WO2021213476A1 - 一种吡唑并[1,5-a]吡啶类衍生物及其制备方法，组合物以及用途 - Google Patents

一种吡唑并[1,5-a]吡啶类衍生物及其制备方法，组合物以及用途 Download PDF

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WO2021213476A1
WO2021213476A1 PCT/CN2021/089064 CN2021089064W WO2021213476A1 WO 2021213476 A1 WO2021213476 A1 WO 2021213476A1 CN 2021089064 W CN2021089064 W CN 2021089064W WO 2021213476 A1 WO2021213476 A1 WO 2021213476A1
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pyridin
alkyl
pyridine
methyl
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Application number
PCT/CN2021/089064
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English (en)
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Inventor
程辉敏
温晓明
刘志强
方磊
陈誉
魏勇
张国刚
李传圣
马松龄
齐珍珍
陈萍
牛春意
张佩宇
赖力鹏
马健
温书豪
Original Assignee
深圳晶泰科技有限公司
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    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P35/00—Antineoplastic agents
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D471/00—Heterocyclic compounds containing nitrogen atoms as the only ring hetero atoms in the condensed system, at least one ring being a six-membered ring with one nitrogen atom, not provided for by groups C07D451/00 - C07D463/00
    • C07D471/02—Heterocyclic compounds containing nitrogen atoms as the only ring hetero atoms in the condensed system, at least one ring being a six-membered ring with one nitrogen atom, not provided for by groups C07D451/00 - C07D463/00 in which the condensed system contains two hetero rings
    • C07D471/04—Ortho-condensed systems
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P1/00—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D519/00—Heterocyclic compounds containing more than one system of two or more relevant hetero rings condensed among themselves or condensed with a common carbocyclic ring system not provided for in groups C07D453/00 or C07D455/00

Definitions

  • the invention belongs to the field of medicine, and specifically relates to a pyrazolo[1,5-a]pyridine derivative and a pharmaceutically acceptable salt thereof, and a pharmaceutical composition using them as an active ingredient.
  • the invention also provides a preparation method of the compound and its application as a medicine.
  • Cancer is caused by uncontrolled and unregulated cell proliferation.
  • the reasons that lead to uncontrolled and unregulated cell proliferation have always been the key research objects of drug researchers.
  • the human gene encoding RET protein is located on the long arm of chromosome 10. Its abnormalities (gene fusion, mutation, amplification) can cause a variety of diseases, including papillary thyroid carcinoma (PTC), medullary thyroid carcinoma (MTC), and lung adenocarcinoma , Hirschsprung's disease, irritable bowel syndrome, etc.
  • the chromosome rearrangement where the RET gene is located may cause the RET gene to break. After the break, the 3'end of the RET gene can be fused with different genes such as KIF5B, TRIM33, CCDC6 or NCOA4 to form a fusion gene.
  • the expressed fusion protein shows continuous activation. Drive the occurrence of tumors.
  • RET is a single transmembrane receptor belonging to the tyrosine kinase superfamily and is required for the normal development, maturation and maintenance of a variety of tissues and cells. RET signaling is mediated by the binding of glial cell-derived neurotrophic factor (GDNF) and family ligand (GFL) soluble proteins.
  • GDNF glial cell-derived neurotrophic factor
  • GFL family ligand
  • the glial cell-derived neurotrophic factor (GDNF) family does not directly bind to RET, but first forms a complex GFL-GFR ⁇ with GDNF family receptor ⁇ (GFR ⁇ ), and then catalyzes the homodimerization of RET to make RET intracellular Regional autophosphorylation, and then recruit adaptor proteins and pathway proteins to activate a variety of signaling pathways including MAPK, PI3K, JAK-STAT, PKA and PKC, thereby participating in cell proliferation, nerve conduction, cell migration and cell differentiation (Alexander Drilon) , Nature Reviews Clinical Oncology, 2018, 15: 151–167), plays an important role in regulating cell survival, differentiation, proliferation, migration and chemotaxis.
  • GFR ⁇ GDNF family receptor ⁇
  • RET reactive oxygen species
  • Vandetanib Vandetanib
  • Lenvatini and Ponatinib All are non-specific RET inhibitors.
  • RET and the kinase domain of VEGFR2 have a large amount of homology, these compounds have a certain inhibitory effect on multiple targets including VEGFR2 in addition to inhibiting RET. Satisfactory effect.
  • the purpose of the present invention is to provide a drug with high specificity and high efficiency to inhibit RET kinase.
  • the first aspect of the present invention provides a compound of formula (I) or a pharmaceutically acceptable salt, hydrate, solvate, stereoisomer, isotopic compound or prodrug thereof;
  • R 1 is selected from the following group: hydrogen, halogen, nitro, cyano, C1-C6 alkyl, C3-C8 cycloalkyl, 3-8 membered heterocyclic group, C1-C6 heteroalkyl, C2-C6 alkenyl , C2-C6 alkynyl, C6-C14 aryl, 5-14 membered heteroaryl, -OR 5 , -O(C1-C6 alkylene) R 5 , -SR 5 , -N(R 5 )(R 6 ), -S(O) 2 R 5 , -S(O)R 5 , -C(O)R 5 , -OC(O)R 5 , -C(O)OR 5 , -OC(O)O -(C1-C6 alkylene)-C(O)R 5 , -C(O)-N(R 5 )(R 6 ), -N(R 5 )-C(O)R
  • B is independently selected from the group consisting of hydrogen, halogen, cyano, CHF 2 , CF 3 , -C(O)OR 5 , C1-C6 alkyl, C3-C8 cycloalkyl;
  • X 1 , X 2 and X 3 are each independently CR or N; wherein each R is independently selected from the following group: hydrogen, substituted or unsubstituted C1-C6 alkyl, halogen, or cyano, wherein The said substitution refers to substitution by one or more groups independently selected from the following group: halogen, cyano, hydroxyl, amino; and 0 , 1, 2, or 3 of X 1, X 2 and X 3 are N ;
  • R 2 is independently selected from the following group: hydrogen, C1-C6 alkyl, C3-C8 cycloalkyl, C1-C6 heteroalkyl, 3-8 membered cycloheteroalkyl; wherein, said alkyl, cycloalkane Group, heteroalkyl, cycloheteroalkyl are unsubstituted or substituted by one or more groups independently selected from the following group: C1-C6 alkyl, C1-C6 alkoxy, C3-C8 cycloalkyl, C3 -C8 cycloalkoxy, C1-C6 heteroalkyl, 3-8 membered cycloheteroalkyl, CHF 2 , CF 3 , halogen, cyano, carboxyl, carbonyl, hydroxyl, mercapto, amino, methyl, amide, methyl Base sulfone, sulfonamide, dimethyl phosphoroxy;
  • R 3 and R 3 ' are each independently selected from the following group: hydrogen, halogen, cyano, hydroxyl, mercapto, amino, CHF 2 , CF 3 , C1-C6 alkyl, C1-C6 alkoxy, C3-C8 ring Alkyl, C1-C6 heteroalkyl, 3-8 membered cycloheteroalkyl; wherein, the alkyl, alkoxy, cycloalkyl, heteroalkyl, and cycloheteroalkyl are unsubstituted or substituted by one or Multiple substituents independently selected from the following group: C1-C6 alkyl, C1-C6 alkoxy, C3-C8 cycloalkyl, C3-C8 cycloalkoxy, C1-C6 heteroalkyl, 3-8 Member cycloheteroalkyl, CHF 2 , CF 3 , halogen, cyano, carboxyl, carbonyl, hydroxyl,
  • R 3 and R 3 together with the C atom to which they are attached form a C3-C8 cycloalkyl group, a 3-8 membered heterocyclic group, or a carbonyl group; wherein, the cycloalkyl group and the heterocyclic group are unsubstituted or are substituted by one or Multiple substituents independently selected from the following group: C1-C6 alkyl, C1-C6 alkoxy, C3-C8 cycloalkyl, C3-C8 cycloalkoxy, C1-C6 heteroalkyl, 3-8 Member cycloheteroalkyl, CHF 2 , CF 3 , halogen, cyano, carboxyl, carbonyl, hydroxyl, mercapto, amino, methyl, amide, methyl sulfone, sulfonamide, dimethyl phosphoroxy;
  • A is independently selected from the following group: C3-C8 cycloalkyl, 3-8 membered heterocyclic group, C6-C14 aryl or 5-14 membered heteroarylene;
  • Each R 4 is independently selected from the following group: hydrogen, halogen, nitro, cyano, hydroxyl, carboxyl, mercapto, C1-C6 alkyl, C3-C8 cycloalkyl, 3-8 membered heterocyclic group, C1-C6 Heteroalkyl, C2-C6 alkenyl, C2-C6 alkynyl, C6-C14 aryl, 5-14 membered heteroaryl, -OR 5 , -SR 5 , -N(R 5 )(R 6 ),- S(O) 2 R 5 , -S(O)R 5 , -C(O)R 5 , -OC(O)R 5 , -C(O)OR 5 , -OC(O)O-(C1- C6 alkylene)-C(O)R 5 , -C(O)-N(R 5 )(R 6 ), -N(R 5 )-C(O)R 6 ,
  • R 5 and R 6 are each independently selected from the following group of substituted or unsubstituted groups: hydrogen, C1-C6 alkyl, C3-C8 cycloalkyl, 3-8 membered monoheterocyclic group, C6-C10 aryl, 5-10 membered heteroaryl, C5-C12 fused bicyclic ring, 5-12 membered fused heterobicyclic ring, C5-C12 membered spiro bicyclic ring or 5-12 membered spiro heterobicyclic ring; wherein, the substitution means being independently selected from Substitution of one or more groups from the following group: C1-C6 alkyl, C1-C6 alkoxy, C3-C8 cycloalkyl, C3-C8 cycloalkoxy, C1-C6 heteroalkyl, 3-8 member Cycloheteroalkyl, CHF 2 , CF 3 , halogen, cyano, carboxyl, carbonyl,
  • R 5 and R 6 together with the N or P atom to which they are attached form a 3-8 membered heterocyclic group
  • alkyl, alkylene, cycloalkyl, heteroalkyl, alkenyl, alkynyl, aryl, heteroaryl, and heterocyclic groups are unsubstituted or are independently selected from one or more of the following Group substitution: C1-C6 alkyl, C1-C6 alkoxy, C3-C8 cycloalkyl, 3-8 membered heterocyclic group, C1-C6 heteroalkyl, C2-C6 alkenyl, C2-C6 Alkynyl, nitro, halogen, cyano, hydroxyl, carboxyl, ester, amide, sulfonamide, carbonyl, sulfhydryl, amine, dimethylphosphoroxy;
  • n 0, 1, 2 or 3.
  • X 1 , X 2 and X 3 are each independently CH or N.
  • X 2 and X 3 are N independently.
  • X 2 is N independently.
  • B is independently selected from the following group: hydrogen, halogen, C1-C6 alkyl or CN, and the alkyl group is unsubstituted or substituted with one or more groups independently selected from the following group: C1-C6 alkyl, C1-C6 alkoxy, C3-C8 cycloalkyl, 3-8 membered heterocyclic group, C1-C6 heteroalkyl, C2-C6 alkenyl, C2-C6 alkynyl, nitro, Halogen, cyano, hydroxyl, carboxyl, ester, amide, sulfonamide, carbonyl, mercapto, amine, dimethyl phosphoroxy.
  • B is independently CN.
  • R 2 is selected from the following group: hydrogen, C1- C6 alkyl, C3-C8 cycloalkyl; wherein, the alkyl and cycloalkyl are unsubstituted or substituted by one or more of the following groups: C1-C6 alkyl, CHF 2 , CF 3 , Halogen, cyano, hydroxyl, carboxyl, ester, amide, sulfonamide, carbonyl, mercapto, amine, dimethyl phosphoroxy.
  • R 3 and R 3 ′ are each independently selected from The following group: hydrogen, halogen, cyano, hydroxyl, CHF 2 , CF 3 , C1-C6 alkyl, C1-C6 alkoxy, C3-C8 cycloalkyl, C1-C6 heteroalkyl;
  • R 3 and R 3 together with the C atom to which they are connected form a C3-C8 cycloalkyl, 3-8 membered heterocyclic group, or carbonyl group;
  • alkyl group, alkoxy group, cycloalkyl group, heteroalkyl group and heterocyclic group are unsubstituted or substituted by one or more groups independently selected from the following group: C1-C6 alkyl group, CHF 2 , CF 3 , halogen, cyano, hydroxyl, carboxyl, ester, amide, sulfonamide, carbonyl, mercapto, amine, dimethylphosphoroxy.
  • R 3 and R 3 ′ are the same or different, and are each independently selected from the following group: hydrogen, halogen, cyano, hydroxyl, C1-C6 alkyl, C3-C6 cycloalkyl,
  • R 3 and R 3 ' together with the C atom to which they are attached form a C3-C6 cycloalkyl group or a carbonyl group;
  • alkyl group and cycloalkyl group are unsubstituted or substituted by one or more groups independently selected from the following group: C1-C6 alkyl, CHF 2 , CF 3 , halogen, cyano, hydroxyl, carboxyl , Ester group, amide group, sulfonamide group, carbonyl group, mercapto group, amine group, dimethyl phosphoroxy group.
  • R 1 is independently selected from the following group: -OR 5 , -OC(O)R 5 , -N(R 5 )(R 6 ), -C(O)-N(R 5 )(R 6 ), -N(R 5 )-C(O)R 6 , -N(R 5 )-C(O)OR 6 , -N(R 5 )S(O) 2 R 6 ; wherein R 5 and R 6 are each independently selected from the following group of substituted or unsubstituted groups :Hydrogen, C1-C6 alkyl, C3-C8 cycloalkyl, 3-8 membered heterocyclic group, C6-C10 aryl, 5-10 membered heteroaryl; wherein, the substitution means to be independently selected from One or more group substitutions: C1-C6
  • R 1 is independently -OR 5 , wherein R 5 is independently selected from the following group of substituted or unsubstituted groups: C1-C6 alkyl, C3-C8 cycloalkyl, 3-8 Membered heterocyclic group, C6-C10 aryl group, 5-10 membered heteroaryl group; wherein, the substitution refers to substitution by one or more groups independently selected from the following group: C1-C6 alkyl, cyano, Halogen, hydroxy, C3-C8 cycloalkyl, 3-8 membered heterocyclic group, C6-C10 aryl, 5-10 membered heteroaryl.
  • R 1 is independently selected from the following group: C3-C8 cycloalkyl, 3-8 membered heterocyclic group, C6-C14 aryl, 5-14 membered heteroaryl, and the ring Alkyl, aryl, heteroaryl, and heterocyclyl are unsubstituted or substituted with one or more groups independently selected from the following group: C1-C6 alkyl, C1-C6 alkoxy, C3-C8 cycloalkane Group, 3-8 membered heterocyclic group, C1-C6 heteroalkyl, C2-C6 alkenyl, C2-C6 alkynyl, nitro, halogen, cyano, hydroxyl, carboxy, ester, amide, sulfonamide , Carbonyl, mercapto, amine, dimethylphosphoroxy.
  • A is independently selected from the following group: C6-C10 aromatic Group or 5-10 membered heteroaryl group, wherein the aryl group and heteroaryl group are unsubstituted or substituted by one or more groups independently selected from the following group: C1-C6 alkyl, C1-C6 alkoxy Group, C3-C8 cycloalkyl, 3-8 membered heterocyclic group, C1-C6 heteroalkyl, C2-C6 alkenyl, C2-C6 alkynyl, nitro, halogen, cyano, hydroxyl, carboxyl, ester group , Amido, sulfonamide, sulfhydryl, amine, dimethylphosphoroxy.
  • R 4 is independently selected from the following group: hydrogen, C1-C6 alkyl, C3-C8 cycloalkyl, C1-C6 heteroalkyl, C6-C10 aryl, 5-10 membered heteroaryl, 3-8 membered heterocyclyl, -OR 5 , -OC(O )R 5 , -N(R 5 )(R 6 ), -C(O)-N(R 5 )(R 6 ), -N(R 5 )-C(O)R 6 , -N(R 5 )-C(O)OR 6 ⁇ -N(R 5 )S(O) 2 R 6 ;
  • R 5 and R 6 are each independently a substituted or unsubstituted group selected from the following group: hydrogen, C1-C6 alkyl, C3-C8 cycloalkyl, 3-8 membered heterocyclic group, C6-C10 Aryl, 5-10 membered heteroaryl; wherein, the substitution refers to substitution by one or more groups independently selected from the following group: C1-C6 alkyl, cyano, halogen, hydroxyl, C3-C8 ring Alkyl group, 3-8 membered heterocyclic group, C6-C10 aryl group, 5-10 membered heteroaryl group;
  • alkyl, cycloalkyl, heteroalkyl, heterocyclyl, aryl, and heteroaryl groups are unsubstituted or substituted with one or more groups independently selected from the following group: C1- C6 alkyl, CHF 2 , CF 3 , halogen, cyano, hydroxyl, carboxyl, ester, amide, sulfonamide, carbonyl, mercapto, amine, dimethylphosphoroxy.
  • each R 4 is independently selected from the following group: hydrogen, C1-C6 alkyl, C3-C8 cycloalkyl, 3-8 membered heterocyclic group, C6-C10 aryl, 5-10 membered Heteroaryl; the alkyl, cycloalkyl, heterocyclyl, aryl, and heteroaryl groups can be optionally and independently substituted by one or more of the following groups: C1-C6 alkyl, CHF 2 , CF 3 , halogen, cyano, hydroxyl, carboxyl, ester, amide, sulfonamide, carbonyl, mercapto, amine, dimethylphosphoroxy.
  • the compound of formula I or a pharmaceutically acceptable salt, hydrate, solvate, stereoisomer, isotopic compound or prodrug thereof has one or more selected from the group feature:
  • R 1 is selected from the following group: -OR 5 , -OC(O)R 5 , -N(R 5 )(R 6 ), -C(O)-N(R 5 )(R 6 ), -N(R 5 ) -C(O)R 6 , -N(R 5 )-C(O)OR 6 , -N(R 5 )S(O) 2 R 6 , preferably -OR 5 ;
  • B is independently selected from the following group: hydrogen, halogen, C1-C6 alkyl or CN, preferably CN;
  • X 1 , X 2 and X 3 are each independently CH or N;
  • R 2 is selected from the following group: hydrogen, C1-C6 alkyl, C3-C8 cycloalkyl, preferably hydrogen, C1-C6 alkyl, more preferably C1-C6 alkyl;
  • R 3 and R 3 ' are each independently selected from the group consisting of hydrogen, halogen, cyano, hydroxyl, CHF 2 , CF 3 , C1-C6 alkyl, C1-C6 alkoxy, C3-C8 cycloalkyl, C1 -C6 heteroalkyl, preferably hydrogen or C1-C6 alkyl;
  • R 3 and R 3 together with the C atom to which they are connected form a C3-C8 cycloalkyl, 3-8 membered heterocyclic group, or carbonyl group;
  • A is independently selected from the following group: C6-C10 aryl or 5-10 membered heteroaryl;
  • Each R 4 is independently selected from the following group: hydrogen, C1-C6 alkyl, C3-C8 cycloalkyl, C1-C6 heteroalkyl, C6-C10 aryl, 5-10 membered heteroaryl, 3-8 membered Heterocyclic group, -OR 5 , -OC(O)R 5 , -N(R 5 )(R 6 ), -C(O)-N(R 5 )(R 6 ), -N(R 5 )- C(O)R 6 , -N(R 5 )-C(O)OR 6 , -N(R 5 )S(O) 2 R 6 , preferably C3-C8 cycloalkyl, C6-C10 aryl , 5-10 membered heteroaryl, 3-8 membered heterocyclic group;
  • R 5 and R 6 are each independently a substituted or unsubstituted group selected from the following group: hydrogen, C1-C6 alkyl, C3-C8 cycloalkyl, 3-8 membered heterocyclic group, C6-C10 aromatic Group, 5-10 membered heteroaryl; wherein, the substitution refers to substitution by one or more groups selected from the following group: C1-C6 alkyl, cyano, halogen, hydroxy, C3-C8 cycloalkyl , 3-8 membered heterocyclic group, C6-C10 aryl group, 5-10 membered heteroaryl group;
  • the aforementioned alkyl, cycloalkyl, heteroalkyl, aryl, heteroaryl, and heterocyclic groups can be optionally and independently substituted by one or more of the following groups: C1-C6 alkyl, C1-C6 alkoxy, C3-C8 cycloalkyl, 3-8 membered heterocyclic group, C1-C6 heteroalkyl, C2-C6 alkenyl, C2-C6 alkynyl, nitro, halogen, cyano, hydroxyl , Carboxyl, ester, amide, sulfonamide, carbonyl, mercapto, amine, dimethylphosphoroxy.
  • the compound of formula I has the structure shown in the following formula (II):
  • X is selected from the following group: O, S, NR 8 ;
  • n 0, 1, 2 or 3;
  • R 7 and R 8 are each a substituted or unsubstituted group selected from the following group: H, C1-C6 alkyl, C3-C8 cycloalkyl, 3-8 membered monoheterocyclic group, C6-C10 aryl, 5-10 membered heteroaryl, C5-C12 fused bicyclic ring, 5-12 membered fused heterobicyclic ring, C5-C12 membered spiro bicyclic ring or 5-12 membered spiro heterobicyclic ring;
  • substitution refers to substitution by one or more groups independently selected from the following group: C1-C6 alkyl, cyano, halogen, hydroxy, C3-C8 cycloalkyl, 3-8 membered monoheterocyclic group , C6-C10 aryl, 5-10 membered heteroaryl, C5-C12 fused bicyclic ring, 5-12 membered fused heterobicyclic ring, C5-C12 membered spiro bicyclic ring or 5-12 membered spiro heterobicyclic ring;
  • X is O.
  • R 7 is a C1-C6 alkyl group, and the alkyl group may be optionally substituted with one or more groups independently selected from the following group: C1-C6 alkyl group, cyano group, halogen, Hydroxy.
  • the compound of formula I has the structure shown in the following formula (III):
  • the compound of formula I has the structure shown in the following formula (IV):
  • R 1 is selected from the following group: -OR 5 , -N(R 5 )(R 6 ), C3-C8 cycloalkyl, 3-8 membered heterocyclyl, C6-C14 aryl, 5-14 membered hetero Aryl;
  • R 2 is selected from the group consisting of hydrogen, C1-C6 alkyl
  • R 3 is selected from the group consisting of hydrogen, halogen, cyano, hydroxyl, CHF 2 , CF 3 , C1-C6 alkyl, C1-C6 alkoxy;
  • R 4 is independently selected from the group consisting of C3-C8 cycloalkyl, C6-C10 aryl, 5-10 membered heteroaryl, 3-8 membered heterocyclic, -OR 5 , -OC(O)R 5 , -N(R 5 )(R 6 ), -C(O)-N(R 5 )(R 6 ), -N(R 5 )-C(O)R 6 , -N(R 5 )-C( O)OR 6 , -N(R 5 )S(O) 2 R 6 ;
  • R 5 and R 6 are each independently a substituted or unsubstituted group selected from the following group: hydrogen, C1-C6 alkyl, C3-C8 cycloalkyl, 3-8 membered heterocyclic group, C6-C10 Aryl, 5-10 membered heteroaryl; wherein, the substitution refers to substitution by one or more groups independently selected from the following group: C1-C6 alkyl, cyano, halogen, hydroxyl, C3-C8 ring Alkyl group, 3-8 membered heterocyclic group, C6-C10 aryl group, 5-10 membered heteroaryl group;
  • alkyl group, cycloalkyl group, aryl group, heteroaryl group, heterocyclic group are unsubstituted or substituted by one or more groups independently selected from the following group: C1-C6 alkyl, C1-C6 alkane Oxy, C3-C8 cycloalkyl, 3-8 membered heterocyclic group, C1-C6 heteroalkyl, C2-C6 alkenyl, C2-C6 alkynyl, nitro, halogen, cyano, hydroxyl, carboxyl, ester Group, amide group, sulfonamide group, carbonyl group, sulfhydryl group, amine group, dimethylphosphoroxy group.
  • the prodrug of the compound or a pharmaceutically acceptable salt thereof has a structure represented by formula (V):
  • R 8 is selected from the following group:
  • R 9 and R 10 are each independently selected from: substituted or unsubstituted C1-C6 alkyl, hydroxyl, OM; M is Na or K;
  • R 11 and R 12 are each independently selected from: substituted or unsubstituted C1-C6 alkyl, substituted or unsubstituted C6-C10 aryl, substituted or unsubstituted 5-10 membered heteroaryl;
  • R 13 and R 14 are each independently selected from: substituted or unsubstituted C1-C6 alkyl, substituted or unsubstituted C6-C10 aryl, substituted or unsubstituted 5-10 membered heteroaryl;
  • p 1, 2, 3;
  • substitution refers to substitution by one or more groups independently selected from the following group: C1-C6 alkyl, C1-C6 alkoxy, C3-C8 cycloalkyl, 3-8 membered heterocyclic group, C1-C6 heteroalkyl, C2-C6 alkenyl, C2-C6 alkynyl, nitro, halogen, cyano, hydroxyl, carboxy, ester, amide, sulfonamide, carbonyl, mercapto, amine;
  • R 1 , R 2 , R 3 and R 4 are as described above.
  • R 4 is a substituted or unsubstituted 5-6 membered heteroaryl group, preferably R 4 is a substituted or unsubstituted group of the following group: pyrrolyl, pyrazolyl, imidazolyl, oxazole Group, isoxazolyl, thiazolyl, thiadiazolyl, isothiazolyl, furanyl, pyridyl, pyrazinyl, pyrimidinyl, pyridazinyl, triazinyl, triazolyl and tetrazolyl ;
  • the substitution refers to substitution by one or more groups independently selected from the following group: C1-C6 alkyl, CHF 2 , CF 3 , halogen (preferably F), cyano, hydroxyl, carboxyl, ester group , Amide group, sulfonamide group, carbonyl group, mercapto group, amine group, dimethylphosphoroxy group.
  • R 2 and R 3 are each independently selected from the following group: hydrogen, C1-C6 alkyl.
  • X 1 , X 2 , X 3 , R 1 , R 2 , R 3 , R 3 ', R 4 , n, p, A, X, R 7 , R 8 and B are examples The specific group corresponding to each specific compound.
  • the compound of formula I or a pharmaceutically acceptable salt, hydrate, solvate, stereoisomer, isotopic compound or prodrug thereof is selected from the following group:
  • the second aspect of the present invention provides a pharmaceutical composition, which comprises the compound described in the first aspect or a pharmaceutically acceptable salt, hydrate, solvate, isotopic compound or prodrug thereof; and a pharmaceutical carrier or diluent .
  • the pharmaceutical composition further includes a second cancer therapeutic agent.
  • the second cancer therapeutic agent includes radioactive agents, cytotoxic agents, kinase inhibitors, immunotargeting inhibitors and angiogenesis inhibitors.
  • the second cancer therapeutic agent is one or more selected from the following group:
  • PD-1 inhibitors such as nivolumab, pembrolizumab, JS-001, SHR-120, BGB-A317, IBI-308, GLS-010, GB-226, STW204, HX008, HLX10, BAT1306, AK105 , LZM 009 or biological analogues of the above drugs, etc.
  • PD-L1 inhibitors such as Devaluzumab, Atezolizumab, CS1001, KN035, HLX20, SHR-1316, BGB-A333, JS003, CS1003, KL-A167, F520, GR1405, MSB2311 or biological analogues of the above drugs, etc.
  • CD20 antibodies such as rituximab, obin utuzumab, ofatumumab, tositumomab, Titumomab, etc.
  • CD47 antibodies such as Hu5F9-G4, CC-90002, TTI-6
  • the third aspect of the present invention provides a use of the compound as described in the first aspect or the pharmaceutical composition as described in the second aspect in the preparation of a medicament for inhibiting RET kinase activity in a cell or a subject.
  • the drug is used to treat the following disorders related to RET: disorders of the expression or activity or level of RET gene, RET kinase, or any one of them.
  • disorders of the expression or activity or level of RET gene RET kinase, or any one of them.
  • the RET gene expression or activity or level imbalance is caused by RET gene mutations (such as point mutations and gene fusion).
  • RET-related diseases refer to disorders related to the expression or activity or level of RET gene, RET kinase (also known as RET kinase protein) or any of them (for example, one or more) (for example, as described herein). Any type of disorder in the expression or activity or level of the RET gene, RET kinase, RET kinase domain, or any one thereof) is related to or has a disease or disorder with the disorder.
  • the disease is selected from the group consisting of irritable bowel syndrome, eye disease, rheumatoid arthritis, pulmonary fibrosis, liver fibrosis, tumors, and the tumors include: bladder cancer, ovarian cancer, Adenocarcinoma, stomach cancer, pancreatic cancer, prostate cancer, colon cancer, lung cancer, bone cancer, brain cancer, neurocytoma, rectal cancer, colon cancer, familial adenomatous polyposis cancer, hereditary non-polyposis colorectal cancer, esophagus Cancer, lip cancer, laryngeal cancer, hypopharyngeal cancer, tongue cancer, salivary gland cancer, gastric cancer, adenocarcinoma, medullary thyroid cancer, papillary thyroid cancer, kidney cancer, renal parenchymal cancer, ovarian cancer, cervical cancer, uterine body cancer, Endometrial cancer, choriocarcinoma, pancreatic cancer, prostate cancer, testicular cancer, urinary cancer, melanom
  • the expression or activity or level of RET gene, RET kinase, or any one of them is dysregulated by one or more point mutations in the RET gene, and one or more points in the RET gene Mutations cause the translation of RET proteins with one or more amino acid substitutions at one or more including but not limited to the following amino acid positions: 378, 385, 618, 620, 630, 631, 633, 804, 810, 883, 918.
  • the expression or activity or level of the RET gene is unregulated as a RET gene fusion
  • the RET gene fusion includes but is not limited to the following: KIF5B-RET, CDC6-RET, NCOA4-RET, CLIP1-RET, ERC1-RET, RUFY3-RET, TFG-RET, PRKAR1A-RET, KTN1-RET.
  • RET-related diseases include, but are not limited to, tumors and intestinal irritability syndrome.
  • RET-related tumors include but are not limited to: lung cancer, papillary thyroid cancer, medullary thyroid cancer, differentiated thyroid cancer, recurrent thyroid cancer, refractory differentiated thyroid cancer, type 2A or 2B multiple Endocrine tumors (MEN2A or MEN2B, respectively), pheochromocytoma, parathyroid hyperplasia, breast cancer, colorectal cancer, papillary renal cell carcinoma, gangliomatosis of the gastrointestinal mucosa, and cervical cancer.
  • MEN2A or MEN2B multiple Endocrine tumors
  • the lung cancer is RET fusion lung cancer or the cancer is medullary thyroid cancer.
  • the fourth aspect of the present invention provides a method for the treatment of RET-related diseases, the method comprising administering to a subject identified or diagnosed as having RET-related diseases a therapeutically effective amount of the compound of the first aspect or its pharmaceutically acceptable Accepted salt or solvate, or pharmaceutical composition as described in the second aspect.
  • the present invention provides a method for inhibiting RET kinase activity in a cell or a subject, the method comprising contacting the cell or administering to the subject the The step of the compound or the pharmaceutical composition of the second aspect.
  • the cell is a mammalian cell.
  • the subject is a mammal, preferably a human.
  • the inventors unexpectedly discovered a class of compounds that have good RET kinase inhibitory activity and at the same time have good selectivity for VEGFR2 kinase.
  • the compound has excellent inhibitory activity on RET kinase-sensitive cells, and has better pharmacodynamic/pharmacokinetic properties.
  • the present invention has been completed.
  • substituent When a substituent is described by a conventional chemical formula written from left to right, the substituent also includes the chemically equivalent substituent obtained when the structural formula is written from right to left.
  • substituent -CH 2 O- is equivalent to -OCH 2 -.
  • alkyl by itself or as part of another substituent refers to a straight or branched chain hydrocarbon group having the specified number of carbon atoms (ie, C1-C6 means containing 1, 2, 3, 4, 5 or 6 Carbon atoms).
  • alkyl groups include, but are not limited to, methyl, ethyl, n-propyl, isopropyl, n-butyl, tert-butyl, isobutyl, sec-butyl, n-pentyl, n-hexyl and similar alkyl groups.
  • an alkyl group is also intended to include a substituted alkyl group, that is, one or more positions in the alkyl group are substituted, especially 1-4 substituents, which can be substituted at any position.
  • alkoxy refers to a linear or branched or cyclic alkyl group connected by an ether oxygen, the free valence of which is derived from the ether oxygen.
  • the alkoxy group is preferably a C1-C6 alkoxy group, and more preferably a C1-C3 alkoxy group.
  • Representative examples include (but are not limited to): methoxy, ethoxy, propoxy, isopropoxy, butoxy and the like.
  • it is a C1-C3 alkoxy group.
  • heteroalkyl refers to a group in which carbon atoms in an alkyl group are substituted with 1, 2, 3 heteroatoms selected from N, O, S, Si or P, and wherein nitrogen and sulfur atoms are optionally Is oxidized
  • C1-C6 heteroalkyl refers to containing 1-6 (ie 1, 2, 3, 4, 5 or 6) carbon atoms, and 1, 2, 3 selected from N, O , S or P heteroatom groups, representative examples include (but are not limited to): CH 3 OCH 2 -, CH 3 SCH 2 -, CH 3 CH 2 OCH 2 -, etc.
  • cycloalkyl refers to a cyclic alkyl group that includes a saturated monocyclic ring (e.g., C3-C8), a bicyclic ring (e.g., a C5-C12 fused bicyclic ring, a C5-C12 membered spiro bicyclic ring) or a polycyclic ring.
  • C3-C8 refers to cyclic alkyl groups including 3, 4, 5, 6, 7, or 8 carbon atoms.
  • Representative cycloalkyl groups of the present invention include but are not limited to: cyclopropyl, cyclobutyl, cyclopentyl, cyclohexyl, norbornanyl, Wait.
  • substituted or unsubstituted cycloalkyl groups such as branched cycloalkyl groups (such as 1-methylcyclopropyl and 2-methylcyclopropyl), are all included in the definition of "cycloalkyl".
  • heterocycle generally refers to a stable monocyclic ring (e.g., 3-8 membered, ie 3, 4, 5, 6, 7 or 8 membered) Or two-ring (such as 5-12 yuan, that is, 5-membered, 6-membered, 7-membered, 8-membered, 9-membered, 10-membered, 11-membered, or 12-membered) or multi-membered ring (such as 7-14-membered, that is 7-membered, 8-membered, 9-membered, 10-membered, 11-membered, 12-membered, 13-membered or 14) heterocyclic ring, including fused ring, spiro ring and/or bridged ring structure, which is saturated, partially unsaturated, and contains carbon Atoms and 1, 2, 3 or 4 heteroatoms independently selected from N, O and S.
  • heterocycle may be substituted or unsubstituted.
  • the nitrogen and sulfur heteroatoms as ring atoms may optionally be oxidized.
  • the nitrogen atom is substituted or unsubstituted (ie N or NR, where R is H or another substituent if defined).
  • the heterocyclic ring can be attached to its pendant group at any heteroatom or carbon atom that results in a stable structure. If the resulting compound is stable, the heterocyclic group described herein may be substituted on a carbon or nitrogen atom.
  • the nitrogen in the heterocyclic ring can optionally be quaternized.
  • the total number of S and O atoms in the heterocycle exceeds 1, then these heteroatoms are not adjacent to each other.
  • the total number of S and O atoms in the heterocyclic ring is not more than one.
  • the heterocyclic group can be attached to any heteroatom or carbon atom residue of the ring or ring system molecule.
  • heterocycles include, but are not limited to, typical monocyclic heterocyclyls including, but not limited to, azetidinyl, pyrrolidinyl, oxetanyl, pyrazolinyl, imidazolinyl, imidazolidinyl , Oxazolidinyl, isoxazolidinyl, thiazolidinyl, isothiazolidinyl, tetrahydrofuranyl, piperidinyl, piperazinyl, 2-oxopiperazinyl, 2-oxopiperidinyl, 2- Oxopyrrolidinyl, hexahydroazepinyl, 4-piperidinone, tetrahydropyranyl, morpholinyl, thiomorpholinyl, thiomorpholinyl sulfoxide, thiomorpholinyl sulfone , 1,3-dioxanyl and tetrahydro-1,1-dioxy
  • Polycyclic heterocyclic groups include spiro rings (e.g. 5-12 members, preferably 7-9 members), fused rings (e.g. 5-12 members, preferably 8-10 members) and bridged heterocyclic groups; spiro rings and Examples of fused rings include, but are not limited to Etc., the heterocyclic group of the spiro ring, fused ring and bridged ring involved is optionally connected to other groups through a single bond, or through any two or more atoms on the ring and other cycloalkyl groups, The heterocyclic group, the aryl group and the heteroaryl group are further connected in a ring.
  • a preferred type of heterocyclic group refers to the designated number of ring vertices (or members) and one to five heteroatoms selected from N, O, S or P to replace carbon atoms in the ring skeleton, and wherein nitrogen and sulfur
  • the cycloheteroalkyl group is usually a 3-12 membered ring.
  • a 3-8 membered ring such as a 3-8 membered monocyclic ring, a bicyclic ring (5-12 membered fused heterobicyclic ring, 5-12 membered spiro heterobicyclic ring ) Or multi-ring system (8-16 membered tricyclic ring).
  • cycloheteroalkyl groups include but are not limited to: pyrrolidinyl, imidazolidinyl, pyrazolidinyl, butyrolactamyl, valerolactam, imidazolidinone, hydantoin, dioxolane Alkyl, phthalimido, piperidinyl, 1,4-dioxanyl, morpholinyl, thiomorpholinyl, thiomorpholine-S-oxide, thiomorpholine -S,S-oxide, piperazinyl, piperanyl, pyridonyl, 3-pyrrolinyl, thiopyranyl, pyranonyl, tetrahydrofuranyl, tetrahydrothienyl, quinuclidine, Etc. and its analogues.
  • alkenyl means a straight or branched hydrocarbon group containing one or more double bonds and usually having a length of 2 to 20 carbon atoms (or C2-C8).
  • C2-C6 alkenyl contains 2, 3, 4, 5 or 6 carbon atoms.
  • Alkenyl includes, but is not limited to, for example, ethenyl, propenyl, butenyl, 1-methyl-2-buten-1-yl and the like.
  • the alkenyl group includes a substituted alkenyl group.
  • alkynyl refers to a straight or branched hydrocarbon group containing one or more triple bonds and usually having a length of 2 to 20 carbon atoms (or C2-C8).
  • C2-6 alkynyl refers to a linear or branched alkynyl group having 2, 3, 4, 5 or 6 carbon atoms, including but not limited to ethynyl, propynyl or similar groups .
  • alkynyl groups also include substituted alkynyl groups, and the substituents can be halogenated, hydroxy, cyano, nitro and the like.
  • aryl alone or as part of a larger part such as “aralkyl”, “aralkoxy” or “aryloxyalkyl”, refers to a monocyclic ring having a total of 5 to 15 ring members , Bicyclic or tricyclic ring system (preferably 6-10 membered aromatic ring), wherein at least one ring in the system is aromatic and wherein each ring in the system contains 3 to 7 ring members.
  • Aryl may be substituted or unsubstituted.
  • aryl refers to an aromatic ring system, which includes, but is not limited to, phenyl, biphenyl, indanyl, 1-naphthyl, 2-naphthyl, and tetrahydronaphthalene base.
  • the aryl group may be fused to a heteroaryl, heterocyclic or cycloalkyl ring, wherein the ring connected to the parent structure is an aryl ring.
  • the fused aryl group may be connected to another group at a suitable position on the cycloalkyl ring or aromatic ring.
  • the connecting line drawn from the ring system indicates that the bond can be connected to any suitable ring atom.
  • Aryl groups can be optionally substituted or unsubstituted.
  • heteroaryl refers to a heteroaromatic system containing 1-4 heteroatoms and 5-14 ring atoms, wherein the heteroatoms are selected from oxygen, nitrogen and sulfur.
  • the heteroaryl group is preferably a 5- to 10-membered ring, more preferably 5-membered or 6-membered, such as pyrrolyl, pyrazolyl, imidazolyl, oxazolyl, isoxazolyl, thiazolyl, thiadiazolyl, isothiazolyl , Furyl, pyridinyl, pyrazinyl, pyrimidinyl, pyridazinyl, triazinyl, triazole and tetrazolyl, etc.
  • Heteroaryl may be substituted or unsubstituted.
  • the substituent is preferably one or more of the following groups, which are independently selected from alkyl, deuterated alkyl, haloalkyl, alkoxy , Haloalkoxy, alkenyl, alkynyl, alkylthio, alkylamino, halogen, amino, nitro, hydroxyl, mercapto, cyano, cycloalkyl, heterocyclic, aryl, heteroaryl, cycloalkane Sulfur group, oxo group, carboxyl group and carboxylate group.
  • amino group refers to the structure -N(R)(R'), and R and R'can independently represent hydrogen, alkyl or substituted alkyl (such as C1-C6 alkyl), ring Alkyl or substituted cycloalkyl, aryl or substituted aryl, heterocycle or substituted heterocycle are as defined above.
  • R and R' may be the same or different in the dialkylamine segment.
  • the amine group is an amino group (NH 2 ).
  • ester group refers to a structure -C(O)-OR or RC(O)-O-, where R independently represents hydrogen, alkyl, cycloalkyl, aryl, heteroaryl , Heterocyclic group, as defined above.
  • amide group refers to a group with the structure -CONRR', wherein R and R'can independently represent hydrogen, alkyl or substituted alkyl, cycloalkyl or substituted cycloalkane Group, aryl or substituted aryl, heterocycle or substituted heterocycle, as defined above. R and R'may be the same or different in the dialkylamine segment.
  • sulfonamide group refers to a group with the structure -SO 2 NRR', where R and R'can independently represent hydrogen, alkyl or substituted alkyl, cycloalkyl or substituted Cycloalkyl, aryl or substituted aryl, heterocycle or substituted heterocycle are as defined above. R and R'may be the same or different in the dialkylamine segment.
  • a substituent is a non-terminal substituent, it is a subunit of the corresponding group, for example, an alkyl group corresponds to an alkylene group, a cycloalkyl group corresponds to a cycloalkylene group, a heterocyclic group corresponds to a heterocyclylene group, and an alkoxy group corresponds to Alkyleneoxy and so on.
  • substituted means that one or more hydrogen atoms on a specific group are replaced by a specific substituent.
  • the specific substituents are the substituents correspondingly described in the foregoing, or the substituents appearing in each embodiment.
  • a substituted group may have a substituent selected from a specific group at any substitutable position of the group, and the substituent may be the same or different in each position, namely The substitutions are independent of each other.
  • substituents contemplated by the present invention are those that are stable or chemically achievable.
  • substituents such as alkyl, cycloalkyl, alkenyl, cycloalkenyl, alkynyl, heterocyclic or aromatic ring may be optionally substituted.
  • the substituents such as (but not limited to): halogen, hydroxyl, cyano, carboxy (-COOH), C1-C6 alkyl, C2-C6 alkenyl, C2-C6 alkynyl, C3-C8 cycloalkyl, 3-12 membered heterocyclic group, aryl group, heteroaryl group, C1-C8 aldehyde group, C2-C10 acyl group, C2-C10 ester group, amino group, C1-C6 alkoxy group, C1-C10 sulfonyl group, and C1 -C6 urea group and so on.
  • halo or halogen includes fluorine, chlorine, bromine and iodine.
  • cyano refers to -CN.
  • hydroxyl refers to -OH.
  • the term "plurality” means 2, 3, 4, 5 independently.
  • the term "deregulation of the expression or activity or level of RET gene, RET kinase or any one of them” refers to gene mutation or caused by gene mutation, including point mutation and gene fusion.
  • the expression or activity or level of RET gene, RET protein, or any one of them may be a mutation in the RET gene encoding the RET protein, which has constitutive activity or is compared to the RET gene that does not include the mutation.
  • the protein has increased activity.
  • the expression or activity or level of RET gene, RET protein, or any one of these disorders may be the result of a gene or chromosomal translocation that causes the first part of RET containing a functional kinase domain and a partner. Expression of the fusion protein of the second part of the protein (ie, non-RET).
  • the terms "compounds of the present invention” or “active ingredients of the present invention” are used interchangeably and refer to compounds of formula I, or pharmaceutically acceptable salts, hydrates, solvates, isotopic compounds (such as deuterated Compounds) or prodrugs (including but not limited to esters, amides, phosphates, sodium phosphates, amino acid esters, etc.). The term also includes racemates and optical isomers.
  • the compound of formula (I) has the following structure:
  • X 1 , X 2 , X 3 , R 1 , R 2 , R 3 , R 3 ′, R 4 , n, A, and B are as described above.
  • the compound of formula I has the structure shown in formula (II)
  • R 2 , R 3 , R 4 , R 7 , m, n, A, B and X are as defined above.
  • the compound of formula I has the structure shown in formula (III)
  • the compound of formula I has the structure shown in the following formula (IV):
  • R 1 is selected from the following group: -OR 5 , -N(R 5 )(R 6 ), C3-C8 cycloalkyl, 3-8 membered heterocyclyl, C6-C14 aryl, 5-14 membered hetero Aryl;
  • R 2 is selected from the group consisting of hydrogen, C1-C6 alkyl
  • R 3 is selected from the group consisting of hydrogen, halogen, cyano, hydroxyl, CHF 2 , CF 3 , C1-C6 alkyl, C1-C6 alkoxy;
  • R 4 is independently selected from the group consisting of C3-C8 cycloalkyl, C6-C10 aryl, 5-10 membered heteroaryl, 3-8 membered heterocyclic, -OR 5 , -OC(O)R 5 , -N(R 5 )(R 6 ), -C(O)-N(R 5 )(R 6 ), -N(R 5 )-C(O)R 6 , -N(R 5 )-C( O)OR 6 , -N(R 5 )S(O) 2 R 6 ;
  • R 5 and R 6 are each independently a substituted or unsubstituted group selected from the following group: hydrogen, C1-C6 alkyl, C3-C8 cycloalkyl, 3-8 membered heterocyclic group, C6-C10 Aryl, 5-10 membered heteroaryl; wherein, the substitution refers to substitution by one or more groups selected from the following group: C1-C6 alkyl, cyano, halogen, hydroxy, C3-C8 cycloalkane Group, 3-8 membered heterocyclic group, C6-C10 aryl group, 5-10 membered heteroaryl group;
  • alkyl group, cycloalkyl group, aryl group, heteroaryl group, heterocyclic group are unsubstituted or substituted by one or more of the following groups: C1-C6 alkyl, C1-C6 alkoxy, C3-C8 cycloalkyl, 3-8 membered heterocyclic group, C1-C6 heteroalkyl, C2-C6 alkenyl, C2-C6 alkynyl, nitro, halogen, cyano, hydroxyl, carboxy, ester, amide Group, sulfonamide group, carbonyl group, mercapto group, amine group, dimethylphosphoroxy group.
  • the prodrug of the compound described in formula I-IV or a pharmaceutically acceptable salt thereof has a structure represented by formula (V):
  • R 8 is selected from the following group:
  • R 9 and R 10 are each independently selected from: substituted or unsubstituted C1-C6 alkyl, hydroxyl, OM; M is Na or K;
  • R 11 and R 12 are each independently selected from: substituted or unsubstituted C1-C6 alkyl, substituted or unsubstituted C6-C10 aryl, substituted or unsubstituted 5-10 membered heteroaryl;
  • R 13 and R 14 are each independently selected from: substituted or unsubstituted C1-C6 alkyl, substituted or unsubstituted C6-C10 aryl, substituted or unsubstituted 5-10 membered heteroaryl;
  • p 1, 2, 3;
  • substitution refers to substitution by one or more groups selected from the following group: C1-C6 alkyl, C1-C6 alkoxy, C3-C8 cycloalkyl, 3-8 membered heterocyclic group, C1 -C6 heteroalkyl, C2-C6 alkenyl, C2-C6 alkynyl, nitro, halogen, cyano, hydroxyl, carboxy, ester, amide, sulfonamide, carbonyl, mercapto, amine;
  • R 1 , R 2 , R 3 and R 4 are as described above.
  • R 4 is a substituted or unsubstituted 5-6 membered heteroaryl group, preferably R 4 is a substituted or unsubstituted group of the following group: pyrrolyl, pyrazolyl, imidazolyl , Oxazolyl, isoxazolyl, thiazolyl, thiadiazolyl, isothiazolyl, furanyl, pyridinyl, pyrazinyl, pyrimidinyl, pyridazinyl, triazinyl, triazole and tetrazolium Azazolyl; the substitution refers to substitution by one or more of the following groups: C1-C6 alkyl, CHF 2 , CF 3 , halogen (preferably F), cyano, hydroxyl, carboxyl, ester, Amido, sulfonamide, carbonyl, sulfhydryl, amine, dimethylphosphoroxy;
  • R 2 and R 3 are each independently selected from the group consisting of hydrogen, C1-C6 alkyl.
  • salts that may be formed by the compounds of the present invention also belong to the scope of the present invention. Unless otherwise specified, the compounds in the present invention are understood to include their salts.
  • the term "salt” as used herein refers to a salt formed into an acid or basic form with an inorganic or organic acid and a base.
  • the compound of the present invention contains a basic fragment, it includes but is not limited to pyridine or imidazole, and when it contains an acidic fragment, including but not limited to carboxylic acid, the zwitterion (“internal salt") that may be formed is contained in Within the scope of the term "salt”.
  • salts are preferred, although other salts are also useful, for example, for separation or purification steps in the preparation process.
  • the compound of the present invention may form a salt.
  • the compound I can be obtained by reacting with a certain amount of acid or base, such as an equivalent amount of acid or base, and salting out in the medium, or freeze-dried in an aqueous solution.
  • the basic fragments contained in the compounds of the present invention may form salts with organic or inorganic acids.
  • Typical acids that can form salts include acetate (such as acetic acid or trihaloacetic acid, such as trifluoroacetic acid), adipate, alginate, ascorbate, aspartate, and benzoate.
  • Benzene sulfonate hydrogen sulfate, borate, butyrate, citrate, camphor salt, camphor sulfonate, cyclopentane propionate, diglycolate, dodecyl sulfate, Ethane sulfonate, fumarate, glucoheptonate, glycerophosphate, hemisulfate, heptanoate, caproate, hydrochloride, hydrobromide, hydroiodide, isethionate (E.g. 2-hydroxyethanesulfonate), lactate, maleate, methanesulfonate, naphthalenesulfonate (e.g.
  • 2-naphthalenesulfonate nicotinate, nitrate, oxalic acid Salt, pectinate, persulfate, phenylpropionate (such as 3-phenylpropionate), phosphate, picrate, pivalate, propionate, salicylate, succinate, Sulfate (such as formed with sulfuric acid), sulfonate, tartrate, thiocyanate, toluenesulfonate such as p-toluenesulfonate, dodecanoate, etc.
  • the acidic fragments that some compounds of the present invention may contain, including but not limited to carboxylic acids, may form salts with various organic or inorganic bases.
  • Typical salts formed by bases include ammonium salts, alkali metal salts such as sodium, lithium, and potassium salts, alkaline earth metal salts such as calcium, magnesium salts, and salts formed by organic bases (such as organic amines), such as benzathine and bicyclohexylamine.
  • Hypamine (a salt formed with N,N-bis(dehydroabietyl)ethylenediamine), N-methyl-D-glucosamine, N-methyl-D-glucamide, tert-butyl Amines, and salts with amino acids such as arginine, lysine, etc.
  • Basic nitrogen-containing groups can be combined with halide quaternary ammonium salts, such as small molecule alkyl halides (such as methyl, ethyl, propyl and butyl chlorides, bromides and iodides), dialkyl sulfates (Eg, dimethyl sulfate, diethyl, dibutyl and dipentyl sulfate), long-chain halides (such as chlorides and bromides of decyl, dodecyl, tetradecyl and tetradecyl And iodides), aralkyl halides (such as benzyl and phenyl bromides) and so on.
  • alkyl halides such as methyl, ethyl, propyl and butyl chlorides, bromides and iodides
  • dialkyl sulfates Eg, dimethyl sulfate, diethyl, dibutyl and dipenty
  • prodrugs and solvates of the compounds of the present invention are also covered.
  • prodrug herein refers to a compound that undergoes metabolic or chemical transformation to produce the compound, salt, or solvate of the present invention when treating related diseases.
  • the compounds of the present invention include solvates, such as hydrates.
  • the compounds, salts or solvates of the present invention may exist in tautomeric forms (such as amides and imine ethers). All these tautomers are part of the invention.
  • All stereoisomers of compounds (for example, those asymmetric carbon atoms that may exist due to various substitutions), including their enantiomeric and diastereomeric forms, fall within the scope of the present invention.
  • the independent stereoisomers of the compound in the present invention may not coexist with other isomers (for example, as a pure or substantially pure optical isomer with special activity), or may be a mixture, such as Racemates, or mixtures with all other stereoisomers or part of them.
  • the chiral center of the present invention has two configurations, S or R, defined by the International Union of Theoretical and Applied Chemistry (IUPAC) in 1974.
  • racemic form can be resolved by physical methods, such as fractional crystallization, or separation of crystallization by derivatization into diastereomers, or separation by chiral column chromatography.
  • Individual optical isomers can be obtained from racemates by suitable methods, including but not limited to traditional methods, such as salt formation with an optically active acid and then recrystallization.
  • the weight content of the compound obtained by successive preparation, separation and purification is equal to or greater than 90%, for example, equal to or greater than 95%, equal to or greater than 99% ("very pure" compound), as described in the text Listed.
  • very pure compounds of the invention are also part of the invention.
  • All configuration isomers of the compounds of the present invention are within the scope of coverage, whether in mixture, pure or very pure form.
  • the definition of the compound of the present invention includes two olefin isomers, cis (Z) and trans (E), as well as cis and trans isomers of carbocyclic and heterocyclic rings.
  • Certain compounds of the present invention may exist in specific geometric or stereoisomeric forms.
  • the present invention covers all compounds, including their cis and trans isomers, R and S enantiomers, diastereomers, (D) isomers, (L) isomers, and exogenous Spin mixtures and other mixtures.
  • the asymmetric carbon atom may represent a substituent, such as an alkyl group. All isomers and their mixtures are included in the present invention.
  • the ratio of the mixture of isomers containing the isomers can be varied.
  • a mixture of only two isomers can have the following combinations: 50:50, 60:40, 70:30, 80:20, 90:10, 95:5, 96:4, 97:3, 98: 2,99:1, or 100:0, all ratios of isomers are within the scope of the present invention. Similar ratios, which are easily understood by those skilled in the art, and ratios that are mixtures of more complex isomers are also within the scope of the present invention.
  • the present invention also includes isotopically labeled compounds, which are equivalent to the original compounds disclosed herein. In practice, however, it usually occurs when one or more atoms are replaced by atoms whose atomic weight or mass number is different.
  • isotopes that can be classified as compounds of the present invention include hydrogen, carbon, nitrogen, oxygen, phosphorus, sulfur, fluorine, and chlorine isotopes, such as 2 H, 3 H, 13 C, 11 C, 14 C, 15 N, and 18 O, respectively. , 17 O, 31 P, 32 P, 35 S, 18 F and 36 Cl.
  • the compounds of the present invention or enantiomers, diastereomers, isomers, or pharmaceutically acceptable salts or solvates, which contain isotopes or other isotopic atoms of the above compounds are all within the scope of the present invention.
  • Certain isotope-labeled compounds in the present invention such as radioisotopes of 3 H and 14 C, are also among them, which are useful in tissue distribution experiments of drugs and substrates.
