BR112015001502B1 - Uso de derivados de tipo azaindazol ou diazaindazol no tratamento ou prevenção de dor - Google Patents

Abstract

DERIVADOS DE TIPO AZAINDAZOL OU DIAZAINDAZOL, SEU USO, E COMPOSIÇÃO FARMACÊUTICA. A presente invenção refere-se a um composto da fórmula (I) que segue: ou um sal farmaceuticamente aceitável ou solvato do mesmo, um tautômero do mesmo, um estereoisômero ou mistura de estereoisômeros do mesmo em quaisquer proporções, tal como uma mistura de enantiômeros, notadamente uma mistura racêmica; para uso no tratamento de dor.

Description

[001] A presente invenção refere-se a derivados bicíclicos fundi dos de azaindazol e diazaindazol para uso no tratamento ou prevenção de dor, em particular dor associada a pelo menos uma proteína Trk.

[002] Dor é um termo usado para descrever uma sensação anormal e dolorosa recebida por um ser humano e percebida pelo cérebro. Esta é uma experiência sensorial e emocional desagradável associada com dano a tecido ou descrita presente ou potencial em termos de tal dano. A dor pode ser aguda ou crônica e está associada com várias patologias.

[003] Vários mecanismos na origem da dor foram descritos:

[004] - Dor nociceptiva: este é um sinal de alarme em resposta a uma agressão contra o corpo, por exemplo, dor causada por queimaduras, trauma, contusão, cobreiros, cirurgia ou extração de dente. Uma mensagem é enviada para o cérebro para alertá-lo de ataque.

[005] - Dor inflamatória está associada com inflamação aguda ou crônica, uma vez que ela pode ser encontrada em infecções, artrite ou doença de Crohn.

[006] - Dor neuropática: é uma dor seguindo lesão ao nervo. Esta lesão causa um mau funcionamento do sistema nervoso periférico ou central. Ela pode ser uma dor neuropática de origem central, tal como seguindo lesão cerebral ou infarto, ou uma dor neuropática periférica tal como ciática devido à herniação de disco.

[007] - Dor idiopática: ela é uma síndrome de dor cujas causas são pobremente explicadas. Os testes são normais, mas a dor está lá. Tal dor está presente em pacientes apresentando, por exemplo, síndromes funcionais, tal como, fibromialgia ou síndrome do intestino irritável.

[008] - Dor psicogênica: ela é uma dor de origem psicológica (perda, depressão, trauma, etc). Ela é notadamente dor crônica encontrada em depressão.

[009] A dor é algumas vezes de origem mista: nociceptiva e in flamatória, como, por exemplo, em cânceres.

[0010] Analgésicos são fármacos usados para aliviar a dor. Eles são classificados em três níveis pela Organização Mundial da Saúde (OMS):

[0011] - O Nível 1 consiste em analgésicos não opioides (parace tamol, fármacos anti-inflamatórios). Eles são usados para dor leve a moderada;

[0012] - O Nível 2 inclui opioides fracos (por exemplo, codeína). Eles são usados para dor moderada a severa ou quando analgésicos do nível 1 não são eficazes para alívio da dor;

[0013] - O Nível 3 consiste em opioides fortes (por exemplo, mor fina). Esses fármacos são usados para dor aguda ou quando os analgésicos nível 2 não são eficazes para alívio da dor.

[0014] Outras classes de fármacos são também usadas para tra tar certa dor, tais como neurolépticos ou antidepressivos para dor neuropática ou triptanos para enxaquecas.

[0015] A necessidade de encontrar novos tratamentos para dor é inevitável dada a eficácia limitada ou efeitos colaterais de tratamentos atuais, seja qual for o nível do analgésico OMS, o tipo ou origem de dor. Por exemplo, analgésicos Tipo 1 de acordo com a OMS, que incluem, dentre outros, paracetamol, aspirina, fármacos anti- inflamatórios não esteroidais (NSAIDs) e inibidores da ciclo- oxigenase, são geralmente ineficazes contra dor intensa, mas são bem tolerados, embora efeitos gástricos adversos possam ocorrer. Não obstante, inibidores seletivos de ciclo-oxigenase tipo 12, como rofecoxibe (Vioxx®) mostraram sérios riscos cardiovasculares. Opiatos tais como morfinas e derivados são eficazes em certas dores agudas ou dor crônica severa, mas podem causar sonolência, náusea e vômito no início do tratamento, e então constipação ou depressão respiratória em overdose. Uso repetido ou crônico de opioides pode levar à tolerância ao efeito analgésico, o que requer doses maiores, mais próximas das doses tóxicas, dependência e síndrome de abstinência na descontinuação do tratamento. Opiatos e derivados não são muito eficazes em dor neuropática e dor crônica na intensidade baixa a moderada.

[0016] Proteínas quinase são enzimas que desempenham um papel-chave em transdução de sinal celular. Elas estão envolvidas em processos fisiológicos tais como proliferação celular, mitose, diferenciação, invasão e mobilidade celular e apoptose, por exemplo.

[0017] Desregulagem dos mecanismos fisiológicos controlados por proteínas quinase é central para o aparecimento e desenvolvimento de muitas patologias, notadamente incluindo cânceres e dor.

[0018] De interesse particular no contexto da invenção, tirosinas quinase receptoras das quinases relacionadas à tropomiosina (Trks) foram associadas à dor aguda ou crônica. Trks são tirosinas quinase receptoras envolvidas no desenvolvimento do sistema nervoso. A família de receptor Trk é composta de três membros, TrkA, TrkB e TrkC, ativadas por ligantes específicos chamados neurotrofinas. Proteínas Trk e seus ligantes associados foram descritos desempenhar um papel no desenvolvimento de dor (Sah e outros, 2003, Nat. Rev. Drug Discovery. 2:460-472).

[0019] Por exemplo, mutações no gene de receptor TrkA foram descritas em pacientes com insensibilidade congênita à dor (Indo e outros, 1996, Nat. Genet. 13: 485-488; Indo e outros, 2001, Hum. Mutations, 18: 308-318). TrkA é expressa em neurônios nociceptivos, os neurônios que transmitem mensagens de dor, e influenciam as propriedades eletrofisiológicas de canais de sódio envolvidos em transmissão de mensagem de dor (Fang e outros, J. Neurosci. 25: 48684878). Vários artigos de revisão destacam o papel de TrkA e seu li- gante Fator de Crescimento de Nervo (NGF) (Nerve Growth Factor) no início de dor no nível de neurônios nociceptivos, particularmente em estados de dor inflamatória, por exemplo, doenças reumáticas tal como osteoartrite, dor na parte inferior das costas, herniação do disco lombar e compressão da raiz do nervo (Hefti e outros, 2006; Trends Pharmacol. Sci. 27:85-91; Pezet e McMahon, 2006, Ann. Rev. Neu- rosci. 29:507-538; Chenge e Ji, 2008, Neurochem Res. 33:1970 1978; Seidel e outros, 2010, Semin Arthritis Rheum. 40:109-126).

[0020] TrkB e seu ligante Fator Neurotrófico Derivado do Cérebro (BDNF) (Brain-Derived Neurotrophic Factor) estão também implicados em dor crônica. BDNF é sintetizado em neurônios sensoriais primários e anterogradamente transportados para os terminais centrais dos aferentes primários no cordão espinhal (Obata e outros, 2006, Neurosci. Res. 55:1-10). BDNF sintetizado por microglia em cordão espinhal causa a mudança em gradiente de ânion neuronal, levando à desinibição de transmissão de dor após lesão ao nervo (Coull e outros, 2005, Nature, 438: 1017-1021). Esse resultado indica que bloqueio do curso de BDNF\TrkB será útil para tratar dor neuropática. BDNF supraspinal também desempenha um papel em facilitação de dor (Guo e outros 2006, J. Neurosci. 26: 126-137). Concentração de BDNF aumentada no soro foi também relatada em fibromialgia (Laske e outros, 2006, J. Psychiatric Res., 41: 600-605). O papel da sinalização de BDNF\TrkB em modulação de dor foi revisto (Merighi e outros, 2008 85: 297-317).

[0021] Bloqueio do curso de TrkA e TrkB pode ser obtido através de receptores TrK solúveis ou anticorpos de neutralização. Tais estra- tégias foram validadas para curso de NGF\TrkA em animais, onde ele reduziu dor associada com câncer nos ossos (Sevcik e outros, 2005, Pain 115: 128-141) ou dor nas juntas não inflamatória (McNamee e outros, 2010 Pain 149: 386-392). Tanezumabe, um anticorpo monoclonal humanizado recombinante contra NGF, está sendo atualmente testado como um tratamento em humanos para dores aguda e crônica associadas com várias condições (Cattaneo, 2010, Curr. Opin. Mol. Ther. 12: 94-106). No entanto, tal terapia deve ser administrada com infusões intravenosas repetidas. Outras formas de tratamento, tais como moléculas inibidoras de Trk pequenas com biodisponibili- dade oral, são altamente desejáveis.

[0022] O número de inibidores de Trk relatado na literatura é limi tado e ainda nenhum é usado como um fármaco contra dor, embora inibidores de Trk já tenham demonstrado eficácia analgésica em modelos pré-clínicos experimentais, notadamente modelos de dor de câncer de osso (Ghilardi e outros, 2010, Mol. Pain 6: 87) e dor inflamatória crônica (Winckler e outros, 2009, 8th International Association for the Study of Pain Research Symposium, Poster No. 348).

[0023] Existe então uma necessidade de compostos capazes de inibir Trk.

[0024] O artigo de Wang e outros (Expert Opin. Ther. Patents 2009, 19(3), 305-319) é uma revisão de pedidos de patente desde 2002 com relação a inibidores de Trk e seu uso no tratamento de câncer e dor. Nenhum dos compostos descritos corresponde a um composto azaindazol ou diazaindazol.

[0025] O WO 2008/112695 descreve compostos de tipo 5- azaindazol ou 5,7-diazaindazol substituídos na posição 6 como inibidores de proteínas quinase tal como Trk. No entanto, nenhum resultado biológico está presente neste pedido provendo a inibição de quaisquer proteínas quinase e em particular da proteína quinase Trk. Além disso, nunca é especificado neste pedido que os compostos podem tratar ou prevenir dor.

[0026] O WO 2004/113303 descreve notadamente compostos de tipo 5-azaindazol substituídos na posição 6 como inibidores da proteína quinase JNK. Nunca é mencionado que tais compostos poderiam também inibir a proteína quinase Trk.

[0027] O WO 2007/023110 descreve notadamente compostos de tipo azaindazol ou diazaindazol como inibidores da proteína quinase p38. Nunca é mencionado que tais compostos poderiam também inibir a proteína quinase Trk.

[0028] O WO 2008/089307 descreve compostos de tipo azain- dazol ou diazaindazol como inibidores da atividade de Δ5- dessaturase. Nunca é mencionado que tais compostos poderiam também inibir a proteína quinase Trk.

[0029] Os compostos da presente invenção têm a propriedade de inibir ou modular a atividade enzimática de proteínas Trk. Consequentemente, os ditos compostos podem ser usados com fármacos no tratamento ou prevenção de dor, em particular dor associada com pelo menos uma proteína Trk.

[0030] Ainda, os compostos de acordo com a invenção são parti cularmente interessantes enquanto os inventores forem capazes de mostrar que eles inibem ou modulam a atividade de mais de uma proteína Trk. Eles então permitem tratamento ao mesmo tempo de dores de várias origens (por exemplo, a associação de dores inflamatória e nociceptiva como é observado no caso de câncer).

[0031] Mais particularmente, a presente invenção tem então co mo um objetivo um composto da fórmula geral (I) que segue:

[0032] (I)

[0033] ou um sal ou solvato farmaceuticamente aceitável do mesmo, um tautômero do mesmo, um estereoisômero ou uma mistura de estereoisômeros do mesmo em quaisquer proporções, tal como uma mistura de enantiômeros, notadamente uma mistura racêmica,

[0034] onde:

[0035] - Y1 e Y4 representam cada um, independentemente do ou tro, um grupo CH ou um átomo de nitrogênio,

[0036] - Y2 representa um átomo de nitrogênio ou um grupo CH ou C-X-Ar,

[0037] - Y3 representa um átomo de nitrogênio ou um grupo C-X-Ar ou C-W,

[0038] contanto que:

[0039] • pelo menos um e no máximo dois grupos Y1, Y2, Y3 e Y4 representem um átomo de nitrogênio,

[0040] • Y2 e Y4 não podem representar um átomo de nitrogênio ao mesmo tempo,

[0041] • quando Y2=C-X-Ar, então Y3 representa um átomo de ni trogênio ou um grupo C-W, e

[0042] • quando Y2=CH ou N, então Y3 representa um grupo C-X- Ar,

[0043] - Ar representa um grupo arila ou heteroarila opcionalmente substituído por um ou mais grupos selecionados de um átomo de ha- logênio, (C1-C6)alquila, (C1-C6)haloalquila, (C1-C6)haloalcóxi, (C1- C6)halotioalcóxi, CN, NO2, OR11, SR12, NR13R14, CO2R15, CONR16R17, SO2R18, SO2NR19R20, COR21, NR22COR23, NR24SO2R25 e R26NR27R28 e/ou opcionalmente fundido a um heterociclo,

[0044] - X representa um grupo divalente selecionado de O, S, S(O), S(O)2, NR4, S(NR4), S(O)(NR4), S(O)2(NR4), NR4S, NR4S(O), NR4S(O)2, CH2, CH2S, CH2S(O), CH2S(O)2, SCH2, S(O)CH2, S(O)2CH2, CH2CH2, CH=CH, C C, CH2O, OCH2, NR4CH2 e CH2NR4,

[0045] - W representa um grupo R5, SR5, OR5 ou NR5R6,

[0046] - U representa um grupo CH2 ou NH, um ou mais átomos de hidrogênio que podem ser substituídos por um grupo (C1-C6)alquila,

[0047] - V representa C(O), C(S) ou CH2,

[0048] - n representa 0 ou 1,

[0049] - R1 representa um átomo de hidrogênio ou um grupo OR7 ou NR7R8,

[0050] - R2 representa um átomo de hidrogênio, um heterociclo op cionalmente substituído, NO2, OR9 ou NR9R10;

[0051] - R3, R4, R11 a R25 e R27 a R28 representam cada um, inde pendentemente um do outro, um átomo de hidrogênio ou um grupo (C1-C6)alquila,

[0052] - R5 e R6 representam cada um, independentemente do ou tro, um átomo de hidrogênio ou um grupo (C1-C6)alquila, arila opcionalmente substituído ou benzila opcionalmente substituído,

[0053] - R7, R8, R9 e R10 representam cada um, independentemen te do outro, um átomo de hidrogênio ou um grupo (C1-C6)alquila ou (C3-C12)cicloalquila opcionalmente substituído ou um heterociclo opcionalmente substituído, e

[0054] - R26 representa (C1-C6)alquila,

[0055] para uso no tratamento ou prevenção de dor, em particular dor associada com pelo menos uma proteína Trk.

[0056] Nas definições acima, todas as combinações de substituin- tes ou variáveis são possíveis enquanto elas levarem a compostos estáveis.

[0057] Deve ser notado além disso que pelo menos um, mas ape nas um, de Y2 e Y3 representa um grupo C-X-Ar.

[0058] Em uma modalidade preferida a presente invenção tem co mo objeto um composto de fórmula geral (I) que segue:

[0059] ou um sal ou solvato farmaceuticamente aceitável do mesmo, um tautômero do mesmo ou um estereoisômero ou mistura de es- tereoisômeros do mesmo em quaisquer proporções, tal como uma mistura de enantiômeros, notadamente uma mistura racêmica,

[0060] onde:

[0061] - Y1 e Y4 representam cada um, independentemente do ou tro, um grupo CH ou um átomo de nitrogênio contanto que pelo menos um de Y1 e Y4 represente um átomo de nitrogênio,

[0062] - Y2 representa um grupo C-X-Ar,

[0063] - Y3 representa um grupo C-W,

[0064] - Ar representa um grupo arila ou heteroarila opcionalmente substituído por um ou mais grupos selecionados de um átomo de ha- logênio, (C1-C6)alquila, (C1-C6)haloalquila, (C1-C6)haloalcóxi, (C1- C6)halotioalcóxi, CN, NO2, OR11, SR12, NR13R14, CO2R15, CONR16R17, SO2R18, SO2NR19R20, COR21, NR22COR23, NR24SO2R25 e R26NR27R28 e/ou opcionalmente fundido a um heterociclo,

[0065] - X representa um grupo divalente selecionado de O, S, S(O), S(O)2, NR4, S(NR4), S(O)(NR4), S(O)2(NR4), NR4S, NR4S(O), NR4S(O)2, CH2, CH2S, CH2S(O), CH2S(O)2, SCH2, S(O)CH2, S(O)2CH2, CH2CH2, CH=CH, C C, CH2O, OCH2, NR4CH2 e CH2NR4,

[0066] - W representa um grupo R5, SR5, OR5 ou NR5R6,

[0067] - U representa um grupo CH2 ou NH, um ou mais átomos de hidrogênio que podem ser substituídos por um grupo (C1-C6)alquila,

[0068] - V representa um C(O), C(S) ou CH2,

[0069] - n representa 0 ou 1,

[0070] - R1 representa um átomo de hidrogênio ou um grupo OR7 ou NR7R8,

[0071] - R2 representa um átomo de hidrogênio, um heterociclo op cionalmente substituído, NO2, OR9 ou NR9R10,

[0072] - R3, R4, R11 a R25 e R27 a R28 representam cada um, inde pendentemente um do outro, um átomo de hidrogênio ou um grupo (C1-C6)alquila,

[0073] - R5 e R6 representam cada um, independentemente do ou tro, um átomo de hidrogênio ou uma (C1-C6)alquila, um grupo arila opcionalmente substituído ou benzila opcionalmente substituído,

[0074] - R7, R8, R9 e R10 representam cada um, independentemen te do outro, um átomo de hidrogênio ou um grupo (C1-C6)alquila ou (C3-C12)cicloalquila opcionalmente substituído ou um heterociclo opcionalmente substituído, e

[0075] - R26 representa um grupo (C1-C6)alquila,

[0076] para uso no tratamento ou prevenção de dor.

[0077] O termo "halogênio" se refere a flúor, cromo, bromo ou io do.

[0078] O termo "(C1-C6)alquila" se refere a cadeias de hidrocarbo- neto lineares ou ramificadas compreendendo 1 a 6 átomos de carbo no. Ele pode ser um grupo metila, etila, propila, isopropila, butila, isobutila, sec-butila, terc-butila, pentila ou hexila.

[0079] O termo "(C1-C6)alcóxi" se refere a uma cadeia (C1- C6)alquila ligada ao resto da molécula através de um átomo de oxigênio. Como um exemplo, devem ser mencionados grupos metóxi, etóxi, propóxi, isopropóxi, butóxi ou terc-butóxi.

[0080] O termo "(C1-C6)tioalcóxi" se refere a uma cadeia (C1- C6)alquila ligada ao resto da molécula através de um átomo de enxofre. Como um exemplo, devem ser mencionados grupos tiometóxi, tio- etóxi, tiopropóxi, tioisopropóxi, tiobutóxi ou tio-terc-butóxi.

[0081] O termo "(C1-C6)haloalquila" se refere a uma cadeia (C1- C6)alquila tal como definido acima onde um ou mais átomos de halo- gênio são substituídos por um átomo de halogênio tal como definido acima. Ele pode ser em particular um grupo trifluormetila.

[0082] O termo "(C1-C6)haloalcóxi" se refere a uma cadeia (C1- C6)alcóxi tal como definido acima onde um ou mais átomos de hidrogênio são substituídos por um átomo de halogênio tal como acima definido. Ele pode ser em particular um grupo trifluormetóxi.

[0083] O termo "(C1-C6)halotioalcóxi" se refere a uma cadeia (C1- C6)tioalcóxi tal como acima definido onde um ou mais átomos de hidrogênio são substituídos por um átomo de halogênio tal como acima definido. Ele pode ser em particular um grupo trifluortiometóxi.

[0084] O termo "(C3-C12)cicloalquila" se refere a sistemas de hidro- carboneto cíclicos compreendendo de a partir de 3 a 12 átomos de carbono e compreendendo um ou mais anéis, em particular anéis fundidos. Como um exemplo, deve ser mencionado grupo adamantila ou ciclo-hexila.

[0085] O termo "arila" se refere a um grupo hidrocarboneto aromá tico compreendendo preferivelmente de a partir de 6 a 14 átomos de carbono e compreendendo um ou mais anéis fundidos tais como, por exemplo, um grupo fenila ou naftila. Vantajosamente, ele é um grupo fenila.

[0086] O termo "heteroarila" se refere a um grupo aromático cíclico compreendendo 5 a 7 átomos incluídos no anel ou um grupo aromático bicíclico compreendendo 8 a 11 átomos incluídos nos anéis, onde 1 a 4 dos átomos incluídos nos anéis são um heteroátomo selecionado independentemente de átomos de enxofre, nitrogênio e oxigênio, e onde outros átomos incluídos nos anéis são átomos de carbono. Exemplos de grupos heteroarila incluem grupos furila, tienila, piridinila e benzotienila.

[0087] O termo "heterociclo" se refere a ou um monociclo estável contendo de a partir de 4 a 7 átomos cíclicos ou um biciclo estável contendo de a partir de 8 a 11 átomos cíclicos, que podem ser ou saturados ou insaturados, onde 1 a 4 dos átomos cíclicos são um heteroá- tomo independentemente selecionado de átomos de enxofre, nitrogênio e oxigênio, e onde os outros átomos cíclicos são átomos de carbono. Como um exemplo, devem ser mencionados furano, pirrol, tiofeno, tiazol, isotiazol, oxadiazol, imidazol, oxazol, isoxazol, piridina, piperidi- na, pirazina, piperazina, tetra-hidropirano, pirimidina, quinazolina, qui- nolina, quinoxalina, benzofurano, benzotiofeno, indolina, indolizina, benzotiazol, benzotienila, benzopirano, benzoxazol, benzo[1,3]dioxol, benzisoxazol, benzimidazol, cromano, cromeno, di-hidrobenzofurano, di-hidrobenzotienila, di-hidroisoxazol, isoquinolina, di-hidrobenzo [1,4] dioxana, imidazol [1,2-a] piridina, furo[2,3-c] piridina, 2,3-di-hidro-1H- indeno, [1,3] dioxol[4,5-c]piridina, pirrol[1,2-c]pirimidina, pirrol[1,2- a]pirimidina, tetra-hidronaftaleno, benzo[b][1,4]oxazina.

[0088] No contexto da presente invenção, "opcionalmente substitu ído" significa que o grupo em questão é opcionalmente substituído por um ou mais substituintes que podem ser selecionados em particular de um átomo de halogênio, (C1-C6)alquila, (C1-C6)haloalquila, (C1- C6)haloalcóxi, (C1-C6)halotioalcóxi, CN, NO2, OR11, SR12, NR13R14, CO2R15, CONR16R17, SO2R18, SO2NR19R20, COR21, NR22COR23, NR24SO2R25 e R26NR27R28, onde R11 a R28 são como acima definido.

[0089] Na presente invenção, "farmaceuticamente aceitável" se refere àquele que é útil na preparação de uma composição farmacêutica que é geralmente segura, não tóxica e nem biologicamente nem de outro modo indesejável e que é aceitável para uso farmacêutico veterinário e humano.

[0090] "Sal ou solvato farmaceuticamente aceitável" de um com posto se refere a sais e solvatos que são farmaceuticamente aceitáveis, conforme aqui definido, e que têm a atividade farmacológica desejada do composto parental.

[0091] Sais aceitáveis para o uso terapêutico dos compostos da presente invenção incluem os sais não tóxicos convencionais dos compostos da invenção tais como aqueles formados de ácidos orgânicos ou inorgânicos farmaceuticamente aceitáveis ou de bases orgânicas ou inorgânicas farmaceuticamente aceitáveis. Como um exemplo, devem ser mencionados sais derivados de ácidos inorgânicos tais como ácido clorídrico, ácido bromídrico, ácido fosfórico e ácido sulfúrico e aqueles derivados de ácidos orgânicos tais como ácido acético, ácido trifluoracético, ácido propiônico, ácido succínico, ácido fumárico, ácido málico, ácido tartárico, ácido cítrico, ácido ascórbico, ácido ma- leico, ácido glutâmico, ácido benzoico, ácido salicílico, ácido toluenos- sulfônico, ácido metanossulfônico, ácido esteárico e ácido láctico. Como um exemplo, devem ser mencionados sais derivados de bases inorgânicas tais como soda, potassa ou hidróxido de cálcio e sais derivados de bases orgânicas tal como lisina ou arginina.

[0092] Esses sais podem ser sintetizados a partir dos compostos da invenção contendo uma parte básica ou ácida e os ácidos ou bases correspondentes de acordo com métodos químicos convencionais bem conhecidos do versado na técnica.

[0093] Solvatos aceitáveis para o uso terapêutico dos compostos da presente invenção incluem solvatos convencionais tais como aqueles formados durante a última etapa da preparação dos compostos da invenção devido à presença de solventes. Como um exemplo, devem ser mencionados solvatos devido à presença de água ou etanol.

[0094] No contexto da presente invenção, "estereoisômero" se re fere a um isômero geométrico ou um isômero óptico.

[0095] Isômeros geométricos resultam da posição diferente de substituintes em uma ligação dupla que pode ter uma configuração Z ou E.

[0096] Isômeros ópticos resultam notadamente da posição diferen te em espaço de substituintes em um átomo de carbono compreendendo quatro substituintes diferentes. Este átomo de carbono então constitui um centro quiral ou assimétrico. Isômeros ópticos incluem di- astereoisômeros e enantiômeros. Isômeros ópticos que são imagens de espelho uns dos outros, mas são não superpostos, são enantiôme- ros. Isômeros ópticos que não são imagens de espelho uns dos outros são diastereoisômeros.

[0097] No contexto da presente invenção, "tautômero" se refere a um isômero constitucional do composto obtido através de prototropia, isto é, através de migração de um átomo de hidrogênio e uma mudança em localização de uma ligação dupla. Os tautômeros diferentes de um composto são geralmente interconversíveis e estão em equilíbrio em solução em proporções que podem variar de acordo com o solvente usado, a temperatura ou o pH.

[0098] De acordo com uma primeira modalidade, Y4=N.

[0099] Vantajosamente, Y2=C-X-Ar e Y3 representa preferivelmen te um grupo C-W.

[00100] Em particular: - Y1=CH ou N e vantajosamente CH, - Y2=C-X-Ar, - Y3=C-W, e - Y4=N.

[00101] De acordo com uma segunda modalidade, Y1 e/ou Y4 representam um átomo de nitrogênio.

[00102] Neste caso, Y2 e Y3 preferivelmente não representam um átomo de nitrogênio.

[00103] Em particular: - Y1 e/ou Y4 = N, - Y2=CH ou C-X-Ar, e - Y3=C-W ou C-X-Ar.

[00104] Em particular: - Y1 representa um grupo CH, - Y4 representa um átomo de nitrogênio, - Y2 representa um grupo CH ou C-X-Ar, e - Y3 representa um grupo C-X-Ar ou C-W, contanto que: • quando Y2=C-X-Ar, então Y3 represente um grupo C-W, e • quando Y2=CH, então Y2 represente um grupo C-X- Ar.

[00105] Vantajosamente, X representa um grupo divalente selecionado de O, S, S(O), S(O)2, NR4, CH2, CH2S, CH2S(O), CH2S(O)2, NHS(O)2, SCH2, S(O)CH2, S(O)2CH2, S(O)2NH, CH2CH2, CH=CH, C C, CH2O, OCH2, NR4CH2 e CH2NR4.

[00106] Em particular, X representa um grupo divalente selecionado de S, S(O), S(O)2, NR4, CH2, CH2S, CH2S(O), CH2S(O)2, NHS(O)2, SCH2, S(O)CH2, S(O)2CH2, S(O)2NH, CH2CH2, C C, CH2O, OCH2, NR4CH2 e CH2NR4.

[00107] Mais particularmente, X pode ser selecionado de S, S(O), S(O)2, CH2, CH2S, CH2S(O), CH2S(O)2, NHS(O)2, SCH2, S(O)CH2, S(O)2CH2, S(O)2NH, CH2CH2, CH=CH e C C.

[00108] Em particular, X pode ser selecionado de S, S(O)2, CH2, SCH2, S(O)2CH2, S(O)2NH, CH2S, CH2S(O)2, NHS(O)2, CH2CH2 e C C.

[00109] X pode ser notadamente selecionado de S, S(O), S(O)2, NR4, CH2, SCH2, S(O)CH2, S(O)2CH2, S(O)2NH, CH2CH2, C C, OCH2 e NR4CH2; notadamente de S, S(O)2, CH2, SCH2, S(O)2CH2, S(O)2NH, CH2CH2 e C=C, onde o primeiro átomo desses grupos é ligado ao átomo C da cadeia C-X-Ar.

[00110] X pode ser em particular S, S(O)2, SCH2, S(O)2CH2, S(O)2NH, CH2S, CH2S(O)2 ou NHS(O)2; e notadamente S, S(O)2, SCH2, S(O)2CH2 ou S(O)2NH, onde o primeiro átomo desses grupos é ligado ao átomo C C da cadeia C-X-Ar.

[00111] Vantajosamente, Ar representa um grupo heteroarila, tal como piridila, ou um grupo arila, tal como fenila, opcionalmente substituído por um ou mais grupos selecionados de um átomo de halogênio, (C1-C6)alquila, (C1-C6)haloalquila, (C1-C6)haloalcóxi, (C1-C6) halotio- alcóxi, CN, NO2, OR11, SR12, NR13R14, CO2R15, CONR16R17, SO2R18, SO2NR19R20, COR21, NR22COR23 e NR24SO2R25; e/ou opcionalmente fundido a um heterociclo.

[00112] Mais particularmente Ar pode representar um grupo arila, tal como fenila, opcionalmente substituído por um ou mais grupos selecionados de um átomo de halogênio, (C1-C6)alquila, (C1-C6) vhaloal- quila, (C1-C6)haloalcóxi, (C1-C6)halotioalcóxi, CN, NO2, OR11, SR12, NR13R14, CO2R15, CONR16R17, SO2R18, SO2NR19R20, COR21, NR22COR23 e NR24SO2R25.

[00113] Ar pode notadamente representar um grupo arila, tal como fenila, opcionalmente substituído por um ou mais grupos selecionados de um átomo de halogênio, (C1-C6)alquila, (C1-C6)haloalquila e CONR16R17, e em particular de um átomo de halogênio tal como flúor, (C1-C6)alquila tal como metila e CONR16R17 tal como CONH2.

[00114] Ar pode também representar um grupo piridina.

[00115] Ar pode ser notadamente selecionado dos grupos que se- guem:

notadamente dos grupos que seguem:

em particular dos grupos que seguem:

[00116] Ar pode vantajosamente representar o grupo:

[00117] W pode vantajosamente representar um grupo R5, SR5, OR5 ou NR5R6 e preferivelmente R5, OR5 ou NR5R6, com R5 e R6 representando, independentemente um do outro, um átomo de hidrogênio ou um grupo (C1-C6)alquila.

[00118] W pode representar em particular H, OMe, Me, OH ou NH2 e notadamente H.

[00119] Vantajosamente, R3 representa um átomo de hidrogênio.

[00120] U pode representar mais particularmente um grupo CH2 ou NH.

[00121] Vantajosamente, n pode representar 0.

[00122] V pode representar mais particularmente um grupo C(O) ou C(S) e vantajosamente um grupo C(O).

[00123] De acordo com uma modalidade particular da invenção: - R3=H, - U=CH2 ou NH, - V=C(O) ou C(S) e notadamente C(O), e - n=0 ou 2 e notadamente 0.

[00124] De acordo com outra modalidade particular da invenção: - V=C(O) ou C(S) e notadamente C(O), e - n=0.

[00125] De acordo com ainda outra modalidade particular da invenção: - R3=H, - V=C(O) ou C(S) e notadamente C(O), e - n=0.

[00126] R1 pode representar mais particularmente um átomo de hidrogênio ou um grupo NR7R8, com R7 notadamente representando um átomo de hidrogênio e R8 notadamente representando um grupo (C3- C12)cicloalquila opcionalmente substituído ou um heterociclo opcionalmente substituído.

[00127] O grupo (C3-C12)cicloalquila pode ser em particular uma ci- clo-hexila. Ele pode ser substituído por um ou mais átomos de halogê- nio. Ele pode ser em particular o grupo:

[00128] O grupo heterocíclico pode ser em particular um tetra- hidropirano, notadamente não substituído. Ele pode então ser o grupo que segue:

[00129] R1 pode então representar mais particularmente um dos grupos que seguem:

e notadamente H e

e vantajosamente

[00130] R2 pode representar mais particularmente um heterociclo opcionalmente substituído (notadamente substituído por (C1-C6)alquila ou NH2), NO2 ou NR9R10, com notadamente R9=R10=H ou então R9 e R10 representam cada um H ou uma (C1-C6)alquila opcionalmente substituída.

[00131] R2 pode representar em particular um heterociclo opcional mente substituído, notadamente substituído por (C1-C6)alquila ou NH2. O heterociclo pode ser em particular um heterociclo com 5 ou 6 membros compreendendo pelo menos um átomo de nitrogênio e em particular um ou dois. O heterociclo pode então ser selecionado de pipera- zina, piperidina e pirrolidina.

[00132] R2 pode notadamente representar um dos grupos que se- guem: NH2, NH(CH2)3NMe2, NMe(CH2)3NMe2, NO2,

e notadamente NH2, NO2,

; e em particular

e mais particularmente

[00133] Os compostos da presente invenção podem ser selecionados dos compostos mencionados na tabela que segue:

[00134] A presente invenção refere-se também ao uso de um com posto de fórmula (I) tal como definido acima para a fabricação de um fármaco, notadamente pretendido para o tratamento ou prevenção de dor, em particular dor associada com pelo menos uma proteína Trk.

[00135] A presente invenção refere-se também a um método para o tratamento ou prevenção de dor, em particular dor associada com pelo menos uma proteína Trk compreendendo a administração a uma pessoa com necessidade do mesmo de uma dose eficaz de um composto de fórmula (I) tal como acima definido.

[00136] A presente invenção refere-se também a uma composição farmacêutica compreendendo pelo menos um composto de fórmula (I) tal como acima definido e pelo menos um excipiente farmaceuticamen- te aceitável para uso no tratamento ou prevenção de dor, em particular dor associada com pelo menos uma proteína Trk.

[00137] As composições farmacêuticas para uso no tratamento ou prevenção de dor, em particular dor associada com pelo menos uma proteína Trk de acordo com a invenção, podem ser formuladas nota- damente para administração oral ou para injeção, onde as ditas composições são pretendidas para mamíferos, incluindo humanos.

[00138] O ingrediente ativo pode ser administrado em formas de dosagem de administração unitárias, em mistura com carreadores farmacêuticos padrão, a animais ou a humanos. Os compostos da invenção como ingredientes ativos podem ser usados em doses variando entre 0,01 mg e 1000 mg por dia, dados em uma dose única uma vez por dia ou administrados em várias doses durante o dia, por exemplo, duas vezes por dia em doses iguais. A dose administrada por dia pode vantajosamente estar entre 5 mg e 500 mg, ainda mais vantajosamente entre 10 mg e 200 mg. Pode ser necessário usar doses fora dessas faixas conforme determinado pelo versado na técnica.

[00139] As composições farmacêuticas para uso no tratamento ou prevenção de dor, em particular dor associada com pelo menos uma proteína Trk de acordo com a invenção, podem compreender ainda pelo menos um outro ingrediente ativo, tal como um exemplo um agente anticâncer.

[00140] A presente invenção tem também como objetivo uma com- posição farmacêutica para uso no tratamento ou prevenção de dor, em particular dor associada com pelo menos uma proteína Trk, compreendendo:

[00141] (i) pelo menos um composto de fórmula (I) tal como acima definido, e

[00142] (ii) pelo menos um outro ingrediente ativo, tal como um agente anticâncer,

[00143] (iii) como um produto de combinação para uso simultâneo, separado ou sequencial.

[00144] No contexto da invenção, o termo "tratamento" significa reversão ou alívio de dor.

