BR112012019725A2 - usos de uma composição farmacêutica e uso de pelo menos um progestogênio - Google Patents

Abstract

USOS DE UMA COMPOSIÇÃO FARMACÊUTICA E USO DE PELO MENOS UM PROGESTOGÊNIO. São fornecidos métodos e kits para administração de progestogênio como um sensibilizador de glicocorticoide para restabelecer a sensibilidade a corticosteroide ou reverter a insensibilidade a glicocorticoide ou aumentar a sensibilidade a glicocorticoide, a fim de tratar uma ou mais doenças ou condições relacionadas à insensibilidade a glicocorticoide. Por exemplo, esses incluem métodos para reverter a insensibilidade a glicocorticoide em um sujeito que não tem histórico da exacerbação relacionada ao ciclo menstrual ou alergia a auto-hormônios, particulamente progestorona, como deterioração pré-menstrual ou perimenstrual nos sintomas, por exemplo, agravamento pré-menstrual de dermatite atópica ou exacerbações de asma pré-menstrual, e que exibem respostas relativamente ou totalmente refratárias à terapia com glicocorticoide, por exemplo, resistência a glicocorticoide. Os métodos a kits fornecem a administração de um hormônio sexual para o sujeito que é dependente de corticosteroide ou resistente a corticoide, ou não responsivo ou intolerantes a corticosteroide, ou intolerante a corticosteroide.

Description

-"Mh mo Ac maço mo memo ca E FATO O eee meme co ERA A o mo meet pe e tr Dt res O Na - 1 à kJ . “USOS DE UMA COMPOSIÇÃO FARMACÊUTICA E USO DE PELO MENOS is UM PROGESTOGÊNIO” Este pedido reivindica prioridade para o pedido provisório de patente US número de série 61/302.325, que foi depositado em 8 de fevereiro de 2010, cuja divulgação completa é incorporada ao presente pedido como referência.

CAMPO DA INVENÇÃO A insensibilidade a glicocorticoide apresenta um problema de gerenciamento profundo em doenças/condições tratadas com glicocorticoides devido à terapia não ser efetiva. A presente invenção refere-se a métodos e kits para administração de progestogênio como um sensibilizador de glicocorticoide para restabelecer a sensibilidade a corticosteroide ou reverter a insensibilidade a glicocorticoide ou aumentar a sensibilidade a glicocorticoide, a fim de tratar uma ou mais doenças ou condições relacionadas à insensibilidade a glicocorticoide. Por exemplo, a presente invenção refere-se a métodos para reverter a insensibilidade a glicocorticoide num sujeito que não tem histórico de exacerbação relacionada ao ciclo menstrual ou alergia a auto-hormônios, particularmente — progesterona, como deterioração pré-menstrual ou perimenstrual nos sintomas, por exemplo, agravamento pré-menstrual de dermatite atópica ou exacerbações de asma pré-menstrual, e que exibem respostas relativamente ou totalmente refratárias à terapia com glicocorticoide, | por exemplo, resistência a glicocorticoides. Os métodos e os kits da presente | invenção fornecem a administração de um hormônio sexual para o sujeito que é dependente de corticosteroide ou resistente, não responsivo ou intolerantes a — corticosteroide.

ANTECEDENTES DA INVENÇÃO Os glicocorticoides são o tratamento de primeira linha para várias doenças imunoinflamatórias e alérgicas. Por exemplo, as doenças autoimunes

' ND 2 : incluem mais de 70 doenças crônicas que afetam cerca de 5% da população : dos EUA, e incluem aquelas que ocorrem mais em mulheres (> 80%), como síndrome de Sjôgren, SLE, doença da tiroide autoimune (tiroidite de Hashimoto e também a doença de Graves) e esclerodermia, ou relativamente comuns entreasmulheres (60 a 75%), como artrite reumatoide (RA), esclerose múltipla (MS) e miastenia grave, ou as que ocorrem em uma razão semelhante entre mulheres e homens, como sarcoide e doenças inflamatórias intestinais. A insensibilidade a glicocorticoide apresenta um problema de gerenciamento profundo nessas doenças/condições tratadas com esteroides, e 20 a 40 por centodos pacientes podem não conseguir controlar a doença. A insensibilidade a glicocorticoide pode se apresentar como relativamente ou totalmente refratária à terapia com glicocorticoide; não responsiva ou intolerante a corticosteroides, não responsiva a uma dose de indução adequada corticosteroides, inicialmente responsiva a corticosteroides, mas com rápida recidiva mediante retirada da droga ou diminuição da dose (corticosteroide dependente); resistente a corticoide, por exemplo, necessita de tratamento com uma dose muito alta, ou “difícil de tratar” ou condição grave. Por exemplo, 20 a 30% dos pacientes com doença de Crohn grave e resistente a esteroide não respondem à terapia com esteroide (Michetti P, Mottet C, Juillerat P, Felley C, Vader J-P, Bumand B, Gonvers J-J, Froehlich F: Severe and Steroid-Resistant Crohn's Disease. Digestion 2005;71:19-25).

Doenças/condições — relacionadas — à insensibilidade — a glicocorticoide podem incluir: doença inflamatória do intestino refratária, como colite ulcerativa refratária e crianças com doença de Crohn grave, asma refratária a corticosteroide ou asma resistente a glicocorticoide ou asma sintomática dependente de corticoide, pneumonia intersticial descamativa | refratária a corticosteroide, miopatias refratárias inflamatórias, miastenia grave refratária, pênfigo vulgar refratário, pacientes com RA refratários a metotrexato, EE o o ut o a oo oo o e H NR sindrome nefrótica refratária em adultos, lúpus eritematoso sistêmico : dependente de corticosteroide (SLE), síndrome de Sjôgren primária, vasculite sistêmica e polimiosite, doença do enxerto contra hospedeiro, esclerose múltipla refratária ou dependente de corticosteroide, doença similar a psilose refratária, sarcoidose resistente a esteroide, lesões de mucosa refratária de pênfigo vulgar, síndrome de Schnitzler refratária, dermatite resistente da | cabeça e pescoço, dermatite atópica grave refratária, púrpura trombocitopênica idiopática refratária, miosite orbital refratária, linfomas refratários ou | recorrentes, pacientes criticamente doentes com sepse ou síndrome do desconforto respiratório agudo (ARDS) ou insuficiência adrenal relativa, condições dependentes de corticosteroide (por exemplo, rosácea, polimialgia reumática, arterite de células gigantes, polimiosite, dermatomiosite, síndrome de Kawasaki, síndrome de Guillain-Barré, polineuropatia desmielinizante inflamatória crônica, neuropatia motora multifocal, síndrome da pessoa rígida).

A insensibilidade a glicocorticoide tem sérios custos de saúde, social e econômico. Por exemplo, uma pequena porcentagem de pacientes com asma (5 a 10%) têm condição refratária a corticosteroide grave que muitas vezes deixa de responder, mas esses pacientes são responsáveis por > 50% do total dos custos na saúde para asma.

Os glicocorticoides suprimem a inflamação principalmente como resultado de ambos, ativação de genes anti-inflamatórios e supressão de | genes pró-inflamatórios. A ativação da expressão gênica anti-inflamatória começa quando o glicocorticoide se liga aos receptores de glicocorticoide | citosólicos (GR), que é ativado e translocado para o núcleo. Uma vez no | 25 núcleo, este se liga a elementos de resposta de glicocorticoide (GREs) e moléculas coativadoras de transcrição, e induzem acetilação das histonas do núcleo, o que leva à expressão de genes anti-inflamatórios. Estímulos inflamatórios ligam múltiplos genes inflamatórios que codificam citocinas, sn— E La Mn quimiocinas, moléculas de adesão, enzimas inflamatórias e receptores através NM de fatores de transcrição pró-inflamatórios, como fator nuclear KB (NFKB) e proteína 1 ativadora, e o recrutamento de moléculas corepressoras. Os receptores de glicocorticoide ativados se ligam aos coativadores no núcleo para inibir a atividade de histona (HAT) diretamente e recrutar histona desacetilase 2 (HDAC2), levando à supressão dos genes inflamatórios ativados. Vários possíveis mecanismos moleculares de resistência a glicocorticoide foram reconhecidos, e incluem predisposição genética, falta ou defeito de ligação a GR e translocação, expressão de GR reduzida, falta de atividade corepressora, ou aumento de ativação de vias inflamatórias. Por exemplo, receptores de glicocorticoide podem ser fosforilados por várias quinases (por exemplo, proteína quinase ativada por mitógeno p38, quinase N- terminal c-Jun e quinase regulada por sinal extracelular) que resulta na ligação defeituosa, alterações na sua estabilidade, translocação para o núcleo, ligação ao DNA e interação com outras proteínas. A ativação excessiva da proteína 1 do ativador do fator de transcrição pode impedir a ligação de GRs a elementos de resposta de glicocorticoide (GREs) ou inibir o fator x«B nuclear; o óxido nítrico (NO) pode nitratar resíduos de tirosina em GRs; GRs também podem ser ubiquitinados (UB), o que resulta em degradação de GR pelo proteassoma; expressão de histona desacetilase-2 (HDAC2) reduzida, aumento do fator inibidor de migração de macrófagos, e aumento de efluxo de droga mediado por glicoproteína P (Peter J Barnes, lan M Adcock. Glucocorticoid resistance in inflammatory diseases. Lancet 2009; 373 : 1905-17). Os mecanismos clínicos e biológicos da dependência de esteroide não são bem compreendidos em comparação com aqueles que determinam | resistência a esteroide. A dependência de esteroides e resistência a esteroide podem compartilhar alguns mecanismos intrínsecos comuns, enquanto outros

E y mecanismos são simplesmente clínicos ou farmacológicos.

Í Muitas tentativas têm sido feitas para melhorar os efeitos de insensibilidade a glicocorticoide. Uma abordagem comum é o uso de tratamentos — anti-inflamatórios de largo espectro, como tratamentos 5 —imunossupressores ou agentes imunomoduladores (por exemplo, ciclosporina, metotrexato, ouro, 6-mercaptopurina, produtos biológicos, como imunoglobulina intravenosa e mepolizumabe), e inibidores da calcineurina (por exemplo, ciclosporina, tacrolimus). Várias abordagens foram propostas ou desenvolvidos para reverter a resistência a glicocorticoide, como, inibidores de quinase MAP p38, inibidores de JNK (diminuir API), vitamina D em asma resistente a esteroide (aumento de células T reguladoras), inibidores MIF, ativadores de histona desacetilase 2, teofilina, inibidores de fosfoinositida-3-quinase-ô, antioxidantes, inibidores iNOS e inibidores de glicoproteína-P. O uso de progesterona para reverter a insensibilidade a glicocorticoide não foi discutido ou apresentado em qualquer lugar, e a presente invenção representa um avanço significativo, surpreendente e inesperado na técnica.

As diferentes abordagens para o gerenciamento de insensibilidade a glicocorticoide tiveram sucesso limitado. Alguns agentes podem trabalhar em uma condição, mas não em outras. O metotrexato é efetivo para artrite reumatoide, mas pode não ser efetivo em casos de doença inflamatória do intestino resistente a glicocorticoide, causada por expressão aumentada de glicoproteina-P. De maneira similar, os inibidores de calcineurina são úteis em alguns pacientes com doença inflamatória do intestino resistente a glicocorticoide, mas eles não provaram ser efetivos na asma resistente a glicocorticoide. Além disso, os usos desses agentes são frequentemente associados aos eventos adversos significativos. Uma porcentagem elevada de pacientes (60 a 70%) pode falhar no tratamento com | o metotrexato devido aos efeitos colaterais. Inibidores de fosfodiesterase-4 e y para COPD e condições inflamatórias têm dose efeitos colaterais dose-limitante o como náuseas, diarreia e dores de cabeça.

A toxicidade significativa e os efeitos colaterais têm dificultado os programas de desenvolvimento de drogas para inibidores de MAP-quinase p38 e inibidores seletivos para bloquear a inibição de NFKB quinase (IKKP/NFKB (Peter J Barnes, lan M Adcock.

Glucocorticoid resistance in inftammatory diseases.

Lancet 2009; 373: 1905-17). Visto que uma proporção considerável de pacientes com doenças autoimunes, alérgicas e linfoproliferativas são refratárias à terapia com glicocorticoide, bem como diversas doenças inflamatórias compartilham mecanismos moleculares semelhantes de insensibilidade a glicocorticoide, existe uma necessidade não satisfeita até agora na técnica para métodos para desenvolvimento de uma estratégia terapêutica comum para reverter a insensibilidade a esteroide.

O uso de progestogênio, de acordo com a presente invenção, foi revelado para apresentar um método surpreendente, inesperado, e também prático para ajudar os pacientes com doenças/condições que não respondem ou são intolerantes aos corticosteroides ou dependentes de corticosteroides e resistentes.

Produtos de progestogênio foram extensivamente usados em uma grande variedade de doenças/condições reprodutivas por mais de 60 anos, e são conhecidos por terem efeitos anti-inflamatórios.

A maioria dos estudos relacionados com respostas inflamatórias foram conduzidos modelos associados a gravidez.

Progesterone/PR Maintains Uterine Quiescence via Antiinftammatory Actions (Carole R.

Mendelson.

