BR112020014594A2 - composições de diagnóstico para imageamento pet, método para fabricar composição de diagnóstico e seu uso em diagnóstico - Google Patents

Abstract

A presente invenção se refere a uma composição de diagnóstico compreendendo: a. um composto de Fórmula I, b. etanol, c. água, e d. um ácido hidroxicarboxílico, um sal de um ácido hidroxicarboxílico ou uma mistura dos mesmos. A composição de diagnóstico pode ser usada na detecção seletiva de distúrbios e anormalidades associados com agregados de Tau, tais como doença de Alzheimer (AD) e outras tauopatias, por exemplo, usando Tomografia por Emissão de Pósitrons (PET). A presente invenção também se refere a um método de preparar a composição de diagnóstico reivindicada.

Description

Relatório Descritivo da Patente de Invenção para "COMPOSIÇÕES DE DIAGNÓSTICO PARA IMAGEAMENTO PET, SEU USO E SEUS MÉTODOS DE FABRICAÇÃO, E MÉTODOS PARA

COLETAR DADOS PARA DIAGNÓSTICO E DETERMINAR A QUANTIDADE DE AGREGADO DE TAU". CAMPO DA INVENÇÃO

[001] A invenção se refere a uma composição de diagnóstico que é adequada para imageamento por Tomografia por Emissão de Pósitrons (PET). Além disso, a invenção se refere a um método para fabricar a composição de diagnóstico bem como a composição para uso em diagnóstico.

FUNDAMENTO

[002] A doença de Alzheimer (AD) é um distúrbio neurológico que se pensa ser causado principalmente por placas amiloides, um acúmulo extracelular de depósito anormal de agregados de beta-amiloide (Aβ) no cérebro ou nos olhos. As outras principais características neuropatológicas na AD são os emaranhados neurofibrilares intracelulares (NFT) que se originam pela agregação da proteína Tau hiperfosforilada (unidade associada à Tubulina), Tau fosforilada ou Tau patológica e seus conformadores. AD compartilha essa patologia com muitas tauopatias neurodegenerativas, em particular, com tipos especificados de demência frontotemporal (FTD). No cérebro com AD, a patologia de tau (tauopatia) se desenvolve mais tarde que a patologia de amiloide, mas ainda é discutido controversamente se a proteína Aβ for o agente causador da AD que constitui a essência da chamada hipótese de cascata de amiloide (Hardy et al., Science 1992, 256, 184- 185, e mais recentemente, Musiek et al., Nature Neurosciences 2015, 18(6), 800-806, "Three dimensions of the amyloid hypothesis: time, space and ‘wingmen’").

[003] Atualmente, a única maneira definitiva de diagnosticar a AD é identificar placas e emaranhados no tecido cerebral por análise histológica de materiais de biópsia ou autópsia após a morte do indivíduo. Além da AD, a Tau desempenha um papel importante em outras doenças neurodegenerativas (não AD). Tais tauopatias não-AD incluem, por exemplo, paralisia supranuclear (PSP), doença de Pick (PiD) e degeneração corticobasal (CBD).

[004] O composto da fórmula geral A foi proposto como sendo útil na detecção seletiva de distúrbios e anormalidades associadas com agregados de Tau, tais como doença de Alzheimer (AD) e outras tauopatias, e certos métodos de fabricar este composto foram descritos na técnica anterior.

[005] A composição farmacêutica descrita no WO 2015/052105 e Gobbi et al. consiste em [18F]-2-(6-fluoro-piridin-3-il)-9H-dipirido[2,3- b;3’,4’-d]pirrol em 1 mL etanol e 10 mL de solução salina. Os componentes são passados por um filtro esterilizante de 0,22 µm. 18

[006] Traçadores radiorrotulados por F para imageamento PET são produzidos por demanda e a composição de diagnóstico é geralmente usada dentro de 10 a 12 h após o final da fabricação. Para transporte de longa distância e para produção de múltiplas doses de uma batelada, o nível de radioatividade é elevado (por exemplo, para obter bateladas de piridinil-9H-pirrolo-dipiridinas [18F]fluoradas de ≥ 20 GBq ou 50 ≥ GBq ou ainda ≥ 100 GBq.). Produtos radiofarmacêuticos são conhecidos por serem sensíveis à decomposição radiolítica, que requer o uso de agentes estabilizantes em composições de diagnóstico adequadas.

[007] Especialmente para compostos lipofílicos, tais como piridinil- 9H-pirrolo-dipiridinas [18F]fluoradas, a perda em filtros estéreis e em superfícies (por exemplo, seringas) precisa ser minimizada para um uso eficiente e confiável da composição de diagnóstico.

[008] Portanto, é um objeto da presente invenção prover uma composição de diagnóstico que tem melhor estabilidade.

DESCRIÇÃO DAS FIGURAS

[009] Figura 1: Configuração do sintetizador GE Tracerlab FX.

[0010] Figura 2: Setup do sintetizador IBA Synthera.

SUMÁRIO DA INVENÇÃO

[0011] A presente invenção se refere aos seguintes itens:

[0012] 1. Uma composição de diagnóstico compreendendo: a. um composto de Fórmula I, b. etanol, c. água, e d. um ácido hidroxicarboxílico, um sal de um ácido hidroxicarboxílico ou uma mistura dos mesmos.

[0013] 2. Uma composição de diagnóstico, de acordo com o item 1, 18 19 18 em que F na Fórmula I é F ou F, preferencialmente F ou uma mistura de 18F e 19F.

[0014] 3. Uma composição de diagnóstico, de acordo com o item 1 ou 2, em que o composto de Fórmula I é um composto de Fórmula Ib .

[0015] 4. Uma composição de diagnóstico, de acordo com qualquer um dos itens 1 a 3, compreendendo cerca de 0,03 GBq/mL a cerca de

10 GBq/mL do composto de Fórmula I, preferencialmente cerca de 0,03 GBq/mL a cerca de 5 GBq/mL do composto de Fórmula I.

[0016] 5. Uma composição de diagnóstico, de acordo com qualquer um dos itens 1 a 4, compreendendo pelo menos cerca de 1 GBq/mL do composto de Fórmula I, preferencialmente pelo menos cerca de 2 GBq/mL do composto de Fórmula I, preferencialmente pelo menos cerca de 3 GBq/mL do composto de Fórmula I.

[0017] 6. Uma composição de diagnóstico, de acordo com qualquer um dos itens 1 a 5, compreendendo cerca de 1% v/v a cerca de 20% v/v de etanol, preferencialmente cerca de 1% v/v a cerca de 15% v/v de etanol, mais preferencialmente cerca de 5% v/v a cerca de 10% v/v de etanol.

[0018] 7. Uma composição de diagnóstico, de acordo com qualquer um dos itens 1 a 6, em que o ácido hidroxicarboxílico, o sal do ácido hidroxicarboxílico ou a mistura dos mesmos são selecionados do grupo que consiste em ácido ascórbico e sais de ácido ascórbico, ácidos hidroxibenzoicos e sais de ácidos hidroxibenzoicos, derivados de ácido hidroxibenzoico e sais de derivados de ácido hidroxibenzoico, ácido cítrico e sais de ácido cítrico e misturas dos mesmos.

[0019] 8. Uma composição de diagnóstico, de acordo com o item 7, em que o derivado de ácido hidroxibenzoico é selecionado do grupo que consiste em ácido hidroxibenzoico, ácido di-hidroxibenzoico e ácido tri- hidroxibenzoico.

[0020] 9. Uma composição de diagnóstico, de acordo com o item 8, em que o ácido di-hidroxibenzoico é ácido gentísico.

[0021] 10. Uma composição de diagnóstico, de acordo com qualquer um dos itens 1 a 9, em que o ácido hidroxicarboxílico, o sal do ácido hidroxicarboxílico ou a mistura dos mesmos é/são selecionado(s) de ácido ascórbico, ascorbato de sódio, ácido gentísico, sal de sódio de ácido gentísico, ácido cítrico, citrato de sódio ou uma mistura dos mesmos.

[0022] 11. Uma composição de diagnóstico, de acordo com qualquer um dos itens 1 a 10, compreendendo cerca de 2,5 a cerca de 500 µmoles/mL do ácido hidroxicarboxílico, do sal do ácido hidroxicarboxílico ou da mistura dos mesmos, preferencialmente cerca de 10 a cerca de 300 µmoles/mL do ácido hidroxicarboxílico, do sal do ácido hidroxicarboxílico ou da mistura dos mesmos, mais preferencialmente cerca de 25 a cerca de 300 µmoles/mL do ácido hidroxicarboxílico, do sal do ácido hidroxicarboxílico ou da mistura dos mesmos.

[0023] 12. Uma composição de diagnóstico de acordo com qualquer um dos itens 1 a 7, 10 e 11, em que o ácido hidroxicarboxílico, o sal do ácido hidroxicarboxílico ou a mistura dos mesmos é/são selecionado(s) de ácido ascórbico, ascorbato de sódio ou mistura dos mesmos, em que a composição de diagnóstico preferencialmente compreende cerca de 10 a cerca de 500 µmoles/mL de ácido ascórbico, ascorbato de sódio ou mistura dos mesmos, mais preferencialmente cerca de 50 a cerca de 500 µmoles/mL de ácido ascórbico, ascorbato de sódio ou mistura dos mesmos, ainda mais preferencialmente cerca de 100 a cerca de 500 µmoles/mL de ácido ascórbico, ascorbato de sódio ou mistura dos mesmos, ainda mais preferencialmente cerca de 50 a cerca de 300 µmoles/mL de ácido ascórbico, ascorbato de sódio ou mistura dos mesmos e ainda mais preferencialmente cerca de 200 a cerca de 300 µmoles/mL de ácido ascórbico, ascorbato de sódio ou mistura dos mesmos.

[0024] 13. Uma composição de diagnóstico de acordo com qualquer um dos itens 1 a 11, em que o ácido hidroxicarboxílico, o sal do ácido hidroxicarboxílico ou a mistura dos mesmos é/são selecionado(s) de ácido gentísico, sal de sódio de ácido gentísico ou uma mistura dos mesmos, em que a composição de diagnóstico preferencialmente compreende cerca de 2,5 a cerca de 100 µmoles/mL de ácido gentísico, sal de sódio de ácido gentísico ou uma mistura dos mesmos, mais preferencialmente cerca de 10 a cerca de 100 µmoles/mL de ácido gentísico, sal de sódio de ácido gentísico ou uma mistura dos mesmos e ainda mais preferencialmente cerca de 25 a cerca de 75 µmoles/mL de ácido gentísico, sal de sódio de ácido gentísico ou uma mistura dos mesmos.

[0025] 14. Uma composição de diagnóstico, de acordo com qualquer um dos itens 1 a 7, 10 e 11, em que o ácido hidroxicarboxílico, o sal do ácido hidroxicarboxílico ou a mistura dos mesmos é/são selecionado(s) de ácido cítrico, citrato de sódio ou uma mistura dos mesmos, em que a composição de diagnóstico preferencialmente compreende cerca de 10 a cerca de 500 µmoles/mL de ácido cítrico, citrato de sódio ou uma mistura dos mesmos, mais preferencialmente cerca de 50 a cerca de 500 µmoles/mL de ácido cítrico, citrato de sódio ou uma mistura dos mesmos e ainda mais preferencialmente cerca de 50 a cerca de 300 µmoles/mL de ácido cítrico, citrato de sódio ou uma mistura dos mesmos.

[0026] 15. Uma composição de diagnóstico, de acordo com qualquer um dos itens 1 a 14, compreendendo um ácido inorgânico, um ácido orgânico, uma base, um sal ou uma mistura dos mesmos, cada um dos quais é, de preferência, diagnosticamente aceitável, em que o ácido orgânico, o sal ou a mistura dos mesmos é/são diferente(s) do ácido hidroxicarboxílico, do sal do ácido hidroxicarboxílico ou da mistura dos mesmos.

[0027] 16. Uma composição de diagnóstico, de acordo com o item 15, em que o ácido inorgânico, o ácido orgânico, a base, o sal ou a mistura dos mesmos é/são selecionados do grupo que consiste em cloreto de sódio, cloreto de potássio, fosfato monossódico, fosfato dissódico, fosfato trissódico, fosfato monopotássico, fosfato dipotássico,

fosfato tripotássico, ácido clorídrico, ácido fosfórico, hidróxido de sódio e hidróxido de potássio.

[0028] 17. Uma composição de diagnóstico, de acordo com qualquer um dos itens 1 a 16, em que o pH da composição de diagnóstico é cerca de 4 a cerca de 8,5.

[0029] 18. Uma composição de diagnóstico, de acordo com qualquer um dos itens 1 a 17, que é estéril.

[0030] 19. Uma composição de diagnóstico, de acordo com qualquer um dos itens 1 a 18, que é adequada para administração parentérica a um mamífero.

[0031] 20. Um método para fabricar uma composição de diagnóstico, conforme definida em qualquer um dos itens 1 a 19, compreendendo as etapas de: a. reagir um composto de Fórmula II com um agente de fluoração com 18F, , em que X é H ou PG, LG é um grupo de partida, e PG é um grupo de proteção amina, b. opcionalmente, se X for PG, clivar o grupo de proteção PG, c. purificação do composto de Fórmula I, e d. opcionalmente, misturar o composto de Fórmula I obtido na etapa c) com um ou mais selecionados do grupo que consiste em etanol, água, o ácido hidroxicarboxílico e o sal do ácido hidroxicarboxílico para prover a composição de diagnóstico.

[0032] 21. O método para fabricar uma composição de diagnóstico,

de acordo com a reivindicação 20, em que um ou mais de um ácido inorgânico, um ácido orgânico, uma base, ou um sal são adicionalmente misturados na etapa d, em que o ácido orgânico, o sal ou a mistura dos mesmos é/são diferente(s) do ácido hidroxicarboxílico, do sal do ácido hidroxicarboxílico ou da mistura dos mesmos.

[0033] 22. Um método, de acordo com o item 20 ou 21, compreendendo ainda

[0034] e. filtração estéril antes ou após a etapa d).

[0035] 23. Um método, de acordo com qualquer um dos itens 20 a 22, em que LG na Fórmula II é um grupo de partida, que pode ser substituído por um íon de [18F]fluoreto nucleofílico ou um átomo de [18F]fluoreto eletrofílico, preferencialmente LG é selecionado do grupo que consiste em nitro, bromo, iodo, cloro, trialquil amônio, hidroxila, ácido borônico, iodônio, éster sulfônico, mais preferencialmente LG é nitro ou trimetil amônio, em que os compostos contendo trialquil amônio ou iodônio podem ainda compreender um ânion.

[0036] 24. Um método, de acordo com qualquer um dos itens 20 a 23, em que PG na Fórmula II é um grupo de proteção, preferencialmente PG é selecionado do grupo que consiste em carbobenzilóxi (Cbz), (p- metoxibenzil)oxicarbonila (Moz ou MeOZ), terc-butiloxicarbonila (BOC), 9-fluorenilmetiloxicarbonila (FMOC), benzila (Bn), p-metoxibenzila (PMB), 3,4-dimetoxibenzila (DMPM), p-metoxifenila (PMP), trifenilmetila (Tritila), metoxifenil difenilmetila (MMT), ou dimetoxitritila (DMT), mais preferencialmente PG é selecionado de terc-butiloxicarbonila (BOC), dimetoxitritila (DMT) e trifenilmetila (Tritila), ainda mais preferencialmente PG é terc-butiloxicarbonila (BOC) ou trifenilmetila (Tritila).

[0037] 25. A composição, de acordo com qualquer um dos itens 1 a 19, para uso em diagnóstico.

[0038] 26. A composição, de acordo com qualquer um dos itens 1 a

19, para uso no imageamento de agregados de Tau, particularmente para uso em imageamento de tomografia por emissão de pósitrons de agregados de Tau.

[0039] 27. Uma composição, conforme definida em qualquer um dos itens 1 a 19, para uso no diagnóstico de um distúrbio associado com agregados de Tau ou para uso no diagnóstico de uma tauopatia, particularmente em que o diagnóstico é conduzido por tomografia por emissão de pósitrons.

[0040] 28. Uma composição para uso, de acordo com o item 27, em que a tauopatia é uma tauopatia 3R.

[0041] 29. Uma composição para uso, de acordo com o item 27, em que a tauopatia é uma tauopatia 4R.

[0042] 30. A composição para uso, de acordo com o item 27, em que o distúrbio é selecionado de doença de Alzheimer (AD), AD familiar, doença de Creutzfeldt-Jacob, demência pugilística, síndrome de Down, doença de Gerstmann-Sträussler-Scheinker, miosite por corpos de inclusão, angiopatia amiloide cerebral de proteína de príon, lesão cerebral traumática (TBI), esclerose lateral amiotrófica, complexo parkinsonismo-demência de Guam, doença neuromotora não guamaniana com emaranhados neurofibrilares, doença de grãos argirofílicos, degeneração corticobasal (CBD), emaranhados neurofibrilares difusos com calcificação, demência frontotemporal com parkinsonismo ligado ao cromossomo 17, doença de Hallervorden- Spatz, atrofia de múltiplos sistemas, doença de Niemann-Pick tipo C, degeneração pálido-ponto-nigral, doença de Pick (PiD), gliose subcortical progressiva, paralisia supranuclear progressiva (PSP), panencefalite esclerosante subaguda, demência apenas com emaranhados, parkinsonismo pós-encefalítico, distrofia miotônica, panencefalopatia de Tau, tipo AD com astrócitos, certas doenças de príon (GSS com Tau), mutações em LRRK2, encefalopatia traumática crônica, demência britânica familiar, demência dinamarquesa familiar, degeneração lobar fronto-temporal, parkinsonismo de Guadalupe, neurodegeneração com acúmulo de ferro cerebral, retardo mental relacionado a SLC9A6, tauopatia de matéria branca com inclusões gliais globulares, síndrome do estresse traumático, epilepsia, demência de corpos de Lewy (LBD), hemorragia cerebral hereditária com amiloidose (tipo holandês), comprometimento cognitivo leve (MCI), esclerose múltipla, doença de Parkinson, parkinsonismo atípico, demência relacionada ao HIV, diabetes de início no adulto, amiloidose cardíaca senil, tumores endócrinos, glaucoma, amiloidose ocular, degeneração primária da retina, degeneração macular (tal como degeneração macular relacionada à idade (AMD)), drusen do nervo óptico, neuropatia óptica, neurite óptica e distrofia lattice.

