BR112014021776A2 - Métodos e sistemas para predizer o risco de câncer de próstata e o volume da glândula da próstata - Google Patents

Métodos e sistemas para predizer o risco de câncer de próstata e o volume da glândula da próstata Download PDF

Info

Publication number
BR112014021776A2
BR112014021776A2 BR112014021776-9A BR112014021776A BR112014021776A2 BR 112014021776 A2 BR112014021776 A2 BR 112014021776A2 BR 112014021776 A BR112014021776 A BR 112014021776A BR 112014021776 A2 BR112014021776 A2 BR 112014021776A2
Authority
BR
Brazil
Prior art keywords
tpsa
fpsa
cassette
value
probability
Prior art date
Application number
BR112014021776-9A
Other languages
English (en)
Other versions
BR112014021776B1 (pt
Inventor
Andrew J. Vickers
Peter T. Scardino
Hans Lilja
Vincent Linder
David Steinmiller
Original Assignee
Oy Arctic Partners Ab
Opko Diagnostics, Llc
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Oy Arctic Partners Ab, Opko Diagnostics, Llc filed Critical Oy Arctic Partners Ab
Publication of BR112014021776A2 publication Critical patent/BR112014021776A2/pt
Publication of BR112014021776B1 publication Critical patent/BR112014021776B1/pt

Links

Classifications

    • G—PHYSICS
    • G16—INFORMATION AND COMMUNICATION TECHNOLOGY [ICT] SPECIALLY ADAPTED FOR SPECIFIC APPLICATION FIELDS
    • G16H—HEALTHCARE INFORMATICS, i.e. INFORMATION AND COMMUNICATION TECHNOLOGY [ICT] SPECIALLY ADAPTED FOR THE HANDLING OR PROCESSING OF MEDICAL OR HEALTHCARE DATA
    • G16H50/00—ICT specially adapted for medical diagnosis, medical simulation or medical data mining; ICT specially adapted for detecting, monitoring or modelling epidemics or pandemics
    • G16H50/30—ICT specially adapted for medical diagnosis, medical simulation or medical data mining; ICT specially adapted for detecting, monitoring or modelling epidemics or pandemics for calculating health indices; for individual health risk assessment
    • B—PERFORMING OPERATIONS; TRANSPORTING
    • B01—PHYSICAL OR CHEMICAL PROCESSES OR APPARATUS IN GENERAL
    • B01L—CHEMICAL OR PHYSICAL LABORATORY APPARATUS FOR GENERAL USE
    • B01L3/00—Containers or dishes for laboratory use, e.g. laboratory glassware; Droppers
    • B—PERFORMING OPERATIONS; TRANSPORTING
    • B01—PHYSICAL OR CHEMICAL PROCESSES OR APPARATUS IN GENERAL
    • B01L—CHEMICAL OR PHYSICAL LABORATORY APPARATUS FOR GENERAL USE
    • B01L3/00—Containers or dishes for laboratory use, e.g. laboratory glassware; Droppers
    • B01L3/50—Containers for the purpose of retaining a material to be analysed, e.g. test tubes
    • B01L3/502—Containers for the purpose of retaining a material to be analysed, e.g. test tubes with fluid transport, e.g. in multi-compartment structures
    • B—PERFORMING OPERATIONS; TRANSPORTING
    • B01—PHYSICAL OR CHEMICAL PROCESSES OR APPARATUS IN GENERAL
    • B01L—CHEMICAL OR PHYSICAL LABORATORY APPARATUS FOR GENERAL USE
    • B01L3/00—Containers or dishes for laboratory use, e.g. laboratory glassware; Droppers
    • B01L3/50—Containers for the purpose of retaining a material to be analysed, e.g. test tubes
    • B01L3/502—Containers for the purpose of retaining a material to be analysed, e.g. test tubes with fluid transport, e.g. in multi-compartment structures
    • B01L3/5027—Containers for the purpose of retaining a material to be analysed, e.g. test tubes with fluid transport, e.g. in multi-compartment structures by integrated microfluidic structures, i.e. dimensions of channels and chambers are such that surface tension forces are important, e.g. lab-on-a-chip
    • B01L3/502715—Containers for the purpose of retaining a material to be analysed, e.g. test tubes with fluid transport, e.g. in multi-compartment structures by integrated microfluidic structures, i.e. dimensions of channels and chambers are such that surface tension forces are important, e.g. lab-on-a-chip characterised by interfacing components, e.g. fluidic, electrical, optical or mechanical interfaces
    • B—PERFORMING OPERATIONS; TRANSPORTING
    • B01—PHYSICAL OR CHEMICAL PROCESSES OR APPARATUS IN GENERAL
    • B01L—CHEMICAL OR PHYSICAL LABORATORY APPARATUS FOR GENERAL USE
    • B01L3/00—Containers or dishes for laboratory use, e.g. laboratory glassware; Droppers
    • B01L3/50—Containers for the purpose of retaining a material to be analysed, e.g. test tubes
    • B01L3/502—Containers for the purpose of retaining a material to be analysed, e.g. test tubes with fluid transport, e.g. in multi-compartment structures
    • B01L3/5027—Containers for the purpose of retaining a material to be analysed, e.g. test tubes with fluid transport, e.g. in multi-compartment structures by integrated microfluidic structures, i.e. dimensions of channels and chambers are such that surface tension forces are important, e.g. lab-on-a-chip
    • B01L3/502761—Containers for the purpose of retaining a material to be analysed, e.g. test tubes with fluid transport, e.g. in multi-compartment structures by integrated microfluidic structures, i.e. dimensions of channels and chambers are such that surface tension forces are important, e.g. lab-on-a-chip specially adapted for handling suspended solids or molecules independently from the bulk fluid flow, e.g. for trapping or sorting beads, for physically stretching molecules
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12Q—MEASURING OR TESTING PROCESSES INVOLVING ENZYMES, NUCLEIC ACIDS OR MICROORGANISMS; COMPOSITIONS OR TEST PAPERS THEREFOR; PROCESSES OF PREPARING SUCH COMPOSITIONS; CONDITION-RESPONSIVE CONTROL IN MICROBIOLOGICAL OR ENZYMOLOGICAL PROCESSES
    • C12Q1/00—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions
    • C12Q1/68—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions involving nucleic acids
    • C12Q1/6876—Nucleic acid products used in the analysis of nucleic acids, e.g. primers or probes
    • C12Q1/6883—Nucleic acid products used in the analysis of nucleic acids, e.g. primers or probes for diseases caused by alterations of genetic material
    • C12Q1/6886—Nucleic acid products used in the analysis of nucleic acids, e.g. primers or probes for diseases caused by alterations of genetic material for cancer
    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
    • G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
    • G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
    • G01N33/53—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor
    • G01N33/543—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor with an insoluble carrier for immobilising immunochemicals
    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
    • G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
    • G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
    • G01N33/53—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor
    • G01N33/543—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor with an insoluble carrier for immobilising immunochemicals
    • G01N33/54366—Apparatus specially adapted for solid-phase testing
    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
    • G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
    • G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
    • G01N33/53—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor
    • G01N33/574—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor for cancer
    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
    • G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
    • G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
    • G01N33/53—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor
    • G01N33/574—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor for cancer
    • G01N33/57407—Specifically defined cancers
    • G01N33/57434—Specifically defined cancers of prostate
    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
    • G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
    • G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
    • G01N33/68—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing involving proteins, peptides or amino acids
    • G01N33/6893—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing involving proteins, peptides or amino acids related to diseases not provided for elsewhere
    • G—PHYSICS
    • G16—INFORMATION AND COMMUNICATION TECHNOLOGY [ICT] SPECIALLY ADAPTED FOR SPECIFIC APPLICATION FIELDS
    • G16B—BIOINFORMATICS, i.e. INFORMATION AND COMMUNICATION TECHNOLOGY [ICT] SPECIALLY ADAPTED FOR GENETIC OR PROTEIN-RELATED DATA PROCESSING IN COMPUTATIONAL MOLECULAR BIOLOGY
    • G16B20/00—ICT specially adapted for functional genomics or proteomics, e.g. genotype-phenotype associations
    • G—PHYSICS
    • G16—INFORMATION AND COMMUNICATION TECHNOLOGY [ICT] SPECIALLY ADAPTED FOR SPECIFIC APPLICATION FIELDS
    • G16B—BIOINFORMATICS, i.e. INFORMATION AND COMMUNICATION TECHNOLOGY [ICT] SPECIALLY ADAPTED FOR GENETIC OR PROTEIN-RELATED DATA PROCESSING IN COMPUTATIONAL MOLECULAR BIOLOGY
    • G16B40/00—ICT specially adapted for biostatistics; ICT specially adapted for bioinformatics-related machine learning or data mining, e.g. knowledge discovery or pattern finding
    • G—PHYSICS
    • G16—INFORMATION AND COMMUNICATION TECHNOLOGY [ICT] SPECIALLY ADAPTED FOR SPECIFIC APPLICATION FIELDS
    • G16H—HEALTHCARE INFORMATICS, i.e. INFORMATION AND COMMUNICATION TECHNOLOGY [ICT] SPECIALLY ADAPTED FOR THE HANDLING OR PROCESSING OF MEDICAL OR HEALTHCARE DATA
    • G16H10/00—ICT specially adapted for the handling or processing of patient-related medical or healthcare data
    • G16H10/40—ICT specially adapted for the handling or processing of patient-related medical or healthcare data for data related to laboratory analysis, e.g. patient specimen analysis
    • G—PHYSICS
    • G16—INFORMATION AND COMMUNICATION TECHNOLOGY [ICT] SPECIALLY ADAPTED FOR SPECIFIC APPLICATION FIELDS
    • G16H—HEALTHCARE INFORMATICS, i.e. INFORMATION AND COMMUNICATION TECHNOLOGY [ICT] SPECIALLY ADAPTED FOR THE HANDLING OR PROCESSING OF MEDICAL OR HEALTHCARE DATA
    • G16H50/00—ICT specially adapted for medical diagnosis, medical simulation or medical data mining; ICT specially adapted for detecting, monitoring or modelling epidemics or pandemics
    • G16H50/20—ICT specially adapted for medical diagnosis, medical simulation or medical data mining; ICT specially adapted for detecting, monitoring or modelling epidemics or pandemics for computer-aided diagnosis, e.g. based on medical expert systems
    • B—PERFORMING OPERATIONS; TRANSPORTING
    • B01—PHYSICAL OR CHEMICAL PROCESSES OR APPARATUS IN GENERAL
    • B01L—CHEMICAL OR PHYSICAL LABORATORY APPARATUS FOR GENERAL USE
    • B01L2300/00—Additional constructional details
    • B01L2300/06—Auxiliary integrated devices, integrated components
    • B01L2300/0627—Sensor or part of a sensor is integrated
    • B01L2300/0654—Lenses; Optical fibres
    • B—PERFORMING OPERATIONS; TRANSPORTING
    • B01—PHYSICAL OR CHEMICAL PROCESSES OR APPARATUS IN GENERAL
    • B01L—CHEMICAL OR PHYSICAL LABORATORY APPARATUS FOR GENERAL USE
    • B01L2300/00—Additional constructional details
    • B01L2300/08—Geometry, shape and general structure
    • B01L2300/0809—Geometry, shape and general structure rectangular shaped
    • B01L2300/0816—Cards, e.g. flat sample carriers usually with flow in two horizontal directions
    • B—PERFORMING OPERATIONS; TRANSPORTING
    • B01—PHYSICAL OR CHEMICAL PROCESSES OR APPARATUS IN GENERAL
    • B01L—CHEMICAL OR PHYSICAL LABORATORY APPARATUS FOR GENERAL USE
    • B01L2300/00—Additional constructional details
    • B01L2300/08—Geometry, shape and general structure
    • B01L2300/0861—Configuration of multiple channels and/or chambers in a single devices
    • B01L2300/087—Multiple sequential chambers
    • B—PERFORMING OPERATIONS; TRANSPORTING
    • B01—PHYSICAL OR CHEMICAL PROCESSES OR APPARATUS IN GENERAL
    • B01L—CHEMICAL OR PHYSICAL LABORATORY APPARATUS FOR GENERAL USE
    • B01L2400/00—Moving or stopping fluids
    • B01L2400/04—Moving fluids with specific forces or mechanical means
    • B01L2400/0475—Moving fluids with specific forces or mechanical means specific mechanical means and fluid pressure
    • B01L2400/0487—Moving fluids with specific forces or mechanical means specific mechanical means and fluid pressure fluid pressure, pneumatics
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12Q—MEASURING OR TESTING PROCESSES INVOLVING ENZYMES, NUCLEIC ACIDS OR MICROORGANISMS; COMPOSITIONS OR TEST PAPERS THEREFOR; PROCESSES OF PREPARING SUCH COMPOSITIONS; CONDITION-RESPONSIVE CONTROL IN MICROBIOLOGICAL OR ENZYMOLOGICAL PROCESSES
    • C12Q2600/00—Oligonucleotides characterized by their use
    • C12Q2600/112—Disease subtyping, staging or classification
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12Q—MEASURING OR TESTING PROCESSES INVOLVING ENZYMES, NUCLEIC ACIDS OR MICROORGANISMS; COMPOSITIONS OR TEST PAPERS THEREFOR; PROCESSES OF PREPARING SUCH COMPOSITIONS; CONDITION-RESPONSIVE CONTROL IN MICROBIOLOGICAL OR ENZYMOLOGICAL PROCESSES
    • C12Q2600/00—Oligonucleotides characterized by their use
    • C12Q2600/158—Expression markers
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12Q—MEASURING OR TESTING PROCESSES INVOLVING ENZYMES, NUCLEIC ACIDS OR MICROORGANISMS; COMPOSITIONS OR TEST PAPERS THEREFOR; PROCESSES OF PREPARING SUCH COMPOSITIONS; CONDITION-RESPONSIVE CONTROL IN MICROBIOLOGICAL OR ENZYMOLOGICAL PROCESSES
    • C12Q2600/00—Oligonucleotides characterized by their use
    • C12Q2600/16—Primer sets for multiplex assays
    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N2333/00—Assays involving biological materials from specific organisms or of a specific nature
    • G01N2333/90—Enzymes; Proenzymes
    • G01N2333/914—Hydrolases (3)
    • G01N2333/948—Hydrolases (3) acting on peptide bonds (3.4)
    • G01N2333/95—Proteinases, i.e. endopeptidases (3.4.21-3.4.99)
    • G01N2333/964—Proteinases, i.e. endopeptidases (3.4.21-3.4.99) derived from animal tissue
    • G01N2333/96425—Proteinases, i.e. endopeptidases (3.4.21-3.4.99) derived from animal tissue from mammals
    • G01N2333/96427—Proteinases, i.e. endopeptidases (3.4.21-3.4.99) derived from animal tissue from mammals in general
    • G01N2333/9643—Proteinases, i.e. endopeptidases (3.4.21-3.4.99) derived from animal tissue from mammals in general with EC number
    • G01N2333/96433—Serine endopeptidases (3.4.21)
    • G01N2333/96441—Serine endopeptidases (3.4.21) with definite EC number
    • G01N2333/96455—Kallikrein (3.4.21.34; 3.4.21.35)

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Physics & Mathematics (AREA)
  • Medical Informatics (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Hematology (AREA)
  • Analytical Chemistry (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Pathology (AREA)
  • Urology & Nephrology (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Biophysics (AREA)
  • Data Mining & Analysis (AREA)
  • Databases & Information Systems (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • General Physics & Mathematics (AREA)
  • Food Science & Technology (AREA)
  • Cell Biology (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Clinical Laboratory Science (AREA)
  • Evolutionary Biology (AREA)
  • Bioinformatics & Computational Biology (AREA)
  • Theoretical Computer Science (AREA)
  • Spectroscopy & Molecular Physics (AREA)
  • Primary Health Care (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Oncology (AREA)
  • Hospice & Palliative Care (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Dispersion Chemistry (AREA)

Abstract

métodos e sistemas para predizer o risco de câncer da próstata e o volume da glândula da próstata. a presente invenção refere-se a métodos e aparelhos para predizer o risco de câncer da próstata e/ou o volume da glândula da próstata. mais particularmente, a presente invenção refere-se aos métodos e aparelhos para a provisão de modelos e o emprego dos modelos para predizer o risco de câncer da próstata e/ou para predizer o volume da glândula da próstata. os métodos e os aparelhos para predizer o risco de câncer da próstata e/ou o volume da glândula da próstata são providos ao usar, pelo menos em parte, as informações de um painel de marcadores de calicreína.

