BR112012004539A2 - composto, composto de orotato, polimorfo de forma 1 e poliformo de forma 2 - Google Patents

Abstract

COMPOSTO, COMPOSTO DE OROTATO, POLIMORFO DE FORMA 1 E POLIFORMO DE FORMA 2 Novos polimorfos de 1,2,3-triazol amino substituído ou 5-amino e seus derivados substituídos, de orotatos dos carboxiamidotriazóis, de formulações dos triazóis e ácido orótico na proporção de 1:1 a 1:4 (base:ácido) e de processos mais seguros da preparação dos rnesmos são divulgados. Os . compostos são úteis no controle e no tratamento de doenças, incluindo, entre outras, cânceres sólidos, degeneração macular, retinopatia, leucemia mieloide crônica, AIDS e doenças que dependem de transdução de sinal aberrante. processos aperfeiçoados para preparar as formulações de orotato usam materiais de partida intermediários de azida estáveis, eficientes e mais seguros na síntese de novos polimorfos de carboxiamidotriazol.

Description

COMPOSTO, COMPOSTO DE OROTATO, POLIMORFO DE FORMA 1 E POLIFORMO DE FORMA 2

REFERÊNCIA CRUZADA COM OUTRO PEDIDO Este pedido é uma continuação parcial do Pedido de Patente dos Estados Unidos de No. de Série 12/584,.448 depositado em 4 de setembro de 2009, que é incorporado ' neste documento, com referências em sua totalidade.

1. CAMPO DA INVENÇÃO ] Esta invenção refere-se aos novos compostos químicos de 1,2,3-triazóis amino substituídos ou 5-amino, assim como seus derivados substitutos (referidos neste documento como carboxiamidotriazóis ou CAI), às formulações | de orotatos de 1,2,3-triazóis amino substituídos ou 5- | amino, assim como seus derivados substituídos, (com proporções base:ácido definidas, CcTOS), as formulação de orotatos de 1,2,3-triazol amino substituídos ou 5-amino, assim como seus derivados substituídos e ácido orótico, (com proporções base:ácido definidas, CAOS) e aos processos mais seguros da preparação dos mesmos, usando-se materiais de partida estáveis, mais eficientes e mais seguros para sintetizar materiais intermediários de azida necessários nas vias de síntese para CAI e as formulação de orotato - CTO e CAO. Mais particularmente, a invenção refere-se aos novos polimorfos de 1,2,3-triazóis amino substitu- ídos ou 5-amino, assim como seus derivados substitutos. Esta invenção ainda mais particularmente refere-se ' aos orotatos de 1,2,3-triazóis amino substituídos ou 5- amino novos (CTOsS com proporções ideais de base:ácido no intervalo de 1:1 a 1:4), assim como formulações de 1,2,3- triazóis amino substituídos ou 5-amino, assim como seus derivados substitutos e ácido orótico (CAO) em propor- ções ideais de base:ácido de 1:1 a 1:4, e uso dos mesmos no controle e tratamento de doenças, incluindo, entre

O V ] 2/29 | outras, cânceres sólidos, degeneração macular, retinopatia, leucemia mieloide crônica, AIDS e doenças que dependem de transdução de sinal aberrante e proliferação.

2. HISTÓRICO DA INVENÇÃO o 5 Esta invenção está no campo do desenvolvimento de novos polimorfos de 1,2,3-triazol amino substituído ou 5- | *. amino (CAT), assim como seus derivados substituídos, de orotatos de 1,2,3-triazóis amino substituídos ou 5-amino, assim como seus derivados substituídos, e de formulações de 1,2,3-triazóis amino substituídos ou 5-amino, assim como seus derivados substitutos e ácido orótico (em proporções ideais de base:ácido). O objetivo é desenvolver novos polimorfos de 1,2,3-triazóis amino substituídos ou 5-amino, assim como seus Ú derivados substitutos, para melhorar as propriedades químicas, biológicas, farmacocinéticas e toxicocinéticas e i melhorar as propriedades terapêuticas, incluindo, entre outras, atividade anticancerígena, atividade antimetastática, transdução de sinal mediada por cálcio, antiangiogênica, anti-PI3, anti-COX2, de apoptose, de regulação descendente da proteína BCR-ABL em leucemia mieloide crônica, de regulação da transcrição de HIV LTR ou propriedades anti-VEGF1.

Em 1986, demonstrou-se que compostos de 1,2,3- triazol amino substituídos ou 5-amino, assim como seus derivados substituídos tinham atividade anticoccídica. A Pat.

No. US 4.590.201, expedida para R. J. Bochis et al., 1986, o descreve o método de preparação de 5-amino-l-(4-[4- clorobenzoil] -3,5-diclorobenzil)-1,2,3-triazol-4-carboxamida .*. (L651582 ou CAI), que incluiu a utilização de azida sódica para sintetizar um intermediário fundamental na via, azida de 3,5-dicloro-4- (4-clorobenzoil)benzila. Subsequentemente, demonstrou-se que L651582 ou CAI inibe vias de transdução de sinal selecionadas, incluindo aquelas que envolvem o influxo de cálcio, a liberação de ácido araquidônico e a geração de fosfatos de inositol. A Pat. US 5.359.078, expedida para E. C. Kohn et al., 1994. “L651582”, como usado neste documento, representa L6515182, CAI, carboxiamidotriazol, NSC 609974 ou 99519-84-3 descrito na técnica anterior, -. 5 A Pat. No. US 5.912.346 expedida para F. Wehrmann, 1999, em seguida, descreveu sais inorgânicos e orgânicos de .s L651582 e em particular descreveu o processo de preparação do sal de orotato de L651582. O L651582 foi preparado pelo processo descrito na Pat. No. US 4.590.201. L651582:0rotato estava na relação de 2:1 (base:ácido) como caracterizado por RMN de próton e tinha um ponto de fusão de 234-235ºC. Como descrito acima, a síntese do intermediário de azida de 3-(4- clorobenzoil)-4-clorobenzila foi realizada utilizando oO ' intermediário brometo de 3-(4-clorobenzoil)-4-clorobenzoil e azida sódica em etanol. A Pat. No. US 5.912.346 descreveu a atividade antitumoral melhorada de orotato de L651582 (orotato de CAI, base:ácido, 2:1) comparada com a de dose equivalente de L651582 no modelo de câncer de próstata Dunning R-3227-AT-1 independente de androgênio em ratos.

