BR112014005413B1

BR112014005413B1 - Composições anti-inflamatórias que compreendem maldivina3obeta-glucosídeo e um extrato de própolis, complemento alimentar, kit e médodo de preparação da composição

Info

Publication number: BR112014005413B1
Application number: BR112014005413-4A
Authority: BR
Inventors: Loíc Renard; M. Djavad Mossalyai; Jean Michel Merillon
Original assignee: Université De Bordeaux; Nutrivercell
Priority date: 2011-09-08
Filing date: 2012-09-07
Publication date: 2021-08-03
Also published as: BR112014005413A2; BR112014005413B8; DK2800574T3; PL2800574T3; EP2800574A1; FR2979826B1; ES2646444T3; CA2848009A1; JP6043795B2; WO2013034746A1; EP2800574B1; US20140314888A1; CA2848009C; JP2014526451A; FR2979826A1; US9308231B2

Abstract

composições anti-inflamatórias que compreendem maldivina-3-o-beta-glucosídeo e um extrato de própolis. a presente invenção se refere uma composição anti-inflamatória que compreende um extrato vegetal e um extrato de própolis.

Description

[0001] A presente invenção refere-se a uma composição anti-inflamatória que compreende um extrato vegetal que compreende um teor específico de malvidina-3- O-e-glicosídeo e um extrato de própolis. A invenção se refere mais particularmente à utilização dessa composição no tratamento de doenças inflamatórias, notadamente artrite.

[0002] O tratamento atual de patologias inflamatórias, e notadamente da artrite, é baseado majoritariamente na utilização de agentes anti-inflamatórios esteroides (corticoides) ou de agentes anti-inflamatórios não esteroides, tais como o ibuprofeno, o cetoprofeno, o ácido niflúmico ou o diclofenaco.

[0003] Todavia, existem inconvenientes grandes ligados à utilização desses agentes anti-inflamatórios, notadamente seus efeitos nefastos no estômago (úlceras gástricas ou duodenais).

[0004] Além disso, existem tratamentos de fundo que participam na extinção de sintomas da inflamação, tais como as sulfassalazinas (Salazopyrine®).

[0005] Todavia, inúmeros inconvenientes persistem com esses tratamentos, notadamente a toxicidade em longo prazo de moléculas, tais como os corticoides, mas igualmente a ausência de prevenção na aparição da inflamação.

[0006] A atividade anti-inflamatória do própolis, notadamente do ácido cafeico ou de seu éster contido no própolis é conhecida (Borelli et al, Fitoterapia (2002), 73 Suppl 1, 53 a 63).

[0007] Todavia, essa atividade, quando o teor em própolis é limitado, é insuficiente para inibir a resposta inflamatória no caso de doenças inflamatórias crônicas, tais como as artrite.

[0008] A atividade anti-inflamatória de antocianinas, notadamente da malvidina e de seu glicosídeo, é igualmente conhecida (Wang et al, J. Agric. Food. Chem (2002), 50, 850 a 857).

[0009] O documento FR 2 916 141 descreve a utilização da malvidina-3-O-β- glicosídeo em uma composição medicamentosa para prevenir ou tratar uma patologia que implica em processos inflamatórios crônicos ou agudos, notadamente a poliartrite reumatoide.

[0010] Todavia, não existem hoje em dia composições atóxicas, notadamente alimentares ou tópicas, que apresentam uma atividade anti-inflamatória, notadamente em relação a artrite, cuja eficácia é próxima ou equivalente aos agentes anti-inflamatórios comumente utilizados.

[0011] Assim, um primeiro objetivo da invenção consiste em propor uma composição que se isenta dos inconvenientes do estado da técnica e que proporciona uma solução a todo ou parte dos problemas do estado da técnica.

[0012] Outro objetivo é o de propor uma composição anti-inflamatória cuja eficácia em relação ao tratamento de patologias que implicam em processos inflamatórios crônicos ou agudos, notadamente a artrite, é próxima ou equivalente àquela das composições atualmente disponíveis.

[0013] Outro objetivo é o de propor uma composição anti-inflamatória atóxica, que pode se apresentar sob a forma de uma composição alimentar ou de uso tópico.

[0014] Outro objetivo da invenção é o de propor uma composição anti-inflamatória que pode ser combinada com outros agentes anti-inflamatórios, tais como a cortisona ou o metotrexato, que diminui, assim, os riscos de toxicidade ligados à sua utilização.

[0015] A presente invenção tem como objeto uma composição anti-inflamatória que compreende: (a) um extrato vegetal que compreende pelo menos 5% em peso, de preferência de 5 a 20% em peso, vantajosamente de 5 a 15% em peso, de malvidina-3-O-b-glicosídeo; e (b) um extrato de própolis que compreende o ácido cafeico ou um de seus ésteres, o ácido ferúlico, a galangina e a pinocembrina;

[0016] em uma razão em peso a/b de extrato vegetal/extrato de própolis que tem de 1/4 a 4/1.

[0017] A malvidina-3-O-b-glicosídeo é um derivado glicosídeo da malvidina que tem a fórmula a seguir:

[0018] De acordo a invenção, o extrato vegetal pode ser escolhido dentre os extratos de uva, de mirtilos (Vaccinium spp), de amoras (Rubus fruticosus) ou ainda de couves roxas (Brassica oleracea var. capitata f. rubra).

[0019] De acordo a invenção, o extrato vegetal é vantajosamente escolhido dentre os extratos de cutícula de uva.

[0020] De acordo a invenção, o extrato de cutícula de uva é obtido ou suscetível de ser obtido por um método que compreende a concentração de frações polifenólicas de pelo menos um bagaço de uva roxa.

[0021] Por bagaço de uva entende-se o conjunto que forma as cutículas, as sementes e o caule obtidos pelo prensagem da uva após ter separado as mesmas do mosto.

[0022] De acordo a invenção, o bagaço de uva roxa é vantajosamente derivado da prensagem de cachos de uvas derivadas de castas Merlot, Cabernets, tais como Sauvignon ou Franc, Syrah, Gamays, Grenache, Tannat ou Alicanthe Bouchet ou de suas misturas.

[0023] De acordo a invenção, o extrato de cutícula de uva é vantajosamente obtido por um método que compreende a seleção de pelo menos um bagaço de uva roxa e a concentração das frações polifenólicas do dito bagaço.

[0024] O método de obtenção do extrato de cutícula de uva pode compreender notadamente uma primeira etapa de seleção de bagaços de uva roxa e depois uma difusão do dito bagaço na presença de uma dispersão aquosa de dióxido de enxofre.

