BR112019010249A2 - método de tratamento de doença de armazenamento de glicogênio - Google Patents

Abstract

a presente divulgação fornece métodos e composições para o tratamento de sintomas hepáticos de doenças de armazenamento de glicogênio através da administração de agonistas do receptor do hormônio da tiroide. os métodos e composições aqui fornecidos são úteis no tratamento de hiperlipidemia, hipercolesterolemia, esteatose hepática, cardiomegalia, hepatomegalia, fibrose hepática e cirrose associada às doenças de armazenamento de glicogênio (gsd) e defeitos do metabolismo de glicogênio. os referidos compostos podem também ser úteis na prevenção de adenoma hepatocelular relacionado com gsd e carcinoma hepatocelular.

Description

DE TRATAMENTO DE DOENÇA DE ARMAZENAMENTO DE GLICOGÊNIO

CAMPO DA INVENÇÃO [001] A presente divulgação se refere ao campo de tratamentos para doenças de armazenamento de glicogênio e seus sintomas. Os tratamentos da presente divulgação podem incluir agonistas do receptor do hormônio da tireoide e/ou moduladores da sinalização do hormônio tireoide.

Descrição da técnica relacionada [002] As doenças de armazenamento de glicogênio (GSD) compreendem um grupo de distúrbios marcados por disfunção no metabolismo do glicogênio, geralmente devido à perda de uma atividade enzimática necessária. Causas da doença de armazenamento de glicogênio incluem defeitos na glicose-6-fosfatase, enzima de desramificação, glicogênio sintase, glicose-6-fosfatase translocase, fosfatase translocase, alfa-l-4-glicosidase, amilo-l-6-glicosidase, amilo-1,4-a-l,6-transglicosidase, glicogênio-fosforilase, fosfofrucocinase, quinase-3',5' dependente de AMP quinase, transportador de glicose 2 e aldolase A, entre outros. Em geral, esses defeitos ocorrem na sintese, transporte ou utilização de glicogênio. Vários desses defeitos levam a um acúmulo de glicogênio no figado, coração e/ou músculo esquelético, bem como um defeito concomitante no armazenamento de energia e no metabolismo energético em

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2/112 todo o corpo. Os sintomas de doenças de armazenamento de glicogênio incluem açúcar no sangue elevado ou reduzido, insensibilidade à insulina, miopatias, bem como sintomas hepáticos, tais como esteatose, hiperlipidemia, hipercolesterolemia, cardiomegalia, hepatomegalia, fibrose, cirrose, adenoma hepatocelular e carcinoma hepatocelular. Os sintomas e sequelas das doenças de armazenamento de glicogênio variam em gravidade, desde disfunção metabólica controlável ou intolerância ao exercido até a morte prematura, e os tratamentos atualmente disponíveis cobrem um intervalo similar, de intervenções dietéticas a tratamento sintomático, como administração de estatinas e/ou fibratos para controlar acúmulo de colesterol e lipidios e, em alguns casos, transplante de figado, rim e/ou de medula óssea. Há necessidade de melhores terapias para o tratamento desses distúrbios.

[003] Em particular, a GSD Ia é caracterizada pela incapacidade de metabolizar precursores de glicose, resultando em hipoglicemia e aumento da lipogênese. A doença é causada por mutações no gene da glicose-6fosfatase (G6PC), uma enzima critica envolvida na produção de glicose a partir do glicogênio ou da gliconeogênese. A função deficiente do G6PC leva a niveis de triglicerideos hepáticos dramaticamente elevados em pacientes humanos e em modelos animais da doença. Em pacientes, isso pode

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3/112 contribuir para complicações sérias a longo prazo, como hepatomegalia grave, adenomas hepáticos e carcinoma hepatocelular. As manifestações da doença começam a aparecer logo após o nascimento e continuam até a idade adulta. Atualmente não existe terapia aprovada para GSD Ia e, consequentemente, há necessidade de novos tratamentos para esta condição em particular.

SUMÁRIO DA DIVULGAÇÃO [004] A presente divulgação se refere a um método de tratamento de uma doença de armazenamento de glicogênio ou sintoma da mesma, compreendendo administrar a um indivíduo em necessidade do mesmo pelo menos um composto de Fórmula I:

ou um seu sal farmaceuticamente aceitável, em que:

G é selecionado do grupo que consiste em —O—, — S—, —S(=O)-, —S (=0) ₂—, -Se-, —CH₂—, —CF₂—, -CHF-, -C(O)-, -CH(OH)-, -CH (alquila C1-C4)-, -CH (alcoxi C1-C4)-, -C(=CH₂), -NH— e -N (alquila C1-C4)-;

T é selecionado a partir do grupo que consiste em

- (CR^a2) k-, -CR^b=CR^b- (CR^a2) _n-, - (CR^a ₂) _n-CR^b=CR^b-,

- (CR^a2) —CR^b=CR^b—(CR^a2)-, -O(CR^b2) (CR^a2)_n-, -S (CR^b2) (CR^a2) _n-,

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N (R^c) (CR^b2) (CR^a2)n-, N (R^b) C (0) (CR^a2)n, -C (0) (CR^a2)_m-,

- (CR^a2)mC (0)-, - (CR^a2)C(0) (CR^a2)n, - (CR^a2)nC (0) (CR^a ₂) - e

-C (0)NH (CRb2	) (CRa 2)p-	r
k	é	um	número	inteiro	de	1	a	4;
m	é	um	número	inteiro	de	0	a	3;
n	é	um	número	inteiro	de	0	a	2;
P	é	um	número	inteiro	de	0	a	1;

cada R^a é independentemente selecionado do grupo que consiste em hidrogênio, alquila C1-C4, halogênio, -OH, -0alquila C1-C4 opcionalmente substituído, -OCF3, -S-alquila C1-C4 opcionalmente substituído, -NR^bR^c, alquenila C₂-C4 opcionalmente substituído e alquinila C₂-C4 opcionalmente substituído; com a condição de que quando um R^a está ligado a C através de um átomo 0, S ou N, então o outro R^a ligado ao mesmo C é um hidrogênio, ou ligado através de um átomo de carbono;

cada R^b é independentemente selecionado do grupo que consiste em hidrogênio e alquila C1-C4 opcionalmente substituído;

cada R^c é independentemente selecionado do grupo que consiste em hidrogênio e -alquila C1-C4 opcionalmente substituído, -C (0)-alquila C1-C4 opcionalmente substituído e -C(O)H;

R¹ e R² são, cada um, independentemente selecionados do grupo que consiste em halogênio, alquila C1-C4

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5/112 opcionalmente substituído, -S-alquila C1-C3 opcionalmente substituído, alquenila C2-C4 opcionalmente substituído, alquinila C2-C4 opcionalmente substituído, -CF3, -OCF3, -0alquila C1-C3 opcionalmente substituído e ciano;

R⁶, R⁷, R⁸ e R⁹ são, cada um, independentemente selecionados do grupo que consiste em hidrogênio, halogênio, alquila C1-C4 opcionalmente substituído, -Salquila C1-C3 opcionalmente substituído, alquenila C2-C4

opcionalmente	substituído,	alquinila	C2-C4	opcionalmente
substituído,	-cf3,	-OCF3,	alquila	C1-C3	opcionalmente
substituído e	ciano;	ou R6	e T são	tomados	em conjunto,
juntamente com os	átomos	de carbono aos	quais estão
ligados, para	formar	um anel	de 5 a 6	átomos,	incluindo 0 a

heteroátomos, selecionados independentemente de —NR¹—, —0— e —S—, com a condição de que são 2 heteroátomos no anel e ambos os heteroátomos são diferentes de nitrogênio, então ambos os heteroátomos têm que ser separados por pelo menos um átomo de carbono; e X está ligado a este anel por uma ligação direta a um carbono do anel, ou por - (CR^a2) - ou -C (0) - ligado a um anel de carbono ou a um nitrogênio do anel;

R¹ é selecionado do grupo que consiste em hidrogênio, -C (0)-alquila C1-C4, -alquila C1-C4 e -arilo C1-C4;

R^{2 3} e R⁴ são independentemente selecionados do grupo que consiste em hidrogênio, halogênio, -CF3, -OCF3, ciano,

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6/112 alquila C1-C12 opcionalmente substituído, alquenila C2-C12 opcionalmente substituído, alquinila C2-C12 opcionalmente substituído, -SR^d, -S(=O)R^e, -S(=O)2R^e, -S (=0) 2NR^fR^g,

-C(O)OR^h, -C(O)R^e, -N (R^b) C (0) NR^fR^g, -N (R^b) S (=0) 2R^e, -N (R^b) S (=0) 2NR^fR^g e -NR^fR^g;

cada R^d é selecionado do grupo que consiste em alquila C1-C12 opcionalmente substituído, alquenila C2-C12 opcionalmente substituído, alquinila C2-C12 opcionalmente substituído, -(CR^b2)n arila opcionalmente substituído, -(CR^b2)n cicloalquila opcionalmente substituído, -(CR^b2)n heterocicloalquila opcionalmente substituído e -C(O)NR^fR^g;

cada R^e é selecionado do grupo que consiste em alquila C1-C12 opcionalmente substituído, alquenila C2-C12 opcionalmente substituído, alquinila C2-C12 opcionalmente substituído, -(CR^a2)n arila opcionalmente substituído, -(CR^a2)n cicloalquila opcionalmente substituído e, -(CRtín heterocicloalquila opcionalmente substituído;

R^f e R^g são cada um independentemente selecionados do grupo que consiste em hidrogênio, alquila C1-C12 opcionalmente substituído, alquenila C2-C12 opcionalmente substituído, alquinila C2-C12 opcionalmente substituído, -(CR^b2)n arila opcionalmente substituído, -(CR^b2)n cicloalquila opcionalmente substituído, e -(CR^b2)n heterocicloalquila opcionalmente substituído, ou R^f e R^g podem em conjunto formar um anel heterociclico

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7/112 opcionalmente substituído, o qual pode conter um segundo heterogrupo selecionado do grupo que consiste em 0, NR^C e S, em que o anel heterocíclico opcionalmente substituído pode ser substituído com 0 a 4 substituintes selecionados do grupo que consiste em alquila C1-C4 opcionalmente substituído, -0R^b, oxo, ciano, -CF3, fenila opcionalmente substituído, e -C(O)OR^h;

cada R^h é selecionado do grupo que consiste em alquila C1-C12 opcionalmente substituído, alquenila C2-C12 opcionalmente substituído, alquinila C2-C12 opcionalmente substituído, -(CR^b2)n arila opcionalmente substituído, -(CR^b2)n cicloalquila opcionalmente substituído e, -(CR^b2)n heterocicloalquila opcionalmente substituído;

R⁵ é selecionado do grupo que consiste em -OH, alquila -OCi-Cs opcionalmente substituído, 00(0) R^e, -OC(O)OR^h, -F, NHC(O)R^e, -NHS(=O)R^e, -NHS(=O)₂R^e, —NHC (=S) NH (R^h) e NHC (0) NH (R^h) ;

X é P (0) YRⁿY'Rⁿ;

Y e Y' são, cada um, independentemente selecionados do grupo que consiste em -0— e —NR^V—; quando Y e Y' são -0-, R¹¹ ligado a -0- é independentemente selecionado do grupo que consiste em -H, alquila, arila opcionalmente substituído, heterocicloalquila opcionalmente substituído, heterocicloalquila-CH2 opcionalmente substituído, em que a fração cíclica contém um carbonato ou tiocarbonato,

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8/112 alquilarila opcionalmente substituído, -C (R^z) 2OC (0) NR^Z2, -NR^Z-C (0)-R^y, -C (R^z) 2-OC (0) R^y, -C (R^z) ₂-0-C (0) 0R^y,

-C (R^z) 2OC (0) SR^y, -alquil-S-C (0) R^y, -alquil-S-alquil-hidroxi e -alquil-S-S-S-alquil-hidroxi;

quando Y e Y' — são —NR^V—, então R¹¹ ligado a —NR^V— é selecionado independentemente do grupo que consiste em —H, - [C (R^z) 2] q-COOR^Y, -C (R^x) 2COOR^Y, - [C (R^z) 2] _q-C (0) SR^y e

-cicloalquileno-COORy;

quando Y é -0- e Y' é NR^V, então R¹¹ ligado a -0- é independentemente selecionado do grupo consistindo em -H, alquila, arila opcionalmente substituído, heterocicloalquila opcionalmente substituído, heterocicloalquila-CH2 opcionalmente substituído em que a fração cíclica contém um carbonato ou tiocarbonato, alquilarila opcionalmente substituído, -C (R^z) 2OC (0) NR^Z2, -NR^Z-C (0)-R^y, -C (R^z) 2-OC (0) Ry, -C (R^z) 2-0-c (0) ORy,

-C (R^z) 20C (0) SRy, -alquil-S-C (0) Ry, -alquil-S-S-alquilhidroxi e -alquil-S-S-S-alquil-hidroxi; e R¹¹ ligado a —NR^V— é selecionado independentemente do grupo que consiste em H, - [C (R^z) 2] q-COORy, -C (R^x) 2COORy, - [C (R^z) 2] _q-C (0) SR^y e -cicloalquileno-COORy;

ou quando Y e Y' são independentemente selecionados de -0- e NR^V, então juntos R¹¹ e R¹¹ são -alquil-S-S-alquilpara formar um grupo cíclico, ou juntos R¹¹ e R¹¹ são o grupo:

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em que :

V, W e W' são independentemente selecionados do grupo que consiste em hidrogênio, alquila opcionalmente substituído, aralquila opcionalmente substituído, heterocicloalquila, arila, arila substituído, heteroarila, heteroarila substituído, 1-alquenila opcionalmente substituído e 1-alquinila opcionalmente substituído;

ou juntos V e Z estão ligados através de 3 a 5 átomos adicionais para formar um grupo ciclico contendo 5 a 7 átomos, em que 0 a 1 átomos são heteroátomos e os átomos restantes são carbono, substituídos com hidroxi, aciloxi, alquiltiocarboniloxi, alcoxicarboniloxi, ou arilaxicarboniloxi ligado a um átomo de carbono que possui três átomos de ambos os grupos Y ligados ao fósforo;

ou juntos V e Z estão ligados através de 3 a 5 átomos adicionais para formar um grupo ciclico, em que 0 a 1 átomos são heteroátomos e os átomos restantes são carbono, que é fundido a um grupo arila na posição beta e gama ao Y ligado ao fósforo;

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10/112 ou juntos V e W estão ligados através de 3 átomos de carbono adicionais para formar um grupo ciclico opcionalmente substituído contendo 6 átomos de carbono e substituído com um substituinte selecionado do grupo que consiste em hidróxi, aciloxi, alcoxicarboniloxi, alquiltiocarboniloxi e arilaxicarboniloxi, ligado a um dos os referidos átomos de carbono estão três átomos de Y ligado ao fósforo;

ou juntos Z e W estão ligados através de 3 a 5 átomos adicionais para formar um grupo ciclico, em que 0 a 1 átomos são heteroátomos e os átomos restantes são carbono e

V deve ser arila, arila substituído, heteroarila ou heteroarila substituído;

ou juntos W e W' estão ligados através de 2 a 5 átomos adicionais para formar um grupo ciclico, em que 0 a 2 átomos são heteroátomos e os átomos restantes são carbono e

V deve ser arila, arila substituído, heteroarila ou heteroarila substituído;

Z é selecionado a partir do grupo que consiste em -CHR^ZOH, -CHR^ZOC (O) R^y, -CHR^ZOC (S) R^y, -CHR^ZOC (S) OR^y, -CHR^ZOC (O) SR^y, -CHR^zOCO2R^y, -OR^Z, -SR^Z, -CHR^ZN3, -CH₂-arila, -CH (aril) OH, -CH (CH₂CR^Z2) OH, -OH (C=CR^Z) OH, -R^z, -NR^Z2, -OCOR^y, -OCO2R^y, -SCOR^Y, -SCO2R^y, -NHCOR^Z, -NHCO2R^y, CH2NHarila, -(CH₂)_q-OR^z e -(CH₂)_q-SR^z;

q é um número inteiro 2 ou 3;

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11/112 cada R^z é selecionado do grupo que consiste em R^y e

-H;

cada R^y é selecionado do grupo que consiste em alquila, arila, heterocicloalquila e aralquila;

cada R^x é selecionado independentemente do grupo que consiste em H e alquila, ou juntos R^x e R^x formam um grupo alquila ciclico; e cada R^v é selecionado do grupo que consiste em -H, alquila inferior, aciloxialquila, alcoxicarboniloxialquila e acila inferior.

[005] Em algumas modalidades, o composto a ser administrado compreende um ou mais dos compostos que possuem estruturas selecionadas do grupo que consiste em:

CH_;

CH:

(Composto 1), (Composto 2)

HO'

H₃C

O

I p—O“

II

O (Composto 3) e

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(Composto 4);

ou sais	farmaceuticamente aceitáveis	dos	mesmos.
[006]	Em	algumas	modalidades,	a	doença	de
armazenamento	de	glicogênio	compreende	uma	ou mais	das

doenças de armazenamento de glicogênio tipos 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11 ou 12, incluindo aquelas doenças conhecidas como aglicogenose, doença de von Gierke, doença de Pompe, doença de Cori, doença de Forbes, dextrinose limite, da doença de desramificação enzimática, doença de Andersen, deficiência de glicogênio fosforilase, deficiência de brancura, amilopectinose, deficiência da enzima de ramificação de glicogênio, doença de McArdle, doença de Tarui, figado autossômico e deficiência de fosforilase quinase muscular, deficiência de fosforilase quinase hepática autossômica, deficiência de fosforilase quinase hepática ligada ao X, GSD X, sindrome de FanconiBickel ou deficiência de aldolase A. Em algumas modalidades, a doença de armazenamento de glicogênio pode compreender qualquer distúrbio marcado pela incapacidade de armazenar ou metabolizar o glicogênio nos tecidos do corpo, ou pela acumulação anormal de glicogênio, lipidios, ácidos graxos ou triglicerideos dentro dos tecidos do corpo. Em

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13/112 algumas modalidades, a administração dos compostos de acordo com a presente divulgação proporciona uma melhoria de um defeito de armazenamento de glicogênio. Em algumas modalidades, a administração dos compostos de acordo com a presente divulgação proporciona uma melhoria de um sintoma de uma doença de armazenamento de glicogênio, tal como lipidios séricos ou teciduais elevados.

