ES2608978T3

ES2608978T3 - Formas en estado sólido de macrólido

Info

Publication number: ES2608978T3
Application number: ES08786436.9T
Authority: ES
Inventors: Fritz Blatter; Meinrad Brenner; Guixian Hu; Timo Rager; Ralf Warrass
Original assignee: Microbial Chemistry Research Foundation; Intervet International BV
Current assignee: Microbial Chemistry Research Foundation; Intervet International BV
Priority date: 2007-07-26
Filing date: 2008-07-25
Publication date: 2017-04-17
Anticipated expiration: 2028-07-25
Also published as: BRPI0814318B1; RU2476438C2; JP2020172516A; CN103360447B; TW200918547A; CN103360446B; JP2020172517A; WO2009013351A2; CN101778858A; CA2693801C; KR20160003899A; BRPI0814318A2; EP2181117B1; KR102508115B1; ES2805534T3; CN103360446A; WO2009013351A3; CN103360445B; AU2008278969A1; EP3170833A1

Abstract

Una forma cristalina de 20,23-dipiperidinil-5-O-micaminosil-tilonolida que tiene al menos una de las siguientes caracteristicas: un espectro de TF-Raman como se muestra en la Figura 2; un espectro de difraccion de rayos X en polvo que comprende un pico a 5,0 (± 0,2) grados 20; un espectro de infrarrojos de reflexion total atenuada como se muestra en la Figura 6; o un punto de fusion de aproximadamente 192 a aproximadamente 195 oC.

Description

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comprende una banda de absorción en una o más frecuencias seleccionadas entre el grupo que consiste en aproximadamente 1711 y aproximadamente 1682 cm1. En otras de tales realizaciones, el Polimorfo de Forma I se define como que tiene un espectro de infrarrojos de reflexión total atenuada que comprende una banda de absorción en una o más frecuencias seleccionadas entre el grupo que consiste en aproximadamente 1635, aproximadamente

5 1404 y aproximadamente 1182 cm1 .

En algunas realizaciones, el Polimorfo de Forma I se define como que tiene una (y normalmente dos o las tres) de las siguientes características:

10 a. un espectro de difracción de rayos X en polvo sustancialmente como se muestra en la Figura 1,

b.: un espectro de TF-Raman atenuado sustancialmente como se muestra en la Figura 2,o

c.: un espectro de infrarrojos de reflexión total atenuada sustancialmente como se muestra en la Figura 6.

Algunas realizaciones de esta invención están dirigidas a composiciones que comprenden

15 20,23-dipiperidinil-5-O-micaminosil-tilonolida, en las que al menos una cantidad detectable de la 20,23-dipiperidinil-5-O-micaminosil-tilonolida en la composición es el Polimorfo de Forma I. En algunas de tales realizaciones, por ejemplo, al menos aproximadamente un 50 % (o al menos aproximadamente un 75 %, al menos aproximadamente un 85 %, al menos aproximadamente un 90 %, al menos aproximadamente un 95 %, al menos aproximadamente un 99 %, o al menos aproximadamente un 99,9 %) de la

20 20,23-dipiperidinil-5-O-micaminosil-tilonolida en la composición es el Polimorfo de Forma I. En otras de tales realizaciones, una cantidad terapéuticamente eficaz de la 20,23-dipiperidinil-5-O-micaminosil-tilonolida en la composición es el Polimorfo de Forma I. En otras más de tales realizaciones, la 20,23-dipiperidinil-5-O-micaminosil-tilonolida en la composición es la Forma I cristalina sustancialmente en fase pura de 20,23-dipiperidinil-5-O-micaminosil-tilonolida.

25 En otras realizaciones, la invención se refiere al polimorfo de Forma II de 20,23-dipiperidinil-5-O-micaminosil-tilonolida. Los métodos para fabricar el polimorfo de Forma II incluyen, por ejemplo, el método mostrado en el Ejemplo 4. Como con el Polimorfo de Forma I, el polimorfo de Forma II tiende a mostrar menos captación de agua que otras formas de estado sólido de 20,23-dipiperidinil-5-O-micaminosil-tilonolida, por ejemplo, en condiciones ambientales. Se plantea la

30 hipótesis de que el polimorfo de Forma II muestra estabilidad física, estabilidad química, propiedades de empaquetamiento, propiedades termodinámicas, propiedades cinéticas, propiedades superficiales, propiedades mecánicas, propiedades de filtración o pureza química ventajosas con respecto a otras formas de estado sólido de 20,23-dipiperidinil-5-O-micaminosil-tilonolida. El polimorfo de Forma II también es útil como un intermedio para la preparación de diversas otras formas de estado sólido. La Tabla 1 resume ejemplos de tales métodos.

35

Tabla 1

Uso del Polimorfo de Forma II para Preparar Otras Formas cristalinas de 20,23Dipiperidinil5OMicamosilTilonolida

Forma cristalina preparada a partir del polimorfo de Forma II: Ejemplo del método que puede usarse Ilustraciones del método de Ejemplo

Polimorfo de Forma I: Disolver el polimorfo de Forma II en un disolvente de tBME/heptano y retirar el disolvente Ejemplos 12, 13 y 16

Polimorfo de Forma III: Disolver el polimorfo de Forma II en disolvente de acetonitrilo, someter la mezcla resultante a repetidos ciclos de calentamiento y refrigeración retirar el disolvente Ejemplo 11

Solvato cristalino S1 de acetato de etilo: Disolver el polimorfo de Forma II en disolvente de acetato de etilo y retirar el disolvente Ejemplos 6, 8 y 9

Solvato cristalino S1 de etanol: Disolver el polimorfo de Forma II en disolvente de etanol y retirar el disolvente Ejemplo 17

Solvato cristalino S1 de dietil cetona: Disolver el polimorfo de Forma II en disolvente de dietil cetona y retirar el disolvente Ejemplo 18

