BG60683B1 - Амидинофенилаланинови производни,метод за получаването им, приложението им и средства,които ги съдържат - Google Patents

Амидинофенилаланинови производни,метод за получаването им, приложението им и средства,които ги съдържат Download PDF

Info

Publication number
BG60683B1
BG60683B1 BG96171A BG9617192A BG60683B1 BG 60683 B1 BG60683 B1 BG 60683B1 BG 96171 A BG96171 A BG 96171A BG 9617192 A BG9617192 A BG 9617192A BG 60683 B1 BG60683 B1 BG 60683B1
Authority
BG
Bulgaria
Prior art keywords
naphthyl
piperidine
derivative according
carbon atoms
hydrogen
Prior art date
Application number
BG96171A
Other languages
English (en)
Other versions
BG96171A (bg
Inventor
Werner Stueber
Gerhard Dickneite
Original Assignee
Behringwerke Ag
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Behringwerke Ag filed Critical Behringwerke Ag
Publication of BG96171A publication Critical patent/BG96171A/bg
Publication of BG60683B1 publication Critical patent/BG60683B1/bg

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K5/00—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
    • C07K5/04—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof containing only normal peptide links
    • C07K5/06—Dipeptides
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K5/00—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
    • C07K5/04—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof containing only normal peptide links
    • C07K5/06—Dipeptides
    • C07K5/06008—Dipeptides with the first amino acid being neutral
    • C07K5/06017—Dipeptides with the first amino acid being neutral and aliphatic
    • C07K5/06026—Dipeptides with the first amino acid being neutral and aliphatic the side chain containing 0 or 1 carbon atom, i.e. Gly or Ala
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P7/00—Drugs for disorders of the blood or the extracellular fluid
    • A61P7/02—Antithrombotic agents; Anticoagulants; Platelet aggregation inhibitors
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
    • C07C45/00—Preparation of compounds having >C = O groups bound only to carbon or hydrogen atoms; Preparation of chelates of such compounds
    • C07C45/61—Preparation of compounds having >C = O groups bound only to carbon or hydrogen atoms; Preparation of chelates of such compounds by reactions not involving the formation of >C = O groups
    • C07C45/62—Preparation of compounds having >C = O groups bound only to carbon or hydrogen atoms; Preparation of chelates of such compounds by reactions not involving the formation of >C = O groups by hydrogenation of carbon-to-carbon double or triple bonds
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
    • C07C45/00—Preparation of compounds having >C = O groups bound only to carbon or hydrogen atoms; Preparation of chelates of such compounds
    • C07C45/61—Preparation of compounds having >C = O groups bound only to carbon or hydrogen atoms; Preparation of chelates of such compounds by reactions not involving the formation of >C = O groups
    • C07C45/67—Preparation of compounds having >C = O groups bound only to carbon or hydrogen atoms; Preparation of chelates of such compounds by reactions not involving the formation of >C = O groups by isomerisation; by change of size of the carbon skeleton
    • C07C45/68—Preparation of compounds having >C = O groups bound only to carbon or hydrogen atoms; Preparation of chelates of such compounds by reactions not involving the formation of >C = O groups by isomerisation; by change of size of the carbon skeleton by increase in the number of carbon atoms
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D223/00—Heterocyclic compounds containing seven-membered rings having one nitrogen atom as the only ring hetero atom
    • C07D223/14—Heterocyclic compounds containing seven-membered rings having one nitrogen atom as the only ring hetero atom condensed with carbocyclic rings or ring systems
    • C07D223/16—Benzazepines; Hydrogenated benzazepines
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides

Landscapes

  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Biophysics (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Diabetes (AREA)
  • Hematology (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
  • Hydrogenated Pyridines (AREA)
  • Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
  • Acyclic And Carbocyclic Compounds In Medicinal Compositions (AREA)
  • Peptides Or Proteins (AREA)
  • Organic Low-Molecular-Weight Compounds And Preparation Thereof (AREA)
  • Plural Heterocyclic Compounds (AREA)
  • Polysaccharides And Polysaccharide Derivatives (AREA)
  • Medicines Containing Plant Substances (AREA)
  • Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
  • Pyridine Compounds (AREA)
  • Nitrogen And Oxygen Or Sulfur-Condensed Heterocyclic Ring Systems (AREA)
  • Steroid Compounds (AREA)
  • Pyrrole Compounds (AREA)

Abstract

Изобретението е приложимо в органичния синтез. Амидофенилаланиновите съединения имат антитромбозна активност, ензимна устойчивост и са добре поносими. Те са с обща формула, в която заместителите иматзначенията, посочени в описанието.

