WO2023016525A1 - 用作atr激酶抑制剂的化合物 - Google Patents

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WO2023016525A1
WO2023016525A1 PCT/CN2022/111868 CN2022111868W WO2023016525A1 WO 2023016525 A1 WO2023016525 A1 WO 2023016525A1 CN 2022111868 W CN2022111868 W CN 2022111868W WO 2023016525 A1 WO2023016525 A1 WO 2023016525A1
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phenyl
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butyl
isoxazol
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彭程
张绍云
张楠
钱梦飞
李中洋
宋国伟
邹罡
袁海卿
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苏州爱科百发生物医药技术有限公司
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    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/495—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with two or more nitrogen atoms as the only ring heteroatoms, e.g. piperazine or tetrazines
    • A61K31/4965—Non-condensed pyrazines
    • A61K31/497—Non-condensed pyrazines containing further heterocyclic rings
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
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    • C07D413/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and oxygen atoms as the only ring hetero atoms
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    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
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    • C07D417/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and sulfur atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D415/00
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    • C07D417/04—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and sulfur atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D415/00 containing two hetero rings directly linked by a ring-member-to-ring-member bond

Definitions

  • the disclosure belongs to the field of medicinal chemistry, and in particular relates to an ATR kinase inhibitor and its preparation method and application.
  • ATR is an ATM Rad3-related protein kinase
  • ATM Ataxia-telangiectasia mutated, telangiectasia ataxia mutation
  • DNA-PKcs DNA-dependent protein kinase catalytic subunit, DNA-dependent protein kinase Catalytic subunit
  • PI3KKs Phosphoinositide 3 kinase-related protein kinases, phosphoinositide 3 kinase-related protein kinases
  • DNA damage Affected by external pressure or the internal environment of the body, cells undergo DNA damage, especially DNA single-strand or double-strand breaks (Double Strand Breaks, DSB) and replication stress.
  • DNA damage Response DNA-damage response, DDR
  • DDR DNA-damage response
  • ATM and ATR are activated by DNA damage and DNA replication stress, but their DNA damage specificity and function are different.
  • ATM is mainly activated by double-strand DNA breaks, while ATR responds to a wide range of DNA damage, including DSBs and various DNA lesions that interfere with replication. The two act synergistically to signal DNA damage and regulate downstream processes.
  • many types of cancer cells are defective in some of their DNA repair processes, such as ATM signaling, thereby displaying a greater dependence on their remaining intact DNA repair proteins, such as ATR.
  • ATR DNA repair proteins
  • Synthetic lethality refers to the occurrence of single gene inactivation that is tolerated for cell survival in a pair of genes that are functionally similar or compensatory, whereas simultaneous disruption of multiple genes results in cell death.
  • the treatment strategy based on synthetic lethality has three advantages: first, ATM is one of the most common abnormal genes in cancer, according to the COSMIC database, it is in tumors and hematological malignancies 167 distinct ATM somatic mutations (excluding variants of unknown origin) were observed, thus therapeutic strategies based on synthetic lethality can combat most cancer mutations; second, corresponding patients can be easily identified based on the high selectivity of genetic mutations ; Finally, combined with chemotherapy drugs can improve its efficacy and reduce the dose, avoid or reduce adverse reactions.
  • ATR kinase inhibitors in preclinical and clinical research stages include Berzosertib (VX-970), Ceralaserti (AZD6738), Elimusertib (BAY-1895344), ART0380, RP-3500, VX-803 and M1774 disclosed in WO2010071837A1.
  • VX-970 is undergoing Phase I/II or Phase II clinical trials for indications such as prostate cancer, small cell lung cancer, ovarian cancer, urothelial cancer and non-small cell lung cancer.
  • the clinical treatment of AZD6738 for breast cancer, head and neck squamous cell carcinoma, gastric cancer and non-small cell lung cancer has entered phase II.
  • ART0380 for the treatment of ovarian cancer RP-3500 for the treatment of solid tumors, and VX-803 for the treatment of breast cancer are currently in phase I/II clinical trials.
  • BAY-1895344 is in the treatment of lymphoma and solid tumors, and M1774 in the treatment of solid tumors is in phase I clinical trials.
  • ATR kinase inhibitors may be effective either as single agents or as sensitizers to radiotherapy or genotoxic chemotherapy.
  • Ring A, ring B and ring C are 6 to 10 membered aryl or 5 to 10 membered heteroaryl;
  • R 2 and R 5 are selected from hydrogen, deuterium, halogen, C 1-6 alkyl, amino and C 1-6 alkoxy;
  • each R 3 is independently selected from hydrogen, deuterium, halogen, C 1-6 alkyl and is selected from cyano, amino, hydroxyl, halogen, C 1-6 alkyl and C 1-6 alkoxy C 1-6 alkyl substituted by the substituent of the group;
  • R 4 is selected from hydrogen, deuterium, C 1-6 alkyl, 3 to 7 membered cycloalkyl, 3 to 7 membered heterocyclyl, C 1-6 alkylamino and (C 1-3 alkyl) 2 amino;
  • each R 6 is independently selected from hydrogen, deuterium, halogen, amino, C 1-6 alkoxy, C 1-6 alkyl and is selected from cyano, amino, hydroxyl, halogen, C 1-6 C 1-6 alkyl substituted by substituents of 6 alkyl and C 1-6 alkoxy;
  • Each R 7 is independently selected from hydrogen, deuterium, C 1-6 alkyl, cyano, 3 to 7 membered cycloalkyl, 3 to 7 membered heterocyclyl, C 1-6 alkoxy, C 1-6 6 alkylamino and C 1-6 alkyl, 3 to 7 membered cycloalkane substituted by a substituent selected from cyano, amino, hydroxyl, halogen, C 1-6 alkyl and C 1-6 alkoxy and 3 to 7 membered heterocyclyl; and
  • n1, n2 and n3 is any integer of 0 to 2.
  • aminopyrazine compounds provided by the present disclosure have high inhibitory activity on ATR, excellent drug efficacy, in vitro/in vivo pharmacokinetic properties and safety, and have high clinical application prospects.
  • Figure 3 The change (percentage) of mouse tumor volume after administration of different administration groups
  • One aspect of the present disclosure provides a compound represented by formula I or a pharmaceutically acceptable salt, ester, isomer, solvate, prodrug or isotope labeling thereof:
  • Ring A, ring B and ring C are 6 to 10 membered aryl or 5 to 10 membered heteroaryl;
  • R 2 and R 5 are selected from hydrogen, deuterium, halogen, C 1-6 alkyl, amino and C 1-6 alkoxy;
  • each R 3 is independently selected from hydrogen, deuterium, halogen, C 1-6 alkyl and is selected from cyano, amino, hydroxyl, halogen, C 1-6 alkyl and C 1-6 alkoxy C 1-6 alkyl substituted by the substituent of the group;
  • R 4 is selected from hydrogen, deuterium, C 1-6 alkyl, 3 to 7 membered cycloalkyl, 3 to 7 membered heterocyclyl, C 1-6 alkylamino and (C 1-3 alkyl) 2 amino;
  • each R 6 is independently selected from hydrogen, deuterium, halogen, amino, C 1-6 alkoxy, C 1-6 alkyl and is selected from cyano, amino, hydroxyl, halogen, C 1-6 C 1-6 alkyl substituted by substituents of 6 alkyl and C 1-6 alkoxy;
  • Each R 7 is independently selected from hydrogen, deuterium, C 1-6 alkyl, cyano, 3 to 7 membered cycloalkyl, 3 to 7 membered heterocyclyl, C 1-6 alkoxy, C 1-6 6 alkylamino and C 1-6 alkyl, 3 to 7 membered cycloalkane substituted by a substituent selected from cyano, amino, hydroxyl, halogen, C 1-6 alkyl and C 1-6 alkoxy and 3 to 7 membered heterocyclyl; and
  • n1, n2 and n3 is any integer of 0 to 2.
  • the compound represented by formula I or a pharmaceutically acceptable salt, ester, isomer, solvate, prodrug or isotope labeling thereof wherein n1 is 0 or 1; n2 is 1 or 2, and n3 is preferably 0 or 1.
  • the compound represented by formula I or a pharmaceutically acceptable salt, ester, isomer, solvate, prodrug or isotope labeling thereof wherein n1 is 0 or 1; n2 is 0 or 1; and n3 is 0 or 1.
  • the compound represented by formula I or a pharmaceutically acceptable salt, ester, isomer, solvate, prodrug or isotope labeling thereof wherein the ring A and ring B are selected from From phenyl and 5 to 6-membered heteroaryl; preferably, the ring A and ring B are selected from phenyl and 6-membered heteroaryl; more preferably, the ring A and ring B are selected from phenyl and pyridine Most preferably, said ring A and ring B are selected from phenyl groups.
  • the compound represented by formula I or a pharmaceutically acceptable salt, ester, isomer, solvate, prodrug or isotope labeling thereof wherein the ring C is 5 to 6 Member heteroaryl;
  • the ring C is a 5-member heteroaryl; More preferably, the ring C is selected from isoxazole, oxadiazole and thiadiazole; Most preferably, the ring C is selected from From isoxazole and oxadiazole.
  • the compound represented by formula I or a pharmaceutically acceptable salt, ester, isomer, solvate, prodrug or isotope label thereof is formula Ia
  • the indicated compound or its pharmaceutically acceptable salt, ester, isomer, solvate, prodrug or isotope label, wherein R 1 , R 2 , R 3 , R 4 , R 5 , R 6 , Q 1 , Q 2 , n1, n2 and n3 are as defined in formula I.
  • the compound represented by formula I or a pharmaceutically acceptable salt, ester, isomer, solvate, prodrug or isotope label thereof is a compound represented by formula I-b or Its pharmaceutically acceptable salts, esters, isomers, solvates, prodrugs or isotope labels:
  • Ring C is a 5-membered heteroaryl group
  • L is CR 10a R 11a or NR 14a ;
  • n4a is 0, 1 or 2;
  • R 9a is selected from oxygen and NR 7 ;
  • R 10a and R 11a are each independently selected from hydrogen, deuterium, C 1-6 alkyl, C 1-6 alkoxy and C 1-6 alkylamino; or R 10 and R 11 are together with the atoms to which they are attached Forming a 3 to 7 membered cycloalkyl group or comprising 1 or 2 3 to 7 membered heterocyclic groups selected from oxygen, nitrogen and sulfur;
  • R 14a is selected from hydrogen, deuterium, substituted or unsubstituted C 1-6 alkyl, C 1-6 alkoxy, 3 to 7 membered cycloalkyl and 3 to 7 membered heterocyclic group, the replacement is selected Substituted by substituents from halogen, hydroxyl, amino, C 1-6 alkylamino and (C 1-6 alkyl) 2 amino;
  • R 1 , R 2 , R 3 , R 6 , R 7 , Q 1 , n1, n2 and n3 are as defined in formula I.
  • the compound represented by formula I or formula I-b or a pharmaceutically acceptable salt, ester, isomer, solvate, prodrug or isotope label thereof is formula I-b-1
  • Ring C, R 1 , R 2 , R 3 , R 6 , R 7 , Q 1 , n1, n2, n3, L, n4a, R 9a and R 12a are as defined in formula Ib.
  • the compound shown in formula I, formula I-b, formula I-b-1 or formula I-b-2 or a pharmaceutically acceptable salt, ester, isomer, solvate, prodrug or Isotope markers wherein the ring C is 5 to 6-membered heteroaryl; preferably, the ring C is 5-membered heteroaryl; more preferably, the ring C is selected from isoxazole, oxadiazole and Thiadiazole; most preferably, the ring C is selected from isoxazole and oxadiazole.
  • the compound shown in formula I-b, formula I-b-1 or formula I-b-2 or its pharmaceutically acceptable salt, ester, isomer, solvate, prodrug or isotope label wherein n4a is 0 or 1; preferably, n4a is 0.
  • the compound represented by Formula Ib, Formula Ib-1 or Formula Ib-2 or a pharmaceutically acceptable salt, ester, isomer, solvate, prodrug or isotope label wherein R 9a is selected from oxygen and NH; preferably, R 9a is selected from oxygen.
  • the compound represented by Formula Ib, Formula Ib-1 or Formula Ib-2 or a pharmaceutically acceptable salt, ester, isomer, solvate, prodrug or isotope label wherein L is CR 10a R 11a , R 10a and R 11a are each independently selected from hydrogen, deuterium, C 1-6 alkyl and C 1-6 alkoxy; preferably, L is CR 10a R 11a , R 10a and R 11a are each independently selected from hydrogen and C 1-6 alkyl; more preferably, L is CR 10a R 11a , both R 10a and R 11a are C 1-6 alkyl; most preferably, L is CR 10a R 11a , R 10a and R 11a are all methyl groups.
  • the compound represented by Formula Ib, Formula Ib-1 or Formula Ib-2 or a pharmaceutically acceptable salt, ester, isomer, solvate, prodrug or isotope label wherein R 10a and R 11a together with the atoms they are connected to form a 3 to 7 membered cycloalkyl group or contain 1 or 2 3 to 7 membered heterocyclic groups selected from oxygen, nitrogen and sulfur; the 3 to 7 membered Cycloalkyl is cyclopropanyl.
  • the compound represented by Formula Ib, Formula Ib-1 or Formula Ib-2 or a pharmaceutically acceptable salt, ester, isomer, solvate, prodrug or isotope label wherein R 12a and R 13a are each independently selected from hydrogen, deuterium, halogen, hydroxyl, C 1-6 alkyl, C 1-6 alkoxy; preferably, R 12a and R 13a are each independently selected from hydrogen, Deuterium, halogen, hydroxyl and C 1-6 alkyl; more preferably, R 12a and R 13a are each independently selected from hydrogen, deuterium, methyl, fluorine and hydroxyl; further preferably, R 12a and R 13a are each independently is selected from hydrogen and fluorine; most preferably R 12a is hydrogen and R 13a is fluorine.
  • the compound represented by Formula Ib, Formula Ib-1 or Formula Ib-2 or a pharmaceutically acceptable salt, ester, isomer, solvate, prodrug or isotope label wherein R 14a is selected from hydrogen, methyl, ethyl, isopropyl, cyclopropyl, hydroxyethyl and
  • the compound represented by formula Ib or a pharmaceutically acceptable salt, ester, isomer, solvate, prodrug or isotope label thereof wherein for R 10a , R 11a , R 12a and R 13a are as defined in formula Ib; preferably, for R 10a , R 11a and R 12a are as defined in formula Ib; more preferably, for Most preferably, for
  • the compound represented by Formula I, Formula Ia, Formula Ib, Formula Ib-1 or Formula Ib-2 or a pharmaceutically acceptable salt, ester, isomer, solvate, Prodrugs or isotope labels wherein R 2 and R 5 are each independently selected from hydrogen, deuterium, halogen and C 1-6 alkyl; preferably, R 2 and R 5 are each independently hydrogen or deuterium.
  • the 6-membered heterocyclic group is any one of the following structures:
  • R 8 is selected from hydrogen, deuterium, C 1-6 alkyl and 3 to 7 membered cycloalkyl; preferably, R 8 is hydrogen.
  • the compound represented by Formula I, Formula Ia, Formula Ib, Formula Ib-1 or Formula Ib-2 or a pharmaceutically acceptable salt, ester, isomer, solvate, Prodrugs or isotope labels wherein R 3 is halogen or halogen-substituted C 1-6 alkyl, preferably F or CF 3 .
  • the compound represented by Formula I, Formula Ia, Formula Ib, Formula Ib-1 or Formula Ib-2 or a pharmaceutically acceptable salt, ester, isomer, solvate, Prodrugs or isotope labels wherein R 3 is selected from hydrogen atom, halogen, C 1-6 alkyl and halogen substituted C 1-6 alkyl; preferably, R 3 is selected from hydrogen atom, halogen and halogen substituted C 1-6 alkyl; more preferably, R 3 is selected from hydrogen atom, F and CF 3 .
  • the compound represented by formula I or formula Ia or a pharmaceutically acceptable salt, ester, isomer, solvate, prodrug or isotope labeling thereof wherein R is selected from C 1-6 alkyl, 3 to 7 membered cycloalkyl, C 1-6 alkylamino and (C 1-3 alkyl) 2 amino; preferably, R is methyl or any of the following structures:
  • the compound represented by Formula I or Formula Ia or a pharmaceutically acceptable salt, ester, isomer, solvate, prodrug or isotope labeling thereof wherein R 4 and R 5 Together with the atoms they are connected to form a 5 to 7 membered heterocyclic group comprising 1 to 3 selected from oxygen, nitrogen and sulfur, the 5 to 7 membered heterocyclic group is preferably any of the following structures:
  • n4 is an integer selected from 0 to 2;
  • R9 is selected from oxygen and NR7 ;
  • R 10 and R 11 are each independently selected from hydrogen, deuterium, C 1-6 alkyl, C 1-6 alkoxy and C 1-6 alkylamino; or R 10 and R 11 are together with the atoms to which they are attached Forming a 3 to 7 membered cycloalkyl group or comprising 1 or 2 3 to 7 membered heterocyclic groups selected from oxygen, nitrogen and sulfur;
  • R 14 is selected from hydrogen, deuterium, substituted or unsubstituted C 1-6 alkyl, C 1-6 alkoxy, 3 to 7 membered cycloalkyl and 3 to 7 membered heterocyclic group, the replacement is selected Substituted by substituents from halogen, hydroxyl, amino, C 1-6 alkylamino and (C 1-6 alkyl) 2 amino;
  • R 7 is as defined in formula I.
  • the compound represented by Formula I, Formula Ia, Formula Ib, Formula Ib-1 or Formula Ib-2 or a pharmaceutically acceptable salt, ester, isomer, solvate, Prodrugs or isotopic labels wherein each R 6 is independently selected from hydrogen, deuterium and fluorine.
  • Q 1 is selected from C 1-6 alkylene, -CO-,
  • each R 7 is independently selected from hydrogen, deuterium, methyl and cyano; preferably, each R 7 is independently selected from hydrogen and methyl.
  • n4 is 0 or 1 in the formula II-a or II-b.
  • R 9 in the formula II-a, II-b or II-c is selected from oxygen and NH.
  • R 10 and R 11 in the formula II-a are each independently selected from hydrogen, deuterium, C 1-6 alkyl and C 1-6 alkoxy; preferably, R 10 and R 11 are each independently selected from hydrogen and C 1-6 alkyl; more preferably, R 10 and R 11 are each independently selected from hydrogen and methyl.
  • R 10 and R 11 form a 3 to 7 membered cycloalkyl group together with the atoms they are connected to or contain 1 or 2 3 selected from oxygen, nitrogen and sulfur to 7-membered heterocyclic group; the 3- to 7-membered cycloalkyl group is cyclopropanyl.
  • R 12 and R 13 in the formula II-a are each independently selected from hydrogen, deuterium, halogen, hydroxyl, C 1-6 alkyl, C 1-6 alkoxy; preferably , R 12 and R 13 are each independently selected from hydrogen, deuterium, halogen, hydroxyl and C 1-6 alkyl; more preferably, R 12 and R 13 are each independently selected from hydrogen, deuterium, methyl, fluorine and hydroxyl ; Further preferably, R 12 and R 13 are each independently selected from hydrogen and fluorine; most preferably, R 12 is hydrogen, and R 13 is fluorine.
  • R in the formula II-b is selected from hydrogen, methyl, ethyl, isopropyl, cyclopropyl, hydroxyethyl and
  • Typical compounds of the present disclosure include, but are not limited to:
  • the present disclosure also provides a preparation method of a compound represented by formula I,
  • step S1 is reacted in the presence of bistrifluoroacetyliodobenzene.
  • step S2 is reacted in the presence of bis-pinacol borate.
  • step S2 is reacted in the presence of a base.
  • the base in step S2 is selected from inorganic bases and organic bases.
  • the inorganic base described in step S2 is selected from one or more of sodium hydride, potassium phosphate, potassium acetate, sodium carbonate, potassium carbonate, cesium carbonate, sodium hydroxide, lithium hydroxide and potassium hydroxide Various.
  • the organic base described in step S2 is selected from triethylamine, pyridine, N,N-diisopropylethylamine, n-butyllithium, lithium diisopropylamide, sodium acetate, potassium acetate , sodium tert-butoxide, potassium tert-butoxide and 1,8-diazabicycloundec-7-ene.
  • step S2 is reacted in the presence of [1,1'-bis(diphenylphosphino)ferrocene]palladium dichloride.
  • step S3 is reacted in the presence of a base.
  • the base in step S3 is selected from inorganic bases and organic bases.
  • the inorganic base described in step S3 is selected from one or more of sodium hydride, potassium phosphate, potassium acetate, sodium carbonate, potassium carbonate, cesium carbonate, sodium hydroxide, lithium hydroxide and potassium hydroxide Various.
  • the organic base described in step S3 is selected from triethylamine, pyridine, N,N-diisopropylethylamine, n-butyllithium, lithium diisopropylamide, sodium acetate, potassium acetate , sodium tert-butoxide, potassium tert-butoxide and 1,8-diazabicycloundec-7-ene.
  • step S3 is reacted in the presence of [1,1'-bis(diphenylphosphino)ferrocene]palladium dichloride.
  • step S4 is reacted in the presence of an acid.
  • the acid in step S4 is selected from one or more of hydrochloric acid, sulfuric acid, formic acid, acetic acid, and trifluoroacetic acid.
  • the method when there is an amino group in the R group in the compound of formula a, b, c, d, I, the method further includes the steps of protecting and deprotecting the amino group.
  • the protecting group is selected from Boc and Cbz.
  • step S1 is reacted in the presence of hydrazine hydrate.
  • step S2 is reacted in the presence of a base.
  • the base in step S2 is selected from inorganic bases and organic bases.
  • the inorganic base described in step S2 is selected from one or more of sodium hydride, potassium phosphate, potassium acetate, sodium carbonate, potassium carbonate, cesium carbonate, sodium hydroxide, lithium hydroxide and potassium hydroxide Various.
  • the organic base described in step S2 is selected from triethylamine, pyridine, N,N-diisopropylethylamine, n-butyllithium, lithium diisopropylamide, sodium acetate, potassium acetate , sodium tert-butoxide, potassium tert-butoxide and 1,8-diazabicycloundec-7-ene.
  • step S2 occurs in the presence of O-(7-azabenzotriazol-1-yl)-N,N,N',N'-tetramethyluronium hexafluorophosphate reaction.
  • step S3 is reacted in the presence of a base.
  • the base in step S3 is selected from inorganic bases and organic bases.
  • the inorganic base described in step S3 is selected from one or more of sodium hydride, potassium phosphate, potassium acetate, sodium carbonate, potassium carbonate, cesium carbonate, sodium hydroxide, lithium hydroxide and potassium hydroxide Various.
  • the organic base in step S3 is selected from triethylamine, pyridine, diisopropylethylamine, n-butyllithium, lithium diisopropylamide, sodium acetate, potassium acetate, tert-butanol One or more of sodium, potassium tert-butoxide and 1,8-diazabicyclounde-7-ene.
  • step S3 is reacted in the presence of dibromotriphenylphosphine.
  • step S4 is reacted in the presence of a base.
  • the base in step S4 is selected from inorganic bases and organic bases.
  • the inorganic base described in step S4 is selected from one or more of sodium hydride, potassium phosphate, potassium acetate, sodium carbonate, potassium carbonate, cesium carbonate, sodium hydroxide, lithium hydroxide and potassium hydroxide Various.
  • the organic base described in step S4 is selected from triethylamine, pyridine, N,N-diisopropylethylamine, n-butyllithium, lithium diisopropylamide, sodium acetate, potassium acetate , sodium tert-butoxide, potassium tert-butoxide and 1,8-diazabicycloundec-7-ene.
  • step S4 is reacted in the presence of [1,1'-bis(diphenylphosphino)ferrocene]palladium dichloride.
  • the method when there is an amino group in the R group in the compound of formulas c, d, and I, the method further includes the steps of protecting and deprotecting the amino group.
  • the protecting group is selected from Boc and Cbz.
  • the present disclosure also provides a pharmaceutical composition, which contains a therapeutically effective amount of the compounds shown in Formula I, Formula I-a, Formula I-b, Formula I-b-1, Formula I-b-2 or Table A or Table B of the present disclosure.
  • the unit dosage of the pharmaceutical composition described in the present disclosure is 0.001 mg-1000 mg.
  • the pharmaceutical composition contains 0.01%-99.99% of Formula I, Formula I-a, Formula I-b, Formula I-b-1, Formula I-b-2 or Table A of the present disclosure. Or a compound shown in Table B or a pharmaceutically acceptable salt, ester, isomer, solvate, prodrug or isotope label. In some embodiments, the pharmaceutical composition contains 0.1%-99.9% of the compounds shown in Formula I, Formula I-a, Formula I-b, Formula I-b-1, Formula I-b-2 or Table A or Table B of the present disclosure Or a pharmaceutically acceptable salt, ester, isomer, solvate, prodrug or isotope label.
  • the pharmaceutical composition contains 0.5%-99.5% of the compound shown in Formula I, Formula I-a, Formula I-b, Formula I-b-1, Formula I-b-2 or Table A or Table B of the present disclosure Or a pharmaceutically acceptable salt, ester, isomer, solvate, prodrug or isotope label.
  • the pharmaceutical composition contains 1%-99% of the compounds shown in Formula I, Formula I-a, Formula I-b or Table A or Table B of the present disclosure or pharmaceutically acceptable salts and esters thereof , isomers, solvates, prodrugs or isotopic labels.
  • the pharmaceutical composition contains 2%-98% of the compounds shown in Formula I, Formula I-a, Formula I-b, Formula I-b-1, Formula I-b-2 or Table A or Table B of the present disclosure Or a pharmaceutically acceptable salt, ester, isomer, solvate, prodrug or isotope label.
  • the pharmaceutical composition of the present disclosure contains 0.01%-99.99% of a pharmaceutically acceptable carrier, diluent or excipient based on the total weight of the composition. In certain embodiments, the pharmaceutical compositions of the present disclosure contain 0.1%-99.9% of a pharmaceutically acceptable carrier, diluent or excipient. In certain embodiments, the pharmaceutical compositions of the present disclosure contain 0.5%-99.5% of a pharmaceutically acceptable carrier, diluent or excipient. In certain embodiments, the pharmaceutical compositions of the present disclosure contain 1%-99% of pharmaceutically acceptable carriers, diluents or excipients. In certain embodiments, the pharmaceutical compositions of the present disclosure contain 2%-98% of pharmaceutically acceptable carriers, diluents or excipients.
  • Compounds shown in Formula I, Formula I-a, Formula I-b, Formula I-b-1, Formula I-b-2 or Table A or Table B involved in the present disclosure or their pharmaceutically acceptable salts, esters, isomers, solvates , prodrugs, or isotope labels, and mixtures and compositions containing them, can be administered into living organisms via any route of administration.
  • the route of administration can be oral administration, intravenous injection, intramuscular injection, subcutaneous injection, rectal administration, vaginal administration, sublingual administration, nasal cavity inhalation, oral inhalation, eye drops, and local or systemic transdermal administration.
  • Compounds shown in Formula I, Formula I-a, Formula I-b, Formula I-b-1, Formula I-b-2 or Table A or Table B involved in the present disclosure or their pharmaceutically acceptable salts, esters, isomers, solvates , prodrugs or isotope markers and mixtures and compositions containing them can be formulated into a single dose, which contains the active compound of the present invention as well as carriers, excipients, etc., and the dosage form can be tablets, capsules, injections , granules, powders, suppositories, pills, creams, pastes, gels, powders, oral solutions, inhalants, suspensions, dry suspensions, patches and lotions, etc.
  • dosage forms may contain ingredients commonly used in pharmaceutical preparations, such as diluents, absorbents, wetting agents, binders, disintegrants, colorants, pH regulators, antioxidants, bacteriostats, isotonic regulators and antibacterial agents. Adhesive, etc.
  • Suitable formulations of the above-mentioned various dosage forms are available from public sources, such as Remington: The Science and Practice of Pharmacy, 21st edition; Lippincott Williams & Wilkins 2006 and Rowe, Raymond C. Handbook of Pharmaceutical Excipients, Chicago, Pharmaceutical Press 2005 Published in 2010, so those skilled in the art can easily prepare.
  • the dosage of the compound of the present disclosure can be 0.01 to 500 mg/kg per day , the preferred daily dose is 1-100 mg/kg, which can be administered in single or multiple doses.
  • the present disclosure also provides a compound shown in Formula I, Formula Ia, Formula Ib, Formula Ib-1, Formula Ib-2 or Table A or Table B or a pharmaceutically acceptable salt, ester, isomer, Solvates, prodrugs or isotope labels or pharmaceutical compositions comprising them, wherein the isotope is selected from 2 H, 3 H, 13 C, 14 C, 15 N, 17 O, 18 O, 31 P, 32 P , 35 S, 18 F and 36 Cl, preferably, the isotope is 2 H.
  • the present disclosure also provides a compound represented by formula I, formula Ib, formula Ib-1 or formula Ib-2 or a pharmaceutically acceptable salt, ester, isomer, solvate, prodrug or isotope label Or or a pharmaceutical composition comprising it, wherein ring C is replaced by an isotope selected from 2 H, 3 H, 13 C, 14 C, 15 N, 17 O, 18 O, 31 P, 32 P, 35 S , 18 F and 36 Cl, preferably, the isotope is 2 H.
  • the present disclosure also provides a compound shown in Formula I, Formula I-a, Formula I-b, Formula I-b-1, Formula I-b-2 or Table A or Table B or a pharmaceutically acceptable salt, ester, isomer, Application of solvate, prodrug or isotope label or pharmaceutical composition containing it in the preparation of medicine for inhibiting ATR kinase.
  • the present disclosure also provides a compound shown in Formula I, Formula I-a, Formula I-b, Formula I-b-1, Formula I-b-2 or Table A or Table B or a pharmaceutically acceptable salt, ester, isomer, Use of solvates, prodrugs or isotope labels or pharmaceutical compositions containing them in the preparation of medicines for preventing and/or treating diseases or disorders mediated by ATR kinase.
  • the present disclosure also provides a compound shown in Formula I, Formula I-a, Formula I-b, Formula I-b-1, Formula I-b-2 or Table A or Table B or a pharmaceutically acceptable salt, ester, isomer, Use of solvates, prodrugs or isotopic labels or pharmaceutical compositions comprising them in the manufacture of medicaments for the prevention and/or treatment of diseases or disorders mediated by ATR kinase; wherein said diseases or disorders are excessive or abnormal Diseases, disorders and conditions of cell proliferation; preferably, the diseases, disorders and conditions are selected from cancer and myeloproliferative disorders; more preferably, the cancer is selected from skin cancer, bladder cancer, ovarian cancer, breast cancer, gastric cancer , prostate cancer, colorectal cancer, lung cancer, bone cancer, brain cancer, esophageal cancer, tongue cancer, stomach cancer, kidney cancer, cervical cancer, endometrial cancer, testicular cancer, urinary cancer, melanoma, squamous cell carcinoma, Glioma, Meningiom
  • the present disclosure also provides a compound shown in Formula I, Formula I-a, Formula I-b, Formula I-b-1, Formula I-b-2 or Table A or Table B or a pharmaceutically acceptable salt, ester, isomer, A solvate, prodrug or isotopic label or a pharmaceutical composition comprising the same for use as a medicament.
  • the present disclosure also provides a compound shown in Formula I, Formula I-a, Formula I-b, Formula I-b-1, Formula I-b-2 or Table A or Table B or a pharmaceutically acceptable salt, ester, isomer, A solvate, prodrug or isotopic label, or a pharmaceutical composition comprising the same, for use as an ATR kinase inhibitor.
  • the present disclosure also provides a compound shown in Formula I, Formula I-a, Formula I-b, Formula I-b-1, Formula I-b-2 or Table A or Table B or a pharmaceutically acceptable salt, ester, isomer, A solvate, a prodrug or an isotope label or a pharmaceutical composition comprising the same for use in the prevention and/or treatment of ATR kinase mediated diseases or conditions.
  • the present disclosure also provides a compound shown in Formula I, Formula I-a, Formula I-b, Formula I-b-1, Formula I-b-2 or Table A or Table B or a pharmaceutically acceptable salt, ester, isomer, Solvates, prodrugs or isotopic labels or pharmaceutical compositions comprising them for the prevention and/or treatment of diseases or disorders mediated by ATR kinase; wherein said diseases or disorders are diseases of excessive or abnormal cell proliferation, Disorders and conditions; preferably, the diseases, disorders and conditions are selected from cancer and myeloproliferative disorders; more preferably, the cancer is selected from the group consisting of skin cancer, bladder cancer, ovarian cancer, breast cancer, gastric cancer, prostate cancer, tumor Rectal cancer, lung cancer, bone cancer, brain cancer, esophagus cancer, tongue cancer, stomach cancer, kidney cancer, cervical cancer, endometrial cancer, testicular cancer, urinary cancer, melanoma, squamous cell carcinoma, glioma, meninges Hodgkin's Ly
  • the present disclosure also provides a method for inhibiting ATR kinase, which comprises administering a therapeutically effective amount of the formula I, formula I-a, formula I-b, formula I-b-1, formula I-b-2, or shown in Table A or Table B to a patient in need.
  • the present disclosure also provides a method for preventing and/or treating ATR kinase-mediated diseases or conditions, which comprises administering a therapeutically effective amount of formula I, formula I-a, formula I-b, formula I-b-1, formula I-b- 2 or a compound shown in Table A or Table B or a pharmaceutically acceptable salt, ester, isomer, solvate, prodrug or isotope label or a pharmaceutical composition comprising the same.
  • the present disclosure also provides a method for preventing and/or treating ATR kinase-mediated diseases or conditions, which comprises administering a therapeutically effective amount of formula I, formula I-a, formula I-b, formula I-b-1, formula I-b- 2 or a compound shown in Table A or Table B or a pharmaceutically acceptable salt, ester, isomer, solvate, prodrug or isotope label or a pharmaceutical composition comprising it; wherein the disease or disease are diseases, disorders and conditions of excessive or abnormal cell proliferation; preferably, said diseases, disorders and conditions are selected from cancer and myeloproliferative disorders; more preferably, said cancers are selected from skin cancer, bladder cancer, ovarian cancer, Breast cancer, stomach cancer, prostate cancer, colorectal cancer, lung cancer, bone cancer, brain cancer, esophagus cancer, tongue cancer, stomach cancer, kidney cancer, cervical cancer, endometrial cancer, testicular cancer, urinary cancer, melanoma, squamous cell carcinoma Cystoid cell carcinoma
  • the present disclosure further provides a method for treating diseases mediated by ATR kinase, the mammal may be a human, or may be a non-human mammal, for therapeutic purposes, comprising administering formula I, formula I-a, formula I-a, Compounds shown in Formula I-b, Formula I-b-1, Formula I-b-2 or Table A or Table B or pharmaceutically acceptable salts, esters, isomers, solvates, prodrugs or isotope labels or compounds comprising them pharmaceutical composition.
  • C 1-6 alkyl alone or in combination means a saturated linear or branched alkyl group containing 1-6, especially 1-4 carbon atoms, including methyl, ethyl, propyl, Isopropyl, butyl, sec-butyl, isobutyl, tert-butyl, n-pentyl, 2-pentyl, 3-pentyl, 2-methyl-2-butyl, 3-methyl-2- Butyl, 3-methyl-1-butyl, 2-methyl-1-butyl, n-hexyl, 2-hexyl, 3-hexyl, 2-methyl-2-pentyl, 3-methyl-2 -Pentyl, 4-methyl-2-pentyl, 3-methyl-3-pentyl, 2-methyl-3-pentyl, 2,3-dimethyl-2-butyl, 3,3 ,-Dimethyl-2-butyl and so on.
  • C 1-6 alkyl is any one of methyl, ethyl, isopropyl and tert-butyl.
  • Alkyl groups may be substituted or unsubstituted, and when substituted, substituents may be substituted at any available point of attachment, said substituents being preferably one or more of the following groups independently selected from alkyl radical, alkenyl, alkynyl, alkoxy, alkylthio, alkylamino, halogen, mercapto, hydroxyl, nitro, cyano, cycloalkyl, heterocyclyl, aryl, heteroaryl, cycloalkoxy group, heterocycloalkoxy group, cycloalkylthio group, heterocycloalkylthio group, oxo group, carboxyl group or carboxylate group.
  • C 1-6 alkylene refers to a saturated straight or branched chain aliphatic hydrocarbon group having two residues derived from the same carbon atom or two different carbon atoms of a parent alkane by removing two hydrogen atoms. group, which is an alkylene group containing 1 to 6 carbon atoms.
  • alkylene examples include, but are not limited to, methylene (-CH 2 -), 1,1-ethylene (-CH(CH 3 )-), 1,2-ethylene (-CH 2 CH 2 )-, 1,1-propylene (-CH(CH 2 CH 3 )-), 1,2-propylene (-CH 2 CH(CH 3 )-), 1,3-propylene (-CH 2 CH 2 CH 2 -), 1,4-butylene (-CH 2 CH 2 CH 2 CH 2 -), etc.
  • Alkylene groups may be substituted or unsubstituted, and when substituted, substituents may be substituted at any available point of attachment.
  • 3 to 7 membered cycloalkyl refers to a saturated or partially unsaturated monocyclic or polycyclic cyclic hydrocarbon substituent, which means a saturated cycloalkyl group having 3 to 7, especially 3 to 6 carbon atoms, including Cyclopropyl, cyclobutyl, cyclopentyl, cyclohexyl, cycloheptyl, etc.
  • Particular "C 3-7 cycloalkyl” is cyclopropyl, cyclopentyl, cyclohexyl and the like.
  • C 1-6 alkylamino denotes an amino group as defined above, wherein the hydrogen atom of the amino group is replaced by at least one C 1-6 alkyl
  • C 1-6 alk Base means as defined above, correspondingly, "C 1-6 alkylamino” includes methylamino, ethylamino, propylamino, isopropylamino, n-butylamino, isobutylamino, 2-butylamino, tert-butylamino, n-pentylamino, 2-pentylamino, 3-pentylamino, 2-methyl-2-butylamino, 3-methyl-2-butylamino, 3-methyl-1-butylamino, 2-methyl-1-butylamino, n-hexylamino, 2-hexylamino, 3-hexylamino, 2-methyl-2-pentylamino, 3-methyl Base-2-pentylamin
  • C 1-6 alkoxy alone or in combination, denotes the group C 1-6 alkyl-O-, wherein “C 1-6 alkyl” denotes as defined above.
  • heterocyclic group refers to a saturated or partially unsaturated (containing 1 or 2 double bonds) non-aromatic cyclic group composed of carbon atoms and heteroatoms such as nitrogen, oxygen or sulfur.
  • This cyclic group can be
  • the number of heteroatoms in the heterocyclic group is preferably 1, 2, 3 or 4, and the nitrogen, carbon or sulfur atoms in the heterocyclic group can be optionally oxidized.
  • the hydrogen atoms on the "heterocyclyl” are independently optionally substituted with one or more substituents described herein.
  • Heterocyclyl can be attached to the parent molecule through any ring atom in the ring.
  • 3- to 7-membered heterocyclyl refers to a monocyclic heterocyclyl containing 3 to 7 carbon atoms and heteroatoms; for example, aziridinyl, azetidinyl, oxetanyl, pyrrolidinyl , tetrahydrofuryl, tetrahydrothienyl, piperidinyl, morpholinyl, thiomorpholinyl, tetrahydropyranyl, 1,1-dioxothiomorpholinyl.
  • 3 to 7-membered cycloalkylamino means the amino group as defined above, alone or in combination, wherein the hydrogen atom of the amino group is replaced by at least one C 3-7 cycloalkyl group, "C 3- 7 cycloalkyl” means as defined above.
  • 3 to 7-membered heterocyclylamino means, alone or in combination, an amino group as defined above, wherein the hydrogen atom of the amino group is replaced by at least one 3 to 7-membered heterocyclic group, "3 to 7 "Heterocyclyl” means as defined above.
  • aryl means any stable 6- to 10-membered monocyclic or bicyclic aromatic group, including phenyl, naphthyl, tetrahydronaphthyl, 2,3-indanyl or biphenyl and the like.
  • heteroaryl means an aromatic ring group formed by replacing a carbon atom on the ring with at least one heteroatom selected from sulfur, oxygen or nitrogen.
  • This aromatic ring group can be a 5-7 membered monocyclic ring or a 7-12 bicyclic group.
  • the number of heteroatoms in the heterocyclic group is preferably 1, 2, 3 or 4, such as thienyl, pyridyl, pyrimidyl, pyrazinyl, pyridazinyl, pyrrolyl, pyrazolyl, thiazolyl, 1,2,3-triazolyl, 1,2,4-triazolyl, imidazolyl, tetrazolyl, isothiazolyl, oxazolyl, isoxazolyl, thiadiazolyl, oxadiazolyl , naphthyl, benzothienyl, indolyl, benzimidazolyl, benzothiazolyl, benzofuryl, quinolinyl, isoquinolyl, quinazolinyl, etc.
  • arylC 1-6 alkyl means that a C 1-6 alkyl group is substituted by one or more aryl groups, aryl and C 1-6 alkyl being as defined above.
  • heteroarylC 1-6 alkyl means that a C 1-6 alkyl group is substituted by one or more heteroaryl groups, heteroaryl and C 1-6 alkyl are as defined above.
  • amino alone or in combination denotes a primary (-NH 2 ), secondary (-NH-) or tertiary amino group
  • halogen alone or in combination denotes fluorine, chlorine, bromine or iodine. Especially fluorine, chlorine or bromine.
  • cyano alone or in combination refers to the group -CN.
  • hydroxy alone or in combination refers to the group -OH.
  • substituted means that one or more hydrogen atoms in a group, preferably up to 5, more preferably 1 to 3 hydrogen atoms are independently substituted by the corresponding number of substituents. It goes without saying that substituents are only in their possible chemical positions and that a person skilled in the art can determine (by experiment or theory) possible or impossible substitutions without undue effort. For example, an amino or hydroxyl group with free hydrogen may be unstable when bonded to a carbon atom with an unsaturated (eg, ethylenic) bond.
  • replacement means that a certain group is completely replaced by another group, for example, a methylene group is replaced by a heteroatom such as an oxygen atom or a nitrogen atom, and the like.
  • the bond configuration is not specified, i.e. the key can be or both Two configurations.
  • key represents a single configuration, for In the chemical structures of the compounds described in this disclosure, the bond If the configuration is not specified, it can be the Z configuration or the E configuration, or both configurations.
  • isotope label means that an isotope can be introduced into any compound involved in the present invention, and the introduced isotope can be 2 H, 3 H, 13 C, 14 C, 15 N, 17 O, 18 O, 31 P, 32 P, 35 S, 18 F, 36 Cl, preferably, the introduced isotope can be 2 H, 3 H, 13 C, 14 C, more preferably, the introduced isotope is 2 H, specific isotopic derivatives can be obtained by conventional technical preparation.
  • pharmaceutically acceptable salt means that the compounds of the present invention exist in the form of their pharmaceutically acceptable salts, including acid addition salts and base addition salts.
  • Pharmaceutically acceptable salts are described in pharmaceutically salts by SM Berge in J. Pharmaceutical Sciences (Vol. 66: 1-19, 1977).
  • the pharmaceutically acceptable non-toxic acid addition salt means the salt formed by the compound in the present invention and organic or inorganic acid
  • organic or inorganic acid includes but not limited to hydrochloric acid, sulfuric acid, hydrobromic acid, hydrogen iodide acid, phosphoric acid, nitric acid, perchloric acid, acetic acid, oxalic acid, maleic acid, fumaric acid, tartaric acid, benzenesulfonic acid, methanesulfonic acid, salicylic acid, succinic acid, citric acid, lactic acid, propionic acid, benzoic acid, P-toluenesulfonic acid and malic acid, etc.