Solvato cristalino S2 de tBME: Disolver el polimorfo de Forma II en disolvente de tBME y retirar el disolvente Ejemplo 19

Solvato cristalino S3 de THF: Disolver el polimorfo de Forma II en disolvente de THF y retirar el disolvente Ejemplo 20

Solvato cristalino S4 de acetato de metilo: Disolver el polimorfo de Forma II en disolvente de acetato de metilo y retirar el disolvente Ejemplo 21

Solvato cristalino S4 de formiato de etilo: Disolver el polimorfo de Forma II en disolvente de formiato de etilo y retirar el disolvente Ejemplo 22

El polimorfo de Forma II puede identificarse usando diversas técnicas analíticas. En algunas realizaciones, el polimorfo de Forma II se define como que tiene una (y normalmente dos, tres, cuatro o todas las cinco) de las siguientes 40 características:

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20,23-dipiperidinil-5-O-micaminosil-tilonolida en las que al menos una cantidad detectable de la 20,23-dipiperidinil-5-O-micaminosil-tilonolida en la composición es el polimorfo de Forma IV. En algunas de tales realizaciones, por ejemplo, al menos aproximadamente un 50 % (o al menos aproximadamente un 75 %, al menos aproximadamente un 85 %, al menos aproximadamente un 90 %, al menos aproximadamente un 95 %, al menos 5 aproximadamente un 99 % o al menos aproximadamente un 99,9 %) de la 20,23-dipiperidinil-5-O-micaminosil-tilonolida en la composición es el polimorfo de Forma IV. En otras de tales realizaciones, una cantidad terapéuticamente eficaz de la 20,23-dipiperidinil-5-O-micaminosil-tilonolida en la composición es el polimorfo de Forma IV. En otras más de tales realizaciones, la 20,23-dipiperidinil-5-O-micaminosil-tilonolida en la composición es la Forma IV cristalina sustancialmente en fase pura

10 de 20,23-dipiperidinil-5-O-micaminosil-tilonolida.

En otras realizaciones, la forma cristalina de 20,23-dipiperidinil-5-O-micaminosil-tilonolida comprende una forma cristalina solvatada. En algunas realizaciones, las formas cristalinas solvatadas de particular interés son aquellas que pueden convertirse en una forma de estado sólido más deseable. En otras realizaciones, formas cristalinas solvatadas 15 farmacéuticamente aceptables de 20,23-dipiperidinil-5-O-micaminosil-tilonolida se usan directamente en composiciones farmacéuticas. Se plantea la hipótesis, por ejemplo, de que algunos solvatos cristalinos tienden a mostrar estabilidad física, estabilidad química, propiedades de empaquetamiento, propiedades termodinámicas, propiedades cinéticas, propiedades superficiales, propiedades mecánicas, propiedades de filtración o pureza química ventajosas con respecto a otras formas de estado sólido de 20,23-diperidinil-5-O-micaminosil-tilonolida. También se

20 cree que las formas cristalinas solvatadas colectivamente pueden ofrecer diversas tasas de disolución diferentes en, por ejemplo, formas de dosificación sólidas. Cuando se usan directamente en composiciones farmacéuticas, las formas cristalinas solvatadas preferiblemente son sustancialmente exclusivas de disolventes que no son farmacéuticamente aceptables.

25 En algunas realizaciones, la forma cristalina de 20,23-dipiperidinil-5-O-micaminosil-tilonolida comprende el solvato cristalino S1 de 20,23-dipiperidinil-5-O-micaminosil-tilonolida. Los métodos ilustrativos para preparar el solvato cristalino S1 de acetato de etilo incluyen, por ejemplo, los mostrados en los Ejemplos 3 (Parte E), 6, 8 y 9. Los métodos para preparar el solvato cristalino S1 de etanol incluyen, por ejemplo, el método mostrado en el Ejemplo 17. y los métodos para preparar el solvato cristalino S1 de dietil cetona incluyen, por ejemplo, el método mostrado en el

30 Ejemplo 18. El solvato cristalino S1 de acetato de etilo, por ejemplo, es útil como un intermedio para preparar otras formas de estado sólido. La Tabla 2 resume los ejemplos de tales métodos.

Tabla 2

Uso de Solvato Cristalino de Acetato de Etilo para Preparar Otras Formas cristalinas de 20,23Dipiperidinil5OMicaminosilTilonolida

Forma cristalina preparada a partir de solvato S1: Ejemplo del método que puede usarse Ilustraciones del método de Ejemplo

Polimorfo de Forma I: Combinar cristales de solvato S1 de acetato de etilo con heptano, calentar la mezcla resultante y retirar el heptano Ejemplo 3, Parte F

Polimorfo de Forma III: Secar cristales de solvato S1 de acetato de etilo al vacío Ejemplos 7 y 10

Polimorfo de Forma IV: Combinar cristales de S1 acetato de etilo con heptano; calentar la mezcla resultante a al menos, por ejemplo, aproximadamente 80 ºC durante un periodo de tiempo prolongado con agitación; y retirar el heptano Ejemplo 23

35 En algunas realizaciones, la forma cristalina de 20,23-dipiperidinil-5-O-micaminosil-tilonolida el solvato cristalino S2 de 20,23-dipiperidinil-5-O-micaminosil-tilonolida. Los métodos para preparar el solvato cristalino S2 incluyen, por ejemplo, el método mostrado en el Ejemplo 19. Se contempla que el solvato cristalino S2 (es decir, la forma cristalina solvatada de tBME) puede ser particularmente adecuada para su uso directamente en composiciones farmacéuticas. Este solvato cristalino muestra estabilidad a, por ejemplo, 60 ºC a 1 mbar (absoluto) durante 1 día.