Description

ОБЛАСТ НА ТЕХНИКАТА
Изобретението се отнася до амидинофенилаланинови производни, до метод за получаването и приложението им и до средства, които ги съдържат.
ПРЕДШЕСТВАЩО СЪСТОЯНИЕ НА ТЕХНИКАТА
Известно е, че редица патофизиологични условия водят до изразходване на Антитромбин III (AT III), най-важният тромбининхибитор в плазмата. Отпадането на AT III повишава риска от тромбоза. При случаите на вроден недостиг на AT III намаляването на стойността под 75 % от нормата води до тромбоемболийни усложнения. Тези усложнения често се проявяват под формата на дисеминирано интравазално съсирване след операции и при шокови състояния. При това, в много от случаите се появяват опасни за живота кръвни съсиреци. За лечение и профилактика на тромбозните заболявания в медицината засега се използват противокоагулирагци средства с различен механизъм на действие. При акутен риск от тромбоза се използват средства като AT III, Хепарин и напоследък Хирудин. Дългосрочна профилактика се провежда с кумаринови и индандионови производни. Изброените антикоагуланти имат значителни недостатъци.
Така например Хепаринът поради полизахаридната си структура, може да се прилага само парентерално и действието му се свежда също до функционноспособно Антитромбин III - ниво. Кумарините действат директно срещу протеиновия биосинтез, като не осигуряват необходимите количества от зависещите от витамин К фактори на съсирването II, VII, IX и X и по този начин намаляват съсирващия потенциал. В резултат на това се получава едновременно забавяне на активността. Известни странични явления са хеморагични кожни некрози, повръщане и изпадане на косата.
За разлика от това, нискомолекулните тромбининхибитори имат предимството, че са независими от кофактора и въздействат директно върху тромбина, като се свързват директно с активния център и блокират ензима. Поради химическата си природа, тези вещества могат да се прилагат през устата и действието им се появява незабавно.
Особена популярност имат производните на аминокиселините и по-специално тези на базата на аргинин или амидинофенилаланин. Към първата група принадлежат съединения като О-фенилаланил-Е-пролил-аргининалдехиди /2R, 41?/-4-метил-1^2-/3-метил1,2,3,4-тетрахидро-8-хинолинсулфонил-1.-аргинил-/2-пиперидинкарбонова киселина монохидрат /МД 805/.
МД 805 е специфичен тромбининхибитор, който може да се използва и терапевтично. Друго известно амидинофенилаланиново производно е Р-нафтилсулфонилглицил^,8-4амидинофенилаланилпиперидид /НАПАП/. В /1 и 2/ са описани производни на НАПАП. При тях глицинът е заменен с аминокиселина със структурата NHj-CHR^COOH, където R, означава нисша алкилова, нисша хидроксиалкилова, фенилова или 4-хидроксифенилова група. 4-амидинофенилаланинът /АФ/ може да е N-метилиран до N-метил-АФ. Освен това са описани различни производни на НАПАП, например производни при арилсулфонила, мостове при глицина или при пиперидиновия пръстен. Най-подходящи са а или β нафтилсулфонилови групи при граничния II, при което хетероарилсулфонилови групи като 8-холинсулфонил са по-неподходящи. Недостатък при естествените аминокиселини като елемент на мост между хидрофобния нафтилов остатък и АФ е лесното ензимно разцепване на амидното съединение до АФ, което се проявява при оралния прием на съединението. При заместването с други елементи в моста, например β аланин вместо глицин, значително се намалява активността по отношение на тромбинхибирането. Заместването с аминокиселини, като например пролин, води също така до намаляване на активността.
Задача на изобретението е да се създадат нови съединения на база амидинофенилаланин с подобрена антитромбозна активност и поносимост, които да са ензимно устойчиви.
ТЕХНИЧЕСКА СЪЩНОСТ НА ИЗОБРЕТЕНИЕТО
Съединенията съгласно изобретението са с формула 1
в която R’ означава нафтилова или фенилова група, заместени с една до три алкоксигрупи, съдържащи до три С атома, или заместени с до 5 алкилови групи, съдържащи един или два въглеродни атома, или означава хроманова група, заместена с до 5 метилови групи;
R] е водород, нисша алкилова група, съдържаща до 4 въглеродни атома, хидроксиалкилова група, аралкилова група, съдържаща до 7 въглеродни атома, или карбоксиалкилова група с до 4 въглеродни атома;
R2 и R3 са еднакви или различни и означават алкилова група, съдържаща до 4 въглеродни атома, като могат заедно с азотния атом да образуват пръстен, който да е заместен с карбоксилна, хидроксилна или хидроксиалкилова група, съдържащи до 3 въглеродни атома; и
X лежи в R- или S-структурата, за предпочитане в R-структурата.
За разлика от известните структури атомът, към който е свързан Rp е азотен, а не въглероден.
НАПАП има следната структура:
Установено е, че при заменяне на глицина в НАПАП с остатък на азааминокиселина се повишава значително антитромбозната активност. Азааминокиселинните остатъци са известни съединения, които могат да се представят със следната формула:
о
II
I
Структурният елемент на азааминокиселините води до структури, показани по-горе при I.
Активността на β нафтил-сулфонилазаглицил-О-амидинофенилаланил-пиперидид в сравнение с тази на глициновото съединение е 5 пъти по-висока. Комбинацията от азааминокиселини с хидрофобни остатъци R’ съгласно формула I, води до съединения с Ki- и ICJ0стойности в пикомоларен обхват. Освен това съединенията, съдържащи азааминокиселини, са резистентни на ензимно разграждане, така че съединенията съгласно изобретението, освен значително повишената активност имат и подобрена стабилност.
Съединенията съгласно изобретението се получават по известни методи /3 и 4/.
Предпочита се, първоначално Вос-цианофенилаланинът да се купелува към аминокомпонент. Като аминокомпонент се използват предимно циклични амини като пиперидин, метилпиперидин или хидроксиметилпиперидин. Пептидното съединение се получава съгласно стандартни методи, като за предпочитане се работи с карбодиимид в присъствие на хидроксибензотриазол в среда на диметилформамид или друг подобен разтворител.
След изолиране на Ν-α защитеното съединение, се отстранява защитната група, в случая Вос-групата, чрез ацидолиза. За отцепването се предпочита да се използва трифлуороцетна киселина, евентуално в разтворител като дихлорметан, или хлороводород в оцетна киселина.
Азааминокиселината се купелува съгласно известни методи, например активестерния метод, при който защитено хидрозиново производно се превръща в активен естер с естери на хлормравчената киселина. Като активни естери се използват предимно пара-нитрофенилестери. Освен това съществува възможността за активиране на аминогрупата на цианофениловия остатък до изоцианат с последващо взаимодействие с хидразиново производно. Ν- β функциите на хидразините при превръщането се блокират със защитни групи. Особено подходяща е бензилоксикарбонилната група и найвече терц.-бутилоксикарбонилната група. След ацидолитично отцепване на защитната група, ароматният, хетероароматният или хетероцикличният хлорид на сулфоновата киселина в разтворител като тетрахидрофуран, диоксан, дихлорметан или диметилформамид, се купелува при прибавянето на база като N-метилморфолин, триетиламин или диизопропилетиламин. Често се оказва по-изгодно първоначално производното на хлорида на сулфоновата киселина да се купелува към хидразиновото производно. С това може да се елиминира въвеждането на защитна група. Превръщането на циано- в амидогрупа се извършва по известните способи на взаимодействие. Предпочита се съответното производно на цианофенилаланина в триетиламин/ пиридин да се третира със сероводород в продължение на няколко дни. Така образуваните тиоамиди се изолират и с помощта на метилиращо средство като метилйодид се превръщат в метилестерни съединения на тиоимидната киселина. Чрез третиране с амониеви съединения, например амониев ацетат, за предпочитане в разтворител метанол, се получава желаното амидинофенилаланиново съединение.
Съединенията се пречистват по известни методи. Предпочита се Гелпермеационова хроматография върху материали като *Сефадекс LH-20 или йонообменна хроматография върху материали като СМ-целулоза, като най-добре е да се използва ацетатен буфер. Чистотата на съединенията съгласно изобретението се отчита с тънкослойна и високоефективна течна хроматография. Идентифицирането им се извършва чрез елементарен анализ или ЯМР-спектър.
Съединенията съгласно изобретението се изпитват по различни критерии за доказване на тяхната активност като инхибитори. Предпочитат се критериите за определяне на Kiстойността, на 1С50-стойността или парциалното тромбопластично време (РТТ) in vivo и in vitro. Съгласно тези критерии съединенията съгласно изобретението са специфични и високоактивни тромбининхибитори със значителен антитромбичен потенциал, който превишава известните досега нискомолекулни инхибитори.
Съгласно изобретението се защитават също така и диагностични или терапевтични средства с антитромбна активност, съдържащи описаните инхибитори, както и използването на тези съединения като диагностициращи средства или в метод за получаване на лекарствено средство с противотромбна активност.
Следващите примери илюстрират изобретението:
Пример 1. β-нафтилсулфонил-азаглицил-О-р-амидинофенилаланилпиперидид.
1. Boc-D-р-цианофенилаланилпиперидид.