  • Non-toxic base addition salts refer to salts formed by the compounds of the present invention with organic or inorganic bases, including but not limited to alkali metal salts such as lithium, sodium or potassium salts; alkaline earth metal salts such as calcium or magnesium salts; organic base salts, such as ammonium salts or N + (C 1-6 alkyl) 4 salts formed by organic bases containing N groups.
  • alkali metal salts such as lithium, sodium or potassium salts
  • alkaline earth metal salts such as calcium or magnesium salts
  • organic base salts such as ammonium salts or N + (C 1-6 alkyl) 4 salts formed by organic bases containing N groups.
  • Oxalyl chloride oxalyl chloride
  • PBS Phosphate Buffered Saline
  • the chromatographic column is filled with silica gel.
  • the silica gel 300-400 mesh
  • the preparative chromatographic plate is produced by Yantai Jiangyou Silica Gel Development Co., Ltd.
  • the chromatographic column used by ISCO is produced by Changzhou Santai Technology Co., Ltd.
  • the LC-MS liquid mass spectrometry chromatograph uses ACQUITY Arc from Waters Company equipped with QDa Detector. A Waters XBridge C18 chromatographic column (specification 2.1 ⁇ 50 mm, 3.5 ⁇ m) was used. Mass Spectrometry (MS) using an ESI source indicates only the molecular weight M of the parent molecule, usually reported as [M+H] + .
  • the injection volume was determined by the sample concentration; the flow rate was: 1.2 mL/min; the HPLC peaks were recorded and read by UV-Vis wavelengths at 220 nm and 254 nm.
  • the mobile phases were 0.01% formic acid in ultrapure water (mobile phase A) and 0.01% formic acid in acetonitrile (mobile phase B). Gradient elution conditions are shown in Table C and Table D below:
  • the NMR spectrum is obtained using a Varian 400MHz nuclear magnetic resonance spectrometer, usually using CDCl 3 and DMSO-d 6 as solvents, and reporting chemical shifts in ppm.
  • the various peaks are described as follows: s (singlet), d (doublet), t (triplet), q (quartet), m (multiplet), dd (doublet of doublets). Coupling constants are expressed in Hz.
  • reaction solution was stirred at 95° C. for three hours. After cooling to room temperature, ethyl acetate (40 mL) and water (40 mL) were added to the reaction solution. The mixed solution was filtered with diatomaceous earth, the resulting solution was separated, the aqueous phase was extracted three times with ethyl acetate (20 mL), the combined organic phase was concentrated and separated by column chromatography to obtain tert-butyl (tert-butoxycarbonyl) (3-(3 -(4-cyanophenyl)isoxazol-5-yl)-5-(4-(isopropylsulfonyl)phenyl)pyrazin-2-yl)carbamate 1c (0.6 g).
  • the aqueous phase was concentrated into a solid, and ethyl acetate (50 mL) and methanol (30 mL) were added to the solid, stirred for 0.5 hours and filtered, and the filtrate was concentrated to obtain a black oil (4-(propyl-2-sulfinimide) Phenyl)boronic acid 2a (1.3 g), was crude and was used directly in the next step without further purification.
  • tert-Butyl-5-formyl-1H-benzo[d][1,2,3]triazole-1-carbamate 3d (0.14g, 0.566mmol), hydroxylamine hydrochloride (0.048g , 0.68mmol) was prepared according to the method similar to the first step of Example 1 to obtain yellow oil tert-butyl (E)-5-((hydroxyimine) methylene)-1H-benzo[d][1, 2,3] Triazole-1-carboxylate 3e (75 mg).
  • the tert-butyl (tert-butoxycarbonyl) (3-(3-(4-cyano-2 fluorophenyl) isoxazol-5-yl)-5-(4-(isopropylsulfonyl)phenyl ) pyrazin-2-yl) carbamate 4c (100mg, 0.177mmol), nickel chloride hexahydrate (127mg, 0.532mmol) and sodium borohydride (20mg, 0.532mmol) according to the fourth step similar to Example 1
  • the method prepares light yellow oil tert-butyl (3-(3-(4-(aminomethyl)-2-fluorophenyl)isoxazol-5-yl)-5-(4-(isopropyl Sulfonyl)phenyl)pyrazin-2-yl)(tert-butoxycarbonyl)carbamate 4d (28 mg).
  • tert-butyl(tert-butoxycarbonyl)(5-(4-(isopropylsulfonyl)phenyl)-3-(3-(4-(((phenoxycarbonyl)amino)methylene)benzene yl)isoxazol-5-yl)pyrazin-2-yl)carbamate 5a (15mg, 0.02mmol), triethylamine (3 ⁇ L) and methyl hydrochloride (15mg, 0.2mmol)
  • the method of the second step of Example 5 prepares white solid tert-butyl (tert-butoxycarbonyl) (3-(3-(4-((3-methylureido) methylene) phenyl) isoxazole- 5-yl)-5-(4-(isopropylsulfonyl)phenyl)pyrazin-2-yl)carbamate 7a (11 mg).
  • reaction solution was stirred at 55° C. for two hours. After cooling to room temperature, ethyl acetate (40 mL) and water (40 mL) were added to the reaction solution. The mixed solution was filtered with diatomaceous earth, the resulting solution was separated, the aqueous phase was extracted three times with ethyl acetate (20 mL), the combined organic phase was concentrated and separated by column chromatography to obtain tert-butyl (tert-butoxycarbonyl) (3-acetylene yl-5-(4-(isopropylsulfonyl)phenyl)pyrazin-2-yl)carbamate 11a (433 mg).
  • tert-butyl tert-butoxycarbonyl
  • reaction solution was stirred at 90° C. for two hours. After cooling to room temperature, ethyl acetate (40 mL) and water (40 mL) were added to the reaction solution. The mixed solution was filtered with diatomaceous earth, the resulting solution was separated, the aqueous phase was extracted three times with ethyl acetate (20 mL), the combined organic phase was concentrated and separated by column chromatography to obtain tert-butyl (tert-butoxycarbonyl) (3-(3 -(4-cyanophenyl)isoxazol-5-yl)-5-(4-(N,S-dimethylsulfonimido)phenyl)pyrazin-2-yl)carbamate Ester 12c (145 mg).
  • phenyl) pyrazin-2-yl) carbamate 12c (145mg, 0.23mmol) in methanol (2mL) solution, add nickel chloride hexahydrate (164mg, 0.69mmol) and sodium borohydride successively at room temperature (26 mg, 0.69 mmol). After the reaction solution was stirred at room temperature for 1 hour, it was quenched with saturated aqueous ammonium chloride (2 mL).
  • reaction solution was stirred at 90° C. for two hours. After cooling to room temperature, ethyl acetate (40 mL) and water (40 mL) were added to the reaction solution. The mixed solution was filtered with diatomaceous earth, the resulting solution was separated, the aqueous phase was extracted three times with ethyl acetate (20 mL), the combined organic phase was concentrated and separated by column chromatography to obtain tert-butyl (tert-butoxycarbonyl) (3-(3 -(4-cyanophenyl)isoxazol-5-yl)-5-(4-(N-methylpropyl-2-ylsulfonimide)phenyl)pyrazin-2-yl) Carbamate 13d (180 mg).
  • tert-butyl (tert-butoxycarbonyl) 3-(3 -(4-cyanophenyl)isoxazol-5-yl)-5-(4-(N-methylpropyl-2-yls
  • reaction solution was stirred at 95° C. for three hours. After cooling to room temperature, ethyl acetate (40 mL) and water (40 mL) were added to the reaction solution. The mixed solution was filtered with diatomaceous earth, the resulting solution was separated, the aqueous phase was extracted three times with ethyl acetate (20 mL), the combined organic phase was concentrated and separated by column chromatography to obtain tert-butyl (tert-butoxycarbonyl) (5-(4 -(isopropylsulfonyl)phenyl)-3-(3-(4-nitrophenyl)isoxazol-5-yl)-pyrazin-2-yl)carbamate 14c (0.17g) .
  • tert-butyl (tert-butoxycarbonyl) 5-(4 -(isopropylsulfonyl)phenyl)-3-(3-(4-nitrophenyl)isoxazol-5-
  • tert-butyl (3-(3-(4-aminophenyl)isoxazol-5-yl)-5- (4-(Isopropylsulfonyl)phenyl)pyrazin-2-yl)(tert-butoxycarbonyl)carbamate 14d (100 mg).
  • tert-butyl (tert-butoxycarbonyl) (5-(4-(isopropylsulfonyl)phenyl)-3-(3-(4-((phenoxycarbonyl)amino)phenyl)isoxazole- 5-yl)pyrazin-2-yl)carbamate 14e (20mg, 0.026mmol) in acetonitrile (3mL) was added methylamine hydrochloride (4mg, 0.052mmol), and the mixture was stirred at 50°C for 2 hours .
  • Tert-butyl (tert-butoxycarbonyl) (5-(4-(isopropylsulfonyl)phenyl)-3-(3-(4-((phenoxycarbonyl)amino)phenyl)isoxazole- 5-yl)pyrazin-2-yl)carbamate 14e (20mg, 0.026mmol) was dissolved in ammonia methanol solution (7M, 3mL) and the mixture was stirred at 50°C for 2 hours.
  • reaction solution was stirred at 95° C. for three hours. After cooling to room temperature, ethyl acetate (40 mL) and water (40 mL) were added to the reaction solution. The mixed solution was filtered with diatomaceous earth, the resulting solution was separated, the aqueous phase was extracted three times with ethyl acetate (20 mL), the combined organic phase was concentrated and separated by column chromatography to obtain tert-butyl (tert-butoxycarbonyl) (5-(4 -(isopropylsulfonyl)phenyl)-3-(3-(5-nitropyridin-2-yl)isoxazol-5-yl)pyrazin-2-yl)carbamate 19c (0.12 g).
  • tert-butyl (tert-butoxycarbonyl) (5-(4 -(isopropylsulfonyl)phenyl)-3-(3-(5-nitropyridin-2-yl)is
  • reaction solution was stirred at room temperature for 16 hours, it was diluted with ethyl acetate (40 mL), the mixture was filtered through celite, washed with aqueous sodium bicarbonate (40 mL) until neutral, and then poured into a separatory funnel.
  • tert-butyl (3-(3-(5-aminopyridin-2-yl)isoxazol-5-yl) -5-(4-(Isopropylsulfonyl)phenyl)pyrazin-2-yl)(tert-butoxycarbonyl)carbamate 19d (75 mg).
  • tert-butyl (tert-butoxycarbonyl) (5-bromo-3-(3-(2-fluoro-4-nitrophenyl) isoxazol-5-yl) pyrazin-2-yl ) Carbamate 20b (0.30g, 0.52mmol) in a mixed solution of 1,4-dioxane (15mL) and water (1.5mL), at room temperature ( ⁇ 20°C) followed by 4-isopropylsulfonyl Phenylboronic acid (0.12 g, 0.52 mmol), potassium carbonate (0.22 g, 1.55 mmol) and [1,1'-bis(diphenylphosphino)ferrocene]palladium dichloride (0.076 g, 0.01 mmol).
  • reaction solution was stirred at 95° C. for three hours. After cooling to room temperature, ethyl acetate (40 mL) and water (40 mL) were added to the reaction solution. The mixed solution was filtered with diatomaceous earth, the resulting solution was separated, the aqueous phase was extracted three times with ethyl acetate (20 mL), the combined organic phase was concentrated and separated by column chromatography to obtain tert-butyl (tert-butoxycarbonyl) (3-(3 -(2-fluoro-4-nitrophenyl)isoxazol-5-yl)-5-(4-(isopropylsulfonyl)phenyl)pyrazin-2-yl)carbamate 20c( 0.13g).
  • reaction solution was stirred at room temperature for 16 hours, it was diluted with ethyl acetate (40 mL), the mixture was filtered through celite, washed with aqueous sodium bicarbonate (40 mL) until neutral, and then poured into a separatory funnel.
  • tert-butyl (tert-butoxycarbonyl) (3-(3-(4-amino-2-fluorophenyl)iso Oxazol-5-yl)-5-(4-(isopropylsulfonyl)phenyl)pyrazin-2-yl)carbamate 20d (85 mg).
  • reaction solution was stirred at 95° C. for three hours. After cooling to room temperature, ethyl acetate (40 mL) and water (40 mL) were added to the reaction solution. The mixed solution was filtered with diatomaceous earth, the resulting solution was separated, the aqueous phase was extracted three times with ethyl acetate (20 mL), the combined organic phase was concentrated and separated by column chromatography to obtain tert-butyl (tert-butoxycarbonyl) (5-(4 -(isopropylsulfonyl)phenyl)-3-(3-(2-oxo-2,3-dihydro-1H-benzo[d]imidazol-5-yl)isoxazol-5-yl )pyrazin-2-yl)carbamate 21c (0.06g).
  • tert-butyl (tert-butoxycarbonyl) (5-(4 -(isopropylsulfonyl)phenyl)
  • reaction solution was stirred at 95° C. for three hours. After cooling to room temperature, ethyl acetate (40 mL) and water (40 mL) were added to the reaction solution. The mixed solution was filtered with diatomaceous earth, the resulting solution was separated, the aqueous phase was extracted three times with ethyl acetate (20 mL), the combined organic phase was concentrated and separated by column chromatography to obtain tert-butyl (tert-butoxycarbonyl) (3-(3 -(2-Oxo-2,3-dihydro-1H-benzo[d]imidazol-5-yl)isoxazol-5-yl)-5-(4-(propan-2-ylsulfinyl )phenyl)pyrazin-2-yl)carbamate 22a (0.07g).
  • reaction solution was stirred at 95° C. for three hours. After cooling to room temperature, ethyl acetate (40 mL) and water (40 mL) were added to the reaction solution. The mixed solution was filtered with diatomaceous earth, the resulting solution was separated, the aqueous phase was extracted three times with ethyl acetate (20 mL), the combined organic phase was concentrated and separated by column chromatography to obtain tert-butyl (tert-butoxycarbonyl) (3-(3 -(4-Cyanophenyl)isoxazol-5-yl)-5-(4-(cyclopropylsulfonyl)phenyl)pyrazin-2-yl)carbamate 23b (0.13 g).
  • reaction solution was stirred at 95° C. for three hours. After cooling to room temperature, ethyl acetate (40 mL) and water (40 mL) were added to the reaction solution. The mixed solution was filtered with diatomaceous earth, the resulting solution was separated, the aqueous phase was extracted three times with ethyl acetate (20 mL), the combined organic phase was concentrated and separated by column chromatography to obtain tert-butyl (tert-butoxycarbonyl) (3-(3 -(4-cyano-3-fluorophenyl)isoxazol-5-yl)-5-(4-(isopropylsulfonyl)phenyl)pyrazin-2-yl)carbamate 24c( 0.11g).
  • Oxyzin-2-yl) (tert-butoxycarbonyl) carbamate 24d (26 mg, 0.046 mmol) in acetonitrile (3 mL) was added successively with 1H-pyrazole-1-carboxamidine hydrochloride (7 mg, 0.046 mmol) and N,N-Diisopropylethylamine (9 ⁇ L). Stir at room temperature ( ⁇ 20°C) for 16 hours.
  • reaction solution was stirred at 95° C. for three hours. After cooling to room temperature, ethyl acetate (40 mL) and water (40 mL) were added to the reaction solution. The mixed solution was filtered with diatomaceous earth, the resulting solution was separated, the aqueous phase was extracted three times with ethyl acetate (20 mL), the combined organic phase was concentrated and separated by column chromatography to obtain tert-butyl (tert-butoxycarbonyl) (3-(3 -(4-cyanophenyl)isoxazol-5-yl)-5-(4-(dimethylcarbamoyl)phenyl)pyrazin-2-yl)carbamate 25a (0.16g) .
  • reaction solution was stirred at 95° C. for three hours. After cooling to room temperature, ethyl acetate (40 mL) and water (40 mL) were added to the reaction solution. The mixed solution was filtered with diatomaceous earth, the resulting solution was separated, the aqueous phase was extracted three times with ethyl acetate (20 mL), the combined organic phase was concentrated and separated by column chromatography to obtain 4-(5-(3-((tert-butoxycarbonyl )amino)-6-(4-(isopropylsulfonyl)phenyl)pyrazin-2-yl)isoxazol-3-yl)methyl benzoate 26c (0.33 g).
  • reaction system was quenched by adding excess saturated sodium sulfite aqueous solution (40mL), the organic phase was separated, the aqueous phase was extracted three times with dichloromethane (30mL), the combined organic phase was dried over anhydrous sodium sulfate, filtered, the filtrate was concentrated under reduced pressure and Column chromatography gave 5-bromobenzo[b]thiophene 1,1-dioxide 27a (0.97 g) as a white solid.
  • reaction solution was stirred at 95° C. for three hours. After cooling to room temperature, ethyl acetate (40 mL) and water (40 mL) were added to the reaction solution. The mixed solution was filtered with diatomaceous earth, the resulting solution was separated, the aqueous phase was extracted three times with ethyl acetate (20 mL), the combined organic phase was concentrated and separated by column chromatography to obtain tert-butyl (tert-butoxycarbonyl) (3-(3 -(4-cyanophenyl)isoxazol-5-yl)-5-(1,1-dioxy-2,3-dihydrobenzothiophen-5-yl)pyrazin-2-yl) Carbamate 27d (0.25 g).
  • tert-Butyl(5-bromo-3-ethynyl-pyrazin-2-yl)(tert-butoxycarbonyl)carbamate (0.5 g, 1.26 mmol) and (E)-4-(bromomethyl) Benzaldehyde oxime 28a (0.40g, 1.88mmol) was prepared according to a method similar to the second step of Example 1 to obtain tert-butyl (5-bromo-3-(3-(4-bromomethylphenyl)isoxazole- 5-yl)pyrazin-2-yl)(tert-butoxycarbonyl)carbamate 28b (350 mg).
  • tert-butyl (3-(3-(4-acetamidinomethylphenyl) isoxazol-5-yl)-5-bromopyrazin-2-yl) (tert-butoxycarbonyl) carbamate 28c (60mg, 0.10mmol) and 4-isopropylsulfonylphenylboronic acid (35.1mg, 0.15mmol) were prepared according to a method similar to the third step of Example 1 to obtain tert-butyl (3-(3-(4-ethyl Amidinomethylphenyl)isoxazol-5-yl)-5-(4-(isopropylsulfonyl)phenyl)pyrazin-2-yl)(tert-butoxycarbonyl)carbamate 28d( 8mg).
  • tert-Butyl(5-bromo-3-ethynyl-pyrazin-2-yl)(tert-butoxycarbonyl)carbamate 500 mg, 1.26 mmol
  • (E)-4-iodobenzaldehyde oxime 29a 463.6mg, 1.88mmol
  • tert-butyl 5-bromo-3-(3-(4-iodophenyl)isoxazol-5-yl)pyrazine- 2-yl)(tert-butoxycarbonyl)carbamate 29b (400 mg).
  • tert-butyl (5-bromo-3-(3-(4-iodophenyl) isoxazol-5-yl) pyrazin-2-yl) (tert-butoxycarbonyl) carbamate 29b (400.0mg, 0.62mmol) and 4-isopropylsulfonylphenylboronic acid (169.6mg, 0.74mmol) were prepared according to a method similar to the third step of Example 1 to obtain tert-butyl (tert-butoxycarbonyl) (3- (3-(4-Iodophenyl)isoxazol-5-yl)-5-(4-(isopropylsulfonyl)phenyl)pyrazin-2-yl)carbamate 29c (90 mg).

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Abstract

一种如式I 所示的ATR 激酶抑制剂及其制备方法和应用。

Description

用作ATR激酶抑制剂的化合物 技术领域
本公开属于药物化学领域，特别是涉及一种ATR激酶抑制剂及其制备方法和应用。
背景技术
ATR(Ataxia-telangiectasia and Rad3 related)是ATM Rad3相关蛋白激酶，与ATM(Ataxia-telangiectasia mutated,毛细血管扩张性共济失调突变)，DNA-PKcs(DNA-dependent protein kinase catalytic subunit,DNA依赖蛋白激酶催化亚基)同属于PI3KKs(Phosphoinositide 3 kinase-related protein kinases,磷酸肌醇3激酶相关蛋白激酶)激酶家族。
受外界压力或机体内部环境影响，细胞发生DNA损伤尤其是DNA单链或双链断裂(Double Strand Breaks,DSB)和复制应激，在正常细胞中，为维持基因组稳定，DNA损伤会被DNA损伤反应(DNA-damage response,DDR)因子迅速识别，从而激活细胞周期检查点并直接进行DNA修复。根据损伤的类型，涉及不同的DNA修复途径，它们共同形成了一个高度复杂的、相互作用的针对基因毒性损伤的防御机制。
ATM和ATR都是由DNA损伤和DNA复制应激激活的，但它们的DNA损伤特异性及功能各不相同，ATM主要由双链DNA断裂激活，而ATR对广泛的DNA损伤做出反应，包括DSB和各种干扰复制的DNA损伤。两者协同作用发出DNA损伤的信号并调节下游过程。然而，许多种癌细胞在其一些DNA修复过程(如ATM信号传导)存在缺陷，从而对其剩余的完整DNA修复蛋白(如ATR)表现出更大依赖性。在ATM缺陷的癌细胞中，抑制ATR能够有效抑制癌细胞生长，起到合成致死治疗癌症的作用。
合成致死性是指，在功能类似或代偿的一对基因中，单个基因失活的发生对于细胞存活是可以容忍的，而多个基因同时破坏导致细胞死亡。相较于传统的放疗化疗等其他癌症治疗方法，基于合成致死的治疗策略有3个优势：首先，ATM是癌症中最常见的异常基因之一，据COSMIC数据库记录，在肿瘤和血液恶性肿瘤中观察到了167种不同的ATM体细胞突变(不包括未知来源的变体)，因此基于合成致死的治疗策略可对抗大多数癌症突变；其次，可根据基因突变的高选择性简单地识别出对应患者；最后，与化疗药物联合用药可以提高其疗效并降低剂量、避免或减轻不良反应。
处于临床前和临床研究阶段的ATR激酶抑制剂包括WO2010071837A1公开的Berzosertib(VX-970)、Ceralaserti(AZD6738)、Elimusertib(BAY-1895344)、ART0380、RP-3500、VX-803以及M1774。其中，VX-970正针对抗前列腺癌、小细胞肺癌、卵巢癌、尿路上皮癌和非小细胞肺癌等适应症进行I/II或II期临床测试。AZD6738针对乳腺癌、头颈部鳞状细胞癌、胃癌及非小细胞肺癌的临床治疗已进入II期。ART0380治疗卵巢癌、RP-3500治疗实体瘤、VX-803治疗乳腺癌正在I/II期临床阶段。BAY-1895344治疗淋巴瘤及实体瘤，M1774治疗实体瘤处于临床I期。
Figure PCTCN2022111868-appb-000001