[00145] O termo "dor" de acordo com a invenção significa qualquer tipo de dor e em particular dor nociceptiva, dor inflamatória, dor neuro- pática, dor idiopática ou dor psicogênica, preferivelmente dor inflamatória ou neuropática. A dor de acordo com a invenção pode ser também uma combinação de dois ou mais tipos de dores, por exemplo, uma combinação entre uma dor inflamatória e uma nociceptiva.

[00146] A dor de acordo com a invenção pode ser de qualquer origem. Em uma modalidade a dor de acordo com a invenção é devido a câncer, por exemplo, câncer do osso. Em outra modalidade, a dor de acordo com a invenção é devido a uma lesão ao nervo, como ocorre, por exemplo, em dor neuropática. Em outra modalidade, a dor de acordo com a invenção é devido a um estado inflamatório, como ocorre, por exemplo, em doenças reumáticas tais como osteoartrite, dor na parte inferior das costas, herniação do disco lombar e compressão da raiz do nervo. Em outra modalidade, a dor de acordo com a invenção está associada com distúrbios funcionais tal como, por exemplo, fi- bromialgia.

[00147] De acordo com a invenção, "proteína Trk" significa qualquer membro da família Ttrk, por exemplo, TrkA (em particular descrito no GenBank sob o número AB019488), TrkB (em particular descrito no GenBank sob o número AAB33109.1) e TrkC (em particular descrito no GenBank sob o número CAA12029.1), preferivelmente TrkA.

[00148] A proteína Trk de acordo com a invenção pode estar em sua forma nativa ou em uma forma modificada. Por "uma forma modificada" quer dizer uma forma mutada da proteína do tipo selvagem. A mutação pode ser uma mutação por ponto, ela pode ser também uma deleção ou uma inserção de um ou mais aminoácidos na sequência da proteína Trk. Alternativamente, a proteína Trk modificada de acordo com a invenção pode ser uma proteína de fusão, por exemplo, obtida após um rearranjo cromossomal. A proteína Trk modificada pode também resultar de uma união alternativa.

[00149] Com a expressão "associada a pelo menos uma proteína Trk" de acordo com a invenção quer dizer que a dor a ser tratada é transmitida por cursos de sinalização passando por uma ou mais proteínas Trk. Em particular, a dor será considerada associada com uma proteína Trk quando ela for uma dor inflamatória ou uma neuropática. Os cursos de sinalização de Trk são bem conhecidos do versado na técnica.

[00150] Os compostos de acordo com a invenção têm a propriedade de inibição ou modulação da atividade enzimática de uma ou mais proteínas Trk, preferivelmente mais de uma proteína Trk.

[00151] Por inibir ou modular a atividade de uma ou mais proteína Trk de acordo com a invenção quer dizer que o composto de acordo com a invenção é capaz de modular a ativação de pelo menos uma proteína Trk, que resulta em uma diminuição, possivelmente uma ina- tivação de um curso de sinalização de Trk, resultando em uma diminuição na sensação de dor. Os compostos de acordo com a invenção permitem, por exemplo, um redução em atividade de proteína Trk de mais ou cerca de 5%, notadamente mais ou cerca de 10%, em particu lar mais ou cerca de 50%.

[00152] Os compostos de fórmula (I) de acordo com a presente invenção podem ser preparados através de vários métodos notadamen- te sumarizados nos diagramas 1a e 1b abaixo.

Ri = NO2, halogênio, OH, OMe, SMe, S(O)Me, SO2Me, OMs, OTf ou OTs Rj = grupo de proteção H ou N Rn = Hal, OMs, OTs ou OTf (Tf representa um grupo -SO2CF3 e Ts representa um grupo tosila) Diagrama 1b

Método A:

[00153] De acordo com o Método A, compostos de fórmula (I) são obtidos através da síntese preliminar de compostos de fórmula geral (V) caracterizados por um anel heterobicíclico halogenado tendo uma amina primária exocíclica. Esses compostos são obtidos através da síntese de intermediários de fórmula geral (II) ou (III).

Método A1:

[00154] O Método A1, apresentado no diagrama 2 (compostos iodi- zados) ou 3 (compostos brominado) abaixo, descreve o processo geral fornecendo compostos de fórmula geral (V) com W definido na descrição de fórmula geral (I) e notadamente H, (C1-C6)alquila ou arila e Rj=grupo de proteção H ou N.

[00155] No contexto do diagrama 2, a 2-cloro-5-iodonicotinonitrila opcionalmente substituída (IIa) é obtida da hidroxinicotinonitrila corres-pondente através do uso sucessivo de um agente de iodação tal como N-iodossuccinimida (NSI) ou iodo molecular com uma base inorgânica tal como, por exemplo, K2CO3 ou Na2CO3, notadamente em um solvente polar tal como DMF quente, seguido por tratamento com oxiclo- reto fosforoso, puro ou diluído em um solvente não polar de ponto de ebulição alto, ou qualquer outro agente de cloração equivalente bem conhecido do versado na técnica. As temperaturas de reação estão entre -20° C e 200° C. O composto (IIa) então obtido é então transformado em 5-iodo-pirazol[3,4-b]piridina-3-amina opcionalmente substituída (Va) através de sua reação, preferivelmente sob calor, na presença de uma hidrazina carregando opcionalmente um grupo de proteção N tal como tritila, terc-butila ou BOC.

[00156] Os análogos brominados de fórmula geral (V) conforme descrito no diagrama 1a podem ser obtidos através do uso do método descrito nas referências que seguem: Witherington e outros, Bioorg. Med. Chem. Lett., 2003, 13, 1577-1580 e Lijuan Chen e outros, Bioorg. Med. Chem. Lett., 2010, 20, 4273-4278. Por questões de conveniência, essas moléculas foram obtidas através do uso da sequência de reação apresentada no diagrama 3 que segue.

Diagrama 3

[00157] A 2-metóxi-nicotinonitrila opcionalmente funcionalizada é obtida, por exemplo, através de reação de metanolato de sódio em metanol em uma temperatura entre -20° C e o ponto de ebulição da mistura. Alternativamente, este composto pode ser obtido através da metilação de 2-hidroxinicotinonitrila ou outros métodos descritos acima. Brominação de 2-metóxi-nicotinonitrila é tipicamente realizada com dibromo em ácido acético em uma temperatura variando entre 20° C e 110° C. Formação do pirazol é tipicamente realizada através de reação de um excesso de hidrazina, funcionalizada ou não, em uma temperatura variando entre 20° C e 100° C na presença de um solven- te polar tal como água, etanol, tetra-hidrofurano (THF) ou qualquer outro solvente com propriedades comparáveis. Alternativamente, o uso de hidrazina em uma forma salina ou hidratada, sem solvente, é também possível. Método A2:

[00158] O Método A2 se refere à síntese das pirazolpirazinas funci- onalizadas apresentadas no diagrama 4 abaixo com Rj=H ou grupo de proteção N, Hal=halogênio e em particular W=H, (C1-C6)alquila ou ari- la.

Diagrama 4

[00159] As 3-amino-6-iodopirazina-2-carboxamidas opcionalmente funcionalizadas são tipicamente obtidas em duas etapas a partir dos 3- aminopirazina-2-carboxilatos de metila correspondentes através de iodinação na presença de N-iodossuccinimida ou iodo molecular opci-onalmente na presença de um co-fator tal como KIO3, AgCO2CF3, Ag2SO4, AlCl3, CuCl2 ou HgO, seguido por uma reação de conversão de função de éster de metila em carboxamida, notadamente pelo uso de amônia em um solvente polar tal como água, metanol ou THF em temperaturas variando entre 0o C e 100° C. A função carboxamida da 3-amino-6-iodopirazina-2-carboxamida opcionalmente funcionalizada é então convertida em nitrila através do uso de agentes de desidratação tal como, em particular, CCl4/PPh3, SOCl2, PhSO2Cl, P2O5, TsCl, COCl2, DCC/py (N,N’-diciclo-hexilcarbodiimida/piridina) ou (COCl)2, usados conforme for o caso na presença de uma base orgânica tal como piridina. O método preferido envolve o uso de oxicloreto fosforo- so em dimetilformamida (DMF). Desproteção da função dimetilformi- midamida é realizada através de tratamento com ácido tal como ácido clorídrico aquoso ou qualquer outro reagente com propriedades equi-valentes. Formação do anel pirazol é realizada através de uma reação Sandmeyer, bem conhecida do versado na técnica, seguido por uma reação na presença de uma hidrazina, funcionalizada ou não, sob condições conforme descrito nos métodos acima. Alternativamente, o sal de diazônio, um intermediário da reação Sandmeyer, pode ser reduzido através do uso de, por exemplo, cloreto de estanho em um meio ácido ou qualquer outro agente equivalente, a fim de formar uma função que pode sofrer ciclização intramolecular sob o efeito de calor. Método A3:

[00160] O Método A3 tem como objetivo derivados de fórmula geral (V) caracterizando uma função variável na posição 6 do biciclo pirazolpiridina. Ele é detalhado no diagrama 5 abaixo.

W = OH, OAlk, NH2, NHAlk, Alk, Ar, CH2Ar Rj = grupo de proteção H ou N (Alk=(C1-C6)alquila, Ar=arila, CH2Ar=benzila, H=halogênio)

Diagrama 5

[00161] A reação da cianotioacetamida com 3-etoxiacrilatos de etila variadamente substituída de acordo com métodos descritos notada- mente por Litrivnor e outros em Russ. Chem. Bull., 1999, 48(1), 195196 e Tsann-Long Su e outros em J. Med. Chem., 1988, 31, 12091215 torna possível fornecer, em duas etapas, o 5-ciano-6- (metiltio)nicotinato de etila carregando uma funcionalidade variável na posição 2. Essas sínteses são tipicamente realizadas, para a primeira etapa, em um solvente polar anidro tal como, por exemplo, etanol em uma temperatura variando entre 0o C e 70° C na presença de uma base orgânica tal como metilmorfolina, trietilamina, DIPEA (N,N- diisopropiletilamina) ou DBU (1,8-diazabiciclo[5.4.0]undec-7-eno). A segunda etapa de ciclização intramolecular e de alquilação é tipica-mente realizada pelo aquecimento para uma temperatura variando entre 20° C e 100° C de uma solução do tioamidato intermediário em um solvente polar, por exemplo, etanol, na presença de um agente de al- quilação adequado tal como haleto de alquila ou sulfato de dialquila.

[00162] Os ácidos 5-ciano-6-(metiltio)nicotínicos substituídos na posição 2 são tipicamente obtidos através de saponificação dos ésteres de etila correspondentes de acordo com métodos bem conhecidos do versado na técnica, notadamente através do uso de hidróxido de lítio quente. Descarboxilação desses compostos é realizada através de tratamento com calor em um solvente de ponto de ebulição alto tal como difeniléter em uma temperatura variando entre 150° C e 250° C.

[00163] As reações de halogenação têm como objetivo principalmente obtenção de derivados iodados, brominado ou clorados, mais particularmente derivados iodados. Os últimos são tipicamente obtidos através de um tratamento com iodo molecular na presença de um sal de prata tal como, por exemplo, Ag2SO4, em um solvente polar tal como etanol em uma temperatura variando entre 0o C e 70° C. Métodos alternativos, notadamente aqueles baseados em outros sais tal como KIO3, AgCO2CF3, AlCl3, CuCl2 ou HgO ou outros agentes de iodação tal como N-iodossuccinimida, são também considerados. Os métodos de brominação concebíveis tipicamente se baseiam em agentes tal como N-bromossuccinimida ou dibromo de acordo com métodos bem conhecidos do versado na técnica.

[00164] No caso onde W=OH (tipicamente resultante do uso de 2- (etoximetileno)malonato de dietila), os compostos correspondentes são protegidos por uma reação de alquilação. Esta reação é notada- mente realizada através do uso de iodeto de metila ou bromometano, e carbonato de prata em dioxana, THF, acetonitrila ou acetona, ou qualquer outro agente equivalente tal como dimetilsulfato. As 5-halo- (2-metiltio)nicotinonitrilas obtidas são submetidas à oxidação de sua função tiometóxi, tipicamente através do uso de m-CPBA (ácido m- cloroperbenzoico), oxona ou qualquer outro agente equivalente, para levar à formação do sulfóxido correspondente. Esses compostos, que podem conter quantidades variáveis da sulfona correspondente, são engajados em uma reação na presença de uma hidrazina opcionalmente substituída para formar a 5-halogeno-pirazol[3,4-b]piridin-3- amina correspondente carregando uma funcionalidade variável na posição 6.

Método A4:

[00165] O Método A4 tem como objetivo obtenção de derivados de fórmula geral (V) a partir de compostos de fórmula geral (III) através de formação de intermediário de compostos de fórmula (IV). Esses compostos são tipicamente obtidos através do curso apresentado no diagrama 6. As referências que seguem ilustram o método usado: Gueif- fier e outros. Heterocycles, 1999, 51(7), 1661-1667; Gui-Dong Zhu e outros. Bioorg. Med. Chem., 2007, 15, 2441-2452.

Diagrama 6

[00166] Os compostos de fórmula geral (IIIa), previamente acetila- dos através de um ou outro dos métodos bem conhecidos do versado na técnica, são submetidos à ação de nitrito isoamila, nitrito de sódio ou outro nitrito orgânico ou inorgânico equivalente, em água ou ácido acético, por período variando tipicamente de 1 a 3 dias em temperaturas variando entre 0o C e 40° C. Os compostos de fórmula geral (IVa) então obtidos são desprotegidos em condições ácidas, por exemplo, através do uso de ácido clorídrico, antes de serem submetidos à ação de agentes de nitração tal como ácido nítrico concentrado ou nitrato de potássio em ácido sulfúrico em temperaturas variando entre 0o C e 25° C.

[00167] Deve ser notado que a conversão direta de compostos de fórmula geral (IIIa) em compostos desprotegidos (IVb) é possível em geral.

[00168] Os nitropirazóis então obtidos são tipicamente reduzidos em aminopirazóis de fórmula geral (Ve) através do uso de SnCl2 em ácido clorídrico. Métodos alternativos incluem o uso de ferro, zinco ou estanho em condições ácidas e métodos de hidrogenação catalítica na presença de complexos de platina, níquel ou Pd/C sob uma atmosfera de hidrogênio ou na presença de agentes equivalentes tal como ciclo- hexadieno, ciclo-hexeno, boroidreto de sódio ou hidrazina. Método B:

[00169] De acordo com o Método B, os compostos de fórmula (I) são obtidos através da síntese preliminar de compostos de fórmula geral (VI) caracterizados por um anel heterobicíclico funcionalizado possuindo uma amina exocíclica. Esses compostos são obtidos através da síntese de intermediários de fórmula geral (VI). Método B1:

[00170] O Método B1 é representado no diagrama 7 abaixo, com W notadamente representando H, (C1-C6)alquila, arila ou benzila.

Diagrama 7

[00171] Os derivados de 3-nitro-6-tioxo-1,6-di-hidropiridin-2- carbonitrila e de 3-nitro-6-tioxo-1,6-di-hidropirazina-2-carbonitrila, opci-onalmente funcionalizados na posição 5, são tipicamente obtidos das 2,6-dicloro-3-nitropiridinas ou 2,6-dicloro-3-nitropirazinas correspondentes através de reações sucessivas de um sal de cianida, tal como cianida de cobre, em um solvente polar de ponto de ebulição alto tal como N-metilpirrolidona em temperaturas variando entre 100° C e 200° C; seguido pela reação de hidrossulfito de sódio aquoso em um solvente polar. Esses compostos são então alquilados, por exemplo, através do uso de um brometo de benzila substituído, em meio básico, de acordo com métodos bem conhecidos do versado na técnica. O protocolo preferido inclui o uso de um solvente polar aprótico e um anidro tal como acetona levado para seu ponto de ebulição e uma base orgânica tal como piridina, trietilamina ou DIPEA, ou uma base inorgânica tal como carbonato de sódio, potássio ou cálcio. Reações para redução de função nitro em amina são preferivelmente realizadas através do uso de SnCl2 em ácido clorídrico. Métodos alternativos incluem o uso de ferro, zinco ou estanho em condições ácidas e métodos de hidrogenação catalítica na presença de complexos de platina, níquel ou Pd/C sob uma atmosfera de hidrogênio ou na presença de agentes equivalentes tal como ciclo-hexadieno, ciclo-hexeno, boroi- dreto de sódio ou hidrazina.

[00172] Em certos casos, o produto da reação de redução, em adição a ter uma amina primária, tem uma função carboxamida resultante da hidrólise da função nitrila. Neste caso isolamento das 3- aminopicolinonitrilas ou 3-aminopirazina-2-carbonitrilas correspondentes pode ser realizado através da desidratação da carboxamida em nitrila através do uso de oxicloreto de fósforo na presença de DMF ou qualquer outro método bem conhecido do versado na técnica. Por último, formação do anel aminopirazol é realizada preferivelmente pela formação de um diazônio, obtido através da reação sucessiva em temperatura baixa de nitrito de isoamila, nitrito de sódio ou qualquer outro nitrito orgânico ou inorgânico equivalente, em água, ácido clorídrico, ácido acético ou ácido sulfúrico, em temperaturas variando entre 0o C e 20° C, seguido por sua redução em hidrazina e ciclização intra-molecular ativada por aquecimento do meio de reação. A reação de redução é preferivelmente realizada com cloreto de estanho em condições ácidas, mas pode ser também realizada através de hidrogenação catalítica ou qualquer outro método bem conhecido do versado na técnica. Em uma alternativa a esta última etapa, é concebível que o diazônio intermediário sofra uma reação Sandmeyer durante a qual seu grupo funcional é substituído por um átomo de halogênio, tal como iodo, pela reação de um sal adequado, tal como NaI. Se esta opção for preferida, formação do anel aminopirazol é realizada através do uso de uma hidrazina, funcionalizada ou não, em um solvente polar tal como etanol em temperaturas variando entre 25° C e 150° C. Método B2:

[00173] Alternativamente, é possível levar vantagem de uma reação de substituição nucleofílicas aromática para funcionalizar o anel piridi- na ou pirazina na posição 6. Neste caso os nucleófilo usados são fe- nóis, tiofenóis, álcoois de benzila ou álcoois de tiobenzila bem como anilinas ou benzilaminas, funcionalizadas ou não. O diagrama de reação geral 8a é apresentado abaixo, notadamente com W=H, (C1- C6)alquila, arila ou benzila.

Diagrama 8a

[00174] No caso onde X=O ou S, as 6-cloro-3-nitropicolinonirilas e 6-cloro-3-nitropirazina-2-carbonitrilas, opcionalmente substituídas na posição 5, são reagidas na presença do nucleófilo adequado, álcool ou tiol, em um solvente polar tal como acetonitrila na presença de uma base inorgânica tal como carbonato de potássio ou sódio. Solventes tal como DSMO (sulfóxido de dimetila), DMF (dimetilformamida), acetona, THF (tetra-hidrofurano) ou piridina podem ser também considerados. Se necessário, essas reações podem ser catalisadas pela ação de cobre e podem ser também realizadas sem solvente. Tipicamente, o protocolo preferido envolve temperaturas variando entre 20° C e 150° C.

[00175] Alternativamente, o uso de bases tal como piridina, DIPEA, diisopropilamina, trietilamina, DBU, terc-butilato de potássio, Net3 ou NaH é também possível. No caso onde X=N, tolueno é um solvente preferido e trietilamina (Net3) a base de escolha.

[00176] As etapas que seguem, até os compostos de fórmula geral (VIIb), são idênticas àquelas documentadas no método B1 acima. Método B3:

[00177] O Método B3, apresentado no diagrama 8b abaixo, é uma variante do Método B2 caracterizado por uma primeira etapa resultante de uma reação de acoplamento catalítica entre um boronato de benzila, em forma de ácido ou éster, e um derivado de 6-cloro-3- nicopicolinonitrila ou 6-cloro-3-nitropirazina-2-carbonitrila. É também bem conhecido do versado na técnica que reações de acoplamento catalíticas usando catalisadores alternativos e derivados de benzila são também possíveis. Dentre esses, a reação Stille, com base em complexos de estanho, ou aquelas baseadas em compostos organozi- nco, podem ser consideradas.

Diagrama 8b

[00178] Um 2-benzil-4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolano opcionalmente substituído é obtido previamente, por exemplo, a partir do cloreto de benzila correspondente e octametil-bi-dioxaborolano em dioxana na presença de acetato de potássio e Pt(dppf)Cl2 (dppf=1,1’- bis(difenilfosfino)ferroceno). Este composto é unido à 6-cloro-3- nicopicolinonitrila, uma 6-cloro-3-nitropirazina-2-carbonitrila opcionalmente substituída na posição 5 ou uma 5-cloro-2-nitronicotinonitrila opcionalmente substituída na posição 6 e um catalisador de paládio tal como Pd(dppf)Cl2 ou Pd(PPh3)4, uma base orgânica tal como trietilami- na ou um alcoolato, ou uma base inorgânica tal como carbonato de sódio, potássio ou césio em um solvente tal como tolueno, benzeno, THF ou dioxana. As temperaturas de reação preferidas estão entre 20° C e 100° C. Os produtos dessas reações correspondem a derivados de 6- benzil-3-picolinonitrila, 6-benzil-3-nitropirazina-2-carbonitrila ou 5-benzil- 2-nitronicotinonitrila substituídos para os quais as etapas de transformação que seguem são reproduzidas a partir do Método B1 acima. Método B4:

[00179] O Método B4, apresentado no diagrama 9 abaixo, fornece biciclos de pirazolpiridina e pirazolpirazinas caracterizando funções aril sulfonamida opcionalmente funcionalizadas, com R1=(C1-C6)alquila e notadamente W=H, (C1-C6)alquila, arila ou benzila.

Diagrama 9

[00180] Os derivados de 2-cloro-5-(clorossulfonil)nicotinato de etila requeridos para esta sequência de reação podem ser obtidos de acordo com os métodos descritos em Levett P.C. e outros, Org. Proc. Res. Dev., 2002, 6(6), 767-772; WO 01/98284 e WO 2008/010964.

[00181] A formação de sulfonamidas é tipicamente realizada misturando o 2-cloro-5-(clorossulfonila)nicotinato de interesse com uma anilina primária ou secundária, opcionalmente funcionalizada, em um solvente aprótico tal como diclorometano, THF, acetona ou acetonitrila na presença de uma base orgânica tal como trietilamina (Net3), piridina ou DIPEA. O uso de uma base inorgânica tal como carbonato de sódio ou potássio pode também ser considerado. As temperaturas de reação ótimas estão entre 0o C e 70° C.

[00182] A reação de saponificação do produto então obtido, nota- damente através do uso de hidróxido de lítio em uma mistura de THF/água, fornece os ácidos 2-cloro-5-(N-fenilsulfamoil)nicotínicos correspondentes.

[00183] Os cloretos ácidos correspondentes são preparados através de tratamento com cloreto de tionila em tolueno sob refluxo ou através de qualquer outro método de desidrocloração bem conhecido do versado na técnica. A reação desses intermediários com amônia aquosa torna possível formar 2-cloro-5-(N-fenilsulfamoil)nicotinamidas opcionalmente funcionalizadas que são então engajadas em uma reação de desidratação, notadamente através do uso de POCl3, em uma temperatura variando entre 75° C e 150° C. O uso alternativo de agentes tal como P2O5 ou anidrido trifluoracético e piridina pode também ser considerado.

[00184] Por último, esses derivados de fórmula geral (VIh) são reagidos na presença de uma hidrazina, funcionalizada ou não, em um solvente polar tal como etanol em temperaturas variando entre 25° C e 150° C para formar os derivados correspondentes de fórmula geral (VIId). Método B5:

[00185] O Método B5, apresentado no diagrama 10 abaixo, fornece biciclos de pirazolpiridina caracterizando funções de éter de benzila opcionalmente funcionalizadas, notadamente com W=-H, (C1- C6)alquila, arila ou benzila.

Diagrama 10

[00186] O método descrito abaixo é inspirado pelo trabalho de J. Baldwin e outros, J. Heterocyclic. Chem., 1980, 17(3), 445-448. Os derivados de 5-hidroxinicotinonitrila, opcionalmente funcionalizados na posição 6, são alquilados, tipicamente pelo uso de um haleto de benzila opcionalmente funcionalizado na presença de uma base. O método preferido requer o uso de um solvente polar aprótico tal como DMF e uma base tal como NaH. As temperaturas de reação ótimas estão entre 20° C e 100° C. Alternativamente, os solventes que podem ser usados incluem, por exemplo, THF, DMSO, dioxana, ace- tonitrila, diclorometano ou acetona e bases tais como tBuOK, DIPEA, piridina, trietilamina, DBU ou carbonato de sódio, potássio ou césio.

[00187] Oxidação do anel piridina em piridina-N-óxido é tipicamente realizada através do uso de m-CPBA em diclorometano em temperatura ambiente. Não obstante, muitos métodos alternativos são concebíveis, notadamente aqueles baseados no uso de percarbonato de sódio na presença de um catalisador de rênio, perborato de sódio na presença de ácido acético ou o complexo de ureia- peróxido de hidrogênio.

[00188] Tratamento desses derivados de piridina-N-óxido com oxicloreto fosforoso leva à formação das 2-cloronicotinonitrilas (VI) correspondentes.

[00189] Sua reação sob calor com uma hidrazina, funcionalizada ou não, em um solvente polar tal como isopropanol ou etanol leva à formação dos biciclos pirazolpiridina (VIIe) solicitados. Método B6:

[00190] O Método B6, apresentado no diagrama 10a abaixo, fornece biciclos de pirazolpiridina e pirazolpirazina opcionalmente fun- cionalizados caracterizando funções sulfonamida revertidas, nota- damente com W=H, (C1-C6)alquila, arila ou benzila.

Diagrama 10a

[00191] O método descrito abaixo consiste na formação de uma função sulfonamida a partir de uma amina aromática e um haleto de arilsulfonila, ou qualquer outro reagente equivalente, na presença de uma base, que pode ser opcionalmente introduzida como solvente ou co-solvente. Alternativamente, o haleto de arilsulfonila ou seu equivalente pode ser gerado in situ.

[00192] Sua reação sob calor com uma hidrazina, funcionalizada ou não, em um solvente polar tal como isopropanol ou etanol leva à formação dos biciclos de pirazolpiridina e pirazolpirazina desejados (VIIf). Método C:

[00193] O Método C tem como objetivo a preparação de compostos de fórmula geral (XI) conforme descrito no diagrama 1. Método C1:

[00194] O Método C1, apresentado no diagrama 11 abaixo, é pretendido para a preparação de pirazolpiridinas e pirazolpirazinas fun- cionalizadas na posição 6 com Rn=halogênio, mesilato, tosilato ou triflato, X=O, S, NH, N-(C1-C)alquila, e opcionalmente CH2 para (Xc) e (Xd) e Rj = grupo de proteção H ou N.

[00195] Este método pode ser também usado para realizar a síntese de moléculas compreendendo um grupo X diatômico correspondendo notadamente a um grupo ArX representando: -ArCH2NH-, -ArCH2N(R4)-, -ArCH2O-, -ArCH2S-, -ArCH2CH2-, -ArCHCH- ou -

Diagrama 11

[00196] As 6-hidróxi-2-(metiltio)nicotinonitrilas ou 5-hidróxi-3- (metiltio) pirazina-2-carbontrilas são submetidas a uma reação de de- sidrocloração, tipicamente na presença de oxicloreto fosforoso, com ou sem solvente, em temperaturas variando entre 70° C e 180° C. Se um solvente for usado, um solvente não polar de ponto de ebulição alto tal como tolueno ou xileno será preferido. Alternativamente, é possível ativar as 6-hidróxi-2-(metiltio)nicotinonitrilas e 5-hidróxi-3-(metiltio) pi- razina-2-carbonitrilas através da sua derivação em ésteres sulfônicos através da formação dos tosilatos, mesilatos ou triflatos correspondentes. Se esta opção for preferida, o uso de cloretos de tosila, mesila ou trifila em um solvente tal como tolueno, diclorometano, THF, acetonitri- la, acetona ou dioxana na presença de uma base orgânica ou inorgânica fornece esses derivados.

[00197] As 6-cloro-2-(metiltio)nicotinonitrilas e 5-cloro-3-(metiltio) pirazina-2-carbonitrilas respectivamente obtidas, ou seus análogos de éster sulfônico se esta opção for preferida, são então reagidos com um nucleófilo tal como um fenol, uma anilina ou um tiofenol no contexto de substituição nucleofílica aromática. Neste caso, a reação é realizada em um solvente polar tal como DMSO, DMF, acetona, THF ou acetoni- trila, na presença de uma base tal como terc-butilato de potássio ou NaH. Se necessário, essas reações podem ser catalisadas pela ação de cobre e podem também ser realizadas sem solvente. Tipicamente, o protocolo preferido envolve temperaturas variando entre 20° C e 150° C.

[00198] Alternativamente, o uso de bases orgânicas tal como piridi- na, diisopropilamina, trietilamina ou DBU ou bases inorgânicas tal como carbonato de sódio ou potássio é também possível.

[00199] Alternativamente, os compostos de fórmula (IXb) podem dar origem a uma reação de acoplamento catalítica tal como uma reação Suzuki. Neste caso, esses compostos são unidos a um 2-benzil- 4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolano opcionalmente substituído já descrito no Método B3 acima, um catalisador de paládio tal como Pd(dppf)Cl2 ou Pd(PPh3)4, uma base inorgânica tal como trietilamina ou um alcoolato ou uma base inorgânica tal como carbonato de sódio, potássio ou césio em um solvente tal como tolueno, benzeno, THF ou dioxana. As temperaturas de reação preferidas estão entre 20o C e 100o C.

[00200] Os derivados obtidos através de um ou outro desses métodos são então oxidados, tipicamente através do uso de m-CPBA ou oxona para formar os sulfóxidos de metila ou metil sulfonas correspondentes. Esses compostos, algumas vezes obtidos como misturas, são usados como são na reação de formação de anel de aminopirazol através do uso de uma hidrazina opcionalmente substituída em um solvente polar tal como etanol em temperaturas variando entre 25° C e 150° C.

[00201] Alternativamente, é possível modificar a sequência de reação, notadamente revertendo as etapas de síntese.

Método C2:

[00202] O Método C2, apresentado no diagrama 12 abaixo, é pretendido para a preparação de pirazolpiridinas e pirazolpiridazinas fun- cionalizadas na posição 6 com X=O, S, NH, N-(C1-C)alquila ou CH2 e Rj=grupo de proteção H ou N.

Diagrama 12

[00203] Os derivados de 6-hidróxi-4-(metiltio)nicotiniltrila ou 6- hidróxi-4-(metiltio)piridazino-3-carbonitrila são oxidados, tipicamente através do uso de m-CPBA ou oxona para formar os sulfóxidos de me- tila ou metil sulfonas correspondentes. Esses compostos, algumas vezes obtidos como misturas, são usados como são na reação de formação de anel aminopirazol através do uso de uma hidrazina opcionalmente substituída em um solvente polar tal como etanol em temperaturas variando entre 25° C e 150° C.

[00204] As pirazolpiridinas e pirazolpiridazinas então obtidas são submetidas a uma reação de desidrocloração, tipicamente na presença de oxicloreto fosforoso, com ou sem solvente, em temperaturas variando entre 70° C e 180° C. Se um solvente for usado, um solvente não polar de ponto de ebulição alto tal como tolueno ou xileno será preferido. A 6-cloro-pirazol[4,3-c]piridin-3-amina e a 6-cloro-pirazol[4,3- c]piridazin-3-amina opcionalmente substituídas respectivamente obtidas são então reagidas com um nucleófilo tal como um fenol, uma anilina ou um tiofenol no contexto de substituição nucleofílicas aromática. Neste caso, a reação é realizada em um solvente polar tal como DMSO, DMF, acetona, THF ou acetonitrila, na presença de uma base tal como terc-butilato de potássio ou NaH. Se necessário, essas reações podem ser catalisadas pela ação de cobre e podem ser também realizadas sem solvente. Tipicamente, o protocolo preferido envolve temperaturas variando entre 20° C e 150° C.

[00205] Alternativamente, o uso de bases orgânicas tal como piridi- na, diisopropilamina, trietilamina ou DBU ou bases inorgânicas tal como carbonato de sódio ou potássio é também possível.

[00206] Alternativamente, os compostos de fórmula (XIVa) podem dar origem a um reação de acoplamento catalítica tal como uma reação Suzuki. Neste caso, esses compostos são unidos com um 2- benzil-4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolano opcionalmente substituído descrito acima no método B3 anterior, um catalisador de paládio tal como Pd(dppf)Cl2 ou Pd(PPh3)4, uma base orgânica tal como trietila- mina ou um alcoolato, ou uma base inorgânica tal como carbonato de sódio, potássio ou césio em um solvente tal como tolueno, benzeno, THF ou dioxana. As temperaturas de reação preferidas estão entre 20° C e 100° C. Método C3:

[00207] O Método C3, apresentado no diagrama 12a abaixo, é uma variante do Método C1 com base na funcionalização regiosseletiva de 2,6-dicloronicotinonitrila ou através de um nucleófilo aniônico tal como fenato ou um tiofenato ou através de um organometálico tal como um cloreto de benzilzinco. No último caso, a reação é catalisada, por exemplo, com um complexo de paládio(II). A transformação da cloro- nicotinonitrila então obtida na pirazolpiridina correspondente, no caso onde Y1 = CH, é realizada conforme anteriormente descrito no Método A1.

Diagrama 12a Método D:

[00208] Esses métodos têm como um objeto a síntese de compostos de fórmula geral (I) ou (VII) através do uso de vários métodos de acoplamento catalítico. Método D1:

[00209] O Método D1, apresentado no diagrama 13 abaixo, faz uso da reação de acoplamento conforme descrito em J.A.C.S., 1984, 106, 158, entre um composto organozinco preparado in situ e um brometo de arila catalisado por complexos de paládio.

Rj=grupo de proteção H ou N

Diagrama 13

[00210] Os 3-amino-diazaindazóis ou 3-amino-azaindazóis opcionalmente substituídos são unidos a um cloreto de zinco benzila, opcionalmente substituído, em um solvente polar aprótico tal como THF ou dioxana, na presença de uma quantidade catalítica de um complexo de paládio tal como (dppf)2PdCh<H2Ch. A reação de acoplamento é realizada em temperaturas variando entre 25° C e 100° C. Método D2:

[00211] O Método D2, apresentado no diagrama 14 abaixo, faz uso da reação de acoplamento conforme descrito por Gueiffier A. e outros, Tetrahedron, 2006, 62, 6042-6049, entre um tiol, em particular um tio- fenol ou um benzotiol, e um iodeto de arila catalisado por complexos

Rj=grupo de proteção H ou N

Diagrama 14

[00212] Esta reação é tipicamente realizada em um solvente polar de ponto de ebulição alto tal como 2-propanol na presença de uma quantidade catalítica de propileno glicol, um sal de metal tal como io- deto de cobre (CuI) e um excesso de uma base inorgânica tal como carbonato de potássio, carbonato de cálcio ou carbonato de sódio. As temperaturas de reação tipicamente variam entre 50° C e 100° C. Método D3:

[00213] O Método D3, apresentado no diagrama 15 abaixo, faz uso da reação de acoplamento conforme descrito por Sonogashira, K. e outros em Tetrahedron Lett., 1975, 16, 4467-4470 entre um derivado de acetileno e um haleto de arila catalisado por complexos de cobre e paládio.

Rj=grupo de proteção H ou N

Diagrama 15

[00214] Tal reação é tipicamente realizada através da reação sob uma atmosfera inerte de um haleto de heteroarila com uma quantidade estequiométrica de um etinilbenzeno opcionalmente substituído na presença de uma quantidade catalítica de um complexo de paládio, por exemplo, PdCl2(PPh3)2 ou Pd(PPh3)4, uma quantidade catalítica de um sal de cobre, por exemplo, CuI, e uma base orgânica tal como trie- tilamina ou DIPEA, ou uma base inorgânica tal como carbonato de potássio ou césio. O protocolo envolve geralmente temperaturas de reação variando entre 20° C e 45° C em solventes incluindo DMF, THF, dioxana ou éter de dietila. Método E:

[00215] Os protocolos do Método E têm como objetivo funcionaliza- ção da amina exocíclica de anéis aminopirazóis através da sua reação com um intermediário caracterizando uma função eletrófilo, opcionalmente gerada in situ, tal como cloreto ácido, um isocianato, um isotio- cianato ou um aldeído. Método E1:

[00216] O Método E1, apresentado no diagrama 16 abaixo, tem como objetivo a transformação da função amina exocíclica primária de compostos aminopirazol em uma função amida.