Minireview: Fetal-Matemal Hormonal Signaling in Pregnancy and Labor Molecular Endocrinology 23: 947- —954,2009). Gellersen (2009) forneceu uma revisão abrangente de ações não genômicas de progesterona e resumiu os possíveis mecanismos efeitos anti- inflamatórios de progesterona, incluindo que a progesterona se opõe à | produção de prostaglandina no útero na gestação, em parte por inibição da — Ps cppsss————====

| 7 ! expressão de ciclo-oxigenase (COX-2); função imunorreguladora em linfócitos Í T humanos através de ativação de proteína G e inibição de canais de K+; o fator de bloqueio induzida por progesterona (PIBF) atua sobre a enzima fosfolipase A2, interfere no metabolismo do ácido araquidônico, induz uma resposta imune influenciada por Th2 e exerce um efeito antiabortivo por controle da atividade de NK (Gellersen B et a/. Non-genomic progesterone actions in female reproduction Human Reproduction Update, Vol.15, No. | páginas 1 19-138, 2009). Outra revisão por Challies (2009) sugere outros possíveis mecanismos: a progestorona bloqueia a proliferação de linfócitos estimulada por mitógeno, modula a produção de anticorpo, explosão oxidativa de monócitos, reduz a produção de citocinas pró-inflamatórias por macrófagos em resposta a produtos bacterianos, e altera a secreção de citocina de clones de células T para favorecer a produção de IL-10, suprarregula a expressão de receptor 4 similar a Toll (TLR4) e suprime resposta TLR-2 à infecção em tecidos intrauterinos, resultando em um papel protetor em relação ao parto prematuro, inibe expressão de metaloproteinases (MMP)-l e MMP-3 basal e de matriz aumentada por citocina em cultura de células deciduais demonstrando proteção contra a prematuridade (Challis JR et al.

Inftammation and Pregnancy Reproductive Sciences 2009; 16; 206). Uma vez que o conceito de uso de progestogênio para a reversão da insensibilidade a glicocorticoide não foi divulgado, ensinado, sugerido, discutido ou apresentado em qualquer lugar, presente a revelação representa um avanço significativo e inesperado na técnica.

A exacerbação relacionada ao ciclo menstrual de condições médicas comuns é um fenômeno bem conhecido, e pode incluir enxaqueca, epilepsia, asma, síndrome do intestino irritável, dermatite de progesterona autoimune e estomatite, e diabetes.

A exacerbação é influenciada por | alterações hormonais do ciclo menstrual.

A maioria desses efeitos ocorre a a a as a a a O

| | 8 E; durante as fases lútea e menstrual do ciclo. Por exemplo, a asma pré- menstrual indica um agravamento dos sintomas da asma, pouco antes e/ou durante a menstruação. A documentação precisa dos sintomas em um calendário menstrual permite a identificação de mulheres com alterações cíclicas na atividade da doença. Hormônios esteroides sexuais femininos desempenham um papel importante, mas o mecanismo exato ainda é desconhecido. Existem várias teorias para explicar esses efeitos relacionados ao ciclo menstrual. Essas incluem flutuações nos níveis de esteroides sexuais, alterações cíclicas no sistema imune, aumento da hiper-reatividade das vias aéreas, alterações na percepção de gravidade da doença provocada por alterações de humor pré-menstruais, como visto na síndrome pré-menstrual, e alergia à auto-hormônios particularmente progesterona. A exacerbação do ciclo do menstrual pode ser melhorada pela suplementação de progesterona [Allison M. Case and Robert L. Reid. Menstrual cycle effects on common medical conditions Journal Comprehensive Therapy Issue Volume 27, número 1/Março, 2001; Beynon HL. Severe premenstrual exacerbations of asthma: effect of intramuscular progesterone. Lancet - 13 de agosto de 1988, 2 (8607): 370-2; Roby, Russell R et al. Sublingual progesterone dilutions as bronchodilator in asthmatic females. World Alleray Organization Journal: November 2007 - Volume -Edição-pS 148].

Acredita-se que a insensibilidade a glicocorticoides muitas vezes se correlaciona com outros fatores que podem contribuir para respostas relativamente ou totalmente refratárias à terapia com glicocorticoide. Essas incluem os vários fatores de risco apontados acima, como a susceptibilidade — genética, anormalidades no gene do receptor de glicocorticoide, infecção viral e stress oxidativo. Por exemplo, dano oxidativo no DNA é conhecido por ser a principal causa do processo de mutação e uma das principais causas de envelhecimento, câncer e outras doenças, porque a guanina, um dos quatro

| 9 "o nucleotídeos básicos que compõem o DNA e formam o código genético da ' vida, é particularmente sensível a danos oxidativos e um número predominante de mutações genéticas está ligado à guanina. Assim, existe uma necessidade na técnica para métodos de redução da ocorrência de condições relacionadas à insensibilidade a glicocorticoide (por exemplo, asma refratária, artrite reumatoide refratária, doença intestinal inflamatória refratária, doença pulmonar obstrutiva crônica e síndrome de angústia respiratória aguda) associadas a esses fatores de risco.

Um ritmo menstrual foi documentado para as exacerbações da asma, que podem ter relevância clínica importante para o paciente com asma grave. Beynon et a/. (1988) relatou 3 casos de exacerbações pré-menstruais de asma que foram tratados com progesterona intramuscular. Os pacientes não tinham respondido ao tratamento convencional, incluindo altas doses de corticosteroides. Em todos os casos houve uma queda pré-menstrual na taxa de pico de fluxo. A adição de progesterona intramuscular (100 mg por dia em dois casos e 600 mg duas vezes por semana, em um) para o regime eliminou as DIPs pré-menstruais no fluxo de pico, e doses diárias de prednisolona foram reduzidas em três pacientes. O estudo descrito acima e os resultados são descritos em Beynon et al. (Severe premenstrual exacerbations of asthma: effect of intramuscular progesterone. Lancet — 13 de agosto de 1988; 2(8607): 370-2.).

Em outro estudo, Russell R et al (2007) testaram a hipótese de que a asma pré-menstrual está associada à alergia a auto-hormônios, particularmente progesterona pelo uso de diluições de progesterona sublingual como broncodilatador. Dezesseis mulheres que tiveram um diagnóstico prévio de asma grave e que eram dependentes de nebulização foram selecionadas para o estudo. Estudos espirométricos foram realizados nesses sujeitos. O estudo mostrou alterações ao longo do tempo do volume expiratório forçado em um segundo (FEV1), da capacidade vital forçada (FVC) e do pico de fluxo E expiratório (PEF), medido em três momentos: (1) antes do tratamento, (2) após tratamento salino normal sublingual (3) após tratamento com progesterona sublingual.

Após o tratamento com progesterona sublingual, 12 dos dezesseis — pacientes (75%) tiveram um efeito broncodilatador (mais que 12% de aumento) tanto em FEV1 como FVC.

Oito (50%) experimentaram um aumento em ambos, FEV1 e FVC.

Oito (50%) tiveram um aumento de 27% ou mais no PFE.

O estudo descrito acima e os resultados são descritos em Russell R et al. (Sublingual progesterone dilutions as bronchodilator in asthmatic females.

World Allergy Organization Joumal: Novembro de 2007 - Volume - Edição - p S 148.). Ativação de proteínas quinases ativadas por mitógeno (MAPKs) é um evento crítico na transdução do sinal mitogênico.

Ruzycky AL (1996) determinou os efeitos de 17-beta-estradiol e progesterona na expressão de proteína quinase ativada por mitógeno.

A expressão e atividade de MAPK foram examinadas no músculo liso uterino de ratos pré-tratados com 17-beta- estradiol sozinho ou com 17-beta-estradiol e progesterona.

A expressão de MAPK foi detectada por immunoblotting usando-se anticorpos erk1i/2. À atividade de MAPK foi detectada por medição da fosforilação de uma sequência peptídica MAPK-específica de proteina básica de mielina.

O tratamento com esteroides causou um declínio (20%) modesto na expressão de erk 1 e 2 na membrana e frações citosólicas.

Tanto o estrógeno como a progesterona aumentaram a fosforilação de tirosina de MAPK e atividade de MAPK associada à membrana.

O tratamento com esteroides aumentou a fosforilação de tirosina de MAPK citosólica, mas não a atividade enzimática.

O — estudo descrito acima e os resultados são descritos em Ruzycky AL (Effects of 17 beta-estradiol and progesterone on mitogen-activated protein kinase expression and activity in rat uterine smooth muscle.

Eur J Pharmacol. 11 de abril de 1996;300(3):247-54). | p— 0. .aans—np——

a. DESCRIÇÃO RESUMIDA DA INVENÇÃO Certas realizações da presente invenção são dirigidas a métodos para restabelecer a sensibilidade a corticosteroide ou reverter a insensibilidade a glicocorticoide ou aumentar a sensibilidade a glicocorticoide.

Outras realizações da presente invenção são dirigidas a métodos para administrar uma composição farmacêutica que compreende um hormônio esteroide para um sujeito que não tem histórico de exacerbação relacionada ao ciclo menstrual, e que sofre de uma ou mais condições relacionadas à insensibilidade a glicocorticoides. Condições relacionadas à insensibilidade a glicocorticoides incluem, por exemplo, uma série de doenças resistentes a corticoide e disfunções imunoinflamatórias tratadas com esteroides quando a terapia se torna inefetiva, intolerantes, dependente, não responsiva ou refratária aos corticosteroides, e combinações das mesmas. Em uma realização, um método da presente invenção compreende administrar uma composição farmacêutica que compreende um hormônio esteroide a um sujeito que não tem histórico de exacerbação relacionada ao ciclo menstrual, em que o sujeito está em risco para o desenvolvimento de insensibilidade a glicocorticoide devido à exposição ao stress oxidativo. No entanto, outras realizações da presente invenção são dirigidas a métodos para restabelecer a sensibilidade a corticosteroide ou reverter a insensibilidade a glicocorticoide ou aumentar a sensibilidade a glicocorticoide, e tratar uma ou mais condições selecionadas a partir do grupo que consiste em doenças resistentes a corticoide, refratárias a corticosteroide, disfunções imunoinflamatórias dependentes de corticosteroide e combinações dos | mesmos. Certas condições resistentes a glicocorticoides exemplares incluem, mas não se limitam a, asma resistente a glicocorticoide, artrite reumatoide refratária, doença intestinal inflamatória refratária, doença pulmonar obstrutiva dE a o o O a a a a vv

| 12

: crônica e síndrome de angústia respiratória aguda, fibrose pulmonar intersticial Í e fibrose cística.

Certas condições exemplares refratárias a glicocorticoide incluem, mas não se limitam a, colite ulcerativa refratária, crianças com doença de Crohn grave, asma refratária a corticosteroides, pneumonia intersticial — descamativa refratária a corticosteroides, miopatias inflamatórias refratárias, miastenia grave refratária, pênfigo vulgar refratário, pacientes com RA refratários a metotrexato, síndrome netfrótica refratária, esclerose múltipla refratária, doença similar a psilose refratária, sarcoidose resistente a esteroide, lesões de mucosa de pênfigo vulgar refratário, síndrome de Schnitzler refratária, dermatite resistente da cabeça e pescoço, dermatite atópica refratária grave, púrpura trombocitopênica idiopática refratária, miosite orbital refratária, linfomas refratários ou recorrentes, pacientes criticamente doentes com sepse ou síndrome do desconforto respiratório agudo (ARDS) e insuficiência adrenal relativa.

Certas condições dependentes a glicocorticoides exemplares incluem, mas não se limitam a, rosácea, polimialgia reumática, arterite de células gigantes, polimiosite, dermatomiosite, síndrome de Kawasaki, síndrome de Guillain-Barré, polineuropatia desmielinizante inflamatória crônica, neuropatia motora multifocal, síndrome da pessoa rígida, lúpus eritematoso sistêmico dependente de corticosteroides, esclerose múltipla dependente de corticosteroides, asma sintomático dependente de corticosteroide, síndrome de Sjôgren primária, vasculite sistêmica e polimiosite, transplantes de órgãos, doença do enxerto contra hospedeiro e câncer dependente de glicocorticoide.

Ainda outras realizações da presente invenção são dirigidos para kits que compreendem (i) uma composição farmacêutica que compreende um hormônio esteroide e um ou mais excipientes farmaceuticamente aceitáveis, e (ii) instruções para a administração da composição farmacêutica para um sujeito, preferencialmente que não tem histórico de exacerbação relacionada

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É ao ciclo menstrual, e que sofre de uma ou mais condições relacionadas à : insensibilidade a glicocorticoides.

Condições relacionadas à insensibilidade a glicocorticoides incluem, por exemplo, uma série de doenças resistentes a corticoide e disfunções imunoinflamatórias tratadas com esteroides quando a terapia se torna inefetiva, intolerantes, dependente, não responsiva ou refratária aos corticosteroides, e combinações das mesmas.

Em outra realização, os kits da presente invenção compreendem (i) uma composição farmacêutica que compreende um hormônio esteroide e um ou mais excipientes farmaceuticamente aceitáveis; e (ii) instruções para a administração da composição farmacêutica a um sujeito que está em risco elevado de desenvolver insensibilidade a glicocorticoide — mas preferencialmente não tem histórico de exacerbação relacionada ao ciclo menstrual, e preferencialmente está em risco para desenvolver uma ou mais condições relacionadas à insensibilidade a glicocorticoides devido ao stress oxidativo.

Ainda outras realizações da presente invenção são dirigidas a kits que compreendem (i) uma composição farmacêutica que compreende um hormônio esteroide e um ou mais excipientes farmaceuticamente aceitáveis, e (ii) instruções para administração da composição farmacêutica para um sujeito que preferencialmente não tem histórico de exacerbação relacionada ao ciclo menstrual, e em que o sujeito está sofrendo de uma ou mais condições relacionadas à insensibilidade a glicocorticoide, a fim de obter os efeitos sensibilizadores de glicocorticoide de poupador de esteroide em pacientes dependentes de corticosteroide, melhorar a responsividade ou tolerância a —corticosteroides, obter eficácia pelo uso de uma dose inferior de corticosteroide, prevenindo indivíduos em risco para o desenvolvimento de respostas refratárias a corticosteroides, resistência ou exacerbações em resposta à exposição a antígenos, infecções, exercícios ou irritantes, obter ótimas funções Rr o oo ooo oito ot t o o o =]

| 14 " imunes, facilitar respostas para o sujeito ou paciente quando a administração de esteroides é reduzida ou retirada, ou na administração prolongada de | corticosteroides, diminuir riscos para o desenvolvimento de eventos adversos relacionados a corticosteroide, como infecções oportunistas e perda óssea, e — combinações dasmesmas.