[0043] 31. A composição para uso, de acordo com o item 27, em que o distúrbio é selecionado de doença de Huntington, acidente vascular cerebral isquêmico e psicose em AD.

[0044] 32. A composição para uso, de acordo com o item 30, em que o distúrbio é doença de Alzheimer (AD).

[0045] 33. A composição para uso, de acordo com o item 30, em que o distúrbio é doença de Parkinson ou parkinsonismo atípico.

[0046] 34. A composição para uso, de acordo com o item 30, em que o distúrbio é paralisia supranuclear progressiva (PSP).

[0047] 35. A composição para uso, de acordo com o item 30, em que o distúrbio é doença de Pick (PiD).

[0048] 36. A composição para uso, de acordo com o item 27, em que os agregados de Tau são imageados no cérebro ou no olho.

[0049] 37. Um método de imageamento de agregados de Tau, particularmente um método de imageamento de agregados de Tau por tomografia por emissão de pósitrons, em que uma quantidade eficaz de uma composição, conforme definida em qualquer um dos itens 1 a 19,

é administrada a um paciente.

[0050] 38. Um método de diagnosticar um distúrbio associado com agregados de Tau ou uma tauopatia, em que uma quantidade eficaz de uma composição, conforme definida em qualquer um dos itens 1 a 19, é administrada a um paciente, particularmente em que o diagnóstico é conduzido por tomografia por emissão de pósitrons.

[0051] 39. Um método, de acordo com o item 38, em que a tauopatia é uma tauopatia 3R.

[0052] 40. Um método, de acordo com o item 38, em que a tauopatia é uma tauopatia 4R.

[0053] 41. O método, de acordo com o item 38, em que o distúrbio é selecionado de doença de Alzheimer (AD), AD familiar, doença de Creutzfeldt-Jacob, demência pugilística, síndrome de Down, doença de Gerstmann-Sträussler-Scheinker, miosite por corpos de inclusão, angiopatia amiloide cerebral de proteína de príon, lesão cerebral traumática, esclerose lateral amiotrófica, complexo parkinsonismo- demência de Guam, doença neuromotora não guamaniana com emaranhados neurofibrilares, doença de grãos argirofílicos, degeneração corticobasal, emaranhados neurofibrilares difusos com calcificação, demência frontotemporal com parkinsonismo ligado ao cromossomo 17, doença de Hallervorden-Spatz, atrofia de múltiplos sistemas, doença de Niemann-Pick tipo C, degeneração pálido-ponto- nigral, doença de Pick (PiD), gliose subcortical progressiva, paralisia supranuclear progressiva (PSP), panencefalite esclerosante subaguda, demência apenas com emaranhados, parkinsonismo pós-encefalítico, distrofia miotônica, panencefalopatia de Tau, tipo AD com astrócitos, certas doenças de príon (GSS com Tau), mutações em LRRK2, encefalopatia traumática crônica, demência britânica familiar, demência dinamarquesa familiar, degeneração lobar fronto-temporal, parkinsonismo de Guadalupe, neurodegeneração com acúmulo de ferro cerebral, retardo mental relacionado a SLC9A6, tauopatia de matéria branca com inclusões gliais globulares, síndrome do estresse traumático, epilepsia, demência de corpos de Lewy (LBD), hemorragia cerebral hereditária com amiloidose (tipo holandês), comprometimento cognitivo leve (MCI), esclerose múltipla, doença de Parkinson, parkinsonismo atípico, demência relacionada ao HIV, diabetes de início no adulto, amiloidose cardíaca senil, tumores endócrinos, glaucoma, amiloidose ocular, degeneração primária da retina, degeneração macular (tal como degeneração macular relacionada à idade (AMD)), drusen do nervo óptico, neuropatia óptica, neurite óptica e distrofia lattice.

[0054] 42. O método, de acordo com o item 38, em que o distúrbio é selecionado de doença de Huntington, acidente vascular cerebral isquêmico e psicose em AD.

[0055] 43. O método, de acordo com o item 41, em que o distúrbio é doença de Alzheimer (AD).

[0056] 44. O método, de acordo com o item 41, em que o distúrbio é doença de Parkinson ou parkinsonismo atípico.

[0057] 45. O método, de acordo com o item 41, em que o distúrbio é paralisia supranuclear progressiva (PSP).

[0058] 46. O método, de acordo com o item 41, em que o distúrbio é doença de Pick (PiD).

[0059] 47. O método, de acordo com o item 41, em que os agregados de Tau são imageados no cérebro ou no olho.

[0060] 48. Uso de uma composição, conforme definida em qualquer um dos itens 1 a 19, para a fabricação de um agente para imagear agregados de Tau, particularmente para imagear agregados de Tau por tomografia por emissão de pósitrons.

[0061] 49. Uso de uma composição, conforme definida em qualquer um dos itens 1 a 19, para a fabricação de um agente para diagnosticar um distúrbio associado com agregados de Tau ou para diagnosticar uma tauopatia, particularmente em que o diagnóstico é conduzido por tomografia por emissão de pósitrons.

[0062] 50. O uso, de acordo com o item 49, em que a tauopatia é uma tauopatia 3R.

[0063] 51. O uso, de acordo com o item 49, em que a tauopatia é uma tauopatia 4R.

[0064] 52. O uso, de acordo com o item 49, em que o distúrbio é selecionado de doença de Alzheimer (AD), AD familiar, doença de Creutzfeldt-Jacob, demência pugilística, síndrome de Down, doença de Gerstmann-Sträussler-Scheinker, miosite por corpos de inclusão, angiopatia amiloide cerebral de proteína de príon, lesão cerebral traumática, esclerose lateral amiotrófica, complexo parkinsonismo- demência de Guam, doença neuromotora não guamaniana com emaranhados neurofibrilares, doença de grãos argirofílicos, degeneração corticobasal, emaranhados neurofibrilares difusos com calcificação, demência frontotemporal com parkinsonismo ligado ao cromossomo 17, doença de Hallervorden-Spatz, atrofia de múltiplos sistemas, doença de Niemann-Pick tipo C, degeneração pálido-ponto- nigral, doença de Pick, gliose subcortical progressiva, paralisia supranuclear progressiva (PSP), panencefalite esclerosante subaguda, demência apenas com emaranhados, parkinsonismo pós-encefalítico, distrofia miotônica, panencefalopatia de Tau, tipo AD com astrócitos, certas doenças de príon (GSS com Tau), mutações em LRRK2, encefalopatia traumática crônica, demência britânica familiar, demência dinamarquesa familiar, degeneração lobar fronto-temporal, parkinsonismo de Guadalupe, neurodegeneração com acúmulo de ferro cerebral, retardo mental relacionado a SLC9A6, tauopatia de matéria branca com inclusões gliais globulares, síndrome do estresse traumático, epilepsia, demência de corpos de Lewy (LBD), hemorragia cerebral hereditária com amiloidose (tipo holandês), comprometimento cognitivo leve (MCI), esclerose múltipla, doença de Parkinson, parkinsonismo atípico, demência relacionada ao HIV, diabetes de início no adulto, amiloidose cardíaca senil, tumores endócrinos, glaucoma, amiloidose ocular, degeneração primária da retina, degeneração macular (tal como degeneração macular relacionada à idade (AMD)), drusen do nervo óptico, neuropatia óptica, neurite óptica e distrofia lattice.

[0065] 53. O uso, de acordo com o item 49, em que o distúrbio é selecionado de doença de Huntington, acidente vascular cerebral isquêmico e psicose em AD.

[0066] 54. O uso, de acordo com o item 52, em que o distúrbio é doença de Alzheimer (AD).

[0067] 55. O uso, de acordo com o item 52, em que o distúrbio é doença de Parkinson ou parkinsonismo atípico.

[0068] 56. O uso, de acordo com o item 52, em que o distúrbio é paralisia supranuclear progressiva (PSP).

[0069] 57. O uso, de acordo com o item 52, em que o distúrbio é doença de Pick (PiD).

[0070] 58. O uso, de acordo com o item 49, em que os agregados de Tau são imageados no cérebro ou no olho.

[0071] 59. Uso da composição, de acordo com qualquer um dos itens 1 a 19, como uma referência analítica.

[0072] 60. Uso da composição, de acordo com qualquer um dos itens 1 a 19, como uma ferramenta de análise in vitro.

[0073] 61. Um método de coletar dados para o diagnóstico de um distúrbio associado com agregados de Tau em uma amostra ou um paciente compreendendo: (a) colocar uma amostra ou uma área do corpo ou parte do corpo específica suspeita de conter um agregado de tau em contato com uma composição, conforme definida em qualquer um dos itens 1 a 19, que contém o composto de Fórmula I; (b) permitir que o composto de Fórmula I se ligue ao agregado de tau; (c) detectar o composto de Fórmula I ligado ao agregado de tau; e (d) opcionalmente correlacionar a presença ou ausência de composto de Fórmula I ligando-se com o agregado de tau com a presença ou ausência de agregado de tau na amostra ou parte do corpo ou área do corpo específica.

[0074] 62. Um método de determinar a quantidade de agregado de tau em um tecido e/ou um fluido corporal compreendendo: (a) prover uma amostra representativa do tecido e/ou fluido corporal sob investigação; (b) testar a amostra para a presença de agregado de tau com uma composição, conforme definida em qualquer um dos itens 1 a 19, que contém o composto de Fórmula I; (c) determinar a quantidade de composto de Fórmula I ligado ao agregado de tau; e (d) calcular a quantidade de agregado de tau no tecido e/ou fluido corporal.

[0075] 63. Um método de coletar dados para determinar uma predisposição para um distúrbio associado com agregados de Tau em um paciente compreendendo detectar a ligação específica de uma composição, conforme definida em qualquer um dos itens 1 a 19, que contém o composto de Fórmula I, a um agregado de tau em uma amostra ou in situ que compreende as etapas de: (a) colocar a amostra ou uma área do corpo ou parte do corpo específica suspeita de conter o agregado de tau em contato com a composição, conforme definida em qualquer um dos itens 1 a 19, que contém composto de Fórmula I que especificamente se liga ao agregado de tau; (b) permitir que o composto de Fórmula I se ligue ao agregado de tau para formar um complexo de composto/agregado de tau; (c) detectar a formação do complexo de composto/agregado de tau; (d) opcionalmente correlacionar a presença ou ausência do complexo de composto/agregado de tau com a presença ou ausência de agregado de tau na amostra ou parte do corpo ou área do corpo específica; e (e) opcionalmente comparar a quantidade do composto/agregado de tau com um valor de controle normal.

[0076] 64. Um método de coletar dados para monitorar distúrbio residual em um paciente que sofre de um distúrbio associado com agregados de Tau que foi tratado com um medicamento, em que o método compreende: (a) colocar uma amostra ou uma área do corpo ou parte do corpo específica suspeita de conter um agregado de tau em contato com uma composição, conforme definida em qualquer um dos itens 1 a 19, que contém composto de Fórmula I que especificamente se liga ao agregado de tau; (b) permitir que o composto de Fórmula I se ligue ao agregado de tau para formar um complexo de composto/agregado de tau; (c) detectar a formação do complexo de composto/agregado de tau; (d) opcionalmente correlacionar a presença ou ausência do complexo de composto/agregado de tau com a presença ou ausência de agregado de tau na amostra ou parte do corpo ou área do corpo específica; e (e) opcionalmente comparar a quantidade do composto/agregado de tau com um valor de controle normal.

[0077] 65. Um método de coletar dados para prever a capacidade de resposta de um paciente que sofre de um distúrbio associado com agregados de Tau e sendo tratado com um medicamento compreendendo: (a) colocar uma amostra ou uma área do corpo ou parte do corpo específica suspeita de conter an agregado de tau em contato com uma composição, conforme definida em qualquer um dos itens 1 a 19, que contém composto de Fórmula I que especificamente se liga ao agregado de tau; (b) permitir que o composto de Fórmula I se ligue ao agregado de tau para formar um complexo de composto/agregado de tau; (c) detectar a formação do complexo de composto/agregado de tau; (d) opcionalmente correlacionar a presença ou ausência do complexo de composto/agregado de tau com a presença ou ausência de agregado de tau na amostra ou parte do corpo ou área do corpo específica; e (e) opcionalmente comparar a quantidade do composto/agregado de tau com um valor de controle normal.

[0078] Entende-se que a presente invenção cobre compostos da Fórmula I, em que um ou mais dos respectivos átomos são substituídos por um isótopo diferente. Por exemplo, os compostos da Fórmula I incluem compostos em que um ou mais dos átomos de hidrogênio são substituídos por trítio e/ou um ou mais dos átomos de hidrogênio são substituídos por deutério.

DEFINIÇÕES

[0079] O termo "alquila" se refere a uma cadeia carbono linear ou ramificada saturada, que, salvo especificação em contrário, contém de 1 a 6 átomos de carbono.

[0080] "Hal" ou "halogênio" representa F, Cl, Br e I. Preferencialmente, "halogênio" é, independentemente em cada ocorrência, selecionado de F, Cl e Br, mais preferencialmente, de F e Cl, ainda mais preferencialmente F.

[0081] O termo "grupo de proteção amina" (PG), como empregado neste documento, é qualquer grupo de proteção que é adequado para proteger um grupo amina durante an reação química prevista. Exemplos de grupos de proteção adequados são bem conhecidos de uma pessoa versada na técnica. Grupos de proteção adequados são discutidos, por exemplo, no livro de Greene e Wuts, Protecting groups in Organic Synthesis, terceira edição, páginas 494-653, que é incluído neste documento por referência. Grupos de proteção podem ser escolhidos de carbamatos, amidas, imidas, N-alquil aminas, N-aril aminas, iminas, enaminas, boranos, grupos de proteção N-P, N-sulfenila, N-sulfonila e N-silila. Exemplos preferidos específicos de grupos de proteção (PG) são carbobenzilóxi (Cbz), (p-metoxibenzil)oxicarbonila (Moz ou MeOZ), terc-butiloxicarbonila (BOC), 9-fluorenilmetiloxicarbonila (FMOC), benzila (Bn), p-metoxibenzila (PMB), 3,4-dimetoxibenzila (DMPM), p- metoxifenila (PMP), trifenilmetila (Tritila), metoxifenil difenilmetila (MMT), ou dimetoxitritila (DMT). Exemplos mais preferidos do grupo de proteção PG incluem terc-butiloxicarbonila (BOC), dimetoxitritila (DMT) e trifenilmetila (Tritila). Um exemplo mais preferido do grupo de proteção PG é terc-butiloxicarbonila (BOC).

[0082] O termo "grupo de proteção carbamato amina" se refere a um grupo de proteção amina contendo um grupo *-CO-O, em que o asterisco indica a ligação à amina. Exemplos são carbobenzilóxi (Cbz), (p-metoxibenzil)oxicarbonila (Moz ou MeOZ), terc-butiloxicarbonila

(BOC) e 9-fluorenilmetiloxicarbonila (FMOC).

[0083] O termo "grupo de partida" (LG), como empregado neste documento, é qualquer grupo de partida e significa que um átomo ou grupo de átomos pode ser substituído por outro átomo ou grupo de átomos. Exemplos são dados, por exemplo, em Synthesis (1982), p. 85- 125, tabela 2, Carey e Sundberg, Organische Synthese, (1995), p. 279- 281, tabela 5.8; ou Netscher, Recent Res. Dev. Org. Chem., 2003, 7, 71-83, esquema 1, 2, 10 e 15 e outros). (Coenen, Fluorine-18 Labeling Methods: Features and Possibilities of Basic Reactions, (2006), em: Schubiger P.A., Friebe M., Lehmann L., (eds), PET-Chemistry - The Driving Force in Molecular Imaging. Springer, Berlin Heidelberg, pp.15- 50, explicitamente: esquema 4 p. 25, esquema 5 p. 28, tabela 4 p. 30, Figura 7 p. 33). Preferencialmente, o "grupo de partida" (LG) é selecionado do grupo que consiste em nitro, bromo, iodo, cloro, trialquil amônio, hidroxila, ácido borônico, iodônio, éster sulfônico. Mais preferencialmente, o "grupo de partida" (LG) é nitro ou trimetil amônio. Deve-se compreender que os compostos contendo trialquil amônio ou iodônio podem ainda compreender um ânion. Ainda mais preferencialmente, "grupo de partida" (LG) é nitro.

[0084] O termo "éter coroa", como empregado neste documento, significa compostos químicos que consistem em um anel contendo vários grupos éter. Mais especificamente, o termo "éter coroa" se refere a grupos orgânicos preferencialmente monocíclicos que podem ser substituídos e contêm de 8 a 16 átomos de carbono e de 4 a 8 heteroátomos selecionados de N, O e S no anel. Cada um dos um ou mais substituintes opcionais pode ser independentemente selecionado de qualquer grupo orgânico contendo de 1 a 15 átomos de carbono e opcionalmente 1 a 6 heteroátomos selecionados de N, O e S. Exemplos preferidos do "éter coroa" são anéis monocíclicos opcionalmente substituídos contendo 10 a 14 átomos de carbono e 5 a 7 heteroátomos selecionados de N, O e S no anel. Exemplos do "éter coroa" são anéis monocíclicos opcionalmente substituídos contendo 12 átomos de carbono e 6 heteroátomos selecionados de N e O no anel. Exemplos específicos incluem 18-coroa-6, dibenzo-18-coroa-6, e diaza-18-coroa-

6.

