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La présente invention se rapporte aux composés de purine et plus spécialement à des 6-mercaptopurines ayant une activité exceptionnelle comme substances inhibitrices des micro-organismes et des néoplasmes.
Les composés de la présente invention sont des menbres de la classe représentée par la formule générale (I)
EMI1.1
où X est choisi dans la classe formée par l'hydrogène et les groupes amino alkylamino et dialkylamino et alkyles inférieures; Y est choisi dans la classe formée par les groupes mercapto, alkylmercapto, sélényle et telluryle et Z est choisi dans la classe formée par les groupes carbonyle, acétylène ( =C-C= ), méthylidyne ( -CH= ), éthylidyne ( -C= ), mercaptométhylidyne et par l'azote. CH3
Il est clair pour le spécialiste en chimie organique que ces composés peuvent être écrits sous un certain nombre de formes tautomères.
C'est ainsi que pour ae mêmes valeurs de Z l'anneau de droite peut être écrit :
EMI1.2
Sauf lorsqu'ils sont fixés par formation de dérivés fonctionnels qui ne peuvent être obtenus qu'à partir d'un même tautomère, les composés de cette série ne sont généralement pas isolables sous la forme de desmotropes individuels, et aux fins de la présente invention les formes tautomères sont considérées comme étant identiques.
Suivant une des caractéristiques de la présente invention., dans un procédé de préparation ae composés de la formule (I) on fait réagir un composé intermédiaire de la formule (II) où W est un groupe hydroxy ou chloro avec un agent de thiation comme le pentasulfure de phosphore ou le soufre ou un sulfures séléniure ou tellurure hydrogéné de métal alcalin.
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L'invention comprend également de nouveaux composés de la formule (I).
Nombre des composés mercapto peuvent être facilement oxydés en disulfures. Les deux formes du composé sont souvent équivalentes et peuvent être facilement converties mutuellement.
Dans certains cas, on peut introduire des éléments isotopes, et bien que les produits soient identiques du point de vue chimique à ceux qu'on obtient avec les isotopes ordinaires, des avantages radiothérapeu- tiques peuvent être obtenus avec des éléments radioactifs.
Les exemples qui suivent illustrent l'invention sans en limiter la portée. exemple 1. -
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2-Amino-6-mercaDto-8-azaDurine
On chauffe à reflux pendant 2 1/2 heures un mélange de 20 g de 8-azaguanine, 100 g de pentasulfure de phosphore en poudre et 250 cm3 de pyridine anhydre. La pyridine est chassée par distillation dans le vide et le résidu est bouilli avec 400 cm3 d'eau pendant 10 minutes. Le pH est réglé à 4 avec de l'acide chlorhydrique et on refroidit le Produit.
Le précipité brun foncé est séparé par filtration et traité par 150 cm3 d'eau et 150 cm3 d'hydroxyde d'ammonium concentré. Le résidu insoluble est séparé par filtration et la solution ammoniacale est bouillie pour chasser l'excès d'ammoniac, puis amené au pH 3 par de l'acide chlorhyàri- que. Par refroidissement, on obtient un précipité brun, (17,9 g) formé d'un mélange de 2-amino-6-mercapto-8-azapurine et de son produit d'oxydation, le disulfure de bis-(2-amino-8-azapurinyl-6-). Ces deux produits peuvent être mutuellement convertis. Le dérivé 6-mercapto est séparé du mélange par une seconde extraction à l'hydroxyde d'ammonium dilué (25 cm3 d'hydroxyde d'ammpnium concentré et 500 cm3 à'eau), filtration et acidification par de l'acide acétique glacial (2,5 g).
Le disulfure est insoluble dans l'hydroxyde d'ammonium mais est purifié en le dissolvant dans 500 cm3 d'acide chlorhydrique 1 N chaud et en le précipitant par de l'hydroxyde d'ammonium au pH 7 (6,5 g). Le dérivé 6-mercapto et le bis-6-disulfure ont tous deux un maximum d'absorption dans l'ultraviolet de 310- 320 mu au pH 11.
