WO2023219120A1

WO2023219120A1 - 抗ｃｄ３７－抗ｃｄ３二重特異性抗体

Info

Publication number: WO2023219120A1
Application number: PCT/JP2023/017658
Authority: WO
Inventors: 真司曽我; 繁典八木; 貴史本田
Original assignee: アステラス製薬株式会社
Priority date: 2022-05-12
Filing date: 2023-05-11
Publication date: 2023-11-16
Also published as: TW202413431A; WO2023219121A1; TW202413430A

Abstract

本発明の課題は、ヒトの治療に用いることができる抗ＣＤ３７－抗ＣＤ３二重特異性抗体を提供することにある。　本発明者らは、ＣＤ３に対する多様な親和性を有し且つ安定性が向上した抗ＣＤ３ｓｃＦｖを複数作製し、それらを用いて複数の抗ＣＤ３７－抗ＣＤ３二重特異性抗体を作製した。当該二重特異性抗体の多くは、高濃度にてｉｎ　ｖｉｔｒｏ細胞傷害活性及びサイトカイン産生活性が減弱するという望ましくない性質を示した。一連の検討により見出された高濃度においても活性が減弱しない抗体は、ｉｎ　ｖｉｖｏにおいて抗腫瘍作用を示した。従って、これらの抗体はＣＤ３７を発現するヒトのがんの治療に用いることができる。

Description

抗ＣＤ３７－抗ＣＤ３二重特異性抗体

　本発明は、ヒトの治療に用いる医薬組成物の有効成分として有用な抗ＣＤ３７－抗ＣＤ３二重特異性抗体に関する。

　ＣＤ３７はテトラスパニンファミリーに属する４回膜貫通タンパク質であり、小細胞外ループ（ｓｍａｌｌ　ｅｘｔｒａｃｅｌｌｕｌａｒ　ｌｏｏｐ；ＳＥＬ）と大細胞外ループ（ｌａｒｇｅ　ｅｘｔｒａｃｅｌｌｕｌａｒ　ｌｏｏｐ；ＬＥＬ）という２つの細胞外領域と、３つの細胞質領域を有する。テトラスパニンファミリーの分子は接着、運動、分化、増殖等の様々な細胞機能に関与することが報告されている。そのうちの一つであるＣＤ３７は、ノックアウトマウスを用いた解析から、抗体産生やＴ細胞の機能の制御等の免疫機能にも関与することが示されている（非特許文献１）。ＣＤ３７の正常組織における発現は血液細胞に限定され、中でも成熟Ｂ細胞に高発現している。これに対し、未熟なＢ細胞や、分化の進んだ形質細胞では発現は低い、又は全く発現していない。Ｔ細胞、単球、顆粒球等の血液細胞においては、低レベルながらもＣＤ３７が発現している。さらに、ＣＤ３７は成熟Ｂ細胞に由来する非ホジキンリンパ腫や慢性リンパ性白血病などの血液がんにおいても高頻度に高発現していることが知られている。上述のように、ＣＤ３７を発現する細胞は限定的であり、且つＣＤ３７はがん細胞において高発現が認められるため、がんの治療標的として好ましく、ＣＤ３７を標的としたがん治療薬の開発が進められている。しかしながら、これまでに実用化に至った治療薬は存在しない（特許文献１、非特許文献１）。

　分化抗原群３（Ｃｌｕｓｔｅｒ　ｏｆ　Ｄｉｆｆｅｒｅｎｔｉａｔｉｏｎ　３；ＣＤ３）は、Ｔ細胞表面においてＴ細胞受容体と複合体を形成することによりＴ細胞に活性化シグナルを伝達するタンパク質である。ＣＤ３は、ガンマ（γ）、デルタ（δ）、イプシロン（ε）、ゼータ（ζ）及びイータ（η）鎖の５種類のサブユニットからなる複合体であり、各サブユニットはεγ、εδ、ζζの３種類の二量体を形成する。ＣＤ３の発現はＴ細胞に特異的であり、Ｔ細胞の分化のすべての段階で発現する。さらに、正常Ｔ細胞及び腫瘍性Ｔ細胞のいずれにも発現していることからＴ細胞のマーカーとして広く使用されている。

　生体内の免疫系を利用した新たながんの治療法として、二重特異性Ｔ細胞リクルート抗体（ｂｉｓｐｅｃｉｆｉｃ　Ｔ－ｃｅｌｌ－ｒｅｃｒｕｉｔｉｎｇ　ａｎｔｉｂｏｄｉｅｓ）の開発が進められている（特許文献２～６）。二重特異性Ｔ細胞リクルート抗体の最も一般的な形態は、がん細胞上に発現する腫瘍関連抗原（Ｔｕｍｏｒ　Ａｓｓｏｃｉａｔｅｄ　Ａｎｔｉｇｅｎ；ＴＡＡ）とＴ細胞上に発現するＣＤ３に同時に結合することで、Ｔ細胞とがん細胞の距離を物理的に近づけ、同時にＴ細胞にＣＤ３を介した活性化シグナルを入力することで、Ｔ細胞によるがん細胞に対する細胞傷害作用を誘導するものである。ＣＤ３とＣＤ１９（Ｃｌｕｓｔｅｒ　ｏｆ　Ｄｉｆｆｅｒｅｎｔｉａｔｉｏｎ　１９）を標的抗原とするブリナツモマブ（ｂｌｉｎａｔｕｍｏｍａｂ）は、既に実臨床において再発又は難治性の急性リンパ性白血病（Ａｃｕｔｅ　Ｌｙｍｐｈｏｂｌａｓｔｉｃ　Ｌｅｕｋｅｍｉａ；ＡＬＬ）の治療に使用されており、優れた治療効果が認められている。さらに、二重特異性Ｔ細胞リクルート抗体の標的として種々のＴＡＡが知られており、例えば、ＴＳＰＡＮ８、ＣＤ３３、ＢＣＭＡ、ＰＳＭＡ、ＥＧＦＲｖＩＩＩ等のＴＡＡを標的とした二重特異性Ｔ細胞リクルート抗体が様々ながんの治療薬として研究開発されている（特許文献２、非特許文献２）。しかしながら、現在までに、抗ＣＤ３７－抗ＣＤ３二重特異性抗体は知られていない。

ＷＯ２０１５／０１７５５２号ＷＯ２０２２／１０２７６８号日本特許第５６８６９５３号米国特許第９５８７０２１号米国特許第９７０１７５９号米国特許第１０２５９８８７号

Ｉｎｔｅｒｎａｔｉｏｎａｌ　Ｊｏｕｒｎａｌ　ｏｆ　Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ　Ｓｃｉｅｎｃｅｓ、２０２０；２１（２４）：ｐ．９５３１Ｂｉｏｍａｒｋｅｒ　Ｒｅｓｅａｒｃｈ、２０２１；９（１）：ｐ．３８

　本発明の課題は、ヒトの治療に用いることができる抗ＣＤ３７－抗ＣＤ３二重特異性抗体を提供することにある。

　本発明者らは、種々のＴＡＡを標的とした抗ＴＡＡ－抗ＣＤ３二重特異性抗体の作製を検討する過程において、抗ＣＤ３ｓｃＦｖの最適な親和性は、組み合わせるＴＡＡの発現量や抗ＴＡＡ抗体のＴＡＡに対する親和性によって異なると考えた。そこで、公知情報及び自社のタンパク質構造情報解析の技術を生かし、多様な親和性を有する抗ＣＤ３ｓｃＦｖを複数取得した（実施例１）。さらに、取得した抗ＣＤ３ｓｃＦｖの安定性を向上させるための変異を複数導入し、多様な親和性と安定性の両方を兼ね備えた抗ＣＤ３ｓｃＦｖを複数取得することに成功した（実施例２）。さらに、本発明者らは、抗ＣＤ３７抗体と抗ＣＤ３ｓｃＦｖを組み合わせた抗ＣＤ３７－抗ＣＤ３二重特異性抗体を複数取得し（実施例３）、当該二重特異性抗体のｉｎ　ｖｉｔｒｏにおける細胞傷害活性及びサイトカイン産生（実施例４）を評価した。その結果、多数の二重特異性抗体は、高濃度において活性が減弱する、望ましくない性質を示すことが明らかとなった。さらに、ここで見出された高濃度においても活性が減弱しにくい抗体が、ｉｎ　ｖｉｖｏにおいて抗腫瘍作用を示すことを明らかにした（実施例５）。それらの検討の結果を踏まえ、本発明者らは、ｉｎ　ｖｉｔｒｏ及びｉｎ　ｖｉｖｏにおいて良好なプロファイルを示す３種類の二重特異性抗体を取得することに成功した（実施例５）。

　すなわち、本発明は、以下の［１］～［２９］に関する。
［１］　抗ＣＤ３７－抗ＣＤ３二重特異性抗体であって、
（ａ）抗ＣＤ３７抗体の重鎖可変領域を含む重鎖フラグメント及び抗ＣＤ３７抗体の軽鎖可変領域を含む軽鎖からなる抗ＣＤ３７抗体のＦａｂ領域、
（ｂ）抗ＣＤ３抗体の重鎖可変領域及び軽鎖可変領域を含む抗ＣＤ３ｓｃＦｖ領域、並びに、
（ｃ）（ａ）のＦａｂ領域の重鎖フラグメントに連結される第一Ｆｃポリペプチド及び（ｂ）の抗ＣＤ３ｓｃＦｖ領域に連結される第二ＦｃポリペプチドからなるＦｃ領域、を含み、
　抗ＣＤ３抗体の重鎖可変領域及び軽鎖可変領域が以下の（１）～（３）のいずれかである、二重特異性抗体：
（１）配列番号１４のアミノ酸番号１から１２５までのアミノ酸配列からなる抗ＣＤ３抗体の重鎖可変領域及び配列番号１４のアミノ酸番号１４６から２５４までのアミノ酸配列からなる抗ＣＤ３抗体の軽鎖可変領域；
（２）配列番号１６のアミノ酸番号１から１２５までのアミノ酸配列からなる抗ＣＤ３抗体の重鎖可変領域及び配列番号１６のアミノ酸番号１４６から２５４までのアミノ酸配列からなる抗ＣＤ３抗体の軽鎖可変領域；又は、
（３）配列番号１８のアミノ酸番号１から１２５までのアミノ酸配列からなる抗ＣＤ３抗体の重鎖可変領域及び配列番号１８のアミノ酸番号１４６から２５４までのアミノ酸配列からなる抗ＣＤ３抗体の軽鎖可変領域。
［２］　抗ＣＤ３ｓｃＦｖ領域が以下の（１）～（３）のいずれかである、［１］に記載の二重特異性抗体：
（１）配列番号１４のアミノ酸番号１から２５４までのアミノ酸配列からなる抗ＣＤ３ｓｃＦｖ領域；
（２）配列番号１６のアミノ酸番号１から２５４までのアミノ酸配列からなる抗ＣＤ３ｓｃＦｖ領域；又は、
（３）配列番号１８のアミノ酸番号１から２５４までのアミノ酸配列からなる抗ＣＤ３ｓｃＦｖ領域。
［３］　抗ＣＤ３７抗体の重鎖可変領域が配列番号１０のアミノ酸番号３１から３５までのアミノ酸配列からなるＣＤＲ１、配列番号１０のアミノ酸番号５０から６５までのアミノ酸配列からなるＣＤＲ２、及び配列番号１０のアミノ酸番号９８から１０４までのアミノ酸配列からなるＣＤＲ３を含み、抗ＣＤ３７抗体の軽鎖可変領域が配列番号１２のアミノ酸番号２４から３４までのアミノ酸配列からなるＣＤＲ１、配列番号１２のアミノ酸番号５０から５６までのアミノ酸配列からなるＣＤＲ２、及び配列番号１２のアミノ酸番号８９から９５までのアミノ酸配列からなるＣＤＲ３を含む、［１］又は［２］に記載の二重特異性抗体。
［４］　抗ＣＤ３７抗体の重鎖可変領域が配列番号１０のアミノ酸番号１から１１５までのアミノ酸配列からなり、抗ＣＤ３７抗体の軽鎖可変領域が配列番号１２のアミノ酸番号１から１０５までのアミノ酸配列からなる、［３］に記載の二重特異性抗体。
［５］　抗ＣＤ３７抗体のＦａｂ領域が、配列番号１０のアミノ酸番号１から２１３までのアミノ酸配列からなる重鎖フラグメント及び配列番号１２のアミノ酸配列からなる軽鎖からなる、［４］に記載の二重特異性抗体。
［６］　以下の（ａ）～（ｃ）のいずれかに記載の抗ＣＤ３７－抗ＣＤ３二重特異性抗体：
（ａ）配列番号１０のアミノ酸番号１から１１５までのアミノ酸配列からなる重鎖可変領域を含む抗ＣＤ３７抗体の重鎖フラグメントに第一Ｆｃポリペプチドが連結された抗ＣＤ３７抗体の重鎖、配列番号１２のアミノ酸番号１から１０５までのアミノ酸配列からなる軽鎖可変領域を含む抗ＣＤ３７抗体の軽鎖、並びに、配列番号１４のアミノ酸番号１から１２５までのアミノ酸配列からなる抗ＣＤ３抗体の重鎖可変領域及び配列番号１４のアミノ酸番号１４６から２５４までのアミノ酸配列からなる抗ＣＤ３抗体の軽鎖可変領域を含む抗ＣＤ３ｓｃＦｖ領域に第二Ｆｃポリペプチドが連結されたポリペプチドを含む、二重特異性抗体；
（ｂ）配列番号１０のアミノ酸番号１から１１５までのアミノ酸配列からなる重鎖可変領域を含む抗ＣＤ３７抗体の重鎖フラグメントに第一Ｆｃポリペプチドが連結された抗ＣＤ３７抗体の重鎖、配列番号１２のアミノ酸番号１から１０５までのアミノ酸配列からなる軽鎖可変領域を含む抗ＣＤ３７抗体の軽鎖、並びに、配列番号１６のアミノ酸番号１から１２５までのアミノ酸配列からなる抗ＣＤ３抗体の重鎖可変領域及び配列番号１６のアミノ酸番号１４６から２５４までのアミノ酸配列からなる抗ＣＤ３抗体の軽鎖可変領域を含む抗ＣＤ３ｓｃＦｖ領域に第二Ｆｃポリペプチドが連結されたポリペプチドを含む、二重特異性抗体；又は、
（ｃ）配列番号１０のアミノ酸番号１から１１５までのアミノ酸配列からなる重鎖可変領域を含む抗ＣＤ３７抗体の重鎖フラグメントに第一Ｆｃポリペプチドが連結された抗ＣＤ３７抗体の重鎖、配列番号１２のアミノ酸番号１から１０５までのアミノ酸配列からなる軽鎖可変領域を含む抗ＣＤ３７抗体の軽鎖、並びに、配列番号１８のアミノ酸番号１から１２５までのアミノ酸配列からなる抗ＣＤ３抗体の重鎖可変領域及び配列番号１８のアミノ酸番号１４６から２５４までのアミノ酸配列からなる抗ＣＤ３抗体の軽鎖可変領域を含む抗ＣＤ３ｓｃＦｖ領域に第二Ｆｃポリペプチドが連結されたポリペプチドを含む、二重特異性抗体。
［７］　以下の（ａ）～（ｃ）のいずれかに記載の抗ＣＤ３７－抗ＣＤ３二重特異性抗体：
（ａ）配列番号１０のアミノ酸番号１から２１３までのアミノ酸配列からなる抗ＣＤ３７抗体の重鎖フラグメントに第一Ｆｃポリペプチドが連結された抗ＣＤ３７抗体の重鎖、配列番号１２のアミノ酸配列からなる抗ＣＤ３７抗体の軽鎖、及び配列番号１４のアミノ酸番号１から２５４までのアミノ酸配列からなる抗ＣＤ３ｓｃＦｖ領域に第二Ｆｃポリペプチドが連結されたポリペプチドを含む、二重特異性抗体；
（ｂ）配列番号１０のアミノ酸番号１から２１３までのアミノ酸配列からなる抗ＣＤ３７抗体の重鎖フラグメントに第一Ｆｃポリペプチドが連結された抗ＣＤ３７抗体の重鎖、配列番号１２のアミノ酸配列からなる抗ＣＤ３７抗体の軽鎖、及び配列番号１６のアミノ酸番号１から２５４までのアミノ酸配列からなる抗ＣＤ３ｓｃＦｖ領域に第二Ｆｃポリペプチドが連結されたポリペプチドを含む、二重特異性抗体；又は、
（ｃ）配列番号１０のアミノ酸番号１から２１３までのアミノ酸配列からなる抗ＣＤ３７抗体の重鎖フラグメントに第一Ｆｃポリペプチドが連結された抗ＣＤ３７抗体の重鎖、配列番号１２のアミノ酸配列からなる抗ＣＤ３７抗体の軽鎖、及び配列番号１８のアミノ酸番号１から２５４までのアミノ酸配列からなる抗ＣＤ３ｓｃＦｖ領域に第二Ｆｃポリペプチドが連結されたポリペプチドを含む、二重特異性抗体。
［８］　Ｆｃ領域がノブズ・イントゥー・ホールズ（Ｋｎｏｂｓ　ｉｎｔｏ　ｈｏｌｅｓ）変異を含み、ノブズ・イントゥー・ホールズ変異が、Ｆｃ領域を形成する１つのＦｃポリペプチドにおけるＴ３６６Ｗ変異、並びにＦｃ領域を形成するもう１つのＦｃポリペプチドにおけるＴ３６６Ｓ、Ｌ３６８Ａ及びＹ４０７Ｖ変異である（ここで、前記変異位置はヒトＩｇγ１定常領域におけるＥＵインデックスに従うアミノ酸位置である）、［１］～［７］のいずれかに記載の二重特異性抗体。
［９］　Ｆｃ領域がＬＡＬＡ変異（Ｌ２３４Ａ及びＬ２３５Ａ）（ここで、前記変異位置はヒトＩｇγ１定常領域におけるＥＵインデックスに従うアミノ酸位置である）を含む、［１］～［８］のいずれかに記載の二重特異性抗体。
［１０］　Ｆｃ領域がＰ３２９Ａ変異（ここで、前記変異位置はヒトＩｇγ１定常領域におけるＥＵインデックスに従うアミノ酸位置である）を含む、［１］～［９］のいずれかに記載の二重特異性抗体。
［１１］　抗ＣＤ３７抗体のＦａｂ領域の重鎖フラグメントと第一Ｆｃポリペプチドがヒンジ領域を介して連結され、抗ＣＤ３ｓｃＦｖ領域と第二Ｆｃポリペプチドがヒンジ領域を介して連結されている、［１］～［１０］のいずれかに記載の二重特異性抗体。
［１２］　抗ＣＤ３ｓｃＦｖ領域と第二Ｆｃポリペプチドを連結するヒンジ領域がＣ２２０Ｓ変異（ここで、前記変異位置はヒトＩｇγ１定常領域におけるＥＵインデックスに従うアミノ酸位置である）を含む、［１１］に記載の二重特異性抗体。
［１３］　Ｆｃ領域がノブズ・イントゥー・ホールズ（Ｋｎｏｂｓ　ｉｎｔｏ　ｈｏｌｅｓ）変異、ＬＡＬＡ変異、及びＰ３２９Ａ変異を含み、抗ＣＤ３ｓｃＦｖ領域と第二Ｆｃポリペプチドを連結するヒンジ領域がＣ２２０Ｓ変異を含む（ここで、前記変異位置はヒトＩｇγ１定常領域におけるＥＵインデックスに従うアミノ酸位置である）、［１１］又は［１２］に記載の二重特異性抗体。
［１４］　以下の（ａ）～（ｃ）のいずれかに記載の二重特異性抗体：
（ａ）配列番号１０のアミノ酸配列からなる抗ＣＤ３７抗体の重鎖、配列番号１２のアミノ酸配列からなる抗ＣＤ３７抗体の軽鎖、及び配列番号１４のアミノ酸配列からなる、抗ＣＤ３ｓｃＦｖ領域に第二Ｆｃポリペプチドが連結されたポリペプチドからなる、二重特異性抗体；
（ｂ）配列番号１０のアミノ酸配列からなる抗ＣＤ３７抗体の重鎖、配列番号１２のアミノ酸配列からなる抗ＣＤ３７抗体の軽鎖、及び配列番号１６のアミノ酸配列からなる、抗ＣＤ３ｓｃＦｖ領域に第二Ｆｃポリペプチドが連結されたポリペプチドからなる、二重特異性抗体；又は、
（ｃ）配列番号１０のアミノ酸配列からなる抗ＣＤ３７抗体の重鎖、配列番号１２のアミノ酸配列からなる抗ＣＤ３７抗体の軽鎖、及び配列番号１８のアミノ酸配列からなる、抗ＣＤ３ｓｃＦｖ領域に第二Ｆｃポリペプチドが連結されたポリペプチドからなる、二重特異性抗体。
［１５］　翻訳後修飾された、［１］～［１４］のいずれかに記載の二重特異性抗体。
［１６］　翻訳後修飾が、重鎖可変領域Ｎ末端のピログルタミル化及び／又は重鎖Ｃ末端リジン欠失である、［１５］に記載の二重特異性抗体。
［１７］　抗ＣＤ３７－抗ＣＤ３二重特異性抗体の生産に用いる、下記（ａ）～（ｐ）からなる群より選択されるポリヌクレオチド：
（ａ）配列番号１０のアミノ酸番号１から１１５までのアミノ酸配列からなる重鎖可変領域を含む抗ＣＤ３７抗体の重鎖フラグメントをコードする塩基配列を含むポリヌクレオチド；
（ｂ）配列番号１２のアミノ酸番号１から１０５までのアミノ酸配列からなる軽鎖可変領域を含む抗ＣＤ３７抗体の軽鎖をコードする塩基配列を含むポリヌクレオチド；
（ｃ）配列番号１０のアミノ酸配列からなる抗ＣＤ３７抗体の重鎖をコードする塩基配列を含むポリヌクレオチド；
（ｄ）配列番号１２のアミノ酸配列からなる抗ＣＤ３７抗体の軽鎖をコードする塩基配列を含むポリヌクレオチド；
（ｅ）配列番号１４のアミノ酸番号１から１２５までのアミノ酸配列からなる抗ＣＤ３抗体の重鎖可変領域及び配列番号１４のアミノ酸番号１４６から２５４までのアミノ酸配列からなる抗ＣＤ３抗体の軽鎖可変領域を含む抗ＣＤ３ｓｃＦｖ領域をコードする塩基配列を含むポリヌクレオチド；
（ｆ）配列番号１６のアミノ酸番号１から１２５までのアミノ酸配列からなる抗ＣＤ３抗体の重鎖可変領域及び配列番号１６のアミノ酸番号１４６から２５４までのアミノ酸配列からなる抗ＣＤ３抗体の軽鎖可変領域を含む抗ＣＤ３ｓｃＦｖ領域をコードする塩基配列を含むポリヌクレオチド；
（ｇ）配列番号１８のアミノ酸番号１から１２５までのアミノ酸配列からなる抗ＣＤ３抗体の重鎖可変領域及び配列番号１８のアミノ酸番号１４６から２５４までのアミノ酸配列からなる抗ＣＤ３抗体の軽鎖可変領域を含む抗ＣＤ３ｓｃＦｖ領域をコードする塩基配列を含むポリヌクレオチド；
（ｈ）配列番号１４のアミノ酸番号１から２５４までのアミノ酸配列からなる抗ＣＤ３ｓｃＦｖ領域をコードする塩基配列を含むポリヌクレオチド；
（ｉ）配列番号１６のアミノ酸番号１から２５４までのアミノ酸配列からなる抗ＣＤ３ｓｃＦｖ領域をコードする塩基配列を含むポリヌクレオチド；
（ｊ）配列番号１８のアミノ酸番号１から２５４までのアミノ酸配列からなる抗ＣＤ３ｓｃＦｖ領域をコードする塩基配列を含むポリヌクレオチド；
（ｋ）配列番号１４のアミノ酸番号１から１２５までのアミノ酸配列からなる抗ＣＤ３抗体の重鎖可変領域及び配列番号１４のアミノ酸番号１４６から２５４までのアミノ酸配列からなる抗ＣＤ３抗体の軽鎖可変領域を含む抗ＣＤ３ｓｃＦｖ領域に第二Ｆｃポリペプチドが連結されたポリペプチドをコードする塩基配列を含むポリヌクレオチド；
（ｌ）配列番号１６のアミノ酸番号１から１２５までのアミノ酸配列からなる抗ＣＤ３抗体の重鎖可変領域及び配列番号１６のアミノ酸番号１４６から２５４までのアミノ酸配列からなる抗ＣＤ３抗体の軽鎖可変領域を含む抗ＣＤ３ｓｃＦｖ領域に第二Ｆｃポリペプチドが連結されたポリペプチドをコードする塩基配列を含むポリヌクレオチド；
（ｍ）配列番号１８のアミノ酸番号１から１２５までのアミノ酸配列からなる抗ＣＤ３抗体の重鎖可変領域及び配列番号１８のアミノ酸番号１４６から２５４までのアミノ酸配列からなる抗ＣＤ３抗体の軽鎖可変領域を含む抗ＣＤ３ｓｃＦｖ領域に第二Ｆｃポリペプチドが連結されたポリペプチドをコードする塩基配列を含むポリヌクレオチド；
（ｎ）配列番号１４のアミノ酸配列からなる、抗ＣＤ３ｓｃＦｖ領域と第二Ｆｃポリペプチドが連結されたポリペプチドをコードする塩基配列を含むポリヌクレオチド；
（ｏ）配列番号１６のアミノ酸配列からなる、抗ＣＤ３ｓｃＦｖ領域と第二Ｆｃポリペプチドが連結されたポリペプチドをコードする塩基配列を含むポリヌクレオチド；又は、
（ｐ）配列番号１８のアミノ酸配列からなる、抗ＣＤ３ｓｃＦｖ領域と第二Ｆｃポリペプチドが連結されたポリペプチドをコードする塩基配列を含むポリヌクレオチド。
［１８］　抗ＣＤ３７－抗ＣＤ３二重特異性抗体の生産に用いる、下記（ａ）～（ｃ）からなる群より選択されるポリヌクレオチド：
（ａ）配列番号１０のアミノ酸番号１から１１５までのアミノ酸配列からなる重鎖可変領域を含む抗ＣＤ３７抗体の重鎖フラグメントに第一Ｆｃポリペプチドが連結された抗ＣＤ３７抗体の重鎖をコードする塩基配列を含むポリヌクレオチド、配列番号１２のアミノ酸番号１から１０５までのアミノ酸配列からなる軽鎖可変領域を含む抗ＣＤ３７抗体の軽鎖をコードする塩基配列を含むポリヌクレオチド、並びに、配列番号１４のアミノ酸番号１から１２５までのアミノ酸配列からなる抗ＣＤ３抗体の重鎖可変領域及び配列番号１４のアミノ酸番号１４６から２５４までのアミノ酸配列からなる抗ＣＤ３抗体の軽鎖可変領域を含む抗ＣＤ３ｓｃＦｖ領域に第二Ｆｃポリペプチドが連結されたポリペプチドをコードする塩基配列を含むポリヌクレオチド；
（ｂ）配列番号１０のアミノ酸番号１から１１５までのアミノ酸配列からなる重鎖可変領域を含む抗ＣＤ３７抗体の重鎖フラグメントに第一Ｆｃポリペプチドが連結された抗ＣＤ３７抗体の重鎖をコードする塩基配列を含むポリヌクレオチド、配列番号１２のアミノ酸番号１から１０５までのアミノ酸配列からなる軽鎖可変領域を含む抗ＣＤ３７抗体の軽鎖をコードする塩基配列を含むポリヌクレオチド、並びに、配列番号１６のアミノ酸番号１から１２５までのアミノ酸配列からなる抗ＣＤ３抗体の重鎖可変領域及び配列番号１６のアミノ酸番号１４６から２５４までのアミノ酸配列からなる抗ＣＤ３抗体の軽鎖可変領域を含む抗ＣＤ３ｓｃＦｖ領域に第二Ｆｃポリペプチドが連結されたポリペプチドをコードする塩基配列を含むポリヌクレオチド；又は、
（ｃ）配列番号１０のアミノ酸番号１から１１５までのアミノ酸配列からなる重鎖可変領域を含む抗ＣＤ３７抗体の重鎖フラグメントに第一Ｆｃポリペプチドが連結された抗ＣＤ３７抗体の重鎖をコードする塩基配列を含むポリヌクレオチド、配列番号１２のアミノ酸番号１から１０５までのアミノ酸配列からなる軽鎖可変領域を含む抗ＣＤ３７抗体の軽鎖をコードする塩基配列を含むポリヌクレオチド、並びに、配列番号１８のアミノ酸番号１から１２５までのアミノ酸配列からなる抗ＣＤ３抗体の重鎖可変領域及び配列番号１８のアミノ酸番号１４６から２５４までのアミノ酸配列からなる抗ＣＤ３抗体の軽鎖可変領域を含む抗ＣＤ３ｓｃＦｖ領域に第二Ｆｃポリペプチドが連結されたポリペプチドをコードする塩基配列を含むポリヌクレオチド。
［１９］　抗ＣＤ３７－抗ＣＤ３二重特異性抗体の生産に用いる、下記（ａ）～（ｃ）からなる群より選択されるポリヌクレオチド：
（ａ）配列番号１０のアミノ酸番号１から２１３までのアミノ酸配列からなる抗ＣＤ３７抗体の重鎖フラグメントに第一Ｆｃポリペプチドが連結された抗ＣＤ３７抗体の重鎖をコードする塩基配列を含むポリヌクレオチド、配列番号１２のアミノ酸配列からなる抗ＣＤ３７抗体の軽鎖をコードする塩基配列を含むポリヌクレオチド、及び配列番号１４のアミノ酸番号１から２５４までのアミノ酸配列からなる抗ＣＤ３ｓｃＦｖ領域に第二Ｆｃポリペプチドが連結されたポリペプチドをコードする塩基配列を含むポリヌクレオチド；
（ｂ）配列番号１０のアミノ酸番号１から２１３までのアミノ酸配列からなる抗ＣＤ３７抗体の重鎖フラグメントに第一Ｆｃポリペプチドが連結された抗ＣＤ３７抗体の重鎖をコードする塩基配列を含むポリヌクレオチド、配列番号１２のアミノ酸配列からなる抗ＣＤ３７抗体の軽鎖をコードする塩基配列を含むポリヌクレオチド、及び配列番号１６のアミノ酸番号１から２５４までのアミノ酸配列からなる抗ＣＤ３ｓｃＦｖ領域に第二Ｆｃポリペプチドが連結されたポリペプチドをコードする塩基配列を含むポリヌクレオチド；又は、
（ｃ）配列番号１０のアミノ酸番号１から２１３までのアミノ酸配列からなる抗ＣＤ３７抗体の重鎖フラグメントに第一Ｆｃポリペプチドが連結された抗ＣＤ３７抗体の重鎖をコードする塩基配列を含むポリヌクレオチド、配列番号１２のアミノ酸配列からなる抗ＣＤ３７抗体の軽鎖をコードする塩基配列を含むポリヌクレオチド、及び配列番号１８のアミノ酸番号１から２５４までのアミノ酸配列からなる抗ＣＤ３ｓｃＦｖ領域に第二Ｆｃポリペプチドが連結されたポリペプチドをコードする塩基配列を含むポリヌクレオチド。
［２０］　抗ＣＤ３７－抗ＣＤ３二重特異性抗体の生産に用いる、下記（ａ）～（ｃ）からなる群より選択されるポリヌクレオチド：
（ａ）配列番号１０のアミノ酸配列からなる抗ＣＤ３７抗体の重鎖をコードする塩基配列を含むポリヌクレオチド、配列番号１２のアミノ酸配列からなる抗ＣＤ３７抗体の軽鎖をコードする塩基配列を含むポリヌクレオチド、及び配列番号１４のアミノ酸配列からなる、抗ＣＤ３ｓｃＦｖ領域に第二Ｆｃポリペプチドが連結されたポリペプチドをコードする塩基配列を含むポリヌクレオチド；
（ｂ）配列番号１０のアミノ酸配列からなる抗ＣＤ３７抗体の重鎖をコードする塩基配列を含むポリヌクレオチド、配列番号１２のアミノ酸配列からなる抗ＣＤ３７抗体の軽鎖をコードする塩基配列を含むポリヌクレオチド、及び配列番号１６のアミノ酸配列からなる、抗ＣＤ３ｓｃＦｖ領域に第二Ｆｃポリペプチドが連結されたポリペプチドをコードする塩基配列を含むポリヌクレオチド；又は、
（ｃ）配列番号１０のアミノ酸配列からなる抗ＣＤ３７抗体の重鎖をコードする塩基配列を含むポリヌクレオチド、配列番号１２のアミノ酸配列からなる抗ＣＤ３７抗体の軽鎖をコードする塩基配列を含むポリヌクレオチド、及び配列番号１８のアミノ酸配列からなる、抗ＣＤ３ｓｃＦｖ領域に第二Ｆｃポリペプチドが連結されたポリペプチドをコードする塩基配列を含むポリヌクレオチド。
［２１］　［１７］～［２０］のいずれかに記載のポリヌクレオチドを含む、発現ベクター。
［２２］　［２１］に記載の発現ベクターで形質転換された、宿主細胞。
［２３］　［１７］～［２０］のいずれかに記載のポリヌクレオチドを含む、宿主細胞。
［２４］　抗ＣＤ３７－抗ＣＤ３二重特異性抗体の生産方法であって、［２２］又は［２３］に記載の宿主細胞を培養する工程を含む、生産方法。
［２５］　［１］～［１６］のいずれかに記載の二重特異性抗体及び薬学的に許容される賦形剤を含む、医薬組成物。
［２６］　がんの治療のための、［１］～［１６］のいずれかに記載の二重特異性抗体。
［２７］　がんの治療のための、［２５］に記載の医薬組成物。
［２８］　［１］～［１６］のいずれかに記載の二重特異性抗体の治療有効量を対象に投与する工程を含む、がんを治療する方法。
［２９］　がんの治療のための医薬組成物の製造における、［１］～［１６］のいずれかに記載の二重特異性抗体の使用。

