WO2024139226A1 - 含白蛋白结合型优替德隆纳米粒的药物组合物及其制备方法 - Google Patents

含白蛋白结合型优替德隆纳米粒的药物组合物及其制备方法 Download PDF

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唐莉
邱荣国
张川
徐靖
关津
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北京华昊中天生物医药股份有限公司
成都华昊中天药业有限公司
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  • the pharmaceutically acceptable buffer salt is selected from one or more of phosphate, citrate, tartrate, acetate, fumarate, ethylenediaminetetraacetic acid (or edetic acid) salt and malate.
  • the pharmaceutically acceptable buffer salt is selected from phosphate.
  • the pharmaceutically acceptable buffer salt is selected from one or more of citrate, malate, tartrate, fumarate, ethylenediaminetetraacetic acid.
  • the pharmaceutically acceptable buffer salt is selected from citrate, tartrate and ethylenediaminetetraacetic acid.
  • the pharmaceutically acceptable buffer salt is selected from citrate.
  • Step 3 homogenizing the emulsion in step 2 into a nanosuspension using a high-pressure homogenizer
  • the buffered salt solution is a phosphate buffer of pH 4.0 to 8.0, such as a phosphate buffer of pH 4.5.
  • the buffered salt solution is a citrate buffer of pH 4.0 to 8.0, such as a citrate buffer of pH 5.4, pH 6.8 or pH 7.2.
  • the buffered saline solution is a malate buffer of pH 4.0 to 8.0, such as a malate buffer of pH 7.2.
  • the buffered saline solution is a tartrate buffer of pH 4.0 to 8.0, such as a tartrate buffer of pH 7.2.
  • a stirrer or a shearing machine is used to mix the oil phase solution of Utidelon and the aqueous phase solution of human albumin to form an emulsion.
  • step 2 of the method the same buffered salt solution used in step 1 can be added to the emulsion in step 2 to increase the volume for homogenization.
  • the method for rapidly removing the organic solvent comprises removing the organic solvent from the nanosuspension by rotary evaporation, thin film evaporator via reduced pressure method, freeze spray drying, and the like.
  • the power source refers to a device capable of delivering the nanosuspension of step 3 to the vacuum chamber, such as a peristaltic pump, a syringe pump, compressed air, etc.
  • a peristaltic pump is used to pump the nanosuspension of step 3 into the vacuum chamber at a speed of 20 rpm to 100 rpm during homogenization.
  • the present invention provides a pharmaceutical composition prepared by the method described in the present invention.
  • the present invention provides the pharmaceutical composition of the present invention for use in treating solid tumors such as advanced breast cancer, lung cancer, gastric cancer, liver cancer, etc.
  • the present invention provides a method for treating a tumor in a subject, such as solid tumors such as advanced breast cancer, lung cancer, gastric cancer, liver cancer, etc., comprising administering to the subject a therapeutically effective amount of the pharmaceutical composition of the present invention.
  • the present invention provides the use of the pharmaceutical composition of the present invention in the preparation of a drug for treating solid tumors such as advanced breast cancer, lung cancer, gastric cancer, liver cancer, etc.
  • the drug is an injection.
  • the pharmaceutical composition of the present invention into an injection using conventional preparation methods in the pharmaceutical field.
  • the drug is a sterile lyophilized powder injection.
  • Those skilled in the art can prepare the pharmaceutical composition of the present invention into a sterile lyophilized powder injection using conventional preparation methods in the pharmaceutical field.
  • the present invention provides an albumin-bound eutidrone nanoparticle preparation for injection.
  • the present invention provides a sterile lyophilized powder injection of albumin-bound eutidrone nanoparticles.
  • albumin-bound eutidrone nanoparticles before administration, the albumin-bound eutidrone nanoparticles sterile lyophilized powder injection is redissolved with a suitable liquid such as 5% glucose solution or 0.9% sodium chloride solution or sterile water for injection, and then administered by injection in a suitable manner such as intravenous injection or intravenous drip.
  • the albumin-bound eutidrone nanoparticles of the present invention or the pharmaceutical composition containing the same are stored at 2°C to 8°C or room temperature. It has good physical and chemical stability under storage conditions, which improves the compliance and safety of the drug;
  • the preparation method of the present invention can make the drug loading of eutidrone as high as 20% or more, or even as high as 60% or more, so that the total amount of albumin dimer, oligomer and polymer impurities in the prepared albumin-bound eutidrone nanoparticles at a unit dose is low, which is beneficial to improving the quality of the final product.
  • the preparation method of the present invention improves the stability of albumin-bound eutidrone nanoparticles by controlling the desolvation speed and efficiency;
  • the albumin-bound eutidrone nanoparticle suspension obtained by the preparation method of the present invention has good particle size uniformity and good filterability, making sterilization filtration in industrial production possible, and has a very high filtration yield, which is suitable for industrial production;
  • albumin-bound eutidrone nanoparticle freeze-dried powder of the present invention is redissolved in a suitable liquid such as a 5% glucose solution or a 0.9% sodium chloride solution, an albumin-bound eutidrone nanoparticle suspension with a relatively uniform particle size can be quickly formed.
  • the suspension has good stability at room temperature and can meet the needs of clinical applications.
  • Figure 1 Particle size distribution of albumin-bound eutidrone nanoparticles in Example 10.
  • the time interval for removing the solvent of samples Y1, Y2, Y3, and Y4 is about 10 minutes respectively.
  • the nanoparticle size of samples Y1, Y2, Y3, and Y4 gradually increases over time, and the results are shown in the following table.
  • the vacuum degree of the thin film evaporator is 1500 pa and the scraper speed is 150 rpm.
  • rinse the pipeline and the thin film evaporator with about 150 ml of water for injection to obtain a suspension containing albumin-bound eutidolar nanoparticles.
  • the average diameter of albumin-bound eutidrone nanoparticles in the suspension was measured using the Nicomp Z3000 nanoparticle size and Zeta potential analyzer produced by PSS Corporation of the United States, and the result was 128.16 nm.
  • the vacuum degree of the thin film evaporator is 1500 Pa and the scraper speed is 150 rpm. After evaporation, a suspension containing albumin-bound eutidrone nanoparticles is obtained. The average diameter of albumin-bound eutidrone nanoparticles in the suspension was measured using the Nicomp Z3000 nanoparticle size and Zeta potential analyzer produced by PSS Corporation of the United States, and the diameter was 155 nm.
  • the vacuum degree of the thin film evaporator is 1500 pa and the scraper speed is 150 rpm. After evaporation, a suspension containing albumin-bound eutidolar nanoparticles is obtained. The average diameter of albumin-bound eutidrone nanoparticles in the suspension was measured using the Nicomp Z3000 nanoparticle size and Zeta potential analyzer produced by PSS Corporation of the United States, and the diameter was 127 nm.
  • the vacuum degree of the thin film evaporator is 1500 pa and the scraper speed is 150 rpm. After evaporation, a suspension containing albumin-bound eutidolar nanoparticles is obtained. The average diameter of albumin-bound eutidrone nanoparticles in the suspension was measured using the Nicomp Z3000 nanoparticle size and Zeta potential analyzer produced by PSS Corporation of the United States, which was 130 nm.
