BR112020023013A2

BR112020023013A2 - composição para reparo de tecido e o método de fabricação da mesma

Info

Publication number: BR112020023013A2
Application number: BR112020023013-8A
Authority: BR
Inventors: Jae Won YU; Myung Seob Shim; Jun Bae Kim
Original assignee: Dexlevo Inc.
Priority date: 2018-05-24
Filing date: 2018-05-25
Publication date: 2021-02-02
Also published as: AU2018424238B2; JP2021523810A; CA3100186A1; JP2023112048A; KR20190133937A; RU2761018C1; CN112118875A; CA3100186C; SG11202009999TA; AU2018424238A1; MX2020011040A; KR102144479B1; WO2019225789A1; EP3763398A4; BR112020023013B1; AU2022202881A1; US20190358363A1; CN116899013A; EP3763398A1

Abstract

  São revelados na presente invenção: uma composição para reparo de tecido que usa um polímero biocompatível não tóxico; e um método de fabricação da mesma. São fornecidos, de acordo com a presente invenção: uma composição para reparo de tecido, sendo que a composição compreende um copolímero obtido a partir da polimerização de um polímero biocompatível hidrofóbico e um polímero biocompatível hidrofílico, em que a composição está em uma fase coloidal na qual o copolímero é disperso na água; e um método de fabricação da mesma.

Description

“COMPOSIÇÃO PARA REPARO DE TECIDO E O MÉTODO DE FABRICAÇÃO DA MESMA” CAMPO DA TÉCNICA

[0001] A presente revelação se refere a uma composição para tratamento de reparo de tecido e um método para a fabricação da mesma e, mais particularmente, a uma composição para tratamento de reparo de tecido e um método para a fabricação da mesma usando polímeros.

ANTECEDENTES DA TÉCNICA

[0002] Tendo em vista a mudança da estrutura social e o aumento da população, o número de pacientes com queimaduras, em decúbito, trauma, cirurgia plástica, úlcera intratável, dermonecrose diabética, entre outros, vem aumentando gradualmente. Assim, um método para tratar peles danificadas vem sendo desenvolvido. Mesmo há 30 anos, pacientes cuja pele danificada ocupava 60% ou mais de uma área da superfície do corpo por queimaduras geralmente morriam de sepse, porém recentemente peles artificiais melhoradas podem proteger da desidratação e infecções, e, portanto, a taxa de mortalidade pode ser reduzida de forma significativa. A pele artificial é, em grande parte, dividida em revestimento de ferimentos e pele cultivada.

[0003] O revestimento de ferimentos é aplicável a ferimentos tópicos ou ferimentos de profundidade menos severa, e o revestimento de ferimentos desempenha o papel de proteger o ferimento durante um período de tempo até que o enxerto de pele seja possível ou durante 3 a 4 semanas até que a pele autocultivada esteja completa e, desse modo,

aplicar facilmente a pele cultivada.

[0004] A pele cultivada é usada em tratamentos para minimizar cicatriz no tecido, no caso de perda severa de pele ou ferimento extenso. A pele cultivada é enxertada para enxerto permanente depois de proliferar totalmente células dérmicas usando técnicas de cultura celular. Para uma pele cultivada, muitas revisões de segurança são necessários através de um teste de bactéria, fungo, endo toxicidade, emicoplasma e é inconveniente em que a pele cultivada deveria ser fabricada após confirmar a segurança através de vários testes de vírus [HIV 1 e 2, HTLVI I e II II , CMV 1gM, Hepatite B & C e adenovírus]. Ademais, no caso de enxertar a pele de cadáveres humanos, há um problema de fonte desconhecida e uma desvantagem que é impossível tratar termicamente o componente no corpo humano em um tratamento em processo, em que os vírus fatais mencionados acima não podem ser esterilizados até 100%.

Além do mais, uma vez que leva pelo menos uma semana para cultivar células e enxertá-las, é difícil ser usada em pacientes que necessitam de primeiros socorros.

[0005] Entretanto, o revestimento de ferimentos tem uma vantagem que o revestimento de ferimentos pode ser extensivamente aplicado e facilmente tratado em relação à pele cultivada, e pode ser aplicado a pacientes que necessitam de primeiros socorros. O revestimento de ferimento, no entanto, é difícil ser enxertado permanentemente uma vez que o revestimento de ferimentos é usado para cobrir temporariamente. Também, o revestimento de ferimentos de polímeros naturais, como quitina, quitosana, colágeno tem baixa resistência mecânica, é caro e é difícil de produzir em massa; e o revestimento de ferimentos de polímero sintético, como silicone e poliuretano tem uma desvantagem que o revestimento de ferimentos tem baixa afinidade com células e nenhuma adesão a um local de ferimento.

[0006] Recentemente, vários produtos usando gel de ácido hialurônico têm sido desenvolvido, porém ácido hialurônico é reabsorvido muito rapidamente no corpo vivo entre 2 semanas e 2 meses, deste modo, causando um problema. Assim, um produto do período de reabsorção do qual é estendido por reticulação de ácido hialurônico e materiais reticuláveis entre si, como divulgado na publicação de patente aberta à inspeção pública nº KR 10- 2014-0072008, está disponível comercialmente. Também é relatado que esse produto reticulado, no entanto, tem um problema devido à toxicidade de materiais reticuláveis.

[0007] Devido a esses problemas, recentemente estão sendo desenvolvidos vários produtos para tratamento de reparo de tecido usando polímeros biodegradáveis e esses produtos são desenvolvidos e usados como uma formulação de enchimento usando os polímeros biocompatíveis existentes, ou uma formulação que é dispersa através do meio que tem viscosidade após processar polímeros insolúveis na água em micropartículas. Uma formulação em que 20 a 50 µm de partículas de ácido poliláctico (PLA) são dispersas em solução aquosa de carboximetilcelulose (CMC), ou uma formulação em que 20 a 50 µm de partículas de policaprolactona (PCL) são dispersas em CMC e solução aquosa de glicerina tem sido usada; no entanto, isso causa um inconveniente em um procedimento devido ao fato de que micropartículas podem ser bloqueadas por uma agulha durante a injeção, e também surge um problema em que as micropartículas não são uniformemente dispersas, de modo que os tecidos não são reparados uniformemente.

[0008] Ademais, de acordo com Klaus Laeschke, “Biocompatibility of Microparticles into Soft Tissue Fillers”, “Semin Cutan Med Surg 23”, 2004, 214 a 217, um produto de tratamento de reparo de tecido com base em polímero deveria ter um diâmetro de partícula de 40 µm ou mais para exibir efeitos duradouros, evitando a fagocitose in vivo. No entanto, o uso da formulação que tem um diâmetro de partícula de 40 µm ou mais resulta em um inconveniente em um procedimento porque as micropartículas são bloqueadas por uma agulha, e causa um problema em que as micropartículas são dispersadas uniformemente, de modo que os tecidos não são reparados uniformemente.

[0009] O desenvolvimento de um produto para tratamento de reparo de tecido para resolver tais problemas acima é urgentemente necessário.

REVELAÇÃO DA INVENÇÃO PROBLEMA DA TÉCNICA

[0010] A presente revelação foi feita tendo em mente os problemas que ocorrem na técnica relacionada, e direcionada para fornecer uma composição para tratamento de reparo de tecido usando polímero não tóxicos e um método de fabricação da mesma.

SOLUÇÃO DA TÉCNICA

[0011] A presente revelação fornece uma composição para tratamento de reparo de tecido, que inclui um copolímero no qual um polímero biocompatível hidrofóbico e um polímero biocompatível hidrofílico são polimerizados, em que a composição tem uma fase coloidal na qual o copolímero é disperso na água.