Rj=grupo de proteção H ou N Diagrama 16

[00217] Esses compostos são sintetizados através do 3- aminopirazol correspondente através da adição de cloreto ácido ade- quado preparado previamente através do uso de cloreto de oxalila e uma quantidade catalítica de DMF em um solvente tal como tetra- hidrofurano. Esses cloretos ácidos podem ser obtidos através do uso de métodos alternativos, tais como aqueles baseados no uso de cloreto de tionila ou oxicloreto fosforoso, bem conhecidos do versado na técnica. A condensação de cloretos ácidos em aminopirazóis é tipicamente realizada em um solvente aprótico tal como tetra-hidrofurano, tolueno ou diclorometano na presença de uma base tal como DIPEA, piridina ou trietilamina.

[00218] Alternativamente, o uso de uma base como um solvente, em particular piridina, é uma possibilidade.

[00219] Alternativamente, este tipo de reação pode ser conduzido em um sistema bifásico de acordo com o método Schotten-Baumann bem conhecido.

[00220] Alternativamente, formação da ligação amida pode ser realizada a partir do 3-aminopirazol correspondente e do ácido de interesse através do uso de condições de acoplamento de peptídeo usando reagentes tal como HOBt (hidroxibenzotriazol), TBTU ( tetrafluorborato de O-(benzotriazol-1-il)-N,N,N’,N,’-tetrametilurônio), HATU (hexafluor- fosfato de 2-(1H-7-azabenzotriazol-1-il)-1,1,3,3-tetrametilurônio), EDCI (1-etil-3-(3-dimetilaminopropil)carbodiimida) ou carbonildiimidazol em uma temperatura variando entre -20° C e 100° C em um solvente apró- tico tal como tetra-hidrofurano, dioxana, diclorometano ou qualquer solvente com propriedades similares. Método E2:

[00221] Os derivados caracterizados pela presença de uma amina secundária na posição 3 do anel aminopirazol são sintetizados através de uma reação de aminação de redução de acordo com o diagrama 17 abaixo.

Rj=grupo de proteção H ou N

Diagrama 17

[00222] Reações de aminação de redução são tipicamente realizadas misturando quantidades estequiométricas adequadas de aminopi- razol e aldeído em um solvente tal como DCE (dicloroetano), THF ou acetonitrila, opcionalmente na presença de uma quantidade de água, TFA (ácido trifluoracético) ou ácido acético, através da adição de frações sucessivas de um agente de redução tal como NaBH4, NaBH(OAc)3 ou NaBH3CN. Essas reações são tipicamente realizadas em temperatura ambiente. Método E3:

[00223] Derivados carregando uma função 3-ureído ou 3-tioureído são obtidos através da reação, apresentada no diagrama 18 abaixo, de um aminopirazol com um isocianato ou isotiocianato obtido de acordo com métodos bem conhecidos do versado na técnica.

Rj=grupo de proteção H ou N Z = O ou S Diagrama 18

[00224] Em uma reação típica, a mistura de reação é preparada em um solvente aprótico polar ou não polar tal como diclorometano, acetona, DMF, DMA, acetonitrila, THF ou dioxana realizada em temperaturas variando entre 20° C e o ponto de ebulição do solvente escolhido. Se necessário, recorrer a uma base orgânica ou inorgânica fracamente nucleofílicas pode ser necessário. Neste caso, hidreto de sódio é uma opção possível. Método F: desproteções e modificações pós-sintéticas Método F1: desproteções

[00225] Os grupos de proteção trifluoracetato são removidos pela ação de uma base orgânica tal como trietilamina ou piridina em um solvente polar tal como metanol, etanol ou THF nas temperaturas de refluxo dos solventes usados.

[00226] Os grupos de proteção terc-butila e tritila carregados pelos anéis pirazol são deslocados pela ação de um ácido forte, tipicamente TFA, em um solvente não polar tal como diclorometano ou DCE. Método F2: reduções de alcina

Rj=grupo de proteção H ou N

Diagrama 19

[00227] Reações para redução de diaril alcinas em diaril alcanos são tipicamente realizadas através de hidrogenação catalítica, sob pressão de hidrogênio, na presença de catalisadores tal como PtO2, Pt, Pd/C, Ni ou Rh. Alternativamente, o uso de DIBAL-H (hidreto de diisobutilalumínio) na presença ou na ausência de um catalisador tal como Cp2TiCl2 é concebível. Método F3: oxidação de sulfetos em sulfonas e sulfóxidos

Rj=grupo de proteção H ou N

Diagrama 20

[00228] Reações de oxidação de sulfetos em sulfóxidos são tipicamente realizadas através do uso de oxona em uma mistura de solventes polares tal como THF/MeOH ou DMF/água. As temperaturas de reação ideais são tipicamente entre 25° C e 50° C.

[00229] Muitos métodos alternativos estão disponíveis e alguns dão a possibilidade de produção de derivados semioxidados, a saber sul- fóxidos. Tais métodos alternativos incluem o uso de m-CPBA, KMnO4/MnO2 em diclorometano, H2O2 (30%) em um meio bifásico e a presença de um catalisador de transferência de fase ou um catalisador na forma de um complexo de ureia (UHP).

[00230] O uso combinado de H2O2 e complexos de metal tal como Sc(OTf)3 promove derivados de oxidação parcial.

[00231] Outros métodos conhecidos incluem, por exemplo, o uso de CAN/NaBrO3 (CAN=nitrato de amônio cérico).

[00232] Os exemplos e figuras que seguem ilustram a invenção sem limitar seu escopo de modo algum.

FIGURAS

[00233] A Figura 1A representa um histograma do efeito de inibição sobre hiperalgesia induzida por NGF (latência de tempo) do Composto 30 administrado a um camundongo em várias doses através de via intraperitoneal.

[00234] A Figura 1B representa um histograma do efeito de inibição sobre hiperalgesia induzida por NGF (latência de tempo) do Composto 30 administrado a um camundongo em várias doses através de via oral.

[00235] A Figura 2A representa um gráfico com relação ao número de lambidas espontâneas após administração a um rato através de via intraperitoneal de Composto 30 em várias doses.

[00236] A Figura 2B representa um gráfico com relação a uma medida de alodinia mecânica após administração oral a um rato de Composto 30 em várias doses.

[00237] A Figura 3A representa um histograma da classificação de uso do membro como uma função de tempo após administração de uma solução salina ou de Composto 30 na dose de 2,5 mg/kg.

[00238] A Figura 3B representa um histograma da lambida evocada por toque leve como uma função de tempo após administração de uma solução salina ou de Composto 30 na dose de 2,5 mg/kg.

EXEMPLOS

[00239] As abreviações que seguem são usadas: DMSO Dimetilsulfóxido EI Impacto de elétron ES Eletropulverização LCMS Cromatografia líquida - espectrometria de massa Mg miligrama mL mililitro RMN Ressonância magnética nuclear I. Síntese dos compostos de acordo com a invenção Exemplos de método A1 Exemplo 1: 5-iodo-1H-pirazol[3,4-b]piridina-3-amina

Exemplo 1a: 2-hidróxi-5-iodonicotinonitrila

[00240] 9 g (0,5 eq.) de N-iodossuccinimida em temperatura ambi ente são adicionados a uma solução de 10 g (83 mmol) de 2- hidroxinicotinonitrila em 150 ml de dimetilformamida anidra. A mistura de reação é agitada a 60° C. Depois de 30 minutos de agitação, 9 g (0,5 eq.) de N-iodossuccinimida são adicionados e então a mistura de reação é agitada a 60° C por 5 horas. O solvente é evaporado e o precipitado formado é filtrado, enxaguado com água e com éter de dietila e então seco sob vácuo para fornecer 18,5 g (90%) de 2-hidróxi-5- iodonicotinonitrila na forma de um pó bege. LCMS (EI, m/z): (M+1) 246,93 1H RMN: δH ppm (400 MHz, DMSO): 12,79 (1H, s, OH), 8,36 (1H, d, CHarom), 8,04 (1H, d, CH arom). Exemplo 1b: 2-cloro-5-iodonicotinonitrila

[00241] 30,7 ml (329 mmol) de oxicloreto fosforoso a 0o C e 6 gotas de ácido sulfúrico são adicionados a 9 g (6,6 mmol) de 2-hidróxi-5- iodonicotinonitrila. A mistura de reação é aquecida a 110° C por 5 horas e então em temperatura ambiente de um dia para o outro. A mistura de reação é despejada em um béquer contendo gelo e um pouco de água e um precipitado é formado. A mistura é deixada gradualmente retornar para temperatura ambiente e então é filtrada e enxaguada com água. O sólido é seco para fornecer 6,8 g (70%) de 2-cloro-5- iodonicotinonitrila. LCMS (EI, m/z): (M+1) 265,45 1H RMN: δH ppm (400 MHz, DMSO): 9,61 (1H, d, CHarom), 9,14 (1H, d, CHarom). Exemplo 1: 5-iodo-1H-pirazol[3,4-b]piridina-3-amina

[00242] Hidrazina (3,86 ml, 79 mmol) é adicionada em temperatura ambiente a 7 g (26,5 mmol) de uma solução de 2-cloro-5- iodonicotinonitrila em 25 ml de propan-2-ol. A mistura de reação é aquecida a 85° C por 7 horas e então em temperatura ambiente de um dia para o outro. O sólido suspenso é filtrado, enxaguado com isopropanol e então com éter e seco em um forno a 50° C para fornecer 6 g (87%) de 5-iodo-1H-pirazol[3,4-b]piridina-3-amina. LCMS (EI, m/z): (M+1) 260,95 1H RMN: δH ppm (400 MHz, DMSO): 12,12 (1H, s amplo, NH), 8,51 (1H, d, CHarom), 8,45 (1H, d, CH arom), 5, 64 (2H, s amplo, NH2).

[00243] Os compostos que seguem foram obtidos de acordo com o mesmo método.

** 1H RMN, DMSO-d6, Ex. 1-2: 8,55 (1H, s amplo, CHarom), 8,42 (1H, s amplo, CH arom), 6, 33 (1H, s amplo, CH arom), 1, 57 (9H, s, CH); 1-3: 11,92 (1H, s, NH), 8,55 (1H, s, CHarom), 5,59 (2H, s amplo, NH2), 2,66 (3H, s, CH3). Exemplo 2: 5-bromo-1H-pirazol[3,4-b]piridina-3-amina

Exemplo 2a: 2-metóxi-nicotinonitrila

[00244] 4,98 g (217 mmol) de sódio são adicionados a 80 ml de me- tanol anidro. O meio de reação é agitado em temperatura ambiente por 10 minutos e então 10 g (72,2 mmol) de 2-cloronicotinonitrila são adicionados a 10° C. O meio de reação é agitado a 25° C por 16 horas. A reação é hidrolisada adicionando lentamente água a 0o C. Após retornar para a temperatura ambiente, o precipitado obtido é filtrado, enxaguado com água e então seco a 50° C para fornecer 7,85 g (81%) de 2-metóxi-nicotinonitrila na forma de um sólido amarelo. LCMS (EI, m/z): (M+1) 135,04 1H RMN: δH ppm (400 MHz, DMSO): 8,46-8,48 (1H, dd, CHarom), 8,258,27 (1H, dd, CH arom), 7,17-7,20 (1H, dd, CH arom), 3, 99 (3H, s, CH3). Exemplo 2b: 5-bromo-2-metóxi-nicotinonitrila

[00245] 12,23 g (149 mmol) de acetato de sódio e então 7,66 ml (149 mmol) de bromo a 0o C são adicionados a 10 g (74,6 mmol) de uma solução de 2-metóxi-nicotinonitrila em 29 ml de ácido acético. A mistura de reação é aquecida a 70° C de um dia para o outro. Após retornar para a temperatura ambiente, o meio de reação é adicionado a um banho gelado e o precipitado obtido é filtrado, enxaguado com água e então seco a 50° C para fornecer 11,6 g (73%) de 5-bromo-2- metóxi-nicotinonitrila na forma de um sólido branco. LCMS (EI, m/z): (M+1) 214,95 1H RMN: δH ppm (400 MHz, DMSO): 8,61 (1H, d, CHarom), 8,60 (1H, d, CHarom), 3,98 (3H, s, CH3) Exemplo 2: 5-bromo-1H-pirazol[3,4-b]piridina-3-amina

[00246] 35 ml (23,47 mmol) de hidrazina são adicionados em tempe ratura ambiente a 5 g (23,47 mmol) de 5-bromo-2-metoxinicotinonitrila. O meio de reação é carregado a 100° C por 3 horas. Após retornar para a temperatura ambiente, o precipitado obtido é filtrado, enxaguado com água e então seco a 50° C para fornecer 3,6 g (72%) de 5-bromo-1H- pirazol[3,4-b]piridina-3-amina na forma de um sólido amarelo. LCMS (EI, m/z): (M+1) 214,05 1H RMN: δH ppm (400 MHz, DMSO): 12,18 (1H, s, NH), 8,38 (1H, d, CHarom), 8,37 (1H, d, CH arom), 5, 66 (2H, s, NH). Exemplos do método A2 Exemplo 3: 5-iodo-1H-pirazol[3,4-b]pirazina-3-amina

Exemplo 3a: 3-amino-6-iodopirazina-2-carboxilato de metila

[00247] 1,5 equivalente de N-iodossuccinimida é adicionado em temperatura ambiente a 5 g (32,7 mmol) de uma solução de 3- aminopirazina-2-carboxilato de metila em 25 ml de dimetilformamida. O meio de reação é aquecido a 65° C por 1 hora, adicionado a 0,5 equivalente de N-iodossuccinimida e mantido a 65° C por 24 horas. Após retornar para a temperatura ambiente, o solvente é evaporado e então o produto é extraído várias vezes com diclorometano. As fases orgânicas são combinadas, lavadas com solução de bissulfito de sódio 10%, secas em sulfato de magnésio e concentradas para fornecer 8 g (88%) de 3-amino-6-iodopirazina-2-carboxilato de metila na forma de um sólido amarelo. LCMS (EI, m/z): (M+1) 280 1H RMN: δH ppm (400 MHz, DMSO): 8,50 (1H, s, CHarom), 7,50 (2H, s amplo, NH2), 3,20 (3H, s, CH3). Exemplo 3b: 3-amino-6-iodopirazina-2-carboxamida

[00248] 30 ml de amônia em água são adicionados sob agitação magnética a 15 g (53,8 mmol) de uma solução de 3-amino-6- iodopirazina-2-carboxilato de metila em 150 ml de metanol. O meio de reação é agitado a 25° C por 48 horas. Após evaporação dos solventes, o precipitado obtido é filtrado, enxaguado com água e então seco a 50° C para fornecer 12,50 g de 3-amino-6-iodopirazina-2- carboxamida (88%) na forma de um sólido bege. LCMS (EI, m/z): (M+1) 265,02 1H RMN: δH ppm (400 MHz, DMSO): 8,35 (1H, s, CHarom), 7,85 (1H, s amplo, NH), 7,60 (3H, s amplo, NH), 3,25 (3H, s, CH3). Exemplo 3c: N’-(3-ciano-5-iodopirazina-2-il)-N,N- dimetilformimidamida

[00249] 13,59 ml (146 mmol) de oxicloreto fosforoso são adiciona dos de gota em gota a 0o C a 11 g (41,7 mmol) de uma solução de 3- amino-6-iodopirazina-2-carboxamida em 80 ml de dimetilformamida. A mistura de reação é agitada em temperatura ambiente de um dia para o outro e então despejada em um béquer contendo gelo e um pouco de água. O pH é ajustado para 8 com solução de soda 1N; um precipitado é formado. A mistura é deixada gradualmente retornar para temperatura ambiente e então o sólido formado é filtrado, enxaguado com água e seco e 50° C para fornecer 10,50 g de N’-(3-ciano-5- iodopirazina-2-il)-N,N-dimetil formimidamida (84%) na forma de um sólido bege. LCMS (EI, m/z): (M+1) 302,07 1H RMN: δH ppm (400 MHz, DMSO): 8,69 (1H, s, CHarom), 8,67 (1H, s, CHetila), 3,20 (3H, s, CH3), 3,11 (3H, s, CH3). Exemplo 3d: 3-amino-6-iodopirazina-2-carbonitrila

[00250] 77 ml (77 mmol) de solução de ácido clorídrico 1M são adi cionados a 7,7 g (25,6 mmol) de N’-(3-ciano-5-iodopirazin-2-il)-N,N- dimetilformimidamida. O meio de reação é aquecido a 50° C por 4 horas e então agitado em temperatura ambiente de um dia para o outro. O precipitado formato é filtrado, enxaguado com água e seco a 50° C para fornecer 6 g (95%) da 3-amino-6-iodopirazina-2-carbonitrila na forma de um sólido bege. LCMS (EI, m/z): (M+1) 247,0 1H RMN: δH ppm (400 MHz, DMSO): 8,49 (1H, s, CHarom), 7,53 (2H, s amplo, NH2). Exemplo 3e: 3-cloro-6-iodopirazina-2-carbonitrila

[00251] 64,3 ml de ácido clorídrico são adicionados a -5° C a 7,7 g (31,3 mmol) de 3-amino-6-iodopirazina-2-carbonitrila. Nesta temperatura, uma solução de nitrito de sódio (4,32 g, 62,6 mmol) dissolvida em 9 ml de água é adicionada à mistura de reação e é agitada por 4 horas a -50° C e então em temperatura ambiente de um dia para o outro. Outro equivalente de nitrito de sódio é adicionado à mistura de reação e o precipitado formado é filtrado, enxaguado com água e seco a 50° C para fornecer 3,65 g (44%) de 3-cloro-6-iodopirazina-2-carbonitrila na forma de um sólido bege. LCMS (EI, m/z): (M+1) 266,49 1H RMN: δH ppm (400 MHz, DMSO): 9,13 (1H, s, CHarom) Exemplo 3: 5-iodo-1H-pirazol[3,4-b]pirazina-3-amina

[00252] 0,74 ml (9,8 mmol) de hidrazina é adicionado a 2,6 g (9,80 mmol) de uma solução de 3-cloro-6-iodopirazina-2-carbonitrila em 15 ml de butanol. A mistura de reação é aquecida a 110° C por 5 horas e então deixada em temperatura ambiente de um dia para o outro. O sólido suspenso é filtrado, enxaguado com butanol e então seco em um forno a 50° C para fornecer 2,2 g (86%) de 5-iodo-1H-pirazol[3,4- b]pirazina-3-amina na forma de um sólido marrom. LCMS (EI, m/z): (M+1) 262,02 1H RMN: δH ppm (400 MHz, DMSO): 12,59 (1H, s amplo, NH), 8,60 (1H, d, CHarom), 5,83 (2H, s amplo, NH2). Exemplos de método A3 Exemplo 4: 5-iodo-6-metóxi-1H-pirazol[3,4-b]piridin-3-amina

Exemplo 4a: 5-ciano-2-hidróxi-6-(metiltio)nicotinato de etila

[00253] 5-Ciano-2-hidróxi-6-(metiltio)nicotinato de etila é obtido se guindo o procedimento de Ya. Yu. Yakunin e outros, Russian Chemical Bulletin, 1999, 48(1), 195-6 com um rendimento total de 34%. LCMS (EI, m/z): (M-1) 237,22 1H RMN: δH ppm (400 MHz, DMSO): 12,72 (1H, s amplo, OH), 8,40 (1H, s, CHarom), 4,29 (2H, q, CH2), 2,64 (3H, s, CH3), 1,30 (3H, t, CH3). Exemplo 4b: ácido 5-ciano-2-hidróxi-6-(metiltio)nicotínico

[00254] 4,16 g (2 eq.) de mono-hidrato de hidróxido de lítio são adi cionados em temperatura ambiente a uma solução de 11,8 g (49,5 mmol) de 5-ciano-2-hidróxi-6-(metiltio)nicotinato de etila em 100 ml de etanol e 100 ml de água. A mistura de reação é agitada a 60° C por 2 horas. O etanol é evaporado e soda aquosa 1N é adicionada. A fase aquosa é lavada com acetato de etila e então reacidificada através da adição de cloreto de hidrogênio aquoso 1N (pH=1). O precipitado formado é filtrado, enxaguado com água e com éter de dietila e então seco sob vácuo para fornecer 9,9 g (95%) de ácido 5-ciano-2-hidróxi-6- (metiltio)nicotínico na forma de um pó marrom. LCMS (EI, m/z): (M-1) 209,09 1H RMN: δH ppm (400 MHz, DMSO): 8,32 (1H, s, CHarom), 2,61 (3H, s, CH3). Exemplo 4c: 6-hidróxi-2-(metiltio)nicotinonitrila

[00255] Uma solução de 6 g (28,5 mmol) de ácido 5-ciano-2-hidróxi- 6-(metiltio)nicotínico em 35 ml de éter de difenila é agitada a 250° C por 4 horas. Após retornar para a temperatura ambiente, 100 ml de ciclo-hexano são adicionados e o meio de reação é triturado por 30 minutos. O sólido formado é filtrado, enxaguado totalmente com ciclo- hexano e então seco sob vácuo para fornecer 2,87 g (60%) de 6- hidróxi-2-(metiltio)nicotinonitrila na forma de um pó marrom. LCMS (EI, m/z): (M+1) 167,12 1H RMN: δH ppm (400 MHz, DMSO): 12,16 (1H, s amplo, OH), 7,92 (1H, d, CHarom), 6,46 (1H, d, CH arom), 2, 59 (3H, s, CH3). Exemplo 4d: 6-hidróxi-5-iodo-2-(metiltio)nicotinonitrila

[00256] 6 g (1,6 eq.) de sulfato de prata e 4,58 g (1,5 eq.) de iodo são adicionados sucessivamente a uma solução de 2 g (12 mmol) de 6-hidróxi-2-(metiltio)nicotinonitrila em 200 ml de etanol. O meio de reação é agitado em temperatura ambiente por 2 horas. O sólido é filtrado e o resíduo enxaguado totalmente com metanol. O filtrado é evaporado e então absorvido em acetato de etila. A fase orgânica é lavada com água três vezes, seca em sulfato de magnésio e evaporada para fornecer 3,18 g (90%) de 6-hidróxi-5-iodo-2-(metiltio)nicotinonitrila na forma de um pó amarelo. LCMS (EI, m/z): (M+1) 292,93 1H RMN: δH ppm (400 MHz, DMSO): 12,96 (1H, s amplo, OH), 8,38 (1H, s, CHarom), 2,62 (3H, s, CH3). Exemplo 4e: 5-iodo-6-metóxi-2-(metiltio)nicotinonitrila

[00257] 905 μl (2 eq.) de iodeto de metila e 2,1 g (1,05 eq.) de car bonato de prata são adicionados sucessivamente a uma solução de 2,12 g (7,26 mmol) de 6-hidróxi-5-iodo-2-(metiltio)nicotinonitrila em 20 ml de 1,4-dioxana. O meio de reação é agitado a 60° C por 5 horas. O sólido é filtrado e o resíduo enxaguado totalmente com metanol. O filtrado é evaporado e o resíduo purificado através de cromatografia de coluna de sílica (diclorometano/ciclo-hexano 4:6 como eluente) para fornecer 1,52 g (68%) de 5-iodo-6-metóxi-2-(metiltio)nicotinonitrila na forma de um pó branco. LCMS (EI, m/z): (M+1) 306,95 1H RMN: δH ppm (400 MHz, DMSO): 8,50 (1H, s, CHarom), 4,04 (3H, s, CH3), 2,63 (3H, s, CH3). Exemplo 4f: 5-iodo-6-metóxi-2-(metilsulfinil)nicotinonitrila

[00258] 1,42 g (1,1 eq.) de ácido 3-cloroperbenzoico 70% é adicio nado a uma solução de 1,6 g (5,23 mmol) de 5-iodo-6-metóxi-2- (metiltio)nicotinonitrila em 20 ml de diclorometano. O meio de reação é agitado em temperatura ambiente por 1 hora. Acetato de etila é adicio- nado e a fase orgânica é lavada com solução de bicarbonato de sódio saturada, seca em sulfato de magnésio, filtrada e evaporada para fornecer 1,63 g (97%) de 5-iodo-6-metóxi-2-(metilsulfinil)nicotinonitrila na forma de um pó branco que pode conter também 5-iodo-6-metóxi-2- (metilsulfonil)nicotinonitrila em pequenas proporções (<20%). Se necessário, a mistura é usada como assim nas etapas que seguem. LCMS (EI, m/z): (M+1) 322,95 1H RMN: δH ppm (400 MHz, DMSO): 8,86 (1H, s, CHarom), 4,05 (3H, s, CH3), 2,95 (3H, s, CH3). Exemplo 4: 5-iodo-6-metóxi-1H-pirazol[3,4-b]piridin-3-amina

[00259] 294 μl (1,2 eq.) de mono-hidrato de hidrazina são adiciona dos a uma solução de 1,63 g (5,05 mmol) de 5-iodo-6-metóxi-2- (metilsulfinil)nicotinonitrila em 30 ml de 2-propanol. O meio de reação é agitado a 80° C por 9 horas. Após retornar para a temperatura ambiente, o sólido formado é filtrado e enxaguado com 2-propanol para fornecer 1,14 g (78%) de 5-iodo-6-metóxi-1H-pirazol[3,4-b]piridina-3-amina na forma de um pó branco. LCMS (EI, m/z): (M+1) 291,00 1H RMN: δH ppm (400 MHz, DMSO): 11,87 (1H, s, NH), 8,49 (1H, s, CHarom), 5,49 (2H, s amplo, NH2), 3,90 (3H, s, CH3). Exemplo 5: 5-iodo-1H-pirazol[3,4-b]piridina-3,6-diamina

Exemplo 5a: (2,4) -etil- 5-amino -2,4- diciano -5- mercaptopenta- 2,4-dienoato de 4-metilmorfolínio

[00260] (2,4)-etil-5-amino-2,4-diciano-5-mercaptopenta-2,4-dienoato de 4-metilmorfolínio é preparado de acordo com o procedimento descrito por V .D. Dyachenko e outros, Chemistry of Heterocyclic Compounds, 2005, 41(4), 503-10 com um rendimento de 50%. 1H RMN: δH ppm (400 MHz, DMSO): 9,60 (1H, s amplo, NH), 8,66 (1H, s, CH), 8,33 (1H, s amplo, NH), 7,43 (1H, s amplo, NH), 4,08 (2H, q, CH2), 3,82-4,02 (2H, m, CH2), 3,55-3,78 (2H, m, CH2), 3,24-3,42 (2H, m, CH2), 3,98-3,17 (2H, m, CH2), 2,81 (3H, s, CH3), 1,19 (3H, t, CH3). Exemplo 5b: 2-amino-5-ciano-6-(metiltio)nicotinato de etila

[00261] 2,73 ml (1 eq.) de iodeto de metila são adicionados a uma solução de 14,2 g (43,8 mmol) de (2,4)-etil-5-amino-2,4-diciano-5- mercaptopenta-2,4-dienoato de 4-metilmorfolínio em 78 ml de N,N- dimetilformamida. A mistura de reação é agitada em temperatura ambiente por 1 hora e então a 75° C por 20 horas. Após retornar para a temperatura ambiente, água é adicionada e o sólido formado é filtrado e seco sob vácuo para fornecer 10,31 g (100%) de 2-amino-5-ciano-6- (metiltio)nicotinato de etila na forma de um pó bege. LCMS (EI, m/z): (M+1) 238,20 1H RMN: δH ppm (400 MHz, DMSO): 8,25 (1H, s, CHarom), 8,19 (1H, s amplo, NH), 7,99 (1H, s amplo, NH), 4,27 (2H, q, CH2), 2,58 (3H, s, CH3), 1,31 (3H, t, CH3). Exemplo 5c: ácido 2-amino-5-ciano-6-(metiltio)nicotínico

[00262] 3,08 g (2 eq.) de mono-hidrato de hidróxido de lítio são adi cionados em temperatura ambiente a uma solução de 8,7 g (36,7 mmol) de 2-amino-5-ciano-6-(metiltio)nicotinato de etila em 87 ml de etanol e 87 ml de água. A mistura de reação é agitada a 60° C por 2 horas. O etanol é evaporado e soda aquosa 1N é adicionada. A fase aquosa é lavada com acetato de etila e então reacidificada através da adição de cloreto de hidrogênio aquoso 1N (pH=1). O precipitado formado é filtrado, enxaguado com água e com éter de dietila e então seco sob vácuo para fornecer 7,67 g (quantitativo) de ácido 2-amino-5- ciano-6-(metiltio)nicotínico na forma de um pó marrom. LCMS (EI, m/z): (M+1) 210,16 1H RMN: δH ppm (400 MHz, DMSO): 13,28 (1H, s amplo, CO2H), 8,21 (1H, s, CHarom), 8,13 (2H, s amplo, NH2), 2,57 (3H, s, CH3). Exemplo 5d: 6-amino-2-(metiltio)nicotinonitrila

[00263] Uma solução de 3 g (14,3 mmol) de ácido 2-amino-5-ciano- 6-(metiltio)nicotínico em 30 ml de éter de difenila é agitada a 255° C por 60 horas. Após retornar para a temperatura ambiente, 60 ml de ciclo-hexano são adicionados e o meio de reação é triturado por 30 minutos. O sólido formado é filtrado e então enxaguado totalmente com ciclo-hexano. O sólido é redissolvido em acetato de etila e então a fase orgânica é lavada com água, seca em sulfato de magnésio, filtrada e então evaporada para fornecer 1,32 g (55%) de 6-amino-2- (metiltio)nicotinonitrila na forma de um pó marrom. LCMS (EI, m/z): (M+1) 166,13 1H RMN: δH ppm (400 MHz, DMSO): 7,58 (1H, d, CHarom), 7,12 (2H, s amplo, NH2), 6,20 (1H, d, CHarom), 2,51 (3H, s, CH3). Exemplo 5e: 6-amino-5-iodo-2-(metiltio)nicotinonitrila

[00264] 3,75 g (1,5 eq.) de sulfato de prata e 2,85 g (1,4 eq.) de io do são adicionados sucessivamente a uma solução de 1,32 g (8,02 mmol) de 6-amino-2-(metiltio)nicotinonitrila em 65 ml de etanol. O meio de reação é agitado em temperatura ambiente por 3 horas. O sólido é filtrado e o resíduo enxaguado totalmente com metanol. O filtrado é evaporado e redissolvido em acetato de etila. A fase orgânica é lavada com água três vezes, seca em sulfato de magnésio e evaporada para fornecer 1,89 g (81%) de 6-amino-5-iodo-2-(metiltio)nicotinonitrila na forma de um pó marrom. LCMS (EI, m/z): (M+1) 291,99 1H RMN: δH ppm (400 MHz, DMSO): 8,13 (1H, s, CHarom), 7,19 (1H, singleto plano amplo, NH2), 2,51 (3H, s, CH3). Exemplo 5f: 6-amino-5-iodo-2-(metilsulfinil)nicotinonitrila

[00265] 1,77 g (1,1 eq.) de ácido 3-cloroperbenzoico 70% é adicio nado a uma solução de 1,89 g (6,51 mmol) de 6-amino-5-iodo-2- (metiltio)nicotinonitrila em 60 ml de diclorometano. O meio de reação é agitado em temperatura ambiente por 1 hora. Acetato de etila é adicionado e a fase orgânica é lavada com solução de bicarbonato de sódio saturada, seca em sulfato de magnésio, filtrada e evaporada para fornecer 1,5 g (75%) de 6-amino-5-iodo-2-(metilsulfinil)nicotinonitrila na forma de um pó branco que pode conter também 6-amino-5-iodo-2- (metilsulfonil)nicotinonitrila em proporções pequenas (<20%). Se necessário, a mistura é usada como é nas etapas que seguem. LCMS (EI, m/z): (M+1) 307,98 1H RMN: δH ppm (400 MHz, DMSO): 8,45 (1H, s, CHarom), 7,70 (2H, singleto liso amplo, NH2), 2,84 (3H, s, CH3). Exemplo 5: 5-iodo-1H-pirazol[3,4-b]piridina-3,6-diamina

[00266] 275 μl (2 eq.) de mono-hidrato de hidrazina são adicionados a uma solução de 872 mg (2,84 mmol) de 6-amino-5-iodo-2- (metilsulfinil) nicotinonitrila em 11 ml de 2-propanol. O meio de reação é agitado a 80° C por 3 horas. Água é adicionada e o produto é extraído com acetato de etila. A fase orgânica é seca em sulfato de magnésio, filtrada e evaporada. O resíduo é triturado em um mínimo de éter de diisopropila. O sólido é filtrado para fornecer 523 mg (67%) de 5- iodo-1H-pirazol[3,4-b]piridina-3,6-diamina na forma de um pó marrom. LCMS (EI, m/z): (M+1) 276,00 1H RMN: δH ppm (400 MHz, DMSO): 11,23 (1H, s, NH), 8,26 (1H, s, CHarom), 6,11 (2H, s amplo, NH2), 5,25 (2H, s amplo, NH2). Exemplos de método B1 Exemplo 6: 5-(3,5-difluorbenziltio)-1H-pirazol[4,3-b]piridin-3-amina

Exemplo 6a: 6-cloro-3-nitropicolinonitrila

[00267] 2,6-Dicloro-3-nitropiridina (5,18 mmol, 1 g) é misturada com 5 ml de N-metil-2-pirrolidinona em um reator de micro-ondas. A mistura de reação é aquecida a 180° C por 15 minutos (6 bars). O produto de reação bruto é dissolvido em acetato de etila, filtrado e lavado várias vezes usando uma fase aquosa. A fase orgânica é coletada, seca em sulfato de magnésio e concentrada seca. O produto bruto então obtido é purificado através de cromatografia de sílica-gel (heptano/AcOEt) para fornecer, após concentração, 0,62 g (65%) de um óleo marrom. 1H RMN: δH ppm (400 MHz, DMSO): 8,81 (1H, d, CHarom), 8,18 (1H, d, CHarom). Exemplo 6b: 3-nitro-6-tioxo-1,6-di-hidropiridina-2-carbonitrila

[00268] Um equivalente de NaSH:H2O é adicionado a uma solução de 6-cloro-3-nitropicolinonitrila (5,45 mmol, 1 g) em 20 ml de EtOH. A cor muda para laranja. O meio de reação é agitado em temperatura ambiente por 30 minutos. O produto de reação bruto é então concentrado, redissolvido em acetato de etila e extraído várias vezes usando uma fase aquosa ácida (HCl 1N) e então uma fase neutra. A fase orgânica é concentrada e o produto de reação bruto recristalizado em acetona para fornecer 0,64 g (79%) de cristais amarelos. 1H RMN: δH ppm (400 MHz, DMSO): 8,71 (1H, d, CHarom), 8,27 (1H, d, CHarom). Exemplo 6c: 6-(3,5-difluorbenziltio)-3-nitropicolinonitrila

[00269] Uma mistura de 3-nitro-6-tioxo-1,6-di-hidropiridin-2- carbonitrila (4,42 mmol, 1,34 g), 3,5-difluorbenzilbenzilbrometo (8,83 mmol, 1,828 g) e K2CO3 (11,04 mmol, 1,525 g) em 5 ml de acetona é aquecida a 70° C por 10 horas e então evaporada sob pressão reduzida. O resíduo é purificado através de cromatografia de sílica-gel (AcOEt/heptano) para fornecer 1,33 g (98%) do produto esperado. LCMS (ES-): m/z 306 (M-H+). 1H RMN: δH ppm (400 MHz, DMSO): 8,53 (1H, d, CHarom), 7,91 (1H, d, CHarom), 7,21 (2H, m), 7,17 (1H, m), 4,55 (2H, CH2). Exemplo 6d: 3-amino-6-(3,5-difluorbenziltio)picolinamida

[00270] Uma mistura de 6-(3,5-difluorbenziltio)-3-nitropicolinonitrila (0,05 g, 0,163 mmol) e PtO2 (0,739 mg, 3,25 μmol) em 10 ml de MeOH é posta sob agitação em pressão atmosférica de hidrogênio por 2 horas. O catalisador é filtrado, a solução é concentrada e o resíduo então obtido é purificado através de cromatografia de sílica-gel (AcO- Et/heptano) para fornecer, após concentração, 0,04 g (83%) de cristais brancos. LCMS (ES+) m/z: 296 (MH+). 1H RMN: δH ppm (400 MHz, DMSO): 7,84 (1H, s amplo, NH), 7,40 (1H, s amplo, NH), 7,14 (1H, d, CH arom), 7, 08 (4H, m, CHarom), 6, 80 (2H, s amplo, NH2), 4,43 (2H, s, CH2). Exemplo 6e: 3-amino-6-(3,5-difluorbenziltio)picolinonitrila

[00271] Uma mistura de 3-amino-6-(3,5-difluorbenziltio) picolinoa- mida (2,37 mmol, 0,7 g) e P2Cl5 (9,48 mmol, 1,346 g), 20 ml de tolueno e 1 ml de solvente iônico (tetrafluorborato de 1-butil-3- metilimidazolínio) são postos em um reator de micro-ondas e então aquecidos a 140° C por 30 minutos. O produto de reação bruto é então concentrado sob pressão reduzida e os cristais laranja então obtidos são redissolvidos em acetato de etila e lavados usando solução de NaHCO3 aquosa saturada. A fase orgânica é seca em sulfato de magnésio e então concentrada para fornecer 0,7 g de um óleo marrom. Este produto de reação bruto é purificado através de cromatografia de sílica-gel (AcOEt/heptano + Net3 0,1%) para fornecer, após concentração, 0,15 g (23%) de cristais laranja. 1H RMN: δH ppm (400 MHz, DMSO): 7,73 (1H, d, CHarom), 7,25 (2H, m, CHarom), 7,18 (1H, m), 6,85 (1H, d), 5,43 (2H, CH2). Exemplo 6: 5-(3,5-difluorbenziltio)-1H-pirazol[4,3-b]piridin-3-amina

[00272] Uma solução esfriada para 0o C de NaNO2 em 3 ml de água é adicionada em gotas a uma solução a 0o C de 3-amino-6-(3,5- difluorbenziltio)picolinonitrila (1,587 mmol, 0,44 g) em 15 ml de solução de HCl 6N. Depois de 15 minutos, uma solução esfriada para 0o C de SnCl2.2H2O diluída em 4 ml de HCl 12N é adicionada em gotas. O meio de reação é então agitado a 25° C por 1 hora. A solução é extraída com acetato de etila e então lavada usando solução de NaHCO3 saturada e então solução de NaCl saturada. A fase orgânica é coletada, seca em sulfato de magnésio e então concentrada sob pressão reduzida. O resíduo é purificado através de cromatografia de sílica-gel (AcOEt/heptano) para fornecer, após concentração de fases orgânicas, 0,07 g (15%) de cristais pretos. 1H RMN: δH ppm (400 MHz, DMSO): 11,64 (1H, s, NH), 7,63 (1H, d, CHarom), 7,21 (2H, m, CH arom), 7,13 (1H, d, CH arom), 7,04 (1H, m, CHa- rom), 5,38 (2H, s, NH2), 4,51 (2H, s, CH2).

