BR112014029708B1 - Composto de pirrolo[2,1-f][1,2,4]triazina e método de preparação de compostos de pirrolo[2,1-f][1,2,4]triazina - Google Patents

Abstract

COMPOSTO DE PIRROLO[2,1-F][1,2,4]TRIAZINA, MÉTODO DE PREPARAÇÃO DE COMPOSTOS DE PIRROLO[2,1-F][1,2,4]TRIAZINA E USO DO COMPOSTO DE PIRROLO[2,1-F] [1,2,4]TRIAZINA. A presente invenção se refere a um composto de pirrolo[2,1-f][1,2,4]triazina, um isômero do mesmo ou um sal, éster ou hidrato farmaceuticamente aceitável do mesmo, e a um método de preparação e aplicação do mesmo. O composto de pirrolo[2,1-f][1,2,4]triazina tem uma estrutura expressa na fórmula geral (I). O composto de pirrolo[2,1-f][1,2,4]triazina expresso na fórmula geral (I) pode inibir uma via de sinalização de fosfatidilinositol-3 quinase (P13K), sendo assim utilizado no preparo de medicamentos para tratar doenças relacionadas com fosfatidilinositol-3 quinase, tal como câncer.

Description

Campo técnico

[0001] A invenção se refere a derivados de pirrolo[2,1- f][1,2,4]triazina conforme mostrado na fórmula geral I, seus isômeros ou sais, ésteres ou hidratos farmaceuticamente aceitáveis dos mesmos, bem como a seu método de preparação e uso. Os Compostos I, conforme mostrados na fórmula geral I, podem inibir a via de sinalização de 3-cinase (P13K), sendo assim utilizados no preparo de medicamentos para tratar doenças relacionadas com fosfatidilinositol 3-quinase, tal como câncer.

Histórico da Invenção

[0002] A P13K é uma lipídeo-quinase que pode fosforilar a posição 3 no anel de inositol em fosfatidilinositol para formar fosfatidilinositol-3-fosfato (PIP), fosfatidilinositol-3,4-difosfato (PIP2) e fosfatidfilinositol-3,4,5-trifosfato (PIP3). PIP, PIP2 e PIP3, como importantes segundos mensageiros, ligam e ativam várias proteínas contendo domínio PH (domínio de homologia com pleckstrina), domínio FYVE (nome composto pela primeira letra das proteínas Fablp, YOTB, Vaclp e EEA1 contendo domínio FYVE de fonte original, vide Gaullier, J. M.; Simonsen, A.; D'Arrigo, A.; Bremnes, B.; Stenmark, H., Chem. Phys. Lipids, 1999, 98: 87-94.), domínio PX (domínio de homologia Phox) e outra região ligante a fosfolipídeo, para formar um complexo de cascata de sinalização e, finalmente, regulam atividades celulares, tais como proliferação, diferenciação, sobrevivência e migração, etc. (vide Vanhaesebroeck., B.; Leevers, S.J.; Ahmadi, K.; Timms, J.; Katso, R.; Driscoll, P.C.; Woscholski, R.; Parker, P.J.; Waterfield, M.D., Annu. Rev.Biochem., 2001, 70: 535-602).

[0003] Dependendo das diferenças na sequência genética, na especificidade e função do substrato, a superfamília P13K é agrupada em três classes: P13K I, II e III. As P13Ks de Classe I são as mais amplamente estudadas até o momento. Os substratos de P13Ks são fosfatidilinositol (PI), fosfatidilinositol-4-fosfato (PI(4)P), fosfatidilinositol 4,5-bifosfato (PI(4,5)P2). As P13Ks de Classe I são moléculas heterodiméricas compostos por uma subunidade catalítica e subunidade regulatória. As P13Ks de Classe I podem também ser divididas em duas categorias devido à diferença na subunidade regulatória e mecanismo de ativação: P13K, IA e P13K IB. Sendo assim, P13K IA compreende P13Kα, P13Kβ e P13Kδ, e é ativada pelo receptor tirosina quinase; sendo assim, P13K IB consiste apenas de P13KY e é ativada por receptores acoplados à proteína G. PI e PI(4)P são substratos das P13Ks de classe II. As P13Ks de Classe II incluem P13KC2α, P13KC2β e P13KC2Y. São caracterizados por um domínio C2 no terminal C, indicando que suas atividades são reguladas pelo íon cálcio. O substrato da classe P13K III é PI. Seu mecanismo de ativação permanece obscuro até o momento (vide Engelman, J. A.; Luo, J.; Cantley, L.C., Nat. Rev. Genet., 2006, 7: 606-619).

[0004] A hiperativação de P13K inicia a via de sinalização de fosfatidilinositol 3-quinase/proteína quinase B/proteína alvo da rapamicina em mamífero (P13K/Akt/mTOR) e promove a sobrevivência e proliferação celular, que está frequentemente presente em cerca de 60% dos tumores humanos. PTEN (homólogo de fosfatase e tensina deletado no cromossomo 10) atua como supressor tumoral e desfosforila a posição 3 no anel de inositol de fosfatidilinositol e antagoniza a atividade de P13K. Essa função é perdida em muitos cânceres. A mutação ativa no gene PIK3CA codificando p110α está presente em mais de 30% dos cânceres. Além disso, as amplificações gênicas de P13K3CA e a proteína quinase B (Akt) vem sendo frequentemente encontrada em muitos cânceres o que também contribui para a expressão de proteína (vide Engelman, J.A., Nat. Rev. Cancer, 2009, 9: 550-562). Esses fatos indicam que a P13K está estreitamente relacionada com tumorigênese e promoção. A proteína alvo de rapamicina (mTOR) é uma importante proteína a jusante (“downstream”) da proteína quinase B, que é uma serina/treonina quinase. A proteína quinase B também ativa a proteína alvo de rapamicina fosforilando mTor diretamente; ou aumenta indiretamente a ativação de mTOR inativando o gene supressor de tumor TSC2 (proteína 2 de esclerose tuberosa). O mTOR ativo participa, direta ou indiretamente, nas regulações de vários processos relacionados com proliferação e crescimento celular, tal como o estágio inicial de tradução, transcrição, reestruturação de microfilamento, transporte de membrana, degradação de proteína, via de proteína quinase (PKC), síntese de proteína ribossomal e síntese de tRNA, etc., regulando as vias de sinalização a jusante, tal como quinase S6 ribossômica (S6K1 ou P70S6K), proteína ligante (4E-BPI) 1 a fator de início de tradução em células eucarióticas 4E (eIF-4 e), transdução de sinal e fator 3 de ativação de transcrição (STAT3), etc. O mTOR é, portanto, uma proteína regulatória central de crescimento e proliferação celular, tendo se tornado um novo algo de fármacos antitumorais.

[0005] Inibidores de P13K e de proteína mTOR de sinalização a jusante são uma classe de fármacos antitumorais promissores. Atualmente, vários inibidores de pan-P13K, tais como GDC-0941m XL-147, PX-866, etc. ingressaram em estudos clínicos. Porém, o número e a diversidade estrutural precisam ser expandidos para atender às necessidades de pesquisa e desenvolvimento de novos fármacos anticâncer. Entretanto, há defeitos nos inibidores conhecidos. Por exemplo, PX-866, que é derivado de Wortmannin, é de difícil sintetização; por outro lado, a atividade de GDC-0941 precisa ser melhorada. Portanto, a descoberta e desenvolvimento de fármacos antitumorais direcionados a P13K com maior atividade e melhor segurança atraem cada vez mais o interesse mundial.

[0006] Pirrolo[2,1-f][1,2,4]triazina é uma estrutura privilegiada na química medicinal. Após essa estrutura privilegiada ter sido relatada como análogos de purina (vide: Hayashi, M.; Araki, A.; Maeba, I., Heterocycles, 1992, 34: 569-574. Patil, S.A.; Otter, B.A.; Klein, R.S., Tetrahedron Lett. 1994, 35: 5339-5342), mais e mais compostos contendo essa estrutura privilegiada foram sintetizados e apresentaram uma variedade de atividades biológicas, por exemplo, atuando como inibidores de JAK2 (vide: Weinberg, L.R.; Albom, M.S.; Angeles, T.S. et al., Bioorg. Med. Chem. Lett. 2001, 21: 7325-7330), inibidores de pan-Aurora quinase (Abraham, S. Hadd, M.J.; Tran, L. et al., Bioorg. Med. Chem. Lett. 2011, 21: 5296-5300), inibidores de proteína quinase ativada por mitógeno (p38α MAPK) (Liu, C.; Lin, J.; Wrobleski, S. T. et al., J. Med. Chem., 2010, 53: 6629-6639), inibidores de quinase ALK de linfoma (Mesaros, E. F.; Thieu, T. V.; Wells, G. J. et al., J. Med. Chem., 2012, 55: 115-125), inibidores duais de VEGFR-2/FGFR-1 (Cai, Z.W.; Zhang, Y.; Borzilleri, R. M. et al., J. Med. Chem., 2008, 5: 1976-1980), inibidores de VEGFR-2 (Hunt, J. T.; Mitt, T.; Borzilleri, R. et al., J. Med. Chem., 2004, 47: 4054-4059), inibidores de EGFR1/2 (Gavai, A. V.; Fink, B. E.; Fairfax, D. J. et al., J. Med. Chem., 2009, 52: 6527-6530), inibidores de IGF-1R (vide: Wittman, M. D.; Carboni, J. M.; Yang, Z. et al. J. Med. Chem., 2009, 52: 7360-7363), ou inibidores de Met quinase inhibitors (vide: Schroeder, G. M.; Chen, X.-T.; Williams, D. K. et al., Bioorg. Med. Chem. Lett., 2007, 18: 1945-1951). Além disso, compostos contendo essa estrutura privilegiada de pirrolo[2,1-f][1,2,4]triazina, tal como o inibidor EGFR AC- 480 (WO-2004054514), antagonista de receptor VEGF-2 receptor BMS-690514 (WO2005/066176A1), e antagonista IGF-1R BMS-754807 (US2008/0009497 A1) etc. ingressaram em estudos clínicos. Os métodos sintéticos para a estrutura núcleo de pirrolo[2,1- f][1,2,4]triazina também foram relatados, for exemplo, Thieu, T; Sclafani, J. A.; Levy, D. V. et al., Org. Lett., 2011, 13: 4204-4207. Além das literaturas acima mencionadas, existem muitos pedidos de patente relacionados com a estrutura núcleo de pirrolo[2,1-f][1,2,4]triazina, por exemplo, atuando como inibidores de quinase (publicação No.: US2006/0084650A1), inibidores de quinase EGFR (Publicação No.: US2006/0089358A1, WO2006/069395), inibidores de VEGFR-2 e FGFR-1 (Publicação No.: WO2004/009784, WO2004/043912), e pedidos de patente relacionados com os métodos sintéticos para intermediários (WO2007/005709, WO2008/083398), inibidores de receptor tirosina quinase (WO2007/061882, WO2008/131050), inibidores de Aurora quinase (Publicação Número: WO2009/136966), inibidores de quinase JAK (Publicação No.: WO2010/002472). As pirrolo[2,1-f][1,2,4]triazinas acima mencionadas não abrangem e nem se referem aos compostos da presente invenção e seu uso como inibidores de P13K.

[0007] Com base nos motivos acima mencionados, os inventores criaram e sintetizaram uma série de inibidores de P13K com pirrolo[2,1-f][1,2,4]triazina como estrutura núcleo. Os compostos na presente invenção demonstraram excelente bioatividade in vitro e in vivo, e se espera que sejam desenvolvidos em novo medicamento anticâncer.

Sumário da Invenção

[0008] O objeto da presente invenção consiste em prover um novo tipo de derivados de pirrolo[2,1-f][1,2,4]triazina, conforme mostra a fórmula geral I:

onde: X = CH ou N; Ri é -NR5R6; R2 é

R3 é -NH2, -NHC(O)NHR11, -NHC(O)OR11, -CH2OH, -CH2S(O)2R12, - CH2OS(O)2R12 ou -CH2NHS(O)2R12; R4 é H ou CF3; R5 e R6 são, cada qual, independentemente, um alquila C1-C4, ou combinados com o átomo de nitrogênio ao qual estão ligados para formar um heterociclo saturado não substituído ou um heterociclo saturado substituído com substituinte(s), preferivelmente um pirrolidila, um piperidinila e um piperazinila, o mais preferivelmente um piperazinila; o substituinte sendo -S(O)2R12; R7, R8, R9 e R10 são, cada qual independentemente, H ou alquila C1-C3; alternativamente, R7 e R8 ou R9 e R10 são combinados com o átomo de carbono ao qual estão ligados para formar um anel saturado de 5-8 membros; preferivelmente R7 e R8 ou R9 e R10, com os átomos de carbono aos quais estão ligados como átomos de carbono em ponte, formam biciclo- heterociclo em ponto com anel de morfolina; R11 é um alquila C1-C4, um cicloalquila C3-C6 não substituído ou um cicloalquila C3-C6 substituído com um ou mais substituintes, um benzila não substituído ou um benzila substituído com um ou mais substituintes, um fenila não substituído ou um fenila substituído com um ou mais substituintes, um isoxazolila não substituído ou um isoxazolila substituído com um ou mais substituintes, ou um piridila não substituído ou um piridila substituído com um ou mais substituintes, o um ou mais substituintes são selecionados de um halogênio, um alquila C1-C3, ou um alcoxila C1-C3, -CF3, -C(O)OR12, -C(O)NR12R15,

R12 e R15 são, cada qual independentemente, alquila C1-C3.

[0009] Preferivelmente, a estrutura de fórmula geral I é conforme mostrada a seguir:

onde X, R1, R2, R3 e R4 são conforme acima definidos.

[0010] Mais preferivelmente, R1 é dimetilamino ou 1- metilssulfonil piperazinila; R2 é morfolinila, (S)-3-metilmorfolinila, ou 8-oxa-3- azabiciclo[3.2.1]octan-3-ila; R3 é -NH2, -NHC(O)NHR11, -NHC(O)OR11, -CH2OH, -CH2S(O)2Me, ou - CH2NHS(O)2Me; R4 é H ou -CF3; R11 é um metila, etila, propila, ciclopropila, ter-butila, isobutila, 4-fluorobenzila, fenila não substituído ou um fenila substituído com um ou mais substituintes, um isoxazolila ou um isoxazolila substituído com um ou mais substituintes, ou um anel de piridina não substituído ou um anel de piridina substituído com um ou mais substituintes, e o substituinte sendo selecionado de um flúor, cloro, trifluorometila, metila, metoxi, etoxicarbonila, dimetilaminocarbonila, 4-metil-piperazino-1-carbonila, piperidino-1-carbonila e um 4-dimetilaminopiperidino-1- carbonila.

[0011] Mais preferivelmente, os compostos representados pela fórmula geral I possuem as seguintes estruturas:

onde R1, R2, R11 e R12 são conforme definidos acima, R16 e R17 são iguais ou diferentes, e cada qual independentemente selecionado de alquila C1-C4, ou R16 e R17 são combinados com o átomo de nitrogênio ao qual estão um 4-metil-piperazinila, um 4-dimetilamino-piperidila ou um piperidin-1-ila.