Deve-se entender que as realizações descritas acima são fornecidas como realizações representativas da presente invenção, e de modo algum devem ser entendidos como limitantes do escopo da presente invenção.

BREVE DESCRIÇÃO DAS FIGURAS As Figuras 1 a 12 são representações gráficas dos resultados de vários exemplos que ilustram certas realizações da invenção, mas de modo algum limitam o escopo da invenção.

A Figura 1 representa os níveis basais de IL-2, após estímulo de PHA e inibição dose-dependente de IL-2 por dexametasona.

A Figura 2 representa que a adição de IL-2 e IL-4 induz resistência a esteroide.

A Figura 3 representa os efeitos de progestogênio (% de Imax) para reverter a resistência a esteroides: comparando-se 17HPC, P4 e MPA mediante dose baixa de dexametasona (desse ponto em diante, “dexametasona”) (10º M).

A Figura 4 representa os efeitos de progestogênio (% de Imax) para reverter a resistência a esteroides: comparando-se 17HPC, P4 e MPA mediante dose alta dexametasona (10º M).

A Figura 5 mostra que 17HPC restabelece a sensibilidade a — corticosteroide.

A Figura 6 mostra que 17HPC reverte a resistência a esteroide e padrões individuais de resposta.

Os resultados representados na Figura 7 mostram que 9 em 11 |

ESC

Tm 15 o. sujeitos tiveram uma melhora superior a 10% na inibição máxima de dexametasona após receber uma dose de 17HPC, o que é consistente com os resultados apresentados na Figura 6. Os resultados representados na Figura 8 mostram que 6 em 8 sujeitos tiveram uma melhora superior a 10% na inibição máxima de dexametasona após receber uma dose de progesterona natural, que é similar a 17HPC.

Os resultados representados na Figura 9 mostram que Oo tratamento com MPA leva um padrão de resposta total diferente: uma resposta “10 “dividida”. Um subgrupo teve uma grande melhora até 58%, enquanto que outro subgrupo apresentou um agravamento na sensibilidade de corticosteroides, uma redução até 88%.

Os efeitos de 17HPC na sensibilidade a dexametasona medido por IL-2 inibição de IL-2 em fumantes são mostrados na Tabela 1 e Figura 10. A Figura 10 mostra que o acréscimo do efeito de 17HPC é melhora da sensibilidade de esteroide.

O efeito anti-inflamatório máximo de dexametasona é 78% de inibição da produção de IL2 induzida por PHA a 10º M. O tratamento “complementar” de 17HPC produz uma responsividade significativamente melhor e resulta em supressão próxima a 100% de IL-2 induzida por PHA (Figura 11). A Figura 11 representa então melhor responsividade ao tratamento com 17HPC complementar.

A combinação de 17HPC com dexametasona aumentou sistematicamente os efeitos anti-inflamatórios e é melhor que seu uso individualmente. A Figura 12 que a combinação levou a um efeito sinérgico, com 25% a 31% de melhora na eficácia de dexametasona. A Figura 12 representa assim efeitos sinérgicos de combinação de 17HPC com dexametasona. Ent

" DESCRIÇÃO DETALHADA DAS REALIZAÇÕES PREFERENCIAIS Métodos, composições e kits preferenciais são descritos no presente pedido, de acordo com a presente invenção, que são adequados para restabelecer a sensibilidade a corticosteroide, aumentar a sensibilidade a —corticosteroide e/ou reverter a insensibilidade a glicocorticoide em um sujeito que vivencia dependência a corticosteroide, resistência a corticoide, não responsividade ou intolerância a corticosteroide.

Condições relacionadas à insensibilidade a glicocorticoide incluem, por exemplo, uma gama de disfunções ou doenças imune-inflamatórias tratadas com esteroides, quando a terapia fracassa em obter controle da doença ou não é efetiva, intolerante, dependente ou resistente a corticosteroides, e combinações das mesmas.

Mais especificamente, os métodos, composições e kits da presente invenção são efetivos para alcançar os efeitos sensibilizadores de glicocorticoide de poupador de esteroide em pacientes dependentes de corticosteroide, melhorar a responsividade ou tolerância a corticosteroides, obter eficácia pelo uso de uma dose inferior de corticosteroide, prevenir indivíduos em risco para o desenvolvimento de respostas refratárias a corticosteroides, resistência ou exacerbações em resposta à exposição a antígenos, infecções, exercícios ou irritantes, obter ótimas funções imunes, facilitar respostas para o sujeito ou paciente quando a administração de esteroides é reduzida ou retirada, ou na administração prolongada de corticosteroides, diminuir riscos para o desenvolvimento de eventos adversos relacionados a corticosteroide, como infecções oportunistas e perda óssea, e combinações das mesmas.

Mais especificamente, condições relacionadas à insensibilidade a glicocorticoide incluem várias condições/disfunções associadas e/ou atribuídas à resistência a | glicocorticoide, respostas refratárias a glicocorticoide, dependência a corticosteroide e intolerância a corticosteroide.

Um fator de risco principal no desenvolvimento de insensibilidade a glicocorticoide é o stress oxidativo. ———s«——q qa a oaspxmpspmtmrrvrrrrrr SN a " Apesar das sérias consequências de insensibilidade a i glicocorticoide, tem havido um sucesso limitado no tratamento de sujeitos que sofrem de várias condiçóes/disfunções associadas e/ou atribuídas à resistência a glicocorticoide, glicocorticoides, respostas refratárias a glicocorticoide, dependência de corticosteroide e intolerância a corticosteroide.

Inibidores da calcineurina e metotrexato podem ser úteis em algumas condições selecionadas, mas eles não têm provado ser eficazes na maior parte das condições relacionadas à insensibilidade a glicocorticoide.

Além disso, existem eventos adversos significativos associados com o seu uso.

A toxicidade significativa e os efeitos colaterais também dificultaram os programas de desenvolvimento de drogas para inibidores de MAP-quinase p38, inibidores seletivos para bloquear a inibição do NF B quinase e inibidores de fosfodiesterase-4. A maioria das disfunções de insensibilidade a glicocorticoide não tem qualquer associação com o ciclo menstrual, e a maioria dos sujeitos que sofre de disfunções de insensibilidade a glicocorticoide não vivencia exacerbação relacionada ao ciclo menstrual, incluindo alergia a progesterona.

Vantajosamente, de acordo com a presente invenção, acredita-se que os métodos detalhados no presente pedido restabelecem significativamente a sensibilidade a corticosteroide em um sujeito que preferencialmente não tem histórico de exacerbação relacionada ao ciclo do menstrual.

Os tratamentos e métodos da presente invenção foram surpreendentemente determinados para reverter a insensibilidade a glicocorticoide e/ou aumentar a sensibilidade a glicocorticoide “em indivíduos que soffem de pelo menos uma condição/disfunção associada e/ou atribuída à resistência a glicocorticoide, respostas refratárias a glicocorticoide, dependência a corticosteroide e intolerância a corticosteroide.

Dessa forma, os métodos da presente invenção são adequados para alcançar os efeitos sensibilizadores de glicocorticoide de | poupador de esteroide em pacientes dependentes de corticosteroide, melhorar o o a a o a A

| ' 18 s * B a responsividade ou tolerância a corticosteroides, obter eficácia pelo uso de A uma dose inferior de corticosteroide, prevenir indivíduos em risco para o desenvolvimento de respostas refratárias a corticosteroides, resistência ou exacerbações em resposta à exposição a antígenos, infecções, exercícios ou irritantes, obter ótimas funções imunes, facilitar respostas para o sujeito ou paciente quando à administração de esteroides é reduzida ou retirada, ou na administração prolongada de corticosteroides, diminuir riscos para o desenvolvimento de eventos adversos relacionados a corticosteroide, como infecções oportunistas e perda óssea, e combinações das mesmas.

De preferência os métodos da presente invenção são adequados para substancialmente anular o efeito de pelo menos um fator de risco ou mecanismo subjacente associado à insensibilidade a glicocorticoide.

Dessa forma, várias realizações da presente invenção são dirigidas a métodos para reverter a insensibilidade a glicocorticoide em um sujeito que preferencialmente nãotem histórico de exacerbação relacionada ao ciclo menstrual e que sofre de uma ou mais condições relacionadas à insensibilidade a glicocorticoide.

Nessas e várias outras realizações, o sujeito a ser tratado é homem ou mulher, e de qualquer idade.

Várias outras realizações são direcionadas ao tratamento de sujeitos que tiveram o primeiro ataque da doença ou já vivenciaram o ataque repetido da doença sem exacerbação relacionada ao ciclo menstrual.

Embora a progesterona tenha propriedades anti-inflamatórias, testes de progesterona para disfunções inflamatórias como artrite reumatoide, geralmente fracassaram em demonstrar um método efetivo e capaz de ser reproduzido para o controle dos sintomas ou melhores resultados clínicos.

Os sujeitos que apresentam uma resposta resistente ou refratária a glicocorticoide são um subconjunto da população doente, mas uma subpopulação “difícil de tratar” bem definida.

Por exemplo, 20% a 30% dos pacientes com doença de | Crohn grave e resistente a esteroide não responderam à terapia com esteroide. o o o o o o o a o

| 19 B Um dos objetivos preferenciais da presente invenção é usar a progesterona : para tratar uma condição resistente ou refratária a glicocorticoide demonstrada pelo efeito poupador de esteroide em pacientes dependentes de corticosteroide, melhorar a responsividade ou tolerância a corticosteroides, obter eficácia pelo uso de uma dose inferior de corticosteroide, prevenir indivíduos em risco para o desenvolvimento de respostas refratárias, resistentes ou exacerbações em resposta à exposição a antígenos, infecções, exercícios ou irritantes, obter ótimas funções imunes, facilitar respostas para o sujeito quando a administração de esteroides é reduzida ou retirada, ou na administração ou após administração prolongada de corticosteroides, diminuir riscos para o desenvolvimento de eventos adversos relacionados a corticosteroide, como infecções oportunistas e perda óssea, e combinações das mesmas. Além disso, a ativação de MAPK é um evento crítico que conduz à insensibilidade a corticosteroide. Foi relatado que a progesterona aumenta a atividade de MAPK (Ruzycky AL. Effects of 17 beta-estradiol and progesterone on mitogen-activated protein kinase expression and activity in rat uterine smooth muscle. Eur J Pharmacol. 11 de abril de 1996; 300(3):247-54). Sem se ligar a uma teoria particular, atualmente acredita-se que um técnico no assunto espera que a ativação de MAPK induz uma perda de GR translocação e função de GR nuclear, levando ao desenvolvimento de. condições relacionadas à insensibilidade a corticosteroide. Novamente, sem se ligar a uma teoria particular, ainda atualmente acredita-se que um técnico no assunto espera que o aumento de MAPK por progesterona agrava a insensibilidade a corticosteroide. No entanto, de acordo com a presente invenção foi —surpreendentemente e inesperadamente revelado que os efeitos moleculares do aumento de MAPK por progesterona não interferiram na efetividade da progesterona no tratamento de uma condição resistente ou refratária a glicocorticoide. No entanto, de acordo com a presente invenção foi

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ke surpreendentemente e inesperadamente revelado que a administração de progesterona, como 17alfa12 caproato de hidroxiprogesterona (17-HPC) para um sujeito com uma condição resistente ou refratária a glicocorticoide ou dependente de corticosteroide alcança os efeitos sensibilizadores para —glicocorticoide, como poupador de esteroide. Dessa forma, de acordo com a presente invenção, atualmente acredita-se que a administração de progesterona (por exemplo, 17-HPC) pode restabelecer a significativamente a sensibilidade a corticosteroide, aumentar a sensibilidade a glicocorticoide e/ou reverter a insensibilidade a glicocorticoide.

Em comparação com o uso de progesterona para os seus efeitos anti-inflamatórios, a presente revelação, surpreendentemente identificou uma nova função de progestogênio e seus usos, isto é, revertendo a insensibilidade a corticosteroide, e claramente identifica uma população de pacientes bem definida que se beneficiaram do tratamento, ou seja, pacientes que apresentam resistência a corticosteroide, dependência a corticosteroide, respostas refratárias a corticosteroide e/ou intolerância a corticosteroide. Visto que as condições relacionadas à insensibilidade a glicocorticoide ocorrem em sujeitos que não têm um histórico de exacerbação relacionada ao ciclo menstrual, a presente revelação também representa um avanço significativo na técnica.

DEFINIÇÕES . Conforme observado, os glicocorticoides permanecem o tratamento de primeira linha para uma gama de doenças imunoinflamatórias e alérgicas. No entanto, 30% dos pacientes não conseguem atingir o controle da doença em doses toleráveis sistêmicas e continuam a ter um aumento da resposta imune com fracos resultados clínicos. A insensibilidade a glicocorticoides é um fator importante na patogênese e prognóstico de várias | doenças. Isto apresenta problemas de gerenciamento consideráveis e ônus de a o o o o as

& custos para os serviços de saúde. Como usado no presente pedido, o termo E “insensibilidade a glicocorticoide” destina-se a incluir, mas não se limita à resistência a corticosteroide, dependência de corticosteroide, resposta refratária a corticosteroide, intolerância a corticosteroide e outros tipos de ineficácia a corticosteroide. Foi reconhecido que vários mecanismos moleculares diferentes contribuem para uma diminuição dos efeitos anti- inflamatórios de glicocorticoides. Diferentes doenças inflamatórias podem compartilhar mecanismos moleculares semelhantes, e uma única doença pode ter uma heterogeneidade de mecanismos.