  • the vacuum degree of the thin film evaporator is 1500 pa and the scraper speed is 150 rpm. After evaporation, a suspension containing albumin-bound eutidolar nanoparticles is obtained.
  • the nanoparticle size and Zeta potential analyzer Nicomp Z3000 of PSS Company of the United States is used to measure the suspension.
  • the average diameter of albumin-bound eutidrone nanoparticles is 132 nm.
  • the vacuum degree of the thin film evaporator is 1500 Pa and the scraper speed is 150 rpm. After evaporation, a suspension containing albumin-bound eutidolar nanoparticles is obtained. The average diameter of albumin-bound eutidrone nanoparticles in the suspension was measured using the Nicomp Z3000 nanoparticle size and Zeta potential analyzer produced by PSS Corporation of the United States, and the diameter was 128 nm.
  • Example 10 Take an appropriate amount of the albumin-bound eutidrone nanoparticle suspension in Example 10, filter it with a 0.45 ⁇ m syringe filter connected in series with a 0.22 ⁇ m syringe filter, take 1 ml of each of the nanoparticle suspension before and after filtration and place it in a 10 ml volumetric flask, add an appropriate amount of After adding acetonitrile, ultrasonic treatment is performed for about 10 minutes to denature and precipitate albumin, and the mixture is diluted to the scale with acetonitrile, mixed, and centrifuged at high speed. The supernatant is taken as the test solution to measure the content of eutidrone.

Abstract

本发明提供了一种包含稳定的白蛋白结合型优替德隆纳米粒的药物组合物及其冻干制剂以及相应的制备方法。所述药物组合物包含活性成分优替德隆、人血白蛋白、药学上可接受的缓冲盐以及任选的冻干赋形剂。本发明还提供了一种白蛋白结合型优替德隆纳米粒冻干制剂，其可提高优替德隆的稳定性、安全性和有效性。

Description

含白蛋白结合型优替德隆纳米粒的药物组合物及其制备方法 技术领域
本发明属于医药领域，涉及一种含白蛋白结合型优替德隆纳米粒的药物组合物及其制剂以及相应的制备方法。
背景技术
优替德隆是一种埃博霉素类衍生物，为大环内脂类化合物，由经基因修饰后的黏细菌纤维堆囊菌产生的次级代谢物。经研究表明埃博霉素类抗生素通过抑制微管蛋白的解聚而发挥抗肿瘤作用。优替德隆的化学名称为：(4S,7R,8S,9S,16S)-4,8-二羟基-5,5,7,9,13-五甲基-16-[(1E)-1-甲基-2-(2-甲基-噻唑-4-基)-乙烯基]-十六烷氧杂环-13Z-烯-2,6-酮内酯，其化学结构式如下所示：
由于优替德隆易溶于乙醇、甲醇、乙酸乙酯、三氯甲烷，难溶于水，在水中的饱和溶解度低于1μg/ml，因此已上市的优替德隆注射液(商标名为：优替帝TM)处方中含有有机溶剂乙醇及表面活性剂聚氧乙烯蓖麻油等，由此具有引发严重的过敏反应的可能性，临床使用前需先进行抗过敏治疗，预防过敏的发生，降低了该类药物临床使用的顺应性，增加了患者的不良反应，限制了其临床适用范围。
专利申请CN 104434808A简要介绍了以埃博霉素B为活性成分的白蛋白结合型纳米粒的制备方法，但是未对所制备的埃博霉素B白蛋白纳米粒的稳定性等关键质量参数进行阐述。此外，在专利申请CN104434808A中，埃博霉素B白蛋白纳米粒的载药量(以埃博霉素B的投料量与白蛋白投料量的重量比计)较低，约为5％。由于白蛋白在高压均质过程中易于形成白蛋白的多聚体等杂质，较低的载药量将显著增加终产品中白蛋白多聚体的总量，不利于产品的质量控制。
虽然优替德隆属于埃博霉素类衍生物，但与埃博霉素B的化学结构比较，仍具有明显的差异，而药物化学结构的改变将显著改变药物与白蛋白的可结合性，从而使制备的白蛋白结合型药物的物理、化学稳定性、生理特征等产生显著的改变，使优替德隆能否成功开 发成白蛋白结合型制剂具有不可预测性。发明人在研究白蛋白结合型优替德隆纳米粒的制备工艺中时发现，采用专利申请CN 104434808A中记载的方法所制备的白蛋白结合型优替德隆纳米粒在均质后的粒径稳定性均较差，不能满足临床应用及工业化生产的需求。
因此，迫切需要一种具有临床应用前景且可工业化生产的稳定的白蛋白结合型优替德隆纳米粒及其制剂以及相应的制备方法。
发明内容