Exemple 2.-
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àciae 2-amino-L-mercaDto-7-hYàrozvDteriàîne-6-carboxvlique A. 2,,4-diamino--mercapto]2Mimidine
On chauffe un mélange de 10 g de 2,4 diamino-6-chloro-pyrimidine et de 200 cm3 à'hyarosulfure de potassium 1 N dans un récipient clos à 150 C pendant 20 heures. Le mélange de réaction est acidifié par de l'aciae acétique et évaporé au bain de vapeur jusqu'à ce qu'il reste un magma épais. On refroidit ce magama, on le filtre, on le lave à l'eau froide et on le sèche à 110 C {rendement, 8 g). Après recristallisation de 50
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parties d'eau chaudes la 2 4-àiamino-6-mercaptopyrimiciine fond à 282 C (àéc.).
B. 2.,a5-triamino-6-mercaptopyrimidine On refroidit à 0 C une solution de 9,15 g de 29h.-àiamino-6-mercaptopyrimi-
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dine aans 800 cm3 d'eau et 40 cm3 d'hydroxyde de sodium 2 N. On ajoute à cette solution une solution de chlorure p-chlorobenzène-diazonium (préparé à partir de 8,4 g de p-chloro-aniline, 33 cm3 d'acide chlorhyarique concentré 110 cm3 d'eau et 4,9 g de nitrite de sodium) et une solution de 17 g de bicarbonate de sodium dans 100 cm3 d'eau. Après 24 heures à
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00-100C, le précipité orange de 2,4-diamino-6-mercapto-5-p-chlorobenzène- azopyrimidine est séparé par filtration, lavé à l'eau et séché à 100 C (15 g).
On fait bouillir ce composé azo brut (15 g) avec 800 cm3 de méthanol en solution aqueuse à 50% à laquelle on ajoute 20 g de poudre de zinc et 28 cm3 a'acide chlorhydrique concentré. Après ébullition pendant 20 à 30 minutes on filtre le mélange et on refroidit le filtrat (pH envi-
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ron 5). La 2,t,,,5-triamino-6 mercaptopyrimiàine (4 g) précipite. Son maximum a'absorption se situe à 310 /qu au pH 1 et à 320 mn au pH 11.
C. Acide 2-amino- -merca to- -h dro - téri ine- -carbo ue On ajoute à une solution de 1,5 g de 2,4,5-triamîno-6-mercapto- pyrimidine dans 300 cm3 d'eau 10 cm3 d'ester oxomalonique et on règle le pH à 5. Onchauffe le mélange à reflux pendant 2 heures, puis on le laisse jusqu'au lendemain à la température ordinaire. On receuille le précipité brun formé et on le purifie en le dissolvant dans un alcali et en le précipitant par l'acide acétique..Le rendement en acide 2-amino-4-mercapto-
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7-hydroxy-6-ptéridine-carboxylique est 0,5 g.
Exemple 3,- 6-merc apto-8-azapurine
On met en suspension 7,5 g de 4-amino-6-chloro-5-nitro-pyrimidine dans 200 cm3 d'hydrosulfure de potassium 1 n et on chauffe le bain de vapeur pendant 2 heures en faisant passer de l'hydrogène sulfuré dans le mélange. On laisse refroidir le mélange et on l'acidifie par de l'acide sulfurique 10 N. Le précipité est séparé par filtration et recristallisé de 300 cm3 d'eau chaude.
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La 4,5-àiamim-6-mercaptopyrimidine présente des maxima d'absorption dans l' ultraviolet à 240 et 305mu au pH 1 et à 240 et 310 jiu au pH 11.
On ajoute à une solution de 2,1 g de 4,5-diamino-6-mercapto-py- rimidine dans 30 cm3 d'eau et 8 cm3 d'hydroxyde de sodium 2 N, 1,1 g de nitrite de sodium, puis goutte à goutte 3 cm3 d'acide acétique glacial.
On laisse reposer la solution à la température ordinaire pendant 1 heure puis à 4 C jusqu'au lendemain. Le précipité (1,7 g) est un mélange de 6-mercapto-8-azapurine et de disulfure de bis(8-azapurine-6-) mutuellement convertissables. On sépare ces composés par de l'alcali dilué dans lequel le disulfure est insoluble. Les deux composés présentent des maxima d'absorption à 315-325 mu au pH 11.