[0085] O termo "criptando", como empregado neste documento, se refere a uma classe de compostos policíclicos relacionados aos éteres coroas, tendo três cadeias acopladas em dois átomos de nitrogênio. Um "criptando" bem conhecido é 4,7,13,16,21,24-hexaoxa-1,10- diazabiciclo[8.8.8]hexacosano (Kryptofix).

[0086] Tau, como usado neste documento, se refere a uma proteína de ligação de microtúbulos altamente solúvel encontrada principalmente em neurônios e inclui as 6 principais isoformas, formas clivadas ou truncadas, e outras formas modificadas, tais como decorrentes de fosforilação, glicosilação, glicação, isomerização de prolil, nitração, acetilação, poliaminação, ubiquitinação, sumoilação e oxidação. Tau patológico ou agregado de Tau (Emaranhados Neurofibrilares, NFTs), como usado neste documento, se refere a agregados insolúveis da proteína Tau hiperfosforilada contendo filamentos helicoidais e filamentos retos emparelhados. Sua presença é uma característica da AD e de outras doenças conhecidas como tauopatias.

[0087] O gene tau contém 16 éxons com as principais isoformas de proteína tau sendo codificadas por 11 deles. A divisão alternativa do éxon 10 gera isoformas de tau com três (éxon 10 ausente) ou quatro (éxon 10 presente) domínios de repetição, conhecidos como tau 3R e 4R, respectivamente (A. Andreadis et al., Biochemistry 31, (1992) 10626 - 10633; M. Tolnay et al., IUBMB Life, 55(6): 299-305, 2003). Na Doença de Alzheimer, a razão das isoformas 3R e 4R é semelhante. Em contraste, em algumas tauopatias, uma das duas isoformas está predominantemente presente. Aqui, o termo "tauopatia 3R" se refere a tauopatias (tais como doença de Pick (PiD)), em que a isoforma 3R está predominantemente presente. Aqui, o termo "tauopatia 4R" se refere a tauopatias (tais como paralisia supranuclear progressiva (PSP) e degeneração corticobasal (CBD)), em que a isoforma 4R está predominantemente presente.

[0088] Como usado a seguir na descrição da invenção e nas reivindicações, o termo "sal farmaceuticamente aceitável" ou "sal diagnosticavelmente aceitável" se refere a derivados não tóxicos dos compostos divulgados, em que o composto de origem é modificado produzindo sais de ácidos inorgânicos e orgânicos do mesmo. Ácidos inorgânicos incluem, mas sem limitação, ácidos como ácido carboxílico, clorídrico, nítrico ou sulfúrico. Ácidos orgânicos incluem, mas sem limitação, ácidos, como ácidos alifáticos, cicloalifáticos, aromáticos, aralifáticos, heterocíclicos, carboxílicos e sulfônicos. Os sais farmaceuticamente aceitáveis da presente invenção podem ser sintetizados a partir do composto de origem que contém uma porção básica ou ácida por métodos químicos convencionais. Geralmente, esses sais podem ser preparados reagindo as formas de base ou ácido livres desses compostos com uma quantidade estequiométrica da base ou ácido apropriado em água ou em um solvente orgânico, ou em uma mistura dos dois. Listas de sais adequados podem ser encontradas em Remington’s Pharmaceutical Sciences, 18ª ed., Mack Publishing Company, Easton, PA, 1990, p. 1445, cuja divulgação é aqui incorporada por referência.

[0089] "Farmaceuticamente aceitável" ou "diagnosticamente aceitável" são definidos como referindo-se aos compostos, materiais, composições e/ou formas de dosagem que são, dentro do escopo de um bom julgamento médico, adequados para uso em contato com tecidos de seres humanos e animais sem toxicidade excessiva, irritação, resposta alérgica ou outro problema ou complicação proporcional a uma relação benefício/risco razoável. De preferência, cada um dos componentes das composições reivindicadas é farmaceuticamente e diagnosticamente aceitável.

[0090] Os pacientes ou indivíduos da presente invenção são tipicamente animais, particularmente mamíferos, mais particularmente, seres humanos.

[0091] "Cromatografia" ou "cromatografia líquida" significa um método para a separação de uma mistura de compostos. A mistura é dissolvida em um fluido e transportada através da "fase móvel" através de uma "fase estacionária". A separação é baseada na interação dos compostos na fase móvel com as fases estacionárias. Tais interações diferentes resultam em retenção diferencial na fase estacionária e, portanto, afetam a separação. A cromatografia pode ser preparativa ou analítica. O objetivo da cromatografia preparativa é separar os componentes de uma mistura e, portanto, uma forma de purificação. A cromatografia analítica é feita com uma pequena amostra de material e é usada para medir as proporções de compostos em uma mistura.

[0092] "Cromatografia Líquida de Alto Desempenho (HPLC)" é uma forma de cromatografia líquida para separar compostos usando partículas muito pequenas da fase estacionária (≤10 µm) e aplicando pressões suficientemente mais altas. Um sistema de HPLC consiste tipicamente em um reservatório de fase(s) móvel(is), uma bomba, um injetor, uma coluna de separação (contendo a fase estacionária) e detectores. Para a separação de compostos radioativos, sistemas de HPLC adequados são equipados com um detector de radioatividade. Opcionalmente, o sistema de HPLC tem detectores adicionais, tais como, por exemplo, UV, matriz de fotodiodos, índice de refração, condutividade, fluorescência, espectrômetro de massa.

[0093] "Extração em fase sólida (SPE)" é uma preparação de amostra e/ou processo de purificação com duas ou mais etapas separadas. Primeiramente, os compostos são dissolvidos ou suspensos em uma mistura líquida de solventes e a amostra líquida é passada por uma fase estacionária (sólida). Alguns compostos são retidos na fase estacionária enquanto outros passam. Na segunda etapa, os compostos retidos são eluídos com um solvente adequado. Opcionalmente, a fase estacionária é lavada com outra solução antes da etapa de eluição. Em contraste com a técnica de HPLC, o tamanho de partícula usado é muito maior (por exemplo, ≥ 25 µm em comparação com HPLC com um tamanho de partícula típico de ≤ 10 µm) e, portanto, a pressão aplicada é muito menor (para HPLC, a pressão é tipicamente > 50 bar = 5,0 x 106 Pa).

[0094] "Cartucho de extração em fase sólida (cartucho SPE)" é uma seringa ou recipiente (por exemplo, Sep Pak®) pré-carregado com a fase estacionária para SPE.

[0095] "Filtração estéril" é um método para esterilização de uma solução por filtração através de um microfiltro. Um microfiltro é um filtro que possui, por exemplo, um tamanho de poro de cerca de 0,25 µm ou menos, preferencialmente cerca de 20 nm a cerca de 0,22 µm, que é geralmente usado para remover microrganismos. Os filtros de membrana usados na microfiltração em processos de produção são geralmente feitos de materiais, tais como éster de celulose misturado, politetrafluoretileno (PTFE), fluoreto de polivinilideno (PVDF) ou polietersulfona (PES).

[0096] "Automatizado", como usado aqui, significa a condução de etapas de síntese e/ou purificação por um aparelho adequado (sintetizador).

[0097] O termo "radiossequestrante" se refere a um composto que diminui a taxa de decomposição devido à radiólise. Radiossequestrantes preferidos incluem ácido ascórbico e sais do mesmo e ácido gentísico e sais do mesmo.

[0098] "Sintetizadores" adequados para radiorrotulagem com F são bem conhecidos da pessoa versada na técnica, incluindo, mas sem limitação, IBA Synthera, GE Fastlab, GE Tracerlab MX, GE Tracerlab FX, Trasis AllinOne, ORA Neptis Perform, ORA Neptis Mosaic, ORA Neptis Plug, Scintomics GPR, Synthera, Comecer Taddeo, Raytest Synchrom, Sofie Elixys, Eckert&Ziegler Modular Lab, Sumitomo Heavy Industries F100 F200 F300, Siemens Explora.

[0099] "Pureza radioquímica" significa a proporção da atividade total do radionuclídeo presente em sua forma química declarada. Tipicamente, a pureza radioquímica é determinada por cromatografia em camada fina ou HPLC.

[00100] O termo "ácido hidroxicarboxílico" se refere a um composto C2-C10 que tem um ou mais grupos de ácido carboxílico e um ou mais grupos hidróxi (não incluindo o(s) grupo(s) hidróxi no(s) grupo(s) de ácido carboxílico). O ácido hidroxicarboxílico pode ser saturado ou insaturado (incluindo aromático) e pode ser cíclico ou acíclico. Em uma modalidade preferida, o ácido hidroxicarboxílico possui um a três grupos de ácido carboxílico. Preferencialmente, o ácido hidroxicarboxílico possui um a seis grupos hidróxi, mais preferencialmente um a quatro grupos hidróxi. O ácido hidroxicarboxílico pode ser na forma do ácido livre ou um éster cíclico do mesmo (isto é, lactona). Possíveis ácidos hidroxicarboxílicos incluem, mas sem limitação, ácido ascórbico, ácidos hidroxibenzóicos (tais como ácido gentísico), derivados de ácido hidroxibenzoico, ácido cítrico, ácido láctico, ácido málico, ácido 2- hidroxibutanoico, ácido 3-hidroxibutanoico, ácido mandélico, ácido glucônico, ácido tartárico e ácido salicílico, de preferência ácido ascórbico, ácidos hidroxibenzoicos (tais como ácido gentísico), derivados de ácido hidroxibenzoico e ácido cítrico.

[00101] As definições preferidas dadas na seção de "Definições" aplicam-se a todas as modalidades descritas neste documento, salvo indicação em contrário.

DESCRIÇÃO DETALHADA

[00102] Em um primeiro aspecto, a invenção se refere a uma composição de diagnóstico compreendendo a. um composto de Fórmula I, b. etanol, c. água, e d. um ácido hidroxicarboxílico, um sal de um ácido hidroxicarboxílico ou uma mistura dos mesmos. 18 19 18

[00103] F na Fórmula I é F ou F. Preferencialmente, F é F ou uma mistura de 18F e 19F.

[00104] Compostos preferidos da Fórmula I são selecionados do grupo que consiste em , , ,e .

[00105] Um composto mais preferido da Fórmula I é

.

[00106] Preferencialmente, a composição de diagnóstico compreende cerca de 0,03 GBq/mL a cerca de 10 GBq/mL do composto de Fórmula I. Mais preferencialmente, a composição de diagnóstico compreende cerca de 0,03 GBq/mL a cerca de 5 GBq/mL do composto de Fórmula I. Preferencialmente, a composição de diagnóstico compreende pelo menos cerca de 1 GBq/mL do composto de Fórmula I. Mais preferencialmente, a composição de diagnóstico compreende pelo menos cerca de 2 GBq/mL do composto de Fórmula I. Ainda mais preferencialmente, a composição de diagnóstico compreende pelo menos cerca de 3 GBq/mL do composto de Fórmula I.

[00107] Preferencialmente, a composição de diagnóstico compreende uma concentração máxima do composto de Fórmula I de cerca de 10 µg/mL, mais preferencialmente uma concentração máxima do composto de Fórmula I de cerca de 5 µg/mL.

[00108] Preferencialmente, a composição de diagnóstico compreende cerca de 1% v/v a cerca de 20% v/v de etanol, com base na quantidade total de etanol e água. Mais preferencialmente, a composição de diagnóstico compreende cerca de 1% v/v a cerca de 15% v/v de etanol, com base na quantidade total de etanol e água. Ainda mais preferencialmente, a composição de diagnóstico compreende cerca de 5% v/v a cerca de 10% v/v de etanol, com base na quantidade total de etanol e água.

[00109] As composições de diagnóstico compreendem um ácido hidroxicarboxílico, um sal de um ácido hidroxicarboxílico ou uma mistura dos mesmos. Qualquer ácido hidroxicarboxílico ou um sal do mesmo pode ser empregado. No entanto, ácidos hidroxicarboxílicos diagnosticamente aceitáveis ou sais dos mesmos são preferidos. Preferencialmente, a composição de diagnóstico compreende um ácido hidroxicarboxílico, um sal de um ácido hidroxicarboxílico ou uma mistura dos mesmos, que é selecionado do grupo que consiste em ácido ascórbico e sais de ácido ascórbico, ácidos hidroxibenzoicos e sais de ácidos hidroxibenzoicos, derivados de ácido hidroxibenzoico e sais de derivados de ácido hidroxibenzoico, ácido cítrico e sais de ácido cítrico e uma mistura dos mesmos. Preferencialmente, os derivados de ácido hidroxibenzoico são selecionados do grupo que compreende ácido hidroxibenzoico, ácido di-hidroxibenzoico, e ácido tri-hidroxibenzoico. Mais preferencialmente, o derivado de ácido di-hidroxibenzoico é ácido gentísico.

[00110] Mais preferencialmente, a composição de diagnóstico compreende um ou mais selecionados de ácido ascórbico, ascorbato de sódio, ácido gentísico, sal de sódio de ácido gentísico, ácido cítrico, citrato de sódio ou uma mistura dos mesmos.

[00111] Em uma modalidade preferida, a composição de diagnóstico compreende cerca de 2,5 a cerca de 500 µmoles/mL de um ácido hidroxicarboxílico, um sal de um ácido hidroxicarboxílico ou uma mistura dos mesmos. Mais preferencialmente, a composição de diagnóstico compreende cerca de 10 a cerca de 300 µmoles/mL de um ácido hidroxicarboxílico, um sal de um ácido hidroxicarboxílico ou uma mistura dos mesmos. Ainda mais preferencialmente, a composição de diagnóstico compreende cerca de 25 a cerca de 300 µmoles/mL de um ácido hidroxicarboxílico, um sal de um ácido orgânico ou uma mistura dos mesmos.

[00112] Em outra modalidade preferida, a composição de diagnóstico compreende ácido ascórbico, ascorbato de sódio ou uma mistura dos mesmos (como o ácido hidroxicarboxílico, o sal do ácido hidroxicarboxílico ou a mistura dos mesmos). Preferencialmente, a composição de diagnóstico compreende cerca de 10 a cerca de 500 µmoles/mL de ácido ascórbico, ascorbato de sódio ou uma mistura dos mesmos. Mais preferencialmente, a composição de diagnóstico compreende cerca de 50 a cerca de 500 µmoles/mL de ácido ascórbico, ascorbato de sódio ou uma mistura dos mesmos. Ainda mais preferencialmente, a composição de diagnóstico compreende cerca de 100 a cerca de 500 µmoles/mL de ácido ascórbico, ascorbato de sódio ou uma mistura dos mesmos. A composição de diagnóstico pode também compreender cerca de 50 a cerca de 300 µmoles/mL de ácido ascórbico, ascorbato de sódio ou uma mistura dos mesmos. Ainda mais preferencialmente, a composição de diagnóstico compreende cerca de 200 a cerca de 300 µmoles/mL de ácido ascórbico, ascorbato de sódio ou uma mistura dos mesmos.

[00113] Em uma modalidade preferida adicional, a composição de diagnóstico compreende ácido gentísico, sal de sódio de ácido gentísico ou uma mistura dos mesmos (como o ácido hidroxicarboxílico, o sal do ácido hidroxicarboxílico ou a mistura dos mesmos). Preferencialmente, a composição de diagnóstico compreende cerca de 2,5 a cerca de 100 µmoles/mL de ácido gentísico, sal de sódio de ácido gentísico ou uma mistura dos mesmos. Mais preferencialmente, a composição de diagnóstico compreende cerca de 10 a cerca de 100 µmoles/mL de ácido gentísico, sal de sódio de ácido gentísico ou uma mistura dos mesmos. Ainda mais preferencialmente, a composição de diagnóstico compreende cerca de 25 a cerca de 75 µmoles/mL de ácido gentísico, sal de sódio de ácido gentísico ou uma mistura dos mesmos.

[00114] Preferencialmente, a composição de diagnóstico compreende ácido cítrico, citrato de sódio ou uma mistura dos mesmos (como o ácido hidroxicarboxílico, o sal do ácido hidroxicarboxílico ou a mistura dos mesmos). Preferencialmente, a composição de diagnóstico compreende cerca de 10 a cerca de 500 µmoles/mL de ácido cítrico, citrato de sódio ou uma mistura dos mesmos. Mais preferencialmente, a composição de diagnóstico compreende cerca de 50 a cerca de 500 µmoles/mL de ácido cítrico, citrato de sódio ou uma mistura dos mesmos. Ainda mais preferencialmente, a composição de diagnóstico compreende cerca de 50 a cerca de 300 µmoles/mL de ácido cítrico, citrato de sódio ou uma mistura dos mesmos.

[00115] O ácido hidroxicarboxílico, o sal do ácido hidroxicarboxílico ou uma mistura dos mesmos atuam como um sequestrante para prevenir a decomposição radiolítica do composto de Fórmula I. Mais preferencialmente, o ácido hidroxicarboxílico, o sal do ácido hidroxicarboxílico ou uma mistura dos mesmos são diagnosticamente aceitáveis.

[00116] Opcionalmente, a composição de diagnóstico compreende um ácido inorgânico, um ácido orgânico, uma base, um sal ou uma mistura dos mesmos, cada um dos quais é, de preferência, diagnosticamente aceitável, em que o ácido orgânico, o sal ou uma mistura dos mesmos é/são diferente(s) do ácido hidroxicarboxílico, do sal do ácido hidroxicarboxílico ou da mistura dos mesmos. Em uma modalidade, o ácido inorgânico, o ácido orgânico, a base, o sal ou a mistura dos mesmos é/são usado(s) durante a síntese ou purificação do composto de Fórmula I. Em outra modalidade, o ácido inorgânico, o ácido orgânico, a base, o sal ou a mistura dos mesmos é/são usado(s) para ajuste de pH e/ou resistência iônica da composição de diagnóstico.