为了解决上述问题，发明人在研究过程中意外发现均质后的白蛋白结合型优替德隆纳米粒不稳定，粒径随时间逐渐增大，而采用边均质边去溶剂的方法快速去除有机溶剂后，纳米粒的粒径稳定性显著增加；另一方面，与用注射用水稀释白蛋白溶液相比，采用磷酸盐缓冲液作为稀释液稀释白蛋白溶液形成水相溶液后均质得到的纳米粒的稳定性优于注射用水，进一步研究发现，采用柠檬酸盐缓冲液、苹果酸盐缓冲液、富马酸盐缓冲液等有机酸盐缓冲液制备的纳米粒相较于磷酸盐缓冲液具有更好的粒径稳定性。因此，本发明提供了一种以优替德隆为主要活性成分的白蛋白结合型纳米粒制剂，该制剂具有良好的物理、化学稳定性，提高了药物的顺应性、安全性，具有临床应用前景且可工业化生产。
一方面，本发明提供了一种药物组合物，其包含具有适宜稳定性的白蛋白结合型优替德隆纳米粒，所述纳米粒包含活性成分优替德隆、人血白蛋白和药学上可接受的缓冲盐。
在一些实施方式中，所述的白蛋白结合型优替德隆纳米粒包含活性成分优替德隆和主要的载体材料人血白蛋白，活性成分优替德隆包裹在该载体材料里或吸附在该载体材料上。
在一些实施方式中，在所述的白蛋白结合型优替德隆纳米粒中，活性成分优替德隆与载体材料人血白蛋白的重量比在0.01:1至1:1的范围内，例如重量比为0.01:1、0.05:1、0.1:1、0.2:1、0.25:1、0.28:1、0.3:1、1:3、0.35:1、0.4:1、4:9、0.45:1、0.5:1、0.6:1、2:3、0.7:1、0.8:1或0.9:1。
在一些实施方式中，所述的白蛋白结合型优替德隆纳米粒还包含药学上可接受的缓冲盐，所述药学上可接受的缓冲盐可以选自无机酸盐和有机酸盐。在一个实施方式中，所述药学可接受的缓冲盐选自无机酸盐，包括但不限于磷酸盐。在一个实施方式中，所述药学可接受的缓冲盐选自有机酸盐，包括但不限于柠檬酸盐、酒石酸盐、醋酸盐、富马酸盐、乙二胺四乙酸(或依地酸)盐和苹果酸盐中的一种或多种。在一个实施方式中，所述药学可接受的缓冲盐选自磷酸盐、柠檬酸盐、酒石酸盐、醋酸盐、富马酸盐、乙二胺四乙酸(或依地酸)盐和苹果酸盐中的一种或多种。在一些具体实施方式中，所述药学上可接受的缓冲盐选自磷酸盐。在一些具体实施方式中，所述药学上可接受的缓冲盐选自柠檬酸盐、苹果酸盐、酒石酸盐、富马酸盐、乙二胺四乙酸盐中的一种或多种。在一些具体实施方式中，所述药学上可接受的缓冲盐选自柠檬酸盐、酒石酸盐和乙二胺四乙酸盐。在一些具体实施方式中，所述药学上可接受的缓冲盐选自柠檬酸盐。
本发明所述的药学上可接受的缓冲盐为白蛋白结合型优替德隆纳米粒提供更好的稳定性。申请人发现本发明所述的白蛋白结合型优替德隆纳米粒的粒径大小和产品质量与缓冲盐的pH值无关，而是与缓冲盐的种类相关。包含有机酸盐的白蛋白结合型优替德隆纳米粒比包含无机酸盐的纳米粒具有更好的稳定性。
在一些实施方式中，所述的白蛋白结合型优替德隆纳米粒还包含蔗糖、甘露醇、葡萄糖和海藻糖中的一种或多种。
在一些实施方式中，所述的白蛋白结合型优替德隆纳米粒的平均粒径在30～200nm的范围内，例如可以为30、40、50、60、70、80、90、100、105、108、110、120、121、122、123、124、125、126、127、128、129、130、131、132、133、134、135、136、137、138、139、140、141、142、143、144、145、146、147、148、149、150、155、160、165、170、175、180、185、190、195或200nm，或上述任意两个数值之间的范围。平均粒径的测量方法包括但不限于沉降法、筛分法、显微镜观察法、激光粒度测量法等。
在一些实施方式中，所述的药物组合物为冻干粉形式。在一些实施方式中，冻干粉形式的药物组合物不包括冻干赋形剂。在一些实施方式中，冻干粉形式的药物组合物包括药学上可接受的冻干赋形剂。申请人发现，冻干赋形剂的种类对于本发明所述的白蛋白结合型优替德隆纳米粒的粒径大小和稳定性不产生显著影响。因此，预期冻干赋形剂的种类不受特别限制。在一些实施方式中，所述药学上可接受的冻干赋形剂选自葡萄糖、果糖、麦芽糖、山梨醇、甘露醇、木糖醇、甘油、蔗糖、海藻糖、乳糖、丙氨酸、半胱氨酸、胱氨酸、组氨酸、谷氨酸、苯丙氨酸、甘氨酸、天冬氨酸、赖氨酸、亮氨酸、精氨酸、丝氨酸、色氨酸、氯化钠、硫酸锌、EDTA、右旋糖酐、磷酸氢二钠、磷酸二氢钠、碳酸氢钠、苹果酸钠、酒石酸钠、乳酸钠、人血白蛋白、透明质酸、壳聚糖、海藻酸、羟乙基淀粉、聚维酮、聚乙二醇、聚乙烯醇、聚赖氨酸、聚天冬氨酸、泊洛沙姆、磷脂、胆固醇、明胶、胶原蛋白、鱼精蛋白等中的一种或两种或更多种的混合物。在一些实施方式中，所述药学上可接受的冻干赋形剂选自甘露醇、蔗糖、海藻糖、葡萄糖、氯化钠中的一种或多种，例如海藻糖、甘露醇等。
另一方面，本发明提供了一种制备本发明所述药物组合物的方法，该方法包括以下步骤：
步骤1：将活性成分优替德隆溶解于有机溶剂中形成油相溶液，以及将人血白蛋白溶解或稀释于水性溶液中形成水相溶液，所述水性溶液为缓冲盐溶液；
步骤2：将优替德隆油相溶液加入人血白蛋白水相溶液中，使其形成乳液；
步骤3：将步骤2中的乳液用高压均质机均质成纳米混悬液；
步骤4：从步骤3所得的纳米混悬液中边均质边快速去除有机溶剂，得到含有白蛋白结合型优替德隆纳米粒的混悬液或粉末；以及
任选地，步骤5：将步骤4所得的混悬液，冷冻干燥，得到本发明所述药物组合物的冻干粉形式。
在一些实施方式中，在所述方法的步骤1中，用于溶解优替德隆的有机溶剂选自三氯甲烷、二氯甲烷、乙酸乙酯、乙酸丙酯、乙酸丁酯、甲酸乙酯、甲醇、乙醇、丙酮、正丙醇、异丙醇、叔丁醇、甲基丁基酮、丁酮等中的一种或两种或更多种的混合溶剂。在一些实施方式中，在所述方法的步骤1中，用于溶解优替德隆的有机溶剂是三氯甲烷和二氯甲烷中的一种或两种与甲醇、乙醇、叔丁醇和丙酮中的一种或多种组成的混合溶剂。在一些具体实施方式中，三氯甲烷和/或二氯甲烷与甲醇、乙醇、叔丁醇和/或丙酮的体积比在20∶1至1∶1的范围内，例如在15∶1至5∶1的范围内，例如体积比为9∶1、8∶2、7∶3、11∶1等。在一些实施方式中，用于溶解优替德隆的有机溶剂是三氯甲烷或二氯甲烷与甲醇、乙醇、叔丁醇或丙酮组成的混合溶剂。在一些具体实施方式中，三氯甲烷或二氯甲烷与甲醇、乙醇、叔丁醇或丙酮的体积比在20∶1至1∶1的范围内，例如在15∶1至5∶1的范围内，例如体积比为9∶1、8∶2、7∶3、11∶1等。
