WO2023007709A1 - プロバイオテックス高純度多機能粉末の製造方法、及びプロバイオテックス高純度多機能粉末 - Google Patents

プロバイオテックス高純度多機能粉末の製造方法、及びプロバイオテックス高純度多機能粉末 Download PDF

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修一 汐見
浩道 大島
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株式会社ニナファームジャポン
株式会社Ｓｋｙ・ライフ
方 明
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    • Y02P60/80—Food processing, e.g. use of renewable energies or variable speed drives in handling, conveying or stacking
    • Y02P60/87—Re-use of by-products of food processing for fodder production

Definitions

  • the present invention relates to a method for producing a probiotic high-purity multifunctional powder and a probiotic high-purity multifunctional powder.
  • BACKGROUND ART Conventionally, it is known that powdery dried products (lactic acid bacteria dried products) containing highly pure lactic acid bacteria have been used, for example, in health foods, livestock feeds, and the like.
  • lactic acid dried product 1.5% pure culture solution of Lactobacillus fermentum, 4% skim milk, 0.5% to 1.5% natural salt, 1% molasses, 0.5% monosodium glutamate, 2 potato starch % ⁇ 6%, defatted soy flour 3% ⁇ 9% is stirred and mixed with 100% purified water, and after the growth process for a predetermined time, the inlet temperature is 150 ° C ⁇ 180 ° C and the temperature is 75 ° C ⁇ 87 ° C.
  • the viable count of Lactobacillus fermentum is 1.1 ⁇ 10 9 cfu / g to 1.2 ⁇ 10 10 cfu / g and the average particle size is 1 ⁇ m to 9 ⁇ m
  • Patent Document 1 A method for producing a powdery lactic acid bacterium dried product has been proposed (see, for example, Patent Document 1).
  • a method for producing mixed bacteria in which lactic acid bacteria and other types of bacteria are mixed can also be considered.
  • the function of each bacterium may be restricted by mixing a plurality of types of bacterium.
  • the present invention has been made in view of the problems described above. It is an object of the present invention to provide a method for producing a probiotic high-purity multifunctional powder that can maintain a high number of bacteria with high purity when producing a probiotic powder.
  • the present invention is characterized by mixing three types of bacteria, lactic acid bacteria, Bacillus subtilis, and actinomycetes, which are separately powdered, in a predetermined ratio.
  • a method for producing a multifunctional powder According to the present invention, it is possible to grow to a high number of bacteria while maintaining high purity without causing contamination during the growth process of each of the three types of bacteria, and even after mixing the three types of bacteria, the high number of bacteria It can hold the number of bacteria.
  • the predetermined ratio is 60% by mass of the lactic acid bacteria, 20% by the Bacillus subtilis, and 20% by the actinomycetes. It is good also as a manufacturing method of powder.
  • the predetermined ratio is advantageous in making lactic acid bacteria the main bacterium in the probiotic high-purity multifunctional powder, and allowing each of the three types of bacteria to exert their functions.
  • a predetermined amount of Lactobacillus fermentum is cultured at a constant temperature, yeast, glucose and peptone are mixed with purified water, and a mixed solution is added to the Lactobacillus fermentum and mixed,
  • a method for producing a probiotic high-purity multifunctional powder may be characterized in that after culturing the number of bacteria to 1.0 ⁇ 10 12 cfu/g or more, the lactic acid bacteria are pulverized to produce a dried product of the lactic acid bacteria. According to this, a sufficient amount of dried lactic acid bacteria can be obtained for producing a probiotic high-purity multifunctional powder.
  • the Lactobacillus fermentum may be cultured at a constant temperature of 36°C for 24 hours. For example, a mixture of 5 g of yeast, 5 g of glucose, and 5 g of peptone in 1000 ml of purified water may be added to the Lactobacillus fermentum.
  • a method for producing a probiotic high-purity multifunctional powder may be characterized by pulverizing to a diameter of up to 0.2 mm to produce a dried product of the Bacillus subtilis. According to this, a sufficient amount of dried Bacillus subtilis can be obtained for producing a probiotic high-purity multifunctional powder.
  • sun-dried pineapple skin is pulverized, the pulverized pineapple skin is immersed in purified water, chitin-chitosan is added, and the temperature is maintained for a predetermined period of time to obtain 1.0 ⁇ 10 10 cfu/g.
  • trehalose and inulin are added to the solution obtained by straining the resulting bacterial cells, and the mixture is dehumidified and dried at low temperature to produce a dried product of the actinomycetes. It may also be a method for producing a pure multifunctional powder. According to this, a sufficient amount of dried actinomycetes can be obtained for producing a probiotic high-purity multifunctional powder.
