BR112013017501B1 - Método para preparação de um pó fino de um extrato de polimanana, uso do pó fino doextrato de polimanana, formulação injetável de um extrato de polimanana e uso de formulação injetável - Google Patents

Método para preparação de um pó fino de um extrato de polimanana, uso do pó fino doextrato de polimanana, formulação injetável de um extrato de polimanana e uso de formulação injetável Download PDF

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Abstract

COMPOSIÇÕES E MÉTODOS DE POLISSACARÍDIOS DE ALOÉ. A presente invenção descreve um método para preparação de um extrato de polimanana de pó de aloé por congelamento-dessecação. O extrato de polimanana da presente invenção é ainda usado para preparar uma formulação injetável estéril destinada ao tratamento de um ou mais cânceres, leucemias e linfomas, câncer de próstata, câncer de mama e câncer de cólon, doenças imunes, particularmente neoplasias relacionadas com o sistema imunológico, síndrome de deficiência imune adquirida e hepatite C.

Description

CAMPO TÉCNICO DA INVENÇÃO
A presente invenção relaciona-se de modo geral com o campo de polissacaridios de aloé e, mais especificamente, com composições de polissacaridios de aloé e com o uso de tais composições como imunomoduladores e para o tratamento de diferentes tipos de câncer.
FUNDAMENTO DA TÉCNICA
Sem limitar o objetivo da invenção, seu fundamento é descrito em conexão com composições, métodos de preparação e usos terapêuticos de polissacaridios de Aloe vera.
Patente nos Estados Unidos No. 7.196.072 publicada por Pasco et al. (2007) descreve uma fração polissacaridica complexa solúvel em água com atividade imunoestimuladora potente isolada de Aloe vera. A fração polissacaridica tem um peso molecular aparente superior a 2 milhões de Daltons com glicose, galactose, manose e arabinose como seus componentes principais. A invenção descreve ainda composições farmacêuticas contendo a fração polissacaridica presente, opcionalmente em combinação com transportadores e/ou excipientes farmaceuticamente aceitáveis. Essas composições farmacêuticas podem ser usadas para proporcionar imunoestimulação a um indivíduo em necessidade de tal tratamento mediante a administração a tal indivíduo de uma quantidade eficaz da composição.
Patente nos Estados Unidos No. 6.083.508 publicada por Avalos e Danhof (2000) descreve um processo para formação de um produto originário de aloé a partir apenas de residue da folha obtido após filetagem de folhas de aloé que possuem um filete interno que é removido dela. De acordo com a patente '508, o residue é formado em uma pasta por trituração, e o produto é gerado a partir da pasta. Além das etapas de preparação, o produto originário de aloé compreende purificação da folha de uma aloé antes de filetá-la, separação da pasta formada em um liquido e sólidos e tratamento adicional do liquido separado para remover substâncias laxantes antes da formação do produto de aloé. Além disso, um processo incluindo todas as etapas acima pode também ser realizado para formar o liquido.
Pedido de Patente nos Estados Unidos No. 2006/0084629 (Needleman and Needleman, 2006) apresenta uma combinação de duas frações especializadas com alto peso molecular e cadeia longa isoladas de Aloe vera e Maitake TD para estimular atividade do sistema imune compreendendo polissacaridios de cadeia longa e alto peso molecular que ativam a resposta imune natural do corpo, desencadeando um aumento na produção de macrófagos, células T, células B, células destruidoras naturais, citocinas e anticorpos. Esses polissacaridios de cadeia longa em conjunto com outros ingredientes ativos podem fornecer suporte apropriado ao sistema imune, portanto prevenindo doenças debilitantes como câncer, cardiopatia e envelhecimento.
DESCRIÇÃO DA INVENÇÃO
A presente invenção descreve uma composição polissacaridica de aloé e o uso da composição como um agente imunomodulador e para o tratamento de diferentes tipos de cânceres selecionados de leucemias e linfomas, câncer de próstata, câncer de mama e câncer de cólon, doenças imunes, particularmente neoplasias relacionadas com o sistema imunológico.
A presente invenção fornece um método para preparação de um pó fino de um extrato de polimanana compreendendo as etapas de: (i) pesagem de uma quantidade especificada de um pó de aloé liofilizado, em que a quantidade é corrigida para um conteúdo de umidade; (ii) dissolução do pó de aloé liofilizado em água desionizada para formar uma solução; (iii) adição de um solvente orgânico à solução para formar uma primeira mistura, em que a proporção entre o solvente orgânico a água desionizada é de pelo menos 2,5:1; (iv) deixar a primeira mistura assentar por pelo menos 8 horas; (v) retirada de um volume especificado de um sobrenadante da primeira mistura e adicionar um volume excedente da solução sobrenadante para formar uma segunda mistura; (vi) centrifugação da segunda mistura; (vii) observação quanto à presença de um precipitado na segunda mistura; (viii) adição de uma quantidade suplementar do solvente orgânico à primeira mistura se qualquer precipitado for observado na segunda mistura; (ix) decantação do sobrenadante da primeira mistura por sifonagem, em que a decantação é feita somente se nenhum precipitado for observado na segunda mistura; filtração do precipitado da primeira mistura usando-se um papel de filtro e um funil de sucção sob vácuo; (x) coleta do pó do extrato de polimanana do funil de sucção por raspagem; (xi) colocação pó do extrato de polimanana em um frasco de liofilização com tampa em um freezerpor pelo menos 8 horas; (xii) liofilização do pó congelado do extrato de polimanana em um liofilizador; e (xii) trituração do pó liofilizado do extrato de polimanana em um triturador até uma textura muito fina.
