链与一定数量的环氧乙烷单元的组合)不适合稳定真菌孢子,但会导致相反的作用。出人意料地,当非常小的烷基链与一定数量的环氧丙烷单元结合时,未观察到这种行为。因此,在另一个优选的实施方案中,在c)的聚合物中,如果m等于0,则所述至少一种乙氧基化有机液体的分子量(MW)大于或等于190个质量单位,更优选大于或等于205个质量单位,甚至更优选大于或等于220个质量单位,例如至少235个质量单位。
尽管技术人员能够确定哪些液体属于本发明的范围,但是优选地,根据c)的所述乙氧基化和/或丙氧基化的有机液体选自聚乙二醇,例如Pluriol E300(聚乙二醇-300);乙氧基化醇,例如Atplus 245(醇乙氧基化物)、Berol 050(线性C12-C16乙氧基化醇,3EO)、Berol 260(C9-C11乙氧基化醇,4EO)、Ecosurf EH3(三乙二醇-单辛醚)、Lucramul L03(C12-C18乙氧基化醇,3EO)、Lucramul L05(C12-C18乙氧基化醇,5EO)、Lutensol AO3(C13-15-支链和直链的乙氧基化醇,3EO)、Lutensol AO7(C13-15-支链和直链的乙氧基化醇,7EO)、三乙二醇单丁醚;单环氧乙烷/聚环氧乙烷二醚,例如Tetraglyme(四乙二醇二醚);单环氧乙烷/聚环氧乙烷醚-酯,例如Arlatone TV(山梨醇-七油酸酯,40EO)、二乙二醇正丁醚乙酸酯、Tween 20(乙氧基化山梨醇单月桂酸酯,20EO)、Tween-80(乙氧基化山梨醇单油酸酯,20EO)、Tween-85(乙氧基化山梨醇单油酸酯,20EO);乙氧基化羧酸,例如Alkamuls A(聚乙二醇单油酸酯)、Radiasurf 7402(聚乙二醇-200单油酸酯)、Radiasurf7403(聚乙二醇-400单油酸酯)、Radiasurf 7423(聚乙二醇-400单月桂酸酯);单环氧乙烷/聚环氧乙烷二酯,例如Radiasurf 7442(聚乙二醇-400二油酸酯);聚丙二醇,例如二丙二醇;丙氧基化醇,例如Dowanol DPM(二丙二醇单甲醚);单环氧丙烷/聚环氧丙烷二醚,例如二丙二醇二甲醚;单环氧丙烷/聚环氧丙烷醚-酯,例如二丙二醇甲醚乙酸酯;丙氧基化羧酸;单环氧丙烷/聚环氧丙烷二酯,例如丙二醇二乙酸酯;醇丙氧基化物-乙氧基化物,例如Atlas G-5002L(醇丙氧基化物-乙氧基化物)、Lucramul HOT 5902(醇丙氧基化物-乙氧基化物);羧酸丙氧基化物-乙氧基化物;羧酸丙氧基化物-乙氧基化物醚,例如Leofat OC0503M(甲基封端的丙氧基化-乙氧基化脂肪酸)。
在另一个额外的优选的实施方案中,乙氧基化醇丁基卡必醇、丁基溶纤剂、己基溶纤剂、三乙二醇单甲醚和丙基溶纤剂不在根据c)的液体的范围内。在本发明的过程中,出人意料地发现如本文所定义的某些液体适于增加真菌孢子的储存稳定性。换句话说,与以不同制剂或纯形式存在的真菌孢子相比,在给定时间之后,根据本发明的液体制剂中存在的真菌孢子显示出提高的萌发率。
如果没有另外说明,则本申请通篇使用的术语“%”是指重量(wt.)%。
关于本发明,“提高的萌发率”是指直至产生所述孢子之后至少2周,即在完成冷却期之后至少2周,休眠的真菌结构体或器官、优选真菌孢子的萌发率,比未根据本发明的程序处理但是以其他方式同等处理的休眠的真菌结构体或器官如孢子(“对照孢子”)的萌发率高至少10%,优选至少20%,更优选至少30%或至少40%,且最优选至少50%。换言之,“提高的萌发率”意指直至产生所述孢子之后至少2周,萌发率为对照孢子的萌发率的至少110%,优选至少120%,更优选至少130%或至少140%,且最优选至少150%或更高。优选地,直至产生之后至少3个月,更优选至少4个月且最优选产生之后至少6个月,例如至少8个月、至少10个月或甚至12个月或更长时间,所述提高的萌发率仍然可见或甚至增加。因此,优选在产生所述孢子之后3个月,根据本发明处理的孢子的萌发率是对照孢子的萌发率的至少200%。在另一个优选的实施方案中,在产生所述孢子之后6个月,萌发率是对照孢子的萌发率的至少300%或至少400%,最优选至少500%。就此而言,萌发率表示孢子在给定时间之后仍然萌发的能力。因此,萌发率%意指在给定时间之后能够萌发的孢子的百分比。测量萌发率的方法是本领域众所周知的。例如,将孢子散布在琼脂培养基的表面上,并在合适的生长温度下培养后,用显微镜确定发育出芽管的孢子的比例(Oliveira等人,2015.Aprotocol for determination of conidial viability of the fungalentomopathogens Beauveria bassiana and Metarhizium anisopliae from commercialproducts.Journal of Microbiological Methods 119;第44-52页,以及其中的文献)。
在一个特定的实施方案中,本发明提供一种液体制剂,其包含
0.1%至40%、优选2.5-30%、最优选5-25%,例如10-20%的真菌孢子,
最高达99.9%、优选70直至97.5%、最优选75直至95%,例如80-90%的如上所定义的乙氧基化和/或丙氧基化的有机液体,
0-10%、优选0-8%、最优选0.1-5%的表面活性剂(例如分散剂乳化剂);
0-10%、优选0-7%、更优选0.5-5%的流变改性剂,例如气相二氧化硅、凹凸棒土;
各自为0-5%、优选0-3%、最优选0.1-0.5%的消泡剂、抗氧化剂、染料。
只要没有另外定义,术语“烷基”就是指饱和的直链或支链烃基,例如(C1-C18)-烷基、(C1-C6)-烷基或(C1-C4)-烷基。实例:甲基、乙基、丙基、1-甲基乙基、丁基等。
实例(但不限于):(C1-C6)-烷基,例如甲基、乙基、丙基、1-甲基乙基、丁基、1-甲基丙基、2-甲基丙基、1,1-二甲基乙基、戊基、1-甲基丁基、2-甲基丁基、3-甲基丁基、1,1-二甲基丙基、1,2-二甲基丙基、2,2-二甲基丙基、1-乙基丙基、己基、1-甲基戊基、2-甲基戊基、3-甲基戊基、4-甲基戊基、1,1-二甲基丁基、1,2-二甲基丁基、1,3-二甲基丁基、2,2-二甲基丁基、2,3-二甲基丁基、3,3-二甲基丁基、1-乙基丁基、2-乙基丁基、1,1,2-三甲基丙基、1,2,2-三甲基丙基、1-乙基-1-甲基丙基和1-乙基-2-甲基丙基。
只要没有另外定义,术语“烯基”就是指包含至少一个双键的不饱和的直链或支链烃基,例如(C2-C18)-烯基、(C2-C6)-烯基或(C2-C4)-烯基。实例:乙烯基、1-丙烯基、3-丁烯基等。
实例(但不限于):(C2-C6)-烯基,例如乙烯基、1-丙烯基、2-丙烯基、1-甲基-乙烯基、1-丁烯基、2-丁烯基、3-丁烯基、1-甲基-1-丙烯基、2-甲基-1-丙烯基、1-甲基-2-丙烯基、2-甲基-2-丙烯基、1-戊烯基、2-戊烯基、3-戊烯基、4-戊烯基、1-甲基-1-丁烯基、2-甲基-1-丁烯基、3-甲基-1-丁烯基、1-甲基-2-丁烯基、2-甲基-2-丁烯基、3-甲基-2-丁烯基、1-甲基-3-丁烯基、2-甲基-3-丁烯基、3-甲基-3-丁烯基、1,1-二甲基-2-丙烯基、1,2-二甲基-1-丙烯基、1,2-二甲基-2-丙烯基、1-乙基-1-丙烯基、1-乙基-2-丙烯基、1-己烯基、2-己烯基、3-己烯基、4-己烯基、5-己烯基、1-甲基-1-戊烯基、2-甲基-1-戊烯基、3-甲基-1-戊烯基、4-甲基-1-戊烯基、1-甲基-2-戊烯基、2-甲基-2-戊烯基、3-甲基-2-戊烯基、4-甲基-2-戊烯基、1-甲基-3-戊烯基、2-甲基-3-戊烯基、3-甲基-3-戊烯基、4-甲基-3-戊烯基、1-甲基-4-戊烯基、2-甲基-4-戊烯基、3-甲基-4-戊烯基、4-甲基-4-戊烯基、1,1-二甲基-2-丁烯基、1,1-二甲基-3-丁烯基、1,2-二甲基-1-丁烯基、1,2-二甲基-2-丁烯基、1,2-二甲基-3-丁烯基、1,3-二甲基-1-丁烯基、1,3-二甲基-2-丁烯基、1,3-二甲基-3-丁烯基、2,2-二甲基-3-丁烯基、2,3-二甲基-1-丁烯基、2,3-二甲基-2-丁烯基、2,3-二甲基-3-丁烯基、3,3-二甲基-1-丁烯基、3,3-二甲基-2-丁烯基、1-乙基-1-丁烯基、1-乙基-2-丁烯基、1-乙基-3-丁烯基、2-乙基-1-丁烯基、2-乙基-2-丁烯基、2-乙基-3-丁烯基、1,1,2-三甲基-2-丙烯基、1-乙基-1-甲基-2-丙烯基、1-乙基-2-甲基-1-丙烯基和1-乙基-2-甲基-2-丙烯基。
只要没有另外定义,术语“烷氧基”(烷基-O-)就是指经由氧原子(-O-)与骨架键合的烷基,例如(C1-C18)-烷氧基、(C1-C6)-烷氧基或(C1-C4)-烷氧基。实例:甲氧基、乙氧基、丙氧基、1-甲基乙氧基等。
实例(但不限于):(C1-C6)-烷氧基,例如甲氧基、乙氧基、丙氧基、1-甲基乙氧基、丁氧基、1-甲基丙氧基、2-甲基丙氧基、1,1-二甲基乙氧基、戊氧基、1-甲基丁氧基、2-甲基丁氧基、3-甲基丁氧基、1,1-二甲基丙氧基、1,2-二甲基丙氧基、2,2-二甲基丙氧基、1-乙基丙氧基、己氧基、1-甲基戊氧基、2-甲基戊氧基、3-甲基戊氧基、4-甲基戊氧基、1,1-二甲基丁氧基、1,2-二甲基丁氧基、1,3-二甲基丁氧基、2,2-二甲基丁氧基、2,3-二甲基丁氧基、3,3-二甲基丁氧基、1-乙基丁氧基、2-乙基丁氧基、1,1,2-三甲基丙氧基、1,2,2-三甲基丙氧基、1-乙基-1-甲基丙氧基和1-乙基-2-甲基丙氧基。
同样,只要没有另外定义,术语“烯氧基”和“炔氧基”就分别是指经由-O-与骨架键合的烯基或炔基,分别例如(C2-C18)-烯氧基、(C2-C6)-烯氧基或(C2-C4)-烯氧基,或(C3-C10)-炔氧基、(C3-C6)-炔氧基或(C3-C4)-炔氧基。
只要没有另外定义,术语“烷基羰基”(烷基-C(=O)-)就是指经由-C(=O)-与骨架键合的烷基,例如(C1-C18)-烷基羰基、(C1-C6)-烷基羰基或(C1-C4)-烷基羰基。因此,C-原子的数目是指烷基羰基内的烷基。
同样,只要没有另外定义,术语“烯基羰基”和“炔基羰基”就分别是指经由-C(=O)-与骨架键合的烯基或炔基,分别例如(C2-C18)-烯基羰基、(C2-C6)-烯基羰基或(C2-C4)-烯基羰基,或(C2-C10)-炔基羰基、(C2-C6)-炔基羰基或(C2-C4)-炔基羰基。因此,C-原子的数目分别是指烯基羰基或炔基羰基内的烯基或炔基。
只要没有另外定义,术语“烷氧基羰基”(烷基-O-C(=O)-)就是指经由-O-C(=O)-与骨架键合的烷基,例如(C1-C18)-烷氧基羰基、(C1-C6)-烷氧基羰基或(C1-C4)-烷氧基羰基。因此,C-原子的数目是指烷氧基羰基内的烷基。
同样,只要没有另外定义,术语“烯氧基羰基”和“炔氧基羰基”就分别是指经由-O-C(=O)-与骨架键合的烯基或炔基,分别例如(C2-C10)-烯氧基羰基、(C2-C6)-烯氧基羰基或(C2-C4)-烯氧基羰基,或(C3-C10)-炔氧基羰基、(C3-C6)-炔氧基羰基或(C3-C4)-炔氧基羰基。因此,C-原子的数目分别是指烯氧基羰基或炔氧基羰基内的烯基或炔基。
只要没有另外定义,术语“烷基羰基氧基”(烷基-C(=O)-O-)就是指经由-C(=O)-O-与骨架键合的烷基,例如(C1-C10)-烷基羰基氧基、(C1-C6)-烷基羰基氧基或(C1-C4)-烷基羰基氧基。因此,C-原子的数目是指烷基羰基氧基内的烷基。