  • Isotopically-labeled compounds can be prepared by general methods, by replacing readily available isotope-labeled reagents with non-isotopic reagents, using the protocol disclosed in the example.
  • a specific enantiomer of the compound of the present invention can be prepared by asymmetric synthesis, or derivatized with a chiral adjuvant, separating the resulting diastereomeric mixture, and then removing the chiral adjuvant. Pure enantiomer.
  • a suitable optically active acid or base can be used to form a diastereomeric salt with it, and then through separation crystallization or chromatography, etc. After separation by conventional means, the pure enantiomers are obtained.
  • the compounds of the present invention can be combined with any number of substituents or functional groups to expand their scope of inclusion.
  • substituents or functional groups Generally, whether the term “substituted” appears before or after the term “optional”, the general formula including substituents in the formula of the present invention means that the substituents of the specified structure are substituted for hydrogen radicals. When a plurality of positions in a specific structure are substituted by a plurality of specific substituents, each position of the substituents may be the same or different.
  • substitution as used herein includes all permissible substitution of organic compounds.
  • the permissible substituents include acyclic, cyclic, branched unbranched, carbocyclic and heterocyclic, aromatic and non-aromatic organic compounds.
  • the heteroatom nitrogen may have a hydrogen substituent or any permitted organic compound as described above to supplement its valence.
  • the present invention is not intended to limit the permitted substitution of organic compounds in any way.
  • the present invention believes that the combination of substituents and variable groups is good in the treatment of diseases in the form of stable compounds.
  • the term "stable" refers to a compound that is stable and can be tested for a long enough time to maintain the structural integrity of the compound, preferably for a long enough time to be effective, and is used herein for the above purpose.
  • each reaction is usually carried out at 0 to 90°C under the protection of inert gas and in a suitable solvent, and the reaction time is usually 2-24 hours.
  • X 1 , X 2 , X 3 , A, B, R 1 , R 2 , R 3 , R 3 ′ and R 4 have the above-mentioned definitions;
  • the method includes the following steps:
  • X 1 , X 2 , X 3 , A, B, R 1 , R 2 , R 3 , R 3 ′ and R 4 have the above-mentioned definitions;
  • the method includes the following steps:
  • X 1 , X 2 , X 3 , A, B, R 1 , R 2 , R 3 , R 3 ′ and R 4 have the above-mentioned definitions;
  • the method includes the following steps:
  • Compound 3-4 and compound 3-5 react in the presence of basic conditions (e.g., cesium carbonate) and a catalyst (e.g., palladium catalyst) to obtain compound 3-6.
  • basic conditions e.g., cesium carbonate
  • a catalyst e.g., palladium catalyst
  • reaction solvent reaction temperature, reaction time, catalyst, etc.
  • reaction time reaction time, catalyst, etc.
  • the pharmaceutical composition of the present invention is used to prevent and/or treat the following diseases: inflammation, cancer, cardiovascular disease, infection, immune disease, and metabolic disease.
  • the compound of general formula (I) can be used in combination with other drugs known to treat or improve similar conditions.
  • the administration mode and dosage of the original drug can be kept unchanged, while the compound of formula I is administered at the same time or subsequently.
  • a pharmaceutical composition containing one or more known drugs and the compound of formula I can be preferably used.
  • the combination of drugs also includes taking the compound of formula I and one or more other known drugs in overlapping time periods.
  • the dose of the compound of formula I or the known drug may be lower than the dose of the compound used alone.
  • the drugs or active ingredients that can be used in combination with the compound of general formula (I) include but are not limited to: PD-1 inhibitors (such as nivolumab, pembrolizumab, JS-001, SHR-120, BGB-A317, IBI-308, GLS-010, GB-226, STW204, HX008, HLX10, BAT1306, AK105, LZM 009 or biological analogues of the above drugs, etc.), PD-L1 inhibitors (such as devaluzumab) , Atezolizumab, CS1001, KN035, HLX20, SHR-1316, BGB-A333, JS003, CS1003, KL-A167, F520, GR1405, MSB2311 or biological analogues of the above drugs, etc.), CD20 antibody (such as Li Tuximab, obin utuzumab, ofatumumab, tositumomab, ibitumo
  • Pabocinib Reboscine, Abemaciclib, Lerociclib, etc.
  • MEK inhibitors e.g. Simetinib (AZD6244), Trametinib (GSK1120212), PD0325901, U0126, AS-703026, PD184352 ( CI-1040), etc.
  • Akt inhibitors such as MK-2206, Ipatasertib, Capivasertib, Afuresertib, Uprosertib, etc.
  • mTOR inhibitors such as Vistusertib, etc.
  • SHP2 inhibitors such as RMC-4630, JAB-3068, TNO155, etc.
  • IGF-1R inhibitors such as Ceritinib, okatinib, linsitinib, BMS-754807, GSK1838705A, etc.
  • the dosage form of the pharmaceutical composition of the present invention includes (but is not limited to): injection, tablet, capsule, aerosol, suppository, film, dripping pill, external liniment, controlled release or sustained release or nano formulation.
  • the pharmaceutical composition of the present invention contains a safe and effective amount of the compound of the present invention or a pharmacologically acceptable salt thereof and a pharmacologically acceptable excipient or carrier.
  • the "safe and effective amount” refers to: the amount of the compound is sufficient to significantly improve the condition without causing serious side effects.
  • the pharmaceutical composition contains 1-2000 mg of the compound of the present invention/agent, more preferably, 10-1000 mg of the compound of the present invention/agent.
  • the "one dose" is a capsule or tablet.
  • “Pharmaceutically acceptable carrier” refers to: one or more compatible solid or liquid fillers or gel substances, which are suitable for human use, and must have sufficient purity and sufficiently low toxicity. "Compatibility” here means that the components in the composition can be blended with the compound of the present invention and between them without significantly reducing the efficacy of the compound.
  • pharmaceutically acceptable carriers include cellulose and its derivatives (such as sodium carboxymethyl cellulose, sodium ethyl cellulose, cellulose acetate, etc.), gelatin, talc, and solid lubricants (such as stearic acid).
  • Magnesium stearate calcium sulfate, vegetable oils (such as soybean oil, sesame oil, peanut oil, olive oil, etc.), polyols (such as propylene glycol, glycerin, mannitol, sorbitol, etc.), emulsifiers (such as Tween) ), wetting agents (such as sodium lauryl sulfate), coloring agents, flavoring agents, stabilizers, antioxidants, preservatives, pyrogen-free water, etc.
  • vegetable oils such as soybean oil, sesame oil, peanut oil, olive oil, etc.
  • polyols such as propylene glycol, glycerin, mannitol, sorbitol, etc.
  • emulsifiers such as Tween
  • wetting agents such as sodium lauryl sulfate
  • coloring agents such as sodium lauryl sulfate
  • flavoring agents such as pepperminophen, sorbitol, etc.
  • antioxidants
  • the method of administration of the compound or pharmaceutical composition of the present invention is not particularly limited.
  • Representative administration methods include (but are not limited to): oral, intratumoral, rectal, parenteral (intravenous, intramuscular, or subcutaneous), and topical administration .
  • Solid dosage forms for oral administration include capsules, tablets, pills, powders and granules.
  • the active compound is mixed with at least one conventional inert excipient (or carrier), such as sodium citrate or dicalcium phosphate, or mixed with the following ingredients: (a) fillers or compatibilizers, for example, Starch, lactose, sucrose, glucose, mannitol and silicic acid; (b) binders such as hydroxymethyl cellulose, alginate, gelatin, polyvinylpyrrolidone, sucrose and gum arabic; (c) humectants, For example, glycerin; (d) disintegrants, such as agar, calcium carbonate, potato starch or tapioca starch, alginic acid, certain complex silicates, and sodium carbonate; (e) slow solvents, such as paraffin; (f) Absorption accelerators, such as quaternary amine compounds; (g) wetting agents, such as cetyl alcohol and glycty
  • Solid dosage forms such as tablets, sugar pills, capsules, pills and granules can be prepared with coatings and shell materials, such as enteric coatings and other materials known in the art. They may contain opacifying agents, and the active compound or the release of the compound in such a composition may be released in a certain part of the digestive tract in a delayed manner. Examples of embedding components that can be used are polymeric substances and waxes. If necessary, the active compound can also be formed into microcapsules with one or more of the above-mentioned excipients.
  • Liquid dosage forms for oral administration include pharmaceutically acceptable emulsions, solutions, suspensions, syrups or tinctures.
  • the liquid dosage form may contain inert diluents conventionally used in the art, such as water or other solvents, solubilizers and emulsifiers, for example, ethanol, isopropanol, ethyl carbonate, ethyl acetate, propylene glycol, 1 , 3-Butanediol, dimethylformamide and oils, especially cottonseed oil, peanut oil, corn germ oil, olive oil, castor oil and sesame oil or mixtures of these substances.
  • composition may also contain adjuvants such as wetting agents, emulsifying and suspending agents, sweetening agents, flavoring agents and perfumes.
  • adjuvants such as wetting agents, emulsifying and suspending agents, sweetening agents, flavoring agents and perfumes.
  • the suspension may contain suspending agents, for example, ethoxylated isostearyl alcohol, polyoxyethylene sorbitol and sorbitan esters, microcrystalline cellulose, aluminum methoxide and agar, or mixtures of these substances, and the like.
  • suspending agents for example, ethoxylated isostearyl alcohol, polyoxyethylene sorbitol and sorbitan esters, microcrystalline cellulose, aluminum methoxide and agar, or mixtures of these substances, and the like.
  • composition for parenteral injection may contain physiologically acceptable sterile aqueous or non-aqueous solutions, dispersions, suspensions or emulsions and sterile powders for reconstitution into sterile injectable solutions or dispersions.
  • Suitable aqueous and non-aqueous carriers, diluents, solvents or excipients include water, ethanol, polyols and suitable mixtures thereof.
  • the dosage form of the compound of the present invention for topical administration includes ointment, powder, patch, propellant and inhalant.
  • the active ingredient is mixed under sterile conditions with a physiologically acceptable carrier and any preservatives, buffers, or propellants that may be required if necessary.
  • the treatment method of the present invention can be administered alone or in combination with other treatment means or therapeutic drugs.
  • a safe and effective amount of the compound of the present invention is applied to a mammal (such as a human) in need of treatment.
  • the administered dose is usually 1 to 2000 mg, preferably 50 to 1000 mg.
  • the specific dosage should also consider factors such as the route of administration and the patient's health status, which are all within the skill range of a skilled physician.
  • the present invention also provides a method for preparing a pharmaceutical composition, which comprises the steps of: combining a pharmaceutically acceptable carrier with the compound of general formula (I) of the present invention or its crystal form, pharmaceutically acceptable salt, hydrate or The solvates are mixed to form a pharmaceutical composition.
  • the present invention also provides a treatment method, which comprises the steps of: administering the compound of the general formula (I) of the present invention, or a crystal form, pharmaceutically acceptable salt, hydrate or solvate thereof, to a subject in need of treatment , Or administer the pharmaceutical composition of the present invention for selectively inhibiting RET.
  • the compound of the present invention has excellent inhibitory ability to RET kinase and excellent selectivity to RET kinase, and has low inhibitory activity to other kinases such as VEGFR2;
  • the compound of the present invention has lower toxic and side effects.
  • the compound of the present invention has good pharmacodynamic and pharmacokinetic properties.
  • the structure of the compound of the present invention is determined by nuclear magnetic resonance (NMR) and liquid mass spectrometry (LC-MS).
  • NMR is detected by Bruker AVANCE-400 and Bruker AVANCE-500 nuclear magnetic instruments.
  • the measurement solvents include deuterated dimethyl sulfoxide (DMSO-d 6 ), deuterated acetone (CD 3 COCD 3 ), deuterated chloroform (CDCl 3 ) And deuterated methanol (CD 3 OD), etc.
  • the internal standard uses tetramethylsilane (TMS), and the chemical shift is measured in units of parts per million (ppm).
  • LC-MS Liquid-mass spectrometry
  • Agilent 1260 mass spectrometer uses Agilent 1100 high pressure chromatograph (Microsorb 5micron C18 100x 3.0mm chromatographic column).
  • the thin layer chromatography silica gel plate uses Qingdao GF254 silica gel plate, the TLC uses 0.15-0.20mm, and the preparative thin layer chromatography uses 0.4mm-0.5mm.
  • Column chromatography generally uses Qingdao silica gel 200-300 mesh silica gel as a carrier.
  • the starting materials in the examples of the present invention are all known and commercially available, or can be synthesized by using or according to literature reported in the field.
  • PE Petroleum ether
  • Pd(PPh 3 ) 4 Tetratriphenylphosphine palladium
  • Step 2 Synthesis of 4-(6-fluoropyridin-3-yl)-6-(2-hydroxy-2-methylpropoxy)pyrazolo[1,5-a]pyridine-3-carbonitrile
  • Step 1 Synthesis of (R)-2-((4-bromo-3-cyanopyrazolo[1,5-a]pyridin-6-yl)oxy)methyl)morpholine-4-carboxylic acid tert-butyl ester
  • Step 2 Synthesis of (R)-2-((3-cyano-4-(6-fluoropyridin-3-yl)pyrazolo[1,5-a]pyridin-6-yl)oxy)methyl ) Morpholine-4-carboxylic acid tert-butyl ester
  • Example 1 4-(6-(((6-(4-Fluoro-1H-pyrazol-1-yl)pyridin-3-yl)methyl)amino)pyridin-3-yl)-6-( Preparation of 2-hydroxy-2-methylpropoxy)pyrazolo[1,5-a]pyridine-3-carbonitrile
  • Step 3 Synthesis of 4-(6-(((6-(4-fluoro-1H-pyrazol-1-yl)pyridin-3-yl)methyl)amino)pyridin-3-yl)-6-( 2-hydroxy-2-methylpropoxy)pyrazolo[1,5-a]pyridine-3-carbonitrile
  • Step 1 Synthesis of 1-(6-(4-fluoro-1H-pyrazol-1-yl)pyridin-3-yl)ethan-1-one
  • Step 2 Synthesis of (R)-N-((S)-1-(6-(4-fluoro-1H-pyrazol-1-yl)pyridin-3-yl)ethyl)-2-methylpropane- 2-sulfinamide
  • Step 4 Synthesis of (S)-4-(6-((1-(6-(4-fluoro-1H-pyrazol-1-yl)pyridin-3-yl)ethyl)amino)pyridine-3- Yl)-6-(2-hydroxy-2-methylpropoxy)pyrazolo[1,5-a]pyridine-3-carbonitrile
  • Step 1 Synthesis of tert-butyl (R)-2-(((3-cyano-4-(6-(((6-(4-fluoro-1H-pyrazol-1-yl)pyridin-3-yl )Methyl)amino)pyridin-3-yl)pyrazolo[1,5-a]pyridin-6-yl)oxy)methyl)morpholine-4-carboxylate
  • Step 2 Synthesis of (R)-4-(6-(((6-(4-Fluoro-1H-pyrazol-1-yl)pyridin-3-yl)methyl)amino)pyridin-3-yl) -6-(morpholin-2-ylmethoxy)pyrazolo[1,5-a]pyridine-3-carbonitrile
  • Step 1 Synthesis of tert-butyl (R)-2-(((3-cyano-4-(6-((((S)-1-6-(4-fluoro-1H-pyrazol-1-yl )Pyridin-3-yl)eth-1-yl)amino)pyridin-3-yl)pyrazolo[1,5-a]pyridin-6-yl)oxy)methyl)morpholine-4- Carboxylate
  • Step 2 Synthesis of (R)-4-(6-((((S)-1-(6-(4-fluoro-1H-pyrazol-1-yl)pyridin-3-yl)ethyl-1 yl) Amino)pyridin-3-yl)-6-(morpholin-2-ylmethoxy)pyrazolo[1,5-a]pyridine-3-carbonitrile
  • Step 1 Synthesis of (S)-N-((R)-1-(6-(4-fluoro-1H-pyrazol-1-yl)pyridin-3-yl)ethyl)-2-methylpropane- 2-sulfinamide
  • Step 3 Synthesis of (R)-4-(6-((1-(6-(4-fluoro-1H-pyrazol-1-yl)pyridin-3-yl)ethyl)amino)pyridine-3- Yl)-6-(2-hydroxy-2-methylpropoxy)pyrazolo[1,5-a]pyridine-3-carbonitrile
  • Example 6 4-(6-((1-(6-(4-(4-Fluoro-1H-pyrazol-1-yl)pyridin-3-yl)ethyl)amino)pyridin-3-yl )-6-(2-hydroxy-2-methylpropoxy)pyrazolo[1,5-a]pyridine-3-carbonitrile
  • Step 1 Synthesis of N-(1-(1-(6-(4-fluoro-1H-pyrazol-1-yl)pyridin-3-yl)ethyl)-2-methylpropane-2-sulfenamide
  • N-(1-(1-(6-(4-fluoro-1H-pyrazol-1-yl)pyridin-3-yl)ethyl)-2-methylpropane-2-sulfenamide (1.2g , 3.9mmol) was dissolved in a small amount of methanol, then 4N HCl/dioxane (8mL) was added at low temperature, and the reaction was stirred at room temperature for 2 hours.
  • Step 3 Synthesis of 4-(6-((1-(6-(4-(4-fluoro-1H-pyrazol-1-yl)pyridin-3-yl)ethyl)amino)pyridin-3-yl )-6-(2-hydroxy-2-methylpropoxy)pyrazolo[1,5-a]pyridine-3-carbonitrile
  • Example 7 4-(6-(((6-(1H-imidazol-1-yl)pyridin-3-yl)methyl)amino)pyridin-3-yl)-6-(2-hydroxy-2 -Methylpropoxy)pyrazolo[1,5-a]pyridine-3-carbonitrile
  • Step 3 Synthesis of 4-(6-(((6-(1H-imidazol-1-yl)pyridin-3-yl)methyl)amino)pyridin-3-yl)-6-(2-hydroxy-2 -Methylpropoxy)pyrazolo[1,5-a]pyridine-3-carbonitrile
  • Step 1 Synthesis of tert-butyl ((6-(2-(2-oxopyrrolidin-1-yl)pyridin-3-yl)methyl)carbamate
  • Step 3 Synthesis of 6-(2-hydroxy-2-methylpropoxy)-4-(6-((((6-(2-oxopyrrolidin-1-yl)pyridin-3-yl)methyl Amine)pyridin-3-yl)pyrazolo[1,5-a]pyridine-3-carbonitrile
  • Step 1 Synthesis of tert-butyl ([2,3'-bipyridyl]-5-ylmethyl)carbamate
  • Step 3 Synthesis of 4-(6-(([[2,3'-bipyridin]-5-ylmethyl)amino)pyridin-3-yl)-6-(2-hydroxy-2-methylpropane (Oxy)pyrazolo[1,5-a]pyridine-3-carbonitrile
  • Step 3 Synthesis of 6-(2-hydroxy-2-methylpropoxy)-4-(6-((6-(pyrrolidin-1-yl)pyridin-3-yl)methyl)amino)pyridine -3-yl)pyrazole[1,5-a]pyridine-3-carbonitrile
  • Step 3 Synthesis of 6-(2-hydroxy-2-methylpropoxy)-4-(6-((6-(4-methyl-1H-imidazol-1-yl)pyridin-3-yl)methyl (Amino)pyridin-3-yl)pyrazolo[1,5-a]pyridine-3-carbonitrile
  • Example 12 6-(2-Hydroxy-2-methylpropoxy)-4-(6-((((6-morpholinopyridin-3-yl)methyl)amino)pyridine-3- Yl)pyrazolo[1,5-a]pyridine-3-carbonitrile
  • Step 3 Synthesis of 6-(2-hydroxy-2-methylpropoxy)-4-(6-((((6-morpholinopyridin-3-yl)methyl)amino)pyridine-3- Yl)pyrazolo[1,5-a]pyridine-3-carbonitrile
  • Step 1 Synthesis of tert-butyl (quinolin-6-ylmethyl)carbamate
  • Step 2 Synthesis of tert-butyl (quinolin-6-ylmethyl)methylcarbamate
  • Step 4 Synthesis of 6-(2-hydroxy-2-methylpropoxy)-4-(6-(methyl(quinolin-6-ylmethyl)amino)pyridin-3-yl)pyrazolo [1,5-a]pyridine-3-carbonitrile
  • Step 1 Synthesis of 1-(6-(4-fluoro-1H-pyrazol-1-yl)pyridin-3-yl)propan-1-one
  • Step 2 Synthesis of (R)-N-((S)-1-(6-(4-fluoro-1H-pyrazol-1-yl)pyridin-3-yl)propyl)-2-methylpropane- 2-sulfinamide
  • Step 4 Synthesis of (S)-4-(6-((1-(6-(4-fluoro-1H-pyrazol-1-yl)pyridin-3-yl)propyl)amino)pyridine-3- Yl)-6-(2-hydroxy-2-methylpropoxy)pyrazolo[1,5-a]pyridine-3-carbonitrile
  • Step 1 Synthesis of 1-(4-(4-fluoro-1H-pyrazol-1-yl)phenyl)ethan-1-one
  • Step 2 Synthesis of (R)-N-((S)-1-(4-(4-fluoro-1H-pyrazol-1-yl)phenyl)ethyl)-2-methylpropane-2-ylidene Sulfonamide
  • Step 4 Synthesis of (S)-4-(6-((1-(4-(4-fluoro-1H-pyrazol-1-yl)phenyl)ethyl)amino)pyridin-3-yl)- 6-(2-Hydroxy-2-methylpropoxy)pyrazolo[1,5-a]pyridine-3-carbonitrile
  • Step 1 Synthesis of tert-butyl (S)-(1-(1-(4-(4-fluoro-1H-pyrazol-1-yl)phenyl)ethyl)carbamate
  • Step 2 Synthesis of tert-butyl (S)-(1-(4-(4-fluoro-1H-pyrazol-1-yl)phenyl)ethyl)(methyl)carbamate
  • Step 4 Synthesis of (S)-5-bromo-N-(1-(4-(4-fluoro-1H-pyrazol-1-yl)phenyl)ethyl)-N-methylpyridin-2-amine
  • Step 5 Synthesis of (S)-N-(1-(4-(4-fluoro-1H-pyrazol-1-yl)phenyl)ethyl)-N-methyl-5-(tributylstannyl) Pyridin-2-amine
  • Step 6 Synthesis of (S)-6-(2-cyano-2-methylpropoxy)-4-(6-((1-(4-(4-fluoro-1H-pyrazol-1-yl )Phenyl)ethyl)(methyl)amino)pyridin-3-yl)pyrazolo[1,5-a]pyridine-3-carbonitrile
  • Step 1 Synthesis of tert-butyl (S)-(1-(6-(4-(4-fluoro-1H-pyrazol-1-yl)pyridin-3-yl)ethyl)carbamate
  • Step 2 Synthesis of tert-butyl (S)-(1-(6-(4-fluoro-1H-pyrazol-1-yl)pyridin-3-yl)ethyl)(methyl)carbamate
  • Step 4 Synthesis of (S)-5-bromo-N-(1-(6-(4-fluoro-1H-pyrazol-1-yl)pyridin-3-yl)ethyl)-N-methylpyridine- 2-amine
  • Step 5 Synthesis of (S)-N-(1-(6-(6-(4-fluoro-1H-pyrazol-1-yl)pyridin-3-yl)ethyl)-N-methyl-5- (Tributylstannyl)pyridine-2-amine
  • Step 6 Synthesis of (S)-6-(2-cyano-2-methylpropoxy)-4-(6-((1-(6-(4-fluoro-1H-pyrazol-1-yl )Pyridin-3-yl)ethyl)(methyl)amino)pyridin-3-yl)pyrazolo[1,5-a]pyridine-3-carbonitrile
  • Step 2 Synthesis of (S)-6-bromo-4-(6-((1-(6-(4-(4-fluoro-1H-pyrazol-1-yl)pyridin)-3-yl)ethyl )(Methyl)amino)pyridyl-3-yl)pyrazolo[1,5-a]pyridine-3-carbonitrile
  • Step 3 Synthesis of (S)-4-(6-((1-(6-(4-fluoro-1H-pyrazol-1-yl)pyridin-3-yl)ethyl)(methyl)amino) Pyridin-3-yl)-6-(4-methylpiperazin-1-yl)pyrazolo[1,5-a]pyridine-3-carbonitrile
  • Example 20 ((S)-4-(6-((1-(6-(4-Fluoro-1H-pyrazol-1-yl)pyridin-3-yl)ethyl)(methyl)amino )Pyridin-3-yl)-6-(2-hydroxyethoxy)pyrazolo[1,5-a]pyridine-3-carbonitrile
  • Step 2 ((S)-4-(6-((1-(6-(4-Fluoro-1H-pyrazol-1-yl)pyridin-3-yl)ethyl)(methyl)amino) Pyridin-3-yl)-6-(2-hydroxyethoxy)pyrazolo[1,5-a]pyridine-3-carbonitrile
  • Step 1 Synthesis of 6-(3,3-difluoroazetidin-1-yl)-4-(4-((3R)-3-(4-(4-fluoro-1H-pyrazole-1) -Yl)phenyl)but-2-yl)phenyl)pyrazolo[1,5-a]pyridine-3-carbonitrile
  • Step 1 Synthesis of tert-butyl(S)-4-(3-cyano-4-(6-((1-(6-(4-fluoro-1H-pyrazol-1-yl)pyridin-3-yl )Ethyl)(methyl)amino)pyridin-3-yl)pyrazolo[1,5-a]pyridin-6-yl)piperidine-1-carboxylate
  • Step 2 Synthesis of (S)-4-(6-((1-(6-(4-fluoro-1H-pyrazol-1-yl)pyridin-3-yl)ethyl)(methyl)amino) Pyridin-3-yl)-6-(piperidin-4-yl)pyrazolo[1,5-a]pyridine-3-carbonitrile
  • Step 1 Synthesis of (S)-4-(6-((1-(6-(4-fluoro-1H-pyrazol-1-yl)pyridin-3-yl)ethyl)(methyl)amino) Pyridin-3-yl)-6-(4-hydroxy-4-methylpiperidin-1-yl)pyrazolo[1,5-a]pyridine-3-carbonitrile
  • Step 1 Synthesis of (S)-6-(3-cyano-3-methylazetidin-1-yl)-4-(6-((1-(6-(4-fluoro-1H- Pyrazol-1-yl)pyridin-3-yl)ethyl)(methyl)amino)pyridin-3-yl)pyrazolo[1,5-a]pyridine-3-carbonitrile
  • Step 1 Synthesis of (S)-4-(6-((1-(6-(4-fluoro-1H-pyrazol-1-yl)pyridin-3-yl)ethyl)(methyl)amino) (Pyridin-3-yl)-6-(2-oxo-7-azaspiro[3.5]nonane-7-yl)pyrazolo[1,5-a]pyridine-3-carbonitrile
  • Step 1 Synthesis of (S)-4-(6-((1-(6-(4-fluoro-1H-pyrazol-1-yl)pyridin-3-yl)ethyl)(methyl)amino) (Pyridin-3-yl)-6-morpholinopyrazolo[1,5-a]pyridine-3-carbonitrile
  • Step 1 Synthesis of (S)-6-bromo-4-(6-((1-(6-(4-fluoro-1H-pyrazol-1-yl)pyridin-3-yl)ethyl)(methyl )Amino)pyridin-3-yl)pyrazolo[1,5-a]pyridine-3-carbonitrile
  • Step 2 Synthesis of (S)-4-(6-((1-(6-(4-fluoro-1H-pyrazol-1-yl)pyridin-3-yl)ethyl)(methyl)amino) Pyridin-3-yl)-6-(3-hydroxy-3-methyl-1-yn-1-yl)pyrazolo[1,5-a]pyridine-3-carbonitrile
  • Step 2 Synthesis of (S)-6-(cyclopropylmethoxy)-4-(6-((1-(6-(4-fluoro-1H-pyrazol-1-yl)pyridin-3-yl )Ethyl)(methyl)amino)pyridin-3-yl)pyrazolo[1,5-a]pyridine-3-carbonitrile
  • Step 1 Synthesis of 4-methoxy-6-(1-methyl-1H-pyrazol-4-yl)pyrazole[1,5-a]pyridine-3-carbonitrile
  • Step 3 Synthesis of 3-cyano-6-(1-methyl-1H-pyrazol-4-yl)pyrazole[1,5-a]pyridin-4-yl trifluoromethanesulfonate
  • Step 4 Synthesis of (S)-6-(1-methyl-1H-pyrazol-4-yl)-4-(6-((1-(6-(4-fluoro-1H-pyrazole-1- (Yl)pyridin-3-yl)ethyl)(methyl)amino)pyridin-3-yl)pyrazolo[1,5-a]pyridine-3-carbonitrile
  • Step 2 Synthesis of (S)-4-(6-((1-(6-(4-fluoro-1H-pyrazol-1-yl)pyridin-3-yl)ethyl)(methyl)amino) (Pyridin-3-yl)-6-ethoxypyrazolo[1,5-a]pyridine-3-carbonitrile
  • Step 2 Synthesis of (S)-4-(6-((1-(6-(4-fluoro-1H-pyrazol-1-yl)pyridin-3-yl)ethyl)(methyl)amino) (Pyridin-3-yl)-6-allyloxypyrazolo[1,5-a]pyridine-3-carbonitrile
  • Step 2 Synthesis of (S)-4-(6-((1-(6-(4-fluoro-1H-pyrazol-1-yl)pyridin-3-yl)ethyl)(methyl)amino) (Pyridin-3-yl)-6-cyanomethoxypyrazolo[1,5-a]pyridine-3-carbonitrile
  • Step 2 Synthesis of (S)-4-(6-((1-(6-(4-fluoro-1H-pyrazol-1-yl)pyridin-3-yl)ethyl)(methyl)amino) (Pyridin-3-yl)-6-isobutoxypyrazolo[1,5-a]pyridine-3-carbonitrile
  • Step 2 (S)-4-(6-((1-(6-(4-Fluoro-1H-pyrazol-1-yl)pyridin-3-yl)ethyl)(methyl)amino)pyridine -3-yl)-6-(2,2-difluoroethoxy)pyrazolo[1,5-a]pyridine-3-carbonitrile
  • Step 1 Synthesis of 4-bromo-6-(2,2,2-trifluoroethoxy)pyrazolo[1,5-a]pyridine-3-carbonitrile
  • Step 2 Synthesis of (S)-4-(6-((1-(6-(4-fluoro-1H-pyrazol-1-yl)pyridin-3-yl)ethyl)(methyl)amino) Pyridin-3-yl)-6-(2,2,2-trifluoroethoxy)pyrazolo[1,5-a]pyridine-3-carbonitrile
  • Step 2 Synthesis of (S)-4-(6-((1-(6-(4-fluoro-1H-pyrazol-1-yl)pyridin-3-yl)ethyl)(methyl)amino) Pyridin-3-yl)-6-(2-hydroxypropoxy)pyrazolo[1,5-a]pyridine-3-carbonitrile
  • Step 1 Synthesis of 1-(6-(4-methyl-1H-pyrazol-1-yl)pyridin-3-yl)ethan-1-one
  • Step 2 Synthesis of 2-methyl-N-((S)-1-(6-(4-methyl-1H-pyrazol-1-yl)pyridin-3-yl)ethyl)propane-2-ylidene Sulfonamide
  • Step 4 Synthesis of tert-butyl (S)-(1-(6-(4-(4-methyl-1H-pyrazol-1-yl)pyridin-3-yl)ethyl)carbamate
  • Step 5 Synthesis of tert-butyl(S)-methyl(1-(6-(4-methyl-1H-pyrazol-1-yl)pyridin-3-yl)ethyl)carbamate
  • Step 6 Synthesis of (S)-N-methyl-1-(6-(4-methyl-1H-pyrazol-1-yl)pyridin-3-yl)ethan-1-amine
  • the tert-butyl (S)-methyl(1-(6-(4-methyl-1H-pyrazol-1-yl)pyridin-3-yl)ethyl)carbamate (2.5g, 7.91 mmol) was dissolved in 50 mL of dichloromethane, 2M hydrochloric acid ethyl acetate solution (23.7 mL, 47.47 mmol) was added dropwise, and the reaction solution was reacted at room temperature for 2 hours.
  • Step 7 Synthesis of (S)-5-bromo-N-methyl-N-(1-(6-(4-methyl-1H-pyrazol-1-yl)pyridin-3-yl)ethyl)pyridine -2-amine
  • Step 8 Synthesis of ((S)-N-methyl-N-(1-(6-(4-methyl-1H-pyrazol-1-yl)pyridin-3-yl)ethyl)-5-( 4,4,5,5-tetramethyl-1,3,2-dioxaborolan-2-yl)pyridin-2-amine
  • Step 10 Synthesis of (S)-6-(2-hydroxy-2-methylpropoxy)-4-(6-(methyl(1-(6-(4-methyl-1H-pyrazole-1 -Yl)pyridin-3-yl)ethyl)amino)pyridin-3-yl)pyrazolo[1,5-a]pyridine-3-carbonitrile
  • reaction solution was reacted at 80°C for 16 hours. After monitoring the completion of the reaction, cooling, adding water to quench the reaction, extracting with EA (20mL*3), washing the organic phase with water, drying and concentrating, and column chromatography to obtain (S)-6-(2- Hydroxy-2-methylpropoxy)-4-(6-(methyl(1-(6-(4-methyl-1H-pyrazol-1-yl)pyridin-3-yl)ethyl)amine (Yl)pyridin-3-yl)pyrazolo[1,5-a]pyridine-3-carbonitrile (compound 37) 65 mg. MS m/z (ESI): 523 [M+H] + .
  • Step 3 Synthesis of (S)-6-(1-ethyl-1H-pyrazol-4-yl)-4-(6-((1-(6-(4-fluoro-1H-pyrazole-1- (Yl)pyridin-3-yl)ethyl)(methyl)amino)pyridin-3-yl)pyrazolo[1,5-a]pyridine-3-carbonitrile
  • Step 2 (S)-4-(6-((1-(6-(4-Fluoro-1H-pyrazol-1-yl)pyridin-3-yl)ethyl)(methyl)amino)pyridine -3-yl)-6-propoxypyrazolo[1,5-a]pyridine-3-carbonitrile
  • Step 1 (S)-4-(6-((1-(6-(4-Fluoro-1H-pyrazol-1-yl)pyridin-3-yl)ethyl)(methyl)amino)pyridine -3-yl)-6-methoxypyrazolo[1,5-a]pyridine-3-carbonitrile
  • Step 2 (S)-4-(6-((1-(6-(4-Fluoro-1H-pyrazol-1-yl)pyridin-3-yl)ethyl)(methyl)amino)pyridine -3-yl)-6-(2-fluoroethoxy)pyrazolo[1,5-a]pyridine-3-carbonitrile
  • Step 2 N-((S)-1-(6-(Diethylamino)pyridin-3-yl)ethyl)-2-methylpropane-2-sulfinamide
  • Step 3 N-((S)-1-(6-(Diethylamino)pyridin-3-yl)ethyl)-N,2-dimethylpropane-2-sulfinamide
  • N-((S)-1-(6-(diethylamino)pyridin-3-yl)ethyl)-2-methylpropane-2-sulfinamide (2.25g, 7.5mmol) Dissolve in THF (20mL) at -78°C, slowly add MeI (1.17g, 8.25mmol) dropwise, and react at -78°C for 1h. Dilute with water (30mL), extract, dry, filter, concentrate, and column chromatography to obtain N-((S)-1-(6-(diethylamino)pyridin-3-yl)ethyl)-N,2 -Dimethylpropane-2-sulfinamide 1.6g, yield: 69%. MS m/z (ESI): 312 [M+H] + .
  • Step 4 (S)-N,N-Diethyl-5-(1-(methylamino)ethyl)pyridin-2-amine
  • Step 5 (S)-5-bromo-N-(1-(6-(diethylamino)pyridin-3-yl)ethyl)-N-methylpyridin-2-amine
  • Step 6 (S)-N-(1-(6-(Diethylamino)pyridin-3-yl)ethyl)-N-methyl-5-(4,4,5,5-tetramethyl -1,3,2-Dioxaborolan-2-yl)pyridin-2-amine
  • Step 7 (S)-4-(6-((1-(6-(Diethylamino)pyridin-3-yl)ethyl)(methyl)amino)pyridin-3-yl)-6- (2-Hydroxy-2-methylpropoxy)pyrazolo[1,5-a]pyridine-3-carbonitrile
  • Step 1 N-((S)-1-(6-methoxypyridin-3-yl)ethyl)-2-methylpropane-2-sulfoxamide
  • Step 2 N-((S)-1-(6-methoxypyridin-3-yl)ethyl)-N,2-dimethylpropane-2-sulfinamide
  • Step 4 (S)-5-bromo-N-methyl-N-(1-(6-(methylamino)pyridin-3-yl)ethyl)pyridin-2-amine
  • Step 5 (S)-N-(1-(6-methoxypyridin-3-yl)ethyl)-N-methyl-5-(4,4,5,5-tetramethyl-1, 3,2-Dioxaborolan-2-yl)pyridine-2-amine
  • Step 6 (S)-6-(2-hydroxy-2-methylpropoxy)-4-(6-((1-(6-methoxypyridin-3-yl)ethyl)(methyl )Amino)pyridin-3-yl)pyrazolo[1,5-a]pyridine-3-carbonitrile
  • Step 1 tert-butyl (S)-(1-(6-(4-fluoro-1H-pyrazol-1-yl)pyridin-3-yl)propyl)(methyl)carbamate
  • Step 2 (S)-1-(6-(4-Fluoro-1H-pyrazol-1-yl)pyridin-3-yl)-N-methylpropane-1-amine
  • Step 3 (S)-5-bromo-N-(1-(6-(4-fluoro-1H-pyrazolyl)pyridin-3-yl)propyl)-N-methylpyridin-2-amine
  • Step 4 (S)-N-(1-(6-(4-Fluoro-1H-pyrazol-1-yl)pyridin-3-yl)propyl)-N-methyl-5-(4,4 ,5,5-Tetramethyl-1,3,2-dioxaborolan-2-yl)pyridin-2-amine
  • Step 5 (S)-4-(6-((1-(6-(4-Fluoro-1H-pyrazolyl)pyridin-3-yl)propyl)(methyl)amino)pyridine-3- Yl)-6-(2-hydroxy-2-methylpropoxy)pyrazole[1,5-a]pyridine-3-carbonitrile
  • Step 2 N-((S)-1-(6-(4-chloro-1H-pyrazol-1-yl)pyridin-3-yl)ethyl)-2-methylpropane-2-sulfinamide
  • Step 4 tert-Butyl (S)-(1-(6-(4-chloro-1H-pyrazol-1-yl)pyridin-3-yl)ethyl)carbamate
  • Step 5 tert-Butyl (S)-(1-(6-(4-chloro-1H-pyrazol-1-yl)pyridin-3-yl)ethyl)(methyl)carbamate
  • Step 6 (S)-1-(6-(4-chloro-1H-pyrazol-1-yl)pyridin-3-yl)-N-methylethane-1-amine
  • Step 7 (S)-5-bromo-N-(1-(6-(4-chloro-1H-pyrazol-1-yl)pyridin-3-yl)ethyl)-N-methylpyridine-2 -amine
  • Step 8 (S)-N-(1-(6-(4-Chloro-1H-pyrazol-1-yl)pyridin-3-yl)ethyl)-N-methyl-5-(4,4 ,5,5-Tetramethyl-1,3,2-dioxaborolan-2-yl)pyridin-2-amine
  • Step 9 (S)4-(6-((1-(6-(4-Chloro-1H-pyrazol-1-yl)pyridin-3-yl)ethyl)(methyl)amino)pyridine- 3-yl)-6-(2-hydroxy-2-methylpropoxy)pyrazole[1,5-a]pyridine-3-carbonitrile
  • Step 1 Synthesis of methyl 2-((tetrahydro-2H-pyran-2-yl)oxy)acetate
  • Step 6 Synthesis of 1-((4-bromo-3-cyanopyrazolo[1,5-a]pyridin-6-yl)oxy)methyl)cyclopropylbenzoate
  • Step 7 Synthesis of 4-bromo-6-((1-hydroxycyclopropyl)methoxy)pyrazolo[1,5-a]pyridine-3-carbonitrile
  • Step 8 (S)-4-(6-((1-(6-(4-Fluoro-1H-pyrazolyl)pyridin-3-yl)ethyl)(methyl)amino)pyridine-3- Yl)-6-((1-hydroxycyclopropyl)methoxy)pyrazolo[1,5-a]pyridine-3-carbonitrile
  • Step 1 Synthesis of 4-((4-methoxybenzyl)oxy)-6-(piperidin-1-yl)pyrazolo[1,5-a]pyridine-3-carbonitrile
  • 6-Bromo-4-((4-methoxybenzyl)oxy)pyrazolo[1,5-a]pyridine-3-carbonitrile (1.0g, 2.79mmol) was dissolved in DCM (5mL) , Add piperidine (0.96g, 11.17mmol), potassium phosphate (1.93g, 8.37mmol), cuprous iodide (0.96g, 11.17mmol), heat to 90°C and react for 5h. When all the raw materials are consumed, pour the system into Ice water.
  • Extract with EA combine the organic phases, dry by spin-drying, and column chromatography to obtain 4-((4-methoxybenzyl)oxy)-6-(piperidin-1-yl)pyrazolo[1,5-a ] Pyridine-3-carbonitrile 0.15 g, MS m/z (ESI): 363.4 [M+H] + .
  • Step 4 Synthesis of (S)-4-(6-((1-(6-(4-fluoro-1H-pyrazol-1-yl)pyridin-3-yl)ethyl)(methyl)amino) Pyridin-3-yl)-6-(piperidin-1-yl)pyrazolo[1,5-a]pyridine-3-carbonitrile
  • Example 48 ((S)-6-(4,4-Difluoropiperidin-1-yl)-4-(6-((1-(6-(4-fluoro-1H-pyrazole-1- (Yl)pyridin-3-yl)ethyl)(methyl)amino)pyridin-3-yl)pyrazolo[1,5-a]pyridine-3-carbonitrile
  • Step 1 Synthesis of 6-(4,4-difluoropiperidin-1-yl)-4-((4-methoxybenzyl)oxy)pyrazolo[1,5-a]pyridine-3- Formonitrile
  • Extract with EA combine the organic phases, dry by spin-drying, and column chromatography to obtain 6-(4,4-difluoropiperidin-1-yl)-4-((4-methoxybenzyl)oxy)pyrazolo [1,5-a]pyridine-3-carbonitrile 0.14 g, MS m/z (ESI): 399.4 [M+H] + .
  • Step 3 Synthesis of 3-cyano-6-(4,4-difluoropiperidin-1-yl)pyrazolo[1,5-a]pyridin-4-yl triflate
  • 6-(4,4-Difluoropiperidin-1-yl)-4-hydroxypyrazolo[1,5-a]pyridine-3-carbonitrile (139mg, 0.50mmol) was dissolved in dichloromethane (5mL ), 1,1,1-trifluoro-N-phenyl-N-((trifluoromethyl)sulfonyl)methanesulfonamide (214mg, 0.60mmol) and DIEA (323mg, 2.50mmol) were added. Stir at room temperature for 30 minutes.
  • Step 4 Synthesis of ((S)-6-(4,4-difluoropiperidin-1-yl)-4-(6-((1-(6-(4-fluoro-1H-pyrazole-1- (Yl)pyridin-3-yl)ethyl)(methyl)amino)pyridin-3-yl)pyrazolo[1,5-a]pyridine-3-carbonitrile
  • Step 1 Synthesis of 6-((cyclopropylmethyl)amino)-4-((4-methoxybenzyl)oxy)pyrazolo[1,5-a]pyridine-3-carbonitrile
  • 6-bromo-4-((4-methoxybenzyl)oxy)pyrazolo[1,5-a]pyridine-3-carbonitrile (1.07g, 3mmol)
  • cyclopropylmethyl Base amine 640mg, 9mmol
  • cuprous iodide 57mg, 0.3mmol
  • potassium phosphate 57mg, 0.3mmol
  • L-proline 69mg, 0.6mmol
  • Step 4 Synthesis of (S)-6-((cyclopropylmethyl)amino)-4-(6-((1-(6-(4-fluoro-1H-pyrazol-1-yl)pyridine- 3-yl)ethyl)(methyl)amino)pyridin-3-yl)pyrazolo[1,5-a]pyridine-3-carbonitrile
  • Step 1 Synthesis of 6-(isopropylamino)-4-((4-methoxybenzyl)oxy)pyrazolo[1,5-a]pyridine-3-carbonitrile
  • 6-Bromo-4-(4-methoxybenzyloxy)pyrazolo[1,5-a]pyridine-3-carbonitrile 400mg, 1.12mmol was dissolved in DMSO (5mL) at room temperature, Then add isopropylamine (460 ⁇ L, 5.6mmol), CuI (23mg, 0.112mmol), L-proline (26mg, 0.224mmol), K 3 PO 4 (480mg, 2.24mmol), and replace the reaction flask with nitrogen three times. The reaction was heated to 115°C under nitrogen protection and stirred for 6 hours.
  • Step 4 Synthesis of (S)-4-(6-((1-(6-(4-fluoro-1H-pyrazol-1-yl)pyridin-3-yl)ethyl)(methyl)amino) (Pyridin-3-yl)-6-(isopropylamino)pyrazolo[1,5-a]pyridine-3-carbonitrile
  • reaction solution is added to 10 mL of water, extracted with ethyl acetate (20 mL*3), and the organic phases are combined. The organic phase was washed with saturated brine (10 mL*2), dried with anhydrous sodium sulfate, filtered with suction and rotary evaporated to obtain a crude product.
  • Step 1 Synthesis of 6-(ethylamino)-4-((4-methoxybenzyl)oxy)pyrazolo[1,5-a]pyridine-3-carbonitrile
  • Step 4 Synthesis of (S)-6-(ethylamino)-4-(6-((1-(6-(4-fluoro-1H-pyrazol-1-yl)pyridin-3-yl)ethyl )(Methyl)amino)pyridin-3-yl)pyrazolo[1,5-a]pyridine-3-carbonitrile
  • reaction solution was poured into water (10 mL), extracted with ethyl acetate (20 mL*3), and the organic phases were combined. The organic phase was washed with saturated brine (10 mL*2), dried with anhydrous sodium sulfate, filtered with suction and rotary evaporated to obtain a crude product.
  • Step 1 Synthesis of 4-((4-methoxybenzyl)oxy)-6-(methylamino)pyrazolo[1,5-a]pyridine-3-carbonitrile
  • 6-bromo-4-((4-methoxybenzyl)oxy)pyrazolo[1,5-a]pyridine-3-carbonitrile 500mg, 1.4mmol
  • iodide Copper 40mg, 0.21mmol
  • L-proline 32mg, 0.28mmol
  • potassium carbonate 1.9g, 14mmol
  • anhydrous DMSO 15mL
  • methylamine hydrochloride 940mg, 14mmol
  • Step 4 Synthesis of (S)-4-(6-((1-(6-(4-fluoro-1H-pyrazol-1-yl)pyridin-3-yl)ethyl)(methyl)amino) (Pyridin-3-yl)-6-(methylamino)pyrazolo[1,5-a]pyridine-3-carbonitrile
  • reaction solution was poured into water (10 mL), extracted with ethyl acetate (20 mL*3), and the organic phases were combined. The organic phase was washed with saturated brine (10 mL*2), dried with anhydrous sodium sulfate, filtered with suction and rotary evaporated to obtain a crude product.
  • the crude product is purified by a fast column machine to obtain (S)-4-(6-((1-(6-(4-fluoro-1H-pyrazol-1-yl)pyridin-3-yl)ethyl)(formaldehyde) (Amino)pyridin-3-yl)-6-(methylamino)pyrazolo[1,5-a]pyridine-3-carbonitrile (compound 52) 60mg, MS m/z(ESI): 468.3 [M+H] + .
  • Step 1 Synthesis of 4-bromo-6-(prop-2-yn-1-yloxy)pyrazolo[1,5-a]pyridine-3-carbonitrile
  • Step 2 Synthesis of (S)-4-(6-((1-(6-(4-fluoro-1H-pyrazol-1-yl)pyridin-3-yl)ethyl)(methyl)amino) Pyridin-3-yl)-6-(prop-2-yn-1-yloxy)pyrazolo[1,5-a]pyridine-3-carbonitrile
  • Step 2 Synthesis of (S)-4-(6-((1-(6-(4-fluoro-1H-pyrazol-1-yl)pyridin-3-yl)ethyl)(methyl)amino) Pyridin-3-yl)-6-(2-methoxyethoxy)pyrazolo[1,5-a]pyridine-3-carbonitrile
  • Step 2 Synthesis of (S)-4-(6-((1-(6-(4-fluoro-1H-pyrazol-1-yl)pyridin-3-yl)ethyl)(methyl)amino) Pyridin-3-yl)-6-(methoxymethoxy)pyrazolo[1,5-a]pyridine-3-carbonitrile
  • Example 56 4-(6-(((6-(4-Fluoro-1H-pyrazol-1-yl)pyridin-3-yl)methyl)(methyl)amino)pyridin-3-yl) Preparation of -6-(2-hydroxy-2-methylpropoxy)pyrazolo[1,5-a]pyridine-3-carbonitrile
  • Step 1 Synthesis of tert-butyl ((6-(4-(4-fluoro-1H-pyrazol-1-yl)pyridin-3-yl)methyl)carbamate
  • Step 2 Synthesis of tert-butyl (((6-(4-fluoro-1H-pyrazol-1-yl)pyridin-3-yl)methyl)(methyl)carbamate
  • Step 4 Synthesis of 5-bromo-N-(((6-(4-fluoro-1H-pyrazol-1-yl)pyridin-3-yl)methyl)-N-methylpyridin-2-amine
  • Step 5 Synthesis of N-(((6-(4-fluoro-1H-pyrazol-1-yl)pyridin-3-yl)methyl)-N-methyl-5-(4,4,5,5 -Tetramethyl-1,3,2-dioxaborolan-2-yl)pyridin-2-amine
  • Step 6 Synthesis of 4-(6-(((6-(4-fluoro-1H-pyrazol-1-yl)pyridin-3-yl)methyl)(methyl)amino)pyridin-3-yl) -6-(2-Hydroxy-2-methylpropoxy)pyrazolo[1,5-a]pyridine-3-carbonitrile
  • Example 57 4-(6-(Ethyl((6-(4-(4-fluoro-1H-pyrazol-1-yl)pyridin-3-yl)methyl)amino)pyridin-3-yl )-6-(2-hydroxy-2-methylpropoxy)pyrazolo[1,5-a]pyridine-3-carbonitrile
  • Step 1 Synthesis of tert-butyl ethyl ((6-(4-fluoro-1H-pyrazol-1-yl)pyridin-3-yl)methyl) carbamate
  • Step 3 Synthesis of 5-bromo-N-ethyl-N-(((6-(4-fluoro-1H-pyrazol-1-yl)pyridin-3-yl)methyl)pyridin-2-amine
  • Step 4 Synthesis of N-ethyl-N-(((6-(4-fluoro-1H-pyrazol-1-yl)pyridin-3-yl)methyl)-5-(4,4,5,5 -Tetramethyl-1,3,2-dioxaborolan-2-yl)pyridin-2-amine
  • Step 5 Synthesis of 4-(6-(ethyl((6-(4-(4-fluoro-1H-pyrazol-1-yl)pyridin-3-yl)methyl)amino)pyridin-3-yl )-6-(2-hydroxy-2-methylpropoxy)pyrazolo[1,5-a]pyridine-3-carbonitrile
  • Step 2 Synthesis of (R)-N-((S)-1-(6-(1H-pyrazol-1-yl)pyridin-3-yl)ethyl)-2-methylpropane-2-sulfinic acid Amide
  • Step 4 Synthesis of (S)-(1-(1-(6-(1H-pyrazol-1-yl)pyridin-3-yl)ethyl)carbamic acid tert-butyl ester
  • Step 5 Synthesis of tert-butyl (S)-(1-(6-(1-(6-H-pyrazol-1-yl)pyridin-3-yl)ethyl)(methyl)carbamate
  • Step 7 Synthesis of (S)-N-(1-(6-(6-(1H-pyrazol-1-yl)pyridin-3-yl)ethyl)-5-bromo-N-methylpyridine-2 -Amine
  • Step 8 Synthesis of (S)-N-(1-(6-(6-(1H-pyrazol-1-yl)pyridin-3-yl)ethyl)-N-methyl-5-(4,4 ,5,5-Tetramethyl-1,3,2-dioxaborane-2-yl)pyridin-2-amine
  • Step 9 Synthesis of (S)-4-(6-((1-(6-(1H-pyrazol-1-yl)pyridin-3-yl)ethyl)(methyl)amino)pyridine-3- Yl)-6-(2-hydroxy-2-methylpropoxy)pyrazolo[1,5-a]pyridine-3-carbonitrile
  • 6-Bromo-4-(4-methoxybenzyloxy)pyrazolo[1,5-a]pyridine-3-carbonitrile 800mg, 2.23mmol was dissolved in DMSO (5mL) at room temperature, Tetrahydropyrrole (900uL, 11.6mmol), CuI (43mg, 0.223mmol), L-proline (52mg, 0.446mmol), K 3 PO 4 (958mg, 4.86mmol) were added sequentially. After the reaction flask was replaced with nitrogen 3 times, the reaction was heated to 115°C under nitrogen protection and stirred for 12 hours.