g (255 mmol) р-цианобензилбромид, 55 g (255 mmol) диетилов естер на ацетамидомалоновата киселина и 2 g калиев йодид в 250 ml абсолютен диоксан се нагряват до кипене. В продължение на 3 h към сместа се накапва прясно приготвен разтвор от 6 g (260 mmol) натрий в етанол. След допълнително тричасово кипене на обратен хладник, сместа се охлажда до 80°С и в продължение на 3 h се прибавят 170 ml 3 N натриева основа. Реакционната смес се нагрява 4 h при 95°С. След охлаждане с помощта на 6 N солна киселина се подкислява до pH 1 и диоксанът се дестилира. Евентуално отделената утайка се филтрува. С натриева основа се алкализира до pH 9 и се екстрахира двукратно с етилацетат. Водната фаза отново се подкислява със солна киселина до pH 1, при което изкристализира N-ацетилцианофенилаланинът. Кристалите се отделят, промиват се неколкократно с вода и се сушат при висок вакуум. Добив: 47 g (79,2 % от теоретичния). Чистота: тънкослойна хроматография Rj = 0,5 (хлороформ 50/метанол 10/ледена оцетна киселина 2,5/об.ч.).
g от този продукт, след прибавяне на 3 N натриева основа, се разтварят в 3 1 вода и pH се наглася на 6 - 6,5.
Прибавят се 500 ml ацилаза и утайката се инкубира 4 дни при 37®. След това чрез ултрафилтруване, разтворът се освобождава от ацилаза и се концентрира до обем 1 1. Подкислява се до pH 1 и се екстрахира многократно с етилацетат. Органичната фаза се промива с концентриран разтвор на натриев хлорид, суши се над натриев сулфат и разтворителят се дестилира. Получават се 8,2 g N-ацетил-О-цианофенилаланин (82 % от теоретичния).
Към 8 g от това съединение се прибавят 22 ml ледена оцетна киселина и 4,3 ml концентрирана хлороводородна киселина с 40 ml вода и се нагряват 24 h при кипене. След изпаряване на отцепващия се разтвор и отстраняване на киселинните остатъци, се утаява с метанол от метанол/диетилетер. Добив: 6,6 g (85 % от теоретичния).
g D-цианофенилаланинхидрохлорид се разтварят във вода 14 ml при прибавяне на 7,5 ml диизопропилетиламин. Към разтвора се прибавя разтвор на 6 g терц.-бутилоксикарбонилоксиимино-2-фенилацетонитрил в 17 ml диоксан и се бърка в продължение на една нощ. Прибавят се 40 ml вода и 50 ml етилацетат. Водната фаза се отделя и органичната фаза се екстрахира още веднъж с 1 М кисел калиев карбонат. Събраните водни фази се промиват още веднъж с 10 ml диетилетер и със солна киселина се подкисляват до pH 3. Екстрахират се трикратно с етилацетат, промиват се с наситен разтвор на натриев хлорид и органичната фаза се суши над натриев сулфат. След изпаряване на разтворителя се получават 5,6 g (78 %) Boc-D-цианофенилаланин.
3,26 g (10 mmol) Boc-D-цианофенилаланин, 1,49 g (11 mmol) хидроксибензотриазол и 2,42 g (12 mmol) дициклохексилкарбодиимид се разтварят в 50 ml диметилформамид и се бъркат 1 h. Прибавя се 1 ml пиперидин и се бърка още една нощ. Отделеният дициклохексилкарбамид се филтрира, диметилформамидът се дестилира и остатъкът се разтваря в диметилформамид. Промива се по три пъти с калиев бикарбонат, 1 М кисел калиев сулфат и с наситен разтвор на натриев хлорид. След изсушаване на органичната фаза с натриев сулфат и дестилиране на разтворителя, се получава 3,16 g (80 %) Boc-D-цианофенилаланил-пиперидид.
Определяне на чистотата: тънкослойна хроматография Rf - 0,27 (хлороформ).
2. D-цианофенилаланил-пиперидин-хидрохлорид.
g от Вос-защитеното съединение се разтварят в 50 ml 1,2 N НС1 в ледена оцетна киселина и се бъркат 30 min при стайна температура. Отцепващият се продукт се дестилира във вакуум, с толуол се доотстранява и остатъкът се разтърква с диетилетер. Кристалите се събират и се сушат под вакуум. Добив: 2,2 g.
3. Вос-азаглицил-О-цианофенилаланилпиперидид.
2,08 g (7 mmol) Вос-азаглицин-пара-нитрофенилестер и 2,06 g (7 mmol) цианофенилаланил-пиреридид се разтварят в 50 ml диметилформамид. След прибавяне на 2,4 ml (14 mmol) диизопропилетиламин се бърка 1 ден на тъмно при стайна температура. Разтворителят се отстранява под вакуум, остатъкът се разтваря в етилацетат и се промива трикратно с 1 М разтвор на кисел калиев сулфат с разтвор на калиев бикарбонат и двукратно с наситен разт вор на натриев хлорид. Органичната фаза се суши над натриев сулфат и разтворителят се дестилира. Остатъкът се разбърква с диизопропилов етер, кристалите се събират и се сушат. Така се получават 2,29 g Вос-азаглицил-О-цианофенилаланил-пиперидид.
4. β -нафтилсулфонил-азаглицил-О-цианофенилаланил-пиперидид.
2,08 g (5 mmol) Вос-азаглицил-Р-цианофенилаланилпиперидид се разтварят в 50 ml
1,2 N НС1 в ледена оцетна киселина и се бъркат 30 min при стайна температура. След отстраняване чрез изпаряване на отцепващия се продукт и доотстраняване с толуол във вакуум, остатъкът се разтрива с етер и получените кристали се събират. Кристалите се разтварят в 50 ml дихлорметан при прибавяне на 1,7 ml (10 mmol) диизопропилетиламин.
Прибавят се 1,134 gP -нафтилсулфонилхлорид и се бърка при стайна температура в продължение на една нощ. Разтворителят се дестилира, остатъкът се разтваря в етилацетат и се промива трикратно с разтвор 1 М на кисел калиев сулфат и с разтвор на калиев бикарбонат и двукратно с наситен разтвор на натриев хлорид. Органичната фаза се суши над натриев сулфат и разтворителят се изпарява. Получават се 1,75 g β -нафтилсулфонил-азаглицилD-цианофенилаланил-пиперидид.
5. β -нафтилсулфонил-азаглицил-О-амидино-фенилаланил-пиперидид.