[007] Em algumas modalidades, a administração dos compostos da presente divulgação leva a uma redução nos niveis de lipidios séricos, triglicerideos séricos, ácidos graxos séricos ou colesterol sérico em um paciente com um defeito de armazenamento de glicogênio ou que sofre de uma doença de armazenamento de glicogênio. Em algumas modalidades adicionais, a administração dos compostos como aqui descritos conduz à melhoria da esteatose hepática, hipercolesterolemia ou inflamação hepática associada a uma doença de armazenamento de glicogênio. Em algumas modalidades, a administração dos compostos como aqui descrito conduz à melhoria da cardiomegalia, hepatomegalia, esteatose hepática, hiperlipidemia, hipercolesterolemia, ALT aumentada, AST aumentada, triglicerideos séricos aumentados, fibrose hepática, cirrose, adenoma hepatocelular ou carcinoma hepatocelular associado a uma doença de armazenamento de glicogênio.

[008] Em algumas modalidades, os métodos de acordo

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14/112 com a presente divulgação compreendem a administração de um segundo agente terapêutico. Em algumas outras modalidades, o referido segundo agente terapêutico pode compreender um ou mais de um amido, um açúcar, um aminoácido, um peptideo, uma enzima, uma terapia genética ou qualquer combinação dos mesmos. Em algumas outras modalidades, o referido segundo agente terapêutico pode compreender um ou mais de amido de milho, amido de batata, amido de trigo, amido vegetal ou mandioca, ou qualquer combinação dos mesmos. Em algumas outras modalidades, o referido segundo agente terapêutico pode compreender um ou mais de glicose, galactose, frutose, sacarose, maltose, lactose, arabinose ou outros açúcares, ou qualquer combinação dos mesmos. Em algumas outras modalidades, o referido segundo agente terapêutico pode também compreender uma ou mais alglicosidase alfa, uma glicose-6-fosfatase, uma enzima de desramificação, uma glicogênio sintase, uma glicose-6-fosfatase translocase, uma fosfatase translocase, uma alfa-l-4-glicosidase, uma amilo-l-6-glicosidase, uma amilogeno-1,4-a-l,6transglicosidase, uma glicogênio fosforilase, uma fosfofrutoquinase, uma quinase ciclica-3',5' dependente de AMP, um transportador de glicose do tipo 2, uma aldolase A, ou qualquer combinação dos mesmos. Em algumas modalidades adicionais, o referido segundo agente terapêutico pode compreender uma ou mais de uma insulina, um peptideo do

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15/112 tipo insulina, um glucagon, um peptideo do tipo glucagon ou gualguer combinação dos mesmos. Em algumas modalidades adicionais, o referido composto pode ser administrado em associação com um figado, rim ou transplante de medula óssea. Em algumas modalidades, os compostos da presente divulgação podem ser co-administrados ou administrados em associação com gualguer um dos tratamentos supramencionados ou com agentes terapêuticos secundários, ou gualguer combinação dos mesmos.

BREVE DESCRIÇÃO DOS DESENHOS [009] A Figura 1 mostra o efeito da administração oral de Composto 2 uma vez ao dia sobre os niveis de colesterol total no plasma (TPC) em cães beagle (n = 4 por grupo) durante 14 dias.

[0010] A Figura 2 mostra o efeito da administração oral uma vez ao dia do Composto 2 durante 14 dias seguido por administração em dias alternados do Composto 2 durante 14 dias nos niveis de colesterol total no plasma (TPC) em cães beagle (n = 4 por grupo).

[0011] A Figura 3 mostra os efeitos do Composto 2 e T3 no conteúdo de triglicerideos do figado após 9 semanas de tratamento. No final de 9 semanas de tratamento, os animais foram sacrificados e o teor de triglicerideos no figado foi analisado. O teor de triglicerideos no figado dos animais do grupo tratado com o Composto 2 de 10 e

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16/112 mg/kg/dia foi significativamente (p < 0,05) inferior ao do grupo tratado com veiculo (*).

[0012] A Figura 4 mostra os efeitos do Composto 2 e T3 na glicose no sangue em camundongos ob/ob masculinos. A glicose no sangue foi medida semanalmente a partir de um rabo usando um medidor de glicose OneTouch.

[0013] A Figura 5 mostra os efeitos do Composto 2 e T3 no conteúdo de glicogênio no figado após 9 semanas de tratamento. No final de 9 semanas de tratamento, os animais foram sacrificados e o teor de glicogênio no figado foi medido. O teor de glicogênio no figado dos animais do grupo tratado com Composto 2 de 10 mg/kg/dia foi significativamente (p < 0,05) mais elevado do que o grupo tratado com veiculo (*).

[0014] A Figura 6 mostra os efeitos do Composto 2 e T3 no peso do figado após 9 semanas de tratamento. No final de 9 semanas de tratamento, os animais foram sacrificados e o peso do figado foi medido. O peso do figado dos animais de todos os grupos de tratamento foi significativamente (p < 0,05) inferior ao do grupo tratado com veiculo (*).

[0015] A Figura 7 mostra o perfil temporal dos efeitos do veiculo, Composto 2 (2,5 mg/kg/dia) e MB07875 (0,2 mg/kg/dia) nos niveis de colesterol total no plasma ao longo do periodo de tratamento de 28 dias. As linhas horizontais representam o grupo tratado com veiculo com a

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17/112 linha sólida representando a média e as linhas pontilhadas superior e inferior representando os limites superior e inferior do SEM (erro padrão da média). Diferenças significativas em relação ao grupo tratado com veiculo são mostradas (*) .

[0016] A Figura 8 mostra o teor de glicogênio no Figado (A) e Músculo (B) em ratos diabéticos Zucker (ZDF) machos após 28 dias de tratamento com o Composto 2 (·) ou com MB07875 (o) na dose indicada. As linhas horizontais representam o grupo tratado com veiculo com a linha sólida representando a média e as linhas pontilhadas superior e inferior representando os limites superior e inferior do SEM. Diferenças significativas em relação ao grupo tratado com veiculo são mostradas (*).

[0017] A Figura 9 mostra cortes hepáticos representativos de hematoxilina e eosina de ratos ZDF machos após 28 dias de tratamento com o Composto 2 (na dose indicada em mg/kg/dia) ou com 0,2 mg/kg/dia de MB07875.

[0018] A Figura 10 mostra os efeitos do Composto 2 no nivel de colesterol total no plasma em ratos masculinos com obesidade induzida por dieta (DIO) . Uma ANOVA de dois fatores com medidas repetidas no fator tempo demonstrou que o efeito do tratamento (p < 0,0001) e a interação entre tratamento e tempo (p = 0,0004) foram significativos. Análises post-hoc do colesterol total no plasma revelaram

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18/112 diferenças significativas no colesterol entre cada um dos grupos tratados com o Composto 2 em comparação com o grupo tratado com veículo em todos os pontos de tempo medidos (*) .

[0019] A Figura 11 mostra os efeitos do Composto 2 nos niveis de glicose no sangue em ratos machos DIO. Uma ANOVA de dois fatores com medidas repetidas no fator tempo demonstrou que o efeito do tratamento foi significativo (p < 0,0001), mas a interação entre o tratamento e o tempo não foi significativa (p = 0,0735) . Análises post-hoc dos niveis de glicose no sangue revelaram diferenças significativas entre os grupos tratados com o Composto 2 e os grupos tratados com veiculo nos pontos de tempo indicados (*).

[0020] A Figura 12 mostra os efeitos do Composto 2 no peso do figado (A) e na razão do peso do figado para o corpo (B) em ratos machos DIO. Uma ANOVA de dois fatores demonstrou que o efeito do tratamento para cada parâmetro foi significativo (p < 0,0001 e p < 0,0001, respectivamente). Análises post-hoc dos dois parâmetros revelaram diferenças significativas entre cada um dos grupos tratados com Composto 2 em comparação com o grupo tratado com veiculo nos pontos de tempo indicados (*) .

[0021] A Figura 13 mostra os efeitos do Composto 2 na massa de triglicerideos totais do figado em camundongos

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DIO machos. Análises usando ANOVA de dois fatores demonstraram que o efeito do tratamento para triglicerideos totais no figado foi significativo (p < 0,001) . Análises post-hoc dos triglicerideos totais no figado revelaram diferenças significativas entre cada um dos grupos tratados com o Composto 2 em comparação com o grupo tratado com veiculo nos pontos de tempo indicados para o teor de triglicerideos totais (*).

[0022] A Figura 14 mostra fotomicrografias de seções de figado coradas com hematoxilina e eosina de camundongos DIO tratados com veiculo e 30 mg/kg/dia com Composto 2. Microfotografias representativas de 4 animais em cada um destes dois grupos são mostradas abaixo.

[0023] A Figura 15 mostra a diferença na massa corporal entre os camundongos tratados com Composto 2 e tratados com veiculo em um modelo de rato knockout G6PC -/(afetado) versus camundongos de tipo selvagem (wt).

[0024] A Figura 16 mostra a diferença na massa do figado entre camundongos tratados com o composto 2 e tratados com veiculo em um camundongo knockout G6PC -/(afetado) versus camundongos do tipo selvagem (wt).

[0025] A Figura 17 mostra a diferença na massa do figado como uma porcentagem da massa corporal entre camundongos tratados com o composto 2 e tratados com veiculo em um modelo de camundongos knockout G6PC -/

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20/112 (afetado) versus camundongos selvagens (wt) .

[0026] A Figura 18 mostra a diferença na concentração de glicogênio no figado entre camundongos tratados com o composto 2 e tratados com veiculo em um camundongo knockout G6PC -/- (afetado) versus camundongos do tipo selvagem (wt).

[0027] A Figura 19 mostra a diferença na concentração de triglicerideos no soro entre camundongos tratados com o Composto 2 e camundongos tratados com veiculo em um camundongo knockout G6PC -/- (afetado) versus camundongos do tipo selvagem (wt).

[0028] A Figura 20 mostra a diferença na concentração de triglicerideos no figado entre camundongos tratados com o Composto 2 e camundongos tratados com veiculo em um modelo de camundongos knockout G6PC -/(afetados) versus camundongos do tipo selvagem (wt).

[0029] A Figura 21 mostra a diferença em triglicerideos totais no figado entre camundongos tratados com o Composto 2 e camundongos tratados com veiculo em um camundongo knockout G6PC -/- (afetado) versus camundongos do tipo selvagem (wt).

[0030] A Figura 22 mostra que não houve diferença significativa entre as massas do corpo de camundongos tratados com o Composto 2 e tratados com veiculo em um modelo de camundongo knockout G6PC -/- (G6PC -/-) contra

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21/112 camundongos do tipo selvagem (wt) . No entanto, todos os camundongos G6pc -/- apresentaram um crescimento estatisticamente significativo em comparação com os camundongos WT.

[0031] A Figura 23 mostra que a massa do rim não é afetada pelo tratamento com Composto 2. (A) Não há mudança significativa na massa absoluta do rim em todos os quatro grupos de tratamento mostrados. (B) O tratamento com composto 2 de camundongos G6pc -/- aumenta a massa do rim como porcentagem da massa total do corpo em comparação com os rins WT, no entanto, a diferença entre as massas do rim em camundongos G6pc -/- tratados com Composto 2 versus veiculo não é significativa. Média +/- desvio padrão mostrado. * = p < 0,05, ** = p < 0,01, *** = p < 0,001, **** = p < 0,0001 da ANOVA.

[0032] A Figura 24 mostra que o tratamento com Composto 2 diminui significativamente os triglicerideos totais do figado. Os triglicerideos totais do figado estavam elevados em camundongos G6pc -/- tratados com veiculo em comparação com os controles WT. Este aumento foi atenuado em camundongos G6pc -/- após tratamento com o Composto 2, o que reduziu significativamente os triglicerideos totais do figado para dentro dos niveis em niveis de controle WT tratados com veículos. Média + /desvio padrão mostrado. * = p < 0,05, ** = p < 0,01,

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22/112 *** = p < 0,001, **** = p < 0,0001 da ANOVA.

[0033] A Figura 25 mostra que o Composto 2 diminui a massa do figado em camundongos G6pc -/-. (A) camundongos G6pc -/- tratados com o Composto 2 tinham figados significativamente menores do que os controles do veiculo. (B) camundongos G6pc -/- tratados com o Composto 2 tinham figados significativamente menores como proporção da massa corporal do que os controles do veiculo. Média + /- desvio padrão mostrado. * = p < 0,05, ** = p < 0,01, *** = p < 0,001, **** = p < 0,0001 da ANOVA.

[0034] A Figura 26 mostra que a concentração de glicogênio nos figados de camundongos G6pc -/- não mudou com o tratamento com o Composto 2. Ambos os grupos G6pc -/apresentaram concentração de glicogênio no figado significativamente maior que os controles WT. Média + /desvio padrão mostrado. * = p < 0,05, ** = p < 0,01, *** = p < 0,001, **** = p < 0,0001 da ANOVA.

[0035] A Figura 27 mostra o efeito do Composto 2 na concentração de glicose no sangue. Todas as medições de glicose no sangue para camundongos G6pc -/-, além de um camundongo tratado com veiculo, estavam abaixo do limite

inferior de		detecção		20 mg/dL)	do	instrumento
glicosimetro,	portanto,	as	estatísticas	não	puderam ser
realizadas neste	conjunto	de	dados. Média	+ /-	desvio padrão
mostrado. * =	P	< 0,05,	* *	= p < 0,01,	% % %	= p < 0,001,

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23/112 **** = p < 0,0001 da ANOVA.

[0036] A Figura 28 mostra o efeito do Composto 2 na concentração de triglicerideos no soro. A concentração de triglicerideos no soro não foi significativamente diferente entre o Composto 2 e os grupos G6pc -/- tratados com veiculo; no entanto, houve uma diferença significativa entre os grupos G6pc -/- e WT tratados com o Composto 2. Média +/- desvio padrão mostrado. * = p < 0,05, ** = p < 0,01, *** = p < 0,001, **** = p < 0,0001 da ANOVA.

DESCRIÇÃO DETALHADA [0037] A presente divulgação fornece compostos e métodos para o tratamento de doenças de armazenamento de glicogênio através da administração de agonistas do receptor de hormônio da tireoide-β (ΤΕβ). Em algumas modalidades, tais doenças compreendem ainda os sintomas de esteatose hepática, hiperlipidemia, dislipidemia, hipertrigliceridemia, fibrose, cirrose, adenoma hepatocelular, carcinoma hepatocelular e outros sintomas hepáticos e não hepáticos que podem ser afetados por intervenções dentro da via ΤΈβ.

Definições [0038] O termo mamifero é usado em seu sentido biológico usual. Assim, inclui especificamente humanos e mamíferos não humanos, como cães, gatos, cavalos, burros,

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24/112 mulas, vacas, búfalos domésticos, camelos, lhamas, alpacas, bisontes, iaques, cabras, ovelhas, porcos, alces, veados, antílopes domésticos e primatas não humanos, assim como muitas outras espécies.

[0039] Indivíduo tal como aqui utilizado, significa um mamífero humano ou não humano incluindo, mas não limitado a um cão, gato, cavalo, burro, mula, vaca, búfalo doméstico, camelo, lhama, alpaca, bisonte, iaque, cabra, ovelha, porco, alce, veado, antílope doméstico ou um primata não humano selecionado para tratamento ou terapia.

[0040] Indivíduo suspeito de ter significa um indivíduo que exibe um ou mais indicadores clínicos de uma doença ou condição. Em certas modalidades, a doença ou condição é uma doença de armazenamento de glicogênio. Em certas modalidades, a doença ou condição é hiperlipidemia. Em certas modalidades, a doença ou condição é hipercolesterolemia. Em certas modalidades, a doença ou condição é diabetes. Em certas modalidades, a doença ou condição é doença hepática gordurosa não alcoólica. Em certas modalidades, a doença ou condição é esteato-hepatite não alcoólica. Em certas modalidades, a doença ou condição é aterosclerose. Em certas modalidades, a doença ou condição é doença cardiovascular.

[0041] Doença de armazenamento de glicogênio significa qualquer um ou mais de um grupo de distúrbios

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25/112 marcados por disfunção na síntese, transporte ou utilização de glicogênio, geralmente devido à perda de uma atividade enzimática necessária. As doenças de armazenamento de glicogênio são geralmente classificadas por tipo de acordo com seus sintomas e etiologias. Os tipos conhecidos incluem GSD tipo 0 (aglicogênese, deficiência de glicogênio sintase); GSD tipo 1 (doença de von Gierke, deficiência de translocase/transportador de glicose-6-fosfatase) ; GSD tipo 2 (doença de Pompe, deficiência de alfa-l-4-glicosidase); GSD tipo 3 (doença de Cori, doença de Forbes, dextrinose limite, doença de enzima de desramificação; deficiência de amilo-l-6-glicosidase devido à perda da atividade de glicosidase e/ou transferase); GSD tipo 4 (doença de Andersen, deficiência de glicogênio fosforilase, deficiência em brancura, amilopectinose, deficiência da enzima de ramificação de glicogênio; deficiência de amilo1,4-a-l,6-transglicosidase); GSD tipo 5 (doença de McArdle; deficiência de glicogênio fosforilase (tipo muscular)); GSD tipo 6 (doença de Hers; deficiência de glicogênio fosforilase E (tipo hepático)); GSD tipo 7 (doença de Tarui; deficiência de fosfofrutoquinase); GSD tipo 8, 9 (GSD com defeitos no sistema de ativação de fosforilase; deficiência de fosforilase quinase (fígado ou músculo); GSD tipo 10 (deficiência de quinase dependente de AMP cíclico); GSD tipo 11 (síndrome de Fanconi-Bickel; deficiência do

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transportador	de	glicose	tipo	2	(GLUT2));	e GSD tipo	12
(deficiência	de	aldolase	A) .	Os	subtipos	de doenças	de
armazenamento	de	glicogênio	são	também	conhecidos,	em

particular GSD la, que resulta de mutações no gene para glucose-6-fosfatase (G6PC) e conduz, entre outros sintomas, ao excesso de acumulação de glicogênio e lipidios no tecido do fígado, hepatomegalia, adenomas hepáticos e carcinoma hepatocelular.

