WO2023112941A1 - 発酵組成物、及びその製造方法 - Google Patents
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- WO2023112941A1 WO2023112941A1 PCT/JP2022/045960 JP2022045960W WO2023112941A1 WO 2023112941 A1 WO2023112941 A1 WO 2023112941A1 JP 2022045960 W JP2022045960 W JP 2022045960W WO 2023112941 A1 WO2023112941 A1 WO 2023112941A1
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- A—HUMAN NECESSITIES
- A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
- A23C—DAIRY PRODUCTS, e.g. MILK, BUTTER OR CHEESE; MILK OR CHEESE SUBSTITUTES; MAKING THEREOF
- A23C9/00—Milk preparations; Milk powder or milk powder preparations
- A23C9/12—Fermented milk preparations; Treatment using microorganisms or enzymes
Definitions
- lactic acid bacteria and Bifidobacterium genus bacteria are added to a certain concentration ( cfu/mL) or more, and the pH is in the neutral range, "increase in sour taste and sour smell", “decrease in pH” and / or "
- the present invention relates to a fermented composition in which the decrease in viable bacteria concentration (cfu/mL) such as lactic acid bacteria is suppressed, a method for producing the same, and the like.
- a fermented composition such as fermented milk obtained by fermenting milk raw materials with lactic acid bacteria is not only a nutritional food containing a large amount of protein and calcium, but also contains metabolites such as lactic acid bacteria, so various physiological effects are expected. and has received increasing attention in recent years.
- physiological effects effects such as improvement of immunity, improvement of allergic diseases, improvement of autonomic nerve function, prevention and improvement of lifestyle-related diseases, etc. are known.
- lactic acid bacteria, etc. with excellent specific functional effects have been extensively researched, and consumers are seeking to actively ingest such excellent lactic acid bacteria, etc. in food and drink such as fermented milk and lactic acid beverages. has risen further in recent years.
- Fermented compositions such as fermented milk and lactic acid bacteria beverages are all produced by fermenting milk or the like with viable bacteria such as lactic acid bacteria.
- viable bacteria such as lactic acid bacteria.
- the live lactic acid bacteria further produce lactic acid and acetic acid, and as the pH decreases, sourness and sourness increase, and at the end of storage, the sourness and sourness become excessive and the flavor deteriorates.
- Patent Document 1 discloses a method of suppressing or reducing the post-acid formation that occurs thereafter by aging in a freezing temperate zone after completion of fermentation in the manufacturing process of yogurt.
- Patent Document 2 discloses a method of suppressing post-acidification of fermented milk products, such as by using lactose-reduced milk as a raw material.
- these methods also have problems such as simplicity.
- Patent Document 3 discloses a method for improving the richness (feel) of coffee by blending dead bacteria such as lactic acid bacteria into a packaged coffee beverage. It is
- An object of the present invention is to provide a fermented composition containing live bacteria such as lactic acid bacteria at a certain concentration (cfu / mL) or more and having a pH in the neutral range
- An object of the present invention is to provide a fermented composition in which "increase in sour odor", “decrease in pH” and/or “decrease in viable bacteria concentration (cfu/mL) such as lactic acid bacteria” is suppressed, and a method for producing the same.
- Step A of adding to raw materials or (B) step B of adding one or more live bacteria selected from the group consisting of lactic acid bacteria and Bifidobacterium bacteria to the milk raw material for producing a fermented composition and fermenting it; and (C) Step C of adding dead Lactococcus bacteria;
- the present inventors have found that the problems of the present invention can be solved by adjusting the pH of raw materials for dairy using a pH adjuster, and have completed the present invention.
- the present invention (1) (a) 1 ⁇ 10 6 cfu/mL or more of live bacteria of one or more bacteria selected from the group consisting of lactic acid bacteria and Bifidobacterium bacteria, (b) raw materials for milk and/or or a fermented composition containing a fermented milk material and (c) killed Lactococcus bacteria and having a pH of 6.0 to 7.4; (2) (A) A fermented product obtained by fermenting a milk raw material for preparing a fermented product with one or more live bacteria selected from the group consisting of lactic acid bacteria and Bifidobacterium spp.
- One or more live bacteria selected from the group consisting of lactic acid bacteria and Bifidobacterium are Lactococcus bacteria, Streptococcus bacteria, Lactobacillus bacteria, and Bifidobacterium
- Step A of adding to raw materials or (B) step B of adding one or more live bacteria selected from the group consisting of lactic acid bacteria and Bifidobacterium bacteria to the milk raw material for producing a fermented composition and fermenting it; and (C) Step C of adding killed Lactococcus bacteria; A pH of 6.0 to 7, in which an increase in acidity and acidity, a decrease in pH, and/or a decrease in the content concentration (cfu/mL) of the viable bacteria is suppressed during refrigerated storage after production of the fermented composition.
- a method for producing the fermented composition of 4 (A) A fermented product obtained by fermenting a milk raw material for preparing a fermented product with live bacteria of one or more kinds of bacteria selected from the group consisting of lactic acid bacteria and Bifidobacterium spp.
- Step A of adding to raw materials or (B) step B of adding live bacteria of one or more bacteria selected from the group consisting of lactic acid bacteria and Bifidobacterium bacteria to the milk raw material for producing the fermented composition and fermenting B; and (C) Step C of adding killed Lactococcus bacteria;
- a fermented composition with a pH of 6.0 to 7.4 during refrigerated storage after production of the fermented composition, an increase in sour taste and sour odor, a decrease in pH and / or the content concentration of the viable bacteria (cfu / mL ) method of suppressing the decrease; Regarding.
- a fermented composition containing viable bacteria such as lactic acid bacteria at a certain concentration (cfu / mL) or more and having a pH in the neutral range, wherein "sourness”
- a fermented composition in which "increase in sour smell", “decrease in pH” and/or “decrease in viable bacteria concentration (cfu/mL) such as lactic acid bacteria” is suppressed, and a method for producing the same.
- FIG. 1 is a diagram showing the relationship between the Lactococcus lactis subspecies lactis JCM5805 strain and its equivalent strains (strains derived from and derived from the strain).
- the present invention [1] (a) 1 ⁇ 10 6 cfu/mL or more live bacteria of one or two or more bacteria selected from the group consisting of lactic acid bacteria and Bifidobacterium bacteria, (b) milk raw materials and/or or a fermented composition containing a fermented milk material and (c) killed Lactococcus bacteria and having a pH of 6.0 to 7.4; [2] (A) A fermented product obtained by fermenting a milk raw material for preparing a fermented product with one or more live bacteria selected from the group consisting of lactic acid bacteria and Bifidobacterium spp.
- the fermented composition of [1] above and the fermented composition of [2] are collectively referred to as the "fermented composition of the present invention"below.);
- [3] In the method for producing a fermented composition (A) A fermented product obtained by fermenting a milk raw material for preparing a fermented product with live bacteria of one or more kinds of bacteria selected from the group consisting of lactic acid bacteria and Bifidobacterium spp.
- Step A of adding to raw materials or (B) step B of adding one or more live bacteria selected from the group consisting of lactic acid bacteria and Bifidobacterium bacteria to the milk raw material for producing a fermented composition and fermenting it; and (C) Step C of adding killed Lactococcus bacteria; A pH of 6.0 to 7, in which an increase in acidity and acidity, a decrease in pH, and/or a decrease in the content concentration (cfu/mL) of the viable bacteria is suppressed during refrigerated storage after production of the fermented composition.
- production method of the present invention A fermented product obtained by fermenting a milk raw material for preparing a fermented product with live bacteria of one or more kinds of bacteria selected from the group consisting of lactic acid bacteria and Bifidobacterium spp.
- Step A of adding to raw materials or (B) step B of adding one or more live bacteria selected from the group consisting of lactic acid bacteria and Bifidobacterium bacteria to the milk raw material for producing a fermented composition and fermenting it; and (C) Step C of adding killed Lactococcus bacteria;
- a fermented composition with a pH of 6.0 to 7.4 during refrigerated storage after production of the fermented composition, an increase in sour taste and sour odor, a decrease in pH and / or the content concentration of the viable bacteria (cfu / mL ) method for suppressing the decrease (hereinafter also referred to as "suppression method of the present invention"); and other embodiments.
- the term “dairy raw material” as used herein is a concept that includes “dairy raw material”, “fermented product-preparing milk raw material”, and “fermented composition-producing milk raw material” in the present invention, unless otherwise specified.
- the term “dairy raw material for preparing a fermented product” as used herein means a “dairy raw material” used for preparing the "fermented product” herein, and the “dairy raw material for producing a fermented composition” as used herein. ' means the 'dairy raw material' used to prepare the 'fermented composition' herein.
- the "dairy ingredients” in this specification typically include "milk” defined in the Ministerial Ordinance on Milk, i.e. raw milk, cow milk, special milk, raw goat milk, sterilized goat milk, raw goat milk, ingredient adjustment milk, such as cow's milk, low-fat milk, non-fat milk and processed milk, or those containing an equivalent or higher non-fat milk solids content (i.e., 8% or more), especially so long as it is a composition containing a milk component Not restricted.
- milk defined in the Ministerial Ordinance on Milk, i.e. raw milk, cow milk, special milk, raw goat milk, sterilized goat milk, raw goat milk, ingredient adjustment milk, such as cow's milk, low-fat milk, non-fat milk and processed milk, or those containing an equivalent or higher non-fat milk solids content (i.e., 8% or more), especially so long as it is a composition containing a milk component Not restricted.
- milk component in the present specification includes milk fat derived from “milk” defined in the Ministerial Ordinance for Milk, etc., and non-fat milk solids derived from the “milk” (e.g., proteins and proteins derived from the "milk” / or one or more selected from the group consisting of sugars derived from the "milk”).
- non-fat milk solids derived from the “milk” e.g., proteins and proteins derived from the “milk” / or one or more selected from the group consisting of sugars derived from the "milk”
- the "dairy ingredients” in this specification can be prepared using milk, dairy products, and the like.
- milk and / or dairy products as “dairy raw materials”, more specifically, milk, buffalo milk, sheep milk, goat milk, horse milk, concentrated milk, skim milk, skim concentrated milk, skim milk powder, It can be prepared using one or more selected from the group consisting of whole milk powder, cream, butter, buttermilk, condensed milk, lactose, milk protein concentrate, whey protein concentrate, and water.
- the "dairy raw material” includes milk components having a solid content concentration of, for example, 1 to 18% by weight, preferably 2 to 16% by weight, more preferably 4 to 12% by weight, and /
- the concentration of non-fat milk solids is, for example, 1 to 18% by weight, preferably 2 to 16% by weight, more preferably 2 to 14% by weight, even more preferably 4 to 12% by weight, 6 to 10% by weight, or 7 to 9% by weight
- / or the concentration of milk fat is, for example, 0 to 8% by weight, preferably 0.1 to 7% by weight, more preferably 0.5 to 4% by weight, or 1 to 3% by weight.
- the term "fermented milk raw material” as used herein means a product obtained by fermenting a milk raw material for preparing a fermented product with lactic acid bacteria or the like.
- Such a “fermented milk raw material” includes, for example, a fermented milk raw material having a concentration of viable bacteria such as lactic acid bacteria of 1 ⁇ 10 7 cfu/mL or more, preferably 1 ⁇ 10 7 to 1 ⁇ 10 10 cfu/mL. are preferred.
- Such a “fermented milk raw material” is fermented with live bacteria such as lactic acid bacteria until the concentration of live bacteria such as lactic acid bacteria reaches 1 ⁇ 10 7 cfu/mL or more, preferably 1 ⁇ 10 7 to 1 ⁇ 10 10 cfu/mL. It can be produced by fermenting milk raw materials for preparing a fermented product.
- live milk material as used herein also includes lactic acid bacteria isolated from the fermented milk material by centrifugation or the like.
- dead cells of Lactococcus bacteria are bacteria classified as lactic acid bacteria.
- Examples of dead Lactococcus bacteria include dead cells of one or more bacteria selected from the group consisting of Lactococcus bacteria, preferably selected from the group consisting of Lactococcus lactis. More preferably, Lactococcus lactis subsp. lactis (hereinafter also simply referred to as "Lactococcus lactis”) ), Lactococcus lactis subsp. lactis biovar diacetylactis, Lactococcus lactis subsp.
- Lactococcus raffinolactis lacto selected from the group consisting of Lactococcus spiscium, Lactococcus plantarum, Lactococcus garvieae, and Lactococcus lactis subsp. hordniae More preferably, killed cells of Lactococcus lactis, more preferably Lactococcus lactis JCM5805, Lactococcus lactis JCM20101, One or two or more killed bacteria selected from the group consisting of Lactococcus lactis NBRC12007 and Lactococcus lactis NRIC1150, particularly preferably killed bacteria of Lactococcus lactis JCM5805 mentioned.
- the killed cell strains listed in this specification also include strains equivalent to the strains as long as they have the effects of the present invention.
- equivalent strains refer to strains derived from the aforementioned strains, strains derived from the aforementioned strains, or progeny strains thereof. Equivalent strains may be preserved in other strain collection institutions.
- FIG. 1 shows strains derived from Lactococcus lactis subspecies lactis JCM5805 and strains derived from Lactococcus lactis subspecies lactis JCM5805. Equivalent strains of Lactococcus lactis subspecies lactis JCM5805 shown in FIG. 1 can also be used as killed cells of the present invention as long as they have the effects of the present invention.
- references to Lactococcus lactis subsp. lactis JCM5805 also include these equivalent strains.
- “Dead cells of Lactococcus bacteria” in the present specification are not particularly limited as long as they are killed cells of Lactococcus bacteria, and may be dried or non-dried. From the viewpoint of the storage stability of the cells, it is preferably a dried product, and a preferred example is a dry powder.
- the method for preparing dead Lactococcus bacteria is not particularly limited.
- a method of sterilizing after collecting the cells from the medium in which the bacteria of the genus is cultured by filtration, centrifugation, or the like can be mentioned, and if necessary, further drying treatment or crushing treatment can be performed.
- the means of sterilization is not particularly limited, and not only heating but also conventional means such as ultraviolet rays and ⁇ -ray irradiation can be used.
- dead Lactococcus bacteria may be added in any step during the production of the fermented composition.
- killed cells may be added to the milk raw material for fermented product preparation before the fermentation step of the milk raw material for fermented product preparation.
- the dead bacteria may be added to the milk raw material for fermented product preparation during the fermentation process of the milk raw material for fermented product preparation, or after the fermentation process for the milk raw material for fermented product preparation is completed, the dead bacteria may be added.
- dead cells may be added to the milk raw material for preparing the fermented product before the fermentation process of the milk raw material for preparing the fermented product, or during the fermentation process of the milk raw material for preparing the fermented product. It is preferable to add dead cells of lactic acid bacteria to the milk raw material for preparing the fermented product.
- dead cells of Lactococcus bacteria may be added to the milk raw material for preparing the fermented product, or the fermented composition may be produced. Although it may be added to the milk raw material for use, it is preferably added to the milk raw material for producing the fermented composition.
- the amount of dead Lactococcus bacteria used in the present invention is not particularly limited as long as the effects of the present invention can be obtained.
- the unit is, for example, 1 ⁇ 10 8 to 1 ⁇ 10 10 pieces/g, preferably 5 ⁇ 10 8 to 1 ⁇ 10 10 pieces/g.
- the number of dead Lactococcus bacteria in the fermented composition can be measured by a direct microscopy method, a particle electric detection zone method, or a PCR method.
- the pH of the fermentation composition in the present invention is 6.0 to 7.4, preferably 6.4 to 7.4.
- the pH of the fermented composition can be measured at 20° C. using, for example, a pH meter or the like, according to a known method.
- the "fermented composition" in the present invention may not contain a pH adjuster, but preferably contains a pH adjuster from the viewpoint of obtaining more effects of the present invention.
- the pH adjuster is not particularly limited as long as it can be used under the Food Sanitation Act and can adjust the pH, but sodium citrate (trisodium citrate), potassium citrate, sodium hydrogen carbonate , sodium carbonate, potassium hydrogen carbonate, potassium carbonate, disodium hydrogen phosphate, sodium acetate, potassium acetate, sodium or potassium salts of organic acids such as sodium L-ascorbate; and bases such as sodium hydroxide and potassium hydroxide. and other pH adjusters that can be used under the Food Sanitation Act, among which trisodium citrate is preferred.
- One type of pH adjuster may be used, or two or more types may be used in combination.
- the concentration of the pH adjuster is not particularly limited, and can be adjusted as appropriate according to the pH to be adjusted. 01 to 3% by weight, 0.1 to 2% by weight, and the like.
- Live bacteria such as lactic acid bacteria
- live bacteria selected from the group consisting of lactic acid bacteria and Bifidobacterium spp.
- live bacteria selected from the group consisting of lactic acid bacteria and Bifidobacterium spp.
- Lactococcus bacteria Streptococcus bacteria, Lactobacillus bacteria, and Bifidobacterium bacteria 1 or 2 or more (preferably 2 or more, more preferably 3 or more) viable bacteria, more preferably 1 or 2 or more (preferably 1 or 2) and one or two or more (preferably one or two) live bacteria of the genus Streptococcus; and 1 or 2 or more (preferably 1 or 2) Lactococcus bacteria and 1 or 2 or more (preferably 1 or 2) Lactobacillus bacteria; and 1 or 2 or more (preferably 1 or 2) Streptococcus bacteria and 1 or 2 or more (preferably 1 or 2) Lactobacillus bacteria; and 1 or 2 or more (preferably 1 or 2) live bacteria of the genus Lactococcus; and 1 or 2 or more (preferably 1 or 2) live bacteria of the genus Streptococcus; and 1 or 2 or more (preferably 1 or 2) live bacteria of the genus Streptococcus; and 1 or 2 or more (preferably 1 or 2) live bacteria of the genus Str
- viable bacteria in the present invention include Lactococcus lactis, Lactococcus lactis biovariant diacetylactis, Lactococcus lactis subspecies cremoris, Lactococcus raffinolactis, Lactococcus raffinolactis Pythium, Lactococcus plantarum, Lactococcus galbieae and Lactococcus lactis subspecies Holdniae, Streptococcus salivarius subsp. thermophilus, Lactobacillus acidophilus, Lactobacillus Lactobacillus delbrueckii subsp. bulgaricus, Lactobacillus delbrueckii subsp.