Description

Relatório Descritivo da Patente de Invenção para "MÉTO-
DOS E SISTEMAS PARA PREDIZER O RISCO DE CÂNCER DE PRÓSTATA E O VOLUME DA GLÂNDULA DA PRÓSTATA". CAMPO DA INVENÇÃO
[001] A presente invenção refere-se a métodos e aparelhos para predizer o risco de câncer de próstata e/ou o volume da glândula da próstata. Mais particularmente, esta descrição refere-se aos métodos e aparelhos para prover os modelos e empregar os mesmos para predi- zer o risco de câncer de próstata e/ou predizer o volume da glândula da próstata.
ANTECEDENTES
[002] A maioria dos homens com um nível elevado no sangue do antígeno específico da próstata total (PSA) — o gatilho mais comum para biópsia em homens nos EUA — não têm câncer de próstata. Em consequência, estimou-se que são realizadas cerca de 750.000 bióp- sias da próstata desnecessárias a cada ano nos EUA. Há evidência considerável que a medição das isoformas do PSA separadamente em vez da combinação em uma única medida de PSA total pode ajudar a predizer a presença do câncer de próstata. Estes dados incluem estu- dos que mostram que o câncer é previsto pelo PSA livre, BPSA ou - 2proPSA. Certamente, o PSA livre é frequentemente medido separa- damente, sendo que os urologistas recebem os dados em termos de PSA total e da razão entre o PSA livre e total, com uma estimativa de 10 milhões de PSAs livres medidos por ano. Há também evidência que a hK2, a molécula que converte o PSA a partir de sua forma proativa, é informativa do risco da próstata. No entanto, nenhum destes marca- dores em si constitui um bom prognosticador do resultado da biópsia da próstata.
[003] Houve diversas tentativas de construir modelos preditivos para o câncer de próstata, mais notavelmente a "Calculadora de Risco para o Ensaio de Prevenção ao Câncer de Próstata", o "Sunnybrook" e a calculadora de risco para o Ensaio Randomizado Europeu de Tria- gem ao Câncer de Próstata (ERSPC). O problema com estes modelos é que requerem mais ou menos exames clínicos extensivos e minucio- sos, isto é, o paciente necessita visitar um urologista. Por exemplo, a calculadora de risco para o ERSPC requer dados sobre o volume da próstata, que são obtidos ao inserir uma sonda de ultrassom no reto. Consequentemente, novos métodos e aparelhos para predizer o risco de câncer de próstata e/ou o volume da glândula da próstata seriam benéficos.
SUMÁRIO DA INVENÇÃO
[004] São providos métodos e aparelhos para predizer o risco de câncer de próstata e/ou o volume da glândula da próstata. Mais parti- cularmente, esta descrição refere-se aos métodos e aparelhos para prover os modelos e empregar os mesmos para predizer o risco de câncer de próstata e/ou predizer o volume da glândula da próstata. Em algumas modalidades, os métodos e aparelhos para predizer o risco de câncer de próstata e/ou o volume da glândula da próstata são pro- vidos utilizando, pelo menos em parte, as informações de um painel de marcadores de calicreína. O objetivo deste pedido de patente envolve, em alguns casos, os métodos relacionados, as soluções alternativas a um problema particular e/ou uma pluralidade de diferentes usos dos sistemas e dispositivos.
[005] Um objetivo da presente invenção consiste na provisão de um método para a obtenção de uma probabilidade de um evento utili- zando um modelo de regressão logística para predizer o risco de um homem desenvolver câncer de próstata.
[006] Em um conjunto de modalidades, é provido um computador para a determinação de uma probabilidade de um evento associado com o câncer de próstata. O computador inclui uma interface de entra-
da configurada para receber as informações de uma pluralidade de marcadores do sangue, em que as informações para a pluralidade de marcadores do sangue incluem um valor de antígeno específico da próstata livre (fPSA) e um valor de PSA total (tPSA). O computador também inclui pelo menos um processador programado para avaliar um modelo de regressão logística com base, pelo menos em parte, nas informações recebidas, para a determinação de uma probabilidade de um evento associado com o câncer de próstata em uma pessoa. A avaliação do modelo de regressão logística compreende a determina- ção dos termos de ranhura cúbica para tPSA, em que a determinação dos termos de ranhura cúbica para tPSA compreende a determinação dos termos de ranhura cúbica para tPSA com base em uma primeira ranhura cúbica que tem um primeiro nó interno entre 2 e 5 e um se- gundo nó interno entre 5 e 8, a determinação dos termos de ranhura cúbica para fPSA, em que a determinação dos termos de ranhura cú- bica para fPSA compreende a determinação dos termos de ranhura cúbica para fPSA com base em uma segunda ranhura cúbica que tem um terceiro nó interno entre 0,25 e 1 e um quarto nó interno entre 1,0 e 2,0, a determinação de um primeiro valor para tPSA com base, pelo menos em parte, no valor de tPSA recebido e nos termos de ranhura cúbica determinados para tPSA, a determinação do segundo valor pa- ra fPSA com base, pelo menos em parte, no valor de fPSA recebido e nos termos de ranhura cúbica determinados para fPSA e a determina- ção da probabilidade do evento associado com o câncer de próstata com base, pelo menos em parte, no primeiro valor e no segundo valor. O computador também inclui uma interface de saída configurada para emitir uma indicação da probabilidade do evento associado com o câncer de próstata.
[007] Em um conjunto de modalidades, é provido um sistema pa- ra a determinação de uma probabilidade de um evento associado com o câncer de próstata. O sistema inclui um detector configurado para medir uma pluralidade de valores para marcadores do sangue, em que a pluralidade de marcadores do sangue inclui o antígeno específico da próstata livre (fPSA), o PSA total (tPSA) e o PSA intacto (iPSA). O sis- tema também inclui pelo menos um processador em comunicação ele- trônica com o detector. Pelo menos um processador é programado pa- ra avaliar um modelo de regressão logística com base, pelo menos em parte, nos valores medidos para fPSA, tPSA e iPSA para a determina- ção de uma probabilidade de um evento associado com o câncer de próstata de grau elevado em uma pessoa. A avaliação do modelo de regressão logística compreende a determinação dos termos de ranhu- ra cúbica para tPSA, em que a determinação dos termos de ranhura cúbica para tPSA compreende a determinação dos termos de ranhura cúbica para tPSA com base em uma primeira ranhura cúbica que tem um primeiro nó interno entre 4-5 e um segundo nó interno entre 6-8, a determinação dos termos de ranhura cúbica para fPSA, em que a de- terminação dos termos de ranhura cúbica para fPSA compreende a determinação dos termos de ranhura cúbica para fPSA com base em uma segunda ranhura cúbica que tem um terceiro nó interno entre 0,25 e 1 e um quarto nó interno entre 1,0 e 2,0, a determinação de um primeiro valor para tPSA com base, pelo menos em parte, no valor de tPSA recebido e nos termos de ranhura cúbica determinados para tP- SA, a determinação do segundo valor para fPSA com base, pelo me- nos em parte, no valor de fPSA recebido e nos termos de ranhura cú- bica determinados para fPSA, a determinação da probabilidade do e- vento associado com o câncer de próstata com base, pelo menos em parte, no primeiro valor e no segundo valor e a emissão de uma indi- cação da probabilidade do evento associado com o câncer de prósta- ta.
[008] Em um conjunto de modalidades, é provido um método pa-
ra a determinação de uma probabilidade de um evento associado com o câncer de próstata.
O método compreende a recepção, através de uma interface de entrada, das informações para uma pluralidade de marcadores do sangue, em que as informações para a pluralidade de marcadores do sangue incluem um valor de antígeno específico da próstata livre (fPSA) e um valor de PSA total (tPSA). O método com- preende adicionalmente a avaliação, utilizando pelo menos um pro- cessador, de um modelo de regressão logística com base, pelo menos em parte, nas informações recebidas, para a determinação de uma probabilidade de um evento associado com o câncer de próstata em uma pessoa.
A avaliação do modelo de regressão logística compreen- de a determinação dos termos de ranhura cúbica para tPSA, em que a determinação dos termos de ranhura cúbica para tPSA compreende a determinação dos termos de ranhura cúbica para tPSA com base em uma primeira ranhura cúbica que tem um primeiro nó interno entre 2 e e um segundo nó interno entre 5 e 8; a determinação dos termos de ranhura cúbica para fPSA, em que a determinação dos termos de ra- nhura cúbica para fPSA compreende a determinação dos termos de ranhura cúbica para fPSA com base em uma segunda ranhura cúbica que tem um terceiro nó interno entre 0,25 e 1 e um quarto nó interno entre 1,0 e 2,0, a determinação de um primeiro valor para tPSA com base, pelo menos em parte, no valor de tPSA recebido e nos termos de ranhura cúbica determinados para tPSA, a determinação de um se- gundo valor para fPSA com base, pelo menos em parte, no valor de fPSA recebido e nos termos de ranhura cúbica determinados para fP- SA e a determinação da probabilidade do evento associado com o câncer de próstata com base, pelo menos em parte, no primeiro valor e no segundo valor.
O método compreende adicionalmente a emissão de uma indicação da probabilidade do evento associado com o câncer de próstata.
[009] Em um conjunto de modalidades, é provido um meio de armazenamento que pode ser lido por computador codificado com uma pluralidade de instruções que, quando executadas por um compu- tador, executam um método para a determinação de uma probabilida- de de um evento associado com o câncer de próstata.
O método com- preende a recepção das informações para uma pluralidade de marca- dores do sangue, em que as informações para a pluralidade de mar- cadores do sangue incluem um valor de antígeno específico da prósta- ta livre (fPSA) e um valor de PSA total (tPSA) e a avaliação de um modelo de regressão logística com base, pelo menos em parte, nas informações recebidas, para a determinação de uma probabilidade de um evento associado com o câncer de próstata em uma pessoa.
A a- valiação do modelo de regressão logística compreende a determina- ção dos termos de ranhura cúbica para tPSA, em que a determinação dos termos de ranhura cúbica para tPSA compreende a determinação dos termos de ranhura cúbica para tPSA com base em uma primeira ranhura cúbica que tem um primeiro nó interno entre 2 e 5 e um se- gundo nó interno entre 5 e 8, a determinação dos termos de ranhura cúbica para fPSA, em que a determinação dos termos de ranhura cú- bica para fPSA compreende a determinação dos termos de ranhura cúbica para fPSA com base em uma segunda ranhura cúbica que tem um terceiro nó interno entre 0,25 e 1 e um quarto nó interno entre 1,0 e 2,0, a determinação de um primeiro valor para tPSA com base, pelo menos em parte, no valor de tPSA recebido e nos termos de ranhura cúbica determinados para tPSA, a determinação do segundo valor pa- ra fPSA com base, pelo menos em parte, no valor de fPSA recebido e nos termos de ranhura cúbica determinados para fPSA e a determina- ção da probabilidade do evento associado com o câncer de próstata com base, pelo menos em parte, no primeiro valor e no segundo valor.
O método compreende adicionalmente a emissão de uma indicação da probabilidade do evento associado com o câncer de próstata.
[0010] Em um conjunto de modalidades, é provido um computador para a determinação de uma probabilidade de um evento associado com o câncer de próstata. O computador inclui uma interface de entra- da configurada para receber as informações de uma pluralidade de marcadores do sangue, em que as informações para a pluralidade de marcadores do sangue incluem um valor de antígeno específico da próstata livre (fPSA), um valor de PSA total (tPSA), um valor de PSA intacto (iPSA) e um valor de calicreína humana 2 (kK2). O computador também inclui pelo menos um processador programado para avaliar um modelo de regressão logística com base, pelo menos em parte, nas informações recebidas, para a determinação de uma probabilidade de um evento associado com o câncer de próstata em uma pessoa. A avaliação do modelo de regressão logística compreende a determina- ção da probabilidade do evento associado com o câncer de próstata com base, pelo menos em parte, no valor de tPSA, no valor de iPSA, no valor hK2 e em uma razão entre o valor de fPSA e o valor de tPSA. O computador também inclui uma interface de saída configurada para emitir uma indicação da probabilidade do evento associado com o câncer de próstata.
[0011] Em um conjunto de modalidades, é provido um método pa- ra a determinação de uma probabilidade de um evento associado com o câncer de próstata. O método compreende a recepção, através de uma interface de entrada, das informações para uma pluralidade de marcadores do sangue, em que as informações para a pluralidade de marcadores do sangue incluem um valor de antígeno específico da próstata livre (fPSA), um valor de PSA total (tPSA), um valor de PSA intacto (iPSA) e um valor de calicreína humana 2 (kK2), para avaliar, utilizando pelo menos um processador, um modelo de regressão logís- tica com base, pelo menos em parte, nas informações recebidas, para a determinação de uma probabilidade de um evento associado com o câncer de próstata em uma pessoa. A avaliação do modelo de regres- são logística compreende a determinação da probabilidade do evento associado com o câncer de próstata com base, pelo menos em parte, no valor de tPSA, no valor de iPSA, no valor hK2 e em uma razão en- tre o valor de fPSA e o valor de tPSA e a emissão de uma indicação da probabilidade do evento associado com o câncer de próstata.
[0012] Em um conjunto de modalidades, é provido um meio de armazenamento que pode ser lido por computador codificado com uma pluralidade de instruções que, quando executadas por um compu- tador, executam um método de determinação de uma probabilidade de um evento associado com o câncer de próstata. O método compreen- de a recepção, através de uma interface de entrada, das informações para uma pluralidade de marcadores do sangue, em que as informa- ções para a pluralidade de marcadores do sangue incluem um valor de antígeno específico da próstata livre (fPSA), um valor de PSA total (tPSA), um valor de PSA intacto (iPSA) e um valor de calicreína hu- mana 2 (kK2), para avaliar, utilizando pelo menos um processador, um modelo de regressão logística com base, pelo menos em parte, nas informações recebidas, para a determinação de uma probabilidade de um evento associado com o câncer de próstata em uma pessoa. A a- valiação do modelo de regressão logística compreende a determina- ção da probabilidade do evento associado com o câncer de próstata com base, pelo menos em parte, no valor de tPSA, no valor de iPSA, no valor hK2 e em uma razão entre o valor de fPSA e o valor de tPSA e a emissão de uma indicação da probabilidade do evento associado com o câncer de próstata.
[0013] Em um conjunto de modalidades, é provido um computador para a determinação de uma probabilidade de um evento associado com o câncer de próstata. O computador inclui uma interface de entra-
da configurada para receber as informações de uma pluralidade de marcadores do sangue, em que as informações para a pluralidade de marcadores do sangue incluem um valor de antígeno específico da próstata livre (fPSA), um valor de PSA total (tPSA), um valor de PSA intacto (iPSA) e um valor de calicreína humana 2 (kK2). O computador também inclui pelo menos um processador programado para avaliar um modelo de regressão logística com base, pelo menos em parte, nas informações recebidas, para a determinação de uma probabilidade de um evento associado com o câncer de próstata em uma pessoa. A avaliação do modelo de regressão logística compreende a determina- ção de um termo não linear para tPSA ao elevar o valor de tPSA a um primeiro expoente, a determinação de um termo não linear para fPSA ao elevar o valor de fPSA para um segundo expoente e a determina- ção da probabilidade do evento associado com o câncer de próstata com base, pelo menos em parte, no valor de tPSA, no valor de fPSA, no valor de iPSA, no valor hK2, no termo não linear para tPSA e no termo não linear para fPSA. O computador inclui adicionalmente uma interface de saída configurada para emitir uma indicação da probabili- dade do evento associado com o câncer de próstata.
[0014] Em um conjunto de modalidades, é provido um método pa- ra a determinação de uma probabilidade de um evento associado com o câncer de próstata. O método compreende a recepção, através de uma interface de entrada, das informações para uma pluralidade de marcadores do sangue, em que as informações para a pluralidade de marcadores do sangue incluem um valor de antígeno específico da próstata livre (fPSA), um valor de PSA total (tPSA), um valor de PSA intacto (iPSA) e um valor de calicreína humana 2 (kK2). O método compreende adicionalmente a avaliação, utilizando pelo menos um processador, de um modelo de regressão logística com base, pelo menos em parte, nas informações recebidas, para a determinação de uma probabilidade de um evento associado com o câncer de próstata em uma pessoa. A avaliação do modelo de regressão logística com- preende a determinação de um termo não linear para tPSA ao elevar o valor de tPSA a um primeiro expoente, a determinação de um termo não linear para fPSA ao elevar o valor de fPSA para um segundo ex- poente e a determinação da probabilidade do evento associado com o câncer de próstata com base, pelo menos em parte, no valor de tPSA, no valor de fPSA, no valor de iPSA, no valor hK2, no termo não linear para tPSA e no termo não linear para fPSA. O método compreende adicionalmente a emissão de uma indicação da probabilidade do even- to associado com o câncer de próstata.
[0015] Em um conjunto de modalidades, é provido um meio de armazenamento que pode ser lido por computador codificado com uma pluralidade de instruções que, quando executadas por um compu- tador, executam um método de determinação de uma probabilidade de um evento associado com o câncer de próstata. O método compreen- de a recepção das informações para uma pluralidade de marcadores do sangue, em que as informações para a pluralidade de marcadores do sangue incluem um valor de antígeno específico da próstata livre (fPSA), um valor de PSA total (tPSA), um valor de PSA intacto (iPSA) e um valor de calicreína humana 2 (kK2). O método compreende adi- cionalmente a avaliação de um modelo de regressão logística com ba- se, pelo menos em parte, nas informações recebidas, para a determi- nação de uma probabilidade de um evento associado com o câncer de próstata em uma pessoa. A avaliação do modelo de regressão logísti- ca compreende a determinação de um termo não linear para tPSA ao elevar o valor de tPSA a um primeiro expoente, a determinação de um termo não linear para fPSA ao elevar o valor de fPSA para um segun- do expoente e a determinação da probabilidade do evento associado com o câncer de próstata com base, pelo menos em parte, no valor de tPSA, no valor de fPSA, no valor de iPSA, no valor hK2, no termo não linear para tPSA e no termo não linear para fPSA. O método compre- ende adicionalmente a emissão de uma indicação da probabilidade do evento associado com o câncer de próstata.
[0016] Em um conjunto de modalidades, é provido um computador para a determinação de uma probabilidade de um evento associado com o câncer de próstata. O computador inclui uma interface de entra- da configurada para receber as informações de uma pluralidade de marcadores do sangue, em que as informações para a pluralidade de marcadores do sangue incluem um valor de antígeno específico da próstata livre (fPSA) e um valor de PSA total (tPSA), um valor de PSA intacto (iPSA) e um valor de calicreína humana 2 (kK2). O computador também inclui pelo menos um processador programado para avaliar um modelo de regressão logística com base, pelo menos em parte, nas informações recebidas, para a determinação de uma probabilidade de um evento associado com o câncer de próstata em uma pessoa. A avaliação do modelo de regressão logística compreende a determina- ção dos termos de ranhura linear para tPSA, a determinação dos ter- mos de ranhura linear para fPSA, a determinação de um primeiro valor para tPSA com base, pelo menos em parte, no valor de tPSA recebido e nos termos de ranhura linear determinados para tPSA, a determina- ção de um segundo valor para fPSA com base, pelo menos em parte, no valor de fPSA recebido e nos termos de ranhura linear determina- dos para fPSA e a determinação da probabilidade do evento associado com o câncer de próstata com base, pelo menos em parte, no primeiro valor e no segundo valor. O computador também inclui uma interface de saída configurada para emitir uma indicação da probabilidade do evento associado com o câncer de próstata.
[0017] Em um conjunto de modalidades, é provido um método pa- ra a determinação de uma probabilidade de um evento associado com o câncer de próstata. O método compreende a recepção, através de uma interface de entrada, das informações para uma pluralidade de marcadores do sangue, em que as informações para a pluralidade de marcadores do sangue incluem um valor de antígeno específico da próstata livre (fPSA), um valor de PSA total (tPSA), um valor de PSA intacto (iPSA) e um valor de calicreína humana 2 (kK2). O método compreende adicionalmente a avaliação, utilizando pelo menos um processador, de um modelo de regressão logística com base, pelo menos em parte, nas informações recebidas, para a determinação de uma probabilidade de um evento associado com o câncer de próstata em uma pessoa. A avaliação do modelo de regressão logística com- preende a determinação dos termos de ranhura linear para tPSA, a determinação dos termos de ranhura linear para fPSA, a determinação de um primeiro valor para tPSA com base, pelo menos em parte, no valor de tPSA recebido e nos termos de ranhura linear determinados para tPSA, a determinação de um segundo valor para fPSA com base, pelo menos em parte, no valor de fPSA recebido e nos termos de ra- nhura linear determinados para fPSA e a determinação da probabilida- de do evento associado com o câncer de próstata com base, pelo me- nos em parte, no primeiro valor e no segundo valor. O método com- preende adicionalmente a emissão de uma indicação da probabilidade do evento associado com o câncer de próstata.
[0018] Em um conjunto de modalidades, é provido um meio de armazenamento que pode ser lido por computador codificado com uma pluralidade de instruções que, quando executadas por um compu- tador, executam um método de determinação de uma probabilidade de um evento associado com o câncer de próstata. O método compreen- de a recepção das informações para uma pluralidade de marcadores do sangue, em que as informações para a pluralidade de marcadores do sangue incluem um valor de antígeno específico da próstata livre
(fPSA), um valor de PSA total (tPSA), um valor de PSA intacto (iPSA) e um valor de calicreína humana 2 (kK2). O método compreende adi- cionalmente a avaliação de um modelo de regressão logística com ba- se, pelo menos em parte, nas informações recebidas, para a determi- nação de uma probabilidade de um evento associado com o câncer de próstata em uma pessoa. A avaliação do modelo de regressão logísti- ca compreende a determinação dos termos de ranhura linear para o tPSA, a determinação dos termos de ranhura linear para o fPSA, a de- terminação de um primeiro valor para o tPSA com base, pelo menos em parte, no valor de tPSA recebido e nos termos de ranhura linear determinados para o tPSA, a determinação de um segundo valor para o fPSA com base, pelo menos em parte, no valor de fPSA recebido e nos termos de ranhura linear determinados para fPSA e a determina- ção da probabilidade do evento associado com o câncer de próstata com base, pelo menos em parte, no primeiro valor e no segundo valor. O método compreende adicionalmente a emissão de uma indicação da probabilidade do evento associado com o câncer de próstata.
[0019] Em um conjunto de modalidades, é provido um sistema pa- ra a determinação de um risco de câncer de grau elevado. O sistema inclui uma interface de entrada configurada para receber as informa- ções de uma pluralidade de marcadores do sangue, em que as infor- mações para a pluralidade de marcadores do sangue incluem um valor de antígeno específico da próstata livre (fPSA), um valor de PSA total (tPSA), um valor de PSA intacto (iPSA) e um valor hK2. O sistema também inclui pelo menos um processador programado para inserir os valores recebidos em um modelo de regressão logística, em que pelo menos o valor de tPSA e os valores de fPSA são incorporados ao mo- delo de regressão logística utilizando os termos lineares e não lineares e para avaliar o modelo de regressão logística para determinar o risco de câncer de grau elevado.
[0020] Em um conjunto de modalidades, é provido um sistema pa- ra a determinação de uma probabilidade de um evento associado com o câncer de próstata em uma pessoa.
O sistema inclui um analisador de amostra microfluídica, que compreende um invólucro e uma abertu- ra no invólucro configurada para receber um cassete que tem pelo menos um canal microfluídico, em que o invólucro inclui um compo- nente configurado para fazer interface com um componente de aco- plamento no cassete para detectar o cassete dentro do invólucro.
O sistema também inclui um sistema de controle de pressão posicionado dentro do invólucro, cujo sistema de controle de pressão é configurado para pressurizar pelo menos um canal microfluídico no cassete para mover a amostra através de pelo menos um canal microfluídico.
O sis- tema inclui adicionalmente um sistema óptico posicionado dentro do invólucro, cujo sistema óptico inclui pelo menos uma fonte de luz e pe- lo menos um detector espaçado da fonte de luz, em que a fonte de luz é configurada para passar luz através do cassete quando o cassete é introduzido no analisador de amostra e em que o detector é posiciona- do de maneira oposta à fonte de luz para detectar a quantidade de luz que passa através do cassete.
O sistema inclui uma interface com o usuário associada com o invólucro para receber pelo menos a idade de uma pessoa e um processador em comunicação eletrônica com o analisador de amostra microfluídica, em que o processador é progra- mado para avaliar um modelo de regressão logística com base, pelo menos em parte, nas informações recebidas de pelo menos um detec- tor, para a determinação de uma probabilidade de um evento associa- do com o câncer de próstata em uma pessoa, em que a avaliação do modelo de regressão logística compreende a graduação de cada uma de uma pluralidade de variáveis por um valor de coeficiente diferente para produzir variáveis graduadas, e a soma dos valores para as vari- áveis graduadas utilizadas para produzir a probabilidade do evento associado com o câncer de próstata em uma pessoa, em que a plura- lidade de variáveis inclui a idade e pelo menos duas variáveis incluídas nas informações recebidas do detector e é selecionada do grupo que consiste em fPSA, iPSA e tPSA.
[0021] Em um conjunto de modalidades, é provido um método pa- ra a determinação de uma probabilidade de um evento associado com o câncer de próstata em uma pessoa. O método envolve a provisão de um analisador de amostra microfluídica, que compreende um invólu- cro, uma abertura no invólucro configurada para receber um cassete que tem pelo menos um canal microfluídico, em que o invólucro inclui um componente configurado para fazer interface com um componente de acoplamento no cassete para detectar o cassete dentro do invólu- cro e um sistema de controle de pressão posicionado dentro do invólu- cro, cujo sistema de controle de pressão é configurado para pressuri- zar pelo menos um canal microfluídico no cassete para mover a amos- tra através de pelo menos um canal microfluídico. O analisador de amostra microfluídica também inclui um sistema óptico posicionado dentro do invólucro, cujo sistema óptico inclui pelo menos uma fonte de luz e pelo menos um detector espaçado da fonte de luz, em que a fonte de luz é configurada para passar luz através do cassete quando o cassete é introduzido no analisador de amostra e em que o detector é posicionado de maneira oposta à fonte de luz para detectar a quanti- dade de luz que passa através do cassete, e uma interface com o u- suário associada com o invólucro para receber pelo menos a idade de uma pessoa. O método envolve a determinação das informações para uma pluralidade de marcadores do sangue utilizando o analisador de amostra microfluídica, em que as informações para a pluralidade de marcadores do sangue incluem um valor de antígeno específico da próstata livre (fPSA), um valor de PSA total (tPSA) e um valor de PSA intacto (iPSA) e a avaliação, utilizando pelo menos um processador,
de um modelo de regressão logística com base, pelo menos em parte, nas informações para a determinação de uma probabilidade de um evento associado com o câncer de próstata em uma pessoa, em que a avaliação do modelo de regressão logística compreende a graduação de cada uma de uma pluralidade de variáveis por um valor de coefici- ente diferente para produzir variáveis graduadas, e a soma dos valores para as variáveis graduadas utilizadas para produzir a probabilidade do evento associado com o câncer de próstata em uma pessoa, em que a pluralidade de variáveis inclui a idade e pelo menos duas variá- veis incluídas nas informações recebidas do detector e é selecionada do grupo que consiste em fPSA, iPSA e tPSA.
[0022] Em um conjunto de modalidades, é provido um sistema. O sistema inclui um dispositivo que compreende uma primeira região de análise que compreende um primeiro parceiro de ligação e uma se- gunda região de análise que compreende um segundo parceiro de li- gação, em que o primeiro parceiro de ligação é adaptado para se ligar a pelo menos um dentre o antígeno específico da próstata livre (fPSA), o antígeno específico da próstata intacto (iPSA) e o PSA total (tPSA) e em que o segundo parceiro de ligação é adaptado para se ligar a pelo menos outro dentre o fPSA, o iPSA e o tPSA. O sistema inclui um detector associado com a primeira e segunda regiões de análise e um processador programado para avaliar um modelo de regressão logísti- ca com base, pelo menos em parte, nas informações recebidas do de- tector, para a determinação de uma probabilidade de um evento asso- ciado com o câncer de próstata em uma pessoa, em que a avaliação do modelo de regressão logística compreende a graduação de cada uma de uma pluralidade de variáveis por um valor de coeficiente dife- rente para produzir variáveis graduadas, e a soma dos valores para as variáveis graduadas utilizadas para produzir a probabilidade do evento associado com o câncer de próstata em uma pessoa, em que a plura-
lidade de variáveis inclui a idade e pelo menos duas variáveis incluídas nas informações recebidas do detector e é selecionada do grupo que consiste em fPSA, iPSA e tPSA.
[0023] Em um conjunto de modalidades, é provido um método. O método compreende a introdução de uma amostra em um dispositivo que compreende uma primeira região de análise que compreende um primeiro parceiro de ligação e uma segunda região de análise que compreende um segundo parceiro de ligação, em que o primeiro par- ceiro de ligação é adaptado para se ligar a pelo menos um dentre o antígeno específico da próstata livre (fPSA), o antígeno específico da próstata intacto (iPSA) e o PSA total (tPSA) e em que o segundo par- ceiro de ligação é adaptado para se ligar a pelo menos outro dentre o fPSA, o iPSA e o tPSA. O método envolve a permissão que qualquer um entre o fPSA, o iPSA e/ou o tPSA da amostra se ligue a o primeiro e/ou segundo parceiros de ligação na primeira e segunda regiões de análise, a determinação de uma característica do fPSA, iPSA e/ou tP- SA utilizando um ou mais detectores associados com a primeira e se- gunda regiões de análise, a inserção das características do fPSA, iP- SA e/ou tPSA em um processador programado para avaliar um mode- lo de regressão logística com base, pelo menos em parte, nas infor- mações recebidas de pelo menos um detector, para a determinação de uma probabilidade de um evento associado com o câncer de prós- tata em uma pessoa, em que a avaliação do modelo de regressão lo- gística compreende a graduação de cada uma de uma pluralidade de variáveis por um valor de coeficiente diferente para produzir variáveis graduadas, e a soma dos valores para as variáveis graduadas utiliza- das para produzir a probabilidade do evento associado com o câncer de próstata em uma pessoa, em que a pluralidade de variáveis inclui a idade e pelo menos duas variáveis incluídas nas informações recebi- das do detector e é selecionada do grupo que consiste em fPSA, iPSA e tPSA, e a determinação da probabilidade do evento associado com o câncer de próstata.
[0024] Em um conjunto de modalidades, é provido um dispositivo. O dispositivo inclui um sistema microfluídico que compreende um pri- meiro canal microfluídico que inclui pelo menos uma entrada e uma saída, um primeiro reagente armazenado no primeiro canal microfluí- dico, uma vedação que cobre a entrada do primeiro canal microfluídico e uma vedação que cobre a saída do primeiro canal microfluídico para armazenar o primeiro reagente no primeiro canal microfluídico e um segundo canal microfluídico que inclui pelo menos uma entrada e uma saída. O dispositivo também inclui uma primeira região de análise, uma segunda região de análise e uma terceira região de análise, em que cada uma das regiões de análise inclui um de um anticorpo de captura específico anti-iPSA, um anticorpo de captura específico anti- fPSA e um anticorpo de captura específico anti-tPSA, em que uma ou mais dentre a primeira, segunda e terceira regiões de análise estão em comunicação fluida com o segundo canal microfluídico. O dispositivo também inclui um conector fluídico que pode ser conectado ao sistema microfluídico, em que o conector fluídico compreende uma passagem de fluido que inclui uma entrada para a passagem de fluido e uma saí- da para a passagem de fluido, em que quando da conexão, a entrada para a passagem de fluido se conecta à saída do primeiro canal micro- fluídico para permitir uma comunicação fluida entre a passagem de fluido e o primeiro canal microfluídico e a saída para a passagem de fluido se conecta à entrada do segundo canal microfluídico para permi- tir uma comunicação fluida entre a passagem de fluido e o segundo canal microfluídico, em que em que o primeiro e segundo canais mi- crofluídicos não estão em comunicação fluida com outra uma conexão ausente através do conector fluídico. O dispositivo também inclui uma fonte de um coloide de metal conjugado a um anticorpo que se liga ao anti-PSA.
[0025] Em um conjunto de modalidades, é provido um método pa- ra a obtenção de uma probabilidade de um evento utilizando um mo- delo de regressão logística para predizer o risco de um homem desen- volver o câncer de próstata. O método compreende as etapas de: a) provisão de um modelo de regressão logística obtido empregando a regressão logística multivariável dos dados de uma sé- rie de pessoas do sexo masculino, cujos ditos dados compreendem, para cada pessoa do sexo masculino da dita série de pessoas do sexo masculino, os dados sobre o status do câncer de próstata e os dados, e os dados precedentes do dito status do câncer de próstata, que compreendem a idade; e as determinações dos marcadores do san- gue, do antígeno específico da próstata total (tPSA), do PSA livre (fP- SA), do PSA intacto (iPSA) e, opcionalmente, da calicreína humana 2 (hK2) das amostras de sangue das ditas pessoas do sexo masculino, em que o dito modelo de regressão logística é gerado empregando a fórmula:  π  j log   = ∑ β i xi + c 1− π  i =1 em que π é a probabilidade do dito evento, βi é o coeficiente para a variável xi para as variáveis de j que compreendem a idade, o tPSA, o fPSA, o iPSA e, opcionalmente, a hK2, respectivamente, para obter o dito modelo de regressão logística; b) provisão da idade de uma pessoa do sexo masculino em anos; c) determinação dos ditos marcadores do sangue i) tPSA, ii) fPSA, iii) iPSA, iv) opcionalmente hK2, respectivamente, de uma amostra de sangue da dita pessoa do sexo masculino; d) emprego do dito modelo de regressão logística utilizando a dita idade provida da etapa b) e os ditos marcadores do sangue de- terminados da etapa c) para obter a dita probabilidade do dito evento da dita pessoa do sexo masculino ao  π  i) definir empregando a fórmula: y = log   e  1− π   ey  ii) obter a dita probabilidade como π =  y   1+ e 
[0026] A característica para o método é que, no dito modelo de regressão logística, o dito risco para o câncer se baseia no tPSA sozi- nho se o tPSA for ≥ 15 ng/ml, de preferência ≥ 20 ng/ml e com a má- xima preferência ≥ 25 ng/ml.
[0027] Outro objetivo da presente invenção consiste na provisão de um método para predizer o volume da glândula da próstata utilizan- do um modelo de regressão linear.
[0028] As modalidades da presente invenção oferecem um método para predizer o volume da glândula da próstata utilizando um modelo de regressão linear em que o dito método compreende as etapas de: a) provisão de um modelo de regressão linear obtido em- pregando a regressão linear dos dados de uma série de pessoas do sexo masculino, em que os ditos dados compreendem, para cada pes- soa do sexo masculino da dita série de pessoas do sexo masculino: i) os dados sobre o volume da glândula da próstata e ii) os dados, os dados precedentes sobre o volume da glândula da próstata, que compreendem a idade; e as determinações dos marcadores do sangue: o antígeno específico da próstata total (tPSA), PSA livre (fPSA), PSA intacto (iPSA) e opcionalmente, a cali- creína humana 2 (hK2), das amostras de sangue das ditas pessoas do sexo masculino, em que o dito modelo de regressão linear é gerado empregando a fórmula: j V = ∑ β i xi + c i =1 em que V é o volume da glândula da próstata, βi é o coeficiente para a variável xi; para as variáveis de j que compreendem a idade, o tPSA, o fPSA, o iPSA e, opcionalmente, a hK2, respectivamente, para obter o dito modelo de regressão linear; b) provisão da idade de uma pessoa do sexo masculino em anos; c) determinação dos ditos marcadores do sangue, tPSA, fPSA, iPSA e opcionalmente, hK2, respectivamente, de uma amostra de sangue da dita pessoa do sexo masculino; d) emprego do dito modelo de regressão linear utilizando a dita idade provida da etapa b) 5 e os ditos marcadores do sangue de- terminados da etapa c) para obter o dito volume predito da próstata da dita pessoa do sexo masculino.
[0029] A característica para o método é que, no dito modelo de regressão linear, o dito risco para o câncer se baseia no tPSA sozinho se o tPSA for ≥ 15 ng/ml, de preferência ≥ 20 ng/ml e com a máxima preferência ≥ 25 ng/ml.
[0030] Outras vantagens e novas características da presente in- venção ficarão evidentes a partir da seguinte descrição detalhada de várias modalidades não limitadoras da invenção quando consideradas conjuntamente com as figuras em anexo. Nos casos em que o presen- te relatório descritivo e um documento incorporado a título de referên- cia incluem descrições conflitantes e/ou inconsistentes, o presente re- latório descritivo prevalecerá. Se dois ou mais documentos incorpora- dos a título de referência incluirem descrições conflitantes e/ou incon- sistentes um em relação ao outro, então o documento que tem a data eficaz mais recente prevalecerá.
BREVE DESCRIÇÃO DOS DESENHOS
[0031] Modalidades não limitadoras da presente invenção serão descritas como exemplo com referência às figuras em anexo, que são esquemáticas e não se prestam a ser desenhadas em escala. Nas fi- guras, cada componente idêntico ou quase idêntico ilustrado é repre- sentado tipicamente por um único numeral. Para finalidades de clare- za, nem todo componente é identificado em cada figura, bem como nem todo componente de cada modalidade da invenção é mostrado onde a ilustração não é necessária, para permitir que o elemento ver- sado na técnica compreenda a invenção. Nas figuras:
[0032] a FIG. 1 ilustra um fluxograma de um processo para a de- terminação de uma probabilidade de uma biópsia de câncer positiva de acordo com algumas modalidades da invenção;
[0033] a FIG. 2 ilustra um fluxograma de um processo para sele- cionar condicionalmente um modelo de regressão logística de acordo com algumas modalidades da invenção;
[0034] a FIG. 3 mostra uma ilustração esquemática de um sistema computadorizado em que algumas modalidades da invenção podem ser implementadas;
[0035] a FIG. 4 ilustra um ambiente de rede exemplificador dentro do qual algumas modalidades da invenção podem ser utilizadas;
[0036] a FIG. 5 é um diagrama de blocos que mostra um sistema microfluídico e uma variedade de componentes que podem fazer parte de um analisador de amostra que pode ser utilizado para a determina- ção de um ou mais marcadores do sangue de acordo com algumas modalidades da invenção;
[0037] a FIG. 6 é uma vista em perspectiva de um analisador de amostra e do cassete que podem ser utilizados para a determinação de um ou mais marcadores do sangue de acordo com algumas moda-
lidades da invenção;
[0038] a FIG. 7 é uma vista em perspectiva de um cassete que in- clui um conector fluídico que pode ser utilizado para a determinação de um ou mais marcadores do sangue de acordo com algumas moda- lidades da invenção;
[0039] a FIG. 8 é uma vista em conjunto explodida de um conector fluídico que pode ser utilizado para a determinação de um ou mais marcadores do sangue de acordo com algumas modalidades da in- venção;
[0040] a FIG. 9 é uma vista em conjunto explodida de um cassete que pode ser utilizado para a determinação de um ou mais marcado- res do sangue de acordo com algumas modalidades da invenção;
[0041] a FIG. 10 é uma vista esquemática de um cassete que in- clui um conector fluídico que pode ser utilizado para a determinação de um ou mais marcadores do sangue de acordo com algumas moda- lidades da invenção;
[0042] a FIG. 11A é uma vista esquemática de um cassete que pode ser utilizado para a determinação de um ou mais marcadores do sangue de acordo com algumas modalidades da invenção;
[0043] as FIGS. 11B-11F são vistas esquemáticas dos cassetes formados de múltiplos componentes que podem ser utilizados para a determinação de um ou mais marcadores do sangue de acordo com um conjunto de modalidades;
[0044] a FIG. 12 é uma vista esquemática de uma porção de um analisador de amostra que pode ser utilizado para a determinação de um ou mais marcadores do sangue de acordo com algumas modalida- des da invenção;
[0045] a FIG. 13 é um diagrama de blocos que mostra um sistema de controle de um analisador de amostra associado com uma varieda- de de componentes diferentes que podem ser utilizados para a deter-
minação de um ou mais marcadores do sangue de acordo com algu- mas modalidades da invenção;
[0046] a FIG. 14 é um diagrama esquemático que mostra um sis- tema microfluídico de um cassete que pode ser utilizado para a deter- minação de um ou mais marcadores do sangue de acordo com algu- mas modalidades da invenção; e
[0047] a FIG. 15 é um diagrama que mostra a medição da densi- dade óptica como uma função do tempo que mostra a determinação de um ou mais marcadores do sangue de acordo com algumas moda- lidades da invenção.
DESCRIÇÃO DETALHADA DA INVENÇÃO
[0048] Tal como discutido acima, muitas técnicas convencionais para predizer uma probabilidade de câncer de próstata e/ou do volume da glândula da próstata são com base, pelo menos em parte, em um exame clínico (por exemplo, um exame retal digital ou DRE) do paci- ente. Algumas modalidades aqui descritas referem-se aos métodos e aparelhos para a determinação de uma probabilidade predita de cân- cer de próstata e/ou do volume da glândula da próstata com base, pelo menos em parte, em um painel de marcadores do sangue, sem a ne- cessidade de um exame clínico minucioso. Tal como discutido em mais detalhes a seguir, a probabilidade predita provida do câncer de próstata na biópsia e/ou no volume da glândula da próstata é uma mé- trica de confiança que pode ser útil para ajudar nas decisões relacio- nadas à biópsia da próstata.
[0049] Algumas modalidades são dirigidas a um sistema computa- dorizado que inclui pelo menos um processador programado para ava- liar um risco de câncer de próstata, em que o risco de câncer de prós- tata é determinado com base, pelo menos em parte, nos valores para uma pluralidade de marcadores do sangue. Em algumas modalidades, o sistema computadorizado pode ser implementado como um sistema integrado (por exemplo, em um analisador e/ou um chip/cassete) com um ou mais detectores que determinam um valor para um ou mais dos marcadores do sangue aqui descritos. Em outras modalidades, o sis- tema computadorizado pode incluir um computador situado remota- mente de um ou mais detectores e os valores para um ou mais dos marcadores do sangue aqui descritos podem ser manualmente incor- porados utilizando uma interface com o usuário e/ou os valores podem ser recebidos através de uma interface de rede acoplada de maneira comunicável a uma rede (por exemplo, a internet). Pelo menos um processador no sistema computadorizado pode ser programado para aplicar um ou mais modelos às entradas recebidas para a avaliação de um risco de câncer de próstata através de biópsia, tal como discutido em mais detalhes a seguir.
[0050] Os modelos utilizados de acordo com algumas modalidades da invenção ajudam a integrar uma pluralidade de informações para os fatores de entrada. Por exemplo, os fatores de entrada podem ser PSA, razão entre o PSA livre e total e/ou status do exame retal digital (DRE). Continuando com este exemplo, um primeiro paciente pode ter um PSA de 3 ng/ml, uma razão entre o PSA livre e total de 15% e um DRE negativo, um segundo paciente pode ter um PSA de 9,5 ng/ml, uma razão entre o PSA livre e total de 50% e um DRE negativo e um terceiro paciente pode ter um PSA de 1,5 ng/ml, uma razão entre livre e total de 29% e um DRE positivo. Para o primeiro paciente, um urologista pode querer saber se uma razão entre o PSA livre e total baixa (mas não extremamente baixa) é suficiente para autorizar a bi- ópsia, dado que o PSA é moderado e o DRE é negativo. Para o se- gundo paciente, o valor elevado de PSA autorizaria normalmente uma biópsia imediata, mas a razão entre o PSA livre e total muito elevada pode ser uma forte indicação que a ascensão de PSA é benigna. Para o terceiro paciente, um DRE positivo é normalmente um sinal muito preocupante, mas pode ser evidência insuficiente de que uma biópsia seja necessária, dado o baixo PSA e a razão entre o PSA livre e total normal. Como deve ser apreciado a partir do que foi visto acima, quando um médico analisa estes fatores isoladamente, pode ser difícil determinar quando uma biópsia é necessária. Além disso, à medida que o número de fatores de entrada aumenta, a decisão de executar uma biópsia com base nas informações numéricas para os vários fato- res de entrada torna-se ainda mais complexa.
[0051] [35]Os pacientes e clínicos variam com respeito à propen- são com que optam pela biópsia, dependendo das diferenças a respei- to de como avaliam a detecção inicial do câncer comparada aos ris- cos, danos e inconveniência da biópsia. É frequentemente pouco prá- tico inserir tais preferências utilizando regras de decisão estritas (por exemplo, executar a biópsia se o PSA for > 4 ng/ml OU se a razão en- tre livre e total for < 15%) ou utilizando os escores de risco (por exem- plo, o escore do índice de saúde da próstata (PHI) de 29). Por exem- plo, se um homem for contrário a procedimentos médicos, pode ser difícil determinar o quão suficientemente elevado um escore de PSA e/ou de PHI deveria ser para autorizar a biópsia.
[0052] Em vez de utilizar as regras de decisão estritas, de acordo com algumas modalidades, pelo menos um processador é programado para utilizar um ou mais modelos estatísticos para processar uma plu- ralidade de entradas para guiar as decisões sobre a biópsia da prósta- ta. As entradas aos modelos estatísticos podem incluir, mas não se limitam aos valores do marcador do sangue, às características do pa- ciente (por exemplo, a idade) e outras informações apropriadas, para a determinação de uma probabilidade que uma biópsia positiva para o câncer de próstata seja encontrada. Tal probabilidade representa uma faixa interpretável que pode ser utilizada para guiar as decisões sobre a biópsia face às preferências do paciente e do clínico.
[0053] A FIG. 1 ilustra um fluxograma de um processo de acordo com algumas modalidades da invenção. Na ação 110, um ou mais va- lores para marcadores do sangue são recebidos por pelo menos um processador para processar utilizando uma ou mais das técnicas aqui descritas. Como descrito em mais detalhes a seguir, o(s) valor(es) do marcador do sangue pode(m) ser recebido(s) em qualquer maneira apropriada incluindo, mas sem limitação, através de uma interface de entrada local tal como um teclado, tela de toque, microfone ou outro dispositivo de entrada, uma interface conectada em rede que recebe o(s) valor(es) de um dispositivo localizado distante do processador(es) ou diretamente de um ou mais detectores que medem o(s) valor(es) do marcador do sangue [por exemplo, em uma implementação onde o(s) processador(es) é(são) integrado(s) com um dispositivo de medição que inclui um ou mais detectores].
[0054] Em resposta à recepção do(s) valor(es) do marcador do sangue, o processo prossegue à ação 120, onde pelo menos um mo- delo de regressão logística é avaliado para a determinação de uma probabilidade de uma biópsia positiva para o câncer de próstata, em que a probabilidade é com base, pelo menos em parte, no(s) valor(es) recebido(s) do marcador do sangue. Tal como descrito em mais deta- lhes a seguir, as informações à exceção dos valores recebidos do marcador do sangue (por exemplo, idade, grau do câncer etc.) podem ser opcionalmente utilizadas como fatores para a determinação de um modelo particular para utilizar e/ou serem utilizados como fatores de entrada para a avaliação de um modelo selecionado.
[0055] Depois de ter determinado uma probabilidade de uma bióp- sia positiva para o câncer, o processo prossegue à ação 130, onde a probabilidade é enviada a um usuário (por exemplo, um médico, um paciente) para guiar um processo de decisão se uma biópsia é neces- sária. A probabilidade pode ser enviada de qualquer maneira apropria-
da. Por exemplo, em algumas modalidades, a probabilidade pode ser enviada ao exibir um valor numérico que representa a probabilidade em uma tela de exibição de um dispositivo. Em outras modalidades, a probabilidade pode ser enviada utilizando uma ou mais luzes ou outros indicadores visuais em um dispositivo. Contudo, em outras modalida- des, a probabilidade pode ser provida utilizando uma saída de áudio, saída tátil ou qualquer combinação de uma ou mais saídas de áudio, táteis e visuais. Em algumas modalidades, a emissão da probabilidade compreende a emissão das informações a um dispositivo conectado em rede para informar um usuário sobre a probabilidade determinada. Por exemplo, a probabilidade pode ser determinada por um ou mais processadores situados em um local remoto, e uma indicação da pro- babilidade pode ser enviada a um dispositivo eletrônico de um usuário (por exemplo, um médico) utilizando uma ou mais redes, em resposta à determinação da probabilidade no local remoto. O dispositivo eletrô- nico que provê a saída a um usuário de acordo com as técnicas aqui descritas pode ser qualquer dispositivo apropriado incluindo, mas sem limitação, um computador do tipo laptop, desktop ou tablet, um smart- phone, um pager, um assistente digital pessoal e uma tela eletrônica.
[0056] Como discutido acima, algumas modalidades são dirigidas a um método para a obtenção de uma probabilidade de um evento uti- lizando um modelo de regressão logística para predizer o risco de câncer de próstata e/ou o volume da glândula da próstata para uma pessoa do sexo masculino. Em algumas modalidades, o método en- volve a inclusão das informações de um ou mais marcadores de cali- creína, a saber, antígeno específico da próstata total (tPSA), PSA livre (fPSA), PSA intacto (iPSA) e calicreína humana 2 (hK2). Qualquer modelo de regressão logística apropriado pode ser utilizado, e as téc- nicas aqui descritas não são limitadas sob este aspecto. Em algumas modalidades, a probabilidade do evento é determinada de acordo com a equação (I), reproduzida abaixo: Probabilidade = __eL_ (I) 1 + eL onde o logit (L) é determinado utilizando qualquer uma de uma plurali- dade de modelos de regressão logística. Exemplos não limitadores de nove tipos diferentes de modelos de regressão logística que podem ser utilizados de acordo com as técnicas aqui descritas incluem:
1. Modelo simples (tPSA somente) L = β0 + β1 (idade) + β2 (tPSA)
2. Quatro modelos de ensaio utilizando a razão entre livre/total
[0057] Neste modelo, a razão entre o PSA livre e o PSA total é substituída pelo termo PSA livre.  fPSA  L = β 0 + β1 ( Age ) + β 2 ( tPSA ) + β 3   + β 4 ( iPSA ) + β 5 ( hK 2 )  tPSA 
3. Modelo de quatro ensaios utilizando log(tPSA) e a relação entre livre/total
[0058] Neste modelo, o log de tPSA é substituído pelo termo tPSA para esclarecer a contribuição aumentada deste fator preditivo.  fPSA  L = β 0 + β1 ( Age ) + β 2 ( log [ tPSA]) + β 3   + β 4 ( iPSA ) + β 5 ( hK 2 )  tPSA 
4. Modelo polinomial
[0059] Neste modelo, termos não lineares adicionais para tPSA e fPSA são incluídos. Na equação exemplificadora provida abaixo, o quadrado de tPSA é utilizado para enfatizar a relação direta entre este termo e o risco de câncer de próstata e a raiz quadrada do termo PSA livre/total é utilizada para refletir a associação inversa deste termo com risco. Deve ser apreciado, no entanto, que os termos polinomiais de uma ordem mais elevada (por exemplo, cúbicos) também possam ser incluídos em algumas modalidades.  fPSA  L = β 0 + β1 ( Age ) + β 2 ( tPSA ) + β 3 ( fPSA ) + β 4 ( iPSA ) + β 5 ( hK 2 ) + β 6 ( tPSA 2 ) + β 7   tPSA   
5. Ranhuras lineares para todos os quatro ensaios
[0060] Neste modelo, as ranhuras lineares são adicionadas, com um único nó no valor mediano. As ranhuras podem ser determinadas utilizando as seguintes equações: sp1(x) = x se x < nó sp1(x) = nó se x ≥ nó sp2(x) = 0 se x < nó sp2(x) = x se x ≥ nó com o modelo sendo representado como: L = β0 + β1 (idade) + β2 (tPSA) + β3 (fPSA) + β4 (iPSA) + β5 (hK2) + β6 (sp1[tPSA]) + β7 (sp2[tPSA]) + β8 (sp1[fPSA]) + β9 (sp2[fPSA]) + β10 (sp1[iPSA]) + β11 (sp2[iPSA]) + β12 (sp1[hK2]) + β13 (sp2[hK2])
6. Ranhuras lineares para tPSA e fPSA
[0061] Neste modelo, as ranhuras lineares são incluídas somente para tPSA e fPSA, para reduzir o número de variáveis e simplificar o modelo. L = β0 + β1 (idade) + β2 (tPSA) + β3 (fPSA) + β4 (iPSA) + β5 (hK2) + β6 (sp1[tPSA]) + β7 (sp2[tPSA]) + β8 (sp1[fPSA]) + β9 (sp2[fPSA])
7. Ranhuras cúbicas para todos os quatro ensaios
[0062] Neste modelo, as ranhuras cúbicas são incluídas para cada termo. No exemplo provido abaixo, uma ranhura cúbica com quatro nós é descrita. Deve ser apreciado, no entanto, que uma ranhura cúbi- ca que utiliza qualquer número apropriado de nós incluindo, mas sem limitação, cinco nós, seis nós, sete nós e oito nós, possa ser alternati- vamente utilizada. As ranhuras podem ser determinadas utilizando as seguintes equações: knot 4 − knot1 sp [ x ]1 = max ( [ x ] − knot1, 0 ) − max ( [ x ] − knot 3, 0 ) 3 3 knot 4 − knot 3 knot 3 − knot1 + max ( [ x ] − knot 4, 0 ) 3 knot 4 − knot 3 knot 4 − knot 2 sp [ x ] 2 = max ( [ x ] − knot 2, 0 ) − max ([ x ] − knot 3, 0 ) 3 3 knot 4 − knot 3 knot 3 − knot 2 + max ( [ x ] − knot 2, 0 ) 3 knot 4 − knot 3
[0063] em que o nó1 e o nó4 são nós externos para a ranhura cú- bica e o nó2 e o nó3 são nós internos para a ranhura cúbica. Em al- gumas modalidades, os nós internos são especificados dentro da faixa entre cerca de 2 a cerca de 5 e entre cerca de 5 a cerca de 8 para o tPSA, entre cerca de 0,25 a cerca de 1 e entre cerca de 1,0 a cerca de 2,0 para o fPSA, entre cerca de 0,2 a cerca de 0,5 e entre cerca de 0,4 a cerca de 0,8 para o iPSA e entre cerca de 0,02 a cerca de 0,04 e en- tre cerca de 0,04 a cerca de 0,08 para a hK2. Por exemplo, em uma implementação, os valores de 3,89 e de 5,54 são utilizados para os nós internos para o tPSA, os valores de 0,81 e 1,19 são utilizados para os nós internos para o fPSA, os valores de 0,3 e 0,51 são utilizados para os nós internos de iPSA e os valores de 0,036 e de 0,056 são uti- lizados para os nós internos de kK2.
[0064] Em determinadas modalidades, um ou mais nós internos para tPSA podem estar independentemente na faixa entre cerca de 3 e cerca de 5, entre cerca de 3 e cerca de 6, entre cerca de 2,5 e cerca de 6, entre cerca de 2,5 e cerca de 6,5, entre cerca de 5 e cerca de 8, entre cerca de 5,5 e cerca de 8, entre cerca de 5 e cerca de 9, entre cerca de 5 e cerca de 10, entre cerca de 1 e cerca de 5, entre cerca de 1 e cerca de 4 e entre cerca de 1 e cerca de 3. Outras faixas também são possíveis.
[0065] Em determinadas modalidades, um ou mais nós internos para fPSA podem estar independentemente na faixa entre cerca de 0,1 e cerca de 1,0, entre cerca de 0,1 e cerca de 1,2, entre cerca de 0,3 e cerca de 0,8, entre cerca de 0,4 e cerca de 0,9, entre cerca de 0,5 e cerca de 1,2, entre cerca de 0,7 e cerca de 1,4, entre cerca de
0,7 e cerca de 0,9, entre cerca de 1,1 e cerca de 1,6, entre cerca de 1,1 e cerca de 1,2 e entre cerca de 1,1 e cerca de 2, Outras faixas também são possíveis.
[0066] Em determinadas modalidades, um ou mais nós internos para iPSA podem estar independentemente na faixa entre cerca de 0,05 e cerca de 0,5, entre cerca de 0,1 e cerca de 0,5, entre cerca de 0,2 e cerca de 0,5, entre cerca de 0,1 e cerca de 0,8, entre cerca de 0,2 e cerca de 0,8, entre cerca de 0,4 e cerca de 0,8, entre cerca de 0,4 e cerca de 1,0, entre cerca de 0,3 e cerca de 0,6, entre cerca de 0,5 e cerca de 1,0 e entre cerca de 0,6 e cerca de 0,8. Outras faixas também são possíveis.
[0067] Em determinadas modalidades, um ou mais nós internos para em hK2 podem estar independentemente na faixa entre cerca de 0,01 e cerca de 0,03, entre cerca de 0,01 e cerca de 0,04, entre cerca de 0,01 e cerca de 0,05, entre cerca de 0,02 e cerca de 0,05, entre cerca de 0,02 e cerca de 0,06, entre cerca de 0,03 e cerca de 0,05, entre cerca de 0,4 e cerca de 0,07, entre cerca de 0,04 e cerca de 1,0, entre cerca de 0,5 e cerca de 1,0 e entre cerca de 0,6 a cerca de 1,0. Outras faixas também são possíveis.
[0068] Tal como discutido acima, as ranhuras cúbicas que incorpo- ram qualquer número apropriado de nós internos (por exemplo, três, quatro, cinco, seis nós internos) podem ser utilizadas, e o exemplo de uma ranhura cúbica incluindo dois nós internos é provido meramente para ilustração e não como limitação. Nas modalidades que incluem mais de dois nós internos, os nós podem ser colocados dentro de uma ou mais das faixas discutidas acima ou em alguma outra faixa apropri- ada. Por exemplo, em algumas modalidades, os nós podem ser espe- cificados de maneira tal que o comprimento dos segmentos da ranhura entre cada um dos pares de nós vizinhos seja essencialmente igual.
[0069] O modelo pode ser representado como:
L = β0 + β1 (idade) + β2 (tPSA) + β3 (fPSA) + β4 (iPSA) + β5 (hK2) + β6 (sp1[tPSA]) + β7 (sp2[tPSA]) + β8 (sp1[fPSA]) + β9 (sp2[fPSA]) + β10 (sp1[iPSA]) + β11 (sp2[iPSA]) + β12 (sp1[hK2]) + β13 (sp2[hK2])
8. Ranhuras cúbicas para tPSA e fPSA
[0070] Neste modelo, as ranhuras cúbicas são incluídas somente para tPSA e fPSA, para reduzir o número de variáveis e simplificar o modelo.
[0071] Em determinadas modalidades, os nós internos para tPSA e fPSA são especificados utilizando uma ou mais das faixas descritas acima com respeito ao modelo de ranhura cúbica para todos os quatro ensaios. Por exemplo, os nós internos podem ser especificados dentro da faixa entre cerca de 2 a cerca de 5 e entre cerca de 5 a cerca de 8 para tPSA e entre cerca de 0,5 a cerca de 1 e entre cerca de 1,0 a cerca de 1,5 para fPSA. Por exemplo, em uma implementação, os va- lores de 3,89 e de 5,54 são utilizados para os nós internos para tPSA e os valores de 0,81 e 1,19 são utilizados para os nós internos para fP- SA. Deve ser apreciado, no entanto, que outros valores e/ou faixas possam ser alternativamente utilizados. Além disso, Deve ser aprecia- do que qualquer número de nós (por exemplo, à exceção de quatro nós) possa ser alternativamente utilizado em algumas modalidades, como discutido acima com respeito ao modelo de ranhura cúbica para todos os quatro ensaios.
[0072] O modelo pode ser representado como: L = β0 + β1 (idade) + β2 (tPSA) + β3 (fPSA) + β4 (iPSA) + β5 (hK2) + β6 (sp1[tPSA]) + β7 (sp2[tPSA]) + β8 (sp1[fPSA]) + β9 (sp2[fPSA])
9. Ranhuras cúbicas com estratificação etária para tPSA e fPSA
[0073] Neste modelo, as ranhuras cúbicas são aplicadas a uma série de dados em duas porções para gerar coeficientes diferentes (β) para o uso com os pacientes que têm uma idade menor ou maior do que ou igual a uma idade particular (por exemplo, 65 anos). Conse-
quentemente, neste modelo, a mesma representação (utilizando valo- res de coeficiente diferentes) é utilizada para ambos os grupos de pa- cientes. Os exemplos dos diferentes coeficientes que podem ser utili- zados com este modelo são providos abaixo na Tabela 1.
[0074] O modelo pode ser representado como:
[0075] Se a idade < 65: L = β0 + β1 (idade) + β2 (tPSA) + β3 (fPSA) + β4 (iPSA) + β5 (hK2) + β6 (sp1[tPSA]) + β7 (sp2[tPSA]) + β8 (sp1[fPSA]) + β9 (sp2[fPSA])
[0076] Se a idade ≥ 65: L = β0 + β1 (idade) + β2 (tPSA) + β3 (fPSA) + β4 (iPSA) + β5 (hK2) + β6 (sp1[tPSA]) + β7 (sp2[tPSA]) + β8 (sp1[fPSA]) + β9 (sp2[fPSA])
[0077] Cada um dos modelos de regressão logística descritos a- cima inclui uma pluralidade de fatores de entrada, incluindo a idade e os valores do marcador do sangue para um ou mais dentre o PSA total (tPSA), o PSA livre (fPSA), o PSA intacto (iPSA) e a calicreína humana 2 (hK2). Em alguns casos, os valores do marcador do sangue são concentrações dos marcadores do sangue em uma amostra do paci- ente. Em alguns dos modelos de regressão logística descritos acima, as ranhuras lineares ou cúbicas para os termos não lineares são de- terminadas. Deve ser apreciado que as ranhuras de ordem superior possam ser alternativamente utilizadas, uma vez que as técnicas aqui descritas não são limitadas sob este aspecto.
[0078] Para os modelos de regressão logística descritos acima, cada um dos termos é multiplicado por um valor do coeficiente corres- pondente (β). Os coeficientes podem ser determinados em qualquer maneira apropriada. Por exemplo, cada um dos modelos pode ser a- plicado a uma série de dados incluindo as informações do paciente, os resultados do ensaio do soro e os resultados da biópsia. Um melhor ajuste de cada um dos modelos para as informações na série de da- dos para predição do câncer pode ser determinado, e os coeficientes que correspondem ao melhor resultado de ajuste podem ser utilizados de acordo com as técnicas aqui descritas.