[0042] Os sintomas de doenças de armazenamento de glicogênio podem incluir açúcar no sangue elevado ou reduzido, insensibilidade à insulina, miopatias, bem como sintomas hepáticos, tais como esteatose, hiperlipidemia, hipercolesterolemia, cardiomegalia, hepatomegalia, fibrose, cirrose, adenoma hepatocelular e carcinoma hepatocelular. Os sintomas também podem incluir insensibilidade à insulina, glicemia elevada ou reduzida e disfunção renal.

[0043] Indivíduo com necessidade do mesmo significa um indivíduo identificado como necessitado de uma terapia ou tratamento.

[0044] Um efeito terapêutico alivia, em certa medida, um ou mais dos sintomas de uma doença ou distúrbio, e inclui a cura da doença ou distúrbio. Cura significa que os sintomas da doença ativa são eliminados. No entanto, certos efeitos a longo prazo ou permanentes da doença podem existir mesmo após a cura ser obtida (como danos extensos

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27/112 ao tecido).

[0045] Tratar, tratamento ou tratando, como usado aqui, refere-se à administração de uma composição farmacêutica para fins profiláticos e/ou terapêuticos. O termo tratamento profilático se refere ao tratamento de um paciente que ainda não tem a doença ou distúrbio relevante, mas que é suscetível a, ou está em risco de, uma doença ou distúrbio em particular, pelo qual o tratamento reduz a probabilidade do paciente desenvolver a doença ou distúrbio. O termo tratamento terapêutico se refere à administração de tratamento a um paciente já com uma doença ou distúrbio.

[0046] Prevenir ou prevenção se refere a retardar ou impedir o início, desenvolvimento ou progressão de uma condição ou doença por um período de tempo, incluindo semanas, meses ou anos.

[0047] Melhora significa uma diminuição da gravidade de pelo menos um indicador de uma condição ou doença. Em certas modalidades, a melhora inclui um atraso ou um abrandamento na progressão de um ou mais indicadores de uma condição ou doença. A gravidade dos indicadores pode ser determinada por medidas subjetivas ou objetivas que são conhecidas das pessoas versadas na técnica.

[0048] Modulação significa uma perturbação de função ou atividade. Em certas modalidades, modulação

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28/112 significa um aumento na expressão gênica. Em certas modalidades, modulação significa uma diminuição na expressão gênica. Em certas modalidades, a modulação significa um aumento ou diminuição nos niveis totais no soro de uma proteina especifica. Em certas modalidades, modulação significa um aumento ou diminuição dos niveis no soro livre de uma proteina especifica. Em certas modalidades, modulação significa um aumento ou diminuição dos niveis totais no soro de um fator especifico não proteico. Em certas modalidades, modulação significa um aumento ou diminuição dos niveis livres no soro de um fator especifico não proteico. Em certas modalidades, modulação significa um aumento ou diminuição na biodisponibilidade total de uma proteina especifica. Em certas modalidades, modulação significa um aumento ou uma diminuição na biodisponibilidade total de um fator especifico não proteico.

[0049] Administrar significa fornecer um agente farmacêutico ou composição a um indivíduo, e inclui, mas não está limitado a, administrar por um profissional médico e auto-administrar.

[0050] A administração dos compostos aqui divulgados ou dos sais farmaceuticamente aceitáveis dos mesmos pode ser através de qualquer um dos modos de administração aceitos para agentes que servem a utilidades

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29/112 semelhantes incluindo, mas não limitadas a, oralmente, subcutaneamente, intravenosamente, intranasalmente, topicamente, transdermicamente, intraperitoneal, intramuscular, intrapulmonarmente, vaginalmente, retalmente ou intraocularmente. Administrações orais e parenterais são habituais no tratamento das indicações que são objeto das modalidades preferidas.

[0051] Administração parenteral significa administração através de injeção ou infusão. A administração parenteral inclui, mas não está limitada a, administração subcutânea, administração intravenosa, administração intramuscular, administração intra-arterial e administração intracraniana.

[0052] Administração subcutânea significa administração logo abaixo da pele.

[0053] Administração intravenosa significa administração em uma veia.

[0054] Administração intra-arterial significa administração em uma artéria.

[0055] O termo agente inclui qualquer substância, molécula, elemento, composto, entidade ou uma combinação dos mesmos. Inclui, mas não está limitado a, por exemplo, proteina, polipeptideo, peptideo ou mimético, molécula orgânica pequena, polissacarideo, polinucleotideo e semelhantes. Pode ser um produto natural, um composto

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30/112 sintético ou um composto quimico, ou uma combinação de duas ou mais substâncias.

[0056] Agente farmacêutico significa uma substância que proporciona um efeito terapêutico quando administrada a um indivíduo.

[0057] Composição farmacêutica significa uma mistura de substâncias adequadas para administração a um indivíduo que inclui um agente farmacêutico. Por exemplo, uma composição farmacêutica pode compreender um oligonucleotideo modificado e uma solução aquosa estéril.

[0058] Ingrediente farmaceuticamente ativo significa a substância em uma composição farmacêutica que fornece um efeito desejado.

[0059] O termo sal farmaceuticamente aceitável se refere a sais que retêm a eficácia biológica e propriedades dos compostos com os quais estão associados e que não são biologicamente ou de outro modo indesejáveis. Em muitos casos, os compostos da presente invenção são capazes de formar sais de ácidos e/ou bases em virtude da presença de grupos fenol e/ou fosfonato ou grupos semelhantes aos mesmos. Uma pessoa versada na técnica estará ciente de que o estado de protonação de qualquer um ou de todos estes compostos pode variar com o pH e caráter iônico da solução envolvente, e assim a presente divulgação contempla estados de carga múltipla de cada composto. Os sais de adição de

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31/112 ácido farmaceuticamente aceitáveis podem ser formados com ácidos inorgânicos e ácidos orgânicos. Ácidos inorgânicos dos quais os sais podem ser derivados incluem, por exemplo, ácido clorídrico, ácido bromídrico, ácido sulfúrico, ácido nítrico, ácido fosfórico e semelhantes. Os ácidos orgânicos dos quais os sais podem ser derivados incluem, por exemplo, ácido acético, ácido propiônico, ácido glicólico, ácido pirúvico, ácido oxálico, ácido maleico, ácido malônico, ácido succínico, ácido fumárico, ácido tartárico, ácido cítrico, ácido benzoico, ácido cinâmico, ácido mandélico, ácido metanossulfônico, ácido etanossulfônico, ácido ptoluenossulfônico, ácido salicílico e semelhantes. Os sais de adição de base farmaceuticamente aceitáveis podem ser formados com bases inorgânicas e orgânicas. Bases inorgânicas das quais os sais podem ser derivados incluem, por exemplo, sódio, potássio, lítio, amônio, cálcio, magnésio, ferro, zinco, cobre, manganês, alumínio e semelhantes; particularmente preferidos são os sais de amônio, potássio, sódio, cálcio e magnésio. Bases orgânicas a partir das quais os sais podem ser derivados incluem, por exemplo, aminas primárias, secundárias e terciárias, aminas substituídas incluindo aminas substituídas de ocorrência natural, aminas cíclicas, resinas de troca iônica básicas e semelhantes, especificamente, tais como isopropilamina, trimetilamina, dietilamina, trietilamina, tripropilamina e

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32/112 etanolamina. Muitos desses sais são conhecidos na técnica, como descrito em WO 87/05297, Johnston et al., Publicado em 11 de setembro de 1987 (aqui incorporado por referência na sua totalidade).

[0060] Solvato se refere ao composto formado pela interação de um solvente e um EPI, um metabólito, ou sal do mesmo. Solvatos adequados são solvatos farmaceuticamente aceitáveis incluindo hidratos.

Compostos [0061]

Em algumas modalidades, os agonistas ΤΚβ para uso como descrito aqui incluem compostos de acordo com a Fórmula I:

Fórmula I:

em que:

G é selecionado do grupo que consiste em —O—, — S—, —S(=O)-, —S (=0) ₂—, -Se-, —CH₂—, —CF₂—, -CHF-, -C(O)-, -CH(OH)-, -CH(alquila C₄-C₄)-, -CH(alcoxi C₄-C₄)-, -C(=CH₂), -NH— e -N (alquila C₄-C₄) -;

T é selecionado a partir do grupo que consiste em

- (CR^a2) k-, -CR^b=CR^b- (CR^a2) _n-, - (CR^a ₂) _n-CR^b=CR^b-,

- (CR^a2) —CR^b=CR^b—(CR^a2)-, -O(CR^b2) (CR^a2)_n-, -S (CR^b2) (CR^a2) _n-,

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N (R^c) (CR^b2) (CR^a2)_n-, N (R^b) C (0) (CR^a2)n, -C (0) (CR^a2)_m-,

- (CR^a2)mC (0)-, - (CR^a2)C(0) (CR^a2)n, - (CR^a2)nC (0) (CR^a ₂) - e

-C (0)NH (CRb2	) (CRa 2)p-	r
k	é	um	número	inteiro	de	1	a	4;
m	é	um	número	inteiro	de	0	a	3;
n	é	um	número	inteiro	de	0	a	2;
P	é	um	número	inteiro	de	0	a	1;

cada R^a é independentemente selecionado do grupo que consiste em hidrogênio, alquila C1-C4, halogênio, -OH, -0alquila C1-C4 opcionalmente substituído, -OCF3, -S-alquila C1-C4 opcionalmente substituído, -NR^bR^c, alquenila C₂-C4 opcionalmente substituído e alquinila C₂-C4 opcionalmente substituído; com a condição de que quando um R^a está ligado a C através de um átomo 0, S ou N, então o outro R^a ligado ao mesmo C é um hidrogênio, ou ligado através de um átomo de carbono;

cada R^b é independentemente selecionado do grupo que consiste em hidrogênio e alquila C1-C4 opcionalmente substituído;

cada R^c é independentemente selecionado do grupo que consiste em hidrogênio e -alquila C1-C4 opcionalmente substituído, -C (0)-alquila C1-C4 opcionalmente substituído e -C(O)H;

R¹ e R² são, cada um, independentemente selecionados do grupo que consiste em halogênio, alquila C1-C4

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34/112 opcionalmente substituído, -S-alquila C1-C3 opcionalmente substituído, alquenila C2-C4 opcionalmente substituído, alquinila C2-C4 opcionalmente substituído, -CF3, -OCF3, -0alquila C1-C3 opcionalmente substituído e ciano;

R⁶, R⁷, R⁸ e R⁹ são, cada um, independentemente selecionados do grupo que consiste em hidrogênio, halogênio, alquila C1-C4 opcionalmente substituído, -Salquila C1-C3 opcionalmente substituído, alquenila C2-C4

opcionalmente	substituído,	alquinila	C2-C4	opcionalmente
substituído,	-cf3,	-OCF3,	alquila	C1-C3	opcionalmente
substituído e	ciano;	ou R6	e T são	tomados	em conjunto,
juntamente com os	átomos	de carbono aos	quais estão
ligados, para	formar	um anel	de 5 a 6	átomos,	incluindo 0 a

heteroátomos, selecionados independentemente de —NR¹—, —0— e —S—, com a condição de que são 2 heteroátomos no anel e ambos os heteroátomos são diferentes de nitrogênio, então ambos os heteroátomos têm que ser separados por pelo menos um átomo de carbono; e X está ligado a este anel por uma ligação direta a um carbono do anel, ou por - (CR^a2) - ou -C (0) - ligado a um anel de carbono ou a um nitrogênio do anel;

R¹ é selecionado do grupo que consiste em hidrogênio, -C (0)-alquila C1-C4, -alquila C1-C4 e -arilo C1-C4;

R^{2 3} e R⁴ são independentemente selecionados do grupo que consiste em hidrogênio, halogênio, -CF3, -OCF3, ciano,

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35/112 alquila C1-C12 opcionalmente substituído, alquenila C2-C12 opcionalmente substituído, alquinila C2-C12 opcionalmente substituído, -SR^d, -S(=O)R^e, -S(=O)2R^e, -S (=0) 2NR^fR^g,

-C(O)OR^h, -C(O)R^e, -N (R^b) C (0) NR^fR^g, -N (R^b) S (=0) 2R^e, -N (R^b) S (=0) 2NR^fR^g e -NR^fR^g;

cada R^d é selecionado do grupo que consiste em alquila C1-C12 opcionalmente substituído, alquenila C2-C12 opcionalmente substituído, alquinila C2-C12 opcionalmente substituído, -(CR^b2)n arila opcionalmente substituído, -(CR^b2)n cicloalquila opcionalmente substituído, -(CR^b2)n heterocicloalquila opcionalmente substituído e -C(O)NR^fR^g;

cada R^e é selecionado do grupo que consiste em alquila C1-C12 opcionalmente substituído, alquenila C2-C12 opcionalmente substituído, alquinila C2-C12 opcionalmente substituído, -(CR^a2)n arila opcionalmente substituído, -(CR^a2)n cicloalquila opcionalmente substituído e, -(CRbb heterocicloalquila opcionalmente substituído;

R^f e R^g são cada um independentemente selecionados do grupo que consiste em hidrogênio, alquila C1-C12 opcionalmente substituído, alquenila C2-C12 opcionalmente substituído, alquinila C2-C12 opcionalmente substituído, -(CR^b2)n arila opcionalmente substituído, -(CR^b2)n cicloalquila opcionalmente substituído, e -(CR^b2)n heterocicloalquila opcionalmente substituído, ou R^f e R^g podem em conjunto formar um anel heterociclico

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36/112 opcionalmente substituído, o qual pode conter um segundo heterogrupo selecionado do grupo que consiste em 0, NR^C e S, em que o anel heterociclico opcionalmente substituído pode ser substituído com 0 a 4 substituintes selecionados do grupo que consiste em alquila C1-C4 opcionalmente substituído, -0R^b, oxo, ciano, -CF3, fenila opcionalmente substituído, e -C(O)OR^h;

cada R^h é selecionado do grupo que consiste em alquila C1-C12 opcionalmente substituído, alquenila C2-C12 opcionalmente substituído, alquinila C2-C12 opcionalmente substituído, -(CR^b2)n arila opcionalmente substituído, -(CR^b2)n cicloalquila opcionalmente substituído e, -(CR^b ₂)n heterocicloalquila opcionalmente substituído;

R⁵ é selecionado do grupo que consiste em -OH, -0alquila Ci-Cs opcionalmente substituído, 00(0) R^e, -OC(O)OR^h, -F, -NHC(O)R^e, -NHS(=O)R^e, —NHS (=0) ₂R^e, —NHC (=S) NH (R^h) e -NHC (0) NH (R^h) ;

X é P (0) YR¹¹Y 'R¹¹;

Y e Y' são, cada um, independentemente selecionados do grupo que consiste em -0— e —NR^V—; quando Y e Y' são -0-, R¹¹ ligado a -0- é independentemente selecionado do grupo que consiste em -H, alquila, arila opcionalmente substituído, heterocicloalquila opcionalmente substituído, heterocicloalquila-CH2 opcionalmente substituído, em que a fração ciclica contém um carbonato ou tiocarbonato,

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37/112 alquilarila opcionalmente substituído, -C (R^z) 2OC (0) NR^Z2, -NR^Z-C (0)-R^y, -C (R^z) 2-OC (0) R^y, -C (R^z) ₂-0-C (0) 0R^y,

-C (R^z) 2OC (0) SR^y, -alquil-S-C (0) R^y, -alquil-S-alquil-hidroxi e -alquil-S-S-S-alquil-hidroxi;

quando Y e Y' — são —NR^V—, então R¹¹ ligado a —NR^V— é selecionado independentemente do grupo que consiste em —H, - [C (R^z) 2] q-COOR^Y, -C (R^x) 2COOR^y, - [C (R^z) 2] _q-C (0) SR^y e

-cicloalquileno-COORy;

quando Y é -0- e Y' é NR^V, então R¹¹ ligado a -0- é independentemente selecionado do grupo consistindo em -H, alquila, arila opcionalmente substituído, heterocicloalquila opcionalmente substituído, heterocicloalquila-CH2 opcionalmente substituído em que a fração cíclica contém um carbonato ou tiocarbonato, alquilarila opcionalmente substituído, -C (R^z) 2OC (0) NR^Z2, -NR^Z-C (0)-R^y, -C (R^z) 2-OC (0) Ry, -C (R^z) 2-0-c (0) ORy,

-C (R^z) 20C (0) SRy, -alquil-S-C (0) Ry, -alquil-S-S-alquilhidroxi e -alquil-S-S-S-alquil-hidroxi; e R¹¹ ligado a —NR^V— é selecionado independentemente do grupo que consiste em H, - [C (R^z) 2] q-COORy, -C (R^x) 2COORy, - [C (R^z) 2] _q-C (0) SR^y e -cicloalquileno-COORy;

ou quando Y e Y' são independentemente selecionados de -0- e NR^V, então juntos R¹¹ e R¹¹ são -alquil-S-S-alquilpara formar um grupo cíclico, ou juntos R¹¹ e R¹¹ são o grupo:

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em que :

V, W e W' são independentemente selecionados do grupo que consiste em hidrogênio, alquila opcionalmente substituído, aralquila opcionalmente substituído, heterocicloalquila, arila, arila substituído, heteroarila, heteroarila substituído, 1-alquenila opcionalmente substituído e 1-alquinila opcionalmente substituído;

ou juntos V e Z estão ligados através de 3 a 5 átomos adicionais para formar um grupo ciclico contendo 5 a 7 átomos, em que 0 a 1 átomos são heteroátomos e os átomos restantes são carbono, substituídos com hidroxi, aciloxi, alquiltiocarboniloxi, alcoxicarboniloxi, ou arilaxicarboniloxi ligado a um átomo de carbono que possui três átomos de ambos os grupos Y ligados ao fósforo;

ou juntos V e Z estão ligados através de 3 a 5 átomos adicionais para formar um grupo ciclico, em que 0 a 1 átomos são heteroátomos e os átomos restantes são carbono, que é fundido a um grupo arila na posição beta e gama ao Y ligado ao fósforo;

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39/112 ou juntos V e W estão ligados através de 3 átomos de carbono adicionais para formar um grupo ciclico opcionalmente substituído contendo 6 átomos de carbono e substituído com um substituinte selecionado do grupo que consiste em hidroxi, aciloxi, alcoxicarboniloxi, alquiltiocarboniloxi e arilaxicarboniloxi, ligado a um dos os referidos átomos de carbono estão três átomos de Y ligado ao fósforo;

ou juntos Z e W estão ligados através de 3 a 5 átomos adicionais para formar um grupo ciclico, em que 0 a 1 átomos são heteroátomos e os átomos restantes são carbono e

V deve ser arila, arila substituído, heteroarila ou heteroarila substituído;

ou juntos W e W' estão ligados através de 2 a 5 átomos adicionais para formar um grupo ciclico, em que 0 a 2 átomos são heteroátomos e os átomos restantes são carbono e

V deve ser arila, arila substituído, heteroarila ou heteroarila substituído;

Z é selecionado a partir do grupo que consiste em -CHR^ZOH, -CHR^ZOC (0) R^y, -CHR^ZOC (S) R^y, -CHR^ZOC (S) 0R^y, -CHR^ZOC (0) SR^y, -CHR^zOCO2R^y, -0R^z, -SR^Z, -CHR^ZN3, -CH₂-arila, -CH (aril) OH, -CH (CH₂CR^Z2) OH, -CH (OCR^Z) OH, -R^z, -NR^Z2, -OCOR^y, -OCO2R^y, -SCOR^Y, -SCO2R^y, -NHCOR^Z, -NHCO2R^y, CH2NHarila, -(CH₂)_q-OR^z e -(CH₂)_q-SR^z;

q é um número inteiro 2 ou 3;

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40/112 cada R^z é selecionado do grupo que consiste em R^y e -H;

cada R^y é selecionado do grupo que consiste em alquila, arila, heterocicloalquila e aralquila;

cada R^x é selecionado independentemente do grupo que consiste em H e alquila, ou juntos R^x e R^x formam um grupo alquila ciclico; e cada R^v é selecionado do grupo que consiste em -H, alquila inferior, aciloxialquila, alcoxicarboniloxialquila e acila inferior;

e os sais farmaceuticamente aceitáveis dos mesmos.

