WO2024053190A1 - 検査容器及び核酸検査方法 - Google Patents

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WO2024053190A1
WO2024053190A1 PCT/JP2023/021253 JP2023021253W WO2024053190A1 WO 2024053190 A1 WO2024053190 A1 WO 2024053190A1 JP 2023021253 W JP2023021253 W JP 2023021253W WO 2024053190 A1 WO2024053190 A1 WO 2024053190A1
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WO
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liquid
heating chamber
liquid storage
storage section
state
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PCT/JP2023/021253
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English (en)
French (fr)
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威史 濱
裕康 石井
大亮 衛藤
和興 込山
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富士フイルム株式会社
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Publication date
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    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12Q—MEASURING OR TESTING PROCESSES INVOLVING ENZYMES, NUCLEIC ACIDS OR MICROORGANISMS; COMPOSITIONS OR TEST PAPERS THEREFOR; PROCESSES OF PREPARING SUCH COMPOSITIONS; CONDITION-RESPONSIVE CONTROL IN MICROBIOLOGICAL OR ENZYMOLOGICAL PROCESSES
    • C12Q1/00—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions
    • C12Q1/68—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions involving nucleic acids
    • C12Q1/6813—Hybridisation assays
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12Q—MEASURING OR TESTING PROCESSES INVOLVING ENZYMES, NUCLEIC ACIDS OR MICROORGANISMS; COMPOSITIONS OR TEST PAPERS THEREFOR; PROCESSES OF PREPARING SUCH COMPOSITIONS; CONDITION-RESPONSIVE CONTROL IN MICROBIOLOGICAL OR ENZYMOLOGICAL PROCESSES
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    • C12Q1/68—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions involving nucleic acids
    • C12Q1/6844—Nucleic acid amplification reactions
    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N35/00—Automatic analysis not limited to methods or materials provided for in any single one of groups G01N1/00 - G01N33/00; Handling materials therefor
    • G01N35/08—Automatic analysis not limited to methods or materials provided for in any single one of groups G01N1/00 - G01N33/00; Handling materials therefor using a stream of discrete samples flowing along a tube system, e.g. flow injection analysis
    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N37/00—Details not covered by any other group of this subclass

Definitions

  • the present invention relates to a test container and a nucleic acid testing method.
  • test containers such as test cartridges or analysis chips that are used to perform various analyzes on specimens extracted from biological samples are known.
  • the test container includes a plurality of chambers (liquid storage portions) that contain liquid, and a flow path that connects the chambers.
  • a sample liquid is transferred from chamber to chamber using an external force such as electromagnetic force, centrifugal force, or pressure.
  • the test container is equipped with a switching valve that switches the connection state between a plurality of chambers, so that liquid can be sent from a desired chamber to another desired chamber.
  • the switching valve is a rotary valve that has a connection port connected to a flow path on the bottom surface, and which switches the flow path connected to the connection port by rotating it. It has been known.
  • JP-A-2010-78493 discloses a device comprising a plurality of chambers, a rotary valve disposed between them, a cylinder disposed within the rotary valve, and a plunger disposed vertically slidably within the cylinder.
  • a reaction vessel plate (corresponding to a test vessel) with a syringe is disclosed.
  • the test container disclosed in Japanese Unexamined Patent Application Publication No. 2010-78493 sucks and discharges liquid or gas using a syringe while the cylinder and chamber are connected by a rotary valve, thereby transferring liquid from the chamber to the cylinder or from the cylinder to the chamber. It is configured to be able to send liquid.
  • each chamber is connected to a fluid flow path through which liquid passes and an air vent flow path through which gas passes, and the air vent flow channel is connected to an air drain space. There is.
  • the volume of the air drain space increases or decreases depending on the flow of air into and out of the space.
  • a sample liquid is sent to each chamber via a fluid channel, and at this time, air in the chamber is sent to an air drain space via an air vent channel.
  • the test container disclosed in Japanese Unexamined Patent Publication No. 2010-78493 is configured to allow air to circulate inside by changing the connection state between a plurality of air vent channels provided therein and an air drain space. This allows for smooth transfer of sample liquid.
  • the reaction container contains gas, so when heated to a high temperature, gas may be mixed into the sample liquid and bubbles may be generated. .
  • the present disclosure has been made in view of the above circumstances, and an object of the present disclosure is to provide an inspection container that has a chamber that performs optical measurement while being heated, and that can suppress air bubbles and suppress a decrease in measurement accuracy. With the goal. Another object of the present invention is to provide a nucleic acid testing method using the test container.
  • the test container of the present disclosure is a test container that is removably loaded into a test device while containing a sample liquid to be tested, and includes: an input port into which the sample liquid is input; a liquid reservoir for storing the sample liquid input from the input port; A heating chamber that accommodates a sample liquid sent from a liquid reservoir and that is disposed in a heating area by a heating unit in the testing device and that can be heated; a connection port for connecting a pressure adjustment mechanism that adjusts the pressure for transferring the sample liquid; A valve that is provided with a liquid storage part for temporarily storing a sample liquid therein, and in which the liquid storage part is constantly communicated with a connection port to adjust the pressure inside the liquid storage part, and the liquid storage part is connected to a liquid storage part.
  • a valve capable of switching between the state and a third state in which both the liquid reservoir and the heating chamber are not in communication with the liquid storage part; When the valve is placed on the upstream side of the heating chamber and the opposite side of the valve is placed on the downstream side, the valve is placed on the downstream side of the heating chamber and outside the heating area, and temporarily controls the pressurized gas flowing in from the heating chamber. and an air buffer connected only to the heating chamber.
  • volume of the air buffer is Va
  • total volume of the flow path, heating chamber, and air buffer provided downstream of the liquid storage section in the second state is Vt, 10% ⁇ Va/Vt ⁇ 100 ⁇ 35% It is preferable to satisfy the following.
  • the volume of the liquid reservoir is V1
  • the volume of the liquid storage part is V2
  • the volume of the heating chamber is V3, V1>V2>V3 It is preferable to satisfy the following.
  • the heating chamber is a heating area and is disposed in a detection area by the detection unit in the inspection device, and the heating chamber is located between the heating chamber and the air buffer and is a heating area but not a detection area.
  • a reservoir connected to the chamber and the air buffer may be included.
  • the heating chamber is a space defined by a bottom surface, a top surface, and a side wall, and the height from the bottom surface to the top surface is equal to It is preferable to have a step portion that differs in height from the bottom surface to the top surface of the region on the upstream side of the downstream region by 5% or more.
  • the wall surface of the region connecting to the heating chamber of the flow path that communicates the heating chamber and the air buffer is made hydrophobic.
  • the liquid storage section may contain a reagent to be mixed with the sample liquid.
  • the reagent may include an amplification reagent for amplifying a specific nucleic acid sequence and a fluorescent probe for determining the nucleic acid sequence.
  • the valve When the liquid storage section is the first liquid storage section, the valve is the second liquid storage section that temporarily stores the sample liquid sent from the heating chamber, and the valve is the second liquid storage section that is in constant communication with the connection port. 2 further comprising a liquid storage section,
  • the third state is a state in which both the liquid reservoir and the heating chamber are not in communication with the first liquid storage part, and the heating chamber and the second liquid storage part are not in communication with each other,
  • the valve also has a fourth state in which the heating chamber and the second liquid storage section are communicated with each other, and the heating chamber and the first liquid storage section are not communicated with each other.
  • it is switchable.
  • the volume of the liquid reservoir is V1
  • the volume of the first liquid storage part is V2
  • the volume of the heating chamber is V3
  • the volume of the second liquid storage part is V4, V1>V2>V4>V3 It is preferable to satisfy the following.
  • the second liquid storage section contains a reagent to be mixed with the sample liquid.
  • the reagent may include an amplification reagent for amplifying a specific nucleic acid sequence and a fluorescent probe for determining the nucleic acid sequence.
  • a first nucleic acid testing method of the present disclosure is a nucleic acid testing method using a test container in which a pressure adjustment mechanism is connected to a connection port directly or indirectly via piping, Inject the sample liquid from the input port of the test container and store the sample liquid in the liquid reservoir, The valve remains in the first state or is switched to the first state, and the pressure adjustment mechanism depressurizes the inside of the liquid storage section to send the sample liquid from the liquid reservoir to the liquid storage section.
  • a mixed solution of the sample liquid and reagent is sent from the liquid storage part to the heating chamber by pressurizing the inside of the liquid storage part by the pressure adjustment mechanism, Switch the valve to the third state, By controlling the temperature of the mixed liquid in the heating chamber, a specific nucleic acid sequence in the mixed liquid is amplified, Irradiate the mixture with excitation light, detect the fluorescence generated from the fluorescent probe, This is a nucleic acid testing method that determines the presence or absence or concentration of a specific nucleic acid sequence.
  • a second nucleic acid testing method of the present disclosure is a nucleic acid testing method using a test container in which a pressure adjustment mechanism is connected to a connection port directly or indirectly via piping, Inject the sample liquid from the input port of the test container and store the sample liquid in the liquid reservoir, The valve remains in the first state or is switched to the first state, and the pressure adjustment mechanism decompresses the inside of the first liquid storage part to send the sample liquid from the liquid reservoir to the first liquid storage part, Switch the valve to the second state, Sending the sample liquid from the first liquid storage section to the heating chamber by pressurizing the inside of the first liquid storage section using the pressure adjustment mechanism; Switch the valve to the third state, Heat-treating the sample liquid in a heating chamber; Switch the valve to the fourth state, By an operation of reducing the pressure inside the second liquid storage part by the pressure adjustment mechanism, the sample liquid is sent from the heating chamber to the second liquid storage part, and the sample liquid and the reagent are mixed in the second liquid storage part, Sending a mixed solution of the sample liquid and
  • test container and nucleic acid testing method of the present disclosure in a chamber in which optical measurements are performed while being heated, air bubbles can be suppressed and a decrease in measurement accuracy can be suppressed.
  • FIG. 1 is a perspective view showing a schematic configuration of a test container according to a first embodiment.
  • 2 is an end view taken along line AB of the test container shown in FIG. 1.
  • FIG. FIG. 2 is a partially exploded perspective view of the test container shown in FIG. 1.
  • FIG. It is a perspective view of a main body member.
  • FIG. 3 is an exploded perspective view of a rotating member.
  • FIG. 6A is a perspective view of the rotating member main body viewed from the top side
  • FIG. 6B is a perspective view of the rotating member main body viewed from the bottom side.
  • It is a flow path structure of the test container of a 1st embodiment, and is a figure showing typically the flow path structure where a valve is in a 1st state.
  • FIG. 7 is a schematic plan view showing a modification of the air buffer.
  • FIG. 7 is a schematic plan view showing a part of a flow path structure of a modified example.
  • FIG. 7 is a schematic plan view showing a part of a flow path structure of a modified example.
  • 13 is an example of a sectional view taken along the line CD in FIG. 12.
  • FIG. 13 is another example of a sectional view taken along the line CD in FIG. 12.
  • FIG. FIG. 15A is an explanatory diagram of the problem when the heating chamber does not have a stepped portion
  • FIG. 15B is an explanatory diagram of the effect when the heating chamber is provided with a stepped portion.
  • FIG. 7 is a schematic plan view showing a part of a flow path structure of a modified example.
  • FIG. 7 is a schematic plan view showing a part of a flow path structure of a modified example. It is a figure which shows typically the flow path structure of the test container of a modification.
  • FIG. 1 is a diagram showing a schematic configuration of an inspection device.
  • FIG. 3 is a diagram showing the steps of nucleic acid testing according to the first embodiment (part 1).
  • FIG. 3 is an exploded perspective view of a rotating member.
  • FIG. 23A is a perspective view of the rotating member main body viewed from the top side
  • FIG. 23B is a perspective view of the rotating member main body viewed from the bottom side.
  • FIG. 2 is a schematic plan view showing a test container of an example.
  • FIG. 32A is an explanatory diagram of the total volume of the space downstream from the liquid storage section
  • FIG. 32B is an explanatory diagram of the volume of the air buffer.
  • FIG. 1 is a perspective view showing a test container 10 according to one embodiment
  • FIG. 2 is a schematic diagram showing an end surface of a cut section taken along line AB of the test container 10 shown in FIG.
  • FIG. 3 is a partially exploded perspective view of the test container 10, in which the flow path structure 11 inside the test container 10 is shown by broken lines.
  • FIG. 4 is a perspective view of the main body member 10A of the test container 10.
  • the test container 10 is a microchannel device that has a channel structure 11 (see FIG. 3) that includes a plurality of chambers and channels that connect the chambers.
  • the test container 10 is a test container that is removably loaded into the test device 200 (see FIG. 19) while containing a sample liquid to be tested, and is used for testing.
  • the test container 10 is composed of a main body member 10A in which recesses, holes, etc. are formed, which constitute a part of a flow path structure 11 including a flow path and a chamber, and a bottom member 10B, which constitutes the bottom surface of the flow path structure 11. has been done.
  • the main body member 10A can be made of any known resin-molded plastic material without particular limitation, but from the viewpoint of heat resistance and transparency, polycarbonate, polypropylene, cycloolefin, or silicone resin is preferable.
  • the bottom member 10B is formed of, for example, a thin plate or a film.
  • any known resin-molded plastic material can be used without particular limitation, but from the viewpoint of adhesion to the main body member 10A, the same material as the main body member 10A is preferable. Although the details will be described later, it is preferable that the bottom member 10B is made of a film from the viewpoint of increasing close contact with the heating means and being able to efficiently perform heating when heating the heating chamber 15. .
  • the test container 10 includes an input port 12, a liquid reservoir 13, a heating chamber 15, and a valve 16 disposed between the liquid reservoir 13 and the heating chamber 15. It includes a connection port 17 that connects a pressure adjustment mechanism, an air buffer 19, and first to third flow paths 18a to 18c that connect them.
  • the plurality of chambers included in the test container 10 are a liquid reservoir 13, a heating chamber 15, and a liquid storage section 30, which will be described later. In the following, when there is no need to distinguish between the liquid reservoir 13, the heating chamber 15, and the liquid storage section 30, they may be collectively referred to as chambers.
  • the input port 12 is an opening for inputting the sample liquid S.
  • the test container 10 may include a lid portion 12A that covers the input port 12 and is removably attached to the opening of the input port 12.
  • the lid portion 12A is formed to be able to be fitted into the input port 12.
  • the lid portion 12A may be attached/detached to/from the input port 12 using a snap-type cap structure or an adhesive.
  • the lid part 12A opens the input port 12 when the sample liquid is input, but closes the input port 12 except when the sample liquid is input to eliminate contamination of impurities from the outside and prevent evaporation of the sample liquid S from inside. do.
  • the sample fluid S is, for example, a liquid obtained by extracting nucleic acids from a sample collected from a subject's nasal cavity, pharynx, oral cavity, or affected area.
  • the surface where the input port 12 is provided will be referred to as the top surface of the test container 10, and the bottom member 10B side will be referred to as the bottom surface of the test container 10.
  • the top surface of the main body member 10A is the same as the top surface of the test container 10
  • the bottom surface of the main body member 10A is a surface in contact with the top surface of the bottom member 10B
  • the bottom surface of the bottom member 10B is the same as the bottom surface of the test container 10. be.
  • the liquid reservoir section 13 is a liquid storage section having the input port 12 as an opening, and stores the sample liquid S dropped from the input port 12.
  • the shape of the liquid reservoir 13 is not particularly limited, and can be arbitrarily selected from a columnar shape, a conical shape, a truncated cone shape, and the like.
  • the input port 12 is configured by the opening on the upper surface side of the first cylindrical part 22 that penetrates the main body member 10A in the thickness direction.
  • a liquid reservoir 13 is formed by the inner portion and the bottom member 10B. The liquid reservoir 13 is a space in which the sample liquid S input from the input port 12 is stored in front of the valve 16 .
  • the heating chamber 15 is a chamber that can accommodate a liquid, and accommodates the sample liquid S fed from the liquid reservoir 13 through the valve 16.
  • the heating chamber 15 is formed by a recess 25 provided on the lower surface of the main body member 10A and a bottom member 10B.
  • the heating chamber 15 is, for example, a chamber in which reaction and detection processing for testing is performed, and in the testing apparatus 200 (see FIG. 19) described later, heating processing by the heating unit 210 and detection processing by the detection unit 240 are performed.
  • the heating chamber 15 is a region (heating region 68 (see FIGS. 7 and 11)) in the test container 10 that is heated by the heating section 210 in the test device and is optically heated by the detection section 240. It is arranged in a detection area 69 (see FIG. 11) where measurement is possible.
  • a substantially rectangular recess 26 (hereinafter referred to as rectangular recess 26) is provided on the upper surface opposite to the recess 25 of the heating chamber 15 provided on the lower surface.
  • the rectangular recess 26 is arranged at a position facing the detection section 240 of the test device 200.
  • the bottom surface of the rectangular recess 26 functions as a light incident surface when light is made to enter the sample liquid S in the heating chamber 15 from the detection section 240 and as a light exit surface from which light generated from the sample liquid S is emitted.
  • the rectangular recess 26 is provided to reduce the heat capacity of the test container. Due to the presence of the rectangular recess 26, heat from the heating section 210 within the inspection device is appropriately applied to the heating chamber 15, and the temperature of the liquid within the heating chamber 15 is appropriately adjusted.
  • a pressure adjustment mechanism 60 is connected to the connection port 17. As shown in FIG. 3, a pressure adjustment mechanism 60 is connected to the connection port 17 directly or via piping or the like.
  • the pressure adjustment mechanism 60 is a syringe.
  • the connection port 17 is an opening on the upper surface side of the second cylindrical portion 27 that penetrates from the upper surface to the lower surface of the main body member 10A.
  • a connection port 65 to which the tip of the cylinder 61 is connected is fitted into the connection port 17, and the connection port 65 is configured so that the tip of the cylinder 61 is connected.
  • a second cylindrical portion 27 whose one end is constituted by the connection port 17, and a gas storage portion 29 in which gas is contained are constituted by the bottom member 10B.
  • the gas storage section 29 communicates with the flow path 18c.
  • a pressure gauge (not shown) is provided in the pipe connecting the connection port 17 and the pressure adjustment mechanism 60, and is configured to be able to control the internal pressure.
  • the pressure adjustment mechanism 60 is not limited to a syringe, and various pumps can be used.
  • the connection port 17 is configured to be connected to a pressure adjustment mechanism 60 provided externally.
  • at least a portion of the pressure adjustment mechanism 60 may be provided in the test container 10.
  • a syringe cylinder 61 may be incorporated into the test container 10. In such a case, the portion to which the tip of the cylinder 61 assembled in the test container 10 is connected becomes the connection port.
  • a rubber plug like that provided at the tip of a plunger is disposed inside the cylinder 61. It is only necessary that the inspection device side is provided with a mechanism for moving the rubber stopper within the cylinder 61.
  • the air buffer 19 is provided on the downstream side of the heating chamber 15 when the valve 16 is placed on the upstream side of the heating chamber 15 and the opposite side of the valve 16 is placed on the downstream side.
  • the air buffer 19 is located downstream of the heating chamber 15 and is heated by a heating section 210 (see FIG. 19) in the inspection device 200 when loaded into the inspection device 200, a heating region 68 (see FIG. 7). (Reference) It is a space located outside.
  • Air buffer 19 temporarily stores pressurized gas flowing from heating chamber 15 .
  • the air buffer 19 is connected only to the heating chamber 15 and is not connected to other channels, chambers, etc.
  • the air buffer 19 includes a flow path 19a provided downstream of the heating chamber 15 and an air chamber 19b.
  • the valve 16 includes a liquid storage section 30 inside.
  • the liquid storage section 30 temporarily stores the sample liquid S sent from the liquid reservoir 13 before sending it to the heating chamber 15 .
  • the valve 16 is a valve that switches the connection state between the liquid reservoir section 13, the heating chamber 15, and the liquid storage section 30 to one of the following states: a first state, a second state, and a third state. .
  • the first state is a state in which the liquid reservoir section 13 and the liquid storage section 30 are in communication with each other, and the heating chamber 15 and the liquid storage section 30 are not in communication with each other.
  • the second state is a state in which the heating chamber 15 and the liquid storage section 30 are in communication with each other, and the liquid reservoir section 13 and the liquid storage section 30 are not in communication with each other.
  • the third state is a state in which both the liquid reservoir section 13 and the heating chamber 15 are not in communication with the liquid storage section 30.
  • the valve 16 in the present test container 10 has a rotating member 40 disposed in a cylindrical recess 24 (hereinafter referred to as cylindrical recess 24) provided on the upper surface of the main body member 10A. .
  • the liquid storage section 30 is provided inside the rotating member 40.
  • FIG. 5 is an exploded perspective view of the rotating member 40. As shown in FIG. 5, the rotating member 40 is composed of a rotating member main body 41 and a lid body 42. As shown in FIG. FIG. 6A is a perspective view showing the top side of the rotating member main body 41, and FIG. 6B is a perspective view showing the bottom side of the rotating member main body 41.
  • the rotating member main body 41 includes a cylindrical part 43 having an outer diameter slightly smaller than the diameter of the cylindrical recess 24 of the main body member 10A, and a flange part 44 extending on the upper end surface of the cylindrical part 43 so as to surround the cylindrical part 43. have
  • the collar portion 44 has an outer diameter larger than the diameter of the cylindrical recess 24 .
  • the rotating member main body 41 is rotatably installed within the cylindrical recess 24 .
  • the collar portion 44 of the rotating member main body 41 is provided with four holes 44a that are used when rotating the rotating member 40.
  • the four holes 44a are arranged four-fold symmetrically about the central axis of the cylindrical portion 43.
  • the rotating member 40 is rotated by driving and rotating a claw 222 of a valve rotation mechanism 220 provided in an inspection device (see FIG. 19), which will be described later, while being inserted into the hole 44a.
  • the cylindrical portion 43 has a circularly opened recess 48 formed on one end surface thereof.
  • a column 49 is erected at the center of the circular recess 48 .
  • a through hole 49a is provided at the center of the cylinder 49.
  • the through hole 49a is located at the center of rotation of the rotating member main body 41.
  • a groove 49b extending radially from the through hole 49a is provided on the upper surface of the column 49.
  • the groove 49b is a groove that communicates the through hole 49a and the recess 48.
  • the lid body 42 is formed to be able to be fitted into the opening of the recess 48 so as to cover the opening.
  • the liquid storage portion 30 is formed by the inner wall surface of the recess 48 and the lid 42 .
  • the lid body 42 has a shape that does not inhibit the flow of gas between the liquid storage portion 30 and the groove 49b, and the groove 49b and the lid body 42 form a flow path.
  • One hole 48a communicating with the liquid storage section 30 is provided at the bottom of the recess 48 of the rotating member main body 41.
  • the bottom surface of the cylindrical recess 24 of the main body member 10A has a hole 24a communicating with the first flow path 18a, a hole 24b communicating with the second flow path 18b, and a hole 24b communicating with the third flow path 18c. It has a hole 24c.