同样,只要没有另外定义,术语“烯基羰基氧基”和“炔基羰基氧基”就分别是指经由-C(=O)-O-与骨架键合的烯基或炔基,分别例如(C2-C10)-烯基羰基氧基、(C2-C6)-烯基羰基氧基或(C2-C4)-烯基羰基氧基,或(C2-C10)-炔基羰基氧基、(C2-C6)-炔基羰基氧基或(C2-C4)-炔基羰基氧基。因此,C-原子的数目分别是指烯基羰基氧基或炔基羰基氧基内的烯基或炔基。
在一个优选的实施方案中,根据本发明的组合物基本上不含水。BCA是处于休眠形式的活的生物。因此,包含低浓度水或甚至基本上不含水的制剂是BCA的优选制剂类型。另一方面,某些BCA也可以以较高的水含量配制。如果存在水,则此类水主要来自干燥的孢子粉中的残留游离水或其他助剂中的痕量水。因此,由于这些事实,水的浓度可能为0至12重量%,优选0至8重量%,那么该范围将落入“基本上不含水”的定义内。换言之,术语“基本上不含水”是指组合物中水的浓度为12%或更少,优选为8重量%或更少。更优选地,水浓度的范围为0至6%,更优选0至4%,例如2至4重量%。因此,示例性水浓度包括2重量%、3重量%、4重量%、5重量%和6重量%。
尽管据信在根据本发明的液体制剂中,所述乙氧基化的和/或丙氧基化的有机液体可以以较低的量(例如至少40重量%)存在,但是优选其存在量为至少50重量%。通常,所述乙氧基化的和/或丙氧基化的有机液体可以以最高达99.9重量%的浓度存在,优选以70重量%至97.5重量%、更优选75重量%至95重量%、最优选80重量%至90重量%存在。
根据本发明的液体制剂优选为可与水混溶的。术语“可与水混溶的(water-miscible)”表示如果流体和水以1:200的比值、优选1:100的比值、更优选1:50的比值组合,则所述液体将产生均匀的混合物。
在一个优选的实施方案中,组合物基本上不含油。关于本发明,油应定义为基本上不可与水混溶的或在水中不可自乳化的任何液体,例如石蜡油、脂肪酸甘油三酯、脂肪酸单酯、某些硅油、芳族溶剂或其他与水不混溶的有机溶剂。术语“基本上不含油”是指油含量为5重量%或更少,优选4重量%或更少,甚至更优选3重量%或更少且最优选2重量%或更少,例如1重量%、0.1重量%、0.05重量%或甚至0.01重量%。由于其成分的生产过程,不能排除本发明的组合物含有痕量的油。除了这些痕量的油,本发明的制剂不含油。
任何真菌物种均可用于本发明。然而,优选所述真菌孢子来自对植物具有有益作用的真菌种类,例如在植物保护中有效用作生物防治剂或作为例如支持或促进植物生长和/或植物健康的植物健康促进剂的真菌种类。更优选地,所述真菌为丝状真菌。
如技术人员众所周知的,丝状真菌与酵母的区别在于其在大多数条件下倾向于以多细胞、丝状形式生长,与之相比,卵形或椭圆形酵母细胞主要是单细胞生长。
所述至少一种丝状真菌可以是对植物产生积极作用(例如植物保护作用或植物生长促进作用)的任何真菌。因此,所述真菌可以是昆虫病原性真菌(entomopathogenicfungus)、食线虫真菌、植物生长促进真菌、对植物病原体如细菌或真菌植物病原体具有活性的真菌或具有除草作用的真菌。
NRRL是美国农业研究菌种保藏中心(Agricultural Research Service CultureCollection)的缩写,是一个在国际承认用于专利程序的微生物保存布达佩斯公约之下的用于保藏微生物菌种的国际权威保存机构,其地址为美国伊利诺伊州,皮奥里亚市,北部大学街1815号,美国农业部农业研究服务局,农业应用研究国家中心,邮编61604。
ATTC是美国标准生物品收藏中心(American Type Culture Collection)的缩写,是一个在国际承认用于专利程序的微生物保存布达佩斯公约之下用于保藏微生物菌种的国际权威保存机构,其地址为美国弗吉尼亚州马纳萨斯市大学林荫大道10801号ATCC专利保存中心,邮编10110。
只有很少的具有选择性除草活性的真菌是已知的,例如F2.1 Phomamacrostroma,特别是菌株94-44B;F2.2小核盘菌(Sclerotinia minor),特别是菌株IMI344141(例如Agrium Advanced Technologies的Sarritor);F2.3胶孢炭疽菌(Colletotrichum gloeosporioides),特别是菌株ATCC 20358(例如AgriculturalResearch Initiatives的Collego(也称为LockDown));F2.4 Stagonospora atriplicis;或F2.5尖孢镰刀菌(Fusarium oxysporum),其不同的菌株对不同的植物种类具有活性,例如杂草独脚金(Striga hermonthica)(尖孢镰刀菌strigae专化型(Fusarium oxysproumformae specialis strigae))。
支持、促进或刺激植物生长/植物健康的真菌的示例性种类为E2.1黄色蠕形霉(Talaromyces flavus),特别是菌株V117b;E2.2深绿木霉(Trichoderma atroviride),特别是菌株CNCM I-1237(例如Agrauxine,FR的WP)、记载于国际申请号PCT/IT2008/000196)中的菌株SC1、菌株编号V08/002387、菌株编号NMI编号V08/002388、菌株编号NMI编号V08/002389、菌株编号NMI编号V08/002390、菌株LC52(例如AgrimmTechnologies Limited的Sentinel)、菌株kd(例如Andermatt Biocontrol的T-Gro),和/或菌株LUI32(例如Agrimm Technologies Limited的Tenet);E2.3哈茨木霉(Trichodermaharzianum),特别是菌株ITEM 908或T-22(例如Koppert的Trianum-P);E2.4疣孢漆斑菌(Myrothecium verrucaria),特别是菌株AARC-0255(例如Valent Biosciences的DiTeraTM);E2.5拜莱青霉(Penicillium bilaii),特别是菌株ATCC 22348(例如AcceleronBioAg的/>)和/或菌株ATCC20851;E2.6寡雄腐霉(Pythium oligandrum),特别是菌株DV74或M1(ATCC 38472;例如Bioprepraty,CZ的Polyversum);E2.7Rhizopogonamylopogon(例如Helena Chemical Company的Myco-Sol);E2.8 Rhizopogon fulvigleba(例如包含于Helena Chemical Company的Myco-Sol);E2.9哈茨木霉,特别是菌株TSTh20、菌株KD、Plant Health Products,ZA的Eco-T或菌株1295-22;E2.10康宁木霉(Trichodermakoningii);E2.11聚丛球囊霉(Glomus aggregatum);E2.12明球囊霉(Glomus clarum);E2.13沙漠球囊霉(Glomus deserticola);E2.14幼套球囊霉(Glomus etunicatum);E2.15根内球囊霉(Glomus intraradices);E2.16单孢球囊霉(Glomus monosporum);E2.17摩西球囊霉(Glomus mosseae);E2.18双色蜡蘑(Laccaria bicolor);E2.19浅黄根须腹菌(Rhizopogon luteolus);E2.20 Rhizopogon tinctorus;E2.21 Rhizopogon villosulus;E2.22光硬皮马勃(Scleroderma cepa);E2.23点柄乳牛肝菌(Suillus granulatus);E2.24Suillus punctatapies;E2.25绿色木霉(Trichoderma virens),特别是菌株GL-21;和E2.26黑白轮枝孢(Verticillium alboatrum)(原名黄萎病菌(V.dahliae)),特别是菌株WCS850(CBS276.92;例如Tree Care Innovations的Dutch Trig);E2.27绿色木霉(Trichoderma viride),特别是菌株B35(Pietr等人,1993,Zesz.Nauk.A R w Szczecinie161:125-137)和E2.28淡紫拟青霉(Purpureocillium lilacinum)(以前称为淡紫拟青霉(Paecilomyces lilacinus))菌株251(AGAL 89/030550;例如Bayer CropScienceBiologics GmbH的BioAct)。
在一个更优选的实施方案中,对植物健康和/或生长具有有益作用的真菌菌株选自黄色蠕形霉,菌株VII7b;哈茨木霉菌株KD或Plant Health Products,SZ的产品Eco-T中的菌株;疣孢漆斑菌,特别是菌株AARC-0255;拜莱青霉,菌株ATCC 22348;和寡雄腐霉,菌株DV74或M1(ATCC 38472);绿色木霉菌株B35;深绿木霉菌株CNCM I-1237;和淡紫拟青霉(Purpureocillium lilacinum)(以前称为淡紫拟青霉(Paecilomyces lilacinus)菌株251(AGAL 89/030550)。
在一个甚至更优选的实施方案中,对植物健康和/或生长具有有益作用的真菌菌株选自:拜莱青霉菌株ATCC 22348;绿色木霉,例如菌株B35;深绿木霉菌株CNCM I-1237和淡紫拟青霉(Purpureocillium lilacinum)(以前称为淡紫拟青霉(Paecilomyceslilacinus)菌株251(AGAL 89/030550)。
杀细菌活性真菌为,例如:A2.2出芽短梗霉(Aureobasidium pullulans),特别是菌株DSM14940的芽生孢子;A2.3出芽短梗霉,特别是菌株DSM 14941的芽生孢子或菌株DSM14940和DSM 14941的芽生孢子的混合物;A2.9黄硬皮马勃(Scleroderma citrinum)。