在一些具体实施方式中，用于溶解优替德隆的有机溶剂是三氯甲烷：乙醇＝9:1(v/v)的混合溶剂。在一些具体实施方式中，用于溶解优替德隆的有机溶剂是二氯甲烷：乙醇＝9:1(v/v)的混合溶剂。在一些具体实施方式中，用于溶解优替德隆的有机溶剂是三氯甲烷：叔丁醇＝9:1(v/v)的混合溶剂。在一些具体实施方式中，用于溶解优替德隆的有机溶剂是三氯甲烷：丙酮＝9:1(v/v)的混合溶剂。在一些具体实施方式中，用于溶解优替德隆的有机溶剂是三氯甲烷：甲醇＝9:1(v/v)的混合溶剂。
在一些实施方式中，在所述方法的步骤1中，油相溶液中优替德隆的浓度在0.1mg/ml～5000mg/ml的范围内，例如在5mg/mL～2000mg/ml、20mg/mL～500mg/ml或50mg/mL～300mg/ml的范围内。
在一些实施方式中，在所述方法的步骤1中，用于溶解或稀释人血白蛋白的水性溶液为缓冲盐溶液。发明人在实验过程中发现，缓冲盐的pH对最终产品的稳定性和质量无显著影响，产品的稳定性和质量与缓冲液种类有关系。在一些实施方式中，用于溶解或稀释人血白蛋白的水性溶液为pH4.0～pH8.0的缓冲盐溶液。在一些实施方式中，所述缓冲盐溶液可以是无机酸盐，包括但不限于磷酸盐。在一些实施方式中，所述缓冲盐溶液可以是有机酸盐，包括但不限于柠檬酸盐、酒石酸盐、醋酸盐、富马酸盐、乙二胺四乙酸盐、和苹果酸盐中的一种或多种。在一个实施方式中，所述缓冲盐溶液选自磷酸盐、柠檬酸盐、酒石酸盐、醋酸盐、富马酸盐、乙二胺四乙酸盐和苹果酸盐溶液中的一种或多种。在一些具体实施方式中，所述缓冲盐溶液选自磷酸盐溶液。在一些具体实施方式中，所述缓冲盐溶液选自柠檬酸盐、苹果酸盐、酒石酸盐、富马酸盐、乙二胺四乙酸盐溶液中的一种或多种。在一些具体实施方式中，所述缓冲盐溶液选自柠檬酸盐、酒石酸盐和乙二胺四乙酸盐溶液。在一些具体实施方式中，所述缓冲盐溶液选自柠檬酸盐溶液。
在一些实施方式中，在所述方法的步骤1中，所述缓冲盐溶液是pH4.0～8.0磷酸盐缓冲液，例如pH4.5的磷酸盐缓冲液。在一些实施方式中，在所述方法的步骤1中，所述缓冲盐溶液是pH4.0～8.0的柠檬酸盐缓冲液，例如pH5.4、pH6.8或pH7.2的柠檬酸盐缓冲 液。在一些实施方式中，在所述方法的步骤1中，所述缓冲盐溶液是pH4.0～8.0的苹果酸盐缓冲液，例如pH7.2的苹果酸盐缓冲液。在一些实施方式中，在所述方法的步骤1中，所述缓冲盐溶液是pH4.0～8.0的酒石酸盐缓冲液，例如pH7.2的酒石酸盐缓冲液。在一些实施方式中，在所述方法的步骤1中，所述缓冲盐溶液是pH4.0～8.0的富马酸盐缓冲液，例如pH7.2的富马酸盐缓冲液。在一些实施方式中，在所述方法的步骤1中，所述缓冲盐溶液是pH4.0～8.0的乙二胺四乙酸缓冲液，例如pH7.2的乙二胺四乙酸钠缓冲液。
在一些实施方式中，在所述方法的步骤1中，所述水相溶液中人血白蛋白的浓度在1mg/ml～1000mg/ml的范围内，例如在10mg/ml～200mg/ml、20mg/ml～150mg/ml或30mg/ml～100mg/ml的范围内。
在一些实施方式中，在所述方法中，活性成分优替德隆与载体材料人血白蛋白的投料量的重量比在0.01％～99.9％的范围内，例如在80％～5％、75％～15％或70％～20％的范围内，例如为5％、10％、20％、25％、33％、40％、44％、50％、60％、67％、80％或上述任意两个数值之间的范围。
在一些实施方式中，在所述方法的步骤2中，采用搅拌器或剪切机使优替德隆油相溶液和人血白蛋白水相溶液混合形成乳液。
在一些实施方式中，需要时，在所述方法的步骤2之后，可以向步骤2中的乳液中加入步骤1中所用的相同的缓冲盐溶液以增加体积便于均质操作。
在一些实施方式中，在所述方法的步骤3中，将步骤2中的乳液用高压均质机在5000psi～30000psi、例如在10000psi～25000psi的压力条件下均质成纳米混悬液。
发明人还研究了均质次数对于最终产品的粒径大小和稳定性的影响，结果发现不同均质次数对最终产品的粒径大小和稳定性无显著影响。
在一些实施方式中，需要时，可以在所述方法的步骤3之后，向步骤3的纳米混悬液中加入水性溶液以将纳米混悬液稀释至所需的浓度。在一些实施方式中，所述水性溶液选自注射用水、缓冲盐溶液、蔗糖溶液、甘露醇溶液、葡萄糖溶液、海藻糖溶液等中的一种或多种。在一些实施方式中，所述水性溶液为注射用水。在一些实施范式中，所述水性溶液为缓冲盐溶液，例如如所述方法的步骤1中所述的缓冲盐溶液。
在一些实施方式中，在所述方法的步骤4中，快速去除有机溶剂的方法包括采用旋转蒸发、采用薄膜蒸发仪经减压法和冷冻喷雾干燥等方法从所述纳米混悬液中去除有机溶剂。
在一些实施方式中，在所述方法的步骤4的快速去除有机溶剂之前，所述方法还包括经动力源将步骤3所得的纳米混悬液送入真空腔体中。
在一些实施方式中，所述动力源是指能将步骤3的纳米混悬液传送到真空腔体中的装置，例如蠕动泵、注射泵、压缩空气等。在一些实施方式中，在均质的同时采用蠕动泵以20转/分钟至100转/分钟的转速将步骤3的纳米混悬液泵入真空腔体中。
在一些实施方式中，所述真空腔体是指可保持内部具有一定真空度的容器或装置。其 实例包括但不限于旋转蒸发仪、薄膜蒸发仪、冷冻喷雾干燥器等。在一些实施方式中，所述真空腔体是旋转蒸发仪。在一些实施方式中，所述真空腔体是薄膜蒸发仪。
在一些实施方式中，根据真空腔体的类型，可以采用旋转蒸发、薄膜蒸发或冷冻喷雾干燥等适宜方法快速去除有机溶剂。在一些实施方式中，在薄膜蒸发仪中利用减压法快速去除有机溶剂，其中薄膜蒸发仪的真空度为1mBar～500mBar，优选10mBar～200mBar，刮板速度为50rpm～300rpm，优选100rpm～200rpm。
本领域技术人员可以理解，当在所述方法的步骤4中采用冷冻喷雾干燥方法从所述纳米乳液中去除有机溶剂时，则无需后续的冷冻干燥步骤5。