　本発明の抗ＣＤ３７－抗ＣＤ３二重特異性抗体は、ＴＡＡであるＣＤ３７とＴ細胞表面分子であるＣＤ３の両方に結合し、がん細胞とＴ細胞の物理的な距離を近づけることにより、Ｔ細胞によるがん細胞殺傷作用を増強させる。よって、本発明の抗ＣＤ３７－抗ＣＤ３二重特異性抗体及び当該二重特異性抗体を含む医薬組成物は、がんの治療のために使用することができる。

図１－１は、ＣＨＯ－Ｋ１＿ヒトＣＤ３７／ＧＦＰＳｐａｒｋ細胞とＥｘｐａｎｄｅｄ　ｐａｎＴ細胞の共培養系における、抗ＣＤ３７－抗ＣＤ３二重特異性抗体の細胞傷害活性の評価結果を示す。横軸は抗体濃度を、縦軸は各ウェルのＧＦＰＳｐａｒｋ蛍光面積を示す。実験はトリプリケートで実施し、各条件の平均値をシンボルで示し、折れ線でつないだ。図１－２は、ＣＨＯ－Ｋ１＿ヒトＣＤ３７／ＧＦＰＳｐａｒｋ細胞とＥｘｐａｎｄｅｄ　ｐａｎＴ細胞の共培養系における、抗ＣＤ３７－抗ＣＤ３二重特異性抗体の細胞傷害活性の評価結果を示す。横軸は抗体濃度を、縦軸は各ウェルのＧＦＰＳｐａｒｋ蛍光面積を示す。実験はトリプリケートで実施し、各条件の平均値をシンボルで示し、折れ線でつないだ。図２－１は、ＣＨＯ－Ｋ１＿ヒトＣＤ３７／ＧＦＰＳｐａｒｋ細胞とＥｘｐａｎｄｅｄ　ｐａｎＴ細胞の共培養系における、抗ＣＤ３７－抗ＣＤ３二重特異性抗体のＩＦＮ－γ分泌誘導活性の評価結果を示す。横軸は抗体濃度を、縦軸は培養上清中のＩＦＮ－γ濃度を示す。実験はトリプリケートで実施し、各条件の平均値をシンボルで示し、折れ線でつないだ。図２－２は、ＣＨＯ－Ｋ１＿ヒトＣＤ３７／ＧＦＰＳｐａｒｋ細胞とＥｘｐａｎｄｅｄ　ｐａｎＴ細胞の共培養系における、抗ＣＤ３７－抗ＣＤ３二重特異性抗体のＩＦＮ－γ分泌誘導活性の評価結果を示す。横軸は抗体濃度を、縦軸は培養上清中のＩＦＮ－γ濃度を示す。実験はトリプリケートで実施し、各条件の平均値をシンボルで示し、折れ線でつないだ。図２－３は、ＣＨＯ-Ｋ１＿ヒトＣＤ３７／ＧＦＰＳｐａｒｋ細胞とＥｘｐａｎｄｅｄ　ｐａｎＴ細胞の共培養系における、抗ＣＤ３７－抗ＣＤ３二重特異性抗体のＴＮＦ－α分泌誘導活性の評価結果を示す。横軸は抗体濃度を、縦軸は培養上清中のＴＮＦ－α濃度を示す。実験はトリプリケートで実施し、各条件の平均値をシンボルで示し、折れ線でつないだ。図２－４は、ＣＨＯ-Ｋ１＿ヒトＣＤ３７／ＧＦＰＳｐａｒｋ細胞とＥｘｐａｎｄｅｄ　ｐａｎＴ細胞の共培養系における、抗ＣＤ３７－抗ＣＤ３二重特異性抗体のＴＮＦ－α分泌誘導活性の評価結果を示す。横軸は抗体濃度を、縦軸は培養上清中のＴＮＦ－α濃度を示す。実験はトリプリケートで実施し、各条件の平均値をシンボルで示し、折れ線でつないだ。図３－１は、ヒトＰＢＭＣ移入ＳＵ－ＤＨＬ－６細胞皮下担癌モデルにおけるＢＴＥ－０１３６の抗腫瘍効果を示す。左図の横軸は抗体投与開始後の日数を、縦軸は腫瘍体積を示し、エラーバーは標準誤差を示す。右図は投与開始１１日後の各個体の腫瘍体積の値を示す。横軸はＢＴＥ－０１３６の投与量を、縦軸は腫瘍体積を示す。横線は平均値を示し、エラーバーは標準誤差を示す。有意確率Ｐ値は、ダネットの多重比較検定によりＰＢＳ投与群の腫瘍体積とＢＴＥ－０１３６の各用量での投与群の腫瘍体積を比較することにより求めた。図中の＊＊はＰ値が有意水準０．０１より小さい群を、＊はＰ値が有意水準０．０５より小さい群を示す。図３－２は、ヒトＰＢＭＣ移入ＳＵ－ＤＨＬ－６細胞皮下担癌モデルにおけるＢＴＥ－０１４２の抗腫瘍効果を示す。左図の横軸は抗体投与開始後の日数を、縦軸は腫瘍体積を示し、エラーバーは標準誤差を示す。右図は投与開始１１日後の各個体の腫瘍体積の値を示す。横軸はＢＴＥ－０１４２の投与量を、縦軸は腫瘍体積を示す。横線は平均値を示し、エラーバーは標準誤差を示す。有意確率Ｐ値は、ダネットの多重比較検定によりＰＢＳ投与群の腫瘍体積とＢＴＥ－０１４２の各用量での投与群の腫瘍体積を比較することにより求めた。図中の＊＊はＰ値が有意水準０．０１より小さい群を、＊はＰ値が有意水準０．０５より小さい群を示す。図３－３は、ヒトＰＢＭＣ移入ＳＵ－ＤＨＬ－６細胞皮下担癌モデルにおけるＢＴＥ－０１４８の抗腫瘍効果を示す。左図の横軸は抗体投与開始後の日数、縦軸は腫瘍体積を示し、エラーバーは標準誤差を示す。右図は投与開始１１日後の各個体の腫瘍体積の値を示す。横軸はＢＴＥ－０１４８の投与量を、縦軸は腫瘍体積を示す。横線は平均値を示し、エラーバーは標準誤差を示す。有意確率Ｐ値は、ダネットの多重比較検定によりＰＢＳ投与群の腫瘍体積とＢＴＥ－０１４８の各用量での投与群の腫瘍体積を比較することにより求めた。図中の＊＊はＰ値が有意水準０．０１より小さい群を示す。

　以下に、本発明について詳述する。

　＜定義＞
　本明細書の用語は、以下で特に定義されない限り、当該技術分野で当業者に一般に使用されている意味にて使用される。

　抗体（又は免疫グロブリン）は、単一の配列を有する重鎖２本と、単一の配列を有する軽鎖２本からなる左右対称Ｙ字型の構造を有する４本鎖構造を基本構造とする糖タンパク質である。抗体にはＩｇＧ、ＩｇＭ、ＩｇＡ、ＩｇＤ及びＩｇＥの５つのクラスが存在する。抗体分子の基本構造は各クラス共通であり、分子量５万～７万の重鎖２本と２万～３万の軽鎖２本がジスルフィド結合及び非共有結合によって結合し、分子量１５万～１９万のＹ字型の４本鎖構造からなる抗体分子を形成する。重鎖は、通常約４４０個のアミノ酸を含むポリペプチド鎖からなり、クラスごとに特徴的な構造をもち、ＩｇＧ、ＩｇＭ、ＩｇＡ、ＩｇＤ、ＩｇＥに対応してそれぞれ、Ｉｇγ、Ｉｇμ、Ｉｇα、Ｉｇδ、Ｉｇεとよばれる。さらにＩｇＧには、ＩｇＧ１、ＩｇＧ２、ＩｇＧ３、ＩｇＧ４のサブクラスが存在し、それぞれに対応する重鎖はＩｇγ１、Ｉｇγ２、Ｉｇγ３、Ｉｇγ４とよばれる。軽鎖は、通常約２２０個のアミノ酸を含むポリペプチド鎖からなり、λ型とκ型の２種が知られており、それぞれＩｇλ、Ｉｇκという。前記２種の軽鎖は、いずれの種類の重鎖とも対をなすことができる。

　抗体分子の鎖内ジスルフィド結合は、重鎖には４つ（Ｉｇμ、Ｉｇεには５つ）、軽鎖には２つ存在し、アミノ酸１００～１１０残基ごとに１つのループを成している。それらの立体構造は各ループ間で類似していて、構造単位又はドメインとよばれる。重鎖、軽鎖ともにＮ末端に位置するドメインは可変領域とよばれ、同種動物の同一クラス（又はサブクラス）から産生された抗体であっても多様なアミノ酸配列を有し、抗体と抗原との結合特異性に関与することが知られている。可変領域よりも下流のＣ末端側のドメインのアミノ酸配列は、各クラス又はサブクラスごとにほぼ一定で、定常領域とよばれている。重鎖は、Ｎ末端からＣ末端に向かって重鎖可変領域（ＶＨ）及び重鎖定常領域（ＣＨ）を有する。ＣＨはさらにＮ末端側からＣＨ１ドメイン、ＣＨ２ドメイン、及びＣＨ３ドメインの３つのドメインに分けられる。軽鎖は、Ｎ末端からＣ末端に向かって軽鎖可変領域（ＶＬ）及び軽鎖定常領域（ＣＬ）を有す。

　ＶＨ及びＶＬに存在する３つの相補性決定領域（ＣＤＲ）のアミノ酸配列は変化が非常に大きく、可変領域の可変性に寄与している。ＣＤＲは、重鎖と軽鎖のＮ末端それぞれにＣＤＲ１、ＣＤＲ２、ＣＤＲ３の順番で存在するおよそ５～１０アミノ酸残基からなる領域であって、抗原結合部位を形成する。一方、可変領域のＣＤＲ以外の部分はフレームワーク領域（ＦＲ）とよばれ、ＦＲ１～４からなり、アミノ酸配列の変化は比較的少ない。

　抗体をタンパク質分解酵素のパパインで処理すると、３つの抗体断片が得られる。Ｎ末端側の２つの断片はＦａｂ（抗原結合断片、Ｆｒａｇｍｅｎｔ，ａｎｔｉｇｅｎ　ｂｉｎｄｉｎｇ）領域と呼ばれている。本明細書において「Ｆａｂ領域」とは、重鎖のＶＨとＣＨ１ドメイン及び軽鎖（ＶＬとＣＬ）からなる領域を指し、当該Ｆａｂ領域が構成する先端部分の抗原結合部位で抗原と結合する。本明細書において「重鎖フラグメント」とは、Ｆａｂ領域を構成する重鎖のＶＨとＣＨ１ドメインからなるフラグメントを指す。また、Ｃ末端側の断片はＦｃ（結晶化可能断片、Ｆｒａｇｍｅｎｔ，ｃｒｙｓｔａｌｌｉｚａｂｌｅ）領域と呼ばれている。本明細書において「Ｆｃポリペプチド」は、重鎖のＣＨ２ドメイン及びＣＨ３ドメインからなるポリペプチドをいい、「Ｆｃ領域」は２つのＦｃポリペプチドからなる複合体を指す。

　本明細書において「ヒンジ領域」とは重鎖のＣＨ１ドメインとＣＨ２ドメインの間に存在する可動性の高いペプチド領域を言い、重鎖フラグメントとＦｃポリペプチドはヒンジ領域で繋がっている。また、抗体の２本の重鎖はヒンジ領域でジスルフィド結合している。

　本明細書において「抗原」とは、一般的な意味で用いられ、特に、抗体、抗原結合フラグメント等の抗原結合タンパク質が特異的に結合し得る分子又は分子の一部を表す用語として用いられる。抗原はタンパク質、核酸等の分子であり得る。１つの抗原は、異なる抗体等と相互作用することができる１つ又はそれ以上のエピトープを有する場合もある。

　本明細書において「抗体」とは、抗原に特異的に結合するポリペプチドであって、抗原に特異的に結合しうる限りにおいて、どのような構造であっても良い。例えば、抗体は、ＩｇＧ等の４本鎖構造を基本構造とするポリペプチドに加え、後述の抗原結合フラグメント、二重特異性抗体、三重特異性抗体等の種々の形状のポリペプチドを含む。

　本明細書において「抗原結合フラグメント」とは、抗体に由来する抗原結合活性を有する少なくとも１つのポリペプチド鎖を含む分子である。代表的な抗原結合フラグメントとしては、一本鎖可変領域フラグメント（ｓｃＦｖ）、Ｆａｂフラグメント、Ｆａｂ’フラグメント、Ｆ（ａｂ’）_２フラグメントが挙げられる。ｓｃＦｖは、リンカーで連結されたＶＨとＶＬから構成される、一価の抗原結合フラグメントである。Ｆａｂフラグメントは、軽鎖と、重鎖のＶＨ、ＣＨ１ドメインを含むフラグメントから構成される、一価の抗原結合フラグメントである。Ｆａｂ’フラグメントは、軽鎖と、重鎖のＶＨ、ＣＨ１ドメインとヒンジ領域の一部とを含むフラグメントから構成される、一価の抗原結合フラグメントであり、このヒンジ領域の部分には重鎖間Ｓ－Ｓ結合を構成していたシステイン残基が含まれる。Ｆ（ａｂ’）_２フラグメントは、Ｆａｂ’フラグメントがジスルフィド結合で繋がっている二価の分子である。一価とは、抗原結合部位を１つ含むことを、二価とは、抗原結合部位を２つ含むことを意味する。本明細書において「ｓｃＦｖ領域」とは、ｓｃＦｖを含む領域を指す。

　本明細書において「ポリペプチド」とは、複数のアミノ酸がペプチド結合により連結されたものを意味する。ポリペプチドに用いられるアミノ酸は天然のアミノ酸又は人工アミノ酸のいずれでもよい。ポリペプチドに含まれるアミノ酸残基の数は２以上であればよく、好ましくは１０以上である。

　本明細書において「二重特異性抗体」とは、２つの異なる抗原に特異的に結合することができる抗体である。

　本明細書において「ヒト抗体」は、ヒト免疫グロブリンアミノ酸配列を有する抗体を表す。本明細書において「ヒト化抗体」は、ＣＤＲ以外のアミノ酸残基の一部、大部分、又は全部が、ヒト免疫グロブリン分子に由来するアミノ酸残基で置換された抗体を表す。ヒト化の方法としては、特に制限されないが、例えば、米国特許第５２２５５３９号、米国特許第６１８０３７０号等を参照してヒト化抗体を作製することができる。

　本明細書において「翻訳後修飾」とは、抗体を細胞内で発現させた場合に抗体が翻訳後に修飾を受けることをいう。翻訳後修飾の例として、重鎖Ｎ末端のグルタミン又はグルタミン酸のピログルタミル化、グリコシル化、酸化、脱アミド化、糖化等の修飾や、重鎖Ｃ末端のリジンのカルボキシペプチダーゼによる切断によるリジン欠失が挙げられる。種々の抗体において、このような翻訳後修飾が生じることが知られている（Ｊ．Ｐｈａｒｍ．Ｓｃｉ．、２００８；Ｖｏｌ．９７：ｐ．２４２６－２４４７）。

　本明細書において「ポリヌクレオチド」とは、ヌクレオチドの重合体を意味し、ＲＮＡ又はＤＮＡを含む。用いられるＲＮＡ又はＤＮＡは天然のものであってもよく、人工的に合成されたものでも良い。

　本明細書中で使用される抗体のアミノ酸残基番号はＫａｂａｔナンバリング又はＥＵインデックス（Ｋａｂａｔら、Ｓｅｑｕｅｎｃｅｓ　ｏｆ　Ｐｒｏｔｅｉｎｓ　ｏｆ　Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｉｃａｌ　Ｉｎｔｅｒｅｓｔ、５ｔｈ　Ｅｄ、１９９１、ＮＩＨ　Ｐｕｂｌｉｃａｔｉｏｎ　Ｎｏ．９１－３２４２）を指定することで、それらのナンバリングシステムに従って規定することができる。

　本明細書において「第一」又は「第二」という用語は、部分の各種類が２つ以上存在する場合、便宜上区別するために使用される。このような用語の使用は、明瞭に述べているのでない限り、特定の順序や意味を付与することを意図しているのではない。

　本明細書において「連結」又は「連結された」とは、複数の成分（例えば、Ｆａｂ領域及びＦｃポリペプチド）が、直接又は一つ若しくは複数の仲介物（例えば、ペプチドリンカー、ヒンジ領域が挙げられるがこれに限定されない）を介して結合していることを意味する。本明細書において「ペプチドリンカー」とは、可変領域間を連結するための、遺伝子工学により導入し得る１以上の任意のアミノ酸残基を意味する。本発明で使用されるペプチドリンカーの長さは特に限定されず、目的に応じて当業者が適宜選択することが可能である。

　本明細書において「対象」とは、その予防又は治療を必要とするヒト又はその他の動物を意味する。ある態様では、治療又は予防を必要とするヒトである。

＜本発明の抗ＣＤ３７－抗ＣＤ３二重特異性抗体＞
　本発明は、以下の（ａ）～（ｃ）の構造を有する、ＣＤ３７及びＣＤ３に結合する二重特異性抗体（「抗ＣＤ３７－抗ＣＤ３二重特異性抗体」とも称する）を提供する：
　ＣＤ３７及びＣＤ３に結合する二重特異性抗体であって、
（ａ）抗ＣＤ３７抗体の重鎖可変領域を含む重鎖フラグメント及び抗ＣＤ３７抗体の軽鎖可変領域を含む軽鎖からなる抗ＣＤ３７抗体のＦａｂ領域、
（ｂ）抗ＣＤ３抗体の重鎖可変領域及び軽鎖可変領域を含む抗ＣＤ３ｓｃＦｖ領域、並びに
（ｃ）（ａ）のＦａｂ領域の重鎖フラグメントに連結される第一Ｆｃポリペプチド及び（ｂ）の抗ＣＤ３ｓｃＦｖ領域に連結される第二ＦｃポリペプチドからなるＦｃ領域、
を含む、二重特異性抗体。

　本発明の抗ＣＤ３７－抗ＣＤ３二重特異性抗体において、抗ＣＤ３７抗体、及び抗ＣＤ３ｓｃＦｖの重鎖可変領域及び軽鎖可変領域は、ヒト抗体由来、ヒト化抗体由来、又はそれらの組み合わせであってよい。１つの実施形態において、本発明の抗ＣＤ３７－抗ＣＤ３二重特異性抗体は、ヒト抗体由来の抗ＣＤ３７抗体とヒト化抗ＣＤ３抗体の重鎖可変領域及び軽鎖可変領域を含む抗ＣＤ３ｓｃＦｖからなる抗体である。

　本発明の抗ＣＤ３７－抗ＣＤ３二重特異性抗体は、抗ＣＤ３抗体の重鎖可変領域及び軽鎖可変領域を含む抗ＣＤ３ｓｃＦｖ領域を含む。

　１つの実施形態において、本発明の抗ＣＤ３７－抗ＣＤ３二重特異性抗体の抗ＣＤ３抗体の重鎖可変領域及び軽鎖可変領域は以下の（１）～（３）のいずれかである：
（１）配列番号１４のアミノ酸番号１から１２５までのアミノ酸配列からなる抗ＣＤ３抗体の重鎖可変領域及び配列番号１４のアミノ酸番号１４６から２５４までのアミノ酸配列からなる抗ＣＤ３抗体の軽鎖可変領域；
（２）配列番号１６のアミノ酸番号１から１２５までのアミノ酸配列からなる抗ＣＤ３抗体の重鎖可変領域及び配列番号１６のアミノ酸番号１４６から２５４までのアミノ酸配列からなる抗ＣＤ３抗体の軽鎖可変領域；又は、
（３）配列番号１８のアミノ酸番号１から１２５までのアミノ酸配列からなる抗ＣＤ３抗体の重鎖可変領域及び配列番号１８のアミノ酸番号１４６から２５４までのアミノ酸配列からなる抗ＣＤ３抗体の軽鎖可変領域。

　１つの実施形態において、本発明の抗ＣＤ３７－抗ＣＤ３二重特異性抗体は、
（ａ）抗ＣＤ３７抗体の重鎖可変領域を含む重鎖フラグメント及び抗ＣＤ３７抗体の軽鎖可変領域を含む軽鎖からなる抗ＣＤ３７抗体のＦａｂ領域、
（ｂ）抗ＣＤ３抗体の重鎖可変領域及び軽鎖可変領域を含む抗ＣＤ３ｓｃＦｖ領域、並びに、
（ｃ）（ａ）のＦａｂ領域の重鎖フラグメントに連結される第一Ｆｃポリペプチド及び（ｂ）の抗ＣＤ３ｓｃＦｖ領域に連結される第二ＦｃポリペプチドからなるＦｃ領域、を含み、
　抗ＣＤ３抗体の重鎖可変領域及び軽鎖可変領域が以下の（１）～（３）のいずれかである、二重特異性抗体：
（１）配列番号１４のアミノ酸番号１から１２５までのアミノ酸配列からなる抗ＣＤ３抗体の重鎖可変領域及び配列番号１４のアミノ酸番号１４６から２５４までのアミノ酸配列からなる抗ＣＤ３抗体の軽鎖可変領域；
（２）配列番号１６のアミノ酸番号１から１２５までのアミノ酸配列からなる抗ＣＤ３抗体の重鎖可変領域及び配列番号１６のアミノ酸番号１４６から２５４までのアミノ酸配列からなる抗ＣＤ３抗体の軽鎖可変領域；又は、
（３）配列番号１８のアミノ酸番号１から１２５までのアミノ酸配列からなる抗ＣＤ３抗体の重鎖可変領域及び配列番号１８のアミノ酸番号１４６から２５４までのアミノ酸配列からなる抗ＣＤ３抗体の軽鎖可変領域。

