BR112016011637B1

BR112016011637B1 - método de quantificação das impurezas no lactídeo

Info

Publication number: BR112016011637B1
Application number: BR112016011637-2A
Authority: BR
Inventors: Gerrit Gobius Du Sart; Jan Arie Niessen; Vincent De Jong
Original assignee: Purac Biochem B.V
Priority date: 2013-12-10
Filing date: 2014-12-08
Publication date: 2020-12-01
Also published as: US20160299071A1; CN105917213A; CA2932420A1; EP3080586A1; JP2016540214A; MY176195A; CN105917213B; US10627347B2; EP3080586B1; KR101945170B1; WO2015086494A1; ES2765263T3; CA2932420C; KR20160096666A; JP6336082B2

Abstract

MÉTODO DE QUANTIFICAÇÃO DAS IMPUREZAS NO LACTÍDEO A presente invenção refere-se a um método para a quantificação da quantidade das impurezas no lactídeo. O referido método é caracterizado pelo fato de que a quantificação das impurezas é com base nas medições realizadas nas absorções na região no Infravermelho próximo do espectro eletromagnético. Com este método, pequenas quantidades das impurezas tipo água, espécies de ácido livre ou ambas podem ser determinadas on line em uma mistura reacional de lactídeo de um modo relativamente simples. Isto permite um monitoramento em linha simples do processo de produção do lactídeo.

Description

Campo da Invenção

[001] A presente invenção refere-se a um método para a quantificação da quantidade das impurezas no lactídeo.

Antecedentes da Invenção

[002] O lactídeo é um produto intermediário bem conhecido na produção de materiais de polímeros, como ácido poliláctico (PLA) ou copolímeros contendo PLA. O lactídeo (algumas vezes chamado di- lactídeo) é um dímero cíclico do ácido láctico e é geralmente produzido por meio de um processo de duas etapas. Na primeira etapa, o ácido láctico é polimerizado em um oligômero ou pré-polímero assim chamado, tendo um peso molecular relativamente baixo. Na segunda etapa, o lactídeo cru é formado a partir deste pré-polímero por meio de um assim chamado processo de ‘difamação’ na presença de um catal-isador. Este material de lactídeo cru pode ser purificado por meio de cristalização (repetida) e / ou destilação (repetida). O lactídeo purificado assim obtido pode subsequentemente ser empregado em um processo de polimerização para a produção do PLA ou copolímeros contendo PLA.

[003] É bem conhecido que o lactídeo pode existir em três diferentes estruturas geométricas, que têm uma relação diastereomérica. Estas diferentes estruturas podem ser distintas como R,R-lactídeo (ou D-lactídeo), S,S-lactídeo (ou L-lactídeo) e R,S-lactídeo (ou meso- lactídeo). As misturas de quantidades iguais de D- e L-lactídeo são muitas vezes referidas como lactídeo racêmico ou rac-lactídeo. Dentro do escopo da presente invenção, a palavra 'lactídeo'se refere igualmente aos três lactídeos puros (sendo composto de apenas um diaste- reômero) assim como às misturas de dois ou mais dos lactídeos puros.

[004] A pureza do lactídeo é um resultado importante. Isto é es- pecialmente verdadeiro conforme as impurezas podem ter uma forte influência na polimerização do lactídeo no PLA. Em consideração, por esse motivo, é relevante ter os métodos disponíveis que permitem a determinação das quantidades das impurezas no lactídeo. Tais métodos deveriam ter uma confiabilidade e precisão elevada. Tais métodos devem, além do mais, ser simples em seu uso e implementação nos processos de manipulação do lactídeo.

[005] As impurezas nos lactídeos bem conhecidas são as espécies com grupos de hidroxila e/ ou grupos de ácido carboxílico. Água e espécies de ácido livre são importantes exemplos destes tipos das impurezas. Em vista destes, a quantidade de tais impurezas no material de lactídeo deve ser mantida tão baixa quanto possível. As técnicas de destilação repetida e de cristalização repetida de diferentes tipos são os meios de purificação técnica bem conhecidos os quais podem ser empregados durante a produção do lactídeo para diminuir a quantidade das impurezas mencionadas tanto quanto possível.

