WO2022173329A1 - Производные 2-ацетамидо-6-гидрокси-бензотиофена, обладающие противовирусной активностью - Google Patents

Производные 2-ацетамидо-6-гидрокси-бензотиофена, обладающие противовирусной активностью Download PDF

Info

Publication number
WO2022173329A1
WO2022173329A1 PCT/RU2022/050030 RU2022050030W WO2022173329A1 WO 2022173329 A1 WO2022173329 A1 WO 2022173329A1 RU 2022050030 W RU2022050030 W RU 2022050030W WO 2022173329 A1 WO2022173329 A1 WO 2022173329A1
Authority
WO
WIPO (PCT)
Prior art keywords
hydroxy
benzothiophene
mass
yield
nch
Prior art date
Application number
PCT/RU2022/050030
Other languages
English (en)
French (fr)
Inventor
Вадим Альбертович Макаров
Владимир Викторович ЗАРУБАЕВ
Original Assignee
Акционерное общество "Отисифарм"
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Акционерное общество "Отисифарм" filed Critical Акционерное общество "Отисифарм"
Priority to CN202280026803.7A priority Critical patent/CN117222630A/zh
Priority to EP22753053.2A priority patent/EP4293017A1/en
Priority to CA3208028A priority patent/CA3208028A1/en
Publication of WO2022173329A1 publication Critical patent/WO2022173329A1/ru

Links

Classifications

    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/38—Heterocyclic compounds having sulfur as a ring hetero atom
    • A61K31/381—Heterocyclic compounds having sulfur as a ring hetero atom having five-membered rings
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A61P31/12—Antivirals
    • A61P31/14—Antivirals for RNA viruses
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A61P31/12—Antivirals
    • A61P31/14—Antivirals for RNA viruses
    • A61P31/16—Antivirals for RNA viruses for influenza or rhinoviruses
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D333/00—Heterocyclic compounds containing five-membered rings having one sulfur atom as the only ring hetero atom
    • C07D333/50—Heterocyclic compounds containing five-membered rings having one sulfur atom as the only ring hetero atom condensed with carbocyclic rings or ring systems
    • C07D333/52—Benzo[b]thiophenes; Hydrogenated benzo[b]thiophenes
    • C07D333/62—Benzo[b]thiophenes; Hydrogenated benzo[b]thiophenes with hetero atoms or with carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, e.g. ester or nitrile radicals, directly attached to carbon atoms of the hetero ring
    • C07D333/66—Nitrogen atoms not forming part of a nitro radical
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D333/00—Heterocyclic compounds containing five-membered rings having one sulfur atom as the only ring hetero atom
    • C07D333/50—Heterocyclic compounds containing five-membered rings having one sulfur atom as the only ring hetero atom condensed with carbocyclic rings or ring systems
    • C07D333/52—Benzo[b]thiophenes; Hydrogenated benzo[b]thiophenes
    • C07D333/62—Benzo[b]thiophenes; Hydrogenated benzo[b]thiophenes with hetero atoms or with carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, e.g. ester or nitrile radicals, directly attached to carbon atoms of the hetero ring
    • C07D333/68—Carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen

Definitions

  • the invention relates to new biologically active compounds derivatives of 2-acetamido-6-hydroxy-benzothiophene of general formula (I), their pharmaceutically acceptable salts, showing activity against various viruses, mainly against the influenza virus and SARS-CoV-2 coronavirus, a method for their preparation and their use as antiviral drugs.
  • the problem of finding new antiviral agents is due to the significant spread of viral infections in humans and animals. This is due to a decrease in immune protection in the human population, as well as the widespread development of resistance in viruses to the drugs available on the market.
  • the problem of the rapid development of resistance is due to the fact that basically many of the known antiviral drugs used are derivatives of one class of compounds, as well as the lack of efficacy and often high toxicity of drugs.
  • Influenza is an acute infectious disease of the respiratory tract caused by an RNA-containing virus, which has a high epidemiological and clinical significance with a high frequency of complications, especially among people at risk.
  • Influenza and other acute respiratory viral infections (ARVI) viruses cause massive outbreaks of diseases that take on the character of epidemics every year. From 27 to 41 million cases of these diseases are registered annually, in particular, from 5 to 15% of the Russian population a year get sick with influenza.
  • Influenza and ARVI remain practically uncontrolled diseases due to the high variability of the antigenic structure of circulating influenza viruses and the heterogeneity of ARVI pathogens.
  • influenza viruses and other acute respiratory viral infections are able to change their properties and pathogenicity.
  • influenza virus has a high mutation rate.
  • the antigenic structure of the virus is highly susceptible to change as a result of the selective pressure of the host's immune system.
  • chemotherapy drugs is perceived by the virus as a selection factor, as a result of which the formation of resistant strains also occurs.
  • virus variants capable of both avoiding the activity of neutralizing antibodies, and thereby elude the body's immune response, and overcoming the action of chemotherapy drugs aimed at a certain stage of virus reproduction.
  • each type of virus has its own mechanism of adaptation to a chemical preparation [Ison MG Antivirals and resistance: influenzavirus, Current OpinioninVirology, 2011, 563].
  • Neuraminidase inhibitors are known, registered in Russia: Oseltamivir (Tamiflu) and Zanamivir (Relenza), as well as used in the USA: Peramivir (Rapiakta) and Laninamivir (Inavir), which act at the stage of budding of newly synthesized influenza virions from the cell membrane, blocking the cleavage of particles viral progeny from the cell surface [Ison M.G. Clinical use of approved influenza antivirals: therapy and prophylaxis. // Influenza Other RespirViruses. 2013, 7 Suppl 1, 7-13].
  • inhibitors of viral neuraminidase interfere with the access of virions to target cells by blocking neuraminidase cleavage of mucopolysaccharides of the mucus of the upper respiratory tract.
  • the practice of using neuraminidase inhibitors in the treatment of influenza has shown that the high efficiency of this group of drugs is limited by the early stage of the disease.
  • Anti-influenza drugs of a different mechanism of action are also known, for example, the drug Remantadine (a-methyl-1-adamantylmethylamine hydrochloride) and Amantadine (1-aminoadamantane) [Davies, WL; Grunert, R.R.; Haff, RF; McGahen, JW; Neumayer, E.M.; Paulshock, M.; Watts, JC; Wood, TR; Hermann, EC; Hoffmann, CE Antiviral Activity of 1-Adamantanamine (Amantadine) // Science. - 1964. - V. 144. P. 862].
  • Remantadine a-methyl-1-adamantylmethylamine hydrochloride
  • Amantadine (1-aminoadamantane) Daavies, WL; Grunert, R.R.; Haff, RF; McGahen, JW; Neumayer, E.M.; Paulshock, M.
  • the drug baloxaviramarboxil (Xofluza), an inhibitor of the endonuclease activity of the polymerase complex of the influenza virus, is registered in the United States (Yang T. Baloxavir Marboxil: The First Cap-dependent Endonuclease inhibitor for the treatmen to influenza. Ann Pharmacother. 2019, 53, 7, 754-759).
  • Arbidol In Russia and a number of other countries, the drug Arbidol (umifenovir) is used to control influenza, blocking the fusogenic activity of viral hemagglutinin and thus preventing the fusion of viral and cell membranes [Blaising, J., Polyak, S.J., Pecheur, E-T, Arbidolas a broad- spectrumantiviral:anupdate. Antiviral Research (2014), doi: http://dx.doi.Org/10.1016/j.antiviral.2014.04.006]. In addition to direct antiviral activity, it has interferonogenic properties, so it can be used both for therapy and for the prevention of influenza infection.
  • the disadvantage of drugs based on adamantane derivatives is the low antiviral activity caused by the resistance of the vast majority of influenza strains to this drug.
  • Resistance is based on amino acid substitutions at or near the NA catalytic site.
  • the H274Y mutation provides oseltamivir-resistance to viruses carrying the N1 subtype neuraminidase
  • the El 19V and R292K mutations determine the resistance of the N2 subtype [McKimm-Breschkin JL Influenza neuraminidase inhibitors: antiviral action and mechanisms of resistance. Influenza Other Resp.
  • Virus strains resistant to the new drug baloxavir have also been isolated from patients treated with this drug (Takashita E, Abe T, Morita H, Nagata S, et al. Influenza A (H1N1) pdm09 virus exhibiting reduced susceptibility to baloxavir due to a PA E23K substitution detected from a child without baloxavir treatment Antiviral Res. 2020, 180, 104828).
  • influenza viruses demonstrate the ability to develop resistance to direct antiviral drugs, regardless of the mechanism of their activity.
  • One way to overcome such resistance is the simultaneous use of several drugs that target different viral targets. In this case, the probability of selecting virus variants that are resistant to two or more drugs is greatly reduced.
  • a number of studies have shown the formation of such double mutants resistant to both adamantane drugs and neuraminidase inhibitors [Sheu T.G., Fry A.M., Koch R.J. Dual Resistance to Adamantanes and Oseltamivir Among Seasonal Influenza A (H1N1) Viruses: 2008-2010. Journal of Infectious Diseases 2011, 203, 13].
  • RNA viruses, influenza and coronavirus suggests the effectiveness of the use of systemic administration of interferon preparations (Viferon, Nitron, Reaferon, etc.) for basic nonspecific therapy of infections caused by them, taking into account the asthenia they cause.
  • interferon preparations Viferon, Nitron, Reaferon, etc.
  • the effectiveness of topical application of interferon solutions is doubtful and can be considered in the presence of local symptoms (rhinitis, pharyngitis, etc.).
  • interferon inducers amiksin, cycloferon, neovir, etc. suggests the formation of secondary immunosuppression in 10-14 days, which can lead to re-infection in the ongoing epidemic period.
  • Basic antiviral therapy drugs include targeted drugs that affect key viral processes: viral genome replication (remdesivir, triazavirin, favipiravir and the most powerful, but also the most toxic of the drugs in this group, ribavirin), viral neuraminidase activity (oseltamivir, zanamivir, peramivir) , proteolysis of viral polyproteins using virus-specific proteases (lopinavir, ritonavir, nelfinavir) [Yamamoto N., Matsuyama S., Hoshino T. Nefinavir inhibits replication of severe acute respiratory syndrome coronavirus 2 in vitro. BioRxiv 2020.04.06.026476 [Preprint]. 2020: biorxiv.org/content/10.1101/2020.04.06.026476vl]. Anti-replicative activity was traced for the purine derivative isoprinosine, which exhibits its activity against influenza viruses A and B types.
  • pandemics of new respiratory infections will always begin in the absence of specific immune prophylaxis and therapy for these infections.
  • the latter predetermines the need for early research and development of pathogenetic agents and methods for the prevention/treatment of respiratory viral infections based on the characteristics of the biology of coronaviruses and influenza A viruses.
  • the objective of the present invention is to find new pharmacologically active compounds against viral infections, primarily against influenza and coronavirus, including strains resistant to currently existing drugs, which would have low toxicity and would not cause side effects in warm-blooded living organisms.
  • the technical result is an increase in the effectiveness of antiviral agents, including against resistant strains of viruses, a decrease in the toxicity of antiviral agents, and an expansion of the arsenal of antiviral agents.
  • R 1 is CN, COOH, COOAlk, CONHAlk, CON(Alk) 2 , CONH 2 ;
  • R 2 is H, Hal, CH 2 (NAlk) 2 ;
  • X is hydrogen or methyl
  • Hal is fluorine, chlorine or bromine; each Aik group is a linear or branched alkyl group having from 1 to 4 carbon atoms, or in the N(Alk) 2 group, two Aik groups together with the nitrogen atom to which they are attached form a -(CH 2 )3-5-group, in which one of these -CH 2 - groups may be substituted by a nitrogen atom or a -N-CH3 group.
  • R 1 is COOAlk or CONHAlk, in the group (CH2X)n X is H, n is 1.
  • R 1 is COOMe
  • R 1 is CONHMe
  • R 1 is CN
  • the invention also relates to pharmaceutically acceptable salts of the compounds of formula I.
  • salts of a compound of formula (I) means salts of an inorganic or organic acid or base which have the desired pharmacological activity of the parent compound. These salts can be obtained in situ during the synthesis, isolation or purification of the compound of formula (I) or prepared specially.
  • the pharmaceutically acceptable acid salts are characterized in that they contain the therapeutically active non-toxic acid addition salt forms which the compounds of formula I are capable of forming.
  • Said acid addition salts can be prepared by treating the base compound represented by the general formula I with suitable acids, for example acids: hydrohalic acid, in particular hydrochloric acid, hydrobromic acid, sulfuric acid, nitric or phosphoric acid; organic acids, for example: acetic acid, hydroxyacetic acid, protionic acid, lactic acid, pyruvic acid, oxalic acid, malonic acid, maleic or fumaric acid, malic, tartaric or citric acid.
  • suitable acids for example acids: hydrohalic acid, in particular hydrochloric acid, hydrobromic acid, sulfuric acid, nitric or phosphoric acid
  • organic acids for example: acetic acid, hydroxyacetic acid, protionic acid, lactic acid, pyruvic acid, oxalic acid, malonic acid, maleic or fumaric acid, malic
  • the compound in case the compound has a free COOH group, the compound can form alkali metal salts, for example the sodium salt.
  • the compounds can be obtained and used in crystalline form.
  • the compounds of general formula I and their pharmaceutically acceptable salts have antiviral activity and can be used in the treatment of diseases caused by a viral infection, in particular, caused by RNA-containing respiratory viruses or coronaviruses.
  • the compounds of general formula I and their pharmaceutically acceptable salts can be used for the treatment or prophylaxis of influenza, for example influenza A, and/or diseases caused by SARS-CoV-2 coronavirus, for example SOUS-19.
  • RNA-containing respiratory viruses or coronaviruses in particular, for example, caused by influenza virus or coronavirus SARS-CoV-2, such as influenza or SARS-19.
  • the objective of the present invention is also solved, and the technical result is achieved by creating a pharmaceutical composition containing an effective amount of a compound of formula I or a pharmaceutically acceptable salt thereof as an active ingredient and at least one pharmaceutically acceptable excipient.
  • “Pharmaceutical acceptable excipients” means diluents, excipients and/or pharmaceutical carriers used in the pharmaceutical field.
  • Pharmaceutical carriers means carriers which are used in the pharmaceutical field in the preparation of a medicament.
  • binders, lubricants, disintegrators, solvents, diluents, stabilizers, suspending agents, colorless agents, flavoring agents are used; in injection forms, antiseptic agents, solubilizers, stabilizers are used; topical forms use bases, diluents, lubricating agents, antiseptic agents.
  • the pharmaceutical composition may be used as a medicament in tablet, capsule or topical form.
  • the pharmaceutical composition can be obtained by mixing the active ingredient in an effective amount and the appropriate excipient.
  • the objective of the present invention is also solved, and the technical result is achieved by using derivatives of 2-acetamido-6-hydroxy-benzothiophene of general formula I and their pharmaceutically acceptable salts, possibly in crystalline form, or a pharmaceutical composition based on them for the preparation of medicines for the prevention and treatment of diseases mediated viral infection caused by viruses such as RNA respiratory viruses or coronaviruses, in particular, for example, those caused by the influenza virus or KopoHaBHpycoMSARS-CoV-2. Diseases in particular can be influenza or SOS-19.
  • the objective of the present invention is solved, and the technical result is also achieved by creating a method for preventing or treating a disease mediated by a viral infection, including the introduction or application to the subject of a 2-acetamido-6-hydroxy-benzothiophene derivative of the general structural formula I, its pharmaceutically acceptable salt or a pharmaceutical composition based on them in an effective amount.
  • the viral infection may be an infection caused by RNA-containing respiratory viruses or coronaviruses, in particular, for example, caused by the influenza virus or the SARS-CoV-2 coronavirus.
  • the method of treatment using a compound of the invention, a pharmaceutical composition or a drug based on them is also effective against strains resistant to currently existing drugs.
  • High performance liquid chromatography with tandem mass spectroscopy was performed on an Agilent 1290 Infinity system, consisting of a triple quadrupole mass Agilent 6460 spectrometric detector, binary pump, mobile phase degasser, column oven and autosampler. Chromatographic separation was carried out on an Agilent Eclipse Plus C 18 RRHD column (2.1 x 50 mm, 1.8 ⁇ m) at 40°C. The volume of the injected sample is 2 ⁇ l.
  • the mobile phase consisted of eluent A: 0.1% formic acid/water and eluent B: 0.1% formic acid and 85% acetonitrile in water.
  • the elemental composition of the synthesized compounds was determined on a CHNS-analyzer Elemental Analyzer EURO EA. Melting points were determined on Electrothermal 9001 and have not been corrected.
  • reaction progress and individuality of the substances were controlled by thin layer chromatography on Merck KGaA TLC Silicagel 60 F254 plates. Spots were detected by irradiation with UV light.
  • Yields refer to purified products and are not optimized.
  • Acetic anhydride 60 mmol was added to a suspension of compound 1 (30 mmol) in 80 ml of carbon tetrachloride and refluxed for 2 hours. The solution is evaporated under vacuum, water is added to the resulting residue and the precipitate is filtered off, washed with water, methanol or ethanol and diethyl ether.
  • a side product of the reaction is ethyl 6-methoxy-2-(methylamino)-1-benzothiophene-3 carboxylate, which is formed in 3% yield. Yield 15: 77%. Mr. 95-97 °C. Mass (El), m/z ((%)): 251.3026[M] + (75). C12H13NO3S. d) Preparation of ethyl 2-amino-5-bromo-6-methoxy-1-benzothiophene-3-carboxylate 16.
  • the synthesis method is similar to the synthesis of Za-s compounds.
  • the reaction is carried out for 96 hours.
  • Acetone is added to the residue obtained after evaporating the ethyl acetate, and the reaction product 18 is filtered off. Yield: 75%.
  • Example 49 While cooling, boron tribromide (1.3 ml, 10 mmol) was added to a solution of compound 18 (0.64 g, 1 mmol) in 20 ml of chloroform, and the mixture was stirred at room temperature for 1 hour. Pour into 60 ml of ice water. The organic layer is separated, chloroform is evaporated, the residue is stirred with water for 30 min. The precipitate is filtered off, washed with water, ethyl alcohol, hexane. Crystallized from ethanol. Yield: 93%. Mr. 201-203 ° ⁇ . Mass (El), m/z ⁇ reiat- (%)): 448.3313[M] + (38). C 2 oHi 8 BrN0 4 S. 1 H NMR (300 MHz, DMSO-d 6 ) d 1.25
  • Diethylamine solution is added to a solution of compound 5b (0.8 mmol) in 10 ml of methanol (0.31 g, 4.00 mmol), 0.5 ml of acetic acid and 37% aqueous formaldehyde solution (0.21 g, 3.00 mmol). The solution was stirred at room temperature for 48 hours. An aqueous solution of sodium carbonate (0.7 g in 5 ml of water) is added to the reaction mass and stirred for 30 minutes.
  • Carbonyldiimidazole (2 mmol) was added to a solution of the corresponding starting compound 25a-g (1 mmol) in 10 ml of dry THF, and the mixture was stirred at room temperature for 1 hour. An anhydrous solution of methylamine in dioxane (3 mmol) is then added. And stir for 1 hour. The volatiles are removed under vacuum, the residue is added with water and extracted with ethyl acetate. The organic layer was washed with water 2 times. Ethyl acetate is evaporated, the residue is applied to the column (eluent hexane:acetone 10:4). Collect all fractions with the reaction product, evaporate the solvent. The residue is recrystallized from a mixture of toluene: ethyl acetate (10:1 or 10:4). A crystalline compound 26 is obtained.
  • Example 78 Example 78.
  • the synthesis is similar to the synthesis of the compounds according to examples 69-75, except for the amine used.
  • Synthesis is similar to the synthesis of compounds according to examples 69-75.
  • the microtetrazolium test was used to study the cytotoxicity of the compounds.
  • MEM cell culture medium a series of threefold dilutions of each compound (300-0.1 ⁇ g/ml) was prepared on the MEM cell culture medium.
  • MDCK cells were seeded in 96 well plates and incubated for 24 hours at 36° C. in 5% CO 2 until a monolayer formed.
  • Serial dilutions of the test substances were added to the wells of the plates (0.2 ml per well) and incubated for 48 hours at 36°C in 5% CO2. The degree of destruction of the cell monolayer was then assessed in the microtetrazolium test (MTT).
  • the cells were washed twice with physiological phosphate buffer and a solution of 3-(4,5-dimethylthiazolyl-2)-2,5-diphenyltetrazolium bromide (ICN Biochemicalslnc., Aurora, Ohio) (0.5 mg/ml) in cell culture medium (0.1 ml per well). After 2 h of incubation, the wells were washed and the colored precipitate of formazan was dissolved in DMSO (0.1 ml per well) using a bacterial culture shaker. The optical density in the wells of the plate was then measured on an optical reader ThermoMultiskanFC (ThermoScientific, USA) at a wavelength of 540 nm.
  • ThermoMultiskanFC ThermoScientific, USA
  • Example 86 Determination of activity against influenza virus of 2-acetamido-6-hydroxy-benzothiophene derivatives of formula I.
  • the antiviral activity of the compounds was assessed by the decrease in virus titer compared to the control.
  • the virus titer was expressed as percent of control values (no drugs) and used for regression analysis as described above.
  • a 50% effective dose (1C 50) was calculated for each compound, that is, the concentration at which the infectious titer of the virus decreased by half compared to the control (placebo), and the selectivity index (SI) (the ratio of CC50 to 1C 50 ).
  • the calculated values of 1C 50 are given as the mean value ⁇ standard deviation for three experimental repetitions, and the results are presented in table. one.
  • Example 87 Efficacy study of 2-acetamido-6-hydroxybenzothiophene derivatives in an in vivo viral infection model
  • White outbred mice females weighing 16-18 g (age 5-6 weeks) were obtained from the nursery "Rappolovo" Leningrad region. Information about the experimental group was placed on the front surface of the cells and included the start date of the experiment, the date of infection, the name and mode of administration of the study drug. The animals were kept under standard conditions in accordance with the Decree of the Chief State Sanitary Doctor of the Russian Federation dated August 29, 2014 N°51 “On approval of SP 2.2.1.3218-14 “Sanitary and epidemiological requirements for the arrangement, equipment and maintenance of experimental biological clinics (vivariums)”.
  • the cages are covered with steel lattice covers with aft recess.
  • the floor area in the holding cage for one animal was 80 cm 2 (the minimum allowable area is 40 cm 2 ).
  • Test samples 6 samples of 2-acetamide-6-hydroxy-benzothiophene derivatives (example 3, 23, 52, 61, 72, 73).
  • Reference drugs Umifenovir, Oseltamivir and imidazolylethanamide pentanedioic acid. Before the experiment, the samples were dissolved or suspended in distilled water. The doses of the studied samples were calculated in relative weight units - mg/kg of animal body weight per day.
  • mice 100 outbred adult female mice weighing 16-18 g (age 5-6 weeks) were used.
  • the influenza virus A/PuertoRico/8/34 (H1N1) from the collection of viral strains of the NIIEM. Pasteur. Animals were infected intranasally under light ether anesthesia using an infecting dose of 2.5x10 3 EID50/animal at the rate of 0.025 ml of virus-containing material in each nostril.
  • the study drugs were administered in daily doses 1 time per day in a volume of 0.2 ml.
  • Compounds were administered orally using a disposable insulin syringe with a gastric tube.
  • the studied samples were administered to animals according to the treatment and prophylactic scheme: 4 hours before infection, 4 hours after infection, then 1 time per day for 5 days. In total, 24 groups of animals were formed for the experiment.
  • the death of animals in the experimental groups was recorded daily for 15 days after infection. As indicators of effectiveness in the experiment, an assessment of survival rates in groups (mortality rate (M), protection index (IZ)) was used.
  • M memory rate
  • IZ protection index
  • the experiment was blinded, the samples were chilled, including the control.
  • Example 88 Determination of the activity against the SARS-CoV-2 coronavirus of 2-acetamido-6-hydroxy-benzothiophene derivatives of formula I on U2-OS ACE2 cells.
  • the plates are read using an automatic confocal microscope (Opera Phoenix) that measures the number of infected cells (GFP signal) and survival (Hoechst signal). Two experiments were carried out. The stock sample concentration for all samples was 25 tM. The results are presented in table. 3. IC50 indicates the concentration that inhibits infection by 50%.
  • Example 89 Acute and subacute toxicity study of 2-acetamido-6-hydroxy-benzothiophene derivatives in mice. The study was carried out on adult mice of the BALB/c line, aged 8-12 weeks, weighing 20+2 g. Oral Toxicity - Fixed Dose Procedure” (see OECD online library data, URL: https://www.oecd-ilibrary.org/environment/test-no-420-acute-oral-toxicity-fixed- dose-procedure_9789264070943-en) when administered intragastrically to female mice. Acute toxicity was assessed in the preliminary (one animal at the maximum dose) and the main experiment. Further, subacute 14-day toxicity was assessed with a 14-day delayed observation period and an assessment of the local irritant effect when administered intragastrically to mice of both sexes at various doses.
  • the studied substances were administered in fixed volumes in the range of tested doses.
  • the volume administered to mice was 0.1 ml/10 g body weight.
  • Substances were introduced as a suspension in 1% starch paste. Before dosing, animals were restricted in food for at least 3 hours before dosing, water was freely available.
  • mice of both sexes were subjected to daily intragastric administration of the test substances indicated in Table 4 for a long time for 14 days at doses of 50, 100 and 200 mg/kg, as well as 1% starch paste in quality control.
  • doses of 50, 100 and 200 mg/kg as well as 1% starch paste in quality control.
  • the total number of animals was 192.