以上临床试验已显示ATR功能的破坏在无论有无DNA损伤剂的存在下都促进癌细胞死亡。这表明ATR激酶抑制剂作为单一药剂或作为放疗或遗传毒性化疗增敏剂都可能是有效的。
发明内容
本公开要解决的问题：
现有技术公开的化合物对ATR虽然有抑制活性，但其细胞毒性高，体内PK暴露量低。因此，仍需开发更多的细胞毒性低，暴露量高的ATR高抑制活性的抑制剂。
用于解决问题的方案：
为了解决上述技术问题，本公开提供了以下技术方案：
一种式I所示的化合物或其药学上可接受的盐、酯、异构体、溶剂化物、前药或同位素标记物：
Figure PCTCN2022111868-appb-000002
其中：
环A、环B和环C分别为6至10元芳基或5至10元杂芳基；
R 1选自氢、氘、氰基、卤素、以及取代或未取代的羟基、氨基、C 1-6烷基、C 1-6烷氧基、3至7元环烷基、3至7元杂环基、胍基、脲基、酰胺基、氨基磺酰胺基、磺酰胺基和HN-C(＝NH)-C 1-6烷基；
R 2和R 5选自氢、氘、卤素、C 1-6烷基、氨基和C 1-6烷氧基；
或者R 1和R 2与它们所连接的原子一起形成包含1至3个选自氧、氮和硫原子的5至6元杂芳基或杂环基，所述5至6元杂芳基或杂环基的环上有0或1个亚甲基可任意被-C(＝O)-或-C(＝NR 7)-替代；
若存在，每一个R 3各自独立地选自氢、氘、卤素、C 1-6烷基和被选自氰基、氨基、羟基、卤素、C 1-6烷基和C 1-6烷氧基的取代基所取代的C 1-6烷基；
R 4选自氢、氘、C 1-6烷基、3至7元环烷基、3至7元杂环基、C 1-6烷基氨基和(C 1-3烷基) 2氨基；
或者R 4和R 5与它们所连接的原子一起形成包含1至3个选自氧、氮和硫的5至7元杂环基，所述5至7元杂环基任选地被选自氘、羟基、C 1-6烷基、卤素、C 1-6烷氧基和C 1-6烷基氨基的取代基所取代；环上有1至3个亚甲基可任意被-SO 2-、-SO(＝NR 7)-、-SO 2NH-、-CO-、-C(＝O)NH-、C 1-6烷基氨基或3至6元环烷基氨基替代；所述C 1-6烷基氨基或者3至6元环烷基氨基，其中有0至2个亚甲基可以任意被氧、氮、硫或C 1-3烷基氨基所替代；
若存在，每一个R 6各自独立地选自氢、氘、卤素、氨基、C 1-6烷氧基、C 1-6烷基和被选自氰基、氨基、羟基、卤素、C 1-6烷基和C 1-6烷氧基的取代基所取代的C 1-6烷基；
Q 1选自C 1-6亚烷基、-CO-、氨基、-SO-、-SO 2-、-C(＝NR 7)-和3至7元杂环基，其中C 1-6亚烷基中的0至4个亚甲基可任意被氨基、-CO-、-SO-、-SO 2或-C(＝NR 7)-替代；
Q 2选自-SO 2-、SO、-SO(＝NR 7)-、-SO 2NR 7-和-CO-；
每一个R 7各自独立地选自氢、氘、C 1-6烷基、氰基、3至7元环烷基、3至7元杂环基、C 1-6烷氧基、C 1-6烷基氨基和被选自氰基、氨基、羟基、卤素、C 1-6烷基和C 1-6烷氧基的取代基所取代的C 1-6烷基、3至7元环烷基和3至7元杂环基；且
n1、n2和n3各自为0至2的任一整数。
本公开的效果：
本公开提供的氨基吡嗪类化合物，其对ATR具有很高的抑制活性，同时具有优异的药效、体外/体内药代动力学性质和安全性，临床应用前景高。
附图说明
图1不同给药组给药后小鼠体重变化图
图2不同给药组给药后小鼠瘤体积变化(绝对值)图
图3不同给药组给药后小鼠瘤体积变化(百分比)图
具体实施方式
为使本公开的技术方案和有益效果能够更加明显易懂，下面通过列举具体实施例的方式进行详细说明。除非另有定义，本公开所使用的技术和科学术语与本申请所属的技术领域中的技术和科学术语的含义相同。
本公开一方面提供式Ⅰ所示的化合物或其药学上可接受的盐、酯、异构体、溶剂化物、前药或同位素标记物：
Figure PCTCN2022111868-appb-000003
其中：
环A、环B和环C分别为6至10元芳基或5至10元杂芳基；
R 1选自氢、氘、氰基、卤素、以及取代或未取代的羟基、氨基、C 1-6烷基、C 1-6烷氧基、3至7元环烷基、3至7元杂环基、胍基、脲基、酰胺基、氨基磺酰胺基、磺酰胺基和HN-C(＝NH)-C 1-6烷基；
R 2和R 5选自氢、氘、卤素、C 1-6烷基、氨基和C 1-6烷氧基；
或者R 1和R 2与它们所连接的原子一起形成包含1至3个选自氧、氮和硫原子的5至6元杂芳基或杂环基，所述5至6元杂芳基或杂环基的环上有0或1个亚甲基可任意被-C(＝O)-或-C(＝NR 7)-替代；
若存在，每一个R 3各自独立地选自氢、氘、卤素、C 1-6烷基和被选自氰基、氨基、羟基、卤素、C 1-6烷基和C 1-6烷氧基的取代基所取代的C 1-6烷基；
R 4选自氢、氘、C 1-6烷基、3至7元环烷基、3至7元杂环基、C 1-6烷基氨基和(C 1-3烷基) 2氨基；
或者R 4和R 5与它们所连接的原子一起形成包含1至3个选自氧、氮和硫的5至7元杂环基，所述5至7元杂环基任选地被选自氘、羟基、C 1-6烷基、卤素、C 1-6烷氧基和C 1-6烷基氨基的取代基所取代；环上有1至3个亚甲基可任意被-SO 2-、-SO(＝NR 7)-、-SO 2NH-、-CO-、-C(＝O)NH-、C 1-6烷基氨基或3至6元环烷基氨基替代；所述C 1-6烷基氨基或者3至6元环烷基氨基，其中有0至2个亚甲基可以任意被氧、氮、硫或C 1-3烷基氨基所替代；
若存在，每一个R 6各自独立地选自氢、氘、卤素、氨基、C 1-6烷氧基、C 1-6烷基和被选自氰基、氨基、 羟基、卤素、C 1-6烷基和C 1-6烷氧基的取代基所取代的C 1-6烷基；
Q 1选自C 1-6亚烷基、-CO-、氨基、-SO-、-SO 2-、-C(＝NR 7)-和3至7元杂环基，其中C 1-6亚烷基中的0至4个亚甲基可任意被氨基、-CO-、-SO-、-SO 2或-C(＝NR 7)-替代；
Q 2选自-SO 2-、SO、-SO(＝NR 7)-、-SO 2NR 7-和-CO-；
每一个R 7各自独立地选自氢、氘、C 1-6烷基、氰基、3至7元环烷基、3至7元杂环基、C 1-6烷氧基、C 1-6烷基氨基和被选自氰基、氨基、羟基、卤素、C 1-6烷基和C 1-6烷氧基的取代基所取代的C 1-6烷基、3至7元环烷基和3至7元杂环基；且
n1、n2和n3各自为0至2的任一整数。
在某些实施方案中，所述的式I所示的化合物或其药学上可接受的盐、酯、异构体、溶剂化物、前药或同位素标记物，其中n1为0或者1；n2为1或者2，且n3优选为0或1。
在某些实施方案中，所述的式I所示的化合物或其药学上可接受的盐、酯、异构体、溶剂化物、前药或同位素标记物，其中n1为0或1。
在某些实施方案中，所述的式I所示的化合物或其药学上可接受的盐、酯、异构体、溶剂化物、前药或同位素标记物，其中n2为0或1。
在某些实施方案中，所述的式I所示的化合物或其药学上可接受的盐、酯、异构体、溶剂化物、前药或同位素标记物，其中n3为0或1。
在某些实施方案中，所述的式I所示的化合物或其药学上可接受的盐、酯、异构体、溶剂化物、前药或同位素标记物，其中n1为0或1；n2为0或1；且n3为0或1。
在某些实施方案中，所述的式I所示的化合物或其药学上可接受的盐、酯、异构体、溶剂化物、前药或同位素标记物，其中所述环A和环B选自苯基和5至6元杂芳基；优选地，所述环A和环B选自苯基和6元杂芳基；更优选地，所述环A和环B选自苯基和吡啶基，最优选地，所述环A和环B选自苯基。
在某些实施方案中，所述的式I所示的化合物或其药学上可接受的盐、酯、异构体、溶剂化物、前药或同位素标记物，其中所述环C为5至6元杂芳基；优选地，所述环C为5元杂芳基；更优选地，所述环C选自异噁唑、噁二唑和噻二唑；最优选地，所述环C选自异噁唑和噁二唑。在某些实施方案中，所述的式I所示的化合物或其药学上可接受的盐、酯、异构体、溶剂化物、前药或同位素标记物，其为式I-a
Figure PCTCN2022111868-appb-000004
所示的化合物或其药学上可接受的盐、酯、异构体、溶剂化物、前药或同位素标记物，其中R 1、R 2、R 3、R 4、R 5、R 6、Q 1、Q 2、n1、n2和n3如式I中所定义。
在某些实施方案中，所述的式I所示的化合物或其药学上可接受的盐、酯、异构体、溶剂化物、前药或同位素标记物，其为式I-b所示的化合物或其药学上可接受的盐、酯、异构体、溶剂化物、前药或同位素标记物：
Figure PCTCN2022111868-appb-000005
其中：
环C为5元杂芳基；
L为CR 10aR 11a或NR 14a；
n4a为0、1或2；
R 9a选自氧和NR 7；
R 10a和R 11a各自独立地选自氢、氘、C 1-6烷基、C 1-6烷氧基和C 1-6烷基氨基；或者R 10和R 11与它们所连接的原子一起形成3至7元环烷基或包含1或2个选自氧、氮和硫的3至7元杂环基；
R 12a和R 13a各自独立地选自氢、氘、卤素、羟基、C 1-6烷基、C 1-6烷氧基和C 1-6烷基氨基；或者R 12a和R 13a形成＝O；
R 14a选自氢、氘、取代或未取代的C 1-6烷基、C 1-6烷氧基、3至7元环烷基和3至7元杂环基，所述取代是被选自卤素、羟基、氨基、C 1-6烷基氨基和(C 1-6烷基) 2氨基的取代基所取代；
R 1、R 2、R 3、R 6、R 7、Q 1、n1、n2和n3如式I中所定义。
在某些实施方案中，所述的式I或式I-b所示的化合物或其药学上可接受的盐、酯、异构体、溶剂化物、前药或同位素标记物，其为式I-b-1或式I-b-2所示的化合物或其药学上可接受的盐、酯、异构体、溶剂化物、前药或同位素标记物：
Figure PCTCN2022111868-appb-000006
其中：
环C、R 1、R 2、R 3、R 6、R 7、Q 1、n1、n2、n3、L、n4a、R 9a和R 12a如式I-b中所定义。
在某些实施方案中，所述的式I、式I-b、式I-b-1或式I-b-2所示的化合物或其药学上可接受的盐、酯、异构体、溶剂化物、前药或同位素标记物，其中所述环C为5至6元杂芳基；优选地，所述环C为5元杂芳基；更优选地，所述环C选自异噁唑、噁二唑和噻二唑；最优选地，所述环C选自异噁唑和噁二唑。
在某些实施方案中，所述的式I、式I-b、式I-b-1或式I-b-2所示的化合物或其药学上可接受的盐、酯、异构体、溶剂化物、前药或同位素标记物，其中所述环C选自
Figure PCTCN2022111868-appb-000007
Figure PCTCN2022111868-appb-000008
优选为
Figure PCTCN2022111868-appb-000009
在某些实施方案中，式I-b、式I-b-1或式I-b-2所示的化合物或其药学上可接受的盐、酯、异构体、溶剂化物、前药或同位素标记物，其中n4a为0或1；优选地，n4a为0。
在某些实施方案中，所述的式I-b、式I-b-1或式I-b-2所示的化合物或其药学上可接受的盐、酯、异构体、溶剂化物、前药或同位素标记物，其中R 9a选自氧和NH；优选地，R 9a选自氧。
在某些实施方案中，所述的式I-b、式I-b-1或式I-b-2所示的化合物或其药学上可接受的盐、酯、异构体、溶剂化物、前药或同位素标记物，其中L为CR 10aR 11a，R 10a和R 11a各自独立地选自氢、氘、C 1-6烷基和C 1-6烷氧基；优选地，L为CR 10aR 11a，R 10a和R 11a各自独立地选自氢和C 1-6烷基；更优选地，L为CR 10aR 11a，R 10a和R 11a均为C 1-6烷基；最优选地，L为CR 10aR 11a，R 10a和R 11a均为甲基。
在某些实施方案中，所述的式I-b、式I-b-1或式I-b-2所示的化合物或其药学上可接受的盐、酯、异构体、溶剂化物、前药或同位素标记物，其中R 10a和R 11a与它们所连接的原子一起形成3至7元环烷基或包含1或2个选自氧、氮和硫的3至7元杂环基；所述3至7元环烷基为环丙烷基。
在某些实施方案中，所述的式I-b、式I-b-1或式I-b-2所示的化合物或其药学上可接受的盐、酯、异构体、溶剂化物、前药或同位素标记物，其中R 12a和R 13a各自独立地选自氢、氘、卤素、羟基、C 1-6烷基、C 1-6烷氧基；优选地，R 12a和R 13a各自独立地选自氢、氘、卤素、羟基和C 1-6烷基；更优选地，R 12a和R 13a各自独立地选自氢、氘、甲基、氟和羟基；进一步优选地，R 12a和R 13a各自独立地选自氢和氟；最优选地，R 12a为氢，且R 13a为氟。
在某些实施方案中，所述的式I-b、式I-b-1或式I-b-2所示的化合物或其药学上可接受的盐、酯、异构体、溶剂化物、前药或同位素标记物，其中R 14a选自氢、甲基、乙基、异丙基、环丙基、羟乙基和
Figure PCTCN2022111868-appb-000010
在某些实施方案中，所述的式I-b所示的化合物或其药学上可接受的盐、酯、异构体、溶剂化物、前药或同位素标记物，其中
Figure PCTCN2022111868-appb-000011
为
Figure PCTCN2022111868-appb-000012
R 10a、R 11a、R 12a和R 13a如式I-b中所定义；优选地，
Figure PCTCN2022111868-appb-000013
为
Figure PCTCN2022111868-appb-000014
R 10a、R 11a和R 12a如式I-b中所定义；更优选地，
Figure PCTCN2022111868-appb-000015
为
Figure PCTCN2022111868-appb-000016
最优选地，
Figure PCTCN2022111868-appb-000017
为
Figure PCTCN2022111868-appb-000018
在某些实施方案中，所述的式I-b-1所示的化合物或其药学上可接受的盐、酯、异构体、溶剂化物、前药或同位素标记物，其中
Figure PCTCN2022111868-appb-000019
为
Figure PCTCN2022111868-appb-000020
R 10a、R 11a和R 12a如式I-b-1中所定义； 优选地，
Figure PCTCN2022111868-appb-000021
为
Figure PCTCN2022111868-appb-000022
在某些实施方案中，所述的式I-b-2所示的化合物或其药学上可接受的盐、酯、异构体、溶剂化物、前药或同位素标记物，其中
Figure PCTCN2022111868-appb-000023
为
Figure PCTCN2022111868-appb-000024
R 10a、R 11a和R 12a如式I-b-2中所定义；优选地，
Figure PCTCN2022111868-appb-000025
为
Figure PCTCN2022111868-appb-000026
在某些实施方案中，所述的式I、式I-a、式I-b、式I-b-1或式I-b-2所示的化合物或其药学上可接受的盐、酯、异构体、溶剂化物、前药或同位素标记物，其中R 1选自氢、氘、氰基、卤素、以及取代或未取代的羟基、氨基、C 1-6烷基、C 1-6烷氧基、3至7元环烷基、3至7元杂环基、胍基、脲基、酰胺基、氨基磺酰胺基、磺酰胺基和HN-C(＝NH)-C 1-6烷基；所述取代是被选自C 1-6烷基或3至7元环烷基的取代基所取代；优选地，R 1选自氢、取代或未取代的氨基、C 1-6烷基、胍基、脲基、3至7元杂环基、氨基磺酰胺基和HN-C(＝NH)-C 1-6烷基；所述取代是被选自C 1-6烷基或3至7元环烷基的取代基所取代；更优选地，R 1选自氢、甲基、乙基、
Figure PCTCN2022111868-appb-000027
Figure PCTCN2022111868-appb-000028
在某些实施方案中，所述的式I、式I-a、式I-b、式I-b-1或式I-b-2所示的化合物或其药学上可接受的盐、酯、异构体、溶剂化物、前药或同位素标记物，其中R 2和R 5各自独立地选自氢、氘、卤素和C 1-6烷基；优选地，R 2和R 5各自独立地为氢或氘。
在某些实施方案中，所述的式I、式I-a、式I-b、式I-b-1或式I-b-2所示的化合物或其药学上可接受的盐、酯、异构体、溶剂化物、前药或同位素标记物，其中R 1和R 2与它们所连接的原子一起形成包含1至3个选自氧、氮和硫原子的5至6元杂芳基或杂环基，所述5至6元杂环基的环上有0或1个亚甲基可任意被-C(＝O)-或-C(＝NR 7)-替代；所述5至6元杂芳基或者5至6元杂环基为下列结构的任一种：
Figure PCTCN2022111868-appb-000029
其中：R 8选自氢、氘、C 1-6烷基和3至7元环烷基；优选地，R 8为氢。
在某些实施方案中，所述的式I、式I-a、式I-b、式I-b-1或式I-b-2所示的化合物或其药学上可接受的盐、酯、异构体、溶剂化物、前药或同位素标记物，其中R 3为卤素或卤素取代的C 1-6烷基，优选为F或 CF 3。
在某些实施方案中，所述的式I、式I-a、式I-b、式I-b-1或式I-b-2所示的化合物或其药学上可接受的盐、酯、异构体、溶剂化物、前药或同位素标记物，其中R 3选自氢原子、卤素、C 1-6烷基和卤素取代的C 1-6烷基；优选地，R 3选自氢原子、卤素和卤素取代的C 1-6烷基；更优选地，R 3选自氢原子、F和CF 3。
在某些实施方案中，所述的式I或式I-a所示的化合物或其药学上可接受的盐、酯、异构体、溶剂化物、前药或同位素标记物，其中R 4选自C 1-6烷基、3至7元环烷基、C 1-6烷基氨基和(C 1-3烷基) 2氨基；优选地，R 4为甲基或下列结构的任一种：
Figure PCTCN2022111868-appb-000030
在某些实施方案中，所述的式I或式I-a所示的化合物或其药学上可接受的盐、酯、异构体、溶剂化物、前药或同位素标记物，其中R 4和R 5与它们所连接的原子一起形成包含1至3个选自氧、氮和硫的5至7元杂环基，所述5至7元杂环基优选为下列结构的任一种：
Figure PCTCN2022111868-appb-000031
n4选自0到2的整数；
R 9选自氧和NR 7；
R 10和R 11各自独立地选自氢、氘、C 1-6烷基、C 1-6烷氧基和C 1-6烷基氨基；或者R 10和R 11与它们所连接的原子一起形成3至7元环烷基或包含1或2个选自氧、氮和硫的3至7元杂环基；
R 12和R 13各自独立地选自氢、氘、卤素、羟基、C 1-6烷基、C 1-6烷氧基和C 1-6烷基氨基；或者R 12和R 13形成＝O；
R 14选自氢、氘、取代或未取代的C 1-6烷基、C 1-6烷氧基、3至7元环烷基和3至7元杂环基，所述取代是被选自卤素、羟基、氨基、C 1-6烷基氨基和(C 1-6烷基) 2氨基的取代基所取代；
R 7如式I中所定义。
在某些实施方案中，所述的式I、式I-a、式I-b、式I-b-1或式I-b-2所示的化合物或其药学上可接受的盐、酯、异构体、溶剂化物、前药或同位素标记物，其中每一个R 6各自独立地选自氢、氘和氟。
在某些实施方案中，所述的式I、式I-a、式I-b、式I-b-1或式I-b-2所示的化合物或其药学上可接受的盐、酯、异构体、溶剂化物、前药或同位素标记物，其中Q 1选自C 1-6亚烷基、-CO-、氨基、-SO-、-SO 2-、-C(＝NR 7)-或为下列结构的任一种：
Figure PCTCN2022111868-appb-000032
Figure PCTCN2022111868-appb-000033
优选地，Q 1选自C 1-6亚烷基、-CO-、
Figure PCTCN2022111868-appb-000034
Figure PCTCN2022111868-appb-000035
在某些实施方案中，所述的式I或式I-a所示的化合物或其药学上可接受的盐、酯、异构体、溶剂化 物、前药或同位素标记物，其中Q 2选自-SO 2-、-SO(＝NH)-、-SO(＝NMe)-和-CO-。
在某些实施方案中，所述的式I、式I-a、式I-b、式I-b-1或式I-b-2所示的化合物或其药学上可接受的盐、酯、异构体、溶剂化物、前药或同位素标记物，其中每一个R 7独立地选自氢、氘、甲基和氰基；优选地，每一个R 7独立地选自氢和甲基。
在某些实施方案中，所述的式II-a或式II-b中n4为0或1。
在某些实施方案中，所述的式II-a、式II-b或II-c中R 9选自氧和NH。
在某些实施方案中，所述的式II-a中R 10和R 11各自独立地选自氢、氘、C 1-6烷基和C 1-6烷氧基；优选地，R 10和R 11各自独立地选自氢和C 1-6烷基；更优选地，R 10和R 11各自独立地选自氢和甲基。
在某些实施方案中，所述的式II-a中R 10和R 11与它们所连接的原子一起形成3至7元环烷基或包含1或2个选自氧、氮和硫的3至7元杂环基；所述3至7元环烷基为环丙烷基。
在某些实施方案中，所述的式II-a中R 12和R 13各自独立地选自氢、氘、卤素、羟基、C 1-6烷基、C 1-6烷氧基；优选地，R 12和R 13各自独立地选自氢、氘、卤素、羟基和C 1-6烷基；更优选地，R 12和R 13各自独立地选自氢、氘、甲基、氟和羟基；进一步优选地，R 12和R 13各自独立地选自氢和氟；最优选地，R 12为氢，且R 13为氟。
在某些实施方案中，所述的式II-b中R 14选自氢、甲基、乙基、异丙基、环丙基、羟乙基和
Figure PCTCN2022111868-appb-000036
表A本公开的典型化合物包括但不限于：
Figure PCTCN2022111868-appb-000037
Figure PCTCN2022111868-appb-000038
Figure PCTCN2022111868-appb-000039
Figure PCTCN2022111868-appb-000040
本公开还提供了一种式I所示化合物的制备方法，
路线1：
Figure PCTCN2022111868-appb-000041
路线2：
Figure PCTCN2022111868-appb-000042
在某些实施方式中，步骤S1是在双三氟乙酰碘苯存在下发生反应。
在某些实施方式中，步骤S2是在双联频哪醇硼酸酯存在下发生反应。
在某些实施方式中，步骤S2是在碱存在下发生反应。
在某些实施方式中，步骤S2中所述碱选自无机碱和有机碱。
在某些实施方式中，步骤S2中所述无机碱选自氢化钠、磷酸钾、醋酸钾、碳酸钠、碳酸钾、碳酸铯、氢氧化钠、氢氧化锂和氢氧化钾中的一种或多种。
在某些实施方式中，步骤S2中所述有机碱选自三乙胺、吡啶、N,N-二异丙基乙胺、正丁基锂、二异丙基氨基锂、醋酸钠、醋酸钾、叔丁醇钠、叔丁醇钾和1,8-二氮杂二环十一碳-7-烯中的一种或多种。
在某些实施方式中，步骤S2是在[1,1'-双(二苯基膦基)二茂铁]二氯化钯存在下发生反应。
在某些实施方式中，步骤S3是在碱存在下发生反应。
在某些实施方式中，步骤S3中所述碱选自无机碱和有机碱。
在某些实施方式中，步骤S3中所述无机碱选自氢化钠、磷酸钾、醋酸钾、碳酸钠、碳酸钾、碳酸铯、氢氧化钠、氢氧化锂和氢氧化钾中的一种或多种。
在某些实施方式中，步骤S3中所述有机碱选自三乙胺、吡啶、N,N-二异丙基乙胺、正丁基锂、二异丙基氨基锂、醋酸钠、醋酸钾、叔丁醇钠、叔丁醇钾和1,8-二氮杂二环十一碳-7-烯中的一种或多种。
在某些实施方式中，步骤S3是在[1,1'-双(二苯基膦基)二茂铁]二氯化钯存在下发生反应。
在某些实施方式中，步骤S4是在酸存在下发生反应。
在某些实施方式中，步骤S4中所述酸选自盐酸、硫酸、甲酸、乙酸、三氟乙酸中的一种或多种。
在某些实施方式中，当所述式a、b、c、d、I化合物中R 1基团中存在氨基时，所述方法还包括对所述氨基上保护基和脱保护基的步骤。
在某些实施方式中，所述保护基选自Boc和Cbz。
路线3：
Figure PCTCN2022111868-appb-000043
路线4：
Figure PCTCN2022111868-appb-000044
路线5：
Figure PCTCN2022111868-appb-000045
在某些实施方式中，步骤S1是在水合肼存在下发生反应。
在某些实施方式中，步骤S2是在碱存在下发生反应。
在某些实施方式中，步骤S2中所述碱选自无机碱和有机碱。
在某些实施方式中，步骤S2中所述无机碱选自氢化钠、磷酸钾、醋酸钾、碳酸钠、碳酸钾、碳酸铯、氢氧化钠、氢氧化锂和氢氧化钾中的一种或多种。
在某些实施方式中，步骤S2中所述有机碱选自三乙胺、吡啶、N,N-二异丙基乙胺、正丁基锂、二异丙基氨基锂、醋酸钠、醋酸钾、叔丁醇钠、叔丁醇钾和1,8-二氮杂二环十一碳-7-烯中的一种或多种。
在某些实施方式中，步骤S2是在O-(7-氮杂苯并三氮唑-1-基)-N,N,N’,N’-四甲基脲六氟磷酸酯存在下发生反应。
在某些实施方式中，步骤S3是在碱存在下发生反应。
在某些实施方式中，步骤S3中所述碱选自无机碱和有机碱。
在某些实施方式中，步骤S3中所述无机碱选自氢化钠、磷酸钾、醋酸钾、碳酸钠、碳酸钾、碳酸铯、氢氧化钠、氢氧化锂和氢氧化钾中的一种或多种。
在某些实施方式中，步骤S3中所述有机碱选自三乙胺、吡啶、二异丙基乙胺、正丁基锂、二异丙基氨基锂、醋酸钠、醋酸钾、叔丁醇钠、叔丁醇钾和1,8-二氮杂二环十一碳-7-烯中的一种或多种。
在某些实施方式中，步骤S3是在二溴三苯基膦存在下发生反应。
在某些实施方式中，步骤S4是在碱存在下发生反应。
在某些实施方式中，步骤S4中所述碱选自无机碱和有机碱。
在某些实施方式中，步骤S4中所述无机碱选自氢化钠、磷酸钾、醋酸钾、碳酸钠、碳酸钾、碳酸铯、氢氧化钠、氢氧化锂和氢氧化钾中的一种或多种。
在某些实施方式中，步骤S4中所述有机碱选自三乙胺、吡啶、N,N-二异丙基乙胺、正丁基锂、二异丙基氨基锂、醋酸钠、醋酸钾、叔丁醇钠、叔丁醇钾和1,8-二氮杂二环十一碳-7-烯中的一种或多种。
在某些实施方式中，步骤S4是在[1,1'-双(二苯基膦基)二茂铁]二氯化钯存在下发生反应。
在某些实施方式中，当所述式c、d、I化合物中R 1基团中存在氨基时，所述方法还包括对所述氨基上保护基和脱保护基的步骤。
在某些实施方式中，所述保护基选自Boc和Cbz。
本公开还提供了一种药物组合物，所述药物组合物含有治疗有效量的本公开式I、式I-a、式I-b、式I-b-1、式I-b-2或表A或表B所示的化合物或其药学上可接受的盐、酯、异构体、溶剂化物、前药或同位素标记物，以及一种或多种药学上可接受的载体、稀释剂或赋形剂。
在某些实施方式中，本公开所述的药物组合物的单位剂量为0.001mg-1000mg。
在某些实施方式中，基于组合物的总重量，所述的药物组合物含有0.01％-99.99％的本公开式I、式I-a、式I-b、式I-b-1、式I-b-2或表A或表B所示的化合物或其药学上可接受的盐、酯、异构体、溶剂化物、前药或同位素标记物。在某些实施方式中，所述的药物组合物含有0.1％-99.9％的本公开式I、式I-a、式I-b、式I-b-1、式I-b-2或表A或表B所示的化合物或其药学上可接受的盐、酯、异构体、溶剂化物、前药或同位素标记物。在某些实施方式中，所述的药物组合物含有0.5％-99.5％的本公开式I、式I-a、式I-b、式I-b-1、式I-b-2或表A或表B所示的化合物或其药学上可接受的盐、酯、异构体、溶剂化物、前药或同位素标记物。在某些实施方式中，所述的药物组合物含有1％-99％的本公开式I、式I-a、式I-b或表A或表B所示的化合物或其药学上可接受的盐、酯、异构体、溶剂化物、前药或同位素标记物。在某些实施方式中，所述的药物组合物含有2％-98％的本公开式I、式I-a、式I-b、式I-b-1、式I-b-2或表A或表B所示的化合物或其药学上可接受的盐、酯、异构体、溶剂化物、前药或同位素标记物。
在某些实施方式中，基于组合物的总重量，本公开所述的药物组合物含有0.01％-99.99％的药学上可接受的载体、稀释剂或赋形剂。在某些实施方式中，本公开所述的药物组合物含有0.1％-99.9％的药学上可接受的载体、稀释剂或赋形剂。在某些实施方式中，本公开所述的药物组合物含有0.5％-99.5％的药学上可接受的载体、稀释剂或赋形剂。在某些实施方式中，本公开所述的药物组合物含有1％-99％的药学上可接受的载体、稀释剂或赋形剂。在某些实施方式中，本公开所述的药物组合物含有2％-98％的药学上可接受的载体、稀释剂或赋形剂。
本公开所涉及的式I、式I-a、式I-b、式I-b-1、式I-b-2或表A或表B所示的化合物或其药学上可接受的盐、酯、异构体、溶剂化物、前药或同位素标记物及包含其的混合物、组合物等，可以经任一给药途径给予到生物体内。给药途径可以是口服给药、静脉注射、肌肉注射、皮下注射、直肠给药、阴道给药、舌下含化、鼻腔吸入、口腔吸入、滴眼、也可局部或全身经皮给药。
本公开所涉及的式I、式I-a、式I-b、式I-b-1、式I-b-2或表A或表B所示的化合物或其药学上可接受的盐、酯、异构体、溶剂化物、前药或同位素标记物及包含其的混合物、组合物等，可以配制成单一剂量，其中含有本发明的活性化合物以及载体、赋形剂等，给药剂型可以是片剂、胶囊剂、注射剂、颗粒剂、粉剂、栓剂、丸剂、乳膏剂、糊剂、凝胶剂、散剂、口服溶液、吸入剂、混悬剂、干悬剂、贴剂和洗剂等。这些剂型中可以含有药物制剂常用的成分，例如稀释剂、吸收剂、润湿剂、粘合剂、崩解剂、着色剂、pH调节剂、抗氧剂、抑菌剂等渗调节剂和抗粘剂等。
上述各类剂型的合适配方可从公开途径获得，例如Remington：The Science and Practice of Pharmacy，第21版；Lippincott Williams&Wilkins于2006年出版和Rowe,Raymond C.Handbook of Pharmaceutical Excipients,Chicago,Pharmaceutical Press于2005年出版，因此本领域的技术人员可以容易的制备。
根据不同个体所患疾病的性质、强度、患者的年龄、性别、体重和给药途径等因素，可以选择不同的给药剂量，本公开的化合物的给药剂量可以为每日0.01至500mg/kg，优选每日剂量为1-100mg/kg，可单次或多次给药。
本公开还提供了一种式I、式I-a、式I-b、式I-b-1、式I-b-2或表A或表B所示的化合物或其药学上可接受的盐、酯、异构体、溶剂化物、前药或同位素标记物或或包含其的药物组合物，其中所述同位素选自 2H、 3H、 13C、 14C、 15N、 17O、 18O、 31P、 32P、 35S、 18F和 36Cl，优选地，所述同位素为 2H。
本公开还提供了一种式I、式I-b、式I-b-1或式I-b-2所示的化合物或其药学上可接受的盐、酯、异构 体、溶剂化物、前药或同位素标记物或或包含其的药物组合物，其中环C被同位素取代，所述同位素选自 2H、 3H、 13C、 14C、 15N、 17O、 18O、 31P、 32P、 35S、 18F和 36Cl，优选地，所述同位素为 2H。
本公开还提供了一种式I、式I-a、式I-b、式I-b-1、式I-b-2或表A或表B所示的化合物或其药学上可接受的盐、酯、异构体、溶剂化物、前药或同位素标记物或或包含其的药物组合物在制备用于抑制ATR激酶的药物中的应用。
本公开还提供了一种式I、式I-a、式I-b、式I-b-1、式I-b-2或表A或表B所示的化合物或其药学上可接受的盐、酯、异构体、溶剂化物、前药或同位素标记物或包含其的药物组合物在制备用于预防和/或治疗ATR激酶介导的疾病或病症的药物中的应用。
本公开还提供了一种式I、式I-a、式I-b、式I-b-1、式I-b-2或表A或表B所示的化合物或其药学上可接受的盐、酯、异构体、溶剂化物、前药或同位素标记物或包含其的药物组合物在制备用于预防和/或治疗ATR激酶介导的疾病或病症的药物中的应用；其中所述的疾病或病症为过度或异常细胞增殖的疾病、障碍和病症；优选地，所述疾病、障碍和病症选自癌症和骨髓增殖性疾病；更优选地，所述癌症选自皮肤癌、膀胱癌、卵巢癌、乳腺癌、胃癌、前列腺癌、结直肠癌、肺癌、骨癌、脑癌、食管癌、舌癌、胃癌、肾癌、宫颈癌、子宫内膜癌、睾丸癌、泌尿癌、黑素癌、鳞状细胞癌、胶质瘤、脑膜瘤、霍奇金淋巴瘤、非霍奇金淋巴瘤、急性淋巴性白血病、慢性淋巴性白血病、急性骨髓性白血病、慢性粒细胞白血病、成人T细胞白血病淋巴瘤、肝癌、支气管癌、多发性骨髓瘤、基底细胞瘤和精原细胞瘤；其中，所述的结直肠癌优选为结肠癌和直肠癌；所述的肾癌优选为肾实质癌；所述的胶质瘤优选为星形细胞瘤；所述的肝癌优选为肝细胞癌；所述的肺癌优选为小细胞肺癌或非小细胞肺癌；所述的肉瘤优选选自横纹肌肉瘤、软骨肉瘤、肌肉瘤和纤维肉瘤。
本公开还提供了一种式I、式I-a、式I-b、式I-b-1、式I-b-2或表A或表B所示的化合物或其药学上可接受的盐、酯、异构体、溶剂化物、前药或同位素标记物或包含其的药物组合物，其用作药物。
本公开还提供了一种式I、式I-a、式I-b、式I-b-1、式I-b-2或表A或表B所示的化合物或其药学上可接受的盐、酯、异构体、溶剂化物、前药或同位素标记物或包含其的药物组合物，其用作ATR激酶抑制剂。
本公开还提供了一种式I、式I-a、式I-b、式I-b-1、式I-b-2或表A或表B所示的化合物或其药学上可接受的盐、酯、异构体、溶剂化物、前药或同位素标记物或包含其的药物组合物，其用作预防和/或治疗ATR激酶介导的疾病或病症。
本公开还提供了一种式I、式I-a、式I-b、式I-b-1、式I-b-2或表A或表B所示的化合物或其药学上可接受的盐、酯、异构体、溶剂化物、前药或同位素标记物或包含其的药物组合物，其用作预防和/或治疗ATR激酶介导的疾病或病症；其中所述的疾病或病症为过度或异常细胞增殖的疾病、障碍和病症；优选地，所述疾病、障碍和病症选自癌症和骨髓增殖性疾病；更优选地，所述癌症选自皮肤癌、膀胱癌、卵巢癌、乳腺癌、胃癌、前列腺癌、结直肠癌、肺癌、骨癌、脑癌、食管癌、舌癌、胃癌、肾癌、宫颈癌、子宫内膜癌、睾丸癌、泌尿癌、黑素癌、鳞状细胞癌、胶质瘤、脑膜瘤、霍奇金淋巴瘤、非霍奇金淋巴瘤、急性淋巴性白血病、慢性淋巴性白血病、急性骨髓性白血病、慢性粒细胞白血病、成人T细胞白血病淋巴瘤、肝癌、支气管癌、多发性骨髓瘤、基底细胞瘤和精原细胞瘤；其中，所述的结直肠癌优选为结肠癌和直肠癌；所述的肾癌优选为肾实质癌；所述的胶质瘤优选为星形细胞瘤；所述的肝癌优选为肝细胞癌；所述的 肺癌优选为小细胞肺癌或非小细胞肺癌；所述的肉瘤优选选自横纹肌肉瘤、软骨肉瘤、肌肉瘤和纤维肉瘤。
本公开还提供了一种抑制ATR激酶的方法，其包括给予所需患者治疗有效量的式I、式I-a、式I-b、式I-b-1、式I-b-2或表A或表B所示的化合物或其药学上可接受的盐、酯、异构体、溶剂化物、前药或同位素标记物或包括其的药物组合物。
本公开还提供了一种预防和/或治疗ATR激酶介导的疾病或病症的方法，其包括给予所需患者治疗有效量的式I、式I-a、式I-b、式I-b-1、式I-b-2或表A或表B所示的化合物或其药学上可接受的盐、酯、异构体、溶剂化物、前药或同位素标记物或包括其的药物组合物。
本公开还提供了一种预防和/或治疗ATR激酶介导的疾病或病症的方法，其包括给予所需患者治疗有效量的式I、式I-a、式I-b、式I-b-1、式I-b-2或表A或表B所示的化合物或其药学上可接受的盐、酯、异构体、溶剂化物、前药或同位素标记物或包括其的药物组合物；其中所述的疾病或病症为过度或异常细胞增殖的疾病、障碍和病症；优选地，所述疾病、障碍和病症选自癌症和骨髓增殖性疾病；更优选地，所述癌症选自皮肤癌、膀胱癌、卵巢癌、乳腺癌、胃癌、前列腺癌、结直肠癌、肺癌、骨癌、脑癌、食管癌、舌癌、胃癌、肾癌、宫颈癌、子宫内膜癌、睾丸癌、泌尿癌、黑素癌、鳞状细胞癌、胶质瘤、脑膜瘤、霍奇金淋巴瘤、非霍奇金淋巴瘤、急性淋巴性白血病、慢性淋巴性白血病、急性骨髓性白血病、慢性粒细胞白血病、成人T细胞白血病淋巴瘤、肝癌、支气管癌、多发性骨髓瘤、基底细胞瘤和精原细胞瘤；其中，所述的结直肠癌优选为结肠癌和直肠癌；所述的肾癌优选为肾实质癌；所述的胶质瘤优选为星形细胞瘤；所述的肝癌优选为肝细胞癌；所述的肺癌优选为小细胞肺癌或非小细胞肺癌；所述的肉瘤优选选自横纹肌肉瘤、软骨肉瘤、肌肉瘤和纤维肉瘤。
本公开进一步提供了一种治疗ATR激酶介导的疾病的方法，所述哺乳动物可为人，或可为非人哺乳动物，用于治疗目的，包括给哺乳动物施用本公开式I、式I-a、式I-b、式I-b-1、式I-b-2或表A或表B所示的化合物或其药学上可接受的盐、酯、异构体、溶剂化物、前药或同位素标记物或包括其的药物组合物。
术语解释
除非有相反陈述，在说明书和权利要求书中使用的术语具有下述含义。
术语“C 1-6烷基”单独或者以组合方式表示包含1-6个，特别是1-4个碳原子的饱和直链或支链的烷基，包括甲基、乙基、丙基、异丙基、丁基、仲丁基、异丁基、叔丁基、正戊基、2-戊基、3-戊基、2-甲基-2-丁基、3-甲基-2-丁基、3-甲基-1-丁基、2-甲基-1-丁基、正己基、2-己基、3-己基、2-甲基-2-戊基、3-甲基-2-戊基、4-甲基-2-戊基、3-甲基-3-戊基、2-甲基-3-戊基、2,3-二甲基-2-丁基、3,3,-二甲基-2-丁基等。优选地，“C 1-6烷基”是甲基、乙基、异丙基、叔丁基中的任一种。烷基可以是取代的或非取代的，当被取代时，取代基可以在任何可使用的连接点上被取代，所述取代基优选为一个或多个以下基团，其独立地选自烷基、烯基、炔基、烷氧基、烷硫基、烷基氨基、卤素、巯基、羟基、硝基、氰基、环烷基、杂环基、芳基、杂芳基、环烷氧基、杂环烷氧基、环烷硫基、杂环烷硫基、氧代基、羧基或羧酸酯基。
术语“C 1-6亚烷基”指饱和的直链或支链脂肪族烃基，其具有2个从母体烷的相同碳原子或两个不同的碳原子上除去两个氢原子所衍生的残基，其为含有1至6个碳原子的亚烷基。亚烷基的非限制性实例包括但不限于亚甲基(-CH 2-)、1,1-亚乙基(-CH(CH 3)-)、1,2-亚乙基(-CH 2CH 2)-、1,1-亚丙基(-CH(CH 2CH 3)-)、1,2-亚丙基(-CH 2CH(CH 3)-)、1,3-亚丙基(-CH 2CH 2CH 2-)、1,4-亚丁基(-CH 2CH 2CH 2CH 2-)等。亚烷基可以是取代的或非取代的，当被取代时，取代基可以在任何可使用的连接点上被取代。
术语“3至7元环烷基”指饱和或部分不饱和单环或多环环状烃取代基，其表示具有3到7个，特别是3-6个碳原子的饱和环烷基，包括环丙基、环丁基、环戊基、环己基、环庚基等。特别的“C 3-7环烷基”是环丙基、环戊基、环己基等。
术语“C 1-6烷基氨基”单独或者以组合方式表示如上所定义的氨基基团，其中氨基基团的氢原子被至少一个C 1-6烷基所取代，其中“C 1-6烷基”表示如以上所定义，相应地，“C 1-6烷基氨基”包括甲基氨基，乙基胺基，丙基氨基，异丙基氨基，正丁基胺基，异丁基氨基，2-丁基氨基，叔丁基氨基，正戊基氨基、2-戊基氨基、3-戊基氨基、2-甲基-2-丁基氨基、3-甲基-2-丁基氨基、3-甲基-1-丁基氨基、2-甲基-1-丁基氨基、正己基氨基、2-己基氨基、3-己基氨基、2-甲基-2-戊基氨基、3-甲基-2-戊基氨基、4-甲基-2-戊基氨基、3-甲基-3-戊基氨基、2-甲基-3-戊基氨基、2,3-二甲基-2-丁基氨基、3,3-二甲基-2-丁基氨基等。特别的“C 1-6烷基氨基”是甲基氨基、乙基氨基、异丙基氨基、叔丁基氨基等。
术语“C 1-6烷氧基”单独或者以组合方式表示基团C 1-6烷基-O-，其中“C 1-6烷基”表示如以上所定义。
术语“杂环基”指由碳原子与氮、氧或硫等杂原子组成的饱和或部分不饱和(包含1或2个双键)的非芳香环状基团，此环状基团可以是单环或双环基团，在本发明中，杂环基中杂原子个数优选1、2、3或4,杂环基中的氮、碳或硫原子可任选地被氧化。“杂环基”上的氢原子独立任选地被一个或多个本发明所描述的取代基所取代。“杂环基”可以通过环上任意的环原子链接到母体分子上。
术语“3至7元杂环基”是指单环杂环基中包含3至7个碳原子和杂原子；例如氮丙啶基、氮杂环丁基、氧杂环丁基、吡咯烷基、四氢呋喃基、四氢噻吩基、哌啶基、吗啉基、硫代吗啉基、四氢吡喃基、1,1-二氧硫代吗啉基。
术语“3至7元环烷基氨基”表示单独或者以组合方式表示如上所定义的氨基基团，其中氨基基团的氢原子被至少一个C 3-7环烷基所取代，“C 3-7环烷基”表示如以上所定义。
术语“3至7元杂环基氨基”表示单独或者以组合方式表示如上所定义的氨基基团，其中氨基基团的氢原子被至少一个3至7元杂环基所取代，“3至7元杂环基”表示如以上所定义。
术语“芳基”表示任何稳定的6至10元单环或双环芳香族基团，包括苯基、萘基、四氢萘基、2,3-二氢化茚基或联苯基等。
术语“杂芳基”表示环上的碳原子被至少一个选自硫、氧或氮的杂原子置换形成的芳香环基团，此芳香环基团可以是5-7元单环或7-12双环基团。在本发明中，杂环基中杂原子个数优选1、2、3或4，例如噻吩基、吡啶基、嘧啶基、吡嗪基、哒嗪基、吡咯基、吡唑基、噻唑基、1,2,3-三唑基、1,2,4-三唑基、咪唑基、四氮唑基、异噻唑基、噁唑基、异噁唑基、噻二唑基、噁二唑基、萘基、苯并噻吩基、吲哚基、苯并咪唑基、苯并噻唑基、苯并呋喃基、喹啉基、异喹啉基、喹唑啉基等。
术语“芳基C 1-6烷基”表示C 1-6烷基基团被一个或多个芳基基团所取代，芳基和C 1-6烷基表示如以上所定义。
术语“杂芳基C 1-6烷基”表示C 1-6烷基基团被一个或多个杂芳基基团所取代，杂芳基和C 1-6烷基表示如以上所定义。
术语“氨基”单独或者以组合方式表示伯氨基(-NH 2)，仲氨基(-NH-)或叔氨基
Figure PCTCN2022111868-appb-000046
术语“卤素”单独或者以组合方式表示氟，氯，溴或碘。特别的是氟，氯或溴。
术语“氰基”单独或组合的是指基团-CN。
术语“羧基”单独或组合的是指基团-COOH。
术语“羟基”单独或组合的是指基团-OH。
术语“胍基”单独或组合的是指基团-NH-C(＝NH)-NH 2。
术语“脲基”单独或组合的是指基团-NH-C(＝O)-NH 2。
术语“酰胺基”单独或组合的是指基团-C(＝O)-NH 2。
术语“取代的”指基团中的一个或多个氢原子，优选为最多5个，更优选为1～3个氢原子彼此独立地被相应数目的取代基取代。不言而喻，取代基仅处在它们的可能的化学位置，本领域技术人员能够在不付出过多努力的情况下确定(通过实验或理论)可能或不可能的取代。例如，具有游离氢的氨基或羟基与具有不饱和(如烯属)键的碳原子结合时可能是不稳定的。