[006] Atualmente, os métodos de titulação são muitas vezes empregados para determinar as quantidades das impurezas, como espécies com os grupos de hidroxila e/ ou grupos de ácido carboxílico, no lactídeo. Para a execução destes métodos, pequenas amostras do material contendo lactídeo necessitam ser tomadas e manuseadas por diferentes procedimentos de titulação a fim de determinar a quantidade exata de diferentes impurezas.

[007] De acordo com a experiência dos inventores, os métodos de titulação conhecidos para quantificação das impurezas no lactídeo são bastantes incômodos e de trabalho intensivo em seu uso. Além do mais, os resultados de tais métodos de quantificação não estão imediatamentedisponíveis. Por esse motivo, a determinação das impurezas por meio dos métodos de titulação conhecidos tem as desvantagens de ser relativamente cara e menos adequado de monitorar a qualidade do lactídeo on line sob as circunstâncias de produção em massa.

[008] Sumário da Invenção

[009] Na visão dos Requerentes, neste ponto existe uma forte necessidade de simplificar o método de quantificação conhecido das impurezas no material de lactídeo. É, por esse motive, um objeto da presente invenção fornecer um método exato ainda simples, flexível e de custo eficaz para a quantificação das impurezas no lactídeo, cujo método não requer uma manipulação experimental complicada e demorada. Tal método de quantificação deve, de preferência, ser operá- vel em vários estágios de um processo de produção do lactídeo e também deve ser operável no monitoramento da qualidade do lactídeo durante seu armazenamento.

[0010] Estes e outros objetos possíveis da presente invenção são obtidos por meio de um método para a quantificação da quantidade das impurezas no lactídeo, cujo método é também caracterizado pelo fato de que a quantificação das impurezas é com base nas medições realizadas nas absorções na região no Infravermelho próximo do espectroeletromagnético.

[0011] A invenção é baseada na perspicácia experimentalmente obtida dos inventores que mais exatamente pequenas quantidades das impurezas podem ser medidas e quantificadas em um material de lactídeo por meio de medições no Infravermelho próximo (nIR). Empregando-se este método, quantidades das impurezas tão pequenas quanto 0,1 % em peso ou menos no lactídeo podem ser medidas e quantificadas de um modo exato e reproduzível. Comparado com os métodos de titulação conhecidos, o método inventado parece ser mias exato quando realizado sob condições ideais. Além do mais, o manuseio para a realização das medições nIR, como a preparação da amostra e a análise dos dados, é muito menor demorado como comparado aos referidos métodos de titulação comumente empregados. Na prática, a determinação dos níveis de impureza por meio de titulação leva pelo menos várias horas após empregar a amostra a ser medida. Isto significa que estes métodos de titulação não são adequados para os propósitos de controle do processo.

[0012] É observado que na prática o espectro nIR é definido para variar de aproximadamente 12000 - 4000 cm-1. Nesta faixa espectral, o sobretom molecular e a combinação das vibrações do lactídeo e as impurezas presentes no lactídeo parecem ser visíveis. Os picos correspondentes de absorção são bastantes amplos e sobrepostos, resultando em espectros nIR complexos. Nestes espectros, os vários picos não podem inequivocamente ser designados para as vibrações específicas. No entanto, as medições de nIR nas misturas contendo as amostras das quantidades bem determinadas de igualmente um e duas impurezas específicas e o lactídeo surpreendentemente mostra que as curvas de calibração com ajustes muitos bons podem ser obtidas. Pode, por esse motivo, ser concluído que quantidades muito pequenas de tais impurezas no lactídeo podem ser quantificadas de um modo simples por meio de nIR.

[0013] Uma modalidade preferida do método de acordo com a presente invenção é caracterizada pelo fato de que as impurezas compreendem água. Até mesmo pequenos traços de umidade ou água no lactídeo são conhecidos por ter efeito negativo nas propriedades e vida de prateleira de tal lactídeo. Existe uma tendência geral para manter a quantidade de água no lactídeo abaixo um valor limite de 100 ppm, mais particularmente abaixo de um valor limite de 50 ppm. Os valores limites de 20 ppm ou menos podem ser exatamente e reprodu- zivelmente medidos com o método de acordo com a presente invenção. O referido método é, por esse motivo, muito adequado para uso no monitoramento (mudança de) da quantidade de umidade nas amostras de lactídeo sob várias condições, tanto on line durante sua produ-ção e off line durante seu armazenamento.