- Lactobacillus delbrueckii Lactobacillus delbrueckii subsp. lactis
- Lactobacillus casei Lactobacillus paracasei
- Lactobacillus gasseri Lactobacillus helveticus
- Lactobacillus johnsonii Lactobacillus plant arum
- Lactobacillus brevis Lactobacillus casei subsp. rhamnosus
- Lactobacillus pentosus Lactobacillus fermentum
- Bifidobacterium bifidum Bifidobacterium breve
- Bifidobacterium longum subsp. longum Bifidobacterium longum subsp.
- Bifidobacterium animalis subsp. animalis Bifidobacterium animalis subsp. lactis
- Bifidobacterium adolescentis Bifidobacterium adolescentis, Bifidobacterium angulatum, Bifidobacterium catenulatum, and Bifidobacterium pseudocatenulatum 1 or 2 or more (preferably 2 or more, more preferably 3 or more) viable bacteria
- Lactococcus lactis Lactococcus lactis Biovariant Diacetylactis, Lactococcus lactis subspecies cremoris, Lactococcus raffinolactis, Lactococcus pythium, Lactococcus plantarum, Lactococcus garviae , Lactococcus lactis subspecies Holdniae, and Streptococcus salivarius subspecies thermophilus one or more (preferably two or more
- Lactic acid bacteria and bifidobacteria used in the production of fermented compositions are also classified according to the difference in optimum growth temperature.
- lactic acid bacteria with an optimum growth temperature of about 25-30°C are called mesophilic bacteria
- lactic acid bacteria with an optimum growth temperature of 37-45°C are called thermophilic bacteria.
- Thermobacteria include, for example, Lactobacillus acidophilus, Lactobacillus delbrueckii subspecies bulgaricus, Lactobacillus delbrueckii subspecies lactis, Lactobacillus delbrueckii subspecies delbrueckii, Lactobacillus gasseri, Lactobacillus helveticus , Lactobacillus johnsonii, Lactobacillus brevis, Lactobacillus casei subspecies rhamnosus, Lactobacillus pentosus, Streptococcus salivarius subspecies thermophilus, Bifidobacterium bifidum, Bifidobacterium breve, Bifidobacterium Longum subspecies longum, and mesophilic bacteria include, for example, Lactobacillus casei, Lactobacillus paracasei, Lactobacillus plantarum, Lactococcus lactis subspecies lactis
- thermophilic bacteria and mesophilic bacteria may be used, or one selected from the group of thermophilic bacteria. and the use of live bacteria of one or more species of bacteria selected from the group of mesophilic bacteria described above. It is preferable to use one or more live bacteria selected from the group.
- Strains of viable bacteria such as lactic acid bacteria used in the present invention and strains of dead lactic acid bacteria can be obtained from depository organizations such as the American type culture collection (USA). Moreover, a commercially available starter culture may be used as live bacteria such as lactic acid bacteria used in the present invention.
- the concentration of viable bacteria such as lactic acid bacteria in the fermented composition of the present invention is not particularly limited as long as it is 1 ⁇ 10 6 cfu/mL or more. ⁇ 10 6 to 5 ⁇ 10 8 cfu/mL is preferred.
- the concentration of viable bacteria such as lactic acid bacteria can be determined by measuring the number of viable bacteria such as lactic acid bacteria in the fermented composition by a pour plate culture method or the like. More specifically, the number of viable lactic acid bacteria in fermented products is determined in accordance with Appended Table 2 of Ministerial Ordinance for Milk, etc., Standards for Milk, etc., and Standards for Manufacturing, Cooking, and Preservation Methods, (7) Tests for Standards for Milk, etc. (3) Fermented Milk and Lactic Acid Beverage, Method for Measuring the Number of 3 Lactic Acid Bacteria.
- the method for adjusting the concentration of viable bacteria such as lactic acid bacteria in the fermented composition in the present invention is not particularly limited. and a method of adjusting the amount of fermented product to be added, and when the method for producing the fermented composition includes step B, for example, adjusting the amount of viable bacteria such as lactic acid bacteria method, and a method of adjusting fermentation conditions such as fermentation time.
- the term "fermented composition” as used herein means that, in any of the production processes, (A) fermented by live bacteria of one or more bacteria selected from the group consisting of lactic acid bacteria and Bifidobacterium spp. or (B) lactic acid bacteria and bacteria of the genus Bifidobacterium. It includes a step B of adding one or more live bacteria to the milk raw material for producing the fermented composition and fermenting it, and the pH is 6.0 to 7.4, preferably 6.4. ⁇ 7.4.
- “Fermented composition” in the present specification includes, for example, “fermented milk” defined in “Ministerial Ordinance Concerning Ingredient Standards for Milk and Dairy Products” (hereinafter referred to as “Milk Ordinance”), “Dairy lactic acid bacteria Beverages”, “Lactic acid bacteria beverages”, “Foods mainly made from milk or the like”, etc., but are not limited to these.
- "fermented milk” defined in the Milk Ministerial Ordinance includes raw milk, cow milk, special milk, raw goat milk, pasteurized goat milk, raw sheep milk, ingredient adjusted milk, low-fat milk, non-fat milk and processed milk.
- the "food containing milk as the main raw material” in this specification includes the above step (B) or (A) in any of the manufacturing processes, and has a pH of 6.0 to 7.
- fermented milk is defined as "milk or milk containing non-fat milk solids equivalent to or higher than milk, fermented with lactic acid bacteria or yeast, and pasty or liquid, or frozen.” It is The ingredient standard is "8% or more non-fat milk solid content, 10 million or more lactic acid bacteria or yeast count (per 1 ml), negative for coliform bacteria".
- the unit of the number of lactic acid bacteria or the number of bifidobacteria is represented by CFU (colony forming unit).
- lactic acid bacteria beverages are defined as “beverages (excluding fermented milk) that are processed or made from milk fermented with lactic acid bacteria or yeast”. Its ingredient standards are "3% or more non-fat milk solids, 10 million or more lactic acid bacteria or yeast count (per 1 mL), negative for coliform bacteria”.
- lactic acid bacteria beverages for foods that use milk as the main ingredient are defined as "beverages (excluding fermented milk) that are processed or made from milk, etc. fermented with lactic acid bacteria or yeast as the main ingredient.” is defined as Its ingredient standards are "less than 3% non-fat milk solids, 1 million or more lactic acid bacteria or yeast counts (per 1 mL), negative for coliform bacteria”.
- the “fermented composition” in the present invention may contain stabilizers, sweeteners, dietary fibers, vitamins, minerals, flavoring agents, etc., as long as the effects of the present invention are not impaired.
- the above stabilizer is not particularly limited, and examples thereof include carrageenan, xanthan gum, and the like.
- the above-mentioned sweetener is not particularly limited, and examples thereof include saccharides, sugar alcohols, high-intensity sweeteners, and the like, and these sweeteners can be used singly or in combination of two or more.
- the stabilizer is 0.01 to 0.5% by weight or 0.1 to 0.3% by weight with respect to the total amount of the fermented composition.
- the "fermented composition" in the present invention may contain agar and gelatin, and the total amount (dry weight) of agar and gelatin is 0.1 to 1% by weight or less with respect to the total amount of the fermented composition. 0.2 to 0.5% by weight.
- the concentration of non-fat milk solids is, for example, 1 to 18% by weight, preferably 2 to 16% by weight, more preferably 2 to 14% by weight, more preferably 4 to 12% by weight. %, 6-10% by weight or 7-9% by weight, and/or the milk fat concentration is, for example, 0-8% by weight, preferably 0.1-7% by weight, more preferably 0.5- 4% by weight or 1 to 3% by weight is preferably included.
- the fermented composition in the present invention is preferably packed in a container.
- "Contained” means filled (inside) a container and sealed.
- the container is preferably a container commonly used in the production of fermented milk and the like, and examples thereof include plastic, glass and paper containers.
- Method for producing fermented composition of the present invention As the production method of the present invention, in the method for producing a fermented composition, (A) A fermented product obtained by fermenting a milk raw material for preparing a fermented product with live bacteria of one or more kinds of bacteria selected from the group consisting of lactic acid bacteria and Bifidobacterium spp.
- Step A of adding to raw materials or (B) step B of adding one or more live bacteria selected from the group consisting of lactic acid bacteria and Bifidobacterium bacteria to the milk raw material for producing a fermented composition and fermenting it; and (C) a step C of adding dead Lactococcus bacteria, wherein the pH of the fermentation composition to be produced is 6.0-7.4, preferably 6.4-7. 4, there is no particular limitation as long as it is a manufacturing method.
- a fermented product obtained by fermenting a milk raw material for preparing a fermented product with one or more live bacteria selected from the group consisting of lactic acid bacteria and Bifidobacterium is used as a fermented composition. It is not particularly limited as long as it is the step A in which it is added to the raw milk material for production.
- the amount of the fermented product obtained by fermenting the milk raw material for preparing the fermented product is not particularly limited, but when the fermented product obtained by fermenting the milk raw material for preparing the fermented product is added to the dairy raw material for producing the fermented composition, such
- the concentration of viable bacteria such as lactic acid bacteria in the milk raw material for producing the fermented composition is, for example, 1 ⁇ 10 6 cfu/mL or more, preferably 1 ⁇ 10 6 to 1 ⁇ 10 9 cfu/mL, or 1 ⁇ 10 6 to 5 ⁇ 10 cfu/mL.
- An addition amount such as 8 cfu/mL is preferred.
- the production method of the present invention includes step A, it may or may not include, after step A, the step of fermenting the milk raw material for producing the fermented composition. Fermentation may progress gradually during refrigerated storage after production of the fermented composition, but such fermentation is not included in the fermenting step referred to herein.
- a step of fermenting the milk raw material for producing the fermented composition is included after step A, the fermentation can be performed in a relatively short time such that the pH of the fermented composition does not become less than 6.
- the manufacturing method of this invention includes the process A, in addition to adding a fermented product, you may add viable bacteria, such as a lactic acid bacterium, separately to the milk raw material for fermented product preparation.
- the step B is a step B in which one or more live bacteria selected from the group consisting of lactic acid bacteria and Bifidobacterium are added to the raw milk material for producing the fermented composition and fermented.
- the amount of viable bacteria such as lactic acid bacteria to be added is not particularly limited and can be adjusted as appropriate.
- Fermentation temperature and fermentation time can be appropriately set by those skilled in the art according to the optimum growth temperature and growth rate of the lactic acid bacteria used, or the type and product design of the desired fermentation composition.
- the fermentation time is not particularly limited, but includes a fermentation time such that the pH of the fermented composition is 6.0 to 7.4, preferably 6.4 to 7.4. Examples of such fermentation time include 1 to 10 hours and 1 to 6 hours.
- the dairy raw material for producing the fermented composition in the above step A and step B is not particularly limited as long as it is the dairy raw material in the present specification, but from the viewpoint of obtaining more effects of the present invention, it further contains a pH adjuster. is preferred.
- the concentration of the pH adjuster is not particularly limited and can be adjusted as appropriate according to the pH to be adjusted. Examples of the concentration of the modifier include 0.01 to 3% by weight, 0.1 to 2% by weight, and the like.
- the pH of the milk raw material for producing the fermented composition is not particularly limited, it preferably ranges from 7 to 8.5.
- the above step C is not particularly limited as long as it is the step C of adding dead cells of bacteria belonging to the genus Lactococcus.
- the dead Lactococcus bacteria may be added in any step during the production of the fermented composition. may be added, the dead cells may be added to the milk raw material during the fermentation process of the milk raw material, or the dead cells may be added to the fermented composition after the completion of the fermentation process of the dairy raw material. Although it is good, it is preferable to add killed cells to the milk raw material before the fermentation process of the milk raw material, or to add dead cells of lactic acid bacteria to the milk raw material during the fermentation process of the milk raw material.
- the killed Lactococcus bacteria only the killed Lactococcus bacteria may be added to the milk raw material, or the killed Lactococcus bacteria may be added to the milk raw material together with other raw materials.
- addition of dead Lactococcus bacteria to the milk raw material also includes adding the dead Lactococcus bacteria to the milk raw material for the sake of convenience.
- when adding dead Lactococcus bacteria it is preferable to sterilize the raw milk material to be added, the raw milk material during fermentation, or the fermented composition after fermentation in advance.
- the production method of the present invention may include optional steps in addition to including Step A and Step C, or Step B or Step C.
- Examples of such an optional step include a step of filling a container with a fermented composition or a milk raw material for preparing a fermented product.
- step B the step of fermenting
- a method of filling a container with milk raw materials for fermented product preparation or further live bacteria such as lactic acid bacteria
- the production method of the present invention includes the step A, for example, the fermented product obtained by fermenting the milk raw material for preparing the fermented product and the dairy raw material for producing the fermented composition are simultaneously or sequentially filled into a container. and a method of filling a container with a fermented composition-producing milk raw material to which a fermented product is added.
- the fermented composition is produced so as to have a pH of 6.0 to 7.4, preferably 6.4 to 7.4.
- Factors that make the pH of the fermented composition within such a range are not particularly limited. One or Two or more factors are possible.
- Step A of adding to raw materials or (B) step B of adding one or more live bacteria selected from the group consisting of lactic acid bacteria and Bifidobacterium bacteria to the milk raw material for producing a fermented composition and fermenting it; and (C) Step C of adding killed Lactococcus bacteria;
- a fermented composition with a pH of 6.0 to 7.4 during refrigerated storage after production of the fermented composition, an increase in sour taste and sour odor, a decrease in pH and / or the content concentration of the viable bacteria (cfu / mL ) is not particularly limited as long as it is a method for suppressing a decrease in ), and may further include other optional steps.
- the fermented composition of the present invention is preferably a fermented composition in which an increase in sour taste and sour odor during refrigeration storage after production of the fermented composition is suppressed.
- the fermented composition "in which the increase in sour taste and sour smell is suppressed” means that dead lactic acid bacteria are not added and / or a pH adjuster (preferably sodium or potassium salt of an organic acid , and one or more pH adjusters selected from bases) are not added (preferably, the pH of the milk raw material for producing the fermented composition is not adjusted to 7 or more), the same type of milk It means a fermented composition in which an increase in sour taste and sour odor is suppressed compared to a fermented composition produced by the same production method using raw materials (hereinafter also referred to as "control fermented composition in the present invention"). .
- the degree of increase in acidity and acidity during refrigerated storage after production of a certain fermented composition and the degree of increase in such acidity and acidity compared to the control fermented composition in the present invention (for example , suppressed or not) can be easily and unambiguously determined by a trained panel.
- General methods can be used for evaluation criteria and how to summarize evaluations between panels.
- the number of panel members who evaluate the degree of increase in sourness and sour odor in the fermented composition may be one person, but from the viewpoint of obtaining a more objective evaluation, the lower limit of the number of panel members is, for example, 3 or more.
- the upper limit of the number of panel members can be, for example, 7 or less.
- Evaluation of the degree of increase in sour taste and sour odor in the fermented composition when there are two or more panels may adopt the average of all the panel members' evaluations of the degree of increase in sour taste and sour odor in the fermented composition. good.
- the fermented composition of the present invention is preferably a fermented composition in which a decrease in pH during cold storage after production of the fermented composition is suppressed.
- the term "fermented composition in which a decrease in pH is suppressed” means a fermentation composition in which a decrease in pH is suppressed compared to the above-described "control fermentation composition of the present invention”.
- the pH of the fermented composition after 14 days of refrigerated storage is compared with the pH of the fermented composition immediately after production and before refrigerated storage.
- Fermented compositions having a degree of pH reduction of 1 or less, preferably 0.6 or less are preferred.
- the fermented composition of the present invention is preferably a fermented composition in which a decrease in the concentration of viable bacteria such as lactic acid bacteria is suppressed during refrigerated storage after production of the fermented composition.
- the fermented composition in which “a decrease in the content concentration of viable bacteria such as lactic acid bacteria is suppressed” refers to the content of viable bacteria such as lactic acid bacteria compared to the above-mentioned “control fermentation composition in the present invention”. It means a fermented composition in which a decrease in concentration is suppressed.
- the fermented composition in which the decrease in the content concentration of viable bacteria such as lactic acid bacteria is suppressed more specifically, it consists of lactic acid bacteria and Bifidobacterium bacteria in the fermented composition after refrigerated storage for 14 days.
- the content concentration (cfu/mL) of one or more viable bacteria selected from the group is relative to the content concentration (cfu/mL) of the viable bacteria in the fermented composition before refrigerated storage 0.2 times or more, preferably 0.2 to 30 times, or 0.2 to 25 times the fermentation composition.
- Refrigerate As used herein, “refrigerated storage” includes, for example, 1 to 10°C, preferably 4 to 10°C, and 10°C.
- Method After adding viable Lactococcus lactic acid bacteria to the substrate milk (milk raw material for fermented product preparation), at 30 ° C., the above-mentioned viable cell concentration becomes a cell concentration (cfu / mL) of the order of 10 to the 9th power. Fermentation was performed to prepare a fermented product.