[0025] Prossegue-se em seguida com uma centrifugação, e depois com uma concentração das frações polifenólicas, notadamente por evaporação, seguida de uma concentração a vácuo.

[0026] O produto obtido dessa maneira pode sofrer uma atomização que permite, assim, obter um extrato de cutícula de uva sob a forma de um pó que compreende pelo menos 5% em peso de malvidina-3-O-b-glicosídeo, assim como uma fraca umidade residual.

[0027] A proporção em malvidina-3-O-b-glicosídeo do extrato vegetal é notadamente medida pelo método de HPLC acoplado a um espectrofotômetro UV-Visível DAD (detecção a 535 nm) utilizando-se uma coluna C18 de fase inversa e um gradiente de solvente composto por ácido trifluoroacético e acetonitrila.

[0028] Como exemplo de extrato de cutículas de uva, pode-se citar um extrato de cutículas de uva que compreende 10% em peso de malvidina-3-O-b-glicosídeo comercializado pela sociedade GRAP’SUD sob a referência Anthos-vin.

[0029] O teor em peso de extrato vegetal na composição de acordo a invenção vai de 0,1 a 50%, de preferência de 1 a 40%.

[0030] O própolis designa toda uma série de substâncias resinosas, gomosas e balsâmicas, de consistência viscosa, reunidas em certas partes, notadamente os brotos e as cascas, de vegetais pelas abelhas que transportam os mesmos até a colmeia e modificam os mesmos em parte com o acréscimo de suas próprias secreções salivares e de cera. Esses vegetais são principalmente árvores, tais como pinhos, abetos, épicéas, choupos, amieiros, salgueiros, castanheiros-da-índia, vidoeiros, ameixeiras, freixos, carvalhos ou ainda olmos.

[0031] Por extrato de própolis entende-se uma forma de própolis que pode ser implantada. A mesma pode ser então não transformada ou tratada, ou ainda transformada na presença notadamente de um excipiente adequado, por exemplo, alfarroba, amido ou derivado de amido, por exemplo, maltodextrina. O própolis pode notadamente se apresentar sob a forma de um pó. Para isso, o própolis pode ser misturado a uma solução hidro alcóolica à qual é acrescentado um excipiente, tal como a maltodextrina ou o pó de alfarroba, enquanto suporte. A mistura assim obtida é evaporada e depois seca. Um extrato de própolis que compreende 18% de própolis e 82% de pó de alfarroba é também comercializado com a denominação própolis PPM 18 pela sociedade LUSTREL. Outro exemplo de extrato de própolis que compreende 60% de própolis e 40% de alfarroba é comercializado pela sociedade Plantex.

[0032] O teor em peso de extrato de própolis na composição de acordo a invenção vai de 20 a 80%, de preferência de 30 a 70%.

[0033] De acordo a invenção, o extrato de própolis compreende um teor em peso de ácido cafeico ou de um de seus ésteres de 0,001 a 0,2%, de preferência de 0,005 a 0,15%, de ácido ferúlico de 0,0001 a 0,005%, de preferência de 0,0005 a 0,003%, de galangina de 0,05 a 10%, de preferência de 0,1 a 6% e de pinocembrina de 0,1 a 5%, de preferência de 0,2 a 3%.

[0034] O ácido cafeico ou ácido (E) 3-(3,4-diidroxifenil)prop-2-enoico é um ácido hidroxicarboxílico que tem aa fórmula a seguir:

[0035] O ácido ferúlico ou ácido 3-(4-hidroxi-3-metoxifenil)prop-2-enoico é um ácido hidroxicarboxílico que tem a fórmula a seguir:

[0036] A galangina ou 3,5,7-triidroxi-2-fenilcromen-4-ona é um derivado flavonoide

[0037] A pinocembrina ou (2R,3R)-3,5,7-Triidroxi-2-fenil-croman-4-ona é um derivado flavonoide que tem a fórmula a seguir:

[0038] Além disso, a composição de acordo a invenção pode compreender igualmente pelo menos um composto ativo adicional que pode ser escolhido dentre os agentes analgésicos, de preferência a capsaicina, vantajosamente derivada de pimentas de Cayenne, os agentes antibacterianos, de preferência um extrato de oxicoco, vantajosamente um extrato de oxicoco Vaccinium macrocarpon, os agentes anti-inflamatórios ou sua mistura.

[0039] Em um modo de realização, a composição de acordo a invenção compreende igualmente a capsaicina ou um agente anti-inflamatório ou sua mistura.

[0040] O teor em peso de capsaicina na composição de acordo a invenção vai de 0,01 a 0,1%, de preferência de 0,025 a 0,075%.

[0041] Como exemplos de extratos de oxicoco, podem-se citar aqueles descritos no documento WO 2011/020957, e notadamente aquele comercializado pela sociedade Tournay Biotechnologies com a referência Exocyan CRAN 20S.

[0042] O teor em peso na composição de acordo a invenção de extrato de oxicoco vai de 5 a 40%.

[0043] Além disso, a composição de acordo a invenção pode compreender igualmente um ingrediente alimentar.

[0044] De maneira vantajosa, o ingrediente alimentar é a piperina.

[0045] A piperina pode ser derivada de diferentes fontes, tais como champignons ou a pimenta preta, branca ou cinza.

[0046] De maneira vantajosa, a piperina é derivada da pimenta preta, branca ou cinza, de preferência da pimenta preta. Como exemplo, pode-se citar o extrato seco de pimenta preta comercializado pela sociedade Plantex que compreende de 10 a 15% de piperina.

[0047] Sem se ater a qualquer teoria em particular, a piperina é suscetível de favorecer a absorção, assim como a biodisponibilidade de compostos ativos presentes na composição de acordo a invenção, notadamente a malvidina-3-O-b- glicosídeo, o ácido cafeico ou um de seus ésteres, o ácido ferúlico, a galangina e/ou a pinocembrina, que permite assim aprimorar a eficácia anti-inflamatória da composição de acordo a invenção.

[0048] De acordo a invenção, o teor em peso de piperina na composição de acordo a invenção vai de 0,01 a 4%, de preferência de 0,1 a 1%.

[0049] O ingrediente alimentar pode ser igualmente escolhido a partir do grupo constituído pelo zinco e seus derivados.