Abstract

本发明涉及一种吡唑并[1,5-a]吡啶类衍生物及其制备方法，组合物以及用途。具体地，本发明涉及式(I)化合物及其在用于治疗和/或预防与野生型、基因融合型(包括但不限于KIF5B、CCDC6和NCOA4)及突变型(包括但不限于G804、G810和M918)RET激酶相关的疾病，包括由RET激酶介导的疾病或病症。

Description

一种吡唑并[1,5-a]吡啶类衍生物及其制备方法，组合物以及用途 技术领域
本发明属于药物领域，具体涉及一种吡唑并[1,5-a]吡啶类衍生物及其可药用盐，和以它们作为活性成分的药物组合物。本发明还提供了所述化合物的制备方法和作为药物的应用。
背景技术
癌症是由不受控制且不受调节的细胞增殖产生，导致细胞增殖不受控制且不受调节的原因一直是药物研究者的重点研究对象。
人类编码RET蛋白的基因位于10号染色体长臂，其异常(基因融合、突变、扩增)可引起多种疾病，包括甲状腺乳头状癌(PTC)、甲状腺髓样癌(MTC)、肺腺癌、先天性巨结肠、肠易激综合征等。RET基因所在的染色体重排可能导致RET基因断裂，断裂后RET基因的3’端可以与KIF5B、TRIM33、CCDC6或NCOA4等不同的基因发生融合，形成融合基因，表达的融合蛋白表现为持续激活，驱动肿瘤的发生。
RET是属于酪氨酸激酶超家族的单次跨膜受体，为多种组织和细胞的正常发育、成熟和维持所需。RET信号传导由胶质细胞源性神经营养因子(GDNF)和家族配体(GFL)的可溶性蛋白质的结合介导。胶质细胞源性神经营养因子(GDNF)家族不直接与RET结合，而是先与GDNF家族受体α(GFRα)形成复合物GFL–GFRα，继而催化RET同源二聚，使RET的胞内区域自磷酸化，继而招募衔接蛋白和通路蛋白来激活包括MAPK、PI3K、JAK-STAT、PKA和PKC在内的多种信号通路，从而参与细胞增殖、神经传导、细胞迁移和细胞分化(Alexander Drilon,Nature Reviews Clinical Oncology,2018,15:151–167)，在调节细胞存活、分化、增殖，迁移和趋化上发挥重要作用。
数个多靶点激酶抑制剂对RET有一定的抑制活性，如卡博替尼(Cabozantinib)、凡德他尼(Vandetanib)、乐伐替尼(Lenvatini)和普纳替尼(Ponatinib)，但均为非特异性的RET抑制剂。此外，由于RET与VEGFR2的激酶结构域存在大量的同源，因此这些化合物除了抑制RET，还对于包括VEGFR2在内的多个靶点都有一定抑制作用，这导致脱靶毒性风险高，难以发挥令人满意的疗效。
因此，本领域迫切需要开发高特异性的、高效抑制RET激酶的药物。
发明内容
本发明的目的是提供一种高特异性的、高效抑制RET激酶的药物。
本发明第一方面，提供一种式(Ⅰ)化合物或其药学上可接受的盐、水合物、溶剂化 物、立体异构体、同位素化合物或前药；
Figure PCTCN2021089064-appb-000001
其中，
R 1选自下组：氢、卤素、硝基、氰基、C1-C6烷基、C3-C8环烷基、3-8元杂环基、C1-C6杂烷基、C2-C6烯基、C2-C6炔基、C6-C14芳基、5-14元杂芳基、-OR 5、-O(C1-C6亚烷基)R 5、-SR 5、-N(R 5)(R 6)、-S(O) 2R 5、-S(O)R 5、-C(O)R 5、-OC(O)R 5、-C(O)OR 5、-OC(O)O-(C1-C6亚烷基)-C(O)R 5、-C(O)-N(R 5)(R 6)、-N(R 5)-C(O)R 6、-N(R 5)-C(O)OR 6、-N(R 5)-C(O)N(R 5)(R 6)、-(C1-C6亚烷基)-N(R 5)-C(O)R 6、-N(R 5)S(O) 2R 6、-P(O)(R 5)(R 6)；其中，所述的杂烷基是指烷基碳链上的一个或多个碳原子被选自下组的二价连接基取代：-O-、-S-、-NH-或-C(O)-；
B独立地选自下组：氢、卤素、氰基、CHF 2、CF 3、-C(O)OR 5、C1-C6烷基、C3-C8环烷基；
X 1、X 2和X 3各自独立地为CR或N；其中，各个R各自独立地选自下组：氢、取代或未取代的C1-C6烷基、卤素、或氰基，其中，所述的取代是指被独立选自下组的一个或多个基团取代：卤素、氰基、羟基、氨基；且X 1、X 2和X 3中有0、1、2或3个为N；
R 2独立地选自下组：氢、C1-C6烷基、C3-C8环烷基、C1-C6杂烷基、3-8元环杂烷基；其中，所述的烷基、环烷基、杂烷基、环杂烷基是未取代或被一个或多个独立选自下组的基团取代：C1-C6烷基、C1-C6烷氧基、C3-C8环烷基、C3-C8环烷氧基、C1-C6杂烷基、3-8元环杂烷基、CHF 2、CF 3、卤素、氰基、羧基、羰基、羟基、巯基、氨基、甲酯、酰胺、甲基砜、磺酰胺、二甲基磷氧基；
R 3和R 3’各自独立地选自下组：氢、卤素、氰基、羟基、巯基、氨基、CHF 2、CF 3、C1-C6烷基、C1-C6烷氧基、C3-C8环烷基、C1-C6杂烷基、3-8元环杂烷基；其中，所述的烷基、烷氧基、环烷基、杂烷基、环杂烷基是未取代或被一个或多个独立选自下组的基团取代：C1-C6烷基、C1-C6烷氧基、C3-C8环烷基、C3-C8环烷氧基、C1-C6杂烷基、3-8元环杂烷基、CHF 2、CF 3、卤素、氰基、羧基、羰基、羟基、巯基、氨基、甲酯、酰胺、甲基砜、磺酰胺、二甲基磷氧基；
或者R 3和R 3’与其连接的C原子一起形成C3-C8环烷基、3-8元杂环基、羰基；其中，所述的环烷基、杂环基是未取代或被一个或多个独立选自下组的基团取代：C1-C6烷基、C1-C6烷氧基、C3-C8环烷基、C3-C8环烷氧基、C1-C6杂烷基、3-8元环杂烷基、CHF 2、CF 3、卤素、氰基、羧基、羰基、羟基、巯基、氨基、甲酯、酰胺、甲基砜、磺酰胺、二甲基磷氧基；
A独立选自下组：C3-C8环烷基、3-8元杂环基、C6-C14芳基或5-14元亚杂芳基；
各R 4独立地选自下组：氢、卤素、硝基、氰基、羟基、羧基、巯基、C1-C6烷基、C3-C8环烷基、3-8元杂环基、C1-C6杂烷基、C2-C6烯基、C2-C6炔基、C6-C14芳基、5-14元杂芳基、-OR 5、-SR 5、-N(R 5)(R 6)、-S(O) 2R 5、-S(O)R 5、-C(O)R 5、-OC(O)R 5、-C(O)OR 5、-OC(O)O-(C1-C6亚烷基)-C(O)R 5、-C(O)-N(R 5)(R 6)、-N(R 5)-C(O)R 6、-N(R 5)-C(O)OR 6、-N(R 5)-C(O)N(R 5)(R 6)、-(C1-C6亚烷基)-N(R 5)-C(O)R 6、-N(R 5)S(O) 2R 6、-P(O)(R 5)(R 6)；其中，所述的烷基、环烷基、杂烷基、杂环基、芳基、杂芳基是未取代或被一个或多个独立选自下组的基团取代：C1-C6烷基、C1-C6烷氧基、C3-C8环烷基、C3-C8环烷氧基、C1-C6杂烷基、3-8元环杂烷基、CHF 2、CF 3、卤素、氰基、羧基、羰基、羟基、巯基、氨基、甲酯、酰胺、甲基砜、磺酰胺、二甲基磷氧基；
R 5和R 6各自独立地选自取代或未取代的下组基团：氢、C1-C6烷基、C3-C8环烷基、3-8元单杂环基、C6-C10芳基、5-10元杂芳基、C5-C12稠合双环、5-12元稠合杂双环、C5-C12元螺双环或5-12元螺杂双环；其中，所述取代是指被独立选自下组的一个或多个基团取代：C1-C6烷基、C1-C6烷氧基、C3-C8环烷基、C3-C8环烷氧基、C1-C6杂烷基、3-8元环杂烷基、CHF 2、CF 3、卤素、氰基、羧基、羰基、羟基、巯基、氨基、甲酯、酰胺、甲基砜、磺酰胺、二甲基磷氧基；
或者R 5和R 6与其连接的N或P原子一起形成3-8元杂环基；
如无特别说明，上述烷基、亚烷基、环烷基、杂烷基、烯基、炔基、芳基、杂芳基、杂环基是未取代或被一个或多个独立选自下组的基团取代：C1-C6烷基、C1-C6烷氧基、C3-C8环烷基、3-8元杂环基、C1-C6杂烷基、C2-C6烯基、C2-C6炔基、硝基、卤素、氰基、羟基、羧基、酯基、酰胺基、磺酰胺基、羰基、巯基、胺基、二甲基磷氧基；
n为0、1、2或3。
在另一优选例中，X 1、X 2和X 3各自独立地为CH或N。
在另一优选例中，X 2和X 3独立地为N。
在另一优选例中，X 2独立地为N。
在另一优选例中，B独立地选自下组：氢、卤素、C1-C6烷基或CN，所述烷基是未取代或被一个或多个独立选自下组的基团取代：C1-C6烷基、C1-C6烷氧基、C3-C8环烷基、3-8元杂环基、C1-C6杂烷基、C2-C6烯基、C2-C6炔基、硝基、卤素、氰基、羟基、羧基、酯基、酰胺基、磺酰胺基、羰基、巯基、胺基、二甲基磷氧基。
在另一优选例中，B独立地为CN。
在另一优选例中，所述的式Ⅰ化合物或其药学上可接受的盐、水合物、溶剂化物、立体异构体、同位素化合物或前药，R 2选自下组：氢、C1-C6烷基、C3-C8环烷基；其中，所述的烷基、环烷基是未取代或被一个或多个下组基团取代的：C1-C6烷基、CHF 2、CF 3、卤素、氰基、羟基、羧基、酯基、酰胺基、磺酰胺基、羰基、巯基、胺 基、二甲基磷氧基。
在另一优选例中，所述的式Ⅰ化合物或其药学上可接受的盐、水合物、溶剂化物、立体异构体、同位素化合物或前药，R 3和R 3’各自独立地选自下组：氢、卤素、氰基、羟基、CHF 2、CF 3、C1-C6烷基、C1-C6烷氧基、C3-C8环烷基、C1-C6杂烷基；
或者R 3和R 3’与其连接的C原子一起形成C3-C8环烷基、3-8元杂环基、羰基；
其中，所述的烷基、烷氧基、环烷基、杂烷基、杂环基是未取代或被一个或多个独立选自下组的基团取代：C1-C6烷基、CHF 2、CF 3、卤素、氰基、羟基、羧基、酯基、酰胺基、磺酰胺基、羰基、巯基、胺基、二甲基磷氧基。
在另一优选例中，R 3和R 3’相同或不同，且各自独立地选自下组：氢、卤素、氰基、羟基、C1-C6烷基、C3-C6环烷基，
或者R 3和R 3’与其连接的C原子一起形成C3-C6环烷基、羰基；
其中，所述的烷基、环烷基是未取代或被一个或多个独立选自下组的基团取代：C1-C6烷基、CHF 2、CF 3、卤素、氰基、羟基、羧基、酯基、酰胺基、磺酰胺基、羰基、巯基、胺基、二甲基磷氧基。
在另一优选例中，所述的式Ⅰ化合物或其药学上可接受的盐、水合物、溶剂化物、立体异构体、同位素化合物或前药，R 1独立地选自下组：-OR 5、-OC(O)R 5、-N(R 5)(R 6)、-C(O)-N(R 5)(R 6)、-N(R 5)-C(O)R 6、-N(R 5)-C(O)OR 6、-N(R 5)S(O) 2R 6；其中，R 5和R 6各自独立地选自取代或未取代的下组基团：氢、C1-C6烷基、C3-C8环烷基、3-8元杂环基、C6-C10芳基、5-10元杂芳基；其中，所述取代是指被独立选自下组的一个或多个基团取代：C1-C6烷基、氰基、卤素、羟基、C3-C8环烷基、3-8元杂环基、C6-C10芳基、5-10元杂芳基。
在另一优选例中，R 1独立地为-OR 5，其中，R 5独立地选自取代或未取代的下组基团：C1-C6烷基、C3-C8环烷基、3-8元杂环基、C6-C10芳基、5-10元杂芳基；其中，所述取代是指被独立选自下组的一个或多个基团取代：C1-C6烷基、氰基、卤素、羟基、C3-C8环烷基、3-8元杂环基、C6-C10芳基、5-10元杂芳基。
在另一优选例中，R 1独立地选自下组：C3-C8环烷基、3-8元杂环基、C6-C14芳基、5-14元杂芳基，且所述的环烷基、芳基、杂芳基、杂环基是未取代或被一个或多个独立选自下组的基团取代：C1-C6烷基、C1-C6烷氧基、C3-C8环烷基、3-8元杂环基、C1-C6杂烷基、C2-C6烯基、C2-C6炔基、硝基、卤素、氰基、羟基、羧基、酯基、酰胺基、磺酰胺基、羰基、巯基、胺基、二甲基磷氧基。
在另一优选例中，所述的式Ⅰ化合物或其药学上可接受的盐、水合物、溶剂化物、立体异构体、同位素化合物或前药，A独立选自下组：C6-C10芳基或5-10元杂芳基，其中，所述芳基、杂芳基是未取代或被一个或多个独立选自下组的基团取代：C1-C6烷基、C1-C6烷氧基、C3-C8环烷基、3-8元杂环基、C1-C6杂烷基、C2-C6烯基、C2-C6炔基、硝基、卤素、氰基、羟基、羧基、酯基、酰胺基、磺酰胺基、巯基、胺基、二 甲基磷氧基。
在另一优选例中，所述的式Ⅰ化合物或其药学上可接受的盐、水合物、溶剂化物、立体异构体、同位素化合物或前药，R 4独立地选自下组：氢、C1-C6烷基、C3-C8环烷基、C1-C6杂烷基、C6-C10芳基、5-10元杂芳基、3-8元杂环基、-OR 5、-OC(O)R 5、-N(R 5)(R 6)、-C(O)-N(R 5)(R 6)、-N(R 5)-C(O)R 6、-N(R 5)-C(O)OR 6、-N(R 5)S(O) 2R 6；
其中，R 5和R 6各自独立地为取代或未取代的选自下组的基团：氢、C1-C6烷基、C3-C8环烷基、3-8元杂环基、C6-C10芳基、5-10元杂芳基；其中，所述取代是指被独立选自下组的一个或多个基团取代：C1-C6烷基、氰基、卤素、羟基、C3-C8环烷基、3-8元杂环基、C6-C10芳基、5-10元杂芳基；
如无特别说明，所述的烷基、环烷基、杂烷基、杂环基、芳基、杂芳基是未取代或被一个或多个独立选自下组的基团取代：C1-C6烷基、CHF 2、CF 3、卤素、氰基、羟基、羧基、酯基、酰胺基、磺酰胺基、羰基、巯基、胺基、二甲基磷氧基。
在另一优选例中，各R 4独立地选自下组：氢、C1-C6烷基、C3-C8环烷基、3-8元杂环基、C6-C10芳基、5-10元杂芳基；所述的烷基、环烷基、杂环基、芳基、杂芳基可任选且独立地被一个或多个下组基团取代：C1-C6烷基、CHF 2、CF 3、卤素、氰基、羟基、羧基、酯基、酰胺基、磺酰胺基、羰基、巯基、胺基、二甲基磷氧基。
在另一优选例中，所述的式Ⅰ化合物或其药学上可接受的盐、水合物、溶剂化物、立体异构体、同位素化合物或前药，其具有选自下组的一个或多个特征：
R 1选自下组：-OR 5、-OC(O)R 5、-N(R 5)(R 6)、-C(O)-N(R 5)(R 6)、-N(R 5)-C(O)R 6、-N(R 5)-C(O)OR 6、-N(R 5)S(O) 2R 6，优选地为-OR 5；
B独立地选自下组：氢、卤素、C1-C6烷基或CN，优选地为CN；
X 1、X 2和X 3各自独立地为CH或N；
R 2选自下组：氢、C1-C6烷基、C3-C8环烷基，优选地为氢、C1-C6烷基，更优选地为C1-C6烷基；
R 3和R 3’各自独立地选自下组：氢、卤素、氰基、羟基、CHF 2、CF 3、C1-C6烷基、C1-C6烷氧基、C3-C8环烷基、C1-C6杂烷基，优选地为氢或C1-C6烷基；
或者R 3和R 3’与其连接的C原子一起形成C3-C8环烷基、3-8元杂环基、羰基；
A独立选自下组：C6-C10芳基或5-10元杂芳基；
各R 4独立地选自下组：氢、C1-C6烷基、C3-C8环烷基、C1-C6杂烷基、C6-C10芳基、5-10元杂芳基、3-8元杂环基、-OR 5、-OC(O)R 5、-N(R 5)(R 6)、-C(O)-N(R 5)(R 6)、-N(R 5)-C(O)R 6、-N(R 5)-C(O)OR 6、-N(R 5)S(O) 2R 6，优选地为C3-C8环烷基、C6-C10芳基、5-10元杂芳基、3-8元杂环基；
其中，R 5和R 6各自独立地为取代或未取代的选自下组基团：氢、C1-C6烷基、C3-C8环烷基、3-8元杂环基、C6-C10芳基、5-10元杂芳基；其中，所述取代是指被选自下组的一个或多个基团取代：C1-C6烷基、氰基、卤素、羟基、C3-C8环烷基、3-8元杂 环基、C6-C10芳基、5-10元杂芳基；
如无特别说明，上述烷基、环烷基、杂烷基、芳基、杂芳基、杂环基可任选且独立地被一个或多个下组基团取代：C1-C6烷基、C1-C6烷氧基、C3-C8环烷基、3-8元杂环基、C1-C6杂烷基、C2-C6烯基、C2-C6炔基、硝基、卤素、氰基、羟基、羧基、酯基、酰胺基、磺酰胺基、羰基、巯基、胺基、二甲基磷氧基。
在另一优选例中，所述的式I化合物具有如下式(II)所示的结构：
Figure PCTCN2021089064-appb-000002
其中，
X选自下组：O、S、NR 8；
m为0、1、2或3；
R 7和R 8各自为取代或未取代的选自下组的基团：H、C1-C6烷基、C3-C8环烷基、3-8元单杂环基、C6-C10芳基、5-10元杂芳基、C5-C12稠合双环、5-12元稠合杂双环、C5-C12元螺双环或5-12元螺杂双环；
其中，所述取代是指被独立选自下组的一个或多个基团取代：C1-C6烷基、氰基、卤素、羟基、C3-C8环烷基、3-8元单杂环基、C6-C10芳基、5-10元杂芳基、C5-C12稠合双环、5-12元稠合杂双环、C5-C12元螺双环或5-12元螺杂双环；
B、R 2、R 3、A、R 4、n的定义如上所述。
在另一优选例中，X为O。
在另一优选例中，R 7为C1-C6烷基，所述烷基可任选地被独立选自下组的一个或多个基团取代：C1-C6烷基、氰基、卤素、羟基。
在另一优选例中，所述的式I化合物具有如下式(III)所示的结构：
Figure PCTCN2021089064-appb-000003
其中，B、R 2、R 3、R 4、R 7、m、n的定义如上所述。
在另一优选例中，所述的式I化合物具有如下式(IV)所示的结构：
Figure PCTCN2021089064-appb-000004
其中，R 1选自下组：-OR 5、-N(R 5)(R 6)、C3-C8环烷基、3-8元杂环基、C6-C14芳基、5-14元杂芳基；
R 2选自下组：氢、C1-C6烷基；
R 3选自下组：氢、卤素、氰基、羟基、CHF 2、CF 3、C1-C6烷基、C1-C6烷氧基；
R 4独立地选自下组：C3-C8环烷基、C6-C10芳基、5-10元杂芳基、3-8元杂环基、-OR 5、-OC(O)R 5、-N(R 5)(R 6)、-C(O)-N(R 5)(R 6)、-N(R 5)-C(O)R 6、-N(R 5)-C(O)OR 6、-N(R 5)S(O) 2R 6；
其中，R 5和R 6各自独立地为取代或未取代的选自下组的基团：氢、C1-C6烷基、C3-C8环烷基、3-8元杂环基、C6-C10芳基、5-10元杂芳基；其中，所述取代是指被独立选自下组的一个或多个基团取代：C1-C6烷基、氰基、卤素、羟基、C3-C8环烷基、3-8元杂环基、C6-C10芳基、5-10元杂芳基；
且所述的烷基、环烷基、芳基、杂芳基、杂环基是未取代或被一个或多个独立选自下组的基团取代：C1-C6烷基、C1-C6烷氧基、C3-C8环烷基、3-8元杂环基、C1-C6杂烷基、C2-C6烯基、C2-C6炔基、硝基、卤素、氰基、羟基、羧基、酯基、酰胺基、磺酰胺基、羰基、巯基、胺基、二甲基磷氧基。
在另一优选例中，所述的化合物的前药或其药学上可接受的盐具有式(V)所示的结构：
Figure PCTCN2021089064-appb-000005
其中，R 8选自下组：
Figure PCTCN2021089064-appb-000006
Figure PCTCN2021089064-appb-000007
R 9和R 10各自独立地选自：取代或未取代C1-C6烷基、羟基、OM；M为Na或K；
R 11和R 12各自独立地选自：取代或未取代C1-C6烷基、取代或未取代C6-C10芳基、取代或未取代5-10元杂芳基；
R 13和R 14各自独立地选自：取代或未取代C1-C6烷基、取代或未取代C6-C10芳基、取代或未取代5-10元杂芳基；
p为1、2、3；
其中，所述取代是指被独立选自下组的一个或多个基团取代：C1-C6烷基、C1-C6烷氧基、C3-C8环烷基、3-8元杂环基、C1-C6杂烷基、C2-C6烯基、C2-C6炔基、硝基、卤素、氰基、羟基、羧基、酯基、酰胺基、磺酰胺基、羰基、巯基、胺基；
R 1、R 2、R 3和R 4的定义如上所述。
在另一优选例中，R 4为取代或未取代的5-6元杂芳基，优选地R 4为取代或未取代的下组基团：吡咯基、吡唑基、咪唑基、噁唑基、异噁唑基、噻唑基、噻二唑基、异噻唑基、呋喃基、吡啶基、吡嗪基、嘧啶基、哒嗪基、三氮嗪基、三氮唑基及四氮唑基；所述取代是指被一个或多个独立选自下组的基团取代：C1-C6烷基、CHF 2、CF 3、卤素(优选地为F)、氰基、羟基、羧基、酯基、酰胺基、磺酰胺基、羰基、巯基、胺基、二甲基磷氧基。
在另一优选例中，R 2和R 3各自独立地选自下组：氢、C1-C6烷基。
在另一优选例中，X 1、X 2、X 3、R 1、R 2、R 3、R 3’、R 4、n、p、A、X、R 7、R 8和B为实施例中各具体化合物相对应的具体基团。
在另一优选例中，所述的式Ⅰ化合物或其药学上可接受的盐、水合物、溶剂化物、立体异构体、同位素化合物或前药，所述化合物选自下组：
Figure PCTCN2021089064-appb-000008
Figure PCTCN2021089064-appb-000009
Figure PCTCN2021089064-appb-000010
Figure PCTCN2021089064-appb-000011
Figure PCTCN2021089064-appb-000012
本发明第二方面，提供一种药物组合物，其包含第一方面所述的化合物或其药学上可接受的盐、水合物、溶剂化物、同位素化合物或前药；和药用载体或稀释剂。
在另一优选例中，所述药物组合物还包括第二癌症治疗剂。
在另一优选例中，所述的第二癌症治疗剂包括放射剂、细胞毒试剂、激酶抑制剂、免疫靶向抑制剂和血管生成抑制剂。
在另一优选例中，所述第二癌症治疗剂是选自下组的一种或多种：
PD-1抑制剂(如纳武单抗、派姆单抗、JS-001、SHR-120、BGB-A317、IBI-308、GLS-010、GB-226、STW204、HX008、HLX10、BAT1306、AK105、LZM 009或上述药物的生物类似药等)、PD-L1抑制剂(如德瓦鲁单抗、阿特珠单抗、CS1001、KN035、HLX20、SHR-1316、BGB-A333、JS003、CS1003、KL-A167、F 520、GR1405、MSB2311或上述药物的生物类似药等)、CD20抗体(如利妥昔单抗、奥滨尤妥珠单抗、奥法木单 抗、托西莫单抗、替伊莫单抗等)、CD47抗体(如Hu5F9-G4、CC-90002、TTI-621、TTI-622、OSE-172、SRF-231、ALX-148、NI-1701、SHR-1603、IBI188、IMM01)、ALK抑制剂(如色瑞替尼、艾乐替尼、布加替尼、劳拉替尼、奥卡替尼)、PI3K抑制剂(如艾代拉里斯、Dactolisib、Taselisib、Buparlisib等)、BTK抑制剂(如依鲁替尼、Tirabrutinib、Acalabrutinib等)、EGFR抑制剂(如阿法替尼、吉非替尼、厄洛替尼、拉帕替尼、达克替尼、埃克替尼、卡奈替尼等)、VEGFR抑制剂(如索拉非尼、帕唑帕尼、瑞伐替尼、卡博替尼、舒尼替尼、多纳非尼等)、HDAC抑制剂(如Givinostat、Droxinostat、恩替诺特、达西司特、泰克地那林等)、CDK抑制剂(如帕博西尼、瑞博西尼、Abemaciclib、Lerociclib等)、MEK抑制剂(如司美替尼(AZD6244)、曲美替尼(GSK1120212)、PD0325901、U0126、AS-703026、PD184352(CI-1040)等)、Akt抑制剂(如MK-2206、Ipatasertib、Capivasertib、Afuresertib、Uprosertib等)、mTOR抑制剂(如Vistusertib等)、SHP2抑制剂(如RMC-4630、JAB-3068、TNO155等)、IGF-1R抑制剂(如Ceritinib、奥卡替尼、linsitinib、BMS-754807、GSK1838705A等)或其组合。
本发明第三方面，提供一种如第一方面所述的化合物或如第二方面所述的药物组合物在制备用于抑制细胞或受试者中的RET激酶活性的药物中的用途。
在另一优选例中，所述药物用于治疗与RET相关疾病的下述失调：RET基因、RET激酶、或其中任何一者的表达或活性或水平失调。其中，RET基因的表达或活性或水平失调由RET基因突变(如点突变和基因融合)导致的。
在另一优选例中，RET相关疾病是指与RET基因、RET激酶(也称为RET激酶蛋白质)或其中任一者(例如一个或多个)的表达或活性或水平的失调(例如本文所述的RET基因、RET激酶、RET激酶结构域或其任何一个的表达或活性或水平的任何类型的失调)相关或具有该失调的疾病或病症。
在另一优选例中，所述疾病选自下组：肠易激综合征、眼疾疾病、风湿性关节炎、肺纤维化、肝纤维化、肿瘤，所述肿瘤包括：膀胱癌、卵巢癌、腺癌、胃癌、胰腺癌、前列腺癌、结肠癌、肺癌、骨癌、脑癌、神经细胞瘤、直肠癌、结肠癌、家族性腺瘤性息肉性癌、遗传性非息肉性结直肠癌、食管癌、唇癌、喉癌、下咽癌、舌癌、唾液腺癌、胃癌、腺癌、甲状腺髓样癌、乳头状甲状腺癌、肾癌、肾实质癌、卵巢癌、宫颈癌、子宫体癌、子宫内膜癌、绒毛膜癌、胰腺癌、前列腺癌、睾丸癌、泌尿癌、黑素瘤、急性淋巴性白血病、慢性淋巴性白血病、急性骨髓性白血病、慢性粒细胞白血病、肝细胞癌、胆囊癌、支气管癌、小细胞肺癌、非小细胞肺癌、多发性骨髓瘤。
在另一优选例中，RET基因、RET激酶、或其中任何一者的表达或活性或水平失调为所述RET基因中的一个或多个点突变，所述RET基因中的一个或多个点突变引起在一个或多个包括但不限于以下氨基酸位置具有一个或多个氨基酸取代的RET蛋白质的翻译：378、385、618、620、630、631、633、804、810、883、918。
在另一优选例中，RET基因的表达或活性或水平失调为RET基因融合体，所述RET 基因融合体包括但不限于以下：KIF5B-RET、CDC6-RET、NCOA4-RET、CLIP1-RET、ERC1-RET、RUFY3-RET、TFG-RET、PRKAR1A-RET、KTN1-RET。
在另一优选例中，RET相关疾病包括但不限于肿瘤和肠应激综合征。
在另一优选例中，RET相关肿瘤包括但不限于：肺癌、乳头状甲状腺癌、髓质甲状腺癌、分化的甲状腺癌、复发性甲状腺癌、难治性分化甲状腺癌、2A或2B型多发性内分泌瘤(分别为MEN2A或MEN2B)、嗜铬细胞瘤、副甲状腺增生、乳腺癌、结肠直肠癌、乳头状肾细胞癌、胃肠道粘膜的神经节瘤病以及子宫颈癌。
在另一优选例中，所述肺癌为RET融合体肺癌或所述癌症为髓质甲状腺癌。
本发明第四方面，提供一种治疗RET相关疾病的方法，所述方法包括给予被鉴定或诊断为具有RET相关疾病的受试者治疗有效量的第一方面所述的化合物或其药学上可接受的盐或溶剂化物，或第二方面所述的药物组合物。
本发明第五方面，本发明提供一种用于抑制细胞或受试者中的RET激酶活性的方法，所述方法包括使所述细胞接触或向所述受试者施用第一方面所述的化合物或第二方面所述的药物组合物的步骤。
在另一优选例中，所述细胞为哺乳动物细胞。
在另一优选例中，所述受试者为哺乳动物，优选为人。
应理解，在本发明范围内中，本发明的上述各技术特征和在下文(如实施例)中具体描述的各技术特征之间都可以互相组合，从而构成新的或优选的技术方案。限于篇幅，在此不再一一累述。
具体实施方式
本发明人经过广泛而深入的研究，意外地发现了一类具有较好的RET激酶抑制活性，同时对VEGFR2激酶具有较好的选择性的化合物。此外，所述化合物对RET激酶敏感的细胞均具有优异的抑制活性，并且具有更好药效学/药代动力学性能。在此基础上，完成了本发明。
术语
在本发明中，除非特别指出，所用术语具有本领域技术人员公知的一般含义。
当通过从左向右书写的常规化学式描述取代基时，该取代基也同样包括从右向左书写结构式时所得到的在化学上等同的取代基。举例而言，-CH 2O-等同于-OCH 2-。
术语“烷基”本身或作为另一取代基的一部分，是指具有指定的碳原子数的直链或支链烃基(即，C1-C6是指包含1、2、3、4、5或6个碳原子)。烷基的实例包括但不限于甲基、乙基、正丙基、异丙基、正丁基、叔丁基、异丁基、仲丁基、正戊基、正己基及其类似烷基。本申请中，烷基还意在包含取代烷基，即烷基中的一个或多个位置 被取代，尤其是1-4个取代基，可在任何位置上取代。
术语“烷氧基”是指通过醚氧连接的直链或支链或环状烷基，其游离价键来自该醚氧。烷氧基优选C1-C6烷氧基，更优选地为C1-C3烷氧基。代表性的例子包括(但并不限于)：甲氧基、乙氧基、丙氧基、异丙氧基和丁氧基等。优选为C1-C3烷氧基。
术语“杂烷基”是指烷基中的碳原子被1、2、3个选自N、O、S、Si或P的杂原子取代的基团，且其中，氮和硫原子任选地被氧化，本发明中“C1-C6杂烷基”是指包含1-6(即1、2、3、4、5或6)个碳原子，和1、2、3个选自N、O、S或P的杂原子的基团，代表性的例子包括(但并不限于)：CH 3OCH 2-、CH 3SCH 2-、CH 3CH 2OCH 2-等。
术语“环烷基”是指包括饱和单环(如，C3-C8)、双环(如，C5-C12稠合双环、C5-C12元螺双环)或多环的环状烷基。C3-C8指包括3、4、5、6、7、或8个碳原子的环状烷基。本发明的代表性的环烷基包括但不限于：环丙基、环丁基、环戊基、环己基、降莰烷基、
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等。应理解，取代或未取代的环烷基，例如支化环烷基(如1-甲基环丙基和2-甲基环丙基)，均包括在“环烷基”的定义中。
术语“杂环”、“杂环基”或“杂环基团”通常指稳定的单环(如3-8元，即3元、4元、5元、6元、7元或8元)或二环(如5-12元，即5元、6元、7元、8元、9元、10元、11元或12元)或元多环(如7-14元，即7元、8元、9元、10元、11元、12元、13元或14)杂环，包括稠环、螺环和/或桥环结构，其为饱和的、部分不饱和的，且其含有碳原子和1个、2个、3个或4个独立地选自N、O和S的杂原子。该术语还包括杂环与芳环(如苯环)稠合所形成的多环基团。“杂环”可以是取代的或者未取代的。作为环原子的氮和硫杂原子可任选地被氧化。氮原子为取代的或未取代的(即N或NR，其中R为H或如果被定义，则为另一取代基)。杂环可在得到稳定结构的任何杂原子或碳原子处连接至其侧基。如果所得化合物是稳定的，则本文所述的杂环基可在碳或氮原子上被取代。杂环中的氮可任选地被季铵化。优选地，当杂环中S和O原子的总数超过1时，则这些杂原子彼此不相邻。优选地，杂环中S和O原子的总数不大于1。杂环基团可以连接到环或环系分子的任何杂原子或碳原子的残基上。杂环的实施例包括但不限于典型的单环杂环基包括但不限于氮杂环丁烷基、吡咯烷基、氧杂环丁烷基、吡唑啉基、咪唑啉基、咪唑烷基、噁唑烷基、异噁唑烷基、噻唑烷基、异噻唑烷基、四氢呋喃基、哌啶基、哌嗪基、2-氧代哌嗪基、2-氧代哌啶基、2-氧代吡咯烷基、六氢吖庚因基、4-哌啶酮基、四氢吡喃基、吗啡啉基、硫代吗啡啉基、硫代吗啡啉亚砜基、硫代吗啡啉砜基、1,3-二噁烷基和四氢-1,1-二氧噻吩等。多环杂环基包括螺环(例如5-12元，优选地7-9元)、稠环(例如5-12元，优选地8-10元)和桥环的杂环基；螺环和稠环的实例包括但不限于
Figure PCTCN2021089064-appb-000014
Figure PCTCN2021089064-appb-000015
等，其中涉及到的螺环、稠环和桥环的杂环基任选与其他基团通过单键相连接，或者通过环上的任意两个或两个以上的原子与其他环烷基、杂环基、芳基和杂芳基进一步并环连接。
一类优选的杂环基是指具有指定的环顶点(或成员)数且具有一至五个选自N、O、S或P的杂原子分别取代环骨架中碳原子，且其中，氮和硫原子任选地被氧化，且氮原子任选被季铵化的环烷基环。环杂烷基通常为3-12元环，本发明中优选地为3-8元环，例如3-8元单环、双环(5-12元稠合杂双环、5-12元螺杂双环)或多环系统(8-16元三环)。环杂烷基例子包括但并不限于：吡咯烷基、咪唑烷基、吡唑烷基、丁内酰胺基、戊内酰胺基、咪唑烷酮基、乙内酰脲基、二氧杂环戊烷基、邻苯二甲酰亚胺基、哌啶基、1,4-二氧六环基、吗啉基、硫代吗啉基、硫代吗啉-S-氧化物、硫代吗啉-S,S-氧化物、哌嗪基、哌喃基、吡啶酮基、3-吡咯啉基、噻喃基、吡喃酮基、四氢呋喃基、四氢噻吩基、奎宁环、
Figure PCTCN2021089064-appb-000016
等及其类似物。
术语“烯基”表示含一个或多个双键且通常长度为2至20个碳原子(或C2-C8)的直链或支链的烃基。例如，本发明中，“C2-C6烯基”含有2、3、4、5或6个碳原子。烯基包括但不限于例如乙烯基、丙烯基、丁烯基、1-甲基-2-丁烯-1-基等。本发明中，烯基包括取代的烯基。
术语“炔基”表示含一个或多个三键且通常长度为2至20个碳原子(或C2-C8)的直链或支链的烃基。本发明中，“C2-6炔基”是指具有2、3、4、5或6个碳原子的直链或支链的炔基，包括但不限于乙炔基、丙炔基或类似基团。本发明中，炔基还包括取代炔基，取代基可以为卤代、羟基、氰基、硝基等。
术语“芳基”，单独或作为较大部分诸如“芳烷基”、“芳烷氧基”或“芳基氧基烷基”的部分，是指具有总计5至15个环成员的单环、二环或三环的环系统(优选6-10元芳环)，其中所述系统中的至少一个环为芳族的且其中所述系统中的每个环含有3至7个环成员。“芳基”可以是取代的或者未取代的。在本发明的某些实施方案中，“芳基”是指芳族环系统，其包括但不限于苯基、联苯基、茚满基、1-萘基、2-萘基和四氢萘基。所述芳基可以稠合于杂芳基、杂环基或环烷基环上，其中与母体结构连接在一起的环为芳基环。稠合的芳基可在环烷基环或芳族环的合适位置上连接至另一基团。从环系统中画出的连接线表明键可连接至任意合适的环原子。芳基可以是任选取代的或未取代的。
术语“杂芳基”指包含1-4个杂原子、5-14个环原子的杂芳族体系，其中，杂原子选自氧、氮和硫。杂芳基优选5至10元环，更优选为5元或6元，例如吡咯基、吡唑基、 咪唑基、噁唑基、异噁唑基、噻唑基、噻二唑基、异噻唑基、呋喃基、吡啶基、吡嗪基、嘧啶基、哒嗪基、三氮嗪基、三氮唑基及四氮唑基等。“杂芳基”可以是取代的或者未取代的，当被取代时，取代基优选为一个或多个以下基团，其独立地选自烷基、氘代烷基、卤代烷基、烷氧基、卤代烷氧基、烯基、炔基、烷硫基、烷基氨基、卤素、氨基、硝基、羟基、巯基、氰基、环烷基、杂环基、芳基、杂芳基、环烷硫基、氧代基、羧基和羧酸酯基。
在本发明中，“胺基”是指具有-N(R)(R')结构，R和R'可以独立的代表氢、烷基或取代的烷基(如C1-C6烷基)、环烷基或取代的环烷基、芳基或取代的芳基、杂环或取代的杂环，如上文所定义。R和R'在二烷基胺片段中可以相同或不同。优选地，胺基为氨基(NH 2)。
在本发明中，“酯基”是指具有-C(O)-O-R或R-C(O)-O-结构，其中，R独立地代表氢、烷基、环烷基、芳基、杂芳基、杂环基，如上文所定义。
在本发明中，术语“酰胺基”是指带有结构-CONRR'的基团，其中，R和R'可以独立的代表氢、烷基或取代的烷基、环烷基或取代的环烷基、芳基或取代的芳基、杂环或取代的杂环，如上文所定义。R和R'在二烷基胺片段中可以相同或不同。
在本发明中，术语“磺酰胺基”是指带有结构-SO 2NRR'的基团，其中R和R'可以独立的代表氢、烷基或取代的烷基、环烷基或取代的环烷基、芳基或取代的芳基、杂环或取代的杂环，如上文所定义。R和R'在二烷基胺片段中可以相同或不同。
在本发明中，上述的烷基、烷氧基、环烷基、杂烷基、芳基、杂芳基、环杂烷基、烯基、炔烃、杂环、杂环基等中各基团可以是取代的或未取代的。
除非另外说明，假定任何不满价态的杂原子有足够的氢原子补充其价态。
当取代基为非末端取代基时，其为相应基团的亚基，例如烷基对应于亚烷基、环烷基对应亚环烷基、杂环基对亚杂环基、烷氧基对应亚烷氧基等。
在本发明中，术语“取代”指特定的基团上的一个或多个氢原子被特定的取代基所取代。特定的取代基为在前文中相应描述的取代基，或各实施例中所出现的取代基。除非特别说明，某个取代的基团可以在该基团的任何可取代的位点上具有一个选自特定组的取代基，所述的取代基在各个位置上可以是相同或不同的，即各个取代之间是相互独立地。本领域技术人员应理解，本发明所预期的取代基的组合是那些稳定的或化学上可实现的组合。典型的取代包括但不限于一个或多个以下基团：如氢、氘、卤素(例如，单卤素取代基或多卤素取代基，后者如三氟甲基或包含Cl 3的烷基)、氰基、硝基、氧代(如＝O)、三氟甲基、三氟甲氧基、环烷基、烯基、炔基、杂环、芳环、OR a、SR a、S(＝O)R e、S(＝O) 2R e、P(＝O) 2R e、S(＝O) 2OR e，P(＝O) 2OR e、NR bR c、NR bS(＝O) 2R e、NR bP(＝O) 2R e、S(＝O) 2NR bR c、P(＝O) 2NR bR c、C(＝O)OR d、C(＝O)R a、C(＝O)NR bR c、OC(＝O)R a、OC(＝O)NR bR c、NR bC(＝O)OR e、NR dC(＝O)NR bR c、NR dS(＝O) 2NR bR c、NR dP(＝O) 2NR bR c、NR bC(＝O)R a、或NR bP(＝O) 2R e，其中，R a可以独立表示氢、氘、烷 基、环烷基、烯基、炔基、杂环或芳环，R b、R c和R d可以独立表示氢、氘、烷基、环烷基、杂环或芳环，或者R b和R c与N原子一起可以形成杂环；R e可以独立表示氢、烷基、环烷基、烯基、炔基、杂环或芳环。上述典型的取代基，如烷基、环烷基、烯基、环烯基、炔基、杂环或芳环可以任选取代。所述取代基例如(但并不限于)：卤素、羟基、氰基、羧基(-COOH)、C1-C6烷基、C2-C6烯基、C2-C6炔基、C3-C8环烷基、3-12元杂环基、芳基、杂芳基、C1-C8醛基、C2-C10酰基、C2-C10酯基、胺基、C1-C6烷氧基、C1-C10磺酰基、及C1-C6脲基等。
术语“卤代”或“卤素”包括氟、氯、溴和碘。
术语“氰基”指-CN。
术语“羟基”指-OH。
术语“二甲基磷氧基”指
Figure PCTCN2021089064-appb-000017
在本发明中，术语“多个”独立指2、3、4、5个。
在本发明中，术语“RET基因、RET激酶或其中任何一个的表达或活性或水平的失调”是指基因突变或者由基因突变导致的，包括点突变和基因融合。例如，RET基因、RET蛋白质或其中任何一个的表达或活性或水平的失调可以是编码RET蛋白质的RET基因中的突变，该RET蛋白质具有组成性活性或相比于由不包括突变的RET基因编码的蛋白质具有增加的活性。例如，RET基因、RET蛋白质或其中任何一个的表达或活性或水平的失调可以是基因或染色体易位的结果，该基因或染色体易位引起含有包括功能性激酶结构域的RET的第一部分与伴侣蛋白质(即，非RET的)的第二部分的融合蛋白质的表达。
活性成分
如本文所用，术语“本发明的化合物”或“本发明的活性成分”可互换使用，指式I化合物、或其药学上可接受的盐、水合物、溶剂化物、同位素化合物(如氘代化合物)或前药(包括但不限于酯、酰胺、磷酸酯、磷酸酯钠盐、氨基酸酯等)。该术语还包括外消旋体、光学异构体。
所述的式(I)化合物具有如下结构：
Figure PCTCN2021089064-appb-000018
式中，
X 1、X 2、X 3、R 1、R 2、R 3、R 3’、R 4、n、A和B的定义如上所述。
优选地，式I化合物具有式(II)所示的结构
Figure PCTCN2021089064-appb-000019
式中，R 2、R 3、R 4、R 7、m、n、A、B和X的定义如上所述。
优选地，式I化合物具有式(III)所示的结构
Figure PCTCN2021089064-appb-000020
其中，B、R 2、R 3、R 4、R 7、m、n的定义如上所述。
优选地，所述的式I化合物具有如下式(IV)所示的结构：
Figure PCTCN2021089064-appb-000021
其中，R 1选自下组：-OR 5、-N(R 5)(R 6)、C3-C8环烷基、3-8元杂环基、C6-C14芳基、5-14元杂芳基；
R 2选自下组：氢、C1-C6烷基；
R 3选自下组：氢、卤素、氰基、羟基、CHF 2、CF 3、C1-C6烷基、C1-C6烷氧基；
R 4独立地选自下组：C3-C8环烷基、C6-C10芳基、5-10元杂芳基、3-8元杂环基、-OR 5、-OC(O)R 5、-N(R 5)(R 6)、-C(O)-N(R 5)(R 6)、-N(R 5)-C(O)R 6、-N(R 5)-C(O)OR 6、-N(R 5)S(O) 2R 6；
其中，R 5和R 6各自独立地为取代或未取代的选自下组的基团：氢、C1-C6烷基、C3-C8环烷基、3-8元杂环基、C6-C10芳基、5-10元杂芳基；其中，所述取代是指被选自下组的一个或多个基团取代：C1-C6烷基、氰基、卤素、羟基、C3-C8环烷基、3-8元杂环基、C6-C10芳基、5-10元杂芳基；
且所述的烷基、环烷基、芳基、杂芳基、杂环基是未取代或被一个或多个下组基团取代的：C1-C6烷基、C1-C6烷氧基、C3-C8环烷基、3-8元杂环基、C1-C6杂烷基、C2-C6烯基、C2-C6炔基、硝基、卤素、氰基、羟基、羧基、酯基、酰胺基、磺酰胺基、羰基、巯基、胺基、二甲基磷氧基。
优选地，上述式I-IV所述的化合物的前药或其药学上可接受的盐具有式(V)所示的结构：
Figure PCTCN2021089064-appb-000022
其中，R 8选自下组：
Figure PCTCN2021089064-appb-000023
Figure PCTCN2021089064-appb-000024
R 9和R 10各自独立地选自：取代或未取代C1-C6烷基、羟基、OM；M为Na或K；
R 11和R 12各自独立地选自：取代或未取代C1-C6烷基、取代或未取代C6-C10芳基、取代或未取代5-10元杂芳基；
R 13和R 14各自独立地选自：取代或未取代C1-C6烷基、取代或未取代C6-C10芳基、取代或未取代5-10元杂芳基；
p为1、2、3；
其中，所述取代是指被选自下组的一个或多个基团取代：C1-C6烷基、C1-C6烷氧基、C3-C8环烷基、3-8元杂环基、C1-C6杂烷基、C2-C6烯基、C2-C6炔基、硝基、卤素、氰基、羟基、羧基、酯基、酰胺基、磺酰胺基、羰基、巯基、胺基；
R 1、R 2、R 3和R 4的定义如上所述。
优选地，上述式I-VI中，R 4为取代或未取代的5-6元杂芳基，优选地R 4为取代或未取代的下组基团：吡咯基、吡唑基、咪唑基、噁唑基、异噁唑基、噻唑基、噻二唑基、异噻唑基、呋喃基、吡啶基、吡嗪基、嘧啶基、哒嗪基、三氮嗪基、三氮唑基及四氮唑基；所述取代是指被一个或多个下组基团取代：C1-C6烷基、CHF 2、CF 3、卤素(优选地为F)、氰基、羟基、羧基、酯基、酰胺基、磺酰胺基、羰基、巯基、胺基、二甲基磷氧基；
R 2和R 3各自独立地选自下组：氢、C1-C6烷基。
本发明中的化合物可能形成的盐也是属于本发明的范围。除非另有说明，本发明中的化合物被理解为包括其盐类。在此使用的术语“盐”，指用无机或有机酸和碱形成酸式或碱式的盐。此外，当本发明中的化合物含一个碱性片段时，它包括但不限于吡啶或咪唑，含一个酸性片段时，包括但不限于羧酸，可能形成的两性离子(“内盐”)包含在术语“盐”的范围内。药学上可接受的(即无毒，生理可接受的)盐是首选，虽然其他盐类也有用，例如可以用在制备过程中的分离或纯化步骤。本发明的化合物可能形成盐，例如，化合物I与一定量如等当量的酸或碱反应，在介质中盐析出来，或在水溶液中冷冻干燥得来。
本发明中的化合物含有的碱性片段，包括但不限于胺或吡啶或咪唑环，可能会和有机 或无机酸形成盐。可以成盐的典型的酸包括醋酸盐(如用醋酸或三卤代醋酸，如三氟乙酸)、己二酸盐、藻朊酸盐、抗坏血酸盐、天冬氨酸盐、苯甲酸盐、苯磺酸盐、硫酸氢盐、硼酸盐、丁酸盐、柠檬酸盐、樟脑盐、樟脑磺酸盐、环戊烷丙酸盐、二甘醇酸盐、十二烷基硫酸盐、乙烷磺酸盐、延胡索酸盐、葡庚糖酸盐、甘油磷酸盐、半硫酸盐、庚酸盐、己酸盐、盐酸盐、氢溴酸盐、氢碘酸盐、羟基乙磺酸盐(如，2-羟基乙磺酸盐)、乳酸盐、马来酸盐、甲磺酸盐、萘磺酸盐(如，2-萘磺酸盐)、烟酸盐、硝酸盐、草酸盐、果胶酸盐、过硫酸盐、苯丙酸盐(如3-苯丙酸盐)、磷酸盐、苦味酸盐、新戊酸盐、丙酸盐，水杨酸盐、琥珀酸盐、硫酸盐(如与硫酸形成的)、磺酸盐、酒石酸盐、硫氰酸盐、甲苯磺酸盐如对甲苯磺酸盐、十二烷酸盐等等。
本发明的某些化合物可能含有的酸性片段，包括但不限于羧酸，可能会和各种有机或无机碱形成盐。典型的碱形成的盐包括铵盐、碱金属盐如钠、锂、钾盐，碱土金属盐如钙、镁盐和有机碱形成的盐(如有机胺)，如苄星、二环已基胺、海巴胺(与N,N-二(去氢枞基)乙二胺形成的盐)、N-甲基-D-葡糖胺、N-甲基-D-葡糖酰胺、叔丁基胺，以及和氨基酸如精氨酸、赖氨酸等等形成的盐。碱性含氮基团可以与卤化物季铵盐，如小分子烷基卤化物(如甲基、乙基、丙基和丁基的氯化物、溴化物及碘化物)，二烷基硫酸盐(如，硫酸二甲酯、二乙酯，二丁酯和二戊酯)，长链卤化物(如癸基、十二烷基、十四烷基和十四烷基的氯化物、溴化物及碘化物)，芳烷基卤化物(如苄基和苯基溴化物)等等。
本发明中化合物的前药及溶剂合物也在涵盖的范围之内。此处术语“前药”是指一种化合物，在治疗相关疾病时，经过代谢或化学过程的化学转化而产生本发明中的化合物、盐、或溶剂合物。本发明的化合物包括溶剂合物，如水合物。
本发明中的化合物、盐或溶剂合物，可能存在的互变异构形式(例如酰胺和亚胺醚)。所有这些互变异构体都是本发明的一部分。
所有化合物的立体异构体(例如，那些由于对各种取代可能存在的不对称碳原子)，包括其对映体形式和非对映形式，都属于本发明的设想范围。本发明中的化合物独立的立体异构体可能不与其他异构体同时存在(例如，作为一个纯的或者实质上是纯的光学异构体具有特殊的活性)，或者也可能是混合物，如消旋体，或与所有其他立体异构体或其中的一部分形成的混合物。本发明的手性中心有S或R两种构型，由理论与应用化学国际联合会(IUPAC)1974年建议定义。外消旋形式可通过物理方法解决，例如分步结晶，或通过衍生为非对映异构体分离结晶，或通过手性柱色谱法分离。单个的光学异构体可通过合适的方法由外消旋体得到，包括但不限于传统的方法，例如与光学活性酸成盐后再结晶。
本发明中的化合物，依次通过制备、分离纯化获得的该化合物其重量含量等于或大于90％，例如，等于或大于95％，等于或大于99％(“非常纯”的化合物)，在正文描述列出。此处这种“非常纯”本发明的化合物也作为本发明的一部分。
本发明的化合物所有的构型异构体都在涵盖的范围之内，无论是混合物、纯的或 非常纯的形式。在本发明化合物的定义包含顺式(Z)和返式(E)两种烯烃异构体，以及碳环和杂环的顺式和反式异构体。
在整个说明书中，基团和取代基可以被选择以提供稳定的片段和化合物。
特定官能团和化学术语定义都详细介绍如下。对本发明来说，化学元素与Periodic Table of the Elements，CAS version，Handbook of Chemistry and Physics，75 th Ed.中定义的一致。特定官能团的定义也在其中描述。此外，有机化学的基本原则以及特定官能团和反应性在“Organic Chemistry”，Thomas Sorrell，University Science Books，Sausalito:1999，也有说明，其全部内容纳入参考文献之列。
本发明的某些化合物可能存在于特定的几何或立体异构体形式。本发明涵盖所有的化合物，包括其顺式和反式异构体、R和S对映异构体、非对映体、(D)型异构体、(L)型异构体、外消旋混合物和其它混合物。另外不对称碳原子可表示取代基，如烷基。所有异构体以及它们的混合物，都包涵在本发明中。
按照本发明，同分异构体的混合物含有异构体的比率可以是多样的。例如，在只有两个异构体的混合物可以有以下组合：50:50，60:40，70:30，80:20，90:10，95:5，96:4，97:3，98:2，99:1，或100:0，异构体的所有比率都在本发明范围之内。本专业内一般技术人员容易理解的类似的比率，及为更复杂的异构体的混合物的比率也在本发明范围之内。
本发明还包括同位素标记的化合物，等同于原始化合物在此公开。不过实际上对一个或更多的原子被与其原子量或质量序数不同的原子取代通常会出现。可以列为本发明的化合物同位素的例子包括氢、碳、氮、氧、磷、硫、氟和氯同位素，分别如 2H、 3H、 13C、 11C、 14C、 15N、 18O、 17O、 31P、 32P、 35S、 18F和 36Cl。本发明中的化合物，或对映体，非对映体，异构体，或药学上可接受的盐或溶剂化物，其中含有上述化合物的同位素或其他同位素原子都在本发明的范围之内。本发明中某些同位素标记化合物，例如 3H和 14C的放射性同位素也在其中，在药物和底物的组织分布实验中是有用的。氚，即 3H和碳-14，即 14C，它们的制备和检测比较容易。是同位素中的首选。此外，较重同位素取代如氘，即 2H，由于其很好的代谢稳定性在某些疗法中有优势，例如在体内增加半衰期或减少用量，因此，在某些情况下可以优先考虑。同位素标记的化合物可以用一般的方法，通过用易得的同位素标记试剂替换为非同位素的试剂，用批露在示例中的方案可以制备。
如果要设计一个本发明的化合物特定的对映体的合成，它可以不对称合成制备，或用手性辅剂衍生化，将所产生的非对映混合物分离，再除去手性辅剂而得到纯的对映体。另外，如果分子中含有一个碱性官能团，如氨基酸，或酸性官能团，如羧基，可以用合适的光学活性的酸或碱的与之形成非对映异构体盐，再通过分离结晶或色谱等常规手段分离，然后就得到了纯的对映体。
如本文所述，本发明中的化合物可与任何数量取代基或官能团取而扩大其包涵范 围。通常，术语“取代”不论在术语“可选”前面或后面出现，在本发明配方中包括取代基的通式，是指用指定结构取代基，代替氢自由基。当特定结构中的多个在位置被多个特定的取代基取代时，取代基每一个位置可以是相同或不同。本文中所使用的术语“取代”包括所有允许有机化合物取代。从广义上讲，允许的取代基包括非环状的、环状的、支链的非支链的、碳环的和杂环的，芳环的和非芳环的有机化合物。在本发明中，如杂原子氮可以有氢取代基或任何允许的上文所述的有机化合物来补充其价态。此外，本发明是无意以任何方式限制允许取代有机化合物。本发明认为取代基和可变基团的组合在以稳定化合物形式在疾病的治疗上是很好的。此处术语“稳定”是指具有稳定的化合物，在足够长的时间内检测足以维持化合物结构的完整性，最好是在足够长的时间内都在效，本文在此用于上述目的。
本申请所涉及的化合物及其药学可接受的盐的代谢产物，以及可以在体内转变为本申请所涉及的化合物及其药学可接受的盐的结构的前药，也包含在本申请的权利要求中。
制备方法
以下方案和实例中描述了制备式I的化合物的方法。原料和中间体从商业来源购买，由已知步骤制备，或以其他方式说明。在某些情况下，可以改变执行反应方案的步骤的顺序，以促进反应或避免不需要的副反应产物。
下面更具体地描述本发明式(I)结构化合物的制备方法，但这些具体方法不对本发明构成任何限制。本发明化合物还可以任选将在本说明书中描述的或本领域已知的各种合成方法组合起来而方便的制得，这样的组合可由本发明所属领域的技术人员容易的进行。
通常，在制备流程中，各反应通常惰性气体保护下，适当溶剂中，在0到90℃下进行，反应时间通常为2-24小时。
方法一：
Figure PCTCN2021089064-appb-000025
X 1、X 2、X 3、A、B、R 1、R 2、R 3、R 3’和R 4具有上面所述的定义；
所述方法包括以下步骤：
(i)惰性溶剂中(例如DMF)，碱性条件下(例如，Cs 2CO 3)，化合物1-1发生反应，得到化合物1-2；
(ii)碱性条件(例如，Na 2CO 3)和催化剂(例如，钯催化剂)存在下，化合物1-2和化合物1-3进行偶联反应，得到化合物1-4；
(iii)惰性溶剂中(例如，DMSO)，高温及碱性条件(例如，K 2CO 3)下，化 合物1-4和化合物1-5反应，得到化合物1-6。
方法二：
Figure PCTCN2021089064-appb-000026
X 1、X 2、X 3、A、B、R 1、R 2、R 3、R 3’和R 4具有上面所述的定义；
所述方法包括以下步骤：
(i')惰性溶剂中(例如，DMSO)，高温及碱性条件(例如，K 2CO 3)下，化合物2-1和2-2反应得到化合物2-3；
(ii')惰性溶剂中(例如，DMF)，催化剂(例如，钯催化剂)存在下，化合物2-3与Sn 2(Bu-n) 6反应，得到锡试剂化合物2-4；
(iii')惰性溶剂中(例如，二甲苯)，催化剂(例如，钯催化剂)存在下，化合物2-4锡试剂和化合物2-5偶联，得到化合物2-6。
方法三：
Figure PCTCN2021089064-appb-000027
式中，X 1、X 2、X 3、A、B、R 1、R 2、R 3、R 3’和R 4具有上面所述的定义；
所述方法包括以下步骤：
(i)惰性溶剂中(例如，DMF)，碱性条件(例如，DIPEA)下，化合物3-1和N-苯基双(三氟甲烷磺酰)亚胺反应得到化合物3-2；
(ii)在混合溶剂中(例如，二氧六环/水)，催化剂(例如，钯催化剂)存在下，化合物3-2与化合物3-3耦联，得到化合物3-4；
(iii)碱性条件(例如，碳酸铯)和催化剂(例如，钯催化剂)存在下，化合物3-4和化合物3-5反应得到化合物3-6。
以上各反应步骤中，反应溶剂、反应温度、反应时间、催化剂等可以根据具体的 反应物进行选择。
药物组合物和施用方法
本发明所述的药物组合物用于预防和/或治疗以下疾病：炎症、癌症、心血管疾病、感染、免疫性疾病、代谢性疾病。
通式(I)所述化合物可以与已知的治疗或改进相似病状的其他药物联用。联合给药时，原来药物的给药方式和剂量可以保持不变，而同时或随后服用式I的化合物。当式I化合物与其它一种或几种药物同时服用时，可以优选使用同时含有一种或几种已知药物和式I化合物的药用组合物。药物联用也包括在重叠的时间段服用式I化合物与其它一种或几种已知药物。当式I化合物与其它一种或几种药物进行药物联用时，式I化合物或已知药物的剂量可能比它们单独用药的剂量低。
可以与通式(I)所述化合物进行药物联用的药物或活性成分包括但不局限为：PD-1抑制剂(如纳武单抗、派姆单抗、JS-001、SHR-120、BGB-A317、IBI-308、GLS-010、GB-226、STW204、HX008、HLX10、BAT1306、AK105、LZM 009或上述药物的生物类似药等)、PD-L1抑制剂(如德瓦鲁单抗、阿特珠单抗、CS1001、KN035、HLX20、SHR-1316、BGB-A333、JS003、CS1003、KL-A167、F 520、GR1405、MSB2311或上述药物的生物类似药等)、CD20抗体(如利妥昔单抗、奥滨尤妥珠单抗、奥法木单抗、托西莫单抗、替伊莫单抗等)、CD47抗体(如Hu5F9-G4、CC-90002、TTI-621、TTI-622、OSE-172、SRF-231、ALX-148、NI-1701、SHR-1603、IBI188、IMM01)、ALK抑制剂(如色瑞替尼、艾乐替尼、布加替尼、劳拉替尼、奥卡替尼)、PI3K抑制剂(如艾代拉里斯、Dactolisib、Taselisib、Buparlisib等)、BTK抑制剂(如依鲁替尼、Tirabrutinib、Acalabrutinib等)、EGFR抑制剂(如阿法替尼、吉非替尼、厄洛替尼、拉帕替尼、达克替尼、埃克替尼、卡奈替尼等)、VEGFR抑制剂(如索拉非尼、帕唑帕尼、瑞伐替尼、卡博替尼、舒尼替尼、多纳非尼等)、HDAC抑制剂(如Givinostat、Droxinostat、恩替诺特、达西司特、泰克地那林等)、CDK抑制剂(如帕博西尼、瑞博西尼、Abemaciclib、Lerociclib等)、MEK抑制剂(如司美替尼(AZD6244)、曲美替尼(GSK1120212)、PD0325901、U0126、AS-703026、PD184352(CI-1040)等)、Akt抑制剂(如MK-2206、Ipatasertib、Capivasertib、Afuresertib、Uprosertib等)、mTOR抑制剂(如Vistusertib等)、SHP2抑制剂(如RMC-4630、JAB-3068、TNO155等)、IGF-1R抑制剂(如Ceritinib、奥卡替尼、linsitinib、BMS-754807、GSK1838705A等)或其组合。
本发明药物组合物的剂型包括(但并不限于)：注射剂、片剂、胶囊剂、气雾剂、栓剂、膜剂、滴丸剂、外用擦剂、控释型或缓释型或纳米制剂。
本发明的药物组合物包含安全有效量范围内的本发明化合物或其药理上可接受的盐及药理上可以接受的赋形剂或载体。其中“安全有效量”指的是：化合物的量足以明显改善病情，而不至于产生严重的副作用。通常，药物组合物含有1-2000mg本发明 化合物/剂，更佳地，含有10-1000mg本发明化合物/剂。较佳地，所述的“一剂”为一个胶囊或药片。
