WO2022165578A1 - Aditivo de preservação de células, tecidos e/ou alimentos e uso - Google Patents

Aditivo de preservação de células, tecidos e/ou alimentos e uso Download PDF

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WO2022165578A1
WO2022165578A1 PCT/BR2022/050037 BR2022050037W WO2022165578A1 WO 2022165578 A1 WO2022165578 A1 WO 2022165578A1 BR 2022050037 W BR2022050037 W BR 2022050037W WO 2022165578 A1 WO2022165578 A1 WO 2022165578A1
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peptide
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cell
flowers
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PCT/BR2022/050037
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Andrea Sterman Heimann
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Proteimax Bio Technology Israel Ltd
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    • C07K2319/01—Fusion polypeptide containing a localisation/targetting motif
    • C07K2319/10—Fusion polypeptide containing a localisation/targetting motif containing a tag for extracellular membrane crossing, e.g. TAT or VP22

Definitions

  • the present invention is in the fields of Biotechnology, Phytochemistry and Food Technology and provides a cell, tissue and/or food preservation additive and the use of a synthetic peptide to prepare said additive.
  • the invention is useful for, among other applications, increasing the shelf life of foods and providing greater food safety.
  • the additive of the invention provides substantial fruit preservation upon a single application of the additive, providing for the treatment of plants or foods to prevent the occurrence of pests such as bacteria or fungi, such as, for example, those related to fruit rot, including strawberries, Xylella fastidiosa in coffee and orange groves.
  • the additive of the invention provides substantial flower or inflorescence preservation upon a single application of the additive, providing an alternative against rapid wilting, rotting or fungal growth associated with stock, transport and/or medicinal processing of flowers or inflorescences of phytochemical interest, including Gerbera, Cannabis, among others.
  • the present additive provides substantial preservation of the metabolic state of shoots or seedlings, as well as delays the seed germination process when said additive is applied, thus being useful for synchronizing germination, adjusting planting or germination timing, among other agronomic or botanical advantages.
  • the present invention solves problems of the state of the art from the use of a synthetic peptide for the preservation of cells, tissues and/or foods and an additive comprising said peptide, being useful to provide improvements in production, logistics and/or or consumption of food and/or plants.
  • the invention provides a topical additive comprising said peptide, for preserving cells, tissues and/or food and water or an excipient.
  • the invention provides an additive for use in the hydration liquid of the stem or flower branch or inflorescence of ornamental or phytochemical interest.
  • the synthetic peptide in the present invention is selected from the peptide of SEQ ID NOs: 1 and SEQ ID NOs: 4 to 14, optionally additionally containing a cell-penetrating peptide tail in the N-terminal portion and/or the C-terminal portion. terminus of the first and/or last amino acid.
  • the peptide of SEQ ID NO: 3 represents a peptide containing the peptide of SEQ ID NO: 1 and the cell penetrating peptide of SEQ ID NO: 2 in the C-terminal region.
  • the peptide of SEQ ID NO: 15 represents a peptide containing the peptide of SEQ ID NO: 9 and the cell penetrating peptide of SEQ ID NO: 2.
  • the present additive provides substantial fruit preservation upon application of at least one dose.
  • the present additive provides for the treatment of plants or foods to prevent the occurrence of pests such as bacteria or fungi, such as, for example, those related to the rot or contamination of strawberries
  • the present additive provides substantial preservation of the metabolic state of shoots or seedlings, as well as delays the process of seed germination when said additive is applied, thus being useful to synchronize germination, adjust planting time or germination, among other agronomic or botanical advantages.
  • the present additive provides the treatment of flowers or inflorescences of ornamental or phytochemical interest, to prevent or delay the wilting, rot or occurrence of pests such as bacteria or fungi, and to maintain the quality or integrity of the flowers or inflorescences longer.
  • Figure 1 shows the visual results of an experiment of application of 100pM of the preservative peptide in the Ktut embodiment, SEQ ID NO: 3 or water (control) on fresh strawberries, all from the same batch and the same commercial product packaging .
  • the results of groups of 10 strawberries in each condition (test and control) are shown at 0, 12, 24, 36, 48 and 60h, respectively in A, B, C, D, E and F.
  • Figure 2 shows the time in hours (abscissa) and the percentage of spoiled fruits (sorted) after application of 100pM of the preservative peptide in the embodiment (Ktut, SEQ ID NO: 3) or water on fresh strawberries.
  • Figure 3 shows the visual results of an experiment applying the additive of the invention with 100pM of the preservative peptide in the concretization (Ktut, SEQ ID NO: 3) in water, or only water as a control on 8 fresh strawberries in each group , all from the same batch and the same commercial product packaging. Representative results of strawberries in each condition (test and control) are shown at 0h, 24h, 48h and 5 days, respectively in A, B, C and D.
  • Figure 4 shows the visual results of an experiment of application of a single dose of 100pM (in water) of the preservative peptide in the concretization (Ktut, SEQ ID NO: 3) or water (control) on bean seeds, being all from the same batch and the same commercial product package and kept at room temperature (28 °C).
  • the results of germination of groups of 14 seeds in wet cotton are shown in each condition (control and test) at 0, 3 and 4 days, respectively in A, B and C.
  • the images show that there were differences in the germination pattern of the beans .
  • Figure 5 shows the time in days (abscissa) and the number of bean seeds that germinated (ordered) after application of 100pM of the peptide preservative in the embodiment (Ktut, SEQ ID NO: 3) under the conditions indicated in figure 4.
  • Figure 6 shows the visual results of an experiment of application of a single dose of 100pM (in water) of the preservative peptide in the concretization (SEQ ID NO: 15) or water (control) on two types of flowers, all of which are from the same batch and same day of acquisition, kept at room temperature (28 °C).
  • Four flowers were used in each container, the stems being kept submerged with at least 5 cm of the respective liquid during the test period.
  • Aluminum foil was used around the container where the stems were submerged, to protect from light. Photographic results of flowers kept in each condition (control and test) at 0, 3 and 6 days are shown.
  • C and E are shown images of roses, respectively on days 0, 3 and 6, the left roses kept in H2O and the right roses in the preservative peptide as indicated above.
  • D and F are shown images of gerberas, respectively on days 0, 3 and 6, the gerberas on the left kept in H2O and the gerberas on the right in the preservative peptide as indicated above.