[0062] Em algumas modalidades, o composto de Fórmula I tem as seguintes condições:

a) quando G é -O—, T é -CH2—, R¹ e R² são cada um bromo, R³ é isopropila, R⁴ é hidrogênio e R⁵ é -OH, então X não é P(O) (OH) 2 ou P (O) (OCH₂CH₃)2;

b) V, Z, W, W' não são todos -H; e

c) quando Z é -R^z, então pelo menos um de V, W e W’ não é -H, alquila, aralquila ou heterocicloalquila;

d) quando G é -O—, T é -(CH2)i-4—, R¹ e R² são independentemente halogênio, alquila e cicloalquila, R³ é alquila, R⁴ é hidrogênio e R⁵ é -OH, então X não é —P(O) (OH)2 ou -P(O) (O-alquila inferior)2; e

e) quando G é -O-, R⁵ é -NHC(O)R^e, -NHS (=0) i-₂R^e,

-NHC (S) NH (R^b) ou -NHC (O) NH (R^h) , T é -(CH₂)_m-, -CH=CH-,

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41/112

-O(CH2)i-2—, ou —NH (CH₂) 1-2—, então X não é — P (0) (OH) 2 ou

-P (0) (OH)NH₂.

[0063] Em algumas modalidades, o composto é selecionado de um ou mais dos seguintes:

dos ou ou sais farmaceuticamente aceitáveis mesmos.

[0064]

Em outras modalidades composto selecionado de:

Estrutura

Número do composto

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44/112

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45/112

trans-13-3

trans-13-6

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46/112

trans-13-7

trans-13-4

cis-13-7

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48/112

8-2

24-1

7-5

7-6

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49/112

24-2

ch₃

19-1

19-2

7-4

19-3

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50/112

7-3

7-2

7-1

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51/112

20-1

24-3

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52/112

41-2

42-2

27-2

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53/112

HO OH

7-7

41-3

24-4

7-8

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54/112

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55/112

7-13

7-10

51-1

51-2

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56/112

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57/112

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60/112

12-6

15-5

ch₃

15-4

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61/112

15-7

65-1

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62/112

65-2

7-16

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63/112

ci

13-14-trans

7-17

15-8

OH

7-15 ou sais farmaceuticamente aceitáveis dos mesmos.

[0065]

Os compostos descritos acima podem ser

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64/112 preparados de acordo com métodos conhecidos, incluindo os descritos na Patente No. US 7.829.552, que é aqui incorporada por referência na sua totalidade. Agonistas de ΤΚβ adicionais são descritos na Patente No. US 7.514.419; Publicação do Pedido de Patente No. US 2009/002895; Publicação do Pedido de Patente No. US 2010/0081634; Publicação do Pedido de Patente No. US 2012/0046364; e Publicação de Pedido PCT No. WO 2011/038207, todos os quais são aqui incorporados por referência na sua totalidade.

Composições Farmacêuticas [0066] Os compostos úteis descritos acima podem ser formulados em composições farmacêuticas para uso no tratamento das condições aqui descritas. Utilizam-se técnicas padrão de formulação farmacêutica, tais como as descritas em The Science and Practice of Pharmacy, de Remington, 21^a Ed., Lippincott Williams & Wilkins (2005), aqui incorporadas por referência na sua totalidade. Consequentemente, algumas modalidades incluem composições farmacêuticas compreendendo: (a) uma quantidade segura e terapeuticamente eficaz de um composto aqui descrito, ou sais farmaceuticamente aceitáveis do mesmo; e (b) um veiculo, diluente, excipiente ou combinação farmaceuticamente aceitável do mesmo.

[0067] O termo veiculo farmaceuticamente aceitável ou excipiente farmaceuticamente aceitável

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65/112 inclui qualquer e todos os solventes, diluentes, emulsificantes, aglutinantes, tampões, meios de dispersão, revestimentos, agentes antibacterianos e antifúngicos, agentes isotônicos e retardadores de absorção e similares, ou qualquer outro composto tal como é conhecido pelas pessoas versadas na técnica como sendo útil na preparação de formulações farmacêuticas. A utilização de tais meios e agentes para substâncias farmaceuticamente ativas é bem conhecida na técnica. Exceto na medida em que qualquer meio ou agente convencional é incompatível com o ingrediente ativo, a sua utilização nas composições terapêuticas é contemplada. Ingredientes ativos suplementares podem também ser incorporados nas composições. Além disso, podem ser incluídos vários adjuvantes, como são vulgarmente utilizados na técnica. Estes e outros compostos são descritos na literatura, por exemplo, no Merck Index, Merck & Company, Rahway, NJ. Considerações para a inclusão de vários componentes em composições farmacêuticas são descritas, por exemplo, em Gilman et al. (Eds.) (1990); Goodman e Gilman's: The Pharmacological Basis of Therapeutics, 8^a Ed., Pergamon Press.

[0068] Alguns exemplos de substâncias, que podem servir como veículos ou componentes farmaceuticamente aceitáveis, são açúcares, tais como lactose, glicose e sacarose; amidos, tais como amido de milho e amido de

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66/112 batata; celulose e seus derivados, tais como carboximetilcelulose, etilcelulose e metilcelulose de sódio; tragacanto em pó; malte; gelatina; talco; lubrificantes sólidos, tais como ácido esteárico e estearato de magnésio; sulfato de cálcio; óleos vegetais, tais como óleo de amendoim, óleo de semente de algodão, óleo de sésamo, azeite, óleo de milho e óleo de teobroma; polióis, tais como propilenoglicol, glicerina, sorbitol, manitol e polietilenoglicol; ácido alginico; emulsionantes, tais como os TWEENS; agentes umectantes, tais como lauril sulfato de sódio; agentes corantes; agentes aromatizantes; agentes de comprimidos, estabilizadores; antioxidantes; conservantes; água isenta de pirogênio; solução salina isotônica; e soluções tampão de fosfato.

[0069] A escolha de um veiculo farmaceuticamente aceitável a ser usado em conjunto com o composto em questão é determinada pela maneira como o composto é administrado.

[0070] As composições aqui descritas são preferencialmente fornecidas na forma de dosagem unitária. Como aqui utilizado, uma forma de dosagem unitária é uma composição contendo uma quantidade de um composto que é adequado para administração a um indivíduo, em uma dose única, de acordo com a boa prática médica. A preparação de uma forma de dosagem única ou unitária, no entanto, não implica que a forma de dosagem seja administrada uma vez

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67/112 por dia ou uma vez por curso de terapia. Uma forma de dosagem unitária pode compreender uma dose diária única ou uma sub-dose fracionada, em que várias formas de dosagem unitária são para ser administradas ao longo de um dia, de modo a completar uma dose diária. De acordo com a presente descrição, uma forma de dosagem unitária pode ser dada mais ou menos frequentemente que uma vez por dia, e pode ser administrada mais de uma vez durante o decurso da terapia. Tais formas de dosagem podem ser administradas de qualquer maneira consistente com a sua formulação, incluindo oralmente, parentericamente, e podem ser administradas como uma infusão durante um periodo de tempo (por exemplo, de cerca de 30 minutos a cerca de 2 a 6 horas) . Enquanto as administrações únicas são especificamente contempladas, as composições administradas de acordo com os métodos aqui descritos podem também ser administradas como uma infusão continua ou através de uma bomba de infusão implantável.

[0071] Os métodos como aqui descritos podem utilizar qualquer uma de uma variedade de formas adequadas para uma variedade de vias para administração, por exemplo, oral, nasal, retal, tópica (incluindo transdérmica), ocular, intracerebral, intracraniana, intratecal, intraarterial, intravenosa, intramuscular ou outras vias parentais de administração. A pessoa versada na técnica irá apreciar que as composições orais e nasais incluem

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68/112 composições que são administradas por inalação e feitas usando metodologias disponíveis. Dependendo da via particular de administração desejada, pode ser utilizada uma variedade de veículos farmaceuticamente aceitáveis bem conhecidos na técnica. Veículos farmaceuticamente aceitáveis incluem, por exemplo, enchimentos sólidos ou líquidos, diluentes, hidrótropos, agentes tensoativos e substâncias encapsulantes. Materiais farmaceuticamente ativos opcionais podem ser incluídos, os quais não interferem substancialmente com a atividade do composto. A quantidade de veiculo empregada em conjunto com o composto é suficiente para proporcionar uma guantidade prática de material para administração por dose unitária do composto. As técnicas e composições para preparar formas de dosagem úteis nos métodos aqui descritos estão descritas nas seguintes referências, todas aqui incorporadas por referência: Modern Pharmaceutics, 4^a Ed., Capítulos 9 e 10 (Banker & Rhodes, editores, 2002); Lieberman et al. Pharmaceutical Dosage Forms: Tablets (1989); e Ansel, Introductions to Pharmaceutical Dosage Forms, 8^a Edição (2004) .

[0072] Podem ser utilizadas várias formas de dosagem oral, incluindo formas sólidas como comprimidos, cápsulas, grânulos e pós a granel. Os comprimidos podem ser comprimidos, comprimidos triturados, com revestimento

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69/112 entérico, revestidos com açúcar, revestidos com filme ou múltiplos comprimidos, contendo ligantes, lubrificantes, diluentes, agentes desintegrantes, agentes corantes, agentes aromatizantes, agentes indutores de fluxo e agentes de fusão adequados. As formas de dosagem oral liquidas incluem soluções aquosas, emulsões, suspensões, soluções e/ou suspensões reconstituídas a partir de grânulos não efervescentes e preparações efervescentes reconstituídas a partir de grânulos efervescentes, contendo solventes, conservantes, agentes emulsionantes, agentes de suspensão, diluentes, edulcorantes, agentes de fusão, corantes e agentes aromatizantes.

[0073] Os veículos farmaceuticamente aceitáveis adequados para a preparação de formas de dosagem unitárias para administração peroral são bem conhecidos na técnica. Os comprimidos compreendem tipicamente adjuvantes convencionais farmaceuticamente compatíveis como diluentes inertes, tais como carbonato de cálcio, carbonato de sódio, manitol, lactose e celulose; aglutinantes, tais como amido, gelatina e sacarose; desintegrantes, tais como amido, ácido alginico e croscarmelose; lubrificantes, tais como estearato de magnésio, ácido esteárico, celulose microcristalina, carboximetilcelulose e talco. Os comprimidos podem também compreender solubilizantes ou emulsionantes, tais como poloxâmeros, cremofor/Kolliphor®/

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70/112

Lutrol®, metilcelulose, hidroxipropil metilcelulose ou outros como são conhecidos na técnica. Os antiaderentes, tais como o dióxido de silício, podem ser utilizados para melhorar as características de fluxo da mistura em pó. Agentes corantes, como os corantes FD & C, podem ser adicionados para a aparência. Adoçantes e agentes aromatizantes, tais como aspartame, sacarina, mentol, hortelã-pimenta e sabores de frutas, são adjuvantes úteis para comprimidos mastigáveis. Cápsulas compreendem tipicamente um ou mais diluentes sólidos revelados acima. A seleção de componentes transportadores depende de considerações secundárias como sabor, custo e estabilidade de prateleira, que podem ser prontamente feitas por uma pessoa versada na técnica.

[0074] As composições perorais (PO) também incluem soluções líquidas, emulsões, suspensões e similares. Os veículos farmaceuticamente aceitáveis adequados para a preparação de tais composições são bem conhecidos na técnica. Componentes típicos de veículos para xaropes, elixires, emulsões e suspensões incluem etanol, glicerol, propilenoglicol, polietilenoglicol, sacarose líquida, sorbitol e água. Para uma suspensão, os agentes de suspensão típicos incluem metilcelulose, carboximetilcelulose de sódio, AVICEL RC-591, tragacanto e alginato de sódio; agentes umectantes típicos incluem

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71/112 lecitina e polissorbato 80; e conservantes típicos incluem metil parabeno e benzoato de sódio. As composições liquidas

orais	também	podem	conter um ou	mais	componentes,	tais como
edulcorantes,	agentes aromatizantes	e corantes	descritos
acima.
[	0075]	Tais	composições	podem	também ser	revestidas

por métodos convencionais, tipicamente com revestimentos dependentes do pH ou dependentes do tempo, de tal modo que o composto em questão é liberado no trato gastrointestinal na vizinhança da aplicação tópica desejada, ou em vários momentos para prolongar a ação desejada. Tais formas de dosagem incluem tipicamente, mas não estão limitadas a, um ou mais ftalato de acetato de celulose, ftalato de polivinilacetato, ftalato de hidroxipropilmetilcelulose, etilcelulose, revestimentos de Eudragit, ceras e goma-laca.

[0076] As composições aqui descritas podem opcionalmente incluir outros fármacos ativos.

[0077] Outras composições úteis para obter uma entrega sistêmica dos compostos em questão incluem formas de dosagem sublingual, bucal e nasal. Tais composições compreendem tipicamente uma ou mais substâncias de carga solúveis, tais como sacarose, sorbitol e manitol; e ligantes, tais como acácia, celulose microcristalina, carboximetilcelulose e hidroxipropilmetilcelulose. Antiaderentes, lubrificantes, edulcorantes, corantes,

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72/112 antioxidantes e agentes aromatizantes descritos acima podem também ser incluídos.

[0078] Uma composição líquida, que é formulada para uso oftálmico tópico, é formulada de tal modo que pode ser administrada topicamente ao olho. O conforto pode ser maximizado tanto quanto possível, embora algumas vezes

considerações	de	formulação	(por exemplo	, estabilidade	do
fármaco	) possam	necessitar	de	um	conforto	inferior	ao
ótimo. :	No caso	em	que o conforto	não	pode	ser	maximizado,	O
líquido	pode	ser	formulado	de	tal	modo	que	o líquido	é

tolerável ao paciente para uso oftálmico tópico. Adicionalmente, um líquido oftalmicamente aceitável pode ser embalado para uso único ou conter um conservante para evitar a contaminação em múltiplos usos.

[0079] Para aplicação oftálmica, soluções ou medicamentos são frequentemente preparados usando uma solução salina fisiológica como veículo principal. As soluções oftálmicas podem preferencialmente ser mantidas a um pH confortável com um sistema tampão apropriado. As formulações podem também conter conservantes, estabilizantes e tensoativos convencionais, farmaceuticamente aceitáveis.

[0080] Os conservantes que podem ser utilizados nas composições farmacêuticas aqui divulgadas incluem, mas não estão limitados a, cloreto de benzalcônio, PHMB,

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73/112 clorobutanol, timerosal, fenilmercúrico, acetato e nitrato de fenilmercúrico. Um tensoativo útil é, por exemplo, Tween 80. Do mesmo modo, vários veículos úteis podem ser utilizados nas preparações oftálmicas aqui descritas. Estes veículos incluem, mas não se limitam a, álcool polivinilico, povidona, hidroxipropilmetilcelulose, poloxâmeros, carboximetilcelulose, hidroxietilcelulose e água purificada.

[0081] Ajustadores de tonicidade podem ser adicionados conforme necessário ou conveniente. Eles incluem, mas não estão limitados a, sais, particularmente cloreto de sódio, cloreto de potássio, manitol e glicerina, ou qualquer outro ajustador de tonicidade oftalmicamente aceitável adequado.

[0082] Podem ser utilizados vários tampões e meios para ajustar o pH, desde que a preparação resultante seja oftalmicamente aceitável. Para muitas composições, o pH estará entre 4 e 9. Por conseguinte, os tampões incluem tampões de acetato, tampões de citrato, tampões de fosfato e tampões de borato. Ácidos ou bases podem ser usados para ajustar o pH destas formulações conforme necessário.

[0083] Antioxidantes oftalmicamente aceitáveis incluem, mas não estão limitados a, metabissulfito de sódio, tiossulfato de sódio, acetilcisteina, hidroxianisol butilado e hidroxitolueno butilado.

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74/112 [0084] Outros componentes de excipiente, que podem ser incluídos nas preparações oftálmicas, são agentes quelantes. Um agente quelante útil é o edetato dissódico, embora outros agentes quelantes também possam ser usados no lugar ou em conjunção com ele.

[0085] Para uso tópico, incluindo para administração transdérmica, são utilizados cremes, unguentos, géis, soluções ou suspensões, etc., contendo o composto aqui revelado. As formulações tópicas podem geralmente ser constituídas por um veiculo farmacêutico, co-solvente, emulsionante, melhorador de penetração, sistema conservante e emoliente.

