BR112017024461B1 - Usos de nuc-1031 para o tratamento de câncer - Google Patents

Abstract

USOS DE NUC-1031 E MÉTODO PARA DETERMINAR SE UM PACIENTE COM CÂNCER OU UMA CONDIÇÃO PRÉ-CANCEROSA SE BENEFICIARÁ DE PREVENÇÃO OU TRATAMENTO DE CÂNCER COM O MESMO. A invenção fornece NUC-1031 (gemcitabina- [fenilbenzóxi-L-alaninil)]-fosfato), um derivado ProTide de gemcitabina, para uso no alvejamento de células tronco cancerosas. Esse alvejamento das células tronco cancerosas pode ser empregado na prevenção ou tratamento do câncer. A invenção também fornece NUC-1031 para uso no tratamento de câncer recidivo ou refratário em um paciente humano. Sem estar ligado a qualquer hipótese, acredita- se que a capacidade de NUC-1031 de alvejar células tronco cancerosas contribui para sua utilidade no tratamento de cânceres recidivos ou refratários.

Description

CAMPO DA INVENÇÃO

[0001] A invenção se refere a usos médicos e métodos para alvejar células-tronco tumorais, particularmente na prevenção ou tratamento de câncer. A presente invenção se refere também a usos médicos e métodos para o tratamento de câncer em recidiva ou refratário em pacientes humanos. A invenção fornece métodos de seleção de pacientes que se beneficiarão da prevenção ou tratamento de câncer através dos usos médicos ou métodos de tratamento da invenção.

INTRODUÇÃO

[0002] A existência putativa de uma célula-tronco tumoral tem sido sugerida em muitos tipos de câncer humano, incluindo leucemias e tumores sólidos. A hipótese das células-tronco tumorais considera que apenas uma pequena subpopulação de células tumorais é responsável pela formação e manutenção da maior parte do tumor. O surgimento deste conceito pode ser retomado ao trabalho de Lapidot et al. (1994), que mostrou evidências de que apenas uma pequena porcentagem de células de leucemia mieloide aguda tinha a capacidade de iniciar a leucemia em camundongos. Demonstrouse que estas células expressam marcadores similares na superfície celular (CD34+/CD38-) para células-tronco hematopoiéticas normais, o que implica que uma organização hierárquica similar pode ocorrer em tumores. Subsequentemente, células-tronco tumorais foram identificadas em uma grande variedade de tumores sólidos, incluindo câncer de mama, pulmão, cólon, próstata, ovário, pele e pâncreas.

[0003] As abordagens convencionais contra o câncer são dirigidas predominantemente às populações de tumores em massa. Tais estratégias têm, frequentemente, limitado a eficácia em virtude da resistência aos fármacos e/ou resistência à radiação ionizante intrínseca ou adquirida, de modo que a recidiva e a emergência de resistência a fármacos são características comuns de muitos cânceres. Os mecanismos de resistência terapêutica incluem aumento do reconhecimento e reparação do dano ao DNA induzido pela terapia, controle alterado do ponto de verificação do ciclo celular, comprometimento do funcionamento das vias apoptóticas e redução do acúmulo de fármacos como um resultado da expressão aumentada de transportadores ABC que efluem dos fármacos. Emergiram evidências de que as células-tronco tumorais aumentam a resistência à quimioterapia e radioterapia e, muitas vezes, são enriquecidas em pacientes que sofrem uma recidiva. Células-tronco tumorais quimiorresistentes evidentes foram reportadas em leucemias humanas, melanoma maligno e em vários tumores sólidos, incluindo câncer de mama, pancreático e colorretal.

[0004] Foi demonstrado que os fenótipos e funções específicas das células-tronco tumorais contribuem para a tumorigenicidade, progressão do câncer e resistência terapêutica. A persistência de células-tronco tumorais também pode contribuir para a falha do tratamento. Portanto, as células-tronco tumorais representam alvos novos e traducionalmente relevantes para terapia contra o câncer.

SUMÁRIO DA INVENÇÃO

[0005] Em um primeiro aspecto, a presente invenção fornece NUC-1031 para uso em alvejamento de células-tronco tumorais.

[0006] Em um segundo aspecto, a invenção fornece o uso de NUC-1031 na fabricação de um medicamento para alvejamento de células-tronco tumorais.

[0007] Em um terceiro aspecto, a invenção fornece um método de alvejamento de células-tronco tumorais, o método compreendendo fornecer a uma população de células-tronco tumorais uma quantidade de NUC-1031 suficiente para alvejar tais células-tronco tumorais.

[0008] O alvejamento das células-tronco tumorais citadas na presente invenção, tal como no primeiro, segundo ou terceiro aspectos da invenção, pode ser empregado na prevenção ou tratamento de câncer. Em tais concretizações do terceiro aspecto da invenção, a população de células-tronco tumorais pode estar em um câncer ou condição pré-tumoral em um paciente que precisa de tal alvejamento e o método pode compreender a administração de uma quantidade terapeuticamente eficaz de NUC-1031 ao paciente.

[0009] Em um quarto aspecto, a invenção fornece NUC- 1031 para uso como um medicamento para células-tronco anticâncer. Este uso de NUC-1031 também pode ser empregado na prevenção ou tratamento de câncer.

[0010] Em um quinto aspecto, a invenção fornece um método para determinar se um paciente com câncer ou uma condição pré-tumoral se beneficiará de prevenção ou tratamento de câncer com NUC-1031, o método compreendendo: ensaiar uma amostra biológica representativa do câncer ou uma condição pré-tumoral no paciente quanto à presença de CSCs; em que a presença de CSCs na amostra biológica indica que o paciente se beneficiará do tratamento com NUC-1031.

[0011] Em um sexto aspecto, a invenção fornece um método para determinar um regime de tratamento adequado para um paciente com câncer ou uma condição pré-tumoral, o método compreendendo: ensaiar uma amostra biológica representativa do câncer ou uma condição pré-tumoral no paciente quanto à presença de CSCs; em que a presença de CSCs na amostra biológica indica que um regime de tratamento adequado compreenderá o tratamento do paciente com NUC-1031.

[0012] Em um sétimo aspecto, a invenção fornece NUC- 1031 para uso na prevenção ou tratamento de câncer em um paciente selecionado para tal tratamento através de um método que compreende: ensaiar uma amostra biológica representativa do câncer ou uma condição pré-tumoral no paciente quanto à presença de CSCs; em que a presença de CSCs na amostra biológica indica que o paciente é adequado para o tratamento com NUC-1031.

[0013] Os métodos do quinto, sexto ou sétimo aspectos da invenção podem ainda compreender uma etapa de prevenir ou tratar o câncer ou condição pré-tumoral usando NUC-1031.

[0014] Em concretizações adequadas do quinto, sexto ou sétimo aspectos da invenção, o câncer é câncer recidivante ou refratário. NUC-1031 pode ser usado para o tratamento de um câncer recidivante ou refratário.

[0015] Em um oitavo aspecto, a presente invenção fornece NUC-1031 para uso no tratamento de câncer refratário em um paciente humano.

[0016] Em um nono aspecto, a invenção fornece o uso de NUC-1031 na fabricação de um medicamento para o tratamento de câncer recidivante ou refratário em um paciente humano.

[0017] Em um décimo aspecto, a invenção fornece um método de tratamento de câncer recidivante ou refratário em um paciente humano, o método compreendendo fornecer uma quantidade terapeuticamente eficaz de NUC-1031 a um paciente que precisa de tal tratamento.

[0018] Em um décimo primeiro aspecto, a invenção fornece NUC-1031 para uso no tratamento de câncer, em que NUC-1031 é para uso em uma dose entre aproximadamente 500 mg/m2 e 1000 mg/m2 por semana em pelo menos um ciclo inicial de tratamento e, então, para uso em uma dose semanal menor em pelo menos um ciclo adicional de tratamento. O câncer pode ser um câncer recidivante ou refratário.

[0019] Os sete primeiros aspectos da invenção se baseiam na descoberta de que o NUC-1031 é capaz de reduzir preferencialmente os números de células-tronco tumorais (CSCs). Esta descoberta é surpreendente pelo fato de que as CSCs são conhecidas por serem resistentes a muitos agentes quimioterapêuticos e não houve sugestão de que NUC-1031 ou a gencitabina, o composto pró-fármaco primário a partir do qual o NUC-1031 é derivado, fossem capazes de alvejar CSCs. Assim, a descoberta de que o NUC-1031 é capaz de alvejar CSCs e, assim, reduzir seus números, uma descoberta que os inventores confirmaram, é aplicável em uma ampla variedade de cânceres, representa uma descoberta surpreendente que permite uma série de novas aplicações terapêuticas do NUC-1031.

[0020] Os oitavo a décimo aspectos da invenção se baseiam na descoberta surpreendente de que o NUC-1031 é capaz de tratar efetivamente cânceres recidivantes ou refratários em pacientes humanos. Estudos realizados pelos inventores mostraram que a administração de NUC-1031 a pacientes com muitas formas diferentes de câncer recidivante ou refratário é capaz de constituir um tratamento eficaz do câncer. Em particular, tal administração é capaz de provocar uma redução no tamanho do tumor e/ou uma redução em biomarcadores clinicamente relevantes que estão associados a um prognóstico mais favorável. Além disso, o tratamento com NUC-1031 é capaz de manter uma redução no tamanho dos tumores em pacientes com câncer recidivante ou refratário. Consequentemente, o NUC-1031 é capaz de alcançar uma Taxa de Controle de Doença (DCR) elevada e durável em pacientes com câncer recidivante ou refratário.

[0021] Na verdade, sem desejar estar preso por qualquer hipótese, os inventores acreditam que a capacidade do NUC-1031 de mobilizar CSCs contribui para a utilidade terapêutica do NUC-1031 no tratamento de câncer recidivante ou refratário.

[0022] Com exceção de onde o contexto requer de outra forma, referências dentro da presente descrição a um "uso" de NUC-1031 de acordo com a invenção podem ser tomadas como se aplicando a um uso de NUC-1031 de acordo com qualquer um do primeiro, segundo, quarto, sétimo, oitavo, nono ou décimo primeiro aspectos da invenção. Da mesma forma, referências a "métodos" da invenção usando NUC-1031 devem ser tomadas como se aplicando a métodos de qualquer um do terceiro, quinto, sexto ou décimo aspectos da invenção.

[0023] A capacidade do NUC-1031 de mobilizar CSCs fornece novas terapias alvejadas contra as células tumorais que são consideradas mais difíceis de tratar e que são consideradas como desempenhando um papel importante na resistência que limita a eficácia de muitas terapias existentes para câncer. Esta habilidade também constitui uma forma de alvejar células que se acredita estarem associadas ao desenvolvimento, progressão, recorrência e propagação de cânceres. Consequentemente, será reconhecido que esta atividade anti-CSCs do NUC-1031 produz benefícios em contextos nos quais terapias novas e efetivas têm sido buscadas há muito tempo.

DESCRIÇÃO DOS DESENHOS

[0024] A Figura 1 mostra a estrutura da gencitabina.

[0025] A Figura 2 mostra gráficos que comparam os efeitos citotóxicos de NUC-1031 e gencitabina em células leucêmicas primárias e que ilustram o valor de DL50 significativamente menor calculado em relação ao NUC- 1031.

[0026] A Figura 3 mostra gráficos que comparam os efeitos citotóxicos de NUC-1031 e gencitabina em células- tronco leucêmicas e ilustram que o tratamento com NUC-1031 esgota preferencialmente células CD34+/CD123+ das populações de células tratadas.

[0027] A Figura 4 é um gráfico que ilustra que NUC- 1031 demonstrou reduções significativas na viabilidade de células-tronco leucêmicas CD34+/CD123+ em concentrações de 1 μM e 2,5 μM comparado à gencitabina.

[0028] A Figura 5 apresenta um gráfico e uma tabela que comparam os valores de DL50 gerados usando isômeros Rp- e Sp- isolados de NUC-1031, uma mistura de isômeros de NUC- 1031 ou gencitabina em culturas de células-tronco leucêmicas KG1a.

[0029] A Figura 6 mostra gráficos que demonstram a capacidade do NUC-1031 de mobilizar CSCs leucêmicas comparado com a atividade citotóxica da gencitabina.

DESCRIÇÃO DETALHADA DA INVENÇÃO

[0030] As definições a seguir podem ser úteis na compreensão da invenção.

"NUC-1031"

[0031] O composto gencitabina-[fenil-benzóxi-L- alaninil)]-fosfato (também conhecido como NUC-1031 ou pelo nome comercial Acelarin) é um derivado 'ProTide' do agente quimioterapêutico gencitabina. Parece que ele evita muitos dos mecanismos de resistência inerente e adquirida que limitam a utilidade da gencitabina (vide documento WO2005/012327 e 'Application of ProTide Technology to Gemcitabine: A Successful Approach to Overcome the Key Cancer Resistance Mechanisms Leads to a New Agent (NUC-1031) in Clinical Development'; Slusarczyk et al.; J. Med. Chem.; 2014, 57, 1531-1542). Conceitualmente, ele é um pró-fármaco de monofosfato de gencitabina, embora isto não reflita necessariamente seu mecanismo de ação contra células-tronco tumorais.

[0032] O NUC-1031 existe em duas formas diastereoméricas, epiméricas no centro de fosfato: gencitabina-[fenil-benzóxi-L-alaninil)]-(S)-fosfato 1 e gencitabina-[fenil-benzóxi-L-alaninil)]-(R)-fosfato 2:

[0033] Assim, o NUC-1031 usado na invenção pode ser gencitabina-[fenil-benzóxi-L-alaninil)]-(S)-fosfato diastereomericamente puro ou substancialmente puro diastereomericamente, pode ser gencitabina-[fenil-benzóxi- L-alaninil)]-(R)-fosfato diastereomericamente puro ou substancialmente puro diastereomericamente ou pode ser uma mistura dos dois isômeros.

[0034] "Substancialmente puro diastereomericamente" é definido, para fins da presente invenção, como uma pureza diastereomérica maior do que cerca de 90%. Isto pode significar uma pureza diastereoisomérica maior do que cerca de 95%, maior do que cerca de 98%, maior do que cerca de 99% ou mesmo maior do que cerca de 99,5%. Os diastereômeros podem ser separados por meio de cromatografia (por exemplo, HPLC, opcionalmente usando uma coluna quiral) ou podem ser separados por meio de cristalização. Pode ser mais conveniente criar uma forma protegida da mistura diastereomérica de NUC-1031 para separar as formas protegidas dos diastereômeros de NUC-1031 (por exemplo, usando cromatografia ou cristalização) e subsequentemente remover os grupos de proteção para fornecer o NUC1031 substancialmente puro diastereomericamente. Alternativamente, os diastereômeros podem ser sintetizados na forma substancialmente pura diastereomericamente usando métodos conhecidos na técnica. Isto pode envolver etapas químicas e enzimáticas.

[0035] O NUC-1031 pode estar na forma de uma base livre ou pode estar na forma de um sal farmaceuticamente aceitável. Sais farmaceuticamente aceitáveis adequados incluem, porém sem limitações, sais de ácidos inorgânicos farmaceuticamente aceitáveis, tais como ácidos clorídrico, sulfúrico, fosfórico, nítrico, carbônico, bórico, sulfâmico e bromídrico, ou sais de ácidos orgânicos farmaceuticamente aceitáveis, tais como ácidos acético, propiônico, butírico, tartárico, maleico, hidroximaleico, fumárico, málico, cítrico, láctico, múcico, glucônico, benzoico, succínico, oxálico, fenilacético, metanossulfônico, toluenossulfônico, benzenossulfônico, salicílico, sulfanílico, aspártico, glutâmico, edético, esteárico, palmítico, oleico, láurico, pantotênico, tânico, ascórbico e valérico. Os sais de base adequados são formados a partir de bases que formam sais não tóxicos. Exemplos incluem os sais de alumínio, arginina, benzatina, cálcio, colina, dietilamina, diolamina, glicina, lisina, magnésio, meglumina, olamina, potássio, sódio, trometamina e zinco. Hemissais de ácidos e bases também podem ser formados, por exemplo, sais hemissulfato e hemicálcio.

[0036] O NUC-1031 pode existir em uma única forma cristalina ou em uma mistura de formas cristalinas ou pode ser amorfo. Assim, os compostos da invenção destinados a uso farmacêutico podem ser administrados como produtos cristalinos ou amorfos. Eles podem ser obtidos, por exemplo, como tampões sólidos, pós ou filmes por meio de métodos tais como precipitação, cristalização, liofilização, secagem por pulverização ou secagem por evaporação. Secagem em microondas ou por radiofrequência pode ser usada para esta finalidade.

"Formulações de NUC-1031"

[0037] NUC-1031, ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, pode ser usado individualmente, porém, em geral, será administrado na forma de uma composição farmacêutica na qual NUC-1031, ou sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, está em associação com um adjuvante, diluente ou carreador farmaceuticamente aceitável. Procedimentos convencionais para a seleção e preparação de formulações farmacêuticas adequadas são descritos, por exemplo, em "Pharmaceuticals - The Science of Dosage Form Designs", M. E. Aulton, Churchill Livingstone, 1988.

[0038] Dependendo do modo de administração de NUC- 1031, ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, a composição farmacêutica que é usada para administrar o NUC- 1031, ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, compreenderá, de preferência, de 0,05 a 99% em peso (por cento em peso) de NUC-1031, ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, mais preferivelmente de 0,05 a 80% em peso de NUC-1031, ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, ainda mais preferivelmente de 0,10 a 70% em peso de NUC-1031, ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo e, mais preferivelmente, de 0,10 a 50% em peso de NUC-1031, ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, todas as porcentagens sendo em peso com base na composição total.

[0039] O NUC-1031, ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, pode ser administrado por via oral. Para administração oral, o NUC-1031 pode ser misturado com um adjuvante ou um carreador, por exemplo, lactose, sacarose, sorbitol, manitol; um amido, por exemplo, amido de batata, amido de milho ou amilopectina; um derivado de celulose; um aglutinante, por exemplo, gelatina ou polivinilpirrolidona; e/ou um lubrificante, por exemplo, estearato de magnésio, estearato de cálcio, polietileno glicol, uma cera, parafina e assim por diante e depois prensado em comprimidos. Se forem necessários comprimidos revestidos, os núcleos, preparados conforme descrito acima, podem ser revestidos com uma solução de açúcar concentrada que pode conter, por exemplo, goma arábica, gelatina, talco e dióxido de titânio. Alternativamente, o comprimido pode ser revestido com um polímero adequado dissolvido em um solvente orgânico facilmente volátil.

[0040] De preferência, no entanto, o NUC-1031 é administrado por via parenteral e, em particular, por via intravenosa. Para administração parenteral (por exemplo, intravenosa), o NUC-1031, ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, pode ser administrado como uma solução aquosa ou oleosa estéril. O NUC-1031 é muito lipofílico. As formulações aquosas para administração intravenosa, em particular aquelas da base livre de NUC-1031, tipicamente, portanto, também contêm um solvente orgânico polar farmaceuticamente aceitável, por exemplo, dimetilacetamida, e um ou mais solubilizantes ou outros aditivos.

"Células-tronco Tumorais"

[0041] Células-tronco tumorais que, algumas vezes, também são referidas como "células iniciadoras de tumores", são bem conhecidas por aqueles versados na técnica. Conforme usado aqui, o termo "célula-tronco tumoral" (normalmente abreviado para CSCs na presente descrição) deve ser interpretado de acordo com seu significado amplamente aceito, que é uma célula com a capacidade de autorrenovar através de divisão assimétrica para iniciar a formação de tumor e dar origem a uma progênie de células tumorais diferentes das células-tronco mais maduras derivadas por meio de diferenciação.