  • Pineapple skins can be dried in the sun for three years. Soak 200 g of the pulverized pineapple skin in 1000 ml of purified water, add 20 g of chitin chitosan, incubate at 35 to 40° C. for 72 hours, strain the resulting cells, and add trehalose and inulin to the solution. The solution, the trehalose, the inulin and water may be added so that the mass ratio is 10:25:15:50, and the mixture is dried at low temperature for 72 hours to produce the dried product of the actinomycetes. .
  • it may be a probiotic high-purity multifunctional powder containing 60% lactic acid bacteria, 20% Bacillus subtilis, and 20% actinomycetes, each of which is powdery in terms of mass ratio. According to this, each bacterial count has a high degree of purity.
  • lactic acid bacteria are anaerobic bacteria
  • Bacillus subtilis and actinomycetes are aerobic bacteria. For this reason, Bacillus subtilis and actinomycetes can absorb oxygen released by lactic acid bacteria. Bacteria and actinomycetes can maintain an active state without dormancy, and a synergistic effect with lactic acid bacteria can produce endospores and create resistant spores.
  • each of lactic acid bacteria, Bacillus subtilis, and actinomycetes can be grown to a high number while maintaining high purity.
  • FIG. 1 is a flow chart showing a method for producing lactic acid bacteria powder in this embodiment.
  • FIG. 2 is a flow chart showing a method for producing Bacillus subtilis powder in this example.
  • FIG. 3 is a flow chart showing the method for producing actinomycete powder in this example.
  • FIG. 4 is a flow chart showing the method for producing the probiotic high-purity multifunctional powder in this example.
  • FIG. 5 is a schematic diagram showing an example of a stirrer used for producing the probiotic high-purity multifunctional powder in this example.
  • FIG. 6 is a schematic diagram showing an example of a stirrer used for producing the probiotic high-purity multifunctional powder in this example.
  • FIG. 1 is a flow chart showing a method for producing lactic acid bacteria powder according to an embodiment of the present invention. The flow of the method for producing lactic acid bacteria powder will be described below with reference to FIG. FIG. 1 illustrates an example of producing a powder of lactic acid bacteria from a Lactobacillus fermentum strain.
  • S101 is the culturing process for Lactobacillus fermentum strains (NBRC numbers 3071 and 3072).
  • a BCP plate count agar medium is formed by pouring molten agar into a petri dish (a circular glass container) so that lactic acid bacteria can be detected and the number of bacteria can be measured. Apply a 2 mm thick layer with a platinum rod. After that, the petri dish smeared with the Lactobacillus fermentum strain is placed in an incubator and cultured at a constant temperature of 36° C. for 24 hours.
  • S102 is a step of generating a culture solution for culturing the Lactobacillus fermentum strain in the colonies generated in the petri dish in S101.
  • This culture solution is produced by putting 1000 ml of purified water in a hard heat-resistant container and mixing 5 g of yeast, 5 g of glucose and 5 g of peptone. Then, the produced mixed solution is placed in an autoclave and sterilized by heating at a constant temperature of 120°C for 20 minutes, and then cooled to 40°C or lower.
  • S103 is a step of adding the Lactobacillus fermentum strain to the culture solution produced in S102.
  • S104 is a step of growing and culturing lactic acid bacteria. Specifically, the culture solution added with the Lactobacillus fermentum strain in S103 is placed in an incubator and grown at 35 to 40° C. for 48 hours. In S104, the number of lactic acid bacteria is grown and cultured to 1.0 ⁇ 10 12 cfu/g or more. As a guideline for confirming proliferation, the culture solution should become cloudy and a swirling state can be observed when the container is tilted. Finally, in the powdering step of S105, after drying the solution grown and cultured in S104, the lactic acid bacteria are powdered.
  • FIG. 2 is a flow chart showing a method for producing a Bacillus subtilis powder according to an embodiment of the present invention. The flow of the method for producing Bacillus subtilis powder will be described below with reference to FIG. FIG. 2 illustrates an example of producing Bacillus subtilis powder using soybeans as a medium. In addition, it is important to have a technique that enables pure cultivation of the spore-bearing fungus, which adheres to dead leaves as a soil bacterium, Bacillus subtilis, and proliferates with spores.
  • S106 is the process of processing soybeans as a culture medium. First, in S106, soybeans are soaked in water and boiled, and the boiled soybeans are cooled and drained. This soybean is used as a medium for Bacillus subtilis. S107 is a step of growing Bacillus subtilis on soybeans. Here, Bacillus natto is exemplified as Bacillus subtilis.
