BR112017020131B1

BR112017020131B1 - Composto, seu uso e composição farmacêutica

Info

Publication number: BR112017020131B1
Application number: BR112017020131-3A
Authority: BR
Inventors: Barbara DYMEK; Marcin ZAGOZDA; Maciej Wieczorek; Krzysztof DUBIEL; Aleksandra STANCZAK; Daria ZDZALIK; Pawel GUNERKA; Mariola SEKULAR; Maciej DZIACHAN
Original assignee: Celon Pharma S.A
Priority date: 2015-04-02
Filing date: 2016-03-30
Publication date: 2023-02-28
Also published as: HUE047822T2; EP3277687A1; CN107743489A; BR112017020131A2; JP6665201B2; ES2765642T3; PL411864A1; EA201792087A1; KR20170132275A; AU2016241568A1; JP2018510192A; HRP20192195T1; EP3277687B1; EA032826B1; PL3277687T3; CA2978828A1; SI3277687T1; AU2016241568B2; WO2016157091A1; US10138247B2

Abstract

Trata-se de um composto de fórmula geral (I) em que Y representa -CH2- ou >C=0; R1 é selecionado a partir do grupo que consiste em A1, A2 e A3; R2 representa uma porção química de dioxotiomorfolino B1, porção química de piperazinila B2, porção química de azetidinila B3 ou porção química de piperidinila B4; R3 é selecionado a partir do grupo que consiste em H, halogênio e alquila C1 -C4; R4 é selecionado a partir do grupo que consiste em alquila C1 -C4, ciclolquila-C3-C4, alquila- C1 -C4 substituída por alcóxi-C1 -C4 e CHF2 e seus sais farmaceuticamente aceitáveis. As composições farmacêuticas que compreendem os ditos compostos e seu uso no tratamento de doenças de sistema imunológico, doenças inflamatórias e câncer.

Description

[001] A presente invenção refere-se a derivados de 7-(morfolin-4- il)pirazolo[1,5-a]pirimidina inovadores, composições farmacêuticas que contêm os mesmos e seu uso como medicamentos. Derivados de 7-(morfolin-4- il)pirazolo[1,5-a]pirimidina exibem a habilidade de inibir atividade de PI3 quinase e podem encontrar uso como medicamentos, especialmente para tratar doenças de sistema imunológico, doenças inflamatórias e câncer.

[002] A família PI3 de quinases é responsável pela transdução de sinal em uma dentre trajetórias de sinalização críticas, responsável pela regulação de sobrevivência celular, processos de diferenciação e migração. Essas quinases também são responsáveis pela regulação da função do sistema imunológico. A ativação anormal de trajetória de PI3K foi confirmada em doenças oncológicas, tais como, leucemia linfocítica crônica ou linfoma não Hodgkin, assim como em doenças com processos inflamatórios subjacentes, tais como, por exemplo, artrite reumatoide ou asma.

[003] Quinases PI3 ativas são compostas de uma subunidade catalítica e uma subunidade regulatória. A família de quinases PI3K tipo I inclui quatro subunidades regulatórias: PI3K-α, -β, -y e -δ. As isoformas α e β são expressas em todos os tecidos, e sua inativação no estágio de desenvolvimento embrionário é letal. A expressão de isoformas y e δ é limitada à linha hematopoiética; sua inativação não é letal, resultando, por sua vez, na ocorrência de síndrome de imunodeficiência em organismos em desenvolvimento.

[004] Lipídeo quinases PI3 catalisam a produção de fosfatidilinositol (3,4,5)- trifosfato (PIP3) por fosforilação de fosfatidilinositol através de intermediários fosfatidilinositol 3-fosfato (PIP) e fosfatidilinositol 3,4-bisfosfato. O fosfolipídeo PIP3 localizado em membrana celular é um local de ligação para proteína AKT, cujo grau de fosforilação reflete a atividade de trajetória PI3K.

[005] Portanto, a inibição de PI3K é o mecanismo atrativo de tratamento de muitas doenças, em que o nível de fosforilação de proteína AKT em células pode ter uma função.

[006] Devido à expressão de PI3K α e β em um amplo espectro de tecidos, assim como seu papel no desenvolvimento embrionário, inibidores de PI3K não seletivos podem ter tolerabilidade limitada e alta toxicidade.

[007] Portanto, há uma necessidade de inibidores de PI3K seletivos,especialmente inibidores de PI3Kδ, que exibam atividade desejada e habilidade limitada para causar efeitos colaterais adversos.

[008] Vários inibidores de PI3 lipídeo quinases são revelados na técnica anterior.

[009] Os documentos no WO2010136491 e WO2010138589 revelam compostos de indolopirimidina bicíclica que exibem atividade de inibição de PI3 quinase e são úteis para tratar doenças, tais como, distúrbios inflamatórios e imunológicos e cânceres.

[010] O documento no WO2011101429 revela compostos de pirido[3,2- d]pirimidina substituídos por morfolino que exibem atividade de inibição de PI3 quinase e são úteis para tratar doenças, tais como, distúrbios inflamatórios e imunológicos e cânceres.

[011] O objetivo da invenção é a provisão de compostos inovadores, inibidores de PI3K de utilidade potencial no tratamento de doenças e distúrbios inflamatórios e imunológicos, e cânceres, que exibem atividade seletiva alvejada em isoformas de PI3K específicas, em particular, PI3K delta.

[012] A presente invenção se refere a um composto da fórmula geral (I)

em que: Y representa –CH2- ou >C=O; R1 é selecionado a partir do grupo que consiste em A1, A2 e A3:

R2 representa: - porção química de dioxotiomorfolino B1;

- porção química de piperazinila B2

em que dois átomos de carbono do anel de piperazina podem ser opcionalmente unidos por ponte de metileno para formar porção química diazabicíclica-2,5, e R5 é selecionado a partir do grupo que consiste em -SO2CH3; –C(O)-C1-C3-alquila; –C(O)-C3-C5-ciclolquila; fenila substituída por –O-C1-C3 alquila; e –CR6R7R8, em que R6, R7 e R8 são independentemente selecionados a partir do grupo que consiste em átomo de hidrogênio, CH3, ciclopropila e CONH2, desde que apenas um dentre R6, R7 e R8 possa representar ciclopropila ou CONH2, ou um dentre R6, R7 e R8 representa átomo de hidrogênio e dois restantes dentre R6, R7 e R8 são unidos para formar -(CH2)2-, –(CH2)3-, -(CH2)4- ou –(CH2-O-CH2)- ; - porção química de azetidinila B3

em que R9 é selecionado a partir do grupo que consiste em morfolino, 2,6- dimetilmorfolino, 1,1-dioxotiomorfolino, 4,4-difluoropiperidinila e 3- metoxiazetidin-1-ila; ou - porção química de piperidinila B4

em que R10 é selecionado a partir do grupo que consiste em alquila C1-C4; alquila C1-C4 substituída por OH; -COO(alquila C1-C3); -N(alquila C1-C3)2; - NHCONH-C1-C3-alquila; -NHCONH-C1-C3-fenila; piperazinila e piperazinila substituída na posição 4 por alquila C1-C3; R3 é selecionado a partir do grupo que consiste em H, halogênio e alquila C1-C4; R4 é selecionado a partir do grupo que consiste em alquila C1-C4, ciclolquila-C3- C4, alquila C1-C4 substituída por alcóxi C1-C4 e CHF2; X1 e X2 têm os seguintes significados: (i) X1 representa CH e X2 representa CH ou N; (ii) X1 representa N e X2 representa CH, ou (iii) X1 representa CH e X2 representa C-O-CH3; X3, X4, X5 e X6 têm os seguintes significados: (iv) X3 representa N, X4 representa CH, X5 representa CH e X6 representa CH; (v) ) X3 representa CH, X4 representa N, X5 representa CH e X6 representa CH; (vi) ) X3 representa CH, X4 representa CH, X5 representa N e X6 representa CH; (vii) X3 representa CH, X4 representa CH, X5 representa CH e X6 representa CH ou CF; ou (viii) X3 representa CH, X4 representa CH, X5 representa CF e X6 representa CH; X7 representa CH ou N; linha ondulada indicou o ponto de fixação; e sais de adição ácida dos mesmos.

[013] Em uma modalidade, a invenção se refere ao composto da fórmula (I), em que Y representa -CH2-.

[014] Em outra modalidade, a invenção se refere ao composto da fórmula (I), em que Y representa >C=O.

[015] Um grupo dos compostos da invenção são os compostos da fórmula (I), em que R3 representa H.

[016] Outro grupo dos compostos da invenção são os compostos da fórmula (I), em que R3 representa alquila C1-C4. Vantajosamente, R3 representa metila.

[017] Ainda outro grupo dos compostos da invenção é o composto da fórmula (I), em que R3 representa átomo de halogênio. O átomo de halogênio engloba átomos de cloro, bromo e flúor, e vantajosamente representa átomo de cloro.

[018] Em outra modalidade dos compostos da invenção R2 representa B1.

[019] Em outra modalidade dos compostos da invenção R2 representa B2.

[020] Outro subgrupo dos compostos da invenção são os compostos da fórmula (I), em que R5 em B2 representa -CR6R7R8 e R8, R6, R7 e R8 são independentemente selecionados a partir do grupo que consiste em átomo de hidrogênio e CH3, isto é, R5 representa alquila C1-C4 selecionada a partir do grupo que consiste em CH3, CH2CH3, CH(CH3)2 e C(CH3)3. Vantajosamente, R5 representa C(CH3)3 (t-butil).

[021] Em outra modalidade dos compostos da invenção R2 representa B3.

[022] Em outra modalidade dos compostos da invenção R2 representa B4.

[023] Em uma variante dos compostos da invenção, R1 representa A1 ou A2.

[024] Em modalidade adicional, R1 representa A1, em que X1 representa CH e X2 representa CH ou N.

[025] Em um subgrupo dessa variante, R1 representa A1, em que X1 representa CH e X2 representa CH ou N, e R2 representa B2 ou B4. Em particular, X1 representa CH e X2 representa CH. Em uma modalidade de tal subgrupo Y representa -CH2-. Vantajosamente, R5 em porção química de B2 representa alquila C1-C4, especialmente t-butila. Também preferencialmente, R10 na porção química de B4 representa alquila C1-C4 substituída por OH, especialmente 2-hidroxipropan-2-ila.

[026] Em outro subgrupo dessa variante, R1 representa A1, em que X1 representa CH e X2 representa CH ou N, e R2 representa B3 e Y representa - CH2-. Em particular, X1 representa CH e X2 representa CH.

[027] Em outra modalidade, R1 representa A1, em que X1 representa N e X2 representa CH, e R2 representa B2 ou B4. Em um subgrupo dessa modalidade, Y representa -CH2-. Vantajosamente, R5 em B2 representa alquila C1-C4, especialmente t-butila. Também preferencialmente, R10 em B4 representa alquila C1-C4 substituída por OH, especialmente 2-hidroxipropan-2-ila.

[028] Em outra modalidade, R1 representa A1, em que X1 representa CH e X2 representa C-O-CH3. Em um subgrupo dessa modalidade, Y representa -CH2- . Vantajosamente, R5 em B2 representa alquila C1-C4, especialmente t-butila. Também preferencialmente, R10 em B4 representa alquila C1-C4 substituída por OH, especialmente 2-hidroxipropan-2-ila.

[029] Vantajosamente, R4 representa alquila C1-C4, o que inclui metila, etila, n-propila, iso-propila, n-butila, iso-butila e t-butila, especialmente metila, etila ou iso-propila. Também preferencialmente, R4 representa ciclopropila ou ciclobutila. Mais preferencialmente, R4 é CHF2.

[030] Em uma variante adicional dos compostos da invenção R1 representa A2.

[031] Em um subgrupo dessa variante, R1 representa A2 em que X3 representa N, X4 representa CH, X5 representa CH, e X6 representa CH, e R2 representa B2 ou B4. Em uma modalidade desse subgrupo Y representa -CH2-. Vantajosamente, R5 em B2 representa alquila C1-C4, especialmente t-butila. Também preferencialmente, R10 em B4 representa alquila C1-C4 substituída por OH, especialmente 2-hidroxipropan-2-ila.

[032] Em outro subgrupo dessa variante, R1 representa A2 em que X3 representa CH, X4 representa N, X5 representa CH, e X6 representa CH, e R2 representa B2 ou B4. Em uma modalidade desse subgrupo Y representa -CH2- . Vantajosamente, R5 em B2 representa alquila C1-C4, especialmente t-butila. Também preferencialmente, R10 em B4 representa alquila C1-C4 substituída por OH, especialmente 2-hidroxipropan-2-ila.