  • the present invention solves problems of the state of the art from the use of a synthetic peptide for the preservation of cells, tissues and/or foods and an additive comprising said peptide, being useful to provide improvements in production, logistics and/or or consumption of food and/or plants.
  • the synthetic peptide in the present invention is selected from the peptide of SEQ ID NOs: 1 and SEQ ID NOs: 4 to 14, optionally additionally containing a cell-penetrating peptide tail in the N-terminal portion and/or the C-terminal portion. terminus of the first and/or last amino acid.
  • the peptide of SEQ ID NO: 3 represents a peptide containing 0 peptide of SEQ ID NO: 1 and 0 peptide of SEQ ID NO: 2 in the C-terminal region.
  • the peptide of SEQ ID NO: 15 depicts a peptide containing the peptide of SEQ ID NO: 9 and the cell penetrating peptide of SEQ ID NO: 2.
  • the invention provides a topical additive comprising said peptide, for preserving cells, tissues and/or food and water and/or an excipient.
  • the invention provides an additive for use in the hydration liquid of the stem or flower branch or inflorescence of ornamental or phytochemical interest.
  • the peptide has a cell-penetrating peptide tail at the N-terminal portion and/or the C-terminal portion of the first and/or last amino acid.
  • said peptide additionally comprises a cell-penetrating peptide tail at the N-terminal portion and/or the C-terminal portion of the first and/or the last amino acid.
  • Cell, tissue and/or food preservation additive comprising water and/or an excipient and A synthetic peptide selected from the peptide of SEQ ID NO: 1 and SEQ ID NOs: 4 to 14.
  • Additive as indicated wherein said peptide additionally comprises a cell-penetrating peptide tail at the N-terminal portion and/or the C-terminal portion of the first and/or the last amino acid.
  • Cell cycle In the context of the present patent application, the cell cycle is to be understood as a series of events that occur in cells and that lead to their division and duplication. It should be understood that the cell cycle comprises any state of the cell cycle of microorganisms or plants, such as quiescence/senescence states regarding interphase and cell division, as well as their phases. Thus, it should be understood that the cell phases GO, G1, S, G2, and mitosis (M) are also part of the cell cycle concept.
  • CPP Cell-penetrating peptide tail
  • cell-penetrating peptide tail refers to short amino acid sequences that facilitate the entry of the main peptide into the intracellular medium and, in this way, acting as a mode of transport of peptides to the intracellular medium.
  • hydrophilic tails known from the state of the art are included in the CPPs, such as, for example, the TAT tail, SynB1, SynB3, PTD-4, PTD-5, D-Tat, R9-Tat, among others.
  • Amphiphilic tails such as the MAP, SBP, FBP and others are also included.
  • cell division or multiplication In the context of the present patent application, cell division or multiplication should be understood as in any type of cell lineage, whether mammals, plants or microorganisms. Still in the context of the present patent application, it should be understood that dividing cells may also be related to the contamination of food or plants with microorganisms and/or the germination of seeds and/or the development of plants.
  • Inhibition of cell multiplication In the context of the present patent application, said term should be understood as the inhibition of the multiplication of any types or lines of mammalian, plant or microorganism cells, and the cells can be in any of the stages of cell division, cells may or may not be synchronized in the cell cycle. Inhibiting cell multiplication of cells presents, in the context of the present patent application, the meaning of interrupting the process of cell division, resulting or not in cell death.
  • Pests or contamination of plants or food In the context of the present patent application, pests or contamination of plants or foods are considered to be those biological agents that contaminate plants or foods, that are related to their rotting and/or that cause damage to the quality or shelf life of such products. .
  • microbial contaminations that lead to rot, those that form toxins and those that alter.
  • examples include, but are not limited to, P. nicotiana and P. idaei, Botrytis cinerea, Colletotrichum spp. Rhizopus stolonifer, S. sclerotiorum, Pestalotia longisetula Rhizoctonia sp., Geotrichum sp., Gnomon ia comari, Pilidium concavum related, among others, to strawberry rot, Xylella fastidiosa in coffee and orange groves, fungi associated with stock, transport and/or processing medicinal cannabis.
  • pep5 or “Pep5”.
  • the term is to be understood as the peptide represented by SEQ ID NO: 1, the amino acid sequence being WELVVLGKL.
  • cpp in the context of the present patent application, the term is to be understood as being a peptide tail, which can be represented by SEQ ID NO: 2, the amino acid sequence being YGRKKRRQRRR.
  • the term is to be understood as the peptide represented by SEQ ID NO: 1 linked to the peptide tail represented by the sequence SEQ ID NO: 2.
  • AN-pep5-cpp In the context of the present patent application, the term is to be understood as the peptide represented by SEQ ID NO: 1 but without the last amino acid of the N-terminal portion, and linked to the peptide tail represented by the sequence SEQ ID NO: 2.
  • AC-pepS-coo In the context of the present patent application, the term is to be understood as the peptide represented by SEQ ID NO: 1 but without the last amino acid of the C-terminal portion, and linked to the peptide tail represented by the sequence SEQ ID NO: 2.
  • SEQ ID NO: 9 An example is SEQ ID NO: 9.
  • SEQ ID NOs: 4 to 14 are considered within the inventive concept of the present invention due to the small changes in the amino acid sequence with respect to SEQ ID NO: 1 and SEQ ID NO: 9, both effectively tested in the present report.
  • Example 1 Use of the peptide for the preparation of a plant or food preservation additive.
  • SEQ ID NO: 3 The peptide of SEQ ID NO: 3, comprising pep5 (SEQ ID NO: 1 ) and cell penetrating peptide (SEQ ID NO: 2), was prepared in 100pM solution in water, for direct topical use on the food to be preserved.
  • Figure 1 shows the visual results of an experiment of application of 100pM of the preservative peptide (SEQ ID NO: 3) or water (control) on fresh strawberries, all from the same batch and commercial product packaging.
  • the results of groups of 10 strawberries in each condition (test and control) are shown at 0, 12, 24, 36, 48 and 60h, respectively in A, B, C, D, E and F.
  • Figure 2 shows the time in hours (abscissa) and the percentage of spoiled fruits (ordered) after application of 100pM of the preservative peptide (SEQ ID NO: 3) or water on fresh strawberries.