- the number of lactic acid bacteria in the fermented product was measured in the attached table 2 of the Ministerial Ordinance for Milk, etc., in the section on standards for ingredients such as milk and standards for methods of production, cooking and storage, (7) Ingredients for milk, etc. It was measured according to the measurement method described in the test method of the standard, (3) Fermented milk and lactic acid bacteria beverage, measurement method for the number of 3 lactic acid bacteria.
- each fermentation composition sample was refrigerated at 10°C.
- pH measurement and Lactococcus lactic acid bacteria concentration were measured.
- seven panelists performed sensory evaluations of sourness and sourness for each fermented composition sample, and the average evaluation was used as a general comment for the fermented composition sample.
- Lactococcus lactic acid viable bacteria are added to the substrate milk (milk raw material for producing a fermented composition) and fermented at 30 ° C. until the bacterial concentration (cfu / mL) of the order of 10 to the 9th power is reached.
- a fermented composition sample of .3 was prepared. Such fermented composition samples were refrigerated and stored at 10°C.
- the viable Lactococcus lactic acid bacteria concentration in the fermented composition sample was measured "before refrigerated storage", "14 days after the start of refrigerated storage", and "28 days after the start of refrigerated storage”. The results are shown in Table 2 below.
- Method After adding viable Lactococcus lactic acid bacteria to the substrate milk (milk raw material for fermented product preparation), at 30 ° C., the above-mentioned viable cell concentration becomes a cell concentration (cfu / mL) of the order of 10 to the 9th power. Fermentation was performed to prepare a fermented product. Next, 1 ⁇ 10 9 cells/g of killed Lactococcus lactic acid bacteria were added to the substrate milk (raw material for producing a fermented composition), and 1% by weight of trisodium citrate as a pH adjuster was added.
- the above-mentioned fermented product (fermented product containing viable bacteria of the genus Lactococcus at a concentration (cfu/mL) of the order of 10 to the ninth power of bacteria) is added to 0.5% by weight and 1.0% by weight. % or 1.5% by weight was added and mixed to prepare each fermented composition sample, and then stored under refrigerated conditions at 10°C.
- pH measurement and measurement of Lactococcus lactic acid viable cell concentration were performed.
- seven panelists performed sensory evaluations of sourness and sourness for each fermented composition sample, and the average evaluation was used as a general comment for the fermented composition sample. These results are shown in Table 3 below.
- a fermented composition containing viable bacteria such as lactic acid bacteria at a certain concentration or more and having a pH in the neutral range, "increase in sour taste and sour odor” during refrigerated storage after production. , "decrease in pH” and/or “decrease in viable bacteria concentration (cfu/mL) such as lactic acid bacteria” can be provided.
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Abstract
本発明の課題は、乳酸菌等の生菌を一定濃度（ｃｆｕ／ｍＬ）以上で含有し、かつ、ｐＨが中性域である発酵組成物であって、製造後の冷蔵保存中の「酸味、酸臭の増大」、「ｐＨの低下」及び／又は「乳酸菌等の生菌濃度（ｃｆｕ／ｍＬ）の低下」が抑制された発酵組成物、及びその製造方法等を提供することにある。 本発明は、（ａ）１×１０６ｃｆｕ／ｍＬ以上の、乳酸菌及びビフィドバクテリウム属細菌からなる群から選択される１種又は２種以上の細菌の生菌、（ｂ）乳原料及び／又は乳原料の発酵物、及び、（ｃ）ラクトコッカス属細菌の死菌体を含有し、ｐＨが６．０～７．４である発酵組成物、及び、その製造方法等に関する。
Description
本発明は、乳酸菌及びビフィドバクテリウム属細菌（以下、「ビフィズス菌」とも表示する。また、以下、乳酸菌とビフィズス菌をまとめて「乳酸菌等」とも表示する。）の生菌を一定濃度（ｃｆｕ／ｍＬ）以上で含有し、かつ、ｐＨが中性域である発酵組成物であって、製造後の冷蔵保存中の「酸味、酸臭の増大」、「ｐＨの低下」及び／又は「乳酸菌等の生菌濃度（ｃｆｕ／ｍＬ）の低下」が抑制された発酵組成物、及びその製造方法等に関する。
乳原料を乳酸菌等で発酵して得られる発酵乳等の発酵組成物は、タンパク質やカルシウムを多く含む栄養食品というだけでなく、乳酸菌等、それらの代謝物を含むために様々な生理効果が期待されており、近年ますます注目されている。かかる生理効果として、免疫力の向上、アレルギー疾患の改善、自律神経機能の改善、生活習慣病の予防・改善などの効果が知られている。また、特定の機能性効果に優れた乳酸菌等も広く研究されており、そのような優れた乳酸菌等を、発酵乳や乳酸菌飲料等の飲食品で積極的に摂取することを求める消費者の志向が近年、より一層高まっている。
発酵乳や乳酸菌飲料等の発酵組成物はいずれも乳等を乳酸菌等の生菌で発酵させて製造される。しかし、かかる発酵組成物において、製品の製造直後（例えば乳原料を発酵した後、それを冷却した直後）は酸味がさほど強くないものの、製品製造後の冷蔵保存中（例えば流通過程での冷蔵保存など）に乳酸菌生菌が乳酸や酢酸をさらに生成することにより、ｐＨが低下していくと共に、酸味や酸臭が増し、保存終期には酸味や酸臭が過度の状態になって風味が劣化するという問題（いわゆる、「冷蔵保存中の後酸生成あるいは後酸性化（post-acidification）」の問題）があった（特許文献１や特許文献２参照）。
かかる後酸生成を改善するための方法として、例えば特許文献１には、ヨーグルトの製造工程において、発酵終了後に氷温帯で熟成を行なうことにより、その後に起こる後酸生成を抑制もしくは減少させる方法が開示されており、特許文献２には、ラクトースを減少させた乳を原料として用いるなどして、発酵乳製品の後酸性化を抑制する方法が開示されている。しかし、これらの方法にも簡便性等の課題があった。
かかる後酸生成を改善するための方法として、例えば特許文献１には、ヨーグルトの製造工程において、発酵終了後に氷温帯で熟成を行なうことにより、その後に起こる後酸生成を抑制もしくは減少させる方法が開示されており、特許文献２には、ラクトースを減少させた乳を原料として用いるなどして、発酵乳製品の後酸性化を抑制する方法が開示されている。しかし、これらの方法にも簡便性等の課題があった。
ところで、乳酸菌等の死菌体を用いた技術として、特許文献３には、乳酸菌等の死菌体を容器詰コーヒー飲料に配合することによって、コーヒーのコク（飲みごたえ）を向上させる方法が開示されている。
しかしながら、発酵組成物のｐＨを中性域とし、かつ、ラクトコッカス属細菌の死菌体を添加すると、発酵組成物製品の製造後の冷蔵保存中の「酸味、酸臭の増大」、「ｐＨの低下」及び／又は「乳酸菌等の生菌濃度（ｃｆｕ／ｍＬ）の低下」が抑制されることはこれまでに知られていなかった。
本発明の課題は、乳酸菌等の生菌を一定濃度（ｃｆｕ／ｍＬ）以上で含有し、かつ、ｐＨが中性域である発酵組成物であって、製造後の冷蔵保存中の「酸味、酸臭の増大」、「ｐＨの低下」及び／又は「乳酸菌等の生菌濃度（ｃｆｕ／ｍＬ）の低下」が抑制された発酵組成物、及びその製造方法等を提供することにある。
本発明者らは、本発明の課題を解決すべく、鋭意検討した結果、
（Ａ）乳酸菌及びビフィドバクテリウム属細菌からなる群から選択される１種又は２種以上の細菌の生菌によって発酵物調製用乳原料を発酵させた発酵物を、発酵組成物製造用乳原料に添加する工程Ａ；又は、
（Ｂ）乳酸菌及びビフィドバクテリウム属細菌からなる群から選択される１種又は２種以上の細菌の生菌を発酵組成物製造用乳原料に添加して発酵させる工程Ｂ；
を含み、かつ、
（Ｃ）ラクトコッカス属細菌の死菌体を添加する工程Ｃ；を含む製造方法によって、ｐＨが６．０～７．４の発酵組成物を製造することにより（好ましくはさらに、発酵組成物製造用乳原料のｐＨをｐＨ調整剤を用いて調整することにより）、本発明の課題を解決できることを見いだし、本発明を完成するに至った。
（Ａ）乳酸菌及びビフィドバクテリウム属細菌からなる群から選択される１種又は２種以上の細菌の生菌によって発酵物調製用乳原料を発酵させた発酵物を、発酵組成物製造用乳原料に添加する工程Ａ；又は、
（Ｂ）乳酸菌及びビフィドバクテリウム属細菌からなる群から選択される１種又は２種以上の細菌の生菌を発酵組成物製造用乳原料に添加して発酵させる工程Ｂ；
を含み、かつ、
（Ｃ）ラクトコッカス属細菌の死菌体を添加する工程Ｃ；を含む製造方法によって、ｐＨが６．０～７．４の発酵組成物を製造することにより（好ましくはさらに、発酵組成物製造用乳原料のｐＨをｐＨ調整剤を用いて調整することにより）、本発明の課題を解決できることを見いだし、本発明を完成するに至った。
すなわち、本発明は、
（１）（ａ）１×１０６ｃｆｕ／ｍＬ以上の、乳酸菌及びビフィドバクテリウム属細菌からなる群から選択される１種又は２種以上の細菌の生菌、（ｂ）乳原料及び／又は乳原料の発酵物、及び、（ｃ）ラクトコッカス属細菌の死菌体を含有し、ｐＨが６．０～７．４である発酵組成物；
（２）（Ａ）乳酸菌及びビフィドバクテリウム属細菌からなる群から選択される１種又は２種以上の細菌の生菌によって発酵物調製用乳原料を発酵させた発酵物を、発酵組成物製造用乳原料に添加する工程Ａ；又は、
（Ｂ）乳酸菌及びビフィドバクテリウム属細菌からなる群から選択される１種又は２種以上の細菌の生菌を発酵組成物製造用乳原料に添加して発酵させる工程Ｂ；
を含み、かつ、
（Ｃ）ラクトコッカス属細菌の死菌体を添加する工程Ｃ；を含む製造方法により製造された、ｐＨが６．０～７．４の発酵組成物；
（３）ラクトコッカス属細菌の死菌体の含有濃度が、１×１０８～１×１０１０個／ｇである上記（１）又は（２）に記載の発酵組成物；
（４）発酵組成物がｐＨ調整剤をさらに含有するか、又は、発酵組成物製造用乳原料がｐＨ調整剤が添加された乳原料である、上記（１）～（３）のいずれかに記載の発酵組成物；
（５）乳酸菌及びビフィドバクテリウム属細菌からなる群から選択される１種又は２種以上の細菌の生菌が、ラクトコッカス属細菌、ストレプトコッカス属細菌、ラクトバシラス属細菌、及び、ビフィドバクテリウム属細菌からなる群から選択される１種又は２種以上の生菌である、上記（１）～（４）のいずれかに記載の発酵組成物；
（６）冷蔵保存前の発酵組成物のｐＨと、冷蔵保存１４日後の発酵組成物のｐＨの差が１未満である、上記（１）～（５）のいずれかに記載の発酵組成物；
（７）発酵組成物の製造方法において、
（Ａ）乳酸菌及びビフィドバクテリウム属細菌からなる群から選択される１種又は２種以上の細菌の生菌によって発酵物調製用乳原料を発酵させた発酵物を、発酵組成物製造用乳原料に添加する工程Ａ；又は、
（Ｂ）乳酸菌及びビフィドバクテリウム属細菌からなる群から選択される１種又は２種以上の細菌の生菌を発酵組成物製造用乳原料に添加して発酵させる工程Ｂ；
を含み、かつ、
（Ｃ）ラクトコッカス属細菌の死菌体を添加する工程Ｃ；を含むことを特徴とする、
発酵組成物の製造後の冷蔵保存中の、酸味、酸臭の増大、ｐＨの低下及び／又は前記生菌の含有濃度（ｃｆｕ／ｍＬ）の低下が抑制された、ｐＨが６．０～７．４の発酵組成物の製造方法；や、
（８）発酵組成物の製造方法において、
（Ａ）乳酸菌及びビフィドバクテリウム属細菌からなる群から選択される１種又は２種以上の細菌の生菌によって発酵物調製用乳原料を発酵させた発酵物を、発酵組成物製造用乳原料に添加する工程Ａ；又は、
（Ｂ）乳酸菌及びビフィドバクテリウム属細菌からなる群から選択される１種又は２種以上の細菌の生菌を発酵組成物製造用乳原料に添加して発酵させる工程Ｂ；
を含み、かつ、
（Ｃ）ラクトコッカス属細菌の死菌体を添加する工程Ｃ；を含む
ことを特徴とする、
ｐＨが６．０～７．４の発酵組成物において、発酵組成物の製造後の冷蔵保存中の、酸味、酸臭の増大、ｐＨの低下及び／又は前記生菌の含有濃度（ｃｆｕ／ｍＬ）の低下を抑制する方法；
に関する。
（１）（ａ）１×１０６ｃｆｕ／ｍＬ以上の、乳酸菌及びビフィドバクテリウム属細菌からなる群から選択される１種又は２種以上の細菌の生菌、（ｂ）乳原料及び／又は乳原料の発酵物、及び、（ｃ）ラクトコッカス属細菌の死菌体を含有し、ｐＨが６．０～７．４である発酵組成物；