  • S108 is a step of growing and culturing Bacillus subtilis. Specifically, the soybeans grown with Bacillus subtilis in S107 are placed in an incubator and cultured at a constant temperature of 37° C. for 24 hours. At this time, the surface of the soybean is covered with spore-like or cotton-like Bacillus subtilis, and the odor of ammonia is released. In S108, if the environment for growth and culture is prepared, the number of bacteria of Bacillus subtilis can be grown and cultured to 1.0 ⁇ 10 12 cfu/g or more. Finally, in the powdering step of S109, the Bacillus subtilis is powdered with a moisture content of 8% or less so that the diameter becomes 0.1 mm to 0.2 mm. By pulverizing with a moisture content of 8% or less, the odor of ammonia released in S108 is eliminated.
  • FIG. 3 is a flow chart showing a method for producing actinomycete powder according to an embodiment of the present invention. The flow of the method for producing actinomycete powder will be described below with reference to FIG. FIG. 3 illustrates an example of producing actinomycete powder from pineapple skin.
  • S110 is the step of culturing actinomycetes.
  • actinomycetes are cultured using pineapple peel dried in the sun for three years as a medium.
  • S111 is a step of pulverizing the culture medium. Specifically, in step S110, the sun-dried pineapple skin is pulverized with a mixer.
  • S112 is a step of growing and culturing actinomycetes. Specifically, in S111, 200 g of pineapple peel dust crushed in a 2-liter container is immersed in 1000 ml of purified water, 20 g of chitin-chitosan is added as a nutrient for actinomycetes, and the mixture is placed in an incubator for 35-40 minutes. Incubate for 72 hours at a constant temperature of °C. After that, in the stirring step of S113, by stirring the solution, filamentous and sticky actinomycetes are generated. A new solution is obtained by straining the actinomycetes. At this time, the actinomycetes grow to 1.0 ⁇ 10 10 cfu/g or more, preferably 1.0 ⁇ 10 11 cfu/g to 1.0 ⁇ 10 12 cfu/g or more.
  • S114 is a step of mixing inulin and trehalose with the solution obtained in S113. Specifically, the solution is mixed with inulin and trehalose so that the mass ratio of the solution, trehalose, inulin and water is 10:25:15:50. Finally, in the low-temperature dehumidifying drying step of S115, 80% of the mixture obtained in S114 is dried for 72 hours. Further, the dried mixture is pulverized in the pulverization step of S116.
  • FIG. 4 is a flow chart showing a method for producing a probiotic high-purity multifunctional powder according to an embodiment of the present invention. The flow of the method for producing the probiotic high-purity multifunctional powder will be described below with reference to FIG.
  • S117 the lactic acid bacteria powder, the Bacillus subtilis powder, and the actinomycete powder are mixed at mass ratios of 60%, 20%, and 20%, respectively.
  • the main strain of probiotic high-purity multifunctional powder is lactic acid bacteria.
  • Lactic acid bacteria, Bacillus subtilis, and actinomycetes are all positive bacteria (good bacteria), and good effects can be obtained even when taken alone. For example, when lactic acid bacteria are ingested alone, the effect of improving the intestinal constitution can be obtained. On the other hand, when probiotic high-purity multifunctional powder mixed with lactic acid bacteria, Bacillus subtilis, and actinomycetes is ingested, as described above, the synergistic effect with lactic acid bacteria produces endospores and resistant spores can be made. This resistance can kill cancer cells, for example.
  • FIGS. 5 and 6 are schematic diagrams showing an example of the stirrer 1 used for producing the probiotic high-purity multifunctional powder in the embodiment of the present invention.
  • the structure of the stirrer 1 for stirring and mixing the powder of lactic acid bacteria, the powder of Bacillus subtilis, and the powder of actinomycetes will be described below with reference to FIGS. 5 and 6.
  • FIG. 5 is a schematic diagram showing an example of the stirrer 1 used for producing the probiotic high-purity multifunctional powder in the embodiment of the present invention.
  • the structure of the stirrer 1 for stirring and mixing the powder of lactic acid bacteria, the powder of Bacillus subtilis, and the powder of actinomycetes will be described below with reference to FIGS. 5 and 6.
  • the lactic acid bacteria powder, the Bacillus subtilis powder, and the actinomycete powder (hereinafter referred to as "three mixed powders") are carried in from the loading unit 2.
  • the carrying-in part 2 has a conveyor inside, and the three kinds of mixed powder is moved to the hopper 3 by the operation of the conveyor.
  • the hopper 3 is connected to the stirring/mixing section 4 .
  • the stirring/mixing section 4 has an internal cylinder 4a in which a screw 41 is provided. That is, the stirring/mixing section 4 has a double cylindrical structure as shown in FIG. 5A.
  • FIG. 5B is a cross-sectional view of the stirring/mixing section 4 along the cross-section XX in FIG. 5A (illustration of the screw 41 is omitted).
  • the stirring and mixing section 4 has a double circular cross section.
