WO2023132348A1 - 急性呼吸窮迫症候群を診断するための試薬および方法 - Google Patents

急性呼吸窮迫症候群を診断するための試薬および方法 Download PDF

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    • G01N33/53—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor

Definitions

  • a reagent for use in diagnosing acute respiratory distress syndrome, evaluating severity, predicting onset or aggravation, or evaluating risk of onset or aggravation A reagent comprising an antibody or antigen-binding fragment thereof to a complex bound to a neutrophil-derived protein or its corresponding binding molecule.
  • a method for diagnosing acute respiratory distress syndrome, evaluating its severity, predicting its onset or aggravation, or evaluating its onset risk or aggravation risk comprising: (1) contacting a sample with an antibody or antigen-binding fragment thereof against a complex bound to a neutrophil-derived protein or its corresponding binding molecule; (2) a method comprising measuring the state of binding between the neutrophil-derived protein or its corresponding binding molecule-bound complex and the antibody or antigen-binding fragment thereof; [3-2]
  • the neutrophil-derived protein is at least one selected from the group consisting of neutrophil elastase, azurocidin, lactoferrin, myeloperoxidase, and pepdylarginine deiminase 4, [3-1 ] The method described in .
  • the method for measuring the binding state is enzyme immunoassay, fluorescence enzyme immunoassay, chemiluminescence enzyme immunoassay, chemiluminescence immunoassay, electrochemiluminescence immunoassay, fluorescent antibody method, radio At least one immunoassay method selected from the group consisting of immunoassay, western blotting, immunoblotting, latex agglutination, immunochromatography, and nephelometry [4-1] to [4] -6].
  • the reagent for immunoassay is an enzyme immunoassay, a fluorescence enzyme immunoassay, a chemiluminescence enzyme immunoassay, a chemiluminescence immunoassay, an electrochemiluminescence immunoassay, a fluorescent antibody method, A reagent for use in at least one immunoassay method selected from the group consisting of radioimmunoassay, western blotting, immunoblotting, latex agglutination, immunochromatography, and nephelometry, [6 -7].
  • a method for evaluating the severity of a coronavirus infection, predicting its aggravation, or evaluating its aggravation risk comprising: (1) contacting a sample with an antibody or antigen-binding fragment thereof against a complex bound to a neutrophil-derived protein or its corresponding binding molecule; (2) a method comprising measuring the state of binding between the neutrophil-derived protein or its corresponding binding molecule-bound complex and the antibody or antigen-binding fragment thereof; [8-2]
  • the neutrophil-derived protein is at least one selected from the group consisting of neutrophil elastase, azurocidin, lactoferrin, myeloperoxidase, and pepdylarginine deiminase 4 [8-1 ] The method described in .
  • the above reagent can be used for predicting the severity of coronavirus infection, assisting the prediction, collecting data for the prediction, and the like.
  • the present invention provides, as one embodiment, a method for detecting or quantifying a complex bound to a neutrophil-derived protein or its corresponding binding molecule in a sample derived from a subject suffering from coronavirus infection, , (1) contacting a sample with an antibody or antigen-binding fragment thereof against a complex bound to a neutrophil-derived protein or its corresponding binding molecule; (2) a method comprising measuring the binding state of a complex bound to the neutrophil-derived protein or its corresponding binding molecule and the antibody or antigen-binding fragment thereof; Samples used in the method include reagents used for evaluating the severity of coronavirus infection and samples to be measured by the method.
  • the antibodies used in the method are the same as the reagents and methods used in the evaluation of the severity of coronavirus infection, etc., and may be of one type or two or more types.
  • the method can be performed using one or more of the above reagents used for evaluating the severity of coronavirus infection.
  • steps (1) and (2) in the method are the same as steps (1) and (2) in the method for evaluating the severity of coronavirus infection.
  • Example 1 Blood samples were collected from SARS-CoV-2-positive patients shown in Table 1 below, and plasma was prepared according to a standard method.