“药学上可以接受的载体”指的是：一种或多种相容性固体或液体填料或凝胶物质，它们适合于人使用，而且必须有足够的纯度和足够低的毒性。“相容性”在此指的是组合物中各组份能和本发明的化合物以及它们之间相互掺和，而不明显降低化合物的药效。药学上可以接受的载体部分例子有纤维素及其衍生物(如羧甲基纤维素钠、乙基纤维素钠、纤维素乙酸酯等)、明胶、滑石、固体润滑剂(如硬脂酸、硬脂酸镁)、硫酸钙、植物油(如豆油、芝麻油、花生油、橄榄油等)、多元醇(如丙二醇、甘油、甘露醇、山梨醇等)、乳化剂(如吐温
Figure PCTCN2021089064-appb-000028
)、润湿剂(如十二烷基硫酸钠)、着色剂、调味剂、稳定剂、抗氧化剂、防腐剂、无热原水等。
本发明化合物或药物组合物的施用方式没有特别限制，代表性的施用方式包括(但并不限于)：口服、瘤内、直肠、肠胃外(静脉内、肌肉内或皮下)、和局部给药。
用于口服给药的固体剂型包括胶囊剂、片剂、丸剂、散剂和颗粒剂。在这些固体剂型中，活性化合物与至少一种常规惰性赋形剂(或载体)混合，如柠檬酸钠或磷酸二钙，或与下述成分混合：(a)填料或增容剂，例如，淀粉、乳糖、蔗糖、葡萄糖、甘露醇和硅酸；(b)粘合剂，例如，羟甲基纤维素、藻酸盐、明胶、聚乙烯基吡咯烷酮、蔗糖和阿拉伯胶；(c)保湿剂，例如，甘油；(d)崩解剂，例如，琼脂、碳酸钙、马铃薯淀粉或木薯淀粉、藻酸、某些复合硅酸盐、和碳酸钠；(e)缓溶剂，例如石蜡；(f)吸收加速剂，例如，季胺化合物；(g)润湿剂，例如鲸蜡醇和单硬脂酸甘油酯；(h)吸附剂，例如，高岭土；和(i)润滑剂，例如，滑石、硬脂酸钙、硬脂酸镁、固体聚乙二醇、十二烷基硫酸钠，或其混合物。胶囊剂、片剂和丸剂中，剂型也可包含缓冲剂。
固体剂型如片剂、糖丸、胶囊剂、丸剂和颗粒剂可采用包衣和壳材制备，如肠衣和其它本领域公知的材料。它们可包含不透明剂，并且，这种组合物中活性化合物或化合物的释放可以延迟的方式在消化道内的某一部分中释放。可采用的包埋组分的实例是聚合物质和蜡类物质。必要时，活性化合物也可与上述赋形剂中的一种或多种形成微胶囊形式。
用于口服给药的液体剂型包括药学上可接受的乳液、溶液、悬浮液、糖浆或酊剂。除了活性化合物外，液体剂型可包含本领域中常规采用的惰性稀释剂，如水或其它溶剂，增溶剂和乳化剂，例知，乙醇、异丙醇、碳酸乙酯、乙酸乙酯、丙二醇、1,3-丁二醇、二甲基甲酰胺以及油，特别是棉籽油、花生油、玉米胚油、橄榄油、蓖麻油和芝麻油或这些物质的混合物等。
除了这些惰性稀释剂外，组合物也可包含助剂，如润湿剂、乳化剂和悬浮剂、甜味剂、矫味剂和香料。
除了活性化合物外，悬浮液可包含悬浮剂，例如，乙氧基化异十八烷醇、聚氧乙 烯山梨醇和脱水山梨醇酯、微晶纤维素、甲醇铝和琼脂或这些物质的混合物等。
用于肠胃外注射的组合物可包含生理上可接受的无菌含水或无水溶液、分散液、悬浮液或乳液和用于重新溶解成无菌的可注射溶液或分散液的无菌粉末。适宜的含水和非水载体、稀释剂、溶剂或赋形剂包括水、乙醇、多元醇及其适宜的混合物。
用于局部给药的本发明化合物的剂型包括软膏剂、散剂、贴剂、喷射剂和吸入剂。活性成分在无菌条件下与生理上可接受的载体及任何防腐剂、缓冲剂，或必要时可能需要的推进剂一起混合。
本发明治疗方法可以单独施用，或者与其它治疗手段或者治疗药物联用。
使用药物组合物时，是将安全有效量的本发明化合物适用于需要治疗的哺乳动物(如人)，其中施用时剂量为药学上认为的有效给药剂量，对于60kg体重的人而言，日给药剂量通常为1～2000mg，优选50～1000mg。当然，具体剂量还应考虑给药途径、病人健康状况等因素，这些都是熟练医师技能范围之内的。
本发明还提供了一种药物组合物的制备方法，包括步骤：将药学上可接受的载体与本发明所述通式(I)化合物或其晶型、药学上可接受的盐、水合物或溶剂合物进行混合，从而形成药物组合物。
本发明还提供了一种治疗方法，它包括步骤：给需要治疗的对象施用本发明中所述通式(I)化合物，或其晶型、药学上可接受的盐、水合物或溶剂合物，或施用本发明所述的药物组合物，用于选择性地抑制RET。
本发明具有以下主要优点：
(1)本发明化合物对RET激酶具有优良的抑制能力，以及对RET激酶具有优良选择性，对VEGFR2等其他激酶的抑制活性低；
(2)本发明化合物具有较低的毒副作用。
(3)本发明化合物具有较好的药效学、药代动力学性能。
实施例
通用方法
下面结合具体实施例，进一步阐述本发明。应理解，这些实施例仅用于说明本发明而不用于限制本发明的范围。下列实施例中未注明具体条件的实验方法，通常按照常规条件如Sambrook等人，分子克隆：实验室手册(New York:Cold Spring Harbor Laboratory Press，1989)中所述的条件，或按照制造厂商所建议的条件。除非另外说明，否则百分比和份数按重量计算。
除非另行定义，文中所使用的所有专业与科学用语与本领域熟练人员所熟悉的意义相同。此外，任何与所记载内容相似或均等的方法及材料皆可应用于本发明方法中。文中所述的较佳实施方法与材料仅作示范之用。
本发明的化合物结构是通过核磁共振(NMR)和液质联用色谱(LC-MS)来确定的。
NMR是使用Bruker AVANCE-400和Bruker AVANCE-500核磁仪检测的，测定溶剂包含氘代二甲亚砜(DMSO-d 6)、氘代丙酮(CD 3COCD 3)、氘代氯仿(CDCl 3)及氘代甲醇(CD 3OD)等，内标采用四甲基硅烷(TMS)，化学位移以百万分之一(ppm)的单位计量。
液质联用色谱(LC-MS)是使用Agilent 1260质谱仪检测的。HPLC的测定使用Agilent 1100高压色谱仪(Microsorb 5micron C18 100x 3.0mm色谱柱)。
薄层层析硅胶板使用青岛GF254硅胶板，TLC采用的是0.15-0.20mm，制备薄层色谱采用的是0.4mm-0.5mm。柱层析一般使用青岛硅胶200-300目硅胶作为载体。
本发明实施例中的起始原料都是已知并有市售的，或者可以采用或按照本领域已报道的文献资料合成的。
除特殊说明外，本发明所有反应均在干燥的惰性气体(如氮气或氩气)保护下通过连续磁力搅拌进行，反应温度均为摄氏度。
下列简写词的使用贯穿本发明
THF：四氢呋喃
DCM：二氯甲烷
PE：石油醚
Na 2CO 3：碳酸钠
MeOH：甲醇
HCl：盐酸
Pd(PPh 3) 4：四三苯基膦钯
K 2CO 3：碳酸钾
H 2O：水
TEA：三乙胺
DIEA：N,N-二异丙基乙胺
DMF：N,N-二甲基甲酰胺
DMSO：二甲基亚砜
NaBH 4：硼氢化钠
Sn 2(Bu-n) 6：六己基二锡
CuI：碘化亚铜
Cs 2CO 3：碳酸铯
K 3PO 4：磷酸钾
Pd 2(dba) 3：三(二亚苄基丙酮)二钯
Pd/C：钯碳
Xantphos：2-二环己基磷-2,4,6-三异丙基联苯
EA：乙酸乙酯
Boc 2O：二碳酸二叔丁酯
Pd(dppf) 2Cl 2：[1,1'-双(二苯基膦)二茂铁]二氯化钯
NaH：氢钠
CH 3I：碘甲烷
L-Proline：L-脯氨酸
L-Selectride：三仲丁基硼氢化锂
中间体1的合成：
Figure PCTCN2021089064-appb-000029
步骤1:3-羟基-2,2-二甲基丙腈
室温下，将2-氰基-2-甲基丙酸甲酯(2.0g,15.7mmol)溶解到THF/H 2O＝20/40mL当中，冷却到0℃，分批加入硼氢化钠(1.78g,53.4mmol)，加料结束，室温反应4h，反应完全。EA萃取，干燥，过滤，浓缩，柱层析(PE:EA＝1:1)，得到3-羟基-2,2-二甲基丙腈1.4g，收率90％。MS m/z(ESI)：100.2[M+H] +。
步骤2:2-氰基-2-甲基丙基4-甲基苯磺酸酯
室温下，将3-羟基-2,2-二甲基丙腈(1.4g,14.1mmol)、DIEA(2.85g,28.28mmol)溶解到二氯甲烷(20mL)中，冷却到0℃，加入对甲苯磺酰氯(2.6g,14.1mmol)，加料结束，室温反应过夜，反应完全。DCM萃取，干燥，过滤，浓缩，柱层析(PE:EA＝3:1)，得到2-氰基-2-甲基丙基4-甲基苯磺酸酯1.4g，收率36％。MS m/z(ESI)：254.1[M+H] +。
步骤3:4-溴-6-(2-氰基-2-甲基丙氧基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈
室温下，将4-溴-6-羟基吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈(350mg,1.37mmol)、2-氰基-2-甲基丙基4-甲基苯磺酸酯(564mg,2.2mmol)溶解到DMF(10mL)当中，加入碳酸钾(1.43g,4.44mmol)，加料结束，100℃搅拌反应过夜，反应完全。过滤，浓缩移除溶剂，柱层析(PE:EA＝2:1)，得到4-溴-6-(2-氰基-2-甲基丙氧基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈170mg，收率36％。MS m/z(ESI)：319.6[M+H] +。
中间体2的合成：
Figure PCTCN2021089064-appb-000030
步骤1:合成4-溴-6-(2-羟基-2-甲基丙氧基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈
室温下，将4-溴-6-羟基吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈(2.0g,8.4mmol)、2,2-二甲基环氧 乙烷(7.38mL,84mmol)溶解到DMF(10mL)当中，加入碳酸钾(3.38g,25mmol)，加料结束，封管80℃搅拌反应过夜，反应完全。过滤，浓缩移除溶剂，柱层析(PE:EA＝2:1)，得到4-溴-6-(2-羟基-2-甲基丙氧基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈1.5g，收率57％。MS m/z(ESI)：310.6[M+H] +。
步骤2:合成4-(6-氟吡啶-3-基)-6-(2-羟基-2-甲基丙氧基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈
将4-溴-6-(2-羟基-2-甲基丙氧基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈(2.0g,6.4mmol)与2-氟-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼杂环戊烷-2-基)吡啶(2.16g,9.9mmol)溶解在二恶烷：水＝(4:1,50mL)中，然后分别加入Pd(PPh 3) 4(747mg,0.64mmol)与碳酸钠(2.73g,25.7mmol)，氮气保护，90℃搅拌过夜，反应完全后加入水淬灭反应，分出有机相，水洗，干燥，柱层析(DCM:MeOH＝20:1)，得到4-(6-氟吡啶-3-基)-6-(2-羟基-2-甲基丙氧基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈1.7g，收率80％。MS m/z(ESI)：327.2[M+H] +。
中间体3的合成：
Figure PCTCN2021089064-appb-000031
步骤1:合成(R)-2-((4-溴-3-氰基吡唑并[1,5-a]吡啶-6-基)氧基)甲基)吗啉-4-甲酸叔丁酯
将4-溴-6-羟基吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈(1.0g,4.2mmol)、(R)-2-溴甲基吗啉-4-甲酸叔丁酯(1.6g,5.9mmol)、碳酸铯(4.1g,12.6mmol)溶解到DMF(20mL)当中，50℃搅拌反应18小时，反应完全。乙酸乙酯稀释，过滤，减压浓缩移除溶剂，柱层析(PE:EA＝2:1)，得到(R)-2-((4-溴-3-氰基吡唑并[1,5-a]吡啶-6-基)氧基)甲基)吗啉-4-甲酸叔丁酯1.13g，收率61％。MS m/z(ESI)：438.6[M+H] +。
步骤2:合成(R)-2-((3-氰基-4-(6-氟吡啶-3-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-6-基)氧基)甲基)吗啉-4-甲酸叔丁酯
将2-氟-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼杂戊烷-2-基)吡啶(807mg,3.62mmol)，(R)-2-((4-溴-3-氰基吡唑并[1,5-a]吡啶-6-基)氧基)甲基)吗啉-4-甲酸叔丁酯(1.13g,2.59mmol)溶解在二恶烷：水＝6:1，(30mL)中，然后分别加入Pd(PPh 3) 4(300mg,0.259mmol)与碳酸钠(823mg,7.78mmol)，氮气保护，90℃搅拌过夜，反应完全后加水淬灭反应，分出有机相，水洗，干燥，柱层析(DCM:MeOH＝10:1)得到(R)-2-((3-氰基-4-(6-氟吡啶-3-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-6-基)氧基)甲基)吗啉-4-甲酸叔丁酯0.9g，收率76％。MS m/z(ESI)：454.1[M+H] +。
实施例1：4-(6-(((6-(4-氟-1H-吡唑-1-基)吡啶-3-基)甲基)胺基)吡啶-3-基)-6-(2-羟 基-2-甲基丙氧基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈的制备
Figure PCTCN2021089064-appb-000032
步骤1：合成6-(4-氟-1H-吡唑-1-基)烟腈
将6-氯烟腈(1.3g,9.4mmol)、4-氟-1H-吡唑(0.8g,9.4mmol)和碳酸铯(6.1g,18.8mmol)加入到单口瓶中，然后加入DMF(10mL)，加热90℃反应10小时，反应完全后，加水(10mL)淬灭反应，DCM(20mL*2)萃取，有机相水洗，干燥，旋干，柱层析(PE:EA＝10:1)，得到6-(4-氟-1H-吡唑-1-基)烟腈1.5g。MS m/z(ESI)：189.3[M+H] +。
步骤2：合成(6-(4-氟-1H-吡唑-1-基)吡啶-3-基)甲胺
将6-(4-氟-1H-吡唑-1-基)烟腈(0.3g,1.6mmol)、Pd/C(0.05g)加入到单口瓶中，再加入甲醇(5mL)，然后滴加3滴浓盐酸，氢气氛围下室温反应过夜，反应完全后，过滤，旋干母液得到(6-(4-氟-1H-吡唑-1-基)吡啶-3-基)甲胺0.22g。MS m/z(ESI)：193.1[M+H] +。
步骤3：合成4-(6-(((6-(4-氟-1H-吡唑-1-基)吡啶-3-基)甲基)胺基)吡啶-3-基)-6-(2-羟基-2-甲基丙氧基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈
将4-(6-氟吡啶-3-基)-6-(2-羟基-2-甲基丙氧基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈(0.2g,0.62mmol)、(6-(4-氟-1H-吡唑-1-基)吡啶-3-基)甲胺(0.23g,1.2mmol)和碳酸钾(0.17g,1.2mmol)加入到单口瓶中，然后加入DMSO(10mL)，加热130℃反应15小时，反应完全后，加水(10mL)淬灭反应，DCM(20mL*2)萃取，有机相水洗，干燥，旋干，柱层析(DCM:MeOH＝10:1)，得到4-(6-(((6-(4-氟-1H-吡唑-1-基)吡啶-3-基)甲基)胺基)吡啶-3-基)-6-(2-羟基-2-甲基丙氧基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈(化合物1)30mg。MS m/z(ESI)：498.7[M+H] +。 1H NMR(400MHz,DMSO)δ8.63(dd,J＝13.0,3.2Hz,2H),8.53(s,1H),8.43(d,J＝1.8Hz,1H),8.19(d,J＝2.3Hz,1H),7.95(dd,J＝8.5,2.2Hz,1H),7.86(dd,J＝15.8,6.3Hz,2H),7.63(dd,J＝8.6,2.4Hz,1H),7.51(t,J＝5.9Hz,1H),7.24(d,J＝2.0Hz,1H),6.63(d,J＝8.7Hz,1H),4.67(s,1H),3.83(s,2H),1.80(d,J＝13.5Hz,2H),1.18(s,6H)。
实施例2：(S)-4-(6-((1-(6-(4-氟-1H-吡唑-1-基)吡啶-3-基)乙基)胺基)吡啶-3-基)-6-(2-羟基-2-甲基丙氧基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈的制备
Figure PCTCN2021089064-appb-000033
步骤1：合成1-(6-(4-氟-1H-吡唑-1-基)吡啶-3-基)乙-1-酮
将2-氯-5-乙酰基吡啶(2g,12.8mmol)、4-氟-1H-吡唑(1.1g,12.8mmol)和碳酸铯(8.4g,25.6mmol)加入到单口瓶中，然后加入DMF(20mL)，加热90℃反应10小时，反应完全后，加水(30mL)淬灭反应，DCM(40mL*2)萃取，有机相水洗，干燥，旋干，柱层析(PE:EA＝10:1)，得到1-(6-(4-氟-1H-吡唑-1-基)吡啶-3-基)乙-1-酮1.8g。MS m/z(ESI)：206.2[M+H] +。
步骤2：合成(R)-N-((S)-1-(6-(4-氟-1H-吡唑-1-基)吡啶-3-基)乙基)-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺
将1-(6-(4-氟-1H-吡唑-1-基)吡啶-3-基)乙-1-酮(1.0g,4.8mmol)、R-(+)-叔丁基亚磺酰胺(0.58g,4.8mmol)和乙醇钛(IV)(2.2g,9.6mmol)加入到二口瓶中，然后加入THF(15mL)，反应液回流反应过夜，反应完全后，冷却，然后降温至-75℃，然后在慢慢滴加L-Selectride(14.4mL,1N)，加完后再低温下搅拌半小时，然后再慢慢升温至室温反应2小时，反应完全后，在低温下加入甲醇淬灭反应，加入水(20mL)，乙酸乙酯(50mL*2)萃取，有机相干燥，旋干，柱层析(PE:EA＝5:1)，得到(R)-N-((S)-1-(6-(4-氟-1H-吡唑-1-基)吡啶-3-基)乙基)-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺0.9g。MS m/z(ESI)：311.1[M+H] +。
步骤3：合成(S)-1-(6-(4-氟-1H-吡唑-1-基)吡啶-3-基)乙-1-胺
将(R)-N-((S)-1-(6-(4-氟-1H-吡唑-1-基)吡啶-3-基)乙基)-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺(0.9g，2.9mmol)溶解于少量甲醇中，然后在低温下加入4N HCl/二恶烷(6mL)，室温下搅拌反应2小时，反应完全后，加入乙醚形成粘性固体，倒掉上层液，加入石油醚搅拌析出固体，过滤，得到(S)-1-(6-(4-氟-1H-吡唑-1-基)吡啶-3-基)乙-1-胺0.45g。MS m/z(ESI)：207.5[M+H] +。
步骤4：合成(S)-4-(6-((1-(6-(4-氟-1H-吡唑-1-基)吡啶-3-基)乙基)胺基)吡啶-3-基)-6-(2-羟基-2-甲基丙氧基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈
将4-(6-氟吡啶-3-基)-6-(2-羟基-2-甲基丙氧基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈(0.2g,0.62mmol)、(S)-1-(6-(4-氟-1H-吡唑-1-基)吡啶-3-基)乙-1-胺(0.25g,1.2mmol)和碳酸钾(0.17g,1.2mmol)加入到单口瓶中，然后加入DMSO(10mL)，加热130℃反应15小时左右，反应完全后，加水(10mL)淬灭反应，DCM(20mL*2)萃取，有机相水洗，干燥， 旋干，柱层析(DCM:MeOH＝10:1)，得到(S)-4-(6-((1-(6-(4-氟-1H-吡唑-1-基)吡啶-3-基)乙基)胺基)吡啶-3-基)-6-(2-羟基-2-甲基丙氧基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈(化合物2)25mg。MS m/z(ESI)：512.8[M+H] +。 1H NMR(400MHz,DMSO)δ8.65–8.58(m,2H),8.51(s,1H),8.47(d,J＝2.1Hz,1H),8.12(d,J＝2.4Hz,1H),7.98(dd,J＝8.5,2.3Hz,1H),7.85(dd,J＝13.4,6.4Hz,2H),7.60(dd,J＝8.7,2.5Hz,1H),7.48(d,J＝7.6Hz,1H),7.21(d,J＝2.1Hz,1H),6.62(d,J＝8.7Hz,1H),4.65(s,1H),3.81(s,2H),1.50(d,J＝7.0Hz,3H),1.17(s,6H)。
实施例3：(R)-4-(6-(((6-(4-氟-1H-吡唑-1-基)吡啶-3-基)甲基)胺基)吡啶-3-基)-6-(吗啉-2-基甲氧基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈的制备
Figure PCTCN2021089064-appb-000034
步骤1：合成叔丁基(R)-2-(((3-氰基-4-(6-(((6-(4-氟-1H-吡唑-1-基)吡啶-3-基)甲基)胺基)吡啶-3-基)吡唑并[1,5-a]吡啶基-6-基)氧基)甲基)吗啉-4-羧酸酯
将(R)-2-(((3-氰基-4-(6-氟吡啶-3-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-6-基)氧基)甲基)吗啉-4-羧酸叔丁酯(0.25g,0.55mmol)、(6-(4-氟-1H-吡唑-1-基)吡啶-3-基)甲胺(0.22g,1.1mmol)和碳酸钾(0.16g,1.1mmol)加入到单口瓶中，然后加入DMSO(10mL)，加热130℃反应15小时左右，反应完全后，加水(10mL)淬灭反应，DCM(30mL*2)萃取，有机相水洗，干燥，旋干，柱层析(DCM:MeOH＝10:1)，得到叔丁基(R)-2-(((3-氰基-4-(6-(((6-(4-氟-1H-吡唑-1-基)吡啶-3-基)甲基)胺基)吡啶-3-基)吡唑并[1,5-a]吡啶基-6-基)氧基)甲基)吗啉-4-羧酸酯50mg。MS m/z(ESI)：626.1[M+H] +。
步骤2：合成(R)-4-(6-(((6-(4-氟-1H-吡唑-1-基)吡啶-3-基)甲基)胺基)吡啶-3-基)-6-(吗啉-2-基甲氧基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈
将叔丁基(R)-2-(((3-氰基-4-(6-(((6-(4-氟-1H-吡唑-1-基)吡啶-3-基)甲基)胺基)吡啶-3-基)吡唑并[1,5-a]吡啶基-6-基)氧基)甲基)吗啉-4-羧酸酯(50mg)溶解于少量二氯甲烷中，然后在低温下加入4N HCl/二恶烷(1mL)，室温下搅拌反应1小时，反应完全后，加入碳酸氢钠水溶液中和，然后用DCM(10mL*2)萃取，有机相干燥，旋干，柱层析(DCM:MeOH＝10:1)，得到(R)-4-(6-(((6-(4-氟-1H-吡唑-1-基)吡啶-3-基)甲基)胺基)吡啶-3-基)-6-(吗啉-2-基甲氧基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈(化合物3)30mg。MS m/z(ESI)：525.9[M+H] +。 1H NMR(500MHz,DMSO)δ8.69–8.62(m,2H),8.55(s,1H),8.45(d,J＝2.0Hz,1H),8.21(d,J＝2.4Hz,1H),7.97(dd,J＝8.5,2.3Hz,1H),7.90–7.82(m,2H),7.64(dd,J＝8.6,2.5Hz,1H),7.52(t,J＝6.0Hz,1H),7.27(d,J＝2.1Hz,1H),6.65(d,J＝8.7Hz,1H),4.60(d,J＝5.9Hz,2H),4.05(d,J＝5.1Hz,2H),3.78–3.68(m,2H),3.46(td,J＝10.9,3.3Hz,1H),2.87(dd,J＝12.1,2.1Hz,1H),2.72–2.59(m,2H)。
实施例4：(R)-4-(6-((((S)-1-(6-(4-氟-1H-吡唑-1-基)吡啶-3-基)乙-1基)胺基)吡啶-3-基)-6-(吗啉-2-基甲氧基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈的制备
Figure PCTCN2021089064-appb-000035
步骤1：合成叔丁基(R)-2-(((3-氰基-4-(6-((((S)-1-6-(4-氟-1H-吡唑-1-基)吡啶-3-基)乙-1-基)胺基)吡啶-3-基)吡唑并[1,5-a]吡啶基-6-基)氧基)甲基)吗啉-4-羧酸酯
将(R)-2-(((3-氰基-4-(6-氟吡啶-3-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-6-基)氧基)甲基)吗啉-4-羧酸叔丁酯(0.30g,0.66mmol)、(S)-1-(6-(4-氟-1H-吡唑-1-基)吡啶-3-基)乙-1-胺(0.27g,1.3mmol)和碳酸钾(0.19g,1.3mmol)加入到单口瓶中，然后加入DMSO(10mL)，加热130℃反应15小时左右，反应完全后，加水(10mL)淬灭反应，DCM(20mL*2)萃取，有机相水洗，干燥，旋干，柱层析(DCM:MeOH＝10:1)，得到叔丁基(R)-2-(((3-氰基-4-(6-((((S)-1-6-(4-氟-1H-吡唑-1-基)吡啶-3-基)乙-1-基)胺基)吡啶-3-基)吡唑并[1,5-a]吡啶基-6-基)氧基)甲基)吗啉-4-羧酸酯65mg。MS m/z(ESI)：640.3[M+H] +。
步骤2：合成(R)-4-(6-((((S)-1-(6-(4-氟-1H-吡唑-1-基)吡啶-3-基)乙-1基)胺基)吡啶-3-基)-6-(吗啉-2-基甲氧基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈
将叔丁基(R)-2-(((3-氰基-4-(6-((((S)-1-6-(4-氟-1H-吡唑-1-基)吡啶-3-基)乙-1-基)胺基)吡啶-3-基)吡唑并[1,5-a]吡啶基-6-基)氧基)甲基)吗啉-4-羧酸酯(65mg)溶解于少量二氯甲烷中，然后在低温下加入4N HCl/二恶烷(1mL)，室温下搅拌反应1小时，反应完全后，加入碳酸氢钠水溶液中和，然后用DCM(10mL*2)萃取，干燥，旋干，柱层析(DCM:MeOH＝10:1),得到(R)-4-(6-((((S)-1-(6-(4-氟-1H-吡唑-1-基)吡啶-3-基)乙-1基)胺基)吡啶-3-基)-6-(吗啉-2-基甲氧基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈(化合物4)40mg。MS m/z(ESI)：540.2[M+H] +。 1H NMR(500MHz,DMSO)δ8.64(dd,J＝4.6,0.7Hz,2H),8.53(s,1H),8.49(d,J＝2.2Hz,1H),8.14(d,J＝2.4Hz,1H),8.00(dd,J＝8.5,2.3Hz,1H),7.89–7.83(m,2H),7.61(dd,J＝8.7,2.5Hz,1H),7.48(d,J＝7.6Hz,1H),7.23(d,J＝2.1Hz,1H),6.63(d,J＝8.6Hz,1H),5.24–5.15(m,1H),4.03(d,J＝5.3Hz,2H),3.77–3.66(m,2H),3.45(td,J＝10.8,3.3Hz,1H),2.85(dd,J＝12.1,2.1Hz,1H),2.64(dd,J＝10.7,3.2Hz,2H),1.51(d,J＝7.0Hz,3H)。
实施例5：(R)-4-(6-((1-(6-(4-氟-1H-吡唑-1-基)吡啶-3-基)乙基)胺基)吡啶-3-基)-6-(2-羟基-2-甲基丙氧基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈的制备
Figure PCTCN2021089064-appb-000036
步骤1：合成(S)-N-((R)-1-(6-(4-氟-1H-吡唑-1-基)吡啶-3-基)乙基)-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺
将1-(6-(4-氟-1H-吡唑-1-基)吡啶-3-基)乙-1-酮(0.5g,2.4mmol)、S-(-)-叔丁基亚磺酰胺(0.3g,2.4mmol)和乙醇钛(IV)(1.1g,4.8mmol)加入到二口瓶中，然后加入THF(10mL)，反应液回流反应过夜，反应完全后，冷却，然后降温至-75℃，然后在慢慢滴加L-Selectride(7.2mL,1N)，加完后再低温下搅拌半小时，然后再慢慢升温至室温反应2小时，反应完全后，在低温下加入甲醇淬灭反应，加入水(20mL)、乙酸乙酯(40mL*2)萃取，有机相干燥，旋干，柱层析(PE:EA＝5:1)，得到(S)-N-((R)-1-(6-(4-氟-1H-吡唑-1-基)吡啶-3-基)乙基)-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺0.5g。MS m/z(ESI)：311.1[M+H] +。
步骤2：合成(R)-1-(6-(4-氟-1H-吡唑-1-基)吡啶-3-基)乙-1-胺
将(S)-N-((R)-1-(6-(4-氟-1H-吡唑-1-基)吡啶-3-基)乙基)-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺(0.5g，1.6mmol)溶解于少量甲醇中，然后在低温下加入4N HCl/二恶烷(4mL)，室温下搅拌反应2小时，反应完全后，加入乙醚形成粘性固体，倒掉上层液，加入石油醚搅拌析出固体，过滤得到(R)-1-(6-(4-氟-1H-吡唑-1-基)吡啶-3-基)乙-1-胺0.25g。MS m/z(ESI)：207.5[M+H] +。
步骤3：合成(R)-4-(6-((1-(6-(4-氟-1H-吡唑-1-基)吡啶-3-基)乙基)胺基)吡啶-3-基)-6-(2-羟基-2-甲基丙氧基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈
将4-(6-氟吡啶-3-基)-6-(2-羟基-2-甲基丙氧基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈(0.2g,0.62mmol)、(R)-1-(6-(4-氟-1H-吡唑-1-基)吡啶-3-基)乙-1-胺(0.25g,1.2mmol)和碳酸钾(0.17g,1.2mmol)加入到单口瓶中，然后加入DMSO(10mL)，加热130℃反应15小时左右，反应完全后，加水(10mL)淬灭反应，DCM(20mL*2)萃取，有机相水洗，干燥，旋干，柱层析(DCM:MeOH＝10:1)，得到(R)-4-(6-((1-(6-(4-氟-1H-吡唑-1-基)吡啶-3-基)乙基)胺基)吡啶-3-基)-6-(2-羟基-2-甲基丙氧基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈(化合物5)15mg。MS m/z(ESI)：512.8[M+H] +。 1H NMR(400MHz,DMSO)δ8.65–8.58(m,2H),8.51(s,1H),8.47(d,J＝2.1Hz,1H),8.12(d,J＝2.4Hz,1H),7.98(dd,J＝8.5,2.3Hz,1H),7.85(dd,J＝13.4,6.4Hz,2H),7.60(dd,J＝8.7,2.5Hz,1H),7.48(d,J＝7.6Hz, 1H),7.21(d,J＝2.1Hz,1H),6.62(d,J＝8.7Hz,1H),4.65(s,1H),3.81(s,2H),1.50(d,J＝7.0Hz,3H),1.17(s,6H)。
实施例6：4-(6-((1-(6-(4-(4-氟-1H-吡唑-1-基)吡啶-3-基)乙基)胺基)吡啶-3-基)-6-(2-羟基-2-甲基丙氧基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈的制备
Figure PCTCN2021089064-appb-000037
步骤1：合成N-(1-(1-(6-(4-氟-1H-吡唑-1-基)吡啶-3-基)乙基)-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺
将1-(6-(4-氟-1H-吡唑-1-基)吡啶-3-基)乙-1-酮(1.5g,7.2mmol)、叔丁基亚磺酰胺(0.9g,7.2mmol)和乙醇钛(IV)(3.3g,14.4mmol)加入到二口瓶中，然后加入THF(20mL)，反应液回流反应过夜，反应完全后，冷却，然后降温至-75℃，然后在慢慢滴加L-Selectride(21.6mL,1N)，加完后再低温下搅拌半小时，然后再慢慢升温至室温反应2小时，反应完全后，在低温下加入甲醇淬灭反应，加入水(30mL),乙酸乙酯(50mL*2)萃取，有机相干燥，旋干，柱层析(PE:EA＝5:1)，得到N-(1-(1-(6-(4-氟-1H-吡唑-1-基)吡啶-3-基)乙基)-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺1.2g。MS m/z(ESI)：311.1[M+H] +。
步骤2：合成1-(6-(4-氟-1H-吡唑-1-基)吡啶-3-基)乙-1-胺
将N-(1-(1-(6-(4-氟-1H-吡唑-1-基)吡啶-3-基)乙基)-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺(1.2g，3.9mmol)溶解于少量甲醇中，然后在低温下加入4N HCl/二恶烷(8mL)，室温下搅拌反应2小时，反应完全后，加入乙醚形成粘性固体，倒掉上层液，加入石油醚搅拌析出固体，过滤，得到1-(6-(4-氟-1H-吡唑-1-基)吡啶-3-基)乙-1-胺0.7g。MS m/z(ESI)：207.5[M+H] +。
步骤3：合成4-(6-((1-(6-(4-(4-氟-1H-吡唑-1-基)吡啶-3-基)乙基)胺基)吡啶-3-基)-6-(2-羟基-2-甲基丙氧基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈
将4-(6-氟吡啶-3-基)-6-(2-羟基-2-甲基丙氧基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈(0.4g,1.2mmol)、1-(6-(4-氟-1H-吡唑-1-基)吡啶-3-基)乙-1-胺(0.5g,2.4mmol)和碳酸钾(0.4g,2.4mmol)加入到单口瓶中，然后加入DMSO(10mL)，加热130℃反应15小时左右，反应完全后，加水(10mL)淬灭反应，DCM(20mL*2)萃取，有机相水洗，干燥，旋干，柱层析(DCM:MeOH＝10:1)，得到4-(6-((1-(6-(4-(4-氟-1H-吡唑-1-基)吡啶-3-基)乙基)胺基) 吡啶-3-基)-6-(2-羟基-2-甲基丙氧基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈(化合物6)50mg。MS m/z(ESI)：512.8[M+H] +。 1H NMR(400MHz,DMSO)δ8.65–8.58(m,2H),8.51(s,1H),8.47(d,J＝2.1Hz,1H),8.12(d,J＝2.4Hz,1H),7.98(dd,J＝8.5,2.3Hz,1H),7.85(dd,J＝13.4,6.4Hz,2H),7.60(dd,J＝8.7,2.5Hz,1H),7.48(d,J＝7.6Hz,1H),7.21(d,J＝2.1Hz,1H),6.62(d,J＝8.7Hz,1H),4.65(s,1H),3.81(s,2H),1.50(d,J＝7.0Hz,3H),1.17(s,6H)。
实施例7：4-(6-(((6-(1H-咪唑-1-基)吡啶-3-基)甲基)胺基)吡啶-3-基)-6-(2-羟基-2-甲基丙氧基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈的制备
Figure PCTCN2021089064-appb-000038
步骤1：合成6-(1H-咪唑-1-基)烟腈
将6-氯烟腈(1.0g,7.3mmol)、1H-吡唑(0.5g,7.3mmol)和碳酸铯(4.7g,14.6mmol)加入到单口瓶中，加入DMF(10mL)，加热90℃反应10小时。反应完全后，加水(10mL)淬灭反应，DCM(30mL*2)萃取，有机相水洗，干燥，旋干，柱层析(PE:EA＝6:1)，得到6-(1H-咪唑-1-基)烟腈1.1g。MS m/z(ESI)：171.2[M+H] +。
步骤2：合成(6-(1H-咪唑-1-基)吡啶-3-基)甲胺
将6-(1H-咪唑-1-基)烟腈(0.5g,2.9mmol)、Pd/C(0.06g)加入到单口瓶中，再加入甲醇(5mL)，然后滴加3滴浓盐酸，氢气氛围下室温反应过夜，反应完全后，过滤，旋干母液得到(6-(1H-咪唑-1-基)吡啶-3-基)甲胺0.4g。MS m/z(ESI)：175.2[M+H] +。
步骤3：合成4-(6-(((6-(1H-咪唑-1-基)吡啶-3-基)甲基)胺基)吡啶-3-基)-6-(2-羟基-2-甲基丙氧基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈
将4-(6-氟吡啶-3-基)-6-(2-羟基-2-甲基丙氧基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈(0.3g,0.92mmol)、(6-(1H-咪唑-1-基)吡啶-3-基)甲胺(0.33g,1.84mmol)和碳酸钾(0.26g,1.84mmol)加入到单口瓶中，然后加入DMSO(10mL)，加热130℃反应15小时左右，反应完全后，加水(10mL)淬灭反应，DCM(30mL*2)萃取，有机相水洗，干燥，旋干，柱层析(DCM:MeOH＝10:1)，得到4-(6-(((6-(1H-咪唑-1-基)吡啶-3-基)甲基)胺基)吡啶-3-基)-6-(2-羟基-2-甲基丙氧基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈(化合物7)45mg。MS m/z(ESI)：481.6[M+H] +。 1H NMR(400MHz,DMSO)δ8.63(d,J＝2.0Hz,1H),8.55(s,2H),8.49(d,J＝1.9Hz,1H),8.21(d,J＝2.3Hz,1H),8.00–7.92(m,2H),7.77(d,J＝8.4Hz,1H),7.65(dd,J＝8.6,2.4Hz,1H),7.54(t,J＝5.9Hz,1H),7.25(d,J＝2.0Hz, 1H),7.13(s,1H),6.66(d,J＝8.6Hz,1H),4.69(s,1H),4.60(d,J＝5.8Hz,2H),3.84(s,2H),1.20(s,6H)。
实施例8：6-(2-羟基-2-甲基丙氧基)-4-(6-((6-(2-氧吡咯烷-1-基)吡啶-3-基)甲胺基)吡啶-3-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈的制备
Figure PCTCN2021089064-appb-000039
步骤1：合成((6-(2-(2-氧吡咯烷-1-基)吡啶-3-基)甲基)胺基甲酸叔丁酯
将((6-氯吡啶-3-基)甲基)胺基甲酸叔丁酯(0.3g,1.3mmol)、吡咯烷-2-酮(0.42g,5.2mmol)、磷酸钾(1.3g，6.5mmol)、三(二亚苄基丙酮)二钯(0.22g，0.26mmol)和xantphos(0.15g，0.3mmol)溶解在甲苯(15ml)中，氮气保护下该反应80℃搅拌反应6小时，监测反应完全后，冷却，加入水淬灭反应，EA(30mL*2)萃取，有机相水洗，干燥浓缩，柱层析(PE:EA＝3:1)，得到((6-(2-(2-氧吡咯烷-1-基)吡啶-3-基)甲基)胺基甲酸叔丁酯0.3g。MS m/z(ESI)：292.3[M+H] +。
步骤2：合成1-(5-(甲胺基)吡啶-2-基)吡咯烷-2-酮
将((6-(2-(2-氧吡咯烷-1-基)吡啶-3-基)甲基)胺基甲酸叔丁酯(0.4g，1.4mmol)溶解于少量二氯甲烷中，然后在低温下加入4N HCl/二恶烷(2mL)，室温下搅拌反应2小时，反应完全后，旋干反应液，加入石油醚搅拌析出固体，过滤得到1-(5-(甲胺基)吡啶-2-基)吡咯烷-2-酮0.2g。MS m/z(ESI)：192.3[M+H] +。
步骤3：合成6-(2-羟基-2-甲基丙氧基)-4-(6-((((6-(2-氧吡咯烷-1-基)吡啶-3-基)甲基胺)吡啶-3-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈
将4-(6-氟吡啶-3-基)-6-(2-羟基-2-甲基丙氧基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈(0.2g,0.62mmol)、1-(5-(甲胺基)吡啶-2-基)吡咯烷-2-酮(0.23g,1.24mmol)和碳酸钾(0.17g,1.24mmol)加入到单口瓶中，然后加入DMSO(10mL)，加热130℃反应15小时左右，反应完全后，加水(10mL)淬灭反应，DCM(20mL*2)萃取，有机相水洗，干燥，旋干，柱层析(DCM:MeOH＝10:1)，得到6-(2-羟基-2-甲基丙氧基)-4-(6-((((6-(2-氧吡咯烷-1-基)吡啶-3-基)甲基)胺基)吡啶-3-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈(化合物8)35mg。MS m/z(ESI)：498.6[M+H] +。 1H NMR(400MHz,DMSO)δ8.65(s,1H),8.62(s,1H),8.20(d,1H),8.15(s,1H),7.59-7.61(m,1H),7.48-7.51(m,1H),7.24(s,1H),6.56(d,1H),6.48(d,1H),4.69(s,1H),3.84(s,1H),2.30(s,4H),1.60(s,6H)。
实施例9：4-(6-(([2,3'-联吡啶]-5-基甲基)胺基)吡啶-3-基)-6-(2-羟基-2-甲基丙氧基) 吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈的制备
Figure PCTCN2021089064-appb-000040
步骤1：合成([2,3'-联吡啶]-5-基甲基)胺基甲酸叔丁酯
将3-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼硼烷-2-基)吡啶(0.5g,2.43mmol)、((6-氯吡啶-3-基)甲基)胺基甲酸叔丁酯(0.6g，2.43mmol)、Pd(dppf) 2Cl 2(0.19g，0.24mmol)、碳酸铯(1.6g，4.86mmol)加入到二氧六环(15ml)和水(5ml)中，该反应在80℃搅拌反应16h，监测反应完全后，冷却，EA(20mL*2)萃取，有机相水洗，干燥浓缩，柱层析(PE:EA＝5:1)，得到([2,3'-联吡啶]-5-基甲基)胺基甲酸叔丁酯0.45g。MS m/z(ESI)：286.5[M+H] +。
步骤2：合成[2,3'-联吡啶]-5-基甲胺
将([2,3'-联吡啶]-5-基甲基)胺基甲酸叔丁酯(0.4g，1.4mmol)溶解于少量二氯甲烷中，然后在低温下加入4N HCl/二恶烷(2mL)，室温下搅拌反应2小时，反应完全后，旋干反应液，加入石油醚搅拌析出固体，过滤，得到[2,3'-联吡啶]-5-基甲胺0.25g。MS m/z(ESI)：186.4.3[M+H] +。
步骤3：合成4-(6-(([[2,3'-联吡啶]-5-基甲基)胺基)吡啶-3-基)-6-(2-羟基-2-甲基丙氧基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈
将4-(6-氟吡啶-3-基)-6-(2-羟基-2-甲基丙氧基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈(0.2g,0.62mmol)、[2,3'-联吡啶]-5-基甲胺(0.17g,0.92mmol)和碳酸钾(0.17g,1.24mmol)加入到单口瓶中，然后加入DMSO(10mL)，加热130℃反应15小时左右，反应完全后，加水(10mL)淬灭反应，DCM(20mL*2)萃取，有机相水洗，干燥，旋干，柱层析(DCM:MeOH＝10:1)，得到4-(6-(([[2,3'-联吡啶]-5-基甲基)胺基)吡啶-3-基)-6-(2-羟基-2-甲基丙氧基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈(化合物9)35mg。MS m/z(ESI)：492.8[M+H] +。 1H NMR(400MHz,DMSO)δ8.63(m,1H),8.55(s,2H),8.49(d,J＝1.9Hz,1H),8.21(d,J＝2.3Hz,1H),7.92(m,2H),7.77(m,1H),7.65(dd,J＝8.6,2.4Hz,1H),7.45(m 1H),7.34(m,2H),7.13(s,1H),6.96(d,J＝8.8Hz,1H),4.69(s,1H),4.60(d,J＝5.8Hz,2H),3.84(s,2H),1.20(s,6H)。
实施例10：6-(2-羟基-2-甲基丙氧基)-4-(6-(((6-(吡咯烷-1-基)吡啶-3-基)甲基)胺基)吡啶-3-基)吡唑[1,5-a]吡啶-3-甲腈的制备
Figure PCTCN2021089064-appb-000041
步骤1:合成6-(吡咯烷-1-基)烟碱腈
室温下，将四氢吡咯(0.5g,7.2mmol)、6-氯烟腈(0.5g,3.6mmol)，溶解到DMF 10mL当中，加入碳酸钾(1.5g,10.8mmol)，加料结束，90℃搅拌反应过夜，反应完全，淬灭，萃取，洗涤，浓缩，柱层析(PE:EA＝2:1)得到6-(吡咯烷-1-基)烟碱腈600mg。MS m/z(ESI)：174.1[M+H] +。
步骤2:合成(6-(吡咯烷-1-基)吡啶-3-基)甲基胺
将6-(吡咯烷-1-基)烟碱腈(0.3g,1.7mmol)溶解到甲醇(10mL)当中，加入Pd/C(30mg)，氢气置换三次，室温搅拌4h，反应完全。过滤，浓缩。柱层析(DCM:MeOH＝10:1)，得到(6-(吡咯烷-1-基)吡啶-3-基)甲基胺165mg。MS m/z(ESI)：178.3[M+H] +。
步骤3:合成6-(2-羟基-2-甲基丙氧基)-4-(6-((6-(吡咯烷-1-基)吡啶-3-基)甲基)胺基)吡啶-3-基)吡唑[1,5-a]吡啶-3-甲腈
室温下，将(6-(吡咯烷-1-基)吡啶-3-基)甲基胺(0.15g,0.84mmol)与4-(6-氟吡啶-3-基)-6-(2-羟基-2-甲基丙氧基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈(0.14g,0.42mmol)溶解到DMSO(5mL)当中，加入碳酸钾(0.18g,1.26mmol)，氮气保护，135℃搅拌反应过夜，反应完全。萃取，洗涤，柱层析(DCM:MeOH＝10:1)，得到6-(2-羟基-2-甲基丙氧基)-4-(6-((6-(吡咯烷-1-基)吡啶-3-基)甲基)胺基)吡啶-3-基)吡唑[1,5-a]吡啶-3-甲腈(化合物10)16mg,收率8％。MS m/z(ESI)：484.5[M+H] +。 1H NMR(400MHz,DMSO)δ8.63(s,1H),8.62(s,1H),8.20(d,1H),8.05(s,1H),7.59-7.61(m,1H),7.48-7.51(m,1H),7.24(s,1H),6.56(d,1H),6.38(d,1H),4.69(s,1H),4.34(d,2H),3.84(s,1H),1.90(s,4H),1.20(s,6H)。
实施例11：6-(2-羟基-2-甲基丙氧基)-4-(6-((6-(4-甲基-1H-咪唑-1-基)吡啶-3-基)甲基)胺基)吡啶-3-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈的制备
Figure PCTCN2021089064-appb-000042
步骤1:合成6-(4-甲基-1H-咪唑-1-基)烟碱腈
室温下，将4-甲基-1H-咪唑(0.6g,2.3mmol)、6-氯烟腈(0.5g,3.6mmol)，溶解到DMF 10mL当中，加入碳酸钾(2.5g,18mmol)，90℃搅拌反应过夜，反应完全，淬灭，萃取，洗涤，浓缩，柱层析(PE:EA＝2:1)，得到6-(4-甲基-1H-咪唑-1-基)烟碱腈650mg。 MS m/z(ESI)：184.5[M+H] +。
步骤2:合成6-(4-甲基-1H-咪唑-1-基)吡啶-3-基)甲基胺
将6-(4-甲基-1H-咪唑-1-基)烟碱腈(0.65g,3mmol)溶解到甲醇(10mL)当中，加入Pd/C(65mg)，氢气置换三次，室温搅拌4h，反应完全，过滤，浓缩。柱层析(DCM:MeOH＝10:1)，得到6-(4-甲基-1H-咪唑-1-基)吡啶-3-基)甲基胺200mg。MS m/z(ESI)：189.1[M+H] +。
步骤3:合成6-(2-羟基-2-甲基丙氧基)-4-(6-((6-(4-甲基-1H-咪唑-1-基)吡啶-3-基)甲基)胺基)吡啶-3-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈
室温下，将4-(6-氟吡啶-3-基)-6-(2-羟基-2-甲基丙氧基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈(0.12g,0.36mmol)与6-(4-甲基-1H-咪唑-1-基)吡啶-3-基)甲基胺(0.2g,0.73mmol)溶解到DMSO(5mL)当中，加入碳酸钾(0.25g,1.8mmol)，氮气保护下135℃搅拌反应过夜，反应完全，经萃取，洗涤，柱层析(DCM:MeOH＝10:1)，得到6-(2-羟基-2-甲基丙氧基)-4-(6-((6-(4-甲基-1H-咪唑-1-基)吡啶-3-基)甲基)胺基)吡啶-3-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈(化合物11)16mg。MS m/z(ESI)：495.2[M+H] +。 1H NMR(400MHz,DMSO)δ8.63(s,1H),8.54(s,1H),8.45(s,1H),8.38(s,1H),8.20(d,1H),7.62-7.69(m,3H),7.50(m,1H),7.25(s,1H),6.63(s,1H),4.68(s,1H),4.57(d,2H),3.84(s,2H),2.15(m,3H),1.20(s,6H)。
实施例12：6-(2-羟基-2-甲基丙氧基)-4-(6-((((6-吗啉代吡啶-3-基)甲基)胺基)吡啶-3-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈的制备
Figure PCTCN2021089064-appb-000043
步骤1：合成6-吗啉代烟腈
室温下，将吗啉(0.32g,3.6mmol)、6-氯烟腈(0.5g,3.6mmol)，溶解到DMF(10mL)当中，加入碳酸铯(1.0g,7.2mmol)，加热90℃反应10小时，反应完全后，加水(10mL)淬灭反应，DCM(30mL*2)萃取，有机相水洗，干燥，旋干，柱层析(PE:EA＝6:1),得到6-吗啉代烟腈0.55g。MS m/z(ESI)：190.2[M+H] +。
步骤2：合成(6-吗啉代吡啶-3-基)甲胺
将6-吗啉代烟腈(0.5g,2.6mmol)、Pd/C(0.05g)加入到单口瓶中，再加入甲醇(5mL)，然后滴加3滴浓盐酸，氢气氛围下室温反应过夜，反应完全后，过滤，旋干母液，得到(6-吗啉代吡啶-3-基)甲胺0.3g。MS m/z(ESI)：193.8[M+H] +。
步骤3：合成6-(2-羟基-2-甲基丙氧基)-4-(6-((((6-吗啉代吡啶-3-基)甲基)胺基)吡啶-3-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈
将4-(6-氟吡啶-3-基)-6-(2-羟基-2-甲基丙氧基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈(0.3g, 0.92mmol)、(6-吗啉代吡啶-3-基)甲胺(0.35g,1.8mmol)和碳酸钾(0.26g,1.8mmol)加入到单口瓶中，然后加入DMSO(10mL)，加热130℃反应15小时左右，反应完全后，加水(10mL)淬灭反应，DCM(30mL*2)萃取，有机相水洗，干燥，旋干，柱层析(DCM:MeOH＝10:1)，得到6-(2-羟基-2-甲基丙氧基)-4-(6-((((6-吗啉代吡啶-3-基)甲基)胺基)吡啶-3-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈化合物12)45mg。MS m/z(ESI)：500.3[M+H] +。 1H NMR(400MHz,DMSO)δ8.63(d,J＝2.0Hz,1H),8.54(s,1H),8.20(d,J＝2.4Hz,1H),8.14(d,J＝2.2Hz,1H),7.59(ddd,J＝15.5,8.7,2.4Hz,2H),7.30(t,J＝5.8Hz,1H),7.24(d,J＝2.0Hz,1H),6.79(d,J＝8.7Hz,1H),6.59(d,J＝8.7Hz,1H),4.69(s,1H),4.39(d,J＝5.7Hz,2H),3.85(s,2H),3.70–3.61(m,4H),3.41–3.34(m,4H),1.20(s,6H)。
实施例13：6-(2-羟基-2-甲基丙氧基)-4-(6-(喹啉-7-甲基)胺基)吡啶-3-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈的制备
Figure PCTCN2021089064-appb-000044
室温下，将4-(6-氟吡啶-3-基)-6-(2-羟基-2-甲基丙氧基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈(0.15g,0.46mmol)、喹啉-7-基甲胺(0.15g,0.92mmol)溶解到DMSO(5mL)当中，加入碳酸钾(0.13g,0.92mmol)，加热到130℃搅拌反应过夜，反应完全，萃取，洗涤，柱层析(DCM:MeOH＝10:1)，得到6-(2-羟基-2-甲基丙氧基)-4-(6-(喹啉-7-甲基)胺基)吡啶-3-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈(化合物13)30mg。MS m/z(ESI)：465.1[M+H] +。 1H NMR(500MHz,DMSO)δ8.84(dd,J＝4.2,1.6Hz,1H),8.64(d,J＝2.0Hz,1H),8.55(s,1H),8.32(dd,J＝29.6,5.1Hz,2H),7.96(d,J＝8.7Hz,1H),7.76(dd,J＝9.0,2.5Hz,2H),7.67(dd,J＝8.7,1.7Hz,1H),7.49(dd,J＝8.3,4.2Hz,1H),7.29(d,J＝2.0Hz,1H),6.82(d,J＝8.9Hz,1H),5.06(s,2H),3.85(s,2H),1.20(s,6H)。