[0012] Ademais, a presente revelação fornece uma composição para tratamento de reparo de tecido, sendo que a composição pode ter uma gama de fatores K representados pela equação 1 a seguir sendo 0,3 a 1,8: EQUAÇÃO 1 K=(m100*Mh2*10)/(Ml*HLB2)

[0013] Na equação 1, m100 é o número de mols dos polímeros em 100 g de uma solução aquosa, Mh é o peso molecular de uma parte hidrofílica, Ml é o peso molecular de uma parte hidrofóbica, e HLB é representado pela seguinte equação 2, EQUAÇÃO 2 HLB=20*Mh/M

[0014] Na equação 2, Mh é o peso molecular de uma parte hidrofílica, e M é o peso molecular total.

[0015] Também, a presente revelação fornece uma composição para tratamento de reparo de tecido, sendo que o valor de HLB pode ser 1 a 14 na equação 2.

[0016] Além do mais, a presente revelação fornece uma composição para tratamento de reparo de tecido, sendo que o polímero biocompatível hidrofóbico pode ser pelo menos qualquer um polímero selecionado a partir do grupo que consiste em ácido poliglicólico, policaprolactona, ácido poliláctico, polidioxanona, poli (carbonato de trimetileno), poli-hidroxibutirato e um copolímero incluindo o mesmo.

[0017] Também, a presente revelação fornece uma composição para tratamento de reparo de tecido, sendo que o polímero biocompatível hidrofílico pode ser pelo menos pelo menos qualquer um polímero selecionado a partir do grupo que consiste em metóxi polietilenoglicol, di-hidróxi polietilenoglicol, mono-alcóxi polietilenoglicol e polietilenoglicol.

[0018] Inclusive, a presente revelação fornece uma composição para tratamento de reparo de tecido, sendo que a estrutura de ligação do copolímero pode incluir a estrutura da seguinte fórmula 1, fórmula 2 ou fórmula 3: FÓRMULA 1 X-Y FÓRMULA 2 Y-X-Y FÓRMULA 3 X-Y-X

[0019] Nas fórmulas 1 a 3, X é o polímero biocompatível hidrofílico, e Y é o polímero biocompatível hidrofóbico.

[0020] Ademais, a presente revelação fornece uma composição para tratamento de reparo de tecido, sendo que o polímero biocompatível hidrofílico pode ser molecular 300 a

20.000 g/mol.

[0021] Também, a presente revelação fornece uma composição para tratamento de reparo de tecido, sendo que o polímero biocompatível hidrofóbico pode ser molecular 1.000 a 30.000 g/mol.

[0022] Além do mais, a presente revelação fornece uma composição para tratamento de reparo de tecido, sendo que o copolímero pode ser molecular 1.300 a 50.000 g/mol.

[0023] Inclusive, a presente revelação fornece uma composição para tratamento de reparo de tecido, sendo que a concentração do copolímero em uma solução coloidal pode ser de 10 a 50% em peso.

[0024] Adicionalmente, a presente revelação fornece uma composição para tratamento de reparo de tecido, sendo que a solução coloidal pode não ter mudança ou um aumento na turbidez quando a água é adicionada.

[0025] Ademais, a presente revelação fornece um método para fabricar uma composição para tratamento de reparo de tecido, sendo que o método inclui: preparar um polímero por polimerização e um polímero biocompatível hidrofóbico e um polímero biocompatível hidrofílico; e obter uma solução coloidal adicionando-se o polímero à água.

EFEITOS VANTAJOSOS

[0026] A presente revelação pode fornecer uma composição de fase coloidal para tratamento de reparo de tecido que inclui um copolímero no qual um polímero biocompatível hidrofóbico e um polímero biocompatível hidrofílico são polimerizados, não tóxicos ou seguros quando a composição é injetada no corpo vivo, capaz de aplicar a pacientes de emergência.

BREVE DESCRIÇÃO DOS DESENHOS

[0027] A Figura 1 é uma imagem que é tirada com DSLR (D3000, Nikon, Japão) para confirmar se as amostras são vazadas após PBS e uma solução aquosa coloidal serem injetados;

[0028] A Figura 2 é uma imagem, que é tirada através de um microscópio óptico, e mostra a espessura da pele ao longo do tempo depois de uma solução aquosa coloidal ser injetada;

[0029] A Figura 3 é uma imagem, que é tirada através de um microscópio óptico, e mostra o colágeno ao longo do tempo depois de uma solução aquosa coloidal ser injetada;

[0030] A Figura 4 é uma imagem, que é tirada através de um microscópio óptico, e mostra a espessura da pele ao longo do tempo após PBS ser injetado;

[0031] A Figura 5 é uma imagem, que é tirada através de um microscópio óptico, e mostra a espessura da pele ao longo do tempo após PBS ser injetado;

[0032] A Figura 6 é um gráfico que mostra a espessura da pele ao longo do tempo após PBS e uma solução aquosa coloidal serem injetados; e

[0033] A Figura 7 é uma imagem, que é tirada com

DSLR (D3000, Nikon, Japão), e mostra uma solução aquosa coloidal.

[0034] A Figura 8 é uma imagem comparada, que é tirada com DSLR (D3000, Nikon, Japão), e mostra a turbidez da presente invenção e a solução padrão.

MODO PARA REALIZAR A INVENÇÃO

[0035] Doravante, a presente revelação será descrita em detalhes com referência às modalidades exemplificadoras. Todos os termos ou palavras usados no relatório descritivo e reivindicações não devem ser interpretados como uma definição geral ou de dicionário, mas o significado e conceitos devem ser interpretados atendendo aos espíritos da técnica da presente revelação com base em um princípio de que os inventores podem apropriadamente definir os conceitos dos termos a fim de descrever suas próprias revelações no melhor modo.

Portanto, configurações descritas nas modalidades do presente relatório descritivo indicam apenas o exemplo mais preferencial em vez de indicar todos os espíritos da técnica da presente revelação, e, assim, deve-se entender que vários equivalentes e modificações que podem substituir as configurações acima podem estar presentes. Ademais, através do relatório descritivo, a menos que explicitamente descrito ao contrário, a palavra “compreender”, “incluir”, “compreendendo”, e/ou “incluindo” será entendido para implicar a inclusão de elementos declarados, mas não a exclusão de quaisquer outros elementos.

[0036] Os presentes inventores estudaram um polímero biocompatível para fazer uma composição não tóxica e segura para tratamento de reparo de tecido que é capaz de ser aplicada a pacientes de emergência e ser fabricada de modo relativamente barato. Como resultado, foi observado que um copolímero no qual um polímero biocompatível hidrofóbico e um polímero biocompatível hidrofílico são polimerizados pode reparar o tecido de forma segura sem toxicidade in vivo e ser aplicado a pacientes de emergência, e a presente revelação foi alcançada.

[0037] Portanto, a presente revelação revela uma composição para tratamento de reparo de tecido, que inclui um copolímero no qual um polímero biocompatível hidrofóbico e um polímero biocompatível hidrofílico são polimerizados e que tem uma fase coloidal na qual o copolímero é disperso na água.

[0038] O termo “fase coloidal” se refere a um estado no qual partículas finas, maiores que as moléculas ou íons são dispersados em gás ou líquido, e o termo “coloide” se refere ao todo que está em uma fase coloidal.

[0039] O tamanho das partículas dos produtos de carga existentes pode ser identificado a olho nu, porém o tamanho das partículas da fase coloidal, de acordo com a presente revelação não pode ser identificado a olho nu, e a substância estranha insolúvel não se apresenta no coloide.

A substância estranha insolúvel se refere a uma substância estranha insolúvel que é facilmente detectada quando a formulação da solução é adicionada a um recipiente que é claro, de acordo com o Teste de Matéria Particulada

Insolúvel, Testes Gerais da Farmacopeia dos Estados Unidos(USP), e é então observado a olho nu na posição de brilho de cerda de 2750-3000 1x diretamente abaixo de uma fonte de luz branca.

[0040] Na presente revelação, o tamanho das partículas não pode ser identificado a olho nu, e quando a composição é injetada no corpo, polímeros são ligados uns aos outros para formar uma estrutura de matriz, deste modo exibindo um efeito duradouro do tratamento de reparo do tecido na pele sem fagocitose.

