WO2022086197A1 - 활성화된 면역 세포의 세포 표면 항원 및 이의 다양한 용도 - Google Patents

활성화된 면역 세포의 세포 표면 항원 및 이의 다양한 용도 Download PDF

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김정호
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Definitions

  • the present invention relates to an activated immune cell, for example, a cell surface antigen Lrig1 (leucine-rich and immunoglobulin-like domains 1 ) to proteins and their various uses.
  • a cell surface antigen Lrig1 leucine-rich and immunoglobulin-like domains 1
  • Cancer is currently one of the diseases that cause the most deaths worldwide, and the incidence of cancer is continuously increasing due to the extension of the average lifespan and the lowering of the age at which cancer occurs. According to the 2013 statistical data provided by the National Cancer Center of Korea, the total number of cancer patients in Korea registered in the Cancer Registration Statistics Department in 2010 was 202,053, and the number is continuously increasing.
  • the anticancer agent used in the anticancer chemotherapy is developed for the purpose of inhibiting protein activity by effectively binding to a protein that disrupts the cell signal transduction system by overexpression of phosphate activator protein, etc., which is mainly contained in the cell signal transduction system.
  • this type of chemotherapy inhibits the growth of normal cells with a fast cell cycle, such as hair, or may cause various side effects such as dry mouth, stomatitis, nausea, vomiting, diarrhea, neutropenia, etc. There is a problem. .
  • the non-response of the living body to the self-antigen is called immunologic unresponsiveness or tolerance.
  • Self-tolerance occurs by eliminating lymphocytes that may have specific receptors for self-antigens, or by inactivating the ability to respond to self-antigens after contact.
  • an immune response to self-antigen occurs, and the resulting disease is called an autoimmune disease.
  • AD Alzheimer's disease
  • PD Parkinson's disease
  • ALS amyotrophic lateral sclerosis
  • One object of the present invention is to provide a cell surface antigen of immune cells.
  • Another object of the present invention is a protein encoded by a leucine-rich and immunoglobulin-like domains 1 (Lrig1) gene, which is a cell surface antigen of an immune cell, preferably an activated immune cell; Or to provide a composition for the prevention, improvement or treatment of various diseases comprising an immune cell comprising an extracellular domain thereof as an active ingredient.
  • Lrig1 leucine-rich and immunoglobulin-like domains 1
  • Another object of the present invention is the Lrig1 gene, which is a cell surface antigen of an immune cell, preferably an activated immune cell;
  • an object of the present invention is to provide a method for diagnosing various diseases using an agent capable of measuring the expression level of the protein encoded thereby.
  • Another object of the present invention is an antibody or antigen-binding fragment thereof that specifically binds to Lrig1; And to provide a pharmaceutical composition for the prevention or treatment of various diseases comprising a bispecific antibody comprising an antibody or antigen-binding fragment thereof that specifically binds to the surface marker of immune cells as an active ingredient.
  • Another object of the present invention is the antibody or antigen-binding fragment thereof according to the present invention. And it is an object to provide a pharmaceutical composition for the prevention or treatment of various diseases comprising an antibody-drug conjugate comprising a drug as an active ingredient.
  • Another object of the present invention is Lrig1 protein; Or to provide a method for isolating immune cells, preferably activated immune cells by confirming the change in the expression level of the gene encoding the same.
  • Another object of the present invention is to provide a method for culturing activated immune cells.
  • Another object of the present invention is Lrig1 protein in immune cells; Or to provide a method of screening a cell therapy agent for the prevention, improvement or treatment of various diseases by confirming the change in the expression level of the gene encoding it.
  • the present invention relates to a cell surface antigen of an immune cell of Lrig1 (leucine-rich and immunoglobulin-like domains 1).
  • the cell surface antigen of the present invention is a cell surface antigen of an activated immune cell consisting of Lrig1 protein or a gene encoding the same.
  • the immune cells of the present invention include T cells, B cells, NK cells, lymphoid cells, dendritic cells, neutrophils, eosinophils, basophils, macrophages. (Macrophage) and may be at least one selected from the group consisting of mast cells (mast cells), but is not limited thereto.
  • the T cell of the present invention may be an effector T cell, but is not limited thereto.
  • the effector T cell of the present invention may be at least one selected from the group consisting of Th1, Th2, Th17 and Th22.
  • the "Lrig1" is a transmembrane protein consisting of 1091 amino acids that can exist on the surface of an activated immune cell, for example, various immune cells with inhibitory activity activated, and an extracellular or lumen side leucine repeat sequence ( leucine-rich repeat (LRR)), three immunoglobulin-like domains, a transmembrane sequence, and a cytoplasmic tail.
  • LRR leucine-rich repeat
  • LRIG1 gene family LRIG1, LRIG2 and LRIG3 exist, and amino acids between them are very conserved.
  • the LRIG1 gene is highly expressed in normal skin and can regulate proliferation of epithelial stem cells by expression in basal and hair follicle cells.
  • the Lrig1 protein may be a protein present in humans or mice, but is not limited thereto.
  • the Lrig1 protein may be a human-derived polypeptide represented by SEQ ID NO: 1 or a mouse-derived polypeptide represented by SEQ ID NO: 3, but is not limited thereto.
  • the Lrig1 protein represented by SEQ ID NO: 1 may be encoded by the polynucleotide represented by SEQ ID NO: 2, but is not limited thereto.
  • the Lrig1 protein represented by SEQ ID NO: 3 may be encoded by the polynucleotide represented by SEQ ID NO: 4, but is not limited thereto.
  • the Lrig1 is an antigen that is specifically present on the surface of the immune cells, for example, immune cells that have an inhibitory function on other types of immune cells such as effector T cells, preferably Lrig1 is expressed.
  • immune cells the same inhibitory effect as in regulatory T cells (Tregs) may be exerted, but the present invention is not limited thereto.
  • the "Th1 cell” of the present invention is a type of CD4 + cell and plays an important role in the adaptive immune system. Specifically, it refers to a cell that helps the activity of other immune cells by releasing cytokines that change the behavior of target cells.
  • the Th1 cells when Lrig1 is expressed on the surface of Th1 cells, the Th1 cells may have an activated inhibitory function to suppress other effector T cells, such as regulatory T cells, out of their intrinsic function, but is not limited thereto.
  • Th2 cells secrete interleukin (IL)4, IL-5, IL-6, IL-13, etc. by stimulation among CD4 + T cells, and interferon ⁇ and IL-2 secreted by TH1 helper T cells. It refers to a subgroup of helper T cells that do not secrete cytokines such as
  • Th2 cells may have an activated inhibitory function to suppress other effector T cells, such as regulatory T cells, out of their intrinsic function, but is not limited thereto.
  • the "Th17 cell” of the present invention refers to a population that produces interleukin 17 among pre-inflammatory helper T cells. These Th17 cells play an important role in adaptive immunity to protect the body from pathogens and, like other helper T cells, are associated with B-cell reinforcement in response to pathogens, for example through CXCL13 chemokine signaling. and the activity of Th17 cells may help to form antibodies. In particular, the Th17 cells have plasticity dependent on the cytokine microenvironment and inflammatory conditions, so that their phenotype and function can be changed.
  • Said “Th17 cells” of the present invention are characterized by the generation of individual profiles of effector cytokines, IL-17A, IL-17F, IL-26, IL-22, IL-21 and TNF ⁇ , at the molecular level, It is dependent on IL-23 for its development, survival and proliferation.
  • cytokines activate different types of cells, such as keratinocytes, resulting in their hyperproliferation and additional production of pro-inflammatory cytokines, chemokines and antimicrobial peptides, which in turn recruit and activate other immune cells in the inflamed skin, Causes amplification of the inflammatory response.
  • IL-17A and IL-17F cause autocrine regulation of IL-17 production, which is considered to promote and maintain Th17 cell differentiation (Wei et al. 2007, J Biol. Chem., September 20).
  • IL-17 also induces upregulation of CCL20, a ligand of a characterized receptor of Th17 cells in stromal cells, enabling the directing of additional cells to inflammatory tissues.
  • the signaling pathway of naive CD4 T cell differentiation into Th17 cells requires the combination of TGFb-1 with IL-21, IL-lb and IL-23 or IL-lb, IL-23 and IL-6, which Promotes cell differentiation and then induces expression of two transcription factors that upregulate IL-17A and IL-17F expression, retinoid-related rare receptor (RORC) and retinoid acid-related rare receptor alpha (RORA) ( Chung Y et al. Critical regulation of early Th17 cell differentiation by interleukin-1 signaling. Immunity 2009;30:576-87, Veldhoen M, Hocking RJ, Atkins CJ, Locksley RM, Stockinger B.
  • RORC retinoid-related rare receptor
  • RORA retinoid acid-related rare receptor alpha
  • the Th17 cells when Lrig1 is expressed on the surface of the Th17 cells, the Th17 cells may have an activated inhibitory function to suppress other effector T cells, such as regulatory T cells, out of their intrinsic function, but is not limited thereto. .
  • Th22 cells are a subset of helper T cells, and perform the function of characteristically producing IL-22.
  • Th22 cells have a feature that allows them to specifically express IL-22 in the absence of IL-17 and INF-gammma.
  • the Th22 cells when Lrig1 is expressed on the surface of Th22 cells, the Th22 cells may have an activated inhibitory function to suppress other effector T cells, such as regulatory T cells, out of their intrinsic function, but is not limited thereto.
  • the "cell surface antigen” of the present invention means a molecule present on the surface of a cell, which can act as a molecule that activates a receptor to specifically identify a cell or to exert a cell-specific function.
  • Examples of such cell surface antigens include various clusters of cell surface antigens (CDs), and the cell surface antigens of the present invention can be used alone or in combination with the CDs or alone in immune cells, such as effector T cells.
  • the inhibitory function against other types of immune cells, such as, may be present in activated immune cells, but is not limited thereto.
  • the contents related to immune cells and Lrig1 protein are the same as those described in 1.
  • Cell surface antigen, and the description thereof will be omitted below.
  • the "cell therapy agent” of the present invention is a living cell used in a treatment method directly injected into a patient, and is manipulated by physical, chemical or biological methods such as culturing, proliferating, or selecting living autologous, allogeneic or xenogeneic cells in vitro. refers to pharmaceuticals manufactured by
  • prevention of the present invention means a reduction in the degree of occurrence or damage to or loss of pathological cells in an animal. Prevention may be complete or partial. In this case, it may refer to a phenomenon in which the generation of pathological cells or abnormal immune action in an individual is reduced compared to the case where the composition for the prevention and treatment of various diseases described below is not used.
  • the "treatment" of the present invention means any action that clinically intervenes in order to change the natural process of a subject or cell to be treated, and may be performed while a clinical pathology is in progress or to prevent it.
  • the desired therapeutic effect is to prevent the occurrence or recurrence of a disease, alleviate symptoms, reduce any direct or indirect pathological consequences of the disease, prevent metastasis, reduce the rate of disease progression, alleviating or temporarily ameliorating the condition, or improving the prognosis. That is, the treatment may be interpreted as encompassing all actions in which symptoms of various diseases described below are improved or cured by the composition.
  • the cells of the present invention are 1 ⁇ 10 7 to 1 ⁇ 10 8 , 1 ⁇ 10 8 to 2 ⁇ 10 8 , 2 ⁇ 10 8 to 4 ⁇ 10 8 , 4 ⁇ 10 8 to 6 ⁇ 10 8 , 6 ⁇ 10 8 to 8 ⁇ 10 8 , 8 ⁇ 10 8 to 1 ⁇ 10 9 , 1 ⁇ 10 9 to 2 ⁇ 10 9 , to 4 ⁇ 10 9 , 4 ⁇ 10 9 to 1 ⁇ 10 10 , 2 ⁇ 10 8 to 6 ⁇ 10 8 , 6 ⁇ 10 8 to 1 ⁇ 10 9 , 1 ⁇ 10 8 to 2 ⁇ 10 8 , 2 ⁇ 10 8 to 2 ⁇ 10 9 , 1 ⁇ 10 7 to 1 ⁇ 10 8 , 1 ⁇ 10 8 to 1 ⁇ 10 It may be administered at a dose of any one of 10 or 1 ⁇ 10 7 to 1 ⁇ 10 9 cells/kg, but is not limited thereto.
  • the pharmaceutical composition of the present invention may be characterized in the form of capsules, tablets, granules, injections, ointments, powders or beverages, and the pharmaceutical composition may be characterized in that it is targeted to humans.
  • the pharmaceutical composition of the present invention is not limited thereto, but each is formulated in the form of oral dosage forms such as powders, granules, capsules, tablets, aqueous suspensions, external preparations, suppositories, and sterile injection solutions according to conventional methods to be used.
  • the pharmaceutical composition of the present invention may include a pharmaceutically acceptable carrier.
  • Pharmaceutically acceptable carriers may include binders, lubricants, disintegrants, excipients, solubilizers, dispersants, stabilizers, suspending agents, dyes, fragrances, etc., for oral administration, and in the case of injections, buffers, preservatives, pain-freezing agents Agents, solubilizers, isotonic agents, stabilizers, etc.
  • the dosage form of the pharmaceutical composition of the present invention can be prepared in various ways by mixing with a pharmaceutically acceptable carrier as described above.
  • a pharmaceutically acceptable carrier as described above.
  • it in the case of oral administration, it can be prepared in the form of tablets, troches, capsules, elixirs, suspensions, syrups, wafers, etc., and in the case of injections, it can be prepared in the form of unit dose ampoules or multiple doses. there is.
  • it can be formulated as a solution, suspension, tablet, capsule, sustained release formulation, and the like.
  • suitable carriers, excipients and diluents for formulation include lactose, dextrose, sucrose, sorbitol, mannitol, xylitol, erythritol, maltitol, starch, acacia gum, alginate, gelatin, calcium phosphate, calcium silicate, cellulose , methyl cellulose, microcrystalline cellulose, polyvinylpyrrolidone, water, methylhydroxybenzoate, propylhydroxybenzoate, talc, magnesium stearate or mineral oil may be used.
  • fillers, anti-agglomeration agents, lubricants, wetting agents, fragrances, emulsifiers, preservatives and the like may be further included.
  • the route of administration of the pharmaceutical composition of the present invention is, but not limited to, oral, intravenous, intramuscular, intraarterial, intramedullary, intrathecal, intracardiac, transdermal, subcutaneous, intraperitoneal, intranasal, intestinal, topical, Sublingual or rectal are included, and may be, for example, oral or parenteral administration.
  • the "parenteral" of the present invention includes subcutaneous, intradermal, intravenous, intramuscular, intraarticular, intrasynovial, intrasternal, intrathecal, intralesional and intracranial injection or infusion techniques.
  • the pharmaceutical composition may be administered by direct injection into the kidney, but is not limited thereto.
  • the pharmaceutical composition of the present invention depends on several factors including the activity of the specific compound used, age, weight, general health, sex, formula, administration time, administration route, excretion rate, drug formulation, and the severity of the specific disease to be prevented or treated. It can be variously changed, and the dosage of the pharmaceutical composition varies depending on the patient's condition, body weight, degree of disease, drug form, administration route and period, but may be appropriately selected by those skilled in the art, and 0.0001 to 50 mg/day per day kg or 0.001 to 50 mg/kg. Administration may be administered once a day, or may be administered in several divided doses. The above dosage does not limit the scope of the present invention in any way.
  • the pharmaceutical composition according to the present invention may be formulated as pills, dragees, capsules, solutions, gels, syrups, slurries, and suspensions.
  • composition for the prevention or treatment of immune-related diseases 2-1.
  • Lrig1 protein relates to a pharmaceutical composition for preventing or treating an immune-related disease comprising an immune cell comprising a gene encoding the same as an active ingredient.
  • Lrig1 protein provided by the present invention.
  • immune cells including a gene encoding it can effectively prevent or treat immune-related diseases because of their excellent inhibitory ability on other effector T cells, out of their intrinsic function.
  • the "immune-related disease” is a disease induced by excessive activation and expression of various immune cells and inflammatory cells, for example, autoimmune diseases; graft-versus-host disease; organ transplant rejection; asthma; atopy; Or it may be an acute or chronic inflammatory disease, etc., but is not limited thereto.
  • the "autoimmune disease” is rheumatoid arthritis, systemic scleroderma, systemic lupus erythematosus, atopic dermatitis, psoriasis, alopecia areata, asthma, Crohn's disease, Behçet's disease, Sjogren's syndrome, Gillia-Barré syndrome, chronic It may be selected from the group consisting of thyroiditis, multiple sclerosis, polymyositis, ankylosing spondylitis, fibromyalgia, and polyarteritis nodosa, but is not limited thereto.
  • Lrig1 protein relates to a pharmaceutical composition for the prevention or treatment of cancer using an immune cell comprising a gene encoding the same as an active ingredient.
  • immune cells containing a gene encoding the same can effectively inhibit the growth of various cancer cells by regulating the activity of other effector T cells outside of their intrinsic function.
  • the cancer to be prevented, improved, or treated in the present invention may be, for example, a solid tumor consisting of a mass generated by abnormal cell growth in a solid organ, Depending on the stomach cancer, liver cancer, glioblastoma, ovarian cancer, colorectal cancer, head and neck cancer, bladder cancer, renal cell cancer, breast cancer, metastatic cancer, prostate cancer, pancreatic cancer, may be at least one selected from the group consisting of melanoma and lung cancer, preferably It may be melanoma or colorectal cancer, but is not limited thereto.
  • composition for the prevention or treatment of neurodegenerative diseases or neuroinflammatory diseases 2-3.
  • Lrig1 protein relates to a pharmaceutical composition for preventing or treating a neurodegenerative disease or neuroinflammatory disease comprising an immune cell comprising a gene encoding the same as an active ingredient.
  • Lrig1 protein provided by the present invention.
  • immune cells containing a gene encoding the same can effectively prevent or treat neurodegenerative diseases or neuroinflammatory diseases because they have excellent inhibitory ability of other effector T cells.
  • the "neurodegenerative disease or neuroinflammatory disease” is stroke, dementia, Alzheimer's disease, Parkinson's disease, Huntington's disease, Niemann-Pick disease, prion Prion disease, Creutzfeldt-Jakob disease, frontotemporal dementia, Lewy dementia, AlzAmyotrophic lateral sclerosis, Paraneoplastic syndrome, cortical basal degeneration, multiple system atrophy disease, progressive supranuclear palsy, nervous system autoimmune disease, spinocerebellar ataxia, inflammatory and neuropathic pain, cerebrovascular disease, spinal cord injury and tauopathy (tauopathy) can be selected from the group consisting of However, the present invention is not limited thereto.
  • the contents related to immune cells and Lrig1 protein are the same as those described in 1. Cell surface antigen, and thus description thereof will be omitted below.
  • composition for diagnosis of immune-related diseases comprising an agent for measuring the expression level of Lrig1 protein or a gene encoding the Lrig1 protein present on the surface of immune cells.
  • the agent for measuring the expression level of the Lrig1 protein is not particularly limited, but for example, an antibody, oligopeptide, ligand, PNA (peptide nucleic acid) and aptamer that specifically binds to the protein. It may include one or more selected from the group consisting of.
  • the "antibody” refers to a substance that specifically binds to an antigen and causes an antigen-antibody reaction.
  • an antibody refers to an antibody that specifically binds to the Lrig1 protein.
  • Antibodies of the present invention include polyclonal antibodies, monoclonal antibodies and recombinant antibodies.
  • the antibody can be readily prepared using techniques well known in the art.
  • the polyclonal antibody can be produced by a method well known in the art, which includes injecting an antigen of the biomarker protein into an animal and collecting blood from the animal to obtain a serum containing the antibody.