On ajoute à une suspension de 1 g de disulfure de 6,6-bis(8azapurinyl) dans 100 cm3 d'isopropanol chaud 3 g de sodium en petits morceaux jusqu'à ce que toute la matière solide initiale soit passée en solution. Peu après, le sel de sodium de 6-mercapto-8-azapurine se sépare par précipitation. On le refroidit, on le filtre, on le dissout dans 100 cm3 d'eau et on acidifie la solution par de l'acide chlorhydrique. La 6-
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mercapto-8-zapurine précipite lentement par repos à 4BC. Après filtra- tion, lavage et séchage dans un dessiccateur sous vide, le composé (870 mg) présente un spectre d'absorption caractéristique dans l'ultraviolet :
EMI3.6
au pH 1, max. > = 327-330 jyu, ant pH 11 max. =322 mu.
Exemple G.. /- 6-mercaDto-8-azaDurine On chauffe à reflux pendant 4 heures 5 g de 6-hydroxy-8-azapu-
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rine, 15 g de pentasulfure ae phosphore en poudre et 200 cm3 de pyridine.
On élimine la pyridine aans le viae et on traite le résidu par aes portions de 150 cm3 d'eau bouillante. La partie soluble dans l'eau est neutralisée au pH 4, et le précipitée formé d'un mélange de 6-mercapto-8- azapurine et ue son aisulfure est recueilli par filtration.
Exemple 5,-
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6 o8-dimercaptODurine On chauffe à 200 C penaant 6 5 heures un mélange cive 6 8 g de 6-hyuroxy-8-mercaptopurine 8 g de foie ae soufre (sulfures mixtes ae potassium) 35 g de pentasulfure ue phosphore aans 200 cm3 ae tétraline. On refroidit et on filtre le mélange. On fait bouillir le résidu inso-
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luble avec 300 cm3 a'eau9 on rend le mélange ammoniacal par ae l'hydro- xyde d'ammonium et on filtre. Le filtrat est acidifié à l'acide acétique, refroidi et on recueille un précipité jaune clair (4,95 g). Après recris-
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tallisation d'eau51 on obtient 2e35 g de 69$-àimercaptopurine pure.
Exemple 6.- 2-amino-6 $-âimerca. to,urine
On chauffe à 20C G en agitant penaant 3,5 heures un mélange de 29,5 g ae 2-amino-6-hydroxy-8-méthylmercaptopurine et 90 g de pentasulfure de phosphore dans 250 cm3 de tétraline. On refroidit le mélange9 on filtre et on le lave au benzène. Le résidu insoluble est bouilli avec 800 cm3 d'eau et filtré à chaud. Le résidu est traité par 250 cm3 d'hyaroxyae d'ammonium concentré et 300 cm3 a'eau et filtré. Le filtrat ammoniacal est amené au pH 6 par de l'acide chlorhyarique concentré.
Après refroidissement..on recueille le précipité jaune clair qui s'est
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formé. On purifie la 2-a.ino-69$-aimercaptopurine en la dissolvant dans 500 cm3 d'hydroxyde d'ammonium dilué et en la précipitant par l'acide chlorhydrique. Le rendement est 9 g.
Exemple 7.-
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6-merc aptp-8-h7droxvDurine On chauffe à 170-175 C penaant 25 minutes un mélange ae 4,2 g de 4.95-ciiamino-6-mercaptopyrimiàine et ae 4 g d'urée. Le mélange fond et se resolidifie. Après refroidissement, le mélange ae réaction est dissous dans 50 cm3 d'hydroxyde de sodium dilué.filtré et acidifié par de l'acide acétique. Le précipité jaune clair de 6-mercapto-8-hyàroxypuri- ne hémihydratée (493 g) est recueilli.;, lavé à l'eau et séché à 100 C.
Exemple 8.-
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a6-dimercaPto-8-hYdroxypurine
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On chauffe à 100 C dans une bombe pendant 6 heures une solution
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de 5 g de 2 68-trichloropurine dans 200 cm3 d'hydrosulfure de potassium 1 N. On acidifie le mélange de réaction par l'acide chlorhydrique et on sépare par filtration le précipité j'aune clair obtenu (4,6 g). La 2,6dimercapto-8-hydroxypurine est purifiée et'abord en la dissolvant dans de l'hydroxyde de baryum saturé et en la reprécipitant par de l'acide chlorhydrique puis en la dissolvant dans de l'hydroxyde de sodium dilué et en la précipitant par de l'acide chlorhydrique.