  • the hole 24c is provided at the center of the bottom surface of the cylindrical recess 24.
  • One end of the first channel 18a is connected to the liquid reservoir 13 (see FIG. 3). Therefore, the hole 24a communicates with the liquid reservoir 13 via the first flow path 18a.
  • the second flow path 18b is connected to the heating chamber 15 at one end. Therefore, the hole 24b communicates with the heating chamber 15 via the second flow path 18b.
  • One end of the third flow path 18c is connected to the connection port 17 via the gas storage section 29. Therefore, the hole 24c communicates with the connection port 17 via the third flow path 18c.
  • the hole 24c provided at the center of the bottom surface of the cylindrical recess 24 is inserted into the cylinder 49 provided at the center of the cylindrical portion 43 of the rotating member main body 41. It coincides with the hole 49a.
  • the through hole 49a and the hole 24c are kept aligned regardless of the rotational state of the rotating member 40. Therefore, the liquid storage portion 30 is always in communication with the connection port 17 via the flow path formed by the groove 49b, the through hole 49a, the third flow path 18c, and the gas storage portion 29.
  • the hole 48a on the bottom surface of the liquid storage section 30 of the rotating member 40 and the hole 24a on the bottom surface of the cylindrical recess 24 are aligned, and the hole 48a and the hole 24b are aligned.
  • the holes 48a and 24b may be aligned with each other, or the hole 48a may be aligned with neither of the holes 24a and 24b.
  • Each of the holes 24a to 24c is provided with an O-ring 36 (see FIG. 2).
  • the O-ring 36 functions to prevent leakage from the connection between the holes when the hole 48a matches the hole 24a or the hole 24b, and when the through hole 49a matches the hole 24c.
  • any known sealing member such as a packing or a gasket can be used as a sealing means for preventing leakage without particular limitation.
  • the material of the sealing means for example, rubber materials such as nitrile rubber, urethane rubber, silicone rubber, and fluororubber, or known elastomers such as olefin and urethane can be used.
  • the sealing means may be integrally formed in the cylindrical recess 24 of the rotating member 40 or the main body member 10A.
  • the rotating member 40 is disposed in the cylindrical recess 24 of the main body member 10A, and is used with the collar 44 urged against the main body member 10A by the restraining plate 50.
  • the restraining plate 50 has a circular center hole 50a having a diameter smaller than the outer diameter of the collar portion 44 at the center (see FIG. 3).
  • the restraining plate 50 is arranged so as to overlap the edge of the flange 44, and the holes 50b provided at the four corners are aligned with the screw holes 20 provided on the top surface of the main body member 10A. It is screwed to 10A.
  • the hole 44a provided in the collar portion 44 is exposed from the center hole 50a of the restraining plate 50. This allows the pawl 222 of the valve rotation mechanism 220 to access the hole 44a when rotating the valve.
  • the restraining plate 50 is fixed to the main body member 10A with screws.
  • the method of fixing the restraining plate 50 is not limited to this, and may include a method of fixing the restraining plate 50 with a fixing claw fixed in advance to the main body member 10A, a method of welding the restraining plate 50 to the main body member 10A, etc. It may be.
  • the first flow path 18a to the third flow path 18c are all formed by recesses 28a to 28c provided on the lower surface of the main body member 10A and the bottom member 10B.
  • the first flow path 18a is a flow path that communicates with the hole 24a on the bottom surface of the cylindrical recess 24 of the valve 16 and connects the liquid reservoir 13 and the liquid storage portion 30 of the valve 16.
  • the second flow path 18b is a flow path that communicates with the hole 24b on the bottom surface of the cylindrical recess 24 of the valve 16 and connects the heating chamber 15 and the liquid storage portion 30 of the valve 16.
  • the third flow path 18c is a flow path that communicates with a hole 24c provided at the center of the bottom surface of the cylindrical recess 24 of the valve 16, and connects the liquid storage section 30 and the gas storage section 29.
  • the cross-sectional size of the first flow path 18a to third flow path 18c is, for example, approximately 0.5 mm to 1 mm wide and 0.5 mm deep.
  • 7 to 9 are schematic plan views of the channel structure 11 in the test container 10. 7 to 9 are diagrams for explaining the first to third states switched by the valve 16.
  • the hole 48a on the bottom surface of the liquid storage portion 30 of the rotating member 40 is connected to the first flow path 18a. At this time, the hole 48a coincides with the hole 24a on the bottom surface of the cylindrical recess 24.
  • the hole 48a on the bottom surface of the liquid storage portion 30 of the rotating member 40 is connected to the second flow path 18b. At this time, the hole 48a coincides with the hole 24b on the bottom surface of the cylindrical recess 24.
  • the hole 48a on the bottom surface of the liquid storage portion 30 of the rotating member 40 is in a state where it is not connected to either the first flow path 18a or the second flow path 18b. That is, the liquid storage section 30 is in a third state in which it is not communicating with either the liquid reservoir section 13 or the heating chamber 15.
  • the third state may be a state in which both the liquid reservoir section 13 and the heating chamber 15 are not in communication with the liquid storage section 30, and the rotational position of the rotating member 40 is not limited to the mode shown in FIG.
  • valve 16 is a rotary valve that can be switched between the first state, the second state, and the third state by rotating the rotary member 40 within the cylindrical recess 24 of the main body member 10A.
  • the valve 16 is not limited to the rotary valve having the above structure as long as it can realize the first to third states described above.
  • the sample liquid S is transferred by connecting the chamber containing the sample liquid S with the valve 16 and the chamber to which the sample liquid S is transferred. This is carried out by increasing or decreasing the pressure inside the section 30. Since the volume of each chamber and each flow path inside the test container is known, the desired amount of liquid can be sent from chamber to chamber by adjusting the pressure increase and decrease by the pressure adjustment mechanism while monitoring the pressure gauge. Can be done.
  • the sample liquid S input from the input port 12 is sent to the liquid reservoir 13, the liquid storage part 30, and the heating chamber 15 in this order.
  • Transfer of liquid from the liquid reservoir 13 to the liquid storage section 30 is achieved by setting the valve 16 to the first state (see FIG. 7) and reducing the internal pressure of the liquid storage section 30 by the pressure adjustment mechanism 60.
  • the plunger 62 inside the cylinder 61 is pulled outward to draw the air inside the liquid storage section 30 into the cylinder 61, thereby reducing the pressure inside the liquid storage section 30.
  • the sample liquid S in the liquid reservoir 13 is drawn into the liquid storage part 30 through the first flow path 18a. Note that the sample liquid S enters the liquid storage section 30 through the hole 48a provided on the bottom surface of the liquid storage section 30.
  • the flow path for discharging air from inside the liquid storage section 30 is constituted by the groove 49b provided in the cylinder 49 and the lid 42 that constitutes the top surface of the liquid storage section 30.
  • the sample liquid S does not enter the groove 49b and is stored in the liquid storage section 30.
  • the upper part of the liquid reservoir 13 is provided with an intake port (not shown), so that air can be sucked into the liquid reservoir 13. .
  • the intake port is equipped with a filter to remove dust.
  • Liquid feeding from the liquid storage section 30 to the heating chamber 15 is achieved by setting the valve 16 to the second state (see FIG. 8) and pressurizing the internal pressure of the liquid storage section 30 using the pressure adjustment mechanism 60.
  • the plunger 62 By pushing the plunger 62 into the cylinder 61 and pushing the air inside the cylinder 61 into the liquid storage section 30, the inside of the liquid storage section 30 is pressurized.
  • the sample liquid S in the liquid storage section 30 is pushed out to the heating chamber 15 through the second flow path 18b, and is sent to the heating chamber 15.
  • the gas in the heating chamber 15 is pressurized and flows into the air buffer 19 located on the downstream side.
  • pressurized gas is stored in the air buffer 19.
  • it is preferable to adjust the pushing amount of the plunger 62 so that the gas is discharged from the heating chamber 15 and the inside of the heating chamber 15 is filled with the sample liquid S.
  • the heating process to the heating chamber 15 is performed in a state filled with the sample liquid S, with the valve 16 in the third state (see FIG. 9), and with the heating chamber 15 closed.
  • the test container 10 can fill the heating chamber 15 with the sample liquid S. Since the air buffer 19 is connected only to the heating chamber 15, the gas contained in the heating chamber 15 before the sample liquid S is transferred to the heating chamber 15 is transferred to the air buffer 19 in a pressurized state. be accommodated in. Further, by using the valve 16, the heating chamber 15 can be easily sealed. At this time, the inside of the heating chamber 15 is sealed in a state where the pressure is higher than atmospheric pressure. Therefore, the heat treatment can be performed with the heating chamber 15 filled with the sample liquid S and with the heating chamber 15 closed. The inside of the heating chamber 15 is filled with the sample liquid S, and the sample liquid S is heated under pressure, so the generation of bubbles is suppressed even when heated at a high temperature exceeding 95°C. be able to. Furthermore, since the heating chamber 15 is filled with the sample liquid S and heated under pressure, the temperature raising and cooling properties of the sample liquid S can be improved. This makes it possible to improve inspection accuracy and inspection speed.
  • the bottom member 10B is made of a film as in this embodiment, if heating is performed with gas remaining in the heating chamber 15, the gas expands and the pressure inside the heating chamber 15 increases. There is a possibility that the bottom member 10B made of a film is pressed from inside and may peel off from the main body member 10A. However, as described above, since the air buffer 19 is provided, the heating chamber 15 is filled with the sample liquid S, and it is possible to heat the sample liquid S in a state where almost no gas remains, it is possible to suppress the separation of the bottom member 10B. can.
  • the air buffer 19 is composed of a flow path 19a and an air chamber 19b.
  • the air buffer 19 may be composed of only the flow path 19c, as shown in FIG. 10.
  • the total volume Vt is the sum of the volume of the flow path 18b, the volume of the heating chamber 15, and the volume of the air buffer 19.
  • the liquid feeding pressure can be adjusted appropriately, and bubbles remaining in the heating chamber 15 can be more effectively suppressed.
  • one surface of the heating chamber 15 is made of a film, peeling of the film can be more effectively suppressed.
  • the volume Va is adjusted appropriately. Furthermore, generation of air bubbles during heating by the heating unit 210 of the inspection device 200 can be effectively suppressed. Air in the air buffer 19 can be prevented from entering the heating chamber 15.
  • the ratio of the volume Va to the total volume Vt is more preferably 14% or more and 30% or less, and even more preferably 15% or more and 25% or less.
  • the relationship is V1>V2>V3. That is, in the testing process, it is preferable that the chamber to which the sample liquid S is sent later has a smaller volume.
  • the volume V1 of the liquid reservoir 13 is 50 ⁇ L to 300 ⁇ L
  • the volume V2 of the liquid storage portion 30 is 30 ⁇ L to 50 ⁇ L
  • the volume V3 of the heating chamber 15 is 10 ⁇ L to 30 ⁇ L.
  • volume V1 of the liquid reservoir 13 is larger than the volume V2 of the liquid storage section 30, more sample liquid S can be stored in the liquid reservoir 13 than the volume V2 of the liquid storage section 30. Then, if the volume relationship of the plurality of chambers arranged from upstream to downstream in feeding the sample liquid S in the testing process is V1>V2>V3, when the sample liquid S is fed, , the downstream chamber can be filled with the sample liquid S. Therefore, it is possible to prevent the sample liquid S from running out in the heating chamber 15 that is ultimately used for detection.
  • the test container 10 may include a reagent 70 that is reacted with the sample liquid S in the liquid storage section 30.
  • the reagent 70 is a reagent containing an amplification reagent for amplifying a specific nucleic acid sequence and a fluorescent probe for determining the nucleic acid sequence.
  • the heating chamber 15 is a heating region of the inspection device 200 and is arranged in a detection region. Thereby, the detection process can be performed while heating inside the heating chamber 15.
  • the test container 10 may include a storage section 67 between the heating chamber 15 and the air buffer 19.
  • the heating region 68 is wider than the detection region 69, and the storage section 67 is provided in a region that is the heating region 68 but not the detection region 69.
  • the pressure adjustment mechanism 60 when sending the sample liquid S to the heating chamber 15, the pressure adjustment mechanism 60 is adjusted so that the sample liquid S fills the heating chamber 15.
  • the heating chamber 15 is directly connected to the air buffer 19, the sample liquid S may enter the air buffer 19 due to a slight difference in the applied pressure.
  • the unheated specimen liquid S in the air buffer 19 returns to the heating chamber 15 side while performing the detection process on the specimen liquid S, the unheated specimen liquid S is added to the heated specimen liquid S. Mixing may cause errors in measurements.
  • the storage section 67 by providing the storage section 67, the above-mentioned measurement error can be suppressed. Since the reservoir 67 is provided in the heating region 68, when the heating chamber 15 is heated, the reservoir 67 is also heated at the same time. Therefore, if there is sample liquid S that has proceeded from the heating chamber 15 to the air buffer 19 side during liquid feeding, the sample liquid S in the storage section 67 is heated together with the sample liquid S in the heating chamber 15. Therefore, during the detection process, even if the sample liquid S in the storage section 67 returns to the heating chamber 15 side, unheated sample liquid will not be mixed, so that errors in measurement can be suppressed. Can be done.
  • the boundary between the storage section 67 and the air buffer 19 provided on the downstream side of the heating chamber 15 coincides with the boundary of the heating region 68.
  • the area upstream of the boundary position 68c of the heating region 68 of the flow path is a part of the storage section 67, and the area downstream of the boundary position 68c is a part of the air buffer 19.
  • the test container 10 may include a stepped portion 90 within the heating chamber 15.
  • the step portion 90 is provided in a downstream area that is in contact with a flow path (here, the flow path 19a that is a part of the air buffer 19) connected to the air buffer 19 in the heating chamber 15.
  • the heating chamber 15 is formed by the recess 25 formed in the main body member 10A and the bottom member 10B.
  • the top surface of the bottom member 10B forms the bottom surface of the heating chamber 15
  • the bottom surface of the recess 25 forms the top surface of the heating chamber 15
  • the side wall of the recess 25 forms the side wall of the heating chamber 15.
  • the heating chamber 15 is a space defined by a bottom surface, a top surface, and side walls.
  • FIG. 13 and 14 are cross-sectional views taken along the line CD in FIG. 12, schematically showing heating chambers 15 having different shapes of step portions 90.
  • the stepped portion 90 is, for example, provided in a downstream area in contact with the flow path 19a of the heating chamber 15, and has a height from a bottom surface 15S to a top surface 15T in an area upstream of the downstream area.
  • This is a convex step 92 that is convex toward the heating chamber 15 and is provided so as to be lower than H by 5% or more.
  • a difference ⁇ H1 between the height H1 from the bottom surface 15S to the top surface 15T in the downstream region of the heating chamber 15 and the height H on the upstream side is 5% or more of the height H.
  • the stepped portion 90 is, for example, provided in a downstream area in contact with the flow path 19a of the heating chamber 15, and has a height from a bottom surface 15S to a top surface 15T in an area upstream of the downstream area.
  • This is a concave step 94 that is concave toward the heating chamber 15 and is provided to be higher than H by 5% or more.
  • a difference ⁇ H2 between the height H2 from the bottom surface 15S to the top surface 15T in the downstream region of the heating chamber 15 and the height H on the upstream side is 5% or more of the height H.
  • the step portion 90 may be a convex step 92 as shown in FIG. 13 or a concave step 94 as shown in FIG. 14. Furthermore, the stepped portion 90 may include a plurality of unevenness extending from the upstream side to the downstream side.
  • the step portion 90 holds back the sample liquid S due to surface tension, and has the effect of temporarily damming up the sample liquid S. This allows the heating chamber 15 to be filled with the specimen liquid S before the tip of the specimen liquid S reaches the channel 19a, making it difficult for gas to remain in the heating chamber 15.
  • the effect of the stepped portion 90 will be explained in more detail with reference to FIG. 15.
  • the sample liquid S when feeding the liquid from the liquid storage section 30 to the heating chamber 15, the sample liquid S may be fed along one side within the heating chamber 15 (step A1). If the stepped portion 90 is not provided, the sample liquid S reaches the connection port with the flow path 19a before the sample liquid S reaches the entire area of the other side surface in the heating chamber 15 (step A2). Since the cross section of the connection port is sufficiently smaller than the internal cross section of the heating chamber 15, the sample liquid S is dammed up at the connection port and sent to the other side of the heating chamber 15. However, as shown in step A3 of FIG. 15A, there are cases where the gas G is sent along one side and blocks the connection port, leaving the gas G remaining in the heating chamber 15.
  • the test container 10 includes a storage section 67 between the heating chamber 15 and the air buffer 19, and A stepped portion 90 may be provided within the portion 15.
  • the step portion 90 is provided in a downstream region that is in contact with a flow path (here, a flow path that is part of the storage portion) connected to the air buffer 19 in the heating chamber 15 .
  • a flow path (here, a flow path 19a that is a part of the air buffer 19) that communicates the heating chamber 15 of the test container 10 with the air buffer 19 is connected to the heating chamber 15.
  • the inner wall surface of the region 75 may be made hydrophobic.
  • hydrophobic treatment on the inner wall surface examples include coating treatment with a hydrophobic coating agent, silane coupling treatment, and lamination of a water-repellent film.
  • the surface treatment such as hydrophobic treatment be applied to the entire inner surface, there may be a portion of the inner surface that is not surface-treated.
  • the water contact angle on the wall surface is preferably 90° or more, more preferably 120° or more, and particularly preferably 150° or more.
  • Examples of materials that exhibit hydrophobicity include hydrophobic monomers or resins containing silicone or fluorine, surfactants, or hydrophobic particles. Examples include methyltrimethoxysilane (KBM-13) from Shin-Etsu Chemical Co., Ltd., Fluorosurf (FS-1610) from Fluoro Technology Co., Ltd., Megafac RS56 from DIC Corporation, and Megafac F-780F. Examples of the hydrophobic particles include hydrophobic silica (trimethylsilyl group-modified silica AEROSIL RX200, manufactured by Nippon Aerosil Co., Ltd.).
  • the inner wall surface can be made hydrophobic by applying these materials or a mixture thereof to the inner wall surface using a known method such as brushing or spraying.
  • the air buffer is removed from the heating chamber 15 when feeding the liquid from the liquid storage section 30 to the heating chamber 15 or when heating the sample liquid S in the heating chamber 15. It is possible to suppress the sample liquid S from flowing to the 19 side.
  • a plurality of heating chambers 15A to 15C may be provided, as in the modified example test container 100 shown in FIG.
  • air buffers 19A to 19C are provided downstream of the respective heating chambers 15A to 15C.
  • the same test can be performed on one specimen in the plurality of heating chambers 15A to 15C, and the test accuracy can be improved.
  • the example shown in FIG. 18 includes three heating chambers 15A to 15C, there is no limit to the number of heating chambers.
  • FIG. 19 is a diagram showing a schematic configuration of the inspection device 200.
  • the testing device 200 is, for example, a nucleic acid testing device.
  • the inspection device 200 includes a heating section 210, a valve rotation mechanism 220, a pressure adjustment mechanism drive section 230, a detection section 240, and a processor (not shown) that controls each section.
  • the processor controls each part according to an inspection procedure according to an inspection program stored in a memory (not shown).
  • the heating unit 210 is provided at a position in contact with the bottom surface of the heating chamber 15 of the test container 10.
  • the heating unit 210 heats the liquid contained in the heating chamber 15.
  • the heating unit 210 heats the sample liquid S to a high temperature of, for example, 90° C. or higher for pretreatment. Further, the heating unit 210 heats the mixed liquid of the sample liquid S and the reagent 70 to promote nucleic acid amplification.
  • the heating unit 210 is equipped with a heater or a Peltier device, and is capable of temperature control, and performs temperature cycles in the nucleic acid amplification process.
  • a known heating mechanism can be used for the heating unit 210, and is not particularly limited.
  • the valve rotation mechanism 220 includes a mechanism for rotating the valve 16 and switching the communication state between the liquid reservoir 13 and the heating chamber 15 and the liquid storage section 30 into a first state, a second state, and a third state.
  • the valve rotation mechanism 220 includes, for example, a pawl 222 that is inserted into the hole 44a of the rotating member 40, and a rotation mechanism that rotates the pawl with the pawl 222 inserted into the hole 44a.
  • the pressure adjustment mechanism drive section 230 is connected to the pressure adjustment mechanism 60 and drives the pressure adjustment mechanism 60.
  • the pressure adjustment mechanism drive section 230 is configured with a linear actuator or the like that pushes and pulls the plunger 62.
  • the pressure adjustment mechanism drive section 230 is controlled by a processor. Since the volumes of each chamber and channel are known, the processor monitors the pressure within the liquid storage section 30 from a pressure gauge (not shown) and calculates the amount of pressure increase or decrease depending on the desired amount of liquid to be fed. Then, the processor controls the pressure adjustment mechanism drive unit 230 according to the calculated pressure increase/decrease amount.
  • the detection unit 240 detects whether a detection target object is contained in the sample liquid S in the heating chamber 15.
  • the detection unit 240 includes a light source 242, a wavelength selection filter 244, and a photodetector 246, as shown in FIG.
  • the detection unit 240 is arranged above the heating chamber 15 of the test container 10.
  • the light source 242 irradiates the heating chamber 15 with excitation light L1 of a specific wavelength via the wavelength selection filter 244.
  • the photodetector 246 detects fluorescence L2 generated from the fluorescent probe when excited by the excitation light L1. Excitation light L1 is selected according to the excitation wavelength of the fluorescent probe.
  • a filter for adjusting the intensity and light amount a lens for converging the excitation light L1, a lens for condensing the fluorescence L2 derived from the detection probe onto the photodetector 246, or an optical system may be included. .
  • the wavelength selection filter 244 is a filter that transmits only the wavelength of the light emitted from the light source 242 that corresponds to the excitation wavelength of the probe.
  • a photodetector 246 for example, a photodiode or a photomultiplier tube is applied. Further, fluorescence from a detection probe may be photographed using a camera such as a CMOS (Complementary Metal Oxide Semiconductor) or a CCD (Charge Coupled Device), and the resulting image may be analyzed and detected.
  • CMOS Complementary Metal Oxide Semiconductor
  • CCD Charge Coupled Device
  • nucleic acid testing method of the first embodiment An example of a nucleic acid testing method using the testing container 10 of the first embodiment will be described with reference to FIGS. 20 and 21.
  • a test container 10 in which a reagent 70 for nucleic acid testing is provided in a liquid storage section 30 is used.
  • the reagent 70 is a reagent containing an amplification reagent for amplifying a specific nucleic acid sequence and a fluorescent probe for determining the nucleic acid sequence.
  • a specimen 81 collected from a living body using a collection tool 80 such as a swab is immersed in an extraction liquid 82 containing a surfactant to extract nucleic acids and treat impurities.
  • an extraction liquid 82 containing a surfactant to extract nucleic acids and treat impurities.
  • a liquid containing the specimen 81 obtained by mixing the specimen 81 with the extract liquid 82 and performing nucleic acid extraction in the extract liquid 82 will be referred to as a specimen liquid S.