[0042] As CSCs desempenham um papel importante no desenvolvimento, progressão, recorrência e propagação de cânceres. Consequentemente, a descoberta de que o NUC-1031 é capaz de alvejar CSCs e, assim, reduzir seus números, oferece possibilidades terapêuticas na prevenção ou tratamento destas atividades.

[0043] Conforme discutido em maiores detalhes em outras partes do relatório descritivo, as CSCs são encontradas em condições pré-tumorais, onde acredita-se que sua presença contribua para o desenvolvimento de tais condições em cânceres. Consequentemente, os métodos de tratamento e os usos médicos da invenção, nos quais o NUC- 1031 é usado para alvejar CSCs, podem ser usados para reduzir os números de CSCs em condições pré-tumorais (como síndrome mielodisplásica ou outras condições consideradas em outras partes do relatório descritivo) e, assim, prevenir a progressão de tais condições pré-tumorais para câncer.

[0044] Conforme mencionado acima, a divisão celular assimétrica de CSCs dá origem a células tumorais diferentes das células-tronco diferenciadas. O acúmulo de tais células tumorais diferentes das células-tronco desempenha um papel importante na progressão dos cânceres. O alvejamento de CSCs pelo NUC-1031 é capaz de reduzir os números de CSCs o que, por sua vez, reduz o número de progênies de células tumorais diferentes das células-tronco. Assim, os métodos de tratamento e usos médicos de NUC-1031 de acordo com a presente invenção são benéficos no tratamento do câncer ao prevenir a progressão do câncer. Tais concretizações são descritas em maiores detalhes em outra parte do presente relatório descritivo.

[0045] As CSCs também são capazes de atuar como um reservatório de células tumorais que podem causar a recorrência do câncer após remissão. Mesmo no caso onde a maioria das células tumorais de um paciente tenham sido removidas (por exemplo, cirurgia, radioterapia ou quimioterapia, individualmente ou em combinação), de modo que não permaneçam sinais observáveis de câncer, a presença contínua de CSCs pode nuclear a recorrência do câncer ao longo do tempo. O alvejamento de CSCs pelo NUC-1031 fornece um novo modo pelo qual os números de CSCs podem ser reduzidos e as CSCs são mortas. Consequentemente, e conforme discutido em maiores detalhes em outra parte do relatório descritivo, em concretizações adequadas, a presente invenção fornece métodos e usos médicos nos quais o NUC-1031 previne ou retarda a recorrência de câncer.

[0046] Além disso, o movimento de CSCs do local de um câncer para outro local dentro do corpo pode contribuir para a propagação do câncer, por exemplo, dando origem a metástases. Consequentemente, a capacidade do NUC-1031 de alvejar CSCs fornece novos métodos de tratamento e usos médicos na prevenção ou tratamento da propagação de câncer.

[0047] Além de suas atividades biológicas, as CSCs podem ser identificadas pela expressão de determinados marcadores característicos na superfície celular. Células- tronco tumorais identificadas em malignidades hematológicas são, tipicamente, células CD34+ enquanto que, em tumores sólidos, CD44+, CD133+ e CD90+ foram identificadas como marcadores de células-tronco tumorais. A tabela a seguir resume exemplos de fenótipos conhecidos na superfície de CSCs. Espera-se que cada uma destas formas de CSCs possa ser mobilizada usando NUC-1031 de acordo com a invenção e, portanto, métodos ou usos que empregam NUC-1031 podem ser usados na prevenção ou tratamento de cânceres associados a CSCs que expressam qualquer um destes conjuntos de marcadores.

[0048] Os dados apresentados nos Exemplos demonstram que NUC-1031 é capaz de mobilizar CSCs de linhagens de células-tronco leucêmicas, especificamente CSCs, presentes na linhagem de células de leucemia mieloide aguda KG1a. Esta linhagem de células manifesta um compartimento de tipo células-tronco com um imunofenótipo distinto (Lin- /CD34+/CD38-/CD123+), que é alvejado pelo NUC- 1031. Consequentemente, os métodos de tratamento ou os usos médicos do NUC-1031 de acordo com a presente invenção podem ser usados para prevenir ou tratar leucemia ou outros cânceres associados a CSCs que expressam estes marcadores característicos.

[0049] A presente invenção também fornece métodos e usos médicos nos quais os pacientes são selecionados para prevenção ou tratamento de câncer usando NUC-1031 de acordo com a presente invenção com base na identificação da presença de CSCs em uma amostra biológica representativa do câncer ou condição pré-tumoral do paciente. Os marcadores apresentados acima constituem exemplos adequados que podem ser usados para identificar a presença de CSCs de acordo com tais concretizações da invenção. Técnicas adequadas pelas quais a expressão destes marcadores pode ser investigada em uma amostra biológica são consideradas mais adiante no presente relatório descritivo.

"Mobilização de Células-tronco Tumorais"

[0050] A presente invenção fornece a primeira indicação de que o NUC-1031 pode ser usado para mobilizar CSCs. A capacidade do NUC-1031 de mobilizar CSCs é ilustrada no Estudo 1 apresentado nos Exemplos descritos no presente relatório descritivo.

[0051] Pode ser visto, a partir dos resultados do Estudo 1 que, quando o NUC-1031 é fornecido a populações de células tumorais que contêm CSCs, ele alveja as CSCs presentes, levando a uma redução no número total de células tumorais e na proporção de células tumorais totais que exibem marcadores fenotípicos de CSCs.

[0052] Sem desejar estar preso por qualquer hipótese, os inventores acreditam que a redução nos números de CSCs surge como um resultado da morte mobilizada das CSCs entre a população de células tumorais. Isto é, o NUC-1031 parece matar preferencialmente as CSCs comparado com a morte de células tumorais diferentes de células-tronco, causando a morte de CSCs e uma redução da proporção de CSCs entre a população total de células tumorais.

[0053] Embora os inventores acreditem que o NUC-1031 mata preferencialmente as CSCs comparado com células tumorais que não células-tronco, outros mecanismos também contribuíram para a redução da proporção de CSCs causada pelo NUC-1031 que alveja estas células.

[0054] Apenas a título de exemplo, o tratamento com NUC-1031 pode causar um aumento na diferenciação de CSCs, reduzindo, assim, os números de CSCs e também a proporção de células tumorais totais representadas por CSCs. Alternativamente, o NUC-1031 pode fazer com que as CSCs percam seu fenótipo de células-tronco, por exemplo, perdendo sua capacidade de autorrenovar, reduzindo, assim, os números de CSCs.

[0055] Referências ao alvejamento de CSCs na presente descrição devem ser interpretadas de forma correspondente. Para fins da presente descrição, o “alvejamento” de CSCs pode ser considerado como abrangendo qualquer mecanismo pelo qual o NUC-1031 reduz a proporção de CSCs presentes em uma população de células, seja in vitro ou in vivo. Em particular, o alvejamento de CSCs pode ser considerado como abrangendo a morte preferencial de CSCs comparado com outros tipos de células, particularmente comparado com células tumorais que não células-tronco.

"Prevenção ou Tratamento de Câncer"

[0056] A invenção fornece usos médicos e métodos de tratamento nos quais o NUC-1031 é usado para a prevenção ou tratamento de câncer. No contexto da presente invenção, "prevenção" de câncer deve ser considerada como relacionada às aplicações profiláticas do NUC-1031 usadas antes de desenvolvimento do câncer e com o objetivo de impedir o desenvolvimento do câncer. Por outro lado, "tratamento" de câncer é considerado quando de uso do NUC-1031 após o câncer ter ocorrido com o objetivo de melhorar o câncer ao diminuir ou interromper a proliferação de células tumorais e o crescimento tumoral. Vantajosamente, o tratamento do câncer pode causar uma redução parcial ou total no número de células tumorais e no tamanho do tumor. O tratamento efetivo do câncer pode provocar doenças que "estabilizam" ou "respondem" de acordo com as regras dos Critérios de avaliação de resposta em tumores sólidos (RECIST).

[0057] Conforme descrito em maiores detalhes abaixo, a prevenção de câncer de acordo com a presente invenção pode ser particularmente benéfica em pacientes que têm uma condição pré-tumoral que aumenta sua probabilidade de desenvolver câncer.

"Prevenção de Câncer"

[0058] A prevenção de câncer de acordo com a presente invenção pode ser realizada por meio de tratamento de uma condição pré-tumoral usando NUC-1031 de acordo com os vários aspectos ou concretizações da invenção descritas aqui.

[0059] Em particular, a prevenção de câncer, no contexto da presente invenção, pode ser alcançada por meio dos métodos ou usos médicos da invenção nos quais o NUC-1031 é fornecido a um paciente com uma condição pré-tumoral. Os métodos de tratamento ou usos médicos de acordo com esta concretização podem impedir o desenvolvimento da condição pré-tumoral tratada em câncer, constituindo, assim, uma prevenção eficaz de câncer.

[0060] Referências à prevenção de câncer no contexto da presente invenção também podem abranger outras aplicações profiláticas de NUC-1031. Por exemplo, a capacidade do NUC- 1031 de mobilizar CSCs e, assim, prevenir o desenvolvimento de câncer e/ou prevenir a progressão de câncer e/ou prevenir a recorrência de câncer e/ou prevenir a propagação de câncer.

"Condições Pré-Tumorais"

[0061] O câncer é frequentemente precedido pelo desenvolvimento de uma condição pré-tumoral que não é, em si, tumoral, mas está associada a um risco aumentado de câncer. O acúmulo de alterações genéticas ou epigenéticas pode fazer com que as células normais desenvolvam um fenótipo de CSC. Consequentemente, as CSCs também podem estar presentes em condições pré-tumorais, bem como em condições tumorais.

[0062] Acredita-se que a presença de CSCs em condições pré-tumorais contribui para o desenvolvimento destas condições em câncer. Os métodos e usos médicos da invenção podem ser usados para mobilizar CSCs presentes em condições pré-tumorais e, deste modo, tratar tais condições. Será apreciado que a descoberta nova e inesperada de que o NUC- 1031 mobiliza CSCs signifique que o tratamento de condições pré-tumorais com NUC-1031 pode ser usado para evitar que tais condições se desenvolvam em câncer. Isto representa uma maneira pela qual o NUC-1031 pode ser usado de forma médica na prevenção de câncer, conforme é considerado em outras partes do presente relatório descritivo.

[0063] Exemplos de condições pré-tumorais que podem ser tratadas de acordo com a presente invenção incluem, porém sem limitações, aquelas selecionadas a partir do grupo que consiste em: queratose actínica, esôfago de Barrett, gastrite atrófica, disqueratose congênita, disfagia siderópica, líquen plano, fibrose submucosal oral, elastose solar, displasia cervical, leucoplasia, eritroplastia, gamopatia monoclonal de significância desconhecida (MGUS), linfocitose monoclonal de células B (MBL), síndromes de mielodisplasia, bem como condições pré-tumorais do estômago, tais como gastrite atrófica, úlcera gástrica, anemia perniciosa, espasmos gástricos, pólipos gástricos e doença de Menetrier. Dentre as condições pré-tumorais do estômago listadas, gastrite atrófica, anemia perniciosa, espasmos gástricos e determinados tipos de pólipos gástricos podem ter um risco particularmente elevado de desenvolver em câncer.

[0064] As condições pré-tumorais geralmente assumem a forma de lesões que compreendem células displásicas ou hiperplásicas. Consequentemente, a presença de displasia ou hiperplasia, como uma alternativa ou além da presença de células com marcadores expressos ou fenótipos característicos de CSCs, pode ser usada na identificação de condições pré-tumorais.

[0065] A gravidade da displasia pode variar entre diferentes condições pré-tumorais ou com o desenvolvimento de uma única condição pré-tumoral ao longo do tempo. Em geral, quanto mais avançada a displasia associada a uma condição pré-tumoral, mais provável é que a condição pré- tumoral se desenvolva em câncer. A displasia é, tipicamente, classificada como leve, moderada ou grave. A displasia grave usualmente se desenvolve em câncer se não for tratada. Adequadamente, os métodos de tratamento e usos médicos da invenção que empregam NUC-1031 podem, portanto, ser usados para tratar um paciente com uma condição pré-tumoral associada à displasia grave.

[0066] Em uma concretização adequada da invenção, o NUC-1031 é usado para tratar um paciente com displasia cervical grave. A displasia cervical grave pode ser diagnosticada por meio de um teste de esfregaço. Em outra concretização da invenção, o NUC-1031 é usado para tratar displasia esofageal grave ("esôfago de Barrett"). A displasia esofageal grave pode ser diagnosticada após uma biópsia tecidual.

[0067] Recentemente foi reportado que pré-malignidades também podem ser identificadas por meio da detecção de mutações somáticas em células em indivíduos que não são conhecidos por ter câncer. Em particular, foi reportado que a hematopoiese clonal relacionada à idade é uma condição pré-maligna comum que está associada ao aumento da mortalidade em geral e aumento do risco de doença cardiometabólica. A maioria das mutações detectadas nas células sanguíneas ocorreu em três genes: DNMT3A, TET2 e ASXL1. Consequentemente, os pacientes que se beneficiarão do uso de NUC-1031 para mobilizar CSCs e, portanto, tratar uma condição pré-tumoral, podem ser identificados por meio de análise de uma amostra que inclui células sanguíneas quanto à presença de mutações genéticas indicativas de uma condição pré-tumoral em pelo menos um de: DNMT3A e/ou TET2 e/ou ASXL1.

[0068] Condições pré-tumorais que podem se beneficiar do tratamento com NUC-1031 de acordo com a invenção para mobilizar CSCs também podem ser identificadas ao determinar a presença de CSCs com referência a qualquer das técnicas com base na expressão de marcadores característicos de CSCs, ou fenótipos de CSCs, discutidas em outra parte do relatório descritivo.

"Tratamento de Câncer"

[0069] Aqueles versados na técnica apreciarão que há muitas medições pelas quais o "tratamento" de câncer pode ser avaliado. Meramente a título de exemplo, qualquer redução ou prevenção do desenvolvimento de câncer, progressão de câncer, recorrência de câncer ou propagação de câncer pode ser considerado como indicativo de um tratamento eficaz de câncer.

[0070] Em determinadas concretizações, NUC-1031 pode ser usado: para reduzir a proporção de CSCs em uma população de células tumorais; e/ou para inibir o crescimento do tumor; e/ou para reduzir a tumorigenicidade; e/ou para prevenir ou tratar um câncer primário; e/ou para prevenir ou tratar um câncer recidivante; e/ou para prevenir ou tratar um câncer metastático ou secundário; e/ou para tratar, prevenir ou inibir a metástase ou recorrência; e/ou para tratar ou prevenir o câncer refratário.

[0071] A capacidade de tratamento de câncer usando NUC-1031 para produzir uma redução no tamanho do tumor e também para manter a redução no tamanho do tumor durante/após o período em que o tratamento é administrado representa uma indicação particularmente relevante de tratamento eficaz de câncer. Conforme apresentado nos exemplos, os tratamentos ou usos médicos da invenção provaram, surpreendentemente, ser eficazes a este respeito, mesmo no tratamento de cânceres recidivantes ou refratários que eram anteriormente resistentes ao tratamento com outras terapias.

[0072] Os dados apresentados nos exemplos ilustram que o tratamento com NUC-1031 reduz a proporção de CSCs em uma população de células tumorais. Atividades biológicas ou marcadores na superfície celular característicos através dos quais CSCs podem ser identificados são descritos em outra parte no relatório descritivo. Em uma concretização adequada, o tratamento de câncer, de acordo com a presente invenção, pode dar origem a uma redução na proporção de CSCs presentes no câncer de um paciente de pelo menos 10%, pelo menos 20%, pelo menos 30% ou pelo menos 40%. Em concretizações adequadas, o tratamento de câncer de acordo com a invenção pode originar uma redução na proporção de CSCs presentes no câncer de pelo menos 50% de um paciente, pelo menos 60%, pelo menos 70% ou pelo menos 80%. Em concretizações adequadas, o tratamento de câncer de acordo com a invenção pode originar uma redução na proporção de CSCs presentes no câncer de um paciente de pelo menos 85%, pelo menos 90% ou pelo menos 95%. Na verdade, o tratamento de câncer de acordo com a invenção pode originar uma redução na proporção de CSCs presentes no câncer de um paciente de pelo menos 96%, pelo menos 97%, pelo menos 98%, pelo menos 99% ou mesmo 100% (de modo que substancialmente nenhuma CSC permaneça).

[0073] A divisão assimétrica de CSCs contribui para o crescimento de tumores. O tratamento de câncer com NUC-1031 de acordo com a presente invenção pode levar a uma inibição de crescimento do tumor de pelo menos 10%, pelo menos 20%, pelo menos 30% ou pelo menos 40%. Adequadamente, o tratamento de câncer de acordo com a invenção pode dar origem a uma inibição de crescimento do tumor de pelo menos 50%, pelo menos 60%, pelo menos 70% ou pelo menos 80%. O tratamento de câncer de acordo com a invenção pode dar origem a uma inibição de crescimento do tumor de pelo menos 85%, pelo menos 90% ou pelo menos 95% em um paciente assim tratado. Na verdade, o tratamento de câncer de acordo com a invenção pode dar origem a uma inibição de crescimento do tumor de pelo menos 96%, pelo menos 97%, pelo menos 98%, pelo menos 99% ou mesmo 100% em um câncer tratado.

[0074] O crescimento do tumor pode ser avaliado por meio de qualquer método adequado no qual a alteração no tamanho de um tumor é avaliada ao longo do tempo. Adequadamente, o tamanho de um tumor antes do tratamento de câncer pode ser comparado com o tamanho do tumor mesmo durante ou após o tratamento de câncer. São conhecidas uma série de formas pelas quais o tamanho de um tumor pode ser avaliado. Por exemplo, o tamanho de um tumor pode ser avaliado por meio de imagiologia do tumor in situ dentro de um paciente. Técnicas adequadas, tais como técnicas de imagiologia, podem permitir que o volume de um tumor seja determinado e alterações no volume do tumor sejam avaliadas.

[0075] Conforme mostrado nos resultados apresentados nos Exemplos do presente relatório descritivo, os métodos de tratamento e usos médicos de NUC-1031 da invenção são capazes não apenas de interromper o crescimento do tumor, mas são realmente capazes de provocar uma redução no volume do tumor em pacientes com câncer, incluindo pacientes com cânceres recidivantes ou refratários. Adequadamente, o tratamento de câncer de acordo com a presente invenção pode originar uma redução no volume de tumor de pelo menos 10%, pelo menos 20%, pelo menos 30% ou pelo menos 40%. Em concretizações adequadas, o tratamento de câncer de acordo com a invenção pode originar uma redução no volume de tumor de pelo menos 50%, pelo menos 60%, pelo menos 70% ou pelo menos 80%. O tratamento de câncer de acordo com a invenção pode dar origem a uma redução no volume de tumor de pelo menos 85%, pelo menos 90% ou pelo menos 95%. Na verdade, o tratamento de câncer de acordo com a invenção pode dar origem a uma redução no volume de tumor de pelo menos 96%, pelo menos 97%, pelo menos 98%, pelo menos 99% ou mesmo 100%.