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xemple 9.- 6-mercaoto-8-méthYlDurine On prépare d'abord la 6-hydroxy-8-méthylpurine.
On dissout z25 g de .-amino-5-acétamido-6-hyàroxYpyrimiàine dans 24,9 c3 d'hydro- xyde de sodium 2,2 N et on soumet la solution à une dessiccation sous pression réduite. Le résidu est chauffé pendant 3 heures à 280 C pour obtenir la fermeture du noyau, Après chauffage, le résidu solide est dissous dans 150 cm3 d'eau, filtré et acidifié à l'acide acétique. Le précipité de 6-hydroxy-8-méthylpurine est séparé par filtration après 24 heures à 4 C. On le lave à l'eau et on le sèche à 120 C. Rendement : 6,5 g.
Le composé présente un spectre d'absorption caractéristique dans l'ultraviolet : maximum }. =247 mu au pH 1; maximum À =257 mu au pH 11.
On chauffe à 200-210 C pendant 3 heures un mélange de 4 g de 6-hydroxy-8-méthylpurine et de 20 g de pentasulfure de phosphore dans 200 cm3 de tétraline. Après refroidissement, on sépare la partie solide par filtration, on la lave au benzène et à l'éther de pétrole et on la sèche dans l'air. On fait bouillir la partie solide avec 300 cm3 d'eau pendant 15 minutes et on filtre à chaud. On règle le filtrat au pH 5 par de l'hydroxyde d'ammonium puis on le concentre à un volume de 100 cm3 sous pression réduite.
Après refroidissement., on sépare par filtrationle précipité orange de 6-mercapto-8-méthylpurine (2 g) on le lave à 1' eau et on le sèche à 110 C. Ce composé présente un spectre d'absorption caractéristique dans l'ultra-violet: maximum }.. =327 mu au pH 1; maximum =312 mu au pH 11. Exemple 10.-
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2-diméthylamino-6-mercaptopurine On chauffe un mélange de 15 g de 2-méthylmercapto-6-hydroxypu- rine et de 30 cm3 de diméthylamine en solution dans le méthanol à 30% à 140 C pendant 24 heures dans un tube scellé. On soumet le mélange à une dessiccation sous pression réduite. On dissout le résidu dans 120 cm3 d' acide chlorhydrique 1 N bouillant et on filtre à chaud pour séparer un résidu insoluble. On règle le filtrat au pH 6 à l'aide d'hydroxyde d'ammonium.
Après refroidissement., on sépare par filtration la 2-diméthylamino-6-hydroxypurine (8,5 g), on la lave à l'eau et on la sèche à 110 C.
On chauffe à reflux pendant 3 heures un mélange de 5 g de 2-diméthyl-amino-6-hydroxypurine, 25 g de pentasulfure de phosphore et 250 cm3 de pyridine anhydre. On élimine l'excès de pyridine par distillation sous pression réduite. On fait bouillir le résidu avec 200 cm3 d'eau pendant une demi-heure.. puis on le refroidit. Le précipité de 2-diméthylamino-6mercaptopurine brute est séparé par filtration et lavé à l'eau. On le purifie en le dissolvant dans 200 cm3 d'hydroxyde d'ammonium dilué,en filtrant et en acidifiant au pH 5 par de l'acide chlorhydrique.
On obtient 2,5 g de produit purifié.
Exemple 11.-
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6-s élényipurine
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On chauffe 2 g de 6-chloropurine, 8 g de séléniure de sodium hydrogéné et 40 cm3 d'éthanol dans un tube scellé à 110 C pendant 7 heu- res. Le produit contient de la 6-éthoxypurine et de la 6-sélénylpurine qu'on sépare par l'insolubilité relative de cette dernière dans de l'eau au pH 4, et la solubilité du dérivé 6-éthoxy dans l'alcool. La 6-sélényl- purine s'oxyde spontanément à l'état de diséléniure. Ce dernier présente un maximum d'absorption dans l'ultra-violet à 312 mu au pH 1,2 et 340 mu au pH 10,7.
Exemple 12,-
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6-mencaotopurine radioactive
On chauffe dans un tube scellé à 100 C pendant 7 heures 2,5 g de 6-chloropurine et une solution d'hydrosulfure de potassium radioactif (36 cm3 N contenant 30 millicuries de S35 sous la forme d'hydrosulfure).