40 En algunas realizaciones, la forma cristalina de 20,23-dipiperidinil-5-O-micaminosil-tilonolida el solvato cristalino S3 de 20,23-dipiperidinil-5-O-micaminosil-tilonolida. Los métodos para preparar el solvato cristalino S3 incluyen, por ejemplo, el método mostrado en el Ejemplo 20.

45 En algunas realizaciones, la forma cristalina de 20,23-dipiperidinil-5-O-micaminosil-tilonolida comprende el solvato cristalino S4 de 20,23-dipiperidinil-5-O-micaminosil-tilonolida. Los métodos para preparar el solvato cristalino S4 de acetato de metilo incluyen, por ejemplo, el método mostrado en el Ejemplo 21. y los métodos para preparar el solvato cristalino S4 de formiato de etilo incluyen, por ejemplo, el método mostrado en el Ejemplo 22.

50 Algunas realizaciones de esta invención están dirigidas a composiciones que comprenden 20,23-dipiperidinil-5-O-micaminosil-tilonolida en las que al menos una cantidad detectable de la 20,23-dipiperidinil-5-O-micaminosil-tilonolida en la composición es una de las formas cristalinas de solvato referenciadas anteriormente. En algunas realizaciones, por ejemplo, al menos aproximadamente un 50 % (o al menos aproximadamente un 75 %, al menos aproximadamente un 85 %, al menos aproximadamente un 90 %, al menos

aproximadamente un 95 %, al menos aproximadamente un 99 % o al menos aproximadamente un 99,9 %) de la 20,23-dipiperidinil-5-O-micaminosil-tilonolida en la composición es la forma de solvato cristalino. En algunas de tales realizaciones, al menos aproximadamente un 50 % (o al menos aproximadamente un 75 %, al menos aproximadamente un 85 %, al menos aproximadamente un 90 %, al menos aproximadamente un 95 %, al menos

5 aproximadamente un 99 % o al menos aproximadamente un 99,9 %) de la 20,23-dipiperidinil-5-O-micaminosil-tilonolida en la composición es el solvato cristalino S1 de acetato de etilo. En otras realizaciones, una cantidad terapéuticamente eficaz de la 20,23-dipiperidinil-5-O-micaminosil-tilonolida en la composición está en una de las formas de solvato cristalino enumeradas anteriormente. En otras realizaciones más, la 20,23-dipiperidinil-5-O-micaminosil-tilonolida en la composición está sustancialmente en fase pura como para una de las formas de solvato cristalino descritas anteriormente. En algunas de tales realizaciones, por ejemplo, la 20,23-dipiperidinil-5-O-micaminosil-tilonolida en la composición es solvato cristalino S1 de acetato de etilo en fase sustancialmente pura.

En otras realizaciones, la invención se refiere a una combinación de dos o más formas de estado sólido seleccionadas

15 entre el grupo que consiste en el polimorfo de Forma I, el polimorfo de Forma II, el polimorfo de Forma III, el polimorfo de Forma IV y las formas cristalinas solvatadas de 20,23-dipiperidinil-5-O-micaminosil-tilonolida. Tales combinaciones pueden ser útiles, por ejemplo, en la preparación de composiciones farmacéuticas sólidas que tengan diversos perfiles de disolución, incluyendo composiciones de liberación controlada. En una realización, una combinación comprende el Polimorfo de Forma I en al menos una cantidad detectable, siendo el resto de 20,23-dipiperidinil-5-O-micaminosil-tilonolida una o más formas de estado sólido seleccionadas entre el grupo que consiste en el polimorfo de Forma II, polimorfo de Forma III, polimorfo de Forma IV y formas cristalinas solvatadas. En otra realización, la combinación comprende el polimorfo de Forma II en al menos una cantidad detectable, siendo el resto de 20,23-dipiperidinil-5-O-micaminosil-tilonolida una o más formas de estado sólido seleccionadas entre el grupo que consiste en el Polimorfo de Forma I, polimorfo de Forma III, polimorfo de Forma IV y formas cristalinas solvatadas.

25 En otra realización, la combinación comprende el polimorfo de Forma III en al menos una cantidad detectable, siendo el resto de 20,23-dipiperidinil-5-O-micaminosil-tilonolida una o más formas de estado sólido seleccionadas entre el grupo que consiste en el Polimorfo de Forma I, polimorfo de Forma II, polimorfo de Forma IV y formas cristalinas solvatadas. En otra realización más, la combinación comprende el polimorfo de Forma IV en al menos una cantidad detectable, siendo el resto de 20,23-dipiperidinil-5-O-micaminosil-tilonolida una o más formas de estado sólido seleccionadas entre el grupo que consiste en el Polimorfo de Forma I, polimorfo de Forma II, polimorfo de Forma III y formas cristalinas solvatadas.

Dependiendo del uso pretendido de la forma de estado sólido de 20,23-dipiperidinil-5-O-micaminosil-tilonolida, las consideraciones de procesado pueden favorecer la selección de una forma de estado sólido específica o una

35 combinación específica de tales formas de estado sólido. La facilidad de preparación de formas de estado sólido de 20,23-dipiperidinil-5-O-micaminosil-tilonolida (o formas de estado sólido de 20,23-dipiperidinil-5-O-micaminosil-tilonolida que tienen una pureza de fase mínima) se diferencian generalmente de una forma de estado sólido a otra.

Caracterización de Formas de Estado Sólido

Técnica

Las muestras de las formas de estado sólido de 20,23-dipiperidinil-5-O-micaminosil-tilonolida preparadas de acuerdo 45 con esta invención se caracterizaron usando varias técnicas diferentes. Estas técnicas incluyen las siguientes.