  • the specimen 81 is collected, for example, from the nasal cavity, pharynx, oral cavity, or affected area of the subject using the collection tool 80. or body fluids such as nasal, pharynx, or oral cavity cleaning fluids, saliva, urine, or blood.
  • any known nucleic acid extraction method can be used without particular limitations. Examples include a method using a surfactant or a chaotropic substance, and a method applying physical shear such as ultrasonic waves or a bead mill.
  • the valve 16 may be in any of the first to third states, but here, the liquid reservoir 13 and the liquid storage part 30 communicate with each other. Set it to the first state.
  • a dripping cap 86 equipped with a filter for removing coarse contaminants is attached to a container containing a sample liquid S containing a sample from which nucleic acid has been extracted in the extract liquid, and the sample liquid is filtered through the filter 84.
  • the sample liquid S is introduced into the test container 10 through the inlet 12 (step ST1).
  • the sample liquid S is stored in the liquid reservoir 13.
  • the test container 10 is loaded into the test device 200 with the sample liquid S loaded therein and the inlet 12 closed by the lid 12A.
  • the following processing is performed within the inspection device 200.
  • the plunger 62 is pulled by the pressure adjustment mechanism driving part 230 while the valve 16 is maintained in the first state, that is, the liquid reservoir part 13 and the liquid storage part 30 are in communication with each other. , the pressure inside the liquid storage section 30 is reduced. As a result, the sample liquid S in the liquid reservoir section 13 is transferred to the liquid storage section 30 (step ST2). Note that if the valve 16 is in a state other than the first state in the initial state, the valve rotation mechanism 220 switches the valve 16 to the first state and the sample liquid S is sent.
  • a reagent 70 is provided in the liquid storage section 30, and the sample liquid S transferred to the liquid storage section 30 and the reagent 70 are mixed (step ST3). Note that with the sample liquid S transferred to the liquid storage section 30, the plunger 62 may be pushed and pulled several times to promote mixing of the sample liquid S and the reagent 70.
  • the valve 16 is switched to the second state by the valve rotation mechanism 220 (step ST4). That is, the liquid storage section 30 and the heating chamber 15 communicate with each other, and the liquid reservoir section 13 and the liquid storage section 30 do not communicate with each other.
  • the plunger 62 is pushed in by the pressure adjustment mechanism drive section 230 to pressurize the inside of the liquid storage section 30.
  • the mixed liquid 70S in which the reagent 70 and the sample liquid S in the liquid storage section 30 are mixed is transferred to the heating chamber 15 (step ST5).
  • valve rotation mechanism 220 switches the valve 16 to the third state (step ST6), that is, the liquid storage section 30 is brought into a state where it does not communicate with either the liquid reservoir section 13 or the heating chamber 15. Thereby, the heating chamber 15 is in a closed state without communicating with any chamber other than the air buffer 19.
  • step ST7 a nucleic acid amplification process and a fluorescence detection process are performed on the mixed liquid 70S in the heating chamber 15 (step ST7).
  • the nucleic acid amplification process is a process in which the heating unit 210 heats the sample liquid S (here, the mixed liquid 70S) in the heating chamber 15 to amplify a specific nucleic acid sequence.
  • the nucleic acid amplification treatment method is not limited, but for example, RT-PCR method or PCR method is used.
  • thermo denaturation step a step of dissociating double-stranded DNA into single-stranded DNA at high temperature
  • annealing step a step of lowering the temperature and binding the primer to the single-stranded DNA
  • elongation step a step of lowering the temperature and binding the primer to the single-stranded DNA
  • elongation step a step of newly synthesizing double-stranded DNA
  • the temperature cycle of the heat denaturation step, annealing step, and extension step one cycle is 94° C. for 1 minute, 50 to 60° C. for 1 minute, and 72° C. for 1 to 5 minutes, which is repeated 20 to 50 times. It will be done.
  • the heat denaturation step and the annealing step may be performed at one temperature.
  • An example of such a temperature cycle is, for example, one cycle consisting of 94° C. for 1 minute and 60° C. for 1 minute, which is repeated 20 to 50 times.
  • the temperature and time of the temperature cycle in the amplification step are not particularly limited and can be arbitrarily selected depending on the performance of the polymerase and primers.
  • the fluorescence detection process is performed by the detection unit 240 located above the heating chamber 15. Excitation light L1 of a specific wavelength is irradiated from the light source 242 to the liquid mixture 70S in the heating chamber 15 via the wavelength selection filter 244.
  • the photodetector 246 detects fluorescence L2 generated from the fluorescent probe excited by the excitation light L1. For example, when the nucleic acid amplification process is a PCR method, fluorescence detection is performed every cycle of the above-mentioned temperature cycle to monitor the amplification status in real time.
  • the nucleic acid sequence is amplified in the amplification step, and the fluorescent probe labeled with this specific nucleic acid sequence is irradiated with excitation light L1, whereby fluorescence L2 is detected. be done.
  • the specific nucleic acid sequence does not exist in the sample liquid S, no fluorescence L2 is detected even if the excitation light L1 is irradiated. This makes it possible to determine the presence or absence of a specific nucleic acid sequence.
  • the air buffer 19 when sending the sample liquid S (here, mixed liquid 70S) from the liquid storage section 30 to the heating chamber 15, the heating chamber 15 can be filled with the mixed liquid 70S, and the mixed liquid 70S can be maintained in a pressurized state. Therefore, it is possible to suppress the generation of bubbles in the liquid when heating the heating chamber 15, and it is possible to improve the inspection accuracy.
  • sample liquid S here, mixed liquid 70S
  • the test container 10 of the first embodiment described above has a configuration in which the valve 16 includes one liquid storage section 30, but the test container of the present disclosure has a configuration in which the valve includes two liquid storage sections. Good too. Below, a configuration in which the valve includes two liquid storage parts will be described as the test container 110 of the second embodiment.
  • Test container of second embodiment The test container 110 (see FIG. 24) of the second embodiment has substantially the same configuration as the test container 10 of the first embodiment except for the structure of the rotating member 140. Similar to the test container 10 of the first embodiment, the test container 110 includes a main body member 10A and a bottom member 10B (see FIGS. 1 to 4). In the following drawings, the same components as those of the test container 10 are denoted by the same reference numerals, and detailed description thereof will be omitted.
  • the configuration and function of the valve 116 in the test container 110 are different from the valve 16 in the test container 10.
  • the valve 116 includes a first liquid storage section 31 and a second liquid storage section 32.
  • the first liquid storage section 31 temporarily stores the sample liquid S sent from the liquid reservoir 13 before sending it to the heating chamber 15 .
  • the second liquid storage section 32 temporarily stores the sample liquid S sent from the heating chamber 15 .
  • the valve 116 changes the connection state between the liquid reservoir 13 and the heating chamber 15 and the first liquid storage part 31 and the second liquid storage part 32 into the following first state, second state, and third state. This is a valve that switches between the fourth state and the fourth state.
  • the first state is a state in which the liquid reservoir section 13 and the first liquid storage section 31 are communicated with each other. Note that in the first state of this example, the heating chamber 15 and the first liquid storage section 31 do not communicate with each other.
  • the second state is a state in which the heating chamber 15 and the first liquid storage section 31 are in communication with each other, and the liquid reservoir section 13 and the first liquid storage section 31 are not in communication with each other.
  • the third state is a state in which both the first liquid storage section 31 and the second liquid storage section 32 are not in communication with either the liquid reservoir section 13 or the heating chamber 15 .
  • the fourth state is a state in which the heating chamber 15 and the second liquid storage section 32 are in communication with each other, and the heating chamber 15 and the first liquid storage section 31 are not in communication with each other.
  • the valve 116 in the present test container 110 has a rotating member 140 disposed in a cylindrical recess 24 (hereinafter referred to as cylindrical recess 24) provided on the upper surface of the main body member 10A.
  • the first liquid storage section 31 and the second liquid storage section 32 are provided inside the rotating member 140.
  • FIG. 22 is an exploded perspective view of the rotating member 140. As shown in FIG. 22, the rotating member 140 is composed of a rotating member body 141 and a lid 142. As shown in FIG. FIG. 23A is a perspective view showing the top side of the rotating member main body 141, and FIG. 24B is a perspective view showing the bottom side of the rotating member main body 141.
  • the rotating member main body 141 includes a cylindrical portion 143 having an outer diameter slightly smaller than the diameter of the cylindrical recess 24 of the main body member 10A, and a flange portion 44 extending on the upper end surface of the cylindrical portion 143 so as to surround the cylindrical portion 143. have
  • the collar portion 44 has an outer diameter larger than the diameter of the cylindrical recess 24 .
  • the rotating member main body 141 is rotatably installed within the cylindrical recess 24 .
  • the collar portion 44 of the rotating member main body 141 is provided with four holes 44a that are used when rotating the rotating member 40.
  • the four holes 44a are arranged four-fold symmetrically about the central axis of the cylindrical portion 143.
  • the rotating member 140 is rotated by driving and rotating the claw 222 of the valve rotation mechanism 220 provided in the above-mentioned inspection device 200 (see FIG. 19) while being inserted into the hole 44a.
  • the cylindrical portion 143 has two recesses 45 and 46 (hereinafter referred to as half-moon recesses 45 and 46) that open in a half-moon shape on one end surface thereof.
  • the two half-moon-shaped recesses 45 and 46 are arranged symmetrically across a separation wall 47 that includes the center of the cylindrical portion 143 and extends in the radial direction.
  • a through hole 47a is provided that penetrates from the upper surface to the lower surface of the cylindrical portion 143.
  • a groove 47b extending from the through hole 47a along one side of the radial direction is provided on the upper surface of the separation wall 47, and one end of the groove 47b is connected to a groove 47c provided perpendicularly to the direction in which the groove 47b extends. It is connected to the.
  • the groove 47c is a groove that communicates with the two semicircular recesses 45 and 46, respectively.
  • the lid body 142 is formed to be able to be fitted into the openings of the semicircular recesses 45 and 46 so as to cover them.
  • the first liquid storage portion 31 is formed by the inner wall surface of the semicircular recess 45 and the lid 142.
  • the second liquid storage section 32 is formed by the inner wall surface of the semicircular recess 46 and the lid 142.
  • the lid body 142 has a shape that does not obstruct the flow of gas between the first liquid storage part 31 and the groove 47c and between the second liquid storage part 32 and the groove 47c, and the lid body A flow path is formed by 42.
  • One hole 45a that communicates with the first liquid storage section 31 is provided on the bottom surface of the half-moon-shaped recess 45 of the rotating member main body 141.
  • one hole 46 a communicating with the second liquid storage section 32 is provided on the bottom surface of the half-moon-shaped recess 46 of the rotating member main body 141 .
  • the hole 24c provided at the center of the bottom of the cylindrical recess 24 coincides with the through hole 47a provided at the center of the cylindrical portion 143 of the rotating member main body 141. do.
  • the through hole 47a and the hole 24c are kept aligned regardless of the rotational state of the rotating member 140. Therefore, the first liquid storage section 31 and the second liquid storage section 32 are always connected via the flow path formed by the grooves 47c and 47b, the through hole 47a, the third flow path 18c, and the gas storage section 29. It is in communication with the mouth 17.
  • the first liquid storage part 31 and the second liquid storage part 32 are the flow path formed by the groove 47c and the groove 47b, and the through hole 47a, the third flow path 18c, and the gas storage part 29 are the first liquid storage part 31 and the flow path formed by the groove 47b.
  • This is an intake/exhaust passage 35 common to the first liquid storage section 31 and the second liquid storage section 32 that connects the second liquid storage section 32 to the connection port 17, respectively.
  • the first liquid storage section 31 and the second liquid storage section 32 have a common suction/exhaust path 35, when the first liquid storage section 31 is pressurized, the second liquid storage section 32 is pressurized at the same time.
  • the second liquid storage section 32 is simultaneously depressurized.
  • the hole 45a on the bottom surface of the first liquid storage section 31 of the rotating member 140 is aligned with the hole 24a on the bottom surface of the cylindrical recess 24, and the hole 45a and A state where the hole 46a on the bottom surface of the second liquid storage part 32 and the hole 24b match, a state where the hole 45a does not match with either of the holes 24a and 24b, and a state where the hole 46a matches the hole 24a and the hole 24b.
  • 24b may be in a state where none of them match.
  • 24 to 27 are schematic plan views of the channel structure 111 in the test container 110. 24 to 27 are diagrams for explaining the first to fourth states switched by the valve 116.
  • the hole 45a at the bottom of the first liquid storage portion 31 of the rotating member 140 is connected to the first flow path 18a. At this time, the hole 45a coincides with the hole 24a on the bottom surface of the cylindrical recess 24.
  • the first liquid storage section 31 and the heating chamber 15 are not in communication with each other.
  • the hole 46a on the bottom surface of the second liquid storage portion 32 of the rotating member 140 is not connected to either the first flow path 18a or the second flow path 18b. That is, the heating chamber 15 does not communicate with either the first liquid storage section 31 or the second liquid storage section 32.
  • the hole 45a on the bottom surface of the first liquid storage portion 31 of the rotating member 140 is connected to the second flow path 18b. At this time, the hole 45a coincides with the hole 24b on the bottom surface of the cylindrical recess 24.
  • the hole 46a on the bottom surface of the rotating member 140 is not connected to either the first flow path 18a or the second flow path 18b. That is, the second liquid storage section 32 does not communicate with either the liquid reservoir section 13 or the heating chamber 15.
  • the hole 45a on the bottom surface of the first liquid storage portion 31 of the rotating member 140 is in a state where it is not connected to either the first flow path 18a or the second flow path 18b. That is, the first liquid storage section 31 is not in communication with either the liquid reservoir section 13 or the heating chamber 15, and the second liquid storage section 32 is not in communication with either the liquid reservoir section 13 or the heating chamber 15. state.
  • the third state may be a state in which both the liquid reservoir section 13 and the heating chamber 15 are not in communication with either the first liquid storage section 31 or the second liquid storage section 32, and the rotational position of the rotation member 140 is The present invention is not limited to 26 aspects.
  • valve 116 is a rotary valve that can switch between the first state, the second state, the third state, and the fourth state by rotating the rotary member 140 within the cylindrical recess 24 of the main body member 10A.
  • the valve 116 is not limited to the rotary valve having the above structure as long as it can realize the first to fourth states.
  • the sample liquid S is transferred by connecting the chamber containing the sample liquid S with the chamber containing the sample liquid S by the valve 116, and then connecting the chamber containing the sample liquid S to the chamber to which the sample liquid S is transferred. This is carried out by increasing or decreasing the pressure within the liquid storage section 31 and/or the second liquid storage section 32.
  • the sample liquid S input from the input port 12 is transferred to the liquid reservoir 13, the first liquid storage section 31, the heating chamber 15, the second liquid storage section 32, and the heating chamber.
  • the liquids are fed in the order of 15.
  • Liquid feeding from the liquid reservoir 13 to the first liquid storage section 31 is achieved by setting the valve 116 to the first state (see FIG. 24) and reducing the internal pressure of the first liquid storage section 31 by the pressure adjustment mechanism 60. Ru.
  • the plunger 62 inside the cylinder 61 is pulled outward to draw the air inside the first liquid storage section 31 into the cylinder 61, thereby reducing the pressure inside the first liquid storage section 31.
  • the sample liquid S in the liquid reservoir 13 is drawn into the first liquid storage part 31 through the first flow path 18a. Note that the sample liquid S enters the first liquid storage section 31 through the hole 45a provided on the bottom surface of the first liquid storage section 31.
  • a flow path for discharging air from inside the first liquid storage section 31 is constituted by a groove 47c provided in the separation wall 47 and a lid 42 that constitutes the top surface of the first liquid storage section 31. Therefore, the sample liquid S is stored in the first liquid storage section 31 without entering the groove 47c.
  • the upper part of the liquid reservoir 13 is provided with an air intake port (not shown), so that air can be sucked into the liquid reservoir 13. ing.
  • the intake port is equipped with a filter to remove dust.
  • Liquid feeding from the first liquid storage section 31 to the heating chamber 15 is achieved by setting the valve 116 to the second state (see FIG. 25) and pressurizing the internal pressure of the first liquid storage section 31 using the pressure adjustment mechanism 60. .
  • the plunger 62 into the cylinder 61 and pushing the air inside the cylinder 61 into the first liquid storage section 31 the inside of the first liquid storage section 31 is pressurized.
  • the sample liquid S in the first liquid storage section 31 is pushed out to the heating chamber 15 through the second flow path 18b, and is sent to the heating chamber 15.
  • Liquid feeding from the heating chamber 15 to the second liquid storage section 32 is achieved by setting the valve 116 to the fourth state (see FIG. 27) and reducing the internal pressure of the second liquid storage section 32 by the pressure adjustment mechanism 60. .
  • the inside of the second liquid storage section 32 is depressurized.
  • the sample liquid S in the heating chamber 15 is drawn into the second liquid storage section 32 through the second flow path 18b.
  • the sample liquid S enters the second liquid storage section 32 through the hole 46a provided on the bottom surface of the second liquid storage section 32.
  • a flow path for discharging air from inside the second liquid storage section 32 is constituted by a groove 47c provided in the separation wall 47 and a lid 42 that constitutes the top surface of the second liquid storage section 32. Therefore, the sample liquid S is stored in the second liquid storage section 32 without entering the groove 47c.
  • Liquid feeding from the second liquid storage section 32 to the heating chamber 15 is achieved by setting the valve 116 to the fourth state (see FIG. 27) and pressurizing the internal pressure of the second liquid storage section 32 by the pressure adjustment mechanism 60. .
  • the plunger 62 into the cylinder 61 and pushing the air inside the cylinder 61 into the second liquid storage section 32 the inside of the second liquid storage section 32 is pressurized. Thereby, the sample liquid S in the second liquid storage section 32 is pushed out to the heating chamber 15 through the second flow path 18b, and is sent to the heating chamber 15.
  • the valve 116 allows the sample liquid S sent from the liquid reservoir 13 to be sent from the heating chamber 15 and the first liquid storage section 31 that temporarily accommodates the sample liquid S sent from the liquid reservoir 13 before being sent to the heating chamber 15.
  • a second liquid accommodating section for temporarily accommodating the sample liquid S is provided inside.
  • the heating chamber 15 can be easily sealed. At this time, the inside of the heating chamber 15 is sealed in a state where the pressure is higher than atmospheric pressure.
  • heating the heating chamber 15 is done with the heating chamber 15 sealed, thereby preventing evaporation of the sample liquid S and generation of bubbles in the sample liquid S. can be suppressed. Since heating is performed while the inside of the heating chamber 15 is pressurized, the temperature raising and cooling properties of the sample liquid S can be improved. Therefore, it is possible to improve inspection accuracy and inspection speed.
  • the volume of the heating chamber 15 is V3, V1 It is preferable that the relationship is >V2>V4>V3. That is, in the testing process, it is preferable that the chamber to which the sample liquid S is sent later has a smaller volume. Note that the heating chamber 15 is the chamber to which the sample liquid S is sent once during the testing process, but is also the last chamber to be sent, so it is considered the most downstream chamber in the delivery of the sample liquid S in the testing process. I'm thinking.
  • the volume V1 of the liquid reservoir 13 is 50 ⁇ L to 300 ⁇ L
  • the volume V2 of the first liquid storage portion 31 is 50 ⁇ L
  • the volume V4 of the second liquid storage portion 32 is 20 ⁇ L to 40 ⁇ L
  • the volume V3 of the heating chamber 15 is 10 ⁇ L. ⁇ 30 ⁇ L, etc.
  • volume V1 of the liquid reservoir 13 is larger than the volume V2 of the first liquid storage part 31, more sample liquid S can be stored in the liquid reservoir 13 than the volume V2 of the first liquid storage part 31. Then, if the relationship between the volumes of the plurality of chambers arranged from the upstream side to the downstream side when sending the sample liquid S in the testing process is V1>V2>V4>V3, the sample liquid S was sent. In this case, the downstream chamber can be filled with the sample liquid S. Therefore, it is possible to prevent the sample liquid S from running out in the heating chamber 15 that is ultimately used for detection.
  • the test container 110 may include a reagent 70 that is reacted with the sample liquid S in the second liquid storage section 32.
  • the reagent 70 is a reagent containing an amplification reagent for amplifying a specific nucleic acid sequence and a fluorescent probe for determining the nucleic acid sequence.
  • valve rotation mechanism 220 moves the valve 116 of the inspection container 110 into the first state, the second state, the third state, and the third state. It suffices if the configuration is switchable to four states.
  • nucleic acid testing method of second embodiment An example of a nucleic acid testing method using the test container 110 of the second embodiment will be described with reference to FIGS. 28 to 30.
  • a test container 110 is used in which the second liquid storage section 32 is equipped with a reagent 70 for nucleic acid testing.
  • the reagent 70 is a reagent containing an amplification reagent for amplifying a specific nucleic acid sequence and a fluorescent probe for determining the nucleic acid sequence.
  • a specimen 81 collected from a living body using a collection tool 80 such as a swab is immersed in an extraction liquid 83 containing a surfactant and ProK (proteinase K) to extract nucleic acids. and dispose of impurities.
  • a liquid containing the sample 81 obtained by mixing the sample 81 with the extract liquid 83 and performing nucleic acid extraction in the extract liquid 83 will be referred to as a sample liquid S.
  • the specimen 81 is collected, for example, from the nasal cavity, pharynx, oral cavity, or affected area of the subject using the collection tool 80. or body fluids such as nasal, pharynx, or oral cavity cleaning fluids, saliva, urine, or blood.
  • any known nucleic acid extraction method can be used without particular limitation. Examples include a method using a surfactant or a chaotropic substance, and a method applying physical shear such as ultrasonic waves or a bead mill.
  • the valve 116 may be in any of the first to fourth states. It is set to the first state of communication.
  • a dripping cap 86 equipped with a filter for removing coarse contaminants is attached to a container containing a sample liquid S containing a sample from which nucleic acid has been extracted in the extract liquid, and the sample liquid is filtered through the filter 84.
  • the sample liquid S is introduced from the input port 12 of the test container 110 (step ST11).
  • the sample liquid S is stored in the liquid reservoir 13.
  • the test container 110 is loaded into the test device 200 with the sample liquid S loaded therein and the inlet 12 closed by the lid 12A.
  • the following processing is performed within the inspection device 200.
  • the plunger 62 is moved by the pressure adjustment mechanism drive section 230 while the valve 116 is maintained in the first state, that is, with the liquid reservoir section 13 and the first liquid storage section 31 communicating with each other. Then, the pressure inside the first liquid storage section 31 is reduced. As a result, the sample liquid S in the liquid reservoir 13 is transferred to the first liquid storage section 31 (step ST12). Note that if the valve 116 is in a state other than the first state in the initial state, the valve rotation mechanism 220 switches the valve 116 to the first state and the sample liquid S is sent.
  • valve rotation mechanism 220 switches the valve 116 to the second state (step ST13). That is, the heating chamber 15 and the first liquid storage section 31 communicate with each other, and the liquid reservoir section 13 and the first liquid storage section 31 do not communicate with each other.