Carboxiamidotriazol, L651582, CAI, NSC 609974 Ou 99519-84-3, um inibidor de transdução de sinal mediada por cálcio, é um dos primeiros fármacos anticâncer inibidores de sinal citostático descobertos. Foi testado em pacientes que sofrem de cânceres sólidos em ensaios de Fase IL, Fase II e Fase IIT no Instituto Nacional do Câncer (National Cancer ás Institute). Entretanto, o NCI parou de desenvolver o L651582 porque ele não conseguiu demonstrar eficácia em ensaios em “. humanos e/ou foi atormentado por má biodisponibilidade, toxicidade gastrointestinal severa, neurotoxicidade e problemas de tolerância que impediram a dose ideal de atingir o efeito terapêutico. Cápsulas de formulação micronizada de L651582 em PEG-400 foram usadas em estudos clínicos para melhorar a biodisponibilidade do fármaco. Kohn EC et al.,

Clinical Cancer Res 7:1600-1609 (2001); Bauer KS et al,, Clinical Cancer Res 5:2324-2329 (1999); Berlin J et al., O Clin One 15;781-789 (1997); Berlin J et al., Clinical Cancer Res 8:86-94 (2002); Yasui H et al., J Biol Chem 45:28762- .. 5 28770 (1997); Alessandro R et al., J Cell Physiol 215:111-121 (2008).

.. Portanto, o orotato de L651582 (base:ácido 2:1) descrito na Pat. No. US 5.912.346, representou uma maneira potencial de salvar este fármaco promissor, L651582, melhorando sua eficácia, com base em estudos pré-clínicos.

l Entretanto, problemas foram encontrados na ampliação do processo de preparação de orotato de L651582 (proporção 2:1) | em quantidades a granel, de acordo com o método descrito na o Pat. No. US 5.912.346.

'

á ou o Etapa TEDMS-CLInidazoL oTIINE maia caca camião O DMAD,DMF o 9581 os e álcool 3,5-diclorobenzílico e er Cloreto de 4-clorobenzoila TRAD, SUCH, Dezune .. Etapa dois > bs pe remo — > Etapa THF,n-BuLi 859B ' ne 4 1 M er [C Bat M Etapa ————o Wet 0/0 CM o E o E a see essD Í na “o NH2 n" E o . Ja , o .s.. Etapa cinco KyCOp,Acetonitriza o er nao o Hidrato de ácido orótico

EUR O L . WMetano1/água ID A, e. Etapa seis C) Gr B858F Com relação ao uso de ácido orótico na intensificação do efeito analgésico de fármacos, a Pat. No. US 4.061.741, expedida para Wawretschek W. et al., 1977, descreve o uso de dextropropoxifeno-HCl, levopropoxifeno-HCl, .. ou salicilato de sódio em combinação com orotato de colina, e conclui que uma formulação do fármaco em combinação com VU orotato de colina deu os melhores efeitos. Claramente, a técnica anterior apresenta ensinamentos contraditórios sobre as proporções e natureza química da ligação de ácido orótico com compostos químicos. O esquema de síntese descrito na técnica anterior para orotato de L651582 é mostrado no Esquema de Reação I acima.

Um identificador de produto é 858, por exemplo, 858A a 858D representam intermediários.

O carboxiamidotriazol (CAI) é representado por 858E.

Representa carboxiamidotriazol:ácido orótico ou carboxiamidotriazol:orotato, ou o CTO como o 5 definido neste documento, 858F.

Ensinamentos da técnica anterior sugeriram o uso de orotato de colina em combinação com o fármaco para ser uma : realização preferida.

Infelizmente, isso não tratou dos problemas encontrados na presente invenção de ampliação da produção de CTO para desenvolvimento clínico.

Não ficou claro se a proporção base:ácido no orotato de L651582 (2:1) era a estrutura química ideal do fármaco.

Além disso, foram encontrados problemas ao ampliar a produção de orotato de Ú L651582 (2:1) para a fabricação de grandes quantidades.

Poucos fabricantes tinham o equipamento e instalações necessários para entregar quantidades a granel de azida sódica, e os contratados que tinham as instalações cobravam grandes taxas de serviços.

Após a proteção do grupo álcool em álcool 3,5- diclorobenzílico, como a etapa de éter de TBDMS (etapa 1), O éter reage com cloreto de 4-clorobenzoil para formar o benzofeno substituído (etapa 2). O benzofeno é tratado com cloreto de tionila (etapa 3) e, em seguida, com azida sódica (etapa 4) para formar azida de 3,5-dicloro-4-(4- clorobenzoil)benzila.

A reação desta azida com cianoacetamida ... produz L651582 (etapa 5). A reação de L651582 com ácido orótico forma o orotato de L651582 (2:1) (etapa 6). VU O uso de azida sódica no processo acima na etapa 4 foi uma desvantagem séria para a ampliação da produção de orotato de L6515182 em grandes quantidades.

A manipulação de grandes quantidades de azida sódica tem que ser feita em reatores especiais sensíveis à pressão, visto que a azida sódica é um material perigoso de conteúdo de alta energia.

As instalações especiais de contenção necessárias para manipular a azida sódica em geral aumentaram o custo de fabricação, porque poucos fabricantes de fármacos tiveram a capacidade de ampliar o processo para quantidades a granel do fármaco.

Isso o 5 ocorre porque a azida sódica é uma substância química potencialmente letal, de ação rápida que existe como um E sólido branco inodoro.

Quando misturada com água Ou com um ácido, a azida sódica muda rapidamente para um gás tóxico, com um odor pungente.

Ela também se transforma em gás tóxico quando entra em contato com metais sólidos.

Sobreviventes de envenenamento grave por azida sódica podem ter lesão cardíaca e cerebral e o Center for Disease Control and Prevention aconselha as vítimas para sua linha direta imediatamente. ' (CDC - Facts About Sodium Azide, 2009). Claramente, havia necessidade de desenvolver-se um processo mais seguro, novo, ] acessível e eficiente para a preparação de orotato de L651582 sem o uso de azida sódica.

A oferta competitiva a custo acessível era impossível porque à azida sódica (etapa 4) era necessária na preparação de azida de 3,5-dicloro-4-(4- clorobenzoil)benzila, um intermediário, na via da síntese de orotato de L651582, como mostrado acima.

Foi, portanto, necessário desenvolver um processo alternativo, mais seguro, mais eficiente para preparar o fármaco de orotato com a configuração química e proporção base: ácido ideais.

A

| 25 presente invenção visa superar estas desvantagens. o Mesmo que O orotato de L651582 tenha demonstrado | ter atividade antitumoral significativamente maior no modelo js de rato de câncer de próstata (Pat.

No.

US 5.912.346), não houve ensinamento ou sugestão sobre se as propriedades químicas, farmacológicas e biológicas de orotato de L651582 na proporção base: ácido de 2:1 eram ideais ou não.