Em outro aspecto, o método ainda compreende a etapa de pesagem, etiquetagem e armazenamento do pó fino do extrato de polimanana em um recipiente. 0 pó de aloé liofilizado conforme descrito na modalidade da presente invenção é derivado de uma espécie de Aloeselecionada do grupo que consiste em Aloe vera, Aloe arborescens, Aloe aristata, Aloe dichotoma, aloe nyeriensis, Aloe variegate, Aloe barbadensis e Aloe wildii.O pó de aloé liofilizado usado na presente invenção compreende polissacaridios de aloé, em que os polissacaridios de aloé compreendem um ou mais polissacaridios de cadeia pequena, cadeia média, cadeia longa, cadeia muito longa ou qualquer combinação destes. Em um aspecto especifico, o solvente orgânico é selecionado do grupo que consiste em metanol, etanol, álcool isopropilico e propanol. Em outro aspecto, os polissacaridios de aloé ainda compreendem açúcares simples, selecionados do grupo que consiste em glicose, manose, arabinose e galactose e têm um peso molecular que varia de 11.500 Daltons a mais de 10.000.000 de Daltons.
Em outro aspecto, o pó de aloé liofilizado contém pelo menos 25% de polissacaridios de aloé. Em ainda outro aspecto, o pó de aloé liofilizado contém 25%, 30%, 40%, 50%, 60%, 70%, 80%, 90% e 95% de polissacaridios de aloé. O pó de aloé liofilizado conforme descrito no método da presente invenção compreende pelo menos 14% de polissacaridios de aloé com peso molecular de 66.000 Daltons, pelo menos 9% de polissacaridios de aloé com peso molecular de 480.000 Daltons, pelo menos 3,5% de polissacarídios de aloé com peso molecular de 1.000.000 de Daltons, pelo menos 2,4% de polissacarídios de aloé com peso molecular de 2.000.000 de Daltons.
Em um aspecto específico do método que se relaciona com a composição de polissacarídio de aloé no pó de aloé liofilizado, cerca de l,32%-6,36% dos polissacarídios de aloé têm peso molecular de 2.000.000 de Daltons, 2,55%- 3,89% têm peso molecular de 1.000.000 de Daltons e 63,85%- 73-36r dos polissacarídios de aloé têm peso molecular de 480.000 de Daltons. Em um aspecto, o pó de aloé liofilizado pode conter uma ou mais espécies com peso molecular pequeno residual, selecionadas do grupo que consiste em glicose, ácidos orgânicos, ácido láctico, ácidos málicos, ácidos cítricos e ácido aspártico. Em outro aspecto, uma ou mais dessas espécies com peso molecular pequeno residual estão presentes em quantidades que variam de 14%-24%. Já em outro aspecto, o pó fino de extrato de polimanana é usado na preparação de uma composição farmacêutica a ser usada no tratamento de uma ou mais doenças malignas selecionadas do grupo que consiste em leucemias e linfomas, câncer de próstata, câncer de mama e câncer de cólon e para o tratamento de um ou mais distúrbios imunes.
Em outra modalidade, a presente invenção apresenta uma formulação injetável estéril de um extrato de polimanana compreendendo: uma quantidade especificada de extrato de polimanana muito fino dissolvido em água desionizada e um ou mais conservantes farmacêuticos. Um ou mais desses conservantes farmacêuticos que podem ser usados na formulação descrita aqui anteriormente são selecionados do grupo que consiste em parabenos, ácido benzoico e seus sais, compostos mercurials, sais de amónio quaternário, álcool benzilico e outros alcoóis relacionados e fenóis. Em um aspecto especifico, o conservante é álcool benzilico. Em outro aspecto, o extrato de polimanana compreende polissacaridios de aloé, em que os polissacaridios de aloé compreendem um ou mais polissacaridios de cadeia pequena, cadeia média, cadeia longa, cadeia muito longa ou quaisquer combinações destes. Em outro aspecto, os polissacaridios de aloé ainda compreendem açúcares simples, selecionados do grupo que consiste em glicose, manose, arabinose e galactose.
Em outros aspectos específicos, os polissacaridios têm um peso molecular que varia de 11.500 Daltons a mais de 10.000.000 de Daltons e o extrato de polimanana tem pelo menos 25% de polissacaridios de aloé, em que o extrato de polimanana tem 25%, 30%, 40%, 50%, 60%, 70%, 80%, 90% e 95% de polissacaridios de aloé. Em um aspecto relacionado, o extrato de polimanana compreende pelo menos 14% de polissacaridios de aloé com peso molecular de 66.000 Daltons, pelo menos 9% com peso molecular de 480.000 Daltons, pelo menos 3,5% com pelo peso molecular de 1.000.000 de Daltons e pelo menos 2,4% de polissacaridios de aloé com peso molecular de 2.000.000 de Daltons. A composição da presente invenção é usada no tratamento de um ou mais cânceres selecionados do grupo que consiste em leucemias e linfomas, câncer de próstata, câncer de mama e câncer de cólon, para imunomodulação, para imunoestimulação ou para o tratamento de um indivíduo com um sistema imune comprometido ou com uma doença imune. A composição da presente invenção causa um aumento de 75-80% em uma ou mais das células destruidoras naturais (NK). Já em outra modalidade, a presente invenção descreve um tratamento para um ou mais cânceres selecionados do grupo que consiste em leucemias e linfomas, câncer de próstata, câncer de mama e câncer de cólon compreendendo as etapas de: identificação de um indivíduo em necessidade de tratamento contra um ou mais desses cânceres e administração de uma formulação do extrato de polimanana injetável duas a três vezes por semana em uma dose suficiente para tratar um ou mais desses cânceres, em que a formulação do extrato de polimanana injetável estéril compreende uma quantidade especificada de extrato de polimanana muito fino dissolvido em água desionizada; e um ou mais conservantes farmacêuticos. O método ainda compreende as etapas de: coleta de amostras de sangue do indivíduo em um ou mais intervalos especificados, determinação de um nivel de uma proteína caspase 3 no sangue e comparação do nivel obtido com o nivel anterior à injeção, em que um nivel aumentado na caspase 3 está diretamente relacionado com um nivel aumentado de apoptose de uma ou mais das células cancerosas.