  • Such polyclonal antibodies can be prepared from any animal such as goat, rabbit, sheep, monkey, horse, pig, cow, dog, and the like.
  • monoclonal antibodies can be prepared using the hybridoma method well known in the art (see Kohler and Milstein (1976) European Journal of Immunology 6:511-519), or the phage antibody library technology (Clackson et al, Nature, 352). :624-628, 1991; Marks et al, J. Mol. Biol., 222:58, 1-597, 1991).
  • the antibody prepared by the above method may be separated and purified using methods such as gel electrophoresis, dialysis, salt precipitation, ion exchange chromatography, and affinity chromatography.
  • the antibodies of the present invention include functional fragments of antibody molecules as well as complete forms having two full-length light chains and two full-length heavy chains.
  • a functional fragment of an antibody molecule means a fragment having at least an antigen-binding function, and includes Fab, F(ab'), F(ab')2 and Fv.
  • PNA Peptide Nucleic Acid
  • DNA has a phosphate-ribose sugar backbone
  • PNA has a repeated N-(2-aminoethyl)-glycine backbone linked by peptide bonds, which greatly increases binding strength and stability to DNA or RNA, resulting in molecular biology , diagnostic assays and antisense therapy.
  • PNA is described in Nielsen PE, Egholm M, Berg RH, Buchardt O (December 1991). "Sequence-selective recognition of DNA by strand displacement with a thymine-substituted polyamide". Science 254 (5037): 1497-1500.
  • the "aptamer” is an oligonucleic acid or peptide molecule, and the general information of the aptamer is described in Bock LC et al., Nature 355(6360):5646(1992); Hoppe-Seyler F, Butz K "Peptide aptamers: powerful new tools for molecular medicine”. J Mol Med. 78(8):42630(2000); Cohen BA, Colas P, Brent R. "An artificial cell-cycle inhibitor isolated from a combinatorial library”. Proc Natl Acad Sci USA. 95(24): 142727 (1998).
  • the agent for measuring the expression level of the gene encoding the Lrig1 protein may include one or more selected from the group consisting of primers, probes and antisense nucleotides that specifically bind to the gene. .
  • the "primer” is a fragment recognizing a target gene sequence, including a pair of forward and reverse primers, but preferably, a primer pair that provides analysis results having specificity and sensitivity. High specificity can be conferred when the primer's nucleic acid sequence is a sequence that is inconsistent with a non-target sequence present in the sample, thus amplifying only the target gene sequence containing the complementary primer binding site and not causing non-specific amplification. .
  • the "probe” refers to a substance capable of specifically binding to a target substance to be detected in a sample, and refers to a substance capable of specifically confirming the presence of a target substance in a sample through the binding.
  • the type of probe is not limited as a material commonly used in the art, but preferably PNA (peptide nucleic acid), LNA (locked nucleic acid), peptide, polypeptide, protein, RNA or DNA, and most preferably It is PNA.
  • the probe is a biomaterial derived from or similar thereto, or manufactured in vitro, and includes, for example, enzymes, proteins, antibodies, microorganisms, animal and plant cells and organs, neurons, DNA, and It may be RNA, and DNA includes cDNA, genomic DNA, and oligonucleotides, RNA includes genomic RNA, mRNA, and oligonucleotides, and examples of proteins include antibodies, antigens, enzymes, peptides, and the like.
  • LNA Locked nucleic acids
  • LNA nucleosides include common nucleic acid bases in DNA and RNA, and can form base pairs according to Watson-Crick base pairing rules. However, due to the 'locking' of the molecule due to the methylene bridge, the LNA does not form the ideal shape in the Watson-Crick bond.
  • LNA When LNA is incorporated into DNA or RNA oligonucleotides, LNA can pair with complementary nucleotide chains more rapidly, increasing the stability of the double helix.
  • the "antisense” means that the antisense oligomer is hybridized with a target sequence in RNA by Watson-Crick base pairing, and typically mRNA and RNA in the target sequence: A sequence of nucleotide bases allowing the formation of an oligomeric heteroduplex and oligomers having an inter-subunit backbone.
  • An oligomer may have exact sequence complementarity or approximate complementarity to a target sequence.
  • Lrig1 protein according to the present invention or the gene encoding it (LRIG1) is known, those skilled in the art can easily design primers, probes or antisense nucleotides that specifically bind to the gene encoding the protein based on this information. There will be.
  • the "immune-related disease” is a disease induced by excessive activation and expression of various immune cells and inflammatory cells, for example, autoimmune diseases; graft-versus-host disease; organ transplant rejection; asthma; atopy; Or it may be an acute or chronic inflammatory disease, etc., but is not limited thereto.
  • the "autoimmune disease” is rheumatoid arthritis, systemic scleroderma, systemic lupus erythematosus, atopic dermatitis, psoriasis, alopecia areata, asthma, Crohn's disease, Behçet's disease, Sjogren's syndrome, Gillia-Barré syndrome, chronic It may be selected from the group consisting of thyroiditis, multiple sclerosis, polymyositis, ankylosing spondylitis, fibromyalgia, and polyarteritis nodosa, but is not limited thereto.
  • composition for diagnosis of cancer comprising an agent for measuring the expression level of Lrig1 protein or a gene encoding the Lrig1 protein present on the surface of immune cells.
  • composition for diagnosis of cancer the content related to the agent for measuring the expression level of a protein or a gene encoding it is described above in 3-1. As described in the composition for diagnosis of immune-related diseases, the description thereof will be omitted below.
  • the cancer to be prevented, improved, or treated in the present invention may be, for example, a solid tumor consisting of a mass generated by abnormal cell growth in a solid organ, Depending on the stomach cancer, liver cancer, glioblastoma, ovarian cancer, colorectal cancer, head and neck cancer, bladder cancer, renal cell cancer, breast cancer, metastatic cancer, prostate cancer, pancreatic cancer, may be at least one selected from the group consisting of melanoma and lung cancer, preferably It may be melanoma or colorectal cancer, but is not limited thereto.
  • composition for diagnosis of neurodegenerative disease or neuroinflammatory disease Composition for diagnosis of neurodegenerative disease or neuroinflammatory disease
  • composition for diagnosis of a neurodegenerative disease or neuroinflammatory disease comprising an agent for measuring the expression level of the Lrig1 protein or a gene encoding the Lrig1 protein present on the surface of immune cells.
  • composition for diagnosis of a neurodegenerative disease or neuroinflammatory disease the content related to the agent for measuring the expression level of a protein or a gene encoding it is described above in 3-1.
  • the description thereof will be omitted below.
  • the "neurodegenerative disease or neuroinflammatory disease” is stroke, dementia, Alzheimer's disease, Parkinson's disease, Huntington's disease, Niemann-Pick disease, prion Prion disease, Creutzfeldt-Jakob disease, frontotemporal dementia, Lewy dementia, AlzAmyotrophic lateral sclerosis, Paraneoplastic syndrome, cortical basal degeneration, multiple system atrophy disease, progressive supranuclear palsy, nervous system autoimmune disease, spinocerebellar ataxia, inflammatory and neuropathic pain, cerebrovascular disease, spinal cord injury and tauopathy (tauopathy) can be selected from the group consisting of However, the present invention is not limited thereto.
  • the contents related to immune cells and Lrig1 protein are the same as those described in 1. Cell surface antigen, and thus description thereof will be omitted below.
  • kits for diagnosis of an immune-related disease comprising the composition for diagnosis of an immune-related disease provided by the present invention.
  • the kit may be an RT-PCR kit, a DNA chip kit, an ELISA kit, a protein chip kit, a rapid kit, or a multiple reaction monitoring (MRM) kit, but is not limited thereto.
  • MRM multiple reaction monitoring
  • the diagnostic kit of the present invention may further include one or more other component compositions, solutions or devices suitable for the assay method.
  • the diagnostic kit of the present invention may further include essential elements necessary for performing the reverse transcription polymerase reaction.
  • the reverse transcription polymerase reaction kit includes a pair of primers specific for a gene encoding a marker protein.
  • the primer is a nucleotide having a sequence specific to the nucleic acid sequence of the gene, and may have a length of about 7 bp to 50 bp, more preferably about 10 bp to 30 bp. It may also include a primer specific for the nucleic acid sequence of the control gene.
  • reverse transcription polymerase reaction kits include test tubes or other suitable containers, reaction buffers (with varying pH and magnesium concentrations), deoxynucleotides (dNTPs), enzymes such as Taq-polymerase and reverse transcriptase, DNase, RNase inhibitor DEPC -Water (DEPC-water), sterile water, etc. may be included.
  • the diagnostic kit of the present invention may include essential elements necessary for performing a DNA chip.
  • the DNA chip kit may include a substrate to which cDNA or oligonucleotide corresponding to a gene or fragment thereof is attached, and reagents, agents, enzymes, etc. for preparing a fluorescently-labeled probe.
  • the substrate may also contain cDNA or oligonucleotides corresponding to control genes or fragments thereof.
  • the diagnostic kit of the present invention may include essential elements necessary for performing ELISA.
  • the ELISA kit contains an antibody specific for this protein.
  • Antibodies are antibodies with high specificity and affinity for a marker protein and little cross-reactivity with other proteins, and are monoclonal antibodies, polyclonal antibodies, or recombinant antibodies.
  • the ELISA kit may also include an antibody specific for a control protein.
  • Other ELISA kits include reagents capable of detecting bound antibody, for example, labeled secondary antibodies, chromophores, enzymes (eg, conjugated with an antibody) and their substrates or capable of binding the antibody. other materials and the like.
  • the present invention relates to a kit for diagnosing an immune-related disease comprising the composition for diagnosing cancer provided in the present invention.
  • kits for diagnosis of cancer the content related to the agent for measuring the expression level of a protein or a gene encoding it is described above in 3-1. It is the same as described in the composition for diagnosis of immune-related diseases, and the contents related to the kit are described in 4-1. It is the same as described in the kit for diagnosis of immune-related diseases, and the description thereof will be omitted below.
  • kits for diagnosing an immune-related disease comprising the composition for diagnosing a neurodegenerative disease or a neuro-inflammatory disease provided by the present invention.
  • kits for diagnosis of a neurodegenerative disease or neuroinflammatory disease the content related to the agent for measuring the expression level of a protein or a gene encoding it is described above in 3-1. It is the same as described in the composition for diagnosis of immune-related diseases, and the contents related to the kit are described in 4-1. It is the same as described in the kit for diagnosis of immune-related diseases, and the description thereof will be omitted below.
  • the contents related to immune cells and Lrig1 protein are the same as those described in 1. Cell surface antigen, and thus description thereof will be omitted below.
  • a method for providing information for diagnosing an immune-related disease comprising measuring the expression level of the Lrig1 protein of immune cells or a gene encoding the same in a biological sample isolated from a subject of interest it's about
  • the "target individual” refers to an individual who is uncertain whether or not the disease will develop, and means an individual with a high probability of developing the disease.
  • the "biological sample” refers to any material, biological fluid, tissue or cell obtained from or derived from an individual, for example, whole blood, leukocytes, peripheral blood mononuclear blood, sputum, tears, mucus, nasal washes, including peripheral blood mononuclear cells, buffy coat, plasma and serum ), nasal aspirate, breath, urine, semen, saliva, peritoneal washings, pelvic fluids, cystic fluid, meningeal fluid, amniotic fluid, glandular fluid, pancreatic fluid, lymph fluid, pleural fluid, nipple aspirate, bronchial aspiration It may include bronchial aspirate, synovial fluid, joint aspirate, organ secretions, cell, cell extract or cerebrospinal fluid, However, the present invention is not limited thereto.
  • the agent for measuring the expression level of the Lrig1 protein or a gene encoding the same overlaps with that described in the composition for diagnosis of the immune-related disease, and thus description thereof will be omitted.
  • the present invention as a method for measuring or comparing the expression level of the Lrig1 protein, protein chip analysis, immunoassay, ligand binding assay, MALDI-TOF (Matrix Assisted Laser Desorption/Ionization Time of Flight Mass Spectrometry) analysis, SELDI-TOF (Sulface Enhanced Laser Desorption/Ionization Time of Flight Mass Spectrometry) analysis, radioimmunoassay, radioimmunodiffusion method, Octeroni immunodiffusion method, rocket immunoelectrophoresis, tissue immunostaining, complement fixation assay, two-dimensional electrophoresis analysis, liquid phase Chromatography-mass spectrometry (LC-MS), LC-MS/MS (liquid chromatography-Mass Spectrometry/ Mass Spectrometry), Western blotting or ELISA (enzyme linked immunosorbent assay), etc., but are limited thereto it is not
  • RT-PCR reverse transcription polymerase reaction
  • Competitive RT-PCR competitive reverse transcription polymerase reaction
  • RPA RNase protection assay
  • predicting that the likelihood of developing an immune-related disease is high may include
  • the expression level of the Lrig1 protein or the gene encoding the immune cells measured with respect to the biological sample of the subject in the present invention is reduced compared to the normal control, the likelihood of developing an immune-related disease is high.
  • the purpose It may further include the step of administering a drug for the disease to the subject.
  • the contents related to the immune cell and the Lrig1 protein are the same as those described in 1. Cell surface antigen, and the description thereof will be omitted below.
  • composition for the prevention or treatment of immune-related diseases comprising
  • a pharmaceutical composition for preventing or treating immune-related diseases comprising, as an active ingredient, a bispecific antibody specifically binding to Lrig1 and a surface marker of immune cells.
  • the bispecific antibody of the present invention may include an antibody or antigen-binding fragment thereof that specifically binds to Lrig1; and an antibody or antigen-binding fragment thereof that specifically binds to an immune cell surface marker.
  • the immune cell of the present invention may be at least one selected from the group consisting of T cells, B cells, NK cells, lymphocyte cells, dendritic cells, neutrophils, eosinophils, basophil granulocytes, macrophages and mast cells, but is limited thereto it is not
  • the T cell of the present invention may be an effector T cell, but is not limited thereto.
  • the effector T cells of the present invention may be at least one selected from the group consisting of Th1, Th2, Th17 and Th22, but is not limited thereto.
  • the bispecific antibody of the present invention is specific only to activated effector T cells whose function or properties can be changed by the surrounding microenvironment because it double targets Lrig1 protein and a surface marker specifically expressed on immune cells.
  • immune-related diseases can be very effectively prevented or treated by effectively regulating not only the intrinsic function of immune cells but also the immunosuppressive function performed by regulatory T cells.
  • a bispecific antibody or bispecific antigen binding fragment may be a bispecific antibody conjugate (eg, an IgG2, F(ab')2 or CovX-body), a bispecific IgG or IgG-like molecule (eg, IgG, scFv4-Ig, IgG-scFv, scFv-IgG, DVD-Ig, IgG-sVD, sVD-IgG, or 2 in 1-IgG, mAb2, or Tandemab common LC), asymmetric bispecific IgG or an IgG-like molecule (eg kih IgG, kih IgG common LC, CrossMab, kih IgG-scFab, mAb-Fv, charge
  • taFv-Fc di-diabody, scDb-CH3, scFv-Fc-scFv, HCAb-VHH, scFv-kih-Fc, or scFv-kih-CH3), or a bispecific fusion protein (eg, scFv2-albumin) , scDb-albumin, taFv-toxin, DNL-Fab3, DNL-Fab4-IgG, DNL-Fab4-IgG-cytokine2).
  • a bispecific fusion protein eg, scFv2-albumin
  • scDb-albumin e.g, scDb-albumin, taFv-toxin, DNL-Fab3, DNL-Fab4-IgG, DNL-Fab4-IgG-cytokine2
  • bispecific antibodies and bispecific antigen binding fragments in the present invention are also described, for example, in Antibody Engineering: Methods and Protocols, Second Edition (Humana Press, 2012), both of which are incorporated herein by reference in their entirety. ), at Chapter 40: Production of Bispecific Antibodies: Diabodies and Tandem scFv (Hornig and Farber-Schwarz), or French, How to make bispecific antibodies, Methods Mol. Med. 2000; 40:333-339). For example, it can be produced recombinantly by expression from a nucleic acid construct encoding a polypeptide for an antigen binding molecule.
  • two antigen binding domains i.e., a light and heavy chain variable domain for an antigen binding domain capable of binding PD-1, and a light and heavy chain variable domain for an antigen binding domain capable of binding another target protein
  • DNA constructs encoding the light and heavy chain variable domains for The recombinant bispecific antibody can then be produced by expression (eg, in vitro) of the construct in a suitable host cell (eg, a mammalian host cell), and the expressed recombinant bispecific antibody can then optionally be purified.
  • the antibody may be produced by an affinity maturation process in which a modified antibody with improved affinity for the antigen compared to the unmodified parent antibody is produced.
  • Affinity matured antibodies are described in the art, for example, Marks et al., Rio/Technology 10:779-783 (1992); Barbas et al. Proc Nat. Acad. Sci. USA 91:3809- 3813 (1994); Schier et al. Gene 169:147-155 (1995); Yelton et al. J. Immunol. 155:1994-2004 (1995); Jackson et al., J. Immunol. 3310-159 (1995); and Hawkins et al, J. Mol. Biol. 226:889-896 (1992)).
  • the “antibody” of the present invention refers to a substance produced by stimulation of an antigen in the immune system, and may be produced in vivo, recombinantly, or artificially synthesized, and the type is not particularly limited.
  • the antibody includes an animal antibody, a chimeric antibody, a humanized antibody, or a human antibody.
  • the term “antibody” also includes an antigen-binding fragment of an antibody having antigen-binding ability.
  • the "antigen-binding fragment" of the present invention is an antibody fragment comprising one or more complementarity determining regions, such as scFv, (scFv)2, scFv-Fc, Fab, Fab' and F(ab')2 from the group consisting of may be selected.
  • a heavy chain variable region comprising a heavy chain CDR1 represented by SEQ ID NO: 11, a heavy chain CDR2 represented by SEQ ID NO: 12 and a heavy chain CDR3 represented by SEQ ID NO: 13;
  • a heavy chain variable region comprising a heavy chain CDR1 represented by SEQ ID NO: 17, a heavy chain CDR2 represented by SEQ ID NO: 18 and a heavy chain CDR3 represented by SEQ ID NO: 19;
  • a heavy chain variable region comprising a heavy chain CDR1 represented by SEQ ID NO: 23, a heavy chain CDR2 represented by SEQ ID NO: 24 and a heavy chain CDR3 represented by SEQ ID NO: 25;
  • a heavy chain variable region comprising a heavy chain CDR1 represented by SEQ ID NO: 29, a heavy chain CDR2 represented by SEQ ID NO: 30 and a heavy chain CDR3 represented by SEQ ID NO: 31;
  • a heavy chain variable region comprising a heavy chain CDR1 represented by SEQ ID NO: 35, a heavy chain CDR2 represented by SEQ ID NO: 36 and a heavy chain CDR3 represented by SEQ ID NO: 37;
  • a heavy chain variable region comprising a heavy chain CDR1 represented by SEQ ID NO: 41, a heavy chain CDR2 represented by SEQ ID NO: 42 and a heavy chain CDR3 represented by SEQ ID NO: 43;
  • a heavy chain variable region comprising a heavy chain CDR1 represented by SEQ ID NO: 47, a heavy chain CDR2 represented by SEQ ID NO: 48, and a heavy chain CDR3 represented by SEQ ID NO: 49; a heavy chain variable region selected from the group consisting of; and
  • a light chain variable region comprising a light chain CDR1 represented by SEQ ID NO: 8, a light chain CDR2 represented by SEQ ID NO: 9 and a light chain CDR3 represented by SEQ ID NO: 10;
  • (k) a light chain variable region comprising a light chain CDR1 represented by SEQ ID NO: 20, a light chain CDR2 represented by SEQ ID NO: 21 and a light chain CDR3 represented by SEQ ID NO: 22;
  • (l) a light chain variable region comprising a light chain CDR1 represented by SEQ ID NO: 26, a light chain CDR2 represented by SEQ ID NO: 27 and a light chain CDR3 represented by SEQ ID NO: 28;
  • a light chain variable region comprising a light chain CDR1 represented by SEQ ID NO: 50, a light chain CDR2 represented by SEQ ID NO: 51 and a light chain CDR3 represented by SEQ ID NO: 52; a light chain variable region selected from the group consisting of;
  • the surface markers of the immune cells of the present invention may be included as long as they are specifically expressed on the surface of each immune cell and can distinguish itself from other immune cells.