A resistência de corticosteroide aos efeitos anti-inflamatórios de corticosteroides é definida como sem melhoria clínica após o tratamento com altas doses de glicocorticoide.

A dependência de corticosteroide é definida como uma condição que inicialmente responde aos corticosteroides, mas recai rapidamente após a retirada da droga ou diminuição gradual da dose.

A resposta refratária a corticosteroide é definida como uma condição que não responde a uma dose de indução adequada de corticosteroides. Incluem respostas relativamente ou totalmente refratárias à terapia com glicocorticoide e muitas vezes precisa ser controlada por tratamento complementar.

Outros tipos de ineficácia a corticosteroide incluem necessidade de tratamento com uma dose muito alta, “difícil de tratar" e “não responde bem” | Ou casos graves e responsividade enfraquecida in vitro e in vivo.

| A intolerância a corticosteroide é definida como toxicidade da | 25 terapia e/ou riscos para o desenvolvimento de eventos adversos relacionados ao corticosteroide, como infecções oportunistas e perda óssea.

O sensibilizador de glicocorticoide é definido como um agente e produto farmacêutico que tem uma função na restauração da sensibilidade a ——“ —=-=ssp-—sss——s———=s-.s.—.

y corticosteroides, melhorando a sensibilidade a glicocorticoides, revertendo a ' insensibilidade a glicocorticoide e proteção contra a perda de sensibilidade a glicocorticoide, e utilizado para tratar, prevenir ou melhorar um ou mais dos sintomas de doenças ou disfunções associadas à insensibilidade a glicocorticoide (por exemplo, corticosteroide dependente, corticoide resistente, não responsivo ou intolerante aos corticosteroides). Os efeitos terapêuticos do uso de um sensibilizador de glicocorticoides inclui qualquer, mas não se limitam a poupador de esteroide em pacientes dependentes de corticosteroide, melhor responsividade ou tolerância aos corticosteroides, alcançando eficácia usando uma dose mais baixa de corticosteroide, prevenindo indivíduos em risco de desenvolver respostas refratárias, resistência ou exacerbações em resposta à exposições de antígenos, infecções, exercícios ou irritantes, alcançando ótimas funções imunológicas, respostas mais fáceis para o sujeito ou paciente quando a administração de esteroide é diminuída ou retirada, ou após a administração prolongada de corticosteroides, diminuiu os riscos para o desenvolvimento de eventos adversos relacionados a corticosteroide, como infecções oportunistas, perda óssea, fratura patológica, diabetes, catarata e combinações das mesmas.

Como usado no presente pedido, os termos “tratar” ou “tratamento” engloba uma ou ambas as medidas responsivas e profiláticas, por exemplo, concebidas para inibir ou retardar o aparecimento da doença ou disfunção, alcançar uma redução total ou parcial dos sintomas ou estado da doença e/ou aliviar, melhorar, diminuir ou curar a doença ou disfunção e/ou seus sintomas.

O tratamento também engloba qualquer uso farmacêutico das composições da presente invenção, como o uso para tratar uma doença, disfunção ou condição relacionada à insensibilidade a glicocorticoide.

Melhoria dos sintomas de uma disfunção específica por administração de um composto | específico ou composição farmacêutica da presente invenção refere-se a

;

| 23 qualquer redução, tanto permanente como temporária, durando ou transiente que pode ser atribuída a ou associada à administração da composição.

Sujeito é definido no presente pedido como um animal, tipicamente um mamífero, incluindo humanos. Como usado no presente —pedido,otermo “paciente” inclui sujeitos humanos e animais.

Na prática os métodos da presente invenção, quantidades efetivas dos compostos de progesterona ou composições contendo concentrações terapeuticamente efetivas dos compostos, que são formuladas para distribuição sistêmica, incluindo parenteral, oral ou distribuição intravenosa ou pulmonar, ou para distribuição local ou tópica, podem ser usados para o tratamento de doenças ou disfunções relacionadas à insensibilidade a glicocorticoides que inclui, mas não se limitam a condições resistentes a glicocorticoides (por exemplo, asma resistente a glicocorticoide, artrite reumatoide refratária, doença intestinal inflamatória refratária, doença pulmonar obstrutiva crônica e síndrome da angústia respiratória aguda, fibrose pulmonar intersticial e fibrose cística); condições refratárias a glicocorticoide (por exemplo, colite ulcerativa refratária, crianças com doença de Crohn grave, asma refratária a corticosteroide, pneumonia intersticial descamativa refratária a corticosteroide, miopatias inflamatórias refratárias, miastenia grave refratária, pênfigo vulgar refratário, pacientes com RA refratária a metotrexato, síndrome nefrótica refratária, esclerose múltipla refratária, doença similar a psilose refratária, sarcoidose resistente a esteroide, lesões da mucosa refratárias de pênfigo vulgar, síndrome de Schnitzler refratária, dermatite resistente da cabeça e pescoço, dermatite atópica refratária grave, púrpura trombocitopênica idiopática refratária, miosite orbital refratária, linfomas refratários ou recorrentes, pacientes criticamente doentes com sepse ou síndrome do | desconforto respiratório agudo (ARDS) e insuficiência adrenal relativa); condições dependentes de glicocorticoide (por exemplo, rosácea, polimialgia tnhu

| 24 " reumática, arterite de células gigantes, polimiosite, dermatomiosite, síndrome de Kawasaki, síndrome de Guillain-Barré, polineuropatia desmielinizante inflamatória crônica, neuropatia motora multifocal, síndrome da pessoa rígida, lúpus eritematoso sistêmico dependente de corticosteroide, esclerose múltipla dependente de corticosteroide, asma dependente de corticosteroide sintomática, síndrome de Sjógren primária, vasculite sistêmica, polimiosite, transplantes de órgãos, e doença do enxerto contra o hospedeiro); e outras doenças inflamatórias, doenças autoimunes, doenças hiperproliferativas e outras dessas doenças quando está envolvida insensibilidade a glicocorticoide.

Exemplares dessas doenças são lúpus, osteoartrite, rinossinusite, poliarterite nodosa, granulomatose de Wegener, arterite de células gigantes, rinite alérgica, urticária, angioedema hereditário, bursite, tendinite, hepatite crônica autoimune ativa, cirrose, rejeição de transplantes, psoríase, dermatite, malignidades (por exemplo, leucemia, mieloma, linfomas), insuficiência adrenal aguda, febre reumática, doença granulomatosa, proliferação/apotose imune, supressão e regulação do eixo hipotalâmico-hipofisário-adrenal (HPA), hipercortisolemia, modulação do balanço de citocinas Th1/Th2, doença renal crônica, lesão medular, edema cerebral, trombocitopenia, síndrome de Little, doença de Addison, anemia hemolítica autoimune, uveite, pênfigo vulgar, pólipos nasais, sepse, infecções bacterianas, infecções virais, infecções por Rickettsia, infecções parasitárias, diabetes tipo Il, obesidade, síndrome metabólica, depressão, esquizofrenia, transtornos do humor, síndrome de Cushing, ansiedade, distúrbios do sono, aprimoramento de memória e aprendizagem, glaucoma induzido por glicocorticoide, dermatite atópica, reações de hipersensibiidade a drogas, doença do soro, dermatite herpetiforme bolhosa, dermatite de contato, eritrodermia esfoliativa, micose fungoide, pênfigo, tireoidite não supurativa, oftalmia simpática, uveite, condições inflamatórias oculares não responsivas aos esteroides tópicos, ———— kw." """ m——=ÕÕõ ep a aspergilose broncopulmonar alérgica, tuberculose pulmonar fulminante ou disseminada quando usado concomitantemente com quimioterapia apropriada, pneumonite por hipersensibilidade, bronquiolite obliterante com pneumonia em organização idiopática, pneumonias eosinofílicas idiopáticas, fibrose pulmonar idiopática, pneumonia por Pneumocystis carinii (PCP) associada à hipoxemia ocorrendo em um indivíduo HIV(+) que também está sob tratamento apropriado com antibióticos anti-PCP, diurese ou remissão de proteinúria na síndrome nefrótica, sem uremia, do tipo idiopático ou devido ao lúpus eritematoso, espondilite anquilosante, polimialgia reumática, artrite psoriática, policondrite recidivante, triquinose com envolvimento neurológico ou do miocárdio e meningite tuberculosa.

Geralmente, de acordo com a presente invenção, os métodos descritos no presente pedido para o tratamento de doenças, distúrbios ou condições relacionadas à insensibilidade a glicocorticoide compreendem a administração de uma composição farmacêutica que compreende um hormônio esteroide.

Tipicamente, o hormônio esteroide lipofílico das gônadas é um progestogênio.

O progestogênio pode ser um progestogênio que ocorre naturalmente ou um progestogênio sintético (ou seja, uma progestina). Os progestogênios que podem ser usados de acordo com a presente invenção são agrupados nas seguintes categorias: progesterona, retroprogesterona, derivado de progesterona, derivados de progesterona 17a-OH (tanto pregnanos como norpregnanos), derivados de 19-norprogesterona, derivados de 19- nortestosterona (tanto estranges como gonanos) e derivados de espironolactona.

Geralmente, o progestogênio para uso de acordo com a presente invenção é selecionado a partir do grupo que consiste em | progesterona e seus derivados ou metabólitos ativos.

Os exemplos específicos de progestogênios que podem ser utilizados nos métodos e kits da presente invenção incluem, mas não se limitam a, 17alfa-HPC hidroxiprogesterona,

"o progesterona natural, didrogesterona, medrogestona, medroxiprogesterona, acetato de megestrol, acetato de clormadinona, acetato de ciproterona, caproato de gestonorona, acetato de nomegestrol demegestona, promegestona, —nestorona, trimegestona, acetato de noretisterona, — noretisterona, diacetato, linestrenol etinodiol, norgestrel, levonorgestrel, desogestrel, etonogestrel (3-cetodesogestrel), gestodeno, norgestimato, norelgestromina — (17-desacetil —“norgestimato), —dienogest, drospirenona, noretinodrel, = norgestrel, = desogestrel, —etonogestrel, —19-nortestosterona, dienogest, noretinodrel, acetato de ciproterona, tibolona, 19-norprogesterona e drospirenona.

Outros agentes que podem ser usados de acordo com os métodos e kits da presente invenção incluem, por exemplo, qualquer derivado de progestogênio farmaceuticamente aceitável, ou seja, derivados de 17alfa- HPC hidroxiprogesterona, progesterona natural, didrogesterona, medrogestona, medroxiprogesterona e megestrol, clormadinona, ciproterona, caproato de gestonorona, acetato de nomegestroll demegestona, promegestona, nestorona, trimegestona, noretisterona, noretisterona, diacetato etinodiol, linestrenol, norgestrel, levonorgestrel, desogestrel, etonogestrel (3- cetodesogestrel), gestodeno, norgestimato, norelgestromina (17-desacetil —norgestimato), dienogest, drospirenona, noretinodrel, norgestrel, desogestrel, etonogestrel, 19-nortestosterona, dienogest, noretinodrel, ciproterona, tibolona, 19-norprogesterona e drospirenona. Cada progestogênio pode ser derivatizado em relação aos sais correspondentes, ésteres, éteres de enol ou ésteres, ácidos, bases, solvatos, hidratos ou pró-drogas antes da formulação, conforme descrito no presente pedido. Os sais representativos farmaceuticamente aceitáveis incluem, mas não se limitam a sais de amina, como, mas não limitado a cloroprocaína, colina» amônia, dietanolamina e outras hidroxialquilaminas, etilenodiamina, Nmetilglicamina, procaína, dietilamina e MNLMNLLLLMhhhuuhhhhhh outras alquilaminas, piperazina e tris(hidroximetil) aminometano; sais de metais E alcalinos, como, mas não limitado a lítio, potássio e sódio; sais de metais alcalinos terrosos, como, mas não limitado a bário, cálcio e magnésio, sais de metais de transição, como, mas não limitado a zinco, alumínio e outros sais de metais, como, mas não limitado a fosfato de hidrogênio e fosfato dissódico, e, também, incluindo, mas não limitado a sais de ácidos minerais, como mas não limitado a hidrocloridratos e sulfatos; e sais de ácidos orgânicos, como, mas não limitados a acetatos, lactatos, malatos, tartratos, citratos, ascorbatos, succinatos, butiratos, valeratos e fumaratos. Por exemplo, o ácido orgânico de acetatos é frequentemente usado como acetato de megestrol, acetato de clormadinona, acetato de ciproterona, caproato de gestonorona, acetato de nomegestro!| e acetato de ciproterona.

Agentes representativos adicionais que podem ser usados de acordo com os métodos e kits da presente invenção incluem, por exemplo, qualquer metabólito ativo de progestogênio incluindo, mas não se limitando a metabólitos ativos de 17alfa-HPC hidroxiprogesterona, progesterona natural, didrogesterona, medrogestona, medroxiprogesterona e acetato de megestrol, acetato de clormadinona, acetato de ciproterona, caproato de gestonorona, acetato de nomegestrol demegestonay promegestona, nestorona, trimegestona, acetato de noretisterona, noretisterona, linestrenol, diacetato etinodiol, — norgestrel, — levonorgestrel, — desogestrel, — etonogestrel — (3- cetodesogestrel), gestodeno, norgestimato, norelgestromina (17-desacetil norgestimato), dienogest, drospirenona, noretinodrel, norgestrel, desogestrel, etonogestrel, 19-nortestosterona, dienogest, noretinodrel, acetato de ciproterona, tibolona, 19-norprogesterona e drospirenona. Por exemplo, os metabolitos ativos de progesterona incluem alopregnanolona e 5 alfa pregnano-3,20-diona do metabólito ativo. Metabólitos ativos de 17-HPC incluem MI 3 mono hidroxi-; MI 2, mono hidroxi-; MI! 9, mono hidroxi M7, di hidroxi-; e MI 6, mono hidroxi-.