[0086] Para administração intravenosa, os compostos e composições aqui descritos podem ser dissolvidos ou dispersos em um diluente farmaceuticamente aceitável, tal como uma solução salina ou dextrose. Os excipientes adequados podem ser incluídos para alcançar o pH desejado,

incluindo mas	não	limitado	a NaOH,	carbonato	de	sódio,
acetato de sódio	, HC1 e	ácido	citrico.	Em	várias
modalidades, o	pH	da composição final	varia de	2 a	8, ou
preferivelmente	de	4 a 7.	Os excipientes antioxidantes
podem incluir	bissulfito de	sódio,	bissulfito	de	sódio

acetona, formaldeido de sódio, sulfoxilato, tioureia e

EDTA. Outros exemplos não limitativos de excipientes adequados encontrados na composição intravenosa final podem

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75/112 incluir fosfates de sódio ou potássio, ácido citrico, ácido tartárico, gelatina e carboidratos, tais como dextrose, manitol e dextrano. Outros excipientes aceitáveis são descritos em Powell, et al., Compendium of Excipients for Pariental Formulations, PDA J Pharm Sci and Tech 1998, 52 238 a 311 e Nema et al., Excipients and their role in approved injectable products: current usage and future directions, PDA J Pharm Sci e Tech 2011, 65 287 a 332, ambos aqui incorporados por referência na sua totalidade. Agentes antimicrobianos também podem ser incluídos para se obter uma solução bacteriostática ou fungistática, incluindo, mas não se limitando a, nitrato de fenilmercúrico, timerosal, cloreto de benzetônio, cloreto de benzalcônio, fenol, cresol e clorobutanol.

[0087] As composições para administração intravenosa podem ser fornecidas a cuidadores na forma de um ou mais sólidos que são reconstituídos com um diluente adequado, tal como água esterilizada, solução salina ou dextrose em água, pouco antes da administração. Em outras modalidades, as composições são fornecidas em solução prontas para administrar parentericamente. Ainda em outras modalidades, as composições são fornecidas em uma solução que é ainda diluida antes da administração. Em modalidades que incluem a administração de uma combinação de um composto aqui descrito e outro agente, a combinação pode

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76/112 ser fornecida a cuidadores como uma mistura, ou os cuidadores podem misturar os dois agentes antes da administração, ou os dois agentes podem ser administrados separadamente.

[0088] A dose unitária real dos compostos ativos aqui descritos depende do composto especifico e da condição a ser tratada. Em algumas modalidades, a dose pode ser de cerca de 0,01 mg/kg a cerca de 120 mg/kg ou mais de peso corporal, de cerca de 0,05 mg/kg ou menos a cerca de

70 mg/kg,

de

cerca

de

0,1

mg/kg

a

cerca

de

50

mg/kg

de

peso

corporal,

de

cerca

de

1,0

mg/kg

a

cerca

de

10

mg/kg

de

peso

corporal,

de

cerca

de

5, 0

mg/kg

a

cerca

de

10

mg/kg

de

peso

corporal,

ou

de cerca

de

10,0

mg/kg a

cerca

de 20,

0

mg/kg

de peso corporal. Em algumas modalidades, a dose pode ser inferior a 100 mg/kg, 90 mg/kg, 80 mg/kg, 70 mg/kg, 60 mg/kg, 50 mg/kg, 40 mg/kg, 30 mg/kg, 25 mg/kg, 20 mg/kg, 10 mg/kg, 7,5 mg/kg, 6 mg/kg, 5 mg/kg, 4 mg/kg, 3 mg/kg, 2,5 mg/kg, 1 mg/kg, 0,5 mg/kg, 0,1 mg/kg, 0,05 mg/kg ou 0,005 mg/kg de peso corporal. Em algumas modalidades, a dose unitária real é 0,05, 0,07, 0,1, 0,3, 1,0, 3,0, 5,0, 10,0 ou 25,0 mg/kg de peso corporal. Assim, para administração a uma pessoa de 70 kg, a faixa de dosagem seria de cerca de 0,1 mg a 70 mg, de cerca de 1 mg a cerca de 50 mg, de cerca de 0,5 mg a cerca de 10 mg, de cerca de 1 mg a cerca de 10 mg, de cerca de 2,5 mg a cerca de 30 mg,

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77/112 de cerca de 35 mg ou menos a cerca de 700 mg ou mais, de cerca de 7 mg a cerca de 600 mg, de cerca de 10 mg a cerca de 500 mg, ou de cerca de 20 mg a cerca de 300 mg, ou de cerca de 200 mg a cerca de 2000 mg. Em algumas modalidades,

a dose unitária real	é de 5	mg.	Em	algumas	modalidades,	a
dose	unitária	real é	de 10	mg.	Em	algumas	modalidades,	a
dose	unitária	real é	de 25	mg.	Em	algumas	modalidades,	a
dose	unitária	real	é de	250	mg	ou menos. Em algumas

modalidades, a dose unitária	real é de	10 0 mg	ou	menos.	Em
algumas modalidades, a dose menos. Métodos de Administração	unitária	real é	de	7 0 mg	ou
[0089]	As composições	descritas acima	podem	ser
administradas	através de	qualquer	via	adequada	de
administração,	por exemplo	, por	inj eção.		tal como

subcutânea, intramuscular, intraperitoneal, intravenosa ou intra-arterial; topicamente, como creme, loção ou adesivo; oralmente, tal como por uma pilula, liquido dissolvido, suspensão oral, filme bucal ou enxaguatório bucal; por via nasal, como por aerossol nasal, pó ou spray; ou ocularmente, como por um colirio. Em algumas modalidades, a composição pode ser administrada uma vez, duas vezes, três vezes, ou quatro vezes por dia. Em outras modalidades, a composição pode ser administrada uma, duas ou três vezes por semana. Em outras modalidades, a composição é

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78/112 administrada em dias alternados, a cada três dias ou a cada quatro dias. Em outras modalidades, a composição é administrada a cada duas semanas, a cada três semanas ou a cada quatro semanas. Em outras modalidades, a composição é administrada uma vez por mês ou duas vezes por mês.

[0090] Em algumas modalidades, é administrada uma dose inicial de carga que é superior às doses subsequentes (doses de manutenção) . A forma de dosagem ou método de administração de uma dose de manutenção pode ser diferente daquela usada para a dose de carga. Em qualquer uma das modalidades divulgadas aqui, uma dose de manutenção pode compreender a administração da forma de dosagem unitária em qualquer esquema de dosagem aqui contemplado, incluindo, mas não limitado a, mensalmente ou várias vezes por mês, quinzenalmente ou várias vezes a cada duas semanas, semanalmente ou múltiplas vezes por semana, diariamente ou várias vezes por dia. Está contemplado na presente divulgação que os feriados de dosagem podem ser incorporados no periodo de dosagem da dose de manutenção. Tais ciclos de dosagem podem ocorrer imediatamente após a administração da dose de carga ou a qualquer momento durante o periodo de administração da dose de manutenção. Em algumas modalidades, a dose de carga é de 300 mg ou menos, 250 mg ou menos, 200 mg ou menos, 150 mg ou menos, ou 100 mg ou menos. Em algumas modalidades, a dose de

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79/112 manutenção é de 300 mg ou menos, 200 mg ou menos, 100 mg ou menos, 50 mg ou menos, 25 mg ou menos, 10 mg ou menos, 5 mg ou menos, ou 1 mg ou menos.

Métodos de Tratamento [0091] Algumas modalidades se referem a um método para o tratamento de uma doença de armazenamento de glicogênio ou seus sintomas ou sequelas, compreendendo a administração de uma quantidade eficaz de um composto aqui descrito a um indivíduo com necessidade do mesmo. A doença de armazenamento de glicogênio pode ser doença de armazenamento de glicogênio hepático ou não hepático.

[0092] Em algumas modalidades, a doença é selecionada a partir do grupo que consiste em doença de armazenamento de glicogênio tipo 0, 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11 ou 12. Em algumas modalidades, a doença de armazenamento de glicogênio é selecionada de uma ou mais de aglicogenose, doença de Von Gierke, doença de Pompe, doença de Cori, doença de Forbes, dextrinose limite, doença de enzima de desramificação, doença de Andersen, deficiência de glicogênio fosforilase, deficiência de brancura, amilopectinose, deficiência de enzima de ramificação de glicogênio, doença de McArdle, Doença de Tarui, deficiência do fígado autossômico e da fosforilase quinase muscular, deficiência de fosforilase quinase hepática autossômica, deficiência de fosforilase quinase ligada ao X, GSD X,

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80/112 sindrome de Fanconi-Bickel ou deficiência de aldolase A. Em algumas modalidades, os compostos da presente divulgação são administrados de modo a efetuar a liberação de glicogênio armazenado.

[0093] Em algumas modalidades, os compostos da presente divulgação são administrados como um meio de tratamento dos sintomas hepáticos de doenças de armazenamento de glicogênio. Em algumas modalidades, o referido composto é administrado a um paciente que apresente sintomas de hiperlipidemia, hipercolesterolemia, esteatose, fibrose hepática, ALT aumentada, AST aumentada, triglicerideos séricos aumentados, cirrose, hepatomegalia, adenoma hepatocelular ou carcinoma hepatocelular. Em algumas modalidades, os compostos da presente divulgação são administrados a um paciente que apresente insensibilidade à insulina ou glicose elevada no sangue. Em algumas modalidades, os compostos da presente divulgação são administrados a um paciente que apresenta niveis de ácido láctico no soro persistentemente elevados. Em algumas modalidades, os compostos da presente divulgação são administrados como um meio de tratamento de sintomas não hepáticos de doenças de armazenamento de glicogênio. Em algumas modalidades adicionais, os sintomas não hepáticos da doença de armazenamento de glicogênio podem compreender hipoglicemia, perturbações na regulação da glicose no

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81/112 sangue e/ou cardiomegalia.

[0094] Em algumas modalidades, os compostos da presente divulgação são co-administrados com outro agente terapêutico. Em algumas outras modalidades, o referido outro agente terapêutico é uma terapia de reposição enzimática. Em algumas outras modalidades, o referido outro agente terapêutico é a alglicosidase alfa. Em algumas outras modalidades, o referido outro agente terapêutico é uma glicose-6-fosfatase, uma enzima de desramificação, uma glicogênio sintase, uma glicose-6-fosfatase translocase, uma fosfatase translocase, uma alfa-l-4-glicosidase, uma amilo-l-6-glicosidase, uma amilo-1,4-a-l,6transglicosidase, uma glicogênio fosforilase, uma fosfofructoquinase, uma quinase ciclica-3',5' dependente de AMP, um transportador de glicose tipo 2 ou uma aldolase A. Em algumas modalidades adicionais, o referido outro agente terapêutico compreende uma mistura das enzimas acima. Em algumas outras modalidades, o referido outro agente terapêutico compreende uma enzima adicional.

[0095] Em algumas modalidades, os compostos da presente divulgação são administrados precedendo, seguindo ou contemporaneamente com uma terapia genética. Em algumas outras modalidades, a referida terapia genética afeta a substituição ou reparação do defeito genético que causa a doença de armazenamento de glicogênio do doente. Em algumas

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82/112 modalidades adicionais, a referida terapia genética efetua a inserção de um gene funcional que codifica uma glicose-6fosfatase, uma enzima de desramificação, uma glicogênio sintase, uma glicose-6-fosfatase translocase, uma fosfatase translocase, uma alfa-l-4-glicosidase, uma amilo-1-6glicosidase, uma amilo-1,4-a-l,6-transglicosidase, uma glicogênio fosforilase, uma fosfofrutoquinase, uma quinase ciclica-3',5' dependente de AMP, um transportador de glicose tipo 2, ou uma aldolase A. Em algumas outras modalidades, a referida terapia genética incorpora reparação ou substituição de uma ou mais cópias nativas do defeito genético relevante. Em algumas modalidades, tal reparação ou substituição é realizada utilizando o sistema CRISPR e, especialmente, o CRISPR-Cas9, CRISPR-Cas3 e/ou CRISPR-Cas6. Em algumas modalidades, a referida terapia genética é realizada ex vivo. Em algumas modalidades, a referida terapia genética é realizada por administração do agente terapêutico relevante diretamente no corpo do paciente, utilizando, por exemplo, um ácido nucleico encapsulado, um vetor viral ou outros meios conhecidos na técnica. Em algumas outras modalidades, a referida terapia genética é complementada com uma terapia de substituição enzimática.

[0096] Em algumas modalidades, os compostos da presente divulgação são administrados precedendo, seguindo

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83/112 ou contemporaneamente com um transplante do coração, do fígado, das células de ilhotas pancreáticas, de um ou mais rins ou de tecido muscular esquelético. Em algumas outras modalidades, o referido transplante de órgão é suplementado com terapia de reposição enzimática. Em algumas outras modalidades, o referido transplante de órgão é suplementado com uma terapia genética. Em algumas modalidades, os compostos da presente divulgação são administrados precedendo, seguindo ou contemporaneamente com um transplante do coração, do fígado, das células de ilhotas pancreáticas, de um ou mais rins, ou de tecido muscular esquelético, assim como uma terapia genética e/ou terapia de reposição enzimática.

[0097] Em algumas modalidades, os compostos da presente divulgação são co-administrados com um segundo agente terapêutico que modula os níveis de lactato no sangue. Em algumas outras modalidades, o referido segundo agente terapêutico pode compreender um co-fator de uma enzima importante para o metabolismo dos lipídios ou carboidratos. Em algumas modalidades adicionais, o referido segundo agente terapêutico pode compreender uma ou mais de tiamina, biotina, riboflavina ou quaisquer precursores para tais agentes e qualquer combinação dos mesmos.

[0098] Em algumas modalidades, os compostos da presente divulgação são co-administrados com um segundo

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84/112 agente terapêutico que modula os niveis de enzimas hepáticas. Em algumas modalidades adicionais, o referido segundo agente terapêutico pode compreender um agente para reduzir ou prevenir a inflamação do figado ou a elevação nos testes da função hepática.

[0099] Em algumas modalidades, os compostos da presente divulgação são co-administrados com um segundo agente terapêutico que modula o açúcar no sangue. Em algumas outras modalidades, o referido segundo agente terapêutico pode compreender um peptideo, um açúcar, um polissacarideo, um aminoácido ou qualquer combinação dos mesmos. Em algumas outras modalidades, o referido segundo agente terapêutico pode compreender um ou mais de glicose, galactose, frutose, sacarose, maltose, lactose, arabinose ou outros açúcares, ou qualquer combinação dos mesmos. Em algumas outras modalidades, o referido segundo agente terapêutico pode compreender um ou mais de amido de milho, amido de batata, amido de trigo, amido vegetal, mandioca ou outros amidos, ou qualquer combinação dos mesmos. Em algumas modalidades, o referido segundo agente terapêutico pode compreender um ou mais açúcares e um ou mais amidos. Em algumas modalidades, o referido segundo agente terapêutico pode compreender um ou mais de asparagina, tirosina, cisteína, serina, tirosina, glutamina, histidina, ácido glutâmico, arginina, lisina, ácido aspártico,

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85/112 triptofano, isoleucina, metionina, prolina, fenilalanina, glicina, alanina, valina, leucina ou qualquer combinação dos mesmos. Em algumas modalidades adicionais, o referido segundo agente terapêutico pode compreender uma insulina, um peptideo do tipo insulina, um glucagon, um peptideo do tipo glucagon ou qualquer combinação dos mesmos. Em algumas modalidades adicionais, o referido segundo agente terapêutico pode compreender uma combinação de uma insulina, um peptideo do tipo insulina, um glucagon e/ou um peptideo do tipo glucagon com um amido ou um açúcar.

[00100] Em algumas modalidades, os compostos da presente divulgação são co-administrados com uma estatina ou inibidor de PCSK9. As estatinas representativas incluem, mas não se limitam a, atorvastatina, fluvastatina, lovastatina, pravastatina, rosuvastatina, sinvastatina e pitavastatina. Os inibidores representativos de PCSK9 incluem, mas não se limitam a, alirocumab, bococizumab e evolocumab.

[00101] Em algumas modalidades, a administração dos compostos da presente divulgação resulta em uma redução no tamanho do figado ou a prevenção de hepatomegalia em um indivíduo com uma doença de armazenamento de glicogênio. Em algumas modalidades, o tamanho do figado é avaliado em relação à massa ou volume absoluto do figado. Em algumas modalidades, o tamanho do figado é avaliado como a massa

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86/112 relativa do figado em comparação com a massa global do corpo do indivíduo. Em algumas modalidades, o tamanho do figado é avaliado por ultrassonografia, radiografia incluindo tomografia computadorizada, ressonância magnética ou por palpitação manual e/ou percussão e estimativa usando métodos e medições como são conhecidos na técnica. Em algumas modalidades, a administração dos compostos da presente divulgação resulta em uma redução na massa corporal em um indivíduo possuindo uma doença de armazenamento de glicogênio. Em algumas modalidades, a administração dos compostos da presente divulgação resulta em uma redução dos triglicerideos totais no figado em um indivíduo com uma doença de armazenamento de glicogênio. Em algumas modalidades, a administração dos compostos da presente divulgação resulta em uma redução da concentração de triglicerideos no figado em um indivíduo com uma doença de armazenamento de glicogênio. Em algumas modalidades, a administração dos compostos da presente divulgação resulta em colesterol sérico reduzido em um indivíduo com uma doença de armazenamento de glicogênio. Em algumas modalidades, a administração dos compostos da presente divulgação resulta na redução da glicose no sangue em um indivíduo possuindo uma doença de armazenamento de glicogênio. Em algumas modalidades, a administração dos compostos da presente divulgação resulta em pouca ou

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87/112 nenhuma alteração nos niveis de glicogênio no figado em um indivíduo com uma doença de armazenamento de glicogênio. Em algumas modalidades, a administração dos compostos da presente divulgação resulta em níveis reduzidos de glicogênio no fígado em um indivíduo com uma doença de armazenamento de glicogênio. Em algumas modalidades, a administração dos compostos da presente divulgação resulta em pouca ou nenhuma alteração nos níveis de glicogênio muscular em um indivíduo com uma doença de armazenamento de glicogênio. Em algumas modalidades, a administração dos compostos da presente divulgação resulta em uma redução do colesterol sérico superior a 5%, superior a 10%, superior a 15%, superior a 20%, superior a 25%, superior a 30%, superior a 35%, superior a 40%, superior a 45%, superior a 50%, superior a 55%, ou superior a 60% em um indivíduo com uma doença de armazenamento de glicogênio. Em algumas modalidades, a administração dos compostos da presente divulgação resulta em uma redução do colesterol sérico de

5%	ou menos,	10% ou menos,	15%	ou menos,	20%	ou menos,	25%
ou	menos, 30	% ou menos, 35%	ou	menos, 40	% ou	menos,	45%	ou
menos, 50%	ou menos, 55%	ou	menos, 60	% ou	menos	em	um

indivíduo com uma doença de armazenamento de glicogênio. Em algumas modalidades, a administração dos compostos da presente divulgação resulta em uma redução da glicose no sangue de superior a 5%, superior a 10%, superior a 15%,

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88/112 superior a 20%, superior a 25%, superior a 30%, superior a 35%, superior a 40%, superior a 45%, superior a 50%, superior a 55%, ou superior a 60% em um individuo com uma doença de armazenamento de glicogênio. Em algumas modalidades, a administração dos compostos da presente divulgação resulta em uma redução da glicose no sangue de 5% ou menos, 10% ou menos, 15% ou menos, 20% ou menos, 25% ou menos, 30% ou menos, 35% ou menos, 40% ou menos, 45% ou menos, 50% ou menos, 55% ou menos, 60% ou menos em um individuo com uma doença de armazenamento de glicogênio. Em algumas modalidades, a administração dos compostos da presente divulgação não resulta em alteração na massa do rim em um individuo com uma doença de armazenamento de glicogênio.