  • antibody-producing cells were collected from the spleen and fused with myeloma (P3X63Ag8.653, ECACC). Cell fusion was performed by the PEG method, and the fused cells were seeded on culture plates. After that, it was cultured in a carbon dioxide gas incubator at 37°C. Next, the hybridoma culture supernatant was collected, and the antibody titer was confirmed using the reactivity with human leukocyte-derived purified elastase as an index. Then, cells of antibody-producing clones were subcultured, and cloning was performed by the limiting dilution method.
  • antibody A which is an anti-human neutrophil elastase monoclonal antibody
  • antibody B which is an anti-human A1AT antibody

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Abstract

本発明は、急性呼吸窮迫症候群の診断、重症度の評価、発症もしくは重症化の予測、または発症リスクもしくは重症化リスクの評価に用いるための試薬であって、好中球由来のタンパク質またはその対応する結合分子と結合した複合体に対する抗体またはその抗原結合フラグメントを含む、試薬に関する。

Description

急性呼吸窮迫症候群を診断するための試薬および方法
　本特許出願は、日本国特許出願第２０２２－００１６４６号について優先権を主張するものであり、ここに参照することによって、その全体が本明細書中へ組み込まれるものとする。
　本発明は、急性呼吸窮迫症候群（ＡＲＤＳ）を診断するための試薬および方法に関する。
　急性呼吸促迫症候群（Ａｃｕｔｅ　Ｒｅｓｐｉｒａｔｏｒｙ　Ｄｉｓｔｒｅｓｓ　Ｓｙｎｄｒｏｍｅ、以下、「ＡＲＤＳ」）は、先行する基礎疾患をもち、急性に発症した低酸素血症で、胸部Ｘ線写真上では両側性の肺浸潤影を認め、かつその原因が心不全、腎不全、血管内水分過剰のみでは説明できない病態の総称である。先行する基礎疾患とは、呼吸器症状の出現または悪化から１週間以内の疾患で、肺の直接損傷と間接損傷の２つに大別される。直接損傷としては、肺炎や誤嚥、間接損傷としては、敗血症、外傷などがあげられる。現在、診断には、２０１２年に提唱されたＢｅｒｌｉｎ定義が用いられている。すなわち（１）急性発症、（２）胸部画像上の両側性陰影、（３）左心不全のみで病態を説明できないこと、（４）低酸素血症、これら４項目全て満たされていることを持って診断されている。ただし、この定義は、臨床的、放射線学的、及び生理学的な要素を経験的にまとめられたものであり、ＡＲＤＳの典型的な病理像であるびまん性肺傷害（ｄｉｆｆｕｓｅ　ａｌｖｅｏｌａｒ　ｄａｍａｇｅ；ＤＡＤ）を示さない呼吸不全が含まれてしまう可能性がある。したがって、病理像を非侵襲的に把握可能なバイオマーカーが求められている。ＡＲＤＳに関するバイオマーカーとしては、（１）簡便かつ繰り返して測定することができること、（２）ＡＲＤＳ発症例で予後予測の指標となること、（３）多発外傷や敗血症などのリスク患者においてＡＲＤＳの発症を予測できること、（４）ＡＲＤＳと他疾患を鑑別できることなどが求められている。しかし、現在までこれらを満足し臨床応用されているものはない。
　ＡＲＤＳについて、特許文献１は、患者の呼気中のｎ－オクタンの含有量に基づき、患者がＡＲＤＳを有するか、またはＡＲＤＳを発症する恐れがあるかどうかを区別する方法を開示している。
　一方、特許文献２は、重症化するとＡＲＤＳを発症させ得るＣＯＶＩＤ－１９について、尿を検体として使用可能なＣＯＶＩＤ－１９感染者の重症化リスクを検査する方法を開示している。
ＷＯ　２０１５／１２４４６８　Ａ１ ＷＯ　２０２１／２５５９００　Ａ１
　本発明の目的は、急性呼吸窮迫症候群（ＡＲＤＳ）を診断、その重症度を評価、その発症もしくは重症化を予測、またはその発症リスクもしくは重症化リスクを評価するための試薬および方法を提供することである。
　また、本発明の別の目的は、コロナウイルス感染症の重症度を評価、その重症化を予測、またはその重症化リスクを評価するための試薬および方法を提供することである。
　本発明者らは、上記課題を解決するため鋭意検討した結果、好中球由来のタンパク質の血中濃度が、ＡＲＤＳの発症およびコロナウイルス感染症の重症化と相関しており、ＡＲＤＳの発症およびコロナウイルス感染症の重症化のリスクが高いほど高値となり得ることを見出し、本発明を完成した。
　すなわち、本発明は、以下の態様を含む。
［１－１］　急性呼吸窮迫症候群の診断、重症度の評価、発症もしくは重症化の予測、または発症リスクもしくは重症化リスクの評価に用いるための試薬であって、
　好中球由来のタンパク質またはその対応する結合分子と結合した複合体に対する抗体またはその抗原結合フラグメントを含む、試薬。
［１－２］　前記好中球由来のタンパク質が、好中球エラスターゼ、アズロシジン、ラクトフェリン、ミエロペルオキシダーゼ、およびペプジルアルギニン・デイミナーゼ４からなる群から選択される少なくとも１種である、［１－１］に記載の試薬。
［１－３］　前記好中球由来のタンパク質が、好中球エラスターゼである、［１－２］に記載の試薬。
［１－４］　前記急性呼吸窮迫症候群が、ウイルス感染症、細菌感染症、敗血症、および臓器損傷からなる群から選択される少なくとも１種に関連する、［１－１］～［１－３］のいずれかに記載の試薬。
［１－５］　前記ウイルス感染症が、コロナウイルス感染症、インフルエンザウイルス感染症、ＲＳウイルス感染症、およびサイトメガロウイルス感染症からなる群から選択される少なくとも１種に関連する、［１－４］に記載の試薬。
［１－６］　前記コロナウイルス感染症が、ＣＯＶＩＤ－１９である、［１－５］に記載の試薬。
［１－７］　前記試薬が、免疫学的測定用試薬である、［１－１］～［１－６］のいずれかに記載の試薬。
［１－８］　前記免疫学的測定用試薬が、酵素免疫測定法、蛍光酵素免疫測定法、化学発光酵素免疫測定法、化学発光免疫測定法、電気化学発光測免疫測定法、蛍光抗体法、ラジオイムノアッセイ、ウェスタンブロット法、イムノブロット法、ラテックス凝集法、イムノクロマトグラフィー法、およびネフェロメトリー法からなる群から選択される少なくとも１種の免疫学的測定法に用いるための試薬である、［１－７］に記載の試薬。
［２－１］　急性呼吸窮迫症候群を診断、その重症度を評価、その発症もしくは重症化を予測、またはその発症リスクもしくは重症化リスクを評価するための方法であって、
（１）試料と、好中球由来のタンパク質またはその対応する結合分子と結合した複合体に対する抗体またはその抗原結合フラグメントを接触させること、
（２）該好中球由来のタンパク質またはその対応する結合分子と結合した複合体と、該抗体またはその抗原結合フラグメントとの結合状態を測定すること
を含む、方法。
［２－２］　前記好中球由来のタンパク質が、好中球エラスターゼ、アズロシジン、ラクトフェリン、ミエロペルオキシダーゼ、およびペプジルアルギニン・デイミナーゼ４からなる群から選択される少なくとも１種である、［２－１］に記載の方法。
［２－３］　前記好中球由来のタンパク質が、好中球エラスターゼである、［２－２］に記載の方法。
［２－４］　前記急性呼吸窮迫症候群が、ウイルス感染症、細菌感染症、敗血症、および臓器損傷からなる群から選択される少なくとも１種に関連する、［２－１］～［２－３］のいずれかに記載の方法。
［２－５］　前記ウイルス感染症が、コロナウイルス感染症、インフルエンザウイルス感染症、ＲＳウイルス感染症、およびサイトメガロウイルス感染症からなる群から選択される少なくとも１種に関連する、［２－４］に記載の方法。
［２－６］　前記コロナウイルス感染症が、ＣＯＶＩＤ－１９である、［２－５］に記載の方法。
［２－７］　前記結合状態の測定方法が、酵素免疫測定法、蛍光酵素免疫測定法、化学発光酵素免疫測定法、化学発光免疫測定法、電気化学発光測免疫測定法、蛍光抗体法、ラジオイムノアッセイ、ウェスタンブロット法、イムノブロット法、ラテックス凝集法、イムノクロマトグラフィー法、およびネフェロメトリー法からなる群から選択される少なくとも１種の免疫学的測定法である、［２－１］～［２－６］のいずれかに記載の方法。
［３－１］　急性呼吸窮迫症候群の診断、その重症度の評価、その発症もしくは重症化の予測、またはその発症リスクもしくは重症化リスクの評価を補助する方法であって、
（１）試料と、好中球由来のタンパク質またはその対応する結合分子と結合した複合体に対する抗体またはその抗原結合フラグメントを接触させること、
（２）該好中球由来のタンパク質またはその対応する結合分子と結合した複合体と、該抗体またはその抗原結合フラグメントとの結合状態を測定すること
を含む、方法。
［３－２］　前記好中球由来のタンパク質が、好中球エラスターゼ、アズロシジン、ラクトフェリン、ミエロペルオキシダーゼ、およびペプジルアルギニン・デイミナーゼ４からなる群から選択される少なくとも１種である、［３－１］に記載の方法。
［３－３］　前記好中球由来のタンパク質が、好中球エラスターゼである、［３－２］に記載の方法。
［３－４］　前記急性呼吸窮迫症候群が、ウイルス感染症、細菌感染症、敗血症、および臓器損傷からなる群から選択される少なくとも１種に関連する、［３－１］～［３－３］のいずれかに記載の方法。
［３－５］　前記ウイルス感染症が、コロナウイルス感染症、インフルエンザウイルス感染症、ＲＳウイルス感染症、およびサイトメガロウイルス感染症からなる群から選択される少なくとも１種に関連する、［３－４］に記載の方法。
［３－６］　前記コロナウイルス感染症が、ＣＯＶＩＤ－１９である、［３－５］に記載の方法。
［３－７］　前記結合状態の測定方法が、酵素免疫測定法、蛍光酵素免疫測定法、化学発光酵素免疫測定法、化学発光免疫測定法、電気化学発光測免疫測定法、蛍光抗体法、ラジオイムノアッセイ、ウェスタンブロット法、イムノブロット法、ラテックス凝集法、イムノクロマトグラフィー法、およびネフェロメトリー法からなる群から選択される少なくとも１種の免疫学的測定法である、［３－１］～［３－６］のいずれかに記載の方法。