Claramente, há a necessidade de desenvolverem-se novos polimorfos de CAI e um composto de orotato de CAI que ofereça características químicas, biológicas, farmacológicas, terapêuticas e toxicocinéticas ideais que justifiquem oO desenvolvimento clínico.

Assim, o objetivo principal da invenção foi o 5 desenvolver uma formulação de orotato de CAI (em que a proporção base:ácido está no intervalo de 1:1 a 1:4) que - possua eficácia aperfeiçoada, o que está relacionado à sua biodisponibilidade, que por sua vez é dependente de sua ' solubilidade nos fluidos corporais humanos. | 10 Outro objetivo da invenção foi desenvolver um processo mais seguro, mais rentável para produzir quantidades a granel de CAI, CTO (como orotato de CAT) e CAO (como formulação de CAI misturada com ácido orótico). Po Um objetivo importante da invenção foi fazer um CAI l 15 mais seguro, usando ingredientes mais seguros e menos tóxicos | : para produzir intermediários, em vez de usar a azida sódica ou azida de potássio que são altamente tóxicas em concentrações muito baixas.

Tinha sido descoberto que O CAT produzido pelos processos descritos na técnica anterior causavam neurotoxicidade grave e toxicidades gástricas em pacientes.

Portanto, era importante usar ingredientes mais seguros e um processo aperfeiçoado de produção também resultou na produção de novos polímorfos de CAI e suas formulações de orotato.

O assunto pertinente das referências acima está o especificamente incorporado neste documento pela referência, em sua totalidade. 7 3. SUMÁRIO DA INVENÇÃO A presente invenção visa superar desvantagens inerentes à técnica anterior, provendo composições de novos polimorfos de 1,2,3-triazol amino substituído ou 5-amino, assim como seus derivados substituídos (referidos neste documento como carboxiamidotriazóis ou CAI); às formulações de orotatos de 1,2,3-triazol amino substituídos ou 5-amino, assim como seus derivados substituídos, (com proporções base:ácido definidas, CTOsS); e às formulações de orotatos de 1,2,3-triazol amino substituídos ou 5-amino, assim como seus . 5 derivados substituídos e ácido orótico, (com proporções base:ácido definidas, CAOS).

". A presente invenção provê processos mais seguros da preparação do mesmo, utilizando materiais de partida estáveis, mais eficientes e mais seguros para sintetizar materiais intermediários de azida necessários nas vias de síntese para CAI e nas formulações de orotato - CTO e CAO. Mais particularmente, a invenção refere-se aos novos polimorfos de 1,2,3-triazóis amino substituídos ou 5- : amino (CAI), assim como seus derivados substitutos. O CAI está presente em diversas formas polimórficas, incluindo, entre outras, a Forma 1 ou a Forma 2. Esta invenção ainda mais particularmente refere-se aos novos orotatos de 1,2,3-triazol amino substituídos ou 5- amino (CTOS com proporções base:ácido ideais no intervalo de 1:1 a 1:4), assim como formulações de 1,2,3-triazóis amino substituídos ou 5-amino, assim como seus derivados substitutos e ácido orótico (CAO) em proporções base:ácido ideais, . orotatos (CTOS), assim como. seus derivados substituídos. Em outro aspecto, a invenção se refere a um .-. processo para preparar os materiais intermediários de azida necessários nas vias de síntese, usando materiais de partida "CU estáveis, mais seguros e acessíveis, incluindo, entre outros, azida de difenilfosforila ou azida de trimetil silila, TMSN;, em vez de azida sódica ou azida de potássio. Mais particularmente, esta invenção refere-se aos novos polimorfos de 1,2,3-triazol amino substituído ou 5- amino, assim como seus derivados substituídos, seus derivados de orotato (CTO) (proporção base:ácido no intervalo de 1:1 a 1:4) e 6 uso dos mesmos no tratamento de doenças incluindo, entre outras, cânceres sólidos, degeneração macular, retinopatia, leucemia mieloide crônica, AIDS e doenças que . 5 dependem de transdução de sinal aberrante e vias de proliferação, como bloqueador de canal de cálcio independente "es de voltagem, PI3, COX2, BCR-ABL, apoptose, transcrição de LTR de HIV ou VEGF1. Em vista da técnica anterior, a presente invenção provê derivados de orotato de 1,2,3-triazol amino substituído ou 5-amino novos ou orotatos de carboxiamidotriazol (CTO) contendo aí uma unidade química orgânica que aumenta a sua biodisponibilidade, distribuição ao alvo, eficácia " antitumoral e reduz a toxicidade.

Especificamente, uma classe de orotatos de carboxiamidotriazol (CTOS) que possui uma i ligação iônica na proporção no intervalo de cerca de l:1 a 1:4 (triazol:ácido orótico) constitui os novos compostos da invenção.

Além disso, formulações de 1,2,3-triazol amino substituído ou 5-amino (CAI), assim como seus derivados substituídos, e ácido orótico, (com proporções base:ácido definidas, 1:1 a 1:4, CAOS). Em outro aspecto, à invenção provê um processo para a preparação do intermediário de azida, azida de 3,5-dicloro- 4-(4-clorobenzoil)benzila, sem usar azida sódica, mas em vez .o disso usando azida de difenilfosforila (DPPA) ou TMN; ou equivalentes de azida mais seguros.

A DPPA é .. significativamente mais segura do que a azida sódica e foi usada para converter alcoóis diretamente em azidas e, portanto, elimina uma etapa (etapa 3 no Esquema descrito acima) na via de síntese para CTO.

Outro objetivo da invenção é aumentar a biodisponibilidade do CTO quando administrado por via oral ou por outras vias, em humanos e outros mamíferos, e melhorar a distribuição de CTO ao alvo, por exemplo, melhorando a absorção, distribuição e transporte através de tecidos, da barreira hematoencefálica e do complexo retina-coroide. o 5 Ainda outro objetivo da invenção é reduzir a toxicidade do cTO e compostos relacionados quando ". administrados como sais de orotato, aumentando o clerance do fármaco a partir do sangue, tecidos e órgãos.

A invenção ainda pode ser usada para reduzir as interações medicamentosas e efeitos colaterais quando o CTO | ou CAI em combinação com o ácido orótico (CAO) são ' administrados como formulações.

