AT145975B - Verfahren zur Herstellung von nicht agglutinierenden Suspensionen tierischer Gewebezellen. - Google Patents

Description

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  Verfahren zur Herstellung von nicht agglutinierenden Suspensionen tierischer Gewebezellen. 



   Um an lebenden isolierten Gewebezellen die gleichen biologischen Reaktionen und Teste vornehmen zu können wie an totem Zellenmaterial, ist es u. a. von Wichtigkeit, die aus Organen oder Geweben isolierten Zellen bzw. deren Suspensionen in Form von einzelnen Zellen haltbar zu machen, d. h. Agglutinationen zu verhindern oder bereits eingetretene Agglutinationen rückgängig zu machen. 



   Es wurde nun gefunden, dass man nicht agglutinierende Suspensionen von Gewebezellen in sehr vorteilhafter Weise dadurch erhalten kann, dass man frisches Zellenmaterial in Gegenwart solcher die Oberflächenspannung erniedrigender oder die Gerinnung von Blut hemmender Stoffe, die die Zellen nicht oder nicht wesentlich verändern, dispergiert oder bereits vorhandenen Suspensionen tierischer Gewebezelle die genannten Stoffe zusetzt. 



   Geeignete, die   Oberflächenspannung   erniedrigende Stoffe sind beispielsweise höhere Alkohole, wie Oktylalkohol, Benzylalkohol u. dgl. Als Stoffe, welche die Gerinnung von Blut hemmen, kommen z. B. polyanetholsulfonsaure Salze,   m-Aminobenzoyl-m-amino-p-methyl-benzoyl-1-naphthylamin-4,   6,   8-trisulfosäurecarbamid   sowie die unter der Bezeichnung Heparin, Hirudin und Novirudin bekannten Organextrakte in Betracht. 



   Im allgemeinen ist es   zweckmässig,   den Suspensionen auch noch antiseptisch wirkende Mittel zuzusetzen. Als solche sind z. B. kampfersaures Hexamethylentetramin, Hexamethylentetramintriborat, Anhydromethylen-zitronensaures Hexamethylentretramin und ähnliche Stoffe sowie Salicylsäurephenylester, Hexylresorcin, Oxybenzoesäuremethyl-oder-äthylester u. a. m. verwendbar. 



   Die Stoffe können zur Erzielung der erstrebten Wirkung nicht nur den isolierten Zellen zugesetzt werden, sondern die Neigung der Zellen zur Agglutination wird auch dadurch verhindert, dass man die Stoffe dem Versuchstier einige Zeit vor Entnahme des Zellenmaterials injiziert oder per os verabreicht. 



  Die dann dem Tier entnommenen Gewebe zeigen nach der Verarbeitung zu Zellensuspensionen keine Neigung zur Agglutination mehr. Es ist zweckmässig, den Suspensionen dann noch geeignete Antiseptika der vorstehend genannten Art in Konzentrationen zuzusetzen, welche die Zellen noch nicht   schädigen,   aber das Wachstum von Bakterien verhindern. Die oben genannten Stoffe mit antiseptischer Wirkung kommen z. B. in solchen Mengen in Betracht, dass die fertige Suspension von diesen Stoffen   O'l   bis   0'2%   enthält. 



   Auf die stabilisierten Suspensionen dieser Art von z. B. Embryonalzellen, Zellen normaler oder kranker Organe, Krebszellen usw. kann man nun zwecks Prüfung u. dgl. ein geeignetes Serum, andere Zellen, ferner chemische Substanzen, Fermente oder Hormone einwirken lassen. Durch Zählung der Zellenzahl vor und nach dem Versuch, durch Trübungsmessung od. ähnl. Methoden gelingt es, die Zuoder Abnahme von Zellen in diesen Suspensionen, also eine zellzerstörende oder zellvermehrende Wirkung zu messen bzw. durch Bestimmung von in den Suspensionen entstandenen chemischen Stoffen den Zerfall von Zellen oder die Entstehung von Stoffwechselprodukten, die Wirkung von Fermenten usw. festzustellen. 



   Beispiel 1 : Eine agglutinierte Zellsuspension wird mit einem innigen Gemisch von   0'25     cm8   sekundärem Oktylalkohol, 0'75 cm8 absolutem Äthylalkohol und   0'60   cm8 Wasser in einer Menge von 1 Tropfen auf je 1 cm8 der Suspension versetzt. Die Zusammenballungen gehen nach gutem Durchschütteln der Probe auseinander, so dass die einzelnen Zellen wieder frei und homogen verteilt sind und in diesem Zustand bleiben. 

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   l% igen Losung   von Hirudin gegeben und gut   durchgeschüttelt.   Die Zellen bleiben in der Suspension einzeln schweben und homogen verteilt. 



   Beispiel 3 : Zu einer zur Agglutination neigenden Zellsuspension wird pro 1   emS 1   Tropfen einer 
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 Suspension zeigt keine oder nur eine ganz geringe Neigung zur Agglutination. 



   PATENT-ANSPRÜCHE :
1. Verfahren zur Herstellung von nicht agglutinierenden Suspensionen tierischer Gewebezellen, dadurch gekennzeichnet, dass man frisches Zellenmaterial in Gegenwart solcher die Oberflächenspannung erniedrigender oder die Blutgerinnung hemmender Stoffe, die die Zellen nicht wesentlich verändern, zweckmässig zusammen mit antiseptisch wirkenden Mitteln dispergiert oder bereits vorhandenen Suspensionen tierischer Gewebezellen die genannten Stoffe zusetzt.

Claims (1)

1. 2. Verfahren gemäss Anspruch 1, dadurch gekennzeichnet, dass man bereits agglutiniertes Zellenmaterial unter Anwendung der genannten Stoffe in Gegenwart von wässrigen Flüssigkeiten dispergiert.

   3. Verfahren gemäss Anspruch 1, dadurch gekennzeichnet, dass man einem lebenden Tier, dem das zur Herstellung der Suspensionen bestimmte Zellenmaterial entnommen werden soll, einige Zeit vor der Entnahme Stoffe der in Anspruch 1 genannten Art verabreicht.