［４－１］　急性呼吸窮迫症候群を診断、その重症度を評価、その発症もしくは重症化を予測、またはその発症リスクもしくは重症化リスクを評価するためのデータの収集方法であって、
（１）試料と、好中球由来のタンパク質またはその対応する結合分子と結合した複合体に対する抗体またはその抗原結合フラグメントを接触させること、
（２）該好中球由来のタンパク質またはその対応する結合分子と結合した複合体と、該抗体またはその抗原結合フラグメントとの結合状態を測定すること
を含む、方法。
［４－２］　前記好中球由来のタンパク質が、好中球エラスターゼ、アズロシジン、ラクトフェリン、ミエロペルオキシダーゼ、およびペプジルアルギニン・デイミナーゼ４からなる群から選択される少なくとも１種である、［４－１］に記載の方法。
［４－３］　前記好中球由来のタンパク質が、好中球エラスターゼである、［４－２］に記載の方法。
［４－４］　前記急性呼吸窮迫症候群が、ウイルス感染症、細菌感染症、敗血症、および臓器損傷からなる群から選択される少なくとも１種に関連する、［４－１］～［４－３］のいずれかに記載の方法。
［４－５］　前記ウイルス感染症が、コロナウイルス感染症、インフルエンザウイルス感染症、ＲＳウイルス感染症、およびサイトメガロウイルス感染症からなる群から選択される少なくとも１種に関連する、［４－４］に記載の方法。
［４－６］　前記コロナウイルス感染症が、ＣＯＶＩＤ－１９である、［４－５］に記載の方法。
［４－７］　前記結合状態の測定方法が、酵素免疫測定法、蛍光酵素免疫測定法、化学発光酵素免疫測定法、化学発光免疫測定法、電気化学発光測免疫測定法、蛍光抗体法、ラジオイムノアッセイ、ウェスタンブロット法、イムノブロット法、ラテックス凝集法、イムノクロマトグラフィー法、およびネフェロメトリー法からなる群から選択される少なくとも１種の免疫学的測定法である、［４－１］～［４－６］のいずれかに記載の方法。
［５－１］　急性呼吸窮迫症候群に罹患しているか、または罹患するリスクがある被験者に由来する試料中の好中球由来のタンパク質またはその対応する結合分子と結合した複合体を検出または定量する方法であって、
（１）試料と、好中球由来のタンパク質またはその対応する結合分子と結合した複合体に対する抗体またはその抗原結合フラグメントを接触させること、
（２）該好中球由来のタンパク質またはその対応する結合分子と結合した複合体と、該抗体またはその抗原結合フラグメントとの結合状態を測定すること
を含む、方法。
［５－２］　前記好中球由来のタンパク質が、好中球エラスターゼ、アズロシジン、ラクトフェリン、ミエロペルオキシダーゼ、およびペプジルアルギニン・デイミナーゼ４からなる群から選択される少なくとも１種である、［５－１］に記載の方法。
［５－３］　前記好中球由来のタンパク質が、好中球エラスターゼである、［５－２］に記載の方法。
［５－４］　前記急性呼吸窮迫症候群が、ウイルス感染症、細菌感染症、敗血症、および臓器損傷からなる群から選択される少なくとも１種に関連する、［５－１］～［５－３］のいずれかに記載の方法。
［５－５］　前記ウイルス感染症が、コロナウイルス感染症、インフルエンザウイルス感染症、ＲＳウイルス感染症、およびサイトメガロウイルス感染症からなる群から選択される少なくとも１種に関連する、［５－４］に記載の方法。
［５－６］　前記コロナウイルス感染症が、ＣＯＶＩＤ－１９である、［５－５］に記載の方法。
［５－７］　前記結合状態の測定方法が、酵素免疫測定法、蛍光酵素免疫測定法、化学発光酵素免疫測定法、化学発光免疫測定法、電気化学発光測免疫測定法、蛍光抗体法、ラジオイムノアッセイ、ウェスタンブロット法、イムノブロット法、ラテックス凝集法、イムノクロマトグラフィー法、およびネフェロメトリー法からなる群から選択される少なくとも１種の免疫学的測定法である、［５－１］～［５－６］のいずれかに記載の方法。
［６－１］　急性呼吸窮迫症候群を診断、その重症度を評価、その発症もしくは重症化を予測、またはその発症リスクもしくは重症化リスクを評価するための試薬を製造するための、好中球由来のタンパク質またはその対応する結合分子と結合した複合体に対する抗体またはその抗原結合フラグメントの使用。
［６－２］　前記好中球由来のタンパク質が、好中球エラスターゼ、アズロシジン、ラクトフェリン、ミエロペルオキシダーゼ、およびペプジルアルギニン・デイミナーゼ４からなる群から選択される少なくとも１種である、［６－１］に記載の使用。
［６－３］　前記好中球由来のタンパク質が、好中球エラスターゼである、［６－２］に記載の使用。
［６－４］　前記急性呼吸窮迫症候群が、ウイルス感染症、細菌感染症、敗血症、および臓器損傷からなる群から選択される少なくとも１種に関連する、［６－１］～［６－３］のいずれかに記載の使用。
［６－５］　前記ウイルス感染症が、コロナウイルス感染症、インフルエンザウイルス感染症、ＲＳウイルス感染症、およびサイトメガロウイルス感染症からなる群から選択される少なくとも１種に関連する、［６－４］に記載の使用。
［６－６］　前記コロナウイルス感染症が、ＣＯＶＩＤ－１９である、［６－５］に記載の使用。
［６－７］　前記試薬が、免疫学的測定用試薬である、［６－１］～［６－６］のいずれかに記載の使用。
［６－８］　前記免疫学的測定用試薬が、酵素免疫測定法、蛍光酵素免疫測定法、化学発光酵素免疫測定法、化学発光免疫測定法、電気化学発光測免疫測定法、蛍光抗体法、ラジオイムノアッセイ、ウェスタンブロット法、イムノブロット法、ラテックス凝集法、イムノクロマトグラフィー法、およびネフェロメトリー法からなる群から選択される少なくとも１種の免疫学的測定法に用いるための試薬である、［６－７］に記載の使用。
［７－１］　コロナウイルス感染症の重症度の評価、重症化の予測、または重症化リスクの評価に用いるための試薬であって、
　好中球由来のタンパク質またはその対応する結合分子と結合した複合体に対する抗体またはその抗原結合フラグメントを含む、試薬。
［７－２］　前記好中球由来のタンパク質が、好中球エラスターゼ、アズロシジン、ラクトフェリン、ミエロペルオキシダーゼ、およびペプジルアルギニン・デイミナーゼ４からなる群から選択される少なくとも１種である、［７－１］に記載の試薬。
［７－３］　前記好中球由来のタンパク質が、好中球エラスターゼである、［７－２］に記載の試薬。
［７－４］　前記コロナウイルス感染症が、ＣＯＶＩＤ－１９である、［７－１］～［７－３］のいずれかに記載の試薬。
［７－５］　前記試薬が、免疫学的測定用試薬である、［７－１］～［７－４］のいずれかに記載の試薬。
［７－６］　前記免疫学的測定用試薬が、酵素免疫測定法、蛍光酵素免疫測定法、化学発光酵素免疫測定法、化学発光免疫測定法、電気化学発光測免疫測定法、蛍光抗体法、ラジオイムノアッセイ、ウェスタンブロット法、イムノブロット法、ラテックス凝集法、イムノクロマトグラフィー法、およびネフェロメトリー法からなる群から選択される少なくとも１種の免疫学的測定法に用いるための試薬である、［７－５］に記載の試薬。
［８－１］　コロナウイルス感染症の重症度を評価、その重症化を予測、またはその重症化リスクを評価するための方法であって、
（１）試料と、好中球由来のタンパク質またはその対応する結合分子と結合した複合体に対する抗体またはその抗原結合フラグメントを接触させること、
（２）該好中球由来のタンパク質またはその対応する結合分子と結合した複合体と、該抗体またはその抗原結合フラグメントとの結合状態を測定すること
を含む、方法。
［８－２］　前記好中球由来のタンパク質が、好中球エラスターゼ、アズロシジン、ラクトフェリン、ミエロペルオキシダーゼ、およびペプジルアルギニン・デイミナーゼ４からなる群から選択される少なくとも１種である、［８－１］に記載の方法。
［８－３］　前記好中球由来のタンパク質が、好中球エラスターゼである、［８－２］に記載の方法。
［８－４］　前記コロナウイルス感染症が、ＣＯＶＩＤ－１９である、［８－１］～［８－３］のいずれかに記載の方法。
［８－５］　前記結合状態の測定方法が、酵素免疫測定法、蛍光酵素免疫測定法、化学発光酵素免疫測定法、化学発光免疫測定法、電気化学発光測免疫測定法、蛍光抗体法、ラジオイムノアッセイ、ウェスタンブロット法、イムノブロット法、ラテックス凝集法、イムノクロマトグラフィー法、およびネフェロメトリー法からなる群から選択される少なくとも１種の免疫学的測定法である、［８－１］～［８－５］のいずれかに記載の方法。
［９－１］　コロナウイルス感染症の重症度の評価、その重症化の予測、またはその重症化リスクの評価を補助する方法であって、
（１）試料と、好中球由来のタンパク質またはその対応する結合分子と結合した複合体に対する抗体またはその抗原結合フラグメントを接触させること、
（２）該好中球由来のタンパク質またはその対応する結合分子と結合した複合体と、該抗体またはその抗原結合フラグメントとの結合状態を測定すること
を含む、方法。
［９－２］　前記好中球由来のタンパク質が、好中球エラスターゼ、アズロシジン、ラクトフェリン、ミエロペルオキシダーゼ、およびペプジルアルギニン・デイミナーゼ４からなる群から選択される少なくとも１種である、［９－１］に記載の方法。
［９－３］　前記好中球由来のタンパク質が、好中球エラスターゼである、［９－２］に記載の方法。
［９－４］　前記コロナウイルス感染症が、ＣＯＶＩＤ－１９である、［９－１］～［９－３］のいずれかに記載の方法。
［９－５］　前記結合状態の測定方法が、酵素免疫測定法、蛍光酵素免疫測定法、化学発光酵素免疫測定法、化学発光免疫測定法、電気化学発光測免疫測定法、蛍光抗体法、ラジオイムノアッセイ、ウェスタンブロット法、イムノブロット法、ラテックス凝集法、イムノクロマトグラフィー法、およびネフェロメトリー法からなる群から選択される少なくとも１種の免疫学的測定法である、［９－１］～［９－５］のいずれかに記載の方法。
［１０－１］　コロナウイルス感染症の重症度を評価、その重症化を予測、またはその重症化リスクを評価するためのデータの収集方法であって、
（１）試料と、好中球由来のタンパク質またはその対応する結合分子と結合した複合体に対する抗体またはその抗原結合フラグメントを接触させること、
（２）該好中球由来のタンパク質またはその対応する結合分子と結合した複合体と、該抗体またはその抗原結合フラグメントとの結合状態を測定すること
を含む、方法。
［１０－２］　前記好中球由来のタンパク質が、好中球エラスターゼ、アズロシジン、ラクトフェリン、ミエロペルオキシダーゼ、およびペプジルアルギニン・デイミナーゼ４からなる群から選択される少なくとも１種である、［１０－１］に記載の方法。
［１０－３］　前記好中球由来のタンパク質が、好中球エラスターゼである、［１０－２］に記載の方法。