[0012] O mais preferivelmente, a presente invenção provê os compostos mostrados na Tabela 1.Tabela 1 - As estruturas de compostos representativos de fórmula geral I

[0013] Outro objeto da presente invenção consiste em prover um método de preparação para os compostos representados pela o método de preparação compreendendo as seguintes etapas:

onde R13 é um nitro ou —CH2OAc; R14 é um amino ou —CH2OH; 1) Derivado de pirrol 1 e cloramina em N-N-dimetilformamida anidra são submetidos à reação de N-aminação na presença de uma base para obter o composto 2; A base pode ser hidreto de sódio, carbonato de potássio ou ter-butóxido de potássio; 2) o composto representado pela Fórmula 2 sem purificação adicional, é submetido à amonólise para dar o composto 3; 3) o composto 3 reage com um aldeído aromático sob a ação de ácido metal de Lewis para dar o composto IIa, o composto 3 e um aldeído, sob catálise com ácido de Lewis, tal como uma solução de trifluoreto de boro em dietil éter, são submetidos à condensação para dar uma base de Schiff, e então ciclização oxidativa para dar o composto IIa; O metal ácido de Lewis pode ser um reagente de cobre monovalente ou divalente, tal como brometo cuproso, cloreto cuproso, acetato de cobre monoidratado, brometo de cobre, cloreto de cobre anidro, cloreto de cobre diidratado, e similares. Preferivelmente, o cloreto de cobre diidratado é usado por seu maior rendimento e facilidade de pós- processamento se comparado com outros reagentes de cobre. O solvente de reação é o dimetil sulfóxido ou N,N- dimetilformamida, N,N-dimetilacetamida e a temperatura de reação é de 80-150°C. O Composto IIa é submetido à cloração para dar o composto IIb; O agente de cloração é oxicloreto de fósforo ou pentacloreto de fósforo e a base utilizada é N,N-dimetilanilina ou 4- dimetilaminopiridina (DMAP); 5) o Composto IIb e morfolina ou derivado de morfolina são submetidos à reação de substituição nucleofílica para dar o composto IIc; 6) o éster do composto IIc é submetido à reação de hidrólise; ou o nitro do composto IIc é submetido primeiramente à redução, e então o grupo éster de IIc é hidrolisado; 7) o Composto IId reage com uma amina ou com um heterociclo saturado substituído/não substituído contendo um átomo de nitrogênio para dar o composto IIe; A amina aqui é dimetilamina ou metilssulfonil piperazina; 8) o Composto IIe é reduzido através de um agente de redução para dar o composto I’; O agente redutor aqui é complexo de borano-tetraidrofurano ou complexo de borano-dimetil sulfeto; 9) o Composto I’ é também submetido à reação de adição com R11NCO, à esterificação ou amidação com R11OC(O)Cl, à esterificação ou amidação com R11C(O)OH ou R11C(O)Cl ou à reação de esterificação ou à reação de amidação com R12S(O)2Cl), para formar os compostos representados pela fórmula geral I.

[0014] Particularmente, os compostos representados pela fórmula geral Ia-If podem ser preparados através das seguintes etapas: (1) Síntese dos compostos representados pela fórmula geral IIIa-IIIc e síntese de N-(5-formil-4-(trifluorometil)piridin- 2-il)pivalamida (7):

derivado de pirrol 1 e cloramina em N,N-dimetilformamida seca são submetidos à reação de aminação na presença de uma base para obter o composto 2, sendo que a base pode ser hidreto de sódio, carbonato de potássio ou ter-butóxido de potássio. Sem purificação adicional, o produto bruto 2 é diretamente amonolisado em tubo lacrado utilizando solução saturada de amônia em metanol ou solução aquosa concentrada de amônia disponível no comércio para dar o composto 3. O Composto 3 reage com o aldeído aromático correspondente (ex: p- nitrobenzaldeído, acetato de 3-formil-benzila, N-(5-formil-4- (trifluorometil)piridin-2-il)pivalamida) na presença de um ácido metal de Lewis para dar os compostos IIIa, IIIb ou IIIc. Os compostos IIIa, IIIb ou IIIc são também obtidos através da condensação de composto 3 e de vários aldeídos na presença de ácido de Lewis, tal como solução de trifluoreto de boro em dietil éter para dar uma base de Schiff, seguido de ciclização oxidativa. Sendo assim, o ácido metal de Lewis pode ser um reagente de cobre monovalente ou divalente, tal como brometo cuproso, cloreto cuproso, acetato de cobre monoidratado, brometo de cobre, cloreto de cobre anidro, cloreto de cobre diidratado, e similares. Em comparação com outro reagente de cobre, pode-se obter rendimentos mais altos utilizando cloreto de cobre diidratado, com facilidade no pós-processamento. O solvente de reação é dimetil sulfóxido ou N,N-dimetilformamida, N,N-dimetilacetamida e a temperatura de reação é de 80-150°C.

[0015] Assim, o aldeído 7 é obtido através de um procedimento em três etapas. 2-amino-4-trifluorometil- piridina (4) é bromada com N-bromosuccinimida em clorofórmio para dar o composto 5. O grupo amino do composto 5 é protegido com um grupo pivaloíla, e então o composto 7 é obtido utilizando n-butil lítio e N,N-dimetilformamida em tetraidrofurano anidro.(2) síntese de derivados de pirrolo[2,1-f][1,2,4]triazina Ia e Ib, sendo que X = CH e R3 é NHC(O)NHR11:

[0016] O Composto IIIa é clorado através de oxicloreto de fósforo ou pentacloreto de fósforo para dar o produto 8, que reage com morfolina ou seu análogo à temperatura ambiente em tetraidrofurano para obter o composto 9. O Composto 9 é reduzido com paládio a 5% ou 10% sobre carbono para dar o composto 10, o grupo éster do qual é hidrolisado sob condições básicas para dar o ácido 11. O Composto 11 e uma amina, tal como dimetilamina ou metilssulfonil piperazina, etc., são submetidos a uma condensação para dar o composto 12. Então 12 é reduzido com um agente redutor para dar o composto 13, sendo que o agente redutor pode ser complexo de borano-tetraidrofurano ou complexo de borano-dimetil sulfeto. O produto redutivo 13 reage com uma série de isocianatos em diclorometano anidro à temperatura ambiente, ou com acil azida em dioxano sob refluxo para dar Ia. Quando R11 é 4- etoxicarbonil-fenila, Ia é hidrolisado para dar o composto 14. O Composto 14 e dimetilamina, N-metilpiperazina ou 4- dimetilaminopiperidina são submetidos à condensação para dar Ib.

(3) síntese de derivados de pirrolo[2,1-f][1,2,4]triazina Ice onde X = CH e R3 é CH2OH, CH2S(O2)R12 ou CH2NHS(O)2R12:

[0017] O composto clorado IIIb reage com morfolina ou seu análogo à temperatura ambiente em tetraidrofurano para obter o composto 16. O grupo éster do composto 16 é hidrolisado para dar o composto 17. 17 e amina, tal como dimetilamina ou metilssulfonil piperazina, etc., são submetidos à condensação para dar o composto 18, e então 18 é reduzido com uma solução de borano-tetraidrofurano ou solução de borano-dimetil sulfeto para dar Ic. Com cloreto de metilssulfonila, o hidroxila de Ic é convertido no grupo metanossulfonato de partida satisfatório, e convertido no composto 19. O Composto 19 reage com alquil sulfonato de sódio sob irradiação de microondas em N-metilpirrolidona a 120°C por 30 min para dar o composto Id. Além disso, o composto 19 é submetido à amonólise para dar o composto 20, que então reage com cloreto de alquil sulfonila para dar o composto Ie.(4) síntese de derivados de pirrolo[2,1-f][1,2,4]triazina If-Ig onde X = N, R3 é NH2, NHC(O)NHR11 ou NHC(O)OR11 e R4 é CF3;

[0018] O composto clorado IIIc reage com morfolina ou seu análogo em tetraidrofurano à temperatura ambiente para obter o composto 22. O grupo éster do composto 22 é hidrolisado para dar o produto 23. 23 e uma amina ou um heterociclo saturado substituído ou não substituído são submetidos à condensação para dar o composto 24, que é então reduzido com uma solução de borano-tetraidrofurano ou uma solução de borano-dimetil sulfeto para dar If. O Composto If reage com isocianato ou cloroformiato em diclorometano anidro à temperatura ambiente para obter Ig.

[0019] Os compostos de acordo com a presente invenção podem inibir eficientemente a atividade de P13K quinase. Portanto, esses compostos podem ser usados no tratamento de doenças associadas com a via P13K, em particular no tratamento de tumores. Portanto, outro objeto da presente invenção consiste em prover uso dos compostos de fórmula geral I ou de seus sais farmaceuticamente aceitáveis para a preparação de medicamentos inibidores de fosfatidilinositol 3-quinase e de proteína alvo da rapamicina em mamífero, ou seja, na preparação de medicamentos para de doenças relacionadas com fosfatidilinositol-3-quinase. Doenças relacionadas com fosfatidilinositol-3-quinase incluem tumores. Os tumores incluem rabdomiosarcoma humano, câncer de pulmão não de pequenas células, glioma humano, câncer de próstata, câncer ovariano, câncer hepático, câncer de cólon, câncer de mama e assim por diante.

[0020] Além disso, a presente invenção provê uma composição farmacêutica compreendendo uma quantidade terapeuticamente eficaz do composto de fórmula geral I e a composição farmacêutica pode também incluir outros ingredientes, tal como um portador, excipiente, e similares.

[0021] A presente invenção provê um método para tratar doenças relacionadas com fosfatidilinositol 3-quinase, que compreende administrar uma quantidade terapeuticamente eficaz do composto representado pela fórmula geral I.

Breve Descrição dos Desenhos

[0022] A Figura 1 mostra os efeitos de I-33 sobre a via de sinalização P13K de células de rabdomiosarcoma humano Rh30 e de células de glioma humano U87MG; e

[0023] A Figura 2 mostra efeitos de inibição de crescimento de I-30 e de I-33 sobre tumores de glioma humano U87MG subcutaneamente transplantados em camundongos nus (“nude”).

Descrição Detalhada

[0024] A presente invenção será também descrita pelos exemplos a seguir, embora tais exemplos não restrinjam a invenção em nenhum aspecto. Em todos os exemplos, 1H NMR foi registrado com espectrômetros de ressonância magnética nuclear Brucher AM-400 ou GEMINI-300, onde o deslocamento químico é representado por δ (ppm). O espectro de massa foi registrado com espectrômetro de massa MAT-95. As sílicas-gel de malha 200-300 foram utilizadas para separação. Exemplos 1. Preparação de 1-amino-5-carbamoil-1H-pirrol-3-carboxilato de metila (3)

[0025] A mistura de 9g de cloreto de amônio e 330 ml de dietil éter foi resfriada a -20ºC e 15 ml de solução aquosa concentrada de amônia foi adicionada com um gotejador. 216 ml de 5% (porcentagem em massa) de solução de hipoclorito de sódio foi gotejada através de um funil gotejador de pressão constante. A mistura foi agitada a -10ºC por 30 minutos. Após a separação, a camada orgânica foi lavada com salmoura saturada (a cloramina é instável e a salmoura deve ser pré- resfriada). Cloreto de cálcio anidro foi adicionado na camada orgânica e a mistura secada a -40ºC por 1 hora antes do uso.

[0026] O composto pirrol-1,3-dicarboxilato 1 (5g, 25,4 mmol, preparado de acordo com Kamijo, S., Kanazawa, C., e Yamamoto Y. J. AM. CHEM.SOC. 2005, 127, 9260-9266, em que os materiais de partida propiolato de metila e isocianoacetato de etila foram adquiridos da Darui Chemical Co.Ltd.) foi dissolvido em 25 ml de N,N-dimetilformamida anidra e resfriado em banho gelado a 0°C. O hidreto de sódio (60%, dispensado em óleo mineral, 1,22g, 30,5 mmol) foi adicionado em lotes. A mistura foi agitada por 1 hora à temperatura ambiente. Então 300 ml de solução de cloramina em dietil éter preparada antecipadamente foram adicionados em uma única porção e agitados da noite para o dia à temperatura ambiente sob atmosfera de nitrogênio. A mistura de reação foi rapidamente resfriada com solução saturada de tiossulfato de sódio e diluída com água. A camada de dietil éter foi separada e a camada aquosa extraída uma vez com acetato de etila. As camadas orgânicas foram combinadas e lavadas com água três vezes, secadas sobre sulfato de sódio anidro, e concentradas sob pressão reduzida para dar 6,2g de produto bruto que é diretamente submetido à amonólise sem purificação. Para cada 3g de produto bruto adicionou-se 80 ml de solução saturada de amônia em metanol e a reação conduzida a 80°C em tubo lacrado por 2 dias. A mistura de reação foi concentrada para precipitar o sólido, e então deixada assentar por cerca de 1 hora e filtrada para obter 3g de produto na forma de um sólido branco. O rendimento das duas etapas foi de 64,6%. m.p. 222-224°C. 1H NMR (300 MHz, DMSO-d6): δ 7.95 (br s, 1H), 7.38 (s, 1H), 7.33 (br s, 1H), 7.15 (s, 1H), 6.87 (s, 2H), 3.70 (s, 3H). MS (EI) m/z (%): 183 (M+, 100). 2. Preparação de 2-amino-4-trifluorometil-5-bromopiridina (5)

[0027] 2-amino-4-trifluorometilpiridina (5g, 30,8 mmol, Langfang Beixin Chemical Co., Hebei) foi dissolvido em 100 ml de clorofórmio e N-bromosuccinimida (5,92g, 33,3 mmol) foi adicionado em lotes. A mistura foi agitada no escuro ou longe da luz à temperatura ambiente por 3 horas. A mistura de reação foi concentrada e purificada através de cromatografia de coluna com eluição de gradiente (éter de petróleo:acetato de etila = 10:1 e diclorometano), para dar 4,33g de um sólido vermelho. Rendimento: 58,2%. LC-MS: 240 (M+1), 242 (M+2+1). 3. Preparação de N-(5-bromo-4-(trifluorometil)piridin-2- il)pivalamida (6)

[0028] Em banho de gelo, 29,8g de cloreto de pivaloíla (226 mmol) foram adicionados gota a gota a uma solução de composto 5 (50,0g, 207 mmol) e trietilamina (37,9 ml) em diclorometano (300,0 ml) no prazo de uma hora e então agitados por 2 horas até que os materiais de partida desaparecessem. 150 ml de água foram adicionados à solução de reação e agitados à temperatura ambiente por 10 minutos. A camada orgânica foi separada, secada sobre sulfato de sódio anidro, concentrada e separada através de uma coluna pequena com acetato de etila para dar um sólido branco (57,7g, 85,6%). m.p. 126-12°C. 1H NMR (300 MHz, CDC13): δ 8.67 (s, 1H), 8.50 (s, 1H), 8.14 (brs, 1H), 1.33 (s, 9H). 4. Preparação de N-(5-formil-4-(trifluorometil)piridin-2-il) pivalamida (7)

[0029] O Composto 6 (15,0g, 46,2 mmol) foi dissolvido em 350 ml de tetraidrofurano anidro e resfriado a -78°C sob nitrogênio. 45 ml de solução de n-butil lítio 2,5M em tetraidrofurano foram lentamente adicionados à solução de reação no prazo de uma hora. A solução de reação foi agitada a -78°C por 1 hora e então 15 ml de N,N-dimetilformamida anidra foram lentamente adicionados em gotas e agitados por mais 2,5h a -78°C. À solução de reação adicionou-se 120 ml de ácido clorídrico diluído 1M para resfriar rapidamente a reação. A mistura de reação foi extraída com acetato de etila (200 ml x 3). As camadas orgânicas foram combinadas e lavadas com água (200 ml x 3), salmoura saturada (200 ml) respectivamente, e então secadas sobre sulfato de sódio anidro e filtradas. O filtrado foi concentrado e purificado através de cromatografia de coluna (éter de petróleo : diclorometano: acetato de etila = 60:10:1) para dar 7,1 de sólido branco (56,1%). m.p. 96-98°C. 1H NMR (300 MHz, CDCl3): δ 10.32 (br s, 1 H), 9.01 (s, 1 H), 8.73 (s, 1 H), 8.40 (s, 1 H), 1.38 (s, 9 H). 5. Método de Preparação Geral para os compostos IIIa-IIIc

[0030] 5 ml de dimetilsulfóxido foram adicionados a uma mistura de composto 3 (55mg, 0,3 mmol), aldeído correspondente (0,3 mmol) e cloreto de cobre diidratado (51 mg, 0,3 mmol) e a reação foi conduzida a 80-150°C. Concluída a reação, a mistura de reação foi resfriada e despejada em água, e os sólidos precipitados filtrados. Se o produto bruto apresentar solubilidade ruim, ele é lavado com metanol. Se tiver boa solubilidade, é purificado em cromatografia de coluna (diclorometano:metanol = 50:1).

[0031] Preparação de 2-p-nitrofenil-4-oxo-3,4-diidropirrolo[2,1-f][1,2,4]triazino-6-formiato (IIIa) de metila

[0032] De acordo com o método de preparação geral descrito no exemplo 5 acima, o p-nitrobenzaldeído reage com o composto 3 para dar o composto IIIa na forma de um sólido amarelo- claro com 72% de rendimento. m.p.>300 C. 1H NMR (300 MHz, DMSO-d6): δ 12.52 (s, 1H), 8.38 (d, J = 8.5 Hz, 2H), 8.22 (s, 1H), 8.21 (d, J = 8.5 Hz, 2H), 7.26 (s, 1H), 3.80 (s, 3H). LRMS (EI) m/z (%): 314 (M+, 85), 283 (100). HRMS calc. C14H10N4O5: 314.0651; encontrado: 314.0659.