[0076] Uma redução no volume do tumor do tipo descrito acima pode ser calculada com referência a um controle adequado. Por exemplo, em estudos realizados in vitro ou in vivo em modelos animais adequados, a redução no volume do tumor pode ser determinada por meio de comparação direta entre o volume de um tumor tratado com NUC-1031 e o volume de um tumor de controle (que pode ser não tratado ou pode ter recebido outro tratamento que não com NUC-1031). Será apreciado que tais modelos que requerem falta de tratamento de um tumor podem não ser eticamente aceitáveis no contexto de ensaios clínicos ou gestão terapêutica de pacientes e, neste caso, uma redução no volume do tumor pode ser avaliada ao comparar o volume de um tumor tratado com o volume do mesmo tumor antes de tratamento ou com um volume previsto que teria sido atingido pelo tumor caso o tratamento não tivesse sido administrado.

[0077] Os resultados apresentados nos exemplos demonstram que os métodos de tratamento e usos médicos de NUC-1031 da invenção são capazes de provocar uma redução em biomarcadores indicativos de câncer. A redução de tais biomarcadores fornece uma avaliação adicional pela qual o tratamento eficaz de câncer pode ser demonstrado. Exemplos adequados de tais biomarcadores podem ser selecionados com base no tipo de câncer a ser tratado: no caso de cânceres ginecológicos, CA125 representa um exemplo adequado de um biomarcador enquanto que, no caso dos cânceres pancreáticos ou biliares, CA19.9 representa um exemplo adequado de um biomarcador e, no caso dos cânceres colorretais, CEA pode ser um biomarcador adequado.

[0078] Adequadamente, o tratamento de câncer de acordo com a presente invenção pode dar origem a uma redução em biomarcadores de câncer de pelo menos 10%, pelo menos 20%, pelo menos 30% ou pelo menos 40%. Em concretizações adequadas, o tratamento de câncer de acordo com a invenção pode dar origem a uma redução em biomarcadores de câncer de pelo menos 50%, pelo menos 60%, pelo menos 70% ou pelo menos 80%. O tratamento de câncer de acordo com a invenção pode dar origem a uma redução em biomarcadores de câncer de pelo menos 85%, pelo menos 90% ou pelo menos 95%. Na verdade, o tratamento de câncer de acordo com a invenção pode dar origem a uma redução em biomarcadores de câncer de pelo menos 96%, pelo menos 97%, pelo menos 98%, pelo menos 99% ou mesmo 100%.

[0079] Os efeitos benéficos, tais como uma redução na proporção de CSCs presentes, redução no crescimento do tumor ou redução do volume do tumor ou de biomarcadores de câncer, observados no tratamento de câncer de acordo com a presente invenção podem ser mantidos durante pelo menos um mês. Adequadamente, tais efeitos benéficos podem ser mantidos durante pelo menos dois meses, pelo menos três meses, pelo menos quatro meses, pelo menos cinco meses ou pelo menos seis meses. Na verdade, tais efeitos benéficos podem ser mantidos durante pelo menos 12 meses, pelo menos 18 meses ou pelo menos 24 meses. Adequadamente, o efeito benéfico pode ser mantido durante pelo menos três anos, pelo menos quatro anos, pelo menos cinco anos, pelo menos seis anos, pelo menos sete anos, pelo menos oito anos, pelo menos nove anos ou dez anos ou mais.

[0080] Em uma concretização adequada da invenção, NUC- 1031 é usado em um método de prevenção ou tratamento de câncer ou uma condição pré-maligna ao mobilizar células- tronco tumorais. Em uma concretização adequada, a invenção fornece o uso de NUC-1031 em um método de prevenção ou tratamento de câncer ou uma condição pré-maligna, em que o método reduz a tumorigenicidade de uma ou mais células-tronco tumorais. Adequadamente, tais métodos podem impedir a progressão do câncer ou inibir o crescimento do tumor.

[0081] Quando NUC-1031 é usado em métodos ou usos médicos da presente invenção para prevenir ou tratar a progressão de um câncer, tal prevenção ou tratamento pode fazer com que a progressão do câncer seja retardada, atrasada ou completamente interrompida.

[0082] A progressão de um câncer é, tipicamente, determinada ao atribuir um estágio para o câncer. A atribuição de estágio é, normalmente, realizada ao atribuir um número de I a IV ao câncer, I sendo um câncer isolado e IV sendo um câncer que se espalhou para o limite das medidas de avaliação. As especificidades da atribuição de estágios variam entre os tipos de câncer, mas o estágio geralmente leva em conta o tamanho de um tumor, se ele invadiu órgãos adjacentes, para quantos gânglios linfáticos regionais (na proximidade) ele se espalhou (se houver) e se apareceu em locais mais distantes (sofreu metástase).

[0083] Em geral, o Estágio I está localizado em uma parte do corpo e pode ser tratado por cirurgia de ressecção cirúrgica (para tumores sólidos que são suficientemente pequenos). O Estágio II é localmente avançado e é tratável por quimioterapia, radioterapia, cirurgia ou uma combinação dos mesmos. O Estágio III também é localmente avançado e a designação de Estágio II ou Estágio III depende do tipo específico de câncer, embora o Estágio III seja geralmente aceito como sendo localmente avançado "tardio". Cânceres em Estágio IV frequentemente sofreram metástase para um segundo órgão. O tratamento de câncer usando NUC-1031 nos métodos ou usos médicos da presente invenção pode ser usado para tratar um câncer em Estágio I, II, III ou IV ao alvejar CSCs. O tratamento com NUC-1031 pode ser usado para prevenir a progressão de um câncer de um estágio para o próximo. Em uma concretização, o tratamento com NUC-1031 é usado para prevenir a progressão do Estágio I para o Estágio II. Em outra concretização, o tratamento com NUC-1031 é usado para prevenir a progressão do Estágio II para o Estágio III. Em ainda outra concretização, o tratamento com NUC-1031 é usado para prevenir a progressão do Estágio III para o Estágio IV.

[0084] A prevenção ou inibição da progressão do câncer é particularmente importante para impedir a disseminação do câncer, por exemplo, a progressão do Estágio I para o Estágio II, onde o câncer se espalha localmente, ou a progressão do Estágio III para o Estágio IV, onde o câncer sofre metástase para outros órgãos. CSCs são tumorigênicas e, portanto, acredita-se que desempenhem um papel fundamental na disseminação do câncer, tanto local como metastaticamente. Os métodos de tratamento ou usos médicos da invenção que empregam NUC-1031 podem, portanto, ser usados para prevenir a disseminação do câncer ao alvejar CSCs tumorigênicas e, assim, reduzir seu número.

"Câncer"

[0085] CSCs desempenham um papel na atividade biológica de uma ampla variedade de cânceres. Portanto, há uma grande variedade de cânceres que podem ser prevenidos ou tratados de acordo com a presente invenção.

[0086] Conforme discutido aqui em outra parte, CSCs são conhecidas por estar presentes em muitos tipos de tumor, incluindo tumores líquidos (incluindo tumores hematológicos, tais como leucemias e linfomas) e tumores sólidos (tais como tumores de mama, pulmão, cólon, próstata, ovário, pele, bexiga, vias biliares e pâncreas). Portanto, espera-se que os métodos de tratamento e usos médicos de NUC-1031 para alvejar CSCs sejam úteis na prevenção ou tratamento de tais cânceres.

[0087] Adequadamente, o NUC-1031 pode ser usado na prevenção ou tratamento de um câncer selecionado a partir do grupo que consiste em: leucemia, linfoma, mieloma múltiplo, câncer de pulmão, câncer de fígado, câncer de mama, câncer de cabeça e pescoço, neuroblastoma, carcinoma da tiroide, câncer de pele (incluindo melanoma), carcinoma de células escamosas oral, câncer de bexiga, tumor de células de Leydig, câncer das vias biliares, tais como colangiocarcinoma ou câncer do duto biliar, câncer de pâncreas, câncer de cólon, câncer colorretal e cânceres ginecológicos, incluindo câncer de ovário, câncer de endométrio, câncer das trompas de falópio, câncer uterino e câncer cervical, incluindo carcinoma do epitélio cervical. Em concretizações adequadas, o câncer é leucemia e pode ser selecionado a partir do grupo que consiste em leucemia linfoblástica aguda, leucemia mielogênea aguda (também conhecida como leucemia mieloide aguda ou leucemia não-linfocítica aguda), leucemia promielocítica aguda, leucemia linfocítica aguda, leucemia mielogênea crônica (também conhecida como leucemia mieloide crônica, leucemia mielocítica crônica ou leucemia granulocítica crônica), leucemia linfocítica crônica, leucemia monoblástica e leucemia das células pilosas. De acordo com outras concretizações preferidas, o câncer é leucemia linfoblástica aguda. Em uma concretização adequada, o câncer é linfoma, o qual pode ser selecionado a partir do grupo que consiste em: linfoma de Hodgkin; linfoma não- Hodgkin; linfoma de Burkitt; e linfoma linfocítico pequeno.

[0088] Adequadamente, o alvejamento de CSCs em tais cânceres pode conseguir um tratamento eficaz do câncer ao prevenir ou tratar o desenvolvimento do câncer, ao prevenir ou tratar a progressão do câncer, ao prevenir ou tratar a recorrência do câncer ou ao prevenir ou tratar a propagação do câncer.

[0089] Em uma concretização adequada, a presente invenção fornece NUC-1031 para uso no alvejamento de CSCs na prevenção ou tratamento de câncer metastático.

[0090] Em uma concretização adequada, a presente invenção fornece NUC-1031 para uso no alvejamento de CSCs no tratamento de câncer recidivante ou refratário.

[0091] Em uma concretização adequada, a presente invenção fornece NUC-1031 para uso no alvejamento de CSCs no tratamento de um câncer primário. Adequadamente, o câncer primário tratado pode ser um segundo câncer primário.

[0092] A invenção fornece NUC-1031 para uso no alvejamento de CSCs no tratamento de câncer secundário. Em uma concretização adequada, o câncer secundário é um câncer metastático.

[0093] Em uma concretização adequada, a presente invenção fornece NUC-1031 para uso no alvejamento de CSCs, em que o alvejamento de CSCs impede ou inibe: (i) a recorrência de um câncer; (ii) a ocorrência de segundo câncer primário; ou (iii) a metástase de um câncer.

[0094] Os métodos de tratamento ou usos médicos nos quais NUC-1031 é empregado com base em sua capacidade de alvejar CSCs podem ser usados no tratamento de câncer recidivante ou refratário. As considerações em relação a câncer recidivante ou refratário em tais concretizações são, exceto onde o contexto requer de outro modo, as mesmas conforme para o tratamento de câncer recidivante ou refratário em relação ao oitavo a décimo aspectos da invenção.

"Câncer Recidivante ou Refratário"

[0095] Conforme observado acima, determinados aspectos e concretizações da invenção referem-se particularmente ao uso de NUC-1031 no tratamento de cânceres recidivantes ou refratários.

[0096] Para fins da presente invenção, cânceres refratários podem ser considerados como cânceres que demonstram resistência ao tratamento por outras terapias anticâncer que não aquelas que usam NUC-1031. Por exemplo, NUC-1031 pode ser usado no tratamento de cânceres refratários que são resistentes ao tratamento com radioterapia. Alternativa ou adicionalmente, NUC-1031 pode ser usado no tratamento de cânceres refratários que são resistentes a agentes biológicos usados no tratamento de câncer. Em uma concretização adequada, NUC-1031 pode ser usado no tratamento de cânceres refratários que são resistentes ao tratamento com outros agentes quimioterapêuticos que não NUC-1031.

[0097] Em particular, os cânceres refratários que podem se beneficiar dos métodos de tratamento e usos médicos da invenção que empregam NUC-1031 incluem cânceres que são resistentes à gencitabina.

[0098] Cânceres recidivantes (ou cânceres recorrentes) são aqueles que voltam depois de um período de remissão, durante o qual o câncer não pode ser detectado. A recorrência do câncer pode ocorrer no local do câncer inicial (recorrência de câncer local), em um local próximo daquele do câncer inicial (recorrência de câncer regional) ou em um local distante daquela do câncer original (recorrência de câncer distal). Acredita-se que CSCs desempenhem um papel na recorrência do câncer ao fornecer uma fonte a partir da qual células do câncer recidivante são geradas. Consequentemente, os métodos de tratamento e usos médicos de NUC-1031 de acordo com a invenção, os quais permitem o alvejamento de CSCs, podem ser de grande benefício no contexto de cânceres recidivantes. A capacidade do NUC-1031 de alvejar CSCs pode ser usada para remover as populações de tais células que são capazes de dar origem à recorrência, prevenindo, assim, a incidência de câncer recidivante. A atividade anti-CSC do NUC-1031 também pode ser usada para alvejar CSCs em cânceres que sofreram recorrência, bem como exercer potencialmente efeitos citotóxicos sobre células tumorais que não células- tronco, permitindo, assim, tratamento de cânceres recidivantes.

[0099] Em vista disso, será apreciado que o NUC-1031 pode ser usado nos métodos ou usos da presente invenção para a prevenção ou tratamento de um câncer recidivante. O NUC- 1031 pode ser usado nos métodos ou usos da presente invenção para a prevenção ou tratamento de um câncer recidivante local, regional ou distante.

[0100] O NUC-1031 pode ser usado nos métodos ou usos da presente invenção para prevenir a recorrência de câncer, fornecendo pelo menos 2 meses, pelo menos 6 meses, pelo menos 12 meses, pelo menos 18 meses, pelo menos 24 meses ou pelo menos 30 meses de remissão. Na verdade, o NUC-1031 pode ser usado para prevenir a recorrência de câncer ao fornecer pelo menos 4 anos, pelo menos 5 anos, pelo menos de 6 anos, pelo menos 7 anos, pelo menos 8 anos, pelo menos 9 anos ou pelo menos 10 anos de remissão.

[0101] O NUC-1031 pode ser usado nos métodos ou usos da presente invenção para o tratamento de um câncer recidivante que recorreu após pelo menos 2 meses, pelo menos 6 meses, pelo menos 12 meses, pelo menos 18 meses, pelo menos 24 meses ou pelo menos de 30 meses de remissão. Na verdade, o NUC-1031 pode ser usado para tratar um câncer recidivante que recorreu após pelo menos 4 anos, pelo menos 5 anos, pelo menos de 6 anos, pelo menos 7 anos, pelo menos 8 anos, pelo menos 9 anos ou pelo menos 10 anos de remissão.

[0102] A capacidade do NUC-1031 de alvejar CSCs dá origem à capacidade deste composto de prevenir ou tratar o câncer, de acordo com os usos médicos ou métodos de tratamento do primeiro ao sexto aspectos da invenção. No entanto, deverá ser observado que o NUC-1031 também exerce um efeito citotóxico direto sobre células tumorais que não células-tronco que compõem o volume dos tumores. Embora a atividade de CSCs possa estar subjacente à maior parte da resistência que torna os cânceres recidivantes ou refratários tão difíceis de tratar, as células tumorais que não células-tronco também são um dos principais constituintes de tais cânceres recidivantes ou refratários.

[0103] O NUC-1031 exerce efeitos citotóxicos sobre células tumorais que não células-tronco maiores que a gencitabina, a molécula a partir da qual o produto quimioterapêutico NUC-1031 é derivado. Consequentemente, o mecanismo pelo qual o NUC-1031 atua no tratamento de câncer recidivante ou refratário, por exemplo, no oitavo, nono ou décimo aspectos da invenção, pode não estar limitado unicamente à atividade anti-CSCs deste composto, mas pode também fazer uso da ação do NUC-1031 sobre as células tumorais que não células-tronco. Em tais usos, o tratamento com NUC-1031 reduzirá o número total tanto de CSCs como de células tumorais que não células-tronco, mas reduzirá preferencialmente a proporção de CSCs que permanecem após o tratamento.

Doses Terapeuticamente Eficazes de NUC-1031

[0104] Uma quantidade terapeuticamente eficaz de NUC- 1031 pode ser uma quantidade suficiente para induzir a morte das CSCs. Em algumas concretizações, particularmente aquelas que se referem ao tratamento de câncer recidivante ou refratário, uma quantidade terapeuticamente eficaz de NUC- 1031 pode ser uma quantidade suficiente para induzir a morte das CSCs e também induzir a morte de células tumorais que não células-tronco.

[0105] Há diversas maneiras diferentes pelas quais a quantidade terapeuticamente eficaz de um composto, tal como NUC-1031, a ser administrada a um paciente pode ser calculada e expressa. Uma de tais maneiras, que é considerada particularmente relevante em doses de agentes para a prevenção ou tratamento de câncer, é a quantidade do agente a ser administrada por unidade de área de superfície corporal do paciente. Tais doses são, tipicamente, expressas em termos da quantidade do agente (que pode ser determinada em massa por metro quadrado (m2) da área da superfície).

[0106] Os usos de NUC-1031 para a prevenção ou tratamento de câncer podem usar uma dose semanal entre 250 mg/m2 e 1000 mg/m2. Tais tratamentos podem, por exemplo, usar uma dose semanal entre 375 mg/m2 e 900 mg/m2. Conforme descrito adicionalmente nos Exemplos, os inventores descobriram que o NUC-1031 obtém um tratamento eficaz de cânceres recidivantes ou refratários quando os pacientes recebem doses semanais que variam entre cerca de 500 mg/m2 e 825 mg/m2.

[0107] Sem desejar estar preso por qualquer hipótese, os inventores acreditam que a capacidade do NUC-1031 de alvejar CSCs permite que eficácia terapêutica seja atingida usando doses mais baixas deste composto do que contrariamente fosse esperado. Meramente a título de exemplo, doses semanais de NUC-1031 que são tão baixas como 825 mg/m2, 750 mg/m2, 600 mg/m2 ou 500 mg/m2 podem ser terapeuticamente eficazes para os usos e métodos da invenção.

[0108] Uma dose semanal escolhida de NUC-1031 pode ser fornecida em uma única incidência de administração ou em múltiplas incidências de administração durante uma semana. Por exemplo, uma dose semanal de NUC-1031 pode ser fornecida em duas incidências de administração, em três incidências de administração ou mais. Assim, no caso de uma dose semanal de 750 mg/m2, isto pode ser alcançado com três administrações de 250 mg/m2 ao longo de uma semana ou duas administrações de 375 mg/m2 durante uma semana. Da mesma forma, no caso de uma dose semanal de 600 mg/m2, isto pode ser alcançado com três administrações de 200 mg/m2 ao longo de uma semana ou duas administrações de 300 mg/m2 durante uma semana.

[0109] Uma quantidade adequada de NUC-1031 a ser administrada em uma única incidência de tratamento, de modo a fornecer uma dose requerida deste composto ao longo de semanas, pode estar entre cerca de 100 mg/m2 e 300 mg/m2.

[0110] A dose semanal de NUC-1031 fornecida pode diminuir ao longo do curso de tratamento. Por exemplo, os inventores descobriram que o tratamento pode ser iniciado com uma dose semanal de cerca de 1000 mg/m2, 900 mg/m2, 825 mg/m 2, 750 mg/m2 ou 725 mg/m2. Durante o curso de tratamento, a dose necessária pode diminuir para cerca de 750 mg/m2 (nos casos em que a dose inicial está acima deste valor), cerca de 650 mg/m2, cerca de 625 mg/m2 ou mesmo cerca de 500 mg/m2 ou cerca de 375 mg/m2.

[0111] As doses de agentes terapêuticos, tal como NUC- 1031 podem, evidentemente, ser apresentadas em outras maneiras. A mais comum destas é a quantidade do agente ativo a ser fornecida por unidade de massa corporal. Calcula-se que, para um paciente humano médio, uma dose de 1 mg/m2 é equivalente a aproximadamente 0,025 mg/kg de massa corporal. Deste modo, os dados indicam que o NUC-1031 é eficaz para o tratamento de câncer recidivante ou refratário em doses que variam a partir de cerca de 6,25 mg/kg a aproximadamente 25 mg/kg. Uma dose adequada pode, por exemplo, estar entre cerca de 9,5 mg/kg e 22,5 mg/kg. Em uma concretização adequada, o NUC-1031 atinge um tratamento eficaz de cânceres recidivantes ou refratários quando os pacientes recebem doses semanais que variam entre cerca de 12,5 mg/kg e 20,5 mg/kg.