［１０－４］　前記コロナウイルス感染症が、ＣＯＶＩＤ－１９である、［１０－１］～［１０－３］のいずれかに記載の方法。
［１０－５］　前記結合状態の測定方法が、酵素免疫測定法、蛍光酵素免疫測定法、化学発光酵素免疫測定法、化学発光免疫測定法、電気化学発光測免疫測定法、蛍光抗体法、ラジオイムノアッセイ、ウェスタンブロット法、イムノブロット法、ラテックス凝集法、イムノクロマトグラフィー法、およびネフェロメトリー法からなる群から選択される少なくとも１種の免疫学的測定法である、［１０－１］～［１０－５］のいずれかに記載の方法。
［１１－１］　コロナウイルス感染に罹患している被験者に由来する試料中の好中球由来のタンパク質またはその対応する結合分子と結合した複合体を検出または定量する方法であって、
（１）試料と、好中球由来のタンパク質またはその対応する結合分子と結合した複合体に対する抗体またはその抗原結合フラグメントを接触させること、
（２）該好中球由来のタンパク質またはその対応する結合分子と結合した複合体と、該抗体またはその抗原結合フラグメントとの結合状態を測定すること
を含む、方法。
［１１－２］　前記好中球由来のタンパク質が、好中球エラスターゼ、アズロシジン、ラクトフェリン、ミエロペルオキシダーゼ、およびペプジルアルギニン・デイミナーゼ４からなる群から選択される少なくとも１種である、［１１－１］に記載の方法。
［１１－３］　前記好中球由来のタンパク質が、好中球エラスターゼである、［１１－２］に記載の方法。
［１１－４］　前記コロナウイルス感染症が、ＣＯＶＩＤ－１９である、［１１－１］～［１１－３］のいずれかに記載の方法。
［１１－５］　前記結合状態の測定方法が、酵素免疫測定法、蛍光酵素免疫測定法、化学発光酵素免疫測定法、化学発光免疫測定法、電気化学発光測免疫測定法、蛍光抗体法、ラジオイムノアッセイ、ウェスタンブロット法、イムノブロット法、ラテックス凝集法、イムノクロマトグラフィー法、およびネフェロメトリー法からなる群から選択される少なくとも１種の免疫学的測定法である、［１１－１］～［１１－５］のいずれかに記載の方法。
［１２－１］　コロナウイルス感染症の重症度の評価、重症化の予測、または重症化リスクの評価に用いるための試薬を製造するための、好中球由来のタンパク質またはその対応する結合分子と結合した複合体に対する抗体またはその抗原結合フラグメントの使用。
［１２－２］　前記好中球由来のタンパク質が、好中球エラスターゼ、アズロシジン、ラクトフェリン、ミエロペルオキシダーゼ、およびペプジルアルギニン・デイミナーゼ４からなる群から選択される少なくとも１種である、［１２－１］に記載の試薬。
［１２－３］　前記好中球由来のタンパク質が、好中球エラスターゼである、［１２－２］に記載の使用。
［１２－４］　前記コロナウイルス感染症が、ＣＯＶＩＤ－１９である、［１２－１］～［１２－３］のいずれかに記載の使用。
［１２－５］　前記試薬が、免疫学的測定用試薬である、［１２－１］～［１２－４］のいずれかに記載の使用。
［１２－６］　前記免疫学的測定用試薬が、酵素免疫測定法、蛍光酵素免疫測定法、化学発光酵素免疫測定法、化学発光免疫測定法、電気化学発光測免疫測定法、蛍光抗体法、ラジオイムノアッセイ、ウェスタンブロット法、イムノブロット法、ラテックス凝集法、イムノクロマトグラフィー法、およびネフェロメトリー法からなる群から選択される少なくとも１種の免疫学的測定法に用いるための試薬である、［１２－５］に記載の使用。
　本発明によれば、ＡＲＤＳを診断、その重症度を評価、その発症もしくは重症化を予測、またはその発症リスクもしくは重症化リスクを評価することができるので、特に、ＡＲＤＳの発症起点、ＡＲＤＳの発症を早期に予測することができる。
　また、本発明によれば、コロナウイルス感染症の重症度の評価、またはその重症化を予測することができるので、特に、コロナウイルス感染症の重症化を早期に予測することができる。
図１は、実施例１で測定した正常者およびＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２陽性患者における血漿中の好中球エラスターゼ濃度を示す。 図２は、実施例１で測定した正常者およびＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２陽性患者における血漿中の好中球アズロシジン濃度を示す。 図３は、実施例１で測定した正常者およびＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２陽性患者における血漿中の好中球ラクトフェリン濃度を示す。 図４は、実施例２で構築した好中球エラスターゼＥＬＩＳＡ測定系における標準曲線を示す。 図５は、実施例３において、実施例２で構築した試薬を用いて測定した各血漿検体中の好中球エラスターゼ濃度を示す。 図６は、実施例５において、実施例４で構築した試薬を用いて測定した各血漿検体中の好中球エラスターゼ濃度を示す。
　本明細書における「好中球」は、細胞質顆粒内にミエロペルオキシダーゼ（ＭＰＯ）、好中球エラスターゼ、カテプシンＧなどのタンパク質分解酵素を有し、刺激に応じて病原体の貪食、脱顆粒、活性酸素種（ＲＯＳ）や炎症性サイトカインの産生を介して病原体の除去を行う細胞を意味する。好中球の重要な生体防御機能として、好中球細胞外トラップ（ｎｅｕｔｒｏｐｈｉｌ　ｅｘｔｒａｃｅｌｌｕｌａｒ　ｔｒａｐｓ：ＮＥＴｓ）が知られている。
　本明細書における「好中球由来のタンパク質」は、好中球から血液中に放出されたタンパク質を意味する。例えば、ＮＥＴｓにより体内に放出されたタンパク質が挙げられ、具体的には、好中球エラスターゼ、アズロシジン、ラクトフェリン、ミエロペルオキシダーゼ、ペプジルアルギニン・デイミナーゼ４（Ｐｅｐｔｉｄｙｌａｒｇｉｎｉｎｅ　ｄｅｉｍｉｎａｓｅ４、以下、「ＰＡＤ４」とも称する）などが挙げられる。好ましくは、好中球エラスターゼ、アズロシジン、ラクトフェリンが挙げられる。
　また、本明細書における「好中球由来のタンパク質の対応する結合分子と結合した複合体」は、上記「好中球由来のタンパク質」に、その対応する結合分子が結合した複合体を意味する。
　上記複合体の具体例としては、例えば、好中球エラスターゼと、α１アンチトリプシン（Ａ１ＡＴ）、α１アンチキモトリプシン（ＡＣＴ）、またはα２マクログロブリン（Ａ２Ｍ）との複合体が挙げられ、特に好中球エラスターゼと、α１アンチトリプシン（Ａ１ＡＴ）またはα１アンチキモトリプシン（ＡＣＴ）との複合体が挙げられる。
　以下、特に言及しない限り、「好中球由来のタンパク質」および「好中球由来のタンパク質の対応する結合分子と結合した複合体」を、まとめて「好中球由来のタンパク質」と称する。
　本明細書における「好中球由来のタンパク質またはその対応する結合分子と結合した複合体に対する抗体またはその抗原結合フラグメント」は、上記好中球由来のタンパク質またはその対応する結合分子と結合した複合体に特異的結合能を有するものであれば特に限定されない。
　ここで、「好中球由来のタンパク質」に特異的結合能を有する抗体またはその抗原結合フラグメントとしては、好中球由来のタンパク質の一部をエピトープとして認識して結合可能である抗体またはそのフラグメントなどが挙げられる。
　また、好中球由来のタンパク質と結合分子との「複合体」に特異的結合能を有する抗体またはその抗原結合フラグメントとしては、複合体の状態で表面に表れている好中球由来のタンパク質の一部をエピトープとして認識して結合可能である抗体またはその抗原結合フラグメント、結合分子の一部をエピトープの一部または全部として認識して結合可能である抗体またはその抗原結合フラグメントなどが挙げられる。
　上記「抗体」は、モノクローナル抗体でも、ポリクローナル抗体でもよい。また、当該抗体は、市販品でもよく、好中球由来のタンパク質またはその一部分を抗原として用いて細胞融合技術、遺伝子組換え技術、ファージディスプレイ等の既知の方法にしたがって生産したものでもよい。
　また、上記「抗体の抗原結合フラグメント」は、上記抗体のフラグメントであって、好中球由来のタンパク質に結合能を有するフラグメントを意味し、例えば、上記抗体をパパイン等で部分分解して得られるＦａｂフラグメント、ペプシン等で部分分解して得られるＦ（ａｂ’）２フラグメント、Ｆ（ａｂ’）２フラグメントを還元処理して得られるＦａｂ’フラグメント等が挙げられる。
　好ましくは、モノクローナル抗体またはその抗原結合フラグメントが挙げられる。
　以下、特に言及しない限り、上記「抗体」および上記「抗体の抗原結合フラグメント」を、まとめて「抗体」と称する。
　本明細書における「急性呼吸窮迫症候群（ＡＲＤＳ）」とは、先行する基礎疾患・外傷をもち、急性に発症した低酸素血症で、胸部Ｘ線写真上では両側性の肺浸潤影を認め、かつその原因が心不全、腎不全、血管内水分過剰のみでは説明できない病態の総称を指す（ＡＲＤＳ　診療ガイドライン　２０１６、一般社団法人　日本呼吸器学会発行参照）。ＡＲＤＳの本態は肺微小血管の透過性亢進型肺水腫であり、その原因として肺胞領域の好中球主体の非特異的な過剰炎症反応および、これらによってもたらされる、広範な肺損傷が指摘されている。
　ＡＲＤＳの診断には、ＡＥＣＣの定義およびＢｅｒｌｉｎ定義が広く使用されているが、本発明におけるＡＲＤＳは、これらの定義に必ずしも一致しない病態も含む。このような病態として、例えば、ＣＯＶＩＤ－１９関連ＡＲＤＳが挙げられる。ＣＯＶＩＤ－１９関連ＡＲＤＳの発症時期は８～１２日であるとされており、１週間以内の経過での急な発症というＡＲＤＳのＢｅｒｌｉｎ定義とは必ずしも一致しない。
　上記ＡＲＤＳとしては、例えば、ウイルス感染症、細菌感染症、敗血症、臓器損傷などに関連するＡＲＤＳが挙げられる。これらの疾患は、その重症化が進行すると、ＡＲＤＳの発症を導き得る。
　好ましくはウイルス感染症が挙げられ、例えば、コロナウイルス感染症、インフルエンザウイルス感染症、ＲＳウイルス感染症、サイトメガロウイルス感染症などが挙げられる。なかでも、コロナウイルス感染症が好ましく、コロナウイルス感染症としては、例えば、ＳＡＲＳ、ＭＡＲＳ、ＣＯＶＩＤ－１９が挙げられ、特にＣＯＶＩＤ－１９が挙げられる。
　本明細書において「診断」とは、疾患の現在または未来の病状を判定することをいう。
　本明細書において「重症度」としては、軽症、中等症、重症等が挙げられ、「重症化」としては、軽症から中等症または重症への重症化、中等症から重症への重症化が挙げられる。
　本明細書において「発症」とは、疾患の症状が現れることをいう。