[0041] A gama de fator K representado pela seguinte equação 1 da composição, de acordo com a presente revelação pode ser 0,3 a 1,8, de preferência 0,4 a 1,5. Se o fator K é menor que 0,3 ou maior que 1,8, a eficácia como uma formulação pode ser diminuída.

EQUAÇÃO 1 K=(m100*Mh2*10) /(Ml*HLB2)

[0042] Na equação 1, m100 é o número de mols de polímeros em 100 g de uma solução aquosa, Mh é o peso molecular da parte hidrofílica, Ml é o peso molecular da parte hidrofílica, e HLB é representado pela seguinte equação 2, EQUAÇÃO 2 HLB=20*Mh/M

[0043] Na equação 2, Mh é o peso molecular da parte hidrofílica, e M é o peso molecular total.

[0044] Em uma solução aquosa coloidal em que o copolímero no qual um polímero biocompatível hidrofóbico e um polímero biocompatível hidrofílico são polimerizados e dissolvidos em água, o número de mols do copolímero dissolvido em 100 g da solução aquosa tem um valor variando com o peso molecular do polímero biocompatível hidrofílico, o peso molecular do polímero biocompatível hidrofóbico, e a razão de mistura, e assim a gama do efeito de tratamento de reparo de tecido da composição para tratamento de reparo de tecido, de acordo com a presente revelação não poderia ser definido. Na presente revelação, para derivar a gama do efeito do tratamento de reparo do tecido da composição para tratamento de reparo de tecido, na solução aquosa coloidal em que o copolímero no qual o polímero biocompatível hidrofóbico e um polímero biocompatível hidrofílico são polimerizados e dissolvidos em água, a correlação entre o número de mols do copolímero dissolvido em 100 g da solução aquosa, o polímero biocompatível hidrofílico, o polímero biocompatível hidrofóbico, e HLB é estudado. Como resultado, um valor constante é identificado e é definido como fator K.

[0045] Em outras palavras, o fator K na presente revelação representa a correlação entre o número de mols do copolímero dissolvido em 100 g da solução aquosa, o peso molecular do polímero biocompatível hidrofílico, o peso molecular do polímero biocompatível hidrofóbico, e o valor de HLB em uma fase coloidal em que o copolímero no qual um polímero biocompatível hidrofóbico e um polímero biocompatível hidrofílico são polimerizados e dispersados.

[0046] O fator K na fase coloidal representa um valor constante, de acordo com o número de mols do copolímero dissolvido em 100g da solução aquosa, o peso molecular do polímero biocompatível hidrofílico, o peso molecular do polímero biocompatível hidrofóbico, e o HLB.

[0047] A eficácia de uma formulação significa que, antes da injeção no corpo, um polímero hidrofílico no copolímero desempenha um papel importante, sem a substância estranha insolúvel que pode ser identificado a olho nu, devido à interação de um solvente e um polímero, para formar uma fase coloidal no qual os polímeros são uniformemente e estavelmente dispersados em uma solução aquosa, porém, após a injeção no corpo , um polímero hidrofóbico desempenha um papel importante, devido à influência do ambiente no corpo, para colapsar a estrutura em que os polímeros são estavelmente dispersados na solução aquosa, e então a estrutura da matriz formada pelos polímeros ligados uns aos outros induzem o colágeno, deste modo raparam o tecido.

[0048] Ademais, o tecido reparador se refere a um mecanismo que, quando a necrose e a perda ocorrem em um tecido devido ao trauma ou inflamação de um tecido da pele, entre outras., restaura o tecido ao estado original.

[0049] O peso molecular de um polímero na presente revelação se refere a um peso molecular médio (Mn). O número médio do peso molecular significa um peso molecular médio obtido por uma média do peso molecular dos componentes moleculares de um polímero composto que tem um peso molecular distribuído por uma fração de número ou fração de mol.

[0050] O valor de HLB calculado pela equação 2 pode ser na gama de 1 a 14, de preferência 2 a 12, e mais preferivelmente de 2,5 a 10. Se o valor HLB é menor que 1, a polimerização do copolímero pode não ser dissolvido na água; e se o valor de HLB é superior que 14, a composição é absorvida pelo corpo durante a injeção da composição no corpo, para que o efeito como uma formulação não pode ser exibido.

[0051] O termo “Valor de equilíbrio hidrófilo lipofílico (HLB)” se refere a uma afinidade pela água e óleo de um polímero anfifílico. Grande HLB indica uma proporção alta do polímero hidrofílico, e pequeno HLB indica uma proporção baixa do polímero hidrofílico.

[0052] A fim de satisfazer o fator K, de acordo com a equação 1, o polímero biocompatível hidrofóbico pode ser pelo menos qualquer um polímero selecionado a partir do grupo que consiste em ácido poliglicólico, policaprolactona, ácido poliláctico, polidioxanona, poli (carbonato de trimetileno), poli-hidroxibutirato, e um copolímero incluindo o mesmo, e de preferência o polímero biocompatível hidrofóbico pode ser policaprolactona.

[0053] A fim de satisfazer o fator K, de acordo com a equação1, o polímero biocompatível hidrofílico pode ser pelo menos qualquer um polímero selecionado a partir do grupo que consiste em metóxi polietilenoglicol, di-hidróxi de polietilenoglicol, mono-alcóxi de polietilenoglicol, e polietilenoglicol, de preferência metóxi polietilenoglicol.

[0054] A estrutura de ligação do copolímero pode ser, porém não se limita a, representado pela estrutura da seguinte fórmula 1, fórmula 2, ou fórmula 3: FÓRMULA 1 X-Y FÓRMULA 2 Y-X-Y FÓRMULA 3 X-Y-X

[0055] Na fórmula 1-3, X é um polímero biocompatível hidrofílico, e Y é um polímero biocompatível hidrofóbico.

[0056] O peso molecular do polímero biocompatível hidrofílico, a fim de satisfazer o fator K, de acordo com a equação1, pode ser 300 a 20.000 g/mol, de preferência 700 a

15.000 g/mol, e mais preferivelmente 1.000 a 10.000 g/mol.

[0057] O peso molecular do polímero biocompatível hidrofóbico, a fim de satisfazer o fator K, de acordo com a equação 1 pode ser 1.000 a 30.000 g/mol, de preferência

1.500 a 27.500 g/mol, e mais preferivelmente 2.000 a 25.000 g/mol.

[0058] A fim de satisfazer o fator K, de acordo com a equação1, o peso molecular do copolímero pode ser

1.300 a 50.000 g/mol, de preferência 2.200 a 42.500 g/mol, e mais preferencialmente 3.000 a 35.000 g/mol.

[0059] A fim de satisfazer o fator K, de acordo com a equação1, a concentração do copolímero na solução coloidal pode ser 10 a 50 % em peso, de preferência 13 a

48% em peso, e mais preferencialmente 15 a 45% em peso. Se a concentração é maior que 50% em peso, a solução aquosa coloidal se torna uma fase de gel que tem uma viscosidade muito alta, então é muito difícil de ser injetada através de uma seringa, e se a concentração é menor que 10% em peso, o efeito como uma formulação não pode ser exibido.

[0060] A fase coloidal não tem mudança ou aumento na turbidez quando a água é adicionada. Uma fase coloidal geral tem uma redução na turbidez quando a água é adicionada, porém a turbidez da fase coloidal na presente revelação não reduz. O polímero disperso na fase coloidal na presente revelação forma uma estrutura em que o biopolímero hidrofílico e um biopolímero hidrofóbico pode ser dissolvido junto na água. Quando a água é adicionada, no entanto, uma estrutura solúvel formada por um biopolímero hidrofílico e um biopolímero hidrofóbico são colapsados. Portanto, quando a água é adicionada como acima, é formada uma ligação entre biopolímeros hidrofóbicos, de modo que a turbidez da fase coloidal não mude ou, em vez disso, aumente.

[0061] Outro aspecto da presente revelação fornece um método para fabricar a composição para tratamento de reparo de tecido.

[0062] O método inclui preparar um copolímero pela polimerização do polímero biocompatível hidrofóbico e um polímero biocompatível hidrofílico, e obter uma solução coloidal ao adicionar o copolímero a água.