[00117] Exemplos de ácidos, bases e sais orgânico ou inorgânicos adequados incluem cloreto de sódio, cloreto de potássio, fosfato monossódico, fosfato dissódico, fosfato trissódico, fosfato monopotássico, fosfato dipotássico, fosfato tripotássico, ácido clorídrico, ácido fosfórico, hidróxido de sódio e hidróxido de potássio.

[00118] Além dos componentes acima, a composição de diagnóstico compreende água. A quantidade de água é escolhida, de modo que a quantidade total da composição seja 100%.

[00119] A composição de diagnóstico tem um pH de cerca de 4 a cerca de 8,5, preferencialmente cerca de 4,5 a cerca de 8.

[00120] Em uma modalidade preferida, a composição de diagnóstico é estéril.

[00121] As composições de diagnóstico da presente invenção são adequadas para administração parenteral a mamíferos para conduzir imageamento PET.

[00122] Em um segundo aspecto, a invenção se refere a um método para obter uma composição de diagnóstico da presente invenção. Em uma modalidade, o método compreende as etapas de a) reagir um composto de Fórmula II com um agente de fluoração com 18F, , em que X é H ou PG, LG é um grupo de partida, e PG é um grupo de proteção amina, b) opcionalmente, se X for PG, clivar o grupo de proteção PG, c) purificação do composto de Fórmula I, e d) opcionalmente, misturar o composto de Fórmula I obtido na etapa c) com etanol, água e um ácido hidroxicarboxílico, um sal de um ácido hidroxicarboxílico ou uma mistura dos mesmos para prover uma composição de diagnóstico.

[00123] Opcionalmente filtração estéril (etapa e) pode também ser conduzida.

[00124] O composto de Fórmula II é um precursor para a síntese de um composto de Fórmula I.

[00125] Compostos preferidos da Fórmula II são selecionados do grupo que consiste em , , , , , , ,e .

[00126] Compostos mais preferidos da Fórmula II são selecionados do grupo que consiste em e .

[00127] Nesses compostos, PG e LG são como definidos na seção "Definições".

[00128] Compostos ainda mais preferidos da Fórmula II são selecionados do grupo que consiste em , , , ,

N X- N N N N O

O e IIb-2g com X– sendo um contraíon, tal como um contraíon selecionado do grupo que consiste em halogênio, CF3SO3–, e CF3CO2.

[00129] Compostos ainda mais preferidos da Fórmula II são selecionados do grupo que consiste em , , ,e , com X– sendo um contraíon, tal como um contraíon selecionado do grupo que consiste em halogênio, CF3SO3–, e CF3CO2. Etapa a)

[00130] A Etapa a) compreende reagir um composto da Fórmula II com um agente de fluoração com 18F em que X é H ou PG, LG é um grupo de partida, e PG é um grupo de proteção amina

[00131] Se X for H, um composto tendo a Fórmula I será obtido. Se X for PG, um composto intermediário tendo a Fórmula III será obtido.

[00132] Agentes de fluoração com F são bem conhecidos da 18 pessoa versada na técnica. Qualquer agente de fluoração com F adequado pode ser empregado. Exemplos típicos incluem H18F, 18 fluoretos F alcalinos ou alcalino-terrosos (por exemplo, K18F, Rb18F, Cs18F e Na18F). Opcionalmente, o agente de fluoração com 18F pode ser usado em combinação com um agente quelante, tal como um criptando (por exemplo: 4,7,13,16,21,24-hexaoxa-1,10-diazabiciclo[8.8.8]- hexacosano - Kryptofix®) ou um éter coroa (por exemplo: 18-coroa-6). 18 Alternativamente, o agente de fluoração com F pode ser um sal de 18 18 tetra-alquil amônio de F ou um sal de tetra-alquil fosfônio de F; por 18 exemplo, sal de tetra(C1–6 alquil)amônio de F ou um sal de tetra(C1–6 18 alquil)fosfônio de F. Exemplos do mesmo incluem tetrabutil amônio [18F]fluoreto e tetrabutil fosfônio [18F]fluoreto. Preferencialmente, o 18 agente de fluoração com F é K18F, H18F, Cs18F, Na18F ou tetrabutil amônio [18F]fluoreto. Em uma modalidade ainda mais preferida, o 18 agente de fluoração com F é K18F. Em outra modalidade mais preferida, o agente de fluoração com 18F é tetrabutil amônio [18F]fluoreto.

[00133] A fluoração com 18F é tipicamente realizada em um solvente que é preferencialmente selecionado de acetonitrila, dimetilsulfóxido, dimetilformamida, dimetilacetamida, álcool amílico, álcool terc-butílico, ou uma mistura dos mesmos, preferencialmente o solvente contém ou é acetonitrila ou DMSO. Mas também outros solventes podem ser usados, os quais são bem conhecidos por uma pessoa versada na técnica. O solvente pode ainda compreender água e/ou outros álcoois, tais como alcanóis C1-10 linear, ramificado ou cíclico, como um cossolvente. Em uma modalidade preferida, o solvente para realizar a radiorrotulagem com 18F contém dimetil sulfóxido. Em outra modalidade 18 preferida, o solvente para realizar a radiorrotulagem com F contém acetonitrila. Em uma modalidade preferida, o solvente para realizar a 18 radiorrotulagem com F é dimetil sulfóxido. Em outra modalidade 18 preferida, o solvente para realizar a radiorrotulagem com F é acetonitrila. 18

[00134] A fluoração com F é tipicamente realizada por no máximo cerca de 60 minutos. Tempos de reação preferidos são no máximo cerca de 30 minutos. Tempos de reação preferidos adicionais são no máximo cerca de 15 minutos. 18

[00135] A fluoração com F é tipicamente realizada a uma temperatura de cerca de 60 a cerca de 200ºC sob aquecimento convencional ou suportado por micro-ondas. Em uma modalidade 18 preferida, a fluoração com F é realizada em cerca de 100 a cerca de 18 180ºC. Em uma modalidade mais preferida, a fluoração com F é realizada em cerca de 100 a cerca de 160ºC. Preferencialmente, a fluoração com 18F é realizada sob aquecimento convencional. Entende- se que aquecimento convencional seja qualquer aquecimento sem o uso de micro-ondas.

[00136] A quantidade de material de partida não é particularmente limitada. Por exemplo, cerca de 0,5 a cerca de 50 µmoles de um composto da Fórmula II podem ser usados para a produção do composto da Fórmula I em uma batelada. Em uma modalidade preferida, cerca de 2 a cerca de 25 µmoles de um composto da Fórmula II são usados. Em uma modalidade mais preferida, cerca de 2,5 a cerca de 15 µmoles de um composto da Fórmula II são usados. Em uma modalidade, pelo menos cerca de 2 µmoles de um composto da Fórmula II são usados. Em uma modalidade preferida, pelo menos cerca de 2,5 µmoles de um composto da Fórmula II são usados. Em uma modalidade mais preferida, pelo menos cerca de 3 µmoles de um composto da

Fórmula II são usados.

[00137] Se X for PG, um composto intermediário tendo a Fórmula III será obtido. O grupo de proteção PG pode ser ainda clivado durante a etapa a) ou em uma etapa subsequente opcional b).

[00138] Compostos preferidos da Fórmula III são selecionados do grupo compreendendo , , ,e .

[00139] Nesses compostos, PG é como definido na seção "Definições". Etapa b)

[00140] Etapa b) é uma etapa opcional que compreende a clivagem de um grupo de proteção PG de um composto da Fórmula III para obter um composto da Fórmula I. Como será evidente para uma pessoa versada, esta etapa não é aplicável se etapa a) for conduzida com um composto da Fórmula II, em que X é hidrogênio ou se o grupo de proteção PG já tiver sido clivado na etapa a).

[00141] Condições de reação para a clivagem de uma ampla variedade de grupos de proteção são bem conhecidas de uma pessoa versada na técnica e podem escolhidas de, mas sem limitação, aquelas descritas no livro de Greene e Wuts, Proteger groups in Organic Synthesis, terceira edição, página 494-653, e no livro de P. J. Kocienski, Proteger Groups, 3ª edição, 2003, ambos os quais são aqui incluídos por referência.

[00142] As condições que são empregadas na etapa b) dependerão do grupo de proteção que deve ser clivado e, assim, não são particularmente limitadas.

[00143] Possíveis condições de reação incluem i) aquecimento a cerca de 60 a cerca de 160ºC, ii) adição de um ácido e aquecimento a cerca de 0ºC a cerca de 160ºC; ou iii) adição de uma base e aquecimento a cerca de 0ºC a cerca de 160ºC.

[00144] Ácidos preferidos são ácido clorídrico, ácido sulfúrico e ácido fosfórico. Um ácido preferido é ácido sulfúrico. Outro ácido preferido é ácido fosfórico. Bases preferidas são hidróxido de sódio, hidróxido de potássio.

[00145] Uma condição de reação preferida é adição de um ácido e aquecimento a cerca de 25ºC a 160ºC, preferencialmente 25ºC a 120ºC.

[00146] Se desejado, as Etapas a) e b) podem ser realizadas no mesmo ou em diferentes vasos de reação. Preferencialmente, as Etapas a) e b) são realizadas no mesmo vaso de reação.

[00147] Se desejado, a solução obtida após a Etapa b) pode ser usada no estado na etapa c). Alternativamente, a composição da solução pode ser adaptada, de modo que seja mais adequada para conduzir HPLC. Por exemplo, um tampão ou diluente pode ser adicionado antes da Etapa c). Etapa c)

[00148] A Etapa c) compreende a purificação do composto de Fórmula I.

[00149] Métodos adequados para purificação do composto de Fórmula I são HPLC, extração de fase sólida (SPE) ou uma combinação dos mesmos.

[00150] Em uma modalidade preferida, o composto de Fórmula I obtido na etapa a) ou, se empregada, Etapa b), é submetido a HPLC usando uma fase móvel compreendendo etanol e água e opcionalmente um ácido, uma base, um tampão, um sal e/ou um ácido hidroxicarboxílico, um sal de um ácido hidroxicarboxílico ou mistura dos mesmos.

[00151] A razão de etanol para água não é particularmente limitada, mas é preferencialmente cerca de 5/95 v/v a cerca de 80/20 v/v, mais preferencialmente, cerca de 5/95 v/v a cerca de 50/50 v/v, ainda mais preferencialmente, cerca de 5/95 v/v a cerca de 20/80 v/v.

[00152] O pH da fase móvel não é restrito, mas é preferencialmente de cerca de 0 a cerca de 8, preferencialmente cerca de 0 a cerca de 6, mais preferencialmente cerca de 1 a cerca de 5, ainda mais preferencialmente cerca de 1 a cerca de 3.

[00153] Tampões possíveis podem incluir sais que podem ser selecionados de di-hidrogenofosfatos de metal alcalino, hidrogenofosfatos de metal di-alcalino, fosfatos de metal tri-alcalino, acetatos de metal alcalino, acetatos de metal alcalino-terroso, formiatos de metal alcalino-terroso, citrato de metal mono/di/tri-alcalino, com os metais alcalinos e alcalino-terrosos preferidos sendo sódio e potássio. Tampões preferidos incluem sais que podem ser selecionados de di- hidrogenofosfatos de metal alcalino, hidrogenofosfatos de metal di- alcalino, fosfatos de metal tri-alcalino, acetatos de metal alcalino, citrato de metal mono/di/tri-alcalino, com os metais alcalinos preferidos sendo sódio e potássio.

[00154] Bases possíveis podem ser hidróxido de sódio e/ou hidróxido de potássio.

[00155] Se desejado, o pH da fase móvel pode ser ajustado usando um ácido orgânico ou inorgânico. Exemplos de ácidos inorgânicos incluem ácido ascórbico, ácido cítrico e ácido acético. Exemplos de ácidos orgânicos incluem ácido clorídrico, ácido sulfúrico e ácido fosfórico, preferencialmente, ácido fosfórico.

[00156] Uma fase móvel preferida compreende cerca de 5 a cerca de 20% v/v de etanol, cerca de 95 a cerca de 80% v/v de água, cerca de 50 a cerca de 150 mM de tampão (por exemplo, di-hidrogenofosfato alcalino), com um pH de cerca de 1 a cerca de 3, e opcionalmente um radiossequestrante.

[00157] Fases estacionárias para uso em métodos de HPLC são bem conhecidas e podem ser apropriadamente escolhidas por uma pessoa versada. Em uma modalidade preferida, a fase estacionária é uma fase estacionária de "fase reversa" (RP).

[00158] Exemplos de fases estacionárias de RP-HPLC incluem C18, C8, fenila, ciano (por exemplo, cianopropila), pentafluorfenila, amino (por exemplo, aminopropila), amida (por exemplo, C10-24-aminopropil alcanoico), resinas funcionalizadas de fenil hexila ou resinas de fase mista.

[00159] Em uma modalidade, o tamanho de partícula da fase estacionária de HPLC é cerca de 1,6 a cerca de 15 µm. Em uma modalidade preferida, o tamanho de partícula da fase estacionária de HPLC é cerca de 5 a cerca de 10 µm. Em outra modalidade, o tamanho de partícula da fase estacionária de HPLC é cerca de 10 µm.

[00160] Tipicamente, a coluna de HPLC tem um diâmetro de cerca de 2,0 a cerca de 50 mm e um comprimento de cerca de 50 a cerca de 300 mm. Em uma modalidade preferida, a coluna de HPLC tem um diâmetro de cerca de 4,6 a cerca de 20 mm e um comprimento de cerca de 150 a cerca de 250 mm. Em uma modalidade mais preferida, a coluna de HPLC tem uma dimensão de 10 x 250 mm.

[00161] A taxa de fluxo empregada na cromatografia líquida de alta performance não é restrita e pode ser de cerca de 1 a cerca de 20 mL/min, mais tipicamente de cerca de 2 a cerca de 15 mL/min, ainda mais tipicamente de cerca de 2 a cerca de 7 mL/min.

[00162] A pressão empregada na cromatografia líquida de alta performance não é particularmente limitada e pode ser na faixa de cerca de 50 bar = 5,0 x 106 Pa a cerca de 400 bar = 4,0 x 107 Pa, tipicamente de cerca de 50 bar = 5,0 x 106 Pa a cerca de 250 bar = 2,5 x 107 Pa, mais tipicamente de cerca de 50 bar = 5,0 x 106 Pa a 200 bar = 2,0 x 107 Pa.

[00163] A etapa opcional d) compreende misturar o composto de Fórmula I obtido na etapa c) com um ou mais selecionados do grupo que consiste em etanol, água, o ácido hidroxicarboxílico e o sal do ácido hidroxicarboxílico, se eles não estiverem já presentes na quantidade desejada em mistura com o composto de Fórmula I após a etapa c), para prover a composição de diagnóstico. Ainda opcionalmente, um ou mais selecionados de um ácido inorgânico, um ácido orgânico adicional, uma base ou um sal podem ainda ser adicionados na etapa d), se eles não estiverem já presentes na quantidade desejada em mistura com o composto de Fórmula I após a etapa c).

[00164] Se a composição de diagnóstico tiver que ser administrada a um paciente, ela deve ser estéril. A composição de diagnóstico pode ser esterilizada por qualquer método conhecido. Uma opção é conduzir filtração estéril (etapa e). O filtro estéril pode ser um filtro estéril padrão usado para filtração por radiotraçador. Tais filtros estéreis são bem conhecidos na técnica. Filtros estéreis adequados são filtros estéreis de politetrafluoroetileno (PTFE) (por exemplo, Millipore Millex-LG), filtros estéreis de polietersulfona (PES) (por exemplo, Millipore Millex-GP), filtros estéreis de fluoreto de polivinilideno (PVDF) (por exemplo, Millipore Millex-GV). Mais preferencialmente, o filtro hidrofóbico é filtro estéril de politetrafluoroetileno (PTFE) ou filtro estéril de fluoreto de polivinilideno (PVDF).

[00165] A Etapa e) pode ser realizada após a etapa d) ou antes da etapa d), em que o composto de Fórmula I obtido após a etapa c) é submetido à filtração estéril e, em seguida, opcionalmente misturado com os outros componentes da composição de diagnóstico, em que os outros componentes da composição farmacêutica são estéreis ou são submetidos à filtração estéril antes de misturar.

[00166] Preferencialmente, a Etapa a), Etapa b) e Etapa c) são realizadas por um sintetizador. Mais preferencialmente, a Etapa a), Etapa b), Etapa c) e Etapa d) são realizadas por um sintetizador. Ainda mais preferencialmente, a Etapa a), Etapa b), Etapa c), Etapa d) e Etapa e) são realizadas por um sintetizador.

[00167] Exemplos de tais dispositivos de síntese adequados incluem, mas sem limitação, IBA Synthera, GE Fastlab, GE Tracerlab MX, GE Tracerlab FX, Trasis AllinOne, ORA Neptis Perform, ORA Neptis Mosaic, ORA Neptis Plug, Scintomics GPR, Synthera, Comecer Taddeo, Raytest Synchrom, Sofie Elixys, Eckert&Ziegler Modular Lab, Sumitomo Heavy Industries F100 F200 F300, e Siemens Explora.

[00168] Preferencialmente, a Etapa a), Etapa b) e Etapa c) são realizadas de forma controlada remotamente. Mais preferencialmente, a Etapa a), Etapa b), Etapa c) e Etapa d) são realizadas de forma controlada remotamente. Ainda mais preferencialmente, a Etapa a), Etapa b), Etapa c), Etapa d) e Etapa e) são realizadas de forma controlada remotamente.

[00169] Preferencialmente, a Etapa a), Etapa b) e Etapa c) são automatizadas. Mais preferencialmente, a Etapa a), Etapa b), Etapa c) e Etapa d) são automatizadas. Ainda mais preferencialmente, a Etapa a), Etapa b), Etapa c), Etapa d) e Etapa e) são automatizadas. Procedimentos de Diagnóstico

[00170] A composição de diagnóstico da presente invenção é preferencialmente para uso em diagnóstico. Nesse caso, F no composto de Fórmula I é preferencialmente 18F.