Se obtuvieron espectros de difracción de rayos X en polvo ("PXRD") para todas las muestras salvo el polimorfo de Forma IV con un difractómetro de rayos X Bruker D8 Advance usando radiación de CuKα (longitudes de onda para el cálculo de valores d: λ = 1,5418 Å); polvo del tubo 35 kV/45 mA; un detector VANTEC1; y a un tamaño de etapa de 0,017º 2θ, 105±5 segundos por etapa y un intervalo de exploración de 2º-50º 2θ. Se usaron portamuestras de un solo cristal de silicio que tenían un diámetro interno de 12 mm y una profundidad de 0,1 mm. El espectro de PXRD para el polimorfo de Forma IV se obtuvo con un difractómetro de rayos X Siemens D5000 usando software Diffract Plus, un tamaño de etapa de 0,04º 2θ, un tiempo de 2 segundos por etapa, un intervalo de exploración de 5,0º-80,0º 2θ, la rendija de divergencia se ajustó a V20, la rendija anti dispersión se ajustó a V20, la rotación de detector de ranura de

55 salida, tensión de generador 40 kV, corriente del generador 30 mA, un contador de centelleo de alta sensibilidad y un tubo de rayos X de Cu.

Se obtuvieron espectros de Raman por transformada de Fourier ("TF-Raman") con un espectrómetro Bruker RFS100 FT-Raman con un láser Nd:YAG usando longitud de onda de excitación de 1064 nm, una energía de láser de 100 mW, un detector de Ge, 64 exploraciones, un intervalo de 50-3500 cm1, una resolución de 2 cm1 y un portamuestras de aluminio.

Se obtuvieron mediciones de termogravimetría acoplada a espectroscopía de infrarrojos por transformada de Fourier("TG-FTIR") usando un Netzsch Thermo-Microbalance TG 209 con un espectrómetro Bruker Vector 22 FT-IR

65 usando un crisol de aluminio (con micro-hueco o abertura), una atmósfera de N2, una velocidad de calentamiento de 10 ºC/min y un intervalo de temperaturas de 25-250 ºC.

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imagen11

410: 0,022

86: 0,080

Las propiedades características del espectro incluyen picos intensos a 2935 cm1, 1633 cm1 y 1596 cm1; y picos más pequeñas a 1712 cm1, 1683 cm1 y 781 cm1 .

5 iv. Termogravimetría para el Polimorfo de Forma I

La Figura 3 muestra los resultados de un análisis de TG-FTIR del Polimorfo de Forma I. Una pérdida de peso del 0,6 % se observó en el intervalo de temperaturas desde 60 a 180 ºC. Los solicitantes creen que esto es atribuible a pérdida de agua. Debido a la pequeña cantidad, los solicitantes creen además que esta pérdida de agua fue resultado

10 del agua absorbida en la superficie en lugar de ser atribuible a un hidrato.

v. Calorimetría de exploración diferencial para el Polimorfo de Forma I

La Figura 4 muestra los resultados de un análisis de DSC para el Polimorfo de Forma I. Existe un pico de fusión agudo

15 a 195 ºC con una entalpía de fusión de ∆Hfus de 57 J/g. Como se mostrará más adelante, estas son ambas mayores que los puntos de fusión y entalpías de fusión para el polimorfo de Forma II y el polimorfo de Forma III. En la Figura 4, la etapa Tg es apenas distinguible. Se cree que esto confirma que la muestra es más del 90 % cristalina.

Las muestras del Polimorfo de Forma I se analizaron independientemente para determinar el un punto de fusión. Las 20 muestras que tenían una pureza de aproximadamente 98 % (p/p) mostraron un punto de fusión de 192 a 195 ºC.

vi. Sorción de Vapor Dinámica para el Polimorfo de Forma I

La Figura 5 muestra los resultados para un análisis DVS del Polimorfo de Forma I. Este análisis se realizó a 25 ºC. Se 25 observó una captación de agua máxima de menos del 1 % (en peso) a humedad relativa del 95 %.

vii. Espectro IR para el Polimorfo de Forma I

La Figura 6 muestra un espectro de ATR-IR para el Polimorfo de Forma I y la Figura 7 proporciona el espectro IR para 30 el Polimorfo de Forma I en una suspensión de nujol. Los datos correspondientes se muestran en la siguiente Tabla 5:

Tabla 5

Datos de IR para el Polimorfo de Forma I

Frecuencias de bandas de absorción de IR intensas observadas con técnica ATR (cm1): Frecuencias de bandas de absorción de IR intensas observadas con técnica de Nujol (cm1)

3544

2932: se solapa con banda de vibración de nujol

1711: 1712

1682: 1683

1635
1635

1599
1599

1442: se solapa con banda de vibración de nujol

1404: 1406

1373: se solapa con banda de vibración de nujol

1350: 1351

1307: 1309

1262: 1263

1182: 1187

1123

1107: 1108

1079: 1082

1053: 1054

1008: 1009

985: 986

958: 960

928

909: 900

877

861

842: 843

818: 816

783: 782

imagen12

Las propiedades características de los espectros, particularmente del espectro de ATR, incluyen bandas de absorción intensa a 2932 cm1 , 1711 cm1 , 1682 cm1 , 1599 cm1 , 1442 cm1 , 1182 cm1 , 1079 cm1 , 1053 cm1 , 1008 cm1 , 985 cm1, 842 cm1 y 783 cm1, las bandas de absorción a 1711 cm1 y 1682 cm1 parecen ser particularmente únicas para este polimorfo. Las bandas de absorción a 1635 cm1 , 1404 cm1 y 1182 cm1 también parecen ser

5 particularmente únicas para este polimorfo.

Polimorfo de Forma II

La siguiente discusión proporciona diversas características observadas del polimorfo de Forma II. 10

i. Apariencia del Polimorfo de Forma II

El polimorfo de Forma II estaba generalmente en forma de cristales prismáticos con un tamaño de hasta varios cientos de micrómetros.