实施例14：6-(2-羟基-2-甲基丙氧基)-4-(6-(甲基(喹啉-6-基甲基)胺基)吡啶-3-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈的制备
Figure PCTCN2021089064-appb-000045
步骤1：合成(喹啉-6-基甲基)胺基甲酸叔丁酯
室温下，将喹啉-6基甲胺(0.5g,3.2mmol)、三乙胺(0.96g,9.6mmol)，溶解到DCM(20mL)当中，然后再加入Boc 2O(0.7g,3.2mmol)，室温下搅拌反应3小时，反应完全后，加水(10mL)淬灭反应，DCM(20mL*2)萃取，有机相水洗，干燥，旋干，得到(喹啉-6-基甲基)胺基甲酸叔丁酯0.6g。MS m/z(ESI)：259.5[M+H] +。
步骤2：合成(喹啉-6-基甲基)甲基胺基甲酸叔丁酯
室温下，将(喹啉-6-基甲基)胺基甲酸叔丁酯(0.6g,2.3mmol)，溶解到THF(10mL)当中，然后降温至0℃，再加入慢慢加入NaH(0.1g，4.6mmol)，低温下搅拌反应半小时，然后再加入碘甲烷(0.33g，2.3mmol)，加完后低温继续反应6小时，反应完全后，低温下加甲醇淬灭反应，EA(20mL*2)萃取，有机相水洗，干燥，旋干，得到(喹啉-6-基甲基)甲基胺基甲酸叔丁酯0.55g。MS m/z(ESI)：272.9[M+H] +。
步骤3：合成N-甲基-1-(喹啉-6-基)甲胺
将(喹啉-6-基甲基)甲基胺基甲酸叔丁酯(0.55g，2.0mmol)溶解于少量二氯甲烷中，然后在低温下加入4N HCl/二恶烷(3mL)，室温下搅拌反应2小时，反应完全后，旋干反应液，加入石油醚搅拌析出固体，过滤得到N-甲基-1-(喹啉-6-基)甲胺0.3g。MS m/z(ESI)：172.7[M+H] +。
步骤4：合成6-(2-羟基-2-甲基丙氧基)-4-(6-(甲基(喹啉-6-基甲基)胺基)吡啶-3-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈
将4-(6-氟吡啶-3-基)-6-(2-羟基-2-甲基丙氧基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈(0.3g,0.92mmol)、N-甲基-1-(喹啉-6-基)甲胺(0.31g,1.8mmol)和碳酸钾(0.26g,1.8mmol)加入到单口瓶中，然后加入DMSO(10mL)，加热130℃反应15小时左右，反应完全后，加水(10mL)淬灭反应，DCM(30mL*2)萃取，有机相水洗，干燥，旋干，柱层析(DCM:MeOH＝10:1)，得到6-(2-羟基-2-甲基丙氧基)-4-(6-(甲基(喹啉-6-基甲基)胺基)吡啶-3-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈(化合物14)60mg。MS m/z(ESI)：479.3[M+H] +。 1H NMR(500MHz,DMSO)δ8.84(dd,J＝4.2,1.6Hz,1H),8.64(d,J＝2.0Hz,1H),8.55(s,1H),8.32(dd,J＝29.6,5.1Hz,2H),7.96(d,J＝8.7Hz,1H),7.76(dd,J＝9.0,2.5Hz,2H),7.67(dd,J＝8.7,1.7Hz,1H),7.49(dd,J＝8.3,4.2Hz,1H),7.29(d,J＝2.0Hz,1H),6.82(d,J＝8.9Hz,1H),5.06(s,2H),3.85(s,2H),3.14(s,3H),1.20(s,6H)。
实施例15：(S)-4-(6-((1-(6-(4-氟-1H-吡唑-1-基)吡啶-3-基)丙基)胺基)吡啶-3-基)-6-(2-羟基-2-甲基丙氧基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈的制备
Figure PCTCN2021089064-appb-000046
步骤1：合成1-(6-(4-氟-1H-吡唑-1-基)吡啶-3-基)丙-1-酮
将1-(6-氯吡啶-3-基)-1-丙酮(1.5g,8.88mmol)、4-氟-1H-吡唑(0.76g,8.88mmol)和碳酸铯(5.8g,17.6mmol)加入到单口瓶中，然后加入DMF(20mL)，加热90℃反应10小时，反应完全后，加水(20mL)淬灭反应，DCM(30mL*2)萃取，有机相水洗，干燥，旋干，柱层析(PE:EA＝10:1)，得到1-(6-(4-氟-1H-吡唑-1-基)吡啶-3-基)丙-1-酮1.4g。MS m/z(ESI)：220.2[M+H] +。
步骤2：合成(R)-N-((S)-1-(6-(4-氟-1H-吡唑-1-基)吡啶-3-基)丙基)-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺
将1-(6-(4-氟-1H-吡唑-1-基)吡啶-3-基)丙-1-酮(1.4g,6.4mmol)、R-(+)-叔丁基亚磺酰胺(0.77g,6.4mmol)和乙醇钛(IV)(2.9g,12.8mmol)加入到二口瓶中，然后加入THF(20mL)，反应液回流反应过夜，反应完全后，冷却，然后降温至-75℃，然后在慢慢滴加L-Selectride(19.2mL,1N)，加完后再低温下搅拌半小时，然后再慢慢升温至室温反应2小时，反应完全后，在低温下加入甲醇淬灭反应，加入水(20mL)，乙酸乙酯(60mL*2)萃取，有机相干燥，旋干，柱层析(PE:EA＝5:1)，得到(R)-N-((S)-1-(6-(4-氟-1H-吡唑-1-基)吡啶-3-基)丙基)-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺1.0g。MS m/z(ESI)：325.5[M+H] +。
步骤3：合成(S)-1-(6-(4-氟-1H-吡唑-1-基)吡啶-3-基)丙-1-胺
将(R)-N-((S)-1-(6-(4-氟-1H-吡唑-1-基)吡啶-3-基)丙基)-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺(1.0g，3.0mmol)溶解于少量甲醇中，然后在低温下加入4N HCl/二恶烷(4mL)，室温下搅拌反应2小时，反应完全后，加入乙醚形成粘性固体，倒掉上层液，加入石油醚搅拌析出固体，过滤，得到(S)-1-(6-(4-氟-1H-吡唑-1-基)吡啶-3-基)丙-1-胺0.5g。MS m/z(ESI)：221.3[M+H] +。
步骤4：合成(S)-4-(6-((1-(6-(4-氟-1H-吡唑-1-基)吡啶-3-基)丙基)胺基)吡啶-3-基)-6-(2-羟基-2-甲基丙氧基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈
将4-(6-氟吡啶-3-基)-6-(2-羟基-2-甲基丙氧基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈(0.35g,1.1mmol)、(S)-1-(6-(4-氟-1H-吡唑-1-基)吡啶-3-基)丙-1-胺(0.47g,2.2mmol)和碳酸钾(0.31g,2.2mmol)加入到单口瓶中，然后加入DMSO(15mL)，加热130℃反应15小时左右，反应完全后，加水(10mL)淬灭反应，DCM(30mL*2)萃取，有机相水洗，干燥，旋干，柱层析(DCM:MeOH＝10:1)，得到(S)-4-(6-((1-(6-(4-氟-1H-吡唑-1-基)吡啶-3-基)丙基)胺基)吡啶-3-基)-6-(2-羟基-2-甲基丙氧基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈(化合物15)50mg，MS m/z(ESI)：527.6[M+H] +。 1H NMR(400MHz,DMSO)δ8.65–8.58(m,2H),8.51(s,1H),8.47(d,J＝2.1Hz,1H),8.12(d,J＝2.4Hz,1H),7.98(dd,J＝8.5,2.3Hz,1H),7.85(dd,J＝13.4,6.4Hz,2H),7.60(dd,J＝8.7,2.5Hz,1H),7.48(d,J＝7.6Hz,1H),7.21(d,J＝2.1Hz,1H),6.62(d,J＝8.7Hz,1H),4.65(s,1H),3.81(s,2H),2.61(s,2H),1.50(d,J＝7.0Hz,3H),1.17(s,6H)。
实施例16：(S)-4-(6-((1-(4-(4-氟-1H-吡唑-1-基)苯基)乙基)胺基)吡啶-3-基)-6-(2-羟基-2-甲基丙氧基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈的制备
Figure PCTCN2021089064-appb-000047
步骤1：合成1-(4-(4-氟-1H-吡唑-1-基)苯基)乙-1-酮
将1-(4-溴苯基)乙-1-酮(2.5g,12.6mmol)、4-氟-1H-吡唑(1.1g,12.6mmol)和碳酸钾(3.5g,25.2mmol)、碘化亚铜(0.22g,1.26mmol)和L-Proline(0.27g,2.52mmol)加入到二口瓶中，然后加入DMSO(20mL)，氮气保护下加热130℃反应5小时，反应完全后，加水(30mL)淬灭反应，DCM(50mL*2)萃取，有机相水洗，干燥，旋干，柱层析(PE:EA＝10:1)，得到1-(4-(4-氟-1H-吡唑-1-基)苯基)乙-1-酮1.1g。MS m/z(ESI)：205.2[M+H] +。
步骤2：合成(R)-N-((S)-1-(4-(4-氟-1H-吡唑-1-基)苯基)乙基)-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺
将1-(4-(4-氟-1H-吡唑-1-基)苯基)乙-1-酮(1.1g,5.4mmol)、R-(+)-叔丁基亚磺酰胺(0.65g,5.4mmol)和乙醇钛(IV)(2.4g,10.8mmol)加入到二口瓶中，然后加入THF(15mL)，反应液回流反应过夜，反应完全后，冷却，然后降温至-75℃，然后在慢慢滴加L-Selectride(16.2mL,1N)，加完后再低温下搅拌半小时，然后再慢慢升温至室温反应2小时。反应完全后，在低温下加入甲醇淬灭反应，加入水(20mL)，乙酸乙酯(60mL*2)萃取，有机相干燥，旋干，柱层析(PE:EA＝5:1)，得到(R)-N-((S)-1-(4-(4-氟-1H-吡唑-1-基)苯基)乙基)-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺0.8g。MS m/z(ESI)：310.7[M+H] +。
步骤3：合成(S)-1-(4-(4-(4-氟-1H-吡唑-1-基)苯基)乙-1-胺
将(R)-N-((S)-1-(4-(4-氟-1H-吡唑-1-基)苯基)乙基)-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺(0.8g，2.6mmol)溶解于少量甲醇中，然后在低温下加入4N HCl/二恶烷(4mL)，室温下搅拌反应2小时，反应完全后，加入乙醚形成粘性固体，倒掉上层液，加入石油醚搅拌析出固体，过滤，得到(S)-1-(4-(4-(4-氟-1H-吡唑-1-基)苯基)乙-1-胺0.35g。MS m/z(ESI)：206.3[M+H] +。
步骤4：合成(S)-4-(6-((1-(4-(4-氟-1H-吡唑-1-基)苯基)乙基)胺基)吡啶-3-基)-6-(2-羟基-2-甲基丙氧基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈
将4-(6-氟吡啶-3-基)-6-(2-羟基-2-甲基丙氧基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈(0.2g, 0.62mmol)、(S)-1-(4-(4-(4-氟-1H-吡唑-1-基)苯基)乙-1-胺(0.19g,0.92mmol)和碳酸钾(0.17g,1.24mmol)加入到单口瓶中，然后加入DMSO(10mL)，加热130℃反应15小时左右，反应完全后，加水(10mL)淬灭反应，DCM(30mL*2)萃取，有机相水洗，干燥，旋干，柱层析(DCM:MeOH＝10:1)，得到(S)-4-(6-((1-(4-(4-氟-1H-吡唑-1-基)苯基)乙基)胺基)吡啶-3-基)-6-(2-羟基-2-甲基丙氧基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈(化合物16)30mg。MS m/z(ESI)：512.7[M+H] +。 1H NMR(500MHz,DMSO)δ8.61(dd,J＝6.0,3.3Hz,2H),8.53(s,1H),8.13(d,J＝2.4Hz,1H),7.78(d,J＝4.2Hz,1H),7.69(d,J＝8.6Hz,2H),7.60(dd,J＝8.7,2.4Hz,1H),7.50(d,J＝8.6Hz,2H),7.43(d,J＝7.5Hz,1H),7.21(d,J＝2.0Hz,1H),6.60(d,J＝8.7Hz,1H),5.16–5.08(m,1H),4.67(s,1H),3.82(s,2H),1.47(d,J＝6.9Hz,3H),1.18(s,6H)。
实施例17：(S)-6-(2-氰基-2-甲基丙氧基)-4-(6-((1-(4-(4-氟-1H-吡唑-1-基)苯基)乙基)(甲基)胺基)吡啶-3-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈的制备
Figure PCTCN2021089064-appb-000048
步骤1：合成(S)-(1-(1-(4-(4-氟-1H-吡唑-1-基)苯基)乙基)胺基甲酸叔丁酯
室温下，将(S)-1-(4-(4-(4-氟-1H-吡唑-1-基)苯基)乙-1-胺(1.0g,4.88mmol)、三乙胺(0.98g,9.8mmol)溶解到DCM(20mL)中，然后再加入Boc 2O(1.07g，4.88mmol)，室温下搅拌反应4小时，反应完全后，加水(10mL)淬灭反应，DCM(20mL*2)萃取，有机相水洗，干燥，旋干，得到(S)-(1-(1-(4-(4-氟-1H-吡唑-1-基)苯基)乙基)胺基甲酸叔丁酯1.2g。MS m/z(ESI)：306.5[M+H] +。
步骤2：合成(S)-(1-(4-(4-氟-1H-吡唑-1-基)苯基)乙基)(甲基)胺基甲酸叔丁酯
室温下，将(S)-(1-(1-(4-(4-氟-1H-吡唑-1-基)苯基)乙基)胺基甲酸酯叔丁基(1.2g,3.9mmol)，溶解到THF(15mL)中，然后降温至0℃，再加入慢慢加入NaH(0.19g，7.8mmol)，低温下搅拌反应半小时，然后再加入碘甲烷(0.56g，3.9mmol)，加完后低温继续反应5小时，反应完全后，低温下加甲醇淬灭反应，EA(20mL*2)萃取，有机相水洗，干燥，旋干，柱层析(PE:DCM＝1:1)得到(S)-(1-(4-(4-氟-1H-吡唑-1-基)苯基)乙基)(甲基)胺基甲酸叔丁酯1.1g。MS m/z(ESI)：319.9[M+H] +。
步骤3：合成(S)-1-(4-(4-氟-1H-吡唑-1-基)苯基)-N-甲基-1-胺
将(S)-(1-(4-(4-氟-1H-吡唑-1-基)苯基)乙基)(甲基)胺基甲酸叔丁酯(1.1g，3.5mmol)溶解于少量二氯甲烷中，然后在低温下加入4N HCl/二恶烷(4mL)，室温下搅拌反应2 小时，反应完全后，旋干反应液，加入石油醚搅拌析出固体，过滤得到(S)-1-(4-(4-氟-1H-吡唑-1-基)苯基)-N-甲基-1-胺0.6g，MS m/z(ESI)：219.7[M+H] +。
步骤4：合成(S)-5-溴-N-(1-(4-(4-氟-1H-吡唑-1-基)苯基)乙基)-N-甲基吡啶-2-胺
将(S)-1-(4-(4-氟-1H-吡唑-1-基)苯基)-N-甲基-1-胺(0.6g,2.73mmol)，2-氟-5-溴吡啶(4.8g,27.3mmol)和碳酸铯(1.78g,5.46mmol)加入到单口瓶中，然后加入DMSO(15mL)，加热130℃反应40小时左右，反应完全后，加水(10mL)淬灭反应，DCM(30mL*2)萃取，有机相水洗，干燥，旋干，柱层析(PE:DCM＝1:1)，得到(S)-5-溴-N-(1-(4-(4-氟-1H-吡唑-1-基)苯基)乙基)-N-甲基吡啶-2-胺0.5g。MS m/z(ESI)：376.3[M+H] +。
步骤5：合成(S)-N-(1-(4-(4-氟-1H-吡唑-1-基)苯基)乙基)-N-甲基-5-(三丁基锡烷基)吡啶-2-胺
将(S)-5-溴-N-(1-(4-(4-氟-1H-吡唑-1-基)苯基)乙基)-N-甲基吡啶-2-胺(0.5g,1.33mmol)溶解在DMF(10mL)中，加入六丁基二锡(1.1g,2.0mmol)和四三苯基膦(0.15g,0.13mmol)，然后140℃搅拌反应2h,监测反应完全后，用氯化铵溶液(10mL)淬灭反应，乙酸乙酯(10mL*2)萃取，有机相水洗，干燥浓缩，柱层析(PE:EA＝10:1)，得到(S)-N-(1-(4-(4-氟-1H-吡唑-1-基)苯基)乙基)-N-甲基-5-(三丁基锡烷基)吡啶-2-胺0.2g。MS m/z(ESI)：586.3[M+H] +。
步骤6：合成(S)-6-(2-氰基-2-甲基丙氧基)-4-(6-((1-(4-(4-氟-1H-吡唑-1-基)苯基)乙基)(甲基)胺基)吡啶-3-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈
将4-溴-6-(2-氰基-2-甲基丙氧基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈(0.15g,0.47mmol)、(S)-N-(1-(4-(4-氟-1H-吡唑-1-基)苯基)乙基)-N-甲基-5-(三丁基锡烷基)吡啶-2-胺(0.27g,0.47mmol)、碘化亚铜(9mg,0.047mmol)和四三苯基膦钯(54mg,0.047mmol)溶解在二甲苯(15mL)中，反应液130℃下搅拌反应4h，监测反应完全后，用水(10mL)淬灭反应，EA(20mL*3)萃取，有机相水洗，干燥浓缩，柱层析(DCM:MeOH＝10:1)，得到(S)-6-(2-氰基-2-甲基丙氧基)-4-(6-((1-(4-(4-氟-1H-吡唑-1-基)苯基)乙基)(甲基)胺基)吡啶-3-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈(化合物17)40mg。MS m/z(ESI)：535.1[M+H] +。 1H NMR(500MHz,DMSO)δ8.71(d,J＝1.9Hz,1H),8.56(d,J＝4.5Hz,1H),8.41(s,2H),8.30(s,2H),7.92(dd,J＝6.4,3.3Hz,2H),7.87(d,J＝8.5Hz,1H),7.80(dd,J＝8.8,2.7Hz,1H),7.40(d,J＝2.9Hz,1H),6.83(d,J＝8.9Hz,1H),4.45(s,1H),3.47(d,J＝6.9Hz,2H),2.83(s,3H),1.81(d,J＝7.0Hz,3H),1.46(s,6H)。
实施例18：(S)-6-(2-氰基-2-甲基丙氧基)-4-(6-((1-(6-(4-氟-1H-吡唑-1-基)吡啶-3-基)乙基)(甲基)胺基)吡啶-3-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈的制备
Figure PCTCN2021089064-appb-000049
步骤1：合成(S)-(1-(6-(4-(4-氟-1H-吡唑-1-基)吡啶-3-基)乙基)胺基甲酸叔丁酯
室温下，将(S)-1-(6-(4-氟-1H-吡唑-1-基)吡啶-3-基)乙-1-胺(1.5g,7.28mmol)、三乙胺(1.48g,14.5mmol)溶解到DCM(20mL)当中，然后再加入Boc 2O(1.59g，7.28mmol)，室温下搅拌反应4小时，反应完全后，加水(10mL)淬灭反应，DCM(20mL*2)萃取，有机相水洗，干燥，旋干，得到(S)-(1-(6-(4-(4-氟-1H-吡唑-1-基)吡啶-3-基)乙基)胺基甲酸叔丁酯1.8g。MS m/z(ESI)：307.4[M+H] +。
步骤2：合成(S)-(1-(6-(4-氟-1H-吡唑-1-基)吡啶-3-基)乙基)(甲基)胺基甲酸叔丁酯
室温下，将(S)-(1-(6-(4-(4-氟-1H-吡唑-1-基)吡啶-3-基)乙基)胺基甲酸叔丁酯(1.8g,5.9mmol)，溶解到THF(20mL)中，然后降温至0℃，再加入慢慢加入NaH(0.29g，11.8mmol)，低温下搅拌反应半小时，然后再加入碘甲烷(0.84g，3.9mmol)，加完后低温继续反应5小时，反应完全后，低温下加甲醇淬灭反应，EA(30mL*2)萃取，有机相水洗，干燥，旋干，柱层析(PE:DCM＝1:1)，得到(S)-(1-(6-(4-氟-1H-吡唑-1-基)吡啶-3-基)乙基)(甲基)胺基甲酸叔丁酯1.7g。MS m/z(ESI)：321.3[M+H] +。
步骤3：合成(S)-1-(6-(4-氟-1H-吡唑-1-基)吡啶-3-基)-N-甲基-1-胺
将(S)-(1-(6-(4-氟-1H-吡唑-1-基)吡啶-3-基)乙基)(甲基)胺基甲酸叔丁酯(1.7g，5.3mmol)溶解于少量二氯甲烷中，然后在低温下加入4N HCl/二恶烷(6mL)，室温下搅拌反应2小时，反应完全后，旋干反应液，加入石油醚搅拌析出固体，过滤，得到(S)-1-(6-(4-氟-1H-吡唑-1-基)吡啶-3-基)-N-甲基-1-胺0.8g。MS m/z(ESI)：221.2[M+H] +。
步骤4：合成(S)-5-溴-N-(1-(6-(4-氟-1H-吡唑-1-基)吡啶-3-基)乙基)-N-甲基吡啶-2-胺
将(S)-1-(6-(4-氟-1H-吡唑-1-基)吡啶-3-基)-N-甲基-1-胺(0.8g,3.62mmol)、2-氟-5-溴吡啶(6.3g,36.2mmol)和碳酸钾(2.4g,7.24mmol)加入到单口瓶中，然后加入DMSO(15mL)，加热130℃反应40小时左右，反应完全后，加水(10mL)淬灭反应，DCM(30mL*2)萃取，有机相水洗，干燥，旋干，柱层析(PE:DCM＝1:1)，得到(S)-5-溴-N-(1-(6-(4-氟-1H-吡唑-1-基)吡啶-3-基)乙基)-N-甲基吡啶-2-胺0.7g。MS m/z(ESI)：377.2[M+H] +。
步骤5：合成(S)-N-(1-(6-(6-(4-氟-1H-吡唑-1-基)吡啶-3-基)乙基)-N-甲基-5-(三丁 基锡烷基)吡啶-2-胺
将(S)-5-溴-N-(1-(6-(4-氟-1H-吡唑-1-基)吡啶-3-基)乙基)-N-甲基吡啶-2-胺(0.7g,1.86mmol)溶解在DMF(10mL)中，加入六丁基二锡(1.6g,2.79mmol)和四三苯基膦钯(0.21g,0.186mmol)，然后140℃搅拌反应2h，监测反应完全后，用氯化铵溶液(10mL)淬灭反应，乙酸乙酯(10mL*2.)萃取，有机相水洗，干燥浓缩，柱层析(PE:EA＝10:1)，得到(S)-N-(1-(6-(6-(4-氟-1H-吡唑-1-基)吡啶-3-基)乙基)-N-甲基-5-(三丁基锡烷基)吡啶-2-胺0.3g。MS m/z(ESI)：587.4[M+H] +。
步骤6：合成(S)-6-(2-氰基-2-甲基丙氧基)-4-(6-((1-(6-(4-氟-1H-吡唑-1-基)吡啶-3-基)乙基)(甲基)胺基)吡啶-3-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈
将4-溴-6-(2-氰基-2-甲基丙氧基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈(0.2g,0.63mmol)、(S)-N-(1-(6-(6-(4-氟-1H-吡唑-1-基)吡啶-3-基)乙基)-N-甲基-5-(三丁基锡烷基)吡啶-2-胺(0.37g,0.63mmol)、碘化亚铜(12mg,0.063mmol)和四三苯基膦钯(73mg,0.063mmol)溶解在二甲苯(15mL)中，反应液130℃下搅拌反应4h，监测反应完全后，用水(10mL)淬灭反应，EA(20mL*3)萃取，有机相水洗，干燥浓缩，柱层析(DCM:MeOH＝10:1)得到(S)-6-(2-氰基-2-甲基丙氧基)-4-(6-((1-(6-(4-氟-1H-吡唑-1-基)吡啶-3-基)乙基)(甲基)胺基)吡啶-3-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈(化合物18)50mg。MS m/z(ESI)：536.6[M+H] +。 1H NMR(500MHz,DMSO)δ8.76(d,J＝1.9Hz,1H),8.66(d,J＝4.5Hz,1H),8.61(s,1H),8.40(s,2H),7.92(dd,J＝6.4,3.3Hz,2H),7.87(d,J＝8.5Hz,1H),7.83(dd,J＝8.8,2.5Hz,1H),7.40(d,J＝1.9Hz,1H),6.83(d,J＝8.9Hz,1H),4.35(s,1H),3.43(d,J＝6.9Hz,2H),2.83(s,3H),1.61(d,J＝7.0Hz,3H),1.44(s,6H)。
实施例19：(S)-4-(6-((1-(6-(4-氟-1H-吡唑-1-基)吡啶-3-基)乙基)(甲基)胺基)吡啶-3-基)-6-(4-甲基哌嗪-1-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈的制备
Figure PCTCN2021089064-appb-000050
步骤1:合成6-溴-3-氰基吡唑并[1,5-a]吡啶-4-基三氟甲磺酸酯
将6-溴-4-羟基吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈(4g,16.88mmol)、N-苯基双(三氟甲烷磺酰)亚胺(7.3g,20.25mmol)和N,N-二异丙基乙胺(4.35g，33.76mmol)溶解在40mL DMA中，该反应室温搅拌反应16h。监测反应完全后，加入水淬灭反应，EA(50mL*2)萃取，有机相盐水洗，干燥浓缩，柱层析，得到6-溴-3-氰基吡唑并[1,5-a]吡啶-4-基三氟甲磺酸盐(4.5g)。MS m/z(ESI)：370[M+H] +。
步骤2:合成(S)-6-溴-4-(6-((1-(6-(4-(4-氟-1H-吡唑-1-基)吡啶)-3-基)乙基)(甲基)胺基)吡啶基-3-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈
将6-溴-3-氰基吡唑并[1,5-a]吡啶-4-基三氟甲磺酸盐(2g,5.42mmol)、碳酸钠(1.56g,14.75mmol)、(S)-N-(1-(6-(4-氟-1H-吡唑-1-基)吡啶-3-基)乙基)-N-甲基-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼杂环戊烷-2-基)吡啶-2-胺(2.08g,4.93mmol)和[1,1'-双(二苯基膦基)二茂铁]二氯化钯(403mg,0.542mmol)溶解在二氧六环：水＝45mL：15mL的混合溶液中，该反应液在80℃反应16h。监测反应完全后，冷却，加入水淬灭反应，EA(30mL*3)萃取，有机相水洗，干燥浓缩，柱层析得到(S)-6-溴-4-(6-((1-(6-(4-(4-氟-1H-吡唑-1-基)吡啶)-3-基)乙基)(甲基)胺基)吡啶基-3-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈510mg。MS m/z(ESI)：517[M+H] +。
步骤3:合成(S)-4-(6-((1-(6-(4-氟-1H-吡唑-1-基)吡啶-3-基)乙基)(甲基)胺基)吡啶-3-基)-6-(4-甲基哌嗪-1-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈
将(S)-6-溴-4-(6-((1-(6-(4-(4-氟-1H-吡唑-1-基)吡啶)-3-基)乙基)(甲基)胺基)吡啶基-3-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈(50mg,0.097mmol)、碳酸铯(94.9mg,0.291mmol)、N-甲基哌嗪(39.1mg,0.291mmol)、4,5-双二苯基膦-9,9-二甲基氧杂蒽(5.6mg,0.0097mmol)和三(二亚苄基丙酮)二钯(8.9mg,0.0097mmol)溶解在甲苯(10ml)中,该反应液在120℃反应16h，监测反应完全后，冷却，加入水淬灭反应，EA(20mL*3)萃取，有机相水洗，干燥浓缩，柱层析，得到(S)-4-(6-((1-(6-(4-氟-1H-吡唑-1-基)吡啶-3-基)乙基)(甲基)胺基)吡啶-3-基)-6-(4-甲基哌嗪-1-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈(化合物19)13mg。MS m/z(ESI)：537[M+H] +。 1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δ8.65(d,J＝4.6Hz,1H),8.50(s,1H),8.39(d,J＝2.2Hz,1H),8.36(d,J＝2.6Hz,1H),8.28(d,J＝2.1Hz,1H),7.92–7.85(m,3H),7.79(dd,J＝8.8,2.6Hz,1H),7.49(d,J＝2.1Hz,1H),6.80(d,J＝8.9Hz,1H),6.29(t,J＝7.2Hz,1H),3.19(t,J＝4.9Hz,4H),2.81(s,3H),2.47(d,J＝4.8Hz,4H),2.22(s,3H),1.60(d,J＝7.1Hz,3H).
实施例20：((S)-4-(6-((1-(6-(4-氟-1H-吡唑-1-基)吡啶-3-基)乙基)(甲基)胺基)吡啶-3-基)-6-(2-羟基乙氧基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈的制备
Figure PCTCN2021089064-appb-000051
步骤1:合成4-溴-6-(2-羟基乙氧基)吡唑[1,5-a]吡啶-3-甲腈
将4-溴-6-羟基吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈(500mg,2.11mmol)、碳酸钾(582.3mg,4.22mmol)和环氧乙烷的四氢呋喃溶液(3M)(2.1ml,6.33mmol)溶解在DMF(10mL)中,该反应液在70℃反应16h。监测反应完全后，冷却，加入水淬灭反应，EA(20mL*3)萃取，有机相水洗，干燥浓缩，柱层析，得到4-溴-6-(2-羟基乙氧基)吡唑[1,5-a]吡啶-3-甲腈305mg。MS m/z(ESI)：281[M+H] +。
步骤2:((S)-4-(6-((1-(6-(4-氟-1H-吡唑-1-基)吡啶-3-基)乙基)(甲基)胺基)吡啶-3- 基)-6-(2-羟基乙氧基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈
将4-溴-6-(2-羟基乙氧基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈(305mg,1.08mmol)、碳酸钠(345mg,3.25mmol)、(S)-N-(1-(6-(4-氟-1H-吡唑-1-基)吡啶-3-基)乙基)-N-甲基-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼杂环戊烷-2-基)吡啶-2-胺(456.8mg,1.08mmol)和四(三苯基膦)钯(124.7mg,0.108mmol)溶解在二氧六环：水＝15mL：5mL中，该反应液在80℃反应16h。监测反应完全后，冷却，加入水淬灭反应，EA(20mL*3)萃取，有机相水洗，干燥浓缩，柱层析得到(S)-4-(6-((1-(6-(4-氟-1H-吡唑-1-基)吡啶-3-基)乙基)(甲基)胺基)吡啶-3-基)-6-(2-羟基乙氧基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈(化合物20)150mg。MS m/z(ESI)：498[M+H] +。 1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.67–8.61(m,2H),8.55(s,1H),8.37(d,J＝2.3Hz,1H),8.35(d,J＝2.5Hz,1H),7.92–7.87(m,2H),7.84(dd,J＝8.6,0.8Hz,1H),7.78(dd,J＝8.8,2.6Hz,1H),7.28(d,J＝2.1Hz,1H),6.80(d,J＝8.8Hz,1H),6.25(t,J＝7.1Hz,1H),4.93(t,J＝5.4Hz,1H),4.10(t,J＝4.8Hz,2H),3.73(q,J＝5.1Hz,2H),2.80(s,3H),1.58(d,J＝7.0Hz,3H).
实施例21：6-(3,3-二氟氮杂环丁烷-1-基)-4-(4-((3R)-3-(4-(4-氟-1H-吡唑-1-基)苯基)丁-2-基)苯基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈的制备
Figure PCTCN2021089064-appb-000052
步骤1：合成6-(3,3-二氟氮杂环丁烷-1-基)-4-(4-((3R)-3-(4-(4-氟-1H-吡唑-1-基)苯基)丁-2-基)苯基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈
将(S)-6-溴-4-(6-((1-(6-(4-氟-1H-吡唑-1-基)吡啶-3-基)乙基)甲基胺)吡啶-3-基)-吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈(50mg,0.097mmol)、3,3-二氟氮杂环丁烷(38mg,0.293mmol)、碳酸铯(126.4mg，0.388mmol)、三(二亚苄基丙酮)二钯(9mg，0.0097mmol)和(9,9-二甲基-9H-氧杂蒽-4,5-二基)双(二苯基膦)(60mg，0.097mmol)溶解在5mL甲苯中，氮气保护，该反应130℃搅拌反应过夜，监测反应完全后，冷却，加入水淬灭反应，EA(30mL*2)萃取，有机相水洗，干燥浓缩，柱层析得到42mg 6-(3,3-二氟氮杂环丁烷-1-基)-4-(4-((3R)-3-(4-(4-氟-1H-吡唑-1-基)苯基)丁-2-基)苯基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈(化合物21)。MS m/z(ESI)：527.2[M+H] +。 1H NMR(400MHz,DMSO)δ8.66(d,J＝4.5Hz,1H),8.53(s,1H),8.38(dd,J＝7.5,2.2Hz,2H),8.28(d,J＝1.9Hz,1H),7.90(dt,J＝15.1,5.6Hz,3H),7.81(dd,J＝8.8,2.5Hz,1H),7.11(d,J＝1.9Hz,1H),6.83(d,J＝8.9Hz,1H),6.28(d,J＝7.1Hz,1H),4.39(t,J＝12.3Hz,4H),2.83(s,3H),1.62(t,J＝7.7Hz,4H),1.26–1.17(m,2H),1.06(s,2H),0.83(d,J＝7.2Hz,1H).
实施例22：(S)-4-(6-((1-(6-(4-氟-1H-吡唑-1-基)吡啶-3-基)乙基)(甲基)胺基)吡啶-3-基)-6-(哌啶-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈的制备
Figure PCTCN2021089064-appb-000053
步骤1：合成叔丁基(S)-4-(3-氰基-4-(6-((1-(6-(4-氟-1H-吡唑-1-基)吡啶-3-基)乙基)(甲基)胺基)吡啶-3-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-6-基)哌啶-1-羧酸酯
将(S)-6-溴-4-(6-((1-(6-(4-氟-1H-吡唑-1-基)吡啶-3-基)乙基)(甲基)胺基)吡啶)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈(50mg,0.097mmol)、哌嗪-1-羧酸叔丁酯(55mg，0.293mmol)、碳酸铯(126.4mg，0.388mmol)、三(二亚苄基丙酮)二钯(9mg，0.0097mmol)和(9,9-二甲基-9H-氧杂蒽-4,5-二基)双(二苯基膦)(60mg，0.097mmol)溶解在5mL甲苯中，氮气保护，该反应130℃搅拌反应过夜，监测反应完全后，冷却，加入水淬灭反应，EA(30mL*2)萃取，有机相水洗，干燥浓缩，柱层析，得到52mg叔丁基(S)-4-(3-氰基-4-(6-((1-(6-(4-氟-1H-吡唑-1-基)吡啶-3-基)乙基)(甲基)胺基)吡啶-3-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-6-基)哌啶-1-羧酸酯。MS m/z(ESI)：621.3[M+H] +。
步骤2：合成(S)-4-(6-((1-(6-(4-氟-1H-吡唑-1-基)吡啶-3-基)乙基)(甲基)胺基)吡啶-3-基)-6-(哌啶-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈
将叔丁基(S)-4-(3-氰基-4-(6-((1-(6-(4-氟-1H-吡唑-1-基)吡啶-3-基)乙基)(甲基)胺基)吡啶-3-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-6-基)哌啶-1-甲酸(52mg,0.083mmol)溶解在盐酸/乙酸乙酯3mL中，反应在0℃搅拌30分钟，监测反应完全后，浓缩至干，用碳酸钠溶液调节pH到7～8，EA(30mL*2)萃取，有机相水洗，干燥浓缩，柱层析，得到42mg(S)-4-(6-((1-(6-(4-氟-1H-吡唑-1-基)吡啶-3-基)乙基)(甲基)胺基)吡啶-3-基)-6-(哌啶-4-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈(化合物22)。MS m/z(ESI)：521.25[M+H] +。 1H NMR(400MHz,DMSO)δ8.66(d,J＝4.5Hz,1H),8.51(s,1H),8.38(dd,J＝12.0,2.2Hz,2H),8.27(d,J＝1.8Hz,1H),7.95–7.83(m,3H),7.80(dd,J＝8.8,2.5Hz,1H),7.48(d,J＝1.9Hz,1H),6.81(d,J＝8.9Hz,1H),6.29(q,J＝6.7Hz,1H),3.18–3.04(m,4H),2.92–2.73(m,7H),1.89(s,1H),1.61(d,J＝7.0Hz,3H),1.23(d,J＝11.5Hz,2H),0.83(d,J＝7.3Hz,1H).
实施例23：(S)-4-(6-((1-(6-(4-氟-1H-吡唑-1-基)吡啶-3-基)乙基)(甲基)胺基)吡啶-3-基)-6-(4-羟基-4-甲基哌啶-1-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈的制备
Figure PCTCN2021089064-appb-000054
步骤1：合成(S)-4-(6-((1-(6-(4-氟-1H-吡唑-1-基)吡啶-3-基)乙基)(甲基)胺基)吡啶-3-基)-6-(4-羟基-4-甲基哌啶-1-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈
将(S)-6-溴-4-(6-((1-(6-(4-氟-1H-吡唑-1-基)吡啶-3-基)乙基)(甲基)胺基)吡啶-3-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈(150mg,0.29mmol)溶解在甲苯(5mL)中，加入4-甲基哌啶-4-醇(100mg,0.87mmol)、(9,9-二甲基-9H-氧杂蒽-4,5-二基)双(二苯基膦)(168mg,0.29mmol)、碳酸铯(378mg,1.16mmol)、Pd 2(dba) 3(27mg,0.03mmol)，氮气保护下加热至130℃反应过夜，待原料全部消耗完将体系降到室温，用水洗涤，EA萃取，合并有机相，干燥旋干，柱层析，得到(S)-4-(6-((1-(6-(4-氟-1H-吡唑-1-基)吡啶-3-基)乙基)(甲基)胺基)吡啶-3-基)-6-(4-羟基-4-甲基哌啶-1-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈(化合物23)104mg。MS m/z(ESI)：552.6[M+H] +。 1H NMR(500MHz,DMSO)δ8.65(d,J＝3.9Hz,1H),8.48(s,1H),8.39(d,J＝2.1Hz,1H),8.36(d,J＝2.3Hz,1H),8.28(d,J＝1.9Hz,1H),7.92(d,J＝3.4Hz,1H),7.90(d,J＝2.3Hz,1H),7.86(d,J＝8.4Hz,1H),7.79(dd,J＝8.8,2.5Hz 1H),7.46(d,J＝1.9Hz,1H),6.80(d,J＝8.8Hz,1H),4.33(s,1H),2.81(s,3H),1.59(m,6H),1.21(s,1H),1.15(s,3H).
实施例24：(S)-6-(3-氰基-3-甲基氮杂环丁烷-1-基)-4-(6-((1-(6-(4-氟-1H-吡唑-1-基)吡啶-3-基)乙基)(甲基)胺基)吡啶-3-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈的制备
Figure PCTCN2021089064-appb-000055
步骤1：合成(S)-6-(3-氰基-3-甲基氮杂环丁烷-1-基)-4-(6-((1-(6-(4-氟-1H-吡唑-1-基)吡啶-3-基)乙基)(甲基)胺基)吡啶-3-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈
将(S)-6-溴-4-(6-((1-(6-(4-氟-1H-吡唑-1-基)吡啶-3-基)乙基)(甲基)胺基)吡啶-3-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈(150mg,0.29mmol)溶解在甲苯(5mL)中，加入3-甲基氮杂环丁烷-3-甲腈(84mg,0.87mmol)、(9,9-二甲基-9H-氧杂蒽-4,5-二基)双(二苯基膦)(168mg,0.29mmol)、碳酸铯(378mg,1.16mmol)、Pd 2(dba) 3(27mg,0.03mmol)，氮气保护下加热至130℃反应过夜，待原料全部消耗完将体系降到室温，用水洗涤，EA萃取，合并有机相，干燥旋干，柱层析得到(S)-6-(3-氰基-3-甲基氮杂环丁烷-1-基)-4-(6-((1-(6-(4-氟-1H-吡唑-1-基)吡啶-3-基)乙基)(甲基)胺基)吡啶-3-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈(化合物24)105mg。MS m/z(ESI)：533.6[M+H] +。 1H NMR(500MHz,DMSO)δ8.65(d,J＝4.5Hz,1H),8.50(s,1H),8.38(d,J＝2.0Hz,1H),8.35(d,J＝2.4Hz,1H),8.17(d,J＝1.8Hz,1H),7.91(d,J＝2.4Hz,1H),7.89(d,J＝3.6Hz,1H),7.86(d,J＝8.6Hz,1H),7.78(dd,J＝8.8,2.5Hz 1H),7.02(d,J＝1.9Hz,1H),6.81(d,J＝8.9Hz,1H),4.25(d,J＝7.7Hz,2H),3.89(d,J＝7.7Hz,2H)2.82(d,J＝5.5Hz,3H),2.48(m,5H),1.64(s,3H),1.59(d,J＝7.0Hz,3H).
实施例25：(S)-4-(6-((1-(6-(4-氟-1H-吡唑-1-基)吡啶-3-基)乙基)(甲基)胺基)吡啶-3-基)-6-(2-氧-7-氮杂螺[3.5]壬烷-7-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈的制备
Figure PCTCN2021089064-appb-000056
步骤1：合成(S)-4-(6-((1-(6-(4-氟-1H-吡唑-1-基)吡啶-3-基)乙基)(甲基)胺基)吡啶-3-基)-6-(2-氧-7-氮杂螺[3.5]壬烷-7-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈
将(S)-6-溴-4-(6-((1-(6-(4-氟-1H-吡唑-1-基)吡啶-3-基)乙基)(甲基)胺基)吡啶-3-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈(150mg,0.29mmol)溶解在甲苯(5mL)中，加入2-氧-7-氮杂螺[3.5]壬烷(110mg,0.87mmol)、(9,9-二甲基-9H-氧杂蒽-4,5-二基)双(二苯基膦)(168mg,0.29mmol)、碳酸铯(378mg,1.16mmol)、Pd 2(dba) 3(27mg,0.03mmol)，氮气保护下加热至回流反应过夜，待原料消失将体系降到室温，用水洗涤，EA萃取，合并有机相，干燥旋干，柱层析得到(S)-4-(6-((1-(6-(4-氟-1H-吡唑-1-基)吡啶-3-基)乙基)(甲基)胺基)吡啶-3-基)-6-(2-氧-7-氮杂螺[3.5]壬烷-7-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈(化合物25)55mg.MS m/z(ESI)：564.3[M+H] +。 1H NMR(400MHz,DMSO)δ8.65(dd,J＝4.6,0.8Hz,1H),8.49(s,1H),8.38(dd,J＝14.1,2.2Hz,2H),8.28(d,J＝2.0Hz,1H),7.90(dd,J＝3.0,1.2Hz,1H),7.87(d,J＝8.4Hz,1H),7.80(dd,J＝8.8,2.5Hz,1H),7.48(d,J＝2.0Hz,1H),6.81(d,J＝8.8Hz,1H),6.28(d,J＝7.1Hz,1H),4.34(s,3H),3.15–3.11(m,3H),2.83(s,3H),1.98–1.83(m,4H),1.61(d,J＝7.0Hz,2H),1.22(s,4H).
实施例26：(S)-4-(6-((1-(6-(4-氟-1H-吡唑-1-基)吡啶-3-基)乙基)(甲基)胺基)吡啶-3-基)-6-吗啉代吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈的制备
Figure PCTCN2021089064-appb-000057
步骤1：合成(S)-4-(6-((1-(6-(4-氟-1H-吡唑-1-基)吡啶-3-基)乙基)(甲基)胺基)吡啶-3-基)-6-吗啉代吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈
将(S)-6-溴-4-(6-((1-(6-(4-氟-1H-吡唑-1-基)吡啶-3-基)乙基)(甲基)胺基)吡啶-3-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈(150mg,0.29mmol)溶解在甲苯(5mL)中，加入吗啉(76mg,0.87mmol)、(9,9-二甲基-9H-氧杂蒽-4,5-二基)双(二苯基膦)(168mg,0.29mmol)、碳酸铯(378mg,1.16mmol)、Pd 2(dba) 3(27mg,0.03mmol)，氮气保护下加热至回流反应过夜，待原料消失将体系降到室温，用水洗涤，EA萃取，合并有机相，干燥旋干，柱层析得到(S)-4-(6-((1-(6-(4-氟-1H-吡唑-1-基)吡啶-3-基)乙基)(甲基)胺基)吡啶-3-基)-6-吗啉代吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈(化合物26)69mg。MS m/z(ESI)：524.1[M+H] +。 1H NMR(400MHz,DMSO)δ8.63(dd,J＝4.5,0.7Hz,1H),8.50(s,1H),8.36(dd,J＝10.2,2.2Hz,2H),8.29(d,J＝2.0Hz,1H),7.93–7.82(m,3H),7.78(dd,J＝8.8,2.5Hz, 1H),7.49(d,J＝2.0Hz,1H),6.79(d,J＝8.8Hz,1H),6.26(q,J＝6.7Hz,1H),3.76–3.67(m,4H),3.20–3.10(m,4H),2.80(s,3H),1.58(d,J＝7.0Hz,3H).
实施例27：(S)-4-(6-((1-(6-(4-氟-1H-吡唑-1-基)吡啶-3-基)乙基)(甲基)胺基)吡啶-3-基)-6-(3-羟基-3-甲基-1-炔-1-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈的制备
Figure PCTCN2021089064-appb-000058
步骤1:合成(S)-6-溴-4-(6-((1-(6-(4-氟-1H-吡唑-1-基)吡啶-3-基)乙基)(甲基)胺基)吡啶-3-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈
室温下6-溴-3-氰基吡唑并[1,5-a]吡啶-4-基三氟甲烷磺酸酯(452mg,1.22mmol)、(S)-N-(1-(6-(4-氟-1H-吡唑-1-基)吡啶-3-基)乙基)-N-甲基-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼杂环-2-基)吡啶-2-胺(400mg,0.94mmol)、Pd(dppf)Cl 2CH 2Cl 2(76mg,0.0114mmol)，溶解在1,4-dioxane:水＝5:1(24mL)中，然后加入KOAc(277mg,2.82mmol)，氮气保护，50℃搅拌过夜，冷却到室温，加水淬灭、经萃取、水洗、干燥，柱层析(S)-6-溴-4-(6-((1-(6-(4-氟-1H-吡唑-1-基)吡啶-3-基)乙基)(甲基)胺基)吡啶-3-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈93mg，收率：30％。MS m/z(ESI)：517[M+H] +。
步骤2:合成(S)-4-(6-((1-(6-(4-氟-1H-吡唑-1-基)吡啶-3-基)乙基)(甲基)胺基)吡啶-3-基)-6-(3-羟基-3-甲基-1-炔-1-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈
室温下将(S)-6-溴-4-(6-((1-(6-(4-氟-1H-吡唑-1-基)吡啶-3-基)乙基)(甲基)胺基)吡啶-3-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈(186mg,0.36mmol)、2-甲基-3-炔-2-醇(30mg,0.36mmol)、PdCl(PPh 3) 2(13mg,0.08mmol)、CuI(7mg,0.036mmol)溶解在二乙胺(10mL)中，50℃搅拌反应5h。反应完全，加水淬灭、经萃取、洗涤、干燥，柱层析得(S)-4-(6-((1-(6-(4-氟-1H-吡唑基)吡啶-3-基)乙基)(甲基)胺基)吡啶-3-基)-6-(3-羟基-3-甲基-1-炔-1-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈(化合物27)37mg，收率：20％，白色固体。MS m/z(ESI)：521[M+H] +。 1H NMR(400MHz,DMSO)δ9.06(s,1H),8.72(s,1H),8.65-8.66(m,1H),8.37-8.40(m,1H),7.80-7.91(m,4H),7.40(s,1H),6.81(d,1H),6.26-6.36(m,1H),5.56(s,1H),2.82(s,3H),1.60-1.62(d,3H),1.48(s,6H)。
实施例28：(S)-6-(环丙基甲氧基)-4-(6-((1-(6-(4-氟-1H-吡唑-1-基)吡啶-3-基)乙基)(甲基)胺基)吡啶-3-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈的制备
Figure PCTCN2021089064-appb-000059
步骤1：合成4-溴-6-(环丙基甲氧基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈
将4-溴-6-羟基吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈(200mg,0.84mmol)、(氯甲基)环丙烷(0.17ml,1.68mmol)、碳酸铯(554.4mg,1.68mmol)溶解在3mL DMF中，反应在60℃搅拌过夜，监测反应完全后，冷却，加入水淬灭反应。EA(30mL*2)萃取，有机相水洗，干燥浓缩，柱层析得到170mg 4-溴-6-(环丙基甲氧基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈。MS m/z(ESI)：291.00[M+H] +。
步骤2：合成(S)-6-(环丙基甲氧基)-4-(6-((1-(6-(4-氟-1H-吡唑-1-基)吡啶-3-基)乙基)(甲基)胺基)吡啶-3-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈
将4-溴-6-(环丙基甲氧基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈(170mg,0.58mmol)、(S)-N-(1-(6-(4-氟-1H-吡唑-1-基)吡啶-3-基)乙基)-N-甲基-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼杂环戊烷-2-基)吡啶-2-胺(247mg,0.58mmol)、碳酸钠(186mg,1.75mmol)、四三苯基膦钯(68mg,0.058mmol)溶解在3mL二氧六环和1mL水中，氮气保护，该反应90℃搅拌反应过夜。监测反应完全后，冷却，加入水淬灭反应，EA(30mL*2)萃取，有机相水洗，干燥浓缩，柱层析得到48mg(S)-6-(环丙基甲氧基)-4-(6-((1-(6-(4-氟-1H-吡唑-1-基)吡啶-3-基)乙基)(甲基)胺基)吡啶-3-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈(化合物28)。MS m/z(ESI)：507.22[M+H] +。 1H NMR(400MHz,DMSO)δ8.66(dd,J＝4.6,0.7Hz,1H),8.61–8.51(m,2H),8.38(dd,J＝10.9,2.2Hz,2H),7.96–7.83(m,3H),7.80(dd,J＝8.8,2.5Hz,1H),7.32(d,J＝2.1Hz,1H),6.82(d,J＝8.8Hz,1H),6.28(d,J＝7.0Hz,1H),5.75(s,1H),4.34(t,J＝5.1Hz,1H),3.94(d,J＝7.1Hz,2H),3.43(ddd,J＝14.0,7.0,5.1Hz,2H),1.61(d,J＝7.0Hz,3H),1.32–1.19(m,2H),1.05(t,J＝7.0Hz,2H),0.64–0.56(m,2H),0.40–0.28(m,2H).