[00171] Por conseguinte, em um terceiro aspecto, a invenção se refere à composição de diagnóstico, como definido no primeiro aspecto para o uso em diagnóstico. A composição da presente invenção é particularmente adequada para imageamento de agregados de Tau, por exemplo, por tomografia por emissão de pósitrons (PET). Pode ser usada no diagnóstico de um distúrbio (tal como um distúrbio neuropatológico) associado com agregados de Tau ou no diagnóstico de uma tauopatia, particularmente se o diagnóstico for conduzido por tomografia por emissão de pósitrons. Os agregados de Tau podem estar no cérebro humano.

[00172] Constatou-se que as composições de diagnóstico da presente invenção são particularmente adequadas para imageamento de agregados de proteína Tau. Com relação à proteína Tau, os compostos detectavelmente rotulados da Fórmula I podem se ligar a vários tipos de agregados de Tau, tais como Tau patologicamente agregada, Tau hiperfosforilada, emaranhados neurofibrilares, filamentos helicoidais emparelhados, filamentos lineares, oligômeros solúveis neurotóxicos, polímeros e fibrilas.

[00173] Devido às características de ligação acima, os compostos detectavelmente rotulados da Fórmula I são adequadas para uso no diagnóstico de distúrbios associados com agregados de Tau. Os compostos detectavelmente rotulados da Fórmula I são particularmente adequados para imageamento por tomografia por emissão de pósitrons 18 (PET) de depósitos de Tau. Tipicamente, compostos rotulados por F da Fórmula I são empregados como compostos detectavelmente rotulados se os compostos forem para administração a um paciente.

[00174] Deve-se compreender que, nos exemplos a seguir, os compostos detectavelmente rotulados da Fórmula I são preferencialmente administrados na composição de diagnóstico da presente invenção.

[00175] A composição de diagnóstico da presente invenção pode, assim, ser usada em um método para coletar dados para o diagnóstico de um distúrbio associado com agregados de Tau em uma amostra ou um paciente, preferencialmente um ser humano, compreendendo: (a) colocar uma amostra ou uma área do corpo ou parte do corpo específica suspeita de conter um agregado de tau em contato com uma composição que compreende o composto de Fórmula I; (b) permitir que o composto se ligue ao agregado de tau; (c) detectar o composto ligado ao agregado de tau; e (d) opcionalmente correlacionar a presença ou ausência de composto se ligando com o agregado de tau com a presença ou ausência de agregado de tau na amostra ou parte do corpo ou área do corpo específica.

[00176] Um método específico para detecção de depósitos de Tau em um indivíduo (por exemplo, um ser humano) pode compreender as etapas de: 1) administração de uma quantidade adequada da composição de diagnóstico ao indivíduo, 2) opcionalmente, aguardar a distribuição da composição de diagnóstico no indivíduo, 3) condução de tomografia por emissão de pósitrons (PET), 4) opcionalmente, reconstrução dos dados de imageamento PET, e 5) interpretação dos dados de imageamento PET.

[00177] Preferencialmente, a composição de diagnóstico é para ser administrada intravenosamente. A dose dos compostos detectavelmente rotulados da Fórmula I pode variar dependendo do composto exato a ser administrado, o peso do indivíduo, tamanho e tipo da amostra, e outras variáveis, como seria evidente para um medico versado na técnica. De forma geral, o volume da composição de diagnóstico que deve ser injetada em um indivíduo humano pode ser cerca de 0,1 a cerca de 20 mL, preferencialmente cerca de 0,1 a cerca de 10 mL, mais preferencialmente cerca de 0,5 a cerca de 10 mL. Preferencialmente, cerca de 100 a cerca de 740 MBq da composição de diagnóstico devem ser administrados, mais preferencialmente, cerca de 100 a cerca de 400 MBq, ainda mais preferencialmente cerca de 150 a cerca de 300 MBq.

[00178] Preferencialmente, a aquisição de imagem PET é realizada por cerca de 5 a cerca de 30 min, preferencialmente por cerca de 5 a cerca de 20 min, mais preferencialmente por cerca de 10 a cerca de 20 min. Preferencialmente, a aquisição de PET é iniciada cerca de 30 a cerca de 120 min pós-injeção da composição de diagnóstico, mais preferencialmente cerca de 30 a cerca de 90 min pós-injeção, ainda mais preferencialmente cerca de 45 a cerca de 60 min pós-injeção. A interpretação dos dados de imageamento PET é realizada por análise visual ou por um método de quantificação.

[00179] No imageamento de agregados de Tau, um composto detectavelmente rotulado da Fórmula I é administrado e o sinal decorrente do composto que é especificamente ligado aos agregados de Tau é detectado. A ligação específica é um resultado da alta afinidade de ligação dos compostos da Fórmula I com os agregados de Tau.

[00180] Em uma modalidade preferida, um composto detectavelmente rotulado da Fórmula I é empregado para diagnosticar se uma tauopatia (preferencialmente doença de Alzheimer) está presente. Neste método, um composto detectavelmente rotulado da Fórmula I é administrado a um paciente que suspeita-se sofrer de uma tauopatia (preferencialmente doença de Alzheimer) ou uma amostra obtida de tal paciente e o sinal decorrente do rótulo detectável é detectado, preferencialmente por tomografia por emissão de pósitrons (PET).

[00181] Se nenhum sinal decorrente do rótulo detectável for detectado, então, o presente método pode ser usado para excluir uma tauopatia, que indica que um distúrbio neurológico que não uma tauopatia está presente.

[00182] Nos métodos de diagnosticar um distúrbio associado com agregados de proteína Tau, tal como Doença de Alzheimer, ou uma predisposição para isso em um indivíduo, o método compreende: a) administrar ao mamífero uma quantidade diagnosticamente eficaz de um composto detectavelmente rotulado da Fórmula I; b) permitir que o composto detectavelmente rotulado da Fórmula I se distribua no tecido de interesse (tal como tecido cerebral ou fluidos corporais, tais como líquido cefalorraquidiano (CSF)); e c) imagear o tecido de interesse, em que um aumento na ligação do composto detectavelmente rotulado da Fórmula I ao tecido de interesse em comparação com um nível de controle normal de ligação indica que o indivíduo é sofre de ou tem risco de desenvolver um distúrbio associado com agregados de proteína Tau.

[00183] Os compostos detectavelmente rotulados da Fórmula I podem ser usados para imagear agregados de proteína Tau em qualquer amostra ou uma área do corpo ou parte do corpo específica de um paciente suspeita de conter um agregado de proteína Tau. Os compostos detectavelmente rotulados da Fórmula I são capazes de ultrapassar a barreira hematoencefálica. Consequentemente, eles são particularmente adequados para imageamento de agregados de proteína Tau no cérebro, bem como em fluidos corporais, tais como líquido cefalorraquidiano (CSF).

[00184] O diagnóstico de um distúrbio de Tau ou de uma predisposição para um distúrbio associado a Tau em um paciente pode ser obtido detectando a ligação específica de um composto detectavelmente rotulado da Fórmula I com os agregados de proteína Tau em uma amostra ou in situ, que inclui: (a) colocar a amostra ou uma área do corpo ou parte do corpo específica suspeita de conter o agregado de proteína Tau em contato com um composto detectavelmente rotulado da Fórmula I que se liga ao agregado de proteína Tau; (b) permitir que o composto detectavelmente rotulado da Fórmula I se ligue ao agregado de proteína Tau para formar um complexo de composto/agregado de proteína Tau (doravante, "complexo de composto/agregado de proteína Tau" será abreviado para "complexo de composto/agregado de proteína"); (c) detectar a formação do complexo de composto/agregado de proteína, (d) opcionalmente correlacionar a presença ou ausência do complexo de composto/agregado de proteína com a presença ou ausência de agregados de proteína Tau na amostra ou parte ou área específica do corpo; e (e) opcionalmente comparar a quantidade do complexo de composto/agregado de proteína com um valor de controle normal, em que um aumento na quantidade do complexo de composto/agregado de proteína em comparação com um valor de controle normal pode indicar que o paciente está sofrendo de ou tem risco de desenvolver um distúrbio associado a Tau.

[00185] Após a amostra ou uma área do corpo ou parte do corpo específica tem sido colocada em contato com o composto detectavelmente rotulado da Fórmula I, o composto é deixado se ligar ao agregado de proteína Tau. A quantidade de tempo necessária para a ligação dependerá do tipo de teste (por exemplo, in vitro ou in vivo) e pode ser determinada por uma pessoa versada no campo por experimentos de rotina.

[00186] O composto que foi ligado ao agregado de proteína Tau pode ser subsequentemente detectado por qualquer método apropriado. Um método preferido é tomografia por emissão de pósitrons (PET).

[00187] A presença ou ausência do complexo de composto/agregado de proteína é, então, opcionalmente correlacionada com a presença ou ausência de agregados de proteína Tau na amostra ou parte ou área específica do corpo. Finalmente, a quantidade do complexo de composto/agregado de proteína pode ser comparada com um valor de controle normal que foi determinado em uma amostra ou uma área do corpo ou parte do corpo específica de um indivíduo saudável, em que um aumento na quantidade do complexo de composto/agregado de proteína em comparação com um valor de controle normal pode indicar que o paciente está sofrendo de ou tem risco de desenvolver um distúrbio associado a Tau.

[00188] Prever a capacidade de resposta de um paciente que sofre de um distúrbio associado com agregados de proteína Tau e está sendo tratado com um medicamento pode ser alcançado: (a) colocando uma amostra ou uma área do corpo ou parte do corpo específica suspeita de conter um agregado de proteína Tau em contato com um composto detectavelmente rotulado da Fórmula I; (b) permitindo que o composto detectavelmente rotulado da Fórmula I se ligue ao agregado de proteína Tau para formar um complexo de composto/agregado de proteína; (c) detectando a formação do complexo de composto/agregado de proteína; (d) opcionalmente correlacionando a presença ou ausência do complexo de composto/agregado de proteína com a presença ou ausência de agregado de proteína Tau na amostra ou parte do corpo ou área do corpo específica; e (e) opcionalmente comparar a quantidade do complexo de composto/agregado de proteína com um valor de controle normal.

[00189] Como as etapas (a) a (e) podem ser conduzidas já foi explicado acima.

[00190] No método para prever a capacidade de resposta, a quantidade do complexo de composto/agregado de proteína pode ser opcionalmente comparado em vários pontos de tempo durante o tratamento, por exemplo, antes e após o início do tratamento ou em vários pontos de tempo após o início do tratamento. Uma mudança, especialmente uma redução, na quantidade do complexo de composto/agregado de proteína pode indicar que o paciente tem um alto potencial de ser responsivo ao respectivo tratamento.

[00191] A composição de diagnóstico da presente invenção tem uma variedade de vantagens significativas: - é quimicamente estável e pode ser armazenada à temperatura ambiente por pelo menos 8 horas ou ainda por pelo menos 10 horas, - é estável em concentrações do composto de Fórmula I de até 5 µg/mL, preferencialmente de até 10 µg/mL, - filtração estéril da composição de diagnóstico pode ser conduzida sem perda significativa de radioatividade, - permite a administração a um indivíduo sem perda significativa de radioatividade em seringas e outros materiais, - tem alta pureza e estabilidade do composto de Fórmula I em alta concentração de radioatividade, por exemplo, ≥ 2 GBq/mL, preferencialmente ≥ 3 GBq/mL, mais preferencialmente ≥ 5 GBq/mL por 10 h, preferencialmente por 12 h, - permite alta pureza e estabilidade do composto de

Fórmula I em altos níveis de radioatividade por batelada, por exemplo, ≥ 20 GBq, preferencialmente ≥ 50 GBq, mais preferencialmente ≥ 100 GBq por 10 h, preferencialmente por 12 h, - pode ser usado para detecção de depósitos de Tau em indivíduos.

[00192] A presente invenção é ilustrada pelos exemplos a seguir, que não devem ser considerados limitantes.

EXEMPLOS

[00193] Todos os reagentes e solventes foram obtidos de fontes comerciais e utilizados sem purificação adicional. Os espectros de prótons (1H) foram registrados em um espectrômetro Bruker DRX-400 MHz RMN ou em um espectrômetro Bruker AV-400 MHz RMN em solventes deuterados. Os espectros de massa (MS) foram registrados em um espectrômetro de massa Advion CMS. A cromatografia foi realizada utilizando sílica gel (Fluka: sílica gel 60, 0,063-0,2 mm) e solventes adequados, conforme indicado nos exemplos específicos. Purificação flash foi realizada com um sistema de purificação flash Biotage Isolera One usando colunas HP-Sil (Biotage) ou colunas puriFlash (Interchim) e com o gradiente de solvente indicado nas amostras específicas. Cromatografia de camada fina (TLC) foi realizada em placas de sílica gel com detecção por UV. Abreviações AD Doença de Alzheimer BSA albumina de soro bovino Boc, BOC terc-butiloxicarbonila CBD degeneração corticobasal d.c. corrigido para decaimento d dupleto dd dupleto de dupleto ddd dupleto de dupleto de dupleto dt dupleto de tripleto

DMA dimetilacetamida DMF N,N-dimetil formamida DMSO dimetilsulfóxido DMTrt-Cl 4,4’-(cloro(fenil)metileno)bis(metoxibenzeno) dppf 1,1′-bis(difenilfosfino)ferroceno EI ionização de elétrons ELSD detector de dispersão de luz evaporativa ESI ionização por eletropulverização EtOH etanol FTD demência frontotemporal HPLC cromatografia líquida de alto desempenho HC Controle saudável GBq Gigabequerel K222 4, 7, 13, 16, 21, 24-hexaoxa-1,10-diazabiciclo[8.8.8]- hexacosano (Kryptofix 222) MBq Megabequerel MS espectrometria de massa MeCN acetonitrila m multipleto mc multipleto centrado n.c.a. não veículo adicionado n.d.c. não decaimento corrigido RMN espectroscopia de ressonância magnética nuclear: deslocamentos químicos (δ) são dados em ppm.

PBS solução salina tamponada com fosfato PET Tomografia por emissão de pósitrons PiD doença de Pick PSP paralisia supranuclear progressiva q quadrupleto (quarteto) RT temperatura ambiente s singuleto t tripleto Tau proteína Tau, depósitos de Tau, agregados de Tau TBI lesão cerebral traumática

Trt tritila (trifenilmetila) TLC cromatografia de camada fina % v/v Porcentagem em volume EOS Final de síntese GBq Giga Becquerel MBq Mega Becquerel SPE Extração de fase sólida WFI Água para injeção Síntese de Compostos de Teste Exemplo Preparativo A Etapa A

[00194] 2,6-dibromopiridina comercialmente disponível (4,12 g, 16,6 mmoles) foi suspenso em etanol (40 mL) e hidrato de hidrazina (10 mL, 97,6 mmoles) em água (~50-60%) foi adicionado. A mistura foi aquecida em um banho de areia a ~115ºC por 18 horas. O solvente foi removido e o resíduo foi purificado por cromatografia em sílica usando etil acetato/n-heptano (60/40) para gerar o composto do título como um sólido esbranquiçado (3,05 g, 93%).

[00195] 1 H-RMN (400 MHz, CDCl3): δ = 7,33 (t, 1H), 6,83 (d, 1H), 6,67 (d, 1H), 6,00 (br-s, 1H), 3,33-3,00 (br-s, 2H)

Etapa B

[00196] O composto do título da Etapa A acima (10 g, 53,2 mmoles) e 1-Boc-4-piperidona comercialmente disponível (10,6 g, 53,2 mmoles) foram adicionados a um frasco de 500 mL e misturados para se tornar uma mistura homogênea. Em seguida, ácido polifosfórico (80 g, 115% de base de H3PO4) foi adicionado e a mistura foi aquecida a ~160°C em um banho de areia. A ~120°C, o grupo de proteção por Boc foi clivado resultando em formação de espuma da mistura de reação. Após conclusão da clivagem por Boc, a espuma colapsou e a mistura de reação escura foi agitada a ~160°C por 20 horas. A mistura de reação foi deixada resfriar para temperatura ambiente, e água (400 mL) foi adicionada. A mistura de reação foi agitada/sonicada até o material gomoso ser dissolvido. A mistura de reação foi, então, substituída em um banho de gelo e o pH da solução foi ajustado para pH ~12 adicionando péletes de hidróxido de sódio sólidos (exotérmicos). O precipitado foi coletado por filtração e lavado com água (400 mL) para remover sais. O precipitado foi dissolvido em diclorometano/metanol (9/1; 1500 mL) por sonicação e lavado com água (2 x 400 mL) para remover sais remanescentes e material insolúvel. A fase orgânica foi seca sobre Na2SO4, filtrada e os solventes foram removidos sob pressão reduzida. O resíduo escuro foi tratado com diclorometano (100 mL), sonicado por 5 minutos e o precipitado foi coletado por filtração. O precipitado foi lavado com diclorometano (40 mL) e seco a ar para gerar o composto do título como um sólido bege (3,5 g, 26%).