Le tube est refroidi et ouvert, et son contenu est rendu alcalin en ajoutant 20 cm3 d'hydroxyde de sodium 2 N, filtré et acidifié au pH 4.
La 6-mercaptopurine radioactive (2,3 g) est receuillie sur un filtre, lavée à l'eau; à l'alcool et à l'éther et séchée à l'air. Elle titre 7.000 c/min./microgramme au compteur. Une autre portion de matière radioactive est séparée du filtrat en ajoutant une solution alcaline de 6-mercaptopurine au filtrat et en séparant la matière solide qui se forme par aci- dific ation.
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2 68 x 1 z NH2 SH '--N azote 2 NH2 SH !C-COOH acétylène If C-0H 3 H SH --N azote lu H SH ,N azote 5 H SH )CSX thiocarboxrle 6 NH2 SH dèC-SH thyocarbonyle 7 H SH j -0H carbonyle SH SH C-0H carbonyle 9 H SH C-fH3 éthylidyne 10 Nge2 SH CH méthylidyne 11 H SCH -e CH méthylidyne 12 H SH jCH radioactif
**ATTENTION** fin du champ DESC peut contenir debut de CLMS **.
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The present invention relates to purine compounds and more especially to 6-mercaptopurines having exceptional activity as substances which inhibit microorganisms and neoplasms.
The compounds of the present invention are members of the class represented by the general formula (I)
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where X is selected from the group consisting of hydrogen and amino alkylamino and dialkylamino and lower alkyl groups; Y is chosen from the class formed by the mercapto, alkylmercapto, selenyl and telluryl groups and Z is chosen from the class formed by the carbonyl, acetylene (= CC =), methylidyne (-CH =), ethylidyne (-C =) groups , mercaptomethylidyne and by nitrogen. CH3
It is clear to those skilled in organic chemistry that these compounds can be written in a number of tautomeric forms.
This is how for the same values of Z the right ring can be written:
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Except when they are fixed by formation of functional derivatives which can only be obtained from the same tautomer, the compounds of this series are generally not isolable in the form of individual desmotropes, and for the purposes of the present invention the tautomeric forms are considered to be identical.
According to one of the characteristics of the present invention., In a process for the preparation of compounds of formula (I), an intermediate compound of formula (II) where W is a hydroxy or chloro group is reacted with a thiation agent such as phosphorus pentasulfide or sulfur or a hydrogenated alkali metal selenide or telluride sulfides.
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The invention also includes novel compounds of formula (I).
Many of the mercapto compounds can be easily oxidized to disulfides. The two forms of the compound are often equivalent and can be easily converted to each other.
In some cases isotopic elements can be introduced, and although the products are chemically identical to those obtained with ordinary isotopes, radiotherapeutic benefits can be obtained with radioactive elements.
The examples which follow illustrate the invention without limiting its scope. example 1. -
EMI2.2
2-Amino-6-mercaDto-8-azaDurine
A mixture of 20 g of 8-azaguanine, 100 g of powdered phosphorus pentasulfide and 250 cm3 of anhydrous pyridine is heated at reflux for 2 1/2 hours. The pyridine is removed by vacuum distillation and the residue is boiled with 400 cm3 of water for 10 minutes. The pH is adjusted to 4 with hydrochloric acid and the product is cooled.
The dark brown precipitate is separated by filtration and treated with 150 cm3 of water and 150 cm3 of concentrated ammonium hydroxide. The insoluble residue is separated by filtration and the ammoniacal solution is boiled to drive off excess ammonia, then brought to pH 3 with hydrochloric acid. By cooling, a brown precipitate is obtained (17.9 g) formed from a mixture of 2-amino-6-mercapto-8-azapurine and its oxidation product, bis- (2-amino- disulfide). 8-azapurinyl-6-). These two products can be mutually converted. The 6-mercapto derivative is separated from the mixture by a second extraction with dilute ammonium hydroxide (25 cm3 of concentrated ammonium hydroxide and 500 cm3 of water), filtration and acidification with glacial acetic acid ( 2.5 g).