[0063] Em particular, a solução coloidal na qual o copolímero é disperso em água, o tamanho das partículas não pode ser identificado a olho nu pelo aquecimento da temperatura entre o ponto de fusão do copolímero e o ponto de ebulição da água, e uma fase coloidal em que a substância estranha insolúvel não presente é formada.

[0064] Quando a composição para tratamento de reparo de tecido fabricado pelo método é injetada na pele, a composição exibe os efeitos do tratamento de reparo do tecido.

[0065] Doravante, a presente revelação é definida com preparação específica de exemplos e exemplos.

Abreviaturas para compostos usados na descrição de exemplos e exemplos da preparação, são as seguintes: - mPEG: metóxi polietilenoglicol - PCL: policaprolactona EXEMPLO DE PREPARAÇÃO 1: PREPARAÇÃO DE FORMULAÇÃO DE POLÍMERO MPEG2000-PCL2000

[0066] Um copolímero (mPEG2000-PCL2000) foi preparado pela polimerização do metóxi polietilenoglicol, que tem um peso molecular de 2.000 g/mol, como um polímero biocompatível hidrofílico e monômero de policaprolactona, que tem um peso molecular de 2.000 g/mol, como um polímero biocompatível hidrofóbico na presença de um catalisador.

EXEMPLO DE PREPARAÇÃO 2: PREPARAÇÃO DE FORMULAÇÃO DE POLÍMERO MPEG2000-PCL4000

[0067] O Exemplo de Preparação 2 foi preparado usando o mesmo método do Exemplo de Preparação 1, exceto que a polimerização é realizada usando a policaprolactona que tem um peso molecular de 4.000 g/mol em vez de policaprolactona, que tem um peso molecular de 2.000 g/mol, no Exemplo de Preparação 1.

EXEMPLO DE PREPARAÇÃO 3: PREPARAÇÃO DE FORMULAÇÃO DE POLÍMERO MPEG2000-PCL5000

[0068] O Exemplo de Preparação 3 foi preparado usando o mesmo método do Exemplo de Preparação 1, exceto que a polimerização é realizada usando a policaprolactona que tem um peso molecular de 5.000 g/mol em vez de policaprolactona, que tem um peso molecular de 2.000 g/mol, no Exemplo de Preparação 1.

EXEMPLO DE PREPARAÇÃO 4: PREPARAÇÃO DE FORMULAÇÃO DE POLÍMERO MPEG2000-PCL7500

[0069] O Exemplo de Preparação 4 foi preparado usando o mesmo método do Exemplo de Preparação 1, exceto que a polimerização é realizada usando a policaprolactona que tem um peso molecular de 7.500 g/mol em vez de policaprolactona, que tem um peso molecular de 2.000 g/mol, no Exemplo de Preparação 1.

EXEMPLO DE PREPARAÇÃO 5: PREPARAÇÃO DE FORMULAÇÃO DE POLÍMERO MPEG2000-PCL10000

[0070] O Exemplo de Preparação 5 foi preparado usando o mesmo método do Exemplo de Preparação 1, exceto que a polimerização é realizada usando a policaprolactona que tem um peso molecular de 10.000 g/mol em vez de policaprolactona, que tem um peso molecular de 2.000 g/mol, no Exemplo de Preparação 1.

EXEMPLO DE PREPARAÇÃO 6: PREPARAÇÃO DE

FORMULAÇÃO DE POLÍMERO MPEG2000-PCL12500

[0071] O Exemplo de Preparação 6 foi preparado usando o mesmo método do Exemplo de Preparação 1, exceto que a polimerização é realizada usando a policaprolactona que tem um peso molecular de 12.500 g/mol em vez de policaprolactona, que tem um peso molecular de 2.000 g/mol, no Exemplo de Preparação 1.

EXEMPLO DE PREPARAÇÃO 7: PREPARAÇÃO DE FORMULAÇÃO DE POLÍMERO MPEG2000-PCL15000

[0072] O Exemplo de Preparação 7 foi preparado usando o mesmo método do Exemplo de Preparação 1, exceto que a polimerização é realizada usando a policaprolactona que tem um peso molecular de 15.000 g/mol em vez de policaprolactona, que tem um peso molecular de 2.000 g/mol, no Exemplo de Preparação 1.

EXEMPLO DE PREPARAÇÃO 8: PREPARAÇÃO DE FORMULAÇÃO DE POLÍMERO MPEG5000-PCL5000

[0073] Um copolímero (mPEG5000-PCL5000) foi preparado pela polimerização do metóxi polietilenoglicol, que tem um peso molecular de 5.000 g/mol, como um polímero biocompatível hidrofílico e monômero de policaprolactona, que tem um peso molecular de 5.000 g/mol, como um polímero biocompatível hidrofóbico na presença do catalisador.

EXEMPLO DE PREPARAÇÃO 9: PREPARAÇÃO DE FORMULAÇÃO DE POLÍMERO MPEG5000-PCL7500

[0074] O Exemplo de Preparação 9 foi preparado usando o mesmo método do Exemplo de Preparação 8, exceto que a polimerização é realizada usando a policaprolactona que tem um peso molecular de 7.500 g/mol em vez de policaprolactona, que tem um peso molecular de 5.000 g/mol, no Exemplo de Preparação 8.

EXEMPLO DE PREPARAÇÃO 10: PREPARAÇÃO DE FORMULAÇÃO DE POLÍMERO MPEG5000-PCL10000

[0075] O Exemplo de Preparação 10 foi preparado usando o mesmo método do Exemplo de Preparação8, exceto que a polimerização é realizada usando a policaprolactona que tem um peso molecular de 10.000 g/mol em vez de policaprolactona, que tem um peso molecular de 5.000 g/mol, no Exemplo de Preparação 8.

EXEMPLO DE PREPARAÇÃO 11: PREPARAÇÃO DE FORMULAÇÃO DE POLÍMERO MPEG5000-PCL12500

[0076] O Exemplo de Preparação 11 foi preparado usando o mesmo método do Exemplo de Preparação 8, exceto que a polimerização é realizada usando a policaprolactona que tem um peso molecular de 12.500 g/mol em vez de policaprolactona, que tem um peso molecular de 5.000 g/mol, no Exemplo de Preparação 8.

EXEMPLO DE PREPARAÇÃO12: PREPARAÇÃO DO MPEG5000-PCL15000 FORMULAÇÃO DE POLÍMERO

[0077] Exemplo de Preparação 12 foi preparada usando o mesmo método do Exemplo de Preparação8, exceto que a polimerização é realizada usando a policaprolactona que tem um peso molecular de 15.000 g/mol em vez de policaprolactona, que tem um peso molecular de 5.000 g/mol, no Exemplo de Preparação8.

EXEMPLO DE PREPARAÇÃO13: PREPARAÇÃO DO

MPEG5000-PCL17500 FORMULAÇÃO DE POLÍMERO

[0078] Exemplo de Preparação 13 foi preparada usando o mesmo método do Exemplo de Preparação8, exceto que a polimerização é realizada usando a policaprolactona que tem um peso molecular de 17.500 g/mol em vez de policaprolactona, que tem um peso molecular de 5.000 g/mol no Exemplo de Preparação 8.

EXEMPLO DE PREPARAÇÃO 14: PREPARAÇÃO DE FORMULAÇÃO DE POLÍMERO MPEG5000-PCL20000

[0079] O Exemplo de Preparação 14 foi preparado usando o mesmo método do Exemplo de Preparação 8, exceto que a polimerização é realizada usando a policaprolactona que tem um peso molecular de 20.000 g/mol em vez de policaprolactona, que tem um peso molecular de 5.000 g/mol no Exemplo de Preparação8.

EXEMPLO DE PREPARAÇÃO 15: PREPARAÇÃO DE FORMULAÇÃO DE POLÍMERO MPEG5000-PCL25000

[0080] O Exemplo de Preparação 15 foi preparado usando o mesmo método do Exemplo de Preparação8, exceto que a polimerização é realizada usando a policaprolactona que tem um peso molecular de 25.000 g/mol em vez de policaprolactona, que tem um peso molecular de 5.000 g/mol no Exemplo de Preparação 8.