在一些实施方式中，在所述方法的步骤5中，可以在加入或不加入冻干赋形剂例如前文所述的冻干赋形剂的情况下，将步骤4得到的混悬液分装至适宜容器中进行冷冻干燥。在一些具体实施方式中，在所述方法的步骤5中，将步骤4所得的混悬液用注射用水或缓冲盐溶液稀释至指定浓度后，冷冻干燥，得到本发明所述药物组合物的冻干粉形式。
在另一方面，本发明提供了利用本发明所述的方法制备得到的药物组合物。
在另一方面，本发明提供了本发明所述的药物组合物，用于治疗肿瘤例如晚期乳腺癌、肺癌、胃癌、肝癌等实体肿瘤。
在另一方面，本发明提供了一种治疗受试者的肿瘤例如晚期乳腺癌、肺癌、胃癌、肝癌等实体肿瘤的方法，该方法包括向该受试者施用治疗有效量的本发明所述的药物组合物。
在另一方面，本发明提供了本发明所述的药物组合物在制备用于治疗肿瘤例如晚期乳腺癌、肺癌、胃癌、肝癌等实体肿瘤的药物中的用途。在一些实施方式中，所述药物为注射剂。本领域技术人员可以采用药学领域中常规的制备方法将本发明所述的药物组合物制备成注射剂。在另一些实施方式中，所述药物为无菌冻干粉针剂。本领域技术人员可以采用药学领域中常规的制备方法将本发明所述的药物组合物制备成无菌冻干粉针剂。
在又一方面，本发明提供了一种注射剂，其包含本发明所述的白蛋白结合型优替德隆纳米粒或药物组合物。
在另一个方面，本发明提供了注射用白蛋白结合型优替德隆纳米粒制剂。
在又一方面，本发明提供了一种无菌冻干粉针剂，其包含本发明所述的白蛋白结合型优替德隆纳米粒或药物组合物。
在另一个方面，本发明提供了白蛋白结合型优替德隆纳米粒无菌冻干粉针剂。在一些实施方式中，在给药前，将白蛋白结合型优替德隆纳米粒无菌冻干粉针剂用5％葡萄糖溶液或0.9％氯化钠溶液或无菌注射用水等适宜液体重新溶解后，采用静脉注射、静脉滴注等适宜的方式进行注射给药。
本发明的技术方案具有以下有益效果：
本发明的白蛋白结合型优替德隆纳米粒或包含其的药物组合物在2℃～8℃、室温贮 存条件下均具有良好的物理、化学稳定性，提高了药物的顺应性、安全性；
采用本发明的制备方法可使优替德隆的载药量高达20％以上、甚至高达60％以上，从而使所制得的单位剂量下的白蛋白结合型优替德隆纳米粒中的白蛋白二聚体、寡聚体和多聚体杂质的总量较低，有利于提高最终产品的质量；
本发明的制备方法通过将人血白蛋白溶解于特定缓冲盐溶液中来提高白蛋白结合型优替德隆纳米粒混悬液在室温条件下的稳定性；
本发明的制备方法通过控制去溶剂速度及效率来提高白蛋白结合型优替德隆纳米粒之后的稳定性；
本发明的制备方法得到的白蛋白结合型优替德隆纳米粒混悬液具有良好的粒径均一性以及良好的可过滤性，使工业生产中的除菌过滤成为可能，同时具有非常高的过滤收率，适宜于工业化生产；
将本发明的白蛋白结合型优替德隆纳米粒冻干粉用5％葡萄糖溶液或0.9％氯化钠溶液等适宜液体重新溶解后，可快速形成粒径较均一的白蛋白结合型优替德隆纳米粒混悬液，该混悬液在室温下具有良好的稳定性，可满足临床应用的需要。
附图说明
图1：实施例10中白蛋白结合型优替德隆纳米粒的粒径分布图。
具体实施方式
下面结合具体实施例进一步阐述说明本发明，但本发明并不局限于这些实施例，对于本技术领域人员来说，在不脱离本发明原理的前提下，可以对本发明进行等同替换、组合、改良或修饰，这些都将包括在本发明的保护范围内。
在具体实施例中，20％的人血白蛋白溶液来自于成都蓉生药业有限公司，优替德隆来自于成都华昊中天药业有限公司。其余试剂均为商购获得的。
对比例1
取20％的人血白蛋白溶液7.5ml，用注射用水稀释至30ml，加入优替德隆溶液200mg/ml(溶剂为三氯甲烷：乙醇＝9:1(v/v))5ml，用5000rpm的转速用高速剪切机(IKA型号T25)剪切成初乳后，用均质机(上海诺泽，型号Nano)以25000psi的压力均质6次循环后，分别取4份，每份约1ml混悬液依次至旋转蒸发仪(瑞士步崎，型号R-300)中，于40℃水浴加热，40mbar减压蒸发条件下去除溶液中的有机溶剂，得样品Y1、Y2、Y3、Y4样品Y1、Y2、Y3、Y4去溶剂的时间间隔依次约为10分钟。样品Y1、Y2、Y3、Y4的纳米粒径随时间逐步增加，结果如下表所示。
4份样品旋蒸蒸发完成后，将剩余混悬液置旋转蒸发仪(瑞士步崎，型号R-300)中，于40℃水浴加热，40mbar减压蒸发条件下去除溶液中的有机溶剂，旋蒸蒸发过程中肉眼可见沉淀产生。
对比例2
取20％的人血白蛋白溶液27ml，用注射用水稀释至60ml，加入优替德隆溶液200mg/ml(溶剂为三氯甲烷：乙醇＝9:1(v/v))9ml，用8000rpm的转速用高速剪切机(IKA型号T25)剪切成初乳后，用均质机(上海诺泽，型号Nano)以20000psi的压力均质6次循环后，边均质边经蠕动泵以55rpm的转速泵入薄膜蒸发仪(上海德大天壹，型号SH-DEA)中去除有机溶剂，薄膜蒸发仪的真空度为1500pa、刮板转速为150rpm，蒸发完成后，用注射用水约150ml冲洗管路及薄膜蒸发仪，得到包含白蛋白结合型优替德隆纳米粒的混悬液。采用美国PSS公司纳米粒径及Zeta电位分析仪Nicomp Z3000测量混悬液中的白蛋白结合型优替德隆纳米粒的平均直径为128.16nm。
实施例1
取20％的人血白蛋白溶液9ml，加入pH4.5磷酸盐缓冲液至60ml，混匀，加入优替德隆溶液200mg/ml(溶剂为三氯甲烷：乙醇＝9:1(v/v))2.5ml，以5000rpm的转速用高速剪切机(IKA，型号T25)剪切成初乳后，用均质机(上海诺泽，型号Nano)以25000psi的压力均质4、6、8、10次后，分别取少量(约0.5ml)纳米乳转移至旋转蒸发仪(瑞士步崎，型号R-300)中，于40℃水浴加热，40mbar减压蒸发去除溶液中的有机溶剂，得到包含白蛋白结合型优替德隆纳米粒的混悬液。采用美国PSS公司纳米粒径及Zeta电位分析仪Nicomp Z3000测量混悬液中的白蛋白结合型优替德隆纳米粒的平均直径，结果如下表所示。
该实施例结果表明，与对比例1相比，采用磷酸盐缓冲液代替注射用水溶解人血白蛋白后，可以形成稳定的白蛋白结合型优替德隆纳米粒。该实施例结果还表明不同均质次数对最终纳米粒产品的粒径大小和产品质量无显著影响。
实施例2