[0050] De acordo a invenção, os derivados do zinco podem ser escolhidos dentre os sais de zinco, tais como o citrato de zinco, o óxido de zinco, o sulfato de zinco, o acetato de zinco ou o gluconato de zinco.

[0051] De maneira vantajosa, o sal de zinco é o sulfato de zinco.

[0052] De acordo a invenção, o teor em peso de zinco ou de um de seus derivados na composição de acordo a invenção vai de 0,01 a 2%, de preferência de 0,1 a 1,5%.

[0053] Outro aspecto da invenção se refere à preparação de uma composição de acordo a invenção, que compreende

[0054] a preparação de um extrato vegetal que compreende pelo menos 5% em peso, de preferência de 5 a 20% em peso, vantajosamente de 5 a 15% em peso, de malvidina-3-O-b-glicosídeo,

[0055] (ii) a mistura do extrato derivado de (i) e de um extrato de própolis.

[0056] De maneira vantajosa, a invenção se refere à preparação de uma composição de acordo a invenção, que compreende: a preparação de um extrato de cutícula de uva obtido pela seleção de pelo menos um bagaço de uva roxa e a concentração das frações polifenólicas do dito bagaço, e (11) a mistura do extrato derivado de (i) e de um extrato de própolis.

[0057] De maneira vantajosa, a invenção se refere à preparação de uma composição de acordo a invenção, que compreende: a preparação de um extrato de cutícula de uva obtido pela seleção de pelo menos um bagaço de uva roxa e a concentração das frações polifenólicas do dito bagaço, em que o dito extrato de cutícula de uva compreende pelo menos 5% em peso, de preferência de 5 a 20% em peso, vantajosamente de 5 a 15% em peso, de malvidina-3-O-b-glicosídeo, e (12) a mistura do extrato derivado de (i) e de um extrato de própolis.

[0058] O conjunto das diferentes características ou preferências da composição de acordo a invenção apresentadas para o extrato de cutícula de uva e o extrato de própolis, assim como aquelas relativas a seus teores, se aplicam igualmente ao método de acordo a invenção.

[0059] A composição de acordo a invenção pode se apresentar sob a forma sólida ou líquida.

[0060] Em um modo de realização particular, a invenção fornece um kit que compreende: (a) uma primeira composição que compreende um extrato vegetal, (b) uma segunda composição que compreende um extrato de própolis.

[0061] O conjunto das diferentes características ou preferências da composição de acordo a invenção apresentadas para o extrato vegetal (a) e o extrato de própolis (b), assim como aquelas relativas a seus teores, se aplicam igualmente ao kit de acordo a invenção.

[0062] Outro aspecto da presente invenção se refere a um complemento alimentar que compreende uma composição de acordo a invenção.

[0063] Em um modo de realização, o complemento alimentar permite diminuir, tratar e/ou prevenir doenças inflamatórias agudas ou crônicas.

[0064] Por doenças inflamatórias agudas ou crônicas, entende-se qualquer patologia ou desordem que implica em processos inflamatórios agudos ou crônicos.

[0065] Inúmeras patologias humanas que implicam em uma inflamação são conhecidas, notadamente a artrite; a poliartrite reumatoide; o lúpus eritematoso, em particular sistêmico; a tireoidite de Hashimoto; a esclerose múltipla, em particular a esclerose em placas; as diabetes, em particular a diabete autoimune; a uveíte; dermatites; psoríase; urticárias; a síndrome nefrótica inflamatória; as glomerulonefrites; a doença inflamatória do cólon; a retocolite ulcero-hemorrágica; a doença celíaca; a doença de Crohn; a síndrome de Sjogren; as alergias; a asma; a asma alérgica; as rinites; o eczema; a endometriose; as doenças ligadas aos transplantes de órgão ou às reações do transplante contra o hospedeiro; as doenças pulmonares obstrutoras crônicas (COPD); as bronquites, em particular as bronquites crônicas; as doenças de Parkinson; as doenças de Alzheimer ou as doenças cutâneas inflamatórias.

[0066] Em um modo de realização preferencial, o complemento alimentar de acordo a invenção é destinado ao tratamento e/ou à prevenção de artrite.

[0067] O complemento alimentar também pode compreender um excipiente ou um vetor inerte, não tóxico, por exemplo, escolhido dentre os gelificantes de origem vegetal, de preferência a gelatina.

[0068] Será possível citar como excipiente inerte os açúcares, como a lactose ou a frutose, a celulose, o carbonato de cálcio, o fosfato tricálcico, o fosfato de magnésio, o estearato de cálcio, o estearato de magnésio, o talco, a sílica coloidal ou amorfa.

[0069] O complemento alimentar pode compreender igualmente um composto escolhido a partir do grupo constituído pelos polióis, como a glicerina ou o sorbitol; os corantes; os edulcorantes como a sucralose ou os ativos aromáticos como a etilvanilina ou o mentol.

[0070] O complemento alimentar de acordo a invenção pode se apresentar sob a forma de pó, de cápsulas duras, de cápsulas, de gomas para mastigar, de granulados, de grânulos, de hóstias, de pílulas, de pastilhas, de comprimidos ou de tabletes. A implantação galênica é efetuada em condições de temperaturas e de pressão que respeitam a integridade de ingredientes implantados e a bioatividade de ingredientes ativos.

[0071] No caso em que a composição de acordo a invenção se apresenta sob a forma de um complemento alimentar, administra-se uma dose eficaz diária, denominada Dose Diária Recomendada (AJR), da composição de acordo a invenção. Por AJR, entende-se uma dose da composição de acordo a invenção consumida por um período de 24 horas.

[0072] Por AJR, entende-se notadamente uma quantidade de composição de acordo a invenção que compreende entre 100 e 400 mg de extrato vegetal e entre 250 e 1.000 mg de extrato de própolis.

[0073] A posologia de administração do complemento alimentar, por exemplo, sob a forma de cápsulas duras, pode variar de 2 a 8 cápsulas duras por dia, em função da natureza e da gravidade da inflamação, a ser renovada caso seja necessário.

[0074] Outro aspecto da presente invenção se refere a uma composição de uso tópico que compreende uma composição de acordo a invenção para o tratamento e/ou a prevenção de doenças inflamatórias agudas ou crônicas, em particular destinada ao tratamento e/ou à prevenção de artrite.

[0075] A composição de uso tópico pode se apresentar sob a forma de uma emulsão água-em-óleo, óleo-em-água, água-em-óleo em água, óleo-em-água em óleo ou de uma formulação anidra. A composição pode se apresentar sob uma forma galênica de uso externo, como um creme, uma pomada ou um gel.