[00102] Os métodos aqui descritos são ainda ilustrados pelos seguintes exemplos.

Exemplo 1:

[00103] Estudo de Dosagem do Composto 2 em Cães: O objetivo do estudo foi determinar os efeitos da administração oral do Composto 2 uma vez por dia durante 14 dias, seguido de dosagem em dias alternados durante 14 dias nos niveis de colesterol no plasma e indicadores da função da tireoide em cães beagle. O Composto 2 foi formulado com Lutrol F68 NF (Poloxômero 188) e carboximetilcelulose (CMC; sal de sódio/alta viscosidade) e foi administrado como uma

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89/112 suspensão em 0,5% de CMC/1% de Lutrol em água desionizada. Doze cães beagle (9 a 15 kg) foram distribuídos aleatoriamente em 6 grupos de dosagem (1 macho e 1 fêmea/grupo) e tratados uma vez por dia com uma suspensão de 0,5% de CMC/1% de Lutrol F68 do Composto 2 em doses de 0,1, 0,3, 1, 3 ou 10 mg/dia ou com veículo durante 14 dias. No final do ciclo de tratamento (ciclo 1), os cães foram lavados durante 4 semanas e depois entraram em um segundo ciclo de tratamento de 14 dias. O ciclo 2 empregou o mesmo paradigma de dosagem que o ciclo 1, mas os animais foram randomizados para o ciclo 2 de tal forma que os grupos de dosagem combinados dos dois ciclos consistiram em 4 animais diferentes (2 machos, 2 fêmeas) cada. No final do ciclo 2, a dosagem foi continuada em dias alternados durante um período adicional de 14 dias (extensão do ciclo 2) . As amostras de sangue foram coletadas na linha de base e intervalos de tempo apropriados posteriormente e analisadas quanto aos níveis de colesterol total no plasma, níveis de T4 total (tT4), T4 livre (fT4), T3 total (tT3) , T3 livre (fT3) e hormônio estimulante da tireoide (TSH) no soro.

[00104] O tratamento com o Composto 2 durante 14 dias resultou em reduções progressivas, dependentes da dose, dos níveis de colesterol total no plasma, com uma redução média no dia 15 de -28 mg/dL ou -22% a partir da linha base em uma dose de 0,3 mg/kg/dia e de -71 mg/dL ou

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-47% da linha de base na maior dose avaliada (10 mg/kg/dia) (ver Fig. 1) . A dose mais baixa do Composto 2 avaliada, 0,1 mg/kg/dia, teve efeitos minimos nos niveis de colesterol total no plasma (Fig. 1) . Durante o periodo de dosagem no dia alternado do ciclo 2 (extensão do ciclo 2), os niveis de colesterol total no plasma nos grupos de tratamento do Composto 2 permaneceram reduzidos em relação aos animais tratados com veiculo em uma proporção semelhante ou maior do que a observada após uma dose diária (ver Fig. 2).

Exemplo 2:

[00105] O objetivo deste estudo foi avaliar a eficácia e segurança do tratamento com Composto 2 em doses de 3, 10 e 30 mg/kg/dia durante 9 semanas em camundongos ob/ob masculinos. 3,3',5-tri-iodo-L-tironina (T3) foi usado como um comparador neste estudo.

[00106] Métodos: Setenta e oito camundongos ob/ob adultos machos foram distribuídos em seis grupos de tratamento diferentes (n = 6 a 24/grupo). Os animais foram doseados diariamente com veiculo [1% de carboximetil celulose (CMC) em água, PO], T3 [(100 nmole/kg/dia em solução aquosa, subcutânea (SC)], ou Composto 2 [3, 10 ou 30 mg/kg/dia em CMC a 1%, PO] . A glicose no sangue e o colesterol no plasma foram medidos semanalmente em todos os animais. Subcategorias de animais nos grupos tratados com

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91/112 veiculo e 30 mg/kg/dia de Compostos 2 foram sacrificados após 3, 6 e 9 semanas de tratamento para analisar os efeitos temporais do Composto 2 no peso do figado e nos niveis de triglicerideos no figado. Os niveis de triglicerideos no figado, conteúdo de glicogênio no figado, pesos de gordura no coração, figado e epididimo e parâmetros de quimica clinica do plasma foram medidos no sacrifício.

[00107] Resultados: O colesterol no plasma, o peso corporal, o peso do fígado e o teor de triglicerideos no fígado aumentaram progressivamente em camundongos tratados com veículo ao longo do período de tratamento de 9 semanas. Múltiplas diferenças nos parâmetros metabólicos e fisiológicos foram observadas em animais tratados com fármacos em relação aos animais tratados com veículo durante todo o estudo. Após 9 semanas de tratamento, os níveis de colesterol total no plasma eram -43%, -42% e -47% inferiores nos grupos tratados com Composto 2 de 3, 10 e 30 mg/kg/dia, respectivamente. Os níveis de triglicerideos no fígado foram mais baixos no grupo tratado com o Composto 2 a 30 mg/kg/dia a partir da Semana 3 em diante. Na semana 9, os níveis de triglicerideos hepáticos eram -39% e -46%

menores	nos grupos tratados	com	10	e 30	mg/kg/dia	de
Composto	2, respectivamente	(Figura	3) .	Os	níveis	de
glicose	no sangue foram aumentados	no	grupo	de	Composto	2

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92/112 de 30 mg/kg/dia na semana 3 e em todos os grupos tratados com o Composto 2 na semana 9 (Figura 4) . Os níveis de glicogênio no fígado terminal nos grupos tratados com o Composto 2 foram modestamente superiores ou semelhantes aos do grupo tratado com veículo (Figura 5). Todos os grupos de dose do Composto 2 tinham pesos de fígado terminais inferiores (Figura 6) . O tratamento com composto 2 (10 e 30 mg/kg/dia) resultou em menores níveis de proteína e albumina total no plasma. Observaram-se níveis aumentados de bilirrubina no plasma total a 10 e 30 mg/kg/dia do Composto 2, mas estas alterações não estavam relacionadas com a dose. Níveis diminuídos de alanina aminotransferase (ALT) foram observados em todos os grupos de dose do Composto 2.

[00108] O colesterol total no plasma foi -66% menor em camundongos tratados com T3 na semana 9. Os níveis de triglicerídeos no fígado e glicogênio hepático terminal foram semelhantes nos grupos tratados com T3 e veículo. Os níveis de glicose no sangue no grupo tratado com T3 foram semelhantes aos do grupo tratado com veículo em todos os momentos avaliados. O tratamento com T3 resultou em menor peso do fígado. O tratamento com T3 também diminuiu os níveis de proteína total, albumina, ALT e cálcio no plasma e aumentou os níveis de triglicerídeos no plasma (-56%).

[00109] Conclusões: O tratamento com o composto 2

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93/112 durante 9 semanas evitou largamente o aumento dos niveis de colesterol no plasma, peso do figado e triglicerideos no figado observados em camundongos tratados com veiculo. Os niveis de glicose no sangue aumentaram em relação ao grupo tratado com veiculo após 3 e 9 semanas de tratamento com o Composto 2. Foram observadas alterações estatisticamente significativas em vários parâmetros da quimica clinica do plasma após o tratamento com o Composto 2: aumento da bilirrubina e diminuição da proteína total e albumina. Adicionalmente, o tratamento com Composto 2 reduziu os niveis elevados de ALT característicos de camundongos ob/ob. Tal como observado no Composto 2, o tratamento com T3 evitou o aumento dos niveis de colesterol no plasma e o peso do figado observado em camundongos tratados com veiculo. 0 tratamento com T3 não aumentou os niveis de glicose no sangue ou diminuiu o conteúdo de triglicerideos no figado. Outra diferença importante entre ο T3 e o Composto 2 foi o aumento nos niveis de triglicerideos no

plasma observados com o	primeiro, mas	não com o	último
tratamento medicamentoso.
Exemplo 3:
[00110] Objetivos:	0 objetivo do	estudo foi	avaliar

a eficácia e a segurança do tratamento com o Composto 2 durante 4 semanas em ratos diabéticos Zucker (ZDF) machos.

colesterol total no plasma, os niveis de glicose no

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94/112 sangue, os níveis de glicogênio no figado e no músculo e a quimica clinica do plasma foram avaliados. Adicionalmente, avaliações histológicas e bioquímicas da esteatose hepática foram realizadas post-mortem. 0 MB07875, um conhecido ligando do receptor do hormônio da tireoide humana, foi incluído como um comparador nestes estudos.

[00111] Métodos: Ratos ZDF machos com oito semanas de idade (n = 5/grupo) foram tratados oralmente com Composto 2 ou MB07875 durante 28 dias. As doses do Composto 2 [em 0,5% de carboximetilcelulose (CMC)] foram 0,25, 0,5, 1, 2,5, 5, 15 e 50 mg/kg/dia. A dose de MB07875 (em 0,5% de CMC) foi de 0,2 mg/kg/dia. O peso corporal foi avaliado imediatamente antes do tratamento e 24 horas após a última dose. O colesterol total no plasma e a glicose no sangue foram medidos semanalmente. Enquanto ainda sob anestesia, o sangue foi coletado da veia cava inferior para análise da quimica clinica e dos niveis de insulina e ácidos graxos livres, e o músculo gastrocnêmio foi removido e congelado para análise do conteúdo de glicogênio. Além disso, o figado foi removido e pesado, e uma fração foi congelada para análise de glicogênio e triglicerideos. Outra porção foi colocada em formalina tamponada neutra a 10% para coloração com hematoxalina e eosina (Η & E) . Finalmente, o coração foi retirado e pesado.

[00112] Resultados: Todas as alterações metabólicas

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95/112 em animais tratados com fármacos são descritas em relação aos animais tratados com veiculo nos pontos de tempo correspondentes. 0 Composto 2, em doses de 1 mg/kg/dia e acima, reduziu o colesterol total no plasma, com reduções de -25% e -34% na primeira dose estatisticamente significativa (1 mg/kg/dia) e a dose mais elevada (50 mg/kg/dia), respectivamente, no dia 28 (Figura 7) . Os niveis de glicose no sangue não aumentaram nos grupos tratados com o Composto 2 em qualquer momento durante o estudo e foram significativamente reduzidos (-47%) no grupo da dose de 2,5 mg/kg/dia no dia 28. O tratamento com Composto 2 não teve efeito significativo no coração ou no peso corporal. Os niveis de glicogênio no figado foram reduzidos de um modo dependente da dose pelo Composto 2 (> 90% a 50 mg/kg/dia), enquanto os niveis de glicogênio no músculo não foram afetados pelo tratamento (Figuras 8A, B). Os niveis de insulina no plasma tenderam a ser superiores a doses de 1 mg/kg/dia do Composto 2 e acima. Os niveis de ácidos graxos livres não foram afetados pelo tratamento com o Composto 2. Várias diferenças estatisticamente significativas nos parâmetros da quimica clinica do plasma foram observadas nos grupos tratados com o Composto 2 no dia 28. O nitrogênio da ureia no sangue diminuiu -21% e -26% nas doses de 15 e 50 mg/kg/dia de 3 de 27 de Composto 2, respectivamente. A bilirrubina total aumentou em -86% e

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-79% nas doses do Composto 2 de 2,5 e 50 mg/kg/dia, respectivamente. A fosfatase alcalina foi diminuída de uma maneira relacionada com a dose nas doses do Composto 2 de 1 mg/kg/dia e acima, com uma diminuição de -42% evidente na dose mais alta (50 mg/kg/dia) . Os níveis de cálcio foram reduzidos em -5% e os níveis de fósforo aumentaram em -27% em 50 mg/kg/dia de Composto 2. A globulina diminuiu em até -25% em doses de Composto 2 de 5 mg/kg/dia e acima. A proporção de albumina para globulina foi aumentada em 21% e 32% nas doses do Composto 2 de 15 e 50 mg/kg/dia, respectivamente. Os níveis de proteína total foram reduzidos em -10% a 50 mg/kg/dia de Composto 2. Embora a análise histológica de seções do fígado tenha revelado uma diminuição na esteatose microvesicular em camundongos tratados com Composto 2 em doses > 2,5 mg/kg/dia (Figura 9) , não houve diminuição estatisticamente significativa no conteúdo de triglicerídeos no fígado.

[00113] O colesterol total no plasma e a glicose no sangue foram -43% e -66% inferiores, respectivamente, no grupo tratado com MB07875 no dia 28, enquanto os níveis de insulina no plasma aumentaram significativamente (-5 vezes) . Pesos do coração, pesos do corpo e as proporções em peso de coração para corpo foram semelhantes entre os grupos tratados com MB07875 e veículo. Após 28 dias de dosagem, o tratamento com MB077811 resultou em

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97/112 reduções acentuadas dependentes da dose nos niveis de glicogênio no figado (Figura 8A) em relação ao tratamento com veiculo, com uma diminuição de -90% observada na dose mais elevada avaliada (50 mg/kd/dia). O teor de glicogênio no figado diminuiu em -96% no grupo tratado com MB07875 em relação ao grupo tratado com veiculo. Não houve diferenças significativas no conteúdo de glicogênio no músculo entre os grupos tratados com veiculo, Composto 2 e MB07875 (Figura 8B). A análise quimica clinica de amostras de plasma do grupo tratado com MB07875 revelou aumento de cloreto (-6%), diminuição do nitrogênio ureico no sangue (-8%), diminuição da fosfatase alcalina (-53%), diminuição do cálcio (-8%), diminuição da globulina (-18%) e uma proporção de albumina/globulina aumentado (-26%). O tratamento com MB07875 reduziu a esteatose hepática microvesicular, mas não alterou o conteúdo de triglicerideos no figado.

[00114] Conclusões: O tratamento de ratos ZDF machos com Composto 2 em doses de 1 a 50 mg/kg/dia durante 28 dias diminuiu os niveis de colesterol total no plasma em até 34%. Além disso, a esteatose microvesicular hepática foi reduzida nas doses do Composto 2 de 2,5 mg/kg/dia e acima. O tratamento com composto 2 (até 50 mg/kg/dia) não alterou a função cardiovascular conforme avaliado pelo monitoramento da frequência cardíaca, pressão aórtica

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98/112 sistólica e diastólica, e dP/dt do VE. Os níveis de glicose no sangue nos grupos tratados com o Composto 2 foram semelhantes ou inferiores aos do grupo de veículos. 0 tratamento com MB07875 (0,2 mg/kg/dia) também foi associado com colesterol plasmático total reduzido, glicose sanguínea reduzida e uma melhora na esteatose hepática microvesicular. Reduções marcadas do glicogênio hepático e alterações em vários parâmetros da química clínica do plasma foram observadas em ambos os grupos tratados com o Composto 2 e ο MB07875. Em resumo, a administração oral de Composto 2 a ratos ZDF machos durante 28 dias diminuiu os níveis de colesterol total no plasma e reduziu a esteatose microvesicular hepática sem causar efeitos colaterais cardiovasculares ou exacerbação de hiperglicemia.

Exemplo 4:

[00115] Objetivos: Os objetivos deste estudo foram avaliar os efeitos de 2, 5 e 10 semanas de tratamento com o Composto 2 nas doses de 10 e 30 mg/kg/dia nos níveis de colesterol total no plasma, glicemia e esteatose hepática, em um modelo de rato de obesidade induzida por dieta.

[00116] Métodos: Camundongos C57B1/6 machos (4 semanas de idade) foram alimentados com uma dieta rica em gordura (60% de gordura por kcal) por 88 dias para induzir obesidade, hiperlipidemia e hiperglicemia moderada antes do início do estudo. Para o estudo, 3 grupos de

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99/112 camundongos (η = 24 a 28) foram doseados diariamente por gavagem com 10 ou 30 mg/kg de Composto 2 ou veiculo (0,1% de carboximetilcelulose) e mantidos na mesma dieta rica em gordura. Durante o tratamento, o peso corporal, os niveis de colesterol total no plasma e os niveis de glicose no sangue dos animais foram medidos semanalmente. Subconjuntos de animais (n = 6 a 12; 30 mg/kg/dia) foram sacrificados antes do tratamento e após 2, 5 e 10 semanas de tratamento para análise do peso do figado, niveis de triglicerideos no figado e histologia do figado.