[0033] Preparação de 2-(3-(acetoxilmetil)fenil)-4-oxo-3,4- diidropirrolo[2,1-f][1,2,4] triazino-6-carboxilato de metila (IIIc)

[0034] De acordo com os métodos de preparação geral descritos no exemplo 5 acima, o acetato de 3-formilbenzila reage com o composto 3 para dar o composto IIIvb na forma de um sólido esbranquiçado com 39,0% de rendimento. m.p. 202203°C. 1H NMR (300 MHz, DMSO-d6): δ 12.29 (s, 1H), 8.19 (d, J = 1.7 Hz, 1H), 7.96 (s, 1H), 7.92 (dt, J = 1.7, 7.2 Hz, 1H), 7.58 — 7.53 (m, 2H), 7.24 (d, J = 1.7 Hz, 1H), 5.16 (s, 2H), 3.81 (s, 3H), 2.10 (s, 3H). LC-MS: 342 (M+1).

[0035] Preparação de 4-oxo-2-(6-pivalamido-4- (trifluorometil)-piridin-3-il)-3,4-diidro pirrolo[2,1- f][1,2,4]triazino-6-carboxilato de metila (IIIc).

[0036] De acordo com o método de preparação geral descrito no exemplo 5 acima, o composto 7 reage com o composto 3 para dar o composto IIIc na forma de um sólido amarelo-claro com 25,9% de rendimento. m.p. 244-24°C. 1H NMR (300 MHz, DMSO- d6): δ 12.47 (s, 1H), 10.68 (s, 1H), 8.86 (s, 1H), 8.57 (s, 1H), 8.20 (d, J = 1.7 Hz, 1H), 7.29 (d, J = 1.7 Hz, 1H), 3.81 (s, 3H), 1.28 (s, 9H). LC-MS: 438 (M+1).

[0037] 6. Preparação de 2-p-nitrofenil-4-cloropirrolo[2,1- f][1,2,4]triazino-6-carboxilato de metila (8)

[0038] 20 ml de oxicloreto fosforoso foram adicionados a uma mistura de composto IIIa (4,74g, 15,1 mmol) e 4-dimetilamino piridina (4,34 g, 35,6 mmol) e refluxados por 5 horas. Após resfriamento da mistura de reação, uma porção de oxicloreto de fósforo foi destilada sob pressão reduzida. O resíduo foi despejado em gelo moído, filtrado e secado para dar um sólido amarelo. (4.6 g, 91.8%) . m.p. 218-223°C. 1H NMR (300 MHz, CDCl3): δ 8.54 (d, J = 8.9 Hz, 2H), 8.36 (s, 1H), 8.34 (d, J = 8.9 Hz, 2H), 7.46 (d, J = 1.3 Hz, 1H), 3.96 (s, 3H). MS (EI) m/z (%): 332 (M+, 100), 334 (M+2,33).7. Preparação do composto 9

[0039] 2-(p-nitrofenil)-4-(morfolinil)-pirrolo[2,1- f][1,2,4]triazino-6-carboxilato de metila (9a).

[0040] O Composto 8 (4,6g, 13,8 mmol) foi suspenso em 150 ml de tetraidrofurano, 3,6 ml de morfolina foram adicionados gota a gota e reagidos por 5 horas à temperatura ambiente. 3,9g de sólido foram obtidos por filtração, e o filtrado separado através de cromatografia de coluna com diclorometano para dar 1,1 g de composto amarelo 9a (94,3%). M.P.296-300°C. 1H NMR (300 MHz, CDCl3): δ 8.45 (d, J = 8.7 Hz, 2H), 8.29 (d, J = 8.7 Hz, 2H), 8.14 (d, J = 1.3 Hz, 1H), 7.23 (d, J = 1.3 Hz, 1H), 4.17 (t, J = 4.8 Hz, 4H), 3.91 (t, J = 4.8 Hz, 7H). LC-MS: 384 (M+1).

[0041] 4-(8-oxa-3-azabiciclo[3.2.1]octan-3-il)-2-(p- nitrofenil)pirrolo[2,1-f][1,2,4]triazino-6-carboxilato de metila (9b).

[0042] O Composto 8 (100mg, 0,3 mmol) foi suspenso em 15 ml de tetraidrofurano e cloridrato de 8-oxa-3- azabiciclo[3.2.1]octano (54 mg, 0,36 mmol) e uma gota de trietilamina foram adicionados e reagidos por 3-4 horas à temperatura ambiente. O solvente foi removido sob pressão reduzida. O resíduo foi lavado com água, secado e purificado através de cromatografia de coluna com diclorometano, para dar 109mg de sólido amarelo 9b (88,6%). m.p. 278-280°C. 1H NMR (300 MHz, CDCl3): δ 8.45 (d, J =9.0 Hz, 2H), 8.29 (d, J = 9.0 Hz, 2H), 8.13 (d, J = 1.3 Hz, 1H), 7.21 (d, J = 1.3 Hz, 1H), 4.60 (br s, 4H), 3.91 (s, 3H), 3.63 (br, s, 2H), 2.08 — 2.04 (m, 2H), 1.91 - 1.84 (m, 2H). LC-MS: 410 (M+1). 8. Método de preparação geral do composto 10.

[0043] Um solvente misto de metanol e clorofórmio (500 ml, 1:1) e 10% em peso de paládio sobre carbono de material de partida (10% Pd-Carbono) foram adicionados ao composto 9 (13 mmol) e reduzidos por 24 horas sob atmosfera de hidrogênio à temperatura ambiente. Paládio-carbono foi filtrado em placa de celite, e o filtrado concentrado sob pressão reduzida para obter quantitativamente o composto 10.

[0044] 2-(p-aminofenil)-4-(morfolinil)pirrolo[2,1- f][1,2,4]triazino-6-carboxilato de metila (10a)

[0045] 10a foi preparado a partir de 9a de acordo com o método de preparação geral do composto 10. Sólido branco, m.p. 238-240°C. 1H NMR (300 MHz, DMSO-d6): δ 8.13 (d, J = 1.6 Hz, 1H), 7.93 (d, J = 8.5 Hz, 2H), 7.31 (d, J = 1.6 Hz, 1H), 6.62 (d, J = 8.5 Hz, 2H), 5.70 (br, s, 2H), 4.04 (t, J = 4.5 Hz, 4H), 3.80 (s, 3H), 3.77 (t, J = 4.5 Hz, 4H). MS (EI) m/e (%): 353 (M+, 100).

[0046] 2-(p-aminofenil)-4-(8-oxa-3-azabiciclo[3.2.1]octan- 3-il)pirrolo[2,1-f][1,2,4] triazino-6-carboxilato de metila (10b)

[0047] 10b foi preparado a partir de 9b, de acordo com o método de preparação geral do composto 10. Amarelo sólido. m.p. 254-256°C. 1H NMR (300 MHz, DMSO-d6): δ 8.21 (s, 1H), 8.19 (d, J = 8.7 Hz, 2H), 7.34 (s, 1H), 7.22 (d, J = 8.7 Hz, 2H), 4.53 (br s, 4H), 3.81 (s, 3H), 3.49 (br, s, 2H), 1.89 — 1.85 (m, 2H), 1.78—1.75 (m, 2H). LC-MS: 380 (M+1).

[0048] 9. Método de Preparação do composto 11

[0049] Ácido 2-(p-aminofenil)-4-(morfolinil)pirrolo[2,1-f][1,2,4]triazino-6-carboxílico (11a).

[0050] O Composto 10a (14 mmol) foi suspenso em 150 ml de etanol e 30 ml de solução aquosa de hidróxido de sódio 2M foram adicionados. A mistura de reação foi refluxada, tornando-se uma solução clara e a reação foi substancialmente concluída. 2ml de ácido acético foram adicionados. A maior parte do solvente foi destilada sob pressão reduzida e os precipitados filtrados para dar o composto 11a (3.25 g, 68.5%). m.p. > 300°C. 1H NMR (300 MHz, DMSO-d6): δ 7.91(d, J = 8.8 Hz, 2H), 7.71 (d, J = 1.2 Hz, 1H), 6.99 (d, J = 1.2 Hz, 1H), 6.59 (d, J =8.8 Hz, 2H), 5.49 (s, 2H), 4.02 (t, J = 4.4 Hz, 4H), 3.77 (t, J = 4.4 Hz, 4H). MS (EI) m/e (%): 339 (M+, 100).

[0051] Ácido 2-(p-aminofenil)-4-(8-oxa-3-azabiciclo[3.2.1]octan-3-il)pirrolo[2,1-f][1,2,4]triazino-6- carboxílico (11b).

[0052] De acordo com o mesmo procedimento da preparação do composto 11a, 360 mg de 10b (0,95 mmol) como material de partida foram hidrolisados para dar o composto 11b (270mg, 77,9%). m.p. 278-280°C. 1H NMR (300 MHz, DMSO-d6): δ 12.46 (s, 1H), 8.04 (d, J = 1.7 Hz, 1H), 7.92 (d, J = 8.8 Hz, 2H), 7.22 (d, J = 1.7 Hz, 1H), 6.60 (d, J = 8.8 Hz, 2H), 5.55 (br s, 2H), 4.51 (br s, 4H), 3.48 (br, s, 1H), 3.44(br, s, 1H), 1.88 — 1.85 (m, 2H), 1.79 - 1.75 (m, 2H). LC-MS: 366 (M+1).

[0053] 10. Método de Preparação Geral do Composto 12

[0054] 2-(p-aminofenil)-N,N-dimetil-4-morfolinopirrolo[2,1- f][1,2,4]triazino-6-carboxamida

[0055] Cloridrato de dimetilamina (686 mg, 8,4 mmol) foi adicionado a 30 ml de N,N-dimetilformamida anidra e carbonato de potássio (3,48g, 25,2 mmol) foi adicionado e agitado por 30 minutos à temperatura ambiente. Então, o composto 11a (4,2 mmol), HBTU hexafluorofosfato de (benzotriazol-N,N,N’,N’- tetrametilurônio, 4,77g, 12,6 mmol) e trietilamina (2,9 ml, 21 mmol) foram adicionados e reagidos da noite para o dia à temperatura ambiente sob atmosfera de nitrogênio. A mistura de reação foi despejada em água e filtrada. O filtrado foi extraído uma vez com acetato de etila, secado sobre sulfato de sódio anidro, filtrado e concentrado até secagem. O resíduo foi combinado com a torta de filtro. O produto bruto foi purificado através de cromatografia de coluna (diclorometano:metanol = 100:1) para dar um composto branco 12a (922 mg, 60,0%). m.p. 238-239°C. 1H NMR (300 MHz, CDC13): δ 8.08 (d, J = 8.6 Hz, 2H), 7.82 (d, J = 1.4 Hz, 1H), 7.02 (d, J = 1.4 Hz, 1H), 6.73 (d, J = 8.6 Hz, 2H), 4.11 (t, J = 4.4 Hz, 4H), 3.86 (t, J = 4.4 Hz, 4H), 3.20 (br, s, 6H). MS (EI) m/e (%): 366 (M+, 100).

[0056] (2-(p-aminofenil)-4-morfolinopirrolo[2,1-f][1,2,4- [triazin-6-il)(4-metilssulfonil)piperazin-1-il)metanona (12b).

[0057] Um sólido branco 12b (540mg, 31,4%) foi obtido de acordo com o mesmo procedimento da preparação do composto 12a, sendo que 1,2g de composto 11a (3,54 mmol) foram utilizados como material de partida e trifluorometanossulfonato de metilssulfonilpiperazina (1,85g, 7,1 mmol) foi utilizado em lugar de cloridrato de dimetilamina. m.p. 185-186°C. 1H NMR (300 MHz, CDC13) : δ 8.07 (d, J = 8.6 Hz, 2H), 7.75 (d, J = 1.5 Hz, 1H), 6.93 (d, J = 1.5 Hz, 1H), 6.71 (d, J = 8.6 Hz, 2H), 4.09 (t, J = 4.8 Hz, 4H), 3.90 (t, J = 4.8 Hz, 4H), 3.86 (t, J = 4.8 Hz, 4H), 3.27 (t, J = 4.8 Hz, 4H), 2.80 (s, 3H). LC-MS: 508 (M+23).

[0058] (2-(p-aminofenil)-4-(8-oxa-3-azabiciclo[3.2.1]octan-3-il)pirrolo[2,1-f][1,2,4]triazin-6-il)(4- (metilssulfonil)piperazin-1-il)metanona (12C).

[0059] 183 mg de composto 11b (0,5 mmol) foram utilizados em lugar do composto 11a, e o composto 12c (120 mg, 46,8%) foi obtido da mesma forma que a preparação do composto 12b. m.p. > 300°C. 1H NMR (300 MHz, DMSO-d6): δ 7.96 (s, 1H), 7.91(d, J = 8.5 Hz, 2H), 7.06 (s, 1H), 6.61 (d, J = 8.5 Hz, 2H), 5.53 (s, 2H), 4.51 (br, s, 4H), 3.75 (t, J = 4.5 Hz, 4H), 3.48 (br s, 1H), 3.43 (br s, 1H), 3.18 (t, J = 4.5 Hz, 4H), 2.91 (s, 3H), 1.90 — 1.75 (m, 4H). LC-MS: 511 (M+), 512 (M+1).11. Método de Preparação Geral do Composto 13

[0060] 2-(p-aminofenil)-6-(dimetilaminometil)(-4- morfolinopirrolo[2,1-f][1,2,4]triazina (13a).

[0061] 1g do composto 12a (2,7 mmol) e 50 ml de tetraidrofurano ou dioxano foram adicionados em um frasco de duas bocas de 150 ml e refluxados sob atmosfera de nitrogênio. 2M de solução de borano-dimetil sulfeto (10,8 mmol) foi lentamente adicionado em gotas e refluxado por 2 horas. A mistura de reação foi rapidamente resfriada com metanol e purificada através de cromatografia de coluna com diclorometano para dar um sólido branco 13a (930 mg, 96,7%). m.p. 205°C (decomposição) . 1H NMR (300 MHz, DMSO-d6) : δ 7.92 (d, J = 8.5 Hz, 2H), 7.86 (s, 1H), 7.05 (s, 1H), 6.60 (d, J = 8.5 Hz, 2H), 5.48 (br s, 2H), 4.02 (t, J = 4.5 Hz, 4H), 3.92 (s, 2H), 3.77 (t, J = 4.5 Hz, 4H), 2.42 (s, 6H). MS (EI) m/e (%): 352 (M+, 24).

[0062] 2-(p-aminofenil)-6-[((4-metilssulfonil)piperazin-1-il)metil]-4-morfolinopirrolo[2,1-f][1,2,4]triazina (13b).

[0063] O Composto 12b (540 mg, 1,1 mmol) foi usado em lugar do composto 12a como material de partida, e o composto 13b (288 mg, 55,0%, sólido branco) foi preparado de acordo com o mesmo procedimento de preparação do composto 13a. m.p. 1992 00°C. 1H NMR (300 MHz, DMSO-d6): δ 7.92 (d, J = 8.6 Hz, 2H), 7.85 (d, J = 1.4 Hz, 1H), 7.03 (d, J = 1.4 Hz, 1H), 6.60 (d, J = 8.6 Hz, 2H), 5.47 (s, 2H), 4.08 (s, 2H), 4.03 (t, J = 4.6 Hz, 4H), 3.78 (t, J = 4.6 Hz, 4H), 3.49 — 3.35 (m, 4H), 2.95 (s, 3H), 2.89 (t, J = 5.7 Hz, 4H). MS (EI) m/e (%): 471 (M+, 12).

[0064] 4-(4-(8-oxa-3-azabiciclo[3.2.1]octan-3-il)-6-((4-(metilssulfonil)piperazin-1-il)metil)pirrolo[2,1- f][1,2,4]triazin-2-il)anilina (13c).

