BR112013000986B1 - uso de manganês e método para aumentar seletivamente o crescimento de bactérias - Google Patents

uso de manganês e método para aumentar seletivamente o crescimento de bactérias Download PDF

Info

Publication number
BR112013000986B1
BR112013000986B1 BR112013000986-1A BR112013000986A BR112013000986B1 BR 112013000986 B1 BR112013000986 B1 BR 112013000986B1 BR 112013000986 A BR112013000986 A BR 112013000986A BR 112013000986 B1 BR112013000986 B1 BR 112013000986B1
Authority
BR
Brazil
Prior art keywords
bacteria
casei
lactobacillus
lactobacillus casei
group
Prior art date
Application number
BR112013000986-1A
Other languages
English (en)
Other versions
BR112013000986A2 (pt
Inventor
Laurent Marchal
Cyril Colin
Original Assignee
Compagnie Gervais Danone
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Family has litigation
First worldwide family litigation filed litigation Critical https://patents.darts-ip.com/?family=43719541&utm_source=google_patent&utm_medium=platform_link&utm_campaign=public_patent_search&patent=BR112013000986(B1) "Global patent litigation dataset” by Darts-ip is licensed under a Creative Commons Attribution 4.0 International License.
Application filed by Compagnie Gervais Danone filed Critical Compagnie Gervais Danone
Publication of BR112013000986A2 publication Critical patent/BR112013000986A2/pt
Publication of BR112013000986B1 publication Critical patent/BR112013000986B1/pt

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N1/00—Microorganisms, e.g. protozoa; Compositions thereof; Processes of propagating, maintaining or preserving microorganisms or compositions thereof; Processes of preparing or isolating a composition containing a microorganism; Culture media therefor
    • C12N1/38—Chemical stimulation of growth or activity by addition of chemical compounds which are not essential growth factors; Stimulation of growth by removal of a chemical compound
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23C—DAIRY PRODUCTS, e.g. MILK, BUTTER OR CHEESE; MILK OR CHEESE SUBSTITUTES; MAKING THEREOF
    • A23C9/00—Milk preparations; Milk powder or milk powder preparations
    • A23C9/12—Fermented milk preparations; Treatment using microorganisms or enzymes
    • A23C9/123—Fermented milk preparations; Treatment using microorganisms or enzymes using only microorganisms of the genus lactobacteriaceae; Yoghurt
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23C—DAIRY PRODUCTS, e.g. MILK, BUTTER OR CHEESE; MILK OR CHEESE SUBSTITUTES; MAKING THEREOF
    • A23C9/00—Milk preparations; Milk powder or milk powder preparations
    • A23C9/12—Fermented milk preparations; Treatment using microorganisms or enzymes
    • A23C9/123—Fermented milk preparations; Treatment using microorganisms or enzymes using only microorganisms of the genus lactobacteriaceae; Yoghurt
    • A23C9/1234—Fermented milk preparations; Treatment using microorganisms or enzymes using only microorganisms of the genus lactobacteriaceae; Yoghurt characterised by using a Lactobacillus sp. other than Lactobacillus Bulgaricus, including Bificlobacterium sp.
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23C—DAIRY PRODUCTS, e.g. MILK, BUTTER OR CHEESE; MILK OR CHEESE SUBSTITUTES; MAKING THEREOF
    • A23C9/00—Milk preparations; Milk powder or milk powder preparations
    • A23C9/12—Fermented milk preparations; Treatment using microorganisms or enzymes
    • A23C9/123—Fermented milk preparations; Treatment using microorganisms or enzymes using only microorganisms of the genus lactobacteriaceae; Yoghurt
    • A23C9/1238—Fermented milk preparations; Treatment using microorganisms or enzymes using only microorganisms of the genus lactobacteriaceae; Yoghurt using specific L. bulgaricus or S. thermophilus microorganisms; using entrapped or encapsulated yoghurt bacteria; Physical or chemical treatment of L. bulgaricus or S. thermophilus cultures; Fermentation only with L. bulgaricus or only with S. thermophilus
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N1/00—Microorganisms, e.g. protozoa; Compositions thereof; Processes of propagating, maintaining or preserving microorganisms or compositions thereof; Processes of preparing or isolating a composition containing a microorganism; Culture media therefor
    • C12N1/20—Bacteria; Culture media therefor

Landscapes

  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Zoology (AREA)
  • Wood Science & Technology (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Food Science & Technology (AREA)
  • Polymers & Plastics (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Virology (AREA)
  • Tropical Medicine & Parasitology (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • General Engineering & Computer Science (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
  • Dairy Products (AREA)
  • Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)

Abstract

uso de manganês, método para aumentar seletivamente o crescimento de bactérias e produto fermentado. a presente invenção refere-se a um método para aumentar seletivamente o crescimento de bactérias do grupo lactobacíllus casei em uma cultura mista, mediante a adição de manganês ao meio de cultura. o dito método é adequado, em particular, no caso de culturas mistas que associam lactobacíl/us casei com bactérias de iogurte.