（２）（Ａ）乳酸菌及びビフィドバクテリウム属細菌からなる群から選択される１種又は２種以上の細菌の生菌によって発酵物調製用乳原料を発酵させた発酵物を、発酵組成物製造用乳原料に添加する工程Ａ；又は、
（Ｂ）乳酸菌及びビフィドバクテリウム属細菌からなる群から選択される１種又は２種以上の細菌の生菌を発酵組成物製造用乳原料に添加して発酵させる工程Ｂ；
を含み、かつ、
（Ｃ）ラクトコッカス属細菌の死菌体を添加する工程Ｃ；を含む製造方法により製造された、ｐＨが６．０～７．４の発酵組成物；
（３）ラクトコッカス属細菌の死菌体の含有濃度が、１×１０８～１×１０１０個／ｇである上記（１）又は（２）に記載の発酵組成物；
（４）発酵組成物がｐＨ調整剤をさらに含有するか、又は、発酵組成物製造用乳原料がｐＨ調整剤が添加された乳原料である、上記（１）～（３）のいずれかに記載の発酵組成物；
（５）乳酸菌及びビフィドバクテリウム属細菌からなる群から選択される１種又は２種以上の細菌の生菌が、ラクトコッカス属細菌、ストレプトコッカス属細菌、ラクトバシラス属細菌、及び、ビフィドバクテリウム属細菌からなる群から選択される１種又は２種以上の生菌である、上記（１）～（４）のいずれかに記載の発酵組成物；
（６）冷蔵保存前の発酵組成物のｐＨと、冷蔵保存１４日後の発酵組成物のｐＨの差が１未満である、上記（１）～（５）のいずれかに記載の発酵組成物；
（７）発酵組成物の製造方法において、
（Ａ）乳酸菌及びビフィドバクテリウム属細菌からなる群から選択される１種又は２種以上の細菌の生菌によって発酵物調製用乳原料を発酵させた発酵物を、発酵組成物製造用乳原料に添加する工程Ａ；又は、
（Ｂ）乳酸菌及びビフィドバクテリウム属細菌からなる群から選択される１種又は２種以上の細菌の生菌を発酵組成物製造用乳原料に添加して発酵させる工程Ｂ；
を含み、かつ、
（Ｃ）ラクトコッカス属細菌の死菌体を添加する工程Ｃ；を含むことを特徴とする、
発酵組成物の製造後の冷蔵保存中の、酸味、酸臭の増大、ｐＨの低下及び／又は前記生菌の含有濃度（ｃｆｕ／ｍＬ）の低下が抑制された、ｐＨが６．０～７．４の発酵組成物の製造方法；や、
（８）発酵組成物の製造方法において、
（Ａ）乳酸菌及びビフィドバクテリウム属細菌からなる群から選択される１種又は２種以上の細菌の生菌によって発酵物調製用乳原料を発酵させた発酵物を、発酵組成物製造用乳原料に添加する工程Ａ；又は、
（Ｂ）乳酸菌及びビフィドバクテリウム属細菌からなる群から選択される１種又は２種以上の細菌の生菌を発酵組成物製造用乳原料に添加して発酵させる工程Ｂ；
を含み、かつ、
（Ｃ）ラクトコッカス属細菌の死菌体を添加する工程Ｃ；を含む
ことを特徴とする、
ｐＨが６．０～７．４の発酵組成物において、発酵組成物の製造後の冷蔵保存中の、酸味、酸臭の増大、ｐＨの低下及び／又は前記生菌の含有濃度（ｃｆｕ／ｍＬ）の低下を抑制する方法；
に関する。
本発明によれば、乳酸菌等の生菌を一定濃度（ｃｆｕ／ｍＬ）以上で含有し、かつ、ｐＨが中性域である発酵組成物であって、製造後の冷蔵保存中の「酸味、酸臭の増大」、「ｐＨの低下」及び／又は「乳酸菌等の生菌濃度（ｃｆｕ／ｍＬ）の低下」が抑制された発酵組成物、及びその製造方法等を提供することことができる。
なお、かかる本発明によれば、健康面から多量の乳酸菌の生菌を摂取することを希望するものの、酸味や酸臭を好まない消費者に訴求する新たな発酵組成物を提供することができる。
なお、かかる本発明によれば、健康面から多量の乳酸菌の生菌を摂取することを希望するものの、酸味や酸臭を好まない消費者に訴求する新たな発酵組成物を提供することができる。
本発明は、
［１］（ａ）１×１０６ｃｆｕ／ｍＬ以上の、乳酸菌及びビフィドバクテリウム属細菌からなる群から選択される１種又は２種以上の細菌の生菌、（ｂ）乳原料及び／又は乳原料の発酵物、及び、（ｃ）ラクトコッカス属細菌の死菌体を含有し、ｐＨが６．０～７．４である発酵組成物；
［２］（Ａ）乳酸菌及びビフィドバクテリウム属細菌からなる群から選択される１種又は２種以上の細菌の生菌によって発酵物調製用乳原料を発酵させた発酵物を、発酵組成物製造用乳原料に添加する工程Ａ；又は、
（Ｂ）乳酸菌及びビフィドバクテリウム属細菌からなる群から選択される１種又は２種以上の細菌の生菌を発酵組成物製造用乳原料に添加して発酵させる工程Ｂ；
を含み、かつ、
（Ｃ）ラクトコッカス属細菌の死菌体を添加する工程Ｃ；を含む製造方法により製造された、ｐＨが６．０～７．４の発酵組成物；
（上記［１］の発酵組成物と、［２］の発酵組成物を併せて、以下「本発明の発酵組成物」とも表示する。）；
［３］発酵組成物の製造方法において、
（Ａ）乳酸菌及びビフィドバクテリウム属細菌からなる群から選択される１種又は２種以上の細菌の生菌によって発酵物調製用乳原料を発酵させた発酵物を、発酵組成物製造用乳原料に添加する工程Ａ；又は、
（Ｂ）乳酸菌及びビフィドバクテリウム属細菌からなる群から選択される１種又は２種以上の細菌の生菌を発酵組成物製造用乳原料に添加して発酵させる工程Ｂ；
を含み、かつ、
（Ｃ）ラクトコッカス属細菌の死菌体を添加する工程Ｃ；を含む
ことを特徴とする、
発酵組成物の製造後の冷蔵保存中の、酸味、酸臭の増大、ｐＨの低下及び／又は前記生菌の含有濃度（ｃｆｕ／ｍＬ）の低下が抑制された、ｐＨが６．０～７．４の発酵組成物の製造方法（以下、「本発明の製造方法」とも表示する。）；
［４］発酵組成物の製造方法において、
（Ａ）乳酸菌及びビフィドバクテリウム属細菌からなる群から選択される１種又は２種以上の細菌の生菌によって発酵物調製用乳原料を発酵させた発酵物を、発酵組成物製造用乳原料に添加する工程Ａ；又は、
（Ｂ）乳酸菌及びビフィドバクテリウム属細菌からなる群から選択される１種又は２種以上の細菌の生菌を発酵組成物製造用乳原料に添加して発酵させる工程Ｂ；
を含み、かつ、
（Ｃ）ラクトコッカス属細菌の死菌体を添加する工程Ｃ；を含む
ことを特徴とする、
ｐＨが６．０～７．４の発酵組成物において、発酵組成物の製造後の冷蔵保存中の、酸味、酸臭の増大、ｐＨの低下及び／又は前記生菌の含有濃度（ｃｆｕ／ｍＬ）の低下を抑制する方法（以下、「本発明の抑制方法」とも表示する。）；
などの実施態様を含んでいる。
［１］（ａ）１×１０６ｃｆｕ／ｍＬ以上の、乳酸菌及びビフィドバクテリウム属細菌からなる群から選択される１種又は２種以上の細菌の生菌、（ｂ）乳原料及び／又は乳原料の発酵物、及び、（ｃ）ラクトコッカス属細菌の死菌体を含有し、ｐＨが６．０～７．４である発酵組成物；
［２］（Ａ）乳酸菌及びビフィドバクテリウム属細菌からなる群から選択される１種又は２種以上の細菌の生菌によって発酵物調製用乳原料を発酵させた発酵物を、発酵組成物製造用乳原料に添加する工程Ａ；又は、
（Ｂ）乳酸菌及びビフィドバクテリウム属細菌からなる群から選択される１種又は２種以上の細菌の生菌を発酵組成物製造用乳原料に添加して発酵させる工程Ｂ；
を含み、かつ、
（Ｃ）ラクトコッカス属細菌の死菌体を添加する工程Ｃ；を含む製造方法により製造された、ｐＨが６．０～７．４の発酵組成物；
（上記［１］の発酵組成物と、［２］の発酵組成物を併せて、以下「本発明の発酵組成物」とも表示する。）；
［３］発酵組成物の製造方法において、
（Ａ）乳酸菌及びビフィドバクテリウム属細菌からなる群から選択される１種又は２種以上の細菌の生菌によって発酵物調製用乳原料を発酵させた発酵物を、発酵組成物製造用乳原料に添加する工程Ａ；又は、
（Ｂ）乳酸菌及びビフィドバクテリウム属細菌からなる群から選択される１種又は２種以上の細菌の生菌を発酵組成物製造用乳原料に添加して発酵させる工程Ｂ；
を含み、かつ、
（Ｃ）ラクトコッカス属細菌の死菌体を添加する工程Ｃ；を含む
ことを特徴とする、
発酵組成物の製造後の冷蔵保存中の、酸味、酸臭の増大、ｐＨの低下及び／又は前記生菌の含有濃度（ｃｆｕ／ｍＬ）の低下が抑制された、ｐＨが６．０～７．４の発酵組成物の製造方法（以下、「本発明の製造方法」とも表示する。）；
［４］発酵組成物の製造方法において、
（Ａ）乳酸菌及びビフィドバクテリウム属細菌からなる群から選択される１種又は２種以上の細菌の生菌によって発酵物調製用乳原料を発酵させた発酵物を、発酵組成物製造用乳原料に添加する工程Ａ；又は、
（Ｂ）乳酸菌及びビフィドバクテリウム属細菌からなる群から選択される１種又は２種以上の細菌の生菌を発酵組成物製造用乳原料に添加して発酵させる工程Ｂ；
を含み、かつ、
（Ｃ）ラクトコッカス属細菌の死菌体を添加する工程Ｃ；を含む
ことを特徴とする、
ｐＨが６．０～７．４の発酵組成物において、発酵組成物の製造後の冷蔵保存中の、酸味、酸臭の増大、ｐＨの低下及び／又は前記生菌の含有濃度（ｃｆｕ／ｍＬ）の低下を抑制する方法（以下、「本発明の抑制方法」とも表示する。）；
などの実施態様を含んでいる。
（乳原料）
本明細書における「乳原料」は、特に明記しない限り、本発明における「乳原料」、「発酵物調製用乳原料」及び「発酵組成物製造用乳原料」を包含する概念である。本明細書における「発酵物調製用乳原料」とは、本明細書における「発酵物」を調製するために用いられる「乳原料」を意味し、本明細書における「発酵組成物製造用乳原料」とは、本明細書における「発酵組成物」を調製するために用いられる「乳原料」を意味する。
本明細書における「乳原料」は、特に明記しない限り、本発明における「乳原料」、「発酵物調製用乳原料」及び「発酵組成物製造用乳原料」を包含する概念である。本明細書における「発酵物調製用乳原料」とは、本明細書における「発酵物」を調製するために用いられる「乳原料」を意味し、本明細書における「発酵組成物製造用乳原料」とは、本明細書における「発酵組成物」を調製するために用いられる「乳原料」を意味する。
本明細書における「乳原料」には、典型的には、乳等省令に定義される「乳」、すなわち、生乳、牛乳、特別牛乳、生山羊乳、殺菌山羊乳、生めん羊乳、成分調整牛乳、低脂肪牛乳、無脂肪牛乳および加工乳などの乳またはこれと同等以上の無脂乳固形分（すなわち８％以上）を含むものが挙げられるが、乳成分を含む組成物である限り特に制限されない。本明細書における「乳成分」としては、乳等省令に定義される「乳」由来の乳脂肪、及び、該「乳」由来の無脂乳固形分（例えば、該「乳」由来のタンパク質及び／又は該「乳」由来の糖）からなる群から選択される１種又は２種以上が挙げられる。
本明細書における「乳原料」は、乳、乳製品等を用いて調製することができる。「乳原料」として、乳及び／又は乳製品を用いる場合は、より具体的には、牛乳、水牛乳、羊乳、山羊乳、馬乳、濃縮乳、脱脂乳、脱脂濃縮乳、脱脂粉乳、全脂粉乳、クリーム、バター、バターミルク、練乳、乳糖、乳タンパク質濃縮物、ホエイタンパク質濃縮物、及び、水からなる群から選択される１種又は２種以上を用いて調製することができる。
本明細書における「乳原料」としては、乳成分の固形分の濃度が例えば１～１８重量％、好ましくは２～１６重量％、より好ましくは４～１２重量％であるものが挙げられ、及び／又は、無脂乳固形分の濃度が例えば１～１８重量％、好ましくは２～１６重量％、より好ましくは２～１４重量％、さらに好ましくは４～１２重量％、６～１０重量％若しくは７～９重量％であるものが挙げられ、及び／又は、乳脂肪分の濃度が例えば０～８重量％、好ましくは０．１～７重量％、より好ましくは０．５～４重量％又は１～３重量％であるものが挙げられる。
（乳原料の発酵物）
本明細書における「乳原料の発酵物」とは、発酵物調製用乳原料を乳酸菌等で発酵したものを意味する。かかる「乳原料の発酵物」には、例えば、乳酸菌等の生菌濃度が１×１０７ｃｆｕ／ｍＬ以上、好ましくは１×１０７～１×１０１０ｃｆｕ／ｍＬである、乳原料の発酵物が好適に挙げられる。
かかる「乳原料の発酵物」は、乳酸菌等の生菌濃度が１×１０７ｃｆｕ／ｍＬ以上、好ましくは１×１０７～１×１０１０ｃｆｕ／ｍＬとなるまで、乳酸菌等の生菌で発酵物調製用乳原料を発酵させることにより製造することができる。
なお、本明細書における「乳原料の発酵物」には、便宜上、かかる乳原料の発酵物から、遠心分離等によって、乳酸菌等のみを単離したものも含まれる。
本明細書における「乳原料の発酵物」とは、発酵物調製用乳原料を乳酸菌等で発酵したものを意味する。かかる「乳原料の発酵物」には、例えば、乳酸菌等の生菌濃度が１×１０７ｃｆｕ／ｍＬ以上、好ましくは１×１０７～１×１０１０ｃｆｕ／ｍＬである、乳原料の発酵物が好適に挙げられる。
かかる「乳原料の発酵物」は、乳酸菌等の生菌濃度が１×１０７ｃｆｕ／ｍＬ以上、好ましくは１×１０７～１×１０１０ｃｆｕ／ｍＬとなるまで、乳酸菌等の生菌で発酵物調製用乳原料を発酵させることにより製造することができる。
なお、本明細書における「乳原料の発酵物」には、便宜上、かかる乳原料の発酵物から、遠心分離等によって、乳酸菌等のみを単離したものも含まれる。
（ラクトコッカス属細菌の死菌体）
本発明においてはラクトコッカス属細菌の死菌体を用いる。ラクトコッカス属細菌は、乳酸菌に分類される細菌である。ラクトコッカス属細菌の死菌体としては、ラクトコッカス属細菌からなる群から選択される１種又は２種以上の細菌の死菌体が挙げられ、好ましくは、ラクトコッカス・ラクティスからなる群から選択される１種又は２種以上の細菌の死菌体が挙げられ、より好ましくは、ラクトコッカス・ラクティス・サブスピーシズ・ラクティス（Lactococcus lactis subsp. lactis）（以下、単に「ラクトコッカス・ラクティス」とも表示する）、ラクトコッカス・ラクティス・バイオバリアント・ダイアセチラクティス（Lactococcus lactis subsp. lactis biovar diacetylactis）、ラクトコッカス・ラクティス・サブスピーシズ・クレモリス（Lactococcus lactis subsp. cremoris）、ラクトコッカス・ラフィノラクティス（Lactococcus raffinolactis）、ラクトコッカス・ピシウム（Lactococcu spiscium）、ラクトコッカス・プランタラム（Lactococcus plantarum）、ラクトコッカス・ガルビエアエ（Lactococcus garvieae）、及び、ラクトコッカス・ラクティス・サブスピーシズ・ホールドニアエ（Lactococcus lactis subsp. hordniae）からなる群から選択される１種又は２種以上の細菌の死菌体が挙げられ、さらに好ましくは、ラクトコッカス・ラクティスの死菌体が挙げられ、より好ましくは、ラクトコッカス・ラクティスJCM5805、ラクトコッカス・ラクティスJCM20101、ラクトコッカス・ラクティスNBRC12007、及び、ラクトコッカス・ラクティスNRIC1150からなる群から選択される１種又は２種以上の細菌の死菌体が挙げられ、特に好ましくは、ラクトコッカス・ラクティスJCM5805の死菌体が挙げられる。
本発明においてはラクトコッカス属細菌の死菌体を用いる。ラクトコッカス属細菌は、乳酸菌に分類される細菌である。ラクトコッカス属細菌の死菌体としては、ラクトコッカス属細菌からなる群から選択される１種又は２種以上の細菌の死菌体が挙げられ、好ましくは、ラクトコッカス・ラクティスからなる群から選択される１種又は２種以上の細菌の死菌体が挙げられ、より好ましくは、ラクトコッカス・ラクティス・サブスピーシズ・ラクティス（Lactococcus lactis subsp. lactis）（以下、単に「ラクトコッカス・ラクティス」とも表示する）、ラクトコッカス・ラクティス・バイオバリアント・ダイアセチラクティス（Lactococcus lactis subsp. lactis biovar diacetylactis）、ラクトコッカス・ラクティス・サブスピーシズ・クレモリス（Lactococcus lactis subsp. cremoris）、ラクトコッカス・ラフィノラクティス（Lactococcus raffinolactis）、ラクトコッカス・ピシウム（Lactococcu spiscium）、ラクトコッカス・プランタラム（Lactococcus plantarum）、ラクトコッカス・ガルビエアエ（Lactococcus garvieae）、及び、ラクトコッカス・ラクティス・サブスピーシズ・ホールドニアエ（Lactococcus lactis subsp. hordniae）からなる群から選択される１種又は２種以上の細菌の死菌体が挙げられ、さらに好ましくは、ラクトコッカス・ラクティスの死菌体が挙げられ、より好ましくは、ラクトコッカス・ラクティスJCM5805、ラクトコッカス・ラクティスJCM20101、ラクトコッカス・ラクティスNBRC12007、及び、ラクトコッカス・ラクティスNRIC1150からなる群から選択される１種又は２種以上の細菌の死菌体が挙げられ、特に好ましくは、ラクトコッカス・ラクティスJCM5805の死菌体が挙げられる。