[00197] 1 H-RMN (400 MHz, DMSO-d6): δ = 11,5 (br-s, 1H), 7,72 (d, 1H), 7,15 (d, 1H), 3,86-3,82 (m, 2H), 3,06-3,00 (m, 2H), 2,71-2,65 (m, 2H). Etapa C

[00198] O composto do título da Etapa B acima (1,75 g, 6,94 mmoles) foi suspenso em xileno (380 mL) e óxido de manganês (IV) (6,62 g, 76,9 mmoles) foi adicionado. A mistura de reação foi, então, aquecida a ~160°C em um banho de areia por 36 horas. A mistura de reação resfriada foi evaporada sob pressão reduzida, o resíduo foi suspenso em diclorometano/metanol (1/1; 400 mL) e agitado à temperatura ambiente por 30 minutos. A mistura de reação foi, então, filtrada através de filtros de papel para remover o óxido de manganês (IV) e o filtro foi lavado com metanol (50 mL). Os filtrados combinados foram evaporados sob pressão reduzida e o resíduo escuro foi purificado por cromatografia em sílica (50 g de cartuchp HP-SIL) usando um sistema Biotage Isolera empregando um gradiente de etil acetato/heptano (5/95- 100/0) para remover impurezas não polares seguido por diclorometano/metanol (9/1 -> 4/1) para gerar o composto do título como um sólido amarelo escuro. O rendimento total de 2 ciclos foi de 1,77 g (51%).

[00199] 1 H-RMN (400 MHz, DMSO-d6): δ = 12,52 (br-s, 1H), 9,42 (s, 1H), 8,61 (d, 1H), 8,53 (d, 1H), 7,56-7,52 (m, 2H). Exemplo Preparativo B Etapa A

[00200] A uma suspensão do composto do título do Exemplo Preparativo A (0,776 g, 0,72 mmol) em diclorometano (65 mL), foi adicionada trietilamina (1,86 mL, 13 mmoles) e tritil-cloreto (2,63 g, 9,39 mmoles). Após a adição de 4-(dimetilamino)-piridina (0,074 g, 0,608 mmol), a mistura de reação foi agitada à temperatura ambiente por 16 horas. A mistura de reação foi diluída com diclorometano (150 mL) e água (50 mL). A fase orgânica foi separada, seca sobre Na2SO4, filtrada e os solventes foram removidos in vacuo. O resíduo foi purificado em cartuchos HP-Sil SNAP (50 g) usando um sistema de purificação Biotage Isolera One empregando um gradiente de etil acetato/n-heptano (5/95 -> 100/0 -> 100/0) para gerar o composto do título B como um sólido amarelo claro (0,831 g, 54%). O material de partida não reagido foi recuperado por exaguamento do cartucho com etil acetato/metanol (90/10) para gerar o material de partida como um sólido esbranquiçado (0,195 g, 25%).

[00201] 1 H-RMN (400 MHz, CDCl3) δ = 9,22 (s, 1H), 8,23 (d, 1H), 8,13 (d, 1H), 7,48-7,42 (m, 7H), 7,33-7,22 (m, 12H), 6,41 (d, 1H)

[00202] MS (ESI); m/z = 490,03/491,96 [M+H]+ Exemplo Preparativo C Etapa A

[00203] A uma suspensão do composto do título do Exemplo Preparativo A (0,482 g, 1,94 mmol) em diclorometano (40 mL), foi adicionada trietilamina (1,15 mL, 8 mmoles) e 4,4’- (cloro(fenil)metileno)bis(metoxibenzeno; DMTrt-Cl) (1,963 g, 5,8 mmoles). Após a adição de 4-(dimetilamino)-piridina (0,046 g, 0,377 mmol), a mistura de reação foi agitada à temperatura ambiente por 3 dias. A mistura de reação foi diluída com diclorometano (100 mL) e água (40 mL). A fase orgânica foi separada, seca sobre Na2SO4, filtrada e os solventes foram removidos in vacuo. O resíduo foi purificado em cartuchos HP-Sil SNAP (50 g) usando um sistema de purificação Biotage Isolera One empregando um gradiente de etil acetato/n-heptano (5/95 -> 100/0 -> 100/0) para gerar o composto do título C como um sólido amarelo claro (0,825 g, 72%). O material de partida não reagido foi recuperado por exaguamento do cartucho com etil acetato/metanol (90/10) para gerar o material de partida como um sólido esbranquiçado (0,042 g, 8,8%).

[00204] 1 H-RMN (400 MHz, CDCl3) δ = 9,23 (s, 1H), 8,23 (d, 1H), 8,13 (d, 1H), 7,39-7,31 (m, 6H), 7,29-7,25 (4H), 6,80 (d, 4H), 6,41 (dd, 1H), 3,81 (s, 6H) Exemplo 1 Etapa A

[00205] A uma mistura de 1,4-dioxano desgaseificado (4,3 mL) e água (1 mL) em um frasco de micro-ondas, foi adicionado [1,1′- bis(difenilfosfino)ferroceno]dicloropaládio(II), complexo com diclorometano (0,0084 g, 0,01 mmol), seguido pelo composto do título do Exemplo Preparativo A (0,05 g, 0,2 mmol), ácido (2-fluoropiridin-4- il)borônico (0,035 g, 0,245 mmol) e carbonato de césio (0,133 g, 0,41 mmol). A mistura de reação foi, então, aquecida a ~115°C em um banho de areia por 6 horas. A mistura de reação foi diluída com etil acetato (60 mL) e água (20 mL), a fase orgânica foi separada, seca sobre Na2SO4, filtrada e os solventes foram evaporados in vacuo. O resíduo escuro foi purificado por cromatografia em sílica (25 g HP-SIL) usando um sistema Biotage Isolera empregando um gradiente de diclorometano/metanol (100/0 -> 95/5 -> 90/10 -> 80/20) para gerar o composto do título 1 (Ib) como um sólido esbranquiçado (0,033 g, 63%).

[00206] 1 H-RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ = 12,50 (br-s, 1H), 9,45 (s, 1H), 8,83 (d, 1H), 8,56-8,52 (m, 1H), 8,43-8,39 (m, 1H), 8,19-8,14 (m, 2H), 7,92 (s, 1H), 7,54-7,50 (m, 1H)

[00207] MS (ESI): m/z = 265,04 [M+H]+ Exemplo 2 Etapa A

[00208] A uma suspensão do composto do título do Exemplo Preparativo A (0,430 g, 1,73 mmol) em diclorometano (25 mL), foram adicionados trietilamina (1,93 mL, 13,89 mmoles) e di-terc-butil dicarbonato (2,27 g, 10,02 mmoles). Após a adição de 4-(dimetilamino)- piridina (0,042 g, 0,34 mmol), a mistura de reação foi agitada à temperatura ambiente por 3 dias. Os solventes foram removidos sob pressão reduzida e o resíduo foi purificado em cartuchos HP-Sil SNAP (25 g) usando um sistema de purificação Biotage Isolera One empregando um gradiente de etil acetato/n-heptano (5/95 -> 100/0 -> 100/0) para gerar o composto do título 2 (Ia) como um sólido esbranquiçado (0,558 g, 92%).

[00209] 1 H-RMN (400 MHz, CDCl3) δ = 9,28 (s, 1H), 8,73 (d, 1H), 8,22 (d, 2H), 7,59 8d, 1H), 1,80 (s, 9H). Etapa B

[00210] A uma mistura de 1,4-dioxano desgaseificado (3 mL) e água (0,7 mL) em um frasco de micro-ondas, foi adicionado [1,1′-

bis(difenilfosfino)ferroceno]dicloropaládio(II), complexo com dicloro- metano (0,0058 g, 0,007 mmol), seguido pelo composto do título da Etapa A acima (0,05 g, 0,143 mmol), ácido (6-fluoropiridin-3-il)borônico (0,024 g, 0,17 mmol) e carbonato de césio (0,092 g, 0,286 mmol). A mistura de reação foi, então, aquecida a ~100°C em um banho de areia por 4 horas. A mistura de reação foi diluída com etil acetato (80 mL) e água (35 mL), a fase orgânica separada, seca sobre Na2SO4, filtrada e os solventes foram evaporados in vacuo. O resíduo escuro foi purificado por cromatografia em sílica (12 g, puriFlash, Interchim) usando um sistema Biotage Isolera empregando um gradiente de diclorometano/metanol (100/0 -> 98/2 -> 95/5 -> 90/10 -> 80/20) para gerar o composto protegido por Boc menos polar (0,0255 g, 49%) e o composto do título mais polar 2 (Ia) como um sólido esbranquiçado (0,0116 g, 31%).

[00211] Composto do título mais polar 2 (Ia):

[00212] 1 H-RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ = 12,40 (br-s, 1H), 9,40 (s, 1H), 9,05 (s, 1H), 8,78-8,70 (m, 2H), 8,51 (d, 1H), 8,02 (d, 1H), 7,50 (d, 1H), 7,36 (dd, 1H)

[00213] MS (ESI): m/z = 265,09 [M+H]+

[00214] Composto protegido por Boc menos polar:

[00215] 1 H-RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ = 9,48 (s, 1H), 9,13 (d, 1H), 8,84-8,78 (m, 2H), 8,68 (d, 1H), 8,23 (d, 1H), 8,19 (d, 1H), 7,40 (dd, 1H), 1,75 8s, 9H) Síntese de Precursores Radiorrotulados Exemplo 3-a

Etapa A

[00216] A uma mistura de 1,4-dioxano desgaseificado (4,3 mL) e água (1 mL) em um frasco de micro-ondas, foram adicionados [1,1′- bis(difenilfosfino)ferroceno]dicloropaládio(II), complexo com diclorometano (0,0084 g, 0,01 mmol), o composto do título do Exemplo Preparativo B (0,1 g, 0,2 mmol), 2-nitro-4-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2- dioxaborolan-2-il)piridina (0,061 g, 0,245 mmol) e carbonato de césio (0,133 g, 0,41 mmol). A mistura de reação foi, então, aquecida a ~115°C em um banho de areia por 6 horas. A mistura de reação foi diluída com etil acetato (60 mL) e água (20 mL), a fase orgânica foi separada, seca sobre Na2SO4, filtrada e os solventes foram evaporados in vacuo. O resíduo escuro foi purificado por cromatografia em sílica (25 g pufiFlash- coluna, Interchim) usando um sistema Biotage Isolera empregando um gradiente de etil acetato/n-heptano (5/95 -> 100/0 -> 100/0) para gerar o composto do título 3-a como um sólido amarelo claro (0,082 g, 75%).

[00217] 1 H RMN (400 MHz, CDCl3) δ = 9,32 (s, 1H); 8,56 (d, 1H), 8,48 (d, 1H), 8,33 (s, 1H); 8,30 (d, 1H), 7,85 (d, 1H), 7,69 (d, 1H), 7,58-7,54 (m, 5H), 7,32-7,25 (m, 10H), 6,48 (d, 1H)

[00218] MS (ESI): m/z = 534,28 [M+H]+. Exemplo 3-b Método a: Etapa A

[00219] A uma solução de 3-a (0,0396 g, 0,074 mmol) em diclorometano (5 mL), foi adicionado ácido trifluoroacético (1,2 mL). A mistura de reação foi agitada à temperatura ambiente por 6 horas e metanol (2 mL) foi adicionado. Os solventes foram evaporados in vacuo e o resíduo foi dissolvido/suspenso em metanol (5 mL). Os solventes foram evaporados in vacuo e o resíduo foi novamente dissolvido/suspenso em metanol (5 mL). Os solventes foram evaporados in vacuo e o resíduo foi suspenso em diclorometano (2 mL). Após a adição de trietilamina (1 mL, 7,2 mmoles), di-terc-butil dicarbonato (0,098 g, 0,43 mmol) e 4-(dimetilamino)-piridina (0,0018 g, 0,014 mmol), a mistura de reação foi agitada à temperatura ambiente por 18 horas. A mistura de reação foi diluída com etil acetato (50 mL) e água (20 mL). A fase orgânica foi separada, seca sobre Na2SO4, filtrada e os solventes foram removidos in vacuo. O resíduo foi purificado em sílica (25 g puriFlash, Interchim) usando um sistema de purificação Biotage Isolera One empregando um gradiente de etil acetato/n-heptano (5/95 -> 100/0 -> 100/0) para eluir subprodutos não polares seguido por etil acetato/metanol (95/5) para gerar o composto do título 3-b como um sólido amarelo claro (0,0184 g, 63%).

[00220] 1 H-RMN (400 MHz, CDCl3) δ = 9,36 (s, 1H), 9,15 (s, 1H), 8,82-8,76 (m, 2H), 8,57 (d, 1H), 8,45 (d, 1H), 8,36 (d, 1H), 8,07 (d, 1H), 1,87 (s, 9H)

[00221] MS (ESI); m/z = 391,82 [M+H]+ Método b: Etapa A

[00222] A uma mistura de 1,4-dioxano desgaseificado (2,2 mL) e água (0,5 mL) em um frasco de micro-ondas, foi adicionado [1,1′-

bis(difenilfosfino)ferroceno]dicloropaládio(II), complexo com diclorometano (0,0042 g, 0,005 mmol), seguido pelo composto do título do Exemplo Preparativo C (0,055 g, 0,1 mmol), 2-nitro-4-(4,4,5,5- tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)piridina (0,0305 g, 0,12255 mmol) e carbonato de césio (0,067 g, 0,205 mmol). A mistura de reação foi, então, aquecida a ~115°C em um banho de areia por 6 horas. A mistura de reação foi diluída com etil acetato (20 mL), o precipitado coletado por filtração, lavado com água (10 mL) e metanol (5 mL) e seco a ar para gerar 3-c (0,0277 g, 95%). Etapa B

[00223] A uma suspensão do produto do título bruto da Etapa A acima (0,0277 g, 0,095 mmol) em diclorometano (4 mL), foram adicionados trietilamina (1 mL, 7,2 mmoles), di-terc-butil dicarbonato (0,2 g, 0,86 mmol), e 4-(dimetilamino)-piridina (0,0036 g, 0,028 mmol). A mistura de reação foi agitada à temperatura ambiente por 16 horas, diluída com etil acetato (50 mL) e água (20 mL). A fase orgânica foi separada, seca sobre Na2SO4, filtrada e os solventes foram removidos in vacuo. O resíduo foi purificado em sílica (25 g puriFlash, Interchim) usando um sistema de purificação Biotage Isolera One empregando um gradiente de etil acetato/n-heptano (5/95 -> 100/0 -> 100/0) para eluir subprodutos não polares seguido por etil acetato/metanol (95/5) para gerar o composto do título 3-b como um sólido amarelo claro (0,0261 g, 70%).

[00224] 1 H-RMN (400 MHz, CDCl3) δ = 9,38 (s, 1H), 9,16 (s, 1H), 8,83-8,78 (m, 2H), 8,58 (d, 1H), 8,46 (d, 1H), 8,38 (d, 1H), 8,09 (d, 1H), 1,88 (s, 9H).

[00225] MS (ESI); m/z = 391,85 [M+H]+; 291,74 [M+H-Boc]+. Exemplo 3-d

Etapa A

[00226] A uma mistura de 1,4-dioxano desgaseificado (2,2 mL) e água (0,5 mL) em um frasco de micro-ondas, foi adicionado [1,1′- bis(difenilfosfino)ferroceno]dicloropaládio(II), complexo com diclorometano (0,0042 g, 0,005 mmol), seguido pelo composto do título do Exemplo Preparativo C (0,055 g, 0,1 mmol), 2-nitro-4-(4,4,5,5- tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)piridina (0,0305 g, 0,12255 mmol) e carbonato de césio (0,067 g, 0,205 mmol). A mistura de reação foi, então, aquecida a ~115°C em um banho de areia por 6 horas. A mistura de reação foi diluída com etil acetato (20 mL), o precipitado coletado por filtração, lavado com água (10 mL) e metanol (5 mL) e seco a ar para gerar 3-c como um sólido cinza (0,0277 g, 95%). Etapa B

[00227] A uma suspensão do produto do título bruto da Etapa A acima (0,0277 g, 0,095 mmol) em diclorometano (4 mL), foram adicionados trietilamina (1 mL, 7,2 mmoles), 4,4’- (cloro(fenil)metileno)bis(metoxibenzeno) (0,081 g, 0,29 mmol), e 4- (dimetilamino)-piridina (0,0036 g, 0,028 mmol). A mistura de reação foi agitada à temperatura ambiente por 18 horas, diluída com etil acetato (50 mL) e água (20 mL). A fase orgânica foi separada, seca sobre Na2SO4, filtrada e os solventes foram removidos in vacuo. O resíduo foi purificado em sílica (25 g puriFlash, Interchim) usando um sistema de purificação Biotage Isolera One empregando um gradiente de etil acetato/n-heptano (5/95 -> 100/0 -> 100/0) para gerar o composto do título 3-d como um sólido amarelo claro (0,0261 g, 44%).

[00228] 1 H-RMN (400 MHz, CDCl3) δ = 9,32 (s, 1H), 8,58 (d, 1H), 8,50 (d, 1h), 8,36 (s, 1H), 8,30 (d, 1H), 7,85 (d, 1H), 7,74 (d, 1H), 7,52-7,42 (m, 6H), 7,27-7,23 (m, 4H), 6,80 (d, 4H), 6,49 (d, 1H), 3,78 (s, 6H). Exemplo 3-e Etapa A

[00229] N,N-dimetil-4-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2- il)piridin-2-amina comercialmente disponível (0,25 g, 1 mmol) foi dissolvido em diclorometano (5 mL). À solução de agitação resultante, foi adicionado em gotas à temperatura ambiente metil trifluorometanossulfonato (0,124 mL, 1,1 mmol). A solução foi agitada à temperatura ambiente por 4 horas. A mistura de reação foi concentrada para remover diclorometano e o resíduo foi seco in vacuo para obter um vidro/espuma amarelo, que foi diretamente usado na etapa seguinte. Etapa B

[00230] A uma solução de 1,4-dioxano desgaseificado (12 mL) e água (3 mL) em um frasco de micro-ondas, foram adicionados [1,1′- bis(difenilfosfino)ferroceno]dicloro-paládio(II), complexo com diclorometano (0,034 g, 0,04 mmol), o composto do título do Exemplo Preparativo B (0,4 g, 0,816 mmol), o composto do título bruto da Etapa A acima (~1 mmol) e carbonato de césio (0,544 g, 1,68 mmol). A mistura de reação foi aquecida a ~120°C em um banho de areia por 6 horas. A mistura de reação foi diluída com etil acetato (150 mL) e água (50 mL), a fase orgânica separada, seca sobre Na2SO4, filtrada e os solventes foram evaporados in vacuo. O resíduo escuro foi purificado por cromatografia em sílica (25 g HP-Ultra) usando um sistema Biotage Isolera empregando um gradiente de etil acetato/n-heptano (5/95 -> 100/0 -> 100/0) para eluir o material de partida não reagido e subprodutos não polares. O gradiente foi, então, alterado para diclorometano/metanol (100/0 -> 95/5 -> 90/10) para gerar o derivado de dimetilamina como vidro amarelo claro (0,127 g, 29%; MS (ESI): m/z = 532,27 [M+H]+) e o derivado de metilamina como sólido cinza (0,0547 g, 13%; MS (ESI): m/z = 519,18 [M+H]+). O gradiente foi novamente alterado para diclorometano/metanol (90/10 -> 80/20) e mantido a (80/20) para obter o composto do título 3-e como um sólido marrom (0,104 g, 18%).