Em um aspecto, a dose da formulação do extrato de polimanana injetável estéril é dependente de um peso, uma idade, uma etnia e um sexo do indivíduo. Em outro aspecto, o extrato de polimanana compreende polissacaridios de aloé, caracterizados pelo fato de que os polissacaridios de aloé compreendem um ou mais polissacaridios de cadeia pequena, cadeia média, cadeia longa, cadeia muito longa ou quaisquer combinações destes. Já em outro aspecto, os polissacaridios de aloé têm um peso molecular que varia de 11.500 Daltons a mais de 10.000.000 de Daltons. O extrato de polimanana conforme descrito no método da presente invenção tem pelo menos 25% de polissacarídios de aloé. O extrato de polimanana do método da presente invenção causa um aumento de 75-80% e uma ou mais das células destruidoras naturais (NK) .
Em uma modalidade, a presente invenção descreve um método de imunomodulação ou imunoestimulação em um indivíduo com um sistema imune comprometido ou uma doença imune compreendendo as etapas de (i) identificação do indivíduo com o sistema imune comprometido ou uma doença imune e em necessidade de imunomodulação ou imunoestimulação, (ii) administração por via intravenosa de uma dose especificada de uma formulação do extrato de polimanana injetável estéril, em que a formulação do extrato de polimanana injetável estéril compreende uma quantidade especificada de extrato de polimanana muito fino dissolvida em água desionizada; e um ou mais conservantes farmacêuticos, em que a dose da formulação do extrato de polimanana injetável estéril é dependente de um peso, uma idade, uma etnia e um sexo do indivíduo, (iii) coleta de amostras de sangue do indivíduo em um ou mais intervalos especificados, determinação de um nivel de um fator de necrose tumoral alfa (TNFα) no sangue e comparação do nivel obtido com o nivel anterior à injeção, de modo que um nivel aumentado no TNFα indica imunomodulação ou imunoestimulação. Em um aspecto especifico, a doença imune é uma neoplasia imunologicamente relacionada. Em um aspecto, o extrato de polimanana compreende polissacarídios de aloé, em que os polissacaridios de aloé compreendem um ou mais polissacaridios de cadeia pequena, cadeia média, cadeia longa cadeia muito longa ou quaisquer combinações deles. Em outro aspecto, o extrato de polimanana causa um aumento de 75-80% em uma ou mais das células destruidoras naturais (NK). Já em outro aspecto, o extrato de polimanana contém pelo menos 25% de polissacaridios de aloé.
DESCRIÇÃO DOS DESENHOS
Para uma compreensão completa das características e vantagens da presente invenção, é feita agora referência à descrição detalhada da invenção juntamente com as figura que a acompanham e em que:
A FIG. 1 mostra uma cromatografia por exclusão de tamanho de um polissacaridio de aloé exibindo os periodos de retenção das diferentes subunidades de glicose e manose;
A FIG. 2 mostra a cromatografia por exclusão de tamanho de um polissacaridio de aloé exibindo os picos correspondentes às diferentes subunidades de glicose e manose;
A FIG. 3 é o perfil de ressonância magnética nuclear protônica do extrato de polimanana da presente invenção;
A FIG. 4A é um cromatograma de HPLC mostrando as quantidades de polissacaridio em cada grupo molecular polissacaridico em um concentrado polissacaridico de aloé precipitado por metanol;
A FIG. 4B é o perfil de ressonância magnética nuclear protônica de um concentrado polissacaridico de aloé precipitado por metanol;
A FIG. 5A é um cromatograma de HPLC mostrando as quantidades de polissacaridio em cada grupo molecular polissacarídico em um concentrado polissacarídico de aloé precipitado por etanol;
A FIG. 5B é o perfil de ressonância magnética nuclear protônica de um concentrado polissacarídico de aloé precipitado por etanol;
A FIG. 6A é um cromatograma de HPLC mostrando as quantidades de polissacaridio em cada grupo molecular polissacarídico em um concentrado polissacarídico de aloé precipitado por álcool isopropilico;
A FIG. 6B é o perfil de ressonância magnética nuclear protônica de um concentrado polissacarídico de aloé precipitado por álcool isoproilico;
A FIG. 7A é um cromatograma de HPLC mostrando as quantidades de polissacaridio em cada grupo molecular polissacarídico em um concentrado polissacarídico de aloé precipitado por propanol; e
A FIG. 7B é o perfil de ressonância magnética nuclear protônica de um concentrado polissacarídico de aloé precipitado por propanol.