EXEMPLO DE PREPARAÇÃO 16: PREPARAÇÃO DE FORMULAÇÃO DE POLÍMERO MPEG10000-PCL10000

[0081] Um copolímero (mPEG10000-PCL10000) foi preparado pela polimerização do metóxi polietilenoglicol, que tem um peso molecular de 10.000 g/mol, como um polímero biocompatível hidrofílico e monômero de policaprolactona, que tem um peso molecular de 10.000 g/mol como um polímero biocompatível hidrofóbico na presença do catalisador.

EXEMPLO DE PREPARAÇÃO 17: PREPARAÇÃO DE FORMULAÇÃO DE POLÍMERO MPEG10000-PCL12500

[0082] O Exemplo de Preparação 17 foi preparado usando o mesmo método do Exemplo de Preparação 16, exceto que a polimerização é realizada usando a policaprolactona que tem um peso molecular de 12.500 g/mol em vez de policaprolactona, que tem um peso molecular de 10.000 g/mol, no Exemplo de Preparação 16.

EXEMPLO DE PREPARAÇÃO 18: PREPARAÇÃO DE FORMULAÇÃO DE POLÍMERO MPEG10000-PCL15000

[0083] O Exemplo de Preparação 18 foi preparado usando o mesmo método do Exemplo de Preparação 16, exceto que a polimerização é realizada usando a policaprolactona que tem um peso molecular de 15.000 g/mol em vez de policaprolactona, que tem um peso molecular de 10.000 g/mol, no Exemplo de Preparação 16.

EXEMPLO DE PREPARAÇÃO 19: PREPARAÇÃO DE FORMULAÇÃO DE POLÍMERO MPEG10000-PCL17500

[0084] O Exemplo de Preparação 19 foi preparado usando o mesmo método do Exemplo de Preparação 16, exceto que a polimerização é realizada usando a policaprolactona que tem um peso molecular de 17.500 g/mol em vez de policaprolactona, que tem um peso molecular de 10.000 g/mol, no Exemplo de Preparação 16.

EXEMPLO DE PREPARAÇÃO 20: PREPARAÇÃO DE

FORMULAÇÃO DE POLÍMERO MPEG10000-PCL20000

[0085] O Exemplo de Preparação 20 foi preparado usando o mesmo método do Exemplo de Preparação 16, exceto que a polimerização é realizada usando a policaprolactona que tem um peso molecular de 20.000 g/mol em vez de policaprolactona, que tem um peso molecular de 10.000 g/mol, no Exemplo de Preparação 16.

EXEMPLO DE PREPARAÇÃO 21: PREPARAÇÃO DE FORMULAÇÃO DE POLÍMERO MPEG10000-PCL25000

[0086] O Exemplo de Preparação 21 foi preparado usando o mesmo método do Exemplo de Preparação 16, exceto que a polimerização é realizada usando a policaprolactona que tem um peso molecular de 25.000 g/mol em vez de policaprolactona, que tem um peso molecular de 10.000 g/mol, no Exemplo de Preparação 16.

EXEMPLO DE PREPARAÇÃO 22: PREPARAÇÃO DE FORMULAÇÃO DE POLÍMERO MPEG10000-PCL30000

[0087] O Exemplo de Preparação 22 foi preparado usando o mesmo método do Exemplo de Preparação 16, exceto que a polimerização é realizada usando a policaprolactona que tem um peso molecular de 30,000 g/mol em vez de policaprolactona, que tem um peso molecular de 10.000 g/mol, no Exemplo de Preparação 16.

EXEMPLO 1

[0088] A solução aquosa coloidal que tem 5% em peso polímero foi preparada pela adição de água a um polímero preparado pelos Exemplos de Preparação 1 a 22, aquecimento a 80 ℃, e mistura.

EXEMPLO 2

[0089] A solução aquosa coloidal foi preparada usando o mesmo método do Exemplo 1, exceto que a solução aquosa coloidal que tem 10% em peso polímero foi preparada.

EXEMPLO 3

[0090] A solução aquosa coloidal foi preparada usando o mesmo método do Exemplo 1, exceto que a solução aquosa coloidal que tem 15% em peso polímero foi preparada.

EXEMPLO 4

[0091] A solução aquosa coloidal foi preparada usando o mesmo método do Exemplo 1, exceto que a solução aquosa coloidal que tem 20% em peso polímero foi preparada.

EXEMPLO 5

[0092] A solução aquosa coloidal foi preparada usando o mesmo método do Exemplo 1, exceto que a solução aquosa coloidal que tem 25% em peso polímero foi preparada.

EXEMPLO 6

[0093] A solução aquosa coloidal foi preparada usando o mesmo método do Exemplo 1, exceto que a solução aquosa coloidal que tem 30% em peso polímero foi preparada.

EXEMPLO 7

[0094] A solução aquosa coloidal foi preparada usando o mesmo método do Exemplo 1, exceto que a solução aquosa coloidal que tem 35% em peso polímero foi preparada.

EXEMPLO 8

[0095] A solução aquosa coloidal foi preparada usando o mesmo método do Exemplo 1, exceto quea solução aquosa coloidal que tem 40% em peso polímero foi preparada.

EXEMPLO 9

[0096] A solução aquosa coloidal foi preparada usando o mesmo método do Exemplo 1, exceto que a solução aquosa coloidal que tem 45% em peso polímero foi preparada.

EXEMPLO 10

[0097] A solução aquosa coloidal foi preparada usando o mesmo método do Exemplo 1, exceto que a solução aquosa coloidal que tem 50 % em peso polímero foi preparada.

EXEMPLO 11

[0098] A solução aquosa coloidal foi preparada usando o mesmo método do Exemplo 1, exceto que a solução aquosa coloidal que tem 55% em peso polímero foi preparada.

EXEMPLO 12

[0099] A solução aquosa coloidal foi preparada usando o mesmo método do Exemplo 1, exceto que a solução aquosa coloidal que tem 60% em peso polímero foi preparada.

EXEMPLO 13

[0100] A solução aquosa coloidal foi preparada usando o mesmo método do Exemplo 1, exceto que a solução aquosa coloidal que tem 65% em peso polímero foi preparada.

EXEMPLO EXPERIMENTAL 1

[0101] O número de mols de um polímero em 100 g de uma solução aquosa para a composição preparada, de acordo com os exemplos 1 a 13 foi medido, e o fator K, de acordo com a seguinte equação 1 foi medido. O efeito de uma formulação foi avaliado, de acordo com isso, os resultados são mostrados nas tabelas 1 e 2 abaixo (a parte do efeito de uma formulação é destacado).

EQUAÇÃO 1 K=(m100*Mh2*10) /(Ml*HLB2)

[0102] Na equação 1, m100 é o número de mols dos polímeros em 100g da solução aquosa, Mh é o peso molecular da parte hidrofílica, Ml é o peso molecular da parte hidrofóbica, e HLB é representado pela seguinte equação2, EQUAÇÃO 2 HLB=20*Mh/M

[0103] Na equação 2, Mh é o peso molecular da parte hidrofílica, e M é o peso molecular total.