[00273] Os compostos que seguem são obtidos através de um método similar:

** 1H RMN: δH ppm (400 MHz, DMSO): 6-2: 11,65 (1H, s, NH), 7,64 (1H, dd, CHarom, J=8,8Hz), 7,42-7,51 (1H, m, CHarom), 7,20-7,25 (1H, m, CHarom), 7,14 (1H, dd, CHarom, J=8,8Hz), 7,01-7,11 (1H, m, CHarom), 5,37-5,41 (2H, m, NH2), 4,49 (2H, s). 6-3: 11,65 (1H, s, NH), 7,83 (1H, m, CHarom), 7,61 (1H, dd, CHarom, J=8,8Hz), 7,50 (1H, m, CHarom), 7,28-7,32 (1H, m, CHarom), 7,10 (1H, dd, CHarom, J=8,8Hz), 7,01-7,11 (1H, m, CHarom), 5,42 (2H, s, NH2), 4,47 (2H, s). Exemplos de método B2 Exemplo 7: 5-(3,5-diclorofeniltio)-1H-pirazol[4,3-b]piridin-3-amina

Exemplo 7a: 6-(3,5-diclorofeniltio)-3-nitropicolinonitrila

[00274] Uma mistura de 6-cloro-3-nitropicolinonitrila (3,70 g, 0,02 mol), 3,5-diclorobenzenotiol (3,60 g, 0,02 mol) e K2CO3 (5,6 g, 0,04 mol) em 100 ml de acetonitrila é realizada a 70° C por 16 horas. O produto de reação bruto é diluído com uma fração de acetato de etila e lavado usando uma fase aquosa. A fase orgânica é seca com sulfato de sódio e o resíduo é purificado através de cromatografia de sílica-gel (AcOET/éter de petróleo) para fornecer 5,4 g (80%) de um sólido amarelo. Exemplo 7b: 3-amino-6-(3,5-diclorofeniltio)picolinonitrila

[00275] 10 ml de HCl concentrado são adicionados a uma solução de 6-(3,5-diclorofeniltio)-3-nitropicolinonitrila (3,4 g, 0,10 mol) em 50 ml de metanol sob agitação. O meio de reação é refluxado, adicionado a 1,68 g (0,03 mol) de ferro e agitado por 10 minutos. Após retornar para a temperatura ambiente, a mistura de reação é adicionada a 100 ml de acetato de etila e 50 ml de água. O pH é ajustado para 10 usando solução de soda 30% e a fase orgânica é extraída e então seca em sulfato de sódio anidro antes de ser concentrada. O resíduo é purificado através de cromatografia de sílica-gel (acetato de etila/éter de petróleo) para fornecer, após concentração das frações, 2,82 g (91%) de um sólido amarelo. LCMS (m/e): 296(M+H+). Exemplo 7: 5-(3,5-diclorofeniltio)-1H-pirazol[4,3-b]piridin-3-amina

[00276] Uma solução de 350 mg de NaNO2 (5,07 mmol) em água (2 ml) é adicionada a uma solução em agitação de 1,5 g de 3-amino-6- (3,5-diclorofeniltio)picolinonitrila (5,07 mmol) em 100 ml de ácido sulfú- rico 50% a 0o C. A mistura é agitada por 20 minutos a 0-5° C. Uma solução de 2,9 g de SnCl2.2H2O (12,7 mmol, 2,5 eq.) em ácido clorídrico (solução 12N, 10 ml) é então adicionada e a solução é agitada por 1 hora em temperatura ambiente. O sólido formado é filtrado e então lavado duas vezes com 20 ml de água. O sólido é suspenso em 100 ml e o pH é ajustado para 10 através da adição de solução de soda 20%. A fase orgânica é separada e então seca em sulfato de sódio anidro antes de ser concentrada sob vácuo. Um sólido amarelo claro é obtido após recristalização em acetato de etila (470 mg, 34%). LCMS m/z 311 (M+H+). 1H RMN: δH ppm (400 MHz, DMSO): 11,91 (1H, s amplo, NH), 7,79 (1H, d, CHarom), 7,55 (1H, s, CH arom), 7, 36 (2H, s, CH arom), 7,33 (1H, m, CHarom), 5,42 (2H, s, NH2).

[00277] Os compostos que seguem são obtidos através de um método similar:

** 1H RMN: δH ppm (400 MHz, DMSO): 7-1: 11,61 (1H, s amplo, NH), 7,73 (1H, d, CHarom), 7,24 (2H, m, CHarom), 7,18 (1H, m, CHarom), 6,86 (1H, d, CHarom). 7-2: 11,95 (1H, sl, NH), 7,78 (1H, d, CHarom, J=11,6Hz), 7,33 (1H, d, CHarom, J=11,6Hz), 7,19 (1H, t, CHarom), 7,04 (2H, 2d, CHarom, J=8,8Hz), 5,51 (2H, s, NH2). 7-3: 11,80 (1H, sl, NH), 7,70 (1H, d, CHarom, J=8,8Hz), 7,60 (1H, t, CHarom), 7,49 (1H, q, CHarom), 7,27-7,33 (1H, m, CHarom), 7,11 (1H, d, CHarom, J=8,8Hz), 5,41 (2H, s, NH2). 7-4: 11,93 (1H, sl, NH), 7,80 (1H, d, CHa- rom, J=11,6Hz), 7,62 (1H, d, CHarom, J=11,6Hz), 7,40 (1H, dd, CHa- rom, J=11,2Hz), 7,29 (1H, d, CHarom, J=11,6Hz), 7,1 (1H, s, CHarom), 5,51 (2H, s, NH2). 7-5: 11,86 (1H, sl, NH), 7,87 (1H, d, CHarom, J=9,6Hz), 7,73 (1H, d, CHarom, J=11,6), 7,50-7,68 (2H, m, CHarom), 7,44 (1H, d, CHarom, J=10,4Hz), 7,11 (1H, d, CHarom, J=11,6Hz), 5,46 (2H, s, NH2). 7-6: 12,66 (1H, sl, NH), 8,52 (1H, s, CHarom), 7,127,20 (1H, m, CHarom), 7,02-7,10 (2H, m, CHarom), 5,90 (2H, s, NH2). 7-7: 12,70 (1H, s, NH), 8,52 (1H, s, CHarom), 7,60 (1H, d, CHarom, J=8,8Hz), 7,38 (1H, dd, CHarom, J=8,4Hz), 7,12 (1H, s, CHarom), 5,92 (2H, s, NH2). 7-8: 12,66 (1H, s, NH), 8,39 (1H, s, CHarom), 7,84 (1H, d, CHarom, J=7,6Hz), 7,58 (1H, t, CHarom), 7,50 (1H, t, CHarom), 7,34 (1H, d, CHarom, J=7,6Hz), 5,87 (2H, s, NH2). 7-9: 11,57 (1H, s, NH), 7,74 (1H, d, Charom, J=9Hz), 7,25 (3H, m, CHarom), 6,88 (1H, d, Cha- rom, J=9Hz), 5,44 (2H, s), 5,08 (2H, s). 7-10: 11,58 (1H, s, NH), 7,73 (1H, d, CHarom, J=12,0Hz), 7,48-7,58 (1H, m, CHarom), 7,21-7,37 (2H, m, CHarom), 6,85 (1H, d, CHarom, J=12,0Hz), 5,44 (2H, s, CH), 5,10 (2H, sl, NH2). 7-11: 11,60 (1H, sl, NH), 7,70-7,77 (2H, m, CHa- rom), 7,57 (1H, d, CHarom, J=11,2Hz), 7,40-7,50 (1H, m, CHarom), 6,89 (1H, d, CHarom, J=12,0Hz), 5,48 (2H, s, CH), 5,06 (2H, sl, NH2). 7-12: 11,60 (1H, sl, NH), 7,91 (1H, s, CHarom), 7,83 (1H, d, CHarom, J=11,2Hz), 7,75 (1H, d, CHarom, J=12,0Hz), 7,66 (1H, d, CHarom, J=9,6Hz), 6,88 (1H, d, CHarom, J=12,0Hz), 5,58 (2H, s, CH), 5,01 (2H, sl, NH2). 7-13: 11,56 (1H, sl, NH), 8,77 (1H, s, CHarom), 8,55 (1H, s, CHarom), 7,96 (1H, d, CHarom, J=10,4Hz), 7,72 (1H, d, CHarom, J=12,0Hz), 7,42 (1H, dd, CHarom, J=10,0Hz), 6,83 (1H, d, CHarom, J=11,6Hz), 5,45 (2H, s, CH), 5,15 (2H, sl, NH2). Exemplo 8: N5- (3,5-difluorfenil) -1H-pirazol [4,3-b] piridina -3,5- diamina

Exemplo 8a: 6-(3,5-difluorfenilamino)-3-nitropicolinonitrila

[00278] Uma mistura de 6,5 g de 6-cloro-3-nitropicolinonitrila (0, 065 mol) e 6,2 g de 3,5-difluoranilina (0,048 mol) em 100 ml de tolueno é aquecida a 70° C por 5 horas. O produto de reação bruto é diluído em uma fração de acetato de etila e lavado usando solução de NaCl saturada. A fase orgânica é seca com sulfato de sódio e o resíduo purificado através de cromatografia de sílica-gel (AcOEt/éter de petróleo) para fornecer 3,9 g (33%) de um sólido amarelo. Exemplo 8b: 3-amino-6-(3,5-difluorfenilamino)picolinonitrila

[00279] 10 ml de HCl concentrado são adicionados a uma solução de 6-(3,5-diclorofeniltio)-3-nitropicolinonitrila (3,9 g, 0,0141 mol) em 150 ml de etanol sob agitação. O meio de reação é refluxado, adicionado a 2,4 g de ferro (0,0423 mol) e agitado a 80° C por 1 hora. Após retornar para 0o C o pH é ajustado para 8 usando solução de soda 1N e o meio de reação é filtrado em Celite. A mistura de reação é adicionada a 100 ml de acetato de etila e 50 ml de metanol. A fase orgânica é extraída e a fase aquosa é extraída várias vezes por frações de acetato de etila. As fases orgânicas são combinadas e então secas em sulfato de sódio anidro antes de ser concentradas para fornecer, após concentração, 2,3 g (66%) de um sólido marrom. Exemplo 8: 5- (3,5-difluorfenilamino) -1H-pirazol [4,3-b] piridin-3- amina

[00280] Uma solução de 713 mg de NaNO2 (10,3 mmol) em água (5 ml) é adicionada, em gotas, a uma solução em agitação de 2,3 g de 3- amino-6-(3,5-difluorfenilamino)picolinonitrila (9,4 mmol) em 100 ml de ácido clorídrico 6N a 0o C. A mistura é agitada por 20 minutos a 0-5° C. Uma solução de 5,3 g de SnCl2.2H2O (23,5 mmol, 2,5 eq.) em ácido clorídrico (solução 12N, 30 ml) é então adicionada em gotas e a solução é agitada por 1 hora em temperatura ambiente. O meio de reação é então esfriado para 0o C e basificado para pH 8 usando solução de soda 30%. A mistura é extraída com acetato de etila e lavada usando solução de NaCl saturada e a fase orgânica é seca em sulfato de sódio anidro antes de ser concentrada sob vácuo. O resíduo é purificado através de cromatografia de coluna de sílica (AcOEt). Um sólido amarelo claro é obtido (530 mg, 22%). LCMS: m/z 262 (M+H+). 1H RMN: δH ppm (400 MHz, DMSO): 11,47 (s, 1H), 9,45 (s, 1H), 7,65 (m, 3H), 6,87 (d, 1H, J=7,8 Hz), 6,60 (m, 1H), 5,09 (s, 2H).

[00281] Os compostos que seguem são obtidos através de um método similar:

** 1H RMN: δ H ppm (400 MHz, DMSO): 8-1: 1 1,46 (1H, s, NH), 8,75- 8,82 (2H, m, CHarom), 7,65 (1H, dd, CHarom, J=9,2Hz), 7,19-7,31 (2H, m, CHarom), 6,67-6,63 (1H, sl, CHarom), 5,06 (2H, s, NH2). 8-2: 11,58 (1H, sl, NH), 8,65 (1H, s, CHarom), 8,35 (1H, s, CHarom), 7,69 (1H, d, CHarom, J=12,0Hz), 7,45 (1H, d, CHarom, J=11,6Hz), 7,24 (1H, d, CHarom, J=12,0Hz), 6,96 (1H, dd, CHarom, J=11,2Hz), 5,03 (2H, sl, NH2). Exemplo de método B3 Exemplo 9: 5-(3,5-difluorbenzil)-1H-pirazol[4,3-b]piridin-3-amina

[00282] Este composto pode ser preparado a partir dos intermediários que seguem, de acordo com o método B3. Exemplo 9a: 2- (3,5- difluorbenzil) -4,4,5,5- tetrametil -1,3,2- dioxaborolano Exemplo 9b: 6-(3,5-difluorbenzil)-3-nitropicolinonitrila Exemplo 9c: 3-amino-6-(3,5-difluorbenzil)picolinonitrila Exemplo de método B4 Exemplo 10: 3-amino-N- (3,5-difluorfenil) -1H-pirazol[3,4-b]piridina- 5-sulfonamida

Exemplo 10a: ácido 5-(N-(3,5-difluorfenil)sulfamoil)nicotínico

[00283] 2,74 g (9,64 mmol) de 2-cloro-5-(clorossulfonil)nicotinato de etila em solução em 20 ml de diclorometano anidro são adicionados, em gotas, a 0o C, a uma mistura de 623 mg (4,82 mmol) de 3,5- difluoranilina e 1,68 ml (12,05 mmol) de trietilamina diluída em 10 ml de diclorometano anidro. A solução é agitada em temperatura ambiente por 3 horas. O solvente é evaporado para prover um sólido marrom claro. O sólido é triturado em 20 ml de metanol, filtrado e então enxaguado com 3 ml de metanol para fornecer 2,85 g de um sólido branco.

[00284] O sólido é redissolvido em 25 ml de tetra-hidrofurano e é adicionado a uma solução de 0,421 g (10,04 mmol) de mono-hidrato de hidróxido de lítio em 10 ml de água. A mistura de reação é deixada sob agitação por 3 horas a 35° C e então diluída em água, acidificada com ácido clorídrico 1N e extraída com acetato de etila. A fase orgânica é coletada, seca em sulfato de sódio, filtrada e concentrada para fornecer 1,12 g de ácido 5-(N-3,5-difluorfenil)sulfamoil)nicotínico na forma de um sólido laranja (rendimento=67%). 1H RMN: δH ppm (400 MHz, DMSO): 8,91 (1H, s, CHarom), 8,51 (1H, s, CHarom), 7,02 (1H, dd, CH arom), 6, 83 (2H, d, CH arom). Exemplo 10b: 2-cloro-5-(N-(3,5-difluorfenil)sulfamoil)nicotinamida

[00285] 0,288 ml (3,87 mmol) de cloreto de tionila e uma gota de DMF são adicionados sucessivamente a 0,450 g (1,29 mmol) de ácido 2-cloro-5-(N-(3,5-difluorfenil)sulfamoil)nicotínico em 5 ml de tolueno anidro. A mistura é posta sob agitação, em refluxo de tolueno, por 2 horas. A mistura de reação de cloreto ácido é então adicionada em gotas a uma solução gelada, sob agitação, de 4,5 ml de hidróxido de amônio 25%. Uma liberação de gás é observada. O meio de reação é deixado sob agitação em temperatura ambiente por 30 minutos. O meio de reação é extraído várias vezes com acetato de etila. As fases orgânicas combinadas são secas em sulfato de sódio anidro e então concentradas. 0,315 g de 2-cloro-5-(N-(3,5-difluorfenil) sulfa- moil)nicotinamida na forma de um sólido marrom claro é obtido (ren- dimento=72%). 1H RMN: δH ppm (400 MHz, DMSO): 11,18 (1H, s amplo, NH), 8,86 (1H, s, CHarom), 8,22 (1H, s, CH arom), 8, 21 (1H, s amplo, NH), 7,98 (1H, s amplo, NH), 6,96 (1H, dd, CH arom), 6, 79 (2H, d, CH arom). Exemplo 10c: 6-cloro-5-ciano-N- (3,5-difluorfenil) piridina-3- sulfonamida

[00286] 3,4 ml (36,2 mmol) de cloreto de fosforila e uma gota de ácido sulfúrico concentrado são adicionados a 0,315 g (0,906 mmol) de 2-cloro-5-(N-(3,5-difluorfenil)sulfamoil)nicotinamida. A mistura de reação é agitada por 2 horas a 90° C e então adicionada em gotas a gelo. O sólido marrom é filtrado, enxaguado com água e então seco sob vácuo. 0,217 g de 6-cloro-5-ciano-N-(3,5-difluorfenil)piridina-3- sulfonamida é obtido na forma de um sólido marrom claro (rendimento=72%). 1H RMN: δH ppm (400 MHz, DMSO): 11,34 (1H, s amplo, NH), 9,04 (1H, s, CHarom), 8,92 (1H, s, CH arom), 7,03 (1H, dd, CH arom), 6, 85 (2H, d, CHarom). Exemplo 10: 3-amino-N-(3,5-difluorfenil)-1H-pirazol[3,4-b]piridina- 5-sulfonamida

[00287] 0,377 ml (2,63 mmol) de hidrazina 35% é adicionado a 0,217 g (0,658 mmol) de 6-cloro-5-ciano-N-(3,5-difluorfenil)piridina-3- sulofonamida diluída em 6 ml de isopropanol. A solução é aquecida a 75° C por 2 horas. O solvente é evaporado para fornecer 0,214 g de 3- amino-N- (3,5-difluorfenil)-1H-pirazol [3,4-b] piridina -5- sulfonamida na forma de um sólido amarelo (rendimento=100%). 1H RMN: δH ppm (400 MHz, DMSO): 8,74 (1H, d, CHarom), 8,68 (1H, d, CHarom), 6,88 (1H, dd, CH arom), 6, 80 (2H, d, CH arom), 6, 04 (2H, s amplo, NH). Exemplos de método B5 Exemplo 11: 5- (3,5-difluorbenzilóxi) -1H-pirazol [3,4-b] piridin-3- amina

[00288] Este composto pode ser preparado a partir dos intermediários que seguem, de acordo com o método B5. Exemplo 11a: 5-hidroxinicotinonitrila

[00289] Uma mistura de 5-metoxinicotinonitrila (7,46 mmol) e 8,62 g de cloridrato de piridina é aquecida a 200° C por 2 horas. O produto de reação bruto é diluído em uma fração de água várias vezes com éter de dietila. A fase aquosa é basificada através da adição de bicarbonato de sódio e então extraída novamente com éter de dietila. A fase orgânica é seca e então concentrada para fornecer 850 mg de 5- hidroxinicotinonitrila (95%) na forma de um sólido bege. LCMS: m/z 120,94 (M+H+). 1H RMN: δH ppm (400 MHz, DMSO): 10,79 (s, 1H), 8,46 (s, 1H, CHa- rom.), 8,42 (s, 1H, CHarom.), 7,60 (s, 1H, CHarom.). Exemplo 11b: 5-(3,5-difluorbenzilóxi)nicotinonitrila

[00290] 876 mg (2 eq.) de hidreto de sódio são adicionados gradu almente a 0o C sob nitrogênio a uma solução de 865 mg de 5- hidroxinicotinonitrila (7,2 mmol) em 15 mL de dimetilacetamida. A mistura é agitada 10 min a 0o C antes da adição de 224 g (1,5 eq.) de brometo de 3,5-difluorbenzila. A mistura é posta sob agitação por mais 2,5 horas antes de ser diluída em uma fração de acetato de etila e sendo lavada com frações aquosas. As fases orgânicas são isoladas, secas e concentradas. O resíduo sólido obtido é recristalizado em metanol para fornecer 1,1 g (68% de 5-(3,5-difluorbenzilóxi)nicotinonitrila na forma de um pó bege). LCMS: m/z 247,11 (M+H+). 1H RMN: δH ppm (400 MHz, DMSO): 8,69 (s, 1H, CH), 8,65 (s, 1H, CH), 8,08 (s, 1H, CH), 7,26 (m, 3H, CH), 5,28 (d, 2H, CH2). Exemplo 11c: 1-óxido 3-ciano-5-(3,5-difluorbenzilóxi)piridina

[00291] 224 mg de m-CPBA são adicionados a 0o C a uma solução em acetonitrila de 250 mg de 5-(3,5-difluorbenzilóxi)nicotinonitrila. O meio de reação é agitado por 20 horas enquanto um precipitado é formado progressivamente. Este sólido é então filtrado e lavado para fornecer 200 mg (75%) de 1-óxido 3-ciano-5-(3,5-difluorbenzilóxi)piridina na forma de um pó branco. LCMS: m/z 263,06 (M+H+) Exemplo 11d: 2-cloro-5-(3,5-difluorbenzilóxi)nicotinonitrila

[00292] Uma mistura de 650 mg de 1-óxido 3-ciano-5-(3,5- difluorbenzilóxi) piridina em 2,3 mL de POCl3 adicionado em algumas gotas de H2SO4 é aquecida a 110° C por 1 hora e meia. O meio de reação bruto é então despejado em gelo e o precipitado então formado é isolado através de filtragem e seco sob vácuo para fornecer 600 mg de um sólido bege na forma de uma mistura de regioisômeros compreendendo principalmente a 2-cloro-5-(3,5-difluorbenzilóxi)nicotinonitrila desejada que é usada sem purificação adicional. LCMS: m/z 281,02 (M+H+). Exemplo 11: 5- (3,5-difluorbenzilóxi) -1H-pirazol [3,4-b] piridin-3- amina

[00293] 313 mg de hidrato de hidrazina (5 eq.) são adicionados a uma solução de 1,6 g de 2-cloro-5-(3,5-difluorbenzilóxi)nicotinonitrila (450 μmol) em 10 mL de propan-2-ol. A mistura de reação é aquecida a 100° C por 6 horas. Após retornar para a temperatura ambiente levando a uma precipitação, o meio de reação bruto é filtrado, o sólido é removido e o filtrado é evaporado seco. Ele é então purificado através de cromatografia em uma coluna de sílica eluída com um gradiente de acetato de etila e metanol, enquanto a fração mais polar é isolada, concentrada e suspensa novamente em uma fração pequena de metanol sob agitação. O sólido então obtido é isolado e seco para fornecer 221 mg de 5-(3,5-difluorbenzilóxi)-1H-pirazol[3,4-b]piridin-3-amina na forma de um sólido bege que é usado sem purificação adicional. LCMS: m/z 277,07 (M+H+). Exemplo de método B6 Exemplo 11bis: N- (3-amino-1H-pirazol [3,4-b] piridin-5-il) -3,5- difluorbenzeno-sulfonamida

Exemplo 11bis-a: N-(6-cloro-5-cianopiridin-3-il)-3,5-difluorbenzeno - sulfonamida

[00294] 1,132 g (5,32 mmol) de cloreto de 3,5-difluorbenzeno-1- sulfonila é adicionado sob argônio a uma solução de 545 mg (3,55 mmol) de 5-amino-2-cloronicotinonitrila em 20 mL de uma mistura anidra 1:1 de THF e piridina. O meio de reação é aquecido para 70° C por 3 horas e então deixado mais 12 horas sob agitação em temperatura ambiente. O solvente é evaporado seco e o produto de reação bruto é redissolvido em acetato de etila e lavado com várias frações aquosas. A fase orgânica é seca em sulfato de magnésio, filtrada, concentrada e então purificada através de cromatografia de sílica-gel para fornecer 784 mg (67%) de N-(6-cloro-5-cianopiridin-3-il)-3,5-difluorbenzeno- sulfonamida. 1H RMN: δH ppm (400 MHz, DMSO): 11,39 (1H, sl, NH), 8,34 (1H, m, CHarom), 8,10 (1H, m, CHarom), 7,67 (1H, m, CHarom), 7,59 (2H, m, CHarom). Exemplo 11bis: N- (3-amino-1H-pirazol [3,4-b] piridin-5-il) -3,5- difluorbenzeno-sulfonamida

[00295] 1,786 g (35,7 mmol) de hidrato de hidrazina é adicionado sob argônio a uma solução de 784 mg (2,38 mmol) de N-(6-cloro-5- cianopiridin-3-il)-3,5-difluorbenzeno-sulfonamida em 6 mL de etanol. A solução é aquecida para 100° C por 20 horas e então esfriada para temperatura ambiente. O solvente é evaporado para fornecer 810 mg de N- (3-amino-1H-pirazol[3,4-b]piridina-5-il)-3,5-difluorbenzeno-sulfonamida (100%) que é usada sem purificação adicional nas etapas que seguem. LCMS: m/z 326,07 (M+H+). Exemplo de método C1 Exemplo 12: N6-(2,4-difluorfenil)-1H-pirazol[3,4-b]piridina-3,6- diamina

[00296] Este composto pode ser preparado a partir dos intermediários que seguem, de acordo com o método C1. Exemplo 12-a: 5-ciano-6-(metiltio)piridin-2-il trifluormetanossulfo- nato

[00297] 15,26 mL (1,2 eq.) de 2-metilpropan-2-olato de potássio e então 9,03 g (1,2 eq.) de 1,1,1-triflúor-N-fenil-N-(trifluormetilsulfonil) metanossulfonamida são adicionados em gotas a uma solução de 3,5 g (21,06 mmol) de 6-hidróxi-2-(metiltio)nicotinonitrila em 180 mL de tetra-hidrofurano sob nitrogênio. A mistura de reação é agitada em temperatura ambiente por 2 horas e 45 minutos. Água é adicionada e o produto é extraído com acetato de etila. A fase orgânica é seca em sulfato de magnésio anidro, filtrada e evaporada para fornecer um sólido laranja. O produto é purificado em uma coluna de sílica-gel (eluen- te: ciclo-hexano/diclorometano 5:5) para fornecer 5,31 g (85%) de tri- fluormetanossulfonato de 5-ciano-6-(metiltio)piridin-3-ila na forma de um sólido amarelo. 1H RMN: δH ppm (400 MHz, DMSO): 8,57 (1H, d, CH), 7,52 (1H, d, CH), 2,59 (3H, s, CH3). Exemplo 12-b: 6-(2,4-difluorfenilamino)-2-(metiltio)nicotinonitrila

[00298] 0,81 mL (1,2 eq.) de ,4-difluoranilina e 1,53 g (1,4 eq.) de carbonato de césio(I) são adicionados sob nitrogênio a uma solução de 2 g (6,71 mmol) de trifluormetanossulfonato de 5-ciano-6- (metiltio)piridin-2-ila em 30 mL de 2,4-dioxana. O meio é desgaseifica- do por 5 minutos sob argônio antes da adição de 0,25 g (0,06 eq.) de 2,2’-bis(difenilfosfino)-1,1’-binaftila e 0,08 g (0,04 eq.) de (1E,4E)-1,5- difenilpenta-1,4-dien-3-ona, complexo com paládio(II). O meio de reação é agitado a 100° C por 2 horas. Após retornar para a temperatura ambiente, acetato de etila e salmoura são adicionados. A fase orgânica é seca em sulfato de magnésio anidro, filtrada e evaporada. O resíduo obtido é purificado em cromatografia de sílica-gel (eluente: ciclo- hexano/acetato de etila 8:2 então 7:3) para fornecer 1,52 g (82%) de 6- (2,4-difluorfenilamino)-2-(metiltio)nicotinonitirila na forma de um sólido branco. LCMS (IE, m/z): (M+1) 278,06 1H RMN: δH ppm (400 MHz, DMSO): 9,57 (1H, s, NH), 7,73-7,86 (2H, m, CH), 7,28-7,44 (1H, m, CH), 7,02-7,18 (1H, m, CH), 6,60 (1H, d, CH), 2,41 (3H, s, CH3). Exemplo 12: N6- (2,4-difluorfenil) -1H-pirazol [3,4-b] piridina-3,6- diamina

[00299] 769 mg (3,12 mmol) de ácido m-cloroperbenzoico (mCPBA) são adicionados sob argônio a uma solução em agitação de 786 mg (2,83 mmol) de 6-(2,4-difluorfenilamino)-2-(metiltio)nicotinonitrila em 25 mL de diclorometano. O meio de reação é agitado 1 hora em temperatura ambiente antes da adição de uma fração de acetato de etila e lavada esta fase orgânica com solução saturada de NaHCO3. As fases orgânicas combinadas são secas em sulfato de magnésio e evaporadas a seco. O produto de reação bruto é dissolvido novamente em 10 mL de propanol e 2 equivalentes de cloridrato de hidrazina em água são adicionados. A mistura é aquecida a 90° C por 6 horas antes de ser diluída em água e extraída com acetato de etila. A fase orgânica é seca em sulfato de magnésio e evaporada a seco antes de ser purificada através de cromatografia em sílica-gel para fornecer 495 mg de N6-(2,4-difluorfenil)-1H-pirazol[3,4-b]piridina-3,6-diamina na forma de um sólido amarelo-laranja (67%). LCMS (IE, m/z): (M+1) 262,14 1H RMN: δH ppm (400 MHz, DMSO): 11,40 (1H, s, NH), 8,76 (1H, s, NH), 8,15 (1H, m, CH), 7,81 (1H, d, CH), 7,28 (1H, m, CH), 7,06 (1H, m, CH), 6,55 (1H, d, CH), 5,24 (2H, s, NH2).

[00300] O composto que segue é obtido através de um método similar:

** 1H RMN, dmso-d6, Ex.: 12-1: 11,17 (1H, s, NH), 7,66 (1H, d, CH), 7,37 (1H, s, NH), 7,04 (3H, m, CH), 6,24 (1H, d, CH), 5,11 (2H, s, NH2), 4,52 (2H, s, CH2). Exemplo 12bis: N6-(2,4-difluorfenil)-N6-metil-1H-pirazol[3,4-b] pi- ridina-3,6-diamina

Exemplo 12bis-a: 6-((3,5-difluorfenil) (metil) amino) -2- (metiltio) nicotinonitrila

[00301] 3,05 mL (5,04 mmol) de 2-metilpropan-2-olato de potássio e então 286 μL (1,8 eq.) de iodometano são adicionados em gotas sob nitrogênio a uma solução de 700 mg (2,52 mmol) de 6-(2,4- difluorfenilamino)-2-(metiltio)nicotinonitrila em 20 mL de N,N- dimetilformamida. O meio de reação é agitado em temperatura ambiente por 24 horas e então 126 μL (0,8 eq., 2,02 mmol) de iodometano são adicionados. O meio de reação é agitado em temperatura ambiente por mais 2 horas. Água é adicionada e o produto é extraído com acetato de etila. A fase orgânica é seca em sulfato de magnésio anidro, filtrada e evaporada para fornecer 660 mg (90%) de 6-((2,4- difluorfenil)(metil)amino)-2-(metiltio)nicotinonitrila na forma de um sólido marrom. LCMS (IE, m/z): (M+1) 292,09 1H RMN: δH ppm (400 MHz, DMSO): 7,74-7,80 (1H, m, CH), 7,55-7,63 (1H, m, CH), 7,43-7,52 (1H, m, CH), 7,18-7,27 (1H, m, CH), 6,16-6,30 (1H, m, CH), 3,43 (3H, s, CH3), 2,42 (3H, s, CH3). Exemplo 12bis: N6- (2,4-difluorfenil) -N6- metil -1H- pirazol [3,4-b] piridina-3,6-diamina

[00302] 452 mg (1,84 mmol) de mCPBA são adicionados sob argô- nio a uma solução em agitação de 486 mg (1,67 mmol) de 6-((2,4- difluorfenil(metil)amino)-2-(metiltio)nicotinonitrila em 15 mL de dicloro- metano. O meio de reação é agitado 30 minutos em temperatura ambiente antes da adição de uma fração de acetato de etila. A fase orgânica é lavada com uma solução saturada de NaHCO3, seca em sulfato de magnésio e evaporada a seco. O produto de reação bruto é dissolvido novamente em 6 mL de propanol e 164 μL (3,38 mmol) de clori- drato de hidrazina em água são adicionados. A mistura é aquecida a 90° C por 6 horas antes de ser diluída em água e extraída com acetato de etila. A fase orgânica é seca em sulfato de magnésio e evaporada a seco antes de ser purificada através de cromatografia de sílica-gel para fornecer 328 mg de N6-(2,4-difluorfenil)-N6-metil-1H-pirazol[3,4- b]pridino-3,6-diamina na forma de um sólido amarelo-laranja (70%). LCMS (IE, m/z): (M+1) 276,15 1H RMN: δH ppm (400 MHz, DMSO): 11,41 (1H, s, NH), 7,75 (1H, d, CH), 7,51-7,55 (1H, m, CH), 7,40-7,43 (1H, m, CH), 7,17-7,22 (1H, m, CH), 6,03 (1H, d, CH), 5,23 (2H, s, NH2), 3,28 (3H, s, CH3). Exemplo de método C3 Exemplo 12ter: 6-(2,4-difluorfeniltio)-1H-pirazol[3,4-b]piridin-3-amina

Exemplo 12ter-a: 2-cloro-6-(2,4-difluorfeniltio)nicotinonitrila

[00303] Uma solução de 362 mg (1,05 eq.) de hidróxido de potássio em 10 mL de etanol é adicionada, sob nitrogênio, a uma solução de 698 μL (6,16 mmol) de 2,4-difluorbenzenotiol em 30 mL de etanol. O meio de reação é agitado em temperatura ambiente por 15 minutos e então esfriado em gelo antes da adição de uma solução de 1,015 g (0,95 eq.) de 2,6-dicloronicotinonitrila em 30 mL de etanol. O meio de reação é agitado por 2 horas a 0-5° C. 63 mL de solução de HCl 0,1N são adicionados para parar a reação. Água é adicionada e o produto é extraído com acetato de etila. A fase orgânica é seca em sulfato de magnésio anidro, filtrada e evaporada. O resíduo é purificado através de cromatografia de sílica-gel (eluente:ciclo-hexano/acetato de etila 94:6) para fornecer 1,09 g (66%) de 2-cloro-6-(2,4-difluorfeniltio)- nicotinonitrila na forma de um sólido branco. LCMS (IE, m/z): (M+1) 282,98. 1H RMN: δH ppm (400 MHz, DMSO): 8,24 (1H, d, CH), 7,77-7,85 (1H, m, CH), 7,52-7,63 (1H, m, CH), 7,25-7,35 (2H, m, CH), 2,41 (3H, s, CH3). Exemplo 12ter: 6-(2,4-difluorfeniltio)-1H-pirazol[3,4-b]piridin-3-amina

[00304] 0,561 mL (11,57 mmol) de mono-hidrato de hidrazina é adi cionado sob nitrogênio a uma solução em agitação de 1,09 g (3,86 mmol) de 2-cloro-6-(2,4-difluorfeniltio)nicotinonitrila em 15 mL de propanol. O meio de reação é aquecido a 80° C por 4 horas. Um precipitado é obtido quando o meio de reação é retornado para a temperatura ambiente. Este precipitado é filtrado e enxaguado com etanol. O sólido é dissolvido em uma fração de acetato de etila e lavado com uma solução de HCl 1N. A fase orgânica é seca em sulfato de magnésio e evaporada a seco para fornecer 420 mg (39%) de 6-(2,4- difluorfeniltio)-1H-pirazol[3,4-b]piridina-3-amina na forma de um sólido amarelo. 1H RMN: δH ppm (400 MHz, DMSO): 12,10 (1H, s, NH), 8,11 (1H, d, CH), 7,82-7,89 (1H, m, CH), 7,58-7,63 (1H, m, CH), 7,32-7,36 (1H, m, CH), 6,86 (1H, d, CH), 4,59 (2H, s, NH2).