Descrição da Invenção
Embora a criação e a utilização de várias modalidades da presente invenção sejam discutidas em detalhes adiante, deve ser compreendido que a presente invenção fornece muitos conceitos inventivos aplicáveis que podem ser incorporados em uma diversidade de contextos específicos. As modalidades especificas discutidas aqui são meramente ilustrativas de maneiras especificas para criar e utilizar a invenção e não para delimitar o objetivo da invenção.
Para facilitar a compreensão desta invenção, diversos termos são definidos adiante. Os termos definidos aqui têm os mesmos significados comumente compreendidos por uma pessoa com experiência prática nas áreas relevantes para a presente invenção. Não se pretende que termos como "um(a)" e "o(a)" se refiram a somente uma entidade singular, mas incluem a classe geral da qual um exemplo especifico pode ser usado para ilustração. A terminologia aqui é usada para descrever modalidades especificas da invenção, mas seu emprego não delimita a invenção, exceto como esboçado nas reivindicações.
A presente invenção descreve um processo para preparação de um extrato de polimanana e o emprego do referido extrato na forma de uma injeção como um composto imunoestimulador. Imunoestimulação é avaliada usando-se macrófagos/monócitos de origem humana, e o tipo celular é avaliado quanto à secreção de fator de necrose tumoral alfa (TNFα).
Polissacarídios de aloé são geralmente considerados aquelas moléculas compostas predominantemente de açúcares simples como glicose e manose com comprimentos da cadeia de 10.000 Daltons até aqueles com pesos moleculares de 10.000.000 de Daltons. Quanto mais elevado o conteúdo de manose e mais longo o comprimento da cadeia, maior é a atividade imunomoduladora expressa pelos polissacarídios. As diferentes cadeias longas não ramificadas compreendendo esses polissacarídios de aloé estão relacionadas na Tabela 1.
Figure img0001
Polissacaridios de aloé com pesos moleculares de 1000.000
Daltons ou mais estão relacionados na Tabela 2.
Tateia 2: Composições e pesos moleculares de polissacaridios de aloé com Peso Mol. de 100.000 ou superior.
Figure img0002
O material precursor para o extrato de polimanana é descrito pelos inventores em uma patente prévia (US Patent No. 6,083,508- Avalos and Danhof, 2000) intitulada "Méthod of Processing Aloe Leaves".0 certificado de análise do material precursor do extrato de polimanana é apresentado na Tabela 3.
A FIG. 1 é um cromatograma por exclusão de tamanho de uma preparação de polissacaridio de aloé mostrando periodos de retenção de subunidades de glicose e manose de vários tamanhos. A FIG. 2 é um cromatograma por exclusão de tamanho de uma preparação de polissacaridio de aloé identificando pesos moleculares que variam de 100 a 10.000.000 de Daltons. A FIG. 3 é um perfil de ressonância magnética nuclear protônica do extrato de polimanana da presente invenção. A FIG. 3 mostra: (i) a ausência de conservantes padrões - benzoato de sódio e sorbato de potássio, (ii) a presença de mono-hexoses menores, (iii) os picos de ácido isocitrico indicando que uma metodologia de folha total foi empregada no processamento do material de aloé bruto, (iv) a presença de picos de ácido málico - um marcador primário para Aloe vera, (v) a presença do pico de aloerida/acemanana na porção polissacaridica do perfil confirmando a presença das grandes espécies de polissacaridio e (vi) que grupos acetil estão presentes 5 confirmando a presença das glicomananas polissacaridicas parcialmente acetiladas.
Cromatografia por exclusão de tamanho (SEC) de uma preparação de aloé antes da extração de polimanana:
Equipamento: Sistema de HPLC é uma bomba Hitachi L- 10 7100 e um autosselecionador de amostra pareado com um refratômetro diferencial Waters 410. O SEC é um Tosoh Biosep G6000 PWXL TSK Gel de 30 cm x 7,8 mm operado em um aquecedor de coluna a 79°C. Os padrões de pesos moleculares são de Sigma - 2.000.000 de Daltons, 1.000.000 de Daltons, 15 480.000 Daltons, 66.000 Daltons e 180 Daltons (glicose). A fase móvel é água desionizada com taxa de fluxo de 0,70 mL/min. O volume de injeção é de 10 pL. O método de SEC é descrito por Pugh et al. (2001)
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Estudo de avaliação do precipitaste de aloé:amostras de 25 mL de concentrado COATS foram pipetadas em provetas de 200 mL e 125 mL de vários líquidos precipitantes de polissacaridios foram adicionados à proveta e agitados completamente. Os polissacaridios precipitados foram coletados por filtração através de papéis de filtro desidratados tarados que, após filtração, foram colocados para dessecação por uma noite. Na manhã seguinte, o peso seco do polissacaridio precipitado foi determinado. Os inventores estudaram quatro precipitantes alcoólicos incluindo metanol, etanol, álcool isopropílico e propanol. Os pós passaram por um procedimento de HPLC que determinou as várias quantidades de todas as espécies moleculares que foram registradas com determinação das quantidades de polissacaridios em cada um dos grupos moleculares, incluindo quantidades superiores a 2.000.000 de Daltons, superiores a 1.000.000 de Daltons, superiores a 480.000 Daltons, superiores a 66.000 Daltons e a fração residual contendo as espécies moleculares muito pequenas, tais como glicose com peso molecular de 180 (dados de HPLC mostrados nas Tabelas 6-9) . Os cromatogramas de HPLC correspondendo aos quatro precipitantes metanol, etanol, álcool isopropilico e propanol são mostrados nas FIGS. 4A, 5A, 6A 5 e 7A, respectivamente. Os Perfis de Ressonância Magnética
Nuclear Protônica dos precipitados foram também obtidos e são mostrados nas FIGS. 4B, 5B, 6B e 7B, respectivamente. Os dados coletados são mostrados na Tabela 5.