本明細書において挙げられている死菌体の菌株について、本発明の効果を有している限り、該菌株と同等の菌株も、該菌株に含まれる。ここで、同等の菌株とは、上記の菌株から由来している菌株または上記の菌株が由来する菌株若しくはその菌株の子孫菌株をいう。同等の菌株は他の菌株保存機関に保存されている場合もある。図１に、ラクトコッカス・ラクティス・サブスピーシズ・ラクティスJCM5805に由来する菌株、及び、ラクトコッ
カス・ラクティス・サブスピーシズ・ラクティスJCM5805が由来する菌株を示す。図１に記載のラクトコッカス・ラクティス・サブスピーシズ・ラクティスJCM5805の同等の菌株も、本発明の効果を有している限り、本発明の死菌体として用いることができる。本明細書において、ラクトコッカス・ラクティス・サブスピーシズ・ラクティスJCM5805（ラクトコッカス・ラクティスJCM5805）という場合、これらの同等の菌株も含む。
カス・ラクティス・サブスピーシズ・ラクティスJCM5805が由来する菌株を示す。図１に記載のラクトコッカス・ラクティス・サブスピーシズ・ラクティスJCM5805の同等の菌株も、本発明の効果を有している限り、本発明の死菌体として用いることができる。本明細書において、ラクトコッカス・ラクティス・サブスピーシズ・ラクティスJCM5805（ラクトコッカス・ラクティスJCM5805）という場合、これらの同等の菌株も含む。
本明細書における「ラクトコッカス属細菌の死菌体」は、ラクトコッカス属細菌の死菌体である限り特に制限されず、乾燥物であっても、非乾燥物であってもよいが、死菌体の保存安定性の観点から乾燥物であることが好ましく、例えば乾燥粉末が好適に挙げられる。
ラクトコッカス属細菌の死菌体の調製方法は特に制限されず、例えば、ラクトコッカス属細菌を培養した培地を殺菌してから、ろ過、遠心分離等により菌体を集菌する方法や、ラクトコッカス属細菌を培養した培地から、ろ過、遠心分離等により菌体を集菌してから、殺菌する方法などを挙げることができ、必要に応じてさらに乾燥処理や破砕処理を行うことができる。
なお、殺菌の手段は特に制限されず、加熱のみならず、紫外線やγ線照射など、菌を死滅させる常套手段を用いることができる。
なお、殺菌の手段は特に制限されず、加熱のみならず、紫外線やγ線照射など、菌を死滅させる常套手段を用いることができる。
本発明において、ラクトコッカス属細菌の死菌体は、発酵組成物を製造する際のいずれの工程で添加してもよい。例えば、本発明における発酵組成物を、上記工程Ｂを含む製造方法で製造する場合は、発酵物調製用乳原料の発酵工程前に、死菌体を発酵物調製用乳原料に添加してもよいし、発酵物調製用乳原料の発酵工程中に、死菌体を発酵物調製用乳原料に添加してもよいし、発酵物調製用乳原料の発酵工程の終了後に、死菌体を発酵組成物に添加してもよいが、発酵物調製用乳原料の発酵工程前に、死菌体を発酵物調製用乳原料に添加することや、発酵物調製用乳原料の発酵工程中に、乳酸菌の死菌体を発酵物調製用乳原料に添加することが好ましい。また、本発明における発酵組成物を、上記工程Ａを含む製造方法で製造する場合は、ラクトコッカス属細菌の死菌体を発酵物調製用乳原料に添加してもよいし、発酵組成物製造用乳原料に添加してもよいが、発酵組成物製造用乳原料に添加することが好ましい。
本発明におけるラクトコッカス属細菌の死菌体の使用量としては、本発明の効果が得られる限り特に制限されないが、発酵組成物当たりに含まれる乳酸菌の死菌体の個数（個／ｇ）の単位で、例えば１×１０８～１×１０１０個／ｇ、好ましくは５×１０８～１×１０１０個／ｇが挙げられる。
発酵組成物中のラクトコッカス属細菌の死菌体の個数は、直接鏡検法、粒子電気的検知帯法、ＰＣＲ法にて計測することができる。
発酵組成物中のラクトコッカス属細菌の死菌体の個数は、直接鏡検法、粒子電気的検知帯法、ＰＣＲ法にて計測することができる。
（ｐＨ）
本発明における発酵組成物のｐＨとしては、６．０～７．４が挙げられ、好ましくは６．４～７．４が挙げられる。本明細書において、発酵組成物のｐＨの測定時について特に言及がない場合は、製造直後の発酵組成物のｐＨを意味する。発酵組成物のｐＨは、公知の方法にしたがって、例えばｐＨメーターなどを用いて２０℃にて測定することができる。
本発明における発酵組成物のｐＨとしては、６．０～７．４が挙げられ、好ましくは６．４～７．４が挙げられる。本明細書において、発酵組成物のｐＨの測定時について特に言及がない場合は、製造直後の発酵組成物のｐＨを意味する。発酵組成物のｐＨは、公知の方法にしたがって、例えばｐＨメーターなどを用いて２０℃にて測定することができる。
（ｐＨ調整剤）
本発明における「発酵組成物」は、ｐＨ調整剤を含んでいなくてもよいが、本発明の効果をより多く得る観点から、ｐＨ調整剤を含んでいることが好ましい。ｐＨ調整剤としては、食品衛生法上使用が可能であって、かつ、ｐＨを調整し得る物である限り特に制限されないが、クエン酸ナトリウム（クエン酸三ナトリウム）、クエン酸カリウム、炭酸水素ナトリウム、炭酸ナトリウム、炭酸水素カリウム、炭酸カリウム、リン酸水素二ナトリウム、酢酸ナトリウム、酢酸カリウム、Ｌ－アスコルビン酸ナトリウムなどの有機酸のナトリウム又はカリウム塩；や、水酸化ナトリウム、水酸化カリウムなどの塩基；や、その他食品衛生法上使用可能なｐＨ調整剤が挙げられ、中でも、クエン酸三ナトリウムが好ましく挙げられる。ｐＨ調整剤は１種を用いてもよく、２種以上を併用してもよい。
本発明における「発酵組成物」は、ｐＨ調整剤を含んでいなくてもよいが、本発明の効果をより多く得る観点から、ｐＨ調整剤を含んでいることが好ましい。ｐＨ調整剤としては、食品衛生法上使用が可能であって、かつ、ｐＨを調整し得る物である限り特に制限されないが、クエン酸ナトリウム（クエン酸三ナトリウム）、クエン酸カリウム、炭酸水素ナトリウム、炭酸ナトリウム、炭酸水素カリウム、炭酸カリウム、リン酸水素二ナトリウム、酢酸ナトリウム、酢酸カリウム、Ｌ－アスコルビン酸ナトリウムなどの有機酸のナトリウム又はカリウム塩；や、水酸化ナトリウム、水酸化カリウムなどの塩基；や、その他食品衛生法上使用可能なｐＨ調整剤が挙げられ、中でも、クエン酸三ナトリウムが好ましく挙げられる。ｐＨ調整剤は１種を用いてもよく、２種以上を併用してもよい。
ｐＨ調整剤を含む場合のｐＨ調整剤の含有濃度は特に制限されず、調整するｐＨに応じて適宜調整することができるが、例えば、発酵組成物全量に対するｐＨ調整剤の濃度として、例えば０．０１～３重量％、０．１～２重量％などが挙げられる。
（乳酸菌等の生菌）
本明細書における「乳酸菌及びビフィドバクテリウム属細菌からなる群から選択される１種又は２種以上の細菌の生菌」としては、乳酸菌と、ビフィドバクテリウム属細菌とからなる群から選択される１種又は２種以上の細菌の生菌である限り特に制限されないが、好ましくは、ラクトコッカス属細菌、ストレプトコッカス属細菌、ラクトバシラス属細菌、及び、ビフィドバクテリウム属細菌からなる群から選択される１種又は２種以上（好ましくは２種以上、より好ましくは３種以上）の細菌の生菌が挙げられ、より好ましくは、１種又は２種以上（好ましくは１種又は２種）のラクトコッカス属細菌と、１種又は２種以上（好ましくは１種又は２種）のストレプトコッカス属細菌の生菌；や、
１種又は２種以上（好ましくは１種又は２種）のラクトコッカス属細菌と、１種又は２種以上（好ましくは１種又は２種）のラクトバシラス属細菌の生菌；や、
１種又は２種以上（好ましくは１種又は２種）のストレプトコッカス属細菌と、１種又は２種以上（好ましくは１種又は２種）のラクトバシラス属細菌の生菌；や、
１種又は２種以上（好ましくは１種又は２種）のラクトコッカス属細菌の生菌；や、
１種又は２種以上（好ましくは１種又は２種）のストレプトコッカス属細菌の生菌；や、１種又は２種以上（好ましくは１種又は２種）のラクトバシラス属細菌の生菌；が挙げられ、さらに好ましくは、１種又は２種以上（好ましくは１種又は２種）のラクトコッカス属細菌の生菌；や、１種又は２種以上（好ましくは１種又は２種）のストレプトコッカス属細菌の生菌；が挙げられる。
本明細書における「乳酸菌及びビフィドバクテリウム属細菌からなる群から選択される１種又は２種以上の細菌の生菌」としては、乳酸菌と、ビフィドバクテリウム属細菌とからなる群から選択される１種又は２種以上の細菌の生菌である限り特に制限されないが、好ましくは、ラクトコッカス属細菌、ストレプトコッカス属細菌、ラクトバシラス属細菌、及び、ビフィドバクテリウム属細菌からなる群から選択される１種又は２種以上（好ましくは２種以上、より好ましくは３種以上）の細菌の生菌が挙げられ、より好ましくは、１種又は２種以上（好ましくは１種又は２種）のラクトコッカス属細菌と、１種又は２種以上（好ましくは１種又は２種）のストレプトコッカス属細菌の生菌；や、
１種又は２種以上（好ましくは１種又は２種）のラクトコッカス属細菌と、１種又は２種以上（好ましくは１種又は２種）のラクトバシラス属細菌の生菌；や、
１種又は２種以上（好ましくは１種又は２種）のストレプトコッカス属細菌と、１種又は２種以上（好ましくは１種又は２種）のラクトバシラス属細菌の生菌；や、
１種又は２種以上（好ましくは１種又は２種）のラクトコッカス属細菌の生菌；や、
１種又は２種以上（好ましくは１種又は２種）のストレプトコッカス属細菌の生菌；や、１種又は２種以上（好ましくは１種又は２種）のラクトバシラス属細菌の生菌；が挙げられ、さらに好ましくは、１種又は２種以上（好ましくは１種又は２種）のラクトコッカス属細菌の生菌；や、１種又は２種以上（好ましくは１種又は２種）のストレプトコッカス属細菌の生菌；が挙げられる。
本発明における生菌の、より具体的な好ましい態様として、ラクトコッカス・ラクティス、ラクトコッカス・ラクティス・バイオバリアント・ダイアセチラクティス、ラクトコッカス・ラクティス・サブスピーシズ・クレモリス、ラクトコッカス・ラフィノラクティス、ラクトコッカス・ピシウム、ラクトコッカス・プランタラム、ラクトコッカス・ガルビエアエ、及び、ラクトコッカス・ラクティス・サブスピーシズ・ホールドニアエ、ストレプトコッカス・サリバリウス・サブスピーシーズ・サーモフィラス（Streptococcus salivarius subsp. thermophilus）、ラクトバシラス・アシドフィラス（Lactobacillus acidophilus）、ラクトバシラス・デルブルッキー・サブスピーシーズ・ブルガリカス（Lactobacillus delbrueckii subsp. bulgaricus）、ラクトバシラス・デルブルッキー・サブスピーシーズ・デルブルッキー（Lactobacillus delbrueckii subsp. delbrueckii）、ラクトバシラス・デルブルッキー・サブスピーシーズ・ラクティス（Lactobacillus delbrueckii subsp. lactis）、ラクトバシラス・カゼイ（Lactobacillus casei）、ラクトバシラス・パラカゼイ（Lactobacillus paracasei）、ラクトバシラス・ガセリ（Lactobacillus gasseri）、ラクトバシラス・ヘルベティカス（Lactobacillus helveticus）、ラクトバシラス・ジョンソニ（Lactobacillus johnsonii）、ラクトバシラス・プランタラム（Lactobacillus plantarum）、ラクトバシラス・ブレビス（Lactobacillus brevis）、ラクトバシラス・カゼイ・サブスピーシーズ・ラムノーサス（Lactobacillus casei subsp. rhamnosus）、ラクトバシラス・ペントーサス（Lactobacillus pentosus）、ラクトバシラス・ファーメンタム（Lactobacillus fermentum）、ビフィドバクテリウム・ビフィダム（Bifidobacterium bifidum）、ビフィドバクテリウム・ブレーベ（Bifidobacterium breve）、ビフィドバクテリウム・ロンガム・サブスピーシーズ・ロンガム（Bifidobacterium longum subsp. longum）、ビフィドバクテリウム・ロンガム・サブスピーシーズ・インファンティス（Bifidobacterium longum subsp. infantis）、ビフィドバクテリウム・アニマリス・サブスピーシーズ・アニマリス（Bifidobacterium animalis subsp. animalis）、ビフィドバクテリウム・アニマリス・サブスピーシーズ・ラクティス（Bifidobacterium animalis subsp. lactis）、ビフィドバクテリウム・アドレセンティス（Bifidobacterium adolescentis）、ビフィドバクテリウム・アンギュラータム（Bifidobacterium angulatum）、ビフィドバクテリウム・カテヌラータム（Bifidobacterium catenulatum）、及び、ビフィドバクテリウム・シュードカテヌラータム（Bifidobacterium pseudocatenulatum）からなる群から選択される１種又は２種以上（好ましくは２種以上、より好ましくは３種以上）の細菌の生菌が挙げられ、
好ましくは、ラクトコッカス・ラクティス、ラクトコッカス・ラクティス・バイオバリアント・ダイアセチラクティス、ラクトコッカス・ラクティス・サブスピーシズ・クレモリス、ラクトコッカス・ラフィノラクティス、ラクトコッカス・ピシウム、ラクトコッカス・プランタラム、ラクトコッカス・ガルビエアエ、ラクトコッカス・ラクティス・サブスピーシズ・ホールドニアエ、及び、ストレプトコッカス・サリバリウス・サブスピーシーズ・サーモフィラスからなる群から選択される１種又は２種以上（好ましくは２種以上、より好ましくは３種以上）の細菌の生菌；や、
ラクトコッカス・ラクティス、ラクトコッカス・ラクティス・バイオバリアント・ダイアセチラクティス、ラクトコッカス・ラクティス・サブスピーシズ・クレモリス、ラクトコッカス・ラフィノラクティス、ラクトコッカス・ピシウム、ラクトコッカス・プランタラム、ラクトコッカス・ガルビエアエ、ラクトコッカス・ラクティス・サブスピーシズ・ホールドニアエ、ラクトバシラス・アシドフィラス、ラクトバシラス・デルブルッキー・サブスピーシーズ・ブルガリカス、ラクトバシラス・デルブルッキー・サブスピーシーズ・ラクティス、ラクトバシラス・デルブルッキー・サブスピーシーズ・デルブルッキー、ラクトバシラス・カゼイ、ラクトバシラス・パラカゼイ、ラクトバシラス・ガセリ、ラクトバシラス・ヘルベティカス、ラクトバシラス・ジョンソニ、ラクトバシラス・プランタラム、ラクトバシラス・ブレビス、ラクトバシラス・カゼイ・サブスピーシーズ・ラムノーサス、ラクトバシラス・ペントーサス、及び、ラクトバシラス・ファーメンタムからなる群から選択される１種又は２種以上（好ましくは２種以上、より好ましくは３種以上）の細菌の生菌；や、
ストレプトコッカス・サリバリウス・サブスピーシーズ・サーモフィラス、ラクトバシラス・アシドフィラス、ラクトバシラス・デルブルッキー・サブスピーシーズ・ブルガリカス、ラクトバシラス・デルブルッキー・サブスピーシーズ・ラクティス、ラクトバシラス・デルブルッキー・サブスピーシーズ・デルブルッキー、ラクトバシラス・カゼイ、ラクトバシラス・パラカゼイ、ラクトバシラス・ガセリ、ラクトバシラス・ヘルベティカス、ラクトバシラス・ジョンソニ、ラクトバシラス・プランタラム、ラクトバシラス・ブレビス、ラクトバシラス・カゼイ・サブスピーシーズ・ラムノーサス、ラクトバシラス・ペントーサス、ラクトバシラス・ファーメンタムからなる群から選択される１種又は２種以上（好ましくは２種以上、より好ましくは３種以上）の細菌の生菌；
が挙げられる。
好ましくは、ラクトコッカス・ラクティス、ラクトコッカス・ラクティス・バイオバリアント・ダイアセチラクティス、ラクトコッカス・ラクティス・サブスピーシズ・クレモリス、ラクトコッカス・ラフィノラクティス、ラクトコッカス・ピシウム、ラクトコッカス・プランタラム、ラクトコッカス・ガルビエアエ、ラクトコッカス・ラクティス・サブスピーシズ・ホールドニアエ、及び、ストレプトコッカス・サリバリウス・サブスピーシーズ・サーモフィラスからなる群から選択される１種又は２種以上（好ましくは２種以上、より好ましくは３種以上）の細菌の生菌；や、