[00305] O composto que segue é obtido através de um método similar:

Exemplo 12quater: 6- (3,5-difluorbenzil) -1H-pirazol[3,4-b]piridin-3- amina

[00306] 17,35 mL de uma solução 0,5 M em THF de cloreto de (3,5- difluorbenzil)zinco (8,58 mmol) são adicionados sob argônio a uma solução de 416 mg de cloreto de paládio(II) (510 mmol) e 883 mg de 2,6- dicloronicotinonitrila (5,1 mmol) em 2 mL de THF anidro. A reação é re- fluxada por 7 horas, então esfriada para a temperatura ambiente. Uma solução aquosa de soda 1N é adicionada e o produto é extraído com várias frações de acetato de etila sucessivas. As fases orgânicas são secas em sulfato de magnésio e evaporadas a seco antes de ser purificadas através de cromatografia de sílica-gel para fornecer 680 mg de uma mistura de 2-cloro-6-(3,5-difluorbenzil)-nicotinonitrila e subprodutos que são usados sem purificação adicional na etapa que segue.

[00307] A mistura anterior é dissolvida em 10 mL de isopropanol sob agitação e 750 μL de hidrato de hidrazina 35% são adicionados. A solução é aquecida a 80° C por 4 horas. O solvente é evaporado a seco e o produto é purificado através de cromatografia de sílica-gel (di- clorometano/metanol 9:1) para fornecer 290 mg de 6-(3,5-difluorbenzil) -1H-pirazol[3,4-b]piridina-3-amina (64%). LCMS (IE, m/z): (M+1) 261,16 1H RMN: δH ppm (400 MHz, DMSO): 11,82 (1H, s, NH), 8,01 (1H, d, CH), 6,99-7,04 (3H, m, CH), 6,91 (1H, d, CH), 5,49 (2H, s, NH2), 4,12 (2H, s, CH2). Exemplo de método D1: Exemplo 13: 5-(3,5-difluorbenzil)-1H-pirazol[3,4-b]piridina-3-amina

[00308] 0,575 g (0,704 mmol) de (dppfkPdCk-CteCk e 28 ml (14,08 mmol) de cloreto de 3,5-difluorbenzil zinco (II) são adicionados a 1,5 g (7,04 mmol) de uma solução de 5-bromo-1H-pirazol[3,4- b]piridin-3-amina em 10 ml de tetra-hidrofurano. O meio de reação é aquecido a 90° C por 18 horas. Após retornar para a temperatura ambiente, a reação é hidrolisada adicionando lentamente água a 0o C. Após filtragem do precipitado formado, o sólido é enxaguado com te- tra-hidrofurano e o filtrado aquoso é extraído várias vezes com acetato de etila. As fases orgânicas são combinadas, secas em sulfato de magnésio e concentradas. O resíduo é purificado através de cromato- grafia de sílica (95:4,5:0,5 e então 95:4:1 de diclorometano/ meta- nol/amônio como eluente) para fornecer 1,7 g (93%) de 5-(3,5- difluorbenzil)-1H-pirazol[3,4-b]piridina-3-amina na forma de um sólido bege. LCMS (EI, m/z): (M+1) 261,41 1H RMN: δH ppm (400 MHz, DMSO): 11,87 (1H, s, NH), 8,31 (1H, d, CHarom), 7,92 (1H, d, CH arom), 6, 98-7,08 (3H, m, CH arom), 5,47 (2H, s, NH), 4,04 (2H, s, CH2).

[00309] Os compostos que seguem são obtidos através de um método similar:

** 1H RMN: δH ppm (400 M Hz, DMSO): 13-1: 11,61 (1H, sl, NH), 7,65 (1H, d, CHarom, J=11,6Hz), 7,20 (1H, d, CHarom, J=11,2Hz), 6,95- 7,10 (3H, m, CHarom), 5,32 (2H, sl, NH2), 4,18 (2H, s, CH2). 13-2: 12,31 (1H, sl, NH), 8,44 (1H, s, CHarom), 7,03-7,08 (3H, m, CHarom), 5,61 (2H, sl, NH2), 4,25 (2H, s, CH2). Exemplos de método D2 Exemplo 14: 5-(3,5-difluorfeniltio)-1H-pirazol[3,4-b]pirazin-3-amina

[00310] 0,7 g (2,68 mmol) de 5-iodo-1H-pirazol[3,4-b]piridina-3- amina, 0,74 g (5,36 mmol) de carbonato de potássio anidro e 0,10 g de iodeto de cobre (0,536 mmol) são misturados em um frasco de fundo redondo de 50 ml. 15 ml de propan-2-ol, 0,01 g (0,2 mmol) de polietile- no glicol e 0,43 g (2,95 mmol) de 3,5-difluortiofenol são então adicionados. A mistura de reação é aquecida a 80° C por 2 horas. O solvente é evaporado e o sólido formado é filtrado, enxaguado com água e então com pentano e seco em um forno a 50° C para fornecer 0,75 g (100%) de 5-(3,5-difluorfeniltio)-1H-pirzol[3,4-b]pirazin-3-amina na forma de um sólido marrom. LCMS (EI, m/z): (M+1) 280,03 1H RMN: δH ppm (400 MHz, DMSO): 12,65 (1H, s amplo, NH), 8,52 (1H, s, CHarom), 7,18 (1H, t, CH arom), 7, 05-7,18 (2H, m, CH arom), 5,89 (2H, s, NH).

[00311] Os derivados que seguem foram obtidos de acordo com o mesmo método:

** 1H RMN, DMSO-d6, Ex.: 14-3: 12,65 (1H, s amplo, NH), 8,52 (1H, s, CHarom), 7,18 (1H, t, CH arom), 7, 05-7,18 (2H, m, CH arom), 5, 89 (2H, s, NH). 14-6: 8,21 (2H, s amplo, CH arom), 7,07 (1H, m, CH arom), 6, 90 (2H, m, CHarom), 6,27 (2H, s amplo, NH), 4,03 (2H, s, CH), 1,63 (9H, s, CH). 14-7: 12,16 (1H, s amplo, NH), 8,39 (1H, s, CHarom), 7,00-7,08 (1H, m, CHarom), 6,64-6,72 (2H, m, CH arom), 5, 73 (2H, s amplo, NH2), 2,54 (3H, s, CH3). 14-9: 8,51 (1H, s amplo, CHarom), 8,35 (1H, s amplo, CHarom), 7,02 (1H, m, CH arom), 6, 72 (2H, s amplo, CH arom), 6, 52 (2H, s amplo, NH), 1,67 (9H, s, CH). (ND: não determinado). Exemplo 14bis: N-(5-(3,5-difluorfenilamino)-1H-pirazol[3,4-b] piri- din-3-il)-4-(4-metilpiperazin-1-il)-2-(tetra-hidro-2H-piran-4- ilamino)benzamida

[00312] Uma solução de 225 mg de N-(5-iodo-1-tritil-1H-pirazol[3,4- b]piridin-3-il)-4-(4-metilpiperazin-1-il)-2-(tetra-hidro-2H-piran-4-ilamino) benzamida (0,25 mmol), 36 mg de difluoranilina (0,275 mmol), 19 mg de R-(+)-2,2’-bis(difenilfosfino)-1,1’-binaftila (0,030 mmol), 11 mg (0,013 mmol) de tris(dibenzilidenoacetona) dipaládio(0) e 75 mg (0,75 mmol) de terc-butóxido de sódio em 10 mL de THF é refluxada sob argônio de um dia para o outro. O meio de reação bruto é esfriado, extraído com acetato de etila e lavado com água. A fase orgânica é seca em sulfato de magnésio e purificada através de cromatografia de sílica-gel para fornecer N-(5-(3,5-difluorfenilamino)-1-tritil-1H-pirazol[3,4- b]piridin-3-il)-4-(4-metilpiperazin-1-il)-2-(tetra-hidro-2H-piran-4-ilamino) benzamida que é usada na etapa seguinte sem purificação adicional.

[00313] O produto então obtido é dissolvido em 10 mL de dicloro- metano a 0o C e 56 mg (0,5 mmol) de TFA são adicionados. O meio de reação é agitado por 4 horas. Água é adicionada e o pH do meio do e reação é ajustado para 7 com uma solução de NaHCO3. A fase aquosa é coletada, basificada (pH 9-10) com uma solução de K2CO3 concentrada e extraída com diclorometano. A fase orgânica é coletada, seca em sulfato de magnésio e concentrada a seco para fornecer 40 mg de N-(5-(3,5-difluorfenilamino)-1H-pirazol[3,4-b]piridina-3-il)-4-(4- metilpiperazin-1-il)-2-(tetra-hidro-2H-piran-4-ilamino)benzamida. LCMS (IE, m/z): (M+1) 562,12 1H RMN: δH ppm (400 MHz, DMSO): 13,45 (1H, sl, NH), 10,47 (1H, sl, NH), 8,65 (1H, s, CH arom), 8,55 (1H, s, CH arom), 8, 14 (1H, d, NH), 7,77 (1H, d, CHarom), 7,26 (2H, m, CH arom), 7,05 (1H, m, CH arom), 6,25 (1H, d, CHarom), 6,14 (1H, s, NH), 6,77 (1H, s, NH), 3,82-3,84 (2H, dt, CH), 3,72 (1H, m, CH), 3,47-3,52 (2H, m, CH), 3,28-3,34 (4H, m, CH), 2,43 (4H, m, CH), 2,23 (3H, s, CH3), 1,94 -1,97 (2H, m, CH), 1,37-1,39 (2H, m, CH). Exemplos de método D3: Exemplo 15: N-(5-((3,5-difluorfenil)etinil)-1H-pirazol[3,4-b]piridin-3- il)-4-(4-metilpiperazin-1-il)-2-(tetra-hidro-2H-piran-4- ilamino)benzamida

[00314] 0,94 mg (0,926 mmol) de trietilamina é adicionado a 400 mg (0,712 mmol) de N- (5-iodo- 1H- pirazol [3,4-b] piridina-3-il) -4- (4- metilpiperazin-1-il) -2-(tetra-hidro-2H-piran-4-ilamino)benzamida, 67,8 mg (0,356 mmol) de CuI e 50 mg (0,071 mmol) de Pd(PPh3)2Cl2 sob argônio em 12 ml de dioxana anidra sob agitação. A reação é aquecida por 3,5 horas a 100° C. A mistura de reação é diluída com 30 ml de água e extraída com acetato de etila. A fase orgânica é seca em sulfato de sódio, filtrada e concentrada. O resíduo obtido é purificado através de cromatografia de sílica-gel (diclorometano/metanol) para fornecer 152 mg de N-(5-((3,5-difluorfenil)etinila)-1H-pirazol[3,4-b]piridin-3- il)-4-(4-metilpiperazin-1-il)-2-(tetra-hidro-2H-piran-4-ilamino)benzamida na forma de um sólido amarelo (rendimento=37%). LCMS (EI, m/z): (M+1) 572,17 1H RMN: δH ppm (400 MHz, DMSO): 13,57 (1H, s amplo, NH), 10,56 (1H, s amplo, NH), 8,68 (1H, s, CH arom), 8,43 (1H, s, CH arom), 8,13 (1H, d, NH), 7,80 (1H, d, CH arom), 7, 38 (2H, m, CH arom), 6,27 (1H, d, CH arom), 6,15 (1H, d, CHarom), 3,84-3,82 (2H, dt, CH), 3,70 (1H, m, CH), 3,453,50 (2H, m, CH), 3,21-3,33 (4H, m, CH), 2,42-2,46 (4H, m, CH), 2,28 (3H, s, CH3), 1,94-1,97 (2H, m, CH), 1,37-1,39 (2H, m, CH).

[00315] O derivado que segue foi obtido de acordo com o mesmo método:

** 1H RMN, dmso-d6, Ex.: 15-1: 12,71 (1H, sl, NH), 8,66 (1H, s, CHa- rom), 7,40-7,47 (3H, m, CHarom), 6,01 (2H, sl, NH2). Exemplos de método E

[00316] Os protocolos compreendendo o método E têm como objetivo funcionalização da amina exocíclica dos anéis aminopirazóis através da sua reação com um intermediário caracterizando uma função eletrofílica, opcionalmente gerado in situ, tal como cloreto ácido, isoci- anato, isotiocianato ou aldeído. Preparação dos intermediários de reação Exemplo 16: ácido 2-(N-(4,4-difluorciclo-hexil)-2,2,2-trifluoracetamido) -4-(4-metilpiperazin-1-il)benzoico

Exemplo 16a: 4-(4-metilpiperazin-1-il)-2-nitrobenzoato de terc-butila

[00317] Este composto foi anteriormente descrito no WO 2008/74749.

[00318] 5,28 ml (47,6 mmol) de 1-metilpiperazina são adicionados a 4,1 g (17 mmol) de 4-flúor-2-nitrobenzoato de terc-butila. A mistura de reação é agitada sem solvente por 5 horas. 150 ml de água são adicionados à mistura de reação e são agitados por 24 horas. O precipitado formado é filtrado, enxaguado com água e seco sob vácuo para fornecer 4,9 g (90%) de 4-(4-metilpiperazin-1-il)-2-nitrobenzoato de terc- butila na forma de um sólido amarelo. LCMS (EI, m/z): (M+1) 322,37 1H RMN: δH ppm (400 MHz, DMSO): 7,69 (1H, d, CHarom), 7,30 (1H, d, CHarom), 7,20 (1H, dd, CH arom), 3, 38 (4H, m, CH), 2,40 (4H, m, CH), 2,22 (3H, s, CH3), 1,45 (9H, s, CH3). Exemplo 16b: 2-amino-4-(4-metilpiperazin-1-il)benzoato de terc- butila

[00319] Este composto foi anteriormente descrito no WO 2008/74749.

[00320] 0,160 g (1,500 mmol) de paládio sobre carbono (10%) e 15,19 ml (150 mmol) de ciclo-hexeno são adicionados a uma solução de 4,82 g (15 mmol) de 4-(4-metilpiperazin-1-il)-2-nitrobenzoato de terc-butila em 100 ml de etanol. A mistura de reação é aquecida em uma temperatura de 80° C por 8 horas. A mistura de reação é filtrada e então enxaguada com etanol para fornecer 4,2 g (rendimento=96%) de 2-amino-4-(4-metilpiperazin-1-il)benzoato de terc-butila na forma de um sólido amarelo. LCMS (EI, m/z): (M+1) 292,39 1H RMN: δH ppm (400 MHz, DMSO): 7,44 (1H, d, CHarom), 6,40 (2H, s amplo, NH2), 6,19 (1H, dd, CH arom), 6,12 (1H, d, CH arom), 3, 17 (4H, m, CH), 2,40 (4H, m, CH), 2,22 (3H, s, CH3), 1,49 (9H, s, CH3). Exemplo 16c: 2-(4,4-difluorciclo-hexilamino)-4-(4-metilpiperazin-1- il) benzoato de terc-butila

[00321] 1,045 ml (13,57 mmol) de ácido trifluoracético, 1 g (7,46 mmol) de 4,4-difluorciclo-hexanona e 2,158 g (8,20 mmol) de triaceto- xiboroidreto de tetrametilamônio são adicionados a 1,521 g (5,22 mmol) de 2-amino-4-(4-metilpiperazin-1-il)benzoato de terc-butila dissolvido em 60 ml de diclorometano. A reação é deixada sob agitação em temperatura ambiente por 24 horas. O solvente é evaporado e então o produto de reação bruto é redissolvido em 30 ml de acetato de etila. A solução é sucessivamente lavada com solução de HCl 0,5 M, solução de soda 0,5 M e finalmente com solução de NaHCO3 saturada. A fase orgânica é seca em sulfato de sódio, filtrada e concentrada para obter 2,2 g de 2-(4,4-difluorciclo-hexilamino)-4-(4-metilpiperazin- 1-il)benzoato de terc-butila na forma de uma goma marrom claro (ren- dimento=72%). LCMS (EI, m/z): (M+1) 410,3 1H RMN: δH ppm (400 MHz, DMSO): 7,73 (1H, s amplo, NH), 7,58 (1H, m, CHarom), 7,77 (1H, m, CH arom), 6, 09 (1H, s amplo, CH arom), 3,37 (4H, m, CH), 3,27 (4H, m, CH), 2,47 (4H, m, CH), 2,25 (3H, s, CH), 1,99 (4H, s, CH), 1,40 (9H, s, CH). Exemplo 16d: 2-(N-(4,4-difluorciclo-hexil)-2,2,2-trifluoracetamido)- 4- (4-metilpiperazin-1-il)benzoato de terc-butila

[00322] 0,99 ml (6,98 mmol) de anidrido trifluoracético e 1,12 ml (8,06 mmol) de trietilamina são adicionados a 2,2 g (5,3 mmol) de 2- (4,4-difluorciclo-hexilamino)-4-(4-metilpiperazin-1-il)benzoato de terc- butila dissolvidos em 40 ml de diclorometano. A reação é deixada sob agitação em temperatura ambiente por 3 horas. O solvente é evaporado e então o produto de reação bruto é absorvido em 30 ml de acetato de etila. A solução é lavada com solução de NaHCO3 saturada. A fase orgânica é seca em sulfato de sódio, filtrada e concentrada para obter 2,5 g de 2-(N-(4,4-difluorciclo-hexil)-2,2,2-trifluoracetamido)-4-(4-metilpiperazin- 1-il)benzoato de terc-butila na forma de uma goma marrom claro (rendi- mento=92%). LCMS (EI, m/z): (M+1) 506,26 1H RMN: δH ppm (400 MHz, DMSO): 7,84 (1H, m, CHarom), 7,09(1H, m, CHarom), 6,89 (1H, s amplo, CH arom), 3,45-3,39 (8H, m, CH), 2,83 (4H, m, CH), 2,20 (4H, m, CH), 2,05 (3H, s, CH), 1,46 (9H, s, CH). Exemplo 16: ácido 2-(N-(4,4-difluorciclo-hexil)-2,2,2- trifluoracetamido)-4-(4-metilpiperazin-1-ol)benzoico

[00323] 7,62 ml (99 mmol) de ácido trifluoracético são adicionados a 2,5 g (4,95 mmol) de 2-(N-(4,4-difluorciclo-hexil)-2,2,2-trifluoracetamido)- 4-(4-metilpiperazin-1-il)benzoato de terc-butila dissolvidos em 30 ml de diclorometano. A reação é deixada sob agitação em temperatura ambiente de um dia para o outro. O solvente é evaporado e então o produto de reação bruto é redissolvido em 30 ml de acetato de etila. Os solventes são evaporados, o sólido formado é redissolvido em acetato de etila e o solvente é novamente evaporado. Esta operação é repetida três vezes até que um sólido marrom claro seja obtido. 2,2 g de ácido 2-(N-(4,4- difluorciclo-hexil)-2,2,2-trifluoracetamido)-4-(4-metilpiperazin-1-il)benzoico na forma de um sal trifluoracético são obtidos (rendimento=79%). LCMS (EI, m/z): (M+1) 450,1 1H RMN: δH ppm (400 MHz, DMSO): 10,01 (1H, s amplo, OH), 7,92 (1H, m, CHarom), 7,13 (1H, m, CH arom), 7, 01 (1H, s amplo, CH arom), 4,39 (1H, m, CH), 3,12-3,52 (8H, m, CH), 2,86 (3H, s, CH), 1,75-2,0 (8H, m, CH).

[00324] Os compostos que seguem são também obtidos através deste método: ácido 4-(4-metilpiperazin-1-il)-2-(2,2,2-triflúor-N-(tetra-hidro-2H- piran-4-il)acetamido)benzoico

[00325] Este composto foi anteriormente descrito nos WO 2008/74749, WO 2009/13126 e WO 2010/69966. LCMS (EI, m/z): (M+1) 416,40 1H RMN: δH ppm (400 MHz, DMSO): 12,60 (1H, s amplo, OH), 10,08 (1H, s amplo, OH), 7,90 (1H, d, CH arom), 7,13 (1H, dd, CH arom), 6,90 (1H, d, CHarom), 4,40 (1H, m, CH), 4,10 (2H, m, CH), 3,70-3,90 (2H, m, CH), 3,59-3,62 (4H, m, CH), 3,30-3,32 (4H, m, CH), 2,87 (3H, s, CH3), 1,87-1,98 (1H, m, CH), 1,59-1,60 (1H, m, CH), 1,00-1,54 (2H, m, CH). ácido 4-((3-(dimetilamino)propil)(metil)amino)-2-(2,2,2-triflúor-N- (tetra-hidro-2H-piran-4-il)acetamido)benzoico

[00326] Este composto foi anteriormente descrito nos WO 2009/13126 e WO 2008/74749. Exemplo 17: ácido (S)-2-(2,2,2-triflúor-N-(tetra-hidro-2H-piran-4- il)acetamido)-4-(3-(2,2,2-trifluoracetamido)pirrolidin-1-il)benzoico

Exemplo 17a: (S)-4-(3-( terc-butoxicarbonilamino)pirrolidin-1-il)-2- (tetra-hidro-2H-piran-4-ilamino)benzoato de terc-butila

[00327] Este composto foi obtido reproduzindo o Exemplo 16d usando (S)-pirrolidin-3-ilcarbamato de terc-butila. Exemplo 17b: ácido (S)-4-(3-aminopirrolidin-1-il)-2-(tetra-hidro-2H- piran-4-ilamino)benzoico

[00328] 19,7 ml (25 eq.) de ácido trifluoracético são adicionados a uma solução de 4,72 g (10,23 mmol) de (S)-4-(3-(terc- butoxicarbonilamino)pirrolidin-1-il)-2-(tetra-hidro-2H-piran-4-ilamino) benzoato de terc-butila em 100 ml de diclorometano. O meio de reação é agitado em temperatura ambiente por 30 horas. Os solventes são evaporados e o resíduo é redissolvido em éter de dietila e triturado até que um sólido seja obtido. O sólido formado é filtrado e seco sob vácuo para fornecer 4,3 g (100%) de um pó amarelo de ácido (S)-4-(3- aminopirrolidin-1-il)-2-(tetra-hidro-2H-piran-4-ilamino)benzoico na forma de um sal de ácido trifluoracético. LCMS (EI, m/z): (M+1) 306,22 Exemplo 17: ácido (S)-2-(2,2,2-triflúor-N-(tetra-hidro-2H-piran-4- il)acetamido)-4-(3-(2,2,2-trifluoracetamido)pirrolidin-1-il)benzoico

[00329] 1,74 ml (3,5 eq.) de trietilamina e 1,6 ml (2,1 eq.) de anidri- do trifluoracético são adicionados a uma solução de 1,5 g (3,58 mmol) de ácido (S)-4-(3-aminopirrolidin-1-il)-2-(tetra-hidro-2H-piran-4-ilamino) benzoico na forma de um sal de ácido trifluoracético em 40 ml de diclo- rometano a 0o C. O meio de reação é agitado em temperatura ambiente por 24 horas. Água (10 mL) é adicionada em gotas e então a fase orgânica é lavada com solução de cloreto de sódio saturada, seca em sulfato de magnésio, filtrada e evaporada. O resíduo é purificado através de cromatografia de sílica-gel (diclorometano/metanol 96 :4 como eluente) para fornecer 250 mg (14%) de ácido (S)-2-(2,2,2-triflúor-N- (tetra-hidro-2H-piran-4-il)acetamido)-4-(3-(2,2,2-trifluoracetamido) pir- rolidin-1-il) benzoico na forma de um pó amarelo. LCMS (EI, m/z): (M+1) 498,07 Exemplo 18: ácido 2-(2-fluoretóxi)-4-(4-metilpiperazin-1-il) benzoico

[00330] Este composto pode ser preparado a partir dos intermediários que seguem. Exemplo 18a: 4-flúor-2-(2-fluoretóxi)benzoato de terc-butila Exemplo 18b: 2-(2-fluoretóxi)-4-(4-metilpiperazin-1-il)benzoato de terc-butila

[00331] O composto que segue foi também obtido através deste método: ácido 2-(2-fluoretóxi)-4-(4-(1-metilpiperidin-4-il)piperazin-1-il) ben- zoico. Exemplo 19: ácido 4-(4-metilpiperazin-1-il)-2-(2,2,2-triflúor-N-(2- fluoretil)-acetamido)-benzoico

[00332] Este composto pode ser preparado a partir dos intermediários que seguem. Exemplo 19a: 4-flúor-2-(2-fluoretilamino)benzoato de terc-butila Exemplo 19b: 4-flúor-2-(2,2,2-triflúor-N-(2-fluoretil)acetamido) benzoato de terc-butila Exemplo 19c: 4-(4-metilpiperazin-1-il)-2-(2,2,2-triflúor-N-(2-fluoretil) -acetamido)-benzoato de terc-butila

[00333] O composto que segue foi também obtido através deste método: ácido 4-((3-(dimetilamino)propil)(metil)amino)-2-(2,2,2-triflúor-N-(2- fluoretil)acetamido)benzoico. Exemplo 20: hidrotrifluoracetato do ácido 4-(1-metilpiperidin-4-il)- 2-(2,2,2-triflúor-N-(tetra-hidro-2H-piran-4-il)acetamido)benzoico

[00334] Este composto pode ser preparado a partir dos intermediários que seguem. Exemplo 20a: 2-nitro-4-(piridin-4-il)benzoato de terc-butila

[00335] 1,67 g de cloreto de bis(trifenilfosfino)paládio(II) (2,38 mmol) e 15,8 g de carbonato de sódio (149 mmol) são adicionados a uma solução de 18 g de 4-bromo-2-nitrobenzoato de terc-butila (59,6 mmol) e 10,98 g de ácido piridina-4-ilborônico (89 mmol) em uma mistura de 200 ml de dimetoxietano e 100 mL de água. O meio de reação é aquecido a 100° C por 24 horas e então concentrado sob pressão reduzida. O resíduo obtido é purificado através de cromatografia flash (CH2Cl2/AcOEt: 100:0 a 70:30, 30 min). O produto é isolado na forma de um óleo que cristaliza para fornecer 14,64 g (82%) de cristais. MS (m/z): (M+1) 301,0 1H RMN: δH ppm (400 MHz, DMSO): 8,73 (2H, d, CHarom, J=6,0Hz), 8,44 (1H, s, CHarom), 8,24 (1H, dd, CHarom, J=8,0Hz), 7,97 (1H, d, CHarom, J=8,0Hz), 7,85 (2H, dd, CHarom, J=4,4Hz), 1,54 (9H, s). Exemplo 20b: iodeto de 4-(4-(terc-butoxicarbonil)-3-nitrofenil)-1- metilpiridínio

[00336] 7,55 mL de iodometano (121 mmol) são adicionados a uma solução de 16,2 g de 2-nitro-4-(piridina-4-il)benzoato de terc-butila (60,6 mmol) em 20 mL de acetona. O meio de reação é aquecido a 60° C por 4 horas e então em temperatura ambiente de um dia para o outro. Após concentração a seco, 27 g de cristais laranja são isolados (100%). MS (m/z): (M+1) 315,0 1H RMN: δH ppm (400 MHz, DMSO): 9,14 (2H, d, CHarom, J=6,4Hz), 8,71 (1H, s, CHarom), 8,63 (2H, d, CHarom, J=6,4Hz), 8,47 (1H, dd, CHarom, J=8,0Hz), 8,08 (1H, d, CHarom, J=8,0Hz), 4,37 (3H, s, CH), 1,54 (9H, s). Exemplo 20c: 2-amino-4-(1-metilpiperidin-4-il)benzoato de terc- butila

[00337] 0,48 g de óxido de platina (IV) (2,12 mmol) é adicionado a uma solução de 26,8 g de iodeto de 4-(4-(terc-butoxicarbonil)-3- nitrofenil)-1-metilpiridínio (60,0 mmol) em 200 mL de metanol posto em um reator feito de aço inoxidável. O meio de reação é trazido sob 5 bar de hidrogênio por 24 h. O catalisador é filtrado e o filtrado é concentrado sob pressão reduzida para fornecer 24,8 g (98%) de cristais brancos. MS (m/z): (M+1) 291,1 1H RMN: δH ppm (400 MHz, DMSO): 9,18 (1H, s, HI), 7,60 (1H, d, CHarom, J=8,4Hz), 6,54-6,40 (3H, m, CHarom), 6,39 (1H, d, CHarom, J=8,0Hz), 3,48-3,53 (2H, m, CH), 3,06 (2H, t, CH), 2,81 (3H, s, CH), 2,60-2,70 (1H, m, CH), 1,89-1,97 (2H, m, CH), 1,70-1,80 (2H, m, CH), 1,52 (9H, s). Exemplo 20d: 4-(1-metilpiperidin-4-il)-2-(tetra-hidro-2H-piran-4- ilamino) benzoato de terc-butila

[00338] 7,18 mL de ácido 2,2,2-trifluoracético (93 mmol), 4,11 mg de di-hidro-2H-piran-4(3H)-ona (44,5 mmol) e então 14,5 g de triaceto- xiboroidreto de tetrametilamônio (53,8 mmol) são sucessivamente adi- cionados a uma solução de 15 g de 2-amino-4-(1-metilpiperidin-4- il)benzoato de terc-butila em 200 mL de diclorometano sob agitação. O meio de reação é agitado em temperatura ambiente por 2 h e então absorvido com uma solução de soda 1N. A fase orgânica é isolada, seca em sulfato de magnésio e então concentrada seca. O resíduo continha sempre HI. Ele é então absorvido em diclorometano e lavado com 100 mL de uma solução de soda 1H. A fase orgânica é decantada, seca em sulfato de magnésio e concentrada seca para fornecer 14,6 g de um sólido amarelo (rendimento quantitativo). MS (m/z): (M+1) 375,2 1H RMN: δH ppm (400 MHz, DMSO): 7,69 (1H, d, CHarom, J=8,4Hz), 7,63 (1H, d, CHarom, J=7,6Hz), 6,65 (1H, s, CHarom), 6,44 (1H, dd, CHarom, J=8,4Hz), 3,74-3,86 (2H, m, CH), 3,66-3,71 (1H, m, CH), 3,51 (2H, t, CH), 3,05-3,12 (2H, m, CH), 2,6-2,5 (1H, m, CH), 2,42 (3H, s, CH), 2,30-2,40 (2H, m, CH), 1,89-1,97 (2H, m, CH), 1,64-1,77 (4H, m, CH), 1,52 (9H, s), 1,33-1,45 (2H, m, CH). Exemplo 20e: 4-(1 -metilpiperidin-4-il)-2-(2,2,2-triflúor-N-(tetra- hidro-2H-piran-4-il) acetamido)benzoato de terc-butila

[00339] 6,35 mL de trietilamina e 5,50 mL de anidrido 2,2,2- trifluoracético (39,6 mmol) são adicionados a 0o C a uma solução de 11,4 g de 4-(1-metilpiperidin-4-il)-2-(tetra-hidro-2H-piran-4-ilamino) benzoato de terc-butila (30,4 mmol) em 240 mL de diclorometano sob agitação. O meio de reação é agitado em temperatura ambiente por 1 h e então 100 mL de água são adicionados em gotas. A fase orgânica é decantada, seca em sulfato de magnésio e concentrada seca. O resíduo é absorvido em uma mistura de etanol/éter de dietila para fornecer um sólido que é filtrado em um disco fritado e 12,06 g de cristais brancos são isolados. O filtrado é concentrado (4,5 g) e então purificado através de cromatografia flash em sílica (CH2Cl2/MeOH: 95:5 a 90:10, 20 min). O produto obtido é recristalizado em éter de dietila pa- ra fornecer 1,04 g de cristais brancos adicionais (rendimento global = 74%). MS (m/z): (M+1) 471,1 1H RMN: δH ppm (400 MHz, DMSO): 9,45 (1H, sl, NH+), 7, 96 (1H, d, CHarom, J=8Hz), 7,51 (1H, d, CHarom, J=8Hz), 7,31 (1H, s, CHarom), 4,6-4,5 (1H, m, CH), 3, 90-3,75 (2H, m, CH), 3,5-3,35 (4H, m, CH), 3,12,85 (3H, m, CH), 2,79 (3H, s, CH3), 2,1-1,95 (3H, 3, CH), 1,9-1,75 (2H, m, CH), 1,55-1,40 (11H, m), 1,0-0,85 (1H, m, CH). Exemplo 20: hidrotrifluoracetato do ácido 4-(1-metilpiperidin-4-il)- 2-(2,2,2-triflúor-N-(tetra-hidro-2H-piran-4-il)acetamido)benzoico

[00340] 6,33 mL de ácido 2,2,2-trifluoracético (82 mmol) são adicio nados sob agitação a uma solução de 3,2 g de 4-(1-metilpiperidin-4-il)- 2-(2,2,2-triflúor-N-(tetra-hidro-2H-piran-4-il)acetamido)benzoato de terc -butila (5,47 mmol) (na forma de um sal de ácido trifluoracético) em 30 mL de diclorometano. O meio de reação é agitado em temperatura ambiente por 16 h e então evaporado sob pressão reduzida. O resíduo é absorvido em etanol e o sólido branco formado é filtrado em um disco fritado para fornecer 1,61 g (53%) de cristais brancos. MS (m/z): (M+1) 415,1 1H RMN: δH ppm (400 MHz, DMSO): 13,39 (1H, sl, COOH), 9,46 (1H, sl, COOH du TFA), 7,99 (1H, d, CHarom, J=8,4Hz), 7,49 (1H, d, CHa- rom, J=8,4Hz), 7,30 (1H, s, CHarom), 4,53 (1H, m, CH), 3,74-3,86 (2H, m, CH), 3,35-3,45 (5H, m, CH), 2,90-3,01 (3H, m, CH), 2,76 (3H, s, CH), 1,65-2,04 (5H, m, CH), 1,44-1,54 (2H, m, CH). Exemplo 21: 1 -(4-isotiocianatofenil)-4-metilpiperazina