Outro objetivo da invenção é prover composições de ' CTO para tratar neoplasias humanas e, particularmente, tumores primários ou metastáticos, doenças que envolvem neovascularização, como degeneração macular, retinopatia, retinopatia diabética, leucemia mieloide crônica, AIDS e doenças que dependem de transdução de sinal aberrante e vias de proliferação, como bloqueador de canal de cálcio independente de voltagem, PI3, COX2, BCR-ABL, apoptose, transcrição de LTR de HIV ou VEGF1 e para reduzir os efeitos secundários tóxicos do fármaco, reduzindo os níveis do fármaco em tecidos não cancerosos que são alvos suscetíveis à toxicidade de fármacos, em 10% a 100% em comparação com a administração de L651582 ou CAI. .. Uma realização preferida da invenção compreende CTO na proporção de 1:1, base:ácido, uma realização mais o preferida na proporção de 1:2 e uma realização mais preferida da invenção compreende composições de CTO (na proporção de cerca de 0,7:1,3) preparadas pelo novo processo da invenção, para o tratamento de doenças incluindo entre outras, cânceres sólidos, degeneração macular, retinopatia, leucemia mieloide crônica e modulação de vias de transdução de sinal, como PI3,

po IP RU A”TSNI-AÕXSE—=A2 . AA A1 PÉA% 2/25) XJDASA%6oOO!! PS“ we MM MM 12/29 COX2, BCR-ABL, STATS, CrkL, apoptose, transcrição de LTR de HIV, VEGF 1 ou outros. 4, BREVE DESCRIÇÃO DAS FIGURAS A Fig. 1 ilustra a estrutura de CTO por RMN como . 5 CAI:ÁCido Orótico ou CAI:Orotato, de uma amostra de CTO, J02642, que possui uma Forma 1 ou Padrão 1 polimorfo de CAI. “a. A Fig. 2 ilustra a estrutura de CTO por RMN como | CAIT:ÁCido Orótico ou CAI:Orotato, de uma amostra de CTO, J02643, que possui uma Forma 2 ou Padrão 2 polimorfo de CAI. A Fig. 3 ilustra um difratograma de alta resolução da amostra de CTO J02642 que possui a Forma 1 ou Padrão 1 polimorfo de CAI. | A Fig. 4 ilustra um difratograma de alta resolução ' da amostra de CTO J02643 que possui a Forma 2 ou Padrão 2 polimorfo de CAT. A Fig. 5 ilustra o FT-IR da amostra de CTO J02642 que possui a Forma 1 ou Padrão 1 polimorfo de CAI. A Fig. 6 ilustra o FT-IR da amostra de CTO J02643 que possui a Forma 2 ou Padrão 2 polimorfo de CAI.

5. DESCRIÇÃO DETALHADA DA INVENÇÃO A presente invenção provê novos polímorfos de 1,2,3-triazol amino substituído ou 5-amino ou seus 1,2,3- triazóis amino substituídos (CAI), preparados por um processo novo e inclui uma classe de compostos de fórmula TI. OS polimorfos novos de CAI incluem, entre outros, a Forma 1 ou a -. Forma 2, como caracterizado por técnicas como RMN, DSC, FT-IR e XRDP. , Fórmula I R3: N

XY

XL P Rá Y R;

na qual R, tem a fórmula II, em que, Ré, Se (Rs), AL, — (CH), Y . Tm 7 (Ri)m em que p é 0 a2; mé0o0als;senélõdas; XxXÉO, SS, U SO, SOx, CO, CHCN, CH; Ou C=NR; onde R; é hidrogênio, alquila inferior, hidroxila, alcóxi inferior, amino, alquilamino inferior, ciano ou alquil amino di-inferior; e, R. e R; são independentemente halogênio (F, cl, Br), ciano, trifluormetila, alcanoila inferior, nitro, alquila inferior, alcóxi inferior, carboxila, carbalcóxi inferior, ' 10 trifluormetóxi, acetamido, alquiltio inferior, alquilsulfinila inferior, alquilsulfonila inferior, - triclorovinila, trifluormetiltio, trifluormetilsulfífinila, ou trifluormetilsulfonila; R, é amino, alquil amino mono ou di- inferior, acetamido, acetimido, ureido, formamido, formimido ou guanidino; e R; é carbamoíla, ciano, carbazoila, amidino ou N-hidroxicarbamoila; em que os grupos de alquila inferior, contendo alquila inferior, alcóxi inferior e alcanoila inferior contêm 1 a 3 átomos de carbono.

O composto de 1,2,3-triazol amino substituído ou 5- amino reage com o ácido orótico, para formar compostos de orotato de composto de 1,2,3-triazol amino substituído ou 5- amino na proporção no intervalo de 1:1 a 1:4 (base:ácido) VU pelo processo aperfeiçoado e mais seguro da invenção para formar CTOsS para uso de acordo com os métodos da presente CÚ 25 invenção.

Os polimorfos novos de CAI reagem ainda com O ácido orótico para formar compostos de orotato de uma classe de compostos da fórmula II: Fórmula II

R3 N

Y DA 7 R$ T .o R1 em que o ácido orótico é ligado ionicamente a R2, x NY

A AO

IX (Ro)m em que p é 0a2; mé 0as;enécoas;Xxéo, SS, SO, SO,, CO, CHCN, CH; ou C=NR; onde R; é hidrogênio, alquila - inferior, hidroxila, alcóxi inferior, amino, alquilamino inferior, ciano ou alquil amino di-inferior; e, R, e R; são . independentemente halogênio (F, cl, Br), ciano, trifluormetila, alcanoila inferior, nitro, alquila inferior, alcóxi inferior, carboxila, carbalcóxi inferior, trifluormetóxi, acetamido, alquiltio inferior, alquilsulfinila inferior, alquilsulfonila inferior, triclorovinila, trifluormetiltio, trifluormetilsulfinila, ou | trifluormetilsulfonila; R; é amino, alquil amino mono ou di- inferior, acetamido, acetimido, ureido, formamido, formimido ou guanidino; e R; é carbamoila, ciano, carbazoila, amidino ou N-hidroxicarbamoila; em que os grupos de alquila inferior, contendo alquila inferior, alcóxi inferior e alcanoila C« inferior contêm 1 a 3 átomos de carbono. . 20 As realizações preferidas de “CTO”, como definidas | neste documento, têm a fórmula empírica de C>2H1sCl3;N;Ok, peso molecular de 580,76, dois pontos de fusão de transição a 201ºC e 236 ºC. O CTO inclui novos polimorfos de CAI ligado ionicamente ao ácido orótico. O CAI tem muitos polimorfos, incluindo, entre outros a Forma 1 (Padrão 1) ou a Forma 2

(Padrão 2). As duas realizações de CTO têm pontos de fusão de transição diferentes, por exemplo, CTO (Forma 1, Padrão 1) tem pontos de fusão em cerca de 136ºC, 194ºC e 235ºC; e CTO (Forma 2, Padrão 2) tem pontos de fusão em cerca de 137ºC e o 5 234ºC. As duas realizações de CTO têm um espectro de RMN H consistente com a estrutura CAI:ÁcCido Orótico (Fig. 1 e Fig. Ps 2, respectivamente) e padrões de FT-IR consistentes com a Forma 1 e a Forma 2 (Fig. 3 e Fig. 4, respectivamente) .O CTO é cristalino como mostrado por padrões de difração de raios-x em pó para a Forma 1 e a Forma 2 (Fig. 5 e Fig. 6&, respectivamente). Os nomes químicos da realização preferida de CTO incluem: ' 5S-amino-1-(4- (4-clorobenzoil)-3,5-diclorobenzil)- : 15 1,2,3-triazol-4-carboxamida, composto com ácido orótico; 5- amino-1-(3,5-dicloro-4- (4-clorobenzoil)benzil)-1H-1,2,3- triazol-4-carboxamida, composto com ácido orótico; e 5-amino- 1-([3,5-dicloro-4- (4-clorobenzoil)fenil]metil)-1H,1,2,3- triazol-4-carboxamida, composto com ácido orótico.