  • the pressure adjustment mechanism drive section 230 pushes the plunger 62 to pressurize the inside of the first liquid storage section 31.
  • the sample liquid S is transferred from the first liquid storage section 31 to the heating chamber 15 (step ST14).
  • the valve rotation mechanism 220 switches the valve 116 to the third state (step ST15). That is, the first liquid storage section 31 and the second liquid storage section 32 are in a state where they do not communicate with either the liquid reservoir section 13 or the heating chamber 15. Thereby, the heating chamber 15 is in a closed state without communicating with any other chamber.
  • a pretreatment is performed on the sample liquid S in the heating chamber 15 (step ST16).
  • the heating unit 210 heats to, for example, 90° C. or higher.
  • ProK in the sample liquid S is deactivated.
  • valve rotation mechanism 220 switches the valve 116 to the fourth state (step ST17). That is, the heating chamber 15 and the second liquid storage section 32 are communicated with each other, and the heating chamber 15 and the first liquid storage section 31 are not communicated with each other.
  • the plunger 62 is pulled by the pressure adjustment mechanism drive section 230 to reduce the pressure inside the second liquid storage section 32 .
  • the sample liquid S in the heating chamber 15 is transferred to the second liquid storage section 32 (step ST18).
  • a reagent 70 is provided in the second liquid storage section 32, and the sample liquid S transferred to the second liquid storage section 32 and the reagent 70 are mixed (step ST19). Note that with the sample liquid S transferred to the second liquid storage section 32, the plunger 62 may be pushed and pulled several times to promote mixing of the sample liquid S and the reagent 70.
  • the plunger 62 is pushed in by the pressure adjustment mechanism drive section 230 to pressurize the inside of the second liquid storage section 32.
  • the mixed liquid 70S in which the reagent 70 and the sample liquid S are mixed in the second liquid storage section 32 is transferred to the heating chamber 15 (step ST20).
  • step ST21 a state in which the first liquid storage section 31 and the second liquid storage section 32 are not in communication with either the liquid reservoir section 13 or the heating chamber 15. shall be. Thereby, the heating chamber 15 is in a closed state without communicating with any other chamber.
  • a nucleic acid amplification process and a fluorescence detection process are performed on the liquid mixture 70S in the heating chamber 15 (step ST22).
  • the sample liquid S before pretreatment is temporarily held in the first liquid storage section 31, and after pretreatment is performed in the heating chamber 15, the pretreated sample liquid S is transferred to the first liquid storage section. 31 and mixed with the reagent 70. Therefore, the sample liquid S that has not been pretreated and the sample liquid S that has been pretreated are not stored in the same chamber (here, the first liquid storage section 31). Therefore, since the untreated sample liquid S is not mixed into the sample liquid S after the pretreatment, uninactivated ProK is not mixed into the sample liquid S after the pretreatment. Therefore, good nucleic acid amplification can be achieved and test accuracy can be improved.
  • the presence or absence of nucleic acids is determined by a fluorescence method using a fluorescent probe, but methods for detecting the presence or absence of nucleic acids are not limited to the fluorescence method.
  • Other detection methods such as nucleic acid chromatography, light scattering, colorimetry, sequencing and electrochemical methods may also be used. These can be realized by appropriately changing the detection section, and the test container may be equipped with a reagent containing a probe corresponding to each detection method instead of the fluorescent probe.
  • the nucleic acid test was mentioned as a test using the test containers 10 and 110, but the test containers 10 and 110 are applicable not only to nucleic acid tests but also to other genetic tests, microbial tests, etc.
  • FIG. 31 is a plan view showing the appearance of the test container of the example.
  • the test container of this example has substantially the same configuration as the test container 110 of the second embodiment described with reference to FIGS. 22 to 27.
  • the same components as those of the test container 110 of the second embodiment are given the same reference numerals.
  • Examples 1 to 7 were prepared in which the volume Va of the air buffer 19 was changed as shown in Table 1.
  • the total volume of the flow path 18b, the heating chamber 15, and the air buffer 19 provided on the downstream side of the liquid storage section 31 was set to Vt, and the volumes of the flow path 18b and the heating chamber 15 were fixed.
  • the total volume Vt is the sum of the volumes of spaces provided on the downstream side of the liquid storage section 31 as shown in FIG. 32A.
  • the volume Va of the air buffer 19 is the sum of the volume of the flow path 19a and the volume of the air chamber 19b shown in FIG. 32B.
  • Polycarbonate was used as the material for the main body member 10A and the rotating member 140. Specifically, it was formed by cutting using PC1600 manufactured by Takiron C.I. A silicone film GFSX6000 (thickness 0.3 mm) manufactured by Tomita Matex Co., Ltd. is sandwiched between the main body member 10A and the rotating member 140 as a sealing material, and the main body is fixed by using a restraining plate 50 from above and screws 51. The member 10A, the sealing material, and the rotating member 140 were brought into contact. For the bottom member 10B, PCR sealing film #MSC1001 manufactured by Bio-RAD was used. A test container 110 was obtained by attaching the bottom member 10B to the bottom surface of the main body member 10A.
  • a Terumo syringe SS-02SZ was connected to the connection port 65 via an air hose 160.
  • the cylinder 61 was fixed to a non-moving part and the plunger 62 was fixed to the stage using an automatic X-axis stage KXL06050-N2-C manufactured by Suruga Seiki Co., Ltd. and a stepping motor controller DS2000A.
  • the plunger 62 was made movable relative to the cylinder 61.
  • the plunger 62 slid within the cylinder 61 as the stage moved, making it possible to feed the sample liquid.
  • the rotating member 140 was rotated while the stage position was fixed and the pressurized state was maintained, thereby sealing the heating chamber 15.
  • the rotation of the rotating member 140 that is, the switching of the valve 116, was performed manually each time.
  • a pressure gauge 162 was connected between the connection port 65 and the cylinder 61 to monitor the pressure during liquid feeding.
  • test For each example, as a test, processing was performed in accordance with steps ST11 to ST16 of the nucleic acid testing method described with reference to FIGS. 28 and 29. First, 50 ⁇ L of water was dropped as a sample liquid into the input port 12 (step ST11), the plunger 62 was pulled in, and the sample liquid was transferred to the first liquid storage section 31 (step ST12). Next, the valve 116 was switched to connect the first liquid storage section 31 and the heating chamber 15 (step ST13), the plunger 62 was pushed in, and the sample liquid was sent to the heating chamber 15 while monitoring the pressure with the pressure gauge 162. (Step ST14).
  • the pressure when feeding the sample liquid to the heating chamber 15, when the leading edge of the sample liquid reached the air buffer 19, the pressure was fixed and the liquid feeding was stopped.
  • the pressure when this liquid feeding was stopped was defined as the liquid feeding pressure (see Table 1).
  • the valve 116 was switched to seal the heating chamber (step ST15), and the heating chamber 15 was heated at 95° C. for 5 minutes using a heater (step ST16). The effects of heating in the heating chamber 15, particularly the generation of bubbles and the occurrence of delamination in the bottom member 10B, were confirmed.
  • Table 1 summarizes the volume Va of the air buffer, the total volume Vt of the flow path 18b, the heating chamber 15, and the air buffer 19, the liquid feeding pressure, the heating evaluation 1, and the heating evaluation 2 for each example.
  • Example 1 A test container was manufactured according to the above manufacturing method, with Va set at 4.4 ⁇ L (microliter) and Vt set at 34.3 ⁇ L. The liquid feeding pressure was 198 kPa, and no bubbles were observed due to heating, but slight delamination was observed around the heating chamber.
  • Example 2 A test container was prepared in the same manner as in Example 1 except that Va was set to 5.2 ⁇ L and Vt was set to 35.1 ⁇ L. The liquid feeding pressure was 154 kPa, and no bubbles were observed due to heating, and no delamination occurred.
  • Example 3 A test container was prepared in the same manner as in Example 1 except that Va was set to 5.9 ⁇ L and Vt was set to 35.8 ⁇ L. The liquid feeding pressure was 121 kPa, and no bubbles were observed due to heating, and no delamination occurred.
  • Example 4 A test container was prepared in the same manner as in Example 1 except that Va was set to 7.7 ⁇ L and Vt was set to 37.6 ⁇ L. The liquid feeding pressure was 83 kPa, and no bubbles were observed due to heating, and no delamination occurred.
  • Example 5 A test container was produced in the same manner as in Example 1 except that Va was set to 8.7 ⁇ L and Vt was set to 38.6 ⁇ L. The liquid feeding pressure was 72 kPa, and no bubbles were observed due to heating, and no delamination occurred.
  • Example 6 A test container was produced in the same manner as in Example 1 except that Va was set to 12.7 ⁇ L and Vt was set to 42.6 ⁇ L. The liquid feeding pressure was 42 kPa, and although some bubbles were observed to be generated due to heating, no delamination occurred.
  • Example 7 A test container was prepared in the same manner as in Example 1 except that Va was set to 15.0 ⁇ L and Vt was set to 44.9 ⁇ L.
  • the liquid feeding pressure was 20 kPa, and although bubbles were observed to be generated due to heating, the effect on the detection section was slight. Further, no delamination occurred.
  • test containers of Examples 1 to 7 were test containers with no practical problems. All examples are 10% ⁇ Va/Vt ⁇ 100 ⁇ 35% This is an example that satisfies the following.
  • Va/Vt is more preferably 14% or more and 30% or less, and even more preferably 15% or more and 25% or less.
  • a test container that is removably loaded into a test device while containing a sample liquid to be tested, an input port into which the sample liquid is input; a liquid reservoir for storing the sample liquid input from the input port; a heating chamber that accommodates the sample liquid sent from the liquid reservoir and is disposed in a heating area by a heating unit in the testing device and is heatable; a connection port for connecting a pressure adjustment mechanism that adjusts the pressure for transferring the sample liquid; A valve in which a liquid storage part for temporarily storing the sample liquid is provided inside, and the liquid storage part is constantly communicated with the connection port in order to adjust the pressure inside the liquid storage part, a first state in which the liquid reservoir and the liquid storage are in communication, and the heating chamber and the liquid storage are not in communication; and a first state in which the heating chamber and the liquid storage are in communication and the liquid storage is in communication.