Uma tabela exemplificadora dos coeficientes determinados para cada um dos modelos descritos acima é mostrada abaixo na Tabela 1. Para estes modelos, a idade é inserida em anos e cada resultado do ensaio é medido em ng/ml.
Tabela 1 modelo β0 Β1 Β2 Β3 Β4 Β5 Β6 Β7 Β8 Β9 Β10 Β11 Β12 Β13 1 -2,434 0,015 0,165 2 -2,130 0,040 0,071 -8,721 -0,268 11,136 3 -2,243 0,041 0,310 -9,306 -0,060 11,035 4 1,483 0,042 0,013 7,789 -0,137 11,198 0,002 -15,612 -4,218 0,042 0,286 -1,395 0,000 0,000 0,284 0,000 -1,059 0,000 -1,686 0,836 27,608 6,628 6 -3,829 0,041 0,285 -1,260 0,228 11,200 0,278 0,000 -1,628 0,000 7 -4,545 0,043 0,702 -2,369 -4,205 43,633 0,014 -0,009 -0,475 0,280 -26,422 15,722 18,207 -11,788 8 -3,925 0,042 0,723 -3,670 0,247 10,822 0,016 -0,010 -1,964 1,288
36/136 9 Idade<65 -4,491 0,045 0,881 -3,965 0,605 13,862 0,025 -0,017 -1,931 1,239
Idade≥65 -6,117 0,085 0,359 -2,850 -0,233 7,525 -0,007 0,006 -1,207 0,781
Tabela 1: Coeficientes exemplificadores (β) para cada um dos nove modelos de regressão linear discutidos acima.
Os coeficientes foram determinados com base em um melhor ajuste de cada modelo a uma série de dados incluindo as informações de 1420 indivíduos.
[0079] Deve ser apreciado que os coeficientes particulares utiliza- dos em uma implementação das técnicas aqui descritas possam diferir daqueles descritos na Tabela 1, uma vez que os valores na Tabela 1 são providos meramente como ilustração. Além disso, em algumas modalidades, diferentes coeficientes podem ser utilizados para popu- lações de pacientes diferentes e/ou para determinar probabilidades de diferentes resultados. Por exemplo, diferentes coeficientes podem ser utilizados para pacientes com faixas etárias diferentes, como descrito acima para o modelo de ranhura cúbica com estratificação etária. Coe- ficientes diferentes também podem ser utilizados para determinar pro- babilidades de uma biópsia positiva para graus diferentes de câncer. Por exemplo, as modalidades utilizadas para a determinação de uma probabilidade de um câncer de grau elevado (por exemplo, escore de Gleason = 7), uma biópsia positiva pode utilizar diferentes coeficientes para um ou mais dos modelos do que as modalidades utilizadas para a determinação de uma probabilidade de uma biópsia de baixo grau po- sitiva para o câncer. Além disso, diferentes coeficientes podem ser uti- lizados com base, pelo menos em parte, no fato de que um ou mais dos valores do marcador do sangue foram determinados a partir do soro ou do plasma.
[0080] Em algumas modalidades, um primeiro modelo de regres- são logística pode ser utilizado quando um valor para um ou mais dos marcadores está acima de um determinado limite e um segundo mo- delo de regressão logística pode ser utilizado quando o valor está a- baixo do limite. A FIG. 2 ilustra um processo para selecionar um mode- lo de regressão logística com base em um limite de acordo com algu- mas modalidades da invenção. Na ação 210, um valor para o PSA to- tal do marcador do sangue (tPSA) é recebido. Embora o processo ilus- trativo da FIG. 2 utilize o tPSA como um valor do marcador do sangue para determinar qual modelo de regressão logística utilizar, deve ser apreciado que qualquer outro valor do marcador do sangue, combina- ção de valores de marcadores do sangue ou qualquer outra informa- ção apropriada possa ser alternativamente utilizada. Consequente- mente, em algumas modalidades, pelo menos um processador pode ser programado para executar e selecionar a partir de uma pluralidade de modelos com base, pelo menos em parte, em um ou mais valores de entrada.
[0081] Depois de ter recebido o valor para o tPSA, o processo prossegue à ação 212, em que um modelo de regressão logística é selecionado com base, pelo menos em parte, no valor de tPSA recebi- do. Por exemplo, em uma implementação, quando o valor de tPSA é ≥ ng/ml, de preferência ≥ 20 ng/ml e com a máxima preferência ≥ 25 ng/ml, o modelo de regressão logística pode se basear no tPSA sozi- nho (por exemplo, o "Modelo Simples (tPSA somente)" descrito acima pode ser utilizado). Para esta implementação, quando o valor de tPSA é menor do que um limite particular (por exemplo, menos de 15 ng/ml), um ou mais dos outros modelos de regressão logística podem ser se- lecionados.
[0082] Continuando com o processo da FIG. 2, depois que um modelo foi selecionado, o processo prossegue à ação 214, em que se determina se o modelo selecionado é um modelo completo (por exem- plo, inclui todos os quatro marcadores de calicreína) ou se é um mode- lo parcial que inclui menos do que todos os marcadores em um painel de calicreína. Se se determina que o modelo selecionado não é um modelo completo, o processo prossegue à ação 216, em que a proba- bilidade de câncer é determinada com base unicamente no valor de tPSA recebido, como descrito acima. Se se determina que o modelo selecionado é um modelo completo, o processo prossegue à ação 218, em que a probabilidade de câncer é determinada com base no modelo selecionado utilizando múltiplos marcadores do sangue. Não obstante o modelo particular que é selecionado, depois que a probabi- lidade de câncer é determinada, o processo prossegue à ação 220, em que a probabilidade de câncer é emitida, tal como discutido acima com relação à FIG. 1.
[0083] Em algumas modalidades da invenção, o dito evento para que a dita probabilidade seja obtida é evidência de câncer de próstata da próstata extraída de uma pessoa do sexo masculino assintomática ou de uma pessoa do sexo masculino com sintomas no trato urinário inferior.
[0084] Em algumas modalidades da invenção, o evento para que a dita probabilidade seja obtida é evidência de câncer de próstata de grau elevado, isto é, escore de Gleason 7 ou mais, na biópsia da prós- tata extraída de uma pessoa do sexo masculino assintomática ou de uma pessoa do sexo masculino com sintomas no trato urinário inferior. Tipicamente, a progressão do câncer de próstata ou o status do cân- cer de próstata é definido como (i) escore de Gleason 7 ou mais, (ii) grau de Gleason 4 + 3 ou mais ou (iii) escore de Gleason 8 ou mais.
[0085] Em muitas modalidades preferidas, os dados da série de pessoas do sexo masculino compreendem um ou mais dados de bióp- sia selecionados do grupo que consiste em razão para a biópsia, ano da biópsia, número de núcleos da biópsia, número de núcleos positi- vos, porcentagem de positivos em cada núcleo e qualquer combinação possível destes.
[0086] Tal como discutido acima, em muitas modalidades preferi- das, os marcadores do sangue são incluídos em um modelo de re- gressão logística empregando até dois termos não lineares para pelo menos um marcador do sangue. Em determinadas modalidades, os marcadores do sangue são incluídos em um modelo de regressão lo- gística empregando até três termos não lineares para pelo menos um marcador do sangue. Em determinadas modalidades, os marcadores do sangue são incluídos em um modelo de regressão logística empre- gando até quatro termos não lineares para pelo menos um marcador do sangue. Em determinadas modalidades, os marcadores do sangue são incluídos em um modelo de regressão logística incluindo até cinco termos não lineares para pelo menos um marcador do sangue.
[0087] Em algumas modalidades, o modelo de regressão logística pode ser recalibrado quando a taxa do evento antecipada em um re- presentante da população alvo da pessoa do sexo masculino para a qual a probabilidade do evento deve ser obtida difere da taxa do even- to da série de pessoas do sexo masculino para a qual os dados foram empregados para obter o modelo de regressão logística pela definição de acordo com a equação (II):  P / (1 − P )  k =    p / (1 − p )  (II), em que p é a taxa do evento nos ditos dados da dita série de pessoas do sexo masculino e P é a taxa do evento antecipada na dita popula- ção alvo, e a definição de acordo com a equação (III): π Odds = 1 − π (III), em que π é a probabilidade original do modelo e a definição de acordo com a equação (IV): Oddsrecalibrada = Oddsxk (IV) e a obtenção de uma probabilidade recalibrada, de acordo com a fórmu- la (V):  Oddsrecalibrated  π recalibrated =    1 + Oddsrecalibrated  (V), em que πrecalibrado é a probabilidade do dito evento.
[0088] Algumas modalidades são dirigidas aos métodos e apare- lho para predizer o volume da glândula da próstata utilizando um mo- delo de regressão linear, em que o dito método compreende uma ação de a) provisão de um modelo de regressão linear obtido empregando a regressão linear dos dados de uma série de pessoas do sexo masculi- no, cujos ditos dados compreendem, para cada pessoa do sexo mas- culino da dita série de pessoas do sexo masculino: (i) dados sobre o volume da glândula da próstata e (ii) os dados, os dados precedentes sobre o volume da glândula da próstata, que compreendem a idade; e as determinações dos marcadores do sangue incluindo o tPSA, o fP- SA, o iPSA e, opcionalmente, a hK2, das amostras de sangue das di- tas pessoas do sexo masculino. O dito modelo de regressão linear po- de ser gerado empregando a fórmula (VI): j V = ∑ β i xi + c i =1 (VI),
[0089] em que V é o volume da glândula da próstata, βi é o coefi- ciente para a variável xi para as variáveis de j que compreendem a i- dade, o tPSA, o fPSA, o iPSA e, opcionalmente, a hK2, respectiva- mente, para obtenção do dito modelo de regressão linear. O método compreende adicionalmente uma ação de b) provisão da idade de uma pessoa do sexo masculino em anos, c) determinação dos ditos marca- dores do sangue tPSA, fPSA, iPSA e, opcionalmente, hK2, respecti- vamente, de uma amostra de sangue da dita pessoa do sexo masculi- no e d) emprego do dito modelo de regressão linear utilizando a dita idade provida da etapa b) e dos ditos marcadores do sangue determi- nados da etapa c) para obter o dito volume predito da próstata da dita pessoa do sexo masculino. Em algumas modalidades, o modelo esta- tístico do dito risco para o câncer se baseia no tPSA sozinho se o tP- SA for ≥ 15 ng/ml, de preferência ≥ 20 ng/ml e com a máxima prefe- rência ≥ 25 ng/ml.
[0090] Deve ser apreciado que qualquer modelo de regressão lo- gística apropriado que inclui, mas não se limita aos modelos descritos acima para a determinação de uma probabilidade do câncer de prósta-
ta através de biópsia, possa ser utilizado com modalidades da inven- ção para a determinação do volume da glândula da próstata.
[0091] Em algumas modalidades, os dados da etapa a) (ii) para prover o modelo de regressão logística ou o modelo de regressão line- ar e a determinação dos marcadores do sangue da dita pessoa do se- xo masculino compreendem a calicreína humana 2.
[0092] Em muitas modalidades preferidas do método da invenção em que o volume da glândula da próstata é predito, o volume da glân- dula da próstata é provido como definido por ultrassom transretal.
[0093] Em muitas modalidades preferidas do método da presente invenção, os dados para cada pessoa do sexo masculino da dita série de pessoas do sexo masculino para prover o modelo de regressão lo- gística ou o modelo de regressão linear incluem adicionalmente os re- sultados do exame retal digital (DRE) e, consequentemente, o DRE é realizado na pessoa do sexo masculino e o resultado obtido é utilizado empregando o modelo de regressão logística ou o modelo de regres- são linear, respectivamente, para obter a dita probabilidade. Os resul- tados do DRE são expressos, de preferência, como valores binários, isto é, normal = 0 e nodularidade presente = 1 com ou sem um segun- do valor para a estimativa do volume, isto é, pequeno = 0, médio = 1 e grande = 2.
[0094] Em algumas modalidades preferidas do método da presen- te invenção, os dados da série de pessoas do sexo masculino para a obtenção do modelo compreendem somente os dados das pessoas do sexo masculino com níveis elevados, definidos como a mediana espe- cífica da idade ou mais elevada, do tPSA e, consequentemente, as probabilidades de o evento ou o volume predito da próstata serem ob- tidos somente para as pessoas do sexo masculino com os ditos níveis elevados de tPSA.
[0095] Nas modalidades preferidas do método da presente inven-
ção, as determinações dos marcadores do sangue para cada pessoa do sexo masculino da série de pessoas do sexo masculino para a ob- tenção do modelo e, consequentemente, daqueles marcadores do sangue determinados para obter a probabilidade ou o volume predito da glândula da próstata são feitas a partir das amostras de sangue do soro ou do plasma, de preferência, anticoagulado, seja fresco ou con- gelado. De preferência, todas as amostras são do mesmo tipo, isto é, soro ou plasma e fresco ou congelado.
[0096] Em algumas modalidades preferidas do método da presen- te invenção, o modelo de regressão logística ou o modelo de regres- são linear é provido, empregando dados de uma série de pessoas do sexo masculino com 40 a 75 anos de idade e, consequentemente, a probabilidade de o evento ou o volume predito da próstata ser obtido de uma pessoa do sexo masculino com 40 a 75 anos de idade.
[0097] Em algumas modalidades preferidas do método da presen- te invenção, o modelo de regressão logística ou o modelo de regres- são linear é provido, empregando os dados de uma série de pessoas do sexo masculino com um tPSA no sangue ≥ tercil da idade máxima, ≥ quartil da idade máxima, ≥ quintil da idade máxima ou ≥ decil da ida- de máxima e, consequentemente, a probabilidade de o evento ou o volume predito da próstata ser obtido de uma pessoa do sexo mascu- lino com o tPSA no sangue ≥ tercil da idade máxima, ≥ quartil da idade máxima, ≥ quintil da idade máxima ou ≥ decil da idade máxima, res- pectivamente. Como um exemplo, para uma pessoa do sexo masculi- no com sessenta anos, os valores totais correspondentes de PSA po- dem ser: 1,5 ng/ml, para ≥ tercil da idade máxima, 1,9 ng/ml, para ≥ quartil da idade máxima, 2,1 ng/ml, para ≥ quintil da idade máxima e 3 ng/ml, para ≥ decil da idade máxima. Sistema computadorizado exemplificador
[0098] Uma implementação ilustrativa de um sistema computado-
rizado 300 em que parte de ou todas as técnicas e/ou interações com o usuário aqui descritas podem ser implementadas é mostrada na FIG.
3. O sistema computadorizado 300 pode incluir um ou mais processa- dores 310 e um ou mais meios de armazenamento não transitórios que podem ser lidos por computador (por exemplo, a memória 320 e um ou mais meios de armazenamento não voláteis 330). O(s) proces- sador(es) 310 pode(m) controlar a gravação dos dados para e a leitura dos dados da memória 320 e o dispositivo de armazenamento não vo- látil 330 de qualquer maneira apropriada, uma vez que os aspectos da presente invenção aqui descritos não são limitados sob este aspecto.
[0099] Para executar qualquer uma das funcionalidades aqui des- critas, o(s) processador(es) 310 pode(m) executar uma ou mais instru- ções, tais como os módulos do programa, armazenados em um ou mais meios de armazenamento que podem ser lidos por computador (por exemplo, a memória 320), que podem servir como os meios de armazenamento não transitórios que podem ser lidos por computador que armazenam instruções para a execução pelo processador 310. De modo geral, os módulos do programa incluem rotinas, programas, ob- jetos, componentes, estruturas de dados etc. que executam tarefas particulares ou executam tipos de dados abstratos particulares. As modalidades também podem ser implementadas nos ambientes com- putacionais distribuídos onde as tarefas são executadas pelos disposi- tivos de processamento remoto que são ligados através de uma rede de comunicações. Em um ambiente computacional distribuído, os mó- dulos do programa podem ser posicionados nos meios de armazena- mento no computador locais e remotos incluindo os dispositivos de armazenamento em memória.
[00100] O computador 300 pode ser operado em um ambiente em rede que utiliza conexões lógicas para um ou mais computadores re- motos. Um ou mais computadores remotos podem incluir um compu-
tador pessoal, um servidor, um roteador, um PC em rede, um disposi- tivo de comunicação direta ou outro nó de rede comum, e inclui tipica- mente muitos ou todos os elementos descritos acima relativos ao computador 300. As conexões lógicas entre o computador 300 e um ou mais computadores remotos podem incluir, mas não se limitam a uma rede de área local (LAN) e uma rede de longa distância (WAN), mas também podem incluir outras redes. Tais redes podem ser com base em qualquer tecnologia apropriada, podem ser operadas de a- cordo com qualquer protocolo apropriado e podem incluir redes sem fio, redes com fio ou redes de fibra óptica. Tais ambientes em rede são comuns em escritórios, redes de computador empresariais, intranets e internet.
[00101] Quando utilizado em um ambiente em rede do tipo LAN, o computador 300 pode ser conectado à LAN através de uma interface ou um adaptador da rede. Quando utilizado em um ambiente em rede do tipo WAN, o computador 300 inclui tipicamente um modem ou outro meio para estabelecer comunicações sobre a WAN, tal como a inter- net. Em um ambiente em rede, os módulos do programa ou porções destes podem ser armazenados no dispositivo de armazenamento em memória remoto.
[00102] Várias entradas aqui descritas para a avaliação de um risco de câncer de próstata e/ou a determinação de um volume da glândula da próstata podem ser recebidas pelo computador 300 através de uma rede (por exemplo, LAN, WAN ou alguma outra rede) de um ou mais computadores remotos ou dispositivos que armazenam dados associ- ados com as entradas. Um ou mais dos computadores/dispositivos remotos podem executar a análise nos dados armazenados remota- mente antes de enviar os resultados da análise como os dados de en- trada ao computador 300. Alternativamente, os dados armazenados remotamente podem ser enviados ao computador 300 como foram armazenados remotamente, sem nenhuma análise remota. Além dis- so, as entradas podem ser recebidas diretamente por um usuário do computador 300 utilizando qualquer uma de uma série de interfaces de entrada (por exemplo, interface de entrada 340) que podem ser incor- poradas como componentes do computador 300.
[00103] Várias saídas aqui descritas, incluindo a saída de uma pro- babilidade de risco de câncer de próstata e/ou do volume da glândula da próstata, podem ser providas visualmente em um dispositivo de sa- ída (por exemplo, uma tela) conectado diretamente ao computador 300 ou a(s) saída(s) pode(m) ser provida(s) a um dispositivo de saída posi- cionado remotamente conectado ao computador 300 através de uma ou mais redes com fio ou sem fio, uma vez que as modalidades da in- venção não são limitadas sob este aspecto. As saídas aqui descritas podem ser adicional ou alternativamente providas à exceção da utili- zação de apresentação visual. Por exemplo, o computador 300 ou um computador remoto ao qual uma saída é provida pode incluir uma ou mais interfaces de saída que incluem, mas não se limitam a alto- falantes e interfaces de saída vibratórias, para a provisão de uma indi- cação da saída.
[00104] Deve ser apreciado que, embora o computador 300 seja ilustrado na FIG. 3 como sendo um dispositivo único, em algumas mo- dalidades, o computador 300 pode compreender uma pluralidade de dispositivos acoplados de maneira comunicável para executar alguma ou todas as funcionalidades aqui descritas, e o computador 300 é so- mente uma implementação ilustrativa de um computador que pode ser utilizado de acordo com as modalidades da invenção. Por exemplo, em algumas modalidades, o computador 300 pode ser integrado a e/ou estar em comunicação eletrônica com o sistema mostrado na FIG. 5.
[00105] Tal como descrito acima, em algumas modalidades, o com-
putador 300 pode ser incluído em um ambiente em rede, onde as in- formações sobre um ou mais marcadores do sangue, utilizadas para a determinação de uma probabilidade de câncer de próstata e/ou volu- me da glândula da próstata, são enviadas de uma fonte externa ao computador 300 para análise utilizando uma ou mais das técnicas aqui descritas. Um ambiente em rede ilustrativo 400 de acordo com algu- mas modalidades da invenção é mostrado na FIG. 4. No ambiente em rede 400, o computador 300 é conectado ao detector 420 através da rede 410. Como discutido acima, a rede 410 pode ser qualquer tipo apropriado de rede com fio ou sem fio, e pode incluir uma ou mais re- des de área local (LANs) ou redes de longa distância (WANs), tal co- mo a internet.
[00106] O detector 420 pode ser configurado para determinar valo- res para um ou mais dos marcadores do sangue utilizados para a de- terminação de uma probabilidade de câncer de próstata e/ou do volu- me da glândula da próstata, de acordo com uma ou mais das técnicas aqui descritas. Embora o detector 420 seja ilustrado na FIG. 4 como um detector único, Deve ser apreciado que o detector 420 possa ser implementado como múltiplos detectores, cada um configurado para a determinação de um ou mais dos valores do marcador do sangue utili- zados de acordo com uma ou mais das técnicas aqui descritas. Os e- xemplos adicionais dos detectores e dos sistemas de detecção são providos mais detalhadamente abaixo (por exemplo, na FIG. 12).
[00107] Em algumas modalidades, as informações que correspon- dem aos valores para os marcadores do sangue determinados a partir do detector 420 podem ser armazenadas antes de enviar os valores ao computador 300. Em tais modalidades, as informações que corres- pondem aos valores podem ser armazenadas localmente no armaze- namento local 420 de maneira comunicável acoplado ao detector 420 e/ou armazenado no armazenamento central conectado à rede 440.
Consequentemente, quando os valores que correspondem aos marca- dores do sangue são recebidos pelo computador 300 de acordo com uma ou mais das técnicas aqui descritas, Deve ser apreciado que pelo menos alguns dos valores possam ser recebidos diretamente do de- tector 420 ou de um ou mais dispositivos de armazenamento (por e- xemplo, armazenamento local 430, armazenamento central 440) nos quais os valores foram armazenados, uma vez que as modalidades não são limitadas com base onde os valores são recebidos. Outros Sistemas e Componentes
[00108] Tal como aqui descrito, em algumas modalidades, um sis- tema pode incluir um processador ou computador programado para avaliar um modelo de regressão logística em comunicação eletrônica com um analisador para a determinação de uma probabilidade de um evento associado com o câncer de próstata (por exemplo, risco de câncer de próstata e/ou volume da glândula da próstata). O analisador pode ser adaptado e arranjado para a determinação de uma ou mais características dos marcadores do sangue para recebimento no mode- lo de regressão logística. Em algumas modalidades, o analisador é um analisador de amostra microfluídica; por exemplo, o analisador pode ser adaptado e arranjado para a determinação de uma amostra pro- cessada em um dispositivo/cassete microfluídico. Deve ser apreciado, no entanto, que outros tipos de analisadores também possam ser utili- zados (por exemplo, analisadores para os ensaios do tipo ELISA de microcavidades) e que os sistemas aqui descritos não sejam limitados sob este aspecto.
[00109] Um exemplo de tal sistema inclui, em um conjunto de mo- dalidades, um analisador de amostra microfluídica que compreende um invólucro, uma abertura no invólucro configurada para receber um cassete que tem pelo menos um canal microfluídico, em que o invólu- cro inclui um componente configurado para fazer interface com um componente de acoplamento no cassete para detectar o cassete den- tro do invólucro. O analisador também pode incluir um sistema de con- trole de pressão posicionado dentro do invólucro, cujo sistema de con- trole de pressão é configurado para pressurizar pelo menos um canal microfluídico no cassete para mover uma amostra através de pelo me- nos um canal microfluídico. Um sistema óptico é posicionado dentro do invólucro, cujo sistema óptico inclui pelo menos uma fonte de luz e pe- lo menos um detector espaçado da fonte de luz, em que a fonte de luz é configurada para passar luz através do cassete quando o cassete é introduzido no analisador de amostra e em que o detector é posiciona- do de maneira oposta à fonte de luz para detectar a quantidade de luz que passa através do cassete. O sistema também pode incluir uma interface com o usuário associada com o invólucro para receber pelo menos a idade de um uma pessoa e/ou outras informações para rece- ber no modelo de regressão linear.
[00110] Em determinadas modalidades, um processador está (ou é adaptado para estar) em comunicação eletrônica com o analisador de amostra microfluídica. Em alguns casos, o processador está dentro do invólucro do analisador. No entanto, em outras modalidades, o proces- sador não é incluído dentro do invólucro do analisador, mas pode ser acessado por um dispositivo eletrônicos como aqui descrito. O proces- sador pode ser programado para avaliar um modelo de regressão lo- gística com base, pelo menos em parte, nas informações recebidas de pelo menos um detector, para a determinação de uma probabilidade de um evento associado com o câncer de próstata em uma pessoa, em que a avaliação do modelo de regressão logística compreende a graduação de cada uma de uma pluralidade de variáveis por um valor de coeficiente diferente para produzir variáveis graduadas, e a soma dos valores para as variáveis graduadas utilizadas para produzir a probabilidade do evento associado com o câncer de próstata em uma pessoa, em que a pluralidade de variáveis inclui a idade e pelo menos duas variáveis incluídas nas informações recebidas do detector e é selecionada do grupo que consiste em fPSA, iPSA e tPSA.
[00111] Um método para a determinação de uma probabilidade de um evento associado com o câncer de próstata em uma pessoa pode incluir, por exemplo, a provisão de um analisador de amostra microflu- ídica. O analisador de amostra microfluídica pode compreender um invólucro, uma abertura no invólucro configurada para receber um cassete que tem pelo menos um canal microfluídico, em que o invólu- cro inclui um componente configurado para fazer interface com um componente de acoplamento no cassete para detectar o cassete den- tro do invólucro. O analisador pode adicionalmente incluir um sistema de controle de pressão posicionado dentro do invólucro, cujo sistema de controle de pressão é configurado para pressurizar pelo menos um canal microfluídico no cassete para mover a amostra através de pelo menos um canal microfluídico. Um sistema óptico é posicionado dentro do invólucro, cujo sistema óptico inclui pelo menos uma fonte de luz e pelo menos um detector espaçado da fonte de luz, em que a fonte de luz é configurada para passar luz através do cassete quando o cassete é introduzido no analisador de amostra e em que o detector é posicio- nado de maneira oposta à fonte de luz para detectar a quantidade de luz que passa através do cassete. O analisador também pode incluir uma interface com o usuário associada com o invólucro para receber pelo menos a idade de uma pessoa. O método pode envolver a deter- minação das informações para uma pluralidade de marcadores do sangue utilizando o analisador de amostra microfluídica, em que as informações para a pluralidade de marcadores do sangue incluem um valor de fPSA, um valor de iPSA, um valor de tPSA e, opcionalmente, um valor de hK2. O método também pode envolver a avaliação, utili- zando pelo menos um processador, de um modelo de regressão logís-
tica com base, pelo menos em parte, nas informações para a determi- nação de uma probabilidade de um evento associado com o câncer de próstata em uma pessoa, em que a avaliação do modelo de regressão logística compreende a graduação de cada uma de uma pluralidade de variáveis por um valor de coeficiente diferente para produzir variáveis graduadas, e a soma dos valores para as variáveis graduadas utiliza- das para produzir a probabilidade do evento associado com o câncer de próstata em uma pessoa, em que a pluralidade de variáveis inclui a idade e pelo menos duas variáveis incluídas nas informações recebi- das do detector e é selecionada do grupo que consiste em fPSA, iPSA e tPSA.
[00112] Outro exemplo de um sistema inclui, em um conjunto de modalidades, um dispositivo (por exemplo, um cassete microfluídico) que compreende uma primeira região de análise que compreende um primeiro parceiro de ligação e uma segunda região de análise que compreende um segundo parceiro de ligação. O primeiro parceiro de ligação é adaptado para se ligar a pelo menos um dentre o fPSA, o iPSA e o tPSA e o segundo parceiro de ligação é adaptado para se ligar a pelo menos outro dentre o fPSA, o iPSA e o tPSA. Em algumas modalidades, o dispositivo inclui uma terceira região de análise que inclui um terceiro parceiro de ligação adaptado para se ligar ao terceiro dentre o fPSA, o iPSA e o tPSA. Opcionalmente, o dispositivo pode incluir uma quarta região de análise que inclui um quarto parceiro de ligação adaptado para se ligar a hK2. O sistema inclui um detector as- sociado com a primeira e segunda regiões de análise, e um processa- dor programado para avaliar um modelo de regressão logística com base, pelo menos em parte, nas informações recebidas do detector, para a determinação de uma probabilidade de um evento associado com o câncer de próstata em uma pessoa. A avaliação do modelo de regressão logística compreende a graduação de cada uma de uma pluralidade de variáveis por um valor de coeficiente diferente para pro- duzir variáveis graduadas, e a soma dos valores para as variáveis gra- duadas utilizadas para produzir a probabilidade do evento associado com o câncer de próstata em uma pessoa, em que a pluralidade de variáveis inclui a idade e pelo menos duas variáveis incluídas nas in- formações recebidas do detector e é selecionada do grupo que consis- te em fPSA, iPSA e tPSA.
[00113] Um método de determinação da probabilidade do evento associado com o câncer de próstata em tal sistema pode incluir, por exemplo, as ações de introduzir uma amostra em um dispositivo (por exemplo, um cassete microfluídico) que compreende uma primeira re- gião de análise que compreende um primeiro um parceiro de ligação e uma segunda região de análise que compreende um segundo parceiro de ligação, em que o primeiro parceiro de ligação é adaptado para se ligar a pelo menos um dentre o fPSA, o iPSA e o tPSA e em que o se- gundo parceiro de ligação é adaptado para se ligar a pelo menos outro dentre o fPSA, o iPSA e o tPSA. Em algumas modalidades, o disposi- tivo inclui uma terceira região de análise que inclui um terceiro parceiro de ligação adaptado para se ligar ao terceiro dentre o fPSA, o iPSA e o tPSA. Opcionalmente, o dispositivo pode incluir uma quarta região de análise que inclui um quarto parceiro de ligação adaptado para se ligar a hK2. O método pode envolver a permissão que qualquer um dentre o fPSA, o iPSA e/ou o tPSA da amostra se ligue com pelo menos o pri- meiro e/ou segundo parceiros de ligação na primeira e segunda regi- ões de análise e a determinação de uma característica do fPSA, iPSA e/ou tPSA utilizando um ou mais detectores associados com a primeira e segunda regiões de análise. O método envolve a inserção das carac- terísticas do fPSA, iPSA e/ou tPSA em um processador programado para avaliar um modelo de regressão logística com base, pelo menos em parte, nas informações recebidas de pelo menos um detector, para a determinação de uma probabilidade de um evento associado com o câncer de próstata em uma pessoa, em que a avaliação do modelo de regressão logística compreende a graduação de cada uma de uma pluralidade de variáveis por um valor de coeficiente diferente para pro- duzir variáveis graduadas, e a soma dos valores para as variáveis gra- duadas utilizadas para produzir a probabilidade do evento associado com o câncer de próstata em uma pessoa, em que a pluralidade de variáveis inclui a idade e pelo menos duas variáveis incluídas nas in- formações recebidas do detector e é selecionada do grupo que consis- te em fPSA, iPSA e tPSA. Consequentemente, a probabilidade do e- vento associado com o câncer de próstata pode ser determinada.
[00114] Em determinadas modalidades, um dispositivo para deter- minar os marcadores do sangue (por exemplo, fPSA, iPSA, tPSA e/ou hK2) é provido. Em alguns casos, o dispositivo pode permitir a deter- minação simultânea dos marcadores do sangue, por exemplo, em um único cassete. O dispositivo pode incluir um sistema microfluídico que compreende um primeiro canal microfluídico que inclui pelo menos uma entrada e uma saída, um primeiro reagente armazenado no pri- meiro canal microfluídico e uma vedação que cobre a entrada do pri- meiro canal microfluídico e uma vedação que cobre a saída do primei- ro canal microfluídico, para armazenar o primeiro reagente no primeiro canal microfluídico. O dispositivo pode adicionalmente incluir um se- gundo canal microfluídico que inclui pelo menos uma entrada e uma saída, uma primeira região de análise, uma segunda região de análise e uma terceira região de análise. Cada uma das regiões de análise pode incluir um dentre um anticorpo de captura específico anti-iPSA, um anticorpo de captura específico anti-fPSA e um anticorpo de captu- ra específico anti-tPSA (e, opcionalmente, um anticorpo de captura específico de hK2). Uma ou mais dentre a primeira, segunda e terceira regiões de análise podem estar em comunicação fluida com o segundo canal microfluídico. O dispositivo também inclui um conector fluídico que pode ser conectado ao sistema microfluídico, em que o conector fluídico compreende uma passagem de fluido que inclui uma entrada para a passagem de fluido e uma saída para a passagem de fluido, em que, quando da conexão, a entrada para a passagem de fluido se co- necta à saída do primeiro canal microfluídico para permitir uma comu- nicação fluida entre a passagem de fluido e o primeiro canal microfluí- dico, e a saída para a passagem de fluido se conecta à entrada do se- gundo canal microfluídico para permitir uma comunicação fluida entre a passagem de fluido e o segundo canal microfluídico. O primeiro e segundo canais microfluídicos não estão em comunicação fluida um com o outro sem conexão através do conector fluídico. O dispositivo pode incluir opcionalmente uma fonte de um coloide de metal conjuga- do a um anticorpo que se liga ao anti-PSA.
[00115] Em algumas modalidades que envolvem um dispositivo a- qui descrito, pelo menos duas (ou pelo menos três) dentre a primeira, segunda e terceira regiões de análise estão em comunicação fluida com o segundo canal microfluídico. Em determinados casos, cada uma dentre a primeira, segunda e terceira (e, opcionalmente, quarta) regiões de análise está em comunicação fluida com o segundo canal microfluídico. Em alguns exemplos, a primeira região de análise está em comunicação fluida com o segundo canal microfluídico, e a segun- da região de análise está em comunicação fluida com um terceiro ca- nal microfluídico. A segunda e terceira regiões de análise (bem como o segundo e terceiro canais microfluídicos) podem, por exemplo, ser formadas na mesma camada do substrato ou em camadas diferentes do substrato, tal como aqui descrito. Além disso, em algumas modali- dades, a terceira região de análise está em comunicação fluida com um quarto canal microfluídico. A terceira e quarta regiões de análise (bem como o terceiro e quarto canais microfluídicos) podem, por e-
xemplo, ser formadas na mesma camada do substrato ou em camadas diferentes do substrato, tal como aqui descrito. Em alguns casos, cada uma dentre a primeira, segunda e terceira (e, opcionalmente, a quarta) regiões de análise é formada em camadas diferentes do substrato. Em outras modalidades, a quarta região de análise (que pode incluir um anticorpo de captura específico anti-hK2, por exemplo) é formada em uma camada do substrato diferente de uma camada do substrato que inclui pelo menos uma dentre a primeira, segunda e terceira regiões de análise. Em algumas tais modalidades, a primeira, segunda e terceira regiões de análise são formadas na mesma camada do substrato.
[00116] Independente do fato se as regiões de análise são forma- das em camadas diferentes do substrato ou na mesma camada do substrato, em algumas modalidades, os reagentes podem ser armaze- nados e vedados na primeira, segunda e/ou terceira (e, opcionalmen- te, quarta) regiões de análise, por exemplo, antes do uso do dispositi- vo. Os reagentes podem incluir, por exemplo, um anticorpo de captura específico anti-iPSA, um anticorpo de captura específico anti-fPSA e um anticorpo de captura específico anti-tPSA (e, opcionalmente, um anticorpo de captura específico hK2). Quando do uso do dispositivo (por exemplo, quando da conexão de um conector fluídico ao sistema microfluídico) o primeiro canal microfluídico pode ser colocado em co- municação fluídica com uma ou mais dentre a primeira, segunda e ter- ceira (e, opcionalmente, quarta) regiões de análise. Por exemplo, o conector fluídico pode se conectar a uma ou mais entradas do segun- do, terceiro e/ou quarto canais microfluídicos quando da conexão ao sistema microfluídico. Os exemplos das configurações de dispositivo são descritos mais detalhadamente abaixo.
[00117] Em determinados dispositivos aqui descritos, a análise en- volve o uso de um anticorpo de detecção que reconhece mais de um dentre o iPSA, o fPSA, o tPSA e a hK2. Por exemplo, um anticorpo de detecção pode reconhecer PSA e hK2 e então um bloqueador pode ser utilizado para interferir no PSA de maneira tal que somente a hK2 seja detectada. Por exemplo, em uma modalidade particular, uma re- gião de análise pode incluir um anticorpo de captura anti-hK2 (que também pode capturar, por exemplo, 5-10% de tPSA e que pode ser armazenado na região de análise antes do uso, tal como aqui descri- to), bem como os anticorpos bloqueadores que bloqueiam o tPSA. Um anticorpo detector anti-hK2 (que também pode detectar o tPSA) pode ser utilizado para detectar a quantidade de ligação da hK2. Uma região de análise diferente pode incluir, por exemplo, um anticorpo de captura anti-tPSA (que pode ser armazenado em uma região de análise antes do uso, tal como aqui descrito) que captura o fPSA e o tPSA. Dois an- ticorpos detectores diferentes, por exemplo, um anticorpo detector an- ti-tPSA com um tag fluorescente para um comprimento de onda e um anticorpo detector anti-fPSA com um tag fluorescente para um com- primento de onda diferente, podem ser utilizados para a detecção. Uma região de análise diferente pode incluir, por exemplo, um anticor- po de captura anti-fPSA e, opcionalmente, um anticorpo de captura anti-iPSA. Dois anticorpos detectores diferentes, por exemplo, um an- ticorpo detector anti-fPSA com um tag fluorescente para um compri- mento de onda e um anticorpo detector anti-iPSA com um tag fluores- cente para um comprimento de onda diferente, podem ser utilizados para a detecção.
[00118] Em outras modalidades, no entanto, os anticorpos de cap- tura específicos podem ser utilizados para a detecção das espécies. Cada um dos anticorpos de captura específicos pode ser posicionado em regiões de análise diferentes, tal como aqui descrito. Vantajosa- mente, o uso de anticorpos de captura específicos e/ou o posiciona- mento dos anticorpos de captura em regiões de análise diferentes po- dem permitir o uso do mesmo anticorpo de detecção para a detecção de cada uma das espécies. Em algumas tais modalidades, o mesmo comprimento de onda pode ser utilizado para determinar cada uma das espécies. Isto pode permitir o uso de detectores simplificados e/ou de componentes ópticos para a detecção. Por exemplo, em algumas modalidades, a detecção envolve a acumulação de um material opaco em regiões de análise diferentes que podem ser determinadas em um comprimento de onda particular, como descrito em mais detalhes a seguir.
[00119] Por exemplo, em um conjunto de modalidades, um anticor- po de captura específico anti-iPSA, um anticorpo de captura específico anti-fPSA e um anticorpo de captura específico anti-tPSA (e, opcio- nalmente, um anticorpo de captura específico hK2) podem ser incluí- dos em regiões de análise diferentes como aqui descrito, opcionalmen- te junto com os controles negativos e positivos. Um anticorpo de de- tecção tal como um anticorpo etiquetado por ouro que é anti-PSA e anti-hK2 pode ser utilizado para detectar cada um dentre o iPSA, o fP- SA, o tPSA e/ou a hK2. Em outras modalidades, no entanto, uma mis- tura de anticorpos etiquetados por ouro, tais como um anticorpo eti- quetado por ouro anti-hK2, um anticorpo anti-PSA etiquetado por ouro e/ou um anticorpo anti-iPSA etiquetado por ouro, pode ser utilizada para a detecção. Em tal sistema, o mesmo comprimento de onda pode ser utilizado para determinar cada uma das espécies, e isto pode per- mitir o uso de detectores simplificados e/ou de componentes ópticos para a detecção.
[00120] Os exemplos de sistemas, dispositivos e analisadores es- pecíficos que podem ser utilizados em combinação com as modalida- des aqui providas são descritos agora.
[00121] A FIG. 5 mostra um diagrama de blocos 510 de um sistema microfluídico e vários componentes que podem ser incluídos de acordo com um conjunto de modalidades. O sistema microfluídico pode incluir,
por exemplo, um cassete 520 associado de maneira operativa com um ou mais componentes tais como uma fonte de fluxo de fluido 540 tal como uma bomba (por exemplo, para introduzir um ou mais fluidos no cassete e/ou para controlar as taxas de fluxo de fluido), opcionalmente uma fonte de fluxo de fluido 540, tal como uma bomba ou vácuo que pode ser configurado para aplicar uma pressão positiva ou vácuo (por exemplo, para mover/remover um ou mais fluidos dentro de/no cassete e/ou para controlar as taxas de fluxo de fluido), um sistema de válvulas 528 (por exemplo, para acionar uma ou mais válvulas), um sistema de detecção 534 (por exemplo, para detectar um ou mais fluidos e/ou processos) e/ou um sistema de regulagem de temperatura 541 (por exemplo, para aquecer e/ou resfriar uma ou mais regiões do cassete). Os componentes podem ser externos ou internos ao dispositivo micro- fluídico e podem incluir opcionalmente um ou mais processadores para controlar o componente ou sistema de componentes. Em determina- das modalidades, um ou mais destes componentes e/ou processado- res são associados com um analisador de amostra 547 configurado para processar e/ou analisar uma amostra contida no cassete. O pro- cessador pode ser opcionalmente programado para avaliar um modelo de regressão linear, tal como aqui descrito.
[00122] Em geral, tal como aqui utilizado, um componente que é "associado de maneira operativa a" um ou mais outros componentes indica que tais componentes estão diretamente conectados uns aos outros, em contato físico direto uns com os outros sem serem conec- tados ou unidos ou não estão diretamente conectados uns com os ou- tros ou em contato uns com os outros, mas são interconectados me- cânica, elétrica (incluindo através de sinais eletromagnéticos transmiti- dos pelo espaço) ou fluidicamente (por exemplo, através de canais tais como a tubulação) para fazer com que ou permitir que os componen- tes desse modo associados executem sua funcionalidade pretendida.
[00123] Os componentes mostrados ilustrativamente na FIG. 5, as- sim como outros componentes opcionais tais como aqueles aqui des- critos, podem ser operativamente associados com um sistema de con- trole 550. Em algumas modalidades, o sistema de controle pode ser utilizado para controlar fluidos e/ou conduzir o controle de qualidade pelo uso do feedback de um ou mais eventos que ocorrem no sistema microfluídico. Por exemplo, o sistema de controle pode ser configurado para receber sinais de entrada de um ou mais componentes, calcular e/ou controlar vários parâmetros, para comparar um ou mais sinais ou padrão de sinais com os sinais pré-programados no sistema de contro- le e/ou para enviar sinais a um ou mais componentes para modular o fluxo de fluido e/ou a operação de controle do sistema microfluídico. O sistema de controle também pode ser opcionalmente associado com outros componentes tais como uma interface 554, um sistema de iden- tificação 556, uma unidade de comunicação externa 558 (por exemplo, um USB) e/ou outros componentes para o usuário, como descrito em mais detalhes a seguir.
[00124] O cassete (por exemplo, o dispositivo microfluídico) 520 pode ter qualquer configuração de canais e/ou componentes apropria- dos para executar uma análise desejada. Em um conjunto de modali- dades, o cassete 520 contém os reagentes armazenados que podem ser utilizados para executar um produto químico e/ou reação biológica (por exemplo, um imunoensaio), por exemplo, como descrito mais de- talhadamente na presente invenção. O cassete pode incluir, por e- xemplo, uma entrada de reagente opcional 562 em comunicação fluida com uma área de armazenagem do reagente opcional 564. A área de armazenamento pode incluir, por exemplo, um ou mais canais e/ou reservatórios que podem, em algumas modalidades, ser parcial ou completamente preenchidos com fluidos (por exemplo, líquidos e ga- ses, incluindo reagentes imiscíveis tais como as soluções do reagente e as soluções de lavagem, separadas opcionalmente por fluidos imis- cíveis, tal como aqui descrito mais detalhadamente). O cassete tam- bém pode incluir uma amostra opcional ou área de carregamento de reagente 566, tal como um conector fluídico que pode ser utilizado pa- ra conectar a área de armazenagem do reagente 564 a uma região de análise opcional 568. A região de análise, que pode incluir uma ou mais áreas para detectar um componente em uma amostra (por e- xemplo, as regiões de análise), pode estar em comunicação fluida com uma área de resíduos opcional 570 e ser acoplada à saída 572. Em alguns casos, estas e outras características do dispositivo podem ser formadas sobre ou em componentes ou camadas diferentes de um cassete, tal como aqui descrito mais detalhadamente. Desse modo, Deve ser apreciado que um cassete possa incluir um componente úni- co ou múltiplos componentes que são unidos durante o uso, tais como uma combinação de um artigo com o conector fluídico unido, tal como aqui descrito. Em um conjunto de modalidades, o fluido pode fluir na direção das setas mostradas na figura. A descrição e os exemplos adi- cionais destes e de outros componentes são aqui providos.
[00125] Em algumas modalidades, as seções 571 e 577 do cassete não estão em comunicação fluida uma com a outra antes da introdu- ção de uma amostra no cassete. Em alguns casos, as seções 571 e 577 não estão em comunicação fluida uma com a outra antes do pri- meiro uso do cassete, sendo que no primeiro uso, as seções são trazi- das em comunicação fluida uma com a outra. Em outras modalidades, no entanto, as seções 571 e 577 estão em comunicação fluida uma com a outra antes do primeiro uso e/ou antes da introdução de uma amostra no cassete. Outras configurações de cassetes também são possíveis.
[00126] Tal como mostrado na modalidade exemplificadora ilustra- da na FIG. 5, uma ou mais fontes de fluxo de fluido 540 tais como uma bomba e/ou um vácuo ou outro sistema de controle de pressão, siste- ma de válvulas 528, sistema de detecção 534, sistema de regulagem de temperatura 541 e/ou outros componentes podem ser operativa- mente associadas com uma ou mais dentre as entradas de reagente 562, a área de armazenagem do reagente 564, a área de carregamen- to de reagente ou da amostra 566, a área de reação 568, a área de resíduos 570, a saída 572 e/ou outras regiões do cassete 520. A de- tecção dos processos ou dos eventos em uma ou mais regiões do cassete pode produzir de um sinal ou padrão de sinais que pode ser transmitido ao sistema de controle 550. Com base no(s) sinal(is) rece- bido(s) pelo sistema de controle, este feedback pode ser utilizado para manipular os fluidos dentro e/ou entre cada uma destas regiões do dispositivo microfluídico, tal como ao controlar uma ou mais dentre uma bomba, um vácuo, um sistema de válvulas, um sistema de detec- ção, um sistema de regulagem de temperatura e/ou outros componen- tes.
[00127] Com referência à FIG. 6, uma modalidade de um analisador de amostra microfluídico 600 é ilustrada. Como mostrado na modali- dade exemplificadora da FIG. 6, o analisador inclui um invólucro 601 que é configurado para cobrir ou reter os componentes do analisador que são discutidos em mais detalhes a seguir. Uma abertura 620 no invólucro é configurada para receber um cassete 520. Tal como indi- cado em mais detalhes a seguir, o analisador 600 também pode incluir uma interface com o usuário 650 posicionada dentro do invólucro que é configurada para que um usuário receba as informações no analisa- dor de amostra. Nesta modalidade particular, a interface com o usuário 650 inclui uma tela de toque, mas, tal como discutido a seguir, a inter- face com o usuário pode ser configurada diferentemente.
[00128] Em algumas modalidades, o analisador pode incluir uma fonte de fluxo de fluido (por exemplo, um sistema a vácuo) configurada para pressurizar o cassete, um leitor de identificação configurado para ler as informações associadas com o cassete e um subsistema mecâ- nico que inclui um componente configurado para fazer interface com o cassete para detectar o cassete dentro do invólucro. Como menciona- do acima, uma abertura no invólucro é configurada para receber um cassete. A abertura 620 pode ser configurada como um entalhe alon- gado. A abertura pode ser configurada dessa maneira a fim de receber um cassete substancialmente em formato de cartão. Deve ser apreci- ado que em outras modalidades, a abertura possa ser formada e con- figurada diferentemente, uma vez que a invenção não é desse modo limitada.
[00129] Tal como mencionado acima, o analisador de amostra mi- crofluídico 600 pode ser configurado para receber uma variedade de tipos de cassetes 520 (por exemplo, dispositivos microfluídicos). As FIGS. 7-11F ilustram várias modalidades exemplificadoras do cassete 520 para uso com o analisador 600. Tal como mostrado, o cassete po- de ser substancialmente em formato de cartão (isto é, similar a uma chave de cartão), tendo uma estrutura similar a uma placa substanci- almente rígida.
[00130] O cassete 520 pode ser configurado para incluir um conec- tor fluídico 720, o qual pode se agarrar a uma extremidade do cassete. Em determinadas modalidades, o conector fluídico pode ser utilizado para introduzir um ou mais fluidos (por exemplo, uma amostra ou um reagente) no cassete.
[00131] Em um conjunto de modalidades, o conector fluídico é utili- zado para conectar de maneira fluida dois (ou mais) canais do cassete durante o primeiro uso, cujos canais não são conectados antes do primeiro uso. Por exemplo, o cassete pode incluir dois canais que não estão em comunicação fluida antes do primeiro uso do cassete. Os canais não conectados podem ser vantajosos em determinados casos,
como para armazenar reagentes diferentes em cada um dos canais. Por exemplo, um primeiro canal pode ser utilizado para armazenar re- agentes secos e um segundo canal pode ser utilizado para armazenar reagentes úmidos. A separação física entre os canais pode intensificar a estabilidade em longo prazo dos reagentes armazenados em cada um dos canais, por exemplo, ao manter o(s) reagente(s) armazena- do(s) na forma seca protegida da umidade que pode ser produzida pe- lo(s) reagente(s) armazenado(s) na forma úmida. No primeiro uso, os canais podem ser conectados através do conector fluídico para permi- tir uma comunicação fluida entre os canais do cassete. Por exemplo, o conector fluídico conectado pode puncionar as vedações que cobrem as entradas e/ou saídas do cassete para permitir a inserção do conec- tor fluídico no cassete.
[00132] Tal como aqui utilizado, "antes do primeiro uso do cassete" significa um momento ou tempo antes de o cassete ser utilizado pri- meiramente por um usuário pretendido após a venda comercial. O primeiro uso pode incluir quaisquer etapas que requeiram a manipula- ção do dispositivo por um usuário. Por exemplo, o primeiro uso pode envolver uma ou mais etapas tais como a punção de uma entrada ve- dada para introduzir um reagente no cassete, a conexão de dois ou mais canais a fim de causar uma comunicação fluida entre os canais, a preparação do dispositivo (por exemplo, o carregamento dos reagen- tes no dispositivo) antes da análise de uma amostra, o carregamento de uma amostra no dispositivo, a preparação de uma amostra em uma região do dispositivo, a execução de uma reação com uma amostra, a detecção de uma amostra etc. O primeiro uso, neste contexto, não in- clui a manufatura ou outras etapas preparatórias ou de controle de qualidade seguidas pelo fabricante do cassete. Os elementos versa- dos na técnica estão cientes do significado do primeiro uso neste con- texto, e poderão facilmente determinar se um cassete da invenção já foi utilizado ou não. Em um conjunto de modalidades, o cassete da in- venção é descartável após o primeiro uso (por exemplo, após a con- clusão de um ensaio) e isto fica particularmente evidente quando tais dispositivos são utilizados pela primeira vez, porque é tipicamente im- possível utilizar novamente os dispositivos (por exemplo, para execu- tar um segundo ensaio) após o primeiro uso.
[00133] Tal como mostrado na modalidade exemplificadora ilustra- da na FIG. 8, o conector fluídico 720 pode incluir um canal substanci- almente em formato de U 722 ou um canal que tem qualquer outro formato apropriado, o qual pode armazenar um fluido e/ou reagente (por exemplo, uma amostra de fluido e/ou um ou mais anticorpos de detecção) antes de ser conectado ao cassete. O canal 722 pode ser abrigado entre dois componentes de escudo que formam o conector
720. Em algumas modalidades, o conector fluídico pode ser utilizado para coletar uma amostra do paciente antes de o conector fluídico ser conectado ao cassete. Por exemplo, uma lanceta ou outro instrumento apropriado pode ser utilizado para obter uma amostra de sangue da ponta do dedo que pode ser então coletada pelo conector fluídico 720 e ser carregada no canal 722 pela ação capilar. Em outras modalida- des, o conector fluídico 720 pode ser configurado para puncionar o dedo de um paciente para coletar a amostra no canal 722. Em deter- minadas modalidades, o conector de fluido 720 não contém uma a- mostra (ou reagente) antes da conexão ao cassete, mas permite sim- plesmente uma comunicação fluida entre dois ou mais canais do cas- sete quando da conexão. Em uma modalidade, o canal em formato de U é formado com um tubo capilar. O conector fluídico também pode incluir outras configurações de canal e, em algumas modalidades, po- de incluir mais de um canal que pode ser conectado fluidicamente ou desconectado um do outro.
[00134] As FIGS. 9-11F ilustram várias modalidades exemplificado-
ras do cassete 520 em um detalhe maior. Como mostrado ilustrativa- mente na vista explodida do conjunto da FIG. 9, o cassete 520 pode incluir um corpo do cassete 704 que inclui pelo menos um canal 706 configurado para receber uma amostra ou reagente e através do qual uma amostra ou um reagente pode fluir. O corpo do cassete 704 tam- bém pode incluir travas 708 posicionadas em uma extremidade que bloqueiam com o elemento de alinhamento do conector fluídico 702 com um fecho de pressão.
[00135] O cassete 520 também pode incluir as tampas superior e inferior 710 e 712, que podem, por exemplo, ser feitas de um material transparente. Em algumas modalidades, uma tampa pode estar na forma de um adesivo biocompatível e pode ser feita de um polímero (por exemplo, polietileno (PE), um copolímero de olefina cíclico (COC), cloreto de polivinila (PVC)) ou um material inorgânico, por exemplo. Em alguns casos, uma ou mais tampas estão na forma de uma pelícu- la adesiva (por exemplo, uma fita adesiva). Para algumas aplicações, o material e as dimensões de uma tampa são escolhidos de modo tal que a tampa é substancialmente impermeável ao vapor de água. Em outras modalidades, a tampa pode ser não adesiva, mas pode se ligar termicamente ao substrato microfluídico pela aplicação de calor direto, energia a laser ou energia ultrassônica. Qualquer entrada e/ou saída de um canal do cassete pode ser vedada (por exemplo, ao colocar um adesivo sobre a entrada e/ou saída) utilizando uma ou mais tampas. Em alguns casos, a tampa veda substancialmente um ou mais reagen- tes armazenados no cassete.
[00136] Tal como ilustrado, o corpo do cassete 704 pode incluir uma ou mais portas 714 acopladas ao canal 706 no corpo do cassete
704. Estas portas 714 podem ser configuradas para alinhamento com o canal substancialmente em formato de U 722 no conector fluídico 720 quando o conector fluídico 720 é acoplado ao cassete 520 para conectar de maneira fluida o canal 706 no corpo do cassete 704 com o canal 722 no conector fluídico 720. Em determinadas modalidades, o canal substancialmente em formato de U 722 também pode ser fluidi- camente conectado ao canal 707, desse modo acoplando os canais 706 e 707. Como mostrado, uma tampa 716 pode ser provida sobre as portas 714, e a tampa 716 pode ser configurada para ser perfurada ou então aberta (por exemplo, pelo conector 720 ou por meio de outro dispositivo) para conectar de maneira fluida os dois canais 706 e 722. Além disso, uma tampa 718 pode ser provida para cobrir a porta 719 (por exemplo, uma porta a vácuo) no corpo do cassete 704. Como de- terminado em um detalhe adicional abaixo, a porta 719 pode ser confi- gurada para conectar de maneira fluida uma fonte de fluxo de fluido 540 com o canal 706 para movimentar uma amostra através do casse- te. A tampa 718 sobre a porta 719 pode ser configurada para ser per- furada ou então aberta para conectar de maneira fluida o canal 706 com a fonte de fluxo de fluido 540.
[00137] O corpo do cassete 704 pode incluir opcionalmente uma região de contenção de líquido tal como uma área de resíduos, inclu- indo um material absorvente 717 (por exemplo, uma almofada de resí- duos). Em algumas modalidades, a região de contenção de líquido in- clui as regiões que capturam um ou mais líquidos que fluem no casse- te, permitindo que os gases ou outros fluidos no cassete passem atra- vés da região. Isto pode ser conseguido, em algumas modalidades, ao posicionar um ou mais materiais absorventes na região de contenção de líquido para absorver os líquidos. Esta configuração pode ser útil para remover as bolhas de ar de uma corrente de fluido e/ou para se- parar os líquidos hidrofóbicos dos líquidos hidrofílicos. Em determina- das modalidades, a região de contenção de líquido impede que os lí- quidos passem através da região. Em alguns tais casos, a região de contenção de líquido pode agir como uma área de resíduos que captu-
ra substancialmente todo o líquido no cassete, desse modo impedindo que o líquido saia do cassete (por exemplo, permitindo que os gases escapem de uma saída do cassete). Por exemplo, a área de resíduos pode ser utilizada para armazenar a amostra e/ou os reagentes no cassete depois que passaram através do canal 706 durante a análise da amostra. Estes e outros arranjos podem ser úteis quando o cassete é utilizado como uma ferramenta diagnóstica, uma vez que a região de contenção de líquido pode impedir que um usuário seja exposto aos fluidos potencialmente prejudiciais no cassete.
[00138] A vista esquemática do cassete 520 ilustrada na FIG. 10 mostra uma modalidade em que o cassete 520 inclui um primeiro ca- nal 706 e um segundo canal 707 espaçado do primeiro canal 706. Em uma modalidade, os canais 706, 707 variam na dimensão em seção transversal maior de cerca de 50 micrômetros a cerca de 500 micrô- metros, embora outros tamanhos e configurações de canal possam ser utilizados, como descrito em mais detalhes a seguir.
[00139] O primeiro canal 706 pode incluir uma ou mais regiões de análise 709 utilizadas para analisar a amostra. Por exemplo, em uma modalidade ilustrativa, o canal 706 inclui quatro regiões de análise 709 (por exemplo, conectadas em série ou em paralelo) que são utilizadas durante a análise da amostra. Tal como aqui descrito, cada uma das regiões de análise pode ser adaptada para detectar um ou mais dentre o iPSA, o fPSA, o tPSA e/ou a hK2.
[00140] Em determinadas modalidades, uma ou mais regiões de análise estão na forma de regiões serpenteantes (por exemplo, regi- ões que envolvem os canais serpenteantes). Uma região serpenteante pode, por exemplo, ser definida por uma área de pelo menos 0,25 mm2, de pelo menos 0,5 mm2, de pelo menos 0,75 mm2 ou de pelo menos 1,0 mm2, em que pelo menos 25%, 50% ou 75% da área da região serpenteante compreende um trajeto de detecção óptica. Um detector que permite a medição de um único sinal através de mais do que um segmento adjacente da região serpenteante pode ser posicio- nado adjacente à região serpenteante. Em alguns casos, o canal 706 é conectado fluidicamente a pelo menos duas regiões serpenteantes co- nectadas em série.
[00141] Tal como aqui descrito, o primeiro canal 706 e/ou o segun- do canal 707 podem ser utilizados para armazenar um ou mais rea- gentes (por exemplo, anticorpos de captura para o iPSA, o fPSA, o tP- SA e/ou a hK2) utilizados para processar e analisar a amostra antes do primeiro uso do cassete. Em algumas modalidades, os reagentes secos são armazenados em um canal ou seção de um cassete, e os reagentes úmidos são armazenados em um segundo canal ou seção do cassete. Alternativamente, duas seções ou canais separados de um cassete podem conter reagentes secos e/ou reagentes úmidos. Os reagentes podem ser armazenados e/ou dispostos, por exemplo, como um líquido, um gás, um gel, uma pluralidade de partículas ou uma pe- lícula. Os reagentes podem ser posicionados em qualquer porção a- propriada de um cassete, incluindo, mas sem limitação, em um canal, reservatório, uma superfície e ou uma membrana, que pode ser opcio- nalmente parte de uma área de armazenagem do reagente. Um rea- gente pode ser associado com um cassete (ou componentes de um cassete) de qualquer maneira apropriada. Por exemplo, os reagentes podem ser reticulados (por exemplo, covalente ou ionicamente), ser absorvidos ou adsorvidos (fisissorvidos) em uma superfície dentro do cassete. Em uma modalidade particular, toda ou uma porção de um canal (tal como uma passagem de fluido de um conector de fluido ou um canal do cassete) é revestida com um anticoagulante (por exem- plo, heparina). Em alguns casos, um líquido é contido dentro de um canal ou reservatório de um cassete antes do primeiro uso e/ou antes da introdução de uma amostra no cassete.
[00142] Em algumas modalidades, os reagentes armazenados po- dem incluir tampões fluidos posicionados em ordem linear de modo que, durante o uso, à medida que os fluidos fluem a uma região de análise, são distribuídos em uma sequência predeterminada. Um cas- sete projetado para executar um ensaio, por exemplo, pode incluir, em série, um fluido de enxágue, um fluido do anticorpo etiquetado, um fluido de enxágue e um fluido de amplificação, todos armazenados no mesmo. Embora os fluidos sejam armazenados, podem ser mantidos separados por meio de fluidos de separação substancialmente imiscí- veis (por exemplo, um gás tal como o ar), de modo que os reagentes fluidos que reagiriam normalmente entre si quando em contato podem ser armazenados em um canal comum.