  • Example 3 Tests of the additive comprising the peptide in the preservation of strawberries against rot.
  • FIG. 3 shows the visual results of an experiment of application of the additive of the invention with 100pM of the preservative peptide (SEQ ID NO: 3) in water, or only water as a control on 8 fresh strawberries in each group, all of them from the same batch and same packaging of commercial product. Representative results of strawberries in each condition (test and control) are shown at Oh, 24h, 48h and 5 days, respectively in A, B, C and D.
  • Example 4 Tests of the preservative additive comprising the peptide in the modulation of the germination rate of bean seeds.
  • Figure 4 shows the visual results of an experiment of application of a single dose of 100pM (in water) of the preservative peptide (Ktut, SEQ ID NO: 3) or water (control) on bean seeds, all of which same batch and same package of commercial product and kept at temperature ambient (28°C).
  • the results of germination of groups of 14 seeds in wet cotton are shown in each condition (control and test) at 0, 3 and 4 days, respectively in A, B and C.
  • the images show that there were differences in the germination pattern of the beans .
  • Figure 5 shows the time in days (abscissa) and the number of bean seeds that will germinate (ordered) after application of 100pM of the preservative peptide (Ktut, SEQ ID NO: 3) as indicated in Figure 4.
  • results show substantial modulation of the metabolic state of the shoots or seedlings, as well as the delay in the process of seed germination when the said additive is applied.
  • the invention has therefore proved to be useful to modulate germination, adjust planting or germination time, among other agronomic or botanical advantages.
  • Example 5 Tests of the additive comprising the preservative peptide in the preservation of post-harvest flowers.
  • the chosen flowers were the rose (Rosa-rubra) and the gerbera (Gerbera).
  • the species of the genus Rosa are among the most cultivated ornamental flowers in the world.
  • the species of the genus Gerbera are used as an experimental organism in studies of flowering and meristematic development of the flower, and because they contain natural derivatives of coumarin, they are flowers of phytochemical interest and biological control.
  • the peptide of SEQ ID NO: 15 was used, which comprises the peptide of SEQ ID NO: 9 and the peptide of SEQ ID NO: 2.
  • Figure 6 shows the visual results of an experiment of application of a single dose of 100pM (in water) of the preservative peptide (SEQ ID NO: 15) or water (control) on two types of flowers, all of the same lot and same day of acquisition, kept at room temperature (28°C).
  • Four flowers were used in each container, the stems being kept submerged with at least 5 cm of the respective liquid during the test period.
  • Aluminum foil was used around the container where the stems were submerged, to protect from light. Photographic results of flowers kept in each condition (control and test) at 0, 3 and 6 days are shown.
  • A) and E) images of roses are shown, respectively on days 0, 3 and 6, the left roses kept in H2O and the right roses in the preservative peptide as indicated above.
  • B) and F) are shown images of gerberas, respectively on days 0, 3 and 6, the gerberas on the left kept in H2O and the gerberas on the right in the preservative peptide as indicated above.
  • the images clearly show that there were significant differences in the pattern of preservation of the flowers kept in the preservative.

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Abstract

A presente invenção situa-se nos campos da Biotecnologia, Fitoquímica e Tecnologia de Alimentos e proporciona um aditivo de preservação de células, tecidos e/ou de alimentos e o uso de um peptídeo sintético para preparar o referido aditivo. A invenção é útil para, dentre outras aplicações, aumentar o tempo de prateleira dos alimentos e proporcionar maior segurança alimentar. Em uma concretização, o aditivo da invenção proporciona substancial preservação de frutas mediante uma única aplicação do aditivo, proporcionando o tratamento de plantas ou alimentos para evitar a ocorrência de pragas como bactérias ou fungos, como, por exemplo, aqueles relacionados à podridão de frutos, incluindo morangos, Xylella fastidiosa em cafeeiros e laranjais, Em uma concretização, o aditivo da invenção proporciona substancial preservação de flores ou inflorescências mediante uma única aplicação do aditivo, proporcionando uma alternativa contra o rápido murchamento, podridão ou surgimento de fungos associados ao estoque, transporte e/ou processamento medicinal de flores ou inflorescências de interesse fitoquímico, incluindo Gerbera, Cannabis, dentre outros. Em uma concretização, o presente aditivo proporciona substancial preservação do estado metabólico de brotos ou plântulas, bem como retarda o processo de germinação de sementes quando o referido aditivo é aplicado, sendo, portanto, útil para sincronizar germinação, ajustar momento de plantio ou germinação, entre outras vantagens agronômicas ou botânicas.

Description

Relatório Descritivo de Patente de Invenção
ADITIVO DE PRESERVAÇÃO DE CÉLULAS, TECIDOS E/OU ALIMENTOS E USO
Campo da Invenção
[0001] A presente invenção situa-se nos campos da Biotecnologia, Fitoquímica e Tecnologia de Alimentos e proporciona um aditivo de preservação de células, tecidos e/ou de alimentos e o uso de um peptídeo sintético para preparar o referido aditivo. A invenção é útil para, dentre outras aplicações, aumentar o tempo de prateleira dos alimentos e proporcionar maior segurança alimentar. Em uma concretização, o aditivo da invenção proporciona substancial preservação de frutas mediante uma única aplicação do aditivo, proporcionando o tratamento de plantas ou alimentos para evitar a ocorrência de pragas como bactérias ou fungos, como, por exemplo, aqueles relacionados à podridão de frutos, incluindo morangos, Xylella fastidiosa em cafeeiros e laranjais, Em uma concretização, o aditivo da invenção proporciona substancial preservação de flores ou inflorescências mediante uma única aplicação do aditivo, proporcionando uma alternativa contra o rápido murchamento, podridão ou surgimento de fungos associados ao estoque, transporte e/ou processamento medicinal de flores ou inflorescências de interesse fitoquímico, incluindo Gerbera, Cannabis, dentre outros. Em uma concretização, o presente aditivo proporciona substancial preservação do estado metabólico de brotos ou plântulas, bem como retarda o processo de germinação de sementes quando o referido aditivo é aplicado, sendo, portanto, útil para sincronizar germinação, ajustar momento de plantio ou germinação, entre outras vantagens agronômicas ou botânicas.