  • the heating chamber is located in the heating area and in the detection area by the detection unit in the inspection device, From Supplementary Note 1, further comprising a storage section connected to the heating chamber and the air buffer in a region between the heating chamber and the air buffer that is the heating region and is not the detection region.
  • the heating chamber is a space defined by a bottom surface, a top surface, and a side wall, In a downstream area in contact with a flow path connected to the air buffer in the heating chamber, the height from the bottom surface to the top surface is from the bottom surface in an area upstream of the downstream area in the heating chamber.
  • the test container according to any one of Supplementary Notes 1 to 4, which has a step portion that differs by 5% or more in height to the top surface.
  • Appendix 8 The test container according to appendix 7, wherein the reagent includes an amplification reagent for amplifying a specific nucleic acid sequence and a fluorescent probe for determining the nucleic acid sequence.
  • the valve is a second liquid storage section that temporarily stores the sample liquid sent from the heating chamber, and is constantly connected to the connection port. further comprising a second liquid storage section in communication with the second liquid storage section;
  • the third state is a state in which both the liquid reservoir and the heating chamber are not in communication with the first liquid storage part, and the heating chamber and the second liquid storage part are not in communication with each other,
  • the valve communicates the heating chamber and the second liquid storage portion, and communicates the heating chamber and the first liquid storage portion.
  • the test container according to any one of Supplementary Notes 1 to 8, wherein the test container can also be switched to a fourth state in which it does not communicate.
  • Appendix 14 A nucleic acid testing method using the test container according to appendix 12, wherein the pressure adjustment mechanism is connected to the connection port directly or indirectly via piping, Injecting the sample liquid from the input port of the test container to accommodate the sample liquid in the liquid reservoir, The sample liquid is transferred from the liquid reservoir to the first liquid storage section by keeping the valve in the first state or switching it to the first state and reducing the pressure inside the first liquid storage section using the pressure adjustment mechanism.

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Abstract

検査容器及び検査容器を用いた核酸検査方法において、検体容器は、検体液が投入される投入口と、液溜め部と、加熱チャンバと、検体液を移送する圧力を調整する圧力調整機構を接続する接続口と、液体収容部が内部に設けられたバルブであって、液溜め部と液体収容部とを連通する第１状態と、加熱チャンバと液体収容部とを連通する第２状態と、液溜め部及び加熱チャンバの両方と液体収容部とが連通しない第３状態とを切り替え可能なバルブと、加熱チャンバに対してバルブを上流側、バルブの反対側を下流側とした場合において、加熱チャンバの下流側で、かつ加熱領域外に配置され、加熱チャンバから流入する加圧された気体を一時的に貯留するエアーバッファであって、加熱チャンバにのみ接続されたエアーバッファとを備える。

Description

検査容器及び核酸検査方法
　本発明は、検査容器及び核酸検査方法に関する。
　生体試料から抽出された検体に対して各種分析を行うために用いられる検査用カートリッジあるいは分析チップなどの検査容器が知られている。例えば、検査容器は、液体を収容する複数のチャンバ（液体収容部）と、チャンバ間を接続する流路とを備えている。検査容器においては、電磁力、遠心力あるいは圧力などの外力を用いて、チャンバからチャンバへ検体液が送液される。検査容器としては、複数のチャンバ間の接続状態を切り替える切替バルブを備え、所望のチャンバから所望の他のチャンバへ液体を送液可能とする構成も知られている。
　切替バルブとしては、特開２０２０－０２０８０７号公報に記載のように、底面に流路と接続する接続ポートを備えたバルブであって、回転させることによって接続ポートに接続する流路を切り替える回転バルブが知られている。
　特開２０１０－７８４９３号公報には、複数のチャンバとその間に配置された回転バルブと、回転バルブ内に配置されたシリンダと、シリンダ内に上下方向に摺動可能の配置されたプランジャを備えたシリンジを備えた反応容器プレート（検査容器に相当する）が開示されている。特開２０１０－７８４９３号公報の検査容器は、回転バルブによりシリンダとチャンバが接続された状態でシリンジにより液体あるいは気体の吸引と吐出を行うことで、チャンバからシリンダ内あるいはシリンダ内からチャンバへ液体を送液可能に構成されている。
　特開２０１０－７８４９３号公報において、各チャンバには、液体が通過する流体流路と、気体が通過するエアー抜き流路とが接続されており、エアー抜き流路はエアードレイン空間に接続されている。エアードレイン空間は、その空間内への空気の出入りに応じて容積が増減する。それぞれのチャンバへは流体流路を介してサンプル液が送液され、この際、チャンバ内の空気は、エアー抜き流路を介してエアードレイン空間に送られる。特開２０１０－７８４９３号公報の検査容器は、内部に設けられた複数のエアー抜き流路と、エアードレイン空間との接続状態を変化させる等により、内部でエアーが循環可能に構成されている。これにより、サンプル液のスムーズな送液を実現している。
　反応容器内の検体液における反応を光学的に測定する場合、検体液内に気泡が含まれていると測定精度が低下する。検体液を加熱することにより反応を促進させる処理を行いながら、光学測定を行う場合には、加熱により気泡が生じることが多く、測定精度の低下が顕著になる。例えば、特開２０１０－７８４９３号公報の検査容器においては、反応容器内には気体が含まれているため、高温加熱した場合には検体液内に気体が混入し、気泡が発生する恐れがある。
　本開示は、上記事情に鑑みてなされたものであり、加熱しながら光学測定を実施するチャンバを有する検査容器であって、気泡を抑制して測定精度の低下を抑制できる検査容器を提供することを目的とする。また、その検査容器を用いた核酸検査方法を提供することを目的とする。
　本開示の検査容器は、検査対象の検体液を収容した状態で検査装置に着脱自在に装填される検査容器であって、
　検体液が投入される投入口と、
　投入口から投入された検体液を貯留する液溜め部と、
　液溜め部から送液される検体液を収容するチャンバであって、検査装置内の加熱部による加熱領域に配置され、加熱可能な加熱チャンバと、
　検体液を移送する圧力を調整する圧力調整機構を接続する接続口と、
　検体液を一時的に収容する液体収容部が内部に設けられ、かつ、液体収容部内の圧力を調整するために液体収容部が接続口と常時連通されているバルブであって、液溜め部と液体収容部とを連通し、かつ、加熱チャンバと液体収容部とは連通しない第１状態と、加熱チャンバと液体収容部とを連通し、かつ液溜め部と液体収容部とは連通しない第２状態と、液溜め部及び加熱チャンバの両方と液体収容部とが連通しない第３状態とを切り替え可能なバルブと、
　加熱チャンバに対してバルブを上流側、バルブの反対側を下流側とした場合において、加熱チャンバの下流側で、かつ加熱領域外に配置され、加熱チャンバから流入する加圧された気体を一時的に貯留するエアーバッファであって、加熱チャンバにのみ接続されたエアーバッファとを備えている。
　エアーバッファの容積をＶａとし、第２状態における液体収容部より下流に設けられている流路、加熱チャンバ及びエアーバッファの総容積をＶｔとした場合に、
　１０％≦Ｖａ／Ｖｔ×１００≦３５％
を満たすことが好ましい。
　液溜め部の容積をＶ１とし、液体収容部の容積をＶ２とし、加熱チャンバの容積をＶ３とした場合に、
Ｖ１＞Ｖ２＞Ｖ３
を満たすことが好ましい。
　加熱チャンバは、加熱領域であって、かつ検査装置内の検出部による検出領域に配置され、加熱チャンバとエアーバッファとの間であって、加熱領域であり、かつ検出領域ではない領域に、加熱チャンバとエアーバッファとに接続された貯留部を備えていてもよい。
　加熱チャンバは、底面、天面及び側壁によって画定された空間であり、加熱チャンバ内のエアーバッファへ接続される流路に接する下流領域に、底面から天面までの高さが、加熱チャンバ内の下流領域よりも上流側の領域の底面から天面までの高さに対して５％以上異なる段差部を有することが好ましい。
　加熱チャンバとエアーバッファとを連通する流路の、加熱チャンバと接続する領域の壁面が疎水化されていることが好ましい。
　液体収容部に、検体液と混合させる試薬が収容されていてもよい。
　試薬が、特定の核酸配列を増幅する増幅試薬と核酸配列判定用の蛍光プローブとを含んでいてもよい。
　液体収容部を第１液体収容部とした場合に、バルブは、加熱チャンバから送液される検体液を一時的に収容する第２液体収容部であって、接続口と常時連通されている第２液体収容部をさらに有し、
　第３状態は、液溜め部及び加熱チャンバの両方と第１液体収容部とが連通せず、かつ、加熱チャンバと第２液体収容部とが連通しない状態であり、
　バルブは、第１状態、第２状態及び第３状態に加えて、加熱チャンバと第２液体収容部とを連通し、かつ、加熱チャンバと第１液体収容部とは連通しない第４状態にも切替え可能であることが好ましい。
　液溜め部の容積をＶ１とし、第１液体収容部の容積をＶ２とし、加熱チャンバの容積をＶ３、第２液体収容部の容積をＶ４とした場合に、
Ｖ１＞Ｖ２＞Ｖ４＞Ｖ３
を満たすことが好ましい。
　第２液体収容部に、検体液と混合させる試薬が収容されていることが好ましい。
　試薬が、特定の核酸配列を増幅する増幅試薬と核酸配列判定用の蛍光プローブとを含んでいてもよい。
　本開示の第１の核酸検査方法は、接続口に圧力調整機構が直接もしくは配管を介して間接的に接続された検査容器を用いた核酸検査方法であって、
　検査容器の投入口から、検体液を投入して、液溜め部に検体液を収容させ、
　バルブを第１状態のまま、もしくは第１状態に切り替え、圧力調整機構による液体収容部内を減圧する操作により液溜め部から液体収容部へ検体液を送液させて、液体収容部において、検体液と試薬とを混合し、
　バルブを第２状態に切り替え、
　圧力調整機構による液体収容部内を加圧する操作により液体収容部から加熱チャンバに検体液及び試薬の混合液を送液し、
　バルブを第３状態に切り替え、
　加熱チャンバにおいて、混合液を温調することにより、混合液中の特定の核酸配列を増幅し、
　励起光を混合液に照射し、蛍光プローブから生じる蛍光を検出し、
　特定の核酸配列の有無もしくは濃度を判定する、核酸検査方法である。
　本開示の第２の核酸検査方法は、接続口に圧力調整機構が直接もしくは配管を介して間接的に接続された検査容器を用いた核酸検査方法であって、
　検査容器の投入口から、検体液を投入して、液溜め部に検体液を収容させ、
　バルブを第１状態のまま、もしくは第１状態に切り替え、圧力調整機構による第１液体収容部内を減圧する操作により液溜め部から第１液体収容部に検体液を送液させ、
　バルブを第２状態に切り替え、
　圧力調整機構による第１液体収容部内を加圧する操作により第１液体収容部から加熱チャンバに検体液を送液させ、
　バルブを第３状態に切り替え、
　加熱チャンバにおいて、検体液を加熱処理し、
　バルブを第４状態に切り替え、
　圧力調整機構による第２液体収容部内を減圧する操作により、加熱チャンバから第２液体収容部に検体液を送液させて、第２液体収容部において、検体液と試薬とを混合し、
　圧力調整機構による第２液体収容部内を加圧する操作により、第２液体収容部から加熱チャンバに、検体液及び試薬の混合液を送液し、
　バルブを第３状態に切り替え、
　加熱チャンバにおいて、混合液を温調することにより、混合液中の特定の核酸配列を増幅し、
　励起光を混合液に照射し、蛍光プローブから生じる蛍光を検出し、
　特定の核酸配列の有無もしくは濃度を判定する、核酸検査方法である。
　本開示の検査容器及び核酸検査方法によれば、加熱しながら光学測定を実施するチャンバにおいて、気泡を抑制して測定精度の低下を抑制できる。
第１実施形態の検査容器の概略構成を示す斜視図である。 図１に示す検査容器のＡ－Ｂ線端面図である。 図１に示す検査容器の一部分解斜視図である。 本体部材の斜視図である。 回転部材の分解斜視図である。 図６Ａは回転部材本体の上面側から見た斜視図であり、図６Ｂは回転部材本体の下面側から見た斜視図である。 第１実施形態の検査容器の流路構造であって、バルブが第１状態である流路構造を模式的に示す図である。 第１実施形態の検査容器の流路構造であって、バルブが第２状態である流路構造を模式的に示す図である。 第１実施形態の検査容器の流路構造であって、バルブが第３状態である流路構造を模式的に示す図である。 エアーバッファの変形例を示す平面模式図である。 変形例の流路構造の一部を示す平面模式図である。 変形例の流路構造の一部を示す平面模式図である。 図１２のＣ－Ｄ線断面図の一例である。 図１２のＣ－Ｄ線断面図の他の一例である。 図１５Ａは加熱チャンバに段差部がない場合の問題点の説明図であり、図１５Ｂは加熱チャンバに段差部を備えた場合の効果の説明図である。 変形例の流路構造の一部を示す平面模式図である。 変形例の流路構造の一部を示す平面模式図である。 変形例の検査容器の流路構造を模式的に示す図である。 検査装置の概略構成を示す図である。 第１実施形態の核酸検査の工程を示す図である（その１）。 第１実施形態の核酸検査の工程を示す図である（その２）。 回転部材の分解斜視図である。 図２３Ａは回転部材本体の上面側から見た斜視図であり、図２３Ｂは回転部材本体の下面側から見た斜視図である。 第２実施形態の検査容器の流路構造であって、バルブが第１状態である流路構造を模式的に示す図である。 第２実施形態の検査容器の流路構造であって、バルブが第２状態である流路構造を模式的に示す図である。 第２実施形態の検査容器の流路構造であって、バルブが第３状態である流路構造を模式的に示す図である。 第２実施形態の検査容器の流路構造であって、バルブが第４状態である流路構造を模式的に示す図である。 第２実施形態の核酸検査の工程を示す図である（その１）。 第２実施形態の核酸検査の工程を示す図である（その２）。 第２実施形態の核酸検査の工程を示す図である（その３）。 実施例の検査容器を示す平面模式図である。 図３２Ａは液体収容部より下流の空間の総容積の説明図であり、図３２Ｂはエアーバッファの容積の説明図である。
　以下、図面を参照して本開示の実施形態を詳細に説明する。なお、図面中の各構成要素の縮尺等は実際のものとは適宜変更している。各図において、同一の構成要素には同一の符号を付している。
「第１実施形態の検査容器」
　図１は、一実施形態の検査容器１０を示す斜視図であり、図２は、図１に示す検査容器１０のＡ－Ｂ線で切断した切断部の端面を示す模式図である。図３は、検査容器１０の一部分解斜視図であり、検査容器１０内部の流路構造１１を破線で示している。図４は、検査容器１０の本体部材１０Ａの斜視図である。
　検査容器１０は、内部に複数のチャンバ及びチャンバ間を接続する流路を含む流路構造１１（図３参照）を有するマイクロ流路デバイスである。検査容器１０は、検査対象の検体液を収容した状態で検査装置２００（図１９参照）に着脱自在に装填される検査容器であって、検査に供される検査容器である。
　検査容器１０は、流路及びチャンバを含む流路構造１１の一部を構成する凹部及び孔部等が形成された本体部材１０Ａと、流路構造１１の底面を構成する底部材１０Ｂとから構成されている。
　本体部材１０Ａは、公知の樹脂成型プラスチック材料であれば、特に制限なく利用できるが、耐熱性及び透明性の観点から、ポリカーボネート、ポリプロピレン、シクロオレフィンあるいはシリコーン樹脂が好ましい。
　底部材１０Ｂは、例えば、薄板あるいはフィルムにより形成されている。底部材１０Ｂとしては、公知の樹脂成型プラスチック材料であれば、特に制限なく利用できるが、本体部材１０Ａとの密着性の観点から、本体部材１０Ａと同じ材質が好ましい。なお、詳細は後述するが、加熱チャンバ１５を加熱する際において、加熱手段との密着を高め加熱を効率的に実施することができる観点から、底部材１０Ｂはフィルムにより構成されていることが好ましい。
　図２及び図３に示すように、検査容器１０は、投入口１２と、液溜め部１３と、加熱チャンバ１５と、液溜め部１３と加熱チャンバ１５との間に配置されたバルブ１６と、圧力調整機構を接続する接続口１７と、エアーバッファ１９と、それらを接続する第１流路１８ａ～第３流路１８ｃとを備える。なお、検査容器１０が備えた複数のチャンバとは、液溜め部１３、加熱チャンバ１５、後述する液体収容部３０である。以下において、液溜め部１３、加熱チャンバ１５、液体収容部３０を区別する必要がない場合には、総括的にチャンバと称する場合がある。
　投入口１２は、検体液Ｓを投入するための開口である。なお、図２及び図３に示すように、検査容器１０は、投入口１２を覆い、投入口１２の開口に着脱可能な蓋部１２Ａを備えていてもよい。本例においては、蓋部１２Ａは投入口１２に嵌め込み可能に形成されている。着脱方法に関して特に制限はなく、例えば、スナップ式のキャップ構造や粘着剤を用いて蓋部１２Ａを投入口１２に対して着脱してもよい。蓋部１２Ａは、検体液投入時には投入口１２を開放するが、検体液投入時以外は、投入口１２を閉じて外部からの不純物の混入を排除すると共に内部からの検体液Ｓの蒸発を防止する。検体液Ｓは、例えば、被検者の鼻腔、咽頭、口腔及び患部などから採取した検体から核酸を抽出した液体である。
　なお、以下において、投入口１２が設けられている面を検査容器１０の上面、底部材１０Ｂ側を検査容器１０の下面と称する。ここで、本体部材１０Ａの上面は検査容器１０の上面と同一であり、本体部材１０Ａの下面は底部材１０Ｂの上面と接する面であり、底部材１０Ｂの下面は検査容器１０の下面と同一である。
　液溜め部１３は、投入口１２を開口とする液体収容部であり、投入口１２から滴下された検体液Ｓを収容する。液溜め部１３の形状に特に制限はなく、柱状、錐状、錐台状など任意に選択することができる。
　本検査容器１０においては、本体部材１０Ａを厚み方向に貫く第１の筒状部２２の上面側の開口によって、投入口１２が構成されており、第１の筒状部２２の本体部材１０Ａの内部側部分と底部材１０Ｂとによって、液溜め部１３が形成されている。液溜め部１３は、投入口１２から投入された検体液Ｓをバルブ１６の手前で貯留する空間である。
　加熱チャンバ１５は、液体を収容可能なチャンバであり、液溜め部１３からバルブ１６を介して送液される検体液Ｓを収容する。加熱チャンバ１５は本体部材１０Ａの下面に設けられた凹部２５と、底部材１０Ｂとによって形成されている。
　加熱チャンバ１５は、一例として、検査のための反応及び検出処理が実施されるチャンバであり、後述する検査装置２００（図１９参照）において、加熱部２１０による加熱処理及び検出部２４０による検出処理が実施される。そのため、加熱チャンバ１５は、検査容器１０内において、検査装置内の加熱部２１０により加熱される領域（加熱領域６８（図７、図１１参照））であって、かつ、検出部２４０により光学的測定が可能な検出領域６９（図１１参照）に配置されている。
　本体部材１０Ａにおいて、下面に設けられた加熱チャンバ１５の凹部２５に対向する上面には、略矩形の凹部２６（以下において矩形状凹部２６という。）が設けられている。検査容器１０が検査装置２００に装填された場合、矩形状凹部２６は検査装置２００の検出部２４０に対向する位置に配置される。矩形状凹部２６の底面は、検出部２４０から加熱チャンバ１５内の検体液Ｓに光を入射させる際の光入射面及び検体液Ｓから生じる光が出射する光出射面として機能する。矩形状凹部２６は検査容器の熱容量を低下するために設けることが好ましい。矩形状凹部２６があることで検査装置内の加熱部２１０による熱が適切に加熱チャンバ１５に印加され、加熱チャンバ１５内の液体温度が適切に調節される。
　接続口１７には、圧力調整機構６０が接続される。図３に示すように接続口１７には、直接、あるいは配管等を介して圧力調整機構６０が接続される。本例において圧力調整機構６０はシリンジである。本例において、接続口１７は、本体部材１０Ａの上面から下面に貫通する第２の筒状部２７の上面側の開口である。一例として、接続口１７にはシリンダ６１の先端が接続される接続ポート６５が嵌め込まれており、接続ポート６５にシリンダ６１の先端が接続されるように構成されている。シリンダ６１内に挿入されたプランジャ６２が押し引きされることにより、接続口１７に連通する検査容器１０内が加圧あるいは減圧される。本例においては、接続口１７によって一端が構成されている第２の筒状部２７と、底部材１０Ｂによって気体が収容される気体収容部２９が構成されている。気体収容部２９は流路１８ｃと連通している。なお、接続口１７と圧力調整機構６０とを接続する配管には、図示しない圧力計が設けられており、内部の圧力を制御することが可能に構成されている。
　圧力調整機構６０はシリンジに限らず各種ポンプを用いることができる。本例においては、接続口１７は外部に備えられた圧力調整機構６０と接続されるように構成されている。一方、圧力調整機構６０の少なくとも一部が検査容器１０に備えられていてもよい。例えば、検査容器１０にシリンジのシリンダ６１が組み込まれていてもよい。このような場合、検査容器１０に組み込まれたシリンダ６１の先端が接続される部分が接続口となる。検査容器１０にシリンダ６１が組み込まれている場合、すなわち、本体部材１０Ａの一部にシリンダ形状が形成されている場合、シリンダ６１内にはプランジャ先端に設けられているようなゴム栓が配置され、検査装置側にはゴム栓をシリンダ６１内で移動させる機構を備えていればよい。