[00143] Os reagentes podem ser armazenados em um cassete du- rante vários períodos de tempo. Por exemplo, um reagente pode ser armazenado por mais de 1 hora, por mais de 6 horas, por mais de 12 horas, por mais de 1 dia, por mais de 1 semana, por mais de 1 mês, por mais de 3 meses, por mais de 6 meses, por mais de 1 ano ou por mais de 2 anos. Opcionalmente, o cassete pode ser tratado de uma maneira apropriada a fim de prolongar o armazenamento. Por exem- plo, os cassetes que armazenam os reagentes contidos no mesmo podem ser vedados a vácuo, armazenados em um ambiente escuro e/ou armazenados a baixas temperaturas (por exemplo, abaixo de 0 grau C). A duração do armazenamento depende de um ou mais fato- res tais como os reagentes particulares utilizados, a forma dos reagen- tes armazenados (por exemplo, úmidos ou secos), as dimensões e os materiais utilizados para formar a(s) camada(s) do substrato e da tam- pa, o método de adesão da(s) camada(s) do substrato e da tampa e como o cassete é tratado ou armazenado como um todo. O armaze- namento de um reagente (por exemplo, um líquido ou um reagente seco) em um canal pode envolver a vedação da(s) entrada(s) e saí-
da(s) do canal antes do primeiro uso ou durante o acondicionamento do dispositivo.
[00144] Tal como ilustrado na modalidade exemplificadora mostra- da nas FIGS. 10 e 11A-11F, os canais 706 e 707 podem não estar em comunicação fluida entre si até que o conector fluídico 720 esteja aco- plado ao cassete 520. Em outras palavras, os dois canais, em algumas modalidades, não estão em comunicação fluida um com o outro antes do primeiro uso e/ou antes da introdução de uma amostra no cassete. Particularmente, como ilustrado, o canal substancialmente em formato de U 722 do conector 720 pode conectar de maneira fluida o primeiro e segundo canais 706, 707 de maneira tal que os reagentes no segun- do canal 707 podem passar através do canal em formato de U 522 e seletivamente se mover nas regiões de análise 709 no primeiro canal
706. Em outras modalidades, os dois canais 706 e 707 estão em co- municação fluida um com o outro antes do primeiro uso e/ou antes da introdução de uma amostra no cassete, mas o conector fluídico conec- ta adicionalmente os dois canais (por exemplo, para formar um siste- ma de circuito fechado) quando do primeiro uso.
[00145] Em algumas modalidades, um cassete aqui descrito pode incluir um ou mais canais microfluídicos, embora tais cassetes não se- jam limitados aos sistemas microfluídicos e possam se relacionar a outros tipos de sistemas fluídicos. Um cassete, um dispositivo, um a- parelho ou um sistema que seja microfluídico pode incluir, por exem- plo, pelo menos um canal de fluido que tem uma dimensão em seção transversal máxima de menos de 1 mm e uma razão entre o compri- mento e a dimensão em seção transversal maior de pelo menos 3:1.
[00146] A dimensão em seção transversal (por exemplo, um diâme- tro) do canal é medida perpendicularmente à direção do fluxo de fluido. A maior parte dos canais de fluido nos componentes dos cassetes aqui descritos tem dimensões em seção transversal máximas de menos do que 2 mm e em alguns casos, menos de 1 mm. Em um conjunto de modalidades, todos os canais de fluido de um cassete são microfluídi- cos ou têm uma dimensão em seção transversal de menos do que 2 mm ou 1 mm. Em outro conjunto de modalidades, a dimensão em se- ção transversal máxima do canal é menor do que 500 micra, menor do que 200 micra, menor do que 100 micra, menor do que 50 micra ou menor do que 25 micra. Em alguns casos, as dimensões do canal po- dem ser escolhidas de maneira tal que o fluido pode fluir livremente através do artigo ou substrato. As dimensões do canal também podem ser escolhidas, por exemplo, a fim de permitir uma determinada vazão volumétrica ou linear do fluido no canal. Naturalmente, o número de canais e o formato dos canais podem ser variados por qualquer méto- do apropriado conhecido pelos elementos versados na técnica. Em alguns casos, mais de um canal ou capilar pode ser utilizado.
[00147] Um canal pode incluir uma característica sobre ou em um artigo (por exemplo, um cassete) que direciona pelo menos parcial- mente o fluxo de um fluido. O canal pode ter qualquer formato em se- ção transversal apropriado (circular, oval, triangular, irregular, quadra- do ou retangular ou similares) e pode ser coberto ou descoberto. Nas modalidades em que é completamente coberto, pelo menos uma por- ção do canal pode ter uma seção transversal que é completamente envolvida, ou o canal inteiro pode ser completamente envolvido ao longo de seu comprimento inteiro, à exceção de sua entrada e saída. Um canal também pode ter uma razão de aspecto (entre o comprimen- to e a dimensão em seção transversal média) de pelo menos 2:1, mais tipicamente de pelo menos 3:1, de 5:1 ou de 10:1 ou mais.
[00148] Os cassetes aqui descritos podem incluir os canais ou segmentos do canal posicionados em um ou dois lados do cassete (ou de uma camada de substrato do cassete). Em alguns casos, os canais são formados em uma superfície do cassete. Os segmentos do canal podem ser conectados por um canal de intervenção que passa através do cassete. Em algumas modalidades, os segmentos do canal são uti- lizados para armazenar os reagentes no dispositivo antes do primeiro uso por um usuário final. A geometria específica dos segmentos do canal e as posições dos segmentos do canal dentro dos cassetes po- de permitir que os reagentes fluidos sejam armazenados por períodos de tempo prolongados sem se misturar, mesmo durante a manipula- ção rotineira dos cassetes, como durante o transporte dos cassetes, e os cassetes estão sujeitos a choque físico ou vibração.
[00149] Em determinadas modalidades, um cassete inclui os ele- mentos ópticos que são fabricados em um lado de um cassete oposto a uma série de canais fluídicos. Um “elemento óptico" é utilizado para se referir a uma característica formada ou posicionada sobre ou em um artigo ou cassete que é provido para e é utilizado para alterar a direção (por exemplo, através de refração ou reflexão), foco, polariza- ção e/ou outra propriedade da radiação eletromagnética incidente rela- tiva à luz incidente sobre o artigo ou cassete na ausência do elemento. Por exemplo, um elemento óptico pode compreender uma lente (por exemplo, côncava ou convexa), espelho, rede, sulco ou outra caracte- rística formada ou posicionada sobre ou em um cassete. Um cassete sem uma característica original, no entanto, não constituiria um ele- mento óptico, mesmo que uma ou mais propriedades da luz incidente pudessem ser alteradas sob interação com o cassete. Os elementos ópticos podem guiar a luz incidente que passa através do cassete de maneira tal que a maior parte da luz seja dispersa para longe das á- reas específicas do cassete, tais como as porções de intervenção en- tre os canais fluídicos. Ao diminuir a quantidade de luz incidente sobre estas porções de intervenção, a quantidade de ruído em um sinal de detecção pode ser diminuída ao utilizar determinados sistemas de de- tecção óptica. Em algumas modalidades, os elementos ópticos com-
preendem sulcos triangulares formados sobre ou em uma superfície do cassete. O ângulo de saída dos sulcos triangulares pode ser esco- lhido de maneira tal que a luz incidente normal à superfície do cassete seja redirecionada a um ângulo dependente dos índices de refração do meio externo (por exemplo, ar) e do material do cassete. Em algumas modalidades, um ou mais elementos ópticos são posicionados entre segmentos adjacentes de uma região serpenteante de uma região de análise.
[00150] Um cassete ou porções deste podem ser fabricados de qualquer material apropriado para formar um canal ou outro compo- nente. Exemplos não limitadores de materiais incluem polímeros (por exemplo, polietileno, poliestireno, metacrilato de polimetila, policarbo- nato, poli(dimetilsiloxano), PVC, PTFE, PET e um copolímero de ciclo- olefina), vidro, quartzo e silício. O material que forma o cassete e todos os componentes associados (por exemplo, uma tampa) pode ser duro ou flexível. Os elementos versados na técnica podem prontamente se- lecionar o(s) material(is) apropriado(s) com base, por exemplo, em sua rigidez, inércia (por exemplo, liberdade de degradação) a um fluido a ser passado, sua robustez a uma temperatura em que um dispositivo particular deve ser utilizado, sua transparência/opacidade à luz (por exemplo, nas regiões ultravioletas e visíveis) e/ou no método utilizado para fabricar as características do material. Por exemplo, para os arti- gos extrusados ou moldados a injeção, o material utilizado pode incluir um material termoplástico (por exemplo, polipropileno, policarbonato, acrilonitrilo-butadieno-estireno, náilon 6), um elastômero (por exemplo, poli-isopreno, isobuteno-isopreno, nitrilo, neopreno, etileno-propileno, Hypalon, silicone), um material consolidado a quente (por exemplo, epóxi, poliésteres insaturados, fenólicos) ou combinações destes. Tal como descrito em mais detalhes a seguir, os cassetes que incluem dois ou mais componentes ou camadas podem ser formados em mate-
riais diferentes a fim de adaptar os componentes à(s) função(ões) principal(is) de cada um dos componentes, por exemplo, com base nos fatores descritos acima e abaixo.
[00151] Em algumas modalidades, o material e as dimensões (por exemplo, a espessura) de um cassete e/ou tampa são escolhidos de maneira tal que sejam substancialmente impermeáveis ao vapor de água. Por exemplo, um cassete projetado para armazenar um ou mais fluidos no mesmo antes do primeiro uso pode incluir uma tampa que compreende um material conhecido por prover uma barreira elevada ao vapor, tal como folha de metal, certos polímeros, certas cerâmicas e combinações destes. Os exemplos de materiais que têm baixa per- meabilidade ao vapor de água são providos abaixo. Em outros casos, o material é escolhido com base, pelo menos em parte, no formato e/ou configuração do cassete. Por exemplo, determinados materiais podem ser utilizados para formar dispositivos planares, visto que ou- tros materiais são mais apropriados para formar dispositivos que são curvados ou têm um formato irregular.
[00152] Em alguns exemplos, um cassete é compreendido de uma combinação de dois ou mais materiais, tais como os relacionados aci- ma. Por exemplo, os canais do cassete podem ser formados em poli- estireno ou outros polímeros (por exemplo, por meio de moldagem a injeção) e uma fita adesiva biocompatível pode ser utilizadas para ve- dar os canais. A fita adesiva biocompatível ou o material flexível pode incluir um material conhecido por aprimorar as propriedades de barrei- ra ao vapor (por exemplo, folha de metal, polímeros ou outros materi- ais conhecidos por ter barreiras elevadas ao vapor) e pode opcional- mente permitir acesso às entradas e saídas ao puncionar ou remover a fita adesiva. Uma variedade de métodos pode ser utilizada para ve- dar um canal microfluídico ou porções de um canal ou para unir múlti- plas camadas de um dispositivo, incluindo, mas sem limitação, o uso de adesivos, de fitas adesivas, cola, ligação, laminação dos materiais ou por meio de métodos mecânicos (por exemplo, por meio mecanis- mos de aperto, pressão etc.).
[00153] Em alguns exemplos, um cassete compreende uma combi- nação de dois ou mais componentes separados (por exemplo, cama- das ou cassetes) montados juntos. Redes de canal independentes (tais como as seções 571 e 577 da FIG. 5), que podem incluir opcio- nalmente reagentes armazenados na mesma antes do primeiro uso, podem ser incluídas sobre ou nos componentes diferentes do cassete. Os componentes separados podem ser montados juntos ou então as- sociados uns com os outros por meio de qualquer dispositivo apropria- do, como pelos métodos aqui descritos, por exemplo, para formar um único cassete (composto). Em algumas modalidades, duas ou mais redes de canal são posicionadas em componentes ou camadas do cassete diferentes e não são conectadas fluidicamente antes do pri- meiro uso, mas são conectadas fluidicamente quando do primeiro uso, por exemplo, pelo uso de um conector fluídico. Em outras modalida- des, duas ou mais redes de canal são conectadas fluidicamente antes do primeiro uso.
[00154] Vantajosamente, cada um dos componentes ou camadas diferentes que formam um cassete composto pode ser adaptado indi- vidualmente, dependendo da(s) função(ões) projetada(s) desse com- ponente ou camada. Por exemplo, em um conjunto de modalidades, um componente de um cassete composto pode ser adaptado para ar- mazenar reagentes úmidos. Em algumas tais modalidades, esse com- ponente pode ser formado em um material que tem uma permeabilida- de relativamente baixa ao vapor. Adicional ou alternativamente, por exemplo, dependendo da quantidade dos fluidos a serem armazena- dos, a(s) região(ões) de armazenamento desse cassete pode(m) ser feita(s) com dimensões em seção transversal maiores do que os ca-
nais ou regiões de outros componentes não utilizados para a armaze- nagem dos líquidos. O material utilizado para formar o cassete pode ser compatível com as técnicas de fabricação apropriadas para formar dimensões em seção transversal maiores. Em contraste, um segundo componente que pode ser adaptado para a detecção de um análito pode, em algumas modalidades, incluir as porções do canal que têm dimensões em seção transversal menores. As dimensões em seção transversal menores podem ser úteis, por exemplo, em determinadas modalidades, para permitir mais tempo de contato entre os fluidos que fluem no canal (por exemplo, em uma solução do reagente ou em um fluido de lavagem) e um análito ligado a uma superfície do canal, para um dado volume de fluido. Adicional ou alternativamente, uma porção do canal do segundo componente pode ter uma aspereza de superfí- cie inferior (por exemplo, para aumentar a razão entre o sinal e o ruído durante a detecção) em comparação a uma porção do canal de outro componente. As dimensões em seção transversal menores ou a aspe- reza de superfície inferior das porções do canal do segundo compo- nente podem, em determinadas modalidades, requerer uma determi- nada técnica de fabricação ou ferramenta de fabricação diferente da- quela utilizada para formar um componente diferente do cassete. Além disso, em algumas modalidades particulares, o material utilizado para o segundo componente pode ser bem caracterizado para a fixação e detecção da proteína. Como tal, pode ser vantajoso formar porções dos canais diferentes utilizadas para finalidades diferentes em compo- nentes diferentes de um cassete, as quais podem então ser unidas antes do uso por um usuário pretendido. Outras vantagens, caracterís- ticas dos componentes e exemplos são providos abaixo.
[00155] As FIGS. 11B-11E mostram um dispositivo que pode incluir múltiplos componentes ou camadas 520B e 520C que são combinados para formar um único cassete. Como mostrado nestas modalidades ilustrativas, o componente 520B pode incluir um primeiro lado 521A e um segundo lado 521B. O componente 520C pode incluir um primeiro lado 522A e um segundo lado 522B. Os componentes ou as peças do dispositivo aqui descritos como os canais ou outras entidades podem ser formados em, sobre ou no primeiro lado de um componente, em um segundo lado de um componente e/ou através do componente, em algumas modalidades. Por exemplo, como mostrado ilustrativamente na FIG. 11C, o componente 520C pode incluir um canal 706 que tem uma entrada e uma saída e pode ser formado em um primeiro materi- al. O canal 706 pode ter qualquer configuração apropriada, tal como aqui descrito, e pode incluir, por exemplo, uma ou mais regiões de ar- mazenagem do reagente, regiões de análise, regiões de contenção líquida, regiões de mistura e outras ainda. Em algumas modalidades, o canal 706 não é formado através da espessura inteira do componente 520B. Isto é, o canal pode ser formado sobre ou em um lado do com- ponente. O canal 706 pode ser opcionalmente incluído por uma tampa, tal como aqui descrito, como uma fita adesiva (não mostrada), outro componente ou camada do cassete ou outro componente apropriado. Em outras modalidades, o canal 706 é formado através da espessura inteira do componente 520B, e as tampas são requeridas em ambos os lados do cassete para incluir o canal. Tal como aqui descrito, dife- rentes camadas ou componentes podem incluir regiões de análise di- ferentes, para a determinação da espécie dentro de uma amostra. Por exemplo, os anticorpos de captura para iPSA, fPSA, tPSA e/ou hK2 podem ser posicionados em regiões de análise diferentes, opcional- mente em diferentes componentes ou camadas de um cassete, tal como mostrado.
[00156] O componente 520B pode incluir o canal 707 que tem uma entrada e uma saída e pode ser formado em um segundo material, que pode ser igual ou diferente do primeiro material. O canal 707 tam-
bém pode ter qualquer configuração apropriada, tal como aqui descri- to, e pode ser formado ou não através da espessura inteira do compo- nente 520C. O canal 707 pode ser envolvido por uma ou mais tampas. Em alguns casos, a tampa não é um componente que inclui um ou mais canais fluídicos, tal como o componente 520C. Por exemplo, a tampa pode ser uma fita adesiva biocompatível ou outra superfície po- sicionada entre os componentes 520B e 520C. Em outras modalida- des, o canal 707 pode ser substancialmente envolvido pelo componen- te 520C. Isto é, a superfície 522A do componente 520C pode formar uma porção do canal 707, uma vez que os componentes 520B e 520C se encontram diretamente adjacentes um ao outro.
[00157] Tal como mostrado ilustrativamente nas FIGS. 11D e 11E, os componentes 520B e 520C podem ser substancialmente planares e podem se encontrar um em cima do outro. No entanto, geralmente, dois ou mais componentes que formam um cassete podem se encon- trar em qualquer configuração apropriada entre si. Em alguns casos, os componentes se encontram adjacentes um ao outro (por exemplo, lado a lado, um em cima do outro). Os primeiros componentes podem se sobrepor completamente, ou apenas as porções dos componentes podem se sobrepor umas às outras. Por exemplo, como mostrado ilus- trativamente nas FIGS. 11D e 11E, o componente 520C pode se es- tender além do componente 520B, de maneira tal que uma porção do componente 520C não é sobreposta ou coberta pelo componente 520B. Em alguns casos, esta configuração pode ser vantajosa quando o componente 520C é substancialmente transparente e requer que a luz viaje através de uma porção do componente (por exemplo, uma área de reação, uma região de análise ou uma região de detecção) e quando o componente 520B é opaco ou menos transparente do que o componente 520C.
[00158] Além disso, o primeiro e o segundo componentes podem incluir qualquer formato e/ou configuração apropriados. Por exemplo, em algumas modalidades, o primeiro componente inclui uma caracte- rística complementar a uma característica do segundo componente, de modo a formar uma conexão não fluídica entre o primeiro e o segundo componentes. As características complementares podem, por exem- plo, ajudar no alinhamento do primeiro e segundo componentes duran- te a montagem.
[00159] O primeiro e o segundo componentes podem ser integral- mente conectados um ao outro em algumas modalidades. Tal como aqui utilizado, o termo "conectado integralmente", quando se refere a dois ou mais objetos, significa os objetos que não se tornam separa- dos um do outro durante o uso normal, por exemplo, não podem ser separados manualmente; a separação requer pelo menos o uso de ferramentas e/ou a ação de causar danos a pelo menos um dos com- ponentes, por exemplo, por meio de quebra, remoção ou separação dos componentes unidos um ao outro através de adesivos ou de fer- ramentas. Os componentes conectados integralmente podem ser irre- versivelmente unidos um ao outro durante o uso normal. Por exemplo, os componentes 520B e 520C podem ser integralmente conectados pelo uso de um adesivo ou por meio de outros métodos de ligação. Em outras modalidades, dois ou mais componentes de um cassete podem ser reversivelmente unidos uns aos outros.
[00160] Tal como aqui descrito, em algumas modalidades, pelo me- nos um primeiro componente e um segundo componente que formam um cassete composto podem ser formados em materiais diferentes. O sistema pode ser projetado de maneira tal que o primeiro componente inclua um primeiro material que ajude ou intensifique uma ou mais fun- cionalidades do primeiro componente. Por exemplo, se o primeiro componente for projetado para armazenar um reagente líquido (por exemplo, em um canal do componente) antes do primeiro uso por um usuário (por exemplo, por pelo menos um dia, uma semana, um mês ou um ano), o primeiro material poderá ser escolhido para ter uma permeabilidade relativamente baixa ao vapor, para reduzir a quantida- de de evaporação do líquido armazenado com o tempo. Deve-se com- preender, no entanto, que os mesmos materiais podem ser utilizados para múltiplos componentes (por exemplo, camadas) de um cassete em algumas modalidades. Por exemplo, o primeiro e o segundo com- ponentes de um cassete podem ser formados em um material que tem uma permeabilidade baixa ao vapor de água.
[00161] Em determinadas modalidades, o primeiro e o segundo componentes de um cassete têm graus diferentes de claridade óptica. Por exemplo, um primeiro componente pode ser substancialmente o- paco e um segundo componente pode ser substancialmente transpa- rente. O componente substancialmente transparente pode ser apropri- ado para a detecção óptica de uma amostra ou análito contido dentro do componente.
[00162] Em um conjunto de modalidades, um material utilizado para formar um componente (por exemplo, um primeiro ou segundo com- ponente) de um cassete tem uma transmissão óptica maior do que 90% entre 400 e 800 nm de comprimento de onda de luz (por exem- plo, luz na faixa visível). A transmissão óptica pode ser medida através de um material que tem uma espessura de, por exemplo, cerca de 2 mm (ou em outras modalidades, cerca de 1 mm ou cerca de 0,1 mm). Em alguns exemplos, a transmissão óptica é maior do que 80%, maior do que 85%, maior do que 88%, maior do que 92%, maior do que 94% ou maior do que 96% entre 400 e 800 nm de comprimento de onda de luz. Outro componente do dispositivo pode ser formado em um materi- al que tem uma transmissão óptica menor do que 96%, menor do que 94%, menor do que 92%, menor do que 90%, menor do que 85%, me- nor do que 80%, menor do que 50%, menor do que 30% ou menor do que 10% entre 400 e 800 nm de comprimento de onda de luz.
[00163] Tal como aqui descrito, em algumas modalidades, um canal de um primeiro componente de um cassete não está em comunicação fluida com um canal de um segundo componente de um cassete antes do primeiro uso por um usuário. Por exemplo, mesmo após o acopla- mento dos dois componentes, como mostrado ilustrativamente na FIG. 11D, os canais 706 e 707 não estão em comunicação fluida um com o outro. No entanto, o cassete pode incluir adicionalmente outras partes ou componentes, tais como o elemento de alinhamento do conector fluídico 702 (FIG. 11E), que pode unir o primeiro e/ou o segundo com- ponentes 520B e 520C ou a outras porções do cassete. Tal como aqui descrito, o elemento de alinhamento do conector fluídico pode ser con- figurado para receber e acoplar-se com o conector fluídico 720, que pode permitir uma comunicação fluida entre os canais 706 e 707 do primeiro e segundo componentes, respectivamente. Por exemplo, o conector fluídico pode incluir uma passagem de fluido que inclui uma entrada para a passagem de fluido e uma saída para a passagem de fluido, em que a entrada para a passagem de fluido pode ser fluidica- mente conectada à saída do canal 706, e a saída para a passagem de fluido podem ser fluidicamente conectada à entrada do canal 707 (ou vice-versa). A passagem de fluido do conector fluídico pode ter qual- quer comprimento apropriado (por exemplo, pelo menos 1 cm, pelo menos 2 cm, pelo menos 3 cm, pelo menos 5 cm) para conectar os canais. O conector fluídico pode ser parte de um kit junto com um cas- sete e pode ser acondicionado de maneira tal que o conector fluídico não conecte fluidicamente os canais 706 e 707.
[00164] Um conector fluídico pode ter qualquer configuração apro- priada com respeito a um cassete ou componentes de um cassete. Como mostrado ilustrativamente na FIG. 11E, quando da conexão do conector fluídico ao cassete, o conector fluídico pode ser posicionado em um lado de um componente (por exemplo, o componente 520B) oposto a outro componente (por exemplo, o componente 520C). Em outras modalidades, um conector fluídico pode ser posicionado entre dois componentes de um cassete. Por exemplo, o conector fluídico pode ser um componente ou uma camada posicionada entre (por e- xemplo, comprimido entre) dois componentes do cassete. Outras con- figurações também são possíveis.
[00165] Embora grande parte da descrição da presente invenção se refira a um cassete que tem um ou mais componentes ou camadas incluindo redes de canal, em outras modalidades, um cassete pode incluir mais de 2, mais de 3 ou mais de 4 tais componentes ou cama- das. Por exemplo, como mostrado ilustrativamente na FIG. 11F, um cassete pode incluir os componentes 520B, 520C, 520D e 520E, cada um incluindo pelo menos um canal ou rede de canais. Em alguns e- xemplos, o(s) canal(is) de um ou mais componentes (por exemplo, 2, 3, ou todos os componentes) pode(m) ser fluidicamente desconecta- do(s) antes do primeiro uso, mas pode(m) ser conectado(s) fluidica- mente quando do primeiro uso, por exemplo, pelo uso de um conector fluídico. Em outras modalidades, o(s) canal(is) de um ou mais compo- nentes (por exemplo, 2, 3, ou todos os componentes) é(são) conecta- do(s) fluidicamente antes do primeiro uso.
[00166] Tal como aqui descrito, cada um dos componentes ou das camadas de um cassete pode ser projetado para ter uma função es- pecífica que é diferente de uma função de outro componente do cas- sete. Em outras modalidades, dois ou mais componentes podem ter a mesma função. Por exemplo, como mostrado na modalidade ilustrativa da FIG. 11F, cada um dos componentes 520C, 520D e 520E pode ter uma ou múltiplas regiões de análise 709 conectadas em série. Quando da conexão do conector fluídico 722 ao cassete composto, as porções de uma amostra (ou de múltiplas amostras) podem ser introduzidas na rede de canal em cada um dos componentes 520C, 520D e 520E para executar múltiplas análises. Por exemplo, cada uma das regiões de análise pode incluir um ou mais parceiros de ligação para detectar um ou mais dentre o iPSA, o fPSA, o tPSA e/ou a hK2 (por exemplo, anti- corpos de captura para o iPSA, o fPSA, o tPSA e/ou a hK2). Tal como aqui descrito, em algumas modalidades, o uso de anticorpos de captu- ra e/ou a separação de anticorpos de captura específicos em regiões de análise diferentes podem permitir o uso do mesmo anticorpo de de- tecção para a detecção de cada uma das espécies. Em algumas tais modalidades, o mesmo comprimento de onda pode ser utilizado para determinar cada uma das espécies. Isto pode permitir o uso de detec- tores simplificados e/ou de componentes ópticos para a detecção. Por exemplo, em algumas modalidades, a detecção envolve a acumulação de um material opaco em regiões de análise diferentes que podem ser determinadas em um comprimento de onda particular.
[00167] Em algumas modalidades, pelo menos o primeiro e o se- gundo componentes de um cassete podem ser parte de um dispositivo ou de um kit utilizado para a determinação de uma condição química ou biológica particular. O dispositivo ou kit pode incluir, por exemplo, um primeiro componente, que compreende um primeiro canal em um primeiro material, cujo primeiro canal inclui uma entrada, uma saída e, entre a primeira entrada e saída, pelo menos uma porção que tem uma dimensão em seção transversal maior do que 200 micra. O dis- positivo ou kit também pode incluir um segundo componente que com- preende um segundo canal em um segundo material, em que o se- gundo canal inclui uma entrada, uma saída e, entre a segunda entrada e saída, pelo menos uma porção que tem uma dimensão em seção transversal menor do que 200 micra. Em alguns casos, o dispositivo ou kit é acondicionado de maneira tal que o primeiro e o segundo componentes são conectados um ao outro. Por exemplo, o primeiro e o segundo componentes podem ser integralmente conectados um ao outro. Em outras modalidades, o primeiro e o segundo componentes são unidos reversivelmente um ao outro. O dispositivo ou kit pode in- cluir adicionalmente um conector fluídico para conectar fluidicamente o primeiro e segundo canais, cujo conector fluídico compreende uma passagem de fluido, incluindo uma entrada para a passagem de fluido e uma saída para a passagem de fluido, em que a entrada para a pas- sagem de fluido pode ser fluidicamente conectada à saída do primeiro canal, e a saída para a passagem de fluido pode ser fluidicamente co- nectada à entrada do segundo canal. Em algumas modalidades, o dis- positivo ou kit é acondicionado de maneira tal que o conector fluídico não conecta fluidicamente o primeiro e segundo canais no pacote. Quando do primeiro uso do dispositivo por um usuário pretendido, o conector fluídico pode ser utilizado para trazer o primeiro e segundo canais em comunicação fluida um com o outro.
[00168] Um cassete aqui descrito pode ter qualquer volume apro- priado para realizar uma análise tal como uma reação química e/ou biológica ou outro processo. O volume inteiro de um cassete inclui, por exemplo, todas as áreas de armazenagem do reagente, as regiões de análise, as regiões de contenção líquida, as áreas de resíduos, bem como quaisquer conectores fluidos e canais fluídicos associados com os mesmos. Em algumas modalidades, pequenas quantidades de rea- gentes e de amostras são utilizadas, e o volume inteiro do dispositivo fluídico é, por exemplo, menor do que 10 ml, 5 ml, 1 ml, 500 µl, 250 µl, 100 µl, 50 µl, 25 µl, 10 µl, 5 µl ou 1 µl.
[00169] Um cassete aqui descrito pode ser portátil e, em algumas modalidades, pode ser carregado manualmente. O comprimento e/ou a largura do cassete podem ser, por exemplo, menores do que ou i- guais a 20 cm, 15 cm, 10 cm, 8 cm, 6 cm ou 5 cm. A espessura do cassete pode ser, por exemplo, menor do que ou igual a 5 cm, 3 cm, 2 cm, 1 cm, 8 mm, 5 mm, 3 mm, 2 mm ou 1 mm. Vantajosamente, os dispositivos portáteis podem ser apropriados para o uso em instala- ções de testes diagnósticos.
[00170] Deve ser compreendido que os cassetes e seus componen- tes respectivos aqui descritos são exemplificadores e que outras confi- gurações e/ou tipos de cassetes e componentes podem ser utilizados com os sistemas e métodos aqui descritos.
[00171] Os métodos e sistemas aqui descritos podem envolver uma variedade de tipos diferentes de análises e podem ser utilizados para a determinação de uma variedade de amostras diferentes. Em alguns casos, uma análise envolve uma reação química e/ou biológica. Em algumas modalidades, uma reação química e/ou biológica envolve a ligação. Diferentes tipos de ligação podem ocorrer nos cassetes aqui descritos. A ligação pode envolver a interação entre um par de molé- culas correspondente (por exemplo, parceiros de ligação) que exibem afinidade mútua ou capacidade de ligação, tipicamente ligação ou inte- ração específica ou não específica, incluindo interações bioquímicas, fisiológicas e/ou farmacêuticas. A ligação biológica define um tipo de interação que ocorre entre pares de moléculas (por exemplo, parceiros de ligação) incluindo proteínas, ácidos nucleicos, glicoproteínas, car- boidratos, hormônios e outros ainda. Exemplos específicos incluem anticorpo/antígeno, fragmento/antígeno de anticorpo, anticorpo, anti- corpo/hapteno, fragmento/hapteno de anticorpo enzima/cofator, prote- ína/substrato de ligação, proteína/substrato do portador, lecti- na/carboidrato, receptor/hormônio, receptor/efetor, cordões comple- mentares de ácidos nucleicos, repressor/indutor de proteína/ácido nu- cleico, receptor da superfície do ligando/da célula, vírus/ligando etc. A ligação também pode ocorrer entre proteínas ou outros componentes e células. Além disso, os dispositivos aqui descritos podem ser utilizados para outras análises de fluidos (que podem envolver ou não ligação e/ou reações) tal como a detecção dos componentes, a concentração etc.
[00172] Em alguns casos, uma reação heterogênea (ou ensaio) po- de ocorrer em um cassete; por exemplo, um parceiro de ligação pode ser associado com uma superfície de um canal e o parceiro de ligação complementar pode estar presente na fase fluida. Outros ensaios de fase sólida que envolvem a reação de afinidade entre proteínas ou ou- tros biomoléculas (por exemplo, DNA, RNA, carboidratos) ou molécu- las que não ocorrem naturalmente, também podem ser executados. Exemplos não limitadores das reações típicas que podem ser execu- tadas em um cassete incluem reações químicas, reações enzimáticas, reações imunobaseadas (por exemplo, antígeno-anticorpo) e reações com base em células.
[00173] Os fluidos típicos da amostra incluem fluidos fisiológicos tais como o sangue inteiro humano ou animal, soro do sangue, plasma do sangue, sêmen, lágrimas, urina, suor, saliva, fluido cerebroespinal, secreções vaginais; fluidos in vitro utilizados em pesquisa ou fluidos ambientais tais como os líquidos aquosos suspeitos de estarem con- taminados pelo análito.
[00174] Em algumas modalidades, um ou mais reagentes que po- dem ser utilizados para a determinação de um análito de uma amostra (por exemplo, um parceiro de ligação do análito a ser determinado) são armazenados em um canal ou câmara de um cassete antes do primeiro uso a fim de executar um teste ou ensaio específico. Nos ca- sos em que um antígeno é analisado, um anticorpo ou um aptâmero correspondente pode ser o parceiro de ligação associado com uma superfície de um canal microfluídico. Se um anticorpo for o análito, en- toa um antígeno ou um aptâmero apropriado pode ser o parceiro de ligação associado com a superfície. Quando uma condição de doença está sendo determinada, pode-se preferir colocar o antígeno sobre a superfície e testá-lo quanto a um anticorpo que é produzido no indiví- duo. Deve ser apreciado que, embora os anticorpos sejam aqui men- cionados, os fragmentos do anticorpo podem ser utilizados em combi- nação com ou no lugar dos anticorpos.
[00175] Em algumas modalidades, um cassete é adaptado e arran- jado para executar uma análise que envolve a acumulação de um ma- terial opaco em uma região de um canal microfluídico, expondo a regi- ão à luz, e a determinação da transmissão da luz através do material opaco. Um material opaco pode incluir uma substância que interfere no transmitância da luz em um ou mais comprimentos de onda. Um material opaco não refrata meramente a luz, mas reduz a quantidade de transmissão através do material, por exemplo, por meio da absor- ção ou reflexão da luz. Materiais opacos diferentes ou diferentes quan- tidades de um material opaco podem permitir uma transmitância de menos do que, por exemplo, 90, 80, 70, 60, 50, 40, 30, 20, 10 ou 1 por cento da luz que ilumina o material opaco. Exemplos de materiais opa- cos incluem camadas moleculares de metal (por exemplo, metal ele- mentar), camadas cerâmicas, camadas poliméricas e camadas de uma substância opaca (por exemplo, uma tinta). O material opaco po- de, em alguns casos, ser um metal que pode ser depositado não ele- troliticamente. Estes metais podem incluir, por exemplo, prata, cobre, níquel, cobalto, paládio e platina.
[00176] Um material opaco que se forma em um canal pode incluir uma série de partículas independentes e descontínuas que formam, em conjunto, uma camada opaca, mas em uma modalidade, é um ma- terial contínuo que assume geralmente um formato planar. O material opaco pode ter uma dimensão (por exemplo, uma largura do compri- mento), por exemplo, maior do que ou igual a 1 mícron, maior do que ou igual a 5 micra, maior do que 10 micra, maior do que ou igual a 25 micra ou maior do que ou igual a 50 micra. Em alguns casos, o materi-
al opaco se estende através da largura do canal (por exemplo, uma região de análise) contendo o material opaco. A camada opaca pode ter uma espessura de, por exemplo, menos do que ou igual a 10 mi- cra, menos do que ou igual a 5 micra, menos do que ou igual a 1 mí- cron, menos do que ou igual a 100 nanômetros ou menos do que ou igual a 10 nanômetros. Mesmo nestas pequenas espessuras, uma mudança detectável na transmitância pode ser obtida. A camada opa- ca pode prover um aumento na sensibilidade do ensaio quando com- parada às técnicas que não formam uma camada opaca.
[00177] Em um conjunto de modalidades, um cassete aqui descrito é utilizado para executar um imunoensaio (por exemplo, para a deter- minação de tPSA, iPSA, fPSA e/ou hK2) e, opcionalmente, utiliza o realce de prata para a amplificação do sinal. Em tal imunoensaio, após a entrega de uma amostra contendo um marcador do sangue a ser detectado nas regiões de análise, pode ocorrer a ligação entre o mar- cador do sangue e o parceiro de ligação correspondente. Um ou mais reagentes, que podem ser opcionalmente armazenados em um canal do dispositivo antes do uso, podem então fluir sobre este complexo do par de ligação. Um dos reagentes armazenados pode incluir uma solu- ção que contém um ou mais coloides de metal que se ligam ao antíge- no a ser detectado. Por exemplo, um anticorpo etiquetado por ouro que é anti-PSA e anti-hK2 pode ser utilizado para detectar cada um dentre o iPSA, o fPSA, o tPSA e/ou a hK2. Em outro exemplo, uma mistura de anticorpos etiquetados por ouro, tal como um anticorpo an- ti-hK2 etiquetado por ouro, anticorpo anti-PSA etiquetado por ouro e/ou anticorpo anti-iPSA etiquetado por ouro pode ser utilizado para a detecção. Tais reagentes podem ser armazenados no cassete, por e- xemplo, antes do uso. O coloide de metal pode prover uma superfície catalítica para a deposição de um material opaco, tal como uma ca- mada de metal (por exemplo, prata), em uma superfície de uma ou mais regiões de análise. A camada de metal pode ser formada utili- zando um sistema de dois componentes: um precursor de metal (por exemplo, uma solução de sais de prata) e um agente redutor (por e- xemplo, hidroquinona, cloroidroquinona, pirogalol, metol, 4-aminofenol e fenidona), que podem ser opcionalmente armazenados em canais diferentes antes do uso.
[00178] À medida que um diferencial de pressão positivo ou negati- vo é aplicado ao sistema, as soluções de sais de prata e redutoras po- dem se misturar (por exemplo, podem se fundir em uma interseção de canal) e então fluem sobre a região de análise. Portanto, se ocorre a ligação entre o anticorpo e o antígeno na região de análise, o fluxo da solução do precursor de metal através da região pode resultar na for- mação de uma camada opaca, tal como uma camada de prata, devido à presença do coloide de metal catalítico associado com o complexo do anticorpo-antígeno. A camada opaca pode incluir uma substância que interfere na transmitância da luz em um ou mais comprimentos de onda. Uma camada opaca que é formada no canal pode ser detectada opticamente, por exemplo, ao medir uma redução na transmitância da luz através de uma porção da região de análise (por exemplo, uma re- gião de canal serpentina) em comparação a uma porção de uma área que não inclui o anticorpo ou o antígeno. Alternativamente, um sinal pode ser obtido ao medir a variação da transmitância da luz como uma função do tempo, uma vez que a película está sendo formada em uma região de análise. A camada opaca pode prover um aumento na sen- sibilidade do ensaio quando comparada às técnicas que não formam uma camada opaca. Além disso, várias químicas de amplificação que produzem sinais ópticos (por exemplo, absorbância, fluorescência, quimioluminescência de fulgor ou de evaporação, eletroquimiolumi- nescência), sinais elétricos (por exemplo, resistência ou condutividade das estruturas de metal criadas por um processo não eletrolítico) ou sinais magnéticos (por exemplo, grânulos magnéticos) podem ser utili- zados para permitir a detecção de um sinal por um detector.
[00179] Vários tipos de fluidos podem ser utilizados com os casse- tes aqui descritos. Tal como aqui descrito, os fluidos podem ser intro- duzidos no cassete no primeiro uso e/ou ser armazenados dentro do cassete antes do primeiro uso. Os fluidos incluem líquidos tais como solventes, soluções e suspensões. Os fluidos também incluem gases e misturas de gases. Quando múltiplos fluidos são contidos em um cas- sete, os fluidos podem ser separados por um outro fluido que é de pre- ferência substancialmente imiscível em cada um dos primeiros dois fluidos. Por exemplo, se um canal contiver duas soluções aquosas di- ferentes, um tampão de separação de um terceiro fluido pode ser substancialmente imiscível em ambas as soluções aquosas. Quando as soluções aquosas devem ser mantidas separadas, os fluidos subs- tancialmente imiscíveis que podem ser utilizados como separadores podem incluir gases tais como o ar ou o nitrogênio ou fluidos hidrofóbi- cos que são substancialmente imiscíveis com os fluidos aquosos. Os fluidos também podem ser escolhidos com base na reatividade do flui- do com os fluidos adjacentes. Por exemplo, um gás inerte tal como o nitrogênio pode ser utilizado em algumas modalidades e pode ajudar a preservar e/ou a estabilizar todos os fluidos adjacentes. Um exemplo de um líquido substancialmente imiscível para separar soluções aquo- sas é a perfluorodecalina. A escolha de um fluido separador também pode ser feita com base em outros fatores, incluindo qualquer efeito que o fluido separador possa ter sobre a tensão de superfície dos tampões de fluidos adjacentes. Pode-se preferir maximizar a tensão de superfície dentro de qualquer tampão de fluido para promover a reten- ção do tampão de fluido como uma única unidade contínua sob condi- ções ambientais variadas, tais como variações de vibração, choque e temperatura. Os fluidos separadores também podem ser inertes a uma região de análise à qual os fluidos serão providos. Por exemplo, se uma região de análise incluir um parceiro de ligação biológico, um flui- do separador tal como o ar ou o nitrogênio poderá não ter quase ne- nhum efeito sobre o parceiro de ligação. O uso de um gás (por exem- plo, o ar) como um fluido separador também pode prover espaço para a expansão dentro de um canal de um dispositivo fluídico caso os lí- quidos contidos no dispositivo devam se expandir ou contrair devido a mudanças tais como as variações de temperatura (incluindo o conge- lamento) ou de pressão.
[00180] O analisador de amostra microfluídica pode incluir uma fon- te de fluxo de fluido (por exemplo, um sistema de controle de pressão) que pode ser conectada de maneira fluida aos canais 706, 707, 722 para pressurizar os canais para mover a amostra e/ou outros reagen- tes através dos canais. Particularmente, a fonte de fluxo de fluido pode ser configurada para mover inicialmente uma amostra e/ou reagente a partir do canal substancialmente em formato de U 722 ao primeiro ca- nal 706. A fonte de fluxo de fluido também pode ser utilizada para mo- ver os reagentes no segundo canal 707 através do canal substancial- mente em formato de U 722 e ao primeiro canal 706. Após a amostra e os reagentes passarem através das regiões de análise 709 e serem analisados, a fonte de fluxo de fluido 540 poderá ser configurada para mover os fluidos ao material absorvente 717 do cassete. Em uma mo- dalidade, a fonte de fluxo de fluido é um sistema a vácuo. Deve-se compreender, no entanto, que outras fontes de fluxo de fluido tais co- mo válvulas, bombas e/ou outros componentes podem ser utilizadas. Como aqui descrito, em algumas modalidades, uma fonte de vácuo pode ser utilizado para dirigir o fluxo de fluido. Uma fonte de vácuo pode incluir uma bomba, tal como uma bomba de diafragma o- perada por solenoide. Em outras modalidades, o fluxo de fluido pode ser dirigido/controlado através do uso de outros tipos de bombas ou de fontes de fluxo de fluido. Por exemplo, em uma modalidade, uma bomba de seringa pode ser utilizada para criar um vácuo ao puxar o acionador da seringa em uma direção para fora. Em outras modalida- des, uma pressão positiva é aplicada a uma ou mais entradas do cas- sete para a provisão de uma fonte de fluxo de fluido.
[00181] Em algumas modalidades, o fluxo de fluido ocorre ao apli- car uma queda de pressão não zero substancialmente constante (isto é, ∆P) através de uma entrada e de uma saída de um cassete. Em um conjunto de modalidades, uma análise inteira é executada ao aplicar uma queda de pressão não zero substancialmente constante (isto é, ∆P) através de uma entrada e de uma saída de um cassete. Uma queda de pressão não zero substancialmente constante pode ser obti- da, por exemplo, ao aplicar uma pressão positiva na entrada ou uma pressão reduzida (por exemplo, um vácuo) na saída. Em alguns casos, uma queda de pressão não zero substancialmente constante é obtida quando o fluxo de fluido não ocorre predominantemente pelas forças capilares e/ou sem o uso de válvulas de acionamento (por exemplo, sem alterar uma área em seção transversal de um canal de uma pas- sagem de fluido do cassete). Em algumas modalidades, durante es- sencialmente a análise inteira conduzida no cassete, uma queda de pressão não zero substancialmente constante pode estar presente, por exemplo, cruzando uma entrada até uma região de análise (que pode ser conectada a um conector fluídico) e uma saída a jusante da região de análise (por exemplo, uma saída a jusante de uma região de con- tenção de líquido), respectivamente.
[00182] Em uma modalidade, uma fonte de vácuo é configurada para pressurizar um canal a cerca de -60kPa (cerca de 2/3 de atmos- fera). Em outra modalidade, a fonte de vácuo é configurada para pres- surizar um canal a cerca de -30kPa. Em determinadas modalidades, a fonte de vácuo é configurada para pressurizar um canal, por exemplo,
entre -100kPa e -70kPa, entre -70kPa e -50kPa, entre -50kPa e - 20kPa ou entre -20kPa e -1kPa.
[00183] Uma vez que o cassete é posicionado dentro do analisador, a fonte de fluxo de fluido pode ser acoplada ao cassete para assegurar uma conexão de resistente a fluidos. Como mencionado acima, o cas- sete pode incluir uma porta configurada para acoplar o canal 706 e o canal 707, se conectados fluidicamente a 706, com a fonte de fluxo de fluido. Em uma modalidade, vedações ou anéis em formato de O são posicionados em torno da porta e um solenoide linear pode ser posi- cionado acima dos anéis em formato de O a fim de vedar os anéis em formato de O contra o corpo do cassete. Por exemplo, como mostrado na modalidade exemplificadora ilustrada na FIG. 11A, além da porta 719, pode haver duas portas de respiro 715 e uma porta de mistura
713. A interface entre cada porta e o distribuidor pode ser independen- te (por exemplo, pode não haver nenhuma conexão fluídica dentro do distribuidor).
[00184] Em uma modalidade, quando uma fonte de fluxo de fluido é ativada, o canal 706, 707 no cassete pode ser pressurizado (por e- xemplo, a cerca de -30kPa), o que dirigirá os fluidos dentro do canal (a amostra de fluido bem como os reagentes) em direção à saída. Em uma modalidade que inclui as portas de respiro 715 e a porta de mistu- ra 713, uma válvula de respiro conectada à porta 713 através do distri- buidor pode estar inicialmente aberta, o que pode permitir que todos os reagentes a jusante da porta de mistura 713 se movam em direção à saída, mas não causará o movimento dos reagentes a montante da porta de mistura 713. Uma vez que a válvula de respiro é fechada, os reagentes a montante da porta de mistura 713 podem se mover em direção a uma porta de mistura e então em direção à saída. Por e- xemplo, os fluidos podem ser armazenados em série em um canal a montante da porta de mistura e, após o fechamento de uma válvula de respiro posicionada ao longo do canal, os fluidos podem fluir sequen- cialmente em direção à saída do canal. Em alguns casos, os fluidos podem ser armazenados em canais separados que se cruzam e, após o fechamento de uma válvula de respiro, os fluidos poderão fluir juntos em direção a um ponto de interseção. Este conjunto de modalidades pode ser utilizado, por exemplo, para misturar controlavelmente os fluidos à medida que fluem. O sincronismo da aplicação e o volume de fluido aplicado pode ser controlado, por exemplo, pelo sincronismo de acionamento da válvula de respiro.
[00185] Vantajosamente, as válvulas de respiro podem ser opera- das sem apertar a seção transversal do canal microfluídico em que são operadas, como pode ocorrer com determinadas válvulas na téc- nica anterior. Tal modo de operação pode ser eficaz para impedir va- zamento através da válvula. Além disso, uma vez que as válvulas de respiro podem ser utilizadas, alguns sistemas e métodos aqui descri- tos não requerem o uso de determinadas válvulas internas, as quais podem ser problemáticas devido, por exemplo, à despesa elevada, complexidade na fabricação, fragilidade, compatibilidade limitada com os sistemas gasosos e líquidos misturados e/ou falta de fiabilidade em sistemas microfluídicos.
[00186] Deve ser compreendido que, quando as válvulas de respiro são descritas, outros tipos de mecanismos de válvulas podem ser utili- zados com os sistemas e métodos aqui descritos. Exemplos não limi- tadores de um mecanismo de válvulas que podem ser operativamente associados com uma válvula incluem uma válvula de diafragma, válvu- la de esfera, válvula de porta, válvula de borboleta, válvula de globo, válvula de agulha, válvula de mangote ou válvula de rosca de torno. O mecanismo de válvulas pode ser acionado por meio de qualquer dis- positivo apropriado, incluindo um solenoide, motor, manualmente, por acionamento eletrônico ou por meio de pressão hidráulica/pneumática.
[00187] Tal como mencionado previamente, todos os líquidos no cassete (amostra e reagentes) podem se mover à área de contenção de líquido que pode incluir um material absorvente 717. Em uma mo- dalidade, o material absorvente absorve somente líquidos, de maneira tal que os gases podem fluir fora do cassete através da saída.
[00188] Uma variedade de técnicas de determinação (por exemplo, medição, quantificação, detecção e qualificação) pode ser utilizada, por exemplo, para analisar um componente da amostra ou outro com- ponente ou condição associada com um sistema microfluídico ou cas- sete aqui descrito. As técnicas de determinação podem incluir as téc- nicas com base óptica tais como a transmissão de luz, absorbância de luz, dispersão de luz, reflexão de luz e técnicas visuais. As técnicas de determinação também podem incluir as técnicas de luminescência tais como a fotoluminescência (por exemplo, fluorescência), quimiolumi- nescência, bioluminescência e/ou eletroluminescência. Em outras mo- dalidades, as técnicas de determinação podem medir a condutividade ou a resistência. Dessa maneira, um analisador pode ser configurado para incluir tais e outros sistemas de detecção apropriados.
[00189] Diferentes técnicas de detecção óptica oferecem uma série de opções para a determinação dos resultados da reação (por exem- plo, ensaio). Em algumas modalidades, a medição da transmissão ou da absorbância significa que a luz pode ser detectada no mesmo com- primento de onda em que é enviada de uma fonte de luz. Embora a fonte de luz possa ser uma fonte de faixa estreita que é emitida em um único comprimento de onda que também pode ser uma fonte de amplo espectro, a qual emite sobre uma faixa de comprimentos de onda, uma vez que muitos materiais opacos podem eficazmente obstruir uma ampla faixa de comprimentos de onda. Em algumas modalidades, um sistema pode ser operado com um mínimo de dispositivos ópticos (por exemplo, um detector óptico simplificado). Por exemplo, o dispositivo de determinação pode estar livre de um fotomultiplicador, pode estar livre de um seletor de comprimento de onda tal como uma rede óptica, um prisma ou um filtro, pode estar livre de dispositivo para dirigir ou colunar a luz tal como um colunador, ou pode estar livre do sistema óptico de aumento (por exemplo, lentes). A eliminação ou redução destas características pode resultar em um dispositivo menos caro, mais robusto.
[00190] A FIG. 12 ilustra um sistema óptico exemplificador 800 que pode ser posicionado no invólucro de um analisador. Como mostrado ilustrativamente nesta modalidade, o sistema óptico inclui pelo menos uma primeira fonte de luz 882 e um detector 884 espaçado da primeira fonte de luz. A primeira fonte de luz 882 pode ser configurada para passar luz através de uma primeira região de análise do cassete quando o cassete é introduzido no analisador. O primeiro detector 884 pode ser posicionado oposto à primeira fonte de luz 882 para detectar a quantidade de luz que passa através da primeira região de análise do cassete 520. Deve ser apreciado que, em outras modalidades, o número de fontes de luz e detectores possa variar, uma vez que a in- venção não se limita a isso. Como mencionado acima, o cassete 520 pode incluir uma pluralidade de regiões de análise 709, e o cassete 520 pode ser posicionado dentro do analisador, de maneira tal que ca- da região de análise se alinhe com uma fonte de luz e detector corres- pondentes. Em algumas modalidades, a fonte de luz inclui uma abertu- ra óptica que pode ajudar a direcionar a luz da fonte de luz a uma re- gião particular dentro de uma região de análise do cassete.
[00191] Em uma modalidade, as fontes de luz são diodos emissores de luz (LEDs) ou diodos a laser. Por exemplo, um diodo semicondutor vermelho de InGaAlP a laser que emite em 654 nm pode ser utilizado. Outras fontes de luz também podem ser utilizadas. A fonte de luz pode ser posicionada dentro de um ninho ou invólucro. O ninho ou invólucro pode incluir uma abertura estreita ou tubo fino que pode ajudar a coli- mar a luz. As fontes de luz podem ser posicionadas acima onde o cas- sete é inserido no analisador, de maneira tal que a fonte de luz brilha para baixo sobre a superfície superior do cassete. Outras configura- ções apropriadas da fonte de luz com respeito ao cassete também são possíveis.
[00192] Deve ser apreciado que o comprimento de onda das fontes de luz varie, uma vez que a invenção não se limita a isso. Por exem- plo, em uma modalidade, o comprimento de onda da fonte de luz é de cerca de 670 nm e, em outra modalidade, o comprimento de onda da fonte de luz é de cerca de 650 nm. Deve ser apreciado que, em uma modalidade, o comprimento de onda de cada fonte de luz possa ser diferente, de maneira tal que cada região de análise do cassete receba um comprimento de onda de luz diferente. Em outras modalidades, no entanto, o comprimento de onda de cada fonte de luz pode ser o mesmo, tal que cada região de análise do cassete receba o mesmo comprimento de onda de luz. As combinações de comprimentos de onda das fontes de luz iguais ou diferentes também são possíveis.
[00193] Tal como mencionado, um detector 884 pode ser espaçado e posicionado abaixo de uma fonte de luz 882 para detectar a quanti- dade de luz que passa através do cassete. Em uma modalidade, um ou mais dos detectores são fotodetectores (por exemplo, fotodiodos). Em determinadas modalidades, o fotodetector pode ser qualquer dis- positivo apropriado que pode detectar a transmissão da luz que é en- viada pela fonte de luz. Um tipo de fotodetector é um circuito integrado óptico (IC) incluindo um fotodiodo que tem uma sensibilidade de pico a 700 nm, um amplificador e um regulador de voltagem. O detector pode ser posicionado dentro de um ninho ou invólucro que pode incluir uma abertura estreita ou tubo fino para garantir que somente a luz do cen- tro da região de análise 709 seja medida no detector 884. Se a fonte de luz for modulada por pulso, o fotodetector poderá incluir um filtro para remover o efeito da luz que não está na frequência selecionada. Quando múltiplos sinais vizinhos são detectados ao mesmo tempo, a fonte de luz utilizada para cada região de análise (por exemplo, a regi- ão de detecção) pode ser modulada a uma frequência suficientemente diferente daquela de sua fonte de luz vizinha. Nesta configuração, ca- da detector pode ser configurado (por exemplo, utilizando software) para selecionar sua fonte de luz atribuída, desse modo evitando que a luz de interferência forme pares ópticos vizinhos.
[00194] O requerente da patente depositada reconheceu que a quantidade de luz transmitida através de uma região de análise do cassete pode ser utilizada para a determinação das informações não somente sobre a amostra, mas também das informações sobre os processos específicos que ocorrem no sistema fluídico do cassete (por exemplo, mistura dos reagentes, taxa de fluxo etc.). Em alguns casos, a medição da luz através de uma região pode ser utilizada como feed- back para controlar o fluxo de fluido no sistema. Em determinadas mo- dalidades, o controle de qualidade ou as anomalias na operação do cassete podem ser determinados. Por exemplo, o feedback de uma região de análise a um sistema de controle pode ser utilizado para de- terminar as anomalias que ocorreram no sistema microfluídico, e o sis- tema de controle pode emitir um sinal a um ou mais componente para fazer com que todo o sistema ou porções deste sejam desligados. Consequentemente, a qualidade dos processos que estão sendo exe- cutados no sistema microfluídico pode ser controlada utilizando os sis- temas e métodos aqui descritos.
[00195] Deve ser reconhecido que um líquido transparente (tal co- mo a água) pode permitir que uma grande quantidade de luz seja transmitida da fonte de luz 882, através da região de análise 709 e ao detector 884. O ar dentro da região de análise 709 pode conduzir a menos luz transmitida através da região de análise 709 porque mais luz pode ser dispersa dentro do canal em comparação a quando um líquido transparente está presente. Quando uma amostra de sangue está em uma região de análise 709, significativamente menos quanti- dade de luz pode passar através do detector 884, devido à dispersão da luz fora das células do sangue e também devido à absorbância. Em uma modalidade, a prata se associa com um componente da amostra ligado a uma superfície dentro da região de análise e, à medida que a prata se acumula dentro da região de análise, menos e menos luz é transmitida através da região de análise 709.
[00196] É reconhecido que a medição da quantidade de luz que é detectada em cada detector 884 permite que um usuário determine quais reagentes estão em uma região particular de análise 709 em um ponto no tempo particular. Reconhece-se também que ao medir a quantidade de luz que é detectada com cada detector 884, é possível medir a quantidade de prata depositada em cada região de análise
709. Esta quantidade pode corresponder à quantidade de análito cap- turada durante uma reação que pode desse modo prover uma medida da concentração do análito na amostra.
[00197] Tal como observado acima, o requerente da patente depo- sitada reconheceu que o sistema óptico 880 pode ser utilizado por uma variedade de razões de controle de qualidade. Primeiramente, o tempo que leva para que uma amostra alcance uma região de análise onde o sistema óptico detecta a luz que passa através da região de análise pode ser utilizado para determinar se há um vazamento ou uma obstrução no sistema. Além disso, quando se espera que a amos- tra tenha determinado volume, por exemplo, cerca de 10 microlitros, há um tempo de fluxo previsto associado para que a amostra passe através dos canais e das regiões de análise. Se a amostra se encon- trar fora deste tempo de fluxo previsto, isto poderá ser uma indicação que não há amostra suficiente para conduzir a análise e/ou que o tipo errado de amostra foi carregado no analisador. Além disso, uma gama de resultados prevista pode ser determinada com base no tipo da a- mostra (por exemplo, soro, sangue, urina etc.) e, caso a amostra esti- vesse fora da faixa prevista, isto poderia ser uma indicação de um er- ro.
[00198] Em uma modalidade, o analisador inclui um sistema de re- gulagem de temperatura posicionado dentro do invólucro, que pode ser configurado para regular a temperatura dentro do analisador. Para determinada análise da amostra, a amostra pode necessitar ser manti- da dentro de alguma faixa de temperatura. Por exemplo, em uma mo- dalidade, é desejável manter a temperatura dentro do analisador a cerca de 37°C. Consequentemente, em uma modalidade, o sistema de regulagem de temperatura inclui um aquecedor configurado para a- quecer o cassete. Em uma modalidade, o aquecedor é um aquecedor resistivo que pode ser posicionado no lado de baixo de onde o cassete é colocado no analisador. Em uma modalidade, o sistema de regula- gem de temperatura também inclui um termistor para medir a tempera- tura do cassete, e um circuito controlador pode ser provido para con- trolar a temperatura.
[00199] Em uma modalidade, o fluxo passivo do ar dentro do anali- sador pode agir para refrigerar o ar dentro do analisador, se necessá- rio. Um ventilador pode ser opcionalmente provido no analisador para abaixar a temperatura dentro do analisador. Em algumas modalidades, o sistema de regulagem de temperatura pode incluir aquecedores ter- moelétricos de Peltier e/ou refrigeradores dentro do analisador.
[00200] Em determinadas modalidades, um sistema de identificação incluindo um ou mais identificadores é utilizado e associado com um ou mais componentes ou materiais associados com um cassete e/ou analisador. Os "identificadores", como descritos em mais detalhes a seguir, podem ser "codificados com" as informações (isto é, podem carregar ou conter as informações, como pelo uso de um dispositivo de carregamento, armazenamento, geração ou transmissão de infor- mações tal como uma tarja ou código de barra de identificação de ra- diofrequência (RFID)) sobre o componente incluindo o identificador, ou podem não ser codificados com as informações sobre o componente, mas em vez disso, podem ser apenas associados com as informações que podem estar contidas, por exemplo, em um banco de dados em um computador ou em um meio que pode ser lido por computador (por exemplo, as informações sobre um usuário e/ou amostra a ser anali- sada). No último exemplo, a detecção de tal identificador pode provo- car a recuperação e o uso das informações associadas do banco de dados.
[00201] Os identificadores "codificados com" as informações sobre um componente não necessitam ser necessariamente codificados com um conjunto completo de informações sobre o componente. Por e- xemplo, em determinadas modalidades, um identificador pode ser co- dificado com informações meramente suficientes a fim de permitir uma identificação original do cassete (por exemplo, com relação a um nú- mero de série, número de peça etc.), visto que as informações adicio- nais que se relacionam ao cassete (por exemplo, tipo, uso [por exem- plo, tipo de ensaio], posse, posição, posição, conectividade, conteúdo etc.) podem ser armazenadas remotamente e ser associadas somente com o identificador.
[00202] As "informações sobre" ou as "informações associadas com" um cassete, um material ou um componente etc. são as informa- ções a respeito da identidade, posicionamento ou localização do cas- sete, do material ou do componente ou da identidade, posicionamento ou localização do conteúdo de um cassete, material ou componente, e podem incluir adicionalmente as informações a respeito da natureza,