The disulfide is insoluble in ammonium hydroxide but is purified by dissolving it in 500 cm3 of hot 1N hydrochloric acid and precipitating it with ammonium hydroxide at pH 7 (6.5 g). The 6-mercapto derivative and the bis-6-disulfide both have an ultraviolet absorption maximum of 310-320 mu at pH 11.
Example 2.-
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2-amino-L-mercaDto-7-hyàrozvDteriàîne-6-carboxylique A. 2,, 4-diamino - mercapto] 2Mimidine
A mixture of 10 g of 2,4 diamino-6-chloro-pyrimidine and 200 cm3 of 1N potassium hyarosulfide is heated in a closed container at 150 ° C. for 20 hours. The reaction mixture is acidified with acetic acid and evaporated on a steam bath until a thick magma remains. This magama is cooled, filtered, washed with cold water and dried at 110 ° C. (yield, 8 g). After recrystallization from 50
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hot parts of water 2 4-aiamino-6-mercaptopyrimicin melts at 282 C (bh).
B. 2., α5-triamino-6-mercaptopyrimidine A solution of 9.15 g of 29h.-aiamino-6-mercaptopyrimi- is cooled to 0 ° C.
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dine in 800 cm3 of water and 40 cm3 of 2N sodium hydroxide. To this solution is added a solution of p-chlorobenzene-diazonium chloride (prepared from 8.4 g of p-chloro-aniline, 33 cm3 of concentrated hydrochloric acid (110 cm3 of water and 4.9 g of sodium nitrite) and a solution of 17 g of sodium bicarbonate in 100 cm3 of water. After 24 hours at
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00-100C, the orange precipitate of 2,4-diamino-6-mercapto-5-p-chlorobenzene-azopyrimidine is separated by filtration, washed with water and dried at 100 C (15 g).
This crude azo compound (15 g) is boiled with 800 cm3 of methanol in 50% aqueous solution to which are added 20 g of zinc powder and 28 cm3 of concentrated hydrochloric acid. After boiling for 20 to 30 minutes, the mixture is filtered and the filtrate is cooled (pH approx.
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ron 5). 2, t ,,, 5-triamino-6 mercaptopyrimaine (4 g) precipitates. Its maximum absorption is 310 / qu at pH 1 and 320 min at pH 11.
C. Acid 2-amino- -merca to- -h dro - teri ine- -carbo ue To a solution of 1.5 g of 2,4,5-triamino-6-mercaptopyrimidine in 300 cm3 of water 10 cm3 of oxomalonic ester and the pH is adjusted to 5. The mixture is heated under reflux for 2 hours, then left overnight at room temperature. The brown precipitate formed is collected and purified by dissolving it in an alkali and by precipitating it with acetic acid. The yield of 2-amino-4-mercapto acid.
EMI3.3
7-hydroxy-6-pteridine-carboxylic acid is 0.5 g.
Example 3, - 6-merc apto-8-azapurine
7.5 g of 4-amino-6-chloro-5-nitro-pyrimidine are suspended in 200 cm3 of 1 n potassium hydrosulphide and the steam bath is heated for 2 hours by passing hydrogen sulphide in the mix. The mixture is allowed to cool and acidified with 10 N sulfuric acid. The precipitate is separated by filtration and recrystallized from 300 cm3 of hot water.
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4,5-Aiamim-6-mercaptopyrimidine exhibits absorption maxima in the ultraviolet at 240 and 305 mu at pH 1 and at 240 and 310 mu at pH 11.
To a solution of 2.1 g of 4,5-diamino-6-mercapto-py-rimidine in 30 cm3 of water and 8 cm3 of 2N sodium hydroxide, 1.1 g of sodium nitrite is added, then dropwise 3 cm3 of glacial acetic acid.
The solution is left to stand at room temperature for 1 hour and then at 4 ° C. overnight. The precipitate (1.7 g) is a mixture of mutually convertible 6-mercapto-8-azapurine and bis (8-azapurine-6-) disulfide. These compounds are separated by dilute alkali in which the disulfide is insoluble. Both compounds show absorption maxima at 315-325 mu at pH 11.