g от полученото в т.4 съединение се разтваря в 30 ml сух пиридин и след като се прибави 1 ml триетиламин в продължение на 3 h се пропуска сероводороден газ. След като престои три дни при стайна температура, реакционната смес се излива върху смес от 100 g лед и 50 ml концентрирана солна киселина. Утайката се филтрира и се промива с вода. След изсушаване тиоамидът се разтваря в 50 ml ацетон и се прибавя 1,5 ml метилйодид. Нагрява се 30 min на обратен хладник. След охлаждане се утаява с диетилетер. Утайката се разтваря в дихлорметан и се промива двукратно с вода. Органичната фаза се суши над натриев сулфат, разтворителят се отстранява и остатъкът се разтваря в 30 ml сух метанол, след което се прибавят 200 mg амониев ацетат. Нагрява се 3 h при 60°С. Разтворителят се из-парява под вакуум. Полученият продукт се пречиства чрез хроматографиране върху *Сефа-декс LH - 20 в метанол. Добив: 590 mg; Чистота: т.т. 182°С;
тънкослойна хроматография: Rf = 0,48 (хлороформ 50/метанол 10/ледена оцетна киселина 2,5/об.ч.); идентифициране: определяне на моларната маса (бомбардиране с ускорени атоми) М+ + Н* 523.
Пример 2. 2,2,5,7,8-пентаметилхроманб-сулфонил-азаглицил-О-р-амидинофенилаланил-пиперидид.
Етапите от 1 до 3 са аналогични на описаните в пример 1.
4. 2,2,5,7,8-пентаметилхроман-6-сулфонил-азаглицил-О-цианофенилаланин-пиперидид.
1,67 g (4 mmol) Вос-азаглицил-О-цианофенилаланил-пиперидид се разтварят в 50 ml
1,2 N НС1 в ледена оцетна киселина и се бърка 30 min при стайна температура. След изпаряване на отцепващия се продукт и доотстраняване с толуол под вакуум, остатъкът се разбърква в етер и кристалите се събират. Кристалите се разтварят в 50 ml дихлорметан при прибавяне на 1,36 ml (8 mmol) диизопропиламин. Към тях се прибавят 1,35 g 2,2,5,7,8-пентаметилхроман6-сулфонил-хлорид и реакционната смес се бърка една нощ при стайна температура. Разтворителят се дестилира, остатъкът се разтваря в етилацетат и се промива трикратно с разтвор на 1 М кисел калиев сулфат, с разтвор на калиев бикарбонат и двукратно с концентриран разтвор на натриев хлорид. Органичната фаза се суши над натриев сулфат и разтворителят се дестилира. Получават се 1,95 g 2,2,5,7,8-пентаметилхроман-6-сулфонил-азаглицил-П-цианофенилаланил-пиперидид.
5. 2,2,5,7,8-пентаметилхроман-6-сулфонилазаглицил-О-амидинофенилаланил-пиперидид.
1,5 g от съединението, получено в етап 4, се разтваря в 30 ml сух пиридин и след прибавяне на 1 ml триетиламин в продължение на 3 h се пропуска сероводороден газ. След като престои 3 дни при стайна температура, реакционната смес се излива върху смес от 100 g лед и 50 ml концентрирана хлороводородна киселина. Утайката се филтрира и се промива с вода.
Тиоамидът се суши и след това се разтваря в 50 ml ацетон, след което се прибавят 1,5 ml метилйодид. Нагрява се на обратен хладник 30 min. След като се охлади, се утаява с 5 диетилетер. Утайката се разтваря в дихлорметан и се промива двукратно с вода. След изсушаване на органичната фаза с натриев сулфат и отстраняване на разтворителя, остатъкът се разтваря в 30 ml сух метанол и се прибавят 10 300 mg амониев ацетат. Нагрява се 3 h при 60°С. Разтворителят се отстранява под вакуум. Продуктът се подлага на пречистване чрез хроматография върху *Сефадекс LH - 20 в метанол. Добив: 990 mg; Чистота: т.т. 149 - 155°С 15 (синтерува, ацетатната сол); тънкослойна хроматография: R( = 0,52 (хлороформ 50/метанол 10/ледена оцетна киселина 2,5/об.ч.)
Определяне на стойността 1С50 на тромбининхибирането:
Съединенията във възходяща концентрация се инкубират с човешки тромбин в 0,1 М трис-НС1-буфер /0,15 М натриев хлорид при pH 8,2/. След 1 h започва ензимната реакция чрез прибавяне на субстрата хромоцимКТН (Tos - Gly - Pro - Arg - pNA, 5 x 10 s M/1). Освобождаването на pNA се измерва след 1 h чрез увеличаването на оптичната плътност при 405 шп във фотометър. Концентрацията на инхибитора, предизвикваща 50 %-но задържане на ензимната активност, се означава като ICJ0 (100 % означава неинхибирана ензимна реакция).
Определяне на стойността KI за тромбин
С описания по-горе тромбинов разтвор се определят KI стойностите за различните съединения. За целта тромбин се инкубира заедно с концентрация на инхибитора, която отговаря приблизително на определената чрез по-горния тест 1С50-стойност. Реакцията започва с различни концентрации на субстрата хромоцим TH (0,7 - 45 . 10'J mol/1). Начинът на задържане и стойността KI се определят съгласно метода на Линвейвър и Бърк /5/.
Таблица 1
Съединение Задържане на тромбина
ICJ0 (mol/1) KI (mol/1)
2,2,5,7,8-пентаметилхроман-6-сулфонил-глицил-О-амидинофенилаланилпиперидид 1,4.10 1,3.10-’
β -нафтилсулфонил-азаглицил-Dр-амидинофенилаланилпиперидид 2,2,5,7,8-пентаметилхроман-6-сулфонил-азаглицил-О-амидофенилаланил- 1,3.10’ 2,6.10
пиперидид 1,6.10’ 9,2.10’
ΝΑΡΑΡ (НАПАП) 2,8.10-’ 1,410’
Патентни претенции