[00117] Resultados: Os niveis de colesterol total no plasma foram reduzidos em mais de 50% nos grupos tratados com Composto 2 de 10 e 30 mg/kg/dia desde a semana 1 até o final do estudo em comparação com o grupo tratado com veiculo (Figura 10) . Os niveis de glicose no sangue foram também significativamente inferiores (até 25%) nos grupos tratados com o Composto 2 em comparação com o grupo tratado com veiculo na maioria dos pontos de tempo examinados (Figura 11) . Os pesos do figado e as razões de peso do figado para o corpo foram -50% e -40% inferiores, respectivamente, para os grupos tratados com 10 e 30 mg/kg/dia em comparação com o grupo tratado com veiculo após 2, 5 e 10 semanas de tratamento (Figura 12). Não foram detectadas alterações significativas nas concentrações de triglicerideos no figado (mg/g de figado) em qualquer

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100/112 momento em que o grupo tratado com o Composto 2 foi comparado com o grupo tratado com veiculo. No entanto, o conteúdo total de triglicerideos no figado (mg/figado) foi significativamente menor (até 60%) nos grupos tratados com 10 e 30 mg/kg/dia do Composto 2 em comparação com o grupo tratado com veiculo nas semanas 2, 5 e 10. (Figura 13) . Esteatose macrovesicular e microvesicular foram visualmente reduzidas nos animais tratados com Composto 2 a 30 mg/kg/dia em comparação com os animais tratados com veiculo após 2, 5 e 10 semanas de tratamento (Figura 14).

[00118] Conclusões: O tratamento com Composto 2 (10 e 30 mg/kg/dia) de camundongos obesos induzidos por dieta durante até 10 semanas tendeu a reduzir o ganho de peso corporal e resultou em uma redução significativa e sustentada do colesterol total no plasma (> 50%) e melhora

da hiperglicemia	(redução	de	glicemia	de até 25%)	. Os
principais efeitos	sobre o	colesterol	e a glicose	foram
observados dentro	de 2 a	3	semanas	de tratamento	com

fármacos e foram mantidos durante o restante do periodo de tratamento de 10 semanas. A esteatose hepática, conforme avaliada por análise histológica de tecido obtido de camundongos tratados com o Composto 2 a 30 mg/kg/dia durante 2, 5 e 10 semanas, melhorou visualmente na semana 2. Uma melhora semelhante foi observada nos pontos de tempo de 5 e 10 semanas avaliados. Consistente com uma redução na

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101/112 esteatose, a hepatomegalia associada à alimentação com alto teor de gordura foi significativa e similarmente reduzida após 2, 5 e 10 semanas de tratamento com o Composto 2.

Exemplo 5:

[00119] Os compostos 1, 2, 3 e 4 são administrados oralmente, em doses variando de 0,1 mg/kg a 10 mg/kg, a camundongos deficientes em alfa-glicosidase que manifestam sintomas hepáticos semelhantes a GSD-2, incluindo hipercolesterolemia e hiperlipidemia. (GAA -/-; ver, por exemplo, Raben, N. et al., Mol. Genet. Metab. Sep-Oct; 80 (1-2): 159 a 169 (2003)). O sangue é retirado de cada animal a cada dois dias ou a cada 3 a 4 dias. Os animais são avaliados quanto aos seus niveis de colesterol no plasma, lipidios totais no plasma, lipidios no figado, glicogênio no figado, glicose livre, aspartate transaminase (AST) e alanina transaminase (ALT) e função tireoidiana. T4 total, T3 total, T4 livre, T3 livre e hormônio estimulante da tireoide são avaliados. Após 14 dias e novamente após 22 dias, os dados são compilados e submetidos a análises estatísticas apropriadas. Após 22 dias, os animais são sacrificados e seus figados são examinados quanto a sinais de esteatose e fibrose, bem como sinais histológicos de armazenamento anormal de glicogênio. Diferenças no tempo de sobrevivência, quando relevante, entre animais tratados e não tratados são avaliadas.

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Exemplo 6:

[00120] Os compostos 1, 2, 3 e 4 são administrados oralmente, em doses variando de 0,1 mg/kg a 10 mg/kg, a camundongos deficientes em glicose-6-fosfatase-α gue manifestam sintomas hepáticos tipo GSD-1, incluindo hipercolesterolemia e hiperlipidemia (G6pc -/-, G6pc3 -/-, ou G6pt -/- ver, por exemplo, Chou, JY et al., Nat. Rev. Endocrinol. 6 (12): 676 a 688 (2010)). O sangue é retirado de cada animal a cada dois dias ou a cada 3 a 4 dias. Os animais são avaliados guanto aos seus níveis de colesterol no plasma, lipídios totais no plasma, lipídios no fígado, glicogênio no fígado, glicose livre, aspartate transaminase (AST) e alanina transaminase (ALT) e função tireoidiana. T4 total, T3 total, T4 livre, T3 livre e hormônio estimulante da tireoide são avaliados. Após 14 dias e novamente após 22 dias, os dados são compilados e submetidos a análises estatísticas apropriadas. Após 22 dias, os animais são sacrificados e seus fígados são examinados guanto a sinais de esteatose e fibrose, bem como sinais histológicos de armazenamento anormal de glicogênio. Diferenças no tempo de sobrevivência, guando relevante, entre animais tratados e não tratados são avaliadas.

Exemplo 7:

[00121] Os compostos 1, 2, 3 e 4 são administrados oralmente, em doses variando de 0,1 mg/kg a 10 mg/kg, a

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103/112 camundongos deficientes em glicose-6-fosfatase-α que manifestam sintomas hepáticos tipo GSD-3, incluindo hipercolesterolemia e hiperlipidemia (Agl -/-, ver, por exemplo, Liu, KM et al., Mol. Genet. Metabol. 111 (4) : 467 a 76 (2014)) . O sangue é retirado de cada animal a cada dois dias ou a cada 3 a 4 dias. Os animais são avaliados quanto aos seus níveis de colesterol no plasma, lipídios totais no plasma, lipídios no fígado, glicogênio no fígado, glicose livre, aspartato transaminase (AST) e alanina transaminase (ALT) e função tireoidiana. T4 total, T3 total, T4 livre, T3 livre e hormônio estimulante da tireoide são avaliados. Após 14 dias e novamente após 22 dias, os dados são compilados e submetidos a análises estatísticas apropriadas. Após 22 dias, os animais são sacrificados e seus fígados são examinados quanto a sinais de esteatose e fibrose, bem como sinais histológicos de armazenamento anormal de glicogênio. Diferenças no tempo de sobrevivência, quando relevante, entre animais tratados e não tratados são avaliadas.

Exemplo 8:

[00122] Os compostos 1, 2, 3 e 4 são administrados oralmente, em doses variando de 0,1 mg/kg a 10 mg/kg, a camundongos deficientes em glicogênio fosforilase de fígado que manifestam sintomas hepáticos semelhantes a GSD-6, incluindo hipercolesterolemia e hiperlipidemia. (Pygl -/-,

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104/112 tal como, por exemplo, a linha de camundongo knockout No. TL1774 da Taconic Biosciences, Inc.). O sangue é retirado de cada animal a cada dois dias ou a cada 3 a 4 dias. Os animais são avaliados quanto aos seus niveis de colesterol no plasma, lipidios totais no plasma, lipidios no figado, glicogênio no figado, glicose livre, aspartate transaminase (AST) e alanina transaminase (ALT) e função tireoidiana. T4 total, T3 total, T4 livre, T3 livre e hormônio estimulante da tireoide são avaliados. Após 14 dias e novamente após 22 dias, os dados são compilados e submetidos a análises estatísticas apropriadas. Após 22 dias, os animais são sacrificados e seus figados são examinados quanto a sinais de esteatose e fibrose, bem como sinais histológicos de armazenamento anormal de glicogênio. Diferenças no tempo de sobrevivência, quando relevante, entre animais tratados e não tratados são avaliadas.

Exemplo 9:

[00123] Os compostos 1, 2, 3 e 4 são administrados oralmente, em doses variando de 0,1 mg/kg a 10 mg/kg, a camundongos deficientes em fosfofrutoguinase que manifestam sintomas hepáticos similares a GSD-7, incluindo hipercolesterolemia e hiperlipidemia (Pfkm). -/-, ver, por exemplo, Garcia M. et al., PLoS Genet. 5 (8) : el000615. Doi: 10.1371/journal.pgen.1000615 (2009)). O sangue é retirado de cada animal a cada dois dias ou a cada 3 a 4

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105/112 dias. Os animais são avaliados quanto aos seus niveis de colesterol no plasma, lipidios totais no plasma, lipidios no figado, glicogênio no figado, glicose livre, aspartato transaminase (AST) e alanina transaminase (ALT) e função tireoidiana. T4 total, T3 total, T4 livre, T3 livre e hormônio estimulante da tireoide são avaliados. Após 14 dias e novamente após 22 dias, os dados são compilados e submetidos a análises estatísticas apropriadas. Após 22 dias, os animais são sacrificados e seus figados são examinados quanto a sinais de esteatose e fibrose, bem como sinais histológicos de armazenamento anormal de glicogênio. Diferenças no tempo de sobrevivência, quando relevante, entre animais tratados e não tratados são avaliadas.

Exemplo 10:

[00124] Os compostos 1, 2, 3 e 4 são administrados oralmente, em doses variando de 0,1 mg/kg a 10 mg/kg, a camundongos deficientes em fosforilase quinase que manifestam sintomas hepáticos semelhantes a GSD-8/9, incluindo hipercolesterolemia e hiperlipidemia (PhKc -/-, ver, por exemplo, Varsanyi, M. et al., Biochem. Genet. 18 (3-4): 247 a 261 (1980)). O sangue é retirado de cada animal a cada dois dias ou a cada 3 a 4 dias. Os animais são avaliados quanto aos seus niveis de colesterol no plasma, lipidios totais no plasma, lipidios no figado, glicogênio no figado, glicose livre, aspartato transaminase

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106/112 (AST) e alanina transaminase (ALT) e função tireoidiana. T4 total, T3 total, T4 livre, T3 livre e hormônio estimulante da tireoide são avaliados. Após 14 dias e novamente após 22 dias, os dados são compilados e submetidos a análises estatísticas apropriadas. Após 22 dias, os animais são sacrificados e seus figados são examinados quanto a sinais de esteatose e fibrose, bem como sinais histológicos de armazenamento anormal de glicogênio. Diferenças no tempo de sobrevivência, quando relevante, entre animais tratados e não tratados são avaliadas.

Exemplo 11:

[00125] Os compostos 1, 2, 3 e 4 são administrados oralmente, em doses variando de 0,1 mg/kg a 10 mg/kg, a camundongos deficientes em fosforilase quinase que manifestam sintomas hepáticos semelhantes a GSD-11, incluindo hipercolesterolemia e hiperlipidemia ( Glut2 -/-, ver, por exemplo, Bady, I. et al., Diabetes 55 (4): 988 a 995 (2006)). O sangue é retirado de cada animal a cada dois dias ou a cada 3 a 4 dias. Os animais são avaliados quanto aos seus niveis de colesterol no plasma, lipidios totais no plasma, lipidios no figado, glicogênio no figado, glicose livre, aspartate transaminase (AST) e alanina transaminase (ALT) e função tireoidiana. T4 total, T3 total, T4 livre, T3 livre e hormônio estimulante da tireoide são avaliados. Após 14 dias e novamente após 22 dias, os dados são

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107/112

compilados	e submetidos	a análises	estatísticas
apropriadas.	Após 22 dias,	os animais são	sacrificados	e
seus figados	são examinados	quanto a sinais	de esteatose	e
fibrose, bem	como sinais	histológicos de	armazenamento
anormal de	glicogênio.	Diferenças no tempo	de
sobrevivência	, quando relevante, entre animais tratados	e
não tratados	são avaliadas.
Exemplo	12 :
[00126]	0 Composto 2	foi testado em	um modelo	de

camundongo G6PC -/- de GSD Ia. A injeção diária de 0,1 a 0,2 mL de dextrose a 10% por via subcutânea foi iniciada dentro de 3 dias de idade para camundongos G6PC -/-. Todos os camundongos G6PC -/- continuaram a receber injeções diárias de dextrose durante esse periodo. O sangue foi coletado no momento da eutanásia, quando os tecidos foram coletados. Dois grupos de 4 camundongos G6PC -/- (1 grupo tratado com o Composto 2, 1 grupo tratado com veiculo) foram analisados para identificar diferenças estatisticamente significativas entre os controles tratados com Composto 2 e tratados com veiculo. Também foram tratados 2 grupos de 3 camundongos normais (do tipo selvagem), um com o Composto 2 e um com veiculo.

[00127] Inicialmente, os camundongos GSD Ia foram tratados com o Composto 2 de 5 a 10 dias de idade. A massa do corpo, massa do figado, concentração de glicogênio no

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108/112 figado, triglicerideos no figado, glicose no soro em jejum, triglicerideos no soro em jejum e vias de sinalização celular relacionadas ao GSD foram examinadas. Do mesmo modo, grupos de camundongos GSD Ia foram tratados com veiculo durante 5 dias para servirem como controles simulados para todos os ensaios. Grupos de 3 a 4 camundongos foram avaliados. Os camundongos GSD Ia foram tratados durante > 7 dias para avaliar a sobrevivência e os efeitos a longo prazo do Composto 2 como descrito acima (camundongos GSD Ia raramente sobrevivem > 12 dias de vida sem uma intervenção terapêutica). A análise metabolômica dos extratos hepáticos foi realizada como descrito (Sinha, Farah et al. (2013), Hepatology 59 (4): 1366 a 1380). A acilcarnitina e o perfil de aminoácidos foram empregados para detectar quaisquer alterações relacionadas ao aumento da lipólise e à beta-oxidação de ácidos graxos, conforme descrito por Sinha et al. (Sinha, Farah et al. (2013), Hepatology 59 (4) : 1366 a 1380) . Os camundongos tratados com o Composto 2 apresentaram massa do corpo reduzida (Figura 15), massa do figado reduzida (Figura 16), massa do figado reduzida em percentagem da massa corporal (Figura 17), concentrações reduzidas de triglicerideos no figado (Figura 20) e triglicerideos totais no figado reduzidos (Figura 21) em comparação com controles tratados com veiculo (tratamento simulado). Estes efeitos foram

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109/112 observados em ambos os camundongos do tipo selvagem (wt) e G6PC -/-, embora os efeitos na massa do figado e nos triglicerideos do figado tenham sido mais pronunciados nos camundongos G6PC -/- do que no wt. Os camundongos tratados com o Composto 2 mostraram triglicerideos no soro um pouco melhorados em comparação com os controles tratados com veiculo, tanto no G6PC -/- como nos antecedentes wt (Figura 19) . Os camundongos G6PC -/- tratados com o Composto 2 apresentaram niveis de glicogênio no figado um pouco aumentados em relação aos controles tratados com veiculo, enquanto os camundongos wt tratados com o Composto 2 mostraram niveis de glicogênio no figado significativamente reduzidos em relação aos controles tratados com veiculo (Figura 18) . O teor médio de triglicerideos no figado foi reduzido em mais de 60% nos animais tratados com o Composto 2 em relação aos animais de controle tratados com veiculo, enquanto o peso médio do figado foi reduzido em mais de 30% versus os controles. É importante ressaltar que o peso médio do figado como porcentagem do peso corporal total também diminuiu em aproximadamente 20% nos animais tratados versus animais de controle. Além disso, o tratamento com o Composto 2 levou a reduções estatisticamente significativas nos principais marcadores metabólicos de GSD Ia.

Exemplo 13:

[00128] O objetivo deste estudo foi determinar a

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110/112 capacidade do Composto 2, uma pequena molécula pró-fármaco de um potente agonista do receptor beta do hormônio tireoidiano (TBR), para reduzir a esteatose hepática e outros distúrbios metabólicos no modelo de camundongos knockout (G6pc -/-) de subunidade catalítica da glicose-6fosfatase da doença de armazenamento de glicogênio tipo Ia (GSD Ia).

[00129] Os camundongos foram tratados com o Composto 2 ou com veiculo, utilizando 4 grupos de 6 a 7 camundongos: camundongos G6pc -/- recebendo o Composto 2, camundongos G6pc -/- que receberam o veiculo, camundongos wt que receberam o Composto 2 e camundongos wt que receberam o veiculo . A injeção diária de 0,1 a 0,2 mL de dextrose a 10% por via subcutânea foi iniciada aos 3 dias de idade para todos os camundongos e todos os camundongos continuaram a receber injeções diárias de dextrose ao longo do tratamento com fármaco ou veiculo. A dextrose não foi administrada no dia da coleta de tecido. Os camundongos foram tratados diariamente com o Composto 2 ou com veiculo, respectivamente, dos 5 aos 8 dias de idade. Os camundongos foram sacrificados no dia 9 e foram coletados sangue e tecidos. O jejum de glicose e triglicerideos no soro, lipidios no figado e conteúdo de glicogênio, e as vias de sinalização celular relacionados com GSD foram examinados.

[00130] A massa do corpo e a massa do rim não foram

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111/112 afetadas pelo tratamento com o composto 2 (Figuras 22 e 23) . Em comparação com controles tratados com veiculo, os triglicerideos totais no figado médios em camundongos G6pc - / - foram significativamente reduzidos em 69,0% de 13,550 mg para 4,210 mg após 4 dias de tratamento com fármaco (p < 0,0001) (Figura 24). Da mesma forma, os pesos médios do figado foram significativamente reduzidos em mais de 30%, de 393,55 mg para 253, 11 mg nas coortes G6pc -/tratadas versus controle (p < 0,05) (Figura 25). O tratamento com fármacos também produziu uma diminuição na concentração média de triglicerideos no soro em 54,0% em camundongos G6pc -/-, de 729,59 mg/dL para 336,58 mg/dL. Sob os parâmetros de dosagem escolhidos, não houve alterações significativas na concentração de glicogênio no figado, concentração de glicose no soro ou concentração de triglicerideos no soro (Figuras 26 a 28) . Estes dados sugerem que o Composto 2 reduz a esteatose hepática no modelo de camundongo G6pc -/- de GSD Ia.