[0065] O Composto 12c (100mg, 0,195 mmol) foi usado em lugar do composto 12a como matéria prima, e o composto 13c foi preparado de acordo com o mesmo procedimento de preparação do composto 13a na forma de um sólido amarelo- claro (39mg, 40,1%). 1H NMR (300 MHz, DMSO-d6): δ 7.89(d, J = 8.4 Hz, 2H), 7.61 (s, 1H), 6.78 (s, 1H), 6.59 (d, J = 8.4 Hz, 2H), 5.46 (br s, 2H), 4.50 (br, s, 4H), 3.56 (s, 2H), 3.43 (br s, 1H), 3.39 (br s, 1H), 3.30 (br s, 4H), 3.11 (br s, 4H), 2.86 (s, 3H), 1.88 - 1.85 (m, 2H), 1.78 - 1.75 (m, 2H). MS (EI) m/e (%): 497 (M+, 12). 12. Método de preparação geral do composto I (1-13, 17-20).

[0066] 1-etil-3-[4-(6-(dimetilaminometil)-4-morfolinopirrolo[2,1-f][1,2,4]triazin-2-il)fenil]ureia (I-1)

[0067] O Composto 13a (0,15 mmol) foi dissolvido em 10 ml de diclorometano anidro, e 3 equiv. de isocianato de etila foram adicionados e agitados à temperatura ambiente da noite para o dia. O composto alvo foi obtido por filtração.

[0068] Sólido branco (22 mg, 34,6%). m.p. 222-224oC. 1H NMR (300 MHz, DMSO-d6): δ 8.65 (s, 1H), 8.09 (d, J = 8.8 Hz, 2H), 7.93 (s, 1H), 7.48 (d, J = 8.8 Hz, 2H), 7.11 (s, 1H), 6.16 (t, J = 5.8 Hz, 1H), 4.05 (t, J = 4.5 Hz, 4H), 3.94 (s, 2H), 3.78 (t, J = 4.5 Hz, 4H), 3.12 (quint, J = 5.8, 7.1 Hz, 2H), 2.43 (s, 6H), 1.06 (t, J = 7.1 Hz, 3H). ESI-MS: 424 (M+1).

[0069] 1-propil-3-[4-(6-(dimetilaminometil)-4-morfolinopirrolo[2,1-f][1,2,4]triazin-2-il)fenil]ureia (I-2)

[0070] O processo de preparação era idêntico ao da de I-1, com exceção de que isocianato de etila foi substituído com isocianato de propila. Sólido branco (23 mg, 35,1%). m.p. 224-225°C. 1H NMR (300 MHz, DMSO-d6): δ 8.64 (s, 1H), 8.09 (d, J = 8.9 Hz, 2H), 7.93 (s, 1H), 7.48 (d, J = 8.9 Hz, 2H), 7.11 (s, 1H), 6.20 (t, J = 5.8 Hz, 1H), 4.05 (t, J = 5.1 Hz, 4H), 3.94 (s, 2H), 3.78 (t, J = 5.1 Hz, 4H), 3.05 (q, J = 5.8, 7.2 Hz, 2H), 2.43 (s, 6H), 1.44 (sext, J = 7.2 Hz, 2H), 0.88 (t, J = 7.2 Hz, 3H). ESI-MS: 438 (M+1).

[0071] 1-ter-butyl-3-[4-(6-(dimetilaminometil)-4- morfolinopirrolo[2,1-f][1,2,4]triazin-2-il)fenil]ureia (I-3)

[0072] O processo de preparação era idêntico ao da I-1, com exceção de que isocianato de etila foi substituído por isocianato de ter-butila. Sólido branco (11 mg, 16,3%). m.p. 220-224°C. 1H NMR (300 MHz, DMSO-d6): δ 8.49 (s, 1H), 8.08 (d, J = 8.8 Hz, 2H), 7.93 (d, J = 1.0 Hz, 1H), 7.44 (d, J = 8.8 Hz, 2H), 7.11 (d, J = 1.0 Hz, 1H), 6.07 (s, 1H), 4.05 (t, J = 4.4 Hz, 4H), 3.94 (s, 2H), 3.78 (t, J = 4.4 Hz, 4H), 2.42 (s, 6H), 1.30 (s, 9H). ESI-MS: 452 (M+1).

[0073] 1-[4-(6-dimetilaminometil-4-morfolinopirrolo[2,1- f][1,2,4]triazin-2-il)fenil]-3-(p-fluorofenil)ureia (I-4)

[0074] O processo de preparação era idêntico à da preparação de I-1, com exceção de que isocianato de etila foi substituído por isocianato de p-fluorofenila. Sólido branco (30 mg, 40,9%). m.p. 217-219°C. 1H NMR (300 MHz, DMSO-d6): δ 8.90 (s, 1H), 8.75 (s, 1H), 8.15 (d, J = 8.7 Hz, 2H), 7.95 (s, 1H), 7.55 (d, J = 8.7 Hz, 2H), 7.47 (dd, J = 4.6, 8.8 Hz, 2H), 7.13 (t, J = 8.8 Hz, 2H), 7.13 (s, 1H), 4.06 (t, J = 4.6 Hz, 4H), 3.94 (s, 2H), 3.79 (t, J = 4.6 Hz, 4H), 2.43 (s, 6H). ESI-MS: 490 (M+1).

[0075] 1-[4-(6-dimetilaminometil-4-morfolinopirrolo[2,1- f][1,2,4]triazin-2-il)fenil]-3-(p-clorofenil)ureia I-5.

[0076] O processo de preparação era idêntico ao da preparação I-1, com exceção de que isocianato de etila foi substituído por isocianato de p-clorofenila. Sólido branco (43 mg, 56,8%) . m.p. 237°C (decomposição) . 1H NMR (300 MHz, DMSO-d6): δ 8.95 (s, 1H), 8.87 (s, 1H), 8.15 (d, J = 8.5 Hz, 2H), 7.95 (s, 1H), 7.55 (d, J = 8.5 Hz, 2H), 7.50 (d, J = 8.7 Hz, 2H), 7.34 (d, J = 8.7 Hz, 2H), 7.13 (s, 1H), 4.06 (t, J = 4.5 Hz, 4H), 3.94 (s, 2H), 3.79 (t, J = 4.5 Hz, 4H), 2.43 (s, 6H). ESI-MS: 506 (M+1), 508 (M+2+1).

[0077] 1-(3-clorofenil)-3-(4-(6-((dimetilamino)metil)-4- morfolinopirrolo[2,1-f][1,2,4]triazin-2-il)fenil)ureia (I-6).

[0078] O processo de preparação era idêntico ao da preparação I-1, com exceção de que isocianato de etila foi substituído por isocianato de m-clorofenila. Sólido branco(25 mg, 33,0%). m.p. 173-176°C. 1H NMR (300 MHz, DMSO-d6): δ 9.00 (s, 1H), 8.94 (s, 1H), 8.16 (d, J = 8.8 Hz, 2H), 7.95 (d, J = 1.3 Hz, 1H), 7.73 (t, J = 1.9 Hz, 1H), 7.56 (d, J = 8.8 Hz, 2H), 7.34 — 7.25 (m, 2H), 7.13 (d, J = 1.3 Hz, 1H), 7.03 (dt, J = 1.9, 7.0 Hz, 1H), 4.07 (t, J = 4.6 Hz, 4H), 3.94 (s, 2H), 3.79 (t, J = 4.6 Hz, 4H), 2.43 (s, 6H). ESI-MS: 506 (M+1), 508 (M+2+1).

[0079] 1-(2,4-diclorofenil)-3-(4-(6-((dimetilamino)metil)- 4-morfolinopirrolo[2,1-f][1,2,4]triazin-2-il)fenil)ureia (I- 7)

[0080] O processo de preparação era idêntico ao da preparação I-1, com exceção de que isocianato de etila foi substituído por isocianato de 2,4-diclorofenila. Sólido branco (29mg, 35,8%). m.p. 225°C (decomposição). 1H NMR (300 MHz, DMSO-d6): δ 9.66 (s, 1H), 8.45 (s, 1H), 8.22 (d, J = 9.0 Hz, 1H), 8.18 (d, J = 8.8 Hz, 2H), 7.95 (d, J = 1.4 Hz, 1H), 7.64 (d, J = 2.4 Hz, 1H), 7.57 (d, J = 8.8 Hz, 2H), 7.40 (dd, J = 2.4, 9.0 Hz, 1H), 7.13 (d, J = 1.4 Hz, 1H), 4.07 (t, J = 4.7 Hz, 4H), 3.95 (s, 2H), 3.79 (t, J = 4.7 Hz, 4H), 2.43 (s, 6H). ESI-MS: 540 (M+1), 542 (M+2+1).

[0081] 1-(4-(6-((dimetilamino)metil)-4-morfolinopirrolo[2,1-f][1,2,4]triazin-2-il)fenil)3-(3- (trifluorometil)fenil)ureia (I-8)

[0082] O processo de preparação era idêntico ao da preparação I-1, com exceção de que isocianato de etila foi substituído por isocianato de m-trifluorofenila. Sólido branco (81 mg, 100%). m.p. 160-163°C. 1H NMR (300 MHz, DMSO- d6): δ 9.73 (s, 1H), 9.55 (s, 1H), 8.16 (d, J = 8.8 Hz, 2H), 8.01 (s, 1H), 7.96 (d, J = 1.1 Hz, 1H), 7.61 (d, J = 8.6 Hz, 1H), 7.57 (d, J = 8.8 Hz, 2H), 7.52 (t, J = 7.5, 8.6 Hz, 1H),7.31 (d, J = 7.5 Hz, 1H), 7.12 (d, J = 1.1 Hz, 1H), 4.07 (t,J = 4.4 Hz, 4H), 3.94 (s, 2H), 3.79 (t, J = 4.4 Hz, 4H), 2.43 (s, 6H). ESI-MS: 540 (M+1).

[0083] 1-(4-(6-((dimetilamino)metil)-4-morfolinopirrolo[2,1-f][1,2,4]triazin-2-il)fenil)-3-(p-tolil)ureia (I-9)

[0084] O processo de preparação era idêntico ao da preparação I-1, com exceção de que isocianato de etila foi substituído por isocianato de p-tolila. Sólido branco (37 mg, 50,8%) . m.p. 230°C (decomposição) . 1H NMR (300 MHz, DMSO-d6) : δ 8.86 (s, 1H), 8.61 (s, 1H), 8.15 (d, J = 8.8 Hz, 2H), 7.95 (d, J = 1.2 Hz, 1H), 7.55 (d, J = 8.8 Hz, 2H), 7.35 (d, J = 8.6 Hz, 2H), 7.13 (d, J = 1.2 Hz, 1H), 7.09 (d, J = 8.6 Hz, 2H), 4.06 (t, J = 4.6 Hz, 4H), 3.94 (s, 2H), 3.79 (t, J = 4.6 Hz, 4H), 2.43 (s, 6H), 2.24 (s, 3H). ESI-MS: 486 (M+1).

[0085] 1-(4-(6-((dimetilamino)metil)-4-morfolinopirrolo[2,1-f][1,2,4]triazin-2-il)fenil)- 3-(4-metoxifenil)ureia (I-10)

[0086] O processo de preparação era idêntico ao da preparação I-1, com exceção de que isocianato de etila foi substituído por isocianato de p-metoxilfenila. Sólido branco (49 mg, 65,2%) . m.p. 235°C (decomposição) . 1H NMR (300 MHz, DMSO-d6): δ 8.82 (s, 1H), 8.52 (s, 1H), 8.14 (d, J = 8.8 Hz, 2H), 7.94 (s, 1H), 7.55 (d, J = 8.8 Hz, 2H), 7.37 (d, J = 8.8 Hz, 2H), 7.12 (s, 1H), 6.87 (d, J = 8.8 Hz, 2H), 4.06 (t, J = 4.5 Hz, 4H), 3.95 (s, 2H), 3.79 (t, J = 4.5 Hz, 4H), 3.72 (s, 3H), 2.43 (s, 6H). ESI-MS: 502 (M+1).

[0087] 1-(4-(6-((dimetilamino)metil)-4-morfolinopirrolo[2,1-f][1,2,4]triazin-2-il)fenil)-3-(4- fluorobenzil)ureia (I-11)

[0088] O processo de preparação era idêntico ao da preparação I-1, com exceção de que isocianato de etila foi substituído por isocianato de p-fluorobenzila. Sólido branco (32mg, 42,4%). m.p. 219-223°C. 1H NMR (300 MHz, DMSO-d6): δ 8.83 (s, 1H), 8.10 (d, J = 8.8 Hz, 2H), 7.93 (s, 1H), 7.50 (d, J = 8.8 Hz, 2H), 7.35 (dd, J = 5.7, 8.6 Hz, 2H), 7.16 (t, J = 8.6 Hz, 2H), 6.70 (t, J = 5.5 Hz, 1H), 7.11 (s, 1H), 4.29 (d, J = 5.5 Hz, 2H), 4.05 (t, J = 4.4 Hz, 4H), 3.94 (s, 2H), 3.78 (t, J = 4.4 Hz, 4H), 2.42 (s, 6H). ESI-MS: 504 (M+1).

[0089] 1-(4-(6-((dimetilamino)metil)-4-morfolinopirrolo[2,1-f][1,2,4]triazin-2-il)fenil)-3-(3,5- dimetilisoxazol-4-il)ureia (I-12).

[0090] O processo de preparação era idêntico ao da preparação I-1, com exceção de que isocianato de etila foi substituído por 3,5-dimetilisoxazolil-4-isocianato. Sólido branco (24 mg, 31,7%). m.p. 236°C (decomposição). 1H NMR (300 MHz, DMSO-d6): δ 9.05 (s, 1H), 8.14 (d, J = 8.8 Hz, 2H), 7.94(d, J = 1.6 Hz, 1H), 7.76 (s, 1H), 7.55 (d, J = 8.8 Hz, 2H), 7.12 (d, J = 1.6 Hz, 1H), 4.06 (t, J = 4.5 Hz, 4H), 3.94 (s, 2H), 3.79 (t, J = 4.5 Hz, 4H), 2.43 (s, 6H), 2.30 (s, 3H), 2.13 (s, 3H). ESI-MS: 505 (M+1).

[0091] 4-(3-(4-(6-((dimetilamino)metil)-4-morfolinopirrolo[2,1-f][1,2,4]triazin-2-il)fenil)- ureido)benzoato de etila (I-13).

[0092] O processo de preparação era idêntico ao da preparação I-1, com exceção de que isocianato de etila foi substituído por isocianato de p-etoxicarbonilfenila. Sólido branco (47 mg, 57,7%). m.p. 175-176°C. 1H NMR (300 MHz, DMSO- d6): δ 8.24 (d, J = 8.5 Hz, 2H), 8.01 (d, J = 8.7 Hz, 2H), 7.68 (s, 1H), 7.49 (d, J = 8.5 Hz, 2H), 7.42 (d, J = 8.7 Hz, 2H), 6.92 (s, 1H), 6.78 (s, 1H), 6.70 (s, 1H), 4.36 (q, J = 7.0 Hz, 2H), 4.10 (t, J = 4.5 Hz, 4H), 4.03 (s, 2H), 3.89 (t, J = 4.5 Hz, 4H), 2.58 (s, 6H), 1.39 (t, J = 7.0 Hz, 3H). ESIMS: 544 (M+1).

[0093] 1-Etil-3-(4-(6-((4-(metilssulfonil)piperazin-1- il)metil)-4-morfolinopirrolo[2,1-f][1,2,4]triazin-2- il)fenil)ureia (I-17)

[0094] O processo de preparação era idêntico ao da preparação I-1, com exceção de que 13a foi substituído pelo composto 13b. Sólido branco (34 mg, 41,8%). m.p. 200°C (decomposição). 1H NMR (300 MHz, DMSO-d6): δ 8.92 (s, 1H), 8.08 (d, J = 8.8 Hz, 2H), 7.92 (s, 1H), 7.49 (d, J = 8.8 Hz, 2H), 7.09 (s, 1H), 6.36 (t, J = 5.6 Hz, 1H), 4.10 (s, 2H), 4.05 (t, J = 4.5 Hz, 4H), 3.79 (t, J = 4.5 Hz, 4H), 3.49 — 3.37 (m, 4H), 3.11 (quint, J = 5.6, 7.0 Hz, 2H), 2.96 (s, 3H), 2.89 (br, s, 4H), 1.05 (t, J = 7.0 Hz, 3H). ESI-MS: 543 (M+1)

[0095] 1-(4-fluorofenil)-3-(4-(6-((4-(metilssulfonil)piperazin-1-il)metil)-4-morfolinopirrolo[2,1- f][1,2,4]triazin-2-il)fenil)ureia (I-18).