Tabela 5: Dados do estudo de avaliação de precipitante de aloé
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Tabela 6: Dados de HPLC mostrando as quantidades de polissacaridios em cada grupo molecular polissacarídico em um concentrado polissacarídico de aloé precipitado por metanol.
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Tabela 7: Dados de HPLC mostrando as quantidades de polissacarídios em cada grupo molecular polissacarídico em um concentrado polissacarídico 5 de aloé precipitado por etanol.
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Tabela 8: Dados de HPLC mostrando as quantidades de polissacaridios em cada grupo molecular polissacarídico em um concentrado polissacarídico 5 de aloé precipitado por álcool isopropílico.
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Tabela 9: Dados de HPLC mostrando as quantidades de polissacaridios em cada grupo molecular polissacaridico em um concentrado polissacaridico 5 de aloé precipitado por propanol.
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O extrato de polimanana é preparado por precipitação.
O pó de aloé liofilizado descrito acima foi pesado após correção apropriada quanto ao conteúdo de umidade. Por exemplo, se o conteúdo de umidade foi de 3,7% θ nós precisávamos de 80 g, os inventores pesaram a quantidade de 82,96 g (80 g + [3,7% x 80] g) . O pó de aloé pesado foi dissolvido completamente em um galão de água desionizada (D.I.) em um vaso de precipitação de aço inoxidável. 2,5 galões de etanol (9,46 litros de etanol) a 95% foram adicionados e agitados para assegurar mistura completa. O vaso foi coberto com tampa de aço inoxidável e deixou-se a mistura assentar por uma noite.
No dia seguinte, 2 mL de um sobrenadante claro foram coletados e 5 mL de etanol a 95% foram adicionados, e a amostra foi centrifugada a 3.000 rpm por 20 minutos. A amostra foi examinada quanto a precipitação; caso não tenha tivesse sido observado nenhum precipitado, então a precipitação foi considerada completa. Se nenhum grau significativo de precipitação foi observado, então etanol a 95% adicional foi adicionado ao vaso de precipitação antes de se prosseguir. O liquido sobrenadante claro no vaso de precipitação foi decantado por sifonação sem perturbar o precipitado no fundo do vaso. O precipitado branco no fundo foi separado usando-se um funil de sucção (papel de filtro sem cinzas quantitativo Whatman No. 42®). O material precipitado foi removido por raspagem para um frasco de liofilização de 600 mL Virtis e distribuído sobre um dos lados do frasco para formar uma fina camada com uma grande área de superfície exposta. O frasco de liofilização foi colocado em uma cápsula frigorifica por uma noite. No dia seguinte, o frasco de liofilização refrigerado com seus conteúdos congelados foi colocado em um liofilizador operando a -90°C em em 1/3 atmosfera por 24 horas. O liofilizador foi esvaziado e o pó liofilizado foi colocado em um triturador de pó de partículas finas até que foi reduzido a um pó fino uniformemente moído. 0 pó moído foi então pesado e colocado em recipientes de plástico pequeno e os recipientes foram armazenados em um conqelador.
Preparação de uma solução injetável de extrato de Polimanana: O pó de extrato de polimanana (PME) preparado conforme descrito anteriormente foi pesado (1,5 g) após correção para conteúdo de umidade e conteúdo de aloerida de pelo menos 2% conforme determinado mediante cromatografia por exclusão de tamanho. Para 125 mL de água D.I. aquecida, 1 mL de HC1 concentrado foi adicionado e agitado seguindo- se adição lenta do pó de PME com agitação constante. A agiração foi continuada até que todo o pó de PME se dissolveu e a solução foi clareada e tornada incolor, tendo sido adicionada uma quantidade suplementar de HC1 para se obter um pH de 1.6 a 1.7 (determinado continuamente por um medidor de pH) . Água D.I. adicional foi acrescentada para ajustar o volume de 150 mL seguindo-se monitoração do pH para assegurar um pH de 1.6-1.7. A solução de PME foi então purificada em um frasco Corning® de 150 mL dotado de sistema de filtro com tamanho do poro de 0,45 pm. O sistema do frasco foi colocado em um refrigerador e o filtrado transferido para um frasco Corning® de 150 mL dotado de sistema de filtro com tamanho do poro de 0,22 pm e colocado em um refrigerador por uma noite. Em condições estéreis, a parte superior do sistema de filtro foi removida e o frasco foi vedado com uma tampa estéril. Os frascos foram então conduzidos para um laboratório de processamento e uma cobertura estéril de álcool benzilico a 0,9% foi adicionada como conservante (porque o produto final é para uso em múltiplas doses), tendo sido a solução colocada em frascos de vidro de 10 mL e vedadas com um fechamento para multidoses. Os frascos foram rotulados com número de partida, número de controle, data de frabricação, data de vencimento de 6 meses juntamente com os nomes do médico e do paciente.