To a suspension of 1 g of 6,6-bis (8azapurinyl) disulfide in 100 cm3 of hot isopropanol is added 3 g of sodium in small pieces until all of the initial solid has gone into solution. Shortly after, the sodium salt of 6-mercapto-8-azapurine precipitated out. It is cooled, filtered, dissolved in 100 cm3 of water and the solution is acidified with hydrochloric acid. The 6-
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8-mercapto-zapurine precipitates slowly on standing at 4BC. After filtration, washing and drying in a desiccator under vacuum, the compound (870 mg) exhibits a characteristic absorption spectrum in the ultraviolet:
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at pH 1, max. > = 327-330 jyu, ant pH 11 max. = 322 mu.
Example G .. / - 6-mercaDto-8-azaDurine 5 g of 6-hydroxy-8-azapu- are heated under reflux for 4 hours.
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rine, 15 g of powdered phosphorus pentasulfide and 200 cm3 of pyridine.
The pyridine is removed in the viae and the residue is treated with 150 cc portions of boiling water. The water-soluble part is neutralized to pH 4, and the precipitate formed from a mixture of 6-mercapto-8-azapurine and its sulphide is collected by filtration.
Example 5, -
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6 o8-dimercaptODurine A mixture of 6 8 g of 6-hyuroxy-8-mercaptopurine 8 g of liver ae sulfur (mixed potassium sulphides) 35 g of phosphorus pentasulphide in 200 cm3 ae tetralin is heated to 200 C for 6 5 hours . The mixture is cooled and filtered. The inso-
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Readable with 300 cm3 of water, the mixture is made ammoniacal with ammonium hydroxide and filtered. The filtrate is acidified with acetic acid, cooled and a light yellow precipitate is collected (4.95 g). After recruiting
EMI4.3
tallization of water51 gives 2e35 g of $ 69 pure amercaptopurine.
Example 6- 2-amino-6 $ -âimerca. to urine
Heated to 20C G with stirring penaant 3.5 hours a mixture of 29.5 g of 2-amino-6-hydroxy-8-methylmercaptopurine and 90 g of phosphorus pentasulfide in 250 cm3 of tetralin. The mixture is cooled, filtered and washed with benzene. The insoluble residue is boiled with 800 cm3 of water and filtered while hot. The residue is treated with 250 cm3 of concentrated ammonium hyaroxy and 300 cm3 of water and filtered. The ammoniacal filtrate is brought to pH 6 with concentrated hydrochloric acid.
After cooling, the light yellow precipitate which is collected is collected.
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form. The 2-a.ino-69 $ -aimercaptopurine is purified by dissolving it in 500 cm3 of dilute ammonium hydroxide and precipitating it with hydrochloric acid. The yield is 9 g.
Example 7.-
EMI4.5
6-merc aptp-8-h7droxvDurine A mixture of 4.2 g of 4.95-ciiamino-6-mercaptopyrimaine and 4 g of urea is heated to 170-175 ° C. for 25 minutes. The mixture melts and re-solidifies. After cooling, the reaction mixture is dissolved in 50 cm3 of dilute sodium hydroxide. Filtered and acidified with acetic acid. The light yellow precipitate of 6-mercapto-8-hyàroxypurine hemihydrate (493 g) is collected., Washed with water and dried at 100 C.
Example 8.-
EMI4.6
a6-dimercaPto-8-hYdroxypurine
<Desc / Clms Page number 5>
A solution is heated at 100 C in a bomb for 6 hours
EMI5.1
of 5 g of 268-trichloropurine in 200 cm3 of 1N potassium hydrosulfide. The reaction mixture is acidified with hydrochloric acid and the resulting clear yellow precipitate (4.6 g) is filtered off. 2,6dimercapto-8-hydroxypurine is purified and first by dissolving it in saturated barium hydroxide and reprecipitating it with hydrochloric acid and then dissolving it in dilute sodium hydroxide and precipitating it. with hydrochloric acid.
EMI5.2
Example 9.- 6-mercaoto-8-methYlDurine 6-hydroxy-8-methylpurine is first prepared.
25 g of.-Amino-5-acetamido-6-hydroxypyrimaine was dissolved in 24.9 cc of 2.2 N sodium hydroxide and the solution was subjected to drying under reduced pressure. The residue is heated for 3 hours at 280 C to obtain the closure of the core. After heating, the solid residue is dissolved in 150 cm3 of water, filtered and acidified with acetic acid. The precipitate of 6-hydroxy-8-methylpurine is separated by filtration after 24 hours at 4 ° C. It is washed with water and dried at 120 ° C. Yield: 6.5 g.