[033] Em outro subgrupo dessa variante, R1 representa A2 em que X3 representa CH, X4 representa CH, X5 representa N, e X6 representa CH, e R2 representa B2 ou B4. Em uma modalidade desse subgrupo Y representa -CH2-. Vantajosamente, R5 em B2 representa alquila C1-C4, especialmente t-butila. Também preferencialmente, R10 em B4 representa alquila C1-C4 substituída por OH, especialmente 2-hidroxipropan-2-ila.

[034] Em outro subgrupo dessa variante, R1 representa A2 em que X3 representa CH, X4 representa CH, X5 representa CH, e X6 representa CH ou CF, especialmente CH, e R2 representa B2 ou B4. Em uma modalidade desse subgrupo Y representa -CH2-. Vantajosamente, R5 em B2 representa alquila C1-C4, especialmente t-butila. Também preferencialmente, R10 em B4 representa alquila C1-C4 substituída por OH, especialmente 2-hidroxipropan-2-ila.

[035] Em outro subgrupo dessa variante, R1 representa A2 em que X3 representa CH, X4 representa CH, X5 representa CH e X6 representa CH ou CF, especialmente CH, e R2 representa B2 ou B4. Vantajosamente, R5 em B2 representa alquila C1-C4, especialmente t-butila. Também preferencialmente, R10 em B4 representa alquila C1-C4 substituída por OH, especialmente 2- hidroxipropan-2-ila.

[036] Em outro subgrupo dessa variante, R1 representa A2 em que X3 representa CH, X4 representa CH, X5 representa CF e X6 representa CH, e R2 representa B2 ou B4. Vantajosamente, R5 em B2 representa alquila C1-C4, especialmente t-butila. Também preferencialmente, R10 em B4 representa alquila C1-C4 substituída por OH, especialmente 2-hidroxipropan-2-ila.

[037] Em uma variante adicional dos compostos da invenção, R1 representa uma porção química A3, e R2 representa B2 ou B4. Vantajosamente, R5 em B2 representa alquila C1-C4, especialmente t-butila. Também preferencialmente, R10 em B4 representa alquila C1-C4 substituída por OH, especialmente 2- hidroxipropan-2-ila.

[038] Em um subgrupo dos compostos da invenção, R1 representa A1 ou A2, e R2 representa B2 ou B4.

[039] Vantajosamente, R5 em B2 representa terc-butila.

[040] Vantajosamente, R10 em B4 representa 2-hidroxipropan-2-ila.

[041] Exceto se definido especificamente de outro modo, o termo alquila C1-C4, usado no presente documento, engloba metila, etila, n-propila, iso- propila, n-butila, sec-butila e terc-butila. O termo alquila C1-C3 engloba metila, etila, n-propila e iso-propila.

[042] O termo alcóxi C1-C4 engloba metóxi, etóxi, n-propóxi, n-butóxi, sec- butóxi e terc-butóxi.

[043] O termo ciclolquila-C3-C4 engloba ciclopropila e ciclobutila, e o termo ciclolquila-C3-C5 engloba ciclopropila, ciclobutila e ciclopentila.

[044] Os compostos da fórmula (I) da invenção exibem a habilidade de inibição de PI3 quinase e podem encontrar uso como medicamentos, em particular, para tratar doenças e distúrbios de sistema imunológico, doenças e distúrbios inflamatórios e câncer. Características específicas dos compostos da invenção é alta seletividade de inibição de PI3K delta (PI3Kδ) quinase em comparação com outras isoformas dessa quinase. Isso permite esperar toxicidade reduzida em comparação com inibidores de espectro amplo que atuam em muitas isoformas de PI3K.

[045] Aspecto adicional da invenção é, portanto, o composto da fórmula (I), conforme definida acima, para uso como um medicamento.

[046] Um aspecto ainda adicional da invenção é, portanto, o uso do composto da fórmula (I), conforme definido acima, para a preparação de um medicamento para o tratamento de doenças e distúrbios do sistema imunológico, doenças e distúrbios inflamatórios e câncer.

[047] Outro aspecto da invenção é uma composição farmacêutica que compreende o composto da fórmula (I), conforme definido acima, e excipientes farmaceuticamente aceitáveis.

[048] Outro aspecto da invenção é um método de tratamento de doenças e distúrbios do sistema imunológico, doenças e distúrbios inflamatórios, e câncer, que compreende administrar uma quantidade eficaz do composto da fórmula (I) conforme definido acima.

[049] Sais de adição ácida dos compostos da fórmula (I) da invenção incluem, em particular, sais com ácido inorgânico ou orgânico farmaceuticamente aceitáveis. São preferenciais sais de adição de ácido farmaceuticamente aceitáveis. Ácidos inorgânicos e orgânicos que têm capacidade para formar sais de adição ácida, o que inclui sais farmaceuticamente aceitáveis com os compostos que têm átomo de nitrogênio básico e métodos de sua preparação são bem conhecidos na técnica. Em particular, sais com ácidos inorgânicos podem compreender sais de ácidos clorídrico, hidrobrômico, sulfúrico e fosfórico. Em particular, sais com ácidos orgânicos podem compreender sais de ácidos metanossulfônico, etanossulfônico, p-toluenossulfônico, benzenossulfônico, naftalenossulfônico, acético, propiônico, lático, tartárico, málico, cítrico, fumárico, maleico e benzoico. Deve ser compreendido que o escopo da invenção inclui também sais com ácidos diferentes daqueles farmaceuticamente aceitáveis que podem ser usados especialmente como intermediários na preparação, isolamento e purificação dos compostos da invenção.

[050] Compostos específicos da invenção são selecionados a partir do grupo que consistem nos compostos apresentados abaixo nos Exemplos e seus sais de adição ácida, especialmente sais de adição de ácido farmaceuticamente aceitáveis, o que inclui sais de adição de ácidos orgânicos e inorgânicos.

[051] Os compostos de fórmula (I) podem ser preparados de uma maneira descrita abaixo genérica e especificamente nos exemplos de preparação de intermediários e Compostos da invenção, e delineados nos Esquemas 1, 2 e 3.ESQUEMA 1 quando R3 = H ou alquila

ESQUEMA 2

ESQUEMA 3

[052] Conforme mostrado no Esquema 1 acima, os compostos de fórmula (I) em que R3 representa átomo de hidrogênio ou alquila C1-C4, e símbolos adicionais têm o significado conforme definido acima, podem ser obtidos a partir de um aldeído ou ácido da fórmula (II) em que Z representa átomo de hidrogênio ou OH, respectivamente, e símbolos adicionais têm o significado conforme definido para a fórmula (I).

[053] O composto da fórmula (II) em que Z representa átomo de hidrogênio é reagido com amina da fórmula R2H na reação de aminação redutiva para obter o composto da fórmula (I) em que Y representa CH2 e R3 representa átomo de hidrogênio ou alquila C1-C4.

[054] A reação de aminação redutiva com amina R2H pode ser realizada na faixa de temperatura de 0 °C até o ponto de ebulição do componente de mais inferior da mistura de reação, em um solvente orgânico tal como, por exemplo clorofórmio, diclorometano, dioxano, dimetilformamida, dimetilacetamida, tolueno, hexano, tetrahidrofurano ou dimetoxietano. O agente de redução pode ser, por exemplo, borohidreto de sódio, triacetoxiborohidreto de sódio ou cianohidreto de sódio. As condições mais adequadas são o uso de diclorometano como o solvente, triacetoxiborohidreto de sódio como o agente de redução e a realização da reação em temperatura ambiente.

[055] O composto da fórmula (II) em que Z representa OH é reagido com amina da fórmula R2H na reação de amidação para obter o composto da fórmula (I) em que Y representa >C=O e R3 representa átomo de hidrogênio ou alquila C1-C4.

[056] A reação de amidação com amina R2H pode ser realizada na faixa de temperatura de 0 °C até o ponto de ebulição do componente de ebulição mais inferior da mistura de reação (temperatura de refluxo), em um solvente orgânico, tal como, por exemplo, clorofórmio, diclorometano, dioxano, dimetilformamida, dimetilacetamida, tolueno, hexano, tetrahidrofurano, dimetoxietano, dimetilsulfóxido, acetato de etila, acetonitrila ou dietil éter. A reação é realizada na presença de carbodiimida, por exemplo cloridrato de N,N’- diisopropilcarbodiimida, N,N’-diciclohexilcarbodiimida, 1-etil-3-(3- dimetilaminopropil)carbodiimida ou 1-[bis(dimetilamino)metileno]-1H-1,2,3- triazolo[4,5-b]piridínio 3-oxido hexafluorofosfato (HATU), um aditivo tal como 1- hidroxibenzotriazol (HOBt) ou N-hidroxisuccinimida, e amina terciária, tal como, por exemplo, trietilamina (TEA) ou N,N-diisopropiletilamina (DIPEA). As condições mais adequadas para realizar amidação são temperatura ambiente em dimetilformamida, na presença de hidrocloreto de 1-etil-3-(3- dimetilaminopropil)carbodiimida (EDCI), aditivo de 1-hidroxibenzotriazol (HOBt) e trietilamina (TEA).

[057] Os compostos de fórmula (I) em que R3 representa átomo de halogênio podem ser preparados por halogenação dos compostos da fórmula (I) em que R3 representa átomo de hidrogênio.

[058] A reação de halogenação pode ser realizada com o uso de halogênio molecular ou N-halossuccinimida como um agente de halogenação na temperatura na faixa de 0 °C até o ponto de ebulição do componente de ebulição mais inferior da mistura, em um solvente orgânico, tal como, por exemplo, clorofórmio, diclorometano, dioxano, dimetilformamida, dimetilacetamida, tolueno, hexano, tetrahidrofurano, dimetoxietano, dimetilsulfóxido, acetato de etila, acetonitrila ou dietil éter. As condições mais adequadas para realizar essa reação são o uso de N-halossuccinimida em diclorometano como um solvente a 30 °C.

[059] Os compostos de fórmula (II) são preparados a partir dos compostos da fórmula (III), em que R3 representa átomo de hidrogênio ou alquila C1-C4 e Bn representa benzila,

conforme delineado no Esquema 2.

[060] No caso de preparação do composto da fórmula (II), em que R1 representa A2 ou A3, o composto da fórmula (III) é submetido à reação de Suzuki com ácido borônico R1B(OH)2 ou seu éster, especialmente éster cíclico, tal como éster pinacol, para obter o composto da fórmula (IV), em que Bn é grupo protetor de benzila.

[061] Na reação de Suzuki são usados catalisadores de paládio, por exemplo, acetato de paládio, tetracis(trifenilfosfino)paládio(0), cloreto de bis(trifenilfosfino)paládio, tris(dibenzilidenoacetona)dipaládio(0), 1,1’- bis(difenilfosfino)ferrocenopaládio(II) dicloreto diclorometano aduto, a base, por exemplo fosfato de sódio, carbonato de sódio, carbonato de potássio, carbonato de césio, ou acetato de sódio, e um solvente orgânico, por exemplo tolueno, hexano, tetrahidrofurano, dioxano, ou 1,2-dimetoxietano, na temperatura da faixa de 0 °C até o ponto de ebulição do componente de ebulição mais inferior da mistura. As condições mais adequadas de realização da reação são tetracis(trifenilfosfino)paládio(0) como um catalisador, 2 M de solução de carbonato de sódio aquoso como uma base, e 1,2-dimetoxietano como um solvente em temperatura de refluxo.

[062] Subsequentemente, o composto da fórmula (IV) é desprotegido pela remoção do grupo benzila (Bn) que protege grupo hidroxila para obter um composto da fórmula (V).

[063] A remoção de grupo protetor de benzila pode ser realizada por hidrogenação do composto da fórmula (IV) na presença de paládio em carbono ativo, em um solvente orgânico, tal como, por exemplo, metanol, etanol, dimetilformamida, dioxano, ciclohexano, tolueno, ou suas misturas, à temperatura de 0 °C até o ponto de ebulição do componente de ebulição mais inferior da mistura, sob pressão de hidrogênio na faixa de 100 a 10.000 kPa (1 a 100 bar). As condições mais adequadas de realização da reação são mistura de solvente dimetilformamida (DMF) e etanol (EtOH) com a adição de ácido fórmico, em temperatura elevada, tal como cerca de 60 °C, sob pressão de hidrogênio de cerca de 100 kPa (1 bar).

[064] Portanto, o composto da fórmula (V) obtido é convertido em aldeído ou ácido da fórmula (II) por oxidação, com o uso de agentes de oxidação adequados.