　本明細書において「被験体」とは、検査対象となる生物、特に動物（例えば、ヒト、マウス、ラット、ハムスター、モルモット、サル、ウシ、ブタ、ウマ、ウサギ、ヒツジ、ヤギ、ネコまたはイヌ等の哺乳動物）を意味し、特にヒト（この場合、「被験者」とも称する）が挙げられる。また、本明細書における「被験体」（ヒトの場合の「被験者」）には、疾患に罹患している被験体（患者）、罹患が疑われる被験体（被験者）、罹患するリスクがある被験者（被験者）、疾患に罹患していない被験体（健常者）などが含まれる。　
　本明細書における「試料」としては、上記好中球由来のタンパク質が含まれ得る試料であれば特に限定されないが、例えば、ヒト被験体から採取された血液から調製した血液試料が挙げられる。本明細書における「血液試料」とは、血液成分の少なくとも一部を含む試料を意味し、全血、血清、および血漿のいずれであってもよく、これらを希釈したものであってもよい。血液試料は、好ましくは血清または血漿であり、より好ましくは血漿である。血液試料の調製は、既知の方法で行うことができる。
［ＡＲＤＳの診断、重症度の評価、発症もしくは重症化の予測、または発症リスクもしくは重症化リスクの評価］
　本発明は、一実施態様として、ＡＲＤＳの診断、重症度の評価、発症もしくは重症化の予測、または発症リスクもしくは重症化リスクの評価に用いるための試薬であって、上記好中球由来のタンパク質またはその対応する結合分子と結合した複合体に対する抗体またはその抗原結合フラグメントを含む、試薬を含む。
　上記試薬の構成、形状、状態などは、特に限定されない。
　また、上記試薬において、上記抗体またはその抗原結合フラグメントは、１種でもよく、２種以上でもよい。２種以上の抗体またはその抗原結合フラグメントを用いる場合、それらは、例えば、異なるエピトープに結合する２種以上の抗体またはその抗原結合フラグメントであってもよく、同じエピトープに結合する２種以上の抗体またはその抗原結合フラグメントであってもよい。また、好中球由来のタンパク質が遊離体としても複合体としても試料中に存在し得る場合、２種以上の抗体のうち、少なくとも１種は、複合体に対する抗体またはその抗原結合フラグメントであってもよい。
　例えば、好中球由来のタンパク質の異なる部分をエピトープとして認識して結合可能である２種以上の抗体またはその抗原結合フラグメントの組合せ；好中球由来のタンパク質の一部をエピトープとして認識して結合可能である少なくとも１種の抗体と、その抗体のエピトープとは異なるエピトープを認識して結合可能である少なくとも１種の抗体の抗原結合フラグメントとの組合せ；好中球由来のタンパク質の一部をエピトープとして認識して結合可能である少なくとも１種の抗体またはその抗原結合フラグメントと、複合体の一部をエピトープの一部または全部として認識して結合可能である少なくとも１種の抗体またはその抗原結合フラグメントの組合せ；好中球由来のタンパク質の一部をエピトープとして認識して結合可能である少なくとも１種の抗体またはその抗原結合フラグメントと、結合分子の一部をエピトープの一部または全部として認識して結合可能である抗体またはその抗原結合フラグメントなどが挙げられる。
　より具体的には、例えば、好中球由来のタンパク質がヒト好中球エラスターゼであり、その結合分子がヒトα１アンチトリプシン（Ａ１ＡＴ）である場合、抗ヒト好中球エラスターゼ抗体と、抗ヒトＡ１ＡＴ抗体との組合せが挙げられる。
　上記試薬において、上記抗体は、支持体に固定化されていてもよい。支持体は、当該試薬を用いる方法に応じて、適宜選択することができる。支持体としては、例えば、ウェルプレート（例、９６ウェルマイクロプレートなど）、メンブレン（例、ニトロセルロース膜、ポリフッ化ビニリデン膜など）、スライドガラス、磁気ビーズ、ラテックス粒子等が挙げられる。抗体の支持体への固定化は、支持体の材質に応じて選択した既知の方法により行うことができる。
　また、上記抗体は、標識化されたものであってもよい。標識化のための標識物質は、特に限定されず、既知のものを用いればよい。標識物質としては、例えば、ペルオキシダーゼ、アルカリホスファターゼなどの酵素標識；フルオレセインイソチオシアネート（ＦＩＴＣ）などの蛍光標識；ヨウ素１２５などの放射性同位体標識；ルテニウム錯体などの電気化学発光標識；ビオチン；金属ナノ粒子等が挙げられる。当該抗体の標識化は、標識物質の種類に応じて選択した既知の方法により行うことができる。
　上記試薬は、キットの形態であってもよい。当該キットには、上記抗体に加えて、他の要素を含んでいてもよい。他の要素としては、例えば、標識物質の検出試薬、好中球由来のタンパク質の標準試料、血液試料調製用試薬、希釈液、バッファー類、支持体、使用説明書等が挙げられる。
　上記試薬の例としては、免疫学的測定法に用いるための試薬（免疫学的測定用試薬）が挙げられ、具体的には、酵素免疫測定法、蛍光酵素免疫測定法、化学発光酵素免疫測定法、化学発光免疫測定法、電気化学発光測免疫測定法、蛍光抗体法、ラジオイムノアッセイ、ウェスタンブロット法、イムノブロット法、ラテックス凝集法、イムノクロマトグラフィー法、ネフェロメトリー法などに用いるための試薬が挙げられる。好ましくは、ラテックス凝集法、またはイムノクロマトグラフィー法に用いるための試薬が挙げられる。これらは、市販されているものでよく、既知の方法にしたがって調製したものでもよい。
　より具体的には、例えば、ラテックス凝集法に用いるための試薬としては、（ｉ）好中球由来のタンパク質（例えば、好中球エラスターゼ）の一部をエピトープとして認識して結合可能である少なくとも１種の抗体またはその抗原結合フラグメントを結合させたラテックス粒子を含む抗体感作ラテックス液と、（ｉｉ）結合分子（例えば、α１アンチトリプシン）の一部をエピトープの一部または全部として認識して結合可能である抗体またはその抗原結合フラグメントを結合させたラテックス粒子を含む抗体感作ラテックス液を含む、試薬などが挙げられる。
　上記試薬は、試料（特に血液試料）中の、好中球由来のタンパク質を検出することができ、好中球由来のタンパク質の量（濃度）を測定することができる。
　ここで、好中球由来のタンパク質の血中濃度は、ＡＲＤＳの発症から重症化の進行と正の相関を示す。すなわち、好中球由来のタンパク質の血中濃度は、ＡＲＤＳの発症から重症化が進行するほど高くなる。
　したがって、好中球由来のタンパク質の血中濃度を、ＡＲＤＳを診断するための指標として用いることができる。
　よって、上記試薬は、ＡＲＤＳの診断、その診断の補助、その診断を行うためのデータの収集等に用いることができる。
　また、好中球由来のタンパク質の血中濃度に基づいて、ＡＲＤＳの重症度を評価することができる。例えば、複数の患者から得られたデータを統計処理してカットオフ値（病態識別値）を決定し、このカットオフ値に基づいてＡＲＤＳの重症度を評価することができる。
　例えば、第一のカットオフ値未満を軽症、第一のカットオフ値以上から第二のカットオフ値未満を中等症、第二のカットオフ値以上を重症と評価することができる。
　したがって、上記試薬は、ＡＲＤＳの重症度の評価、その評価の補助、その評価を行うためのデータの収集等に用いることができる。
　さらに、好中球由来のタンパク質の血中濃度に基づいて、ＡＲＤＳが発症するか否か、またはＡＲＤＳの重症化が進行するか否かを予測することができる。例えば、複数の患者から得られたデータを統計処理してカットオフ値を決定し、このカットオフ値に基づいてＡＲＤＳが発症するか否か、またはＡＲＤＳの重症化が進行するか否かを予測することができる。
　例えば、所定のカットオフ値以上である場合、ＡＲＤＳが発症すると予測することができ、当該カットオフ値未満である場合、ＡＲＤＳは発症しないと予測することができる。
　同様に、所定のカットオフ値以上である場合、ＡＲＤＳの重症化が進行すると予測することができ、当該カットオフ値未満である場合、ＡＲＤＳの重症化は進行しないと予測することができる。
　したがって、上記試薬は、ＡＲＤＳの発症または重症化の予測、その予測の補助、その予測を行うためのデータの収集等に用いることができる。
　加えて、好中球由来のタンパク質の血中濃度に基づいて、ＡＲＤＳの発症リスクまたは重症化リスクの有無または高低を判定することができる。例えば、複数の患者から得られたデータを統計処理してカットオフ値を決定し、このカットオフ値に基づいてＡＲＤＳの発症リスクまたは重症化リスクの有無または高低を判定することができる。
　例えば、所定のカットオフ値以上である場合、ＡＲＤＳの発症リスクが存在するまたは高いと判定することができ、逆に当該カットオフ値未満である場合、そのようなリスクが存在しないまたは低いと判定することができる。
　同様に、所定のカットオフ値以上である場合、ＡＲＤＳの重症化リスクが存在するまたは高いと判定することができ、逆に当該カットオフ値未満である場合、そのようなリスクが存在しないまたは低いと判定することができる。
　したがって、上記試薬は、ＡＲＤＳの発症リスクまたは重症化リスクの評価、その評価の補助、その評価を行うためのデータの収集等に用いることができる。
　上記試薬を用いた測定の対象となる試料は、ヒト被験体（被験者）から採取された血液から調製した血液試料が挙げられるが、当該被験者は、ＡＲＤＳの罹患が確認されていなくても、確認済みであってよく、また、ウイルス感染症、細菌感染症、敗血症、臓器損傷などのＡＲＤＳの原因となり得る疾患への罹患が確認されていなくても、確認済みであってよい。
　ここで、疾患の罹患の確認は、既知の方法で行うことができる。例えば、抗体検査、ＰＣＲ検査、バイオマーカー、医師の診断などで確認することができる。
　また、本発明は、一実施態様として、ＡＲＤＳを診断、その重症度を評価、その発症もしくは重症化を予測、またはその発症リスクもしくは重症化リスクを評価するための方法であって、
（１）試料と、好中球由来のタンパク質またはその対応する結合分子と結合した複合体に対する抗体またはその抗原結合フラグメントを接触させること、
（２）該好中球由来のタンパク質またはその対応する結合分子と結合した複合体と、該好中球由来のタンパク質またはその対応する結合分子と結合した複合体に対する抗体またはその抗原結合フラグメントとの結合状態を測定すること
を含む、方法を含む。
　また、本発明は、一実施態様として、急性呼吸窮迫症候群の診断、その重症度の評価、その発症もしくは重症化の予測、またはその発症リスクもしくは重症化リスクの評価を補助する方法であって、
（１）試料と、好中球由来のタンパク質またはその対応する結合分子と結合した複合体に対する抗体またはその抗原結合フラグメントを接触させること、
（２）該好中球由来のタンパク質またはその対応する結合分子と結合した複合体と、該抗体またはその抗原結合フラグメントとの結合状態を測定すること