Claims (5)

Патентни претенции
1. ЕР 0 236 163.
1. Амидофенилаланинови производни с формула I в която R’ означава нафтилова или фенилова група, която може да е субституирана
15 с 1 до 3 алкоксигрупи, съдържащи до 3 въглеродни атома, или с до 5 алкилови групи, които съдържат един до два въглеродни атома, или хроманова група, която може да е заместена с до 5 метилови групи; R, е водород, нисша алкилова група, съдържаща до 4 въглеродни атома, хидроксиалкилова група, аралкилова група, съдържащата до 7 въглеродни атома или карбоксиалкилова група, съдържащата до 4 въглеродни атома; R, и R, са еднакви или раз* л 35 лични и означават алкилова група, съдържаща до 4 въглеродни атома, при което R^ и R3 могат заедно с азотния атом да образуват пръстен, който да е заместен с карбоксилна, с хидроксилна или хидроксиалкилова група, съдържащи до 3 въглеродни атома и символът * лежи в R- или S-структурата, за предпочитане в R-структурата.
2. ЕР 0 236 164.
2. Производно съгласно претенция 1, характеризиращо се с това, че R’ означава β нафтил, Rj е водород и R; и R3 заедно образуват пиперидинов пръстен.
3. Houben-Weyl, “Methoden der organischen Chemie”, Bp 15 (12).
3. Производно съгласно претенция 1, характеризиращо се с това, че R’ означава 2,2,5,7,8-пентаметилхроман, Rj е водород и и R3 заедно образуват пиперидин.
4. Pharmazie 39, 228 (1984).
4. Производно съгласно претенция 1, ха рактеризиращо се с това, че R’ е β -нафтил, R, означава -СН2-СООН и R2 и R3 заедно образуват пиперидин.
5. Производно съгласно претенция 1, характеризиращо се с това, че R’ означава β нафтил, Rj е метил и 1% и R3 заедно образуват пиперидин.
6. Производно съгласно претенция 1, характеризиращо се с това, че R’ означава 6,7диметокси- β -нафтил, Rj е водород и R2 и Rj заедно са пиперидин.
7. Производно съгласно претенция 1, характеризиращо се с това, че R’ означава метокси- а -нафтил, Rj е метил и R2 и Rj заедно са пиперидин.
8. Производно съгласно претенция 1, характеризиращо се с това, че R’ означава β нафтил, R( е водород и RJ и заедно са 3пиперидин.
9. Производно съгласно претенция 1, характеризиращо се с това, че R’ означава 5,6,7,8-тетрахидро- β -нафтил, R3 е -СН2СООН и Rj и R3 заедно са пиперидин.
10. Производно съгласно претенция 1, характеризиращо се с това, че R’ означава метокситриметил фенил.
11. Производно съгласно претенция 1, характеризиращо се с това, че R’ означава пентаметилфенил, R, е водород и 1Ц и R3 заедно са пиперидин.
12. Метод за получаване на амидинофенилаланинови производни с формула /I/, характеризиращ се с това, че хидрозиново производно с формула R’-SOj-NH-NHRp където R’ и Rj имат значенията, посочени в претенция 1, взаимодейства с обичайно карбонилиращо средство, за предпочитане пара-нитрофенилов естер на хлормравчената киселина в разтвор, и реакционният продукт взаимодейства с пара-амидинофенилдиалкиламид, където алкиловата група има значенията^посочени в претенция 1 за R2 и Rr
13. Диагностично или терапевтично средство, характеризиращо се с това, че съдържа производни съгласно претенция 1.
14. Приложение на производни съгласно 5 претенция 1, като диагностични или лечебни средства с антитромбозна активност.
Литература
5. J. Amer. Chem. Soc., 56, 658 - 666, 1934.
BG96171A 1991-04-09 1992-04-02 Амидинофенилаланинови производни,метод за получаването им, приложението им и средства,които ги съдържат BG60683B1 (bg)