[065] O composto da fórmula (V) pode ser convertido em aldeído da fórmula (II) por oxidação com reagente Collins , reagente Dess-Martin , piridínio dicromato (PDC), piridínio clorocromato (PCC), ácido 2-iodoxibenzoico (IBX), dióxido manganês ou na reação de Swern, em um solvente, tal como, diclorometano, acetonitrila, hexano, tolueno, dimetilformamida (DMF), dimetilacetamida, dimetilsulfóxido (DMSO) ou dioxano, na temperatura de 0 °C até o ponto de ebulição do componente de ebulição mais inferior da mistura. As condições mais adequadas de realização da reação são o uso de reagente Dess- Martina em um solvente tal como DMF à temperatura ambiente.

[066] O composto da fórmula (V) pode ser convertido em ácido da fórmula (II) por oxidação com reagente Jones, permanganato de potássio, piridínio dicromato (PDC), tetraóxido de rutênio, 2,2,6,6-tetrametilpiperidínio N-óxido, em um solvente, tal como acetonitrila, água, tolueno, acetona, dioxano ou tetrahidrofurano a uma temperatura de 0 °C até o ponto de ebulição do componente de ebulição mais inferior da mistura. As condições mais adequadas são o uso de reagente Jones em uma solução aquosa à temperatura de refluxo.

[067] No caso da preparação do composto da fórmula (II), em que R1 representa A1, o composto da fórmula (III) é primeiro convertido na reação de Buchwald-Hartwig com nitrocomposto da fórmula (VI):

em composto da fórmula (VII)

em que Bn representa grupo protetor de benzila.

[068] A reação de Buchwald-Hartwig é realizada na presença de um catalisador de paládio, por exemplo, acetato de paládio, cloreto de tetracis(trifenilfosfino)paládio(0), bis(trifenilfosfino)paládio,tris(dibenzilidenoacetona)dipaládio(0), dicloreto de 1,1’- bis(difenilfosfino)ferrocenopaládio(II) diclorometano aduto, uma base, por exemplo, fosfato de sódio, carbonato de sódio, carbonato de potássio, carbonato de césio, acetato de sódio, hidróxido de sódio, hidróxido de potássio, terc- butanolato de sódio ou terc-butanolato de potássio, um ligante de fosfato tal como, por exemplo, trifenilfosfina, 9,9-dimetil-4,5-bis(difenilfosfina)xantana, (2- bifenil)di-terc-butilfosfina, 2-diciclohexilfosfina-2’,4’,6’-triisopropilbifenila, (2- bifenil)diciclohexilfosfina e um solvente orgânico, por exemplo, tolueno, hexano, tetrahidrofurano, dioxano ou 1,2-dimetoxietano, a uma temperatura de 0 °C até o ponto de ebulição do componente de ebulição mais inferior da mistura. As condições mais adequadas de realização da reação são temperatura de refluxo na presença de tris(dibenzilidenoacetona)dipaládio(0) como um catalisador, 9,9- dimetil-4,5-bis(difenilfosfina)xantana, carbonato de césio, em tolueno como um solvente.

[069] Subsequentemente, o composto da fórmula (VII) é reduzido para obter um composto da fórmula (VIII)

[070] O composto da fórmula (VIII) é, então, submetido à reação de amidação com um ácido da fórmula R4COOH de uma maneira análoga àquela descrita para a preparação do composto da fórmula (I) a partir do composto da fórmula (II) quando Z é grupo hidroxila (-OH), para obter um composto da fórmula (IX).

[071] O composto da fórmula (IX) é convertido para um composto da fórmula (X) através da ciclização por aquecimento no refluxo em ácido acético.

[072] Subsequentemente, o grupo benzila que protege o grupo hidroxila é removido do composto (X), de uma maneira descrita acima para a desproteção de grupo hidroxila no composto da fórmula (IV), para obter um composto da fórmula (XI),

e o composto da fórmula (XI) obtido desse modo é convertido por oxidação em um aldeído ou ácido da fórmula (II), em que R1 representa grupo A1, com o uso de agente oxidante adequado, conforme descrito acima para oxidação do composto da fórmula (V).

[073] O composto da fórmula (III) pode ser preparado conforme mostrado no Esquema 3.

[074] Os processos da preparação de Intermediários apresentados no Esquema 3 foram desenvolvidos com base nos métodos da literatura para compostos de estrutura similar.

[075] De acordo com o Esquema 3, a reação de álcool benzílico com bromoacetato de etila na presença de uma base forte, tal como hidreto de sódio, analogamente conforme descrito no documento no WO2011/109267, gera etil 2- benziloxiacetato, que subsequentemente é convertido em nitrila da fórmula (XII) na reação com nitrila da fórmula R3CH2CN, em que R3 representa átomo de hidrogênio ou alquila C1-C4, realizada na presença de uma base forte, tal como butil lítio, analogamente conforme descrito no documento no WO2009/106539. Nitrila da fórmula (XII) é convertida em composto da fórmula (XIII) em reação de ciclização com hidrazina, analogamente conforme descrito no documento no WO2009/106539. O composto da fórmula (XIII), por reação de ciclização com malonato de dietila na presença de uma base forte, tal como, etanolato de sódio, é convertido em composto da fórmula (XIV), que é adicionalmente convertido em composto da fórmula (XV) por clorinação com tricloreto de fosforila (POCl3) e, depois, o composto da fórmula (XV) é convertido em composto da fórmula (III) por reação com morfolina na presença de uma base, tal como carbonato de sódio. As condições e uma maneira de realizar as reações apresentadas no Esquema 3 são descritos em detalhes abaixo na descrição da preparação de intermediários.

[076] Os intermediários da fórmula R2H são compostos conhecidos que estão comercialmente disponíveis ou podem ser obtido com o uso de métodos conhecidos, em uma maneira apresentada em detalhes abaixo na descrição da preparação de intermediários. Na maioria dos casos, a reação de aminação redutiva descrita acima entre um composto que inclui sistema carbonila e uma amina apropriada foi empregada para preparar intermediários R2H. Para compostos R2H que compreendem sistema de ureia, uma reação entre amina primária e derivado de isocianato foi empregada. A reação pode ser realizada a uma temperatura de -80 °C até o ponto de ebulição do componente de ebulição mais inferior da mistura, em um solvente orgânico, tal como, por exemplo, clorofórmio, diclorometano, dioxano, dimetilformamida, dimetilacetamida, tolueno, hexano, tetrahidrofurano, dimetoxietano, dimetilsulfóxido, acetonitrila ou dietil éter.

[077] Ácidos borônicos R1B(OH)2 e seus ésteres, tal como, ésteres de pinacol, estão comercialmente disponíveis ou podem ser obtidos com o uso de reação de Miyaura ou na reação entre haloderivado e ácido borônico ou seu éster na presença de uma base ou catalisador paládio.

[078] Nitrilas da fórmula R3CH2CN, em que R3 representa átomo de hidrogênio ou alquila C1-C4, são compostos conhecidos que estão comercialmente disponíveis.

[079] Os compostos da fórmula (I) podem ser administrados no tratamento de doenças e distúrbios mencionados no presente documento como composto químico ou na forma de composição farmacêutica ou formulação farmacêutica que contêm os mesmos. Tipicamente, os mesmos serão usados como composição farmacêutica ou formulação farmacêutica que contém o composto da invenção ou seu sal farmaceuticamente aceitável, em combinação com transportadores farmaceuticamente aceitáveis e substâncias auxiliares.

[080] No tratamento de distúrbios, doenças e afecções mencionadas acima, a composição farmacêutica da invenção pode ser administrada por qualquer rota adequada, preferencialmente, rota oral, parenteral ou inalação, e será na forma de uma preparação destinada para o uso na medicine, dependendo da rota de administração pretendida.

[081] As composições para administração oral podem ter forma de preparações sólidas ou líquidas. As preparações sólidas podem ter, por exemplo, a forma de um tablete ou cápsula produzida de um modo convencional a partir de excipientes inativos farmaceuticamente aceitáveis tais como aglutinantes (por exemplo, amido de milho pré-gelatinisado, polivinilpirrolidona ou hidroxipropilmetilcelulose); preenchedores (por exemplo lactose, sacarose, carboximetilcelulose, celulose microcristalina ou hidrogenfosfato de cálcio); desintegrantes (por exemplo polivinilpirrolidona, amido de milho ou glicolato de amido sódico); lubrificantes (por exemplo, estearato de magnésio, talco ou sílica), agentes umectantes (por exemplo, laurilsulfato de sódio). Tabletes podem ser revestidos com revestimentos bem conhecidos na técnica, tais como revestimentos simples, revestimentos de liberação controlada/atrasada ou revestimentos entéricos. As preparações líquidas para administração oral podem ser na forma de, por exemplo, soluções, xaropes ou suspensões, ou podem ter a forma de produto sólido seco para a reconstituição em água ou outro veículo adequado ante do uso. Tais preparações líquidas podem ser preparadas com o uso de meios convencionais a partir de excipientes inativos farmaceuticamente aceitáveis, tais como, agentes de suspensão (por exemplo, xarope de sorbitol, derivados de celulose ou óleos comestíveis hidrogenados), emulsificantes (por exemplo, lecitina ou goma acácia), veículos não aquosos (por exemplo, óleo mandélico, ésteres de óleo, álcool etílico ou óleos vegetais fracionados) e conservantes (por exemplo, metil ou propil p-hidroxibenzoato ou ácido sórbico). As preparações incluem também agentes de tamponamento adequados, agentes flavorizantes, agentes corantes e adoçantes.

[082] As preparações para administração oral podem ser formuladas de modo a obter liberação controlada do composto ativo com o uso de métodos conhecidos por um indivíduo versado na técnica.

[083] A rota parental de administração inclui administração por injeções intramuscular e intravenosa, assim como infusões intravenosas. As composições para administração parenteral podem, por exemplo, ter a forma de uma forma de dosagem unitária, tal como ampolas, ou recipientes com múltiplas dosagens com a adição de um conservante. As composições podem ter a forma tal como suspensão, solução ou emulsão em um veículo aquoso ou oleoso, e podem incluir excipientes tais como agentes de suspensão, estabilizadores e/ou agentes dispersantes. Alternativamente, o ingrediente ativo pode ser formulado como um pó para a reconstituição antes do uso em um transportador adequado, por exemplo água livre de pirogênio, estéril.

[084] As composições para administração através de rota de inalação podem ter a forma de inalação e serem administradas por nebulização. Tais preparações incluem um composto ativo e substância (ou substâncias) sólida administrada como um aerossol, isto é, um sistema de partículas pequenas finamente divididas de substância sólida ou líquida suspensa em um gás. As substâncias auxiliares usadas em nebulização podem ser, por exemplo, cloreto de sódio como um agente de isotonicidade, ácidos inorgânicos e hidróxidos como reguladores de pH e estabilizadores, cloreto de benzalcônio como um conservante, citrato de sódio como um agente de tamponamento, polissorbato 80 como um tensoativo, etanol e propileno glicol como um cossolvente e sulfatos (VI) como antioxidantes. As preparações para administração por rota de inalação podem ter a forma de inaladores de pressão ou inalação de pó seco.

[085] O método de tratamento com o uso dos compostos da presente invenção compreenderá administração de uma quantidade terapeuticamente eficaz do composto da invenção, preferencialmente na forma de uma composição farmacêutica, ao sujeito em necessidade de tal tratamento.

[086] A dosagem proposta dos compostos da invenção é de 0,1 a cerca de 1.000 mg por dia, em uma dose única ou em doses divididas. Será evidente para um indivíduo com habilidade na técnica que a seleção de uma dosagem exigida para obter o efeito biológico desejável dependerá de muitos fatores, por exemplo, composto específico, a indicação, a maneira de administração, a idade e condição de um paciente e a dosagem exata será finalmente determinada por um médico responsável.

EXEMPLOS PREPARAÇÃO DE INTERMEDIÁRIOS ETIL 2-BENZILOXIACETATO

[087] À suspensão de 21,8 g (0,545 mol) de 60% de NaH em 1.000 ml de tolueno seco 47 ml (0,454 mol) de álcool benzílico foram adicionados por gotejamento durante 30 minutos. Toda a mistura foi agitada à temperatura ambiente por 4 horas. A suspensão foi resfriada em um banho de água gelada e 66 ml (0,595 mol) de bromoacetato de etila foram adicionados por gotejamento durante 45 minutos. A mistura de reação foi aquecida à temperatura ambiente e agitada por 1 hora. Toda a mistura foi despejada em água gelada (1.200 ml) acidificada com 10 ml de ácido clorídrico concentrado. As fases foram separadas e a fase aquosa foi extraída com 3x éter dietílico. As fases orgânicas combinadas foram lavadas com salmoura e secas por sulfato de magnésio anidro. Depois da filtragem do agente de secagem, os solventes orgânicos foram evaporados sob pressão reduzida. O resíduo foi separado por destilação sob pressão reduzida. Depois da destilação, 66,7 g (76%) de etil 2-benziloxiacetato foram obtidos como um líquido incolor (Tb = 104 a 106 °C / 0,7 tor). RMN de 1H (500 MHz, CDCl3) δ: 7,39 - 7,28 (m; 5H), 4,63 (s; 2H), 4,23 (q; J = 7,1 Hz; 2H), 4,09 (s; 2H), 1,28 (t; J = 7,1 Hz; 3H). MS-ESI: (m/z) calculado para C11H14O3 [M+H]+: 195,23; determinou 195,1.