　抗ＣＤ３ｓｃＦｖ領域において、抗ＣＤ３抗体の重鎖可変領域と軽鎖可変領域を連結するペプチドリンカーの種類及び長さは特に限定されず、当業者が適宜選択することが可能であるが、好ましい長さは５アミノ酸以上（上限は特に限定されないが、通常、３０アミノ酸以下、好ましくは２０アミノ酸以下）であり、特に好ましくは１５アミノ酸である。ペプチドリンカーとして、例えば、グリシン－セリンリンカー（ＧＳリンカー）や、グリシン－リジン－プロリン－グリシン－セリンリンカー（ＧＫＰＧＳリンカー）を使用することができる。ペプチドリンカーとしては、例えば、以下が挙げられる。
Ｓｅｒ
Ｇｌｙ－Ｓｅｒ
Ｇｌｙ－Ｇｌｙ－Ｓｅｒ
Ｓｅｒ－Ｇｌｙ－Ｇｌｙ
Ｇｌｙ－Ｇｌｙ－Ｇｌｙ－Ｓｅｒ　（配列番号１９）
Ｓｅｒ－Ｇｌｙ－Ｇｌｙ－Ｇｌｙ　（配列番号２０）
Ｇｌｙ－Ｇｌｙ－Ｇｌｙ－Ｇｌｙ－Ｓｅｒ　（配列番号２１）
Ｓｅｒ－Ｇｌｙ－Ｇｌｙ－Ｇｌｙ－Ｇｌｙ　（配列番号２２）
Ｇｌｙ－Ｇｌｙ－Ｇｌｙ－Ｇｌｙ－Ｇｌｙ－Ｓｅｒ　（配列番号２３）
Ｓｅｒ－Ｇｌｙ－Ｇｌｙ－Ｇｌｙ－Ｇｌｙ－Ｇｌｙ　（配列番号２４）
Ｇｌｙ－Ｇｌｙ－Ｇｌｙ－Ｇｌｙ－Ｇｌｙ－Ｇｌｙ－Ｓｅｒ　（配列番号２５）
Ｓｅｒ－Ｇｌｙ－Ｇｌｙ－Ｇｌｙ－Ｇｌｙ－Ｇｌｙ－Ｇｌｙ　（配列番号２６）
（Ｇｌｙ－Ｇｌｙ－Ｇｌｙ－Ｇｌｙ－Ｓｅｒ）_ｎ
（Ｓｅｒ－Ｇｌｙ－Ｇｌｙ－Ｇｌｙ－Ｇｌｙ）_ｎ
Ｇｌｙ－Ｌｙｓ－Ｐｒｏ－Ｇｌｙ－Ｓｅｒ　（配列番号２７）
（Ｇｌｙ－Ｌｙｓ－Ｐｒｏ－Ｇｌｙ－Ｓｅｒ）_ｎ
　上記のｎは１以上の整数を示す。ペプチドリンカーの長さや配列は目的に応じて当業者が適宜選択することができる。

　１つの実施形態において、抗ＣＤ３ｓｃＦｖ領域に用いられるリンカーは（Ｇｌｙ－Ｌｙｓ－Ｐｒｏ－Ｇｌｙ－Ｓｅｒ）_ｎの配列を含むリンカーである。１つの実施形態において、抗ＣＤ３ｓｃＦｖ領域に用いられるリンカーは、好ましくは（Ｇｌｙ－Ｌｙｓ－Ｐｒｏ－Ｇｌｙ－Ｓｅｒ）_４の配列を含むリンカーである。

　１つの実施形態において、抗ＣＤ３ｓｃＦｖ領域は、以下の（１）～（３）のいずれかである：
（１）配列番号１４のアミノ酸番号１から２５４までのアミノ酸配列からなる抗ＣＤ３ｓｃＦｖ領域；
（２）配列番号１６のアミノ酸番号１から２５４までのアミノ酸配列からなる抗ＣＤ３ｓｃＦｖ領域；又は、
（３）配列番号１８のアミノ酸番号１から２５４までのアミノ酸配列からなる抗ＣＤ３ｓｃＦｖ領域。

　本発明の抗ＣＤ３７－抗ＣＤ３二重特異性抗体は、抗ＣＤ３７抗体の重鎖可変領域及び軽鎖可変領域を含む。本発明に用いる抗ＣＤ３７抗体は、当該分野で公知の抗ＣＤ３７抗体の重鎖可変領域及び軽鎖可変領域の配列情報に基づいて作製してもよい。例えば、公知の抗ＣＤ３７抗体は、特許文献１に記載されている。

　１つの実施形態において、抗ＣＤ３７抗体の重鎖可変領域は、配列番号１０のアミノ酸番号３１から３５までのアミノ酸配列からなるＣＤＲ１、配列番号１０のアミノ酸番号５０から６５までのアミノ酸配列からなるＣＤＲ２、及び配列番号１０のアミノ酸番号９８から１０４までのアミノ酸配列からなるＣＤＲ３を含み、抗ＣＤ３７抗体の軽鎖可変領域は、配列番号１２のアミノ酸番号２４から３４までのアミノ酸配列からなるＣＤＲ１、配列番号１２のアミノ酸番号５０から５６までのアミノ酸配列からなるＣＤＲ２、及び配列番号１２のアミノ酸番号８９から９５までのアミノ酸配列からなるＣＤＲ３を含む。

　１つの実施形態において、抗ＣＤ３７抗体の重鎖可変領域は、配列番号１０のアミノ酸番号１から１１５までのアミノ酸配列からなり、抗ＣＤ３７抗体の軽鎖可変領域は、配列番号１２のアミノ酸番号１から１０５までのアミノ酸配列からなる。

　抗ＣＤ３７抗体Ｆａｂ領域の重鎖フラグメントのＣＨ１ドメインが由来する重鎖定常領域としては、Ｉｇγ、Ｉｇμ、Ｉｇα、Ｉｇδ又はＩｇεのいずれの定常領域も選択可能である。Ｉｇγとしては、例えば、Ｉｇγ１、Ｉｇγ２、Ｉｇγ３又はＩｇγ４から選択することが可能である。１つの実施形態において、抗ＣＤ３７抗体Ｆａｂ領域の重鎖フラグメントは、ヒトＩｇγ１定常領域に由来するＣＨ１ドメインを含む。

　抗ＣＤ３７抗体Ｆａｂ領域の軽鎖のＣＬとしては、Ｉｇλ又はＩｇκのいずれの定常領域も選択可能である。１つの実施形態において、抗ＣＤ３７抗体Ｆａｂ領域は、Ｉｇκ定常領域であるＣＬを含む。１つの実施形態において、抗ＣＤ３７抗体Ｆａｂ領域の軽鎖は、ヒトＩｇκ定常領域であるＣＬを含む。

　１つの実施形態において、抗ＣＤ３７抗体Ｆａｂ領域は、配列番号１０のアミノ酸番号１から２１３までのアミノ酸配列からなる重鎖フラグメント及び配列番号１２のアミノ酸配列からなる軽鎖からなる。

　本明細書において、抗ＣＤ３７抗体の重鎖可変領域を含む重鎖フラグメントと第一Ｆｃポリペプチドが連結されたポリペプチドを「抗ＣＤ３７抗体の重鎖」とも称する。本発明の抗ＣＤ３７－抗ＣＤ３二重特異性抗体において、抗ＣＤ３７抗体の重鎖可変領域を含む重鎖フラグメントとＦｃポリペプチド（第一Ｆｃポリペプチド）は、直接連結されてもよく、又はペプチドリンカー若しくはヒンジ領域を介して連結されてもよい。また、本発明の抗ＣＤ３７－抗ＣＤ３二重特異性抗体において、抗ＣＤ３ｓｃＦｖ領域とＦｃポリペプチド（第二Ｆｃポリペプチド）は、直接連結されてもよく、又はペプチドリンカー若しくはヒンジ領域を介して連結されても良い。

　１つの実施形態において、本発明の抗ＣＤ３７－抗ＣＤ３二重特異性抗体は、以下の（ａ）～（ｃ）のいずれかに記載の抗ＣＤ３７－抗ＣＤ３二重特異性抗体である：
（ａ）配列番号１０のアミノ酸番号３１から３５までのアミノ酸配列からなるＣＤＲ１、配列番号１０のアミノ酸番号５０から６５までのアミノ酸配列からなるＣＤＲ２、及び配列番号１０のアミノ酸番号９８から１０４までのアミノ酸配列からなるＣＤＲ３を含む重鎖可変領域を含む抗ＣＤ３７抗体の重鎖フラグメントに第一Ｆｃポリペプチドが連結された、抗ＣＤ３７抗体の重鎖、配列番号１２のアミノ酸番号２４から３４までのアミノ酸配列からなるＣＤＲ１、配列番号１２のアミノ酸番号５０から５６までのアミノ酸配列からなるＣＤＲ２、及び配列番号１２のアミノ酸番号８９から９５までのアミノ酸配列からなるＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域を含む抗ＣＤ３７抗体の軽鎖、並びに、配列番号１４のアミノ酸番号１から１２５までのアミノ酸配列からなる抗ＣＤ３抗体の重鎖可変領域及び配列番号１４のアミノ酸番号１４６から２５４までのアミノ酸配列からなる抗ＣＤ３抗体の軽鎖可変領域を含む抗ＣＤ３ｓｃＦｖ領域に第二Ｆｃポリペプチドが連結されたポリペプチドを含む、二重特異性抗体；
（ｂ）配列番号１０のアミノ酸番号３１から３５までのアミノ酸配列からなるＣＤＲ１、配列番号１０のアミノ酸番号５０から６５までのアミノ酸配列からなるＣＤＲ２、及び配列番号１０のアミノ酸番号９８から１０４までのアミノ酸配列からなるＣＤＲ３を含む重鎖可変領域を含む抗ＣＤ３７抗体の重鎖フラグメントに第一Ｆｃポリペプチドが連結された、抗ＣＤ３７抗体の重鎖、配列番号１２のアミノ酸番号２４から３４までのアミノ酸配列からなるＣＤＲ１、配列番号１２のアミノ酸番号５０から５６までのアミノ酸配列からなるＣＤＲ２、及び配列番号１２のアミノ酸番号８９から９５までのアミノ酸配列からなるＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域を含む抗ＣＤ３７抗体の軽鎖、並びに、配列番号１６のアミノ酸番号１から１２５までのアミノ酸配列からなる抗ＣＤ３抗体の重鎖可変領域及び配列番号１６のアミノ酸番号１４６から２５４までのアミノ酸配列からなる抗ＣＤ３抗体の軽鎖可変領域を含む抗ＣＤ３ｓｃＦｖ領域に第二Ｆｃポリペプチドが連結されたポリペプチドを含む、二重特異性抗体；又は、
（ｃ）配列番号１０のアミノ酸番号３１から３５までのアミノ酸配列からなるＣＤＲ１、配列番号１０のアミノ酸番号５０から６５までのアミノ酸配列からなるＣＤＲ２、及び配列番号１０のアミノ酸番号９８から１０４までのアミノ酸配列からなるＣＤＲ３を含む重鎖可変領域を含む抗ＣＤ３７抗体の重鎖フラグメントに第一Ｆｃポリペプチドが連結された、抗ＣＤ３７抗体の重鎖、配列番号１２のアミノ酸番号２４から３４までのアミノ酸配列からなるＣＤＲ１、配列番号１２のアミノ酸番号５０から５６までのアミノ酸配列からなるＣＤＲ２、及び配列番号１２のアミノ酸番号８９から９５までのアミノ酸配列からなるＣＤＲ３を含む軽鎖可変領域を含む抗ＣＤ３７抗体の軽鎖、並びに、配列番号１８のアミノ酸番号１から１２５までのアミノ酸配列からなる抗ＣＤ３抗体の重鎖可変領域及び配列番号１８のアミノ酸番号１４６から２５４までのアミノ酸配列からなる抗ＣＤ３抗体の軽鎖可変領域を含む抗ＣＤ３ｓｃＦｖ領域に第二Ｆｃポリペプチドが連結されたポリペプチドを含む、二重特異性抗体。

　１つの実施形態において、本発明の抗ＣＤ３７－抗ＣＤ３二重特異性抗体は、以下の（ａ）～（ｃ）のいずれかに記載の抗ＣＤ３７－抗ＣＤ３二重特異性抗体である：
（ａ）配列番号１０のアミノ酸番号１から１１５までのアミノ酸配列からなる重鎖可変領域を含む抗ＣＤ３７抗体の重鎖フラグメントに第一Ｆｃポリペプチドが連結された抗ＣＤ３７抗体の重鎖、配列番号１２のアミノ酸番号１から１０５までのアミノ酸配列からなる軽鎖可変領域を含む抗ＣＤ３７抗体の軽鎖、並びに、配列番号１４のアミノ酸番号１から１２５までのアミノ酸配列からなる抗ＣＤ３抗体の重鎖可変領域及び配列番号１４のアミノ酸番号１４６から２５４までのアミノ酸配列からなる抗ＣＤ３抗体の軽鎖可変領域を含む抗ＣＤ３ｓｃＦｖ領域に第二Ｆｃポリペプチドが連結されたポリペプチドを含む、二重特異性抗体；
（ｂ）配列番号１０のアミノ酸番号１から１１５までのアミノ酸配列からなる重鎖可変領域を含む抗ＣＤ３７抗体の重鎖フラグメントに第一Ｆｃポリペプチドが連結された抗ＣＤ３７抗体の重鎖、配列番号１２のアミノ酸番号１から１０５までのアミノ酸配列からなる軽鎖可変領域を含む抗ＣＤ３７抗体の軽鎖、並びに、配列番号１６のアミノ酸番号１から１２５までのアミノ酸配列からなる抗ＣＤ３抗体の重鎖可変領域及び配列番号１６のアミノ酸番号１４６から２５４までのアミノ酸配列からなる抗ＣＤ３抗体の軽鎖可変領域を含む抗ＣＤ３ｓｃＦｖ領域に第二Ｆｃポリペプチドが連結されたポリペプチドを含む、二重特異性抗体；又は、
（ｃ）配列番号１０のアミノ酸番号１から１１５までのアミノ酸配列からなる重鎖可変領域を含む抗ＣＤ３７抗体の重鎖フラグメントに第一Ｆｃポリペプチドが連結された抗ＣＤ３７抗体の重鎖、配列番号１２のアミノ酸番号１から１０５までのアミノ酸配列からなる軽鎖可変領域を含む抗ＣＤ３７抗体の軽鎖、並びに、配列番号１８のアミノ酸番号１から１２５までのアミノ酸配列からなる抗ＣＤ３抗体の重鎖可変領域及び配列番号１８のアミノ酸番号１４６から２５４までのアミノ酸配列からなる抗ＣＤ３抗体の軽鎖可変領域を含む抗ＣＤ３ｓｃＦｖ領域に第二Ｆｃポリペプチドが連結されたポリペプチドを含む、二重特異性抗体。

　１つの実施形態において、本発明の抗ＣＤ３７－抗ＣＤ３二重特異性抗体は、以下の（ａ）～（ｃ）のいずれかに記載の抗ＣＤ３７－抗ＣＤ３二重特異性抗体である：
（ａ）配列番号１０のアミノ酸番号１から２１３までのアミノ酸配列からなる抗ＣＤ３７抗体の重鎖フラグメントに第一Ｆｃポリペプチドが連結された抗ＣＤ３７抗体の重鎖、配列番号１２のアミノ酸配列からなる抗ＣＤ３７抗体の軽鎖、及び配列番号１４のアミノ酸番号１から２５４までのアミノ酸配列からなる抗ＣＤ３ｓｃＦｖ領域に第二Ｆｃポリペプチドが連結されたポリペプチドを含む、二重特異性抗体；
（ｂ）配列番号１０のアミノ酸番号１から２１３までのアミノ酸配列からなる抗ＣＤ３７抗体の重鎖フラグメントに第一Ｆｃポリペプチドが連結された抗ＣＤ３７抗体の重鎖、配列番号１２のアミノ酸配列からなる抗ＣＤ３７抗体の軽鎖、及び配列番号１６のアミノ酸番号１から２５４までのアミノ酸配列からなる抗ＣＤ３ｓｃＦｖ領域に第二Ｆｃポリペプチドが連結されたポリペプチドを含む、二重特異性抗体；又は、
（ｃ）配列番号１０のアミノ酸番号１から２１３までのアミノ酸配列からなる抗ＣＤ３７抗体の重鎖フラグメントに第一Ｆｃポリペプチドが連結された抗ＣＤ３７抗体の重鎖、配列番号１２のアミノ酸配列からなる抗ＣＤ３７抗体の軽鎖、及び配列番号１８のアミノ酸番号１から２５４までのアミノ酸配列からなる抗ＣＤ３ｓｃＦｖ領域に第二Ｆｃポリペプチドが連結されたポリペプチドを含む、二重特異性抗体。

　本発明の抗ＣＤ３７－抗ＣＤ３二重特異性抗体において、Ｆｃ領域を構成する第一Ｆｃポリペプチド及び第二Ｆｃポリペプチドが由来する重鎖定常領域としては、Ｉｇγ、Ｉｇμ、Ｉｇα、Ｉｇδ又はＩｇεのいずれの定常領域も選択可能である。Ｉｇγとしては、例えば、Ｉｇγ１、Ｉｇγ２、Ｉｇγ３又はＩｇγ４から選択することが可能である。１つの実施形態において、第一Ｆｃポリペプチド及び第二Ｆｃポリペプチドは、ヒトＩｇγ１定常領域に由来するＦｃポリペプチドである。

　本発明の抗ＣＤ３７－抗ＣＤ３二重特異性抗体におけるＦｃ領域は、抗体依存性細胞傷害活性（ＡＤＣＣ）や補体依存性傷害活性（ＣＤＣ）を低下させる変異を含んでもよい。Ｌ２３４Ａとは、ヒトＩｇγ１定常領域におけるＥＵインデックスに従うアミノ酸２３４位のロイシンのアラニンへの置換である。Ｌ２３５Ａとは、ヒトＩｇγ１定常領域におけるＥＵインデックスに従うアミノ酸２３５位のロイシンのアラニンへの置換である。ヒトＩｇγ１定常領域Ｌ２３４Ａ及びＬ２３５Ａのアミノ酸変異を「ＬＡＬＡ変異」という。当該変異は、抗体の抗体依存性細胞傷害活性や補体依存性傷害活性を低下させることが知られている（Ｍｏｌ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．、１９９２；Ｖｏｌ．２９：ｐ．６３３－６３９；Ｊ．Ｉｍｍｕｎｏｌ．、２０００；Ｖｏｌ．１６４：ｐ．４１７８－４１８４）。

　本発明の抗ＣＤ３７－抗ＣＤ３二重特異性抗体におけるＦｃ領域は、さらに他の公知技術に基づく変異を含んでもよい。例えば、Ｆｃ領域は、Ｐ３２９Ａ変異（Ｊ　Ｂｉｏｌ　Ｃｈｅｍ．、２００１；Ｖｏｌｕｍｅ　２７６：Ｉｓｓｕｅ　９：ｐ．６５９１－６６０４；Ｊ　Ｉｍｍｕｎｏｌ、２０００；Ｖｏｌ　１６４：Ｉｓｓｕｅ　８：ｐ．４１７８－４１８４）又はノブズ・イントゥー・ホールズ（Ｋｎｏｂｓ　ｉｎｔｏ　ｈｏｌｅｓ）技術に基づく変異（以下、「ノブズ・イントゥー・ホールズ変異」とも称する）を含んでもよい。Ｐ３２９Ａ変異は、ＦｃγＲおよびＣ１ｑとの結合を減弱させることによりＡＤＣＣ活性及びＣＤＣ活性を低く抑える効果を有する。ノブズ・イントゥー・ホールズ技術は、一方の重鎖のＣＨ３領域に存在するアミノ酸側鎖をより大きい側鎖（ｋｎｏｂ；突起）に置換し、もう一方の重鎖のＣＨ３領域に存在するアミノ酸側鎖をより小さい側鎖（ｈｏｌｅ；空隙）に置換することにより、突起が空隙内に配置されるようにして、重鎖のヘテロ二量体化を促進し、目的のヘテロ二量体化抗体分子を効率的に取得できる技術である（Ｎａｔｕｒｅ、１９９４；Ｖｏｌ．３７２：ｐ．３７９－３８３；Ｎａｔｕｒｅ　Ｂｉｏｔｅｃｈ．、１９９８；Ｖｏｌ．１６：ｐ．６７７－６８１；Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．、１９９７；Ｖｏｌ．２７０：ｐ．２６－３５；Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ、２０１３；Ｖｏｌ．１１０：ｐ．Ｅ２９８７－Ｅ２９９６）。

　１つの実施形態において、本発明の抗ＣＤ３７－抗ＣＤ３二重特異性抗体は、Ｌ２３４Ａ及びＬ２３５Ａのアミノ酸変異（ＬＡＬＡ変異）を含むＦｃ領域を含む。１つの実施形態において、本発明の抗ＣＤ３７－抗ＣＤ３二重特異性抗体は、Ｐ３２９Ａ変異を含むＦｃ領域を含む。１つの実施形態において、本発明の抗ＣＤ３７－抗ＣＤ３二重特異性抗体は、ノブズ・イントゥー・ホールズ変異を含むＦｃ領域を含む。１つの実施形態において、本発明の抗ＣＤ３７－抗ＣＤ３二重特異性抗体は、Ｌ２３４Ａ及びＬ２３５Ａのアミノ酸変異（ＬＡＬＡ変異）、Ｐ３２９Ａ変異、及びノブズ・イントゥー・ホールズ変異のうちの１つ以上の変異を含むＦｃ領域を含む。１つの実施形態において、本発明の抗ＣＤ３７－抗ＣＤ３二重特異性抗体は、Ｌ２３４Ａ及びＬ２３５Ａのアミノ酸変異（ＬＡＬＡ変異）、Ｐ３２９Ａ変異、及びノブズ・イントゥー・ホールズ変異を含むＦｃ領域を含む。１つの実施形態において、本発明の抗ＣＤ３７－抗ＣＤ３二重特異性抗体に含まれるノブズ・イントゥー・ホールズ変異は、そのＦｃ領域を形成する１つのＦｃポリペプチドにおけるＴ３６６Ｗ変異、並びにそのＦｃ領域を形成するもう１つのＦｃポリペプチドにおけるＴ３６６Ｓ、Ｌ３６８Ａ及びＹ４０７Ｖ変異（ＷＯ１９９８／０５０４３１号を参照）である。

　１つの実施形態において、本発明の抗ＣＤ３７－抗ＣＤ３二重特異性抗体は、配列番号１０のアミノ酸番号２２９から４４５までのアミノ酸配列からなる第一Ｆｃポリペプチドを含む。１つの実施形態において、本発明の抗ＣＤ３７－抗ＣＤ３二重特異性抗体は、配列番号１４のアミノ酸番号２７０から４８６までのアミノ酸配列、配列番号１６のアミノ酸番号２７０から４８６までのアミノ酸配列、又は配列番号１８のアミノ酸番号２７０から４８６までのアミノ酸配列からなる第二Ｆｃポリペプチドを含む。

　１つの実施形態において、本発明の抗ＣＤ３７－抗ＣＤ３二重特異性抗体は、以下の（ａ）～（ｃ）のいずれかに記載のポリペプチドを含む：
（ａ）配列番号１０のアミノ酸番号２２９から４４５までのアミノ酸配列からなる第一Ｆｃポリペプチド及び配列番号１４のアミノ酸番号２７０から４８６までのアミノ酸配列からなる第二ＦｃポリペプチドからなるＦｃ領域；
（ｂ）配列番号１０のアミノ酸番号２２９から４４５までのアミノ酸配列からなる第一Ｆｃポリペプチド及び配列番号１６のアミノ酸番号２７０から４８６までのアミノ酸配列からなる第二ＦｃポリペプチドからなるＦｃ領域；又は、
（ｃ）配列番号１０のアミノ酸番号２２９から４４５までのアミノ酸配列からなる第一Ｆｃポリペプチド及び配列番号１８のアミノ酸番号２７０から４８６までのアミノ酸配列からなる第二ＦｃポリペプチドからなるＦｃ領域。

　本発明の抗ＣＤ３７－抗ＣＤ３二重特異性抗体において、抗ＣＤ３７抗体の重鎖可変領域を含む重鎖フラグメントと第一Ｆｃポリペプチドは、ヒンジ領域を介して連結され、抗ＣＤ３７抗体の重鎖を構成してもよい。
　また、本発明の抗ＣＤ３７－抗ＣＤ３二重特異性抗体において、抗ＣＤ３ｓｃＦｖ領域と第二Ｆｃポリペプチドは、ヒンジ領域を介して連結されても良い。

　１つの実施形態において、本発明の抗ＣＤ３７－抗ＣＤ３二重特異性抗体は、抗ＣＤ３７抗体のＦａｂ領域の重鎖フラグメントと第一Ｆｃポリペプチドがヒンジ領域を介して連結された抗ＣＤ３７抗体の重鎖を含む。１つの実施形態において、本発明の抗ＣＤ３７－抗ＣＤ３二重特異性抗体は、抗ＣＤ３ｓｃＦｖ領域と第二Ｆｃポリペプチドがヒンジ領域を介して連結されたポリペプチドを含む。１つの実施形態において、本発明の抗ＣＤ３７－抗ＣＤ３二重特異性抗体は、抗ＣＤ３７抗体のＦａｂ領域の重鎖フラグメントと第一Ｆｃポリペプチドがヒンジ領域を介して連結された抗ＣＤ３７抗体の重鎖、及び抗ＣＤ３ｓｃＦｖ領域と第二Ｆｃポリペプチドがヒンジ領域を介して連結されたポリペプチドを含む。

　１つの実施形態において、本発明の抗ＣＤ３７－抗ＣＤ３二重特異性抗体は、抗ＣＤ３７抗体のＦａｂ領域の重鎖フラグメントと第一Ｆｃポリペプチドがヒンジ領域を介して連結された抗ＣＤ３７抗体の重鎖、抗ＣＤ３７抗体の軽鎖、及び抗ＣＤ３ｓｃＦｖ領域と第二Ｆｃポリペプチドがヒンジ領域を介して連結されたポリペプチドを含む。

　本発明の抗ＣＤ３７－抗ＣＤ３二重特異性抗体がヒンジ領域を含む場合、公知技術に基づくヒンジ領域における変異を含んでもよい。例えば、ヒンジ領域は、Ｃ２２０Ｓ変異（Ｍｅｔｈｏｄｓ、２０１９；Ｖｏｌｕｍｅ　１５４：ｐ．３８－５０）を含んでもよい。Ｃ２２０Ｓ変異は、軽鎖定常領域に存在したシステインの欠損により、ペアとなるシステインを失った結果としてフリーとなった２２０位のシステインを除去することを目的とした変異である。本発明の抗ＣＤ３７－抗ＣＤ３二重特異性抗体がヒンジ領域を含む場合、１つの実施形態において、抗ＣＤ３ｓｃＦｖ領域と第二Ｆｃポリペプチドを連結するヒンジ領域がＣ２２０Ｓ変異を含む。

　本発明の抗ＣＤ３７－抗ＣＤ３二重特異性抗体の１つの実施形態において、Ｆｃ領域がＬ２３４Ａ及びＬ２３５Ａのアミノ酸変異（ＬＡＬＡ変異）、Ｐ３２９Ａ変異、及びノブズ・イントゥー・ホールズ変異を含み、抗ＣＤ３ｓｃＦｖ領域と第二Ｆｃポリペプチドを連結するヒンジ領域がＣ２２０Ｓ変異を含む。

　１つの実施形態において、本発明の抗ＣＤ３７－抗ＣＤ３二重特異性抗体は、配列番号１０のアミノ酸番号２１４から４４５までのアミノ酸配列からなるヒンジ領域及び第一Ｆｃポリペプチドを含むポリペプチドを含む。１つの実施形態において、本発明の抗ＣＤ３７－抗ＣＤ３二重特異性抗体は、配列番号１４のアミノ酸番号２５５から４８６までのアミノ酸配列、配列番号１６のアミノ酸番号２５５から４８６までのアミノ酸配列、又は配列番号１８のアミノ酸番号２５５から４８６までのアミノ酸配列からなるヒンジ領域及び第二Ｆｃポリペプチドを含むポリペプチドを含む。