Antecedentes da Invenção
[0002] Os mercados de fitoquímicos e de alimentos requerem constante evolução para atender às necessidades de produção, logística e consumo. Neste contexto, soluções que beneficiem qualquer destes pontos da cadeia são altamente desejáveis. A presente invenção proporciona uma solução que se aplica a todos estes elementos das respectivas cadeias.
[0003] Na busca pelo estado da técnica em literaturas científica e patentária, foram encontrados os seguintes documentos que tratam sobre o tema:
[0004] O pedido de patente BR 102014000521 -0, da presente inventora, é considerado o antecedente mais próximo à presente invenção. No entanto, nem este nem nenhum dos demais documentos encontrados revela, sugere ou ensina o uso tópico de um peptídeo para preservação de células e/ou alimentos e um aditivo compreendendo o referido peptídeo sintético.
[0005] Do que se depreende da literatura pesquisada, não foram encontrados documentos antecipando ou sugerindo os ensinamentos da presente invenção, de forma que a solução aqui proposta possui, aos olhos da inventora, novidade e atividade inventiva frente ao estado da técnica.
Sumário da Invenção
[0006] A presente invenção vem resolver problemas do estado da técnica a partir do uso de um peptídeo sintético para preservação de células, tecidos e/ou alimentos e um aditivo compreendendo o referido peptídeo, sendo útil para proporcionar melhorias na produção, logística e/ou consumo de alimentos e/ou plantas.
[0007] É um dos objetos da invenção proporcionar uma abordagem para aumentar o tempo de prateleira de alimentos e proporcionar maior segurança alimentar.
[0008] É outro dos objetos da invenção proporcionar uma abordagem para aumentar a qualidade e/ou o tempo de prateleira de plantas ou partes das mesmas para proporcionar melhorias na cadeia de produção de produtos fitoquímicos.
[0009] Em uma concretização, a invenção proporciona um aditivo de uso tópico compreendendo o referido peptídeo, para preservação de células, tecidos e/ou alimentos e água ou um excipiente. [0010] Em uma concretização, a invenção proporciona um aditivo de uso no líquido de hidratação do caule ou ramo de flor ou inflorescência de interesse ornamental ou fitoquímico.
[0011] O peptídeo sintético na presente invenção é selecionado dentre o peptídeo de SEQ ID NO: 1 e SEQ ID NOs: 4 a 14, opcionalmente contendo adicionalmente uma cauda peptídica célula-penetrante na porção N-terminal e/ou na porção C-terminal do primeiro e/ou do último aminoácido. O peptídeo de SEQ ID NO: 3 representa um peptídeo contendo o peptídeo de SEQ ID NO: 1 e o peptídeo célula penetrante de SEQ ID NO: 2 na região C-terminal. O peptídeo de SEQ ID NO: 15 representa um peptídeo contendo o peptídeo de SEQ ID NO: 9 e o peptídeo célula penetrante de SEQ ID NO: 2.
[0012] Em uma concretização, o presente aditivo proporciona substancial preservação de frutas mediante a aplicação de pelo menos uma dose.
[0013] Em uma concretização, o presente aditivo proporciona o tratamento de plantas ou alimentos para evitar a ocorrência de pragas como bactérias ou fungos, como, por exemplo, aqueles relacionados à podridão ou contaminação de morangos
[0014] Em uma concretização, o presente aditivo proporciona substancial preservação do estado metabólico de brotos ou plântulas, bem como retarda o processo de germinação de sementes quando o referido aditivo é aplicado, sendo, portanto, útil para sincronizar germinação, ajustar momento de plantio ou germinação, entre outras vantagens agronômicas ou botânicas.
[0015] Em uma concretização, o presente aditivo proporciona o tratamento de flores ou inflorescências de interesse ornamental ou fitoquímico, para evitar ou retardar o murchamento, podridão ou ocorrência de pragas como bactérias ou fungos, e manter a qualidade ou integridade das flores ou inflorescências por mais tempo.
[0016] Estes e outros objetos da invenção serão imediatamente valorizados pelos versados na arte e pelas empresas com interesses no segmento, e serão descritos em detalhes suficientes para sua reprodução na descrição a seguir. Breve Descrição das Figuras
[0017] Com o intuito de melhor definir e esclarecer o conteúdo do presente pedido de patente, são apresentadas as presentes figuras:
[0018] A figura 1 mostra os resultados visuais de um experimento de aplicação do de 100pM do peptídeo preservante na concretização Ktut, SEQ ID NO: 3 ou água (controle) sobre morangos frescos, sendo todos do mesmo lote e mesma embalagem de produto comercial. São mostrados os resultados de grupos de 10 morangos em cada condição (teste e controle) em 0, 12, 24, 36, 48 e 60h, respectivamente em A, B, C, D, E e F.
[0019] A figura 2 mostra o tempo em horas (abcissas) e o porcentual de frutas estragadas (ordenadas) após aplicação de 100pM do peptídeo preservante na concretização (Ktut, SEQ ID NO: 3) ou água sobre morangos frescos.
[0020] A figura 3 mostra os resultados visuais de um experimento de aplicação do aditivo da invenção com 100pM do peptídeo preservante na concretização (Ktut, SEQ ID NO: 3) em água, ou somente água como controle sobre 8 morangos frescos em cada grupo, sendo todos do mesmo lote e mesma embalagem de produto comercial. São mostrados os resultados representativos de morangos em cada condição (teste e controle) em 0h, 24h, 48h e 5 dias, respectivamente em A, B, C e D.
[0021] A figura 4 mostra os resultados visuais de um experimento de aplicação de uma única dose de 100pM (em água) do peptídeo preservante na concretização (Ktut, SEQ ID NO: 3) ou água (controle) sobre sementes de feijão, sendo todos do mesmo lote e mesma embalagem de produto comercial e mantidos em temperatura ambiente (28 °C). São mostrados os resultados da germinação de grupos de 14 sementes em algodão úmido em cada condição (controle e teste) em 0, 3 e 4 dias, respectivamente em A, B e C. As imagens mostram que houve diferenças no padrão de germinação dos feijões.
[0022] A figura 5 mostra o tempo em dias (abcissas) e o número de sementes de feijão que germinaram (ordenadas) após aplicação de 100pM do peptídeo preservante na concretização (Ktut, SEQ ID NO: 3) nas condições indicadas na figura 4.