Avaliação de atividade imunomoduladora do PME. A atividade imunoestimuladora é avaliada usando-se macrófagos/monócitos de origem humana obtidos da American Type Culture Collection (ATCC) em Maryland. O tipo celular foi avaliado quanto a secreção de TNFα. Em condições celulares padrões, uma pequena quantidade do produto final de PME foi introduzida na cultura. Amostras foram extraídas em 6, 12 e 24 horas e avaliadas quanto a niveis de TNFa. Uma quantidade especifica de TNFa não foi usada em virtude da variabilidade nas diferentes partidas celulares. Em um contexto clinico, espera-se que a resposta imunomoduladora varie em razão de alterações em fatores hematológicos tais como contagem de leucócitos, contagem diferencial de macrófagos/monócitos, número de receptores de monócitos de superfície dos leucócitos, quantidade de proteina transportadora de ligação a manose etc.
O perfil leucocitário varia tendo em vista o movimento constante na corrente sanguínea de entrada e saida de células. A afinidade dos receptores celulares de manose pelo PME excede em muito a da proteina de ligação a manose. À medida que novos macrófagos/monócitos entram na corrente sanguínea, o PME é transferido para as novas células a partir da proteina de ligação a manose circulante. A ligação do PME à proteina de ligação a manose de macrófagos/monócitos resulta na liberação de uma série de comunicadores celulares. Os comunicadores celulares incluindo TNFα, IL-lβ, INFy, IL-2 e IL-6 restauram ao normal a função de vigilância comprometida do sistema imune que falhou em sua função detectora de neoplasia no paciente com câncer que permite ao sistema imune do paciente identificar e remover as células malignas.
Os polissacaridios de aloé no extrato de polimanana, com pesos moleculares de 1.000.000, 300.000, 100.000, 50.000 e 25.000, exibiram todos atividade de caspase. Essa atividade de caspase 3, caspase 9 e citocromo-C é essencial no tratamento de neoplasias malignas pela composição da presente invenção, uma vez que a caspase 3 é um mediador de apoptose de células tumorais. A atividade imunomoduladora da caspase 3 iniciadora (apical) e da caspase 3 efetora (executadora) bem como do citocromo-C foi demonstrada como existente e é considerada o sistema mediador de apoptose de células tumorais.
Os inventores testaram a composição descrita aqui em 104 pacientes com diferentes tipos de câncer. Leucemia e linfomas foram os que mais responderam ao extrato de polimanana da presente invenção (>98%). Cânceres de próstata, mama e cólon também responderam ao extrato de polimanana da presente invenção. Para a realização do teste, o extrato de polimanana foi administrado como injeção. 10 mg do extrato de polimanana foram reconstituídos em água estéril para injeção e administrados em uma concentração final de ~10 mg/mL. Essa concentração foi injetada 2 a 3 vezes por semana. As amostras séricas dos pacientes foram então coletas em intervalos regulares e monitoradas quanto a atividade de caspase 3.
Considera-se que qualquer modalidade discutida neste relatório descritivo pode ser aplicada no que diz respeito a qualquer método, kit, reagente ou composição da invenção, e vice-versa. Além disso, as composições da invenção podem ser usadas para se realizar os métodos da invenção.
Será compreensível que modalidades especificas descritas aqui são mostradas por meio de ilustração e não como limitações da invenção. As características principais desta invenção podem ser empregadas em várias modalidades sem se desviar do objetivo da invenção. Aqueles com experiência no assunto irão identificar, ou ser capazes de comprovar, usando não mais que experimentação de rotina, numerosos equivalentes aos procedimentos específicos descritos aqui. Considera-se que tais equivalentes estão dentro do propósito desta invenção e são amparados pelas reivindicações.
Todas as publicações e pedidos de patentes mencionados no relatório descritivo são indicativos do nivel daqueles com experiência no assunto a que esta invenção diz respeito. Todas as publicações e pedidos de patentes são aqui incorporados por referência do mesmo modo como se cada publicação ou pedido de patente individual tivesse especificamente e individualmente indicação para incorporação por referência.
O uso da palavra "um(a)" quando usado em conjunto com "compreendendo" nas reivindicações e/ou no relatório descritivo pode significar "uma unidade", mas também é compatível com o significado de "um(a) ou mais", "pelo menos um (a)" e "um (a) ou mais de um(a)". O uso do termo "ou" nas reivindicações é usado com o significado de "e/ou" a menos que explicitamente indicado para se referir a alternativas somente ou as alternativas são mutuamente exclusivas, embora a descrição garanta uma definição que se refere a alternativas apenas "e/ou". Em todo este pedido, a expressão "cerca de" é usada para indicar que um valor inclui a variação inerente de erro para o dispositivo, sendo o método empregado para determinar o valor ou a variação que existe entre os indivíduos em estudo.
Conforme se usa neste relatório descritivo e na(s) reivindicação(ões), as palavras "compreendendo" (e qualquer forma de compreendendo, como "compreendem", "compreende"), "tendo" (e qualquer forma de tendo, como "ter" e "tem"), "incluindo" (e qualquer forma de incluindo, como "inclui" e "incluem") ou "contendo" (e qualquer forma de contendo, como "contém" e "contêm") são inclusivas ou sem restrição e não excluem elementos adicionais não citados ou etapas do método.
A expressão "ou combinações destes(as)" conforme se usa aqui refere-se a todas as permutas e combinações dos itens listados que precedem a expressão. Por exemplo, "A, B, C ou combinações destes" tem como objetivo incluir pelo menos um de: A, B, C, AB, AC, BC ou ABC, e, se a ordem é importante em determinado contexto, também BA, CA, CB, CBA, BCA, ACB, BAC ou CAB. Continuando com este exemplo, são expressamente incluídas combinações que contêm repetições de um ou mais item ou termos, como BB, AAA, MB, BBC, AAABCCCC, CBBAAA, CABABB e assim por diante. O especialista no assunto compreenderá que tipicamente não há limite no que diz respeito ao número de itens ou termos em qualquer combinação, a menos que aparente de outro modo com base no contexto.