Description

(54) Título: USO DE MANGANÊS E MÉTODO PARA AUMENTAR SELETIVAMENTE O CRESCIMENTO DE BACTÉRIAS (73) Titular: COMPAGNIE GERVAIS DANONE, Empresa Francesa. Endereço: 17, BOULEVARD HAUSSMANN PARIS - 75009 - FR, FRANÇA(FR) (72) Inventor: LAURENT MARCHAL; CYRIL COLIN.
Prazo de Validade: 20 (vinte) anos contados a partir de 15/07/2010, observadas as condições legais
Expedida em: 04/12/2018
Assinado digitalmente por:
Liane Elizabeth Caldeira Lage
Diretora de Patentes, Programas de Computador e Topografias de Circuitos Integrados
1/11 “USO DE MANGANÊS E MÉTODO PARA AUMENTAR SELETIVAMENTE O CRESCIMENTO DE BACTÉRIAS”
Campo da invenção [001] A presente invenção refere-se a um método para aumentar o crescimento de bactérias do grupo Lactobacillus casei em culturas mistas.
Antecedentes da invenção [002] O grupo Lactobacillus casei abrange diversas espécies de bactérias lácticas de grande interesse para a indústria alimentícia. Em particular, cepas do grupo Lactobacillus casei, que pertencem às espécies L. casei subsp. casei, L. casei subsp. paracasei, e L. casei subsp. rhamnosus, foram apresentadas como tendo propriedades que promovem a saúde e são usadas como probióticos em diferentes produtos alimentícios incluindo, em particular, produtos lácteos.
[003] A menos que especificado de outra forma, os termos Lactobacillus casei (ou L. casei) são usados daqui em diante no presente documento para designar qualquer subespécie do grupo Lactobacillus casei, e em particular, qualquer subespécie casei, paracasei ou rhamnosus mencionada acima.
[004] Uma desvantagem do uso de bactérias do grupo Lactobacillus casei na produção de produtos lácteos fermentados é seu baixo crescimento no leite.
[005] Quando usada em uma cultura pura, o tempo de fermentação da L. casei é muito grande, o que é uma limitação em seu uso na produção industrial.
[006] Na fabricação de produtos lácteos probióticos, bactérias Lactobacillus casei são frequentemente associadas a outras espécies de bactérias lácticas, probióticas ou não. Em muitos casos as mesmas são combinadas com bactérias de iogurte (Streptococcus thermophilus e Lactobacillus delbrueckii ssp.
Petição 870180072434, de 17/08/2018, pág. 11/25
2/11 bulgarícus ou ssp. lactis), o que dá propriedades organolépticas específicas (tais como textura e sabor) ao produto fermentado. As bactérias de iogurte crescem mais rápido no leite do que a Lactobacillus casei, o que dessa forma permite a aceleração do processo de fermentação global. Entretanto, a rápida acidificação do meio por essas bactérias de iogurte limita o crescimento da L. casei na cultura mista e, portanto, sua população no produto final.
[007] Os inventores agora revelaram que quando manganês era adicionado a uma cocultura de Lactobacillus casei com outras bactérias lácticas, em particular bactérias de iogurte, o crescimento de L. casei era aumentado, enquanto nenhum efeito foi observado nas outras bactérias lácticas.
Descrição Resumida da invenção [008] Um objetivo da presente invenção é, portanto, o uso de manganês para aumentar seletivamente o crescimento de bactérias do grupo Lactobacillus casei em uma cultura mista que contém bactérias lácticas que não pertencem ao grupo Lactobacillus casei.
[009] Mais especificamente, a presente invenção fornece um método para aumentar seletivamente o crescimento de bactérias do grupo Lactobacillus casei em uma cultura mista que contém bactérias lácticas que não pertencem ao grupo Lactobacillus casei, em que dito método compreende:
a) fornecer um meio de fermentação que contém manganês;
b) inocular dito meio de fermentação com as bactérias;
c) fermentar o meio inoculado até que o mesmo alcance um pH alvo desejado;
d) interromper a fermentação e recuperar o produto fermentado.
Descrição Detalhada da invenção [010] As bactérias do grupo Lactobacillus case/são selecionadas preferencialmente dentre as espécies L. casei subsp. casei, L. casei subsp. paracasei, L. case/subsp. rhamnosus. As bactérias lácticas que não pertencem
Petição 870180072434, de 17/08/2018, pág. 12/25
3/11 ao grupo Lactobacillus casei são selecionadas preferencialmente dentre Lactobacillus delbrueckii ssp bulgaricus, Lactobacillus delbrueckii ssp iactis e Streptococcus thermophilus.
[011] O meio de fermentação é preferencialmente um meio de fermentação lácteo, isto é um meio líquido com base em leite. Qualquer fonte de leite animal ou vegetal pode ser considerada. Leite de vaca, entretanto, é preferido. O mesmo pode ser, por exemplo, leite integral, semidesnatado e desnatado, reconstituído opcionalmente de leite em pó. O mesmo também pode consistir de uma fração de leite, por exemplo, soro ou misturas de duas ou mais frações de leite. Preferencialmente, o dito meio será usado sem suplementação diferente do manganês. Entretanto, o mesmo pode opcionalmente ser suplementado com ingredientes tais como açúcares, amidos, espessantes, etc. desde que esses ingredientes não interfiram com o crescimento de uma ou mais das cepas com as quais foi feita cocultura, desde que as mesmas sejam adequadas para consumo humano ou animal.