[0014] Outra modalidade preferida do método inventado é caracterizada pelo fato de que as impurezas compreendem espécies de ácido livre. A frase 'espécies de ácido livre' representa qualquer uma das espécies acídicas que podem ser esperado no lactídeo, incluindo ácido láctico, lactoila, ácido láctico e oligômeros de ácido láctico, assim como, os produtos da degradação oxidativa como ácido 2- piruvoiloxipropanóico. Estas impurezas no lactídeo contêm pelo menos um grupo de ácido carboxílico livre. Pelo menos parte destas impurezas pode ser formada por meio da degradação de lactídeo. As quantidades destes produtos da degradação devem ser mantidas tão pe-quenas quanto possível, de preferência abaixo 10 mmol por kg de lac- tídeo. Os valores limites de 5 mmol/ kg ou até mesmo menos pode ser exatamente e reproduzivelmente medidos com o método de acordo com a presente invenção. O referido método é, por esse motivo, muito adequado para uso no monitoramento (mudança de) da quantidade de ácido livre nas amostras de lactídeo sob várias condições.

[0015] Também preferida é a modalidade do método inventado que é caracterizado pelo fato de que a quantidade das impurezas é medida no lactídeo sendo em uma fase de agregado líquido. Os inventorestêm constatado que o método inventado de quantificação é facilmente realizado nas temperaturas em que o lactídeo está na forma líquida. Na prática isto significa que as medições devem ser realizadas nas temperaturas acima de aproximadamente 55 °C para a medição das impurezas em meso-lactídeo e acima de aproximadamente 100 °C para a medição das impurezas em L- ou D-lactídeo assim como as misturas dos dois últimos lactídeos.

[0016] Interessante é também a modalidade do método de acordo com a presente invenção que é caracterizada pelo fato de que a quantidade das impurezas é medida no lactídeo sendo em uma fase de agregado sólido. Na prática isto indica que a quantidade nas impurezas mencionadas em qualquer tipo de lactídeo pode satisfatoriamente ser medida em temperatura ambiente (ou qualquer outra temperatura menor do que o ponto de fusão do referido lactídeo). O lactídeo sólido pode estar presente de várias formas, tipo como um pó, como grãos, como flocos ou como péletes. Por esse motivo, o método inventado permite o controle da qualidade do lactídeo sólido, independente de seu tipo (R,R-, S,S- ou R,S e até mesmo as misturas destes três tipos) durante um longo período de tempo, o referido lactídeo sendo armazenado e/ ou transportado durante este período de tempo.

[0017] Muito interesse também é dado à modalidade da presente invenção, que é caracterizada pelo fato de que na quantidade das impurezasé medida em um processo de produção do lactídeo em que o lactídeo é preparado por meio da despolimerização dos oligômeros do ácido láctico. O lactídeo obtido por este processo é liquidificado a partir do estado de agregado vaporoso, em poucas palavras após sua produção. A partir deste estágio no processo de produção, as medições em linha de nIR podem ser realizadas no lactídeo liquidificado a fim de monitorar sua qualidade. O referido lactídeo liquidificado pode mais tarde ser solidificado por meio de uma ou mais etapas de cristalização, se necessário após uma ou mais etapas de destilação. A qualidade de lactídeo pode ser monitorada durante o processo complete de purificação.

[0018] Também de interesse é a modalidade do método inventado que é caracterizado pelo fato de que com isso o processo de produção é um processo em batelada. Nesta modalidade preferida do método de acordo com a presente invenção, a quantificação da quantidade das impurezas pode ser realizada em qualquer estágio desejado do processo de produção do lactídeo. É até mesmo possível monitorar em tempo de toda a reação, isto é, para continuamente quantificar a alte- ração na concentração de ácido livre e água na mistura reacional a partir do início da produção de lactídeo até sua conclusão.