do estado ou da composição do cassete, material, componente ou conteúdo. As "informações sobre" ou as "informações associadas com" um cassete, material ou componente ou seu conteúdo podem incluir as informações que identificam o cassete, material ou compo- nente ou seu conteúdo e distinguem o cassete, material, componente ou seu conteúdo de outros. Por exemplo, as "informações sobre" ou as "informações associadas com" um cassete, material ou componente ou seu conteúdo podem se referir às informações que indicam o tipo ou o que o cassete, material ou componente ou seu conteúdo é, onde está ou deve ser encontrado, como é ou deve ser posicionado, a fun- ção ou finalidade do cassete, do material ou do componente ou seu conteúdo, como o cassete, material ou componente ou seu conteúdo deve ser conectado com outros componentes do sistema, número de lote, origem, informações sobre calibração, data de expiração, destino, fabricante ou posse do cassete, do material ou do componente ou seu conteúdo, tipo de análise/ensaio a ser executado no cassete, informa- ções sobre se o cassete foi utilizado/analisado etc.
[00203] Os exemplos não limitadores dos identificadores que po- dem ser utilizados no contexto da invenção incluem tarjas de identifi- cação de radiofrequência (RFID), códigos de barra, números de série, tarjas coloridas, fluorescentes ou ópticas (por exemplo, utilizando pon- tos quânticos), compostos químicos, tarjas de rádio, tarjas magnéticas, entre outros.
[00204] Em uma modalidade, um leitor de identificação é um leitor de RFID configurado para ler um identificador de RFID associado com o cassete. Por exemplo, em uma modalidade, o analisador inclui um módulo de RFID e antena que é configurado para ler as informações do cassete introduzidas no analisador. Em outra modalidade, o leitor de identificação é um leitor de código de barras configurado para ler um código de barras associado com o cassete. Uma vez que o casse-
te é introduzido no analisador, o leitor de identificação pode ler as in- formações do cassete. O identificador no cassete pode incluir um ou mais dos tipos de informações tais como o tipo do cassete, o tipo de análise/ensaio a ser executado, o número de lote, as informações so- bre se o cassete foi utilizado/analisado e outras informações aqui des- critas. O leitor também pode ser configurado para ler as informações providas com um grupo de cassetes, tais como dentro uma caixa de cassetes, como, mas não limitado às informações sobre calibração, data de expiração e quaisquer informações específicas adicionais para esse lote. As informações identificadas podem ser opcionalmente exi- bidas a um usuário, por exemplo, para confirmar que um cassete e/ou um tipo de ensaio corretos estão sendo executados.
[00205] Em alguns casos, o leitor de identificação pode ser integra- do com um sistema de controle através dos trajetos de comunicação. Uma comunicação entre os leitores de identificação e o sistema de controle pode ocorrer ao longo de uma rede com fio ou pode ser transmitida de maneira sem fio. Em uma modalidade, o sistema de controle pode ser programado para reconhecer um identificador espe- cífico (por exemplo, de um cassete associado com as informações que se relacionam a um tipo de cassete, fabricante, ensaio a ser executado etc.) indicando que o cassete está apropriadamente conectado ou in- serido dentro de um tipo particular de analisador.
[00206] Em uma modalidade, o identificador de um cassete está associado com as informações predeterminadas ou programadas con- tidas em um banco de dados a respeito do uso do sistema ou cassete para uma finalidade, um usuário ou um produto particular, ou com as condições particulares da reação, tipos de amostra, reagentes, usuá- rios e outros ainda. Se uma correspondência incorreta for detectada, ou um identificador estiver desativado, o processo poderá ser inter- rompido ou o sistema poderá ficar inoperável até que o usuário seja notificado, ou quando do reconhecimento por um usuário.
[00207] As informações de ou associadas com um identificador po- dem, em algumas modalidades, ser armazenadas, por exemplo, na memória do computador ou em um meio que pode ser lido por compu- tador, para futuras finalidades de referência e gravação de registro. Por exemplo, determinados sistemas de controle podem empregar as informações de ou associadas com os identificadores para identificar quais componentes (por exemplo, cassetes) ou tipos de cassete foram utilizados em uma análise particular, a data, o tempo e a duração do uso, as condições de uso etc. Tais informações podem ser utilizadas, por exemplo, para determinar se um ou mais componentes do analisa- dor devem ser limpos ou substituídos. Opcionalmente, um sistema de controle ou qualquer outro sistema apropriado pode gerar um relatório das informações recolhidas, incluindo as informações codificadas por ou associadas com os identificadores, que podem ser utilizadas para prover prova de conformidade com os padrões regulatórios ou verifica- ção do controle de qualidade.
[00208] As informações codificadas em ou associadas com um i- dentificador também podem ser utilizadas, por exemplo, para determi- nar se o componente associado com o identificador (por exemplo, um cassete) é autêntico ou forjado. Em algumas modalidades, a determi- nação da presença de um componente forjado causa o fechamento do sistema. Em um exemplo, o identificador pode conter um código de identidade exclusivo. Neste exemplo, o software ou analisador de con- trole do processo não permitiria a inicialização do sistema (por exem- plo, o sistema poderia ser desativado) se um código de identidade es- tranho ou incompatível (ou nenhum código de identidade) fosse detec- tado.
[00209] Em determinadas modalidades, as informações obtidas de ou associadas com um identificador podem ser utilizadas para verificar a identidade de um cliente a quem o cassete e/ou o analisador são vendidos ou para quem um processo biológico, químico ou farmacêuti- co deve ser executado. Em alguns casos, as informações obtidas de ou associadas com um identificador são utilizadas como parte de um processo de recolha de dados para a resolução de problemas de um sistema. O identificador também pode conter ou ser associado com as informações tais como os históricos de grupo, processo de montagem e diagramas de instrumentação (P e IDs), históricos de resolução de problemas, entre outros. A resolução de problemas de um sistema po- de ser realizada, em alguns casos, através de acesso remoto ou incluir o uso de um software diagnóstico.
[00210] Em uma modalidade, o analisador inclui uma interface com o usuário, que pode ser posicionada dentro do invólucro e é configura- da para que um usuário receba as informações no analisador de a- mostra. Em uma modalidade, a interface com o usuário é uma tela de toque.
[00211] A tela de toque pode guiar um usuário através da operação do analisador, provendo texto e/ou instruções gráficas para uso do a- nalisador. A interface com o usuário da tela de toque pode, por exem- plo, guiar o usuário para introduzir o cassete no analisador. Pode en- tão guiar o usuário para receber o nome do paciente ou outra fon- te/número de identificação do paciente no analisador (por exemplo, idade, resultados de um exame de DRE etc.). Deve ser apreciado que as informações do paciente tais como o nome, a data de nascimento e/ou o número da ID do paciente possam ser recebidas na interface com o usuário da tela de toque para identificar o paciente. A tela de toque pode indicar a quantidade de tempo restante para terminar a análise da amostra. A interface com o usuário da tela de toque pode então ilustrar os resultados da análise da amostra junto com o nome do paciente ou outras informações de identificação.
[00212] Em outra modalidade, a interface com o usuário pode ser configurada diferentemente, como com uma tela de LCD e um único menu de rolamento de botão. Em outra modalidade, a interface com o usuário pode simplesmente incluir uma tecla de inicialização para ati- var o analisador. Em outras modalidades, a interface com o usuário de dispositivos independentes e separados (tais como um smartphone ou computador móvel) pode ser utilizada para fazer interface com o anali- sador.
[00213] O analisador descrito acima pode ser utilizado em uma va- riedade de maneiras para processar e analisar uma amostra colocada dentro do analisador. Em uma modalidade particular, uma vez que um componente mecânico configurado para fazer interface com o cassete indica que o cassete está carregado corretamente no analisador, o lei- tor de identificação lê e identifica as informações associadas com o cassete. O analisador pode ser configurado para comparar as informa- ções com os dados armazenados em um sistema de controle para ga- rantir que tenha as informações de calibração para esta amostra parti- cular. Caso o analisador não tenha as informações de calibração a- propriadas, o analisador poderá enviar um pedido ao usuário para car- regar as informações específicas necessárias. O analisador também poderá ser configurado para rever as informações sobre a data de ex- piração associadas com o cassete e cancelar a análise se a data de expiração tiver passado.
[00214] Em uma modalidade, uma vez que o analisador determinou que o cassete pode ser analisado, uma fonte de fluxo de fluido tal co- mo o distribuidor a vácuo pode ser configurada para entrar em contato com o cassete para garantir uma vedação hermética em torno da porta a vácuo e das portas de respiro. Em uma modalidade, o sistema óptico pode fazer as medições iniciais para obter leituras de referência. Tais leituras de referência podem ser feitas com as fontes de luz ativadas ou desativadas.
[00215] Para iniciar o movimento da amostra, o sistema a vácuo pode ser ativado, o que pode alterar rapidamente a pressão dentro de um ou mais canais (por exemplo, reduzir a cerca de -30kPa). Esta re- dução de pressão dentro do canal pode dirigir a amostra a um canal e através de cada uma das regiões de análise 709A-709D (vide a FIG. 10). Depois que a amostra atinge a região de análise final 709D, a amostra pode continuar a fluir na região de contenção líquida 717.
[00216] Em um conjunto particular de modalidades, o analisador de amostra microfluídica é utilizado para medir o nível do iPSA, fPSA, tP- SA e/ou da hK2 em uma amostra de sangue. Em uma modalidade, três, quatro, cinco, seis ou mais regiões de análise (por exemplo, as regiões de análise 709A-709D) podem ser utilizadas para analisar a amostra. Por exemplo, em uma primeira região de análise, as paredes do canal podem ser bloqueadas com uma proteína de bloqueio (tal como a albumina de soro bovino), de maneira tal que quase nenhuma proteína na amostra de sangue se fixe às paredes da região de análise (à exceção talvez de alguma ligação não específica que pode ser la- vada). Esta primeira região de análise pode agir como um controle ne- gativo.
[00217] Em uma segunda região de análise, as paredes do canal podem ser revestidas com uma grande quantidade predeterminada de um antígeno específico da próstata (PSA) para agir como um controle elevado ou positivo. Uma vez que a amostra de sangue passa através da segunda região de análise, quase nenhuma proteína do PSA no sangue pode se ligar às paredes do canal. Os anticorpos de detecção conjugados com ouro na amostra podem ser dissolvidos dentro do tu- bo do conector fluídico 722 ou podem fluir a partir de qualquer outra posição apropriada. Estes anticorpos podem ainda não ser ligados ao PSA na amostra e, desse modo, podem se ligar ao PSA nas paredes do canal para agir como um controle elevado ou positivo.
[00218] Em uma terceira região de análise, as paredes do canal podem ser revestidas com um anticorpo de captura para o iPSA (por exemplo, um anticorpo anti-iPSA), que pode se ligar a um epítopo dife- rente na proteína de PSA daquele do anticorpo de sinal conjugado com ouro. Enquanto a amostra de sangue flui através da terceira regi- ão de análise, as proteínas do iPSA na amostra de sangue podem se ligar ao anticorpo anti-iPSA de uma maneira proporcional à concentra- ção destas proteínas no sangue.
[00219] Em uma quarta região de análise, as paredes do canal po- dem ser revestidas com um anticorpo de captura para fPSA (por e- xemplo, um anticorpo anti-fPSA), que pode se ligar a um epítopo dife- rente na proteína de PSA daquele do anticorpo de sinal conjugado com ouro. Enquanto a amostra de sangue flui através da quarta região de análise, as proteínas de fPSA na amostra de sangue podem se li- gar ao anticorpo anti-fPSA de uma maneira proporcional à concentra- ção destas proteínas no sangue.
[00220] Em uma quinta região de análise, as paredes do canal po- dem ser revestidas com um anticorpo de captura para tPSA (por e- xemplo, um anticorpo anti-tPSA), que pode se ligar a um epítopo dife- rente na proteína de PSA daquele do anticorpo de sinal conjugado com ouro. Enquanto a amostra de sangue flui através da quinta região de análise, as proteínas de tPSA na amostra de sangue podem se li- gar ao anticorpo anti-tPSA de uma maneira proporcional à concentra- ção destas proteínas no sangue.
[00221] Opcionalmente, em uma sexta região de análise, as pare- des do canal podem ser revestidas com um anticorpo de captura para hK2 (por exemplo, um anticorpo anti-hK2), que pode se ligar a um epí- topo diferente na proteína daquele do anticorpo de sinal conjugado com ouro. Enquanto a amostra de sangue flui através da sexta região de análise, as proteínas hK2 na amostra de sangue podem se ligar ao anticorpo anti-hK2 de uma maneira proporcional à concentração des- tas proteínas no sangue.
[00222] Um anticorpo de detecção tal como um anticorpo etiqueta- do por ouro que é anti-PSA e anti-hK2 pode ser utilizado para detectar cada um dentre o iPSA, o fPSA, o tPSA e/ou a hK2. Em outras moda- lidades, no entanto, uma mistura de anticorpos etiquetados por ouro, tais como um anticorpo etiquetado por ouro anti-hK2, anticorpo anti- PSA etiquetado por ouro e/ou o anticorpo anti-iPSA etiquetado por ou- ro, pode ser utilizada para a detecção. Em algumas modalidades, os anticorpos de detecção conjugados com ouro na amostra podem ser dissolvidos dentro do tubo do conector fluídico 722 ou podem fluir a partir de qualquer outra posição apropriada.
[00223] Em alguns exemplos, as medições de uma região que ana- lisa podem ser utilizadas para determinar não somente a concentração de um análito em uma amostra, mas também como um controle. Por exemplo, uma medição do limite pode ser estabelecida em uma fase inicial de amplificação. As medições acima deste valor (ou abaixo des- te valor) podem indicar que a concentração do análito está fora da fai- xa desejada para o ensaio. Esta técnica pode ser utilizada para identi- ficar, por exemplo, se um Efeito Gancho de Dose Elevada está ocor- rendo durante a análise, isto é, quando uma concentração muito ele- vada do análito produz uma leitura artificialmente baixa.
[00224] Em outras modalidades, diferentes números de regiões de análise podem ser providos, e uma análise pode incluir opcionalmente mais de uma região de análise que testa realmente a amostra. Regi- ões de análise adicionais podem ser utilizadas para medir os análitos adicionais, de modo que o sistema possa executar ensaios compostos por múltiplas partes simultaneamente com uma única amostra.
[00225] Em uma modalidade particular, leva cerca de oito minutos para uma amostra de sangue de 10 microlitros fluir através das quatro regiões de análise. O início desta análise pode ser calculado quando a pressão dentro do canal é cerca de -30kPa. Durante este tempo, o sis- tema óptico está medindo a transmissão de luz para cada região de análise e, em uma modalidade, estes dados podem ser transmitidos a um sistema de controle cerca de a cada 0,1 segundo. Ao utilizar os valores de referência, estas medições podem ser convertidas utilizan- do as seguintes fórmulas: Transmissão = (l-ld)/(lr-ld) (1) em que: l = intensidade da luz transmitida através de uma região de análise em um dado ponto no tempo; ld = intensidade da luz transmitida através de uma região de análise com a fonte de luz desligada; lr = intensidade de referência (isto é, a intensidade da luz transmitida em uma região de análise com a fonte de luz ativada ou antes do início de uma análise, quando somente o ar está no canal e Densidade Óptica = - log(Transmissão) (2)
[00226] Desse modo, utilizando estas fórmulas, a densidade óptica em uma região de análise pode ser calculada.
[00227] A FIG. 13 é um diagrama de blocos 900 que ilustra como um sistema de controle 550 (vide a FIG. 12) pode ser operativamente associado com uma variedade de componentes diferentes de acordo com uma modalidade. Os sistemas de controle aqui descritos podem ser implementados de numerosas maneiras, tal como com hardware ou firmware dedicado, utilizando um processador que seja programado utilizando microcódigo ou software para executar as funções citadas acima ou qualquer combinação apropriada do que foi mencionado a- cima. Um sistema de controle pode controlar uma ou mais operações de uma única análise (por exemplo, para uma reação biológica, bio- química ou química) ou de múltiplas análises (separadas ou interco- nectadas). Por exemplo, o sistema de controle pode ser posicionado dentro do invólucro do analisador e pode ser configurado para se co- municar com um leitor de identificação, interface com o usuário, fonte de fluxo de fluido, sistema óptico e/ou sistema de regulagem de tem- peratura para analisar uma amostra no cassete.
[00228] Em uma modalidade, o sistema de controle inclui pelo me- nos dois processadores, incluindo um processador em tempo real que controla e monitora todos dos subsistemas que fazem interface direta com o cassete. Em uma modalidade, em um intervalo de tempo parti- cular (por exemplo, a cada 0,1 segundo), este processador comunica- se com um segundo processador de nível mais elevado que se comu- nica com o usuário através da interface com o usuário e/ou do subsis- tema de comunicação (discutido abaixo) e controla a operação do ana- lisador (por exemplo, determina quando começar a análise de uma amostra e interpreta os resultados). Em uma modalidade, uma comu- nicação entre estes dois processadores ocorre através de um barra- mento de comunicação serial. Deve ser apreciado que, em outra mo- dalidade, o analisador pode somente incluir um processador ou mais de dois processadores, uma vez que a invenção não se limita a isso.
[00229] Em uma modalidade, o analisador pode se conectar com os dispositivos externos e pode, por exemplo, incluir portas para a cone- xão com uma ou mais unidades de comunicação externas. Uma co- municação externa pode ser realizada, por exemplo, via comunicação USB. Por exemplo, tal como mostrado na FIG. 13, o analisador pode enviar os resultados de uma análise da amostra a uma impressora USB 901 ou a um computador 902. Além disso, a corrente de dados produzida pelo processador em tempo real pode ser enviada a um computador ou cartão de memória USB 904. Em algumas modalida-
des, um computador também pode controlar diretamente o analisador através de uma conexão USB. Além disso, outros tipos de opção de comunicação estão disponíveis, uma vez que a presente invenção não se limita sob este aspecto. Por exemplo, Ethernet, Bluetooth e/ou uma comunicação wi-fi com o analisador podem ser estabelecidos através do processador.
[00230] Os métodos de cálculo, as etapas, as simulações, os algo- ritmos, os sistemas e os elementos do sistema aqui descritos podem ser implementados utilizando um sistema de controle implementado pelo computador, tal como as várias modalidades dos sistemas im- plementados pelo computador descritos abaixo. Os métodos, as eta- pas, os sistemas e os elementos do sistema aqui descritos não são limitados em sua implementação a nenhum sistema computadorizado específico aqui descrito, uma vez que muitas outras máquinas diferen- tes podem ser utilizadas.
[00231] O sistema de controle implementado pelo computador pode ser parte de ou acoplado em associação operativa com um analisador de amostra, e, em algumas modalidades, é configurado e/ou progra- mado para controlar e ajustar os parâmetros operacionais do analisa- dor de amostra, bem como analisa e calcula valores, como descrito acima. Em algumas modalidades, o sistema de controle implementado pelo computador pode enviar e receber sinais de referência para ajus- tar e/ou controlar parâmetros operacionais do analisador de amostra e, opcionalmente, de outros aparelhos do sistema. Em outras modalida- des, o sistema implementado pelo computador pode ser separado de e/ou localizado remotamente com respeito ao analisador de amostra, e pode ser configurado para receber dados de um ou mais aparelhos analisadores de amostra remotos através de um dispositivo indireto e/ou portátil, como através de dispositivos de armazenamento de da- dos eletrônicos portáteis, tais como discos magnéticos, ou via comuni-
cação através uma rede de computador, tal como internet ou intranet local.
[00232] O sistema de controle implementado pelo computador pode incluir diversos componentes e circuitos conhecidos, incluindo uma unidade de processamento (isto é, processador), um sistema de me- mória, dispositivos de entrada e saída e interfaces (por exemplo, um mecanismo de interconexão), bem como outros componentes, tais como circuitos de transporte (por exemplo, um ou mais barramentos), um subsistema de entrada/saída (E/S) de dados de vídeo e de áudio, hardware com finalidades especiais, bem como outros componentes e circuitos, tal como descrito em mais detalhes a seguir. Além disso, o sistema computadorizado pode ser um sistema computadorizado de multiprocessador, ou pode incluir múltiplos computadores conectados através de uma rede de computador.
[00233] O sistema de controle implementado pelo computador pode incluir um processador, por exemplo, um processador comercialmente disponível tal como um da série x86, processadores Celeron e Penti- um, disponíveis junto à Intel, dispositivos similares da AMD e Cyrix, microprocessadores da série 680X0 disponíveis junto à Motorola, o microprocessador PowerPC da IBM e os processadores ARM. Muitos outros processadores estão disponíveis e o sistema computadorizado não é limitado a um processador particular.
[00234] Um processador executa tipicamente um programa chama- do de sistema operacional, sendo que WindowsNT, Windows95 ou 98, Windows 7, Windows 8, UNIX, Linux, DOS, VMS, MacOS e OSX e iOS são exemplos, os quais controlam a execução de outros programas de computador e oferecem programação, eliminação de erros, controle de entrada/saída, contabilidade, compilação, atribuição de armazenamen- to, gerência de dados e gerência de memória, controle de comunica- ção e serviços relacionados. O processador e o sistema operacional definem juntos uma plataforma de computador para que os programas aplicativos nas linguagens de programação de alto nível sejam escri- tos. O sistema de controle implementado pelo computador não é limi- tado a uma plataforma de computador particular.
[00235] O sistema de controle implementado pelo computador pode incluir um sistema de memória, que inclui tipicamente um meio de re- gistro não volátil que pode ser lido e gravado por computador, sendo que um disco magnético, disco óptico, uma memória flash e fita são exemplos. Tal meio de gravação pode ser removível, por exemplo, um disco flexível, CD de leitura/gravação ou cartão de memória ou pode ser permanente, por exemplo, um drive rígido.
[00236] Tal meio de gravação armazena sinais, tipicamente na for- ma binária (isto é, uma forma interpretada como uma sequência de um e zero). Um disco (por exemplo, magnético ou óptico) tem um número de trilhas, em que tais sinais podem ser armazenados, tipicamente na forma binária, isto é, uma forma interpretada como uma sequência de um e zero. Tais sinais podem definir um programa de software, por exemplo, um programa aplicativo, a ser executado pelo microproces- sador ou, as informações a serem processadas pelo programa aplica- tivo.
[00237] O sistema de memória do sistema de controle implementa- do pelo computador também pode incluir um elemento de memória de circuito integrado, que é tipicamente uma memória de acesso volátil, aleatória tal como uma memória de acesso aleatório dinâmica (DRAM) ou memória estática (SRAM). Tipicamente, em operação, o processa- dor faz com que os programas e os dados sejam lidos a partir do meio de gravação não volátil ao elemento de memória de circuito integrado, o que permite tipicamente um acesso mais rápido às instruções do programa e aos dados pelo processador do que o meio de gravação não volátil.
[00238] O processador manipula de modo geral os dados dentro do elemento de memória de circuito integrado, de acordo com as instru- ções de programa e então copia os dados manipulados no meio de gravação não volátil depois que o processamento é terminado. Uma variedade de mecanismos é conhecida por gerenciar o movimento dos dados entre o meio de gravação não volátil e o elemento de memória de circuito integrado, e o sistema de controle implementado pelo com- putador que executa os métodos, as etapas, os sistemas e os elemen- tos do sistema descritos acima com relação à FIG. 13 não é limitado a isso. O sistema de controle implementado pelo computador não é limi- tado a um sistema de memória particular.
[00239] Pelo menos parte de tal sistema de memória descrito acima pode ser utilizada para armazenar uma ou mais estruturas de dados (por exemplo, tabelas de verificação) ou equações descritas acima. Por exemplo, pelo menos parte do meio de gravação não volátil pode armazenar pelo menos parte de um banco de dados que inclui uma ou mais de tais estruturas de dados. Tal banco de dados pode ser qual- quer um de uma variedade de tipos de bancos de dados, por exemplo, um sistema de arquivo que inclui uma ou mais estruturas de dados u- nidimensional, em que os dados são organizados em unidades de da- dos separadas por delimitadores, um banco de dados relacional, em que os dados são organizados nas unidades de dados armazenadas nas tabelas, um banco de dados orientado por objeto em que os dados são organizados nas unidades de dados armazenadas como objetos, um outro tipo de banco de dados ou qualquer combinação destes.
[00240] O sistema de controle implementado pelo computador pode incluir um subsistema de E/S de dados de áudio e vídeo. Uma porção do subsistema de áudio pode incluir um conversor (A/D) analógico em digital, que recebe as informações de áudio análogas e as converte em informações digitais. As informações digitais podem ser comprimi-
das utilizando os sistemas de compressão conhecidos para o armaze- namento em disco rígido para uso posterior. Uma porção de vídeo típi- ca do subsistema de E/S pode incluir um compressor/descompressor de imagem de vídeo, sendo que muitos deles são conhecidos na téc- nica. Tais compressores/descompressores convertem as informações de vídeo análogas em informações digitais comprimidas e vice-versa. As informações digitais comprimidas podem ser armazenadas em dis- co rígido para uso posterior.
[00241] O sistema de controle implementado pelo computador pode incluir um ou mais dispositivos de saída. Os dispositivos de saída e- xemplificadores incluem uma tela de tubo de raio catódico (CRT), telas de cristal líquido (LCD) e outros dispositivos de saída de vídeo, im- pressoras, dispositivos de comunicação, tais como um modem ou uma interface da rede, dispositivos de armazenamento tais como disco ou fita, e dispositivos de saída de áudio tais como um alto-falante.
[00242] O sistema de controle implementado pelo computador tam- bém pode incluir um ou mais dispositivos de entrada. Os dispositivos de entrada exemplificadores incluem um teclado, keypad, trackball, mouse, caneta e tablet, dispositivos de comunicação tais como descri- to acima e dispositivos de entrada de dados tais como os dispositivos e sensores de captura de áudio e vídeo. O sistema de controle imple- mentado pelo computador não é limitado aos dispositivos de entrada ou de saída particulares aqui descritos.
[00243] Deve ser apreciado que um ou mais de qualquer tipo de um sistema de controle implementado pelo computador possam ser utili- zados para executar várias modalidades aqui descritas. Os aspectos da invenção podem ser implementados em software, hardware ou firmware ou qualquer combinação destes. O sistema de controle im- plementado pelo computador pode incluir um hardware para finalida- des especiais, especialmente programado, por exemplo, um circuito integrado específico de aplicativo (ASIC). Tal hardware com finalida- des especiais pode ser configurado para executar um ou mais dos mé- todos, das etapas, das simulações, dos algoritmos, dos sistemas e dos elementos do sistema descrito acima como parte do sistema de con- trole implementado pelo computador descrito acima ou como um com- ponente independente.
[00244] O sistema de controle implementado pelo computador e os componentes do mesmo podem ser programáveis utilizando qualquer uma de uma variedade de uma ou mais linguagens de programação computacional apropriadas. Tais linguagens podem incluir as lingua- gens de programação processuais, por exemplo, C, Pascal, Fortran e BASIC, as linguagens orientadas por objeto, por exemplo, C++, Java e Eiffel e outras linguagens, tais como uma linguagem de script ou ainda uma linguagem Assembly.
[00245] Os métodos, as etapas, as simulações, os algoritmos, os sistemas e os elementos do sistema podem ser implementados utili- zando qualquer uma de uma variedade de linguagens de programação apropriadas, incluindo linguagens de programação processuais, lin- guagens de programação orientadas por objeto, outras linguagens e combinações destas, que podem ser executadas por tal sistema com- putadorizado. Tais métodos, etapas, simulações, algoritmos, sistemas e elementos do sistema podem ser implementados como módulos se- parados de um programa de computador ou podem ser implementa- dos individualmente como programas de computador separados. Tais módulos e programas podem ser executados em computadores sepa- rados.
[00246] Tais métodos, etapas, simulações, algoritmos, sistemas e elementos do sistema, individualmente ou em combinação, podem ser implementados como um produto do programa de computador incor- porado de modo tangível como sinais que podem ser lidos por compu-
tador em um meio que pode ser lido por computador, por exemplo, em um meio de gravação não volátil, um elemento de memória de circuito integrado ou uma combinação destes. Para cada tal método, etapa, simulação, algoritmo, sistema ou elemento do sistema, tal produto do programa de computador pode compreender os sinais que podem ser lidos por computador incorporados de modo tangível no meio que po- de ser lido por computador, os quais definem instruções, por exemplo, como parte de um ou mais programas, que, em consequência de se- rem executados por um computador, instruem o computador a execu- tar o método, a etapa, a simulação, o algoritmo, o sistema ou o ele- mento do sistema.
[00247] Deve ser apreciado que várias modalidades possam ser formadas com uma ou mais das características descritas acima. Os aspectos e as características acima podem ser empregados em qual- quer combinação apropriada, uma vez que a presente invenção não é limitada sob este aspecto. Deve-se também apreciar que os desenhos ilustrem vários componentes e características que podem ser incorpo- rados em várias modalidades. Para simplificação, alguns dos dese- nhos podem ilustrar mais de uma característica ou componente opcio- nal. No entanto, a invenção não é limitada às modalidades específicas descritas nos desenhos. Deve ser reconhecido que a invenção abran- ge as modalidades que podem incluir somente uma porção dos com- ponentes ilustrados em qualquer figura e/ou também pode abranger as modalidades que combinam os componentes ilustrados em múltiplas figuras diferentes. Outras modalidades preferidas
[00248] Será apreciado que os métodos da presente invenção pos- sam ser incorporados na forma de uma variedade de modalidades, sendo que apenas algumas delas são aqui descritas. Ficará evidente ao elemento versado na técnica que outras modalidades existem e não se desviam do caráter da invenção. Desse modo, as modalidades descritas são ilustrativas e não devem ser interpretadas como restriti- vas.
EXEMPLOS Exemplo 1 Estudos
[00249] No total, sete estudos separados utilizando o modelo esta- tístico foram realizados. Os estudos compreendem um total de 7.647 homens com PSA elevado e 2.270 cânceres, sendo que cinco destes estudos constituem validação externa. Além disso, os estudos foram projetados sistematicamente para cobrir uma ampla faixa de cenários clínicos. Talvez, de um modo marcante, um dos estudos inclua uma abordagem de histórico natural. Uma vez que o resultado da biópsia é um desfecho substituto — o que importa não é se um homem tem câncer de próstata, mas se tem risco de desenvolver um câncer de próstata que afete sua vida - o estudo ideal extrairia sangue dos paci- entes, então seguiria estes pacientes por diversos anos na ausência de uma triagem adicional para determinar os resultados do câncer de próstata. Felizmente, este estudo foi conduzido [Vickers, A.J., et al., Cancer Epidemiol Biomarkers Prey, 2011. 20(2): p. 255-61].
[00250] A coorte Malmö Diet and Cancer é parte de um grande es- tudo com base populacional para identificar os fatores de risco da dieta na mortalidade por câncer. 11.063 homens que viviam na cidade de Malmö, Suécia e que nasceram entre 1923 e 1945, proveram uma amostra de sangue anticoagulado de EDTA 1991 - 1996. A constata- ção do resultado foi feita através do Registro Sueco do Câncer. Os va- lores do marcador foram obtidos das amostras de sangue arquivadas analisadas em 2008, as quais foram previamente validadas como ao obter medidas exatas de calicreína do sangue armazenado [Ulmert, D., et al., Clin. Chem., 2006. 52(2): p. 235-9]. A taxa de teste do PSA era muito baixa, com quase todos os casos diagnosticados clinicamen- te. Dessa maneira, o estudo segue o "histórico natural" do câncer de próstata em homens com o PSA elevado. De 792 homens que tinham um PSA de 3 ng/ml no período basal, 474 foram subsequentemente diagnosticados com câncer de próstata, em um acompanhamento mé- dio de 11 anos. A discriminação preditiva do modelo estatístico do pai- nel de quatro calicreínas era notoriamente mais elevada do que o PSA para a predição de qualquer câncer e de cânceres avançados (estágio T3 ou T4, ou metastático), exatamente aqueles cânceres mais prova- velmente fatais. Como verificado em estudos precedentes, cerca de 50% dos homens tiveram um risco de câncer de próstata do modelo menor do que 20%. Foi estimado que somente 13 homens por 1000 com PSA elevado teriam um risco < 20% do modelo, ainda que diag- nosticados com câncer dentro de cinco anos; somente 1 homem teria câncer avançado no diagnóstico.
[00251] A coorte de Malmö demonstra diversas características im- portantes do nosso modelo preditivo. Primeiramente, constitui uma va- lidação externa. Em segundo lugar, mostra que o modelo prediz os cânceres clinicamente diagnosticados que, por definição, não constitu- em sobrediagnóstico. Em terceiro lugar, o estudo sugere que os cân- ceres não contemplados pelo modelo são aqueles considerados so- brediagnósticos: os dados de nossos estudos de biópsia indicam que o painel classifica como baixo risco cerca de 60 homens por 1000 quem têm cânceres detectáveis na biópsia; os dados da coorte de Malmö sugerem que menos de 1 em 4 destes se tornaria clinicamente eviden- te após 5 anos da acompanhamento. Em quarto lugar, demonstra que o modelo é muito fortemente preditivo dos tipos de cânceres agressi- vos que muito provavelmente encurtam a vida de um homem. Final- mente, os dados indicam que o uso clínico do modelo não conduziria a dano importante em termos de diagnósticos tardios, uma vez que so-
mente 1 homem em cada 1000 teria um baixo risco de câncer de prós- tata de acordo com o modelo, mas seria subsequentemente diagnosti- cado com câncer avançado. Uma visão geral de nossos estudos sobre nosso modelo é dada na Tabela 2.
1. Em suma, os estudos preliminares podem ser resumidos como segue:
2. Múltiplas formas de calicreína no sangue — PSA total, PSA livre, PSA intacto e hK2 - podem predizer o resultado da biópsia da próstata em homens com o PSA total elevado.
3. Um modelo de predição estatística com base nas quatro calicreínas foi construído utilizando um único conjunto de treinamento. Isto integra as informações dos novos marcadores com o exame clínico a fim de prover uma probabilidade predita do câncer.
4. No total, o painel foi aplicado a mais 7.500 homens diag- nosticados com quase 2250 cânceres, com os cinco estudos separa- dos constituindo a validação externa.
5. O modelo é altamente discriminatório para o câncer de próstata, com uma AUC muito mais elevada do que um modelo esta- tístico com base em preditores padrão sozinhos (PSA total, idade e exame retal digital).
6. O uso do modelo de predição estatística das quatro cali- creínas para determinar a indicação à biópsia da próstata, de acordo com a análise da decisão, melhoraria o resultado clínico em compara- ção às estratégias alternativas, tais como a execução de biópsias em todos os homens.
7. O modelo era de valor em uma faixa de instalações clíni- cas diferentes: com e sem triagem prévia; com e sem biópsia prévia; com e sem exame minucioso antes da indicação à biópsia. Tabela 2. Visão geral dos estudos
Tabela 2. Esboço dos estudos Coorte Descrição Tama- Aumento na Aumento na AUC: 4 nho da AUC: 4 modelos painéis de calicreína amostra de calicreína mais o modelo de DRE vs.. PSA vs.. PSA + DRE Ciclo Go- Homens não 740 Qualquer cân- Qualquer câncer: 0,836 thenburg 1 rastreados cer: 0,832 vs. vs. 0,724 0,680 Alto grau: 0,903 vs. Alto grau: 0,870 0,868 vs. 0,816 Ciclos sub- Homens com 1241 Qualquer cân- Qualquer câncer: 0,697 sequentes um teste de cer: 0,674 vs. vs. 0,622 de Gothen- PSA prévio 0,564 Alto grau: 0,828 vs. burg Alto grau: 0,819 0,717 vs. 0,658 Ciclo Rot- Homens não 2186 Qualquer cân- Qualquer câncer: 0,776 terdam 1 rastreados cer: 0,764 vs. vs. 0,695 0,637 Alto grau: 0,837 vs. Alto grau: 0,825 0,806 vs. 0,776 Ciclos sub- Homens com 1501 Qualquer cân- Qualquer câncer: 0,711 sequentes um teste de cer: 0,713 vs. vs. 0,585 de Rotter- PSA prévio 0,557 Alto grau: 0,798 vs. dam Alto grau: 0,793 0,709 vs. 0,699 Biópsia PSA persis- 925 Não avaliado Qualquer câncer: 0,681 negativa tentemente vs. 0,584 antes do elevado após Alto grau: 0,837 vs. Rotterdam biópsia nega- 0,764 tiva Tarn Exame clíni- 262 Não avaliado Qualquer câncer: 0,728 co minucioso vs. 0,628 antes da bi- Alto grau: 0,870 vs. ópsia 0,767 Malmo Acompa- 792 Qualquer cân- Não avaliado nhamento cer: 0,751 vs. longitudinal 0,654 sem biópsia Câncer avança- ou triagem do:* 0,824 vs. 0,716 *T3/T4 ou metastático ao diagnóstico
8. A aplicação do modelo a sangues arquivados em ho- mens acompanhados longitudinalmente sem triagem demonstrou que era altamente improvável que os homens com PSA elevado, mas com baixo risco a partir do modelo estatístico, desenvolvessem cânceres agressivos durante os 5 a 10 anos subsequentes. Por outro lado, os cânceres agressivos clinicamente diagnosticados eram comuns em homens com risco elevado a partir do modelo.
[00252] Um modelo ilustrativo utilizado neste exemplo: Idade: inserir a idade em anos tPSA: inserir o PSA total em ng/ml fPSA: inserir o PSA livre em ng/ml iPSA: inserir o PSA intacto em ng/ml hK2: inserir a hK2 em ng/ml Se o tPSA ≥ 25, utilizar então: L = 0,0733628 x tPSA – 1,377984 risco de câncer de próstata = exp(L)/[1 + exp(L)] Se o tPSA < 25, utilizar então uma das duas equações a- baixo, uma que incorpora as informações clínicas e a outra que não:
[00253] As variáveis de ranhura cúbica são determinadas como se- gue: Spline1_tPSA = - (162 – 4,4503)/(162 - 3) x (tPSA - 3)^3 + max(tPSA – 4,4503, 0)^3 Spline2_tPSA = - (162 – 6,4406)/(162 - 3) x (tPSA - 3)^3 + max(tPSA – 6,4406, 0)^3 Se fPSA < 11,8, então Spline1_fPSA = - (11,8 – 0,84)/(11,8 – 0,25) x (fPSA – 0,25)^3 + max(fPSA – 0,84, 0)^3 Se fPSA > 11,8, então Splinel_fPSA = (11,8 – 0,84) x (0,84 — 0,25) x (11,8 + 0,84 + 0,25 – 3 x fPSA)
Se fPSA < 11,8, então Spline2_fPSA = - (11,8 – 1,29)/(11,8 – 0,25) x (fPSA – 0,25)^3 + max(fPSA – 1,29, 0)^3 Se fPSA > 11,8, então Spline2_fPSA = (11,8 – 1,29) x (1,29 – 0,25) x (11,8 + 1,29 + 0,25 – 3 x fPSA) Para o modelo de laboratório:
[0233] Definir o seguinte: x1 = 0,0846726 x tPSA + -,0211959 x Spline1_tPSA + ,0092731 x Spline2_tPSA x2 = -3,717517 x fPSA – 0,6000171 x Spline1_fPSA + 0,275367 x Spline2_fPSA x3 = 3,968052 x iPSA x4 = 4,508231 x hK2
[0234] Então: L = -1,735529 + 0,0172287 x Idade + x1 + x2 + x3 + x4 risco de câncer de próstata = exp(L)/[+ exp(L)]
[00254] Isto provê o risco de câncer de próstata na ausência de quaisquer informações clínicas. Supomos que, se este risco for eleva- do, o clínico pedirá que o paciente se apresente a um exame clínico minucioso e exame retal digital. O seguinte modelo é então executado duas vezes, com o DRE codificado como 0 ou 1, para prover riscos, dependendo se o DRE é normal ou anormal, respectivamente. Definir o seguinte: x1 = 0,0637121 x tPSA – 0,0199247 x Spline1_PSA + 0,0087081 x Spline2_tPSA x2 = -3,460508 x fPSA – 0,4361686 x Spline1_fPSA + 0,1801519 x Spline2_fPSA x3 = 4,014925 x iPSA x4 = 3,523849 x hK2
Então o risco se o DRE for positivo: L = -1,373544 + 0,9661025 + 0,0070077 x Idade + x1 + x2 + x3 + x4 Para o DRE negativo: L = -1,373544 + 0,0070077 x Idade + x1 + x2 + x3 + x4 Determinar o risco como: risco de câncer de próstata = exp(L)/[+ exp(L)] Para a recalibração:
[00255] A recalibração pode ser utilizada para homens com biópsia negativa prévia, mas a recalibração pode ser utilizada em outras situa- ções em que as taxas do evento são notoriamente diferentes da taxa observada do evento (previamente não rastreada) na coorte de Rot- terdam (29%). Definir o seguinte: odds_cancer = Pr(cancer)/(1-(Pr(cancer)) odds_prediction = risco predito de câncer/(1 – risco predito de câncer). Então: bayes_factor = odds_cancer/odds_prediction y_adj = y +log(bayesfactor) risco recalibrado de câncer de próstata = exp(y_adj)/[1 + exp(y_adj) Exemplo 2 (Profético)
[00256] Este é um exemplo profético que descreve o uso de um cassete e um analisador par executar um ensaio para detectar o iPSA, o fPSA, o tPSA e a hK2 em uma amostra por meio da deposição não eletrolítica de prata nas partículas de ouro que são associadas com a amostra. A FIG. 14 inclui uma ilustração esquemática de um sistema microfluídico 1500 de um cassete utilizado neste exemplo. O cassete tinha um formato similar ao cassete 520 mostrado na FIG. 7.
[00257] O sistema microfluídico incluiu as regiões de análise 1510A-1510F, a região de contenção de resíduos 1512 e uma saída
1514. As regiões de análise incluíram um canal microfluídico com 50 micra de profundidade e 120 micra de largura, com um comprimento total de 175 mm. O sistema microfluídico também incluiu o canal mi- crofluídico 1516 e as ramificações de canal 1518 e 1520 (com as en- tradas 1519 e 1521, respectivamente). As ramificações de canal 1518 e 1520 tinham 350 micra de profundidade e 500 micra de largura. O canal 1516 foi formado dos canais secundários 1515, que tinham 350 micra de profundidade e 500 micra de largura, situados em lados al- ternados do cassete, conectados pelos furos passantes 1517 que têm um diâmetro de cerca de 500 micra. Embora a FIG. 14 mostre que os reagentes foram armazenados em um único lado do cassete, em ou- tras modalidades, os reagentes foram armazenados em ambos os la- dos do cassete. O canal 1516 tinha um comprimento total de 390 mm e as ramificações 1518 e 1520 tinham, cada uma, 360 mm de compri- mento. Antes de vedar os canais, os anticorpos de captura anti-PSA e anti-hK2 foram unidos às superfícies do sistema microfluídico nos segmentos das regiões de análise 1510 e 1511, como descrito em mais detalhes a seguir.
[00258] Antes do primeiro uso, o sistema microfluídico foi carregado com os reagentes líquidos que foram armazenados no cassete. Uma série de 7 tampões da lavagem 1523-1529 (água ou tampão, cerca de 2 microlitros cada) foi carregada utilizando uma pipeta nos canais se- cundários 1515 do canal 1516 utilizando os furos passantes. Cada um dos tampões de lavagem foi separado por tampões de ar. O fluido 1528, contendo uma solução de sal de prata, foi carregado ao canal de ramificação através da porta 1519 utilizando uma pipeta. O fluido 1530, contendo uma solução redutora, foi carregado ao canal de rami- ficação 1520 através da porta 1521. Cada um dos líquidos mostrados foi separado dos outros líquidos por tampões de ar. As portas 1514, 1519, 1521, 1536, 1539 e 1540 foram vedadas com uma fita adesiva que pudesse ser facilmente removida ou perfurada. Dessa maneira, os líquidos foram armazenados no sistema microfluídico antes do primei- ro uso.
[00259] Quando do primeiro uso, as portas 1514, 1519, 1521, 1536, 1539 e 1540 foram abertas por um usuário ao remover a fita que co- bria a abertura das portas. Um tubo 1544 contendo os anticorpos anti- PSA e anti-hK2 liofilizados etiquetados com ouro coloidal e ao qual 10 microlitros do sangue da amostra (1522) foram adicionados, conecta- dos às portas 1539 e 1540. O tubo era parte de um conector de fluido que tem um formato e uma configuração mostrados na FIG. 7. Isto cri- ou uma conexão fluídica entre a região de análise 1510 e o canal 1516, que estariam de outra maneira desconectados e sem comunica- ção fluida um com o outro antes do primeiro uso.
[00260] O cassete incluindo o sistema microfluídico 1500 foi intro- duzido em uma abertura de um analisador. O invólucro do analisador incluiu um braço posicionado dentro do invólucro que foi configurado para acoplar uma superfície ressaltada no cassete. O braço se esten- deu pelo menos parcialmente na abertura no invólucro, de maneira tal que o cassete foi introduzido na abertura, e o braço foi empurrado para longe da abertura em uma segunda posição, permitindo que o cassete entrasse na abertura. Uma vez que o braço acoplou a superfície res- saltada para dentro do cassete, o cassete foi posicionado e retido den- tro do invólucro do analisador, e a impulsão da mola impediu que o cassete deslizasse fora do analisador. O analisador detectou a inser- ção do cassete por meio de um sensor de posição.
[00261] Um leitor de identificação (leitor de RFID) posicionado den- tro do invólucro do analisador foi utilizado para ler um tag de RFID no cassete, o que inclui as informações de identificação do lote. O anali- sador utilizou este identificador para combinar as informações do lote (por exemplo, as informações sobre calibração, data de expiração do cassete, verificação se o cassete é novo e sobre o tipo de análi-
se/ensaio a ser executado no cassete) armazenadas no analisador. O usuário foi alertado para receber as informações sobre o paciente (de cuja amostra foram adquiridas) no analisador utilizando a tela de to- que. Depois que as informações sobre o cassete foram verificadas pe- lo usuário, o sistema de controle iniciou a análise.
[00262] O sistema de controle incluiu as instruções programadas para executar a análise. Para iniciar a análise, um sinal foi enviado à eletrônica que controla um sistema a vácuo, que era parte do analisa- dor e era utilizado para prover o fluxo de fluido. Um distribuidor com anéis em formato de O foi pressionado contra a superfície do cassete por um solenoide. Uma porta no distribuidor foi vedada (por um anel em formato de O) à porta 1536 do sistema microfluídico do cassete. Esta porta no distribuidor foi conectada por um tubo a uma válvula de solenoide simples que estava aberta à atmosfera. Uma porta a vácuo separada no distribuidor vedada (pelo anel em formato de O) à porta 1514 do sistema microfluídico do cassete. Um vácuo de cerca de -30 kPa foi aplicado à porta 1514. Durante toda a análise, o canal incluindo a região de análise 1510 posicionada entre as portas 1540 e 1514 ti- nha uma queda de pressão não zero substancialmente constante de cerca de -30 kPa. A amostra 1522 flui na direção da seta 538 em cada uma das regiões de análise 1510A-1510H. À medida que o fluido pas- sava através das regiões de análise, o PSA e as proteínas de hK2 na amostra 1522 eram capturados pelos anticorpos anti-PSA e anti-hK2 imobilizados nas paredes da região de análise, como descrito em mais detalhes a seguir. Levou cerca de 7-8 minutos para a amostra passar através das regiões de análise, depois do que a amostra restante foi capturada na região de contenção de resíduos 1512.
[00263] A iniciação da análise também envolveu o sistema de con- trole que envia um sinal aos detectores ópticos, que estavam posicio- nados adjacentes a cada uma das regiões de análise 1510, para iniciar a detecção. Cada um dos detectores associados com as regiões de análise gravou a transmissão da luz através dos canais das regiões de análise. À medida que a amostra passava por cada uma das regiões de análise, os picos foram sendo produzidos. Os picos (e as calhas) medidos pelos detectores são sinais (ou são convertidos em sinais) que são enviados ao sistema de controle que compara os sinais medi- dos com os sinais de referência ou os valores pré-programados no sis- tema de controle. O sistema de controle incluiu um conjunto pré- programado de instruções para prover um feedback ao sistema micro- fluídico com base, pelo menos em parte, na comparação dos si- nais/valores.
[00264] Em uma primeira região de análise 1510-A do dispositivo 1500 da FIG. 14, as paredes do canal desta região de análise foram bloqueadas com uma proteína de bloqueio (albumina de soro bovino) antes do primeiro uso (por exemplo, antes de vedar o dispositivo). Quase nenhuma proteína na amostra de sangue se uniu às paredes da região de análise 1510-A (à exceção, talvez, de alguma ligação não específica que pode ser lavada). Esta primeira região de análise agiu como um controle negativo.
[00265] Em uma segunda região de análise 1510-B, as paredes do canal desta região de análise foram revestidas com uma grande quan- tidade predeterminada de um antígeno específico da próstata (PSA) antes do primeiro uso (por exemplo, antes de vedar o dispositivo) para agir como um controle elevado ou positivo. À medida que a amostra de sangue passava através da segunda região de análise 1510-B, quase nenhuma proteínas do PSA no sangue se ligava às paredes do canal. Os anticorpos de sinal conjugados com ouro na amostra ainda não podem se ligar ao PSA na amostra e, desse modo, podem se ligar ao PSA nas paredes do canal para agir como um controle elevado ou po- sitivo.
[00266] Em uma terceira região de análise 1510-C, as paredes do canal desta região de análise foram revestidas com o anticorpo de captura, um anticorpo anti-iPSA, que se liga a um epítopo diferente na proteína do iPSA daquele do anticorpo de sinal conjugado com ouro. As paredes foram revestidas antes do primeiro uso (por exemplo, an- tes de vedar o dispositivo). À medida que a amostra de sangue fluiu através da quarta região de análise durante o uso, as proteínas de iP- SA na amostra de sangue limitam ao anticorpo anti-iPSA de uma ma- neira proporcional à concentração destas proteínas no sangue. Desde a amostra, que o iPSA incluído, também anticorpos etiquetados por ouro incluídos anti-iPSA acoplou ao iPSA, o iPSA capturado nas pare- des da região de análise deu forma a um imunocomplexo do tipo san- duíche.
[00267] Em uma quarta região 1510-D da análise, as paredes do canal desta região de análise foram revestidas com o anticorpo de captura, um anticorpo anti-fPSA, que ligasse a um epítopo diferente na proteína de fPSA do que o anticorpo de sinal conjugado com ouro. As paredes eram revestidas antes do primeiro uso (por exemplo, antes de vedar o dispositivo). À medida que a amostra de sangue fluiu através da quarta região de análise durante o uso, as proteínas do fPSA na amostra de sangue se ligaram ao anticorpo anti-fPSA de uma maneira proporcional à concentração destas proteínas no sangue. Uma vez que a amostra, que incluía o fPSA, também incluía os anticorpos anti- fPSA etiquetados por ouro acoplados ao fPSA, o fPSA capturado nas paredes da região de análise formou um imunocomplexo do tipo san- duíche.
[00268] Em uma quinta região de análise 1510-E, as paredes do canal desta região de análise foram revestidas com o anticorpo de captura, um anticorpo anti-tPSA, que se liga a um epítopo diferente na proteína de tPSA daquele do anticorpo de sinal conjugado com ouro.
As paredes foram revestidas antes do primeiro uso (por exemplo, an- tes de vedar o dispositivo). À medida que a amostra de sangue fluiu através da quinta região de análise durante o uso, as proteínas do tP- SA na amostra de sangue se ligaram ao anticorpo anti-tPSA de uma maneira proporcional à concentração destas proteínas no sangue. Uma vez que a amostra, que incluía o tPSA, também incluía os anti- corpos anti-tPSA etiquetados por ouro acoplados ao tPSA, o tPSA capturado nas paredes da região de análise formou um imunocomple- xo do tipo sanduíche.
[00269] Embora os anticorpos anti-iPSA, anti-fPSA e anti-tPSA eti- quetados por ouro possam ser utilizados, em outras modalidades, os anticorpos anti-PSA etiquetados por ouro que se ligam a qualquer pro- teína do PSA podem ser utilizados para a detecção.
[00270] A primeira, segunda, terceira, quarta e quinta regiões de análise foram formadas em uma única camada do substrato. A sexta (1510-F), sétima (1510-G) e oitava regiões de análise (1510-H) foram formadas em uma camada separada do substrato (1511).
[00271] Na sexta região de análise 1510-F, as paredes do canal desta região de análise foram revestidas com o anticorpo de captura, um anticorpo anti-hK2, que se liga a um epítopo diferente na proteína hK2 daquele do anticorpo de sinal conjugado com ouro. As paredes foram revestidas antes do primeiro uso (por exemplo, antes de vedar o dispositivo). À medida que a amostra de sangue fluiu através da sexta região de análise durante o uso, as proteínas hK2 na amostra de san- gue se ligaram ao anticorpo anti-hK2 de uma maneira proporcional à concentração destas proteínas no sangue. Uma vez que a amostra, que incluía hK2, também incluía os anticorpos anti-hK2 etiquetados por ouro acoplados ao hK2, a hK2 capturada nas paredes da região de análise formou um imunocomplexo do tipo sanduíche.
[00272] A sétima região de análise 1510-G pode ser utilizada como um controle negativo como descrito acima para a região de análise 1510-A. A oitava região de análise 1510-H pode ser utilizada como um controle elevado ou positivo como descrito acima para a região de análise 1510-B.
[00273] Opcionalmente, uma nona região de análise (não mostrada) pode ser utilizada como um controle baixo. Em tal modalidade, as pa- redes do canal desta região de análise podem ser revestidas com uma baixa quantidade predeterminada de PSA antes do primeiro uso (por exemplo, antes de vedar o dispositivo) para agir como um controle baixo. À medida que a amostra de sangue flui através esta região de análise, quase nenhuma proteína de PSA na amostra se liga à parede do canal. Os anticorpos de sinal conjugados com ouro na amostra po- dem se ligar ao PSA nas paredes do canal para agir como um controle baixo.
[00274] Os fluidos de lavagem 1523-1529 seguiram a amostra atra- vés das regiões de análise 1510 até a região de contenção de resí- duos 1512 na direção da seta 1538. À medida que os fluidos de lava- gem passaram através das regiões de análise, os componentes não ligados restantes foram removidos da amostra. Cada tampão de lava- gem limpou os canais das regiões de análise, provendo uma limpeza progressivamente mais completa. O último fluido de lavagem 1529 (á- gua) removeu os sais que poderiam reagir com os sais de prata (por exemplo, cloreto, fosfato, azeto).
[00275] Tal como mostrado no lote ilustrado na FIG. 15, enquanto os fluidos de lavagem estão fluindo através das regiões de análise, cada um dos detectores associados com as regiões de análise mede um padrão 1620 de picos e calhas. As calhas correspondem aos tam- pões de lavagem (que são líquidos transparentes e proporcionam, desse modo, a transmissão de luz máxima). Os picos entre cada tam- pão representam o ar entre cada tampão de líquido transparente. Uma vez que o ensaio incluiu 7 tampões de lavagem, 7 calhas e 7 picos es- tão presentes no lote 1600. A primeira calha 1622 não é de modo geral tão profunda quanto as outras calhas 1624, uma vez que o primeiro tampão de lavagem frequentemente captura as células do sangue à esquerda no canal e não fica desse modo completamente transparen- te.
[00276] O pico final de ar 1628 é muito mais longo do que os picos precedentes, porque não há nenhum tampão de lavagem a seguir. Uma vez que um detector detecta o comprimento deste pico de ar, um ou mais sinais são enviados ao sistema de controle, que compara a duração de tempo deste pico a um valor de sinal ou de entrada de re- ferência pré-ajustado que tem uma duração particular. Se a duração de tempo do pico medido for suficientemente longa em comparação ao sinal de referência, o sistema de controle envia um sinal à eletrônica que controla válvula de respiro 1536 para acionar a válvula e iniciar a mistura dos fluidos 1528 e 1530. (Observe que o sinal de pico de ar 1628 pode ser combinado com um sinal que indica: 1) a intensidade do pico; 2) onde este pico é posicionado como uma função do tempo e/ou 3) um ou mais sinais que indicam que uma série de picos 1620 de intensidade particular já passou. Dessa maneira, o sistema de controle distingue o pico de ar 1628 de outros picos de longa duração, tais co- mo o pico 1610 da amostra, por exemplo, que utiliza um padrão de si- nais.)
[00277] Novamente com referência à FIG. 14, para iniciar a mistura, o solenoide conectado pelo distribuidor à porta de respiro 1536 é fe- chado. Uma vez que o vácuo permanece e nenhum ar pode entrar a- través da válvula de respiro 1536, o ar entra no dispositivo através das portas 1519 e 1521 (que estão abertas). Isto força os dois fluidos 1528 e 1530 nos dois canais de armazenamento a montante da válvula de respiro 1536 a se moverem substancial e simultaneamente em direção à saída 1514. Estes reagentes se misturam na interseção dos canais para formar um reagente de amplificação (uma solução de prata reati- va) que tem uma viscosidade de cerca de 1x10-3 Pa-s. A relação entre os volumes dos fluidos 1528 e 1530 era de cerca de 1:1. O reagente de amplificação continuou através do canal do armazenamento a ju- sante, através do tubo 1544, através das regiões de análise 1510 e então à região de contenção de resíduos 1512. Depois de um período de tempo definido (12 segundos), o analisador reabre a válvula de respiro 1536, de maneira tal que o ar flui através da válvula de respiro 1536 (em vez das portas de respiro). Isto deixa parte do reagente para trás nos canais de armazenamento a montante 1518 e 1520 no dispo- sitivo. Isto também resulta em um único tampão de reagente de ampli- ficação misturado. Os 12 segundos de fechamento da válvula de respi- ro resultam em um tampão de amplificação com cerca de 50 µl. (Em vez de sincronismo simples, uma outra maneira de provocar a reaber- tura da válvula de respiro seria detectar o reagente de amplificação à medida que este entra nas regiões de análise.)
[00278] Uma vez que o reagente de amplificação misturado é está- vel por apenas alguns minutos (geralmente menos de 10 minutos), a mistura foi executada por menos do que um minuto antes do uso na região de análise 1510. O reagente de amplificação é um líquido transparente, de modo que, quando entra nas regiões de análise, a densidade óptica está em seu nível mais baixo. À medida que o rea- gente de amplificação passa através das regiões de análise, a prata é depositada nas partículas de ouro capturadas para aumentar o tama- nho dos coloides para amplificar o sinal. (Como observado acima, as partículas de ouro podem estar presentes nas regiões de análise de controle positivo baixas e elevadas e, até o ponto em que o PSA e a hK2 estavam presentes na amostra, na região de análise do teste.) A prata pode ser então depositada em cima da prata já depositada, dei-
xando mais e mais prata depositada nas regiões de análise. Por fim, a prata depositada reduz a transmissão da luz através das regiões de análise. A redução na luz transmitida é proporcional à quantidade de prata depositada, e pode ser relacionada à quantidade de coloides do ouro capturados nas paredes do canal. Em uma região de análise on- de nenhuma prata está depositada (o controle negativo, por exemplo, ou a área de teste quando a amostra não contém nenhuma proteína alvo), não haverá nenhum aumento (ou aumento mínimo) na densida- de óptica. Em uma região de análise com deposição de prata significa- tiva, a inclinação e o nível final do padrão aumento da densidade ópti- ca serão elevados. O analisador monitora o padrão desta densidade óptica durante a amplificação na área de teste para a determinação da concentração do análito na amostra. Em uma versão do teste, o pa- drão é monitorado dentro dos primeiros três minutos da amplificação. A densidade óptica em cada uma das regiões de análise em função do tempo foi gravada e é mostrada como as curvas 1640-1647 na FIG.
14. Estas curvas corresponderam aos sinais que foram produzidos nas regiões de análise. Após três minutos de amplificação, o analisador interrompe o teste. Nenhuma medição óptica é gravada, e o distribui- dor é desacoplado do dispositivo.
[00279] A partir das curvas, os valores (por exemplo, as concentra- ções) dos marcadores do sangue (por exemplo, iPSA, fPSA, tPSA e/ou hK2) são determinados utilizando um computador (por exemplo, dentro do analisador). Os valores são enviados a um processador (que está em comunicação eletrônica com o analisador) que é programado para avaliar um modelo de regressão logística (por exemplo, tal como aqui descrito) com base, pelo menos em parte, nos valores recebidos para a determinação de uma probabilidade do risco de câncer de prós- tata no paciente, uma indicação de um volume estimado da glândula da próstata e/ou uma indicação de uma probabilidade que uma biópsia de câncer de próstata seja positiva no paciente.
[00280] O resultado do teste é exibido na tela do analisador e é co- municado a uma impressora, computador ou qualquer saída que o u- suário tenha selecionado. O usuário pode remover o dispositivo do a- nalisador e jogá-lo fora. A amostra e todos os reagentes utilizados no ensaio permanecem no dispositivo. O analisador está pronto para ou- tro teste.
[00281] Este exemplo profético mostra que a análise de uma amos- tra que contém o iPSA, o fPSA, o tPSA e/ou a hK2 pode ser executada em um único sistema microfluídico utilizando um analisador que con- trole o fluxo de fluido no cassete e utilizando um feedback de um ou mais sinais medidos para modular o fluxo de fluido. Este exemplo pro- fético mostra também que os resultados de tal análise podem ser utili- zados para a determinação de uma probabilidade de risco de câncer de próstata no paciente, uma indicação de um volume estimado da glândula da próstata e/ou uma indicação de uma probabilidade que uma biópsia de câncer de próstata seja positiva no paciente.