[012] O dito meio é esterilizado de forma clássica antes da inoculação com as cepas de Lactobacillus. A esterilização é realizada por métodos conhecidos por si só, tais como tratamento por calor.
[013] O pH do meio de fermentação antes da inoculação com as bactérias é preferencialmente de 5,5 a 7, preferencialmente de aproximadamente 6,4.
[014] De acordo com uma modalidade preferida da invenção, o meio de fermentação contém pelo menos 0,1 mg/L, preferencialmente 0,5 mg/L, e até 100 mg/L de manganês. Geralmente, o mesmo irá conter de aproximadamente 5 até aproximadamente 60 mg/L de manganês. O manganês é adicionado na forma de um sal de manganês de nível alimentar na quantidade apropriada para alcançar as concentrações finais mencionadas acima de ânion de manganês no meio de fermentação. Exemplos de sais de
Petição 870180072434, de 17/08/2018, pág. 13/25
4/11 manganês de nível alimentar que podem ser no método da invenção incluem cloreto de manganês, óxido de manganês, sulfato de manganês, citrato de manganês, glicerofosfato de manganês, gluconato de manganês e semelhantes. No caso de um meio de fermentação lácteo, a quantidade de manganês adicionada será de pelo menos 0,05 mg, preferencialmente de pelo menos 0,45 mg, para levar em consideração da quantidade de manganês naturalmente presente no leite (que é de aproximadamente 0,05 +/- 0,02 mg/L).
[015] O sal de manganês pode ser adicionado ao meio de fermentação antes da inoculação com as bactérias ou simultaneamente com a dita inoculação. Vantajosamente, o mesmo pode ser adicionado ao inóculo L. casei durante sua preparação, por exemplo, o mesmo pode ser adicionado após concentração das bactérias propagadas e antes do congelamento do concentrado. Nesse caso a quantidade de manganês no inóculo será geralmente de 0,5 mg/mL a 4,5 mg/mL.
[016] Geralmente, as bactérias do grupo Lactobacillus casei são inoculadas no meio em uma quantidade de pelo menos 104 CFU/mL, preferencialmente de 5 x 104 a 1 x 101° CFU/mL, mais preferencialmente de 106 a
108 CFU/mL e ainda mais preferencialmente de aproximadamente 2.107 CFU/mL.
[017] As bactérias lácticas que não pertencem ao grupo Lactobacillus casei são inoculadas no meio em uma quantidade de 103 CFU/mL a
109 CFU/mL, preferencialmente de 105 a 108 CFU/mL, mais preferencialmente de
106 a 107 CFU/mL e ainda mais preferencialmente de aproximadamente 5.106 CFU/mL.
[018] Mais especificamente, no caso de cocultura de L. casei com bactérias de iogurte, Streptococcus thermophilus são inoculadas no meio em uma quantidade de 105 CFU/mL a 108 CFU/mL, preferencialmente de 106 a
107 CFU/mL, mais preferencialmente de aproximadamente 5.106 CFU/mL e Lactobacillus delbrueckii ssp. Bulgaricus ou Lactobacillus delbrueckii ssp iactis
Petição 870180072434, de 17/08/2018, pág. 14/25
5/11 são inoculados no meio em uma quantidade de 104 CFU/mL a 108 CFU/mL, preferencialmente de 105 a 107 CFU/mL, mais preferencialmente de aproximadamente 106 CFU/mL.
[019] Após inoculação do meio lácteo, a fermentação é conduzida sob as condições comuns adequadas para o crescimento das bactérias inoculadas.
[020] A temperatura de fermentação será geralmente de 15SC a 45SC, preferencialmente de 25SC a 43SC, mais preferencialmente de aproximadamente 36SC.
[021] A fermentação é interrompida quando o meio de fermentação alcança o pH alvo desejado e/ou quando a população Lactobacillus case/alcança o valor alvo desejado.
[022] Geralmente, o pH alvo será de 3,7 a 4,9, preferencialmente de 4 a 4,8, mais preferencialmente de aproximadamente 4,6.
[023] O valor alvo para a população final de Lactobacillus casei é geralmente de pelo menos 1,1 vez, preferencialmente de 1,3 vez e normalmente de até 1,5 vez a população final obtida quando as mesmas bactérias Lactobacillus casei são colocadas em cultura sob as mesmas condições sem Mn.
[024] Geralmente, a fermentação é interrompida quando a população L. casei é de pelo menos 107 CFU/mL, preferencialmente de pelo menos 107 a 101° CFU/mL.
[025] A presente invenção também abrange um produto lácteo fermentado obtenível pelo processo da presente invenção. Esse produto normalmente contém, em adição às bactérias usadas para a fermentação, o meio lácteo fermentado que contém o sal de manganês. Esse produto lácteo fermentado pode ser usado como tal, em particular como um produto alimentício ou um suplemento nutricional.