术语“替代”是指某一个基团被另一个基团完全替换，如亚甲基被杂原子如氧原子或氮原子替代等。
本公开所述化合物的化学结构中，键
Figure PCTCN2022111868-appb-000047
并未指定构型，即键
Figure PCTCN2022111868-appb-000048
可以为
Figure PCTCN2022111868-appb-000049
或者同时包含
Figure PCTCN2022111868-appb-000050
两种构型。键
Figure PCTCN2022111868-appb-000051
表示单一构型，为
Figure PCTCN2022111868-appb-000052
本公开所述化合物的化学结构中，键
Figure PCTCN2022111868-appb-000053
并未指定构型，即可以为Z构型或E构型，或者同时包含两种构型。
术语“异构体”包含所有的同分异构形式包括对映异构体、非对映异构体和几何异构体包括顺反异构体。因此，本发明中所设计的化合物的单个立体化学异构体或其对映异构体、非对映异构体、或几何异构体(或顺反异构体)的混合物都属于本发明的范围。
术语“同位素标记物”，可以将同位素引入本发明涉及的任一化合物中，引入的同位素可以是 2H， 3H， 13C， 14C， 15N， 17O， 18O， 31P， 32P， 35S， 18F， 36Cl，优选地，引入的同位素可以是 2H， 3H， 13C， 14C，更优选地，引入的同位素是 2H，具体的同位素衍生物可以通过常规技术制备。
术语“药学上可接受的盐”表示本发明的化合物以它们的药用盐的形式存在，包括酸加成盐和碱加成盐。药学上可接受的盐在S.M.Berge在J.Pharmaceutical Sciences(66卷:1-19页,1977年)中描述的pharmaceutically salts中有所描述。在本发明中，药学上可接受的无毒的酸加成盐表示本发明中的化合物与有机或无机酸形成的盐，有机或无机酸包括但不限于盐酸、硫酸、氢溴酸、氢碘酸、磷酸、硝酸、高氯酸、乙酸、草酸、马来酸、富马酸、酒石酸、苯磺酸、甲磺酸、水杨酸、琥珀酸、柠檬酸、乳酸、丙酸、苯甲酸、对甲苯磺酸和苹果酸等。药学上可接受的无毒的碱加成盐表示本发明中的化合物与有机或无机碱所形成的盐，包括但不限于碱金属盐，例如锂，钠或钾盐；碱土金属盐，例如钙或镁盐；有机碱盐，例如通过与含N基团的有机碱形成的铵盐或N +(C 1-6烷基) 4盐。
以上对本发明的涉及的术语进行了定义，本领域技术人员还可以结合现有技术对以上术语进行理解，以下基于本发明的内容以及对术语的定义进一步进行描述。
以下结合实施例进一步描述本公开所述的化合物、可药用盐的制备，但这些实施例并非限制本公开中的范围。
本公开中实施例中未注明具体条件的实验方法，通常按照常规条件，或按照原料或商品制造厂商所建议的条件。未注明具体来源的试剂，为市场购买的常规试剂。
本发明中使用的缩写如下：
CDCl 3：氘代氯仿
dioxane：1,4-二氧六环
CO 2：二氧化碳
conc.H 2SO 4：浓硫酸
DCM：二氯甲烷
DME：乙二醇二甲醚
DMF：N,N-二甲基甲酰胺
DMSO：二甲亚砜
DMSO-d 6：氘代二甲亚砜
EtOH：乙醇
EtONa：乙醇钠
FeCl 3：三氯化铁
g：克
HCOOH：甲酸
Hz：赫兹
h：小时
IC 50：半最大抑制浓度
MeOH：甲醇
mg：毫克
mL：毫升
mmol：毫摩尔
MHz：兆赫兹
NaBH 3CN：氰基硼氢化钠
NaOH：氢氧化钠
NH 4OAc：醋酸铵
NMR：核磁共振
M：摩尔浓度
Oxalyl chloride：草酰氯
PBS：磷酸缓冲盐溶液
PdCl 2(dppf)：[1,1'-双(二苯基膦基)二茂铁]二氯化钯
TCQ：四氯苯醌
TLC：薄层色谱
TsNHNH 2：对甲基苯磺酰肼
uM：微摩尔/升
μg：微克
μL：微升
δ：化学位移
以下描述本发明实施例中通用试验条件：
首先，实施例中的反应一般在氮气保护下进行。
进一步地，中间体和最终产物通过色谱柱、制备色谱板和ISCO快速制备色谱系统分离纯化。色谱柱使用硅胶填充，硅胶(300-400目)由上海泰坦科技股份有限公司生产，制备色谱板由烟台江友硅胶开发有限公司生产，ISCO所用色谱柱(粒度40-63μm，
Figure PCTCN2022111868-appb-000054
)由常州三泰科技有限公司生产。
进一步地，LC-MS液质联用色谱仪使用Waters公司ACQUITY Arc配备QDa Detector。使用Waters XBridge C18色谱柱(规格2.1×50mm，3.5μm)。质谱(MS)采用ESI源，仅指示母体分子的分子量M，通常汇报[M+H] +。注射体积是通过样品浓度来确定；流速为：1.2mL/min；HPLC的峰值是通过在220nm和254nm处的UV-Vis波长来记录读取的。流动相为0.01％甲酸的超纯水溶液(流动相A)和0.01％甲酸的乙腈溶液(流动相B)。梯度洗脱条件如下表C和表D所示：
表C：梯度洗脱条件1
时间(min) A(H 2O,0.01％HCOOH) B(CH 3CN,0.01％HCOOH)
0.0-0.3 95-85 5-15
0.3-3.2 85-20 15-80
3.2-3.8 20-5 80-95
3.8-3.81 5-95 95-5
3.81-4.0 95 5
表D：梯度洗脱条件2
时间(min) A(H 2O,0.01％HCOOH) B(CH 3CN,0.01％HCOOH)
0.00-5.90 95-5 5-95
5.90-5.91 5-95 95-5
5.91-6.00 95 5
进一步地，NMR谱图采用Varian 400MHz核磁共振谱仪获得数据，常以CDCl 3，DMSO-d 6作为溶剂，以ppm报告化学位移。各种峰的描述如下：s(单峰)，d(双峰)，t(三重峰)，q(四重峰)，m(多重峰)，dd(双二重峰)。偶合常数使用Hz表示。
实施例1
1-(4-(5-(3-氨基-6-(4-(异丙基磺酰基)苯基)吡嗪-2-基)异噁唑-3-基)苄基)胍二盐酸盐1
Figure PCTCN2022111868-appb-000055
第一步
(E)-4-((羟基亚胺)甲基)苯甲腈1a
Figure PCTCN2022111868-appb-000056
室温下，向4-氰基-苯甲醛(5g，38.13mmol)在四氢呋喃(30mL)和水(3mL)的混合溶液中加入羟胺盐酸盐(3.18g，45.75mmol)。将反应混合物在室温(～20℃)下搅拌16小时后。向反应体系中加入水(40mL)，有机相分离出，水相用乙酸乙酯(30mL)萃取三次，合并的有机相用无水硫酸钠干燥，过滤，滤液减压浓缩得到黄色固体(E)-4-((羟基亚胺)甲基)苯甲腈1a(4.5g)，为粗产品并在未经进一步纯化下直接用于下一步骤。
第二步
叔丁基(5-溴-3-(3-(4-氰基苯基)异噁唑-5-基)吡嗪-2-基)(叔丁氧羰基)氨基甲酸酯1b
Figure PCTCN2022111868-appb-000057
向叔丁基(5-溴-3-乙炔基-2-吡嗪基)(叔丁氧羰基)氨基甲酸酯(0.5g，1.26mmol)的甲醇(12mL)和水(2.4mL)的混合溶液中依次加入(E)-4-((羟基亚胺)甲基)苯甲腈1a(0.27g，1.88mmol)和双三氟乙酰碘苯(0.81g，1.88mmol)，在室温下搅拌过夜。向反应液中加入乙酸乙酯(40mL)和水(40mL)。有机相接着用水(20mL)洗三遍。有机相分离出并用无水硫酸钠干燥，过滤后浓缩并柱层析分离得到叔丁基(5-溴-3-(3-(4-氰基苯基)异噁唑-5-基)吡嗪-2-基)(叔丁氧羰基)氨基甲酸酯1b(0.45g)。
第三步
叔丁基(叔丁氧羰基)(3-(3-(4-氰基苯基)异噁唑-5-基)-5-(4-(异丙基磺酰基)苯基)吡嗪-2-基)氨基甲酸酯1c
Figure PCTCN2022111868-appb-000058
氮气保护下，向叔丁基(5-溴-3-(3-(4-氰基苯基)异噁唑-5-基)吡嗪-2-基)(叔丁氧羰基)氨基甲酸酯1b(1.5g，3.39mmol)的1,4-二氧六环(15mL)和水(1.5mL)混合溶液中，室温下依次加入4-异丙基磺酰基苯硼酸(0.77g，3.39mmol)，碳酸钾(0.94g，6.78mmol)和[1,1'-双(二苯基膦基)二茂铁]二氯化钯(0.5g，0.678mmol)。置换氮气三次后，反应液在95℃下搅拌三个小时。冷却至室温后，向反应液中加入乙酸乙酯(40mL)和水(40mL)。混合溶液用硅藻土过滤，所得溶液分液，水相用乙酸乙酯(20mL)萃取三次，合并的有机相浓缩并柱层析分离得到叔丁基(叔丁氧羰基)(3-(3-(4-氰基苯基)异噁唑-5-基)-5-(4-(异丙基磺酰基)苯基)吡嗪-2-基)氨基甲酸酯1c(0.6g)。
第四步
叔丁基(3-(3-(4-(胺甲基)苯基)异噁唑-5-基)-5-(4-(异丙基磺酰基)苯基)吡嗪-2-基)(叔丁氧羰基)氨基甲酸酯1d
Figure PCTCN2022111868-appb-000059
向叔丁基(叔丁氧羰基)(3-(3-(4-氰基苯基)异噁唑-5-基)-5-(4-(异丙基磺酰基)苯基)吡嗪-2-基)氨基甲酸酯1c(540mg，0.99mmol)的甲醇(15mL)溶液中，室温下依次加入六水合氯化镍(705mg，2.97mmol)和硼氢化钠(112mg，2.97mmol)。反应液室温下搅拌1个小时之后，用氯化铵(2mL)淬灭。再加入乙酸乙酯(40mL)和饱和的碳酸氢钠水溶液(40mL)。混合溶液用硅藻土过滤后，滤液倒入分液漏斗。水相用乙酸乙酯(40mL)萃取三次，合并的有机相浓缩并柱层析分离得到叔丁基(3-(3-(4-(胺甲基)苯基)异噁唑-5-基)-5-(4-(异丙基磺酰基)苯基)吡嗪-2-基)(叔丁氧羰基)氨基甲酸酯1d(300mg)。
第五步
叔丁基(叔丁氧羰基)(3-(3-(4-(胍基亚甲基)苯基)异噁唑-5-基)-5-(4-(异丙基磺酰基)苯基)吡嗪-2-基)氨基甲酸酯1e
Figure PCTCN2022111868-appb-000060
向叔丁基(3-(3-(4-(胺甲基)苯基)异噁唑-5-基)-5-(4-(异丙基磺酰基)苯基)吡嗪-2-基)(叔丁氧羰基)氨基甲酸酯1d(36mg，0.053mmol)的乙腈(3mL)溶液中，依次加入1H-吡唑-1-甲脒盐酸(7.5mg，0.051mmol)和N,N-二异丙基乙胺(10μL)。室温下搅拌16个小时。向反应液中加入乙酸乙酯(20mL)和水(20mL),所得溶液分液，水相用乙酸乙酯(20mL)萃取三次，合并的有机相浓缩并经柱层析色谱分离得到叔丁基(叔丁氧羰基)(3-(3-(4-(胍基亚甲基)苯基)异噁唑-5-基)-5-(4-(异丙基磺酰基)苯基)吡嗪-2-基)氨基甲酸酯1e(27mg)。
第六步
1-(4-(5-(3-氨基-6-(4-(异丙基磺酰基)苯基)吡嗪-2-基)异噁唑-3-基)苄基)胍二盐酸盐1
向叔丁基(叔丁氧羰基)(3-(3-(4-(胍基亚甲基)苯基)异噁唑-5-基)-5-(4-(异丙基磺酰基)苯基)吡嗪-2-基)氨基甲酸酯1e(27mg，0.04mmol)的乙酸乙酯(2mL)溶液中，加入盐酸乙酸乙酯混合溶液(4M，2mL)。反应液室温下搅拌1个小时后，反应液浓缩得到黄色固体1-(4-(5-(3-氨基-6-(4-(异丙基磺酰基)苯基)吡嗪-2-基)异噁唑-3-基)苄基)胍二盐酸盐1(22mg)。
1H NMR(400MHz,DMSO-d 6):δ8.94(s,1H),8.38–8.36(m,2H),8.05–8.03(m,2H),7.94–7.92(m,2H),7.80(s,1H),7.53–7.51(m,2H),7.48(brs,3H),7.35(brs,2H),7.22(brs,3H),4.52–4.50(m,2H),3.49–3.42(m,1H),1.20–1.18(m,6H)。
MS实测值(ESI +)[(M+H) +]:492。
实施例2
(4-(5-氨基-6-(3-(4-((甲基氨基)甲基)苯基)异噁唑-5-基)吡嗪-2-基)苯基)(亚胺基)(异丙基)-λ 6-亚砜2
Figure PCTCN2022111868-appb-000061
第二步
(4-(丙基-2-亚磺酰亚胺基)苯基)硼酸2a
Figure PCTCN2022111868-appb-000062
向4-(异丙基硫代)苯基硼酸(2.20g，11.22mmol)的乙醇(50mL)溶液中，加入碘苯二乙酸酯(10.84g，33.66mmol)和乙酸胺(3.46g，44.88mmol)。反应液加热到75℃并搅拌4个小时后，向反应溶液中加入乙酸乙酯(50mL)和水(50mL)。水相浓缩成固体，再向固体中加入乙酸乙酯(50mL)和甲醇(30mL)，搅拌0.5小时过滤，滤液浓缩得到黑色油状物(4-(丙基-2-亚磺酰亚胺基)苯基)硼酸2a(1.3g)，为粗产品并在未经进一步纯化下直接用于下一步骤。
第二步
1-(4-(二乙氧甲基)苯基)-N-甲基亚甲基胺2b
Figure PCTCN2022111868-appb-000063
向对苯二甲醛缩二乙醛(2g，9.60mmol)的甲醇(10mL)溶液中，依次加入三乙胺(1.6mL)和甲胺盐酸盐(0.78g，11.52mmol)。反应液室温搅拌0.5小时后，再加入硼氢化钠(0.58g，15.37mmol)。反应液再继续室温搅拌1个小时。冰水(0.1mL)加入淬灭反应，然后再加入乙酸乙酯(50mL)和水(50mL)。分液后的水相再用乙酸乙酯(20mL)萃取三次，合并的有机相浓缩并柱层析分离得到1-(4-(二乙氧甲基)苯基)-N-甲基亚甲基胺2b(2.78g)。
第三步
叔丁基(4-(二乙氧甲基)苄基)(亚甲基)氨基甲酸酯2c
Figure PCTCN2022111868-appb-000064
向1-(4-(二乙氧甲基)苯基)-N-甲基亚甲基胺2b(2.78g，9.58mmol)的二氯甲烷(20mL)溶液中，依次加入三乙胺(2.91g，28.75mmol)和二叔丁基二碳酸酯(6.27g，28.75mmol)。反应液室温下搅拌4个小时。水(20mL)加入反应液。分液后水相用二氯甲烷(20mL)萃取三次。合并的有机相浓缩并柱层析分离得到叔丁基(4-(二乙氧甲基)苄基)(亚甲基)氨基甲酸酯2c(2.9g)。
第四步
叔丁基(E)-(4-((羟基亚胺)甲基)苄基)(甲基)氨基甲酸酯2d
Figure PCTCN2022111868-appb-000065
将叔丁基(4-(二乙氧甲基)苄基)(亚甲基)氨基甲酸酯2c(2.9g，8.97mmol)，羟胺盐酸盐(0.75g，10.76 mmol)按照类似于实施例1第一步的方法制备得到黄色油状物叔丁基(E)-(4-((羟基亚胺)甲基)苄基)(甲基)氨基甲酸酯2d(1.8g)。
第五步
叔丁基(5-溴-3-(3-(4-(((叔丁氧羰基)(甲基)氨基)甲基)苯基)异噁唑-5-基)吡嗪-2-基)(叔丁氧羰基)氨基甲酸酯2e
Figure PCTCN2022111868-appb-000066
将叔丁基(E)-(4-((羟基亚胺)甲基)苄基)(甲基)氨基甲酸酯2d(500mg，1.88mmol)，(E)-4-((异亚硝基)甲基)苯甲腈(500mg，1.26mmol)和双三氟乙酰碘苯(810mg，1.88mmol)按照类似于实施例1第二步的方法制备得到叔丁基(5-溴-3-(3-(4-(((叔丁氧羰基)(甲基)氨基)甲基)苯基)异噁唑-5-基)吡嗪-2-基)(叔丁氧羰基)氨基甲酸酯2e(680mg)。
第六步
叔丁基(叔丁氧羰基)(3-(3-(4-(((叔丁氧羰基)(甲基)氨基)甲基)苯基)异噁唑-5-基)-5-(4-(丙基-2-基亚磺酰亚胺基)苯基)吡嗪-2-基)氨基甲酸酯2f
Figure PCTCN2022111868-appb-000067
将叔丁基(5-溴-3-(3-(4-(((叔丁氧羰基)(甲基)氨基)甲基)苯基)异噁唑-5-基)吡嗪-2-基)(叔丁氧羰基)氨基甲酸酯2e(100mg，0.151mmol)和(4-(丙基-2-基-亚磺酰亚胺基)苯基)硼酸(68mg，0.302mmol)，碳酸钾(42mg，0.302mmol)和[1,1'-双(二苯基膦基)二茂铁]二氯化钯(22mg，0.03mmol)按照类似于实施例1第三步的方法制备得到黄色固体叔丁基(叔丁氧羰基)(3-(3-(4-(((叔丁氧羰基)(甲基)氨基)甲基)苯基)异噁唑-5-基)-5-(4-(丙基-2-基亚磺酰亚胺基)苯基)吡嗪-2-基)氨基甲酸酯2f(65mg)。
第七步
(4-(5-氨基-6-(3-(4-((甲基氨基)(甲基)苯基)异噁唑-5-基)吡嗪-2-基)苯基)(亚胺基)(异丙基)-λ 6-亚砜2
向叔丁基(叔丁氧羰基)(3-(3-(4-(((叔丁氧羰基)(甲基)氨基)甲基)苯基)异噁唑-5-基)-5-(4-(丙基-2-基亚磺酰亚胺基)苯基)吡嗪-2-基)氨基甲酸酯2f(35mg，0.046mmol)的乙酸乙酯(2mL)溶液中，加入盐酸乙酸乙酯混合溶液(4M，2mL)。反应液室温下搅拌1个小时后，反应液浓缩后加入乙酸乙酯(20mL)和饱和的碳酸氢钠水溶液(20mL)，分液后有机相用水(20mL)洗一遍后，有机相浓缩并经柱层析色谱分离得到(4-(5-氨基-6-(3-(4-((甲基氨基)亚甲基)苯基)异噁唑-5-基)吡嗪-2-基)苯基)(亚胺基)(异丙基)-λ 6-亚砜2(14.5mg)。
1H NMR(400MHz,DMSO-d 6):δ9.29(s,2H),8.93(s,1H),8.33–8.31(m,2H),8.11–8.09(m,2H),7.95–7.92(m,2H),7.84(s,1H),7.74–7.72(m,2H),7.23–7.17(m,2H),4.20(s,2H),3.30–3.24(m,1H),2.58(s,3H),1.17–1.15(m,6H)。
MS实测值(ESI +)[(M+H) +]:463。
实施例3
3-(3-(1H-苯并[d][1,2,3]三氮唑-5-基)异噁唑-5-基)-5-(4-(异丙基磺酰基)苯基)吡嗪-2-胺3
Figure PCTCN2022111868-appb-000068
第一步
1H-苯并[d][1,2,3]三氮唑-5-甲腈3a
Figure PCTCN2022111868-appb-000069
向3,4-二氨基苯甲腈(1.0g，7.51mmol)的醋酸(15mL)溶液中，加入亚硝酸钠水溶液(0.62g亚硝酸钠溶于15mL水)。反应液室温下搅拌2个小时。加入乙酸乙酯(40mL)和水溶液(20mL)。分液后，有机相浓缩得到白色固体1H-苯并[d][1,2,3]三氮唑-5-甲腈3a(0.8g)，为粗产品并在未经进一步纯化下直接用于下一步骤。
第二步
叔丁基-5-氰基-1H-苯并[d][1,2,3]三氮唑-1-氨基甲酸酯3b
Figure PCTCN2022111868-appb-000070
将1H-苯并[d][1,2,3]三氮唑-5-甲腈3a(0.8g，5.55mmol)，三乙胺(2.27mL)和二叔丁基二碳酸酯(3.63g，16.65mmol)按照类似于实施例2第三步的方法制备得到叔丁基-5-氰基-1H-苯并[d][1,2,3]三氮唑-1-氨基甲酸酯3b(1.23g)。
第三步
1H-苯并[d][1,2,3]三氮唑-5-甲醛3c
Figure PCTCN2022111868-appb-000071
-40℃下，向叔丁基-5-氰基-1H-苯并[d][1,2,3]三氮唑-1-氨基甲酸酯3b(1.23g，5.04mmol)的甲苯(10mL)溶液中，缓慢加入DABAL-H(12mL，1M in PhMe)。反应液-40℃下搅拌3个小时。加入L-酒石酸水溶液(1mL，1M)淬灭。乙酸乙酯(20mL)加入，体系过滤，滤液用水(20mL)和饱和食盐水(20mL)洗涤。有机相浓缩得到1H-苯并[d][1,2,3]三氮唑-5-甲醛3c(160mg)，为粗产品并在未经进一步纯化下直接用于下一步骤。
第四步
叔丁基-5-甲酰基-1H-苯并[d][1,2,3]三氮唑-1-氨基甲酸酯3d
Figure PCTCN2022111868-appb-000072
将1H-苯并[d][1,2,3]三氮唑-5-甲醛3c(0.16g，1.09mmol)，三乙胺(0.44mL)和二叔丁基二碳酸酯(0.72g，3.26mmol)按照类似于实施例2第三步的方法制备得到叔丁基-5-甲酰基-1H-苯并[d][1,2,3]三氮唑-1-氨基甲酸酯3d(140mg)。
第五步
叔丁基(E)-5-((羟基亚胺)亚甲基)-1H-苯并[d][1,2,3]三氮唑-1-羧酸酯3e
Figure PCTCN2022111868-appb-000073
将叔丁基-5-甲酰基-1H-苯并[d][1,2,3]三氮唑-1-氨基甲酸酯3d(0.14g，0.566mmol)，羟胺盐酸盐(0.048g，0.68mmol)按照类似于实施例1第一步的方法制备得到黄色油状物叔丁基(E)-5-((羟基亚胺)亚甲基)-1H-苯并[d][1,2,3]三氮唑-1-羧酸酯3e(75mg)。
第六步
叔丁基5-(5-(6-溴-3-(N,N-二(叔丁氧羰基)氨基)吡嗪-2-基)异噁唑-3-基)-1H-苯并[d][1,2,3]三氮唑-1-羧酸酯3f
Figure PCTCN2022111868-appb-000074
将叔丁基(E)-5-((羟基亚胺)亚甲基)-1H-苯并[d][1,2,3]三氮唑-1-羧酸酯3e(75mg，0.282mmol)，(E)-4-((异亚硝基)甲基)苯甲腈(75mg，0.188mmol)和双三氟乙酰碘苯(121mg，0.282mmol)按照类似于实施例1第二步的方法制备得到黄色固体叔丁基5-(5-(6-溴-3-(N,N-二(叔丁氧羰基)氨基)吡嗪-2-基)异噁唑-3-基)-1H-苯并[d][1,2,3]三氮唑-1-羧酸酯3f(30mg)。
第七步
叔丁基(3-(3-(1H-苯并[d][1,2,3]三氮唑-5-基)异噁唑-5-基)-5-(4-(异丙基磺酰基)苯基)吡嗪-2-基)氨基甲酸酯3g
Figure PCTCN2022111868-appb-000075
将叔丁基5-(5-(6-溴-3-(N,N-二(叔丁氧羰基)氨基)吡嗪-2-基)异噁唑-3-基)-1H-苯并[d][1,2,3]三氮唑-1-羧酸酯3f(30mg，0.045mmol)和4-异丙基磺酰基苯硼酸(10mg，0.045mmol)，碳酸钾(13mg，0.09mmol)和[1,1'-双(二苯基膦基)二茂铁]二氯化钯(7mg，0.009mmol)按照类似于实施例1第三步的方法制备得到黄色固体叔丁基(3-(3-(1H-苯并[d][1,2,3]三氮唑-5-基)异噁唑-5-基)-5-(4-(异丙基磺酰基)苯基)吡嗪-2-基)氨基甲酸酯3g(15mg)。
第八步
3-(3-(1H-苯并[d][1,2,3]三氮唑-5-基)异噁唑-5-基)-5-(4-(异丙基磺酰基)苯基)吡嗪-2-胺3
将叔丁基(3-(3-(1H-苯并[d][1,2,3]三氮唑-5-基)异噁唑-5-基)-5-(4-(异丙基砜基)苯基)吡嗪-2-基)氨基甲酸酯3g(15mg，0.027mmol)和盐酸乙酸乙酯(2mL，4M)按照类似于实施例2第七步的方法制备得到黄色固体3-(3-(1H-苯并[d][1,2,3]三氮唑-5-基)异噁唑-5-基)-5-(4-(异丙基磺酰基)苯基)吡嗪-2-胺3(6.9mg)。
1H NMR(DMSO-d 6,400MHz)：δ8.96(s,1H),8.65(brs,1H),8.41–8.39(m,2H),8.13–8.08(m,2H),8.00(s,1H),7.95–7.93(m,2H),7.25–7.24(m,3H),3.50–3.43(m,1H),1.20–1.18(m,6H)。
MS实测值(ESI +)[(M+H) +]:462。
实施例4
1-(4-(5-(3-氨基-6-(4-异丙基磺酰基)苯基)吡嗪-2-基)异噁唑-3-基)-3-氟苄基)胍二盐酸盐4
Figure PCTCN2022111868-appb-000076
第一步
(E)-3-氟-4-((羟基亚胺)亚甲基)苯甲腈4a
Figure PCTCN2022111868-appb-000077
向4-氰基-2-氟甲醛(2.0g，13.41mmol)的甲醇(30mL)和水(3mL)的混合溶液中加入羟胺盐酸盐(1.86g，26.82mmol)和碳酸钾(1.85g，13.41mmol)。将反应混合物在75℃下搅拌3小时后。向反应体系中加入乙酸乙酯(40mL)和水(40mL)，有机相分离出，水相用乙酸乙酯(30mL)萃取三次，合并的有机相用无水硫酸钠干燥，过滤，滤液减压浓缩得到白色固体(E)-3-氟-4-((羟基亚胺)亚甲基)苯甲腈4a(2.1g)，为粗产品并在未经进一步纯化下直接用于下一步骤。
第二步
叔丁基(叔丁氧羰基)(5-溴-3-(3-(4-氰基-2-氟苯基)异噁唑-5-基)吡嗪-2-基)氨基甲酸酯4b
Figure PCTCN2022111868-appb-000078
将(E)-3-氟-4-((羟基亚胺)亚甲基)苯甲腈4a(300mg，1.88mmol)，叔丁基(5-溴-3-乙炔基-2-吡嗪基)(叔丁氧羰基)氨基甲酸酯(500mg，1.26mmol)和双三氟乙酰碘苯(0.81g，1.88mmol)按照类似于实施例1第二步的方法制备得到黄色固体叔丁基(叔丁氧羰基)(5-溴-3-(3-(4-氰基-2-氟苯基)异噁唑-5-基)吡嗪-2-基)氨基甲酸酯4b(450mg)。
第三步
叔丁基(叔丁氧羰基)(3-(3-(4-氰基-2氟苯基)异噁唑-5-基)-5-(4-(异丙基磺酰基)苯基)吡嗪-2-基)氨基甲酸酯4c
Figure PCTCN2022111868-appb-000079
将叔丁基(叔丁氧羰基)(5-溴-3-(3-(4-氰基-2-氟苯基)异噁唑-5-基)吡嗪-2-基)氨基甲酸酯4b(450mg，0.803mmol)，4-异丙基磺酰基苯硼酸(183mg，0.803mmol)，碳酸钾(222mg，1.61mmol)和[1,1'-双(二苯基膦基)二茂铁]二氯化钯(117mg，0.16mmol)按照类似于实施例1第三步的方法制备得到淡黄色固体叔丁基(叔丁氧羰基)(3-(3-(4-氰基-2氟苯基)异噁唑-5-基)-5-(4-(异丙基磺酰基)苯基)吡嗪-2-基)氨基甲酸酯4c(230mg)。
第四步
叔丁基(3-(3-(4-(胺甲基)-2-氟苯基)异噁唑-5-基)-5-(4-(异丙基磺酰基)苯基)吡嗪-2-基)(叔丁氧羰基)氨基甲酸酯4d
Figure PCTCN2022111868-appb-000080
将叔丁基(叔丁氧羰基)(3-(3-(4-氰基-2氟苯基)异噁唑-5-基)-5-(4-(异丙基磺酰基)苯基)吡嗪-2-基)氨基甲酸酯4c(100mg，0.177mmol)，六水合氯化镍(127mg，0.532mmol)和硼氢化钠(20mg，0.532mmol)按照类似于实施例1第四步的方法制备得到淡黄色油状物叔丁基(3-(3-(4-(胺甲基)-2-氟苯基)异噁唑-5-基)-5-(4-(异丙基磺酰基)苯基)吡嗪-2-基)(叔丁氧羰基)氨基甲酸酯4d(28mg)。
第五步
叔丁基(叔丁氧羰基)(3-(3-(2-氟-4-(胍基亚甲基)苯基)异噁唑-5-基)-5-(4-(异丙基砜基)苯基)吡嗪-2-基)氨基甲酸酯4e
Figure PCTCN2022111868-appb-000081
将叔丁基(3-(3-(4-(胺甲基)-2-氟苯基)异噁唑-5-基)-5-(4-(异丙基磺酰基)苯基)吡嗪-2-基)(叔丁氧羰基)氨基甲酸酯4d(28mg，0.05mmol)，1H-吡唑-1-甲脒盐酸(7mg，0.05mmol)和N,N-二异丙基乙胺(10μL)按照类似于实施例1第五步的方法制备得到淡黄色油状叔丁基(叔丁氧羰基)(3-(3-(2-氟-4-(胍基亚甲基)苯基)异噁唑-5-基)-5-(4-(异丙基磺酰基)苯基)吡嗪-2-基)氨基甲酸酯4e(15mg)。
第六步
1-(4-(5-(3-氨基-6-(4-异丙基磺酰基)苯基)吡嗪-2-基)异噁唑-3-基)-3-氟苄基)胍二盐酸盐4
将叔丁基(叔丁氧羰基)(3-(3-(2-氟-4-(胍基亚甲基)苯基)异噁唑-5-基)-5-(4-(异丙基磺酰基)苯基)吡嗪-2-基)氨基甲酸酯4e(15mg，0.025mmol)和盐酸乙酸乙酯混合溶液(4M，2mL)按照类似于实施例1第六步的方法制备得到黄色固体1-(4-(5-(3-氨基-6-(4-异丙基磺酰基)苯基)吡嗪-2-基)异噁唑-3-基)-3-氟苄基) 胍二盐酸盐4(9.3mg)。
1H NMR(400MHz,DMSO-d 6):δ8.95(s,1H),8.50–8.47(m,1H),8.37–8.35(m,2H),8.06–8.02(m,1H),7.94–7.92(m,2H),7.61–7.60(m,1H),7.47(brs,3H),7.34(brs,3H),7.21(s,3H),4.55–4.53(m,2H),3.49–3.42(m,1H),1.19–1.17(m,6H)。
MS实测值(ESI +)[(M+H) +]:510。
实施例5
1-(4-(5-(3-氨基-6-(4-(异丙基磺酰基)苯基)吡嗪-2-基)异噁唑-3-基)苄基)-3-环丙基脲5
Figure PCTCN2022111868-appb-000082
第一步
叔丁基(叔丁氧羰基)(5-(4-(异丙基磺酰基)苯基)-3-(3-(4-(((苯氧羰基)胺基)亚甲基)苯基)异噁唑-5-基)吡嗪-2-基)氨基甲酸酯5a
Figure PCTCN2022111868-appb-000083
向叔丁基(3-(3-(4-(胺甲基)苯基)异噁唑-5-基)-5-(4-(异丙基磺酰基)苯基)吡嗪-2-基)(叔丁氧羰基)氨基甲酸酯1d(200mg，0.364mmol)的二氯甲烷(20mL)溶液中加入三乙胺(0.15mL)和氯甲酸苯酯(114mg，0.728mmol)，将混合物在25℃搅拌2小时。将混合物浓缩并柱层析纯化得到黄色油状物叔丁基(叔丁氧羰基)(5-(4-(异丙基磺酰基)苯基)-3-(3-(4-(((苯氧羰基)胺基)亚甲基)苯基)异噁唑-5-基)吡嗪-2-基)氨基甲酸酯5a(152mg)。
第二步
叔丁基(叔丁氧羰基)(3-(3-(4-((3-环丙基脲基)甲基)苯基)异噁唑-5-基)-5-(4-(异丙基磺酰基)苯基)吡嗪-2-基)氨基甲酸酯5b
Figure PCTCN2022111868-appb-000084
向叔丁基(叔丁氧羰基)(5-(4-(异丙基磺酰基)苯基)-3-(3-(4-(((苯氧羰基)胺基)亚甲基)苯基)异噁唑-5-基)吡嗪-2-基)氨基甲酸酯5a(13mg，0.019mmol)的乙腈(3mL)溶液中加入环丙胺(22mg)，将混合物在70℃搅拌2小时。向反应溶液中加入乙酸乙酯(20mL)和水(20mL)，分液后的水相再用乙酸乙酯 (20mL)萃取三次，合并的有机相浓缩并柱层析分离得到白色固体叔丁基(叔丁氧羰基)(3-(3-(4-((3-环丙基脲基)亚甲基)苯基)异噁唑-5-基)-5-(4-(异丙基磺酰基)苯基)吡嗪-2-基)氨基甲酸酯5b(10mg)。
第三步
1-(4-(5-(3-氨基-6-(4-(异丙基磺酰基)苯基)吡嗪-2-基)异噁唑-3-基)苄基)-3-环丙基脲5
将叔丁基(叔丁氧羰基)(3-(3-(4-((3-环丙基脲基)亚甲基)苯基)异噁唑-5-基)-5-(4-(异丙基磺酰基)苯基)吡嗪-2-基)氨基甲酸酯5b(10mg，0.015mmol)和盐酸乙酸乙酯混合溶液(4M，2mL)按照类似于实施例2第七步的方法制备得到黄色固体1-(4-(5-(3-氨基-6-(4-(异丙基磺酰基)苯基)吡嗪-2-基)异噁唑-3-基)苄基)-3-环丙基脲5。
1H NMR(DMSO-d 6,400MHz):δ8.93(s,1H),8.38–8.36(m,2H),7.97–7.92(m,4H),7.75(s,1H),7.45–7.43(m,2H),7.17(s,2H),6.49–6.48(m,1H),6.26(s,1H),4.31–4.30(m,2H),3.49–3.42(m,1H),2.47–2.44(m,1H),1.20–1.18(m,6H),0.62–0.58(m,2H),0.38–0.37(m,2H)。
MS实测值(ESI +)[(M+H) +]:533。
实施例6
1-(4-(5-(3-氨基-6-(4-(异丙基磺酰基)苯基)吡嗪-2-基)异噁唑-3-基)苄基)-3-乙基脲6
Figure PCTCN2022111868-appb-000085
第一步
叔丁基(叔丁氧羰基)(3-(3-(4-((3-乙基脲基)亚甲基)苯基)异噁唑-5-基)-5-(4-(异丙基磺酰基)苯基)吡嗪-2-基)氨基甲酸酯6a
Figure PCTCN2022111868-appb-000086
将叔丁基(叔丁氧羰基)(5-(4-(异丙基磺酰基)苯基)-3-(3-(4-(((苯氧羰基)胺基)亚甲基)苯基)异噁唑-5-基)吡嗪-2-基)氨基甲酸酯5a(22mg，0.03mmol)，三乙胺(4.5μL)和乙基盐酸盐(27mg，0.3mmol)按照类似于实施例5第二步的方法制备得到白色固体叔丁基(叔丁氧羰基)(3-(3-(4-((3-乙基脲基)亚甲基)苯基)异噁唑-5-基)-5-(4-(异丙基磺酰基)苯基)吡嗪-2-基)氨基甲酸酯6a(7mg)。
第二步
1-(4-(5-(3-氨基-6-(4-(异丙基磺酰基)苯基)吡嗪-2-基)异噁唑-3-基)苄基)-3-乙基脲6
将叔丁基(叔丁氧羰基)(3-(3-(4-((3-乙基脲基)亚甲基)苯基)异噁唑-5-基)-5-(4-(异丙基磺酰基)苯基)吡嗪-2-基)氨基甲酸酯6a(7mg，0.01mmol)和盐酸乙酸乙酯混合溶液(4M，2mL)按照类似于实施例2第七步的方法制备得到黄色固体1-(4-(5-(3-氨基-6-(4-(异丙基磺酰基)苯基)吡嗪-2-基)异噁唑-3-基)苄基)-3- 乙基脲6(1.6mg)。
1H NMR(DMSO-d 6,400MHz):δ8.93(s,1H),8.38–8.36(m,2H),7.97–7.92(m,4H),7.75(s,1H),7.44–7.42(m,2H),7.17(s,2H),6.40–6.37(m,1H),5.95–5.92(m,1H),4.29–4.28(m,2H),3.49–3.42(m,1H),3.08–3.02(m,2H),1.20–1.18(m,6H),1.03–1.00(m,3H)。
MS实测值(ESI +)[(M+H) +]:521。
实施例7
1-(4-(5-(3-氨基-6-(4-(异丙基磺酰基)苯基)吡嗪-2-基)异噁唑-3-基)苄基)-3-甲基脲7
Figure PCTCN2022111868-appb-000087
第一步
叔丁基(叔丁氧羰基)(3-(3-(4-((3-甲基脲基)亚甲基)苯基)异噁唑-5-基)-5-(4-(异丙基砜基)苯基)吡嗪-2-基)氨基甲酸酯7a
Figure PCTCN2022111868-appb-000088
将叔丁基(叔丁氧羰基)(5-(4-(异丙基磺酰基)苯基)-3-(3-(4-(((苯氧羰基)胺基)亚甲基)苯基)异噁唑-5-基)吡嗪-2-基)氨基甲酸酯5a(15mg，0.02mmol)，三乙胺(3μL)和甲基盐酸盐(15mg，0.2mmol)按照类似于实施例5第二步的方法制备得到白色固体叔丁基(叔丁氧羰基)(3-(3-(4-((3-甲基脲基)亚甲基)苯基)异噁唑-5-基)-5-(4-(异丙基磺酰基)苯基)吡嗪-2-基)氨基甲酸酯7a(11mg)。
第二步
1-(4-(5-(3-氨基-6-(4-(异丙基磺酰基)苯基)吡嗪-2-基)异噁唑-3-基)苄基)-3-甲基脲7
将叔丁基(叔丁氧羰基)(3-(3-(4-((3-甲基脲基)亚甲基)苯基)异噁唑-5-基)-5-(4-(异丙基磺酰基)苯基)吡嗪-2-基)氨基甲酸酯7a(11mg，0.018mmol)和盐酸乙酸乙酯混合溶液(4M，2mL)按照类似于实施例2第七步的方法制备得到黄色固体1-(4-(5-(3-氨基-6-(4-(异丙基磺酰基)苯基)吡嗪-2-基)异噁唑-3-基)苄基)-3-甲基脲7(6.3mg)。
1H NMR(DMSO-d 6,400MHz):δ8.93(s,1H),8.38–8.36(m,2H),7.97–7.92(m,4H),7.75(s,1H),7.44–7.42(m,2H),7.16(s,2H),6.49–6.46(m,1H),5.87–5.86(m,1H),4.29–4.27(m,2H),3.47–3.44(m,1H),2.59–2.58(m,3H),1.20–1.18(m,6H)。
MS实测值(ESI +)[(M+H) +]:507。
实施例8
3-(3-(4-((氨基磺酰基)氨基亚甲基)苯基)异噁唑-5-基)-5-(4-(异丙基磺酰基)苯基)吡嗪-2-胺8
Figure PCTCN2022111868-appb-000089
第一步
叔丁基(叔丁氧羰基)(3-(3-(4-(((N-(叔丁氧羰基)氨基磺酰基)氨基)亚甲基)苯基)异噁唑-5-基)-5-(4-(异丙基砜基)苯基)吡嗪-2-基)氨基甲酸酯8a
Figure PCTCN2022111868-appb-000090
将叔丁基(3-(3-(4-(胺甲基)苯基)异噁唑-5-基)-5-(4-(异丙基磺酰基)苯基)吡嗪-2-基)(叔丁氧羰基)氨基甲酸酯1d(30mg，0.05mmol)，三乙胺(20μL)和氯磺酰氨基甲酯叔丁基(24mg，0.1mmol)按照类似于实施例5第一步的方法制备得到淡黄色固体叔丁基(叔丁氧羰基)(3-(3-(4-(((N-(叔丁氧羰基)氨基磺酰基)氨基)亚甲基)苯基)异噁唑-5-基)-5-(4-(异丙基磺酰基)苯基)吡嗪-2-基)氨基甲酸酯8a(13mg)。
第二步
3-(3-(4-((氨基磺酰基)氨基亚甲基)苯基)异噁唑-5-基)-5-(4-(异丙基磺酰基)苯基)吡嗪-2-胺8
将叔丁基(叔丁氧羰基)(3-(3-(4-(((N-(叔丁氧羰基)氨基磺酰基)氨基)亚甲基)苯基)异噁唑-5-基)-5-(4-(异丙基磺酰基)苯基)吡嗪-2-基)氨基甲酸酯8a(13mg，0.02mmol)和盐酸乙酸乙酯混合溶液(4M，2mL)按照类似于实施例2第七步的方法制备得到黄色固体3-(3-(4-((氨基磺酰基)氨基亚甲基)苯基)异噁唑-5-基)-5-(4-(异丙基磺酰基)苯基)吡嗪-2-胺8(6.2mg)。
1H NMR:δ(DMSO-d 6,400MHz)8.93(s,1H),8.39–8.36(m,2H),7.99–7.92(m,4H),7.78(s,1H),7.56–7.54(m,2H),7.17–7.13(m,3H),6.66(s,2H),4.18–4.16(m,2H),3.47–3.44(m,1H),1.20–1.18(m,6H)。
MS实测值(ESI +)[(M+H) +]:529。
实施例9
1-(4-(5-(3-氨基-6-(4-(异丙基磺酰基)苯基)吡嗪-2-基)异噁唑-3-基)苄基)-3-脲9
Figure PCTCN2022111868-appb-000091
第一步
叔丁基(叔丁氧羰基)(5-(4-(异丙基砜基)苯基)-3-(3-(4-(脲基亚甲基)苯基)异噁唑-5-基)吡嗪-2-基)氨基甲酸酯9a
Figure PCTCN2022111868-appb-000092
将叔丁基(叔丁氧羰基)(5-(4-(异丙基磺酰基)苯基)-3-(3-(4-(((苯氧羰基)胺基)亚甲基)苯基)异噁唑-5-基)吡嗪-2-基)氨基甲酸酯5a(22mg，0.03mmol)，氨甲醇(2mL，7M)按照类似于实施例5第二步的方法制备得到白色固体叔丁基(叔丁氧羰基)(5-(4-(异丙基磺酰基)苯基)-3-(3-(4-(脲基亚甲基)苯基)异噁唑-5-基)吡嗪-2-基)氨基甲酸酯9a(16mg)。
第二步
1-(4-(5-(3-氨基-6-(4-(异丙基磺酰基)苯基)吡嗪-2-基)异噁唑-3-基)苄基)-3-脲9
将叔丁基(叔丁氧羰基)(5-(4-(异丙基磺酰基)苯基)-3-(3-(4-(脲基亚甲基)苯基)异噁唑-5-基)吡嗪-2-基)氨基甲酸酯9a(16mg，0.03mmol)和HCl的乙酸乙酯溶液(4M，2mL)按照类似于实施例2第七步的方法制备得到黄色固体1-(4-(5-(3-氨基-6-(4-(异丙基磺酰基)苯基)吡嗪-2-基)异噁唑-3-基)苄基)-3-脲9(5.7mg)。
1H NMR(DMSO-d 6,400MHz)：δ8.94(s,1H),8.39–8.37(m,2H),7.98–7.92(m,4H),7.77(s,1H),7.44–7.42(m,2H),7.20(s,2H),6.54–6.51(m,1H),5.59(s,2H),4.27–4.25(m,2H),3.49–3.46(m,1H),1.19–1.18(m,6H)。
MS实测值(ESI +)[(M+H) +]:493。
实施例10
4-(5-氨基-6-(3-(4-(胍甲基)苯基)异噁唑-5-基)吡嗪-2-基)-N,N-二甲基苯磺酰胺二盐酸盐10
Figure PCTCN2022111868-appb-000093
第一步
叔丁基(叔丁氧羰基)(3-(3-(4-氰基苯基)异噁唑-5-基)-5-(4-(N,N-二甲基氨基磺酰基)苯基)吡嗪-2-基)氨基甲酸酯10a
Figure PCTCN2022111868-appb-000094
氮气保护下，向叔丁基(5-溴-3-(3-(4-氰基苯基)5-异噁唑基)2-吡嗪基(叔丁氧羰基)氨基甲酸酯(200mg，0.37mmol)的1,4-二氧六环(3mL)和水(0.6mL)混合溶液中，室温(≈20℃)下依次加入4-异丙基磺酰基苯硼酸(127mg，0.41mmol),碳酸钾(102mg，0.74mmol)和[1,1'-双(二苯基膦基)二茂铁]二氯化钯(27mg，0.037mmol)。置换氮气三次后，反应液在95℃下搅拌三个小时。冷却至室温后，向反应液中加入乙酸乙酯(10mL)和水(5mL)。混合溶液用硅藻土过滤，所得溶液分液，水相用乙酸乙酯(10mL)萃取三次，合并的有机相浓缩并柱层析分离得到叔丁基(叔丁氧羰基)(3-(3-(4-氰基苯基)异噁唑-5-基)-5-(4-(N,N-二甲基氨基磺酰基)苯基)吡嗪-2-基)氨基甲酸酯10a(205mg)。
第二步
叔丁基(3-(3-(4-(氨基甲基)苯基)异噁唑-5-基)-5-(4-(N,N-二甲基氨基磺酰基)苯基)吡嗪-2-基)(叔丁氧羰
基)氨基甲酸酯10b
Figure PCTCN2022111868-appb-000095