[0023] A figura 6 mostra os resultados visuais de um experimento de aplicação de uma única dose de 100pM (em água) do peptídeo preservante na concretização (SEQ ID NO: 15) ou água (controle) sobre dois tipos de flores, sendo todas do mesmo lote e mesma dia de aquisição, mantidos em temperatura ambiente (28 °C). Foram usadas quatro flores em cada recipiente, os caules sendo mantidos submersos com pelo menos 5 cm do respectivo líquido durante o período do teste. Foi usado papel alumínio em volta do recipiente onde os caules estavam submersos, para proteger de incidência de luz. São mostrados os resultados fotográficos das flores mantidas em cada condição (controle e teste) em 0, 3 e 6 dias. Em A, C e E são mostradas imagens de rosas, respectivamente nos dias 0, 3 e 6, as rosas da esquerda mantidas em H2O e as rosas da direita no peptídeo preservante conforme indicado acima. Em B, D e F são mostradas imagens de gérberas, respectivamente nos dias 0, 3 e 6, as gérberas da esquerda mantidas em H2O e as gérberas da direita no peptídeo preservante conforme indicado acima.
Descrição Detalhada da Invenção
[0024] A presente invenção vem resolver problemas do estado da técnica a partir do uso de um peptídeo sintético para preservação de células, tecidos e/ou alimentos e um aditivo compreendendo 0 referido peptídeo, sendo útil para proporcionar melhorias na produção, logística e/ou consumo de alimentos e/ou plantas.
[0025] O peptídeo sintético na presente invenção é selecionado dentre 0 peptídeo de SEQ ID NO: 1 e SEQ ID NOs: 4 a 14, opcionalmente contendo adicionalmente uma cauda peptídica célula-penetrante na porção N-terminal e/ou na porção C-terminal do primeiro e/ou do último aminoácido. O peptídeo de SEQ ID NO: 3 representa um peptídeo contendo 0 peptídeo de SEQ ID NO: 1 e 0 peptídeo de SEQ ID NO: 2 na região C-terminal. O peptídeo de SEQ ID NO: 15 representa um peptídeo contendo o peptídeo de SEQ ID NO: 9 e o peptídeo célula penetrante de SEQ ID NO: 2.
[0026] Em uma concretização, a invenção proporciona um aditivo de uso tópico compreendendo o referido peptídeo, para preservação de células, tecidos e/ou alimentos e água e/ou um excipiente.
[0027] Em uma concretização, a invenção proporciona um aditivo de uso no líquido de hidratação do caule ou ramo de flor ou inflorescência de interesse ornamental ou fitoquímico.
[0028] Em uma concretização, o peptídeo possui uma cauda peptídica célula- penetrante na porção N-terminal e/ou na porção C-terminal do primeiro e/ou do último aminoácido.
[0029] A invenção é também definida pelas seguintes cláusulas.
[0030] Uso do peptídeo sintético selecionado dentre o peptídeo de SEQ ID NO: 1 e SEQ ID NOs:4 a 14, para a preparação de um aditivo de preservação de preservação de células, tecidos e/ou alimentos.
[0031] Uso conforme indicado acima em que o referido peptídeo adicionalmente compreende uma cauda peptídica célula-penetrante na porção N-terminal e/ou na porção C-terminal do primeiro e/ou do último aminoácido.
[0032] Uso conforme indicado acima em que a referida cauda peptídica célula- penetrante é de SEQ ID NO: 2.
[0033] Uso conforme indicado acima em que o referido peptídeo compreende a SEQ ID NO: 3.
[0034] Uso conforme indicado acima em que o referido peptídeo compreende a SEQ ID NO: 15.
[0035] Uso conforme indicado acima para a preparação de um aditivo de preservação de plantas e/ou frutas de interesse agronômico, botânico e/ou medicinal, ou para aumentar o tempo de prateleira dos alimentos e a segurança alimentar. [0036] Uso conforme indicado acima para a preparação de um aditivo para modular a germinação e/ou desenvolvimento vegetal de plantas de interesse agronômico, botânico e/ou medicinal.
[0037] Uso conforme indicado acima para a preparação de um aditivo para o tratamento de flores ou inflorescências de interesse ornamental ou fitoquímico, para evitar ou retardar o murchamento, podridão ou ocorrência de pragas como bactérias ou fungos, e/ou manter a qualidade ou integridade das flores ou inflorescências por mais tempo.
[0038] Aditivo de preservação de células, tecidos e/ou alimentos compreendendo água e/ou um excipiente e UM peptídeo sintético selecionado dentre o peptídeo de SEQ ID NO: 1 e SEQ ID NOs: 4 a 14.
[0039] Aditivo conforme indicado em que o referido peptídeo adicionalmente compreende uma cauda peptídica célula-penetrante na porção N-terminal e/ou na porção C-terminal do primeiro e/ou do último aminoácido.
[0040] Aditivo conforme indicado acima em que a referida cauda peptídica célula-penetrante é de SEQ ID NO: 2.
[0041] Aditivo conforme indicado acima em que o peptídeo sintético é de SEQ ID NO: 3.
[0042] Aditivo conforme indicado acima em que referido peptídeo compreende a SEQ ID NO: 15.
[0043] Aditivo conforme indicado acima para uso na preservação pós-colheita de flores e/ou inflorescências de interesse ornamental ou fitoquímico.
[0044] A seguir são definidos termos utilizados no presente pedido de patente: [0045] Peptídeo para incorporação ao meio intracelular. No contexto do presente pedido de patente, deve-se entender o termo como qualquer peptídeo que possua a função de auxiliar/possibilitar que um peptídeo biologicamente ativo seja incorporado ao meio intracelular e, desse modo, apresentando o efeito biológico no meio intracelular.