Petição 870180072434, de 17/08/2018, pág. 15/25
6/11 [026] O mesmo também pode ser adicionado a um produto alimentício, em particular um produto lácteo tal como um iogurte ou para uma composição nutricional, farmacêutica ou cosmética. A composição alimentícia, assim como composições nutricionais, farmacêuticas ou cosméticas que compreendem o produto lácteo fermentado, também é parte da invenção.
[027] A presente invenção é ilustrada adicionalmente pela descrição adicional que se segue, que se refere a exemplos não limitantes da implantação do processo da invenção.
Exemplo 1: Aumento Seletivo Por Manganês De Crescimento De L. Casei
Ssp Paracasei Colocada Em Cocultura Com Bactérias De Iogurte.
[028] Um meio de fermentação lácteo foi preparado pela mistura de pó de leite desnatado (30 g) com água destilada (920 g), sacarose (50 g), com (meio A) ou sem (meio B) adição de sulfato de manganês monoidratado em uma concentração final de 61,44 mg/ml_, que corresponde a 20 mg/L de cátions de manganês. Após uma 1 h de reidratação, a mistura foi esterilizada pelo uso de autoclave por 15 minutos a 115SC.
[029] Os meios A e B são inoculados com Lactobacillus casei subsp. paracasei DN-114 121 (3,80 x 107 CFU/mL), e um fermento de iogurte (DN 542 142) que consiste de: Streptococcus thermophilus DN-001 640 (106 CFU/mL), Streptococcus thermophilus DN-001 336 (2.106 CFU/mL).
Streptococcus thermophilus DN-001 236 (7.105 CFU/mL) e Lactobacillus bulgaricus DN-100 290 (105 CFU/mL).
[030] A fermentação foi conduzida a 36SC e monitorada pela medição da diminuição do pH no meio de cultura. A fermentação foi interrompida pela transferência da preparação a 4SC quando o pH alvo de 4,6 foi alcançado.
[031] O pH alvo foi alcançado após 6,1 horas de fermentação no caso do meio A, e 6,6 horas de formatação no caso do meio B.
Petição 870180072434, de 17/08/2018, pág. 16/25
7/11 [032] A população de Lactobacillus casei subsp. paracasei foi avaliada em J+3 pela análise de contagem de células. Análise de contagem de células foi realizada por diluições em série do meio fermentado com uma solução de sal de triptona e revestimento em placas de petri com o meio ágar apropriado: Ágar MRS que contém 1,5 g/L de BactoOXGALL (DIFCO) para Lactobacillus casei.
[033] Placas de Petri foram incubadas a 37SC durante 96H em condições anaeróbias (5% de CO2).
[034] A população de Lactobacillus casei no produto fermentado obtido do meio A foi de 1,2 x 108 CFU/mL.
[035] A população de Lactobacillus casei no produto fermentado obtido do meio B foi de 8,8 x 107 CFU/mL.
[036] As populações de Streptococcus thermophilus e Lactobacillus bulgarícus não foram avaliadas por contagens de células, mas pela avaliação da cinética de acidificação. É bem conhecido que Streptococcus thermophilus e Lactobacillus bulgarícus crescem mais rápido no leite que L. casei e suas produções lácticas são diretamente correlacionadas ao seu crescimento. Também, na presente invenção, 0 monitoramento da acidificação corresponde ao monitoramento do crescimento de Streptococcus thermophilus e Lactobacillus bulgarícus.
[037] Os experimentos foram realizados novamente com Lactobacillus casei subsp. paracasei DN-114 121, no mesmo meio de fermentação lácteo conforme acima, com ou sem sulfato de manganês monoidratado em uma concentração final de 61,44 mg/L, que corresponde a 20 mg/L de cátions de manganês.
[038] Dois fermentos de iogurte foram testados em combinação com Lactobacillus caser. DN 542 142 descrito acima e DN 543 043, que consiste de uma cepa de Streptococcus thermophilus (DN-001 171) e uma cepa de Lactobacillus bulgarícus (DN-100 182).
Petição 870180072434, de 17/08/2018, pág. 17/25
8/11 [039] Lactobacillus casei subsp. paracasei DN-114 121 foi inoculado a 3,8.107 CFU/mL.
[040] O DN 542 142 foi inoculado a 106 CFU/mL para Streptococcus thermophilus DN-001 640; 2.106 CFU/mL para Streptococcus thermophilus DN-001 336; 7.105 CFU/mL para Streptococcus thermophillus DN001 236 e 105 CFU/mL para Lactobacillus bulgaricus DN-100 290.
[041] DN 543 043 foi inoculado a 2.106 CFU/mL para Streptococcus thermophilus DN-001 171; e 7.104 CFU/mL para Lactobacillus bulgaricus DN-100 182.
[042] Fermentação foi conduzida a 36SC e monitorada pela medição da diminuição de pH no meio de cultura. A fermentação foi interrompida pela transferência da preparação a 4SC quando um alvo pH de aproximadamente 4,6 (no caso da cocultura com o fermento de iogurte DN 542 142), ou de aproximadamente 4,45 (no caso da cocultura com o fermento de iogurte DN 543 043) foi alcançado.
[043] A população de Lactobacillus casei subsp. paracasei foi avaliada após incubação por 1 dia (J+1) e 3 dias (J+3) a 10sC.
[044] Os resultados são ilustrados pelas Figuras 1 e 2 e pelas Tabelas I e II abaixo.