  • the inner cylinder 4a of the stirring/mixing section 4 is in contact with one drive wheel 42, and the outer cylinder of the stirring/mixing section 4 is in contact with two supporting sections 43 having relatively large diameters.
  • the rotation of the two driving wheels 42 causes the internal cylinder 4a of the stirring/mixing section 4 and the screw 41 inside the stirring/mixing section 4 to also rotate.
  • the support portion 43 supports the stirring and mixing portion 4, and the outer cylinder of the stirring and mixing portion 4 and the support portion 43 do not rotate.
  • the screw 41 rotates for 30 minutes in the direction in which the powder advances at a rate of 10 times per minute, and then rotates in the reverse direction once. By rotating the screw 41 in the reverse direction by one rotation, it is possible to separate the powder stuck to the screw 41, for example.
  • FIG. 6A is a plan view of the stirrer 1 for showing the process after the three-mixed powder has passed through the second hopper 5 and moved to the conveying section 6.
  • the conveying section 6 also has a conveyor inside, and the three-mixed powder is moved to the second conveying section 7 by the operation of the conveyer.
  • the three-mixed powder passes through the second conveying section 7 and returns to the carrying-in section 2 shown in FIG. 5A.
  • the conveying section 6 and the second conveying section 7 are illustrated as a series of line-shaped structures in FIG. 6A, the conveying section 6 and the second conveying section 7 may have a stepped structure.
  • FIG. 6B is a side view of FIG. 6A viewed in the direction of the arrow. Since the carrying-in section 2 is located higher than the conveying section 6 and the second conveying section 7 , the conveying section 6 and the second conveying section 7 are inclined with respect to the whole stirrer 1 and are directed toward the carry-in section 2 . It may also be a structure that goes up.
  • FIG. 6C is a cross-sectional view of the second transport section 7 according to cross-section YY of FIG. 6A.
  • the three-mixed powder is conveyed by the belt 8 (the belt 8 is also provided in the conveying section 6) in the second conveying section 7, and the belt 8 is sandwiched between the motor 9 and the training wheels 10 and is moved by them.