[0046] Ciclo celular. No contexto do presente pedido de patente, o ciclo celular deve ser entendido como uma série de eventos que ocorrem nas células e que levam à sua divisão e duplicação. Deve-se entender que o ciclo celular compreende qualquer estado do ciclo celular de microrganismos ou plantas, como os estados de quiescência/senescência quanto a intérfase e a divisão celular, bem como suas fases. Assim, deve-se entender que as fases celulares GO, G1 , S, G2, e a mitose (M) também fazem parte do conceito de ciclo celular. [0047] Cauda peptídica célula-penetrante (CPP). No contexto do presente pedido de patente, a cauda peptídica célula-penetrante (CPP) refere-se a sequências de aminoácidos curtas que facilitam a entrada do peptídeo principal para o meio intracelular e, dessa forma, atuando como um modo de transporte de peptídeos para o meio intracelular. Ainda no contexto do presente pedido de patente, incluem-se nas CPPs caudas hidrofílicas conhecidas do estado da arte como, por exemplo, a cauda TAT, SynB1 , SynB3, PTD-4, PTD-5, D-Tat, R9-Tat, dentre outras. Também estão inclusas caudas anfifílicas como a cauda MAP, SBP, FBP dentre outras.
[0048] Divisão ou multiplicação celular. No contexto do presente pedido de patente, a divisão ou multiplicação celular deve ser entendida como em qualquer tipo de linhagem celular, seja de mamíferos, seja de vegetais ou microrganismos. Ainda no contexto do presente pedido de patente, deve-se entender que as células em divisão podem também estar relacionadas à contaminação de alimentos ou plantas com microrganismos e/ou à germinação de sementes e/ou ao desenvolvimento de plantas.
[0049] Inibição da multiplicação de células. No contexto do presente pedido de patente, o referido termo deve ser entendido como a inibição da multiplicação de quaisquer tipos ou linhagens de células de mamíferos, de vegetais ou de microrganismos, sendo que as células podem estar em qualquer uma das etapas da divisão celular, podendo as células estar sincronizadas no ciclo celular ou não. Inibir a multiplicação celular das células apresenta, no contexto do presente pedido de patente, o significado de interromper o processo da divisão celular, resultando ou não na morte celular. [0050] Pragas ou contaminações de plantas ou alimentos. No contexto do presente pedido de patente, são consideradas pragas ou contaminações de plantas ou alimentos aqueles agentes biológicos que contaminam as plantas ou alimentos, que são relacionados à podridão dos mesmos e/ou que acarretem prejuízo à qualidade ou ao tempo de prateleira de tias produtos. Incluem-se nesta definição as contaminações microbianas que levam à podridão, as que formam toxinas e as que alteram. Exemplos incluem, mas não se limitam a P. nicotiana e P. idaei, Botrytis cinerea, Colletotrichum spp. Rhizopus stolonifer, S. sclerotiorum, Pestalotia longisetula Rhizoctonia sp., Geotrichum sp., Gnomon ia comari, Pilidium concavum relacionados, dentre outros, à podridão de morangos, Xylella fastidiosa em cafeeiros e laranjais, fungos associados ao estoque, transporte e/ou processamento medicinal de Cannabis.
[0051] “pep5” ou “Pep5”. No contexto do presente pedido de patente, o termo deve ser entendido como o peptídeo representado pela SEQ ID NO: 1 , sendo a sequência de aminoácidos WELVVLGKL.
[0052] “cpp”. No contexto do presente pedido de patente, o termo deve ser entendido como sendo uma cauda peptídica, que pode ser representada pela SEQ ID NO: 2, sendo a sequência de aminoácidos YGRKKRRQRRR.
[0053] oeo5-CDD ou Pep5-cpp ou “pep5-cpp”. No contexto do presente pedido de patente, o termo deve ser entendido como o peptídeo representado pela SEQ ID NO: 1 ligado à cauda peptídica representada pela sequência SEQ ID NO: 2. [0054] AN-pep5-cpp. No contexto do presente pedido de patente, o termo deve ser entendido como o peptídeo representado pela SEQ ID NO: 1 porém sem o último aminoácido da porção N-terminal, e ligado à cauda peptídica representada pela sequência SEQ ID NO: 2.
[0055] ANi-pep5-cpp. No contexto do presente pedido de patente, o termo deve ser entendido como o peptídeo representado pela SEQ ID NO: 1 porém sem os últimos i aminoácidos da porção N-terminal, em que i = 1 , 2, 3, 4 ou 5, e ligado à cauda peptídica representada pela sequência SEQ ID NO: 2. [0056] AC-pepS-coo. No contexto do presente pedido de patente, o termo deve ser entendido como o peptídeo representado pela SEQ ID NO: 1 porém sem o último aminoácido da porção C-terminal, e ligado à cauda peptídica representada pela sequência SEQ ID NO: 2.
[0057] ACi-pep5-cpp. No contexto do presente pedido de patente, o termo deve ser entendido como o peptídeo representado pela SEQ ID NO: 1 porém sem os últimos i aminoácidos da porção C-terminal, em que i = 1 , 2, 3, 4 ou 5 e ligado à cauda peptídica representada pela sequência SEQ ID NO: 2. Um exemplo é a SEQ ID NO: 9.
[0058] Os peptídeos de SEQ ID NOs: 4 a 14 são considerados dentro do conceito inventivo da presente invenção devido às pequenas mudanças na sequência de aminoácidos em relação à SEQ ID NO: 1 e à SEQ ID NO: 9, ambas efetivamente testadas no presente relatório.
[0059] Síntese dos peptídeos. Os peptídeos revelados pelo presente pedido de patente foram sintetizados empregando-se a técnica de síntese de peptídeos em fase sólida (Química FastMoc, da empresa Applied Biosystems).
[0060] Os exemplos aqui mostrados têm o intuito somente de exemplificar uma das inúmeras maneiras de se realizar a invenção, contudo sem limitar, o escopo da mesma.
[0061 ] Exemplo 1 - Uso do peptídeo para a preparação de um aditivo de preservação de plantas ou alimentos.
[0062] O peptídeo de SEQ ID NO: 3, que compreende o pep5 (SEQ ID NO: 1 ) e o peptídeo célula penetrante (SEQ ID NO: 2), foi preparado em solução 100pM em água, para uso tópico direto sobre o alimento a ser preservado.
[0063] O peptídeo de SEQ ID NO: 15, que compreende o peptídeo de SEQ ID NO: 9 e o peptídeo célula penetrante de SEQ ID NO: 2, foi preparado em solução 100pM em água, para uso no alimento ou planta a ser preservada.
[0064] Os versados na arte imediatamente compreenderão que poderão incorporar outros excipientes ao aditivo da invenção além de água, para melhorar o desempenho de preservação aqui mostrado. [0065] Exemplo 2 - Testes do aditivo compreendendo o peptídeo na preservação de morangos contra contaminação por fungos.