15

ii. Espectro de difracción de rayos X en polvo para el Polimorfo de Forma II

El espectro de PXRD observado para el polimorfo de Forma II se muestra en la Figura 8 y los datos correspondientes se muestran en la siguiente Tabla 6:

20 Tabla 6

Datos de Difracción de rayos X para el Polimorfo de Forma II

Ángulo (grados 2θ): Valor d (Å) Intensidad (cps) Intensidad Rel. (%)

6,5: 13,598 250,71 100,0

8,7: 10,164 86,09 34,3

9,7: 9,118 29,90 11,9

9,9: 8,934 35,38 14,1

12,4: 7,138 34,12 13,6

13,0: 6,810 43,56 17,4

15,0: 5,906 55,07 22,0

15,8: 5,609 44,94 17,9

16,1: 5,505 19,86 7,9

16,3: 5,438 22,40 8,9

17,0: 5,216 85,44 34,1

17,9: 4,955 30,02 12,0

18,1: 4,901 56,47 22,5

19,7: 4,506 50,08 20,0

20,0: 4,439 125,24 50,0

21,3: 4,171 43,10 17,2

24,9: 3,576 14,93 6,0

26,3: 3,389 12,77 5,1

27,4: 3,255 15,40 6,1

Las propiedades características del espectro incluyen que el pico inicial y más intenso esté a 2θ = 6,5º.

25: iii. Espectro de TFRaman para el Polimorfo de Forma II

El Espectro de TF-Raman observado para el polimorfo de Forma II correspondientes se muestran en la siguiente Tabla 7:: se muestra en la Figura 9, y los datos

30: Tabla 7

Datos de TFRaman para el Polimorfo de Forma II

Posición (cm1): Intensidad

2929: 0,435

1685: 0,044

1625: 0,550

1595: 1,118

1451: 0,114

1361: 0,062

1311: 0,100

1270: 0,085

1248: 0,100

1195: 0,074

1117: 0,060

1095: 0,075

1023: 0,073

984: 0,047

925: 0,051

873: 0,058

783: 0,084

513: 0,063

379: 0,066

87: 0,198

Propiedades características del espectro incluyen picos intensos a 2929 cm1, 1625 cm1 y 1595 cm1, y picos más pequeños, pero agudos, a 1685 cm1 y 783 cm1 .

5 iv. Termogravimetría para el Polimorfo de Forma II

La Figura 10 muestra los resultados de un análisis de TG-FTIR del polimorfo de Forma II. Se observó una pérdida de peso del 0,7 %, principalmente en el intervalo de temperaturas de 50 a 100 ºC. Los solicitantes creen que esto es atribuible a pérdida de agua. La descomposición comenzó a una temperatura de más de 220 ºC.

10

v. Calorimetría de exploración diferencial para el Polimorfo de Forma II

La Figura 11 muestra los resultados de un análisis de DSC del polimorfo de Forma II. La primera exploración (la línea continua) muestra un pico de fusión a 113 ºC con una entalpía de fusión de ∆Hfus = 15 J/g. La segunda exploración (la

15 línea discontinua) muestra una temperatura de transición vítrea ("Tg") de 96,1 ºC. No se observó recristalización.

Las muestras del polimorfo de Forma II se analizaron independientemente para determinar el punto de fusión. Las muestras que tenían una pureza de aproximadamente 96 % (p/p) mostraron un punto de fusión de 113 a 119 ºC.

20 vi. Sorción de Vapor Dinámica para el Polimorfo de Forma II

La Figura 12 muestra los resultados de un análisis DVS del polimorfo de Forma II. Este análisis se realizó a 25 ºC. Se observó una captación máxima de agua de aproximadamente 2 % (en peso) a una humedad relativa del 95 %.

25 vii. Espectro IR para el Polimorfo de Forma II

La Figura 13 muestra Espectro de ATR-IR para el polimorfo de Forma II, y la Figura 14 proporciona el espectro IR para el polimorfo de Forma II en una suspensión de nujol. Los datos correspondientes se muestran en la siguiente

Tabla 8:

30

Tabla 8

Datos de IR para el Polimorfo de Forma II

3540

2935: se solapa con banda de vibración de nujol

1736: 1741

1668: 1669

1626

1587: 1591

1451: se solapa con banda de vibración de nujol

1372: se solapa con banda de vibración de nujol

1352: 1349

1310: 1313

1302

1277
1277

1242: 1245

1217

1187

1165: 1166

1116

1080: 1087

1057: 1058

1042: 1044

1005
1005

981: 980

966
966

934: 933

910: 908

882

859: 858

838: 837

811

781: 780

755
755

722

Las propiedades características de los espectros, particularmente del espectro de ATR, incluyen bandas de absorción intensa a 2935 cm1 , 1736 cm1 , 1668 cm1 , 1587 cm1 , 1451 cm1 , 1165 cm1 , 1080 cm1 , 1057 cm1 , 1042 cm1 , 1005 cm1, 981 cm1, 838 cm1 y 755 cm1 ,

5

Polimorfo de Forma III

La siguiente discusión proporciona diversas características observadas del polimorfo de Forma III. 10 i. Apariencia del Polimorfo de Forma III El polimorfo de Forma III estaba generalmente en forma de agujas finas.

ii. Espectro de difracción de rayos X en polvo para el Polimorfo de Forma III

15 El espectro de PXRD observado para el polimorfo de Forma III se muestra en la Figura 15, y los datos correspondientes se muestran en la siguiente Tabla 9:

Tabla 9

Datos de Difracción de rayos X para el Polimorfo de Forma III

Ángulo (grados 2θ): Valor d (Å) Intensidad (cps) Intensidad Rel. (%)