　１つの実施形態において、本発明の抗ＣＤ３７－抗ＣＤ３二重特異性抗体は、以下の（ａ）～（ｃ）のいずれかに記載のポリペプチドを含む：
（ａ）配列番号１０のアミノ酸番号２１４から４４５までのアミノ酸配列からなるヒンジ領域及び第一Ｆｃポリペプチドを含むポリペプチド並びに配列番号１４のアミノ酸番号２５５から４８６までのアミノ酸配列からなるヒンジ領域及び第二Ｆｃポリペプチドを含むポリペプチド；
（ｂ）配列番号１０のアミノ酸番号２１４から４４５までのアミノ酸配列からなるヒンジ領域及び第一Ｆｃポリペプチドからなるポリペプチド並びに配列番号１６のアミノ酸番号２５５から４８６までのアミノ酸配列からなるヒンジ領域及び第二Ｆｃポリペプチドを含むポリペプチド；又は、
（ｃ）配列番号１０のアミノ酸番号２１４から４４５までのアミノ酸配列からなるヒンジ領域及び第一Ｆｃポリペプチドからなるポリペプチド並びに配列番号１８のアミノ酸番号２５５から４８６までのアミノ酸配列からなるヒンジ領域及び第二Ｆｃポリペプチドを含むポリペプチド。

　なお、本明細書において、ＬＡＬＡ変異、Ｐ３２９Ａ変異及びＣ２２０Ｓ変異、ノブズ・イントゥー・ホールズ変異等のアミノ酸変異の記載は、ヒトＩｇγ１定常領域におけるＥＵインデックスに従うアミノ酸位置に基づくものである。例えば、前述の通り、Ｌ２３４Ａとは、ヒトＩｇγ１定常領域におけるＥＵインデックスに従うアミノ酸２３４位のロイシンのアラニンへの置換である。

　１つの実施形態において、本発明の抗ＣＤ３７－抗ＣＤ３二重特異性抗体は、以下の（ａ）～（ｃ）のいずれかである：
（ａ）配列番号１０のアミノ酸配列からなる抗ＣＤ３７抗体の重鎖、配列番号１２のアミノ酸配列からなる抗ＣＤ３７抗体の軽鎖、及び配列番号１４のアミノ酸配列からなる、抗ＣＤ３ｓｃＦｖ領域に第二Ｆｃポリペプチドが連結されたポリペプチド、を含む二重特異性抗体；
（ｂ）配列番号１０のアミノ酸配列からなる抗ＣＤ３７抗体の重鎖、配列番号１２のアミノ酸配列からなる抗ＣＤ３７抗体の軽鎖、及び配列番号１６のアミノ酸配列からなる、抗ＣＤ３ｓｃＦｖ領域に第二Ｆｃポリペプチドが連結されたポリペプチド、を含む、二重特異性抗体；又は、
（ｃ）配列番号１０のアミノ酸配列からなる抗ＣＤ３７抗体の重鎖、配列番号１２のアミノ酸配列からなる抗ＣＤ３７抗体の軽鎖、及び配列番号１８のアミノ酸配列からなる、抗ＣＤ３ｓｃＦｖ領域に第二Ｆｃポリペプチドが連結されたポリペプチド、を含む、二重特異性抗体。

　１つの実施形態において、本発明の抗ＣＤ３７－抗ＣＤ３二重特異性抗体は、配列番号１０のアミノ酸配列からなる抗ＣＤ３７抗体の重鎖、配列番号１２のアミノ酸配列からなる抗ＣＤ３７抗体の軽鎖、及び配列番号１４のアミノ酸配列からなる、抗ＣＤ３ｓｃＦｖ領域に第二Ｆｃポリペプチドが連結されたポリペプチド、を含む二重特異性抗体である。

　１つの実施形態において、本発明の抗ＣＤ３７－抗ＣＤ３二重特異性抗体は、配列番号１０のアミノ酸配列からなる抗ＣＤ３７抗体の重鎖、配列番号１２のアミノ酸配列からなる抗ＣＤ３７抗体の軽鎖、及び配列番号１６のアミノ酸配列からなる、抗ＣＤ３ｓｃＦｖ領域に第二Ｆｃポリペプチドが連結されたポリペプチド、を含む二重特異性抗体である。

　１つの実施形態において、本発明の抗ＣＤ３７－抗ＣＤ３二重特異性抗体は、配列番号１０のアミノ酸配列からなる抗ＣＤ３７抗体の重鎖、配列番号１２のアミノ酸配列からなる抗ＣＤ３７抗体の軽鎖、及び配列番号１８のアミノ酸配列からなる、抗ＣＤ３ｓｃＦｖ領域に第二Ｆｃポリペプチドが連結されたポリペプチド、を含む二重特異性抗体である。

　１つの実施形態において、本発明の抗ＣＤ３７－抗ＣＤ３二重特異性抗体は、翻訳後修飾されていてもよい。１つの実施形態において、翻訳後修飾は重鎖可変領域Ｎ末端のピログルタミル化及び／又は重鎖Ｃ末端リジン欠失である。Ｎ末端のピログルタミル化又はＣ末端リジン欠失による翻訳後修飾が抗体の活性に影響を及ぼすものではないことは当該分野で知られている（Ａｎａｌｙｔｉｃａｌ　Ｂｉｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ、２００６；Ｖｏｌ．３４８：ｐ．２４－３９）。

　本発明の抗ＣＤ３７－抗ＣＤ３二重特異性抗体は、ヒトＣＤ３７（遺伝子番号：ＮＭ＿００１７７４．３）及びヒトＣＤ３εδ複合タンパク（ＣＤ３ε遺伝子番号：ＮＭ＿０００７３３．３、ＣＤ３δ遺伝子番号：ＮＭ＿０００７３２．４又はＮＭ＿００１０４０６５１．１）に結合する。ヒトＣＤ３７及びヒトＣＤ３εδ複合タンパクに結合するか否かは、公知の結合活性測定方法を用いて確認することができる。結合活性を測定する方法としては、例えば、Ｅｎｚｙｍｅ－Ｌｉｎｋｅｄ　ＩｍｍｕｎｏＳｏｒｂｅｎｔ　Ａｓｓａｙ（ＥＬＩＳＡ）法、フローサイトメトリー法等の方法が挙げられる。ＥＬＩＳＡ法を用いる場合は、例えば実施例１－３に記載される方法を用いることができる。

　本発明の抗ＣＤ３７－抗ＣＤ３二重特異性抗体は、当業者であれば、本明細書に開示される抗ＣＤ３７抗体及び抗ＣＤ３ｓｃＦｖ領域の重鎖可変領域及び軽鎖可変領域の配列情報等に基づき、当該分野で公知の方法を使用して作製することができる。また、本発明の抗ＣＤ３７－抗ＣＤ３二重特異性抗体の抗ＣＤ３ｓｃＦｖ領域は、当業者であれば、抗ＣＤ３抗体の重鎖可変領域及び軽鎖可変領域の配列情報等に基づき、当該分野で公知の方法を使用して作製することができる。

　１つの実施形態において、本発明の抗ＣＤ３７－抗ＣＤ３二重特異性抗体は、ヒト化抗体又はヒト抗体の配列を含む。ヒト化抗体の作製にあたっては、当業者に周知の方法を用いて、適宜バックミューテーションを導入してもよい（Ｂｉｏｉｎｆｏｒｍａｔｉｃｓ、２０１５；Ｖｏｌ．３１：ｐ．４３４－４３５）。本発明の抗ＣＤ３７－抗ＣＤ３二重特異性抗体は、特に限定されるものではないが、例えば、後述の＜本発明の二重特異性抗体を生産する方法及び該方法により生産される本発明の二重特異性抗体＞に記載の方法に従い製造することができる。

＜本発明の抗ＣＤ３７－抗ＣＤ３二重特異性抗体のポリヌクレオチド＞
　本発明はまた、本発明の抗ＣＤ３７－抗ＣＤ３二重特異性抗体の生産に用いるポリヌクレオチド（「本発明の抗ＣＤ３７－抗ＣＤ３二重特異性抗体のポリヌクレオチド」とも称する）を提供する。

　１つの実施形態において、本発明の抗ＣＤ３７－抗ＣＤ３二重特異性抗体のポリヌクレオチドは、以下の（ａ）～（ｐ）からなる群より選択される：
（ａ）配列番号１０のアミノ酸番号１から１１５までのアミノ酸配列からなる重鎖可変領域を含む抗ＣＤ３７抗体の重鎖フラグメントをコードする塩基配列を含むポリヌクレオチド；
（ｂ）配列番号１２のアミノ酸番号１から１０５までのアミノ酸配列からなる軽鎖可変領域を含む抗ＣＤ３７抗体の軽鎖をコードする塩基配列を含むポリヌクレオチド；
（ｃ）配列番号１０のアミノ酸配列からなる抗ＣＤ３７抗体の重鎖をコードする塩基配列を含むポリヌクレオチド；
（ｄ）配列番号１２のアミノ酸配列からなる抗ＣＤ３７抗体の軽鎖をコードする塩基配列を含むポリヌクレオチド；
（ｅ）配列番号１４のアミノ酸番号１から１２５までのアミノ酸配列からなる抗ＣＤ３抗体の重鎖可変領域及び配列番号１４のアミノ酸番号１４６から２５４までのアミノ酸配列からなる抗ＣＤ３抗体の軽鎖可変領域を含む抗ＣＤ３ｓｃＦｖ領域をコードする塩基配列を含むポリヌクレオチド；
（ｆ）配列番号１６のアミノ酸番号１から１２５までのアミノ酸配列からなる抗ＣＤ３抗体の重鎖可変領域及び配列番号１６のアミノ酸番号１４６から２５４までのアミノ酸配列からなる抗ＣＤ３抗体の軽鎖可変領域を含む抗ＣＤ３ｓｃＦｖ領域をコードする塩基配列を含むポリヌクレオチド；
（ｇ）配列番号１８のアミノ酸番号１から１２５までのアミノ酸配列からなる抗ＣＤ３抗体の重鎖可変領域及び配列番号１８のアミノ酸番号１４６から２５４までのアミノ酸配列からなる抗ＣＤ３抗体の軽鎖可変領域を含む抗ＣＤ３ｓｃＦｖ領域をコードする塩基配列を含むポリヌクレオチド；
（ｈ）配列番号１４のアミノ酸番号１から２５４までのアミノ酸配列からなる抗ＣＤ３ｓｃＦｖ領域をコードする塩基配列を含むポリヌクレオチド；
（ｉ）配列番号１６のアミノ酸番号１から２５４までのアミノ酸配列からなる抗ＣＤ３ｓｃＦｖ領域をコードする塩基配列を含むポリヌクレオチド；
（ｊ）配列番号１８のアミノ酸番号１から２５４までのアミノ酸配列からなる抗ＣＤ３ｓｃＦｖ領域をコードする塩基配列を含むポリヌクレオチド；
（ｋ）配列番号１４のアミノ酸番号１から１２５までのアミノ酸配列からなる抗ＣＤ３抗体の重鎖可変領域及び配列番号１４のアミノ酸番号１４６から２５４までのアミノ酸配列からなる抗ＣＤ３抗体の軽鎖可変領域を含む抗ＣＤ３ｓｃＦｖ領域に第二Ｆｃポリペプチドが連結されたポリペプチドをコードする塩基配列を含むポリヌクレオチド；
（ｌ）配列番号１６のアミノ酸番号１から１２５までのアミノ酸配列からなる抗ＣＤ３抗体の重鎖可変領域及び配列番号１６のアミノ酸番号１４６から２５４までのアミノ酸配列からなる抗ＣＤ３抗体の軽鎖可変領域を含む抗ＣＤ３ｓｃＦｖ領域に第二Ｆｃポリペプチドが連結されたポリペプチドをコードする塩基配列を含むポリヌクレオチド；
（ｍ）配列番号１８のアミノ酸番号１から１２５までのアミノ酸配列からなる抗ＣＤ３抗体の重鎖可変領域及び配列番号１８のアミノ酸番号１４６から２５４までのアミノ酸配列からなる抗ＣＤ３抗体の軽鎖可変領域を含む抗ＣＤ３ｓｃＦｖ領域に第二Ｆｃポリペプチドが連結されたポリペプチドをコードする塩基配列を含むポリヌクレオチド；
（ｎ）配列番号１４のアミノ酸配列からなる、抗ＣＤ３ｓｃＦｖ領域に第二Ｆｃポリペプチドが連結されたポリペプチドをコードする塩基配列を含むポリヌクレオチド；
（ｏ）配列番号１６のアミノ酸配列からなる、抗ＣＤ３ｓｃＦｖ領域に第二Ｆｃポリペプチドが連結されたポリペプチドをコードする塩基配列を含むポリヌクレオチド；又は、
（ｐ）配列番号１８のアミノ酸配列からなる、抗ＣＤ３ｓｃＦｖ領域に第二Ｆｃポリペプチドが連結されたポリペプチドをコードする塩基配列を含むポリヌクレオチド。

　１つの実施形態において、本発明の抗ＣＤ３７－抗ＣＤ３二重特異性抗体のポリヌクレオチドは、以下の（ａ）～（ｃ）からなる群より選択される：
（ａ）配列番号１０のアミノ酸番号１から１１５までのアミノ酸配列からなる重鎖可変領域を含む抗ＣＤ３７抗体の重鎖フラグメントをコードする塩基配列を含むポリヌクレオチド、配列番号１２のアミノ酸番号１から１０５までのアミノ酸配列からなる軽鎖可変領域を含む抗ＣＤ３７抗体の軽鎖をコードする塩基配列を含むポリヌクレオチド、並びに配列番号１４のアミノ酸番号１から１２５までのアミノ酸配列からなる抗ＣＤ３抗体の重鎖可変領域及び配列番号１４のアミノ酸番号１４６から２５４までのアミノ酸配列からなる抗ＣＤ３抗体の軽鎖可変領域を含む抗ＣＤ３ｓｃＦｖ領域をコードする塩基配列を含むポリヌクレオチド；
（ｂ）配列番号１０のアミノ酸番号１から１１５までのアミノ酸配列からなる重鎖可変領域を含む抗ＣＤ３７抗体の重鎖フラグメントをコードする塩基配列を含むポリヌクレオチド、配列番号１２のアミノ酸番号１から１０５までのアミノ酸配列からなる軽鎖可変領域を含む抗ＣＤ３７抗体の軽鎖をコードする塩基配列を含むポリヌクレオチド、並びに配列番号１６のアミノ酸番号１から１２５までのアミノ酸配列からなる抗ＣＤ３抗体の重鎖可変領域及び配列番号１６のアミノ酸番号１４６から２５４までのアミノ酸配列からなる抗ＣＤ３抗体の軽鎖可変領域を含む抗ＣＤ３ｓｃＦｖ領域をコードする塩基配列を含むポリヌクレオチド；又は
（ｃ）配列番号１０のアミノ酸番号１から１１５までのアミノ酸配列からなる重鎖可変領域を含む抗ＣＤ３７抗体の重鎖フラグメントをコードする塩基配列を含むポリヌクレオチド、配列番号１２のアミノ酸番号１から１０５までのアミノ酸配列からなる軽鎖可変領域を含む抗ＣＤ３７抗体の軽鎖をコードする塩基配列を含むポリヌクレオチド、並びに配列番号１８のアミノ酸番号１から１２５までのアミノ酸配列からなる抗ＣＤ３抗体の重鎖可変領域及び配列番号１８のアミノ酸番号１４６から２５４までのアミノ酸配列からなる抗ＣＤ３抗体の軽鎖可変領域を含む抗ＣＤ３ｓｃＦｖ領域をコードする塩基配列を含むポリヌクレオチド。

　１つの実施形態において、本発明の抗ＣＤ３７－抗ＣＤ３二重特異性抗体のポリヌクレオチドは、以下の（ａ）～（ｃ）からなる群より選択される：
（ａ）配列番号１０のアミノ酸番号１から１１５までのアミノ酸配列からなる重鎖可変領域を含む抗ＣＤ３７抗体の重鎖フラグメントに第一Ｆｃポリペプチドが連結された抗ＣＤ３７抗体の重鎖をコードする塩基配列を含むポリヌクレオチド、配列番号１２のアミノ酸番号１から１０５までのアミノ酸配列からなる軽鎖可変領域を含む抗ＣＤ３７抗体の軽鎖をコードする塩基配列を含むポリヌクレオチド、並びに、配列番号１４のアミノ酸番号１から１２５までのアミノ酸配列からなる抗ＣＤ３抗体の重鎖可変領域及び配列番号１４のアミノ酸番号１４６から２５４までのアミノ酸配列からなる抗ＣＤ３抗体の軽鎖可変領域を含む抗ＣＤ３ｓｃＦｖ領域に第二Ｆｃポリペプチドが連結されたポリペプチドをコードする塩基配列を含むポリヌクレオチド；
（ｂ）配列番号１０のアミノ酸番号１から１１５までのアミノ酸配列からなる重鎖可変領域を含む抗ＣＤ３７抗体の重鎖フラグメントに第一Ｆｃポリペプチドが連結された抗ＣＤ３７抗体の重鎖をコードする塩基配列を含むポリヌクレオチド、配列番号１２のアミノ酸番号１から１０５までのアミノ酸配列からなる軽鎖可変領域を含む抗ＣＤ３７抗体の軽鎖をコードする塩基配列を含むポリヌクレオチド、並びに、配列番号１６のアミノ酸番号１から１２５までのアミノ酸配列からなる抗ＣＤ３抗体の重鎖可変領域及び配列番号１６のアミノ酸番号１４６から２５４までのアミノ酸配列からなる抗ＣＤ３抗体の軽鎖可変領域を含む抗ＣＤ３ｓｃＦｖ領域に第二Ｆｃポリペプチドが連結されたポリペプチドをコードする塩基配列を含むポリヌクレオチド；又は、
（ｃ）配列番号１０のアミノ酸番号１から１１５までのアミノ酸配列からなる重鎖可変領域を含む抗ＣＤ３７抗体の重鎖フラグメントに第一Ｆｃポリペプチドが連結された抗ＣＤ３７抗体の重鎖をコードする塩基配列を含むポリヌクレオチド、配列番号１２のアミノ酸番号１から１０５までのアミノ酸配列からなる軽鎖可変領域を含む抗ＣＤ３７抗体の軽鎖をコードする塩基配列を含むポリヌクレオチド、並びに、配列番号１８のアミノ酸番号１から１２５までのアミノ酸配列からなる抗ＣＤ３抗体の重鎖可変領域及び配列番号１８のアミノ酸番号１４６から２５４までのアミノ酸配列からなる抗ＣＤ３抗体の軽鎖可変領域を含む抗ＣＤ３ｓｃＦｖ領域に第二Ｆｃポリペプチドが連結されたポリペプチドをコードする塩基配列を含むポリヌクレオチド。

　１つの実施形態において、本発明の抗ＣＤ３７－抗ＣＤ３二重特異性抗体のポリヌクレオチドは、以下の（ａ）～（ｃ）からなる群より選択される：
（ａ）配列番号１０のアミノ酸番号１から２１３までのアミノ酸配列からなる抗ＣＤ３７抗体の重鎖フラグメントに第一Ｆｃポリペプチドが連結された抗ＣＤ３７抗体の重鎖をコードする塩基配列を含むポリヌクレオチド、配列番号１２のアミノ酸配列からなる抗ＣＤ３７抗体の軽鎖をコードする塩基配列を含むポリヌクレオチド、及び配列番号１４のアミノ酸番号１から２５４までのアミノ酸配列からなる抗ＣＤ３ｓｃＦｖ領域と第二Ｆｃポリペプチドが連結されたポリペプチドをコードする塩基配列を含むポリヌクレオチド；
（ｂ）配列番号１０のアミノ酸番号１から２１３までのアミノ酸配列からなる抗ＣＤ３７抗体の重鎖フラグメントに第一Ｆｃポリペプチドが連結された抗ＣＤ３７抗体の重鎖をコードする塩基配列を含むポリヌクレオチド、配列番号１２のアミノ酸配列からなる抗ＣＤ３７抗体の軽鎖をコードする塩基配列を含むポリヌクレオチド、及び配列番号１６のアミノ酸番号１から２５４までのアミノ酸配列からなる抗ＣＤ３ｓｃＦｖ領域と第二Ｆｃポリペプチドが連結されたポリペプチドをコードする塩基配列を含むポリヌクレオチド；又は、
（ｃ）配列番号１０のアミノ酸番号１から２１３までのアミノ酸配列からなる抗ＣＤ３７抗体の重鎖フラグメントに第一Ｆｃポリペプチドが連結された抗ＣＤ３７抗体の重鎖をコードする塩基配列を含むポリヌクレオチド、配列番号１２のアミノ酸配列からなる抗ＣＤ３７抗体の軽鎖をコードする塩基配列を含むポリヌクレオチド、及び配列番号１８のアミノ酸番号１から２５４までのアミノ酸配列からなる抗ＣＤ３ｓｃＦｖ領域と第二Ｆｃポリペプチドが連結されたポリペプチドをコードする塩基配列を含むポリヌクレオチド。

　１つの実施形態において、本発明の抗ＣＤ３７－抗ＣＤ３二重特異性抗体のポリヌクレオチドは、以下の（ａ）～（ｃ）からなる群より選択される：
（ａ）配列番号１０のアミノ酸配列からなる抗ＣＤ３７抗体の重鎖をコードする塩基配列を含むポリヌクレオチド、配列番号１２のアミノ酸配列からなる抗ＣＤ３７抗体の軽鎖をコードする塩基配列を含むポリヌクレオチド、及び配列番号１４のアミノ酸配列からなる、抗ＣＤ３ｓｃＦｖ領域に第二Ｆｃポリペプチドが連結されたポリペプチドをコードする塩基配列を含むポリヌクレオチド；
（ｂ）配列番号１０のアミノ酸配列からなる抗ＣＤ３７抗体の重鎖をコードする塩基配列を含むポリヌクレオチド、配列番号１２のアミノ酸配列からなる抗ＣＤ３７抗体の軽鎖をコードする塩基配列を含むポリヌクレオチド、及び配列番号１６のアミノ酸配列からなる、抗ＣＤ３ｓｃＦｖ領域に第二Ｆｃポリペプチドが連結されたポリペプチドをコードする塩基配列を含むポリヌクレオチド；又は
（ｃ）配列番号１０のアミノ酸配列からなる抗ＣＤ３７抗体の重鎖をコードする塩基配列を含むポリヌクレオチド、配列番号１２のアミノ酸配列からなる抗ＣＤ３７抗体の軽鎖をコードする塩基配列を含むポリヌクレオチド、及び配列番号１８のアミノ酸配列からなる、抗ＣＤ３ｓｃＦｖ領域に第二Ｆｃポリペプチドが連結されたポリペプチドをコードする塩基配列を含むポリヌクレオチド。

　本発明の抗ＣＤ３７－抗ＣＤ３二重特異性抗体のポリヌクレオチドは、当業者であれば、その塩基配列に基づき当該分野で公知の方法を使用して作製し得る。例えば、本発明の抗ＣＤ３７－抗ＣＤ３二重特異性抗体のポリヌクレオチドは、当該分野で公知の遺伝子合成方法を利用して合成することが可能である。このような遺伝子合成方法としては、国際公開第９０／０７８６１号に記載の抗体遺伝子の合成方法等の当業者に公知の種々の方法が使用され得る。

＜本発明の抗ＣＤ３７－抗ＣＤ３二重特異性抗体の発現ベクター＞
　本発明はまた、以下の（ａ）～（ｐ）に記載の本発明の抗ＣＤ３７－抗ＣＤ３二重特異性抗体のポリヌクレオチドを含む発現ベクター（「本発明の抗ＣＤ３７－抗ＣＤ３二重特異性抗体の発現ベクター」とも称する）を提供する。これらのポリヌクレオチドは、それぞれが別々のベクターに含まれていてもよく、又は複数のポリヌクレオチドが１つのベクターに含まれていてもよい：
（ａ）配列番号１０のアミノ酸番号１から１１５までのアミノ酸配列からなる重鎖可変領域を含む抗ＣＤ３７抗体の重鎖フラグメントをコードする塩基配列を含むポリヌクレオチド；
（ｂ）配列番号１２のアミノ酸番号１から１０５までのアミノ酸配列からなる軽鎖可変領域を含む抗ＣＤ３７抗体の軽鎖をコードする塩基配列を含むポリヌクレオチド；
（ｃ）配列番号１０のアミノ酸配列からなる抗ＣＤ３７抗体の重鎖をコードする塩基配列を含むポリヌクレオチド；
（ｄ）配列番号１２のアミノ酸配列からなる抗ＣＤ３７抗体の軽鎖をコードする塩基配列を含むポリヌクレオチド；
（ｅ）配列番号１４のアミノ酸番号１から１２５までのアミノ酸配列からなる抗ＣＤ３抗体の重鎖可変領域及び配列番号１４のアミノ酸番号１４６から２５４までのアミノ酸配列からなる抗ＣＤ３抗体の軽鎖可変領域を含む抗ＣＤ３ｓｃＦｖ領域をコードする塩基配列を含むポリヌクレオチド；
（ｆ）配列番号１６のアミノ酸番号１から１２５までのアミノ酸配列からなる抗ＣＤ３抗体の重鎖可変領域及び配列番号１６のアミノ酸番号１４６から２５４までのアミノ酸配列からなる抗ＣＤ３抗体の軽鎖可変領域を含む抗ＣＤ３ｓｃＦｖ領域をコードする塩基配列を含むポリヌクレオチド；
（ｇ）配列番号１８のアミノ酸番号１から１２５までのアミノ酸配列からなる抗ＣＤ３抗体の重鎖可変領域及び配列番号１８のアミノ酸番号１４６から２５４までのアミノ酸配列からなる抗ＣＤ３抗体の軽鎖可変領域を含む抗ＣＤ３ｓｃＦｖ領域をコードする塩基配列を含むポリヌクレオチド；
（ｈ）配列番号１４のアミノ酸番号１から２５４までのアミノ酸配列からなる抗ＣＤ３ｓｃＦｖ領域をコードする塩基配列を含むポリヌクレオチド；
（ｉ）配列番号１６のアミノ酸番号１から２５４までのアミノ酸配列からなる抗ＣＤ３ｓｃＦｖ領域をコードする塩基配列を含むポリヌクレオチド；
（ｊ）配列番号１８のアミノ酸番号１から２５４までのアミノ酸配列からなる抗ＣＤ３ｓｃＦｖ領域をコードする塩基配列を含むポリヌクレオチド；
（ｋ）配列番号１４のアミノ酸番号１から１２５までのアミノ酸配列からなる抗ＣＤ３抗体の重鎖可変領域及び配列番号１４のアミノ酸番号１４６から２５４までのアミノ酸配列からなる抗ＣＤ３抗体の軽鎖可変領域を含む抗ＣＤ３ｓｃＦｖ領域に第二Ｆｃポリペプチドが連結されたポリペプチドをコードする塩基配列を含むポリヌクレオチド；
（ｌ）配列番号１６のアミノ酸番号１から１２５までのアミノ酸配列からなる抗ＣＤ３抗体の重鎖可変領域及び配列番号１６のアミノ酸番号１４６から２５４までのアミノ酸配列からなる抗ＣＤ３抗体の軽鎖可変領域を含む抗ＣＤ３ｓｃＦｖ領域に第二Ｆｃポリペプチドが連結されたポリペプチドをコードする塩基配列を含むポリヌクレオチド；
（ｍ）配列番号１８のアミノ酸番号１から１２５までのアミノ酸配列からなる抗ＣＤ３抗体の重鎖可変領域及び配列番号１８のアミノ酸番号１４６から２５４までのアミノ酸配列からなる抗ＣＤ３抗体の軽鎖可変領域を含む抗ＣＤ３ｓｃＦｖ領域に第二Ｆｃポリペプチドが連結されたポリペプチドをコードする塩基配列を含むポリヌクレオチド；
（ｎ）配列番号１４のアミノ酸配列からなる、抗ＣＤ３ｓｃＦｖ領域と第二Ｆｃポリペプチドが連結されたポリペプチドをコードする塩基配列を含むポリヌクレオチド；
（ｏ）配列番号１６のアミノ酸配列からなる、抗ＣＤ３ｓｃＦｖ領域と第二Ｆｃポリペプチドが連結されたポリペプチドをコードする塩基配列を含むポリヌクレオチド；又は、
（ｐ）配列番号１８のアミノ酸配列からなる、抗ＣＤ３ｓｃＦｖ領域と第二Ｆｃポリペプチドが連結されたポリペプチドをコードする塩基配列を含むポリヌクレオチド。