  • stirrer 1 As described above, by using the stirrer 1, it is possible to stir and mix the three types of mixed powder, and even after mixing, it is possible to retain the number of each of the three types of bacteria with high purity.

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Abstract

乳酸菌と枯草菌と放線菌類との三種類の菌を混合したプロバイオテックス高純度多機能粉末を製造する際に、各々の菌数を高い純度をもって保有することを可能とする、プロバイオテックス高純度多機能粉末の製造方法を提供する。当該製造方法によって得られるプロバイオテックス高純度多機能粉末は、人間の腸内のような無酸素環境においても、嫌気性菌である乳酸菌が放出する酸素を好気性菌である枯草菌と放線菌類が吸収することで、枯草菌と放線菌類が休眠することなく活性状態を維持することができ、乳酸菌との相乗効果で内生胞子を生成して抵抗性を持つ胞子を作ることができる。当該製造方法においては、それぞれ別々に粉末化した乳酸菌と枯草菌と放線菌類との三種類の菌を、所定の比率で混合する。

Description

プロバイオテックス高純度多機能粉末の製造方法、及びプロバイオテックス高純度多機能粉末
　本発明は、プロバイオテックス高純度多機能粉末の製造方法、及びプロバイオテックス高純度多機能粉末に関する。
　従来、高純度の乳酸菌を含む粉体の乾燥物（乳酸菌乾燥物）が、例えば健康食品や家畜の飼料等に使用されていることが公知である。当該乳酸菌乾燥物の製造方法について、一例として、ラクトバチルスファーメンタム（Lactobacillus fermentum）の純粋培養液1.5％、スキムミルク4％、天然塩0.5％～1.5％、糖蜜1％、グルタミン酸ソーダ0.5％、片栗粉2％～6％、脱脂大豆粉3％～9％を、精製水100％に対して攪拌混合し、所定時間の増殖工程の後に、150℃～180℃の入口温度であって75℃～87℃の出口温度に設定したスプレードライヤーにて噴霧乾燥して、ラクトバチルスファーメンタムの生菌数が1.1×109cfu/g～1.2×1010cfu/gであると共に平均粒径が1μｍ～9μｍの粉体状の乳酸菌乾燥物を製造する乳酸菌乾燥物製造方法が提案されていた（例えば、特許文献１参照）。
　上記のような乳酸菌乾燥物製造方法に対して、乳酸菌と他の種類の菌を混合した混合菌（ハイブリッド菌）の製造方法も考え得る。しかし、当該製造方法においては、複数の種類の菌を混合することで、各々の菌の機能が制限されてしまう虞があった。
特許４０６７４７４号公報
　本発明は、上記のような問題点に鑑みてなされたものであり、一例として乳酸菌と枯草菌と放線菌類との三種類の菌を混合した混合菌（以下、「プロバイオテックス高純度多機能粉末」という）を製造する際に、各々の菌を高純度で高い菌数に維持することを可能とする、プロバイオテックス高純度多機能粉末の製造方法を提供することを目的とする。
　上記の課題を解決するための本発明は、それぞれ別々に粉末化した乳酸菌と枯草菌と放線菌類との三種類の菌を、所定の比率で混合することを特徴とする、プロバイオテックス高純度多機能粉末の製造方法である。本発明によれば、三種類の菌それぞれの増殖過程においてコンタミが生じることなく、高い純度を維持しつつ高い菌数まで増殖することができ、また、三種類の菌を混合した後も当該高い菌数を保有することができる。
　また、本発明においては、前記所定の比率は、質量比で前記乳酸菌を60%、前記枯草菌を20%、前記放線菌類を20%とすることを特徴とする、プロバイオテックス高純度多機能粉末の製造方法としてもよい。当該所定の比率は、プロバイオテックス高純度多機能粉末の中でも乳酸菌を主力菌としつつ、三種類の菌のそれぞれの機能を発揮させる上で有利である。 
　また、本発明においては、所定量のラクトバチルスファーメンタムを一定温度で培養し、酵母、グルコース、ペプトンを、精製水に対して混合した混合液を当該ラクトバチルスファーメンタムに添加して混合し、菌数を1.0×1012cfu/g以上まで増殖培養した後に、粉末化して前記乳酸菌の乾燥物を製造することを特徴とする、プロバイオテックス高純度多機能粉末の製造方法としてもよい。これによれば、プロバイオテックス高純度多機能粉末を製造するうえで十分な量の乳酸菌の乾燥物を得ることができる。その際、ラクトバチルスファーメンタムは、36℃の一定温度で24時間培養してもよい。例えば、酵母5ｇ、グルコース5ｇ、ペプトン5ｇを、精製水1000mlに対して混合した混合液を当該ラクトバチルスファーメンタムに添加してもよい。