を含む、方法を含む。
　さらに、本発明は、一実施態様として、急性呼吸窮迫症候群を診断、その重症度を評価、その発症もしくは重症化を予測、またはその発症リスクもしくは重症化リスクを評価するためのデータの収集方法であって、
（１）試料と、好中球由来のタンパク質またはその対応する結合分子と結合した複合体に対する抗体またはその抗原結合フラグメントを接触させること、
（２）該好中球由来のタンパク質またはその対応する結合分子と結合した複合体と、該抗体またはその抗原結合フラグメントとの結合状態を測定すること
を含む、方法を含む。
　上記のＡＲＤＳを診断等する方法、診断等を補助する方法および診断等をするためのデータの収集方法における試料は、上記試薬を用いた測定の対象となる試料が挙げられる。
　上記方法で使用する抗体は、上記試薬と同様であり、また、１種でもよく、２種以上でもよい。
　また、上記方法は、１種または２種以上の上記試薬を用いて行うことができる。
　上記工程（１）は、試料と抗体とを接触させることにより、該試料中に含まれる好中球由来のタンパク質と、該抗体を結合させる工程である。したがって、該好中球由来のタンパク質と、該抗体が結合可能な条件下での工程であれば、特に限定されない。例えば、既知の免疫学的測定法に準じて行うことができる。
　上記工程（２）は、上記工程（１）によって得られた該好中球由来のタンパク質と該抗体との結合の状態を測定する工程である。
　結合の状態の測定は、特に限定されず、既知の定性的または定量的方法が挙げられる。具体的には、例えば、既知の免疫学的測定法が挙げられ、具体的には、酵素免疫測定法、蛍光酵素免疫測定法、化学発光酵素免疫測定法、化学発光免疫測定法、電気化学発光測免疫測定法、蛍光抗体法、ラジオイムノアッセイ、ウェスタンブロット法、イムノブロット法、ラテックス凝集法、イムノクロマトグラフィー法、ネフェロメトリー法などが挙げられる。
　上記測定方法によって、例えば、試料中の好中球由来のタンパク質を検出することができ、試料中の好中球由来のタンパク質の量（濃度）を定量することができる。
　上記のＡＲＤＳを診断等する方法は、工程（２）で得られた好中球由来のタンパク質の量（濃度）に基づいて、ＡＲＤＳを診断、その重症度を評価、その発症もしくはその重症化を予測、またはその発症リスクもしくは重症化リスクを評価する工程（３）を含んでいてもよい。当該工程（３）は、例えば、上記試薬において説明したように、好中球由来のタンパク質の量（濃度）を指標として診断すること、あるいは、カットオフ値を決定し、そのカットオフ値に基づいて重症度を評価、発症もしくは重症化を予測、または発症リスクもしくは重症化リスクを評価すること、などを含む。
　上記のＡＲＤＳの診断等を補助する方法は、工程（２）で得られた好中球由来のタンパク質の量（濃度）に基づいて、例えば、上記試薬において説明したように、その診断等で指標となるカットオフ値を決定すること、そのカットオフ値と比較した結果を提供すること、などの工程をさらに含んでいてもよい。
　上記のＡＲＤＳを診断等するためのデータの収集方法は、工程（２）で得られた好中球由来のタンパク質の量（濃度）に基づいて、例えば、上記試薬において説明したように、その診断等で指標となるカットオフ値を決定するためのデータを収集すること、そのカットオフ値と比較したデータを提供すること、などの工程をさらに含んでいてもよい。
　また、本発明は、一実施態様として、急性呼吸窮迫症候群に罹患しているか、または罹患するリスクがある被験者に由来する試料中の好中球由来のタンパク質またはその対応する結合分子と結合した複合体を検出または定量する方法であって、
（１）試料と、好中球由来のタンパク質またはその対応する結合分子と結合した複合体に対する抗体またはその抗原結合フラグメントを接触させること、
（２）該好中球由来のタンパク質またはその対応する結合分子と結合した複合体と、該抗体またはその抗原結合フラグメントとの結合状態を測定すること
を含む、方法を含む。
　当該方法における試料は、上記ＡＲＤＳの診断等に用いる試薬および方法の測定対象となる試料が挙げられる。
　当該方法で使用する抗体は、上記ＡＲＤＳの診断等に用いる試薬および方法と同様であり、また、１種でもよく、２種以上でもよい。
　当該方法は、１種または２種以上の上記ＡＲＤＳの診断等に用いる試薬を用いて行うことができる。
　また、当該方法における工程（１）および（２）は、上記ＡＲＤＳを診断等する方法の工程（１）および（２）と同様である。
　さらに、本発明は、一実施態様として、急性呼吸窮迫症候群を診断、その重症度を評価、その発症もしくは重症化を予測、またはその発症リスクもしくは重症化リスクを評価するための試薬を製造するための、好中球由来のタンパク質またはその対応する結合分子と結合した複合体に対する抗体またはその抗原結合フラグメントの使用を含む。
　当該態様における抗体は、上記ＡＲＤＳの診断等に用いる試薬と同様であり、また、１種でもよく、２種以上でもよい。
［コロナウイルス感染症の重症度の評価、重症化の予測、または重症化リスクの評価］
　本発明は、一実施態様として、コロナウイルス感染症の重症度の評価、重症化の予測、または重症化リスクの評価に用いるための試薬であって、上記好中球由来のタンパク質またはその対応する結合分子と結合した複合体に対する抗体またはその抗原結合フラグメントを含む、試薬を含む。
　当該試薬の構成、形態、状態等は、上記ＡＲＤＳの診断等に用いる試薬と同様である。
　上記「コロナウイルス感染症」としては、例えば、ＳＡＲＳ、ＭＡＲＳ、ＣＯＶＩＤ－１９が挙げられ、特にＣＯＶＩＤ－１９が挙げられる。これらの疾患は、その重症化が進行すると、ＡＲＤＳの発症を導き得る。
　上記試薬は、試料（特に血液試料）中の、好中球由来のタンパク質を検出することができ、好中球由来のタンパク質の量（濃度）を測定することができる。
　ここで、好中球由来のタンパク質の血中濃度は、後述する実施例に示されているとおり、コロナウイルス感染症の重症度と正の相関を示す。すなわち、好中球由来のタンパク質の血中濃度は、コロナウイルス感染症の重症度が高いほど高くなる。したがって、好中球由来のタンパク質の血中濃度に基づいて、コロナウイルス感染症の重症度を評価することができる。例えば、複数の患者から得られたデータを統計処理してカットオフ値を決定し、このカットオフ値に基づいてコロナウイルス感染症の重症度を評価することができる。
　例えば、第一のカットオフ値未満を軽症、第一のカットオフ値以上から第二のカットオフ値未満を中等症、第二のカットオフ値以上を重症と評価することができる。
　したがって、上記試薬は、コロナウイルス感染症の重症度の評価、その評価の補助、その評価を行うためのデータの収集等に用いることができる。
　さらに、好中球由来のタンパク質の血中濃度に基づいて、コロナウイルス感染症の重症化が進行するか否かを予測することができる。例えば、複数の患者から得られたデータを統計処理してカットオフ値を決定し、このカットオフ値に基づいてコロナウイルス感染症の重症化が進行するか否かを予測することができる。
　例えば、所定のカットオフ値以上である場合、コロナウイルス感染症の重症化が進行すると予測することができ、当該カットオフ値未満である場合、コロナウイルス感染症の重症化は進行しないと予測することができる。
　したがって、上記試薬は、コロナウイルス感染症の重症化の予測、その予測の補助、その予測を行うためのデータの収集等に用いることができる。
　加えて、好中球由来のタンパク質の血中濃度に基づいて、コロナウイルス感染症の重症化リスクの有無または高低を判定することができる。例えば、複数の患者から得られたデータを統計処理してカットオフ値を決定し、コロナウイルス感染症の重症化リスクの有無または高低を判定することができる。
　例えば、所定のカットオフ値以上である場合、コロナウイルス感染症の重症化リスクが存在するまたは高いと判定することができ、逆に当該カットオフ値未満である場合、そのようなリスクが存在しないまたは低いと判定することができる。
　したがって、上記試薬は、コロナウイルス感染症の重症化リスクの評価、その評価の補助、その評価を行うためのデータの収集等に用いることができる。
　上記試薬を用いた測定の対象となる試料としては、コロナウイルス感染症に罹患したヒト被験者より採取された血液から調製した血液試料が挙げられる。罹患の確認は、既知の方法で行うことができ、例えば、抗体検査、ＰＣＲ検査などで確認することができる。
　また、本発明は、一実施態様として、コロナウイルス感染症の重症度を評価、その重症化を予測、またはその重症化リスクを評価するための方法であって、
（１）試料と、好中球由来のタンパク質またはその対応する結合分子と結合した複合体に対する抗体またはその抗原結合フラグメントを接触させること、
（２）該好中球由来のタンパク質またはその対応する結合分子と結合した複合体と、該好中球由来のタンパク質またはその対応する結合分子と結合した複合体に対する抗体またはその抗原結合フラグメントとの結合状態を測定すること
を含む、方法を含む。
　本発明は、一実施態様として、コロナウイルス感染症の重症度の評価、その重症化の予測、またはその重症化リスクの評価を補助する方法であって、
（１）試料と、好中球由来のタンパク質またはその対応する結合分子と結合した複合体に対する抗体またはその抗原結合フラグメントを接触させること、
（２）該好中球由来のタンパク質またはその対応する結合分子と結合した複合体と、該抗体またはその抗原結合フラグメントとの結合状態を測定すること
を含む、方法を含む。
　本発明は、一実施態様として、コロナウイルス感染症の重症度を評価、その重症化を予測、またはその重症化リスクを評価するためのデータの収集方法であって、
（１）試料と、好中球由来のタンパク質またはその対応する結合分子と結合した複合体に対する抗体またはその抗原結合フラグメントを接触させること、
（２）該好中球由来のタンパク質またはその対応する結合分子と結合した複合体と、該抗体またはその抗原結合フラグメントとの結合状態を測定すること
を含む、方法を含む。
　上記のコロナウイルス感染症の重症度を評価等する方法、評価等を補助する方法および評価等をするためのデータの収集方法における試料は、上記試薬を用いた測定の対象となる試料が挙げられる。
　上記方法で使用する抗体は、上記試薬と同様であり、また、１種でもよく、２種以上でもよい。
　また、上記方法は、１種または２種以上の上記試薬を用いて行うことができる。
　上記工程（１）および（２）は、上記ＡＲＤＳを診断等するための方法の工程（１）および（２）と同様である。