[00341] Este composto foi preparado adaptando o método descrito na EP1215208. O composto que segue foi também obtido através deste método: 2-isotiocianato-5-(4-metilpiperazin-1-il)fenilcarbamato de terc-butila Exemplo 22: 2-isocianato-5-(4-metilpiperazin-1 -il)fenilcarbamato de terc-butila

[00342] Este composto pode ser preparado a partir dos intermediários que seguem. Exemplo 22a: 5-(4-metilpiperazin-1-il)-2-nitrofenilcarbamato de terc -butila Exemplo 22b: 2-amino-5-(4-metilpiperazin-1-il)fenilcarbamato de terc -butila Exemplo 22: 2-isocianato-5-(4-metilpiperazin-1-il)fenilcarbamato de terc-butila Exemplo 23: 4-(4-metilpiperazin-1-il)-2-(tetra-hidro-2H-piran-4-ilamino) benzaldeído

Exemplo 23a: (4-(4-metilpiperazin-1-il)-2-(tetra-hidro-2H-piran-4- ilamino)fenil)metanol

[00343] 500 mg (1,060 mmol) de ácido 4-(4-metilpiperazino-1-il)-2- (2,2,2-triflúor-N-(tetra-hidro-2H-piran-4-il)acetamido)benzoico dissolvidos em 5 ml de tetra-hidrofurano são adicionados a 0o C a uma suspensão de 201 mg (5,30 mmol) de LiAlH4 em 9 ml de tetra-hidrofurano. A mistura de reação é agitada a 0o C por 1 hora e então em temperatura ambiente por 3 horas. A mistura de reação é esfriada a 0o C e então, em gotas, 200 μl de água, então 200 μl de solução de soda (15% em peso) e finalmente 1 ml de água são adicionados. A mistura de reação é agitada em temperatura ambiente por 2 horas e então filtrada e enxaguada com tetra-hidrofurano. O filtrado é concentrado para fornecer 250 mg (rendimento=77%) de (4-(4-metilpiperazino-1-il)-2-(tetra- hidro-2H-piran-4-ilamino)fenil)metanol na forma de um sólido branco. LCMS (EI, m/z): (M+1) 306,14 1H RMN: δH ppm (400 MHz, DMSO): 6,85 (1H, d, CHarom), 6,20 (1H, d, CHarom), 6,10 (1H, d, CHarom), 4, 95 (1H, s amplo, OH), 4,87 (1H, d, NH), 4,37 (2H, d, CH2), 3,83-3,86 (2H, m, CH), 3,56 (1H, m, CH), 3,46-3,56 (3H, m, CH), 3,45 (1H, m, CH), 3,05-3,07 (4H, m, CH), 2,41-2,44 (4H, m, CH), 2,21 (3H, s, CH3), 1,89-1,92 (2H, m, CH). Exemplo 23: 4-(4-metilpiperazin-1-il)-2-(tetra-hidro-2H-piran-4-ilamino) benzaldeído

[00344] 85 mg (0,982 mmol) de dióxido de manganês são adiciona dos em temperatura ambiente a uma solução de (4-(4-metilpiperazino-1- il)-2-(tetra-hidro-2H-piran-4-ilamino)fenil)metanol (100 mg, 0,327 mmol) em uma mistura de acetato de etila (10 ml) e diclorometano (9 ml). A mistura de reação é posta em um banho ultrassônico por 5 horas. A mistura de reação é filtrada, os solventes são evaporados e o produto bruto é purificado através de cromatografia para fornecer 50,0 mg (rendimen- to=50,3%) de (4-(4-metilpiperazino-1-il)-2-(tetra-hidro-2H-piran-4-ilamino) benzaldeído na forma de um sólido branco. LCMS (EI, m/z): (M+1) 304,19 1H RMN: δH ppm (400 MHz, DMSO): 9,43 (1H, d, CH), 7,32 (1H, d, CHa- rom), 6,36 (1H, d, CHarom), 6,08 (1H, d, CH arom), 3, 94-3,99 (2H, m, CH), 3,77 (1H, m, CH), 3,61-3,63 (2H, m, CH), 3,42-3,45 (4H, m, CH), 2,572,60 (4H, m, CH), 2,36 (3H, s, CH3), 2,04-2,08 (2H, m, CH), 1,51-1,60 (2H, m, CH). Exemplo 24: ácido 2-(4-(4-metilpiperazin-1-il)fenil)acético

Exemplo 24a: 2,2,2-tricloro-1-(4-(4-metilpiperazin-1-il)fenil)etanol

[00345] 1,0 ml (10,00 mmol) de ácido tricloroacético e, em peque nas porções, 1,854 g (10 mmol) de 2,2,2-tricloroacetato de sódio são adicionados em temperatura ambiente a uma solução de 1,362 g de (6,67 mmol) de 4-(4-metilpiperazino-1-il)benzaldeído em 13,5 ml de dimetilformamida. A mistura de reação é agitada por 3 horas em temperatura ambiente. O solvente é concentrado e o produto de reação bruto extraído com acetato de etila. A fase orgânica é lavada usando solução de bicarbonato de sódio saturada. As fases orgânicas são combinadas, secas em sulfato de magnésio e então concentradas para fornecer 1,760 g (rendimento=82%) de 2,2,2-tricloro-1-(4-(4- metilpiperazino-1-il)fenil)etanol na forma de um sólido branco. LCMS (EI, m/z): (M+1) 324,04 1H RMN: δH ppm (400 MHz, DMSO): 7,41 (2H, d, CHarom), 7,02 (1H, s amplo, OH), 6,90 (2H, d, CHarom), 5,08 (1H, s amplo, CH), 3,14-3,16 (4H, m, CH), 2,42-2,47 (4H, m, CH), 2,21 (3H, s, CH3). Exemplo 24: ácido 2-(4-(4-metilpiperazin-1-il)fenil)acético

[00346] 0,559 g (14,77 mmol) de boroidreto de sódio é adicionado rapidamente a 2,294 g (7,35 mmol) de dibenzil disselenida em 28 ml de etanol. A mistura de reação é agitada em temperatura ambiente por 1 hora. 2,266 g (7 mmol) de 2,2,2-tricloro-1-(4-(4-metilpiperazino-1- il)fenil)etanol e 1,680 g (42,0 mmol) de hidróxido de sódio são então adicionados. A mistura de reação é agitada a 35° C por 24 horas. O solvente é concentrado e o produto bruto extraído com acetato de etila após adição de uma fase aquosa de pH 5. As fases orgânicas são combinadas, secas em sulfato de magnésio e então concentradas para fornecer ácido 2-(4-(4-metilpiperazino-1-il)fenil)acético que é usado sem purificação adicional. LCMS (EI, m/z): (M+1) 235,294 Exemplo 25: ácido 2-(4-(4-metilpiperazin-1-il)-2-nitrofenil)acético

[00347] Este composto pode ser preparado a partir dos intermediários que seguem. Exemplo 25a: 2-(4-flúor-2-nitrofenil)malonato de dietila Exemplo 25b: 2-(4-(4-metilpiperazin-1-il)-2-nitrofenil)malonato de dietila Exemplo de método E1: Exemplo 26: N-(5-(3,5-difluorfeniltio)-1H-pirazol[3,4-b]piridin-3-il)- 4-(4-metilpiperazin-1-il)-2-(2,2,2-triflúor-N-(tetra-hidro-2H-piran-4-il) acetamido)benzamida

[00348] 0,95 ml (11,21 mmol) de cloreto de oxalila e 2 gotas de di- metilformamida anidra são adicionados a 2,97 g (5,61 mmol) de uma solução de ácido 4-(4-metilpiperazin-1-il)-2-(2,2,2-triflúor-N-(tetra-hidro- 2H-piran-4-il)acetamido)benzoico em 95 ml de diclorometano. A mistura de reação é agitada por 2 horas em temperatura ambiente. Os solventes são evaporados, o sólido formado é absorvido em tolueno e o solvente evaporado. Esta operação é repetida três vezes até que um sólido branco seja obtido. O cloreto ácido é dissolvido em 35 ml de te- tra-hidrofurano anidro a -20° C e então a solução formada é adicionada a uma solução contendo 1,56 g (5,61 mmol) de 5-(3,5-difluorfeniltio)- 1H-pirazol[3,4-b]piridina-3-amina e 3,71 ml (21,30 mmol) de N-etil-N- isopropilpropan-2-amina em 30 ml de tetra-hidrofurano anidro. A mistura de reação é agitada por 3 horas a -20° C e então de um dia para o outro em temperatura ambiente. O precipitado obtido é filtrado e enxaguado com tetra-hidrofurano e água e então seco para fornecer 2 g (53%) de N- (5-(3,5-difluorfeniltio) -1H-pirazol [3,4-b] piridin-3-il) -4-(4- metilpiperazin-1-il)-2-(2,2,2-triflúor-N-(tetra-hidro-2H-piran-4-il) aceta-mido) benzamida. LCMS (EI, m/z): (M+1) 676,20 1H RMN: δH ppm (400 MHz, DMSO): 13,66 (1H, s amplo, NH), 11,08 (1H, s amplo, NH), 8,61 (1H, s, CH arom), 8,46 (1H, s, CH arom), 7,83 (1H, d, CHarom), 7,05-7,10 (2H, m, CH arom), 6, 83-6,89 (3H, m, CH arom), 4,394,44 (1H, m, CH), 3,83-3,85 (1H, m, CH), 3,69-3,72 (1H, m, CH), 3,593,62 (1H, m, CH), 3,30-3,32 (4H, m, CH2), 2,30-2,44 (4H, m, CH2), 2,27 (3H, s, CH3), 1,87-1,90 (1H, m, CH), 1,59-1,60 (1H, m, CH), 1,49-1,50 (1H, m, CH), 1,20-1,40 (1H, m, CH).

[00349] Os derivados que seguem foram obtidos de acordo com o mesmo método:

** 1H RMN, dmso-d6, Ex.: 21 6-4: 13,64 (1H, s , NH), 11,26 (1H, sl, NH), 8,68 (1H, d, CH arom), 8,58 (1H, d, CH arom), 8, 20 (2H, d, CH arom), 7,64 (2H, d, CH arom), 7,03 (1H, m, CH arom), 6, 78 (2H, m, CH arom), 3, 95 (2H, m, CH2). 26-8: 13,59 (1H, sl, NH), 11,05 (1H, sl, NH), 8,68 (1H, d, CHa- rom), 8,57 (1H, d, CH arom), 7, 19 (2H, d, CH arom), 6,99-7,08 (1H, m, CHa- rom), 6,88 (2H, d, CHarom), 6,75-6,79 (2H, m, CHarom), 3,61 (2H, m, CH2), 3,07-3,09 (4H, m, CH), 2,41-2,44 (4H, m, CH), 2,20 (3H, s, CH3). 26-9: 13,17 (1H, sl, NH), 10,90 (1H, sl, NH), 8,55 (1H, s, CHarom), 7,79 (1H, d, CHarom), 7,07 (1H, dd, CHarom), 6,90 (1H, d, CHarom), 4,40-4,50 (1H, m, CH), 3,96 (3H, s, CH3), 3,82-3,89 (1H, m, CH), 3,74-3,80 (1H, m, CH), 3,34-3,41 (2H, m, CH), 3,28-3,33 (4H, m, 2*CH2), 2,43-2,47 (4H, m, 2*CH2), 2,23 (3H, s, CH3), 1,85-1,92 (1H, m, CH), 1,58-1,63 (1H, m, CH), 1,45-1,53 (1H, m, CH), 1,22-1,33 (1H, m, CH). 26-10: 12,48 (1H, sl, NH), 10,72 (1H, sl, NH), 8,30 (1H, s, CHarom), 7,77 (1H, d, CHarom), 7,06 (1H, dd, CHarom), 6,88 (1H, d, CHarom), 6,40 (2H, sl, NH2), 4,40-4,50 (1H, m, CH), 3,82-3,89 (1H, m, CH), 3,74-3,80 (1H, m, CH), 3,34-3,41 (2H, m, CH), 3,28-3,33 (4H, m, 2*CH2), 2,43-2,47 (4H, m, 2*CH2), 2,23 (3H, s, CH3), 1,85-1,92 (1H, m, CH), 1,58-1,65 (1H, m, CH), 1,45-1,55 (1H, m, CH), 1,22-1,34 (1H, m, CH). (ND: não determinado). 26-14: 12,99 (1H, sl, NH), 10,25 (1H, s, NH), 7,96 (1H, d, CHarom, J=9,2Hz), 7,90-7,80 (1H, m, CHarom), 7,23-7,16 (3H, m, CHarom), 7,12-7,08 (1H, m, CHarom), 6,96 (1H, d, CHarom, J=8,8Hz), 6,87 (1H, s, CHarom), 5,31 (2H, s), 4,49-4,42 (1H ,m), 3,86-3,75 (2H, m), 3,45 (1H, m), 3,37 (1H,m), 3,35 (4H, s), 2,42 (4H, s), 2,22 (3H, s), 1,90-1,75 (2H, m), 1,53-1,49 (1H, m), 1,31-1,25 (1H, m). 26-16: 13,00 (1H, s, NH), 10,27 (1H, s, NH), 7,95 (1H, d, CHarom, J=8,8Hz), 7,897,84 (1H, m, CHarom), 7,50-7,40 (1H, m, CHarom), 7,35-7,20 (2H, m, CHarom), 7,12-7,09 (1H, m, CHarom), 6,94 (1H, d, CHarom, J=8,8Hz), 6,87 (1H, s, CHarom), 5,30 (2H, s), 4,52-4,43 (1H, m), 3,85-3,75 (2H, m), 3,46-3,43 (1H, m), 3,36 (5H, s), 2,45 (4H, s), 2,22 (3H, s), 1,921,82 (2H, m), 1,60-1,52 (1H, m), 1,33-1,26 (1H, m). 26-20: 13,01 (1H, s, NH), 10,22 (1H, s, NH), 7,97 (1H, d, CHarom, J=8,8Hz), 7,90-7,78 (3H, m, CHarom), 7,68-7,64 (1H, m, CHarom), 7,12-7,08 (1H, m, CHa- rom), 6,97 (1H, d, CHarom, J=8,8Hz), 6,85 (1H, s, CHarom), 5,43 (2H, s), 4,45-4,40 (1H, m), 3,86-3,70 (2H, m), 3,46-3,42 (1H, m), 3,30-3,28 (5H, m), 2,46 (4H, s), 2,23 (3H, s), 1,90 (1H, d, J=11,2Hz), 1,77 (1H, d, J=11,2Hz), 1,58-1,50 (1H, m), 1,30-1,20 (1H, m).

[00350] Em certos casos, o produto principal dessas reações corresponde ao produto dissubstituído caracterizado pela funcionalização adicional do anel pirazol. Nesses casos, este produto é isolado e transformado em um produto monossubstituído através de tratamento com uma base conforme descrito abaixo. Exemplo 27: N-(5-(3,5-difluorfeniltio)-1-H-pirazol[3,4-b]pirazina-3-il) -4-(4-metilpiperazino-1-il)-2-(tetra-hidro-2H-piran-4- ilamino)benzamida

Exemplo 27a: N-(5-(3,5-difluorfeniltio)-1 -(4-(4-metilpiperazino-1 -il)- 2-(2,2,2-triflúor-N-(tetra-hidro-2H-piran-4-il)acetamido)benzoil)-1H- pirazol[3,4-b]pirazina-3-il)-4-(4-metilpiperazino-1-il)-2-(2,2,2- triflúor-N-(tetra-hidro-2H-piran-4-il)acetamido)benzamida

[00351] 1,51 ml (17,90 mmol) de cloreto de oxalila e 2 gotas de di- metilformamida anidra são adicionados a 4,74 g (8,95 mmol) de uma solução de ácido 4-(4-metilpiperazino-1-il) -2- (2,2,2- triflúor-N- (tetra- hidro-2H-piran-4-il)acetamido)benzoico em 60 ml de diclorometano. A mistura de reação é agitada por 2 horas em temperatura ambiente. Os solventes são evaporados, o sólido formado é absorvido em tolueno e o solvente é evaporado; esta operação é repetida três vezes até que um sólido branco seja obtido.

[00352] O cloreto ácido é adicionado a 0o C em frações pequenas a 1 g (3,58 mmol) de 5-(3,5-difluorfeniltio)-1H-pirazol[3,4-b]pirazina-3- amina dissolvido em 15 ml de piridina. A mistura de reação é agitada a 25° C de um dia para o outro em temperatura ambiente. Após evaporação do solvente, o resíduo é purificado através de cromatografia de sílica-gel (diclorometano/metanol 90:10 e então 90:9:1 e então 90:5:5 de diclorometano/metanol/amônio como eluente) para fornecer N-(5- (3,5-difluorfeniltio)-1-(4-(4-metilpiperazino-1-il)-2-(2,2-triflúor-N-(tetra- hidro-2H-piran-4-il)acetamido)benzoil)-1H-pirazol[3,4-b]pirazina-3-il)-4- (4-metilpiperazino-1-il)-2-(2,2,2-triflúor-N-(tetra-hidro-2H-piran-4-il) ace- tamido)benzamida. LCMS (EI, m/z): (M+1) 1074,64 Exemplo 27: N-(5-(3, 5-difluorfeniltio)-1-H-pirazol[3,4-b]pirazina-3- il)-4-(4-metilpiperazino-1-il)-2-(tetra-hidro-2H-piran-4- ilamino)benzamida

[00353] 0,27 ml (1,95 mmol) de trietilamina é adicionado a 0,21 g (0,19 mmol) de uma solução de N-(5-(3,5-difluorfeniltio)-1-(4-(4- metilpiperazino-1-il)-2-(2,2,2-triflúor-N-(tetra-hidro-2H-piran-4-il) aceta- mido)benzoil)-1H-pirazol[3,4-b]pirazina-3-il)-4-(4-metilpiperazino-1-il)- 2-(2,2,2-triflúor-N-(tetra-hidro-2H-piran-4-il)acetamido)benzamida em 5 ml de metanol. O meio de reação é aquecido a 65° C por 4 horas e então de um dia para o outro em temperatura ambiente. Após evaporação do solvente, o produto é extraído várias vezes com acetato de eti- la. As fases orgânicas são combinadas, lavadas com solução de bicarbonato de sódio saturada, secas em sulfato de magnésio e concentradas. O resíduo é purificado através de cromatografia de sílica-gel (95:4:1 de diclorometano/metanol/amônio como eluente) para fornecer 0,065 g (57%) de N-(5-(3,5-difluorfeniltio)-1-H-pirazol[3,4-b]pirazina-3- il)-4-(4-metilpiperazino-1-il)-2-(tetra-hidro-2H-piran-4-ilamino) benzami- da na forma de um sólido amarelo. LCMS (EI, m/z): (M-1) 579,21 1H RMN: δH ppm (400 MHz, DMSO): 13,95 (1H, s amplo, NH), 10,25 (1H, s amplo, NH), 8,62 (1H, s, CHarom), 8,27 (1H, d, NH), 7,80 (1H, d, CHarom), 7,17-7,27 (3H, m, CH arom), 6,27 (1H, d, CH arom), 6,12 (1H, d, CHarom), 3,79-3,82 (2H, m, CH), 3,67 (1H, m, CH), 3,45-3,50 (2H, m, CH), 3,26-3,29 (4H, m, CH), 2,42-2,44 (4H, m, CH), 2,22 (3H, s, CH3), 1,90-1,93 (2H, m, CH), 1,31-1,36 (2H, m, CH).

[00354] Os compostos que seguem foram obtidos através do mesmo método:

[00355] As reações realizadas em piridina frequentemente tornam possível modificar a distribuição de regioisômero dos produtos. O exemplo que segue é característico de uma reação deste tipo. Exemplo 27-bis: N-(5-(N-(3,5-difluorfenil)sulfamoil)-1H-pirazol[3,4- b]piridin-3-il)-4-(4-metilpiperazin-1-il)-2-(2,2,2-triflúor-N-(tetra- hidro-2H-piran-4-il)acetamido)benzamida

[00356] 0,224 ml (2,63 mmol) de cloreto de oxalila e 2 gotas de dimetilformamida anidra são adicionados a 0,697 g (1,316 mmol) de uma solução de ácido 4-(4-metilpiperazin-1-il)-2-(2,2,2-triflúor-N- (tetra-hidro-2H-piran-4-il)acetamido)benzoico em 20 ml de diclorome- tano. A mistura de reação é agitada por 2 horas em temperatura ambiente. Os solventes são evaporados, o sólido formado é redissolvido em tolueno e o solvente é evaporado. Esta operação é repetida três vezes até que um sólido branco seja obtido. O cloreto ácido é dissolvido em 5 ml de piridina anidra e então a solução formada é adicio-nada a uma solução de 0,214 g (0,658 mmol) de 3-amino-N-(3,5- difluorfenil)-1H-pirazol[3,4-b]piridina-5-sulfonamida em 5 ml de piridi- na a 0o C. A mistura de reação é agitada por 3 horas a 0o C, e então de um dia para o outro em temperatura ambiente. A piridina é evaporada e o produto de reação bruto é redissolvido em tolueno e então concentrado seco. A mistura de reação é diluída com solução de NaHCO3 saturada e extraída com acetato de etila. A fase orgânica é seca em MgSO4, filtrada e concentrada e o produto bruto é usado di-retamente na reação de desproteção sem nenhuma purificação ou caracterização.

[00357] Os compostos que seguem foram obtidos através do mesmo método:

Exemplo de método E2: Exemplo 28: 5-(3,5-difluorfeniltio)-N-(4-(4-metilpiperazin-1 -il) ben- zil)-1H-pirazol[3,4-b]piridin-3-amina

[00358] 41,5 μl de ácido trifluoracético (0,539 mmol) e, em frações pequenas, 129 mg (0,611 mmol) de triacetoxiboroidreto de sódio são adicionados a uma solução de 100 mg (0,35 mmol) de 5-(3,5- difluorfeniltio)-1H-pirazol[3,4-b]piridin-3-amina e 81 mg (0,395 mmol) de 4-(4-metilpiperazin-1-il)benzaldeído em 20 ml de uma mistura 1:1 de diclorometano e tetra-hidrofurano. O meio de reação é agitado por 16 horas em temperatura ambiente. Uma fração adicional de 125 μl de ácido trifluoracético e 388 mg de triacetoxiboroidreto de sódio são adicionados e o meio de reação é agitado por mais 24 horas. O solvente é então concentrado e o meio de reação extraído com acetato de etila e lavado usando solução de bicarbonato de sódio saturada. As fases orgânicas são combinadas, secas em sulfato de magnésio e então concentradas para fornecer um óleo amarelo. Uma trituração deste óleo em metanol leva ao isolamento de 135 mg de um sólido amarelo. LCMS (EI, m/z): (M+1) 467,57 1H RMN: δH ppm (400 MHz, DMSO): 12,43 (1H, s amplo, NH), 8,49 (1H, d, CHarom), 8,47 (1H, d, CHarom), 7,25 (2H, d, CHarom), 7, 03-7,08 (1H, m, CHarom), 6,89 (2H, d, CHarom), 6, 76-6,77 (3H, m, NH and CH arom), 4,34 (2H, d, CH), 3,08 (4H, m, CH), 2,44 (4H, m, CH), 2,21 (3H, s, CH3).

[00359] O derivado que segue foi obtido de acordo com o mesmo método:

**1H RMN, DMSO-d6, Ex.: 28-1: 12,43 (1H, s amplo, NH), 8,49 (1H, d, CHarom), 8,47 (1H, d, CH arom), 7,51 (1H, d, CH arom), 7,45 (1H, m, CHa- rom), 7,27 (1H, m, CH arom), 7,03-7,08 (1H, m, CH arom), 7, 00 (1H, t, NH), 6,77-6,80 (2H, m, CHarom), 4,63 (2H, d, CH), 3,19-3,21 (4H, m, CH), 2,42-2,45 (4H, m, CH), 2,21 (3H, s, CH3). Exemplo de método E3 Exemplo 29: 1-(5-(3,5-difluorfeniltio)-1H-pirazol[3,4-b]piridin-3-il)-3- (4-(4-metilpiperazin-1-il)fenil)tioureia

[00360] 0,507 g (2,17 mmol) de 1-(4-isotiocianatofenil)-4- metilpiperazina é adicionado a 25o C a 0,540 g (2,17 mmol) de 3,5- difluorfeniltio-1H-pirazol[3,4-b]piridin-3-amina dissolvido em 12 ml de dimetilacetamida anidra. A mistura é deixada sob agitação por 15 horas a 85° C. A reação é tratada através da adição de 20 ml de água e então é extraída com acetato de etila. A fase orgânica é seca em sulfato de sódio, filtrada e concentrada. O produto é purificado através de cromatografia de sílica (15:1 de diclorometano/metanol como eluente) para fornecer 0,156 g (rendimento=15%) de 1-(1-terc-butil-5-(3,5- difluorfeniltio)-1H-pirazol[3,4-b]piridin-3-il)-3-(4-(4-metilpiperazin-1- il)fenil)tioureia na forma de um sólido marrom claro. LCMS (EI, m/z): (M+1) 512,08 1H RMN: δH ppm (400 MHz, DMSO): 13,69 (1H, s amplo, NH), 11,50 (1H, s amplo, NH), 11,19 (1H, s amplo, NH), 8,96 (1H, d, CHarom), 8,66 (1H, d, CHarom), 7,41 (2H, d, CH arom), 7,10 (1H, ddd, CH arom), 6, 95 (2H, d, CHarom), 6,89 (2H, bd, CH arom), 3, 13-3,16 (4H, m, CH), 2,45-2,47 (4H, m, CH), 2,23 (3H, s, CH). Exemplo 29-bis: 1-(5-(3,5-difluorfeniltio)-1H-pirazol[3,4-b]piridin-3- il)-3-(4-(4-metilpiperazin-1-il)fenil)ureia

[00361] 0,048 g (1,19 mmol) de hidreto de sódio é adicionado a 0o C a 0,200 g (0,598 mmol) de 1-terc-butil-5-(3,5-difluorfeniltio)-1H- pirazol[3,4-b]piridin-3-amina dissolvido em 10 ml de dimetilacetamida anidra. A reação é deixada sob agitação por 10 minutos. 0,130 g (0,598 mmol) de 1-(4-isocianatofenil)-4-metilpiperazina é então adicionado a 0o C. A mistura é deixada sob agitação por 3 horas em temperatura ambiente. A reação é tratada adicionando 20 ml de água em gotas a 0o C e então é extraída com acetato de etila. A fase orgânica é seca em sulfato de sódio, filtrada e concentrada. O produto é purificado através de cromatografia de sílica para fornecer 0,150 g (rendimen- to=45%) de 1-(1-terc-butil-5-(3,5-difluorfeniltio)-1H-pirazol[3,4-b]piridin- 3-il)-3-(4-(4-metilpiperazin-1-il)fenil)ureia na forma de um sólido mar-rom claro. LCMS (EI, m/z): (M+1) 552,21 1H RMN: δH ppm (400 MHz, DMSO): 8,92 (1H, s amplo, NH), 8,58 (1H, s amplo, NH), 8,51 (1H, s amplo, CH arom), 8, 30 (1H, s amplo, CHa- rom), 7,31 (2H, d, CHarom), 7,05 (1H, m, CHarom), 6,83-6,85 (2H, m, CHa- rom), 3,03-3,08 (4H, m, CH), 2,45-2,48 (4H, m, CH), 2,21 (3H, s, CH), 1,76 (9H, s, CH).

[00362] Uma solução de 0,150 g (0,272 mmol) de 1-(1-terc-butil-5- (3,5-difluorfeniltio)-1H-pirazol[3,4-b]piridin-3-il)-3-(4-(4-metilpiperazin-1- il)fenil)ureia dissolvida em 20 ml de TFA (ácido trifluoracético) é reflu- xada por 3 horas. O solvente é evaporado e o produto de reação bruto é diluído com solução de NaHCO3 e extraído com acetato de etila. A fase orgânica é seca em MgSO4, filtrada e concentrada. O sólido obtido é triturado em metanol, filtrada e seca. 110 mg (82%) de 1-(5-(3,5- difluorfeniltio)-1H-pirazol[3,4-b]piridin-3-il)-3-(4-(4-metilpiperazin-1-il) fenil)ureia na forma de um sólido bege são obtidos. LCMS (EI, m/z): (M+1): 496,06 1H RMN: δH ppm (400 MHz, DMSO): 10,85 (1H, s amplo, NH), 9,57 (1H, s amplo, NH), 8,57 (1H, s amplo, CH arom), 8, 30 (1H, s amplo, CHa- rom), 7,39 (2H, d, CHarom), 6,99 (1H, m, CHarom), 6,89 (2H, d, CHarom), 6,70 (2H, bd, CHarom), 3,03-3,08 (4H, m, CH), 2,45-2,48 (4H, m, CH), 2,21 (3H, s, CH). Exemplos de método F Exemplos de método F1: desproteção Exemplo 30: N-(5-(3, 5-difluorfeniltio)-1-H-pirazol[3, 4-b]piridina-3- il)-4-(4-metilpiperazino-1-il)-2-(tetra-hidro-2H-piran-4- ilamino)benzamida

[00363] 9,08 ml (65,1 mmol) de trietilamina são adicionados a 2 g (2,96 mmol) de uma solução de N-(5-(3,5-difluorfeniltio)-1H-pirazol[3,4- b]piridin-3-il)-4-(4-metilpiperazin-1-il)-2-(2,2,2-triflúor-N-(tetra-hidro-2H- piran-4-il)acetamido)benzamida em 65 ml de metanol. O meio de reação é aquecido a 65° C por 2 horas e então de um dia para o outro em temperatura ambiente. O precipitado formado é filtrado, enxaguado com pentano, com água e então com éter de dietila, e então é seco sob vácuo para fornecer 0,73 g (43%) de (N-(5-(3,5-difluorfeniltio)-1-H- pirazol[3,4-b]piridina-3-il)-4-(4-metilpiperazino-1-il)-2-(tetra-hidro-2H- piran-4-ilamino)benzamida na forma de um sólido branco. LCMS (EI, m/z): (M+1) 580,23 1H RMN: δH ppm (400 MHz, DMSO): 13,59 (1H, s amplo, NH), 10,56 (1H, s amplo, NH), 8,61 (1H, s, CH arom), 8,50 (1H, s, CH arom), 8,17 (1H, d, NH), 7,80 (1H, d, CH arom), 7,07 (1H, m, CH arom), 6, 86 (2H, m, CHa- rom), 6,23 (1H, d, CH arom), 6,13 (1H, d, CH arom), 3, 79-3,82 (2H, dt, CH), 3,60 (1H, m, CH), 3,45-3,50 (2H, m, CH), 3,21-3,33 (4H, m, CH), 2,422,46 (4H, m, CH), 2,22 (3H, s, CH3), 1,91-1,94 (2H, m, CH), 1,35-1,38 (2H, m, CH).