ラクトコッカス・ラクティス、ラクトコッカス・ラクティス・バイオバリアント・ダイアセチラクティス、ラクトコッカス・ラクティス・サブスピーシズ・クレモリス、ラクトコッカス・ラフィノラクティス、ラクトコッカス・ピシウム、ラクトコッカス・プランタラム、ラクトコッカス・ガルビエアエ、ラクトコッカス・ラクティス・サブスピーシズ・ホールドニアエ、ラクトバシラス・アシドフィラス、ラクトバシラス・デルブルッキー・サブスピーシーズ・ブルガリカス、ラクトバシラス・デルブルッキー・サブスピーシーズ・ラクティス、ラクトバシラス・デルブルッキー・サブスピーシーズ・デルブルッキー、ラクトバシラス・カゼイ、ラクトバシラス・パラカゼイ、ラクトバシラス・ガセリ、ラクトバシラス・ヘルベティカス、ラクトバシラス・ジョンソニ、ラクトバシラス・プランタラム、ラクトバシラス・ブレビス、ラクトバシラス・カゼイ・サブスピーシーズ・ラムノーサス、ラクトバシラス・ペントーサス、及び、ラクトバシラス・ファーメンタムからなる群から選択される１種又は２種以上（好ましくは２種以上、より好ましくは３種以上）の細菌の生菌；や、
ストレプトコッカス・サリバリウス・サブスピーシーズ・サーモフィラス、ラクトバシラス・アシドフィラス、ラクトバシラス・デルブルッキー・サブスピーシーズ・ブルガリカス、ラクトバシラス・デルブルッキー・サブスピーシーズ・ラクティス、ラクトバシラス・デルブルッキー・サブスピーシーズ・デルブルッキー、ラクトバシラス・カゼイ、ラクトバシラス・パラカゼイ、ラクトバシラス・ガセリ、ラクトバシラス・ヘルベティカス、ラクトバシラス・ジョンソニ、ラクトバシラス・プランタラム、ラクトバシラス・ブレビス、ラクトバシラス・カゼイ・サブスピーシーズ・ラムノーサス、ラクトバシラス・ペントーサス、ラクトバシラス・ファーメンタムからなる群から選択される１種又は２種以上（好ましくは２種以上、より好ましくは３種以上）の細菌の生菌；
が挙げられる。
（乳酸菌やビフィズス菌の至適生育温度による分類）
発酵組成物の製造に用いられる乳酸菌やビフィズス菌は、至適生育温度の違いによっても分類される。一般に、至適生育温度が約２５～３０℃の乳酸菌等は中温菌と呼ばれ、至適生育温度が３７～４５℃の乳酸菌等は高温菌と呼ばれる。
高温菌としては、例えば、ラクトバシラス・アシドフィラス、ラクトバシラス・デルブルッキー・サブスピーシーズ・ブルガリカス、ラクトバシラス・デルブルッキー・サブスピーシーズ・ラクティス、ラクトバシラス・デルブルッキー・サブスピーシーズ・デルブルッキー、ラクトバシラス・ガセリ、ラクトバシラス・ヘルベティカス、ラクトバシラス・ジョンソニ、ラクトバシラス・ブレビス、ラクトバシラス・カゼイ・サブスピーシーズ・ラムノーサス、ラクトバシラス・ペントーサス、ストレプトコッカス・サリバリウス・サブスピーシーズ・サーモフィラス、ビフィドバクテリウム・ビフィダム、ビフィドバクテリウム・ブレーベ、ビフィドバクテリウム・ロンガム・サブスピーシーズ・ロンガムが挙げられ、中温菌としては、例えば、ラクトバシラス・カゼイ、ラクトバシラス・パラカゼイ、ラクトバシラス・プランタラム、ラクトコッカス・ラクティス・サブスピーシズ・ラクティス、ラクトコッカス・ラクティス・バイオバリアント・ダイアセチラクティス、ラクトコッカス・ラクティス・サブスピーシズ・クレモリスが挙げられる。
なお、本発明に用いる乳酸菌等として、上記の高温菌及び中温菌の群から選択される１種又は２種以上の細菌の生菌を用いることや、上記の高温菌の群から選択される１種又は２種以上の細菌の生菌を用いることや、上記の中温菌の群から選択される１種又は２種以上の細菌の生菌を用いることも挙げられ、中でも、上記の高温菌の群から選択される１種又は２種以上の細菌の生菌を用いることが好ましく挙げられる。
発酵組成物の製造に用いられる乳酸菌やビフィズス菌は、至適生育温度の違いによっても分類される。一般に、至適生育温度が約２５～３０℃の乳酸菌等は中温菌と呼ばれ、至適生育温度が３７～４５℃の乳酸菌等は高温菌と呼ばれる。
高温菌としては、例えば、ラクトバシラス・アシドフィラス、ラクトバシラス・デルブルッキー・サブスピーシーズ・ブルガリカス、ラクトバシラス・デルブルッキー・サブスピーシーズ・ラクティス、ラクトバシラス・デルブルッキー・サブスピーシーズ・デルブルッキー、ラクトバシラス・ガセリ、ラクトバシラス・ヘルベティカス、ラクトバシラス・ジョンソニ、ラクトバシラス・ブレビス、ラクトバシラス・カゼイ・サブスピーシーズ・ラムノーサス、ラクトバシラス・ペントーサス、ストレプトコッカス・サリバリウス・サブスピーシーズ・サーモフィラス、ビフィドバクテリウム・ビフィダム、ビフィドバクテリウム・ブレーベ、ビフィドバクテリウム・ロンガム・サブスピーシーズ・ロンガムが挙げられ、中温菌としては、例えば、ラクトバシラス・カゼイ、ラクトバシラス・パラカゼイ、ラクトバシラス・プランタラム、ラクトコッカス・ラクティス・サブスピーシズ・ラクティス、ラクトコッカス・ラクティス・バイオバリアント・ダイアセチラクティス、ラクトコッカス・ラクティス・サブスピーシズ・クレモリスが挙げられる。
なお、本発明に用いる乳酸菌等として、上記の高温菌及び中温菌の群から選択される１種又は２種以上の細菌の生菌を用いることや、上記の高温菌の群から選択される１種又は２種以上の細菌の生菌を用いることや、上記の中温菌の群から選択される１種又は２種以上の細菌の生菌を用いることも挙げられ、中でも、上記の高温菌の群から選択される１種又は２種以上の細菌の生菌を用いることが好ましく挙げられる。
（乳酸菌等の入手法など）
本発明に用いる乳酸菌等の生菌の菌株や、乳酸菌の死菌体の菌株は、American type culture collection（米国）等の寄託機関などから入手することができる。また、本発明に用いる乳酸菌等の生菌として、市販のスターターカルチャーを用いてもよい。
本発明に用いる乳酸菌等の生菌の菌株や、乳酸菌の死菌体の菌株は、American type culture collection（米国）等の寄託機関などから入手することができる。また、本発明に用いる乳酸菌等の生菌として、市販のスターターカルチャーを用いてもよい。
本発明における発酵組成物中の、乳酸菌等の生菌濃度としては、１×１０６ｃｆｕ／ｍＬ以上である限り特に制限されず、例えば１×１０６～１×１０９ｃｆｕ／ｍＬや、１×１０６～５×１０８ｃｆｕ／ｍＬが好ましく挙げられる。
乳酸菌等の生菌濃度は、発酵組成物中の乳酸菌等の生菌数を、混釈平板培養法等により測定することができる。より具体的には、発酵物の乳酸菌生菌数は、乳等省令別表の二、乳等の成分規格並びに製造、調理及び保存の方法の基準の部、（七）乳等の成分規格の試験法、（３）発酵乳及び乳酸菌飲料、３乳酸菌数の測定法、に記載される測定法にしたがって測定することができる。
乳酸菌等の生菌濃度は、発酵組成物中の乳酸菌等の生菌数を、混釈平板培養法等により測定することができる。より具体的には、発酵物の乳酸菌生菌数は、乳等省令別表の二、乳等の成分規格並びに製造、調理及び保存の方法の基準の部、（七）乳等の成分規格の試験法、（３）発酵乳及び乳酸菌飲料、３乳酸菌数の測定法、に記載される測定法にしたがって測定することができる。
本発明における発酵組成物中の、乳酸菌等の生菌濃度の調整方法は特に制限されず、発酵組成物の製造方法が工程Ａを含んでいる場合は、例えば、発酵物中の乳酸菌等の濃度を調整する方法や、添加する発酵物の添加量を調整する方法が挙げられ、発酵組成物の製造方法が工程Ｂを含んでいる場合は、例えば、乳酸菌等の生菌の添加量を調整する方法や、発酵させる時間等の発酵条件を調整する方法が挙げられる。
（発酵組成物）
本明細書における「発酵組成物」とは、製造工程のいずれかに、（Ａ）乳酸菌及びビフィドバクテリウム属細菌からなる群から選択される１種又は２種以上の細菌の生菌によって発酵物調製用乳原料を発酵させた発酵物を、発酵組成物製造用乳原料に添加する工程Ａを含むものであるか、又は、（Ｂ）乳酸菌及びビフィドバクテリウム属細菌からなる群から選択される１種又は２種以上の細菌の生菌を発酵組成物製造用乳原料に添加して発酵させる工程Ｂを含むものであり、かつ、ｐＨが６．０～７．４、好ましくは６．４～７．４であるものを意味する。
本明細書における「発酵組成物」には、例えば、「乳及び乳製品の成分規格等に関する省令」（以下、「乳等省令」という。）で定義される「発酵乳」、「乳製品乳酸菌飲料」、「乳酸菌飲料」、「乳等を主要原料とする食品」、等を包含するがこれらに限定されない。例えば、乳等省令で定義される「発酵乳」とは、生乳、牛乳、特別牛乳、生山羊乳、殺菌山羊乳、生めん羊乳、成分調整牛乳、低脂肪牛乳、無脂肪牛乳および加工乳などの乳；や、クリーム、バター、チーズ、練乳などの乳製品；や、乳等を主要原料とする食品；などの乳等を、乳酸菌または酵母で発酵させ、固形状（ハードタイプ）、糊状（ソフトタイプ）または液状（ドリンクタイプ）にしたもの、または、これらを凍結したものをいうが、本明細書における「発酵組成物」は、このような乳等省令で定義される発酵乳に限定されない。また、本明細書における「乳等を主要原料とする食品」には、製造工程のいずれかに、上記工程（Ｂ）又は（Ａ）を含むものであり、かつ、ｐＨが６．０～７．４である限り、乳等省令に規定される「乳等を主要原料とする食品」等に限られず、「乳」及び／又は「クリーム、バター、チーズ、練乳、粉乳、発酵乳等の乳製品」を主要原料とする食品も含まれる。かかる「乳等を主要原料とする食品」として、サワークリーム等が挙げられる。
本明細書における「発酵組成物」とは、製造工程のいずれかに、（Ａ）乳酸菌及びビフィドバクテリウム属細菌からなる群から選択される１種又は２種以上の細菌の生菌によって発酵物調製用乳原料を発酵させた発酵物を、発酵組成物製造用乳原料に添加する工程Ａを含むものであるか、又は、（Ｂ）乳酸菌及びビフィドバクテリウム属細菌からなる群から選択される１種又は２種以上の細菌の生菌を発酵組成物製造用乳原料に添加して発酵させる工程Ｂを含むものであり、かつ、ｐＨが６．０～７．４、好ましくは６．４～７．４であるものを意味する。
本明細書における「発酵組成物」には、例えば、「乳及び乳製品の成分規格等に関する省令」（以下、「乳等省令」という。）で定義される「発酵乳」、「乳製品乳酸菌飲料」、「乳酸菌飲料」、「乳等を主要原料とする食品」、等を包含するがこれらに限定されない。例えば、乳等省令で定義される「発酵乳」とは、生乳、牛乳、特別牛乳、生山羊乳、殺菌山羊乳、生めん羊乳、成分調整牛乳、低脂肪牛乳、無脂肪牛乳および加工乳などの乳；や、クリーム、バター、チーズ、練乳などの乳製品；や、乳等を主要原料とする食品；などの乳等を、乳酸菌または酵母で発酵させ、固形状（ハードタイプ）、糊状（ソフトタイプ）または液状（ドリンクタイプ）にしたもの、または、これらを凍結したものをいうが、本明細書における「発酵組成物」は、このような乳等省令で定義される発酵乳に限定されない。また、本明細書における「乳等を主要原料とする食品」には、製造工程のいずれかに、上記工程（Ｂ）又は（Ａ）を含むものであり、かつ、ｐＨが６．０～７．４である限り、乳等省令に規定される「乳等を主要原料とする食品」等に限られず、「乳」及び／又は「クリーム、バター、チーズ、練乳、粉乳、発酵乳等の乳製品」を主要原料とする食品も含まれる。かかる「乳等を主要原料とする食品」として、サワークリーム等が挙げられる。
乳等省令における発酵乳などの定義や成分規格は以下のとおりである。
乳等省令において、発酵乳とは「乳又はこれと同等以上の無脂乳固形分を含む乳等を乳酸菌又は酵母で発酵させ、糊状又は液状にしたもの又はこれらを凍結したもの」と定義されている。その成分規格は「無脂乳固形分８％以上、乳酸菌数又は酵母数（１ｍｌ当たり）１，０００万以上、大腸菌群陰性」とされている。なお、本明細書において乳酸菌数又はビフィズス菌数の単位は、ＣＦＵ（colony forming unit；コロニー形成単位）で表さ
れる。
また、乳等省令において、乳製品乳酸菌飲料とは「乳等を乳酸菌又は酵母で発酵させたものを加工し、又は主要原料とした飲料（発酵乳を除く。）」と定義されている。その成分規格は「無脂乳固形分３％以上、乳酸菌数又は酵母数（１ｍＬ当たり）１，０００万以上、大腸菌群陰性」とされている。
また、乳等省令において、乳等を主要原料とする食品の乳酸菌飲料とは「乳等を乳酸菌又は酵母で発酵させたものを加工し、又は主要原料とした飲料（発酵乳を除く。）」と定義されている。その成分規格は「無脂乳固形分３％未満、乳酸菌数又は酵母数（１ｍＬ当たり）１００万以上、大腸菌群陰性」とされている。
乳等省令において、発酵乳とは「乳又はこれと同等以上の無脂乳固形分を含む乳等を乳酸菌又は酵母で発酵させ、糊状又は液状にしたもの又はこれらを凍結したもの」と定義されている。その成分規格は「無脂乳固形分８％以上、乳酸菌数又は酵母数（１ｍｌ当たり）１，０００万以上、大腸菌群陰性」とされている。なお、本明細書において乳酸菌数又はビフィズス菌数の単位は、ＣＦＵ（colony forming unit；コロニー形成単位）で表さ
れる。
また、乳等省令において、乳製品乳酸菌飲料とは「乳等を乳酸菌又は酵母で発酵させたものを加工し、又は主要原料とした飲料（発酵乳を除く。）」と定義されている。その成分規格は「無脂乳固形分３％以上、乳酸菌数又は酵母数（１ｍＬ当たり）１，０００万以上、大腸菌群陰性」とされている。
また、乳等省令において、乳等を主要原料とする食品の乳酸菌飲料とは「乳等を乳酸菌又は酵母で発酵させたものを加工し、又は主要原料とした飲料（発酵乳を除く。）」と定義されている。その成分規格は「無脂乳固形分３％未満、乳酸菌数又は酵母数（１ｍＬ当たり）１００万以上、大腸菌群陰性」とされている。
本発明における「発酵組成物」は、本発明の効果を損なわない範囲で、安定剤、甘味料、食物繊維、ビタミン、ミネラル、香料等を含有させてもよい。上記の安定剤としては特に限定されず、例えば、カラギーナン、キサンタンガム等が挙げられる。また、上記の甘味料としては特に限定されず、例えば、糖類、糖アルコール類、高甘味度甘味料等が挙げられ、これらの甘味料を１種又は２種以上組み合わせて用いることができる。
なお、本発明における「発酵組成物」が安定剤を含んでいる場合、かかる安定剤は発酵組成物全量に対して０．０１～０．５重量％や、０．１～０．３重量％であることが挙げられる。また、本発明における「発酵組成物」は、寒天やゼラチンを含んでいてもよく、寒天、ゼラチンの合計配合量（乾燥重量）は、発酵組成物全量に対して０．１～１重量％や０．２～０．５重量％であることが挙げられる。
なお、本発明における「発酵組成物」が安定剤を含んでいる場合、かかる安定剤は発酵組成物全量に対して０．０１～０．５重量％や、０．１～０．３重量％であることが挙げられる。また、本発明における「発酵組成物」は、寒天やゼラチンを含んでいてもよく、寒天、ゼラチンの合計配合量（乾燥重量）は、発酵組成物全量に対して０．１～１重量％や０．２～０．５重量％であることが挙げられる。
本発明における「発酵組成物」には、無脂乳固形分の濃度が例えば１～１８重量％、好ましくは２～１６重量％、より好ましくは２～１４重量％、さらに好ましくは４～１２重量％、６～１０重量％若しくは７～９重量％であり、及び／又は、乳脂肪分の濃度が例えば０～８重量％、好ましくは０．１～７重量％、より好ましくは０．５～４重量％又は１～３重量％であるものが好適に含まれる。
本発明における発酵組成物は、容器詰めされていることが好ましい。
「容器詰めされた」とは、容器（内）に充填され密封されたことをいう。容器は、発酵乳等の製造において一般的に用いられる容器が好ましく挙げられ、例えば、プラスチック製、ガラス製及び紙製等の容器が挙げられる。
「容器詰めされた」とは、容器（内）に充填され密封されたことをいう。容器は、発酵乳等の製造において一般的に用いられる容器が好ましく挙げられ、例えば、プラスチック製、ガラス製及び紙製等の容器が挙げられる。
（本発明の発酵組成物の製造方法）
本発明の製造方法としては、発酵組成物の製造方法において、
（Ａ）乳酸菌及びビフィドバクテリウム属細菌からなる群から選択される１種又は２種以上の細菌の生菌によって発酵物調製用乳原料を発酵させた発酵物を、発酵組成物製造用乳原料に添加する工程Ａ；又は、
（Ｂ）乳酸菌及びビフィドバクテリウム属細菌からなる群から選択される１種又は２種以上の細菌の生菌を発酵組成物製造用乳原料に添加して発酵させる工程Ｂ；
を含み、かつ、