Mais particularmente, a estrutura química dos polimorfos de CTOis: o Es co HAN ' o & N DA. O . cr. CAI:ácido orótico Uma realização adicional inclui a formulação de diferentes polimorfos de CAI e ácido orótico (CAO). Os novos polimorfos de 1,2,3-triazol amino substituído ou 5-amíno (CAI) ou 1,2,3-triazóis amino substituídos ou 5-amino são misturados com ácido orótico no intervalo de 1:1 a 1:4 (base: o 5 ácido) para prover formulações de uso de CAO de acordo com os métodos da presente invenção. a.

NOVO PROCESSO: O processo novo da invenção em que compostos da invenção podem ser preparados é mostrado no Esquema de Reação II abaixo em cinco (5) etapas.

Mais especificamente, oO processo novo usa azida de difenilfosforila para reagir com o intermediário 858.B na etapa 3 em vez de com azida sódica.

Elimina a etapa 3 da técnica anterior para formar o Ú intermediário 858.C.

Veja o Esquema I acima (seis etapas). Os processos detalhados são descritos nos Exemplos.

Os produtos intermediários e CTO são representados por 858.A a 858,F como resumido abaixo: O éter t-butildimetilsilil-3,5-diclorobenzílico é representado por 858.A.

O álcool 3,5-dicloro-4-(4-clorobenzoil)benzílico é representado por 858.B.

O cloreto de 3,5-dicloro-4- (4' -clorobenzoil)benzila | é representado por 858.C.

A azida de 3,5-dicloro-4- (4' -clorobenzoil)benzila é representada por 858.D. -. A 5-amino-1- (4- (4-clorobenzoil)-3,S-diclorobenzil)- 1,2,3-triazol-4-carboxamida é representada por 858.E. *. A 5-amino-1-(4- (4-clorobenzoil)-3,5-diclorobenzil)- 1,2,3-triazol-4-carboxamida é representada por 858.F, composto com ácido orótico, (CAIT:ÁCido orótico) (CAI:Orotato) (cTO).

PF fe Ho, TBOMSO TBDMS-CI,Imidazol —— RSR.AI Etapa DMAP, DME a álcool 3,5-diclorobenzílico a com -. a cloreto de 4-clorobenzoila 14, 8SE.B Etapa dois Fa o LVFHE, niduti, - 14 C 9 2)HCL1 aq í a moto, a mo " Ne LsRD Etapa Azida de difenilfosforila - É DUBU Tolueno si , Hs ne Nro o a Ho 2-Ciancacetamida o RS8.E Etapa o K CO, Acetonitrila cr e no o

O o a Hs m | Ácido orático N . . NÉ Ps Etapa cinco — e Metanol/água f-) BSS.F a É importante ressaltar que foi observado que . diferentes polimorfos de CAI, CTO e CAO, fabricados pelo processo acima, exibem menos lesões gástricas e toxicidade em .. 5 roedores, quando comparados com CAI, que foi sintetizado por procedimentos descritos na técnica anterior. Isso pode estar relacionado com a ausência de uso de ingredientes tóxicos, como azida sódica ou azida de potássio. O novo processo também resultou na produção de novos polimorfos de CAI, CTO e CAO. Assim, compostos da invenção incluem moléculas que cristalizam em mais de uma estrutura cristalina diferente e exibem diferentes propriedades químicas de diferentes polimorfos de CAI, como caracterizado por técnicas como RMN, DSC, FT-IR e XRDP (Figs. -. 5 l1a6).

DOSE E FORMULAÇÃO ". 1,2,3-Triazóis amino substituídos ou 5-amino, assim como seus derivados substitutos foram fabricados em diferentes polimorfos que possuem propriedades químicas e biológicas que superaram as desvantagens de CAI produzido por procedimentos descritos na técnica anterior. Além disso, o 1,2,3-triazol amino substituído ou 5- amino, assim como derivados substitutos, reagiu quimicamente S com ácido orótico para formar orotatos (CTO) na proporção 1:1 | : 15 a 1:4 (base:ácido), que possuem biodisponibilidade, | propriedades farmacocinéticas, segurança e eficácia exclusivas. | Uma realização alternativa inclui polimorfos de 1,2,3-triazóis amino substituídos ou 5-amino, assim como seus derivados substitutos, misturados com ácido orótico, na proporção 1:1 a 1:4 (base: ácido) para formar formulações de CAI e ácido orótico (CAO). As composições farmacêuticas e formulações acima podem ser formuladas em preparações farmacêuticas para administração a mamíferos para a prevenção e tratamento de .. neoplasias primárias e metastáticas, leucemia mieloide crônica, degeneração macular, retinopatias e outras doenças *.- proliferativas de células. Muitos dos compostos de orotato de triazol podem ser providos como sais de ácido orgânico diretamente ou com contra-íons farmaceuticamente compatíveis, uma forma em que eles são meramente hidrossolúveis. Sais tendem a ser mais solúveis em solventes aquosos ou outros protônicos que são as correspondentes formas de base livre.

Os compostos terapêuticos ou composições farmacêuticas podem ser administradas por via intravenosa, intraperitoneal, subcutânea, intramuscular, intratecal, oral, retal, tópica, ou por aerossol. o E Formulações “adequadas para administração oral o incluem formulações sólidas em pó, soluções líquidas do - composto ativo dissolvido em diluentes como salina, água ou PEG 400; cápsulas ou comprimidos, cada um contendo uma quantidade predeterminada do princípio ativo como sólido, pó, grânulos ou gelatina; suspensões em meio aproximado; e emulsões.

Formulações adequadas para administração parenteral incluem soluções estéreis isotônicas aquosas e não aquosas, ' as quais contêm tampões, antioxidantes e conservantes.

As formulações podem estar em recipiente selado de dose unitária ou multidose.

Doses de paciente para a administração oral de CTO variam de 0,25-500 mg/dia, comumente 25-100 mg/dia e tipicamente 50-400 mg/dia.