TABELA 1 Concentração do Polímero em Solução aquosa (% em peso) 5% 10% 15% 20% 25% 30% 35% 40% 45% 50% 55% 60% 65% rnPE

PCL HLB

G 0,00 0,00 0,00 0,00 0,00 0,00 0,00 0,01 0,01 0,01 0,01 0,01 0,01 2000 2000 10,00 13 25 38 50 63 75 88 00 13 25 38 50 63 0,00 0,00 0,00 0,00 0,00 0,00 0,00 0,00 0,00 0,00 0,00 0,01 0,01 2000 4000 6,67 08 17 25 33 42 50 58 67 75 83 92 00 08 0,00 0,00 0,00 0,00 0,00 0,00 0 0,00 0,00 0,00 0,00 0,00 0,00 2000 5000 5,71 07 14 21 29 36 43 003) 57 64 71 79 86 93 0,00 0,00 0,00 0,00 0,00 0,00 0,00 0,00 0,00 0,00 0,00 0,00 2000 7500 4,21 05 11 16 21 26 MTTT 37 42 47 53 58 63 68 1000 0,00 0,00 0,00 0,00 0,00 0,00 0,00 0,00 0,00 0,00 0,00 0,00 2000 3,33 0 04 08 13 17 21 25 33 38 42 46 50 54 1250 0,00 0,00 0,00 0,00 0,00 0,00 0,00 0,00 0,00 0,00 0,00 0,00 2000 276 0 03 07 10 14 17 21 24 31 34 38 41 45 Número 2000 1500 2,35 0,00 0,00 0,00 0,00 0,00 0,00 0,00 0,00 0,00 0,00 0,00 0,00 0,00 de mols 0 03 06 09 12 15 18 21 24 26 29 32 35 38 do 0,00 0,00 0,00 0,00 0,00 0,00 0,00 0,00 0,00 0,00 0,00 0,00 0,00 5000 5000 10,00 Polímer 05 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 65 o em 0,00 0,00 0,00 0,00 0,00 0,00 0,00 0,00 0,00 0,00 0,00 0,00 0,00 solução 5000 7500 8,00 04 08 12 16 20 24 28 32 36 40 44 48 52 aquosa 1000 0,00 0,0 0,00 0,00 0,00 0,00 0,00 0,00 0,00 0,00 0,00 0, 0,00 100 g 5000 0 6,67 03 007 10 13 17 20 23 27 30 33 37 0040 43 1250 0,00 0,00 0,00 0,00 0,00 0,00 0,00 0,00 0,00 0,00 0,00 0,00 0,00 5000 5,71 0 03 06 09 11 14 17 20 23 26 29 31 34 37 1500 0,00 0,00 0,00 0,00 0,00 0,00 0,00 0,00 0,00 0,00 0,00 0,00 0,00 5000 5,00 0 03 05 08 10 13 15 18 20 23 25 28 30 33 1750 0,00 0,00 0,00 0,00 0,00 0,00 0,00 0,00 0,00 0,00 0,00 0,00 0,00 5000 4,44 0 02 04 07 09 11 13 16 18 20 22 24 27 29 2000 0,00 0,00 0,00 0,00 0,00 0,00 0,00 0,00 0,00 0,00 0,00 0,00 0,00 5000 4,00 0 02 04 06 08 10 12 14 16 18 20 22 24 26 2500 0,00 0,00 0,00 0,00 0,00 0,00 0,00 0,00 0,00 0,00 0,00 0,00 0,00 5000 3,33 0 02 03 05 07 08 10 12 13 15 17 18 20 22 1000 1000 0,00 0,00 0,00 0,00 0,00 0,00 0,00 0,00 0,00 0,00 0,00 0,00 0,00 10,00 0 0 03 05 08 10 13 15 18 20 23 25 28 30 33 1000 1250 0,00 0,00 0,00 0,00 0,00 0,00 0,00 0,00 0,00 0,00 0,00 0,00 0,00 8,89 0 0 02 04 07 09 11 13 16 18 20 22 24 27 29

1000 1500 0,00 0,00 0,00 0,00 0,00 0,00 0,00 0,00 0,00 0,00 0,00 0,00 0,00 8,00 0 0 02 04 06 08 10 12 14 16 18 20 22 24 26 1000 1750 0,00 0,00 0,00 0,00 0,00 0,00 0,00 0,00 0,00 0,00 0,00 0,00 0,00 7,27 0 0 02 04 05 07 09 11 13 15 16 18 20 22 24 1000 2000 0,00 0,00 0,00 0,00 0,00 0,00 0,00 0,00 0,00 0,00 0,00 0,00 0,00 6,67 0 0 02 03 05 07 08 10 12 13 15 17 18 20 22 1000 2500 0,00 0,00 0,00 0,00 0,00 0,00 0,00 0,00 0,00 0,00 0,00 0,00 0,00 5,71 0 0 01 03 04 06 07 09 10 11 13 14 16 17 19 1000 3000 0,00 0,00 0,00 0,00 0,00 0,00 0,00 0,00 0,00 0,00 0,00 0,00 0,00 5,00 0 0 01 03 04 05 06 08 09 10 11 13 14 15 16 TABELA 2 Concentração do Polímero em Solução aquosa (% em peso) 5% 10% 15% 20% 25% 30% 39% 40% 45% 50% 55% 60% 65% mPEG PCL HLB 0,25 0,50 0,75 1,00 1,25 1,50 1,75 2000 2,25 2,50 2750 3,00 3,250 2000 2000 10,00 00 00 00 0000 00 00 0 00 00 0 00 0 0,18 0,37 0,56 0,75 0,93 1,12 1,31 1,50 1,68 1,87 2062 2250 2000 4000 6,67 24375 75 50 25 7500 50 25 00 75 50 5 0 0175 0 0 0 0875 1050 1225 1400 1 1750 1925 2,10 2000 5000 5,71 22750 0 3500 5250 07000 0 0 0 5750 0 0 00 0,15 0,31 0,47 0 0791 0 1108 1,26 1425 1,58 1,74 1,90 2000 7500 421 20583 83 67 50 76333 9500 3 67 0 33 17 00 1000 0,15 0 3 0 0,60 0750 0900 1050 1200 1350 1,50 1650 1,80 2060 333 19500 0 00 000 4500 0 00 0 0 0 0 00 0 00 1250 0,14 0 0,43 0,58 0,72 0,87 1015 1160 1,30 1,45 1595 1,74 1,885 2000 276 0 50 2900 50 5000 00 0 0 50 00 0 00 0 1500 0,14 0283 0,42 0,56 0,70 0,85 0,99 1,13 1,27 1,41 1,55 1,70 1,841 2000 235 0 17 3 50 8367 00 17 33 50 67 83 00 7 0,25 0,50 0,75 1,00 1,25 1,50 1,75 2000 2,25 2,50 2750 3,00 3,250 5000 5000 10,00 00 00 00 0000 00 00 0 00 00 0 00 0 0,20 0,41 0,62 0,83 1,04 1,25 1,45 1,66 1,87 2,08 2291 2500 5000 7500 8,00 27083 83 67 50 1733 00 83 67 50 33 7 0 1000 0,18 0375 0,56 0,75 0937 1125 1312 1,50 1687 1875 2062 2250 2 5000 667 0, 75 0 25 5 00 0 5 00 5 0 5 0 4375 1250 0,17 0,35 0,52 0,70 0,87 1,05 1225 1400 1,57 1,75 1,92 2100 5000 5,71 22750 Fator 0 50 00 50 5000 00 0 0 50 00 50 0 K 1500 0,16 0,33 0,50 0,66 0,83 1,00 1,16 1,33 1,50 1,66 1,83 2.00 5000 5,00 21667 0 67 33 00 3367 00 67 33 00 67 33 0-0 1750 0,16 0,32 0,48 0,64 0,80 0,96 1,12 1285 1,44 1,60 1767 1,92 5000 4,44 20893 0 07 14 21 3629 43 50 7 64 71 9 86 2000 0,15 0,31 0 00,62 0937 1,09 1250 1,40 1,56 1,71 1,87 5000 400 20313 0 63 25 4688 50 7813 5 38 0 63 25 88 50 2500 0,15 0,30 0 0,60 0750 0,90 1050 1200 1,35 1,50 1650 1800 1,950 5000 333 0 00 00 4500 0 00 00 0 0 00 00 0 0 0 1000 1000 0,25 0,50 0,75 1 1,25 1,50 1,75 2000 2,25 2,50 2750 3,00 3,250 10,00 0 0 00 00 00 0000 00 00 00 0 00 00 0 00 0 1000 1250 0,22 0,45 0,67 0 1125 1350 1575 1800 2 2 2475 2700 2 8,89 0 0 50 00 50 09000 0 0 0 0250 2500 0 0 9250 1000 1500 0 0,41 0 0,83 1,04 1,25 1458 1,66 1,87 2,08 2291 2500 8,00 27083 0 0 2083 67 6250 1733 00 3 67 50 33 7 0 1000 1750 0,19 0392 0 0785 0982 1178 1,37 1,57 1,76 1,96 2160 2357 25,53 7,27 0 0 64 9 5893 1 7 6 50 14 79 43 7 1 6 1000 2000 0,18 0,37 0,56 0,75 0,93 1,12 1,31 1,50 1,68 1,87 2062 2250 6,67 24375 0 0 75 50 25 7500 50 25 00 75 50 5 0 1000 2500 0,17 0,35 0,52 0,70 0875 1,05 1225 1400 1,57 1,75 1925 2100 5,71 22750 0 0 50 00 50 0 00 00 0 0 50 00 0 0 — 1000 3000 0166 0 0,50 0,66 1,00 1166 1,33 1500 1,66 1,83 2.00 5,00 Q833 21667 0 0 7 3333 00 67 00 7 33 0 67 33 00 3