Claims (17)

REIVINDICAÇÕES
1. Sistema para a determinação de uma probabilidade de um evento associado com o câncer da próstata, caracterizado pelo fato de compreender: uma interface de entrada configurada para receber as in- formações de uma pluralidade de marcadores do sangue, em que as informações para a pluralidade de marcadores do sangue incluem um valor de antígeno específico da próstata livre (fPSA) e um valor de PSA total (tPSA); pelo menos um processador programado para avaliar um modelo de regressão logística com base, pelo menos em parte, nas informações recebidas para a determinação de uma probabilidade de um evento associado com o câncer da próstata em uma pessoa, em que a avaliação do modelo de regressão logística compreende: a determinação dos termos de ranhura cúbica para tPSA, em que a determinação dos termos de ranhura cúbica para tPSA com- preende a determinação dos termos de ranhura cúbica para tPSA com base em uma primeira ranhura cúbica que tem um primeiro nó interno entre 2 e 5 e um segundo nó interno entre 5 e 8; a determinação dos termos de ranhura cúbica para fPSA, em que a determinação dos termos de ranhura cúbica para fPSA com- preende a determinação dos termos de ranhura cúbica para fPSA com base em uma segunda ranhura cúbica que tem um terceiro nó interno entre 0,25 e 1 e um quarto nó interno entre 1,0 e 2,0; a determinação de um primeiro valor para tPSA com base, pelo menos em parte, no valor de tPSA recebido e os termos de ra- nhura cúbica determinados para tPSA; a determinação de um segundo valor para fPSA com base, pelo menos em parte, no valor de fPSA recebido e nos termos de ra- nhura cúbica determinados para fPSA; e a determinação da probabilidade do evento associado com o câncer da próstata com base, pelo menos em parte, no primeiro va- lor e no segundo valor; e uma interface de saída configurada para emitir uma indica- ção da probabilidade do evento associado com o câncer da próstata.
2. Sistema, de acordo com a reivindicação 1, caracterizado pelo fato de que os termos de ranhura cúbica para tPSA incluem um primeiro termo de ranhura cúbica e um segundo termo de ranhura cú- bica, em que os termos de ranhura cúbica para fPSA incluem um ter- ceiro termo cúbico ranhura e um quarto termo de ranhura cúbica; em que a determinação do primeiro valor compreende a graduação do valor de tPSA recebido por um valor do primeiro coefici- ente, a graduação do primeiro termo de ranhura cúbica por um segun- do valor do coeficiente, e a graduação do segundo termo de ranhura cúbica por um terceiro valor do coeficiente para produzir valores de tPSA graduados e a soma dos valores de tPSA graduados; e em que a determinação do segundo valor compreende a graduação do valor de fPSA recebido por um valor do quarto coeficien- te, a graduação do terceiro termo de ranhura cúbica por um quinto va- lor do coeficiente, e a graduação do quarto termo de ranhura cúbica por um sexto valor do coeficiente para produzir valores de fPSA gra- duados, e a soma dos valores de fPSA graduados.
3. Sistema, de acordo com a reivindicação 1, caracterizado pelo fato de que as informações para a pluralidade dos marcadores do sangue também incluem um valor de PSA intacto (iPSA) e um valor de calicreína humana 2 (hK2), e em que a determinação da probabilidade do evento associado com o câncer da próstata também é baseada, pelo menos em parte, no valor de iPSA e no valor de hK2.
4. Sistema, de acordo com a reivindicação 1,caracterizado pelo fato de que o primeiro nó interno é especificado como 3,89, o se-
gundo nó interno é especificado como 5,54, o terceiro nó interno é es- pecificado como 0,81, e o quarto nó interno é especificado como 1,19.
5. Sistema, de acordo com a reivindicação 1, caracterizado pelo fato de que a interface de entrada compreende uma interface de rede, e em que a interface de rede é configurada para receber as in- formações para a pluralidade de marcadores do sangue através de pelo menos uma rede.
6. Sistema, de acordo com a reivindicação 1, caracterizado pelo fato de que a interface de entrada também é configurada para re- ceber as informações do paciente, em que as informações do paciente incluem a informação da idade, e em que a determinação da probabili- dade do evento associado com o câncer da próstata também é basea- da, pelo menos em parte, na informação da idade através da: comparação da informação da idade a um valor limite; seleção de um primeiro conjunto de coeficientes quando a informação da idade estiver acima do valor limite e a seleção de um segundo conjunto de coeficientes quando a informação da idade esti- ver abaixo do valor limite; e em que a determinação da probabilidade do evento associ- ado com o câncer da próstata também é baseada, pelo menos em par- te, no primeiro conjunto de coeficientes ou segundo conjunto de coefi- cientes selecionado.
7. Sistema, de acordo com a reivindicação 1, caracterizado pelo fato de compreender adicionalmente: um módulo de detecção configurado para medir as informa- ções para pelo menos um primeiro marcador do sangue da pluralidade de marcadores do sangue, em que o módulo de detecção é configura- do para fornecer as informações para pelo menos um primeiro marca- dor do sangue a pelo menos um processador através da interface de entrada depois de ter medido as informações para pelo menos um primeiro marcador do sangue.
8. Sistema, de acordo com a reivindicação 7, caracterizado pelo fato de que a interface de entrada é configurada para receber pe- lo menos um segundo marcador do sangue da pluralidade de marca- dores do sangue de uma fonte conectada em rede através de uma re- de.
9. Sistema, de acordo com a reivindicação 1, caracterizado pelo fato de que a interface de saída compreende uma interface de exibição, uma interface de alto-falante, ou pelo menos uma fonte de luz, e em que a emissão da indicação compreende a provisão de uma indicação numérica da probabilidade na interface de exibição, proven- do uma indicação de áudio da probabilidade através da interface do alto-falante, ou pela ativação de pelo menos uma fonte de luz.
10. Sistema, de acordo com a reivindicação 1, caracteriza- do pelo fato de que a emissão de uma indicação da probabilidade do evento associado com o câncer da próstata compreende a emissão de uma indicação de um volume estimado da glândula da próstata ou a emissão de uma indicação de uma probabilidade que uma biópsia de câncer da próstata será positiva.
11. Método para a determinação de uma probabilidade de um evento associado com o câncer da próstata, em que o método é caracterizado pelo fato de compreender: a recepção, através de uma interface de entrada, das in- formações para uma pluralidade de marcadores do sangue, em que as informações para a pluralidade de marcadores do sangue incluem um valor de antígeno específico da próstata livre (fPSA) e um valor de PSA total (tPSA); a avaliação, ao usar pelo menos um processador, de um modelo de regressão logística com base, pelo menos em parte, nas informações recebidas para a determinação de uma probabilidade de um evento associado com o câncer da próstata em uma pessoa, em que a avaliação do modelo de regressão logística compreende: a determinação dos termos de ranhura cúbica para tPSA, em que a determinação dos termos de ranhura cúbica para tPSA com- preende a determinação dos termos de ranhura cúbica para tPSA com base em uma primeira ranhura cúbica que tem um primeiro nó interno entre 2 e 5 e um segundo nó interno entre 5 e 8; a determinação dos termos de ranhura cúbica para fPSA, em que a determinação dos termos de ranhura cúbica para fPSA com- preende a determinação dos termos de ranhura cúbica para fPSA com base em uma segunda ranhura cúbica que tem um terceiro nó interno entre 0,25 e 1 e um quarto nó interno entre 1,0 e 2,0; a determinação de um primeiro valor para tPSA com base, pelo menos em parte, no valor de tPSA recebido e nos termos de ra- nhura cúbica determinados para tPSA; a determinação de um segundo valor para fPSA com base, pelo menos em parte, no valor de fPSA recebido e nos termos de ra- nhura cúbica determinados para fPSA; e a determinação da probabilidade do evento associado com o câncer da próstata com base, pelo menos em parte, no primeiro va- lor e no segundo valor; e a emissão de uma indicação da probabilidade do evento associado com o câncer da próstata.
12. Sistema, de acordo com a reivindicação 1, caracteriza- do pelo fato de que também compreende: um analisador de amostra microfluídica em comunicação eletrônica com a interface de emissão, o analisador de amostra microfluídica, o qual compreende: um invólucro; uma abertura no invólucro configurada para receber um cassete que tem pelo menos um canal microfluídico, em que o invólu-
cro inclui um componente configurado para fazer interface com um componente de acoplamento no cassete para detectar o cassete den- tro do invólucro; um sistema de controle da pressão posicionado dentro do invólucro, em que o sistema de controle da pressão é configurado para pressurizar pelo menos um canal microfluídico no cassete para mover a amostra através de pelo menos um canal microfluídico; e um sistema ótico posicionado dentro do invólucro, em que o sistema ótico inclui pelo menos uma fonte de luz e pelo menos um de- tector espaçado da fonte de luz, em que a fonte de luz é configurada para passar através a luz do cassete quando o cassete é inserido no analisador de amostra e em que o detector está posicionado oposto à fonte de luz para detectar a quantidade de luz que passa através do cassete; e uma interface do usuário associada com o invólucro para inserir pelo menos a idade de uma pessoa.
13. Método para a determinação de uma probabilidade de um evento associado com o câncer da próstata em uma pessoa, ca- racterizado pelo fato de que compreende: a provisão de um analisador de amostra microfluídica, o qual compreende: um invólucro; uma abertura no invólucro configurada para receber um cassete que tem pelo menos um canal microfluídico, em que o invólu- cro inclui um componente configurado para formar interface com um componente de acoplamento no cassete para detectar o cassete den- tro do invólucro; um sistema de controle da pressão posicionado dentro do invólucro, em que o sistema de controle da pressão é configurado para pressurizar pelo menos um canal microfluídico no cassete para mover a amostra através de pelo menos um canal microfluídico; um sistema ótico posicionado dentro do invólucro, em que o sistema ótico inclui pelo menos uma fonte de luz e pelo menos um de- tector espaçado da fonte de luz, em que a fonte de luz é configurada para passar a luz através do cassete quando o cassete é inserido no analisador de amostra e em que o detector está posicionado oposto à fonte de luz para detectar a quantidade de luz que passa através do cassete; e uma interface do usuário associada com o invólucro para inserir pelo menos a idade de uma pessoa; a determinação das informações para uma pluralidade de marcadores do sangue ao usar o analisador de amostra microfluídica, em que as informações para a pluralidade de marcadores do sangue incluem um valor de antígeno específico da próstata livre (fPSA), um valor de PSA total (tPSA), e um valor de PSA intacto (iPSA); e a avaliação, ao usar pelo menos um processador, de um modelo de regressão logística com base, pelo menos em parte, nas informações para a determinação de uma probabilidade de um evento associado com o câncer da próstata em uma pessoa, em que a avalia- ção do modelo de regressão logística compreende a graduação de ca- da variável de uma pluralidade de variáveis por um valor do coeficiente diferente para produzir variáveis graduadas e a soma de valores para as variáveis graduadas usadas para produzir a probabilidade do even- to associado com o câncer da próstata em uma pessoa, em que a plu- ralidade de variáveis inclui a idade e pelo menos duas variáveis incluí- das nas informações recebidas do detector e é selecionada do grupo que consiste em fPSA, iPSA, e tPSA.
14. Sistema, de acordo com a reivindicação 1, caracteriza- do pelo fato de também compreender: um dispositivo, o qual compreende:
uma primeira região de análise que compreende um primei- ro parceiro de ligação; e uma segunda região de análise que compreende um se- gundo parceiro de ligação, em que o primeiro parceiro de ligação é adaptado para ligar com pelo menos um dentre o antígeno específico da próstata livre (fPSA), o antígeno específico da próstata intacto (iPSA) e o PSA total (tPSA), e em que o segundo parceiro de ligação é adaptado para li- gar com pelo menos o outro dentre fPSA, iPSA e tPSA, e um detector associado com a primeira e a segunda regiões de análise para determinar a informação sobre a pluralidade de mar- cadores do sangue, em que o dispositivo é configurado para fornecer a informação sobre a pluralidade de marcadores do sangue para pelo menos um processador.
15. Método, caracterizado pelo fato de compreender: a introdução de uma amostra em um dispositivo que com- preende: uma primeira região de análise que compreende um primei- ro parceiro de ligação; e uma segunda região de análise que compreende um se- gundo parceiro de ligação, em que o primeiro parceiro de ligação é adaptado para ligar com pelo menos um dentre o antígeno específico da próstata livre (fPSA), o antígeno específico da próstata intacto (iPSA) e o PSA total (tPSA), e em que o segundo parceiro de ligação é adaptado para li- gar com pelo menos o outro dentre o fPSA, o iPSA e o tPSA, e a provisão para que qualquer um de fPSA, iPSA e/ou tPSA da amostra ligue com o primeiro e/ou segundo parceiros de ligação na primeira e segunda regiões de análise; a determinação de uma característica de fPSA, de iPSA e/ou de tPSA ao usar um ou mais detectores associados com a primei- ra e segunda regiões de análise; a inserção das características de fPSA, de iPSA e/ou de tPSA em um processador programado para avaliar um modelo de re- gressão logística com base, pelo menos em parte, nas informações recebidas de pelo menos um detector para a determinação de uma probabilidade de um evento associado com o câncer da próstata em uma pessoa, em que a avaliação do modelo de regressão logística compreende a graduação de cada variável de uma pluralidade de vari- áveis por um valor do coeficiente diferente para produzir variáveis gra- duadas e a soma de valores para as variáveis graduadas usadas para produzir a probabilidade do evento associado com o câncer da prósta- ta em uma pessoa, em que a pluralidade de variáveis inclui a idade e pelo menos duas variáveis incluídas nas informações recebidas do de- tector e é selecionada do grupo que consiste em fPSA, iPSA e tPSA; e a determinação da probabilidade do evento associado com o câncer da próstata.
16. Sistema, de acordo com a reivindicação 1, caracteriza- do pelo fato de também compreender: um sistema microfluídico em comunicação eletrônica com a interface de emissão para fornecer a informação sobre a pluralidade de marcadores do sangue para a interface de emissão, o sistema mi- crofluídico, o qual compreende: um primeiro canal microfluídico que inclui pelo menos uma entrada e uma saída; um primeiro reagente armazenado no primeiro canal micro- fluídico; uma vedação que cobre a entrada do primeiro canal micro-
fluídico e uma vedação que cobre a saída do primeiro canal microfluí- dico para armazenar o primeiro reagente no primeiro canal microfluídi- co; um segundo canal microfluídico que inclui pelo menos uma entrada e uma saída; uma primeira região de análise, uma segunda região de análise e uma terceira região de análise, em que cada uma das regi- ões de análise inclui um dentre um anticorpo de captura específico an- ti-iPSA, um anticorpo de captura específico anti-fPSA, e um anticorpo de captura específico anti-tPSA; em que uma ou mais dentre a primeira, a segunda e a ter- ceira regiões de análise ficam em comunicação fluida com o segundo canal microfluídico; um conector fluídico que pode ser conectado ao sistema microfluídico, em que o conector fluídico compreende uma passagem de fluido que inclui uma entrada da passagem de fluido e uma saída da passagem de fluido, em que, com a conexão, a entrada da passa- gem de fluido conecta com a saída do primeiro canal microfluídico pa- ra permitir uma comunicação fluida entre o passagem de fluido e o primeiro canal microfluídico, e a saída da passagem de fluido conecta com a entrada do segundo canal microfluídico para permitir uma co- municação fluida entre a passagem de fluido e o segundo canal micro- fluídico, em que o primeiro e o segundo canais microfluídicos não fi- cam em comunicação fluida um com o outro sem uma conexão atra- vés do conector fluídico; e uma fonte de um coloide de metal conjugado a um anticor- po que se liga a anti-PSA.
17. Invenção, em quaisquer formas de suas concretizações ou em qualquer categoria aplicável de reivindicação, por exemplo,
produto, aparelho, processo ou uso, ou qualquer outro tipo de reivindi- cação englobada pela matéria inicialmente descrita, revelada ou ilus- trada no pedido de patente.
BR112014021776-9A 2012-03-05 2013-03-05 Sistema de ensaio e método para a determinação de uma probabilidade de um evento associado com o câncer da próstata BR112014021776B1 (pt)