INTERMEDIÁRIO XII-1: 4-BENZILOXI-3-OXOBUTIRONITRILA

[088] Ao frasco argonado preenchido com 750 ml de THF seco resfriado a -78 °C, 200 ml (0,5 mol) de 2,5 M de solução de n-BuLi hexano foram adicionados e, depois, 28 ml (0,533 mol) de acetonitrila foram adicionados por gotejamento. Toda a mistura foi agitada a -78 °C por 2 horas. À suspensão 77,7 g (0,4 mol) de etil 2-benziloxiacetato obtido acima foram adicionados por gotejamento e agitação foi continuada a -78 °C por 1 hora. A reação foi bruscamente arrefecida adicionando-se cloreto de amônio saturado. A mistura foi despejada em água gelada e acidificada com 6 M de ácido clorídrico. A fase aquosa foi extraída com éter dietílico. As fases orgânicas combinadas foram lavadas com salmoura e secas por sulfato de magnésio anidro. O agente de secagem foi filtrado e o solvente foi evaporado sob pressão reduzida. Intermediário XII-1 foi usado na próxima etapa sem purificação. MS-ESI: (m/z) calculado para C11H11NO2 [M+H]+: 190,22; determinou 190,1.

INTERMEDIÁRIO XII-2: 4-BENZILOXI-2-METIL-3-OXOBUTILONITRILA.

[089] Obtido a partir de etil 2-benziloxiacetato e propionitrila, analogamente como para Intermediário XII-1.

INTERMEDIÁRIO XIII-1: 3-(BENZILOXIMETIL)-1H-PIRAZOL-5-AMINA.

[090] Ao Intermediário XII-1 (cerca de 75,7 g, 0,4 mol) obtido acima, 500 ml de etanol e 100 ml (2,1 mol) de monohidrato de hidrazina foram adicionados. A mistura foi refluxada por 16 horas. Depois da evaporação do solvente até secar sob pressão reduzida, o resíduo foi adicionado com clorofórmio e seco por sulfato de sódio anidro. O agente de secagem foi filtrado e o solvente foi evaporado, e a mistura foi separada em uma coluna cromatográfica com o uso de acetato de etila/metanol de 100/0 a 95/5 como um eluente. Depois da separação, 70,4 g (87%) do Intermediário XIII-1 foram obtidos como um óleo marrom. RMN de 1H (300 MHz; CDCI3) δ: 7,39 - 7,28 (m; 5H); 5,59 (s; 1H); 4,53 (s; 2H); 4,50 (s; 2H). MS-ESI: (m/z) calculado para C11H13N3O [M+H]+: 204,25; determinou 204,1.

INTERMEDIÁRIO XIII-2: 3-(BENZILOXIMETIL)-4-METIL-1H-PIRAZOL-5-AMINA.

[091] Obtida a partir de Intermediário XII-2, analogamente conforme descrito para o Intermediário XIII-1.

INTERMEDIÁRIO XIV-1: 2-(BENZILOXIMETIL)PIRAZOLO[1,5-A]PIRIMIDIN- 5,7-DIOL.

[092] Ao frasco com solução de etanolato de sódio obtida a partir de 53 g (0,74 mol) de etanolato de sódio e 700 ml de etanol 70,4 g (0,35 mol) de Intermediário XIII-1 dissolvido em 200 ml de etanol e 80 ml (0,53 mol) de malonato de dietila foram adicionados. A reação foi realizada em refluxo por 24 horas. A mistura de reação foi resfriada à temperatura ambiente, depois, o solvente foi evaporado sob pressão reduzida. O resíduo foi dissolvido em 1.200 ml de água e acidificado com ácido clorídrico concentrado para pH de aproximadamente 2. O sólido cremoso precipitado da solução foi filtrado, lavado e seco. 79 g (84%) de Intermediário XIV-1 foram obtidos como um sólido cremoso. MS-ESI: (m/z) calculado para C14H13N3O3 [M+Na]+: 294,26; determinou 294,1.

INTERMEDIÁRIO XIV-2: 2-(BENZILOXIMETIL)-3-METILPIRAZOLO[1,5- A]PIRIMIDIN-5,7-DIOL

[093] Obtido a partir de Intermediário XIII-2, analogamente como para Intermediário _XIV-1.

INTERMEDIÁRIO XV-1: 2-(BENZILOXIMETIL)-5,7-DICLOROPIRAZOLO[1,5- A]PIRIMIDINA

[094] A suspensão de 30 g (0,11 mol) de Intermediário XIV-1 em 270 ml de acetonitrila foi resfriada em um banho de água gelada e 206 ml (2,2 mol) de POCl3 foram adicionados. A reação foi realizada a 80 °C por 5 horas. A mistura de reação foi concentrada no evaporador para remover acetonitrila e POCl3. O resíduo foi despejado em água com gelo, e alcalinizado para pH 5 com solução de hidrogencarbonato de sódio saturado. A fase aquosa foi extraída com acetato de etila e, depois da separação, a fase orgânica foi seca por sulfato de sódio anidro. Depois da filtragem do agente de secagem e evaporação do solvente, o resíduo foi purificado por cromatografia de coluna com o uso de acetato de etila/heptano de 100/0 a 80/20 como um eluente. Depois da separação, 13 g (38%) de Intermediário XV-1 foram obtidos como um óleo ligeiramente amarelo. RMN de 1H (300 MHz, CDCI3) δ: 7,41 - 7,27 (m; 5H); 6,96 (s; 1H); 6,80 (s; 1H); 4,81 (s; 2H); 4,65 (s; 2H). MS-ESI: (m/z) calculado para C14H11Cl2N3O [M+H]+: 309,17; determinou 308,0.

INTERMEDIÁRIO XV-2: 2-(BENZILOXIMETIL)-5,7-DICLORO-3-METILPIRAZOLO[1,5-A]PIRIMIDINA

[095] Obtida a partir de Intermediário XIV-2, analogamente ao procedimento descrito para Intermediário XV-1.

INTERMEDIÁRIO III-1: 2-(BENZILOXIMETIL)-5-CLORO-7-(MORFOLIN-4- IL)PIRAZOLO[1,5-A]PIRIMIDINA

[096] À solução de 13 g (42,3 mmol) de Intermediário XV-1 dissolvida em 450 ml de acetona, 5,38 g (50,8 mmol) de carbonato de sódio e 6,65 ml (76,2 mmol) de morfolina foram adicionados. A reação foi realizada à temperatura ambiente por 1,5 hora. 500 ml de água foram adicionados à mistura de reação, e o sólido branco precipitado foi filtrado. O sólido foi lavado com água e 200 ml de mistura de água/acetona (2/1), depois seco. 14 g (92%) de Intermediário III-1 foram obtidos como um sólido branco. RMN de 1H (300 MHz, CDCl3) δ: 7,41 - 7,27 (m; 5H); 6,56 (s; 1H); 6,06 (s; 1H); 4,73 (s; 2H); 4,62 (s; 2H); 3,98 - 3,90 (m; 4H); 3,82 - 3,74 (m; 4H). MS-ESI: (m/z) calculado para C18H19ClN4O2 [M+H]+: 359,83; determinou 359,2.

INTERMEDIÁRIO III-2: 2-(BENZILOXIMETIL)-5-CLORO-3-METIL-7-(MORFOLIN-4-IL)PIRAZOLO[1,5-A]PIRIMIDINA

[097] Obtida a partir de Intermediário XV-2, analogamente ao procedimentodescrito para Intermediário III-1.INTERMEDIÁRIO IV-1: 2-(BENZILOXIMETIL)-5-(1H-INDOL-4-IL)-7-(MORFOLIN-4-IL)PIRAZOLO[1,5-A]PIRIMIDINA

[098] À solução de 1,88 g (5,24 mmol) de Intermediário III-1 dissolvida em 52 ml de 1,2-dimetoxietano (DME), foram adicionados 1,97 g (7,87 mmol) de éster de pinacol de ácido indol-4-borônico, 0,61 g (0,52 mmol) de tetracis(trifenilfosfino)paládio (0) e 5,2 ml de 2M de solução de carbonato de sódio aquoso. A reação foi realizada em refluxo por 16 horas. A mistura de reação foi resfriada à temperatura ambiente, filtrada por Celit® e sólido lavado com acetato de etila. O filtrado foi concentrado com o uso de evaporador. O resíduo foi separado por cromatografia de coluna, com o uso de acetato de etila/heptano de 100/0 a 30/70 como um eluente para obter 1,91 g (83%) de Intermediário IV-1. RMN de 1H (300 MHz, CDCl3) δ: 8,61 (bs; 1H); 7,61 (dd; J = 7,4; 0,8 Hz; 1H); 7,50 - 7,23 (m; 8H); 7,13 - 7,07 (m; 1H); 6,74 (s; 1H); 6,66 (s; 1H); 4,81 (s; 2H); 4,67 (s; 2H); 4,02 - 3,95 (m; 4H); 3,81 - 3,73 (m; 4H). MS-ESI: (m/z) calculado para C11H13N3O [M+H]+: 204,25; determinou 204,1.

[099] Od de Intermediários IV-2 a IV-9, apresentadas na Tabela 1 foram obtidas ao se proceder em uma maneira análoga à descrita para preparação de Intermediário IV-1 e iniciando-se do Intermediário III-1 (R3 = H) ou III-2 (R3 = Me) e éster de pinacol de ácido borônico respectivo R1B(OH)2.TABELA 1.

INTERMEDIÁRIO V-1: [7-(MORFOLIN-4-IL)-5-(1H-INDOL-4- IL)PIRAZOLO[1,5-A]PIRIMIDIN-2-IL]METANOL

[100] À solução de 5,0 g (9,1 mmol) de Intermediário IV-1 em 120 ml de DMF e 60 ml de EtOH 11,3 g de 10% de Pd/C e 100 μl de ácido fórmico foram adicionados. A reação foi realizada a 60 °C sob pressão de hidrogênio por 24 horas. Depois de resfriar a mistura de reação à temperatura ambiente, o catalisador foi filtrado em um Celite®, o sólido foi lavado com EtOH e, depois, o filtrado foi concentrado com o uso de evaporador. A mistura obtida foi purificada por cromatografia de coluna, com o uso de acetato de etila/heptano de 100/0 a 0/100 como o eluente. 2,08 g (66%) de Intermediário V-1 foram obtidos depois da resolução. RMN de 1H (300 MHz, DMSO) δ 11,36 (bs; 1H); 7,70 - 7,63 (m; 1H); 7,59 - 7,52 (m; 1H); 7,52 - 7,46 (m; 1H); 7,28 - 7,20 (m; 1H); 7,14 - 7,09 (m; 1H); 6,78 (s; 1H); 6,55 (s; 1H); 5,36 (t; J = 6,0 Hz; 1H); 4,66 (d; J = 6,0 Hz; 2H); 3,90 - 3,83 (m; 4H); 3,83 - 3,75 (m; 4H). MS-ESI: (m/z) calculado para C19H19N5O2 [M+H]+: 350,39; determinou 350,2.

[101] Intermediários V-2 a V-9 apresentados na Tabela 2 foram obtidos iniciando-se do respectivo Intermediário IV de uma maneira análoga conforme descrito para a preparação de Intermediário V-1.TABELA 2.

INTERMEDIÁRIO VII-1: 2-((BENZILOXI)METIL)-7-(MORFOLIN-4-IL)-N-(2-NITROFENIL)PIRAZOLO[1,5-A]PIRIMIDINA-5-AMINA

[102] 1,65 g (4,6 mmol) de Intermediário III-1, 0,953 g (6,9 mmol) de 2-nitroanilina, 4,49 g (13,8 mmol) de carbonato de césio, 0,211 g (0,23 mmol) de tris(dibenzilidenoacetona)dipaládio(0), 0,266 g (0,46 mmol) de 9,9-dimetil-4,5- bis(difenilfosfina)xantana e 46 ml de tolueno seco foram introduzidos ao vaso de reação. Toda a mistura foi argonada e misturada a 110 °C por 24 horas. Depois de resfriar à temperatura ambiente, a mistura de reação foi filtrada através de Celite® e o sólido lavado com acetato de etila. O filtrado foi concentrado com o uso de evaporador. O resíduo foi separado em uma coluna cromatográfica com o uso de sistema de acetato de etila/heptano de 50/50 a 0/100 como um eluente. 1,84 g (87%) de Intermediário VII-1 foram obtidos depois da resolução. MS-ESI: (m/z) calculado para C24H24N6O4 [M+H]+: 461,49; determinou 461,5.