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Em várias realizações, outro grupo de hormônio esteroide, fã glicocorticoides, para uso de acordo com a presente invenção é preferencialmente selecionado a partir do grupo que consiste em hormônios esteroides produzidos naturalmente ou compostos sintéticos, que inibem o — processo de inflamação. Exemplos específicos de glicocorticoides incluem, mas não se limitam a hidrocortisona (cortisol), acetato de cortisona, dexametasona (desse ponto em diante, “dexametasona”), prednisona, prednisolona, metilprednisolona, betametasona, triancinolona, beclometasona, parametasona, fluticasona, acetato de fludrocortisona, acetato de desoxicorticosterona (DOCA), fluprednisolona, propionato de fluticasona, budesonida, dipropionato de beclometasona, flunisolida e acetonida de triancinolona.

Na prática os métodos da presente invenção, quantidades efetivas dos compostos ou composições contendo concentrações terapeuticamente efetivas dos compostos, são preferencialmente formulados para distribuição sistêmica, incluindo parenteral, oral ou distribuição por via intravenosa, ou para aplicação local ou tópica. Por exemplo, a composição farmacêutica pode ser administrada por via subcutânea, intravenosa, injeção intraperitoneal, intra-arterial ou intramuscular; retal; por distribuição via transdérmica; distribuição intravaginal; ou bucal, ou por distribuição oral.

Quando administrado por injeção subcutânea ou intramuscular, o hormônio esteroide é adequadamente formulado como uma formulação de depósito para permitir a libertação sustentada do hormônio esteroide durante um período prolongado de tempo. Quando administrado por administração tópica, incluindo distribuição intravaginal, a distribuição pode adequadamente ser, por exemplo, através de uma solução, suspensão, emulsões ou outras semelhantes e são preferencialmente formuladas como cremes, géis, pomadas, emulsões, soluções, elixires, loções, suspensões, tinturas, pastas, espumas, aerossóis, , irrigações, sprays, supositórios, bandagens, adesivos dérmicos ou quaisquer mo

| | 29 é & . outras formulações adequadas para a rota. Quando uma rota de inalação de administração é utilizada, a distribuição pode preferencialmente, por exemplo, ser através de um spray aerossol ou mistura em pó em uma embalagem pressurizada ou um nebulizador ou um inalador.

Em relação à frequência de administração, pode ser usada qualquer frequência que alcance o resultado desejado, ou seja, esteroide poupador em pacientes dependentes de corticosteroide, melhor responsividade ou tolerância aos corticosteroides, alcançando eficácia usando uma dose mais baixa de corticosteroide, prevenindo indivíduos em risco de desenvolver respostas refratárias, resistência ou exacerbações em resposta à exposições de antígenos, infecções, exercícios ou irritantes, alcançando ótimas funções imunológicas, respostas mais fáceis para o sujeito quando a administração de esteroide é diminuída ou retirada, ou após a administração prolongada de . Ccorticosteroides, diminuiu os riscos para o desenvolvimento de eventos — adversos relacionados a corticosteroide, como infecções oportunistas e perda óssea, e combinações das mesmas. A frequência de administração será preferencialmente determinada, pelo menos em parte, pelo(s) hormônio(s) esteroide(s) e/ou forma de dosagem selecionada. Em várias realizações, a composição farmacêutica é preferencialmente administrada em um intervalo superior ao diário ou uma vez por semana. Por exemplo, a composição farmacêutica pode ser administrada uma vez a cada duas semanas, uma vez por mês, uma vez a cada dois meses ou uma vez a cada três meses. Em várias outras realizações, a composição farmacêutica é administrada uma vez por semana ou em um intervalo de menos de uma semana (por exemplo, | 25 diariamente ou em dias alternados). Por exemplo, quando o hormônio esteroide | é caproato de 17alfa-hidroxiprogesterona (17-HPC), a administração adequadamente pode ser através de injeções diárias, uma vez por semana, uma vez a cada duas semanas, uma vez por mês ou uma vez a cada 3 meses. Str

| | 30 Ds Os técnicos no assunto compreenderão que a rota de administração e ” frequência de administração para as composições farmacêuticas utilizadas nos métodos e kits da presente invenção irão depender de uma variedade de fatores, incluindo, por exemplo, o(s) hormônio(s) esteroide(s) específico(s) utilizado(s), a formulação na qual é distribuído, o tecido a ser tratado, a idade e gênero do indivíduo tratado, dados de teste in vivo ou in vitro, e o julgamento profissional das necessidades do paciente em particular. As faixas de frequência de dosagem apresentadas no presente pedido são apenas exemplares e não se destinam a limitar o escopo ou prática de formulações fornecidas no presente pedido.

O técnico no assunto também irá apreciar que a dosagem apropriada do hormônio esteroide irá depender do(s) hormônio(s) esteroide(s) selecionado(s), a rota de administração e forma de dosagem, a frequência de administração, a(s) doença(s) a ser(em) tratada(s), a estabilidade metabólica e duração de ação desse composto, a espécie, idade, peso corporal, saúde geral e dieta do sujeito, taxa de excreção, combinação de drogas e a gravidade da condição particular. A quantidade efetiva de um hormônio esteroide fornecida no presente pedido pode ser determinada por um técnico no assunto, e inclui as quantidades de dosagem exemplares para um mamífero de cerca de 0,001 a100 mg/kg de peso corporal de composto ativo administrado por via oral por dia. Por exemplo, para atingir o endométrio e efeitos antigonadotróficos (ou seja, dose para inibição de ovulação), 0,15 mg/dia p.o. para levonorgestrel ou | desogestrel é preferencialmente desejado, enquanto a quantidade necessária é | muito mais alta, 5 a 10 mg/dia para acetato de medroxiprogesterona ou 200 a — 300 mg/dia para progesterona.

O técnico no assunto também irá apreciar que a dosagem adequada do hormônio esteroide irá depender do gênero, visto que a progesterona é o hormônio sexual. A progesterona é principalmente secretada psaneae—&é>— 0 wu s-pxpappppqacqq—

' pelas células da granulosa e do corpo lúteo no ovário. Durante a gravidez, uma "i fonte importante de progesterona também vem da placenta. Os machos produzem progesterona na glândula adrenal e testículos, pois esse é um precursor de testosterona. Nas mulheres, os níveis de progesterona são relativamente baixos durante a fase pré-ovulatória do ciclo menstrual, aumentam após a ovulação e são elevados durante a fase lútea. Os níveis de progesterona tendem a ser < 2 ng/ml antes da ovulação e > 5 ng/ml após a ovulação. Se ocorrer uma gravidez, os níveis de progesterona são inicialmente mantidos em níveis lúteos. Com o início da mudança lúteo-placentária no suporte de progesterona da gravidez, os níveis começam a aumentar ainda mais e podem alcançar de 100 a 200 ng/ml a termo. A faixa de referência para os níveis de progesterona em homens adultos é de 0,13 a 0,97 ngml. Os machos adultos têm níveis semelhantes aos de mulheres durante a fase folicular do ciclo menstrual, bem como o nível em mulheres pós-menopausa.

Claramente, as mulheres regularmente vivenciam uma alteração de 17 vezes na concentração de progesterona no soro durante o ciclo menstrual ou aumento de mais de 100 vezes na gravidez. Dessa forma, a tolerância, dose máxima ou dose mínima efetiva de tratamento de progestogênio seria maior em mulheres que em homens. Por exemplo, quando o hormônio esteroide é caproato de 17alfa-hidroxiprogesterona (17-HPC) e uma dosagem comum utilizada é injeção semanal de 150 a 500 mg para as suas utilizações em mulheres saudáveis relacionadas às indicações. Dado alguns efeitos importantes de progesterona sobre restauração da sensibilidade a | corticosteroide são considerados ser mediado não genomicamente através de diferentes modos biológicos moleculares de ação (ou seja, as funções não relacionadas com atividade progestacional), isso pode resultar em alguma variabilidade farmacodinâmica. Uma dose muito baixa ou muito alta de progesterona (por exemplo, 17-HPC) pode ser selecionada, bem como um | N—s2——rqcrres—a]=“ . ———. = —=————s==—————=——|s=%s—st— ssss—s——————s

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y nível de dosagem diferente para sujeitos machos.

As faixas de dosagem i apresentadas no presente pedido são apenas exemplares e não se destinam a limitar o escopo ou prática de formulações fornecidas no presente pedido.

Preferencialmente, as composições farmacêuticas da presente invenção contêm: i) um veículo fisiologicamente aceitável, diluente, excipiente ou uma combinação dos mesmos, e ii) um ou mais hormônios esteroide(s) conforme descrito no presente pedido.

As composições podem ser formuladas para administração de dosagem única ou para múltiplas dosagens.

As formas de dosagem ou composições contendo hormônio(s) esteroide na faixa de 0,005% a 100% com o equilíbrio feito a partir de um veículo não tóxico transportadora podem ser preparadas.

Por exemplo, a composição farmacêutica pode conter um ou mais diluentes, um ou mais carreadores, um ou mais ligantes, um ou mais revestimentos, um ou mais lubrificantes, um ou mais solventes, um ou mais tampões, um ou mais conservantes, um ou mais agentes aromatizantes, um ou mais corantes e/ou um ou mais intensificadores de absorção e/ou um ou mais polímeros biodegradáveis.

O(s) excipiente(s) particular(es) incluídos na composição farmacêutica irão depender do(s) hormônio(s) esteroide(s) específico(s) e forma de dosagem selecionada e o técnico no assunto será capaz de selecionar prontamente excipientes apropriados uma vez que o(s) hormônio(s) esteroide(s) e a forma de dosagem, portanto, foi escolhida.

Por exemplo, para administração oral, uma composição farmaceuticamente aceitável não tóxica pode ser formada pela incorporação de qualquer dos excipientes normalmente empregados, como, por exemplo, graus farmacêuticos de manitol, lactose, amido, estearato de magnésio, talco, derivados de celulose, croscarmelose de sódio, glicose, sacarose, carbonato de magnésio ou sacarina de sódio Essas composições incluem preferencialmente soluções, suspensões, comprimidos, cápsulas, pós e formulações de liberação sustentada, como, mas não limitados a, implantes e i sistemas de distribuição microencapsulados e biodegradáveis, polímeros nº biocompatíveis, como colágeno, acetato de vinil etileno, polianidridos, ácido poliglicólico, poliortoésteres, ácido poliláctico e outros. Para outro exemplo, os injetáveis convencionais podem ser preparados em formas convencionais, tanto como soluções líquidas ou suspensões, formas sólidas adequadas para solução ou suspensão em líquido antes da injeção ou como emulsões. Os excipientes adequados incluem, por exemplo, água, solução salina, dextrose, glicerol, manitol, 1,3-butanodiol, solução de Ringer, uma solução de cloreto de sódio isotônica ou etanol. Para outro exemplo, suspensões injetáveis são preparadas usando carreadores líquidos apropriados, agentes de suspensão e similares. Certas composições farmacêuticas para injeção são apresentadas na forma de unidade de dosagem, por exemplo, em ampolas ou em recipientes de dose múltipla. Certas composições farmacêuticas para injeção são suspensões, soluções ou emulsões em óleo ou veículos aquosos e podem conter agentes formuladores, como agentes de suspensão, estabilização e/ou dispersão. Certos solventes adequados para uso em composições farmacêuticas para injeção incluem, mas não se limitam a solventes lipofílicos e óleos graxos, como óleo de sésamo, ésteres de ácidos graxos sintéticos, como oleato de etila ou triglicerídeos e lipossomas.

Além da administração de um hormônio progesterona, os métodos da presente invenção podem ainda compreender uma ou mais terapias adicionais voltadas ao tratamento de doenças, disfunções ou condições relacionadas à insensibilidade a glicocorticoide, conforme discutido no presente pedido. Um ou mais tratamentos adicionais podem incluir, por exemplo, glicocorticoide (por exemplo, hidrocortisona, acetato de cortisona, | dexametasona, prednisona, prednisolona, metilprednisolona, betametasona, triamcinolona, beclometasona, parametasona, fluticasona, acetato de fludrocortisona, acetato de desoxicorticosterona, fluprednisolona, propionato de E o a

" fluticasona, budesonida, dipropionato de beclometasona, flunisolida e a acetonido de triamcinolona, um androgênio (por exemplo,

desidroepiandrosterona (DHEA)), um estrogênio (por exemplo, estradiol),

agentes imunossupressores ou imunomoduladores (por exemplo, ciclosporina,

metotrexato, ouro, 86-mercaptopurina, produtos biológicos, como infliximabe,

etanercepte e adalimumabe, imunoglobulina intravenosa e mepolizumabe) e inibidores da calcineurina (por exemplo, ciclosporina, tacrolimus), os inibidores p38 da MAP quinase, inibidores de INK (diminuir API), vitamina D, inibidores de

MIF, ativadores de histona desacetilase-2, teofilina, inibidores de fosfoinositida-

3-quinase-5, modificadores de leucotrienos, beta agonistas de ação prolongada, antioxidantes, inibidores iNOS e inibidores de P-glicoproteína e combinações dos mesmos.

Dos outros agentes farmacêuticos acima, quando empregados em combinação com os agentes descritos no presente pedido,

podem ser usados, por exemplo, naquelas quantidades indicadas no

Physicians' Desk Reference (PDR), ou conforme determinado de outro modo por um técnico no assunto.

A quantidade de um agente utilizado com rotas não orais é preferencialmente determinada com base no nível de concentração de soro correspondente de uma dosagem oral ou contendo uma quantidade do composto ativo em uma quantidade suficiente para aliviar os sintomas do sujeito tratado.

Nos métodos fornecidos no presente pedido, esses outros agentes farmacêuticos podem ser administrados antes, simultaneamente ou após a administração dos compostos fornecidos no presente pedido.