[0096] O processo de preparação era idêntico ao da preparação I-4, com exceção de que 13a foi substituído pelo composto 13b. Sólido branco (45 mg, 49,3%). m.p. 255-256°C. 1H NMR (300 MHz, DMSO-d6): δ 8.89 (s, 1H), 8.74 (s, 1H), 8.15 (d, J = 8.8 Hz, 2H), 7.93 (s, 1H), 7.56 (d, J = 8.8 Hz, 2H), 7.47 (dd, J = 4.8, 8.8 Hz, 2H), 7.13 (t, J = 8.8 Hz, 2H), 6.50 (s, 1H), 4.10 (s, 2H), 4.07 (br, s, 4H), 3.80 (br, s, 4H), 3.58 — 3.38 (m, 4H), 2.96 (s, 3H), 2.90 (br, s, 4H).ESI-MS: 609 (M+1).

[0097] 1-(4-(4-(8-oxa-3-azabiciclo[3.2.1]octan-3-il)-6-((4- (metilssulfonil)piperazin-1-il)metil)-pirrolo[2,1- f][1,2,4]triazin-2-il)fenil)-3-(4-fluorofenil)ureia

[0098] O processo de preparação era idêntico ao da preparação I-4, com exceção de que 13a foi substituído pelo composto 13c. Sólido branco (31mg, 32,6%). m.p. 266-267°C. 1H NMR (300 MHz, DMSO-d6): δ 8.89 (s, 1H), 8.75 (s, 1H), 8.13 (d, J = 8.5 Hz, 2H), 7.70 (s, 1H), 7.54 (d, J = 8.5 Hz, 2H), 7.47 (dd, J = 5.0, 8.8 Hz, 2H), 7.13 (t, J = 8.8 Hz, 2H),1. 84 (s, 1H), 4.51 (br, s, 4H), 3.57 (s, 2H), 3.47 (br s,1H), 3.43 (br s, 1H), 3.32 (br s, 4H), 3.11 (t, J = 4.0 Hz, 4H), 2.87 (s, 3H), 1.89 — 1.85 (m, 2H), 1.80 — 1.76 (m, 2H). ESI-MS: 635 (M+1).

[0099] 4-(-3-(4-(6-((4-(metilssulfonil)piperazin-1- il)metil)-4-morfolinopirrolo[2,1-f][1,2,4]triazin-2- il)fenil)ureído)benzoato de etila (I-20).

[0100] O processo de preparação era idêntico ao de I-13, com exceção de que 13a foi substituído pelo composto 13b. Sólido branco (40 mg, 40,2%). m.p. 260-262°C. 1H NMR (300 MHz, DMSO-d6): δ 9.15 (s, 1H), 9.02 (s, 1H), 8.16 (d, J = 8.8 Hz, 2H), 7.90 (d, J = 8.8 Hz, 2H), 7.72 (s, 1H), 7.62 — 7.56 (m, 4H), 6.90 (s, 1H), 6.52 (s, 3H), 4.28 (q, J = 7.0 Hz, 2H), 4.05 (br s, 4H), 3.79 (br s, 4H), 3.58 (s, 2H), 3.11 (br s, 4H), 2.87 (br s, 4H), 1.31 (t, J = 7.0 Hz, 3H). ESI-MS: 663 (M+1).13. Método de preparação geral para os compostos I-14 ~ I-16

[0101] O ácido carboxílico correspondente (0,5 mmol) foi dissolvido em N,N-dimetilformamida anidra e trietilamina (101 mg, 1 mmol) e difenil azidofosfato (165 mg, 0,6 mmol) foi adicionado e reagido à temperatura ambiente por 1 hora. A mistura de reação foi despejada em água e filtrada, e a torta de filtro secada em forno a vácuo à temperatura ambiente por 24 horas para dar p-carbamoilbenzoil azida. O Composto 13 (0,1 mmol) e p-carbamoilbenzoil azida (0,2 mmol) em dioxano anidro foram refluxados por 3 horas. O solvente foi destilado sob pressão reduzida. O resíduo foi dissolvido em solvente misto de diclorometano e metanol e purificado através de cromatografia de camada fina preparatória (diclorometano:metanol = 8:1), para dar o produto desejado puro.

[0102] 4-(3-(4-(6-((dimetilamino)metil)-4-morfolinopirrolo[2,1-f][1,2,4]triazin-2-il)fenil)ureído)-N,N- dimetilbenzamida (I-14)

[0103] De acordo com o método geral descrito no Exemplo 13, ácido 4-(dimetilcarbamoil)benzóico foi usado como material de partida, e a 4-(dimetilcarbamoil)benzoil azida resultante reagida com 13a para dar um sólido amarelo claro (14 mg, 25,8%). m.p. 240°C. 1H NMR (300 MHz, DMSO-d6): δ 9.59 (s, 2H), 8.16 (d, J = 8.5 Hz, 2H), 7.99 (s, 1H), 7.58 (d, J = 8.5 Hz, 2H), 7.52 (d, J = 8.5 Hz, 2H), 7.36 (d, J = 8.5 Hz, 2H), 7.19 (s, 1H), 4.25 (s, 2H), 4.08 (t, J = 4.4 Hz, 4H), 3.80 (t, J = 4.4 Hz, 4H), 2.96 (s, 6H), 2.69 (s, 6H). ESI-MS: 543 (M+1).

[0104] 1-(4-(6-((dimetilamino)metil)-4-morfolinopirrolo[2,1-f][1,2,4]triazin-2-il)fenil)-3-(4-(4- metilpiperazino-1-carbonil)fenil)ureia (I-15)

[0105] De acordo com os métodos gerais descritos no Exemplo 13, ácido 4-(4-metilpiperazino-1-carbonil)benzóico foi usado como material de partida, e a 4-(4-metilpiperazino-1- carbonil)benzoil azida resultante reagida com 13a para dar um sólido branco (9 mg, 15,1%). 1H NMR (300 MHz, DMSO-d6): δ 9.63 (br, s, 2H), 8.16 (d, J = 8.9 Hz, 2H), 7.92 (s, 1H), 7.57 (d, J = 8.9 Hz, 2H), 7.53 (d, J = 8.5 Hz, 2H), 7.34 (d, J = 8.5 Hz, 2H), 7.13 (s, 1H), 4.07 (br, s, 6H), 3.80 (br, s, 4H), 3.51 (br, s, 4H), 3.06 (br s, 2H), 2.55 (s, 6H), 2.38 (br s, 2H), 2.24 (s, 3H). ESI-MS: 598 (M+1).

[0106] 1-(4-(6-((dimetilamino)metil)-4-morfolinopirrolo[2,1-f][1,2,4]triazin-2-il)fenil)-3-(4- (piperidino-1-carbonil)fenil)ureia (I-16)

[0107] De acordo com os métodos gerais descritos no Exemplo 13, ácido 4-(piperidino-1-carbonil)benzóico foi usado como material de partida, e a 4-(piperidino-1-carbonil)benzoil azida resultante reagida com 13a para dar um sólido amarelo (11 mg, 18,9%). m.p. 184-186°C. 1H NMR (300 MHz, DMSO-d6): δ 9.57 (s, 2H), 8.15 (d, J = 8.8 Hz, 2H), 7.93 (s, 1H), 7.57 (d, J = 8.8 Hz, 2H), 7.52 (d, J = 8.6 Hz, 2H), 7.31 (d, J = 8.6 Hz, 2H), 7.13 (s, 1H), 4.07 (br, s, 6H), 3.79 (t, J = 4.3 Hz, 4H), 3.38 (br, s, 4H), 2.58 (s, 6H), 1.60 (br, s, 2H), 1.50 (br, s, 4H). ESI-MS: 583 (M+1).14. Preparação de ácido 4-(3-(-4(6-((4- (metilssulfonil)piperazin-1-il)metil)-4-morfolino pirrolo [2,1-f][1,2,4]triazin-2-il)fenil)ureído)benzóico (14).

[0108] O Composto I-20 (395 mg, 0,6 mmol) foi suspenso em 20 ml de tetraidrofurano e 10 ml de metanol, e 4 ml de solução de hidróxido de potássio 1M foi adicionado e refluxado por 3 horas. A mistura de reação foi resfriada e 2 ml de ácido acético adicionados aos sólidos precipitados. Após filtragem, os sólidos brancos (312 mg, 82,0%) foram obtidos. m.p. 207-209°C. m.p. 207-209C. 1H NMR (300 MHz, DMSO-d6): δ 9.16 (s, 1H), 9.08 (s, 1H), 8.16 (d, J = 8.7 Hz, 2H), 7.88 (d, J = 8.7 Hz, 2H), 7.71 (s, 1H), 7.58 (d, J = 7.9 Hz, 4H), 6.87 (s, 1H), 4.04 (br s, 4H), 3.79 (br s, 4H), 3.58 (s, 2H), 3.34 (br, s, 4H), 3.11 (br s, 4H), 2.87 (s, 3H). LC- MS: 635 (M+1).15. Métodos de preparação geral para os compostos I-21 ~ I-23.

[0109] O Composto 14 (95 mg, 0,15 mmol), diisopropiletilamina (116 mg, 0,9 mmol) e HBTU hexafluorofosfato de(benzotriazol-N,N,N’,N’-tetrametilurônio, 284 mg, 0,75 mmol) foram dissolvidos em 5 ml de N,N- dimetilformamida e agitados por 1 hora à temperatura ambiente. Cada amina correspondente (0,6 mmol) foi adicionada e agitada à temperatura ambiente por 4-6 horas. A mistura de reação foi despejada em 50ml de água e extraída com acetato de etila. A mistura resultante foi separada através de placa preparatória (diclorometano:metanol = 10:1) para dar um produto.

[0110] N,N-dimetil-4-(3-(4-(6-((4-(metilssulfonil)piperazin-1-il)metil)-4-morfolinopirrolo[2,1- f][1,2,4]triazin-2-il)fenil)ureído)benzamida

[0111] Sólido amarelo-claro (387 mg, 38,3%). m.p. 248250°C. 1H NMR (300 MHz, DMSO-d6): δ 9.40 (s, 2H) , 8.15 (d, J = 8.8 Hz, 2H), 7.72 (s, 1H), 7.57 (d, J = 8.9 Hz, 2H), 7.52 (d, J = 8.9 Hz, 2H), 7.36 (d, J = 8.8 Hz, 2H), 6.89 (s, 1H), 4.05 (t, J = 4.4 Hz, 4H), 3.79 (t, J = 4.4 Hz, 4H), 3.59 (s, 2H), 3.32 (br s, 4H), 3.12 (br s, 4H), 2.96 (s, 6H), 2.87 (s, 3H). ESI-MS: 684 (M+23).

[0112] 1-(4-(4-metilpiperazino-1-carbonil)fenil)-3-(4-(6- ((4-(metilssulfonil)piperazin-1-il)metil)-4-morfolinopirrolo[2,1-f][1,2,4]triazin-2-il)fenil)ureia (I-22)

[0113] Sólido amarelo-claro (40 mg, 37,2%). m.p. 185-188°C. 1H NMR (300 MHz, DMSO-d6): δ 9.03 (s, 1H), 9.02 (s, 1H), 8.15 (d, J = 8.7 Hz, 2H), 7.71 (s, 1H), 7.58 - 7.52 (m, 4H), 7.34 (d, J = 8.7 Hz, 2H), 6.89 (s, 1H), 4.04 (t, J = 4.7 Hz, 4H), 3.79 (t, J = 4.7 Hz, 4H), 3.59 (s, 2H), 3.50 (br s, 4H), 3.32 (br s, 4H), 3.12 (br s, 4H), 2.87 (s, 3H), 2.38 (br s, 4H), 2.24 (s, 3H). ESI-MS: 717 (M+1).

[0114] 1-(4-(4-(dimetilamino)piperidino-1-carbonil)fenil)-3-(4-(6-((4-(metilssulfonil)piperazin-1-il)metil)-4-morfolinopirrolo[2,1-f][1,2,4]triazin-2-il)fenil)ureia (I-23).

[0115] Sólido branco (44 mg, 39.4%). m.p. 200-202°C. 1H NMR (300 MHz, DMSO): δ 9.12 (s, 2H), 8.15 (d, J = 8.6 Hz, 2H), 7.71 (s, 1H), 7.58 — 7.53 (m, 4H), 7.37 (d, J = 8.6 Hz, 2H), 6.90 (s, 1H), 4.05 (t, J = 4.2 Hz, 4H), 3.79 (t, J = 4.2 Hz,4H), 3.59 (s, 2H), 3.32 (br s, 8H), 3.12 (br s, 4H), 2.87 (s, 3H), 2.94 (s, 1H), 2.68 (s, 6H), 2.05 — 1.91 (m, 2H), 1.63 — 1.48 (m, 2H). ESI-MS: 745 (M+1). 16. Preparação de 2-(3-(acetoximetil)fenil)-4- cloropirrolo[2,1-f][1,2,4] triazino-6-carboxilato de metila (15)

[0116] O Composto 15 foi preparado através do método idêntico ao empregado no preparo do composto 8, sendo que o composto IIIb (341 mg, 1 mmol) foi usado como material de partida. O produto bruto foi purificado através de cromatografia de coluna (éter de petróleo:acetato de etila = 5:1) para obter sólido branco (197 mg, 54,8%).197 mg, 54.8%). m.p. 154-155°C. 1H NMR (300 MHz, CDC13): δ 8.33 — 8.29 (m, 3H), 7.52 — 7.50 (m, 2H), 7.41 (d, J = 1.3 Hz, 1H), 5.20 (s, 2H), 3.94 (s, 3H), 2.14 (s, 3H). LC-MS: 360 (M+1), 362 (M+2+1).17. Preparação de 2-(3-(acetoximetil)fenil)-4- morfolinopirrolo[2,1-f][1,2,4] triazino-6-carboxilato de metila (16)

[0117] O Composto 16 foi preparado através do método idêntico ao empregado no preparo do composto 9, sendo que o composto 15 (180 mg, 0,5 mmol) foi usado como material de partida. Sólido branco (177 mg, 86,3%). m.p. 204-205°C. 1H NMR (300 MHz, CDC13): δ 8.26 - 8.22 (m, 2H), 8.13 (s, 1H), 7.46 (d, J = 4.5 Hz, 2H), 7.19 (s, 1H), 5.19 (s, 2H), 4.15 (t, J = 4.8 Hz, 4H), 3.90 (s, 3H), 3.90 (t, J = 4.8 Hz, 4H), 2.13 (s, 3H). LC-MS: 411 (M+1). 18. Preparação de ácido 2-(3-(hidroximetil)fenil)-4- morfolinopirrolo[2,1-f][1,2,4] triazino-6-carboxílico

[0118] O Composto 18 foi preparado através do método idêntico ao empregado no preparo do composto 12a, sendo que o composto 17 (92 mg, 0,26 mmol) foi usado como material de partida. Sólido branco (80 mg, 80,8%). m.p. 170-171°C. 1H NMR (300 MHz, DMSO-d6): δ 12.64 (s, 1H), 8.21 (s, 1H), 8.19 (d, J = 1.6 Hz, 1H), 8.13 - 8.10 (m, 1H), 7.44 — 7.42 (m, 2H), 7.36 (d, J = 1.6 Hz, 1H), 5.30 (s, 1H), 4.58 (s, 2H), 4.10 (t, J = 4.5 Hz, 4H), 3.80 (t, J = 4.5 Hz, 4H). LC-MS: 355 (M+1).19. Preparação de 2-(3-(hidroximetil)fenil)-N,N-dimetil-4- morfolinopirrolo[2,1-f][1,2,4]triazino-6-carboxamida (18).

[0119] O Composto 18 foi preparado através do método idêntico ao empregado no preparo do composto 12a, sendo que o composto 17 (92 mg, 0,26 mmol) foi usado como material de partida. Sólido branco (80 mg, 80,8%). m.p. 170-171°C. 1H NMR (300 MHz, CDCl3): δ 8.22 (s, 1H), 8.20 - 8.17 (m, 1H), 7.84 (d, J = 1.5 Hz, 1H), 7.46 - 7.43 (m, 2H), 7.04 (d, J = 1.5 Hz, 1H), 4.77 (s, 2H), 4.11 (t, J = 4.7 Hz, 4H), 3.87 (t, J = 4.7 Hz, 4H), 3.20 (br, s, 6H). LC-MS: 382 (M+1). 20. Preparação de (3-(6-((dimetilamino)metil)-4- morfolinopirrolo[2,1-f][1,2,4]triazin-2-il)fenil)metanol (I24).