[00131] As modalidades acima descritas foram fornecidas a titulo de exemplo, e os métodos e células aqui descritos não estão limitados a estes exemplos. Variações e modificações múltiplas das modalidades divulgadas ocorrerão, na medida em que não sejam mutuamente exclusivas, para as pessoas versadas na técnica, por consideração da descrição anterior. Adicionalmente, outras

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112/112 combinações, omissões, substituições e modificações serão evidentes para a pessoa versada na técnica, tendo em vista a presente descrição. Consequentemente, os métodos e composições aqui divulgados não se destinam a ser limitados pelas modalidades divulgadas, mas devem ser definidos por referência às reivindicações anexas. As pessoas versadas na técnica reconhecerão, ou serão capazes de determinar utilizando não mais do que experimentação de rotina, muitos equivalentes às modalidades especificas dos métodos e células aqui descritos. Tais equivalentes se destinam a ser englobados pelas seguintes reivindicações.

Claims (16)

1. REIVINDICAÇÕES

   1. Método de tratamento de uma doença de armazenamento de glicogênio ou um sintoma da mesma, caracterizado pelo fato de compreender administrar a um indivíduo com necessidade do mesmo pelo menos um composto de Fórmula I:

   

   ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, em

   G é selecionado do grupo que consiste em —0—, —S—, —S(=0)-, —S (=0) ₂—, -Se-, —CH₂—, —CF₂—, -CHF-, -C(0)-,

   -CH(OH)-, - CH(alquila C₄-C₄)-, -CH (alcoxi C₄-C₄)-,

   -C(=CH₂)-, -NH- e -N (alquila C₄-C₄) -;

   T é selecionado do grupo que consiste em -(CR^a2)k— , -CR^b=CR^b— (CR^a2) _n-, - (CR^a2) n-CR^b=CR^b-, - (CR^a2)-CR^b=CR^b-(CR^a ₂)-,

   -O(CR^b2) (CR^a2)_n-, -S (CR^b2) (CR^a2)_n-, N (R^c) (CR^b2) (CR^a2) _n-, N (R^b) C (0) (CR^a2)n, -C (0) (CR^a2)_m—, - (CR^a2) mC (0), - (CR^a2)C(O) (CR^a2)n, - (CR^a2)nC (0) (CR^a ₂)e -C (O)NH (CR^b2) (CR^a2)_P-;

   k é um número inteiro de 1 a 4;

   m é um número inteiro de 0 a 3;

   n é um número inteiro de 0 a 2;

   p é um número inteiro de 0 a 1;

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2. 2/13 cada R^a é independentemente selecionado do grupo que consiste em hidrogênio, alquila C1-C4 opcionalmente substituída, halogênio, -OH, -O-alquila C1-C4 opcionalmente substituída, -OCF3, -S-alquila C1-C4 opcionalmente substituída, -NR^bR^c, alquenila C2-C4 opcionalmente substituída e alquinila C2-C4 opcionalmente substituída; com a condição de que quando um R^a está ligado a C através de um átomo de 0, S ou N, então o outro R^a ligado ao mesmo C é um hidrogênio, ou ligado através de um átomo de carbono;

   cada R^b é independentemente selecionado do grupo que consiste em hidrogênio e alquila C1-C4 opcionalmente substituída;

   cada R^c é independentemente selecionado do grupo que consiste em hidrogênio e alquila C1-C4 opcionalmente substituída, -C (0)-alquila C1-C4 opcionalmente substituída e -C(O)H;

   R¹ e R² são, cada um, independentemente selecionados do grupo que consiste em halogênio, alquila C1-C4 opcionalmente substituída, -S-alquila C1-C3 opcionalmente substituída, alquenila C2-C4 opcionalmente substituída, alquinila C2-C4 opcionalmente substituída, -CF3, -OCF3, -O-alquila C1-C3 opcionalmente substituída e ciano;

   R⁶, R⁷, R⁸ e R⁹ são, cada um, independentemente selecionados do grupo que consiste em hidrogênio,

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3. 3/13 halogênio, alquila C1-C4 opcionalmente substituída, -S-alquila C1-C3 opcionalmente substituída, alquenila C2-C4 opcionalmente substituída, alquinila C2-C4 opcionalmente substituída, -CF3, -OCF3, -O-alquila C1-C3 opcionalmente substituída e ciano; ou R⁶ e T são tomados em conjunto, juntamente com os átomos de carbono aos quais estão ligados, para formar um anel de 5 a 6 átomos, incluindo 0 a 2 heteroátomos, selecionados independentemente de —NR¹—, —0— e —S—, com a condição de que são 2 heteroátomos no anel e ambos os heteroátomos são diferentes de nitrogênio, então ambos os heteroátomos têm que ser separados por pelo menos um átomo de carbono; e X está ligado a este anel por uma ligação direta a um carbono do anel, ou por - (CR^a2) - ou -C (0) - ligado a um anel de carbono ou a um nitrogênio do anel;

   R¹ é selecionado do grupo que consiste em hidrogênio, -C (0)-alquila C1-C4, alquila C1-C4 e arila C1-C4;

   R³ e R⁴ são independentemente selecionados do grupo que consiste em hidrogênio, halogênio, -CF3, -OCF3, ciano, alquila C1-C12 opcionalmente substituída, alquenila C2-C12 opcionalmente substituída, alquinila C2-C12 opcionalmente substituída, -SR^d, -S(=O)R^e, -S(=O)2R^e, -S (=0) 2NR^fR^g,

   -C(O)OR^h, -C(O)R^e, -N (R^b) C (0) NR^fR^g, -N (R^b) S (=0) 2R^e, -N (R^b) S (=0) 2NR^fR^g e -NR^fR^g;

   cada R^d é selecionado do grupo que consiste em alquila

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4. 4/13

   Ci-Ci2 opcionalmente substituída, alquenila C2-C12 opcionalmente substituída, alquinila C2-C12 opcionalmente substituída, - (CR^b2) n-arila opcionalmente substituída,

   - (CR^b2) n-cicloalquila opcionalmente substituída, -(CR^b2)_nheterocicloalquila opcionalmente substituída e -C(O)NR^fR^g;

   cada R^e é selecionado do grupo que consiste em alquila C1-C12 opcionalmente substituída, alquenila C2-C12 opcionalmente substituída, alquinila C2-C12 opcionalmente substituída, - (CR^a2) n-arila opcionalmente substituída,

   - (CR^a2) n-cicloalquila opcionalmente substituída e, -(CR_a2)_nheterocicloalquila opcionalmente substituída;

   R^f e R^g são cada um independentemente selecionados do grupo que consiste em hidrogênio, alquila C1-C12 opcionalmente substituída, alquenila C2-C12 opcionalmente substituída, alquinila C2-C12 opcionalmente substituída,

   - (CR^b2) n-arila opcionalmente substituída, -(CR^b2)ncicloalquila opcionalmente substituída, e -(CR^b2)nheterocicloalquila opcionalmente substituída, ou R^f e R^g podem em conjunto formar um anel heterocíclico opcionalmente substituído, o qual pode conter um segundo grupo hetero selecionado do grupo que consiste em 0, NR^C e S, em que o referido anel heterocíclico opcionalmente substituído pode ser substituído com 0 a 4 substituintes selecionados do grupo que consiste em alquila C1-C4 opcionalmente substituída, -0R^b, oxo, ciano, -CF3, fenila

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5. 5/13 opcionalmente substituída, e -C(O)OR^h;

   cada R^h é selecionado do grupo que consiste em alquila C1-C12 opcionalmente substituída, alquenila C2-C12 opcionalmente substituída, alquinila C2-C12 opcionalmente substituída, - (CR^b2) n-arila opcionalmente substituída, - (CR^b2) n-cicloalquila opcionalmente substituída e, -(CR^b2)_nheterocicloalquila opcionalmente substituída;

   R⁵ é selecionado do grupo que consiste em -OH, alquila OCi-Cs opcionalmente substituída, -OC(O)R^e, -OC(O)OR^h, -F, -NHC(O)R^e, -NHS(=O)R^e, -NHS(=O)₂R^e, -NHC (=S) NH (R^h) e -NHC (0) NH (R^h) ;

   X é P (0) YR¹¹Y 'R¹¹;

   Y e Y' são, cada um, independentemente selecionados do grupo que consiste em -0— e —NR^V—; quando Y e Y' são -0-, R¹¹ ligado a -0- é independentemente selecionado do grupo que consiste em -H, alquila, arila opcionalmente substituída, heterocicloalquila opcionalmente substituída, CH2-heterocicloalquila opcionalmente substituída, em que a fração ciclica contém um carbonato ou tiocarbonato, alquilarila opcionalmente substituída, -C (R^z) 2OC (0) NR^Z2, -NR^Z-C (0)-R^y, -C (R^z) 2-OC (0) R^y, -C (R^z) 2-0-c (0) ORy,

   -C (R^z) 2OC (0) SR^y, -alquil-S-C (0) R^y, -alquil-S-alquil-hidroxi e -alquil-S-S-S-alquil-hidroxi;

   quando Y e Y^r são —NR^V—, então R¹¹ ligado a —NR^V— é selecionado independentemente do grupo que consiste em —H,

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6. 6/13

   - [C (R^z) 2] q-COOR^Y, -C (R^x) 2COOR^Y, - [C (R^z) 2] _q-C (0) SR^y e

   -cicloalquileno-C00R^y;

   quando Y é -0- e Y' é NR^V, então, R¹¹ ligado a -0- é independentemente selecionado do grupo consistindo em -H, alquila, arila opcionalmente substituída, heterocicloalquila opcionalmente substituída, heterocicloalquila-CH2 opcionalmente substituída em que a fração cíclica contém um carbonato ou tiocarbonato, alquil arila opcionalmente substituída, -C (R^z) 2OC (0) NR^Z2, -NR^Z-C (0)-R^y, -C (R^z) 2-OC (0) R^y, -C (R^z) 2-0-C (0) 0R^y,

   -C (R^z) 20C (0) SR^y, -alquil-S-C (0) R^y, -alquil-S-S-alquilhidroxi e -alquil-S-S-S-alquil-hidroxi; e R¹¹ ligado a —NR^V— é selecionado independentemente do grupo que consiste em H, - [C (R^z) 2] q-COOR^y, -C (R^x) 2C00R^y, - [C (R^z) 2] _q-C (0) SR^y e

   -cicloalquileno-COOR^y;

   ou quando Y e Y' são independentemente selecionados de -0- e NR^V, então, juntos R¹¹ e R¹¹ são -alquil-S-S-alquilpara formar um grupo cíclico, ou juntos R¹¹ e R¹¹ são o grupo:

   

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7. 7/13 em que:

   V, W e W’ são independentemente selecionados do grupo que consiste em hidrogênio, alquila opcionalmente substituída, aralquila opcionalmente substituída, heterocicloalquila, arila, arila substituída, heteroarila, heteroarila substituída, 1-alquenila opcionalmente substituída e 1-alquinila opcionalmente substituída;

   ou juntos V e Z estão ligados através de 3 a 5 átomos adicionais para formar um grupo cíclico contendo 5 a 7 átomos, em que 0 a 1 átomos são heteroátomos e os átomos restantes são carbono, substituídos com hidroxila, aciloxila, alquiltiocarboniloxi, alcoxicarboniloxi, ou ariloxicarboniloxi ligado a um átomo de carbono que possui três átomos de ambos os grupos Y ligados ao fósforo;

   ou juntos V e Z estão ligados através de 3 a 5 átomos adicionais para formar um grupo cíclico, em que 0 a 1 átomos são heteroátomos e os átomos restantes são carbono, que é fundido a um grupo arila na posição beta e gama para o Y ligado ao fósforo;

   ou juntos V e W estão ligados através de 3 átomos de carbono adicionais para formar um grupo cíclico opcionalmente substituído contendo 6 átomos de carbono e substituído com um substituinte selecionado do grupo que consiste em hidroxi, aciloxi, alcoxicarboniloxi, alquiltiocarboniloxi e ariloxicarboniloxi, ligado a um dos

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8. 8/13 referidos átomos de carbono que são três átomos de um Y ligado ao fósforo;

   ou juntos Z e W estão ligados através de 3 a 5 átomos adicionais para formar um grupo ciclico, em que 0 a 1 átomos são heteroátomos e os átomos restantes são carbono e

   V deve ser arila, arila substituída, heteroarila ou heteroarila substituída;

   ou juntos W e W’ estão ligados através de 2 a 5 átomos adicionais para formar um grupo ciclico, em que 0 a 2 átomos são heteroátomos e os átomos restantes são carbono e

   V deve ser arila, arila substituída, heteroarila ou heteroarila substituída;

   Z é selecionado a partir do grupo que consiste em -CHR^ZOH, -CHR^ZOC (0) R^y, -CHR^ZOC (S) R^y, -CHR^ZOC (S) 0R^y,

   -CHR^ZOC (0) SR^y, -CHR^zOCO2R^y, -0R^z, -SR^Z, -CHR^ZN3, -CH₂-arila, -CH (aril) OH, -CH (CH₂CR^Z2) OH, -CH (C=CR^Z) OH, -R^z, -NR^Z2, -OCOR^y, -OCO2R^y, -SCOR^Y, -SCO2R^y, - NHCOR^Z, -NHCO2R^y, CH2NHarila, -(CH₂)_q-OR^z e -(CH₂)_q-SR^z;

   q é um número inteiro 2 ou 3;

   cada R^z é selecionado do grupo que consiste em R^y e -H;

   cada R^y é selecionado do grupo que consiste em alquila, arila, heterocicloalquila e aralquila;

   cada R^x é selecionado independentemente do grupo que consiste em H e alquila, ou juntos R^x e R^x formam um grupo

   Petição 870190047112, de 20/05/2019, pág. 45/53
9. 9/13 alquila ciclico; e cada R^v é selecionado do grupo que consiste em -H, alquila inferior, aciloxialquila, alcoxicarboniloxialquila e acila inferior.

   2. Método, de acordo com a reivindicação 1, caracterizado pelo fato de que o composto a ser administrado compreende um ou mais dos compostos que possuem estruturas selecionadas do grupo que consiste em:

   

   

   

   

   O ou sais farmaceuticamente aceitáveis dos mesmos.

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10. 10/13

    3. Método, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 ou 2, caracterizado pelo fato de que a doença de armazenamento de glicogênio compreende uma ou mais das doenças de armazenamento de glicogênio tipos 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11 ou 12, aglicogenoses, doença de Pompe, doença de Cori, doença de Forbes, dextrinose limite, doença enzimática desramifiçada, doença de Andersen, deficiência de glicogênio fosforilase, deficiência de ramificação, amilopectinose, deficiência de enzima ramificadora de glicogênio, doença de McArdle, doença de Hers, doença de Tarui, figado autossômico e deficiência de fosforilase quinase muscular, deficiência de fosforilase quinase hepática autossômica, deficiência de fosforilase quinase hepática ligada a X, GSD X, síndrome de FanconiBickel ou deficiência de aldolase A.

    4. Método, de acordo com qualquer uma das reivindicações de 1 a 3, caracterizado pelo fato de que a administração do referido composto resulta na melhoria de um defeito de armazenamento de glicogênio.

    5. Método, de acordo com qualquer uma das reivindicações de 1 a 4, caracterizado pelo fato de que a administração do referido composto conduz a uma redução nos niveis de lipidio sérico ou de colesterol sérico.

    6. Método, de acordo com qualquer uma das reivindicações de 1 a 4, caracterizado pelo fato de que a

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11. 11/13 administração do referido composto conduz à melhoria da esteatose hepática, hipercolesterolemia ou inflamação hepática associada a uma doença de armazenamento de glicogênio.

    7. Método, de acordo com qualquer uma das reivindicações de 1 a 4, caracterizado pelo fato de que a referida doença de armazenamento de glicogênio está associada a cardiomegalia, hepatomegalia, esteatose hepática, hiperlipidemia, hipercolesterolemia, ALT aumentada, AST aumentada, triglicerideos séricos aumentados, fibrose hepática, cirrose, adenoma hepatocelular ou carcinoma hepatocelular.

    8. Método, de acordo com qualquer uma das reivindicações de 1 a 7, caracterizado pelo fato de compreender adicionalmente a administração de um segundo agente terapêutico.

    9. Método, de acordo com a reivindicação 8, caracterizado pelo fato de que o segundo agente terapêutico é selecionado do grupo que consiste em um amido, um açúcar, um aminoácido, um peptideo, uma enzima e uma terapia gênica, ou qualquer combinação dos mesmos.

    10. Método, de acordo com qualquer uma das reivindicações 8 ou 9, caracterizado pelo fato de que o segundo agente terapêutico é selecionado do grupo que consiste em amido de milho, amido de batata, amido de

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12. 12/13 trigo, amido vegetal e mandioca, ou qualquer combinação dos mesmos.

    11. Método, de acordo com qualquer uma das reivindicações 8 ou 9, caracterizado pelo fato de que o segundo agente terapêutico compreende glicose, galactose, frutose, sacarose, maltose, lactose, arabinose ou outro açúcar, ou qualquer combinação dos mesmos.

    12. Método, de acordo com qualquer uma das reivindicações 8 ou 9, caracterizado pelo fato de que o segundo agente terapêutico é selecionado do grupo que consiste em alglicosidase alfa, uma glicose-6-fosfatase, uma enzima desramificante, uma glicogênio sintase, uma translocase de glicose-6-fosfatase, uma translocase de fosfatase, uma alfa-l-4-glicosidase, uma amilo-1-6glicosidase, uma amilo-1,4-a-l,6-transglicosidase, uma glicogênio fosforilase, uma fosfofrutoquinase, um AMP ciclico-3',5' dependente de quinase, um transportador de glicose do tipo 2, e uma aldolase A, ou qualquer combinação dos mesmos.
13. 13. Método, de acordo com qualquer uma das reivindicações 8 ou 9, caracterizado pelo fato de que o segundo agente terapêutico é selecionado do grupo que consiste em uma insulina, um peptideo semelhante à insulina, um glucagon e um peptideo do tipo glucagon ou qualquer combinação dos mesmos.

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    13/13
14. 14. Método, de acordo com qualquer uma das reivindicações de 1 a 13, caracterizado pelo fato de que o referido composto é administrado em associação com um transplante de figado, rim ou medula óssea.
15. 15. Método, de acordo com qualquer uma das reivindicações de 1 a 14, caracterizado pelo fato de que a referida doença de armazenamento de glicogênio é GSD-Ia.
16. 16. Método, de acordo com qualquer uma das reivindicações de 1 a 14, caracterizado pelo fato de que a administração do referido composto conduz a reduções na massa corporal, massa do figado, massa do figado em percentagem da massa corporal ou niveis de triglicerideos no figado.