[103] Intermediários VII-2 a VII-5 apresentados na Tabela 3 foram preparados de uma maneira análoga àquela descrita para a preparação de Intermediário VII-1, iniciando-se pelo Intermediário III-1 (R3 = H) ou III-2 (R3 = alquila) e derivado de nitroamina adequada da fórmula VI no lugar da 2- nitroanilina.TABELA 3

INTERMEDIÁRIO VIII-1: N-(2-(BENZILOXIMETIL)-7-(MORFOLIN-4-IL)PIRAZOLO[1,5-A]PIRIMIDIN-5-IL)BENZENO-1,2-DIAMINA

[104] Uma mistura de 1,75 g (3,8 mmol) de Intermediário VII-1 e 3,94 g (19,0 mmol) de dicloreto de estanho dihidrato (II) em etanol (25 ml) foi aquecida em refluxo com agitação por cerca de 20 horas. Depois de resfriar a reação à temperatura ambiente, 100 ml de acetato de etila e 100 ml de solução de hidrogencarbonato de sódio saturada foram adicionados. A suspensão foi filtrada através de Celite® e as fases foram separadas. A fase aquosa foi extraída duas vezes com acetato de etila. As fases orgânicas combinadas foram secas por sulfato de sódio anidro. O agente de secagem foi filtrado e a solução foi concentrada com o uso de evaporador. A mistura foi separada com coluna cromatográfica (gel de sílica modificado com propilamina), com o uso do sistema de acetato de etila/heptano de 100/0 a 50/50 como um eluente. Depois da resolução, 1,30 g (79%) de Intermediário VIII-1 foram obtidos. RMN 1H (300 MHz, CDCl3) δ 7,41 - 7,27 (m; 5H); 7,3 - 7,17 (m; 1H); 7,17 - 7,08 (m; 1H); 6,87 - 6,75 (m; 2H); 6,17 (s; 1H); 5,34 (s; 1H); 4,68 (s; 2H); 4,61 (s; 2H); 3,93 - 3,86 (m; 4H); 3,57 - 3,49 (m; 4H). MS-ESI: (m/z) calculado para C24H26N6O2 [M+H]+: 431,22; determinou 431,2.

[105] Intermediários VIII-2 a VIII-5 (R3 = H, alquila) apresentados na Tabela 4 foram obtidos iniciando-se a partir de Intermediário VII adequado analogamente conforme descrito para a preparação de Intermediário VIII-1.TABELA 4.

INTERMEDIÁRIO IX-1: N-(2-((2-(BENZILOXIMETIL)-7-(MORFOLIN-4-IL)PIRAZOLO[1,5-A]PIRIMIDIN-5-IL)AMINO)FENIL)PROPIONAMIDA

[106] À solução de 0,943 g (2,2 mmol) de Intermediário VIII-1 dissolvida em 50,0 ml de DCM seco, 0,364 ml (0,36 g, 4,8 mmol) de ácido propiônico, 0,652 g (4,8 mmol) de HOBt, 0,920 g (4,8 mmol) de EDCI e 0,916 ml (0,666 g, 6,6 mmol) de TEA foram adicionados. Toda a mistura foi agitada à temperatura ambiente por 48 horas. 100 ml de água foram adicionados à mistura e as fases foram separadas. A fase aquosa foi extraída 3x com DCM. As fases orgânicas combinadas foram secas por sulfato de sódio anidro. Depois de agente de secagem ser filtrado e o solvente evaporado, a mistura de reação foi separada em uma coluna cromatográfica, com o uso de acetato de etila/heptano de 50/50 a 0/100 como um eluente. Depois da separação, 0,84 g (79%) de Intermediário IX-1 foram obtidos. RMN de 1H (300 MHz, CDCI3) δ 8,43 (s; 1H); 7,61 - 7,55 (m; 1H); 7,40 - 7,28 (m; 6H); 7,17 - 7,11 (m; 2H); 6,18 (s; 1H); 5,38 (s; 1H); 4,68 (s; 2H); 4,62 (s; 2H); 3,96 - 3,89 (m; 4H); 3,63 - 3,55 (m; 4H); 2,32 (q; J = 7,6 Hz; 2H); 1,15 (t; J = 7,6 Hz; 3H). MS-ESI: (m/z) calculado para C27H30N6O3 [M+H]+: 487,25; determinou 487,3.

[107] Intermediários IX-2 a IX-13 (R3 = H, alquila) apresentados na Tabela 5 foram preparados analogamente conforme descrito para Intermediário IX-1, iniciando-se a partir do Intermediário VIII adequado e um ácido R4COOH no lugar do ácido propiônico.TABELA 5.

INTERMEDIÁRIO X-1: 2-(BENZILOXIMETIL)-5-(2-ETILBENZIMIDAZOL-1-IL)-7-(MORFOLIN-4-IL)PIRAZOLO[1,5-A]PIRIMIDINA

[108] 0,763 g (1,57 mmol) de Intermediário IX-1 foi introduzido ao frasco e dissolvidos em 200 ml de ácido acético gelado. A reação foi realizada em refluxo por 24 h. Depois de resfriar a mistura de reação, a solução foi concentrada com o uso de evaporador. O resíduo foi diluído com água e depois neutralizado com solução de hidrogencarbonato de sódio saturada. A fase aquosa foi extraída 3x com acetato de etila. As frações orgânicas combinadas foram secas em sulfato de sódio. Depois de o agente de secagem ser filtrado, o solvente foi evaporado com o uso de evaporador. A mistura de reação foi separada em uma coluna cromatográfica com o uso de sistema de acetato de etila/heptano de 100/0 a 0/100 como um eluente. Depois da separação, 0,459 g (62%) de Intermediário X-1 foi obtido. RMN de 1H (300 MHz, CDCI3) δ 7,84 - 7,77 (m; 1H); 7,49 - 7,22 (m; 8H); 6,71 (s; 1H); 6,21 (s; 1H); 4,80 (s; 2H); 4,69 (s; 2H); 4,05 - 3,95 (m; 4H); 3,91 - 3,82 (m; 4H); 3,13 (q; J = 7,5 Hz; 2H); 1,42 (t; J = 7,5 Hz; 3H). MS-ESI: (m/z) calculado para C27H28N6O2 [M+H]+: 469,23; determinou 469,2.

[109] Od de Intermediários X-2 a X-13 apresentadas na Tabela 6 foram preparadas analogamente conforme descrito para Intermediário, iniciando-se a partir de Intermediário IX adequado analogamente conforme descrito para a preparação de Intermediário X-1.TABELA 6.

INTERMEDIÁRIO XI:

[110] Intermediários XI-1 a XI-13 apresentados na Tabela 7 foram preparados analogamente conforme descrito para Intermediário V-1, iniciando- se a partir de Intermediário X, adequado e com o uso de mistura de acetato de etila/etanol 1 / 1 no lugar de DMF e etanol. TABELA 7.

INTERMEDIÁRIO II-1: 5-(1H-INDOL-4-IL)-7-(MORFOLIN-4-IL)-PIRAZOLO[1,5- A]PIRIMIDIN-2-CARBOXIALDEÍDO

[111] À solução de 0,90 g (2,58 mmol) de Intermediário V-1 em 26 ml de DMF seco 1,31 g (3,09 mmol) de reagente Dess-Martin foram adicionados. Toda a mistura foi agitada à temperatura ambiente por 1 hora. O sólido foi filtrado e depois lavado com acetato de etila. A solução obtida foi concentrada sob pressão reduzida. A mistura foi purificada em uma coluna cromatográfica em um sistema de acetato de etila/heptano de 100/0 a 30/70. Depois da separação, 0,70 g (78%) de Intermediário II-1 foi obtido. RMN de 1H (300 MHz, CDCl3) δ 10,22 (s; 1H); 8,47 (bs; 1H); 7,66 - 7,59 (m; 1H); 7,57 - 7,50 (m; 1H); 7,39 - 7,29 (m; 2H); 7,18 - 7,09 (m; 2H); 6,83 (s; 1H); 4,08 - 4,00 (m; 4H); 3,86 - 3,77 (m; 4H). MS-ESI: (m/z) calculado para C19H17N5O2 [M+H]+: 348,38; determinou 348,1.

[112] Od de Intermediários II-2 a II-9 apresentadas na Tabela 8 foram preparadas iniciando-se a partir de Intermediário V adequado, analogamente conforme descrito para a preparação de Intermediário II-1.TABELA 8.

INTERMEDIÁRIO II-10: ÁCIDO 5-(1H-INDOL-4-IL)-7-(MORFOLIN-4-IL)- PIRAZOLO[1,5-A]PIRIMIDIN-2-CARBOXÍLICO.

Obtido por oxidação de Intermediário II-1.

[113] Ao frasco com 35 ml de 20% de solução de ácido sulfúrico, 1,40 g (4,73 mmol) de dicromato de potássio e, depois, 1,1 g (3,15 mmol) de Intermediário II-1 foram adicionados. Toda a mistura foi levada a refluxo, enquanto em agitação e mantida naquela temperatura por 5 horas. A mistura foi resfriada à temperatura ambiente e o sólido precipitado da mistura foi filtrado. O sólido foi lavado com água e depois seco no dessecador em P2O5. 0,56 g (49%) de Intermediário II-10 cru foi obtido e usado em uma etapa adicional sem purificação.

[114] Intermediários II-11 a II-23 (R3 = H, alquila) apresentados na Tabela 9 foram preparados analogamente conforme descrito para a preparação de Intermediário II-1, iniciando-se a partir de Intermediário XI adequado.TABELA 9.

INTERMEDIÁRIOS R2H (AMINAS) 4-(AZETIDIN-3-IL)MORFOLINA

[115] Etapa:1. À solução de 0,50 g (2,0 mmol) de 1-benzidrilazetidin-3-ona em 20,0 ml de DCM seco 0,21 ml (0,209 g; 2,4 mmol) de morfolina foram adicionados e depois a mistura foi agitada à temperatura ambiente. Depois de 4 horas, 0,848 g (4,0 mmol) de triacetoxiborohidreto de sódio foram adicionados e agitação foi continuada à temperatura ambiente de um dia para o outro. Água foi adicionada à mistura de reação e fases foram separadas. A fase aquosa foi extraída 3x com clorofórmio. As fases orgânicas combinadas foram secas por sulfato de sódio anidro. O resíduo obtido depois da filtragem do agente de secagem e da evaporação do solvente sob pressão reduzida foi purificado em uma coluna cromatográfica. O sistema de MeOH/acetato de etila/heptano de 100/0/0 a 0/95/5 foi usado para separação. Depois da separação, 0,564 g de 4- [1-(difenilometil)azetidin-3-il]morfolina foram obtidos. RMN de 1H (300 MHz, DMSO) δ 7,45 - 7,38 (m; 4H); 7,30 - 7,22 (m; 4H); 7,20 - 7,13 (m; 2H); 4,41 (s; 1H); 3,58 - 3,49 (m; 4H); 3,27 - 3,18 (m; 2H); 2,93 - 2,82 (m; 1H); 2,80 - 2,71 (m; 2H); 2,25 - 2,13 (m; 4H). MS-ESI: (m/z) calculado para C20H24N2O [M+H]+: 309,20; determinou 309,2.

[116] Etapa 2. À solução de 114 mg (0,37 mmol) do produto da Etapa 1 em 4 ml de EtOH, 114 mg de 10% de Pd/C e 10 μl de ácido fórmico foram adicionados. A reação foi realizada à temperatura ambiente sob pressão de hidrogênio por 48 horas. O catalisador foi filtrado em Celite®, o sólido foi lavado com EtOH e o filtrado foi concentrado no evaporador. 50 mg (95%) de 4- (azetidin-3-il)morfolina foram obtidos. RMN de 1H (300 MHz, CDCl3) δ 3,76 - 3,67 (m; 4H); 3,55 - 3,43 (m; 2H); 3,04 - 2,90 (m; 2H); 2,90 - 2,80 (m; 1H); 2,39 - 2,23 (m; 4H). MS-ESI: (m/z) calculado para C7H14N2O [M+H]+: 143,12; determinou 143,1.