[0120] O Composto I-12 foi preparado através do método idêntico ao empregado no preparo do composto 13a, sendo que o composto 18 (70 mg, 0,184 mmol) foi usado como material de partida. Sólido branco (100%). m.p. 163-165°C. 1H NMR (300 MHz, DMSO-d6): δ 8.20 (s, 1H), 8.11 (dt, J = 2.4, 6.0 Hz, 1H), 7.99 (d, J = 1.3 Hz, 1H), 7.45 — 7.41 (m, 2H), 7.15 (d, J = 1.3 Hz, 1H), 5.27 (t, J = 5.8 Hz, 1H), 4.57 (d, J = 5.8 Hz, 2H), 4.07 (t, J = 4.6 Hz, 4H), 3.95 (s, 2H), 3.80 (t, J = 4.6 Hz, 4H), 2.44 (s, 6H). MS (EI) m/e(%): 367 (M+, 16).21. Preparação de metanossulfonato de 3-(6- ((dimetilamino)metil)-4-morfolinopirrolo[2,1-f][1,2,4] triazin-2-il)benzila (19)

[0121] O Composto I-24 (36,7 mg, 0,1 mmol) foi dissolvido em 5 ml de diclorometano anidro e resfriado a 0°C. Cloreto de metanossulfonila (14 μL, 0,12 mmol) e trietilamina (16μL, 0,12 mmol) foram adicionados. A reação foi conduzida a 0°C por 30 minutos. A mistura de reação foi lavada sucessivamente com solução saturada de bicarbonato de sódio e água, e a camada orgânica secada sobre sulfato de sódio anidro, e o solvente removido sob pressão reduzida para dar 45 mg de sólido branco (100%). m.p. 178-179°C.22. Preparação de N,N-dimetil-1-(2-(3-((metilssulfonil)metil)fenil)-4-morfolino pirrolo[2,1-f][1,2,4]triazin-6-il)metanamina (I-25)

[0122] O Composto 19 (45 mg, 0,1 mmol) e metilssulfinato de sódio (41 mg, 0,4 mmol) foram dissolvidos em 2 ml de N- metilpirrolidona. A mistura foi submetida à irradiação de microondas por 30 minutos a 120°C com a potência de 100 watts. Concluída a reação, a mistura de reação foi despejada em água, extraída três vezes com acetato de etila, e extraída três vezes com diclorometano. As camadas orgânicas foram combinadas e secadas sobre sulfato de sódio anidro. O solvente foi concentrado sob prfessão reduzida até um pequeno volume. O produto bruto foi purificado através de placa preparatória (diclorometano:metanol = 6:1) para obter 12 mg de sólido branco (28,0%). m.p. 143-144°C.23. Preparação de 1-(2-(3-(aminometil)fenil)-4- morfolinopirrolo[2,1-f][1,2,4] triazin-6-il)-N,N- dimetilmetanamina (20).

[0123] O Composto 19 (80 mg, 0,18 mmol) foi adicionado a 20 ml de solução de metanol saturada de amônia. A reação foi conduzida a 80°C em tubo lacrado por 8 horas. Após a mistura de reação ser concentrada, ela foi purificada através de placa preparatória (diclorometano:metanol = 6:1) para obter 37 mg de óleo incolor (56,2%). %). 1H NMR (300 MHz, CDCl3): δ 8.20 (s, 1H), 8.17- 8.13 (m, 1H), 7.64 (s, 1H), 7.41— 7.39 (m, 2H), 6.86 (s, 1H), 4.11 (t, J = 4.7 Hz, 4H), 3.97 (s, 2H), 3.87 (t, J = 4.7 Hz, 4H), 3.69 (s, 2H), 2.41 (s, 6H). LC-MS: 367 (M+1).24. Preparação de N-(3-(6-((dimetilamino)metil)-4-morfolinopirrolo[2,1-f][1,2,4]triazin-2- il)benzil)metanossulfonamida (I-26).

[0124] O Composto I-26 foi preparado através do método idêntico ao empregado no preparo do composto 19, sendo que o composto 20 (37 mg, 0,1 mmol) foi usado como material de partida. Um sólido amarelo-claro (12 mg, 26,7%) foi obtido através de placa preparatória (diclorometano: metanol = 8:1). m.p. 238-240°C. 1H NMR (300 MHz, CDC13): δ 8.20 (s, 1H), 8.19 (d, J = 7.1 Hz, 1H), 7.60 (s, 1H), 7.47- 7.38 (m, 2 H), 6.88 (s, 1H), 4.41 (s, 2H), 4.02 (br, s, 4H), 3.81 (t, J = 4.4 Hz, 4H), 2.95 (s, 2H), 2.94 (s, 3H), 2.87 (s, 1H), 2.51 (s, 6H). MS (EI) m/e (%): 444 (M+, 16).25. Preparação de 4-cloro-2-(6-pivalamido-4- (trifluorometil)piridin-3-il)pirrolo[2,1-f][1,2,4]triazino-6- carboxilato de metila (21).

[0125] O Composto 21 foi preparado através do método idêntico ao empregado no preparo do composto 8, sendo que IIIc (300 mg, 0,686 mmol) foi usado como material de partida. Sólido amarelo claro (290 mg, 92,9%). m.p. 172-173°C. 1H NMR (300 MHz, CDCl3): δ 8.79 (s, 1H), 8.77 (s, 1H), 8.33 (d, J = 1.6 Hz, 1H), 8.30 (s, 1H), 7.47 (d, J = 1.6 Hz, 1H), 3.94 (s, 3H), 1.36 (s, 9H). LC-MS: 478 (M+23), 480 (M+2+23).26. Preparação de compostos 22

[0126] A preparação de compostos 22 foi idêntica à do Composto 9.

[0127] 4-morfolino-2-(6-pivalamido-4-(trifluorometil)piridin-3-il)pirrolo[2,1-f][1,2,4]triazino-6- carboxilato de metila (22a).

[0128] O Composto 22a foi preparado a partir de 100 mg de composto 21 (0,22 mmol). Sólido branco (73 mg, 65,8%). m.p. 205°C. 1H NMR (300 MHz, DMSO-d6): δ 10.53 (s, 1H), 8.79 (s, 1H), 8.57 (s, 1H), 8.30 (d, J = 1.2 Hz, 1H), 7.46 (d, J = 1.2 Hz, 1H), 4.03(t, J = 4.2 Hz, 4H), 3.83 (s, 3H), 3.75 (t, J = 4.2 Hz, 4H), 1.27 (s, 9H). LC-MS: 507 (M+1).

[0129] Metil-4-(8-oxa-3-azabiciclo[3.2.1]octan-3-il)-2-(6-pivalamido-4-(trifluorometil)piridino-3-il)pirrolo[2,1- f][1,2,4]triazino-6-carboxilato

[0130] O Composto 22b foi preparado a partir de 276 mg de composto 21 (0,61 mmol). Sólido amarelo-claro (274 mg,84,8%). m.p. 175-176°C. 1H NMR (300 MHz, CDCI3): δ 8.71 (s, 1H), 8.70 (s, 1H), 8.27 (s, 1H), 8.09 (s, 1H), 7.21 (s, 1H), 4.52 (br s, 4H), 3.90 (s, 3H), 3.54 (br s, 2H), 2.04 — 1.99 (m, 2H), 1.89 - 1.78 (m, 2H), 1.36 (s, 9H). LC-MS: 533 (M+1).

[0131] 4-(3-metilmorfolino)-2-(6-pivalamido-4- (trifluorometil)piridin-3-il)pirrolo[2,1-f][1,2,4]triazino-6- carboxilato de (S)-metila (22c).

[0132] O Composto 22c foi preparado a partir de 210 mg de composto 21 (0,46 mmol). Sólido amarelo-claro (145 mg,60.4%). m.p. 225-226°C. 1H NMR (300 MHz, DMSO-d6): δ 10.53 (s, 1H), 8.79 (s, 1H), 8.57 (s, 1H), 8.29 (d, J = 1.5 Hz, 1H), 7.42 (s, 1H), 4.92 (br, 1H), 4.61 (br, 1H), 4.03- 3.96(m, 1H), 3.83 (s, 3H), 3.81- 3.64(m, 3H), 3.53 (t, J = 11.4 Hz, 1H), 1.43-1.31 (m, 3H), 1.27 (s, 9H). LC-MS: 521 (M+1). 27. Preparação de compostos 23

[0133] Ácido 2-(6-amino-4-(trifluorometil)piridin-3-il)-4- morfolinopirrolo[2,1-f][1,2,4]triazino-6-carboxílico (23a).

[0134] O Composto 22a (300 mg, 0,59 mmol) foi suspenso em 10 ml de etanol. 1,5 ml de solução 2M de hidróxido de potássio foi adicionado e refluxado por 1 hora. A reação é substancialmente concluída. 2 ml de ácido acético foram adicionados. A maior parte do solvente foi destilada sob pressão reduzida para precipitar os sólidos. Os sólidos precipitados foram filtrados para dar o composto 23a. Sólido branco (224 mg, 92,6%). m.p. 244-245°C. °C. 1H NMR (300 MHz, DMSO-d6): δ 12.54 (s, 1H), 8.37 (s, 1H), 8.11 (s, 1H), 7.34 (s, 1H), 6.83 (s, 3H), 4.00(t, J = 4.0 Hz, 4H), 3.73(t, J = 4.0 Hz, 4H). LC-MS: 409 (M+1).

[0135] Ácido 2-(6-amino-4-(trifluorometil)piridin-3-il)-4- (8-oxa-3-azabiciclo[3.2.1]octan-3-il)pirrolo[2,1- f][1,2,4]triazino-6-carboxílico (23b).

[0136] O Composto 23b foi preparado através do método idêntico ao empregado no preparo do composto 23a, sendo que o composto 22b (250 mg, 0,45 mmol) foi usado como material de partida. Sólido branco (102mg, 51,9%). m.p. 284-285°C. 1H NMR (300 MHz, DMSO-d6): δ 12.44(br s, 1H), 8.36 (s, 1H), 8.11 (s, 1H), 7.30 (s, 1H), 6.82 (s, 3H), 4.47 (br s, 2H), 4.42 (br s, 2H), 3.32 (br s, 2H), 1.87 — 1.84 (m, 2H), 1.75 — 1.68 (m, 2H). LC-MS: 435 (M+1).

[0137] Ácido (S)-2-(6-amino-4-(trifluorometil)piridin-3- il)-4-(3-metilamorfolino)pirrolo[2,1-f][1,2,4]triazino-6- carboxílico (23c).

[0138] O Composto 23c foi preparado através do método idêntico ao empregado no preparo do composto 23a, sendo que o composto 22c (1,8g, 3,46 mmol) foi usado como material de partida. Sólido branco (1,33g, 91,2%). m.p. > 300°C. 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 12.76 (s, 1H), 8.36 (s, 1H), 8.11 (d, J = 1.3 Hz, 1H), 7.30 (s, 1H), 6.85 (s, 2H), 6.82 (s, 1H), 4.89 (br, 1H), 4.52 (br, 1H), 3.97 (d, J = 8.2 Hz, 1H), 3.76-3. 63(m, 2H), 3.51 (t, J = 10.7 Hz, 2H),1.36(s, 3H). LC-MS: 423(M+1).28. Preparação de compostos 24

[0139] A preparação dos compostos 24 foi idêntica à empregada no composto 12.

[0140] (2-(6-amino-4-(trifluorometil)piridin-3-il)-4- morfolinopirrolo[2,1-f][1,2,4]triazin-6-il)(4-(metilssulfonil)piperazin-1-il)metanona (24a).

[0141] O Composto 24 foi preparado a partir de 220 mg de composto 23a (0,54 mmol). Sólido branco (253 mg, 84,7%). m.p.197-198°C. 1H NMR (300 MHz, DMSO-d6): δ 8.36 (s, 1H), 8.04 (s, 1H), 7.18 (s, 1H), 6.83 (s, 3H), 4.04 — 3.92 (m, 4H), 3.73 (br s, 8H), 3.20 — 3.11 (m, 4H), 2.91 (s, 3H). MS (EI) m/e (%): 554 (68, M+).

[0142] (2-(6-amino-4-(trifluorometil)piridin-3-il)-4-(8- oxa-3-azabiciclo[3.2.1]octan-3-il)pirrolo[2,1- f][1,2,4]triazin-6-il)(4-(metilssulfonil)piperazin-1- il)metanona (24b).

[0143] O Composto 24b foi preparado a partir de 90 mg de composto 23b (0,21 mmol). Sólido branco (113 mg, 93,8%). m.p. 175°C. 1H NMR (300 MHz, CDCI3): δ 8.52 (s, 1H), 7.77 (d, J = 1.7 Hz, 1H), 6.96 (d, J = 1.7 Hz, 1H), 6.81 (s, 1H), 4.86 (s, 2H), 4.49 (br s, 4H), 3.91 (t, J = 4.6 Hz, 4H), 3.55 (br s, 2H), 3.28 (t, J = 4.6 Hz, 4H), 2.81 (s, 3H), 2.04 — 1.95 (m, 2H), 1.89 — 1.79 (m, 2H). LC-MS: 581 (M+1).

[0144] (S)-(2-(6-amino-4-(trifluorometil)piridin-3-il)-4-(3-metilmorfolino)pirrolo[2,1-f][1,2,4]triazin-6-il)(4- (metilssulfonil)piperazin-1-il)metanona (24c).

[0145] O Composto 24c foi preparado a partir de 2,42g de composto 23c (4,86 mmol) como material de partida. Sólido amarelo-claro (3g, 92,2%). m.p.200-202°C. 1H NMR (300 MHz, CDCl3): δ 8.52 (s, 1H), 7.78 (d, J = 1.7 Hz, 1H), 6.97 (d, J = 1.7 Hz, 1H), 6.81 (s, 1H), 4.90 (s, 3H), 4.81 — 4.40 (m, 1H), 4.03 (d, J = 7.4 Hz, 1H), 3.91 (t, J = 4.8 Hz, 4H), 3.83 - 3.72 (m, 2H), 3.66 - 3.56 (m, 2H), 3.28 (t, J = 4.8 Hz, 4H), 2.81 (s, 3H), 1.48 (d, J = 6.2 Hz, 3H). LC-MS: 569 (M+1).29. Preparação de 5-(6-((4-(metilssulfonil)piperazin-1-il)metil)-4-morfolinopirrolo [2,1-f][1,2,4]triazin-2-il)-4- (trifluorometil)piridin-2-amina (I-27)

[0146] O Composto I-27 foi preparado com 200 mg de composto 24a (0,36 mmol) como material de partida. O processo de preparação era similar ao do composto 13. Uma placa preparatória (diclorometano:metanol = 20:1) foi usada para purificação. Sólido amarelo-claro (43 mg, 22,0%). m.p. 122- 123°C. 1H NMR (300 MHz, CDCI3): δ 8.51 (s, 1H), 7.59 (s, 1H), 6.80 (s, 1H), 6.67 (s, 1H), 4.89 (s, 2H), 4.04(t, J = 4.4 Hz, 4H), 3.82(t, J = 4.4 Hz, 4H), 3.64 (s, 2H), 3.27 (br s, 4H), 2.78 (s, 3H), 2.62 (br s, 4H). MS (EI) m/e (%): 540 (M+, 5).

[0147] 30. Preparação de 1-(4-fluorofenil)-3-(5-(6-((4-(metilssulfonil)piperazin-1-il)metil)-4- morfolinopirrolo[2,1-f][1,2,4]triazin-2-il)-4- (trifluorometil)piridin-2-il)ureia (I-28).