取20％的人血白蛋白溶液6ml，加入不同pH值的磷酸盐缓冲液至30ml，混匀，加入优替德隆溶液100mg/ml(溶剂为三氯甲烷：乙醇＝9:1(v/v))3ml，以5000rpm的转速用高速剪切机(IKA，型号T25)剪切成初乳后，加入30ml相应的不同pH值的磷酸盐缓冲液，用均质机(上海诺泽，型号Nano)以25000psi的压力均质4次后，将少量纳米乳(约0.5ml)转移至旋转蒸发仪(瑞士步崎，型号R-300)中，于40℃水浴加热，40mbar减压蒸发去除溶液中的有机溶剂，得到包含白蛋白结合型优替德隆纳米粒的混悬液。采用美国PSS公司纳米粒径及Zeta电位分析仪Nicomp Z3000测量混悬液中的白蛋白结合型优替德隆纳米粒的平均直径，结果如下表所示。
该实施例结果表明，与对比例1相比，采用磷酸盐缓冲液代替注射用水溶解人血白蛋白后，可以形成稳定的白蛋白结合型优替德隆纳米粒。该实施例结果还表明不同pH的磷酸盐缓冲液对最终纳米粒产品的粒径大小和产品质量无显著影响。
实施例3
取20％的人血白蛋白溶液7.5ml，用pH4.5磷酸盐缓冲液稀释至30ml，混匀，加入优替德隆溶液200mg/ml(溶剂为三氯甲烷：乙醇＝9:1(v/v))3ml，用5000rpm的转速用高速剪切机(IKA，型号T25)剪切成初乳后，加入30ml pH4.5磷酸盐缓冲液，用均质机(上海诺泽，型号Nano)以25000psi的压力均质4次后，加入pH4.5磷酸盐缓冲液约250ml，边均质边经蠕动泵以65rpm的转速泵入薄膜蒸发仪(上海德大天壹，型号SH-DEA)去除其中的有机溶剂，薄膜蒸发仪的真空度为1500pa、刮板转速为150rpm，蒸发完成后，得到包含白蛋白结合型优替德隆纳米粒的混悬液。采用PSS公司纳米粒径及Zeta电位分析 仪Nicomp Z3000测量混悬液中的白蛋白结合型优替德隆纳米粒的平均直径，为125nm。
实施例4
取20％的人血白蛋白溶液9ml，用pH4.5磷酸盐缓冲液稀释至60ml，加入优替德隆溶液200mg/ml(溶剂为三氯甲烷：乙醇＝9:1(v/v))6ml，用5000rpm的转速用高速剪切机(IKA型号T25)剪切成初乳后，用均质机(上海诺泽，型号Nano)以25000psi的压力均质4次循环后，加入注射用水约250ml，边均质边经蠕动泵以55rpm的转速泵入薄膜蒸发仪(上海德大天壹，型号SH-DEA)去除其中的有机溶剂，薄膜蒸发仪的真空度为1500pa、刮板转速为150rpm，蒸发完成后，得到包含白蛋白结合型优替德隆纳米粒的混悬液。采用美国PSS公司纳米粒径及Zeta电位分析仪Nicomp Z3000测量混悬液中的白蛋白结合型优替德隆纳米粒的平均直径，为134nm。
实施例5
取20％的人血白蛋白溶液9ml，用pH4.5磷酸盐缓冲液稀释至60ml，加入优替德隆溶液200mg/ml(溶剂为二氯甲烷：乙醇＝9:1(v/v))4ml，用5000rpm的转速用高速剪切机(IKA型号T25)剪切成初乳后，用均质机(上海诺泽，型号Nano)以25000psi的压力均质4次循环后，加入注射用水约200ml，边均质边经蠕动泵以55rpm的转速泵入薄膜蒸发仪(上海德大天壹，型号SH-DEA)去除其中的有机溶剂，薄膜蒸发仪的真空度为1500pa、刮板转速为150rpm，蒸发完成后，得到包含白蛋白结合型优替德隆纳米粒的混悬液。采用美国PSS公司纳米粒径及Zeta电位分析仪Nicomp Z3000测量混悬液中的白蛋白结合型优替德隆纳米粒的平均直径，为135nm。
实施例6
取20％的人血白蛋白溶液9ml，用pH4.5磷酸盐缓冲液稀释至60ml，加入优替德隆溶液200mg/ml(溶剂为三氯甲烷：叔丁醇＝9:1(v/v))4ml，用5000rpm的转速用高速剪切机(IKA型号T25)剪切成初乳后，用均质机(上海诺泽，型号Nano)以25000psi的压力均质4次循环后，加入注射用水约200ml，边均质边经蠕动泵以55rpm的转速泵入薄膜蒸发仪(上海德大天壹，型号SH-DEA)中去除有机溶剂，薄膜蒸发仪的真空度为1500pa、刮板转速为150rpm，蒸发完成后，得到包含白蛋白结合型优替德隆纳米粒的混悬液。采用美国PSS公司纳米粒径及Zeta电位分析仪Nicomp Z3000测量混悬液中的白蛋白结合型优替德隆纳米粒的平均直径，为155nm。
实施例7
取20％的人血白蛋白溶液9ml，用pH4.5磷酸盐缓冲液稀释至60ml，加入优替德隆溶液200mg/ml(溶剂为三氯甲烷：丙酮＝9:1(v/v))4ml，用5000rpm的转速用高速剪切机 (IKA型号T25)剪切成初乳后，用均质机(上海诺泽，型号Nano)以25000psi的压力均质4次循环后，加入注射用水约200ml，边均质边经蠕动泵以55rpm的转速泵入薄膜蒸发仪(上海德大天壹，型号SH-DEA)中去除有机溶剂，薄膜蒸发仪的真空度为1500pa、刮板转速为150rpm，蒸发完成后，得到包含白蛋白结合型优替德隆纳米粒的混悬液。采用美国PSS公司纳米粒径及Zeta电位分析仪Nicomp Z3000测量混悬液中的白蛋白结合型优替德隆纳米粒的平均直径，为135nm。
实施例8
取20％的人血白蛋白溶液9ml，用pH4.5磷酸盐缓冲液稀释至60ml，加入优替德隆溶液200mg/ml(溶剂为三氯甲烷：甲醇＝9:1(v/v))4ml，用5000rpm的转速用高速剪切机(IKA型号T25)剪切成初乳后，用均质机(上海诺泽，型号Nano)以25000psi的压力均质4次循环后，加入注射用水约200ml，边均质边经蠕动泵以55rpm的转速泵入薄膜蒸发仪(上海德大天壹，型号SH-DEA)中去除有机溶剂，薄膜蒸发仪的真空度为1500pa、刮板转速为150rpm，蒸发完成后，得到包含白蛋白结合型优替德隆纳米粒的混悬液。采用美国PSS公司纳米粒径及Zeta电位分析仪Nicomp Z3000测量混悬液中的白蛋白结合型优替德隆纳米粒的平均直径，为127nm。
实施例9