  • the "surface marker of Th1 cells” of the present invention is a marker that is specifically expressed on the surface of Th1 cells and can differentiate Th1 cells from other cells, for example, CD94, CD119 (IFN ⁇ R1), IFN ⁇ R2, CD183 (CXCR3), CD186 (CXCR6), CD191 (CCR1), CD195 (CCR5), CD212 (IL-12R ⁇ 1), IL-12R ⁇ 2, CD218a (IL-18R ⁇ ), IL-27R ⁇ , CD254 (RANKL) or CD366 (TIM3) may be, but is not limited thereto.
  • the "surface marker of Th2 cells” of the present invention is a marker that is specifically expressed on the surface of Th2 cells and can distinguish Th2 cells from other cells, for example, CD184 (CXCR4), CD193 (CCR3), CD194 (CCR4), CD198 (CCR8), CD294 (CRTH2), CD365 (TIM1), IL-25R (IL-17RB), IL-33R (ST2, IL-4R or TSLPR).
  • the "surface marker of Th17 cells” of the present invention is a marker that is specifically expressed on the surface of Th17 cells and can differentiate Th17 cells from other cells, for example, CD121a (IL-1RI), CD126 (IL -6R ⁇ ), CD161, CD194 (CCR4), CD196 (CCR6), IL-23R, CD360 (IL-21R), CD212 (IL-12R ⁇ 1) or TGF- ⁇ RII.
  • the "surface marker of Th22 cells” of the present invention is a marker that is specifically expressed on the surface of Th22 cells and can distinguish Th22 cells from other cells, for example, CD194 (CCR4), CD196 (CCR6), It may be CCR10, IL-6R ⁇ , TGF- ⁇ RII or TNFRI, but is not limited thereto.
  • the heavy chain CDR and light chain CDR regions are immunoglobulins of all subtypes (eg, IgA, IgD, IgE, IgG (IgG1, IgG2, IgG3, IgG4), IgM, etc.), for example, it may be derived from the light chain constant region and/or the heavy chain constant region of all of the above subtypes of immunoglobulins.
  • CDR complementarity-determining regions
  • a pharmaceutical composition for preventing or treating cancer comprising as an active ingredient a bispecific antibody that specifically binds to Lrig1 and a surface marker of immune cells.
  • the bispecific antibody, antibody or binding fragment thereof that specifically binds to Lrig1 and the surface marker of immune cells is described above in 6-1. It is the same as described in the pharmaceutical composition for the prevention or treatment of immune-related diseases, and the description thereof will be omitted below.
  • composition for the prevention or treatment of neurodegenerative diseases or neuroinflammatory diseases 6-3.
  • a pharmaceutical composition for the prevention or treatment of neurodegenerative or neuro-inflammatory diseases comprising, as an active ingredient, a bispecific antibody that specifically binds to Lrig1 and a surface marker of immune cells.
  • the pharmaceutical composition of the present invention may be additionally administered in combination with a therapeutic agent for other immune-related diseases, cancer or neurodegenerative diseases or neuroinflammatory diseases.
  • the therapeutic agent for an immune-related disease of the present invention is an immunomodulator, for example, cytokines, stem cell growth factors, lymph toxin, hematopoietic factors, colony stimulating factor (CSF), interferon (IFN), erythropoietin and thrombopoietin ; or an anti-inflammatory agent, such as, but not limited to, a steroidal or non-steroidal anti-inflammatory agent.
  • the cancer therapeutic agent of the present invention includes nitrogen mustard, imatinib, oxaliplatin, rituximab, erlotinib, neratinib, lapatinib, gefitinib, vandetanib, nirotinib, semasanib, bosutinib, axitinib, cediranib, restautinib, trastuzumab, gefitinib, bortezomib, sunitinib, carboplatin, bevacizumab, cisplatin, cetuximab, viscumalbum, asparaginase, tretinoin, Hydroxycarbamide, dasatinib, estramustine, gemtuzumab ozogamicin, ibritumomab tucetan, heptaplatin, methylaminolevulinic acid, amsacrine, alemtuzuma
  • the therapeutic agent for a neurodegenerative disease or neuroinflammatory disease of the present invention is a small molecule therapeutic drug such as an AchE inhibitor, an NMDA receptor antagonist, a dopamine substitute, a dopamine agonist, an MAO inhibitor, or a COMT inhibitor, a gene therapy agent, a single antibody therapeutic agent, immunotherapy, iPSC and the like, but is not limited thereto.
  • the contents related to the immune cells and the Lrig1 protein are the same as those described in 1. Cell surface antigen, and the description thereof will be omitted below.
  • composition for the prevention or treatment of immune-related diseases is provided.
  • a bispecific antibody or antigen-binding fragment that specifically binds to Lrig1 and a surface marker of immune cells; And it provides a pharmaceutical composition for preventing or treating immune-related diseases comprising an antibody-drug conjugate comprising a drug as an active ingredient.
  • the “antibody-drug conjugate (ADC)" of the present invention refers to a form in which a drug and an antibody are chemically linked without reducing the biological activity of the antibody and the drug.
  • the antibody-drug conjugate is a form in which a drug is bound to an amino acid residue at the N-terminus of the heavy and/or light chain of the antibody, specifically, the N-terminal and ⁇ -amine group of the heavy and/or light chain of the antibody. This is the combined form.
  • the "drug” may refer to any substance having a specific biological activity in a cell, which is a concept including DNA, RNA, or peptides.
  • the drug may be in a form including a reactive group capable of crosslinking by reaction with an ⁇ -amine group, and also includes a form in which a linker including a reactive group capable of crosslinking by reaction with an ⁇ -amine group is connected.
  • Examples of the reactive group capable of crosslinking by reacting with the ⁇ -amine group in the present invention are not particularly limited as long as it can react with and crosslink with the ⁇ -amine group at the N-terminus of the heavy or light chain of the antibody. All types that react with known amine groups are included. For example, isothiocyanate, isocyanates, acyl azide, NHS ester, sulfonyl chloride, aldehyde (Aldehyde), glyoxal (Glyoxal), Epoxide, Oxirane, Carbonate, Aryl halide, Imidoester, Carbodiimide, Anhydride and Fluorophenyl ester ester), but is not limited thereto.
  • a bispecific antibody or antigen-binding fragment that specifically binds to Lrig1 and a surface marker of immune cells; And it provides a pharmaceutical composition for preventing or treating cancer comprising an antibody-drug conjugate comprising a drug as an active ingredient.
  • the antibody-drug conjugate that specifically binds to Lrig1 and the surface marker of immune cells is described above in 7-1. It is the same as described in the pharmaceutical composition for the prevention or treatment of immune-related diseases, and the description thereof will be omitted below.
  • composition for the prevention or treatment of neurodegenerative diseases or neuroinflammatory diseases comprising
  • a bispecific antibody or antigen-binding fragment that specifically binds to Lrig1 and a surface marker of immune cells; And it provides a pharmaceutical composition for the prevention or treatment of neurodegenerative diseases or neuro-inflammatory diseases comprising an antibody-drug conjugate comprising a drug as an active ingredient.
  • the antibody-drug conjugate that specifically binds to Lrig1 and the surface marker of immune cells is described above in 7-1. It is the same as described in the pharmaceutical composition for the prevention or treatment of immune-related diseases, and the description thereof will be omitted below.
  • Another embodiment of the present invention provides a method for isolating activated immune cells.
  • the separation method of the present invention comprises: Lrig1 protein in the isolated biological sample; or measuring the expression level of a gene encoding it.
  • the "isolated biological sample” of the present invention may be a healthy normal control or a biological sample isolated from a subject to be immunotherapy. Specifically, it refers to any material, biological fluid, tissue or cell obtained from the subject or derived from the subject, for example, whole blood, leukocytes, peripheral blood mononuclear cells (peripheral blood mononuclear).
  • the Lrig1 protein; Or the gene encoding it is expressed its expression level is increased compared to a normal control, or immune cells with an increased expression level than the average immune cells can be isolated.
  • Activated immune cells isolated by the method of the present invention can be administered to an individual who has or is highly likely to develop an immune-related disease, cancer, neurodegenerative disease, or neuroinflammatory disease for the prevention, improvement or treatment of the disease.
  • the subject to which the immune cells will be administered may be the same as or different from the subject from which the biological sample is derived.
  • Another embodiment of the present invention provides a method of culturing an activated immune cell.
  • the contents related to immune cells and Lrig1 protein are the same as those described in 1. Cell surface antigen, and thus description thereof will be omitted below.
  • the culturing method of the present invention comprises: Lrig1 protein from the isolated biological sample; or measuring the expression level of a gene encoding it to isolate activated immune cells; and culturing the activated immune cells.
  • the step of isolating activated immune cells is the same as described in 8. Method for isolating immune cells, and thus description thereof is omitted.
  • culture means any in vitro culture of cells.
  • the culture of the present invention may use a cell culture medium, and the cell culture medium refers to any type of medium used in an environment for culturing cells, for example, amino acids, at least one carbohydrate as an energy source, trace elements, vitamins , salts and possibly additional ingredients (eg, to affect cell growth, productivity, or product quality).
  • the contents related to the immune cells and the Lrig1 protein are the same as those described in 1. Cell surface antigen, and the description thereof will be omitted below.
  • Another embodiment of the present invention provides a method for screening a cell therapeutic agent for an immune-related disease.
  • the screening method of the present invention comprises: Lrig1 protein; or measuring the expression level of a gene encoding it.
  • Lrig1 protein in immune cells of the isolated biological sample when the expression level of the gene encoding it is increased or decreased compared to the control group, it can be selected as a cell therapeutic agent for immune-related diseases.
  • a cell therapeutic agent a biological sample, a protein
  • the method for measuring the expression level of the gene encoding it and the contents related to immune-related diseases are the same as described above, and thus description thereof will be omitted.
  • Another embodiment of the present invention provides a method for screening a cell therapeutic agent for cancer.
  • the screening method of the present invention comprises: Lrig1 protein; or measuring the expression level of a gene encoding it.
  • Lrig1 protein in immune cells of the isolated biological sample when the expression level of the gene encoding it is increased or decreased compared to the control group, it can be selected as a cell therapeutic agent for cancer.
  • a cell therapeutic agent a biological sample, a protein
  • the method for measuring the expression level of the gene encoding it and the content related to cancer are the same as described above, and thus description thereof will be omitted.
  • Another embodiment of the present invention provides a method for screening a cell therapeutic agent for a neurodegenerative disease or a neuroinflammatory disease.
  • the screening method of the present invention comprises: Lrig1 protein; or measuring the expression level of a gene encoding it.
  • Lrig1 protein in immune cells of the isolated biological sample when the expression level of the gene encoding it is increased or decreased compared to the control group, it can be selected as a cell therapeutic agent for a neurodegenerative disease or a neuroinflammatory disease.
  • a cell therapeutic agent In the screening method of the present invention, a cell therapeutic agent, a biological sample, a protein; Or the method for measuring the expression level of the gene encoding it, and the contents related to a neurodegenerative disease or a neuro-inflammatory disease are the same as described above, and thus description thereof will be omitted.
  • the immune cells of the present invention have an activated inhibitory function, and the activated Lrig1 protein of the immune cells can be used as a new target for immunosuppressants, cancer diseases, neurodegenerative or inflammatory diseases, and the like.
  • FIG. 1 The results of confirming the inhibitory effect by Th17 cells according to an embodiment of the present invention are shown in FIG. 1 .
  • Th0, Th1, Th2, Th17 and iTreg which are subsets of T cells, were prepared.
  • the iTreg refers to cells artificially induced to differentiate in a medium containing the following composition, unlike the naturally isolated nTreg.
  • the subtype of T cells is first separated from naive T cells from the spleen of mice according to a conventional method using MACS, and then RPMI1640 containing 10% of fetal bovine serum (FBS; hyclone, logan, UT) ( Invitrogen Gibco, Grand Island, NY)
  • FBS fetal bovine serum
  • hyclone hyclone, logan, UT
  • Invitrogen Gibco, Grand Island, NY fetal bovine serum
  • the cells differentiated in the preparation example were subjected to a fluorescence-activated cell sorter (FACS) with a high Lrig1 expression level (Th17 L1+ or iTreg L1+) and a low Lrig1 expression level cell (Th17 L1- or iTreg L1-).
  • FACS fluorescence-activated cell sorter
  • antigen presenting cells APC
  • naive CD4+ T cells were washed twice with PBS to completely remove serum.
  • APC antigen presenting cells
  • naive CD4+ T cells were washed twice with PBS to completely remove serum.
  • CFSE labeling when the above pellet was released with 1 ml of PBS, 1 ml of a mixture of 0.25 ⁇ l of 5 mM CFSE was added to 1 ml of PBS for 2 ⁇ 10 7 cells and mixed at a ratio of 1:1. However, when the number of cells was 2 ⁇ 10 7 or less, 500 ⁇ l of PBS was used, and 500 ⁇ l of the CFSE+PBS mixture was mixed. Then, the mixture was incubated at 37° C. for 10 minutes.
  • the immune cells of the present invention have an activated inhibitory function, and the activated Lrig1 protein of the immune cells can be used as a new target for immunosuppressants, cancer diseases, neurodegenerative or inflammatory diseases, and the like.

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Abstract

본 발명은 면역 세포의 표면에 특이적으로 존재하는 세포 표면 항원인 Lrig1(leucine-rich and immunoglobulin-like domains 1) 단백질과 이의 다양한 용도에 관한 것이다.

Description

활성화된 면역 세포의 세포 표면 항원 및 이의 다양한 용도
본 발명은 활성화된 면역 세포, 예를 들면 효과 T 세포와 같은 다른 종류의 면역 세포에 대한 억제 기능이 활성화된 면역 세포의 표면에 존재하는 세포 표면 항원인 Lrig1(leucine-rich and immunoglobulin-like domains 1) 단백질과 이의 다양한 용도에 관한 것이다.
암은 현재 전세계적으로 가장 많은 사망자를 내는 질병 중 하나로서, 평균 수명의 연장과 암 발생 연령이 낮아짐에 의해 암 발생률은 계속적으로 증가되고 있는 추세이다. 한국의 국립 암센터(National Cancer Center)에서 제공하는 2013년 통계 자료에 따르면, 2010년 암 등록 통계과에 등록된 우리 나라 암 발생 환자는 모두 202,053 명이며 계속적으로 증가되는 추세이다.
상기 암이 고형 장기에 발생된 경우에는 전통적으로 외과적 절제술에 의해 치료하였다. 그러나, 환부가 너무 크거나, 고형 장기가 아닌 부위에 암이 발생된 경우에는 외과적 절제술이 불가능하여 경구 또는 주사제 등을 이용한 항암 화학요법(Chemotherapy)이 사용되었다. 상기 항암 화학요법에 사용되는 항암제는 암이 주로 세포신호 전달체계에 포함된 인산 활성 인자 단백질의 과발현 등에 의해 세포신호 전달체계를 교란시키는 단백질에 효과적으로 결합하여, 단백질의 활성을 억제하는 용도로 개발되어 사용되었다. 그러나, 이러한 방식의 항암 화학요법은 머리카락과 같은 세포주기가 빠른 정상 세포의 성장을 저해하거나, 구강 건조, 구내염, 오심, 구토, 설사, 호중구 감소증 등과 같은 다양한 부작용을 야기할 수 있다는 문제점이 존재한다. 이에 따라, 암과 관련된 다양한 생체 내 분자를 동정하고 이를 표적으로 하는 약물을 개발하는 노력이 진행되고 있으며, 이러한 약물 중 일부를 조합하여 암 치료 효과를 증진시키려는 노력이 시도되고 있다. 따라서 암과 관련된 전사인자와 같은 표적 분자를 추가적으로 발굴하는 노력은 매우 중요한 일이라고 할 수 있다.
한편, 모든 정상 개체에 있어서 가장 중요한 특성은, 자기(self)를 구성하고 있는 항원 물질에 대해서는 해롭게 반응하지 않는 반면, 비-자기(non-self) 항원에 대해서는 이를 인식하고 제거할 수 있는 능력을 갖는 것이다. 이처럼 자기 항원에 대한 생체의 무반응을 면역학적 무반응성(immunologic unresponsiveness) 또는 관용(tolerance)이라 한다. 자기 관용은 자기 항원의 특이적인 수용체를 가지고 있을지 모르는 림프구를 제거함으로써, 또는 자기 항원에 접한 후 스스로 반응하는 기능이 불활성화됨으로써 발생한다. 자기 관용을 유도하거나 계속 유지하는데 있어서 문제가 생기게 되면 자기 항원에 대하여 면역반응이 일어나게 되고, 이로 인하여 초래되는 질환을 자가면역질환(autoimmune disease)이라 한다.
과거에는 알츠하이머병(Alzheimer's disease; AD), 파킨슨병(Parkinson's disease; PD), 근위축성측삭경화증(Amyotrophic lateral sclerosis; ALS)과 같은 신경계 퇴행성 질환의 병리 소견상 관찰되는 신경교세포(neuroglial cell)의 증식과 면역-염증에 관련된 세포 및 면역 매개물질의 침윤 등은 신경세포의 파괴에 따른 비특이적 이차적 현상으로만 받아들여져 왔다. 그러나, 분자생물학의 발전으로 면역-염증 기전(immune-inflammatory mechanism)에 중요한 역할을 하는 세포들의 표피 지표에 대한 동정이 가능해졌고, 면역-염증 매개물질들의 정체 및 기능이 밝혀짐에 따라 면역-염증 기전이 신경계 손상에 대한 비특이적 이차적 반응만이 아니고 신경계 퇴행성 질환의 진행 경과 중 초기부터 관여할 수도 있으며, 병리 현상의 완급을 조절하고 신경세포의 생존 및 사멸에 적극적으로 관여할 것이라는 증거들이 제시되고 있다.
본 발명의 일 목적은 면역 세포의 세포 표면 항원을 제공하고자 하는 것이다.
본 발명의 다른 목적은 면역 세포, 바람직하게는 활성화된 면역 세포의 세포 표면 항원인 Lrig1(leucine-rich and immunoglobulin-like domains 1) 유전자에 의해 암호화되는 단백질; 또는 이의 세포 외 도메인을 포함하는 면역 세포를 유효성분으로 포함하는 다양한 질환의 예방, 개선 또는 치료용 조성물을 제공하고자 하는 것이다.
본 발명의 또 다른 목적은 면역 세포, 바람직하게는 활성화된 면역 세포의 세포 표면 항원인 Lrig1 유전자; 또는 이에 의해 암호화되는 단백질의 발현 수준을 측정할 수 있는 제제를 이용하여 다양한 질환을 진단하는 방법을 제공하고자 하는 것이다.
본 발명의 또 다른 목적은 Lrig1에 특이적으로 결합하는 항체 또는 이의 항원 결합 단편; 및 면역 세포의 표면 마커에 특이적으로 결합하는 항체 또는 이의 항원 결합 단편을 포함하는 이중 특이 항체를 유효성분으로 포함하는 다양한 질환의 예방 또는 치료용 약학 조성물을 제공하고자 하는 것이다.