[117] Intermediários R2H apresentados na Tabela 10 foram obtidos analogamente conforme descrito para a preparação de 4-(azetidin-3-il)morfolina, substituindo-se morfolina por 2,6-dimetilmorfolina, 1,1-dioxotiomorfolina, 4,4- difluoropiperidina ou 3-metoxiazetidina, respectivamente.TABELA 10.

1-(OXETAN-3-IL)PIPERAZINA.

ETAPA 1.

[118] À solução de 0,23 ml (0,279 g 3,9 mmol) de 3-oxetanona em 39,0 ml de DCM seco, 0,60 g (3,2 mmol) de 1-Boc-piperazina foram adicionados e depois a mistura foi agitada à temperatura ambiente. Depois de 4 horas, 1,35 g (6,4 mmol) de triacetoxiborohidreto de sódio foram adicionados e a agitação foi continuada à temperatura ambiente de um dia para o outro. Água foi adicionada à mistura de reação e fases foram separadas. A fase aquosa foi extraída 3x com clorofórmio. As fases orgânicas combinadas foram secas por sulfato de sódio anidro. Depois da filtragem do agente de secagem, o solvente foi evaporado sob pressão reduzida. 0,61 g de terc-butil 4-(oxetan-3-il)piperazin-1-carboxilato cru foram obtidos. RMN de 1H (300 MHz, CDCI3) δ 4,68 - 4,52 (m; 4H); 3,50 - 3,32 (m; 5H); 2,31 - 2,09 (m; 4H); 1,43 (s; 9H). MS-ESI: (m/z) calculado para C12H22N2O3 [M+H]+: 243,17; determinou 243,2.ETAPA 2.

[119] À solução de 0,55 g (2,8 mmol) do produto da Etapa 1 em 28 ml de DCM, 16,8 ml de ácido trifluoroacético foram adicionados. A reação foi realizada à temperatura ambiente por 2 horas. A água foi adicionada e a mistura de reação foi alcalinizada com solução de carbonato de sódio saturada. As fases foram separadas e a fase aquosa foi extraída 3x com clorofórmio. As fases orgânicas combinadas foram secas por sulfato de sódio anidro. O agente de secagem foi filtrado e o solvente evaporado sob pressão reduzida. 0,23 g de 1-(oxetan-3- il)piperazina crua obtido desse modo foi usado para reação adicional sem purificação. RMN de 1H (300 MHz, CDCI3) δ 4,66 - 4,56 (m; 4H); 3,66 - 3,56 (m; 1H); 3,30 - 3,12 (m; 4H); 2,68 - 2,51 (m; 4H). MS-ESI: (m/z) calculado para C7H14N2O [M+H]+: 143,12; determinou 143,1.(1S, 4S)-2-(OXETAN-3-IL)-2,5-DIAZABICICLO[2.2.1]HEPTANO

[120] Preparada analogamente ao descrito para a preparação de 1-(oxetan- 3-il)piperazina, iniciando-se a partir de z 3-oxetanona e Boc-(1S, 4S)-2,5- diazabiciclo[2.2.1]heptano.3-ETIL-1-(PIPERIDIN-4-IL)UREIA

[121] Preparada conforme descrito no documento no US2005/197333, Exemplo 41.

1-FENIL-3-(PIPERIDIN-4-IL)UREIA

[122] Preparada analogamente conforme descrito para a preparação de 3- etil-1-(piperidin-4-il)ureia no documento no US2005/197333, Exemplo 41. COMPOSTOS DA INVENÇÃO EXEMPLO 1. 2-((4-(CICLOPROPANOCARBONIL)PIPERAZIN-1-IL)METIL)-5-(1H-INDOL-4-IL)-7-(MORFOLIN-4-IL)PIRAZOLO[1,5-A]PIRIMIDINA

[123] À solução de 124 mg (0,357 mmol) de Intermediário II-1 em 4,0 ml de DCM seco, 69,5 mg (0,428 mmol) de 1-(ciclopropilcarbonil)piperazina foram adicionados e depois agitados à temperatura ambiente. Depois de 1 hora, 151 mg (0,714 mmol) de triacetoxiborohidreto de sódio foram adicionados e agitação foi continuada à temperatura ambiente por mais 1 hora. A água foi adicionada à mistura de reação e fases foram separadas. A fase aquosa foi extraída 3x com clorofórmio. As fases orgânicas combinadas foram secas por sulfato de sódio anidro. Depois da filtragem do agente de secagem e evaporação do solvente sob pressão reduzida, o resíduo foi purificado em uma placa cromatográfica. O sistema CHCl3/MeOH 90/10 foi usado para separação. Depois da separação, 170 mg (98%) do composto 1 foram obtidos. RMN de 1H (300 MHz, CDCl3) δ 8,55 (bs; 1H); 7,61 (dd; J = 7,4; 0,8 Hz; 1H); 7,52 - 7,47 (m; 1H); 7,36 - 7,27 (m; 2H); 7,13 - 7,08 (m; 1H); 6,66 (s; 1H); 6,64 (s; 1H); 4,03 - 3,95 (m; 4H); 3,84 (s; 2H); 3,81 - 3,65 (m; 8H); 2,71 - 2,53 (m; 4H); 1,81 - 1,70 (m; 1H); 1,02 - 0,95 (m; 2H); 0,79 - 0,71 (m; 2H). MS-ESI: (m/z) calculado para C27H31N7O2 [M+H]+: 486,59; determinou 486,2.

[124] Compostos da invenção dos Exemplos 2 a 69 em que na fórmula (I) Y representa -CH2- e R3 representa H ou alquila, apresentados na Tabela 11, foram preparados analogamente como no Exemplo 1 iniciando-se a partir dos Intermediários adequados II-1 a II-9 e II-11 a II-23 e amina adequada R2H.

EXEMPLO 70. 2-(4-TERC-BUTILPIPERAZIN-1-ILCARBONIL)-5-(1H-INDOL-4-IL)-7-(MORFOLIN-4-IL)PIRAZOLO[1,5-A]PIRIMIDINA

[125] À solução de 0,545 g (1,50 mmol) de Intermediário II-10 dissolvida em 15 ml de DMF seco, 0,47 g (3,3 mmol) de 1-terc-butilpiperazina, 0,446 g (3,3 mmol) de HOBt, 0,633 g (3,3 mmol) de EDCI e 0,63 ml (0,455 g, 4,5 mmol) de TEA foram adicionados. Toda a mistura foi agitada à temperatura ambiente por 40 horas. A mistura foi adicionada com 50 ml de água e fases foram separadas. A fase aquosa foi extraída 3x com DCM. As fases orgânicas combinadas foram secas por sulfato de sódio anidro. Depois da filtragem do agente de secagem e evaporação do solvente, a mistura de reação foi separada por cromatografia de coluna (gel de sílica modificado com propilamina) com o uso do sistema acetato de etila/heptano de 100/0 a 0/100 como um eluente. Depois da separação, 0,263 g (36%) do composto 70 foram obtidos. RMN de 1H (300 MHz, CDCl3) δ 8,90 (bs; 1H); 7,60 (dd; J = 7,4; 0,8 Hz; 1H); 7,48 (d; J = 8,1 Hz; 1H); 7,33 - 7,25 (m; 2H); 7,12 - 7,04 (m; 1H); 6,93 (s; 1H); 6,72 (s; 1H); 4,01 - 3,93 (m; 4H); 3,93 - 3,84 (m; 4H); 3,80 - 3,71 (m; 4H); 2,78 - 2,55 (m; 4H); 1,13 (s; 9H). MS-ESI: (m/z) calculado para C27H33N7O2 [M+H]+: 488,28; determinou 488,3.EXEMPLO 71. 5-(2-(DIFLUOROMETIL)BENZIMIDAZOL-1-IL)-3-CLORO-2-((4- TERC-BUTILPIPERAZIN-1-IL)METIL)-7-(MORFOLIN-4-IL)PIRAZOLO[1,5-A]PIRIMIDINA

[126] Ao frasco, 50 mg (0,095 mmol) do composto do Exemplo 50 foram adicionados e dissolvidos em 1,0 ml de DCM, depois 17,8 mg (0,134 mmol) de NCS (N-clorossuccinimida) foram adicionados. Toda a mistura foi agitada a 30 °C por 24 horas e depois 3 ml de pirossulfito de sódio foram adicionados. As fases foram separadas e a fase aquosa foi extraída duas vezes com clorofórmio. As fases orgânicas combinadas foram secas por sulfato de sódio anidro. Depois da filtragem do agente de secagem e evaporação do solvente com o evaporador, a mistura de reação foi separada em placa cromatográfica que usa como um eluente o sistema CHCI3 / MeOH - 90/10. Depois da separação, 50 mg (94%) do composto 71 foram obtidos. 1H RMN (300 MHz, CDCI3) δ 7,97 - 7,89 (m; 1H); 7,74 - 7,66 (m; 1H); 7,49 - 7,39 (m; 2H); 7,37 (t; J = 54Hz; 1H); 6,36 (s; 1H); 4,00 - 3,91 (m; 10H); 2,78 - 2,57 (m; 8H); 1,07 (s; 9H). MS-ESI: (m/z) calculado para C279H33ClF2N8O [M+H]+: 559,25; determinou 559,3.EXEMPLO 72. 5-(2-(DIFLUOROMETIL)BENZIMIDAZOL-1-IL)-3-BROMO-2- ((4-TERC-BUTILPIPERAZIN-1-IL)METIL)-7-(MORFOLIN-4-IL)PIRAZOLO[1,5- A]PIRIMIDINA

[127] Obtido analogamente como o composto do Exemplo 71, substituindo N-clorossuccinimida por NCB (N-bromossuccinimida). RMN de 1H (300 MHz, CDCl3) δ 7,97 - 7,89 (m; 1H); 7,74 - 7,66 (m; 1H); 7,49 - 7,39 (m; 2H); 7,38 (t; J = 54Hz; 1H); 6,40 (s; 1H); 4,01 - 3,92 (m; 10H); 2,77 - 2,56 (m; 8H); 1,07 (s; 9H). MS-ESI: (m/z) calculado para C28H33BrF2N8O [M+H]+: 602,20; determinou 602,2.

ATIVIDADE BIOLÓGICA DOS COMPOSTOS DA INVENÇÃO TESTE DE INIBIÇÃO DE PI3K QUINASES IN VITRO

[128] Os efeitos dos compostos da invenção foram analisados in vitro com o uso de ensaio de inibição de PI3K quinases descrito abaixo.

[129] Compostos testados foram dissolvidos em 100% de DMSO e, portanto, as soluções obtidas foram diluídas em série em 1x de tampão de reação. A quinase recombinante foi diluída em uma mistura de reação que compreende 5x de tampão de reação, substrato (1 mM de solução de fosfatidilinositol-4,5-bisfosfato de diacetato de sódio (PIP2) em 40 mM de tampão Tris) e água. Às cavidades em uma placa de 96 cavidades, 5 μl de soluções de compostos e 15 μl da solução de quinase na mistura de reação foram adicionados. Para iniciar a interação de compostos químicos testados com a enzima, a placa foi incubada por 10 minutos em temperatura adequada em um termostato de placa com agitação orbital a 600 rpm. As cavidades de controle negativo continham todos os reagentes acima exceto composto testado e quinase, e as cavidades de controle positivo continham todos os reagentes acima exceto os compostos testados. A reação enzimática foi iniciada adicionando-se 5 μl de solução de ATP de 150 μM, subsequentemente a placa foi incubada por 1 hora a 25 °C ou 30 °C (dependendo da isoforma de PI3K testada) no termostato de placa com agitação orbital do conteúdo da placa a 600 rpm. As condições de reação são apresentadas abaixo na Tabela 12.TABELA 12

[130] Detecção de ADP formado na reação enzimática foi depois realizada com o uso de Ensaio de Quinase ADP-Glo (Promega). Às cavidades de uma placa de 96 cavidades, 25 μl de Reagente ADP-Glo foram adicionados, e a placa foi incubada por 40 minutos a 25 °C em um termostato de placa com agitação orbital a 600 rpm. Depois, às cavidades da placa de 96 cavidades, 50 μl de Reagente de Detecção de Quinase foram adicionados r s placa foi incubada por 40 minutos 25 °C em um termostato de placa com agitação orbital a 600 rpm. Depois do tempo de incubação, a intensidade de luminescência em uma cavidade foi medida pelo luminômetro Victor Light (Perkin Elmer, Inc.).

[131] Os valores de IC50 foram determinados com base nas medições de intensidade de luminescência em cavidades que contêm compostos testados em diferentes concentrações e em cavidades de controle. Esses valores foram calculados com o software Graph Pad 5.03 ajustando-se a curva com o uso de regressão não linear. Cada composto foi testado pelo menos em quadruplicatas (4 cavidades) em duas placas de 96 cavidades com o uso de pelo menos 4 cavidades de cada um dos controles.