** 1H RMN, DMSO-d6, Ex.: 30-3: 13,86 (1H, s amplo, NH), 10,70 (1H, s amplo, NH), 8,67 (2H, s amplo, CHarom), 8,10 (1H, d, NH), 7,77 (1H, d, CHarom), 7,22 (1H, m, CH arom), 6, 95 (2H, d, CH arom), 6,26 (1H, d, CHarom), 6,16 (1H, s amplo, CHarom), 4,85 (2H, s amplo, CH), 3,82-3,86 (2H, dt, CH), 3,70 (1H, m, CH), 3,47-3,53 (2H, m, CH), 3,28-3,32 (4H, m, CH), 2,42-2,46 (4H, m, CH), 2,20 (3H, s, CH3), 1,94-1,98 (2H, m, CH), 1,34-1,41 (2H, m, CH).; 30-5: 13,25 (1H, s amplo, NH), 10,48 (1H, s amplo, NH), 8,42 (1H, s, CHarom), 8,11 (1H, d, NH), 7,76 (1H, d, CHarom), 7,00-7,10 (1H, m, CH arom), 6, 79-6,87 (2H, m, CH arom), 6,23 (1H, dd, CHarom), 6,12 (1H, d, CH arom), 3, 94 (3H, s, CH3), 3,75-3,83 (2H, m, CH), 3,63-3,71 (1H, m, CH), 3,42-3,52 (2H, m, CH), 3,22-3,32 (4H, m, 2*CH2), 2,36-2,48 (4H, m, 2*CH2), 2,22 (3H, s, CH3), 1,88-1,97 (2H, m, CH), 1,32-1,42 (2H, m, CH). 30-6: 13,10 (1H, s amplo, NH), 10,38 (1H, s amplo, NH), 8,56 (1H, s, CHarom), 8,12 (1H, d, NH), 7,75 (1H, d, CHarom), 6,23 (1H, dd, CH arom), 6,14 (1H, d, CH arom), 3, 97 (3H, s, CH3), 3,80-3,86 (2H, m, CH), 3,62-3,74 (1H, m, CH), 3,40-3,55 (2H, m, CH), 3,22-3,32 (4H, m, 2*CH2), 2,36-2,48 (4H, m, 2*CH2), 2,23 (3H, s, CH3), 1,90-1,99 (2H, m, CH), 1,32-1,45 (2H, m, CH). 30-7: 12,43 (1H, s amplo, NH), 10,22 (1H, s amplo, NH), 8,32(1H, s, CHarom), 8,13(1H, d, NH), 7,73 (1H, d, CHarom), 6,37 (2H, s amplo, NH2), 6,22 (1H, dd, CHarom), 6,13 (1H, d, CH arom), 3, 78-3,86 (2H, m, CH), 3,65-3,74 (1H, m, CH), 3,44-3,54 (2H, m, CH), 3,22-3,32 (4H, m, 2*CH2), 2,36-2,48 (4H, m, 2*CH2), 2,23 (3H, s, CH3), 1,90-1,99 (2H, m, CH), 1,32-1,45 (2H, m, CH). 30-8: 13,79 (1H, s amplo, NH), 10,91 (1H, s amplo, NH), 10,69 (1H, s amplo, NH), 8,83 (1H, s, CH arom), 8,76 (1H, s, CH arom), 8,18 (1H, d, NH), 7,80 (1H, d, CH arom), 6, 82-6,75 (3H, m, CH arom), 6,26 (1H, d, CHarom), 6,15 (1H, d, CH arom), 3, 87-3,82 (2H, dt, CH), 3,72 (1H, m, CH), 3,54-3,47 (2H, m, CH), 3,32-3,29 (4H, m, CH), 2,42-2,46 (4H, m, CH), 2,28 (3H, s, CH3), 1,97-1,95 (2H, m, CH), 1,43-1,36 (2H, m, CH). 3013: 12,99 (1H, s, NH), 9,92 (1H, s, NH), 8,38 (1H, d, NH, J=7,6Hz), 7,92 (1H, d, CHarom, J=8,4Hz), 7,84 (1H, d, CHarom, J=9,2Hz), 7,32 (1H, d, CHarom, J=8,4Hz), 7,07-7,00 (3H, m, CHarom), 6,26 (1H, d, CHarom, J=8,8Hz), 6,14 (1H, s, CHarom), 4,21 (2H, s), 3,82-3,76 (2H, m), 3,69-3,63 (1H, m), 3,48 (2H, t), 3,28 (4H, s), 2,46 (4H, s), 2,25 (3H, s), 2,00-1,90 (2H, m), 1,37-1,26 (2H, m). 30-14: 12,96 (1H, sl, NH), 9,84 (1H, s, NH), 8,34 (1H, d, NH, J=7,6Hz), 7,96 (1H, d, CHarom, J=9,2Hz), 7,81 (1H, d, CHarom, J=8,8Hz), 7,25 (1H, s, CHarom), 7,23 (1H, s, CHarom), 7,17 (1H, t, CHarom), 6,96 (1H, d, CHarom, J=9,2Hz), 6,25 (1H, d, CHarom, J=7,6Hz), 6,14 (1H, s, CHarom), 5,35 (2H, s), 3,82-3,77 (2H, m), 3,67 (1H, sl), 3,46 (2H, t), 3,29 (4H, s), 2,50 (4H, s), 2,29 (3H, s), 1,93-1,88 (2H, m), 1,35-1,25 (2H, m). 30-15: 13,01 (1H, sl, NH), 10,11 (1H, sl, NH), 7,99 (1H, sl, NH), 7,97 (1H, d, CHarom, J=9,2Hz), 7,84 (1H, d, CHarom, J=8,4Hz), 7,25-7,14 (3H, m, CHarom), 6,97 (1H, d, CHarom, J=8,8Hz), 6,67 (1H, sl, CHarom), 6,51 (1H, d, CHarom, J=8,0Hz), 5,35 (2H, s, CHarom), 3,83-3,78 (2H, m), 3,68-3,63 (1H, m), 3,47 (2H, t), 2,87 (2H, d, J=11,2Hz), 2,45-2,40 (1H, m), 2,19 (3H, s), 2,00-1,87 (4H, m), 1,75-1,65 (4H, m), 1,34-1,28 (2H, m). 30-16: 12,95 (1H, sl, NH), 9,85 (1H, s, NH), 8,33 (1H, d, NH, J=7,6Hz), 7,95 (1H, d, CHarom, J=8,8Hz), 7,81 (1H, d, CHarom, J=8,8Hz), 7,48 (1H, q, CHarom), 7,31-7,20 (2H, m, CHarom), 6,93 (1H, d, CHarom, J=9,2Hz), 6,25 (1H, d, CHarom, J=9,2Hz), 6,14 (1H, s, CHarom), 5,35 (2H, s), 3,81-3,76 (2H, m), 3,68 (1H, sl), 3,47 (2H, t), 3,26 (4H, s), 2,44 (4H, s), 2,29 (3H, s), 1,94-1,88 (2H, m), 1,36-1,27 (2H, m). 30-17: 13,06 (1H, sl, NH), 10,12 (1H, sl, NH), 7,93 (1H, sl, NH), 7,86 (2H, d, CHarom, J=8,4Hz), 7,51-7,44 (1H, m, CHarom), 7,30-7,20 (2H, m, CHarom), 6,90 (1H, sl, CHarom), 6,64 (1H, sl, CHa- rom), 6,49 (1H, sl, CHarom), 5,37 (2H, s, CHarom), 3,83-3,76 (2H, m), 3,68-3,63 (1H, m), 3,46 (2H, t), 2,86 (2H, d, J=10,4Hz), 2,44-2,38 (1H, m), 2,19 (3H, s), 1,99-1,90 (4H, m), 1,75-1,65 (4H, m), 1,40-1,30 (2H, m). 30-18: 12,94 (1H, sl, NH), 9,81 (1H, s, NH), 8,32 (1H, d, CHarom, J=7,7Hz), 7,96 (1H, d, CHarom, J=9Hz), 7,81 (1H,d, CHarom, J=9Hz), 7,71 (1H, d, NH), 7,51 (1H, d, CHarom, J=8,6Hz), 7,43 (1H, dd, CHa- rom, J=8,6Hz), 6,97 (1H, d, CHarom, J=8,6Hz), 6,24 (1H, d, CHarom, J=8,9Hz), 6,13 (1H, s, CHarom), 5,39 (2H, s), 3,82-3,74 (2H, m), 3,72-3,62 (1H, m), 3,46 (2H, t), 3,28-3,22 (4H, m), 2,46-2,40 (4H, m), 2,22 (3H, s), 1,95-1,87 (2H, m), 1,37-1,26 (2H, m). 30-19: 13,01 (1H, sl, NH), 10,09 (1H, s, NH), 7,97 (2H, d, CHarom, J=9Hz), 7,83 (1H,d, CHarom, J=8,2Hz), 7,71 (1H, dd, NH), 7,50 (1H, d, CHarom, J=7,4Hz), 7,43 (1H, dd, CHarom, J=8,6Hz), 6,98 (1H, d, CHarom, J=9Hz), 6,67 (1H, s, CHarom), 6,51 (1H, d, CHarom, J=8,2Hz), 5,38 ( 2H, s), 3,84- 3,75 (2H, m), 3,72-3,62 (1H, m), 3,46 (2H, t), 2,86 (2H, d), 2,43 (1H, m), 2,19 (3H, s), 1,99-1,88 (4H, m), 1,74-1,64 (4H, m), 1,38-1,26 (2H, m). 30-20: 12,97 (1H, sl, NH), 9,82 (1H, s, NH), 8,32 (1H, d, NH, J=8,0Hz), 7,97 (1H, d, CHarom, J=8,8Hz), 7,87 (1H, s, CHarom), 7,807,76 (2H, m, CHarom), 7,64 (1H, d, CHarom, J=8,4Hz), 6,96 (1H, d, CHarom, J=8,8Hz), 6,24 (1H, d, CHarom, J=8,8Hz), 6,13 (1H, s, CHa- rom), 5,47 (2H, s), 3,81-3,76 (2H, m), 3,66 (1H, sl), 3,46 (2H, t), 3,26 (4H, s), 2,43 (4H, s), 2,29 (3H, s), 1,93-1,88 (2H, m), 1,35-1,25 (2H, m). 30-21: 13,03 (1H, s, NH), 10,08 (1H, s, NH), 8,00-7,95 (2H, m, CHarom), 7,87-7,75 (3H, m, CHarom), 7,63 (1H, d, CHarom, J=8,4Hz), 6,97 (1H, d, CHarom, J=8,8Hz), 6,67 (1H, s, CHarom), 6,51 (1H, d, CHarom, J=8,0Hz), 5,47 (2H, s, CHarom), 3,83-3,76 (2H, m), 3,68-3,64 (1H, m), 3,47 (2H, t), 2,87 ( 2H, d, J=10,4Hz), 2,45-2,40 (1H, m), 2,20 (3H, s), 2,00-1,87 (4H, m), 1,74-1,65 (4H, m), 1,36-1,25 (2H, m). 30-22: 12,93 (1H, s, NH), 9,86 (1H, s, NH), 8,70 (1H, s, CHarom), 8,51 (1H, dd, CHarom, J=5,2Hz), 8,38 (1H, d, NH, J=8,0Hz), 7,96-7,90 (2H, m, CHarom), 7,84 (1H, d, CHarom, J=8,8Hz), 7,73-7,33 (1H, m, CHarom), 6,91 (1H, d, CHarom, J=8,8Hz), 6,27 (1H, d, CHarom, J=8,8Hz), 6,15 (1H, s, CHarom), 5,35 (2H, s), 3,83-3,77 (2H, m), 3,70-3,64 (1H, m), 3,47 (2H, t), 3,59 (4H, s), 2,59 (4H, s), 2,34 (3H, s), 1,95-1,88 (2H, m), 1,40-1,28 (2H, m). 30-23: 13,03 (1H, s, NH), 10,17 (1H, s, NH), 8,70 (1H, s, CHarom), 8,52 (1H, dd, CHarom, J=4,8Hz), 8,06 (1H, d, NH, J=7,6Hz), 7,96 (1H, d, CHarom, J=8,8Hz), 7,94-7,88 (2H, m, CHarom), 7,37-7,34 (1H, m, CHarom), 6,93 (1H, d, CHarom, J=9,2Hz), 6,69 (1H, s, CHarom), 6,52 (1H, d, CHarom, J=8,0Hz), 5,36 (2H, s, CHarom), 3,83-3,79 (2H, m), 3,68-3,64 (1H, m), 3,46 (2H, t), 3,25-3,15 (2H, m), 2,65-2,55 (3H, m), 2,54 (3H, s), 2,00-1,85 (6H, m), 1,41-1,28 (2H, m). 30-24: 13,21 (1H, s, NH), 10,00 (1H, s, NH), 8,30 (1H, d, NH, J=7,6Hz), 8,00 (1H, d, CHarom, J=8,8Hz), 7,79 (1H, d, CHarom, J=9,2Hz), 7,33 (1H, d, CHarom, J=8,8Hz), 7,26-7,16 (3H, m, CHarom), 6,24 (1H, d, CHarom, J=8,8Hz), 6,13 (1H, s, CHarom), 4,06-3,99 (2H, m), 3,67 (1H, sl), 3,47 (2H, t), 3,28 (4H, s), 2,47 (4H, s), 2,25 (3H, s), 1,94-1,88 (2H, m), 1,37-1,26 (2H, m). 30-25: 13,26 (1H, s, NH), 10,28 (1H, s, NH), 8,02 (1H, d, CHarom, J=8,8Hz), 7,97 (1H, d, NH, J=7,6Hz), 7,83 (1H, d, CHarom, J=8,0Hz), 7,34 (1H, d, CHarom, J=8,8Hz), 7,27-7,17 (3H, m, CHarom), 6,68 (1H, s, CHarom), 6,51 (1H, d, CHarom, J=8,0Hz), 3,85-3,78 (2H, m), 3,71-3,65 (1H, m), 3,47 (2H, t), 2,87 (2H, d, J=11,2Hz), 2,48-2,40 (1H, m), 2,19 (3H, s), 1,98-1,88 (4H, m), 1,741,66 (4H, m), 1,36-1,27 (2H, m). 30-26: 13,12 (1H, s, NH), 9,95 (1H, s, NH), 8,32 (1H, d, NH, J=7,6Hz), 7,93 (1H, d, CHarom, J=8,8Hz), 7,79 (1H, d, CHarom, J=8,8Hz), 7,73 (1H, t, CHarom), 7,52-7,40 (2H, m, CHarom), 7,12 (1H, d, CHarom, J=8,8Hz), 6,25 (1H, d, CHarom, J=8,8Hz), 6,13 (1H, s, CHarom), 3,83-3,77 (2H, m), 3,69 (1H, sl), 3,48 (2H, t), 3,28 (4H, s), 2,44 (4H, s), 2,27 (3H, s), 1,96-1,89 (2H, m), 1,371,27 (2H, m). 30-27: 13,17 (1H, s, NH), 10,21 (1H, s, NH), 7,99-7,92 (2H, m, CHarom et NH), 7,81 (1H, d, CHarom, J=8,4Hz), 7,77-7,70 (1H, m, CHarom), 7,51-7,40 (2H, m, CHarom), 7,13 (1H, dd, CHarom, J=8,8Hz), 6,69 (1H, s, CHarom), 6,51 (1H, d, CHarom, J=8,4 Hz), 3,853,78 (2H, m), 3,72-3,67 (1H, m), 3,48 (2H, t), 2,87 (2H, d, J=11,2Hz), 2,47-2,40 (1H, m), 2,20 (3H, s), 1,96-1,87 (4H, m), 1,75-1,65 (4H, m), 1,38-1,28 (2H, m). 30-28: 13,31 (1H, sl, NH), 9,95 (1H, sl, NH), 8,31 (1H, d, NH, J=7,6Hz), 7,99 (1H, d, CHarom, J=7,6Hz), 7,78 (1H, d, CHarom, J=9,2Hz), 7,58-7,49 (3H, m, CHarom), 7,31 (1H, d, CHarom, J=8,8Hz), 6,24 (1H, d, CHarom, J=8,8Hz), 6,10 (1H, s, CHarom), 3,833,76 (2H, m), 3,70-3,60 (1H, m), 3,45 (2H, t), 3,21 (4H, s), 2,43 (4H, s), 2,22 (3H, s), 1,94-1,86 (2H, m), 1,38-1,28 (2H, m). 30-29: 13,26 (1H, s, NH), 10,25 (1H, s, NH), 8,01 (1H, d, CHarom, J=8,8Hz), 7,94 (1H, d, NH, J=7,6Hz), 7,82 (1H, d, CHarom, J=8,4Hz), 7,59-7,54 (3H, m, CHa- rom), 7,32 (1H, d, CHarom, J=8,8Hz), 6,67 (1H, s, CHarom), 6,54 (1H, d, CHarom, J=7,6Hz), 3,84-3,78 (2H, m), 3,71-3,62 (1H, m), 3,47 (2H, t), 2,87 (2H, d, J=11,2Hz), 2,45-2,41 (1H, m), 2,19 (3H, s), 1,96-1,90 (4H, m), 1,74-1,68 (4H, m), 1,34-1,27 (2H, m). 30-30: 13,23 (1H, s, NH), 9,98 (1H, s, NH), 8,29 (1H, d, NH, J=7,6Hz), 8,01 (1H, d, CHa- rom, J=8,8Hz), 7,79 (1H, d, CHarom, J=8,8Hz), 7,62 (1H, d, CHarom, J=8,4Hz), 7,52 (1H, s, CHarom), 7,44 (1H, d, CHarom, J=7,6Hz), 7,24 (1H, d, CHarom, J=8,4Hz), 6,25 (1H, d, CHarom, J=8,0Hz), 6,12 (1H, s, CHarom), 3,82-3,75 (2H, m), 3,73-3,67 (1H, m), 3,47 (2H, t), 3,27 (4H, s), 2,43 (4H, s), 2,22 (3H, s), 1,95-1,87 (2H, m), 1,35-1,28 (2H, m). 30-31: 13,28 (1H, s, NH), 10,25 (1H, s, NH), 8,02 (1H, d, CHarom, J=8,8Hz), 7,95 (1H, d, NH, J=7,6Hz), 7,81 (1H, d, CHarom, J=8,0Hz), 7,61 (1H, d, CHarom, J=8,4Hz), 7,56 (1H, s, CHarom), 7,43 (1H, dd, CHarom, J=8,4Hz), 7,25 (1H, d, CHarom, J=8,8Hz), 6,68 (1H, s, CHa- rom), 6,51 (1H, d, CHarom, J=7,2 Hz), 3,84-3,78 (2H, m), 3,69-3,61 (1H, m), 3,47 (2H, t), 2,87 (2H, d, J=11,2Hz), 2,47-2,41 (1H, m), 2,20 (3H, s), 2,00-1,90 (4H, m), 1,76-1,69 (4H, m), 1,40-1,30 (2H, m). 30-32: 13,16 (1H, s, NH), 9,95 (1H, s, NH), 8,33 (1H, d, NH, J=8,0Hz), 7,93 (1H, d, CHarom, J=8,8Hz), 7,89 (1H, d, CHarom, J=9,2Hz), 7,79 (1H, d, CHarom, J=9,2Hz), 7,70-7,63 (2H, m, CHarom), 7,60 (1H, t, CHa- rom), 6,97 (1H, d, CHarom, J=8,8Hz), 6,25 (1H, d, CHarom, J=9,2Hz), 6,14 (1H, s, CHarom), 3,83-3,78 (2H, m), 3,68 (1H, sl), 3,48 (2H, t), 3,28 (4H, s), 2,44 (4H, s), 2,23 (3H, s), 1,95-1,90 (2H, m), 1,38-1,28 (2H, m). 30-33: 13,21 (1H, s, NH), 10,22 (1H, s, NH), 7,99 (1H, d, NH, J=7,6Hz), 7,94 (1H, d, CHarom, J=9,2Hz), 7,89 (1H, d, CHarom, J=7,2Hz), 7,82 (1H, d, CHarom, J=8,4Hz), 7,71-7,57 (3H, m, CHarom), 6,98 (1H, d, CHarom, J=8,8Hz), 6,69 (1H, s, CHarom), 6,52 (1H, d, CHarom, J=8,0 Hz), 3,85-3,79 (2H, m), 3,72-3,62 (1H, m), 3,48 (2H, t), 2,87 (2H, d, J=11,2Hz), 2,47-2,41 (1H, m), 2,19 (3H, s), 2,00-1,90 (4H, m), 1,76-1,69 (4H, m), 1,40-1,30 (2H, m). 30-34: 13,07 (1H, s, NH), 10,11 (1H, s, NH), 8,32 (1H, d, NH, J=7,6Hz), 7,90-7,85 (2H, m, CHa- rom), 7,22 (1H, d, CHarom, J=8,8Hz), 7,19 (1H, s, CHarom), 7,17 (1H, s, CHarom), 7,03 (1H, t, CHarom), 6,30 (1H, d, CHarom, J=8,4Hz), 6,19 (1H, s, CHarom), 4,43 (2H, s), 4,02 (2H, sl), 3,80-3,74 (2H, m), 3,67 (1H, sl), 3,44 (2H, t), 3,10 (4H, s), 2,84 (3H, s), 1,89-1,84 (2H, m), 1,30-1,14 (4H, m). 30-35: 13,08 (1H, s, NH), 10,28 (1H, s, NH), 7,96 (1H, d, NH, J=7,6Hz), 7,88 (1H, d, CHarom, J=8,8Hz), 7,86 (1H, d, CHarom, J=6,8Hz), 7,22 (1H, d, CHarom, J=8,8Hz), 7,18 (1H, s, CHa- rom), 7,17 (1H, s, CHarom), 7,02 (1H, t, CHarom), 6,66 (1H, s, CHa- rom), 6,51 (1H, d, CHarom, J=8,4Hz), 4,43 (2H, s), 3,80-3,74 (2H, m), 3,64 (1H, sl), 3,44 (2H, t), 2,89-2,84 (2H, m), 2,43 (1H, sl), 2,20 (3H, s), 1,98-1,95 (2H, m), 1,89-1,84 (2H, m), 1,72-1,69 (4H, m), 1,29-1,20 (2H, m). 30-36: 13,10 (1H, sl, NH), 10,11 (1H, s, NH), 9,73 (1H, sl, COOH), 8,34 (1H, sl, NH), 7,92-7,86 (2H, m, CHarom), 7,47-7,40 (1H, m, CHa- rom), 7,23 (1H, d, CHarom, J=8,8Hz), 7,20-7,13 ( 1H, m, CHarom), 7,11-7,05 (1H, m, CHarom), 6,31 (1H, dd, CHarom, J=9,2Hz), 6,20 (1H, s, CHarom), 4,41 (2H, s), 4,04 (2H, d, J=8,8Hz), 3,81-3,75 (2H, m), 3,70-3,66 (1H, m), 3,51 (2H, d, J=11,2Hz), 3,44 (2H, t), 3,16-2,97 ( 4H, m), 2,87 (3H, s), 1,91-1,84 (2H, m), 1,34-1,22 (2H, m). 30-37: 13,09 (1H, s, NH), 10,29 (1H, s, NH), 7,97 (1H, d, NH, J=7,6Hz), 7,907,86 (2H, m, CHarom), 7,47-7,41 (1H, m, CHarom), 7,23 (1H, d, CHa- rom, J=8,8Hz), 7,19-7,13 ( 1H, m, CHarom), 7,11-7,05 ( 1H, m, CHa- rom), 6,67 (1H, s, CHarom), 6,52 (1H, d, CHarom, J=8,0Hz), 4,41 (2H, s), 3,79-3,74 (2H, m), 3,66-3,62 (1H, m), 3,44 (2H, t), 2,86 ( 2H, d, J=11,2Hz), 2,45-2,40 (1H, m), 2,19 (3H, s), 2,00-1,85 (4H, m), 1,741,65 (4H, m), 1,33-1,23 (2H, m). 30-38: 13,02 (1H, s, NH), 10,04 (1H, s, NH), 8,28 (1H, d, NH, J=8,0Hz), 7,88-7,84 (2H, m, CHarom), 7,74 (1H, s, CHarom), 7,43 (1H, d, CHarom, J=8,8Hz), 7,29 (1H, dd, CHa- rom, J=8,4Hz), 7,22 (1H, d, CHarom, J=8,8Hz), 6,25 (1H, dd, CHarom, J=9,2Hz), 6,12 (1H, s, CHarom), 4,50 (2H, s), 3,78-3,74 (2H, m), 3,663,62 (1H, m), 3,44 (2H, t), 3,26 (4H, s), 2,43 ( 4H, s), 2,22 (3H, s), 1,911,84 (2H, m), 1,35-1,23 (2H, m). 30-39: 13,09 (1H, s, NH), 10,32 (1H, s, NH), 8,28 (1H, d, NH, J=8,0Hz), 7,90 (2H, D, CHarom), 7,74 (1H, s, CHarom), 7,43 (1H, d, CHarom, J=8,4Hz), 7,29 (1H, dd, CHarom, J=8,4Hz), 7,25 (1H, d, CHarom, J=8,8Hz), 6,67 (1H, s, CHarom), 6,54 (1H, dd, CHarom, J=8,4Hz), 4,51 (2H, s), 3,79-3,76 (2H, m), 3,70-3,64 (1H, m), 3,44 (2H, t), 2,95-2,92 (2H, m), 2,52-2,51 (1H, m), 2,27 (3H, s), 2,13-2,01 (2H, m), 1,90-1,87 (2H , m) 1,77-1,69 (4H, m), 1,32-1,24 (2H, m). 30-40: 12,77 (1H, s, NH), 9,86 (1H, s, NH), 9,60 (1H, s, NH), 8,40 (1H, d, NH, J=7,6Hz), 7,86 (1H, d, CHarom, J=8,8Hz), 7,83 (1H, d, CHarom, J=9,2Hz), 7,56 (2H, d, CHarom, J=8,8Hz), 6,93 (1H, d, CHarom, J=9,2Hz), 6,55 (1H, t, CHarom), 6,23 (1H, dd, CHarom, J=9,2Hz), 6,13 (1H, s, CHarom), 3,82-3,75 (2H, m), 3,69-3,61 (1H, m), 3,46 (2H, t), 3,27 (4H, s), 2,44 (4H, s), 2,29 (3H, s), 1,96-1,88 (2H, m), 1,38-1,26 (2H, m). 30-41: 12,85 (1H, sl, NH), 10,13 (1H, s, NH), 9,62 (1H, s, NH), 8,03 (1H, d, NH, J=7,2Hz), 7,90-7,84 (2H, m, CHarom), 7,57 (2H, dd, CHarom, J=10,4Hz), 6,95 (1H, d, CHarom, J=8,8Hz), 6,68 (1H, s, CHarom), 6,60-6,50 (2H, m, CHarom), 3,83-3,78 (2H, m), 3,68-3,63 (1H, m), 3,46 (2H, t), 2,87 (2H, d, J=11,2Hz), 2,45-2,40 (1H, m), 2,20 (3H, s), 2,00-1,92 (4H, m), 1,75-1,65 (4H, m), 1,37-1,27 (2H, m). 30-42: 12,77 (1H, s, NH), 9,87 (1H, s, NH), 9,02 (1H, s, NH), 8,808,72 (1H, m, CHarom), 8,41(1H, d, NH, J=7,6Hz), 7,86 (1H, d, CHa- rom, J=8,8Hz), 7,83 (1H, d, CHarom, J=9,2Hz), 7,28 (1H, d, CHarom, J=9,2Hz), 7,22-7,15 (1H, m, CHarom), 6,63-6,57 (1H, m, CHarom), 6,23 (1H, d, CHarom, J=8,8Hz), 6,13 (1H, s, CHarom), 3,83-3,75 (2H, m), 3,70-3,64 (1H, m), 3,46 (2H, t), 3,27 (4H, s), 2,44 (4H, s), 2,23 (3H, s), 1,95-1,88 (2H, m), 1,39-1,26 (2H, m). 30-43: 12,84 (1H, s, NH), 10,13 (1H, s, NH), 9,05 (1H, sl, NH), 8,81-8,74 (1H, m, CHarom), 8,05 (1H, d, NH, J=7,2Hz ), 7,89-7,84 (2H, m, CHarom), 7,30 (1H, d, CHa- rom, J=8,8Hz), 7,23-7,15 (1H, m, CHarom), 6,67 (1H, s, CHarom), 6,64-6,58 (1H, m, CHarom), 6,51 (1H, d, CHarom, J=8,4Hz), 3,83-3,76 (2H, m), 3,68-3,64 (1H, m), 3,47 (2H, t), 2,89 ( 2H, d, J=10,8Hz), 2,45- 2,40 (1H, m), 2,21 (3H, s), 2,01-1,91 (4H, m), 1,74-1,66 (4H, m), 1,381,27 (2H, m). 30-44: 12,80 (1H, s, NH), 10,16 (1H, s, NH), 8,89 (1H, s, CHarom), 8,52 (1H, s, NH), 8,34 (1H, d, NH, J=7,6Hz), 7,89 (1H, d, CHarom, J=9,2Hz), 7,81 (1H, d, CHarom, J=9,2Hz), 7,41 (1H, d, CHa- rom, J=8,8Hz), 7,35 (1H, d, CHarom, J=9,2Hz), 6,89 (1H, dd, CHarom, J=8,4Hz), 6,21 (1H, d, CHarom, J=9,2Hz), 6,11 (1H, s, CHarom), 3,833,75 (2H, m), 3,66-3,60 (1H, m), 3,46 (2H, t), 3,25 (4H, s), 2,44 (4H, s), 2,23 (3H, s), 1,95-1,87 (2H, m), 1,37-1,26 (2H, m). 30-45: 12,86 (1H, s, NH), 10,10 (1H, s, NH), 8,91 (1H, s, CHarom), 8,54 (1H, s, NH), 8,00 (1H, d, NH, J=7,6Hz ), 7,90 (1H, d, CHarom, J=9,2Hz), 7,85 (1H, d, CHarom, J=8,0Hz), 7,41 (1H, d, CHarom, J=8,4Hz), 7,37 (1H, d, CHa- rom, J=9,2Hz), 6,88 (1H, dd, CHarom, J=8,4Hz), 6,64 (1H, s, CHarom), 6,48 (1H, d, CHarom, J=8,4Hz), 3,83-3,77 (2H, m), 3,67-3,60 (1H, m), 3,47 (2H, t), 2,88 (2H, d, J=11,2Hz), 2,45-2,38 (1H, m), 2,21 (3H, s), 2,00-1,87 (4H, m), 1,75-1,65 (4H, m), 1,37-1,26 (2H, m). 30-46: 13,74 (1H, sl, NH), 10,14 (1H, s, NH), 8,62 (1H, s, CHarom), 8,33 (1H, d, NH), 7,81 (1H, d, CHarom, J=8,7Hz), 7,12-7,03 (3H, m, CHarom), 6,26 (1H, d, CHarom, J=8,8Hz), 6,13 (1H, s, CHarom), 4,31 (2H, s), 4,144,07 (4H, m), 3,68 (1H, sl), 3,28 (4H, s), 2,43 (4H, s), 2,23 (3H, s), 1,92 (2H, d, J=12,4Hz), 1,38-1,26 (2H, m). 30-47: 13,80 (1H, sl, NH), 10,41 (1H, s, NH), 8,64 (1H, s, CHarom), 8,02 (1H, d, NH), 7,85 (1H, d, CHa- rom, J=8,1Hz), 7,12-7,03 (3H, m, CHarom), 6,69 (1H, s, CHarom), 6,52 (1H, d, CHarom, J=8,1Hz), 4,30 (2H, s), 3,81 (2H, d, J=11,1Hz), 3,68 (1H, sl), 3,48 (2H, t), 2,87 (2H, d, J=10,5Hz), 2,47-2,39 (1H, sl), 2,19 (3H, s), 2-1,88 (4H, m), 1,76-1,66 (4H, m), 1,39-1,27 (2H, m). 30-48: 13,99 (1H, sl, NH), 10,17 (1H, s, NH), 8,34 (1H, s, CHarom), 8,29 (1H, dl, NH), 7,78 (1H, d, CHarom, J=8,9Hz), 7,54-7,41 (3H, m, CHarom), 6,07 (1H, d, CHarom, J=8,9Hz), 5,87 (1H, s, CHarom), 3,82 (2H, dl), 3,62 (1H, sl), 3,51-3,37 (4H, m), 2,97 (3H, s), 2,28-2,19 (2H, m), 2,15 (6H, s), 2-1,90 (2H, m), 1,71-1,61 (2H, m), 1,42-1,28 (2H, m). 30-49: 14,06 (1H, sl, NH), 10,56 (1H, s, NH), 8,85 (1H, s, CHarom), 7,97 (1H, sl, NH), 7,85 (1H, d, CHarom, J=8,1Hz), 7,50-7,40 (3H, m, CHarom), 6,71 (1H, s, CHarom), 6,54 (1H, d, CHarom, J=8,1Hz), 3,83-3,76 (2H, m), 3,70 (1H, sl), 3,48 (2H, t), 2,88 (2H, d, J=10,6Hz), 2,48-2,40 (1H, m), 2,20 (3H, s), 2,01-1,89 (4H, m), 1,76-1,66 (4H, m), 1,40-1,28 (2H, m). 30-50: 13,94 (1H, sl, NH), 10,11 (1H, sl, NH), 8,59 (1H, s, CHa- rom), 8,30 (1H, sl, NH), 7,76 (1H, d, CHarom, J=9,2Hz), 7,27-7,13 (3H, m, CHarom), 6,04 (1H, dd, CHarom, J=9,2Hz), 5,85 (1H, s, CHarom), 3,87-3,76 (2H, m), 3,66-3,55 (1H, m), 3,49-3,26 (4H, m), 2,96 (3H, s), 2,22 (2H, t), 2,14 (6H, s), 1,97-1,89 (2H, m), 1,69-1,60 (2H, q), 1,401,28 (2H, m). 30-51: 13,95 (1H, sl, NH), 10,17 (1H, sl, NH), 8,54 (1H, s, CHarom), 8,28 (1H, sl, NH), 7,78 (1H, d, CHarom, J=8,8Hz), 7,59 (1H, d, CHarom, J=9,2Hz), 7,42-7,38 (2H, m, CHarom), 6,23 (1H, d, CHa- rom, J=8,0Hz), 6,11 (1H, s, CHarom), 3,82-3,77 (2H, m), 3,66 (1H, sl), 3,46 (2H, t), 3,26 (4H, s), 2,43 (4H, s), 2,22 (3H, s), 1,92-1,88 (2H, m), 1,34-1,24 (2H, m). 30-52: 13,97 (1H, sl, NH), 10,20 (1H, s, NH), 8,38 (1H, s, CHarom), 8,27 (1H, d, NH), 7,88 (1H, d, CHarom, J=7,2Hz), 7,78 (1H, d, CHarom, J=9,2Hz), 7,66-7,55 (3H, m, CHarom), 6,26 (1H, dd, CHarom, J=9,2Hz), 6,13 (1H, s, CHarom), 3,85-3,76 (2H, m), 3,753,63 (1H, m), 3,48 (2H, t), 3,37-3,26 (4H, m), 2,61-2,52 (4H, m), 2,32 (3H, sl), 1,96-1,88 (2H, m), 1,39-1,26 (2H, m). 30-53: 13,64 (1H, s, NH), 10,20 (1H, s, NH), 8,30 (1H, d, CHarom, J=8,8Hz), 8,23 (1H, d, CHarom, J=8,0Hz), 8,19 (1H, d, CHarom, J=8,8Hz), 7,81 (1H, d, CHa- rom, J=9,2Hz), 7,75-7,65 (3H, m, CHarom), 6,28 (1H, dd, CHarom, J=8,8Hz), 6,14 (1H, s, CHarom), 3,83-3,77 (2H, m), 3,70-3,64 (1H, m), 3,48 (2H, t), 3,29 (4H, s), 2,44 (4H, s), 2,23 (3H, s), 1,95-1,89 (2H, m), 1,38-1,26 (2H, m). 30-54: 13,64 (1H, sl, NH), 10,48 (1H, sl, NH), 8,32 (1H, d, CHarom, J=8,8Hz), 8,19 (1H, d, CHarom, J=8,8Hz), 7,91 (1H, sl, NH), 7,85 (1H, d, CHarom, J=8,4Hz), 7,77-7,65 (3H, m, CHarom), 6,71 (1H, s, CHarom), 6,54 (1H, d, CHarom, J=8,4Hz), 3,86-3,80 (2H, m), 3,71-3,64 (1H, m), 3,48 (2H, t), 2,89 (2H, d, J=11,2Hz), 2,45-2,40 (1H, m), 2,21 (3H, s), 2,00-1,90 (4H, m), 1,75-1,65 (4H, m), 1,38-1,27 (2H, m). 30-55: 13,64 (1H, s, NH), 10,16 (1H, s, NH), 8,29 (1H, d, CHa- rom, J=8,8Hz), 8,24 (1H, d, NH, J=7,6Hz), 8,17 (1H, d, CHarom, J=8,8Hz), 8,09 (1H, t, CHarom), 7,88-7,85 (1H, m, CHarom), 7,81 (1H, d, CHarom, J=9,2Hz), 7,67 (1H, q, CHarom), 6,28 (1H, d, CHarom, J=8,8Hz), 6,14 (1H, s, CHarom), 3,83-3,75 (2H, m), 3,72-3,67 (1H, m), 3,48 (2H, t), 3,29 (4H, s), 2,44 (4H, s), 2,23 (3H, s), 1,96-1,89 (2H, m), 1,35-1,28 (2H, m). 30-56: 13,67 (1H, s, NH), 10,43 (1H, s, NH), 8,31 (1H, d, CHarom, J=8,8Hz), 8,18 (1H, d, CHarom, J=8,8Hz), 8,13-8,05 (1H, m, CHarom), 7,92 (1H, d, NH, J=7,6Hz), 7,90-7,82 (2H, m, CHa- rom), 7,66 (1H, q, CHarom), 6,71 (1H, s, CHarom), 6,54 (1H, d, CHa- rom, J=8,4Hz), 3,85-3,80 (2H, m), 3,73-3,65 (1H, m), 3,49 (2H, t), 2,89 (2H, d, J=11,2Hz), 2,48-2,42 (1H, m), 2,21 (3H, s), 1,99-1,90 (4H, m), 1,76-1,68 (4H, m), 1,37-1,27 (2H, m). 30-57: 13,66 (1H, s, NH), 10,17 (1H, s, NH), 8,30 (1H, d, CHarom, J=8,8Hz), 8,24-8,16 (2H, m, CHa- rom et NH), 8,03-7,97 ( 3H, m, CHarom), 7,81 (1H, d, CHarom, J=9,2Hz), 6,28 (1H, d, CHarom, J=7,2Hz), 6,14 (1H, s, CHarom), 3,833,77 (2H, m), 3,71-3,67 (1H, m), 3,48 (2H, t), 3,29 (4H, s), 2,44 (4H, s), 2,23 (3H, s), 1,96-1,89 (2H, m), 1,34-1,28 (2H, m). 30-58: 13,71 (1H, s, NH), 10,45 (1H, s, NH), 8,32 (1H, d, CHarom, J=9,2Hz), 8,22 (1H, d, CHarom, J=8,8Hz), 8,02-7,96 (3H, m, CHarom), 7,86-7,81 (1H, m, NH), 7,83 (1H, d, Charom), 6,71 (1H, s, CHarom), 6,54 (1H, d, CHa- rom, J=7,6Hz), 3,85-3,78 (2H, m), 3,72-3,65 (1H, m), 3,48 (2H, t), 2,88 (2H, d, J=11,2Hz), 2,48-2,44 (1H, m), 2,21 (3H, s), 1,97-1,87 (4H, m), 1,76-1,70 (4H, m), 1,36-1,28 (2H, m). 30-59: 13,69 (1H, s, NH), 10,04 (1H, s, NH), 8,34 (1H, d, NH, J=8,8Hz), 8,26-8,16 (3H, m, CHarom), 7,81 (1H, dd, CHarom, J=8,4Hz), 7,74 (1H, d, CHarom, J=9,2Hz), 7,66 (1H, d, CHarom, J=8,4Hz), 6,24 (1H, dd, CHarom, J=9,2Hz), 6,10 (1H, s, CHarom), 3,82-3,76 (2H, m), 3,68-3,62 (1H, m), 3,48 (2H, t), 3,27 (4H, s), 2,43 (4H, s), 2,22 (3H, s), 1,93-1,86 (2H, m), 1,31-1,21 (2H, m). 30-60: 13,74 (1H, s, NH), 10,31 (1H, s, NH), 8,35 (1H, d, CHarom, J=8,8Hz), 8,25 (1H, d, CHarom, J=8,8Hz), 8,21 (1H, s, CHarom), 7,85 (1H, d, NH, J=7,2Hz), 7,81 (1H, dd, CHarom, J=8,8Hz), 7,76 (1H, d, CHarom, J=8,0Hz), 7,66 (1H, d, CHarom, J=8,8Hz), 6,67 (1H, s, CHa- rom), 6,50 (1H, d, CHarom, J=8,0Hz), 3,85-3,78 (2H, m), 3,68-3,62 (1H, m), 3,48 (2H, t), 2,87 (2H, d, J=11,2Hz), 2,46-2,40 (1H, m), 2,20 (3H, s), 1,97-1,87 (4H, m), 1,75-1,67 (4H, m), 1,32-1,24 (2H, m). 30-61: 13,61 (1H, s, NH), 10,32 (1H, s, NH), 8,71 (1H, d, NH, J=8,0Hz), 8,21 (1H, d, CHarom, J=8,8Hz), 7,87 (1H, d, CHarom, J=9,2Hz), 7,80 (1H, d, CHarom, J=8,8Hz), 7,17 (1H, t, CHarom), 7,05-7,02 (2H, m, CHa- rom), 6,29 (1H, d, CHarom, J=9,2Hz), 6,14 (1H, s, CHarom), 4,93 (2H, s), 3,74-3,68 (3H, m), 3,43 (2H, t), 3,29 (4H, s), 2,44 ( 4H, s), 2,28 (3H, s), 1,90-1,84 (2H, m), 1,28-1,20 (2H, m). 30-62: 13,67 (1H, sl, NH), 10,59 (1H, s, NH), 8,23 (1H, d, CHarom, J=8,8Hz), 8,10 (1H, d, NH, J=7,6Hz), 7,92 (1H, d, CHarom, J=8,0Hz), 7,82 (1H, d, CHarom, J=8,8Hz), 7,17 (1H, t, CHarom), 7,05-7,02 (2H, m, CHarom), 6,71 (1H, s, CHarom), 6,56 (1H, d, CHarom, J=8,0Hz), 4,94 (2H, s), 3,77-3,70 (3H, m), 3,43 (2H, t), 2,87 (2H, d, J=11,2Hz), 2,45-2,40 (1H, m), 2,20 (3H, s), 1,98-1,91 (2H, m), 1,89-1,95 (2H, m), 1,75-1,67 (4H, m), 1,301,20 (2H, m). 30-63: 13,63 (1H, sl, NH), 10,28 (1H, s, NH), 8,37 (1H, d, NH, J=8,0Hz), 8,24 (1H, d, CHarom, J=8,8Hz), 7,88-7,82 (2H, m, CHa- rom), 7,24-7,17 (3H, m, CHarom), 6,29 (1H, d, CHarom, J=9,2Hz), 6,14 (1H, s, CHarom), 4,87 (2H, s), 3,75-3,70 (3H, m), 3,43 (2H, t), 3,28 ( 4H, s), 2,45 ( 4H, s), 2,23 (3H, s), 1,90-1,85 (2H, m), 1,32-1,20 (2H, m). 30-64: 13,69 (1H, sl, NH), 10,55 (1H, s, NH), 8,26 (1H, d, CHarom, J=8,8Hz), 8,05 (1H, d, NH, J=7,6Hz), 7,90 (1H, d, CHarom, J=8,4Hz), 7,86 (1H, d, CHarom, J=8,8Hz), 7,24-7,15 (3H, m, CHarom), 6,70 (1H, s, CHarom), 6,56 (1H, d, CHarom, J=8,0Hz), 4,88 (2H, s), 3,80-3,65 (3H, m), 3,43 (2H, t), 2,87 (2H, d, J=11,2Hz), 2,46-2,40 (1H, m), 2,20 (3H, s), 2,00-1,86 (4H, m), 1,75-1,67 (4H, m), 1,29-1,23 (2H, m). 30-65: 13,49 (1H, sl, NH), 10,45 (1H, s, NH), 9,31 (1H, sl, COOH), 8,21 (1H, d, CHarom, J=8,8Hz), 8,06 (1H, sl, NH), 7,92 (1H, d, CHarom, J=8,4Hz), 7,57 (1H, d, CHarom, J=8,8Hz), 7,17-7,11 ( 2H, m, CHa- rom), 6,96-6,91 (1H, m, CHarom), 6,67 (1H, s, CHarom), 6,53 (1H, d, CHarom, J=8,0Hz), 4,51 (1H, d, J=13,2Hz), 4,20 (1H, d, J=13,2Hz), 3,81-3,76 (2H, m), 3,71-3,62 (1H, m), 3,56-3,41 (4H, m), 3,08 (2H, t), 2,83 (3H, s), 2,45-2,40 (1H, m), 2,07-2,00 (2H, m), 1,95-1,86 (4H, m), 1,41-1,29 (2H, m). 30-66: 13,62 (1H, sl, NH), 10,22 (1H, sl, NH), 8,36 (1H, d, NH, J=7,6Hz), 8,23 (1H, d, CHarom, J=8,8Hz), 7,85 (1H, d, CHarom, J=9,2Hz), 7,80 (1H, d, CHarom, J=8,8Hz), 7,48 (1H, s, CHa- rom), 7,45-7,37 ( 2H, m, CHarom), 6,29 (1H, d, CHarom, J=7,2Hz), 6,14 (1H, s, CHarom), 4,97 (2H, s), 3,76-3,70 (3H, m), 3,44 (2H, t), 3,28 (4H, s), 2,44 ( 4H, s), 2,23 (3H, s), 1,91-1,86 (2H, m), 1,30-1,24 (2H, m). 30-67: 13,67 (1H, sl, NH), 10,49 (1H, s, NH), 8,25 (1H, d, CHarom, J=8,8Hz), 8,02 (1H, d, NH, J=7,2Hz), 7,89 (1H, d, CHarom, J=8,0Hz), 7,82 (1H, d, CHarom, J=8,8Hz), 7,49 (1H, t, CHarom), 7,457,35 (2H, m, CHarom), 6,70 (1H, s, CHarom), 6,56 (1H, d, CHarom, J=8,0Hz), 4,97 (2H, s), 3,78-3,64 (3H, m), 3,44 (2H, t), 2,88 (2H, d, J=11,2Hz), 2,45-2,40 (1H, m), 2,20 (3H, s), 1,98-1,86 (4H, m), 1,761,66 (4H, m), 1,32-1,22 (2H, m). 30-68: 13,46 (1H, s, NH), 10,36 (1H, s, NH), 8,21 (1H, d, CHarom, J=8,8Hz), 8,00 (1H, d, NH, J=7,6Hz), 7,86 (1H, d, CHarom, J=8,4Hz), 7,59 (1H, d, CHarom, J=8,8Hz), 7,437,33 ( 2H, m, CHarom), 7,28 ( 1H, s, CHarom), 6,69 (1H, s, CHarom), 6,54 (1H, d, CHarom, J=7,6Hz), 4,58 (1H, d, J=12,8Hz), 4,30 (1H, d, J=12,8Hz), 3,78-3,75 (2H, m), 3,70-3,65 (1H, m), 3,46 (2H, t), 2,922,88 (2H, m), 2,45-2,40 (1H, m), 2,24 (3H, s), 2,05-1,95 (2H, m), 1,931,89 (2H, m), 1,77-1,70 (4H, m), 1,34-1,24 (2H, m). (ND: não determinado). Exemplo 30-bis: (S)-4-(3-aminopirrolidin-1-il)-N-(5-(3,5-difluorfeniltio)- 1H-pirazol[3,4-b]piridin-3-il)-2-(tetra-hidro-2H-piran-4-ilamino) benza- mida