본 발명의 또 다른 목적은 본 발명에 따른 상기 항체 또는 이의 항원 결합 단편; 및 약물을 포함하는 항체-약물 결합체를 유효성분으로 포함하는 다양한 질환의 예방 또는 치료용 약학 조성물을 제공하고자 하는 것이다.
본 발명의 또 다른 목적은 Lrig1 단백질; 또는 이를 암호화하는 유전자의 발현 수준 변화를 확인하여 면역 세포, 바람직하게는 활성화된 면역 세포를 분리하는 방법을 제공하고자 한다.
본 발명의 또 다른 목적은 활성화된 면역 세포를 배양하는 방법을 제공하고자 한다.
본 발명의 또 다른 목적은 면역세포에서 Lrig1 단백질; 또는 이를 암호화하는 유전자의 발현 수준 변화를 확인하여 다양한 질환의 예방, 개선 또는 치료를 위한 세포치료제를 스크리닝하는 방법을 제공하고자 한다.
그러나 본 발명이 이루고자 하는 기술적 과제는 이상에서 언급한 과제에 제한되지 않으며, 언급되지 않은 또 다른 과제들은 아래의 기재로부터 당 업계에서 통상의 지식을 가진 자에게 명확하게 이해될 수 있을 것이다.
1. 세포 표면 항원
본 발명의 일 구현 예에 따르면, Lrig1(leucine-rich and immunoglobulin-like domains 1)의 면역 세포의 세포 표면 항원에 관한 것이다.
구체적으로, 본 발명의 상기 세포 표면 항원은 Lrig1 단백질 또는 이를 암호화하는 유전자로 이루어진, 활성화된 면역 세포의 세포 표면 항원이다.
본 발명의 상기 면역 세포는 T 세포, B 세포, NK 세포, 림프구 세포(Innate lymphoid cell), 수지상 세포(Dendritic cell), 호중구(Neutrophil), 호산구(Eosinophil), 호염기성 과립구(Basophil), 대식세포(Macrophage) 및 비만세포(mast cell)로 이루어진 군으로부터 선택되는 적어도 하나일 수 있으나, 이에 제한되는 것은 아니다.
본 발명의 상기 T 세포는 효과 T 세포일 수 있으나, 이에 제한되는 것은 아니다.
본 발명의 상기 효과 T 세포는 Th1, Th2, Th17 및 Th22로 이루어진 군으로부터 선택되는 적어도 하나인 것일 수 있다.
본 발명에서 상기 "Lrig1"은 활성화된 면역 세포, 예를 들면 억제 활성이 활성화된 다양한 면역 세포의 표면에 존재할 수 있는 1091개의 아미노산으로 이루어진 막관통 단백질로서, 세포 외 혹은 루멘 쪽의 루신 반복 서열(leucine-rich repeat(LRR))과 세개의 면역 체 유사 도메인(immunoglobulin-like domains), 세포막 관통 서열 및 세포질 꼬리부분으로 구성되어 있다. LRIG 유전자 패밀리는 LRIG1, LRIG2와 LRIG3이 존재하며, 이들 간의 아미노산들은 매우 보전적으로 구성되어 있다. 상기 LRIG1 유전자는 정상 피부에서 높게 발현하고 있으며, 기저와 모낭 세포에 발현하여 상피 줄기세포의 증식을 조절할 수 있다. 따라서, 표피의 항상성 유지에 중요한 역할을 하며, 부존재 시 건선이나 피부암으로 발전할 수 있다. LRIG1이 위치한 염색체 3p14.3 부분이 잘리는 경우에는 암세포로 발전할 가능성이 있는 것으로 보고된 바 있으며, 실제로 신장암(renal cell carcinoma)과 편평상피암(cutaneous squamous cell carcinoma)에서는 LRIG1의 발현이 매우 감소되어 있는 것으로 확인되었다.
본 발명의 목적상 상기 Lrig1 단백질은 인간 또는 쥐에 존재하는 단백질 일 수 있으나, 이에 제한되는 것은 아니다.
본 발명에서 상기 Lrig1 단백질은 인간 유래인 서열번호 1로 표시되는 폴리펩티드이거나, 마우스 유래인 서열번호 3으로 표시되는 폴리펩티드일 수 있으나, 이에 제한되는 것은 아니다.
본 발명에서 상기 서열번호 1로 표시되는 Lrig1 단백질은 서열번호 2로 표시되는 폴리뉴클레오티드에 의해 암호화되는 것일 수 있으나, 이에 제한되는 것은 아니다.
본 발명에서 상기 서열번호 3으로 표시되는 Lrig1 단백질은 서열번호 4로 표시되는 폴리뉴클레오티드에 의해 암호화되는 것일 수 있으나, 이에 제한되는 것은 아니다.
본 발명에서 상기 Lrig1은 상기 면역 세포, 예를 들면 효과 T 세포와 같은 다른 종류의 면역 세포에 대한 억제 기능이 활성화된 면역 세포의 표면에 특이적으로 존재하는 항원으로, 바람직하게는 Lrig1이 발현된 면역 세포에서는 조절 T 세포(Regulatory T cell; Treg)에서와 같은 억제 효과가 발휘되는 것일 수 있으나, 이에 제한되는 것은 아니다.
본 발명의 상기 "Th1 세포"는 CD4 + 세포의 유형으로, 적응 면역 시스템에 중요한 역할을 한다. 구체적으로, 표적 세포의 행동을 변화시키는 사이토카인을 방출함으로써, 다른 면역 세포의 활동을 돕는 세포를 의미한다. 본 발명의 목적상 Th1 세포의 표면에 Lrig1이 발현된 경우 Th1 세포는 고유의 기능을 벗어나 조절 T 세포와 같이 다른 효과 T 세포를 억제하는 억제 기능이 활성화된 것일 수 있으나, 이에 제한되는 것은 아니다.
본 발명의 상기 "Th2 세포"는 CD4＋T세포 중 자극에 의해 인터류킨(IL)4, IL-5, IL-6, IL-13 등을 분비하고, TH1 도움 T 세포가 분비되는 인터페론 γ, IL-2 등의 사이토카인을 분비하지 않는 도움T세포의 아집단을 의미한다. 본 발명의 목적상 Th2 세포의 표면에 Lrig1이 발현된 경우 Th2 세포는 고유의 기능을 벗어나 조절 T 세포와 같이 다른 효과 T 세포를 억제하는 억제 기능이 활성화된 것일 수 있으나, 이에 제한되는 것은 아니다.
본 발명의 상기 "Th17 세포"는 염증 전 도움 T 세포 중에서 인터루킨 17을 생성하는 집단을 의미한다. 이와 같은 Th17 세포는 병원체로부터 몸을 보호하는 적응 면역에 있어서 중요한 역할을 하며, 다른 도움 T 세포들과 마찬가지로 병원체에 반응하는데 있어 B 세포, 예를 들면 CXCL13 키모카인 신호전달을 통해 B 세포 보강과 연관될 수 있으며, Th17 세포의 활성은 항체 형성에 도움이 될 수 있다. 특히, 상기 Th17 세포는 사이토카인 미세환경 및 염증 상황에 의존적으로 가소성(plasticity)이 존재하여, 그 표현형과 기능이 변화될 수 있다.
본 발명의 상기 "Th17 세포"는 분자 수준에서, 작동인자 사이토카인, IL-17A, IL-17F, IL-26, IL-22, IL-21 및 TNFα의 개별 프로파일의 생성에 의해 특징화되고, 이의 발전, 생존 및 증식에 있어서 IL-23에 의존한다. 이러한 사이토카인은 케라티노사이트와 같은 상이한 유형의 세포를 활성화시켜, 이의 과증식 및 전염증성 사이토카인, 케모카인 및 항균성 펩티드의 추가적인 생성을 야기하고, 이는 염증성 피부에서 다른 면역 세포를 차례로 모집 및 활성화시켜, 염증성 반응의 증폭을 야기한다. 나아가, IL-17A 및 IL-17F는 Th17 세포 분화를 촉진 및 유지하는 것으로 간주되는 IL-17 생성의 자가분비 조절을 야기한다 (Wei et al. 2007, J Biol. Chem., September 20). IL-17 은 또한 기질 세포 내 Th17 세포의 특징화된 수용체의 리간드인 CCL20의 상향조절을 유도하여, 추가적인 세포를 염증성 조직으로 이끄는 것을 가능하게 한다. Th17 세포로의 순수한 CD4 T 세포 분화의 신호화 경로는 TGFb-1 과 IL-21, IL-lb 및 IL-23 또는 IL-lb, IL-23 및 IL-6 과의 조합이 요구되고, 이는 Th17 세포 분화를 촉진하고, 이어서 IL-17A 및 IL-17F 발현을 상향조절하는 2 개의 전사 인자인, 레티노이드-관련 희귀 수용체(RORC) 및 레티노이드산-관련 희귀 수용체 알파 (RORA)의 발현을 유도한다 (Chung Y et al. Critical regulation of early Th17 cell differentiation by interleukin-1 signaling. Immunity 2009;30:576-87, Veldhoen M, Hocking RJ, Atkins CJ, Locksley RM, Stockinger B. and Immunity 2006 Feb; 24(2): 179-89). 본 발명의 목적상 상기 Th17 세포의 표면에 Lrig1이 발현된 경우 Th17 세포는 고유의 기능을 벗어나 조절 T 세포와 같은 다른 효과 T 세포를 억제하는 억제 기능이 활성화된 것일 수 있으나, 이에 제한되는 것은 아니다.
본 발명의 상기 "Th22 세포"는 도움 T 세포 서브세트로서, IL-22를 특징적으로 생산하는 기능을 수행한다. 특히 Th22 세포는 IL-17 및 INF-gammma가 존재하지 않는 경우에 특이적으로 IL-22를 발현할 수 있도록 하는 특징을 갖는다. 본 발명의 목적상 Th22 세포의 표면에 Lrig1이 발현된 경우 Th22 세포는 고유의 기능을 벗어나 조절 T 세포와 같이 다른 효과 T 세포를 억제하는 억제 기능이 활성화된 것일 수 있으나, 이에 제한되는 것은 아니다.
본 발명의 상기 "세포 표면 항원"이란, 세포의 표면에 존재하는 분자로서, 세포를 특이적으로 동정하거나, 그 세포 고유의 기능을 발휘하는데 수용체를 활성화시키는 분자로 작용할 수 있는 것을 의미한다. 이와 같은 세포 표면 항원의 예로는 다양한 세포 표면 항원무리(cluster of differentiation; CD)가 존재하며, 본 발명의 상기 세포 표면 항원은 단독 또는 상기 CD와 함께 또는 단독으로 면역 세포, 예를 들면 효과 T 세포와 같은 다른 종류의 면역 세포에 대한 억제 기능이 활성화되어 있는 면역 세포에 존재하는 것일 수 있으나, 이에 제한되는 것은 아니다.
2. 세포 치료제
본 발명의 2. 세포치료제에서, 면역 세포 및 Lrig1 단백질과 관련된 내용은 앞서 1. 세포 표면 항원에 기재된 바와 동일하여, 이하에서는 그 기재를 생략한다.
본 발명의 상기 "세포치료제"는 환자에 직접 주입하는 치료 방법에 사용되는 살아있는 세포로서, 살아있는 자가세포, 동종세포 또는 이종세포를 체외에서 배양, 증식하거나 선별하는 등 물리적, 화학적 또는 생물학적 방법으로 조작하여 제조하는 의약품을 의미한다.
본 발명의 상기 "예방" 은 동물의 병리학적 세포의 발생 또는 세포의 손상, 소실의 정도의 감소를 의미한다. 예방은 완전할 수 있으며 또는 부분적일 수도 있다. 이 경우에는 개체 내의 병리학적 세포의 발생 또는 비정상적인 면역 작용 등이 이하에서 기재되는 다양한 질환의 예방 및 치료용 조성물을 사용하지 않은 경우와 비교하여 감소하는 현상을 의미할 수 있다.
본 발명의 상기 "치료"는 치료하고자 하는 대상 또는 세포의 천연 과정을 변경시키기 위하여 임상적으로 개입하는 모든 행위를 의미하며, 임상 병리 상태가 진행되는 동안 또는 이를 예방하기 위하여 수행할 수 있다. 목적하는 치료 효과는 질병의 발생 또는 재발을 예방하거나, 증상을 완화시키거나, 질병에 따른 모든 직접 또는 간접적인 병리학적 결과를 저하시키거나, 전이를 예방하거나, 질병 진행 속도를 감소시키거나, 질병 상태를 경감 또는 일시적 완화시키거나, 예후를 개선시키는 것을 포함할 수 있다. 즉, 상기 치료는 상기 조성물에 의해 이하에서 기재되는 다양한 질환의 증세가 호전되거나 완치되는 모든 행위를 포괄하는 것으로 해석될 수 있다.
본 발명의 상기 세포는 1Х107 내지 1Х108, 1Х108 내지 2Х108, 2Х108 내지 4Х108, 4Х108 내지 6Х108, 6Х108 내지 8Х108, 8Х108 내지 1Х109, 1Х109 내지 2Х109, 2Х109 내지 4Х109, 4Х109 내지 1Х1010, 2Х108 내지 6Х108, 6Х108 내지 1Х109, 1Х108 내지 2Х108, 2Х108 내지 2Х109, 1Х107 내지 1Х108, 1Х108 내지 1Х109, 1Х109 내지 1Х1010 또는 1Х107 내지 1Х109개 중 어느 하나의 세포/㎏의 투여량으로 투여될 수 있으나, 이에 제한되는 것은 아니다.
본 발명의 상기 약학 조성물은 캡슐, 정제, 과립, 주사제, 연고제, 분말 또는 음료 형태임을 특징으로 할 수 있으며, 상기 약학 조성물은 인간을 대상으로 하는 것을 특징으로 할 수 있다.
본 발명의 상기 약학 조성물은 이들로 한정되는 것은 아니지만, 각각 통상의 방법에 따라 산제, 과립제, 캡슐, 정제, 수성 현탁액 등의 경구형 제형, 외용제, 좌제 및 멸균 주사 용액의 형태로 제형화되어 사용될 수 있다. 본 발명의 약학 조성물은 약학적으로 허용 가능한 담체를 포함할 수 있다. 약학적으로 허용되는 담체는 경구 투여 시에는 결합제, 활탁제, 붕해제, 부형제, 가용화제, 분산제, 안정화제, 현탁화제, 색소, 향료 등이 사용될 수 있으며, 주사제의 경우에는 완충제, 보존제, 무통화제, 가용화제, 등장제, 안정화제 등이 혼합되어 사용될 수 있으며, 국소투여용의 경우에는 기제, 부형제, 윤활제, 보존제 등이 사용될 수 있다. 본 발명의 약학 조성물의 제형은 상술한 바와 같은 약학적으로 허용되는 담체와 혼합하여 다양하게 제조될 수 있다. 예를 들어, 경구 투여시에는 정제, 트로키, 캡슐, 엘릭서(Elixir), 서스펜션, 시럽, 웨이퍼 등의 형태로 제조할 수 있으며, 주사제의 경우에는 단위 투약 앰플 또는 다수 회 투약 형태로 제조할 수 있다. 기타, 용액, 현탁액, 정제, 캡슐, 서방형 제제 등으로 제형화할 수 있다.
한편, 제제화에 적합한 담체, 부형제 및 희석제의 예로는, 락토즈, 덱스트로즈, 수크로즈, 솔비톨, 만니톨, 자일리톨, 에리스리톨, 말티톨, 전분, 아카시아 고무, 알지네이트, 젤라틴, 칼슘 포스페이트, 칼슘 실리케이트, 셀룰로즈, 메틸 셀룰로즈, 미정질 셀룰로즈, 폴리비닐피롤리돈, 물, 메틸하이드록시벤조에이트, 프로필하이드록시벤조에이트, 탈크, 마그네슘 스테아레이트 또는 광물유 등이 사용될 수 있다. 또한, 충진제, 항 응집제, 윤활제, 습윤제, 향료, 유화제, 방부제 등을 추가로 포함할 수 있다.
본 발명의 상기 약학 조성물의 투여 경로는 이들로 한정되는 것은 아니지만 구강, 정맥내, 근육내, 동맥내, 골수내, 경막내, 심장내, 경피, 피하, 복강내, 비강내, 장관, 국소, 설하 또는 직장이 포함되며, 예를 들면, 경구 또는 비경구 투여일 수 있다.
본 발명의 상기 "비경구"란, 피하, 피내, 정맥내, 근육내, 관절내, 활액낭내, 흉골내, 경막내, 병소내 및 두개골내 주사 또는 주입기술을 포함한다. 본 발명의 목적상 상기 약학 조성물은 신장에 직접 주사되는 방식으로 투여될 수 있으나, 이에 제한되는 것은 아니다.
본 발명의 상기 약학 조성물은 사용된 특정 화합물의 활성, 연령, 체중, 일반적인 건강, 성별, 정식, 투여 시간, 투여 경로, 배출율, 약물 배합 및 예방 또는 치료될 특정 질환의 중증을 포함한 여러 요인에 따라 다양하게 변할 수 있고, 상기 약학 조성물의 투여량은 환자의 상태, 체중, 질병의 정도, 약무 형태, 투여 경로 및 기간에 따라 다르지만 당업자에 의해 적절하게 선택될 수 있고, 1일 0.0001 내지 50 mg/kg 또는 0.001 내지 50 mg/kg으로 투여할 수 있다. 투여는 하루에 한번 투여할 수도 있고, 수회 나누어 투여할 수도 있다. 상기 투여량은 어떠한 면으로든 본 발명의 범위를 한정하는 것은 아니다. 본 발명에 따른 의약 조성물은 환제, 당의정, 캡슐, 액제, 겔, 시럽, 슬러리, 현탁제로 제형화될 수 있다.
2-1. 면역 관련 질환의 예방 또는 치료용 약학 조성물
본 발명의 다른 구현 예에 따르면, Lrig1 단백질; 또는 이를 암호화하는 유전자를 포함하는 면역 세포를 유효 성분으로 포함하는 면역 관련 질환의 예방 또는 치료용 약학 조성물에 관한 것이다.
본 발명에서 제공하는 Lrig1 단백질; 또는 이를 암호화하는 유전자를 포함하는 면역 세포는 고유의 기능을 벗어나, 다른 효과 T 세포(effector T cells)에 대한 억제능이 뛰어나 면역 관련 질환을 효과적으로 예방 또는 치료할 수 있다.
본 발명에서 상기 "면역 관련 질환"은 다양한 면역 세포 및 염증 세포들의 과도화된 활성화 및 발현에 의하여 유도되는 질환으로, 예를 들면, 자가면역질환; 이식편대숙주 질환; 장기이식거부반응; 천식; 아토피; 또는 급성 또는 만성의 염증 질환 등일 수 있으나, 이에 제한되는 것은 아니다.
또한, 본 발명에서 상기 “자가면역질환”은 류마티스성 관절염, 전신성 경피증, 전신 홍반성 낭창, 아토피 피부염, 건선, 원형탈모증, 천식, 크론씨병, 베체시병, 쇼그렌 증후군, 길리아-바레 증후군, 만성 갑상선염, 다발성 경화증, 다발성 근염, 강직성 척추염, 섬유조직염 및 결절성 다발성 동맥염으로 구성된 군으로부터 선택될 수 있으나, 이에 제한되는 것은 아니다.
2-2. 암의 예방 또는 치료용 약학 조성물
본 발명의 또 다른 구현 예에 따르면, Lrig1 단백질; 또는 이를 암호화하는 유전자를 포함하는 면역 세포를 유효 성분으로 암의 예방 또는 치료용 약학 조성물에 관한 것이다.