对真菌病原体具有活性的真菌为例如B2.1盾壳霉(Coniothyriumminitans),特别是菌株CON/M/91-8(登记号DSM-9660;例如Bayer CropScience Biologics GmbH的B2.2核果梅奇酵母(Metschnikowia fructicola),特别是菌株NRRL Y-30752;B2.3赫色小球壳孢(Microsphaeropsis ochracea),特别是菌株P130A(ATCC保藏号74412);B2.4白黏帚菌(Muscodor albus),特别是菌株QST 20799(登记号NRRL 30547);B2.5哈茨木霉(Trichoderma harzianum rifai),特别是菌株KRL-AG2(也称为菌株T-22,/ATCC 208479,例如BioWorks,US的PLANTSHIELD T-22G、/>和TurfShield)和菌株T39(例如Makhteshim,US的/>B2.6指状节丛孢(Arthrobotrysdactyloides);B2.7少孢节丛孢(Arthrobotrys oligospora);B2.8多孢节丛孢(Arthrobotrys superba);B2.9黄曲霉(Aspergillus flavus),特别是菌株NRRL 21882(例如Syngenta的/>)或菌株AF36(例如Arizona Cotton Research andProtection Council,US的AF36);B2.10粉红粘帚霉(Gliocladium roseum)(也称为Clonostachys rosea f.rosea),特别是Adjuvants Plus的菌株321U,如Xue(Efficacy ofClonostachys rosea strain ACM941 and fungicide seed treatments forcontrolling the root rot complex of field pea,Can Jour Plant Sci 83(3):519-524)中所公开的菌株ACM941,菌株IK726(Jensen DF等人,Development of a biocontrolagent for plant disease control with special emphasis on the near commercialfungal antagonist Clonostachys rosea strain‘IK726’;Australas PlantPathol.2007;36:95-101),菌株88-710(WO2007/107000),菌株CR7(WO2015/035504)或WO2017109802中公开的菌株CRrO、CRM和CRr2;B2.11大伏革菌(Phlebiopsis(或Phlebia或Peniophora)gigantea),特别是菌株VRA 1835(ATCC 90304)、菌株VRA 1984(DSM16201)、菌株VRA 1985(DSM16202)、菌株VRA 1986(DSM16203)、菌株FOC PG B20/5(IMI390096)、菌株FOC PG SP log6(IMI390097)、菌株FOC PG SP log5(IMI390098)、菌株FOC PG BU3(IMI390099)、菌株FOC PG BU4(IMI390100)、菌株FOC PG 410.3(IMI390101)、菌株FOC PG97/1062/116/1.1(IMI390102)、菌株FOC PG B22/SP1287/3.1(IMI390103)、菌株FOC PGSH1(IMI390104)和/或菌株FOC PG B22/SP1190/3.2(IMI390105)(Phlebiopsis产品为例如Verdera and FIN的/>e-nema,DE的 和/>);B2.12寡雄腐霉,特别是菌株DV74或M1(ATCC 38472;例如Bioprepraty,CZ的Polyversum);B2.13黄硬皮马勃;B2.14黄色蠕形霉,特别是菌株V117b;B2.15棘孢木霉(Trichodermaasperellum),特别是Isagro的菌株ICC 012或菌株SKT-1(例如Kumiai Chemical Industry的/>)、菌株T34(例如Biobest Group NV的/>和Biocontrol Technologies S.L.,ES的T34/>);B2.16深绿木霉(Trichoderma atroviride),特别是菌株CNCM I-1237(例如Agrauxine,FR的/>WP)、国际申请号PCT/IT2008/000196中记载的菌株SC1、菌株77B(Andermatt Biocontrol的T77)、菌株编号V08/002387、菌株NMI编号V08/002388、菌株NMI编号V08/002389、菌株NMI编号V08/002390、菌株LC52(例如Agrimm Technologies Limited的Sentinel)、菌株LUI32(例如Agrimm Technologies Limited的Tenet)、菌株ATCC 20476(IMI 206040)、菌株T11(IMI352941/CECT20498)菌株SKT-1(FERM P-16510)、菌株SKT-2(FERM P-16511)、菌株SKT-3(FERM P-17021);B2.17哈马木霉(Trichoderma harmatum);B2.18哈茨木霉,特别是菌株KD、菌株T-22(例如Koppert的Trianum-P)、菌株TH35(例如Mycontrol的Root-Pro)、菌株DB103(例如Dagutat Biolab的T-Gro 7456);B2.19绿色木霉(Trichoderma virens)(也称为绿色粘帚霉(Gliocladium virens)),特别是菌株GL-21(例如Certis,US的SoilGard);B2.20绿色木霉(Trichoderma viride),特别是菌株TV1(例如Koppert的Trianum-P)、菌株B35(Pietr等人,1993,Zesz.Nauk.A R w Szczecinie 161:125-137);B2.21白粉寄生孢(Ampelomyces quisqualis),特别是菌株AQ 10(例如CBC Europe,Italy的AQ/>);B2.22阿肯色(Arkansas)真菌18,ARF;B2.23出芽短梗霉,特别是菌株DSM14940的芽生孢子、菌株DSM 14941的芽生孢子或菌株DSM14940和DSM 14941的芽生孢子的混合物(例如bio-ferm,CH的/>);B2.24角毛壳菌(Chaetomium cupreum)(例如AgriLife的BIOKUPRUMTM);B2.25球毛壳菌(Chaetomium globosum)(例如Rivale的Rivadiom);B2.26枝状枝孢菌(Cladosporium cladosporioides),特别是菌株H39(Stichting Dienst LandbouwkundigOnderzoek);B2.27Dactylaria candida;B2.28 Dilophosphora alopecuri(例如TwistFungus);B2.29尖孢镰刀菌(Fusarium oxysporum),特别是菌株Fo47(例如Natural PlantProtection的Fusaclean);B2.30链孢粘帚菌(Gliocladiumcatenulatum)(同义词:链状粉红粘帚菌(Clonostachys rosea f.catenulate)),特别是菌株J1446(例如Lallemand的);B2.31蜡蚧轮枝菌(Lecanicillium lecanii)(以前称为蜡蚧轮枝孢(Verticillium lecanii)),特别是菌株KV01的分生孢子(例如Koppert/Arysta的);B2.32蠕形青霉菌(Penicillium vermiculatum);B2.33盖姆斯木霉(Trichoderma gamsii)(原名绿色木霉(T.viride)),特别是菌株ICC080(IMI CC392151CABI,例如AGROBIOSOL DE MEXICO,S.A.DE C.V.的BioDerma);B2.34多孢木霉(Trichoderma polysporum),特别是菌株IMI 206039(例如BINAB Bio-Innovation AB,Sweden的Binab TF WP);B2.35钩木霉(Trichoderma stromaticum)(例如Ceplac,Brazil的Tricovab);B2.36微变冢村氏菌(Tsukamurella paurometabola),特别是菌株C-924(例如);B2.37奥德曼细基格孢(Ulocladium oudemansii),特别是菌株HRU3(例如Botry-Zen Ltd,NZ的/>);B2.38黑白轮枝孢(Verticillium albo-atrum)(原名黄萎病菌(V.dahliae)),特别是菌株WCS850(CBS276.92;例如Tree Care Innovations的Dutch Trig);B2.39粉红产气霉(Muscodor roseus),特别是菌株A3-5(登记号NRRL30548);B2.40厚垣轮枝孢菌(Verticillium chlamydosporium);B2.41棘孢木霉(Trichoderma asperellum)菌株ICC 012和盖姆斯木霉菌株ICC 080的混合物(产品已知为例如Bayer CropScience LP,US的BIO-TAMTM);B2.42Simplicillium lanosoniveum和B2.43顶孢木霉(Trichoderma fertile)(例如BASF的产品TrichoPlus)。
在一个优选的实施方案中,具有杀真菌活性的生物防治剂选自盾壳霉,特别是菌株CON/M/91-8(登记号DSM-9660);黄曲霉,菌株NRRL 21882(可作为Syngenta的获得)和菌株AF 36(可作为Arizona Cotton Research and ProtectionCouncil,US的AF36获得);粉红粘帚霉菌株321U、菌株ACM941、菌株IK726、菌株88-710(WO2007/107000)、菌株CR7(WO2015/035504);链孢粘帚菌(Gliocladiumcatenulatum)菌株J1446;大伏革菌(Phlebiopsis(或Phlebia或Peniophora)gigantea),特别是菌株VRA 1835(ATCC 90304)、VRA 1984(DSM16201)、VRA 1985(DSM16202)、VRA 1986(DSM16203)、FOC PGB20/5(IMI390096)、FOC PG SP log6(IMI390097)、FOC PG SP log5(IMI390098)、FOC PGBU3(IMI390099)、FOC PG BU4(IMI390100)、FOC PG 410.3(IMI390101)、FOC PG 97/1062/116/1.1(IMI390102)、FOC PG B22/SP1287/3.1(IMI390103)、FOC PG SH1(IMI390104)、FOCPG B22/SP1190/3.2(IMI390105)(可作为Verdera and FIN的/>获得,作为e-nema,DE的/> 和/>获得);寡雄腐霉,菌株DV74或M1(ATCC38472)(可作为Bioprepraty,CZ的Polyversum获得);黄色蠕形霉,菌株VII7b;白粉寄生孢,特别是菌株AQ 10(可作为CBCEurope,Italy的AQ/>获得);链孢粘帚菌(Gliocladium catenulatum)(同义词:链状粉红粘帚菌)菌株J1446;枝状枝孢菌,例如菌株H39(Stichting Dienst LandbouwkundigOnderzoek);绿色木霉(也称为绿色粘帚霉),特别是菌株GL-21(例如Certis,US的SoilGard);深绿木霉菌株CNCM I-1237、菌株77B、菌株LU132或菌株SC1,其登记号为CBS122089;哈茨木霉菌株T-22(例如Andermatt Biocontrol或Koppert的Trianum-P);棘孢木霉菌株SKT-1,其登记号为FERM P-16510或菌株T34;绿色木霉菌株B35和Trichodermaasperelloides JM41R(登记号NRRL B-50759)。