[0076] De acordo a invenção, a composição de uso tópico é aplicada por distribuição na ou nas regiões cutâneas que apresentam uma inflamação.

[0077] Outro aspecto da presente invenção se refere igualmente a um medicamento que compreende uma composição de acordo a invenção para o tratamento e/ou a prevenção de doenças inflamatórias agudas ou crônicas, em particular destinado ao tratamento e/ou à prevenção de artrite.

[0078] Outro aspecto da presente invenção se refere também aos métodos de tratamento que compreendem a administração por via oral ou a aplicação tópica em um mamífero, notadamente um ser humano, de uma composição de acordo a invenção para o tratamento e/ou a prevenção de doenças inflamatórias agudas ou crônicas, em que a composição de acordo a invenção pode, por exemplo, se apresentar sob a forma de um complemento alimentar, de uma composição de uso tópico ou de um medicamento tal como definido anteriormente.

[0079] Em um modo de realização preferencial, o método de tratamento compreende a administração por via oral ou a aplicação tópica de uma composição de acordo a invenção para o tratamento e/ou a prevenção de artrite.

[0080] Esse tratamento pode ser associado a um tratamento terapêutico anti- inflamatório, notadamente à administração de um agente anti-inflamatório, notadamente escolhido dentre os agentes anti-inflamatórios esteroides ou não esteroides.

[0081] A invenção tem então igualmente como objeto a utilização da composição de acordo a invenção para preceder, completar e/ou seguir um tratamento terapêutico ou preventivo anti-inflamatório. Isso significa que o profissional prescreve ao paciente que precisa consumir o mesmo o complemento alimentar ou o medicamento ou aplicar a composição de uso tópico de acordo a invenção para cura antes, durante e/ou após a condução de um tratamento por anti-inflamatório.

[0082] Outro aspecto da presente invenção se refere um kit que compreende: - uma primeira composição que compreende um extrato vegetal (a) e um extrato de própolis (b), - uma segunda composição que compreende um agente anti-inflamatório.

[0083] O conjunto das diferentes características ou preferências da composição de acordo a invenção apresentadas para o extrato vegetal (a) e o extrato de própolis (b), assim como aquelas relativas a seus teores e sua razão se aplicam igualmente ao kit de acordo a invenção.

[0084] Os agentes anti-inflamatórios utilizados no kit de acordo a invenção podem ser escolhidos dentre os agentes anti-inflamatórios esteroides ou não esteroides.

[0085] Os diferentes aspectos da invenção serão mais bem compreendidos com a leitura dos exemplos que seguem. Esses exemplos são fornecidos a título indicativo, sem caráter limitante.

Exemplo 1: produção de um extrato de cutícula de uva

[0086] Após ter selecionado um bagaço de uva roxa dentre uvas derivadas de castas Merlot, Cabernets e Syrah, prossegue-se a uma difusão na presença de uma dispersão aquosa de dióxido de enxofre.

[0087] Uma centrifugação com uma gravidade compreendida entre 7.000 e 7.500 G e um tempo de permanência que tem de 10 a 20 s é em seguida aplicada ao produto assim obtido.

[0088] Ao fim dessa centrifugação, concentram-se os polifenois no produto por evaporação, sendo o produto assim obtido caracterizado por um teor em materiais secos que tem de 30 a 35%.

[0089] Prossegue-se em seguida com uma concentração a vácuo em depressão a 5 kPa (50 mbar) absoluto, sendo o concentrado assim obtido caracterizado por um teor em materiais secos superior ou igual a 35%.

[0090] O concentrado assim obtido é em seguida desidratado por atomização; pulveriza-se assim o concentrado em ar quente em ligeira depressão.

[0091] O produto assim obtido se apresenta sob a forma de um pó caracterizado por um teor em malvidina-3-O-b-glicosídeo igual a 10% em peso e uma umidade relativa inferior a 10%.

Exemplo 2: produção de um extrato de própolis

[0092] Após ter coletado o própolis bruto, o mesmo é colocado em solução hidro- alcóolica, filtrado, concentrado a vácuo e depois pasteurizado. O mesmo é, em seguida, misturado juntamente com o pó de alfarroba enquanto suporte e depois uma etapa de secagem por atomização ("spray-drying") é aplicada à mistura, sendo a dita mistura em seguida peneirada. O extrato de própolis assim obtido se apresenta sob a forma de um pó que contém 60% de própolis ativo.

[0093] O extrato de própolis é caracterizado por um teor médio em peso de ácido cafeico igual a 0,05%, de ácido ferúlico igual a 0,001%, de galangina igual a 1,6% e de pinocembrina igual a 1%. Exemplo 3: complemento alimentar sob a forma de cápsula dura que compreende uma composição de acordo a invenção - Extrato de cutícula de uva(1) 0,100 g - Extrato de própolis(2) 0,200 g (1) Anthos-Vin comercializado pela sociedade Grap’Sud (2) própolis comercializado pela sociedade Plantex

[0094] A composição de acordo o exemplo 3 se apresenta sob a forma de pó e é condicionada em cápsula dura e a posologia de utilização é de 2 a 4 cápsulas duras por dia, a ser renovado caso seja necessário. Exemplos 4 e 5: complementos alimentares sob a forma de cápsula dura que compreende uma composição de acordo a invenção

(1) Anthos-vin comercializado pela sociedade Grap’Sud (2) própolis comercializado pela sociedade Plantex

[0095] A composição de acordo o exemplo 4 se apresenta sob a forma de pó e é condicionada em cápsulas duras.

[0096] A posologia de utilização é de 2 a 6 cápsulas duras por dia, a ser renovada caso seja necessário.

[0097] A composição de acordo o exemplo 5 se apresenta sob a forma de pó e é condicionada em cápsula dura.

[0098] A posologia por tratamento flash é de 4 cápsulas duras a cada 12 horas durante as 48 primeiras horas, e depois de 2 cápsulas duras a cada 12 horas durante as 48 horas seguintes e, caso seja necessário, de 1 a 2 cápsulas duras a cada 12 horas durante as 48 horas seguintes.

[0099] A posologia em tratamento preventivo é de 1 a 2 cápsulas duras, a ser renovada caso seja necessário. Exemplos 6, 7 e 8: complementos alimentares sob a forma de cápsula dura que compreende uma composição de acordo a invenção

(1) Ant hos-vin comercializado pela sociedad e Grap’Sud (2) própolis comercializado pela sociedade Plantex (3) Extrato de pimenta preta a 10% de piperina comercializado pela sociedade Plantex

[00100] As composições de acordo com os exemplos 6, 7 e 8 se apresentam sob a forma de pó e são condicionadas em cápsula dura.