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
DE4111394A DE4111394A1 (de) 1991-04-09 1991-04-09 Amidinophenylalaninderivate, verfahren zu deren herstellung, deren verwendung und diese enthaltende mittel

Publications (2)

Publication Number Publication Date
BG96171A BG96171A (bg) 1993-12-24
BG60683B1 true BG60683B1 (bg) 1995-12-29

Family

ID=6429103

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
BG96171A BG60683B1 (bg) 1991-04-09 1992-04-02 Амидинофенилаланинови производни,метод за получаването им, приложението им и средства,които ги съдържат

Country Status (28)

Country Link
US (1) US5274098A (bg)
EP (1) EP0508220B1 (bg)
JP (1) JPH0597793A (bg)
KR (1) KR920019738A (bg)
CN (1) CN1067431A (bg)
AT (1) ATE125549T1 (bg)
AU (1) AU650526B2 (bg)
BG (1) BG60683B1 (bg)
BR (1) BR9201253A (bg)
CA (1) CA2065585A1 (bg)
CS (1) CS106492A3 (bg)
DE (2) DE4111394A1 (bg)
DK (1) DK0508220T3 (bg)
ES (1) ES2076595T3 (bg)
FI (1) FI921525A (bg)
GR (1) GR3017107T3 (bg)
HU (1) HUT65359A (bg)
IE (1) IE67347B1 (bg)
IL (1) IL101529A (bg)
MA (1) MA22495A1 (bg)
MX (1) MX9201642A (bg)
NO (1) NO921382L (bg)
NZ (1) NZ242246A (bg)
PL (1) PL294148A1 (bg)
RO (1) RO109197B1 (bg)
TW (1) TW214542B (bg)
UY (1) UY23395A1 (bg)
ZA (1) ZA922535B (bg)

Families Citing this family (17)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
DE4115468A1 (de) * 1991-05-11 1992-11-12 Behringwerke Ag Amidinophenylalaninderivate, verfahren zu deren herstellung, deren verwendung und diese enthaltende mittel als antikoagulantien
DE4242655A1 (de) * 1992-12-17 1994-06-23 Behringwerke Ag Verwendung von Thrombin-Inhibitoren zur Inhibition okularer Fibrinbildung
DE4342154A1 (de) * 1993-12-10 1995-06-14 Behringwerke Ag Amidinophenylalaninderivate, Verfahren zu deren Herstellung, deren Verwendung und diese enthaltende Mittel als Antikoagulantien
WO1996005189A1 (de) * 1994-08-09 1996-02-22 Pentapharm Ag Neue inhibitoren vom benzamidintyp
US5525617A (en) * 1994-08-24 1996-06-11 Merck & Co., Inc. Fibrinogen receptor antagonists
DE19517198C1 (de) * 1995-05-11 1996-10-10 Samson Ag Verfahren zur Führung der Hubstellung eines Stellgliedes
US5766932A (en) * 1995-12-20 1998-06-16 Hoechst Marion Roussel, Inc. Process for preparing N-acetyl(L)-4-cyanophenylalanine from a mixture of the corresponding D,L ethyl esters using subtilisin
US5840733A (en) * 1996-07-01 1998-11-24 Redcell, Canada, Inc. Methods and compositions for producing novel conjugates of thrombin inhibitors and endogenous carriers resulting in anti-thrombins with extended lifetimes
KR19990074598A (ko) * 1998-03-12 1999-10-05 성재갑 고체상 반응을 이용한 벤즈아미딘 유도체의 신규한 제조방법
PL223152B1 (pl) 2000-08-18 2016-10-31 Ajinomoto Kk Pochodne fenyloalaniny, kompozycja farmaceutyczna oraz zastosowanie tych pochodnych
SI21137A (sl) * 2002-01-24 2003-08-31 LEK, tovarna farmacevtskih in kemičnih izdelkov, d.d. Derivati azafenilalanina
DE10330900B4 (de) * 2003-07-01 2006-09-14 Leibniz-Institut Für Polymerforschung Dresden E.V. Biomaterial mit einem modularen Beschichtungssystem zur Anwendung in Medizinprodukten mit direktem Blutkontakt
CN1917881B (zh) 2003-12-22 2014-11-26 味之素株式会社 新型苯基丙氨酸衍生物
US7994221B2 (en) 2004-12-06 2011-08-09 Siga Technologies, Inc. Sulfonyl semicarbazides, carbonyl semicarbazides, semicarbazides and ureas, pharmaceutical compositions thereof, and methods for treating hemorrhagic fever viruses, including infections associated with arenaviruses
US8410149B2 (en) 2004-12-06 2013-04-02 Siga Technologies Inc. Sulfonyl semicarbazides, semicarbazides and ureas, pharmaceutical compositions thereof, and methods for treating hemorrhagic fever viruses, including infections associated with arenaviruses
JP5285276B2 (ja) * 2004-12-06 2013-09-11 シガ テクノロジーズ，インコーポレーテッド アレナウイルスに関連した感染をはじめとする出血熱ウイルスを処置するための、スルホニルセミカルバジド、セミカルバジドおよび尿素、その医薬組成物および方法
CN101034257B (zh) * 2007-04-06 2010-09-08 上海复旦天臣新技术有限公司 用于全息记录的感光薄膜及其制备方法