Tabela I
Fim de Cultura
Testes pH (36aC) Tempo (Horas) pH J+1 (10aC)
543 043 + 114 121 - Mn 20 mg/L 4,65 08h12 4,70
543 043 + 114 121 4,61 08h22 4,67
542 142+ 114 121 -Mn 20 mg/L 4,43 06h58 4,44
542 142 + 114 121 4,47 07h08 4,46
Tabela II
Contagem ufc/mL a +10aC
Testes J+1 Contagem J+3 Razão Contagem Mn/Contagem J+1 Razão Contagem Mn/Contagem J+3
543 043 + 114 121 - Mn 20 mg/L 2.70E+08 3.00E+08 1,9 2,1
Petição 870180072434, de 17/08/2018, pág. 18/25
9/11
Contagem ufc/mL a +10aC
Testes J+1 Contagem J+3 Razão Contagem Mn/Contagem J+1 Razão Contagem Mn/Contagem J+3
543 043 + 114 121 1.46E+08 1,41E+08
542 142 + 114 121 - Mn 20 mg/L 1.15E+08 1,61 E+08 1,9 1,7
542 142 + 114 121 6.15E+07 9.60E+07
[045] Esses resultados mostram que a adição de 20 mg/L de manganês não tem efeito na cinética de acidificação das cocultura. O tempo para alcançar o pH alvo é o mesmo com ou sem manganês. Por outro lado, a adição de 20 mg/L de manganês seletivamente aumenta a população de Lactobacillus casei.
[046] Em alguns casos a população de L. casei foi maior em J+3 do que em J+1. Isso pode ser explicado pelo fato de que o resfriamento da cultura a 4SC para interromper a fermentação induz certo stress, o que resulta em uma habilidade reduzida no crescimento quando revestido em placas de petri. Após alguns dias as bactérias se recuperam do stress e recuperam sua habilidade de recomeçar a crescer.
Exemplo 2: Efeito De Manganês No Crescimento De L. Casei Ssp Paracasei
Ou L. Casei Ssp Rhamnosus Colocada Em Cocultura Com Diferentes
Fermentos De Iogurte [047] Os mesmos experimentos do Exemplo 1 foram realizados com coculturas de Lactobacillus casei subsp. paracasei DN-114 121 ou Lactobacillus case/subsp. rhamnosus DN-116 010 com o fermento de iogurte DN 543 043 descrito acima, ou o fermento de iogurte DN 522 044, que consiste de uma cepa de Streptococcus thermophilus (DN-001 143), Streptococcus thermophilus (DN-001 257) e uma cepa de Lactobacillus lactis (DN-111 224).
[048] Os experimentos foram realizados no mesmo meio de fermentação lácteo do Exemplo 1, com ou sem sulfato de manganês
Petição 870180072434, de 17/08/2018, pág. 19/25
10/11 monoidratado em concentrações finais de 1,54 mg/L, 61,44 mg/L, 184,33 mg/L, que correspondem a 0,5 mg/L, 20 mg/L e 60 mg/L de cátions de manganês.
[049] Lactobacillus casei subsp. paracasei DN-114 121 foi inoculado a 3,8.107 CFU/mL.
[050] Lactobacillus casei subsp. rhamnosus DN-116 010 foi inoculado a 5,8.107 CFU/mL.
[051] DN 543 043 foi inoculado a 2.106 CFU/mL para Streptococcus thermophilus DN-001 171; e 7.104 CFU/mL para Lactobacillus bulgaricus DN-100 182.
[052] DN 522 044 foi inoculado a 2.106 CFU/mL para Streptococcus thermophilus DN-001 143; 106 CFU/mL para Streptococcus thermophilus DN-001 257, 4.106 CFU/mL para Streptococcus thermophilus DN001 623 e 2,5.105 CFU/mL para Lactobacillus lactis DN-111 224.
[053] Fermentação foi conduzida a 36SC e monitorada pela medição da diminuição do pH no meio de cultura. A fermentação foi interrompida pela transferência da preparação a 4SC quando o pH alvo de aproximadamente 4,6 foi alcançado.
[054] A população de Lactobacillus casei subsp. paracasei foi avaliada após incubação de 1 dia (J+1) a 10sC.
[055] Os resultados são ilustrados pelas Figuras 3, 4 e 5 e Tabelas lll e IV abaixo.
Tabela lll
Fim da Cultura
Testes pH Tempo (Horas)
1 - 543 043 + 114 121 0 mg/L Mn 4,60 09h17
2 - 543 043 + 114 121 60 mg/L Mn 4,59 09h14
3 - 543 043 + 114 121 20 mg/L Mn 4,58 09h02
4 - 543 043 + 114 121 0,5 Mg/L Mn 4,60 09h18
5 - 543 043 + 116 010 0 mg/L Mn 4,59 09h50
6 - 543 043 + 116010 20 mg/L Mn 4,60 09h06
7 - 543 043 + 116 010 60 Mg/L Mn 4,60 09h04
8-522044 + 114121 0 mg/L Mn 4,60 09h22
Petição 870180072434, de 17/08/2018, pág. 20/25
11/11
9 - 522 044 + 114 121 20 Mg/L Mn 4,60 09h20
Tabela IV
Contagem ufc/mL a +10sC paracasei ou rhamnosus
Testes Contagem J+1 paracasei ou rhamnosus Contagem Número de Mn/Contagem J+1
1 - 543 043 + 114 121 0 mg/L Mn 1.35E+08 /
2 - 543 043 + 114 121 60 mg/L Mn 3.25E+08 2,4
3 - 543 043 + 114 121 20 mg/L Mn 3.13E+08 2,3
4 - 543 043 + 114 121 0,5 Mg/L Mn 2.99E+08 2,2
5-543 043 + 1160100mg/L Mn 2.52E+08 /
6 - 543 043 + 116 010 20 mg/L Mn 3.20E+08 1,3
7 - 543 043 + 116 010 60 Mg/L Mn 3.30E+08 1,3
8-522 044+ 114 121 0 mg/L Mn 1.42E+08 /
9-522044 + 114121 20 Mg/L Mn 3.25E+08 2,3
[056] Esses resultados confirmam que a adição de manganês não tem efeito na cinética de acidificação das coculturas. No tempo para alcançar o pH alvo é o mesmo com ou sem manganês. Por outro lado, o mesmo seletivamente aumenta a população das bactérias do grupo L. casei (Lactogbacillus casei ssp paracasei ou Lactobacillus casei ssp rhamnosus).
Petição 870180072434, de 17/08/2018, pág. 21/25
1/3