[0112] Considerações sobre formulações de NUC-1031 adequadas para uso nos métodos de prevenção ou tratamento e usos médicos da presente invenção são descritas em outra parte da presente descrição. No caso de formulações injetáveis de NUC-1031, estas podem ser administradas por via intravenosa. A administração intravenosa pode ser alcançada durante qualquer período de tempo adequado, por exemplo, em uma injeção de 10 minutos ou similar.

Regimes de Dosagem

[0113] O décimo primeiro aspecto da invenção fornece o NUC-1031 para uso no tratamento de câncer, em que o NUC- 1031 é para uso com uma dose relativamente elevada (compreendida entre cerca de 625 mg/m2 e 1000 mg/m2 por semana) durante pelo menos um ciclo no início do tratamento, antes de trocar para uma dose semanal mais baixa em pelo menos um outro ciclo de tratamento. Tais regimes de dosagem podem ser usados na prevenção ou tratamento de câncer através de alvejamento de CSCs ou no tratamento de câncer recidivante ou refratário.

[0114] Em um exemplo adequado, o NUC-1031 pode ser administrado como uma injeção intravenosa em bolo ao longo de um período de 5 minutos, 10 minutos ou 30 minutos.

[0115] Adequadamente, o NUC-1031 pode ser administrado nos dias 1, 8, 15 de um ciclo de 4 semanas durante até 6 ciclos. Alternativamente, o NUC-1031 pode ser administrado nos dias 1, 5, 8, 12, 15, 19, de um ciclo de 4 semanas durante até 6 ciclos.

[0116] Os regimes de dosagem e ciclos que fornecem duas vezes semanalmente o NUC-1031 são particularmente potentes no tratamento de câncer, tal como câncer recidivante ou refratário.

Tipos de Tratamento

[0117] Em uma concretização adequada da presente invenção, o NUC-1031 serve para uso de acordo com a reivindicação 1 no alvejamento de CSCs como um tratamento de primeira linha para o câncer.

[0118] No entanto, a descoberta de que o NUC-1031 é capaz de alvejar CSCs e, assim, tratar câncer recidivante ou refratário ilustra que o NUC-1031 é capaz de fornecer um tratamento eficaz de câncer em contextos nos quais outros tratamentos se revelaram ineficazes. Consequentemente, em uma concretização apropriada, a presente invenção fornece NUC-1031 para alvejamento de CSCs como um tratamento de segunda linha para o câncer. Na verdade, em uma concretização apropriada, a presente invenção fornece o NUC-1031 para alvejamento de CSCs como um tratamento de terceira linha ou mais para o câncer.

[0119] Em uma concretização adequada, a presente invenção fornece o NUC-1031 para o uso como um neoadjuvante no tratamento de câncer. Um neoadjuvante é um agente fornecido a um paciente de modo a reduzir o tamanho de um tumor antes de uma terapia anticâncer "principal", tal como remoção cirúrgica do câncer. O NUC-1031 pode ser usado como uma terapia neoadjuvante para um paciente que será subsequentemente submetido a tratamento cirúrgico de câncer e/ou radioterapia para o câncer.

[0120] Alternativa ou adicionalmente, a invenção fornece o NUC-1031 a ser usado como um adjuvante no tratamento de câncer. Um adjuvante é um agente fornecido a um paciente após uma terapia anticâncer "principal", tal como remoção cirúrgica do câncer, de modo a evitar o retorno do câncer após a terapia principal. O NUC-1031 pode ser usado como um adjuvante para um paciente que foi submetido a tratamento cirúrgico de câncer e/ou radioterapia para o câncer.

[0121] O NUC-1031 pode ser empregado nos métodos ou usos da presente invenção em uma monoterapia, o que quer dizer em prevenções ou tratamentos nos quais o NUC-1031 confere substancialmente toda a atividade terapêutica que é usada na prevenção ou tratamento.

[0122] Alternativamente, os métodos ou usos da presente invenção podem empregar o NUC-1031 em uma terapia combinada. Em tais concretizações, o NUC-1031 é usado em conjunto com pelo menos uma terapia adicional para o câncer. A terapia adicional para o câncer pode compreender cirurgia e/ou radioterapia. Alternativa ou adicionalmente, a terapia para o câncer pode compreender ainda o uso de pelo menos um agente terapêutico adicional que contribui para a prevenção ou tratamento do câncer a ser alcançado. Adequadamente, tal agente pode ser um agente quimioterapêutico ou um agente biológico usado na prevenção ou tratamento de câncer.

[0123] Em uma concretização adequada de uma terapia combinada, o NUC-1031 e um agente terapêutico adicional podem ser fornecidos a um paciente ao mesmo tempo. Em um exemplo adequado, o NUC-1031 e um agente terapêutico adicional podem ser formulados como parte da mesma composição farmacêutica. Alternativamente, o NUC-1031 e um agente terapêutico adicional podem ser formulados separadamente para fornecimento ao paciente substancialmente ao mesmo tempo.

[0124] Em outra concretização adequada de uma terapia combinada, o NUC-1031 e um agente terapêutico adicional podem ser fornecidos a um paciente em diferentes tempos. O NUC- 1031 e um agente terapêutico adicional podem ser fornecidos a um paciente sequencialmente. Por exemplo, o NUC-1031 pode ser fornecido ao paciente antes de fornecimento do agente terapêutico adicional. Alternativamente, o NUC-1031 pode ser fornecido ao paciente após o fornecimento do agente terapêutico adicional

"Outros Agentes Terapêuticos"

[0125] NUC-1031 pode ser usado em combinação com uma grande variedade de outros agentes terapêuticos para a prevenção ou tratamento de câncer. Estes incluem agentes biológicos, agentes imunoterapêuticos e agentes quimioterapêuticos que podem ser usados para a prevenção ou tratamento de câncer.

[0126] Embora exemplos específicos de outros agentes adequados sejam considerados nos parágrafos a seguir, estes não devem ser considerados como limitativos da variedade de outros agentes terapêuticos adequados para uso com o NUC- 1031. Na verdade, a capacidade do NUC-1031 de alvejar CSCs indica que ele pode ser beneficamente usado em combinação com qualquer outro agente terapêutico usado na prevenção ou tratamento de câncer, se tal agente adicional tem como alvo CSCs, células tumorais que não células-tronco ou outras células ou constituintes envolvidos no desenvolvimento, manutenção ou propagação de câncer.

[0127] Exemplos de outros agentes terapêuticos que podem ser usados em combinação com o NUC-1031 incluem: (a) um agente antiangiogênico, opcionalmente onde o agente antiangiogênico é: (i) um inibidor da via de VEGF, opcionalmente bevacizumabe; (ii) um inibidor de tirosina quinase, opcionalmente sorafenibe, sunitinibe ou pazopanibe; ou (iii) um inibidor de mTOR, opcionalmente everolimus; (b) um agente de alquilação; (c) um antimetabólito; (d) um antibiótico antitumor; (e) um inibidor de topoisomerase; (f) um inibidor mitótico; (g) um anticorpo monoclonal; (h) um agente metálico; ou (i) uma imunoterapia ativa ou passiva.

[0128] Exceto para onde o contexto requer de outro modo, todos os agentes terapêuticos adicionais apresentados na lista anterior devem ser considerados adequados para uso em qualquer uma das concretizações de terapias combinadas com NUC-1031 consideradas acima.

Seleção de Pacientes

[0129] A constatação dos inventores de que o NUC-1031 é capaz de alvejar CSCs torna possível uma série de métodos pelos quais é possível determinar se um dado paciente é suscetível de se beneficiar da administração de NUC-1031 na prevenção ou tratamento de câncer, tal como câncer recidivante ou refratário.

[0130] Consequentemente, a invenção fornece um método para determinar se um paciente com câncer ou uma condição pré-tumoral se beneficiará de prevenção ou tratamento de câncer com NUC-1031, o método compreendendo: ensaiar uma amostra biológica representativa de câncer ou uma condição pré-tumoral no paciente quanto à presença de CSCs; em que a presença de CSCs na amostra biológica indica que o paciente se beneficiará do tratamento com NUC-1031.

[0131] A invenção fornece ainda um método para determinação de um regime de tratamento adequado para um paciente com câncer ou uma condição pré-tumoral, o método compreendendo: ensaiar uma amostra biológica representativa de câncer ou uma condição pré-tumoral no paciente quanto à presença de CSCs; em que a presença de CSCs na amostra biológica indica que um regime de tratamento adequado compreenderá o tratamento do paciente com NUC-1031.

[0132] A invenção também fornece NUC-1031 para uso na prevenção ou tratamento de câncer em um paciente selecionado para tal tratamento por meio de um método que compreende: ensaiar uma amostra biológica representativa de câncer ou uma condição pré-tumoral no paciente quanto à presença de CSCs; em que a presença de CSCs na amostra biológica indica que o paciente é adequado para tratamento com NUC-1031.

[0133] Em concretizações adequadas, as CSCs em uma amostra biológica podem ser identificadas por seus de padrões de expressão característicos de marcadores discutidos anteriormente no pedido.

[0134] Aqueles versados na técnica apreciarão que há muitos exemplos adequados de amostras biológicas que podem ser usadas em concretizações da invenção, tais como aquelas fornecidas acima. Adequadamente, tal amostra pode incluir células tumorais ou da condição pré-tumoral. Uma amostra biológica adequada pode ser uma amostra de tecido, tal como uma amostra para uso em histologia. As células em tais amostras podem ser diretamente avaliadas quanto à sua expressão de marcadores de CSCs, tais como aqueles fornecidos acima.

[0135] Alternativa ou adicionalmente, uma amostra biológica adequada pode compreender moléculas alvo representativas da expressão do gene por células tumorais ou da condição pré-tumoral. Exemplos destas moléculas alvo incluem proteínas codificadas pelos genes expressos ou ácidos nucleicos, tal como mRNA, representativos da expressão do gene.

[0136] Exemplos adequados de técnicas por meio das quais a expressão de marcadores de CSCs pode ser avaliada podem ser selecionados com referência ao tipo de amostra. Técnicas para investigação de marcadores expressos são frequentemente usadas no contexto de avaliação clínica (tal como para fins diagnósticos ou prognósticos) e seu uso será familiar para aqueles que devem praticá-las no contexto da presente invenção. Meramente a título de exemplo, em amostras que contêm proteínas, a presença de marcadores de CSCs pode ser avaliada por meio de técnicas adequadas usando anticorpos que reagem com os marcadores de CSCs em questão. Exemplos de tais amostras contendo marcadores de CSCs incluem amostras histológicas (onde a presença dos marcadores pode ser visualizada por meio de técnicas de imunocitoquímica adequadas) ou amostras derivadas da circulação. Aqui, a presença de CSCs circulantes (as quais acredita-se que contribuem para a propagação do câncer através de metástase) pode ser avaliada usando técnicas tal como citometria de fluxo.

[0137] Nas amostras que contêm ácidos nucleicos representativos de expressão de marcadores de CSCs, tal expressão pode ser avaliada por meio de técnicas adequadas de biologia molecular, tal como através de reação de polimerase em cadeia (PCR) usando iniciadores adequados.

[0138] A invenção será agora adicionalmente descrita com referência aos Exemplos a seguir.

EXEMPLOS 1. NUC-1031 Mobiliza Preferencialmente CSCs

[0139] O estudo a seguir ilustra a capacidade do NUC- 1031 de mobilizar preferencialmente CSCs in vitro, e, assim, reduzir a proporção de CSCs presentes nas populações de células tumorais.

1.1 Comparação de valores de DL50 para NUC-1031 e gencitabina em blastos de leucemia mieloide aguda primários

[0140] NUC-1031 foi testado quanto aos seus efeitos citotóxicos em culturas primárias de blastos de leucemia mieloide aguda (AML blastos). Os valores de DL0 (a concentração necessária para matar 50% das células tumorais em cultura) foram calculados em relação ao NUC-1031 e gencitabina.

Ensaio de citotoxicidade in vitro em células de leucemia mieloide aguda primárias

[0141] Amostras de medula óssea foram coletadas em ácido etilenodiaminotetracético (EDTA) a partir de pacientes com leucemia mieloide aguda (AML) recém-diagnosticados, não previamente tratados. Blastos de AML foram enriquecidos por meio de centrifugação em gradiente de densidade usando Histopaque (Sigma, Poole, Reino Unido) e foram subsequentemente mantidos em meio Roswell Park Memorial Institute (RPMI) suplementado com soro fetal bovino (FBS) a 10%. As células foram tratadas com gencitabina ou NUC-1031 em concentrações entre 0,25 μM e 10 μM e incubadas durante 48 h. Todas as culturas foram mantidas a 37°C em uma atmosfera umidificada com CO2 a 5%.

Medição de apoptose in vitro em células de AML primárias

[0142] As células foram coletadas e marcadas com isotiocianato de CD34-fluoresceína (FITC) (BD Biosciences, Buckingham, RU) e depois ressuspensas em 200 μl de tampão de ligação contendo 4 μl de anexina V marcada com aloficocianina (APC) (eBioscience Ltd, Hatfield, Reino Unido). A apoptose foi quantificada em células de AML CD34+ usando um citômetro de fluxo Accuri C6 (Becton Dickinson, CA, EUA). Pelo menos 10.000 eventos foram adquiridos e os dados foram posteriormente analisados usando o software FlowJo (Tree Star Inc., Ashland, OR, EUA). Todos os valores de DL50 (concentração de fármaco necessária para matar 50% das células) foram derivados a partir das curvas de dose- resposta.

Identificação e quantificação de subpopulações de células de AML primárias CD34+/CD123+

[0143] Células-tronco leucêmicas putativas foram identificadas pela expressão dupla de CD34 e CD123. A sensibilidade relativa destas células aos efeitos de gencitabina e NUC-1031 foi avaliada como uma função da porcentagem destas células que permaneceram viáveis após exposição aos equivalentes molares de cada agente.

[0144] Os resultados deste estudo são mostrados na Figura 2, em que o painel A mostra as curvas de dose-resposta sobrepostas calculadas em relação tanto ao NUC-1031 como gencitabina, e o painel B é um gráfico de barras que ilustra o valor de DL50 significativamente menor obtido em relação ao NUC-1031 (1,6 x 10-6 M) comparado com a gencitabina (3,1 x 10-6 M).

[0145] Além do aumento da potência exibida pelo NUC- 1031 quando comparado com a gencitabina, também é mostrada uma capacidade aumentada de esgotar CSCs nas culturas de blastos de AML em concentrações micromolares (Figuras 3 e 4). A atividade citotóxica de NUC-1031 medida neste ensaio demonstra um aumento da potência em relação tanto a CSCs como células tumorais que não células-tronco quando comparado com a gencitabina.

1.2 Alvejamento preferencial de CSCs pelo NUC-1031

[0146] As respectivas capacidades do NUC-1031 e da gencitabina de alvejar CSCs foram investigadas na linhagem de células AML KG1a. A linhagem de células KG1 foi escolhida em particular para este estudo porque as CSCs dentro da população exibem um imunofenótipo Lin-/CD34+/CD38-/CD123+ que lhes permite ser facilmente distinguidas de células tumorais que não células-tronco (também denominadas células tumorais "a granel") na população.

1.3 Condições de cultura de células KG1a

[0147] A linhagem de células de leucemia mieloide aguda (AML) KG1 foi mantida em meio RPMI (Invitrogen, Paisley, Reino Unido) suplementado com 100 unidades/ml de penicilina, 100 μg/ml de estreptomicina e soro fetal de vitelo a 20%. As células foram subsequentemente divididas em alíquotas (105 células/100 μl) em placas com 96 cavidades e foram incubadas a 37°C em uma atmosfera umidificada com 5% de dióxido de carbono durante 72 horas na presença de NUC- 1031 ou gencitabina em concentrações que foram determinadas experimentalmente para cada composto. Além disso, as culturas de controle foram realizadas de modo que não se adicionou qualquer fármaco. As células foram subsequentemente coletadas por meio de centrifugação e foram analisadas através de citometria de fluxo usando o ensaio Anexina V.

Medição de apoptose in vitro

[0148] As células em cultura foram coletadas por meio de centrifugação e depois ressuspensas em 195 μl de tampão rico em cálcio. Subsequentemente, 5 μl de Anexina V (Caltag Medsystems, Botolph Claydon, Reino Unido) foram adicionados à suspensão de células e as células foram incubadas no escuro durante 10 minutos antes de lavagem. As células foram finalmente ressuspensas em 190 μl de tampão rico em cálcio juntamente com 10 μl de iodeto de propídio. A apoptose foi avaliada por meio de citometria de fluxo através de imunofluorescência de duas cores conforme descrito anteriormente. Subsequentemente, os valores de DL50 (a dose necessária para matar 50% das células em cultura) foram calculados para cada análogo de nucleosídeo e ProTide.

1.5 Identificação imunofenotípica do compartimento de células-tronco leucêmicas

[0149] Células KG1a foram cultivadas durante 72 horas na presença de uma grande variedade de concentrações de cada análogo de nucleosídeo e seu respectivo ProTide. As células foram, então, coletadas e marcadas com um coquetel de anticorpos antilinhagem (PE-Cy7), anti-CD34 (FITC), anti- CD38 (PE) e anti-CD123 (PerCP Cy5). A subpopulação que expressa um fenótipo de células-tronco leucêmicas (LSC) foi subsequentemente identificada e foi expressa como uma porcentagem de todas as células viáveis restantes na cultura. As porcentagens de células-tronco remanescentes foram, então, representadas em um gráfico de dose-resposta e os efeitos do ProTide foram comparados com o nucleosídeo parental.

[0150] Células KG1a foram cultivadas durante 72 horas na presença de uma grande variedade de concentrações de cada composto ensaiado. As células foram, então, coletadas e marcadas com um coquetel de anticorpos antilinhagem (PE- Cy7), anti-CD34 (FITC), anti-CD38 (PE) e anti-CD123 (PerCP Cy5). A subpopulação que expressa um fenótipo de CSCs foi subsequentemente identificada e foi expressa como uma porcentagem de todas as células viáveis remanescentes na cultura. As porcentagens de CSCs remanescentes foram, então, representadas em um gráfico de dose-resposta e os efeitos do NUC-1031 (e seus isômeros purificados) foram comparados com a gencitabina.

1.6 Análise estatística

[0151] Os dados obtidos nestes experimentos foram avaliados usando ANOVA de uma via. Todos os dados foram confirmados como Gaussiana ou uma aproximação Gaussiana usando o teste omnibus K2. Os valores de DL50 foram calculados a partir da regressão não linear e da linha de análise de melhor ajuste das curvas de dose-resposta sigmoidais. Todas as análises estatísticas foram realizadas usando o software Graphpad Prism 6.0 (Graphpad Software Inc., San Diego, CA).

[0152] Em células KG1a, NUC-1031 (e seus isômeros purificados) mostrou um aumento na potência in vitro quando comparado com a gencitabina (Figura 5). No entanto, não houve diferença significativa na potência entre a mistura não separada e os isômeros purificados de NUC-1031. Além disso, o NUC-1031 mostrou alvejamento preferencial de CSCs quando comparado com a gencitabina. Isto foi observado consistentemente em concentrações submicromolares de ProTide (Figura 6). Mais uma vez, os dois isômeros purificados de NUC-1031 não mostraram nenhuma diferença significativa em sua capacidade de alvejar CSCs em nosso sistema experimental.