Abstract

Изобретение относится к новому производному 2-ацетамидо-6- гидроксибензотиофена общей структурной формулы I или его фармацевтически приемлемой соли, обладающих противовирусной активностью, которые могут быть использованы для лечения вирусных заболеваний вызванных РНК- содержащими респираторными вирусами, вирусам гриппа или коронавирусами. Преимущественное применение соединений для лечения заболеваний, где вирусом является вирус гриппа или коронавирус SARS-CoV-2, а заболеванием является грипп А или COVID-19.

Description

ПРОИЗВОДНЫЕ 2-АЦЕТАМИДО-6-ГИДРОКСИ-БЕНЗОТИОФЕНА, ОБЛАДАЮЩИЕ
ПРОТИВОВИРУСНОЙ АКТИВНОСТЬЮ
Изобретение относится к новым биологически активным соединениям производным 2- ацетамидо-6-гидрокси-бензотиофенаобщей формулы (I), их фармацевтически приемлемым солям, проявляющим активность в отношении различных вирусов, преимущественно в отношении вируса гриппа и коронавируса SARS-CoV-2, способу их получения и их применению в качестве противовирусных лекарственных средств.
Проблема поиска новых противовирусных средств обусловлена значительным распространением вирусных инфекций у человека и животных. Это связано с понижением иммунной защиты у человеческой популяции, а также с широким развитием резистентности у вирусов к имеющимся на рынке лекарственным препаратам. Проблема быстрого развития резистентности обусловлена тем, что в основном многие используемые известные противовирусные препараты представляют собой производные одного класса соединений, а также недостаточной эффективностью и зачастую высокой токсичностью препаратов.
Грипп - острое инфекционное заболевание дыхательных путей, вызываемое РНК-содержащим вирусом, имеющим высокую эпидемиологическую и клиническую значимость с высокой частотой осложнений, в особенности среди лиц групп риска. Вирусы гриппа и других острых респираторных вирусных инфекций (ОРВИ) вызывают массовые вспышки заболеваний, принимающие ежегодно характер эпидемий. Ежегодно регистрируется от 27 до 41 млн случаев этих заболеваний, в частности гриппом переболевает от 5 до 15% населения России в год. Грипп и ОРВИ остаются практически неконтролируемыми заболеваниями из-за высокой изменчивости антигенной структуры циркулирующих вирусов гриппа и гетерогенности возбудителей ОРВИ. Кроме того, вирусы гриппа и других ОРВИ способны изменять свои свойства и патогенность. Последним примером таких изменений является возбудитель гриппа HlNlpdm09, циркулирующий в эпидемический сезон 2009-2010 гг., получивший название «свиной грипп». Противовирусные средства для лечения гриппа представляют собой крайне ограниченную группу лекарственных препаратов, причем для большинства из них известна резистентность к ним вирусов. Благодаря особенностям организации генома (отсутствие механизма коррекции ошибок репликации) и короткому жизненному циклу вирус гриппа обладает высокой скоростью мутаций. Как результат, антигенная структура вируса в высокой степени подвержена изменениям в результате селективного давления иммунной системы организма-хозяина. Кроме того, применение химиопрепаратов воспринимается вирусом как фактор селекции, в реультате чего также происходит формирование устойчивых штаммов. Эти два процесса приводят к появлению вариантов вирусов, способных избегать как активности нейтрализующих антител, и тем самым ускользать от иммунного ответа организма, так и преодолевать действие химиопрепаратов, направленных на определенный этап репродукции вируса. При этом каждый тип вируса имеет свой механизм приспособления к химическому препарату [Ison M.G. Antivirals and resistance: influenzavirus, Current OpinioninVirology, 2011, 563].
Известны ингибиторы нейраминидазы, зарегистрированные в России: Осельтамивир (Тамифлю) и Занамивир (Реленза), а также используемые в США: Перамивир (Рапиакта) и Ланинамивир (Инавир), которые действуют на этапе почкования вновь синтезированных вирионов гриппа из оболочки клетки, блокируя отщепление частиц вирусного потомства от поверхности клеток [Ison M.G. Clinical use of approved influenza antivirals: therapy and prophylaxis. // Influenza Other RespirViruses. 2013, 7 Suppl 1, 7-13]. Кроме того, ингибиторы вирусной нейраминидазы препятствуют доступу вирионов к клеткам-мишеням, блокируя нейраминидазное расщепление мукополисахаридов слизи верхних дыхательных путей. Практика применения ингибиторов нейраминидазы в лечении гриппа показала, что высокая эффективность этой группы препаратов ограничена ранней стадией заболевания.
Известны также противогриппозные препараты другого механизма действия, например, препарат Ремантадин (а-метил-1-адамантилметиламина гидрохлорид) и Амантадин (1-аминоадамантан) [Davies, W.L.; Grunert, R.R.; Haff, R.F.; McGahen, J.W.; Neumayer, E.M; Paulshock, M.; Watts, J.C; Wood, T.R.; Hermann, E.C; Hoffmann, C.E. Antiviral Activity of 1-Adamantanamine (Amantadine) // Science. - 1964. - V. 144. P. 862]. Данные соединения блокируют белок М2 вируса гриппа, препятствуя тем самым процессу расщепления гемагглютинина, слиянию мембран вируса и лизосомальной вакуоли и процессу «раздевания» вируса [Scholtissek С., Quack G., Klenk H.D., WebsterR.G. // AntiviralRes. 1998, V. 37, P. 83-95]. Механизм действия этих препаратов изучендостаточно полно [Cady S.D., Schmidt-Rohr К., Wang J., Soto C.S., DeGrado W.F., Hong M.H. Structure of the amantadine binding site of influenza М2 proton channels in lipid bilayers, Nature. 2010, 463, 689]. Адамантановые препараты значительно дешевле и проще в производстве, чем коммерчески доступные ингибиторы нейраминидазы, что делает их более доступными для лечения и профилактики гриппа среди населения. Однако в настоящее время в результате широкого использования адамантановых препаратов значительно утрачены их противовирусные свойства в отношении вирусов гриппа А. Тем не менее каркасные соединения остаются привлекательными в качестве основы для дизайна противовирусных препаратов. Так, известно средство дейтифорин (2-(Г-аминоэтил)бицикло[2.2.1]гептан, являющееся одним из наиболее интересных препаратов на основе природных бициклических каркасных соединений - борнанов [Патент RU 2448692 С2, оп. 27.04.2012], а также недавно разработанный препарат камфецин (1,7,7-триметилбицикло[2.2.1]гептан-2-илиден-аминоэтанол) [Патент РФ N° 2530554 от 22.04.2013].
В США зарегистрирован препарат балоксавирамарбоксил (Ксофлюза) - ингибитор эндонуклеазной активности полимеразного комплекса вируса гриппа (Yang Т. Baloxavir Marboxil: The First Cap-dependent Endonuclease inhibitor for the treatmen to influenza. Ann Pharmacother. 2019, 53, 7, 754-759).
В России и ряде других стран для контроля гриппа применяется препарат Арбидол (умифеновир), блокирующий фузогенную активность вирусного гемагглютинина и препятствующий таким образом слиянию вирусной и клеточной мембран [Blaising, J., Polyak, S.J., Pecheur, Е-Т, Arbidolas a broad-spectrumantiviral: anupdate. Antiviral Research (2014), doi: http://dx.doi.Org/10.1016/j.antiviral.2014.04.006]. Помимопрямой противовирусной активности, он обладает интерфероногенными свойствами, поэтому может применяться как для терапии, так и для профилактики гриппозной инфекции.
Недостатком препаратов на основе производных адамантана является невысокая противовирусная активность, вызванная резистентностью подавляющего большинства штаммов гриппа к этому препарату. Были также зарегистрированы варианты вируса гриппа, резистентные к ингибиторам нейраминидазы, в частности, к наиболее распространенному препарату - Тамифлю. В основе резистентности лежат аминокислотные замены в каталитическом сайте NA или вблизи него. Так, например, мутация H274Y обеспечивает осельтамивир-устойчивость вирусов, несущих нейраминидазу подтипа N1, тогда как мутации El 19V и R292K определяют резистентность подтипа N2 [McKimm-Breschkin J. L. Influenza neuraminidase inhibitors: antiviral action and mechanisms of resistance. Influenza Other Resp. Viruses. 2013, 7, Suppl. 1, 25.]. В целом, по данным CDC, распространенность вирусов, резистентных к осельтамивиру, в США в период, предшествовавший пандемии, оставалась на низком уровне и не превышала 1 %, а в 2008-2009 гг. уровень резистентности к осельтамивиру вырос до 12 %, после чего число резистентных штаммов начало постепенно сокращаться. В пределах подтипа H1N1, однако, уровень осельтамивир-резистентности достиг практически 100% во всех регионах Земли [Okomo-Adhiambo М., Fry А. М., Su S. et al. Oseltamivir-resistant influenza A (H1N1) pdm09 viruses, United States, 2013-14. Emerg. Infect. Dis. 2015, 21, 136].
Штаммы вируса, резистентные к новому препарату балоксавиру, также были выделены от пациентов, проходящих лечение этим препаратом (Takashita Е, Abe Т, Morita Н, Nagata S, etal. Influenza A (H1N1) pdm09 virus exhibiting reduced susceptibility to baloxavir due to a PA E23K substitution detected from a child without baloxavir treatment. Antiviral Res. 2020, 180, 104828).
Такимобразом, вирусы гриппа демонстрируют способность к выработке устойчивости к препаратам прямого противовирусного действия независимо от механизма их активности. Одним из способов преодоления такой резистентности является одновременное использование нескольких препаратов, направленных на разные вирусные мишени. В этом случае вероятность селекции вариантов вируса, обладающих устойчивостью к двум и более препаратам, многократно снижается. Несмотрянаэто, в ряде исследований показано формирование таких двойных мутантов, резистентных как к препаратам адамантанового ряда, так и к ингибиторам нейраминидазы [Sheu T.G., Fry А.М., Garten R.J. Dual Resistance to Adamantanes and Oseltamivir Among Seasonal Influenza A (H1N1) Viruses: 2008-2010. Journal of Infectious Diseases 2011, 203, 13].
Природа РНК-вирусов, гриппа и коронавируса, предполагает эффективность применения для базисной неспецифической терапии инфекций, вызванных ими, системного введения препаратов интерферона (виферон, нитрон, реаферон и др.) с учетом вызываемой ими астенизации. Эффективность местного применения растворов интерферона сомнительна и может рассматриваться при наличиилокальной симптоматики (ринит, фарингит и т.п.). Применение индукторов интерферонов (амиксин, циклоферон, неовир и др.) предполагает формирование через 10-14 суток вторичной иммунодепрессии, что может в продолжающемся эпидемическом периоде привести к повторному инфицированию. К препаратам базисной противовирусной терапии относят средства направленного действия, воздействующие на ключевые вирусные процессы: репликацию вирусного генома (ремдезивир, триазавирин, фавипиравир и наиболее сильный, но и наиболее токсичный из препаратов данной группы рибавирин), активность вирусной нейраминидазы (осельтамивир, занамивир, перамивир), протеолиз вирусных полипротеинов при помощи вирусспецифических протеаз (лопинавир, ритонавир, нельфинавир) [Yamamoto N., Matsuyama S., Hoshino T. Nelfinavir inhibits replication of severe acute respiratory syndrome coronavirus 2 in vitro. BioRxiv 2020.04.06.026476 [Preprint]. 2020: biorxiv.org/content/ 10.1101/2020.04.06.026476vl]. Антирепликативная активность прослежена для производного пурина изопринозина, проявляющего свою активность в отношении вирусов гриппа А и В типов.
Таким образом, биология вирусов гриппа и коронавирусов с неизбежностью обусловливает появление их новых пандемических штаммов, время возникновения, изменчивость генома и антигенные свойства которых предсказать невозможно. То есть, пандемии новых респираторных инфекций всегда будут начинаться в отсутствие средств специфической иммунной профилактики и терапии этих инфекций. Последнее предопределяет необходимость заблаговременного изыскания и разработки патогенетических средств и способов профилактики/терапии респираторных вирусных инфекций исходя из особенностей биологии коронавирусов и вирусов гриппа типа А.
Для максимально полного и эффективного контроля над гриппозной инфекцией актуальной задачей является постоянная разработка и внедрение новых противовирусных препаратов, химически неродственных уже используемым в клинике и направленных на альтернативные мишени в жизненном цикле вируса.
Задача настоящего изобретения состоит в изыскании новых фармакологически активных соединений в отношении вирусных инфекций, прежде всего в отношении гриппа и коронавируса, в том числе, к штаммам, резистентным к существующим в настоящее время лекарственным препаратам, которые при этом имели бы низкую токсичность и не вызывали бы побочных эффектов у теплокровных живых организмов. Технический результат - повышение эффективности противовирусных агентов, в том числе против резистентных штаммов вирусов, снижение токсичности противовирусных агентов, расширение арсенала противовирусных средств.
Данная задача решается, а технический результат достигается путем синтеза производных 2-ацетамидо-6-гидрокси-бензотиофена, соответствующими общей структурной формуле I.
Figure imgf000007_0001
где
R1 представляет собой CN, СООН, COOAlk, CONHAlk, CON(Alk)2, CONH2;
R2 представляет собой H, Hal, CH2(NAlk)2;
R3 представляет собой Hal , Aik, OAlk, CF3, или две близлежащие группы R3 образуют группу -СН=СН-СН=СН- ;
R4 представляет собой Н или Hal; п=1-4; ш=1-3;
X представляет собой водород или метил;
Hal представляет собой фтор, хлор или бром; каждая группа Aik представляет собой линейную или разветвленную алкильную группу имеющую от 1 до 4 атомов углерода, или в группе N(Alk)2 две группы Aik вместе с атомом азота, к которому они присоединены образуют -(СН2)з-5-группу, в которой одна из указанных -СН2- групп может быть замещена атомом азота или группой -N-СНз.
Преимущественными являются соединения общей формулы (I), где R1 это COOAlk или CONHAlk, в группе (CH2X)n X означает Н, п равно 1. Примерами таких соединений являются соединение согласно формуле (I) где R1 это СООМе, R2 это Н, С1 или CH2(NAlk)2 и п=1; или соединение согласно формуле (I) где R1 это CONHMe, R2 это Н, С1 или CH2(NAlk)2 и п=1; или соединение согласно формуле (I) где R1 это CN, R2 это Н, С1 или CH2(NAlk)2 и п=1;
Важнейшим отличием представленных соединений и их ключевой характеристикой является наличие при атоме азота во втором положении бензотиофена одновременно бензильного (замещенного бензильного) и ацетильного заместителя.
Изобретение также относится к фармацевтически приемлемым солям соединений формулы I.
Термин «фармацевтически приемлемые соли соединения формулы (I)» означает соли неорганической или органической кислоты, или основания, которые обладают необходимой фармакологической активностью исходного соединения. Эти соли могут быть получены in situ в процессе синтеза, выделения или очистки соединения формулы (I) или приготовлены специально.
Фармацевтически приемлемые соли с кислотами характеризуются тем, что содержат терапевтически активные нетоксичные аддитивные солевые формы с кислотами, которые способны образовывать соединения формулы I. Указанные аддитивные соли с кислотами могут быть получены обработкой соединения в виде оснований, представленных общей формулой I подходящими кислотами, например, неорганическими кислотами: галогенводородной кислотой, в частности хлористоводородной кислотой, бромистоводородной кислотой, серной кислотой, азотной или фосфорной кислотой; органическими кислотами, например: уксусной кислотой, гидроксиуксусной кислотой, протионовой кислотой, молочной кислотой, пировиноградной кислотой, щавелевой кислотой, малоновой кислотой, малеиновой или фумаровой кислотой, яблочной, винной или лимонной кислотой.
В случае, если соединение имеет свободную группу СООН, соединение может образовывать соли со щелочными металлами, например, натриевую соль.
Соединения могут быть получены и использованы в кристаллическом виде.
Соединения общей формулы I и их фармацевтически приемлемые соли обладают противовирусной активностью и могут быть использованы при лечении заболеваний, вызванных вирусной инфекцией, в частности вызываемой РНК-содержащими респираторными вирусами или коронавирусами. Соединения общей формулы I и их фармацевтически приемлемые соли могут быть использованы для лечения или профилактики гриппа, например, гриппа А, и/или заболеваний, вызванных коронавирусом SARS-CoV-2, например, СОУШ-19.