实施例29：(S)-6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)-4-(6-((1-(6-(4-氟-1H-吡唑-1-基)吡啶-3-基)乙基)(甲基)胺基)吡啶-3-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈的制备
Figure PCTCN2021089064-appb-000060
步骤1:合成4-甲氧基-6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑[1,5-a]吡啶-3-甲腈
将6-溴-4-甲氧基吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈(510mg,2.03mmol)、碳酸钠(646mg, 6.09mmol)、1-甲基-1H-吡唑-4-硼酸频那醇酯(507mg,2.44mmol)和四(三苯基膦)钯(234.2mg,0.203mmol)溶解在二氧六环：水(15ml：5ml)中，该反应液在80℃反应16h。监测反应完全后，冷却，加入水淬灭反应，EA(20mL*3)萃取，有机相水洗，干燥浓缩，柱层析得到4-甲氧基-6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑[1,5-a]吡啶-3-甲腈400mg。MS m/z(ESI)：254[M+H] +。
步骤2:合成4-羟基-6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑[1,5-a]吡啶-3-甲腈
将4-甲氧基-6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑[1,5-a]吡啶-3-甲腈(430mg,1.70mmol)、三氯化铝(678mg，5.10mmol)溶解在30mL DCE中，该反应室温搅拌反应16h。监测反应完全后，加入水淬灭反应，EA(30mL*2)萃取，有机相盐水洗，干燥浓缩，柱层析得到160mg 4-羟基-6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑[1,5-a]吡啶-3-甲腈。MS m/z(ESI)：240[M+H] +。
步骤3:合成3-氰基-6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑[1,5-a]吡啶-4-基三氟甲基磺酸酯
将4-羟基-6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑[1,5-a]吡啶-3-甲腈(160mg,0.669mmol)、N-苯基双(三氟甲烷磺酰)亚胺(287mg,0.803mmol)和N,N-二异丙基乙胺(173mg,1.34mmol)溶解在20mL DMA中，该反应室温搅拌反应16h。监测反应完全后，加入水淬灭反应，EA(30mL*2)萃取，有机相盐水洗，干燥浓缩，柱层析得到120mg 3-氰基-6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑[1,5-a]吡啶-4-基三氟甲基磺酸酯。MS m/z(ESI)：372[M+H] +。
步骤4:合成(S)-6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)-4-(6-((1-(6-(4-氟-1H-吡唑-1-基)吡啶-3-基)乙基)(甲基)胺基)吡啶-3-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈
将3-氰基-6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡唑[1,5-a]吡啶-4-基三氟甲基磺酸酯(120mg,0.323mmol)、三(二亚苄基丙酮)二钯(29.3mg,0.032mmol)、2-二环己基磷-2,4,6-三异丙基联苯(30.9mg,0.065mmol)、(S)-N-(1-(6-(4-氟-1H-吡唑-1-基)吡啶-3-基)乙基)-N-甲基-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼杂环戊烷-2-基)吡啶-2-胺(164.2mg,0.388mmol)溶解在二氧六环：水(15ml：5ml)中，该反应液在85℃下搅拌反应16h。用10mL水淬灭反应，EA(20mL*3)萃取，有机相水洗，干燥浓缩，柱层析得到(S)-6-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)-4-(6-((1-(6-(4-氟-1H-吡唑-1-基)吡啶-3-基)乙基)(甲基)胺基)吡啶-3-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈(化合物29)30mg，MS m/z(ESI)：519[M+H] +。 1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.22(d,J＝1.5Hz,1H),8.68–8.63(m,2H),8.44–8.37(m,3H),8.12(d,J＝0.8Hz,1H),7.94–7.84(m,4H),7.80(d,J＝1.5Hz,1H),6.85(d,J＝8.8Hz,1H),6.30(d,J＝7.0Hz,1H),3.87(s,3H),2.84(s,3H),1.62(d,J＝7.0Hz,3H)。
实施例30：(S)-4-(6-((1-(6-(4-氟-1H-吡唑-1-基)吡啶-3-基)乙基)(甲基)胺基)吡啶-3-基)-6-乙氧基吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈的制备
Figure PCTCN2021089064-appb-000061
步骤1:合成4-溴-6-乙氧基吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈
将4-溴-6-羟基吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈(200mg,0.844mmol)、碳酸钾(256mg,1.857mmol)和碘乙烷(263mg,1.688mmol)溶解在DMF(20mL)中，该反应液在60℃反应16h。监测反应完全后，冷却，加入水淬灭反应，EA(20mL*3)萃取，有机相水洗，干燥浓缩，柱层析得到4-溴-6-乙氧基吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈190mg。MS m/z(ESI)：266[M+H] +。
步骤2:合成(S)-4-(6-((1-(6-(4-氟-1H-吡唑-1-基)吡啶-3-基)乙基)(甲基)胺基)吡啶-3-基)-6-乙氧基吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈
将4-溴-6-乙氧基吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈(190mg,0.717mmol)、碳酸钠(228mg,2.15mmol)、(S)-N-(1-(6-(4-氟-1H-吡唑-1-基)吡啶-3-基)乙基)-N-甲基-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼杂环戊烷-2-基)吡啶-2-胺(363mg,0.86mmol)和四(三苯基膦)钯(83mg,0.0717mmol)溶解在二氧六环：水(15ml：5ml)中，该反应液在80℃反应16h。监测反应完全后，冷却，加入水淬灭反应，EA(20mL*3)萃取，有机相水洗，干燥浓缩，柱层析得到(S)-4-(6-((1-(6-(4-氟-1H-吡唑-1-基)吡啶-3-基)乙基)(甲基)胺基)吡啶-3-基)-6-乙氧基吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈(化合物30)65mg。MS m/z(ESI)：483[M+H] +。 1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.68–8.61(m,2H),8.56(s,1H),8.41–8.35(m,2H),7.94–7.84(m,3H),7.79(dd,J＝8.8,2.6Hz,1H),7.28(d,J＝2.1Hz,1H),6.84–6.78(m,1H),6.28(q,J＝6.9Hz,1H),4.14(q,J＝6.9Hz,2H),2.82(s,3H),1.60(d,J＝7.0Hz,3H),1.37(t,J＝6.9Hz,3H).
实施例31：(S)-4-(6-((1-(6-(4-氟-1H-吡唑-1-基)吡啶-3-基)乙基)(甲基)胺基)吡啶-3-基)-6-烯丙氧基吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈
Figure PCTCN2021089064-appb-000062
步骤1:合成4-溴-6-烯丙氧基吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈
将4-溴-6-羟基吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈(200mg,0.844mmol)、碳酸钾(256mg,1.857mmol)和烯丙基溴(112mg,0.928mmol)溶解在DMF(20ml)中，该反应液在60℃反应16h。监测反应完全后，冷却，加入水淬灭反应，EA(20mL*3)萃取，有机相水洗，干燥浓缩，柱层析得到4-溴-6-烯丙氧基吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈120mg。MS m/z(ESI)：278[M+H] +。
步骤2:合成(S)-4-(6-((1-(6-(4-氟-1H-吡唑-1-基)吡啶-3-基)乙基)(甲基)胺基)吡啶-3-基)-6-烯丙氧基吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈
将4-溴-6-烯丙氧基吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈(120mg,0.433mmol)、碳酸钠(138 mg,1.299mmol)、(S)-N-(1-(6-(4-氟-1H-吡唑-1-基)吡啶-3-基)乙基)-N-甲基-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼杂环戊烷-2-基)吡啶-2-胺(220mg,0.520mmol)和四(三苯基膦)钯(50mg,0.0433mmol)溶解在二氧六环：水(15ml：5ml)中，该反应液在80℃反应16h。监测反应完全后，冷却，加入水淬灭反应，EA(20mL*3)萃取，有机相水洗，干燥浓缩，柱层析得到(S)-4-(6-((1-(6-(4-氟-1H-吡唑-1-基)吡啶-3-基)乙基)(甲基)胺基)吡啶-3-基)-6-烯丙氧基吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈(化合物31)20mg。MS m/z(ESI)：495[M+H] +。 1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ10.14(s,1H),8.66(dd,J＝4.5,0.9Hz,1H),8.55(s,1H),8.40(dt,J＝1.7,0.8Hz,1H),8.33(dd,J＝2.6,0.7Hz,1H),7.94–7.85(m,3H),7.76(dd,J＝8.8,2.5Hz,1H),7.22(s,1H),6.82(dd,J＝8.9,0.8Hz,1H),6.28(q,J＝6.9Hz,1H),6.04–5.94(m,1H),5.15–5.03(m,2H),3.92(d,J＝6.2Hz,2H),2.82(s,3H),1.61(d,J＝7.0Hz,3H).
实施例32：(S)-4-(6-((1-(6-(4-氟-1H-吡唑-1-基)吡啶-3-基)乙基)(甲基)胺基)吡啶-3-基)-6-氰基甲氧基吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈的制备
Figure PCTCN2021089064-appb-000063
步骤1:合成4-溴-6-氰基甲氧基吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈
将4-溴-6-羟基吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈(200mg,0.844mmol)、碳酸钾(256mg,1.857mmol)和溴乙腈(112mg,0.928mmol)溶解在DMF(20ml)中，该反应液在60℃反应16h，监测反应完全后，冷却，加入水淬灭反应，EA(20mL*3)萃取，有机相水洗，干燥浓缩，柱层析得到4-溴-6-氰基甲氧基吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈190mg。MS m/z(ESI)：277[M+H] +。
步骤2:合成(S)-4-(6-((1-(6-(4-氟-1H-吡唑-1-基)吡啶-3-基)乙基)(甲基)胺基)吡啶-3-基)-6-氰基甲氧基吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈
将4-溴-6-氰基甲氧基吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈(190mg,0.688mmol)、碳酸钠219mg,2.065mmol)、(S)-N-(1-(6-(4-氟-1H-吡唑-1-基)吡啶-3-基)乙基)-N-甲基-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼杂环戊烷-2-基)吡啶-2-胺(350mg,0.826mmol)和四(三苯基膦)钯(79mg,0.0688mmol)溶解在二氧六环：水(15ml：5ml)中，该反应液在80℃反应16h。监测反应完全后，冷却，加入水淬灭反应，EA(20mL*3)萃取，有机相水洗，干燥浓缩，柱层析得到(S)-4-(6-((1-(6-(4-氟-1H-吡唑-1-基)吡啶-3-基)乙基)(甲基)胺基)吡啶-3-基)-6-氰基甲氧基吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈(化合物32)32mg。MS m/z(ESI)：494[M+H] +。 1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.93(d,J＝2.1Hz,1H),8.71–8.64(m,2H),8.43–8.38(m,2H),7.95–7.86(m,3H),7.83(dd,J＝8.8,2.6Hz,1H),7.47(d,J＝2.2Hz,1H),6.86–6.81(m,1H),6.29(q,J＝7.0Hz,1H),5.34(s,2H),2.83(s,3H),1.61(d,J＝7.0Hz,3H).
实施例33：(S)-4-(6-((1-(6-(4-氟-1H-吡唑-1-基)吡啶-3-基)乙基)(甲基)胺基)吡啶-3-基)-6-异丁氧基吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈的制备
Figure PCTCN2021089064-appb-000064
步骤1:合成4-溴-6-异丁氧基吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈
将4-溴-6-羟基吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈(200mg,0.844mmol)，碳酸钾(256mg,1.857mmol)，和异丁基基溴(127mg,0.928mmol)溶解在DMF(20ml)中,该反应液在60℃反应16h，监测反应完全后，冷却，加入水淬灭反应，EA(20mL*3)萃取，有机相水洗，干燥浓缩，柱层析得到4-溴-6-异丁氧基吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈110mg。MS m/z(ESI)：294[M+H] +。
步骤2:合成(S)-4-(6-((1-(6-(4-氟-1H-吡唑-1-基)吡啶-3-基)乙基)(甲基)胺基)吡啶-3-基)-6-异丁氧基吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈
将4-溴-6-异丁氧基吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈(110mg,0.375mmol)、碳酸钠(120mg,1.126mmol)、(S)-N-(1-(6-(4-氟-1H-吡唑-1-基)吡啶-3-基)乙基)-N-甲基-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼杂环戊烷-2-基)吡啶-2-胺(190mg,0.451mmol)和四(三苯基膦)钯(43mg,0.0375mmol)溶解在二氧六环：水(15ml：5ml)中，该反应液在80℃反应16h。监测反应完全后，冷却，加入水淬灭反应，EA(20mL*3)萃取，有机相水洗，干燥浓缩，柱层析得到(S)-4-(6-((1-(6-(4-氟-1H-吡唑-1-基)吡啶-3-基)乙基)(甲基)胺基)吡啶-3-基)-6-异丁氧基吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈(化合物33)50mg。MS m/z(ESI)：511[M+H] +。 1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.69–8.63(m,2H),8.57(s,1H),8.39(ddd,J＝9.3,2.7,0.8Hz,2H),7.95–7.84(m,3H),7.81(dd,J＝8.8,2.6Hz,1H),7.31(d,J＝2.1Hz,1H),6.82(d,J＝8.9Hz,1H),6.29(q,J＝6.9Hz,1H),3.88(d,J＝6.5Hz,2H),2.82(s,3H),2.06(dt,J＝13.2,6.6Hz,1H),1.61(d,J＝7.0Hz,3H),1.00(d,J＝6.7Hz,6H).
实施例34：(S)-4-(6-((1-(6-(4-氟-1H-吡唑-1-基)吡啶-3-基)乙基)(甲基)胺基)吡啶-3-基)-6-(2,2-二氟乙氧基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈的制备
Figure PCTCN2021089064-appb-000065
步骤1:合成4-溴-6-(2,2-二氟乙氧基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈
将4-溴-6-羟基吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈(200mg,0.844mmol)、碳酸钾(233mg,1.688mmol)和1-溴-2,2-二氟乙烷(184mg,1.266mmol)溶解在DMF(20ml)中，该反应液在60℃反应16h。监测反应完全后，冷却，加入水淬灭反应，EA(20mL*3)萃取，有机相水洗，干燥浓缩，柱层析得到4-溴-6-(2,2-二氟乙氧基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈150mg。MS m/z(ESI)：302[M+H] +。
步骤2:(S)-4-(6-((1-(6-(4-氟-1H-吡唑-1-基)吡啶-3-基)乙基)(甲基)胺基)吡啶-3- 基)-6-(2,2-二氟乙氧基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈
将4-溴-6-(2,2-二氟乙氧基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈(150mg,0.498mmol)、碳酸钠(158mg,1.49mmol)、(S)-N-(1-(6-(4-氟-1H-吡唑-1-基)吡啶-3-基)乙基)-N-甲基-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼杂环戊烷-2-基)吡啶-2-胺(253mg,0.598mmol)和四(三苯基膦)钯(58mg,0.0498mmol)溶解在二氧六环：水(15ml：5ml)中，该反应液在80℃反应16h。监测反应完全后，冷却，加入水淬灭反应，EA(20mL*3)萃取，有机相水洗，干燥浓缩，柱层析得到(S)-4-(6-((1-(6-(4-氟-1H-吡唑-1-基)吡啶-3-基)乙基)(甲基)胺基)吡啶-3-基)-6-(2,2-二氟乙氧基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈(化合物34)60mg。MS m/z(ESI)：519[M+H] +。 1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.82(d,J＝2.1Hz,1H),8.66(dd,J＝4.5,0.9Hz,1H),8.61(s,1H),8.39(dd,J＝5.5,2.4Hz,2H),7.94–7.85(m,3H),7.82(dd,J＝8.8,2.6Hz,1H),7.40(d,J＝2.1Hz,1H),6.83(d,J＝8.9Hz,1H),6.46(tt,J＝54.1,3.5Hz,1H),6.28(t,J＝7.1Hz,1H),4.49(td,J＝14.6,3.5Hz,2H),2.83(s,3H),1.61(d,J＝7.0Hz,3H).
实施例35：(S)-4-(6-((1-(6-(4-氟-1H-吡唑-1-基)吡啶-3-基)乙基)(甲基)胺基)吡啶-3-基)-6-(2,2,2-三氟乙氧基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈的制备
Figure PCTCN2021089064-appb-000066
步骤1:合成4-溴-6-(2,2,2-三氟乙氧基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈
将4-溴-6-羟基吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈(200mg,0.844mmol)、碳酸钾(233mg,1.688mmol)和1-溴-2,2,2-三氟乙烷(206mg,1.266mmol)溶解在DMF(20ml)中，该反应液在60℃反应16h。监测反应完全后，冷却，加入水淬灭反应，EA(20mL*3)萃取，有机相水洗，干燥浓缩，柱层析得到4-溴-6-(2,2,2-三氟乙氧基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈120mg。MS m/z(ESI)：320[M+H] +。
步骤2:合成(S)-4-(6-((1-(6-(4-氟-1H-吡唑-1-基)吡啶-3-基)乙基)(甲基)胺基)吡啶-3-基)-6-(2,2,2-三氟乙氧基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈
将4-溴-6-(2,2,2-三氟乙氧基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈(120mg,0.376mmol)，碳酸钠(120mg,1.129mmol)、(S)-N-(1-(6-(4-氟-1H-吡唑-1-基)吡啶-3-基)乙基)-N-甲基-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼杂环戊烷-2-基)吡啶-2-胺(191mg,0.451mmol)和四(三苯基膦)钯(43mg,0.0376mmol)溶解在二氧六环：水(15ml：5ml)中，该反应液在80℃反应16h。监测反应完全后，冷却，加入水淬灭反应，EA(20mL*3)萃取，有机相水洗，干燥浓缩，柱层析得到(S)-4-(6-((1-(6-(4-氟-1H-吡唑-1-基)吡啶-3-基)乙基)(甲基)胺基)吡啶-3-基)-6-(2,2,2-三氟乙氧基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈(化合物35)55mg。MS m/z(ESI)：537[M+H] +。 1H NMR(400MHz,DMSO-d 6)δ8.88(d,J＝2.1Hz,1H),8.65(dd,J＝4.5,0.9Hz,1H),8.63(s,1H),8.41–8.36(m,2H),7.94–7.80(m,4H),7.46(d,J＝2.1Hz,1H),6.82(d,J＝8.9Hz,1H),6.28(t,J＝7.0Hz,1H),4.94(q,J＝8.8Hz,2H), 2.83(s,3H),1.61(d,J＝7.0Hz,3H).
实施例36：(S)-4-(6-((1-(6-(4-氟-1H-吡唑-1-基)吡啶-3-基)乙基)(甲基)胺基)吡啶-3-基)-6-(2-羟丙氧基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈的制备
Figure PCTCN2021089064-appb-000067
步骤1:合成4-溴-6-(2-羟丙氧基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈
将4-溴-6-羟基吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈(300mg,1.27mmol)、碳酸钾(524mg,3.80mmol)和环氧丙烷(220mg,3.80mmol)溶解在DMF(20ml)中。该反应液在60℃反应16h，监测反应完全后，冷却，加入水淬灭反应，EA(20mL*3)萃取，有机相水洗，干燥浓缩，柱层析得到4-溴-6-(2-羟丙氧基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈150mg。MS m/z(ESI)：296[M+H] +。
步骤2:合成(S)-4-(6-((1-(6-(4-氟-1H-吡唑-1-基)吡啶-3-基)乙基)(甲基)胺基)吡啶-3-基)-6-(2-羟丙氧基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈
将4-溴-6-(2-羟丙氧基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈(150mg,0.508mmol)、碳酸钠(162mg,1.525mmol)、(S)-N-(1-(6-(4-氟-1H-吡唑-1-基)吡啶-3-基)乙基)-N-甲基-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼杂环戊烷-2-基)吡啶-2-胺(237mg,0.559mmol)和四(三苯基膦)钯(59mg,0.0508mmol)溶解在二氧六环：水(15ml：5ml)中，该反应液在80℃反应16h。监测反应完全后，冷却，加入水淬灭反应，EA(20mL*3)萃取，有机相水洗，干燥浓缩，柱层析得到(S)-4-(6-((1-(6-(4-氟-1H-吡唑-1-基)吡啶-3-基)乙基)(甲基)胺基)吡啶-3-基)-6-(2-羟丙氧基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈(化合物36)30mg。MS m/z(ESI)：513[M+H] +。 1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.73–8.65(m,2H),8.57(s,1H),8.42–8.35(m,2H),7.94–7.84(m,3H),7.80(ddd,J＝8.8,2.6,1.4Hz,1H),7.30(d,J＝2.1Hz,1H),6.82(d,J＝8.8Hz,1H),6.29(q,J＝7.0Hz,1H),4.94(dd,J＝11.8,5.1Hz,1H),3.96(hept,J＝3.2,2.8Hz,2H),3.57–3.40(m,1H),2.82(s,3H),1.61(d,J＝7.0Hz,3H),1.16(d,J＝6.1Hz,3H).
实施例37：(S)-6-(2-羟基-2-甲基丙氧基)-4-(6-(甲基(1-(6-(4-甲基-1H-吡唑-1-基)吡啶-3-基)乙基)胺基)吡啶-3-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈的制备
Figure PCTCN2021089064-appb-000068
步骤1:合成1-(6-(4-甲基-1H-吡唑-1-基)吡啶-3-基)乙-1-酮
将4-甲基-1H-吡唑(5g,24.4mmol)、1-(6-氯吡啶-3-基)乙-1-酮(9.5g,24.4mmol)和碳酸钾(16.8g，48.8mmol)溶解在60mL DMF中，该反应110℃搅拌反应16h，监测反应完全后，加入水淬灭反应。EA(50mL*2)萃取，有机相盐水洗，干燥浓缩，柱层析得到6.8g 1-(6-(4-甲基-1H-吡唑-1-基)吡啶-3-基)乙-1-酮。MS m/z(ESI)：206[M+H] +。
步骤2:合成2-甲基-N-((S)-1-(6-(4-甲基-1H-吡唑-1-基)吡啶-3-基)乙基)丙烷-2-亚磺酰胺
将1-(6-(4-甲基-1H-吡唑-1-基)吡啶-3-基)乙-1-酮(3.5g,17.4mmol)、钛酸四乙酯(7.9g,34.8mmol)和(S)-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺(2.7g,22.64mmol)溶解在四氢呋喃(50mL)中，该反应液在75℃反应16h，监测反应完全后，冷却至-78℃，滴加2M三仲丁基硼氢化锂(34.8ml,34.8mmol)。监测反应完全后加入水淬灭反应，EA(70mL*3)萃取，有机相水洗，干燥浓缩，柱层析得到2-甲基-N-((S)-1-(6-(4-甲基-1H-吡唑-1-基)吡啶-3-基)乙基)丙烷-2-亚磺酰胺5.3g。MS m/z(ESI)：307[M+H] +。
步骤3:合成(S)-1-(6-(4-(4-甲基-1H-吡唑-1-基)吡啶-3-基)乙-1-胺
将2-甲基-N-((S)-1-(6-(4-甲基-1H-吡唑-1-基)吡啶-3-基)乙基)丙烷-2-亚磺酰胺(3g,9.80mmol)溶解在50mL二氯甲烷中，滴加2M的盐酸乙酸乙酯溶液(29.4ml,58.8mmol)，该反应液在室温反应2h。监测反应完全后，EA(50mL*3)萃取，有机相水洗，干燥浓缩得到(S)-1-(6-(4-(4-甲基-1H-吡唑-1-基)吡啶-3-基)乙-1-胺1.8g。MS m/z(ESI)：203[M+H] +。
步骤4:合成(S)-(1-(6-(4-(4-甲基-1H-吡唑-1-基)吡啶-3-基)乙基)胺基甲酸叔丁酯
将(S)-1-(6-(4-(4-甲基-1H-吡唑-1-基)吡啶-3-基)乙-1-胺(1.8g,8.91mmol)、Boc酸酐 (2.1g,9.8mmol)和三乙胺(4.5g，44.55mmol)溶解在50mL二氯甲烷中，该反应室温搅拌反应3h。监测反应完全后，加入水淬灭反应，EA(50mL*2)萃取，有机相盐水洗，干燥浓缩，柱层析得到2.5g(S)-(1-(6-(4-(4-甲基-1H-吡唑-1-基)吡啶-3-基)乙基)胺基甲酸叔丁酯。MS m/z(ESI)：303[M+H] +。
步骤5:合成叔丁基(S)-甲基(1-(6-(4-甲基-1H-吡唑-1-基)吡啶-3-基)乙基)胺基甲酸酯
将(S)-(1-(6-(4-(4-甲基-1H-吡唑-1-基)吡啶-3-基)乙基)胺基甲酸叔丁酯(2.5g,8.28mmol)溶解在四氢呋喃(50mL)中，加入氢化钠(0.5g,12.4mmol)该反应液在室温反应30min，滴加碘甲烷(1.2g,8.3mmol)，监测反应完全后，加入水淬灭反应，EA(20mL*3)萃取，有机相水洗，干燥浓缩，柱层析得到叔丁基(S)-甲基(1-(6-(4-甲基-1H-吡唑-1-基)吡啶-3-基)乙基)胺基甲酸酯2.5g。MS m/z(ESI)：317[M+H] +。
步骤6:合成(S)-N-甲基-1-(6-(4-甲基-1H-吡唑-1-基)吡啶-3-基)乙-1-胺
将叔丁基(S)-甲基(1-(6-(4-甲基-1H-吡唑-1-基)吡啶-3-基)乙基)胺基甲酸酯(2.5g,7.91mmol)溶解在50mL二氯甲烷中，滴加2M的盐酸乙酸乙酯溶液(23.7ml,47.47mmol)，该反应液在室温反应2h。监测反应完全后，EA(50mL*3)萃取，有机相水洗，干燥浓缩得到(S)-N-甲基-1-(6-(4-甲基-1H-吡唑-1-基)吡啶-3-基)乙-1-胺1.6g。MS m/z(ESI)：217[M+H] +。
步骤7:合成(S)-5-溴-N-甲基-N-(1-(6-(4-甲基-1H-吡唑-1-基)吡啶-3-基)乙基)吡啶-2-胺
将(S)-N-甲基-1-(6-(4-甲基-1H-吡唑-1-基)吡啶-3-基)乙-1-胺(1.6g,7.4mmol)、碳酸钾(5.1g,37.03mmol)和2-氟-5-溴吡啶(6.5g,37.03mmol)溶解在DMSO(50ml)中，该反应液在140℃反应24h。监测反应完全后，冷却，加入水淬灭反应，EA(20mL*3)萃取，有机相水洗，干燥浓缩，柱层析得到(S)-5-溴-N-甲基-N-(1-(6-(4-甲基-1H-吡唑-1-基)吡啶-3-基)乙基)吡啶-2-胺2.1g。MS m/z(ESI)：372[M+H] +。
步骤8:合成((S)-N-甲基-N-(1-(6-(4-甲基-1H-吡唑-1-基)吡啶-3-基)乙基)-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼杂环戊烷-2-基)吡啶-2-胺
将(S)-5-溴-N-甲基-N-(1-(6-(4-甲基-1H-吡唑-1-基)吡啶-3-基)乙基)吡啶-2-胺(1g,2.70mmol)、乙酸钾(796mg,8.09mmol)、联硼频哪醇酯(2.05g,8.09mmol)和[1,1'-双(二苯基膦基)二茂铁]二氯化钯(220mg,0.27mmol)溶解在二氧六环(50mL)中。该反应液在80℃反应16h，监测反应完全后，冷却，加入水淬灭反应，EA(30mL*3)萃取，有机相水洗，干燥浓缩，柱层析得到(S)-N-甲基-N-(1-(6-(4-甲基-1H-吡唑-1-基)吡啶-3-基)乙基)-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼杂环戊烷-2-基)吡啶-2-胺500mg。MS m/z(ESI)：420[M+H] +。
步骤9:合成4-溴-6-(2-羟基-2-甲基丙氧基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈
将4-溴-6-羟基吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈(300mg,1.27mmol)，碳酸钾(524mg,3.80mmol)和2,2-二甲基环氧乙烷(273mg,3.80mmol)溶解在DMF(20mL)中。该反应液在60℃ 反应16h，监测反应完全后，冷却，加入水淬灭反应，EA(20mL*3)萃取，有机相水洗，干燥浓缩，柱层析得到4-溴-6-(2-羟基-2-甲基丙氧基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈248mg。MS m/z(ESI)：310[M+H] +。
步骤10:合成(S)-6-(2-羟基-2-甲基丙氧基)-4-(6-(甲基(1-(6-(4-甲基-1H-吡唑-1-基)吡啶-3-基)乙基)胺基)吡啶-3-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈
将4-溴-6-(2-羟基-2-甲基丙氧基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈(248mg,0.803mmol)、碳酸钠(255mg,2.409mmol)、(S)-N-甲基-N-(1-(6-(4-甲基-1H-吡唑-1-基)吡啶-3-基)乙基)-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼杂环戊烷-2-基)吡啶-2-胺(370mg,0.883mmol)和四(三苯基膦)钯(93mg,0.0803mmol)溶解在二氧六环：水(15ml：5ml)中。该反应液在80℃反应16h，监测反应完全后，冷却，加入水淬灭反应，EA(20mL*3)萃取，有机相水洗，干燥浓缩，柱层析得到(S)-6-(2-羟基-2-甲基丙氧基)-4-(6-(甲基(1-(6-(4-甲基-1H-吡唑-1-基)吡啶-3-基)乙基)胺基)吡啶-3-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈(化合物37)65mg。MS m/z(ESI)：523[M+H] +。 1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.65(d,J＝2.1Hz,1H),8.56(s,1H),8.39–8.33(m,3H),7.87–7.78(m,3H),7.61(s,1H),7.31(d,J＝2.1Hz,1H),6.81(d,J＝8.8Hz,1H),6.27(q,J＝7.0Hz,1H),4.71(s,1H),3.87(s,2H),2.81(s,3H),2.09(s,3H),1.59(d,J＝7.0Hz,3H),1.22(s,6H).
实施例38：(S)-6-(1-乙基-1H-吡唑-4-基)-4-(6-((1-(6-(4-氟-1H-吡唑-1-基)吡啶-3-基)乙基)(甲基)胺基)吡啶-3-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈的制备
Figure PCTCN2021089064-appb-000069
步骤1:合成6-(1-乙基-1H-吡唑-4-基)-4-羟基吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈
将6-溴-4-羟基吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈(300mg,1.26mmol)、碳酸钠(402mg,3.79mmol)、1-乙基-1H-吡唑-4-硼酸频那醇酯(337mg,1.52mmol)和四(三苯基膦)钯(146mg,0.126mmol)溶解在二氧六环：水(15ml：5ml)中。该反应液在80℃反应16h，监测反应完全后，冷却，加入水淬灭反应，EA(20mL*3)萃取，有机相水洗，干燥浓缩，柱层析得到6-(1-乙基-1H-吡唑-4-基)-4-羟基吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈310mg。MS m/z(ESI)：254[M+H] +。
步骤2:3-氰基-6-(1-乙基-1H-吡唑-4-基)吡唑[1,5-a]吡啶-4-基三氟甲基磺酸酯
将6-(1-乙基-1H-吡唑-4-基)-4-羟基吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈(310mg,1.23mmol)、N-苯基双(三氟甲烷磺酰)亚胺(539mg,1.47mmol)和N,N-二异丙基乙胺(316mg， 2.45mmol)溶解在30mL DMA中，该反应室温搅拌反应16h，监测反应完全后，加入水淬灭反应，EA(30mL*2)萃取，有机相盐水洗，干燥浓缩，柱层析得到325mg 3-氰基-6-(1-乙基-1H-吡唑-4-基)吡唑[1,5-a]吡啶-4-基三氟甲基磺酸盐。MS m/z(ESI)：386[M+H] +。
步骤3:合成(S)-6-(1-乙基-1H-吡唑-4-基)-4-(6-((1-(6-(4-氟-1H-吡唑-1-基)吡啶-3-基)乙基)(甲基)胺基)吡啶-3-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈
将3-氰基-6-(1-乙基-1H-吡唑-4-基)吡唑[1,5-a]吡啶-4-基三氟甲基磺酸盐(325mg,0.84mmol)、三(二亚苄基丙酮)二钯(49mg,0.084mmol)、2-二环己基磷-2,4,6-三异丙基联苯(80mg,0.168mmol)、(S)-N-(1-(6-(4-氟-1H-吡唑-1-基)吡啶-3-基)乙基)-N-甲基-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼杂环戊烷-2-基)吡啶-2-胺(426mg,1.01mmol)溶解在二氧六环：水(15ml：5ml)中，该反应液在85℃下搅拌反应16h。用10mL水淬灭反应，EA(20mL*3)萃取，有机相水洗，干燥浓缩，柱层析得到(S)-6-(1-乙基-1H-吡唑-4-基)-4-(6-((1-(6-(4-氟-1H-吡唑-1-基)吡啶-3-基)乙基)(甲基)胺基)吡啶-3-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈(化合物38)100mg，MS m/z(ESI)：533[M+H] +。 1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ9.22(d,J＝1.5Hz,1H),8.66(dd,J＝4.6,0.9Hz,1H),8.64(s,1H),8.46(d,J＝0.8Hz,1H),8.42(dd,J＝2.6,0.7Hz,1H),8.40(dd,J＝2.0,1.1Hz,1H),8.13(d,J＝0.8Hz,1H),7.94–7.83(m,4H),7.81(d,J＝1.5Hz,1H),6.87–6.82(m,1H),6.30(q,J＝7.0Hz,1H),4.15(q,J＝7.3Hz,2H),2.84(s,3H),1.62(d,J＝7.0Hz,3H),1.41(t,J＝7.3Hz,3H).
实施例39：(S)-4-(6-((1-(6-(4-氟-1H-吡唑-1-基)吡啶-3-基)乙基)(甲基)胺基)吡啶-3-基)-6-丙氧基吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈的制备
Figure PCTCN2021089064-appb-000070
步骤1:合成4-溴-6-丙氧基吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈
将4-溴-6-羟基吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈(300mg,1.26mmol)、碳酸钾(523mg,3.79mmol)和1-溴丙烷(187mg,1.52mmol)溶解在DMF(20ml)中，该反应液在60℃反应16h。监测反应完全后，冷却，加入水淬灭反应，EA(20mL*3)萃取，有机相水洗，干燥浓缩，柱层析得到4-溴-6-丙氧基吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈210mg。MS m/z(ESI)：280[M+H] +。
步骤2:(S)-4-(6-((1-(6-(4-氟-1H-吡唑-1-基)吡啶-3-基)乙基)(甲基)胺基)吡啶-3-基)-6-丙氧基吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈
将4-溴-6-丙氧基吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈(210mg,0.75mmol)、碳酸钠(239mg,2.26mmol)、(S)-N-(1-(6-(4-氟-1H-吡唑-1-基)吡啶-3-基)乙基)-N-甲基-5-(4,4,5,5-四甲基 -1,3,2-二氧硼杂环戊烷-2-基)吡啶-2-胺(381mg,0.9mmol)和四(三苯基膦)钯(87mg,0.075mmol)溶解在二氧六环：水(15ml：5ml)中，该反应液在80℃反应16h。监测反应完全后，冷却，加入水淬灭反应，EA(20mL*3)萃取，有机相水洗，干燥浓缩，柱层析得到(S)-4-(6-((1-(6-(4-氟-1H-吡唑-1-基)吡啶-3-基)乙基)(甲基)胺基)吡啶-3-基)-6-丙氧基吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈(化合物39)110mg，MS m/z(ESI)：497[M+H] +。 1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.64(dd,J＝4.6,0.9Hz,1H),8.63(d,J＝2.1Hz,1H),8.56(s,1H),8.40–8.38(m,1H),8.36(dd,J＝2.5,0.7Hz,1H),7.93–7.84(m,3H),7.79(dd,J＝8.8,2.6Hz,1H),7.29(d,J＝2.1Hz,1H),6.81(dd,J＝8.9,0.8Hz,1H),6.27(q,J＝7.0Hz,1H),4.05(t,J＝6.5Hz,2H),2.81(s,3H),1.76(q,J＝6.9Hz,2H),1.60(d,J＝7.0Hz,3H),0.99(t,J＝7.4Hz,3H).
实施例40：(S)-4-(6-((1-(6-(4-氟-1H-吡唑-1-基)吡啶-3-基)乙基)(甲基)胺基)吡啶-3-基)-6-甲氧基吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈
Figure PCTCN2021089064-appb-000071
步骤1:(S)-4-(6-((1-(6-(4-氟-1H-吡唑-1-基)吡啶-3-基)乙基)(甲基)胺基)吡啶-3-基)-6-甲氧基吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈
将4-溴-6-甲氧基吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈(100mg,0.39mmol)、碳酸钠(126mg,1.19mmol)、(S)-N-(1-(6-(4-氟-1H-吡唑-1-基)吡啶-3-基)乙基)-N-甲基-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼杂环戊烷-2-基)吡啶-2-胺(198mg,0.47mmol)和四(三苯基膦)钯(45mg,0.039mmol)溶解在二氧六环：水(15mL：5mL)中，该反应液在80℃反应16h。监测反应完全后，冷却，加入水淬灭反应，EA(20mL*3)萃取，有机相水洗，干燥浓缩，柱层析得到(S)-4-(6-((1-(6-(4-氟-1H-吡唑-1-基)吡啶-3-基)乙基)(甲基)胺基)吡啶-3-基)-6-甲氧基吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈(化合物40)110mg。MS m/z(ESI)：469[M+H] +。 1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.66–8.63(m,2H),8.57(s,1H),8.39(dd,J＝1.9,1.1Hz,1H),8.36(dd,J＝2.5,0.7Hz,1H),7.92–7.84(m,3H),7.79(dd,J＝8.8,2.6Hz,1H),7.30(d,J＝2.1Hz,1H),6.81(dd,J＝8.9,0.8Hz,1H),6.27(q,J＝7.0Hz,1H),3.88(s,3H),2.82(s,3H),1.60(d,J＝7.1Hz,3H).
实施例41：(S)-4-(6-((1-(6-(4-氟-1H-吡唑-1-基)吡啶-3-基)乙基)(甲基)胺基)吡啶-3-基)-6-(2-氟乙氧基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈的制备
Figure PCTCN2021089064-appb-000072
步骤1:合成4-溴-6-(2-氟乙氧基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈
将4-溴-6-羟基吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈(100mg,0.42mmol)，碳酸钾(175mg,1.27mmol)，和1-溴-2-氟乙烷(64mg,0.50mmol)溶解在DMF(20ml)中,该反应液在60℃反应16h，监测反应完全后，冷却，加入水淬灭反应，EA(20mL*3)萃取，有机相水洗，干燥浓缩，柱层析得到4-溴-6-(2-氟乙氧基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈103mg。MS m/z(ESI)：284[M+H] +。
步骤2:(S)-4-(6-((1-(6-(4-氟-1H-吡唑-1-基)吡啶-3-基)乙基)(甲基)胺基)吡啶-3-基)-6-(2-氟乙氧基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈
将4-溴-6-(2-氟乙氧基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈(103mg,0.36mmol)、碳酸钠(114mg,1.08mmol)、(S)-N-(1-(6-(4-氟-1H-吡唑-1-基)吡啶-3-基)乙基)-N-甲基-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼杂环戊烷-2-基)吡啶-2-胺(183mg,0.43mmol)和四(三苯基膦)钯(42mg,0.036mmol)溶解在二氧六环：水(15mL：5mL)中，该反应液在80℃反应16h。监测反应完全后，冷却，加入水淬灭反应，EA(20mL*3)萃取，有机相水洗，干燥浓缩，柱层析得到(S)-4-(6-((1-(6-(4-氟-1H-吡唑-1-基)吡啶-3-基)乙基)(甲基)胺基)吡啶-3-基)-6-(2-氟乙氧基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈(化合物41)90mg，MS m/z(ESI)：501[M+H] +。 1H NMR(500MHz,DMSO-d6)δ8.73(d,J＝2.2Hz,1H),8.66(d,J＝4.5Hz,1H),8.60(s,1H),8.40(d,J＝2.3Hz,1H),8.38(d,J＝2.5Hz,1H),7.94–7.84(m,3H),7.82(dd,J＝8.8,2.6Hz,1H),7.36(d,J＝2.0Hz,1H),6.83(d,J＝8.8Hz,1H),6.29(d,J＝7.2Hz,1H),4.88–4.80(m,1H),4.77–4.71(m,1H),4.47–4.42(m,1H),4.40–4.35(m,1H),2.83(s,3H),1.61(d,J＝6.9Hz,3H).