Family Cites Families (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US4028380A (en) * 1974-06-01 1977-06-07 Akzona Incorporated Hydrazino-imidazole derivatives
DD155954B1 (de) * 1981-02-03 1988-11-09 Wagner Guenter Verfahren zur herstellung von n tief alpha arly-bzw. n tief alpha heteroarylsulfonylaminoacylierten amidinophenylalaninamiden
DD235866B1 (de) * 1985-03-29 1988-12-28 Univ Leipzig Verfahren zur herstellung von n alpha (2-naphthyl)-sulfonylaminoacylierten amidinophenylalanisamiden
PT84171B (pt) * 1986-01-24 1989-03-30 Sanofi Sa Processo para a preparacao de derivados das n alfa-aril-sulfonilamiminoacil-p- -amidinofenil-alaninamidas, bem como dos seus derivados de sintese e das composicoes farmaceuticas que os contem
PT84170B (pt) * 1986-01-24 1989-03-30 Sanofi Sa Processo para a preparacao de derivados n alfa-substituidos das n alfa-aril-sulfonilaminoacil d-amidinofenil-alaninamidas

Also Published As

Publication number Publication date
MA22495A1 (fr) 1992-12-31
DE4111394A1 (de) 1992-10-15
IE921123A1 (en) 1992-10-21
HU9201189D0 (en) 1992-07-28
NO921382L (no) 1992-10-12
CS106492A3 (en) 1992-10-14
AU650526B2 (en) 1994-06-23
PL294148A1 (bg) 1993-02-08
FI921525A (fi) 1992-10-10
EP0508220B1 (de) 1995-07-26
MX9201642A (es) 1992-10-01
NO921382D0 (no) 1992-04-08
CN1067431A (zh) 1992-12-30
BG96171A (bg) 1993-12-24
RO109197B1 (ro) 1994-12-30
IL101529A0 (en) 1992-12-30
DK0508220T3 (da) 1995-11-27
FI921525A0 (fi) 1992-04-07
EP0508220A1 (de) 1992-10-14
UY23395A1 (es) 1992-04-21
ZA922535B (en) 1992-11-25
KR920019738A (ko) 1992-11-19
IE67347B1 (en) 1996-03-20
IL101529A (en) 1996-05-14
NZ242246A (en) 1993-12-23
US5274098A (en) 1993-12-28
ATE125549T1 (de) 1995-08-15
BR9201253A (pt) 1992-12-01
ES2076595T3 (es) 1995-11-01
TW214542B (bg) 1993-10-11
DE59203006D1 (de) 1995-08-31
JPH0597793A (ja) 1993-04-20
HUT65359A (en) 1994-05-02
AU1470392A (en) 1992-10-15
CA2065585A1 (en) 1992-10-10
GR3017107T3 (en) 1995-11-30

Similar Documents

Publication Publication Date Title
RU2088591C1 (ru) Производные амидинофенилаланина, способ их получения и производные амидинофенилаланина, обладающие антикоагулирующей активностью
FI67539C (fi) Foerfarande foer framstaellning av nya terapeutiskt anvaendbara peptidyl-ng-karboxyl-arginaldehyder
BG60683B1 (bg) Амидинофенилаланинови производни,метод за получаването им, приложението им и средства,които ги съдържат
JP3453357B2 (ja) トロンビンの阻害剤および基質
US4918105A (en) Novel compounds with collagenase-inhibiting activity, a process for their preparation and pharmaceutical compositions in which these compounds are present
US4713369A (en) Oligopeptidylargininol derivatives and their homologs, a process for their preparation, their use and agents containing them
JPS62207251A (ja) オリゴペプチジルニトリル誘導体
HU201961B (en) Process for producing 2,3-disubstituted isoxazolidines and pharmaceutical compositions comprising same
US20090117185A1 (en) 2-(Aminomethyl)-5-Chlorobenzylamide Derivatives and their use as Inhibitors of the Clotting Factor Xa
US5571844A (en) Amidinophenylalanine derivatives, a process for their preparation, their use and compositions containing these as anticoagulants
CZ300365B6 (cs) Inhibitory faktoru VIIa, zpusob jejich prípravy a jejich použití
NO319678B1 (no) Fremgangsmate for fremstilling av N-acetyl(L)-4-cyanofenyl-alanin, Ac-(L)-Phe(4-CN)-OH og N-acetyl-(L)-p-amidinofenyl-alanin-sykloheksylglysin-<beta>-(3-N-metylpyridinium)-alanin, Ac-(L)-pAph-Chg-PalMe(3)-NH2
HU210248B (en) Process for preparing 3-l-(5-thioxo-l-prolyl)-thiazolidine-4-carboxylic acid, derivatives thereof and pharmaceutical compositions containing them
PT92329A (pt) Processo para a preparacao de dipeptidios inibidores da renina e de composicoes farmaceuticas que os contem