5,6: 15,781 36 17,3

6,1: 14,489 209 100,0

8,3: 10,653 54 25,8

11,0: 8,043 44 21,2

12,2: 7,255 40 19,2

13,2: 6,707 45 21,4

13,7: 6,463 21 9,8

14,2: 6,237 26 12,4

15,2: 5,829 16 7,9

15,7: 5,644 53 25,2

16,1: 5,505 19 9,2

16,8: 5,277 105 50,1

17,9: 4,955 28 13,3

18,2: 4,874 22 10,6

18,9: 4,695 37 17,8

19,6: 4,529 17 8,1

20,5: 4,332 86 41,1

21,6: 4,114 44 21,2

22,5: 3,952 20 9,4

24,3: 3,663 14 6,6

26,0: 3,427 15 7,1

20 Las propiedades características del espectro incluyen el pico más intenso estando a 2θ = 6,1º, que está acompañado de un pico más pequeño a 2θ = 5,6º. Se ha observado que la intensidad relativa de estos dos picos varía de lote en lote, como lo hacen las intensidades relativas de otros picos en el espectro. Tales variaciones no son poco comunes para PXRD. Con frecuencia, estas se originan desde efectos de orientación, particularmente en el contexto de cristales

25 anisotrópicos (es decir, tipo aguja y placa). Estas variaciones, sin embargo, generalmente no incluyen la identificación de la forma polimórfica debido a que esta depende normalmente de las posiciones de pico en lugar de las intensidades.

imagen13

observó una captación de agua de aproximadamente 6 % a humedad relativa entre el 70 y el 85 %.

vii. Espectro IR para el Polimorfo de Forma III

La Figura 20 muestra Espectro de ATR-IR para el polimorfo de Forma III y la Figura 21 proporciona el espectro IR para el polimorfo de Forma III en una suspensión de nujol. Los datos correspondientes se muestran en la siguiente Tabla 11:

Tabla 11

Datos de IR para el Polimorfo de Forma III

3541

2931: se solapa con banda de vibración de nujol

1732: 1734

1667: 1669

1626

1590: 1591

1453: se solapa con banda de vibración de nujol

1376: se solapa con banda de vibración de nujol

1350
1350

1304: 1312

1277
1277

1256
1256

1217
1217

1189

1165
1165

1081: 1087

1057: 1060

1046

1005: 1004

981: 980

965: 966

934: 935

908
908

881

859

834: 836

812: 811

780

756: 757

722

10 Las propiedades características de los espectros, particularmente del espectro de ATR, incluyen bandas de absorción intensa a 2931 cm1 , 1732 cm1 , 1667 cm1 , 1590 cm1 , 1453 cm1 , 1165 cm1 , 1081 cm1 , 1057 cm1 , 1046 cm1 , 1005 cm1, 981 cm1, 834 cm1 y 756 cm1 .

Polimorfo de Forma IV

15 La siguiente discusión proporciona diversas características observadas del polimorfo de Forma IV.

i. Espectro de difracción de rayos X en polvo para el Polimorfo de Forma IV

20 El espectro de PXRD observado para el polimorfo de Forma IV se muestra en la Figura 22 y los datos correspondientes se muestran en la siguiente Tabla 12:

Tabla 12

Datos de Difracción de rayos X para el Polimorfo de Forma IV

Ángulo (grados 2θ): Valor d (Å) Intensidad (cps) Intensidad Rel. (%)

6,232: 14,171 135 6,4

6,848: 12,898 367 17,5

8,653: 10,211 709 33,8

10,16: 8,7007 1650 78,7

10,64: 8,3119 887 42,3

11,18: 7,9106 706 33,7

imagen14

1314

1307

1272: 1271

1259
1259

1215

1195
1195

1165: 1166

1140

1118: 1116

1075
1075

1060

1045: 1046

1010
1010

985: 992

954: 953

936

910

872

860

839
839

810

785: 784

757: 756

722

Las propiedades características de los espectros, particularmente del espectro de ATR, incluyen bandas de absorción intensa a 2933 cm1 , 1743 cm1 , 1668 cm1 , 1584 cm1 , 1448 cm1 , 1165 cm1 , 1075 cm1 , 1060 cm1 , 1045 cm1 , 1010 cm1, 985 cm1, 839 cm1 y 757 cm1. La banda de absorción a 3559 cm1 parece ser particularmente única para

5 este polimorfo.

Solvato Cristalino S1

La siguiente discusión proporciona diversas características observadas del solvato cristalino S1. Aunque los datos de

10 PXRD y TF-Raman posteriores se corresponden con el solvato cristalino S1 de acetato de etilo, estos datos son generalmente aplicables a la caracterización de los solvatos cristalinos de dietil cetona y etanol, también porque son isomórficos con el solvato cristalino de acetato de etilo.

i. Apariencia del S1 Solvato Cristalino de Acetato de Etilo

15 El acetato de etilo solvato cristalino S1 estaba generalmente en forma de agujas finas, o cristales más grandes con una tendencia a rotura en fibras.

ii. Espectro de difracción de rayos X en polvo para el Solvato Cristalino S1 de Acetato de Etilo

20 El espectro de PXRD observado para el solvato cristalino S1 de acetato de etilo se muestra en la Figura 26 y los datos correspondientes se muestran en la siguiente Tabla 14:

Tabla 14

Datos de Difracción de rayos X para Solvato Cristalino S1 de Acetato de Etilo

Ángulo (grados 2θ): Valor d (Å) Intensidad (cps) Intensidad Rel. (%)