[0104] Referente a Tabela 1, o número de mols do polímero dissolvido em 100 g de uma solução aquosa pode ser visto, e pode-se ver que o menor valor de HLB em uma concentração constante, menor o número de mols.

[0105] Quando a concentração era mais do que 45% em peso, a viscosidade da solução aquosa coloidal foi aprimorada, que era difícil de ser injetada através de uma seringa, e quando a concentração era menor 15% em peso, o efeito como uma formulação não era exibido.

[0106] Ademais, quando o HLB era inferior a 2,5, a taxa do polímero biocompatível hidrofóbico era alta, de modo que, quando a água fosse adicionada, o polímero não se dissolvesse, e quando o HLB era superior a 10, a composição era absorvida no corpo durante a injeção da composição no corpo, de modo que o efeito como uma formulação não fosse exibido.

[0107] No entanto, determinar não com uma proporção de um biopolímero hidrofílico e um biopolímero hidrofóbica, porém o peso molecular de um polímero polimerizado na Tabela 1, comparando o mPEG 2.000 g/mol e mPEG 5.000 g/mol, quando mPEG era 2.000 g/mol, o número de mols do polímero em 100 g de uma solução aquosa aumentou mais do que quando o mPEG era 5.000 g/mol. Portanto, o número de mols do polímero em 100 g da solução aquosa não era constante, e assim, converter isso a um valor constante, através disso para medir uma gama de formação da composição para tratamento de reparo de tecido, de acordo com a presente revelação, que resulta no fator K.

[0108] Referente à Tabela 2, ao contrário da

Tabela 1, uma relação do peso molecular de um biopolímero hidrofílico e um biopolímero hidrofóbico e o valor de HLB pode ser entendido, quando o peso molecular de um biopolímero hidrofílico é o mesmo, como o peso molecular de um biopolímero hidrofóbico aumenta, o fator K reduz. Isso é o mesmo que determinar com uma proporção de um biopolímero hidrofílico e um biopolímero hidrofóbico. Ademais, pode-se ver que mesmo que o peso molecular de um biopolímero hidrofílico é diferente, quando uma proporção de um biopolímero hidrofílico e um biopolímero hidrofóbico é o mesmo, o fator K tem um valor muito similar.

[0109] O fator K tem um valor constante dentro da gama de uma certa concentração discutida abaixo, o efeito de uma formulação dentro dessa gama pode ser identificado.

Também, o fator K é convertido cerca de 0,12 a 3,26, a parte do efeito de uma formulação é uma gama de 0,4 a 1,5.

[0110] Além do mais, pode ser identificado que o efeito como uma formulação está em uma concentração de 15 a 45% em peso na solução aquosa coloidal, HLB de 2,5 a 10, e o fator K de 0,4 a 1,5.

EXEMPLO EXPERIMENTAL 2

[0111] Para medir a turbidez de uma composição para tratamento de reparo de tecido, de acordo com a presente revelação como o seguinte método, a fase coloidal preparada usando o Exemplo de Preparação3, o resultado é mostrado na Tabela 3 abaixo. Padrão de turbidez da formazina, 4000NTU era usada como uma turbidez da solução padrão.

MÉTODO DE MEDIDA

[0112] (1) Uma amostra comparável foi preparade para fazer uma solução na qual uma fase coloidal preparada usando a solução padrão e o Exemplo de Preparação 3 era diluído 2 vezes, 5 vezes, 10 vezes e 20 vezes, respectivamente, e colocando isso em um frasco, e a turbidez da solução padrão diluída era 4.000, 2.000, 800, 400 e 200 NTU, respectivamente.

[0113] (2) Depois de limpar o exterior de um frasco de amostras para comparar a turbidez, mudanças na turbidez devido à diluição e diferença da turbidez na mesma taxa de diluição foi observada em um brilho de cerca de

1.000 1x abaixo da fonte de luz LED branca.

[0114] A Figura 8 é uma imagem comparada, que é tirada com o DSLR (D3000, Nikon, Japão), e mostra a turbidez da presente invenção e a solução padrão.

[0115] Vendo a Figura 8 acima, para a solução padrão, da esquerda para a direita, pode-se ver que quanto mais diluição menos a turbidez.

[0116] Em contraste, para a presente revelação, da esquerda para a direita, pode-se identificar a olho nu que, embora a solução tenha sido diluída, a turbidez não diminuiu, e sim, a turbidez aumentou mais do que a solução não diluída.

EXEMPLO EXPERIMENTAL 3

[0117] Para validar os efeitos como uma formulação da composição para tratamento de reparo de tecido, de acordo com a presente revelação, experimentos em animais foram performados.

[0118] Seis ratos SD de seis semanas de idade (comprados da Orient Bio) foram usados como um animal experimental.

[0119] O experimento foi realizado que o total de 10 ratos foram subdivididos em três grupos, designando que um lado é o fosfato tamponado salino (PBS), e o outro é o grupo de amostra de teste em oito locais por seis ratos SD de seis semanas individuais. Durante o experimento, ambiente de alimentação foi definida como uma temperatura de 24±2 ℃, a umidade relativa de 50±10%, e um tempo de iluminação de 12 horas, e animais eram permitidos de comer alimentos livremente.

[0120] PBS foi injetado a camada subcutânea esquerda com respeito a linha de centro de um rato em cada grupo, e uma solução aquosa coloidal preparada pelo polímero dissolvido na água, que foi preparado no Exemplo de Preparação3 (que tem uma concentração de 25%, HLB de 5,7, fator K de 0,8864) é regularmente injetado em 250 ㎕.

Imediatamente após a injeção, foi observado se as amostras foram vazadas, e os resultados são mostrados na Figura 1.

[0121] Imediatamente após a administração da solução aquosa coloidal e PBS (0 h), os animais experimentais foram sacrificados depois de uma semana, duas semanas, quatro semanas e seis semanas, respectivamente, os tecidos da pele em que as amostras foram injetadas e os tecidos de pele em que as amostras não foram injetadas foram colhidos e fixos em solução de formalina tamponada

10% neutra. Depois, os tecidos da pele foram embutidos em parafina e solidificados, e 5 ㎛ seções foram preparadas.

As seções foram manchadas com Hematoxilina e Eosina (H&E), e a reação da inflamação/substância estranha foi, depois, avaliado, de acordo com a Tabela 3 abaixo. A espessura de toda camada da pele (camada dérmica e subcutânea) aumenta, devido à injeção da amostra, foi observado através de um microscópio óptico, e os resultados são mostrados nas Figuras 2, 4 e 6, respectivamente.

[0122] Também, para avaliar a capacidade de biossíntese do novo colágeno de uma solução aquosa coloidal e PBS, as seções foram manchadas com Trichorme de Masson (MT), e a formação de colágeno no tecido foi, então, observado. A histocompatibilidade das amostras injetadas foi avaliada através da confirmação da inflamação e da reação da substância estranha, de acordo com a Tabela 3 abaixo, como critério principal. Lâminas de tecido foram observadas com 40 vezes, 100 vezes, 200 vezes e 400 vezes usando um microscópio óptico, principais características histológicas de cada lâmina foram decifradas, e os resultados são mostrados nas Figuras 3 e 5.