본 발명의 상기 Lrig1 단백질; 또는 이를 암호화하는 유전자를 포함하는 면역 세포는 고유의 기능을 벗어나, 다른 효과 T 세포의 활성을 조절함으로써 다양한 암 세포의 성장을 효과적으로 억제할 수 있다.
본 발명의 상기 "암" 포유류에서 전형적으로 조절되지 않는 세포 성장으로 특징 지어진 생리적 상태를 나타내거나 가리킨다. 본 발명의 상기 예방, 개선 또는 치료의 대상이 되는 암은 예를 들면, 고형 장기(solid organ)에서 비정상적으로 세포가 성장하여 발생한 덩어리로 이루어진 고형암(solid tumor)일 수 있고, 고형 장기의 부위에 따라 위암, 간암, 교세포종, 난소암, 대장암, 두경부암, 방광암, 신장세포암, 유방암, 전이암, 전립선암, 췌장암, 흑색종 및 폐암으로 이루어진 군으로부터 선택되는 적어도 하나일 수 있으며, 바람직하게는 흑색종 또는 대장암일 수 있으나, 이에 제한되는 것은 아니다.
2-3. 신경 퇴행성 질환 또는 신경 염증성 질환의 예방 또는 치료용 약학 조성물
본 발명의 또 다른 구현 예에 따르면, Lrig1 단백질; 또는 이를 암호화하는 유전자를 포함하는 면역 세포를 유효 성분으로 포함하는 신경 퇴행성 질환 또는 신경 염증성 질환의 예방 또는 치료용 약학 조성물에 관한 것이다.
본 발명에서 제공하는 Lrig1 단백질; 또는 이를 암호화하는 유전자를 포함하는 면역 세포는 다른 효과 T 세포(effector T cells)의 억제능이 뛰어나 신경 퇴행성 질환 또는 신경 염증성 질환을 효과적으로 예방 또는 치료할 수 있다.
본 발명에서 상기 “신경 퇴행성 질환 또는 신경 염증성 질환”은 뇌졸중, 치매, 알츠하이머병(Alzheimer's disease), 파킨슨병(Parkinson's disease), 헌팅턴병(Huntington's disease), 니만-피크병(Niemann-Pick disease), 프리온병(prion disease), 크로이펠츠-야콥병(Creutzfeldt-Jakob disease), 전두측두치매, 루이치매, 근위축성 측삭경화증(AlzAmyotrophic lateral sclerosis), 부신생물증후군(Paraneoplastic syndrome), 피질기저퇴행증, 다계통위축병, 진행성핵상마비, 신경계 자가면역질환, 척수 소뇌 실조(spinocerebellar ataxia), 염증성 및 신경병증성 통증, 뇌혈관 질환, 척수 손상(spinal cord injury) 및 타우병증(tauopathy)으로 이루어진 군에서 선택될 수 있으나, 이에 제한되는 것은 아니다.
3. 진단용 조성물
본 발명의 3. 진단용 조성물에서, 면역 세포 및 Lrig1 단백질과 관련된 내용은 앞서 1. 세포 표면 항원에 기재된 바와 동일하여, 이하에서는 그 기재를 생략한다.
3-1. 면역 관련 질환의 진단용 조성물
본 발명의 또 다른 구현 예에 따르면, 면역 세포의 표면에 존재하는 Lrig1 단백질 또는 이를 암호화하는 유전자의 발현 수준을 측정하는 제제를 포함하는 면역 관련 질환의 진단용 조성물에 관한 것이다.
본 발명에서 상기 Lrig1 단백질의 발현 수준을 측정하는 제제는 특별히 제한하지는 않으나, 예를 들면 상기 단백질에 특이적으로 결합하는 항체, 올리고펩타이드, 리간드, PNA(peptide nucleic acid) 및 앱타머(aptamer)로 이루어진 군에서 선택된 1종 이상을 포함할 수 있다.
본 발명에 상기 "항체"는 항원과 특이적으로 결합하여 항원-항체 반응을 일으키는 물질을 가리킨다. 본 발명의 목적상, 항체는 상기 Lrig1 단백질에 대해 특이적으로 결합하는 항체를 의미한다. 본 발명의 항체는 다클론 항체, 단클론 항체 및 재조합 항체를 모두 포함한다. 상기 항체는 당업계에 널리 공지된 기술을 이용하여 용이하게 제조될 수 있다. 예를 들어, 다클론 항체는 상기 바이오마커 단백질의 항원을 동물에 주사하고 동물로부터 채혈하여 항체를 포함하는 혈청을 수득하는 과정을 포함하는 당업계에 널리 공지된 방법에 의해 생산될 수 있다. 이러한 다클론 항체는 염소, 토끼, 양, 원숭이, 말, 돼지, 소, 개 등의 임의의 동물로부터 제조될 수 있다. 또한, 단클론 항체는 당업계에 널리 공지된 하이브리도마 방법(hybridoma method; Kohler 및 Milstein (1976) European Journal of Immunology 6:511-519 참조), 또는 파지 항체 라이브러리 기술(Clackson et al, Nature, 352:624-628, 1991; Marks et al, J. Mol. Biol., 222:58, 1-597, 1991 참조)을 이용하여 제조될 수 있다. 상기 방법으로 제조된 항체는 겔 전기영동, 투석, 염 침전, 이온교환 크로마토그래피, 친화성 크로마토그래피 등의 방법을 이용하여 분리, 정제될 수 있다. 또한, 본 발명의 항체는 2개의 전장의 경쇄 및 2개의 전장의 중쇄를 갖는 완전한 형태뿐만 아니라, 항체 분자의 기능적인 단편을 포함한다. 항체 분자의 기능적인 단편이란, 적어도 항원 결합 기능을 보유하고 있는 단편을 의미하며, Fab, F(ab'), F(ab')2 및 Fv 등이 있다.
본 발명에 상기 "PNA(Peptide Nucleic Acid)"는 인공적으로 합성된, DNA 또는 RNA와 비슷한 중합체를 가리키며, 1991년 덴마크 코펜하겐 대학교의 Nielsen, Egholm, Berg와 Buchardt 교수에 의해 처음으로 소개되었다. DNA는 인산-리보스당 골격을 갖는데 반해, PNA는 펩타이드 결합에 의해 연결된 반복된 N-(2-아미노에틸)-글리신 골격을 가지며, 이로 인해 DNA 또는 RNA에 대한 결합력과 안정성이 크게 증가되어 분자 생물학, 진단 분석 및 안티센스 치료법에 사용되고 있다. PNA는 문헌[Nielsen PE, Egholm M, Berg RH, Buchardt O (December 1991). "Sequence-selective recognition of DNA by strand displacement with a thymine-substituted polyamide". Science 254 (5037): 1497-1500]에 상세하게 개시되어 있다.
본 발명에서 상기 "앱타머"는 올리고핵산 또는 펩타이드 분자이며, 앱타머의 일반적인 내용은 문헌[Bock LC et al., Nature 355(6360):5646(1992); Hoppe-Seyler F, Butz K "Peptide aptamers: powerful new tools for molecular medicine". J Mol Med. 78(8):42630(2000); Cohen BA, Colas P, Brent R. "An artificial cell-cycle inhibitor isolated from a combinatorial library". Proc Natl Acad Sci USA. 95(24): 142727(1998)]에 상세하게 개시되어 있다.
본 발명에서 상기 Lrig1 단백질을 암호화하는 유전자(즉, LRIG1)의 발현 수준을 측정하는 제제는 상기 유전자에 특이적으로 결합하는 프라이머, 프로브 및 안티센스 뉴클레오티드로 이루어진 군에서 선택된 1종 이상을 포함할 수 있다.
본 발명에서 상기 "프라이머"는 표적 유전자 서열을 인지하는 단편으로서, 정방향 및 역방향의 프라이머 쌍을 포함하나, 바람직하게는, 특이성 및 민감성을 가지는 분석 결과를 제공하는 프라이머 쌍이다. 프라이머의 핵산 서열이 시료 내 존재하는 비-표적 서열과 불일치하는 서열이어서, 상보적인 프라이머 결합 부위를 함유하는 표적 유전자 서열만 증폭하고 비특이적 증폭을 유발하지 않는 프라이머일 때, 높은 특이성이 부여될 수 있다.
본 발명에서 상기 "프로브"는 시료 내의 검출하고자 하는 표적 물질과 특이적으로 결합할 수 있는 물질을 의미하며, 상기 결합을 통하여 특이적으로 시료 내의 표적 물질의 존재를 확인할 수 있는 물질을 의미한다. 프로브의 종류는 당업계에서 통상적으로 사용되는 물질로서 제한은 없으나, 바람직하게는 PNA(peptide nucleic acid), LNA(locked nucleic acid), 펩타이드, 폴리펩타이드, 단백질, RNA 또는 DNA일 수 있으며, 가장 바람직하게는 PNA이다. 보다 구체적으로, 상기 프로브는 바이오 물질로서 생물에서 유래되거나 이와 유사한 것 또는 생체 외에서 제조된 것을 포함하는 것으로, 예를 들어, 효소, 단백질, 항체, 미생물, 동식물 세포 및 기관, 신경세포, DNA, 및 RNA일 수 있으며, DNA는 cDNA, 게놈 DNA, 올리고뉴클레오타이드를 포함하며, RNA는 게놈 RNA, mRNA, 올리고뉴클레오타이드를 포함하며, 단백질의 예로는 항체, 항원, 효소, 펩타이드 등을 포함할 수 있다.
본 발명에서 상기 "LNA(Locked nucleic acids)"란, 2'-O, 4'-C 메틸렌 브릿지를 포함하는 핵산 아날로그를 의미한다 [J Weiler, J Hunziker and J Hall Gene Therapy (2006) 13, 496.502]. LNA 뉴클레오사이드는 DNA와 RNA의 일반적 핵산 염기를 포함하며, Watson-Crick 염기 쌍 규칙에 따라 염기 쌍을 형성할 수 있다. 하지만, 메틸렌 브릿지로 인한 분자의 'locking'으로 인해, LNA는 Watson-Crick 결합에서 이상적 형상을 형성하지 못하게 된다. LNA가 DNA 또는 RNA 올리고뉴클레오티드에 포함되면, LNA는 보다 빠르게 상보적 뉴클레오티드 사슬과 쌍을 이루어 이중 나선의 안정성을 높일 수 있다.
본 발명에서 상기 "안티센스"는 안티센스 올리고머가 왓슨-크릭 염기쌍 형성에 의해 RNA 내의 표적 서열과 혼성화되어, 표적서열 내에서 전형적으로 mRNA와 RNA:올리고머 헤테로이중체의 형성을 허용하는, 뉴클레오티드 염기의 서열 및 서브유닛간 백본을 갖는 올리고머를 의미한다. 올리고머는 표적 서열에 대한 정확한 서열 상보성 또는 근사 상보성을 가질 수 있다.
본 발명에 따른 Lrig1 단백질이나, 이를 암호화하는 유전자(LRIG1)의 정보는 알려져 있으므로, 당업자라면 이를 바탕으로 상기 단백질을 암호화하는 유전자에 특이적으로 결합하는 프라이머, 프로브 또는 안티센스 뉴클레오티드를 용이하게 디자인할 수 있을 것이다.
본 발명에서 상기 "면역 관련 질환"은 다양한 면역 세포 및 염증 세포들의 과도화된 활성화 및 발현에 의하여 유도되는 질환으로, 예를 들면, 자가면역질환; 이식편대숙주 질환; 장기이식거부반응; 천식; 아토피; 또는 급성 또는 만성의 염증 질환 등일 수 있으나, 이에 제한되는 것은 아니다.
또한, 본 발명에서 상기 “자가면역질환”은 류마티스성 관절염, 전신성 경피증, 전신 홍반성 낭창, 아토피 피부염, 건선, 원형탈모증, 천식, 크론씨병, 베체시병, 쇼그렌 증후군, 길리아-바레 증후군, 만성 갑상선염, 다발성 경화증, 다발성 근염, 강직성 척추염, 섬유조직염 및 결절성 다발성 동맥염으로 구성된 군으로부터 선택될 수 있으나, 이에 제한되는 것은 아니다.
3-2. 암의 진단용 조성물
본 발명의 또 다른 구현 예에 따르면, 면역 세포의 표면에 존재하는 Lrig1 단백질 또는 이를 암호화하는 유전자의 발현 수준을 측정하는 제제를 포함하는 암의 진단용 조성물에 관한 것이다.
본 발명의 3-2. 암의 진단용 조성물에서, 단백질 또는 이를 암호화하는 유전자의 발현 수준을 측정하는 제제와 관련된 내용은 앞서 3-1. 면역관련질환의 진단용 조성물에 기재된 바와 동일하여, 이하에서는 그 기재를 생략한다.
본 발명의 상기 "암" 포유류에서 전형적으로 조절되지 않는 세포 성장으로 특징 지어진 생리적 상태를 나타내거나 가리킨다. 본 발명의 상기 예방, 개선 또는 치료의 대상이 되는 암은 예를 들면, 고형 장기(solid organ)에서 비정상적으로 세포가 성장하여 발생한 덩어리로 이루어진 고형암(solid tumor)일 수 있고, 고형 장기의 부위에 따라 위암, 간암, 교세포종, 난소암, 대장암, 두경부암, 방광암, 신장세포암, 유방암, 전이암, 전립선암, 췌장암, 흑색종 및 폐암으로 이루어진 군으로부터 선택되는 적어도 하나일 수 있으며, 바람직하게는 흑색종 또는 대장암일 수 있으나, 이에 제한되는 것은 아니다.
3-3. 신경 퇴행성 질환 또는 신경 염증성 질환의 진단용 조성물
본 발명의 또 다른 구현 예에 따르면, 면역 세포의 표면에 존재하는 Lrig1 단백질 또는 이를 암호화하는 유전자의 발현 수준을 측정하는 제제를 포함하는 신경 퇴행성 질환 또는 신경 염증성 질환의 진단용 조성물에 관한 것이다.
본 발명의 3-3. 신경 퇴행성 질환 또는 신경 염증성 질환의 진단용 조성물에서, 단백질 또는 이를 암호화하는 유전자의 발현 수준을 측정하는 제제와 관련된 내용은 앞서 3-1. 면역관련질환의 진단용 조성물에 기재된 바와 동일하여, 이하에서는 그 기재를 생략한다.
본 발명에서 상기 “신경 퇴행성 질환 또는 신경 염증성 질환”은 뇌졸중, 치매, 알츠하이머병(Alzheimer's disease), 파킨슨병(Parkinson's disease), 헌팅턴병(Huntington's disease), 니만-피크병(Niemann-Pick disease), 프리온병(prion disease), 크로이펠츠-야콥병(Creutzfeldt-Jakob disease), 전두측두치매, 루이치매, 근위축성 측삭경화증(AlzAmyotrophic lateral sclerosis), 부신생물증후군(Paraneoplastic syndrome), 피질기저퇴행증, 다계통위축병, 진행성핵상마비, 신경계 자가면역질환, 척수 소뇌 실조(spinocerebellar ataxia), 염증성 및 신경병증성 통증, 뇌혈관 질환, 척수 손상(spinal cord injury) 및 타우병증(tauopathy)으로 이루어진 군에서 선택될 수 있으나, 이에 제한되는 것은 아니다.
4. 진단용 키트
본 발명의 3. 진단용 조성물에서, 면역 세포 및 Lrig1 단백질과 관련된 내용은 앞서 1. 세포 표면 항원에 기재된 바와 동일하여, 이하에서는 그 기재를 생략한다.
4-1. 면역 관련 질환의 진단용 키트
본 발명의 또 다른 구현 예에 따르면, 본 발명에서 제공하는 면역 관련 질환의 진단용 조성물을 포함하는 면역 관련 질환의 진단용 키트에 관한 것이다.
본 발명에서 상기 키트는 RT-PCR 키트, DNA 칩 키트, ELISA 키트, 단백질 칩 키트, 래피드(rapid) 키트 또는 MRM(Multiple reaction monitoring) 키트일 수 있으나, 이에 제한되는 것은 아니다.
본 발명의 진단용 키트는 분석 방법에 적합한 한 종류 또는 그 이상의 다른 구성 성분 조성물, 용액 또는 장치를 더 포함할 수 있다.
예를 들면, 본 발명의 진단용 키트는 역전사 중합효소반응을 수행하기 위해 필요한 필수 요소를 더 포함할 수 있다. 역전사 중합효소반응 키트는 마커 단백질을 암호화하는 유전자에 대해 특이적인 프라이머 쌍을 포함한다. 프라이머는 상기 유전자의 핵산서열에 특이적인 서열을 가지는 뉴클레오티드로서, 약 7 bp 내지 50 bp의 길이, 보다 바람직하게는 약 10 bp 내지 30 bp의 길이를 가질 수 있다. 또한 대조군 유전자의 핵산 서열에 특이적인 프라이머를 포함할 수 있다. 그 외 역전사 중합효소반응 키트는 테스트 튜브 또는 다른 적절한 용기, 반응 완충액(pH 및 마그네슘 농도는 다양), 데옥시뉴클레오타이드(dNTPs), Taq-폴리머라아제 및 역전사효소와 같은 효소, DNase, RNase 억제제 DEPC-수(DEPC-water), 멸균수 등을 포함할 수 있다.
또한, 본 발명의 진단용 키트는 DNA 칩을 수행하기 위해 필요한 필수 요소를 포함할 수 있다. DNA 칩 키트는 유전자 또는 그의 단편에 해당하는 cDNA 또는 올리고뉴클레오티드(oligonucleotide)가 부착되어 있는 기판, 및 형광표지 프로브를 제작하기 위한 시약, 제제, 효소 등을 포함할 수 있다. 또한 기판은 대조군 유전자 또는 그의 단편에 해당하는 cDNA 또는 올리고뉴클레오티드를 포함할 수 있다.
또한, 본 발명의 진단용 키트는 ELISA를 수행하기 위해 필요한 필수 요소를 포함할 수 있다. ELISA 키트는 상기 단백질에 대해 특이적인 항체를 포함한다. 항체는 마커 단백질에 대한 특이성 및 친화성이 높고 다른 단백질에 대한 교차 반응성이 거의 없는 항체로, 단클론 항체, 다클론 항체 또는 재조합 항체이다. 또한 ELISA 키트는 대조군 단백질에 특이적인 항체를 포함할 수 있다. 그 외 ELISA 키트는 결합된 항체를 검출할 수 있는 시약, 예를 들면, 표지된 2차 항체, 발색단(chromophores), 효소(예: 항체와 컨주게이트됨) 및 그의 기질 또는 항체와 결합할 수 있는 다른 물질 등을 포함할 수 있다.
4-2. 암의 진단용 키트
본 발명의 또 다른 구현 예에 따르면, 본 발명에서 제공하는 암의 진단용 조성물을 포함하는 면역 관련 질환의 진단용 키트에 관한 것이다.
본 발명의 4-2. 암의 진단용 키트에서, 단백질 또는 이를 암호화하는 유전자의 발현 수준을 측정하는 제제와 관련된 내용은 앞서 3-1. 면역관련질환의 진단용 조성물에 기재된 바와 동일하고, 키트와 관련된 내용은 앞서 4-1. 면역 관련 질환의 진단용 키트에 기재된 바와 동일하여, 이하에서는 그 기재를 생략한다.
4-3. 신경 퇴행성 질환 또는 신경 염증성 질환의 진단용 키트
본 발명의 또 다른 구현 예에 따르면, 본 발명에서 제공하는 신경 퇴행성 질환 또는 신경 염증성 질환의 진단용 조성물을 포함하는 면역 관련 질환의 진단용 키트에 관한 것이다.