叔丁基(叔丁氧羰基)(3-(3-(4-氰基苯基)异噁唑-5-基)-5-(4-(N,N-二甲基氨基磺酰基)苯基)吡嗪-2-基)氨基甲酸酯10a(205mg，0.32mmol)的甲醇(3mL)溶液中，室温下依次加入六水合氯化镍(228mg，0.96mmol)和硼氢化钠(36mg，0.96mmol)。反应液室温下搅拌1个小时之后，用氯化铵饱和水溶液(2mL)淬灭。再加入乙酸乙酯(10mL)和饱和的碳酸氢钠水溶液(10mL)。混合溶液用硅藻土过滤后，滤液倒入分液漏斗。水相用乙酸乙酯(10mL)萃取三次，合并的有机相浓缩并柱层析分离得到叔丁基(3-(3-(4-(氨基甲基)苯基)异噁唑-5-基)-5-(4-(N,N-二甲基氨基磺酰基)苯基)吡嗪-2-基)(叔丁氧羰基)氨基甲酸酯10b(33mg)。
第三步
叔丁基(叔丁氧羰基)(5-(4-(N,N-二甲基氨基磺酰基)苯基)-3-(3-(4-(胍甲基)苯基)异噁唑-5-基)吡嗪-2-基)氨基甲酸酯10c
Figure PCTCN2022111868-appb-000096
向叔丁基(3-(3-(4-(氨基甲基)苯基)异噁唑-5-基)-5-(4-(N,N-二甲基氨基磺酰基)苯基)吡嗪-2-基)(叔丁氧羰基)氨基甲酸酯10b(33mg，0.050mmol)的乙腈(2mL)溶液中，依次加入1H-吡唑-1-甲脒盐酸(7.3mg，0.050mmol)和N,N-二异丙基乙胺(10uL)。室温(≈20℃)下搅拌16个小时。向反应液中加入乙酸乙酯(10mL)和水(10mL),所得溶液分液，水相用乙酸乙酯(10mL)萃取三次，合并的有机相浓缩并经柱层析色谱分离得到叔丁基(叔丁氧羰基)(5-(4-(N,N-二甲基氨基磺酰基)苯基)-3-(3-(4-(胍甲基)苯基)异噁唑-5-基)吡嗪-2-基)氨基甲酸酯10c(29mg)。
第四步
4-(5-氨基-6-(3-(4-(胍甲基)苯基)异噁唑-5-基)吡嗪-2-基)-N,N-二甲基苯磺酰胺二盐酸盐10
向叔丁基(叔丁氧羰基)(5-(4-(N,N-二甲基氨基磺酰基)苯基)-3-(3-(4-(胍甲基)苯基)异噁唑-5-基)吡嗪-2-基)氨基甲酸酯10c(29mg，0.04mmol)的乙酸乙酯(2mL)溶液中，加入盐酸乙酸乙酯混合溶液(4M，2mL)。反应液室温下搅拌1个小时后，反应液浓缩得到黄色固体4-(5-氨基-6-(3-(4-(胍甲基)苯基)异噁唑-5-基)吡嗪-2-基)-N,N-二甲基苯磺酰胺二盐酸盐10(12.4mg)。
1H NMR(400MHz,DMSO-d 6):δ8.96(s,1H),8.40–8.38(m,2H),8.36-8.33(m,1H),8.08–8.06(m,2H),7.87–7.85(m,2H),7.82(s,1H),7.55–7.53(m,2H),7.44(brs,2H),7.31(brs,2H),7.18(brs,3H),4.53–4.52(m,2H),2.68(s,6H)。
MS实测值(ESI +)[(M+H) +]:493。
实施例11
1-(4-(5-(3-氨基-6-(4-(异丙基磺酰基)苯基)吡嗪-2-基)异噁唑-3-基)-3,5-二氟苄基)胍二盐酸盐11
Figure PCTCN2022111868-appb-000097
第一步
叔丁基(叔丁氧基羰基)(3-乙炔基-5-(4-(异丙基磺酰基)苯基)吡嗪-2-基)氨基甲酸酯11a
Figure PCTCN2022111868-appb-000098
在氮气保护下，向4-异丙基磺酰基苯硼酸(500mg，2.19mmol)的1，4-二氧六环(5mL)和水(1mL)混合溶液中，在室温(～20℃)下，依次加入N-(5-溴-3-乙炔基吡嗪-2-基)-N-[(叔丁氧基)羰基]氨基甲酸叔丁酯(582mg，1.46mmol)，碳酸钾(606mg，4.38mmol)和[1,1'-双(二苯基膦基)二茂铁]二氯化钯(107mg，0.15mmol)。置换氮气三次后，反应液在55℃下搅拌两个小时。冷却至室温后，向反应液中加入乙酸乙酯(40mL)和水(40mL)。混合溶液用硅藻土过滤，所得溶液分液，水相用乙酸乙酯(20mL)萃取三次，合并的有机相浓缩并柱层析分离得到叔丁基(叔丁氧基羰基)(3-乙炔基-5-(4-(异丙基磺酰基)苯基)吡嗪-2-基)氨基甲酸酯11a(433mg)。
第二步
(E)-3,5-二氟-4-((羟基亚氨基)甲基)苯甲腈11b
Figure PCTCN2022111868-appb-000099
室温下，向3,5-二氟-4-甲酰基苯甲腈(1g，5.98mmol)在四氢呋喃(10mL)和水(1mL)的混合溶液中加入羟胺盐酸盐(499mg，7.18mmol)。将反应混合物在室温(～20℃)下搅拌16小时后。向反应体系中加入水(60mL)，有机相分离出，水相用乙酸乙酯(20mL)萃取三次，合并的有机相用无水硫酸钠干燥，过滤，滤液减压浓缩得到白色固体(E)-3,5-二氟-4-((羟基亚氨基)甲基)苯甲腈11b(433mg)，为粗产品并在未经进一步纯化下直接用于下一步骤。
第三步
叔丁基(3-(3-(4-氰基-2,6-二氟苯基)异噁唑-5-基)-5-(4-(异丙基磺酰基)苯基)吡嗪-2-基)氨基甲酸酯11c
Figure PCTCN2022111868-appb-000100
向(E)-3,5-二氟-4-((羟基亚氨基)甲基)苯甲腈11b(80mg，0.44mmol)的甲醇(5mL)和水(1mL)的混合溶液中依次加入叔丁基(叔丁氧基羰基)(3-乙炔基-5-(4-(异丙基磺酰基)苯基)吡嗪-2-基)氨基甲酸酯11a(147 mg，0.29mL)和双三氟乙酰碘苯(189mg，0.44mmol)，在室温(～20℃)下搅拌过夜。向反应液中加入乙酸乙酯(40mL)和水(40mL)。有机相接着用水(20mL)洗三遍。有机相分离出并用无水硫酸钠干燥，过滤后浓缩并柱层析分离得到叔丁基(3-(3-(4-氰基-2,6-二氟苯基)异噁唑-5-基)-5-(4-(异丙基磺酰基)苯基)吡嗪-2-基)氨基甲酸酯11c(177mg)。
第四步
叔丁基(3-(3-(4-(氨基甲基)-2,6-二氟苯基)异噁唑-5-基)-5-(4-(异丙基磺酰基)苯基)吡嗪-2-基)氨基甲酸酯11d
Figure PCTCN2022111868-appb-000101
向叔丁基(3-(3-(4-氰基-2,6-二氟苯基)异噁唑-5-基)-5-(4-(异丙基磺酰基)苯基)吡嗪-2-基)氨基甲酸酯11c(177mg，0.26mmol)的甲醇(2mL)溶液中，室温下依次加入六水合氯化镍(185mg，0.78mmol)和硼氢化钠(29mg，0.78mmol)。反应液室温下搅拌1个小时之后，用氯化铵(2mL)淬灭。再加入乙酸乙酯(40mL)和饱和的碳酸氢钠水溶液(40mL)。混合溶液用硅藻土过滤后，滤液倒入分液漏斗。水相用乙酸乙酯(40mL)萃取三次，合并的有机相浓缩并柱层析分离得到叔丁基(3-(3-(4-(氨基甲基)-2,6-二氟苯基)异噁唑-5-基)-5-(4-(异丙基磺酰基)苯基)吡嗪-2-基)氨基甲酸酯11d(25mg)。
第五步
叔丁基(3-(3-(2,6-二氟-4-(胍甲基)苯基)异噁唑-5-基)-5-(4-(异丙基磺酰基)苯基)吡嗪-2-基)氨基甲酸酯11e
Figure PCTCN2022111868-appb-000102
向叔丁基(3-(3-(4-(氨基甲基)-2,6-二氟苯基)异噁唑-5-基)-5-(4-(异丙基磺酰基)苯基)吡嗪-2-基)氨基甲酸酯11d(25mg，0.042mmol)的乙腈(2mL)溶液中，依次加入1H-吡唑-1-甲脒盐酸(6.3mg，0.043mmol)和N,N-二异丙基乙胺(6mg，0.045mmol)。室温(～20℃)下搅拌16个小时。向反应液中加入乙酸乙酯(20mL)和水(20mL)，所得溶液分液，水相用乙酸乙酯(20mL)萃取三次，合并的有机相浓缩并经柱层析色谱分离得到叔丁基(3-(3-(2,6-二氟-4-(胍甲基)苯基)异噁唑-5-基)-5-(4-(异丙基磺酰基)苯基)吡嗪-2-基)氨基甲酸酯11e(20mg)。
第六步
1-(4-(5-(3-氨基-6-(4-(异丙基磺酰基)苯基)吡嗪-2-基)异噁唑-3-基)-3,5-二氟苄基)胍二盐酸盐11
向叔丁基(3-(3-(2,6-二氟-4-(胍甲基)苯基)异噁唑-5-基)-5-(4-(异丙基磺酰基)苯基)吡嗪-2-基)氨基甲酸酯11e(20mg，0.032mmol)的乙酸乙酯(2mL)溶液中，加入盐酸乙酸乙酯混合溶液(4M，2mL)。反应液室温下搅拌1个小时后，反应液浓缩得到黄色固体1-(4-(5-(3-氨基-6-(4-(异丙基磺酰基)苯基)吡嗪-2-基)异噁唑-3-基)-3,5-二氟苄基)胍二盐酸盐11(13mg)。
1H NMR(400MHz,DMSO-d 6):δ8.96(s,1H),8.43–8.40(m,1H),8.36–8.34(m,2H),7.93–7.91(m,2 H),7.52(s,1H),7.38(s,2H),7.32–7.30(m,2H),7.25(s,2H),7.22(s,1H),7.13(s,2H),4.55–4.54(m,2H),3.48–3.45(m,1H),1.19–1.17(m,6H)。
MS实测值(ESI +)[(M+H) +]:528。
实施例12
1-(4-(5-(3-氨基-6-(4-(N,S-二甲基磺酰亚胺基)苯基)吡嗪-2-基)异噁唑-3-基)苄基)胍二盐酸盐12
Figure PCTCN2022111868-appb-000103
第一步
(4-溴苯基)(甲基)(甲基亚氨基)-λ 6-磺胺酮12a
Figure PCTCN2022111868-appb-000104
将氢化纳(60％，于矿物油中，154mg，3.84mmol)添加至于N,N-二甲基甲酰胺(3mL)中的(4-溴苯基)(亚氨基)(甲基)-λ 6-磺胺酮(300mg，1.28mmol)中且将所得混合物在室温下搅拌5min。添加碘甲烷(0.4mL，6.41mmol)并将反应混合物搅拌过夜。在真空中浓缩混合物，用水稀释，并用乙酸乙酯萃取。用盐水洗涤合并萃取物，经MgSO 4干燥，并在真空中浓缩。通过硅胶色谱纯化残留物得(4-溴苯基)(甲基)(甲基亚氨基)-λ 6-磺胺酮12a(330mg)。
第二步
(4-(N,S-二甲基亚磺酰基)苯基)硼酸12b
Figure PCTCN2022111868-appb-000105
在氮气保护下，将(4-溴苯基)(甲基)(甲基亚氨基)-λ 6-磺胺酮12a(230mg，0.93mmol)、4,4,4,4,5,5,5,5-八甲基-2,2-双(1,3,2-二氧杂硼烷)(353mg，1.39mmol)、乙酸钾(273mg，2.78mmol)及[1,1'-双(二苯基膦基)二茂铁]二氯化钯(68mg，0.09mmol)溶于无水1,4-二氧六环(4mL)溶液中。置换三次氮气后，反应液在90℃下搅拌两个小时。冷却至室温后，向反应液中加入乙酸乙酯(40mL)和水(40mL)。混合溶液用硅藻土过滤，所得溶液分液，水相用乙酸乙酯(20mL)萃取三次，合并的有机相浓缩并柱层析分离得到(4-(N,S-二甲基亚磺酰基)苯基)硼酸12b(197mg)。
第三步
叔丁基(叔丁氧羰基)(3-(3-(4-氰基苯基)异恶唑-5-基)-5-(4-(N,S-二甲基磺酰亚胺基)苯基)吡嗪-2-基)氨基甲酸酯12c
Figure PCTCN2022111868-appb-000106
在氮气保护下，将(4-(N,S-二甲基亚磺酰基)苯基)硼酸12b(197mg，0.93mmol)、叔丁基N-{5-溴-3-[3-(4-氰基苯基)-1,2-噁唑-5-基]吡嗪-2-基}-N-[(叔丁氧基)羰基]氨基甲酸酯(300mg，0.55mmol)、碳酸钾(299mg，1.66mmol)及[1,1'-双(二苯基膦基)二茂铁]二氯化钯(41mg，0.06mmol)溶于1,4-二氧六环(4mL)和水(1mL)的混合溶液中。置换三次氮气后，反应液在90℃下搅拌两个小时。冷却至室温后，向反应液中加入乙酸乙酯(40mL)和水(40mL)。混合溶液用硅藻土过滤，所得溶液分液，水相用乙酸乙酯(20mL)萃取三次，合并的有机相浓缩并柱层析分离得到叔丁基(叔丁氧羰基)(3-(3-(4-氰基苯基)异恶唑-5-基)-5-(4-(N,S-二甲基磺酰亚胺基)苯基)吡嗪-2-基)氨基甲酸酯12c(145mg)。
第四步
叔丁基(叔丁氧羰基)(3-(3-(4-(氨基甲基)苯基)异恶唑-5-基)-5-(4-(N,S-二甲基磺酰亚胺基)苯基)吡嗪-2-基)氨基甲酸酯12d
Figure PCTCN2022111868-appb-000107
向叔丁基(叔丁氧羰基)(3-(3-(4-氰基苯基)异恶唑-5-基)-5-(4-(N,S-二甲基磺酰亚胺基)苯基)吡嗪-2-基)氨基甲酸酯12c(145mg，0.23mmol)的甲醇(2mL)溶液中，室温下依次加入六水合氯化镍(164mg，0.69mmol)和硼氢化钠(26mg，0.69mmol)。反应液室温下搅拌1个小时之后，用氯化铵饱和水溶液(2mL)淬灭。再加入乙酸乙酯(40mL)和饱和的碳酸氢钠水溶液(40mL)。混合溶液用硅藻土过滤后，滤液倒入分液漏斗。水相用乙酸乙酯(40mL)萃取三次，合并的有机相浓缩并柱层析分离得到叔丁基(叔丁氧羰基)(3-(3-(4-(氨基甲基)苯基)异恶唑-5-基)-5-(4-(N,S-二甲基磺酰亚胺基)苯基)吡嗪-2-基)氨基甲酸酯12d(15mg)。
第五步
叔丁基(叔丁氧羰基)(5-(4-(N,S-二甲基磺酰亚胺基)苯基)-3-(3-(4-(胍基甲基)苯基)异恶唑-5-基)吡嗪-2-基)氨基甲酸酯12e
Figure PCTCN2022111868-appb-000108
将叔丁基(叔丁氧羰基)(3-(3-(4-(氨基甲基)苯基)异恶唑-5-基)-5-(4-(N,S-二甲基磺酰亚胺基)苯基)吡嗪-2-基)氨基甲酸酯12d(15mg，23.63μmol)的乙腈(1mL)溶液中，依次加入1H-吡唑-1-甲脒盐酸(7mg，47.26μmol)和N,N-二异丙基乙胺(9mg，70.89μmol)。室温(～20℃)下搅拌16个小时。向反应液中加入乙酸乙酯(20mL)和水(20mL),所得溶液分液，水相用乙酸乙酯(20mL)萃取三次，合并的有机相浓缩并经柱层析色谱分离得到叔丁基(叔丁氧羰基)(5-(4-(N,S-二甲基磺酰亚胺基)苯基)-3-(3-(4-(胍基甲基)苯基)异恶唑-5-基)吡嗪-2-基)氨基甲酸酯12e(15mg)。
第六步
1-(4-(5-(3-氨基-6-(4-(N,S-二甲基磺酰亚胺基)苯基)吡嗪-2-基)异噁唑-3-基)苄基)胍二盐酸盐12
向叔丁基(叔丁氧羰基)(5-(4-(N,S-二甲基磺酰亚胺基)苯基)-3-(3-(4-(胍基甲基)苯基)异恶唑-5-基)吡嗪-2-基)氨基甲酸酯12e(15mg，22.16μmol)的乙酸乙酯(2mL)溶液中，加入HCl的乙酸乙酯溶液(4M，2mL)。反应液室温下搅拌1个小时后，反应液浓缩得到黄色固体1-(4-(5-(3-氨基-6-(4-(N,S-二甲基磺酰亚胺基)苯基)吡嗪-2-基)异噁唑-3-基)苄基)胍二盐酸盐12(11mg)。
1H NMR(400MHz,DMSO-d 6)：δ9.01(s,1H),8.50–8.48(m,2H),8.30–8.27(m,1H),8.13–8.11(m,2H),8.05–8.03(m,1H),7.81(s,1H),7.52–7.51(m,2H),7.37(s,2H),7.24(s,2H),7.12(s,2H),4.50–4.48(m,2H),3.93-3.92(m,2H),2.66(s,3H),1.23(s,3H)。
MS实测值(ESI +)[(M+H) +]:477。
实施例13
1-(4-(5-(3-氨基-6-(4-(N-甲基丙烷-2-基磺酰亚胺基)苯基)吡嗪-2-基)异噁唑-3-基)苄基)胍二盐酸盐13
Figure PCTCN2022111868-appb-000109
第一步
(4-溴苯基)(亚氨基)(异丙基)-λ 6-磺胺酮13a
Figure PCTCN2022111868-appb-000110
室温下，向(4-溴苯基)(异丙基)磺胺(1g，4.33mmol)在乙醇(10mL)溶液中加入碘苯二乙酸(4.18g，12.98mmol)和醋酸铵(1.34g，17.30mmol)。将反应混合物在室温(～20℃)下搅拌3小时后。向反应体系中加入水(60mL)，有机相分离出，水相用乙酸乙酯(20mL)萃取三次，合并的有机相用无水硫酸钠干燥，过滤，浓缩并柱层析分离得到(4-溴苯基)(亚氨基)(异丙基)-λ 6-磺胺酮13a(1.07g)。
第二步
(4-溴苯基)(异丙基)(甲基亚氨基)-λ 6-磺胺酮13b
Figure PCTCN2022111868-appb-000111
将氢化纳(60％，于矿物油中，229mg，5.72mmol)添加至于N,N-二甲基甲酰胺(5mL)中的(4-溴苯基)(亚氨基)(异丙基)-λ 6-磺胺酮13a(500mg，1.91mmol)中且将所得混合物在室温下搅拌5分钟。添加碘甲烷(0.6mL，9.54mmol)并将反应混合物搅拌过夜。在真空中浓缩混合物，用水稀释，并用乙酸乙酯萃取。用盐水洗涤合并萃取物，经MgSO 4干燥，并在真空中浓缩。粗品通过硅胶色谱纯化得(4-溴苯基)(异丙基)(甲基亚氨基)-λ 6-磺胺酮13b(490mg)。
第三步
(4-(N-甲基丙烷-2-基磺酰亚胺基)苯基)硼酸13c
Figure PCTCN2022111868-appb-000112
在氮气保护下，将(4-溴苯基)(异丙基)(甲基亚氨基)-λ 6-磺胺酮13b(250mg，0.91mmol)、4,4,4,4,5,5,5,5-八甲基-2,2-双(1,3,2-二氧杂硼烷)(345mg，1.36mmol)、乙酸钾(267mg，2.72mmol)及[1,1'-双(二苯基膦基)二茂铁]二氯化钯(66mg，0.09mmol)溶于无水1,4-二氧六环(4mL)溶液中。置换三次氮气后，反应液在90℃下搅拌两个小时。冷却至室温后，向反应液中加入乙酸乙酯(40mL)和水(40mL)。混合溶液用硅藻土过滤，所得溶液分液，水相用乙酸乙酯(20mL)萃取三次，合并的有机相浓缩并柱层析分离得到(4-(N-甲基丙烷-2-基磺酰亚胺基)苯基)硼酸13c(218mg)。
第四步
叔丁基(叔丁氧羰基)(3-(3-(4-氰基苯基)异恶唑-5-基)-5-(4-(N-甲基丙基-2-基磺酰亚胺基)苯基)吡嗪-2-基)氨基甲酸酯13d
Figure PCTCN2022111868-appb-000113
在氮气保护下，将(4-(N-甲基丙烷-2-基磺酰亚胺基)苯基)硼酸13c(218mg，0.91mmol)、叔丁基(5-溴-3-(3-(4-氰基苯基)异噁唑-5-基)吡嗪-2-基)(叔丁氧羰基)氨基甲酸酯1b(300mg，0.55mmol)、碳酸钾(229mg，1.66mmol)及[1,1'-双(二苯基膦基)二茂铁]二氯化钯(40mg，0.06mmol)溶于1,4-二氧六环(4mL)和水(1mL)的混合溶液中。置换三次氮气后，反应液在90℃下搅拌两个小时。冷却至室温后，向反应液中加入乙酸乙酯(40mL)和水(40mL)。混合溶液用硅藻土过滤，所得溶液分液，水相用乙酸乙酯(20mL)萃取三次，合并的有机相浓缩并柱层析分离得到叔丁基(叔丁氧羰基)(3-(3-(4-氰基苯基)异恶唑-5-基)-5-(4-(N-甲基丙基-2-基磺酰亚胺基)苯基)吡嗪-2-基)氨基甲酸酯13d(180mg)。
第五步
叔丁基(叔丁氧羰基)(3-(3-(4-(氨基甲基)苯基)异恶唑-5-基)-5-(4-(N-甲基丙基-2-基磺酰亚胺基)苯基)吡嗪-2-基)氨基甲酸酯13e
Figure PCTCN2022111868-appb-000114
向叔丁基(叔丁氧羰基)(3-(3-(4-氰基苯基)异恶唑-5-基)-5-(4-(N-甲基丙基-2-基磺酰亚胺基)苯基)吡嗪-2-基)氨基甲酸酯13d(180mg，0.27mmol)的甲醇(2mL)溶液中，室温下依次加入六水合氯化镍(195mg，0.82mmol)和硼氢化钠(31mg，0.82mmol)。反应液室温下搅拌1个小时之后，用氯化铵饱和水溶液(2mL)淬灭。再加入乙酸乙酯(40mL)和饱和的碳酸氢钠水溶液(40mL)。混合溶液用硅藻土过滤后，滤液倒入分液漏斗。水相用乙酸乙酯(40mL)萃取三次，合并的有机相浓缩并柱层析分离得到 叔丁基(叔丁氧羰基)(3-(3-(4-(氨基甲基)苯基)异恶唑-5-基)-5-(4-(N-甲基丙基-2-基磺酰亚胺基)苯基)吡嗪-2-基)氨基甲酸酯13e(16mg)。
第六步
叔丁基(叔丁氧羰基)(3-(3-(4-(胍基甲基)苯基)异恶唑-5-基)-5-(4-(N-甲基丙基-2-基磺酰亚胺基)苯基)-吡嗪-2-基)氨基甲酸酯13f
Figure PCTCN2022111868-appb-000115
将叔丁基(叔丁氧羰基)(3-(3-(4-(氨基甲基)苯基)异恶唑-5-基)-5-(4-(N-甲基丙基-2-基磺酰亚胺基)苯基)吡嗪-2-基)氨基甲酸酯13e(16mg，24.14μmol)的乙腈(1mL)溶液中，依次加入1H-吡唑-1-甲脒盐酸(7mg，48.28μmol)和N,N-二异丙基乙胺(9mg，72.42μmol)。室温(～20℃)下搅拌16个小时。向反应液中加入乙酸乙酯(20mL)和水(20mL),所得溶液分液，水相用乙酸乙酯(20mL)萃取三次，合并的有机相浓缩并经柱层析色谱分离得到叔丁基(叔丁氧羰基)(3-(3-(4-(胍基甲基)苯基)异恶唑-5-基)-5-(4-(N-甲基丙基-2-基磺酰亚胺基)苯基)-吡嗪-2-基)氨基甲酸酯13f(13mg)。
第七步
1-(4-(5-(3-氨基-6-(4-(N-甲基丙烷-2-基磺酰亚胺基)苯基)吡嗪-2-基)异噁唑-3-基)苄基)胍二盐酸盐13
向叔丁基(叔丁氧羰基)(3-(3-(4-(胍基甲基)苯基)异恶唑-5-基)-5-(4-(N-甲基丙基-2-基磺酰亚胺基)苯基)-吡嗪-2-基)氨基甲酸酯13f(13mg，18.44μmol)的乙酸乙酯(2mL)溶液中，加入盐酸乙酸乙酯混合溶液(4M，2mL)。反应液室温下搅拌1个小时后，反应液浓缩得到黄色固体1-(4-(5-(3-氨基-6-(4-(N-甲基丙烷-2-基磺酰亚胺基)苯基)吡嗪-2-基)异噁唑-3-基)苄基)胍二盐酸盐13(8mg)。
1H NMR(400MHz,DMSO-d 6):δ9.00(s,1H),8.52–8.50(m,2H),8.34–8.31(m,1H),8.05–8.03(m,4H),7.82(s,1H),7.52–7.50(m,2H),7.40(s,2H),7.27(s,2H),7.14(s,2H),4.50–4.49(m,2H),4.28(s,1H),3.93(s,1H),2.67(s,3H),1.45–1.44(m,3H),1.26–1.25(m,3H)。
MS实测值(ESI +)[(M+H) +]:505。
实施例14
1-(4-(5-(3-氨基-6-(4-(异丙基磺酰基)苯基)吡嗪-2-基)异噁唑-3-基)苯基)-3-甲基脲14
Figure PCTCN2022111868-appb-000116
第一步
(E)-4-硝基苯甲醛肟14a
Figure PCTCN2022111868-appb-000117
室温下，向4-硝基苯甲醛(2g，13.24mmol)在四氢呋喃(30mL)的溶液中加入羟胺盐酸盐(1.02g，15.89mmol)。将反应混合物在室温(≈20℃)下搅拌16小时后。向反应体系中加入水(40mL)，有机相分离出，水相用乙酸乙酯(30mL)萃取三次，合并的有机相用无水硫酸钠干燥，过滤，滤液减压浓缩得到黄色固体(E)-4-硝基苯甲醛肟14a(2.2g)，为粗产品并在未经进一步纯化下直接用于下一步骤。
第二步
叔丁基(5-溴-3-(3-(4-硝基苯基)异噁唑-5-基)吡嗪-2-基)(叔丁氧羰基)氨基甲酸酯14b
Figure PCTCN2022111868-appb-000118
向叔丁基(5-溴-3-乙炔基-2-吡嗪基)(叔丁氧羰基)氨基甲酸酯(0.48g，1.20mmol)的甲醇(18mL)和水(3.6mL)的混合溶液中依次加入(E)-4-硝基苯甲醛肟14a(0.3g，1.81mmol)和双三氟乙酰碘苯(0.78g，1.81mmol)，在室温下搅拌过夜。向反应液中加入乙酸乙酯(40mL)和水(40mL)。有机相接着用水(20mL)洗三遍。有机相分离出并用无水硫酸钠干燥，过滤后浓缩并柱层析分离得到叔丁基(5-溴-3-(3-(4-硝基苯基)异噁唑-5-基)吡嗪-2-基)(叔丁氧羰基)氨基甲酸酯14b(0.41g)。
第三步
叔丁基(叔丁氧羰基)(5-(4-(异丙基磺酰基)苯基)-3-(3-(4-硝基苯基)异噁唑-5-基)-吡嗪-2-基)氨基甲酸酯14c
Figure PCTCN2022111868-appb-000119
氮气保护下，向叔丁基(5-溴-3-(3-(4-硝基苯基)异噁唑-5-基)吡嗪-2-基)(叔丁氧羰基)氨基甲酸酯14b(0.37g，0.66mmol)的1,4-二氧六环(15mL)和水(1.5mL)混合溶液中，室温下依次4-异丙基磺酰基苯硼酸(0.17g，0.73mmol)，碳酸钾(0.18g，1.32mmol)和[1,1'-双(二苯基膦基)二茂铁]二氯化钯(0.10g，0.13mmol)。置换氮气三次后，反应液在95℃下搅拌三个小时。冷却至室温后，向反应液中加入乙酸乙酯(40mL)和水(40mL)。混合溶液用硅藻土过滤，所得溶液分液，水相用乙酸乙酯(20mL)萃取三次，合并的有机相浓缩并柱层析分离得到叔丁基(叔丁氧羰基)(5-(4-(异丙基磺酰基)苯基)-3-(3-(4-硝基苯基)异噁唑-5-基)-吡嗪-2-基)氨基甲酸酯14c(0.17g)。
第四步
叔丁基(3-(3-(4-氨基苯基)异噁唑-5-基)-5-(4-(异丙基磺酰基)苯基)吡嗪-2-基)(叔丁氧羰基)氨基甲酸酯
14d
Figure PCTCN2022111868-appb-000120
向叔丁基(叔丁氧羰基)(3-(3-(4-硝基苯基)5-异噁唑基)-5-(4-(异丙基磺酰基)苯基)吡嗪-2-基)氨基甲酸酯14c(130mg，0.20mmol)的醋酸(8mL)溶液中，室温下加入还原铁粉(109mg，2.0mmol)。反应 液室温下搅拌16个小时之后，用乙酸乙酯(40mL)稀释，混合液用硅藻土过滤，用碳酸氢钠水溶液(40mL)水洗至中性后倒入分液漏斗。水相用乙酸乙酯(40mL)萃取三次，合并的有机相浓缩并柱层析分离得到叔丁基(3-(3-(4-氨基苯基)异噁唑-5-基)-5-(4-(异丙基磺酰基)苯基)吡嗪-2-基)(叔丁氧羰基)氨基甲酸酯14d(100mg)。
第五步
叔丁基(叔丁氧羰基)(5-(4-(异丙基磺酰基)苯基)-3-(3-(4-((苯氧羰基)氨基)苯基)异噁唑-5-基)吡嗪-2-基)氨基甲酸酯14e
Figure PCTCN2022111868-appb-000121
向叔丁基(3-(3-(4-氨基苯基)异噁唑-5-基)-5-(4-(异丙基磺酰基)苯基)吡嗪-2-基)(叔丁氧羰基)氨基甲酸酯14d(27mg，0.042mmol)的二氯甲烷(2mL)溶液中加入三乙胺(0.017mL)和氯甲酸苯酯(7.3mg，0.047mmol)，将混合物在25℃搅拌2小时。将混合物浓缩并薄层层析纯化得到黄色油状物叔丁基(叔丁氧羰基)(5-(4-(异丙基磺酰基)苯基)-3-(3-(4-((苯氧羰基)氨基)苯基)异噁唑-5-基)吡嗪-2-基)氨基甲酸酯14e(20mg)。
第六步
叔丁基(叔丁氧羰基)(5-(4-(异丙基磺酰基)苯基)-3-(3-(4-(3-甲基脲基)苯基)异噁唑-5-基)吡嗪-2-基)氨基甲酸酯14f
Figure PCTCN2022111868-appb-000122
向叔丁基(叔丁氧羰基)(5-(4-(异丙基磺酰基)苯基)-3-(3-(4-((苯氧羰基)氨基)苯基)异噁唑-5-基)吡嗪-2-基)氨基甲酸酯14e(20mg，0.026mmol)的乙腈(3mL)溶液中加入甲胺盐酸盐(4mg，0.052mmol)，将混合物在50℃搅拌2小时。向反应溶液中加入乙酸乙酯(10mL)和水(10mL)，分液后的水相再用乙酸乙酯(20mL)萃取三次，合并的有机相浓缩并柱层析分离得到白色固体叔丁基(叔丁氧羰基)(5-(4-(异丙基磺酰基)苯基)-3-(3-(4-(3-甲基脲基)苯基)异噁唑-5-基)吡嗪-2-基)氨基甲酸酯14f(12mg)。
第七步
1-(4-(5-(3-氨基-6-(4-(异丙基磺酰基)苯基)吡嗪-2-基)异噁唑-3-基)苯基)-3-甲基脲14
将叔丁基(叔丁氧羰基)(5-(4-(异丙基磺酰基)苯基)-3-(3-(4-(3-甲基脲基)苯基)异噁唑-5-基)吡嗪-2-基)氨基甲酸酯14f(12mg，0.015mmol)和HCl的乙酸乙酯溶液(4M，2mL)，反应液室温下搅拌1个小时后，浓缩，加入乙酸乙酯(20mL)和饱和的碳酸氢钠水溶液(20mL)，分液后有机相用水(20mL)洗一遍后，有机相浓缩并经柱层析色谱分离得到黄色固体1-(4-(5-(3-氨基-6-(4-(异丙基磺酰基)苯基)吡嗪-2-基)异噁唑-3-基)苯基)-3-甲基脲14(6.7mg)。
1H NMR(DMSO-d 6,400MHz):δ8.93(s,1H),8.82(s,1H),8.38–8.36(m,2H),7.94–7.92(m,2H),7.88–7.86(m,2H),7.69(s,1H),7.59–7.57(m,2H),7.17(s,2H),6.13–6.11(m,1H),3.48–3.44(m,1H),2.67–2.66(m,3H),1.20–1.18(m,6H)。
MS实测值(ESI +)[(M+H) +]:493。
实施例15
1-(4-(5-(3-氨基-6-(4-(异丙基磺酰基)苯基)吡嗪-2-基)异噁唑-3-基)苯基)脲15
Figure PCTCN2022111868-appb-000123
第一步
叔丁基(叔丁氧羰基)(5-(4-(异丙基磺酰基)苯基)-3-(3-(4-脲基苯基)异噁唑-5-基)吡嗪-2-基)氨基甲酸酯15a
Figure PCTCN2022111868-appb-000124
将叔丁基(叔丁氧羰基)(5-(4-(异丙基磺酰基)苯基)-3-(3-(4-((苯氧羰基)氨基)苯基)异噁唑-5-基)吡嗪-2-基)氨基甲酸酯14e(20mg，0.026mmol)溶入氨甲醇溶液(7M，3mL)溶液中，将混合物在50℃搅拌2小时。向反应溶液中加入乙酸乙酯(10mL)和水(10mL)，分液后的水相再用乙酸乙酯(20mL)萃取三次，合并的有机相浓缩并柱层析分离得到白色固体叔丁基(叔丁氧羰基)(5-(4-(异丙基磺酰基)苯基)-3-(3-(4-脲基苯基)异噁唑-5-基)吡嗪-2-基)氨基甲酸酯15a(12mg)。
第二步
1-(4-(5-(3-氨基-6-(4-(异丙基磺酰基)苯基)吡嗪-2-基)异噁唑-3-基)苯基)脲15
将叔丁基(叔丁氧羰基)(5-(4-(异丙基磺酰基)苯基)-3-(3-(4-脲基苯基)异噁唑-5-基)吡嗪-2-基)氨基甲酸酯15a(12mg，0.015mmol)和HCl的乙酸乙酯溶液(4M，2mL)，反应液室温下搅拌1个小时后，浓缩，加入乙酸乙酯(20mL)和饱和的碳酸氢钠水溶液(20mL)，分液后有机相用水(20mL)洗一遍后，有机相浓缩并经柱层析色谱分离得到黄色固体1-(4-(5-(3-氨基-6-(4-(异丙基磺酰基)苯基)吡嗪-2-基)异噁唑-3-基)苯基)脲15。
1H NMR(DMSO-d 6,400MHz):δ8.92(s,1H),8.86(s,1H),8.38–8.36(m,2H),7.94–7.92(m,2H),7.88–7.86(m,2H),7.68(s,1H),7.59–7.57(m,2H),7.15(s,2H),6.97(m,2H),3.48–3.44(m,1H),1.20–1.18(m,6H)。
MS实测值(ESI +)[(M+H) +]:479。
实施例16
1-(4-(5-(3-氨基-6-(4-(异丙基磺酰基)苯基)吡嗪-2-基)异噁唑-3-基)苯基)胍16
Figure PCTCN2022111868-appb-000125
向叔丁基(3-(3-(4-氨基苯基)异噁唑-5-基)-5-(4-(异丙基磺酰基)苯基)吡嗪-2-基)(叔丁氧羰基)氨基甲酸酯14d(50mg，0.079mmol)的盐酸二氧六环(4M，3mL)溶液中加入单氰胺(10mg，0.14mmol)，将混合物在80℃搅拌2小时。待反应冷却至室温后向反应溶液中加入乙酸乙酯(20mL)和碳酸氢钠水溶液(10mL)，分液后的水相再用乙酸乙酯(20mL)萃取三次，合并的有机相浓缩并柱层析分离得到白色固体1-(4-(5-(3-氨基-6-(4-(异丙基磺酰基)苯基)吡嗪-2-基)异噁唑-3-基)苯基)胍16(18.3mg)。
1H NMR(DMSO-d 6,400MHz)：δ8.95(s,1H),8.39–8.37(m,2H),8.10–8.07(m,2H),7.95–7.93(m,2H),7.82(s,1H),7.71(m,3H),7.44–7.42(m,2H),7.19(s,2H),5.40(s,2H),3.50–3.43(m,1H),1.20–1.18(m,6H)。
MS实测值(ESI +)[(M+H) +]:478。
实施例17
1-(4-(5-(3-氨基-6-(4-(异丙基磺酰基)苯基)吡嗪-2-基)异噁唑-3-基)苯基)-3-甲基胍二盐酸盐17
Figure PCTCN2022111868-appb-000126
第一步
叔丁基(叔丁氧羰基)(5-(4-(异丙基磺酰基)苯基)-3-(3-(4-异硫氰酸根苯基)异噁唑-5-基)吡嗪-2-基)氨基甲酸酯17a
Figure PCTCN2022111868-appb-000127
向叔丁基(3-(3-(4-氨基苯基)异噁唑-5-基)-5-(4-(异丙基磺酰基)苯基)吡嗪-2-基)(叔丁氧羰基)氨基甲酸酯14d(110mg，0.21mmol)的二氯甲烷(4mL)溶液中加入氢氧化钠水溶液(1M，0.6mL)和硫代氯甲酸苯酯(43mg，0.25mmol)，将混合物在25℃搅拌2小时。向反应溶液中加入二氯甲烷(20mL)和水溶液(10mL)，分液后的水相再用二氯甲烷(10mL)萃取三次，合并的有机相浓缩并柱层析分离得到黄色油状物叔丁基(叔丁氧羰基)(5-(4-(异丙基磺酰基)苯基)-3-(3-(4-异硫氰酸根苯基)异噁唑-5-基)吡嗪-2-基)氨基甲酸酯17a(70mg)。
第二步
叔丁基(叔丁氧羰基)(5-(4-(异丙基磺酰基)苯基)-3-(3-(4-(3-甲基硫脲基)苯基)异噁唑-5-基)吡嗪-2-基)氨基甲酸酯17b
Figure PCTCN2022111868-appb-000128
向叔丁基(叔丁氧羰基)(5-(4-(异丙基磺酰基)苯基)-3-(3-(4-异硫氰酸根苯基)异噁唑-5-基)吡嗪-2-基)氨基甲酸酯17a(200mg，0.42mmol)的乙腈(5mL)中加入甲胺盐酸盐(28mg，0.42mmol)，反应液50℃ 搅拌1个小时后，加入乙酸乙酯(20mL)和水(20mL)，分液后有机相用水(20mL)洗一遍后，有机相浓缩并经柱层析色谱分离得到黄色固体叔丁基(叔丁氧羰基)(5-(4-(异丙基磺酰基)苯基)-3-(3-(4-(3-甲基硫脲基)苯基)异噁唑-5-基)吡嗪-2-基)氨基甲酸酯17b(150mg)。
第三步
叔丁基(叔丁氧羰基)(5-(4-(异丙基磺酰基)苯基)-3-(3-(4-(3-甲基胍基)苯基)异噁唑-5-基)吡嗪-2-基)氨基甲酸酯17c
Figure PCTCN2022111868-appb-000129
叔丁基(叔丁氧羰基)(5-(4-(异丙基磺酰基)苯基)-3-(3-(4-(3-甲基硫脲基)苯基)异噁唑-5-基)吡嗪-2-基)氨基甲酸酯17b(26mg，0.04mmol)的乙腈(1.5mL)和氨水(1.5mL)反应液中加入2-碘酰基苯甲酸(13mg，0.05mmol)，反应液50℃搅拌1个小时后，加入乙酸乙酯(20mL)和水(20mL)，分液后有机相用水(20mL)洗一遍后，有机相浓缩并经柱层析色谱分离得到黄色固体叔丁基(叔丁氧羰基)(5-(4-(异丙基磺酰基)苯基)-3-(3-(4-(3-甲基胍基)苯基)异噁唑-5-基)吡嗪-2-基)氨基甲酸酯17c(5mg)。
第四步
1-(4-(5-(3-氨基-6-(4-(异丙基磺酰基)苯基)吡嗪-2-基)异噁唑-3-基)苯基)-3-甲基胍二盐酸盐17
叔丁基(叔丁氧羰基)(5-(4-(异丙基磺酰基)苯基)-3-(3-(4-(3-甲基胍基)苯基)异噁唑-5-基)吡嗪-2-基)氨基甲酸酯17c(5mg，0.007mmol)和盐酸乙酸乙酯混合溶液(4M，2mL)反应液室温下搅拌1个小时后，反应液浓缩得到1-(4-(5-(3-氨基-6-(4-(异丙基磺酰基)苯基)吡嗪-2-基)异噁唑-3-基)苯基)-3-甲基胍二盐酸盐17(1.7mg)。
1H NMR(400MHz,DMSO-d 6):δ8.98(s,1H),8.42–8.40(m,2H),8.12–8.10(m,2H),8.02–8.00(m,2H),7.86(s,1H),7.46–7.44(m,2H),3.51–3.48(m,1H),2.89–2.88(m,3H),1.22–1.21(m,6H)。
MS实测值(ESI +)[(M+H) +]:492。
实施例18
1-(4-(5-(3-氨基-6-(4-(异丙基磺酰基)苯基)吡嗪-2-基)异噁唑-3-基)苯基)-3-乙基胍二盐酸盐18
Figure PCTCN2022111868-appb-000130
第一步
叔丁基(叔丁氧羰基)(3-(3-(4-(3-乙基硫脲基)苯基)异噁唑-5-基)-5-(4-(异丙基磺酰基)苯基)-吡嗪-2-基)氨基甲酸酯18a
Figure PCTCN2022111868-appb-000131
向叔丁基(叔丁氧羰基)(5-(4-(异丙基磺酰基)苯基)-3-(3-(4-异硫氰酸根苯基)异噁唑-5-基)吡嗪-2-基)氨基甲酸酯17a(120mg，0.42mmol)的乙腈(5mL)中加入乙胺盐酸盐(25mg，0.13mmol)和三乙胺(63mg，0.62mmol)，反应液50℃搅拌1个小时后，加入乙酸乙酯(20mL)和水(20mL)，分液后有机相用水(20mL)洗一遍后，有机相浓缩并经柱层析色谱分离得到黄色固体叔丁基(叔丁氧羰基)(3-(3-(4-(3-乙基硫脲基)苯基)异噁唑-5-基)-5-(4-(异丙基磺酰基)苯基)-吡嗪-2-基)氨基甲酸酯18a(100mg)。
第二步
叔丁基(叔丁氧羰基)(3-(3-(4-(3-乙基胍基)苯基)异噁唑-5-基)(5-(4-(异丙基磺酰基)苯基)-吡嗪-2-基)氨基甲酸酯18b
Figure PCTCN2022111868-appb-000132
叔丁基(叔丁氧羰基)(3-(3-(4-(3-乙基硫脲基)苯基)异噁唑-5-基)-5-(4-(异丙基磺酰基)苯基)-吡嗪-2-基)氨基甲酸酯18a(100mg，0.16mmol)的乙腈(2mL)和氨水(2mL)反应液中加入2-碘酰基苯甲酸(50mg，0.18mmol)，反应液50℃搅拌1个小时后，加入乙酸乙酯(20mL)和水(20mL)，分液后有机相用水(20mL)洗一遍后，有机相浓缩并经柱层析色谱分离得到黄色固体叔丁基(叔丁氧羰基)(3-(3-(4-(3-乙基胍基)苯基)异噁唑-5-基)(5-(4-(异丙基磺酰基)苯基)-吡嗪-2-基)氨基甲酸酯18b(5mg)。
第三步
1-(4-(5-(3-氨基-6-(4-(异丙基磺酰基)苯基)吡嗪-2-基)异噁唑-3-基)苯基)-3-乙基胍二盐酸盐18
叔丁基(叔丁氧羰基)(3-(3-(4-(3-乙基胍基)苯基)异噁唑-5-基)(5-(4-(异丙基磺酰基)苯基)-吡嗪-2-基)氨基甲酸酯18b(45mg，0.063mmol)和盐酸乙酸乙酯混合溶液(4M，2mL)反应液室温下搅拌1个小时后，反应液浓缩得到黄色固体1-(4-(5-(3-氨基-6-(4-(异丙基磺酰基)苯基)吡嗪-2-基)异噁唑-3-基)苯基)-3-乙基胍二盐酸盐18(34.5mg)。
1H NMR(400MHz,DMSO-d 6):δ9.94(s,1H),8.96(s,1H),8.39–8.37(m,2H),8.17–8.15(m,1H),8.09–8.07(m,2H),7.95–7.93(m,2H)7.83(s,1H),7.42–7.40(m,2H),3.50–3.45(m,1H),3.33–2.29(m,2H),1.20–1.15(m,9H)。
MS实测值(ESI +)[(M+H) +]:506。
实施例19
1-(6-(5-(3-氨基-6-(4-(异丙基磺酰基)苯基)吡嗪-2-基)异噁唑-3-基)吡啶-3-基)-3-甲基胍二盐酸盐19
Figure PCTCN2022111868-appb-000133
第一步
(E)-5-硝基吡啶甲醛肟19a
Figure PCTCN2022111868-appb-000134
室温下，向5-硝基吡啶甲醛(1g,6.57mmol)在四氢呋喃(15mL)的溶液中加入羟胺盐酸盐(0.55g,7.89mmol)。将反应混合物在室温下搅拌16小时后。向反应体系中加入水(40mL)，有机相分离出，水相用乙酸乙酯(30mL)萃取三次，合并的有机相用无水硫酸钠干燥，过滤，滤液减压浓缩得到黄色固体(E)-5-硝基吡啶甲醛肟19a(1.1g)，为粗产品并在未经进一步纯化下直接用于下一步骤。
第二步
叔丁基(5-溴-3-(3-(5-硝基吡啶-2-基)异噁唑-5-基)吡嗪-2-基)(叔丁氧羰基)氨基甲酸酯19b
Figure PCTCN2022111868-appb-000135
向叔丁基(5-溴-3-乙炔基-2-吡嗪基)(叔丁氧羰基)氨基甲酸酯(0.80g，1.99mmol)的甲醇(18mL)和水(3.6mL)的混合溶液中依次加入(E)-5-硝基苯甲醛肟19a(0.50g，2.99mmol)和双三氟乙酰碘苯(1.29g，2.99mmol)，在室温下搅拌过夜。向反应液中加入乙酸乙酯(40mL)和水(40mL)。有机相接着用水(20mL)洗三遍。有机相分离出并用无水硫酸钠干燥，过滤后浓缩并柱层析分离得到叔丁基(5-溴-3-(3-(5-硝基吡啶-2-基)异噁唑-5-基)吡嗪-2-基)(叔丁氧羰基)氨基甲酸酯19b(0.20g)。
第三步
叔丁基(叔丁氧羰基)(5-(4-(异丙基磺酰基)苯基)-3-(3-(5-硝基吡啶-2-基)异噁唑-5-基)吡嗪-2-基)氨基甲酸酯19c
Figure PCTCN2022111868-appb-000136