实施例42：(S)-4-(6-((1-(6-(二乙胺基)吡啶-3-基)乙基)(甲基)胺基)吡啶-3-基)-6-(2-羟基-2-甲基丙氧基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈的制备
Figure PCTCN2021089064-appb-000073
步骤1:1-(6-(二乙胺基)吡啶-3-基)乙烷-1-酮
室温下，将2-氯-5-乙酰基吡啶(2.1g,19.43mmol)、二乙胺(4.9g,7.48mmol)和K 2CO 3(5.5,g 4.47mmol)溶解到DMF(20mL)当中，110℃搅拌过夜。冷却到室温，水(100mL) 稀释，经萃取、干燥、过滤、浓缩、柱层析，得到1-(6-(二乙胺基)吡啶-3-基)乙烷-1-酮2.3g，收率：88％MS m/z(ESI)：193[M+H] +。
步骤2:N-((S)-1-(6-(二乙胺基)吡啶-3-基)乙基)-2-甲基丙烷-2-亚硫酰胺
室温下，在反应瓶中加入(R)-2-甲基丙烷-2-磺酰亚胺(1.45g,11.98mmol)和1-(6-(二乙胺基)吡啶-3-基)乙烷-1-酮(2.3g,11.98mmol)、THF(50mL)，然后加入钛酸四乙酯(5.56g,24.4mmol)，滴加完毕后升至75℃反应16小时。将反应液冷却至-78℃，缓慢滴加L-selectride(36mL,35.94mmol)，滴加完毕，升至室温反应15分钟。然后在-50℃加甲醇淬灭，加水(50mL)，EA(200mL)充分搅拌后过滤、萃取、无水硫酸钠干燥、过滤，浓缩得粗品，柱层析纯化得N-((S)-1-(6-(二乙胺基)吡啶-3-基)乙基)-2-甲基丙烷-2-亚硫酰胺2.5g，收率：71％。MS m/z(ESI)：298[M+H] +。
步骤3：N-((S)-1-(6-(二乙胺基)吡啶-3-基)乙基)-N,2-二甲基丙烷-2-亚硫酰胺
室温下，将N-((S)-1-(6-(二乙胺基)吡啶-3-基)乙基)-2-甲基丙烷-2-亚硫酰胺(2.25g,7.5mmol)溶解到THF(20mL)，-78℃，缓慢滴加MeI(1.17g,8.25mmol)，-78℃反应1h。水(30mL)稀释，经萃取、干燥、过滤、浓缩、柱层析得到N-((S)-1-(6-(二乙胺基)吡啶-3-基)乙基)-N,2-二甲基丙烷-2-亚硫酰胺1.6g，收率：69％。MS m/z(ESI)：312[M+H] +。
步骤4:(S)-N,N-二乙基-5-(1-(甲胺基)乙基)吡啶-2-胺
室温下，将N-((S)-1-(6-(二乙胺基)吡啶-3-基)乙基)-N,2-二甲基丙烷-2-亚硫酰胺(1.6g,5.14mmol)溶解到MeOH(2mL)，然后加入HCl/Dioxane(20mL,4M)，室温反应1h。真空减压浓缩移除溶剂，NaHCO 3淬灭，经萃取、干燥、过滤、浓缩、柱层析得到(S)-N,N-二乙基-5-(1-(甲胺基)乙基)吡啶-2-胺0.8g，收率：80％。MS m/z(ESI)：208[M+H] +。
步骤5:(S)-5-溴-N-(1-(6-(二乙胺基)吡啶-3-基)乙基)-N-甲基吡啶-2-胺
室温下，将(S)-N，N-二乙基-5-(1-(甲胺基)乙基)吡啶-2-胺(0.7g,0.24mmol)、5-溴-2-氟吡啶(4.76g,1.2mmol)、K 2CO 3(2.3g,0.72mmol)溶解到DMSO(10mL)，140℃反应24h。冷却到室温，水稀释、萃取、干燥、过滤、浓缩、柱层析，得到(S)-5-溴-N-(1-(6-(二乙胺基)吡啶-3-基)乙基)-N-甲基吡啶-2-胺0.8g，收率：57％。MS m/z(ESI)：363[M+H] +。
步骤6:(S)-N-(1-(6-(二乙胺基)吡啶-3-基)乙基)-N-甲基-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼杂环戊烷-2-基)吡啶-2-胺
室温下，将(S)-5-溴-N-(1-(6-(二乙胺基)吡啶-3-基)乙基)-N-甲基吡啶-2-胺(0.7g,0.13mmol)、联硼酸频那醇酯(1.4g,0.41mmol)、Pd(dppf)ClCH 2Cl 2(140mg,0.013mmol)，KOAc(560mg,0.041mmol)，溶解到Dioxane(15mL)，90℃反应6h，真空减压浓缩移除溶剂。NaHCO 3稀释、萃取、干燥、过滤、浓缩、柱层析，得到(S)-N-(1-(6-(二乙胺基)吡啶-3-基)乙基)-N-甲基-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼杂环戊烷-2-基)吡啶-2-胺437mg，收率：50.8％，MS m/z(ESI)：329[M+H] +。
步骤7:(S)-4-(6-((1-(6-(二乙胺基)吡啶-3-基)乙基)(甲基)胺基)吡啶-3-基)-6-(2-羟 基-2-甲基丙氧基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈
室温下氮气保护将4-溴-6-(2-羟基-2-甲基丙氧基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈(240mg,0.77mmol)、(S)-N-(1-(6-(二乙胺基)吡啶-3-基)乙基)-N-甲基-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼杂环戊烷-2-基)吡啶-2-胺(480mg,1.17mmol)、Pd(PPh 3) 4(88mg,0.076mmol)、Na 2CO 3(324mg,3.05mmol)溶解在1,4-dioxane:水＝5:1(12mL)中，100℃搅拌反应12h。冷却到室温，加水淬灭、经萃取、水洗、干燥，柱层析(S)4-(6-((1-(6-(二乙胺基)吡啶-3-基)乙基)(甲基)胺基)吡啶-3-基)-6-(2-羟基-2-甲基丙氧基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈(化合物42)92mg，收率：23％，白色固体。MS m/z(ESI)：514[M+H] +1。 1H NMR(400MHz,DMSO)δ8.64(d,1H),8.56(s,1H),8.34(d,1H),8.00(d,1H),7.74-7.77(m,1H),7.29-7.38(m,1H),7.36-7.38(d,1H),6.73(d,1H),6.56(d,1H),4.68(s,1H),3.84(s,2H),3.41-3.46(m,4H),2.73(s,3H),1.37-1.48(m,3H),1.20(s,6H)。
实施例43：(S)-6-(2-羟基-2-甲基丙氧基)-4-(6-((1-(6-甲氧基吡啶-3-基)乙基)(甲基)胺基)吡啶-3-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈的制备
Figure PCTCN2021089064-appb-000074
步骤1:N-((S)-1-(6-甲氧基吡啶-3-基)乙基)-2-甲基丙烷-2-亚砜酰胺
室温下向反应瓶中加入(R)-2-甲基丙烷-2-磺酰亚胺(4.8g,39.6mmol)和5-乙酰基-2-甲氧基吡啶(4.0g,26mmol)、THF(50mL)，钛酸四乙酯(11.86g,52mmol)，80℃反应16小时。将反应液冷却至-78℃，缓慢滴加L-selectride(18.8mL,188mmol)，滴加完毕，升至室温反应15分钟。然后在-50℃甲醇淬灭，加50mL水，EA(200mL)充分搅拌后过滤、萃取、干燥、过滤，浓缩。粗品柱层析纯化得N-((S)-1-(6-甲氧基吡啶-3-基)乙基)-2-甲基丙烷-2-亚砜酰胺2.0g，收率30％。MS m/z(ESI)：257[M+H] +。
步骤2:N-((S)-1-(6-甲氧基吡啶-3-基)乙基)-N,2-二甲基丙烷-2-亚硫酰胺
室温下将N-((S)-1-(6-甲氧基吡啶-3-基)乙基)-N,2-二甲基丙烷-2-亚硫酰胺(2.0g,7.8mmol)溶解到THF(20mL)中，-78℃下缓慢滴加LiHMDS(15.6mL,15.6mmol)，-78℃反应1h。向体系中添加MeI(1.22g,8.58mmol)，-78℃反应3h。加水淬灭，经萃取、干燥、过滤、浓缩、柱层析得到N-((S)-1-(6-甲氧基吡啶-3-基)乙基)-N,2-二甲基丙烷-2-亚硫酰胺1.9g，收率90％。MS m/z(ESI)：271[M+H] +。
步骤3:(S)-1-(6-甲氧基吡啶-3-基)-N-甲基乙烷-1-胺
室温下将N-((S)-1-(6-甲氧基吡啶-3-基)乙基)-N,2-二甲基丙烷-2-亚硫酰胺(1.9g,7.0mmol)溶解到DCM(10mL)中，然后加入HCl/Dioxane(20mL,4M)，室温反应1h，真空减压浓缩移除溶剂。经NaHCO 3稀释，萃取、干燥、过滤、浓缩、柱层析得到(S)-1-(6-甲氧基吡啶-3-基)-N-甲基乙烷-1-胺0.81g，收率：69％。MS m/z(ESI)：167[M+H] +。
步骤4:(S)-5-溴-N-甲基-N-(1-(6-(甲基胺基)吡啶-3-基)乙基)吡啶-2-胺
室温下，将(S)-1-(6-甲氧基吡啶-3-基)-N-甲基乙烷-1-胺(0.8g,4.8mmol)、5-溴-2-氟吡啶(6.8g,39mmol)、K 2CO 3(2.0g,14.6mmol)溶解到DMSO(10mL)，140℃反应24h。冷却到室温，加水稀释、萃取、干燥、过滤、浓缩、柱层析得到(S)-5-溴-N-甲基-N-(1-(6-(甲基胺基)吡啶-3-基)乙基)吡啶-2-胺860mg，收率：57％。MS m/z(ESI)：321[M+H] +。
步骤5:(S)-N-(1-(6-甲氧基吡啶-3-基)乙基)-N-甲基-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼杂环戊烷-2-基)吡啶-2-胺
室温下将(S)-5-溴-N-甲基-N-(1-(6-(甲基胺基)吡啶-3-基)乙基)吡啶-2-胺(0.5g,1.5mmol)、联硼酸频那醇酯(1.18g,4.67mmol)、Pd(dppf)ClCH 2Cl 2(122mg,0.15mmol)、KOAc(460mg,4.67mmol)溶解到Dioxane(15mL)中，90℃反应12h。真空减压浓缩移除溶剂，NaHCO 3稀释，经萃取、干燥、过滤、浓缩、柱层析得到(S)-N-(1-(6-甲氧基吡啶-3-基)乙基)-N-甲基-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼杂环戊烷-2-基)吡啶-2-胺770mg，收率：100％。MS m/z(ESI)：288[M+H] +。
步骤6:(S)-6-(2-羟基-2-甲基丙氧基)-4-(6-((1-(6-甲氧基吡啶-3-基)乙基)(甲基)胺基)吡啶-3-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈
室温下将4-溴-6-(2-羟基-2-甲基丙氧基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈(140mg,0.45mmol)、(S)-N-(1-(6-甲氧基吡啶-3-基)乙基)-N-甲基-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼杂环戊烷-2-基)吡啶-2-胺(334mg,0.9mmol)、Pd(PPh 3) 4(40mg,0.045mmol)、Na 2CO 3(143mg,1.35mmol)溶解在1,4-dioxane:水＝5:1(12mL)中，氮气保护，100℃搅拌反应12h。冷却到室温，加水淬灭、经萃取、水洗、干燥，柱层析(S)-6-(2-羟基-2-甲基丙氧基)-4-(6-((1-(6-甲氧基吡啶-3-基)乙基)(甲基)胺基)吡啶-3-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈(化合物43)66mg，收率：31％，白色固体MS m/z(ESI)：473[M+H] +。 1H NMR(400MHz,DMSO)δ8.65(d,1H),8.57(s,1H),8.35(d,1H),8.10(d,1H),7.75-7.80(m,1H),7.59-7.63(m,2H),7.30(d,1H),6.72-6.79(dd,2H),3.80(s,2H),3.81(s,3H),2.75(s,3H),1.52(d,3H),1.21(s,6H)。
实施例44：(S)-4-(6-((1-(6-(4-氟-1H-吡唑基)吡啶-3-基)丙基)(甲基)胺基)吡啶-3-基)-6-(2-羟基-2-甲基丙氧基)吡唑[1,5-a]吡啶-3-甲腈的制备
Figure PCTCN2021089064-appb-000075
步骤1:叔丁基(S)-(1-(6-(4-氟-1H-吡唑-1-基)吡啶-3-基)丙基)(甲基)胺基甲酸酯
室温下将叔丁基(S)-(1-(6-(4-氟-1H-吡唑-1-基)吡啶-3-基)丙基)胺基甲酸酯(470mg,1.46mmol)溶解到THF(20mL)当中，氮气保护，0℃加入钠氢(117mg,3.0mmol)，保温反应0.5h。加入MeI(248mg,1.75mmol)，室温反应5h。加水稀释，经萃取、干燥、过滤、浓缩、柱层析得到叔丁基(S)-(1-(6-(4-氟-1H-吡唑-1-基)吡啶-3-基)丙基)(甲基)胺基甲酸酯400mg，收率：81％。MS m/z(ESI)：335[M+H] +。
步骤2:(S)-1-(6-(4-氟-1H-吡唑-1-基)吡啶-3-基)-N-甲基丙烷-1-胺
室温下将叔丁基(S)-(1-(6-(4-氟-1H-吡唑-1-基)吡啶-3-基)丙基)(甲基)胺基甲酸酯(400mg,1.19mmol)溶解到MeOH(2mL)，然后加入HCl/Dioxane(10mL,4M)，室温反应1h，真空减压浓缩移除溶剂。NaHCO 3稀释，经萃取、干燥、过滤、浓缩、柱层析得到(S)-1-(6-(4-氟-1H-吡唑-1-基)吡啶-3-基)-N-甲基丙烷-1-胺276mg，收率：100％。MS m/z(ESI)：225[M+H] +
步骤3:(S)-5-溴-N-(1-(6-(4-氟-1H-吡唑基)吡啶-3-基)丙基)-N-甲基吡啶-2-胺
室温下将(S)-1-(6-甲氧基吡啶-3-基)-N-甲基乙烷-1-胺(480mg，1.18mmol)、5-溴-2-氟吡啶(1.25g,7.1mmol)、K 2CO 3(987mg,7.1mmol)溶解到10mL DMSO中，140℃反应24h。冷却到室温，经加水稀释、萃取、干燥、过滤、浓缩、柱层析得到得到(S)-5-溴-N-(1-(6-(4-氟-1H-吡唑基)吡啶-3-基)丙基)-N-甲基吡啶-2-胺160mg，收率19％。MS m/z(ESI)：390[M+H] +。
步骤4:(S)-N-(1-(6-(4-氟-1H-吡唑-1-基)吡啶-3-基)丙基)-N-甲基-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼杂环戊烷-2-基)吡啶-2-胺
室温下，将(S)-5-溴-N-(1-(6-(4-氟-1H-吡唑基)吡啶-3-基)丙基)-N-甲基吡啶-2-胺(160mg,0.4mmol)、联硼酸频那醇酯(313mg,1.23mmol)、Pd(dppf)ClCH 2Cl 2(32mg,0.04mmol)、KOAc(121mg,1.23mmol)溶解到Dioxane(10mL)，90℃反应12h。真空减压浓缩移除溶剂，NaHCO 3稀释，经萃取、干燥、过滤、浓缩、柱层析，得到(S)-N-(1-(6-(4-氟-1H-吡唑 -1-基)吡啶-3-基)丙基)-N-甲基-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼杂环戊烷-2-基)吡啶-2-胺160mg，收率：89％。MS m/z(ESI)：456[M+H] +。
步骤5:(S)-4-(6-((1-(6-(4-氟-1H-吡唑基)吡啶-3-基)丙基)(甲基)胺基)吡啶-3-基)-6-(2-羟基-2-甲基丙氧基)吡唑[1,5-a]吡啶-3-甲腈
室温氮气保护下将4-溴-6-(2-羟基-2-甲基丙氧基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈(96mg,0.3mmol)、(S)-N-(1-(6-(4-氟-1H-吡唑-1-基)吡啶-3-基)丙基)-N-甲基-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼杂环戊烷-2-基)吡啶-2-胺(160mg,0.35mmol)、Pd(PPh 3) 4(34mg,0.03mmol)、Na 2CO 3(95mg,0.9mmol)溶解在1,4-dioxane:水＝5:1(12mL)中，90℃搅拌反应12h。冷却到室温，加水淬灭、经萃取、水洗、干燥、柱层析，得到(S)-4-(6-((1-(6-(4-氟-1H-吡唑基)吡啶-3-基)丙基)(甲基)胺基)吡啶-3-基)-6-(2-羟基-2-甲基丙氧基)吡唑[1,5-a]吡啶-3-甲腈(化合物44)31mg，收率：18％；白色固体，MS m/z(ESI)：541[M+H] +。 1H NMR(400MHz,DMSO)δ8.75(s,1H),8.64(s,1H),8.56(s,1H),8.37(d,1H),7.60-7.94(m,3H),7.58-7.62(m,2H),7.30(s,1H),6.81(d,1H),6.28(d,1H),4.70(s,1H),3.87(s,2H),2.83(s,3H),1.61(s,2H),1.40(s,3H),1.22(s,6H)。
实施例45：(S)-4-(6-((1-(6-(4-氯-1H-吡唑-1-基)吡啶-3-基)乙基)(甲基)胺基)吡啶-3-基)-6-(2-羟基-2-甲基丙氧基)吡唑[1,5-a]吡啶-3-甲腈的制备
Figure PCTCN2021089064-appb-000076
步骤1:1-(6-(4-氯-1H-吡唑-1-基)吡啶-3-基)乙烷-1-酮
室温下将2-氯-5-乙酰基吡啶(4.0g,29.26mmol)、4-氟-1H-吡唑(2.0g,19.50mmol)＝K 2CO 3(8.1g,58.5mmol)溶解到DMF(20mL)当中，110℃搅拌过夜。冷却到室温，加水(50mL)稀释，经萃取、干燥、过滤、浓缩、柱层析，得到1-(6-(4-氯-1H-吡唑-1-基)吡啶-3-基)乙烷-1-酮4.0g，收率：93％。MS m/z(ESI)：222[M+H] +。
步骤2:N-((S)-1-(6-(4-氯-1H-吡唑-1-基)吡啶-3-基)乙基)-2-甲基丙烷-2-亚硫酰胺
室温下向反应瓶中加入(R)-2-甲基丙烷-2-磺酰亚胺(1.8g,14.89mmol)和1-(6-(4-氯-1H-吡唑-1-基)吡啶-3-基)乙烷-1-酮(2.2g,9.9mmol)、THF(50mL)，然后加入钛酸四乙酯(4.5,g,19.8mmol)，75℃反应16小时。将反应液冷却至-78℃，缓慢滴加L-selectride(20mL,19.8mmol)，滴加完毕，-78℃反应3h。加水(50mL)，EA(200mL)充分搅拌后过滤、萃取、无水硫酸钠干燥、过滤，浓缩得粗品，柱层析纯化得N-((S)-1-(6-(4-氯-1H-吡唑-1-基)吡啶-3-基)乙基)-2-甲基丙烷-2-亚硫酰胺3.0g，收率：93％。MS m/z(ESI)：298[M+H] +。
步骤3：(S)-1-(6-(4-氯-1H-吡唑-1-基)吡啶-3-基)乙烷-1-胺
室温下将N-((S)-1-(6-(4-氯-1H-吡唑-1-基)吡啶-3-基)乙基)-2-甲基丙烷-2-亚硫酰胺(4.0g,12.26mmol)溶解到DCM(20mL)当中，然后加入HCl/Dioxane(50mL,4M)，室温反应1h。真空减压浓缩移除溶剂，NaHCO 3碱化，萃取、干燥、过滤、浓缩得到(S)-1-(6-(4-氯-1H-吡唑-1-基)吡啶-3-基)乙烷-1-胺2.28g，收率：89％。MS m/z(ESI)：223[M+H] +。
步骤4:叔丁基(S)-(1-(6-(4-氯-1H-吡唑-1-基)吡啶-3-基)乙基)胺基甲酸酯
室温下将(S)-1-(6-(4-氯-1H-吡唑-1-基)吡啶-3-基)乙烷-1-胺(2.28g,10.2mmol)、三乙胺(3.7g,36mmol)溶解到DCM(20mL)当中，然后加入二碳酸二叔丁酯(3.0g,13.5mmol)，室温搅拌5h。经萃取、干燥、过滤、浓缩、柱层析得到叔丁基(S)-(1-(6-(4-氯-1H-吡唑-1-基)吡啶-3-基)乙基)胺基甲酸酯5g，收率：45％。MS m/z(ESI)：266[M-56] +。
步骤5:叔丁基(S)-(1-(6-(4-氯-1H-吡唑-1-基)吡啶-3-基)乙基)(甲基)胺基甲酸酯
室温下将叔丁基(S)-(1-(6-(4-氯-1H-吡唑-1-基)吡啶-3-基)乙基)胺基甲酸酯(1.5g,4.6mmol)溶解到THF(20mL)中，0℃加钠氢(276mg,6.9mmol)，保温反应0.5h。向体系中加入MeI(0.85g,6.0mmol)，0℃反应1h，水(50mL)淬灭，经萃取、干燥、过滤、浓缩、柱层析得到叔丁基(S)-(1-(6-(4-氯-1H-吡唑-1-基)吡啶-3-基)乙基)(甲基)胺基甲酸酯1.2g，收率77％。MS m/z(ESI)：337[M+H] +。
步骤6:(S)-1-(6-(4-氯-1H-吡唑-1-基)吡啶-3-基)-N-甲基乙烷-1-胺
室温下将叔丁基(S)-(1-(6-(4-氯-1H-吡唑-1-基)吡啶-3-基)乙基)(甲基)胺基甲酸酯(1.2g,3.57mmol)溶解到DCM(5mL)中，然后加入HCl/Dioxane(20mL,4M)，室温反应1h。真空减压浓缩移除溶剂，NaHCO 3稀释，萃取、干燥、过滤、浓缩、柱层析得到(S)-1-(6-甲氧基吡啶-3-基)-N-甲基乙烷-1-胺560mg，收率：66％。MS m/z(ESI)：237[M+H] +。
步骤7:(S)-5-溴-N-(1-(6-(4-氯-1H-吡唑-1-基)吡啶-3-基)乙基)-N-甲基吡啶-2-胺
室温下将((S)-1-(6-(4-氯-1H-吡唑-1-基)吡啶-3-基)-N-甲基乙烷-1-胺(560mg,2.36mmol)、5-溴-2-氟吡啶(2.5g,14mmol)、K 2CO 3(1.6g,11.8mmol)溶解到DMSO(10mL) 中，140℃反应24h。冷却到室温，加水稀释、萃取、干燥、过滤、浓缩、柱层析得(S)-5-溴-N-(1-(6-(4-氯-1H-吡唑-1-基)吡啶-3-基)乙基)-N-甲基吡啶-2-胺300mg，收率：32％。MS m/z(ESI)：392[M+H] +。
步骤8:(S)-N-(1-(6-(4-氯-1H-吡唑-1-基)吡啶-3-基)乙基)-N-甲基-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼杂环戊烷-2-基)吡啶-2-胺
室温下将(S)-5-溴-N-(1-(6-(4-氯-1H-吡唑-1-基)吡啶-3-基)乙基)-N-甲基吡啶-2-胺(200mg,0.51mmol)、联硼酸频那醇酯(390mg,1.53mmol)、Pd(dppf)ClCH 2Cl 2(41mg,0.051mmol)、KOAc(150mg,1.53mmol)溶解到Dioxane(10mL)中，0℃反应12h。真空减压浓缩移除溶剂，NaHCO 3稀释，经萃取、干燥、过滤、浓缩、柱层析得到(S)-N-(1-(6-(4-氯-1H-吡唑-1-基)吡啶-3-基)乙基)-N-甲基-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼杂环戊烷-2-基)吡啶-2-胺210mg，收率：95％。MS m/z(ESI)：358[M+H] +。
步骤9:(S)4-(6-((1-(6-(4-氯-1H-吡唑-1-基)吡啶-3-基)乙基)(甲基)胺基)吡啶-3-基)-6-(2-羟基-2-甲基丙氧基)吡唑[1,5-a]吡啶-3-甲腈
室温氮气保护下将4-溴-6-(2-羟基-2-甲基丙氧基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈(170mg,0.55mmol)、(S)-N-(1-(6-(4-氯-1H-吡唑-1-基)吡啶-3-基)乙基)-N-甲基-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼杂环戊烷-2-基)吡啶-2-胺(268mg,0.61mmol)、Pd(PPh 3) 4(63mg,0.055mmol)、Na 2CO 3(175mg,1.65mmol)溶解在1,4-dioxane:水＝5:1(12mL)中，85℃搅拌反应12h。冷却到室温，加水淬灭、经萃取、水洗、干燥，柱层析(S)4-(6-((1-(6-(4-氯-1H-吡唑-1-基)吡啶-3-基)乙基)(甲基)胺基)吡啶-3-基)-6-(2-羟基-2-甲基丙氧基)吡唑[1,5-a]吡啶-3-甲腈(化合物45)40mg，收率20％。MS m/z(ESI)：543[M+H] +。 1H NMR(400MHz,DMSO)δ8.76(s,1H),8.65(s,1H),8.57(s,1H),8.38(d,1H),7.60-7.94(m,3H),7.59-7.62(m,2H),7.31(s,1H),6.81(d,1H),6.28(d,1H),4.70(s,1H),3.87(s,2H),2.83(s,3H),1.61(s,3H),1.22(s,6H)。
实施例46：(S)-4-(6-((1-(6-(4-氟-1H-吡唑基)吡啶-3-基)乙基)(甲基)胺基)吡啶-3-基)-6-((1-羟基环丙基)甲氧基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈的制备
Figure PCTCN2021089064-appb-000077
步骤1:合成2-((四氢-2H-吡喃-2-基)氧基)乙酸甲酯
室温下将3,4-二氢-2H-吡喃(6.0g,72mmol)、2-羟基乙酸乙酯(5.0g,48mmol)和PPTs(1.2g,4.8mmol)溶解到DCM(30mL)当中，室温搅拌过夜。反应完全，经萃取、干燥、过滤、浓缩、柱层析得到2-(四氢-2H吡喃-2-基)氧基)乙酸乙酯6.0g，收率：66％。
步骤2:合成1-((四氢-2H-吡喃-2-基)氧基)甲基)环丙烷-1-醇
室温下将2-(四氢-2H-吡喃-2-基氧基)乙酸甲酯(1.0g,5.32mmol)与Ti(Oi-Pr) 4(301mg,1.06mmol)溶解到无水乙醚(30mL)中，0℃下滴加乙基溴化镁(6.6mL,2M)，0℃搅拌反应1小时。加20mL水淬灭，乙酸乙酯(30mL x3)萃取，有机层合并，Na 2SO 4干燥、过滤、浓缩、柱层析得到得1-((四氢-2H-吡喃-2-基)氧基)甲基)环丙烷-1-醇870mg，收率：95％。
步骤3:合成1-((四氢-2H-吡喃-2-基)氧基)甲基)环丙基苯甲酸酯
室温下将1-((四氢-2H-吡喃-2-基)氧基)甲基)环丙烷-1-醇(1.23g,2.9mmol)、三乙胺(880mg,8.72mmol)溶解在在无水DCM(10mL)中，0℃滴加入苯甲酰氯(490mg,3.48mmol)，室温搅拌过夜。加20mL水淬灭，DCM(30mL x 3)萃取。合并有机层，Na 2SO 4干燥、过滤、浓缩、柱层析得1-((四氢-2H-吡喃-2-基)氧基)甲基)环丙基苯甲酸酯1.3g，收率：65％。
步骤4:合成1-(羟甲基)环丙基苯甲酸酯
室温下将1-((四氢-2H-吡喃-2-基)氧基)甲基)环丙基苯甲酸酯(600mg,2.17mmol)和PPTs(817mg,3.2mmol)溶解在10mL甲醇中，室温搅拌2小时。经萃取、干燥、过滤、浓缩、柱层析得获得1-(羟甲基)环丙基苯甲酸酯230mg，收率：55％。MS m/z(ESI)：193[M+H] +。
步骤5:合成1-((对甲苯氧基)甲基)环丙基苯甲酸酯
室温下将1-(羟甲基)环丙基苯甲酸酯(230mg,1.2mmol)与三乙胺(363mg,3.6mmol)溶解在无水THF(10mL)中，0℃下滴加对甲苯磺酰氯(253mg,1.33mmol)，室温搅拌过夜。加10mL水淬灭，EA(20mL x 3)萃取，合并有机层，Na 2SO 4干燥、过滤、浓缩、柱层析得1-((对甲苯氧基)甲基)环丙基苯甲酸酯110mg，收率：27％。MS m/z(ESI)：369[M+Na] +。
步骤6:合成1-((4-溴-3-氰基吡唑并[1,5-a]吡啶-6-基)氧基)甲基)环丙基苯甲酸酯
室温下将4-溴-6-羟基吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈(60mg,0.21mmol)、1-((对甲苯氧基)甲基)环丙基苯甲酸酯(110mg,0.31mmol)、碳酸钾(86mg,0.63mmol)溶解在2mL无水DMF中，80℃搅拌反应3h。冷却到室温，加10mL水淬灭反应，EA(20mL x 3)萃取，合并有机层，Na 2SO 4干燥、过滤、浓缩、柱层析得1-((4-溴-3-氰基吡唑并[1,5-a]吡啶-6-基)氧基)甲基)环丙基苯甲酸酯56mg，收率：70％。MS m/z(ESI)：412[M+H] +。
步骤7:合成4-溴-6-((1-羟基环丙基)甲氧基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈
室温下将1-((4-溴-3-氰基吡唑并[1,5-a]吡啶-6-基)氧基)甲基)环丙基苯甲酸酯(120mg,0.29mmol)溶解到7mL甲醇：水＝2:1的混合溶液中，然后加入氢氧化钠(23mg,0.58mmol)，室温反应2h。加10mL水淬灭反应，DCM(20mL x 3)萃取，有机层合并，Na 2SO 4 干燥、过滤、浓缩、柱层析得4-溴-6-((1-羟基环丙基)甲氧基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈35mg，收率：38％。MS m/z(ESI)：308[M+H] +。
步骤8:(S)-4-(6-((1-(6-(4-氟-1H-吡唑基)吡啶-3-基)乙基)(甲基)胺基)吡啶-3-基)-6-((1-羟基环丙基)甲氧基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈
室温氮气保护下，将4-溴-6-((1-羟基环丙基)甲氧基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈(35mg,0.114mmol)、(S)-N-(1-(6-(4-氟-1H-吡唑-1-基)吡啶-3-基)乙基)-N-甲基-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼杂环戊烷-2-基)吡啶-2-胺(63mg,0.148mmol)、Pd(PPh 3) 4(15mg,0.0114mmol)溶解在1,4-dioxane:水＝5:1的混合溶液(6mL)中，然后加入碳酸钾(50mg,0.342mmol)，90℃搅拌过夜。冷却到室温，加水淬灭，分出有机相、水洗、干燥、柱层析,得(DCM:EA＝10:1)得到(S)-4-(6-((1-(6-(4-氟-1H-吡唑基)吡啶-3-基)乙基)(甲基)胺基)吡啶-3-基)-6-((1-羟基环丙基)甲氧基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈(化合物46)8mg。MS m/z(ESI)：525[M+H] +。 1H NMR(400MHz,DMSO)δ8.75(s,1H),8.64(s,1H),8.56(s,1H),8.37(d,1H),7.60-7.94(m,3H),7.59-7.62(m,2H),7.31(s,1H),6.81(d,1H),6.28(d,1H),4.70(s,1H),3.87(s,2H),2.83(s,3H),1.60(s,3H),1.22(m,4H)。
实施例47：(S)-4-(6-((1-(6-(4-氟-1H-吡唑-1-基)吡啶-3-基)乙基)(甲基)胺基)吡啶-3-基)-6-(哌啶-1-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈的制备
Figure PCTCN2021089064-appb-000078
步骤1：合成4-((4-甲氧基苄基)氧基)-6-(哌啶-1-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈
将6-溴-4-((4-甲氧基苄基)氧基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈(1.0g,2.79mmol)溶解在DCM(5mL)中，加入哌啶(0.96g,11.17mmol)、磷酸钾(1.93g,8.37mmol)、碘化亚铜(0.96g,11.17mmol)，加热至90℃反应5h，待原料全部消耗完将体系倒入冰水中。EA萃取，合并有机相，干燥旋干，柱层析得到4-((4-甲氧基苄基)氧基)-6-(哌啶-1-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈0.15g，MS m/z(ESI)：363.4[M+H] +。
步骤2：合成4-羟基-6-(哌啶-1-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈
将4-((4-甲氧基苄基)氧基)-6-(哌啶-1-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈(150mg,0.41mmol)溶解在二氯甲烷(5mL)中，然后加入三氟乙酸(5mL)，在室温下搅拌30min。反应完全后，将体系旋干得到粗产品4-羟基-6-(哌啶-1-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈0.1g，MS m/z(ESI)：243.3[M+H] +。
步骤3：合成3-氰基-6-(哌啶-1-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-4-基三氟甲磺酸酯
将4-羟基-6-(哌啶-1-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈(100mg,0.41mmol)溶解在二氯甲烷(5mL)中，加入1,1,1-三氟-N-苯基-N-((三氟甲基)磺酰基)甲磺酰胺(177mg,0.50mmol)和DIEA(267mg,2.06mmol)，室温下搅拌30min。反应完全后体系用水洗涤，二氯甲烷萃取，合并有机相，干燥旋干，柱层析得到3-氰基-6-(哌啶-1-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-4-基三氟甲磺酸酯0.105g，MS m/z(ESI)：375.3[M+H] +。
步骤4：合成(S)-4-(6-((1-(6-(4-氟-1H-吡唑-1-基)吡啶-3-基)乙基)(甲基)胺基)吡啶-3-基)-6-(哌啶-1-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈
将3-氰基-6-(哌啶-1-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-4-基三氟甲磺酸酯(0.15g,0.4mmol)溶解在4mL二氧六环：水＝3：1的混合溶液中，然后再加入(S)-N-(1-(6-(6-(4-氟-1H-吡唑-1-基)吡啶-3-基)乙基)-N-甲基-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼杂环戊烷-2-基)吡啶-2-胺(0.20g,0.48mmol)、Pd 2(dba) 3(0.036g,0.04mmol)、X-Phos(0.038g,0.08mmol)、碳酸钠(0.212g,2.0mmol)，该反应液加热至80℃反应过夜。反应完全后将反应液用水洗涤，EA萃取，合并有机相，干燥旋干，硅胶柱层析后得到(S)-4-(6-((1-(6-(4-氟-1H-吡唑-1-基)吡啶-3-基)乙基)(甲基)胺基)吡啶-3-基)-6-(哌啶-1-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈(化合物47)0.05g，MS m/z(ESI)：522.6[M+H] +。 1H NMR(500MHz,DMSO)δ8.65(d,J＝4.5Hz,1H),8.49(s,1H),8.39(s,1H),8.36(d,J＝2.3Hz,1H),8.25(s,1H),7.91(s,1H),7.90(s,1H),7.86(d,J＝8.5Hz,1H),7.79(dd,J＝8.8,2.5Hz,1H),7.46(d,J＝1.8Hz,1H),6.80(d,J＝8.8Hz,1H),3.15(m,4H),1.97(s,1H),1.62(m,3H),1.60(d,J＝7.0Hz,3H),1.53(d,J＝4.3Hz,2H),1.21(m,4H).
实施例48：((S)-6-(4,4-二氟哌啶-1-基)-4-(6-((1-(6-(4-氟-1H-吡唑-1-基)吡啶-3-基)乙基)(甲基)胺基)吡啶-3-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈的制备
Figure PCTCN2021089064-appb-000079
步骤1：合成6-(4,4-二氟哌啶-1-基)-4-((4-甲氧基苄基)氧基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈
将6-溴-4-((4-甲氧基苄基)氧基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈(1.0g,2.79mmol)溶解在DMSO(10mL)中，加入4,4-二氟哌啶(1.35g,11.2mmol)、磷酸钾(1.93g,8.37mmol)、碘化亚铜(0.53g,2.79mmol)、L-脯氨酸(0.32g,2.79mmol)加热至90℃反应5h，待原料全部消耗完将体系倒入冰水中。EA萃取，合并有机相，干燥旋干，柱层析得到6-(4,4-二氟哌啶-1-基)-4-((4-甲氧基苄基)氧基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈0.14g，MS  m/z(ESI)：399.4[M+H] +。
步骤2：合成6-(4,4-二氟哌啶-1-基)-4-羟基吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈
将6-(4,4-二氟哌啶-1-基)-4-((4-甲氧基苄基)氧基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈(200mg,0.50mmol)溶解在二氯甲烷(5mL)中，然后加入三氟乙酸(5mL)，在室温下搅拌30min。反应完全后，将体系旋干得到粗产品6-(4,4-二氟哌啶-1-基)-4-羟基吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈0.14g.MS m/z(ESI)：279.3[M+H] +。
步骤3：合成3-氰基-6-(4,4-二氟哌啶-1-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-4-基三氟甲磺酸酯
将6-(4,4-二氟哌啶-1-基)-4-羟基吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈(139mg,0.50mmol)溶解在二氯甲烷(5mL)中，加入1,1,1-三氟-N-苯基-N-((三氟甲基)磺酰基)甲磺酰胺(214mg,0.60mmol)和DIEA(323mg,2.50mmol)。室温下搅拌30min，反应完全后体系用水洗涤，二氯甲烷萃取，合并有机相，干燥旋干，柱层析得到3-氰基-6-(4,4-二氟哌啶-1-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-4-基三氟甲磺酸酯0.165g，MS m/z(ESI)：411.3[M+H] +。
步骤4：合成((S)-6-(4,4-二氟哌啶-1-基)-4-(6-((1-(6-(4-氟-1H-吡唑-1-基)吡啶-3-基)乙基)(甲基)胺基)吡啶-3-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈
将3-氰基-6-(4,4-二氟哌啶-1-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-4-基三氟甲磺酸酯(165mg,0.4mmol)溶解在4mL 1,4-二氧六环/水＝3：1的混合溶剂中，然后再加入(S)-N-(1-(6-(6-(4-氟-1H-吡唑-1-基)吡啶-3-基)乙基)-N-甲基-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼杂环戊烷-2-基)吡啶-2-胺(204mg,0.48mmol)、Pd 2(dba) 3(23mg,0.04mmol)、X-Phos(38mg,0.08mmol)、碳酸钠(213mg,2.0mmol)，该反应液加热至80℃反应过夜。反应完全后将反应液用水洗涤，EA萃取，合并有机相，干燥旋干，硅胶柱层析后得到((S)-6-(4,4-二氟哌啶-1-基)-4-(6-((1-(6-(4-氟-1H-吡唑-1-基)吡啶-3-基)乙基)(甲基)胺基)吡啶-3-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈(化合物48)30mg，MS m/z(ESI)：558.6[M+H] +。 1H NMR(500MHz,DMSO)δ8.65(d,J＝4.6Hz,1H),8.52(s,1H),8.42(d,J＝1.9Hz,1H),8.39(s,1H),8.37(d,J＝2.3Hz,1H),7.91(d,J＝3.6Hz,1H),7.90(d,J＝2.2Hz,1H),7.86(d,J＝8.4Hz,1H),7.80(dd,J＝8.8,2.5Hz 1H),7.54(d,J＝2.0Hz,1H),6.81(d,J＝8.9Hz,1H),2.87(s,3H),2.07(m,4H),1.60(d,J＝7.0Hz,3H),1.21(m,4H).
实施例49：(S)-6-((环丙基甲基)胺基)-4-(6-((1-(6-(4-氟-1H-吡唑-1-基)吡啶-3-基)乙基)(甲基)胺基)吡啶-3-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈的制备
Figure PCTCN2021089064-appb-000080
步骤1：合成6-((环丙基甲基)胺基)-4-((4-甲氧基苄基)氧基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈
氮气保护下将6-溴-4-((4-甲氧基苄基)氧基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈(1.07g,3mmol)、环丙基甲基胺(640mg,9mmol)、碘化亚铜(57mg,0.3mmol)、磷酸钾(1.27g,6mmol)及L-脯氨酸(69mg,0.6mmol)分散于10mL二甲基亚砜中，120℃下搅拌反应4h。反应完成后加入水(50mL)，用EA(50mL×3)萃取，合并有机相并用饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，浓缩，柱层析得到6-((环丙基甲基)胺基)-4-((4-甲氧基苄基)氧基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈420mg。MS m/z(ESI)：349.3[M+H] +。
步骤2：合成6-((环丙基甲基)胺基)-4-羟基吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈
将6-((环丙基甲基)胺基)-4-((4-甲氧基苄基)氧基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈(420mg,1.2mmol)溶解在二氯甲烷(10mL)中，冰水浴下加入三氟乙酸(3mL)，室温下反应30min，反应完成后，旋干反应液直接进行下一步。
步骤3：合成3-氰基-6-((环丙基甲基)胺基)吡唑并[1,5-a]吡啶-4-基三氟甲磺酸酯
将6-((环丙基甲基)胺基)-4-((4-甲氧基苄基)氧基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈(420mg,1.2mmol)溶解在二氯甲烷(10mL)中，冰水浴下加入DIPEA(311mg,2.4mmol)及N-苯基双(三氟甲磺酰)亚胺(515mg,1.44mmol)，室温下反应1h。反应完成后，向反应混合物中加入30mL水，萃取分离有机相，水层进一步用DCM(30mL×2)萃取。合并有机相，用饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥后浓缩，柱层析得到3-氰基-6-((环丙基甲基)胺基)吡唑并[1,5-a]吡啶-4-基三氟甲磺酸盐310mg。MS m/z(ESI)：361.2[M+H] +。
步骤4：合成(S)-6-((环丙基甲基)胺基)-4-(6-((1-(6-(4-氟-1H-吡唑-1-基)吡啶-3-基)乙基)(甲基)胺基)吡啶-3-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈
氮气保护下将三(二亚苄基丙酮)二钯(38.5mg,0.1mol)、2-二环己基磷-2,4,6-三异丙基联苯(40.1mg,0.2mol)、3-氰基-6-((环丙基甲基)胺基)吡唑并[1,5-a]吡啶-4-基三氟甲磺酸盐(150mg,1.0mmol)、(S)-N-(1-(6-(6-(4-氟-1H-吡唑-1-基)吡啶-3-基)乙基)-N-甲基-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼杂环戊烷-2-基)吡啶-2-胺(211.7mg,1.2mmol)及碳酸钠(38.5mg,5mmol分散于二氧六环:水＝6:1的混合溶剂中，90℃反应过夜。反应完成后加入50mL水，用EA(50mL×3)萃取，合并有机相并用饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干燥，浓缩，柱层析得到(S)-6-((环丙基甲基)胺基)-4-(6-((1-(6-(4-氟-1H-吡唑-1-基)吡啶-3-基)乙基)(甲基)胺基)吡啶-3-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈(化合物49)35mg。MS m/z(ESI)：508.5[M+H] +。 1H NMR(400MHz,DMSO-d 6)δ8.66(d,J＝4.5Hz,1H),8.40(d,J＝2.2Hz,1H),8.37(s,1H),8.31(d,J＝2.5Hz,1H),7.95–7.89(m,3H),7.86(d,J＝8.5Hz,1H),7.74(dd,J＝8.8,2.6Hz,1H),7.12(d,J＝2.0Hz,1H),6.81(d,J＝8.9Hz,1H),6.28(q,J＝7.0Hz,1H),6.02(t,J＝5.4Hz,1H),2.92(t,J＝6.0Hz,2H),2.81(s,3H),1.60(d,J＝7.0Hz,3H),1.06(s,1H),0.55–0.46(m,2H),0.29–0.20(m,2H).
实施例50：(S)-4-(6-((1-(6-(4-氟-1H-吡唑-1-基)吡啶-3-基)乙基)(甲基)胺基)吡啶 -3-基)-6-(异丙胺基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈的制备
Figure PCTCN2021089064-appb-000081
步骤1：合成6-(异丙基胺基)-4-((4-甲氧基苄基)氧基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈
在室温下将6-溴-4-(4-甲氧基苄氧基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈(400mg,1.12mmol)溶于DMSO(5mL)中，然后依次加入异丙胺(460μL,5.6mmol)、CuI(23mg,0.112mmol)、L-proline(26mg,0.224mmol)、K 3PO 4(480mg,2.24mmol)，反应瓶用氮气置换3次后，将反应在氮气保护条件下升温到115℃搅拌6h。TLC监测反应结束，将反应液到于20mL水中，用乙酸乙酯(20mL*3)萃取，合并有机相。有机相用饱和食盐水(10mL*2)洗涤，无水硫酸钠干燥，抽滤、旋蒸得粗品。粗品用快速过柱机过柱，纯化后得到4-(4-甲氧基苄氧基)-6-(异丙胺基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈(220mg)。MS:m/z＝337.1[M+1] +。
步骤2：合成4-羟基-6-(异丙基胺基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈
在室温下，将化合物4-(4-甲氧基苄氧基)-6-(异丙胺基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈(220mg,0.651mmol)溶于二氯甲烷(8mL)，滴加TFA(2mL)。反应液室温下搅拌0.5h，TLC(石油醚/乙酸乙酯＝1/1)和LCMS监测反应结束。将反应液浓缩，油泵拉干得粗品4-羟基-6-(异丙胺基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈，直接用于下一步反应。MS:m/z＝217.0[M+1] +。
步骤3：合成3-氰基-6-(异丙基胺基)吡唑并[1,5-a]吡啶-4-基三氟甲磺酸酯
在室温下将上步所得粗品4-羟基-6-(异丙胺基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈溶于DMF(3mL)，向反应液中加入DIPEA(314μL)和化合物1,1,1-三氟-N-苯基-N-((三氟甲基)磺酰)甲磺酰胺(408mg,1.14mmol)。反应液在室温下搅拌1h，TLC监测反应结束。将反应倒入10mL水中，用乙酸乙酯(20mL*2)萃取，合并有机相。有机相用饱和食盐水(10mL*2)洗涤，无水硫酸钠干燥，抽滤、旋蒸得粗品。经快速过柱机纯化后，得到3-氰基-6-异丙胺基吡唑并[1,5-a]吡啶-4-三氟甲基磺酸酯280mg，LCMS:m/z＝348.9[M+1] +。
步骤4：合成(S)-4-(6-((1-(6-(4-氟-1H-吡唑-1-基)吡啶-3-基)乙基)(甲基)胺基)吡啶-3-基)-6-(异丙胺基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈
在室温下将3-氰基-6-异丙胺基吡唑并[1,5-a]吡啶-4-三氟甲基磺酸酯(280mg,0.603mmol)溶于1,4-二氧六环(6mL)和水(2mL)的混合液中，室温下依次加入化合物(S)-N-(1-(6-(4-氟-1H-吡唑-1-基)吡啶-3-基)乙基)-N-甲基-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧 硼杂环戊环-2-基)吡啶-2-胺(443mg,1.05mmol)、Pd 2(dba) 3(160mg,0.17mmol)、X-Phos(333mg,0.70mmol)、Na 2CO 3(185mg,1.74mmol)。反应瓶用氮气置换3次后，将反应在氮气保护条件下升温到85℃搅拌12h。TLC监测反应结束，将反应液到于10mL水中，乙酸乙酯(20mL*3)萃取，合并有机相。有机相用饱和食盐水(10mL*2)洗涤，无水硫酸钠干燥，抽滤、旋蒸得粗品。经快速过柱机纯化后得到(S)-N-((1-(6-(4-氟-1H-吡唑-1-基)吡啶-3-基)乙基)(甲基)胺)-吡啶-3-基)-6-异丙胺基-吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈(化合物50)50mg，MS:m/z＝496.2[M+1] +。 1HNMR(400MHz，DMSO-d 6)δ：8.81(d,J＝16.0Hz,1H),8.51–8.32(m,3H),7.93–7.81(m,4H),7.77–7.74(m,1H),6.83(d,J＝8.00Hz,1H),6.51–6.36(m,1H),3.50(s,1H),3.2(s,1H),2.82(s,3H),1.86–1.58(m,3H),0.97(t,J＝8.00Hz,6H).
实施例51：(S)-4-(6-((1-(6-(4-氟-1H-吡唑-1-基)吡啶-3-基)乙基)(甲基)胺基)吡啶-3-基)-6-(乙胺基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈的制备
Figure PCTCN2021089064-appb-000082
步骤1：合成6-(乙胺基)-4-((4-甲氧基苄基)氧基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈
室温氮气保护下，将6-溴-4-((4-甲氧基苄基)氧基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈(1.0g,2.8mmol)、碘化亚铜(53mg,0.28mmol)、L-脯氨酸(48mg,0.42mmol)、碳酸钾(3.8g,28mmol)溶解到15mL无水DMSO当中，加入乙胺盐酸盐(2.28g,28mmol)。100℃反应过夜，反应完全，冷却到室温，EA(50mL)和水(20mL)稀释，搅拌过滤，经萃取、干燥、过滤、浓缩、柱层析(PE:EA＝3:1)得到6-(乙胺基)-4-((4-甲氧基苄基)氧基)吡唑[1,5-a]吡啶-3-甲腈(470mg)。MS m/z(ESI)：323.1[M+H] +。
步骤2：6-(乙胺基)-4-羟基吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈
室温下将6-(乙胺基)-4-((4-甲氧基苄基)氧基)吡唑[1,5-a]吡啶-3-甲腈(2.28g,7mmol)溶解到DCM 10mL当中，0℃加入三氟乙酸10mL，反应0.5h。反应完全，室温浓缩抽干，不需要进一步纯化，产物直接用于下一步。MS m/z(ESI)：203.1[M+H] +。
步骤3：合成3-氰基-6-(乙胺基)吡唑并[1,5-a]吡啶-4-基三氟甲磺酸酯
室温下将6-(乙胺基)-4-羟基吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈(1.43g,7mmol)、DIEA(2.7g,21mmol)溶解到DMF(10mL)中，0℃加入N-苯基双(三氟甲烷磺酰)亚胺(2.5g,7mmol)，室温搅拌反应0.5h。反应完全，加入水(10mL)，EA(20mL*2)萃取、干燥、过滤、浓缩、柱层析(PE:EA＝3:1)得到3-氰基-6-(乙胺基)吡唑[1,5-a]吡啶-4-基三氟甲磺酸酯(1.74g)，MS m/z(ESI)：335.1[M+H] +。
步骤4：合成(S)-6-(乙胺基)-4-(6-((1-(6-(4-氟-1H-吡唑-1-基)吡啶-3-基)乙基)(甲基)胺基)吡啶-3-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈
在室温下将3-氰基-6-(乙胺基)吡唑并[1,5-a]吡啶-4-基三氟甲磺酸酯(300mg,0.89mmol)溶于1,4-二氧六环(9mL)和水(3mL)的混合液中，依次加入(S)-N-(1-(6-(4-氟-1H-吡唑-1-基)吡啶-3-基)乙基)-N-甲基-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼杂环戊环-2-基)吡啶-2-胺(379mg,0.89mmol)、Pd 2(dba) 3(91mg,0.1mmol)、X-Phos(127mg,0.26mmol)、Na 2CO 3(185mg,1.78mmol)。反应瓶用氮气置换3次后，将反应在氮气保护条件下升温到85℃搅拌12h。TLC监测反应结束，将反应液倒于水(10mL)中，乙酸乙酯(20mL*3)萃取，合并有机相。有机相用饱和食盐水(10mL*2)洗涤，无水硫酸钠干燥，抽滤、旋蒸得粗品。粗品经快速过柱机纯化后得到(S)-6-(乙胺基)-4-(6-((1-(6-(4-氟-1H-吡唑-1-基)吡啶-3-基)乙基)(甲基)胺基)吡啶-3-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈(化合物51)80mg，MS:m/z＝482.2[M+1] +， 1H NMR(400MHz,DMSO)δ8.64(dd,J＝4.6,0.8Hz,1H),8.40–8.34(m,2H),8.32–8.26(m,1H),7.88(ddd,J＝20.0,11.9,5.0Hz,4H),7.72(dd,J＝8.8,2.5Hz,1H),7.02(d,J＝1.9Hz,1H),6.79(d,J＝8.8Hz,1H),6.25(q,J＝6.9Hz,1H),5.88(s,1H),3.03(dd,J＝6.8,4.3Hz,2H),2.79(s,3H),1.58(d,J＝7.0Hz,3H),1.08(d,J＝9.0Hz,3H).
实施例52：(S)-4-(6-((1-(6-(4-氟-1H-吡唑-1-基)吡啶-3-基)乙基)(甲基)胺基)吡啶-3-基)-6-(甲胺基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈的制备
Figure PCTCN2021089064-appb-000083
步骤1：合成4-((4-甲氧基苄基)氧基)-6-(甲胺基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈
室温氮气保护下将6-溴-4-((4-甲氧基苄基)氧基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈(500mg,1.4mmol)、碘化亚铜(40mg,0.21mmol)、L-脯氨酸(32mg,0.28mmol)、碳酸钾(1.9g,14mmol)溶解到无水DMSO(15mL)中，加入甲胺盐酸盐(940mg,14mmol)。100℃反应10小时，反应完全，冷却到室温，EA(50mL*2)萃取，加水(50mL)稀释，搅拌过滤，经分液，萃取、干燥、过滤、浓缩、柱层析(PE:EA＝3:1)，得到4-((4-甲氧基苄基)氧基)-6-(甲胺基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈(150mg)。MS m/z(ESI)：309.1[M+H] +。
步骤2：合成4-羟基-6-(甲胺基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈
室温下，将4-((4-甲氧基苄基)氧基)-6-(甲胺基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈(150mg,0.48mmol)溶解到DCM(3mL)中，0℃加入三氟乙酸(1mL)，反应0.5h。反应完全，室温浓缩抽干，不需要进一步纯化，产物直接用于下一步。MS m/z(ESI)：189.1[M+H] +。
步骤3：合成3-氰基-6-(甲胺基)吡唑并[1,5-a]吡啶-4-基三氟甲磺酸酯
将4-羟基-6-(甲胺基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈(150mg,0.8mmol)、DIEA(307mg,2.4mmol)溶解到DMF 5mL中，0℃加入N-苯基双(三氟甲烷磺酰)亚胺(286mg,0.8mmol)，室温搅拌反应0.5h。反应完全，经萃取、干燥、过滤、浓缩、柱层析(PE:EA＝3:1)，得到3-氰基-6-(甲胺基)吡唑并[1,5-a]吡啶-4-基三氟甲磺酸酯(180mg)。MS m/z(ESI)：321.3[M+H] +。
步骤4：合成(S)-4-(6-((1-(6-(4-氟-1H-吡唑-1-基)吡啶-3-基)乙基)(甲基)胺基)吡啶-3-基)-6-(甲胺基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈
在室温下，将3-氰基-6-(甲胺基)吡唑并[1,5-a]吡啶-4-基三氟甲磺酸酯(300mg,0.93mmol)溶于1,4-二氧六环(9mL)和水(3mL)的混合液中，室温下依次加入化合物(S)-N-(1-(6-(4-氟-1H-吡唑-1-基)吡啶-3-基)乙基)-N-甲基-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼杂环戊环-2-基)吡啶-2-胺(385mg,0.93mmol)、Pd 2(dba) 3(91mg,0.1mmol)、X-Phos(127mg,0.26mmol)、Na 2CO 3(190mg,1.86mmol)。反应瓶用氮气置换3次后，将反应在氮气保护条件下升温到85℃搅拌12h。TLC监测反应结束，将反应液倒于水(10mL)中，乙酸乙酯(20mL*3)萃取，合并有机相。有机相用饱和食盐水(10mL*2)洗涤，无水硫酸钠干燥，抽滤、旋蒸得粗品。粗品经快速过柱机纯化后得到(S)-4-(6-((1-(6-(4-氟-1H-吡唑-1-基)吡啶-3-基)乙基)(甲基)胺基)吡啶-3-基)-6-(甲胺基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈(化合物52)60mg，MS m/z(ESI)：468.3[M+H] +。 1H NMR(400MHz,DMSO)δ8.64(dd,1H),8.40–8.34(m,2H),8.32–8.28(m,1H),7.88(s,4H),7.72(dd,J＝8.8,2.5Hz,1H),7.02(d,J＝1.9Hz,1H),6.79(d,J＝8.8Hz,1H),6.25(q,J＝6.9Hz,1H),5.89(s,1H),2.89(s,3H),1.88(s,3H),1.28(s,3H).
实施例53：(S)-4-(6-((1-(6-(4-氟-1H-吡唑-1-基)吡啶-3-基)乙基)(甲基)胺基)吡啶-3-基)-6-(丙-2-炔-1-基氧基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈的制备
Figure PCTCN2021089064-appb-000084
步骤1：合成4-溴-6-(丙-2-炔-1-基氧基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈
将4-溴-6-羟基吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈(200mg,0.84mmol)、3-氯丙炔(189mg,2.52mmol)、碳酸铯(554.4mg,1.68mmol)溶解在3mL DMF中，反应在60℃搅拌过夜。监测反应完全后，冷却，加入水淬灭反应，EA(30mL*2)萃取，有机相水洗，干燥浓缩，柱层析得到4-溴-6-(丙-2-炔-1-基氧基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈150mg。MS m/z(ESI)：277.2[M+H] +。
步骤2：合成(S)-4-(6-((1-(6-(4-氟-1H-吡唑-1-基)吡啶-3-基)乙基)(甲基)胺基)吡啶-3-基)-6-(丙-2-炔-1-基氧基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈
氮气保护下将4-溴-6-(丙-2-炔-1-基氧基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈(150mg,0.54mmol)、(S)-N-(1-(6-(4-氟-1H-吡唑-1-基)吡啶-3-基)乙基)-N-甲基-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼杂环戊环-2-基)吡啶-2-胺(230mg,0.54mmol)、碳酸钠(172mg,1.62 mmol)、四三苯基膦钯(63mg,0.054mmol)溶解在6mL二氧六环和2mL水中，该反应90℃搅拌反应过夜。监测反应完全后，冷却，加入水淬灭反应，EA(30mL*2)萃取，有机相水洗，干燥浓缩，柱层析得到(S)-4-(6-((1-(6-(4-氟-1H-吡唑-1-基)吡啶-3-基)乙基)(甲基)胺基)吡啶-3-基)-6-(丙-2-炔-1-基氧基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈(化合物53)60mg。MS m/z(ESI)：493.2[M+H] +。 1H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ8.93(s 1H),8.71–8.64(m,2H),8.43–8.38(m,2H),7.95–7.86(m,3H),7.83(s,1H),7.47(d,J＝2.2Hz,1H),6.86–6.81(m,1H),5.34(s,1H),4.14(s,1H),2.83(s,3H),1.61(d,J＝7.0Hz,3H).
实施例54：(S)-4-(6-((1-(6-(4-氟-1H-吡唑-1-基)吡啶-3-基)乙基)(甲基)胺基)吡啶-3-基)-6-(2-甲氧基乙氧基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈的制备
Figure PCTCN2021089064-appb-000085
步骤1：合成4-溴-6-(2-甲氧基乙氧基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈
将4-溴-6-羟基吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈(200mg,0.84mmol)、2-氯乙基甲基醚(239mg,2.52mmol)、碳酸铯(554.4mg,1.68mmol)溶解在3mL DMF中，反应在60℃搅拌过夜。监测反应完全后，冷却，加入水淬灭反应，EA(30mL*2)萃取，有机相水洗，干燥浓缩，柱层析得到4-溴-6-(2-甲氧基乙氧基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈180mg，MS m/z(ESI)：297.1[M+H] +。
步骤2：合成(S)-4-(6-((1-(6-(4-氟-1H-吡唑-1-基)吡啶-3-基)乙基)(甲基)胺基)吡啶-3-基)-6-(2-甲氧基乙氧基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈
氮气保护下将4-溴-6-(2-甲氧基乙氧基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈(180mg,0.61mmol)、(S)-N-(1-(6-(4-氟-1H-吡唑-1-基)吡啶-3-基)乙基)-N-甲基-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼杂环戊环-2-基)吡啶-2-胺(256mg,0.61mmol)、碳酸钠(129mg,1.22mmol)、四三苯基膦钯(70mg,0.061mmol)溶解在6mL二氧六环和2mL水中，该反应90℃搅拌反应过夜。监测反应完全后，冷却，加入水淬灭反应，EA(30mL*2)萃取，有机相水洗，干燥浓缩，柱层析得到(S)-4-(6-((1-(6-(4-氟-1H-吡唑-1-基)吡啶-3-基)乙基)(甲基)胺基)吡啶-3-基)-6-(2-甲氧基乙氧基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈(化合物54)75mg。MS m/z(ESI)：513.5[M+H] +。 1H NMR(500MHz,DMSO)δ8.66(dd,J＝11.5,3.3Hz,2H),8.57(s,1H),8.38(dd,J＝9.9,2.3Hz,2H),7.84(ddd,J＝13.3,11.3,3.0Hz,4H),7.31(d,J＝2.0Hz,1H),6.81(d,J＝8.9Hz,1H),6.28(d,J＝7.0Hz,1H),4.27–4.17(m,2H),3.69(dd,J＝5.2,3.5Hz,2H),3.31(s,3H),2.82(s,3H),1.60(d,J＝7.0Hz,3H).
实施例55：(S)-4-(6-((1-(6-(4-氟-1H-吡唑-1-基)吡啶-3-基)乙基)(甲基)胺基)吡啶-3-基)-6-(甲氧基甲氧基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈的制备
Figure PCTCN2021089064-appb-000086
步骤1：合成4-溴-6-(甲氧基甲氧基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈
将4-溴-6-羟基吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈(200mg,0.84mmol)、2-氯甲基甲基醚(201mg,2.52mmol)、碳酸铯(554.4mg,1.68mmol)溶解在3mL DMF中，反应在60℃搅拌过夜。监测反应完全后，冷却，加入水淬灭反应，EA(30mL*2)萃取，有机相水洗，干燥浓缩，柱层析得到4-溴-6-(甲氧基甲氧基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈170mg，MS m/z(ESI)：283.1[M+H] +。
步骤2：合成(S)-4-(6-((1-(6-(4-氟-1H-吡唑-1-基)吡啶-3-基)乙基)(甲基)胺基)吡啶-3-基)-6-(甲氧基甲氧基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈
氮气保护下将4-溴-6-(甲氧基甲氧基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈(170mg,0.61mmol)、(S)-N-(1-(6-(4-氟-1H-吡唑-1-基)吡啶-3-基)乙基)-N-甲基-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼杂环戊环-2-基)吡啶-2-胺(256mg,0.61mmol)、碳酸钠(129mg,1.22mmol)、四三苯基膦钯(70mg,0.061mmol)溶解在二氧六环(6mL)和水(2mL)中，该反应90℃搅拌反应过夜。监测反应完全后，冷却，加入水淬灭反应，EA(30mL*2)萃取，有机相水洗，干燥浓缩，柱层析得到(S)-4-(6-((1-(6-(4-氟-1H-吡唑-1-基)吡啶-3-基)乙基)(甲基)胺基)吡啶-3-基)-6-(甲氧基甲氧基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈(化合物55)55mg。MS m/z(ESI)：499.4[M+H] +。 1H NMR(500MHz,DMSO)δ8.66(dd,J＝11.5,3.3Hz,2H),8.57(s,1H),8.38(dd,J＝9.9,2.3Hz,2H),7.84(ddd,J＝13.3,11.3,3.0Hz,4H),7.31(d,J＝2.0Hz,1H),6.81(d,J＝8.9Hz,1H),6.28(d,J＝7.0Hz,1H),4.27–4.17(m,2H),3.35(s,3H),2.92(s,3H),1.65(d,J＝7.0Hz,3H).
实施例56：4-(6-(((6-(4-氟-1H-吡唑-1-基)吡啶-3-基)甲基)(甲基)胺基)吡啶-3-基)-6-(2-羟基-2-甲基丙氧基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈的制备
Figure PCTCN2021089064-appb-000087
步骤1：合成((6-(4-(4-氟-1H-吡唑-1-基)吡啶-3-基)甲基)胺基甲酸叔丁酯
室温下将(6-(4-氟-1H-吡唑-1-基)吡啶-3-基)甲胺(1.5g,7.8mmol)、三乙胺(1.58g, 15.6mmol)溶解到DCM(20mL)当中，再加入Boc-酸酐(1.6g，7.8mmol)室温下搅拌反应4小时。反应完全后，加水(10mL)淬灭反应，DCM(20mL*2)萃取，有机相水洗，干燥，旋干，得到((6-(4-(4-氟-1H-吡唑-1-基)吡啶-3-基)甲基)胺基甲酸叔丁酯1.5g，MS m/z(ESI)：293.4[M+H] +。
步骤2：合成叔丁基(((6-(4-氟-1H-吡唑-1-基)吡啶-3-基)甲基)(甲基)胺基甲酸酯
室温下将((6-(4-(4-氟-1H-吡唑-1-基)吡啶-3-基)甲基)胺基甲酸叔丁酯(1.5g,5.1mmol)，溶解到THF(20mL)当中。降温至0℃，再加入慢慢加入NaH(0.25g，10.2mmol)，低温下搅拌反应半小时，加入碘甲烷(0.94g，6.6mmol)，加完后低温反应5小时。反应完全后，低温下加甲醇淬灭反应，EA(30mL*2)萃取，有机相水洗，干燥，旋干，柱层析(PE:DCM＝1:1)得到叔丁基(((6-(4-氟-1H-吡唑-1-基)吡啶-3-基)甲基)(甲基)胺基甲酸酯1.7g，MS m/z(ESI)：307.3[M+H] +。
步骤3：合成1-(6-(4-氟-1H-吡唑-1-基)吡啶-3-基)-N-甲基甲胺
将叔丁基(((6-(4-氟-1H-吡唑-1-基)吡啶-3-基)甲基)(甲基)胺基甲酸酯(1.7g，5.5mmol)溶解于少量二氯甲烷中，然后在低温下加入4N HCl/二恶烷(6mL)，室温下搅拌反应2小时。反应完全后，旋干反应液，加入石油醚搅拌析出固体，过滤得到1-(6-(4-氟-1H-吡唑-1-基)吡啶-3-基)-N-甲基甲胺0.9g，MS m/z(ESI)：207.2[M+H] +。
步骤4：合成5-溴-N-(((6-(4-氟-1H-吡唑-1-基)吡啶-3-基)甲基)-N-甲基吡啶-2-胺
将1-(6-(4-氟-1H-吡唑-1-基)吡啶-3-基)-N-甲基甲胺(0.9g,4.3mmol)、2-氟-5-溴吡啶(3.8g,21.7mmol)和碳酸铯(4.1g,12.9mmol)加入到单口瓶中，加入DMSO(25mL)，加热130℃反应40小时。反应完全后，加水(10mL)淬灭反应，DCM(30mL*2)萃取，有机相水洗，干燥，旋干，柱层析(PE:DCM＝1:1)，得到5-溴-N-(((6-(4-氟-1H-吡唑-1-基)吡啶-3-基)甲基)-N-甲基吡啶-2-胺0.6g，MS m/z(ESI)：363.2[M+H] +。
步骤5：合成N-(((6-(4-氟-1H-吡唑-1-基)吡啶-3-基)甲基)-N-甲基-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼杂环戊烷-2-基)吡啶-2-胺
室温下将5-溴-N-(((6-(4-氟-1H-吡唑-1-基)吡啶-3-基)甲基)-N-甲基吡啶-2-胺(0.6g,1.65mmol)、联硼酸频那醇酯(0.84g,3.3mmol)、Pd(dppf)Cl 2CH 2Cl 2(0.13g,0.1mmol)、KOAc(0.97g,9.9mmol)溶解到二氧六环中(15mL)，90℃反应6h。真空减压浓缩移除溶剂，NaHCO 3稀释、萃取、干燥、过滤、浓缩、柱层析得到N-(((6-(4-氟-1H-吡唑-1-基)吡啶-3-基)甲基)-N-甲基-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼杂环戊烷-2-基)吡啶-2-胺0.45g，MS m/z(ESI)：410.1[M+H] +。
步骤6：合成4-(6-(((6-(4-氟-1H-吡唑-1-基)吡啶-3-基)甲基)(甲基)胺基)吡啶-3-基)-6-(2-羟基-2-甲基丙氧基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈
室温氮气保护下下将4-溴-6-(2-羟基-2-甲基丙氧基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈(0.24g,0.77mmol)、N-(((6-(4-氟-1H-吡唑-1-基)吡啶-3-基)甲基)-N-甲基-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼杂环戊烷-2-基)吡啶-2-胺(0.48g,1.17mmol)、Pd(PPh 3) 4(0.01g,0.076 mmol)、Na 2CO 3(0.33g,3.05mmol)溶解在二氧六环(15mL)和水(5mL)中，100℃搅拌反应5h。冷却到室温，加水淬灭、经萃取、水洗、干燥，柱层析得到4-(6-(((6-(4-氟-1H-吡唑-1-基)吡啶-3-基)甲基)(甲基)胺基)吡啶-3-基)-6-(2-羟基-2-甲基丙氧基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈(化合物56)90mg，MS m/z(ESI)：513.3[M+H] +1H NMR(500MHz,DMSO)δ8.68–8.61(m,2H),8.55(s,1H),8.37(dd,J＝18.8,2.0Hz,2H),7.97–7.81(m,3H),7.78(dd,J＝8.8,2.5Hz,1H),7.30(d,J＝2.0Hz,1H),6.82(d,J＝8.8Hz,1H),4.94(s,2H),3.86(s,2H),3.11(s,3H),1.22(s,6H).