Expressa em termos de peso corporal do paciente, a dose habitual varia de 0,005 à 10 mg/kg/dia, comumente 0,5-2,0 mg/kg/dia, tipicamente 1,0 a 8,0 mg/kg/dia.

Expressa em termos de áreas de superfície corporal dos pacientes, a dose habitual varia de 0,1-300 mg/mº/dia, comumente 20-250 mg/mº/dia, tipicamente 25-50 mg/mº/dia.

Intervalo e quantidade de dose podem ser ajustados .. individualmente para prover níveis plasmáticos da unidade ativa que sejam suficientes para manter os efeitos .. antiproliferativos, antimetastáticos, antiangiogênicos Ou outros efeitos terapêuticos em doenças que dependem de transdução de sinal aberrante e proliferação.

Doses podem ser ajustadas dependendo da via de administração, por exemplo, para administrações intravenosas, por inalação/aerossol, subcutâneas ou intraperitoneais diretas, tópicas ou intratecais.

Uma variedade de sistemas de distribuição para os compostos farmacológicos podem ser empregados, incluindo, entre outros, lipossomos, nanopartículas, suspensões e o 5 emulsões, : As composições farmacêuticas também podem compreender sólidos adequados ou veículos de fase de gel ou *. excipientes. Exemplos desses veículos ou excipientes incluem, entre outros, carbonato de cálcio, fosfato de cálcio, açúcares diversos, amidos, derivados celulósicos, gelatina e polímeros, como polietilenoglicóis.

Ademais, pode-se administrar o fármaco em um sistema de distribuição de fármacos direcionado, por exemplo, em um lipossomo revestido com anticorpo tumor-específico, ' como nanopartículas e outras formas. Lipossomos ou nanopartículas podem ser direcionados e absorvidos i seletivamente pelo tumor ou outro alvo de doença.

Uma das propriedades mais difíceis de construir em uma molécula de sonda recém-descoberta é o perfil farmacocinético desejado, particularmente no caso de compostos administrados por via oral. “A maioria dos químicos medicinais experientes prefeririam começar em uma série estrutural que tivesse propriedades farmacocinéticas inerentemente boas, embora com potência baixa no receptor- alvo, e então definir o aperfeiçoamento da potência no alvo, ao invés de trabalhar em outra direção”, “Organic Chemistry .. in Drug Discovery, Drug Discovery", Science 303: 1810-1813 (2004). *. APERFEIÇOANDO A BIODISPONIBILIDADE DE CTO ADMINISTRADO POR VIA ORAL. A presente invenção refere-se geralmente ao método ' para aumentar a biodisponibilidade oral, distribuição e clerance de CTO, um exclusivo orotato de L651582 na proporção 1:1 à 1:4 (base:ácido). A presente invenção provê processos para preparar sais de orotato de fármacos não solúveis em água, que possuem um centro ionizável, para aperfeiçoar a biodisponibilidade oral, perfil toxicológico e eficácia dos fármacos, Preferencialmente, o CTO está na proporção 1:1 e . . 5 mais preferivelmente está na proporção 1:2 e mais preferivelmente está na proporção 0,7:1,3. o A absorção de fármacos através da via oral é um assunto de intensa investigação na indústria farmacêutica, visto que boa biodisponibilidade implica que o fármaco seja capaz de atingir a circulação sistêmica pela boca.

A absorção oral é afetada tanto pelas propriedades de fármaco como pela fisiologia do trato gastrointestinal, incluindo a dissolução do fármaco a partir da forma farmacêutica, da forma em que o ' fármaco interage com o ambiente aquoso e com a membrana, da . 15 permeação através da membrana e remoção irreversível por órgãos de primeira passagem como o intestino, fígado e pulmão.

Alguns agentes farmacêuticos que exibem baixa solubilidade mostram má biodisponibilidade ou absorção irregular, o grau de irregularidade sendo afetado por fatores como nível de dose, estado alimentar do paciente e propriedades físico-químicas do fármaco.

A maior parte da absorção de fármacos ocorre no intestino delgado devido a grande área de superfície, visto que a presença das vilosidades e microvilosidades aumenta O coletor de área de absorção.

A circulação do intestino é -. única, em que O intestino é o tecido anterior ou portal que regula o fluxo de substratos para o fígado.

O sangue venoso ".- intestinal constitui cerca de 75% do suprimento de sangue para o fígado.

Portanto, para fármacos que são altamente depurados pelo intestino, a contribuição do fígado, rim ou pulmão ao metabolismo do fármaco tornar-se-á reduzida.

Reciprocamente, para fármacos que são mal extraídos pelo intestino, o substrato é capaz de atingir os próximos órgãos,

| 22/29 ' o fígado e o pulmão, para remoção.

Portanto, a concentração de fármaco que entra no intestino e a taxa de fluxo intestinal alteram a taxa de distribuição do fármaco e afetam as taxas de clerance intestinal através do metabolismo . 5 hepático de primeira passagem.

A “biodisponibilidade do fármaco” é definida neste ". documento como a quantidade de fármaco sistemicamente disponível ao longo do tempo.

A presente invenção aumenta a biodisponibilidade do fármaco de agentes farmacêuticos, convertendo-os em sais de orotato.

Isto pode ser alcançado alterando-se as propriedades hidrofílicas e lipofílicas do | fármaco, para que o fármaco permeie a membrana e a taxa de perfusão sanguínea torne-se a etapa de limitação de taxa " global para absorção, ou por inibição da biotransformação de fármacos no intestino e/ou por inibição dos sistemas de transporte ativo de retorno no intestino, que diminui o transporte de fármacos através da membrana do intestino para a corrente sanguínea.

Em qualquer caso, a composição responsável pelo aumento de biodisponibilidade de fármacos é o sal de orotato do agente farmacêutico.

Por razões que não são imediatamente evidentes, descobriu-se que a conversão de um L651582 insolúvel em água em CTO (base:ácido, 0,5:1 a 1:2) provê um método para aumentar a biodisponibilidade de um agente farmacêutico administrado oralmente a um mamífero em necessidade de tratamento. .. Alterações nas concentrações sistêmicas integradas | ao longo do tempo são indicadas pela área sob a curva (ASC) "os ou C náx, ambos os parâmetros conhecidos na técnica.

A presente invenção provê métodos em que uma composição provê um aumento da biodisponibilidade do sal de orotato do agente farmacêutico como medido pela ASC de pelo menos 25% a 100% em relação à dose do agente farmacêutico.