[0019] Interessante é também a modalidade do método da invenção que é caracterizado pelo fato de que o processo de produção do lactídeo é um processo contínuo. Em tal processo contínuo, a quantidade das impurezas como água e de ácido livre pode ser quantificada em certos pontos de interesse no equipamento de produção do lactí- deo. No caso de mais pontos de interesse, como no lactídeo líquido cru e no lactídeo líquido (parcialmente) purificado, a referida quantificação das impurezas pode ser realizada empregando-se múltiplas sondas de medição em combinação com um mecanismo único de medição nIR. Os dados resultantes podem ser calculados instantaneamente e de preferência com uma única calculadora de dados. Desse modo, o monitoramento on line da alteração nas impurezas medidas em um processo contínuo de produção do lactídeo é agora possível. Como resultado da presente invenção, o processo e o controle de qualidade de um tal processo contínuo tem se tornado muito mais simples. Além do mais, os desvios indesejáveis na água e/ ou teor de espécies de ácido livre ocorrendo durante o processo de produção do lactídeo podem ser determinados em um estágio muito inicial, a fim de que as alterações nos parâmetros do processo para reparar estes desvios possam ser aplicadas em um estágio inicial. Como resultado, possível perda do produto pode ser minimizada.

[0020] O método inventado de quantificação pode ser realizado com qualquer estado do mecanismo de medição no Infravermelho próximo. Se bem que as medições na faixa espectral nIR entre 6100 e 5100 cm-1 fornece informação mais relevante (primeiros sobretons), as medições em uma faixa nIR mais ampla como entre 12000 e 4000 cm- 1 fornecem os dados mais exatos, como esta faixa mais ampla pode incluir o segundo ou os sobretons mais elevados das impurezas a ser medida, assim como, o lactídeo em que estas impurezas estão presentes. Tal mecanismo nIR pode compreender a câmara de medição, cuja câmara é fornecida com uma fonte no Infravermelho próximo e uma sonda de medição. A última sonda pode ser conectada através de uma fibra óptica à fonte no Infravermelho próximo, assim como, um módulo de software. Um mecanismo deste projeto é especialmente adequado para medição on line das impurezas nos processos de produção do lactídeo. Especialmente preferido é um mecanismo nIR que é equipado com um número de sondas as quais são todas conectadas à fonte nIR através de fibras ópticas. Tal mecanismo tendo duas ou mais sondas é muito adequado para uso em um processo contínuo de produção do lactídeo nas quais as concentrações de impureza devem ser simultaneamente monitoradas nos diferentes estágios do referido processo, como apenas antes e após uma etapa de purificação do lac- tídeo.

[0021] Comparado com o mecanismo necessário para medições Infravermelhas médias, existe uma vantagem significante nos termos do transporte de sinal da sonda de medição para o dispositivo de medição. A este respeito, é observado que a faixa de transporte de sinal Infravermelho médio através do estado das fibras ópticas da técnica é bastante limitada (poucos metros) devido às perdas do sinal. De qualquer modo, os sinais no Infravermelho próximo podem ser transmitidos para dezenas de metros através das mesmas fibras ópticas sem perdas significantes. Desse modo, em princípio um mecanismo nIR único com várias sondas conectadas através de fibras ópticas podem ser empregadas para o monitoramento de uma produção completa de lac- tídeo em uma fábrica de produção de lactídeo.

[0022] Breve Descrição da Invenção

[0023] A presente invenção é descrita de forma mais detalhada e esclarecida por diferentes exemplos e um desenho, em que

[0024] A Figura 1 mostra uma sobreposição de vários espectros nIR de lactídeo com diferentes quantidades de espécies de ácido livre e água,

[0025] A Figura 2 mostra um gráfico de validação cruzada da medição e dos dados calculados de concentrações de espécies de ácido livre no lactídeo, e

[0026] A Figura 3 mostra um gráfico de validação cruzada da medição e dos dados calculados das concentrações de água no lactídeo.

[0027] Descrição Detalhada da Invenção

[0028] Em um experimento, aproximadamente 550 gramas de lac- tídeo (recentemente preparado com uma extrema quantidade baixa de espécies de ácido livre e água) foi dissolvido em uma manta de nitrogênio em um frasco de fundo redondo de 500 ml com 4 gargalos por um revestimento de aquecimento. A temperatura do lactídeo dentro do frasco de fundo redondo foi controlada por meio de um controlador especial de temperatura. Uma sonda nIR foi inserida na fase de agregadolíquido do lactídeo e a aquisição dos dados foi iniciada. A cada 17 segundos um espectro foi adquirido. As quantidades das impurezas foram determinadas por meio de titulação, mais particularmente com um método de titulação Karl Fischer para o teor de água e uma titulação com Metanoato de Potássio para determinar a quantidade de espécies de ácido livre. A titulação foi realizada empregando um mecanismo Titrino 736 com um coletor de amostras automático 730. O momento de amostragem foi empregado para conectar os resultados com um único espectro nIR que foi empregado para desenvolver um modelo correspondente de medição.