Efeitos terapêuticos do uso de um sensibilizador de glicocorticoides incluem qualquer,

mas não se limitam a, dosagem poupadora de drogas de tratamento

—concomitantes acima, melhor responsividade ou tolerante a drogas de

| tratamento concomitante, obtendo eficácia usando dose mais baixa de drogas

| de tratamento concomitantes, prevenção de indivíduos em risco de desenvolver respostas refratárias ou resistência a drogas de tratamento concomitante, g——— ——p——————... w e. .u1cQ.—

: obtendo ótimas funções imunes, respostas mais fáceis após redução ou retirada de drogas de tratamento concomitantes ou administração prolongada de drogas de tratamento concomitantes, riscos reduzidos para desenvolvimento de eventos adversos relacionados a drogas devido a drogas de tratamento concomitantes e combinações das mesmas. Os Exemplos 1 a 2 demonstram o estabelecimento de modelos de estudo na avaliação da sensibilidade a esteroide e resistência a esteroide, ou seja, produção de IL-2 induzida por PHA e resistência a esteroide induzida por IL-2/4 em células mononucleares do sangue periférico (PBMC) a partir de homens fumantes saudáveis.

Os Exemplos 1 e 2 demonstram o estabelecimento de modelos de estudo na avaliação da sensibilidade a esteroide e resistência a esteroide, ou seja, produção de IL-2 induzida por PHA e resistência a esteroide induzida por IL-2/4 em células mononucleares do sangue periférico (PBMC) a partir de homens fumantes saudáveis.

Os Exemplos 3, 4 e 5 demonstram que o progestogênio reverte resistência a corticosteroide e aprimora a sensibilidade a corticosteroide mediante uma condição resistente a esteroide (ou seja, 1L-2/4 induzido).

Exemplos 6, 7 e 8 demonstram que progestogênio aprimora a sensibilidade a corticosteroide mediante uma condição não resistente a esteroide (ou seja, produção de IL-2 induzida por PHA sem adição de 1L-2/4). Foi surpreendentemente revelado, de acordo com a presente invenção, que os efeitos da utilização de um sensibilizador de glicocorticoide incluem, mas não se limitam a poupador de esteroide em pacientes | dependentes de corticosteroide, melhor responsividade ou tolerância aos —corticosteroides, alcançando eficácia usando uma dose mais baixa de corticosteroide, prevenindo indivíduos em risco de desenvolver respostas refratárias, resistência ou exacerbações em resposta à exposições de antígenos, infecções, exercícios ou irritantes, alcançando ótimas funções a o imunológicas, respostas mais fáceis para um paciente quando a administração " de esteroide é diminuída ou retirada, ou a administração prolongada de corticosteroides, diminuiu os riscos para o desenvolvimento de eventos adversos relacionados a corticosteroide, como infecções oportunistas, perda óssea, fratura patológica, diabetes, catarata e combinações das mesmas.

MATERIAIS E MÉTODOS DE TRIAGEM /N VITRO

VISÃO GERAL A resistência a esteroide induzida por IL-2/4 em células mononucleares do sangue periférico (PBMCs) é um modelo de estudo bem reconhecido para avaliar os possíveis modificadores de resistência e sensibilidade a esteroide (Kam, J, C. etc. Combination IL-2 and IL-4 reduces glucocorticoid receptor-binding affinity and T cell response to glucocorticoids. J. Immunol 1993. 151: 3460-3466. Irusen, E. etc. p38 mitogen-activated protein kinase-induced glucocorticoid receptor phosphorylation reduces its activity. role in steroid-insensitive asthma. J. Allergy Clin. Immunol 2002. 109: 649-657. Creed TJ etc. The Effects of Cytokines on Suppression of Lymphocyte Proliferation by Dexamethasone. J Immunol 2009; 183; 164-171). A inibição de dexametasona do teste de proliferação de linfócito e de citocina correlaciona com o desfecho da terapia de esteroide em pacientes com doenças inflamatórias. A supressão de citocina liberada por dexametasona (também — chamada no presente pedido como “dexametasona”) em voluntários saudáveis é usada para medir as alterações na sensibilidade de esteroide e na resistência a esteroide. Após o estímulo de PBMCs com fitohemaglutinina mitogênica (PHA), há uma forte correlação entre os níveis de secreção de citocina e a resistência a esteroide, bem como com a sensibilidade a esteroide in vitro. À adição de IL-2, IL-4 e TNF reduz a sensibilidade a esteroide. O objetivo de um estudo foi avaliar o efeito dos componentes sobre a reversão da resistência do corticoide por um aumento na capacidade ooo a o a o a o a ooo o oo a o o oo o o da dexametasona inibir IL-2 induzido por PHA no modelo resistente a esteroide f induzido por IL-2 e IL-4. Os efeitos dos compostos foram avaliados no aumento da sensibilidade a corticoide, medido pela melhora no IC50, poupador de — esteroide, que atinge uma eficácia anti-inflamatória semelhante pelo uso de uma dose menor de corticoide, melhor responsividade e combinação de efeitos sinergéticos na secreção de |L-2 induzida por PHA em PBMCs.

MATERIAIS Sistema de separação de PBMCs (células mononucleares do | 10 sangue periférico; PBMCs): Accuspin system-Histopaque de GEHealthcare Bio- Sciences AB (US); Meio RPMI-1640 de HyClone, Pequim, China, sulfóxido dimetílico (DMSO) da Sigma (US), 17a-CAPROATO DE HIDROXIPROGESTERONA (17HPC) (CAS No: 630-56-8), ACETATO DE | MEDROXIPROGESTERONA (MPA) (CAS No. 71 -58-9), Progesterona natural (P4) (CAS No. 57-83-0), dexametasona (dexametasona) (CAS No: 50-02-2) e PHA da Sigma Ltd (EUA); IL-2 e IL-4 recombinante da PeproTech, kit de teste imunoabsorvente de IL-2 (ELISA para IL-2) da ExCell Biology, Xangai, China; anti-humano anti-CD3 e anti-CD28 da R&D Systems (US). ISOLAMENTO DE PBMCs As PBMCs foram isoladas da camada leuco-plaquetária | sanguínea humana fornecida por um hemocentro regional. As células de camada leuco-plaquetária aleatórias de doadores do sexo masculino eram um subproduto do sangue processado para uso clínico e nenhum detalhe (ou seja, identificação regional e retrospecto) foi fornecido, exceto o uso de tabaco. Quase todos os doadores de sangue do sexo masculino eram fumantes de cigarro. As PBMCs foram separadas usando-se uma barreira porosa de polietileno de alta densidade (HISTOPAQUE do GEHealthcare Bio-Sciences AB (EUA). Após a centrifugação das amostras de sangue em cada tubo (35 | SN .

V minutos em 800 xg em temperatura ambiente ou RT), as PBMCs foram É coletadas e lavadas duas vezes com solução salina tamponada com Hank (HBSS). As PBMCs foram ressuspensas em meio RPMI-1640 que continha 10% de soro fetal bovino (FCS) e 15 nM de glutamina, as células foram — contadase plaqueadas.

CULTURA DE CÉLULAS As PBMCs (2 x 10º) foram incubadas com ou sem IL-2 (13 ng/ml) e I1L-4 (6,5 ng/ml) por 48 horas em meio RPMI-1640 que continha 10% de FCS e 2 mM de glutamina. As PBMCs foram contadas e plaqueadas novamente em 10” células/ml antes de estimular com ou sem 170a- CAPROATO DE HIDROXIPROGESTEONA (17HPC), Progesterona (P4) e | ACETATO DE MEDROXIPROGESTERONA (MPA) durante 12 horas antes do tratamento de Dexametasona As PBMCs estimuladas por IL-2 e IL-4 foram também plaqueadas em uma concentração de 10º células/ml em placas de 96 poços prontas para estímulo com PHA (15 ug/mL, 24 horas) de secreção de citocina e detecção por ELISA. ELISA SANDUÍCHE (ENSAIO IMUNOABSORVENTE LIGADO À ENZIMA) As Células PBMC (10º células/ml) foram plaqueadas em placas de 96 poços e estimuladas com ou sem dexametasona (10º M a 10º M) durante 1 hora antes de transferir as células para uma placa de 96 poços . com ou sem PHA (15 ug/mL), 24 horas em 37ºC, 5% de CO». As diluições em série dos padrões e os sobrenadantes das PBMCs foram medidas por ensaio imunoabsorvente ligado à enzima para determinar IL-2 no período basal e seus níveis depois dos tratamentos com 17HPC, P4 e MAP. À densidade óptica foi medida em 450 nm e corrigida com 550 nm. À concentração f IL-2 foi calculada usando-se a curva padrão e considerando a diluição do sobrenadante utilizada. O limite de detecção para IL-2 é de 4,0 pg/ml. Mt á ANÁLISE ESTATÍSTICA A Os dados são expressos como média + DP. As eficácias dos tratamentos do medicamento foram analisados por teste-t pareado, A análise unicaudal da variância foi usada para comparar três ou mais grupos — combinados elC de 95% foi realizado para apresentar as diferenças entre os grupos. Todos os gráficos indicam os valores médios dos resultados ou a % de inibição de 1L-2 estimulado por pHA. Os valores de IC50 foram calculados por uso de um modelo sigmoidal (BioDataFit). Um valor de p < 0,05 foi considerado estatisticamente significativo.

RESULTADOS MEDIÇÃO SIMULTÂNEA DE SENSIBILIDADE A ESTEROIDE EM PBMC's (1 os CÉLULAS/ML) Para medir a sensibilidade de glicocorticoide simultaneamente, as PBMCs (10º células/ml) foram plaqueadas em placas de 96 poços e estimuladas com ou sem diluições séricas de dexametasona (10º? M a 10º M) durante 1 hora e, então, foram posteriormente com PHA (15 ug/mL) durante 24 horas a 37ºC, 5% de CO». Os níveis de IL-2 foram quantificados usando-se ELISA. Os resultados na Figura 1 incluem os níveis basais de IL-2 nível, após o estímulo de PHA e a inibição dependente da dose de IL-2 por dexametasona. Os níveis de Il-2 em PBMCs foram de 19+25 pg/ml no período basal em homens fumantes saudáveis (n = 11), 677+447 pg/ml depois do estímulo de PHA PHA (n = 20), 371+447 pg/ml em dexametasona 10? M (n = 11), 287+313 pg/ml em dexametasona10º M (n = 14), 293+338 pg/ml em dex 10º M (n = 17) e 144+157 pg/ml em dexametasona 10º M (n = 17). Os tratamentos com dexametasona e 17HPC não tiveram efeito significativo no nível basal de | IL-2 (dados não apresentados). A Figura 1, então, mostra os níveis de IL-2 (média) no período basal, depois do estímulo de PHA e o efeito da dexametasona na produção de IL-2 induzida por PHA (n = 20) (p < 0,001). A :

| 40 D dexametasona mostra uma inibição significativa como resposta à dose da ii. produção de IL-2 (Figura 1). EXEMPLO 1 ADIÇÃO DE IL-2 E IL-4 REDUZ A SENSIBILIDADE A ESTEROIDE OU INDUZ A

RESISTÊNCIA A ESTEROIDE ENTRE HOMENS FUMANTES Resistência a esteroide induzida por I11-2/4 em PBMCs, um modelo de estudo bem reconhecido foi utilizado para avaliar modificadores potenciais de resistência e sensibilidade ao esteroide. Foram coletados PBMCs de fumantes saudáveis. Insensibilidade ou resistência a corticosteroide foi induzida por adição de IL-2 e IL-4 em células mononucleares do sangue periférico (PBMCs) de homens saudáveis fumantes (n = 11). As PBMCs (10º células/ml!) estimuladas com ou sem IL-2 (13 ng/ml) e IL-4 (6,5 ng/ml) foram cultivadas em placas de 96 poços durante 48 horas e sendo expostas de modo subsequente a diluições em série de dexametasona (10ºM, 10ºM a 10º M) durante 1 hora e, em seguida foram estimuladas com PHA (15 pa/mL) durante 24 horas a 37ºC, 5% de CO». Os níveis de IL-2 foram quantificados utilizando ELISA. A porcentagem de inibição sobre a produção de IL-2 induzido por PHA foi calculada como % de inibição = 1 - (IL-2 com dexametasona / IL-2 sem dexametasona).

Os resultados descritos na Figura 2 mostram que a capacidade de inibição de dexametasona sobre a produção de IL-2 induzido por PHA foi significativamente reduzido com adição de IL-2 e IL-4 entre homens fumantes. Por exemplo, a % de inibição com dexametasona em dose baixa 10º M foi completamente perdida: 52% contra nenhuma inibição, e com dose mais alta —dedexametasona 10º M: 87% contra 21%, uma redução significativa. A adição de IL-2 e I1L-4 reduz a sensibilidade a esteroide ou induz a resistência a esteroide entre homens fumantes, um modelo/condição resistente a esteroide válido.

a a a aa as na a

" N EXEMPLO 2 : fa PROGESTOGÊNIO APRIMORA A SENSIBILIDADE A CORTICOSTEROIDE OU REVERTE A

RESISTÊNCIA A CORTICOSTEROIDE ENTRE HOMENS FUMANTES A insensibilidade ou resistência ao corticosteroide pode ser revertida do ponto de vista farmacológico. Foram investigados os efeitos de classe de droga progestogênio que é atualmente desconhecida apesar de sua função na reversão de resistência a esteroide e drogas de teste de progestogênio de 170a-HIDROXIPROGESTERONA CAPROATO (17HPC), acetato de medroxiprogesterona (MPA) e PROGESTERONA NATURAL (P4) em seus efeitos no aprimoramento de sensibilidade de glicocorticoides em células mononucleares do sangue periférico (PBMCs) de homens saudáveis | fumantes. As PBMCs (10º célutas/m!) estimuladas com IL-2 (13 ng/ml) e IL-4 (6,5 ng/ml) foram cultivadas em placas de 96 poços durante 48 horas e de modo subsequente, estimuladas com 17HPC (10º M, 107 M e 10º M) ou P4 ou MPA ((10º M, 10º M e 10º M) durante 12 horas antes de ser exposta com | ou sem baixas e altas doses de dexametasona (10º M e 10º M) durante 1 hora e depois foram de modo subsequente com PHA (15 ug/mL) durante 24 horas a 37ºC, 5% de CO, (n = 11 para as combinações de grupos 17HPC + dexametasona). Os níveis de IL-2 foram quantificados utilizando ELISA. Um aumento de 10% na inibição máxima de dexametasona (Imax) mediante uma | condição resistente a esteroide representa um aprimoramento clínico significativo (Creed TJ etc. The Effects of Cytokines on Suppression of Lymphocyte Proliferation by Dexamethasone. J Immunol 2009; 183; 164-171). Os resultados descritos nas Figuras 3 a 4 mostram que o progestogênio aprimora de modo consistente a insensibilidade a corticosteroide por todos os três agentes de progestogênio (17HPC, P4 e MPA), quando é usada a dose baixa de dexametasona. O Imax aprimora a partir de 9% a 33%. ts,

: A Figura 3 descreve os efeitos do progestogênio (% de Imax) na reversão de a resistência a esteroide: comparando 17HPC, P4 e MPA mediante baixa dose de dexametasona (107º M). A Figura 4 descreve os efeitos do progestogênio (% de Imax) em reverter a resistência a esteroide: comparando 17HPC, P4 e —MPA mediante alta dose de dexametasona (10º M).