[132] Os resultados ponderados da atividade de inibição em relação a isoformas específicas de PI3K quinases para compostos selecionados da invenção conforme apresentados como IC50 na Tabela 13 abaixo. Na Tabela 13, símbolos A, B e C têm os seguintes significados:A: IC50 < 100 nM; B: 100 nM < ICÕO< 1000 nM; C: IC50 > 1.000 nM n.d. - não determinado TABELA 13.

TESTE DE NÍVEL DE FOSFORILAÇÃO DE PROTEÍNA AKT POR WESTERN BLOT

[133] O nível de fosforilação de proteína AKT em uma célula depende da atividade de trajetória de PI3K - inibição de PI3K quinases com um inibidor (composto testado) resulta na diminuição de fosforilação de AKT que pode ser vista em um método Western blot como desaparecimento de uma faixa marcada com anticorpos anti-pAKT. A inibição de quinases não influencia o nível de proteína total; o manchamento com anticorpos anti-pAKT é um controle o experimento. O controle para cada manchamento é a medição do nível de gliceraldeído 3-fosfato dehidrogenase (GAPDH), a proteína presente em células em uma quantidade constante.

[134] Como um modelo de célula para testar nível de fosforilação de AKT por PI3Kδ, a linhagem de célula de RAJI (origem: Linfoma de Burkitt, fornecedor: ATCC) estimulada com anticorpo IgM foi usada. Esse anticorpo, ligando-se com receptor de BCR presente em uma superfície dessas células, causa a ativação de PI3Kδ e, por sua vez, aumenta a fosforilação de AKT (Winkler et al. 2013, Chemistry and Biology).

[135] Como um modelo de célula para testar nível de fosforilação de AKT por PI3KY, a linhagem de célula RAW264.7 (origem: linhagem de linfócitos de murino transformada com Ab-MLB, fornecedor: ATCC), estimulada com componente C5a do sistema de complemento. Essa proteína, ligando-se com receptor de C5aR, causa a ativação de PI3KY, isso, por sua vez, resulta no aumento de nível de fosforilação de AKT (Winkler et al. 2013, Chemistry and Biology).

[136] As células foram semeadas em placas de 6 cavidades e uma densidade de 1 a 1,5x106/ml em uma cultura sem inibidor. Diretamente depois de semear, as células foram tratadas com o composto testado por 1 hora, e depois as células foram estimuladas (Raji: anti-IgM, 5 mg/ml, 15min antes do final da incubação; RAW: C5a, 5ng/ml, 5min antes do fim da incubação). Depois, as células foram lisadas com tampão RIPA (Sigma-Aldrich) que contém inibidores de proteases (Halt Protease Inhibitor Cocktail, Thermo) e fosfatases (PhosSTOP, Roche) e a concentração de proteína foi determinada com o uso de método BCA (Pierce) de acordo com as recomendações do fabricante. Os lisados obtidos foram submetidos à eletroforese SDS-PAGE por 2 horas a 100 V em aparelho Mini Protean III (BioRad). Em seguida à eletroforese, proteínas separadas foram transferidas para a membrana de nitrocelulose por técnica de eletrotransferência por 1 hora a 100 V em aparelho Mini Protean III. A análise Western blot de proteínas selecionadas foi realizada de acordo com recomendações de fabricante de anticorpos.

[137] Os anticorpos primários usados foram anti-pAKT e anti-AKT (Cell Signaling Technology) e anti-GAPDH (Millipore). Para detecção de anticorpos primários, anticorpos secundários acoplados à peroxidase de rábano silvestre (Sigma-Aldrich) foram usados. As proteínas ligadas à membrana foram visualizadas com reagente LumiLight (Roche), e depois desenvolvidas em filmes Light Film BioMax (Kodak).

[138] Os resultados de determinação do nível de AKT fosforilada (pAKT) e a AKT total em células tratadas por 1 hora com compostos selecionados da invenção são apresentados em um Desenho, nas Figuras 1 a 3 para PI3Kδ, e para PI3KY na Figura 4. A Figura 3 mostra diminuição dependente de dose de atividade de PI3K delta como uma intensidade decrescente de uma faixa para proteína fosfo-AKT (linhagem RAJI). Experimentos realizados em linhagem RAW, em que proteína AKT é fosforilada por PI3K quinase gama, não mostram diminuição da quantidade de AKT fosforilada, o que confirma a ação seletiva dos compostos em PI3K delta quinase.

TESTE DE FARMACOCINÉTICA IN VIVO

[139] Para testar a biodisponibilidade dos compostos da invenção, suas propriedades farmacocinéticas foram estudadas in vivo em ratos de acordo com a metodologia descrita abaixo.

[140] Os testes foram realizados em ratos Wistar de cerca de 12 semanas de idade com peso de 250 a 300 g. Ratos foram administrados oralmente com compostos testados a 30 mg/kg m.c. As amostras sanguíneas foram coletadas de animais para análise em 6 pontos no tempo - 30 minutos, 1 hora, 2 horas, 4 horas, 7 horas e 12 horas a partir da administração do composto. O sangue foi coletado em tubos com K2EDTA e centrifugado por 15 minutos, 2000xg, à temperatura ambiente para soror separado. As amostras de soro coletadas foram mantidas a -20 °C antes da análise. Cada um dos compostos foi testado em um grupo de 5 animais.

[141] Concentrações de soro de compostos testados foram determinados por espectrofotometria. Para cada um dos compostos testados, tempo para alcançar a concentração de soro máxima (Tmáx), concentração máxima (Cmáx) e área abaixo da curva (AUC) foram determinados. Os parâmetros farmacocinéticos para quatro compostos representativos da presente invenção são apresentados na Tabela 14:TABELA 14.

[142] Compostos testados são compostos biodisponíveis e alcançam Tmáx e Cmáx típicos para medicamentos nessa classe.

Claims

1. Composto da fórmula geral (I)

caracterizado por: Y representar –CH2- ou >C=O; R1 ser selecionado a partir do grupo que consiste em A1, A2 e A3:

R2 representar: - porção química de dioxotiomorfolino B1;

- porção química de piperazinila B2

em que dois átomos de carbono do anel de piperazina podem ser opcionalmente unidos com ponte de metileno -CH2- para formar porção química diazabicíclica-2,5, e R5 é selecionado a partir do grupo que consiste em -SO2CH3; alquila-C(O)-C1-C3, ciclolquil-C(O)-C3-C5; fenila substituída por alquila-O-C1-C3 e -CR6R7R8, em que R6, R7 e R8 representam independentemente átomo de hidrogênio, CH3, ciclopropila ou CONH2, desde que apenas um dentre R6, R7 e R8 possa representar ciclopropila ou CONH2, ou um dentre R6, R7 e R8 representa átomo de hidrogênio e dois restantes dentre R6, R7 e R8 são unidos para formar grupo -(CH2)2, -(CH2)3, -(CH2)4 ou -(CH2- O-CH2); - porção química de azetidinila B3

em que R9 é selecionado a partir do grupo que consiste em morfolino, 2,6- dimetilmorfolino, 1,1-dioxotiomorfolino, 4,4-difluoropiperidinila e 3-metoxiazetidin-1- ila; ou - porção química de piperidinila B4

em que R10 é selecionado a partir do grupo que consiste em alquila C1-C4; alquila C1-C4 substituída por OH; -COO(alquila C1-C3); -N(alquila C1-C3)2; - NHCONH-C1-C3-alquila; -NHCONH-C1-C3-fenila; piperazinila e piperazinila substituída na posição 4 por alquila C1-C3; R3 é selecionado a partir do grupo que consiste em H, halogênio e alquila C1-C4; R4 é selecionado a partir do grupo que consiste em alquila C1-C4, ciclolquila-C3-C4, alquila C1-C4 substituída por alcóxi C1-C4 e CHF2; X1 e X2 têm os seguintes significados: (i) X1 representa CH e X2 representa CH ou N; (ii) X1 representa N e X2 representa CH, ou (iii) X1 representa CH e X2 representa C-O-CH3; X3, X4, X e X têm os seguintes significados: (iv) X3 representa N, X4 representa CH, X5 representa CH e X6 representa CH; (v) ) X3 representa CH, X4 representa N, X5 representa CH e X6 representa CH; (vi) ) X3 representa CH, X4 representa CH, X5 representa N e X6 representa CH; (vii) X3 representa CH, X4 representa CH, X5 representa CH e X6 representa CH ou CF; ou (viii) X3 representa CH, X4 representa CH, X5 representa CF e X6 representa CH; X7 representa CH ou N; linha ondulada indica o ponto de fixação; e sais farmaceuticamente aceitáveis dos mesmos.

2. Composto, de acordo com a reivindicação 1, caracterizado por Y representar -CH2-.

3. Composto, de acordo com a reivindicação 1, caracterizado por Y representar >C=O.

4. Composto, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 3, caracterizado por R3 representar H.

5. Composto, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 3, caracterizado por R3 representar alquila C1-C4.

6. Composto, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 3, caracterizado por R3 representar halogênio.

7. Composto, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 6, caracterizado por R1 representar A1 ou A2.

8. Composto, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 6, caracterizado por R1 representar A3.

9. Composto, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 8, caracterizado por R2 representar B1.

10. Composto, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 8, caracterizado por R2 representar B2.

11. Composto, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 8, caracterizado por R2 representar B3.

12. Composto, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 8, caracterizado por R2 representar B4.

13. Composto, de acordo com a reivindicação 10, caracterizado por Y representar -CH2; R1 representar A1 ou A2; e R3 representar H.

14. Composto, de acordo com a reivindicação 13, caracterizado por ser 5- (2-(difluorometil)benzimidazol-1-il)-2-((4-terc-butilpiperazin-1-il)metil)-7-(morfolin-4- il)pirazolo[1,5-a]pirimidina ou seu sal farmaceuticamente aceitável.

15. Composto, de acordo com a reivindicação 13, caracterizado por ser 5- (1H-6-azaindol-4-il)-2-((4-terc-butilpiperazin-1-il)metil)-7-(morfolin-4-il)pirazolo[1,5- a]pirimidina.