　上記のコロナウイルス感染症の重症度を評価等する方法は、工程（２）で得られた好中球由来のタンパク質の量（濃度）に基づいて、コロナウイルス感染症の重症度を評価、その重症化を予測、またはその重症化リスクを評価する工程（３）を含んでいてもよい。当該工程（３）は、例えば、上記試薬において説明したように、好中球由来のタンパク質の量（濃度）をあらかじめ設定されたカットオフ値に基づいて重症度を評価、重症化を予測、または重症化リスクを評価すること、などを含む。
　上記のコロナウイルス感染症の重症度の評価等を補助する方法は、工程（２）で得られた好中球由来のタンパク質の量（濃度）に基づいて、例えば、上記試薬において説明したように、その評価等で指標となるカットオフ値を決定すること、そのカットオフ値と比較した結果を提供すること、などの工程をさらに含んでいてもよい。
　上記のコロナウイルス感染症の重症度の評価等するためのデータの収集方法は、工程（２）で得られた好中球由来のタンパク質の量（濃度）に基づいて、例えば、上記試薬において説明したように、その評価等で指標となるカットオフ値を決定するためのデータを収集すること、そのカットオフ値と比較したデータを提供すること、などの工程をさらに含んでいてもよい。
　本発明は、一実施態様として、コロナウイルス感染に罹患している被験者に由来する試料中の好中球由来のタンパク質またはその対応する結合分子と結合した複合体を検出または定量する方法であって、
（１）試料と、好中球由来のタンパク質またはその対応する結合分子と結合した複合体に対する抗体またはその抗原結合フラグメントを接触させること、
（２）該好中球由来のタンパク質またはその対応する結合分子と結合した複合体と、該抗体またはその抗原結合フラグメントとの結合状態を測定すること
を含む、方法を含む。
　当該方法における試料は、上記コロナウイルス感染症の重症度の評価等に用いる試薬および方法の測定対象となる試料が挙げられる。
　当該方法で使用する抗体は、上記コロナウイルス感染症の重症度の評価等に用いる試薬および方法と同様であり、また、１種でもよく、２種以上でもよい。
　当該方法は、１種または２種以上の上記コロナウイルス感染症の重症度の評価等に用いる試薬を用いて行うことができる。
　また、当該方法における工程（１）および（２）は、上記コロナウイルス感染症の重症度を評価等する方法の工程（１）および（２）と同様である。
　また、本発明は、一実施態様として、コロナウイルス感染症の重症度の評価、重症化の予測、または重症化リスクの評価に用いるための試薬を製造するための、好中球由来のタンパク質またはその対応する結合分子と結合した複合体に対する抗体またはその抗原結合フラグメントの使用を含む。
　当該態様における抗体は、上記コロナウイルス感染症の重症度の評価等に用いる試薬と同様であり、また、１種でもよく、２種以上でもよい。
　以下、実施例を参照して本発明をさらに具体的に説明するが、本発明はこれらに限定されるものではない。
［実施例１］
　以下の表１に示したＳＡＲＳ－ＣｏＶ－２陽性患者から血液試料を採取し、常法に従って血漿を調製した。
Figure JPOXMLDOC01-appb-T000001
　次いで、正常者および患者の血漿中の好中球エラスターゼ、アズロシジン、およびラクトフェリンの濃度（ｎｇ／ｍＬ）を、それぞれ測定した。測定は、以下の検査キットを使用し、各キットの添付文書に示された測定方法に準じて行った。それらの結果を、図１～３に示す。

・好中球エラスターゼの測定：Human Elastase（Cat＃HK319、Hycult Biotech社製）
・アズロシジンの測定：Human Azurocidin（Cat＃HK352、Hycult Biotech社製）
・ラクトフェリンの測定：Human Lactoferrin（Cat＃HK329、Hycult Biotech社製）
　図１～３から、各好中球由来のタンパク質濃度の測定値は、正常者と比較して、ＣＯＶＩＤ－１９の重症化が進行した患者において高値を示した。すなわち、ＣＯＶＩＤ－１９の重症化が進行するほど、好中球関連タンパク質の血中濃度が高まることが判明した。
［実施例２］
＜モノクローナル抗体の作製＞
　以下の手順にしたがって、抗体Ａ、抗体Ｂを得た。
ヒト白血球由来精製エラスターゼ（Ｅｌａｓｔｉｎ　Ｐｒｏｄｕｃｔｓ社、Ｃａｔ．Ｎｏ．ＣＫ８２８）をアジュバント（Ｃｏｍｐｌｅｔｅ　Ｆｒｅｕｎｄ’ｓ　ａｄｊｕｖａｎｔ：ＣＦＡ）に懸濁し、ＢＡＬＢ／ｃマウス（５週齢、雌）に２週間間隔で免疫した。途中で部分採血を行い、抗血清レベルでの力価上昇度を免疫原であるヒト白血球由来精製エラスターゼとの反応性を指標に確認した。複数回の免疫にて抗体力価が十分上昇していることを確認した上で、脾臓より抗体産生細胞を採取し、ミエローマ（Ｐ３Ｘ６３Ａｇ８．６５３、ＥＣＡＣＣ）と細胞融合した。細胞融合はＰＥＧ法で行い、融合細胞を培養プレートに播種した。その後、３７℃の炭酸ガスインキュベーター内で培養した。次に、ハイブリドーマ培養上清を採取し、抗体力価をヒト白血球由来精製エラスターゼとの反応性を指標に確認した。そして抗体産生クローンの細胞を継代培養し、限界希釈法によりクローニングを行った。得られた単一コロニー由来の細胞を抗ヒト好中球エラスターゼモノクローナル抗体産生ハイブリドーマとして取得した。抗ヒトＡ１ＡＴ抗体産生ハイブリドーマについても、ヒト血漿由来α１アンチトリプシン（Ｍｅｒｃｋ社、Ｃａｔ．Ｎｏ．Ａ６１５０－２５ＭＧ）を用い、同様な方法により所得した。
　次に得られた２種のモノクローナル抗体産生ハイブリドーマを大量培養した。予め腹腔内にプリスタンを投与し、予備飼育したＢＡＬＢ／ｃマウスに対し、それぞれハイブリドーマを腹腔内投与した。そして１０～２５日間飼育し、腹水の貯留を待った。その後、腹水を採取し、得られた腹水抗体についてアフィニティー精製を行うことにより抗ヒト好中球エラスターゼモノクローナル抗体である抗体Ａ、抗ヒトＡ１ＡＴ抗体である抗体Ｂを取得した。
＜好中球エラスターゼＥＬＩＳＡ測定系の構築＞
　以下の試薬で構成したキットを用いて、サンドイッチ型酵素免疫測定法による酵素免疫測定を行った。
（１）標準試薬：ＨｉＴｒａｐ　ＮＨＳ－ａｃｔｉｖａｔｅｄ　ＨＰ　Ｃｏｌｕｍｎｓ（Ｃｙｔｉｖａ社、Ｃａｔ．Ｎｏ．１７０７１６０１）に、抗体Ａおよび抗体Ｂをそれぞれ結合させ、抗体Ａ結合アフェニティカラム、抗体Ｂ結合アフェニティカラムを得た。次に、健常者血漿３０ｍＬを２０ｍＭリン酸緩衝液１０倍希釈後、０．４５μｍフィルターを通しろ液を回収した。ろ液を抗体Ａ結合アフェニティカラムへ通し、吸着したタンパク質成分を１００ｍＭＧｌｙｃｉｎｅ－ＨＣｌ　Ｂｕｆｆｅｒ　ｐＨ２．７で溶出し、溶出画分を得た。溶出画分を２０ｍＭリン酸緩衝液でバッファー置換後、抗体Ｂ結合アフェニティカラムへ通し、吸着したタンパク質成分を１００ｍＭＧｌｙｃｉｎｅ－ＨＣｌ　Ｂｕｆｆｅｒ　ｐＨ２．７で溶出し、溶出画分を得た。溶出画分を２０ｍＭリン酸緩衝液でバッファー置換し標準試薬原液を得た。標準試薬原液を１％ＢＳＡ含有ＰＢＳ緩衝液で希釈系列を作成し、１％ＢＳＡ含有ＰＢＳ緩衝液のみの緩衝液を標準試薬０とする。
（２）検体希釈溶液：１％ＢＳＡ含有ＰＢＳ緩衝液。そのまま使用する。
（３）酵素標識抗体液：西洋ワサビペルオキシダーゼ（ＨＲＰ）標識された酵素標識抗体Ｂを、１％ＢＳＡ含有ＰＢＳ緩衝液にて１６，０００倍に希釈したものからなる。そのまま使用する。
（４）反応プレート：抗体Ａを９６穴マイクロプレートに固相化後、ブロッキングを施したものを用いる。一回の測定に１ウェルを使用する。
（５）洗浄液：０．０５％Ｔｗｅｅｎ２０、ＰＢＳ緩衝液。そのまま使用する。
（６）基質液：テトラメチルベンジジン（３，３’，５，５’－ｔｅｔｒａｍｅｔｈｙｌ　ｂｅｎｚｉｄｉｎｅ　ｓｔａｂｉｌｉｚｅｄ　ｓｕｂｓｔｒａｔｅ：ＴＭＢ、Ａｇｉｌｅｎｔ）を含む溶液からなる。基質液はそのまま使用する。一回の測定では基質液を１００μＬ使用する。
（７）反応停止液：３Ｎ硫酸。そのまま使用する。一回の測定では反応停止液を１００μＬ使用する。
　以下の手順に従って標準曲線を作成した。はじめに、検体希釈溶液にて標準試薬を適宜希釈して、各種濃度の好中球エラスターゼ溶液を調製した。そして、この希釈した標準溶液をそれぞれ１００μＬずつ反応プレートに加えてミキサー撹拌し、室温で１時間インキュベーションを行った。その後、ＥＬＩＳＡ用ウォッシャーを用いて各ウェルから反応液を除去するとともに、各ウェルに洗浄原液を希釈して調製した洗浄液０．３ｍＬを加えて洗浄した。この洗浄を３回繰り返した後、ウェル中に残った洗浄液をペーパータオル等により除去した。ついで、酵素標識抗体液１００μＬを加え、室温で１時間インキュベーションを行った。その後、ＥＬＩＳＡ用ウォッシャーを用いて各ウェルから反応液を除去するとともに、各ウェルに洗浄原液を希釈して調製した洗浄液０．３ｍＬを加えて洗浄した。この洗浄を３回繰り返した後、ウェル中に残った洗浄液をペーパータオル等により除去した。ついで、基質液１００μＬを加え、室温、暗所で正確に３０分間インキュベーションを行った。その後、反応停止液１００μＬを加えて素早くミキサーにて撹拌することで、酵素反応を停止させた。各ウェルについて４５０ｎｍの吸光度を測定し、標準曲線を作成した（図４）。
［実施例３］
＜ヒト血漿検体のＥＬＩＳＡ測定系での測定＞
　ＳＡＲＳ―ＣＯＶ２陽性患者から採取された血漿検体１５検体（検体番号１～１５）、ＣＯＰＤ患者から採取された血漿検体３検体（検体番号１６～１８）および健常者から採取された血漿検体３検体（検体番号１９～２１）を準備した。
Figure JPOXMLDOC01-appb-T000002
　準備した血漿検体中の好中球エラスターゼ濃度を測定した。測定は、実施例２で構築した試薬を用いた。結果を図５に示す。
［実施例４］
＜ラテックスへの抗体感作＞
　以下の材料および方法にしたがって、抗体Ａ感作ラテックスα液、抗体Ｂ感作ラテックスβ液を調製した。
（材料）
・ラテックス液：ラテックス（ＪＳＲ製、商品名：ＩＭＭＵＮＴＥＸ）、平均粒子径３５１　ｎｍ、固形分：１０％
・抗体Ａ溶液：３．４ｍｇ／ｍＬ　実施例２で作製した抗体Ａ、５０ｍＭ　ＨＥＰＥＳ　Ｓａｌｉｎｅ　（ｐＨ８．０）
・抗体Ｂ溶液：７．７ｍｇ／ｍＬ　実施例２で作製した抗体Ｂ、５０ｍＭ　ＨＥＰＥＳ　Ｓａｌｉｎｅ　（ｐＨ８．０）
・ＭＥＳ緩衝液：１％ＢＳＡ、２０ｍＭ　ＭＥＳ（ｐＨ６．０）、０．０５％ＮａＮ３
・ＨＥＰＥＳ緩衝液：２％ＢＳＡ、２０ｍＭ　ＨＥＰＥＳ（ｐＨ７．０）、１５０ｍＭ　ＮａＣｌ　０．０５％ＮａＮ３
（方法）
　ラテックス液（１０％ｗ／ｖｏｌ）５００μＬと抗体Ａ溶液（３．４ｍｇ／ｍＬ）７３０μＬを混和し、２０℃で９０分間振とう撹拌した。また、別途、同様に調製した混合液に、抗体Ｂ溶液（７．７ｍｇ／ｍＬ）３２０μＬを追加し、２０℃で９０分間振とう撹拌した。