Соединения общей формулы I и их фармацевтически приемлемые соли исследованы в отношении патогенных вирусов и могут быть использованы для получения лекарственных средств на их основе для лечения или профилактики вирусных заболеваний, вызываемых РНК-содержащими респираторными вирусами или коронавирусами, в частности, например, вызываемых вирусом гриппа или коронавирусом SARS-CoV-2, например, гриппа или СОУШ-19.
Задача настоящего изобретения также решается, а технический результат достигается созданием фармацевтической композиции, содержащей в эффективном количестве соединение формулы I или его фармацевтически приемлемую сольв качестве активного компонента и по меньше мере один фармацевтическиприемлемый эксцепиент.
«Фармацевтически приемлемые эксципиенты» означает применяемые в сфере фармацевтики разбавители, вспомогательные агенты и/или фармацевтические носители.
Фармацевтические носители означает носители, которые применяются в области фармацевтики при получении лекарственого средства. При получеии композиций в виде лекарственной формы для перорального введения используют связующие вещества, смазывающие агенты, дезинтеграторы, растворители, разбавители, стабилизаторы, суспендирующие агенты, бесцветные агенты, корригенты вкуса; в формах для инъекций используются антисептические агенты, солюбилизаторы, стабилизаторы; в местных формах используются основы, разбавители, смазывающие агенты, антисептические агенты.
Фармацевтическая композиция может быть использована в виде лекарственного средства в форме таблетки, капсулы или в форме, пригодной для местного применения.
Фармацевтическая композиция может быть получена путем смешения активного компонента в эффективном количестве и соответствующего эксципиента.
Задача настоящего изобретения также решается, а технический результат достигается применением производных 2-ацетамидо-6-гидрокси-бензотиофена общей формулы I и их фармацевтически приемлемыхсолей, возможно в кристаллическом виде, или фармацевтической композиции на их основе для приготовления лекарственных средств для предупреждения и лечения заболеваний опосредованных вирусной инфекцией, вызываемых такими вирусами, как РНК-содержащими респираторными вирусами или коронавирусами, в частности например, вызываемых вирусом гриппа или KopoHaBHpycoMSARS-CoV-2. Заболеваниями в частности может быть грипп или СОУШ-19.
Задача настоящего изобретения решается, а технический результат достигается также созданием способа предупреждения или лечения заболевания, опосредованоговирусной инфекцией, включающий введение или нанесение субъекту производного 2-ацетамидо-6-гидрокси-бензотиофена общей структурной формулы I, его фармацевтически приемлемой соли или фармацевтической композиции на их основе в эффективном количестве. Вирусной инфекцией может быть инфекция, вызываемаяРНК- содержащими респираторными вирусами или коронавирусами, в частности, например, вызываемая вирусом гриппа или коронавирусом SARS-CoV-2.
Способ лечения с использованием соединения изобретения, фармацевтической композиции или лекарственного средства на их основе эффективен также к штаммам резистентным к существующим в настоящее время лекарственным препаратам.
В экспериментах invitro и invivo показана высокая активность представителей 2- ацетамид-6-гидрокси-бензотиофена формулы I в отношении вируса гриппа и коронавируса SARS-CoV-2.
Ниже показаны примеры получения соединений по изобретению. Примеры включают в себя конкретные варианты предлагаемого изобретения, но не ограничивают настоящее изобретение.
Примеры осуществления изобретения и реализации назначения Материалы и методы
Все реагенты и растворители были приобретены у коммерческих поставщиков (AlfaAesar, Acros, Химмед) и использованы без дополнительной очистки.
Спектры 'Н и 13С ЯМР были зарегистрированы на спектрометрах Bruker АС-300 (рабочая частота 300 МГц, 1 Н и Bruker АС-200 (рабочая частота 50 МГц, 13С) в растворителях ДМСО-<7б Или CDCb. Химические сдвиги приведены в м.д. по шкале d относительно Me4Si. Масс-спектры соединений были записаны на квадрупольном масс-спектрометре Finnigan MAT INCO 50 (электронный удар, энергия ионизации 70 эВ) при прямом вводе образца в ионный источник.
Высокоэффективная жидкостная хроматография с тандемной масс- спектроскопией была проведена на системе Agilent 1290 Infinity, состоящей из тройного квадрупольного масс- спектрометрического детектора Agilent 6460, бинарного насоса, дегазатора подвижной фазы, термостата колонок и автосемплера. Хроматографическое разделение осуществлялось на колонке Agilent Eclipse Plus С 18 RRHD (2.1 х 50 мм, 1.8 мкм) при температуре 40 °С. Объем вводимой пробы - 2 мкл. Подвижная фаза состояла из элюента А: 0.1 % муравьиной кислоты / вода - и элюента В: 0.1 % муравьиной кислоты и 85 % ацетонитрила в воде. Градиентный режим: 0.0-3.0 мин: 60% В (разделение), 3.0-4.0 мин: 60 — >· 97% В (промывка и регенерация), 4.0-6.0 мин: 97% В, 6.0-6.1 мин: 97 — >· 60% В, 6.1-9.0 мин: 60% В. Скорость потока подвижной фазы составляла 0.4 мл/мин. Масс- спектрометрическое детектирование проводили при положительной ионизации. Оптимальные параметры: напряжение на капилляре 3.5 кВ, газ-осушитель - азот, температура 350 °С и скорость потока - 12 л/мин. Чистота всех конечных соединений составила > 95 %.
Элементный состав синтезированных соединений определен на CHNS-анализаторе Elemental Analyzer EURO ЕА. Температуры плавления определены на Electrothermal 9001 и не откорректированы.
Контроль над ходом реакции и индивидуальностью веществ осуществлялся с помощью тонкослойной хроматографии на пластинах Merck KGaA TLC Silicagel 60 F254. Пятна обнаруживали при облучении УФ-светом.
Разделение смесей соединений осуществляли методом колоночной хроматографии (S1O2, 0.006-0.2 мм (70-230 меш)).
Выходы относятся к очищенным продуктам и не оптимизированы.
Общий метод синтеза 1.
Figure imgf000013_0002
Figure imgf000013_0001
a) Получение производных 2-амино-4,7-дигидро-5Н-спиро[1-бензотиофен-6,2'- [1,3] д иоксол ан] -3 - кар боксил ата la-d .
Смесь 1,4-диоксоспиро[4.5]декан-8-она (40 ммоль), этилцианоацетата (40 ммоль) или метилцианоацетата (40 ммоль) или изопропилцианоацета (40ммоль) или трет- бутилцианоацетата (40 ммоль), серы (40 ммоль) и морфолина (40 ммоль) в 40 мл соответствующего спирта перемешивают 4 ч при температуре 45°С. Летучие вещества удаляют под вакуумом и остаток растворяют в 150 мл этилацетата. Раствор переносят в делительную воронку, промывают водой до pH 6.5, сушат сульфатом натрия, этилацетат упаривают.
Этил 2-амино-4, 7 -дигидро-5Н-спиро[1 -бензотиофен-6, 2'-[ 1 ,3 ] диоксолан] -3-карбоксилат la. Выход 92%, масло. Mass (El), m/z ( (%)): 283.3444 [М]+ (57). C13H17NO4S.
Метил 2-амино-4, 7 -дигидро-5Н-спиро[1 -бензотиофен-6, 2'-[ 1,3] диоксолан] -3-карбоксилат lb. Выход 84%. Мр. 101-3°С. Mass (El), m/z ( (% )): 269.3178 [М]+ (62). C12H15NO4S.
Изопропил 2-амино-4, 7-дигидро-5Н-спиро] 1 -бензотиофен-6,2'-] 1,3] диоксолан] -3- карбоксилат 1с. Выход 93%, масло. Mass (El), m/z (1 reiat- (%)): 297.371 [М]+ (52).Ci4Hi9N04S. Трет-бутил 2-амино-4, 7-дигидро-5Н-спиро] 1 -бензотиофен-6,2'-] 1,3] диоксолан] -3- карбоксилат Id. Выход 90%, масло. Mass (El), m/z ( Ireim.(% )): 311.3976 [М]+ (49). C15H21NO4S. b) Получение производных2-(ацетиламино)-4,7-дигидро-5Н-спиро[1-бензотиофен-6,2'- [1,3] диоксолан] -3 - кар боксил ата 2a-d .
К суспензии соединения 1 (30 ммоль) в 80 мл четыреххлористого углерода добавляют уксусный ангидрид (60 ммоль) и кипятят 2 часа. Раствор упаривают под вакуумом, в полученный остаток добавляют воду и осадок отфильтровывают, промывают водой, метанолом или этанолом и диэтиловым эфиром.
Этил 2-( ацетиламино)-4, 7-дигидро-5Н-спиро] 1 -бензотиофен-6, 2 '-[1,3 ] диоксолан ] -3- карбоксилат 2а. Выход: 80%. Мр. 128-130°С. Mass (El), m/z (Ireiat- (%)): 325.3811 [М]+ (82). C15H19NO5S. Метил 2-( ацетиламино)-4, 7-дигидро-5Н-спиро[ 1 -бензотиофен-6, 2'- [1,3 ]диоксолан ] -3- карбоксилат 2Ь. Выход: 89%. Мр. 143-147°С. Mass (El), m/z ( Ireiat-(% )): 311.3545 [М]+ (87). C14H17NO5S.
Пропил 2-( ацетиламино)-4, 7-дигидро-5Н-спиро[ 1 -бензотиофен-6, 2 '-[1,3 [диоксолан ] -3- карбоксилат 2с. Выход:60%, масло. Mass (El), m/z ( Ireiat-(% )): 339.4077 [М]+ (78). C16H21NO5S.
Трет-бутил 2-(ацетиламино)-4,7-дигидро-5Н-спиро[ 1 -бензотиофен-6, 2'-[ 1,3 [диоксолан] - 3-карбоксилат 2d. Выход: 59%. Мр. 129-133°С. Mass (El), m/z (Ireiat- (%)): 353.4343 [М]+ (68). C16H21NO5S. с) Получениепроизводных 2-[ацетил(бензил)амино]-4,7-дигидро-5Н-спиро[1-бензотиофен- 6,2'- [ 1 ,3 ] диоксолан] -3 -карбоксилата За- w .
К раствору соединения 2 (10 ммоль) в 40 мл сухого диметилформамида добавляют карбонат цезия (15 ммоль), тетрабутиламмония бромид (15 ммоль) и соответствующий бензил бромид (15 ммоль). Реакционную массу перемешивают при комнатной температуре от 2 до 4 часов (контроль ТСХ в системе гексан:этилацетат 7:3). Добавляют 150 мл этилацетата и 200 мл воды. Органический слой еще раз промывают 100 мл воды. Сушат сульфатом натрия в течении 4х часов и этилацетат упаривают. Получают соединения 3, большинство из которых являются маслами. Очистка методом колоночной хроматографии, в качестве элюента используют хлороформ.
Этил2-[ ацетил ( бензил )амино ] -4, 7-дигидро-5Н-спиро[ 1 -бензотиофен-6, 2 '-[ 1,3 [диоксолан ] - 3-карбоксилат За. Выход: 70%. Мр. 66-70°С. Mass (El), m/z ( Ireiat-(% )): 415.5036 [М]+ (45). C22H25NO5S.
Метил2-[ ацетил ( бензил )амино]-4, 7-дигидро-5Н-спиро[ 1 -бензотиофен-6,2
[1,3] диоксолан] -3-карбоксилат ЗЬ. Выход: 88%. Мр. 64-66°С. Mass (El), m/z (Ireiat-(%)):
401.4771 [М]+ (34). C21H23NO5S.
Изопропил2- [ацетил] бензил )амино[-4, 7-дигидро-5Н-спиро[ 1 -бензотиофен-6,2' -
[1,3 [диоксолан] -3-карбоксилат Зс. Выход: 64%, масло. Mass (El), m/z (Ireiat- (%))- 429.5302
[М]+ (32). C23H27NO5S.
Трет-бутил2-[ ацетил ( бензил )амино ] -4, 7-дигидро-5Н-спиро[ 1 -бензотиофен-6, 2 '- [ 1 ,3 ] диоксолан] -3-карбоксилат 3d. Выход: 88%, масло. Mass (El), m/z ( Ireiat-(% )): 443.5568 [М]+ (34). C24H29NO5S. Этил2-[ ацетил(2-хлоробензил )амино ] -4, 7-дигидро-5Н-спиро[ 1 -бензотиофен-6, 2 '-
[1,3]диоксолан]-3 -карбоксилам Зе. Выход: 82%, масло. Mass (El), m/z {Ireia (%)): 449.9484 [М]+ (24). C22H24CINO5S.
Этил2-[ацетил(4-хлоробензил)амино]-4,7-дигидро-5Н-спиро[1-бензотиофен-6,2'-
[1,3]диоксолан]-3 -карбоксилам 3f. Выход: 93%, масло. Mass (El), m/z ( Ireiau{% )): 449.9484 [М]+ (28). C22H24CINO5S.
Этил2-[ ацетил(4-метилбензил )амино]-4, 7-дигидро-5Н-спиро[ 1 -бензотиофен-6,2 [ 1 ,3 ] диоксолан] -3 -карбоксилам 3g. Выход: 81%, масло. Mass (El), m/z {Ireia (%)): 429.5302 [М]+ (35). C23H27NO5S.
Метил2-[ ацетил(2 -хлоробензил )амино ] -4, 7-дигидро-5Н-спиро[ 1 -бензотиофен-6, 2
[1,3] диоксолан] -3 -карбоксилам 3h. Выход: 80%, масло. Mass (El), m/z { Ireiau{% )): 435.9218 [М]+ (38). C21H22CINO5S.
Метил2-[ ацетил(4-метилбензил )амино]-4, 7-дигидро-5Н-спиро[ 1 -бензотиофен-6,2
[1,3] диоксолан] -3 -карбоксилам 3i. Выход: 87%, масло. Mass (El), m/z {Ireia (%)): 415.503 [М]+ (22). C22H25NO5S.
Метил 2-[ ацетил(2 -трифторометилбензил )амино ] -4, 7-дигидро-5Н-спиро[ 1 - бензотиофен -6, 2'-[1,3]диоксолан]-3-карбоксилат 3j. Выход: 88%, масло. Mass (El), m/z {Ireiau{%)) 469.475 [М]+ (21). C22H22F3NO5S.
Метил2-[ ацетил(4 -трифторометилбензил )амино]-4, 7-дигидро-5Н-спиро[ 1 -бензотиофен- 6,2' -[1,3] диоксолан] -3 -карбоксилам Зк. Выход: 85%, масло. Mass (El), m/z {Ireiau{%)): 469.475 [М]+ (24). C22H22F3NO5S.
Метил2 -[ ацетил(2 -фторбензил )амино ] -4, 7-дигидро-5Н-спиро[ 1 -бензотиофен-6, 2
[1,3] диоксолан] -3 -карбоксилам 31. Выход: 93%, масло. Mass (El), m/z {Ireiau{%)): 419.4675 [М]+ (29). C21H22FNO5S.
Метил2 -[ ацетил(3 -фторбензил )амино ] -4, 7-дигидро-5Н-спиро[ 1 -бензотиофен-6, 2
[1,3] диоксолан] -3 -карбоксилам Зт. Выход: 90%, масло. Mass (El), m/z {Ireiau{%)): 419.4675 [М]+ (28). C21H22FNO5S.
Метил2-[ ацетил(4 -фторбензил )амино]-4, 7-дигидро-5Н-спиро[ 1 -бензотиофен-6,2
[1,3] диоксолан] -3 -карбоксилам Зп. Выход: 86%, масло. Mass (El), m/z {Ireiau{%)): 419.4675 [М]+ (25). C21H22FNO5S.
Метил2-[ ацетил(2,4-дифторбензил )амино ] -4, 7-дигидро-5Н-спиро[ 1 -бензотиофен-6, 2
[1,3] диоксолан] -3 -карбоксилам Зо. Выход: 87%, масло. Mass (El), m/z {Ireiau{%)): 437.458 [М]+ (17). C21H21F2NO5S. Метил2-[ ацетил( 1 -нафтилметил )амино]-4, 7-дигидро-5Н-спиро[ 1 -бензотиофен-6,2 '- [ 1 ,3] диоксолан] -3 -карбоксилам Зр. Выход: 92%, масло. Mass (El), m/z (Ireia {%)). 451.5357 [М]+ (19). C25H25NO5S.
Метил2 -[ ацетил(2 -нафтилметил )амино ] -4, 7-дигидро-5Н-спиро[ 1 -бензотиофен-6, 2
[1,3] диоксолан] -3 -карбоксилам 3q. Выход: 93%, масло. Mass (El), m/z (Ireia {%)). 451.5357 [М]+ (15). C25H25NO5S.
Метил2-[ ацетил(2 -фенилэтил )амино ] -4, 7-дигидро-5Н-спиро[ 1 -бензотиофен-6, 2
[1,3] диоксолан] -3 -карбоксилам Зг. Выход: 75%, масло. Mass (El), m/z (helm. (%))'- 415.5036
[М]+ (23). C22H25NO5S.
Метил2-[ ацетил ( 1 -фенилэтил )амино ] -4, 7-дигидро-5Н-спиро[ 1 -бензотиофен-6, 2
[1,3] диоксолан] -3 -карбоксилам 3s. Выход: 87%, масло. Mass (El), m/z (Ireia {%)). 415.5036
[М]+ (22). C22H25NO5S.
Метил2 -[ ацетил(2 -метилбензил )амино ] -4, 7-дигидро-5Н-спиро[ 1 -бензотиофен-6, 2
[1,3] диоксолан] -3 -карбоксилам 3t. Выход: 84%, масло. Mass (El), m/z (Ireia {%)). 415.503 [М]+ (20). C22H25NO5S.
Метил2-[ ацетил(4-изопропилбензил )амино]-4, 7-дигидро-5Н-спиро[ 1- бензотиофен -6, 2
[1,3] диоксолан] -3 -карбоксилам Зи. Выход: 91%, масло. Mass (El), m/z (Ireia {%)). 443.5568 [М]+ (18). C24H29NO5S.
Метил2 -[ ацетил(2 -цианобензил )амино ] -4, 7-дигидро-5Н-спиро[ 1 -бензотиофен-6, 2
[1,3] диоксолан] -3 -карбоксилам 3v. Выход: 89%, масло. Mass (El), m/z (helm. (%))- 428.5024 [М]+ (22). C22H24N2O5S.
Метил2-[ацетил(2-фторофенилэтил)амино]-4, 7-дигидро-5Н-спиро[ 1 -бензотиофен-6,2
[1,3] диоксолан] -3 -карбоксилам 3w. Выход: 69%, масло. Mass (El), m/z (helm. (%))- 435.51 [М]+ (23). C22H24FNO5S. d) Получение производных метил-2-[ацетил(бензил)амино]-7-хлоро-6-гидрокси-1- бензотиофен-3-карбоксилата 4a-w иметил 2-[ацетил(бензил)амино]-6-гидрокси-1- бензотиофен-3-карбоксилата 5a-w.
К раствору соединения 3 (10 ммоль) в 70 мл ацетонитрила добавляют дигидрат хлорида меди II (20 ммоль). Перемешивают при комнатной температуре от 2 до 4 часов (контроль по ТСХ в системе дихлорметан:этилацетат 19:1). Реакционную массу обрабатывают 80 мл 2Н раствора НС1, 50 мл воды и 200мл этилацетата. Органический слой промывают водой до pH 6-7. Этилацетат удаляют под вакуумом. Полученное масло представляет собой смесь продуктов реакции 4a-w и 5a-w, которые выделяют в индивидуальном виде методом колоночной хроматографии (используют систему дихлорметан:этилацетат 19:1).
Пример 1.
Этил 2-[ацетил(бензил)амино] -7 -хлоро-6-гидрокси-1 -бензотиофен-3 -карбоксилат 4а.
Figure imgf000018_0001
Выход: 20%.
Мр. 151-155 °С. Mass (El), m/z ( (%)): 403.88 [М]+ (40). CioHisCINCES. ^NMR (300 MHz, DMSO-d6) d 1.27 (t, J = 1.1 Hz, 3H, CH3CH2), 1.85 - 2.11 (br s, 3H, CH3CO), 4.20 (br q, / = 7.1Hz, 2H, CH3CH2), 4.87 (br s, 2H, NCH2Ph), 7.07 - 7.43 (m, 6H, C6H5, H5), 8.07 (d, J = 8.9 Hz, 1H, H4), 10.54 (s, 1H, OH).
Пример 2.
Этил 2-[ ацетил( бензил )амино ] -6-гидрокси-1 -бензотиофен-3 -карбоксилат 5а.
Figure imgf000018_0002
Выход: 39%. Мр. 146-148 °С. Mass (El), m/z ( (% )): 369.4352 [М]+ (38). C20H19NO4S. ^NMR^OO MHz, DMSO-d6) d 1.25 (t, / = 7.1 Hz, 3H, CH3CH2), 1.95 (s, 3H, CH3CO), 4.17 (br. s, 2H, CH3CH2), 4.56 (d, / = 13.0 Hz, 1H, NCHPh), 5.08 (d, / = 13.0 Hz, 1H, NCHPh), 6.98 (dd, /= 8.9, 2.3 Hz, 1H, H5), 7.11 - 7.38 (m, 6H, C6H5, H7), 8.10 (d, /= 8.9 Hz, 1H, H4), 9.86 (s, 1H, OH). Пример 3.
Метил 2-[ацетил(бензил)амино]-7-хлоро-6-гидрокси-1-бензотиофен-3-карбоксилат 4b.
Figure imgf000019_0001
Выход: 22%. Мр. 218-222 °С. Mass (El), m/z ( (% )): 389.8534 [М]+ (45). C19H16CINO4S. ^NMR (300 MHz, DMSO-d6) d 1.94 (s, 3H, CH3CO), 3.72 (s, 3H, OCH3), 4.72 (br s, 1H, NCH2), 4.99 (br s, 1H, NCH2), 7.05 - 7.30 (m, 6H), 8.06 (d, J = 8.9 Hz, 1H, H4), 10.70 (s, 1H, OH).