본 발명의 4-3. 신경 퇴행성 질환 또는 신경 염증성 질환의 진단용 키트에서, 단백질 또는 이를 암호화하는 유전자의 발현 수준을 측정하는 제제와 관련된 내용은 앞서 3-1. 면역관련질환의 진단용 조성물에 기재된 바와 동일하고, 키트와 관련된 내용은 앞서 4-1. 면역 관련 질환의 진단용 키트에 기재된 바와 동일하여, 이하에서는 그 기재를 생략한다.
5. 진단 방법
본 발명의 3. 진단용 조성물에서, 면역 세포 및 Lrig1 단백질과 관련된 내용은 앞서 1. 세포 표면 항원에 기재된 바와 동일하여, 이하에서는 그 기재를 생략한다.
5-1. 면역 관련 질환을 진단하기 위한 정보 제공 방법
본 발명의 또 다른 구현 예에 따르면, 목적하는 개체로부터 분리된 생물학적 시료에서 면역 세포의 Lrig1 단백질 또는 이를 암호화하는 유전자의 발현 수준을 측정하는 단계를 포함하는 면역 관련 질환을 진단하기 위한 정보 제공 방법에 관한 것이다.
본 발명에서 상기 "목적하는 개체"란 해당 질환의 발병 여부가 불확실한 개체로, 질환의 발병 가능성이 높은 개체를 의미한다.
본 발명에서 상기 "생물학적 시료"는 개체로부터 얻어지거나 개체로부터 유래된 임의의 물질, 생물학적 체액, 조직 또는 세포를 의미하는 것으로, 예를 들면, 전혈(whole blood), 백혈구(leukocytes), 말초혈액 단핵 세포(peripheral blood mononuclear cells), 백혈구 연층(buffy coat), 혈장(plasma) 및 혈청(serum)을 포함하는) 혈액, 객담(sputum), 눈물(tears), 점액(mucus), 세비액(nasal washes), 비강 흡인물(nasal aspirate), 호흡(breath), 소변(urine), 정액(semen), 침(saliva), 복강 세척액(peritoneal washings), 골반 내 유체액(pelvic fluids), 낭종액(cystic fluid), 뇌척수막 액(meningeal fluid), 양수(amniotic fluid), 선액(glandular fluid), 췌장액(pancreatic fluid), 림프액(lymph fluid), 흉수(pleural fluid), 유두 흡인물(nipple aspirate), 기관지 흡인물(bronchial aspirate), 활액(synovial fluid), 관절 흡인물(joint aspirate), 기관 분비물(organ secretions), 세포(cell), 세포 추출물(cell extract) 또는 뇌척수액(cerebrospinal fluid)을 포함할 수 있으나, 이에 제한되는 것은 아니다.
본 발명의 면역 관련 질환을 진단하기 위한 정보 제공 방법에서, 상기 Lrig1 단백질 또는 이를 암호화하는 유전자의 발현 수준을 측정하는 제제는 상기 면역 관련 질환의 진단용 조성물에 기재된 바와 중복되어 이하 그 기재를 생략한다.
본 발명에 상기 Lrig1 단백질의 발현 수준을 측정 또는 비교 분석 방법으로는 단백질 칩 분석, 면역측정법, 리간드 바인딩 어세이, MALDI-TOF(Matrix Assisted Laser Desorption/Ionization Time of Flight Mass Spectrometry) 분석, SELDI-TOF(Sulface Enhanced Laser Desorption/Ionization Time of Flight Mass Spectrometry) 분석, 방사선 면역 분석, 방사 면역 확산법, 오우크테로니 면역 확산법, 로케트 면역전기영동, 조직면역 염색, 보체 고정 분석법, 2차원 전기영동 분석, 액상 크로마토그래피-질량분석(liquid chromatography-Mass Spectrometry, LC-MS), LC-MS/MS(liquid chromatography-Mass Spectrometry/ Mass Spectrometry), 웨스턴 블랏팅 또는 ELISA(enzyme linked immunosorbentassay) 등이 있으나, 이에 제한되는 것은 아니다.
본 발명에 상기 Lrig1 단백질을 암호화하는 유전자의 존재 여부와 발현 정도를 확인하는 과정으로, 상기 유전자의 발현 수준을 측정하는 분석 방법으로는 역전사 중합효소반응(RT-PCR), 경쟁적 역전사 중합효소반응(Competitive RT-PCR), 실시간 역전사 중합효소반응(Real-time RT-PCR), RNase 보호 분석법(RPA; RNase protection assay), 노던 블랏팅(Northern blotting) 또는 DNA 칩 등이 있으나 이에 제한되는 것은 아니다.
본 발명에서 목적하는 개체의 생물학적 시료에 대하여 측정된 상기 면역 세포의 Lrig1 단백질 또는 이를 암호화하는 유전자의 발현 수준이 정상 대조군에 비하여 증가 또는 감소된 경우, 면역 관련 질환의 발병 가능성이 높은 것으로 예측하는 단계를 포함할 수 있다.
보다 구체적으로, 본 발명에서 목적하는 개체의 생물학적 시료에 대하여 측정된 상기 면역 세포의 Lrig1 단백질 또는 이를 암호화하는 유전자의 발현 수준이 정상 대조군에 비하여 감소된 경우, 면역 관련 질환의 발병 가능성이 높은 것으로 예측할 수 있다.
더 나아가, 본 발명에서 상기와 같이 목적하는 개체의 생물학적 시료에 대하여 측정된 상기 Lrig1 단백질 또는 이를 암호화하는 유전자의 발현 수준을 측정하여 면역 관련 질환의 발병 가능성이 높은 것으로 예측 또는 진단하는 경우, 상기 목적하는 개체에 대하여 그 질환에 대한 약제 투여를 수행하는 단계를 추가로 포함할 수 있다.
6. 이중 특이 항체
본 발명의 6. 이중 특이적 항체에서, 면역 세포 및 Lrig1 단백질과 관련된 내용은 앞서 1. 세포 표면 항원에 기재된 바와 동일하여, 이하에서는 그 기재를 생략한다.
6-1. 면역 관련 질환의 예방 또는 치료용 약학 조성물
본 발명의 또 다른 구현 예에서는 Lrig1 및 면역 세포의 표면 마커에 특이적으로 결합하는 이중 특이 항체를 유효성분으로 포함하는 면역 관련 질환의 예방 또는 치료용 약학 조성물을 제공한다.
본 발명의 상기 이중 특이 항체는 Lrig1에 특이적으로 결합하는 항체 또는 이의 항원 결합 단편; 및 면역 세포 표면 마커에 특이적으로 결합하는 항체 또는 이의 항원 결합 단편을 포함한다.
본 발명의 상기 면역 세포는 T 세포, B 세포, NK 세포, 림프구 세포, 수지상 세포, 호중구, 호산구, 호염기성 과립구, 대식세포 및 비만세포로 이루어진 군으로부터 선택되는 적어도 하나일 수 있으나, 이에 제한되는 것은 아니다.
본 발명의 상기 T 세포는 효과 T 세포일 수 있으나, 이에 제한되는 것은 아니다.
본 발명의 상기 효과 T 세포는 Th1, Th2, Th17 및 Th22로 이루어진 군으로부터 선택되는 적어도 하나 이상일 수 있으나, 이에 제한되는 것은 아니다.
본 발명의 상기 이중 특이 항체의 경우, Lrig1 단백질과 면역 세포에 특이적으로 발현되는 표면 마커를 이중으로 표적하기 때문에 주변 미세환경에 의해 그 기능이나 성질이 변모될 수 있는 활성화된 효과 T 세포에만 특이적으로 결합함으로써, 면역 세포 고유의 기능 뿐만 아니라 조절 T 세포가 수행하는 면역 억제 기능 역시 효과적으로 조절하여 면역 관련 질환을 매우 효과적으로 예방 또는 치료할 수 있다.
본 발명의 상기 "이중특이적 항체"는 임의의 적합한 포맷, 예를 들면, 전문이 본원에 참조로 인용된 문헌(참조: Kontermann MAbs 2012, 4(2): 182-197)에 기재된 포맷으로 제공될 수 있다. 예를 들면, 이중특이적 항체 또는 이중특이적 항원 결합 단편은 이중특이적 항체 접합체(예: IgG2, F(ab')2 또는 CovX-바디), 이중특이적 IgG 또는 IgG-형 분자(예: IgG, scFv4-Ig, IgG-scFv, scFv-IgG, DVD-Ig, IgG-sVD, sVD-IgG, 또는 2 인(in) 1-IgG, mAb2, 또는 Tandemab common LC), 비대칭성 이중특이적 IgG 또는 IgG-형 분자(예: kih IgG, kih IgG common LC, CrossMab, kih IgG-scFab, mAb-Fv, 전하쌍 또는 SEED-바디), 소형 이중특이적 항체 분자(예: 디아바디(Db), dsDb, DART, scDb, tandAbs, 탠덤 scFv (taFv), 탠덤 dAb/VHH, 트리플 바디, 트리플 헤드, Fab-scFv, 또는 F(ab')2-scFv2), 이중특이적 Fc 및 CH3 융합 단백질(예: taFv-Fc, 디-디아바디, scDb-CH3, scFv-Fc-scFv, HCAb-VHH, scFv-kih-Fc, 또는 scFv-kih-CH3), 또는 이중특이적 융합 단백질(예: scFv2-알부민, scDb-알부민, taFv-독소, DNL-Fab3, DNL-Fab4-IgG, DNL-Fab4-IgG-사이토카인2)일 수 있다. 특히, 문헌(참조: Kontermann MAbs 2012, 4(2): 182-19)의 도 2를 참조한다. 당업자는 본 발명에 따르는 이중특이적 항체 및 이중특이적 항원 결합 단편을 설계하고 제조할 수 있다.
본 발명에서 상기 이중특이적 항체를 생산하는 방법은, 예를 들면, 전문이 본원에 참조로 인용된 문헌(참조: Segal and Bast, 2001. Production of Bispecific Antibodies. Current Protocols in Immunology. 14:IV:2.13:2.13.1-2.13.16)에 기재된 바와 같이 환원성 디설파이드 또는 비환원성 티오에테르 결합과 항체 또는 항체 단편의 화학적 가교결합을 포함한다. 예를 들면, N-석신이미딜-3-(-2-피리딜디티오)-프로피오네이트(SPDP)는 디설파이드 연결된 이중특이적 F(ab)2 헤테로다이머를 생성하기 위해, 예를 들면, 힌지 영역 SH- 그룹을 통해 Fab 단편을 화학적으로 가교결합시키는데 사용될 수 있다.
또한, 본 발명에서 상기 이중특이적 항체를 생산하기 위한 다른 방법은, 예를 들면, 문헌(참조: D. M. and Bast, B. J. 2001. Production of Bispecific Antibodies. Current Protocols in Immunology. 14:IV:2.13:2.13.1-2.13.16)에 기재된 바와 같이, 이중특이적 항체를 분비할 수 있는 쿼드로마 세포를 생성하기 위해 항체-생산 하이브리도마를, 예를 들면, 폴리에틸렌 글리콜과 융합시키는 과정을 포함한다.
본 발명에서 상기 이중특이적 항체 및 이중특이적 항원 결합 단편은 또한, 예를 들면, 둘 다 전문이 본원에 참조로 인용된 문헌(참조: Antibody Engineering: Methods and Protocols, Second Edition (Humana Press, 2012), at Chapter 40: Production of Bispecific Antibodies: Diabodies and Tandem scFv (Hornig and Farber-Schwarz), 또는 French, How to make bispecific antibodies, Methods Mol. Med. 2000; 40:333-339)에 기재된 바와 같이, 예를 들면, 항원 결합 분자를 위한 폴리펩티드를 암호화하는 핵산 작제물로부터 발현에 의해 재조합으로 생산될 수 있다. 예를 들면, 2개의 항원 결합 도메인(즉, PD-1에 결합할 수 있는 항원 결합 도메인을 위한 경쇄 및 중쇄 가변 도메인, 및 다른 표적 단백질에 결합할 수 있는 항원 결합 도메인을 위한 경쇄 및 중쇄 가변 도메인)을 위한 경쇄 및 중쇄 가변 도메인을 암호화하고, 항원 결합 도메인 사이의 적합한 링커 또는 이량체화 도메인을 암호화하는 서열을 포함하는 DNA 작제물은 분자 클로닝 기술에 의해 제조될 수 있다. 재조합 이중특이적 항체는 이후 적합한 숙주 세포(예: 포유류 숙주 세포) 중에서 작제물의 발현(예: 시험관내)에 의해 생산될 수 있고, 이어서 발현된 재조합 이중특이적 항체는 임의로 정제될 수 있다.
본 발명에서 상기 항체는, 비변형된 부모 항체와 비교하여 항원에 대한 항체의 친화도가 개선된 변형된 항체가 생성되는 친화도 성숙 공정에 의해 생성될 수 있다. 친화도 성숙 항체는 당해 기술 분야, 예를 들면, 문헌(참조: Marks et al., Rio/Technology 10:779-783 (1992); Barbas et al. Proc Nat. Acad. Sci. USA 91:3809-3813 (1994); Schier et al. Gene 169:147-155 (1995); Yelton et al. J. Immunol. 155:1994-2004 (1995); Jackson et al., J. Immunol. 154(7):3310-159 (1995); 및 Hawkins et al, J. Mol. Biol. 226:889-896 (1992))에 공지된 절차로 생산될 수 있다.
본 발명의 상기 "항체"는, 면역계 내에서 항원의 자극에 의하여 만들어지는 물질을 의미하는 것으로서, 생체 내에서 생성된 것, 재조합적으로 생성된 것, 또는 인공적으로 합성된 것일 수 있으며, 그 종류는 특별히 제한되지 않는다. 본 발명에서 항체는 동물 항체, 키메릭 항체, 인간화 항체, 또는 인간 항체를 모두 포함한다. 또한 본 발명에서 항체란 항원 결합능을 보유한 항체의 항원 결합 단편도 포함한다.
본 발명의 상기 "항원 결합 단편"은 상기 상보성 결정 영역을 하나 이상 포함하는 항체 단편, 예컨대, scFv, (scFv)2, scFv-Fc, Fab, Fab' 및 F(ab')2로 이루어진 군에서 선택되는 것일 수 있다.
본 발명의 상기 Lrig1에 특이적으로 결합하는 항체 또는 이의 항원 결합 단편은,
(a) 서열번호 5로 표시되는 중쇄 CDR1, 서열번호 6으로 표시되는 중쇄 CDR2, 및 서열번호 7로 표시되는 중쇄 CDR3를 포함하는 중쇄 가변 영역;
(b) 서열번호 11로 표시되는 중쇄 CDR1, 서열번호 12로 표시되는 중쇄 CDR2 및 서열번호 13으로 표시되는 중쇄 CDR3를 포함하는 중쇄 가변 영역;
(c) 서열번호 17로 표시되는 중쇄 CDR1, 서열번호 18로 표시되는 중쇄 CDR2 및 서열번호 19로 표시되는 중쇄 CDR3를 포함하는 중쇄 가변 영역;
(d) 서열번호 23으로 표시되는 중쇄 CDR1, 서열번호 24로 표시되는 중쇄 CDR2 및 서열번호 25로 표시되는 중쇄 CDR3를 포함하는 중쇄 가변 영역;
(e) 서열번호 29로 표시되는 중쇄 CDR1, 서열번호 30으로 표시되는 중쇄 CDR2 및 서열번호 31로 표시되는 중쇄 CDR3를 포함하는 중쇄 가변 영역;
(f) 서열번호 35로 표시되는 중쇄 CDR1, 서열번호 36으로 표시되는 중쇄 CDR2 및 서열번호 37로 표시되는 중쇄 CDR3를 포함하는 중쇄 가변 영역;
(g) 서열번호 41로 표시되는 중쇄 CDR1, 서열번호 42로 표시되는 중쇄 CDR2 및 서열번호 43으로 표시되는 중쇄 CDR3를 포함하는 중쇄 가변 영역; 및
(h) 서열번호 47로 표시되는 중쇄 CDR1, 서열번호 48로 표시되는 중쇄 CDR2 및 서열번호 49로 표시되는 중쇄 CDR3를 포함하는 중쇄 가변 영역;으로 이루어진 군에서 선택되는 중쇄 가변 영역; 및
(i) 서열번호 8로 표시되는 경쇄 CDR1, 서열번호 9로 표시되는 경쇄 CDR2 및 서열번호 10으로 표시되는 경쇄 CDR3를 포함하는 경쇄 가변 영역;
(j) 서열번호 14로 표시되는 경쇄 CDR1, 서열번호 15로 표시되는 경쇄 CDR2 및 서열번호 16으로 표시되는 경쇄 CDR3를 포함하는 경쇄 가변 영역;
(k) 서열번호 20으로 표시되는 경쇄 CDR1, 서열번호 21로 표시되는 경쇄 CDR2 및 서열번호 22로 표시되는 경쇄 CDR3를 포함하는 경쇄 가변 영역;
(l) 서열번호 26으로 표시되는 경쇄 CDR1, 서열번호 27로 표시되는 경쇄 CDR2 및 서열번호 28로 표시되는 경쇄 CDR3를 포함하는 경쇄 가변 영역;
(m) 서열번호 32로 표시되는 경쇄 CDR1, 서열번호 33으로 표시되는 경쇄 CDR2 및 서열번호 34로 표시되는 경쇄 CDR3를 포함하는 경쇄 가변 영역;
(n) 서열번호 38로 표시되는 경쇄 CDR1, 서열번호 39로 표시되는 경쇄 CDR2 및 서열번호 40으로 표시되는 경쇄 CDR3를 포함하는 경쇄 가변 영역;
(o) 서열번호 44로 표시되는 경쇄 CDR1, 서열번호 45로 표시되는 경쇄 CDR2 및 서열번호 46으로 표시되는 경쇄 CDR3를 포함하는 경쇄 가변 영역; 및
(p) 서열번호 50으로 표시되는 경쇄 CDR1, 서열번호 51로 표시되는 경쇄 CDR2 및 서열번호 52로 표시되는 경쇄 CDR3를 포함하는 경쇄 가변 영역;으로 이루어진 군에서 선택되는 경쇄 가변 영역;을 포함하는 것일 수 있다.
본 발명의 상기 면역 세포의 표면 마커는 각각의 면역 세포의 표면에 특이적으로 발현되어, 다른 면역 세포와 자신을 구분해낼 수 있는 마커라면 모두 포함될 수 있다.
본 발명의 상기 "Th1 세포의 표면 마커"는 Th1 세포의 표면에 특이적으로 발현되어, 다른 세포와 Th1 세포를 구분해낼 수 있는 마커로서, 예를 들면, CD94, CD119 (IFNγR1), IFNγR2, CD183 (CXCR3), CD186 (CXCR6), CD191 (CCR1), CD195 (CCR5), CD212 (IL-12Rβ1), IL-12Rβ2, CD218a (IL-18Rα), IL-27Rα, CD254 (RANKL) 또는 CD366 (TIM3)일 수 있으나, 이에 제한되는 것은 아니다.
본 발명의 상기 "Th2 세포의 표면 마커"는 Th2 세포의 표면에 특이적으로 발현되어, 다른 세포와 Th2 세포를 구분해낼 수 있는 마커로서, 예를 들면, CD184 (CXCR4), CD193(CCR3), CD194 (CCR4), CD198 (CCR8), CD294 (CRTH2), CD365 (TIM1), IL-25R (IL-17RB), IL-33R (ST2, IL-4R 또는 TSLPR일 수 있으나, 이에 제한되는 것은 아니다.