Os efeitos na reversão de resistência a corticosteroide são observados quando a alta dose de dexametasona é utilizada (Figura 4). Cada agente progestogênio tem o seu próprio padrão de resposta à dose. Entre as três drogas testadas, 17HPC tem os melhores efeitos de tratamento, ou seja, taxade aprimoramento mais alta (de 18%) e consistência de todos os níveis de dose (16 a 18%).

O progestogênio (por exemplo, 17HPC, P4 e MPA), dessa forma, tem o efeito surpreendente e inesperado de reversão de resistência a glicocorticoides e aprimoramento da sensibilidade ao glicocorticoide em fumantes de cigarro. O progestogênio, portanto, pode ser usado para doenças com resistência a glicocorticoide induzida por fumo tratadas como, por exemplo, doença pulmonar obstrutiva crônica (COPD).

EXEMPLO 3 REVERTER A RESISTÊNCIA A CORTICOSTEROIDE 17HPC ENTRE HOMENS FUMANTES As PBMCs (10º células / ml) estimulados com IL-2 (13 ng/ml) e IL- 4 (6,5 ng/ml) foram cultivadas em placas de 96 poços durante 48 horas e, de modo subsequente, estimuladas com 17HPC (10º M, 107 M e 10º M) durante 12 horas antes de serem expostas com ou sem três doses de dexametasona (10ºM, 10ººM e 10º M) durante 1 hora e, em seguida foram de modo — subsequentemente com PHA (15 ug/mL) durante 24 horas a 37ºC, 5% de CO, (n= 11). Os níveis de IL-2 foram quantificados utilizando ELISA.

A Figura 5 mostra que a adição de IL-2 e Il-4 reduziu significativamente a sensibilidade a esteroide em todas as três concentrações | p—— www annpp——epecvsnsss————sps—p—pp——W i aass——— —— an——— asae= sss——p—mm asa ea

: de dexametasona.

O aprimoramento de inibição a dexametasona por liberação "i de IL-2 induzido por PHA é alcançado por adição de 17HPC.

O 17HPC inverte a insensibilidade a glicocorticoide em uma dose-resposta padrão.

O 17HPC dessa forma restaura a sensibilidade a corticosteroide.

Por exemplo, o nível de IL-2 induzido por PHA com dexametasona 10º M, mas sem 17HPC foi de 2364 pg/ml contra supressão de citocina significativamente melhorada de 2119, 1805 e 1595 pg/ml após a adição de 17HPC em 107º M, 107 M e 10º M, respectivamente (p < 0,05 em ambos os grupos 17HPC 107 M e 10º M). A Figura 6 mostra as respostas individuais antes e após O tratamento 17HPC quando foi dada a dose elevada de dexametasona 10º M.

Dez de cada 11 sujeitos tiveram uma melhora de mais de 10% (em % de inibição máximo de dexametasona) após o tratamento com 17HPC, e apenas um sujeito (46) não apresentou melhora (p < 0,05 em teste de qui-quadrado para todos os três grupos de dose 17HPC). O 17HPC dessa forma reverte a resistência a esteroides e padrões de resposta individuais.

EXEMPLO 4 PADRÕES DE RESPOSTA INDIVIDUAIS COM TRÊS AGENTES PROGESTOGÊNIO: 17HPC, P4E MPA O Exemplo 3 acima mostrou que progestogênio reverte a resistência a corticosteroide entre homens fumantes.

A Figura 7 a 9 compara os padrões de resposta individuais com três agentes de progestogênios: 17HPC, P4 e MPA com a mesma dose de dexametasona de 10º M. . Os resultados descritos na Figura 7 mostram que 9 em cada 11 sujeitos tiveram uma melhora de mais de 10% em inibição máxima de —dexametasona após receber uma dose de 17HPC, o que é consistente com os resultados apresentados na Figura 6. | Os resultados descritos na Figura 8 mostram que 6 em cada 8 sujeitos tiveram uma melhora superior de mais de 10% em inibição máxima de a amanita aa eta,

| 44 2 Ss dexametasona após receber uma dose de progesterona natural, que é semelhante ao 17HPC. Os resultados descritos na Figura 9 mostram que o tratamento com MPA leva a um padrão de resposta total diferente: uma resposta “dividida”. Um subgrupo teve uma grande melhora de até 58%, enquanto que outro subgrupo apresentou uma redução de até 88% com um agravamento na sensibilidade a corticosteroide. ExEMPLO 5 PROGESTOGÊNIO (POR EXEMPLO, 17HPC) MELHORA A SENSIBILIDADE A

CORTICOSTEROIDE MEDIANTE UMA CONDIÇÃO RESISTENTE A NÃO ESTEROIDE Para determinar o efeito de tratamento complementar de 17HPC simultaneamente sobre a sensibilidade a glicocorticoide, PBMCs (108 células/ml) foram plaqueadas em placas de 96 poços e estimuladas com 17HPC (10 M a 10º M) durante 12 horas antes de ser exposta com ou sem diluições em série de dexametasona (10º? M a 10º M) durante 1 hora e, em seguida foram de modo subsequente com PHA (15 ug/ml) durante 24 horas a 37ºC, 5% de CO». Os níveis de IL-2 foram quantificados utilizando ELISA. Os valores de ICso foram calculados usando-se um modelo sigmoide (BioDataFit). O valor (de IL-2 = 734) do controle negativo (ou seja, célula + PHA sem dexametasona ou 17HPC) foi artificialmente definido como a dexametasona”º M ou 17HPC”?” M (ou seja, assumindo a concentração da droga de aproximadamente O M) para ajustar-se ao modelo sigmoide quando calcular dexametasona-lCso e 17HPC-ICs5o (N = 14).

Os efeitos de 17HPC sobre a sensibilidade a dexametasona | 25 —medido por inibição a IL-2 em fumantes são mostrados na Tabela 1 e na Figura

10. A Figura 10 mostra o efeito complementar de 17HPC e é uma melhora da sensibilidade a esteroide. 17HPC, especialmente em concentrações mais baixas, aumenta significativamente a sensibilidade a esteroide medida por dexametasona- a e Mar en sra

| 45 : ICs5o, que é aprimorada a partir de ICs9 = 7,5 (apenas dexametasona) para 10,2 a " 12,0 (dexametasona + 17HPC) (p = 0,0052 em ANOVA). A dose mais alta de 17HPC (a 17HPC 10º M) teve efeito mínimo ou nenhum efeito. TABELA 1 —EFEITODE17HPCNAMELHORA DA SENSIBILIDADE ACORTICOSTEROIDE (MEO IL-2 PGIML E 1C5o) [TR ressesros ss02200007 | s20 000502 [ 160 2100055 | 225504007 [0 190007 [rom [ramais [arosemets | rsaz0enso | 1rrssossts] razaranno [oco [rotm | sraesmss | roramanso [17770070 [rost8ae | smnsren | r1ex,| [rom | ssa sereis | rasas [ 62920106s [ 1a8 3005007 e z000 [rom | reosasaass — [oosoesans [zramreva [agrersem | 200 | a |

ER TEDCIDCDCIS ExEMPLO 6 PROGESTOGÊNIO (POR EXEMPLO, 17HPC) TEM EFEITOS POUPADORES DE

ESTEROIDE SIGNIFICATIVO Para determinar o efeito de tratamento complementar de 17HPC simultaneamente sobre o glicocorticoide poupado, PBMCs (10º célutas/ml) foram plaqueadas em placas de 96 poços e estimuladas com 17HPC (10º Ma 10º M) durante 12 horas antes de ser exposta com ou sem diluições em série de dexametasona (10? M a 10º M) durante 1 hora e, em seguida foram de —modo subsequente com PHA (15 pg/ml) durante 24 horas a 37ºC, 5% de CO». Os níveis de IL-2 foram quantificados utilizando ELISA. Foi calculado o % de inibição de estímulo de PHA de IL-2 (pg/ml) por 17HPC e/ou dexametasona (dexametasona) em PBMCs. O valor (de IL-2 = 734,7) do controle negativo (ou seja, célula + PHA sem qualquer tratamento de droga) foi definido como zero % deinibiçãoe todos os outros valores de % de inibição foram derivados a partir da fórmula: (1 - (nível de tratamento IL-2 / 714,5) x 100%, (N = 14) (nota: 714,5 o aa Da uu, up bh ng/ml (IL-2 induzido por PHA) foi o valor médio a partir dos 14 sujeitos). fá O complemento de 17HPC pode alcançar eficácia similar usando- se uma dose mais baixa de corticosteroide (Tabela 2). A porcentagem de supressão de liberações de IL-2 por dose mais alta de 10º M de dexametasona (Imax) em fumantes saudáveis é de 78%. O tratamento complementar de 17HPC irá reduzir significativamente a dose necessária de dexametasona. À Tabela 2 mostra que o complemento das doses mais baixas de 17HPC (107 M ou 107º M) irá alcançar um efeito anti-inflamatório semelhante (inibição de IL-2 > 78%) em comparação a dexametasona 10º M), ou seja, usando apenas a 1/1.000º a 1/100.000º da dose original de dexametasona, um efeito poupador de esteroide substancial. Portanto, o complemento de 17HPC pode prevenir que indivíduos em risco para desenvolvimento de respostas refratárias, resistência, exacerbações ou tolerâncias aos corticosteroides, bem como melhorar o perfil de segurança. TABELA 2 EFEITO COMPLEMENTAR DE 17HPC: EFEITO POUPADOR DE ESTEROIDE MEDIDO POR % DE INIBIÇÃO DE PHA AO ESTÍMULO DE IL-2

RENTALS Dexametasona 10" mM 10º M 10º M Os valores representam o % de inibição de PHA ao estímulo de IL-2 (pg/ml) por apenas 17HPC, apenas dexametasona e 17HPC mais dexametasona em diferentes concentrações no modelo PBMC. ——— a a a a

" EXEMPLO 7 COMPLEMENTO DE PROGESTOGÊNIO (POR EXEMPLO, 17HPC) LEVA A UMA MELHORA DE RESPONSIVIDADE AO TRATAMENTO E A COMBINAÇÃO DE 17HPC com

DEXAMETASONA RESULTA EM EFEITOS SINÉRGICOS Para determinar o efeito de tratamento complementar de 17HPC simultaneamente sobre o glicocorticoide poupado, PBMCs (10º células/ml) foram plaqueadas em placas de 96 poços e estimuladas com 17HPC (10 M a 10º M) durante 12 horas antes de ser exposta com ou sem diluições em série de dexametasona (10? M a 10º M) durante 1 hora e, em seguida foram de modo subsequente com PHA (15 pg/ml) durante 24 horas a 37ºC, 5% de CO,. Os níveis de IL-2 foram quantificados utilizando ELISA. Foi calculado o % de inibição de estímulo de PHA de IL-2 (pg/ml) por 17HPC e/ou dexametasona (dexametasona) em PBMCs. O valor (de IL-2 = 734,7) do controle negativo (ou seja, célula + PHA sem qualquer tratamento de droga) foi definido como zero % deinibiçãoe todos os outros valores de % de inibição foram derivados a partir da fórmula: (1 - (nível de tratamento IL-2 / 714,5) x 100%, (N = 14). O efeito anti-inflamatório máximo de dexametasona é a inibição de 78% de produção de IL-2 induzido por PHA a 10º M. O tratamento “complementar” de 17HPC produz uma responsividade significativamente melhor e resulta em quase 100% de supressão de IL-2 induzido por PHA (Figura 11). A Figura 11 dessa forma descreve uma melhor responsividade ao tratamento com o complemento de 17HPC. Além disso, a combinação de 17HPC com dexametasona consistentemente aumenta os efeitos anti-inflamatórios de dexametasona e é | 25 melhor do que as suas utilizações individualmente. A Figura 12 mostra que a combinação leva a um efeito sinérgico, com melhorias de 25 a 37% na eficácia de dexametasona. A Figura 12 então descreve efeitos sinérgicos de combinação de 17HPC com dexametasona. ps