Пример 4. Метил 2-[ацетил(бензил)амино]-6-гидрокси-1-бензотиофен-3-карбоксилат 5b.
Figure imgf000019_0002
Выход: 35%. Мр. 165-167 °С. Mass (El), m/z ( (% )): 355.4086 [M]+ (50). C19H17NO4S. !HNMR (300 MHz, DMSO-d6) d 1.94 (s, 3H, CH3CO), 3.72 (s, 3H, OCH ), 4.64 (br s, 1H, NCH2), 4.99 (br s, 1H, NCH2), 6.97 (dd, J = 9.0, 2.4 Hz, 1H, H5), 7.13 - 7.32 (m, 6H), 8.06 (d, / = 8.9 Hz, 1H, H4), 9.86 (s, 1H, OH).
Пример 5.
Трет-бутил 2-[ацетил(бензил)амино]-7-хлоро-6-гидрокси-1-бензотиофен-3-карбоксилат 4c.
Figure imgf000019_0003
Выход: 19%. Mp. 200-205 °С. Mass (El), m/z ( (% )): 431.9331 [M]+ (31). C22H22CINO4S. 1HNMR(200 MHz, DMSO-d6) d 1.50 (s, 9H, (СНз)зС), 1.94 (s, 3H, CH3CO), 4.31 (d, = 14.8 Hz, 1H), 5.37 (d, / = 14.8 Hz, 1H), 7.05 - 7.40 (m, 6H), 8.12 (d, / = 8.9 Hz, 1H, H4), 10.8 (s, / = 2.4 Hz, 1H, OH).
Пример 6.
Figure imgf000020_0001
Выход: 10%. Mp. 185-190 °C. Mass (El), m/z ( (% )): 397.4884 [M]+ (34). C22H23NO4S. !HNMR^OO MHZ, DMSO-d6) d 1.51 (s, 9H, (СНз)зС), 1.94 (s, 3H, CH3CO), 4.28 (d, / = 14.8 Hz, 1H), 5.37 (d, / = 14.8 Hz, 1H), 6.97 (dd, / = 9.0, 2.3 Hz, 1H, H5), 7.11 - 7.42 (m, 6H), 8.13 (d, / = 8.9 Hz, 1H, H4), 9.87 (s, / = 2.4 Hz, 1H, OH).
Пример 7.
Изопропил 2-[ацетил(бензил)амино] -7 -хлоро-6-гидрокси-1 -бензотиофен-3 -карбоксилат
41.
Figure imgf000020_0002
Выход: 20%. Мр. 164-168 °С. Mass (El), m/z ( (% )): 417.9065 [М]+ (35). C21H20CINO4S. ^NMR (300 MHz, DMSO-d6) d 1.27 (d, / = 6.2 Hz, 6H, (CH )2CH), 1.96 (s, 3H, CH3CO), 4.43 (d, /= 15.0 Hz, IHNCH2), 5.13 (hept, /= 6.2 Hz, CHO), 5.27 (d, /= 15.0 Hz, 1H, NCH2), 7.44 - 7.08 (m, 6H), 8.11 (d, / = 8.8 Hz, 1H, H4), 10.72 (s, 1H, OH).
Пример 8.
Figure imgf000021_0001
Выход: 11%. Мр. 126-130 °С. Mass (El), m/z ( (%)): 383.4618 [М]+ (44). C21H21NO4S. !HNMR (300 MHz, DMSO-d6) d 1.28 (d, J = 6.3 Hz, 6H, (CH )2CH), 2.01 (s, 3H, CH3CO), 4.37 (brs, 1H, NCH2), 5.11 (hept, /= 6.2 Hz, 1H, CHO), 5.28 (br s, 1H, NCH2), 6.98 (dd, /= 8.9, 2.4 Hz, 1H, H5), 7.10 - 7.43 (m, 6H), 8.13 (d, /= 8.9 Hz, 1H, H4), 9.85 (s, 1H, OH).
Пример 9. Этил 2-[ацетил(2-хлоробензил)амино] -7 -хлоро-6-гидрокси-1 -бензотиофен-3 -карбоксилат
4е.
Figure imgf000021_0002
Выход: 15%. Мр. 174-178°С. Mass (El), m/z ( (% )): 438.3247 [М]+ (55). C20H17CI2NO4S. ^NMR^OO MHz, DMSO-d6) d 1.31 (t, / = 7.2Hz, 3H, CH3CH2), 2.00 (s, 3H, CH3CO), 4.31 (d, J = 7.2 Hz, 2H, CH3CH2), 4.68, 5.25 (br s, 2H, NCH2), 7.17 (d, J = 8.9, 2.3 Hz, 1H, H5), 7.25 - 7.48 (m, 4H), 8.10 (d, /= 8.9 Hz, 1H, H4), 10.22 (br s, 1H, OH).
Пример 10.
Этил 2-[ацетил(2-хлоробензил)амино]-6-гидрокси-1 -бензотиофен-3 -карбоксилат 5е.
Figure imgf000021_0003
Выход: 24%. Мр. 176-180 °С. Mass (El), m/z ( (% )): 403.88 [М]+ (50). C20H18CINO4S. !HNMR^OO MHZ, DMSO-d6) d 1.30 (t, / = 7.2Hz, 3H, CH3CH2), 1.98 (s, 3H, CH3CO), 4.27 (q, = 7.2 Hz, 2H, CH3CH2), 4.98 (brs, 2H, NCH2), 6.98 (dd, / = 8.9, 2.3 Hz, 1H, H5), 7.22 (d, / = 2.3 Hz, 1H, H7), 7.26 - 7.42 (m, 4H), 8.11 (d, /= 8.9 Hz, 1H, H4), 9.70 (s, 1H, OH).
Пример 11.
Этил 2-[ацетил(4-хлоробензил)амино]-7-хлоро-6-гидрокси-1-бензотиофен-3-карбоксилат
4f
Figure imgf000022_0001
Выход: 11%. Mp. 174-176 °С. Mass (El), m/z ( (% )): 438.3247 [M]+ (43). C20H17CI2NO4S. !HNMR (300 MHz, DMSO-d6) d 1.32 (t, J = 1.1 Hz, 3H, CH3CH2), 1.98 (s, 3H, CH3CO), 4.19 (br. s, 2H, CH20), 4.70 (s, 1H, NCH2), 4.90 (s, 1H, NCH2), 7.11 - 7.25 (m, 4H), 7.40 (d, / = 8.0 Hz, 1H), 8.10 (d, /= 8.9 Hz, 1H, H4), 10.22 (s, 1H, OH).
Пример 12.
Этил 2-[ацетил(4-хлоробензил)амино]-6-гидрокси-1-бензотиофен-3-карбоксилат 5f
Figure imgf000022_0002
Выход: 45%. Mp. 172-176 °C. Mass (El), m/z ( (% )): 403.88 [M]+ (40). C20H18CINO4S. ^NMR (300 MHz, DMSO-d6) d 1.26 (t, J = 1.1 Hz, 3H, CH3CH2), 1.94 (s, 3H, CH3CO), 4.19 (br. s, 2H, CH20), 4.60 (s, 1H, NCH2), 5.02 (s, 1H, NCH2), 6.98 (dd, J = 8.9, 2.4 Hz, 1H), 7.20 - 7.29 (m, 3H), 7.35 (d, / = 8.0 Hz, 2H), 8.10 (d, / = 8.9 Hz, 1H, H4), 9.84 (s, 1H, OH).
Пример 13.
Этил 2-[ацетил(4-метилбензил)амино]-7-хлоро-6-гидрокси-1-бензотиофен-3-карбоксилат
4g-
Figure imgf000023_0001
Выход: 22%. Mp. 170-172 °С. Mass (El), m/z ( (% )): 417.9065 [M]+ (40). C21H22CINO4S. 1И NMR (300 MHz, DMSO-d6) d 1.25 (t, J = 1.1 Hz, 3H, CH3CH2), 1.95 (s, 3H, CH3CO), 2.26 (s, 3H, CH3PI1), 4.17 (br. s, 2H, CH3CH2), 4.61 (s, 1H, NCH2), 4.97 (s, 1H, NCH2), 7.09 (m, 4H),
7.19 (d, / = 8.9 Hz, 1H, H5), 8.07 (d, / = 8.9 Hz, 1H, H4), 10.67 (s, 1H, OH).
Пример 14.
Этил 2-[ацетил(4-метилбензил)амино]-6-гидрокси-1 -бензотиофен-3 -карбоксилат 5g.
Figure imgf000023_0002
Выход: 20%. Мр. 145-147 °С. Mass (El), m/z ( (%)): 383.4618 [М]+ (38). C21H21NO4S. 1И NMR (300 MHz, DMSO-d6) d 1.25 (t, J = 1.1 Hz, 3H, CH3CH2), 1.95 (s, 3H, CH3CO), 2.26 (s, 3H, CH3PI1), 4.17 (br. s, 2H, CH3CH2), 4.50 (s, 1H, NCH2), 5.05 (s, 1H, NCH2), 6.98 (d, J = 8.9 Hz, 1H, H7), 7.11-7.30 (m, 5H), 8.11 (d, /= 8.9 Hz, 1H, H4), 9.97 (s, 1H, OH).
Пример 15.
Метил 2-[ацетил(2-хлорбензил)амино] -7 -хлоро-6-гидрокси-1 -бензотиофен-3 -карбоксилат 4h.
Figure imgf000023_0003
Выход: 45%. Mp. 229-233 °С. Mass (El), m/z ( (% )): 424.2981 [M]+ (60). C19H15CI2NO4S. ^NMR (200 MHz, DMSO-d6) d 1.97 (s, 3H, CH3CO), 3.73 (s, 3H, OCH3), 4.50 (d, /= 15.4 Hz, 1H, NCH2PI1), 5.42 (d, / = 15.4 Hz, 1H, NCH2Ph), 7.18 (d, / = 8.9 Hz, 1H, H5), 7.25 -7.45 (m, 4H), 8.18 (d, /= 8.9 Hz, 1H, H4), 10.59 (s, 1H, OH).
Пример 16.
Метил 2-[ацетил(2-хлорбензил)амино]-6-гидрокси-1 -бензотиофен-3 -карбоксилат 5h.
Figure imgf000024_0001
Выход: 2%. Мр. 220-224 °С. Mass (El), m/z ( (% )): 389.8534 [М]+ (68). C19H16CINO4S. ^NMR (200 MHz, DMSO-d6) d 1.97 (s, 3H, CH3CO), 3.73 (s, 3H, OCH ), 4.42 (d, /= 15.4 Hz, 1H, NCH2PI1), 4.96 (d, / = 15.4 Hz, 1H, NCH2Ph), 7.18 (d, / = 8.9 Hz, 1H, H5), 7.25 -7.45 (m, 4H), 7.36 (d, / = 3.3 Hz, 1H, H7), 8.18 (d, / = 8.9 Hz, 1H, H4), 9.65 (s, 1H, OH).
Пример 17.
Метил 2-[ ацетил(4-метилбензил )амино] -7-хлоро-6-гидрокси-1 -бензотиофен-3 - карбоксилат 4ί.
Figure imgf000024_0002
Выход: 22%. Мр. 195-197 °С. Mass (El), m/z ( (% )): 403.88 [М]+ (45). C20H18CINO4S. !HNMR (300 MHz, DMSO-d6) d 1.95 (s, 3H, CH3CO), 2.26 (s, 3H, CH3Ar), 3.72 (s, 3H, OCH ), 4.64 (d, /= 13.4 Hz, 1H, NCH2), 4.94 (d, /= 13.4 Hz, 1H, NCH2), 7.06 - 7.11 (m, 4H), 7.18 (d, / = 8.9 Hz, 1H, H5), 8.04 (dd, /= 8.9, 1.7 Hz, 1H, H4), 10.72 (s, 1H, OH).
Пример 18.
Метил 2-[ацетил(4-метилбензил)амино]-6-гидрокси-1 -бензотиофен-3 -карбоксилат 5L
Figure imgf000025_0001
Выход: 20%. Mp. 160-164 °С. Mass (El), m/z ( (% )): 369.4352 [M]+ (50). C20H19NO4S. !HNMR (300 MHz, DMSO-d6) d 1.93 (s, 3H, CH3CO), 2.26 (s, 3H, CH Ar), 3.72 (s, 3H, OCH3), 4.54 (d, J = 13.8 Hz, 1H, NCH2), 4.99 (d, J = 13.8Hz, 1H, NCH2), 6.97 (dd, J = 9.0, 2.4 Hz, 1H,
H5), 7.06 - 7.14 (m, 4H), 7.26 (d, / = 2.3 Hz, 1H, H7), 8.06 (d, / = 8.9 Hz, 1H, H4), 9.88 (s, 1H, OH).
Пример 19. Метил 2-[ацетил(2-трифторометилбензил)амино]-7-хлоро-6-гидрокси-1 -бензотиофен-3- карбоксилат 4j.
Figure imgf000025_0002
Выход: 41%. Мр. 182-186 °С. Mass (El), m/z ( (% )): 457.8513 [М]+ (55). C2oHi5ClF3N04S. !HNMR (300 MHz, DMSO-d6) d 1.95 (s, 3H, CH3CO), 3.70 (s, 3H, OCH3), 4.90 (d, 2H, NCH2), 7.20-7.67 (m, 5H), 8.05 (d, / = 8.9 Hz, 1H, H4), 10.70 (s, 1H, OH).
Пример 20.
Метил 2-[ацетил(2-трифторометилбензил)амино]-6-гидрокси-1-бензотиофен-3-
Figure imgf000025_0003
Выход: 20%. Мр. 165-169 °С. Mass (El), m/z ( (% )): 423.4066 [М]+ (60). C2oHi6F3N04S. !HNMR (300 MHz, DMSO-d6) d 1.93 (s, 3H, CH3CO), 3.72 (s, 3H, OCH3), 4.72 (brs, 1H, NCH2), 5.02 (brs, 1H, NCH2), 6.98 (dd, = 8.9, 2.3 Hz, 1H, H5), 7.28 (d, / = 2.3 Hz, 1H, H7), 7.44 (d, / = 8.0 Hz, 2H, HI’, H4’), 7.67 (d, / = 8.0Hz, 2H, H2\ H3’), 8.05 (d, / = 8.9 Hz, 1H, H4), 9.68 (s, 1H, OH).
Пример 21.
Метил 2-[ацетил(4-трифторометилбензил)амино] -7-хлоро-6-гидрокси-1 -бензотиофен-3 - карбоксилат 4k.
Figure imgf000026_0001
Выход: 35%. Mp. 176-180 °C. Mass (El), m/z ( (%)): 457.8513 [M]+ (55). C2oHi5ClF3N04S. !HNMR (300 MHz, DMSO-d6) d 1.98 (s, 3H, CH3CO), 3.70 (s, 3H, OCH ), 4.93 (m, 2H, NCH2), 7.20 (d, / = 8.9 Hz, 1H), 7.44 (d, / = 7.9 Hz, 2H, HI’, H5’), 7.67 (d, / = 8.0 Hz, 2H, H2’, H4’), 8.05 (d, /= 8.9 Hz, 1H, H4), 10.74 (s, 1H, OH).
Пример 22.
Метил 2-[ ацетил(4-трифторометилбензил )амино] -6-гидрокси-1 -бензотиофен-3 -
Figure imgf000026_0002
Выход: 17%. Мр. 171-175 °С. Mass (El), m/z ( (% )): 423.4066 [М]+ (58). C20H16F3NO4S. !HNMR (300 MHz, DMSO-d6) d 1.96 (s, 3H, CH3CO), 3.71 (s, 3H, OCH ), 4.78 (brs, 1H, NCH2), 5.05 (brs, 1H, NCH2), 6.98 (dd, /= 8.9, 2.3 Hz, 1H, H-5), 7.28 (d, / = 2.3 Hz, 1H, H7), 7.44 (d, / = 8.0 Hz, 2H, HI’, H5’), 7.67 (d, / = 8.0Hz, 2H, H2’, H4’), 8.07 (d, / = 8.9 Hz, 1H, H4), 9.88 (s, 1H, OH).
Пример 23. Метил 2-[ацетил(2-фторбензил)амино] -7-хлоро-6-гидрокси-1 -бензотиофен-3 -
Figure imgf000027_0001
Выход: 25%. Мр. 229-232 °С. Mass (El), m/z ( (% )): 407.8438 [М]+ (45). C19H15CIFNO4S. ^NMR (300 MHz, DMSO-d6) d 1.97 (s, 3H, CH3CO), 3.71 (s, 3H, OCH3), 4.83 (d, / = 13.2 Hz, 1H, NCH2), 4.98 (d, J = 13.2 Hz, 1H, NCH2), 6.97- 7.43 (m, 5H), 8.05 (d, J = 8.9 Hz, 1H, H4), 10.73 (s, 1H, OH). Пример 24.
Метил 2-[ацетил(2-фторбензил)амино]-6-гидрокси-1 -бензотиофен-3 -карбоксилат 51.
Figure imgf000027_0002
Выход: 41%. Мр. 165-167 °С. Mass (El), m/z ( (% )): 374.3991 [М]+ (50). C19H16FNO4S. !HNMR (300 MHz, DMSO-d6) d 1.93 (s, 3H, CH3CO), 3.71 (s, 3H, OCH ), 4.78 (s, 1H, NCH2), 4.99 (s, 1H, NCH2), 6.98 (dd, J = 8.9, 2.4 Hz, 1H, H5), 7.04 - 7.17 (m, 2H), 7.23 - 7.39 (m, 3H), 8.07 (d, J = 8.9 Hz, 1H, H4), 9.90 (s, 1H, OH).
Пример 25. Метил 2-[ацетил(3-фторбензил)амино]-7-хлоро-6-гидрокси-1 -бензотиофен-3 -
Figure imgf000027_0003
Выход: 35%. Mp. 152-155 °С. Mass (El), m/z ( (% )): 407.8438 [M]+ (20). C19H15CIFNO4S. !HNMR (300 MHz, DMSO-d6) d 1.98 (s, 3H, CH3CO), 3.74 (s, 3H, OCH3), 4.77 (s, 1H, NCH2), 4.94 (s, 1H, NCH2), 7.07 (m, 3H), 7.20 (d, J = 8.9 Hz, 1H, H5), 7.29 - 7.39 (m, 1H), 8.05 (d, J = 8.9 Hz, 1H, H4), 10.70 (s, 1H, OH).
Пример 26.
Метил 2-[ацетил(3-фторбензил)амино]-6-гидрокси-1 -бензотиофен-3 -карбоксилат 5m.
Figure imgf000028_0001
Выход: 30%. Mp. 145-150 °C. Mass (El), m/z ( (% )): 374.3991 [M]+ (18). C19H16FNO4S. !HNMR (300 MHz, DMSO-d6) d 1.96 (s, 3H, CH3CO), 3.74 (s, 3H, OCH ), 4.68 (s, 1H, NCH2), 4.99 (s, 1H, NCH2), 6.98 (dd, /= 8.9, 2.5 Hz, 1H), 7.01 - 7.07 (m, 2H), 7.10 (dd, /= 8.9, 2.5 Hz, 1H, H5), 7.28 (d, / = 2.3 Hz, 1H, H7), 7.27 - 7.40 (m, 1H), 8.07 (d, / = 8.9 Hz, 1H, H4), 9.88 (s, 1H, OH).
Пример 27.
Метил 2-[ацетил(4-фторбензил)амино] -7-хлоро-6-гидрокси-1 -бензотиофен-3 -
Figure imgf000028_0002
Выход: 27%. Мр. 233-235 °С. Mass (El), m/z ( (% )): 407.8438 [М]+ (19). C19H15CIFNO4S. 1Я NMR (300 MHz, DMSO-d6) d 1.96 (s, ЗН, СНзСО), 3.72 (s, ЗН, ОСНз), 4.83 (br s, 2Н, NCH2), 7.37 - 6.97 (m, 5Н), 8.04 (d, /= 8.9 Hz, 1Н, Н4), 10.69 (s, 1Н, ОН).
Пример 28.
Метил 2-[ацетил(4-фторбензил)амино]-6-гидрокси-1 -бензотиофен-3 -карбоксилат 5п.
Figure imgf000029_0001
Выход: 29%. Mp. 198-202 °С. Mass (El), m/z ( (% )): 374.3991 [M]+ (22). CI9HI6FN04S. 1HNMR(300 MHz, DMSO-d6) d 1.93 (s, 3H, CH CO), 3.72 (s, 3H, OCH3), 4.65 (d, / = 13.1Hz, 1H, NCH2), 4.95 (d, = 13.1 Hz, 1H, NCH2), 6.97 (dd, J = 9.0, 2.3 Hz, 1H, H5), 7.10 (t, J = 8.7
Hz, 2H, H3\ H5’), 7.19 - 7.29 (m, 3H), 8.06 (d, J = 8.9 Hz, 1H, H4), 9.91 (s, 1H, OH).
Пример 29.
Метил 2-[ацетил(2,4-дифторбензил)амино] -7-хлоро-6-гидрокси-1 -бензотиофен-3 - карбоксилат 4о.
Figure imgf000029_0002
Выход: 41%. Мр. 205-210 °С. Mass (El), m/z ( (% )): 425.8343 [М]+ (20). Ci9Hi4ClF2N04S. ^NMR (200 MHz, DMSO-d6) d 1.94 (s, 3H, CH3CO), 3.71 (s, 3H, OCH ), 4.88 (brs, 2H, NCH2Ph), 7.02 (tdd, / = 8.5, 2.8, 0.9 Hz, 1H), 7.10 - 7.24 (m, 1H), 7.19 (d, / = 8.9 Hz, 1H, H5), 7.33 (td, / = 8.6, 6.7 Hz, 1H, H6’), 8.05 (d, / = 8.9 Hz, 1H, H4), 10.78 (s, 1H, OH).
Пример 30.
Figure imgf000029_0003
Выход: 15%. Мр. 178-180 °С. Mass (El), m/z ( (% )): 391.3895 [М]+ (24). CI9HI5F2N04S. 1И NMR (200 MHz, DMSO-d6) d 1.92 (s, 3H, CH3CO), 3.72 (s, 3H, OCH ), 4.78 (d, / = 13.0 Hz, 1H, NCH2Ph), 4.93 (d, = 13.0 Hz, 1H, NCH2Ph), 6.85- 7.44 (m, 5H), 8.06 (d, / = 8.9 Hz, 1H, H4), 9.92 (s, 1H, OH).
Пример 31.
Метил 2-[ацетил( 1 -нафтилметил )амино] -7-хлоро-6-гидрокси-1 -бензотиофен-3 -
Figure imgf000030_0001
Выход: 28%. Мр. 210-212 °С. Mass (El), m/z ( (% )): 439.9121 [М]+ (35). C23H18CINO4S. !HNMR (300 MHz, DMSO-d6) d 1.99 (s, 3H, CH3CO), 3.39 (s, 3H, OCH ), 5.34 (brs, 2H, NCH2), 7.14 (d, / = 8.8 Hz, 2H), 7.30 (t, / = 7.6 Hz, 1H), 7.54 (td, / = 6.8, 6.4, 3.5 Hz, 2H), 7.84 (d, / = 8.2 Hz, 1H), 7.91 - 7.99 (m, 2H), 8.13 (d, / = 8.8Hz, 1H, H4), 10.68 (s, 1H, OH).
Пример 32.
Figure imgf000030_0002
Выход: 22%. Мр. 198-202 °С. Mass (El), m/z ( (%)): 405.4673 [М]+ (42). C23HI9N04S. 1HNMR(300 MHz, DMSO-d6) d 1.96 (s, 3H, CH3CO), 3.45 (s, 3H, OCH ), 5.20 (d, / = 14.0 Hz, 1H, NCH2), 5.43 (d, / = 14.0 Hz, 1H, NCH2), 6.93 (dd, /= 8.9, 2.3 Hz, 1H, H5), 7.12 (d, / = 7.0 Hz, 1H), 7.18 (d, / = 2.3 Hz, 1H, H7), 7.29 (t, / = 7.6 Hz, 1H), 7.48 - 7.60 (m, 2H), 7.83 (d, / = 8.2 Hz, 1H), 7.89 - 7.95 (m, 1H), 7.98 (d, J = 8.9 Hz, 1H), 8.13 (d, J = 8.8Hz, 1H, H4), 9.86 (s, 1H, OH).
Пример 33.
Метил 2-[ацетил(2-нафтилметил)амино]-7-хлоро-6-гидрокси-1-бензотиофен-3- карбоксилат 4q.
Figure imgf000031_0001
Выход: 24%. Мр. 185-190 °С. Mass (El), m/z ( (% )): 439.9121 [М]+ (40). CisHisCINCES. 1HNMR(300 MHz, DMSO-d6) d 2.00 (s, 3H, CH CO), 3.64 (s, 3H, OCH3), 4.89 (d, = 12.6 Hz, 1H, NCH2), 5.15 (d, = 13.6 Hz, 1H, NCH2), 7.17 (d, / = 8.9 Hz, 1H, H5), 7.38 (d, / = 8.5 Hz,
1H), 7.44 - 7.53 (m, 2H), 7.69 (s, 1H, H2’), 7.85 (dt, / = 13.5, 5.3 Hz, 3H), 8.01 (d, / = 8.9 Hz, 1H, H4), 10.72 (s, 1H, OH).
Пример 34.
Figure imgf000031_0002
Выход: 23%. Мр. 200-202 °С. Mass (El), m/z ( (% )): 405.4673 [M]+ (38). C23HI9N04S. ^NMR^OO MHz, DMSO-d6) d 1.98 (s, 3H, CH3CO), 3.68 (s, 3H, OCH ), 4.76 (d, / = 12.2 Hz, 1H, NCH2), 5.23 (d, J = 12.2 Hz, 1H, NCH2), 6.96 (dd, J = 9.0, 2.4 Hz, 1H, H5), 7.23 (d, J = 2.3
Hz, 1H), 7.38 (dd, / = 8.5, 1.8 Hz, 1H), 7.44 - 7.52 (m, 2H), 7.68 (s, 1H, H2’), 7.78 - 7.91 (m, 3H), 8.05 (d, /= 8.9 Hz, 1H, H4), 9.86 (s, 1H, OH).
Пример 35. Метил 2-[ацетил(2-фенилэтил)амино] -7-хлоро-6-гидрокси-1 -бензотиофен-3 -карбоксилат
4г.
Figure imgf000031_0003
Выход: 9%. Mp. 150-155 °С. Mass (El), m/z ( (% )): 403.88 [M]+ (53). C20H18CINO4S. !HNMR (200 MHz, DMSO-d6) d 1.90 (s, 3H, CH3CO), 2.64 - 3.00 (m, 3H, PhCH2, NCH), 3.58 - 3.76 (m, 1H, NCH), 3.84 (s, 3H, OCH3), 3.93 - 4.12 (m, 1H, NCH), 7.07 - 7.40 (m, 6H), 8.14 (d, /= 8.9 Hz, 1H, H4), 10.79 (s, 1H, OH).
Пример 36.
Метил 2-[ацетил(2-фенилэтил)амино]-6-гидрокси-1 -бензотиофен-3 -карбоксилат 5г.
Figure imgf000032_0001
Выход: 11%. Мр. 190-194 °С. Mass (El), m/z ( (% )): 369.4352 [М]+ (59). C2oHi9N04S.1H NMR (200 MHz, DMSO-d6) d 1.88 (s, 3H, CH3CO), 2.84 (s, 2H, PhCH2), 3.62 (s, 2H, NCH2), 3.83 (s, 3H, OCH3), 7.02 (dd, J = 8.9, 2.4 Hz, 1H, H5), 7.12 - 7.36 (m, 6H), 8.15 (d, J = 8.9 Hz, 1H, H4), 10.02 (s, 1H, OH).
Пример 37.
Метил 2-[ ацетил( 1 -фенилэтил )амино ] -7-хлоро-6-гидрокси-1 -бензотиофен-3 -карбоксилат
4s.
Figure imgf000032_0002
Выход: 8%. Мр. 195-200 °С. Mass (El), m/z ( (% )): 403.88 [М]+ (66). C20Hi8ClNO4S. XHNMR (200 MHz, DMSO-d6) d 1.28 (d, / = 7.2 Hz, 2H, CH3CH), 1.58 (d, / = 7.1 Hz, 1H, CH3CH), 1.91 (s, 3H, CH3CO), 3.48 (s, 1H, OCH ), 3.90 (s, 2H, OCH ), 6.07 (brq, J = 8.1 Hz, 1H, CH3CH), 7.45 - 7.05 (m, 6H), 7.82 (d, / = 8.9 Hz, 0.4H, H4), 8.08 (d, / = 8.9 Hz, 0.6H, H4), 10.75 (s, 1H, OH). (Mixture of stereoisomers).
Пример 38.
Метил 2-[ ацетил( 1 -фенилэтил )амино] -6-гидрокси-1 -бензотиофен-3 -карбоксилат 5s.
Figure imgf000033_0001
Выход: 14%. Mp. 152-157 °С. Mass (El), m/z ( (% )): 369.4352 [M]+ (64). C20H19NO4S. ^NMR (200 MHz, DMSO-d6) d 1.27 (d, / = 7.3 Hz, 2H, CH3CH), 1.56 (d, / = 7.1 Hz, 1H, CH3CH), 1.90 (s, 3H, CH3CO), 3.47 (s, 1H, OCH ), 3.89 (s, 2H, OCH ), 6.04 (brq, / = 7.2Hz, 1H, CH3CH), 7.08 - 7.43 (m, 6H), 7.83 (d, J = 9.0 Hz, 0.4H, H4), 8.09 (d, / = 8.8 Hz, 0.6H, H4), 9.90 (s, 1H, ОН). (смесь стереоизомеров).
Пример 39.
Метил 2-[ацетил(2-метилбензил)амино]-7-хлоро-6-гидрокси-1-бензотиофен-3-