[0066] O aditivo preparado conforme o exemplo 1 foi utilizado em experimentos para a preservação de alimentos mediante aplicação tópica única.
[0067] A figura 1 mostra os resultados visuais de um experimento de aplicação de 100pM do peptídeo preservante (SEQ ID NO: 3) ou água (controle) sobre morangos frescos, sendo todos do mesmo lote e mesma embalagem de produto comercial. São mostrados os resultados de grupos de 10 morangos em cada condição (teste e controle) em 0, 12, 24, 36, 48 e 60h, respectivamente em A, B, C, D, E e F.
[0068] Em D) e E) da figura 1 é visível a presença de um fungo com hifas brancas, que não é detectável nos morangos tratados. Embora estes contaminantes não tenham sido caracterizados, sua aparência é consistente com Rhizopus stolon if er ou Sclerotinia sclerotiorum.
[0069] A figura 2 mostra o tempo em horas (abcissas) e o porcentual de frutas estragadas (ordenadas) após aplicação de 100pM do peptídeo preservante (SEQ ID NO: 3) ou água sobre morangos frescos.
[0070] Os resultados das figuras 1 e 2 mostram com clareza o grande potencial de preservação de frutas mediante uma única aplicação do aditivo em solução aquosa.
[0071] Resultados semelhantes são obtidos com a aplicação do peptídeo de SEQ ID NO: 15, que compreende o peptídeo de SEQ ID NO: 9 e o peptídeo de SEQ ID NO: 2.
[0072] Exemplo 3 - Testes do aditivo compreendendo o peptídeo na preservação de morangos contra podridão.
[0073] Um novo experimento com morangos, agora com os grupos teste e controle sendo mantidos em temperatura de 4 °C (em geladeira) foi conduzido para viabilizar a observação da preservação em condições que não favorecem o crescimento de microrganismos. [0074] A figura 3 mostra os resultados visuais de um experimento de aplicação do aditivo da invenção com 100pM do peptídeo preservante (SEQ ID NO: 3) em água, ou somente água como controle sobre 8 morangos frescos em cada grupo, sendo todos do mesmo lote e mesma embalagem de produto comercial. São mostrados os resultados representativos de morangos em cada condição (teste e controle) em Oh, 24h, 48h e 5 dias, respectivamente em A, B, C e D.
[0075] Em D) na figura 3, é muito visível presença de intensa podridão no grupo de morangos não tratados, condição que não é detectável no grupo dos morangos tratados com o aditivo da invenção mesmo após 5 dias. Referida podridão é bem distinta da condição de contaminação microbiana observada no experimento do exemplo 2.
[0076] Os versados na arte imediatamente compreenderão o grande valor técnico e econômico da presente invenção e poderão aplicar o aditivo da invenção para a preservação de outras plantas ou alimentos.
[0077] Exemplo 4 - Testes do aditivo preservante compreendendo o peptídeo na modulação da taxa de germinação de sementes de feijão.
[0078] Para avaliar os efeitos do aditivo da invenção na modulação da divisão ou multiplicação celular em vegetais, particularmente na modulação da germinação de sementes e/ou ao desenvolvimento de plantas, um experimento visando observar a germinação de sementes de feijão e o subsequente desenvolvimento de plântulas foi conduzido. Grupos de grupos de 14 sementes de feijão preto foram colocados em algodão úmido, cada grupo em uma condição: controle, com aplicação de água; e teste, com aplicação do aditivo da invenção conforme descrito abaixo. Foi observado e documentado o estado das sementes nos tempos 0, 3 e 4 dias, e o padrão e perfil de germinação dos feijões foram analisados.
[0079] A figura 4 mostra os resultados visuais de um experimento de aplicação de uma única dose de 100pM (em água) do peptídeo preservante (Ktut, SEQ ID NO: 3) ou água (controle) sobre sementes de feijão, sendo todos do mesmo lote e mesma embalagem de produto comercial e mantidos em temperatura ambiente (28 °C). São mostrados os resultados da germinação de grupos de 14 sementes em algodão úmido em cada condição (controle e teste) em 0, 3 e 4 dias, respectivamente em A, B e C. As imagens mostram que houve diferenças no padrão de germinação dos feijões.
[0080] A figura 5 mostra o tempo em dias (abcissas) e o número de sementes de feijão que germinarão (ordenadas) após aplicação de 100pM do peptídeo preservante (Ktut, SEQ ID NO: 3) conforme indicado na figura 4.
[0081] Os resultados mostram substancial modulação do estado metabólico dos brotos ou plântulas, bem como o retardo no processo de germinação de sementes quando o referido aditivo é aplicado. A invenção se mostrou, portanto, útil para modular a germinação, ajustar momento de plantio ou germinação, entre outras vantagens agronômicas ou botânicas.
[0082] Resultados semelhantes são obtidos com a aplicação do peptídeo de SEQ ID NO: 15, que compreende o peptídeo de SEQ ID NO: 9 e o peptídeo de SEQ ID NO: 2.
[0083] Exemplo 5 - Testes do aditivo compreendendo o peptídeo preservante na preservação de flores pós-colheita.
[0084] Os surpreendentes resultados obtidos nos exemplos anteriores motivaram a inventora a avaliar se o aditivo da invenção poderia também proporcionar a preservação de flores após sua colheita. É sabido que flores e inflorescências são particularmente sensíveis e tendem a murchar ou apodrecer rapidamente, o que causa dificuldades técnicas e econômicas nos segmentos que exploram tais partes de plantas. Especial destaque é feito ao mercado de flores ornamentais e, particularmente, ao mercado de produtos fitoterápicos ou farmacêuticos que fazem uso de flores ou inflorescências como insumos. Nestes segmentos, é particularmente desejável dispor de uma abordagem que preserve a qualidade e/ou integridade das flores ou inflorescências colhidas, para que o subsequente processamento logístico ou industrial sofra menos impacto negativo. [0085] Neste contexto, como modelo experimental para avaliar a preservação de flores ou inflorescências, foram avaliados dois tipos distintos de flores e seu perfil de degradação/preservação mediante incubação com água ou com uma solução do aditivo de preservação da invenção, mantendo-as as flores em temperatura ambiente por alguns dias.