Claims (14)

  1. Reivindicações
    1. USO DE MANGANÊS, caracterizado por ser para aumentar seletivamente o crescimento de bactérias do grupo Lactobacillus casei em uma cultura mista que contém bactérias lácticas que não pertencem ao grupo Lactobacillus casei.
  2. 2. USO, de acordo com a reivindicação 1, caracterizado pelas bactérias do grupo Lactobacillus casei serem selecionadas dentre as espécies L. casei subsp. casei, L. casei subsp. paracasei, L. casei subsp. rhamnosus.
  3. 3. USO, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a
    2, caracterizado pelas bactérias lácticas que não pertencem ao grupo Lactobacillus casei serem selecionadas dentre Lactobacillus delbrueckii ssp bulgaricus, Lactobacillus delbrueckii ssp iactis e Streptococcus thermophilus.
  4. 4. USO, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a
    3, caracterizado pelas bactérias serem cultivadas em um meio de fermentação lácteo.
  5. 5. MÉTODO PARA AUMENTAR SELETIVAMENTE O CRESCIMENTO DE BACTÉRIAS do grupo Lactobacillus casei em uma cultura mista que contém bactérias lácticas que não pertencem ao grupo Lactobacillus casei, caracterizado pelo método compreender:
    a) fornecer um meio de fermentação que contém manganês;
    b) inocular dito meio de fermentação com as bactérias;
    c) fermentar o meio inoculado até que o mesmo alcance um pH alvo desejado;
    d) interromper a fermentação e recuperar o produto fermentado.
  6. 6. MÉTODO, de acordo com a reivindicação 5, caracterizado pelo meio de fermentação conter pelo menos 0,1 mg/L de manganês.
  7. 7. MÉTODO, de acordo com qualquer uma das reivindicações 5 a 6, caracterizado pelo meio de fermentação ser um meio de fermentação
    Petição 870180072434, de 17/08/2018, pág. 22/25
    2/3 lácteo, com pelo menos 0,05 mg/L de manganês adicionado.
  8. 8. MÉTODO, de acordo com qualquer uma das reivindicações 5 a 7, caracterizado pelas bactérias do grupo Lactobacillus casei serem selecionadas dentre as espécies L. casei subsp. casei, L. casei subsp. paracasei, L. case/subsp. rhamnosus.
  9. 9. MÉTODO, de acordo com qualquer uma das reivindicações 5 a 8, caracterizado pelas bactérias lácticas que não pertencem ao grupo Lactobacillus casei serem selecionadas dentre Lactobacillus delbrueckii ssp bulgaricus, Lactobacillus delbrueckii ssp iactis e Streptococcus thermophilus.
  10. 10. MÉTODO, de acordo com qualquer uma das reivindicações 5 a 9, caracterizado pelas bactérias do grupo Lactobacillus casei serem inoculadas no meio em uma quantidade de pelo menos 104 CFU/mL, e as bactérias lácticas que não pertencem ao grupo Lactobacillus casei são inoculadas no meio em uma quantidade de 103 CFU/ ml_ a 109 CFU/ ml_.
  11. 11. MÉTODO, de acordo com qualquer uma das reivindicações 5 a 10, caracterizado pela fermentação ser conduzida a uma temperatura de 159Ca459C.
  12. 12. MÉTODO, de acordo com qualquer uma das reivindicações 5 a 11, caracterizado pela fermentação ser interrompida quando um pH alvo de
    3,7 a 4,9 é alcançado.
  13. 13. MÉTODO, de acordo com qualquer uma das reivindicações 5 a 12, caracterizado pela população final de bactérias do grupo Lactobacillus casei no produto fermentado ser de pelo menos 1,1 vezes a população final obtida quando as mesmas bactérias Lactobacillus casei são cultivadas sob as mesmas condições sem Mn.
  14. 14. MÉTODO, de acordo com qualquer uma das reivindicações 5 a 12, caracterizado pela população final de bactérias do grupo Lactobacillus casei no produto fermentado ser de pelo menos 1,3 vezes a população final obtida
    Petição 870180072434, de 17/08/2018, pág. 23/25
    3/3 quando as mesmas bactérias Lactobacillus casei são cultivadas sob as mesmas condições sem Mn.
    Petição 870180072434, de 17/08/2018, pág. 24/25
    1/3 unidades de pH
    Curvas de acidificação da cepa 114 121 em simbiose com incubação de cultura 543 043 j
    10123456789 10 11 12 i Tempo (horas)
    ....... Mn20mg/L —sem Mn --pH 4,6
BR112013000986-1A 2010-07-15 2010-07-15 uso de manganês e método para aumentar seletivamente o crescimento de bactérias BR112013000986B1 (pt)