　エアーバッファ１９は、加熱チャンバ１５に対してバルブ１６を上流側、バルブ１６の反対側を下流側とした場合において、加熱チャンバ１５の下流側に備えられている。エアーバッファ１９は、加熱チャンバ１５の下流側であって、検査装置２００に装填された場合に検査装置２００内の加熱部２１０（図１９照）によって加熱される領域である加熱領域６８（図７参照）外に配置されている空間である。エアーバッファ１９は、加熱チャンバ１５から流入する加圧された気体を一時的に貯留する。エアーバッファ１９は、加熱チャンバ１５にのみ接続されており、他の流路及びチャンバ等とは接続されていない。本例において、エアーバッファ１９は、加熱チャンバ１５の下流側に設けられた流路１９ａ及びエアーチャンバ１９ｂとからなる。
　図２に示すように、バルブ１６は、内部に液体収容部３０を備える。液体収容部３０は、液溜め部１３から送液される検体液Ｓを、加熱チャンバ１５に送液する前に一時的に収容する。
　バルブ１６は、液溜め部１３及び加熱チャンバ１５と、液体収容部３０との接続状態を、次の第１状態と、第２状態と、第３状態とのいずれかの状態に切り替えるバルブである。第１状態は、液溜め部１３と液体収容部３０とを連通し、かつ加熱チャンバ１５と液体収容部３０とは連通しない状態である。第２状態は、加熱チャンバ１５と液体収容部３０とを連通し、かつ液溜め部１３と液体収容部３０とは連通しない状態である。第３状態は、液溜め部１３及び加熱チャンバ１５の両方と液体収容部３０が連通しない状態である。
　図３に示すように、本検査容器１０におけるバルブ１６は、本体部材１０Ａの上面に設けられた筒状の凹部２４（以下において筒状凹部２４という。）中に配置される回転部材４０を有する。液体収容部３０は回転部材４０内部に設けられている。図５は回転部材４０の分解斜視図である。図５に示すように、回転部材４０は回転部材本体４１と蓋体４２とから構成されている。図６Ａは回転部材本体４１の上面側を示す斜視図であり、図６Ｂは、回転部材本体４１の下面側を示す斜視図である。
　回転部材本体４１は、本体部材１０Ａの筒状凹部２４の直径より若干小さい外径の円筒部４３と、円筒部４３の上端面に円筒部４３を囲むように延設された鍔部４４とを有する。鍔部４４は、筒状凹部２４の直径より大きい外径を有する。回転部材本体４１は、筒状凹部２４内において回転可能に設置される。回転部材本体４１の鍔部４４には、回転部材４０を回転させる際に使用される孔４４ａが４つ備えられている。４つの孔４４ａは円筒部４３の中心軸に４回転対称に配置されている。後述する検査装置（図１９参照）に備えられているバルブ回転機構２２０の爪２２２が孔４４ａに挿し込まれた状態で駆動され回転されることにより、回転部材４０が回転される。
　円筒部４３には、その一端面に円形に開口する凹部４８が形成されている。円形の凹部４８の中心には円柱４９が立設されている。円柱４９の中心には貫通孔４９ａが設けられている。貫通孔４９ａは、回転部材本体４１の回転中心に位置する。また、円柱４９の上面には、貫通孔４９ａから径方向に延びる溝４９ｂが設けられている。溝４９ｂは、貫通孔４９ａと凹部４８とを連通する溝である。
　蓋体４２は、凹部４８の開口を覆うように開口に嵌め込み可能に形成されている。液体収容部３０は凹部４８の内壁面と蓋体４２により形成される。蓋体４２は、液体収容部３０と溝４９ｂとの間の気体の行き来を阻害しない形状を有し、溝４９ｂと蓋体４２とによって流路が形成されている。
　回転部材本体４１の凹部４８の底面には、液体収容部３０と連通する１つの孔４８ａが設けられている。
　図４に示すように、本体部材１０Ａの筒状凹部２４の底面には第１流路１８ａと連通する孔２４ａと、第２流路１８ｂと連通する孔２４ｂと、第３流路１８ｃと連通する孔２４ｃとを有する。孔２４ｃは、筒状凹部２４の底面の中心に設けられている。第１流路１８ａは一端が液溜め部１３と接続されている（図３参照）。したがって、孔２４ａは第１流路１８ａを介して液溜め部１３と連通している。第２流路１８ｂは一端が加熱チャンバ１５と接続されている。したがって、孔２４ｂは第２流路１８ｂを介して加熱チャンバ１５と連通している。第３流路１８ｃは一端が気体収容部２９を介して接続口１７に接続されている。したがって、孔２４ｃは第３流路１８ｃを介して接続口１７と連通している。
　筒状凹部２４に回転部材４０を配置した状態において、筒状凹部２４の底面の中心に設けられている孔２４ｃは回転部材本体４１の円筒部４３の中心に設けられている円柱４９内の貫通孔４９ａと一致する。本構成により、回転部材４０の回転状態にかかわらず、貫通孔４９ａと孔２４ｃは一致した状態が保たれる。したがって、液体収容部３０は、溝４９ｂによって形成された流路、貫通孔４９ａ、第３流路１８ｃ及び気体収容部２９を介して、常時、接続口１７と連通した状態にある。
　回転部材４０を筒状凹部２４内で回転させることで、回転部材４０の液体収容部３０の底面の孔４８ａと、筒状凹部２４の底面の孔２４ａとが一致した状態、孔４８ａと孔２４ｂとが一致した状態、及び孔４８ａが孔２４ａ及び２４ｂのいずれとも一致しない状態とすることができる。
　孔２４ａ～２４ｃにはそれぞれＯリング３６が備えられている（図２参照）。Ｏリング３６は、孔４８ａと孔２４ａまたは孔２４ｂが一致した状態、及び貫通孔４９ａが孔２４ｃと一致した状態において、孔同士の接続部からの漏れ防止の機能を奏する。漏れ防止のためのシール手段としては、Ｏリング３６の他、パッキンやガスケットなど公知のシール部材を特に制限なく利用できる。シール手段の材料としては、例えばニトリルゴム、ウレタンゴム、シリコンゴム及びフッ素ゴムなどのゴム材料、あるいは、オレフィン及び、ウレタンなどの公知のエラストマーを用いることができる。また、シール手段が、回転部材４０もしくは本体部材１０Ａの筒状凹部２４に一体的に成形されていてもよい。
　回転部材４０は、本体部材１０Ａの筒状凹部２４に配置され、抑え板５０によって鍔部４４が本体部材１０Ａに付勢された状態で使用される。抑え板５０は、中心に鍔部４４の外径よりも小さい直径の円形の中心孔５０ａを有する（図３参照）。抑え板５０は鍔部４４の縁部と重なるように、かつ、四隅に設けられた孔５０ｂが本体部材１０Ａの上面に設けられているネジ穴２０と一致させて配置され、ネジ５１で本体部材１０Ａにネジ止めされている。なお、回転部材４０及び抑え板５０が本体部材１０Ａにセットされた状態において、抑え板５０の中心孔５０ａからは、鍔部４４に設けられている孔４４ａが露出されている。これにより、バルブを回転する際にバルブ回転機構２２０の爪２２２が孔４４ａにアクセス可能とされている。
　本例では、上記の通り、抑え板５０をネジで本体部材１０Ａに固定している。しかし、抑え板５０の固定方法はこれに限らず、本体部材１０Ａにあらかじめ固定されている固定爪によって抑え板５０を固定する方法、あるいは、抑え板５０を本体部材１０Ａに対して溶着させる方法などであってもよい。
　第１流路１８ａ～第３流路１８ｃはいずれも、本体部材１０Ａの下面に設けられた凹部２８ａ～２８ｃと、底部材１０Ｂとによって形成されている。既に述べた通り、第１流路１８ａは、バルブ１６の筒状凹部２４の底面の孔２４ａと連通し、液溜め部１３とバルブ１６の液体収容部３０とを接続する流路である。第２流路１８ｂは、バルブ１６の筒状凹部２４の底面の孔２４ｂと連通し、加熱チャンバ１５とバルブ１６の液体収容部３０とを接続する流路である。第３流路１８ｃは、バルブ１６の筒状凹部２４の底面の中心に設けられている孔２４ｃと連通し、液体収容部３０と気体収容部２９とを接続する流路である。第１流路１８ａ～第３流路１８ｃの断面サイズは一例として、０．５ｍｍ～１ｍｍ幅、深さ０．５ｍｍ程度である。
　図７～図９は、検査容器１０における流路構造１１の平面模式図である。図７～図９は、バルブ１６により切り替えられる第１状態～第３状態を説明するための図である。
　図７では、回転部材４０の液体収容部３０の底面の孔４８ａが第１流路１８ａと接続した状態である。このとき、孔４８ａは、筒状凹部２４の底面の孔２４ａと一致している。これは、液溜め部１３と、液体収容部３０とを連通し、かつ、加熱チャンバ１５と液体収容部３０とは連通しない第１状態である。
　図８では、回転部材４０の液体収容部３０の底面の孔４８ａが第２流路１８ｂと接続した状態である。このとき、孔４８ａは筒状凹部２４の底面の孔２４ｂと一致している。これは、加熱チャンバ１５と液体収容部３０とを連通し、かつ液溜め部１３と液体収容部３０とは連通しない第２状態である。
　図９では、回転部材４０の液体収容部３０の底面の孔４８ａは、第１流路１８ａとも第２流路１８ｂとも接続していない状態である。すなわち、液体収容部３０が、液溜め部１３とも加熱チャンバ１５とも連通していない第３状態である。第３状態は、液溜め部１３及び加熱チャンバ１５の両方が、液体収容部３０と連通しない状態であればよく、回転部材４０の回転位置は、図９の態様に限られない。
　このように、バルブ１６は、回転部材４０を本体部材１０Ａの筒状凹部２４内で回転させることにより、第１状態、第２状態及び第３状態を切り替えることができる回転バルブである。なお、バルブ１６としては、上記第１状態～第３状態を実現できればよく、上記構造の回転バルブに限定されるものではない。
　検査容器１０において、検体液Ｓの送液は、バルブ１６により検体液Ｓが収容されたチャンバと検体液Ｓを送液するチャンバとを接続した状態とした上で、圧力調整機構６０により液体収容部３０内の圧力を加減圧することで実施される。検査容器内部の各チャンバ及び各流路の容積が既知であるので、圧力計をモニタしながら、圧力調整機構による加減圧を調整することにより、所望の液量をチャンバからチャンバへ送液することができる。
　検査容器１０を用いた検査の一例において、投入口１２から投入される検体液Ｓは、液溜め部１３、液体収容部３０、及び加熱チャンバ１５、の順に送液される。
　液溜め部１３から液体収容部３０への送液は、バルブ１６を第１状態（図７参照）とし、圧力調整機構６０により液体収容部３０の内圧を減圧することにより実現される。シリンダ６１内のプランジャ６２を外側に引き、液体収容部３０内の空気をシリンダ６１内に引き込むことで液体収容部３０内を減圧する。これにより、液溜め部１３内の検体液Ｓは第１流路１８ａを通って、液体収容部３０内に引き込まれる。なお、検体液Ｓは液体収容部３０の底面に設けられている孔４８ａから液体収容部３０に浸入する。液体収容部３０内から空気を排出するための流路は、円柱４９に設けられている溝４９ｂと、液体収容部３０の天面を構成する蓋体４２とによって構成されているので、検体液Ｓは溝４９ｂに検体液Ｓが入り込むことはなく、液体収容部３０に溜められる。なお、液溜め部１３から液体収容部３０への送液をスムーズに実現するため、液溜め部１３の上部は図示しない吸気口を備え、液溜め部１３内に空気を吸引可能となっている。なお、吸気口には塵埃を排除するためのフィルタが備えられている。
　液体収容部３０から加熱チャンバ１５への送液は、バルブ１６を第２状態（図８参照）とし、圧力調整機構６０により液体収容部３０の内圧を加圧することにより実現される。プランジャ６２をシリンダ６１内で押込み、液体収容部３０内にシリンダ６１内の空気を押し込むことで、液体収容部３０内を加圧する。これにより、液体収容部３０内の検体液Ｓは、第２流路１８ｂを通って、加熱チャンバ１５に押し出され、加熱チャンバ１５に送液される。この際、加熱チャンバ１５内の気体は加圧され、下流側に配置されているエアーバッファ１９に流入する。これにより、エアーバッファ１９には加圧された気体が貯留される。なお、この際、プランジャ６２の押込み量を調整して、加熱チャンバ１５から気体が排出され、加熱チャンバ１５内が検体液Ｓで満たされる状態とすることが好ましい。
　なお、加熱チャンバ１５への加熱処理は、検体液Ｓで満たされた状態で、バルブ１６を第３状態（図９参照）とし、加熱チャンバ１５を閉じた状態で実施される。
　検査容器１０は、エアーバッファ１９を備えることにより、加熱チャンバ１５内を検体液Ｓで満たすことができる。エアーバッファ１９は、加熱チャンバ１５にのみ接続されているので、加熱チャンバ１５に検体液Ｓが移送される前に加熱チャンバ１５内に収容されていた気体は、加圧された状態でエアーバッファ１９に収容される。また、バルブ１６を用いることで、容易に加熱チャンバ１５を密閉することができる。この際、加熱チャンバ１５内は大気圧よりも加圧された状態で密閉されることになる。したがって、加熱チャンバ１５内が検体液Ｓで満たされた状態、かつ、加熱チャンバ１５を閉じた状態で加熱処理を実施することができる。加熱チャンバ１５内は検体液Ｓが満たされた状態であり、かつ検体液Ｓが加圧された状態で加熱されるので、９５℃を超えるような高温で加熱した場合でも気泡の発生を抑制することができる。また、加熱チャンバ１５内は検体液Ｓが満たされ、加圧された状態で加熱されるので、検体液Ｓの昇温性及び冷却性を向上させることができる。これにより、検査精度及び検査速度の向上を図ることができる。
　また、本実施形態のように底部材１０Ｂがフィルムで構成されている場合に、加熱チャンバ１５内に気体が残留した状態で加熱すると、気体が膨張することにより加熱チャンバ１５内の圧力が高まり、フィルムからなる底部材１０Ｂが内部から押圧され、本体部材１０Ａから剥離する恐れがある。しかし、既述のようにエアーバッファ１９を備え、加熱チャンバ１５内を検体液Ｓで満たし、気体がほとんど残留しない状態で加熱することが可能であるので、底部材１０Ｂの剥離を抑制することができる。
　検査容器１０において、エアーバッファ１９は、流路１９ａ及びエアーチャンバ１９ｂとから構成されている。しかし、エアーバッファ１９は、図１０に示すように、流路１９ｃのみで構成されていてもよい。
　エアーバッファ１９の容積をＶａとし、第２状態における液体収容部３０より下流に設けられている流路（ここでは、流路１８ｂ）、加熱チャンバ１５及びエアーバッファ１９の総容積をＶｔとした場合に、
１０％≦Ｖａ／Ｖｔ×１００≦３５％
を満たすことが好ましい。
　ここで、総容積Ｖｔは、流路１８ｂの容積、加熱チャンバ１５の容積及びエアーバッファ１９の容積の和である。
　容積Ｖａを総容積Ｖｔの１０％以上とすることにより送液圧力を適切にでき、加熱チャンバ１５に気泡が残留することをより効果的に抑制できる。加熱チャンバ１５の一面がフィルムで構成されている場合におけるフィルムの剥離をより効果的に抑制できる。容積Ｖａを総容積Ｖｔの３５％未満とすることにより送液圧力を適切にできる。また、検査装置２００の加熱部２１０による加熱時に気泡が発生するのを効果的に抑制できる。エアーバッファ１９内の空気が加熱チャンバ１５内に侵入するのを抑制できる。
　なお、容積Ｖａの総容積Ｖｔに対する割合は、１４％以上、３０％以下であることがより好ましく、１５％以上２５％以下であることがさらに好ましい。
　流路構造１１において、液溜め部１３の容積をＶ１、液体収容部３０の容積をＶ２、加熱チャンバ１５の容積をＶ３とした場合に、Ｖ１＞Ｖ２＞Ｖ３という関係にあることが好ましい。すなわち、検査工程において、検体液Ｓが後に送液されるチャンバほど容積が小さいことが好ましい。
　一例として、液溜め部１３の容積Ｖ１は、５０μＬ～３００μＬ、液体収容部３０の容積Ｖ２は３０μＬ～５０μＬ、加熱チャンバ１５の容積Ｖ３は１０μＬ～３０μＬなどである。
　液溜め部１３の容積Ｖ１が液体収容部３０の容積Ｖ２よりも大きければ、液溜め部１３に液体収容部３０の容積Ｖ２よりも多くの検体液Ｓを貯留させることができる。そして、検査工程の検体液Ｓの送液における送液上流から下流に向けて配置されている複数のチャンバの容積の関係がＶ１＞Ｖ２＞Ｖ３であれば、検体液Ｓを送液した際に、下流側のチャンバを検体液Ｓで満たすことができる。そのため、最終的に検出に用いられる加熱チャンバ１５において、検体液Ｓの不足が生じるのを抑制できる。
　検査容器１０は、図７に示すように、検体液Ｓと反応させる試薬７０を液体収容部３０内に備えていてもよい。例えば、検査容器１０が核酸検出に用いられる場合、試薬７０は、特定の核酸配列を増幅する増幅試薬と核酸配列判定用の蛍光プローブとを含む試薬である。
　既述の通り、本例において、加熱チャンバ１５は検査装置２００における加熱領域であって、かつ、検出領域に配置されている。これにより、加熱チャンバ１５内において加熱しつつ、検出処理を実施することができる。
　図１１に検査容器１０の変形例の流路構造の一部を示すように、検査容器１０は、加熱チャンバ１５とエアーバッファ１９との間に貯留部６７を備えていてもよい。本例では、図１１に示す通り、加熱領域６８が検出領域６９よりも広く、貯留部６７は、加熱領域６８であり、かつ検出領域６９ではない領域に備えられている。
　既述の通り、加熱チャンバ１５へ検体液Ｓを送液する際には、圧力調整機構６０により加熱チャンバ１５を検体液Ｓが満たすように調整される。しかし、検体液Ｓの最も下流側の液面の位置の調整は非常に難しい。例えば、加熱チャンバ１５が直にエアーバッファ１９と接続されている場合、印加される圧力の微妙な差で検体液Ｓがエアーバッファ１９側まで進入してしまう場合がある。検体液Ｓに対する検出処理を行っている際に、エアーバッファ１９内の加熱されていない検体液Ｓが加熱チャンバ１５側に戻ると、加熱されている検体液Ｓに加熱されていない検体液Ｓが混ざるため、測定に誤差が生じる可能性がある。
　図１１のように、貯留部６７を備えることにより、上述のような測定誤差を抑制できる。貯留部６７は加熱領域６８に設けられているので、加熱チャンバ１５が加熱される際には、貯留部６７も同時に加熱される。したがって、送液時に、加熱チャンバ１５よりもエアーバッファ１９側に進んだ検体液Ｓがあった場合、貯留部６７の検体液Ｓは加熱チャンバ１５内の検体液Ｓと共に加熱される。そのため、検出処理を行っている際に、貯留部６７の検体液Ｓが加熱チャンバ１５側に戻っても加熱していない検体液が混ざることがないので、測定に誤差が生じるのを抑制することができる。
　なお、加熱チャンバ１５よりも下流側に設けられる貯留部６７とエアーバッファ１９との境界は、加熱領域６８の境界と一致する。図１１の場合、貯留部６７から下流側に延びる流路の途中に加熱領域６８の境界がある。この場合、流路の加熱領域６８の境界位置６８ｃより上流側は貯留部６７の一部であり、境界位置６８ｃより下流側がエアーバッファ１９の一部である。
　また、図１２に検査容器１０の変形例の流路構造の一部を示すように、検査容器１０は、加熱チャンバ１５内に段差部９０を備えていてもよい。段差部９０は、加熱チャンバ１５内のエアーバッファ１９へ接続される流路（ここではエアーバッファ１９の一部である流路１９ａ）に接する下流領域に備えられている。
　既に述べた通り、加熱チャンバ１５は、本体部材１０Ａに形成された凹部２５と底部材１０Ｂとによって形成されている。底部材１０Ｂの上面が加熱チャンバ１５の底面をなし、凹部２５の底面が加熱チャンバ１５の天面をなし、凹部２５の側壁が加熱チャンバ１５の側壁をなす。加熱チャンバ１５は、底面、天面及び側壁によって画定された空間である。
　図１３及び図１４は段差部９０の形態が互いに異なる加熱チャンバ１５について、図１２のＣ－Ｄ線断面を模式的に示す図である。
　図１３に示すように、段差部９０は、例えば、加熱チャンバ１５の流路１９ａと接する下流領域に設けられた、その下流領域よりも上流側の領域の底面１５Ｓから天面１５Ｔまでの高さＨに対して５％以上低くなるように設けられた加熱チャンバ１５側に凸となる凸状の段差９２である。加熱チャンバ１５の下流領域における底面１５Ｓから天面１５Ｔまでの高さＨ１と上流側における高さＨとの差ΔＨ１は、高さＨの５％以上である。
　図１４に示すように、段差部９０は、例えば、加熱チャンバ１５の流路１９ａと接する下流領域に設けられた、その下流領域よりも上流側の領域の底面１５Ｓから天面１５Ｔまでの高さＨに対して５％以上高くなるように設けられた加熱チャンバ１５側に凹となる凹状の段差９４である。加熱チャンバ１５の下流領域における底面１５Ｓから天面１５Ｔまでの高さＨ２と上流側における高さＨとの差ΔＨ２は、高さＨの５％以上である。
　このように、段差部９０としては、図１３に示すような凸状の段差９２であってもよいし、図１４に示すような凹状の段差９４であってもよい。また、段差部９０としては、凹凸が上流側から下流側に向かって複数設けられていてもよい。
　図１３及び図１４に示すように、段差部９０には、検体液Ｓが表面張力によりせき止められ、検体液Ｓを一次的に堰き止める効果がある。これにより、検体液Ｓの先端が流路１９ａに到達するまでに加熱チャンバ１５内を検体液Ｓで満たすことができ、加熱チャンバ１５内に気体が残留しにくくなる。段差部９０の効果について図１５を参照してより詳細に説明する。
　図１５Ａに示すように、液体収容部３０から加熱チャンバ１５へ送液する際に、加熱チャンバ１５内において検体液Ｓが片側の側面に沿って送液される場合がある（工程Ａ１）。段差部９０を備えていない場合、検体液Ｓが加熱チャンバ１５内のもう一方の側面の全域に到達する前に検体液Ｓは流路１９ａとの接続口に到達する（工程Ａ２）。接続口断面は加熱チャンバ１５内断面より十分小さいので、検体液Ｓは接続口でせき止められ、加熱チャンバ１５内のもう一方の側面側に送液される。しかし、図１５Ａの工程Ａ３に示すように、片側に沿って送液されて接続口を塞ぎ、気体Ｇが加熱チャンバ１５に残留してしまう場合がある。
　一方、図１５Ｂに示すように、段差部９０を備えている場合、加熱チャンバ１５内において検体液Ｓが片側の側面に沿って送液されても、段差部９０で検体液がせき止められる（工程Ｂ１～工程Ｂ３）。そして、液面がそろってからエアーバッファ１９への接続口へ送液される（工程Ｂ３～工程Ｂ４）。したがって、加熱チャンバ１５に気体Ｇが残留するのを抑制することができる。
　また、図１６に検査容器１０のさらなる変形例の流路構造の一部を示すように、検査容器１０は、加熱チャンバ１５とエアーバッファ１９との間に貯留部６７を備え、かつ、加熱チャンバ１５内に段差部９０を備えていてもよい。段差部９０は、加熱チャンバ１５内のエアーバッファ１９へ接続される流路（ここでは貯留部の一部である流路）に接する下流領域に備えられている。これにより、貯留部６７を備えることによる効果と段差部９０を備えることによる効果を重畳した効果を得ることができる。
　また、図１７に示すように、検査容器１０の加熱チャンバ１５とエアーバッファ１９とを連通する流路（ここでは、エアーバッファ１９の一部である流路１９ａ）の、加熱チャンバ１５と接続する領域７５の内壁面が疎水化されていてもよい。
　内壁面の疎水化処理としては、例えば、疎水性コーティング剤の塗布処理、及びシランカップリング処理、撥水性フィルムの貼合等が挙げられる。疎水化処理等の表面処理は、内面の全域に形成されていることが好ましいが、内面の一部に表面処理がなされていない部分があっても構わない。壁面の水接触角は９０°以上であることが好ましく、１２０°以上であることがより好ましく、１５０°以上であることが特に好ましい。流路１９ａの内壁面の水接触角を高めることで、液体の進入を抑制する効果を高めることができる。
　疎水性を発現する素材としては、シリコンあるいはフッ素などを含む疎水性モノマーあるいは樹脂、界面活性剤、もしくは疎水性粒子などがある。例えば信越化学社メチルトリメトキシシラン（ＫＢＭ－１３）、株式会社フロロテクノロジー社フロロサーフ（ＦＳ－１６１０）、ＤＩＣ社メガファックＲＳ５６、及びメガファックＦ－７８０Ｆなどが挙げられる。疎水性粒子としては、例えば疎水性シリカ（日本アエロジル社トリメチルシリル基修飾シリカＡＥＲＯＳＩＬ　ＲＸ２００）などが挙げられる。これらの材料、または混合物を内壁面に対して刷毛やスプレーなど公知の方法で塗布することにより、内壁面を疎水化することができる。
　流路１９ａの領域７５の内壁面が疎水化されていれば、液体収容部３０から加熱チャンバ１５への送液時、あるいは、加熱チャンバ１５における検体液Ｓの加熱時に、加熱チャンバ１５からエアーバッファ１９側に検体液Ｓが流れだすのを抑制することができる。
　また、図１８に示す変形例の検査容器１００のように、複数の加熱チャンバ１５Ａ～１５Ｃを備えてもよい。この場合、それぞれの加熱チャンバ１５Ａ～１５Ｃの下流側にそれぞれエアーバッファ１９Ａ～１９Ｃを備えている。複数の加熱チャンバ１５Ａ～１５Ｃを備えた場合、１つの検体に対して同一の検査を複数の加熱チャンバ１５Ａ～１５Ｃで実施することができ、検査精度を向上させることができる。図１８に示す例では３つの加熱チャンバ１５Ａ～１５Ｃを備えた例を挙げているが、加熱チャンバの数に制限はない。
「検査装置」
　検査容器１０が装填され、検査を実施するための検査装置２００について図１９を参照して説明する。図１９は検査装置２００の概略構成を示す図である。検査装置２００は、一例として、核酸検査装置である。
　検査装置２００は、加熱部２１０と、バルブ回転機構２２０と、圧力調整機構駆動部２３０と、検出部２４０と、各部を制御する図示しないプロセッサとを備えている。
　プロセッサは、図示しないメモリに記憶されている検査プログラムに沿った検査手順で、各部を制御する。
　加熱部２１０は、検査容器１０の加熱チャンバ１５の底面と接触する位置に備えられている。加熱部２１０は、加熱チャンバ１５に収容された液体を加熱する。加熱部２１０は、前処理のために検体液Ｓを、例えば、９０℃以上の高温に加熱する。また、加熱部２１０は、検体液Ｓと試薬７０との混合液を加熱して、核酸増幅を促進させる。加熱部２１０は、ヒータあるいはペルチェ素子などを備え温調可能とされており、核酸増幅工程における温度サイクルを実施する。加熱部２１０には、公知の加熱機構を用いることができ、特に制限されない。