在一个更优选的实施方案中,具有杀真菌活性的真菌种类选自盾壳霉,特别是菌株CON/M/91-8(登记号DSM-9660)(可作为Prophyta,DE的获得);粉红粘帚霉菌株321U、菌株ACM941或菌株IK726;链孢粘帚菌菌株J1446;绿色木霉(也称为绿色粘帚霉)菌株GL-21。所述真菌种类还可优选为盾壳霉菌株CON/M/91-8(登记号DSM-9660)或链孢粘帚菌菌株J1446或深绿木霉菌株CNCM I-1237或绿色木霉菌株B35。/>
在杀真菌活性真菌中,尤其优选木霉属(Trichoderma),特别是绿色木霉和深绿木霉。其包括深绿木霉菌株CNCM I-1237;深绿木霉菌株SC1,登记号为CBS122089,WO 2009/116106和美国专利号8,431,120(Bi-PA);深绿木霉菌株77B;深绿木霉菌株LU132;绿色木霉菌株B35。特别优选深绿木霉菌株CNCM I-1237和绿色木霉菌株B35。
所述真菌种类可为昆虫病原性真菌。
对昆虫具有活性的真菌(昆虫病原性真菌)包括C2.1白黏帚菌,特别是菌株QST20799(登记号NRRL 30547);C2.2粉红产气霉,特别是菌株A3-5(登记号NRRL 30548);C2.3球孢白僵菌(Beauveria bassiana),特别是菌株ATCC 74040(例如Intrachem Bio Italia的);菌株GHA(登记号ATCC74250;例如Laverlam InternationalCorporation的BotaniGuard Es和Mycontrol-O);菌株ATP02(登记号DSM 24665);菌株PPRI5339(例如BASF的BroadBandTM);菌株PPRI 7315、菌株R444(例如Andermatt Biocontrol的Bb-Protec)、菌株IL197、IL12、IL236、IL10、IL131、IL116(全部参引Jaronski,2007.Use ofEntomopathogenic Fungiin Biological Pest Management,2007:ISBN:978-81-308-0192-6)、菌株Bv025(参见例如Garcia等人,2006.Manejo Integrado de Plagas yAgroecología(Costa Rica)第77期);菌株BaGPK;菌株ICPE 279,菌株CG 716(例如Novozymes的/>);C2.4桔形被毛孢(Hirsutella citriformis);C2.5汤普森被毛孢(Hirsutella thompsonii)(例如Agro Bio-tech Research Centre,IN的Mycohit和ABTEC);C2.6蜡蚧轮枝菌(以前称为蜡蚧轮枝孢),特别是菌株KV01(例如Koppert/Arysta的和/>)、菌株DAOM198499或菌株DAOM216596的分生孢子;C2.9蜡蚧霉(Lecanicillium muscarium)(原名蜡蚧轮枝孢),特别是菌株VE 6/CABI(=IMI)268317/CBS102071/ARSEF5128(例如Koppert的Mycotal);C2.10金龟子绿僵菌蝗变种(Metarhiziumanisopliae var acridum),例如Becker Underwood,US的GreenGuard的ARSEF324或分离株IMI 330189(ARSEF7486;例如Biological Control Products的Green Muscle);C2.11棕色绿僵菌(Metarhizium brunneum),例如菌株Cb 15(例如BIOCARE的/>);C2.12金龟子绿僵菌(Metarhizium anisopliae),例如菌株ESALQ 1037(例如SP Organic的)、菌株E-9(例如SP Organic的/>)、菌株M206077、菌株C4-B(NRRL30905)、菌株ESC1、菌株15013-1(NRRL 67073)、菌株3213-1(NRRL 67074)、菌株C20091、菌株C20092、菌株F52(DSM3884/ATCC 90448;例如Bayer CropScience的BIO 1020以及例如Novozymes的Met52)或菌株ICIPE 78;C2.15罗伯茨绿僵菌(Metarhizium robertsii)23013-3(NRRL 67075);C2.13莱氏野村菌(Nomuraea rileyi);C2.14玫烟色拟青霉(Paecilomyces fumosoroseus)(新名:玫烟色棒束孢),特别是菌株Apopka 97(作为Certis,USA的PreFeRal获得)、FE 9901(作为Natural industries,USA的NoFly获得)、ARSEF 3581、ARSEF 3302、ARSEF 2679(ARS Collection of Entomopathogenic FungalCultures,Ithaca,USA)、IfB01(中国典型培养物保藏中心(China Center for TypeCulture Collection)CCTCC M2012400)、ESALQ1296、ESALQ1364、ESALQ1409(ESALQ:University of/>Paulo(Piracicaba,SP,Brazil))、CG1228(EMBRAPA GeneticResources and Biotechnology(Brasília,DF,Brazil))、KCH J2(Dymarska等人,2017;PLoS one 12(10)):e0184885)、HIB-19、HIB-23、HIB-29、HIB-30(Gandarilla-Pacheco等人,2018;Rev Argent Microbiol 50:81-89)、CHE-CNRCB 304、EH-511/3(Flores-Villegas等人,2016;Parasites&Vectors 2016 9:176doi:10.1186/s13071-016-1453-1)、CHE-CNRCB 303、CHE-CNRCB 305、CHE-CNRCB 307(Gallou等人,2016;fungal biology 120(2016)414-423)、EH-506/3、EH-503/3、EH-520/3、PFCAM、MBP、PSMB1(National Center forBiololgical Control,Mexico;Castellanos-Moguel等人,2013;Revista Mexicana DeMicologia 38:23-33,2013)、RCEF3304(Meng等人,2015;Genet Mol Biol.2015Jul-Sep;38(3):381-389)、PF01-N10(CCTCC编号M207088)、CCM 8367(Czech Collection ofMicroorganisms,Brno)、SFP-198(Kim等人,2010;Wiley Online:DOI 10.1002/ps.2020)、K3(Yanagawa等人,2015;J Chem Ecol.2015;41(12):118-1126)、CLO 55(Ansari Ali等人,2011;PLoS One.2011;6(1):e16108.DOI:10.1371/journal.pone.0016108)、IfTS01、IfTS02、IfTS07(Dong等人2016/PLoS ONE 11(5):e0156087.doi:10.1371/journal.pone.0156087)、P1(Sun Agro Biotech Research Centre,India)、If-02、If-2.3、If-03(Farooq and Freed,2016;DOI:10.1016/j.bjm.2016.06.002)、Ifr AsC(Meyer等人,2008;J.Invertebr.Pathol.99:96-102.10.1016/j.jip.2008.03.007)、PC-013(DSMZ26931)、P43A、PCC(Carrillo-Pérez等人,2012;DOI 10.1007/s11274-012-1184-1)、Pf04、Pf59、Pf109(KimJun等人,2013;Mycobiology 2013Dec;41(4):221-224)、FG340(Han等人,2014;DOI:10.5941/MYCO.2014.42.4.385)、Pfr1、Pfr8、Pfr9、Pfr10、Pfr11、Pfr12(Angel-Sahagún等人,2005;Journal of Insect Science)、Ifr531(Daniel and Wyss,2009;DOI10.1111/j.1439-0418.2009.01410.x)、IF-1106(山西农业大学昆虫生态学和生物防治实验室(Insect Ecology and Biocontrol Laboratory,Shanxi AgriculturalUniversity))、I9602、I7284(Hussain等人2016,DOI:10.3390/ijms17091518)、I03011(专利US 4618578)、CNRCB1(Centro Nacional de Referencia de Control Biologico(CNRCB),Colima,Mexico)、SCAU-IFCF01(Nian等人,2015;DOI:10.1002/ps.3977)、PF01-N4(中国广州华南农业大学生物防治工程研究中心(Engineering Research Center ofBiological Control,SCAU,Guangzhou,P.R.China))、Pfr-612(Institute ofBiotechnology(IB-FCB-UANL),Mexico)、Pf-Tim、Pf-Tiz、Pf-Hal、Pf-Tic(Chan-Cupul等人,DOI:10.5897/AJMR12.493);C2.15粉虱座壳孢(Aschersonia aleyrodis);C2.16布氏白僵菌(Beauveria brongniartii)(例如Andermatt Biocontrol AG的Beaupro);C2.17暗孢耳霉(Conidiobolus obscurus);C2.18毒力虫霉(Entomophthora virulenta)(例如Ecomic的Vektor);C2.19大链壶菌(Lagenidium giganteum);C2.20黄绿绿僵菌(Metarhiziumflavoviride);C2.21冻土毛霉(Mucor haemelis)(例如Indore Biotech Inputs&Research的BioAvard);C2.22飞虱虫疠霉(Pandora delphacis);C2.23虫生簇孢(Sporothrixinsectorum)(例如Biocerto,BR的Sporothrix Es);C2.24圆孢虫疫霉(Zoophtoraradicans)。