본 발명의 상기 "Th17 세포의 표면 마커"는 Th17 세포의 표면에 특이적으로 발현되어, 다른 세포와 Th17 세포를 구분해낼 수 있는 마커로서, 예를 들면, CD121a (IL-1RI), CD126 (IL-6Rα), CD161, CD194 (CCR4), CD196 (CCR6), IL-23R, CD360 (IL-21R), CD212 (IL-12Rβ1) 또는 TGF-βRII일 수 있으나, 이에 제한되는 것은 아니다.
본 발명의 상기 "Th22 세포의 표면 마커"는 Th22 세포의 표면에 특이적으로 발현되어, 다른 세포와 Th22 세포를 구분해낼 수 있는 마커로서, 예를 들면, CD194 (CCR4), CD196 (CCR6), CCR10, IL-6Rα, TGF-βRII 또는 TNFRI일 수 있으나, 이에 제한되는 것은 아니다.
본 발명의 상기 이중 특이 항체에서, 중쇄 CDR 및 경쇄 CDR 부위, 또는 중쇄 가변 영역 및 경쇄 가변 영역을 제외한 나머지 부위는 모든 서브타입의 면역글로불린(예컨대, IgA, IgD, IgE, IgG (IgG1, IgG2, IgG3, IgG4), IgM, 등)으로부터 유래한 것일 수 있고, 예컨대, 상기 모든 서브타입의 면역글로불린의 경쇄 불변 영역 및/또는 중쇄 불변 영역으로부터 유래한 것일 수 있다.
본 발명의 상기 "상보성　결정 영역(Complementarity-determining regions, CDR)"라 함은, 항체의 가변 영역 중에서 항원과의 결합 특이성을 부여하는 부위를 의미한다.
6-2. 암의 예방 또는 치료용 약학 조성물
본 발명의 또 다른 구현 예에서는 Lrig1 및 면역 세포의 표면 마커에 특이적으로 결합하는 이중 특이 항체를 유효성분으로 포함하는 암의 예방 또는 치료용 약학 조성물을 제공한다.
본 발명의 6-2. 암의 예방 또는 치료용 약학 조성물에서, Lrig1 및 면역 세포의 표면 마커에 특이적으로 결합하는 이중 특이 항체, 항체 또는 이의 결합 단편과 관련된 내용은 앞서 6-1. 면역 관련 질환의 예방 또는 치료용 약학 조성물에 기재된 바와 동일하여, 이하에서는 그 기재를 생략한다.
6-3. 신경 퇴행성 질환 또는 신경 염증성 질환의 예방 또는 치료용 약학 조성물
본 발명의 또 다른 구현 예에서는 Lrig1 및 면역 세포의 표면 마커에 특이적으로 결합하는 이중 특이 항체를 유효성분으로 포함하는 신경 퇴행성 질환 또는 신경 염증성 질환의 예방 또는 치료용 약학 조성물을 제공한다.
본 발명의 6-3. 신경 퇴행성 질환 또는 신경 염증성 질환의 예방 또는 치료용 약학 조성물에서, Lrig1 및 면역 세포의 표면 마커에 특이적으로 결합하는 이중 특이 항체, 항체 또는 이의 결합 단편과 관련된 내용은 앞서 6-1. 면역 관련 질환의 예방 또는 치료용 약학 조성물에 기재된 바와 동일하여, 이하에서는 그 기재를 생략한다.
6-4. 병용 투여
본 발명의 약학 조성물은 다른 면역 관련 질환, 암 또는 신경 퇴행성 질환 또는 신경 염증성 질환의 치료제와도 추가로 병용 투여할 수 있다.
본 발명의 면역 관련 질환의 치료제는 면역 조절제, 예를 들면, 사이토 카인, 줄기 세포 성장 인자, 림프 독소, 조혈 인자, 콜로니 자극 인자(CSF), 인터페론(IFN), 에리트로포이에틴 및 트롬 보포이에틴; 또는 항염증제, 예를들면, 스테로이드 또는 비-스테로이드성 항염증제일 수 있으나, 이에 제한되는 것은 아니다.
본 발명의 상기 암 치료제, 즉 항암제로는 나이트로젠 머스타드, 이마티닙, 옥살리플라틴, 리툭시맙, 엘로티닙, 네라티닙, 라파티닙, 제피티닙, 반데타닙, 니로티닙, 세마사닙, 보수티닙, 악시티닙, 세디라닙, 레스타우르티닙, 트라스투주맙, 게피티니브, 보르테조밉, 수니티닙, 카보플라틴, 베바시주맙, 시스플라틴, 세툭시맙, 비스쿰알붐, 아스파라기나제, 트레티노인, 하이드록시카바마이드, 다사티닙, 에스트라머스틴, 겜투주맵오조가마이신, 이브리투모맙튜세탄, 헵타플라틴, 메칠아미노레불린산, 암사크린, 알렘투주맙, 프로카르바진, 알프로스타딜, 질산홀뮴 키토산, 젬시타빈, 독시플루리딘, 페메트렉세드, 테가푸르, 카페시타빈, 기메라신, 오테라실, 아자시티딘, 메토트렉세이트, 우라실, 시타라빈, 플루오로우라실, 플루다가빈, 에노시타빈, 플루타미드, 데시타빈, 머캅토푸린, 티오구아닌, 클라드리빈, 카르모퍼, 랄티트렉세드, 도세탁셀, 파클리탁셀, 이리노테칸, 벨로테칸, 토포테칸, 비노렐빈, 에토포시드, 빈크리스틴, 빈블라스틴, 테니포시드, 독소루비신, 이다루비신, 에피루비신, 미톡산트론, 미토마이신, 블레로마이신, 다우노루비신, 닥티노마이신, 피라루비신, 아클라루비신, 페프로마이신, 템시롤리무스, 테모졸로마이드, 부설판, 이포스파미드, 사이클로포스파미드, 멜파란, 알트레트민, 다카바진, 치오테파, 니무스틴, 클로람부실, 미토락톨, 레우코보린, 트레토닌, 엑스메스탄, 아미노글루테시미드, 아나그렐리드, 나벨빈, 파드라졸, 타목시펜, 토레미펜, 테스토락톤, 아나스트로졸, 레트로졸, 보로졸, 비칼루타미드, 로무스틴 및 카르무스틴으로 이루어진 군에서 선택된 1종 이상을 사용할 수 있으나, 이에 제한되는 것은 아니다.
본 발명의 신경 퇴행성 질환 또는 신경 염증성 질환의 치료제는 AchE 억제제, NMDA 수용체 길항제, 도파민 대체제, 도파민 작용물질, MAO 저해제, COMT 저해제와 같은 저분자 치료 약물, 유전자 치료제, 단일클항체 치료제, 면역요법, iPSC 등일 수 있으나, 이에 제한되는 것은 아니다.
7. 이중 특이 항체-약물 결합체
본 발명의 7. 이중 특이적 항체 약물 결합체에서, 면역 세포 및 Lrig1 단백질과 관련된 내용은 앞서 1. 세포 표면 항원에 기재된 바와 동일하여, 이하에서는 그 기재를 생략한다.
또한, 7. 이중 특이 항체-약물 결합체에서, 병용 투여와 관련된 내용은 앞서, 6-4. 병용투여에 기재된 바와 동일하여, 이하에서는 그 기재를 생략한다.
7-1. 면역 관련 질환의 예방 또는 치료용 약학 조성물
본 발명의 또 다른 구현 예에서는 Lrig1 및 면역 세포의 표면 마커에 특이적으로 결합하는 이중 특이 항체 또는 항원 결합 단편; 및 약물을 포함하는 항체-약물 결합체를 유효성분으로 포함하는 면역 관련 질환의 예방 또는 치료용 약학 조성물을 제공한다.
본 발명의 상기 "항체-약물 결합체(Antibody-Drug Conjugate, ADC)"란, 항체와 약물의 생물학적 활성을 저하시키지 않으면서 약물과 항체를 화학적으로 연결한 형태를 지칭한다. 본 발명에서 상기 항체-약물 결합체는 항체의 중쇄 및/또는 경쇄의 N-말단의 아미노산 잔기에 약물이 결합된 형태, 구체적으로는 항체의 중쇄 및/또는 경쇄의 N-말단, α-아민기에 약물이 결합된 형태를 말한다.
본 발명에서 상기 "약물"은 세포에 특정 생물학적 활성을 가지는 임의의 물질을 의미할 수 있으며, 이는 DNA, RNA 또는 펩타이드(Peptide)를 포함하는 개념이다. 상기 약물은 α-아민기와 반응하여 가교할 수 있는 반응기를 포함하는 형태일 수 있으며, α-아민기와 반응하여 가교할 수 있는 반응기를 포함하는 링커가 연결되어 있는 형태 역시 포함한다.
본 발명에서 상기 α-아민기와 반응하여 가교할 수 있는 반응기의 예로는, 항체의 중쇄 또는 경쇄의 N-말단의 α-아민기와 반응하여 가교할 수 있다면 그 종류는 특별히 제한되지 않으며, 당업계에 공지된 아민기와 반응하는 종류를 모두 포함한다. 그 예로 아이소티오시아네이트(Isothiocyanate), 아이소시아네이트(Isocyanates), 아실 아자이드(Acyl azide), NHS 에스터(NHS ester), 설포닐 클로라이드(Sulfonyl chloride), 알데하이드(Aldehyde), 글리옥살(Glyoxal), 에폭사이드(Epoxide), 옥시레인(Oxirane), 칼보네이트(Carbonate), 아릴 할라이드(Aryl halide), 이미도에스터(Imidoester), 카보이미드(Carbodiimide), 안하이드라이드(Anhydride) 및 플루오로페닐 에스터(Fluorophenyl ester) 중 어느 하나 일 수 있으나, 이에 제한되는 것은 아니다.
7-2. 암의 예방 또는 치료용 약학 조성물
본 발명의 또 다른 구현 예에서는 Lrig1 및 면역 세포의 표면 마커에 특이적으로 결합하는 이중 특이 항체 또는 항원 결합 단편; 및 약물을 포함하는 항체-약물 결합체를 유효성분으로 포함하는 암의 예방 또는 치료용 약학 조성물을 제공한다.
본 발명의 7-2. 암의 예방 또는 치료용 약학 조성물에서, Lrig1 및 면역 세포의 표면 마커에 특이적으로 결합하는 항체-약물 결합체와 관련된 내용은 앞서 7-1. 면역 관련 질환의 예방 또는 치료용 약학 조성물에 기재된 바와 동일하여, 이하에서는 그 기재를 생략한다.
7-3. 신경 퇴행성 질환 또는 신경 염증성 질환의 예방 또는 치료용 약학 조성물
본 발명의 또 다른 구현 예에서는 Lrig1 및 면역 세포의 표면 마커에 특이적으로 결합하는 이중 특이 항체 또는 항원 결합 단편; 및 약물을 포함하는 항체-약물 결합체를 유효성분으로 포함하는 신경 퇴행성 질환 또는 신경 염증성 질환의 예방 또는 치료용 약학 조성물을 제공한다.
본 발명의 7-3. 신경 퇴행성 질환 또는 신경 염증성 질환의 예방 또는 치료용 약학 조성물에서, Lrig1 및 면역 세포의 표면 마커에 특이적으로 결합하는 항체-약물 결합체와 관련된 내용은 앞서 7-1. 면역 관련 질환의 예방 또는 치료용 약학 조성물에 기재된 바와 동일하여, 이하에서는 그 기재를 생략한다.
8. 면역 세포를 분리하는 방법
본 발명의 또 다른 구현 예에서는 활성화된 면역 세포의 분리 방법을 제공한다.
본 발명의 8. 면역 세포를 분리하는 방법에서, 면역 세포 및 Lrig1 단백질과 관련된 내용은 앞서 1. 세포 표면 항원에 기재된 바와 동일하여, 이하에서는 그 기재를 생략한다.
본 발명의 상기 분리 방법은 분리된 생물학적 시료에서 Lrig1 단백질; 또는 이를 암호화하는 유전자의 발현 수준을 측정하는 단계를 포함한다.
본 발명의 상기 "분리된 생물학적 시료"는 건강한 정상 대조군, 또는 면역 치료를 받고자 하는 개체로부터 분리된 생물학적 시료일 수 있다. 구체적으로는 상기 개체로부터 얻어지거나 개체로부터 유래된 임의의 물질, 생물학적 체액, 조직 또는 세포를 의미하는 것으로, 예를 들면, 전혈(whole blood), 백혈구(leukocytes), 말초혈액 단핵 세포(peripheral blood mononuclear cells), 백혈구 연층(buffy coat), 혈장(plasma), 혈청(serum), 객담(sputum), 눈물(tears), 점액(mucus), 세비액(nasal washes), 비강 흡인물(nasal aspirate), 호흡(breath), 소변(urine), 정액(semen), 침(saliva), 복강 세척액(peritoneal washings), 골반 내 유체액(pelvic fluids), 낭종액(cystic fluid), 뇌척수막 액(meningeal fluid), 양수(amniotic fluid), 선액(glandular fluid), 췌장액(pancreatic fluid), 림프액(lymph fluid), 흉수(pleural fluid), 유두 흡인물(nipple aspirate), 기관지 흡인물(bronchial aspirate), 활액(synovial fluid), 관절 흡인물(joint aspirate), 기관 분비물(organ secretions), 세포(cell), 세포 추출물(cell extract) 또는 뇌척수액(cerebrospinal fluid)을 포함할 수 있으나, 이에 제한되는 것은 아니다.
본 발명의 면역 세포의 분리 방법에서, 상기 Lrig1 단백질; 또는 이를 암호화하는 유전자가 발현되거나, 그 발현 수준이 정상 대조군 대비 증가되거나, 또는 평균 면역 세포에서 보다 발현 수준이 증가된 면역 세포를 분리할 수 있다.
본 발명의 상기 방법에 의해 분리된 활성화된 면역 세포는 면역 관련 질환, 암 또는 신경 퇴행성 질환 또는 신경 염증성 질환이 발병하였거나, 발병 가능성이 높은 개체에게 그 질환의 예방, 개선 또는 치료를 위하여 투여될 수 있다. 여기서, 상기 면역 세포가 투여될 개체는 상기 생물학적 시료가 유래된 개체와 동일하거나 상이할 수 있다.
9. 면역 세포를 배양하는 방법
본 발명의 또 다른 구현 예에서는 활성화된 면역 세포를 배양하는 방법을 제공한다.
본 발명의 9. 면역 세포를 배양하는 방법에서, 면역 세포 및 Lrig1 단백질과 관련된 내용은 앞서 1. 세포 표면 항원에 기재된 바와 동일하여, 이하에서는 그 기재를 생략한다.
본 발명의 상기 배양하는 방법은 분리된 생물학적 시료에서 Lrig1 단백질; 또는 이를 암호화하는 유전자의 발현 수준을 측정하여 활성화된 면역 세포를 분리하는 단계; 및 상기 활성화된 면역 세포를 배양하는 단계;를 포함한다.
본 발명의 상기 배양하는 방법에서, 활성화된 면역 세포를 분리하는 단계는 상기 8. 면역 세포를 분리하는 방법에 기재된 바와 동일하여 그 기재를 생략한다.
본 발명의 상기 배양하는 단계에서, "배양"이란, 세포의 임의의 시험관 내 배양을 의미한다. 본 발명의 배양은 세포 배양 배지를 이용할 수 있으며, 세포 배양 배지는 세포를 배양하는 환경에서 쓰는 모든 종류의 배지를 의미하고, 예를 들면, 아미노산, 에너지원으로서 적어도 하나의 탄수화물, 미량원소, 비타민, 염 및 가능한 추가 성분(예:　세포의 성장, 생산성, 또는 생산물의 품질에 영향을 미치기 위함)을 포함할 수 있으나, 이에 제한되는 것은 아니다.
10. 세포 치료제를 스크리닝하는 방법
본 발명의 상기 10. 세포치료제에서, 면역 세포 및 Lrig1 단백질과 관련된 내용은 앞서 1. 세포 표면 항원에 기재된 바와 동일하여, 이하에서는 그 기재를 생략한다.
10-1. 면역 관련 질환의 세포 치료제를 스크리닝하는 방법
본 발명의 또 다른 구현 예에서는 면역 관련 질환의 세포 치료제를 스크리닝하는 방법을 제공한다.
본 발명의 상기 스크리닝하는 방법은 분리된 생물학적 시료의 면역세포에서, Lrig1 단백질; 또는 이를 암호화하는 유전자의 발현 수준을 측정하는 단계를 포함한다.
본 발명의 상기 스크리닝하는 방법에서, 분리된 생물학적 시료의 면역세포에서 Lrig1 단백질; 또는 이를 암호화하는 유전자의 발현 수준이 대조군과 비교하여 증가 또는 감소된 경우 면역 관련 질환의 세포 치료제로 선별할 수 있다.
본 발명의 상기 스크리닝하는 방법에서, 세포 치료제, 생물학적 시료, 단백질; 또는 이를 암호화하는 유전자의 발현 수준을 측정하는 방법 및 면역 관련 질환 등과 관련된 내용은 앞서 기재된 바와 동일하여 그 기재를 생략한다.
10-2. 암의 세포 치료제를 스크리닝하는 방법
본 발명의 또 다른 구현 예에서는 암의 세포 치료제를 스크리닝하는 방법을 제공한다.
본 발명의 상기 스크리닝하는 방법은 분리된 생물학적 시료의 면역세포에서, Lrig1 단백질; 또는 이를 암호화하는 유전자의 발현 수준을 측정하는 단계를 포함한다.
본 발명의 상기 스크리닝하는 방법에서, 분리된 생물학적 시료의 면역세포에서 Lrig1 단백질; 또는 이를 암호화하는 유전자의 발현 수준이 대조군과 비교하여 증가 또는 감소된 경우 암의 세포 치료제로 선별할 수 있다.
본 발명의 상기 스크리닝하는 방법에서, 세포 치료제, 생물학적 시료, 단백질; 또는 이를 암호화하는 유전자의 발현 수준을 측정하는 방법 및 암 등과 관련된 내용은 앞서 기재된 바와 동일하여 그 기재를 생략한다.
10-3. 신경 퇴행성 질환 또는 신경 염증성 질환의 세포 치료제를 스크리닝하는 방법
본 발명의 또 다른 구현 예에서는 신경 퇴행성 질환 또는 신경 염증성 질환의 세포 치료제를 스크리닝하는 방법을 제공한다.
본 발명의 상기 스크리닝하는 방법은 분리된 생물학적 시료의 면역세포에서, Lrig1 단백질; 또는 이를 암호화하는 유전자의 발현 수준을 측정하는 단계를 포함한다.
본 발명의 상기 스크리닝하는 방법에서, 분리된 생물학적 시료의 면역세포에서 Lrig1 단백질; 또는 이를 암호화하는 유전자의 발현 수준이 대조군과 비교하여 증가 또는 감소된 경우 신경 퇴행성 질환 또는 신경 염증성 질환의 세포 치료제로 선별할 수 있다.
본 발명의 상기 스크리닝하는 방법에서, 세포 치료제, 생물학적 시료, 단백질; 또는 이를 암호화하는 유전자의 발현 수준을 측정하는 방법 및 신경 퇴행성 질환 또는 신경 염증성 질환 등과 관련된 내용은 앞서 기재된 바와 동일하여 그 기재를 생략한다.
본 발명의 면역 세포는 억제 기능이 활성화되어 있는 것으로서, 활성화되어 있는 면역 세포의 Lrig1 단백질은 면역 억제제, 암 질환 또는 신경 퇴행성 또는 염증성 질환 등의 새로운 타겟으로 사용될 수 있다.