Applications Claiming Priority (5)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US201261606554P 2012-03-05 2012-03-05
FI20125238 2012-03-05
FI20125238 2012-03-05
US61/606,554 2012-03-05
PCT/US2013/028978 WO2013134179A2 (en) 2012-03-05 2013-03-05 Methods and apparatuses for predicting risk of prostate cancer and prostate gland volume

Publications (2)

Publication Number Publication Date
BR112014021776A2 true BR112014021776A2 (pt) 2021-09-08
BR112014021776B1 BR112014021776B1 (pt) 2022-08-09

Family

ID=49117494

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
BR112014021776-9A BR112014021776B1 (pt) 2012-03-05 2013-03-05 Sistema de ensaio e método para a determinação de uma probabilidade de um evento associado com o câncer da próstata

Country Status (20)

Country Link
US (4) US9672329B2 (pt)
EP (2) EP3312749B1 (pt)
JP (2) JP6308954B2 (pt)
KR (2) KR101933752B1 (pt)
CN (2) CN108108590A (pt)
AU (3) AU2013230167B2 (pt)
BR (1) BR112014021776B1 (pt)
CA (1) CA2866007C (pt)
CL (1) CL2014002347A1 (pt)
CO (1) CO7160023A2 (pt)
EA (2) EA030682B1 (pt)
HK (1) HK1206837A1 (pt)
IL (1) IL234462B (pt)
MX (2) MX2019000711A (pt)
MY (2) MY193914A (pt)
PE (1) PE20150333A1 (pt)
PL (1) PL2823427T3 (pt)
SG (2) SG11201406213WA (pt)
TW (2) TWI638277B (pt)
WO (1) WO2013134179A2 (pt)

Families Citing this family (33)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
ES2687620T3 (es) 2007-05-04 2018-10-26 Opko Diagnostics, Llc Dispositivo y método para análisis en sistemas microfluídicos
TR201815133T4 (tr) 2009-02-02 2018-11-21 Opko Diagnostics Llc Mikrofilidik cihazlar ile ışık etkileşiminin kontrol edilmesi için yapılar.
BR112014021776B1 (pt) 2012-03-05 2022-08-09 Opko Diagnostics, Llc Sistema de ensaio e método para a determinação de uma probabilidade de um evento associado com o câncer da próstata
CN110579435B (zh) 2012-10-15 2023-09-26 纳诺赛莱克特生物医药股份有限公司 颗粒分选的系统、设备和方法
MX2016012667A (es) * 2014-03-28 2017-01-09 Opko Diagnostics Llc Composiciones y metodos relacionados con el diagnostico de cancer de prostata.
US9927447B2 (en) * 2014-06-16 2018-03-27 Southern Methodist Univerisity Composition, device and imaging system for analysis using chemiluminescent probes
US10634665B2 (en) 2014-09-24 2020-04-28 Triad National Security, Llc Bio-assessment device and method of making the device
CN107406510B (zh) * 2015-03-27 2022-02-18 欧普科诊断有限责任公司 前列腺抗原标准品及其用途
JP6475069B2 (ja) * 2015-04-23 2019-02-27 アズビル株式会社 粒子検出装置及び粒子の検出方法
TWI766836B (zh) * 2015-04-29 2022-06-11 美商Ｏｐｋｏ診斷法有限責任公司 用於主動監測前列腺癌之方法、電腦、系統及電腦可讀儲存媒體
CN105232060A (zh) * 2015-08-31 2016-01-13 陈琼 基于独立风险因子组合筛查的预警系统
EP3361951B1 (en) 2015-10-16 2021-06-02 Opko Diagnostics, LLC Articles and methods for preparing a surface for obtaining a patient sample
CA3005084A1 (en) 2015-12-11 2017-06-15 Opko Diagnostics, Llc Fluidic systems involving incubation of samples and/or reagents
HUE055156T2 (hu) 2015-12-29 2021-11-29 Opko Diagnostics Llc Folyadékgyûjtési eszköz és kapcsolódó módszerek
USD810084S1 (en) * 2016-03-23 2018-02-13 Formfox, Inc. Mobile scanner
CN105893782A (zh) * 2016-05-26 2016-08-24 江苏省人民医院 前列腺癌风险预测装置
US11059039B2 (en) * 2016-07-06 2021-07-13 Precision Nanosystems Inc. Smart microfluidic mixing instrument and cartridges
US11346850B2 (en) 2017-06-21 2022-05-31 Gyntools Ltd Assay system including assay apparatus and handheld single use assay devices for use therewith
IL253067B (en) * 2017-06-21 2022-01-01 Gyntools Ltd Test devices and test fixture for use with them
DE202017006951U1 (de) 2017-08-14 2019-02-07 Opko Diagnostics, Llc Multiplex-Assays zur Beurteilung des Prostatakrebsstatus
WO2019035805A1 (en) * 2017-08-14 2019-02-21 Opko Diagnostics, Llc MULTIPLEX ASSAYS TO EVALUATE PROSTATE CANCER CONDITION
US10393667B2 (en) * 2017-12-21 2019-08-27 International Business Machines Corporation Analysis using optical sensors and signal enhancing agents
EP3794354A4 (en) * 2018-05-16 2022-01-12 Opko Diagnostics, LLC METHODS OF DETECTING PROSTATE CANCER ASSOCIATED WITH NEGATIVE RESULTS
CN108985216B (zh) * 2018-07-10 2022-01-25 常州大学 一种基于多元logistic回归特征融合的行人头部检测方法
CN109374891B (zh) * 2018-11-07 2023-04-07 国家纳米科学中心 基于热泳细胞外囊泡检测的前列腺癌检测系统及方法
WO2020205204A1 (en) 2019-04-03 2020-10-08 Opko Diagnostics, Llc Methods for the detection of prostate cancer
IL267301A (en) 2019-06-12 2019-11-28 Gyntools Ltd A test device and hand-held sample collection tools for it
US11549956B2 (en) 2019-10-30 2023-01-10 Gyntools Ltd Assay system including assay apparatus and handheld single use assay devices for use therewith
USD937266S1 (en) 2020-02-25 2021-11-30 Amazon Technologies, Inc. Pedestal scanner
CN111563891B (zh) * 2020-05-09 2023-09-26 吾征智能技术(北京)有限公司 基于颜色认知的疾病预测系统
USD962239S1 (en) * 2020-08-20 2022-08-30 Amazon Technologies, Inc. Pedestal scanner
CN112450982B (zh) * 2020-12-09 2023-03-28 上海市闵行区中心医院 一种通过b超表现预测前列腺癌的定性和数据评分系统
US11896372B2 (en) * 2021-05-18 2024-02-13 Matthew Hummer Device for reading, processing and transmitting test result data for pathogens or viruses in fluid test samples