在一个优选的实施方案中,具有杀昆虫作用的真菌菌株选自C2.3球孢白僵菌菌株ATCC 74040;菌株GHA(登记号ATCC74250);菌株ATP02(登记号DSM 24665);菌株PPRI 5339;菌株PPRI 7315、菌株R444、菌株IL197、IL12、IL236、IL10、IL131、IL116;菌株BaGPK;菌株ICPE 279、菌株CG 716;C2.6蜡蚧轮枝菌(以前称为蜡蚧轮枝孢),特别是菌株KV01、菌株DAOM198499或菌株DAOM216596的分生孢子;C2.9蜡蚧霉(原名蜡蚧轮枝孢)菌株VE 6/CABI(=IMI)268317/CBS102071/ARSEF5128;C2.10金龟子绿僵菌蝗变种菌株ARSEF324或分离株IMI 330189(ARSEF7486);C2.11棕色绿僵菌菌株Cb 15;C2.12金龟子绿僵菌,例如菌株ESALQ 1037、菌株E-9、菌株M206077、菌株C4-B(NRRL 30905)、菌株ESC1、菌株15013-1(NRRL67073)、菌株3213-1(NRRL 67074)、菌株C20091、菌株C20092、菌株F52(DSM3884/ATCC90448)或菌株ICIPE 78;C2.14玫烟色拟青霉(新名:玫烟色棒束孢)菌株Apopka 97、FE9901、ARSEF 3581、ARSEF 3302、ARSEF 2679、IfB01(中国典型培养物保藏中心(ChinaCenter for Type Culture Collection)CCTCC M2012400)、ESALQ1296、ESALQ1364、ESALQ1409、CG1228、KCH J2、HIB-19、HIB-23、HIB-29、HIB-30、CHE-CNRCB 304、EH-511/3、CHE-CNRCB 303、CHE-CNRCB 305、CHE-CNRCB 307、EH-506/3、EH-503/3、EH-520/3、PFCAM、MBP、PSMB1、RCEF3304、PF01-N10(CCTCC编号M207088)、CCM 8367、SFP-198、K3、CLO 55、IfTS01、IfTS02、IfTS07、P1、If-02、If-2.3、If-03、Ifr AsC、PC-013(DSMZ 26931)、P43A、PCC、Pf04、Pf59、Pf109、FG340、Pfr1、Pfr8、Pfr9、Pfr10、Pfr11、Pfr12、Ifr531、IF-1106、I9602、I7284、I03011(专利US 4618578)、CNRCB1、SCAU-IFCF01、PF01-N4、Pfr-612、Pf-Tim、Pf-Tiz、Pf-Hal和Pf-Tic;以及C2.16布氏白僵菌(例如Andermatt Biocontrol AG的Beaupro)。
在一个更优选的实施方案中,具有杀昆虫作用的真菌菌株选自C2.3球孢白僵菌菌株ATCC 74040;菌株GHA(登记号ATCC74250);菌株ATP02(登记号DSM 24665);菌株PPRI5339;菌株PPRI 7315和/或菌株R444;C2.6蜡蚧轮枝菌(以前称为蜡蚧轮枝孢),菌株KV01、菌株DAOM198499或菌株DAOM216596的分生孢子;C2.9蜡蚧霉(原名蜡蚧轮枝孢),特别是菌株VE 6/CABI(=IMI)268317/CBS102071/ARSEF5128;C2.10金龟子绿僵菌蝗变种菌株ARSEF324或分离株IMI 330189(ARSEF7486);C2.11棕色绿僵菌菌株Cb 15;C2.12金龟子绿僵菌菌株ESALQ 1037、菌株E-9、菌株M206077、菌株C4-B(NRRL 30905)、菌株ESC1、菌株15013-1(NRRL 67073)、菌株3213-1(NRRL 67074)、菌株C20091、菌株C20092、菌株F52(DSM3884/ATCC 90448)或菌株ICIPE 78;C2.14玫烟色拟青霉(新名:玫烟色棒束孢)菌株Apopka 97和Fe9901;以及C2.16布氏白僵菌(例如Andermatt Biocontrol AG的Beaupro)。
甚至更优选地,所述真菌微生物为玫烟色棒束孢的菌株。优选的玫烟色棒束孢的菌株选自Apopka 97、Fe9901、ARSEF 3581、ARSEF 3302、ARSEF 2679、IfB01(中国典型培养物保藏中心(China Center for Type Culture Collection)CCTCC M2012400)、ESALQ1296、ESALQ1364、ESALQ1409、CG1228、KCH J2、HIB-19、HIB-23、HIB-29、HIB-30、CHE-CNRCB 304、EH-511/3、CHE-CNRCB 303、CHE-CNRCB 305、CHE-CNRCB 307、EH-506/3、EH-503/3、EH-520/3、PFCAM、MBP、PSMB1、RCEF3304、PF01-N10(CCTCC编号M207088)、CCM 8367、SFP-198、K3、CLO 55、IfTS01、IfTS02、IfTS07、P1、If-02、If-2.3、If-03、Ifr AsC、PC-013(DSMZ26931)、P43A、PCC、Pf04、Pf59、Pf109、FG340、Pfr1、Pfr8、Pfr9、Pfr10、Pfr11、Pfr12、Ifr531、IF-1106、I9602、I7284、I03011(专利US 4618578)、CNRCB1、SCAU-IFCF01、PF01-N4、Pfr-612、Pf-Tim、Pf-Tiz、Pf-Hal、Pf-Tic。
最优选地,所述玫烟色棒束孢菌株选自Apopka 97和Fe9901。特别优选的菌株为APOPKA97。
还特别优选绿僵菌属种(Metarhizium spp.)的昆虫病原性真菌。绿僵菌属(Metahrizium)包括若干种类,最近已经对其中一些进行了重新分类(关于概述,参见Bischoff等人,2009;Mycologia 101(4):512-530)。绿僵菌属的成员包括:平沙绿僵菌(M.pingshaense)、金龟子绿僵菌(M.anisopliae)、罗伯茨绿僵菌(M.robertsii)、棕色绿僵菌(M.brunneum)(这四种也称为金龟子绿僵菌复合种)、蝗绿僵菌(M.acridum)、大孢绿僵菌(M.majus)、贵州绿僵菌(M.guizouense)、鳞翅目绿僵菌(M.lepidiotae)、M.globosum和莱氏绿僵菌(M.rileyi)(以前称为莱氏野村菌)。在这些当中,金龟子绿僵菌、罗伯茨绿僵菌、棕色绿僵菌、蝗绿僵菌和莱氏绿僵菌是甚至更优选的,而棕色绿僵菌那些是最优选的。
还尤其优选的属于绿僵菌属种的示例性的菌株为蝗绿僵菌(Metarhiziumacridum)ARSEF324(BASF的产品GreenGuard)或分离株IMI 330189(ARSEF7486;例如Biological Control Products的Green Muscle);棕色绿僵菌菌株Cb 15(例如BIOCARE的),或菌株F52(DSM3884/ATCC 90448;例如Bayer CropScience的BIO1020以及例如Novozymes的Met52);金龟子绿僵菌(Metarhizium anisopliae)复合种菌株菌株ESALQ 1037或菌株ESALQ E-9(二者均来自/>WP Organic)、菌株M206077、菌株C4-B(NRRL 30905)、菌株ESC1、菌株15013-1(NRRL67073)、菌株3213-1(NRRL 67074)、菌株C20091、菌株C20092或菌株ICIPE 78。最优选分离株F52(也称为Met52),其主要感染甲虫幼虫,并且其最初是为防治葡萄黑耳喙象(Otiorhynchus sulcatus)而开发的;和商业上用于蝗虫防治的ARSEF324。基于F52分离株的商业产品为单个分离株F52的继代培养物,并且在包括以下的几个培养物保藏中具有代表性:Julius/>for BiologicalControl(先前为BBA),Darmstadt,Germany:[as M.a.43];HRI,UK:[275-86(缩略词V275或KVL 275)];KVL Denmark[KVL 99-112(Ma 275或V275)];Bayer,Germany[DSM 3884];ATCC,USA[ATCC 90448];USDA,Ithaca,USA[ARSEF 1095]。数家公司已经开发了基于该分离株的颗粒制剂和乳油制剂,并已在欧盟和北美(美国和加拿大)注册,用于对抗苗圃观赏植物和软果中的葡萄黑象甲、其他鞘翅目(Coleoptera)、温室观赏植物中的西花蓟马和草坪中的麦长蝽(chinch bug)。
球孢白僵菌大量生产并用于处理各种昆虫害虫,包括粉虱、蓟马、蚜虫和象鼻虫。球孢白僵菌的优选菌株包括菌株ATCC 74040;菌株GHA(登记号ATCC74250);菌株ATP02(登记号DSM 24665);菌株PPRI 5339;菌株PPRI 7315、菌株IL197、IL12、IL236、IL10、IL131、IL116、菌株Bv025;菌株BaGPK;菌株ICPE 279、菌株CG 716;ESALQPL63、ESALQ447和ESALQ1432、CG1229、IMI389521、NPP111B005、Bb-147。最优选地,球孢白僵菌菌株包括菌株ATCC 74040和菌株GHA(登记号ATCC74250)。根据权利要求1至17中任一项所述的液体制剂,其中所述真菌种类为杀线虫活性真菌。
杀线虫活性真菌种类包括:D2.1白黏帚菌,特别是菌株QST 20799(登记号NRRL30547);D2.2粉红产气霉,特别是菌株A3-5(登记号NRRL 30548);D2.3淡紫拟青霉(Purpureocillium lilacinum)(以前称为淡紫拟青霉(Paecilomyces lilacinus)),特别是淡紫拟青霉(P.lilacinum)菌株251(AGAL 89/030550;例如Bayer CropScienceBiologics GmbH的BioAct)、菌株580(Laverlam的WP(ATCC编号38740))、产品/>(T.Stanes and Company Ltd.)中的菌株、产品/>(Varsha Bioscience and Technology India Pvt Ltd.)中的菌株、产品(Nico Orgo Maures,India)中的菌株、产品/>(BallagroAgro Tecnologia Ltda,Brazil)中的菌株和产品SPECTRUM/>(Promotora TecnicaIndustrial,S.A.DE C.V.,Mexico)中的菌株;D2.4康宁木霉;D2.5 Harposporiumanguillullae;D2.6明尼苏达被毛孢(Hirsutella minnesotensis);D2.7柱捕单顶孢(Monacrosporiumcionopagum);D2.8 Monacrosporium psychrophilum;D2.9疣孢漆斑菌,特别是菌株AARC-0255(例如Valent Biosciences的DiTeraTM);D2.10多变拟青霉(Paecilomyces variotii),菌株Q-09(例如Quimia,MX的/>);D2.11菜豆壳多孢(Stagonospora phaseoli)(例如Syngenta);D2.12木素木霉(Trichoderma lignorum),特别是菌株TL-0601(例如Futureco Bioscience,ES的Mycotric);D2.13腐皮镰刀菌(Fusarium solani),菌株Fs5;D2.14洛斯里被毛孢(Hirsutella rhossiliensis);D2.15掘氏单顶孢(Monacrosporium drechsleri);D2.16哺噬单顶孢(Monacrosporiumgephyropagum);D2.17 Nematoctonus geogenius;D2.18Nematoctonus leiosporus;D2.19侵管新赤壳(Neocosmospora vasinfecta);D2.20类球囊霉属种(Paraglomus sp),特别是巴西类球囊霉(Paraglomus brasilianum);D2.21厚垣孢普可尼亚菌(Pochoniachlamydosporia)(也称为厚垣轮枝孢菌(Vercillium chlamydosporium)),特别是var.catenulata(IMI SD 187;例如The National Center of Animal and Plant Health(CENSA),CU的KlamiC);D2.22异皮壳多孢(Stagonospora heteroderae);D2.23Meristacrum asterospermum;和D2.24 Duddingtonia flagrans。