2. NUC-1031 é capaz de tratar cânceres recidivantes ou refratários em pacientes humanos

[0153] Os dados a seguir foram gerados em estudos clínicos de NUC-1031 em pacientes humanos com cânceres progressivos que são recidivantes ou refratários a todas as terapias convencionais que foram usadas até o momento. Os resultados ilustram claramente a capacidade do NUC-1031 de tratar cânceres refratários com sucesso.

[0154] Embora que os objetivos primários da parte de escalonamento de dose do estudo fossem determinar a Dose de Fase II Recomendada (RP2D) e o perfil de segurança, os objetivos secundários incluíram a determinação do perfil de PK, também foi observado, no entanto, o tratamento eficaz de pacientes com uma variedade de cânceres refratários como parte do presente estudo.

[0155] Um total de 68 pacientes foi inserido neste estudo de escalonamento de dose, dos quais 49 foram avaliados quanto à resposta clínica pelo fato de que eles receberam pelo menos 2 ciclos de NUC-1031 e eram, portanto, elegíveis para uma avaliação RECIST 1.1. Tabela 1: Melhor resposta global no Estudo ProGeml

[0156] NUC-1031 foi administrado como uma injeção de bolo intravenoso lenta de 5 a 30 minutos. • Regime A: NUC-1031 foi administrado nos dias 1, 8, 15 de um ciclo de 4 semanas. • Regime B: NUC-1031 foi administrado nos dias 1, 5, 8, 12, 15, 19 de um ciclo de 4 semanas.

Pacientes avaliáveis [n = 49]

[0157] Os pacientes avaliáveis eram pacientes que receberam > 2 Ciclos de NUC-1031 e, portanto, eram elegíveis para uma avaliação RECIST 1.1 ao final do ciclo 2. Sempre que a duração da resposta da doença, medida em meses, é seguida por um "+", isto indica controle da doença em curso a partir da última data de corte.

Paciente 004 com Câncer de Mama: Doença Estável

[0158] Sexo feminino (67 anos)

[0159] Diagnosticado com carcinoma dutal invasivo da mama de grau 2 (ER+ve, HER2-ve) em 2002. A primeira linha de tratamento fornecida foi cirurgia e ela recebeu epirrubicina + docetaxel adjuvantes, radioterapia e terapia hormonal de manutenção com tamoxifeno, então, anastrozol até 2010. Em 2010, o paciente foi diagnosticado com doença metastática no osso e foi tratado com radioterapia paliativa e iniciou ibondronato e fulvestranto como tratamento de segunda linha.

[0160] Progressão da doença foi observada em 2012 e foi fornecida quimioterapia de terceira linha com capecitabina e navelbina por 4 meses, mas durante o tratamento sua doença progrediu, com novas metástases hepáticas e pulmonares. A paciente iniciou um inibidor de PI3K (estudo de Fase 1) em Setembro de 2012 e recebeu 2 ciclos (2 meses), mas a doença progrediu, com aumento do tamanho das metástases do fígado, enquanto sob tratamento.

[0161] Iniciou NUC-1031, em 3 de dezembro de 2012, 500 mg/m2 semanalmente. Concluiu 6 ciclos e tolerou bem o tratamento. A paciente tinha doença estável ao final do estudo e solicitou continuação compassiva de um 7° Ciclo de NUC-1031, então, foi eleito para um 'intervalo sem medicamentos' após o Ciclo 7. Permaneceu estável por mais 5 meses sem nenhum tratamento adicional antes de progressão da doença.

[0162] Doença estável pela RECIST (12 meses).

Paciente 005 com Câncer Ovariano: Doença Estável

[0163] Sexo feminino (58 anos)

[0164] Diagnosticado com câncer ovariano seroso bilateral em Estágio 3c (Grau 3) em 2009. Em 23 de junho 2009, a paciente sofreu uma histerectomia abdominal total e salpingo-ooferectomia, mas depósitos omentais não passíveis de remoção cirúrgica foram deixados in situ.

[0165] Como quimioterapia de primeira linha, em outubro de 2009, a paciente recebeu 6 Ciclos de carboplatina + paclitaxel, mas desenvolveu uma reação alérgica à carboplatina no ciclo de tratamento final.

[0166] A primeira recidiva foi 8 meses depois e, em dezembro de 2010, a paciente começou 6 Ciclos de Caelyx mais inibidor de VEGFR-2 (estudo clínico de Fase II), permanecendo sob VEGFR-2 como monoterapia de manutenção. A segunda recaída foi 9 meses depois, com um aumento de CA125 e evidência por TC de uma massa pélvica no lado esquerdo que media 3,2 cm. Iniciou quimioterapia de terceira linha e recebeu 6 Ciclos de paclitaxel semanal e houve uma resposta moderada inicial, com uma queda na CA125 e alguma redução no volume do tumor. A progressão da doença foi confirmada 5 meses mais tarde, com aumento dos níveis de CA125 e aumento do tamanho do tumor. A paciente recebeu a última dose de paclitaxel em março de 2012.

[0167] Iniciou NUC-1031 no dia 7 de janeiro 2013 em 500 mg/m2 semanalmente. Concluiu 6 ciclos, conforme o protocolo de estudo, com doença estável e, então, mais 6 meses de NUC- 1031, resultando em 12 meses de tratamento. A paciente tolerou bem o tratamento. Os níveis de CA125 caíram de 208 no início do estudo para 140 ao final do Ciclo 6. A paciente foi eleita para interromper a terapia após 12 meses e teve uma recidiva 3 meses após interrupção do tratamento.

[0168] Doença estável pela RECIST (15 meses).

Paciente 006 com Colangiocarcinoma: Doença Estável

[0169] Sexo masculino (43 anos)

[0170] Diagnosticado com um colangiocarcinoma primário em 2009. Um procedimento de Whipple foi realizado e o paciente recebeu 6 ciclos de gencitabina adjuvante. Mediante recorrência da doença em fevereiro de 2012, o paciente iniciou CapeOx até julho de 2012. Mais tarde naquele ano, uma tomografia computadorizada mostrou metástases ósseas e estas foram tratadas com um curso de radioterapia na parte inferior das costas.

[0171] Iniciou NUC-1031 em 31 de janeiro 2013 a 375 mg/m2 duas vezes por semana e concluiu 2 ciclos. Trocou para o regime A a 500 mg/m2 e recebeu outra dose. Redução na CA19.9 de 125.002 para 59.285 após apenas duas doses de NUC- 1031. Tomografia computadorizada revelou uma redução na lesão pulmonar metastática e nódulos linfáticos a partir da linha de base.

[0172] Doença estável pela RECIST (3 meses).

Paciente 007 com Câncer Colorretal: Doença Estável

[0173] Sexo masculino (73 anos)

[0174] Diagnosticado com câncer colorretal em 2008. Após 6 ciclos de FOLFOX, teve o tumor primário removido em abril de 2009. Além disso, sofreu cirurgia em agosto de 2009, quando uma hepatectomia direita e ileostomia foram realizadas. Em Julho de 2010, foi incluído no ensaio PICCOLO (panitumumabe + irinotecano). Seis meses mais tarde, recebeu ablação por radiofrequência (RFA), além de colocação de stent biliar para complicações adicionais. Em dezembro de 2011, recebeu 7 ciclos de cetuximabe + irinotecano + 5-FU, mas com posterior progressão da doença.

[0175] Iniciou NUC-1031 em 11 de fevereiro 2013 a 375 mg/m2 duas vezes por semana e concluiu 0,5 de um ciclo.

[0176] Após atrasos no tratamento, e a pedido do paciente, por conveniência, ele foi trocado para um regime semanal de 500 mg/m2 e concluiu 2 ciclos. Durante o período de tratamento, ele desenvolveu trombocitopenia (G3) (possivelmente relacionada à esplenomegalia observada no início do estudo). Uma ecografia em 25 de fevereiro de 2013 mostrou compressão da veia porta, com possibilidade de trombose, como um resultado da esplenomegalia. Redução em CEA 361-286 e CA19.9 de 3.151 para 2.957.

[0177] Doença estável pela RECIST (3 meses).

Paciente 008 com Câncer Primário Desconhecido: Doença Estável

[0178] Sexo feminino (37 anos)

[0179] Diagnosticada com uma massa retroperitoneal e doença metastática primária desconhecida em 2012. Progressão tumoral rápida após 4 ciclos de gencitabina + cisplatina a partir de agosto de 2012.

[0180] Iniciou NUC-1031 em 12 de fevereiro 2013 a 375 mg/m2 duas vezes por semana e concluiu 2 ciclos. Durante o Ciclo 1, a paciente teve alívio sintomático no tratamento e uma melhora geral no humor e bem-estar. Transaminite transitória (G3) desenvolvida (ALT e AST). Linfedema, o qual estava presente no início do estudo, foi progredindo durante o Ciclo 2.

[0181] Também desenvolveu uma efusão pleural (G3) que foi avaliada como improvável de estar relacionada com o fármaco de estudo.

[0182] Doença estável pela RECIST (3 meses).

Paciente 010 com Câncer Endometrial: Doença Estável

[0183] Sexo feminino (60 anos)

[0184] Diagnosticada com câncer do endométrio (fase IV, grau 3) em 2012. Em Fevereiro de 2012, a paciente recebeu radioterapia para uma massa pélvica e 6 ciclos de carboplatina + paclitaxel. Na progressão da doença em novembro de 2012, recebeu 3 ciclos de paclitaxel e depois progrediu rapidamente através de um ciclo de Megace em janeiro de 2013.

[0185] Iniciou NUC-1031 em 19 de março de 2013 a 750 mg/m2 semanalmente e concluiu um ciclo. Neutropenia se desenvolveu (G3) durante o Ciclo 1, que se resolveu depois de alguns dias após intervenção com GCSF. A dose foi reduzida para 500 mg/m2 para o Ciclo 2 e concluiu 5 ciclos nesta dose. A paciente teve anemia transitória de Grau 3. Redução de CA125 de 727 para 488. A paciente tinha doença estável no estudo e esta foi mantida por mais 3 meses após interrupção do NUC-1031.

[0186] Doença estável pela RECIST (9 meses).

Paciente 011 com Carcinossarcoma Uterino: Doença Estável

[0187] Sexo feminino (67 anos)

[0188] Diagnosticada com carcinossarcoma uterino (MMMT recidivante do útero) e metástases nodais no fígado, pulmão e para-aórticas. Cirurgia foi realizada em junho de 2011 com uma histerectomia radical e salpingo-ooforectomia bilateral. De junho de 2011 a novembro de 2012, a paciente recebeu cisplatina e doxorrubicina adjuvante - concluiu 6 ciclos (boa resposta ao tratamento com remissão quase completa).

[0189] Em junho de 2012, foi submetida a uma cirurgia adicional com um exenteração anterior, dissecção do reto e reparação e formação de duto ileal com anastomose extremidade-a-extremidade. Nova cirurgia em junho de 2012, quando passou por uma laparotomia com a implantação de um ureter em seu duto ileal e procedimento de Hartman para uma fístula retal. Em março de 2013 concluiu 6 ciclos de paclitaxel semanal, mas com progressão do tumor através deste curso de tratamento.

[0190] Iniciou NUC-1031 em 15 de abril de 2013 a 375 mg/m2 duas vezes por semana e concluiu 2.6 Ciclos. A paciente teve doença estável pela RECIST, com uma redução no volume de tumor de 26%. Durante o tratamento, teve neutropenia transitória (G3) e uma baixa de hemoglobina (G2). A pedido do paciente, trocou para um regime semanal a 625 mg/m2 para o Ciclo 4 e concluiu outro ciclo. Ao final do ciclo 4 (final do mês 4), tomografia computadorizada em agosto de 2013 mostrou doença progressiva. Três novas lesões apareceram: 2 no pulmão e 1 no nódulo linfático retro cava. A lesão original no fígado continuou a diminuir de tamanho e outra lesão alvo no pulmão permaneceu estável. A paciente foi retirada do estudo.

[0191] Doença estável pelo RECIST (4 meses).

Paciente 012 com Colangiocarcinoma: Doença Estável

[0192] Sexo feminino (48 anos)

[0193] Diagnosticada com colangiocarcinoma em estágio IV, Grau 3 em 2013 após investigação para dor abdominal do lado direito. Tomografia computadorizada mostrou metástase no fígado, pulmão e peritônio. A partir de janeiro-abril de 2013, a paciente recebeu 3 ciclos de cisplatina + gencitabina, com rápida progressão da doença.

[0194] Iniciou NUC-1031 em 16 de maio de 2013 a 375 mg/m2 duas vezes por semana e concluiu 3 ciclos. A pedido da paciente, trocou para um regime semanal a 625 mg/m2 para o Ciclo 4, concluiu 3 ciclos adicionais e tolerou bem o tratamento. A paciente tinha doença estável ao final do estudo e teve mais dois ciclos, com um total de 8 ciclos.

[0195] Doença estável pela RECIST (8 meses).

Paciente 013 com Câncer Cervical: Resposta Parcial

[0196] Sexo feminino (51 anos)

[0197] Diagnosticada com câncer inoperável, fracamente diferenciado das células escamosas do colo do útero (2b Palco, G2/3) em setembro de 2011. Foi tratada com cisplatina (4 ciclos) mais radioterapia e foi dito pelo médico como tendo uma "boa resposta".

[0198] Em julho de 2012, a paciente desenvolveu progressão da doença e entre julho de 2012 e novembro de 2012, recebeu 6 doses de carboplatina + paclitaxel mais cediranibe (rastreamento CIRCCA) e teve doença estável. Em abril de 2013, exame de ressonância magnética mostrou progressão da doença com aumento do envolvimento de gânglios linfáticos ilíacos.

[0199] Iniciou NUC-1031 em 28 de maio de 2013 a 750 mg/m2 semanalmente e concluiu 2 ciclos. A dose foi reduzida para 625 mg/m2 e concluiu mais 4 ciclos. Teve dor pélvica inferior antes do estudo, mas teve alívio da dor sob tratamento, com uma redução significativa do uso de opioides.

[0200] A paciente teve problemas com infecções recidivantes do trato urinário, tanto antes de iniciar NUC- 1031 como durante o tratamento em virtude de stents uretéricos bilaterais de metal.

[0201] A paciente teve uma Resposta Parcial ao final do estudo ProGem1 e, então, concluiu mais 3 Ciclos de uma dose reduzida de 500 mg/m2 semanalmente, com um total de 9 ciclos de NUC-1031. O tumor da paciente diminuiu até o ponto em que ela estava sendo reavaliada para nova cirurgia debulking.

[0202] Resposta parcial pela RECIST (9 meses, PFS 11 meses).

Paciente 014 com Mesotelioma: Doença Progressiva

[0203] Sexo feminino (51 anos)

[0204] Paciente diagnosticada com um mesotelioma epitelioides recidivante no hemi-tórax direito em 2012. Recebeu 4 ciclos de permetrexede + carboplatina. Mediante progressão em dezembro de 2012, entrou em um estudo clínico para receber dasatinibe, mas foi inútil e teve progressão da doença.

[0205] Iniciou NUC-1031 em 20 de junho 2013 a 750 mg/m2 semanalmente e concluiu um ciclo. A dose foi reduzida para 625 mg/m2 e concluiu mais um ciclo. Retirada do estudo.

[0206] Doença progressiva.

Paciente 015 com Câncer (Primário Desconhecido): Resposta Parcial

[0207] Sexo masculino (54 anos)

[0208] Diagnosticado com câncer de origem desconhecida em setembro de 2012, tendo sido investigado por sintomas de dor abdominal.

[0209] Foi observado na época que tinha metástases hepáticas e pulmonares. Biópsia hepática mostrou um carcinoma pouco diferenciado com diferenciação glandular focal. Recebeu 8 Ciclos de epirrubicina + cisplatina + capecitabina de outubro de 2012 até abril de 2013 dentro do estudo clínico "CUP", mas desenvolveu doença progressiva com edema, derrame pleural e ascite, com um ganho de peso de 20 kg. O paciente apresentou náuseas e vômitos severos e fadiga neste regime.

[0210] Iniciou NUC-1031 em 20 de junho de 2013 a 750 mg/m2 semanalmente e recebeu 2 doses. A dose foi reduzida para 625 mg/m2 de um Ciclo completo e recebeu 5 Ciclos posteriores em uma dose inferior. Mediante entrada no estudo, o paciente tinha edema acentuado dos membros inferiores e ascite abdominal (aproximadamente 20 kg). Após o Ciclo 1, foi relatado que o edema e ascite tinham desaparecido e o paciente estava se sentindo muito melhor. Durante o Ciclo 1, Dia 8, trombocitopenia (G3), linfopenia (G3) e neutropenia (G2) se desenvolveram, o que causou um atraso no tratamento de duas semanas. Ao final do Ciclo 2, tomografia mostrou uma redução em todas as lesões alvo, com uma avaliação RECIST de doença estável. Ao final do Ciclo 4, tomografia mostrou uma redução maior em todas as lesões alvo, com uma avaliação RECIST de uma resposta parcial, a qual foi mantida até o final do estudo. Solicitou continuação compassiva e concluiu mais 3 Ciclos nesta dose. Estava começando a mostrar uma queda consistente no hematócrito após o Dia 8 de cada Ciclo. A partir do Ciclo 10, a dose foi ainda mais reduzida para 500 mg/m2 com o efeito desejado e concluiu mais 10 Ciclos (19 no total).

[0211] Verificação por TC mais recente em 9 de janeiro de 2015 mostrou Resposta Parcial sustentada (redução de aproximadamente 58% no tamanho do tumor) e o nódulo mesentérico alvo não era mais visível. Teve aumento de fluídos em ambas as pernas durante o Ciclo 10, mas respondeu bem à espironolactona e foi completamente resolvido. Substitui a sonda de Hickman em 12 de dezembro 2014 após 19 meses in situ, sem efeitos adversos. O paciente permanece clinicamente muito bem. Após discussões com CI, o paciente está feliz por ter uma pausa no tratamento e será enviado ao oncologista para discutir as opções.

[0212] Resposta parcial pela RECIST (20 + meses; PFS 24+ meses) em curso.

Paciente 017 com Câncer de Pulmão: Resposta Parcial

[0213] Sexo feminino (60 anos)

[0214] Diagnosticada com adenocarcinoma de pulmão, com metástases no pulmão, fígado e adrenais em setembro 2011. Também teve doença nos nódulos linfáticos mediastinais, abdominais e intracervicais. A paciente sofreu uma pleurodese realizada em dezembro de 2011, seguido de 3 Ciclos de cisplatina + pemetrexede, que foi concluído em março de 2012 e obteve uma resposta parcial. A partir de março- setembro de 2012, recebeu um total de 6 Ciclos de docetaxel, com uma resposta parcial. Em abril 2013, teve progressão da doença e recebeu nova dose de docetaxel, mas progrediu ao longo dos 2 Ciclos de docetaxel.

[0215] Iniciou NUC-1031 em julho de 2013 a 750 mg/m2 semanalmente e recebeu uma dose. A dose foi reduzida para 625 mg/m2 e recebeu 2 doses para concluir um Ciclo e concluiu mais 5 Ciclos. Teve um atraso de tratamento de 4 semanas em virtude de infecções pulmonares e baixa contagem de plaquetas. Resposta significativa nos gânglios linfáticos afetados, particularmente no pescoço.

[0216] As lesões alvo continuaram a diminuir, o que foi evidente em exames de TC após o Ciclo 2 e Ciclo 4. Neste estágio, a avaliação RECIST classificou a resposta como doença estável.