　バルブ回転機構２２０は、バルブ１６を回転させて液溜め部１３及び加熱チャンバ１５と、液体収容部３０との連通状態を、第１状態、第２状態及び第３状態に切り替えるための機構を備える。バルブ回転機構２２０は、例えば、回転部材４０の孔４４ａに挿入する爪２２２と、爪２２２を孔４４ａ挿入した状態で爪を回転させる回転機構とを備える。
　圧力調整機構駆動部２３０は、圧力調整機構６０に接続されて圧力調整機構６０を駆動する。圧力調整機構６０がシリンジの場合、圧力調整機構駆動部２３０は、プランジャ６２を押し引きするリニアアクチュエータ等で構成される。圧力調整機構駆動部２３０は、プロセッサにより制御される。各チャンバ及び流路の容積は既知であるので、プロセッサは、図示しない圧力計から液体収容部３０内の圧力をモニタし、所望の送液量に応じた加減圧量を算出する。そして、プロセッサは、算出した加減圧量に応じて圧力調整機構駆動部２３０を制御する。
　検出部２４０は、加熱チャンバ１５において、検体液Ｓ中に検出対象物が含まれているか否かを検出する。検出部２４０は、図１９に示すように、光源２４２と、波長選択フィルタ２４４と、光検出器２４６とを備える。検出部２４０は、検査容器１０の加熱チャンバ１５の上方に配置されている。光源２４２は、波長選択フィルタ２４４を介して、特定の波長の励起光Ｌ１を加熱チャンバ１５内に照射する。光検出器２４６は、励起光Ｌ１によって励起されて蛍光プローブから生じる蛍光Ｌ２を検出する。励起光Ｌ１は蛍光プローブの励起波長に応じて選択される。また、必要に応じて、強度や光量を調整するフィルタ、励起光Ｌ１を収束したり、検出プローブ由来の蛍光Ｌ２を光検出器２４６へ集光するためのレンズ、あるいは光学系などを含んでもよい。
　光源２４２としては、ＬＥＤ（light emitting diode）あるいはレーザなどが用いられる。波長選択フィルタ２４４は、光源２４２から発せられた光のうちプローブの励起波長に応じた波長のみを透過するフィルタである。光検出器２４６としては、例えばフォトダイオードあるいは光電子増倍管などが適用される。また、ＣＭＯＳ（Complementary Metal Oxide Semiconductor）やＣＣＤ（Charge Coupled Device）などカメラを用いて検出プローブからの蛍光を撮影し、得られた画像を解析して検出してもよい。
「第１実施形態の核酸検査方法」
　第１実施形態の検査容器１０を用いた一例の核酸検査方法について図２０及び図２１を参照して説明する。ここでは、液体収容部３０に核酸検査用の試薬７０が備えられた検査容器１０を用いる。試薬７０は、特定の核酸配列を増幅する増幅試薬と核酸配列判定用の蛍光プローブとを含む試薬である。
　まず、事前準備として、スワブなどの採取具８０を用いて生体から採取された検体８１を、界面活性剤を含む抽出液８２中に浸漬させ、核酸の抽出と夾雑物の処理を行う。以下において、抽出液８２に検体８１が混合され、抽出液８２中で核酸抽出がなされた検体８１を含む液体を検体液Ｓという。
　検体８１は、例えば、被検者の鼻腔、咽頭、口腔内部あるいは患部から採取具８０を用いて採取する。もしくは、鼻腔、咽頭、口腔内部の洗浄液、唾液、尿あるいは血液などの体液である。核酸抽出方法としては、公知の核酸抽出方法を特に制限なく利用できる。例えば、界面活性剤やカオトロピック物質を用いる方法、超音波やビーズミルなどの物理的なせん断を加える方法が挙げられる。
　検査容器１０は検体液Ｓを投入する前の初期状態において、バルブ１６は、第１状態から第３状態いずれにあってもよいが、ここでは、液溜め部１３と液体収容部３０が連通する第１状態に設定しておく。検査においては、まず、抽出液中で核酸抽出がなされた検体を含む検体液Ｓを収容する容器に粗大な夾雑物を除去するフィルタを備えた滴下用のキャップ８６を取り付け、フィルタ８４で濾した検体液Ｓを検査容器１０の投入口１２から投入する（工程ＳＴ１）。検体液Ｓは液溜め部１３に貯留される。
　検査容器１０は、検体液Ｓが投入され、蓋部１２Ａにより投入口１２が閉じられた状態で、検査装置２００に装填される。以下の処理は、検査装置２００内において実施される。
　まず、検査容器１０においては、バルブ１６を第１状態に維持したまま、すなわち、液溜め部１３と液体収容部３０とが連通した状態で、圧力調整機構駆動部２３０により、プランジャ６２を引いて、液体収容部３０内を減圧する。これによって、液溜め部１３中の検体液Ｓは液体収容部３０に移送される（工程ＳＴ２）。なお、初期状態でバルブ１６が第１状態以外であった場合には、バルブ回転機構２２０によりバルブ１６を第１状態に切り替えて、検体液Ｓの送液を行う。
　液体収容部３０内には試薬７０が備えられており、液体収容部３０に移送された検体液Ｓと試薬７０とが混合される（工程ＳＴ３）。なお、液体収容部３０に検体液Ｓが移送された状態で、プランジャ６２を数回押し引きして検体液Ｓと試薬７０との混合を促進させてもよい。
　検体液Ｓと試薬７０とを混合させ、混合液７０Ｓとした後、バルブ回転機構２２０によりバルブ１６を第２状態に切り換える（工程ＳＴ４）。すなわち、液体収容部３０と加熱チャンバ１５とが連通し、かつ液溜め部１３と液体収容部３０とが連通しない状態とする。
　次に、圧力調整機構駆動部２３０により、プランジャ６２を押込み、液体収容部３０内を加圧する。これにより、液体収容部３０内の試薬７０と検体液Ｓが混合された混合液７０Ｓは加熱チャンバ１５に移送される（工程ＳＴ５）。
　次に、バルブ回転機構２２０によりバルブ１６を第３状態に切り替える（工程ＳＴ６）すなわち、液体収容部３０が液溜め部１３及び加熱チャンバ１５のいずれとも連通しない状態とする。これにより、加熱チャンバ１５はエアーバッファ１９以外のチャンバとは連通せず閉じた状態となっている。
　その後、加熱チャンバ１５中の混合液７０Ｓに対する核酸増幅処理及び蛍光検出処理が実施される（工程ＳＴ７）。
　核酸増幅処理は、加熱部２１０により加熱チャンバ１５内の検体液Ｓ（ここでは、混合液７０Ｓ）を加熱して、特定の核酸配列を増幅させる処理である。なお、核酸増幅処理方法は限定されるものではないが、例えば、ＲＴ－ＰＣＲ法、あるいはＰＣＲ法を用いる。ＰＣＲ法を用いる場合、二本鎖ＤＮＡを高温で一本鎖ＤＮＡに解離させる工程（熱変性工程）、その後温度を下げてプライマーを一本鎖ＤＮＡに結合させる工程（アニーリング工程）、及び一本鎖ＤＮＡを鋳型として、ポリメラーゼにより、新たに二本鎖ＤＮＡを合成する工程（伸長工程）を繰り返す。熱変性工程、アニーリング工程及び伸長工程の温度サイクルの一例として、９４℃で１分、５０～６０℃で１分、７２℃で１～５分を１サイクルとして、２０～５０回繰り返すものが挙げられる。また、熱変性工程、アニーリング工程を１つの温度で行ってもよい。このような温度サイクルの一例としては、例えば、９４℃で１分、６０℃で１分を１サイクルとして、２０～５０回繰り返すものが挙げられる。増幅工程における温度サイクルの温度、時間は特に制限はなく、ポリメラーゼやプライマーの性能により任意に選択される。
　蛍光検出処理は、加熱チャンバ１５の上方に配置された検出部２４０により実施される。光源２４２から、波長選択フィルタ２４４を介して、特定の波長の励起光Ｌ１が加熱チャンバ１５内の混合液７０Ｓに照射される。光検出器２４６により、励起光Ｌ１によって励起されて蛍光プローブから生じる蛍光Ｌ２を検出する。例えば、核酸増幅処理がＰＣＲ法である場合、上記の温度サイクルの１サイクルごとに蛍光検出を行いリアルタイムに増幅状況をモニタリングする。
　検体液Ｓ内に特定の核酸配列が存在した場合、増幅工程でその核酸配列が増幅され、この特定の核酸配列に標識される蛍光プローブに励起光Ｌ１が照射されることにより、蛍光Ｌ２が検出される。他方、検体液Ｓ内に特定の核酸配列が存在しない場合には、励起光Ｌ１を照射しても蛍光Ｌ２が検出されない。これによって、特定の核酸配列の有無を判定することができる。
　本検査容器１０を用いた核酸検査方法によれば、エアーバッファ１９を備えているので液体収容部３０から加熱チャンバ１５に検体液Ｓ（ここでは、混合液７０Ｓ）を送液する際、加熱チャンバ１５内を混合液７０Ｓで満たし、かつ混合液７０Ｓを加圧した状態で維持できる。したがって、加熱チャンバ１５を加熱する際に液中に気泡が生じるのを抑制することができ、検査精度を向上させることができる。
　上述の第１実施形態の検査容器１０は、バルブ１６が１つの液体収容部３０を備えた構成であるが、本開示の検査容器は、バルブが２つの液体収容部を備えた形態であってもよい。以下に、第２実施形態の検査容器１１０としてバルブが２つの液体収容部を備えた形態について説明する。
「第２実施形態の検査容器」
　第２実施形態の検査容器１１０（図２４参照）は、回転部材１４０の構成以外は、第１実施形態の検査容器１０と略同様の構成を有する。検査容器１１０は、第１実施形態の検査容器１０と同様に本体部材１０Ａと底部材１０Ｂ（図１～図４参照）とを有する。以下の図面において、検査容器１０と同一の構成要素には同一の符号を付し、詳細な説明を省略する。
　検査容器１１０は、バルブ１１６の構成及び機能が検査容器１０のバルブ１６と異なる。
　図２４に示すように、バルブ１１６は、第１液体収容部３１及び第２液体収容部３２を備える。第１液体収容部３１は、液溜め部１３から送液される検体液Ｓを、加熱チャンバ１５に送液する前に一時に収容する。第２液体収容部３２は、加熱チャンバ１５から送液される検体液Ｓを一時的に収容する。
　バルブ１１６は、液溜め部１３及び加熱チャンバ１５と、第１液体収容部３１及び第２液体収容部３２との接続状態を、次の第１状態と、第２状態と、第３状態と、第４状態とのいずれかの状態に切り替えるバルブである。第１状態は、液溜め部１３と第１液体収容部３１とを連通する状態である。なお、本例の第１状態においては、加熱チャンバ１５と第１液体収容部３１とは連通しない。第２状態は、加熱チャンバ１５と第１液体収容部３１とを連通し、かつ液溜め部１３と第１液体収容部３１とは連通しない状態である。第３状態は、液溜め部１３及び加熱チャンバ１５のいずれとも第１液体収容部３１及び第２液体収容部３２の両方が連通しない状態である。第４状態は、加熱チャンバ１５と第２液体収容部３２とを連通し、かつ、加熱チャンバ１５と第１液体収容部３１とは連通しない状態である。
　本検査容器１１０におけるバルブ１１６は、本体部材１０Ａの上面に設けられた筒状の凹部２４（以下において筒状凹部２４という。）中に配置される回転部材１４０を有する。第１液体収容部３１及び第２液体収容部３２は回転部材１４０内部に設けられている。図２２は回転部材１４０の分解斜視図である。図２２に示すように、回転部材１４０は回転部材本体１４１と蓋体１４２とから構成されている。図２３Ａは回転部材本体１４１の上面側を示す斜視図であり、図２４Ｂは、回転部材本体１４１の下面側を示す斜視図である。
　回転部材本体１４１は、本体部材１０Ａの筒状凹部２４の直径より若干小さい外径の円筒部１４３と、円筒部１４３の上端面に円筒部１４３を囲むように延設された鍔部４４とを有する。鍔部４４は、筒状凹部２４の直径より大きい外径を有する。回転部材本体１４１は、筒状凹部２４内において回転可能に設置される。回転部材本体１４１の鍔部４４には、回転部材４０を回転させる際に使用される孔４４ａが４つ備えられている。４つの孔４４ａは円筒部１４３の中心軸に４回転対称に配置されている。既述の検査装置２００（図１９参照）に備えられているバルブ回転機構２２０の爪２２２が孔４４ａに挿し込まれた状態で駆動され回転されることにより、回転部材１４０が回転される。
　円筒部１４３には、その一端面に半月状に開口する２つの凹部４５、４６（以下において、半月状凹部４５、４６という。）が形成されている。２つの半月状凹部４５、４６は、円筒部１４３の中心を含んで径方向に延びる分離壁４７を挟み対称に配置されている。
　分離壁４７に位置する、円筒部１４３の中心には円筒部１４３の上面から下面に貫通する貫通孔４７ａが設けられている。また、分離壁４７の上面には貫通孔４７ａから径方向の一方に沿って延びる溝４７ｂが設けられており、溝４７ｂの一端は、溝４７ｂの延びる方向に直交して設けられている溝４７ｃに接続されている。溝４７ｃは、２つの半月状凹部４５、４６にそれぞれ連通する溝である。
　蓋体１４２は、半月状凹部４５、４６の開口を覆うように開口に嵌め込み可能に形成されている。第１液体収容部３１は半月状凹部４５の内壁面と蓋体１４２により形成される。同様に、第２液体収容部３２は半月状凹部４６の内壁面と蓋体１４２により形成される。蓋体１４２は、第１液体収容部３１と溝４７ｃとの間、第２液体収容部３２と溝４７ｃとの間の気体の行き来を阻害しない形状を有し、溝４７ｂ及び溝４７ｃと蓋体４２とによって流路が形成されている。
　回転部材本体１４１の半月状凹部４５の底面には、第１液体収容部３１と連通する１つの孔４５ａが設けられている。同様に、回転部材本体１４１の半月状凹部４６の底面には、第２液体収容部３２と連通する１つの孔４６ａが設けられている。
　筒状凹部２４に回転部材１４０を配置した状態において、筒状凹部２４の底面の中心に設けられている孔２４ｃは回転部材本体１４１の円筒部１４３の中心に設けられている貫通孔４７ａと一致する。本構成により、回転部材１４０の回転状態にかかわらず、貫通孔４７ａと孔２４ｃは一致した状態が保たれる。したがって、第１液体収容部３１及び第２液体収容部３２は、溝４７ｃ及び溝４７ｂによって形成された流路、貫通孔４７ａ、第３流路１８ｃ及び気体収容部２９を介して、常時、接続口１７と連通した状態にある。第１液体収容部３１及び第２液体収容部３２は、溝４７ｃ及び溝４７ｂによって形成された流路、貫通孔４７ａ、第３流路１８ｃ及び気体収容部２９は、第１液体収容部３１と第２液体収容部３２をそれぞれ接続口１７に連通させる、第１液体収容部３１及び第２液体収容部３２に共通の吸排気路３５である。本検査容器１１０においては、第１液体収容部３１と第２液体収容部３２とで共通の吸排気路３５を備えた構成であるため、第１液体収容部３１を加圧すると、同時に第２液体収容部３２が加圧され、第１液体収容部３１を減圧すると、同時に第２液体収容部３２が減圧される。
　回転部材１４０を筒状凹部２４内で回転させることで、回転部材１４０の第１液体収容部３１の底面の孔４５ａと、筒状凹部２４の底面の孔２４ａとが一致した状態、孔４５ａと孔２４ｂとが一致した状態、第２液体収容部３２の底面の孔４６ａと孔２４ｂとが一致した状態、孔４５ａが孔２４ａ及び２４ｂのいずれとも一致せず、かつ、孔４６ａが孔２４ａ及び２４ｂのいずれも一致しない状態とすることができる。
　図２４～図２７は、検査容器１１０における流路構造１１１の平面模式図である。図２４～図２７は、バルブ１１６により切り替えられる第１状態～第４状態を説明するための図である。
　図２４では、回転部材１４０の第１液体収容部３１の底面の孔４５ａが第１流路１８ａと接続した状態である。このとき、孔４５ａは、筒状凹部２４の底面の孔２４ａと一致している。これは、液溜め部１３と、第１液体収容部３１とを連通した第１状態である。そして、本例において、第１液体収容部３１と加熱チャンバ１５とは連通していない。また、回転部材１４０の第２液体収容部３２の底面の孔４６ａは、第１流路１８ａにも第２流路１８ｂにも接続していない。すなわち、加熱チャンバ１５は、第１液体収容部３１とも第２液体収容部３２とも連通していない。
　図２５では、回転部材１４０の第１液体収容部３１の底面の孔４５ａが第２流路１８ｂと接続した状態である。このとき、孔４５ａは筒状凹部２４の底面の孔２４ｂと一致している。これは、加熱チャンバ１５と第１液体収容部３１とを連通し、かつ液溜め部１３と第１液体収容部３１とは連通しない第２状態である。本例において、回転部材１４０の底面の孔４６ａは、第１流路１８ａにも第２流路１８ｂにも接続していない。すなわち、第２液体収容部３２は、液溜め部１３とも加熱チャンバ１５とも連通していない。
　図２６では、回転部材１４０の第１液体収容部３１の底面の孔４５ａは、第１流路１８ａとも第２流路１８ｂとも接続していない状態である。すなわち、第１液体収容部３１が、液溜め部１３とも加熱チャンバ１５とも連通しておらず、かつ、第２液体収容部３２も、液溜め部１３とも加熱チャンバ１５とも連通していない第３状態である。第３状態は、液溜め部１３及び加熱チャンバ１５の両方が、第１液体収容部３１及び第２液体収容部３２のいずれとも連通しない状態であればよく、回転部材１４０の回転位置は、図２６の態様に限られない。
　図２７では、回転部材１４０の第２液体収容部３２の底面の孔４６ａが第２流路１８ｂと接続した状態である。このとき、孔４６ａは筒状凹部２４の底面の孔２４ｂと一致している。これは、加熱チャンバ１５と第２液体収容部３２とを連通し、かつ加熱チャンバ１５と第１液体収容部３１とは連通しない第４状態である。
　このように、バルブ１１６は、回転部材１４０を本体部材１０Ａの筒状凹部２４内で回転させることにより、第１状態、第２状態、第３状態及び第４状態を切り替えることができる回転バルブである。なお、バルブ１１６としては、上記第１状態～第４状態を実現できればよく、上記構造の回転バルブに限定されるものではない。
　検査容器１１０において、検体液Ｓの送液は、バルブ１１６により検体液Ｓが収容されたチャンバと検体液Ｓを送液するチャンバとを接続した状態とした上で、圧力調整機構６０により第１液体収容部３１及び／または第２液体収容部３２内の圧力を加減圧することで実施される。
　検査容器１１０を用いた検査の一例において、投入口１２から投入される検体液Ｓは、液溜め部１３、第１液体収容部３１、加熱チャンバ１５、第２液体収容部３２、及び、加熱チャンバ１５の順に送液される。
　液溜め部１３から第１液体収容部３１への送液は、バルブ１１６を第１状態（図２４参照）とし、圧力調整機構６０により第１液体収容部３１の内圧を減圧することにより実現される。シリンダ６１内のプランジャ６２を外側に引き、第１液体収容部３１内の空気をシリンダ６１内に引き込むことで第１液体収容部３１内を減圧する。これにより、液溜め部１３内の検体液Ｓは第１流路１８ａを通って、第１液体収容部３１内に引き込まれる。なお、検体液Ｓは第１液体収容部３１の底面に設けられている孔４５ａから第１液体収容部３１に浸入する。第１液体収容部３１内から空気を排出するための流路は、分離壁４７に設けられている溝４７ｃと、第１液体収容部３１の天面を構成する蓋体４２とによって構成されているので、検体液Ｓは溝４７ｃに検体液Ｓが入り込むことはなく、第１液体収容部３１に溜められる。なお、液溜め部１３から第１液体収容部３１への送液をスムーズに実現するため、液溜め部１３の上部は図示しない吸気口を備え、液溜め部１３内に空気を吸引可能となっている。なお、吸気口には塵埃を排除するためのフィルタが備えられている。
　第１液体収容部３１から加熱チャンバ１５への送液は、バルブ１１６を第２状態（図２５参照）とし、圧力調整機構６０により第１液体収容部３１の内圧を加圧することにより実現される。プランジャ６２をシリンダ６１内で押込み、第１液体収容部３１内にシリンダ６１内の空気を押し込むことで、第１液体収容部３１内を加圧する。これにより、第１液体収容部３１内の検体液Ｓは、第２流路１８ｂを通って、加熱チャンバ１５に押し出され、加熱チャンバ１５に送液される。
　加熱チャンバ１５から第２液体収容部３２への送液は、バルブ１１６を第４状態（図２７参照）とし、圧力調整機構６０により第２液体収容部３２の内圧を減圧することにより実現される。シリンダ６１内のプランジャ６２を外側に引き、第２液体収容部３２内の空気をシリンダ６１内引き込むことで、第２液体収容部３２内を減圧する。これにより、加熱チャンバ１５内の検体液Ｓは第２流路１８ｂを通って、第２液体収容部３２内に引き込まれる。検体液Ｓは第２液体収容部３２の底面に設けられている孔４６ａから第２液体収容部３２に浸入する。第２液体収容部３２内から空気を排出するための流路は、分離壁４７に設けられている溝４７ｃと、第２液体収容部３２の天面を構成する蓋体４２とによって構成されているので、検体液Ｓは溝４７ｃに検体液Ｓが入り込むことはなく、第２液体収容部３２に溜められる。
　第２液体収容部３２から加熱チャンバ１５への送液は、バルブ１１６を第４状態（図２７参照）とし、圧力調整機構６０により第２液体収容部３２の内圧を加圧することにより実現される。プランジャ６２をシリンダ６１内で押込み、第２液体収容部３２内にシリンダ６１内の空気を押し込むことで、第２液体収容部３２内を加圧する。これにより、第２液体収容部３２内の検体液Ｓは、第２流路１８ｂを通って、加熱チャンバ１５に押し出され、加熱チャンバ１５に送液される。
　このように、バルブ１１６は、液溜め部１３から送液される検体液Ｓを、加熱チャンバ１５に送液する前に一時的に収容する第１液体収容部３１及び加熱チャンバ１５から送液される検体液Ｓを一時的に収容する第２液体収容部を内部に備えている。これにより、前処理を実施する前の検体液Ｓの一時的な収容と、前処理を実施した後の検体液Ｓの一時的な収容とを、異なる液体収容部で実施することができる。そのため、バルブ１１６に設けられた液体収容部３１あるいは３２内におけるコンタミネーションを抑制できる。前処理を実施する前の未処理の検体液Ｓと、前処理を実施した後の処理済みの検体液Ｓとの混合が生じないため、検査エラーを抑制することができる。
　また、バルブ１１６を用いることで、容易に加熱チャンバ１５を密閉することができる。この際、加熱チャンバ１５内は大気圧よりも加圧された状態で密閉されることになる。加熱チャンバ１５における前処理あるいは反応処理等の際に、加熱チャンバ１５を加熱する場合、加熱チャンバ１５を密閉した状態で行うことで、検体液Ｓの蒸発、及び、検体液Ｓ中における気泡の発生を抑制できる。加熱チャンバ１５内を加圧した状態で加熱するので、検体液Ｓの昇温性及び冷却性を向上させることができる。したがって、検査精度及び検査速度の向上を図ることができる。
　流路構造１１において、液溜め部１３の容積をＶ１、第１液体収容部３１の容積をＶ２、第２液体収容部３２の容積をＶ４、加熱チャンバ１５の容積をＶ３とした場合に、Ｖ１＞Ｖ２＞Ｖ４＞Ｖ３という関係にあることが好ましい。すなわち、検査工程において、検体液Ｓが後に送液されるチャンバほど容積が小さいことが好ましい。なお、加熱チャンバ１５は検査工程の途中で一度検体液Ｓが送液されるが、最後に送液されるチャンバでもあるため、検査工程の検体液Ｓの送液において最も下流側のチャンバと見做している。
　一例として、液溜め部１３の容積Ｖ１は、５０μＬ～３００μＬ、第１液体収容部３１の容積Ｖ２は５０μＬ、第２液体収容部３２の容積Ｖ４は２０μＬ～４０μＬ、加熱チャンバ１５の容積Ｖ３は１０μＬ～３０μＬなどである。
　液溜め部１３の容積Ｖ１が第１液体収容部３１の容積Ｖ２よりも大きければ、液溜め部１３に第１液体収容部３１の容積Ｖ２よりも多くの検体液Ｓを貯留させることができる。そして、検査工程の検体液Ｓの送液における送液上流から下流に向けて配置されている複数のチャンバの容積の関係がＶ１＞Ｖ２＞Ｖ４＞Ｖ３であれば、検体液Ｓを送液した際に、下流側のチャンバを検体液Ｓで満たすことができる。そのため、最終的に検出に用いられる加熱チャンバ１５において、検体液Ｓの不足が生じるのを抑制できる。
　検査容器１１０は、図２４に示すように、検体液Ｓと反応させる試薬７０を第２液体収容部３２内に備えていてもよい。例えば、検査容器１１０が核酸検出に用いられる場合、試薬７０は、特定の核酸配列を増幅する増幅試薬と核酸配列判定用の蛍光プローブとを含む試薬である。
　上述した検査装置２００において、第２実施形態の検査容器１１０を用いた検査を実施する場合、バルブ回転機構２２０が、検査容器１１０のバルブ１１６を第１状態、第２状態、第３状態及び第４状態に切り替え可能に構成されていればよい。
「第２実施形態の核酸検査方法」
　第２実施形態の検査容器１１０を用いた一例の核酸検査方法について図２８～図３０を参照して説明する。ここでは、第２液体収容部３２に核酸検査用の試薬７０が備えられた検査容器１１０を用いる。試薬７０は、特定の核酸配列を増幅する増幅試薬と核酸配列判定用の蛍光プローブとを含む試薬である。
　まず、事前準備として、スワブなどの採取具８０を用いて生体から採取された検体８１を、界面活性剤、ＰｒｏＫ（プロテイナーゼＫ（proteinase K））を含む抽出液８３中に浸漬させ、核酸の抽出と夾雑物の処理を行う。以下において、抽出液８３に検体８１が混合され、抽出液８３中で核酸抽出がなされた検体８１を含む液体を検体液Ｓという。
　検体８１は、例えば、被検者の鼻腔、咽頭、口腔内部あるいは患部から採取具８０を用いて採取する。もしくは、鼻腔、咽頭、口腔内部の洗浄液、唾液、尿あるいは血液などの体液である。核酸抽出方法としては、公知の核酸抽出方法を特に制限なく利用できる。例えば、界面活性剤やカオトロピック物質を用いる方法、超音波やビーズミルなどの物理的なせん断を加える方法が挙げられる。
　検査容器１１０は検体液Ｓを投入する前の初期状態において、バルブ１１６は、第１状態から第４状態いずれにあってもよいが、ここでは、液溜め部１３と第１液体収容部３１が連通する第１状態に設定しておく。検査においては、まず、抽出液中で核酸抽出がなされた検体を含む検体液Ｓを収容する容器に粗大な夾雑物を除去するフィルタを備えた滴下用のキャップ８６を取り付け、フィルタ８４で濾した検体液Ｓを検査容器１１０の投入口１２から投入する（工程ＳＴ１１）。検体液Ｓは液溜め部１３に貯留される。
　検査容器１１０は、検体液Ｓが投入され、蓋部１２Ａにより投入口１２が閉じられた状態で、検査装置２００に装填される。以下の処理は、検査装置２００内において実施される。