　得られた混合液を、遠心分離機（ローター：Ｒ１５Ａ、エッペンドルフ・ハイマック・テクノロジーズ社）を用いて、１０，０００ｒｐｍの条件で、１０℃で３０分間遠心分離した。上清をデカンテーションし、得られた沈査にＭＥＳ緩衝液２５ｍＬを添加し、ソニケーションにて分散した。その後、３７℃で６０分間振とう撹拌した。
　得られた分散液を、同遠心分離機を用いて、１０，０００ｒｐｍの条件で、１０℃で３０分間遠心分離した。上清をデカンテーションし、得られた沈査にＨＥＰＥＳ緩衝液５０ｍＬを添加し、ソニケーションにて分散させ、各抗体感作ラテックスα、β液を得た。
＜好中球エラスターゼラテックス測定系の構築＞
　下記の組成を有する試薬Ａおよび試薬Ｂを調製した。試薬Ａは、各構成成分を所定の量または濃度になるように混合することにより調製した。試薬Ｂは、各抗体感作ラテックスα、β液を等量の割合で混合し、さらに他の構成成分を所定の量または濃度になるように混合して調製した。
（１）試薬Ａ
（組成）
・０．１％Ｔｗｅｅｎ２０、
・０．５％ポリエチレングリコール（ＰＥＧ）（５０００～５００００）、
・０．５％ウシ血清アルブミン（ＢＳＡ）、
・１５０ｍＭ　ＮａＣｌ、
・０．０９％ＮａＮ３、
・１００ｍＭ　ＨＥＰＥＳ緩衝液（ｐＨ７．６）
（２）試薬Ｂ
（組成）
・０．５％ＢＳＡ、
・１５０ｍＭ　ＮａＣｌ、
・０．０９％ＮａＮ３、
・１００ｍＭ　ＨＥＰＥＳ緩衝液（ｐＨ７．０）
・抗体Ａ感作ラテックスα液
・抗体Ｂ感作ラテックスβ液
［実施例５］
＜ヒト血漿検体のラテックス測定系での測定＞
（１）ＡＲＤＳを発症したＳＡＲＳ―ＣＯＶ２陽性患者から採取された血漿検体１０検体、健常者から採取された血漿検体３検体を、実施例４で構築した試薬を用い測定した。各検体は、生理食塩水で１００倍希釈後、測定検体として４μＬを試薬Ａ９６μＬに加えて混和し、３７℃で約５分間加温した。この混合液に試薬Ｂ２４μＬを加えて混和し、３７℃で約５分間反応後の波長７００ｎｍの吸光度を測定した。結果を図６に示す。

Claims (28)

  1. 　急性呼吸窮迫症候群の診断、重症度の評価、発症もしくは重症化の予測、または発症リスクもしくは重症化リスクの評価に用いるための試薬であって、
    　好中球由来のタンパク質またはその対応する結合分子と結合した複合体に対する抗体またはその抗原結合フラグメントを含む、試薬。
  2. 　前記好中球由来のタンパク質が、好中球エラスターゼ、アズロシジン、ラクトフェリン、ミエロペルオキシダーゼ、およびペプジルアルギニン・デイミナーゼ４からなる群から選択される少なくとも１種である、請求項１に記載の試薬。
  3. 　前記好中球由来のタンパク質が、好中球エラスターゼである、請求項２に記載の試薬。
  4. 　前記急性呼吸窮迫症候群が、ウイルス感染症、細菌感染症、敗血症、および臓器損傷からなる群から選択される少なくとも１種に関連する、請求項１～３のいずれかに記載の試薬。
  5. 　前記ウイルス感染症が、コロナウイルス感染症、インフルエンザウイルス感染症、ＲＳウイルス感染症、およびサイトメガロウイルス感染症からなる群から選択される少なくとも１種に関連する、請求項４に記載の試薬。
  6. 　前記コロナウイルス感染症が、ＣＯＶＩＤ－１９である、請求項５に記載の試薬。
  7. 　急性呼吸窮迫症候群を診断、その重症度を評価、その発症もしくは重症化を予測、またはその発症リスクもしくは重症化リスクを評価するための方法であって、
    （１）試料と、好中球由来のタンパク質またはその対応する結合分子と結合した複合体に対する抗体またはその抗原結合フラグメントを接触させること、
    （２）該好中球由来のタンパク質またはその対応する結合分子と結合した複合体と、該抗体またはその抗原結合フラグメントとの結合状態を測定すること
    を含む、方法。
  8. 　急性呼吸窮迫症候群の診断、その重症度の評価、その発症もしくは重症化の予測、またはその発症リスクもしくは重症化リスクの評価を補助する方法であって、
    （１）試料と、好中球由来のタンパク質またはその対応する結合分子と結合した複合体に対する抗体またはその抗原結合フラグメントを接触させること、
    （２）該好中球由来のタンパク質またはその対応する結合分子と結合した複合体と、該抗体またはその抗原結合フラグメントとの結合状態を測定すること
    を含む、方法。
  9. 　急性呼吸窮迫症候群を診断、その重症度を評価、その発症もしくは重症化を予測、またはその発症リスクもしくは重症化リスクを評価するためのデータの収集方法であって、
    （１）試料と、好中球由来のタンパク質またはその対応する結合分子と結合した複合体に対する抗体またはその抗原結合フラグメントを接触させること、
    （２）該好中球由来のタンパク質またはその対応する結合分子と結合した複合体と、該抗体またはその抗原結合フラグメントとの結合状態を測定すること
    を含む、方法。
  10. 　急性呼吸窮迫症候群に罹患しているか、または罹患するリスクがある被験者に由来する試料中の好中球由来のタンパク質またはその対応する結合分子と結合した複合体を検出または定量する方法であって、
    （１）試料と、好中球由来のタンパク質またはその対応する結合分子と結合した複合体に対する抗体またはその抗原結合フラグメントを接触させること、
    （２）該好中球由来のタンパク質またはその対応する結合分子と結合した複合体と、該抗体またはその抗原結合フラグメントとの結合状態を測定すること
    を含む、方法。
  11. 　前記好中球由来のタンパク質が、好中球エラスターゼ、アズロシジン、ラクトフェリン、ミエロペルオキシダーゼ、およびペプジルアルギニン・デイミナーゼ４からなる群から選択される少なくとも１種である、請求項７～１０のいずれかに記載の方法。
  12. 　前記好中球由来のタンパク質が、好中球エラスターゼである、請求項１１に記載の方法。
  13. 　前記急性呼吸窮迫症候群が、ウイルス感染症、細菌感染症、敗血症、および臓器損傷からなる群から選択される少なくとも１種に関連する、請求項７～１２のいずれかに記載の方法。
  14. 　前記ウイルス感染症が、コロナウイルス感染症、インフルエンザウイルス感染症、ＲＳウイルス感染症、およびサイトメガロウイルス感染症からなる群から選択される少なくとも１種に関連する、請求項１３に記載の方法。
  15. 　前記コロナウイルス感染症が、ＣＯＶＩＤ－１９である、請求項１４に記載の方法。
  16. 　急性呼吸窮迫症候群を診断、その重症度を評価、その発症もしくは重症化を予測、またはその発症リスクもしくは重症化リスクを評価するための試薬を製造するための、好中球由来のタンパク質またはその対応する結合分子と結合した複合体に対する抗体またはその抗原結合フラグメントの使用。
  17. 　コロナウイルス感染症の重症度の評価、重症化の予測、または重症化リスクの評価に用いるための試薬であって、
    　好中球由来のタンパク質またはその対応する結合分子と結合した複合体に対する抗体またはその抗原結合フラグメントを含む、試薬。
  18. 　前記好中球由来のタンパク質が、好中球エラスターゼ、アズロシジン、ラクトフェリン、ミエロペルオキシダーゼ、およびペプジルアルギニン・デイミナーゼ４からなる群から選択される少なくとも１種である、請求項１７に記載の試薬。
  19. 　前記好中球由来のタンパク質が、好中球エラスターゼである、請求項１８に記載の試薬。
  20. 　前記コロナウイルス感染症が、ＣＯＶＩＤ－１９である、請求項１７～１９のいずれかに記載の試薬。
  21. 　コロナウイルス感染症の重症度を評価、その重症化を予測、またはその重症化リスクを評価するための方法であって、
    （１）試料と、好中球由来のタンパク質またはその対応する結合分子と結合した複合体に対する抗体またはその抗原結合フラグメントを接触させること、
    （２）該好中球由来のタンパク質またはその対応する結合分子と結合した複合体と、該抗体またはその抗原結合フラグメントとの結合状態を測定すること
    を含む、方法。
  22. 　コロナウイルス感染症の重症度の評価、その重症化の予測、またはその重症化リスクの評価を補助する方法であって、
    （１）試料と、好中球由来のタンパク質またはその対応する結合分子と結合した複合体に対する抗体またはその抗原結合フラグメントを接触させること、
    （２）該好中球由来のタンパク質またはその対応する結合分子と結合した複合体と、該抗体またはその抗原結合フラグメントとの結合状態を測定すること
    を含む、方法。
  23. 　コロナウイルス感染症の重症度を評価、その重症化を予測、またはその重症化リスクを評価するためのデータの収集方法であって、
    （１）試料と、好中球由来のタンパク質またはその対応する結合分子と結合した複合体に対する抗体またはその抗原結合フラグメントを接触させること、
    （２）該好中球由来のタンパク質またはその対応する結合分子と結合した複合体と、該抗体またはその抗原結合フラグメントとの結合状態を測定すること
    を含む、方法。
  24. 　コロナウイルス感染に罹患している被験者に由来する試料中の好中球由来のタンパク質またはその対応する結合分子と結合した複合体を検出または定量する方法であって、
    （１）試料と、好中球由来のタンパク質またはその対応する結合分子と結合した複合体に対する抗体またはその抗原結合フラグメントを接触させること、
    （２）該好中球由来のタンパク質またはその対応する結合分子と結合した複合体と、該抗体またはその抗原結合フラグメントとの結合状態を測定すること
    を含む、方法。
  25. 　前記好中球由来のタンパク質が、好中球エラスターゼ、アズロシジン、ラクトフェリン、ミエロペルオキシダーゼ、およびペプジルアルギニン・デイミナーゼ４からなる群から選択される少なくとも１種である、請求項２１～２４のいずれかに記載の方法。
  26. 　前記好中球由来のタンパク質が、好中球エラスターゼである、請求項２５に記載の方法。
  27. 　前記コロナウイルス感染症が、ＣＯＶＩＤ－１９である、請求項２１～２６のいずれかに記載の方法。
  28. 　コロナウイルス感染症の重症度の評価、重症化の予測、または重症化リスクの評価に用いるための試薬を製造するための、好中球由来のタンパク質またはその対応する結合分子と結合した複合体に対する抗体またはその抗原結合フラグメントの使用。
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