E EXEMPLO 8 MPA) MOSTRA EFEITOS SEMELHANTES NO AUMENTO DE SENSIBILIDADE À

GLICOCORTICOIDE Para determinar o efeito de tratamento complementar de ACETATO DE MEDROXIPROGESTERONA (MPA) e Progesterona natural (P4) simultaneamente sobre o glicocorticoide poupado, PBMCs (10º células/ml) foram plaqueadas em placas de 96 poços e estimuladas com P4 ou MPA (107º M, 10º M e 10º M) durante 12 horas antes de ser exposta com ou sem dexametasona (10º M a 10º M) durante 1 hora e, em seguida foram de modo subsequente com PHA (15 ug/ml) durante 24 horas a 37ºC, 5% de CO, (n = 6 para as combinações de P4 ou MAP + dexametasona). Os níveis de IL-2 foram quantificados utilizando ELISA. Foi calculado o % de inibição de estímulo de PHA de IL-2 (pg/ml) por P4 ou MPA e/ou dexametasona (dexametasona) em PBMCs. O valor (de IL-2 = 765) do controle negativo (ou seja, célula + PHA sem qualquer tratamento de droga, n = 25) foi definido como zero % de inibição e todos os outros valores de % de inibição foram derivados a partir da fórmula: (1 - (nível de tratamento IL-2 / 765) x 100%. A Tabela 3 e Tabela 4 mostram que tanto P4 como MPA têm efeitos semelhantes em aumentar a sensibilidade a glicocorticoide como efeitos poupadores de esteroide e sinérgico de combinação. Para exemplos, a porcentagem de supressão de liberações de IL- 2 por 10º M de dexametasona é melhorada de 67% a 96% quando é adicionado 10º M de MPA (P= 0,035 em comparação ao Teste T). O complemento da dose baixa tanto de P4 como de MPA (10º M) irá alcançar um efeito anti-inflamatório semelhante (inibição de IL-2 > 86%) em comparação a dexametasona 10º M), ou seja, usando apenas a 1/100º da dose original de dexametasona, um efeito poupador de esteroide substancial. ;

TABELA 3 EFEITOS COMPLEMENTARES DE ACETATO DE MEDROXIPROGESTERONA (MPA) SOBRE O AUMENTO DE SENSIBILIDADE A GLICOCORTICOIDE (MEIO IL-2 PG/ML E % DE INIBIÇÃO DE PRODUÇÃO DE IL-2 INDUZIDO POR PHA)

MPA 10" M 765,0 206,1 166,9 39,8 (0,0%) (73%) (78%) (95%) DEXAMETASONA 2161 129,1 10E11M (72%) (83%) " DEXAMETASONA 251,6 44,7 29,2 12,3 10E'8M (67%) (94%) (96%) (98%) DEXAMETASONA 109,6 10E'6M (86%) TABELA 4 EFEITOS COMPLEMENTARES DE PROGESTERONA NATURAL (P4) SOBRE O AUMENTO DE SENSIBILIDADE A GLICOCORTICOIDE (MEIO IL.-2 PG/ML E % DE INIBIÇÃO DE PRODUÇÃO DE IL-2 INDUZIDO POR PHA) P4 10º M (0,0%) (34%) (36% (85%) DEXAMETASONA 216,1 100,8 10E-11M (72%) (87%) DEXAMETASONA 251,6 59,6 291,4 81,2 10E8M (67%) (92%) (88%) (89%) DEXAMETASONA 109,6 10E'6M (86%)

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NV REIVINDICAÇÕES " 1. USO DE UMA COMPOSIÇÃO FARMACÊUTICA, que compreende um hormônio esteroide (progestogênio) como um sensibilizador de glicocorticoide, caracterizado pelo fato de que é para a fabricação de um medicamento para restabelecimento da sensibilidade a corticosteroide, aumento da sensibilidade a glicocorticoide e reversão da insensibilidade a glicocorticoide em um sujeito que vivencia dependência de corticosteroide, resistência a corticoide ou não responsividade ou intolerância a corticosteroides, para o sujeito que apresenta. uma ou mais condições relacionadas à insensibilidade a glicocorticoide, em que o sujeito não tem histórico de exacerbação relacionada ao ciclo menstrual, e ainda em que as condições relacionadas à insensibilidade a glicocorticoide compreendem uma série de disfunções/doenças imunoinflamatórias tratadas com esteroides, quando a terapia não consegue obter o controle da doença ou não é efetiva, intolerante ou dependente de corticosteroide, e combinações dos mesmos.

2. USO DE UMA COMPOSIÇÃO FARMACÊUTICA, que compreende um hormônio esteroide (progestogênio) como um sensibilizador de glicocorticoide, caracterizado pelo fato de que é para a fabricação de um medicamento para o tratamento de doenças, disfunções ou condições relacionadas à insensibilidade a glicocorticoide em um sujeito que apresenta insensibilidade a glicocorticoide, em que a insensibilidade a glicocorticoide compreende dependência de corticosteroide ou resistência a corticoide ou não responsividade ou intolerância a corticosteroide, e em que o sujeito não tem histórico de exacerbação relacionada ao ciclo menstrual.

3. USO DE UMA COMPOSIÇÃO FARMACÊUTICA, que compreende um hormônio esteroide, caracterizado pelo fato de que é para a fabricação de um medicamento para restabelecer a sensibilidade a corticosteroide ou reverter a insensibilidade a glicocorticoide ou aumentar a e

" sensibilidade a glicocorticoide, para tratar uma ou mais condições relacionadas à insensibilidade a glicocorticoide selecionadas a partir do grupo que consiste em uma série de doenças resistentes a corticoide e disfunções imunoinflamatórias tratadas com glicocorticoide quando a terapia torna-se ineficaz, intolerante, dependente, não responsiva ou refratária a corticosteroides, e combinações das mesmas em um sujeito que não tem histórico de exacerbação relacionada ao ciclo menstrual e em que o sujeito apresenta uma ou mais doenças, disfunções ou condições relacionadas à insensibilidade a glicocorticoide, selecionadas a partir do grupo que consiste em asma resistente a glicocorticoide, artrite reumatoide refratária, doença intestinal inflamatória refratária, doença pulmonar obstrutiva crônica, síndrome da angústia respiratória aguda, fibrose pulmonar intersticial, fibrose cística,

colite ulcerativa refratária, crianças com doença de Crohn grave, asma refratária a corticosteroide, pneumonia intersticial descamativa refratária a

—corticosteroide, miopatias inflamatórias refratárias, miastenia grave refratária,

pênfigo vulgar refratário, pacientes com RA refratários a metotrexato, síndrome nefrótica refratária, esclerose múltipla refratária, doença similar a psilose refratária, sarcoidose resistente a esteroide, lesões da mucosa refratárias de pênfigo vulgar, síndrome de Schnitzler refratária, dermatite resistente de cabeçae pescoço, dermatite atópica grave refratária, púrpura trombocitopênica idiopática refratária, miosite orbital refratária, linfomas refratários ou recorrentes, pacientes criticamente doentes com sepse ou síndrome do desconforto respiratório agudo (ARDS) e insuficiência adrenal relativa, rosácea,

polimialgia reumática, arterite de células gigantes, polimiosite, dermatomiosite,

síndrome de Kawasaki, síndrome de Guillain-Barré, polineuropatia desmielinizante inflamatória crônica, neuropatia motora multifocal, síndrome da

| pessoa rígida, lúpus eritematoso sistêmico dependente de corticosteroide,

| esclerose múltipla dependente de corticosteroide, asma sintomática —————mm——m—————m—————m—m——

" dependente de corticosteroide, síndrome primária de Sjógren's, vasculite sistêmica, polimiosite, transplantes de órgãos, doença do enxerto contra hospedeiro, “doenças inflamatórias, doenças autoimunes, doenças hiperproliferativas, lúpus, osteoartrite, rinossinusite, poliarterite nodosa,

— granulomatose de Wegener, arterite de células gigantes, rinite alérgica,

urticária, angioedema hereditário, tendinite, bursite, hepatite crônica autoimune ativa, cirrose, rejeição de transplante, psoríase, dermatite, malignidades,

leucemia, mielomas, linfomas, insuficiência adrenal aguda, febre reumática,

doença granulomatosa, proliferação/apoptose imune, supressão e regulação do eixo hipotalâmico-hipofisário-adrenal (HPA), hipercortisolemia, modulação do balanço de citocinas Th1/Th2, doença renal crônica, lesão medular, edema cerebral, trombocitopenia, síndrome de Little, doença de Addison, anemia hemolítica autoimune, uveite, pênfigo vulgar, pólipos nasais, sepse, infecções bacterianas, infecções virais, infecções por Rickettsia, infecções parasitárias,

diabetes tipo Il, obesidade, síndrome metabólica, depressão, esquizofrenia,

transtornos do humor, síndrome de Cushing, ansiedade, distúrbios do sono,

aprimoramento de memória e aprendizagem, glaucoma induzido por

| glicocorticoide, dermatite atópica, reações de hipersensibilidade a drogas,

doença do soro, dermatite herpetiforme bolhosa, dermatite de contato,

; 20 eritrodermia esfoliativa, micose fungoide, pênfigo, tireoidite não supurativa,

oftalmia simpática, uveite, condições inflamatórias oculares não responsivas

| aos esteroides tópicos, aspergilose broncopulmonar alérgica, tuberculose pulmonar fulminante ou disseminada quando usado concomitantemente com

; quimioterapia apropriada, pneumonite por hipersensibilidade, bronquiolite i 25 —obliterante com pneumonia em organização idiopática, pneumonias eosinofílicas idiopáticas, fibrose pulmonar idiopática pneumonia por

! Pneumocystis carinii (PCP) associada à hipoxemia ocorrendo em um indivíduo

| HIV(+) que também está sob tratamento apropriado com antibióticos anti-cPCP, =

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". P diurese ou remissão de proteinúria na síndrome nefrótica, sem uremia, do tipo idiopático ou devido ao lúpus eritematoso, espondilite anquilosante, polimialgia reumática, artrite psoriática, policondrite recidivante, triquinose com envolvimento neurológico ou do miocárdio e meningite tuberculosa. 4, USO, de acordo com uma das reivindicações 1 a 3, caracterizado pelo fato de que o hormônio esteroide é progestogênio.

5. USO, de acordo com uma das reivindicações 1 a 4, caracterizado pelo fato de que o medicamento é para administração via parenteral, intravenosa, pulmonar, oral, retal, bucal, transdérmica, intravaginal, aplicação local, aplicação tópica, injeção de depósito, subcutânea, intraperitoneal, intra-arterial e injeção intramuscular.

6. USO, de acordo com uma das reivindicações 1 a 5, caracterizado pelo fato de que progestogênio é selecionado a partir do grupo que consiste em 17alfa- hidroxiprogesterona ou um derivado da mesma, progesterona natural, didrogesterona ou um derivado ou metabólito da mesma, medrogestona ou um derivado ou metabólito da mesma, medroxiprogesterona ou um derivado ou metabólito da mesma, megestrol ou um derivado ou metabólito do mesmo, clormadinona ou um derivado ou metabólito da mesma, ciproterona ou um derivado ou metabólito da mesma, gestonorona ou um derivado ou metabólito da mesma, nomegestrol ou um derivado ou metabólito | da mesma, demegestona ou um derivado ou metabólito da mesma, | promegestona ou um derivado ou metabólito da mesma, nestorona ou um | derivado ou metabólito da mesma, trimegestona ou um derivado ou metabólito da mesma, noretisterona ou um derivado ou metabólito da mesma, linestrenol ou um derivado ou metabólito do mesmo, etinodiol ou um derivado ou ! metabólito do mesmo, diacetato, norgestrel ou um derivado ou metabólito do | mesmo, levonorgestrel ou um derivado ou metabólito do mesmo, desogestrel ! ou um derivado ou metabólito do mesmo, etonogestrel (3-cetodesogestrel) ou |

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7. USO, de acordo com a reivindicação 6, caracterizado pelo fato de que o derivado de progestogênio é selecionado a partir do grupo que consiste em sal de amina, sal de metal alcalino, sal de metal de transição, outros sais metálicos, sal de um ácido mineral, sal de um ácido orgânico, um éster, éter ou éster enólico, ácido, base, solvato, hidrato ou pró-droga antes da formulação.

8. USO, de acordo com a reivindicação 7, caracterizado pelo fato de que o derivado de 17alfa-hidroxiprogesterona é um éster de ácido carboxílico de 17alfa-hidroxiprogesterona.

9. USO, de acordo com uma das reivindicações 1 a 8, caracterizado pelo fato de que o medicamento contendo progestogênio compreende ainda glicocorticoide.

10. USO DE PELO MENOS UM PROGESTOGÊNIO, caracterizado pelo fato de que é para a fabricação de um medicamento para tratamento de uma doença resistente a glicocorticoide induzida pelo fumo.

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* Resumo Ê “USOS DE UMA COMPOSIÇÃO FARMACÊUTICA E USO DE PELO MENOS UM PROGESTOGÊNIO” São fornecidos métodos e Kits para administração de — progestogênio como um sensibilizador de glicocorticoide para restabelecer a sensibilidade a corticosteroide ou reverter a insensibilidade a glicocorticoide ou aumentar a sensibilidade a glicocorticoide, a fim de tratar uma ou mais doenças ou condições relacionadas à insensibilidade a glicocorticoide. Por exemplo, esses incluem métodos para reverter a insensibilidade a glicocorticoide em um sujeito que não tem histórico de exacerbação relacionada ao ciclo menstrual ou | alergia a auto-hormônios, particularmente progesterona, como deterioração pré-menstrual ou perimenstrual nos sintomas, por exemplo, agravamento pré- : menstrual de dermatite atópica ou exacerbações de asma pré-menstrual, e que ; exibem respostas relativamente ou totalmente refratárias à terapia com | 15 —glicocorticoide, por exemplo, resistência a glicocorticoide. Os métodos e kits ! fornecem a administração de um hormônio sexual para o sujeito que é | dependente de corticosteroide ou resistente a corticoide, ou não responsivo ou ; intolerantes a corticosteroide, ou intolerante a corticosteroide. |

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