　１つの実施形態において、本発明の抗ＣＤ３７－抗ＣＤ３二重特異性抗体の発現ベクターは、以下の（ａ）～（ｃ）のいずれかに記載のポリヌクレオチドを含む：
（ａ）配列番号１０のアミノ酸番号１から１１５までのアミノ酸配列からなる重鎖可変領域を含む抗ＣＤ３７抗体の重鎖フラグメントをコードする塩基配列を含むポリヌクレオチド、配列番号１２のアミノ酸番号１から１０５までのアミノ酸配列からなる軽鎖可変領域を含む抗ＣＤ３７抗体の軽鎖をコードする塩基配列を含むポリヌクレオチド、並びに、配列番号１４のアミノ酸番号１から１２５までのアミノ酸配列からなる抗ＣＤ３抗体の重鎖可変領域及び配列番号１４のアミノ酸番号１４６から２５４までのアミノ酸配列からなる抗ＣＤ３抗体の軽鎖可変領域を含む抗ＣＤ３ｓｃＦｖ領域をコードする塩基配列を含むポリヌクレオチド；
（ｂ）配列番号１０のアミノ酸番号１から１１５までのアミノ酸配列からなる重鎖可変領域を含む抗ＣＤ３７抗体の重鎖フラグメントをコードする塩基配列を含むポリヌクレオチド、配列番号１２のアミノ酸番号１から１０５までのアミノ酸配列からなる軽鎖可変領域を含む抗ＣＤ３７抗体の軽鎖をコードする塩基配列を含むポリヌクレオチド、並びに、配列番号１６のアミノ酸番号１から１２５までのアミノ酸配列からなる抗ＣＤ３抗体の重鎖可変領域及び配列番号１６のアミノ酸番号１４６から２５４までのアミノ酸配列からなる抗ＣＤ３抗体の軽鎖可変領域を含む抗ＣＤ３ｓｃＦｖ領域をコードする塩基配列を含むポリヌクレオチド；又は
（ｃ）配列番号１０のアミノ酸番号１から１１５までのアミノ酸配列からなる重鎖可変領域を含む抗ＣＤ３７抗体の重鎖フラグメントをコードする塩基配列を含むポリヌクレオチド、配列番号１２のアミノ酸番号１から１０５までのアミノ酸配列からなる軽鎖可変領域を含む抗ＣＤ３７抗体の軽鎖をコードする塩基配列を含むポリヌクレオチド、並びに、配列番号１８のアミノ酸番号１から１２５までのアミノ酸配列からなる抗ＣＤ３抗体の重鎖可変領域及び配列番号１８のアミノ酸番号１４６から２５４までのアミノ酸配列からなる抗ＣＤ３抗体の軽鎖可変領域を含む抗ＣＤ３ｓｃＦｖ領域をコードする塩基配列を含むポリヌクレオチド。

　１つの実施形態において、本発明の抗ＣＤ３７－抗ＣＤ３二重特異性抗体の発現ベクターは、以下の（ａ）～（ｃ）のいずれかに記載のポリヌクレオチドを含む：
（ａ）配列番号１０のアミノ酸番号１から１１５までのアミノ酸配列からなる重鎖可変領域を含む抗ＣＤ３７抗体の重鎖フラグメントに第一Ｆｃポリペプチドが連結された抗ＣＤ３７抗体の重鎖をコードする塩基配列を含むポリヌクレオチド、配列番号１２のアミノ酸番号１から１０５までのアミノ酸配列からなる軽鎖可変領域を含む抗ＣＤ３７抗体の軽鎖をコードする塩基配列を含むポリヌクレオチド、並びに配列番号１４のアミノ酸番号１から１２５までのアミノ酸配列からなる抗ＣＤ３抗体の重鎖可変領域及び配列番号１４のアミノ酸番号１４６から２５４までのアミノ酸配列からなる抗ＣＤ３抗体の軽鎖可変領域を含む抗ＣＤ３ｓｃＦｖ領域に第二Ｆｃポリペプチドが連結されたポリペプチドをコードする塩基配列を含むポリヌクレオチド；
（ｂ）配列番号１０のアミノ酸番号１から１１５までのアミノ酸配列からなる重鎖可変領域を含む抗ＣＤ３７抗体の重鎖フラグメントに第一Ｆｃポリペプチドが連結された抗ＣＤ３７抗体の重鎖をコードする塩基配列を含むポリヌクレオチド、配列番号１２のアミノ酸番号１から１０５までのアミノ酸配列からなる軽鎖可変領域を含む抗ＣＤ３７抗体の軽鎖をコードする塩基配列を含むポリヌクレオチド、並びに配列番号１６のアミノ酸番号１から１２５までのアミノ酸配列からなる抗ＣＤ３抗体の重鎖可変領域及び配列番号１６のアミノ酸番号１４６から２５４までのアミノ酸配列からなる抗ＣＤ３抗体の軽鎖可変領域を含む抗ＣＤ３ｓｃＦｖ領域に第二Ｆｃポリペプチドが連結されたポリペプチドをコードする塩基配列を含むポリヌクレオチド；又は、
（ｃ）配列番号１０のアミノ酸番号１から１１５までのアミノ酸配列からなる重鎖可変領域を含む抗ＣＤ３７抗体の重鎖フラグメントに第一Ｆｃポリペプチドが連結された抗ＣＤ３７抗体の重鎖をコードする塩基配列を含むポリヌクレオチド、配列番号１２のアミノ酸番号１から１０５までのアミノ酸配列からなる軽鎖可変領域を含む抗ＣＤ３７抗体の軽鎖をコードする塩基配列を含むポリヌクレオチド、並びに配列番号１８のアミノ酸番号１から１２５までのアミノ酸配列からなる抗ＣＤ３抗体の重鎖可変領域及び配列番号１８のアミノ酸番号１４６から２５４までのアミノ酸配列からなる抗ＣＤ３抗体の軽鎖可変領域を含む抗ＣＤ３ｓｃＦｖ領域に第二Ｆｃポリペプチドが連結されたポリペプチドをコードする塩基配列を含むポリヌクレオチド。

　１つの実施形態において、本発明の抗ＣＤ３７－抗ＣＤ３二重特異性抗体の発現ベクターは、以下の（ａ）～（ｃ）のいずれかに記載のポリヌクレオチドを含む：
（ａ）配列番号１０のアミノ酸番号１から２１３までのアミノ酸配列からなる抗ＣＤ３７抗体の重鎖フラグメントに第一Ｆｃポリペプチドが連結された抗ＣＤ３７抗体の重鎖をコードする塩基配列を含むポリヌクレオチド、配列番号１２のアミノ酸配列からなる抗ＣＤ３７抗体の軽鎖をコードする塩基配列を含むポリヌクレオチド、及び配列番号１４のアミノ酸番号１から２５４までのアミノ酸配列からなる抗ＣＤ３ｓｃＦｖ領域に第二Ｆｃポリペプチドが連結されたポリペプチドをコードする塩基配列を含むポリヌクレオチド；
（ｂ）配列番号１０のアミノ酸番号１から２１３までのアミノ酸配列からなる抗ＣＤ３７抗体の重鎖フラグメントに第一Ｆｃポリペプチドが連結された抗ＣＤ３７抗体の重鎖をコードする塩基配列を含むポリヌクレオチド、配列番号１２のアミノ酸配列からなる抗ＣＤ３７抗体の軽鎖をコードする塩基配列を含むポリヌクレオチド、及び配列番号１６のアミノ酸番号１から２５４までのアミノ酸配列からなる抗ＣＤ３ｓｃＦｖ領域に第二Ｆｃポリペプチドが連結されたポリペプチドをコードする塩基配列を含むポリヌクレオチド；又は、
（ｃ）配列番号１０のアミノ酸番号１から２１３までのアミノ酸配列からなる抗ＣＤ３７抗体の重鎖フラグメントに第一Ｆｃポリペプチドが連結された抗ＣＤ３７抗体の重鎖をコードする塩基配列を含むポリヌクレオチド、配列番号１２のアミノ酸配列からなる抗ＣＤ３７抗体の軽鎖をコードする塩基配列を含むポリヌクレオチド、及び配列番号１８のアミノ酸番号１から２５４までのアミノ酸配列からなる抗ＣＤ３ｓｃＦｖ領域に第二Ｆｃポリペプチドが連結されたポリペプチドをコードする塩基配列を含むポリヌクレオチド。

　１つの実施形態において、本発明の抗ＣＤ３７－抗ＣＤ３二重特異性抗体の発現ベクターは、以下の（ａ）～（ｃ）のいずれかに記載のポリヌクレオチドを含む：
（ａ）配列番号１０のアミノ酸配列からなる抗ＣＤ３７抗体の重鎖をコードする塩基配列を含むポリヌクレオチド、配列番号１２のアミノ酸配列からなる抗ＣＤ３７抗体の軽鎖をコードする塩基配列を含むポリヌクレオチド、及び配列番号１４のアミノ酸配列からなる、抗ＣＤ３ｓｃＦｖ領域に第二Ｆｃポリペプチドが連結されたポリペプチドをコードする塩基配列を含むポリヌクレオチド；
（ｂ）配列番号１０のアミノ酸配列からなる抗ＣＤ３７抗体の重鎖をコードする塩基配列を含むポリヌクレオチド、配列番号１２のアミノ酸配列からなる抗ＣＤ３７抗体の軽鎖をコードする塩基配列を含むポリヌクレオチド、及び配列番号１６のアミノ酸配列からなる、抗ＣＤ３ｓｃＦｖ領域に第二Ｆｃポリペプチドが連結されたポリペプチドをコードする塩基配列を含むポリヌクレオチド；又は
（ｃ）配列番号１０のアミノ酸配列からなる抗ＣＤ３７抗体の重鎖をコードする塩基配列を含むポリヌクレオチド、配列番号１２のアミノ酸配列からなる抗ＣＤ３７抗体の軽鎖をコードする塩基配列を含むポリヌクレオチド、及び配列番号１８のアミノ酸配列からなる、抗ＣＤ３ｓｃＦｖ領域に第二Ｆｃポリペプチドが連結されたポリペプチドをコードする塩基配列を含むポリヌクレオチド。

　本発明の抗ＣＤ３７－抗ＣＤ３二重特異性抗体の発現ベクターは、真核細胞（例えば、動物細胞、昆虫細胞、植物細胞、酵母）及び／又は原核細胞（例えば、大腸菌）等の各種宿主細胞中においてポリヌクレオチドを産生できるものである限り、特に制限されるものではない。このような発現ベクターとしては、例えば、プラスミドベクター、ウイルスベクター等が挙げられる。プラスミドベクターとしては、例えば、ｐｃＤＮＡシリーズ（Ｔｈｅｒｍｏ　Ｆｉｓｈｅｒ　Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ社）、ｐＡＬＴＥＲ（登録商標）－ＭＡＸ（プロメガ）、ｐＨＥＫ２９３　Ｕｌｔｒａ　Ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ　Ｖｅｃｔｏｒ（タカラバイオ社）、ｐＥＥ６．４又はｐＥＥ１２．４（Ｌｏｎｚａ　Ｂｉｏｌｏｇｉｃｓ社）等を使用することができる。ウイルスベクターとしては、例えば、レンチウイルス、アデノウイルス、レトロウイルス、アデノ随伴ウイルスを使用することができる。例えば、細胞へ前記ポリヌクレオチドを導入するためにレンチウイルスを使用する場合、当該レンチウイルスは、ｐＬＶＳＩＮ－ＣＭＶ／ＥＦ１αベクター（タカラバイオ社）、ｐＬｅｎｔｉベクター（Ｔｈｅｒｍｏ　Ｆｉｓｈｅｒ　Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ社）等を用いることができる。１つの実施形態において、本発明の二重特異性抗体の発現ベクターに使用されるベクターは、ｐｃＤＮＡ３．４－ＴＯＰＯ（登録商標）（Ｔｈｅｒｍｏ　Ｆｉｓｈｅｒ　Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ社）及びｐｃＤＮＡ３．１（Ｔｈｅｒｍｏ　Ｆｉｓｈｅｒ　Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ社）である。

　本発明の抗ＣＤ３７－抗ＣＤ３二重特異性抗体の発現ベクターは、ポリヌクレオチドに動作可能なように連結されたプロモーターを含み得る。動物細胞でポリヌクレオチドを発現させるためのプロモーターとしては、例えば、ＣＭＶ、ＲＳＶ、ＳＶ４０などのウイルス由来プロモーター、アクチンプロモーター、ＥＦ（ｅｌｏｎｇａｔｉｏｎ　ｆａｃｔｏｒ）１αプロモーター、ヒートショックプロモーターなどが挙げられる。細菌（例えば、エシェリキア属菌）で当該ポリヌクレオチドを発現させるためのプロモーターとしては、例えば、ｔｒｐプロモーター、ｌａｃプロモーター、λＰＬプロモーター、ｔａｃプロモーターなどが挙げられる。酵母で当該ポリヌクレオチドを発現させるためのプロモーターとしては、例えば、ＧＡＬ１プロモーター、ＧＡＬ１０プロモーター、ＰＨ０５プロモーター、ＰＧＫプロモーター、ＧＡＰプロモーター、ＡＤＨプロモーターなどが挙げられる。

　発現ベクターを作製するための宿主細胞として、動物細胞、昆虫細胞又は酵母を用いる場合、本発明の二重特異性抗体の発現ベクターは、開始コドン及び終止コドンを含み得る。この場合、エンハンサー配列、本発明の抗体又はその重鎖若しくは軽鎖をコードする遺伝子の５’側及び３’側の非翻訳領域、分泌シグナル配列、スプライシング接合部、ポリアデニレーション部位、あるいは複製可能単位などを含んでいてもよい。宿主細胞として大腸菌を用いる場合、本発明の発現ベクターは、開始コドン、終止コドン、ターミネーター領域、及び複製可能単位を含み得る。本発明の発現ベクターは、目的に応じて通常用いられる薬剤選択マーカー遺伝子（例えば、テトラサイクリン耐性遺伝子、アンピシリン耐性遺伝子、カナマイシン耐性遺伝子、ネオマイシン耐性遺伝子、ジヒドロ葉酸還元酵素遺伝子）を含んでいてもよい。

＜本発明の抗ＣＤ３７－抗ＣＤ３二重特異性抗体のポリヌクレオチドを含む宿主細胞＞
　本発明はまた、本発明の抗ＣＤ３７－抗ＣＤ３二重特異性抗体の発現ベクターによって形質転換された又は細胞内に抗ＣＤ３７－抗ＣＤ３二重特異性抗体のポリヌクレオチドを含む宿主細胞（纏めて「本発明の抗ＣＤ３７－抗ＣＤ３二重特異性抗体のポリヌクレオチドを含む宿主細胞」とも称する）を提供する。宿主細胞はｉｎ　ｖｉｔｒｏで培養される細胞のみならず、ｉｎ　ｖｉｖｏにおいて組織を構成している細胞も含む。

　１つの実施形態において、本発明の抗ＣＤ３７－抗ＣＤ３二重特異性抗体のポリヌクレオチドを含む宿主細胞は、以下の（ａ）～（ｐ）に記載の本発明の抗ＣＤ３７－抗ＣＤ３二重特異性抗体のポリヌクレオチド又は当該ポリヌクレオチドを含む本発明の抗ＣＤ３７－抗ＣＤ３二重特異性抗体の発現ベクターを含んでいる：
（ａ）配列番号１０のアミノ酸番号１から１１５までのアミノ酸配列からなる重鎖可変領域を含む抗ＣＤ３７抗体の重鎖フラグメントをコードする塩基配列を含むポリヌクレオチド；
（ｂ）配列番号１２のアミノ酸番号１から１０５までのアミノ酸配列からなる軽鎖可変領域を含む抗ＣＤ３７抗体の軽鎖をコードする塩基配列を含むポリヌクレオチド；
（ｃ）配列番号１０のアミノ酸配列からなる抗ＣＤ３７抗体の重鎖をコードする塩基配列を含むポリヌクレオチド；
（ｄ）配列番号１２のアミノ酸配列からなる抗ＣＤ３７抗体の軽鎖をコードする塩基配列を含むポリヌクレオチド；
（ｅ）配列番号１４のアミノ酸番号１から１２５までのアミノ酸配列からなる抗ＣＤ３抗体の重鎖可変領域及び配列番号１４のアミノ酸番号１４６から２５４までのアミノ酸配列からなる抗ＣＤ３抗体の軽鎖可変領域を含む抗ＣＤ３ｓｃＦｖ領域をコードする塩基配列を含むポリヌクレオチド；
（ｆ）配列番号１６のアミノ酸番号１から１２５までのアミノ酸配列からなる抗ＣＤ３抗体の重鎖可変領域及び配列番号１６のアミノ酸番号１４６から２５４までのアミノ酸配列からなる抗ＣＤ３抗体の軽鎖可変領域を含む抗ＣＤ３ｓｃＦｖ領域をコードする塩基配列を含むポリヌクレオチド；
（ｇ）配列番号１８のアミノ酸番号１から１２５までのアミノ酸配列からなる抗ＣＤ３抗体の重鎖可変領域及び配列番号１８のアミノ酸番号１４６から２５４までのアミノ酸配列からなる抗ＣＤ３抗体の軽鎖可変領域を含む抗ＣＤ３ｓｃＦｖ領域をコードする塩基配列を含むポリヌクレオチド；
（ｈ）配列番号１４のアミノ酸番号１から２５４までのアミノ酸配列からなる抗ＣＤ３ｓｃＦｖ領域をコードする塩基配列を含むポリヌクレオチド；
（ｉ）配列番号１６のアミノ酸番号１から２５４までのアミノ酸配列からなる抗ＣＤ３ｓｃＦｖ領域をコードする塩基配列を含むポリヌクレオチド；
（ｊ）配列番号１８のアミノ酸番号１から２５４までのアミノ酸配列からなる抗ＣＤ３ｓｃＦｖ領域をコードする塩基配列を含むポリヌクレオチド；
（ｋ）配列番号１４のアミノ酸番号１から１２５までのアミノ酸配列からなる抗ＣＤ３抗体の重鎖可変領域及び配列番号１４のアミノ酸番号１４６から２５４までのアミノ酸配列からなる抗ＣＤ３抗体の軽鎖可変領域を含む抗ＣＤ３ｓｃＦｖ領域に第二Ｆｃポリペプチドが連結されたポリペプチドをコードする塩基配列を含むポリヌクレオチド；
（ｌ）配列番号１６のアミノ酸番号１から１２５までのアミノ酸配列からなる抗ＣＤ３抗体の重鎖可変領域及び配列番号１６のアミノ酸番号１４６から２５４までのアミノ酸配列からなる抗ＣＤ３抗体の軽鎖可変領域を含む抗ＣＤ３ｓｃＦｖ領域に第二Ｆｃポリペプチドが連結されたポリペプチドをコードする塩基配列を含むポリヌクレオチド；
（ｍ）配列番号１８のアミノ酸番号１から１２５までのアミノ酸配列からなる抗ＣＤ３抗体の重鎖可変領域及び配列番号１８のアミノ酸番号１４６から２５４までのアミノ酸配列からなる抗ＣＤ３抗体の軽鎖可変領域を含む抗ＣＤ３ｓｃＦｖ領域に第二Ｆｃポリペプチドが連結されたポリペプチドをコードする塩基配列を含むポリヌクレオチド；
（ｎ）配列番号１４のアミノ酸配列からなる、抗ＣＤ３ｓｃＦｖ領域と第二Ｆｃポリペプチドが連結されたポリペプチドをコードする塩基配列を含むポリヌクレオチド；
（ｏ）配列番号１６のアミノ酸配列からなる、抗ＣＤ３ｓｃＦｖ領域と第二Ｆｃポリペプチドが連結されたポリペプチドをコードする塩基配列を含むポリヌクレオチド；又は、
（ｐ）配列番号１８のアミノ酸配列からなる、抗ＣＤ３ｓｃＦｖ領域と第二Ｆｃポリペプチドが連結されたポリペプチドをコードする塩基配列を含むポリヌクレオチド。

　１つの実施形態において、本発明の抗ＣＤ３７－抗ＣＤ３二重特異性抗体のポリヌクレオチドを含む宿主細胞は、以下の（ａ）～（ｃ）のいずれかに記載のポリヌクレオチドを含む：
（ａ）配列番号１０のアミノ酸番号１から１１５までのアミノ酸配列からなる重鎖可変領域を含む抗ＣＤ３７抗体の重鎖フラグメントをコードする塩基配列を含むポリヌクレオチド、配列番号１２のアミノ酸番号１から１０５までのアミノ酸配列からなる軽鎖可変領域を含む抗ＣＤ３７抗体の軽鎖をコードする塩基配列を含むポリヌクレオチド、並びに、配列番号１４のアミノ酸番号１から１２５までのアミノ酸配列からなる抗ＣＤ３抗体の重鎖可変領域及び配列番号１４のアミノ酸番号１４６から２５４までのアミノ酸配列からなる抗ＣＤ３抗体の軽鎖可変領域を含む抗ＣＤ３ｓｃＦｖ領域をコードする塩基配列を含むポリヌクレオチド；
（ｂ）配列番号１０のアミノ酸番号１から１１５までのアミノ酸配列からなる重鎖可変領域を含む抗ＣＤ３７抗体の重鎖フラグメントをコードする塩基配列を含むポリヌクレオチド、配列番号１２のアミノ酸番号１から１０５までのアミノ酸配列からなる軽鎖可変領域を含む抗ＣＤ３７抗体の軽鎖をコードする塩基配列を含むポリヌクレオチド、並びに、配列番号１６のアミノ酸番号１から１２５までのアミノ酸配列からなる抗ＣＤ３抗体の重鎖可変領域及び配列番号１６のアミノ酸番号１４６から２５４までのアミノ酸配列からなる抗ＣＤ３抗体の軽鎖可変領域を含む抗ＣＤ３ｓｃＦｖ領域をコードする塩基配列を含むポリヌクレオチド；又は、
（ｃ）配列番号１０のアミノ酸番号１から１１５までのアミノ酸配列からなる重鎖可変領域を含む抗ＣＤ３７抗体の重鎖フラグメントをコードする塩基配列を含むポリヌクレオチド、配列番号１２のアミノ酸番号１から１０５までのアミノ酸配列からなる軽鎖可変領域を含む抗ＣＤ３７抗体の軽鎖をコードする塩基配列を含むポリヌクレオチド、並びに、配列番号１８のアミノ酸番号１から１２５までのアミノ酸配列からなる抗ＣＤ３抗体の重鎖可変領域及び配列番号１８のアミノ酸番号１４６から２５４までのアミノ酸配列からなる抗ＣＤ３抗体の軽鎖可変領域を含む抗ＣＤ３ｓｃＦｖ領域をコードする塩基配列を含むポリヌクレオチド。

　１つの実施形態において、本発明の抗ＣＤ３７－抗ＣＤ３二重特異性抗体のポリヌクレオチドを含む宿主細胞は、以下の（ａ）～（ｃ）のいずれかに記載のポリヌクレオチドを含む：
（ａ）配列番号１０のアミノ酸番号１から１１５までのアミノ酸配列からなる重鎖可変領域を含む抗ＣＤ３７抗体の重鎖フラグメントに第一Ｆｃポリペプチドが連結された抗ＣＤ３７抗体の重鎖をコードする塩基配列を含むポリヌクレオチド、配列番号１２のアミノ酸番号１から１０５までのアミノ酸配列からなる軽鎖可変領域を含む抗ＣＤ３７抗体の軽鎖をコードする塩基配列を含むポリヌクレオチド、並びに配列番号１４のアミノ酸番号１から１２５までのアミノ酸配列からなる抗ＣＤ３抗体の重鎖可変領域及び配列番号１４のアミノ酸番号１４６から２５４までのアミノ酸配列からなる抗ＣＤ３抗体の軽鎖可変領域を含む抗ＣＤ３ｓｃＦｖ領域に第二Ｆｃポリペプチドが連結されたポリペプチドをコードする塩基配列を含むポリヌクレオチド；
（ｂ）配列番号１０のアミノ酸番号１から１１５までのアミノ酸配列からなる重鎖可変領域を含む抗ＣＤ３７抗体の重鎖フラグメントに第一Ｆｃポリペプチドが連結された抗ＣＤ３７抗体の重鎖をコードする塩基配列を含むポリヌクレオチド、配列番号１２のアミノ酸番号１から１０５までのアミノ酸配列からなる軽鎖可変領域を含む抗ＣＤ３７抗体の軽鎖をコードする塩基配列を含むポリヌクレオチド、並びに配列番号１６のアミノ酸番号１から１２５までのアミノ酸配列からなる抗ＣＤ３抗体の重鎖可変領域及び配列番号１６のアミノ酸番号１４６から２５４までのアミノ酸配列からなる抗ＣＤ３抗体の軽鎖可変領域を含む抗ＣＤ３ｓｃＦｖ領域に第二Ｆｃポリペプチドが連結されたポリペプチドをコードする塩基配列を含むポリヌクレオチド；又は、
（ｃ）配列番号１０のアミノ酸番号１から１１５までのアミノ酸配列からなる重鎖可変領域を含む抗ＣＤ３７抗体の重鎖フラグメントに第一Ｆｃポリペプチドが連結された抗ＣＤ３７抗体の重鎖をコードする塩基配列を含むポリヌクレオチド、配列番号１２のアミノ酸番号１から１０５までのアミノ酸配列からなる軽鎖可変領域を含む抗ＣＤ３７抗体の軽鎖をコードする塩基配列を含むポリヌクレオチド、並びに配列番号１８のアミノ酸番号１から１２５までのアミノ酸配列からなる抗ＣＤ３抗体の重鎖可変領域及び配列番号１８のアミノ酸番号１４６から２５４までのアミノ酸配列からなる抗ＣＤ３抗体の軽鎖可変領域を含む抗ＣＤ３ｓｃＦｖ領域に第二Ｆｃポリペプチドが連結されたポリペプチドをコードする塩基配列を含むポリヌクレオチド。

　１つの実施形態において、本発明の抗ＣＤ３７－抗ＣＤ３二重特異性抗体のポリヌクレオチドを含む宿主細胞は、以下の（ａ）～（ｃ）のいずれかに記載のポリヌクレオチドを含む：
（ａ）配列番号１０のアミノ酸番号１から２１３までのアミノ酸配列からなる抗ＣＤ３７抗体の重鎖フラグメントに第一Ｆｃポリペプチドが連結された抗ＣＤ３７抗体の重鎖をコードする塩基配列を含むポリヌクレオチド、配列番号１２のアミノ酸配列からなる抗ＣＤ３７抗体の軽鎖をコードする塩基配列を含むポリヌクレオチド、及び配列番号１４のアミノ酸番号１から２５４までのアミノ酸配列からなる抗ＣＤ３ｓｃＦｖ領域に第二Ｆｃポリペプチドが連結されたポリペプチドをコードする塩基配列を含むポリヌクレオチド；
（ｂ）配列番号１０のアミノ酸番号１から２１３までのアミノ酸配列からなる抗ＣＤ３７抗体の重鎖フラグメントに第一Ｆｃポリペプチドが連結された抗ＣＤ３７抗体の重鎖をコードする塩基配列を含むポリヌクレオチド、配列番号１２のアミノ酸配列からなる抗ＣＤ３７抗体の軽鎖をコードする塩基配列を含むポリヌクレオチド、及び配列番号１６のアミノ酸番号１から２５４までのアミノ酸配列からなる抗ＣＤ３ｓｃＦｖ領域に第二Ｆｃポリペプチドが連結されたポリペプチドをコードする塩基配列を含むポリヌクレオチド；又は、
（ｃ）配列番号１０のアミノ酸番号１から２１３までのアミノ酸配列からなる抗ＣＤ３７抗体の重鎖フラグメントに第一Ｆｃポリペプチドが連結された抗ＣＤ３７抗体の重鎖をコードする塩基配列を含むポリヌクレオチド、配列番号１２のアミノ酸配列からなる抗ＣＤ３７抗体の軽鎖をコードする塩基配列を含むポリヌクレオチド、及び配列番号１８のアミノ酸番号１から２５４までのアミノ酸配列からなる抗ＣＤ３ｓｃＦｖ領域に第二Ｆｃポリペプチドが連結されたポリペプチドをコードする塩基配列を含むポリヌクレオチド。