在一个更优选的实施方案中,具有杀线虫作用的真菌菌株选自淡紫拟青霉,特别是淡紫拟青霉菌株251(AGAL 89/030550)的孢子;Harposporium anguillullae;明尼苏达被毛孢;柱捕单顶孢;Monacrosporium psychrophilum;疣孢漆斑菌,菌株AARC-0255;多变拟青霉;菜豆壳多孢(由Syngenta商购可得);和Duddingtonia flagrans。
在一个甚至更优选的实施方案中,具有杀线虫作用的真菌菌株选自淡紫拟青霉,特别是淡紫拟青霉菌株251(AGAL 89/030550)的孢子;和Duddingtonia flagrans。更优选地,所述具有杀线虫作用的真菌菌株来自淡紫拟青霉,特别是淡紫拟青霉菌株251。
产生孢子并且用作生物防治剂和/或植物生长促进剂的真菌微生物根据本领域中已知的方法或如本申请中所描述的那样在合适的底物上培养或发酵,例如通过深层发酵或固态发酵,例如使用如WO2005/012478或WO1999/057239中公开的设备和方法。
尽管特定的真菌繁殖体如微菌核(参见例如Jackson and Jaronski(2009).Production of microsclerotia of the fungal entomopathogen Metarhiziumanisopliae and their potential for use as a biocontaol agent for soil-inhabiting insects;Mycological Research 113,第842-850页)可通过液体发酵技术生产,但优选根据本发明的休眠的结构体或器官通过固态发酵法生产。固态发酵技术在本领域中是众所周知的(概述参见Gowthaman等人,2001,Appl Mycol Biotechnol(1),第305-352页)。
在发酵之后,可将真菌孢子与底物分离。优选在任何分离步骤之前,将被真菌孢子占据的底物干燥。微生物或真菌孢子可在分离之后通过例如冷冻干燥法、真空干燥法或喷雾干燥法干燥。用于制备干燥的孢子的方法在本领域中是众所周知的,并且包括流化床干燥法、喷雾干燥法、真空干燥法和冻干法。分生孢子可分2步干燥:对于通过固态发酵法生产的分生孢子,首先将分生孢子覆盖的培养底物干燥,之后从干燥的培养底物中收集分生孢子,从而获得纯的分生孢子粉末。然后使用真空干燥法或冻干法进一步干燥分生孢子粉末,之后将其储存或制成制剂。
根据本发明的液体制剂可进一步包含至少一种选自表面活性剂、流变改性剂、消泡剂、抗氧化剂和染料的物质。
非离子和/或阴离子表面活性剂为通常可用于农业化学试剂中的这种类型的所有物质。可能的非离子表面活性剂选自聚环氧乙烷-聚环氧丙烷嵌段共聚物、支链或直链醇的聚乙二醇醚、脂肪酸或脂肪酸醇与环氧乙烷和/或环氧丙烷的反应产物,以及支链或直链烷基乙氧基化物和烷基芳基乙氧基化物,其中可例如提及聚环氧乙烷-脱水山梨糖醇脂肪酸酯。在上述实例中,所选择的种类可任选地被磷酸化以及用碱中和。可能的阴离子表面活性剂为通常可用于农业化学试剂中的这种类型的所有物质。优选烷基磺酸或烷基磷酸以及烷基芳基磺酸或烷基芳基磷酸的碱金属盐、碱土金属盐和铵盐。另一组优选的阴离子表面活性剂或分散助剂为聚苯乙烯磺酸的碱金属盐、碱土金属盐和铵盐,聚乙烯基磺酸的盐,烷基萘磺酸的盐,萘磺酸-甲醛缩合产物的盐,萘磺酸、苯酚磺酸和甲醛的缩合产物的盐,以及木素磺酸的盐。
流变改性剂,也称为增稠剂、抗结块剂、粘度改进剂或结构化剂,可以添加到本发明的制剂中,例如以便防止(不可逆的)沉降。流变改性剂优选衍生自矿物。这些流变控制剂在制剂静止或储存时提供长期稳定性。合适的化合物为选自以下的流变改性剂:亲水性和疏水化的气相二氧化硅和沉淀二氧化硅颗粒,胶凝粘土,包括膨润土、锂蒙脱石、laponite、凹凸棒土、海泡石、蒙皂石,或疏水/亲有机改性的膨润土。在根据本发明的液体制剂中,流变改性剂的合适范围包含0-10%,优选0-7%,更优选0.5-5%。
只要没有另外定义,本申请中的%就是指重量%。
为了将二氧化硅或粘土增稠剂分散在给定的流体中,如本领域中已知的,期望高剪切混合以形成凝胶。
气相(热解)亲水性或疏水化二氧化硅的全球主要生产商为Evonik(商品名)、Cabot Corporation(商品名/>)、Wacker Chemie(HDK产品系列)、Dow Corning,以及OCI/>另一类合适的流变改性剂为沉淀二氧化硅,全球主要生产商为Evonik(商品名/>或/>)、Rhodia(Tixosil)和PPGIndustries(Hi-Sil)。
流变改性剂的另一类合适的实例为粘土增稠剂。粘土增稠剂通常为微粉化的层状硅酸盐,其可为用于广泛应用中的有效增稠剂。它们通常以其非疏水化或疏水化形式使用。为了使它们可分散在非水溶剂中,通常用季铵盐处理粘土表面。这些改性粘土称为有机改性的粘土增稠剂。任选地,少量的低分子量醇或水可用作活化剂。这种基于粘土的流变改性剂的实例包括蒙皂石、膨润土、锂蒙脱石、凹凸棒土、海泡石或蒙脱石粘土。优选的流变改性剂(b)为例如有机改性的锂蒙脱石粘土,例如38和SD3;有机改性的膨润土粘土,例如/>34、SD1和SD2;有机改性的海泡石,例如/>B20;亲水性二氧化硅,例如/>200;疏水化二氧化硅,例如/>R972、R974和R812S;凹凸棒土,例如/>50。
流变改性剂的另一类合适的实例是基于改性的氢化蓖麻油(三羟基硬脂精)或蓖麻油有机衍生物如R和/>ST的有机流变改性剂。
所选流变改性剂的物理性质
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在一个优选的实施方案中,流变控制剂的浓度为0至10重量%,例如1至7或3至6重量%。特别地,流变控制剂的浓度可为0、0.5、1、1.5、2、2.5、3、4、5、6、7、8或9重量%,并且基本上取决于生物防治剂的物理性质以及载液的物理性质。通常,根据本发明的制剂中的流变控制剂的浓度还可取决于生物防治剂。
可以将消泡剂添加到本发明的制剂中,以防止用水稀释时起泡。合适的消泡剂为例如石蜡油、植物油、硅油(例如Solvay的Silcolapse 411、Silcolapse 454、Silcolapse482;Wacker的Silfoam SC1132、Silfoam SC132;Dow的Xiameter ACP-0100)或水性硅油乳液(例如SAG30、SAG 1572/Momentive、Silcolapse 426R、Silcolapse 432/Solvay;SilfarSE4/Wacker;消泡剂8830/Harcros Chemicals)。在一个优选的实施方案中,消泡剂的浓度为0至0.5重量%,例如0.1至0.3重量%。特别地,消泡剂的浓度可以为0、0.1、0.2、0.3、0.4或0.5重量%或介于两者之间的任何值。
可以将抗氧化剂添加到本发明的制剂中,以防止或减慢氧化降解过程。合适的抗氧化剂为例如叔丁基羟基醌(TBHQ)、丁基羟基甲苯(BHT)、丁基羟基茴香醚(BHA)、抗坏血酸棕榈酸酯、生育酚乙酸酯、抗坏血酸硬脂酸酯或类胡萝卜素(例如β-胡萝卜素)或没食子酸酯(例如没食子酸乙酯、没食子酸丙酯、没食子酸辛酯、没食子酸十二烷基酯)。
可使用的染料包括无机颜料,实例为氧化铁、氧化钛和普鲁士蓝,以及有机染料,例如茜素染料、偶氮染料和金属酞菁染料。
在不同的方面,本发明涉及一种包含根据本发明的液体制剂的液体组合物。
本发明还涉及一种用于防治植物中或植物上的植物病原性真菌、昆虫和/或线虫,用于增强植物生长或用于改善植物健康(包括植物产量或根部生长)的方法,该方法包括将有效量的如上所述的本发明的液体制剂或液体组合物施用于所述植物或植物正在生长或意欲生长的场所。
术语“植物健康”通常包含与害虫或植物病原体防治无关的各种植物改进。例如,可提及的有利特性为改进的作物特性,包括:出苗、作物产量、蛋白含量、油含量、淀粉含量、更发达的根系、改进的根部生长、改进的根部尺寸维持、改善的根部效率、改进的胁迫耐受性(例如耐干旱、热、盐、紫外线、水、寒冷)、乙烯减少(减少产生和/或抑制接受)、分蘖增加、植物高度增加、更大的叶片、更少的死基生叶、更强壮的分蘖、更绿的叶片颜色、色素含量、光合活性、需要更少的输入(如肥料或水)、需要更少的种子、更高产的分蘖、开花更早、谷粒成熟更早、植物倒逆(倒伏)更少、枝条生长加快、增强的植物活力、增加的植物直立性(plant stand)以及早且更好的萌芽。
改进的植物健康优选是指改进的植物特性,包括:作物产量、更发达的根系(改进的根部生长)、改进的根部尺寸维持、改善的根部效率、分蘖增加、植物高度增加、更大的叶片、更少的死基生叶、更强壮的分蘖、更绿的叶片颜色、光合活性、更高产的分蘖、增强的植物活力及增加的植物直立性。
关于本发明,改进的植物健康尤其优选是指改进的植物特性,选自:作物产量、更发达的根系、改进的根部生长、改进的根部尺寸维持、改善的根部效率、分蘖增加以及植物高度增加。
本发明的组合物对本文所定义的植物健康的作用可通过比较在相同环境条件下生长的植物而确定,其中一部分所述植物用本发明的液体制剂处理而另一部分所述植物不用本发明的液体制剂处理。相反,所述另一部分完全没有处理或者用安慰剂处理(即没有施用本发明的液体制剂,例如没有施用所有活性成分(即,没有施用本文所述的生物防治剂)。
本发明的液体制剂可以任何所需的方式施用,例如以种子包衣、土壤浸透的形式、和/或直接施用于犁沟中和/或作为叶面喷雾,并可在出苗前、出苗后或者出苗前后均施用。换言之,可将液体制剂施用于种子、植物或收获的果实及蔬菜,或施用于其中正生长有所述植物或期望生长所述植物的土壤(植物的生长位点)中。常规的施用方法包括例如浸渍、喷雾、雾化、灌溉、蒸发、撒粉、弥雾、撒播、发泡、涂抹、铺展(spreading-on)、浇水(浸透)和滴灌。
所有的植物和植物部位均可根据本发明进行处理。在本文中,植物应理解为意指所有的植物和植物部位,如需要的和不需要的野生植物或作物植物(包括天然存在的作物植物)。