（Ｃ）ラクトコッカス属細菌の死菌体を添加する工程Ｃ；を含む製造方法であって、製造される発酵組成物のｐＨが６．０～７．４、好ましくは６．４～７．４である、製造方法である限り特に制限されない。
本発明の製造方法としては、発酵組成物の製造方法において、
（Ａ）乳酸菌及びビフィドバクテリウム属細菌からなる群から選択される１種又は２種以上の細菌の生菌によって発酵物調製用乳原料を発酵させた発酵物を、発酵組成物製造用乳原料に添加する工程Ａ；又は、
（Ｂ）乳酸菌及びビフィドバクテリウム属細菌からなる群から選択される１種又は２種以上の細菌の生菌を発酵組成物製造用乳原料に添加して発酵させる工程Ｂ；
を含み、かつ、
（Ｃ）ラクトコッカス属細菌の死菌体を添加する工程Ｃ；を含む製造方法であって、製造される発酵組成物のｐＨが６．０～７．４、好ましくは６．４～７．４である、製造方法である限り特に制限されない。
上記工程Ａとしては、乳酸菌及びビフィドバクテリウム属細菌からなる群から選択される１種又は２種以上の細菌の生菌によって発酵物調製用乳原料を発酵させた発酵物を、発酵組成物製造用乳原料に添加する工程Ａである限り特に制限されない。
発酵物調製用乳原料を発酵させた発酵物の添加量としては、特に制限されないが、発酵物調製用乳原料を発酵させた発酵物を発酵組成物製造用乳原料に添加した場合に、かかる発酵組成物製造用乳原料中の乳酸菌等の生菌濃度が例えば１×１０６ｃｆｕ／ｍＬ以上、好ましくは１×１０６～１×１０９ｃｆｕ／ｍＬや、１×１０６～５×１０８ｃｆｕ／ｍＬとなるような添加量が好ましく挙げられる。
発酵物調製用乳原料を発酵させた発酵物の添加量としては、特に制限されないが、発酵物調製用乳原料を発酵させた発酵物を発酵組成物製造用乳原料に添加した場合に、かかる発酵組成物製造用乳原料中の乳酸菌等の生菌濃度が例えば１×１０６ｃｆｕ／ｍＬ以上、好ましくは１×１０６～１×１０９ｃｆｕ／ｍＬや、１×１０６～５×１０８ｃｆｕ／ｍＬとなるような添加量が好ましく挙げられる。
本発明の製造方法が工程Ａを含む場合、工程Ａの後に、発酵組成物製造用乳原料を発酵させる工程を含んでいなくてもよいし、含んでいてもよい。なお、発酵組成物製造後の冷蔵保存中に発酵が徐々に進行する場合があるが、そのような発酵は、本明細書でいう発酵させる工程には含めない。
工程Ａの後に発酵組成物製造用乳原料を発酵させる工程を含んでいる場合、発酵組成物のｐＨが６未満にならないような、比較的短い時間で発酵させることができる。
また、本発明の製造方法が工程Ａを含む場合、発酵物を添加することに加えて、乳酸菌等の生菌を別途、発酵物調製用乳原料に添加してもよい。
工程Ａの後に発酵組成物製造用乳原料を発酵させる工程を含んでいる場合、発酵組成物のｐＨが６未満にならないような、比較的短い時間で発酵させることができる。
また、本発明の製造方法が工程Ａを含む場合、発酵物を添加することに加えて、乳酸菌等の生菌を別途、発酵物調製用乳原料に添加してもよい。
上記工程Ｂとしては、乳酸菌及びビフィドバクテリウム属細菌からなる群から選択される１種又は２種以上の細菌の生菌を発酵組成物製造用乳原料に添加して発酵させる工程Ｂである限り特に制限されない。
乳酸菌等の生菌の添加量としては特に制限されず、適宜調整することができる。
発酵温度や発酵時間は、用いる乳酸菌等の至適生育温度や増殖速度、あるいは、目的とする発酵組成物の種類や商品設計などに応じて、当業者であれば適宜設定することができる。発酵時間としては、特に制限されないが、発酵組成物のｐＨが６．０～７．４、好ましくは６．４～７．４となるような発酵時間が挙げられる。かかる発酵時間として、例えば１～１０時間、１～６時間などが挙げられる
乳酸菌等の生菌の添加量としては特に制限されず、適宜調整することができる。
発酵温度や発酵時間は、用いる乳酸菌等の至適生育温度や増殖速度、あるいは、目的とする発酵組成物の種類や商品設計などに応じて、当業者であれば適宜設定することができる。発酵時間としては、特に制限されないが、発酵組成物のｐＨが６．０～７．４、好ましくは６．４～７．４となるような発酵時間が挙げられる。かかる発酵時間として、例えば１～１０時間、１～６時間などが挙げられる
上記工程Ａや工程Ｂにおける発酵組成物製造用乳原料としては、本明細書における乳原料である限り特に制限されないが、本発明の効果をより多く得る観点から、さらにｐＨ調整剤を含んでいることが好ましい。
発酵組成物製造用乳原料がｐＨ調整剤を含む場合の、ｐＨ調整剤の含有濃度は特に制限されず、調整するｐＨに応じて適宜調整することができるが、例えば、発酵組成物全量に対するｐＨ調整剤の濃度として、例えば０．０１～３重量％、０．１～２重量％などが挙げられる。
発酵組成物製造用乳原料のｐＨは特に制限されないが、７～８．５が好ましく挙げられる。
発酵組成物製造用乳原料がｐＨ調整剤を含む場合の、ｐＨ調整剤の含有濃度は特に制限されず、調整するｐＨに応じて適宜調整することができるが、例えば、発酵組成物全量に対するｐＨ調整剤の濃度として、例えば０．０１～３重量％、０．１～２重量％などが挙げられる。
発酵組成物製造用乳原料のｐＨは特に制限されないが、７～８．５が好ましく挙げられる。
上記工程Ｃとしては、ラクトコッカス属細菌の死菌体を添加する工程Ｃである限り特に制限されない。
前述したように、ラクトコッカス属細菌の死菌体は、発酵組成物を製造する際のいずれの工程で添加してもよく、例えば、乳原料の発酵工程前に、死菌体を乳原料に添加してもよいし、乳原料の発酵工程中に、死菌体を乳原料に添加してもよいし、乳原料の発酵工程の終了後に、死菌体を発酵組成物に添加してもよいが、乳原料の発酵工程前に、死菌体を乳原料に添加することや、乳原料の発酵工程中に、乳酸菌の死菌体を乳原料に添加することが好ましい。
なお、ラクトコッカス属細菌の死菌体は、ラクトコッカス属細菌の死菌体のみを乳原料に添加してもよいし、ラクトコッカス属細菌の死菌体を他の原材料と共に乳原料に添加してもよい。また、本明細書において、ラクトコッカス属細菌の死菌体を乳原料に添加することには、便宜上、乳原料をラクトコッカス属細菌の死菌体に添加することも含まれる。また、ラクトコッカス属細菌の死菌体を添加した後は混合することが好ましい。また、本発明において、ラクトコッカス属細菌の死菌体を添加する際、添加対象となる乳原料、発酵中の乳原料又は発酵後の発酵組成物はあらかじめ殺菌処理しておくことが好ましい。
前述したように、ラクトコッカス属細菌の死菌体は、発酵組成物を製造する際のいずれの工程で添加してもよく、例えば、乳原料の発酵工程前に、死菌体を乳原料に添加してもよいし、乳原料の発酵工程中に、死菌体を乳原料に添加してもよいし、乳原料の発酵工程の終了後に、死菌体を発酵組成物に添加してもよいが、乳原料の発酵工程前に、死菌体を乳原料に添加することや、乳原料の発酵工程中に、乳酸菌の死菌体を乳原料に添加することが好ましい。
なお、ラクトコッカス属細菌の死菌体は、ラクトコッカス属細菌の死菌体のみを乳原料に添加してもよいし、ラクトコッカス属細菌の死菌体を他の原材料と共に乳原料に添加してもよい。また、本明細書において、ラクトコッカス属細菌の死菌体を乳原料に添加することには、便宜上、乳原料をラクトコッカス属細菌の死菌体に添加することも含まれる。また、ラクトコッカス属細菌の死菌体を添加した後は混合することが好ましい。また、本発明において、ラクトコッカス属細菌の死菌体を添加する際、添加対象となる乳原料、発酵中の乳原料又は発酵後の発酵組成物はあらかじめ殺菌処理しておくことが好ましい。
（その他の任意工程）
本発明の製造方法は、工程Ａ及び工程Ｃ、又は、工程Ｂ又は工程Ｃを含んでいることの他に、任意の工程を含んでいてもよい。かかる任意工程としては、発酵組成物又は発酵物調製用乳原料などを容器に充填する工程が挙げられる。
本発明の製造方法が、工程Ｂ（発酵させる工程）を含んでいる場合、例えば、容器に発酵物調製用乳原料（又は、さらに乳酸菌等の生菌）を容器に充填してから発酵させる方法や、（いわゆる後発酵タイプ）、発酵組成物製造用乳原料を乳酸菌等で発酵させ、生じたカードを砕いて、これを容器に充填する方法（いわゆる前発酵タイプ）が挙げられる。
一方、本発明の製造方法が、工程Ａを含んでいる場合、例えば、発酵物調製用乳原料を発酵させた発酵物と、発酵組成物製造用乳原料とを、同時又は逐次に容器に充填する方法や、発酵物調製用乳原料を発酵させた発酵物を添加した発酵組成物製造用乳原料を容器に充填する方法が挙げられる。
本発明の製造方法は、工程Ａ及び工程Ｃ、又は、工程Ｂ又は工程Ｃを含んでいることの他に、任意の工程を含んでいてもよい。かかる任意工程としては、発酵組成物又は発酵物調製用乳原料などを容器に充填する工程が挙げられる。
本発明の製造方法が、工程Ｂ（発酵させる工程）を含んでいる場合、例えば、容器に発酵物調製用乳原料（又は、さらに乳酸菌等の生菌）を容器に充填してから発酵させる方法や、（いわゆる後発酵タイプ）、発酵組成物製造用乳原料を乳酸菌等で発酵させ、生じたカードを砕いて、これを容器に充填する方法（いわゆる前発酵タイプ）が挙げられる。
一方、本発明の製造方法が、工程Ａを含んでいる場合、例えば、発酵物調製用乳原料を発酵させた発酵物と、発酵組成物製造用乳原料とを、同時又は逐次に容器に充填する方法や、発酵物調製用乳原料を発酵させた発酵物を添加した発酵組成物製造用乳原料を容器に充填する方法が挙げられる。
なお、本発明の製造方法において、発酵組成物はｐＨが６．０～７．４、好ましくは６．４～７．４となるように製造される。発酵組成物のｐＨがかかる範囲内となる要因としては特に制限されるものではないが、本発明の製造方法が工程Ａ、工程Ｂのいずれを含む場合であっても、一般的な発酵乳などと比較して発酵の進行の程度が低いこと、所定量のｐＨ調整剤が使用されること、及び、ラクトコッカス属細菌の死菌体が添加されることからなる群から選択される１つ又は２つ以上の要因が考えられる。
（本発明の抑制方法）
本発明の抑制方法としては、発酵組成物の製造方法において、
（Ａ）乳酸菌及びビフィドバクテリウム属細菌からなる群から選択される１種又は２種以上の細菌の生菌によって発酵物調製用乳原料を発酵させた発酵物を、発酵組成物製造用乳原料に添加する工程Ａ；又は、
（Ｂ）乳酸菌及びビフィドバクテリウム属細菌からなる群から選択される１種又は２種以上の細菌の生菌を発酵組成物製造用乳原料に添加して発酵させる工程Ｂ；
を含み、かつ、
（Ｃ）ラクトコッカス属細菌の死菌体を添加する工程Ｃ；を含む
ことを特徴とする、
ｐＨが６．０～７．４の発酵組成物において、発酵組成物の製造後の冷蔵保存中の、酸味、酸臭の増大、ｐＨの低下及び／又は前記生菌の含有濃度（ｃｆｕ／ｍＬ）の低下を抑制する方法である限り特に制限されず、その他の任意工程をさらに含んでいてもよい。
本発明の抑制方法としては、発酵組成物の製造方法において、
（Ａ）乳酸菌及びビフィドバクテリウム属細菌からなる群から選択される１種又は２種以上の細菌の生菌によって発酵物調製用乳原料を発酵させた発酵物を、発酵組成物製造用乳原料に添加する工程Ａ；又は、
（Ｂ）乳酸菌及びビフィドバクテリウム属細菌からなる群から選択される１種又は２種以上の細菌の生菌を発酵組成物製造用乳原料に添加して発酵させる工程Ｂ；
を含み、かつ、
（Ｃ）ラクトコッカス属細菌の死菌体を添加する工程Ｃ；を含む
ことを特徴とする、
ｐＨが６．０～７．４の発酵組成物において、発酵組成物の製造後の冷蔵保存中の、酸味、酸臭の増大、ｐＨの低下及び／又は前記生菌の含有濃度（ｃｆｕ／ｍＬ）の低下を抑制する方法である限り特に制限されず、その他の任意工程をさらに含んでいてもよい。
上記工程Ａ～工程Ｃや、その他の任意工程等について、本発明の製造方法について説明したものと同様である。
（酸味、酸臭の増大が抑制された発酵組成物）
本発明の発酵組成物は、発酵組成物の製造後の冷蔵保存中の酸味、酸臭の増大が抑制された発酵組成物であることが好ましい。本明細書において、「酸味、酸臭の増大が抑制された」発酵組成物とは、乳酸菌の死菌体を添加しないこと、及び／又は、ｐＨ調整剤（好ましくは有機酸のナトリウム又はカリウム塩、及び、塩基から選択される１種又は２種以上のｐＨ調整剤）を添加しないこと（好ましくは、発酵組成物製造用乳原料のｐＨを７以上に調整しないこと）以外は、同種の乳原料を用いて同じ製造方法で製造した発酵組成物（以下、「本発明におけるコントロール発酵組成物」とも表示する）と比較して、酸味、酸臭の増大が抑制された発酵組成物を意味する。
本発明の発酵組成物は、発酵組成物の製造後の冷蔵保存中の酸味、酸臭の増大が抑制された発酵組成物であることが好ましい。本明細書において、「酸味、酸臭の増大が抑制された」発酵組成物とは、乳酸菌の死菌体を添加しないこと、及び／又は、ｐＨ調整剤（好ましくは有機酸のナトリウム又はカリウム塩、及び、塩基から選択される１種又は２種以上のｐＨ調整剤）を添加しないこと（好ましくは、発酵組成物製造用乳原料のｐＨを７以上に調整しないこと）以外は、同種の乳原料を用いて同じ製造方法で製造した発酵組成物（以下、「本発明におけるコントロール発酵組成物」とも表示する）と比較して、酸味、酸臭の増大が抑制された発酵組成物を意味する。
ある発酵組成物の製造後の冷蔵保存中の酸味、酸臭の増大の程度や、かかる酸味、酸臭の増大の程度が本発明におけるコントロール発酵組成物と比較してどのようであるか（例えば、抑制されているかどうか）は、訓練されたパネルであれば、容易かつ明確に決定することができる。評価の基準や、パネル間の評価のまとめ方は、一般的な方法を用いることができる。発酵組成物における酸味、酸臭の増大の程度を評価するパネルの人数は１名であってもよいが、客観性がより高い評価を得る観点から、パネルの人数の下限を、例えば３名以上、好ましくは５名以上とすることができ、また、評価試験をより簡便に実施する観点から、パネルの人数の上限を、例えば７名以下とすることができる。パネルが２名以上の場合の発酵組成物における酸味、酸臭の増大の程度の評価は、その発酵組成物における酸味、酸臭の増大の程度についてのパネル全員の評価の平均を採用してもよい。
（ｐＨの低下が抑制された発酵組成物）
本発明の発酵組成物は、発酵組成物の製造後の冷蔵保存中のｐＨの低下が抑制された発酵組成物であることが好ましい。本明細書において、「ｐＨの低下が抑制された」発酵組成物とは、上記の「本発明におけるコントロール発酵組成物」と比較して、ｐＨの低下が抑制された発酵組成物を意味する。
本発明の発酵組成物は、発酵組成物の製造後の冷蔵保存中のｐＨの低下が抑制された発酵組成物であることが好ましい。本明細書において、「ｐＨの低下が抑制された」発酵組成物とは、上記の「本発明におけるコントロール発酵組成物」と比較して、ｐＨの低下が抑制された発酵組成物を意味する。
本発明における、ｐＨの低下が抑制された発酵組成物として、より具体的には、製造直後であって、冷蔵保存前の発酵組成物のｐＨと比較した、冷蔵保存１４日後の発酵組成物のｐＨの低下の程度が１以下、好ましくは０．６以下である発酵組成物が好ましく挙げられる。
（乳酸菌等の生菌の含有濃度の低下が抑制された発酵組成物）
本発明の発酵組成物は、発酵組成物の製造後の冷蔵保存中の、乳酸菌等の生菌の含有濃度の低下が抑制された発酵組成物であることが好ましい。本明細書において、「乳酸菌等の生菌の含有濃度の低下が抑制された」発酵組成物とは、上記の「本発明におけるコントロール発酵組成物」と比較して、乳酸菌等の生菌の含有濃度の低下が抑制された発酵組成物を意味する。
本発明の発酵組成物は、発酵組成物の製造後の冷蔵保存中の、乳酸菌等の生菌の含有濃度の低下が抑制された発酵組成物であることが好ましい。本明細書において、「乳酸菌等の生菌の含有濃度の低下が抑制された」発酵組成物とは、上記の「本発明におけるコントロール発酵組成物」と比較して、乳酸菌等の生菌の含有濃度の低下が抑制された発酵組成物を意味する。
本発明における、乳酸菌等の生菌の含有濃度の低下が抑制された発酵組成物として、より具体的には、冷蔵保存１４日後の発酵組成物中の、乳酸菌及びビフィドバクテリウム属細菌からなる群から選択される１種又は２種以上の細菌の生菌の含有濃度（ｃｆｕ／ｍＬ）が、冷蔵保存前の発酵組成物中の前記細菌の生菌の含有濃度（ｃｆｕ／ｍＬ）に対して、０．２倍以上、好ましくは０．２～３０倍や、０．２～２５倍である発酵組成物が好ましく挙げられる。
（冷蔵保存）
本明細書における「冷蔵保存」としては、例えば１～１０℃、好ましくは４～１０℃や、１０℃が挙げられる。
本明細書における「冷蔵保存」としては、例えば１～１０℃、好ましくは４～１０℃や、１０℃が挙げられる。
以下に、本発明を実施例によって詳細に説明するが、本発明はこれらの実施例に限定されるものではない。