[0217] Ao final do Ciclo 6, um exame de TC mostrou redução adicional e a avaliação RECIST foi trocada para uma resposta parcial em todas as lesões alvo ao final do estudo. Solicitou continuação em uma base de uso compassivo e concluiu mais 3 Ciclos. A paciente tolerou bem o NUC-1031, com melhora na voz rouca e disfagia. Ao final do Ciclo 9, TC em 17 de abril de 2014 mostrou Doença Progressiva, com um crescimento das lesões alvo e novas lesões hepáticas. Retirada do estudo.

[0218] Resposta parcial pela RECIST (3 meses; PFS 10 meses).

Paciente 018 com Câncer de Pulmão: Doença Estável

[0219] Sexo feminino (65 anos)

[0220] Diagnosticada com câncer de pulmão de células escamosas em maio de 2011. Recebeu gencitabina + cisplatina, 6 Ciclos, de junho a outubro de 2011 dentro do ensaio SQUIRE. Recidiva da doença em abril de 2012 e recebeu radioterapia paliativa de fração única no hilo direito e 6 Ciclos de docetaxel de maio até setembro de 2012.

[0221] Doença progressiva em outubro de 2012. Iniciou eriotinibe em dezembro de 2012 durante 3 meses, mas em março de 2013 descobriu que tinha doença progressiva no hilo direito.

[0222] Iniciou NUC-1031 em 25 de julho de 2013 a 625 mg/m2 semanalmente e concluiu 4 Ciclos. Doença estável pela RECIST (4 meses). A paciente saiu do estudo em virtude de deterioração causada por obstrução sintomática da veia cava. Recebeu radioterapia em baixa dose em uma tentativa de resolver a obstrução e recomeçou o NUC-1031 sobre o programa de acesso compassivo. Após mais uma dose de NUC-1031, a paciente decidiu se retirar do programa de acesso compassivo. A maior parte da doença da paciente era estável quando ela saiu.

[0223] Doença estável pela RECIST (4 meses).

Paciente 021 com Câncer da Trompa de Falópio: Resposta Parcial

[0224] Sexo feminino (61 anos)

[0225] Diagnosticada com adenocarcinoma de ovário endometrioide recidivante em Estágio 2a, Grau 2 em 2008. Recebeu 6 Ciclos de carboplatina + paclitaxel, concluídos em outubro de 2008. Em junho de 2011, teve uma recidiva e foi anotado que tinha nódulos tumorais pleurais, subcapsulares no fígado, omentais e mesentéricos e foi recrutada para o estudo ICON6, recebendo 6 Ciclos de carboplatina mais paclitaxel +/- cediranibe. Obteve uma resposta parcial ao tratamento. Permaneceu sob manutenção com cediranibe até março de 2012, quando o tratamento foi interrompido em virtude do aumento em CA125 e doença peritoneal progressiva.

[0226] De março a julho 2012, recebeu 6 Ciclos de paclitaxel semanal, inicialmente com boa resposta radiológica da doença peritoneal. Em fevereiro de 2013, descobriu-se que tinha uma nova efusão e um aumento na doença peritoneal. Iniciou carboplatina + paclitaxel e inibidor de AKT diária no estudo AKTRES, mas com progressão da doença (nova massa pélvica) em maio 2013 após 3 Ciclos.

[0227] Iniciou NUC-1031 em 28 de agosto 2013 a 625 mg/m2 semanalmente e concluiu 6 Ciclos. Observada uma redução significativa na ascite abdominal; necessidade de drenagem a cada duas semanas antes de vir ao estudo e não requereu mais drenagem desde o início de NUC-1031. A paciente tolerou bem o NUC-1031. Doença estável pela RECIST ao final do estudo. Solicitou continuação em regime de uso compassivo e concluiu mais um Ciclo. Ao final do Ciclo 7, tomografia computadorizada feita em 26 de fevereiro 2014 mostrou uma redução adicional no volume do tumor, que confirmou resposta parcial pela RECIST. Resposta de CA125 significativa: redução de 91% a partir da linha de base (372) até o final do Ciclo 6 (35).

[0228] Melhor resposta global até o momento é a Resposta Parcial (3 meses) de acordo com a RECIST ou Resposta Parcial (9 meses) de acordo com critérios GCIG.

[0229] Resposta Parcial.

Paciente 024 com Câncer Primário Desconhecido: Doença Progressiva

[0230] Sexo feminino (51 anos)

[0231] Diagnosticada com câncer de origem desconhecida em abril de 2012. Recebeu CAPOX, 8 Ciclos de abril a outubro de 2012. Recebeu irinotecano em outubro de 2012 com adição de bevacizumabe em novembro de 2012, mas sem resposta.

[0232] Iniciou NUC-1031 em 26 de setembro 2013 a 675 mg/m2 semanalmente e concluiu 2 Ciclos. Ao final do Ciclo 2, tomografia computadorizada revelou doença progressiva.

[0233] Doença progressiva.

Paciente 025 com Mesotelioma: Doença Estável

[0234] Sexo masculino (54 anos)

[0235] Diagnosticado com mesotelioma epitelioide do pulmão direito T4 N3 M0 em março de 2013. Recebeu 4 Ciclos de pemetrexede + cisplatina de maio a agosto de 2013.

[0236] Iniciou NUC-1031 em 23 de outubro de 2013 a 725 mg/m2 semanalmente e concluiu 4 Ciclos. Ao final de C4, tomografia computadorizada mostrou doença progressiva. Retirado do estudo.

[0237] Doença estável pela RECIST (4 meses).

Paciente 026 com Câncer Colorretal: Doença Estável

[0238] Sexo feminino (63 anos)

[0239] Diagnosticada com câncer colorretal, T4 N2, com metástases no pulmão e bexiga em fevereiro de 2007. Recebeu FOLFOX adjuvante, 12 Ciclos, a partir de novembro de 2007. Doença recidivante pélvica se desenvolveu e recebeu capecitabina em 2009.

[0240] Quando de recidiva em 2012, recebeu FOLFIRI em setembro de 2012 e capecitabina + irinotecano até janeiro de 2013. Em julho de 2013, TC mostrou doença Progressiva, recorrência do tumor pré-sacral causando destruição do sacro e um nódulo no pulmão.

[0241] Iniciou NUC-1031 em 17 de outubro de 2013 a 725 mg/m2 semanalmente e concluiu 4 Ciclos. Melhora significativa na dor, com redução drástica no uso de analgésicos opioides. Ao final do Ciclo 4, tomografia computadorizada mostrou doença progressiva.

[0242] Doença estável pela RECIST (4 meses).

Paciente 027 com Câncer Ovariano: Doença Estável

[0243] Sexo feminino (46 anos)

[0244] Diagnosticada com adenocarcinoma seroso de ambos os ovários em dezembro de 2009. Após histerectomia total, salpingo-ooforectomia bilateral e omentectomia, recebeu 6 Ciclos de carboplatina + paclitaxel e obteve uma resposta completa em maio de 2010. A paciente teve uma recidiva em junho de 2011 e recebeu carboplatina + paclitaxel 6 por Ciclos (Estudo ICON6). Em Dezembro de 2012, a paciente recebeu mais 3 Ciclos de gencitabina + carboplatina, mas teve uma reação alérgica à carboplatina, a qual foi trocada para cisplatina. Concluiu 6 Ciclos no total e alcançou uma resposta parcial em abril de 2013. Esta foi seguida por 6 meses de tamoxifeno mas, em julho de 2013, uma tomografia computadorizada mostrou novo envolvimento de gânglios linfáticos do mediastino e níveis de CA125 aumentados. Tomografia computadorizada em outubro de 2013 mostrou um aumento no tamanho dos depósitos peritoneais.

[0245] Iniciou NUC-1031 em 30 de outubro de 2013 a 725 mg/m2 semanalmente. ALT se mostrou elevada (G3) após o Ciclo 1, Dia 1, aumentou de 96 na linha de base para 256 no dia 7, uma DLT para esta coorte. ALT se recuperou para G2 alguns dias depois, permitindo que a paciente recebesse o Ciclo 1, Dia 8, na dose reduzida para 675 mg/m2. Concluiu o Ciclo 1 sob a dose reduzida e passou a receber mais 3 Ciclos. A paciente tinha doença estabilizada pela RECIST, com uma redução no volume de tumor de 23%. CA125 foi reduzido de 188 para 99 na linha de base ao final do Ciclo 6. A dose foi ainda mais reduzida para 625 mg/m2 no Ciclo 5 em virtude de neutropenia branda. Concluiu o estudo nesta dose sem maiores problemas. Solicitou continuação compassiva e recebeu um novo Ciclo.

[0246] Doença estável pela RECIST (8 meses).

Paciente 029 com Câncer de Mama: Doença Estável

[0247] Sexo feminino (53 anos)

[0248] Diagnosticada com câncer metastático de mama (positivo para ER e PGR), com múltiplas metástases nos ossos e hepáticas em 2002. Recebeu 6 Ciclos de FEC, radioterapia e tamoxifeno com goserelina adjuvante. Em 2010, novas metástases ósseas foram detectadas e tratadas com Zoladex, letrozol e pamidronato. Em julho de 2011, trocou para Zoladex e exemestano, os quais foram complementados com Faslodex em novembro. Quando de progressão em 2012, recebeu capecitabina + Zometa, seguido de paclitaxel durante apenas 3 Ciclos. O tratamento foi iniciado com rucaparibe em maio de 2013. Doença hepática progressiva em julho de 2013 e recebeu gencitabina + carboplatina em 3 Ciclos.

[0249] Iniciou NUC-1031 em 14 de novembro de 2013 a 725 mg/m2 semanalmente. Concluiu 3 Ciclos. Infelizmente, sofreu uma parada cardíaca fatal, enquanto em casa, não relacionada ao estudo.

[0250] Doença estável pela RECIST (4 meses).

Paciente 030 com Câncer Ovariano: Doença Estável

[0251] Sexo feminino (62 anos)

[0252] Diagnosticada com adenocarcinoma seroso do ovário em 2012. Recebeu carboplatina + paclitaxel adjuvante durante 6 Ciclos em julho de 2012, obteve resposta completa. Doença progressiva em agosto de 2013, começou carboplatina + Caelyx, progrediu após 3 Ciclos.

[0253] Iniciou NUC-1031 em 21 de novembro de 2013 a 725 mg/m2 semanalmente. Concluiu 3 Ciclos e tolerou bem o fármaco de estudo. Ao final do Ciclo 2, tomografia computadorizada revelou doença estável pela RECIST. Questões alimentares instáveis, resultando em desidratação e desnutrição, que levaram a longos atrasos do tratamento. Retirada do estudo.

[0254] Doença estável pela RECIST (3 meses).

Paciente 031 com Colangiocarcinoma: Doença Progressiva

[0255] Sexo feminino (76 anos)

[0256] Diagnosticada com colangiocarcinoma em julho de 2013. No dia 27 de julho, passou por um procedimento de Whipple modificado. No momento da cirurgia, foi observado que tinha múltiplas metástases hepáticas. Em agosto de 2013, começou gencitabina + oxaliplatina, as quais foram fornecidas a cada duas semanas durante 6 Ciclos.

[0257] Iniciou NUC-1031 em 9 de dezembro de 2013 a 750 mg/m2 semanalmente e concluiu 2 Ciclos. Ao final do Ciclo 2, tomografia computadorizada revelou doença progressiva. Retirada do estudo.

Paciente 032 Câncer Esofágico: Doença Estável

[0258] Sexo masculino (56 anos)

[0259] Diagnosticado com carcinoma de células escamosas do esôfago em junho de 2013. Recebeu 3 Ciclos de cisplatina + capecitabina de julho a setembro de 2013. Doença progressiva com metástases peritoneais e pulmonares. Stent esofágico inserido em outubro de 2013 para controlar os sintomas de disfagia.

[0260] Iniciou NUC-1031 em 16 de dezembro de 2013 a 750 mg/m2 semanalmente e concluiu 2 Ciclos. Ao final do Ciclo 2, tomografia computadorizada revelou doença estável pela RECIST. O paciente estava tendo dificuldades com uma fístula no pulmão/traqueia. Retirado do estudo em virtude de progressão clínica. Doença estável pela RECIST (2 meses).

Paciente 033 Colangiocarcinoma: Doença Estável

[0261] Sexo feminino (37 anos)

[0262] Diagnosticada com colangiocarcinoma avançado em junho de 2013 com metástases linfáticas para o fígado, peritoneais e para aorta e pequenos nódulos pulmonares. Em junho, sofreu uma biópsia do fígado, que mostrou um provável colangiocarcinoma pouco diferenciado, com algumas características que sugerem uma metástase primária para o fígado. Em julho de 2013, começou quimioterapia com gencitabina e cisplatina e recebeu 6 Ciclos, faltando uma parte do Ciclo 5 em virtude de uma internação por sepse neutropênica.

[0263] Infelizmente, apesar de sua tomografia computadorizada mostrar uma resposta parcial, sua TC após tratamento no dia 28 de novembro de 2013 mostrou doença progressiva com uma lesão hepática estável, mas um aumento no tamanho de suas metástases pulmonares e alguns novos depósitos peritoneais. Também se sabe que tinha uma lesão esternal lítica.

[0264] Iniciou NUC-1031, em 3 de janeiro de 2014 a 750 mg/m2 semanalmente e concluiu 4 Ciclos. Ao final do Ciclo 2, tomografia computadorizada revelou doença estável pela RECIST. Ao final do Ciclo 4, tomografia mostrou progressão da doença e a paciente foi retirada do estudo.

[0265] Doença estável pela RECIST (3 meses).

Paciente 036 Carcinoma Renal: Doença Estável

[0266] Sexo masculino (20 anos)

[0267] Diagnosticado com carcinoma de células renais medular em dezembro de 2012. Recebeu 5 Ciclos de gencitabina + paclitaxel + carboplatina de janeiro até julho de 2013, resultando em doença estável durante o tratamento. O paciente teve atrasos do tratamento em virtude de trombocitopenia e neutropenia, as quais requereram intervenção com G-CSF. Após recidiva em julho de 2013, começou a gencitabina + doxorrubicina, mas progrediu através de 2 Ciclos em setembro de 2013.

[0268] Iniciou NUC-1031 em 28 de janeiro de 2014 a 825 mg/m2 semanalmente e concluiu 4 Ciclos. O paciente apresentou fadiga e cansaço durante o Ciclo 1. Lorazepam foi interrompido e o paciente se tornou muito mais alerta. Ele relatou que estava tolerando o NUC-1031 muito melhor do que seu regime anterior. Ao final do Ciclo 4, TC mostrou doença estável sustentada com uma redução no volume de tumor de 7%. Após o Ciclo 5, Dia 1, trombocitopenia se desenvolveu (G3) e a dose foi reduzida para 750 mg/m2. Após o Ciclo 5, Dia 8, desenvolveu fadiga, perda de apetite e não apresentou qualquer tratamento adicional. Retirado do estudo em virtude de progressão clínica.

[0269] Doença estável pela RECIST (5 meses).

Paciente 037 com Câncer de Pâncreas: Resposta Parcial

[0270] Sexo feminino (70 anos)

[0271] Diagnosticada com adenocarcinoma do pâncreas em março de 2013. Um procedimento de Whipple foi planejado para 26de março de 2013, mas em virtude de aderências extensas, o câncer não era passível de cirurgia, mas biópsias foram realizadas. Ressecção da cunha do fígado confirmou doença metastática. Exame histológico mostrou adenocarcinoma moderadamente diferenciado. A paciente recebeu 6 Ciclos de gencitabina de maio a outubro de 2013. Tomografia computadorizada em novembro de 2013 sugeriu Resposta Parcial do tumor pancreático, mas com novas metástases no lobo lateral esquerdo do fígado.

[0272] Iniciou NUC-1031 em 4 de fevereiro de 2014 a 1.000 mg/m2 semanalmente e recebeu um ciclo com esta dose. Neste momento, o CMSD decidiu reduzir a dose em todos os pacientes na coorte para 900 mg/m2 em virtude de uma DLT em um paciente (paciente 039). A paciente recebeu um novo Ciclo na nova dose. Ao final do Ciclo 2, TC mostrou Doença Estável pela RECIST, com uma redução de 18,4% no volume do tumor.

[0273] A dor no abdômen e nas costas tinha melhorado significativamente; a paciente estava sob 80 mg de oxycontin bd e agora tinha interrompido toda a morfina. Ela também teve uma queda muito significativa nos marcadores tumorais: CA19.9 de 15.000 na linha de base para 4.000 e CEA de 536 na linha de base para 42. A fadiga tinha se tornado uma questão importante após cada Ciclo. TC em 29 de abril de 2014 mostrou uma redução adicional no volume do tumor de 30%, atingindo uma Resposta Parcial pela RECIST. A paciente teve perda de apetite, fadiga grave e foi retirada do estudo.

[0274] Resposta parcial pela RECIST (1 mês; PFS 4 meses).

Paciente 038 com Câncer Ovariano: Doença Progressiva

[0275] Sexo feminino (65 anos)

[0276] Diagnosticada com adenocarcinoma seroso do ovário recidivante de Grau 3, Estágio 3c em 2000. Foi submetida a uma histerectomia total abdominal, salpingo- ooforectomia bilateral e cirurgia debulking, deixando doença residual mínima em novembro de 2000. Recebeu 6 Ciclos de carboplatina semanalmente + paclitaxel até março de 2001. Após recidiva em 2002, recebeu 6 Ciclos de carboplatina mais etoposídeo até remissão completa em março de 2003. Além disso, teve uma recidiva em 2005 e passou por outra cirurgia debulking, seguido por carboplatina + gencitabina x 6 Ciclos, que terminaram em julho de 2006 com Resposta Completa. Cirurgia para diminuição de volume adicional, incluindo esplenectomia, foi necessária após recidiva em 2009. Isto foi seguido por 6 Ciclos de carboplatina + Caelyx e uma Resposta Completa foi alcançada. Recidiva pélvica bem próximo da crista ilíaca externa direita, a qual foi considerada inoperável, foi observada em 2010. A paciente recebeu carboplatina e paclitaxel durante 6 Ciclos, os quais foram concluídos em abril de 2011, com uma Resposta Parcial. Em outubro de 2011, mostrou evidência de progressão, recebeu topotecano durante 6 Ciclos até março de 2012 e tinha doença estável. Neste momento, se submeteu à inserção de um stent ureteral determinado para hidronefrose. Em junho de 2012, após outra progressão da doença com novas metástases pulmonares bilaterais, foi iniciou carboplatina + paclitaxol + bevacizumabe semanal até março 2013, seguido por manutenção com bevacizumabe + letrozol em setembro de 2013. Este foi seguido por 3 Ciclos de Ciclofosfamida + bevacizumabe, mas TC mostrou doença progressiva em novembro de 2013 e seu tratamento foi interrompido.

[0277] Stent ureteral direito trocado em janeiro de 2014.

[0278] Iniciou NUC-1031 em 4 de março 2014 a 900 mg/m2 semanalmente e concluiu 2 Ciclos. A principal toxicidade foi fadiga de início retardado, a qual foi resolvida nos dias 3 e 4. Ao final do Ciclo 2, TC mostrou doença progressiva com um aumento de 25% no volume do tumor. Retirada do estudo.

[0279] Doença progressiva.

Paciente 040 com Colangiocarcinoma: Doença Estável

[0280] Sexo feminino (69 anos)

[0281] Diagnosticada em maio de 2013 com colangiocarcinoma intra-hepático de Grau 2, com massa hepática de 11 cm que obstrui o duto biliar comum e causa icterícia. Foi colocada sob um stent biliar. Recebeu 7 Ciclos de gencitabina + cisplatina de agosto a dezembro.