16. Composto, de acordo com a reivindicação 1, caracterizado por ser selecionado a partir do grupo consistindo em: - 2-((4-(ciclopropanocarbonil)piperazin-1-il)metil)-5-(1h-indol-4-il)-7- (morfolin-4-il)pirazolo[1,5-a]pirimidina; - 5-(1H-indol-4-il)-2-((4-(metilsulfonil)piperazin-1-il)metil)-7- (morfolin-4-il)pirazolo[1,5-a]pirimidina; - 5-(1H-indol-4-il)-2-((4-(4-metilpiperazin-1-il)piperidin-1-il)metil)-7- (morfolin-4-il)pirazolo[1,5-a]pirimidina; - 2-((4-(2-hydroxypropan-2-yl)piperidin-1-yl)methyl)-5-(1H-indol-4- yl)-7-(morpholin-4-yl)pyrazolo[1,5-a]pyrimidine; - 2-((4-(dimetilamino)piperidin-1-il)metil)-5-(1H-indol-4-il)-7- (morfolin-4-il)pirazolo[1,5-a]pirimidina; - 5-(1H-indol-4-il)-2-((4-(4-metoxifenil)piperazin-1-il)metil)-7- (morfolin-4-il)pirazolo[1,5-a]pirimidina; - 2-((4-(2-hidroxipropan-2-il)piperidin-1-il)metil)-5-(5-fluoro-1H- indol-4-il)-7-(morfolin-4-il)pirazolo[1,5-a]pirimidina; - 2-((4-terc-butilpiperazin-1-il)metil)-5-(1H-indol-4-il)-7-(morfolin-4- il)pirazolo[1,5-a]pirimidina; - 2-(4-((5-(1H-indol-4-il)-7-(morfolin-4-il)pirazolo[1,5-a]pirimidin-2- il)metil)piperazin-1-il)-2-metilpropionamida; - 2-(4-((5-(5-fluoro-1H-indol-4-il)-7-(morfolin-4-il)pirazolo[1,5- a]pirimidin-2-il)metil)piperazin-1-il)-2-metilpropionamida; - 2-((4-terc-butilpiperazin-1-il)metil)-5-(6-fluoro-1H-indol-4-il)-7- (morfolin-4-il)pirazolo[1,5-a]pirimidina; - 2-((4-terc-butilpiperazin-1-il)metil)-5-(1H-indazol-4-il)-7-(morfolin- 4-il)pirazolo[1,5-a]pirimidina; - 2-((4-(dimetilamino)piperidin-1-il)metil)-5-(5-fluoro-1H-indol-4-il)- 7-(morfolin-4-il)pirazolo[1,5-a]pirimidina; - 5-(5-fluoro-1H-indol-4-il)-2-((4-(4-metilpiperazin-1-il)piperidin-1- il)metil)-7-(morfolin-4-il)pirazolo[1,5-a]pirimidina; - 2-((4-(2-hidroxipropan-2-il)piperidin-1-il)metil)-5-(1H-indazol-4-il)- 7-(morfolin-4-il)pirazolo[1,5-a]pirimidina; - 5-(2-aminopiridin-5-il)-2-((4-terc-butilpiperazin-1-il)metil)-7- (morfolin-4-il)pirazolo[1,5-a]pirimidina; - 5-(2-aminopirimidin-5-il)-2-((4-terc-butilpiperazin-1-il)metil)-7- (morfolin-4-il)pirazolo[1,5-a]pirimidina; - 5-(2-aminopirimidin-5-il)-2-((4-(2-hidroxipropan-2-il)piperidin-1- il)metil)-7-(morfolin-4-il)pirazolo[1,5-a]pirimidina; - 5-(2-aminopiridin-5-il)-2-((4-(2-hidroxipropan-2-il)piperidin-1- il)metil)-7-(morfolin-4-il)pirazolo[1,5-a]pirimidina; - 2-((4-ciclopropilpiperazin-1-il)metil)-5-(1H-indol-4-il)-7-(morfolin- 4-il)pirazolo[1,5-a]pirimidina; - 5-(1H-indol-4-il)-2-((4-metilpiperazin-1-il)metil)-7-(morfolin-4- il)pirazolo[1,5-a]pirimidina; - 2-((4-etilpiperazin-1-il)metil)-5-(1H-indol-4-il)-7-(morfolin-4- il)pirazolo[1,5-a]pirimidina; - 2-((1,1-dioxotiomorfolin-1-il)metil)-5-(1H-indol-4-il)-7-(morfolin-4- il)pirazolo[1,5-a]pirimidina; - Metil 1-((5-(1H-indol-4-il)-7-(morfolin-4-il)pirazolo[1,5-a]pirimidin- 2-il)metil)piperidin-4-carboxilato; - 5-(1H-indol-4-il)-2-((3-(morfolin-4-il)azetidin-1-il)metil)-7- (morfolin-4-il)pirazolo[1,5-a]pirimidina; - 2-((4-(ciclopropilmetil)piperazin-1-il)metil)-5-(1H-indol-4-il)-7- (morfolin-4-il)pirazolo[1,5-a]pirimidina; - 2-((4-ciclopentilpiperazin-1-il)metil)-5-(1H-indol-4-il)-7-(morfolin- 4-il)pirazolo[1,5-a]pirimidina; - 2-((4-terc-butilpiperidin-1-il)metil)-5-(1H-indol-4-il)-7-(morfolin-4- il)pirazolo[1,5-a]pirimidina; - 5-(1H-6-azaindol-4-il)-2-((4-(2-hidroxipropan-2-il)piperidin-1- il)metil)-7-(morfolin-4-il)pirazolo[1,5-a]pirimidina; - 5-(1H-6-azaindol-4-il)-2-((4-terc-butilpiperazin-1-il)metil)-7- (morfolin-4-il)pirazolo[1,5-a]pirimidina; - 5-(1H-indol-4-il)-2-((3-(1,1-dioxotiomorfolin-4-il)azetidin-1- il)metil)-7-(morfolin-4-il)pirazolo[1,5-a]pirimidina; - 5-(1H-7-azaindol-4-il)-2-((4-terc-butilpiperazin-1-il)metil)-7- (morfolin-4-il)pirazolo[1,5-a]pirimidina; - 5-(1H-7-azaindol-4-il)-2-((4-(2-hidroxipropan-2-il)piperidin-1- il)metil)-7-(morfolin-4-il)pirazolo[1,5-a]pirimidina; - 5-(1H-indol-4-il)-2-((4-(oxetan-3-il)piperidin-1-il)metil)-7-(morfolin- 4-il)pirazolo[1,5-a]pirimidina; - 5-(1H-5-fluoroindol-4-il)-2-((4-(oxetan-3-il)piperidin-1-il)metil)-7- (morfolin-4-il)pirazolo[1,5-a]pirimidina; - 5-(1H-indol-4-il)-2-(((1S,4S)-2-(oxetan-3-il)-2,5- diazabiciclo[2.2.1]hept-2-il)metil)-7-(morfolin-4-il)pirazolo[1,5-a]-pirimidina; - 3-etil-1-(1-((5-(1H-indol-4-il)-7-(morfolin-4-il)pirazolo[1,5- a]pirimidin-2-il)metil)piperidin-4-il)ureia; - 1-fenil-3-(1-((5-(1H-indol-4-il)-7-(morfolin-4-il)pirazolo[1,5- a]pirimidin-2-il)metil)piperidin-4-il)ureia; - 2-((4-terc-butilpiperazin-1-il)metil)-5-(6-fluoro-1H-indol-4-il)-7- (morfolin-4-il)pirazolo[1,5-a]pirimidina; - 2-((4-terc-butilpiperazin-1-il)metil)-5-(1H-indol-4-il)-3-metil-7- (morfolin-4-il)pirazolo[1,5-a]pirimidina; - 2-((4-(2-hidroxipropan-2-il)piperidin-1-il)metil)-5-(1H-indol-4-il)-3- metil-7-(morfolin-4-il)pirazolo[1,5-a]pirimidina; - 5-(2-etilbenzimidazol-1-il)-2-((4-(metilsulfonil)piperazin-1-il)metil)- 7-(morfolin-4-il)pirazolo[1,5-a]pirimidina; - 5-(2-etilbenzimidazo-1-il)-2-((4-(dimetilamino)piperidin-1-il)metil)- 7-(morfolin-4-il)pirazolo[1,5-a]pirimidina; - 5-(2-etilbenzimidazol-1-il)-2-((4-(4-metilpiperazin-1-il)piperidin-1- il)metil)-7-(morfolin-4-il)pirazolo[1,5-a]pirimidina; - 5-(2-etilbenzimidazol-1-il)-2-((4-(4-metoxifenil)piperazin-1- il)metil)-7-(morfolin-4-il)pirazolo[1,5-a]pirimidina; - 5-(2-etilbenzimidazol-1-il)-2-((4-(2-hidroxipropan-2-il)piperidin-1- il)metil)-7-(morfolin-4-il)pirazolo[1,5-a]pirimidina; - 5-(2-etilbenzimidazol-1-il)-2-((4-terc-butilpiperazin-1-il)metil)-7- (morfolin-4-il)pirazolo[1,5-a]pirimidina; - 5-(2-metilbenzimidazol-1-il)-2-((4-terc-butilopiperazin-1-il)metil)- 7-(morfolin-4-il)pirazolo[1,5-a]pirimidina; - 5-(2-metilbenzimidazol-1-il)-2-((4-(2-hidroxipropan-2-il)piperidin- 1-il)metil)-7-(morfolin-4-il)pirazolo[1,5-a]pirimidina; - 5-(2-(difluorometil)benzimidazol-1-il)-2-((4-terc-butilpiperazin-1- il)metil)-7-(morfolin-4-il)pirazolo[1,5-a]pirimidina; - 5-(2-(difluorometil)benzimidazol-1-il)-2-((4-(2-hidroxipropan-2- il)piperidin-1-il)metil)-7-(morfolin-4-il)pirazolo[1,5-a]pirimidina; - 5-(2-iso-propilbenzimidazol-1-il)-2-((4-terc-butilpiperazin-1- il)metil)-7-(morfolin-4-il)pirazolo[1,5-a]pirimidina; - 5-(2-iso-propilbenzimidazol-1-il)-2-((4-(2-hidroxipropan-2- il)piperidin-1-il)metil)-7-(morfolin-4-il)pirazolo[1,5-a]pirimidina; - 5-(2-ciclopropilbenzimidazol-1-il)-2-((4-terc-butilpiperazin-1- il)metil)-7-(morfolin-4-il)pirazolo[1,5-a]pirimidina; - 5-(2-ciclopropilbenzimidazol-1-il)-2-((4-(2-hidroxipropan-2- il)piperidin-1-il)metil)-7-(morfolin-4-il)pirazolo[1,5-a]pirimidina; - 5-(2-etilimidazo[4,5-b]piridin-1-il)-2-((4-terc-butilpiperazin-1- il)metil)-7-(morfolin-4-il)pirazolo[1,5-a]pirimidina; - 5-(2-etilimidazo[4,5-c]piridin-1-il)-2-((4-terc-butilpiperazin-1- il)metil)-7-(morfolin-4-il)pirazolo[1,5-a]pirimidina; - 5-(2-etil-5-metoxibenzimidazol-1-il)-2-((4-terc-butilpiperazin-1- il)metil)-7-(morfolin-4-il)pirazolo[1,5-a]pirimidina; - 5-(2-etil-5-metoxibenzimidazol-1-il)-2-((4-(2-hidroxipropan-2- il)piperidin-1-il)metil)-7-(morfolin-4-il)pirazolo[1,5-a]pirimidina; - 5-(2-difluorometil-5-metoxibenzimidazol-1-il)-2-((4-terc- butilpiperazin-1-il)metil)-7-(morfolin-4-il)pirazolo[1,5-a]pirimidina; - 5-(2-difluorometil-5-metoxibenzimidazol-1-il)-2-((4-(2- hidroxipropan-2-il)piperidin-1-il)metil)-7-(morfolin-4-il)pirazolo[1,5-a]pirimidina; - 5-(2-(difluorometil)imidazo[4,5-c]piridin-1-il)-2-((4-terc- butilpiperazin-1-il)metil)-7-(morfolin-4-il)pirazolo[1,5-a]pirimidina; - 5-(2-(metoximetil)-benzimidazol-1-il)-2-((4-terc-butilpiperazin-1- il)metil)-7-(morfolin-4-il)pirazolo[1,5-a]pirimidina; - 5-(2-(difluorometil)benzimidazol-1-il)-2-((3-(morfolin-4-il)azetidin- 1-il)metil)-7-(morfolin-4-il)pirazolo[1,5-a]pirimidina; - 5-(2-(difluorometil)benzimidazol-1-il)-2-((3-((2R,6S)-2,6- dimetilmorfolin-4-il)azetidin-1-il)metil)-7-(morfolin-4-il)pirazolo[1,5-a]pirimidina; - 5-(2-(difluorometil)benzimidazol-1-il)-2-((3-(4,4-difluoropiperidin- 1-il)azetidin-1-il)metil)-7-(morfolin-4-il)pirazolo[1,5-a]pirimidina; - 5-(2-(difluorometil)benzimidazol-1-il)-2-((3-(3-metoxiazetidin-1- il)azetidin-1-il)metil)-7-(morfolin-4-il)pirazolo[1,5-a]pirimidina; - 5-(2-(difluorometil)benzimidazol-1-il)-3-metil-2-((4-terc- butilpiperazin-1-il)metil)-7-(morfolin-4-il)pirazolo[1,5-a]pirimidina; - 5-(2-(difluorometil)benzimidazol-1-il)-3-metil-2-((4-(2- hidroxipropan-2-il)piperidin-1-il)metil)-7-(morfolin-4-il)pirazolo[1,5-a]pirimidina; - 2-(4-terc-butilpiperazin-1-ilcarbonil)-5-(1H-indol-4-il)-7-(morforlin- 4-il)pirazolo[1,5-a]pirimidina; - 5-(2-(difluorometil)benzimidazol-1-il)-3-cloro-2-((4-terc- butilpiperazin-1-il)metil)-7-(morfolin-4-il)pirazolo[1,5-a]pirimidina; - 5-(2-(difluorometil)benzimidazol-1-il)-3-bromo-2-((4-terc- butilpiperazin-1-il)metil)-7-(morfolin-4-il)pirazolo[1,5-a]pirimidina.

17. Uso do composto de fórmula (I), conforme definido em qualquer uma das reivindicações 1 a 16, caracterizado por ser na fabricação de um medicamento.

18. Uso do composto de fórmula (I), conforme definido em qualquer uma das reivindicações 1 a 16, caracterizado por ser na fabricação de um medicamento para o tratamento de doenças de sistema imunológico, doenças inflamatórias e câncer.

19. Composição farmacêutica caracterizada por compreender o composto de fórmula (I), conforme definido em qualquer uma das reivindicações 1 a 16, e excipientes farmaceuticamente aceitáveis.

20. Uso do composto de fórmula (I), conforme definido em qualquer uma das reivindicações 1 a 16, caracterizado por ser na preparação de um medicamento para tratamento de doenças de sistema imunológico, doenças inflamatórias e câncer.