5,6: 15,781 199 100,0

6,1: 14,489 62 31,3

7,1: 12,450 32 15,9

8,3: 10,653 30 15,2

11,0: 8,043 32 15,9

11,2: 7,900 62 31,3

11,5: 7,695 37 18,7

12,0: 7,375 22 10,9

12,2: 7,255 17 8,5

12,8: 6,916 17 8,5

13,3: 6,657 24 12,2

13,5: 6,559 47 23,6

13,8: 6,417 31 15,6

14,4: 6,151 26 13,3

14,9: 5,946 68 34,3

15,7: 5,644 18 8,9

16,8: 5,277 71 36,0

17,2: 5,155 27 13,6

17,8: 4,983 89 44,8

19,0: 4,671 41 20,8

19,4: 4,575 23 11,5

20,3: 4,375 29 14,8

20,5: 4,332 29 14,7

21,6: 4,114 22 11,0

22,1: 4,022 19 9,7

22,6: 3,934 21 10,7

23,9: 3,723 17 8,6

25,2: 3,534 13 6,5

Las propiedades características del espectro incluyen picos iniciales a 2θ = 5,6º y 6,1º.

iii. Espectro de TFRaman para el Solvato Cristalino S1 de Acetato de Etilo

El espectro observado de TF-Raman para el solvato cristalino S1 de acetato de etilo se muestra en la Figura 27 y los datos correspondientes se muestran en la siguiente Tabla 15:

Tabla 15

Datos de TFRaman para el Solvato Cristalino S1 de Acetato de Etilo

Posición (cm1): Intensidad

2936: 0,212

2877: 0,098

2857: 0,078

2775: 0,040

1745: 0,012

1669: 0,029

1625: 0,198

1586: 0,363

1451: 0,058

1392: 0,022

1300: 0,033

1271: 0,039

1244: 0,030

1215: 0,021

1193: 0,029

1118: 0,028

1097: 0,037

1040: 0,034

1008: 0,024

978: 0,038

911: 0,018

882: 0,024

833: 0,018

812: 0,017

781: 0,023

554: 0,012

504: 0,029

445: 0,019

398: 0,021

84: 0,076

10: Las propiedades características del espectro incluyen picos intensos a 2936 cm1, 1625-1627 cm1 y 1586 cm1 y picos más pequeños, pero agudos, a 1745 cm1, 1669 cm1 y 978 cm1 ,

15: iv. Termogravimetría para Solvato Cristalinos S1

24

imagen15

imagen16

imagen17

2883: 0,192

1673: 0,051

1622: 0,405

1586: 0,828

1451: 0,111

1394: 0,039

1318: 0,074

1296: 0,066

1269: 0,073

1244: 0,092

1191: 0,080

1127: 0,057

1067: 0,052

1040: 0,066

980: 0,051

910: 0,052

890: 0,045

839: 0,036

782: 0,057

503: 0,041

438: 0,037

419: 0,036

100: 0,138

Las propiedades características del espectro incluyen picos intensos a 2928 cm1, 1622 cm1 y 1586 cm1 y picos más pequeños, pero agudos, a 1673 cm1, 1244 cm1, 1191 cm1 y 782 cm1

5 iv. Termogravimetría para el Solvato Cristalino S3 de THF

La Figura 36 muestra los resultados de TG-FTIR para el solvato cristalino S3 de THF. La mayoría de la pérdida de peso sucedió a temperaturas que eran mayores que el punto de ebullición de THF. Específicamente, menos del 10 % de la pérdida de peso sucedió desde 60 a 100 ºC, mientras que aproximadamente el 80 % de la pérdida sucedió desde

10 110 a 180 ºC. Los resultados muestran una pérdida de peso de aproximadamente 8,1 % sucediendo a temperaturas mayores a 100 ºC debido a la liberación de THF. Esto se corresponde a aproximadamente 0,8 moléculas de THF por molécula de 20,23-dipiperidinil-5-O-micaminosil-tilonolida, asumiendo 20,23-dipiperidinil-5-O-micaminosil-tilonolida esencialmente pura.

15 Solvato Cristalino S4

La siguiente discusión proporciona diversas características observadas del solvato cristalino S4. Aunque los datos de PXRD y TF-Raman posteriores se corresponden con el solvato cristalino S4 de acetato de metilo, estos datos son generalmente aplicables a la caracterización del solvato cristalino de formiato de etilo así como debido a su

20 isomorfismo con el solvato cristalino de acetato de metilo.

i. Apariencia del Solvato Cristalino S4 de Acetato de Metilo

El acetato de solvato cristalino S4 de metilo contenía algunos cristales prismáticos bien desarrollados. Los cristales no 25 mostraron ninguna tendencia a la rotura en las fibras, en comparación con los cristales de solvato S1.

ii. Espectro de difracción de rayos X en polvo para el Solvato Cristalino S4 de Acetato de Metilo

El espectro de PXRD observado para el solvato cristalino S4 de acetato de metilo se muestra en la Figura 37 y los 30 datos correspondientes se muestran en la siguiente Tabla 21:

Tabla 21

Datos de Difracción de rayos X para el Solvato Cristalino S4 de Acetato de Metilo

Ángulo (grados 2θ): Valor d (Å) Intensidad (cps) Intensidad Rel. (%)

6,3: 14,029 144 66,5

8,7: 10,164 44 20,3

9,5: 9,309 25 11,7

10,1: 8,758 88 40,6

10,5: 8,425 90 41,3

11,0: 8,043 44 20,2

11,7: 7,563 24 11,2

12,6: 7,025 44 20,3

13,1: 6,758 26 11,9

13,6: 6,511 54 25,1

13,9: 6,371 40 18,5

14,1: 6,281 49 22,4

14,8: 5,985 120 55,3

15,8: 5,609 50 23,2

16,8: 5,277 109 50,1

17,4: 5,096 161 74,0

18,0: 4,928 71 32,7

18,9: 4,695 217 100,0

19,8: 4,484 73 33,4

20,5: 4,332 49 22,6

20,9: 4,250 145 66,6

21,8: 4,077 36 16,6

22,5: 3,952 26 12,0

23,5: 3,786 58 26,8

24,2: 3,678 23 10,4

25,0: 3,562 41 18,8

26,6: 3,351 34 15,7

27,8: 3,209 23 10,4

28,5: 3,132 29 13,4

29,7: 3,008 25 11,7

32,7: 2,739 17 7,7

Las propiedades características del espectro incluyen varios picos con intensidad similar a 2θ = 6,3º, 10,1º, 10,5º, 14,8º, 16,8º, 17,4º, 18,9º y 20,9º.