[0282] Iniciou NUC-1031 em 20 de fevereiro 2014 a 1.000 mg/m2 semanalmente e recebeu uma dose. Se apresentou para o Ciclo 1, Dia 8 em 27 de fevereiro com febre, calafrios e uma bilirrubina elevada. Foi internada e a fonte de infecção (G3) era um stent bloqueado com tumor e um cisto do trato biliar. Dois novos stents estavam funcionando bem. O Ciclo 1 foi concluído a 900 mg/m2 em virtude de DLT nesta coorte. Concluiu 3 Ciclos. Ao final do Ciclo 2, TC em 23 de maio mostrou Doença Estável pela RECIST, com ligeira redução no volume do tumor de 85 na linha de base para 82,1. CA19.9 caiu de 664 no início do estudo para 155 em 4 de junho. Foi internada com delírio em junho de 2014 e diagnosticada com uma infecção urinária. Outras investigações também revelaram Doença Progressiva no fígado. Retirada do estudo.

[0283] Doença estável pela RECIST (4 meses).

Paciente 041 com Câncer de Mama: Doença Estável

[0284] Sexo feminino (54 anos)

[0285] Diagnosticada com câncer de mama dutal invasivo metastático (ER e PR +ve) com metástases nos gânglios axilares bilaterais, pulmão e hepática. Recebeu FEC x 3 Ciclos, paclitaxel x 9 Ciclos, capecitabina x 8 Ciclos, euribulina x 3 Ciclos e gencitabina + carboplatina x 1 dose. Sua última dose de quimioterapia foi no dia 19 de dezembro de 2013 e a última tomografia computadorizada antes de inscrição mostrou doença progressiva.

[0286] Iniciou NUC-1031 em 18 de março 2014 a 900 mg/m2 semanalmente e concluiu 3 Ciclos. Teve 2 atrasos de tratamento após o Ciclo 1, Dia 8 e Dia 15 em virtude de neutropenia, a qual se resolveu espontaneamente dentro de uma semana. Ao final do Ciclo 2, tomografia computadorizada revelou doença estável pela RECIST. O marcador de tumor CA15.3 era 726 na linha de base 845 em C2 e era 824 em 19 de maio de 2014. (Este marcador de tumor sempre foi um indicador confiável da resposta anteriormente). Experimentou fadiga (G3) durante o Ciclo 3, mas conseguiu reduzir significativamente os opioides. A dose de NUC-1031 foi reduzida para 825 mg/m2 para o Ciclo 4. Ao final do Ciclo 4, TC mostrou progressão da doença, com um aumento em locais alvo e novas lesões ósseas. Retirada do estudo.

[0287] Doença estável pela RECIST (4 meses)

Paciente 042 com Colangiocarcinoma: Doença Progressiva

[0288] Sexo masculino (48 anos)

[0289] Diagnosticado com colangiocarcinoma metastático em janeiro de 2013. Hepatectomia parcial em fevereiro de 2013. Iniciou no braço de observação do ensaio BILCAP (compara a capecitabina com observação após cirurgia de câncer do trato biliar). Quando de progressão, iniciou gencitabina e cisplatina x 6 Ciclos. Quando de progressão em novembro de 2013, iniciou capecitabina. No entanto, esta foi interrompida após dois meses, uma vez que o paciente desenvolveu angina. Quando de progressão adicional, iniciou 5FU x 6 semanas, mas teve doença progressiva com metástases para o pulmão, fígado e ossos.

[0290] Último tratamento foi em janeiro de 2014. Recebeu radioterapia paliativa para dor pelas metástases no osso do ombro direito em 20 de Janeiro de 2014.

[0291] Iniciou NUC-1031 em 18 de março 2014 a 900 mg/m2 semanalmente e concluiu 2 Ciclos. Experimentou fadiga de início tardio (G2) nos dias 3-5 após o fármaco de estudo. Ao final do Ciclo 2, TC mostrou uma redução de 9% no volume do tumor da lesão alvo primária, mas mostrou novas lesões pulmonares e nos ossos. Retirado do estudo.

[0292] Doença progressiva.

Paciente 043 com Câncer Ovariano: Doença Estável

[0293] Sexo feminino (54 anos)

[0294] Diagnosticada com câncer peritoneal papilar seroso de Grau 3, Estágio 4. Histerectomia total abdominal, salpingo-ooforectomia bilateral e omentectomia realizadas em setembro de 2007. Recebeu carboplatina + paclitaxel x 4 Ciclos, seguido por 2 Ciclos de carboplatina apenas em virtude de neuropatia e concluiu o curso em janeiro de 2008. Em abril de 2011, foi submetida à cirurgia de citorredução secundária para massa pélvica recidivante. A paciente não quis receber quimioterapia adjuvante ou radioterapia. Além disso, teve recidiva da doença em julho de 2012 e inseriu um stent para hidronefrose. Doença recidivante em agosto de 2012 e começou carboplatina + gencitabina. Tomografia computadorizada em março 2013 revelou progressão da doença; a paciente concluiu 6 x Ciclos de Caelyx em outubro de 2013. Doença progressiva começou em 2014 com derrame pleural, o qual requereu drenagem muito regular.

[0295] Iniciou NUC-1031 em 20 de março 2014 a 900 mg/m2 semanalmente e concluiu 6 Ciclos. Realizou PET em 7 de abril 2014, a qual mostrou doença estável e SUV que tinha baixado em alguns tumores alvo. CA125 tinha reduzido de 1.099 na linha de base para 783 no início do Ciclo 2. O volume de fluido proveniente da efusão pleural também reduziu (300 ml eram drenados por semana, agora 150 ml por semana). Desenvolveu fadiga de início retardado (G2) nos Dias 4 e 5 e G1 em todas as vezes. Ao final do Ciclo 6, TC mostrou Doença Estável pela RECIST, com uma redução global de 10% no volume do tumor a partir da linha de base. CA125 caiu de 1.099 inicialmente para 910 em 15 de julho. Concluiu o estudo e solicitou continuação compassiva. A dose foi reduzida para 750 mg/m2 para o Ciclo 7 e recebeu um novo Ciclo. Edema nas pernas se desenvolveu para G3, sem progressão da doença, mas novas opções de tratamento foram procuradas e se retirou do estudo.

[0296] Doença estável pela RECIST (13 meses).

Paciente 044 com Câncer de Pulmão: Doença Estável

[0297] Sexo feminino (64 anos)

[0298] Diagnosticada com adenocarcinoma do pulmão (lobo inferior esquerdo) em fevereiro de 2010 após tosse sem solução durante 7 meses. Entre janeiro de 2011 - abril 2012, a paciente recebeu Gefitinibe a 250 mg, mas teve doença progressiva. Recebeu afatinibe de abril de 2012 a novembro 2012 (mas teve redução da dose em virtude de toxicidade cutânea), mas apresentou novamente doença progressiva. De novembro de 2012 a junho 2013, a paciente recebeu Erlotinibe após agravamento da tosse e progressão da lesão primária. Em junho de 2013, desenvolveu visão anormal e manchas pretas no olho esquerdo e descobriu-se que tinha metástases coroides, para as quais recebeu radioterapia em ambos os olhos, com melhora de sua visão. Em junho de 2013, começou pemetrexede + carboplatina durante 6 Ciclos, seguido de manutenção com pemetrexede até 6 de fevereiro 2014, quando doença progressiva foi diagnosticada.

[0299] Iniciou NUC-1031 em 27 de março de 2014 a 900 mg/m2 semanalmente e concluiu 2 Ciclos. Teve uma infecção G3 no pulmão em 19 de abril, a qual respondeu bem aos antibióticos. Iniciou o Ciclo 2 com uma dose reduzida de 825 mg/m2 e concluiu mais 2 Ciclos. Ao final do Ciclo 2, TC mostrou Doença Estável pela RECIST, com uma redução de 10% no volume do tumor. Teve 2 atrasos no tratamento para drenagem da ascite e mais dois em virtude de trombocitopenia. Ao final do Ciclo 4, TC mostrou doença progressiva no pulmão e novas metástases hepáticas. Retirada do estudo.

[0300] Doença estável pela RECIST (5 meses).

Paciente 046 com Carcinoma Adrenal: Doença Estável

[0301] Sexo masculino (36 anos)

[0302] Diagnosticado em agosto de 2011 com um grande carcinoma adrenocortical de 20 x 19 x 9 cm. Ki 67 35-40% contagem mitótica 25/50hpf, pontuação de Weiss de 6 com tumor se estendendo por 0,3 mm a partir das margens externas, mas sem envolvimento renal. Recebeu mitotano adjuvante até janeiro de 2012, quando foi interrompido em virtude de náuseas e diarreia. Recomeçou o mitotano em junho de 2012. Recidiva em junho de 2013, com novas metástases hepáticas e iniciou etoposídeo + carboplatina.

[0303] Classificação de estágio por TC em setembro 2013 mostrou resposta diferencial, mas doença global estável, e recebeu mais 3 Ciclos e permaneceu estável após conclusão em novembro de 2013. Em janeiro 2014, mostrou progressão da doença para o fígado.

[0304] Iniciou NUC-1031 em 16 de abril 2014 a 1.000 mg/m2 semanalmente e concluiu 1 Ciclo. Durante o Ciclo 1, experimentou fadiga de início tardio, náuseas e vômitos (todos G3). A dose foi reduzida para 900 mg/m2 para o Ciclo 2 e recebeu mais 5 Ciclos nesta dose até concluir o estudo. Ao final do Ciclo 6, TC mostrou uma redução de 12,6% no volume do tumor a partir da linha de base. Solicitou continuação compassiva e concluiu mais 3 Ciclos. Fadiga (G3) e neutropenia (G2) se desenvolveram após o Ciclo 8, D1, a dose foi reduzida para 750 mg/m2 para o Ciclo 8 e recebeu mais 2 Ciclos. Embora tenha melhorado para G1, a fadiga continuou e também teve náusea e vômitos e a dose foi reduzida para 625 mg/m2 para C11. Recebeu mais 2 doses. Retirado do estudo.

[0305] Doença estável pela RECIST (11 meses).

Paciente 048 com Câncer Ovariano: Doença Estável

[0306] Sexo feminino (63 anos)

[0307] Diagnosticada com tumor de células granulosas do ovário em Estágio 1 em 2000 e sofreu histerectomia total abdominal e salpingo-ooforectomia bilateral + omentectomia. Quando de recidiva em fevereiro de 2004, começou 3 Ciclos de BEP (bleomicina + etoposídeo + cisplatina) para progressão da doença. Cirurgia debulking secundária em julho de 2004.

[0308] Em junho de 2006, foi submetida à hepatectomia parcial, esplenectomia e excisão de depósitos no estômago e peritônio. Isto foi seguido por ablação através de radiofrequência de depósitos hepáticos. Sofreu laparotomia e ressecção de 4 novos depósitos metastáticos em setembro de 2008. Em março de 2009, iniciou 3 carboplatina + paclitaxel semanal, com uma resposta mista. Trocou para carboplatina + baixa dose de paclitaxel semanalmente em 12 de maio de 2009. Concluiu em outubro de 2009 com PR e CA-125 negativos. Além disso, sofreu cirurgia debulking em outubro 2011, com complicações que requereram internação prolongada em CTI. TC em abril de 2014 mostrou que a lesão no segmento 8 do fígado tinha aumentado de tamanho, novas pequenas metástases peritoneais no ligamento gastro-hepático e alguma nova linfadenopatia de pequeno volume no mesentério do intestino delgado e ainda pequenos depósitos peritoneais na pelve em torno da junção reto-sigmoide.

[0309] Iniciou NUC-1031 em 29 de abril 2014 a 1.000 mg/m2 semanalmente e recebeu uma dose. Após o Ciclo 1, Dia 1, desenvolveu ALT (G3, uma DLT); AST e neutropenia (G2); ALP (G1). A dose foi reduzida para 900 mg/m2 para o Ciclo 1, Dia 8. ALT voltou a G3 após os Dias 8 e 15. A dose para o Ciclo 2 foi reduzida para 825 mg/m2. Os resultados de PET ao final do Ciclo 1 mostraram doença estável e redução na SUV em locais alvo. Em janeiro de 2014, a inibina B era 430 e aumentou para 1.038 antes de entrada no estudo. Em julho de 2014, a inibina B tinha estabilizado em 1.106, em agosto 1.148, em setembro 1.053. A dose foi reduzida para o Ciclo 4, Dia 15 para 750 mg/m2 em virtude de neutropenia (G3), apesar da intervenção com G-CSF. Concluiu o estudo nesta dose. Ao final do Ciclo 6, TC em 11 de novembro confirmou doença estável pela RECIST. Solicitou continuação compassiva. Em virtude de diarreia após cada dose, iniciou o Ciclo 7 na dose reduzida de 625 mg/m2. Desenvolveu êmbolos próximo da linha de Hickman e, embora tenha respondido ao Clexane, a paciente foi retirada do estudo.

[0310] Doença estável pela RECIST (8 meses).

Paciente 050 (202) com Câncer Esofágico: Doença Progressiva

[0311] Sexo feminino (41 anos)

[0312] Diagnosticada com carcinoma de células escamosas do esôfago em Estágio 4 com metástases hepáticas em novembro de 2013. Recebeu 6 Ciclos de cisplatina + capecitabina de dezembro de 2013 até abril de 2014. Sua TC pós-tratamento mostrou doença progressiva e os novos depósitos no pulmão.

[0313] Iniciou NUC-1031 em 21 de maio de 2014 a 900 mg/m2 semanalmente e recebeu 3 Ciclos. Após o Ciclo 1, Dia 1, desenvolveu ALT e fadiga, ambos G3, e teve redução de dose para o Ciclo 1, Dia 8. Ao final do Ciclo 2, TC parecia mostrar progressão da doença, embora com incerteza sobre algumas lesões iniciais.

[0314] Uma vez que a paciente apresentou benefício clínico com melhora em sua disfagia, foi decidido permitir mais um Ciclo. Ao final do Ciclo 3, TC confirmou progressão da doença e a paciente foi retirada do estudo.

[0315] Doença progressiva.

Paciente 051 (203) com Câncer Anal: Doença Progressiva

[0316] Sexo feminino (51 anos)

[0317] Diagnosticada com carcinoma de células escamosas do ânus metastático em outubro de 2013. Progrediu após 6 Ciclos de cisplatina + 5FU de outubro de 2013 até março de 2014.

[0318] Iniciou NUC-1031, em 3 de junho 2014 a 900 mg/m2 semanalmente e recebeu 2 Ciclos. Precisou de transfusão de sangue durante o Ciclo 2, mas tolerou bem o tratamento. Ao final do Ciclo 2, tomografia computadorizada revelou doença progressiva.

[0319] Doença progressiva.

Paciente 052 (204) com Câncer Esofágico: Doença Estável

[0320] Sexo masculino (66 anos)

[0321] Diagnosticado com câncer esofágico em Estágio IV em dezembro de 2012. Recebeu FOX a partir de janeiro de 2013 até julho de 2013, com uma resposta parcial. Doença Progressiva mostrada em abril de 2014. Stent esofágico inserido.

[0322] Iniciou NUC-1031 em 10 de junho 2014 a 900 mg/m2 semanalmente e concluiu um Ciclo. Em virtude de fadiga, a dose foi reduzida para 825 mg/m2 para o Ciclo 2, com um bom efeito. Concluiu mais 2 Ciclos nesta dose. Ao final do Ciclo 2, tomografia computadorizada revelou doença estável pela RECIST. Continuou a ter dor óssea, mas TC revelou que esta não era relacionada à doença. A disfagia estava ficando exacerbada. Ao final do Ciclo 4, tomografia computadorizada em 10 de novembro revelou progressão da doença.

[0323] Doença estável pela RECIST (5 meses).

Paciente 053 (205) com Câncer de Cólon: Doença Progressiva

[0324] Sexo feminino (31 anos)

[0325] Diagnosticada com um adenocarcinoma T3 N1 M0 do cólon em 2008. Sofreu ressecção e recebeu 12 Ciclos de FOLFOX, que foram concluídos em 2009. Quando de progressão em 2011, recebeu 13 Ciclos de Folfiri (6 dos ciclos incluíam Avastin). Quando de progressão em 2012, recebeu 12 Ciclos de FOLFOX (6 dos ciclos incluíam Avastin). Além disso, Doença Progressiva em janeiro de 2014, com metástases para os pulmões e vértebras. Recebeu radioterapia na coluna vertebral.

[0326] Iniciou NUC-1031 em 12 de junho 2014 a 900 mg/m2 semanalmente e concluiu 1 Ciclo. Desenvolveu uma série de infecções e requereu uma ileostomia. Após muitos atrasos no tratamento, recebeu o Ciclo 2, Dia 15 e, ao final do Ciclo 2, tomografia computadorizada revelou Doença Progressiva com novas lesões no pulmão e fígado.

[0327] Doença progressiva.

Paciente 055 (207) com Câncer Ovariano: Doença Estável

[0328] Sexo feminino (42 anos)

[0329] Diagnosticada em janeiro de 2002 com adenocarcinoma seroso papilar do ovário de Grau 1, Estágio 2c. Sofreu histerectomia abdominal total, salpingo- ooforectomia bilateral e omentectomia com 6 Ciclos de carboplatina + paclitaxel adjuvante. Concluiu o tratamento em junho de 2002.

[0330] Em janeiro de 2012, desenvolveu um novo câncer peritoneal primário de Grau 3, Estágio 3c, envolvendo a junção reto-sigmoide. Sofreu exenteração posterior compreendendo ressecção do ceco, reto e cólon sigmoide e mais omentectomia peritoneal. De março a agosto 2012, recebeu 6 Ciclos de carboplatina + paclitaxel adjuvante.

[0331] Quando de recidiva da doença em janeiro de 2013, recebeu 6 Ciclos de paclitaxel semanalmente até maio de 2013. Após progressão em outubro de 2013, iniciou paclitaxel + carboplatina + inibidor de AKT diária por 3 semanas dentro do estudo AKTRES. Em maio de 2014, TC mostrou novas lesões e doença progressiva.

[0332] Iniciou NUC-1031 em 2 de julho 2014 a 900 mg/m2 semanalmente e recebeu 1 Ciclo. A dose foi reduzida para 825 mg/m2 para o Ciclo 2 em virtude de fadiga e concluiu 4 Ciclos posteriores. Náusea e vômito foram experimentados após quimioterapia, a dose foi reduzida para 625 mg/m2 para o Ciclo 6 e concluiu mais 1 Ciclo. Ao final do Ciclo 6, tomografia computadorizada em 16 de dezembro de 2014 mostrou doença estável pela RECIST, com uma redução no volume do tumor de 18% a partir da linha de base. A CA125 do paciente era de 36 na linha de base e 24 em janeiro de 2015. Concluiu o estudo e solicitou continuação compassiva. Recebeu mais 2 Ciclos sob o Programa de Acesso Compassivo sem maiores problemas. Paciente eleito para sair estudo, uma vez que estava viajando uma grande distância e solicitou interrupção.

[0333] Doença estável pela RECIST (10 + meses).