A invenção provê uma composição que aumenta a biodisponibilidade do sal de orotato do agente farmacêutico como medido por Cmax em pelo menos 50% a 100%. “Efeitos colaterais” ou “toxicidade” ou “reações farmacêuticas adversas” dos agentes quimioterápicos são o 5 observados na fase aguda da administração de quimioterapia e em pacientes curados de câncer com lesão tecidual subclínica. .- Há um maior reconhecimento dos efeitos colaterais de tecidos relacionados com o fármaco que podem ser bastante graves, incapacitantes e irreversíveis.

O médico deve estar ciente das potenciais complicações em tecido/órgão por agentes quimioterápicos e quando apropriado realizar um exame de tecido na condição básica antes de iniciar a terapia.

O “clerance” do fármaco ocorre por perfusão do Ú sangue para os órgãos de extração. “Extração” refere-se à : 15 proporção de fármaco apresentado ao órgão que é removido de forma irreversível (excretado) ou alterado em uma forma química diferente (metabolismo). A presente invenção provê um método para aumentar o clerance dos derivados de orotato de CTO a partir de tecidos não cancerosos ou normais, como medido por estudos farmacológicos, em pelo menos 25% a 100% em relação à dose do agente farmacêutico.

A "“biodisponibilidade” de uma fármaco após àa administração oral é a medida em que ou a taxa na qual a unidade ativa do fármaco ou metabólito entra na circulação .. sistêmica, ganhando assim o acesso ao sítio de ação.

As propriedades físico-químicas de um fármaco governam seu ". potencial de absorção, e ligação às proteínas séricas.

A eficácia do fármaco depende de sua interação com o alvo molecular.

Portanto, as propriedades da forma farmacêutica dependem parcialmente de suas características químicas e dos processos para a fabricação do fármaco em quantidades a granel.

Diferenças na biodisponibilidade, eficácia,

transporte e clerance entre formulações químicas de um ! determinada fármaco podem ter um significado clínico. | A taxa de “absorção” é importante, porque mesmo | quando o fármaco é completamente absorvido, ele pode ser o 5 absorvido lentamente demais para produzir um nível sanguíneo i terapêutico com suficiente rapidez ou tão rapidamente que a | toxicidade resulta de altas concentrações de fármaco administradas para alcançar o nível terapêutico após cada dose. A absorção ocorre por um dentre três métodos, difusão passiva, transporte ativo ou transporte ativo facilitado. A difusão passiva é simplesmente a passagem de moléculas através da barreira mucosa até a concentração de moléculas [ atingir o equilíbrio osmótico em ambos os lados da membrana. i No transporte ativo, a molécula é bombeada ativamente através da mucosa. No transporte facilitado, um veículo, geralmente uma proteína, é necessário para transportar a molécula através da membrana para absorção. A presente invenção provê compostos de CTO em configurações químicas que permitem que O fármaco seja distribuído com êxito para diferentes tecidos e órgãos e até mesmo atravesse a barreira hematoencefálica, para alcançar o cérebro.

O ácido orótico, uma pirimidina livre, é importante na síntese de uridilato (UPP) o principal nucleotídeo de pirimidina. Pirimidinas desempenham um papel central no metabolismo e regulação celular. Elas são substratos para a o biossíntese de DNA/RNA, reguladores da biossíntese de alguns aminoácidos e co-fatores na biossíntese de fosfolipídeos, ..- glicolipídeos, açúcares e polissacarídeos. A via clássica da biossíntese de novo de pirimidina termina com a síntese de | 30 UMP. Biochemistry, ed. Lubert Stryer, ed, W. H. Freeman & Co NY, 4th ed, 739-762 (1995). A presente invenção provê uma classe de CTOs que passam por dissolução para liberar o fármaco como uma molécula carregada e ácido orótico livre,

/ 25/29 : | que podem prevenir a ligação do fármaco às proteínas e | facilitar o transporte para o alvo e clerance rápido. | A invenção provê realizações que mostram o aumento da eficácia do CTO, como medida pela melhora na 1) eficácia | 2 5 do CTO comparado com formulação de dose equivalente de CAI + | i ácido orótico, 2) biodisponibilidade e clerance de CTO quando | Ta administrado como CTO sólido encapsulado comparado com CTO em | PEG-400, 3) transporte de CTO administrado oralmente ao | cérebro através da barreira hematoencefálica, 4) transporte Í de CTO oralmente administrado para diferentes tecidos de olhos, incluindo o complexo coroide-retina e humor vítreo em cães. Importante, a toxicidade pré-clínica de CTO foi : determinada em cães pela via PO em 175, 350, 1025 mg/kg/dia e nenhuma morte ocorreu após 28 dias.

6. EXEMPLOS EXEMPLO 1. CLORETO DE 4-CLOROBENZOILA O álcool 3,5-diclorobenzílico (1 mol) é tratado com cloreto de terc-butildimetilsilila (1,05 mol), imidazol, 99% (2,44 mol), 4-dimetilaminopiridina em N,N-dimetilformamida a temperatura fria para produzir o éter t-butildimetilsilil- 3,5-diclorobenzílico (858.Al) no processo de obtenção de extração. EXEMPLO 2 -. ÁLCOOL 3, 5-DICLORO-4-(4-CLOROBENZOIL) BENZÍLICO i Reagir o éter t-butildimetilsilili-3,5- ES diclorobenzílico (858.A1) (1 mol) com a solução de 1,6 M de n-butil-lítio em hexano, seguida por cloreto de 4- clorobenzoila, (1,01 mol), em tetraidrofurano, enquanto frios e tratar o intermediário com ácido clorídrico aquoso para resultar no álcool 3,5-dicloro-4-(4-clorobenzoil)benzílico (858.B).

EXEMPLO 3 AZIDA DE 3,5-DICLORO-4- (4-CLOROBENZOIL) BENZILA O álcool 3,5-dicloro-4-(4-clorobenzoil)benzílico (858.B) (1 mol) reage com a azida de difenilfosforila (azida .. 5 difenilfosfônica) (DPPA) (1,2 mol, ée o 1,8-diazabiciclo [5.4. 0) undec-7-eno, (Sinônimo: DBU) (1,2 mol)) em tolueno em T- temperatura fria, seguido por processo de obtenção aquoso e titulação alcoólica, para resultar na azida de 3,5 dicloro-4- (4' -clorobenzoil)benzila (858.D). DPPA é um composto orgânico que é usado na síntese de outros compostos orgânicos.

Aust.

J.