　１つの実施形態において、本発明の抗ＣＤ３７－抗ＣＤ３二重特異性抗体のポリヌクレオチドを含む宿主細胞は、以下の（ａ）～（ｃ）のいずれかに記載のポリヌクレオチドを含む：
（ａ）配列番号１０のアミノ酸配列からなる抗ＣＤ３７抗体の重鎖をコードする塩基配列を含むポリヌクレオチド、配列番号１２のアミノ酸配列からなる抗ＣＤ３７抗体の軽鎖をコードする塩基配列を含むポリヌクレオチド、及び配列番号１４のアミノ酸配列からなる、抗ＣＤ３ｓｃＦｖ領域に第二Ｆｃポリペプチドが連結されたポリペプチドをコードする塩基配列を含むポリヌクレオチド；
（ｂ）配列番号１０のアミノ酸配列からなる抗ＣＤ３７抗体の重鎖をコードする塩基配列を含むポリヌクレオチド、配列番号１２のアミノ酸配列からなる抗ＣＤ３７抗体の軽鎖をコードする塩基配列を含むポリヌクレオチド、及び配列番号１６のアミノ酸配列からなる、抗ＣＤ３ｓｃＦｖ領域に第二Ｆｃポリペプチドが連結されたポリペプチドをコードする塩基配列を含むポリヌクレオチド；又は
（ｃ）配列番号１０のアミノ酸配列からなる抗ＣＤ３７抗体の重鎖をコードする塩基配列を含むポリヌクレオチド、配列番号１２のアミノ酸配列からなる抗ＣＤ３７抗体の軽鎖をコードする塩基配列を含むポリヌクレオチド、及び配列番号１８のアミノ酸配列からなる、抗ＣＤ３ｓｃＦｖ領域に第二Ｆｃポリペプチドが連結されたポリペプチドをコードする塩基配列を含むポリヌクレオチド。

　本発明の抗ＣＤ３７－抗ＣＤ３二重特異性抗体のポリヌクレオチドを含む宿主細胞としては、使用する発現ベクター又は遺伝子導入方法に適合し、当該ポリヌクレオチドがコードするポリペプチドを発現することができるものである限り、特に限定されるものではない。前記の宿主細胞としては、例えば、本発明の技術分野において通常使用される従来細胞又は人工的に樹立された細胞など種々の細胞（例えば、動物細胞（例えば、ＣＨＯ－Ｋ１細胞、ＥｘｐｉＣＨＯ－Ｓ（登録商標）細胞、ＣＨＯＫ１ＳＶ細胞、ＣＨＯ－ＤＧ４４細胞、ＨＥＫ２９３細胞、ＮＳ０細胞）、昆虫細胞（例えば、Ｓｆ９）、細菌（エシェリキア属菌など）、酵母（サッカロマイセス属、ピキア属など）など）が挙げられる。１つの実施形態において、本発明の宿主細胞はＣＨＯ－Ｋ１細胞、又はＥｘｐｉＣＨＯ－Ｓ細胞である。また、宿主細胞はｉｎ　ｖｉｔｒｏで培養される細胞のみならず、ｉｎ　ｖｉｖｏにおいて組織を構成している細胞も含む。

　宿主細胞に本発明の抗ＣＤ３７－抗ＣＤ３二重特異性抗体のポリヌクレオチド又は本発明の抗ＣＤ３７－抗ＣＤ３二重特異性抗体の発現ベクターを導入する方法は、特に限定されるものではないが、例えば、リン酸カルシウム法、エレクトロポレーション法、又はリポフェクション方等の当業者に一般的に用いられる方法を使用することができる。リポフェクション法としては、リポソーム、脂質ナノ粒子、エキソソーム等の一般的に知られているポリヌクレオチドのデリバリーシステムを用いることができる。また、ｉｎ　ｖｉｖｏにおいて組織を構成している細胞に発現ベクターを導入する方法としては、特に限定されるものではないが、例えばアデノ随伴ウイルス、リポソーム、脂質ナノ粒子、エキソソーム等を用いる方法も含む。

　本発明の抗ＣＤ３７－抗ＣＤ３二重特異性抗体のポリヌクレオチドを含む宿主細胞の選別は、当業者に一般に使用されている方法にて行うことができる。選別方法には、例えば、薬剤選択マーカー遺伝子とテトラサイクリン、アンピシリン、ネオマイシン又はハイグロマイシン等の薬剤を用いた薬剤選択法や、限外希釈法、シングルセルソーティング法、又はコロニーピックアップ法等の細胞単離法を用いることができる。

＜本発明の抗ＣＤ３７－抗ＣＤ３二重特異性抗体の生産方法＞
　本発明はまた、本発明の抗ＣＤ３７－抗ＣＤ３二重特異性抗体を生産する方法（「本発明の抗ＣＤ３７－抗ＣＤ３二重特異性抗体の生産方法」とも称する）を提供する。本発明の抗ＣＤ３７－抗ＣＤ３二重特異性抗体の生産方法には、＜本発明の抗ＣＤ３７－抗ＣＤ３二重特異性抗体のポリヌクレオチドを含む宿主細胞＞に記載の抗ＣＤ３７－抗ＣＤ３二重特異性抗体のポリヌクレオチドを含む宿主細胞を培養し、該細胞又は該培養上清中に該抗体を発現させる工程、該抗体を回収、単離、精製する方法等が含まれうるが、本発明の抗ＣＤ３７－抗ＣＤ３二重特異性抗体が生産される限りにおいて、これらの方法に限定されるものではない。

　本発明の抗ＣＤ３７－抗ＣＤ３二重特異性抗体のポリヌクレオチドを含む宿主細胞の培養は公知の方法により行うことができる。培養条件、例えば、温度、培地のｐＨ及び培養時間は、当業者により適宜選択されうる。宿主細胞が動物細胞の場合、培地としては、例えば、約５～２０％の胎児牛血清を含むＭＥＭ培地（Ｓｃｉｅｎｃｅ、１９５９；Ｖｏｌ．１３０：ｐ．４３２－４３７）、ＤＭＥＭ培地（Ｖｉｒｏｌ．、１９５９；Ｖｏｌ．８：ｐ．３９６）、ＲＰＭＩ－１６４０培地（Ｊ．Ａｍ．Ｍｅｄ．Ａｓｓｏｃ．、１９６７；Ｖｏｌ．１９９：ｐ．５１９）、１９９培地（Ｅｘｐ．Ｂｉｏｌ．Ｍｅｄ．、１９５０；Ｖｏｌ．７３：ｐ．１－８）等を用いることができる。培地のｐＨは、例えば、約６～８であり、培養は、必要により通気や撹拌しながら、通常約３０～４０℃で約１５～３３６時間行われる。宿主細胞が昆虫細胞の場合、培地としては、例えば、胎児牛血清を含むＧｒａｃｅ’ｓ培地（Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ．、１９８５；Ｖｏｌ．８２：ｐ．８４０４）等を用いることができる。培地のｐＨは、例えば、約５～８であり、培養は、必要により通気や撹拌しながら、通常約２０～４０℃で約１５～１００時間行われる。宿主細胞が大腸菌又は酵母である場合、培地としては、例えば、栄養源を含有する液体培地が適当である。栄養培地は、例えば、形質転換された宿主細胞の生育に必要な炭素源、無機窒素源、又は有機窒素源を含んでいる。炭素源としては、例えば、グルコース、デキストラン、可溶性デンプン、ショ糖等が、無機窒素源又は有機窒素源としては、例えば、アンモニウム塩類、硝酸塩類、アミノ酸、コーンスチープ・リカー、ペプトン、カゼイン、肉エキス、大豆粕、バレイショ抽出液等が挙げられる。所望により他の栄養素（例えば、無機塩（例えば、塩化カルシウム、リン酸二水素ナトリウム、塩化マグネシウム）、ビタミン類）、抗生物質（例えば、テトラサイクリン、ネオマイシン、アンピシリン、カナマイシン）等を含んでいてもよい。培地のｐＨは、例えば、約５～８である。宿主細胞が大腸菌の場合、培地としては、例えば、ＬＢ培地、Ｍ９培地（Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ　Ｃｌｏｎｉｎｇ、Ｃｏｌｄ　Ｓｐｒｉｎｇ　Ｈａｒｂｏｒ　Ｌａｂｏｒａｔｏｒｙ；Ｖｏｌ．３：Ａ２．２）等を用いることができる。培養は、必要により通気や撹拌しながら、通常約１４～４３℃で約３～２４時間行われる。宿主細胞が酵母の場合、培地としては、例えば、Ｂｕｒｋｈｏｌｄｅｒ最小培地（Ｐｒｏｃ．Ｎａｔｌ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．ＵＳＡ．、１９８０；Ｖｏｌ．７７：ｐ．４５０５）等を用いることができる。培養は、必要により通気や撹拌しながら、通常約２０～３５℃で約１４～１４４時間行われる。上述のような培養により、本発明の抗ＣＤ３７－抗ＣＤ３二重特異性抗体を発現させることができる。

　本発明の抗ＣＤ３７－抗ＣＤ３二重特異性抗体の生産方法は、本発明の抗ＣＤ３７－抗ＣＤ３二重特異性抗体のポリヌクレオチドを含む宿主細胞を培養し、抗ＣＤ３７－抗ＣＤ３二重特異性抗体を発現させる工程に加えて、さらには、該形質転換された宿主細胞から抗ＣＤ３７－抗ＣＤ３二重特異性抗体を回収、単離又は精製する工程を含むことができる。単離又は精製方法としては、例えば、塩析、溶媒沈澱法などの溶解度を利用する方法、透析、限外濾過、ゲル濾過などの分子量の差を利用する方法、イオン交換クロマトグラフィー、ヒドロキシルアパタイトクロマトグラフィーなどの荷電を利用する方法、アフィニティークロマトグラフィーなどの特異的親和性を利用する方法、逆相高速液体クロマトグラフィーなどの疎水性の差を利用する方法、等電点電気泳動などの等電点の差を利用する方法などが挙げられる。１つの実施形態において、培養上清中に分泌された抗体は、各種クロマトグラフィー、例えば、プロテインＡカラム又はプロテインＧカラムを用いたカラムクロマトグラフィーにより精製することができる。

　本発明の抗ＣＤ３７－抗ＣＤ３二重特異性抗体には、本発明の抗ＣＤ３７－抗ＣＤ３二重特異性抗体の生産方法によって生産された抗ＣＤ３７－抗ＣＤ３二重特異性抗体も含まれる。

＜本発明の抗ＣＤ３７－抗ＣＤ３二重特異性抗体の医薬組成物＞
　本発明はまた、抗ＣＤ３７－抗ＣＤ３二重特異性抗体の医薬組成物（「本発明の抗ＣＤ３７－抗ＣＤ３二重特異性抗体の医薬組成物」とも称する）を提供する。本発明の抗ＣＤ３７－抗ＣＤ３二重特異性抗体の医薬組成物には、本発明の抗ＣＤ３７－抗ＣＤ３二重特異性抗体及び薬学的に許容される賦形剤を含む医薬組成物が含まれる。本発明の医薬組成物は、当該分野において通常用いられている賦形剤、即ち、薬剤用賦形剤や薬剤用担体等を用いて、通常使用される方法によって調製することができる。これら医薬組成物の剤型の例としては、例えば、注射剤、点滴用剤等の非経口剤が挙げられ、静脈内投与、皮下投与、腹腔内投与等により投与することができる。製剤化にあたっては、薬学的に許容される範囲で、これら剤型に応じた賦形剤、担体、添加剤等を使用することができる。

　本発明の医薬組成物には、本発明の抗ＣＤ３７－抗ＣＤ３二重特異性抗体の翻訳後修飾体を含み得る。例えば、Ｃ末端リジンの欠失やＮ末端のピログルタミル化の両方又は一方を受けた抗体等を含有する医薬組成物も本発明に含まれる。

　１つの実施形態において、本発明の抗ＣＤ３７－抗ＣＤ３二重特異性抗体の医薬組成物は、以下（ａ）～（ｃ）のいずれかより選択される本発明の抗ＣＤ３７－抗ＣＤ３二重特異性抗体及び／又は当該抗体の翻訳後修飾体を含有する医薬組成物である：
（ａ）配列番号１０のアミノ酸番号１から１１５までのアミノ酸配列からなる重鎖可変領域を含む抗ＣＤ３７抗体の重鎖フラグメントに第一Ｆｃポリペプチドが連結された抗ＣＤ３７抗体の重鎖、配列番号１２のアミノ酸番号１から１０５までのアミノ酸配列からなる軽鎖可変領域を含む抗ＣＤ３７抗体の軽鎖、並びに、配列番号１４のアミノ酸番号１から１２５までのアミノ酸配列からなる抗ＣＤ３抗体の重鎖可変領域及び配列番号１４のアミノ酸番号１４６から２５４までのアミノ酸配列からなる抗ＣＤ３抗体の軽鎖可変領域を含む抗ＣＤ３ｓｃＦｖ領域に第二Ｆｃポリペプチドが連結されたポリペプチドを含む、二重特異性抗体及び／又は当該抗体の翻訳後修飾体；
（ｂ）配列番号１０のアミノ酸番号１から１１５までのアミノ酸配列からなる重鎖可変領域を含む抗ＣＤ３７抗体の重鎖フラグメントに第一Ｆｃポリペプチドが連結された抗ＣＤ３７抗体の重鎖、配列番号１２のアミノ酸番号１から１０５までのアミノ酸配列からなる軽鎖可変領域を含む抗ＣＤ３７抗体の軽鎖、並びに、配列番号１６のアミノ酸番号１から１２５までのアミノ酸配列からなる抗ＣＤ３抗体の重鎖可変領域及び配列番号１６のアミノ酸番号１４６から２５４までのアミノ酸配列からなる抗ＣＤ３抗体の軽鎖可変領域を含む抗ＣＤ３ｓｃＦｖ領域に第二Ｆｃポリペプチドが連結されたポリペプチドを含む、二重特異性抗体及び／又は当該抗体の翻訳後修飾体；又は、
（ｃ）配列番号１０のアミノ酸番号１から１１５までのアミノ酸配列からなる重鎖可変領域を含む抗ＣＤ３７抗体の重鎖フラグメントに第一Ｆｃポリペプチドが連結された抗ＣＤ３７抗体の重鎖、配列番号１２のアミノ酸番号１から１０５までのアミノ酸配列からなる軽鎖可変領域を含む抗ＣＤ３７抗体の軽鎖、並びに、配列番号１８のアミノ酸番号１から１２５までのアミノ酸配列からなる抗ＣＤ３抗体の重鎖可変領域及び配列番号１８のアミノ酸番号１４６から２５４までのアミノ酸配列からなる抗ＣＤ３抗体の軽鎖可変領域を含む抗ＣＤ３ｓｃＦｖ領域に第二Ｆｃポリペプチドが連結されたポリペプチドを含む、二重特異性抗体及び／又は当該抗体の翻訳後修飾体。

　１つの実施形態において、本発明の医薬組成物は、以下（ａ）～（ｃ）から選択される本発明の抗ＣＤ３７－抗ＣＤ３二重特異性抗体及び／又は当該抗体の翻訳後修飾体を含有する医薬組成物である：
（ａ）配列番号１０のアミノ酸配列からなる抗ＣＤ３７抗体の重鎖、配列番号１２のアミノ酸配列からなる抗ＣＤ３７抗体の軽鎖、及び配列番号１４のアミノ酸配列からなる、抗ＣＤ３ｓｃＦｖ領域と第二Ｆｃポリペプチドが連結されたポリペプチド、を含む二重特異性抗体／又は当該抗体の翻訳後修飾体；
（ｂ）配列番号１０のアミノ酸配列からなる抗ＣＤ３７抗体の重鎖、配列番号１２のアミノ酸配列からなる抗ＣＤ３７抗体の軽鎖、及び配列番号１６のアミノ酸配列からなる、抗ＣＤ３ｓｃＦｖ領域と第二Ｆｃポリペプチドが連結されたポリペプチド、を含む、二重特異性抗体／又は当該抗体の翻訳後修飾体；又は、
（ｃ）配列番号１０のアミノ酸配列からなる抗ＣＤ３７抗体の重鎖、配列番号１２のアミノ酸配列からなる抗ＣＤ３７抗体の軽鎖、及び配列番号１８のアミノ酸配列からなる、抗ＣＤ３ｓｃＦｖ領域と第二Ｆｃポリペプチドが連結されたポリペプチド、を含む、二重特異性抗体／又は当該抗体の翻訳後修飾体。

　１つの実施形態において、本発明の医薬組成物は、配列番号１０のアミノ酸配列からなる抗ＣＤ３７抗体の重鎖、配列番号１２のアミノ酸配列からなる抗ＣＤ３７抗体の軽鎖、及び配列番号１４のアミノ酸配列からなる、抗ＣＤ３ｓｃＦｖ領域と第二Ｆｃポリペプチドが連結されたポリペプチド、を含む二重特異性抗体及び／又は当該抗体の翻訳後修飾体を含有する医薬組成物である。

　１つの実施形態において、本発明の医薬組成物は、配列番号１０のアミノ酸配列からなる抗ＣＤ３７抗体の重鎖、配列番号１２のアミノ酸配列からなる抗ＣＤ３７抗体の軽鎖、及び配列番号１６のアミノ酸配列からなる、抗ＣＤ３ｓｃＦｖ領域と第二Ｆｃポリペプチドが連結されたポリペプチド、を含む、二重特異性抗体及び／又は当該抗体の翻訳後修飾体を含有する医薬組成物である。

　１つの実施形態において、本発明の医薬組成物は、配列番号１０のアミノ酸配列からなる抗ＣＤ３７抗体の重鎖、配列番号１２のアミノ酸配列からなる抗ＣＤ３７抗体の軽鎖、及び配列番号１８のアミノ酸配列からなる、抗ＣＤ３ｓｃＦｖ領域と第二Ｆｃポリペプチドが連結されたポリペプチド、を含む、二重特異性抗体及び／又は当該抗体の翻訳後修飾体を含有する医薬組成物である。

　製剤化における本発明の抗ＣＤ３７－抗ＣＤ３二重特異性抗体の添加量は、患者の症状の程度や年齢、使用する製剤の剤型、あるいは抗体の結合力価等により異なるが、例えば、０．００１ｍｇ／ｋｇ～１００ｍｇ／ｋｇ程度を用いることができる。

＜本発明の抗ＣＤ３７－抗ＣＤ３二重特異性抗体の医薬用途＞
　本発明の抗ＣＤ３７－抗ＣＤ３二重特異性抗体、及びそれらを含有する医薬組成物は、がんの治療のために用いることができる。また、本発明には、本発明の抗ＣＤ３７－抗ＣＤ３二重特異性抗体の治療有効量を対象に投与する工程を包含する、がんを治療する方法が含まれる。また、本発明には、がんの治療のための、本発明の抗ＣＤ３７－抗ＣＤ３二重特異性抗体を含む。また、本発明には、がんの治療のための医薬組成物の製造における、本発明の抗ＣＤ３７－抗ＣＤ３二重特異性抗体の使用が含まれる。本発明による治療の対象となるがんは、特に限定されないが、例えば、種々のがん細胞の腹膜播種、胃がん、肺がん、急性リンパ芽球性白血病（ＡＬＬ）、急性骨髄性白血病（ＡＭＬ）、慢性骨髄性白血病（ＣＭＬ）、慢性リンパ性白血病（ＣＬＬ）、ホジキンリンパ腫、非ホジキンリンパ腫、Ｂ細胞リンパ腫、多発性骨髄腫、Ｔ細胞リンパ腫、骨髄異形成症候群等の血液がん、腺がん、扁平上皮がん、腺扁平上皮がん、未分化がん、大細胞がん、非小細胞肺がん、小細胞肺がん、中皮腫、皮膚がん、皮膚Ｔ細胞リンパ腫、乳がん、前立腺がん、膀胱がん、膣がん、頸部がん、頭頸部がん、子宮がん、子宮頸がん、肝臓がん、胆のうがん、胆管がん、腎臓がん、膵臓がん、結腸がん、大腸がん、直腸がん、小腸がん、胃がん、食道がん、精巣がん、卵巣がん、脳腫瘍等の固形がん、並びに骨組織、軟骨組織、脂肪組織、筋組織、血管組織及び造血組織のがんの他、軟骨肉腫、ユーイング肉腫、悪性血管内皮腫、悪性シュワン腫、骨肉腫、軟部組織肉腫などの肉腫や、膠芽腫、多形性膠芽腫、肝芽腫、髄芽腫、腎芽腫、神経芽腫、膵芽腫、胸膜肺芽腫、網膜芽腫などの芽腫等が挙げられる。

　１つの実施形態において、本発明による治療の対象となるがんは、非ホジキンリンパ腫、Ｂ細胞リンパ腫、ＣＬＬ、ＡＭＬ、Ｔ細胞リンパ腫である。１つの実施形態において、本発明による治療の対象となるがんは、好ましくは、非ホジキンリンパ腫、Ｂ細胞リンパ腫、ＣＬＬである。

　また、本発明の抗ＣＤ３７－抗ＣＤ３二重特異性抗体、及び当該抗体を含有する医薬組成物は、がん治療のために用いられる他の薬剤及びそれらを含有する医薬組成物との組み合わせにて使用されうる。組み合わせにて使用される薬剤としては、例えば、リツキシマブ、オビヌツズマブ、オファツムマブ、シクロホスファミド、ドキソルビシン、ビンクリスチン、プレドニゾロン、ベンダムスチン、イホスファミド、レナリドミド、カルボプラチン、エトポシド、イブルチニブ、ベネトクラクス、ニボルマブ、ペムブロリズマブ、ピジリズマブ、スパルタリズマズ、セミプリマブ、アテゾリズマブ、デュルバルマブ、アベルマブ等が挙げられる。

　本発明についてさらに理解を得るために参照する特定の実施例をここに提供するが、これらは例示目的とするものであって、本発明を限定するものではない。

　一般的に、二重特異性Ｔ細胞リクルート抗体の生理活性は、抗体フォーマット、標的とするＴＡＡの発現量、抗体が認識するＴＡＡ上のエピトープ、ＴＡＡ及びＣＤ３に対する親和性、体内動態など様々な要因に影響されることが知られている。本発明者らは、多様な親和性を有する抗ＣＤ３ｓｃＦｖを複数取りそろえ、抗ＣＤ３７抗体と抗ＣＤ３ｓｃＦｖとの最適な組み合わせを探索することにより、親和性のバランスが最適となる二重特異性Ｔ細胞リクルート抗体を取得できると考え、以下の検討を実施した。

［実施例１：多様なＣＤ３結合親和性を有する抗ＴＳＰＡＮ８－抗ＣＤ３二重特異性抗体の取得］
　まず、本発明者らは、多様な親和性を有する抗ＣＤ３ｓｃＦｖ群を取得することを目的とし、配列番号２、４及び６に記載のアミノ酸配列からなるポリペプチドにより構成される抗ＴＳＰＡＮ８－抗ＣＤ３二重特異性抗体（特許文献２）の配列を用いて抗ＣＤ３ｓｃＦｖ（配列番号６）の改変を試みた。改変された抗ＣＤ３ｓｃＦｖと第二Ｆｃポリペプチドが連結されたポリペプチドをコードするＤＮＡを常法に従い合成し、ｐｃＤＮＡ３．４ＴＯＰＯベクター（Ｔｈｅｒｍｏ　Ｆｉｓｈｅｒ　ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ社　、Ａ１４６９７）に挿入した。本明細書において、抗ＣＤ３ｓｃＦｖ領域と第二Ｆｃポリペプチドが連結されたポリペプチドを「抗ＣＤ３ｓｃＦｖ－Ｆｃ」とも称する。

［実施例１－１：多様なＣＤ３結合親和性を有する抗ＣＤ３ｓｃＦｖの作製］
　配列番号６の抗ＣＤ３ｓｃＦｖにおいてＣＤ３結合親和性に影響を与えうるアミノ酸残基を推定するために、（１）公知情報（特許文献３～６）、（２）抗体の構造情報、（３）抗体の各アミノ酸残基位置におけるアミノ酸出現頻度情報、及び（４）ヒトＧｅｒｍｌｉｎｅ配列情報を用いた分析を行った。分析結果を参考にして６６種類の改変体を設計した。これらの改変体のアミノ酸配列をコードするＤＮＡを用い、常法に従って抗体を取得した。得られた抗ＴＳＰＡＮ８－抗ＣＤ３二重特異性抗体をＢＴＥ－０００２～ＢＴＥ－００６７と称する。また、改変前の抗体として、配列番号２、４及び６に記載のアミノ酸配列をコードするＤＮＡを用い、常法に従って抗体を取得した。得られた改変前の抗ＴＳＰＡＮ８－抗ＣＤ３二重特異性抗体をＢＴＥ－０００１と称する。

［実施例１－２：ＣＤ３εδ複合タンパクの調製］
　抗ＴＳＰＡＮ８－抗ＣＤ３二重特異性抗体のＣＤ３への結合活性を評価するために、ＣＤ３εδ複合タンパクの取得を行った。ＣＤ３εδ複合タンパクは、ＣＤ３ε又はＣＤ３δをコードするＤＮＡをそれぞれ搭載した２つの発現ベクターを細胞に導入して取得した。発現ベクターとしてｐｃＤＮＡ３．４ＴＯＰＯベクターを用いた。１つ目の発現ベクターには、ＣＤ３εのシグナル配列及び細胞外ドメイン（ＵＮＩＰＲＯＴアクセッション番号：Ｐ０７７６６のアミノ酸番号１～１２６に該当）にアルパカＦｃ（Ｇｅｎｂａｎｋアクセッション番号：ＣＡＯ７９５７４．１のアミノ酸番号１０２～３２８に該当）を順に連結したアミノ酸配列をコードするＤＮＡを挿入した。２つ目のベクターには、ＣＤ３δのシグナル配列及び細胞外ドメイン（ＵＮＩＰＲＯＴアクセッション番号：Ｐ０４２３４のアミノ酸番号１～１０５に該当）にアルパカＦｃ（Ｇｅｎｂａｎｋアクセッション番号：ＣＡＯ７９５７４．１のアミノ酸番号１０２～３２７に該当）を順に連結したアミノ酸配列をコードするＤＮＡを挿入した。ＤＮＡは常法に従い合成した。作製した２つのベクターをＥｘｐｉＣＨＯ－Ｓ（登録商標）細胞（Ｔｈｅｒｍｏ　Ｆｉｓｈｅｒ　Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ社、Ａ２９１２７）にトランスフェクションした。培養上清をＨｉＴｒａｐ　ＭａｂＳｅｌｅｃｔ　ＳｕＲｅ　ｐｃｃ（Ｃｙｔｉｖａ社、１７－５４９１－１２）を用いたアフィニティ精製法、及び陰イオン交換カラム（Ｃｙｔｉｖａ社、１７－１１５４－０１）を用いて精製してＣＤ３εδ複合タンパクを得た。