氮气保护下，向叔丁基(5-溴-3-(3-(5-硝基吡啶-2-基)异噁唑-5-基)吡嗪-2-基)(叔丁氧羰基)氨基甲酸酯19b(0.20g，0.36mmol)的1,4-二氧六环(15mL)和水(1.5mL)混合溶液中，室温(～20℃)下依次4-异丙基磺酰基苯硼酸(0.082g，0.36mmol),碳酸钾(0.15g，1.07mmol)和[1,1'-双(二苯基膦基)二茂铁]二氯化钯(0.05g，0.071mmol)。置换氮气三次后，反应液在95℃下搅拌三个小时。冷却至室温后，向反应液中加入乙酸乙酯(40mL)和水(40mL)。混合溶液用硅藻土过滤，所得溶液分液，水相用乙酸乙酯(20mL)萃取三次，合并的有机相浓缩并柱层析分离得到叔丁基(叔丁氧羰基)(5-(4-(异丙基磺酰基)苯基)-3-(3-(5-硝基吡啶-2-基)异噁唑-5-基)吡嗪-2-基)氨基甲酸酯19c(0.12g)。
第四步
叔丁基(3-(3-(5-氨基吡啶-2-基)异噁唑-5-基)-5-(4-(异丙基磺酰基)苯基)吡嗪-2-基)(叔丁氧羰基)氨基甲酸酯19d
Figure PCTCN2022111868-appb-000137
向叔丁基(叔丁氧羰基)(5-(4-(异丙基磺酰基)苯基)-3-(3-(5-硝基吡啶-2-基)异噁唑-5-基)吡嗪-2-基)氨基甲酸酯19c(120mg，0.20mmol)的醋酸(8mL)溶液中，室温下加入还原铁粉(109mg，2.0mmol)。反应液室温下搅拌16个小时之后，用乙酸乙酯(40mL)稀释，混合液用硅藻土过滤，用碳酸氢钠水溶液(40mL)水洗至中性后倒入分液漏斗。水相用乙酸乙酯(40mL)萃取三次，合并的有机相浓缩并柱层析分离得到叔丁基(3-(3-(5-氨基吡啶-2-基)异噁唑-5-基)-5-(4-(异丙基磺酰基)苯基)吡嗪-2-基)(叔丁氧羰基)氨基甲酸酯19d(75mg)。
第五步
叔丁基(叔丁氧羰基)(5-(4-(异丙基磺酰基)苯基)-3-(3-(5-异硫氰酸吡啶-2-基)异噁唑-5-基)吡嗪-2-基)氨基甲酸酯19e
Figure PCTCN2022111868-appb-000138
向叔丁基(3-(3-(5-硝基吡啶-2-基)异噁唑-5-基)-5-(4-(异丙基磺酰基)苯基)吡嗪-2-基)(叔丁氧羰基)氨基甲酸酯19d(75mg，0.11mmol)的二氯甲烷(4mL)溶液中加入氢氧化钠水溶液(1M，0.35mL)和硫代氯甲酸苯酯(23mg，0.13mmol)，将混合物在25℃搅拌2小时。向反应溶液中加入二氯甲烷(20mL)和水溶液(10mL)，分液后的水相再用二氯甲烷(10mL)萃取三次，合并的有机相浓缩并柱层析分离得到黄色油状物叔丁基(叔丁氧羰基)(5-(4-(异丙基磺酰基)苯基)-3-(3-(5-异硫氰酸吡啶-2-基)异噁唑-5-基)吡嗪-2-基)氨基甲酸酯19e(53mg)。
第六步
叔丁基(叔丁氧羰基)(5-(4-(异丙基磺酰基)苯基)-3-(3-(5-(3-甲基硫脲基)吡啶-2-基)异噁唑-5-基)吡嗪-2-基)氨基甲酸酯19f
Figure PCTCN2022111868-appb-000139
向叔丁基(叔丁氧羰基)(5-(4-(异丙基磺酰基)苯基)-3-(3-(5-异硫氰酸吡啶-2-基)异噁唑-5-基)吡嗪-2-基)氨基甲酸酯19e(45mg，0.078mmol)的乙腈(5mL)中加入甲胺盐酸盐(8mg，0.12mmol)和三乙胺(24mg，0.23mmol)，反应液50℃搅拌1个小时后，加入乙酸乙酯(20mL)和水(20mL)，分液后有机相用水(20mL)洗一遍后，有机相浓缩并经柱层析色谱分离得到黄色固体叔丁基(叔丁氧羰基)(5-(4-(异丙基磺酰基)苯基)-3-(3-(5-(3-甲基硫脲基)吡啶-2-基)异噁唑-5-基)吡嗪-2-基)氨基甲酸酯19f(38mg)。
第七步
叔丁基(叔丁氧羰基)(5-(4-(异丙基磺酰基)苯基)-3-(3-(5-(3-甲基胍基)吡啶-2-基)异噁唑-5-基)吡嗪-2-基)氨基甲酸酯19g
Figure PCTCN2022111868-appb-000140
叔丁基(叔丁氧羰基)(5-(4-(异丙基磺酰基)苯基)-3-(3-(5-(3-甲基硫脲基)吡啶-2-基)异噁唑-5-基)吡嗪-2-基)氨基甲酸酯19f(38mg，0.075mmol)的乙腈(1.5mL)和氨水(1.5mL)反应液中加入2-碘酰基苯甲酸(25mg，0.089mmol)，反应液50℃搅拌1个小时后，加入乙酸乙酯(20mL)和水(20mL)，分液后有机相用水(20mL)洗一遍后，有机相浓缩并经柱层析色谱分离得到黄色固体叔丁基(叔丁氧羰基)(5-(4-(异丙基磺酰基)苯基)-3-(3-(5-(3-甲基胍基)吡啶-2-基)异噁唑-5-基)吡嗪-2-基)氨基甲酸酯19g(15mg)。
第八步
1-(6-(5-(3-氨基-6-(4-(异丙基磺酰基)苯基)吡嗪-2-基)异噁唑-3-基)吡啶-3-基)-3-甲基胍二盐酸盐19
叔丁基(叔丁氧羰基)(5-(4-(异丙基磺酰基)苯基)-3-(3-(5-(3-甲基胍基)吡啶-2-基)异噁唑-5-基)吡嗪-2-基)氨基甲酸酯19g(15mg，0.021mmol)和盐酸乙酸乙酯混合溶液(4M，2mL)反应液室温下搅拌1个小时后，反应液浓缩得到黄色固1-(6-(5-(3-氨基-6-(4-(异丙基磺酰基)苯基)吡嗪-2-基)异噁唑-3-基)吡啶-3-基)-3-甲基胍二盐酸盐19(11.7mg)。
1H NMR(400MHz,DMSO-d 6):δ10.13(s,1H),8.96(s,1H),8.68(m,1H),8.39–8.37(m,2H),8.21–8.17(m,2H),7.95–7.93(m,2H),7.90–7.87(m,2H),7.71(s,1H),3.49–3.45(m,1H),2.87(m,3H),1.20–1.18(m,6H)。
MS实测值(ESI +)[(M+H) +]:493。
实施例20
1-(4-(5-(3-氨基-6-(4-(异丙基磺酰基)苯基)吡嗪-2-基)异噁唑-3-基)-3-氟苯基)-3-甲基胍二盐酸盐20
Figure PCTCN2022111868-appb-000141
第一步
(E)-2-氟-4-硝基苯甲醛肟20a
Figure PCTCN2022111868-appb-000142
室温下向2-氟-4-硝基苯甲醛(0.5g,2.96mmol)在四氢呋喃(8mL)的溶液中加入羟胺盐酸盐(0.25g,3.55mmol)。将反应混合物在室温(～20℃)下搅拌16小时后。向反应体系中加入水(40mL)，有机相分离出，水相用乙酸乙酯(30mL)萃取三次，合并的有机相用无水硫酸钠干燥，过滤，滤液减压浓缩得到黄色固体(E)-2-氟-4-硝基苯甲醛肟20a(0.7g)，为粗产品并在未经进一步纯化下直接用于下一步骤。
第二步
叔丁基(5-溴-3-(3-(2-氟-4-硝基苯基)异噁唑-5-基)吡嗪-2-基)(叔丁氧羰基)氨基甲酸酯20b
Figure PCTCN2022111868-appb-000143
向叔丁基(5-溴-3-乙炔基-2-吡嗪基)(叔丁氧羰基)氨基甲酸酯(0.85g，2.14mmol)的甲醇(18mL)和水(3.6mL)的混合溶液中依次加入(E)-2-氟-4-硝基苯甲醛肟20a(0.59g，3.21mmol)和双三氟乙酰碘苯(1.38g，3.21mmol)，在室温下搅拌过夜。向反应液中加入乙酸乙酯(40mL)和水(40mL)。有机相接着用水(20mL)洗三遍。有机相分离出并用无水硫酸钠干燥，过滤后浓缩并柱层析分离得到叔丁基(5-溴-3-(3-(2-氟-4-硝基苯基)异噁唑-5-基)吡嗪-2-基)(叔丁氧羰基)氨基甲酸酯20b(0.72g)。
第三步
叔丁基(叔丁氧羰基)(3-(3-(2-氟-4-硝基苯基)异噁唑-5-基)-5-(4-(异丙基磺酰基)苯基)吡嗪-2-基)氨基甲酸酯20c
Figure PCTCN2022111868-appb-000144
氮气保护下，向叔丁基(叔丁氧羰基)(5-溴-3-(3-(2-氟-4-硝基苯基)异噁唑-5-基)吡嗪-2-基)氨基甲酸酯20b(0.30g，0.52mmol)的1,4-二氧六环(15mL)和水(1.5mL)混合溶液中，室温(～20℃)下依次4-异丙基磺酰基苯硼酸(0.12g，0.52mmol),碳酸钾(0.22g，1.55mmol)和[1,1'-双(二苯基膦基)二茂铁]二氯化钯(0.076g，0.01mmol)。置换氮气三次后，反应液在95℃下搅拌三个小时。冷却至室温后，向反应液中加入乙酸乙酯(40mL)和水(40mL)。混合溶液用硅藻土过滤，所得溶液分液，水相用乙酸乙酯(20mL)萃取三次，合并的有机相浓缩并柱层析分离得到叔丁基(叔丁氧羰基)(3-(3-(2-氟-4-硝基苯基)异噁唑-5-基)-5-(4-(异丙基磺酰基)苯基)吡嗪-2-基)氨基甲酸酯20c(0.13g)。
第四步
叔丁基(叔丁氧羰基)(3-(3-(4-氨基-2-氟苯基)异噁唑-5-基)-5-(4-(异丙基磺酰基)苯基)吡嗪-2-基)氨基甲酸酯20d
Figure PCTCN2022111868-appb-000145
向叔丁基(叔丁氧羰基)(3-(3-(2-氟-4-硝基苯基)异噁唑-5-基)-5-(4-(异丙基磺酰基)苯基)吡嗪-2-基)氨基甲酸酯20c(130mg，0.19mmol)的醋酸(8mL)溶液中，室温下加入还原铁粉(106mg，1.9mmol)。反应液室温下搅拌16个小时之后，用乙酸乙酯(40mL)稀释，混合液用硅藻土过滤，用碳酸氢钠水溶液(40mL)水洗至中性后倒入分液漏斗。水相用乙酸乙酯(40mL)萃取三次，合并的有机相浓缩并柱层析分离得到叔丁基(叔丁氧羰基)(3-(3-(4-氨基-2-氟苯基)异噁唑-5-基)-5-(4-(异丙基磺酰基)苯基)吡嗪-2-基)氨基甲酸酯20d(85mg)。
第五步
叔丁基(叔丁氧羰基)(3-(3-(2-氟-4-异硫氰酸根苯基)异噁唑-5-基)-(5-(4-(异丙基磺酰基)苯基)-吡嗪-2-基) 氨基甲酸酯20e
Figure PCTCN2022111868-appb-000146
向叔丁基(叔丁氧羰基)(3-(3-(4-氨基-2-氟苯基)异噁唑-5-基)-5-(4-(异丙基磺酰基)苯基)吡嗪-2-基)氨基甲酸酯20d(75mg，0.11mmol)的二氯甲烷(4mL)溶液中加入氢氧化钠水溶液(1M，0.35mL)和硫代氯甲酸苯酯(23mg，0.13mmol)，将混合物在25℃搅拌2小时。向反应溶液中加入二氯甲烷(20mL)和水溶液(10mL)，分液后的水相再用二氯甲烷(10mL)萃取三次，合并的有机相浓缩并柱层析分离得到黄色油状物叔丁基(叔丁氧羰基)(3-(3-(2-氟-4-异硫氰酸根苯基)异噁唑-5-基)-(5-(4-(异丙基磺酰基)苯基)-吡嗪-2-基)氨基甲酸酯20e(56mg)。
第六步
叔丁基(叔丁氧羰基)(3-(3-(2-氟-4-(3-甲基硫脲基)苯基)异噁唑-5-基)-5-(4-(异丙基磺酰基)苯基)吡嗪-2-基)氨基甲酸酯20f
Figure PCTCN2022111868-appb-000147
叔丁基(叔丁氧羰基)(3-(3-(2-氟-4-异硫氰酸根苯基)异噁唑-5-基)-(5-(4-(异丙基磺酰基)苯基)-吡嗪-2-基)氨基甲酸酯20e(56mg，0.078mmol)的乙腈(5mL)中加入甲胺盐酸盐(8mg,0.12mmol)和三乙胺(24mg,0.23mmol)，反应液50℃搅拌1个小时后，加入乙酸乙酯(20mL)和水(20mL)，分液后有机相用水(20mL)洗一遍后，有机相浓缩并经柱层析色谱分离得到黄色固体叔丁基(叔丁氧羰基)(3-(3-(2-氟-4-(3-甲基硫脲基)苯基)异噁唑-5-基)-5-(4-(异丙基磺酰基)苯基)吡嗪-2-基)氨基甲酸酯20f(38mg)。
第七步
叔丁基(叔丁氧羰基)(3-(3-(2-氟-4-(3-甲基胍基)苯基)异噁唑-5-基)-5-(4-(异丙基磺酰基)苯基)吡嗪-2-基)氨基甲酸酯20g
Figure PCTCN2022111868-appb-000148
向叔丁基(叔丁氧羰基)(3-(3-(2-氟-4-(3-甲基硫脲基)苯基)异噁唑-5-基)-5-(4-(异丙基磺酰基)苯基)吡嗪-2-基)氨基甲酸酯20f(38mg，0.075mmol)的乙腈(1.5mL)和氨水(1.5mL)反应液中加入2-碘酰基苯甲酸(25mg，0.089mmol)，反应液50℃搅拌1个小时后，加入乙酸乙酯(20mL)和水(20mL)，分液后有机相用水(20mL)洗一遍后，有机相浓缩并经柱层析色谱分离得到黄色固体叔丁基(叔丁氧羰基)(3-(3-(2-氟-4-(3-甲基胍基)苯基)异噁唑-5-基)-5-(4-(异丙基磺酰基)苯基)吡嗪-2-基)氨基甲酸酯20g(28mg)。
第八步
1-(4-(5-(3-氨基-6-(4-(异丙基磺酰基)苯基)吡嗪-2-基)异噁唑-3-基)-3-氟苯基)-3-甲基胍二盐酸盐20
叔丁基(叔丁氧羰基)(3-(3-(2-氟-4-(3-甲基胍基)苯基)异噁唑-5-基)-5-(4-(异丙基磺酰基)苯基)吡嗪-2-基)氨基甲酸酯20g(28mg，0.039mmol)和盐酸乙酸乙酯混合溶液(4M，2mL)反应液室温下搅拌1个小时后，反应液浓缩得到黄色固体1-(4-(5-(3-氨基-6-(4-(异丙基磺酰基)苯基)吡嗪-2-基)异噁唑-3-基)-3-氟苯基)-3-甲基胍二盐酸盐20(19.1mg)。
1H NMR(400MHz,DMSO-d 6):δ10.16(s,1H),8.99(s,1H),8.40–8.38(m,2H),8.23–8.22(m,1H),8.11–8.07(m,2H),7.98–7.96(m,2H),7.63–7.62(m,1H)，7.42–7.39(m,1H),7.29–7.26(m,2H),3.52–3.46(m,1H),2.91–2.89(m,3H),1.23–1.21(m,6H)。
MS实测值(ESI +)[(M+H) +]:510。
实施例21
5-(5-(3-氨基-6-(4-(异丙基磺酰基)苯基)吡嗪-2-基)异噁唑-3-基)-1,3-二氢-2H-苯并[d]咪唑-2-酮21
Figure PCTCN2022111868-appb-000149
第一步
(E)-2-氧代-2,3-二氢-1H-苯并[d]咪唑-5-甲醛肟21a
Figure PCTCN2022111868-appb-000150
室温下向2-氧代-2,3-二氢-苯并咪唑-5-甲醛(0.7g，4.31mmol)在四氢呋喃(16mL)的溶液中加入羟胺盐酸盐(0.36g，5.18mmol)。将反应混合物在室温(～20℃)下搅拌16小时后。向反应体系中加入水(40mL)，有机相分离出，水相用乙酸乙酯(30mL)萃取三次，合并的有机相用无水硫酸钠干燥，过滤，滤液减压浓缩得到黄色固体(E)-2-氧代-2,3-二氢-1H-苯并[d]咪唑-5-甲醛肟21a为粗产品并在未经进一步纯化下直接用于下一步骤。
第二步
叔丁基(5-溴-3-(3-(2-氧代-2,3-二氢-1H-苯并[d]咪唑-5-基)异噁唑-5-基)吡嗪-2-基)(叔丁氧羰基)氨基甲酸酯21b
Figure PCTCN2022111868-appb-000151
向叔丁基(5-溴-3-乙炔基-2-吡嗪基)(叔丁氧羰基)氨基甲酸酯(1.05g，2.14mmol)的甲醇(25mL)和水(5mL)的混合溶液中依次加入(E)-2-氧代-2,3-二氢-1H-苯并[d]咪唑-5-甲醛肟21a(0.7g，3.95mmol)和双三氟乙酰碘苯(1.7g，3.95mmol)，在室温(约20℃)下搅拌过夜。向反应液中加入乙酸乙酯(40mL)和水(40mL)。有机相接着用水(20mL)洗三遍。有机相分离出并用无水硫酸钠干燥，过滤后浓缩并柱 层析分离得到叔丁基(5-溴-3-(3-(2-氧代-2,3-二氢-1H-苯并[d]咪唑-5-基)异噁唑-5-基)吡嗪-2-基)(叔丁氧羰基)氨基甲酸酯21b(0.33g)。
第三步
叔丁基(叔丁氧羰基)(5-(4-(异丙基磺酰基)苯基)-3-(3-(2-氧代-2,3-二氢-1H-苯并[d]咪唑-5-基)异噁唑-5-基)吡嗪-2-基)氨基甲酸酯21c
Figure PCTCN2022111868-appb-000152
氮气保护下，向叔丁基(5-溴-3-(3-(2-氧代-2,3-二氢-1H-苯并[d]咪唑-5-基)异噁唑-5-基)吡嗪-2-基)(叔丁氧羰基)氨基甲酸酯21b(0.150，0.26mmol)的1,4-二氧六环(7mL)和水(1.4mL)混合溶液中，室温下依次4-异丙基磺酰基苯硼酸(0.066g，0.29mmol)，碳酸钾(0.073g，0.52mmol)和[1,1'-双(二苯基膦基)二茂铁]二氯化钯(0.038g，0.05mmol)。置换氮气三次后，反应液在95℃下搅拌三个小时。冷却至室温后，向反应液中加入乙酸乙酯(40mL)和水(40mL)。混合溶液用硅藻土过滤，所得溶液分液，水相用乙酸乙酯(20mL)萃取三次，合并的有机相浓缩并柱层析分离得到叔丁基(叔丁氧羰基)(5-(4-(异丙基磺酰基)苯基)-3-(3-(2-氧代-2,3-二氢-1H-苯并[d]咪唑-5-基)异噁唑-5-基)吡嗪-2-基)氨基甲酸酯21c(0.06g)。
第四步
5-(5-(3-氨基-6-(4-(异丙基磺酰基)苯基)吡嗪-2-基)异噁唑-3-基)-1,3-二氢-2H-苯并[d]咪唑-2-酮21
叔丁基(叔丁氧羰基)(5-(4-(异丙基磺酰基)苯基)-3-(3-(2-氧代-2,3-二氢-1H-苯并[d]咪唑-5-基)异噁唑-5-基)吡嗪-2-基)氨基甲酸酯21c(60mg，0.13mmol)和HCl的乙酸乙酯溶液(4M，2mL)反应液室温下搅拌1个小时后，反应液用乙酸乙酯(400mL)稀释，碳酸氢钠饱和溶液洗至中性，合并并干燥有机相，浓缩得到黄色固体5-(5-(3-氨基-6-(4-(异丙基磺酰基)苯基)吡嗪-2-基)异噁唑-3-基)-1,3-二氢-2H-苯并[d]咪唑-2-酮21(39.4mg)。
1H NMR(400MHz,DMSO-d 6):δ8.92(s,1H),8.38–8.36(m,2H),7.94–7.92(m,2H),7.70(s,1H),7.62–7.60(m,1H),7.53(s,1H),7.15(s,2H),7.07–7.05(m,1H),3.52–3.46(m,1H),1.20–1.18(m,6H)。
MS实测值(ESI +)[(M+H) +]:477。
实施例22
5-(5-(3-氨基-6-(4-(丙烷-2-基磺酰亚胺基)苯基)吡嗪-2-基)异噁唑-3-基)-1,3-二氢-苯并咪唑-2-酮二盐酸盐22
Figure PCTCN2022111868-appb-000153
第一步
叔丁基(叔丁氧羰基)(3-(3-(2-氧代-2,3-二氢-1H-苯并[d]咪唑-5-基)异噁唑-5-基)-5-(4-(丙-2-基亚磺酰基)苯基)吡嗪-2-基)氨基甲酸酯22a
Figure PCTCN2022111868-appb-000154
氮气保护下，向叔丁基(5-溴-3-(3-(2-氧代-2,3-二氢-1H-苯并[d]咪唑-5-基)异噁唑-5-基)吡嗪-2-基)(叔丁氧羰基)氨基甲酸酯21b(0.150，0.26mmol)的1,4-二氧六环(7mL)和水(1.4mL)混合溶液中，室温(～20℃)下依次(4-(丙-2-基磺酰亚胺酰基)苯基)硼酸(0.120g，0.52mmol),碳酸钾(0.11g，0.79mmol)和[1,1'-双(二苯基膦基)二茂铁]二氯化钯(0.038g，0.05mmol)。置换氮气三次后，反应液在95℃下搅拌三个小时。冷却至室温后，向反应液中加入乙酸乙酯(40mL)和水(40mL)。混合溶液用硅藻土过滤，所得溶液分液，水相用乙酸乙酯(20mL)萃取三次，合并的有机相浓缩并柱层析分离得到叔丁基(叔丁氧羰基)(3-(3-(2-氧代-2,3-二氢-1H-苯并[d]咪唑-5-基)异噁唑-5-基)-5-(4-(丙-2-基亚磺酰基)苯基)吡嗪-2-基)氨基甲酸酯22a(0.07g)。
第二步
5-(5-(3-氨基-6-(4-(丙烷-2-基磺酰亚胺基)苯基)吡嗪-2-基)异噁唑-3-基)-1,3-二氢-苯并咪唑-2-酮二盐酸盐22
叔丁基(叔丁氧羰基)(3-(3-(2-氧代-2,3-二氢-1H-苯并[d]咪唑-5-基)异噁唑-5-基)-5-(4-(丙-2-基亚磺酰基)苯基)吡嗪-2-基)氨基甲酸酯22a(70mg，0.18mmol)和盐酸乙酸乙酯混合溶液(4M，2mL)反应液室温下搅拌1个小时后，浓缩得到黄色固体5-(5-(3-氨基-6-(4-(丙烷-2-基磺酰亚胺基)苯基)吡嗪-2-基)异噁唑-3-基)-1,3-二氢-苯并咪唑-2-酮二盐酸盐22(48.1mg)。
1H NMR(400MHz,DMSO-d 6):δ10.97–10.95(m,2H),9.04(s,1H),8.55–8.53(m,2H),8.15–8.13(m,2H),7.78(s,1H),7.67–7.65(m,1H),7.57(s,1H),7.13–7.11(m,2H),4.25–4.18(m,1H),1.44–1.42(m,3H),1.33–1.31(m,3H)。
MS实测值(ESI +)[(M+H) +]:476。
实施例23
1-(4-(5-(3-氨基-6-(4-(环丙基磺酰基)苯基)吡嗪-2-基)异噁唑-3-基)苄基)胍二盐酸盐23
Figure PCTCN2022111868-appb-000155
第一步
(4-(环丙基磺酰基)苯基)硼酸23a
Figure PCTCN2022111868-appb-000156
向1-溴-4-(环丙基磺酰基)苯(500mg，2.03mmol)的N,N-二甲基甲酰胺(12mL)混合溶液中，室温 下依次加入双联频那醇硼酸酯(775mg，3.05mmol)，醋酸钾(497mg，0.51mmol)和[1,1'-双(二苯基膦基)二茂铁]二氯化钯(150mg，0.20mmol)。置换氮气三次后，反应液在95℃下搅拌三个小时。冷却至室温后，向反应液中加入乙酸乙酯(40mL)和水(40mL)。混合溶液用硅藻土过滤，所得溶液分液，水相用乙酸乙酯(20mL)萃取三次，合并的有机相浓缩得到(4-(环丙基磺酰基)苯基)硼酸23a(800mg)为粗产品并在未经进一步纯化下直接用于下一步骤。
第二步
叔丁基(叔丁氧羰基)(3-(3-(4-氰基苯基)异噁唑-5-基)-5-(4-(环丙基磺酰基)苯基)吡嗪-2-基)氨基甲酸酯23b
Figure PCTCN2022111868-appb-000157
氮气保护下，向叔丁基(5-溴-3-(3-(4-氰基苯基)异噁唑-5-基)吡嗪-2-基)(叔丁氧羰基)氨基甲酸酯1b(0.6g，1.11mmol)的1,4-二氧六环(15mL)和水(1.5mL)混合溶液中，室温下依次加入(4-(环丙基磺酰基)苯基)硼酸23a(0.31g，1.33mmol),碳酸钾(0.44g，3.33mmol)和[1,1'-双(二苯基膦基)二茂铁]二氯化钯(0.16g，0.22mmol)。置换氮气三次后，反应液在95℃下搅拌三个小时。冷却至室温后，向反应液中加入乙酸乙酯(40mL)和水(40mL)。混合溶液用硅藻土过滤，所得溶液分液，水相用乙酸乙酯(20mL)萃取三次，合并的有机相浓缩并柱层析分离得到叔丁基(叔丁氧羰基)(3-(3-(4-氰基苯基)异噁唑-5-基)-5-(4-(环丙基磺酰基)苯基)吡嗪-2-基)氨基甲酸酯23b(0.13g)。
第三步
叔丁基(3-(3-(4-氨基苯基)异噁唑-5-基)-5-(4-(环丙基磺酰基)苯基)吡嗪-2-基)(叔丁氧羰基)氨基甲酸酯23c
Figure PCTCN2022111868-appb-000158
向叔丁基(叔丁氧羰基)(3-(3-(4-氰基苯基)异噁唑-5-基)-5-(4-(环丙基磺酰基)苯基)吡嗪-2-基)氨基甲酸酯23b(125mg，0.20mmol)的甲醇(5mL)溶液中，室温下依次加入六水合氯化镍(142mg，0.60mmol)和硼氢化钠(23mg，0.60mmol)。反应液室温下搅拌1个小时之后，用氯化铵(2mL)淬灭。再加入乙酸乙酯(40mL)和饱和的碳酸氢钠水溶液(40mL)。混合溶液用硅藻土过滤后，滤液倒入分液漏斗。水相用乙酸乙酯(40mL)萃取三次，合并的有机相浓缩并柱层析分离得到制备叔丁基(3-(3-(4-氨基苯基)异噁唑-5-基)-5-(4-(环丙基磺酰基)苯基)吡嗪-2-基)(叔丁氧羰基)氨基甲酸酯23c(21mg)。
第四步
叔丁基(叔丁氧羰基)(5-(4-(环丙基磺酰基)苯基)-3-(3-(4-(胍基甲基)苯基)异噁唑-5-基)吡嗪-2-基)氨基甲酸酯23d
Figure PCTCN2022111868-appb-000159
向叔丁基(3-(3-(4-氨基苯基)异噁唑-5-基)-5-(4-(环丙基磺酰基)苯基)吡嗪-2-基)(叔丁氧羰基)氨基甲酸酯23c(21mg，0.034mmol)的乙腈(3mL)溶液中，依次加入1H-吡唑-1-甲脒盐酸(6mg，0.038mmol)和N,N-二异丙基乙胺(8μL)。室温下搅拌16个小时。向反应液中加入乙酸乙酯(20mL)和水(20mL)，所得溶液分液，水相用乙酸乙酯(20mL)萃取三次，合并的有机相浓缩并经柱层析色谱分离得到叔丁基(叔丁氧羰基)(5-(4-(环丙基磺酰基)苯基)-3-(3-(4-(胍基甲基)苯基)异噁唑-5-基)吡嗪-2-基)氨基甲酸酯23d(6mg)。
第五步
1-(4-(5-(3-氨基-6-(4-(环丙基磺酰基)苯基)吡嗪-2-基)异噁唑-3-基)苄基)胍二盐酸盐23
向叔丁基(叔丁氧羰基)(5-(4-(环丙基磺酰基)苯基)-3-(3-(4-(胍基甲基)苯基)异噁唑-5-基)吡嗪-2-基)氨基甲酸酯23d(6mg，0.01mmol)的乙酸乙酯(2mL)溶液中，加入盐酸乙酸乙酯混合溶液(4M，2mL)。反应液室温下搅拌1个小时后，反应液浓缩得到黄色固体1-(4-(5-(3-氨基-6-(4-(环丙基磺酰基)苯基)吡嗪-2-基)异噁唑-3-基)苄基)胍二盐酸盐23(3mg)。
1H NMR(400MHz,DMSO-d 6):δ8.96(s,1H),8.39–8.37(m,2H),8.22–8.20(m,1H),8.09–8.07(m,2H),8.02–7.99(m,2H),7.82(s,1H),7.54–7.52(m,2H),7.35(s,2H),7.22(s,3H),7.10(s,2H),4.52–4.51(m,2H),2.97–2.91(m,1H),1.40–1.37(m,2H),1.32–1.29(m,2H)。
MS实测值(ESI +)[(M+H) +]:490。
实施例24
1-(4-(5-(3-氨基-6-(4-(异丙基磺酰基)苯基)吡嗪-2-基)异噁唑-3-基)-2-氟苄基)胍二盐酸盐24
Figure PCTCN2022111868-appb-000160
第一步
(E)-2-氟-4-((羟基亚氨基)甲基)苄腈24a
Figure PCTCN2022111868-appb-000161
室温下，向2-氟-4-甲酰基苄腈(500mg，3.36mmol)的四氢呋喃(30mL)溶液中加入羟胺盐酸盐(466mg，6.71mmol)。将反应混合物在室温下搅拌16小时后。向反应体系中加入水(40mL)，有机相分离出，水相用乙酸乙酯(30mL)萃取三次，合并的有机相用无水硫酸钠干燥，过滤，滤液减压浓缩得到黄色固体(E)-2-氟-4-((羟基亚氨基)甲基)苄腈24a(430mg)，为粗产品并在未经进一步纯化下直接用于下一步骤。
第二步
叔丁基(5-溴-3-(3-(4-氰基-3-氟苯基)异噁唑-5-基)吡嗪-2-基)(叔丁氧羰基)氨基甲酸酯24b
Figure PCTCN2022111868-appb-000162
向叔丁基(5-溴-3-乙炔基-2-吡嗪基)(叔丁氧羰基)氨基甲酸酯(0.4g，4.88mmol)的甲醇(12mL)和水(2.4mL)的混合溶液中依次加入(E)-2-氟-4-((羟基亚氨基)甲基)苄腈24a(0.65g，3.25mmol)和双三氟乙酰碘苯(1.05g，4.88mmol)，在室温下搅拌过夜。向反应液中加入乙酸乙酯(40mL)和水(40mL)。有机相接着用水(20mL)洗三遍。有机相分离出并用无水硫酸钠干燥，过滤后浓缩并柱层析分离得到叔丁基(5-溴-3-(3-(4-氰基-3-氟苯基)异噁唑-5-基)吡嗪-2-基)(叔丁氧羰基)氨基甲酸酯24b(0.24g)。
第三步
叔丁基(叔丁氧羰基)(3-(3-(4-氰基-3-氟苯基)异噁唑-5-基)-5-(4-(异丙基磺酰基)苯基)吡嗪-2-基)氨基甲酸酯24c
Figure PCTCN2022111868-appb-000163
氮气保护下，向叔丁基(5-溴-3-(3-(4-氰基-3-氟苯基)异噁唑-5-基)吡嗪-2-基)(叔丁氧羰基)氨基甲酸酯24b(0.2g，0.36mmol)的1,4-二氧六环(15mL)和水(1.5mL)混合溶液中，室温下依次加入4-异丙基磺酰基苯硼酸(0.80g，0.36mmol)，碳酸钾(0.15g，1.08mmol)和[1,1'-双(二苯基膦基)二茂铁]二氯化钯(0.052g，0.072mmol)。置换氮气三次后，反应液在95℃下搅拌三个小时。冷却至室温后，向反应液中加入乙酸乙酯(40mL)和水(40mL)。混合溶液用硅藻土过滤，所得溶液分液，水相用乙酸乙酯(20mL)萃取三次，合并的有机相浓缩并柱层析分离得到叔丁基(叔丁氧羰基)(3-(3-(4-氰基-3-氟苯基)异噁唑-5-基)-5-(4-(异丙基磺酰基)苯基)吡嗪-2-基)氨基甲酸酯24c(0.11g)。
第四步
叔丁基(3-(3-(4-(氨基甲基)-3-氟苯基)异噁唑-5-基)-5-(4-(异丙基磺酰基)苯基)吡嗪-2-基)(叔丁氧羰基)氨基甲酸酯24d
Figure PCTCN2022111868-appb-000164
向叔丁基(叔丁氧羰基)(3-(3-(4-氰基-3-氟苯基)异噁唑-5-基)-5-(4-(异丙基磺酰基)苯基)吡嗪-2-基)氨基甲酸酯24c(107mg，0.16mmol)的甲醇(5mL)溶液中，室温下依次加入六水合氯化镍(115mg，0.48mmol)和硼氢化钠(19mg，0.48mmol)。反应液室温下搅拌1个小时之后，用氯化铵(2mL)淬灭。再加入乙酸乙酯(40mL)和饱和的碳酸氢钠水溶液(40mL)。混合溶液用硅藻土过滤后，滤液倒入分液漏斗。水相用乙酸乙酯(40mL)萃取三次，合并的有机相浓缩并柱层析分离得到叔丁基(3-(3-(4-(氨基甲基)-3-氟苯基)异噁唑-5-基)-5-(4-(异丙基磺酰基)苯基)吡嗪-2-基)(叔丁氧羰基)氨基甲酸酯24d(26mg)。
第五步
叔丁基(叔丁氧羰基)(3-(3-(3-氟-4-(胍甲基)苯基)异噁唑-5-基)-5-(4-(异丙基磺酰基)苯基)吡嗪-2-基)氨基甲酸酯24e
Figure PCTCN2022111868-appb-000165
向叔丁基(3-(3-(4-(氨基甲基)-3-氟苯基)异噁唑-5-基)-5-(4-(异丙基磺酰基)苯基)吡嗪-2-基)(叔丁氧羰基)氨基甲酸酯24d(26mg，0.046mmol)的乙腈(3mL)溶液中，依次加入1H-吡唑-1-甲脒盐酸(7mg，0.046mmol)和N,N-二异丙基乙胺(9μL)。室温(～20℃)下搅拌16个小时。向反应液中加入乙酸乙酯(20mL)和水(20mL)，所得溶液分液，水相用乙酸乙酯(20mL)萃取三次，合并的有机相浓缩并经柱层析色谱分离得到叔丁基(叔丁氧羰基)(3-(3-(3-氟-4-(胍甲基)苯基)异噁唑-5-基)-5-(4-(异丙基磺酰基)苯基)吡嗪-2-基)氨基甲酸酯24e(12mg)。
第六步
1-(4-(5-(3-氨基-6-(4-(异丙基磺酰基)苯基)吡嗪-2-基)异噁唑-3-基)-2-氟苄基)胍二盐酸盐24
向叔丁基(叔丁氧羰基)(3-(3-(3-氟-4-(胍甲基)苯基)异噁唑-5-基)-5-(4-(异丙基磺酰基)苯基)吡嗪-2-基)氨基甲酸酯24e(12mg，0.02mmol)的乙酸乙酯(2mL)溶液中，加入HCl的乙酸乙酯溶液(4M，2mL)。反应液室温下搅拌1个小时后，反应液浓缩得到黄色固体1-(4-(5-(3-氨基-6-(4-(异丙基磺酰基)苯基)吡嗪-2-基)异噁唑-3-基)-2-氟苄基)胍二盐酸盐24(8mg)。
1H NMR(400MHz,DMSO-d 6):δ8.99(s,1H),8.42–8.40(m,2H),8.06(s,1H),7.98–7.94(m,4H),7.93–7.90(m,1H),7.60–7.56(m,1H),7.25(s,2H),4.57–4.56(m,2H),3.54–3.48(m,1H),1.23–1.21(m,6H)。
MS实测值(ESI +)[(M+H) +]:510。
实施例25
4-(5-氨基-6-(3-(4-(胍甲基)苯基)异噁唑-5-基)吡嗪-2-基)-N,N-二甲基苯甲酰胺二盐酸盐25
Figure PCTCN2022111868-appb-000166
第一步
叔丁基(叔丁氧羰基)(3-(3-(4-氰基苯基)异噁唑-5-基)-5-(4-(二甲基氨甲酰)苯基)吡嗪-2-基)氨基甲酸酯
25a
Figure PCTCN2022111868-appb-000167
氮气保护下，向叔丁基(5-溴-3-(3-(4-氰基苯基)异噁唑-5-基)吡嗪-2-基)(叔丁氧羰基)氨基甲酸酯1b(0.4g，0.74mmol)的1,4-二氧六环(10mL)和水(2mL)混合溶液中，室温下依次加入N,N-二甲基-4-(4,4,5,5- 四甲基-1,3,2-二氧苯甲醛-2-基)苯甲酰胺(0.24g，0.89mmol)，碳酸钾(0.30g，2.22mmol)和[1,1'-双(二苯基膦基)二茂铁]二氯化钯(0.10g，0.15mmol)。置换氮气三次后，反应液在95℃下搅拌三个小时。冷却至室温后，向反应液中加入乙酸乙酯(40mL)和水(40mL)。混合溶液用硅藻土过滤，所得溶液分液，水相用乙酸乙酯(20mL)萃取三次，合并的有机相浓缩并柱层析分离得到叔丁基(叔丁氧羰基)(3-(3-(4-氰基苯基)异噁唑-5-基)-5-(4-(二甲基氨甲酰)苯基)吡嗪-2-基)氨基甲酸酯25a(0.16g)。
第二步
叔丁基(3-(3-(4-(氨基甲基)苯基)异噁唑-5-基)-5-(4-(二甲基氨基甲酰)苯基)吡嗪-2-基)(叔丁氧羰基)氨基甲酸酯25b
Figure PCTCN2022111868-appb-000168
向叔丁基(叔丁氧羰基)(3-(3-(4-氰基苯基)异噁唑-5-基)-5-(4-(二甲基氨甲酰)苯基)吡嗪-2-基)氨基甲酸酯25a(160mg，0.26mmol)的甲醇(5mL)溶液中，室温下依次加入六水合氯化镍(187mg，0.79mmol)和硼氢化钠(30mg，0.79mmol)。反应液室温下搅拌1个小时之后，用氯化铵(2mL)淬灭。再加入乙酸乙酯(40mL)和饱和的碳酸氢钠水溶液(40mL)。混合溶液用硅藻土过滤后，滤液倒入分液漏斗。水相用乙酸乙酯(40mL)萃取三次，合并的有机相浓缩并柱层析分离得到叔丁基(3-(3-(4-(氨基甲基)苯基)异噁唑-5-基)-5-(4-(二甲基氨基甲酰)苯基)吡嗪-2-基)(叔丁氧羰基)氨基甲酸酯25b(21mg)。
第三步
叔丁基(叔丁氧羰基)(5-(4-(二甲基氨甲酰基)苯基)-3-(3-(4-(胍甲基)苯基)异噁唑-5-基)吡嗪-2-基)氨基甲酸酯25c
Figure PCTCN2022111868-appb-000169
叔丁基(3-(3-(4-(氨基甲基)苯基)异噁唑-5-基)-5-(4-(二甲基氨基甲酰)苯基)吡嗪-2-基)(叔丁氧羰基)氨基甲酸酯25b(21mg，0.034mmol)的乙腈(3mL)溶液中，依次加入1H-吡唑-1-甲脒盐酸(6mg，0.038mmol)和N,N-二异丙基乙胺(8μL)。室温(～20℃)下搅拌16个小时。向反应液中加入乙酸乙酯(20mL)和水(20mL),所得溶液分液，水相用乙酸乙酯(20mL)萃取三次，合并的有机相浓缩并经柱层析色谱分离得到叔丁基(叔丁氧羰基)(5-(4-(二甲基氨甲酰基)苯基)-3-(3-(4-(胍甲基)苯基)异噁唑-5-基)吡嗪-2-基)氨基甲酸酯25c(15mg)。
第四步
4-(5-氨基-6-(3-(4-(胍甲基)苯基)异噁唑-5-基)吡嗪-2-基)-N,N-二甲基苯甲酰胺二盐酸盐25
叔丁基(叔丁氧羰基)(5-(4-(二甲基氨甲酰基)苯基)-3-(3-(4-(胍甲基)苯基)异噁唑-5-基)吡嗪-2-基)氨基甲酸酯25c(15mg，0.03mmol)的乙酸乙酯(2mL)溶液中，加入HCl的乙酸乙酯溶液(4M，2mL)。反应液室温下搅拌1个小时后，反应液浓缩得到黄色固体4-(5-氨基-6-(3-(4-(胍甲基)苯基)异噁唑-5-基)吡嗪-2-基)-N,N-二甲基苯甲酰胺二盐酸盐25(5mg)。
1H NMR(400MHz,DMSO-d 6):δ8.87(s,1H),8.25–8.23(m,1H),8.21–8.15(m,2H),8.06–8.04(m,2H),7.77(s,1H),7.53–7.49(m,4H),7.36(s,3H),7.23(s,2H),7.11(s,2H),4.50–4.48(m,2H),3.00–2.97(m,6H)。
MS实测值(ESI +)[(M+H) +]:457。
实施例26
4-(5-(3-氨基-6-(4-(异丙基磺酰基)苯基)吡嗪-2-基)异噁唑-3-基)-N-氨基甲酰苯甲酰胺二盐酸盐26
Figure PCTCN2022111868-appb-000170
第一步
(E)-4-((羟亚胺)甲基)苯甲酸甲酯26a
Figure PCTCN2022111868-appb-000171
室温下，向4-甲酰基苯甲酸甲酯(1g，6.10mmol)在四氢呋喃(30mL)的溶液中加入羟胺盐酸盐(0.51g，7.31mmol)。将反应混合物在室温下搅拌16小时后。向反应体系中加入水(40mL)，有机相分离出，水相用乙酸乙酯(30mL)萃取三次，合并的有机相用无水硫酸钠干燥，过滤，滤液减压浓缩得到黄色固体(E)-4-((羟亚胺)甲基)苯甲酸甲酯26a(1.2g)为粗产品并在未经进一步纯化下直接用于下一步骤。
第二步
4-(5-(3-(二(叔丁氧羰基)氨基)-6-溴-吡嗪-2-基)异噁唑-3-基)苯甲酸甲酯26b
Figure PCTCN2022111868-appb-000172
向叔丁基(5-溴-3-乙炔基-2-吡嗪基)(叔丁氧羰基)氨基甲酸酯(0.89g，2.23mmol)的甲醇(12mL)和水(2.4mL)的混合溶液中依次加入(E)-4-((羟亚胺)甲基)苯甲酸甲酯26a(0.60g，3.35mmol)和双三氟乙酰碘苯(1.44g，3.35mmol)，在室温下搅拌过夜。向反应液中加入乙酸乙酯(40mL)和水(40mL)。有机相接着用水(20mL)洗三遍。有机相分离出并用无水硫酸钠干燥，过滤后浓缩并柱层析分离得到4-(5-(3-(二(叔丁氧羰基)氨基)-6-溴-吡嗪-2-基)异噁唑-3-基)苯甲酸甲酯26b(0.96g)。
第三步
4-(5-(3-((叔丁氧羰基)氨基)-6-(4-(异丙基磺酰基)苯基)吡嗪-2-基)异噁唑-3-基)苯甲酸甲酯26c
Figure PCTCN2022111868-appb-000173
氮气保护下，向4-(5-(6-溴-3-(N,N-二(叔丁氧羰基)氨基)吡嗪-2-基)异噁唑-3-基)苯甲酸甲酯26b(0.4g， 0.70mmol)的1,4-二氧六环(15mL)和水(1.5mL)混合溶液中，室温(～20℃)下依次4-异丙基磺酰基苯硼酸(0.16g，0.70mmol),碳酸钾(0.29g，2.10mmol)和[1,1'-双(二苯基膦基)二茂铁]二氯化钯(0.10g，0.14mmol)。置换氮气三次后，反应液在95℃下搅拌三个小时。冷却至室温后，向反应液中加入乙酸乙酯(40mL)和水(40mL)。混合溶液用硅藻土过滤，所得溶液分液，水相用乙酸乙酯(20mL)萃取三次，合并的有机相浓缩并柱层析分离得到4-(5-(3-((叔丁氧羰基)氨基)-6-(4-(异丙基磺酰基)苯基)吡嗪-2-基)异噁唑-3-基)苯甲酸甲酯26c(0.33g)。
第四步
4-(5-(3-((叔丁氧羰基)氨基)-6-(4-(异丙基磺酰基)苯基)吡嗪-2-基)异噁唑-3-基)苯甲酸26d
Figure PCTCN2022111868-appb-000174
向4-(5-(3-((叔丁氧羰基)氨基)-6-(4-(异丙基磺酰基)苯基)吡嗪-2-基)异噁唑-3-基)苯甲酸甲酯26c(150mg，0.26mmol)的甲醇(5mL)溶液中，室温下加入氢氧化锂(33mg，0.78mmol)。反应液室温下搅拌1个小时之后，用盐酸水溶液(1M)调至酸性，再加入乙酸乙酯(20mL)萃取三次，合并的有机相浓缩得到4-(5-(3-((叔丁氧羰基)氨基)-6-(4-(异丙基磺酰基)苯基)吡嗪-2-基)异噁唑-3-基)苯甲酸26d(150mg)为粗产品并在未经进一步纯化下直接用于下一步骤。
第五步
叔丁基(3-(3-(4-(脒基氨甲酰基)苯基)异噁唑-5-基)-5-(4-(异丙基磺酰基)苯基)吡嗪-2-基)氨基甲酸酯26e
Figure PCTCN2022111868-appb-000175
向4-(5-(3-((叔丁氧羰基)氨基)-6-(4-(异丙基磺酰基)苯基)吡嗪-2-基)异噁唑-3-基)苯甲酸26d(75mg，0.013mmol)的N-甲基吡咯烷酮(3mL)溶液中，加入2-氯-1-甲基碘化吡啶鎓(45mg，0.17mmol)并在50℃下搅拌1个小时，然后依次加入1-(叔丁氧羰基)胍(28mg，0.17mmol)和N,N-二异丙基乙胺(66uL)。室温下搅拌16个小时。向反应液中加入乙酸乙酯(20mL)和水(20mL)，所得溶液分液，水相用乙酸乙酯(20mL)萃取三次，合并的有机相浓缩并经柱层析色谱分离得到叔丁基(3-(3-(4-(脒基氨甲酰基)苯基)异噁唑-5-基)-5-(4-(异丙基磺酰基)苯基)吡嗪-2-基)氨基甲酸酯26e(60mg)。
第六步
4-(5-(3-氨基-6-(4-(异丙基磺酰基)苯基)吡嗪-2-基)异噁唑-3-基)-N-脒基苯甲酰胺二盐酸盐26
向叔丁基(3-(3-(4-(脒基氨甲酰基)苯基)异噁唑-5-基)-5-(4-(异丙基磺酰基)苯基)吡嗪-2-基)氨基甲酸酯26e(60mg，0.10mmol)的乙酸乙酯(2mL)溶液中，加入盐酸乙酸乙酯混合溶液(4M，2mL)。反应液室温下搅拌1个小时后，反应液浓缩得到黄色固体4-(5-(3-氨基-6-(4-(异丙基磺酰基)苯基)吡嗪-2-基)异噁唑-3-基)-N-脒基苯甲酰胺二盐酸盐26(45mg)。