[0148] I-28 foi preparado com 30 mg de I-27 (0,055 mmol) como material de partida. O processo de preparação foi igual ao da síntese do composto I-1. Uma placa preparatória (diclorometano:metanol = 10:1) foi usada para purificação. Sólido branco (7 mg, 18,6%). m.p. 204-205°C. 1H NMR (300 MHz, CDCl3): δ 11.38 (s, 1H), 9.37 (s, 1H), 8.75 (s, 1H), 7.62 (s, 1H), 7.57 (dd, J = 8.5, 4.4 Hz, 2H), 7.33 (s, 1H), 7.06 (t, J = 8.5 Hz, 2H), 6.72 (s, 1H), 4.10 - 4.01 (m, 4H) , 3.89 - 3.81 (m, 4H), 3.67 (s, 2H), 3.30 (br s, 4H), 2.79 (s, 3H), 2.64 (br s, 4H). ESI-MS: 678 (M+1).31. Preparação de 5-(4-(8-oxa-3-azabiciclo[3.2.1]octan-3-il)- 6-((4-(metilssulfonil) piperazin-1-il)metil)pirrolo[2,1-f][1,2,4]triazin-2-il)-4-(trifluorometil)piridin-2-amina (I29)

[0149] I-29 foi preparado com 100 mg de composto 24b (0,17 mmol). O processo de preparação era similar ao do composto 13. Uma placa preparatória (diclorometano:metanol = 20:1) foi usada para purificação. Sólido branco (17 mg, 17,4%). m.p. 138°C. 1H NMR (300 MHz, CDC13): δ 8.50 (s, 1H), 7.57 (d, J = 1.2 Hz, 1H), 6.79 (s, 1H), 6.63 (d, J = 1.2 Hz, 1H), 4.92 (s, 2H), 4.48 (br s, 4H), 3.61 (s, 2H), 3.52 (br s, 1H), 3.47 (br s, 1H), 3.26 (t, J = 4.8 Hz, 4H), 2.77 (s, 3H), 2.60 (t, J = 4.8 Hz, 4H), 2.00 — 1.96 (m, 2H), 1.89 — 1.79 (m, 2H). MS (EI) m/e (%): 566 (M+, 5). 32. Preparação de 1-etil-3-(5-(6-((4- (metilssulfonil)piperazin-1-il)metil)-4-morfolino pirrolo[2,1-f][1,2,4]triazin-2-il)-4-(trifluorometil)piridin- 2-il)ureia (I-30)

[0150] Isocianato de etila (85 mg, 1,2 mmol) foi adicionado à solução de I-27 (110 mg, 0,2 mmol) e 1,8- diazaciclo[5.4.0]undec-7-eno (DBU, 183 mg, 1,2 mmol) em diclorometano e agitado por dois dias à temperatura ambiente. Dietil éter foi usado para recristalização e 74 mg (60,5%)de sólido branco foi obtido. m.p. 208°C (decomposição). 1H NMR (300 MHz, DMSO-d6): δ 9.99 (br s, 1H), 8.62 (s, 1H), 8.18 (s, 1H), 7.78 (br s, 1H), 7.73 (s, 1H), 6.95 (s, 1H), 3.98 (br s, 4H), 3.73 (br s, 4H), 3.59 (s, 2H), 3.33 (br s, 2H), 3.16 (q, J = 7.5 Hz, 2H), 3.11 (br s, 4H), 2.86 (s, 3H), 1.62 (br s, 2H), 1.09 (t, J = 7.5 Hz, 3H). LC-MS: 612 (M+1). 33. Preparação de compostos (I-31 ~ I-33)

[0151] Método de preparação geral: À solução de I-27 (54 mg, 0,1 mmol) e trietilamina (101 mg, 1 mmol) em clorofórmio adicionou-se o cloroformiato correspondente (0,3 mmol). A mistura de reação foi agitada à temperatura ambiente por dois dias. O produto bruto foi purificado através de cromatografia de coluna com diclorometano/metanol (10:1).

[0152] (5-(6-((4-(metilssulfonil)piperazin-1-il)metil)-4- morfolinopirrolo[2,1-f][1,2,4]triazin-2-il)-4- (trifluorometil)piridin-2-il)carbamato de fenila (I-31)

[0153] Sólido amarelo-claro. Rendimento 37,1%. m.p. 108-110°C. 1H NMR (300 MHz, DMSO-d6): δ 11.42 (s, 1H), 8.79 (s, 1H), 8.27 (s, 1H), 7.76 (s, 1H), 7.49 — 7.44 (m, 2H), 7.32 — 7.27 (m, 3H), 6.98 (s, 1H), 3.99 (br s, 4H), 3.74 (br s, 4H),3.60 (s, 2H), 3.31 (br s, 4H), 3.12 (br s, 4H), 2.87 (s, 3H).LC-MS: 661 (M+1).

[0154] (5-(6-((4-(metilssulfonil)piperazin-1-il)metil)-4-morfolinopirrolo[2,1-f][1,2,4]triazin-2-il)-4-(trifluorometil)piridin-2-il)carbamato de etila (I-32).

[0155] Sólido branco. Rendimento 50,7%. m.p. 211-213°C. 1H NMR (300 MHz, CDCl3): δ 8.71 (s, 1H), 8.41 (s, 1H), 7. 92(s, 1H), 7.60 (s, 1H), 6.67 (s, 1H), 4.30 (q, J = 7.2 Hz, 2H), 4.05 (t, J = 4.5 Hz, 4H), 3.83 (t, J = 4.5 Hz, 4H), 3.63 (s, 2H), 3.26 (br s, 4H), 2.78 (s, 3H), 2.61 (br s, 4H), 1.36 (t, J = 7.2 Hz, 3H). LC-MS: 613(M+1).

[0156] (5-(6-((4-(metilssulfonil)piperazin-1-il)metil)-4- morfolinopirrolo[2,1-f] [1,2,4]triazin-2-il)-4- (trifluorometil)piridin-2-il)carbamato de metila (I-33).

[0157] Sólido branco (43,4%). m.p. 212-214°C. 1H NMR (300 MHz, CDCl3): δ 8.70 (s, 1H), 8.40 (s, 1H), 7. 60 (d, J = 1.5 Hz, 1H), 6.67 (s, 1H), 4.05 (t, J = 4.5 Hz, 4H), 3.85 (s, 3H), 3.83 (t, J = 4.5 Hz, 4H), 3.63 (s, 2H), 3.27 (br s, 4H), 2.78 (s, 3H), 2.61 (br s, 4H). LC-MS: 599 (M+1). 34. Preparação de (S)-5-(4-(3-metilmorfolino)-6-((4- (metilssulfonil)piperazin-1-il)metil)pirrolo[2,1- f][1,2,4]triazin-2-il)-4-(trifluorometil)piridin-2-amina (I34).

[0158] A 40°C, borano-THF 1M (80 ml) foi adicionado gota a gota à solução de composto 24c (1,8g, 3,17 mmol) em 50 ml de tetraidrofurano. Após a reação ter sido conduzida por 0,5 hora nessa temperatura, o sistema de reação foi refluxado por 2 horas, e então resfriado para menos de 0°C. 100ml de ácido clorídrico concentrado foi adicionado gota a gota e em seguida refluxado por 1 hora. Quando a maior parte do ácido clorídrico foi removida através de evaporação rotativa, o pH da solução foi ajustado em cerca de 8 utilizando solução saturada de carbonato de sódio. Após ter sido extraída três vezes com acetato de etila, a fase orgânica foi secada sobre sulfato de sódio anidro, e o solvente removido sob pressão reduzida para dar o produto bruto. O produto bruto foi purificado através de cromatografia de coluna com diclorometano/metanol (40:1) para dar um sólido branco (56,9%). m.p. 262°C. 1H NMR (300 MHz, DMSO-d6): δ 8.34 (s, 1H), 7.68 (s, 1H), 6.88 (s, 1H), 6.82 (s, 1H), 6.77 (s, 2H), 4.87 (br s, 1H), 4.47 (br s, 1H), 3.96 (br s, 1H), 3.77-3.41 (m, 8H), 3.11 (s, 6H), 2.87 (s, 3H), 1.32 (s, 3H). LC-MS: 555 (M+1). 35. Preparação de (5-(4-(3-metilmorfolino)-6-((4- (metilssulfonil)piperazin-1-il)metil)pirrolo[2,1- f][1,2,4]triazin-2-il)-4-(trifluorometil)piridin-2- il)carbamato de (S)-metila (I-35).

[0159] A ~40°C, cloroformiato de metila (28,85 mmol) foi adicionado à solução de I-34 (880 mg, 1,44 mmol) e trietilamina (1,5 g, 14,4 mmol) em clorofórmio e agitada por 2 horas. O produto bruto foi purificado através de cromatografia de coluna com diclorometano/metanol (60:1) para dar um sólido branco (44,2%) . m.p. 150-152°C. 1H NMR (400 MHz, CDCl3): δ 8.70 (s, 1H), 8.41 (s, 1H), 8.22 (s, 1H), 7.60 (s, 1H), 6.67 (s, 1H), 4.92 (br s, 1H), 4.56 (br s, 1H), 4.03 (d, J = 7.9 Hz, 1H), 4.00 - 3.52 (m, 9H), 3.27 (s, 4H), 2.78 (s, 3H), 2.62 (s, 4H), 1.47 (d, J = 6.6 Hz, 3H). LC-MS: 613 (M+1). 36. Preparação de (S)-1-etil-3-(5-(4-(3-metilmorfolino)-6- ((4-(metilssulfonil)piperazin-1-il)metil)pirrolo[2,1- f][1,2,4]triazin-2-il)-4-(trifluorometil)piridin-2-il)ureia (I-36).

[0160] O Composto I-36 foi preparado através do mesmo método de preparação do composto I-30. Sólido branco. 1H NMR (300 MHz, CDCl3) δ 9.45 (s, 1H), 9.01 (br s, 1H), 8.63 (s, 1H), 7.59 (s, 1H), 7.30 (s, 1H), 6.67 (s, 1H), 4.93 (br s, 1H), 4.56 (br s, 1H), 4.03 (d, J = 7.5 Hz, 1H), 3.89 — 3.69 (m, 2H), 3.64 (s, 2H), 3.44 (q, J = 6.9 Hz, 2H) , 3.39 — 3.11 (m, 6H), 2.78 (s, 3H), 2.62 (s, 4H), 1.47 (d, J = 6.7 Hz, 3H), 1.26 (t, J = 7.2 Hz, 3H).

[0161] Mesilato de 1-Etil-3-(5-(6-((4-(metilssulfonil)piperazin-1-il) metil)-4-morfolinopirrolo[2,1-f][1,2,4]triazin-2-il)-4-(trifluorometil)piridin-2-il)ureia

[0162] Solução a 5% de ácido metanossulfônico em tetraidrofurano (600 μL, 0,47 mmol) foi adicionada à solução de I-30 (220 mg, 0,36 mmol) em 10 ml de clorofórmio e agitada por 1 hora à temperatura ambiente. O produto bruto foi obtido por filtração. Pó branco (99,0%). m.p. 220°C (decomposição). 1H NMR (300 MHz, DMSO-d6): δ 9.83 (br s, 1H), 9.63 (s, 1H), 8.63 (s, 1H), 8.12 (s, 1H), 7.94 (s, 1H), 7.37 (s, 1H), 7.17 (s, 1H), 4.43 (s, 2H), 4.01 (s, 4H), 3.75 (s, 6H), 3.50 (s, 2H), 3.28 — 3.01 (m, 6H), 3.0 (s, 3H), 2.32 (s, 3H), 1.08 (t, J = 7.2 Hz, 3H). 13C NMR (126 MHz, DMSO) δ 155.03, 154.57, 153.91, 153.00, 150.65, 136.78 (q, J = 32.1 Hz, CF3C), 123.24 (q, J = 274.8 Hz, CF3), 123.51, 121.78, 113.99, 113.09, 108.30 (q, J = 5.2 Hz, CF3CCH), 107.81, 66.37, 52.23, 50.49, 46.00, 42.93, 35.55, 34.45, 15.67.15.67. 38. Carbamato mesilato de (5-(6-((4- (metilssulfonil)piperazin-1-il)metil)-4-morfolinopirrolo[2,1- f][1,2,4]triazin-2-il)-4-(trifluorometil)piridin-2-il) metila.

[0163] Solução a 5% de ácido metanossulfônico em tetraidrofurano (978 μL, 0,77 mmol) foi adicionada à solução de I-33 (300 mg, 0,50 mmol) em 15 ml de tetraidrofurano e agitada por 5 minutos à temperatura ambiente. Dietil éter foi adicionado ao sistema até precipitação de grande quantidade de sólidos. O produto bruto foi obtido por filtração. Sólido branco (100%) . m.p. 240°C (decomposição) . 1H NMR (300 MHz, DMSO-d6): δ 10.94 (s, 1 H), 9.82 (s, 1 H), 8.74 (s, 1 H), 8.32 (s, 1 H), 7.99 (s, 1H), 7.19 (s, 1 H), 4.46 (s, 2 H), 4.03 (t, J = 4.8 Hz, 4 H), 3.78 (t, J = 4.8 Hz, 4H), 3.75 (s, 3 H), 3.67 — 3.43 (m, 4H), 3.27 — 3.05 (m, 4 H), 3.02 (s, 3 H), 2.33 (s, 3 H). 13C NMR (126 MHz, DMSO-d6): δ 154.58, 154.16, 153.88, 152.90, 151.07, 137.029 (q, J = 31 Hz, CF3C), 125.19, 123.23 (q, J = 274.9 Hz, CF3), 121.84, 113.99, 113.07, 108.60 (q, J = 5 Hz, CF3CH), 107.88, 66.35, 52.78, 52.22, 50.49, 46.03, 42.95, 35.57, 25.59.39. Carbamato mesilato de (5-(4-(3-metilmorfolino)-6-((4- (metilssulfonil)piperazin-1-il)metil)pirrolo[2,1-f][1,2,4]triazin-2-il)-4-(trifluorometil)piridin-2-il) (S)-metila.

[0164] Solução a 5% de ácido metanossulfônico em tetraidrofurano (589 μL, 0,46 mmol) foi adicionada à solução agitada por 3 horas à temperatura ambiente. Tetraidrofurano foi removido sob pressão reduzida para dar uma geleia. Uma pequena quantidade de metanol foi adicionada para dissolver a geleia. Em seguida, dietil éter foi adicionado gota a gota até que um sólido se precipitasse. O produto puro foi obtido por filtração. Pó branco (80,72%). m.p. 210°C (decomposição). δ 10.91 (s, 1H), 9.86 (s, 1H), 8.73 (s, 1H), 8.31 (s, 1H), 7.98 (s, 1H), 7.17 (s, 1H), 4.90 (br s, 1H), 4.45 (br s, 3H), 4.00 (d, J = 7.9 Hz, 1H), 3.88 - 3.61 (m, 7H), 3.53 (s, 4H), 3.15 (br s, 4H), 3.01 (s, 3H), 2.41 - 2.26 (m, 3H), 1.39 (br s, 3H). 13C NMR (126 MHz, DMSO-d6): δ 154.60, 154.15, 153.68, 152.96, 151.09, 136.91 (q, J = 32.5 Hz, CF3C), 125.26, 123.24 (q, J = 274.9 Hz, CF3) 121.89, 114.05, 113.09, 108.60 (q, J = 5.5 Hz, CF3CH), 107.95, 70.51, 66.46, 52.78, 52.20, 50.48, 42.93, 35.58, 31.17, 13.19.