取20％的人血白蛋白溶液9ml，用pH4.5磷酸盐缓冲液稀释至60ml，加入优替德隆溶液200mg/ml(溶剂为三氯甲烷：乙醇＝9:1(v/v))4.5ml，用5000rpm的转速用高速剪切机(IKA型号T25)剪切成初乳后，用均质机(上海诺泽，型号Nano)以25000psi的压力均质4次循环后，加入注射用水约200ml，边均质边经蠕动泵以55rpm的转速泵入薄膜蒸发仪(上海德大天壹，型号SH-DEA)中去除有机溶剂，薄膜蒸发仪的真空度为1500pa、刮板转速为150rpm，蒸发完成后，得到包含白蛋白结合型优替德隆纳米粒的混悬液。采用美国PSS公司纳米粒径及Zeta电位分析仪Nicomp Z3000测量混悬液中的白蛋白结合型优替德隆纳米粒的平均直径，为130nm。
实施例10
取20％的人血白蛋白溶液18ml，用pH6.8柠檬酸缓冲液稀释至60ml，加入优替德隆溶液200mg/ml(溶剂为三氯甲烷：乙醇＝9:1(v/v))3.6ml，用5000rpm的转速用高速剪切机(IKA型号T25)剪切成初乳后，用均质机(上海诺泽，型号Nano)以25000psi的压力均质5次循环后，加入pH6.8柠檬酸缓冲液约200ml，边均质边经蠕动泵以55rpm的转速泵入薄膜蒸发仪(上海德大天壹，型号SH-DEA)中去除有机溶剂，薄膜蒸发仪的真空度为1500pa、刮板转速为150rpm，蒸发完成后，得到包含白蛋白结合型优替德隆纳米粒的混悬液。采用美国PSS公司纳米粒径及Zeta电位分析仪Nicomp Z3000测量混悬液中 的白蛋白结合型优替德隆纳米粒的平均直径，为132nm。
实施例11
取20％的人血白蛋白溶液9ml，用pH 5.4柠檬酸缓冲液稀释至60ml，加入优替德隆溶液200mg/ml(溶剂为三氯甲烷：乙醇＝9:1(v/v))2.25ml，用5000rpm的转速用高速剪切机(IKA型号T25)剪切成初乳后，用均质机(上海诺泽，型号Nano)以25000psi的压力均质6次循环后，加入pH 5.4柠檬酸缓冲液约200ml，边均质边经蠕动泵以55rpm的转速泵入薄膜蒸发仪(上海德大天壹，型号SH-DEA)中去除有机溶剂，薄膜蒸发仪的真空度为1500pa、刮板转速为150rpm，蒸发完成后，得到包含白蛋白结合型优替德隆纳米粒的混悬液。采用美国PSS公司纳米粒径及Zeta电位分析仪Nicomp Z3000测量混悬液中的白蛋白结合型优替德隆纳米粒的平均直径，为128nm。
实施例12
取20％的人血白蛋白溶液27ml，用下表所述缓冲液稀释至60ml，加入优替德隆溶液200mg/ml(溶剂为三氯甲烷：乙醇＝9:1(v/v))9ml，用8000rpm的转速用高速剪切机(IKA型号T25)剪切成初乳后，用均质机(上海诺泽，型号Nano)以20000psi的压力均质6次循环后，边均质边经蠕动泵以55rpm的转速泵入薄膜蒸发仪(上海德大天壹，型号SH-DEA)中去除有机溶剂，薄膜蒸发仪的真空度为1500pa、刮板转速为150rpm，蒸发完成后，用对应缓冲盐溶液约150ml冲洗管路及薄膜蒸发仪，得到包含白蛋白结合型优替德隆纳米粒的混悬液。采用美国PSS公司纳米粒径及Zeta电位分析仪Nicomp Z3000测量混悬液中的白蛋白结合型优替德隆纳米粒的平均直径，结果如下表所示。
该实施例结果表明，除了磷酸盐等无机酸盐缓冲液外，采用多种有机酸盐缓冲液也能得到稳定的白蛋白结合型优替德隆纳米粒。
实施例13
分别取上述对比例2、实施例8和10中的白蛋白结合型优替德隆纳米粒混悬液约15ml分装至西林瓶中，置于至2℃～8℃条件下考察纳米粒混悬液的粒径稳定性，具体结果如下 表所示。
结果表明，在2℃～8℃储存条件下，对比例2以注射用水作为水相溶解白蛋白所得的纳米粒径随时间逐渐增大，而本发明中以缓冲盐溶液作为水相所得的白蛋白纳米粒具有良好的粒径稳定性。
实施例14
分别取上述对比例2、实施例8和10中的白蛋白结合型优替德隆纳米粒混悬液约15ml分装至西林瓶中，置25℃条件下考察纳米粒混悬液的粒径稳定性，具体结果如下表所示。

结果表明，对比例2在室温条件下，纳米粒很快聚集沉淀，而以缓冲盐溶液作为水相，纳米粒的稳定性优于注射用水，其中有机酸盐如柠檬酸盐缓冲液(实施例10)的粒径稳定性优于无机酸盐如磷酸盐缓冲液(实施例8)。
实施例15
取实施例8、实施例10中的白蛋白结合型优替德隆纳米粒混悬液适量，加入适量冻干赋形剂后，用注射用水稀释至每1ml约含优替德隆5mg并定量分装至西林瓶，放置冷冻干燥机中，将溶液在1小时内迅速降温至-40℃，保温3～4h得冻结体，抽真空使真空度小于300pa，再将冻结体在1～2h内升温至-20℃，维持20h～48h，再在1h～2h内升温至5℃，维持2h～4h，再在1h～2h内升温至25℃，维持2h～4h，压塞，出箱。冷冻干燥完成后，加入0.9％氯化钠溶液重悬后，用美国PSS公司纳米粒径及Zeta电位分析仪Nicomp Z3000测量其粒径，测试结果如下表所示。
实施例16
取上述对比例2、实施例8、实施例10及实施例12中的冻干粉末适量用5％葡萄糖溶液溶解后，置2℃～8℃静置30分钟后，转移至25℃药品稳定性试验箱中，考察白蛋白结合型优替德隆纳米粒冷冻干燥后在室温下的粒径稳定性，具体结果如下表所示。

结果表明，对比例2的纳米粒在室温条件下很快聚集沉淀，实施例10、12的纳米粒在室温条件下，4小时内的粒径变化小于10nm，具有良好的稳定性，预示了良好的临床应用可行性。
实施例17
在此实施例中，评价了实施例10所述的白蛋白结合型优替德隆纳米粒混悬液经0.45μm过滤器串联0.22μm过滤器的可过滤性，通过过滤前后优替德隆的含量变化评价混悬液的可过滤性。
取实施例10中的白蛋白结合型优替德隆纳米粒混悬液适量，用0.45μm针头过滤器串联0.22μm针头过滤器过滤，取过滤前后的纳米粒混悬液各1ml置10ml容量瓶中，加入适 量乙腈后超声处理约10分钟使白蛋白变性沉淀，用乙腈稀释至刻度，混匀，高速离心，取上清液作为供试品溶液，测量优替德隆的含量。优替德隆含量测定方法采用HPLC法，检测波长为250nm，色谱柱为C18色谱柱，流动相为乙腈-水(60：40，v/v)，进样体积为10μl。测试结果表明实施例10中的白蛋白结合型优替德隆纳米粒混悬液具有良好的可过滤性，过滤前后，优替德隆的含量变化率小于5％。这表明本发明制备的白蛋白结合型优替德隆纳米粒具有良好的粒径均一性，并具有良好的可滤过性，使工业生产中的除菌过滤成为可能，同时具有非常高的过滤收率，适宜于工业化生产。
实施例18