[0029] Na Figura 1, uma sobreposição de vários espectros nIR é mostrada, em que a absorção A é representada como uma função do número de onda W (em cm-1). De forma mais detalhada, esta Figura mostra uma série de espectros nIR do lactídeo medido no estado lí- quido em que quantidades determinadas de água e espécies de ácido livre estão presentes. Os espectros do lactídeo no estado do agregado líquido foram registrados no modo de transmissão na faixa entre aproximadamente 12000 e 4000 cm-1. O teor de água e o teor de espécies de ácido livre das amostras de lactídeo dos quais os espectros são mostrados variados entre 10 - 381 mmol por kg de lactídeo e 0,0113 - 0,695 % (peso/ peso), respectivamente. As medições foram realizadas com um espectrômetro NIR duplo Bruker MPA Matriz F. Os picos de interesse específico para o método de quantificação de acordo com a presente invenção estão localizados na faixa espectral entre 7300 e 4500 cm-1. Isto é a área em que as vibrações das ligações de OH moleculares nas diferentes moléculas de interesse mostra os sobretons.

[0030] A Figura 2 mostra uma assim chamada curva de validação cruzada das quantidades medidas de ácido livre (em mmol/ kg) no lac- tídeo recentemente preparado. Nesta Figura, a concentração modelada (Cm) é representada como uma função da concentração experimentalmente determinada (Cexp). A fim de determinar estas curvas, pequenas quantidades do ácido láctico foram adicionadas à mistura durante um período de tempo. Em um número de intervalos de tempo, uma amostra da medição foi tomada do frasco, cuja amostra foi congelada e a quantidade de ácido livre foi determinada por meio de titulação. No momento da coleta da amostra, um espectro nIR foi registrado na área indicada. Com base nos resultados da titulação, os espectros registra-dos e o software empregado, as curvas melhores ajustadas plotadas podem ser obtidas para ambos, a curva de calibração e a curva de validação cruzada.

[0031] A partir da Figura 2, pode ser concluído que com o método nIR empregado é possível determinar a quantidade de espécies de ácido livre no lactídeo puro dentro de uma faixa de 6 a 600 mmol/ kg com um intervalo de confiança de 4 mmol/ kg (RMSECV, isto é o erro para todo o modelo, na parte mais baixa da linha de calibração este erro torna-se 1 mmol/ kg). Nestes experimentos iniciais, não foi possível testar o sistema nos números de ácido livre mais fraco porque o material tinha de ser dissolvido e pequenas quantidades de ar podem entrar na estrutura resultando em absorção de água que é em seguida (parcialmente) convertida em ácido livre. Nos experimentos posteriores, foi confirmado que as quantidades de espécies de ácido livre tão baixa quanto 2 mmol/ kg de lactídeo podem ser medidas com nIR com um RMSECV de nível de confiança de 0,33 mmol/ kg (gráfico de validação cruzada não mostrado).

[0032] A Figura 3 mostra uma curva de validação cruzada das quantidades medidas de água (na % de peso/ peso) no lactídeo recentemente preparado. Nesta Figura, a concentração modelada (Cm) é representada como uma função da concentração experimentalmente determinada (Cexp). A fim de determinar estas curvas, a amostra acima mencionada foi deixada para absorver água durante um período de tempo. Em um número de intervalos de tempo, uma amostra da medição foi tomada do frasco, cuja amostra foi congelada e a quantidade de água foi determinada por meio de titulação. Conforme o momento da coleta da amostra, um espectro nIR foi registrado na área indicada. Com base nos resultados da titulação, os espectros registrados e o software empregado, as curvas melhores ajustadas plotadas podem ser obtidas para ambos, a curva de calibração e a curva de validação cruzada.

[0033] A partir da Figura 3, pode ser concluído que com o método nIR empregado é possível determinar a quantidade de água no lactí- deo puro dentro de uma faixa de 0,006 a 0,2 % (peso/ peso) com um intervalo de confiança de 0,01 % (peso/ peso). A precisão da determinação de água é menos boa comparada com a precisão da quantidade de espécies de ácido livre (coeficiente de correlação de 0,9681 versus 0,9999). Isto é parcialmente devido ao fato de que o método de referência empregado tem um maior intervalo de confiança.