Todas as composições e/ou métodos descritos e reivindicados aqui podem ser feitos e executados sem experimentação excessiva à luz da presente descrição. Embora as composições e métodos desta invenção tenham sido descritos em termos de modalidades preferidas, será evidente para aqueles especializados no assunto que variações podem ser aplicadas às composições e/ou métodos e nas etapas ou na sequência de etapas do método descrito aqui sem se desviar do conceito, do principio e do propósito da invenção. Considera-se que cada qual de tais substitutos e modificações similares aparentes para aqueles especializados na técnica está dentro do espirito, do escopo e do conceito da invenção conforme definido pelas reivindicações anexas.
REFERÊNCIAS
United States Patent No. 7.196.072: High Molecular Weight Polysaccharide Fraction From Aloe Vera with Immunostimulatory Activity.
United States Patent No. 6.083.508: Method of Processing Aloe Vera.
United States Patent Application No. 2006/0084629: Immune System Activating Formula Composed of Selected Long Chain Polysaccharides From Natural Sources. 1Pugh N., Ross S.A., ElSohly M.A., and Pasco, D.S. (2000). Characterization of Aloeride, a new high-molecular weight polysaccharide from Aloe vera with potent immunomodulatory activity. J. Agr. Food Chem., 49, 1030-1034.

Claims (11)

1. Método para preparação de um pó fino de um extrato de polimanana, caracterizado pelo fato de que compreende as etapas de: pesagem de uma quantidade especificada de um pó de aloé liofilizado, em que a quantidade é corrigida para um conteúdo de umidade; dissolução do pó de aloé liofilizado em água desionizada para formar uma solução; adição de um primeiro volume de um solvente orgânico à solução para formar uma primeira mistura; em que a proporção entre o solvente orgânico e a água desionizada é de pelo menos 2,5:1; deixar a primeira mistura assentar por pelo menos 8 horas; retirar um volume especificado de uma solução sobrenadante da primeira mistura e adicionar um segundo volume do solvente orgânico ao volume especificado da solução sobrenadante para formar uma segunda mistura; centrifugação da segunda mistura; observação quanto à presença de um precipitado na segunda mistura; adição de um terceiro volume do solvente orgânico à primeira mistura se qualquer precipitado for observado na segunda mistura; decantação do sobrenadante da primeira mistura por sifonação, em que a decantação é realizada somente se nenhum precipitado for observado na segunda mistura; filtração do precipitado da primeira mistura usando-se um papel de filtro e um funil de sucção sob vácuo; recuperação do pó do extrato de polimanana do funil de sucção por raspagem; colocação do pó do extrato de polimanana em um frasco de liofilização tampado em um congelador por pelo menos 8 horas; liofilização do pó congelado do extrato de polimanana em um liofilizador; e trituração do pó liofilizado do extrato de polimanana em um triturador até uma textura desejada.
2. Método, de acordo com a reivindicação 1, caracterizado pelo fato de que o pó de aloé liofilizado é derivado de uma espécie de Aloeselecionada do grupo que consiste em Aloe vera, Aloe arborescens, Aloe aristata, Aloe dichotoma, Aloe nyeriensis, Aloe variegate, Aloe barbadensis e Aloe wildii.
3. Método, de acordo com a reivindicação 1, caracterizado pelo fato de que o solvente orgânico é selecionado do grupo que consiste em metanol, etanol, álcool isopropilico e propanol.
4. Método, de acordo com a reivindicação 1, caracterizado pelo fato de que o pó de aloé liofilizado compreende polissacaridios de aloé que possuem um peso molecular que varia de 11.500 Daltons a mais de 10.000.000 Daltons.
5. Método, de acordo com a reivindicação 1, caracterizado pelo fato de que o pó de aloé liofilizado possui pelo menos 25%, 30%, 40%, 50%, 60%, 70%, 80%, 90% e 95% de polissacaridios de aloé; pelo menos 14% de polissacaridios de aloé possuem peso molecular de 66.000 Daltons; pelo menos 9% de polissacaridios de aloé possuem peso molecular de 480.000 Daltons; pelo menos 3,5% de polissacarídios de aloé possuem peso molecular de 1.000.000 Daltons; pelo menos 2,4% de polissacarídios de aloé possuem peso molecular de 2.000.000 Daltons; um peso molecular de 2.000.000 Daltons no pó de aloé liofilizado varia de 1,32% a 6,36%; um peso molecular de 1.000.000 de Daltons no pó de aloé liofilizado varia de 2,55% a 3,89%; ou um peso molecular de 480.000 Daltons no pó de aloé liofilizado varia de 63,85% a 73,36%.
6. Método, de acordo com a reivindicação 1, caracterizadopelo fato de que o pó de aloé liofilizado pode conter uma ou mais espécies com peso molecular pequeno residual, selecionadas do grupo que consiste em glicose, ácidos orgânicos, ácido láctico, ácidos málicos, ácidos cítricos e ácido aspártico, em que uma ou mais espécies de peso molecular pequeno residual estão presentes em quantidades que variam de 14% a 24%.