Figure imgf000033_0002
Выход: 28%. Мр. 182-184 °С. Mass (El), m/z ( (% )): 403.88 [М]+ (38). C20H18CINO4S. !HNMR (300 MHz, DMSO-d6) d 1.95 (s, 3H, CH3CO), 2.25 (s, 3H, CH3Ar), 3.72 (s, 3H, OCH ), 4.64 (d, /= 13.4 Hz, 1H, NCH2), 4.94 (d, /= 13.4 Hz, 1H, NCH2), 7.12 - 7.20 (m, 4H), 7.22 (d, / = 8.9 Hz, 1H, H5), 8.12 (dd, / = 8.9, 1.7 Hz, 1H, H4), 10.72 (s, 1H, OH).
Пример 40.
Метил 2-[ацетил(2-метилбензил)амино]-6-гидрокси-1 -бензотиофен-3 -карбоксилат 5t.
Figure imgf000033_0003
Выход: 26%. Мр. 164-168 °С. Mass (El), m/z ( (% )): 369.4352 [М]+ (40). C20H19NO4S. !HNMR (300 MHz, DMSO-d6) d 1.93 (s, 3H, CH3CO), 2.26 (s, 3H, CH3Ar), 3.72 (s, 3H, OCH ), 4.54 (d, J = 13.8 Hz, 1H, NCH2), 5.02 (d, J = 13.8Hz, 1H, NCH2), 6.99 (dd, J = 9.0, 2.4 Hz, 1H, H5), 7.06 - 7.14 (m, 4H), 7.26 (d, / = 2.3 Hz, 1H, H7), 8.06 (d, / = 8.9 Hz, 1H, H4), 9.88 (s, 1H, OH).
Пример 41.
Метил 2-[сщетил(4-изопропилбензил)амино] -7 -хлоро-6-гидрокси-1 -бензотиофен-3 - карбоксилат 4и.
Figure imgf000034_0001
Выход: 8%. Mp. 183-186 °C. Mass (El), m/z ( (% )): 431.9331 [M]+ (50). C22H22CINO4S. !HNMR (200 MHz, DMSO-d6) d 1.20 (d, J = 6.7 Hz, 6H, (СНз)г), 1-98 (s, 3H, CH3CO), 2.82 (hept, J = 6.7 Hz, 1H, CH(CH )2), 3.72 (s, 3H, OCH3), 4.60 (br s, 1H, NCH2), 4.80 (br s, 1H, NCH2), 7.00 - 7.20 (m, 5H), 8.04 (d, / = 8.7Hz, 1H, H4), 10.2 (s, 1H, OH).
Пример 42.
Метил 2-[ацетил(4-изопропилбензил)амино]-6-гидрокси-1-бензотиофен-3-карбоксилат
5u.
Figure imgf000034_0002
Выход: 30%. Mp. 141-145 °C. Mass (El), m/z ( (% )): 397.4884 [M]+ (59). C22H23NO4S. !HNMR (200 MHz, DMSO-d6) d 1.20 (d, J = 6.7 Hz, 6H, (СНз)г), 1-98 (s, 3H, CH3CO), 2.82 (hept, J = 6.7 Hz, 1H, CH(CH )2), 3.72 (s, 3H, OCH3), 4.65 (br s, 1H, NCH2), 4.82 (br s, 1H, NCH2), 6.98 (dd, / = 8.7, 2.4 Hz, 1H, H5), 7.00 - 7.20 (m, 4H), 7.25 (s, 1H, H7), 8.11 (d, / = 8.7Hz, 1H, H4), 9.88 (s, 1H, OH).
Пример 43. Метил 2-[ацетил(2-цианобензил)амино] -7-хлоро-6-гидрокси-1 -бензотиофен-3 -
Figure imgf000035_0001
Выход: 28%. Мр. 204-208 °С. Mass (El), m/z ( (% )): 414.8629 [М]+ (35). C20H15CIN2O4S. ^NMR (300 MHz, DMSO-d6) d 1.97 (s, 3H, CH3CO), 3.71 (s, 3H, OCH3), 4.80 (d, / = 13.2 Hz, 1H, NCH2), 4.95 (d, J = 13.2 Hz, 1H, NCH2), 7.01- 7.47 (m, 5H), 8.06 (d, J = 8.9 Hz, 1H, H4), 10.81 (s, 1H, OH).
Пример 44. Метил 2-[ацетил(2-цианобензил)амино]-6-гидрокси-1-бензотиофен-3-карбоксилат 5v.
Figure imgf000035_0002
Выход: 38%. Мр. 168-172 °С. Mass (El), m/z ( (% )): 380.4181 [M]+ (54). C20H16FN2O4S. !HNMR (300 MHz, DMSO-d6) d 1.93 (s, 3H, CH3CO), 3.71 (s, 3H, OCH ), 4.88 (s, 1H, NCH2), 5.10 (s, 1H, NCH2), 7.05 (dd, / = 8.9, 2.4 Hz, 1H, H5), 7.08 - 7.20 (m, 2H), 7.28 - 7.44 (m, 3H), 8.10 (d, / = 8.9 Hz, 1H, H4), 9.88 (s, 1H, OH).
Пример 45.
Метил 2-[ацетил(2-фторфенилэтил)амино] -7 -хлоро-6-гидрокси-1 -бензотиофен-3 -
Figure imgf000035_0003
Выход: 15%. Мр. 172-174 °С. Mass (El), m/z ( (% )): 421.8704 [М]+ (43). C20H17CIFNO4S. !HNMR (200 MHz, DMSO-d6) d 1.90 (s, 3H, CH3CO), 2.66 - 3.02 (m, 2H, PhCH2, NCH2), 3.59 - 3.78 (m, 1H, NCH2), 3.84 (s, 3H, OCH ), 3.94 - 4.13 (m, 1H, NCH2), 7.09 - 7.43 (m, 5H), 8.16 (d, /= 8.9 Hz, 1H, H4), 10.79 (s, 1H, OH).
Пример 46.
Метил 2-[ацетил(2-фторфенилэтил)амино]-6-гидрокси-1-бензотиофен-3-карбоксилат
5w.
Figure imgf000036_0001
Выход: 12%. Мр. 183-185 °С. Mass (El), m/z ( (%)): 387.4257 [М]+ (49). C2oHi8FN04S. 1И NMR (200 MHz, DMSO-d6) d 1.88 (s, 3H, CH CO), 2.86 (s, 2H, PhCH2), 3.64 (s, 2H, NCH2), 3.83 (s, 3H, OCH3), 7.10 (dd, J = 8.9, 2.4 Hz, 1H, H5), 7.14 - 7.38 (m, 5H), 8.16 (d, J = 8.9 Hz, 1H, H4), 10.00 (s, 1H, OH).
Общий метод синтеза 2.
Figure imgf000037_0001
a) Получение2 -а шо-4, 7-дигидро—5Н-спиро[ 1 -бензотиофен-6, 2’-[ 1,3]диоксолан]-3- карбонитрила 6. Смесь 1,4-диоксоспиро[4.5]декан-8-он (6.24 г, 40 ммоль), малононитрила (2.64 г, 40 ммоль), серы (1.28 г, 40 ммоль) и морфолина (3.40 мл, 40 ммоль) в 40 мл этанола перемешивают 2ч при температуре 70°С и охлаждают. Выпавший осадок фильтруют, промывают этанолом и кристаллизуют из смеси толуол-ацетон. Выход: 71%. Мр. 193-195 °С. Mass (El), m/z С Ireiat.(% )): 236.2913 [М]+ (73). C11H12N2O2S. b) Получение2-/ [ (1Е)-фенилметилен ]амино}-4, 7-дигидро-5Н-спиро[ 1 -бензотиофен-6,2 [ 1,3]диоксолан]-3-карбонитрила 7.
При перемешивании в 70 мл толуола кипятят 1ч с насадкой для отделения воды соединение 6 (7.08 г, 30.0 ммоль), бензальдегид (3.45 г, 33.0 ммоль) и 0.1 rp-TsOH. Толуол упаривают до объема -20 мл, осадок фильтруют, промывают толуолом и гексаном.
Выход: 90%. Мр. 137-139 °С. Mass (El), m/z ( (%)): 324.3979 [М]+ (36). C18H16N2O2S. с) Получение2-( бензиламино)-4, 7-дигидро-5Н-спиро[ 1 -бензотофен-6,2’-[ 1,3]диоксолан]-3- карбоинтрила 8. Суспензию соединения 7 (3.24 г, 10 ммоль) и боргидрида натрия (0.380 г, 10 ммоль) перемешивают в 50 мл этанола при комнатной температуре 15 мин и затем 30 мин при 50°С. Этанол упаривают до объема 15 мл, к остатку приливают 20 мл воды, осадок фильтруют, промывают 30% этанолом и водой.
Выход:88%. Мр. 134-136 °С. Mass (El), m/z ( (%)): 326.4138 [М]+ (46). CisHisNiOiS. d) Получение 2-(бензиламино)-6-гидрокси-1-бензотофен-3-карбоинтрила 9.
К смеси соединения 8 (9.78 г, 30.0 ммоль) и СиС12*2Н20 (10.2 г, 60.0 ммоль) приливают 200 мл ацетонитрила. Суспензию перемешивают при комнатной температуре 45 мин и к реакционной массе прибавляют 330 мл 0.05L7 соляной кислоты и 330 мл этилацетата. Водный слой отделяют, экстракт промывают водой (3x200 мл) до рН~6.5 и сушат сульфатом натрия. Этилацетат упаривают, к остатку приливают 30 мл смеси хлороформ - ацетон (20:1), выпавший осадок размешивают, фильтруют и промывают хлороформом. Выход: 39%. Мр. 167-169 °С. Mass (El), m/z ( (%)): 280.3454 [М]+ (53). CI6HI2N2OS. e) Получение 2-[ацетил(бензил)амино]-3-циано-1-бензотиофен-6-ил ацетата 10.
При перемешивании кипятят 30 мин соединение 9 (2.80 г, 10.0 ммоль) в 15 мл уксусного ангидрида и 2 мл триэтиламина. Уксусный ангидрид разлагают водой. Реакционную массу упаривают, остаток растворяют в этилацетате и промывают водой. Раствор сушат сульфатом натрия. Этилацетат упаривают, остаток в виде масла используют на следующей стадии без дополнительной очистки.Выход: 94%. масло. Mass (El), m/z ( Irdat. (% )): 364.4187 [M]+ (39). C2OHI6N203S.
Пример 47.
N-бензил- Ы-(3-циано-6-гидрокси-1-бензотиофен-2-ил)ацетамид 11.
Figure imgf000038_0001
Метод f) К раствору 6 г карбоната натрия в 20 мл воды прибавляют соединение 10 (3.64 г, 10.0 ммоль) в 40 мл этанола. Суспензию кипятят при перемешивании 30 мин. Летучие вещества удаляют под вакуумом. К остатку прибавляют этилацетат и воду, смесь перемешивают, водный слой отделяют, экстракт промывают водой до рН~6.5 и сушат сульфатом натрия. Этилацетат упаривают, остаток в виде масла используют на следующей стадии без дополнительной очистки.Выход: 88%. масло. Mass (El), m/z ( Irdat. (% )): 322.3820 [М]+ (50). C18H14N2O2S. 1Я NMR (300 MHz, DMSO-d6) d 2.11 (br.s, ЗН, СНзСО), 4.98 (br s, 2Н, NCH2), 7.04 (dd, = 8.7, 2.2 Hz, 1H, H5), 7.16 - 7.46 (m, 6H), 7.61 (d, /= 8.8 Hz, 1H, , H4),
10.07 (s, 1H, OH).
Пример 48. g) N-бензил- Ы-(7-хлоро-3-циано-6-гидрокси-1-бензотиофен-2-ил)ацетамид 12.
Figure imgf000039_0001
К раствору соединения 11 (0.5 г, 1.55 ммоль) в 5 мл уксусной кислоты прибавляют 0.222 г (1.66 ммоль) хлорсукцинимида. Смесь перемешивают при комнатной температуре 1 ч и выливают воду. Темное масло экстрагируют этилацетатом, водный слой отделяют, экстракт промывают водой до pH 6.5 и сушат сульфатом натрия. Этилацетат упаривают. Остаток перемешивают в смеси этанол-вода- гексан. Кристаллы фильтруют и промывают водным этанолом. Продукт чистят кристаллизацией из толуола. Выход: 50%. Мр. 176-178 °С. Mass (El), m/z Ireiat- (%)): 356.8268 [М]+ (46). C18H13CIN2O2S. 1Я NMR (200 MHz, DMSO-d6) d 2.14 (s, ЗН, СНзСО), 5.03 (s, 2Н, NCH2Ph), 7.27 (m, 6H), 7.62 (d, /= 8.7 Hz, 1H, H4), 10.98 (s, 1H, OH).
Общая схема синтеза 3.
Figure imgf000040_0001
a) Получение этил 2-(ацетиламино)-6-гидрокси-1 -бензотиофен-3 -карбоксилата 13.
К раствору соединения 2а (9.6 г, 20.0 ммоль) в 200 мл ацетонитрила добавляютСиСЬ^ЬЬО (11.9 г, 70.0 ммоль). Суспензию перемешивают при комнатной температуре 2часа и к реакционной массе прибавляют 330 мл 0.05L7 соляной кислоты и 330 мл этилацетата. Водный слой отделяют, экстракт промывают водой (3x200 мл) до рН~6.5 и сушат сульфатом натрия. Этилацетат упаривают, к остатку приливают 40 мл диэтилового эфира, осадок фильтруют и промывают этиловым спиртом, диэтиловым эфиром. Кристаллизуют из этилового спирта.
Выход: 78%. Мр. 210-213 °С. Mass (El), m/z ( (%)): 279.3127[М]+ (65). C13H13NO4S. b) Получение этил 2-амино-6-гидрокси-1 -бензотиофен-3 -карбоксилата 14.
Реакцию проводят в бомбе, предварительно продув аргоном. Соединение 13 (1г, 4 ммоль) растворяют в 10 мл 2Н НС1 и 50 мл этилового спирта, раствор нагревают при температуре силиконовой бани 100°С в течении 20 часов. Охлаждают реакционную массу, нейтрализуют ацетатом аммония (2 г), раствор упаривают. В остаток добавляют воду, охлаждают, постепенно кристаллизуется продукт реакции. Осадок отфильтровывают, промывают водой. Кристаллизуют из толуола. Выход: 88%. Мр. 170-175 °С. Mass (El), m/z ( Irdat.(% )): 237.276[М]+ (53). C11H11NO3S. c) Получение этил 2-амино-6-метокси-1-бензотиофен-3-карбоксилата 15.
Реакцию проводят в бомбе. Соединение 14 (1 г, 4 ммоль) растворяют в 20 мл сухого ацетона, добавляют поташ (0.7 г, 4.8 ммоль) и йодистый метил (0.32 мл, 4.8 ммоль). Раствор выдерживают при температуре силиконовой бани 80°С 20 часов. Охлаждают, ацетон упаривают, в маслянистый остаток добавляют воду. Декантируют. Постепенно кристаллизуется осадок, его отфильтровывают, промывают водой. Очищают методом колоночной хроматографии, в качестве элюента используют хлороформ. Побочным продуктом реакции является этил 6-метокси-2-(метиламино)-1 -бензотиофен-3 карбоксилат, который образуется с выходом 3%. Выход продукта 15: 77%. Мр. 95-97 °С. Mass (El), m/z ( (%)): 251.3026[М]+ (75). C12H13NO3S. d) Получение этил 2-амино-5-бром-6-метокси-1 -бензотиофен-3 -карбоксилата 16.
К раствору соединения 15 (0.22 г, 0.8 ммоль) в 5 мл хлороформа при перемешивании при комнатной температуре прикапывают раствор брома (0.1 мл, 2 ммоль) в 3 мл хлороформа. Кипятят 1 час. Охлаждают, выпавший осадок отфильтровывают, промывают хлороформом. Переносят осадок в водный раствор ацетата аммония (0.4 г) и перемешивают 30 мин. Осадок отфильтровывают, промывают водой, метиловым спиртом, гексаном. Выход: 51%. Мр. 160-164 °С. Mass (El), m/z ( (%)): 330.1986[М]+ (57). CiiHiiBrNCES. e) Получение этил 2-(ацетиламино)-5-бром-6-метокси-1-бензотиофен-3-карбоксилата
17.
Соединение 16 (0.3 г) супендируют в уксусном ангидриде (5 мл). Кипятят 1 час. Вначале образуется раствор, затем через 30 мин кипячения выпадает осадок. Реакционную массу охлаждают, осадок отфильтровывают, промывают водой, этиловым спиртом, гексаном. Выход: 89%. Мр. 215-210 °С. Mass (El), m/z ( (%)): 372.2353[М]+ (65). Ci4Hi4BrNC>3S. f) Получение этил 2-[ацетил(бензил)амино]-5-бром-6-метокси-1-бензотиофен-3- карбоксилата 18. Метод синтеза аналогично синтезу соединений За-s. Реакцию проводят 96 часов. В остаток, полученный после упаривания этилацетата, добавляют ацетон и отфильтровывают продукт реакции 18. Выход: 75%. Мр. 175-180 °С. Mass (El), m/z ( (%)): 462.3578[М]+ (57). C2iH2oBrN04S.
Пример 49.
Figure imgf000042_0001
При охлаждении в раствор соединения 18 (0.64г, 1 ммоль) в 20 мл хлороформа добавляют трибромид бора (1.3 мл, 10 ммоль), перемешивают при комнатной температуре 1 час. Выливают в 60 мл ледяной воды. Органический слой отделяют, хлороформ упаривают, остаток перемешивают с водой 30 мин. Осадок отфильтровывают, промывают водой, этиловым спиртом, гексаном. Кристаллизуют из этанола. Выход: 93%. Мр. 201-203 °С. Mass (El), m/z { reiat- (%)): 448.3313[M]+ (38). C2oHi8BrN04S.1H NMR (300 MHz, DMSO-d6) d 1.25
(t, = 7.1 Hz, 3H, CH3CH2), 1.95 (s, 3H, CH3CO), 4.18 (s, 2H, CH3CH2), 4.58 (br s, 1H, NCH2), 5.06 (br s, 1H, NCH2), 7.05 - 7.35 (m, 5H, Ph), 7.45 (s, 1H, H7), 8.41 (s, 1H, H4), 10.71 (s, 1H, OH). Общая схема синтеза 4
Figure imgf000043_0002
Figure imgf000043_0001
Figure imgf000044_0001
а) Получение производных метил 2-[aifemm(R2,R3,R4,R5-6eu3m)aMUuo-7- [ ( диметиламино )метил ] -6-гидрокси-1 -бензотиофен-3 -карбоксилата 20( a-g) и N-6eu3m-N- {3-( цианокарбонил )-7-[ ( диметиламино )метил] -6-гидрокси-1 -бензотиен-2-ил }ацетамида 20h.
К раствору соединения 5b, h, l-o, w или 11(1.00 ммоль) в 5 мл ДМФА прибавляют 40% водный раствор диметиламина (0.563 г, 5.00 ммоль), 1 мл уксусной кислоты и 37% водный раствор формальдегида (0.216 г, 2.00 ммоль). Раствор перемешивают при комнатной температуре 24ч. (для 20a-g) и 72 ч. (для 20h). К реакционной массе добавляют водный раствор карбоната натрия (1.8 г в 7 мл воды) и перемешивают 30 мин. Переносят в делительную воронку, добавляют 70 мл этилацетата и 30 мл воды. Органический слой дополнительно промывают 50 мл воды. Сушат сульфатом натрия. Этилацетат упаривают. В остаток добавляют гексан и отфильтровывают осадок. В случае синтеза 20h, после упаривания этилацетата получают масло.
Пример 50.
Метил 2-[ ацетил( бензил )амино-7-[ ( диметиламино )метил ] -6-гидрокси-1 -бензотиофен-3 -
Figure imgf000044_0002
Выход: 64%. Mp. 135-140 °С. Mass (El), m/z ( (% )): 412.503[M]+ (79). C22H24N2O4S. !HNMR (300 MHz, DMSO-d6) d 1.94 (s, 3H, CH3CO), 2.20 (d, / = 1.4 Hz, 6H, N(CH )2), 3.66 (s, 2H, CH2N(CH3)2), 3.70 (s, 3H, OCH3), 4.83 (br s, 2H, NCH2), 6.99 (d, J = 8.8 Hz, 1H, H5), 7.15 - 7.33 (m, 6H), 7.98 (d, / = 8.8 Hz, 1H, H4).
Пример 51.
Метил 2-[ ацетил(2-хлорбензил )амино-7-[ ( диметиламино )метил] -6-гидрокси-1 - бензотиофен-3 -карбоксилат 20Ь.
Figure imgf000045_0001
Выход: 82%. Мр. 132-136 °С. Mass (El), m/z ( (% )): 446.9478[М]+ (80). C22H23C1N204S. !HNMR (200 MHz, DMSO-d6) d 1.92 (s, 3H, CH3CO), 2.50 (s, 6H, N(CH3)2), 3.64 (s, 2H, CH2N(CH3)2), 3.68 (s, 3H, OCH3), 4.79 (d, J = 12.5Hz, 1H, NCH2Ph), 4.96 (d, J = 12.5Hz, 1H, NCH2PI1), 7.00 (d, / = 8.9 Hz, 1H, H5), 7.07 - 7.18 (m, 2H), 7.28 (t, / = 7.3 Hz, 2H), 7.98 (d, / = 8.9 Hz, 1H, H4).
Пример 52.
Метил 2-[ ацетил(2-фторбензил )амино-7-[ ( диметиламино )метил] -6-гидрокси-1 - бензотиофен-3 -карбоксилат 20с.
Figure imgf000045_0002
Выход: 78%. Мр. 120-125 °С. Mass (El), m/z ( (% )): 430.4935[М]+ (86). C22H23FN204S. !HNMR (200 MHz, DMSO-d6) d 1.92 (s, 3H, CH3CO), 2.40 (s, 6H, N(CH3)2), 3.68 (s, 3H, OCH3), 3.90 (s, 2H, CH2N(CH3)2), 4.85 (d, /= 12.5Hz, 1H, NCH2Ph), 4.97 (d, /= 12.5Hz, 1H, NCH2Ph), 7.02 (d, / = 8.9 Hz, 1H, H5), 7.09 - 7.18 (m, 2H), 7.38 (t, / = 7.3 Hz, 2H), 8.06 (d, / = 8.9 Hz, 1H, H4).
Пример 53. Метил 2-[ ацетил( 3-фторбензил )амино-7-[ ( диметиламино )метил] -6-гидрокси-1 -
Figure imgf000046_0001
Выход: 80%. Мр. 142-144 °С. Mass (El), m/z ( (% )): 430.4935[М]+ (90). C22H23FN2O4S. !HNMR (300 MHz, DMSO-d6) d 1.96 (s, 3H, CH3CO), 2.45 (s, 6H, N(CH )2), 3.56 (s, 2H, CH2N(CH )2), 3.74 (s, 3H, OCH ), 4.68 (s, 1H, NCH2), 4.99 (s, 1H, NCH2), 6.98 (dd, J = 8.9, 2.5
Hz, 1H), 7.01 - 7.07 (m, 2H), 7.10 (dd, / = 8.9, 2.5 Hz, 1H, H5), 7.27 - 7.40 (m, 1H), 8.07 (d, / = 8.9 Hz, 1H, H4).
Пример 54. Метил 2-[ ацетил(4-фторбензил )амино-7-[ ( диметиламино )метил] -6-гидрокси-1 -
Figure imgf000046_0002
Выход: 46%. Мр. 145-149 °С. Mass (El), m/z ( (% )): 430.4935[М]+ (93). C22H23FN2O4S. !HNMR (200 MHz, DMSO-d6) d 1.92 (s, 3H, CH3CO), 2.38 (s, 6H, N(CH )2), 3.54 (s, 2H, CH2N(CH )2), 3.72 (s, 3H, OCH ), 4.80 (d, J = 12.5Hz, 1H, NCH2Ph), 5.02 (d, J = 12.5Hz, 1H,
NCH2PI1), 7.05 (d, / = 8.9 Hz, 1H, H5), 7.13 - 7.20 (m, 2H), 7.35 (t, / = 7.3 Hz, 2H), 8.08 (d, J = 8.9 Hz, 1H, H4). Пример 55.
Метил 2-[ ацетил( 2,4-дифторбензил )амино-7-[ ( диметиламино )метил] -6-гидрокси-1 -
Figure imgf000047_0001
Выход: 44%. Мр. 118-122 °С. Mass (El), m/z ( (%)): 448.484[М]+ (35). C22H23F2N2O4S. 1HNMR(200 MHz, DMSO-d6) d 1.91 (s, 3H, CH3CO), 2.18 (s, 6H, N(CH )2), 3.65 (s, 2H, CH2N(CH )2), 3.69 (s, 3H, OCH3), 4.79 (d, / = 13.6 Hz, 1H, NCH2Ph), 4.91 (d, / = 13.6Hz, 2H, NCH2PI1), 7.00 (m, 1H), 7.01 (d, /= 8.8 Hz, 1H, H5), 7.14 (td, /= 9.9, 2.6 Hz, 1H), 7.31 (td, / = 8.6, 6.6 Hz, 1H, H6’), 7.98 (d, / = 8.8 Hz, 1H, H4).