[0123] Ademais, o grau de inflamação e a reação da substância estranha, devido à solução aquosa coloidal injetada ser dividida em quatro etapas. A reação da inflamação e substância estranha, que é observada no grupo PBS administrado, é definido como nenhuma inflamação, e como a reação da inflamação ou reação da substância estranha é intensificado, o grau é definido como quase claro (escore 1), leve(escore 2), moderado(escore 3), severo(escore 4) e avaliado, de acordo com a Tabela 3 abaixo (Duranti et al. Dermatol Surg 1998:24:1317 a 25).

TABELA 3 Classificação Granuloma do corpo estranho escore Nenhuma Nenhuma reação visível 0 inflamação escore quase Reação ligeira com algumas células 1 claro inflamatórias escore Reação inflamatória clara com uma ou duas leve 2 células gigantes escore Tecido fibroso com células inflamatórias, moderado 3 linfócitos e células gigantes escore Reação do corpo estranho ao granuloma com severo 4 implante claro encapsulado

[0124] A Figura 1 é uma imagem que foi tirada com DSLR (D3000, Nikon, Japão) para confirmar se as amostras foram vazadas depois da PBS e uma solução aquosa coloidal foi injetada; a Figura 2 é uma imagem, que foi tirada através de um microscópio óptico, de espessura da pele ao longo do tempo depois de uma solução aquosa coloidal ser injetada; e a Figura 3 é uma imagem, que foi tirada através de um microscópio óptico, de colágeno ao longo do tempo depois de uma solução aquosa coloidal ser injetada. A Figura 4 é uma imagem, que foi tirada através de um microscópio óptico, de espessura da pele ao longo do tempo depois do PBS ser injetado; a Figura 5 é uma imagem, que foi tirada através de um microscópio óptico, de espessura da pele ao longo do tempo depois do PBS ser injetado; e a Figura 6 é um gráfico que mostra a espessura da pele ao longo do tempo depois do PBS e uma solução aquosa coloidal serem injetados.

[0125] Referente à Figura 1, ao ser observado imediatamente após a injeção de PBS e a solução aquosa coloidal, pode-se identificar que as amostras não foram vazadas.

[0126] Referente às Figuras 2, 4 e 6, como resultado da avaliação histopatológica com a mancha de H&E, pode-se identificar que a espessura da camada subcutânea no tecido, a camada subcutânea em que a solução aquosa coloidal foi injetada também aumentou como a solução aquosa coloidal foi injetada ao longo do tempo até seis semanas, e pode-se ver que uma quantidade de aumento, de acordo com isso, foi certamente melhorada em relação à Figura 4 em que o PBS foi injetado.

[0127] Referente às Figuras 3 e 5, como resultado da avaliação histopatológica com a mancha MT, pode-se identificar que a formação do colágeno no tecido da camada subcutânea em que a solução aquosa coloidal foi injetada foi identificada, e a espessura da camada subcutânea, de acordo com a formação de colágeno, também aumenta ao longo do tempo até seis semanas, e pode-se ver que uma quantidade de aumento, de acordo com isso, foi certamente melhorada em relação à Figura 5 em que o PBS foi injetado.

[0128] Ademais, referente às Figuras 2 a 5, ao avaliar a reação da substância estranha, de acordo com a Tabela 3 acima, identificou-se que não foi observada uma reação significativa devido à injeção da solução aquosa coloidal, e as células inflamatórias, linfócitos, e macrófagos em um tecido fibroso quase não foram vistos (Escore 1), não houve diferença na reação da substância estranha antes da injeção da solução aquosa coloidal.

[0129] Como tal, ao atender uma concentração, HLB, e o valor de K, de acordo com a presente revelação, a composição para tratamento de reparo de tecido usando um polímero biocompatível não tóxico e um método de fabricação do mesmo é fornecido.

[0130] Até agora, os preferidos exemplos da presente revelação foram descritos com referência as figuras. Embora os exemplos da presente revelação tenham sido divulgados para fins ilustrativos, aqueles qualificados na técnica apreciarão que várias modificações, adições e substituições são possíveis, sem se afastar da ideia técnica ou características essenciais da presente revelação.

[0131] Assim, o escopo da presente revelação é definido pelas seguintes reivindicações em vez de pela descrição detalhada dos exemplos. Deve ser entendido que todas as modificações ou mudanças nas formas concebidas do significado e escopo das reivindicações e seus equivalentes são inclusos no escopo da presente revelação.

Claims

REIVINDICAÇÕES

1. Composição para tratamento de reparo de tecido caracterizada por compreender um copolímero no qual um polímero biocompatível e hidrofóbico e um polímero biocompatível hidrofílico são polimerizados, sendo que a composição tem uma fase coloidal na qual o copolímero é disperso na água.

2. Composição para tratamento de reparo de tecido, de acordo com a reivindicação 1, caracterizada por ter uma gama de fatores K representada pela equação 1 a seguir sendo 0,3 a 1,8: <Equação 1> K=(m100*Mh2*10) /(Ml*HLB2) em que m100 é o número de mol de polímeros em 100 g de uma solução aquosa, Mh é o peso molecular de uma parte hidrofílica, Ml é o peso molecular de uma parte hidrofóbica, e HLB é representado pela seguinte equação 2, <Equação 2> HLB=20*Mh/M em que Mh é o peso molecular da parte hidrofílica, e M é o peso molecular total.

3. Composição para tratamento de reparo de tecido, de acordo com a reivindicação 1, caracterizada pelo valor de HLB ser de 1 a 14 na equação 2.

4. Composição para tratamento de reparo de tecido, de acordo com a reivindicação 1, caracterizada pelo polímero biocompatível hidrofóbico ser pelo menos qualquer um polímero selecionado a partir do grupo que consiste em ácido poliglicólico, policaprolactona, ácido poliláctico, polidioxanona, poli(carbonato de trimetileno), poli- hidroxibutirato e um copolímero incluindo o mesmo.

5. Composição para tratamento de reparo de tecido, de acordo com a reivindicação 1, caracterizada pelo polímero biocompatível hidrofílico ser pelo menos qualquer um polímero selecionado a partir do grupo que consiste em metóxi polietilenoglicol, di-hidróxi polietilenoglicol, mono-alcóxi polietilenoglicol e polietilenoglicol.

6. Composição para tratamento de reparo de tecido, de acordo com a reivindicação 1, caracterizada pela estrutura de ligação do copolímero compreender a estrutura da seguinte fórmula 1, fórmula 2 ou fórmula 3: [Fórmula 1] X-Y [Fórmula 2] Y-X-Y [Fórmula 3] X-Y-X em que X é o polímero biocompatível hidrofílico, e Y é o polímero biocompatível hidrofóbico.

7. Composição para tratamento de reparo de tecido, de acordo com a reivindicação 1, caracterizada pelo polímero biocompatível hidrofílico ter 300 a 20.000 g/mol.

8. Composição para tratamento de reparo de tecido, de acordo com a reivindição 1, caracterizada pelo polímero biocompatível hidrofóbico ter 1.000 a 30.000 g/mol.

9. Composição para tratamento de reparo de tecido, de acordo com a reivindicação 1, caracterizada pelo copolímero ter 1.300 a 50.000 g/mol.

10. Composição para tratamento de reparo de tecido, de acordo com a reivindicação 1, caracterizada pela concentração do copolímero em uma solução coloidal ser de 10 a 50% em peso.

11. Composição para tratamento de reparo de tecido, de acordo com a reivindicação 1, caracterizada pela solução coloidal não ter mudança ou um aumento na turbidez quando a água é adicionada.

12. Método para fabricar uma composição para tratamento de reparo de tecido, sendo que o método é caracterizado por compreender: preparar um polímero polimerizando-se um polímero biocompatível hidrofóbico e um polímero biocompatível hidrofílico; e obter uma solução coloidal adicionando-se o polímero à água.