The compound exhibits a characteristic absorption spectrum in the ultraviolet: maximum}. = 247 mu at pH 1; maximum À = 257 mu at pH 11.
A mixture of 4 g of 6-hydroxy-8-methylpurine and 20 g of phosphorus pentasulfide in 200 cm3 of tetralin is heated at 200-210 C for 3 hours. After cooling, the solid part is filtered off, washed with benzene and petroleum ether and dried in air. The solid part is boiled with 300 cm3 of water for 15 minutes and filtered while hot. The filtrate is adjusted to pH 5 with ammonium hydroxide and then concentrated to a volume of 100 cm 3 under reduced pressure.
After cooling, the orange precipitate of 6-mercapto-8-methylpurine (2 g) is filtered off, washed with water and dried at 110 C. This compound has a characteristic absorption spectrum in the ultra. -purple: maximum} .. = 327 mu at pH 1; maximum = 312 mu at pH 11. Example 10.-
EMI5.3
2-Dimethylamino-6-mercaptopurine A mixture of 15 g of 2-methylmercapto-6-hydroxypurine and 30 cm3 of dimethylamine in solution in 30% methanol at 140 ° C. is heated for 24 hours in a sealed tube. The mixture is subjected to drying under reduced pressure. The residue is dissolved in 120 cm3 of boiling 1N hydrochloric acid and filtered while hot to separate an insoluble residue. The filtrate is adjusted to pH 6 with ammonium hydroxide.
After cooling, the 2-dimethylamino-6-hydroxypurine (8.5 g) is filtered off, washed with water and dried at 110 ° C.
A mixture of 5 g of 2-dimethyl-amino-6-hydroxypurine, 25 g of phosphorus pentasulfide and 250 cm3 of anhydrous pyridine is heated under reflux for 3 hours. The excess pyridine is removed by distillation under reduced pressure. The residue is boiled with 200 cm3 of water for half an hour .. then cooled. The precipitate of crude 2-dimethylamino-6mercaptopurine is separated by filtration and washed with water. It is purified by dissolving it in 200 cm3 of dilute ammonium hydroxide, filtering and acidifying to pH 5 with hydrochloric acid.
2.5 g of purified product are obtained.
Example 11.-
EMI5.4
6-s elenyipurine
<Desc / Clms Page number 6>
2 g of 6-chloropurine, 8 g of hydrogenated sodium selenide and 40 cm3 of ethanol are heated in a sealed tube at 110 ° C. for 7 hours. The product contains 6-ethoxypurine and 6-selenylpurine which is separated by the relative insolubility of the latter in water at pH 4, and the solubility of the 6-ethoxy derivative in alcohol. 6-Selenyl-purine oxidizes spontaneously to the state of diselenide. The latter exhibits a maximum absorption in the ultraviolet at 312 mu at pH 1.2 and 340 mu at pH 10.7.
Example 12, -
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Radioactive 6-mencaotopurine
2.5 g of 6-chloropurine and a solution of radioactive potassium hydrosulphide (36 cm3 N containing 30 millicuries of S35 in the form of hydrosulphide) are heated in a sealed tube at 100 ° C. for 7 hours.
The tube is cooled and opened, and its contents are made alkaline by adding 20 cm3 of 2 N sodium hydroxide, filtered and acidified to pH 4.
The radioactive 6-mercaptopurine (2.3 g) is collected on a filter, washed with water; in alcohol and ether and air dried. It counts 7000 c / min. / Microgram on the meter. Another portion of radioactive material is separated from the filtrate by adding an alkaline solution of 6-mercaptopurine to the filtrate and separating the solid material which forms on acidification.
EMI6.2
2 68 x 1 z NH2 SH '--N nitrogen 2 NH2 SH! C-COOH acetylene If C-0H 3 H SH --N nitrogen lu H SH, N nitrogen 5 H SH) CSX thiocarboxrle 6 NH2 SH dèC-SH thyocarbonyl 7 H SH j -0H carbonyl SH SH C-0H carbonyl 9 H SH C-fH3 ethylidyne 10 Nge2 SH CH methylidyne 11 H SCH -e CH methylidyne 12 H SH jCH radioactive
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