Пример 56.
Метил 2- { ацетил [2-(2-фторфенил)этил] амино } -7- [(диметиламино)метил]-6-гидрокси- 1 - бензотиофен-3-карбоксилат 20g.
Figure imgf000047_0002
Выход: 67%. Мр. 114-120 °С. Mass (El), m/z ( (% )): 444.5201[М]+ (76). C23H25FN2O4S. !HNMR (200 MHz, DMSO-d6) d 1.92 (s, 3H, CH3CO), 2.60 (s, 6H, N(CH )2), 2.96 (s, 2H, PI1CH2), 3.76 (s, 2H, NCH2), 3.68 (s, 3H, OCH ), 3.78 (s, 2H, CH2N(CH )2), 7.08 (d, /= 8.9 Hz, 1H, H5), 7.12 - 7.19 (m, 2H), 7.30 (t, / = 7.3 Hz, 2H), 8.02 (d, / = 8.9 Hz, 1H, H4).
Пример 57.
N-6eu3m-N-{ 3-( цианокарбонил )-7-[ ( диметиламино )метил ] -6-гидрокси-1 -бензотиен-2- ил }ацетамид 20h .
Figure imgf000048_0001
Выход: 89%. Масло. Mass (El), m/z ( (% )): 4074866.484[M]+ (55). C22H21N3O3S. ^NMR (200 MHz, DMSO-d6) d 2.14 (s, 3H, CH3CO), 2.76 (s, 6H), 4.30 (s, 2H, CH2N(CH )2), 4.89 (s, 2H, NCH2PI1), 7.00 - 7.45 (m, 6H), 7.68 (d, / = 8.7 Hz, 1H, H4). b) Получениепроизводных метил 2-[ацетил( Ri-oemiu )амнно-7-[( )нметнламнно )метил]- 6-гидрокси-1 -бензотиофен-3 -карбоксилатагидрохлоридов 21а, Ъ и N-6eu3m-N-{3-
( цианокарбонилкарбонил )-7-[ ( диметиламино )метил ] -6-гидрокси-1 -бензотиофен-2- ил}ацетамида гидрохлорида 21с.
Соединения 20а, е (1 ммоль) и 20h (1 ммоль) суспендируют в 15 мл метанола. К суспензии прибавляют раствор НС1 в метаноле до рН~2. Суспензию перемешивают при комнатной температуре 30 мин, упаривают спирт, добавляют диэтиловый эфир и отфильтровывают осадок, тщательно промывают эфиром. В случае использования в качестве исходного соединения 20h суспензию перемешивают при комнатной температуре 2ч, осадок фильтруют и промывают эфиром.
Пример 58.
Метил 2-[ацетил(2-метилбензил )амино-7 -[( диметиламино )метил ] -6-гидрокси-1 - бензотиофен-3 -карбоксилат 20ί.
Figure imgf000048_0002
Выход: 76%. Мр. 155-160 °С. Mass (El), m/z ( (% )): 426.5296 М]+ (79). C23H26N2O4S. !HNMR (300 MHz, DMSO-d6) d 1.94 (s, 3H, CH3CO), 2.15 (d, / = 1.4 Hz, 6H, N(CH )2), 2.25 (s, 3H, CH Ar), 3.65 (s, 2H, СР (СНз)2), 3.72 (s, 3H, OCH ), 4.67 (s, 2H, NCH2), 6.92 (d, / = 8.8 Hz, 1H, H5), 7.14 - 7.35 (m, 5H), 8.10 (d, / = 8.8 Hz, 1H, H4). Пример 59.
Метил 2-[ ацетил(2-( трифторометил )бензил )амино-7-[ ( диметиламино )метил]-6- гидрокси-1 -бензотиофен-3 -карбоксилат 20j.
Figure imgf000049_0001
Выход: 46%. Мр. 184-188 °С. Mass (El), m/z ( (% )): 480.501 [М]+ (67). C23H23F3N2O4S. !HNMR (300 MHz, DMSO-d6) d 1.98 (s, 3H, CH3CO), 2.24 (d, / = 1.4 Hz, 6H, N(CH )2), 3.63 (s, 3H, OCH3), 3.89 (s, 2H, CH2N(CH )2), 4.87 (br s, 2H, NCH2), 7.02 (d, J = 8.8 Hz, 1H, H5), 7.25 - 7.43 (m, 5H), 8.09 (d, / = 8.8 Hz, 1H, H4).
Пример 60.
Метил 2-[ацетил(2-цианобензил )амино-7-[( диметиламино )метил ] -6-гидрокси-1 - бензотиофен-3 -карбоксилат 20k.
Figure imgf000049_0002
Выход: 73%. Мр. 178-182 °С. Mass (El), m/z ( (% )): 437.5125 [М]+ (69). C23H23N3O4S. ^NMR (300 MHz, DMSO-d6) d 1.92 (s, 3H, CH3CO), 2.26 (d, / = 1.4 Hz, 6H, N(CH )2), 3.71 (s, 2H, CH2N(CH )2), 3.73 (s, 3H, OCH ), 4.89 (br s, 2H, NCH2), 6.97 (d, J = 8.8 Hz, 1H, H5), 7.06 - 7.28 (m, 5H), 7.98 (d, / = 8.8 Hz, 1H, H4).
Пример 61.
Метил 2-[ ацетил( бензил )амино-7-[ ( диметиламино )метил ] -6-гидрокси-1 -бензотиофен-3 - карбоксилат гидрохлорид 21а.
Figure imgf000050_0001
Выход: 95%. Mp. 190-194 °С. Mass (El), m/z ( (% )): 448.9637[M]+ (30). C22H25CIN2O4S. ^NMR (200 MHz, DMSO-d6) d 1.97 (s, 3H, CH3CO), 2.75 (s, 6H), 3.71 (s, 3H, OCH3), 4.35 (s, 2H, CH2N(CH )2), 4.72 (d, J = 14.8 Hz, 1H, NCH2), 4.95 (d, J = 14.8 Hz, 1H, NCH2), 7.07 - 7.42
(m, 6H), 8.19 (d, /= 8.9 Hz, 1H), 9.92 (s, 1H, H4), 11.20 (s, 1H, OH).
Пример 62.
Метил 2-[ ацетил(4-фторбензил )амино-7-[ ( диметиламино )метил ] -6-гидрокси-1 - бензотиофен-3 -карбоксилат гидрохлорид 21Ь.
Figure imgf000050_0002
Выход: 78%. Мр. 130 °С с разложением. Mass (El), m/z ( Ireiat. (%)) : 466.9541[М]+ (35). C22H24CIFN2O4S. !HNMR (200 MHz, DMSO-d6) d 1.96 (s, ЗН, СНзСО), 2.76 (d, / = 4.2 Hz, 6Н), 3.72 (s, ЗН, ОСНз), 4.36 (d, J = 4.7 Hz, 2H СР (СН )2), 4.70 (d, J = 14.5Hz, 1H, NCH2Ph),
4.92 (d, / = 14.5Hz, 1H, NCH2Ph), 6.97 - 7.42 (m, 6H), 8.19 (d, / = 8.9 Hz, 1H, H4), 9.94 (brs, 1H, NH), 11.17 (s, 1H, OH).
Пример 63. N-6eu3m-N-{ 3-( цианокарбонилкарбонил )- 7-[ ( диметиламино )метил ] -6-гидрокси-1 - бензотиен-2-ил} ацетамид гидрохлорид 21с.
Figure imgf000050_0003
Выход: 58%. Мр. 120-125 °С. Mass (El), m/z ( (% )): 407.484[М]+ (55).
СззНззС зОзЗ^ННМК (200 MHz, DMSO-d6) d 2.14 (s, ЗН, СНзСО), 2.76 (s, 6Н), 4.38 (s, 2Н, CH2N(CH )2), 5.00 (s, 2Н, NCH2Ph), 7.04 - 7.55 (m, 6H), 7.75 (d, /= 8.7 Hz, 1H, H4), 10.13 (br s, 1H, NH), 11.43 (s, 1H, OH).
Пример 64.
Figure imgf000051_0001
Метил 2-[ ацетил( бензил )амино-7-[ ( диметиламино )метил ] -6-гидрокси-1 -бензотиофен-3 - карбоксилата гидрохлорид 22. с) К раствору соединения 5Ь (0.8 ммоль) в 10 мл метанола прибавляют раствор диэтиламина (0.31 г, 4.00 ммоль), 0.5 мл уксусной кислоты и 37% водный раствор формальдегида (0.21 г, 3.00 ммоль). Раствор перемешивают при комнатной температуре 48ч. К реакционной массе добавляют водный раствор карбоната натрия (0.7 г в 5 мл воды) и перемешивают 30 мин. Переносят в делительную воронку, добавляют 70 мл этилацетата и 30 мл воды. Органический слой дополнительно промывают 50 мл воды. Сушат сульфатом натрия. Этилацетат упаривают. Получают масло. Масло растворяют в 5 мл этанола, прибавляют раствор НС1 в метаноле до рН~2. Раствор перемешивают при комнатной температуре 30 мин, упаривают спирт, добавляют диэтиловый эфир и отфильтровывают осадок, тщательно промывают эфиром.
Выход: 65%. Мр. 210-215 °С. Mass (El), m/z ( (%)): 477.0168 [М]+ (35). C24H29CIN2O4S. ^NMR (300 MHz, DMSO-d6) d 1.27 (t, / = 7.2 Hz, 6H), 1.98 (s, 3H, CH3CO), 3.11 (br. s, 4H), 3.73 (s, 3H, OCH3), 4.31 (s, 2H), 4.68 (s, 1H, NCH2), 4.99 (s, 1H, NCH2), 7.16 - 7.35 (m, 6H), 8.19 (d, / = 8.9 Hz, 1H, H4), 9.42 (br s, 1H, NH), 11.17 (s, 1H, OH).
Пример 65.
Метил 2-[ ацетил( бензил )амино-6-гидрокси-7-[(4-метилпиперазин-1 -ил )метил]-1 - бензотиофен-3 -карбоксилат гидрохлорид 23.
Figure imgf000052_0001
d) К раствору соединения 5b (0.8 ммоль) в 10 мл метанола прибавляют раствор метилпиперазина (0.42 г, 4.00 ммоль), 0.5 мл уксусной кислоты и 37% водный раствор формальдегида (0.21 г, 3.00 ммоль). Раствор перемешивают при комнатной температуре 15 суток. Далее обрабытывают реакционную массу и выделяют соединение 23, аналогично синтезу соединения 22.
Выход: 55%. Мр. 170 °С с разложение. Mass (El), m/z ( 1геш.{% )): 504.0422 [М]+ (27). C25H30CIN3O4S. !HNMR (300 MHz, DMSO-d6) d 1.92 (s, ЗН, СНзСО), 2.15 (s, ЗН), 2.30 (br. m, 8Н), 3.66 (d, /= 10.4 Hz, 2H), 3.74 (s, ЗН, ОСНз), 4.50 (d, /= 14.9 Hz, 1H, NCH2), 5.13 (d, / =
14.9 Hz, 1H, NCH2), 7.01 (d, / = 8.8 Hz, 1H, H5), 7.17 - 7.38 (m, 6H, Ph, NH), 8.00 (d, / = 8.8 Hz, 1H, H4).
Общая схема синтеза 5.
Figure imgf000053_0001
а) Получение производных 2-[aifemm(R2,R3-6eH3m)aMUuo]-6-2udpoKCU-7-Ri-l- бензотиофен-3 -карбоновых кислот 25a-g.
Суспензию соответствующего исходного (2 ммоль) в водном метаноле (10 мл воды и 25 мл метанола) и гидроксида лития (6 ммоль) нагревают в бомбе на масляной бане при температуре бани 80°С 20 часов. Охлаждают, в раствор добавляют НС1 к. до рН~2. Спирт упаривают, в масляный остаток добавляют воду, декантируют. Снова добавляют воду и перемешивают при охлаждении 3 часа. Осадок отфильтровывают, промывают водой, растирают на фильтре со смесью гексана и диэтилового эфира (1:1) или только с эфиром. Пример 66.
2-[ацетил(бензил)амино] -7-хлор-6-гидрокси-1 -бензотиофен-3 -карбоновая кислота 25а.
Figure imgf000054_0001
Выход: 80%. Мр. 240-245 °С. Mass (El), m/z ( (% )): 375.8268 [М]+ (18). CI8HI4C1N04S. !HNMR (300 MHz, DMSO-d6) d 1.96 (s, 3H, СНзСО), 4.39 (d, / = 15.1 Hz, 1H, NCH2), 5.31 (d, /= 15.1Hz, 1H, NCH2), 7.17 (d, /= 8.9 Hz, 1H, H5), 7.21 - 7.34 (m, 5H, Ph), 8.15 (d, /= 8.9 Hz, 1H, H4), 10.63 (s, 1H, OH), 13.34 (s, 1H, COOH). Пример 67.
2-[ ацетил( бензил )амино] -6-гидрокси-1 -бензотиофен-3-карбоноваякислота 25b.
Figure imgf000054_0002
Выход: 86%. Мр. 130-135 °С. Mass (El), m/z ( (% )): 341.382[М]+ (96). CI8HI5N04S. ^NMR (200 MHz, DMSO-d6) d 2.01 (s, 3H, CH3CO), 4.80 (br s, 2H, NCH2), 6.91 (dd, / = 8.7, 2.4 Hz, 1H, H5), 7.15 - 7.39 (m, 6H), 7.58 (d, /= 8.8 Hz, 1H, H4), 9.78 (s, 1H, OH), 12.22 (s, 1H, COOH).
Пример 68. 2-[ ацетил(2-хлорбензил )амино] -7-хлор-6-гидрокси-1 -бензотиофен-3 -карбоновая кислота
25с.
Figure imgf000054_0003
Выход: 73%. Mp. 265-270 °С. Mass (El), m/z ( (% )): 410.2716 [M]+ (15). C18H13CI2NO4S. ^NMR (200 MHz, DMSO-d6) d 2.01 (s, 3H, CH3CO), 4.80 (br s, 2H, NCH2Ph), 7.16 (d, /= 8.9 Hz, 1H, H5), 7.25 - 7.36 (m, 3H), 7.36 - 7.49 (m, 1H), 8.16 (d, /= 8.9 Hz, 1H, H4), 10.69 (s, 1H, OH), 13.53 (s, 1H, COOH).
Пример 69.
2-[ацетил(2-фторбензил)амино] -7-хлор-6-гидрокси-1 -бензотиофен-3 -карбоновая кислота
25d.
Figure imgf000055_0001
Выход: 63%. Мр. 230-234 °С. Mass (El), m/z ( (% )): 393.8173[М]+ (20). C18H13CIFNO4S. 1П NMR (200 MHz, DMSO-d6) d 1.95 (s, 3H, CH3CO), 4.52 (d, 1H, NCH2Ph), 5.32 (d, 1H, NCH2Ph), 7.01 - 7.42 (m, 6H), 8.14 (d, /= 8.8 Hz, 1H, H4), 10.81 (s, 1H, OH).
Пример 70.
2-[ацетил(2-фторбензил)амино]-6-гидрокси-1 -бензотиофен-3 -карбоновая кислота 25е.
Figure imgf000055_0002
Выход: 85%. %. Мр. 140-145 °С. Mass (El), m/z ( (% )): 359.3725[М]+ (17). Ci8Hi4FN04S. 1П NMR (200 MHz, DMSO-d6) d 2.04 (s, 3H, CH3CO), 4.82 (br s, 2H, NCH2Ph), 7.01 - 7.38 (m, 6H), 7.45 (d, /= 8.8 Hz, 1H, H4), 10.01 (s, 1H, OH), 13.42 (s, 1H, COOH).
2-[ацетил(4-фторбензил)амино]-7-хлор-6-гидрокси-1 -бензотиофен-3 -карбоновая кислота 25 f Выход: 83%. Мр. 220-224 °С. Mass (El), m/z ( (%)): 393.8173 [М]+ (21). C18H13CIFNO4S. Пример 71.
2-[ ацетил( 2,4-дифторбензил )амино] -7-хлор-6-гидрокси-1 -бензотиофен-3 -карбоновая кислота 25g.
Figure imgf000056_0001
Выход: 68%. Мр. 238-242 °С. Mass (El), m/z ( (% )): 411.8077 [М]+ (20). C18H12CIF2NO4S. ΉNMίO^OO MHz, DMSO-d6) d 1.94 (s, ЗН, СНзСО), 4.62 (d, / = 14.8 Hz, 1Н, NCH2Ph), 5.12 (d, / = 14.8 Hz, 1H, NCH2PI1), 6.94- 7.24 (m, 2H), 7.19 (d, / = 9.0 Hz, 1H, H5), 7.36 (ddd, / =
7.0, 8.0, 8.2 Hz, 1Н, H6’), 8.14 (d, /= 8.9 Hz, 1Н, H4), 10.73 (s, 1Н, ОН). b) Получение производных 2-[aifemm(R2, R -беи ил )амиио] -7 -R -б-гиОрокси-Ы -метил- 1 - бензотиофен-3 -карбоксамида 26a-g.
К раствору соответствующего исходного соединения 25a-g (1 ммоль) в 10 мл сухого ТГФ добавляют карбонилдиимидазол (2 ммоль), перемешивают при комнатной температуре 1 час. Затем добавляют безводный раствор метиламина в диоксане (3 ммоль). И перемешивают еще 1 час. Летучие вещества удаляют под вакуумом, в остаток добавляют воду и экстрагируют этилацетатом. Органический слой промывают водой 2 раза. Этилацетат упаривают, остаток наносят на колонку (элюент гексан:ацетон 10:4). Собирают все фракции с продуктом реакции, упаривают растворитель. Остаток перекристаллизовывают из смеси толуол: этилацетат (10:1 или 10:4). Получают кристаллическое соединение 26.
Пример 72.
2-[ацетил(бензил)амино] -7 -хлор-6-гидрокси-Ы-метил-1 -бензотиофен-3 -карбоксамид 26а.
Figure imgf000056_0002
Выход: 53%. Mp. 192-195 °С. Mass (El), m/z ( (% )): 388.8687 [M]+ (67). C19H17CIN2O3S. ^NMR (300 MHz, DMSO-d6) d 2.05 (s, 3H, CH3CO), 2.74 (d, / = 4.6 Hz, 3H, NCH ), 4.86 (brs, 2H, NCH2), 7.13 (d, /= 8.7 Hz, 1H, H5), 7.18 - 7.38 (m, 5H), 7.57 (d, / = 8.7 Hz, 1H, H4), 8.09 (br. q, / = 4.6 Hz, 1H, NH), 10.59 (s, 1H, OH).
Пример 73.
2-[ацетил(бензил)амино]—6-гидрокси-Ы-метил-1 -бензотиофен-3 -карбоксамид 26b.
Figure imgf000057_0001
Выход: 33%. Мр. 158-162 °С. Mass (El), m/z ( (% )): 354.4239 [М]+ (56). C19H18N2O3S. ^NMR (200 MHz, DMSO-d6) d 2.03 (s, 3H, CH3CO), 2.74 (d, / = 4.5 Hz, 3H, NCH ), 4.82 (brs, 2H, NCH2), 6.92 (dd, J = 8.7, 2.4 Hz, 1H, H5), 7.15 - 7.39 (m, 6H), 7.56 (d, J = 8.8 Hz, 1H, H4), 8.11 (br. q, /= 5.0 Hz, 1H, NH), 9.88 (s, 1H, OH).
Пример 74.
2-[ ацетил(2-хлорбензил )амино ]-7-хлор-6-гиОрокси-Ы-метил- / -бензотиофен-3 - карбоксамид 26с.
Figure imgf000057_0002
Выход: 53%. Мр. 200-202 °С. Mass (El), m/z ( (% )): 423.3134[М]+ (67). C19H16CI2N2O3S. 1П NMR (200 MHz, DMSO-d6) d 2.08 (s, 3H, CH3CO), 2.77 (d, / = 4.5 Hz, NCH ), 4.95 (br s, 2H, NCH2Ph), 7.14 (d, / = 8.7 Hz, 1H, H5), 7.29 - 7.37 (m, 3H), 7.39 - 7.47 (m, 1H), 7.58 (d, / = 8.7 Hz, 1H, H4), 8.25 (br s, 1H, NH), 10.65 (s, 1H, OH).
Пример 75.
2-[ ацетил(2-фторбензил )амино ]-7-хлор-6-гиОрокси-Ы-метил-1 -бензотиофен-3 - карбоксамид 26d.
Figure imgf000058_0001
Выход: 38%. Mp. 108-112 °С. Mass (El), m/z ( (% )): 406.8591 [M]+ (67). C19H16CIFN2O3S. ^NMR (200 MHz, DMSO-d6) d 2.04 (s, 3H, CH3CO), 2.73 (d, / = 4.6 Hz, 3H, NCH ), 4.91 (br s, 2H, NCH2PI1), 7.00 - 7.45 (m, 5H), 7.58 (d, / = 8.7 Hz, 1H, H4), 8.21 (br. q, / = 4.7 Hz, 1H, NH), 10.66 (s, 1H, OH).
Пример 76.
2-[ацетил(2-фторбензил)амино]-6-гидрокси-Ы-метил-1 -бензотиофен-3 -карбоксамид 26е.
Figure imgf000058_0002
Выход: 35%. Мр. 105-112 °С. Mass (El), m/z ( (%)): 372.4144 [М]+ (67). C19H17FN2O3S. ^NMR (200 MHz, DMSO-d6) d 2.03 (s, 3H, CH3CO), 2.74 (d, / = 4.6 Hz, 3H, NCH ), 4.89 (s, 2H, NCH2Ph), 6.92 (d, J = 8.8 Hz, 1H, H5), 7.31 - 7.06 (m, 5H), 7.56 (d, J = 8.8 Hz, 1H, H4), 8.15 (br s, 1H, NH), 9.81 (s, 1H, OH).
Пример 77.
Figure imgf000058_0003
Выход: 53%. Мр. 192-195 °С. Mass (El), m/z ( (%)): 406.8591 [М]+ (67). C19H16CIFN2O3S. XHNMR (200 MHz, DMSO-d6) d 2.04 (s, 3H, CH3CO), 2.71 (br. d, / = 4.7 Hz, 3H, NCH ), 4.82 (br s, 2H, NCH2Ph), 6.99 - 7.39 (m, 5H), 7.56 (d, /= 8.7 Hz, 1H, H4), 8.15 (br q, / = 4.7 Hz, 1H, NH), 10.66 (s, 1H, OH). Пример 78.
2-[ ацетил( 2,4-дифторбензил )амино]-7-хлор-6-гидрокси-Ы-метил-1 -бензотиофен-3 -
Figure imgf000059_0001
Выход: 38%. Мр. 125-130 °С. Mass (El), m/z ( (% )): 424.8496 [М]+ (14). C19H15CIF2N2O3S. 1HNMR(200 MHz, DMSO-d6) d 2.04 (s, 3H, CH3CO), 2.72 (d, / = 4.5 Hz, 3H, NCH ), 4.87 (brs, 2H, NCH2PI1), 6.97 - 7.24 (m, 1H), 7.15 (d, / = 8.8 Hz, 2H), 7.34 (td, / = 8.7, 6.6 Hz, 1H, H6’), 7.57 (d, / = 8.7 Hz, 1H, H4), 8.17 (d, / = 4.9 Hz, 1H, NH), 10.66 (s, 1H, OH). с) Получение производных 2-[ацетил(бензил)амино]-6-гидрокси^М -R-замещенный-!- бензотиофен -3 -карбоксамида 27a-d.
Синтез аналогичен синтезу соединений по примерам 69-75, за исключением используемого амина.
Пример 79.
2-[ ацетил( бензил )амино] -б-гидрокси-N -этил-1 -бензотиофен-3 -карбоксамид 27а.
Figure imgf000059_0002
Для синтеза используют безводный раствор диоксана, насыщенный этиламином.
Выход: 17%. Мр. 138-142 °С. Mass (El), m/z ( (%)): 368.4505 [М]+ (38). C20H20N2O3S. ^NMR (300 MHz, DMSO-d6) d 1.11 (t, / = 7.2 Hz, 3H, CH3CH2), 2.02 (s, 3H, CH3CO), 3.23 (q, J = 7.2 Hz, 2H, CH3CH2), 4.91 (br s, 2H, NCH2), 6.93 (dd, J = 8.8, 2.3 Hz, 1H, H5), 7.08 - 7.45 (m, 6H), 7.56 (d, / = 8.8 Hz, 1H, H4), 8.18 (br s, 1H, NH), 9.77 (s, 1H, OH).
Пример 80.
2-[ацетил(бензил)амино]-6-гидрокси-Ы-пропил-1 -бензотиофен-3 -карбоксамид 27b.
Figure imgf000060_0001
Для синтеза используют безводный раствор диоксана, насыщенный пропиламином.
Выход: 12%. Mp. 85-90 °С. Mass (El), m/z ( (% )): 382.4771 [M]+ (77). C21H22N2O3S. 1HNMR(300 MHz, DMSO-d6) d 1.11 (t, / = 7.2 Hz, 3H, CH3CH2), 2.02 (s, 3H, CH3CO), 2.21 (m,
2H, CH3CH2), 3.23 (q, / = 7.2 Hz, 2H, NHCH2), 4.91 (br. s, 2H, NCH2), 6.93 (dd, /= 8.8, 2.3 Hz, 1H), 7.08 - 7.40 (m, 6H), 7.55 (d, / = 8.8 Hz, 1H, H-4), 8.08 (br t, / = 4.3 Hz, 1H, NH), 9.79 (s, 1H, OH). Пример 81.
2-[ ацетил( бензил )амино] -6-гидрокси-1 -бензотиофен-3 -карбоксамид 27с.
Figure imgf000060_0002
Для синтеза используют метанольный раствор аммиака. Выход: 12%. Мр. 110-115°С. Mass (El), m/z ( (% )): 340.3973[М]+ (47). CI8HI6N203S. !HNMR (300 MHz, DMSO-d6) d 2.03 (s, 3H, CH3CO), 4.38 -5.61 (m, 2H, NCH2), 6.93 (dd, J = 8.8, 2.3 Hz, 1H, H5), 7.17 (d, / = 2.3 Hz, 1H, H7), 7.21 - 7.37 (m, 5H), 7.65 (d, / = 8.8 Hz, 3H, H4, NH2), 9.74 (s, 1H, OH). Пример 82.
Ы-бензил-Ы-[7-хлор-6-гидрокси-3-(пиперидин-1-илкарбонил)-1-бензотиен-2-ил] ацетамид
28.
Figure imgf000060_0003