[00101] Sua posologia de utilização em tratamento preventivo é de 2 cápsulas duras por dia durante 30 dias, a ser renovada caso seja necessário.

[00102] Sua posologia de utilização em tratamento flash é de 2 cápsulas duras a cada 12 horas durante 5 dias. Exemplo 9: composição tópico sob a forma de gel que compreende uma composição de acordo a invenção

[00103] A composição é preparada por mistura de soluções hidro-alcóolicas de extrato de cutícula de uva e de extrato de própolis, e depois acréscimo de agentes gelificantes e hidratantes e, enfim, complemento por água e conservantes, para obter a textura desejada.

[00104] A posologia de aplicação é de 1 a 4 aplicações por dia, a ser renovada caso seja necessário. Exemplo 10: estudo da hematotoxicidade de extratos de cutícula de uva, de própolis, assim como de um extrato de oxicoco enquanto composto ativo adicional

[00105] Esse estudo tem como objetivo mostrar que os diferentes extratos que podem ser incorporados em uma composição de acordo a invenção não têm ação tóxica nas células humanas.

[00106] Culturas celulares e dosagens de citocinas foram realizadas.

[00107] Os três extratos avaliados são os seguintes:

[00108] Extrato de cutículas de uva (Anthos-vin), ressuspenso a 331 mg/ml no etanol a 100%,

[00109] Extrato de própolis, ressuspenso a 500 mg/ml no etanol a 70%,

[00110] Extrato de oxicoco, ressuspenso a 50 mg/ml no metanol a 90%.

[00111] As células mononucleadas humanas foram isoladas a partir de sangue periférico derivado de 3 doadores sãos diferentes. A técnica utilizada foi o isolamento em gradiente de Ficoll. Entre Ficoll e plasma se estabelece um anel celular composto por monócitos e linfócitos. O mesmo é recuperado e lavado em PBS (Solução Salina Tamponada por Fosfato - Phosphate Buffered Saline) para o cálculo em Célula de Malassez.

[00112] As células mononucleadas sanguíneas (PBMC, Peripheral Blood Mononuclear Cells) são cultivadas (10 6/ml) à razão de 105 células por cavidades em placa de 96 cavidades para os testes de hematotoxicidade, no meio de RPMI (Roswell Park Memorial Institute) suplementado com 10% de soro de vitela fetal SVF descomplementado e antibióticos, a fim de evitar uma infecção bacteriana: penicilina (100 Ul/ml) e estreptavidina (100 μg/ml).

[00113] O teste de proliferação celular a MTS (3-(4,5-dimetiltiazol-2-il)-5-(3- carboximetoxifenil)-2-(4-sulfofenil)-2H-tetrazolio) é um método colorimétrico para determinar o número de células viáveis em proliferação. O teste utiliza a transformação de MTS em formazan (produto colorido) que é solúvel no meio de cultura celular. A absorvância do formazan pode ser diretamente lida a 490 nm por um espectrofotômetro. A redução de MTS em formazan solúvel é induzida por desidrogenases implicadas no metabolismo de células ativadas.

[00114] As PBMC são colocadas em cultura à razão de 105 células por cavidade de placas de 96 cavidades em condição quiescente (células virgens) ou em condição proliferativa (na presença de Bacto-Fitohemaglutinina P (PHA, Difco) a 0,5 μg/ml). O PHA tem uma atividade mitótica nos linfócitos T e induz sua proliferação.

[00115] Os extratos foram testados em PBMC provenientes de 2 doadores diferentes, quadruplicados, em diferentes concentrações: 8, 17, 33 e 66 μg/ml para Anthos-vin; e 5, 20, 50 e 100 μg/ml para o própolis e o oxicoco, comparativamente a PBMC nas quais nenhum extrato foi testado.

[00116] Nenhum dos 3 extratos mostrou citotoxicidade nas células hematopoiéticas de dois doadores em cultura, assim como aqueles que foram testados em concentrações que tem até 200 μg/ml para os extratos de própolis e de oxicoco, e 66 μg/ml para o extrato de cutículas de uva.

[00117] Nenhuma toxicidade foi observada nas composições que associam extrato de cutículas de uva e extrato de própolis, nem naquelas que associam extrato de cutículas de uva, extrato de própolis e extrato de oxicoco. Exemplo 11: estudo da atividade anti-inflamatória in vitro de uma composição de acordo a invenção.

[00118] Esse estudo tem como objetivo demonstrar a atividade in vitro anti- inflamatória de composições de acordo a invenção, em que uma primeira composição associa extrato de cutículas de uva (Anthos-vin) e extrato de própolis e em que uma segunda associa extrato de cutículas de uva (Anthos-vin), extrato de própolis e extrato de oxicoco.

[00119] As culturas celulares e as dosagens de citocinas foram realizadas.

[00120] As composições seguintes foram testadas:

[00121] Composições, de acordo a invenção: - uma composição que compreende 8 μg/ml de Anthos-vin e 25 μg/ml de extrato de própolis, - uma composição que compreende 16 μg/ml de Anthos-vin e 50 μg/ml de extrato de própolis, - uma composição que compreende 33 μg/ml de Anthos-vin e 100 μg/ml de extrato de própolis, - uma composição que compreende 8 μg/ml de Anthos-vin, 25 μg/ml de extrato de própolis e 25 μg/ml de extrato de oxicoco, - uma composição que compreende 16 μg/ml de Anthos-vin, 50 μg/ml de extrato de própolis e 50 μg/ml de extrato de oxicoco, - uma composição que compreende 33 μg/ml de Anthos-vin, 100 μg/ml de extrato de própolis e 100 μg/ml de extrato de oxicoco,

[00122] Composições de referência: - uma composição que compreende 8 μg/ml de Anthos-vin, - uma composição que compreende 16 μg/ml de Anthos-vin, - uma composição que compreende 33 μg/ml de Anthos-vin, - uma composição que compreende 25 μg/ml de extrato de própolis, - uma composição que compreende 50 μg/ml de extrato de própolis, - uma composição que compreende 100 μg/ml de extrato de própolis, - uma composição que compreende 25 μg/ml de extrato de oxicoco, - uma composição que compreende 50 μg/ml de extrato de oxicoco, - uma composição que compreende 100 μg/ml de extrato de oxicoco.