Teste de Atividade Biológica Inibição da atividade de P13Kα quinase Método Experimental

[0165] A atividade de quinase purificada foi detectada com o ensaio luminescente de quinase Kinase-Glo®Plus medindo-se a quantidade da quinase restante na solução após a reação de quinase ser concluída. A reação de quinase foi conduzida em placa branca com 384 cavidades (Greiner), 1μL do composto testado ou DMSO de controle foi adicionado em cada cavidade contendo 5μL de tampão de reação [10 mMK Tris-HCl pH 7,5, 50 mM NaCl, 3 mM MgCl2, 1 mM DTT (ditiotreitol), 0,05% CHAPS (3- [(3-colamidopropil)dimetilamônio]-1-propanossulfonato, ácido 3-(3-colaminopropil)-dimetilamino-1-propanossulfônico), e o tampão de reação foi complementado com 12 μM de substrato, D- mio-fosfatidilinositol-4,5-bisfosfato (4,5-fosfatidil inositol difosfato) e 2 μM ATP (adenosina trifosfato). E então 4 μL de tampão de reação contendo 62,5 nM de controle P13Kα ou semn P13Kα foram adicionados para iniciar a reação de quinase. Concluída a reação por 1 hora à temperatura ambiente, 10 μL de mistura de Kinase Glo-Plus foram adicionados e incubados por 1 hora para resfriar a reação. O valor de quimioluminescência foi detectado com leitor de microplacas multifuncional EnVision 2104 (Perkinelmer). Resultados Experimentais

[0166] Os resultados experimentais (tabela 2) mostraram que as atividades inibitórias dos sete compostos seguintes da presente invenção sobre P13Kα eram comparáveis a ou mais potentes que as de PI-103. Foram os seguintes os compostos: I-22 (9,59 nM), I-27 (8,37 nM), I-28 (9,30 nM), I-30 (8,19 nM), I-32 (7,15 nM), I-33 (2,84 nM), e I-35 (5,67 nM),respectivamente.Tabela 2 IC50 de compostos de pirrolo[2,1-f][1,2,4]triazina sobre P13α

[0167] Atividade inibitória sobre a proliferação de células Rh30 de rabdomiosarcoma humano

[0168] Células Rh30 foram semeadas em placas de 96 cavidades em base de 3000 células/cavidade. Após adesão das células, os compostos testados a concentrações de 10, 3, 1, 0,3 ou 0,1 μM foram adicionados e incubados por 72 horas. Os meios de cultura foram descartados e as células fixadas com ácido tricloroacético. Após lavagem com água destilada cinco vezes e secagem, adicionou-se sulfonilrodamina B. Após lavagem com ácido acético glacial cinco vezes e secagem, adicionou-se tampão de triidroximetilaminometano. O valor OD foi medido utilizando-se um leitor de microplacas a um comprimento de onda de 560 nm. A taxa inibitória foi calculada e os resultados mostrados na Tabela 3. Os resultados acima demonstram que os compostos da presente invenção exibem atividade inibitória potente sobre a proliferação de células Rh30, sendo que os valores IC50 de I24, I-25 e I-28 até atingiram dezenas de nanomolares.Tabela 3 - IC50S de compostos de pirrolo[2,1- f][1,2,4]triazina contra a proliferação de células Rh30

Efeitos de I-33 sobre a sinalização de P13K em células Rh30 de rabdomiosarcoma humano e células U87MG de glioma humano Método Experimental

[0169] Células de Rh30 e U87MG foram semeadas em placas de 12 cavidades em base de 2 x 105 células/cavidade. No dia seguinte, as células foram incubadas em meio de cultura fresco livre de soro submetidas à inanição por 24 horas. As células foram então tratadas com concentrações diferentes de composto I-33 por 1 hora. Após estimuladas com IGF-1 por 10 minutos, as células lisadas foram coletadas, e 4 x tampão carga SDS [200 mM Tris.Cl (pH 6,8), 400 mM DTT, 8% SDS (dodecil sulfato de sódio), 0,4% azul de bromofenol, 40% glicerol] foi adicionado. Os lisados de célula foram fervidos por 10 minutos. A alíquota foi carregada sobre gel de poliacrilamida e conduzida eletroforese em tampão de eletroforese de tris-glicina (25 mM tris, 250 mM glicina, 0,1% SDS) a 80-100 V por 2-2,5 horas. As proteínas foram transformadas de gel em membrana de filtro de nitrocelulose utilizando método semi-seco. A membrana de filtro foi bloqueada com solução bloqueadora contendo leite em pó desnatado a 5% (leite em pó desnatado a 5%, 20 mM Tris-HCl (pH 7,2-7,4), 150 mM NaCl, 0,1% (v/v) Tween 20) em batedeira à temperatura ambiente por 2 horas. Então, anticorpo primário específico foi adicionado hibridizado a 4°C da noite para o dia. A membrana foi lavada com tampão de lavagem [20 mM Tris- HCl (pH 7,2-7,4), 150 mM NaCl, 0,1% (v/v) Tween 20] três vezes à temperatura ambiente, 15 minutos de cada vez. Um anticorpo secundário marcado com enzima Horseradish peroxidase foi adicionado e o sistema colocado em batedeira e levemente batido à temperatura ambiente por 1 hora. Após lavagem com tampão de lavagem 3 vezes, a membrana foi incubada com Substrato Quimioluminescente Supersignal West Dura (Pierce Inc, Rochford, IL). E então a membrana foi exposta, desenvolvida, e fixada e coletadas as imagens.

Resultados Experimentais

[0170] Os resultados experimentais (Figura 1) demonstraram que I-33 inibiu significativamente a transdução de sinalização de P13K em células Rh30 de rabdomiosarcoma humano e em células U87MG de glioma humano.

Atividade inibitória de I-30 e I-33 sobre a proliferação de células de câncer humano de vários tecidos

[0171] I-30 e I-33 foram selecionados para teste de sua atividade sobre a proliferação de células de câncer humano originadas de diferentes tipos de tecido. Os resultados são mostrados na Tabela 4. Tabela 4 Atividade inibidora de I30- e I-33 sobre um painel ou células de câncer humano

[0172] Conforme mostra a Tabela 4, a atividade de compostos I-30 e I-33 é comparável à do controle positivo GDC0941 (que foi adquirido de Shanghai han-xiang chemical co., Ltd, dimesilato) contra a proliferação de várias linhagens celulares, tais como células de câncer de cólon C-HCT-116, células de câncer colorretal C-LOVO, células de câncer do endométrio E-RL95-2, células de câncer gástrico G-MKN-45, células de hepatoma L-BEL-7402 e células S-RH30 de rabdomiosarcoma. Porém, as atividades dos compostos são significativamente mais potentes do que as do controle positivo na inibição de proliferação de células B-BT474.

Efeitos inibitórios sobre o crescimento de xenoenxerto U87-MG de neuroglioma humano subcutaneamente transplantado em camundongos nus (“nude”) Método Experimental

[0173] Tumores bem desenvolvidos em camundongos nus foram seccionados em fragmentos de 1,5 mm3 e transplantados subcutaneamente no flanco direito de camundongos nus sob condições estéreis. Os diâmetros de tumores subcutaneamente transplantados em camundongos nus foram medidos com um calibrador Vernier. Quando o tumor atingiu um volume de 100200 mm , os camundongos foram aleatoriamente designados em vários grupos: I-33 mesilato grupo 50 mg/kg e grupo 25 mg/kg; I-30 mesilato grupo 50 mg/kg; GDC0941 dimesilato grupo 50 mg/kg e grupo controle. Os grupos controle receberam a mesma quantidade de solvente em branco e os grupos de tratamento receberam os compostos testados (p.o.). Os compostos foram administrados uma vez ao dia por três semanas. Durante todo o experimento, os tamanhos dos tumores foram medidos duas vezes por semana e nesse interim os pesos corpóreos dos camundongos foram medidos. O volume de tumor (TV) foi calculado como segue: TV = ^ x a x b2, onde a e b representam o comprimento e a largura, respectivamente. O volume de tumor relativo individual (RTV) foi calculado como segue: RTV = Vt/Vo, onde Vo é o volume no início do tratamento e V1 é o volume medido de cada vez. O índice de avaliação da atividade antitumoral foi a taxa relativa de proliferação de tumor T/C (%), cuja fórmula de cálculo consta a seguir: T/C (%) = (TRTV/CRTV) x 100% TRTV: RTV de grupo de tratamento; CRTV: RTV de grupo de controle negativo.

Resultados Experimentais

[0174] Os resultados experimentais foram mostrados na Tabela 5 e na Figura 2. I-33 mesilato foi administrado via oral à dose de 50 mg/kg ou 20 mg/kg todos os dias. Após uma semana, o crescimento do tumor em grupos tratados com I-33 foi significativamente reduzido. Após administração com sucesso por três semanas, I-33 mesilato inibiu significativamente o crescimento de xenoenxerto U87mG subcutaneamente transplantados em camundongos nus (Figura 2). O valor T/C no 21° dia foi de 25, 65% e 32,61%, respectivamente. I-33 mesilato demonstrou atividade mais potente do que GDC0941 (50 mg/kg) na inibição do crescimento do tumor. I-30 mesilato a 50 mg/kg também exibiu efeitos inibitórios significativos sobre o crescimento do tumor. O valor T/C de I-30 mesilato a 50 mg/kg no 21° dia foi de 37,26%, ao passo que o GDC0941 no grupo 50 mg/kg foi de 51.40%. Tabela 5 - Taxas Relativas de Crescimento de Tumor em xenoenxerto U87-MG de neuroglioma humano em camundongos nus

Claims (11)

1. Composto de pirrolo[2,1-f][1,2,4]triazina, de fórmula geral I, um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, caracterizado pelo fato de apresentar a fórmula I:

onde: X = CH ou N; Ri é -NR5R6; R2 é:

R3 é -NH2, -NHC(O)NHRii, -NHC(O)ORii, -CH2OH, -CH2S(O)2Ri2, ou - CH2OS(O)2Ri2; R4 é H ou CF3; R5 e R6 são, cada qual, independentemente, um alquila Ci-C4, ou combinados com o átomo de nitrogênio ao qual estão ligados para formar um heterociclo saturado não substituído de 5-8 membros ou um heterociclo saturado de 5-8 membros substituído por um substituinte, o substituinte sendo -S(O)2R12; R7, R8, R9 e Ri0 são, cada qual independentemente, H ou alquila C1-C3; alternativamente, R7 e R8 ou R9 e R10 com o átomo de carbono ao qual estão ligados como átomos de carbono em ponte, formam biciclo-heterociclo em ponte com anel de morfolina; R11 é um alquila C1-C4, um cicloalquila C3-C6 não substituído ou um cicloalquila C3-C6 substituído por um ou mais substituintes, um benzila não substituído ou um benzila substituído com um ou mais substituintes, um fenila não substituído ou um fenila substituído com um ou mais substituintes, um isoxazolila não substituído ou um isoxazolila substituído por um ou mais substituintes, ou um piridila não substituído ou um piridila substituído por um ou mais substituintes, e o um ou mais substituintes são selecionados de um halogênio, um alquila C1-C3, ou um alcoxila C1-C3, -CF3, -C(O)OR12, -C(O)NR12R15,

R12 e R15 são, cada qual independentemente, alquila C1-C3.

2. Composto de pirrolo[2,1-f][1,2,4]triazina, de fórmula geral I, um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, de acordo com a reivindicação 1, caracterizado pelo fato de o composto ter a estrutura a seguir da fórmula geral I:

onde: X = CH ou N; Ri é -NR5R6;

R3 é -NH2, -NHC(O)NHR11, -NHC(O)OR11, -NHC(O)R11, -CH2OH, - CH2S(O)2R12, ou -CH2NHS(O)2R12; R4 é H ou CF3; R5 e R6 são, cada qual, independentemente, um alquila C1-C4, ou combinados com o átomo de nitrogênio ao qual estão ligados para formar um piperazina substituído por -S(O)2R12; R7, R8, R9 e R10 são, cada qual independentemente, H ou alquila C1-C3; alternativamente, R7 e R8 formam biciclo- heterociclo em ponte com anel de morfolina; R11 é um alquila C1-C4, benzila ou um benzila substituído por um ou mais substituintes, um fenila não substituídos ou um fenila substituído por um ou mais substituintes, ou um isoxazolila substituído por um ou mais substituintes, e um ou mais substituintes são selecionados a partir de halogênio, um alquila C1-C3, ou um alcoxila C1-C3, -CF3, -C(O)OR12,C(O)NR12R15,

R12 e R15 são, cada qual independentemente, um alquila C1-C3.

3. Composto, de acordo com a reivindicação 1, caracterizado pelo fato de ter a seguinte estrutura mostrada na Fórmula Geral A ou Fórmula Geral B:

4. Composto, de acordo com qualquer uma das reivindicações de 1 a 3, caracterizado pelo fato de: R2 ser:

R5 e R6 serem combinados com o átomo de nitrogênio ao qual estão ligados para formar um heterociclo saturado não substituído ou um heterociclo saturado substituído com um substituinte, sendo que o heterociclo saturado é pirrolidila, piperidinila ou piperazinila, e o substituinte é -S(O)2R12.

5. Composto, de acordo com a reivindicação 4, caracterizado pelo fato de: R1 ser dimetilamino ou 1-metilssulfonil piperazinila; R2 ser:

R11 ser metila, etila, propila, ciclopropila, ter-butila, isobutila, 4-fluorobenzila, fenila não substituído ou um fenila substituído por um ou mais substituintes, um isoxazolila ou um isoxazolila substituído com um ou mais substituintes, ou um anel de piridina não substituído ou um anel de piridina substituído por um ou mais substituintes, e o substituinte sendo selecionado de um flúor, um cloro, um trifluorometila, um metila, um metoxi, um etoxicarbonila, um dimetilaminocarbonila, um 4-metil-piperazino-1-carbonila, um piperidina-1-carbonila e um 4-dimetilamino-piperidina-1- carbonila.

6. Composto, de acordo com a reivindicação 1, caracterizado pelo fato de ter a seguinte estrutura de fórmula geral:

onde R1, R2, R11 e R12 são conforme definidos na reivindicação 1, R16 e R17 são iguais ou diferentes, e cada qual independentemente selecionado de alquila C1-C4, ou R16 e R17 são combinados com o átomo de nitrogênio ao qual estão ligados para formar um 4-metil-piperazinila, um 4- dimetilamino-piperidila ou piperidin-1-ila.

7. Composto, de acordo com a reivindicação 1, caracterizado pelo fato de o composto ter a seguinte estrutura de fórmula geral:

8. Método de preparação de compostos de pirrolo[2,1-f][1,2,4]triazina, conforme definidos na reivindicação 1,caracterizado pelo fato de compreender as seguintes etapas:

onde R13 é um nitro ou —CH2OAc; R14 é um amino ou -CH2OH; 1) Derivado de pirrolo 1 e cloramina em N-N-dimetilformamida anidra são submetidos à reação de N-aminação na presença de uma base para obter o composto 2; 2) o composto representado pela Fórmula 2 sem purificação adicional, é submetido à amonólise para dar o composto 3; 3) o composto 3 reage com um aldeído aromático sob a ação de ácido metal de Lewis para dar o composto IIa, ou composto 3 e um aldeído, sob catálise com ácido de Lewis, tal como uma solução de trifluoreto de boro em dietil éter, são submetidos à condensação para dar uma base de Schiff, e então ciclização oxidativa para dar o composto IIa; 4) o Composto IIa é submetido à reação de cloração na presença de uma base para dar o composto IIb; 5) o Composto IIb e R2-H são submetidos à reação de substituição nucleofílica para dar o composto IIc; 6) o grupo éster do composto IIc é submetido à reação de hidrólise; ou o grupo nitro do composto IIc é submetido à reação de redução, e então o grupo éster do composto IIc é hidrolisado; 7) o Composto IId reage com uma amina R1-H ou com um heterociclo saturado substituído/não substituído de 3-8 membros contendo pelo menos um átomo de nitrogênio para dar o composto IIe; e o substituinte é -S(O)2R12; 8) o Composto IIe é reduzido através de um agente de redução para dar o composto I’; 9) o Composto I’ é também submetido à reação de adição com R11NCO, à reação de esterificação ou amidação com R11OC(O)Cl, à reação de esterificação ou amidação com R11C(O)OH ou R11C(O)Cl ou à reação de esterificação ou à reação de amidação com R12S(O)2Cl), para formar os compostos representados pela fórmula geral I.

9. Método, de acordo com a reivindicação 8, caracterizado pelo fato de a base na etapa 1) ser hidreto de sódio, carbonato de potássio ou ter-butóxido de potássio; o ácido metal de Lewis na etapa 3) poder ser um reagente de cobre monovalente ou divalente e a temperatura de reação ser de 80-150°C; o agente de cloração na etapa 4) ser oxicloreto de fósforo ou pentacloreto de fósforo, e a base usada ser N,N- dimetilanilina ou 4-dimetilaminopiridina; a amina na etapa 7) ser dimetilamina ou 1-metilssulfonil piperazina; o agente redutor na etapa 8) ser complexo de borano- tetraidrofurano ou complexo de borano-sulfeto de dimetila.

10. Método, de acordo com a reivindicação 9, caracterizado pelo fato de o reagente de cobre ser brometo cuproso, cloreto cuproso, acetato de cobre monohidratado, brometo de cobre, cloreto de cobre anidro, cloreto de cobre diidratado, e o solvente de reação ser o dimetil sulfóxido ou N,N- dimetilformamida, N,N-dimetilacetamida.

11. Composto de pirrolo[2,1-f][1,2,4]triazina, de acordo com a reivindicação 1, caracterizado pelo fato de ser para uso no tratamento de uma doença relacionada com fosfatidilinositol 3-quinase selecionada a partir do grupo consistindo de rabdomiosarcoma humano, câncer de pulmão de células não pequenas, glioma humano, câncer de próstata, câncer ovariano, câncer hepático, câncer de cólon ou câncer de mama.

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