　また、本発明においては、ボイルした後に冷却し、水切りした大豆に前記枯草菌を殖菌し、菌数を1.0×1012cfu/g以上まで増殖培養した後に、水分率8%以内で0.1mm～0.2mmの径に粉末化して前記枯草菌の乾燥物を製造することを特徴とする、プロバイオテックス高純度多機能粉末の製造方法としてもよい。これによれば、プロバイオテックス高純度多機能粉末を製造するうえで十分な量の枯草菌の乾燥物を得ることができる。
　また、本発明においては、天日に干したパイナップルの皮を粉砕し、粉砕した当該パイナップルの皮を精製水に浸漬し、キチンキトサンを添加して所定時間保温し、1.0×1010cfu/g以上まで増殖した後に、生じた菌体を布漉しした溶液に、トレハロースとイヌリンを添加し、混合物を低温除湿乾燥して前記放線菌類の乾燥物を製造することを特徴とする、プロバイオテックス高純度多機能粉末の製造方法としてもよい。これによれば、プロバイオテックス高純度多機能粉末を製造するうえで十分な量の放線菌類の乾燥物を得ることができる。なお、パイナップルの皮は3年間天日に干してもよい。粉砕した当該パイナップルの皮200gを精製水1000mlに浸漬し、キチンキトサン20gを添加して35～40℃にて72時間保温した後に、生じた菌体を布漉しした溶液に、トレハロースとイヌリンを、当該溶液と当該トレハロースと当該イヌリンと水分の質量比が10:25:15:50となるように添加し、混合物を72時間低温除湿乾燥して前記放線菌類の乾燥物を製造することとしてもよい。
　また、本発明においては、質量比でそれぞれ粉末状である、乳酸菌を60%、枯草菌を20%、放線菌類を20%含んで構成される、プロバイオテックス高純度多機能粉末としてもよい。これによれば、それぞれの菌数が高い純度を有する。また、乳酸菌は嫌気性菌であり、枯草菌と放線菌類は好気性菌である。このため、枯草菌と放線菌類は、乳酸菌が放出した酸素を吸収することができ、本発明におけるプロバイオテックス高純度多機能粉末について、例えば人間の腸内のような無酸素環境においても、枯草菌と放線菌類が休眠することなく活性状態を維持することができ、乳酸菌との相乗効果で内生胞子を生成して抵抗性を持つ胞子を作ることができる。
　本発明によれば、乳酸菌と枯草菌と放線菌類のそれぞれを高純度を維持しつつ高い菌数まで増殖することができる。
図１は、本実施例における乳酸菌の粉末の製造方法を示すフローチャートである。 図２は、本実施例における枯草菌の粉末の製造方法を示すフローチャートである。 図３は、本実施例における放線菌類の粉末の製造方法を示すフローチャートである。 図４は、本実施例におけるプロバイオテックス高純度多機能粉末の製造方法を示すフローチャートである。 図５は、本実施例におけるプロバイオテックス高純度多機能粉末の製造に用いる撹拌機の一例を示す模式図である。 図６は、本実施例におけるプロバイオテックス高純度多機能粉末の製造に用いる撹拌機の一例を示す模式図である。
　以下、本発明の実施形態について図面を用いて詳細に説明する。以下の実施形態においては、乳酸菌と枯草菌と放線菌類から成るプロバイオテックス高純度多機能粉末の製造方法の一例、及び当該プロバイオテックス高純度多機能粉末の製造に用いる装置の一例を示す。以下に示すプロバイオテックス高純度多機能粉末の製造方法、装置は一例に過ぎず、その製造条件や仕様を記載された内容に限定する趣旨ではない。
　図１は、本発明の実施形態における乳酸菌の粉末の製造方法を示すフローチャートである。以下、図１を用いて乳酸菌の粉末の製造方法の流れについて説明する。図１では、ラクトバチルスファーメンタム菌株から乳酸菌の粉末を製造する例について説明する。
　Ｓ１０１は、ラクトバチルスファーメンタム菌株（NBRC番号3071及び3072）の培養工程である。まず、Ｓ１０１では、乳酸菌の検出や菌数の測定が可能となるよう、シャーレ（円形状のガラス容器）に溶融した寒天を流し込むことでBCPプレートカウント寒天培地を形成し、ラクトバチルスファーメンタム菌株を白金棒で厚み2mmの層に塗り込む。その後、ラクトバチルスファーメンタム菌株を塗り込んだシャーレをインキューベータに入れて36℃の一定温度で24時間培養する。
　Ｓ１０２は、Ｓ１０１においてシャーレ内に生じたコロニーにおけるラクトバチルスファーメンタム菌株を培養するための培養溶液を生成する工程である。この培養溶液は、硬質耐熱容器に精製水1000ｍｌを入れ、酵母5ｇ、グルコース5ｇ、ペプトン5ｇを混合して生成する。そして、生成された混合液をオートクレーブに入れて120℃の一定温度で20分加熱して滅菌し、その後、40℃以下まで冷却する。
　Ｓ１０３は、Ｓ１０２において生成した培養溶液にラクトバチルスファーメンタム菌株を添加する工程である。
　Ｓ１０４は、乳酸菌の増殖培養工程である。具体的には、Ｓ１０３においてラクトバチルスファーメンタム菌株を添加した培養溶液をインキューベータに入れて35～40℃にて48時間増殖培養する。Ｓ１０４では、乳酸菌の菌数を1.0×1012cfu/g以上まで増殖培養する。増殖確認の目安としては、培養溶液が白濁状態となり容器を傾けると渦巻き状態が観察できることであり、PH測定を行った場合に、PH3.2～3.5の値を示すことである。最後に、Ｓ１０５の粉末化工程において、Ｓ１０４で増殖培養したの溶液を乾燥させた上で、乳酸菌を粉末化する。