d) К раствору соединения 25а (0.5 ммоль) в 5 мл сухого ТГФ добавляют карбонилдиимидазол (1 ммоль), перемешивают при комнатной температуре 1 час. Затем добавляют пиперидин (1.5 ммоль). И перемешивают еще 18 часов. Летучие вещества удаляют под вакуумом, в остаток добавляют воду и экстрагируют хлороформом. Органический слой промывают водой 2 раза, хлорофом упаривают, остаток наносят на колонку (элюент гексан:ацетон 10:4). Собирают фракции с продуктом реакции, упаривают растворитель. Получают масло. Добавляют гексан и диэтиловый эфир в соотношении 1:1, осадок отфильтровывают. Выход: 12%. Mp. 95-100 °С. Mass (El), m/z ( (% )): 442.9591[M]+ (16). C23H23CIN2O3S. ^NMR (200 MHz, DMSO-d6) d 1.12 - 1.77 (m, 6H, (СН2)з), 2.11 (s, 3H, CH3CO), 3.01 (d, / = 12.9 Hz, 2H, NCH2), 3.92 (d, /= 13.0 Hz, 2H, NCH2), 4.81 (s, 2H, NCH2Ph), 7.14 (d, /= 8.6 Hz, 1H, H5), 7.17 - 7.39 (m, 5H, Ph), 7.43 (d, /= 8.6 Hz, 1H, H4). Общая схема синтеза 6.
Figure imgf000061_0001
Синтез аналогичен синтезу соединений по примерам 69-75.
Пример 83.
2-[ацетил( бензил )амино]-7-[ ( диметиламино )метил ] -б-гидрокси-N -метил-1 -бензотиофен- 3-карбоксамид 29а.
Figure imgf000061_0002
Выход: 18%. Мр. 145-147 °С. Mass (El), m/z ( (% )): 411.5183 [М]+ (16). C22H25N3O3S. !HNMR (200 MHz, DMSO-d6) d 2.03 (s, 3H, CH3CO), 2.19 (s, 6H, N(CH )2), 2.72 (d, J = 4.6 Hz, 3H, NCH3), 3.63 (s, 2H, CH2N(CH )2), 4.83 (brs, 2H, NCH2Ph), 6.94 (d, J= 8.7 Hz, 1H, H5), 7.06 - 7.41 (m, 5H), 7.49 (d, / = 8.7Hz, 1H, H4), 8.06 (brq, / = 4.6 Hz, 1H, NH).
Пример 84.
2-[ ацетил(2-фторбензил )амино]-7-[ ( диметиламино )метил ] -б-гидрокси-N-Memm-l - бензотиофен-3 -карбоксамид 29Ь.
Figure imgf000062_0001
Выход: 65%. Мр. 122-126 °С. Mass (El), m/z ( (% )): 429.5988 [М]+ (23). C22H24FN3O3S. !HNMR (200 MHz, DMSO-d6) d 1.97 (s, 3H, CH3CO), 2.20 (s, 6H, N(CH )2), 2.75 (d, / = 4.6 Hz, 3H, NCH3), 3.63 (s, 2H, CH2N(CH )2), 4.83 (brs, 2H, NCH2Ph), 6.99 (d, J= 8.7 Hz, 1H, H5), 7.15 - 7.56 (m, 5H), 7.59 (d, / = 8.7Hz, 1H, H4), 8.12 (brq, / = 4.6 Hz, 1H, NH).
Пример 85. Описание испытаний по определению цитотоксичности и противовирусной активности соединений формулы I.
Цитотоксичность производных 2-ацетамидо-6-гидрокси-бензотиофена
Для изучения цитотоксичности соединений использовали микротетразолиевый тест (МТТ). С этой целью на среде для клеточных культур МЕМ готовили серии трехкратных разведений каждого соединения (300-0,1 мкг/мл). Клетки MDCK сеяли на 96- луночные планшеты и выдерживали 24 часа при 36°С в 5% СО2 до формирования монослоя. Серийные разведения исследуемых веществ вносили в лунки планшетов (0,2 мл на лунку) и инкубировали в течение 48 ч при 36°С в 5% СО2. Степень разрушения клеточного монослоя затем оценивали в микротетразолиевом тесте (МТТ). Для этого клетки дважды промывали физиологическим фосфатным буфером и вносили в лунки планшетов раствор 3-(4,5-диметилтиазолил-2)-2,5-дифенилтетразолия бромида (ICN Biochemicalslnc., Aurora, Ohio) (0,5 мг/мл) в среде для культивирования клеток (0,1 мл на лунку). После 2 ч инкубации лунки промывали и окрашенный осадок фор мазана растворяли в ДМСО (0,1 мл на лунку) при помощи шейкера для бактериальных культур. Оптическую плотность в лунках планшета затем измеряли на оптическом ридере ThermoMultiskanFC (ThermoScientific, США) при длине волны 540 нм. Полученные значения оптической плотности выражали в процентах от контрольных значений (клетки без тестируемых соединений) и с соответствующими концентрациями испытываемых соединений использовали для регрессионного анализа при помощи пакета программ GraphPadPrism (LaJolla, СА). При построении регрессионной зависимости использовали 4- параметрическую модель логистической кривой с вариабельным наклоном. Каждая концентрация была проверена в двух параллелях и трехкратной повторности опыта. На основе полученных данных рассчитывали 50% цитотоксическую дозу (СС50) каждого соединения (то есть концентрацию соединения, которая вызывает гибель 50% клеток в культуре или уменьшение оптической плотности в два раза по сравнению с контрольными лунками). Данные СС50 приведены как среднее значение ± стандартное отклонение для трех повторностей и результаты представлены в таблице 1.
Пример 86. Определение активности в отношении вируса гриппа производных 2- ацетамидо-6-гидрокси-бензотиофена формулы I.
Соединение в соответствующих концентрациях инкубировали с клетками MDCK в течение 1 ч при 36°С. Затем клеточную культуру инфицировали вирусом гриппа A/PuertoRico/8/34 (H1N1) (MOI 0,01). Планшеты инкубировали в течение 24 ч при 36 °С в присутствии 5% СОг. Затем из культуральной среды готовили 10-кратные разведения и использовали для заражения клеток MDCK в планшетах. Планшеты инкубировали в течение 48 ч при 36°С в присутствии 5% СО2. Присутствие вируса оценивали по реакции гемагглютинации с куриными эритроцитами. Для этого по 100 мкл культуральной жидкости переносили в соответствующие лунки круглодонных планшетов для иммунологических реакций и добавляли равный объем 1% взвеси куриных эритроцитов в физиологическом растворе. Уровень репродукции вируса в лунках панели оценивали по реакции гемагглютинации (РГА) эритроцитов. За титр вируса принимали величину, обратную наибольшему разведению вируса, способному вызвать положительную реакцию гемагглютинации. Инфекционный титр вируса выражали в количестве 50% экспериментальных инфекционных доз (TCID50) вируса в 0,2 мл. Каждая концентрация соединений была проверена в двух параллелях. Противовирусную активность соединений оценивали по снижению титра вируса по сравнению с контролем. Титр вируса выражали в процентах от контрольных значений (без препаратов) и использовали для регрессионного анализа, как описано выше. На основании полученных данных рассчитывали 50% эффективную дозу (1C 50) для каждого соединения, то есть концентрацию, при которой инфекционный титр вируса снижался в два раза по сравнению с контролем (плацебо), и индекс селективности (SI) (отношение СС50 к 1C 50). Рассчитанные значения 1C 50 приведены как среднее значение ± стандартное отклонение для трех экспериментальных повторностей, и результаты представлены в табл. 1.
Таблица 1. Значения активности в отношении вируса гриппа полученных производных 2- ацетамидо-6-гидрокси-бензотиофена.
Figure imgf000064_0001
Figure imgf000065_0001
* SI - индекс селективности
Пример 87. Исследование эффективности производных 2-ацетамидо-6-гидрокси- бензотиофена на модели вирусной инфекции in vivo Белых беспородных мышей (самки) массой 16-18 г (возраст 5-6 недель) получали из питомника «Рапполово» Ленинградской области. Информация о группе эксперимента была размещена на передней поверхности клеток и включала дату начала эксперимента, дату инфицирования, название и режим введения изучаемого препарата. Животные содержались в стандартных условиях в соответствии с постановлением Главного государственного санитарного врача РФ от 29.08.2014 N°51 «Об утверждении СП 2.2.1.3218-14 «Санитарно-эпидемиологические требования к устройству, оборудованию и содержанию экспериментально-биологических клиник (вивариев)».В период акклиматизации (7 дней) и эксперимента мыши были размещены в поликарбонатных клетках (BENEX а.с., Чешская республика, тип ТЗА, S=1200 см2) барьера открытого типа группами по 15 особей, на подстиле из опилок. Клетки покрыты стальными решетчатыми крышками с кормовым углублением. Площадь пола в клетке содержания для одного животного составила 80 см2 (минимально допустимая площадь 40 см2). Корм для содержания лабораторных животных, рецепт N° ПК-120-2_173000 «Лабораторкорм» (Москва), приготовленный по ГОСТ Р 50258-92 в соответствии с нормами, утвержденными приказом М3 СССР N° 755 от 12.08.77 г., давали ad libitum в кормовое углубление стальной решетчатой крышки клетки. Животные получали воду, очищенную и нормированную по органолептическим свойствам, по показателям pH, сухого остатка, восстанавливающих веществ, диоксида углерода, нитратов и нитритов, аммиака, хлоридов, сульфатов, кальция и тяжелых металлов на основании ГОСТ 51232-98 «Вода питьевая. Общие требования к организации и методам контроля качества». Вода в стандартных поилках со стальными крышками-носиками, давалась ad libitum. В качестве подстила использовали древесные гранулы (ООО «Биосфера», Санкт-Петербург, Россия).
Исследуемые образцы: 6 образцов производных 2-ацетамид-6-гидрокси-бензотиофена (пример 3, 23, 52, 61, 72, 73). Препараты сравнения: Умифеновир, Озельтамивир и имидазолилэтанамид пентандиовой кислоты. Перед проведением эксперимента образцы растворяли или суспензировали в дистиллированной воде. Дозы исследуемых образцов рассчитывали в относительных весовых единицах - мг/кг массы тела животных в сутки.
В эксперименте использовали 100 белых беспородных половозрелых мышей-самок массой 16-18 г (возраст 5-6 недель). В работе использовали вирус гриппа A/PuertoRico/8/34 (H1N1) из коллекции вирусных штаммов НИИЭМ им. Пастера. Животных заражали интраназально под легким эфирным наркозом, используя заражающую дозу 2.5х103 ЭИД5о/животное из расчета по 0.025 мл вируссодержащего материала в каждую ноздрю. Исследуемые препараты вводили в суточных дозах 1 раз в сутки в объеме 0,2 мл. Соединения вводили перорально при помощи одноразового инсулинового шприца с желудочным зондом. Изучаемые образцы вводили животным по лечебно- профилактической схеме: за 4 часа до инфицирования, через 4 часа после инфицирования, далее 1 раз в день в течение 5 дней. Всего для проведения эксперимента было сформировано 24 групп животных.
Гибель животных в группах опыта фиксировали ежедневно в течение 15 дней после инфицирования. В качестве показателей эффективности в эксперименте использовали оценку показателей выживаемости в группах (процент смертности (М), индекс защиты (ИЗ)).
Сравнительное исследование эффективности химических соединений были проведены в соответствии с Методическими указаниями по изучению специфической противовирусной активности фармакологических веществ (2005), Приказом Минздрава России от 23.08.2010 N°708H «Об утверждении правил лабораторной практики в Российской Федерации», а также принимая во внимание рекомендации международных разрешительных органов (Всемирной организации здравоохранения, Центра экспертизы и изучения лекарств Управления по санитарному надзору за качеством пищевых продуктов и медикаментов Министерства здравоохранения и социальных служб США).
Эксперимент проводился слепым методом, образцы были охолощены, включая контроль.
Результаты изучения динамики гибели животных в контрольных и опытных группах представлены в таблице2.
Таблица 2. Показатели протективной активности производных 2-ацетамидо-6- гидрокси-бензотиофена формулы I на модели экспериментальной летальной гриппозной пневмонии у мышей.
Figure imgf000067_0001
Figure imgf000068_0001
* Имидазолилэтанамид пентандиовой кислоты
В группе животных, получавших физиологический раствор (контрольное вещество) заражение вирусом гриппа приводило к специфической смертности животных, начиная с первых суток после инфицирования. К 15 суткам эксперимента гибель животных в группе животных, получавших плацебо, составила 100%. Применение референс препаратов Умифеновира, Озельтамивира, и имидазолилэтанамидпентандиовой кислоты приводило к снижению смертности (индекс защиты до 33%, /?<0.0001). Применение изучаемых соединений влияло на показатели гибели животных в разной степени. Наиболее выдающуюся эффективность в эксперименте продемонстрировали соединения по примерам 52, 61 и 73.
Пример 88. Определение активности в отношении коронавируса SARS-CoV-2 производных 2-ацетамидо-6-гидрокси-бензотиофена формулы I на U2-OS АСЕ2 клетках.
Эксперимент проведен в соответствии с описанием в статье Buchrieser, J. et al. // EMBOJ. 2020, el06267 (doi: 10.15252/embj.2020106267). Так, U2-OS Ace2 (osteosarcoma cell lines, angiotensin □converting enzyme 2, ) GFP (glomerular permeability factor, ) 1-10 и 1-11 (S- Fuse клетки) были разделены за день до заражения как описано. Экспериментальные вещества были предварительно растворены в воде в концентрации 25mM. 100 мкл раствора экспериментального соединения были добавлены к клеткам U2-OS АСЕ2 в среде (8х103 клеток в ячейке) для выращивания (DMEM 10% (минимальная эссенциальная среда Игла, модифицированная по способу Дульбекко) FCS (фетальная бычья сыворотка) 1% PS (пенициллин- стрептомицин)) и инкубировали 45-60 мин при 37°С. Затем добавляли 10 мкл вируса на лунку (конечный MOI 0,1). Клетки инкубировали при 37°С в течение 20 часов, фиксировали 8% PFA в течении 30 минут при комнатной температуре и промывали PBS. Для окрашивания ядер клеток и измерения их жизнеспособности добавляли 100 мкл раствора Hoechst (Invitrogen Hoechst 33342 nucleic acid stain). Планшеты считываются с помощью автоматического конфокального микроскопа (Opera Phoenix), который измеряет количество инфицированных клеток (сигнал GFP) и выживаемость (сигнал Hoechst). Было проведено два эксперимента. Концентрация стокового образца для всех образцов была 25 тМ. Результаты представлены в табл. 3. IC50 указывает на концентрацию, подавляющую инфекцию на 50%.
Таблица 3. Противовирусная активность производных 2-ацетамидо-6-гидрокси- бензотиофена формулы I в отношении вируса SARS-Cov-2.
Figure imgf000069_0001
Figure imgf000070_0001
Пример 89. Исследование острой и подострой токсичности производных 2-ацетамидо- 6-гидрокси-бензотиофена на мышах. Исследование проведено на половозрелых мышах линии BALB/c, в возрасте 8- 12 недель, с массой тела 20+2 г. Оценивалась острая токсичность пяти производных 2- ацетамидо-6-гидрокси-бензотиофена методом фиксированной дозы согласно OECD Test Guideline 420: «Acute Oral Toxicity - Fixed Dose Procedure» (см. данные онлайн-библиотеки Организации экономического сотрудничества и развития, URL: https://www.oecd- ilibrary.org/environment/test-no-420-acute-oral-toxicity-fixed-dose-procedure_9789264070943- еп) при внутрижелудочном введении самкам мышей. Острая токсичноть оценивалась в предварительном (по одному животному в максимально дозе) и основом эксперименте. Далее, оценивалась подострая 14-дневная токсичность с периодом 14-дневного отсроченного наблюдения и оценкой местнораздражающего действия при их внутрижелудочном введении мышам обоего пола в различных дозах.
Изучаемые вещества вводились фиксированными объемами в диапазоне испытуемых доз. Вводимый мышам объем составлял 0,1 мл / 10 г массы тела. Вещества вводили в виде суспензии в 1% крахмальном клейстере. Перед введением дозы животных ограничивали в пище не менее 3 часов перед введением дозы, вода - в свободном доступе.
Таблица 4. Острая токсичность производных 2-ацетамидо-6-гидрокси- бензотиофена для мышей.
Figure imgf000071_0001
* Класс опасности согласно Рекомендациям ООН ST/SG/AC.10/30/Rev.4* "Согласованная на глобальном уровне система классификации опасности и маркировки химической продукции (СГС)".
При изучении подострой токсичности и местнораздражающего действия половозрелым мышам линии BALB/c обоего пола длительно в течение 14 дней производили ежедневное внутрижелудочное введение исследуемых веществ, указаннвых в Таблице 4, в дозах 50, 100 и 200 мг/кг, а также 1% крахмального клейстера в качестве контроля. В каждой исследуемой группе было 12 животных (6 самок и 6 самцов), общее число животных составило 192.
Было выявлено, что внутрижелудочное введение исследуемых веществ в изучаемых дозах в течение 14 дней не приводило к статистически значимому изменению массы тела, потребления корма и воды по сравнению с группой контрольных животных. Также не происходило изменения общего состояния, количественных показателей крови и функций внутренних органов экспериментальных мышей по сравнению с контрольной группой животных. У мышей, получавших внутрижелудочно исследуемые вещества в указанных дозах, не отмечалось изменений локомоторной и исследовательской активности. При гистологическом исследовании внутренних органов также не было обнаружено признаков общетоксического и местнораздражающего действия, вызванного 14-дневным внутрижелудочным введением исследуемых веществ. Не наблюдалось патологических изменений у животных и по прошествии 14 дней после прекращения введения веществ.