7. Método, de acordo com a reivindicação 1, caracterizadopelo fato de que o pó fino do extrato de polimanana é usado na preparação de uma composição farmacêutica.
8. Uso do pó fino do extrato de polimanana obtido pelo método como definido em qualquer uma das reivindicações 1 a 7, caracterizadopelo fato de ser para a preparação de um medicamento para o tratamento de uma ou mais doenças malignas selecionadas do grupo que consiste em leucemias e linfomas, câncer de próstata, câncer de mama e câncer de cólon e para o tratamento de um ou mais distúrbios imunes.
9. Composição que consiste em uma formulação injetável de um extrato de polimanana caracterizadapelo fato de que compreende: uma quantidade especificada de um extrato de 5 polimanana muito fino dissolvida em água desionizada produzida pelo método como definido na reivindicação 1; e um ou mais conservantes farmacêuticos.
10. Uso de uma composição que compreende a formulação injetável estéril de um extrato de polimanana produzido 10 pelo método como definido na reivindicação 1, caracterizado pelo fato de ser para a preparação de um medicamento para o tratamento de um ou mais cânceres, em que o um ou mais cânceres são selecionados do grupo que consiste em leucemias e linfomas, câncer de próstata, câncer de mama e 15 câncer de cólon.
11. Uso, de acordo com a reivindicação 10, caracterizadopelo fato de que o medicamento é formulado para causar um aumento de 75-80% em uma ou mais das células destruidoras naturais (NK).
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Families Citing this family (9)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US8604187B2 (en) 2010-01-14 2013-12-10 North Texas Medical Associates Compositions and methods of aloe polysaccharides
CN103876014B (zh) * 2014-03-31 2015-07-08 福建农林大学 一种复方桑黄口服液及其制备方法
EA201692085A1 (ru) 2014-04-17 2017-02-28 Юнилевер Н.В. Экстракт алоэ (aloe vera) для композиций, применяемых в личной гигиене
EA201692084A1 (ru) 2014-04-17 2017-02-28 Юнилевер Н.В. Композиции для личной гигиены
US9993416B1 (en) * 2017-04-24 2018-06-12 Shen Wei (Usa) Inc. Hydrating elastomeric flexible article with natural bioactives and manufacturing method
CN110270132A (zh) * 2018-07-20 2019-09-24 何晴雪 一种甜叶菊糖液提取装置的使用方法
CN109320626B (zh) * 2018-10-08 2020-06-23 伍曾利 一种芦荟多糖及其制备方法与应用
CN111467365A (zh) * 2019-01-24 2020-07-31 开封九福来生物技术有限公司 含有石斛多糖的口腔速溶膜剂及其制备方法
WO2022046975A1 (en) * 2020-08-28 2022-03-03 Herbalife International Of America, Inc. Compositions comprising neutral and acidic polysaccharides of aloe vera and their uses

Family Cites Families (14)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US2106616A (en) * 1935-11-06 1938-01-25 Locke Insulator Corp Switch and bus insulator stack
US5118673A (en) * 1982-05-07 1992-06-02 Carrington Laboratories, Inc. Uses of aloe products
US5106616A (en) * 1988-01-14 1992-04-21 Carrington Laboratories, Inc. Administration of acemannan
US5308838A (en) * 1982-05-07 1994-05-03 Carrington Laboratories, Inc. Uses of aloe products
US6133440A (en) * 1997-10-10 2000-10-17 Univera Pharmaceuticals, Inc. Process for the preparation of immunomodulatory polysaccharides from aloe
US20030096378A1 (en) * 1997-10-10 2003-05-22 Univera Pharmaceuticals, Inc. Process for the preparation of immunomodulatory polysaccharides from aloe
CA2328092A1 (en) * 1999-01-12 2000-07-20 Vito-Mannan Polysaccharide L.L.C. Method of isolating mucilaginous polysaccharides and uses thereof
WO2002003999A1 (en) * 2000-07-10 2002-01-17 The University Of Missisippi High molecular weight polysaccharide fraction from aloe vera with immunostimulatory activity
CN1362105A (zh) * 2001-01-04 2002-08-07 杨孟君 纳米当归龙荟制剂药物及其制备方法
KR20020075622A (ko) * 2001-03-26 2002-10-05 김세웅 고기 구이장치
US20080063675A1 (en) * 2004-05-21 2008-03-13 Shunichi Yagi Aloe Powder, Aloe Juice, and Method for Producing the Same
US20060084629A1 (en) * 2004-10-15 2006-04-20 Alvin Needleman Immune system activating formula composed of selected long chain polysaccharides from natural sources
CN101070354B (zh) * 2007-05-18 2010-04-07 中南大学 一种利用芦荟同时生产芦荟多糖粉、芦荟活性水的方法
CN101306012A (zh) * 2008-06-19 2008-11-19 中国人民解放军第四军医大学 富含甘露糖的改性多糖在制备阻止结肠炎癌变的药物中的应用

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Publication number Publication date
JP5886877B2 (ja) 2016-03-16
ES2742220T3 (es) 2020-02-13
AU2017202499A1 (en) 2017-05-04
IL227093B (en) 2018-04-30
EP2661274A4 (en) 2014-08-20
AU2019200361B2 (en) 2020-07-30
AU2011353765B2 (en) 2017-04-06
RU2587784C2 (ru) 2016-06-20
KR20180120799A (ko) 2018-11-06
WO2012094010A1 (en) 2012-07-12
AU2017202499B2 (en) 2018-12-06
ZA201304789B (en) 2014-12-23
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