　図２は、本発明の実施形態における枯草菌の粉末の製造方法を示すフローチャートである。以下、図２を用いて枯草菌の粉末の製造方法の流れについて説明する。図２では、大豆を培地として枯草菌の粉末を製造する例について説明する。なお、枯草菌（ナット菌）土壌細菌バチルスサブチルス有胞子菌として枯葉に付着して胞子によって増殖している、その有胞子菌を純粋培養可能とする技術が重要である。
　Ｓ１０６は、培地としての大豆を処理する工程である。まず、Ｓ１０６では、大豆を水に浸してボイルし、ボイルした大豆を冷却し、水切りする。この大豆を枯草菌の培地とする。Ｓ１０７は、枯草菌を大豆に殖菌する工程である。ここで、枯草菌としては納豆菌が例示される。
　Ｓ１０８は、枯草菌の増殖培養工程である。具体的には、Ｓ１０７において枯草菌を殖菌した大豆をインキューベータに入れて37℃の一定温度で24時間培養する。このとき、大豆の表面は胞子状または綿状の枯草菌で覆われ、アンモニアの臭気が放たれる。Ｓ１０８では、増殖培養のための環境が整えば、枯草菌の菌数を1.0×1012cfu/g以上まで増殖培養できる。最後に、Ｓ１０９の粉末化工程において、水分率8%以内で枯草菌を粉末化して径が0.1mm～0.2mmとなるようにする。水分率8%以内で粉末化することで、Ｓ１０８において放たれたアンモニアの臭気が解消される。
　図３は、本発明の実施形態における放線菌類の粉末の製造方法を示すフローチャートである。以下、図３を用いて放線菌類の粉末の製造方法の流れについて説明する。図３では、パイナップルの皮から放線菌類の粉末を製造する例について説明する。
　Ｓ１１０は、放線菌類の培養工程である。まず、Ｓ１１０では、３年間天日に干したパイナップルの皮を培地として放線菌類を培養する。Ｓ１１１は、培地の粉砕工程である。具体的には、Ｓ１１０において天日に干したパイナップルの皮をミキサーで粉砕する工程である。
　Ｓ１１２は、放線菌類の増殖培養工程である。具体的には、Ｓ１１１において粉砕したパイナップルの皮の粉塵200ｇを２lの容器に入れ1000mlの精製水に浸漬し、放線菌の栄養分としてキチンキトサン20ｇを添加し、インキューベータに入れて35～40℃の一定温度で72時間培養する。その後、Ｓ１１３の攪拌工程において、溶液を攪拌することで、糸状で粘り気のある放線菌類を生成する。その放線菌類を布漉することで新たな溶液を得る。このとき、放線菌類は1.0×1010cfu/g以上、好ましくは1.0×1011cfu/g～1.0×1012cfu/g以上まで増殖する。
　Ｓ１１４は、Ｓ１１３において得られた溶液にイヌリンとトレハロースを混合する工程である。具体的には、溶液とトレハロースとイヌリンと水分の質量比が10:25:15:50となるように、溶液にイヌリンとトレハロースを混合する。最後に、Ｓ１１５の低温除湿乾燥工程において、Ｓ１１４において得られた混合物80%を72時間乾燥する。さらに、Ｓ１１６の粉末化工程においてその乾燥した混合物を粉末化する。
　図４は、本発明の実施形態におけるプロバイオテックス高純度多機能粉末の製造方法を示すフローチャートである。以下、図４を用いてプロバイオテックス高純度多機能粉末の製造方法の流れについて説明する。
　図１に示すＳ１０５において得られた乳酸菌の粉末、及び図２に示すＳ１０９において得られた枯草菌の粉末、及び図３に示すＳ１１６において得られた放線菌類の粉末を撹拌機（図５、図６参照）によって攪拌し、混合することでプロバイオテックス高純度多機能粉末を製造する（Ｓ１１７）。Ｓ１１７において、乳酸菌の粉末、及び枯草菌の粉末、及び放線菌類の粉末は、それぞれ重量比で60%、20%、20%の質量比で混合する。すなわち、プロバイオテックス高純度多機能粉末の中でも主力菌は乳酸菌である。
　乳酸菌、及び枯草菌、及び放線菌類はいずれも陽性菌（善玉菌）であり、単体で摂取した場合でも良好な効果が得られる。例えば乳酸菌単体を摂取した場合は、腸内の体質改善の効果が得られる。対して乳酸菌、及び枯草菌、及び放線菌類を混合したプロバイオテックス高純度多機能粉末を摂取した場合は、上述の通り、乳酸菌との相乗効果によって内生胞子を生成して抵抗性を持つ胞子を作ることができる。この抵抗性によって、例えばがん細胞を終息させることができる。
　また、乳酸菌、及び枯草菌、及び放線菌類のそれぞれを乾燥して粉末化する前に混合すると、それぞれの菌が加水分解する虞がある。本実施例では、それぞれの菌を別々に水分率8％以下まで乾燥して粉末化することで、このような加水分解の発生を抑制することが可能である。
　図５及び図６は、本発明の実施形態におけるプロバイオテックス高純度多機能粉末の製造に用いる撹拌機１の一例を示す模式図である。以下、図５及び図６を用いて、乳酸菌の粉末、及び枯草菌の粉末、及び放線菌類の粉末を攪拌し、混合するための撹拌機１の構造について説明する。