[00123] As PBMC foram isoladas a partir de sangue periférico derivado de 3 doadores sãos diferentes. A técnica utilizada foi o isolamento em gradiente de Ficoll. Entre Ficoll e plasma se estabelece um anel celular composto por monócitos e linfócitos. O mesmo é recuperado e lavado em PBS para cálculo em Célula de Malassez.

[00124] Os macrófagos de ratos foram isolados por lavagem a PBS do peritônio dos animais, centrifugação do mesmo e lavagem em PBS para cálculo em Célula de Malassez.

[00125] As PBMC foram cultivadas (10 6/ml) à razão de 5.105 células por cavidade em placa de 24 cavidades, no meio de RPMI suplementado com 10% de SVF descomplementado e antibióticos: penicilina (100 UI/ml) e estreptavidina (100 μg/ml).

[00126] Os macrófagos de ratos foram cultivados (10 6/ml) à razão de 5.105 células por cavidade em placa de 24 cavidades no meio de RPMI suplementado com 10% de SVF descomplementado e antibióticos penicilina (100 UI/ml) e estreptavidina (100 μg/ml).

[00127] Para induzir uma reação inflamatória nas PBMC e nos macrófagos de ratos, as células são incubadas na presença de LPS (LipoPoliSacarídeo bacteriano, produto pró-inflamatório) a 10 μg/ml durante 48h.

[00128] Dosagem do NO: após 48h de cultura de macrófagos peritoneais de ratos, os sobrenadantes tiveram amostras retiradas. O NO tem uma alta reatividade química. Na presença de água, esse radical livre é rapidamente oxidado de modo estequiométrico e forma, assim, íons de nitretos (NO2-) de acordo a reação:

[00129]

[00130] Os nitretos se acumulam nos meios e são facilmente detectáveis quimicamente pelo método de Griess (Kolb e al., 1994):

[00131] Griess A: Sulfanilamida a 1% em HCl a 1,2N,

[00132] Griess B: Naftileno diamina dicloridrato a 0,3% em água destilada

[00133] A 60 μl de Griess A e 60 μl de Griess B, foram acrescentados 50 μl de sobrenadante de cultura a ser dosado. A reação colorimétrica é desenvolvida ao abrigo da luz durante 10 min. As densidades ópticas obtidas a 540 nm foram corrigidas pela subtração de DO obtidos nas cavidades que contêm o meio de cultura sozinho.

[00134] Dosagem de mediadores da inflamação: 48h após a ativação por LPS das PBMC, 25 μl de sobrenadante celular tiveram amostras retiradas e foram imediatamente testados para a dosagem de citocinas pró- e anti-inflamatórias pela técnica do FlowCytomix.

[00135] O FlowCytomix de ser humano é um sistema de imunoensaio por esferas fluorescentes para a detecção quantitativa por citometria em fluxo do Interferão-g, a Interleucina-1b, Interleucina-2, Interleucina-4, Interleucina-5, Interleucina-6, Interleucina-8, Interleucina-10, Interleucina-12p70 e o Fator de Necrose de Tumor a e b nos sobrenadantes de cultura.

[00136] Microesferas foram revestidas com anticorpos direcionados especialmente para cada citocina detectada pelo sistema multiplex. As esferas podem ser diferenciadas por seu tamanho e por sua emissão espectral. Uma mistura de cada esfera revestida para cada citocina foi incubada com a amostra ou a gama do padrão. As citocinas presentes na amostra se ligam aos anticorpos fixados na esfera fluorescente. Um segundo anticorpo acoplado à biotina foi acrescentado à mistura, em que esse anticorpo específico se liga às citocinas capturadas pelo primeiro anticorpo.

[00137] A estreptavidina-ficoeritrina foi acrescentada, a mesma se liga ao conjugado de biotina e emite um sinal fluorescente.

[00138] Dosagem de Prostaglandina E2: as vias de transdução do sinal de eicosanoides são extremamente conservadas e implicadas em inúmeros processos fisiopatológicos. As prostaglandinas são sintetizadas a partir do ácido araquidônico pelas ciclo-oxigenases (COX-1 e COX-2), que convertem o ácido em Prostaglandina H2 (PGH2). Esse último é então transformado pelas prostaglandinas sintases microssomais ou citosólicas em prostaglandinas E2 (PGE2) ou em diversos outros prostanóides.

[00139] A PGE2 é produzida por uma grande variedade de tecidos e em inúmeras condições fisiopatológicas, das quais as inflamações, as artrite, a febre, os tecidos lesionados, a endometriose e inúmeros cânceres.

[00140] A PGE2 foi dosada nos sobrenadantes de cultura com a ajuda de um kit de dosagem ELISA (Tebu-Bio, Le Perray em Yvelines, França).

[00141] Quarenta e oito horas após a ativação por LPS de PBMC, 100 μl de sobrenadante celular têm sua amostra retirada e são imediatamente testados para a dosagem do PGE2.

[00142] A tabela 1 apresenta os resultados obtidos e mostra os efeitos de diferentes composições em relação à taxa de mediadores pro-inflamatórios. Tabela 1

• Porcentagem de inibição em relação às células ativadas na ausência de extratos

[00143] Esses resultados mostram que a composição de acordo a invenção que associa Anthos-vin e própolis tem melhor ação anti-inflamatória global que aquelas que compreendem Anthos-vin ou própolis sozinhos.

[00144] Esses resultados mostram igualmente que a composição de acordo a invenção que associa Anthos-vin, própolis e oxicoco tem uma ação significativa em relação a TNF-a e IFN-g, então que o oxicoco sozinho apresenta apenas pouco interesse para uma ação anti-inflamatória.

[00145] Para confirmar esses resultados, foi testada uma composição de acordo a invenção que compreende (33 μg de Anthos-vin + 100 μg de extrato de própolis)/ml na transcrição de genes codificantes para as moléculas inflamatórias no ser humano.

[00146] As culturas celulares e as dosagens de citocinas foram realizadas.

[00147] As células mononucleadas humanas foram isoladas a partir de sangue periférico derivado de um doador. A técnica utilizada foi o isolamento em gradiente de Ficoll. Entre Ficoll e plasma é estabelecido um anel celular composto por monócitos e linfócitos. O mesmo foi recuperado e lavado em PBS para cálculo em Célula de Malassez.