1H NMR(400MHz,DMSO-d 6):δ12.12(s,1H),8.96(s,1H),8.73(s,2H),8.56(s,2H),8.39–8.37(m,2H),8.34–8.32(m,2H),8.26–8.24(m,2H),7.95–7.93(m,3H),7.23(s,1H),3.50–3.43(m,1H),1.23–1.21(m,6H)。
MS实测值(ESI+)[(M+H)+]:506。
实施例27
1-(4-(5-(3-氨基)-6-(1,1-二氧基-2,3-二氢苯并[b]噻吩-5-基)吡嗪-2-基)异噁唑-3-基)苄基)胍二盐酸盐27
Figure PCTCN2022111868-appb-000176
第一步
5-溴苯并[b]噻吩1,1-二氧化物27a
Figure PCTCN2022111868-appb-000177
室温下，向5-溴苯并噻吩(1g，4.72mmol)在二氯甲烷(20mL)的溶液中加入间氯过氧苯甲酸(2.4g，14.16mmol)。将反应混合物在室温下搅拌6小时后。向反应体系中加入过量饱和亚硫酸钠水溶液淬灭(40mL)，有机相分离出，水相用二氯甲烷(30mL)萃取三次，合并的有机相用无水硫酸钠干燥，过滤，滤液减压浓缩并柱层析得到白色固体5-溴苯并[b]噻吩1,1-二氧化物27a(0.97g)。
第二步
5-溴-2,3-二氢苯并[b]噻吩1,1-二氧化物27b
Figure PCTCN2022111868-appb-000178
室温下，向5-溴苯并[b]噻吩1,1-二氧化物27a(0.5g，2.05mmol)在乙醇(8mL)的溶液中加入硼氢化钠(0.12g，3.07mmol)。将反应混合物在室温(～20℃)下搅拌6小时后。向反应体系中加入饱和氯化铵水溶液淬灭(4mL)后加入乙酸乙酯(40mL)和水(40mL)，有机相分离出，水相用乙酸乙酯(30mL)萃取三次，合并的有机相用无水硫酸钠干燥，过滤，滤液减压浓缩得到白色固体5-溴-2,3-二氢苯并[b]噻吩1,1-二氧化物27b(0.50g)为粗产品并在未经进一步纯化下直接用于下一步骤。
第三步
(1,1-二氧基-2,3-二氢苯并[b]噻吩-5-基)硼酸27c
Figure PCTCN2022111868-appb-000179
向5-溴-2,3-二氢苯并[b]噻吩1,1-二氧化物27b(500mg，2.03mmol)的N,N-二甲基甲酰胺(12mL) 混合溶液中，室温下依次加入双联频那醇硼酸酯(775mg，3.05mmol)，醋酸钾(497mg，0.51mmol)和[1,1'-双(二苯基膦基)二茂铁]二氯化钯(150mg，0.20mmol)。置换氮气三次后，反应液在80℃下搅拌三个小时。冷却至室温后，向反应液中加入乙酸乙酯(40mL)和水(40mL)。混合溶液用硅藻土过滤，所得溶液分液，水相用乙酸乙酯(20mL)萃取三次，合并的有机相浓缩得到(1,1-二氧基-2,3-二氢苯并[b]噻吩-5-基)硼酸27c(800mg)为粗产品并在未经进一步纯化下直接用于下一步骤。
第四步
叔丁基(叔丁氧羰基)(3-(3-(4-氰基苯基)异噁唑-5-基)-5-(1,1-二氧基-2,3-二氢苯并噻吩-5-基)吡嗪-2-基)氨基甲酸酯27d
Figure PCTCN2022111868-appb-000180
氮气保护下，向叔丁基(5-溴-3-(3-(4-氰基苯基)异噁唑-5-基)吡嗪-2-基)(叔丁氧羰基)氨基甲酸酯1b(0.6g，1.11mmol)的1,4-二氧六环(15mL)和水(1.5mL)混合溶液中，室温(～20℃)下依次(1,1-二氧基-2,3-二氢苯并噻吩-5-基)硼酸27c(0.65g，2.22mmol)，碳酸钾(0.44g，3.33mmol)和[1,1'-双(二苯基膦基)二茂铁]二氯化钯(0.16g，0.22mmol)。置换氮气三次后，反应液在95℃下搅拌三个小时。冷却至室温后，向反应液中加入乙酸乙酯(40mL)和水(40mL)。混合溶液用硅藻土过滤，所得溶液分液，水相用乙酸乙酯(20mL)萃取三次，合并的有机相浓缩并柱层析分离得到叔丁基(叔丁氧羰基)(3-(3-(4-氰基苯基)异噁唑-5-基)-5-(1,1-二氧基-2,3-二氢苯并噻吩-5-基)吡嗪-2-基)氨基甲酸酯27d(0.25g)。
第五步
叔丁基(叔丁氧羰基)(3-(3-(4-(氨基甲基)苯基)异噁唑-5-基)-5-(1,1-二氧基-2,3-二氢苯并噻吩-5-基)吡嗪-2-基)氨基甲酸酯27e
Figure PCTCN2022111868-appb-000181
向叔丁基(叔丁氧羰基)(3-(3-(4-氰基苯基)异噁唑-5-基)-5-(1,1-二氧基-2,3-二氢苯并噻吩-5-基)吡嗪-2-基)氨基甲酸酯27d(250mg，0.40mmol)的甲醇(5mL)溶液中，室温下依次加入六水合氯化镍(284mg，1.20mmol)和硼氢化钠(23mg，1.2mmol)。反应液室温下搅拌1个小时之后，用氯化铵饱和水溶液(2mL)淬灭。再加入乙酸乙酯(40mL)和饱和的碳酸氢钠水溶液(40mL)。混合溶液用硅藻土过滤后，滤液倒入分液漏斗。水相用乙酸乙酯(40mL)萃取三次，合并的有机相浓缩并柱层析分离得到叔丁基(叔丁氧羰基)(3-(3-(4-(氨基甲基)苯基)异噁唑-5-基)-5-(1,1-二氧基-2,3-二氢苯并噻吩-5-基)吡嗪-2-基)氨基甲酸酯27e(62mg)。
第六步
叔丁基(叔丁氧羰基)(5-(1,1-二氧基-2,3-二氢苯并[b]噻吩-5-基)-3-(3-(4-(胍甲基)苯基)异噁唑-5-基)吡嗪-2-基)氨基甲酸酯27f
Figure PCTCN2022111868-appb-000182
向叔丁基(叔丁氧羰基)(3-(3-(4-(氨基甲基)苯基)异噁唑-5-基)-5-(1,1-二氧基-2,3-二氢苯并噻吩-5-基)吡嗪-2-基)氨基甲酸酯27e(62mg，0.10mmol)的乙腈(3mL)溶液中，依次加入1H-吡唑-1-甲脒盐酸(17mg，0.11mmol)和N,N-二异丙基乙胺(32μL)。室温下搅拌16个小时。向反应液中加入乙酸乙酯(20mL)和水(20mL),所得溶液分液，水相用乙酸乙酯(20mL)萃取三次，合并的有机相浓缩并经柱层析色谱分离得到叔丁基(叔丁氧羰基)(5-(1,1-二氧基-2,3-二氢苯并[b]噻吩-5-基)-3-(3-(4-(胍甲基)苯基)异噁唑-5-基)吡嗪-2-基)氨基甲酸酯27f(25mg)。
第七步
1-(4-(5-(3-氨基)-6-(1,1-二氧基-2,3-二氢苯并[b]噻吩-5-基)吡嗪-2-基)异噁唑-3-基)苄基)胍二盐酸盐27
向叔丁基(叔丁氧羰基)(5-(1,1-二氧基-2,3-二氢苯并[b]噻吩-5-基)-3-(3-(4-(胍甲基)苯基)异噁唑-5-基)吡嗪-2-基)氨基甲酸酯27f(25mg，0.037mmol)的乙酸乙酯(2mL)溶液中，加入HCl的乙酸乙酯溶液(4M，2mL)。反应液室温下搅拌1个小时后，反应液浓缩得到黄色固体1-(4-(5-(3-氨基)-6-(1,1-二氧基-2,3-二氢苯并[b]噻吩-5-基)吡嗪-2-基)异噁唑-3-基)苄基)胍二盐酸盐27(14mg)。
1H NMR(400MHz,DMSO-d 6):δ8.92(s,1H),8.27–8.25(m,2H),8.19–8.16(m,1H),8.06–8.04(m,2H),7.84–7.82(m,1H),7.79(s,1H),7.51–7.49(m,2H),7.32(m,1H),7.19–7.17(m,3H),7.06(s,1H),4.50–4.48(m,2H),3.67–3.63(m,2H),3.46–3.43(m,2H)。
MS实测值(ESI +)[(M+H) +]:476。
实施例28
N-(4-(5-(3-氨基-6-(4-(异丙基磺酰基)苯基)吡嗪-2-基)异噁唑-3-基)苄基)乙脒二盐酸盐28
Figure PCTCN2022111868-appb-000183
第一步
(E)-4-(溴甲基)苯甲醛肟28a
Figure PCTCN2022111868-appb-000184
将4-(溴甲基)苯甲醛(500mg，2.51mmol)和羟胺盐酸盐(346.7mg，5.02mmol)按照类似于实施例1第一步的方法制备得白色固体(E)-4-(溴甲基)苯甲醛肟28a(500mg)。
第二步
叔丁基(5-溴-3-(3-(4-溴甲基苯基)异噁唑-5-基)吡嗪-2-基)(叔丁氧羰基)氨基甲酸酯28b
Figure PCTCN2022111868-appb-000185
将叔丁基(5-溴-3-乙炔基-吡嗪-2-基)(叔丁氧羰基)氨基甲酸酯(0.5g，1.26mmol)和(E)-4-(溴甲基)苯甲醛肟28a(0.40g，1.88mmol)按照类似于实施例1第二步的方法制备得到叔丁基(5-溴-3-(3-(4-溴甲基苯基)异噁唑-5-基)吡嗪-2-基)(叔丁氧羰基)氨基甲酸酯28b(350mg)。
第三步
叔丁基(3-(3-(4-乙脒基甲基苯基)异噁唑-5-基)-5-溴吡嗪-2-基)(叔丁氧羰基)氨基甲酸酯28c
Figure PCTCN2022111868-appb-000186
室温下，向叔丁基(5-溴-3-(3-(4-溴甲基苯基)异噁唑-5-基)吡嗪-2-基)(叔丁氧羰基)氨基甲酸酯28b(3ml)溶液中加入乙脒盐酸盐(46.4mg，0.49mmol)，碳酸钾(113.8mg，0.83mmol)和碘化钾(54.8mg，0.33mmol)，反应液在室温下搅拌3小时，向反应液中加入乙酸乙酯(40mL)和水(40mL)。有机相接着用水(20mL)洗三遍。有机相分离出并用无水硫酸钠干燥，过滤后浓缩并柱层析分离得到叔丁基(3-(3-(4-乙脒基甲基苯基)异噁唑-5-基)-5-溴吡嗪-2-基)(叔丁氧羰基)氨基甲酸酯28c(60mg)。
第四步
叔丁基(3-(3-(4-乙脒基甲基苯基)异噁唑-5-基)-5-(4-(异丙基磺酰基)苯基)吡嗪-2-基)(叔丁氧羰基)氨基甲酸酯28d
Figure PCTCN2022111868-appb-000187
将叔丁基(3-(3-(4-乙脒基甲基苯基)异噁唑-5-基)-5-溴吡嗪-2-基)(叔丁氧羰基)氨基甲酸酯28c(60mg，0.10mmol)和4-异丙基磺酰基苯硼酸(35.1mg，0.15mmol)按照类似于实施例1第三步的方法制备得到叔丁基(3-(3-(4-乙脒基甲基苯基)异噁唑-5-基)-5-(4-(异丙基磺酰基)苯基)吡嗪-2-基)(叔丁氧羰基)氨基甲酸酯28d(8mg)。
第五步
N-(4-(5-(3-氨基-6-(4-(异丙基磺酰基)苯基)吡嗪-2-基)异噁唑-3-基)苄基)乙脒二盐酸盐28
将叔丁基(3-(3-(4-乙脒基甲基苯基)异噁唑-5-基)-5-(4-(异丙基磺酰基)苯基)吡嗪-2-基)(叔丁氧羰基)氨基甲酸酯28d(8mg，0.011mmol)按照类似于实施例1第三步的方法制备得到黄色固体N-(4-(5-(3-氨基-6-(4-(异丙基磺酰基)苯基)吡嗪-2-基)异噁唑-3-基)苄基)乙脒二盐酸盐28(4mg)。
1H NMR(400MHz,DMSO-d 6):δ10.18(br.s,1H),9.45(s,1H),9.01(s,1H),8.98(s,1H),8.42–8.40(m,2H),8.09-8.07(m,2H),7.97–7.95(m,2H),7.85(s,1H),7.62–7.60(m,2H),7.48(brs,3H),7.35(brs,3H),7.22(brs,2H),4.63–4.62(m,2H),3.49–3.42(m,1H),2.29(s,3H),1.23–1.21(m,2H)。
MS实测值(ESI+)[(M+H)+]:491。
实施例29
N-(4-(5-(3-氨基-6-(4-(异丙基磺酰基)苯基)吡嗪-2-基)异噁唑-3-基)苯基)乙酰亚胺二盐酸盐29
Figure PCTCN2022111868-appb-000188
第一步
(E)-4-碘苯甲醛肟29a
Figure PCTCN2022111868-appb-000189
将4-碘苯甲醛(500mg,2.16mmol)和羟胺盐酸盐(223.6mg,3.24mmol)按照类似于实施例1第一步的方法制备得到白色固体(E)-4-碘苯甲醛肟29a(400mg)。
第二步
叔丁基(5-溴-3-(3-(4-碘苯基)异噁唑-5-基)吡嗪-2-基)(叔丁氧羰基)氨基甲酸酯29b
Figure PCTCN2022111868-appb-000190
将叔丁基(5-溴-3-乙炔基-吡嗪-2-基)(叔丁氧羰基)氨基甲酸酯(500mg，1.26mmol)和(E)-4-碘苯甲醛肟29a(463.6mg，1.88mmol)按照类似于实施例1第二步的方法制备得到叔丁基(5-溴-3-(3-(4-碘苯基)异噁唑-5-基)吡嗪-2-基)(叔丁氧羰基)氨基甲酸酯29b(400mg)。
第三步
叔丁基(叔丁氧羰基)(3-(3-(4-碘苯基)异噁唑-5-基)-5-(4-(异丙基砜基)苯基)吡嗪-2-基)氨基甲酸酯29c
Figure PCTCN2022111868-appb-000191
氮气保护下，将叔丁基(5-溴-3-(3-(4-碘苯基)异噁唑-5-基)吡嗪-2-基)(叔丁氧羰基)氨基甲酸酯29b(400.0mg，0.62mmol)和4-异丙基磺酰基苯硼酸(169.6mg，0.74mmol)按照类似于实施例1第三步的方法制备得到叔丁基(叔丁氧羰基)(3-(3-(4-碘苯基)异噁唑-5-基)-5-(4-(异丙基磺酰基)苯基)吡嗪-2-基)氨基甲酸酯29c(90mg)。
第四步
叔丁基(3-(3-(4-乙酰亚胺基苯基)异噁唑-5-基)-5-(4-(异丙基磺酰基)苯基)吡嗪-2-基)(叔丁氧羰基)氨基甲酸酯29d
Figure PCTCN2022111868-appb-000192
氮气保护下，向叔丁基(叔丁氧羰基)(3-(3-(4-碘苯基)异噁唑-5-基)-5-(4-(异丙基磺酰基)苯基)吡嗪-2-基)氨基甲酸酯29c(50.0mg，0.067mmol)的叔丁醇(2ml)溶液中依次加入乙脒盐酸盐(12.6mg，0.13mmol)，叔丁醇钠(19.3mmol，0.20mmol)，2-(二环己基膦)-3,6-二甲氧基-2'-4'-6'-三-I-丙基-11'-联苯(7.2mg,0.013mmol)和氯(2-二环己基膦基-3,6-二甲氧基-2',4',6'-三异丙基-1,1'-联苯)[2-(2-氨基乙基苯基)]钯(II)(9.7mg，0.013mmol)。反应液在95℃下搅拌五个小时。冷却至室温后，向反应液中加入乙酸乙酯(40mL)和水(40mL)。混合溶液用硅藻土过滤，所得溶液分液，水相用乙酸乙酯(20mL)萃取三次，合并的有机相浓缩并柱层析分离得到叔丁基(3-(3-(4-乙酰亚胺基苯基)异噁唑-5-基)-5-(4-(异丙基磺酰基)苯基)吡嗪-2-基)(叔丁氧羰基)氨基甲酸酯29d(8mg)。
第五步
N-(4-(5-(3-氨基-6-(4-(异丙基磺酰基)苯基)吡嗪-2-基)异噁唑-3-基)苯基)乙酰亚胺二盐酸盐29
将叔丁基(3-(3-(4-乙酰亚胺基苯基)异噁唑-5-基)-5-(4-(异丙基磺酰基)苯基)吡嗪-2-基)(叔丁氧羰基)氨基甲酸酯29d(8mg，0.012mmol)按照类似于实施例1第六步的方法制备得到N-(4-(5-(3-氨基-6-(4-(异丙基磺酰基)苯基)吡嗪-2-基)异噁唑-3-基)苯基)乙酰亚胺二盐酸盐29(4mg)。
1H NMR(400MHz,DMSO-d6):δ11.66(s,1H),9.7(br.s,1H),8.99(s,1H),8.78(s,1H),8.42–8.40(m,2H),8.22–8.20(m,2H),7.98–7.96(m,2H),7.90(s,1H),7.57–7.55(m,2H),7.27-7.20(m,2H),3.56-3.53(m,1H),2.42(s,3H),1.23-1.21(m,6H)。
MS实测值(ESI+)[(M+H)+]:477。
实施例30
1-(4-(5-(3-氨基-6-(4-(异丙基磺酰基)苯基)吡嗪-2-基)异噁唑-3-基)-3-(三氟甲基)苄基)胍二盐酸盐30
Figure PCTCN2022111868-appb-000193
第一步
4-甲酰基-3-(三氟甲基)苯甲腈30a
Figure PCTCN2022111868-appb-000194
氮气保护下，向4-溴-2-(三氟甲基)苯甲醛(2g，7.96mmol)的DMF(15ml)溶液中依次加入氰化锌(1.0g，8.8mmol)和四(三苯基膦)钯(459.7mg，0.40mmol)，反应液在90℃下搅拌四个小时。冷却至室温后，反应液浓缩，然后向反应液中加入乙酸乙酯(50mL)和水(50mL)，所得溶液分液，水相用乙酸乙酯(30mL)萃取两次，合并的有机相浓缩并柱层析分离得到4-甲酰基-3-(三氟甲基)苯甲腈30a(1.1g)。
第二步
(E)-4-((羟基亚氨基)甲基)-3-(三氟甲基)苯甲腈30b
Figure PCTCN2022111868-appb-000195
将4-甲酰基-3-(三氟甲基)苯甲腈30a(500mg，2.5mmol)和羟胺盐酸盐(223.6mg，3.24mmol)按照类似于实施例1第一步的方法制备得到白色固体(E)-4-((羟基亚氨基)甲基)-3-(三氟甲基)苯甲腈30b(400mg)。
第三步
叔丁基(5-溴-3-(3-(2-三氟甲基-4-氰基苯基)异噁唑-5-基)吡嗪-2-基)(叔丁氧羰基)氨基甲酸酯30c
Figure PCTCN2022111868-appb-000196
将叔丁基(5-溴-3-乙炔基-吡嗪-2-基)(叔丁氧羰基)氨基甲酸酯(500mg，1.26mmol)和(E)-4-((羟基亚氨基)甲基)-3-(三氟甲基)苯甲腈30b(400mg，1.87mmol)按照类似于实施例1第二步的方法制备得到叔丁基(5-溴-3-(3-(2-三氟甲基-4-氰基苯基)异噁唑-5-基)吡嗪-2-基)(叔丁氧羰基)氨基甲酸酯30c(300mg)。
第四步
叔丁基(叔丁氧羰基)(3-(3-(4-氰基-2-(三氟甲基)苯基)异噁唑-5-基)-5-(4-(异丙基磺酰基)苯基)吡嗪-2-基)氨基甲酸酯30d
Figure PCTCN2022111868-appb-000197
氮气保护下，将叔丁基(5-溴-3-(3-(2-三氟甲基-4-氰基苯基)异噁唑-5-基)吡嗪-2-基)(叔丁氧羰基)氨基甲酸酯30c(300.0mg，0.49mmol)和4-异丙基磺酰基苯硼酸(169.6mg，0.74mmol)按照类似于实施例1第三步的方法制备得到叔丁基(叔丁氧羰基)(3-(3-(4-氰基-2-(三氟甲基)苯基)异噁唑-5-基)-5-(4-(异丙基磺酰基)苯基)吡嗪-2-基)氨基甲酸酯30d(100mg)。
第五步
叔丁基(3-(3-(4-氨甲基-2-(三氟甲基)苯基)异噁唑-5-基)-5-(4-(异丙基磺酰基)苯基)吡嗪-2-基)(叔丁氧羰基)氨基甲酸酯30e
Figure PCTCN2022111868-appb-000198
将叔丁基(叔丁氧羰基)(3-(3-(4-氰基-2-(三氟甲基)苯基)异噁唑-5-基)-5-(4-(异丙基磺酰基)苯基)吡嗪-2-基)氨基甲酸酯30d(100mg，0.14mmol)按照类似于实施例1第四步的方法制备得到叔丁基(3-(3-(4-氨甲基-2-(三氟甲基)苯基)异噁唑-5-基)-5-(4-(异丙基磺酰基)苯基)吡嗪-2-基)(叔丁氧羰基)氨基甲酸酯30e(10 mg)。
第六步
叔丁基(叔丁氧羰基)(3-(3-(4-(胍基亚甲基)-2-(三氟甲基)苯基)异噁唑-5-基)-5-(4-(异丙基磺酰基)苯基)吡嗪-2-基)氨基甲酸酯30f
Figure PCTCN2022111868-appb-000199
将叔丁基(3-(3-(4-氨甲基-2-(三氟甲基)苯基)异噁唑-5-基)-5-(4-(异丙基磺酰基)苯基)吡嗪-2-基)(叔丁氧羰基)氨基甲酸酯30e(10mg，0.014mmol)和1H-吡唑-1-甲脒盐酸(7.5mg，0.051mmol)按照类似于实施例1第五步的方法制备得到叔丁基(叔丁氧羰基)(3-(3-(4-(胍基亚甲基)-2-(三氟甲基)苯基)异噁唑-5-基)-5-(4-(异丙基磺酰基)苯基)吡嗪-2-基)氨基甲酸酯30f(5mg)。
第七步
1-(4-(5-(3-氨基-6-(4-(异丙基磺酰基)苯基)吡嗪-2-基)异噁唑-3-基)-3-(三氟甲基)苄基)胍二盐酸盐30
将叔丁基(叔丁氧羰基)(3-(3-(4-(胍基亚甲基)-2-(三氟甲基)苯基)异噁唑-5-基)-5-(4-(异丙基磺酰基)苯基)吡嗪-2-基)氨基甲酸酯30f(5mg，0.006mmol)按照类似于实施例1第六步的方法制备得到1-(4-(5-(3-氨基-6-(4-(异丙基磺酰基)苯基)吡嗪-2-基)异噁唑-3-基)-3-(三氟甲基)苄基)胍二盐酸盐30(2mg)。
1H NMR(400MHz,DMSO-d 6):δ8.96(s,1H),8.36–8.34(m,2H),8.30-8.27(m,1H),8.18–8.16(m,1H),7.98–7.97(m,1H),7.94-7.92(m,2H),7.87-7.85(m,1H),7.79–7.77(m,1H),7.45(s,1H),7.32(s,1H),7.19(s,1H),7.06(s,1H),4.61–4.59(m,1H),3.55–3.53(m,1H),1.19–1.17(m,6H)。
MS实测值(ESI +)[(M+H) +]:560。
实施例31
5-(5-(3-氨基-6-(4-异丙基磺酰基)苯基)吡嗪-2-基)异噁唑-3-基)-异吲哚基-1-酮31
Figure PCTCN2022111868-appb-000200
第一步
(E)-1-氧杂异吲哚基-5-甲醛肟31a
Figure PCTCN2022111868-appb-000201
向1-氧杂异吲哚基-5-甲醛(0.1g，0.62mmol)和羟胺盐酸盐(0.052g，0.74mmol)按照类似于实施例1第一步的方法制备得到白色固体(E)-1-氧杂异吲哚基-5-甲醛肟31a(0.175g)，为粗产品并在未经进一步纯化下直接用于下一步骤。
第二步
叔丁基(5-溴-3-(3-(1-氧杂异吲哚-5-基)异噁唑-5-基)吡嗪-2-基)(叔丁氧羰基)氨基甲酸酯31b
Figure PCTCN2022111868-appb-000202
将(E)-1-氧杂异吲哚基-5-甲醛肟31a(175mg，0.62mmol)，二(叔丁基)(5-溴-3-乙炔基-2-吡嗪基)氨基甲酸酯(160mg，0.401mmol)和双三氟乙酰碘苯(0.26g，0.62mmol)按照类似于实施例1第二步的方法制备得到黄色固体叔丁基(5-溴-3-(3-(1-氧杂异吲哚-5-基)异噁唑-5-基)吡嗪-2-基)(叔丁氧羰基)氨基甲酸酯31b(120mg)。
第三步
叔丁基(叔丁氧羰基)(5-(4-(异丙基砜基)苯基)-3-(3-(1-氧杂异吲哚-5-基)异噁唑-5-基)吡嗪-2-基)氨基甲酸酯31c
Figure PCTCN2022111868-appb-000203
将叔丁基(5-溴-3-(3-(1-氧杂异吲哚-5-基)异噁唑-5-基)吡嗪-2-基)(叔丁氧羰基)氨基甲酸酯31b(120mg，0.209mmol)，4-异丙基磺酰基苯硼酸(48mg，0.209mmol)，碳酸钾(58mg，0.418mmol)和[1,1'-双(二苯基膦基)二茂铁]二氯化钯(31mg，0.042mmol)按照类似于实施例1第三步的方法制备得到淡黄色固体叔丁基(叔丁氧羰基)(5-(4-(异丙基磺酰基)苯基)-3-(3-(1-氧杂异吲哚-5-基)异噁唑-5-基)吡嗪-2-基)氨基甲酸酯31c(90mg)。
第四步
5-(5-(3-氨基-6-(4-异丙基磺酰基)苯基)吡嗪-2-基)异噁唑-3-基)-异吲哚基-1-酮31
将叔丁基(叔丁氧羰基)(5-(4-(异丙基磺酰基)苯基)-3-(3-(1-氧杂异吲哚-5-基)异噁唑-5-基)吡嗪-2-基)氨基甲酸酯31c(90mg，0.156mmol)和盐酸乙酸乙酯混合溶液(4M，2mL)按照类似于实施例1第六步的方法制备得到黄色固体5-(5-(3-氨基-6-(4-异丙基磺酰基)苯基)吡嗪-2-基)异噁唑-3-基)-异吲哚基-1-酮31(24.7mg)。
1H NMR(400MHz,DMSO-d 6):δ8.95(s,1H),8.72(s,1H),8.39–8.37(m,2H),8.24(s,1H),8.15–8.13(m,1H),7.95–7.93(m,2H),7.88–7.84(m,2H),7.20(s,2H),4.50(s,2H),3.49–3.43(m,1H),1.20–1.19(m,6H)。
MS实测值(ESI +)[(M+H) +]:476。
实施例32
5-(5-氨基-6-(3-(4-((甲基氨基)甲基)苯基)异恶唑-5-基)吡嗪-2-基)-3-氟-2,2-二甲基-2,3-二氢苯并[b]噻吩1,1-二氧化物32
Figure PCTCN2022111868-appb-000204
第一步
甲基-2-((4-溴苯基)硫基)乙酸酯32a
Figure PCTCN2022111868-appb-000205
室温下，向4-溴苯硫酚(5.88g，31.10mmol)在四氢呋喃(50mL)的溶液中加入溴乙酸甲酯(7.14g，46.65mmol)和三乙胺(6.29g，62.20mmol)。将反应混合物加热至70摄氏度下搅拌3小时后。向反应体系中加入水(100mL)和乙酸乙酯(100mL)，有机相分离出，水相用乙酸乙酯(50mL)萃取三次，合并的有机相用无水硫酸钠干燥，过滤，滤液减压浓缩并柱层析得到白色固体甲基-2-((4-溴苯基)硫基)乙酸酯32a(8.6g)。
第二步
2-((4-溴苯基)硫基)乙酸32b
Figure PCTCN2022111868-appb-000206
室温下，向甲基-2-((4-溴苯基)硫基)乙酸酯32a(8.12g，31.10mmol)在甲醇(60mL)和水(20mL)混合溶液中加入氢氧化钠(2.49g，62.19mmol)。将反应混合物在室温(～20℃)下搅拌12小时后。向反应体系中加入水(300mL)后，用2M盐酸水溶液调节pH至5～6，再加入乙酸乙酯(300mL)，有机相分离出，水相用乙酸乙酯(100mL)萃取三次，合并的有机相用无水硫酸钠干燥，过滤，滤液减压浓缩得到白色固体2-((4-溴苯基)硫基)乙酸32b(6.3g)为粗产品并在未经进一步纯化下直接用于下一步骤。
第三步
5-溴苯并[b]噻吩-3(2H)-酮32c
Figure PCTCN2022111868-appb-000207
将2-((4-溴苯基)硫基)乙酸(3.0g，12.14mmol)溶于三氟甲磺酸(15mL)，反应液在80℃下搅拌0.5小时后。冷却至室温后，将反应液滴入冰水中，然后加入乙酸乙酯(100mL)，有机相用饱和的碳酸氢钠水溶液(30mL)洗涤三次。所得的有机相浓缩并柱层析得到黄色固体5-溴苯并[b]噻吩-3(2H)-酮32c(1.5g)。
第四步
5-溴苯并[b]噻吩-3(2H)-酮-1,1-二氧化物32d
Figure PCTCN2022111868-appb-000208
将5-溴苯并[b]噻吩-3(2H)-酮32c(1.5g，6.55mmol)和间氯过氧苯甲酸(3.39g，19.64mmol)按照类似于实施例27第一步的方法制备得到黄色固体5-溴苯并[b]噻吩-3(2H)-酮-1,1-二氧化物32d(1.4g)。
第五步
5-溴-2,2-二甲基-苯并[b]噻吩-3(2H)-酮-1,1-二氧化物32e
Figure PCTCN2022111868-appb-000209
向5-溴苯并[b]噻吩-3(2H)-酮-1,1-二氧化物32d(400mg，1.53mmol)的四氢呋喃(12mL)溶液中，室温下依次加入1,5-二氮杂双环[4.3.0]壬-5-烯(950mg，7.66mmol)和碘甲烷(2.17g，15.32mmol)。反应液加热至70摄氏度下搅拌3个小时之后，加入乙酸乙酯(50mL)和水(50mL)，分出有机相，水相用乙酸乙酯(40mL)萃取三次，合并的有机相浓缩并柱层析分离得到白色固体5-溴-2,2-二甲基-苯并[b]噻吩-3(2H)-酮-1,1-二氧化物32e(380mg)。
第六步
5-溴-3-羟基-2,2-二甲基-2,3-二氢苯并[b]噻吩-1,1-二氧化物32f
Figure PCTCN2022111868-appb-000210
向5-溴-2,2-二甲基-苯并[b]噻吩-3(2H)-酮-1,1-二氧化物32e(210mg，0.73mmol)的甲醇(5mL)溶液中，加入硼氢化钠(137mg，3.63mmol)。室温下搅拌1个小时。反应液用水淬灭(1mL)后，再加入乙酸乙酯(20mL)和水(20mL),所得溶液分液，水相用乙酸乙酯(20mL)萃取三次，合并的有机相浓缩并经柱层析色谱分离得到白色固体5-溴-3-羟基-2,2-二甲基-2,3-二氢苯并[b]噻吩-1,1-二氧化物32f(150mg)。
第七步
5-溴-3-氟-2,2-二甲基-2,3-二氢苯并[b]噻吩-1,1-二氧化物32g
Figure PCTCN2022111868-appb-000211
零摄氏度下，向5-溴-3-羟基-2,2-二甲基-2,3-二氢苯并[b]噻吩-1,1-二氧化物32f(150mg，0.51mmol)的二氯甲烷(5mL)溶液中，加入二乙胺基三氟化硫(250mg，1.55mmol)。室温下搅拌1个小时。反应液用水淬灭(1mL)后，再加入二氯甲烷(20mL)和水(20mL)，所得溶液分液，水相用二氯甲烷(20mL)萃取三次，合并的有机相浓缩并经柱层析色谱分离得到白色固体5-溴-3-氟-2,2-二甲基-2,3-二氢苯并[b]噻吩-1,1-二氧化物32g(120mg)。
第八步
3-氟-2,2-二甲基-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂环戊硼烷-2-基)-2,3-二氢苯并[b]噻吩-1,1-二氧化物32h
Figure PCTCN2022111868-appb-000212
将5-溴-3-氟-2,2-二甲基-2,3-二氢苯并[b]噻吩-1,1-二氧化物32g(120mg，0.409mmol)，联硼酸频那醇酯(208mg，0.82mmol)，醋酸钾(80mg，0.82mmol)和[1,1'-双(二苯基膦基)二茂铁]二氯化钯(60mg，0.082mmol)按照类似于实施例27第三步的方法制备得到3-氟-2,2-二甲基-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂环戊硼烷-2-基)-2,3-二氢苯并[b]噻吩-1,1-二氧化物32h(230mg)为粗产品并在未经进一步纯化下直接用于下一步骤。
第九步
叔丁基(叔丁氧羰基)(3-(3-(4-(((叔丁氧羰基)氨基)甲基)苯基)异噁唑-5-基)-5-(3-氟-2,2-二甲基-1,1-二氧化-2,3-二氢苯并[b]噻吩-5-基)吡嗪-2-基)氨基酸甲酯32i
Figure PCTCN2022111868-appb-000213
将3-氟-2,2-二甲基-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂环戊硼烷-2-基)-2,3-二氢苯并[b]噻吩-1,1-二氧化物32h(270mg，0.409mmol)，3-氟-2,2-二甲基-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂环戊硼烷-2-基)-2,3-二氢苯并[b]噻吩-1,1-二氧化物(140mg，0.408mmol)，碳酸钾(113mg，0.82mmol)和[1,1'-双(二苯基膦基)二茂铁]二氯化钯(60mg，0.082mmol)按照类似于实施例27第四步的方法制备得到叔丁基(叔丁氧羰基)(3-(3-(4-(((叔丁氧羰基)氨基)甲基)苯基)异噁唑-5-基)-5-(3-氟-2,2-二甲基-1,1-二氧化-2,3-二氢苯并[b]噻吩-5-基)吡嗪-2-基)氨基酸甲酯32i(130mg)。
第十步
5-(5-氨基-6-(3-(4-((甲基氨基)甲基)苯基)异恶唑-5-基)吡嗪-2-基)-3-氟-2,2-二甲基-2,3-二氢苯并[b]噻吩
1,1-二氧化物32
将叔丁基(叔丁氧羰基)(3-(3-(4-(((叔丁氧羰基)氨基)甲基)苯基)异噁唑-5-基)-5-(3-氟-2,2-二甲基-1,1-二氧化-2,3-二氢苯并[b]噻吩-5-基)吡嗪-2-基)氨基酸甲酯32i(130mg，0.163mmol)和盐酸乙酸乙酯混合溶液(4M，2mL)按照类似于实施例1第六步的方法制备得到黄色固体5-(5-氨基-6-(3-(4-((甲基氨基)甲基)苯基)异恶唑-5-基)吡嗪-2-基)-3-氟-2,2-二甲基-2,3-二氢苯并[b]噻吩1,1-二氧化物32(57.2mg)。
1H NMR(400MHz,DMSO-d 6):δ8.99(s,1H),8.53–8.51(m,2H),8.02–7.98(m,3H),7.79(s,1H),7.56–7.54(m,2H),7.22(s,2H),6.06(s,0.5H),5.93(s,0.5H),3.82(s,2H),2.36(s,3H),1.50–1.49(m,3H),1.37(s,3H)。
MS实测值(ESI +)[(M+H) +]:494。
实施例33-1或实施例33-2
(R)-5-(5-氨基-6-(5-(4-((甲基氨基)亚甲基)苯基)-1,3,4-噁二唑-2-基)吡嗪-2-基)-3-氟-2,2-二甲基-2,3-二氢苯并[b]噻吩1,1-二氧化物33-1
或
(S)-5-(5-氨基-6-(5-(4-((甲基氨基)亚甲基)苯基)-1,3,4-噁二唑-2-基)吡嗪-2-基)-3-氟-2,2-二甲基-2,3-二氢苯并[b]噻吩1,1-二氧化物33-2
Figure PCTCN2022111868-appb-000214
第一步
(R)-5-溴-3-氟-2,2-二甲基-2,3-二氢苯并[b]噻吩-1,1-二氧化物33a-1
或
(S)-5-溴-3-氟-2,2-二甲基-2,3-二氢苯并[b]噻吩-1,1-二氧化物33a-2
Figure PCTCN2022111868-appb-000215
将5-溴-3-氟-2,2-二甲基-2,3-二氢苯并[b]噻吩-1,1-二氧化物32g(300mg，1.02mmol)经过SFC(仪器：SHIMADZU LC-30AD，柱：DAICEL AD-H，4.6mmI.D.*250mmL 5μm,流动相：CO 2/MeOH[0.1％NH 3(7M Solution in MeOH)]＝60/40，流速：2.5mL/min，波长：UV 214nM/254nM，温度：40℃)拆分得到33a-1或33a-2(144mg，保留时间：3.812min)。
第二步
(R)-3-氟-2,2-二甲基-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂环戊硼烷-2-基)-2,3-二氢苯并[b]噻吩-1,1-二氧化物33b-1
或
(S)-3-氟-2,2-二甲基-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂环戊硼烷-2-基)-2,3-二氢苯并[b]噻吩-1,1-二氧化物33b-2
Figure PCTCN2022111868-appb-000216
将33a-1或33a-2(85mg，0.289mmol，保留时间：3.812min)，联硼酸频那醇酯(147mg，0.58mmol)，醋酸钾(57mg，0.58mmol)和[1,1'-双(二苯基膦)二茂铁]二氯化钯(42mg，0.058mmol)按照类似于实施例27第三步的方法制备得到33b-1或33b-2(150mg)为粗产品并在未经进一步纯化下直接用于下一步骤。
第三步
3-氨基-6-溴吡嗪基-2-酰基肼33c
Figure PCTCN2022111868-appb-000217
室温下，向3-氨基-6-溴吡嗪基-2-羧酸甲酯(3.0g,12.93mmol)在乙醇(15mL)的溶液中加入水合肼(1.88mL，38.79mmol)。将反应混合物加热至80摄氏度下搅拌2小时后，反应液冷却后并浓缩并柱层析得到淡黄色油状物3-氨基-6-溴吡嗪基-2-酰基肼33c(2.7g)。
第四步
叔丁基(4-(2-(3-氨基-6-溴吡嗪-2-羧基)肼-1-羧基)苄基)(甲基)氨基甲酸酯33d
Figure PCTCN2022111868-appb-000218
室温下，向4-(((叔-丁氧羰基)(甲基)氨基)甲基)苯甲酸(500mg，1.88mmol)在N,N-二甲基甲酰胺(10mL)的溶液中加入3-氨基-6-溴吡嗪基-2-酰基肼33c(525mg，2.26mmol)，三乙胺(0.57mL，4.15mmol)和O-(7-氮杂苯并三氮唑-1-基)-N,N,N’,N’-四甲基脲六氟磷酸酯(726mg，2.26mmol)。反应混合物在室温下搅拌16小时后，向反应体系中加入水(50mL)和乙酸乙酯(50mL)，有机相分离出，水相用乙酸乙酯(50mL)萃取三次，合并的有机相用无水硫酸钠干燥，过滤，滤液减压浓缩并柱层析得到黄色油状物叔丁基(4-(2-(3-氨基-6-溴吡嗪-2-羧基)肼-1-羧基)苄基)(甲基)氨基甲酸酯33d(800mg)。
第五步
叔丁基(4-(5-(3-氨基-6-溴吡嗪-2-基)-1,3,4-噁二唑-2-基)苄基)(甲基)氨基甲酸酯33e
Figure PCTCN2022111868-appb-000219
室温下，向叔丁基(4-(2-(3-氨基-6-溴吡嗪-2-羧基)肼-1-羧基)苄基)(甲基)氨基甲酸酯33d(800mg，1.67 mmol)在无水乙腈(10mL)的溶液中加入二异丙基乙胺(0.87mL，5.01mmol)。二溴三苯基膦(915mg，2.17mmol)缓慢加入混合反应液中后，在室温下搅拌16小时。向反应体系中加入水(50mL)和乙酸乙酯(50mL)，有机相分离出，水相用乙酸乙酯(50mL)萃取三次，合并的有机相用无水硫酸钠干燥，过滤，滤液减压浓缩并柱层析得到白色固体叔丁基(4-(5-(3-氨基-6-溴吡嗪-2-基)-1,3,4-噁二唑-2-基)苄基)(甲基)氨基甲酸酯33e(330mg)。
第六步
叔丁基(R)-(4-(5-(3-氨基-6-(3-氟-2,2-二甲基-1,1-二氧-2,3-二氢苯并[b]噻吩-5-基)吡嗪-2-基)-1,3,4-噁二唑-2-基)苄基)(甲基)氨基甲酸酯33f-1
或
叔丁基(S)-(4-(5-(3-氨基-6-(3-氟-2,2-二甲基-1,1-二氧-2,3-二氢苯并[b]噻吩-5-基)吡嗪-2-基)-1,3,4-噁二唑-2-基)苄基)(甲基)氨基甲酸酯33f-2
Figure PCTCN2022111868-appb-000220
将叔丁基(4-(5-(3-氨基-6-溴吡嗪-2-基)-1,3,4-噁二唑-2-基)苄基)(甲基)氨基甲酸酯33e(130mg，0.282mmol)，33b-1或33b-2(96mg，0.281mmol)，碳酸钾(78mg，0.563mmol)和[1,1'-双(二苯基膦基)二茂铁]二氯化钯(42mg，0.056mmol)按照类似于实施例27第四步的方法制备得到标题产物33f-1或33f-2(100mg)。
第七步
(R)-5-(5-氨基-6-(5-(4-((甲基氨基)亚甲基)苯基)-1,3,4-噁二唑-2-基)吡嗪-2-基)-3-氟-2,2-二甲基-2,3-二氢苯并[b]噻吩1,1-二氧化物33-1
或
(S)-5-(5-氨基-6-(5-(4-((甲基氨基)亚甲基)苯基)-1,3,4-噁二唑-2-基)吡嗪-2-基)-3-氟-2,2-二甲基-2,3-二氢苯并[b]噻吩1,1-二氧化物33-2
将化合物33f-1或33f-2(100mg，0.168mmol)和盐酸乙酸乙酯混合溶液(4M，2mL)按照类似于实施例1第六步的方法制备得到黄色固体标题产物33-1或33-2(51.2mg)。
1H NMR(400MHz,DMSO-d 6):δ9.12(s,1H),8.56–8.53(m,2H),8.24–8.21(m,2H),8.07–8.05(m,1H),7.78–7.76(m,2H),6.11(s,0.5H),5.98(s,0.5H),4.16(s,2H),2.54(s,3H),1.51–1.50(m,3H),1.38(s,3H)。
MS实测值(ESI +)[(M+H) +]:495。
实施例34
5-(5-氨基-6-(5-(4-((甲基氨基)甲基)苯基)异噁唑-3-基)吡嗪-2-基)-3-氟-2,2-二甲基-2,3-二氢苯并[b]噻吩1,1-二氧化物34
Figure PCTCN2022111868-appb-000221
第一步
(E)-3-氨基-6-溴吡嗪-2-甲醛肟34a
Figure PCTCN2022111868-appb-000222
室温下，向3-氨基-6-溴吡嗪-2-甲醛(200mg，1.00mmol)在四氢呋喃(4mL)的溶液中加入羟胺盐酸盐(138mg，2.00mmol)。将反应混合物在室温下搅拌4小时后。向反应体系中加入水(10mL)，有机相分离出，水相用乙酸乙酯(10mL)萃取三次，合并的有机相用无水硫酸钠干燥，过滤，滤液减压浓缩得到白色固体(E)-3-氨基-6-溴吡嗪-2-甲醛肟34a(230mg)，为粗产品并在未经进一步纯化下直接用于下一步骤。
第二步
1-(4-乙炔基苯基)-N-甲基甲胺34b
Figure PCTCN2022111868-appb-000223
室温下，向4-乙炔基苯甲醛(1g，7.69mmol)在甲醇(10mL)的加入甲氨盐酸盐(572mg，8.46mmol)，氰基硼氢化钠(966mg，15.38mmol)和乙酸(50mg，0.77mmol)。反应混合物在室温下搅拌4小时后，向反应体系中加入水(50mL)和乙酸乙酯(50mL)，有机相分离出，水相用乙酸乙酯(50mL)萃取三次，合并的有机相用无水硫酸钠干燥，过滤，滤液减压浓缩并柱层析得到无色油状物1-(4-乙炔基苯基)-N-甲基甲胺34b(500mg)。
第三步
(4-乙炔基苄基)(甲基)氨基甲酸叔丁酯34c
Figure PCTCN2022111868-appb-000224
室温下，向1-(4-乙炔基苯基)-N-甲基甲胺34b(500mg，2.04mmol)在二氯甲烷(13mL)的溶液中加入三乙胺(413mg，4.08mmol)，二碳酸二叔丁酯(668mg，3.06mmol)。反应混合物在室温下搅拌4小时后，向反应体系中加入水(50mL)和二氯甲烷(50mL)，有机相分离出，水相用乙酸乙酯(50mL)萃取三次，合并的有机相用无水硫酸钠干燥，过滤，滤液减压浓缩并柱层析得到无色油状物(4-乙炔基苄基)(甲基)氨基甲酸叔丁酯34c(550mg)。