Family Cites Families (257)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US3735640A (en) 1972-03-10 1973-05-29 L Chizhov Apparatus for injecting a sample into a gas chromatograph
US4318994A (en) 1979-08-30 1982-03-09 Mcdonnell Douglas Corporation Enterobacteriaceae species biochemical test card
US4517302A (en) 1982-11-15 1985-05-14 Technicon Instruments Corporation Continuous flow metering apparatus
CA1211157A (en) 1982-11-22 1986-09-09 Richard L. Columbus Capillary transport device having means for increasing the viscosity of the transported liquid
US4963498A (en) 1985-08-05 1990-10-16 Biotrack Capillary flow device
US4918025A (en) 1987-03-03 1990-04-17 Pb Diagnostic Systems, Inc. Self contained immunoassay element
US4871233A (en) 1987-05-12 1989-10-03 Sheiman David M Thin plate prism and stereoscopic system
US5051237A (en) 1988-06-23 1991-09-24 P B Diagnostic Systems, Inc. Liquid transport system
JPH02176466A (ja) 1988-12-27 1990-07-09 Mochida Pharmaceut Co Ltd 液性試料中の特定物質の測定方法および測定器具
US5286454A (en) 1989-04-26 1994-02-15 Nilsson Sven Erik Cuvette
US5234813A (en) 1989-05-17 1993-08-10 Actimed Laboratories, Inc. Method and device for metering of fluid samples and detection of analytes therein
GB8915512D0 (en) 1989-07-06 1989-08-23 Sec Dep For Health Silver enhanced gold-labelled immuno assay method
JPH03223674A (ja) 1989-11-30 1991-10-02 Mochida Pharmaceut Co Ltd 反応容器
US6176962B1 (en) * 1990-02-28 2001-01-23 Aclara Biosciences, Inc. Methods for fabricating enclosed microchannel structures
SE470347B (sv) 1990-05-10 1994-01-31 Pharmacia Lkb Biotech Mikrostruktur för vätskeflödessystem och förfarande för tillverkning av ett sådant system
SE9002480D0 (sv) 1990-07-23 1990-07-23 Hans Lilja Assay of free and complexed prostate-specific antigen
DE59104604D1 (de) 1990-11-26 1995-03-23 Ciba Geigy Ag Detektorzelle.
US5268147A (en) 1992-02-26 1993-12-07 Miles, Inc. Reversible direction capsule chemistry sample liquid analysis system and method
US5296375A (en) 1992-05-01 1994-03-22 Trustees Of The University Of Pennsylvania Mesoscale sperm handling devices
US5726026A (en) 1992-05-01 1998-03-10 Trustees Of The University Of Pennsylvania Mesoscale sample preparation device and systems for determination and processing of analytes
US5637469A (en) 1992-05-01 1997-06-10 Trustees Of The University Of Pennsylvania Methods and apparatus for the detection of an analyte utilizing mesoscale flow systems
US5304487A (en) 1992-05-01 1994-04-19 Trustees Of The University Of Pennsylvania Fluid handling in mesoscale analytical devices
US5486335A (en) 1992-05-01 1996-01-23 Trustees Of The University Of Pennsylvania Analysis based on flow restriction
US5885527A (en) 1992-05-21 1999-03-23 Biosite Diagnostics, Inc. Diagnostic devices and apparatus for the controlled movement of reagents without membrances
US5516639A (en) 1993-07-22 1996-05-14 Mayo Foundation For Medical Education And Research Antibodies specific for human prostate glandular kallkrein
CA2105515A1 (en) 1993-09-03 1995-03-04 Carlos A. Santizo Lescaille Visual immunoassay method for the detection of ligands, based on the use of opaque plastic supports
WO1995011621A1 (en) 1993-10-28 1995-05-04 I-Stat Corporation Fluid sample collection and introduction device
US20040077074A1 (en) 1993-11-01 2004-04-22 Nanogen, Inc. Multi-chambered analysis device
US6638482B1 (en) 1993-11-01 2003-10-28 Nanogen, Inc. Reconfigurable detection and analysis apparatus and method
US5478751A (en) 1993-12-29 1995-12-26 Abbott Laboratories Self-venting immunodiagnositic devices and methods of performing assays
US5599677A (en) 1993-12-29 1997-02-04 Abbott Laboratories Immunoassays for prostate specific antigen
US6037127A (en) 1994-03-31 2000-03-14 E. I. Du Pont De Nemours And Company Method for detection of non-denatured nucleic acid fragments
US5580523A (en) 1994-04-01 1996-12-03 Bard; Allen J. Integrated chemical synthesizers
US5571410A (en) 1994-10-19 1996-11-05 Hewlett Packard Company Fully integrated miniaturized planar liquid sample handling and analysis device
US5504011A (en) 1994-10-21 1996-04-02 International Technidyne Corporation Portable test apparatus and associated method of performing a blood coagulation test
US5585069A (en) 1994-11-10 1996-12-17 David Sarnoff Research Center, Inc. Partitioned microelectronic and fluidic device array for clinical diagnostics and chemical synthesis
US5603351A (en) 1995-06-07 1997-02-18 David Sarnoff Research Center, Inc. Method and system for inhibiting cross-contamination in fluids of combinatorial chemistry device
JP3220158B2 (ja) 1994-11-14 2001-10-22 トラスティーズ・オブ・ザ・ユニバーシティ・オブ・ペンシルベニア 分析対象物質の確定及び処理のためのメソ規模の試料前処理装置及びシステム
WO1996015269A2 (en) 1994-11-14 1996-05-23 Trustees Of The University Of Pennsylvania Mesoscale polynucleotide amplification devices
US5731212A (en) 1994-12-20 1998-03-24 International Technidyne Corporation Test apparatus and method for testing cuvette accommodated samples
GB9502112D0 (en) 1995-02-03 1995-03-22 British Biocell Int Assay device and method
US5614372A (en) 1995-02-24 1997-03-25 Lilja; Hans Early detection of prostate cancer (CAP) by employing prostate specific antigen (PSA) and human glandular kallikrein (hGK-1)
US6207369B1 (en) 1995-03-10 2001-03-27 Meso Scale Technologies, Llc Multi-array, multi-specific electrochemiluminescence testing
CN1192097C (zh) * 1995-03-10 2005-03-09 梅索磅秤技术有限公司 多阵列、多特异性的电化学发光检验
US6673533B1 (en) 1995-03-10 2004-01-06 Meso Scale Technologies, Llc. Multi-array multi-specific electrochemiluminescence testing
US6168948B1 (en) 1995-06-29 2001-01-02 Affymetrix, Inc. Miniaturized genetic analysis systems and methods
US5856174A (en) 1995-06-29 1999-01-05 Affymetrix, Inc. Integrated nucleic acid diagnostic device
CA2228485A1 (en) 1995-08-03 1997-02-20 Akzo Nobel Nv Diagnostic device
US6709869B2 (en) 1995-12-18 2004-03-23 Tecan Trading Ag Devices and methods for using centripetal acceleration to drive fluid movement in a microfluidics system
WO1997039351A1 (en) 1996-04-12 1997-10-23 Carter Herbert B Novel methods for the prediction and early detection of prostatic adenocarcinoma
US5942443A (en) 1996-06-28 1999-08-24 Caliper Technologies Corporation High throughput screening assay systems in microscale fluidic devices
US5885470A (en) 1997-04-14 1999-03-23 Caliper Technologies Corporation Controlled fluid transport in microfabricated polymeric substrates
US6399023B1 (en) 1996-04-16 2002-06-04 Caliper Technologies Corp. Analytical system and method
US6586193B2 (en) 1996-04-25 2003-07-01 Genicon Sciences Corporation Analyte assay using particulate labels
IL126544A (en) 1996-04-25 2004-08-31 Genicon Sciences Inc Test for component detection using detectable particles in diffused light
BR9710054A (pt) 1996-06-28 2000-01-11 Caliper Techn Corp Aparelhos para separar compostos de teste para um efeito sobre um sistema bioquìmico e para detectar ummefeito de um composto de teste sobre um sistema bioquìmico, processos de determinação de se uma amostra contém um composto capaz de afetar um sistema bioquìmico, de separação de uma pluralidade de compostos de teste para um efeito sobre um sistema bioquìmico e usos de um sistema microfluido e de um substrato de ensaio.
WO1998000705A1 (en) 1996-06-28 1998-01-08 Caliper Technologies Corporation Electropipettor and compensation means for electrophoretic bias
US6074827A (en) 1996-07-30 2000-06-13 Aclara Biosciences, Inc. Microfluidic method for nucleic acid purification and processing
US5840501A (en) 1996-10-25 1998-11-24 Bayer Corporation Determination of cPSA
US5923481A (en) 1996-11-27 1999-07-13 The Regents Of The University Of California Microlens frames for laser diode arrays
AU5895898A (en) 1996-12-20 1998-07-17 Gamera Bioscience Corporation An affinity binding-based system for detecting particulates in a fluid
US5945289A (en) * 1996-12-20 1999-08-31 Lehrer; Steven Method for detecting prostate cancer by apolipoprotein E (Apo-E) genotyping
JP3618511B2 (ja) 1997-04-14 2005-02-09 オリンパス株式会社 微小流路素子
US6632619B1 (en) 1997-05-16 2003-10-14 The Governors Of The University Of Alberta Microfluidic system and methods of use
US6613512B1 (en) 1997-06-09 2003-09-02 Caliper Technologies Corp. Apparatus and method for correcting for variable velocity in microfluidic systems
US6375871B1 (en) 1998-06-18 2002-04-23 3M Innovative Properties Company Methods of manufacturing microfluidic articles
US5876675A (en) 1997-08-05 1999-03-02 Caliper Technologies Corp. Microfluidic devices and systems
US20020092767A1 (en) 1997-09-19 2002-07-18 Aclara Biosciences, Inc. Multiple array microfluidic device units
US6136272A (en) 1997-09-26 2000-10-24 University Of Washington Device for rapidly joining and splitting fluid layers
US5842787A (en) 1997-10-09 1998-12-01 Caliper Technologies Corporation Microfluidic systems incorporating varied channel dimensions
AU1874099A (en) 1997-11-19 1999-06-07 Elena Gromakovskaja Device for sequential discharge of flowable reagents
ES2333283T3 (es) 1998-02-05 2010-02-18 Novartis Ag Procedimiento y dispositivo para medir la luminiscencia.
US6251343B1 (en) 1998-02-24 2001-06-26 Caliper Technologies Corp. Microfluidic devices and systems incorporating cover layers
US6100541A (en) 1998-02-24 2000-08-08 Caliper Technologies Corporation Microfluidic devices and systems incorporating integrated optical elements
US6209928B1 (en) 1998-06-04 2001-04-03 The Regents Of The University Of California Microfluidic interconnects
US7087148B1 (en) 1998-06-23 2006-08-08 Clinical Micro Sensors, Inc. Binding acceleration techniques for the detection of analytes
FR2780791B1 (fr) 1998-07-03 2000-09-01 Bio Merieux Methode de depistage ou de diagnostic d'un adenocarcinome ou d'une pathologie benigne de la prostate et procede de mise en oeuvre
US6794197B1 (en) 1998-07-14 2004-09-21 Zyomyx, Inc. Microdevice and method for detecting a characteristic of a fluid
US6333200B1 (en) 1998-07-27 2001-12-25 University Of Delaware Miniaturized immunosensor assembled from colloidal particles between micropatterned electrodes
WO2000006996A1 (en) 1998-07-28 2000-02-10 Ce Resources Pte Ltd. Optical detection system
US6103199A (en) 1998-09-15 2000-08-15 Aclara Biosciences, Inc. Capillary electroflow apparatus and method
WO2000022436A1 (en) 1998-10-13 2000-04-20 Biomicro Systems, Inc. Fluid circuit components based upon passive fluid dynamics
US6146489A (en) 1998-11-19 2000-11-14 General Electric Company Method and apparatus for depositing scintillator material on radiation imager
US6416642B1 (en) 1999-01-21 2002-07-09 Caliper Technologies Corp. Method and apparatus for continuous liquid flow in microscale channels using pressure injection, wicking, and electrokinetic injection
US20020019059A1 (en) 1999-01-28 2002-02-14 Calvin Y.H. Chow Devices, systems and methods for time domain multiplexing of reagents
WO2000050871A1 (en) 1999-02-26 2000-08-31 Orchid Biosciences, Inc. Microstructures for use in biological assays and reactions
US6297020B1 (en) 1999-03-01 2001-10-02 Bayer Corporation Device for carrying out lateral-flow assays involving more than one analyte
US6319476B1 (en) 1999-03-02 2001-11-20 Perseptive Biosystems, Inc. Microfluidic connector
US6558945B1 (en) 1999-03-08 2003-05-06 Aclara Biosciences, Inc. Method and device for rapid color detection
US6326083B1 (en) 1999-03-08 2001-12-04 Calipher Technologies Corp. Surface coating for microfluidic devices that incorporate a biopolymer resistant moiety
JP2000323241A (ja) 1999-05-12 2000-11-24 Honda Tsushin Kogyo Co Ltd コネクタ
EP1054259A1 (en) 1999-05-19 2000-11-22 Remacle, José Method for the identification of a target compound
US6771376B2 (en) 1999-07-05 2004-08-03 Novartis Ag Sensor platform, apparatus incorporating the platform, and process using the platform
KR100677860B1 (ko) 1999-07-23 2007-02-05 보드 오브 트러스티스 오브 유니버스티 오브 일리노이즈 미세하게 제조되는 장치 및 그의 제조방법
US6495104B1 (en) 1999-08-19 2002-12-17 Caliper Technologies Corp. Indicator components for microfluidic systems
US6858185B1 (en) 1999-08-25 2005-02-22 Caliper Life Sciences, Inc. Dilutions in high throughput systems with a single vacuum source
US6906797B1 (en) 1999-09-13 2005-06-14 Aclara Biosciences, Inc. Side light activated microfluid channels
US6136549A (en) * 1999-10-15 2000-10-24 Feistel; Christopher C. systems and methods for performing magnetic chromatography assays
US8111401B2 (en) 1999-11-05 2012-02-07 Robert Magnusson Guided-mode resonance sensors employing angular, spectral, modal, and polarization diversity for high-precision sensing in compact formats
US6361958B1 (en) 1999-11-12 2002-03-26 Motorola, Inc. Biochannel assay for hybridization with biomaterial
EP1246698B1 (en) 2000-01-06 2006-09-20 Caliper Life Sciences, Inc. Ultra high throughput sampling and analysis systems and methods
WO2001068238A2 (en) 2000-03-14 2001-09-20 Micronics, Inc. Microfluidic analysis cartridge
US6358387B1 (en) 2000-03-27 2002-03-19 Caliper Technologies Corporation Ultra high throughput microfluidic analytical systems and methods
US20050118073A1 (en) 2003-11-26 2005-06-02 Fluidigm Corporation Devices and methods for holding microfluidic devices
AU2001252973A1 (en) 2000-04-17 2001-10-30 Purdue Research Foundation Biosensor and related method
AU6154101A (en) 2000-05-11 2001-11-20 Caliper Techn Corp Microfluidic devices and methods to regulate hydrodynamic and electrical resistance utilizing bulk viscosity enhancers
WO2001089691A2 (en) 2000-05-24 2001-11-29 Micronics, Inc. Capillaries for fluid movement within microfluidic channels
US20010048637A1 (en) 2000-05-24 2001-12-06 Weigl Bernhard H. Microfluidic system and method
US8329118B2 (en) 2004-09-02 2012-12-11 Honeywell International Inc. Method and apparatus for determining one or more operating parameters for a microfluidic circuit
US7262838B2 (en) 2001-06-29 2007-08-28 Honeywell International Inc. Optical detection system for flow cytometry
US20030118486A1 (en) 2000-07-03 2003-06-26 Xeotron Corporation Fluidic methods and devices for parallel chemical reactions
FR2811403B1 (fr) 2000-07-05 2002-08-16 Commissariat Energie Atomique Raccordement d'un micro-tube a une structure
US20020142618A1 (en) 2000-08-04 2002-10-03 Caliper Technologies Corp. Control of operation conditions within fluidic systems
WO2002014926A2 (en) 2000-08-15 2002-02-21 Nanostream, Inc. Optical devices with fluidic systems
US6610499B1 (en) 2000-08-31 2003-08-26 The Regents Of The University Of California Capillary array and related methods
GB2366529A (en) 2000-09-11 2002-03-13 Univ Sheffield Fluidic control valve for an assembly containing a plurality of microreactors
JP2004508571A (ja) 2000-09-18 2004-03-18 プレジデント・アンド・フェローズ・オブ・ハーバード・カレッジ 勾配発生方法及び装置
FI20002127A0 (fi) 2000-09-27 2000-09-27 Artic Partners Oy Ab Uusi vasta-aine, immunomääritys ja menetelmä eturauhassyövän havaitsemiseksi
US6780584B1 (en) 2000-09-27 2004-08-24 Nanogen, Inc. Electronic systems and component devices for macroscopic and microscopic molecular biological reactions, analyses and diagnostics
US6934836B2 (en) 2000-10-06 2005-08-23 Protasis Corporation Fluid separation conduit cartridge with encryption capability
US20020076825A1 (en) * 2000-10-10 2002-06-20 Jing Cheng Integrated biochip system for sample preparation and analysis
US6536477B1 (en) 2000-10-12 2003-03-25 Nanostream, Inc. Fluidic couplers and modular microfluidic systems
US6827095B2 (en) 2000-10-12 2004-12-07 Nanostream, Inc. Modular microfluidic systems
DE60128404D1 (de) 2000-11-20 2007-06-21 Eastern Virginia Med School Verfahren und vorrichtungen zum quantitativen nachweis eines prostata-spezifischen membranantigens und anderer prostatamarker
JP2002236131A (ja) 2000-12-08 2002-08-23 Minolta Co Ltd マイクロチップ
CA2432210A1 (en) 2000-12-29 2002-08-01 Chromagen, Inc. Scanning spectrophotometer for high throughput fluorescence detection
US6878755B2 (en) 2001-01-22 2005-04-12 Microgen Systems, Inc. Automated microfabrication-based biodetector
AU2002306486A1 (en) 2001-02-09 2002-08-28 Microchem Solutions Method and apparatus for sample injection in microfabricated devices
JP2005507489A (ja) 2001-02-23 2005-03-17 ジェニコン サイエンスィズ コーポレーション 検体分析において拡張ダイナミックレンジを提供する方法
US6949377B2 (en) 2001-03-05 2005-09-27 Ho Winston Z Chemiluminescence-based microfluidic biochip
DE10111457B4 (de) 2001-03-09 2006-12-14 Siemens Ag Diagnoseeinrichtung
US7859660B2 (en) 2001-03-20 2010-12-28 Kaiser Optical Systems Laser indication light configuration
US6742661B1 (en) 2001-04-03 2004-06-01 Micronics, Inc. Well-plate microfluidics
US6418968B1 (en) 2001-04-20 2002-07-16 Nanostream, Inc. Porous microfluidic valves
US6729352B2 (en) 2001-06-07 2004-05-04 Nanostream, Inc. Microfluidic synthesis devices and methods
KR100425536B1 (ko) 2001-07-16 2004-03-30 학교법인 포항공과대학교 유체 마이크로칩용 브레드보드
KR100413535B1 (ko) 2001-07-18 2003-12-31 학교법인 포항공과대학교 랩온어칩을 위한 흡광검출 시스템
US7019831B2 (en) 2001-08-24 2006-03-28 Applera Corporation Separation device substrate including non-fluorescent quencher dye
US7218810B2 (en) 2001-09-27 2007-05-15 Bio-Rad Laboratories, Inc. Biochemical assay detection in a liquid receptacle using a fiber optic exciter
JP2005505441A (ja) 2001-10-08 2005-02-24 カリフォルニア インスティテュート オブ テクノロジー 微小加工レンズ、その製造の方法および応用
US7094379B2 (en) 2001-10-24 2006-08-22 Commissariat A L'energie Atomique Device for parallel and synchronous injection for sequential injection of different reagents
US20030138969A1 (en) 2002-01-24 2003-07-24 Jakobsen Mogens Havsteen Closed substrate platforms suitable for analysis of biomolecules
EP1446274A4 (en) 2001-10-26 2010-06-30 Aclara Biosciences Inc SYSTEM AND METHOD FOR SPLASHED MICROREPLICATION OF MICROFLUIDATE SUBSTRATES
US7258837B2 (en) 2001-12-05 2007-08-21 University Of Washington Microfluidic device and surface decoration process for solid phase affinity binding assays
AU2002365278A1 (en) 2001-12-20 2003-07-09 Radius Biosciences Centrifugal array processing device
US6982787B1 (en) 2002-01-02 2006-01-03 The United States Of America As Represented By The Secretary Of The Air Force Modification of the degree of liquid contact with a solid by control of surface and micro-channel capillary geometry
US20030235816A1 (en) 2002-03-14 2003-12-25 Baylor College Of Medicine (By Slawin And Shariat) Method to determine outcome for patients with prostatic disease
DE10213272A1 (de) 2002-03-25 2003-10-23 Evotec Ag Vorrichtung und Verfahren zur Leitungsankopplung an fluidische Mikrosysteme
US7524462B2 (en) 2002-03-29 2009-04-28 Agilent Technologies, Inc. Capillary flow for a heterogenous assay in a micro-channel environment
US7611616B2 (en) 2002-05-07 2009-11-03 Microfabrica Inc. Mesoscale and microscale device fabrication methods using split structures and alignment elements
JPWO2003100425A1 (ja) * 2002-05-28 2005-11-04 株式会社常光 免疫学的クロマトグラフ法の試験紙片の読み取り定量装置
JP4423189B2 (ja) 2002-05-31 2010-03-03 ユィロス・パテント・アクチボラグ 表面プラズモン共鳴に基づく検出装置
DE10227962B4 (de) 2002-06-22 2005-12-15 Lavision Biotec Gmbh Grundkörper für einen Bio-Chip, Anordnung zum Auslesen und Vorrichtung zur Hybridisierung
US7244961B2 (en) 2002-08-02 2007-07-17 Silicon Valley Scientific Integrated system with modular microfluidic components
KR20110019357A (ko) 2002-08-06 2011-02-25 더 존스 홉킨스 유니버시티 난소암의 검출을 위한 생물 마커의 용도
US7605002B2 (en) 2002-09-06 2009-10-20 Epigem Limited Modular microfluidic system
US6878271B2 (en) 2002-09-09 2005-04-12 Cytonome, Inc. Implementation of microfluidic components in a microfluidic system
SE524730C2 (sv) 2002-11-20 2004-09-21 Boule Medical Ab Blodprovsapparat
US20040115794A1 (en) * 2002-12-12 2004-06-17 Affymetrix, Inc. Methods for detecting transcriptional factor binding sites
CA2941139C (en) 2002-12-26 2021-07-20 Meso Scale Technologies, Llc. Assay cartridges and methods of using the same
US20050221281A1 (en) 2003-01-08 2005-10-06 Ho Winston Z Self-contained microfluidic biochip and apparatus
US6832787B1 (en) 2003-01-24 2004-12-21 Sandia National Laboratories Edge compression manifold apparatus
WO2004067162A2 (en) 2003-01-30 2004-08-12 Ciphergen Biosystems Inc. Apparatus for microfluidic processing and reading of biochip arrays
DE10315074A1 (de) 2003-04-02 2004-10-14 Clondiag Chip Technologies Gmbh Vorrichtung zur Vervielfältigung und zum Nachweis von Nukleinsäuren
US7011793B2 (en) 2003-05-15 2006-03-14 Kionix, Inc. Reconfigurable modular microfluidic system and method of fabrication
WO2004111586A1 (en) 2003-05-27 2004-12-23 Wayne State University Diffractive imaging spectrometer
US7435381B2 (en) 2003-05-29 2008-10-14 Siemens Healthcare Diagnostics Inc. Packaging of microfluidic devices
EP1494007B8 (de) 2003-06-30 2014-09-24 Tecan Trading AG Vorrichtung und Verfahren zum Analysieren von Proben
US7461048B2 (en) 2003-07-21 2008-12-02 Aureon Laboratories, Inc. Systems and methods for treating, diagnosing and predicting the occurrence of a medical condition
US7357898B2 (en) 2003-07-31 2008-04-15 Agency For Science, Technology And Research Microfluidics packages and methods of using same
US20060269971A1 (en) 2003-09-26 2006-11-30 Mount Sinai Hospital Methods for detecting prostate cancer
US20050118061A1 (en) 2003-11-28 2005-06-02 Sysmex Corporation Analyzer, assay cartridge and analyzing method
EP1691924B1 (en) 2003-12-10 2016-09-14 The Provost, Fellows, Foundation Scholars, & the other members of Board, of the College of the Holy & Undiv. Trinity of Queen Elizabeth near Dublin A modular biochip assembly
US20050148063A1 (en) 2003-12-24 2005-07-07 Cracauer Raymond F. Disposable reaction vessel with integrated optical elements
CA2564609C (en) 2003-12-31 2014-02-11 President And Fellows Of Harvard College Assay device and method
ES2439225T3 (es) 2004-01-26 2014-01-22 President And Fellows Of Harvard College Sistema y método para el suministro de fluidos
US8030057B2 (en) 2004-01-26 2011-10-04 President And Fellows Of Harvard College Fluid delivery system and method
US8101431B2 (en) 2004-02-27 2012-01-24 Board Of Regents, The University Of Texas System Integration of fluids and reagents into self-contained cartridges containing sensor elements and reagent delivery systems
ES2541680T3 (es) 2004-03-06 2015-07-23 F. Hoffmann-La Roche Ag Dispositivo de muestreo de líquidos corporales
TW200538734A (en) * 2004-03-12 2005-12-01 Aureon Biosciences Corp Systems and methods for treating, diagnosing and predicting the occurrence of a medical condition
US8852862B2 (en) 2004-05-03 2014-10-07 Handylab, Inc. Method for processing polynucleotide-containing samples
WO2005111625A2 (en) * 2004-05-11 2005-11-24 Baylor College Of Medicine Method to predict prostate cancer
US20060154276A1 (en) 2004-05-13 2006-07-13 Prometheus Laboratories Inc. Methods of diagnosing inflammatory bowel disease
WO2005116614A1 (en) 2004-05-24 2005-12-08 Nanostream, Inc. Capillary multi-channel optical flow cell
US7655470B2 (en) 2004-10-29 2010-02-02 University Of Chicago Method for manipulating a plurality of plugs and performing reactions therein in microfluidic systems
EP1611954A1 (en) 2004-07-03 2006-01-04 Roche Diagnostics GmbH Liquid reservoir connector
ATE534925T1 (de) 2004-07-20 2011-12-15 Agency Science Tech & Res Mikrolinse mit variabler brennweite
JP4370214B2 (ja) 2004-07-29 2009-11-25 アルプス電気株式会社 検査用プレートと、前記検査用プレートを用いた検査方法
MX2007001357A (es) 2004-08-02 2009-08-07 Childrens Medical Center Biomarcadores de plaquetas para cancer.
WO2006018044A1 (en) 2004-08-18 2006-02-23 Agilent Technologies, Inc. Microfluidic assembly with coupled microfluidic devices
CA2580494A1 (en) 2004-09-17 2006-03-30 The Johns Hopkins University Biomarkers for breast cancer
WO2006098772A2 (en) 2004-10-13 2006-09-21 U.S. Genomics, Inc. Systems and methods for measurement optimization
EP1526372A3 (en) 2004-11-02 2005-05-04 Agilent Technologies, Inc. Microfluidic system with adjustment for an optical detection
GB0426082D0 (en) 2004-11-26 2004-12-29 Norchip As A device for carrying out biological assays
US8663600B2 (en) * 2005-02-17 2014-03-04 Diaprost Ab Diagnosis of prostate cancer
US20060227328A1 (en) 2005-04-08 2006-10-12 Vanwiggeren Gregory D Light-sensing system that uses light guides
US8501416B2 (en) 2005-04-19 2013-08-06 President And Fellows Of Harvard College Fluidic structures including meandering and wide channels
JP2006308428A (ja) 2005-04-28 2006-11-09 Hitachi High-Technologies Corp 核酸分析方法、核酸分析装置および核酸分析用カートリッジ
WO2006122311A2 (en) 2005-05-11 2006-11-16 The Trustees Of The University Of Pennsylvania Microfluidic chip
WO2006132666A1 (en) 2005-06-06 2006-12-14 Decision Biomarkers, Inc. Assays based on liquid flow over arrays
JP2007017354A (ja) 2005-07-08 2007-01-25 Sumitomo Bakelite Co Ltd 化学反応検出システム
TW200712487A (en) 2005-08-02 2007-04-01 3M Innovative Properties Co Apparatus and method for detecting an analyte
US20070048189A1 (en) 2005-08-26 2007-03-01 Applera Corporation Fluid processing device, system, kit, and method
US20070065954A1 (en) 2005-09-15 2007-03-22 Minoru Taya Surface plasmon resonance biosensor system for detection of antigens and method for determining the presence of antigens
WO2007039852A1 (en) 2005-10-03 2007-04-12 Koninklijke Philips Electronics N.V. Biosensors with improved sensitivity
DE102005048236A1 (de) 2005-10-07 2007-04-12 Ministerium für Wissenschaft, Forschung und Kunst Baden-Württemberg Vorrichtung und Verfahren zur Bestimmung der Volumenanteile der Phasen in einer Suspension
JP2009511896A (ja) 2005-10-12 2009-03-19 コーニンクレッカ フィリップス エレクトロニクス エヌ ヴィ 全ポリマー光導波路センサ
JP4888394B2 (ja) 2005-11-07 2012-02-29 コニカミノルタエムジー株式会社 マイクロリアクタおよびそれを用いた送液方法
EP1960306A4 (en) 2005-11-22 2014-04-02 Mycrolab Diagnostics Pty Ltd MICROFLUIDIC STRUCTURES
MX342351B (es) 2005-12-21 2016-09-26 Meso Scale Technologies Llc Modulos de ensayo que tienen reactivos de ensayo y metodos para hacer y utilizar los mismos.
DE102005062174C5 (de) 2005-12-23 2010-05-06 INSTITUT FüR MIKROTECHNIK MAINZ GMBH Meßchip
WO2007077218A1 (en) 2006-01-03 2007-07-12 Inverness Medical Switzerland Gmbh An optical system; an optical chip for an optical system and a method of using an optical chip for an analytical operation
US7515261B2 (en) 2006-03-06 2009-04-07 Hewlett-Packard Development Company, L.P. Capillary based optical measurement system
BRPI0709176A2 (pt) 2006-03-24 2011-06-28 Phenomenome Discoveries Inc biomarcadores úteis para diagnosticar o cáncer de próstata e seus métodos
US7598091B2 (en) 2006-04-04 2009-10-06 Micropoint Bioscience, Inc. Micromachined diagnostic device with controlled flow of fluid and reaction
AU2007271232A1 (en) * 2006-07-03 2008-01-10 Exonhit Therapeutics Sa Prostate specific transcripts and the use thereof for prostate cancer therapeutics and diagnostics
US20080085219A1 (en) 2006-10-05 2008-04-10 Beebe David J Microfluidic platform and method
KR20080043106A (ko) 2006-11-13 2008-05-16 삼성전자주식회사 광학렌즈 및 그 제조방법
EP1944084B1 (de) 2006-12-08 2010-05-26 ibidi GmbH Ventilvorrichtung für ein Mikrofluidsystem
CN1973778A (zh) 2006-12-08 2007-06-06 南京大学 胃癌术后严重并发症风险度的预测方法
CN101541962A (zh) 2007-03-23 2009-09-23 株式会社东芝 核酸检测盒以及核酸检测装置
WO2008118098A1 (en) 2007-03-26 2008-10-02 Agency For Science, Technology And Research Fluid cartridge, pump and fluid valve arrangement
US7863037B1 (en) 2007-04-04 2011-01-04 Maven Technologies, Llc Ligand binding assays on microarrays in closed multiwell plates
EP2089159B1 (en) 2007-05-03 2013-01-23 Clondiag GmbH Assays
ES2687620T3 (es) 2007-05-04 2018-10-26 Opko Diagnostics, Llc Dispositivo y método para análisis en sistemas microfluídicos
AU2008251877A1 (en) 2007-05-08 2008-11-20 Picobella Llc Methods for diagnosing and treating prostate and lung cancer
JP5203453B2 (ja) 2007-05-18 2013-06-05 アクセラ インク． 集積光学および流体制御要素を有する反応容器
US7799558B1 (en) 2007-05-22 2010-09-21 Dultz Shane C Ligand binding assays on microarrays in closed multiwell plates
CN101329343A (zh) * 2007-06-19 2008-12-24 天津迪爱盟生物技术有限公司 新一代早期诊断前列腺癌试剂盒及其制备方法和检测方法
US20090087860A1 (en) 2007-08-24 2009-04-02 Todd John A Highly sensitive system and methods for analysis of prostate specific antigen (psa)
US7952705B2 (en) 2007-08-24 2011-05-31 Dynamic Throughput Inc. Integrated microfluidic optical device for sub-micro liter liquid sample microspectroscopy
FR2921648A1 (fr) 2007-09-28 2009-04-03 Commissariat Energie Atomique Procede de fabrication d'un composant microfluidique comportant au moins un microcanal rempli de nanostructures.
US7763856B2 (en) 2008-01-31 2010-07-27 Palo Alto Research Center Incorporated Producing time variation in emanating light
US7817254B2 (en) 2008-01-30 2010-10-19 Palo Alto Research Center Incorporated Obtaining information from time variation of sensing results
EP2281201B1 (en) * 2008-05-14 2018-03-28 ETH Zurich Method for biomarker and drug-target discovery for prostate cancer diagnosis and treatment as well as biomarker assays determined therewith
US8039270B2 (en) 2008-05-22 2011-10-18 Maven Technologies, Llc Apparatus and method for performing ligand binding assays on microarrays in multiwell plates
FR2934698B1 (fr) * 2008-08-01 2011-11-18 Commissariat Energie Atomique Procede de prediction pour le pronostic ou le diagnostic ou la reponse therapeutique d'une maladie et notamment du cancer de la prostate et dispositif permettant la mise en oeuvre du procede.
EP2163306A1 (en) 2008-09-12 2010-03-17 F. Hoffmann-la Roche AG Multi-well plate with tailored chambers
CA2741034C (en) 2008-10-20 2021-06-22 Liposcience, Inc. Lipoprotein insulin resistance indexes and related methods, systems and computer programs for generating same
EP2370813A4 (en) * 2008-12-04 2012-05-23 Univ California MATERIALS AND METHODS FOR DIAGNOSIS AND PROGNOSIS OF PROSTATE CANCER
EP2376226B1 (en) 2008-12-18 2018-09-12 Opko Diagnostics, LLC Improved reagent storage in microfluidic systems and related articles and methods
WO2010075446A1 (en) 2008-12-23 2010-07-01 Soar Biodynamics, Ltd. Methods and systems for prostate health monitoring
US20120022793A1 (en) * 2009-01-19 2012-01-26 Miraculins, Inc. Biomarkers for the diagnosis of prostate cancer in a non-hypertensive population
TR201815133T4 (tr) 2009-02-02 2018-11-21 Opko Diagnostics Llc Mikrofilidik cihazlar ile ışık etkileşiminin kontrol edilmesi için yapılar.
KR101563689B1 (ko) 2009-03-13 2015-11-09 삼성전자주식회사 튜브 연결용 부속품 및 이를 구비한 미세유동 시스템
JP2010243406A (ja) * 2009-04-08 2010-10-28 F Hoffmann La Roche Ag Ａｆｐおよびｐｉｖｋａ−ｉｉの測定値を特徴値とした識別関数を利用する、肝臓癌および慢性肝疾患の病態進行度の検出方法
WO2010127322A1 (en) * 2009-05-01 2010-11-04 Genomic Health Inc. Gene expression profile algorithm and test for likelihood of recurrence of colorectal cancer and response to chemotherapy
WO2011130629A1 (en) 2010-04-16 2011-10-20 Claros Diagnostics, Inc. Systems and devices for analysis of samples
US20140227720A1 (en) 2011-06-09 2014-08-14 Quanterix Corporation Methods of determining a patient's prognosis for recurrence of prostate cancer and/or determining a course of treatment for prostate cancer following a radical prostatectomy
WO2013106778A2 (en) 2012-01-13 2013-07-18 Iris International, Inc. Non-equilibrium two-site assays for linear, ultrasensitive analyte detection
BR112014021776B1 (pt) * 2012-03-05 2022-08-09 Opko Diagnostics, Llc Sistema de ensaio e método para a determinação de uma probabilidade de um evento associado com o câncer da próstata
WO2013172779A2 (en) 2012-05-16 2013-11-21 Phadia Ab Method for indicating the presence or non-presence of prostate cancer
RU2675370C2 (ru) 2012-11-20 2018-12-19 Пхадиа Аб Способ выявления присутствия или отсутствия агрессивного рака предстательной железы
MX2016012667A (es) 2014-03-28 2017-01-09 Opko Diagnostics Llc Composiciones y metodos relacionados con el diagnostico de cancer de prostata.
US20170089904A1 (en) 2014-03-28 2017-03-30 Opko Diagnostics, Llc Compositions and methods for active surveillance of prostate cancer
CN107406510B (zh) 2015-03-27 2022-02-18 欧普科诊断有限责任公司 前列腺抗原标准品及其用途
TWI766836B (zh) 2015-04-29 2022-06-11 美商Ｏｐｋｏ診斷法有限責任公司 用於主動監測前列腺癌之方法、電腦、系統及電腦可讀儲存媒體

Also Published As

Publication number Publication date
MX362555B (es) 2019-01-24
EP3312749A1 (en) 2018-04-25
EA201890925A3 (ru) 2019-01-31
AU2018203269B2 (en) 2020-02-27
AU2013230167B2 (en) 2018-05-24
EP2823427B1 (en) 2020-12-16
JP2015512050A (ja) 2015-04-23
TWI638277B (zh) 2018-10-11
MX2019000711A (es) 2022-12-13
AU2018203269A1 (en) 2018-05-31
AU2018203269C1 (en) 2021-07-08
EA036387B1 (ru) 2020-11-03
JP6308954B2 (ja) 2018-04-11
WO2013134179A2 (en) 2013-09-12
CL2014002347A1 (es) 2015-03-27
TW201401094A (zh) 2014-01-01
EA201400984A2 (ru) 2015-04-30
CA2866007C (en) 2023-01-03
EA201890925A2 (ru) 2018-09-28
HK1206837A1 (en) 2016-01-15
CN108108590A (zh) 2018-06-01
CN104364788A (zh) 2015-02-18
US10672503B2 (en) 2020-06-02
AU2020203006A1 (en) 2020-05-28
MY193914A (en) 2022-11-01
KR101933752B1 (ko) 2018-12-28
KR102150771B1 (ko) 2020-09-01
KR20180030920A (ko) 2018-03-26
CN104364788B (zh) 2018-02-06
US20130273643A1 (en) 2013-10-17
KR20140140068A (ko) 2014-12-08
US20170168060A1 (en) 2017-06-15
EP3312749B1 (en) 2024-05-01
US9672329B2 (en) 2017-06-06
US20170091380A1 (en) 2017-03-30
EA030682B1 (ru) 2018-09-28
AU2013230167A1 (en) 2014-09-25
JP2018109644A (ja) 2018-07-12
BR112014021776B1 (pt) 2022-08-09
PE20150333A1 (es) 2015-03-25
CA2866007A1 (en) 2013-09-12
IL234462B (en) 2022-05-01
AU2020203006B2 (en) 2021-04-22
TW201732663A (zh) 2017-09-16
JP6611844B2 (ja) 2019-11-27
SG10201607357YA (en) 2016-10-28
MX2014010608A (es) 2015-05-11
PL2823427T3 (pl) 2021-07-12
EP2823427A2 (en) 2015-01-14
MY171654A (en) 2019-10-22
SG11201406213WA (en) 2014-11-27
TWI596494B (zh) 2017-08-21
US20170091379A1 (en) 2017-03-30
CO7160023A2 (es) 2015-01-15

Similar Documents

Publication Publication Date Title
AU2020203006B2 (en) Methods and apparatuses for predicting risk of prostate cancer and prostate gland volume
US9116124B2 (en) Feedback control in microfluidic systems
JP2020073885A (ja) 前立腺癌のリスク及び前立腺容積を予測する方法及び装置

Legal Events

Date Code Title Description
B06F Objections, documents and/or translations needed after an examination request according [chapter 6.6 patent gazette]
B06U Preliminary requirement: requests with searches performed by other patent offices: procedure suspended [chapter 6.21 patent gazette]
B09A Decision: intention to grant [chapter 9.1 patent gazette]
B16A Patent or certificate of addition of invention granted [chapter 16.1 patent gazette]

Free format text: PRAZO DE VALIDADE: 20 (VINTE) ANOS CONTADOS A PARTIR DE 05/03/2013, OBSERVADAS AS CONDICOES LEGAIS