[0086] As flores escolhidas foram a rosa (Rosa-rubra) e a gérbera (Gerbera). As espécies do gênero Rosa estão dentre as mais flores ornamentais cultivadas no mundo. As espécies do gênero Gerbera são utilizadas como organismo experimental em estudos de floração e de desenvolvimento meristemático da flor, e por conterem derivados naturais da cumarina, são flores de interesse fitoquímico e de controle biológico.
[0087] Nesta concretização, foi utilizado o peptídeo de SEQ ID NO: 15, que compreende o peptídeo de SEQ ID NO: 9 e o peptídeo de SEQ ID NO: 2.
[0088] A figura 6 mostra os resultados visuais de um experimento de aplicação de uma única dose de 100pM (em água) do peptídeo preservante (SEQ ID NO: 15) ou água (controle) sobre dois tipos de flores, sendo todas do mesmo lote e mesma dia de aquisição, mantidos em temperatura ambiente (28°C). Foram usadas quatro flores em cada recipiente, os caules sendo mantidos submersos com pelo menos 5 cm do respectivo líquido durante o período do teste. Foi usado papel alumínio em volta do recipiente onde os caules estavam submersos, para proteger de incidência de luz. São mostrados os resultados fotográficos das flores mantidas em cada condição (controle e teste) em 0, 3 e 6 dias. Em A), C) e E) são mostradas imagens de rosas, respectivamente nos dias 0, 3 e 6, as rosas da esquerda mantidas em H2O e as rosas da direita no peptídeo preservante conforme indicado acima. Em B), D) e F) são mostradas imagens de gérberas, respectivamente nos dias 0, 3 e 6, as gérberas da esquerda mantidas em H2O e as gérberas da direita no peptídeo preservante conforme indicado acima. As imagens mostram claramente que houve diferenças significativas no padrão de preservação das flores mantidas no preservante. [0089] Os resultados da figura 6 mostram efetiva preservação destas duas diferentes espécies de flor e proporcionam prova de conceito do uso do aditivo da invenção tanto para o segmento de flores e inflorescências ornamentais quanto para o segmento de flores e inflorescências de interesse fitoquímico, como é o caso de Gerbera, de Cannabis e outras espécies vegetais.
[0090] Os versados na arte valorizarão os conhecimentos aqui apresentados e poderão reproduzir a invenção nas modalidades apresentadas e em outras variantes, abrangidas no escopo das reivindicações anexas.

Claims

Reivindicações Uso do peptídeo sintético selecionado dentre o peptídeo de SEQ ID NO: 1 e SEQ ID NOs: 4 a 14 caracterizado por ser para a preparação de um aditivo de preservação de preservação de células, tecidos e/ou alimentos, ou para aumentar o tempo de prateleira dos alimentos e a segurança alimentar. Uso, de acordo com a reivindicação 1 , caracterizado pelo fato de que o referido peptídeo adicionalmente compreende uma cauda peptídica célula-penetrante na porção N-terminal e/ou na porção C-terminal do primeiro e/ou do último aminoácido. Uso, de acordo com a reivindicação 2, caracterizado pelo fato de que a referida cauda peptídica célula-penetrante é de SEQ ID NO: 2. Uso, de acordo com a reivindicação 3, caracterizado pelo fato de que o referido peptídeo compreende a SEQ ID NO: 3 ou a SEQ ID NO: 15. Uso, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 4, caracterizado pelo fato de ser para a preparação de um aditivo de preservação de plantas e/ou frutas de interesse agronômico, botânico e/ou medicinal. Uso, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 4, caracterizado pelo fato de ser para a preparação de um aditivo para modular a germinação e/ou desenvolvimento vegetal de plantas de interesse agronômico, botânico e/ou medicinal. Uso, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 4, caracterizado pelo fato de ser para a preparação de um aditivo para o tratamento de flores ou inflorescências, para evitar ou retardar o murchamento, podridão ou ocorrência de pragas como bactérias ou fungos, e/ou manter a qualidade ou integridade das flores ou inflorescências por mais tempo. Aditivo de preservação de células, tecidos e/ou alimentos caracterizado pelo fato de compreender água e/ou um excipiente e um peptídeo sintético selecionado dentre o peptídeo de SEQ ID NO: 1 e SEQ ID NOs: 4 a 14. Aditivo, de acordo com a reivindicação 8, caracterizado pelo fato de o referido peptídeo adicionalmente compreender uma cauda peptídica célula-penetrante na porção N-terminal e/ou na porção C-terminal do primeiro e/ou do último aminoácido. Aditivo, de acordo com a reivindicação 9, caracterizado pelo fato de que a referida cauda peptídica célula penetrante corresponde à SEQ ID NO: 2. Aditivo, de acordo com a reivindicação 10, caracterizado pelo fato de o referido peptídeo compreender a SEQ ID NO: 3 ou a SEQ ID NO:15. Aditivo, de acordo com a reivindicação 8 ou 1 1 , caracterizado por ser para a preservação pós-colheita de flores e/ou inflorescências de interesse ornamental ou fitoquímico.
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Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
BR102014000521A2 (pt) * 2014-01-09 2015-12-22 Proteimax Biotecnologia Ltda peptídeo, composição farmacêutica, método de inibição in vitro e/ou in vivo de células em divisão, método de identificação in vitro de células em divisão e usos
BR112013008768A2 (pt) * 2010-10-12 2016-06-28 Consumo Em Verde Biotecnologia Das Plantas S A uso de uma composição que compreende um peptídeo antimicrobiano como um alimento conservante
CN111374168A (zh) * 2019-12-18 2020-07-07 苏州大学 一种天然抗菌肽As-CATH4在食品防腐保鲜中的应用

Patent Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
BR112013008768A2 (pt) * 2010-10-12 2016-06-28 Consumo Em Verde Biotecnologia Das Plantas S A uso de uma composição que compreende um peptídeo antimicrobiano como um alimento conservante
BR102014000521A2 (pt) * 2014-01-09 2015-12-22 Proteimax Biotecnologia Ltda peptídeo, composição farmacêutica, método de inibição in vitro e/ou in vivo de células em divisão, método de identificação in vitro de células em divisão e usos
CN111374168A (zh) * 2019-12-18 2020-07-07 苏州大学 一种天然抗菌肽As-CATH4在食品防腐保鲜中的应用

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