第四步
叔丁基(4-(3-(3-氨基-6-溴吡嗪-2-基)异噁唑-5-基)苄基)(甲基)氨基甲酸酯34d
Figure PCTCN2022111868-appb-000225
向(4-乙炔基苄基)(甲基)氨基甲酸叔丁酯34c(0.48g，1.20mmol)的甲醇(10mL)和水(2mL)的混合溶液中依次加入(E)-3-氨基-6-溴吡嗪-2-甲醛肟(0.135g，0.63mmol)和双三氟乙酰碘苯(0.404g，0.94mmol)，在室温下搅拌过夜。向反应液中加入乙酸乙酯(40mL)和水(40mL)。有机相用水(20mL)洗三遍。有机相分离出并用无水硫酸钠干燥，过滤后浓缩并柱层析分离得到叔丁基(4-(3-(3-氨基-6-溴吡嗪-2-基)异噁唑-5-基)苄基)(甲基)氨基甲酸酯34d(0.10g)。
第五步
叔丁基(4-(3-(3-氨基-6-(3-氟-2,2-二甲基-1,1-二氧基-2,3-二氢苯并[b]噻吩-5-基)吡嗪-2-基)异噁唑-5-基)苄基)(甲基)氨基甲酸酯34e
Figure PCTCN2022111868-appb-000226
将叔丁基(4-(3-(3-氨基-6-溴吡嗪-2-基)异噁唑-5-基)苄基)(甲基)氨基甲酸酯34d(100mg，0.169mmol)，3-氟-2,2-二甲基-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂环戊硼烷-2-基)-2,3-二氢苯并[b]噻吩-1,1-二氧化物32h(57mg，0.169mmol)，碳酸钾(69mg，0.507mmol)和[1,1'-双(二苯基膦基)二茂铁]二氯化钯(12mg，0.017mmol)按照类似于实施例27步第四步的方法制备得到叔丁基(4-(3-(3-氨基-6-(3-氟-2,2-二甲基-1,1-二氧基-2,3-二氢苯并[b]噻吩-5-基)吡嗪-2-基)异噁唑-5-基)苄基)(甲基)氨基甲酸酯34e(80mg)。
第五步
5-(5-氨基-6-(5-(4-((甲基氨基)甲基)苯基)异噁唑-3-基)吡嗪-2-基)-3-氟-2,2-二甲基-2,3-二氢苯并[b]噻吩1,1-二氧化物34
将叔丁基(4-(3-(3-氨基-6-(3-氟-2,2-二甲基-1,1-二氧基-2,3-二氢苯并[b]噻吩-5-基)吡嗪-2-基)异噁唑-5-基)苄基)(甲基)氨基甲酸酯34e(80mg，0.134mmol)和盐酸乙酸乙酯混合溶液(4M，2mL)按照类似于实施例1第六步的方法制备得到黄色固体5-(5-氨基-6-(5-(4-((甲基氨基)甲基)苯基)异噁唑-3-基)吡嗪-2-基)-3-氟-2,2-二甲基-2,3-二氢苯并[b]噻吩1,1-二氧化物34(31.7mg)。
1H NMR(400MHz,DMSO-d 6):δ9.12(s,1H),8.63–8.59(m,2H),8.02–8.00(m,3H),7.87(s,1H),7.57–7.55(m,2H),6.04(s,0.5H),5.91(s,0.5H),3.78(s,2H),2.32(s,3H),1.51–1.50(m,3H),1.38(s,3H)。
MS实测值(ESI +)[(M+H) +]:494。
实施例35-1或实施例35-2
(R)-5-(5-氨基-6-(3-(4-((甲基氨基)甲基)苯基)异噁唑-5-基)吡嗪-2-基)-3-氟-2,2-二甲基-2,3-二氢苯并[b]噻吩1,1-二氧化物35-1
或
(S)-5-(5-氨基-6-(3-(4-((甲基氨基)甲基)苯基)异噁唑-5-基)吡嗪-2-基)-3-氟-2,2-二甲基-2,3-二氢苯并[b]噻吩1,1-二氧化物35-2
Figure PCTCN2022111868-appb-000227
第一步
(5-(双(叔丁氧基羰基)氨基)-6-(3-(4-(((叔丁氧基羰基)(甲基)氨基)甲基)苯基)异噁唑-5-基)吡嗪-2-基)硼酸35a
Figure PCTCN2022111868-appb-000228
室温下，向叔丁基(5-溴-3-(3-(4-(((叔丁氧羰基)(甲基)氨基)甲基)苯基)异噁唑-5-基)吡嗪-2-基)(叔丁氧羰基)氨基甲酸酯2e(220mg，0.33mmol)的乙二醇二甲醚溶液(2mL)的溶液中加入双联频哪醇硼酸酯(101mg，0.40mmol)，醋酸钾(98mg，1.00mmol)和[1,1'-双(二苯基膦基)二茂铁]二氯化钯(24mg，0.03mmol)。将反应混合物在氮气保护下60℃搅拌3h后，向反应体系中加入水(10mL)，有机相分离出，水相用乙酸乙酯(10mL)萃取三次，合并的有机相用无水硫酸钠干燥，过滤，滤液减压浓缩得到黑色油状物(5-(双(叔丁氧基羰基)氨基)-6-(3-(4-(((叔丁氧基羰基)(甲基)氨基)甲基)苯基)异噁唑-5-基)吡嗪-2-基)硼酸35a(230mg)，为粗产品并在未经进一步纯化下直接用于下一步骤。
第二步
叔丁基(R)-(叔丁氧基羰基)(3-(3-(4-(((叔丁氧基羰基)(甲基)氨基)甲基)苯基)异噁唑-5-基)-5-(3-氟-2,2-二甲基-1,1-二氧化-2,3-二氢苯并[b]噻吩-5-基)吡嗪-2-基)氨基甲酸酯35b-1
或
叔丁基(S)-(叔丁氧基羰基)(3-(3-(4-(((叔丁氧基羰基)(甲基)氨基)甲基)苯基)异噁唑-5-基)-5-(3-氟-2,2-二甲基-1,1-二氧化-2,3-二氢苯并[b]噻吩-5-基)吡嗪-2-基)氨基甲酸酯35b-2
Figure PCTCN2022111868-appb-000229
室温下，向(5-(双(叔丁氧基羰基)氨基)-6-(3-(4-(((叔丁氧基羰基)(甲基)氨基)甲基)苯基)异噁唑-5-基)吡嗪-2-基)硼酸35a(213.7mg，0.34mmol)的1,4二氧六环(3mL)和水(0.6mL)溶液中加入化合物33a-1或33a-2(100mg，0.34mmol)，碳酸钾(94.3mg，0.68mmol)和[1,1'-双(二苯基膦基)二茂铁]二氯化钯(25mg，0.03mmol)。将反应混合物在氮气保护和60摄氏度下搅拌3h后，向反应体系中加入水(20mL)和乙酸乙酯(20mL)，有机相分离出，水相用乙酸乙酯(20mL)萃取三次，合并的有机相用无水硫酸钠干燥，过滤，滤液减压浓缩并柱层析得到棕色油状物35b-1或35b-2(120mg)
第三步
(R)-5-(5-氨基-6-(3-(4-((甲基氨基)甲基)苯基)异噁唑-5-基)吡嗪-2-基)-3-氟-2,2-二甲基-2,3-二氢苯并[b]噻吩1,1-二氧化物35-1
或
(S)-5-(5-氨基-6-(3-(4-((甲基氨基)甲基)苯基)异噁唑-5-基)吡嗪-2-基)-3-氟-2,2-二甲基-2,3-二氢苯并[b]噻吩1,1-二氧化物35-2
将化合物35b-1或35b-2(120mg，0.15mmol)和盐酸乙酸乙酯混合溶液(4M，2mL)按照类似于实施例1第六步的方法制备得到黄色固体标题产物35-1或35-2。
1H NMR(400MHz,DMSO-d 6):δ8.99(s,1H),8.54–8.51(m,2H),8.03–7.96(m,3H),7.79(s,1H),7.50(m,2H),7.24(s,2H)6.06(s,0.5H),5.93(s,0.5H),5.75(s,1H),3.73(s,2H),2.30(s,3H),1.50–1.49(m,3H),1.37(s,3H)。
MS实测值(ESI +)[(M+H) +]:494。
实施例36
5-(5-氨基-6-(5-(4-((1-甲基哌啶-4-基)氨基)甲基)苯基)-1,3,4-噁二唑-2-基)吡嗪-2-基)-3-氟-2,2-二甲基-2,3-二氢苯并[b]噻吩1,1-二氧化物36
Figure PCTCN2022111868-appb-000230
第一步
5-溴-3-(5-(4-(溴甲基)苯基)-1,3,4-噁二唑-2-基)吡嗪-2-胺36a
Figure PCTCN2022111868-appb-000231
室温下，向3-氨基-6-溴吡嗪-2-碳酰肼(1.294g，5.58mmol)的乙腈(20mL)中，加入4-(溴甲基)苯甲酸(1.20g，5.58mmol)和二溴三苯基膦(10.0g，22.321mmol)，在氮气保护下于25摄氏度下搅拌1小时后缓慢滴加二异丙基乙基胺(2.884g，22.321mmol)，滴毕，于30℃搅拌12h。反应结束后，加入水(100mL)和乙酸乙酯(100mL)，有机相分离出，水相用乙酸乙酯(50mL)萃取三次，合并的有 机相用无水硫酸钠干燥，过滤，滤液减压浓缩并柱层析得到黄色固体5-溴-3-(5-(4-(溴甲基)苯基)-1,3,4-噁二唑-2-基)吡嗪-2-胺36a(1.10g)。
第二步
5-溴-3-(5-(4-(((1-甲基哌啶-4-基)氨基)甲基)苯基)-1,3,4-噁二唑-2-基)吡嗪-2-胺36b
Figure PCTCN2022111868-appb-000232
室温下，5-溴-3-(5-(4-(溴甲基)苯基)-1,3,4-噁二唑-2-基)吡嗪-2-胺36a(500mg，1.22mmol)，1-甲基哌啶-4-胺(167mg，1.46mmol)和碳酸钠(387mg，3.65mmol)溶于四氢呋喃(10mL)中，混合液加热至60摄氏度搅拌3h后，加入水(50mL)和乙酸乙酯(50mL)，有机相分离出，水相用乙酸乙酯(50mL)萃取三次，合并的有机相用无水硫酸钠干燥，过滤，滤液减压浓缩并柱层析得到黄色固体5-溴-3-(5-(4-(((1-甲基哌啶-4-基)氨基)甲基)苯基)-1,3,4-噁二唑-2-基)吡嗪-2-胺36b(300mg)。
第三步
5-(5-氨基-6-(5-(4-((1-甲基哌啶-4-基)氨基)甲基)苯基)-1,3,4-噁二唑-2-基)吡嗪-2-基)-3-氟-2,2-二甲基-2,3-二氢苯并[b]噻吩1,1-二氧化物36
将5-溴-3-(5-(4-(((1-甲基哌啶-4-基)氨基)甲基)苯基)-1,3,4-噁二唑-2-基)吡嗪-2-胺36b(120mg，0.27mmol)，1-甲基哌啶-4-胺，3-氟-2,2-二甲基-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂环戊硼烷-2-基)-2,3-二氢苯并[b]噻吩-1,1-二氧化物32h(96mg，0.28mmol)，碳酸钾(112mg，0.81mmol)和[1,1'-双(二苯基膦基)二茂铁]二氯化钯(20mg，0.03mmol)按照类似于实施例27第四步的方法制备得到5-(5-氨基-6-(5-(4-((1-甲基哌啶-4-基)氨基)甲基)苯基)-1,3,4-噁二唑-2-基)吡嗪-2-基)-3-氟-2,2-二甲基-2,3-二氢苯并[b]噻吩1,1-二氧化物36(18.68mg)。
1H NMR(400MHz,DMSO-d 6):δ9.10(s,1H),8.55–8.52(m,2H),8.10–8.04(m,3H),7.65–7.63(m,2H),6.11(s,0.5H),5.98(s,0.5H),3.84(s,2H),2.70–2.67(m,3H),2.34–2.32(m,2H),2.15(s,3H),1.83–1.87(m,4H),1.50(m,3H),1.38(s,3H)。
MS实测值(ESI +)[(M+H) +]:578。
实施例37
5-(5-氨基-6-(5-(4-((甲基氨基)甲基)苯基)-1,3,4-噻二唑-2-基)吡嗪-2-基)-3-氟-2,2-二甲基-2,3-二氢苯并[b]噻吩1,1-二氧化物37
Figure PCTCN2022111868-appb-000233
第一步
(4-(肼羰基)苄基)(甲基)氨基甲酸叔丁酯37a
Figure PCTCN2022111868-appb-000234
室温下，向4-(((叔丁氧基羰基)(甲基)氨基)甲基)苯甲酸甲酯(3.0g，10.75mmol)在乙醇(15mL)的溶液中加入水合肼(1.57mL，32.24mmol)。将反应混合物加热至80摄氏度下搅拌2小时后，反应液冷却后浓缩并柱层析得到淡黄色油状物(4-(肼羰基)苄基)(甲基)氨基甲酸叔丁酯37a(2.7g)。
第二步
2-(4-(((叔丁氧基羰基)(甲基)氨基)甲基)苯甲酰基)肼-1-羧酸叔丁酯37b
Figure PCTCN2022111868-appb-000235
室温下将(4-(肼羰基)苄基)(甲基)氨基甲酸叔丁酯37a(2.5g，8.9mmol)溶于二氯甲烷(20mL)中，在氮气保护室温条件下，滴加二碳酸二叔丁酯(3.85g，17.83mmol)，滴毕搅拌12h。反应结束后向反应体系中加入水(20mL)和乙酸乙酯(20mL)，有机相分离出，水相用乙酸乙酯(50mL)萃取三次，合并的有机相用无水硫酸钠干燥，过滤，滤液减压浓缩并柱层析得到无色油状物2-(4-(((叔丁氧基羰基)(甲基)氨基)甲基)苯甲酰基)肼-1-羧酸叔丁酯37b(2.5g)。
第三步
2-(4-(((叔丁氧基羰基)(甲基)氨基)甲基)苯基硫代羰基)肼-1-羧酸叔丁酯37c
Figure PCTCN2022111868-appb-000236
在零摄氏度下，将2-(4-(((叔丁氧基羰基)(甲基)氨基)甲基)苯甲酰基)肼-1-羧酸叔丁酯37b(2.5g，6.25mmol)和劳森试剂(10.1g，25.12mmol)溶于甲苯(15mL)中，在氮气保护下于100℃搅拌12h。反应结束后向体系中加入水(10mL)淬灭，加入水(50mL)和乙酸乙酯(50mL)，有机相分离出，水相用乙酸乙酯(50mL)萃取三次，合并的有机相用无水硫酸钠干燥，过滤，滤液减压浓缩并柱层析得到黄色固体2-(4-(((叔丁氧基羰基)(甲基)氨基)甲基)苯基硫代羰基)肼-1-羧酸叔丁酯37c(2g)。
第四步
4-((甲氨基)甲基)苯并硫代酰肼37d
Figure PCTCN2022111868-appb-000237
室温下将2-(4-(((叔丁氧基羰基)(甲基)氨基)甲基)苯基硫代羰基)肼-1-羧酸叔丁酯37c(2.0g，5.031mmol)溶于MeOH(10mL)中，加入盐酸乙酸乙酯混合溶液(4M，2mL)，将反应液在氮气保护下于25摄氏度搅拌2h，反应结束后将反应液减压浓缩得到黄色油状物叔丁基4-((甲氨基)甲基)苯并硫代酰肼37d粗品 (650mg)直接用于下一步反应。
第五步
5-溴-3-(5-(4-((甲基氨基)甲基)苯基)-1,3,4-噻二唑-2-基)吡嗪-2-胺37e
Figure PCTCN2022111868-appb-000238
室温下，向4-((甲氨基)甲基)苯并硫代酰肼37d(500mg，2.56mmol)的无水乙腈(10mL)的溶液中加入二异丙基乙胺(1.985g，15.36mmol)。二溴三苯基膦(4.860g，10.24mmol)缓慢加入混合反应液中后，在室温下搅拌48小时。向反应体系中加入水(50mL)和乙酸乙酯(50mL)，有机相分离出，水相用乙酸乙酯(50mL)萃取三次，合并的有机相用无水硫酸钠干燥，过滤，滤液减压浓缩并柱层析得到黄色固体5-溴-3-(5-(4-((甲基氨基)甲基)苯基)-1,3,4-噻二唑-2-基)吡嗪-2-胺37e(200mg)。
第六步
5-(5-氨基-6-(5-(4-((甲基氨基)甲基)苯基)-1,3,4-噻二唑-2-基)吡嗪-2-基)-3-氟-2,2-二甲基-2,3-二氢苯并[b]噻吩1,1-二氧化物37
将5-溴-3-(5-(4-((甲基氨基)甲基)苯基)-1,3,4-噻二唑-2-基)吡嗪-2-胺37e(200mg，0.53mmol)3-氟-2,2-二甲基-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂环戊硼烷-2-基)-2,3-二氢苯并[b]噻吩-1,1-二氧化物32h(216mg，0.64mmol)，碳酸钠(168mg，1.59mmol)和四(三苯基膦)钯(61mg，0.053mmol)，混合物在微波150℃下反应30min。反应结束后，旋干，经柱层析纯化得到黄色固体5-(5-氨基-6-(5-(4-((甲基氨基)甲基)苯基)-1,3,4-噻二唑-2-基)吡嗪-2-基)-3-氟-2,2-二甲基-2,3-二氢苯并[b]噻吩1,1-二氧化物37(20.26mg)。
1H NMR(400MHz,DMSO-d 6):δ9.06(s,1H),8.48–8.45(m,2H),8.07–8.05(m,5H),7.56–7.54(m,2H),6.09(s,0.5H),5.96(s,0.5H),3.77(s,2H),2.34(s,3H),1.50–1.49(m,3H),1.38(s,3H)。
MS实测值(ESI +)[(M+H) +]:511。
实施例38-1或实施例38-2
(R)-5-(5-氨基-6-(3-(4-((甲基氨基)甲基)苯基)异噁唑-5-基-4-氘)吡嗪-2-基)-3-氟-2,2-二甲基-2,3-二氢苯并[b]噻吩1,1-二氧化物38-1
或
(S)-5-(5-氨基-6-(3-(4-((甲基氨基)甲基)苯基)异噁唑-5-基-4-氘)吡嗪-2-基)-3-氟-2,2-二甲基-2,3-二氢苯并[b]噻吩1,1-二氧化物38-2
Figure PCTCN2022111868-appb-000239
第一步
(5-溴-3-(氘代乙炔基)吡嗪-2-基)氨基甲酸叔丁酯38a
Figure PCTCN2022111868-appb-000240
将叔丁基(5-溴-3-乙炔基-2-吡嗪基)(叔丁氧羰基)氨基甲酸酯(1g，3.3mmol)溶于氘代甲醇溶液(10mL)中，混合液在氮气保护下加热至70℃搅拌48小时。反应结束后，将反应液直接旋干得到粗棕色固体(5-溴-3-(氘代乙炔基)吡嗪-2-基)氨基甲酸叔丁酯38a(0.7g)，为粗产品并在未经进一步纯化下直接用于下一步骤。
第二步
(4-(5-(6-溴-3-((叔丁氧基羰基)氨基)吡嗪-2-基)异噁唑-3-基-4-氘)苄基)(甲基)氨基甲酸叔丁酯38b
Figure PCTCN2022111868-appb-000241
向(5-溴-3-(氘代乙炔基)吡嗪-2-基)氨基甲酸叔丁酯38a(500mg，1.25mmol)的甲醇(12mL)和水(2.4mL)的混合溶液中依次加入(E)-(4-((羟基亚氨基)甲基)苄基)(甲基)氨基甲酸叔丁酯(332mg，1.25mmol)和双三氟乙酰碘苯(646.3mg，1.50mmol)，在室温下搅拌过夜。向反应液中加入乙酸乙酯(40mL)和水(40mL)。有机相用水(20mL)洗三遍。有机相分离出并用无水硫酸钠干燥，过滤后浓缩并柱层析分离得到(4-(5-(6-溴-3-((叔丁氧基羰基)氨基)吡嗪-2-基)异噁唑-3-基-4-氘)苄基)(甲基)氨基甲酸叔丁酯38b(800mg)。
第三步
叔丁基(4-(5-(3-((叔丁氧羰基)氨基)-6-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧苯甲醛-2-基)吡嗪-2-基)异噁唑-3-基-4-氘)苄基)(甲基)氨基甲酸酯38c
Figure PCTCN2022111868-appb-000242
室温下，向(4-(5-(6-溴-3-((叔丁氧基羰基)氨基)吡嗪-2-基)异噁唑-3-基-4-氘)苄基)(甲基)氨基甲酸叔丁酯38b(100mg，0.18mmol)的乙二醇二甲醚溶液(2mL)的溶液中加入双联频哪醇硼酸酯(54mg，0.21mmol)，醋酸钾(52mg，0.53mmol)和[1,1'-双(二苯基膦基)二茂铁]二氯化钯(13mg，0.02mmol)。将反应混合物在氮气保护下60摄氏度下搅拌3h后，向反应体系中加入水(10mL)，有机相分离出，水相用乙酸乙酯(10mL)萃取三次，合并的有机相用无水硫酸钠干燥，过滤，滤液减压浓缩得到黑色油状物叔丁基(4-(5-(3-((叔丁氧羰基)氨基)-6-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧苯甲醛-2-基)吡嗪-2-基)异噁唑-3-基-4-氘)苄基)(甲基)氨基甲酸酯38c(180mg)为粗产品并在未经进一步纯化下直接用于下一步骤。
第四步
叔丁基(R)-(4-(5-(3-((叔丁氧羰基)氨基)-6-(3-氟-2,2-二甲基-1,1-二氧基-2,3-二氢苯并【b】噻吩-5-基)吡嗪-2-基)异噁唑-3-基-4-氘)苄基(甲基)氨基甲酸酯38d-1
或
叔丁基(S)-(4-(5-(3-((叔丁氧羰基)氨基)-6-(3-氟-2,2-二甲基-1,1-二氧基-2,3-二氢苯并【b】噻吩-5-基)吡嗪-2-基)异噁唑-3-基-4-氘)苄基(甲基)氨基甲酸酯38d-2
Figure PCTCN2022111868-appb-000243
向叔丁基(4-(5-(3-((叔丁氧羰基)氨基)-6-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧苯甲醛-2-基)吡嗪-2-基)异噁唑-3-基-4-氘)苄基)(甲基)氨基甲酸酯38c(180mg，0.34mmol)的1,4二氧六环(3mL)和水(0.6mL)溶液中加入33a-1或33a-2(105mg，0.36mmol)，碳酸钾(142mg，1.02mmol)和[1,1'-双(二苯基膦基)二茂铁]二氯化钯(25mg，0.03mmol)。将反应混合物在氮气保护下100摄氏度下搅拌3h后，向反应体系中加入水(20mL)和乙酸乙酯(20mL)，有机相分离出，水相用乙酸乙酯(20mL)萃取三次，合并的有机相用无水硫酸钠干燥，过滤，滤液减压浓缩并柱层析得到棕色油状物38d-1或38d-2(120mg)。
第五步
(R)-5-(5-氨基-6-(3-(4-((甲基氨基)甲基)苯基)异噁唑-5-基-4-氘)吡嗪-2-基)-3-氟-2,2-二甲基-2,3-二氢苯并[b]噻吩1,1-二氧化物38-1
或
(S)-5-(5-氨基-6-(3-(4-((甲基氨基)甲基)苯基)异噁唑-5-基-4-氘)吡嗪-2-基)-3-氟-2,2-二甲基-2,3-二氢苯并[b]噻吩1,1-二氧化物38-2
将化合物38d-1或38d-2(120mg，0.17mmol)和盐酸乙酸乙酯混合溶液(4M，2mL)按照类似于实施例1第六步的方法制备得到黄色固体标题化合物38-1或38-1(66.12mg)。
1H NMR(400MHz,DMSO-d 6):δ8.99(s,1H),8.53–8.51(m,2H),8.01–7.99(m,3H),7.56–7.54(m,2H),7.24(s,2H),6.06(s,0.5H),5.93(s,0.5H),3.84(s,2H),2.37(s,3H),1.50–1.49(m,3H),1.37(s,3H)。
MS实测值(ESI +)[(M+H) +]:495。
生物学评价
以下具体描述了生物学实施数据，以进一步阐述本公开技术方案。
测试例1：ATR酶活性抑制试验
使用HTRF(均相时间分辨荧光，Homogeneous Time-Resolved Fluorescence)试验筛选化合物抑制ATR激酶的能力。在反应体系中，ATR将底物p53磷酸化后加入anti-phospho-p53-Eu作为能量供体能与p53上的磷酸化位点特异性结合，加入anti-GST-d2作为能量受体与p53上携带的GST标签特异性结合。使用一定波长的激光(340nm)激发能量供体能发射出615nm波长的发射光，供体与受体之间发生能量转移，使得能量受体发射出665nm波长的发射光。使用读板机对两个发射光进行检测并求出665nm与615nm两种信号的比值，通过作图和计算即可求出待测样品的IC 50。
配置实验所需的各类缓冲液体系：
1.配置含25mM HEPES(Gibco,Cat#15630-080)，5mM DTT(Sigma,Cat#D0632-10G)，10mM  MnCl 2(Sigma,Cat#7773-01-5)，5mM DTT(Sigma,Cat#D0632-10G)，1mg/mL BSA(Sigma,Cat#B2064-50G)，0.01％Brij35(Sigma,Cat#9002-92-0)，1％Glycerol(Sigma,Cat#G5516-500ML)以及H 2O的ATR反应缓冲液。使用配置好的ATR缓冲液将全长的ATR酶(eurofins,Cat#14-953M)稀释至60nM。
2.制备含80nM p53(eurofins,Cat#14-952M)以及300nM ATP(Sigma,Cat#R0441)的反应底物。
3.制备检测液:HTRF detection buffer(Cisbio,Cat#62SDBRDF)将anti-phospho-p53-Eu cryptate(Cisbio,Cat#61P08KA)和anti-GST-d2(Cisbio,Cat#61GSTDLB)各稀释至1unit。
粉末状化合物以10mM的母液浓度溶解于DMSO。待测化合物从1μM终浓度开始用DMSO三倍稀释10个浓度后加入384孔板中，每孔10.05μL(含0.498％DMSO)。相应每孔加入5μLATR，25℃孵育10分钟后，加入5μL反应底物。25℃孵育90分钟后加入10μL检测液(Detection solution)。反应过夜，在Envision 2104Multilabel Reader上读取665/615nm数据，通过XLfit软件四参数罗吉斯回归方程作出化合物抑制曲线，计算化合物抑制率。
下表1显示了本申请中公开的化合物对ATR酶的相对抑制值：
表1化合物对ATR酶的相对抑制值
实施例编号 IC 50(nM)
实施例1 0.97
实施例2 2.79
实施例3 1.60
实施例4 0.83
实施例5 2.32
实施例6 2.90
实施例7 1.04
实施例8 3.64
实施例9 1.83
实施例10 1.75
实施例11 0.82
实施例12 2.53
实施例13 1.68
实施例14 1.42
实施例15 2.00
实施例16 9.74
实施例17 0.93
实施例18 1.16
实施例19 1.26
实施例20 1.81
实施例21 1.31
实施例22 1.21
实施例23 0.70
实施例24 1.08
实施例25 1.98
实施例26 2.06
实施例27 0.75
实施例28 1.29
实施例29 3.12
实施例30 3.35
实施例31 4.00
实施例32 2.09
实施例33-1或33-2 0.83
实施例34 0.92
实施例35-1或35-2 0.41
实施例36 0.57
实施例37 0.77
实施例38-1或38-2 0.75
VX-970(Berzosertib) 1.94
结论：分析以上实例数据，我们的化合物对ATR的抑制能力与VX-970持平或者更优。
测试例2：NCI-H23皮下移植瘤模型测试化合物的体内药效学作用
一、实验方法：
1、细胞培养：人肺癌NCI-H23细胞(ATCC，货号：CRL-5800)体外单层培养，培养条件为RPMI 1640培养基中加10％胎牛血清，1％青霉素/链霉素/两性霉素B，37℃ 5％CO 2孵箱培养。一周两次用胰酶-EDTA进行常规消化处理传代。当细胞饱和度为80％-90％，数量到达要求时，收取细胞，计数，接种。
2、动物：CB.17/SCID小鼠，雌性，6-8周龄，体重18-22克。共需84只。由北京维通利华实验动物技术有限公司或同等资质供应商提供。
3、测试化合物信息如下表2所示：
表2：测试化合物信息
测试化合物 货号/纯度
Cisplatin TCI/D3371-100MG
VX-970 99.68％
实施例33-1或33-2 99.73％
实施例38-1或38-2 99.12％
4、肿瘤接种：将0.2mL(10×10 6个)NCI-H23细胞(加基质胶，体积比为1:1)皮下接种于每只小鼠的右后背，肿瘤平均体积达到约200mm 3时开始分组给药。实验分组和给药方案见下表3。给药前称重动物，测量瘤体积。根据瘤体积随机分组(随机区组设计)。
表3：动物实验分组和给药
Figure PCTCN2022111868-appb-000244
二、实验指标：
1、实验指标是考察肿瘤生长是否被抑制、延缓或治愈。每周三次用游标卡尺测量肿瘤直径。
2、肿瘤体积的计算公式为：V＝0.5a×b 2，a和b分别表示肿瘤的长径和短径。
3、化合物的抑瘤疗效用TGI(％)和Tumor change(％)评价。
4、TGI(％)，反映肿瘤生长抑制率。TGI(％)的计算：TGI(％)＝[1-(某处理组给药结束时平均瘤体积－该处理组开始给药时平均瘤体积)/(溶剂对照组治疗结束时平均瘤体积－溶剂对照组开始治疗时平均瘤体积)]×100％。TGI(％)：大于100，给药后小鼠肿瘤不在增长，有抑制。
5、Tumor change(％)的计算：Tumor change(％)＝(某处理组给药结束时平均瘤体积－该处理组开始给药时平均瘤体积)/该处理组开始给药时平均瘤体积×100％。Tumor change(％)：小于0，给药后小鼠肿瘤不在增长，有抑制。
6、数据分析：T检验用于两组间比较。p<0.05认为有显著性差异。
三、实验结果：
给药后，Cisplatin+VX-970组、Cisplatin+实施例33-1或33-2组和Cisplatin+实施例38-1或38-2组小鼠体重具有下降，但各组间体重下降无差异，如图1所示(注：图1中下方黑色箭头ATR激酶抑制剂给药，上方灰色箭头顺铂给药)。给药后，各组瘤体积与给药前相比均有下降趋势，如图2和图3所示，与Cisplatin+VX-970组相比，Cisplatin+实施例33-1或33-2组和Cisplatin+实施例38-1或38-2组瘤体积下降更明显，T检验，p<0.05，说明实施例33-1或33-2和实施例38-1或38-2分别与Cisplatin联合用药后，抑制肿瘤生长的效果比VX-970联合Cisplatin用药更佳。
给药后14天，Cisplatin+VX-970组为Tumor change(％)为-12％，TGI(％)为128％；Cisplatin+实施例33-1或33-2组Tumor change(％)为-66％，TGI(％)为245％；Cisplatin+实施例38-1或38-2组Tumor change(％)为-29％，TGI(％)为159％(表4)。
表4 TGI(％)和Tumor change(％)
Figure PCTCN2022111868-appb-000245
应当理解，以上实施例均为示例性的，不用于包含权利要求所包含的所有可能的实施方式。在不脱离本公开的范围的情况下，还可以在以上实施例的基础上做出各种变形和改变。同样的，也可以对以上实施例的各个技术特征进行任意组合，以形成可能没有被明确描述的本公开的另外的实施例。因此，上述实施例仅表达了本公开的几种实施方式，不对本公开专利的保护范围进行限制。

Claims (27)

  1. 式Ⅰ所示的化合物或其药学上可接受的盐、酯、异构体、溶剂化物、前药或同位素标记物：
    Figure PCTCN2022111868-appb-100001
    其中：
    环A、环B和环C分别为6至10元芳基或5至10元杂芳基；
    R 1选自氢、氘、氰基、卤素、以及取代或未取代的羟基、氨基、C 1-6烷基、C 1-6烷氧基、3至7元环烷基、3至7元杂环基、胍基、脲基、酰胺基、氨基磺酰胺基、磺酰胺基和HN-C(＝NH)-C 1-6烷基；
    R 2和R 5选自氢、氘、卤素、C 1-6烷基、氨基和C 1-6烷氧基；
    或者R 1和R 2与它们所连接的原子一起形成包含1至3个选自氧、氮和硫原子的5至6元杂芳基或杂环基，所述5至6元杂芳基或杂环基的环上有0或1个亚甲基可任意被-C(＝O)-或-C(＝NR 7)-替代；
    若存在，每一个R 3各自独立地选自氢、氘、卤素、C 1-6烷基和被选自氰基、氨基、羟基、卤素、C 1-6烷基和C 1-6烷氧基的取代基所取代的C 1-6烷基；
    R 4选自氢、氘、C 1-6烷基、3至7元环烷基、3至7元杂环基、C 1-6烷基氨基和(C 1-3烷基) 2氨基；
    或者R 4和R 5与它们所连接的原子一起形成包含1至3个选自氧、氮和硫的5至7元杂环基，所述5至7元杂环基任选地被选自氘、羟基、C 1-6烷基、卤素、C 1-6烷氧基和C 1-6烷基氨基的取代基所取代；环上有1至3个亚甲基可任意被-SO 2-、-SO(＝NR 7)-、-SO 2NH-、-CO-、-C(＝O)NH-、C 1-6烷基氨基或3至6元环烷基氨基替代；所述C 1-6烷基氨基或者3至6元环烷基氨基，其中有0至2个亚甲基可以任意被氧、氮、硫或C 1-3烷基氨基所替代；
    若存在，每一个R 6各自独立地选自氢、氘、卤素、氨基、C 1-6烷氧基、C 1-6烷基和被选自氰基、氨基、羟基、卤素、C 1-6烷基和C 1-6烷氧基的取代基所取代的C 1-6烷基；
    Q 1选自C 1-6亚烷基、-CO-、氨基、-SO-、-SO 2-、-C(＝NR 7)-和3至7元杂环基，其中C 1-6亚烷基中的0至4个亚甲基可任意被氨基、-CO-、-SO-、-SO 2或-C(＝NR 7)-替代；
    Q 2选自-SO 2-、SO、-SO(＝NR 7)-、-SO 2NR 7-和-CO-；
    每一个R 7各自独立地选自氢、氘、C 1-6烷基、氰基、3至7元环烷基、3至7元杂环基、C 1-6烷氧基、C 1-6烷基氨基和被选自氰基、氨基、羟基、卤素、C 1-6烷基和C 1-6烷氧基的取代基所取代的C 1-6烷基、3至7元环烷基和3至7元杂环基；且
    n1、n2和n3各自为0至2的任一整数。
  2. 如权利要求1所述的化合物或其药学上可接受的盐、酯、异构体、溶剂化物、前药或同位素标记物，其特征在于，
    n1为0或1；n2为1或2；且n3优选为0或1。
  3. 如权利要求1或2所述的化合物或其药学上可接受的盐、酯、异构体、溶剂化物、前药或同位素标记物，其特征在于，
    所述环A和环B选自苯基和吡啶基，优选自苯基；
    优选地，所述环C选自异噁唑、噁二唑和噻二唑，优选自异噁唑和噁二唑。
  4. 如权利要求1至3中任一项所述的化合物或其药学上可接受的盐、酯、异构体、溶剂化物、前药或同位素标记物，其特征在于，所述式I化合物为
    Figure PCTCN2022111868-appb-100002
    其中R 1、R 2、R 3、R 4、R 5、R 6、Q 1、Q 2、n 1、n 2和n 3如权利要求1中所定义。
  5. 如权利要求1至4中任一项所述的化合物或其药学上可接受的盐、酯、异构体、溶剂化物、前药或同位素标记物，其特征在于，
    R 1选自氢、氘、氰基、卤素、以及取代或未取代的羟基、氨基、C 1-6烷基、C 1-6烷氧基、3至7元环烷基、3至7元杂环基、胍基、脲基、酰胺基、氨基磺酰胺基、磺酰胺基和HN-C(＝NH)-C 1-6烷基；所述取代是被选自C 1-6烷基或3至7元环烷基的取代基所取代。
  6. 如权利要求1至5中任一项所述的化合物或其药学上可接受的盐、酯、异构体、溶剂化物、前药或同位素标记物，其特征在于，
    R 2和R 5各自独立地为氢或氘。
  7. 如权利要求1至4中任一项所述的化合物或其药学上可接受的盐、酯、异构体、溶剂化物、前药或同位素标记物，其特征在于，
    R 1和R 2与它们所连接的原子一起形成包含1至3个选自氧、氮和硫原子的5至6元杂芳基或杂环基，所述5至6元杂环基的环上有0或1个亚甲基可任意被-C(＝O)-或-C(＝NR 7)-替代；所述5至6元杂芳基或5至6元杂环基为下列结构的任一种：
    Figure PCTCN2022111868-appb-100003
    R 8选自氢、氘、C 1-6烷基和3至7元环烷基。
  8. 如权利要求1至7中任一项所述的化合物或其药学上可接受的盐、酯、异构体、溶剂化物、前药或同位素标记物，其特征在于，
    R 3为卤素或卤素取代的C 1-6烷基，优选为F或CF 3。
  9. 如权利要求1至8中任一项所述的化合物或其药学上可接受的盐、酯、异构体、溶剂化物、前药或同位素标记物，其特征在于，
    R 4为甲基或下列结构的任一种：
    Figure PCTCN2022111868-appb-100004
  10. 如权利要求1至8中任一项所述的化合物或其药学上可接受的盐、酯、异构体、溶剂化物、前药或同位素标记物，其特征在于，
    R 4和R 5与它们所连接的原子一起形成包含1至3个选自氧、氮和硫的5至7元杂环基，所述5至7元杂环基优选为下列结构的任一种：
    Figure PCTCN2022111868-appb-100005
    n4选自0到2的整数；
    R 9选自氧和NR 7；
    R 10和R 11各自独立地选自氢、氘、C 1-6烷基、C 1-6烷氧基和C 1-6烷基氨基；或者R 10和R 11与它们所连接的原子一起形成3至7元环烷基或包含1或2个选自氧、氮和硫的3至7元杂环基；
    R 12和R 13各自独立地选自氢、氘、卤素、羟基、C 1-6烷基、C 1-6烷氧基和C 1-6烷基氨基；或者R 12和R 13形成＝O；
    R 14选自氢、氘、取代或未取代的C 1-6烷基、C 1-6烷氧基、3至7元环烷基和3至7元杂环基，所述取代是被选自卤素、羟基、氨基、C 1-6烷基氨基和(C 1-6烷基) 2氨基的取代基所取代；
    R 7如权利要求1中所定义。
  11. 如权利要求1至10中任一项所述的化合物或其药学上可接受的盐、酯、异构体、溶剂化物、前药或同位素标记物，其特征在于，
    每一个R 6各自独立地选自氢、氘和氟。
  12. 如权利要求1至11中任一项所述的化合物或其药学上可接受的盐、酯、异构体、溶剂化物、前药或同位素标记物，其特征在于，
    Q 1选自C 1-6亚烷基、-CO-、氨基、-SO-、-SO 2-、-C(＝NR 7)-或为下列结构的任一种：
    Figure PCTCN2022111868-appb-100006
  13. 如权利要求1至9、11和12中任一项所述的化合物或其药学上可接受的盐、酯、异构体、溶剂化物、前药或同位素标记物，其特征在于，
    Q 2选自-SO 2-、-SO(＝NH)-、-SO(＝NMe)-和-CO-。
  14. 如权利要求1至13中任一项所述的化合物或其药学上可接受的盐、酯、异构体、溶剂化物、前药或同位素标记物，其特征在于，
    每一个R 7独立地选自氢、氘、甲基和氰基。
  15. 如权利要求10至12和14中任一项所述的化合物或其药学上可接受的盐、酯、异构体、溶剂化物、前药或同位素标记物，其特征在于，
    n4为0或1。
  16. 如权利要求10至12、14和15中任一项所述的化合物或其药学上可接受的盐、酯、异构体、溶剂化物、前药或同位素标记物，其特征在于，
    R 9选自氧和NH。
  17. 如权利要求10至12、14至16中任一项所述的化合物或其药学上可接受的盐、酯、异构体、溶剂化物、前药或同位素标记物，其特征在于，
    R 10和R 11各自独立地选氢和甲基。
  18. 如权利要求10至12、14至16中任一项所述的化合物或其药学上可接受的盐、酯、异构体、溶剂化物、前药或同位素标记物，其特征在于，
    R 10和R 11与它们所连接的原子一起形成3至7元环烷基或包含1或2个选自氧、氮和硫的3至7元杂环基；所述3至7元环烷基为环丙烷基。
  19. 如权利要求10至12、14至18中任一项所述的化合物或其药学上可接受的盐、酯、异构体、溶剂化物、前药或同位素标记物，其特征在于，
    R 12和R 13各自独立地选自氢、氘、甲基、氟和羟基。
  20. 如权利要求10至12、15和16中任一项所述的化合物或其药学上可接受的盐、酯、异构体、溶剂化物、前药或同位素标记物，其特征在于，
    R 14选自氢、甲基、乙基、异丙基、环丙基、羟乙基和
    Figure PCTCN2022111868-appb-100007
  21. 一种化合物或其药学上可接受的盐、酯、异构体、溶剂化物、前药或同位素标记物，所述化合物选自：
    Figure PCTCN2022111868-appb-100008
    Figure PCTCN2022111868-appb-100009
  22. 一种化合物或其酯、异构体、溶剂化物、前药或同位素标记物，所述化合物选自：
    Figure PCTCN2022111868-appb-100010
    Figure PCTCN2022111868-appb-100011
  23. 如权利要求1至22中任一项所述的化合物或其药学上可接受的盐、酯、异构体、溶剂化物、前药或同位素标记物，其特征在于，所述同位素选自 2H、 3H、 13C、 14C、 15N、 17O、 18O、 31P、 32P、 35S、 18F和 36Cl，优选地，所述同位素为 2H。
  24. 一种药物组合物，所述药物组合物含有治疗有效量的如权利要求1至23中任一项所述的式I所示的化合物或其药学上可接受的盐、酯、异构体、溶剂化物、前药或同位素标记物，以及一种或多种药学上可接受的载体、稀释剂或赋形剂。
  25. 如权利要求1至23中任一项所述的化合物或其药学上可接受的盐、酯、异构体、溶剂化物、前药或同位素标记物，或者如权利要求24所述的药物组合物，其在制备用于抑制ATR激酶的药物中的应用。
  26. 如权利要求1至23中任一项所述的化合物或其药学上可接受的盐、酯、异构体、溶剂化物、前药或同位素标记物，或者如权利要求24所述的药物组合物，在制备用于预防和/或治疗ATR激酶介导的疾病或病症的药物中的应用。
  27. 如权利要求26所述的应用，其中所述的疾病或病症为过度或异常细胞增殖的疾病、障碍和病症；地，所述疾病、障碍和病症选自癌症和骨髓增殖性疾病；更优选地，所述癌症选自皮肤癌、膀胱癌、卵巢癌、乳腺癌、胃癌、前列腺癌、结直肠癌、肺癌、骨癌、脑癌、食管癌、舌癌、胃癌、肾癌、宫颈癌、子宫内膜癌、睾丸癌、泌尿癌、黑素癌、鳞状细胞癌、胶质瘤、脑膜瘤、霍奇金淋巴瘤、非霍奇金淋巴瘤、急性淋巴性白血病、慢性淋巴性白血病、急性骨髓性白血病、慢性粒细胞白血病、成人T细胞白血病淋巴瘤、肝癌、支气管癌、多发性骨髓瘤、基底细胞瘤和精原细胞瘤；其中，所述的结直肠癌优选为结肠癌和直肠癌；所述的肾癌优选为肾实质癌；所述的胶质瘤优选为星形细胞瘤；所述的肝癌优选为肝细胞癌；所述的肺癌优选为小细胞肺癌或非小细胞肺癌；所述的肉瘤优选选自横纹肌肉瘤、软骨肉瘤、肌肉瘤和纤维肉瘤。
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