도 1은 본 발명의 일 실시예에 따른 Th17 세포에 의한 억제 효과를 확인한 결과를 나타낸 것이다.
본 발명의 일 실시예에 따른 Th17 세포에 의한 억제 효과를 확인한 결과를 도 1에서 나타내었다.
이하, 본 발명을 하기의 실시예에 의해 상세히 설명한다. 단, 하기 실시예는 본 발명을 예시하는 것일 뿐, 본 발명의 내용이 하기 실시예에 의해 한정되는 것은 아니다.
실시예
[준비예] T 세포 아형 세포 배양
Th17 세포의 효과 T 세포 억제 효과를 확인하기 위하여, T 세포의 아형(subset)인 Th0, Th1, Th2, Th17 및 iTreg을 준비하였다. 상기 iTreg은 자연적으로 분리한 nTreg과는 달리 하기 조성을 포함하는 배지에서 분화를 인공적으로 유도한 세포를 의미한다.
T 세포의 아형은 우선, MACS를 이용하여 통상의 방법에 따라 쥐의 비장으로부터 나이브(naive) T 세포를 분리한 뒤, 우태아혈청(FBS; hyclone, logan, UT) 10%를 포함하는 RPMI1640(Invitrogen Gibco, Grand Island, NY) 영양배지에 하기 표 1의 성분을 각각 더 포함하도록 하여, 37 ℃, 5 % CO2 배양기 내에서 72시간 배양을 통해 각각의 세포로 분화 유도하였다.
분화 세포 조성
Th0 anti-CD3, anti-CD28
Th1 IL-12, anti-IL-4 항체
Th2 IL-4, anti-IFNβ
Th17 IL-6, TGFβ, anti-IFNγ, anti-IL-4
iTreg IL-2, TGFβ
[실시예] 효과 T 세포 억제 효과 확인
상기 준비예에서 분화된 세포들을 형광 이용 세포 분류기(Fluorescence-Activated Cell Sorter; FACS)를 이용하여 Lrig1의 발현 수준이 높은 세포(Th17 L1+ 또는 iTreg L1+) 및 Lrig1의 발현 수준이 낮은 세포(Th17 L1- 또는 iTreg L1-)로 분류하였다.
그런 다음, 효과 T 세포의 억제 효과를 확인하기 위하여, 항원 제시 세포(antigen presenting cells; APC)와 나이브 CD4+ T 세포를 PBS로 2번 세척해서 혈청을 완전히 제거하였다. CFSE 라벨링을 위하여 위의 펠렛을 PBS 1 ml로 풀어주었을 때 2 ×107 세포의 경우 PBS 1 ml에 5 mM의 CFSE 0.25 ㎕의 혼합물을 1 ml 넣어 주어 1:1의 비율로 혼합하였다. 단, 세포수가 2 ×107 이하인 경우는 PBS 500 ㎕로 풀고, 상기 CFSE+PBS 혼합물을 500 ㎕로 혼합하였다. 이후, 상기 혼합물을 37 ℃에서 10분간 배양하였다. APC 분열을 억제하기 위하여 PBS 1ml에 세포가 5×107으로 있을 때 미토마이신 C(mitomycin C)(0.5 mg/ml)를 100 ㎕의 볼륨만큼 넣고, 37 ℃에서 20분간 배양하였다. 미리 차갑게 만든 배지를 넣어 15 ml를 채운 뒤 아이스에서 5분간 보관한 뒤, 배양 배지로 2번 세척하고 세포를 계수하였다. Th17L+ 세포, Th17L- 세포, iTreg L+ 세포 및 iTregL- 세포는 CD4+ T 세포에 대하여 2:1, 1:1, 1:2의 양으로 넣고, 단백질 및 항-CD3 항체(0.5 ug/ml)를 첨가한 뒤 3일 후 CFSE-FL4를 이용하여 효과 T 세포의 증식 억제 정도를 확인하여, 그 결과를 도 1에 나타내었다.
도 1에서 보는 바와 같이, Lrig1의 발현 수준이 낮은 경우와 비교하여, Lrig1의 발현 수준이 높은 Th17 세포에서 2:1, 1:1 및 1:2의 비율의 모든 경우에서 효과 T 세포의 억제 효과가 발휘되었다.
이상으로 본 발명의 특정한 부분을 상세히 기술하였는 바, 당업계의 통상의 지식을 가진 자에게 있어서 이러한 구체적인 기술은 단지 바람직한 구현 예일 뿐이며, 이에 본 발명의 범위가 제한되는 것이 아닌 점은 명백하다. 따라서, 본 발명의 실질적인 범위는 첨부된 청구항과 그의 등가물에 의하여 정의된다고 할 것이다.
본 발명의 면역 세포는 억제 기능이 활성화되어 있는 것으로서, 활성화되어 있는 면역 세포의 Lrig1 단백질은 면역 억제제, 암 질환 또는 신경 퇴행성 또는 염증성 질환 등의 새로운 타겟으로 사용될 수 있다.

Claims (35)

  1. Lrig1 단백질 또는 이를 암호화하는 유전자로 이루어진, 활성화된 면역 세포의 세포 표면 항원.
  2. 제1항에 있어서,
    상기 면역 세포는 T 세포, B 세포, NK 세포, 림프구 세포(Innate lymphoid cell), 수지상 세포(Dendritic cell), 호중구(Neutrophil), 호산구(Eosinophil), 호염기성 과립구(Basophil), 대식세포(Macrophage) 및 비만세포(mast cell)로 이루어진 군으로부터 선택되는 적어도 하나인 것인, 활성화된 면역 세포의 세포 표면 항원.
  3. Lrig1 단백질; 또는 이를 암호화하는 유전자를 포함하는 면역 세포를 유효 성분으로 포함하는 면역 관련 질환의 예방 또는 치료용 약학 조성물.
  4. 제3항에 있어서,
    상기 면역 세포는 T 세포, B 세포, NK 세포, 림프구 세포, 수지상 세포, 호중구, 호산구, 호염기성 과립구, 대식세포 및 비만세포로 이루어진 군으로부터 선택되는 적어도 하나인 것인, 약학 조성물.
  5. 제3항에 있어서,
    상기 면역 관련 질환은 자가면역질환, 이식편대숙주 질환, 장기이식거부반응, 천식, 아토피, 및 급성 또는 만성의 염증 질환으로 이루어진 군으로부터 선택되는 적어도 하나인, 약학 조성물.
  6. 제5항에 있어서,
    상기 자가면역질환은 류마티스성 관절염, 전신성 경피증, 전신 홍반성 낭창, 아토피 피부염, 건선, 원형탈모증, 천식, 크론씨병, 베체시병, 쇼그렌 증후군, 길리아-바레 증후군, 만성 갑상선염, 다발성 경화증, 다발성 근염, 강직성 척추염, 섬유조직염 및 결절성 다발성 동맥염으로 구성된 군으로부터 선택되는 적어도 하나인, 약학 조성물.
  7. Lrig1 단백질; 또는 이를 암호화하는 유전자를 포함하는 면역 세포를 유효 성분으로 포함하는 암의 예방 또는 치료용 약학 조성물.
  8. 제7항에 있어서,
    상기 면역 세포는 T 세포, B 세포, NK 세포, 림프구 세포, 수지상 세포, 호중구, 호산구, 호염기성 과립구, 대식세포 및 비만세포로 이루어진 군으로부터 선택되는 적어도 하나인 것인, 약학 조성물.
  9. 제7항에 있어서,
    상기 암은 위암, 간암, 교세포종, 난소암, 대장암, 두경부암, 방광암, 신장세포암, 유방암, 전이암, 전립선암, 췌장암, 흑색종 및 폐암으로 이루어진 군으로부터 선택되는 적어도 하나인, 약학 조성물.
  10. Lrig1 단백질; 또는 이를 암호화하는 유전자를 포함하는 면역 세포를 유효 성분으로 포함하는 신경 퇴행성 질환 또는 신경 염증성 질환의 예방 또는 치료용 약학 조성물.
  11. 제10항에 있어서,
    상기 면역 세포는 T 세포, B 세포, NK 세포, 림프구 세포, 수지상 세포, 호중구, 호산구, 호염기성 과립구, 대식세포 및 비만세포로 이루어진 군으로부터 선택되는 적어도 하나인 것인, 약학 조성물.
  12. 제10항에 있어서,
    상기 신경 퇴행성 질환 또는 신경 염증성 질환은 뇌졸중, 치매, 알츠하이머병(Alzheimer's disease), 파킨슨병(Parkinson's disease), 헌팅턴병(Huntington's disease), 니만-피크병(Niemann-Pick disease), 프리온병(prion disease), 크로이펠츠-야콥병(Creutzfeldt-Jakob disease), 전두측두치매, 루이치매, 근위축성 측삭경화증(AlzAmyotrophic lateral sclerosis), 부신생물증후군(Paraneoplastic syndrome), 피질기저퇴행증, 다계통위축병, 진행성핵상마비, 신경계 자가면역질환, 척수 소뇌 실조(spinocerebellar ataxia), 염증성 및 신경병증성 통증, 뇌혈관 질환, 척수 손상(spinal cord injury) 및 타우병증(tauopathy)으로 이루어진 군에서 선택되는, 약학 조성물.
  13. 면역 세포의 표면에 존재하는 Lrig1 단백질 또는 이를 암호화하는 유전자의 발현 수준을 측정하는 제제를 포함하는 면역 관련 질환의 진단용 조성물.
  14. 제13항에 있어서,
    상기 면역 세포는 T 세포, B 세포, NK 세포, 림프구 세포, 수지상 세포, 호중구, 호산구, 호염기성 과립구, 대식세포 및 비만세포로 이루어진 군으로부터 선택되는 적어도 하나인 것인, 진단용 조성물.
  15. 제13항 및 제14항 중 어느 한 항의 진단용 조성물을 포함하는 면역 관련 질환의 진단용 키트.
  16. 목적하는 개체로부터 분리된 생물학적 시료에서 면역 세포의 Lrig1 단백질 또는 이를 암호화하는 유전자의 발현 수준을 측정하는 단계를 포함하는 면역 관련 질환을 진단하기 위한 정보 제공 방법.
  17. 면역 세포의 표면에 존재하는 Lrig1 단백질 또는 이를 암호화하는 유전자의 발현 수준을 측정하는 제제를 포함하는 암의 진단용 조성물.
  18. 제17항에 있어서,
    상기 면역 세포는 T 세포, B 세포, NK 세포, 림프구 세포, 수지상 세포, 호중구, 호산구, 호염기성 과립구, 대식세포 및 비만세포로 이루어진 군으로부터 선택되는 적어도 하나인 것인, 진단용 조성물.
  19. 제17항 및 제18항 중 어느 한 항의 진단용 조성물을 포함하는 암의 진단용 키트.
  20. 목적하는 개체로부터 분리된 생물학적 시료에서 면역 세포의 Lrig1 단백질 또는 이를 암호화하는 유전자의 발현 수준을 측정하는 단계를 포함하는 암을 진단하기 위한 정보 제공 방법.
  21. 면역 세포의 표면에 존재하는 Lrig1 단백질 또는 이를 암호화하는 유전자의 발현 수준을 측정하는 제제를 포함하는 신경 퇴행성 질환 또는 신경 염증성 질환의 진단용 조성물.
  22. 제21항에 있어서,
    상기 면역 세포는 T 세포, B 세포, NK 세포, 림프구 세포, 수지상 세포, 호중구, 호산구, 호염기성 과립구, 대식세포 및 비만세포로 이루어진 군으로부터 선택되는 적어도 하나인 것인, 진단용 조성물.
  23. 제21항 및 22항 중 어느 한 항의 진단용 조성물을 포함하는 신경 퇴행성 질환 또는 신경 염증성 질환의 진단용 키트.
  24. 목적하는 개체로부터 분리된 생물학적 시료에서 면역 세포의 Lrig1 단백질 또는 이를 암호화하는 유전자의 발현 수준을 측정하는 단계를 포함하는 신경 퇴행성 질환 또는 신경 염증성 질환을 진단하기 위한 정보 제공 방법.
  25. Lrig1에 특이적으로 결합하는 항체 또는 이의 항원 결합 단편; 및 면역 세포 표면 마커에 특이적으로 결합하는 항체 또는 이의 항원 결합 단편을 포함하는 이중 특이 항체를 유효성분으로 포함하는 면역 관련 질환의 예방 또는 치료용 약학 조성물.
  26. Lrig1에 특이적으로 결합하는 항체 또는 이의 항원 결합 단편; 및 면역 세포 표면 마커에 특이적으로 결합하는 항체 또는 이의 항원 결합 단편을 포함하는 이중 특이 항체를 유효성분으로 포함하는 암의 예방 또는 치료용 약학 조성물.
  27. Lrig1에 특이적으로 결합하는 항체 또는 이의 항원 결합 단편; 및 면역 세포 표면 마커에 특이적으로 결합하는 항체 또는 이의 항원 결합 단편을 포함하는 이중 특이 항체를 유효성분으로 포함하는 신경 퇴행성 질환 또는 신경 염증성 질환의 예방 또는 치료용 약학 조성물.
  28. Lrig1 및 면역 세포 표면 마커에 특이적으로 결합하는 이중 특이 항체 또는 항원 결합 단편; 및 약물을 포함하는 항체-약물 결합체를 유효성분으로 포함하는 면역 관련 질환의 예방 또는 치료용 약학 조성물.
  29. Lrig1 및 면역 세포 표면 마커에 특이적으로 결합하는 이중 특이 항체 또는 항원 결합 단편; 및 약물을 포함하는 항체-약물 결합체를 유효성분으로 포함하는 암의 예방 또는 치료용 약학 조성물.
  30. Lrig1 및 면역 세포 표면 마커에 특이적으로 결합하는 이중 특이 항체 또는 항원 결합 단편; 및 약물을 포함하는 항체-약물 결합체를 유효성분으로 포함하는 신경 퇴행성 질환 또는 신경 염증성 질환의 예방 또는 치료용 약학 조성물.
  31. 분리된 생물학적 시료에서 Lrig1 단백질; 또는 이를 암호화하는 유전자의 발현 수준을 측정하는 단계를 포함하는 활성화된 면역 세포를 분리하는 방법.
  32. 분리된 생물학적 시료에서 Lrig1 단백질; 또는 이를 암호화하는 유전자의 발현 수준을 측정하여 활성화된 면역 세포를 분리하는 단계; 및
    상기 활성화된 면역 세포를 배양하는 단계;를 포함하는 활성화된 면역 세포를 배양하는 방법.
  33. 분리된 생물학적 시료의 면역세포에서, Lrig1 단백질; 또는 이를 암호화하는 유전자의 발현 수준을 측정하는 단계를 포함하는 면역 관련 질환의 세포 치료제를 스크리닝하는 방법.
  34. 분리된 생물학적 시료의 면역세포에서, Lrig1 단백질; 또는 이를 암호화하는 유전자의 발현 수준을 측정하는 단계를 포함하는 암의 세포 치료제를 스크리닝하는 방법.
  35. 분리된 생물학적 시료의 면역세포에서, Lrig1 단백질; 또는 이를 암호화하는 유전자의 발현 수준을 측정하는 단계를 포함하는 신경 퇴행성 질환 또는 신경 염증성 질환의 세포 치료제를 스크리닝하는 방법.
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Citations (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US20150239964A1 (en) * 2011-01-24 2015-08-27 Sang-Kyou Lee Novel Use of Regulatory T Cell-Specific Surface Protein LRIG-1
KR20180116925A (ko) * 2017-04-18 2018-10-26 주식회사 굳티셀 암 또는 면역 질환의 예방 또는 치료용 약학 조성물
KR20180117067A (ko) * 2017-04-18 2018-10-26 주식회사 굳티셀 Lrig-1 단백질에 특이적인 결합 분자 및 이의 용도
KR20200043301A (ko) * 2018-10-17 2020-04-27 주식회사 굳티셀 Lrig-1 단백질에 특이적인 결합 분자 및 이의 용도
KR20200112745A (ko) * 2019-03-20 2020-10-05 주식회사 굳티셀 뇌신경계 질환의 예방 또는 치료용 조성물

Patent Citations (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US20150239964A1 (en) * 2011-01-24 2015-08-27 Sang-Kyou Lee Novel Use of Regulatory T Cell-Specific Surface Protein LRIG-1
KR20180116925A (ko) * 2017-04-18 2018-10-26 주식회사 굳티셀 암 또는 면역 질환의 예방 또는 치료용 약학 조성물
KR20180117067A (ko) * 2017-04-18 2018-10-26 주식회사 굳티셀 Lrig-1 단백질에 특이적인 결합 분자 및 이의 용도
KR20200043301A (ko) * 2018-10-17 2020-04-27 주식회사 굳티셀 Lrig-1 단백질에 특이적인 결합 분자 및 이의 용도
KR20200112745A (ko) * 2019-03-20 2020-10-05 주식회사 굳티셀 뇌신경계 질환의 예방 또는 치료용 조성물

Non-Patent Citations (19)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
"Antibody Engineering: Methods and Protocols", 2012, HUMANA PRESS
BARBAS ET AL., PROC NAT. ACAD. SCI. USA, vol. 91, 1994, pages 3809 - 3813
BOCK LC ET AL., NATURE, vol. 355, no. 6360, 1992, pages 5646
CHUNG Y ET AL.: "Critical regulation of early Th17 cell differentiation by interleukin-1 signaling", IMMUNITY, vol. 30, 2009, pages 576 - 87, XP055034079, DOI: 10.1016/j.immuni.2009.02.007
CLACKSON ET AL., NATURE, vol. 352, 1991, pages 624 - 628
COHEN BACOLAS PBRENT R: "an artificial cell-cycle inhibitor isolated from a combinatorial library", PROC NATL ACAD SCI USA., vol. 95, no. 24, 1998, pages 142727
D.M.BAST, B.J.: "Production of Bispecific Antibodies", CURRENT PROTOCOLS IN IMMUNOLOGY, vol. 14, 2001
HAWKINS ET AL., J. MOL. BIOL., vol. 226, 1992, pages 889 - 896
HOPPE-SEYLER FBUTZ K: "Peptide aptamers: powerful new tools for molecular medicine", J MOL MED, vol. 78, no. 8, 2000, pages 42630, XP002413234, DOI: 10.1007/s001090000140
HORNIGFARBER-SCHWARZ: "How to make bispecific antibodies", METHODS MOL. MED, vol. 40, 2000, pages 333 - 339
JACKSON ET AL., J. IMMUNOL., vol. 154, no. 7, 1995, pages 3310 - 2004
KOHLERMILSTEIN, EUROPEAN JOURNAL OF IMMUNOLOGY, vol. 6, 1976, pages 511 - 519
KONTERMANN, MABS, vol. 4, no. 2, 2012, pages 182 - 197
MARKS ET AL., J. MOL. BIOL., vol. 222, no. 58, 1991, pages 1 - 597
MARKS ET AL., RIO/TECHNOLOGY, vol. 10, 1992, pages 779 - 783
NIELSEN PEEGHOLM MBERG RHBUCHARDT O: "Sequence-selective recognition of DNA by strand displacement with a thymine-substituted polyamide", SCIENCE, vol. 254, no. 5037, December 1991 (1991-12-01), pages 1497 - 1500, XP002912953, DOI: 10.1126/science.1962210
SCHIER ET AL., GENE, vol. 169, 1995, pages 147 - 155
VELDHOEN MHOCKING RJAKINS CJLOCKSLEY RMSTOCKINGER B, IMMUNITY, vol. 24, no. 2, February 2006 (2006-02-01), pages 178 - 89
WEI ET AL., J BIOL. CHEM., 2007

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