[00148] As PBMC foram cultivadas (10 6/ml) à razão de 1.107 células por cavidade em placa de 6 cavidades, no meio de RPMI suplementado com 10% de SVF descomplementado e antibióticos: penicilina (100 UI/ml) e estreptavidina (100 μg/ml).

[00149] Uma reação inflamatória foi induzida nas PBMC. Rapidamente, as células foram incubadas na presença de LPS.

[00150] A PCR quantitativa permite perfilar 84 genes-chave.

[00151] No nível inflamatório, a PCR em tempo real permite medir a expressão genética de 84 genes que representam os principais mediadores pró/anti- inflamatórios (quimiocinas, receptores de quimiocinas, citocinas, receptores de citocinas e genes conectados ao motivo inflamatório), mas também aqueles implicados na transdução do sinal, a apoptose e o ciclo celular. Utilizando-se a PCR em tempo real, é possível analisar a expressão de um painel dirigido de genes em relação à reação inflamatória.

[00152] Os genes dirigidos são listados abaixo:

[00153] Moléculas de vias de transdução: FOS, HSF1, HSP90AA2, HSP90AB1, HSPB1, JUN, IKBKB, MYC, NFKB1, NOX5, STAT1, STAT3, TANK;

[00154] Moléculas implicadas nas vias apoptóticas: BAD, BAX, BCL2, CASP10, CASP3, CASP9, TP53;

[00155] Moléculas de adesão: ICAM1, ITGAX, SELE, SELPLG, VCAM1;

[00156] Moléculas do ciclo celular: CCNC, CCND1, CDKN1B, CDKN2B, MAP2K1, MAPK1, MAPK11;

[00157] Quimiocinas e Citocinas: CCL3 (MIP-1a), CCL20 (MIP-3a), CXCL9, CXCL10 (IP-10), CXCL11 (I-TAC / IP-9), IFNA2, IFR1, IL10, IL17C, IL1A, IL1B, IL2, IL22, IL4, IL6, IL8, LTA, LTB, MIF, TGFB2, TGFB3;

[00158] Receptores de Citocinas: IL1RN;

[00159] Ligantes do TNF e Receptores: CD40LG, FAS, FASLG, LTA (LT-a), LTB (LT-b), TNF (TNF-a), TNFRSF1A (TNFR1), TNFRSF10A TNFRSF10B.

[00160] Outros fatores Implicados na Resposta Inflamatória: C3, CAT, CRP, CYP1A1, CYP2E1, CYP7A1, GPX1, ICEBERG, MMP1, MMP10, MMP3, MMP7, NOS, NOS2A, NOS3, PRKCA, SOD1, SOD2.

[00161] O ARN total de células foi extraído com a ajuda de um kit de extração (Qiagen, França). Esse ARN foi analisado qualitativamente e quantitativamente a fim de verificar a integralidade desse material. Uma amostra de ARN foi migrada em gel de agarose a 1% a 80V a fim de verificar a presença de ARN ribossômicos 28S e 16S, de ARN de transferência e de ARN mensageiros (medida qualitativa).

[00162] Além disso, esse ARN foi dosado a 230 nm, 260 nm e 280 nm a fim de ser quantificado e de verificar a ausência de contaminantes proteicos.

[00163] Um μg de ARN foi utilizado para a PCR em tempo real. Com a ajuda de um kit (eBioscience, França), o ARN foi retro-transcrito em ADNc e depois amplificado por PCR. Simultaneamente à amplificação, a utilização de uma sonda fluorescente (Sybergreen), permitiu medir em tempo real a integração de bases genômicas. O conjunto de resultados foi analisado com a ajuda de um programa de computador adaptado.

[00164] Além disso, a utilização de um aparelho de PCR em tempo real é necessária (Stratagène MX3000P).

[00165] A tabela 2 abaixo apresenta as principais modificações significativas da transcrição de genes pró-inflamatórios nas células incubadas com a composição de acordo a invenção em relação às células não tratadas. Tabela 2

[00166] Os resultados mostram que os genes em relação à inflamação são, na maioria, inibidos (IL-1, C3, IL-6 e IL-8).

[00167] Além disso, na presença de uma composição de acordo a invenção, a transcrição do TGFb2 e do interferão-a, que são ambos moléculas bem conhecidas por sua ação anti-inflamatória, é aumentada.

[00168] Além disso, os resultados mostram igualmente que os ARN codificantes para as proteínas protetoras de células (HSP, DAX, BCL-2, SOD1) são aumentados, o que confirma a ausência de toxicidade da composição de acordo a invenção nas células humanas.

[00169] Exemplo 12: estudo da atividade anti-inflamatória in vivo de uma composição de acordo a invenção.

[00170] Esse estudo foi realizado com o objetivo de confirmar os resultados do estudo in vitro. Para isso foram testados in vivo diferentes composições de acordo a invenção no modelo de rato artrítico. Esse modelo consiste em desenvolver uma crise de inflamação crônica no rato jovem por injeção de antígeno bacteriano. Esse modelo apresenta a vantagem de ter inúmeras similaridades com os sintomas da poliartrite reumatoide no ser humano: uma simetria nas articulações implicadas, articulações periféricas que são preferencialmente tocadas, uma hiperplasia sinovial, uma infiltração de células inflamatórias, erosões marginais e melhor susceptibilidade da doença nas fêmeas. Ao contrário da poliartrite reumatoide humana, não se detecta vestígios de fatores reumatoides no soro.

[00171] Deve ser notado que o estado inflamatório de ratos é muito avançado (em relação ao ser humano) e necessita de doses terapêuticas 10 a 20 vezes superiores àquelas utilizadas no ser humano (testes efetuados com a corticoterapia), em particular pela via oral.

[00172] Ratos Lewis fêmeas com idades de 6 semanas foram imunizados por uma injeção intradermal, na base da cauda, com 60 mg de Mycobacterium butyricum exterminados pelo calor e emulsificados em uma solução oleosa.

[00173] A J+7, uma segunda imunização, nas mesmas condições, foi realizada. Os primeiros sinais clínicos aparecem em J+14.

[00174] Os ratos desenvolvem rapidamente uma artrite no nível das articulações periféricas (essencialmente as patas posteriores) com uma forte reação inflamatória da cavidade sinovial se traduzindo em uma quase paralisia da articulação relacionada e uma erosão destrutiva do tecido ósseo. Como em muitos modelos patológicos, o animal sofre uma forte perda de peso.