　図５Ａにおいて、まず搬入部２から乳酸菌の粉末、及び枯草菌の粉末、及び放線菌類の粉末（以下、「三種混合粉末」という）を搬入する。搬入部２は内部にコンベアを有し、コンベアの稼働によって三種混合粉末はホッパ３に移動する。ホッパ３は攪拌混合部４とつながっている。攪拌混合部４は、内部にスクリュー４１が設けられた内部円筒４ａを有する。すなわち、攪拌混合部４は、図５Ａに示すように二重の円筒構造を有する。
　図５Ｂは、図５Ａの断面Ｘ－Ｘによる攪拌混合部４の断面図である（スクリュー４１は図示を省略する）。攪拌混合部４は二重円形の断面を有する。また、攪拌混合部４の内部円筒４ａは一つの駆動輪４２に接しており、攪拌混合部４の外側の円筒は比較的直径の大きい二つの支持部４３に接している。二つの駆動輪４２の回転によって攪拌混合部４の内部円筒４ａ、及び攪拌混合部４の内部のスクリュー４１も回転する。支持部４３は攪拌混合部４を支えており、攪拌混合部４の外側の円筒、及び支持部４３は回転しない。なお、スクリュー４１は、１分間に１０回の割合で粉体を前進させる方向に３０分回転した後、逆方向に１回転回転する。１回転逆方向に回転させることで、例えばスクリュー４１に固着した粉体を離脱させることが可能である。
　ここで、図５Ａの説明に戻る。スクリュー４１の回転によって押し出された三種混合粉末は、第２のホッパ５に移動する。ここで、所定のサイクル数以内では、三種混合粉末は第２のホッパ５に移動した後、再び搬入部２から搬入され、以降同じプロセスを繰り返す。ホッパ５から搬入部２へ至る経路については、以下の図６に示す。
　図６Ａは、三種混合粉末が第２のホッパ５を経て搬送部６に移動した後のプロセスを示すための撹拌機１の平面図である。搬送部６も内部にコンベアを有し、コンベアの稼働によって三種混合粉末は第２の搬送部７に移動する。三種混合粉末は、第２の搬送部７を経て再び図５Ａに示す搬入部２に戻る。なお、図６Ａでは搬送部６と第２の搬送部７を一連のライン状の構成として図示しているが、搬送部６と第２の搬送部７は段違いの構成であってもよい。すなわち、三種混合粉末が搬送部６から第２の搬送部７に移動する際に落下する構成であってもよい。図６Ｂは、図６Ａを矢印の方向から見た側面図である。搬入部２は搬送部６及び第２の搬送部７より高い位置にあるため、搬送部６及び第２の搬送部７は撹拌機１全体に対して斜めに傾いており、搬入部２に向かって上がっていく構造であってもよい。図６Ｃは、図６Ａの断面Ｙ－Ｙによる第２の搬送部７の断面図である。三種混合粉末は第２の搬送部７におけるベルト８（ベルト８は搬送部６にも備わっている）によって搬送され、ベルト８はモーター９と補助輪１０に挟まれ、それらによって動いている。
　以上のように、撹拌機１を用いることによって三種混合粉末を攪拌し、混合することが可能であり、混合した後も三種類それぞれの菌数を高い純度をもって保有することが可能である。
１　　　　　：撹拌機
２　　　　　：搬入部
３　　　　　：ホッパ
４　　　　　：攪拌混合部
４ａ　　　　：内部円筒
４１　　　　：スクリュー
４２　　　　：駆動輪
４３　　　　：支持部
５　　　　　：第２のホッパ
６　　　　　：搬送部
７　　　　　：第２の搬送部
８　　　　　：ベルト
９　　　　　：モーター
１０　　　　：補助輪
 

Claims (6)

  1. 　それぞれ別々に粉末化した乳酸菌と枯草菌と放線菌類との三種類の菌を、所定の比率で混合することを特徴とする、プロバイオテックス高純度多機能粉末の製造方法。
  2. 　前記所定の比率は、質量比で前記乳酸菌を60%、前記枯草菌を20%、前記放線菌類を20%とすることを特徴とする、請求項１に記載のプロバイオテックス高純度多機能粉末の製造方法。
  3. 　所定量のラクトバチルスファーメンタムを一定温度で培養し、酵母、グルコース、ペプトンを、精製水に対して混合した混合液を当該ラクトバチルスファーメンタムに添加して混合し、菌数を1.0×1012cfu/g以上まで増殖培養した後に、粉末化して前記乳酸菌の乾燥物を製造することを特徴とする、請求項１または２に記載のプロバイオテックス高純度多機能粉末の製造方法。
  4. 　ボイルした後に冷却し、水切りした大豆に前記枯草菌を殖菌し、菌数を1.0×1012cfu/g以上まで増殖培養した後に、水分率8%以内で0.1mm～0.2mmの径に粉末化して前記枯草菌の乾燥物を製造することを特徴とする、請求項１または２に記載のプロバイオテックス高純度多機能粉末の製造方法。
  5. 　天日に干したパイナップルの皮を粉砕し、粉砕した当該パイナップルの皮を精製水に浸漬し、キチンキトサンを添加して所定時間保温し、1.0×1010cfu/g以上まで増殖した後に、生じた菌体を布漉しした溶液に、トレハロースとイヌリンを添加し、混合物を低温除湿乾燥して前記放線菌類の乾燥物を製造することを特徴とする、請求項１または２に記載のプロバイオテックス高純度多機能粉末の製造方法。
  6. 　それぞれ粉末状である、乳酸菌を60%、枯草菌を20%、放線菌類を20%含んで構成される、プロバイオテックス高純度多機能粉末。
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