[0034] O Desvio-padrão Relativo (RSD) da titulação do ácido livre é de menos do que 2,5 %. Para a titulação da água, o RSD é muito mais elevado. As amostras são muito sensíveis à umidade do ar. A precisão mais reduzida da determinação da água é mais provavelmente causada pela estabilidade da amostra e do tempo que leva entre a amostragem e a análise (uns poucos minutos). A precisão do método NIR deve ser igual ou menos em comparação à precisão do método de referência empregado.

[0035] Além dos resultados experimentais acima mencionados, também tem sido mostrado que ambas as impurezas mencionadas (água e ácido livre) podem ser medidas e quantificadas simultaneamente nas amostras de lactídeo.

[0036] Em resumo, tem sido mostrado que, com o método de quantificação do lactídeo atualmente inventado, pequenas quantidades das impurezas como água e ácido livre podem ser determinadas on line em uma mistura reacional de lactídeo de um modo relativamente simples. Isto permite um monitoramento simples on line do processo de produção de lactídeo.

[0037] Ao mesmo tempo que a invenção foi ilustrada e descrita de forma detalhada na descrição anterior, tal descrição é para ser considerada ilustrativa ou exemplar e não restritiva; a invenção não é limitada aos experimentos e modalidades descritas. As variações para as modalidades descritas podem ser entendidas e efetuadas por aqueles versados na técnica na prática da invenção reivindicada, a partir de um estudo da descrição e das reivindicações anexas.

[0038] Nas reivindicações, a palavra "compreendendo"não exclui outros elementos ou etapas, e o artigo indefinido "um" ou "uma"não exclui uma pluralidade. O mero fato de que certas medições são reci- tadas nas reivindicações dependentes mutuamente diferentes não indica que uma combinação destas medições não pode ser empregada com vantagem.

Claims

1. Método para a quantificação das impurezas no lactídeo, em que as ditas impurezas possuem hidroxila e/ou grupos de ácidos carboxílico, em que compreendendo: Fornecer lactídeo, em que o lactídeo é um dímero cíclico de ácido láctico; e Testar o referido lactídeo com radiação infra-vermelha próximo fornecida a partir de uma fonte da mesma para obter um espectro mensurável, O referido método é caracterizado pelo fato de que a quantificação é com base nas medições realizadas no espectro de absorção gravado na faixa entre 12000 cm-1 e 4000 cm-1 na região no Infravermelho próximo do espectro eletromagnético de forma a capturar o segundo ou os sobretons mais elevados das impurezas e do ácido lacteideo.

2. Método, de acordo com a reivindicação 1, caracterizado pelo fato de que as impurezas compreendem água.

3. Método, de acordo com a reivindicação 1 ou 2, caracterizado pelo fato de que as impurezas compreendem espécies livres de ácido apresentando pelo menos um grupo de ácido carboxílico livre.

4. Método, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 3, caracterizado pelo fato de que a quantidade das impurezas é quantificada no lactídeo sendo em uma fase de agregado líquida.

5. Método, de acordo com qualquer uma das reivindicações de 1 a 3, caracterizado pelo fato de que a quantidade das impurezas é quantificada no lactídeo sendo em uma fase de agregado sólida.

6. Método, de acordo com qualquer uma das reivindicações de 1 a 4, caracterizado pelo fato de que a quantidade das impurezas é quantificada durante um processo de produção do lactídeo com base nas medições realizadas sobre o lactídeo obtido por meio da despolimerização de oligômeros do ácido láctico.

7. Método, de acordo com a reivindicação 6, caracterizado pelo fato de que o processo de produção é um processo em batelada.

8. Método, de acordo com a reivindicação 6, caracterizado pelo fato de que o processo de produção é um processo contínuo.

9. Método, de acordo com a reivindicação 8, caracterizado pelo fato de que a quantidade das impurezas no processo contínuo é medida simultaneamente nos diferentes estágios do processo de produção do lactídeo.

10. Método, de acordo com a reivindicação 9, caracterizado pelo fato de que a produção da quantificação das quantidades de água e das espécies livres de ácido é empregada para controlar os parâmetros de produção, a fim de ajustar o processo de produção.