［実施例１－３：多様なＣＤ３結合親和性を有する抗ＴＳＰＡＮ８－抗ＣＤ３二重特異性抗体群のＣＤ３結合活性評価］
　抗ＴＳＰＡＮ８－抗ＣＤ３二重特異性抗体であるＢＴＥ－０００１～ＢＴＥ－００６７のＣＤ３に対する結合活性をＥＬＩＳＡ法により評価した。ＥＬＩＳＡ法は常法に従って行った。実施例１－２で取得したＣＤ３εδ複合タンパクをプレートに固相化した。被験抗体としてＢＴＥ－０００１～ＢＴＥ－００６７を使用した。２次抗体にはＧｏａｔ　ａｎｔｉ－Ｈｕｍａｎ　ＩｇＧ　Ｆｃ，　Ｍｕｌｔｉ－Ｓｐｅｃｉｅｓ　ＳＰ　ａｄｓ－ＨＲＰ（ＳｏｕｔｈｅｒｎＢｉｏｔｅｃｈ社、２０１４－０５）を使用した。検出試薬にはＴＭＢ＋Ｓｕｂｓｔｒａｔｅ－Ｃｈｒｏｍｏｇｅｎ（Ｄａｋｏ社、Ｓ１５９９）を使用した。吸光度の測定にはＩｎｆｉｎｉｔｅ　Ｍ２００ｐｒｏ（Ｔｅｃａｎ社）を用いた。ＥＣ５０値は、同一プレート内の最大値をトップに固定し、同一プレート内のブランクの中の最小値をボトムに固定し、ＧｒａｐｈＰａｄ　Ｐｒｉｓｍのｖａｒｉａｂｌｅ　ｓｌｏｐｅ　ｍｏｄｅｌ（ｆｏｕｒ　ｐａｒａｍｅｔｅｒｓ）を用いて算出した。結果、ＢＴＥ－０００２～ＢＴＥ－００６７の６６抗体のＥＣ５０値は、最小値がＢＴＥ－００６７の３．３４ｎｇ／ｍＬ、中央値が９３．２ｎｇ／ｍＬ、最大値がＢＴＥ－００３０の＞７５００ｎｇ／ｍＬとなり、多様な結合活性を示すことが確認できた。

［実施例１－４：多様なＣＤ３結合親和性を有する抗ＴＳＰＡＮ８－抗ＣＤ３ｓｃＦｖ二重特性抗体群の安定性評価］
　また、ＢＴＥ－０００１～ＢＴＥ－００６７の安定性を評価するために、サーマルシフトアッセイ（以下「ＴＳＡ」）を実施した。ＴＳＡにて、５０％の分子のフォールディングが崩壊する変性中点温度（以下「Ｔｍ」）を測定した。一般的にＴｍが高いほど、熱安定性の高いタンパク質であることが知られている。ＴＳＡには、Ｐｒｏｔｅｉｎ　Ｔｈｅｒｍａｌ　Ｓｈｉｆｔ　Ｄｙｅ　Ｋｉｔ（Ｔｈｅｒｍｏ　Ｆｉｓｈｅｒ　Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ社、４４６１１４６、以後「Ｋｉｔ」）を用いた。Ｋｉｔのプロトコルに従い各抗体とＫｉｔ付属の蛍光色素を混合し、ＭｉｃｒｏＡｍｐ　Ｆａｓｔ　Ｏｐｔｉｃａｌ　９６－Ｗｅｌｌ　Ｒｅａｃｔｉｏｎ　Ｐｌａｔｅ（Ｔｈｅｒｍｏ　Ｆｉｓｈｅｒ　Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ社、４３４６９０７）に分注し、ＳｔｅｐＯｎｅＰｌｕｓリアルタイムＰＣＲシステム（Ｔｈｅｒｍｏ　Ｆｉｓｈｅｒ　Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ社）を用いて測定を行った。ＴＳＡの測定は２５℃から９９℃まで昇温することで実施した。解析にはＰｒｏｔｅｉｎ　Ｔｈｅｒｍａｌ　Ｓｈｉｆｔ　Ｓｏｆｔｗａｒｅ（Ｔｈｅｒｍｏ　Ｆｉｓｈｅｒ　Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ社、４４６６０３８）を使用した。測定で得られたスペクトルから常法に従い最も低いＴｍを算出した。結果、改変によって得られたＢＴＥ－０００２～ＢＴＥ－００６７の多くは、改変前のＢＴＥ－０００１よりもＴｍが同じ又は低い値であった。ＢＴＥ－０００１よりもＴｍが高くなったのはＢＴＥ－０００６～ＢＴＥ－０００８、ＢＴＥ－００１０、ＢＴＥ－００３４、ＢＴＥ－００４８のみであった。Ｔｍは約６３℃以上を目標にしていたが、得られた抗体の多くが６０℃付近にＴｍを持ち、熱安定性が十分ではないことが示唆された。

［実施例２：多様なＣＤ３結合親和性を有し、且つ、安定性が改善された抗ＴＳＰＡＮ８－抗ＣＤ３二重特異性抗体の取得］
　実施例１にて、発明者らは多様なＣＤ３結合親和性を持つ抗ＴＳＰＡＮ８－抗ＣＤ３二重特異性抗体群を得ることに成功した。しかしながら、同時に、それらの抗体の熱安定性が十分ではないことも示唆された。そこで、実施例１で得た抗体の中からＣＤ３結合親和性の多様性がある１１種類の抗体を選択し、安定性の改善を目指して検討を行った。選択した抗体は、ＢＴＥ－００１５、ＢＴＥ－００２５、ＢＴＥ－００３１、ＢＴＥ－００３４（高結合活性抗体）、ＢＴＥ－０００６、ＢＴＥ－０００９、ＢＴＥ－００４８（中結合活性抗体）、ＢＴＥ－０００８、ＢＴＥ－００１１、ＢＴＥ－００１２、ＢＴＥ－００１９（低結合活性抗体）であり、これらの抗体を総称して「１１種類の抗ＴＳＰＡＮ８－抗ＣＤ３二重特異性抗体」とも称する。

［実施例２－１：安定性を改善する為の変異を導入した抗ＴＳＰＡＮ８－抗ＣＤ３二重特異性抗体の作製］
　１１種の抗ＴＳＰＡＮ８－抗ＣＤ３二重特異性抗体の安定性を向上させるために改変体を設計した。改変体は、特許文献３及び特許文献５を参考にして設計した。具体的には、１１種の抗ＴＳＰＡＮ８－抗ＣＤ３二重特異性抗体に対して、Ｌ７５にＩｌｅを、Ｈ１００にＡｓｐを、Ｌ５８にＶａｌを、Ｌ８５にＡｓｐを、及び、Ｌ９５にＨｉｓを変異導入した５５種の抗体（ＢＴＥ００７０～ＢＴＥ０１２４）を設計した。尚、上記Ｌ７５、Ｈ１００、Ｌ５８、Ｌ８５、Ｌ９５はいずれもＫａｂａｔ　Ｎｕｍｂｅｒｉｎｇにおけるナンバリングである。また、前述の５５種の抗体にはＮ２９７Ｇ変異を導入せず、代わりに、ＥＵインデックスにおける３２９番目のプロリン（Ｐｒｏ）をＡｌａに置換したＰ３２９Ａ変異を導入した。Ｎ２９７ＧからＰ３２９Ａに変更したことによる安定性への影響を確認する為に、比較抗体として、１１種の抗ＴＳＰＡＮ８－抗ＣＤ３二重特異性抗体のＮ２９７ＧをＰ３２９Ａに変更した二重特異性抗体（ＢＴＥ－０１２５～ＢＴＥ－０１３５）を設計した。これらの抗体作製に用いた、配列番号２の抗ＴＳＰＡＮ８抗体の重鎖のＮ２９７ＧをＰ３２９Ａに変更した配列を配列番号８に記載する。設計した抗体を「６６種の抗ＴＳＰＡＮ８－抗ＣＤ３二重特異性抗体」とも称する。これらの抗体をコードするＤＮＡを常法に従って作製し、常法に従って抗体を得た。得られた６６種類の抗ＴＳＰＡＮ８－抗ＣＤ３二重特異性抗体を、それぞれＢＴＥ－００７０～ＢＴＥ－０１３５と称する。

［実施例２－２：安定性を改善するための変異を導入した抗ＴＳＰＡＮ８－抗ＣＤ３二重特異性抗体群のＣＤ３結合活性評価］
　６６種の抗ＴＳＰＡＮ８－抗ＣＤ３二重特異性抗体のＣＤ３に対する結合活性を、実施例１－３に記載のＥＬＩＳＡ法により評価した。結果、安定性を改善するための改変はＣＤ３への結合活性に大きな影響を与えず、概ね改変前の多様な結合活性を維持していた。

［実施例２－３：安定性を改善するための変異を導入した６６種の抗ＴＳＰＡＮ８－抗ＣＤ３二重特異性抗体の安定性評価］
　６６種の抗ＴＳＰＡＮ８－抗ＣＤ３二重特異性抗体の安定性を、実施例１－４に記載のＴＳＡにより評価した。ＥＬＩＳＡ　ＥＣ５０が１２５０ｎｇ／ｍＬ以下、ＴＳＡにおけるＴｍが６３℃以上の抗体を安定性が改善した抗体とした。さらに、タンパク調製時の培地量に対する抗体産生量（Ｙｉｅｌｄ）が１ｍｇ／ｍＬ以上である抗体を選択した。さらに、選択した３４種の抗ＴＳＰＡＮ８－抗ＣＤ３ｓｃＦｖ二重特異性抗体を４０℃で１週間静置し、安定性を評価した。抗体の安定性は、静置前後の抗体のＣＤ３結合活性を表面プラズモン共鳴（ＳＰＲ）法を用いて測定して評価した。ＳＰＲ法による測定にはＢｉａｃｏｒｅＴ－２００（Ｃｙｔｉｖａ社）を用いた。Ｂｉａｃｏｒｅ測定に用いるチップは、Ｓｅｒｉｅｓ　Ｓ　Ｓｅｎｓｏｒ　Ｃｈｉｐ　ＣＭ５（Ｃｙｔｉｖａ社、２９１０４９８８）にＨｉｓ　Ｃａｐｔｕｒｅ　Ｋｉｔ（Ｃｙｔｉｖａ社、２８９９５０５６）及びＡｍｉｎｅ　Ｃｏｕｐｌｉｎｇ　Ｋｉｔ（Ｃｙｔｉｖａ社、ＢＲ１０００５０）を用いて抗Ｈｉｓ抗体を固定化させ、続いてＨｕｍａｎ　ＣＤ３　ｅｐｓｉｌｏｎ＆ＣＤ３　ｄｅｌｔａ　Ｈｅｔｅｒｏｄｉｍｅｒ　Ｐｒｏｔｅｉｎ，　Ｈｉｓ　Ｔａｇ＆Ｔａｇ　Ｆｒｅｅ　（ＭＡＬＳ　ｖｅｒｉｆｉｅｓ）（ＡｃｒｏＢｉｏｓｙｓｔｅｍｓ社、ＣＤＤ－Ｈ５２Ｗ１）を結合させて作製した。静置前のＣＤ３結合活性を１００％とした場合の静置後のＣＤ３結合活性（Ｂｉａｃｏｒｅ４０Ｃ１Ｗ）を算出した。Ｂｉａｃｏｒｅ４０Ｃ１Ｗにおける相対値が低いほど、静置による保存安定性が悪いことを示す。結果、Ｔｍが６３℃以上、且つ、残存活性が７８％以上保持された抗体として、１６種類の抗ＴＳＰＡＮ８－抗ＣＤ３二重特異性抗体（ＢＴＥ－００７９、００８０、００９０、００９１、００９２、００９７～０１０２、０１１１～０１１３、０１３４、０１３５）を見出した。これらの抗体のＥＬＩＳＡ法によるＣＤ３に対する結合活性とＴＳＡ及びＳＰＲ法による安定性の結果を表１に示す。ｄＴｍは各抗体のＴｍとＢＴＥ－０００１のＴｍとの差分を示す。Ｂｉａｃｏｒｅの値はＳＰＲ法による静置前のＣＤ３結合活性を１００％とした場合の静置後のＣＤ３結合活性（Ｂｉａｃｏｒｅ４０Ｃ１Ｗ）を示す。また、この１６種に使用された抗ＣＤ３ｓｃＦｖを以下「１６種類の抗ＣＤ３ｓｃＦｖ」と称する。

［実施例３：抗ＣＤ３７－抗ＣＤ３二重特異性抗体の取得］
　実施例２－３で取得した１６種類の抗ＣＤ３ｓｃＦｖを用いて、ＣＤ３７に結合する二重特異性抗体である抗ＣＤ３７－抗ＣＤ３二重特異性抗体を取得した。
　抗ＣＤ３７抗体として、特許文献１の記載に基づき抗ＣＤ３７抗体をコードする配列番号９及び配列番号１１の塩基配列に基づきＤＮＡを合成し、ｐｃＤＮＡ３．４ＴＯＰＯベクターに挿入した。作製したベクターをＡｐｉＤ００１５８及びＡｐｉＤ００１５９と称する。そして、抗ＣＤ３ｓｃＦｖ－ＦｃをコードするＤＮＡをｐｃＤＮＡ３．４ＴＯＰＯベクターに搭載したベクターであるＡｐｉＤ０００８７、ＡｐｉＤ０００８８、ＡｐｉＤ００１４５、ＡｐｉＤ００１４６、ＡｐｉＤ００１００、ＡｐｉＤ００１０５～ＡｐｉＤ００１１０、ＡｐｉＤ００１１９～ＡｐｉＤ００１２１、ＡｐｉＤ００１５６、ＡｐｉＤ００１５７のいずれか１種類と、ＡｐｉＤ００１５８及びＡｐｉＤ００１５９を、ＥｘｐｉＣＨＯ－Ｓ（登録商標）細胞にトランスフェクションした。常法に従い、培養上清をＭａｂＳｅｌｅｃｔ　ＳｕＲｅを用いて精製した。得られた１６種類の抗ＣＤ３７－抗ＣＤ３二重特異性抗体をＢＴＥ－０１３６～０１４９、０１５１、０１５２、又は総称して「１６種類の抗ＣＤ３７－抗ＣＤ３二重特異性抗体」と称する。抗ＣＤ３７－抗ＣＤ３二重特異性抗体作製に使用したベクター名称及び抗ＣＤ３ｓｃＦｖの改変アミノ酸番号及び変異の情報を表２に示す。

［実施例４：抗ＣＤ３７－抗ＣＤ３二重特異性抗体のｉｎ　ｖｉｔｒｏ活性評価］
　実施例３で作製した１６種類の抗ＣＤ３７－抗ＣＤ３二重特異性抗体の中から、安定性及び活性において優れた抗体を選抜すべく、ヒトＣＤ３への結合親和性、安定性、ＣＤ３７発現細胞とヒトＴ細胞との共培養系における細胞傷害作用（Ｒｅｄｉｒｅｃｔｅｄ　Ｔ　Ｃｅｌｌ　Ｃｙｔｏｔｏｘｉｃｉｔｙ：ＲＴＣＣ）、及びサイトカイン産生の評価を以下のとおり行った。

［実施例４－１：１６種類の抗ＣＤ３７－抗ＣＤ３二重特異性抗体の結合活性評価］
　１６種類の抗ＣＤ３７－抗ＣＤ３二重特異性抗体のＣＤ３に対する結合活性を、実施例１－３に記載のＥＬＩＳＡ法により評価した。その結果、抗ＣＤ３７抗体との二重特異性抗体においても、１６種類の抗ＣＤ３二重特異性抗体はＣＤ３への多様な結合活性を概ね維持していることが確認できた。１６種類の抗ＣＤ３７－抗ＣＤ３二重特異性抗体のＥＣ５０値を表３に示す。

［実施例４－２：１６種類の抗ＣＤ３７－抗ＣＤ３二重特異性抗体の安定性評価］
　１６種類の抗ＣＤ３７－抗ＣＤ３二重特異性抗体の安定性を、実施例１－４に記載のＴＳＡにより評価した。Ｔｍを表３に示す。さらに、４０℃で１週間静置した後の抗ＣＤ３結合活性の残存率を測定した（表３）。１６種類の抗ＣＤ３７－抗ＣＤ３二重特異性抗体は、いずれもＢｉａｃｏｒｅ４０Ｃ１Ｗにおいて約７０％以上の安定性を示した。特にＢＴＥ－０１３６、０１３８、０１４１、０１４２、０１４４、０１４５、０１４８、０１５１は８０％以上の残存率を示しており、安定性の高い抗体であることが示唆された。

［実施例４－３：１６種類の抗ＣＤ３７－抗ＣＤ３二重特異性抗体のＲＴＣＣ活性評価］
　ヒトＣＤ３７及びＧＦＰＳｐａｒｋ（登録商標）を発現するＣＨＯ－Ｋ１細胞（ＣＨＯ－Ｋ１＿ヒトＣＤ３７／ＧＦＰＳｐａｒｋ細胞）とヒトＰＢＭＣから単離したＴ細胞との共培養系に、抗ＣＤ３７－抗ＣＤ３二重特異性抗体を作用させることで誘導されるｉｎ　ｖｉｔｒｏ　ＲＴＣＣ活性を評価した。
１：ＣＨＯ－Ｋ１＿ヒトＣＤ３７／ＧＦＰＳｐａｒｋ細胞の作製
　ＣＨＯ－Ｋ１＿ヒトＣＤ３７／ＧＦＰＳｐａｒｋ細胞を、以下の方法で作製した。ヒトＣＤ３７発現ベクターは、ヒトＣＤ３７（ＮＣＢＩアクセッション番号：ＮＰ＿００１７６５．１）をコードするＤＮＡを常法に従い、ｐｃＤＮＡ３．４ＴＯＰＯベクターに挿入することで構築した。ＧＦＰＳｐａｒｋ発現ベクターは、ＰＤ－Ｌ１－ＧＦＰＳｐａｒｋ発現ベクター（ＳｉｎｏＢｉｏｌｏｇｉｃａｌ社、ＨＧ１００８４－ＡＣＧ）から、常法に従いＰＤ－Ｌ１配列を除去することで構築した。これら２種のプラスミドベクターをＣＨＯ－Ｋ１細胞（Ａｍｅｒｉｃａｎ　Ｔｙｐｅ　Ｃｕｌｔｕｒｅ　Ｃｏｌｌｅｃｔｉｏｎ、ＣＣＬ－６１）にＬｉｐｏｆｅｃｔａｍｉｎｅ３０００　Ｔｒａｎｓｆｅｃｔｉｏｎ　Ｒｅａｇｅｎｔ（Ｔｈｅｒｍｏ　Ｆｉｓｈｅｒ　Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ社、Ｌ３００００１５）を用いてトランスフェクションし、Ｇｅｎｅｔｉｃｉｎ（Ｔｈｅｒｍｏ　Ｆｉｓｈｅｒ　Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ社、１０１３１－０２７）及びＨｙｇｒｏｍｙｃｉｎ　Ｂ　Ｇｏｌｄ（ＩｎｖｉｖｏＧｅｎ社、ａｎｔ－ｈｇ－５）を含む培地で培養して遺伝子導入細胞をセレクションした。単一クローン細胞を単離した後、フローサイトメトリーによりヒトＣＤ３７及びＧＦＰＳｐａｒｋ両方の発現が確認された細胞をＣＨＯ－Ｋ１＿ヒトＣＤ３７／ＧＦＰＳｐａｒｋ細胞として以下の実験に用いた。

２：Ｅｘｐａｎｄｅｄ　ｐａｎＴ細胞の作製
　ＰａｎＴ　Ｃｅｌｌ　Ｉｓｏｌａｔｉｏｎ　Ｋｉｔ、ｈｕｍａｎ（Ｍｉｌｔｅｎｙｉ　Ｂｉｏｔｅｃ社、１３０－０９６－５３５）を用い、添付のプロトコルに基づいてヒトＰＢＭＣ（ＡＬＬＣＥＬＬＳ社、ＰＢ００３Ｆ）からｐａｎＴ細胞（ＣＤ４Ｔ細胞及びＣＤ８Ｔ細胞の両方を含む）を単離した。単離したｐａｎＴ細胞を１×１０^６個／ｍＬに希釈し、ｐａｎＴ細胞と同数のＤｙｎａｂｅａｄｓ　Ｈｕｍａｎ　Ｔ－Ａｃｔｉｖａｔｏｒ　ＣＤ３／ＣＤ２８　ｆｏｒ　Ｔ　Ｃｅｌｌ　Ｅｘｐａｎｓｉｏｎ　ａｎｄ　Ａｃｔｉｖａｔｉｏｎ（Ｔｈｅｒｍｏ　Ｆｉｓｈｅｒ　Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ社、１１１３１Ｄ）及び終濃度３０Ｕ／ｍＬのヒトＩＬ－２（ＰｅｐｒｏＴｅｃｈ社、２００－０２）を添加して、３７℃、５％　ＣＯ_２インキュベーターにて培養した。培養開始４日後、６日後、８日後に５×１０^５個／ｍＬの濃度で継代した。培養開始４日後及び６日後の継代の際にはヒトＩＬ－２を終濃度３０Ｕ／ｍＬで添加した。培養開始１１日後に細胞を回収し、Ｄｙｎａｂｅａｄｓ　Ｈｕｍａｎ　Ｔ－Ａｃｔｉｖａｔｏｒ　ＣＤ３／ＣＤ２８　ｆｏｒ　Ｔ　Ｃｅｌｌ　Ｅｘｐａｎｓｉｏｎ　ａｎｄ　Ａｃｔｉｖａｔｉｏｎをマグネットにより除去した後、ＣＥＬＬＢＡＮＫＥＲ１（Ｔａｋａｒａ社、ＣＢ０１１）に懸濁して凍結保存した。調製した細胞をＥｘｐａｎｄｅｄ　ｐａｎＴ細胞と称する。

３：ＲＴＣＣアッセイ
　培養培地で５×１０^４個／ｍＬに調製したＣＨＯ－Ｋ１＿ヒトＣＤ３７／ＧＦＰＳｐａｒｋ細胞の懸濁液を平底３８４ウェルマイクロプレート（Ｇｒｅｉｎｅｒ社、７８１１８２）に２０μＬ（１×１０^３個）ずつ播種し、３７℃、５％　ＣＯ_２インキュベーターにて３時間培養した。続いて、ＢＴＥ－０１３６、０１３８、０１４１～０１４５、０１４７、０１４８、０１５１は３．０×１０^３ｎｇ／ｍＬを最高濃度として４倍公比で２．９×１０^－３ｎｇ／ｍＬまで（終濃度に換算して１．０×１０^３ｎｇ／ｍＬ～９．５×１０^－４ｎｇ／ｍＬ）、ＢＴＥ－０１３７、０１３９、０１４０、０１４６、０１４９、０１５２は３．０×１０^４ｎｇ／ｍＬを最高濃度として４倍公比で２．９×１０^－２ｎｇ／ｍＬまで希釈し（終濃度に換算して１．０×１０^４ｎｇ／ｍＬ～９．５×１０^－３ｎｇ／ｍＬ）、希釈後の抗体を培養中の３８４ウェルプレートに２０μＬずつ添加した。ここに培養培地で５×１０^５個／ｍＬに調製したＥｘｐａｎｄｅｄ　ｐａｎＴ細胞を２０μＬずつ添加し、３７℃、５％　ＣＯ_２インキュベーターで３日間培養後にＩｎｃｕＣｙｔｅ（登録商標）　ＺＯＯＭ（ザルトリウス社）にて、生細胞数の指標として各ウェルのＧＦＰＳｐａｒｋ蛍光面積を測定した。各種抗ＣＤ３７－抗ＣＤ３二重特異性抗体濃度とＧＦＰＳｐａｒｋ蛍光面積の関係を図１－１、１－２に示す。結果、ＢＴＥ－０１３７を除く１５種類の抗ＣＤ３７－抗ＣＤ３二重特異性抗体がＣＨＯ－Ｋ１＿ヒトＣＤ３７／ＧＦＰＳｐａｒｋ細胞の生細胞数を減少させた。

［実施例４－４：１６種類の抗ＣＤ３７－抗ＣＤ３二重特異性抗体によるサイトカイン産生評価］
　実施例４－３－３のＲＴＣＣアッセイの培養上清中に含まれるＩＦＮ－γ及びＴＮＦ－αをＥＬＩＳＡで測定することにより、抗ＣＤ３７－抗ＣＤ３二重特異性抗体のＴ細胞活性化作用を評価した。測定にはＢＤ　ＯｐｔＥＩＡ　Ｈｕｍａｎ　ＩＦＮ－γ　ＥＬＩＳＡ（ＢＤ　Ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅｓ社、５５５１４２）、及びＨｕｍａｎ　ＴＮＦ－ａｌｐｈａ　ＤｕｏＳｅｔ　ＥＬＩＳＡ（Ｒ＆Ｄ　Ｓｙｓｔｅｍｓ社、ＤＹ２１０―５）を用いた。添加した抗ＣＤ３７－抗ＣＤ３二重特異性抗体の濃度に対して、検出されたＩＦＮ－γ及びＴＮＦ－αの量をプロットしたグラフを図２－１～２－４に示す。結果、ＢＴＥ－０１３７を除く１５種類の抗ＣＤ３７－抗ＣＤ３二重特異性抗体がＩＦＮ－γ及びＴＮＦ－αの産生を誘導したが、多くの抗体では一定濃度以上の抗体存在下では逆にＩＦＮ－γ及びＴＮＦ－αの産生量が低下していた。一般的に、２つの抗原分子を認識することで細胞間に架橋を形成するように設計された抗体は、高濃度条件下では一方の抗原分子にのみ結合した抗体によって抗原が占有されることで、細胞間の架橋形成が阻害されることが知られている（ＡＡＰＳ　Ｊ．２０１９、Ｖｏｌ．２１（４）、ｐ．６６）。高抗体濃度域におけるＩＦＮ－γ及びＴＮＦ－αの産生量減少は、このような細胞間架橋形成阻害の結果であり、このような特徴を持つ抗体はＴ細胞による細胞傷害作用の減弱が起こりやすい抗体であると考えられるため、ヒトのがん治療に用いる抗体としては好ましくない。この点を考慮し、多様なＣＤ３結合親和性を有し、安定であり、且つ、ＲＴＣＣアッセイにおいて高濃度域であってもＩＦＮ－γ及びＴＮＦ－αの産生量が低下しにくい抗体を総合的に選抜した結果、ＢＴＥ－０１３６、０１４２、０１４８をヒトの治療に用いるための抗体候補として選定した。

［実施例５：抗ＣＤ３７－抗ＣＤ３二重特異性抗体のｉｎ　ｖｉｖｏ抗腫瘍評価］
　６週齢ＮＯＤ／Ｓｈｉ－ｓｃｉｄ、ＩＬ－２ＲγＫＯ（ＮＯＧ）雌マウス（インビボサイエンス株式会社）の尾静脈よりＰＢＳに懸濁した２．５×１０^６個／１００μＬのヒトＰＢＭＣ（Ｐｒｅｃｉｓｉｏｎ　ｆｏｒ　Ｍｅｄｉｃｉｎｅ社、３３０００－１０Ｍ）を移入した。続いて、ヒトＰＢＭＣの移植から１３日後にＣｏｒｎｉｎｇ　Ｍａｔｒｉｇｅｌ　Ｂａｓｅｍｅｎｔ　Ｍｅｍｂｒａｎｅ　Ｍａｔｒｉｘ、Ｐｈｅｎｏｌ　Ｒｅｄ－Ｆｒｅｅ（Ｃｏｒｎｉｎｇ社、３５６２３７）に懸濁した２×１０^６個／１００μＬのＳＵ－ＤＨＬ－６細胞（Ａｍｅｒｉｃａｎ　Ｔｙｐｅ　Ｃｕｌｔｕｒｅ　Ｃｏｌｌｅｃｔｉｏｎ、ＣＲＬ－２９５９）をマウス皮下に移植した。ＳＵ－ＤＨＬ－６細胞の移植から８日後に腫瘍体積及び体重を測定し、腫瘍体積が各群均等になるように群分けを行った。群分けの当日及び７日後にＰＢＳに希釈したＢＴＥ－０１３６、０１４２、０１４８を５、１、０．１、０．０１、０．００１ｍｇ／ｋｇの用量で尾静脈から投与した。コントロール群にはＰＢＳを投与した。群分け当日、４日後、７日後及び１１日後に腫瘍体積を測定した。試験は各群８例で実施した。ただし、抗体投与開始後１１日よりも前に死亡したＢＴＥ－０１３６の０．００１ｍｇ／ｋｇ投与群およびＢＴＥ－０１４８の０．００１ｍｇ／ｋｇ投与群の各１例は解析から除外した。結果を図３―１～３―３に示す。腫瘍体積［ｍｍ^３］は次式で計算した。
（腫瘍長軸の長さ［ｍｍ］）×（腫瘍短軸の長さ［ｍｍ］）^２×０．５
　対照群と抗体投与各群の抗体投与開始１１日後における腫瘍体積を比較し、ダネットの多重比較検定によりｐ＜０．０５となる群に＊を、ｐ＜０．０１となる群に＊＊を付した。結果、ＢＴＥ－０１３６及びＢＴＥ－０１４２は０．００１ｍｇ／ｋｇ以上の投与量で、ＢＴＥ－０１４８は０．０１ｍｇ／ｋｇ以上の投与量で、有意な抗腫瘍作用を示した。