Claims

Формула изобретения
1. Производное 2-ацетамид о-6-гидрокси-бензотиофена общей структурной формулы I или его фармацевтически приемлемая соль
Figure imgf000073_0001
(I), где
R1 представляет собой CN, СООН, COOAlk, CONHAlk, CON(Alk)2, CONH2;
R2 представляет собой H, Hal, CH2(NAlk)2;
R3 представляет собой Hal , Aik, OAlk, CF3, или две близлежащие группы R3 образуют группу -СН=СН-СН=СН- ;
R4 представляет собой Н или Hal; п=1-4; ш=1-3;
X представляет собой водород или метил;
Hal представляет собой фтор, хлор или бром;
Aik представляет собой линейную или разветвленную алкильную группу, имеющую от 1 до 4 атомов углерода, или в группе N(Alk)2 две группы Aik вместе с атомом азота, к которому они присоединены образуют -(СН2)Р- группу, причем р=3-5, одна из указанных СН2 групп может быть замещена атомом азота, кислорода или группой -N-СНз.
2. Производное 2-ацетамидо-6-гидрокси-бензотиофена по пункту 1, отличающееся тем, что R1 представляет собой COOAlk или CONHAlk, п равно 1.
3. Производное 2-ацетамид о-6-гидрокси-бензотиофена по пункту 1, отличающееся тем, что R1 представляет собой СООМе, R2 представляет собой Н, С1 или CH2(NAlk)2 и п равно 1.
4. Производное 2-ацетамидо-6-гидрокси-бензотиофена общей формулы I по пункту 1, отличающееся тем, что R1 представляет собой CONHMe, R2 представляет собой Н, С1 или CH2(NAlk)2 и п равно 1.
5. Производное 2-ацетамид о-6-гидрокси-бензотиофена общей формулы I по пункту 1, отличающееся тем, что R1 представляет собой CN, R2 представляет собой Н, С1 или CH2(NAlk)2 и п равно 1.
6. Производное 2-ацетамидо-6-гидроксибензотиофена общей формулы I или его фармацевтически приемлемая соль по любому из пунктов 1-5, обладающее противовирусной активностью.
7. Производное 2-ацетамидо-6-гидрокси-бензотиофена по пункту 6, отличающееся тем, что противовирусной активностью является противовирусной активностью в отношении вируса гриппа А и коронавируса SARS-CoV-2.
8. Применение производного 2-ацетамид о-6-гидрокси-бензотиофена общей формулы I или его фармацевтически приемлемой соли по любому из пунктов 1-7 в качестве противовирусного компонента в составе лекарственного средства для предупреждения или лечения заболевания, опосредованного вирусной инфекцией.
9. Применение производного 2-ацетамидо-6-гидрокси-бензотиофена по пункту 8, отличающееся тем, что вирусная инфекция является инфекцией, вызываемой РНК- содержащими респираторными вирусами, вирусом гриппа или кор онавиру сами.
10. Применение производного 2-ацетамидо-6-гидрокси-бензотиофена по пункту 8 или 9, отличающееся тем, что вирусная инфекция является вирусом гриппа А или коронавирусом SARS-CoV-2, а заболеванием является грипп или COVID 19.
11. Фармацевтическая композиция, обладающая противовирусной активностью, содержащая в эффективном количестве производное 2-ацетамидо-6-гидрокси- бензотиофена по любому из пунктов 1-7 и по меньше мере один фармацевтически приемлемый эксципиент.
12. Фармацевтическая композиция по пункту 11, отличающаяся тем, что упомянутая композиция находится в форме, пригодной для перорального введения или в форме, пригодной для местного применения или в форме, пригодной для приготовления инъекционных растворов.
13. Способ предупреждения или лечения заболевания, опосредованного вирусной инфекцией, включающий введение или нанесение субъекту в эффективном количестве производного 2-ацетамидо-6-гидрокси-бензотиофена общей структурной формулы I или его фармацевтически приемлемой соли по любому из пунктов 1-7 или фармацевтической композиции по любому из пунктов 11-12.
14. Способ предупреждения или лечения по пункту 13, отличающийся тем, что вирусная инфекция является вирусом гриппа, а заболеванием является грипп А.
PCT/RU2022/050030 2021-02-12 2022-02-01 Производные 2-ацетамидо-6-гидрокси-бензотиофена, обладающие противовирусной активностью WO2022173329A1 (ru)

Priority Applications (3)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN202280026803.7A CN117222630A (zh) 2021-02-12 2022-02-01 具有抗病毒活性的2-乙酰胺基-6-羟基-苯并噻吩衍生物
EP22753053.2A EP4293017A1 (en) 2021-02-12 2022-02-01 2-acetamido-6-hydroxy-benzothiophene derivatives with antiviral activity
CA3208028A CA3208028A1 (en) 2021-02-12 2022-02-01 2-acetamido-6-hydroxy-benzothiophene derivatives with antiviral activity

Applications Claiming Priority (2)

Application Number Priority Date Filing Date Title
RU2021103521A RU2756587C9 (ru) 2021-02-12 2021-02-12 Производные 2-ацетамидо-6-гидрокси-бензотиофена и их фармацевтически приемлемые соли, обладающие противовирусной активностью
RU2021103521 2021-02-12

Publications (1)

Publication Number Publication Date
WO2022173329A1 true WO2022173329A1 (ru) 2022-08-18

Family

ID=78000224

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
PCT/RU2022/050030 WO2022173329A1 (ru) 2021-02-12 2022-02-01 Производные 2-ацетамидо-6-гидрокси-бензотиофена, обладающие противовирусной активностью

Country Status (5)

Country Link
EP (1) EP4293017A1 (ru)
CN (1) CN117222630A (ru)
CA (1) CA3208028A1 (ru)
RU (1) RU2756587C9 (ru)
WO (1) WO2022173329A1 (ru)

Citations (6)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2005023818A2 (en) * 2003-09-10 2005-03-17 Gpc Biotech Ag Heterobicyclic compounds as pharmaceutically active agents
WO2009012430A1 (en) * 2007-07-18 2009-01-22 Janssen Pharmaceutica N.V. Sulfonamides as trpm8 modulators
RU2448692C2 (ru) 2009-11-09 2012-04-27 Федеральное государственное бюджетное учреждение "Научно-исследовательский Институт гриппа" Министерства здравоохранения и социального развития Российской Федерации (ФГБУ "НИИ гриппа" Минздравсоцразвития России) Фармацевтические соли аминобицикло[2.2.1]гептанов как ингибиторы транскрипционного фактора nf-kb с противовирусной активностью (варианты) и их применение
RU2530554C1 (ru) 2013-04-22 2014-10-10 Федеральное государственное бюджетное учреждение науки Новосибирский институт органической химии им. Н.Н. Ворожцова (НИОХ СО РАН) Применение 1,7,7-триметилбицикло[2.2.1]гептан-2-илиден-аминоэтанола в качестве ингибитора репродукции вируса гриппа
WO2017153789A1 (en) * 2016-03-11 2017-09-14 Vichem Chemie Kutató Kft. Benzo[b]thiophene derivatives and their use for the inhibition of fibroblast growth factor receptor kinases (fgfrs) for the use of neo- and hyperplasia therapies
EA202091889A1 (ru) * 2018-02-08 2020-10-29 Энио Фарма Конденсированные производные тиофена и их применение

Patent Citations (6)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2005023818A2 (en) * 2003-09-10 2005-03-17 Gpc Biotech Ag Heterobicyclic compounds as pharmaceutically active agents
WO2009012430A1 (en) * 2007-07-18 2009-01-22 Janssen Pharmaceutica N.V. Sulfonamides as trpm8 modulators
RU2448692C2 (ru) 2009-11-09 2012-04-27 Федеральное государственное бюджетное учреждение "Научно-исследовательский Институт гриппа" Министерства здравоохранения и социального развития Российской Федерации (ФГБУ "НИИ гриппа" Минздравсоцразвития России) Фармацевтические соли аминобицикло[2.2.1]гептанов как ингибиторы транскрипционного фактора nf-kb с противовирусной активностью (варианты) и их применение
RU2530554C1 (ru) 2013-04-22 2014-10-10 Федеральное государственное бюджетное учреждение науки Новосибирский институт органической химии им. Н.Н. Ворожцова (НИОХ СО РАН) Применение 1,7,7-триметилбицикло[2.2.1]гептан-2-илиден-аминоэтанола в качестве ингибитора репродукции вируса гриппа
WO2017153789A1 (en) * 2016-03-11 2017-09-14 Vichem Chemie Kutató Kft. Benzo[b]thiophene derivatives and their use for the inhibition of fibroblast growth factor receptor kinases (fgfrs) for the use of neo- and hyperplasia therapies
EA202091889A1 (ru) * 2018-02-08 2020-10-29 Энио Фарма Конденсированные производные тиофена и их применение

Non-Patent Citations (14)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
A.V. IVASHCHENKO ET AL.: "Sintez i protivovirusnaia aktivnost zameshchennykh etil-2-aminometil-5-gidroksi-1 N-indol-3-karbonovykh kislot i ikh proizvodnykh", KHIMIKO-FARMATSEVTICHESKII ZHURNAL, IZDATEL'STVO FOLIUM, RU, vol. 49, no. 3, 30 November 2014 (2014-11-30), RU , pages 7 - 19, XP009550708, ISSN: 0023-1134 *
BLAISING, J.POLYAK, S.J.ECHEUR, E-I.: "Arbidolas a broad-spectrumantiviral: anupdate", ANTIVIRAL RESEARCH, 2014
BUCHRIESER, J ET AL., EMBOJ, 2020, pages e106267
CADY S.D.SCHMIDT-ROHR K.WANG J.SOTO C.S.DEGRADO W.F.HONG M.H.: "Structure of the amantadine binding site of influenza M2 proton channels in lipid bilayers", NATURE, vol. 463, 2010, pages 689
DAVIES, W.L.GRUNERT, R.R.HAFF, R.F.MCGAHEN, J.W.NEUMAYER, E.MPAULSHOCK, M.WATTS, J.CWOOD, T.R.HERMANN, E.CHOFFMANN, C.E: "Antiviral Activity of 1-Adamantanamine (Amantadine", SCIENCE, vol. 144, 1964, pages 862, XP002507819, DOI: 10.1126/science.144.3620.862
ISON M.G.: "Antivirals and resistance: influenzavirus", CURRENT OPINION IN VIROLOGY, 2011, pages 563
ISON M.G.: "Clinical use of approved influenza antivirals: therapy and prophylaxis", INFLUENZA OTHER RESPIR. VIRUSES., vol. 1, 2013, pages 7 - 13
MCKIMM-BRESCHKIN J. L.: "Influenza neuraminidase inhibitors: antiviral action and mechanisms of resistance", INFLUENZA OTHER RESP. VIRUSES, vol. 7, no. 1, 2013, pages 25
OKOMO-ADHIAMBO M.FRY A. M.SU S. ET AL.: "Oseltamivir-resistant influenza A (H1N1) pdm09 viruses", EMERG. INFECT. DIS, vol. 21, 2015, pages 136
PHARMACOTHER, vol. 53, no. 7, 2019, pages 754 - 759
SCHOLTISSEK C.QUACK G.KLENK H.D.WEBSTER R.G., ANTIVIRAL RES, vol. 37, 1998, pages 83 - 95
SHEU T.G.FRY A.M.GARTEN R.J: "Dual Resistance to Adamantanes and Oseltamivir Among Seasonal Influenza A (H1N1) Viruses", JOURNAL OF INFECTIOUS DISEASES, vol. 203, 2011, pages 13, XP055234265, DOI: 10.1093/infdis/jiq005
TAKASHITA EABE TMORITA HNAGATA S ET AL.: "Influenza A (H1N1) pdm09 virus exhibiting reduced susceptibility to baloxavir due to a PA E23K substitution detected from a child without baloxavir treatment", ANTIVIRAL RES, vol. 180, 2020, pages 104828, XP086226163, DOI: 10.1016/j.antiviral.2020.104828
YAMAMOTO N.MATSUYAMA S.HOSHINO T: "Nelfinavir inhibits replication of severe acute respiratory syndrome coronavirus 2 in vitro", BIORXIV, 2020

Also Published As

Publication number Publication date
CA3208028A1 (en) 2022-08-18
EP4293017A1 (en) 2023-12-20
RU2756587C9 (ru) 2021-10-12
RU2756587C1 (ru) 2021-10-01
CN117222630A (zh) 2023-12-12

Similar Documents

Publication Publication Date Title
KR102353413B1 (ko) 인플루엔자 바이러스 복제 억제제
Zhao et al. Discovery of highly potent agents against influenza A virus
CN108290869B (zh) 用于在流感病毒感染中使用的杂环吲哚
CN108473493B (zh) 用于流感病毒感染的官能化的戊酸
JP6088639B2 (ja) 抗マラリア薬
KR20200069380A (ko) 글루타르이미드 유도체, 이의 용도, 이를 기반으로 한 약학 조성물 및 글루타르이미드 유도체를 생산하는 방법
JP2021514967A (ja) ピリジノイミダゾール系化合物の結晶型、塩型及びその製造方法
Krake et al. Novel inhibitors of Plasmodium falciparum based on 2, 5-disubstituted furans
Camps et al. Synthesis and pharmacological evaluation of several ring-contracted amantadine analogs
CN112771048B (zh) 流感病毒复制抑制剂及其中间体和用途
Radix et al. N, N′-disubstituted cinnamamide derivatives potentiate ciprofloxacin activity against overexpressing NorA efflux pump Staphylococcus aureus 1199B strains
RU2756587C9 (ru) Производные 2-ацетамидо-6-гидрокси-бензотиофена и их фармацевтически приемлемые соли, обладающие противовирусной активностью
EA046411B1 (ru) Производные 2-ацетамидо-6-гидроксибензотиофена, обладающие противовирусной активностью
CN112724156B (zh) 一种多环吡啶酮衍生物和药物组合物及其应用
RU2720305C1 (ru) Замещенный 3,4,12,12а-тетрагидро-1Н-[1,4]оксазино[3,4-c]пиридо[2,1-f] [1,2,4]триазин-6,8-дион, фармацевтическая композиция, способы их получения и применения
US20150329515A1 (en) Composition and method for treating or preventing influenza virus infection
WO2007120079A2 (fr) Dérivés de 4-aminométhyl-6-brome-5-hydroxyindol-3-carboxylates
Barlow et al. Synthesis and evaluation of 4-amino-3, 4-dihydro-2H-naphthalen-1-one derivatives as mast cell stabilising and anti-inflammatory compounds
Altenkämper et al. Antimalarial and antitrypanosomal activity of a series of amide and sulfonamide derivatives of a 2, 5-diaminobenzophenone
CN114213395A (zh) 一种嘧啶酮酰基哌嗪类化合物及其制备方法与应用
JPS6214539B2 (ru)
RU2649406C1 (ru) 3-n-замещенные борнилпропионаты, используемые в качестве ингибиторов вируса марбург
RU2697716C1 (ru) Гидрохлорид 1,7,7-триметилбицикло[2.2.1]гептан-2-ил 3-(пиперидин-1-ил)пропионат, используемый в качестве ингибитора вируса Эбола
Xie et al. Discovery of a series of novel compounds with moderate anti-avian H5N1 influenza virus activity in chick embryo
Li et al. Hybrid molecules based on an emodin scaffold. Synthesis and activity against SARS-CoV-2 and Plasmodium

Legal Events

Date Code Title Description
121 Ep: the epo has been informed by wipo that ep was designated in this application

Ref document number: 22753053

Country of ref document: EP

Kind code of ref document: A1

WWE Wipo information: entry into national phase

Ref document number: 3208028

Country of ref document: CA

WWE Wipo information: entry into national phase

Ref document number: 18546127

Country of ref document: US

WWE Wipo information: entry into national phase

Ref document number: 202392198

Country of ref document: EA

WWE Wipo information: entry into national phase

Ref document number: 2022753053

Country of ref document: EP

NENP Non-entry into the national phase

Ref country code: DE

ENP Entry into the national phase

Ref document number: 2022753053

Country of ref document: EP

Effective date: 20230912