[00231] 1 H RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ = 9,47 (s, 1H); 8,89 (d, 1H), 8,55 (d, 1H), 8-35-8,32 (m, 2H), 8,29 (d, 1H), 7,63-7,57 (m, 5H), 7,48 (d, 1H), 7,34-7,25 (m, 10H), 6,48 (d, 1H), 3,60 (s, 9H).

[00232] MS (ESI): m/z = 546,26 [M+H]+. Exemplo 3-f Etapa A

[00233] 3-e (0,199 g, 0,364 mmol) foi suspenso em diclorometano (10 mL). Após a adição de ácido trifluoroacético (10 mL), a mistura de reação foi agitada à temperatura ambiente por 18 horas. Os solventes foram removidos sob pressão reduzida, o resíduo foi dissolvido em metanol (10 mL) e os solventes removidos sob pressão reduzida. O tratamento com metanol do resíduo foi repetido mais duas vezes. O resíduo foi, então, suspenso em diclorometano (20 mL) e sonicado por ~5 minutos. O precipitado foi coletado por filtração, lavado com diclorometano (10 mL) e seco a ar para gerar o composto do título 3-f como um sólido cinza (0,127 g, 83%).

[00234] 1 H RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ = 13,76 (br-s, 1H), 9,84 (s, 1H); 8,12 (d, 1H), 8,89 (d, 1H), 8,80 (d, 1H), 8,75 (s, 1H), 8,54-8,50 (m, 2H), 8,04 (d, 1H), 3,72 (s, 9H).

[00235] MS (ESI): m/z = 303,91 [M+H]+. Exemplo 4-a Etapa A

[00236] A uma mistura de 1,4-dioxano desgaseificado (3 mL) e água (0,7 mL) em um frasco de micro-ondas, foi adicionado [1,1′- bis(difenilfosfino)ferroceno]dicloropaládio(II), complexo com dicloro- metano (0,0058 g, 0,007 mmol), seguido pelo composto do título do Exemplo 2 Etapa A (0,05 g, 0,143 mmol), 2-nitro-5-(4,4,5,5-tetrametil- 1,3,2-dioxaborolan-2-il)piridina (0,0428 g, 0,17 mmol) e carbonato de césio (0,092 g, 0,286 mmol). A mistura de reação foi, então, aquecida a ~100°C em um banho de areia por 4 horas. A mistura de reação foi diluída com etil acetato (80 mL) e água (35 mL), a fase orgânica separada, seca sobre Na2SO4, filtrada e os solventes foram evaporados in vacuo. O resíduo escuro foi purificado por cromatografia em sílica (12 g, puriFlash, Interchim) usando um sistema Biotage Isolera empregando um gradiente de diclorometano/metanol (100/0 -> 98/2 -> 95/5 -> 90/10 -> 80/20) para gerar o composto do título 4-a como um sólido amarelo claro (0,0173 g, 31%).

[00237] 1 H RMN (400 MHz, CDCl3/CD3OD) δ = 9,45 (d, 1H), 9,32 (s, 1H), 8,93 (dd, 1H), 8,68-8,64 (m, 2H), 8,46 (d, 1H), 8,35 (d, 1H), 8,14 (d, 1H), 1,82 (s, 9H).

[00238] MS (ESI): m/z = 392,13 [M+H]+. Radiorrotulagem de Precursores com 18F

[00239] Método de radiorrotulagem geral A, realizado em um Tracerlab FX, tal como ilustrado na Figura 1 (Radiorrotulagem, desproteção, HPLC e SPE) – Exemplos Comparativos.

[00240] [18F]fluoreto foi retido em um cartucho de Sep-Pak Accell Plus QMA Light (Waters) e eluído com uma solução K2CO3/Kryptofix®

2.2.2. A água foi removida usando um fluxo de He ou N2 a 95ºC e coevaporada para secagem com MeCN (1 mL). Após, uma solução do precursor dissolvido foi adicionada ao complexo K[18F]F-Kryptofix seco. O frasco de reação foi vedado e aquecido por 15 min a 150ºC. Subsequentemente, um ácido (1-2 M de HCl, 0,5-1M de H2SO4 ou 0,5- 2M de H3PO4) foi adicionado e a mistura foi aquecida por 10 min a 150ºC. A mistura de reação foi diluída com 1 mL de NaOH e 2,4 mL da fase móvel de HPLC preparativa e o produto bruto foi purificado através de HPLC semipreparativa (por exemplo, Phenomenex, Gemini C18, 5 µm, 250 x 10 mm) a 4 mL/min. O traçador isolado foi diluído com água (20 mL + 10 mg/mL de ascorbato de sódio), retido em um cartucho C- 18 Plus (Waters), lavado com água (10 mL + 10 mg/mL de ascorbato de sódio), eluído com etanol (1 mL) e misturado com água (14 mL+10 mg/mL de ascorbato de sódio).

[00241] Método de radiorrotulagem geral B, realizado em um

Tracerlab FX, tal como ilustrado na Figura 1 (Radiorrotulagem, HPLC e SPE) – Exemplos Comparativos.

[00242] [18F]fluoreto foi retido em um cartucho de Sep-Pak Accell Plus QMA Light (Waters) e eluído com uma solução K2CO3/Kryptofix®

2.2.2. A água foi removida usando um fluxo de He ou N2 a 95ºC e coevaporada para secagem com MeCN (1 mL). Após, uma solução do precursor dissolvido foi adicionada ao complexo K[18F]F-Kryptofix seco. O frasco de reação foi vedado e aquecido por 15 min a 150ºC. A mistura de reação foi diluída com 0,5-1 mL de NaOH e 2,4 mL da fase móvel de HPLC preparativa e o produto bruto foi purificado através de HPLC semipreparativa (por exemplo, Phenomenex, Gemini C18, 5 µm, 250 x 10 mm) a 4 mL/min. O traçador isolado foi diluído com água (20 mL + 10 mg/mL de ascorbato de sódio), retido em um cartucho C-18 Plus (Waters), lavado com água (10 mL + 10 mg/mL de ascorbato de sódio), eluído com etanol (1 mL) e misturado com água (14 mL+10 mg/mL de ascorbato de sódio).

[00243] Método de radiorrotulagem geral C realizado em IBA Synthera + Synthera HPLC, tal como ilustrado na Figura 2 (Radiorrotulagem, HPLC).

[00244] [18F]fluoreto foi retido em um cartucho de Sep-Pak Accell Plus QMA Light (Waters) e eluído com uma solução K2CO3/Kryptofix®

2.2.2. A água foi removida usando um fluxo de He ou N2 a 95-110ºC e coevaporada para secagem. Após, uma solução do precursor dissolvido foi adicionada ao complexo K[18F]F-Kryptofix seco. O frasco de reação foi vedado e aquecido por 15 min a 150ºC. A mistura de reação foi diluída com 0,5-1 mL de 1M H3PO4 e 3-3,5 mL do componente aquoso da fase móvel de HPLC preparativa e o produto bruto foi purificado através de HPLC semipreparativa (por exemplo, Waters XBridge Peptide BEH C18, 130 Å, 10 µm, 10 mm x 250 mm) a 3-6 mL/min. A fração contendo o produto (5-10 mL) foi coletada e diluída com um meio de diluição contendo 0-2 mL de EtOH, 10-20 mL de água, e 0-4 mL de concentrado de tampão de fosfato (Braun, 3,05 g de dodeca-hidrato de mono-hidrogenofosfato dissódico, 0,462 g de di-hidrato de di- hidrogenofosfato de sódio em 20 mL de água para injeção) e/ou ascorbato de sódio (100-1000 mg) e/ou citrato de sódio (100-1000 mg) e/ou ácido gentísico (20-200 mg).

[00245] Método de radiorrotulagem geral D, realizado em um Tracerlab FX, tal como ilustrado na Figura 1 (Radiorrotulagem, HPLC).

[00246] [18F]fluoreto foi retido em um cartucho de Sep-Pak Accell Plus QMA Light (Waters) e eluído com uma solução K2CO3/Kryptofix®

2.2.2. A água foi removida usando um fluxo de He ou N2 a 95ºC e coevaporada para secagem com MeCN (1 mL). Após, uma solução do precursor dissolvido foi adicionada ao complexo K[18F]F-Kryptofix seco. O frasco de reação foi vedado e aquecido por 15 min a 150ºC. A mistura de reação foi diluída com 0,5-1 mL de 1M H3PO4 e 3-3,5 mL do componente aquoso da fase móvel de HPLC preparativa e o produto bruto foi purificado através de HPLC semipreparativa (por exemplo, Waters XBridge Peptide BEH C18, 130 Å, 10 µm, 10 mm x 250 mm ou Gemini 5 µm C18, 250x10 mm, Phenomenex: 00G-4435-N0) a 3-6 mL/min. A fração contendo o produto (5-10 mL) foi coletada e diluída com um meio de diluição contendo 0-2 mL de EtOH, 10-20 mL de água, e 0-4 mL de concentrado de tampão de fosfato (Braun) e/ou ascorbato de sódio (100-1000 mg) e/ou citrato de sódio (100-1000 mg) e/ou ácido gentísico (20-200 mg).

[00247] Método de radiorrotulagem geral E, realizado em um Tracerlab FX, tal como ilustrado na Figura 1 (Radiorrotulagem, desproteção, HPLC).

[00248] [18F]fluoreto foi retido em um cartucho de Sep-Pak Accell Plus QMA Light (Waters) e eluído com uma solução K2CO3/Kryptofix®

2.2.2. A água foi removida usando um fluxo de He ou N2 a 95ºC e coevaporada para secagem com MeCN (1 mL). Após, uma solução do precursor dissolvido foi adicionada ao complexo K[18F]F-Kryptofix seco. O frasco de reação foi vedado e aquecido por 15 min a 150ºC. Subsequentemente, 1 mL de 0,5M H2SO4 foi adicionado e a mistura foi aquecida por 10 min a 100ºC. A mistura de reação foi diluída com 0,5-1 mL de 1M NaOH e 2-3 mL do componente aquoso da fase móvel de HPLC preparativa e o produto bruto foi purificado através de HPLC semipreparativa (por exemplo, Waters XBridge Peptide BEH C18, 130 Å, 10 µm, 10 mm x 250 mm ou Gemini 5 µm C18, 250x10 mm, Phenomenex: 00G-4435-N0) a 3-6 mL/min. A fração contendo o produto (5-10 mL) foi coletada e diluída com um meio de diluição contendo 0-2 mL de EtOH, 10-20 mL de água, e 0-4 mL de concentrado de tampão de fosfato (Braun) e/ou ascorbato de sódio (100-1000 mg) e/ou citrato de sódio (100-1000 mg) e/ou ácido gentísico (20-200 mg). Determinação da pureza química e radioquímica

[00249] Pureza química e radioquímica foi determinada por HPLC analítica, por exemplo: coluna: Atlantis T3, Waters, 100 × 4,6 mm, 3 µm, 100; fase móvel A: 40 mM de acetato de sódio, finalmente ajustado para pH 5,0 com ácido acético glacial; fase móvel B: 35% metanol em acetonitrila; taxa de fluxo: 1,8 mL/min; gradiente: 0-5 min 15-32% B, 5- 8 min 32-80% B, 8-12 min 80% B, 12-13 min 80-15% B, 13-16 min 15% B. Avaliação de Estabilidade Química de Composições de Diagnóstico

[00250] Misturas de acordo com a composição descrita na Tabela 1 foram preparadas. A pureza química do composto 1 (Ib) foi determinada por HPLC (detecção UV a 310 nm) após a preparação da composição, bem como após armazenamento à temperatura ambiente. Tabela 1: Estabilidade química do composto 1 (Ib) nas composições de diagnósticos

Pureza Tempo de Pureza química Armaze- química Composição da composição de # na linha namento após diagnóstico por 1 mL de base armazena- [%] [h] mento [%] 1 5 µg de composto 1, 50 µL de EtOH, 160 µL de concentrado de fosfato*, 586 µl de WFI, 204 µL de 100 mM de NaH2PO4 (acidificado para pH 2 100 25 100 com H3PO4) pH final: 6,9 2 5 µg de composto 1, 76 µL de EtOH, 160 µL de concentrado de fosfato*, 560 µl de WFI, 204 µL de 100 mM de NaH2PO4 (acidificado para pH 2 100 25 100 com H3PO4) pH final: 6,9 3 5 µg de composto 1, 100 µL de EtOH, 160 µL de concentrado de fosfato*, 536 µl de WFI, 204 µL de 100 mM de NaH2PO4 (acidificado 100 25 100 para pH 2 com H3PO4) pH final: 7,0 4 5 µg de composto 1, 88 µL de EtOH, 20 mg de di-hidrato de citrato de sódio, 602 µl de WFI, 272 µL de 100 mM de NaH2PO4 (acidificado para 100 93 100 pH 2 com H3PO4), 4 µL de HCl conc., 34 µL de 1 M HCl pH final: 4,5 5 5 µg de composto 1, 88 µL de EtOH, 20 mg de di-hidrato de citrato de sódio, 640 µl de WFI, 272 µL de 100 mM de NaH2PO4 (acidificado para 100 93 100 pH 2 com H3PO4) pH final: 6,1 6 5 µg de composto 1, 88 µL de EtOH, 20 mg de di-hidrato de citrato de sódio, 600 µl de WFI, 272 µL de 100 mM de NaH2PO4 (acidificado para 100 92 100 pH 2 com H3PO4), 40 µL de 1M NaOH pH final: 7,1 7 5 µg de composto 1, 88 µL de EtOH, 20 mg de di-hidrato de citrato de sódio, 638 µl de WFI, 272 µL de 100 mM de NaH2PO4 (acidificado para 100 43 100 pH 2 com H3PO4), 1,6 µL de NaOH conc., 0,4 µL 3M NaOH pH final: 8,5

8 5 µg de composto 1, 88 µL de EtOH, 2 mg de ácido gentísico, 476,4 µl de WFI, 272 µL de 100 mM de NaH2PO4 (acidificado para pH 2 com H3PO4), 160 µL de concentrado de 100 20 100 fosfato*, 2,8 µL de H3PO4 85%, 0,8 µL de 3 M H3PO4 pH final: 4,5 9 5 µg de composto 1, 88 µL de EtOH, 2 mg de ácido gentísico, 480 µl de WFI, 272 µL de 100 mM de NaH2PO4 (acidificado para pH 2 com 100 22 73,3 H3PO4), 160 µL de concentrado de fosfato* pH final: 6,6 10 5 µg de composto 1, 88 µL de EtOH, 2 mg de ácido gentísico, 450 µl de WFI, 272 µL de 100 mM de NaH2PO4 (acidificado para pH 2 com 40,9 19 18,6 H3PO4), 160 µL de concentrado de fosfato*, 30 µL de 3 M NaOH pH final: 8,5 11 5 µg de composto 1, 88 µL de EtOH, 30 mg de ascorbato de sódio, 640 µl de WFI, 272 µL de 100 mM de NaH2PO4 (acidificado para pH 2 com 100 19 91,8 H3PO4) pH final: 5,1 12 5 µg de composto 1, 88 µL de EtOH, 50 mg de ascorbato de sódio, 640 µl de WFI, 272 µL de 100 mM de NaH2PO4 (acidificado para pH 2 com 100 17 96,6 H3PO4) pH final: 5,5 *concentrado de tampão de fosfato: Braun, 3,05 g de dodeca-hidrato de mono- hidrogenofosfato dissódico, 0,462 g de di-hidrato de di-hidrogenofosfato de sódio em 20 mL de água para injeção

Tabela 2: Estabilidade radioquímica do composto 18F-1 (Ib) nas composições de diagnóstico

[00251] As composições foram preparadas de acordo com a descrição nos métodos de radiorrotulagem gerais. Concentração de Método de Pureza Pureza radioquímica Composição da composição de Precur- radioatividade em # radiorrotula- radioquímica após diagnóstico sor EOS gem geral em EOS [%] armazenamento [%] [GBq/mL] 1 36 GBq 18F-1, 1 mL de EtOH, 14 mL de asolução de scorbato de sódio em A 3-a 3,3 97,6 < 10 (EOS+ 4 h) água (10 mg/mL) 2 34 GBq 18F-1, 1,3 mL de EtOH, 7,7 mL de 70 mM NaOAc (acidificado para pH 2 com HCl), 1 mL de solução C 3-b 3,4 100 < 5 (EOS + 2h) 71/75 salina tamponada com fosfato (Gibco DPBS #: 14190), 100 µl de 5M NaOH 3 32 GBq 18F-1, 1,9 mL de EtOH, 5,1 mL de 100 mM de NaH2PO4 pH 2, 91,2 (EOS + 4 h) 540 mg de ascorbato de sódio, 3,5 C 3-b 1,78 100 mL de concentrado de fosfato, 7,5 88,3% (EOS + 21 h) mL de água 4 85 GBq 18F-1, 2,2 mL de EtOH, 6,8 mL de 100 mM de NaH2PO4 pH 2, C 3-b 3,2 99,3 81,8 (EOS + 4 h) 750 mg de ascorbato de sódio, 6 mg de ácido ascórbico, 18 mL de água 5 22 GBq 18F-1, 1,9 mL de EtOH, 5,1 mL de 100 mM de NaH2PO4 pH 2, 100 mg de ácido gentísico, 9,5 mL de C 3-b 1,1 97,7 97,0 (EOS + 4 h) água, 3,5 mL de concentrado de tampão de fosfato*