可根据本发明进行处理的植物包括以下主要作物植物:玉米、大豆、苜蓿、棉花、向日葵、芸苔属(Brassica)油料种子如甘蓝型油菜(Brassica napus)(例如加拿大油菜(canola)、油菜籽)、芜青(Brassica rapa)、芥菜型油菜(B.juncea)(例如(田)芥菜)和埃塞俄比亚芥(Brassica carinata))、槟榔科属种(Arecaceae sp.)(例如油棕、椰子)、稻、小麦、糖用甜菜、甘蔗、燕麦、黑麦、大麦、粟和高粱、黑小麦、亚麻、坚果、葡萄和藤本植物以及各种植物分类单位的各种水果和蔬菜,例如蔷薇科属种(Rosaceaesp.)(例如仁果类水果如苹果和梨,还有核果类水果如杏、樱桃、扁桃、李子和桃,以及浆果类水果如草莓、覆盆子、红加仑和黑加仑以及醋粟)、茶藨子科属种(Ribesioidae sp.)、胡桃科属种(Juglandaceaesp.)、桦木科属种(Betulaceae sp.)、漆树科属种(Anacardiaceae sp.)、壳斗科属种(Fagaceae sp.)、桑科属种(Moraceae sp.)、木犀科属种(Oleaceae sp.)(例如橄榄树)、猕猴桃科属种(Actinidaceae sp.)、樟科属种(Lauraceae sp.)(例如鳄梨、肉桂、樟脑)、芭蕉科属种(Musaceae sp.)(例如香蕉树和香蕉种植园)、茜草科属种(Rubiaceae sp.)(例如咖啡)、山茶科属种(Theaceaesp.)(例如茶)、梧桐科属种(Sterculiceae sp.)、芸香科属种(Rutaceae sp.)(例如柠檬、橙、桔和葡萄柚);茄科属种(Solanaceae sp.)(例如番茄、马铃薯、胡椒、辣椒、茄子、烟草)、百合科属种(Liliaceae sp.)、菊科属种(Compositaesp.)(例如莴苣、朝鲜蓟和菊苣——包括根菊苣、苣荬菜(endive)或普通菊苣)、伞形科属种(Umbelliferae sp.)(例如胡萝卜、欧芹、芹菜和块根芹)、葫芦科属种(Cucurbitaceaesp.)(例如黄瓜——包括腌食用小黄瓜、南瓜、西瓜、葫芦和甜瓜)、葱科属种(Alliaceaesp.)(例如韭和洋葱)、十字花科属种(Cruciferae sp.)(例如白球甘蓝、红球甘蓝、西兰花(broccoli)、花椰菜(cauliflower)、抱子甘蓝、小白菜、球茎甘蓝、萝卜、辣根、水芹和大白菜)、豆科属种(Leguminosae sp.)(例如花生、豌豆、小扁豆和菜豆——例如刀豆和蚕豆)、藜科属种(Chenopodiaceae sp.)(例如唐莴苣、饲用甜菜、菠菜、甜菜根)、亚麻科属种(Linaceae sp.)(例如大麻(hemp))、大麻科属种(Cannabeacea sp.)(例如印度大麻(cannabis))、锦葵科属种(Malvaceae sp.)(例如秋葵、可可)、罂粟科(Papaveraceae)(例如罂粟)、天门冬科(Asparagaceae)(例如芦笋);园艺和森林中的有用植物和观赏植物,包括草地、草坪、牧草和甜叶菊(Stevia rebaudiana);以及在每种情况下,这些植物的基因修饰型。
作物植物可为可通过常规育种和优化方法或通过生物技术和基因工程法或这些方法的组合而获得的植物,包括转基因植物且包括可受或不受品种权权利保护的植物品种。植物应理解为意指所有发育阶段,例如种子、幼苗、幼小的(未成熟的)植物,直至成熟的植物。植物部位应理解为意指植物的地上和地下的所有部位和器官,如芽、叶、花及根,实例为叶、针叶、茎、干、花、子实体、果实和种子,以及块茎、根及根茎。植物部位还包括采收的植物或采收的植物部位,以及无性和有性繁殖材料,例如幼苗、块茎、根茎、插条和种子。
根据本发明,用液体制剂或包含所述液体制剂的组合物对植物和植物部位进行的处理通过常规处理方法直接进行或使所述化合物作用于周围、环境或贮存空间而进行,所述常规处理方法为例如浸渍、喷雾、蒸发、弥雾、散布(scattering)、涂抹、注入,以及在繁殖材料的情况下,特别是在种子的情况下,还通过施用一层或多层包衣来进行。
如上已提及,可以根据本发明处理所有植物及其部位。在一个优选的实施方案中,处理野生植物种和植物栽培种,或由常规生物育种方法如杂交或原生质体融合而获得的那些,及其部位。在另一个优选的实施方案中,处理通过基因工程方法——如果合适,与常规方法相结合——而获得的转基因植物和植物栽培种(基因修饰的有机体)及其部位。术语“部位”或“植物的部位”或“植物部位”已在上文作出解释。特别优选使用本发明处理分别市售的常规栽培种的植物或使用中的植物。植物栽培种理解为意指具有新特性(“性状”)的并且通过常规育种、通过诱变或通过重组DNA技术获得的植物。它们可以是栽培种、变种、生物型或基因型。
待优选根据本发明处理的转基因植物或植物栽培种(通过基因工程而获得的那些)包括通过基因修饰而接受了将特别有利的、有用的特性(“性状”)赋予这些植物的基因材料的所有植物。这些特性的实例为更好的植物生长、提高的对高温或低温的耐受性、提高的对干旱或对水或土壤盐度水平的耐受性、增强的开花性能、更容易的采收、加速的成熟、更高的产量、采收产品的更高的品质和/或更高的营养价值、采收产品的更好的贮存期限和/或可加工性。这些特性的其他和特别强调的实例为:由于例如在植物内形成的毒素,特别是通过来自苏云金芽孢杆菌(Bacillus thuringiensis)的基因材料(例如通过基因CryIA(a)、CryIA(b)、CryIA(c)、CryIIA、CryIIIA、CryIIIB2、Cry9c、Cry2Ab、Cry3Bb和CryIF,及其组合)在植物内形成的毒素而提高的植物对动物害虫和微生物害虫的抵抗力,例如对昆虫、蛛形纲动物、线虫、螨虫、蛞蝓和蜗牛的抵抗力;以及例如由系统获得性抗性(SAR)、系统素、植物抗毒素、诱导子(elicitor)以及抗性基因和相应地表达的蛋白质和毒素而引起的植物对植物致病真菌、细菌和/或病毒提高的抵抗力;以及植物对某些除草活性化合物(例如咪唑啉酮、磺酰脲、草甘膦或草丁膦(phosphinothricin))提高的耐受性(例如“PAT”基因)。赋予所讨论的所需性状的基因也可在转基因植物中以相互结合的方式存在。可提及的转基因植物的实例为重要的作物植物,如谷物(小麦、稻、黑小麦、大麦、黑麦、燕麦)、玉米、大豆、马铃薯、糖用甜菜、甘蔗、番茄、豌豆和其他类型的蔬菜、棉花、烟草、油菜以及水果植物(果实为苹果、梨、柑橘类水果和葡萄),特别强调玉米、大豆、小麦、稻、马铃薯、棉花、甘蔗、烟草和油菜。特别强调的性状为植物对昆虫、蛛形纲动物、线虫以及蛞蝓和蜗牛的提高的抵抗力。
此外,本发明涉及根据本发明的液体制剂或液体组合物作为植物保护剂或用于促进植物活力和/或植物健康的用途。
以下实施例以非限制性方式说明本发明。
材料和方法
载液列表
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实施例I(淡紫拟青霉)
使用无菌勺将3g淡紫拟青霉菌株251纯孢子粉转移到制剂容器(IKA DT-20型混合容器,具有用于Ultra Turrax的分散工具)中。将12mL流体加入到相应的制剂容器中,并使用ultra turrax tube drive control以3000rpm分散1min;30sec后改变方向。此后,将2.8mL转移到四个样品瓶(I型Wheaton血清瓶)中,留有很少的顶部空间,并使用钳口(crimpneck)盖(Macherey-Nagel N 13型)将其密闭。然后将所有样品瓶转移至设定为30℃的培养箱中,并储存给定时间。
定期从储存地点取回样品并分析孢子活力。因此,将原始样品充分均匀化。将每个样品的0.25g或250μL的等分试样转移到50mL falcon管中。使用包含2% Tween 80的无菌水溶液将试管填充至25g,并通过涡旋均匀化以实现第一稀释步骤(1:100稀释液)。该稀释液用于进一步稀释并在琼脂上点样。
为了评估孢子萌发率,基于1:100稀释液制备1:30000稀释液,其通过多次自动稀释(移液机器人,96孔板)实现。然后,取12x 12cm琼脂平板,并使用自动的12-通道移液器用10乘5μL的每个样品点样。等到液体被琼脂吸收,将琼脂平板转移到培养箱中,并在25℃下培养17小时。打开平板并将其放在显微镜下。每个点随机选择一个区域,并记录指定区域内萌发和未萌发的孢子数。每个样品需要评估至少200个孢子。如果需要,每个点计数多于一个的区域。
表I中给出了孢子活力的结果。
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表I;*由于技术原因无法评估样品;$对照:6次试验的平均值;#非本发明。
讨论:
由表I所示的结果显而易见,并非每种流体都适合于在储存后提供良好的孢子活力。在样品制备之后(第1天)立即测得的孢子活力通常很高,在大多数情况下为或高于80%,在许多情况下甚至高于90%。某些不属于本发明范围的流体甚至在样品制备后的第1天表现出孢子活力的急剧下降,在给定条件下储存后表现出孢子活力的甚至更多的下降(表I,第5、6、14、20、23项)。BreakThru S240先前已被描述为储存真菌孢子的优良流体。在给定的测试条件下,BreakThru S240(表I,第33项)在储存2个月后提供~77%的孢子活力,在储存7个月后提供~7%的孢子活力。在根据本发明的实施例中,选择分别储存2个月或3个月后,表现出约53%或更高的孢子活力的流体。在许多情况下,检测到孢子活力为约80%或更高(表I,第1、7、10、11、13、15、16、18、21、26、29项)。对于选定的流体,即使在30℃下储存7个月后仍具有出色的孢子活力(表I,第25、27、32项)。
实施例II(玫烟色棒束孢)
方法1:使用无菌勺将1.5g玫烟色棒束孢纯孢子粉转移到制剂容器(IKA DT-20型混合容器,具有用于Ultra Turrax的分散工具)中。将13.5mL流体加入到相应的制剂容器中,并使用ultra turrax tube drive control以3000rpm分散1min;30sec后改变方向。此后,将2.8mL转移到四个样品瓶(I型Wheaton血清瓶)中,留有很少的顶部空间,并使用钳口盖(Macherey-Nagel N 13型)将其密闭。然后将所有样品瓶转移至设定为30℃的培养箱中,并储存给定时间。
定期从存储地点取回样品并分析孢子活力。因此,将原始样品充分均匀化。将每个样品的0.25g或250μL的等分试样转移到50mL falcon管中。使用包含2% Tween 80的无菌水溶液将试管填充至25g,并通过涡旋均匀化以实现第一稀释步骤(1:100稀释液)。该稀释液用于进一步稀释并在琼脂上点样。
为了评估孢子萌发率,基于1:100稀释液制备1:15000稀释液,其通过多次自动稀释(移液机器人,96孔板)实现。然后,取12x 12cm琼脂平板,并使用自动的12-通道移液器用10乘5μL的每个样品点样。所有液体被琼脂吸收后,将琼脂平板在23℃下培养16小时。
方法2:使用无菌勺将0.5g玫烟色棒束孢纯孢子粉转移到锥形瓶中。使用Ultra-Turrax(IKA;T 25D型)将24.5mL流体在3,000rpm下分散1min。此后,将2.0mL转移到20个样品瓶(I型Wheaton血清瓶)中,留出很少的顶部空间,并使用钳口盖(Macherey-Nagel N 13型)将其密闭。然后,将所有样品瓶转移到设定为30℃的培养箱中,并储存给定时间。
定期从存储地点取回样品并分析孢子活力。为此,将原始样品充分均匀化。将每个样品的0.5g的等分试样转移到100mL锥形瓶中。使用含有0.1%S240(Evonik,Industries)的无菌水溶液将锥形瓶填充至50g,并在磁力搅拌器(Thermo FisherScientific:CimarecTM)上以750rpm均匀化至少15min,以实现第一稀释步骤(1:100稀释液)。该稀释液用于进一步稀释。
并非所有样品都能很好地混入或完全混入0.1% Break Thru S240中。对于这些样品,还将500μL Neo-wett(Kwizda Agro GmbH)和/或少量(刀尖)-OMT(LEUNA Tenside GmbH)加入到水溶液中。