5 iii. Espectro de TFRaman para el Solvato Cristalino S4 de Acetato de Metilo El Espectro de TF-Raman observado para el solvato cristalino S4 de acetato de metilo se muestra en la Figura 38 y los datos correspondientes se muestran en la siguiente Tabla 22:

10 Tabla 22

Datos de TFRaman para el Solvato Cristalino S4 de Acetato de Metilo

Posición (cm1): Intensidad

2949: 0,205

2934: 0,223

1740: 0,019

1671: 0,034

1619: 0,242

1581: 0,468

1452: 0,075

1394: 0,027

1318: 0,047

1296: 0,045

1269: 0,048

1243: 0,058

1191: 0,054

1155: 0,024

1128: 0,038

1091: 0,037

1040: 0,048

1008: 0,031

981: 0,041

889: 0,028

864: 0,023

841: 0,039

815: 0,017

782: 0,039

641: 0,021

502: 0,026

436: 0,027

imagen18

imagen19

imagen20

imagen21

imagen22

Se cargaron tolueno (19,2 kg), tilosina A (1) (3,68 kg; ≥80 % tilosina A; ≥95 % tilosina A, B, C y D), piperidina (0,40 kg) y ácido fórmico (0,55 kg) en un reactor. La mezcla se calentó a 70-80 ºC, mientras se agitaba. Después, se continuó agitando a esa temperatura durante 1-2 horas más. La formación del compuesto (2) de 20-piperidinil-tilosina se

10 controló por HPLC. Después de que se completara la reacción (≤2 % tilosina A (1)), la mezcla de producto se enfrió a temperatura ambiente.

Parte B. Hidrólisis ácida de sustituyente de micarosiloxi. Preparación de 23Omicinosil20piperidinil5Omicaminosiltilonolida, Compuesto (3).

15

imagen23

Se añadió HBr (48 % de HBr diluido al 24 %) a la mezcla de producto de Parte A mientras se agitaba y se mantenía la mezcla a menos de 40 ºC. Después de esto, las fases en la mezcla de producto se separaron usando un periodo de 20 separación de fases de 20 minutos. La mezcla del producto estuvo a 20-25 ºC durante esta separación de fases. La HPLC de la fase inferior se usó para confirmar la finalización de la reacción (≤ 2 % de 20-piperidinil-tilosina, compuesto

(2)).

imagen24

5

Se añadió un veinticuatro por ciento de HBr (18,4 l) a temperatura ambiente a la fase acuosa obtenida de la Parte B, seguido de calentamiento a 54 ± 3 ºC en aproximadamente 1 hora mientras se agitaba. La agitación se continuó a esta temperatura durante 2-4 horas más, mientras la reacción se supervisaba usando HPLC. Después de la finalización de 10 la reacción (≤ 2 % de 23-O-micinosil-20-piperidinil-5-O-micaminosil-tilonolida, compuesto (3)), la mezcla se enfrió a temperatura ambiente usando una camisa de refrigeración a -10 ºC. Después de un periodo de refrigeración, la mezcla se extrajo tres veces con diclorometano (9,8 kg cada vez). El producto acuoso se enfrió a 4-8 ºC, y después se añadió lentamente NaOH 6 N (33,6 kg) para ajustar el pH a ≥10. La mezcla resultante se extrajo con diclorometano tres veces (con 32,6 kg, 29,3 kg y 24,5 kg) a temperatura ambiente. Las fases orgánicas combinadas se cargaron en un reactor

15 separado. Se añadió sulfato sódico (2,9 kg; Na2SO4) y se retiró por filtración. Después, se añadió diclorometano (4,9 kg) y se retiró mediante destilación. El producto en bruto resultante se disolvió y se recristalizó dos veces en tercbutil metil éter (6,1 kg cada vez) a temperatura ambiente. Después, el producto se aisló en un filtro Nutsch, se lavó dos veces con tercbutil metil éter (1,0 kg cada vez) y se secó en un secador de bandeja al vacío durante una noche a 40 ºC. El producto final se analizó usando HPLC.

20

imagen25

25 Se disolvieron trifenilfosfina (0,9 kg) y piridina (0,3 kg; libre de agua) en diclorometano (11,7 kg) a temperatura ambiente. Después, se añadió yodo (0,8 kg). Después, la mezcla resultante se agitó hasta que se disolvió todo el yodo. Después, la mezcla se enfrió a 13 ºC. La mezcla enfriada se añadió al producto de la Parte C en diclorometano (11,7 kg) mientras se agitaba a 15 ± 3 ºC. La reacción se controló por HPLC y se determinó que estaba completa en 2-2,5 horas (≤ 2 % de compuesto de 23-hidroxil-20-piperidinil-5-O-micaminosil-tilonolida).

30

Parte E. Aminación. Preparación de 20,23dipiperidinil5Omicaminosiltilonolida (6).

imagen26

35 Se añadieron carbonato potásico (1,8 kg), acetonitrilo (16,7 kg) y piperidina (1,1 kg) al producto de la Parte D. Después, la mezcla resultante se calentó a 78 ºC mientras se retiraba por destilación diclorometano. Después de un intercambio de disolvente a acetonitrilo, la mezcla se agitó durante 2-2,5 horas a reflujo y después se enfrió a temperatura ambiente. Después, el carbonato potásico residual se retiró por filtración, la torta de filtro se lavó con acetonitrilo (2,8 kg) y el disolvente se retiró por destilación al vacío a una temperatura de camisa de 50 ºC. El residuo

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Claims

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