6 102 GBq 18F-1, 2,2 mL de EtOH, 6,8 mL de 100 mM de NaH2PO4 pH 2, 100 mg de ácido gentísico, 13,5 mL C 3-b 3,8 99,7 98,7 (EOS + 6 h) de água, 4,5 mL de concentrado de tampão de fosfato* 7 38 GBq 18F-1, 1,9 mL de EtOH, 5,1 mL de 100 mM de NaH2PO4 pH 2, 13 96,2 (EOS + 4 h) C 3-b 1,9 99,7 mL de água, 500 mg de citrato de 95,4 (EOS + 20 h) sódio 8 91 GBq 18F-1, 2,2 mL de EtOH, 6,8 mL de 100 mM de NaH2PO4 pH 2, C 3-b 3,5 99,9 > 97 (EOS + 10h) 500 mg de citrato de sódio, 16 mL de água 114 GBq 18F-1, 2,2 mL de EtOH, 6,8

72/75 9 mL de 100 mM de NaH2PO4 pH 2, 17 C 3-b 4,4 99,8 > 91 (EOS + 8h) mL de água, 50 mg/mL de ascorbato de sódio 9 107 GBq 18F-1, 2,2 mL de EtOH, 6,8 mL de 100 mM de NaH2PO4 pH 2, 17 C 3-b 4,1 99,5 > 92 (EOS + 8h) mL de água, 70 mg/mL de ascorbato de sódio 10 105 GBq 18F-1, 2,2 mL de EtOH, 6,8 mL de 100 mM de NaH2PO4 pH 2, 17 C 3-b 4,0 99,7 > 93 (EOS + 8h) mL de água, 100 mg/mL de ascorbato de sódio * concentrado de tampão de fosfato: Braun, 3,05 g de dodeca-hidrato de mono-hidrogenofosfato dissódico, 0,462 g de di-hidrato de di- hidrogenofosfato de sódio em 20 mL de água para injeção

AVALIAÇÃO DE RETENÇÃO DE FILTRO ESTÉRIL Tabela 3: Retenção de Filtro

[00252] Misturas de acordo com a composição descrita na Tabela 1 foram preparadas. A retenção de filtro do composto 1 (Ib) foi determinada comparando a área de pico correspondente na HPLC analítica (detecção UV a 310 nm) antes e após a filtração de 10 mL da composição de diagnóstico. % de retenção de composto 1 em filtro estéril What- Composição da composição de B.Braun, man Millex- Millex Millex- # diagnóstico por 1 mL Sterifix FP GV GP LG (PES) (Acetat (PVDF) (PES) (PTFE) oCel.) 1 5 µg de composto 1, 50 µL de EtOH, 160 µL de concentrado de fosfato*, 586 µl de WFI, 204 µL de 100 mM de NaH2PO4 24,9 89,8 25,5 25,1 25,4 (acidificado para pH 2 com H3PO4) pH final: 6,9 2 5 µg de composto 1, 76 µL de EtOH, 160 µL de concentrado de fosfato*, 560 µl de WFI, 204 µL de 100 mM de NaH2PO4 5,7 82,6 5,4 4,3 4,0 (acidificado para pH 2 com H3PO4) pH final: 6,9 3 5 µg de composto 1, 100 µL de EtOH, 160 µL de concentrado de fosfato*, 536 µl de WFI, 204 µL de 100 mM de NaH2PO4 5,4 74,2 3,5 1,2 4,1 (acidificado para pH 2 com H3PO4) pH final: 7,0 4 5 µg de composto 1, 88 µL de EtOH, 20 mg de di-hidrato de citrato de sódio, 602 µl de WFI, 272 µL de 100 mM de NaH2PO4 (acidificado para pH 2 com <1 3,4 2,7 <1 <1 H3PO4), 4 µL de HCl conc., 34 µL de 1 M HCl pH final: 4,5 5 5 µg de composto 1, 88 µL de EtOH, 20 mg de di-hidrato de citrato de sódio, 640 µl de WFI, 272 µL de 100 mM de NaH2PO4 <1 31,8 1,2 <1 <1 (acidificado para pH 2 com H3PO4) pH final: 6,1

6 5 µg de composto 1, 88 µL de EtOH, 20 mg de di-hidrato de citrato de sódio, 600 µl de WFI, 272 µL de 100 mM de NaH2PO4 5,3 82,2 4,0 3,2 3,3 (acidificado para pH 2 com H3PO4), 40 µL de 1M NaOH pH final: 7,1 7 5 µg de composto 1, 88 µL de EtOH, 20 mg de di-hidrato de citrato de sódio, 638 µl de WFI, 272 µL de 100 mM de NaH2PO4 (acidificado para pH 2 com 8,8 98,2 7,4 6,8 11,3 H3PO4), 1,6 µL de NaOH conc., 0,4 µL 3M NaOH pH final: 8,5 8 5 µg de composto 1, 88 µL de EtOH, 2 mg de ácido gentísico, 476,4 µl de WFI, 272 µL de 100 mM de NaH2PO4 (acidificado para pH 2 com H3PO4), 160 µL <1 6,2 11,9 - <1 de concentrado de fosfato*, 2,8 µL de H3PO4 85%, 0,8 µL de 3 M H3PO4 pH final: 4,5 9 5 µg de composto 1, 88 µL de EtOH, 2 mg de ácido gentísico, 480 µl de WFI, 272 µL de 100 mM de NaH2PO4 (acidificado 2,6 48,8 4,5 - 4,0 para pH 2 com H3PO4), 160 µL de concentrado de fosfato* pH final: 6,6 10 5 µg de composto 1, 88 µL de EtOH, 2 mg de ácido gentísico, 450 µl de WFI, 272 µL de 100 mM de NaH2PO4 (acidificado para pH 2 com H3PO4), 160 µL 9,3 100 12 - 13,8 de concentrado de fosfato*, 30 µL de 3 M NaOH pH final: 8,5 11 5 µg de composto 1, 88 µL de EtOH, 30 mg de ascorbato de sódio, 640 µl de WFI, 272 µL de 100 mM de NaH2PO4 1,5 8,1 1,9 -. 2,8 (acidificado para pH 2 com H3PO4) pH final: 5,1 12 5 µg de composto 1, 88 µL de EtOH, 50 mg de ascorbato de sódio, 640 µl de WFI, 272 µL de 100 mM de NaH2PO4 <1 8,7 <1 - <1 (acidificado para pH 2 com H3PO4) pH final: 5,5

* concentrado de tampão de fosfato: Braun, 3,05 g de dodeca-hidrato de mono- hidrogenofosfato dissódico, 0,462 g de di-hidrato de di-hidrogenofosfato de sódio in 20 mL de água para injeção

Claims (17)

REIVINDICAÇÕES

1. Composição de diagnóstico, caracterizada pelo fato de que compreende: a. um composto de Fórmula I, b. etanol, c. água, e d. um ácido hidroxicarboxílico, um sal de um ácido hidroxicarboxílico ou uma mistura dos mesmos.

2. Composição de diagnóstico, de acordo com a 18 reivindicação 1, caracterizada pelo fato de que F na Fórmula I é F ou 19 F, preferencialmente 18F ou uma mistura de 18F e 19F.

3. Composição de diagnóstico, de acordo com a reivindicação 1 ou 2, caracterizada pelo fato de que o composto de Fórmula I é um composto de Fórmula Ib .

4. Composição de diagnóstico, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 3, caracterizada pelo fato de que o ácido hidroxicarboxílico, o sal do ácido hidroxicarboxílico ou a mistura dos mesmos são selecionados do grupo que consiste em ácido ascórbico e sais de ácido ascórbico, ácidos hidroxibenzoicos e sais de ácidos hidroxibenzoicos, derivados de ácido hidroxibenzoico e sais de derivados de ácido hidroxibenzoico, ácido cítrico e sais de ácido cítrico e uma mistura dos mesmos, preferivelmente sendo que o derivado de ácido hidroxibenzoico é selecionado do grupo que consiste em ácido hidroxibenzoico, ácido di-hidroxibenzoico e ácido tri-hidroxibenzoico,

mais preferencialmente sendo que o ácido di-hidroxibenzoico é ácido gentísico.

5. Composição de diagnóstico, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 4, caracterizada pelo fato de que compreende 2,5 a 500 µmoles/mL do ácido hidroxicarboxílico, do sal do ácido hidroxicarboxílico ou da mistura dos mesmos, preferencialmente 10 a 300 µmoles/mL do ácido hidroxicarboxílico, do sal do ácido hidroxicarboxílico ou da mistura dos mesmos, mais preferencialmente 25 a 300 µmoles/mL do ácido hidroxicarboxílico, do sal do ácido hidroxicarboxílico ou da mistura dos mesmos.

6. Composição de diagnóstico, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 5, caracterizada pelo fato de que ainda compreende um ou mais de um ácido inorgânico, um ácido orgânico, uma base, ou um sal, em que o ácido orgânico, o sal ou a mistura dos mesmos é/são diferente(s) do ácido hidroxicarboxílico, do sal do ácido hidroxicarboxílico ou da mistura dos mesmos, preferencialmente sendo que o ácido inorgânico, o ácido orgânico, a base, o sal ou a mistura dos mesmos é/são selecionados do grupo que consiste em cloreto de sódio, cloreto de potássio, fosfato monossódico, fosfato dissódico, fosfato trissódico, fosfato monopotássico, fosfato dipotássico, fosfato tripotássico, ácido clorídrico, ácido fosfórico, hidróxido de sódio e hidróxido de potássio.

7. Método para fabricar uma composição de diagnóstico, como definida em qualquer uma das reivindicações 1 a 6, caracterizado pelo fato de que compreende as etapas de: a. reagir um composto de Fórmula II com um agente de fluoração com 18F,

, na qual X é H ou PG, LG é um grupo de partida, e PG é um grupo de proteção amina, b. opcionalmente, se X for PG, clivar o grupo de proteção PG, c. purificar o composto de Fórmula I, d. opcionalmente, misturar o composto de Fórmula I obtido na etapa c) com um ou mais selecionados do grupo que consiste em etanol, água, o ácido hidroxicarboxílico e o sal do ácido hidroxicarboxílico para prover a composição de diagnóstico, e e. opcionalmente, filtração estéril antes ou após a etapa d).

8. Método, de acordo com a reivindicação 7, caracterizado pelo fato de que LG na Fórmula II é um grupo de partida, que pode ser substituído por um íon de [18F]fluoreto nucleofílico ou um átomo de [18F]fluoreto eletrofílico, preferencialmente LG é selecionado do grupo que consiste em nitro, bromo, iodo, cloro, trialquil amônio, hidroxila, ácido borônico, iodônio, éster sulfônico, mais preferencialmente LG é nitro ou trimetil amônio, em que os compostos contendo trialquil amônio ou iodônio podem ainda compreender um ânion.

9. Método, de acordo com a reivindicação 7 ou 8, caracterizado pelo fato de que PG na Fórmula II é um grupo de proteção, preferencialmente PG é selecionado do grupo que consiste em carbobenzilóxi (Cbz), (p-metoxibenzil)oxicarbonila (Moz ou MeOZ), terc- butiloxicarbonila (BOC), 9-fluorenilmetiloxicarbonila (FMOC), benzila (Bn), p-metoxibenzila (PMB), 3,4-dimetoxibenzila (DMPM), p-

metoxifenila (PMP), trifenilmetila (Tritila), metoxifenil difenilmetila (MMT), ou dimetoxitritila (DMT), mais preferencialmente PG é selecionado de terc-butiloxicarbonila (BOC), dimetoxitritila (DMT) e trifenilmetila (Tritila), ainda mais preferencialmente PG é terc- butiloxicarbonila (BOC) ou trifenilmetila (Tritila).

10. Uso de uma composição, como definida em qualquer uma das reivindicações 1 a 6, caracterizado pelo fato de que é para fabricação de um agente para imagear agregados de Tau, particularmente para imagear agregados de Tau por tomografia por emissão de pósitrons.

11. Uso de uma composição, como definida em qualquer uma das reivindicações 1 a 6, caracterizado pelo fato de que é para fabricação de um agente para diagnosticar um distúrbio associado com agregados de Tau ou para diagnosticar uma tauopatia, particularmente em que o diagnóstico é conduzido por tomografia por emissão de pósitrons.

12. Uso, de acordo com a reivindicação 11, caracterizado pelo fato de que o distúrbio é selecionado de doença de Alzheimer (AD), AD familiar, doença de Creutzfeldt-Jacob, demência pugilística, síndrome de Down, doença de Gerstmann-Sträussler-Scheinker, miosite por corpos de inclusão, angiopatia amiloide cerebral de proteína de príon, lesão cerebral traumática, esclerose lateral amiotrófica, complexo parkinsonismo-demência de Guam, doença neuromotora não guamaniana com emaranhados neurofibrilares, doença de grãos argirofílicos, degeneração corticobasal, emaranhados neurofibrilares difusos com calcificação, demência frontotemporal com parkinsonismo ligado ao cromossomo 17, doença de Hallervorden-Spatz, atrofia de múltiplos sistemas, doença de Niemann-Pick tipo C, degeneração pálido-ponto-nigral, doença de Pick, gliose subcortical progressiva, paralisia supranuclear progressiva (PSP), panencefalite esclerosante subaguda, demência apenas com emaranhados, parkinsonismo pós- encefalítico, distrofia miotônica, panencefalopatia de Tau, tipo AD com astrócitos, certas doenças de príon (GSS com Tau), mutações em LRRK2, encefalopatia traumática crônica, demência britânica familiar, demência dinamarquesa familiar, degeneração lobar fronto-temporal, parkinsonismo de Guadalupe, neurodegeneração com acúmulo de ferro cerebral, retardo mental relacionado a SLC9A6, tauopatia de matéria branca com inclusões gliais globulares, síndrome do estresse traumático, epilepsia, demência de corpos de Lewy (LBD), hemorragia cerebral hereditária com amiloidose (tipo holandês), comprometimento cognitivo leve (MCI), esclerose múltipla, doença de Parkinson, parkinsonismo atípico, demência relacionada ao HIV, diabetes de início no adulto, amiloidose cardíaca senil, tumores endócrinos, glaucoma, amiloidose ocular, degeneração primária da retina, degeneração macular (tal como degeneração macular relacionada à idade (AMD)), drusen do nervo óptico, neuropatia óptica, neurite óptica, distrofia lattice, doença de Huntington, acidente vascular cerebral isquêmico e psicose em AD.

13. Uso, de acordo com a reivindicação 12, caracterizado pelo fato de que o distúrbio é doença de Alzheimer (AD), doença de Parkinson, parkinsonismo atípico, paralisia supranuclear progressiva (PSP) ou doença de Pick (PiD).

14. Uso da composição, como definida em qualquer uma das reivindicações 1 a 6, caracterizado pelo fato de que é como uma referência analítica ou como uma ferramenta de análise in vitro.

15. Método para coletar dados para diagnóstico de um distúrbio associado com agregados de Tau em uma amostra, caracterizado pelo fato de que compreende: (a) colocar uma amostra suspeita de conter um agregado de tau em contato com uma composição, como definida em qualquer uma das reivindicações 1 a 6, que contém o composto de Fórmula I; (b) permitir que o composto de Fórmula I se ligue ao agregado de tau; (c) detectar o composto de Fórmula I ligado ao agregado de tau; e (d) opcionalmente correlacionar a presença ou ausência de composto de Fórmula I ligando-se com o agregado de tau com a presença ou ausência de agregado de tau na amostra ou parte do corpo.

16. Método para determinar a quantidade de agregado de tau em um tecido e/ou um fluido corporal, caracterizado pelo fato de que compreende: (a) prover uma amostra representativa do tecido e/ou fluido corporal sob investigação; (b) testar a amostra para a presença de agregado de tau com uma composição, como definida em qualquer uma das reivindicações 1 a 6, que contém o composto de Fórmula I; (c) determinar a quantidade de composto de Fórmula I ligado ao agregado de tau; e (d) calcular a quantidade de agregado de tau no tecido e/ou fluido corporal.

17. Método, caracterizado pelo fato de que compreende as etapas de: (a) colocar a amostra suspeita para conter o agregado de tau em contato com a composição, como definida em qualquer uma das reivindicações 1 a 6, que contém composto de Fórmula I que especificamente se liga ao agregado de tau; (b) permitir que o composto de Fórmula I se ligue ao agregado de tau para formar um complexo de composto/agregado de tau; (c) detectar a formação do complexo de composto/agregado de tau; (d) opcionalmente correlacionar a presença ou ausência do complexo de composto/agregado de tau com a presença ou ausência de agregado de tau na amostra; e (e) opcionalmente, comparar a quantidade do composto/agregado de tau com um valor de controle normal, sendo que o dito método é: (i) um método para coletar dados para determinar uma predisposição para um distúrbio associado com agregados de Tau em um paciente compreendendo detectar a ligação específica de uma composição, conforme definida em qualquer uma das reivindicações 1 a 6, que contém o composto de Fórmula I, a um agregado de tau em uma amostra, (ii) um método para coletar dados para monitorar distúrbio residual em um paciente que sofre de um distúrbio associado com agregados de Tau que foi tratado com um medicamento, ou (iii) um método para coletar dados para prever a capacidade de resposta de um paciente que sofre de um distúrbio associado com agregados de Tau e sendo tratado com um medicamento.