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
PCT/IB2010/053237 WO2012007794A1 (en) 2010-07-15 2010-07-15 Use of manganese for enhancing the growth of l. casei in mixed cultures

Publications (2)

Publication Number Publication Date
BR112013000986A2 BR112013000986A2 (pt) 2016-05-24
BR112013000986B1 true BR112013000986B1 (pt) 2018-12-04

Family

ID=43719541

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
BR112013000986-1A BR112013000986B1 (pt) 2010-07-15 2010-07-15 uso de manganês e método para aumentar seletivamente o crescimento de bactérias

Country Status (8)

Country Link
US (1) US20130149415A1 (pt)
EP (1) EP2593539B1 (pt)
BR (1) BR112013000986B1 (pt)
CA (1) CA2805208C (pt)
EA (1) EA024923B1 (pt)
ES (1) ES2614162T3 (pt)
PL (1) PL2593539T3 (pt)
WO (1) WO2012007794A1 (pt)

Families Citing this family (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US10039296B2 (en) * 2011-06-20 2018-08-07 H.J. Heinz Company Brands Llc Probiotic compositions and methods
CN108882718A (zh) * 2016-01-21 2018-11-23 科·汉森有限公司 使用干酪乳杆菌生产发酵乳制品的方法
CN112262939A (zh) * 2020-09-21 2021-01-26 云南皇氏来思尔乳业有限公司 一种在制作褐色乳酸菌饮料时提高产酸速度的方法
CN114747700A (zh) * 2022-04-27 2022-07-15 田阳 一种鲈鱼幼苗饲料转口添加剂