均匀化后,将1mL转移到1.5mL试管中,并以14,000rpm(Thermo FisherScientific,Megafuge 8R型)离心15min。通过使用移液管丢弃上清液(=上部的相)。使用包含0.1% Neo-Wett的无菌水溶液将试管填充至1mL,并通过涡旋均匀化。
为了评估真菌活力,使用了基于流式细胞仪的方法。
表II中给出了孢子活力的结果。
表II:储存后玫烟色棒束孢的孢子活力;#非本发明;$对照;*3个月后;**在40℃下储存2周后,***6个月后
讨论:
在样品制备后(第1天)立即测得的孢子活力通常很高,并且在大多数情况下为或高于90%,但丁基卡必醇和卡必醇(表II,第1、2项)除外,它们用作阴性标准品(即非本发明)。如几个实施例(表2,第6/6a、7/7a、13/13a、14/14a、16/16a)所示,两种测定孢子活力的方法均提供了可比的结果。在根据本发明的实施例中,选择在30℃下储存1个月后表现出约60%或更高的孢子活力的流体(表II,第3-7、9-12、14、16,-1-20)或在30℃下储存7个月后表现出约50%或更高的孢子活力的流体(表2,第6、7、14、16、19、20项)。
实施例III(球孢白僵菌)
使用无菌勺将1.5g球孢白僵菌纯孢子粉转移到制剂容器(IKA DT-20型混合容器,具有用于Ultra Turrax的分散工具)中。将13.5mL流体加入到相应的制剂容器中,并使用ultra turrax tube drive control以3000rpm分散1min;30sec后改变方向。此后,将2.8mL转移到四个样品瓶(I型Wheaton血清瓶)中,留有很少的顶部空间,并使用钳口盖(Macherey-Nagel N 13型)将其密闭。然后将所有样品瓶转移至设定为30℃的培养箱中,并储存给定时间。
定期从储存地点取回样品并分析孢子活力。因此,将原始样品充分均匀化。将每个样品的0.25g或250μL的等分试样转移到50mL falcon管中。使用包含2% Tween 80的无菌水溶液将试管填充至25g,并通过涡旋均匀化以实现第一稀释步骤(1:100稀释液)。该稀释液用于进一步稀释并在琼脂上点样。
为了评估孢子萌发率,基于1:100稀释液制备1:15000稀释液,其通过多次自动稀释(移液机器人,96孔板)实现。然后,取12x 12cm琼脂平板,并使用自动的12-通道移液器用10乘5μL的每个样品点样。等到液体被琼脂吸收,将琼脂平板转移到培养箱中,并在20℃下培养17小时。打开平板并将其放在显微镜下。每个点随机选择一个区域,并记录指定区域内萌发和未萌发的孢子数。每个样品需要评估至少200个孢子。如果需要,每个点计数多于一个的区域。表III中给出了孢子活力的结果。
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表III;#非本发明
讨论:
在样品制备后(第1天)立即测得的孢子活力通常很高,并在大多数情况下为或高于80%,在许多情况下甚至高于90%。不在本发明范围内的流体在给定条件下储存后表现出孢子活力的急剧下降(表III,第4、12项)。在根据本发明的实施例中,选择在30℃下储存3周或更长时间后表现出约50%或更高的孢子活力的流体。
实施例IV:拜莱青霉
使用无菌勺将1.5g拜莱青霉(ATCC 20851)纯孢子粉转移到制剂容器(IKA DT-20型混合容器,具有用于Ultra Turrax的分散工具)中。将13.5mL流体加入到相应的制剂容器中,并使用ultra turrax tube drive control以3000rpm分散1min;30sec后改变方向。此后,将2.8mL转移到四个样品瓶(I型Wheaton血清瓶)中,留有很少的顶部空间,并使用钳口盖(Macherey-Nagel N 13型)将其密闭。然后将所有样品瓶转移至设定为30℃的培养箱中,并储存给定时间。
定期从储存地点取回样品并分析孢子活力。因此,将原始样品充分均匀化。将每个样品的0.25g或250μL的等分试样转移到50mL falcon管中。使用包含2% Tween 80的无菌水溶液将试管填充至25g,并通过涡旋均匀化以实现第一稀释步骤(1:100稀释液)。该稀释液用于进一步稀释并在琼脂上点样。
为了评估孢子萌发率,基于1:100稀释液制备1:15000稀释液,其通过多次自动稀释(移液机器人,96孔板)实现。然后,取12x 12cm琼脂平板,并使用自动的12-通道移液器用10乘5μL的每个样品点样。等到液体被琼脂吸收,并将琼脂平板转移到培养箱中,并在20℃下培养17小时。打开平板并将其放在显微镜下。每个点随机选择一个区域,并记录指定区域内萌发和未萌发的孢子数。每个样品需要评估至少200个孢子。如果需要,每个点计数多于一个的区域。表IV中给出了孢子活力的结果。
表IV;*由于技术原因无法评估样品;#对照;$2个月后
讨论:
在样品制备后(第1天)立即测得的孢子活力变化很大;在大多数情况下,活力为或高于50%,在所选情况下甚至高于90%。在根据本发明的实施例中,选择在30℃下储存约3个月后表现出约50%或更高的孢子活力的流体(表IV,第1、10、11、15-17项)。在许多情况下,在30℃下储存约3个月后,所选流体中的孢子活力高于用作对照的Break-Thru S240的孢子活力,即高约20%。在此处给定的条件下,一些流体提供较差的孢子活力。
Claims (27)
1.一种液体制剂,其基本上不含水,包含至少一种选自以下的乙氧基化和/或丙氧基化的有机液体以及真菌孢子:
a)具有3-10个环氧乙烷单元的乙氧基化脂肪酸甘油三酯,其中所述脂肪酸甘油三酯选自蓖麻油和植物油;
b)以下通式的嵌段共聚物
H-O-[CH2-CH2-O-]a-[CH2-CH(CH3)-O]b-[CH2-CH2-O-]a2-H
其中a1和a2彼此独立地具有1至20的平均值,并且b具有15至35的平均值;
c)以下通式的聚合物
X-O-[CH2-CH(CH3)-O]m-[CH2-CH2-O-]n-Y
其中X和Y独立地选自
氢
具有1-24个碳原子的支链或直链烷基,以及
具有2-24个碳原子的支链或直链羰基,其为饱和或部分不饱和的,任选地带有羟基官能团;
其中m为0至10的平均数;
其中n为0至40的平均数,
其中m+n不为零
或a)至c)任一混合物。
2.根据权利要求1所述的液体制剂,其中根据a)的所述乙氧基化脂肪酸甘油三酯为植物油,所述植物油选自向日葵油、菜籽油、大豆油、玉米油、椰子油和棕榈油。
3.根据权利要求1所述的液体制剂,其中根据a)的所述乙氧基化脂肪酸甘油三酯为蓖麻油。
4.根据权利要求1所述的液体制剂,其中根据b)的所述乙氧基化和丙氧基化的有机液体选自平均分子量为约1000至约3000g/mol的嵌段共聚物,其中a1和a2彼此独立地具有1至20的平均值,并且b具有15至35的平均值。
5.根据权利要求1和4所述的液体制剂,其中根据b)的所述乙氧基化和丙氧基化的有机液体选自平均分子量为约1500至约3000g/mol的嵌段共聚物,其中a1和a2彼此独立地具有10至15的平均值,并且b具有20至30的平均值。
6.根据权利要求1、4和5中任一项所述的液体制剂,其中根据b)的所述乙氧基化和丙氧基化的有机液体选自平均分子量为约2000至约3000g/mol的嵌段共聚物,其中a1和a2彼此独立地具有3至16的平均值,并且b具有25至35的平均值;和平均分子量为约1400至约2200g/mol的嵌段共聚物,其中a1和a2彼此独立地具有2至12的平均值,并且b具有15至25的平均值。
7.根据权利要求1所述的液体制剂,其中在c)的聚合物中,X为具有1-18个碳原子的支链或直链烷基,或具有2-18个碳原子的支链或直链羰基,其为饱和或部分不饱和的,任选地带有羟基官能团,并且Y为氢,或具有1-6个碳原子的支链或直链烷基,或具有2-6个碳原子的支链或直链羰基,其为饱和或部分不饱和的,任选地带有羟基官能团。
8.根据权利要求1所述的液体制剂,其中在c)的聚合物中,X为具有1-6个碳原子的支链或直链烷基,或具有1-6个碳原子的支链或直链羰基,其为饱和或部分不饱和的,任选地带有羟基官能团,并且Y为具有1-18个碳原子的支链或直链烷基,或具有2-18个碳原子的支链或直链羰基,其为饱和或部分不饱和的,任选地带有羟基官能团。
9.根据权利要求1、7和8中任一项所述的液体制剂,其中在c)的聚合物中,m+n为1至30。
10.根据权利要求1和7至9中任一项所述的液体制剂,其中在c)的聚合物中,m+n优选为1至20。
11.根据权利要求1和7至10中任一项所述的液体制剂,其中在c)的聚合物中,m+n优选为1至15。
12.根据权利要求1和7至11中任一项所述的液体制剂,其中在c)的聚合物中,如果m等于0,则所述至少一种乙氧基化有机液体的分子量(MW)大于或等于190个质量单位。
13.根据权利要求12所述的液体制剂,其中如果m等于0,则所述至少一种乙氧基化有机液体的分子量(MW)大于或等于205个质量单位。
14.根据权利要求1和7至13中任一项所述的液体制剂,其中根据c)的所述乙氧基化和/或丙氧基化的有机液体选自聚环氧乙烷、乙氧基化醇、单环氧乙烷/聚环氧乙烷二醚、单环氧乙烷/聚环氧乙烷醚-酯、乙氧基化羧酸、单环氧乙烷/聚环氧乙烷二酯、聚环氧丙烷、丙氧基化醇、单环氧丙烷/聚环氧丙烷二醚、单环氧丙烷/聚环氧丙烷醚-酯、丙氧基化羧酸、单环氧丙烷/聚环氧丙烷二酯、醇丙氧基化物-乙氧基化物、羧酸丙氧基化物-乙氧基化物和羧酸丙氧基化物-乙氧基化物醚。
15.根据权利要求1至14中任一项所述的液体制剂,其中所述乙氧基化和/或丙氧基化的有机液体的存在量为至少40重量%,优选至少50重量%。
16.根据权利要求1至15中任一项所述的液体制剂,其为可与水混溶的。
17.根据权利要求1至16中任一项所述的液体制剂,其中所述真菌孢子来自有效作为植物保护中的生物防治剂或植物健康促进剂的真菌种类。
18.根据权利要求1至17中任一项所述的液体制剂,其中所述真菌种类为昆虫病原性真菌。
19.根据权利要求1至17中任一项所述的液体制剂,其中所述真菌种类为杀线虫活性真菌。
20.根据权利要求1至19中任一项所述的液体制剂,其中所述真菌种类选自玫烟色棒束孢、拜莱青霉、金龟子绿僵菌、淡紫拟青霉、盾壳霉、球孢白僵菌和粉红粘帚霉。
21.根据权利要求1至20中任一项所述的液体制剂,其还包含至少一种选自表面活性剂、流变改性剂、消泡剂、抗氧化剂和染料的物质。
22.根据权利要求21所述的液体制剂,其中所述流变改性剂选自气相二氧化硅(疏水性/亲水性)或沉淀二氧化硅、天然来源的二氧化硅、基于凹凸棒土的流变改性剂、有机改性的粘土及其混合物。
23.根据权利要求22所述的液体制剂,其中所述流变改性剂为气相二氧化硅。
24.根据前述权利要求中任一项所述的液体制剂,其包含0.1至40重量%的真菌孢子、最高达99.9%的至少一种根据权利要求1至16中任一项所述的乙氧基化和/或丙氧基化的有机液体,以及0至10重量%的至少一种表面活性剂和/或流变改性剂。
25.液体组合物,其包含根据权利要求1至24中任一项所述的液体制剂。
26.用于防治植物中或植物上的植物病原性真菌、昆虫和/或线虫,用于增强植物生长或用于增加植物产量或根部健康的方法,其包括将有效量的根据前述权利要求中任一项所述的液体制剂或液体组合物施用于所述植物或植物正在生长或意欲生长的场所。
27.根据前述权利要求中任一项所述的液体制剂或液体组合物作为植物保护剂或用于促进植物活力和/或植物健康的用途。
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