　まず、検査容器１１０においては、バルブ１１６を第１状態に維持したまま、すなわち、液溜め部１３と第１液体収容部３１とが連通した状態で、圧力調整機構駆動部２３０により、プランジャ６２を引いて、第１液体収容部３１内を減圧する。これによって、液溜め部１３中の検体液Ｓは第１液体収容部３１に移送される（工程ＳＴ１２）。なお、初期状態でバルブ１１６が第１状態以外であった場合には、バルブ回転機構２２０によりバルブ１１６を第１状態に切り替えて、検体液Ｓの送液を行う。
　次に、バルブ回転機構２２０（図１９参照）によりバルブ１１６を第２状態に切り替える（工程ＳＴ１３）。すなわち、加熱チャンバ１５と第１液体収容部３１とが連通し、かつ、液溜め部１３と第１液体収容部３１とが連通しない状態とする。
　次に、圧力調整機構駆動部２３０により、プランジャ６２を押し込み、第１液体収容部３１内を加圧する。これによって、第１液体収容部３１から加熱チャンバ１５へ検体液Ｓを移送する（工程ＳＴ１４）。
　第１液体収容部３１内に検体液Ｓが十分に移送された後、バルブ回転機構２２０により、バルブ１１６を第３状態に切り替える（工程ＳＴ１５）。すなわち、第１液体収容部３１及び第２液体収容部３２が液溜め部１３及び加熱チャンバ１５のいずれとも連通しない状態とする。これにより、加熱チャンバ１５は他のどのチャンバにも連通せず閉じた状態となっている。
　加熱チャンバ１５内の検体液Ｓに対し前処理を実施する（工程ＳＴ１６）。ここでは、加熱部２１０により、例えば、９０℃以上に加熱される。これにより、検体液Ｓ中のＰｒｏＫを失活させる。
　次に、バルブ回転機構２２０により、バルブ１１６を第４状態に切り替える（工程ＳＴ１７）。すなわち、加熱チャンバ１５と第２液体収容部３２とを連通し、加熱チャンバ１５と第１液体収容部３１とは連通しない状態とする。
　加熱チャンバ１５と第２液体収容部３２とが連通した状態で、圧力調整機構駆動部２３０により、プランジャ６２を引いて、第２液体収容部３２内を減圧する。これによって、加熱チャンバ１５中の検体液Ｓは第２液体収容部３２に移送される（工程ＳＴ１８）。
　第２液体収容部３２内には試薬７０が備えられており、第２液体収容部３２に移送された検体液Ｓと試薬７０とが混合される（工程ＳＴ１９）。なお、第２液体収容部３２に検体液Ｓが移送された状態で、プランジャ６２を数回押し引きして検体液Ｓと試薬７０との混合を促進させてもよい。
　検体液Ｓと試薬７０とを混合させた後、圧力調整機構駆動部２３０により、プランジャ６２を押込み、第２液体収容部３２内を加圧する。これにより、第２液体収容部３２内の試薬７０と検体液Ｓが混合された混合液７０Ｓは加熱チャンバ１５に移送される（工程ＳＴ２０）。
　次に、バルブ回転機構２２０によりバルブ１１６を第３状態に切り替える（工程ＳＴ２１）すなわち、第１液体収容部３１及び第２液体収容部３２が液溜め部１３及び加熱チャンバ１５のいずれとも連通しない状態とする。これにより、加熱チャンバ１５は他のどのチャンバにも連通せず閉じた状態となっている。
　その後、加熱チャンバ１５中の混合液７０Ｓに対する核酸増幅処理及び蛍光検出処理が実施される（工程ＳＴ２２）。
　本検査容器１１０を用いた核酸検査方法によれば、エアーバッファ１９を備えているので、第１実施形態の核酸検査方法の場合と同様の効果を得ることができる。また、本検査方法では、前処理前の検体液Ｓを第１液体収容部３１で一時保留し、加熱チャンバ１５で前処理を行った後、前処理済みの検体液Ｓを第１液体収容部３１とは異なる第２液体収容部３２に移送して試薬７０と混合する。そのため、前処理をしていない検体液Ｓと、前処理後の検体液Ｓを同一のチャンバ（ここでは、第１液体収容部３１）に貯留させることはない。したがって、前処理後の検体液Ｓに未処理の検体液Ｓを混入させないので、前処理後の検体液Ｓに失活していないＰｒｏＫを混入させない。したがって、良好な核酸増幅を実現でき、検査精度を向上させることができる。
　上記検査容器１０、１１０を用いた核酸検査方法においては、蛍光プローブを用いた蛍光法により、核酸の有無の判定を行っているが、核酸の有無の検出方法としては、蛍光法に限らず、核酸クロマト法、光散乱法、比色法、シーケンス法及び電気化学法などの他の検出方法を用いてもよい。これらは、検出部を適宜変更することで実現可能であり、検査容器に、蛍光プローブに代えて、各検出方法に応じたプローブを含む試薬を備えればよい。
　上記において、検査容器１０、１１０を用いた検査として核酸検査を挙げたが、検査容器１０、１１０は核酸検査のみならず、他の遺伝子検査あるいは微生物検査などにおいても適用可能である。
　以下、本開示の技術のより具体的な実施例について説明する。
　図３１は、実施例の検査容器の外観を示す平面図である。実施例の検査容器は、図２２～２７を参照して説明した第２実施形態の検査容器１１０と略同様の構成をしている。図３１において、第２実施形態の検査容器１１０と同一の構成要素には同一の符号を付している。
［検査容器の作製方法］
　表１に示すようにエアーバッファ１９の容積Ｖａを変化させた実施例１～７を作製した。各実施例において、液体収容部３１より下流側に設けられている流路１８ｂ、加熱チャンバ１５及びエアーバッファ１９の総容積をＶｔとし、流路１８ｂ及び加熱チャンバ１５の容積は固定とした。総容積Ｖｔは、図３２Ａで示すように液体収容部３１より下流側に設けられている空間の容積の和であり、ここでは、流路１８ｂの容積、加熱チャンバ１５の容積、及びエアーバッファ１９の容積の和である。また、エアーバッファ１９の容積Ｖａは、図３２Ｂに示す、流路１９ａの容積、及エアーチャンバ１９ｂの容積の和である。
　本体部材１０Ａ及び回転部材１４０の材料としては、ポリカーボネートを用いた。
具体的にはタキロンシーアイ社のＰＣ１６００を用いて、切削加工により形成した。本体部材１０Ａと回転部材１４０との間に、封止材として冨田マテックス社製のシリコーンフィルムＧＦＳＸ６０００（厚み０．３ｍｍ）を挟み、上部から抑え板５０を用いてネジ５１で固定することで、本体部材１０Ａ、封止材及び回転部材１４０を接触させた。底部材１０Ｂには、Ｂｉｏ－ＲＡＤ社製のＰＣＲシーリングフィルム：＃ＭＳＣ１００１を用いた。本体部材１０Ａの底面に底部材１０Ｂを貼り付けることで検査容器１１０を得た。
　接続ポート６５に、エアーホース１６０を介してテルモ社シリンジＳＳ－０２ＳＺを接続した。駿河精機製自動Ｘ軸ステージＫＸＬ０６０５０－Ｎ２－Ｃ、ステッピングモータコントローラＤＳ２０００Ａを用いて、シリンダ６１を非移動部に固定し、プランジャ６２をステージに固定した。この状態でステージ移動するとプランジャ６２をシリンダ６１に対して可動とした。ステージの移動に伴いプランジャ６２がシリンダ６１内を摺動することで、検体液の送液を可能とした。なお、加熱チャンバ１５を封止する際には、ステージ位置を固定して加圧状態を維持したまま回転部材１４０を回転させて、加熱チャンバ１５を封止した。なお、回転部材１４０の回転、すなわちバルブ１１６の切り替えは都度手操作で行った。また、接続ポート６５と、シリンダ６１との間に圧力計１６２を接続することにより、送液時の圧力をモニタリングした。
［試験］
　各実施例について、試験として、図２８～図２９を参照して説明した核酸検査方法の工程ＳＴ１１～ＳＴ１６に沿った処理を行った。まず、投入口１２に検体液として水を５０μＬ滴下し（工程ＳＴ１１）、プランジャ６２を引き込み、第１液体収容部３１に検体液を移送した（工程ＳＴ１２）。次いで、バルブ１１６を切換えて第１液体収容部３１と加熱チャンバ１５とを接続させ（工程ＳＴ１３）、プランジャ６２を押込み、圧力計１６２により圧力をモニタリングしながら検体液を加熱チャンバ１５に送液した（工程ＳＴ１４）。検体液の加熱チャンバ１５への送液に際しては、検体液の先頭がエアーバッファ１９に到達したときに圧力を固定して送液をストップした。この送液をストップした時の圧力を送液圧力とした（表１参照）。さらに、バルブ１１６を切換えて、加熱チャンバを密閉し（工程ＳＴ１５）、ヒータを用いて加熱チャンバ１５に９５℃、５分の加熱処理を行った（工程ＳＴ１６）。この加熱チャンバ１５の加熱による影響、特には気泡の発生状態及び底部材１０Ｂのデラミネーションの発生状態を確認した。
　気泡の発生及び底部材１０Ｂのデラミネーションを加熱評価として、それぞれ、以下の基準で評価した。
１）気泡の発生（加熱評価１）
　４：気泡の発生がみられない。
　３：気泡の発生が若干生じる。
　２：気泡の発生が生じるが、影響は軽微。
　１：気泡の発生が激しく、検出に支障がでる。
　実用上２、以上あることが好ましい。
２）デラミネーション（加熱評価２）
　３：デラミネーションが発生していない。
　２：ラミネーションがわずかにみられるが、検体液は加熱チャンバ１５内に残っており、その後の工程への影響は軽微。
　１：デラミネーションが大きく発生しており、検体液がデラミネーションにより発生した空間に移動して加熱チャンバ１５内に残らない、もしくは、デラミネーションにより検査容器が外部と連通し、検体液が外部に流出する。
　実用上、２以上であることが好ましい。
　表１に各実施例のエアーバッファの容積Ｖａ、流路１８ｂ、加熱チャンバ１５及びエアーバッファ１９の総容積Ｖｔ、送液圧力、加熱評価１及び加熱評価２をまとめて示す。
［実施例１］
　Ｖａを４．４μＬ（マイクロリットル）、Ｖｔを３４．３μＬに設定して、上記作製方
法に従って検査容器を作製した。送液圧力は１９８ｋＰａであり、加熱による気泡の発生は見られ無かったが、加熱チャンバの周辺部にわずかにデラミネーションが確認された。
［実施例２］
　Ｖａを５．２μＬ、Ｖｔを３５．１μＬに設定した以外は実施例１と同様の手順で検査容器を作製した。送液圧力は１５４ｋＰａであり、加熱による気泡の発生は見られず、デラミネーションも発生しなかった。
［実施例３］
　Ｖａを５．９μＬ、Ｖｔを３５．８μＬに設定した以外は実施例１と同様の手順で検査容器を作製した。送液圧力は１２１ｋＰａであり、加熱による気泡の発生は見られず、デラミネーションも発生しなかった。
［実施例４］
　Ｖａを７．７μＬ、Ｖｔを３７．６μＬｌに設定した以外は実施例１と同様の手順で検査容器を作製した。送液圧力は８３ｋＰａであり、加熱による気泡の発生は見られず、デラミネーションも発生しなかった。
［実施例５］
　Ｖａを８．７μＬ、Ｖｔを３８．６μＬに設定した以外は実施例１と同様の手順で検査容器を作製した。送液圧力は７２ｋＰａであり、加熱による気泡の発生は見られず、デラミネーションも発生しなかった。
［実施例６］
　Ｖａを１２．７μＬ、Ｖｔを４２．６μＬに設定した以外は実施例１と同様の手順で検査容器を作製した。送液圧力は４２ｋＰａであり、加熱により若干気泡の発生が見られたが、デラミネーションは発生しなかった。
［実施例７］
　Ｖａを１５．０μＬ、Ｖｔを４４．９μＬに設定した以外は実施例１と同様の手順で検査容器を作製した。送液圧力は２０ｋＰａであり、加熱による気泡の発生が見られたが検出部への影響は軽微であった。また、デラミネーションは発生しなかった。
　以上の通り、実施例１～実施例７の検査容器はいずれも実用上問題ない検査容器であった。実施例はいずれも
１０％≦Ｖａ／Ｖｔ×１００≦３５％
を満たす例である。
　なお、加熱評価１、２から、Ｖａ／Ｖｔは、１４％以上、３０％以下であることがより好ましく、１５％以上２５％以下であることがさらに好ましいという結果が得られた。
　以上の実施形態に関し、更に以下の付記を開示する。
（付記１）
　検査対象の検体液を収容した状態で検査装置に着脱自在に装填される検査容器であって、
　前記検体液が投入される投入口と、
　前記投入口から投入された前記検体液を貯留する液溜め部と、
　前記液溜め部から送液される前記検体液を収容するチャンバであって、前記検査装置内の加熱部による加熱領域に配置され、加熱可能な加熱チャンバと、
　前記検体液を移送する圧力を調整する圧力調整機構を接続する接続口と、
　前記検体液を一時的に収容する液体収容部が内部に設けられ、かつ、前記液体収容部内の圧力を調整するために前記液体収容部が前記接続口と常時連通されているバルブであって、前記液溜め部と前記液体収容部とを連通し、かつ、前記加熱チャンバと前記液体収容部とは連通しない第１状態と、前記加熱チャンバと前記液体収容部とを連通し、かつ前記液溜め部と前記液体収容部とは連通しない第２状態と、前記液溜め部及び前記加熱チャンバの両方と前記液体収容部とが連通しない第３状態とを切り替え可能なバルブと、
　前記加熱チャンバに対して前記バルブを上流側、前記バルブの反対側を下流側とした場合において、前記加熱チャンバの下流側で、かつ前記加熱領域外に配置され、前記加熱チャンバから流入する加圧された気体を一時的に貯留するエアーバッファであって、前記加熱チャンバにのみ接続されたエアーバッファとを備えている、検査容器。
（付記２）
　前記エアーバッファの容積をＶａとし、前記第２状態における前記液体収容部より下流に設けられている流路、前記加熱チャンバ及び前記エアーバッファの総容積をＶｔとした場合に、
　１０％≦Ｖａ／Ｖｔ×１００≦３５％
を満たす、付記１に記載の検査容器。
（付記３）
　前記液溜め部の容積をＶ１とし、前記液体収容部の容積をＶ２とし、前記加熱チャンバの容積をＶ３とした場合に、
Ｖ１＞Ｖ２＞Ｖ３
を満たす、付記１又は２に記載の検査容器。
（付記４）
　前記加熱チャンバは、前記加熱領域であって、かつ前記検査装置内の検出部による検出領域に配置され、
　前記加熱チャンバと前記エアーバッファとの間であって、前記加熱領域であり、かつ前記検出領域ではない領域に、前記加熱チャンバと前記エアーバッファとに接続された貯留部を備えた、付記１から付記３のいずれか１つに記載の検査容器。
（付記５）
　前記加熱チャンバは、底面、天面及び側壁によって画定された空間であり、
　前記加熱チャンバ内の前記エアーバッファへ接続される流路に接する下流領域に、前記底面から前記天面までの高さが、前記加熱チャンバ内の前記下流領域よりも上流側の領域の前記底面から前記天面までの高さに対して５％以上異なる段差部を有する、付記１から付記４のいずれか１つに記載の検査容器。
（付記６）
　前記加熱チャンバと前記エアーバッファとを連通する流路の、前記加熱チャンバと接続する領域の壁面が疎水化されている、付記１から付記５のいずれか１つに記載の検査容器。
（付記７）
　前記液体収容部に、前記検体液と混合させる試薬が収容されている、付記１から付記６のいずれか１つに記載の検査容器。
（付記８）
　前記試薬が、特定の核酸配列を増幅する増幅試薬と核酸配列判定用の蛍光プローブとを
含む、付記７に記載の検査容器。
（付記９）
　前記液体収容部を第１液体収容部とした場合に、前記バルブは、前記加熱チャンバから送液される前記検体液を一時的に収容する第２液体収容部であって、前記接続口と常時連通されている第２液体収容部をさらに有し、
　前記第３状態は、前記液溜め部及び前記加熱チャンバの両方と前記第１液体収容部とが連通せず、かつ、前記加熱チャンバと前記第２液体収容部とが連通しない状態であり、
　前記バルブは、前記第１状態、前記第２状態及び前記第３状態に加えて、前記加熱チャンバと前記第２液体収容部とを連通し、かつ、前記加熱チャンバと前記第１液体収容部とは連通しない第４状態にも切替え可能である、付記１から付記８のいずれか１つに記載の検査容器。
（付記１０）
　前記液溜め部の容積をＶ１とし、前記第１液体収容部の容積をＶ２とし、前記加熱チャンバの容積をＶ３、前記第２液体収容部の容積をＶ４とした場合に、
Ｖ１＞Ｖ２＞Ｖ４＞Ｖ３
を満たす、付記９に記載の検査容器。
（付記１１）
　前記第２液体収容部に、前記検体液と混合させる試薬が収容されている、付記９に記載の検査容器。
（付記１２）
　前記試薬が、特定の核酸配列を増幅する増幅試薬と核酸配列判定用の蛍光プローブとを含む、付記１１に記載の検査容器。
（付記１３）
　前記接続口に前記圧力調整機構が直接もしくは配管を介して間接的に接続された付記８に記載の検査容器を用いた核酸検査方法であって、
　前記検査容器の前記投入口から、前記検体液を投入して、前記液溜め部に前記検体液を収容させ、
　前記バルブを前記第１状態のまま、もしくは前記第１状態に切り替え、前記圧力調整機構による前記液体収容部内を減圧する操作により前記液溜め部から前記液体収容部へ前記検体液を送液させて、前記液体収容部において、前記検体液と前記試薬とを混合し、
　前記バルブを前記第２状態に切り替え、
　前記圧力調整機構による前記液体収容部内を加圧する操作により前記液体収容部から前記加熱チャンバに前記検体液及び前記試薬の混合液を送液し、
　前記バルブを前記第３状態に切り替え、
　前記加熱チャンバにおいて、前記混合液を温調することにより、前記混合液中の前記特定の核酸配列を増幅し、
　励起光を前記混合液に照射し、前記蛍光プローブから生じる蛍光を検出し、
　前記特定の核酸配列の有無もしくは濃度を判定する、核酸検査方法。
（付記１４）
　前記接続口に前記圧力調整機構が直接もしくは配管を介して間接的に接続された付記１２に記載の検査容器を用いた核酸検査方法であって、
　前記検査容器の前記投入口から、前記検体液を投入して、前記液溜め部に前記検体液を収容させ、
　前記バルブを前記第１状態のまま、もしくは前記第１状態に切り替え、前記圧力調整機構による前記第１液体収容部内を減圧する操作により前記液溜め部から前記第１液体収容部に前記検体液を送液させ、
　前記バルブを前記第２状態に切り替え、
　前記圧力調整機構による前記第１液体収容部内を加圧する操作により前記第１液体収容部から前記加熱チャンバに前記検体液を送液させ、
　前記バルブを前記第３状態に切り替え、
　前記加熱チャンバにおいて、前記検体液を加熱処理し、
　前記バルブを前記第４状態に切り替え、
　前記圧力調整機構による前記第２液体収容部内を減圧する操作により、前記加熱チャンバから前記第２液体収容部に前記検体液を送液させて、前記第２液体収容部において、前記検体液と前記試薬とを混合し、
　前記圧力調整機構による前記第２液体収容部内を加圧する操作により、前記第２液体収容部から前記加熱チャンバに、前記検体液及び前記試薬の混合液を送液し、
　前記バルブを前記第３状態に切り替え、
　前記加熱チャンバにおいて、前記混合液を温調することにより、前記混合液中の前記特定の核酸配列を増幅し、
　励起光を前記混合液に照射し、前記蛍光プローブから生じる蛍光を検出し、
　前記特定の核酸配列の有無もしくは濃度を判定する、核酸検査方法。
　なお、２０２２年９月５日に出願された日本国特許出願２０２２－１４０９２４の開示は、その全体が参照により本明細書に取り込まれる。本明細書に記載された全ての文献、特許出願及び技術規格は、個々の文献、特許出願及び技術規格が参照により取り込まれることが具体的かつ個々に記された場合と同程度に、本明細書中に参照により取り込まれる。

Claims (14)

  1. 　検査対象の検体液を収容した状態で検査装置に着脱自在に装填される検査容器であって、
    　前記検体液が投入される投入口と、
    　前記投入口から投入された前記検体液を貯留する液溜め部と、
    　前記液溜め部から送液される前記検体液を収容するチャンバであって、前記検査装置内の加熱部による加熱領域に配置され、加熱可能な加熱チャンバと、
    　前記検体液を移送する圧力を調整する圧力調整機構を接続する接続口と、
    　前記検体液を一時的に収容する液体収容部が内部に設けられ、かつ、前記液体収容部内の圧力を調整するために前記液体収容部が前記接続口と常時連通されているバルブであって、前記液溜め部と前記液体収容部とを連通し、かつ、前記加熱チャンバと前記液体収容部とは連通しない第１状態と、前記加熱チャンバと前記液体収容部とを連通し、かつ前記液溜め部と前記液体収容部とは連通しない第２状態と、前記液溜め部及び前記加熱チャンバの両方と前記液体収容部とが連通しない第３状態とを切り替え可能なバルブと、
    　前記加熱チャンバに対して前記バルブを上流側、前記バルブの反対側を下流側とした場合において、前記加熱チャンバの下流側で、かつ前記加熱領域外に配置され、前記加熱チャンバから流入する加圧された気体を一時的に貯留するエアーバッファであって、前記加熱チャンバにのみ接続されたエアーバッファとを備えている、検査容器。
  2. 　前記エアーバッファの容積をＶａとし、前記第２状態における前記液体収容部より下流に設けられている流路、前記加熱チャンバ及び前記エアーバッファの総容積をＶｔとした場合に、
    　１０％≦Ｖａ／Ｖｔ×１００≦３５％
    を満たす、請求項１に記載の検査容器。
  3. 　前記液溜め部の容積をＶ１とし、前記液体収容部の容積をＶ２とし、前記加熱チャンバの容積をＶ３とした場合に、
    Ｖ１＞Ｖ２＞Ｖ３
    を満たす、請求項１に記載の検査容器。
  4. 　前記加熱チャンバは、前記加熱領域であって、かつ前記検査装置内の検出部による検出領域に配置され、
    　前記加熱チャンバと前記エアーバッファとの間であって、前記加熱領域であり、かつ前記検出領域ではない領域に、前記加熱チャンバと前記エアーバッファとに接続された貯留部を備えた、請求項１に記載の検査容器。
  5. 　前記加熱チャンバは、底面、天面及び側壁によって画定された空間であり、
    　前記加熱チャンバ内の前記エアーバッファへ接続される流路に接する下流領域に、前記底面から前記天面までの高さが、前記加熱チャンバ内の前記下流領域よりも上流側の領域の前記底面から前記天面までの高さに対して５％以上異なる段差部を有する、請求項１に記載の検査容器。
  6. 　前記加熱チャンバと前記エアーバッファとを連通する流路の、前記加熱チャンバと接続する領域の壁面が疎水化されている、請求項１に記載の検査容器。
  7. 　前記液体収容部に、前記検体液と混合させる試薬が収容されている、請求項１に記載の検査容器。
  8. 　前記試薬が、特定の核酸配列を増幅する増幅試薬と核酸配列判定用の蛍光プローブとを含む、請求項７に記載の検査容器。
  9. 　前記液体収容部を第１液体収容部とした場合に、前記バルブは、前記加熱チャンバから送液される前記検体液を一時的に収容する第２液体収容部であって、前記接続口と常時連通されている第２液体収容部をさらに有し、
    　前記第３状態は、前記液溜め部及び前記加熱チャンバの両方と前記第１液体収容部とが連通せず、かつ、前記加熱チャンバと前記第２液体収容部とが連通しない状態であり、
    　前記バルブは、前記第１状態、前記第２状態及び前記第３状態に加えて、前記加熱チャンバと前記第２液体収容部とを連通し、かつ、前記加熱チャンバと前記第１液体収容部とは連通しない第４状態にも切替え可能である、請求項１に記載の検査容器。
  10. 　前記液溜め部の容積をＶ１とし、前記第１液体収容部の容積をＶ２とし、前記加熱チャンバの容積をＶ３、前記第２液体収容部の容積をＶ４とした場合に、
    Ｖ１＞Ｖ２＞Ｖ４＞Ｖ３
    を満たす、請求項９に記載の検査容器。
  11. 　前記第２液体収容部に、前記検体液と混合させる試薬が収容されている、請求項９に記載の検査容器。
  12. 　前記試薬が、特定の核酸配列を増幅する増幅試薬と核酸配列判定用の蛍光プローブとを含む、請求項１１に記載の検査容器。
  13. 　前記接続口に前記圧力調整機構が直接もしくは配管を介して間接的に接続された請求項８に記載の検査容器を用いた核酸検査方法であって、
    　前記検査容器の前記投入口から、前記検体液を投入して、前記液溜め部に前記検体液を収容させ、
    　前記バルブを前記第１状態のまま、もしくは前記第１状態に切り替え、前記圧力調整機構による前記液体収容部内を減圧する操作により前記液溜め部から前記液体収容部へ前記検体液を送液させて、前記液体収容部において、前記検体液と前記試薬とを混合し、
    　前記バルブを前記第２状態に切り替え、
    　前記圧力調整機構による前記液体収容部内を加圧する操作により前記液体収容部から前記加熱チャンバに前記検体液及び前記試薬の混合液を送液し、
    　前記バルブを前記第３状態に切り替え、
    　前記加熱チャンバにおいて、前記混合液を温調することにより、前記混合液中の前記特定の核酸配列を増幅し、
    　励起光を前記混合液に照射し、前記蛍光プローブから生じる蛍光を検出し、
    　前記特定の核酸配列の有無もしくは濃度を判定する、核酸検査方法。
  14. 　前記接続口に前記圧力調整機構が直接もしくは配管を介して間接的に接続された請求項１２に記載の検査容器を用いた核酸検査方法であって、
    　前記検査容器の前記投入口から、前記検体液を投入して、前記液溜め部に前記検体液を収容させ、
    　前記バルブを前記第１状態のまま、もしくは前記第１状態に切り替え、前記圧力調整機構による前記第１液体収容部内を減圧する操作により前記液溜め部から前記第１液体収容部に前記検体液を送液させ、
    　前記バルブを前記第２状態に切り替え、
    　前記圧力調整機構による前記第１液体収容部内を加圧する操作により前記第１液体収容部から前記加熱チャンバに前記検体液を送液させ、
    　前記バルブを前記第３状態に切り替え、
    　前記加熱チャンバにおいて、前記検体液を加熱処理し、
    　前記バルブを前記第４状態に切り替え、
    　前記圧力調整機構による前記第２液体収容部内を減圧する操作により、前記加熱チャンバから前記第２液体収容部に前記検体液を送液させて、前記第２液体収容部において、前記検体液と前記試薬とを混合し、
    　前記圧力調整機構による前記第２液体収容部内を加圧する操作により、前記第２液体収容部から前記加熱チャンバに、前記検体液及び前記試薬の混合液を送液し、
    　前記バルブを前記第３状態に切り替え、
    　前記加熱チャンバにおいて、前記混合液を温調することにより、前記混合液中の前記特定の核酸配列を増幅し、
    　励起光を前記混合液に照射し、前記蛍光プローブから生じる蛍光を検出し、
    　前記特定の核酸配列の有無もしくは濃度を判定する、核酸検査方法。
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