Family Cites Families (9)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US4115199A (en) * 1977-05-04 1978-09-19 Chr. Hansen's Laboratory, Inc. Preparation of culture concentrates for direct vat set cheese production
DE130228T1 (de) * 1983-07-01 1985-09-12 Microlife Technics Inc., Sarasota, Fla. Fermentierungsverfahren mit einem selektierten lactobacillus.
ITRM20040166A1 (it) 2004-03-31 2004-06-30 Alberto Cresci Ceppi batterici lab con proprieta' probiotiche e composizioni che contengono gli stessi.
JP2008199905A (ja) * 2007-02-16 2008-09-04 Snow Brand Milk Prod Co Ltd 乳酸菌生残性向上剤
FR2928935B1 (fr) 2008-03-19 2011-05-20 Gervais Danone Sa Souche de lactobacillus rhamnosus.
FR2930264B1 (fr) 2008-04-18 2013-02-22 Gervais Danone Sa Nouvelle souche de lactobacillus paracasei subsp. paracasei dotee de proprietes antimicrobiennes et immunomodulatrices.
EP2251020A1 (en) * 2009-05-11 2010-11-17 Nestec S.A. Short-time high temperature treatment generates microbial preparations with anti-inflammatory profiles
BR112012023635A2 (pt) * 2010-03-19 2017-12-12 Yakult Honsha Kk novos lactobacilos classificados como lactobacillus plantarum e seu uso
WO2011141762A1 (en) 2010-05-12 2011-11-17 Compagnie Gervais Danone Synergistic fermentation of lactobacillus rhamnosus and lactobacillus paracasei subsp paracasei

Also Published As

Publication number Publication date
PL2593539T3 (pl) 2017-07-31
EA024923B1 (ru) 2016-11-30
CA2805208C (en) 2019-11-26
WO2012007794A1 (en) 2012-01-19
BR112013000986A2 (pt) 2016-05-24
US20130149415A1 (en) 2013-06-13
CA2805208A1 (en) 2012-01-19
EA201390124A1 (ru) 2013-05-30
ES2614162T3 (es) 2017-05-29
EP2593539B1 (en) 2016-11-09
EP2593539A1 (en) 2013-05-22

Similar Documents

Publication Publication Date Title
ES2674353T3 (es) Método para preparar cultivos líquidos microbianos que tienen alta estabilidad y actividad fermentativa
JP4772131B2 (ja) 新規乳酸菌を用いた発酵乳の製造方法
JP4862053B2 (ja) 新規乳酸菌
JP6317251B2 (ja) 酸度上昇が抑制された発酵乳およびその製造方法
CA2799101C (en) Synergistic fermentation of lactobacillus rhamnosus and lactobacillus paracasei subsp paracasei
CN104542966B (zh) 整肠作用的包含开菲尔乳杆菌的发酵乳及其制备方法
BRPI0713023A2 (pt) agente para intensificar o crescimento e melhorar a viabilidade de uma bactéria de ácido láctico, substrato de cultura, e, leite em pó ou leite concentrado
Sadaghdar et al. Survival and activity of 5 probiotic lactobacilli strains in 2 types of flavored fermented milk
Shu et al. Research article effect of inoculum and temperature on the fermentation of goat yogurt
CN110157650B (zh) 一株分离自母乳的乳双歧杆菌m8及其应用
CN101731511A (zh) 益生菌活性制品及其制备方法
BR112017023467B1 (pt) Processo para a fabricação de um produto lácteo fermentado drenado e produto lácteo fermentado drenado
Xanthopoulos et al. Use of a selected multi-strain potential probiotic culture for the manufacture of set-type yogurt from caprine milk
BR112013000986B1 (pt) uso de manganês e método para aumentar seletivamente o crescimento de bactérias
CN110250270B (zh) 一种利用植物乳杆菌提高发酵乳叶酸含量的方法
Lavasani Biochemical Changes of Iranian Probiotic Lighvan Cheese.
JP2012105577A (ja) ホエイ発酵飲料の製造方法
JP4794592B2 (ja) 新規乳酸菌
JP4794593B2 (ja) 新規乳酸菌を用いた発酵乳の製造方法
WO2023112941A1 (ja) 発酵組成物、及びその製造方法
Fadaei et al. Influence of Spirulina platensis powder on viability of Lactococcus strains in probiotic UF feta cheese containing Mentha longifolia L
Karimpour et al. Certain probiotic properties of lactic acid bacteria from the Iranian dairy product “Richal”
Shirzadi et al. The survey of survival of probiotic Bifidobacterium bifidum and its effect on microbial and physiochemical of fruit drinking yogurt
RU2577112C1 (ru) Штамм lactobacillus helveticus вкпм в-11175, полученный на доступных питательных средах
Ahmed et al. Survival of some Probiotics in Bio-Yoghurt Production

Legal Events

Date Code Title Description
B06A Patent application procedure suspended [chapter 6.1 patent gazette]
B09A Decision: intention to grant [chapter 9.1 patent gazette]
B16A Patent or certificate of addition of invention granted [chapter 16.1 patent gazette]

Free format text: PRAZO DE VALIDADE: 20 (VINTE) ANOS CONTADOS A PARTIR DE 15/07/2010, OBSERVADAS AS CONDICOES LEGAIS.