在此实施例中，评价了实施例10所述的白蛋白结合型优替德隆纳米粒混悬液中白蛋白二聚体、寡聚体、多聚体的含量。
取实施例10中的白蛋白结合型优替德隆纳米粒冻干粉末适量，用注射用水稀释至每1ml约含人血白蛋白10mg，用0.45μm针头过滤器串联0.22μm针头过滤器过滤，取续滤液作为供试品溶液，测量供试品中的白蛋白二聚体、寡聚体、多聚体的含量。白蛋白结合型优替德隆纳米粒中白蛋白二聚体、寡聚体和多聚体的含量测定采用HPLC法，色谱柱为亲水硅胶高效排阻色谱柱，流动相为含1％异丙醇的pH 7.0、0.2mol/L的磷酸盐缓冲液，检测波长为280nm，流速为0.6ml/min，进样体积为20μl。测试结果表明实施例10中单剂量的白蛋白结合型优替德隆纳米粒(按优替德隆计为30mg/瓶)中含有的白蛋白寡聚体、二聚体、多聚体的和不超过15mg，远小于人血白蛋白注射液中的限制(500mg白蛋白多聚体/瓶)。该实施例表明本发明所制得的单位剂量下的白蛋白结合型优替德隆纳米粒中的白蛋白二聚体、寡聚体和多聚体杂质的总量较低，有利于提高最终产品的质量，从而提高了药物的顺应性、安全性。

Claims (23)

  1. 一种药物组合物，其包含白蛋白结合型优替德隆纳米粒，所述纳米粒包含活性成分优替德隆、人血白蛋白和药学上可接受的缓冲盐。
  2. 根据权利要求1所述的药物组合物，其中所述活性成分优替德隆包裹或吸附在人血白蛋白上。
  3. 根据权利要求1或2所述的药物组合物，其中所述药学上可接受的缓冲盐选自磷酸盐、柠檬酸盐、醋酸盐、酒石酸盐、苹果酸盐、富马酸盐、乙二胺四乙酸盐中的一种或多种。
  4. 根据权利要求1至3中任一项所述的药物组合物，其中所述纳米粒还包含蔗糖、甘露醇、葡萄糖和海藻糖中的一种或多种。
  5. 根据权利要求1至4中任一项所述的药物组合物，其中所述纳米粒的平均粒径在30～200nm的范围内。
  6. 根据权利要求1至5中任一项所述的药物组合物，其中所述药物组合物为冻干粉形式。
  7. 根据权利要求6所述的药物组合物，其中所述药物组合物还包含药学上可接受的冻干赋形剂。
  8. 根据权利要求7所述的药物组合物，其中所述药学上可接受的冻干赋形剂选自葡萄糖、果糖、麦芽糖、山梨醇、甘露醇、木糖醇、甘油、蔗糖、海藻糖、乳糖、丙氨酸、半胱氨酸、胱氨酸、组氨酸、谷氨酸、苯丙氨酸、甘氨酸、天冬氨酸、赖氨酸、亮氨酸、精氨酸、丝氨酸、色氨酸、氯化钠、硫酸锌、EDTA、右旋糖酐、磷酸氢二钠、磷酸二氢钠、碳酸氢钠、苹果酸钠、酒石酸钠、乳酸钠、人血清白蛋白、透明质酸、壳聚糖、海藻酸、羟乙基淀粉、聚维酮、聚乙二醇、聚乙烯醇、聚赖氨酸、聚天冬氨酸、泊洛沙姆、磷脂、胆固醇、明胶、胶原蛋白和鱼精蛋白中的一种或多种。
  9. 一种制备权利要求1至8中任一项所述的药物组合物的方法，其包括：
    将活性成分优替德隆溶解于有机溶剂中形成油相溶液，以及将人血白蛋白溶解或稀释于水性溶液中形成水相溶液，所述水性溶液为缓冲盐溶液；
    将优替德隆油相溶液加入人血白蛋白水相溶液中，使其形成乳液；
    将所述乳液用均质机高压均质形成纳米混悬液；
    从所述纳米混悬液中边均质边快速去除有机溶剂，得到含有白蛋白结合型优替德隆纳米粒的混悬液或粉末；以及
    任选地，将所述混悬液冷冻干燥。
  10. 根据权利要求9所述的方法，其中用于溶解优替德隆的有机溶剂选自三氯甲烷、二氯甲烷、乙酸乙酯、乙酸丙酯、乙酸丁酯、甲酸乙酯、甲醇、乙醇、丙酮、正丙醇、异丙醇、叔丁醇、甲基丁基酮、丁酮中的一种或两种或更多种的混合溶剂。
  11. 根据权利要求9或10所述的方法，其中用于溶解优替德隆的有机溶剂是三氯 甲烷或二氯甲烷与甲醇、乙醇、叔丁醇或丙酮组成的混合溶剂。
  12. 根据权利要求11所述的方法，其中三氯甲烷或二氯甲烷与甲醇、乙醇、叔丁醇或丙酮的体积比在20∶1至1∶1的范围内，例如在15∶1至5∶1的范围内。
  13. 根据权利要求9至12中任一项所述的方法，其中所述油相溶液中优替德隆的浓度在0.1mg/ml～5000mg/ml的范围内，例如在5mg/ml～2000mg/ml、20mg/ml～500mg/ml或50mg/mL～300mg/ml的范围内。
  14. 根据权利要求9至13中任一项所述的方法，其中所述缓冲盐溶液选自磷酸盐缓冲液、柠檬酸盐缓冲液、醋酸盐缓冲液、酒石酸盐缓冲液、富马酸盐缓冲液、乙二胺四乙酸盐和苹果酸盐溶液中的一种或多种。
  15. 根据权利要求9至14中任一项所述的方法，其中所述水相溶液中人血白蛋白的浓度在1mg/ml～1000mg/ml的范围内，例如在10mg/ml～200mg/ml、20mg/ml～150mg/ml或30mg/ml～100mg/ml的范围内。
  16. 根据权利要求9至15中任一项所述的方法，其中活性成分优替德隆与人血白蛋白的投料量的重量比在0.01％～99.9％的范围内，例如在80％～5％、75％～15％或70％～20％的范围内。
  17. 根据权利要求9至16中任一项所述的方法，所述方法还包括在均质形成纳米混悬液之后，向所述纳米混悬液中加入水性溶液。
  18. 根据权利要求17所述的方法，其中所述水性溶液选自注射用水、缓冲盐溶液、蔗糖溶液、甘露醇溶液、葡萄糖溶液和海藻糖溶液中的一种或多种。
  19. 根据权利要求18所述的方法，其中所述缓冲盐溶液选自磷酸盐缓冲液、柠檬酸盐缓冲液、醋酸盐缓冲液、酒石酸盐缓冲液、富马酸盐缓冲液、乙二胺四乙酸盐和苹果酸盐溶液中的一种或多种。
  20. 根据权利要求9至19中任一项所述的方法，其中通过旋转蒸发、薄膜蒸发或喷雾干燥来实现快速去除有机溶剂。
  21. 权利要求1至8中任一项所述的药物组合物在制备用于治疗或预防癌症的药物中的用途。
  22. 一种注射剂，其包含权利要求1至8中任一项所述的所述药物组合物。
  23. 一种无菌冻干粉针剂，其包含权利要求1至8中任一项所述的药物组合物。
PCT/CN2023/111308 2022-12-27 2023-08-04 含白蛋白结合型优替德隆纳米粒的药物组合物及其制备方法 WO2024139226A1 (zh)

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