[00175] Os sintomas inflamatórios são avaliados seguindo uma pontuação clínica pré-estabelecida e resumida na tabela 3: Tabela 3

[00176] Sete dias antes da 1a imunização com Mycobacterium butyricum, os ratos são separados em diversos grupos:

[00177] Grupo 1: controles negativos, ratos sãos;

[00178] Grupo 2: controles positivos, ratos que tem uma artrite experimental sem tratamento;

[00179] Grupo 3: ratos artríticos que recebem 5 doses (uma todos os 2 dias) de uma composição de acordo a invenção que compreende 30 mg de Anthos-vin e 100 mg de extrato de própolis por kg de animal e por dose, desde o 1o dia de aparição de sintomas;

[00180] Grupo 4: ratos artríticos que recebem continuamente, todos os 2 dias, uma dose de uma composição de acordo a invenção que compreende 30 mg de Anthos-vin e 100 mg de extrato de própolis por kg de animal e por dose, desde o 1o dia de sintomas e até o fim do estudo (J+50);

[00181] Grupo 5: ratos artríticos que recebem 5 doses (uma todos os 2 dias) de uma composição de acordo a invenção que compreende 150 mg de Anthos-vin e 500 mg de extrato de própolis por kg de animal e por dose, desde o 1o dia de aparição de sintomas;

[00182] Grupo 6: ratos artríticos que recebem continuamente, todos os 2 dias, uma dose de uma composição de acordo a invenção que compreende 150 mg de Anthos-vin e 500 mg de extrato de própolis por kg de animal e por dose desde o 1o dia de sintomas e até o fim do estudo (J+50).

[00183] A partir da aparição de sintomas, os ratos dos grupos 3, 4, 5 e 6 recebem por via oral (sonda gástrica) todos os 2 dias seu tratamento, seja durante 10 dias (Grupo 3 e 5), seja continuamente (Grupo 4 e 6).

[00184] Os mesmos são pesados cotidianamente e sua pontuação clínica é registrada.

[00185] Os resultados desse estudo são apresentados nas tabelas 4 e 5: Tabela 4

[00186] O conjunto de ratos tratados por uma das composições de acordo a invenção apresenta pontuações clínicas bem inferiores em relação aos ratos não tratados.

[00187] As composições de acordo a invenção diminuem fortemente a severidade de sinais patológicos. O número de patas tocadas e a inflamação das mesmas são consideravelmente reduzidos.

[00188] Deve ser notado que os ratos que recebem doses moderadas de maneira contínua (grupos 4 e 6) mostram melhor resposta em relação aos outros ratos que recebem 5 doses (grupos 3 e 5).

[00189] Além disso, nenhuma toxicidade aparente foi constatada nos ratos dos grupos 3, 4, 5 e 6 (ausência de sangramento, náusea, diarreia, perda de apetite). Tabela 5

[00190] Esses resultados confirmam que as composições de acordo a invenção testadas permitem diminuir muito significativamente a importância de sinais patológicos.

Claims

1. Composição anti-inflamatória, caracterizada pelo fato de que compreende a. um extrato vegetal que compreende pelo menos 5% em peso, de preferência de 5 a 20% em peso, vantajosamente de 5 a 15% em peso, de malvidina-3-O-e-glicosídeo; e b. um extrato de própolis que compreende o ácido cafeico ou um de seus ésteres, o ácido ferúlico, a galangina e a pinocembrina; em uma razão em peso a/b de extrato vegetal/extrato de própolis que tem de 1/4 a 4/1.

2. Composição, de acordo com a reivindicação 1, caracterizada pelo fato de que o extrato vegetal é um extrato de cutícula de uva, obtido ou suscetível de ser obtido por um método que compreende a concentração de frações polifenólicas de pelo menos um bagaço de uva roxa.

3. Composição, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 2, caracterizada pelo fato de que compreende - de 0,1 a 50% em peso, de preferência de 1 a 40% em peso, de extrato vegetal, ou - de 20 a 80% em peso, de preferência de 30 a 70% em peso, de extrato de própolis, ou - de 0,1 a 50% em peso, de preferência de 1 a 40% em peso, de extrato vegetal e de 20 a 80% em peso, de preferência de 30 a 70% em peso, de extrato de própolis.

4. Composição, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 3, caracterizada pelo fato de que o extrato de própolis compreende • de 0,001 a 0,2% em peso, de preferência de 0,005 a 0,15% em peso, de ácido cafeico ou de um de seus ésteres; • de 0,0001 a 0,005% em peso, de preferência de 0,0005 a 0,003% em peso, de ácido ferúlico; • entre 0,05 a 10% em peso, de preferência de 0,1 a 6% em peso, de galangina; • de 0,1 a 5% em peso, de preferência de 0,2 a 3% em peso, de pinocembrina.

5. Composição, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 4, caracterizada pelo fato de que compreende igualmente capsaicina ou um agente anti-inflamatório ou sua mistura.

6. Composição, de acordo com a reivindicação 5, caracterizada pelo fato de que compreende de 0,01 a 0,1%, em peso, de preferência de 0,025 a 0,075% em peso, de capsaicina.

7. Composição, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 6, caracterizada pelo fato de que compreende igualmente um ingrediente alimentar.

8. Composição, de acordo com a reivindicação 7, caracterizada pelo fato de que o ingrediente alimentar é escolhido dentre a piperina ou um derivado do zinco.

9. Composição, de acordo com a reivindicação 7 ou 8, caracterizada pelo fato de que compreende de 0,01 a 4% em peso, de preferência de 0,1 a 1%, em peso, de piperina.

10. Composição, de acordo com a reivindicação 7 ou 8, caracterizada pelo fato de que compreende de 0,01 a 2% em peso, de preferência de 0,1 a 1,5% em peso, de um derivado de zinco.

11. Composição, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 10, caracterizada pelo fato de que está sob a forma sólida ou sob a forma líquida.

12. Complemento alimentar, caracterizado pelo fato de que compreende uma composição, conforme definida nas reivindicações 1 a 11.

13. Kit, caracterizado pelo fato de que compreende: - uma primeira composição, conforme definida em qualquer uma das reivindicações 1 a 11, - uma segunda composição que compreende um agente anti-inflamatório.

14. Método de preparação de uma composição, conforme definida nas reivindicações 2 a 11, caracterizado pelo fato de que compreende: (i) a preparação de um extrato de cutícula de uva obtido pela seleção de pelo menos um bagaço de uva roxa e a concentração de frações polifenólicas do dito bagaço, (ii) a mistura do extrato derivado de (i) e de um extrato de própolis.