　本発明の抗ＣＤ３７－抗ＣＤ３二重特異性抗体は、がんの治療に有用であると期待される。また、本発明のポリヌクレオチド、発現ベクター、発現ベクターを含む宿主細胞、及び抗体を生産する方法は、前記抗ＣＤ３７－抗ＣＤ３二重特異性抗体を生産するのに有用である。

配列番号２及び８は抗ＴＳＰＡＮ８抗体の重鎖アミノ酸配列を示し、配列番号１及び７に示される塩基配列は、配列番号２及び８に示される抗ＴＳＰＡＮ８抗体の重鎖アミノ酸配列をコードする塩基配列である。配列番号４は抗ＴＳＰＡＮ８抗体の軽鎖アミノ酸配列を示し、配列番号３に示される塩基配列は、配列番号４に示される抗ＴＳＰＡＮ８抗体の軽鎖アミノ酸配列をコードする塩基配列である。配列番号１０は抗ＣＤ３７抗体の重鎖アミノ酸配列を示し、配列番号９に示される塩基配列は、配列番号１０に示される抗ＣＤ３７抗体の重鎖アミノ酸配列をコードする塩基配列である。配列番号１２は抗ＣＤ３７抗体の軽鎖アミノ酸配列を示し、配列番号１１に示される塩基配列は、配列番号１２に示される抗ＣＤ３７抗体の軽鎖アミノ酸配列をコードする塩基配列である。配列番号６、１４、１６、１８は抗ＣＤ３ｓｃＦｖ領域と第二Ｆｃポリペプチドが連結されたポリペプチドのアミノ酸配列であり、配列番号５、１３、１５、１７に示される塩基配列は、配列番号６、１４、１６、１８に示される抗ＣＤ３ｓｃＦｖ領域と第二Ｆｃポリペプチドが連結されたポリペプチドのアミノ酸配列をコードする塩基配列である。配列番号１９～２７は発明の詳細な説明にて記載した各種リンカーのアミノ酸配列である

Claims

　抗ＣＤ３７－抗ＣＤ３二重特異性抗体であって、
（ａ）抗ＣＤ３７抗体の重鎖可変領域を含む重鎖フラグメント及び抗ＣＤ３７抗体の軽鎖可変領域を含む軽鎖からなる抗ＣＤ３７抗体のＦａｂ領域、
（ｂ）抗ＣＤ３抗体の重鎖可変領域及び軽鎖可変領域を含む抗ＣＤ３ｓｃＦｖ領域、並びに、
（ｃ）（ａ）のＦａｂ領域の重鎖フラグメントに連結される第一Ｆｃポリペプチド及び（ｂ）の抗ＣＤ３ｓｃＦｖ領域に連結される第二ＦｃポリペプチドからなるＦｃ領域、を含み、
　抗ＣＤ３抗体の重鎖可変領域及び軽鎖可変領域が以下の（１）～（３）のいずれかである、二重特異性抗体：
（１）配列番号１４のアミノ酸番号１から１２５までのアミノ酸配列からなる抗ＣＤ３抗体の重鎖可変領域及び配列番号１４のアミノ酸番号１４６から２５４までのアミノ酸配列からなる抗ＣＤ３抗体の軽鎖可変領域；
（２）配列番号１６のアミノ酸番号１から１２５までのアミノ酸配列からなる抗ＣＤ３抗体の重鎖可変領域及び配列番号１６のアミノ酸番号１４６から２５４までのアミノ酸配列からなる抗ＣＤ３抗体の軽鎖可変領域；又は、
（３）配列番号１８のアミノ酸番号１から１２５までのアミノ酸配列からなる抗ＣＤ３抗体の重鎖可変領域及び配列番号１８のアミノ酸番号１４６から２５４までのアミノ酸配列からなる抗ＣＤ３抗体の軽鎖可変領域。
　抗ＣＤ３ｓｃＦｖ領域が以下の（１）～（３）のいずれかである、請求項１に記載の二重特異性抗体：
（１）配列番号１４のアミノ酸番号１から２５４までのアミノ酸配列からなる抗ＣＤ３ｓｃＦｖ領域；
（２）配列番号１６のアミノ酸番号１から２５４までのアミノ酸配列からなる抗ＣＤ３ｓｃＦｖ領域；又は、
（３）配列番号１８のアミノ酸番号１から２５４までのアミノ酸配列からなる抗ＣＤ３ｓｃＦｖ領域。
　抗ＣＤ３７抗体の重鎖可変領域が配列番号１０のアミノ酸番号３１から３５までのアミノ酸配列からなるＣＤＲ１、配列番号１０のアミノ酸番号５０から６５までのアミノ酸配列からなるＣＤＲ２、及び配列番号１０のアミノ酸番号９８から１０４までのアミノ酸配列からなるＣＤＲ３を含み、抗ＣＤ３７抗体の軽鎖可変領域が配列番号１２のアミノ酸番号２４から３４までのアミノ酸配列からなるＣＤＲ１、配列番号１２のアミノ酸番号５０から５６までのアミノ酸配列からなるＣＤＲ２、及び配列番号１２のアミノ酸番号８９から９５までのアミノ酸配列からなるＣＤＲ３を含む、請求項１又は２に記載の二重特異性抗体。
　抗ＣＤ３７抗体の重鎖可変領域が配列番号１０のアミノ酸番号１から１１５までのアミノ酸配列からなり、抗ＣＤ３７抗体の軽鎖可変領域が配列番号１２のアミノ酸番号１から１０５までのアミノ酸配列からなる、請求項３に記載の二重特異性抗体。
　抗ＣＤ３７抗体のＦａｂ領域が、配列番号１０のアミノ酸番号１から２１３までのアミノ酸配列からなる重鎖フラグメント及び配列番号１２のアミノ酸配列からなる軽鎖からなる、請求項４に記載の二重特異性抗体。
　以下の（ａ）～（ｃ）のいずれかに記載の抗ＣＤ３７－抗ＣＤ３二重特異性抗体：
（ａ）配列番号１０のアミノ酸番号１から１１５までのアミノ酸配列からなる重鎖可変領域を含む抗ＣＤ３７抗体の重鎖フラグメントに第一Ｆｃポリペプチドが連結された抗ＣＤ３７抗体の重鎖、配列番号１２のアミノ酸番号１から１０５までのアミノ酸配列からなる軽鎖可変領域を含む抗ＣＤ３７抗体の軽鎖、並びに、配列番号１４のアミノ酸番号１から１２５までのアミノ酸配列からなる抗ＣＤ３抗体の重鎖可変領域及び配列番号１４のアミノ酸番号１４６から２５４までのアミノ酸配列からなる抗ＣＤ３抗体の軽鎖可変領域を含む抗ＣＤ３ｓｃＦｖ領域に第二Ｆｃポリペプチドが連結されたポリペプチドを含む、二重特異性抗体；
（ｂ）配列番号１０のアミノ酸番号１から１１５までのアミノ酸配列からなる重鎖可変領域を含む抗ＣＤ３７抗体の重鎖フラグメントに第一Ｆｃポリペプチドが連結された抗ＣＤ３７抗体の重鎖、配列番号１２のアミノ酸番号１から１０５までのアミノ酸配列からなる軽鎖可変領域を含む抗ＣＤ３７抗体の軽鎖、並びに、配列番号１６のアミノ酸番号１から１２５までのアミノ酸配列からなる抗ＣＤ３抗体の重鎖可変領域及び配列番号１６のアミノ酸番号１４６から２５４までのアミノ酸配列からなる抗ＣＤ３抗体の軽鎖可変領域を含む抗ＣＤ３ｓｃＦｖ領域に第二Ｆｃポリペプチドが連結されたポリペプチドを含む、二重特異性抗体；又は、
（ｃ）配列番号１０のアミノ酸番号１から１１５までのアミノ酸配列からなる重鎖可変領域を含む抗ＣＤ３７抗体の重鎖フラグメントに第一Ｆｃポリペプチドが連結された抗ＣＤ３７抗体の重鎖、配列番号１２のアミノ酸番号１から１０５までのアミノ酸配列からなる軽鎖可変領域を含む抗ＣＤ３７抗体の軽鎖、並びに、配列番号１８のアミノ酸番号１から１２５までのアミノ酸配列からなる抗ＣＤ３抗体の重鎖可変領域及び配列番号１８のアミノ酸番号１４６から２５４までのアミノ酸配列からなる抗ＣＤ３抗体の軽鎖可変領域を含む抗ＣＤ３ｓｃＦｖ領域に第二Ｆｃポリペプチドが連結されたポリペプチドを含む、二重特異性抗体。
　以下の（ａ）～（ｃ）のいずれかに記載の抗ＣＤ３７－抗ＣＤ３二重特異性抗体：
（ａ）配列番号１０のアミノ酸番号１から２１３までのアミノ酸配列からなる抗ＣＤ３７抗体の重鎖フラグメントに第一Ｆｃポリペプチドが連結された抗ＣＤ３７抗体の重鎖、配列番号１２のアミノ酸配列からなる抗ＣＤ３７抗体の軽鎖、及び配列番号１４のアミノ酸番号１から２５４までのアミノ酸配列からなる抗ＣＤ３ｓｃＦｖ領域に第二Ｆｃポリペプチドが連結されたポリペプチドを含む、二重特異性抗体；
（ｂ）配列番号１０のアミノ酸番号１から２１３までのアミノ酸配列からなる抗ＣＤ３７抗体の重鎖フラグメントに第一Ｆｃポリペプチドが連結された抗ＣＤ３７抗体の重鎖、配列番号１２のアミノ酸配列からなる抗ＣＤ３７抗体の軽鎖、及び配列番号１６のアミノ酸番号１から２５４までのアミノ酸配列からなる抗ＣＤ３ｓｃＦｖ領域に第二Ｆｃポリペプチドが連結されたポリペプチドを含む、二重特異性抗体；又は、
（ｃ）配列番号１０のアミノ酸番号１から２１３までのアミノ酸配列からなる抗ＣＤ３７抗体の重鎖フラグメントに第一Ｆｃポリペプチドが連結された抗ＣＤ３７抗体の重鎖、配列番号１２のアミノ酸配列からなる抗ＣＤ３７抗体の軽鎖、及び配列番号１８のアミノ酸番号１から２５４までのアミノ酸配列からなる抗ＣＤ３ｓｃＦｖ領域に第二Ｆｃポリペプチドが連結されたポリペプチドを含む、二重特異性抗体。
　Ｆｃ領域がノブズ・イントゥー・ホールズ（Ｋｎｏｂｓ　ｉｎｔｏ　ｈｏｌｅｓ）変異を含み、ノブズ・イントゥー・ホールズ変異が、Ｆｃ領域を形成する１つのＦｃポリペプチドにおけるＴ３６６Ｗ変異、並びにＦｃ領域を形成するもう１つのＦｃポリペプチドにおけるＴ３６６Ｓ、Ｌ３６８Ａ及びＹ４０７Ｖ変異である（ここで、前記変異位置はヒトＩｇγ１定常領域におけるＥＵインデックスに従うアミノ酸位置である）、請求項１～７のいずれか一項に記載の二重特異性抗体。
　Ｆｃ領域がＬＡＬＡ変異（Ｌ２３４Ａ及びＬ２３５Ａ）（ここで、前記変異位置はヒトＩｇγ１定常領域におけるＥＵインデックスに従うアミノ酸位置である）を含む、請求項１～８のいずれか一項に記載の二重特異性抗体。
　Ｆｃ領域がＰ３２９Ａ変異（ここで、前記変異位置はヒトＩｇγ１定常領域におけるＥＵインデックスに従うアミノ酸位置である）を含む、請求項１～９のいずれか一項に記載の二重特異性抗体。
　抗ＣＤ３７抗体のＦａｂ領域の重鎖フラグメントと第一Ｆｃポリペプチドがヒンジ領域を介して連結され、抗ＣＤ３ｓｃＦｖ領域と第二Ｆｃポリペプチドがヒンジ領域を介して連結されている、請求項１～１０のいずれか一項に記載の二重特異性抗体。
　抗ＣＤ３ｓｃＦｖ領域と第二Ｆｃポリペプチドを連結するヒンジ領域がＣ２２０Ｓ変異（ここで、前記変異位置はヒトＩｇγ１定常領域におけるＥＵインデックスに従うアミノ酸位置である）を含む、請求項１１に記載の二重特異性抗体。
　Ｆｃ領域がノブズ・イントゥー・ホールズ（Ｋｎｏｂｓ　ｉｎｔｏ　ｈｏｌｅｓ）変異、ＬＡＬＡ変異、及びＰ３２９Ａ変異を含み、抗ＣＤ３ｓｃＦｖ領域と第二Ｆｃポリペプチドを連結するヒンジ領域がＣ２２０Ｓ変異を含む（ここで、前記変異位置はヒトＩｇγ１定常領域におけるＥＵインデックスに従うアミノ酸位置である）、請求項１１又は１２に記載の二重特異性抗体。
　以下の（ａ）～（ｃ）のいずれかに記載の二重特異性抗体：
（ａ）配列番号１０のアミノ酸配列からなる抗ＣＤ３７抗体の重鎖、配列番号１２のアミノ酸配列からなる抗ＣＤ３７抗体の軽鎖、及び配列番号１４のアミノ酸配列からなる、抗ＣＤ３ｓｃＦｖ領域に第二Ｆｃポリペプチドが連結されたポリペプチドからなる、二重特異性抗体；
（ｂ）配列番号１０のアミノ酸配列からなる抗ＣＤ３７抗体の重鎖、配列番号１２のアミノ酸配列からなる抗ＣＤ３７抗体の軽鎖、及び配列番号１６のアミノ酸配列からなる、抗ＣＤ３ｓｃＦｖ領域に第二Ｆｃポリペプチドが連結されたポリペプチドからなる、二重特異性抗体；又は、
（ｃ）配列番号１０のアミノ酸配列からなる抗ＣＤ３７抗体の重鎖、配列番号１２のアミノ酸配列からなる抗ＣＤ３７抗体の軽鎖、及び配列番号１８のアミノ酸配列からなる、抗ＣＤ３ｓｃＦｖ領域に第二Ｆｃポリペプチドが連結されたポリペプチドからなる、二重特異性抗体。
　翻訳後修飾された、請求項１～１４のいずれか一項に記載の二重特異性抗体。
　翻訳後修飾が、重鎖可変領域Ｎ末端のピログルタミル化及び／又は重鎖Ｃ末端リジン欠失である、請求項１５に記載の二重特異性抗体。
　抗ＣＤ３７－抗ＣＤ３二重特異性抗体の生産に用いる、下記（ａ）～（ｐ）からなる群より選択されるポリヌクレオチド：
（ａ）配列番号１０のアミノ酸番号１から１１５までのアミノ酸配列からなる重鎖可変領域を含む抗ＣＤ３７抗体の重鎖フラグメントをコードする塩基配列を含むポリヌクレオチド；
（ｂ）配列番号１２のアミノ酸番号１から１０５までのアミノ酸配列からなる軽鎖可変領域を含む抗ＣＤ３７抗体の軽鎖をコードする塩基配列を含むポリヌクレオチド；
（ｃ）配列番号１０のアミノ酸配列からなる抗ＣＤ３７抗体の重鎖をコードする塩基配列を含むポリヌクレオチド；
（ｄ）配列番号１２のアミノ酸配列からなる抗ＣＤ３７抗体の軽鎖をコードする塩基配列を含むポリヌクレオチド；
（ｅ）配列番号１４のアミノ酸番号１から１２５までのアミノ酸配列からなる抗ＣＤ３抗体の重鎖可変領域及び配列番号１４のアミノ酸番号１４６から２５４までのアミノ酸配列からなる抗ＣＤ３抗体の軽鎖可変領域を含む抗ＣＤ３ｓｃＦｖ領域をコードする塩基配列を含むポリヌクレオチド；
（ｆ）配列番号１６のアミノ酸番号１から１２５までのアミノ酸配列からなる抗ＣＤ３抗体の重鎖可変領域及び配列番号１６のアミノ酸番号１４６から２５４までのアミノ酸配列からなる抗ＣＤ３抗体の軽鎖可変領域を含む抗ＣＤ３ｓｃＦｖ領域をコードする塩基配列を含むポリヌクレオチド；
（ｇ）配列番号１８のアミノ酸番号１から１２５までのアミノ酸配列からなる抗ＣＤ３抗体の重鎖可変領域及び配列番号１８のアミノ酸番号１４６から２５４までのアミノ酸配列からなる抗ＣＤ３抗体の軽鎖可変領域を含む抗ＣＤ３ｓｃＦｖ領域をコードする塩基配列を含むポリヌクレオチド；
（ｈ）配列番号１４のアミノ酸番号１から２５４までのアミノ酸配列からなる抗ＣＤ３ｓｃＦｖ領域をコードする塩基配列を含むポリヌクレオチド；
（ｉ）配列番号１６のアミノ酸番号１から２５４までのアミノ酸配列からなる抗ＣＤ３ｓｃＦｖ領域をコードする塩基配列を含むポリヌクレオチド；
（ｊ）配列番号１８のアミノ酸番号１から２５４までのアミノ酸配列からなる抗ＣＤ３ｓｃＦｖ領域をコードする塩基配列を含むポリヌクレオチド；
（ｋ）配列番号１４のアミノ酸番号１から１２５までのアミノ酸配列からなる抗ＣＤ３抗体の重鎖可変領域及び配列番号１４のアミノ酸番号１４６から２５４までのアミノ酸配列からなる抗ＣＤ３抗体の軽鎖可変領域を含む抗ＣＤ３ｓｃＦｖ領域に第二Ｆｃポリペプチドが連結されたポリペプチドをコードする塩基配列を含むポリヌクレオチド；
（ｌ）配列番号１６のアミノ酸番号１から１２５までのアミノ酸配列からなる抗ＣＤ３抗体の重鎖可変領域及び配列番号１６のアミノ酸番号１４６から２５４までのアミノ酸配列からなる抗ＣＤ３抗体の軽鎖可変領域を含む抗ＣＤ３ｓｃＦｖ領域に第二Ｆｃポリペプチドが連結されたポリペプチドをコードする塩基配列を含むポリヌクレオチド；
（ｍ）配列番号１８のアミノ酸番号１から１２５までのアミノ酸配列からなる抗ＣＤ３抗体の重鎖可変領域及び配列番号１８のアミノ酸番号１４６から２５４までのアミノ酸配列からなる抗ＣＤ３抗体の軽鎖可変領域を含む抗ＣＤ３ｓｃＦｖ領域に第二Ｆｃポリペプチドが連結されたポリペプチドをコードする塩基配列を含むポリヌクレオチド；
（ｎ）配列番号１４のアミノ酸配列からなる、抗ＣＤ３ｓｃＦｖ領域に第二Ｆｃポリペプチドが連結されたポリペプチドをコードする塩基配列を含むポリヌクレオチド；
（ｏ）配列番号１６のアミノ酸配列からなる、抗ＣＤ３ｓｃＦｖ領域に第二Ｆｃポリペプチドが連結されたポリペプチドをコードする塩基配列を含むポリヌクレオチド；又は、
（ｐ）配列番号１８のアミノ酸配列からなる、抗ＣＤ３ｓｃＦｖ領域に第二Ｆｃポリペプチドが連結されたポリペプチドをコードする塩基配列を含むポリヌクレオチド。
　抗ＣＤ３７－抗ＣＤ３二重特異性抗体の生産に用いる、下記（ａ）～（ｃ）からなる群より選択されるポリヌクレオチド：
（ａ）配列番号１０のアミノ酸番号１から１１５までのアミノ酸配列からなる重鎖可変領域を含む抗ＣＤ３７抗体の重鎖フラグメントに第一Ｆｃポリペプチドが連結された抗ＣＤ３７抗体の重鎖をコードする塩基配列を含むポリヌクレオチド、配列番号１２のアミノ酸番号１から１０５までのアミノ酸配列からなる軽鎖可変領域を含む抗ＣＤ３７抗体の軽鎖をコードする塩基配列を含むポリヌクレオチド、並びに、配列番号１４のアミノ酸番号１から１２５までのアミノ酸配列からなる抗ＣＤ３抗体の重鎖可変領域及び配列番号１４のアミノ酸番号１４６から２５４までのアミノ酸配列からなる抗ＣＤ３抗体の軽鎖可変領域を含む抗ＣＤ３ｓｃＦｖ領域に第二Ｆｃポリペプチドが連結されたポリペプチドをコードする塩基配列を含むポリヌクレオチド；
（ｂ）配列番号１０のアミノ酸番号１から１１５までのアミノ酸配列からなる重鎖可変領域を含む抗ＣＤ３７抗体の重鎖フラグメントに第一Ｆｃポリペプチドが連結された抗ＣＤ３７抗体の重鎖をコードする塩基配列を含むポリヌクレオチド、配列番号１２のアミノ酸番号１から１０５までのアミノ酸配列からなる軽鎖可変領域を含む抗ＣＤ３７抗体の軽鎖をコードする塩基配列を含むポリヌクレオチド、並びに、配列番号１６のアミノ酸番号１から１２５までのアミノ酸配列からなる抗ＣＤ３抗体の重鎖可変領域及び配列番号１６のアミノ酸番号１４６から２５４までのアミノ酸配列からなる抗ＣＤ３抗体の軽鎖可変領域を含む抗ＣＤ３ｓｃＦｖ領域に第二Ｆｃポリペプチドが連結されたポリペプチドをコードする塩基配列を含むポリヌクレオチド；又は、
（ｃ）配列番号１０のアミノ酸番号１から１１５までのアミノ酸配列からなる重鎖可変領域を含む抗ＣＤ３７抗体の重鎖フラグメントに第一Ｆｃポリペプチドが連結された抗ＣＤ３７抗体の重鎖をコードする塩基配列を含むポリヌクレオチド、配列番号１２のアミノ酸番号１から１０５までのアミノ酸配列からなる軽鎖可変領域を含む抗ＣＤ３７抗体の軽鎖をコードする塩基配列を含むポリヌクレオチド、並びに、配列番号１８のアミノ酸番号１から１２５までのアミノ酸配列からなる抗ＣＤ３抗体の重鎖可変領域及び配列番号１８のアミノ酸番号１４６から２５４までのアミノ酸配列からなる抗ＣＤ３抗体の軽鎖可変領域を含む抗ＣＤ３ｓｃＦｖ領域に第二Ｆｃポリペプチドが連結されたポリペプチドをコードする塩基配列を含むポリヌクレオチド。
　抗ＣＤ３７－抗ＣＤ３二重特異性抗体の生産に用いる、下記（ａ）～（ｃ）からなる群より選択されるポリヌクレオチド：
（ａ）配列番号１０のアミノ酸番号１から２１３までのアミノ酸配列からなる抗ＣＤ３７抗体の重鎖フラグメントに第一Ｆｃポリペプチドが連結された抗ＣＤ３７抗体の重鎖をコードする塩基配列を含むポリヌクレオチド、配列番号１２のアミノ酸配列からなる抗ＣＤ３７抗体の軽鎖をコードする塩基配列を含むポリヌクレオチド、及び配列番号１４のアミノ酸番号１から２５４までのアミノ酸配列からなる抗ＣＤ３ｓｃＦｖ領域に第二Ｆｃポリペプチドが連結されたポリペプチドをコードする塩基配列を含むポリヌクレオチド；
（ｂ）配列番号１０のアミノ酸番号１から２１３までのアミノ酸配列からなる抗ＣＤ３７抗体の重鎖フラグメントに第一Ｆｃポリペプチドが連結された抗ＣＤ３７抗体の重鎖をコードする塩基配列を含むポリヌクレオチド、配列番号１２のアミノ酸配列からなる抗ＣＤ３７抗体の軽鎖をコードする塩基配列を含むポリヌクレオチド、及び配列番号１６のアミノ酸番号１から２５４までのアミノ酸配列からなる抗ＣＤ３ｓｃＦｖ領域に第二Ｆｃポリペプチドが連結されたポリペプチドをコードする塩基配列を含むポリヌクレオチド；又は、
（ｃ）配列番号１０のアミノ酸番号１から２１３までのアミノ酸配列からなる抗ＣＤ３７抗体の重鎖フラグメントに第一Ｆｃポリペプチドが連結された抗ＣＤ３７抗体の重鎖をコードする塩基配列を含むポリヌクレオチド、配列番号１２のアミノ酸配列からなる抗ＣＤ３７抗体の軽鎖をコードする塩基配列を含むポリヌクレオチド、及び配列番号１８のアミノ酸番号１から２５４までのアミノ酸配列からなる抗ＣＤ３ｓｃＦｖ領域に第二Ｆｃポリペプチドが連結されたポリペプチドをコードする塩基配列を含むポリヌクレオチド。
　抗ＣＤ３７－抗ＣＤ３二重特異性抗体の生産に用いる、下記（ａ）～（ｃ）からなる群より選択されるポリヌクレオチド：
（ａ）配列番号１０のアミノ酸配列からなる抗ＣＤ３７抗体の重鎖をコードする塩基配列を含むポリヌクレオチド、配列番号１２のアミノ酸配列からなる抗ＣＤ３７抗体の軽鎖をコードする塩基配列を含むポリヌクレオチド、及び配列番号１４のアミノ酸配列からなる、抗ＣＤ３ｓｃＦｖ領域に第二Ｆｃポリペプチドが連結されたポリペプチドをコードする塩基配列を含むポリヌクレオチド；
（ｂ）配列番号１０のアミノ酸配列からなる抗ＣＤ３７抗体の重鎖をコードする塩基配列を含むポリヌクレオチド、配列番号１２のアミノ酸配列からなる抗ＣＤ３７抗体の軽鎖をコードする塩基配列を含むポリヌクレオチド、及び配列番号１６のアミノ酸配列からなる、抗ＣＤ３ｓｃＦｖ領域に第二Ｆｃポリペプチドが連結されたポリペプチドをコードする塩基配列を含むポリヌクレオチド；又は、
（ｃ）配列番号１０のアミノ酸配列からなる抗ＣＤ３７抗体の重鎖をコードする塩基配列を含むポリヌクレオチド、配列番号１２のアミノ酸配列からなる抗ＣＤ３７抗体の軽鎖をコードする塩基配列を含むポリヌクレオチド、及び配列番号１８のアミノ酸配列からなる、抗ＣＤ３ｓｃＦｖ領域に第二Ｆｃポリペプチドが連結されたポリペプチドをコードする塩基配列を含むポリヌクレオチド。
　請求項１７～２０のいずれか一項に記載のポリヌクレオチドを含む、発現ベクター。
　請求項２１に記載の発現ベクターで形質転換された、宿主細胞。
　請求項１７～２０のいずれか一項に記載のポリヌクレオチドを含む、宿主細胞。
　抗ＣＤ３７－抗ＣＤ３二重特異性抗体の生産方法であって、請求項２２又は２３に記載の宿主細胞を培養する工程を含む、生産方法。
　請求項１～１６のいずれか一項に記載の二重特異性抗体及び薬学的に許容される賦形剤を含む、医薬組成物。
　がんの治療のための、請求項１～１６のいずれか一項に記載の二重特異性抗体。
　がんの治療のための、請求項２５に記載の医薬組成物。
　請求項１～１６のいずれか一項に記載の二重特異性抗体の治療有効量を対象に投与する工程を含む、がんを治療する方法。
　がんの治療のための医薬組成物の製造における、請求項１～１６のいずれか一項に記載の二重特異性抗体の使用。