Paciente 057 (209) com Câncer Ovariano: Doença Estável

[0334] Sexo feminino (58 anos)

[0335] Diagnosticada com câncer ovariano seroso de Grau 3, Estágio 3c em outubro de 2011. Recebeu 3 Ciclos de carboplatina + taxol neo-adjuvante, mas desenvolveu alergia ao taxol no Ciclo 3. Sofreu exenteração posterior, citorredução do ovário, ressecção anterior com uma anastomose primária e omentectomia em 21 de dezembro de 2011. Concluiu 3 Ciclos de carboplatina + docetaxel em março de 2012. Recidiva em junho de 2013 e recebeu 6 Ciclos de carboplatina + Caelyx até novembro de 2013. Em fevereiro de 2014, teve evidência de doença recidivante por TC e recebeu 3 Ciclos de carboplatina + gencitabina a partir de março até junho de 2014.

[0336] Iniciou NUC-1031 em 9 de julho de 2014 a 900 mg/m2 semanalmente e recebeu 2 doses. Se apresentou para o Ciclo 1, Dia 15, em 30de julho com anemia e ascite, ambos G3. A dose foi reduzida para 825 para o Ciclo 2 e recebeu 2 Ciclos posteriores. Ao final do Ciclo 4, TC mostrou doença estável pela RECIST, com uma redução no volume de tumor de 10% a partir da linha de base. Recebeu um dreno pleural com aproximadamente 1.000 ml de fluido muito cheio de sangue extraído a cada duas semanas. Redução adicional da dose para 750 mg/m2 a partir do Ciclo 4, Dia 1, em virtude de fadiga. Recebeu mais um Ciclo. Fluido abdominal crescente. Retirada do estudo em virtude de progressão clínica.

[0337] Doença estável pela RECIST (5 meses)

Paciente 058 (210) com Câncer de Pulmão: Doença Estável

[0338] Sexo masculino (54 anos)

[0339] Diagnosticado com adenocarcinoma metastásico do pulmão de células não pequenas, com metástases nos nódulos linfáticos e ósseas em janeiro de 2014.

[0340] Iniciou 3 Ciclos de cisplatina e pemetrexede com uma resposta de doença estável. Em março de 2014 iniciou manutenção com pemetrexede, recebeu 4 Ciclos até abril de 2014. Em maio de 2014, mostrou doença progressiva com metástases pulmonares bilaterais e recebeu mais uma dose de pemetrexede.

[0341] Iniciou NUC-1031 em 14 de julho de 2014 a 825 mg/m2 semanalmente e recebeu 1 Ciclo. O Ciclo 1, Dia 15, foi atrasado em virtude de uma semana de transaminite G3 (ALT), uma DLT, e a dose foi reduzida para 750 mg/m2. No entanto, uma parte da elevação das enzimas hepáticas pode ser em virtude de uma condição hepática congênita. Recebeu outro Ciclo a 750 mg/m2. Ao final do Ciclo 4, tomografia computadorizada revelou Doença Progressiva com novas lesões nos ossos.

[0342] Doença estável pela RECIST (4 meses)

Paciente 059 (211) com Câncer Cervical: Doença Estável

[0343] Sexo feminino (52 anos)

[0344] Diagnosticada com carcinoma de células escamosas do colo do útero em Estágio IV em dezembro de 2012. Iniciou quimioterapia com carboplatina + taxol, a qual foi interrompida em virtude de toxicidade, especialmente pelo taxol (exantema e prurido), em fevereiro de 2013. Iniciou 6 Ciclos de cisplatina + topotecano em março de 2013 até julho de 2013 e alcançou doença estável. Tomografia computadorizada em outubro de 2013 mostrou progressão da doença. Recebeu 30Gy em 10 frações de radioterapia pélvica que foi concluída em novembro de 2013. Iniciou gencitabina + carboplatina em dezembro de 2013 e recebeu 3 Ciclos. No entanto, uma tomografia computadorizada em fevereiro de 2014 mostrou progressão da doença.

[0345] Iniciou NUC-1031 em 24 de julho de 2014 a 825 mg/m2 semanalmente e concluiu 1 Ciclo. O Ciclo 1, Dia 15, foi adiado por uma semana em virtude de trombocitopenia (G3). A dose foi reduzida para 750 mg/m2 para o Ciclo 2 e concluiu 2 Ciclos posteriores. Ao final do Ciclo 4, tomografia computadorizada revelou doença estável pela RECIST. A dose foi reduzida para 625 mg/m2 para o Ciclo 4 em virtude de fadiga (G3) experimentada durante o Ciclo 3 com um bom efeito. Concluiu mais 2 Ciclos nesta dose. Stent urinário fez com que a paciente ficasse muito desconfortável e foi substituído em janeiro de 2015. Durante o Ciclo 6, a paciente relatou estar muito cansada e escolheu sair do estudo.

[0346] Doença estável pela RECIST (7 meses).

Paciente 060 (212) com Câncer de Pâncreas: Doença Progressiva

[0347] Sexo masculino (83 anos)

[0348] Diagnosticado com câncer metastático pancreático (adenocarcinoma moderadamente diferenciado), com múltiplas metástases no fígado em janeiro de 2014. Eleito para quimioterapia paliativa no estudo Maestro (gencitabina nos Dia 1, 8 e 15 e hipóxia TH302 ativado) de janeiro a junho de 2014, mas teve doença progressiva.

[0349] Iniciou NUC-1031 em 5 de agosto 2014 a 825 mg/m2 semanalmente e concluiu 1 Ciclo. Se apresentou em 10 de setembro com ALP, AST, ALT, todas G3. Necessário novo stent. Atrasos seguidos de tratamento. Concluiu o Ciclo 2 em 1 de outubro. Tomografia computadorizada mostrou Doença Progressiva com novas lesões hepáticas.

[0350] Doença progressiva.

Paciente 061 (213) com Câncer Colorretal: Doença Estável

[0351] Sexo feminino (53 anos)

[0352] Diagnosticada com câncer de cólon em 2012. Realizou cirurgia, a qual envolveu salpingo-ooforectomia bilateral e omentectomia + uma ileostomia. Começou 12 Ciclos de FOLFOX de janeiro a julho de 2013. Após recidiva da doença em abril de 2014, recebeu 8 Ciclos de FOLFIRI e cetuximabe de abril a julho de 2014. Teve náuseas e vômitos severos por toda a quimioterapia.

[0353] Iniciou NUC-1031 em 11 de agosto de 2014 a 825 mg/m2 semanalmente e concluiu 4 Ciclos. Não teve náuseas ou vômitos durante o tratamento. Ao final do Ciclo 2, TC mostrou Doença Estável pela RECIST com uma redução de 2% no volume do tumor. Ao final do Ciclo 4, TC mostrou Doença Progressiva com novas lesões no baço e fígado.

[0354] Doença estável pela RECIST (3 meses).

Paciente 063 (215) com Câncer Ovariano: Doença Estável

[0355] Sexo feminino (78 anos)

[0356] Em maio de 2011, foi diagnosticada com melanoma concomitante vulvar (nível 4 de Clark) e um câncer ovariano em Estágio 3b. Iniciou 3 Ciclos de carboplatina + paclitaxel de agosto a setembro 2011, seguido por cirurgia debulking no intervalo compreendendo histerectomia total abdominal, salpingo-ooforectomia bilateral e omentectomia. Então, recebeu mais 3 Ciclos de carboplatina + paclitaxel, concluindo o tratamento em novembro 2011. Mediante progressão da doença, iniciou 6 Ciclos de gencitabina + carboplatina + Avastin de setembro de 2013 a fevereiro de 2014. Então, recebeu 2 Ciclos de Caelix de abril a junho de 2014.

[0357] Iniciou NUC-1031 em 27 de agosto de 2014 a 825 mg/m2 semanalmente e recebeu 1 Ciclo. A dose foi reduzida para 750 mg/m2 para o Ciclo 2, Dia 15, em virtude de anemia e neutropenia e recebeu 2 Ciclos posteriores. Ao final do Ciclo 2, tomografia computadorizada revelou doença estável pela RECIST. A dose foi reduzida para 625 mg/m2 para o Ciclo 4, Dia 1, em virtude de fadiga (G3), experimentada no Ciclo 3. Desenvolveu falta persistente de respiração. Removida do estudo.

[0358] Doença estável pela RECIST (3 meses).

Paciente 064 (216) com Câncer Trofoblástico: Doença Progressiva

[0359] Sexo feminino (38 anos)

[0360] Em junho de 2011, foi diagnosticada com tumor trofoblástico e epitelioide e sítio placentário misto (PSTT/ETT) em estágio 3 recidivante. Após histerectomia radical e amostragem de nódulos linfáticos, recebeu quimioterapia adjuvante com paclitaxel + cisplatina, por fim com paclitaxel + etoposídeo a partir de junho a outubro de 2011, seguido por cirurgia para extravasamento de linfa em novembro de 2011 e um implante ureteral bilateral em fevereiro de 2012.

[0361] Em fevereiro de 2013, sofreu uma ooforectomia esquerda e ressecção de serosa da bexiga para doença recidivante e recebeu quimioterapia adjuvante com etoposídeo em dose elevada de março a julho de 2013, seguido de transplante autólogo de células-tronco. Em janeiro de 2014 sofreu exenteração posterior compreendendo ressecção da parte superior da vagina, do reto e da bexiga, remoção do ovário esquerdo, parte anterior da vagina, nódulo mesentérico e ureter direito. Recebeu 5 Ciclos de pemetrexede + carboplatina de fevereiro a maio de 2014. Este foi trocado por gencitabina + carboplatina em virtude de aumento dos níveis de HCG. Recebeu 2 Ciclos, mas tomografia computadorizada mostrou lesão inferior no lobo esquerdo do pulmão que foi considerado inoperável.

[0362] Iniciou NUC-1031, em 3 de setembro 2014 a 825 mg/m2 semanalmente e recebeu 2 Ciclos. Ao final do Ciclo 2, tomografia computadorizada revelou Doença Progressiva, com crescimento nas lesões existentes nos pulmões e peritônio.

[0363] Doença progressiva.

Paciente 066 (218) com Câncer Colorretal: Doença Estável

[0364] Sexo masculino (65 anos)

[0365] Em maio de 2011, foi primeiro diagnosticado com adenocarcinoma moderadamente diferenciado do cólon sigmoide pT4B. Sofreu uma ressecção anterior em novembro de 2011 e iniciou quimioterapia com FOLFOX em janeiro de 2012. Desenvolveu neuropatia periférica após 3 Ciclos e foi trocada para monoterapia com 5FU. Também teve atrasos em virtude de diarreia e mal-estar. Após 3 meses com 5-FU, mostrou uma resposta de marcador estável, mas uma resposta mista na tomografia computadorizada em julho de 2012. Permaneceu estável e fora de tratamento até maio 2013, quando mostrou progressão em sua tomografia computadorizada, com os níveis de marcadores tumorais dobrando. Reiniciou 5FU + Avastin que foram concluídos em outubro de 2013. O tratamento foi complicado com inúmeras internações com infecções no peito e dor no peito. Recebeu 8 Ciclos de cetuximab ede março a julho de 2014. TC mostrou progressão da doença relacionada à 5FU mais Avastin. Em junho 2014, sofreu uma laparotomia e adesiólise em virtude de aderências de depósitos metastáticos dentro seu peritônio. Recebeu um novo Ciclo de Avastin mas, com uma CEA subindo, foi descontinuado. Teve muitas comorbidades, DPOC, doença cardíaca isquêmica e insuficiência cardíaca congestiva.

[0366] Iniciou NUC-1031 em 16 de setembro de 2014 a 825 mg/m2 semanalmente e recebeu 2 Ciclos. Redução da dose de 750 mg/m2 para o Ciclo 3 em virtude de fadiga e recebeu um novo Ciclo. Ao final do Ciclo 2, tomografia computadorizada revelou doença estável pela RECIST.

[0367] Teve duas internações recentes por complicações de uma hérnia, o que resultou em atrasos de tratamento. TC realizada em 30 de dezembro mostrou doença estável com redução contínua no volume do tumor para 16% a partir da linha de base. Dose adicionalmente reduzida para 625 mg/m2 para o Ciclo 4 em virtude de fadiga. Recebeu um novo Ciclo com esta dose sem maiores problemas.

[0368] Admitida no Ciclo 5 com dor aguda nas costas, fratura pela idade observada (não relacionada ao estudo). Continua sob avaliação cirúrgica. Retirada do estudo em virtude de atrasos no tratamento.

[0369] Doença estável pela RECIST (8 + meses).

Paciente 067 (219) com Osteossarcoma: Doença Estável

[0370] Sexo masculino (38 anos)

[0371] Em Maio de 2011, foi diagnosticado com osteossarcoma de tíbia direita proximal.

[0372] Recebeu 6 Ciclos de cisplatina + doxorrubicina + metotrexato de fevereiro a novembro de 2012. Teve uma reposição tibial proximal em novembro de 2012 e recebeu quimioterapia com mifamurtida por 6 meses. Tomografia computadorizada em agosto de 2014 mostrou recorrência metastática com nova lesão intrapulmonar e do pericárdio, inferior a IVC e adjacente ao átrio direito.

[0373] Iniciou NUC-1031 em 30 de setembro de 2014 a 825 mg/m2 semanalmente e recebeu 5 Ciclos. Ao final do Ciclo 4, tomografia computadorizada revelou doença estável pela RECIST. Tende a desenvolver neutropenia G2 ao final de cada Ciclo, mas as contagens se recuperam rapidamente. Concluiu o estudo no dia 3 de março de 2015. Fármaco de estudo bem tolerado. EOS TC mostrou doença estável pela RECIST, com um aumento de 1% a partir da linha de base. TC também mostrou calcificação significativa do tumor. Paciente solicitou continuação compassiva do fármaco sob estudo e terá concluído C7 em 2 de abril 2015, com a dose reduzida para 750 mg/m2. Avaliado pelo cirurgião torácico que operará o pulmão esquerdo para remover a lesão alvo no lobo inferior em 26 de abril de 2015. Os cirurgiões torácicos removeram a lesão alvo calcificada no lobo inferior em 26 de abril de 2015. A lesão foi completamente removida com uma clara margem de tecido normal circundante. O paciente apresentou uma boa recuperação da operação.

[0374] Doença estável pela RECIST (7+ meses).

Paciente 068 (220) com Câncer de Pulmão

[0375] Sexo masculino (60 anos)

[0376] Em Maio de 2011, foi diagnosticado com carcinoma de células não pequenas do pulmão direito T3 N3 M1b (adenocarcinoma), EGFR de tipo selvagem em fevereiro de 2013. Recebeu 10 Ciclos de pemetrexede e cisplatina de fevereiro a dezembro de 2013, seguido de radioterapia paliativa torácica. De janeiro a maio 2014, incluído no estudo POPLAR no braço com docetaxel.

[0377] Iniciou NUC-1031 em 3 de outubro de 2014 a 825 mg/m2 semanalmente e recebeu 2 Ciclos. Ao final do Ciclo 2, tomografia computadorizada revelou doença progressiva. Removido do estudo.

[0378] Doença progressiva.

Paciente 069 (221) com Câncer colorretal

[0379] Sexo feminino (45 anos)

[0380] Em maio de 2011, foi diagnosticada com câncer colorretal. Em agosto de 2011, recebeu capecitabina neo- adjuvante com radioterapia e, então, cirurgia debulking primária em dezembro de 2011. Recebeu FOLFOX adjuvante de janeiro a julho de 2012. Em abril 2013, desenvolveu uma recorrência de pulmão solitário, a qual foi ressecada. Em julho de 2013, uma recorrência parieto-occipital direita foi encontrada e removida, juntamente com alguns depósitos de câncer dérmicos e subcutâneos. Iniciou cetuximabe com Folfiri partir de setembro de 2013 e se manteve sob manutenção com cetuximabe até setembro de 2014. Tratamento com gama-knife em setembro de 2014 para metástase cerebral. É assintomática para sintomas neurológicos.

[0381] Iniciou NUC-1031 em 9 de outubro 2014 a 825 mg/m2 semanalmente e recebeu 3 Ciclos. PET scan em 30/10 mostrou resposta parcial. Durante exame antes de C2, metástases cutâneas e subcutâneas estavam grandemente reduzidas ou tinham quase desaparecido e nenhuma nova havia aparecido. Ao final de C2, TC mostrou doença estável pela RECIST, com uma redução de 11% no volume do tumor a partir da linha de base. Desenvolveu neutropenia (G4) e leucopenia (G3) durante o Ciclo 3 e a dose foi reduzida para 750 mg/m2 para o Ciclo 4. Ao final de C4, TC mostrou doença estável pela RECIST, com redução de 26% no volume do tumor a partir da linha de base. Após o Ciclo 4, D1, desenvolveu neutropenia e leucopenia, G3, e a dose foi reduzida para 675 mg/m2 para o Ciclo 4, D8. A dose foi reduzida para 625 mg/m2 para C5, D8, em virtude de neutropenia e leucopenia, G2. Experimentou transtornos visuais, tomografia computadorizada revelou que a lesão no cérebro tinha aumentado. Esta foi removida com Cyberknife. Recomeçou o fármaco de estudo, C7, D1, em 29 de abril de 2015, a dose foi reduzida para 500 mg/m2. Doença estável pela RECIST (7+ meses).

Claims (11)

1. Uso de NUC-1031 (gemcitabina-[fenil-benzóxi-L- alaninil)]-fosfato) caracterizado por ser para fabricação de um medicamento para alvejamento de células-tronco tumorais para tratamento de câncer.

2. Uso de NUC-1031, de acordo com a reivindicação 1, caracterizado por o câncer ser refratário ou recidiva do mesmo em um paciente humano.

3. Uso de NUC-1031, de acordo com a reivindicação 2, caracterizado por ser para o tratamento de recidiva do câncer em um paciente humano.

4. Uso de NUC-1031, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 3, caracterizado por o alvejamento das células-tronco tumorais provocar a morte das mesmas.

5. Uso de NUC-1031, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 4, caracterizado por ser através de redução ou prevenção do desenvolvimento do câncer.

6. Uso de NUC-1031, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 5, caracterizado por ser através de redução ou prevenção da progressão do câncer.

7. Uso de NUC-1031, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 6, caracterizado por ser através de redução ou prevenção da recorrência do câncer.

8. Uso de NUC-1031, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 7, caracterizado por ser através de redução ou prevenção da propagação do câncer.

9. Uso de NUC-1031, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 8, caracterizado por o câncer ser selecionado do grupo que consiste em: leucemia, linfoma, mieloma múltiplo, câncer de pulmão, câncer de fígado, câncer de mama, câncer de cabeça e pescoço, neuroblastoma, carcinoma de tireoide, câncer de pele (incluindo melanoma), carcinoma de células escamosas orais, câncer de bexiga, tumor de células de Leydig, câncer biliar, tal como colangiocarcinoma ou câncer de duto biliar, câncer de pâncreas, câncer de cólon, câncer colorretal, osteossarcoma e cânceres ginecológicos, incluindo câncer de ovário, câncer de endométrio, câncer de trompas de falópio, câncer uterino e câncer cervical.

10. Uso de NUC-1031, de acordo com a reivindicação 9, caracterizado por a leucemia ser selecionada do grupo que consiste em leucemia linfoblástica aguda, leucemia mielógena aguda (também conhecida como leucemia mieloide aguda ou leucemia não linfocítica aguda), leucemia promielocítica aguda, leucemia linfocítica aguda, leucemia mielógena crônica (também conhecida como leucemia mieloide crônica, leucemia mielocítica crônica ou leucemia granulocítica crônica), leucemia linfocítica crônica, leucemia monoblástica e leucemia de células pilosas, em particular leucemia linfoblástica aguda.

11. Uso de NUC-1031, de acordo com a reivindicação 9, caracterizado por o linfoma ser selecionado do grupo que consiste em: linfoma de Hodgkin; linfoma não Hodgkin; linfoma de Burkitt; e linfoma linfocítico pequeno.

Images