Chem 26: 1 91 -1593 (1973). A estabilidade de DPPA ao aquecimento é mostrada pela sua destilação a 157ºC e pelo fato de que à evolução vigorosa de nitrogênio não é observada Í até uma temperatura de 175ºC ser alcançada. . 215 EXEMPLO 4 S-AMINO-1- (4- (4-CLOROBENZOIL) -3, 5-DICLOROBENZIL) -1,2,3- TRIAZOL-4-CARBOXAMIDA (CAI) A azida de 3,5-dicloro-4-(4'-clorobenzoil)benzila (858.D) (1 mol) reage com cianoacetamida (1,69 mol) em acetonitrila quente e carbonato de potássio (6,2 mol), para resultar em 5-amino-1-(4- (4-clorobenzoil)-3,5-diclorobenzil)- 1,2,3-triazol-4-carboxamida (858.E). EXEMPLO 5 5-AMINO-1-(4- (4-CLOROBENZOIL) -3, 5-DICLOROBENZIL) -1,2,3- TRIAZOL-4-CARBOXAMIDA, COMPOSTO COM ÁCIDO ORÓTICO, (CAI:ÁCIDO :. ORÓTICO) A 5-amino-1-(4- (4-clorobenzoil)-3,5-diclorobenzil)- To 1,2,3-triazol-4-carboxamida (858.E) (1 mol) reage com ácido orótico (1,03 mol) e mistura metanol/água para resultar em 5- amino-l-(4-(4-clorobenzoil)-3,5-diclorobenzil)-1,2,3-triazol- 4-carboxamida, composto sólido com ácido orótico, (CAI: Ácido orótico; 1:1) (CTO) (858.F), PM 580,76 g, possuindo pontos de fusão de transição de cerca de 151ºC, 238ºC e 332ºC, medidos por calorimetria diferencial de varredura.

O padrão XRPD indica que o CTO é composto de material cristalino e amorfo (polimórfico). EXEMPLO 6 .. 5 COMPARAÇÃO DA ATIVIDADE ANTICÂNCER DE CTO (858.F) COM CAI + ÁCIDO ORÓTICO (1:1) Os O efeito do PM de CTO de 580,8 e PM de CAI de 424,6 + PM do ácido orótico de 156,1, foi estudado em xenoenxertos de tumor de cólon humano HT29 implantado s.c. em camundongos NCr-nu/nu atímicos, machos.

Camundongos de 6 semanas de idade receberam implantes de fragmentos de HT29 e 13 dias depois foram classificados em 3 grupos de dez.

Pelos próximos 14 dias (dias 13-26), o Grupo 1 de controle (C) recebeu o veículo; Grupo 2 = 343 mg/kg/dose; Grupo 3 = 240 mg/kg/dia de . 15 CAT + 103 mg/kg/dia de ácido orótico.

Em 41 dias, o volume | médio de tumor (mm?) foi medido como mostrado abaixo: : Grupo 1 (Controle)= 1436 mm? Grupo 2 (CT0343mMg/kg/dia) = 864 mmº (p = 0,0050, Gr | 2X6Gr1) l 20 Grupo 3 (CAT 250mg/kg/dia + Ácido Orótico 103mg/kg/dia) = 1268 mm? (p = 0,2706, Gr 3 X Gr 1). Estes resultados sugerem que o CTO é mais eficaz na inibição do crescimento do tumor do que uma quantidade equivalente de CAI e ácido orótico, que não reagem quimicamente.

Entretanto, a formulação de CAI + ácido orótico mostrou alguma inibição do -. tumor.

EXEMPLO 7 " COMPARAÇÃO DO CTO ADMINISTRADO POR VIA ORAL COMO SÓLIDO EM CÁPSULA OU COMO LÍQUIDO EM PEG-400 A biodisponibilidade de CTO (base;ácido, 0,7:1,3) foi determinada através da administração de uma dose única de | 685mg/kg por cápsula (Grupo 1) ou por gavagem oral em PEG400 (Grupo 2). Dois cães (1 F/1 M) foram usados em cada grupo.

AS amostras de sangue foram coletadas em O, 1, 2, 4, 8, 12, 24, 48, 72 e 92 horas. O CAI foi medido por CLAE/EMWN. Grupo 1 que recebe a cápsula: As concentrações plasmáticas após 1 hora foram de 155 e 174 ng/ml para cães . 5 machos e fêmeas. A Cmax foi de 5800ng/mL em 12 horas para Os machos e 7950 ng/ml em 24 horas para às fêmeas. A meia-vida Ts foi de 18 horas e 22,7 horas e valores de ASC foram de 326 e 277 pg/ml, para os machos e fêmeas, respectivamente. Grupo 2 que recebe gavagem em PEG400: As concentrações plasmáticas após 1 hora foram de 511 e 570 ng/mL para cães machos e fêmeas. A Cmax foi de 6634 ng/ml em 24 horas para os machos e 5350 ng/mL em 24 horas para as | fêmeas. A biodisponibilidade foi de 81,8 % daquela do Grupo 1 (100%). . 15 Esses resultados mostram que CTO administrado como sólido em cápsula teve um melhor padrão de absorção e biodisponibilidade do que o CTO em PEG400. Com base nestes e em resultados adicionais, o CTO será administrado como sólido em cápsulas aos pacientes. EXEMPLO 8

CTO ADMINISTRADA POR VIA ORAL A CAMUNDONGOS ATRAVESSA A

BARREIRA HEMATOENCEFÁLICA O CTO foi administrado por via oral (em PEG400) a camundongos de seis semanas de idade classificados em dois Grupos de 6. Duas doses foram administradas - Grupo 1 = 513 fo. mg/kg; Grupo 2 = 342 mg/kg. Oito horas após o tratamento com o CTO, os camundongos foram sacrificados para medição da a. concentração de CTO (como CAI) no tecido cerebral.

Resultados obtidos foram: Grupo 1 - Os níveis de CAI foram de 15167 + 2372 ng/g de tecido; os níveis do Grupo 2 para CAI foram de 10950 + 1704 n9g9/g de tecido, ambos no intervalo terapêutico (6000 ng/ml). Visto que o CTO foi administrado por via oral, esses resultados indicam que o CTO

Claims (1)

1. atravessa a barreira hematoencefálica e atinge o órgão-alvo, o cérebro.

   A presente invenção não deve ser limitada no escopo pela realização divulgada no exemplo, que se destina a uma - 5 ilustração de um aspecto da invenção e quaisquer métodos que sejam funcionalmente equivalentes estão dentro do escopo da ". invenção.

   De fato, várias modificações da invenção além dessas mostradas e descritas neste documento tornar-se-ão evidentes para os técnicos no assunto à partir da descrição acima.

   Tais modificações destinam-se a cair dentro do escopo das reivindicações anexadas.

   Os técnicos no assunto reconhecerão, ou serão capazes de determinar usando não mais do que a experimentação ' de rotina, muitos equivalentes para as realizações . 15 específicas da invenção descrita neste documento.

   Tais equivalentes se destinam a ser abrangidos pelas reivindicações.