[00364] 876 μl (20 eq.) de trietilamina são adicionados a uma solu- ção de 238 mg (0,314 mmol) de (S)-N-(5-(3,5-difluorfeniltio)-1H- pirazol[3,4-b]piridin-3-il)-2-(2,2,2-triflúor-N-(tetra-hidro-2H-piran-4- il)acetamido)-4-(3-(2,2,2-trifluoracetamido)pirrolidin-1-il)benzamida em 6 ml de metanol. O meio de reação é agitado a 65° C por 4 horas. Após retornar para a temperatura ambiente, 8 ml de n-butanol e 260 mg (6 eq.) de carbonato de potássio são adicionados. O meio de reação é agitado a 80° C por 24 horas. Após retornar para a temperatura ambiente, os solventes são evaporados, água é adicionada e o produto é extraído com diclorometano. A fase orgânica é lavada com solução de cloreto de sódio saturada, seca em sulfato de magnésio, filtrada e evaporada. O resíduo é purificado através de cromatografia de sílica-gel (8:2 de diclorometano/metanol como eluente) para fornecer 87 mg (rendimento=49%) de (S)-4-(3-aminopirrolidin-1-il)-N-(5-(3,5- difluorfeniltio)-1H-pirazol [3,4-b] pirazina-3-il)-2-(tetra-hidro-2H-piran-4- ilamino)benzamida na forma de um pó marrom. LCMS (EI, m/z): (M+1) 566,24 1H RMN: δH ppm (400 MHz, DMSO): 10,46 (1H, s amplo, NH), 8,60 (1H, s, CHarom), 8,50 (1H, s, CH arom), 8, 26 (1H, d, NH), 7,78 (1H, d, CHarom), 7,08 (1H, t, CH arom), 6, 86 (2H, d, CH arom), 5,86 (1H, dd, CHa- rom), 5,71 (1H, d, CH arom), 3, 80-3,88 (2H, m, CH), 3,63-3,70 (2H, m, CH), 3,40-3,55 (5H, m, CH), 3,01-3,08 (1H, m, CH), 2,08-2,13 (1H, m, CH), 1,92-1,99 (2H, m, CH3), 1,76-1,82 (1H, m, CH), 1,30-1,41 (2H, m, CHpiranona). Exemplos de método F2: redução Exemplo 31: N-(5-(3,5-difluorfenetil)-1H-pirazol[3,4-b]piridin-3-il)-4- (4-metilpiperazin-1-il)-2-(tetra-hidro-2H-piran-4-ilamino)benzamida

[00365] 10 mg de Pd/C 10% são adicionados a 100 mg (0,175 mmol) de N-(5-((3,5-difluorfenil)etinil)-1H-pirazol[3,4-b]piridin-3-il)-4-(4- metilpiperazin-1-il)-2-(tetra-hidro-2H-piran-4-ilamino)benzamida em solução em uma mistura de 10 ml de tetra-hidrofurano e 5 ml de metanol antes de colocação no meio de reação sob uma atmosfera de hidrogênio. A mistura de reação é agitada por 12 horas em temperatura ambiente e então filtrada em Celite e concentrada. 62 mg (rendimen- to=60%) de N-(5-(3,5-difluorfenetil)-1H-pirazol[3,4-b]piridin-3-il)-4-(4- metilpiperazin -1-il) -2-( tetra-hidro -2H- piran - 4-ilamino) benzamida são isolados na forma de um sólido branco. LCMS (EI, m/z): (M+1) 576,23 1H RMN: δH ppm (400 MHz, DMSO): 13,14 (1H, s amplo, NH), 10,32 (1H, s amplo, NH), 8,40 (1H, d, CHarom), 8,22 (1H, d, NH), 7,96 (1H, d, CHarom), 7,80 (1H, d, CH arom), 7, 03-6,98 (3H, m, CH arom), 6,23 (1H, d, CHarom), 6,16 (1H, s amplo, CH arom), 3, 84-3,81 (2H, dt, CH), 3,70 (1H, m, CH), 3,52-3,46 (2H, m, CH), 3,04-2,93 (4H, m, CH), 2,59-2,69 (4H, m, CH), 2,42-2,46 (4H, m, CH), 2,38 (3H, s, CH3), 1,96-1,93 (2H, m, CH), 1,40-1,33 (2H, m, CH).

[00366] O derivado que segue foi obtido de acordo com o mesmo método:

** 1H RMN, dmso-d6, Ex. : 31-1: 13,68 (1H, sl, NH), 10,11 (1H, s, NH), 8,52 (1H, s, CHarom), 8,35 (1H, dl, NH), 7,82 (1H, d, CHarom, J=9Hz), 7,05-6,97 (3H, m, CHarom), 6,27 (1H, dd, CHarom), 6,14 (1H, s, CHa- rom), 3,83-3,76 (2H, m), 3,74-3,64 (1H, m), 3,47 (2H, t), 3,32-3,20 (6H, m), 3,07 (2H, dd), 2,44 (4H, dd), 2,23 (3H, s), 1,91 (2H, d), 1,38-1,27 (2H, m). Exemplo 32: 5-(3,5-difluorfeniltio)-N-(4-(4-metilpiperazin-1-il)-2-(tetra- hidro-2H-piran-4-ilamino)benzil)-1H-pirazol[3,4-b]piridin-3-amina

[00367] 100 mg (0,173 mmol) de N-(5-(3,5-difluorfeniltio)-1-H- pirazol[3,4-b]piridina-3-il)-4-(4-metilpiperazino-1-il)-2-(tetra-hidro-2H- piran-4-ilamino)benzamida são adicionados, em frações pequenas, a uma solução de 19,64 mg (0,518 mmol) de LiAlH4 em 3 ml de tetra- hidrofurano anidro sob argônio a 0o C. A mistura de reação é aquecida a 90° C por 15 horas. Uma porção adicional de 20 mg de LÍAIH4 é então adicionada e o meio de reação agitado a 90° C por 5 horas. 45 μl de água a 0o C são então adicionados à mistura de reação, seguido por 45 μl de hidróxido de sódio (15% em peso) e finalmente 120 μl de água. A mistura de reação é agitada a 25° C por 1 hora e então filtrada em Dicalite. Após evaporação dos solventes, o produto bruto é purificado através de cromatografia. 16,80 mg (17%) de 5-(3,5- difluorfeniltio)-N-(4-(4-metilpiperazin-1-il)-2-(tetra-hidro-2H-piran-4- ilamino)benzil)-1H-pirazol[3,4-b]piridin-3-amina na forma de um sólido amarelo são obtidos. LCMS (EI, m/z): (M+1) 566,68 1H RMN: δH ppm (400 MHz, DMSO): 12,57 (1H, s amplo, NH), 8,45 (2H, d, CH arom), 6, 97-7,06 (2H, m, CH arom), 6, 73-6,75 (2H, m, CH arom), 6,65 (1H, t, NH), 6,13-6,19 (2H, m, CHarom), 4,98 (1H, d, NH), 4,30 (2H, m, CH2), 3,73-3,77 (2H, m, CH), 3,60 (1H, m, CH), 3,45-3,50 (2H, m, CH), 3,04 (4H, m, CH), 2,42 (4H, m, CH), 2,18 (3H, s, CH3), 1,80-1,83 (2H, m, CH), 1,27-1,32 (2H, m, CH).

[00368] Os derivados que seguem foram obtidos de acordo com o mesmo método:

Exemplo 33: 2-(4-aminofenil)-N-(5-(3,5-difluorfeniltio)-1H-pirazol [3,4b] piridin-3-il)acetamida

[00369] Uma solução de 152 mg (2,72 mmol) e 70 mg (1,3 mmol) de cloreto de amônio em 100 μl de água é adicionada a uma solução de 0,24 g (0,544 mmol) de N-(5-(3,5-difluorfeniltio)-1H-pirazol[3,4- b]piridin-3-il)-2-(4-nitrofenil)acetamida em 10 ml de mistura de eta- nol/água 2:1. Várias gotas de ácido acético são adicionadas a esta mistura e ela é aquecida a 60° C por 4 horas. Após esfriamento e concentração dos solventes, o produto de reação bruto é extraído com acetato de etila e é lavado com solução de bicarbonato de sódio saturada. As fases orgânicas são combinadas, secas em sulfato de magnésio e então concentradas. O produto bruto é purificado através de cromatografia de sílica-gel (DCM/MeOH) para fornecer 11 mg (4%) de 2-(4-aminofenil)-N-(5-(3,5-difluorfeniltio)-1H-pirazol[3,4-b]piridin-3-il) acetamida na forma de um sólido marrom. LCMS (EI, m/z): (M+1) 412,09 1H RMN: δH ppm (400 MHz, DMSO): 13,60 (1H, s amplo, NH), 10,96 (1H, s amplo, NH), 8,68 (1H, d, CH arom), 8,55 (1H, d, CH arom), 7,06 (1H, m, CHarom), 6,98 (2H, d, CH arom), 6, 79 (2H, m, CH arom), 6, 50 (2H, m, CHarom), 4,92 (2H, s, NH), 3,51 (2H, m, CH2). Exemplos de método F3: oxidação de sulfeto Exemplo 34: 5- (3,5-difluorfenilsulfonil) -1H- pirazol [3,4-b] piridin-3- amina

[00370] Uma solução de 663 mg (1,078 mmol) de oxona em 1,1 ml de água é adicionada a uma solução de 300 mg (1,078 mmol) de 5- (3,5-difluorfeniltio)-1H-pirazol[3,4-b]piridin-3-amina em 10 ml de uma mistura 1:1 de tetra-hidrofurano e metanol a 0o C. A mistura de reação é agitada em temperatura ambiente por 16 horas. Uma porção adicional de 663 mg de oxona a 0o C é então adicionada e o meio de reação agitado em temperatura ambiente por 24 horas. Os solventes são evaporados e o meio de reação é diluído com solução de bicarbonato de sódio, extraído com acetato de etila, seco em MgSO4 e então concentrado para fornecer 340 mg (81%) de 5-(3,5-difluorfenilsulfonil)-1H- pirazol[3,4-b]piridin-3-amina na forma de um sólido amarelo. LCMS (EI, m/z): (M+1) 311,03 1H RMN: δH ppm (400 MHz, DMSO): 12,72 (1H, s amplo, NH), 8,92 (1H, d, CHarom), 8,84 (1H, d, CH arom), 7,89-8,01 (1H, d, CH arom), 7,627,80 (2H, m, CHarom), 6,06 (2H, s amplo, NH).

[00371] Os compostos que seguem foram também obtidos através deste método:

** 1H RMN, DMSO-d6, Ex.: 33-2: 12,64 (1H, s amplo, NH), 8,56 (1H, d, CHarom), 8,49 (1H, d, CH arom), 7,24 (1H, ddd, CH arom), 6, 94 (2H, bd, CHarom), 6,03 (2H, s amplo, NH), 4,80 (2H, s, CH). (ND: não determinado).

[00372] Alternativamente, uma etapa de proteção pode ser realizada antes da reação de oxidação, seguido por uma etapa de desproteção que pode levar à preparação das sulfonas ou sulfóxidos correspondentes. Exemplo 34-bis: 5-(3,5-difluorfenilsulfinil)-1H-pirazol[4,3-b]pirazin- 3-amina

[00373] 0,55 mL de trietilamina e 22 mg de 4-dimetilaminopiridina são adicionados sob argônio a uma solução de 500 mg (1,790 mmol) de 5-(3,5-difluorfeniltio)-1H-pirazol[3,4-b]pirazin-3-amina em 10 mL de tetra-hidrofurano. A solução é agitada a 0o C e 0,915 mL de dicarbonato de di-terc-butila é adicionado e o meio de reação é agitado de um dia para o outro. Uma fração aquosa é adicionada ao meio de reação que é então extraído com acetato de etila. As fases orgânicas são secas em MgSO4 e concentradas a vácuo para fornecer um produto bruto que é usado na etapa de oxidação sem purificação adicional. O produto bruto obtido é dissolvido em 10 mL de uma mistura 1:1 de tetra- hidrofurano e metanol a 0o C e então uma solução de 1,103 g (1,794 mmol) de oxona em 2 mL de água é adicionada. O meio de reação é agitado em temperatura ambiente por 16 horas. Uma porção adicional de 550 mg de oxona é então adicionada e o meio de reação é agitado em temperatura ambiente por 5 horas. Os solventes são evaporados e o meio de reação é diluído com uma solução de bicarbonato de sódio, extraído com acetato de etila, seco em sulfato de magnésio e concentrado para levar a uma mistura da sulfona e do sulfóxido correspon- dentes que são usados sem purificação adicional na etapa de desproteção. 0,373 mL de TFA em 4 mL de THF anidro é adicionado a 0o C a uma solução de 600 mg da mistura previamente obtida em 6 mL de diclorometano. A mistura é agitada 1 hora em temperatura ambiente e uma porção adicional de 4 equivalentes de TFA em 4 mL de THF é adicionada. Após 1 hora de agitação, esta operação é repetida e o meio de reação é agitado por um tempo total de 3 horas e 45 minutos. Os solventes são evaporados e o meio de reação é diluído com solução de carbonato de potássio, extraído com acetato de etila, seco em sulfato de magnésio e concentrado para fornecer uma mistura 1:1 de 5-(3,5-difluorfenilsulfonil)-1H-pirazol[3,4-b]pirazin-3-amina e 5-(3,5- difluorfenilsulfinil)-1H-pirazol[3,4-b]pirazin-3-amina.

[00374] Os compostos que seguem foram também obtidos através deste método:

** 1H RMN, DMSO-d6, Ex.: 34bis-1: 12,31 (1H, sl, NH), 8,08-8,18 (1H, m, CHarom), 8,05 (1H, d, CHarom, J=11,6Hz), 7,97 (1H, d, CHarom, J=11,6Hz), 7,87-7,93 (1H, m, CHarom), 7,64-7,76 (1H, m, CHarom), 5,81 (2H, sl, NH2). 34bis-2: 12,32 (1H, sl, NH), 7,94-8,11 (5H, m, CHa- rom), 5,85 (2H, sl, NH2). 34bis-3: 12,34 (1H, sl, NH), 8,27 (1H, s, CHa- rom), 8,12 (1H, d, CHarom, J=11,6Hz), 8,01 (1H, d, CHarom, J=11,6Hz), 7,82-7,89 (1H, m, CHarom), 7,67 (1H, d, CHarom, J=11,2Hz), 5,70 (2H, sl, NH2). 34bis-4: 12,28 (1H, sl, NH), 7,89 (1H, d, CHarom, J=8,8Hz), 7,68 (1H, d, CHarom, J=8,8Hz), 7,21 (1H, m, CHa- rom), 6,91-6,97 (2H, m, CHarom), 5,87 (2H, s, NH2), 4,94 (2H, s, CH). 34bis-5: 12,28 (1H, sl, NH), 7,89 (1H, d, CHarom, J=8,8Hz), 7,68 (1H, d, CHarom, J=8,8Hz), 7,20-7,25 (2H, m, CHarom), 7,10-7,15 (1H, m, CHarom), 5,84 (2H, s, NH2), 4,87 (2H, s, CH). 34bis-6: 12,04 (1H, s, NH), 7,87 (1H, d, CHarom, J=8,8Hz), 7,40 (1H, d, CHarom, J=8,8Hz), 7,10-7,25 (2H, m, CHarom), 6,90-6,97 (1H, m, CHarom), 5,61 (2H, s, NH2), 4,47 (1H, d, CH, J=13,2Hz), 4,18 (1H, d, CH, J=13,2Hz). 34bis- 7: 12,28 (1H, s, NH), 7,89 (1H, d, CHarom, J=8,8Hz), 7,64 (1H, d, CHarom, J=8,8Hz), 7,40-7,50 (3H, m, CHarom), 5,81 (2H, s, NH2), 4,96 (2H, s, CH). Exemplo de método F4: desmetilação Exemplo 35: N-(5-(3,5-difluorfeniltio)-6-hidróxi-1H-pirazol[3,4-b] pi- ridin-3-il)-4-(4-metilpiperazin-1-il)-2-(tetra-hidro-2H-piran-4-ilamino) benzamida

[00375] 443 μl (3 eq.) de uma solução de tribrometo de boro 1M em dicloromentao são adicionados a uma solução de 90 mg (0,148 mmol) de N-(5-(3,5-difluorfeniltio)-6-metóxi-1H-pirazol[3,4-b]piridin-3-il)-4-(4- metilpiperazin-1-il)-2- (tetra-hidro-2H-piran-4-ilamino) benzamida (Exemplo 18) em 4 ml de 1,2-dicloroetano a 0 em 4 ml de 1,2- dicloroetano a 0o C. O meio de reação é agitado a 60o C por 3 horas e então esfriado em um banho gelado antes da adição de metanol. Os solventes são evaporados e o resíduo é redissolvido em uma mistura de metanol e acetato de etila. O sólido formado é filtrado, redissolvido em 3 ml de tetra-hidrofurano e é adicionado à solução de soda 1N. O meio de reação é agitado por 18 horas em temperatura ambiente. O pH da solução é ajustado para 8-9 e a fase aquosa é extraída com acetato de etila. A fase orgânica é seca em sulfato de magnésio e o produto bruto é purificado em uma coluna de sílica-gel (diclorometa- no/metanol como eluente) para fornecer 21 mg (24%) de N-(5-(3,5- difluorfeniltio)-6-hidróxi-1H-pirazol[3,4-b]piridin-3-il)-4-(4-metilpiperazin- 1-il)-2-(tetra-hidro-2H-piran-4-ilamino)benzamida na forma de um pó amarelo. LCMS (EI, m/z): (M+1) 596,13 1H RMN: δH ppm (400 MHz, DMSO): 12,96 (1H, singleto liso plano), 12,02 (1H, broad flat singlet), 10,64 (1H, s amplo, NH), 8,46 (1H, bs), 8,09 (1H, bs), 7,72 (1H, d, CH arom), 6,97-7,10 (1H, m, CH arom), 6,606,74 (2H, m, CH arom), 6,28 (1H, dd, CH arom), 6,13 (1H, d, CH arom), 3,803,90 (2H, m, CHpiranona), 3,65-3,77 (1H, m, CHpiranona), 3,50 (2H, t, CHpi- ranona), 3, 25-3,32 (4H, m, 2 CH2), 2,37-2,45 (4H, m, 2*CH2), 2,22 (3H, s, CH3), 1,91-2,00 (2H, m, CHpiranona), 1,28-1,43 (2H, m, CHpiranona). II. Testes biológicos dos compostos de acordo com a in venção

• Teste para medição da inibição de TrkA, TrkB ou TrkC quinase

[00376] Essas quinases são produzidas pela Millipore ou Kinome Scan (DiscoverX) e são avaliadas de acordo com os protocolos de fabricação.

[00377] Os resultados são apresentados na tabela abaixo :

● Atividade analgésica in vivo contra hiperalgesia induzida por NGF

[00378] Os compostos de fórmula geral (I), e particularmente composto 30, foram testados in vivo no camundongo recebendo uma inje- ção intraplantar de NGF. Este tratamento elicita hiperalgesia térmica (Schuligoi e outros., 1998, Neuroscience Letters 252:147–149). Em suma, camundongos machos receberam uma injeção subcutânea de 10 µl de NGFβ (1 µg; SIGMA) na superfície plantar da pata traseira direita. Seguindo a injeção, os camundongos foram retornados para as suas gaiolas. Quatro horas após a injeção de NGF, os camundongos foram postos no centro do analgesímetro de placa quente (BIO HC2.00, Bioseb, França) e o tempo de latência para o primeiro levantamento ou lambida ativo da pata traseira ou pulo será registrado. Um tempo de corte máximo de 60 segundos é usado para prevenir dano a tecido. Os resultados são dados como a média ± s.e.m. do tempo de latência. Os compostos de teste foram dados 30 minutos antes da injeção de NGF.

[00379] A Figura 1 mostra que o Composto 30 inibiu dependentemente da dose hiperalgesia induzida por NGF, ou quando administrado através de via intraperitoneal (Figura 1A) ou via oral (Figura 1B). Reversão completa ou quase completa de hiperalgesia induzida por NGF ocorreu em doses de 10 mg/kg e menores (*P <0,05 vs. NGF sozinho por ANOVA).

• Atividade analgésica in vivo no teste de formalina em ratos

[00380] O método foi adaptado de Wheeler-Aceto e outros. (Pain, 1990, 40:229-38) e Bardin e outros. (2003, Pharmacology 67: 182194). Na segunda fase do teste, o Composto 30 inibiu lambida de pata em 44% vs. animais tratados com veículo (P < 0,05 por ANOVA). • Atividade analgésica in vivo contra dor infalmatória aguda e crônica induzida por Adjuvante de Freund Completo (CFA)

[00381] Ratos Sprague-Dawley machos [Crl:OFA(SD) Charles River Lyon, França] pesando 160-180 g quando da chegada foram usados. Os ratos foram primeiro habituados diariamente a manuseamento e ao aparelho de teste usado para os modelos von-Frey e de placa quente uma semana antes da indução de inflamação. Na Segunda-feira seguinte, eles foram submetidos a testes nociceptivos para determinação de classificações basais. Então, os ratos receberão uma injeção subcutânea de 100 μl de CFA (1 mg/ml; Sigma) na superfície plantar da pata traseira direita (dia 0: D0). Solução salina foi injetada através da mesma via no grupo de placebo.

[00382] Então cada rato foi posto em uma malha plástica elevada em uma gaiola plástica transparente e o número de recuos espontâneos (medição de dor espontânea) foi registrado durante 10 minutos. Alodinia mecânica foi avaliada usando o teste Frey Hair. Cada rato foi posto em uma malha plástica elevada em uma gaiola plástica transparente e deixado se adaptar ao ambiente de teste por pelo menos 5 min. O von Frey Hairs (monofilamentos Semmes - Weinstein, Stoelting IL, USA; 0,6, 1,4, 2, 4, 6, 8, 10 e 15 g) foi aplicado à superfície plantar da pata injetada a partir de debaixo do piso de malha por 1 segundo na ordem ascendente. O limiar foi determinado como a força mais baixa que evocou uma resposta de retirada. O teste foi repetido três vezes com um intervalo de 5 minutos entre cada teste. A classificação de retirada de pata do estímulo tátil foi determinada com a média das 3 medições. Os animais receberam injeções intraperitoneais ou orais de compostos de teste. Compostos de fórmula geral (I) exibiram atividade analgésica neste teste em doses de 0,5 a 20 mg/kg, ambos contra dor inflamatória aguda (recuos) e alodinia mecânica. Por exemplo, o Com-posto 30 inibiu dependentemente da dose recuos após injeção intrape-ritoneal (Figura 2A) e alodinia mecânica após administração oral (Figura 2B). O composto reverteu completamente ou quase que completamente dor espontânea de 0,16 mg/kg e alodinia mecânica de 2,5 mg/kg.

• Atividade analgésica in vivo contra dor crônica em um modelo de dor de câncer de osso

[00383] O câncer de osso produz uma das condições mais dolorosas que afetam humanos e animais. Ela é também a dor mais comum em pacientes humanos com câncer avançado e permanece difícil de tratar e contribui significantemente para morbidez alta e qualidade de vida reduzida. Vários modelos de dor induzida por osteossarcoma de murino foram desenvolvidos (Pacharinsak and Beitz, Animal models of cancer pain. Comp Med. 2008 Jun; 58:220-33).

[00384] A requerente induziu dor de câncer de osso através do implante de 10 μl de PBS contendo 2x105 de células de fibrossarcoma osteolítico NCTC 2472 na tíbia de camundongos C3H/HeNCrl de 5-6 semanas de vida sob anestesia com isoflurano. A presença dessas células induz lesões osteolíticas em osso devido a ambos um aumento no número de osteoclastos e sua ativação, o que leva à destruição de tecido ósseo e a invasão do tecido mole adjacente e comportamentos relacionados à dor. Comportamentos relacionados à dor foram avaliados ambos antes e em 3, 7, 10, 14 e 17 dias seguindo injeção de célula de tumor. Os comportamentos que seguem foram avaliados:

[00385] - Uso do membro durante ambulação espontânea em uma escala de 0-4 onde 0 = uso normal e 4 = não uso da pata traseira injetada ;

[00386] - Dor evocada por toque leve. Recuos induzidos por toque leve foram medidos após o período de 1 minuto de estimulação prejudicial da pata injetada com tumor com um pincel pequeno. Os números de recuos foram registrados durante 5 minutos.

[00387] Para tratamento com fármaco, os animais foram tratados cronicamente com o composto de teste ou solução salina, administrados 30 minutos antes do teste através de via i.p., começando no dia 7 seguindo injeção de células de tumor, quando comportamentos relacionados à dor estavam claramente presentes. Como um exemplo, o Composto 30 na dose de 2,5 mg/kg reduziu significantemente classificação de uso de membro a partir do dia 10 (Figura 3A) e recuo evocado por toque leve a partir do dia 8 (Figura 3B).

• Experimentos comparativos:

[00388] Um ensaio de quinase baseado em quinase-glo plus in vitro (Promega) foi desenvolvido em um formato de placa de ensaio de 96 cavidades para avaliar as propriedades de inibição de compostos sobre receptores de quinases relacionados à tropomiosina (Trk), usando o segmento intracelular solúvel desses receptores, contendo a atividade de quinase (TrkA (ou NTRK1 ; 400 ng/cavidade; Millipore) e TrkB (ou NTRK2 ; 200 ng/cavidade; Invitrogen)). O ensaio foi realizado em um volume final de 50 μl contendo MOPS 8 mM (pH 7,0), EDTA 0,2 mM, Acetato Mg 40 mM, 2-glicerofosfato 25 mM, DTT 1 mM, Vanadato Na 2 mM, Triton X-100 0,01%, ou 1 (TrkA) ou 2,5 (TrkB) mgml de poli EY (poli Glu-Tyr 4:1; substrato) e 30 (Trk A) ou 40 (Trk B) μM de ATP. Os compostos de teste foram dissolvidos (10 mM) e diluídos em DMSO 100% através de diluição serial, com concentrações half log testadas geralmente variando de 1 a 30 000 nM de concentração final (DMSO 5% final), mas essas concentrações poderiam ser adaptadas de acordo com a potência do composto. A reação foi iniciada pela adição de ATP e as placas foram incubadas por 2 horas a 30° C. As placas foram removidas da incubadora e 50 μl de quinase-glo plus foram adicionados a cada cavidade, seguido por uma incubação de 10 minutos em temperatura ambiente. A luminescência induzida por luciferase, que é proporcional à ATP restante na cavidade, foi medida em um lu- minômetro. Controles em cada placa incluíam cavidades com a qui- nase sozinha (consumo de ATP máximo ou inibição 0%), cavidades sem a quinase (sinal de ATP máximo ou inibição de 100%) e cavidades com 200 μM de estaurosporina (controle de inibição positivo). Uma curva de inibição de concentração-resposta com K252a (concentrações half log de a partir de 1 a 10 000 nM) foi também incluída em cada placa. Valores de pIC50 foram derivados de ajuste da curva de inibição de consumo de ATP, usando a faixa de luminescência 0-100% definida pelos controles, com uma equação de dose-resposta sigmoidal: Inibição %=100-(100/(1+10(X+pIC50)*nH)), onde X é o logaritmo das concentrações de composto testado. Sob essas condições, K252a tinha um pIC50 de 7,46 ± 0,07 em TrkA (média ± SD; N=42; IC50 = 30 nM) e 7,16 ± 0,18 em TrkB (N=36; IC50 = 74 nM), esses valores sendo consistentes com dados da literatura in vitro (Tapley e outros (1992) Oncogene 7: 371-381, Tan e outros (2007) Mol. Pharmacol. 72: 14401446).

[00389] Os resultados obtidos são apresentados abaixo:

Claims (6)

1. Uso de um composto da seguinte fórmula geral (I):

ou um sal farmaceuticamente aceitável ou solvato do mes- mo, um tautômero do mesmo, ou um estereoisômero ou mistura de estereoisômeros do mesmo em quaisquer proporções, tal como uma mistura de enantiômeros, notadamente uma mistura racêmica, em que: - Y1 representa um grupo CH, - Y4 representa um átomo de nitrogênio, - Y2 representa um grupo C-X-Ar, - Y3 representa um grupo C-W, F^ - Ar representa F ,

- X representa um grupo divalente selecionado de S, S(O)2, S(O)2(NR4), CH2, em que o primeiro átomo desses grupos está ligado ao átomo C da cadeia C-X-Ar, - W representa um grupo R5, ou NR5R6, - V representa C(O), - n representa 0, HN Ç O - Ri representa

- R2 representa

- R3, R4, R5 e R6 representam cada um, independentemente um do outro, um átomo de hidrogênio ou uma (C1-C6)alquila, caracterizado pelo fato de que é na fabricação de um fár- maco para o tratamento ou prevenção de dor, em que a dor é uma dor nociceptiva, uma dor inflamatória, uma dor neuropática, uma dor idio- pática ou uma dor psicogênica, preferivelmente uma dor inflamatória ou dor neuropática.

2. Uso de acordo com a reivindicação 1, caracterizado pelo fato de que a dor é devido a câncer, a uma lesão do nervo ou a doenças reumáticas.

3. Uso de acordo com a reivindicação 1 ou 2, caracterizado pelo fato de que X representa um grupo divalente selecionado de S, S(O)2, CH2 e S(O)2NH, em que o primeiro átomo desses grupos é ligado ao átomo C da cadeia C-X-Ar.

4. Uso de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 3 caracterizado pelo fato de que R3=H.

5. Uso de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 4 caracterizado pelo fato de que ele é selecionado dos compostos

6. Uso de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 5, caracterizado pelo fato de que o composto de fórmula (I) é:

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