［試験１：比較例１］冷蔵保存中のｐＨ及び乳酸菌生菌濃度の変化の確認
発酵組成物の冷蔵保存中のｐＨ及び乳酸菌生菌濃度の変化を調べるために、以下の試験を行った。
発酵組成物の冷蔵保存中のｐＨ及び乳酸菌生菌濃度の変化を調べるために、以下の試験を行った。
（方法）
基質である牛乳（発酵物調製用乳原料）にラクトコッカス属乳酸菌生菌を添加した後、３０℃にて、前述の生菌濃度が１０の９乗オーダーの菌濃度（ｃｆｕ／ｍＬ）になるまで発酵を行って、発酵物を調製した。なお、本願実施例のすべての試験において、発酵物の乳酸菌数は、乳等省令別表の二、乳等の成分規格並びに製造、調理及び保存の方法の基準の部、（七）乳等の成分規格の試験法、（３）発酵乳及び乳酸菌飲料、３乳酸菌数の測定法、に記載される測定法にしたがって測定した。
基質である牛乳（発酵物調製用乳原料）にラクトコッカス属乳酸菌生菌を添加した後、３０℃にて、前述の生菌濃度が１０の９乗オーダーの菌濃度（ｃｆｕ／ｍＬ）になるまで発酵を行って、発酵物を調製した。なお、本願実施例のすべての試験において、発酵物の乳酸菌数は、乳等省令別表の二、乳等の成分規格並びに製造、調理及び保存の方法の基準の部、（七）乳等の成分規格の試験法、（３）発酵乳及び乳酸菌飲料、３乳酸菌数の測定法、に記載される測定法にしたがって測定した。
次いで、基質である牛乳（発酵組成物製造用乳原料）に、前述の発酵物（ラクトコッカス属乳酸菌生菌を１０の９乗オーダーの菌濃度（ｃｆｕ／ｍＬ）で含む発酵物）を３重量％又は７重量％添加及び混合して各発酵組成物サンプルを調製した。その後、各発酵組成物サンプルを１０℃条件下で冷蔵保存した。「冷蔵保存前」、「冷蔵保存開始から１４日後」、及び、「冷蔵保存開始から２８日後」の各発酵組成物サンプルについて、ｐＨ測定、及び、ラクトコッカス属乳酸菌生菌濃度の測定を行った。また、各発酵組成物サンプルについて、７名のパネルが酸味、酸臭の官能評価を行い、その平均的な評価をその発酵組成物サンプルについての総合コメントとした。これらの結果を以下の表１に示す。
（結果）
表１から分かるように、いずれの発酵組成物サンプルにおいても、冷蔵保存中にｐＨが低下し、冷蔵保存１４日後には冷蔵保存前と比較してｐＨが１．３以上低下した。また、冷蔵保存１４日後には酸味、酸臭が確認され、冷蔵保存２８日後には酸味、酸臭がさらに強くなった。なお、いずれのサンプルにおいても、冷蔵保存前のラクトコッカス属乳酸菌生菌濃度より高い生菌濃度が、冷蔵保存１４日後及び２８日後のいずれの時点でも維持されていた。
表１から分かるように、いずれの発酵組成物サンプルにおいても、冷蔵保存中にｐＨが低下し、冷蔵保存１４日後には冷蔵保存前と比較してｐＨが１．３以上低下した。また、冷蔵保存１４日後には酸味、酸臭が確認され、冷蔵保存２８日後には酸味、酸臭がさらに強くなった。なお、いずれのサンプルにおいても、冷蔵保存前のラクトコッカス属乳酸菌生菌濃度より高い生菌濃度が、冷蔵保存１４日後及び２８日後のいずれの時点でも維持されていた。
［試験２：比較例２］ｐＨが酸性域の発酵組成物の冷蔵保存中の乳酸菌生菌濃度の変化の確認
ｐＨが酸性域の発酵組成物を冷蔵保存した場合の、乳酸菌生菌濃度の変化を確認するために、以下の試験を行った。
ｐＨが酸性域の発酵組成物を冷蔵保存した場合の、乳酸菌生菌濃度の変化を確認するために、以下の試験を行った。
（方法）
基質である牛乳（発酵組成物製造用乳原料）に、ラクトコッカス属乳酸菌生菌を添加して、１０の９乗のオーダーの菌濃度（ｃｆｕ／ｍＬ）になるまで３０℃で発酵させ、ｐＨ４．３の発酵組成物サンプルを調製した。かかる発酵組成物サンプルを１０℃条件下で冷蔵保存した。「冷蔵保存前」、「冷蔵保存開始から１４日後」、及び、「冷蔵保存開始から２８日後」において、発酵組成物サンプル中のラクトコッカス属乳酸菌生菌濃度の測定を行った。その結果を以下の表２に示す。
基質である牛乳（発酵組成物製造用乳原料）に、ラクトコッカス属乳酸菌生菌を添加して、１０の９乗のオーダーの菌濃度（ｃｆｕ／ｍＬ）になるまで３０℃で発酵させ、ｐＨ４．３の発酵組成物サンプルを調製した。かかる発酵組成物サンプルを１０℃条件下で冷蔵保存した。「冷蔵保存前」、「冷蔵保存開始から１４日後」、及び、「冷蔵保存開始から２８日後」において、発酵組成物サンプル中のラクトコッカス属乳酸菌生菌濃度の測定を行った。その結果を以下の表２に示す。
（結果）
表２の結果から、ｐＨが酸性域の発酵組成物サンプルを冷蔵保存すると、乳酸菌生菌濃度が低下することが示された。
表２の結果から、ｐＨが酸性域の発酵組成物サンプルを冷蔵保存すると、乳酸菌生菌濃度が低下することが示された。
［試験３：実施例１］冷蔵保存中のｐＨ及び乳酸菌生菌濃度の変化への、乳酸菌死菌体及びｐＨ調整剤の添加による影響の確認
発酵組成物に乳酸菌死菌体やｐＨ調整剤を添加すると、発酵組成物の冷蔵保存中のｐＨ及び乳酸菌生菌濃度の変化に対してどのような影響がでるかを調べるために、以下の試験を行った。
発酵組成物に乳酸菌死菌体やｐＨ調整剤を添加すると、発酵組成物の冷蔵保存中のｐＨ及び乳酸菌生菌濃度の変化に対してどのような影響がでるかを調べるために、以下の試験を行った。
（方法）
基質である牛乳（発酵物調製用乳原料）にラクトコッカス属乳酸菌生菌を添加した後、３０℃にて、前述の生菌濃度が１０の９乗オーダーの菌濃度（ｃｆｕ／ｍＬ）になるまで発酵を行って、発酵物を調製した。
次いで、基質である牛乳（発酵組成物製造用乳原料）に、ラクトコッカス属乳酸菌死菌体を１×１０９個／ｇ添加し、及び、ｐＨ調整剤であるクエン酸三ナトリウムを１重量％添加してｐＨ調整した上で、前述の発酵物（ラクトコッカス属乳酸菌生菌を１０の９乗オーダーの菌濃度（ｃｆｕ／ｍＬ）で含む発酵物）を０．５重量％、１．０重量％又は１．５重量％添加及び混合して各発酵組成物サンプルを調製した後、１０℃条件下で冷蔵保存した。「冷蔵保存前」、及び、「冷蔵保存開始から１４日後」の各発酵組成物サンプルについて、ｐＨ測定、及び、ラクトコッカス属乳酸菌生菌濃度の測定を行った。また、各発酵組成物サンプルについて、７名のパネルが酸味、酸臭の官能評価を行い、その平均的な評価をその発酵組成物サンプルについての総合コメントとした。これらの結果を以下の表３に示す。
基質である牛乳（発酵物調製用乳原料）にラクトコッカス属乳酸菌生菌を添加した後、３０℃にて、前述の生菌濃度が１０の９乗オーダーの菌濃度（ｃｆｕ／ｍＬ）になるまで発酵を行って、発酵物を調製した。
次いで、基質である牛乳（発酵組成物製造用乳原料）に、ラクトコッカス属乳酸菌死菌体を１×１０９個／ｇ添加し、及び、ｐＨ調整剤であるクエン酸三ナトリウムを１重量％添加してｐＨ調整した上で、前述の発酵物（ラクトコッカス属乳酸菌生菌を１０の９乗オーダーの菌濃度（ｃｆｕ／ｍＬ）で含む発酵物）を０．５重量％、１．０重量％又は１．５重量％添加及び混合して各発酵組成物サンプルを調製した後、１０℃条件下で冷蔵保存した。「冷蔵保存前」、及び、「冷蔵保存開始から１４日後」の各発酵組成物サンプルについて、ｐＨ測定、及び、ラクトコッカス属乳酸菌生菌濃度の測定を行った。また、各発酵組成物サンプルについて、７名のパネルが酸味、酸臭の官能評価を行い、その平均的な評価をその発酵組成物サンプルについての総合コメントとした。これらの結果を以下の表３に示す。
（結果）
表３から分かるように、いずれの発酵組成物サンプルにおいても、冷蔵保存中にｐＨがやや低下したものの、ｐＨは６．４以上の中性域に維持された。すなわち、冷蔵保存１４日後のｐＨは、冷蔵保存前と比較して０．６以下の低下にとどまった。また、冷蔵保存１４日後の発酵組成物サンプルにおいて、酸味、酸臭は感じられないか、あるいは、きわめてかすかに感じられるかどうかという程度であった。また、いずれの発酵組成物サンプルにおいても、冷蔵保存前のラクトコッカス属乳酸菌生菌濃度より高い生菌濃度が、冷蔵保存１４日後の時点でも維持されていた。
これらのことから、ラクトコッカス属乳酸菌死菌体やｐＨ調整剤を添加すると、冷蔵保存中の「ｐＨの低下」及び「酸味、酸臭の増大」が抑制されることが示された。
表３から分かるように、いずれの発酵組成物サンプルにおいても、冷蔵保存中にｐＨがやや低下したものの、ｐＨは６．４以上の中性域に維持された。すなわち、冷蔵保存１４日後のｐＨは、冷蔵保存前と比較して０．６以下の低下にとどまった。また、冷蔵保存１４日後の発酵組成物サンプルにおいて、酸味、酸臭は感じられないか、あるいは、きわめてかすかに感じられるかどうかという程度であった。また、いずれの発酵組成物サンプルにおいても、冷蔵保存前のラクトコッカス属乳酸菌生菌濃度より高い生菌濃度が、冷蔵保存１４日後の時点でも維持されていた。
これらのことから、ラクトコッカス属乳酸菌死菌体やｐＨ調整剤を添加すると、冷蔵保存中の「ｐＨの低下」及び「酸味、酸臭の増大」が抑制されることが示された。
［試験４：実施例２］他の種の乳酸菌を用いた場合の効果の確認
ラクトコッカス属乳酸菌以外の種の乳酸菌生菌を用いた場合であっても、ラクトコッカス属乳酸菌死菌体を添加することによる、冷蔵保存中の「ｐＨの低下」及び「酸味、酸臭の増大」に対する抑制効果が得られるかを確認するために以下の試験を行った。
ラクトコッカス属乳酸菌以外の種の乳酸菌生菌を用いた場合であっても、ラクトコッカス属乳酸菌死菌体を添加することによる、冷蔵保存中の「ｐＨの低下」及び「酸味、酸臭の増大」に対する抑制効果が得られるかを確認するために以下の試験を行った。
基質である牛乳（発酵物調製用乳原料）にストレプトコッカス属乳酸菌生菌を添加した後、４０℃にて、前述の生菌濃度が１０の８乗オーダーの菌濃度（ｃｆｕ／ｍＬ）になるまで発酵を行って、発酵物を調製した。
次いで、基質である牛乳（発酵組成物製造用乳原料）に、ラクトコッカス属乳酸菌死菌体を１×１０９個／ｇ添加し、次いで、前述の発酵物（ストレプトコッカス属乳酸菌生菌を１０の８乗オーダーの菌濃度（ｃｆｕ／ｍＬ）で含む発酵物）を３重量％、６重量％、９重量％添加及び混合して各発酵組成物サンプルを調製した後、１０℃条件下で冷蔵保存した。「冷蔵保存前」、「冷蔵保存開始から１４日後」、及び、「冷蔵保存開始から２８日後」の各サンプルについて、ｐＨ測定、及び、ストレプトコッカス属乳酸菌生菌濃度の測定を行った。また、各発酵組成物サンプルについて、７名のパネルが酸味、酸臭の官能評価を行い、その平均的な評価をその発酵組成物サンプルについての総合コメントとした。これらの結果を以下の表４に示す。
次いで、基質である牛乳（発酵組成物製造用乳原料）に、ラクトコッカス属乳酸菌死菌体を１×１０９個／ｇ添加し、次いで、前述の発酵物（ストレプトコッカス属乳酸菌生菌を１０の８乗オーダーの菌濃度（ｃｆｕ／ｍＬ）で含む発酵物）を３重量％、６重量％、９重量％添加及び混合して各発酵組成物サンプルを調製した後、１０℃条件下で冷蔵保存した。「冷蔵保存前」、「冷蔵保存開始から１４日後」、及び、「冷蔵保存開始から２８日後」の各サンプルについて、ｐＨ測定、及び、ストレプトコッカス属乳酸菌生菌濃度の測定を行った。また、各発酵組成物サンプルについて、７名のパネルが酸味、酸臭の官能評価を行い、その平均的な評価をその発酵組成物サンプルについての総合コメントとした。これらの結果を以下の表４に示す。
（結果）
表４から分かるように、いずれの発酵組成物サンプルにおいても、冷蔵保存中において、ｐＨは６．５以上の中性域に維持された。また、冷蔵保存１４日後、２８日後のいずれの発酵組成物サンプルにおいても、酸味、酸臭は感じられなかった。また、いずれの発酵組成物サンプルにおいても、冷蔵保存前のストレプトコッカス属乳酸菌生菌濃度より高い生菌濃度が、冷蔵保存１４日後及び２８日後の時点でも維持されていた。
これらのことから、ラクトコッカス属乳酸菌以外の種の乳酸菌生菌を用いた場合であっても、ラクトコッカス属乳酸菌死菌体を添加すると、冷蔵保存中の「ｐＨの低下」及び「酸味、酸臭の増大」が抑制されることが示された。
表４から分かるように、いずれの発酵組成物サンプルにおいても、冷蔵保存中において、ｐＨは６．５以上の中性域に維持された。また、冷蔵保存１４日後、２８日後のいずれの発酵組成物サンプルにおいても、酸味、酸臭は感じられなかった。また、いずれの発酵組成物サンプルにおいても、冷蔵保存前のストレプトコッカス属乳酸菌生菌濃度より高い生菌濃度が、冷蔵保存１４日後及び２８日後の時点でも維持されていた。
これらのことから、ラクトコッカス属乳酸菌以外の種の乳酸菌生菌を用いた場合であっても、ラクトコッカス属乳酸菌死菌体を添加すると、冷蔵保存中の「ｐＨの低下」及び「酸味、酸臭の増大」が抑制されることが示された。
本発明によれば、乳酸菌等の生菌を一定濃度以上で含有し、かつ、ｐＨが中性域である発酵組成物であって、製造後の冷蔵保存中の「酸味、酸臭の増大」、「ｐＨの低下」及び／又は「乳酸菌等の生菌濃度（ｃｆｕ／ｍＬ）の低下」が抑制された発酵組成物、及びその製造方法等を提供することことができる。
Claims (8)
- （ａ）１×１０６ｃｆｕ／ｍＬ以上の、乳酸菌及びビフィドバクテリウム属細菌からなる群から選択される１種又は２種以上の細菌の生菌、（ｂ）乳原料及び／又は乳原料の発酵物、及び、（ｃ）ラクトコッカス属細菌の死菌体を含有し、ｐＨが６．０～７．４である発酵組成物。
- （Ａ）乳酸菌及びビフィドバクテリウム属細菌からなる群から選択される１種又は２種以上の細菌の生菌によって発酵物調製用乳原料を発酵させた発酵物を、発酵組成物製造用乳原料に添加する工程Ａ；又は、
（Ｂ）乳酸菌及びビフィドバクテリウム属細菌からなる群から選択される１種又は２種以上の細菌の生菌を発酵組成物製造用乳原料に添加して発酵させる工程Ｂ；
を含み、かつ、
（Ｃ）ラクトコッカス属細菌の死菌体を添加する工程Ｃ；を含む製造方法により製造された、ｐＨが６．０～７．４の発酵組成物。 - ラクトコッカス属細菌の死菌体の含有濃度が、１×１０８～１×１０１０個／ｇである請求項１又は２に記載の発酵組成物。
- 発酵組成物がｐＨ調整剤をさらに含有するか、又は、発酵組成物製造用乳原料がｐＨ調整剤が添加された乳原料である、請求項１～３のいずれかに記載の発酵組成物。
- 乳酸菌及びビフィドバクテリウム属細菌からなる群から選択される１種又は２種以上の細菌の生菌が、ラクトコッカス属細菌、ストレプトコッカス属細菌、ラクトバシラス属細菌、及び、ビフィドバクテリウム属細菌からなる群から選択される１種又は２種以上の生菌である、請求項１～４のいずれかに記載の発酵組成物。
- 冷蔵保存前の発酵組成物のｐＨと、冷蔵保存１４日後の発酵組成物のｐＨの差が１未満である、請求項１～５のいずれかに記載の発酵組成物。
- 発酵組成物の製造方法において、
（Ａ）乳酸菌及びビフィドバクテリウム属細菌からなる群から選択される１種又は２種以上の細菌の生菌によって発酵物調製用乳原料を発酵させた発酵物を、発酵組成物製造用乳原料に添加する工程Ａ；又は、
（Ｂ）乳酸菌及びビフィドバクテリウム属細菌からなる群から選択される１種又は２種以上の細菌の生菌を発酵組成物製造用乳原料に添加して発酵させる工程Ｂ；
を含み、かつ、
（Ｃ）ラクトコッカス属細菌の死菌体を添加する工程Ｃ；を含む
ことを特徴とする、
発酵組成物の製造後の冷蔵保存中の、酸味、酸臭の増大、ｐＨの低下及び／又は前記生菌の含有濃度（ｃｆｕ／ｍＬ）の低下が抑制された、ｐＨが６．０～７．４の発酵組成物の製造方法。 - 発酵組成物の製造方法において、
（Ａ）乳酸菌及びビフィドバクテリウム属細菌からなる群から選択される１種又は２種以上の細菌の生菌によって発酵物調製用乳原料を発酵させた発酵物を、発酵組成物製造用乳原料に添加する工程Ａ；又は、
（Ｂ）乳酸菌及びビフィドバクテリウム属細菌からなる群から選択される１種又は２種以上の細菌の生菌を発酵組成物製造用乳原料に添加して発酵させる工程Ｂ；
を含み、かつ、
（Ｃ）ラクトコッカス属細菌の死菌体を添加する工程Ｃ；を含む
ことを特徴とする、
ｐＨが６．０～７．４の発酵組成物において、発酵組成物の製造後の冷蔵保存中の、酸味、酸臭の増大、ｐＨの低下及び／又は前記生菌の含有濃度（ｃｆｕ／ｍＬ）の低下を抑制する方法。
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Citations (2)
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- 2021-12-15 JP JP2021203339A patent/JP2023088538A/ja active Pending
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