实施例57：4-(6-(乙基((6-(4-(4-氟-1H-吡唑-1-基)吡啶-3-基)甲基)胺基)吡啶-3-基)-6-(2-羟基-2-甲基丙氧基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈的制备
Figure PCTCN2021089064-appb-000088
步骤1：合成叔丁基乙基((6-(4-氟-1H-吡唑-1-基)吡啶-3-基)甲基)胺基甲酸酯
室温下将((6-(4-(4-氟-1H-吡唑-1-基)吡啶-3-基)甲基)胺基甲酸叔丁酯(2.0g,6.8mmol)，溶解到THF(20mL)当中，然后降温至0℃，慢慢加入NaH(0.33g,13.6mmol)，低温下搅拌反应半小时，然后再加入碘乙烷(1.3g,8.8mmol)，加完后低温反应5小时，反应完全后，低温下加甲醇淬灭反应，EA(30mL*2)萃取，有机相水洗，干燥，旋干，柱层析(PE:DCM＝1:1)得到叔丁基乙基((6-(4-氟-1H-吡唑-1-基)吡啶-3-基)甲基)胺基甲酸酯1.8g，MS m/z(ESI)：321.5[M+H] +。
步骤2：合成N-((6-(4-氟-1H-吡唑-1-基)吡啶-3-基)甲基乙胺
将叔丁基乙基((6-(4-氟-1H-吡唑-1-基)吡啶-3-基)甲基)胺基甲酸酯(1.8g,5.6mmol)溶解于少量二氯甲烷中，然后在低温下加入4N HCl/二恶烷(6mL)，室温下搅拌反应2小时，反应完全后，旋干反应液，加入石油醚搅拌析出固体，过滤得到N-((6-(4-氟-1H-吡唑-1-基)吡啶-3-基)甲基乙胺1.1g，MS m/z(ESI)：221.2[M+H] +。
步骤3：合成5-溴-N-乙基-N-(((6-(4-氟-1H-吡唑-1-基)吡啶-3-基)甲基)吡啶-2-胺
将N-((6-(4-氟-1H-吡唑-1-基)吡啶-3-基)甲基乙胺(0.9g,5.0mmol)、2-氟-5-溴吡啶(4.4g,25.0mmol)和碳酸铯(4.9g,15.0mmol)加入到单口瓶中，加入DMSO(25mL)，加热130℃反应40小时。反应完全后，加水(10mL)淬灭反应，DCM(30mL*2)萃取，有机相水洗，干燥，旋干，柱层析(PE:DCM＝1:1)，得到5-溴-N-乙基-N-(((6-(4-氟-1H- 吡唑-1-基)吡啶-3-基)甲基)吡啶-2-胺0.8g，MS m/z(ESI)：377.2[M+H] +。
步骤4：合成N-乙基-N-(((6-(4-氟-1H-吡唑-1-基)吡啶-3-基)甲基)-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼杂环戊烷-2-基)吡啶-2-胺
室温下将5-溴-N-乙基-N-(((6-(4-氟-1H-吡唑-1-基)吡啶-3-基)甲基)吡啶-2-胺(0.8g,2.1mmol)、联硼酸频那醇酯(1.0g,4.2mmol)、Pd(dppf)Cl 2CH 2Cl 2(0.26g,0.2mmol)、KOAc(0.97g,9.9mmol)溶解到二氧六环中(20mL)，90℃反应6h。真空减压浓缩移除溶剂，NaHCO 3稀释、萃取、干燥、过滤、浓缩、柱层析得到N-乙基-N-(((6-(4-氟-1H-吡唑-1-基)吡啶-3-基)甲基)-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼杂环戊烷-2-基)吡啶-2-胺0.5g，MS m/z(ESI)：424.1[M+H] +。
步骤5：合成4-(6-(乙基((6-(4-(4-氟-1H-吡唑-1-基)吡啶-3-基)甲基)胺基)吡啶-3-基)-6-(2-羟基-2-甲基丙氧基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈
室温氮气保护下将4-溴-6-(2-羟基-2-甲基丙氧基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈(0.3g,0.97mmol)、N-乙基-N-(((6-(4-氟-1H-吡唑-1-基)吡啶-3-基)甲基)-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼杂环戊烷-2-基)吡啶-2-胺(0.5g,1.2mmol)、Pd(PPh 3) 4(0.015g,0.1mmol)、Na 2CO 3(0.32g,3.0mmol)溶解在二氧六环(15mL)和水(5mL)中，100℃搅拌反应5h。冷却到室温，加水淬灭、经萃取、水洗、干燥，柱层析得到4-(6-(乙基((6-(4-(4-氟-1H-吡唑-1-基)吡啶-3-基)甲基)胺基)吡啶-3-基)-6-(2-羟基-2-甲基丙氧基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈(化合物57)70mg，MS m/z(ESI)：527.5[M+H] +1H NMR(500MHz,DMSO)δ8.65(dd,J＝6.8,1.4Hz,2H),8.56(s,1H),8.40(d,J＝1.7Hz,1H),8.34(d,J＝2.4Hz,1H),7.96–7.86(m,2H),7.85(s,1H),7.76(dd,J＝8.8,2.5Hz,1H),7.30(d,J＝2.1Hz,1H),6.80(d,J＝8.8Hz,1H),4.89(s,2H),3.86(s,2H),3.62(d,J＝7.0Hz,2H),1.21(s,6H),1.14(t,J＝7.0Hz,3H).
实施例58：(S)-4-(6-((1-(6-(1H-吡唑-1-基)吡啶-3-基)乙基)(甲基)胺基)吡啶-3-基)-6-(2-羟基-2-甲基丙氧基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈的制备
Figure PCTCN2021089064-appb-000089
步骤1：合成1-(6-(1H-吡唑-1-基)吡啶-3-基)乙-1-酮
室温下将2-氯-5-乙酰基吡啶(4.0g,25.8mmol)、吡唑(1.75g,25.8mmol)和K 2CO 3(7.1g,51.6mmol)溶解到DMF(40mL)中，90℃搅拌过夜。冷却到室温，加水(50mL)稀释，经萃取、干燥、过滤、浓缩、柱层析得到得到1-(6-(1H-吡唑-1-基)吡啶-3-基)乙-1-酮4.1g，MS m/z(ESI)：188.2[M+H] +。
步骤2：合成(R)-N-((S)-1-(6-(1H-吡唑-1-基)吡啶-3-基)乙基)-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺
室温下，反应瓶中加入(R)-2-甲基丙烷-2-磺酰亚胺(1.6g,12.7mmol)和1-(6-(1H-吡唑-1-基)吡啶-3-基)乙-1-酮(2.0g,10.6mmol)、THF(50mL)，然后滴加钛酸四乙酯(4.9g,21.2mmol)，75℃反应16小时。将反应液冷却至-78℃，缓慢滴加L-selectride(21.2mL，21.2mmol)，滴加完毕，-78℃反应3h。加水(50mL)，EA(200mL)充分搅拌后过滤、萃取、无水硫酸钠干燥、过滤，浓缩得粗品，柱层析纯化得(R)-N-((S)-1-(6-(1H-吡唑-1-基)吡啶-3-基)乙基)-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺2.5g，MS m/z(ESI)：293.3[M+H] +。
步骤3：合成(S)-1-(6-(1-(1-H-吡唑-1-基)吡啶-3-基)乙-1-胺
室温下，将(R)-N-((S)-1-(6-(1H-吡唑-1-基)吡啶-3-基)乙基)-2-甲基丙烷-2-亚磺酰胺(4.0g,13.6mmol)溶解到DCM(20mL)中，加入HCl/Dioxane(20mL，4M)，室温反应1h。真空减压浓缩移除溶剂，NaHCO 3碱化，萃取、干燥、过滤、浓缩得到(S)-1-(6-(1-(1-H-吡唑-1-基)吡啶-3-基)乙-1-胺2.3g，MS m/z(ESI)：189.5[M+H] +。
步骤4：合成(S)-(1-(1-(6-(1H-吡唑-1-基)吡啶-3-基)乙基)胺基甲酸叔丁酯
室温下将(S)-1-(6-(1-(1H-吡唑-1-基)吡啶-3-基)乙-1-胺(2.3g,12.2mmol)、三乙胺(2.5g,24.4mmol)溶解到20mL DCM中，加入二碳酸二叔丁酯(3.0g,13.5mmol)，室温搅拌5h。经萃取、干燥、过滤、浓缩、柱层析，得到(S)-(1-(1-(6-(1H-吡唑-1-基)吡啶-3-基)乙基)胺基甲酸叔丁酯4.6g，MS m/z(ESI)：289.4[M+H] +。
步骤5：合成(S)-(1-(6-(1-(6-H-吡唑-1-基)吡啶-3-基)乙基)(甲基)胺基甲酸叔丁酯
室温下将(S)-(1-(1-(6-(1H-吡唑-1-基)吡啶-3-基)乙基)胺基甲酸叔丁酯(2.0g,6.9mmol)溶解到THF(20mL)中，0℃加钠氢(0.32g,13.8mmol)，保温反应0.5h。加入碘甲烷(1.3g，9.0mmol)，0℃继续反应4h。反应完全后加水(20mL)淬灭，经萃取、干燥、过滤、浓缩、柱层析，得到(S)-(1-(6-(1-(6H-吡唑-1-基)吡啶-3-基)乙基)(甲基)胺基甲酸叔丁酯1.8g。
步骤6：合成(S)-1-(6-(1H-吡唑-1-基)吡啶-3-基)-N-甲基-1-胺
室温下将(S)-(1-(6-(1-(6H-吡唑-1-基)吡啶-3-基)乙基)(甲基)胺基甲酸叔丁酯(1.8g,6.0mmol)溶解到DCM(5mL)中，然后加入HCl/Dioxane(10mL,4M)，室温反应1h。反应完真空减压浓缩移除溶剂，NaHCO 3稀释，萃取、干燥、过滤、浓缩、柱层析，得到(S)-1-(6-(1H-吡唑-1-基)吡啶-3-基)-N-甲基-1-胺0.9g，MS m/z(ESI)：203.6[M+H] +。
步骤7：合成(S)-N-(1-(6-(6-(1H-吡唑-1-基)吡啶-3-基)乙基)-5-溴-N-甲基吡啶-2- 胺
室温下将(S)-1-(6-(1H-吡唑-1-基)吡啶-3-基)-N-甲基-1-胺(0.9g,4.5mmol)、5-溴-2-氟吡啶(3.9g,22.5mmol)、K 2CO 3(1.9g,13.5mmol)溶解到DMSO(10mL)，140℃反应30h。冷却到室温，水稀释、萃取、干燥、过滤、浓缩、柱层析，得到(S)-N-(1-(6-(6-(1H-吡唑-1-基)吡啶-3-基)乙基)-5-溴-N-甲基吡啶-2-胺0.5g，MS m/z(ESI)：359.3[M+H] +。
步骤8：合成(S)-N-(1-(6-(6-(1H-吡唑-1-基)吡啶-3-基)乙基)-N-甲基-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧杂硼烷-2-基)吡啶-2-胺
室温下将(S)-N-(1-(6-(6-(1H-吡唑-1-基)吡啶-3-基)乙基)-5-溴-N-甲基吡啶-2-胺(0.5g,1.4mmol)、联硼酸频那醇酯(0.7g,2.8mmol)、Pd(dppf)ClCH 2Cl 2(90mg,0.14mmol)、KOAc(0.27g,2.8mmol)溶解到二氧六环(15mL)中，90℃反应12h。真空减压浓缩移除溶剂，NaHCO 3稀释，经萃取、干燥、过滤、浓缩、柱层析，得到(S)-N-(1-(6-(6-(1H-吡唑-1-基)吡啶-3-基)乙基)-N-甲基-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼杂环戊烷-2-基)吡啶-2-胺0.3g，MS m/z(ESI)：406.1[M+H] +。
步骤9：合成(S)-4-(6-((1-(6-(1H-吡唑-1-基)吡啶-3-基)乙基)(甲基)胺基)吡啶-3-基)-6-(2-羟基-2-甲基丙氧基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈
室温氮气保护下将4-溴-6-(2-羟基-2-甲基丙氧基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈(0.2g,0.65mmol)、(S)-N-(1-(6-(6-(1H-吡唑-1-基)吡啶-3-基)乙基)-N-甲基-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼杂环戊烷-2-基)吡啶-2-胺(0.27g,0.65mmol)、Pd(PPh 3) 4(0.07g,0.065mmol)、Na 2CO 3(0.18g,1.65mmol)溶解在二氧六环:水＝5:1的混合溶液(12mL)中，85℃搅拌反应12h。冷却到室温，加水淬灭、经萃取、水洗、干燥，柱层析得到(S)-4-(6-((1-(6-(1H-吡唑-1-基)吡啶-3-基)乙基)(甲基)胺基)吡啶-3-基)-6-(2-羟基-2-甲基丙氧基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈(化合物58)65mg，MS m/z(ESI)：509.2[M+H] +。 1H NMR(400MHz,DMSO)δ8.78(s,1H),8.65(s,1H),8.50(s,1H),8.18(d,1H),7.80-7.90(m,3H),7.50-7.66(m,2H),7.32(s,1H),6.81(d,1H),6.28(d,1H),6.03(d,1H),5.57(s,1H),3.87(s,2H),2.83(s,3H),1.61(s,3H),1.23(s,6H)。
实施例59：(S)-N-((1-(6-(4-氟-1H-吡唑-1-基)吡啶-3-基)乙基)(甲基)胺)-吡啶-3-基)-6-(吡咯烷-1-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈的制备
Figure PCTCN2021089064-appb-000090
步骤1.合成4-(4-甲氧基苄氧基)-6-(吡咯烷-1-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈
在室温下将6-溴-4-(4-甲氧基苄氧基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈(800mg,2.23mmol)溶于DMSO(5mL)中，依次加入四氢吡咯(900uL,11.6mmol)、CuI(43mg,0.223mmol)、L-proline(52mg,0.446mmol)、K 3PO 4(958mg,4.86mmol)。反应瓶用氮气置换3次后，将反应在氮气保护条件下升温到115℃搅拌12h。TLC(石油醚/乙酸乙酯＝5/1，R f1＝0.55，R f2＝0.25)监测反应结束，将反应液倒于水(100mL)中，然后乙酸乙酯(80mL*2)萃取，合并有机相。有机相用饱和食盐水(50mL*2)洗涤，无水硫酸钠干燥，抽滤、旋蒸得粗品。粗品经快速过柱机(石油醚：乙酸乙酯＝20/1～5/1)纯化后得到4-(4-甲氧基苄氧基)-6-(吡咯烷-1-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈(155mg)，收率19.1％。MS:m/z＝349.1[M+1] +。
步骤2.合成4-羟基-6-(吡咯烷-1-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈
在室温下将4-(4-甲氧基苄氧基)-6-(吡咯烷-1-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈(155mg,0.445mmol)溶于二氯甲烷(2mL)，滴加TFA(0.5mL)。反应液室温下搅拌0.5h，TLC(石油醚/乙酸乙酯＝2/1，R f1＝0.80，R f2＝0.1)和LCMS监测。反应结束后将反应液浓缩，油泵拉干得粗品4-羟基-6-(吡咯烷-1-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈，粗品直接用于下一步反应。MS:m/z＝229.0[M+1] +。
步骤3.合成3-氰基-6-(吡咯烷-1-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-4-三氟甲基磺酸酯
在室温下将上步所得粗品4-羟基-6-(吡咯烷-1-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈溶于DMF(3mL)，向反应液中加入DIPEA(400μL)和1,1,1-三氟-N-苯基-N-((三氟甲基)磺酰)甲磺酰胺(344mg,0.963mmol)。反应液在室温下搅拌1h,TLC(石油醚/乙酸乙酯＝5/1，R f1＝0.15，R f2＝0.6)监测反应结束。将反应倒入水(50mL)中，用乙酸乙酯(30mL*2)萃取，合并有机相。有机相用饱和食盐水(30mL*2)洗涤，无水硫酸钠干燥，抽滤、旋蒸得粗品。粗品经快速过柱机(石油醚：乙酸乙酯＝20/1～5/1)纯化后得到3-氰基-6-(吡咯烷-1-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-4-三氟甲基磺酸酯(95mg,0.246mmol，两步收率59.3％)。MS:m/z＝360.9[M+1] +。
步骤4.合成(S)-N-((1-(6-(4-氟-1H-吡唑-1-基)吡啶-3-基)乙基)(甲基)胺)-吡啶-3-基)-6-(吡咯烷-1-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈
在室温下将3-氰基-6-(吡咯烷-1-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-4-三氟甲基磺酸酯(130mg,0.361mmol)溶于1,4-二氧六环(3mL)和水(0.6mL)的混合液中，室温下依次加入(S)-N-(1-(6-(4-氟-1H-吡唑-1-基)吡啶-3-基)乙基)-N-甲基-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼杂环戊环-2-基)吡啶-2-胺(230mg,0.541mmol)、Pd 2(dba) 3(66mg,0.072mmol)、X-Phos(138mg,0.289mmol)、Na 2CO 3(76.5mg,0.722mmol)。反应瓶用氮气置换3次后，将反应在氮气保护条件下升温到85℃搅拌12h。TLC(石油醚/乙酸乙酯＝5/1，R f1＝0.7，R f2＝0.45)和LCMS监测反应结束，将反应液倒于水(50mL)中，乙酸乙酯(30mL*2)萃取，合并有机相。有机相用饱和食盐水(30mL*2)洗涤，无水硫酸钠干燥，抽滤、旋蒸得粗品。粗品用快速过柱机过柱(石油醚：乙酸乙酯＝20/1～5/1)，纯化后得到 (S)-N-((1-(6-(4-氟-1H-吡唑-1-基)吡啶-3-基)乙基)(甲基)胺)-吡啶-3-基)-6-(吡咯烷-1-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈(化合物59)8mg(纯度92.5％)。MS:m/z＝508.1[M+1] +， 1HNMR(400MHz,DMSO-d 6)δ：8.67(d,J＝4.00Hz,1H),8.43–8.38(m,3H),8.07–8.02(m,1H),7.94–7.87(m,3H),7.83–7.80(m,1H),7.18–7.14(m,1H),6.84(d,J＝8.00Hz,1H),6.30–6.28(m,1H),2.84(s,3H),2.0–1.96(m,4H),1.63(d,J＝8.00Hz,3H),1.33–1.23(m,4H).
实施例60：(S)-N-((1-(6-(4-氟-1H-吡唑-1-基)吡啶-3-基)乙基)(甲基)胺)-吡啶-3-基)-6-丙胺基-吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈的制备
Figure PCTCN2021089064-appb-000091
步骤1.合成4-(4-甲氧基苄氧基)-6-(丙胺基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈
在室温下将6-溴-4-(4-甲氧基苄氧基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈(800mg,2.23mmol)溶于DMSO(5mL)中，依次加入丙胺(918μL,11.2mmol)、CuI(43mg,0.223mmol)、L-proline(52mg,0.446mmol)、K 3PO 4(950mg,4.27mmol)。反应瓶用氮气置换3次后，将反应在氮气保护条件下升温到115℃搅拌12h。TLC(石油醚/乙酸乙酯＝5/1，R f1＝0.55，R f2＝0.3)监测反应结束，将反应液倒于水(100mL)中，然后乙酸乙酯(50mL*3)萃取，合并有机相。有机相用饱和食盐水(50mL*2)洗涤，无水硫酸钠干燥，抽滤、旋蒸得粗品。粗品经快速过柱机(石油醚：乙酸乙酯＝20/1～5/1)纯化后得到4-(4-甲氧基苄氧基)-6-(丙胺基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈(320mg,0.951mmol，收率42.6％)。MS:m/z＝337.0[M+1] +。
步骤2.合成4-羟基-6-(丙胺基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈
在室温下将化合物4-(4-甲氧基苄氧基)-6-(丙胺基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈(320mg,0.951mmol)溶于二氯甲烷(8mL)，然后滴加TFA(2mL)。反应液室温下搅拌0.5h，TLC(石油醚/乙酸乙酯＝1/1，R f2＝0.5，R f3＝0.1)和LCMS监测反应结束。将反应液浓缩，油泵拉干得粗品4-羟基-6-(丙胺基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈，粗品直接用于下一步反应。MS:m/z＝217.0[M+1] +。
步骤3.合成3-氰基-6-丙胺基吡唑并[1,5-a]吡啶-4-三氟甲基磺酸酯
在室温下将上步所得粗品4-羟基-6-(丙胺基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈溶于DMF(3.00mL)，向反应液中加入DIPEA(314μL)和化合物1,1,1-三氟-N-苯基-N-((三氟甲基)磺酰)甲磺酰胺(408mg,1.14mmol)。反应液在室温下搅拌1h，TLC(石油醚/乙酸乙酯＝5/1，R f3＝0.1，R f4＝0.5)监测反应结束。将反应倒入水(100mL)中，用乙酸乙 酯(50mL*2)萃取，合并有机相。有机相用饱和食盐水(100mL*2)洗涤，无水硫酸钠干燥，抽滤、旋蒸得粗品。粗品经快速过柱机(石油醚：乙酸乙酯＝20/1～5/1)纯化后得到3-氰基-6-丙胺基吡唑并[1,5-a]吡啶-4-三氟甲基磺酸酯280mg(纯度75.0％，两步收率63.3％)。LCMS:m/z＝348.9[M+1] +。
步骤4.合成(S)-N-((1-(6-(4-氟-1H-吡唑-1-基)吡啶-3-基)乙基)(甲基)胺)-吡啶-3-基)-6-丙胺基-吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈
在室温下将3-氰基-6-丙胺基吡唑并[1,5-a]吡啶-4-三氟甲基磺酸酯(280mg,0.603mmol)溶于1,4-二氧六环(6mL)和水(2mL)的混合液中，室温下依次加入(S)-N-(1-(6-(4-氟-1H-吡唑-1-基)吡啶-3-基)乙基)-N-甲基-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼杂环戊环-2-基)吡啶-2-胺(443mg,1.05mmol)、Pd 2(dba) 3(160mg,0.17mmol)、X-Phos(333mg,0.70mmol)、Na 2CO 3(185mg,1.74mmol)。反应瓶用氮气置换3次后，将反应在氮气保护条件下升温到85℃搅拌12h。TLC(石油醚/乙酸乙酯＝3/1，R f4＝0.7，R fT＝0.3)和LCMS监测反应结束，将反应液倒于水(100mL)中，乙酸乙酯(50mL*3)萃取，合并有机相。有机相用饱和食盐水(100mL*2)洗涤，无水硫酸钠干燥，抽滤、旋蒸得粗品。粗品经快速过柱机(石油醚：乙酸乙酯＝10/1～2/1)纯化后得到(S)-N-((1-(6-(4-氟-1H-吡唑-1-基)吡啶-3-基)乙基)(甲基)胺)-吡啶-3-基)-6-丙胺基-吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈(化合物60)80mg(收率26.8％，纯度93.45％)，MS:m/z＝496.1[M+1] +。 1HNMR(400MHz,DMSO-d 6)δ：8.71(d,J＝16.0Hz,1H),8.41–8.32(m,3H),7.93–7.88(m,4H),7.77–7.74(m,1H),6.83(d,J＝8.00Hz,1H),6.31–6.26(m,1H),3.00(t,J＝8.00Hz,2H),2.82(s,3H),1.86–1.58(m,5H),0.97(t,J＝8.00Hz,3H).
实施例61：(S)-4-(6-((1-(6-(4-氟-1H-吡唑-1-基)吡啶-3-基)乙基)(甲基)胺基)吡啶-3-基)-6-(2-羟基-2-甲基丙氧基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈的制备
Figure PCTCN2021089064-appb-000092
步骤1：合成(S)-4-(6-((1-(6-(4-氟-1H-吡唑-1-基)吡啶-3-基)乙基)(甲基)胺基)吡啶-3-基)-6-(2-羟基-2-甲基丙氧基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈
将4-溴-6-(2-羟基-2-甲基丙氧基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈(200mg,0.65mmol)、碳酸钠(205mg,1.93mmol)、(S)-N-(1-(6-(4-氟-1H-吡唑-1-基)吡啶-3-基)乙基)-N-甲基-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼杂环戊烷-2-基)吡啶-2-胺(409mg,0.97mmol)和四(三苯基膦)钯(115mg,0.1mmol)溶解在二氧六环：水(15mL:5mL)中,该反应液在90℃反应6h。监测反应完全后，冷却，加入水淬灭反应，EA(20mL*3)萃取，经有机相水洗、干燥浓缩、柱层析得到(S)-4-(6-((1-(6-(4-氟-1H-吡唑-1-基)吡啶-3-基)乙基)(甲基) 胺基)吡啶-3-基)-6-(2-羟基-2-甲基丙氧基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈(化合物61)50mg。MS m/z(ESI)：527.3[M+H] +。 1H NMR(400MHz,DMSO)δ8.70–8.61(m,2H),8.57(s,1H),8.38(dd,J＝8.0,2.3Hz,2H),7.84(ddd,J＝12.8,11.4,3.4Hz,4H),7.31(d,J＝2.0Hz,1H),6.81(d,J＝8.9Hz,1H),6.29(d,J＝6.9Hz,1H),3.86(s,2H),2.81(s,3H),1.60(d,J＝7.0Hz,3H),1.21(s,6H).
实施例62：(S)-6-(2-羟基-2-甲基丙氧基)-4-(6-(甲基(1-(6-(吡咯烷基-1-基)吡啶-3-基)乙基)胺基)吡啶-3-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈的制备
Figure PCTCN2021089064-appb-000093
步骤1:合成1-(6-(吡咯烷-1-基)吡啶-3-基)乙-1-酮
室温下，将2-氯-5-乙酰基吡啶(2.0g,12.9mmol)、四氢吡咯(2.7g,38.7mmol)和K 2CO 3(3.6g,25.8mmol)溶解到DMF(20mL)当中，80℃搅拌过夜。反应完全后冷却到室温，加水(20mL)淬灭，经萃取、干燥、过滤、浓缩、柱层析得到1-(6-(吡咯烷-1-基)吡啶-3-基)乙-1-酮1.8g，MS m/z(ESI)：191.4[M+H] +。
步骤2：合成2-甲基-N-((S)-1-(6-(吡咯烷-1-基)吡啶-3-基)乙基)丙烷-2-亚磺酰胺
室温下，在反应瓶中加入(R)-2-甲基丙烷-2-磺酰亚胺(1.2g,9.4mmol)和1-(6-(吡咯烷-1-基)吡啶-3-基)乙-1-酮(1.8g,9.4mmol)、THF(20mL)，加入钛酸四乙酯(4.3g,18.8mmol)，滴加完毕后升至75℃反应16小时。将反应液冷却至-78℃，缓慢滴加L-selectride(18.8mL,18.8mmol)，滴加完毕，升至室温反应15分钟。然后在-50℃甲醇淬灭，加水(20mL)，EA(60mL)充分搅拌后过滤、萃取、无水硫酸钠干燥、过滤，浓缩得粗品，柱层析纯化得2-甲基-N-((S)-1-(6-(吡咯烷-1-基)吡啶-3-基)乙基)丙烷-2-亚磺酰胺2.0g,MS m/z(ESI)：296.1[M+H] +。
步骤3：合成N,2-二甲基-N-((S)-1-(6-(吡咯烷基-1-基)吡啶-3-基)乙基)丙烷-2-亚磺酰胺
室温下将2-甲基-N-((S)-1-(6-(吡咯烷-1-基)吡啶-3-基)乙基)丙烷-2-亚磺酰胺(2.0g,6.75mmol)溶解到THF(20mL)，降温至-78℃，向体系中慢慢滴加双三甲基硅基胺基锂(8.25mmol)，低温下搅拌半小时，再缓慢滴加MeI(1.17g,8.25mmol)，-78℃反应1h。加水(30mL)淬灭反应，经萃取、干燥、过滤、浓缩、柱层析得到N,2-二甲基 -N-((S)-1-(6-(吡咯烷基-1-基)吡啶-3-基)乙基)丙烷-2-亚磺酰胺1.5g，MS m/z(ESI)：310.2[M+H] +。
步骤4：合成(S)-N-甲基-1-(6-(吡咯烷基-1-基)吡啶-3-基)乙-1-胺
室温下，将N,2-二甲基-N-((S)-1-(6-(吡咯烷基-1-基)吡啶-3-基)乙基)丙烷-2-亚磺酰胺(1.5g,4.8mmol)溶解到MeOH(2mL)中，然后加入HCl/Dioxane(6mL,4M)，室温反应1h。真空减压浓缩移除溶剂，NaHCO 3淬灭，经萃取、干燥、过滤、浓缩、柱层析得到(S)-N-甲基-1-(6-(吡咯烷基-1-基)吡啶-3-基)乙-1-胺0.8g，MS m/z(ESI)：206.3[M+H] +。
步骤5：合成(S)-5-溴-N-甲基-N-(1-(6-(吡咯烷-1-基)吡啶-3-基)乙基)吡啶-2-胺
室温下，将(S)-N-甲基-1-(6-(吡咯烷基-1-基)吡啶-3-基)乙-1-胺(0.8g,3.8mmol)、5-溴-2-氟吡啶(3.4g,19mmol)、K 2CO 3(1.6g,11.4mmol)溶解到DMSO(10mL)，140℃反应24h。冷却到室温，水稀释、萃取、干燥、过滤、浓缩、柱层析得到得到(S)-5-溴-N-甲基-N-(1-(6-(吡咯烷-1-基)吡啶-3-基)乙基)吡啶-2-胺0.7g，MS m/z(ESI)：362[M+H] +。
步骤6：合成(S)-N-甲基-N-(1-(6-(吡咯烷-1-基)吡啶-3-基)乙基)-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼杂环戊烷-2-基)吡啶-2-胺
室温下将(S)-5-溴-N-甲基-N-(1-(6-(吡咯烷-1-基)吡啶-3-基)乙基)吡啶-2-胺(0.7g,1.9mmol)、联硼酸频那醇酯(0.74g,2.9mmol)、Pd(dppf)ClCH 2Cl 2(155mg,0.19mmol)、KOAc(559mg,5.7mmol)溶解到Dioxane(15mL)，90℃反应6h。真空减压浓缩移除溶剂，NaHCO 3稀释、萃取、干燥、过滤、浓缩、柱层析得到(S)-N-甲基-N-(1-(6-(吡咯烷-1-基)吡啶-3-基)乙基)-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼杂环戊烷-2-基)吡啶-2-胺0.4g，MS m/z(ESI)：409.2[M+H] +。
步骤7：合成(S)-6-(2-羟基-2-甲基丙氧基)-4-(6-(甲基(1-(6-(吡咯烷基-1-基)吡啶-3-基)乙基)胺基)吡啶-3-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈
氮气保护室温下，将4-溴-6-(2-羟基-2-甲基丙氧基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈(200mg,0.65mmol)、(S)-N-甲基-N-(1-(6-(吡咯烷-1-基)吡啶-3-基)乙基)-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼杂环戊烷-2-基)吡啶-2-胺(400mg,0.97mmol)、Pd(PPh 3) 4(76mg,0.065mmol)、Na 2CO 3(207mg,1.95mmol)溶解在1,4-dioxane:H 2O＝5:1(12mL)中，90℃搅拌反应8h。冷却到室温，加水淬灭、经萃取、水洗、干燥，柱层析得到(S)-6-(2-羟基-2-甲基丙氧基)-4-(6-(甲基(1-(6-(吡咯烷基-1-基)吡啶-3-基)乙基)胺基)吡啶-3-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-碳腈(化合物62)80mg. 1H NMR(300MHz,DMSO)δ8.64(d,J＝1.9Hz,1H),8.56(s,1H),8.35(d,J＝2.3Hz,1H),8.01(d,J＝2.1Hz,1H),7.76(dd,J＝8.8,2.5Hz,1H),7.38(dd,J＝8.7,2.3Hz,1H),7.29(d,J＝1.9Hz,1H),6.75(d,J＝8.9Hz,1H),6.37(d,J＝8.7Hz,1H),6.07(d,J＝6.8Hz,1H),3.86(s,2H),3.32(d,J＝6.3Hz,4H),2.71(s,3H),1.90(t,J＝6.4Hz,4H),1.47(d,J＝6.9Hz,3H),1.21(s,6H).
实施例63：(S)-6-(2-羟基-2-甲基丙氧基)-4-(6-(甲基(1-(6-(6-甲基吡啶-3-基)乙基)胺基)吡啶-3-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈的制备
Figure PCTCN2021089064-appb-000094
步骤1：合成2-甲基-N-((S)-1-(6-甲基吡啶-3-基)乙基)丙烷-2-亚磺酰胺
室温下，在反应瓶中加入(R)-2-甲基丙烷-2-磺酰亚胺(1.8g,14.8mmol)和2-甲基-5-乙酰基吡啶(2.0g,14.8mmol)、THF(20mL)，加入钛酸四乙酯(6.7g,29.6mmol)，滴加完毕后升至75℃反应16小时。将反应液冷却至-78℃，缓慢滴加L-selectride(30mL,29.6mmol)，滴加完毕，升至室温反应15分钟。然后在-50℃甲醇淬灭，加水(20mL)，EA(60mL)充分搅拌后过滤、萃取、无水硫酸钠干燥、过滤，浓缩得粗品，柱层析纯化得2-甲基-N-((S)-1-(6-甲基吡啶-3-基)乙基)丙烷-2-亚磺酰胺2.6g,MS m/z(ESI)：241.1[M+H] +。
步骤2：合成N,2-二甲基-N-((S)-1-(6-甲基吡啶-3-基)乙基)丙烷-2-亚磺酰胺
室温下将2-甲基-N-((S)-1-(6-甲基吡啶-3-基)乙基)丙烷-2-亚磺酰胺(2.6g,10.8mmol)溶解到THF(20mL)，然后降温至-78℃，缓慢滴加双三甲基硅基胺基锂(10.8mmol)，低温下搅拌半小时，再缓慢滴加MeI(1.5g,10.8mmol),-78℃反应1h。加水(30mL)淬灭反应，经萃取、干燥、过滤、浓缩、柱层析，得到N,2-二甲基-N-((S)-1-(6-甲基吡啶-3-基)乙基)丙烷-2-亚磺酰胺2.0g，MS m/z(ESI)：255.2[M+H] +。
步骤3：合成(S)-N-甲基-1-(6-甲基吡啶-3-基)乙-1-胺
室温下，将N,2-二甲基-N-((S)-1-(6-甲基吡啶-3-基)乙基)丙烷-2-亚磺酰胺(2.0g,7.8mmol)溶解到MeOH(4mL)，然后加入HCl/Dioxane(6mL,4M)，室温反应1h。真空减压浓缩移除溶剂，NaHCO 3淬灭，经萃取、干燥、过滤、浓缩、柱层析，得到(S)-N-甲基-1-(6-甲基吡啶-3-基)乙-1-胺1.2g，MS m/z(ESI)：151.3[M+H] +。
步骤4:合成(S)-5-溴-N-甲基-N-(1-(6-甲基吡啶-3-基)乙基)吡啶-2-胺
室温下将(S)-N-甲基-1-(6-甲基吡啶-3-基)乙-1-胺(1.2g,7.9mmol)、5-溴-2-氟吡啶(6.9g,40mmol)、K 2CO 3(3.2g,23.7mmol)溶解到DMSO(20mL)，140℃反应24h。冷却到室温，加水稀释、萃取、干燥、过滤、浓缩、柱层析，得到(S)-5-溴-N-甲基-N-(1-(6- 甲基吡啶-3-基)乙基)吡啶-2-胺1.0g，MS m/z(ESI)：306.5[M+H] +。
步骤5：合成(S)-N-甲基-N-(1-(6-甲基吡啶-3-基)乙基)-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼杂环戊烷-2-基)吡啶-2-胺
室温下，将(S)-5-溴-N-甲基-N-(1-(6-甲基吡啶-3-基)乙基)吡啶-2-胺(1.0g,3.3mmol)、联硼酸频那醇酯(1.3g,4.9mmol)、Pd(dppf)ClCH 2Cl 2(266mg,0.33mmol)、KOAc(970mg,9.9mmol)溶解到Dioxane(15mL)，90℃反应6h。真空减压浓缩移除溶剂，NaHCO 3稀释、萃取、干燥、过滤、浓缩、柱层析，得到(S)-N-甲基-N-(1-(6-甲基吡啶-3-基)乙基)-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼杂环戊烷-2-基)吡啶-2-胺0.6g,MS m/z(ESI)：354.2[M+H] +。
步骤6：合成(S)-6-(2-羟基-2-甲基丙氧基)-4-(6-(甲基(1-(6-(6-甲基吡啶-3-基)乙基)胺基)吡啶-3-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈
氮气保护下，室温下将4-溴-6-(2-羟基-2-甲基丙氧基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-碳腈(200mg,0.65mmol)、(S)-N-甲基-N-(1-(6-甲基吡啶-3-基)乙基)-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼杂环戊烷-2-基)吡啶-2-胺(360mg,0.97mmol)、Pd(PPh 3) 4(76mg,0.065mmol)、Na 2CO 3(207mg,1.95mmol)溶解在1,4-dioxane:H 2O＝5:1(12mL)中，90℃搅拌反应8h。冷却到室温，加水淬灭、经萃取、水洗、干燥，柱层析，得到(S)-6-(2-羟基-2-甲基丙氧基)-4-(6-(甲基(1-(6-(6-甲基吡啶-3-基)乙基)胺基)吡啶-3-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈(化合物63)100mg,MS m/z(ESI)：457.2[M+H] +。 1H NMR(300MHz,DMSO)δ8.66(d,J＝2.0Hz,1H),8.57(s,1H),8.37(dd,J＝7.0,2.2Hz,2H),7.79(dd,J＝8.8,2.5Hz,1H),7.58(dd,J＝8.0,2.3Hz,1H),7.30(d,J＝2.0Hz,1H),7.20(d,J＝8.0Hz,1H),6.78(d,J＝8.8Hz,1H),6.20(q,J＝6.8Hz,1H),3.86(s,2H),2.76(s,3H),2.43(s,3H),1.55(d,J＝7.0Hz,3H),1.21(s,6H).
实施例64：N-(5-(3-氰基-6-(2-羟基-2-甲基丙氧基)吡唑并[1,5-a]吡啶-4-基)吡啶-2-基)-N-甲基-6-(吡咯烷酮-1-基)烟酰胺
Figure PCTCN2021089064-appb-000095
步骤1:合成6-(吡咯烷-1-基)烟酸甲酯
将6-氯烟酸甲酯(2g,11.66mmol)、吡咯烷(1.95mL,23.31mmol)、碳酸铯(11g, 34.97mmol)溶于20mL DMF中，65℃搅拌过夜，监测反应完全。加水淬灭，二氯甲烷萃取，有机相水洗，干燥浓缩，得到6-(吡咯烷-1-基)烟酸甲酯2.4g，收率99.85％，MS m/z(ESI):207.1[M+H] +。
步骤2:合成6-(吡咯烷-1-基)烟酸
将6-(吡咯烷-1-基)烟酸甲酯(2.4g,11.64mmol)溶于THF(12mL)和水(12mL)中，加入氢氧化钠(1.4g,34.92mmol)室温搅拌过夜，监测反应完全。浓缩反应液，加水，加入浓盐酸调节pH至中性或者偏酸性，抽滤，得到6-(吡咯烷-1-基)烟酸1.6g，收率71.51％，MS m/z(ESI):191.0[M-H] -。
步骤3:合成6-(吡咯烷-1-基)烟酰氯
将6-(吡咯烷-1-基)烟酸(0.6g,3.12mmol)溶于SOCl 2(10mL)中，加入2滴DMF，85℃回流反应2h，监测反应完全。浓缩反应液，得到粗品产物，直接投下一步。
步骤4:合成N-(5-溴吡啶-2-基)-N-甲基-6-(吡咯烷-1-基)烟酰胺
N 2保护下将5-溴-N-甲基吡啶-2-胺(0.35g,1.87mmol)溶解在DME(4mL)中，加入TEA(0.78mL,5.61mmol)，0℃下加入上一步得到的粗品，70℃搅拌过夜，监测反应完全。加入适量的水，乙酸乙酯萃取，有机相干燥浓缩，柱层析分离，得到N-(5-溴吡啶-2-基)-N-甲基-6-(吡咯烷-1-基)烟酰胺0.52g，收率76.93％，MS m/z(ESI):360.9[M+H] +。
步骤5:合成N-甲基-6-(吡咯烷-1-基)-N-(5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼杂环戊烷-2-基)吡啶-2-基)烟酰胺
氮气保护下，将N-(5-溴吡啶-2-基)-N-甲基-6-(吡咯烷-1-基)烟酰胺(0.3g,0.83mmol)、联硼频哪醇酯(0.42g,1.66mmol)、醋酸钾(0.25g,2.49mmol)、[1,1'-双(二苯基膦)二茂铁]二氯化钯二氯甲烷络合物(69mg,0.08mmol)溶于二氧六环(5mL)中，90℃下搅拌过夜，监测反应完全。冷却至室温，加入适量的水，乙酸乙酯萃取，有机相干燥浓缩，柱层析分离，得到N-甲基-6-(吡咯烷-1-基)-N-(5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼杂环戊烷-2-基)吡啶-2-基)烟酰胺0.20g，收率59％，MS m/z(ESI):327.0[M+H] +。
步骤6:合成N-(5-(3-氰基-6-(2-羟基-2-甲基丙氧基)吡唑并[1,5-a]吡啶-4-基)吡啶-2-基)-N-甲基-6-(吡咯烷酮-1-基)烟酰胺
氮气保护下，将N-甲基-6-(吡咯烷-1-基)-N-(5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼杂环戊烷-2-基)吡啶-2-基)烟酰胺(60mg,0.15mmol)、4-溴-6-(2-羟基-2-甲基丙氧基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈(55mg,0.18mmol)、Pd 2(dba) 3(14mg,0.01mmol)、X-phos(14mg,0.03mmol)、碳酸钠(78mg,0.74mmol)溶于二氧六环(3mL)和水(1mL)中，90℃下搅拌过夜，监测反应完全。冷却至室温，浓缩反应液，加水，二氯甲烷萃取，有机相水洗，干燥浓缩，柱层析，得到N-(5-(3-氰基-6-(2-羟基-2-甲基丙氧基)吡唑并[1,5-a]吡啶-4-基)吡啶-2-基)-N-甲基-6-(吡咯烷酮-1-基)烟酰胺(化合物64)16mg，收率21％，MS m/z(ESI):512.1[M+H] +。 1H NMR(500MHz,DMSO)δ8.75(d,J＝2.1Hz,1H),8.64(d,J＝ 2.5Hz,1H),8.59(s,1H),8.19(d,J＝2.0Hz,1H),7.93(dd,J＝8.3,2.5Hz,1H),7.42(d,J＝2.0Hz,1H),7.26(t,J＝9.2Hz,2H),6.24(d,J＝9.0Hz,1H),4.70(s,1H),3.87(s,2H),3.47(s,3H),3.36(s,4H),1.90(s,4H),1.22(s,6H).
实施例65：(S)-N-((1-(6-(4-氟-1H-吡唑-1-基)吡啶-3-基)乙基)甲基胺)-吡啶-3-基)-6-乙炔基-吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈的制备
Figure PCTCN2021089064-appb-000096
步骤1.合成6-溴-3-氰基吡唑并[1,5-a]吡啶-4-三氟甲基磺酸酯
在室温下，将6-溴-4-羟基吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈(1.00g,4.20mmol)溶于DMF(10.0mL)中，然后在搅拌状态下依次加入DIPEA(1.46mL,8.40mmol)和1,1,1-三氟-N-苯基-N-(三氟甲基磺酰基)甲烷磺酰胺(1.80g,5.04mmol)。反应液在室温条件下室温搅拌1h。TLC(石油醚/乙酸乙酯＝10/1，R fT1＝0.25，R fT2＝0.4)监测反应结束后，将反应倒入100mL水中，用乙酸乙酯(50mL*3)萃取，合并有机相。有机相用饱和食盐水(50mL*2)洗涤，无水硫酸钠干燥，抽滤、旋蒸得粗品。粗品用快速过柱机过柱(石油醚：乙酸乙酯＝100/1～10/1)，纯化后得到6-溴-3-氰基吡唑并[1,5-a]吡啶-4-三氟甲基磺酸酯(1.13g,3.05mmol,收率72.7％)MS m/z：370.0[M+1] +。
步骤2.合成(S)-6-溴-N-((1-(6-(4-氟-1H-吡唑-1-基)吡啶-3-基)乙基)(甲基)胺)-吡啶-3-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈
在室温下，将6-溴-3-氰基吡唑并[1,5-a]吡啶-4-三氟甲基磺酸酯(400mg,1.08mmol)溶于1,4-二氧六环(8mL)和水(0.8mL)的混合液中，然后依次加入(S)-N-(1-(6-(4-氟-1H-吡唑-1-基)吡啶-3-基)乙基)-N-甲基-5-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧硼杂戊环-2-基)吡啶-2-胺(503mg,1.19mmol)、Pd 2(dba) 3(18mg,0.216mmol)、X-Phos(412mg,0.864mmol)、Na 2CO 3(229mg,2.16mmol)。反应瓶用氮气置换3次后，将反应在室温下氮气保护条件下搅拌12h。TLC(石油醚/乙酸乙酯＝3/1，R fT2＝0.65，R fT3＝0.4)和LCMS监测反应结束，将反应液到于水(100mL)中，乙酸乙酯(50mL*2)萃取，合并有机相。有机相用饱和食盐水(50mL*2)洗涤，无水硫酸钠干燥，抽滤、旋蒸得粗品。粗品经快速过柱机(石油醚：乙酸乙酯＝10/1～3/1)纯化，得到(S)-6-溴-N-((1-(6-(4-氟-1H-吡唑-1-基)吡啶-3-基)乙基)(甲基)胺)-吡啶-3-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈128mg(22.9％)。MS m/z:517.0[M+1] +。
步骤3.合成(S)-N-((1-(6-(4-氟-1H-吡唑-1-基)吡啶-3-基)乙基)甲基胺)-吡啶-3-基)-6-((三甲基硅基)乙炔基)-吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈
在室温下，将化合物(S)-6-溴-N-((1-(6-(4-氟-1H-吡唑-1-基)吡啶-3-基)乙基)甲基胺)-吡啶-3-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈(400mg,1.08mmol)溶于DMF(2.00mL)中，然后依次加入化合物三甲基硅乙炔(49mg,70μL,0.494mmol)、Pd(PPh 3) 2Cl 2(17.3mg,0.025mmol)、PPh 3(3.24mg,0.012mmol)、TEA(75mg,103μL,0.74mmol)。反应瓶用氮气置换3次后，将反应氮气保护条件下升温到65℃搅拌3h。TLC(石油醚/乙酸乙酯＝5/1，R fT3＝0.3，R fT4＝0.4)和LCMS监测反应结束，将反应液到于水(50mL)中，乙酸乙酯(30mL*2)萃取，合并有机相。有机相用饱和食盐水(30mL*2)洗涤，无水硫酸钠干燥，抽滤、旋蒸得粗品。粗品用快速过柱机过柱(石油醚：乙酸乙酯＝50/1～5/1)，纯化后得到(S)-N-((1-(6-(4-氟-1H-吡唑-1-基)吡啶-3-基)乙基)甲基胺)-吡啶-3-基)-6-((三甲基硅基)乙炔基)-吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈109mg(82.4％)。MS:m/z＝535.1[M+1] +。
步骤4.合成(S)-N-((1-(6-(4-氟-1H-吡唑-1-基)吡啶-3-基)乙基)甲基胺)-吡啶-3-基)-6-乙炔基-吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈
在室温条件下，将(S)-N-((1-(6-(4-氟-1H-吡唑-1-基)吡啶-3-基)乙基)甲基胺)-吡啶-3-基)-6-((三甲基硅基)乙炔基)-吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈(109mg,0.203mmol)溶于DCM/MeOH(2/1,5mL)，然后加入K 2CO 3(10.0mg,0.073mmol)。反应液在室温条件下搅拌2h，TLC(石油醚/乙酸乙酯＝5/1，R fT4＝0.4，R fT3＝0.3)和LCMS监测反应结束。将反应液旋干得粗品，然后粗品用快速过柱机过柱(石油醚：乙酸乙酯＝50/1～5/1)，纯化后得到(S)-N-((1-(6-(4-氟-1H-吡唑-1-基)吡啶-3-基)乙基)甲基胺)-吡啶-3-基)-6-乙炔基-吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈(化合物65)(89mg,0.192mmol,纯度96.96％，收率94.6％)。MS m/z:463.0[M+1] +。 1HNMR(400MHz,DMSO-d 6)δ：9.23(d,J＝1.08Hz,1H),8.75(s,1H),8.67–8.65(m,1H),8.40–8.38(m,2H),7.93–7.86(m,3H),7.83–7.80(m,1H),7.51(d,J＝4.00Hz,1H),6.30–6.26(m,1H),4.47(s,1H),2.83(s,3H),1.62(d,J＝8.00Hz,3H).
实施例66：(S)-N-((1-(6-(4-氟-1H-吡唑-1-基)吡啶-3-基)乙基)甲基胺)-吡啶-3-基)-6-乙基-吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈的制备
Figure PCTCN2021089064-appb-000097
步骤1.合成(S)-N-((1-(6-(4-氟-1H-吡唑-1-基)吡啶-3-基)乙基)甲基胺)-吡啶-3-基)-6-乙基-吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈
在室温下，将(S)-N-((1-(6-(4-氟-1H-吡唑-1-基)吡啶-3-基)乙基)甲基胺)-吡啶-3-基)-6-乙炔基-吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈(70mg,0.151mmol)溶于EtOH(3.00mL)，然后加入10％Pd/C(8mg)，反应体系用H 2(15psi)置换3次。然后在H 2(15psi)氛围下室温搅拌24h。LCMS和TLC(石油醚/乙酸乙酯＝4/1，R fT4＝0.5，R f3＝0.3)监测反应结束。将 反应液通过硅藻土抽滤、EtOH(20mL*3)洗涤。滤液旋干得粗品，然后粗品用快速过柱机过柱(石油醚：乙酸乙酯＝50/1～5/1)，纯化后得到(S)-N-((1-(6-(4-氟-1H-吡唑-1-基)吡啶-3-基)乙基)甲基胺)-吡啶-3-基)-6-乙基-吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈(化合物66)(13.4mg,0.029mmol，纯度98.6％，收率19.0％)。MS:m/z＝467.1[M+1] +， 1HNMR(400MHz，DMSO-d 6)δ：8.77(d,J＝4.00Hz,1H),8.66(d,J＝4.00Hz,3H),8.61(s,1H),8.40–8.37(m,2H),7.93-7.86(m,3H),7.82-7.79(m,1H),7.46(s,2H),2.83(s,3H),2.74-2.70(m,2H),2.02-1.95(m,1H),1.28(t,J＝4.00Hz,3H).
生物活性测试例1：
(a)体外筛选实验-HTRF方法检测化合物对RET的抑制活性
方法如下：
1. 1x激酶缓冲液的配制：5x酶缓冲液与蒸馏水以1：4混匀，终浓度是5mM氯化镁；1mM二硫苏糖醇。
2.用100％二甲基亚砜将测试化合物(5mM储液)稀释5倍至1mM，在384孔稀释板中以1:3进行等比稀释10个浓度。
3.使用Echo 550移液系统将0.2μL梯度稀释的化合物加到384孔板中，每个浓度2个复孔，二甲基亚砜终浓度为0.5％(v/v)。测试化合物的梯度浓度为5000、1666.7、555.5、185.18、61.72、20.57、6.858、2.286、0.764、0.254nM。
4.用1x激酶缓冲液配制2x RET(0.1ng/μl)。
5.在384孔板加入5μl的2x RET，1000g离心30s，室温孵育10min。
6.用1x激酶缓冲液配制2x酪氨酸激酶-生物素标记的底物(2μM)和腺嘌呤核苷三磷酸(20μM)混合液。
7.加入5μL酪氨酸激酶-生物素标记的底物和腺嘌呤核苷三磷酸混合液以启动反应。1000g离心30s，封板，室温孵育30min。
8.用均相时间分辨荧光技术检测缓冲液配制2x Sa-XL 665(注：一种试剂)(125μM)和酪氨酸激酶-抗体-穴状化合物混合液。
9.每空加入10μL Sa-XL 665和酪氨酸激酶-抗体-穴状化合物混合液，1000g离心30s，室温孵育1h。
10.Envision 2104酶标仪615nm和665nm读板，计算比率(665/615nm)。
11.％抑制率计算如下：
Figure PCTCN2021089064-appb-000098
式中，
R0是溶媒空白组的酶标仪板平均比率
R1是测试化合物酶标仪板比率
R2是100％抑制RET酶活性的酶标仪板平均比率
通过将化合物浓度的抑制率值和对数拟合到非线性回归(剂量反应-可变斜率)中，用GraphPad 6.0软件计算IC 50。
(b)体外筛选实验-HTRF方法检测化合物抑制VEGFR2活性测试
实验步骤：
1.1x激酶缓冲液配制：5x酶缓冲液与蒸馏水以1：4混匀，终浓度是5mM氯化镁；1mM二硫苏糖醇；1mM氯化锰。
2.用100％二甲基亚砜将测试化合物(5mM储液)稀释5倍至1mM，在384孔稀释板中以1:3进行等比稀释10个浓度。
3.使用Echo 550移液系统将0.2μL梯度稀释的化合物加到384孔细胞培养板(Corning，3570)中，每个浓度2个复孔，二甲基亚砜终浓度为0.5％(v/v)。测试化合物的梯度浓度为5000、1666.7、555.5、185.18、61.72、20.57、6.858、2.286、0.764、0.254nM。
4.用1x激酶缓冲液配制2x VEGFR2(0.02ng/μL)。
5.在384孔板加入5μl的2x VEGFR2，1000g离心30s，室温孵育10min。
6.用1x激酶缓冲液配制2x酪氨酸激酶-生物素标记的底物(2μM)和ATP(8μM)混合液。
7.加入5μl酪氨酸激酶-生物素标记的底物和腺嘌呤核苷三磷酸混合液以启动反应。1000g离心30s，封板，室温孵育40min。
8.用均相时间分辨荧光技术检测缓冲液配制2x Sa-XL 665(125μM)和酪氨酸激酶-抗体-穴状化合物混合液。
9.每孔加入10μL Sa-XL 665和酪氨酸激酶-抗体-穴状化合物混合液，1000g离心30s，室温孵育1h。
10.Envision 2104酶标仪615nm和665nm读板，计算比率(665/615nm)。
11.％抑制率计算如下:
Figure PCTCN2021089064-appb-000099
式中，
R0是溶媒空白组的酶标仪板平均比率
R1是测试化合物酶标仪板比率
R2是100％抑制RET酶活性的酶标仪板平均比率
12.通过将化合物浓度的抑制率值和对数拟合到非线性回归(剂量反应-可变斜率)中，用GraphPad 6.0计算IC 50。
(c)体外筛选实验-CellTiter-Glo发光法检测化合物抑制Ba/F3-KIF5B-RET细胞活力测试
实验步骤：
1.利用
Figure PCTCN2021089064-appb-000100
转染系统方法将包含人源KIF5B-RET cDNA的哺乳动物细胞表达载体导入Ba/F3细胞，经嘌呤霉素筛选过后存活的克隆进行细胞生长抑制功能实验和蛋白免疫印迹法法验证RET稳定高表达的细胞系。
2.细胞培养于RPMI 1640培养液、10％胎牛血清、1％青霉素-链霉素、2μg/mL嘌呤霉素的培养基中，置于37℃、5％二氧化碳细胞培养箱中培养。
3.用100％二甲基亚砜将测试化合物(5mM储液)稀释2.5倍至2mM，在384孔稀释板中以1:3进行等比稀释10个浓度。
4.使用Echo 550移液系统将0.2μL梯度稀释的化合物加到384孔细胞培养板(Corning，3570)中，每个浓度2个复孔，二甲基亚砜终浓度为0.5％(v/v)。测试化合物的梯度浓度为5000、1666.7、555.5、185.18、61.72、20.57、6.858、2.286、0.764、0.254nM。
5.每孔加入40μL含800个Ba/F3-KIF5B-RET细胞悬液，于5％二氧化碳细胞培养箱培养72h。
6.按每孔20μL Cell Titer-Glo试剂加入细胞培养板，震荡混匀2min以裂解细胞，然后室温孵育30min，用Envision 2104酶标仪读取荧光信号值。
7.数据由XLFit 5.0按4参数公式：
Y＝Bottom+(Top-Bottom)/(1+10^((LogIC50-X)*HillSlope))拟合计算IC 50值。
化合物活性汇总如下表1所示
表1
Figure PCTCN2021089064-appb-000101
Figure PCTCN2021089064-appb-000102
Figure PCTCN2021089064-appb-000103
‘-’表示没有测试。
结果表明：相较于现有已知的化合物(卡博替尼和凡德替尼)，本发明所设计的化合物均具有较好的RET激酶活性，同时对VEGFR2激酶具有较好的选择性，部分化合物的选择性可达1000倍以上。此外，所述化合物均具有较好的RET激酶敏感的细胞抑制活性。
在本发明提及的所有文献都在本申请中引用作为参考，就如同每一篇文献被单独引用作为参考那样。此外应理解，在阅读了本发明的上述讲授内容之后，本领域技术人员可以对本发明作各种改动或修改，这些等价形式同样落于本申请所附权利要求书所限定的范围。

Claims (18)

  1. 式(Ⅰ)化合物或其药学上可接受的盐、水合物、溶剂化物、立体异构体、同位素化合物或前药；
    Figure PCTCN2021089064-appb-100001
    其中，
    R 1选自下组：氢、卤素、硝基、氰基、C1-C6烷基、C3-C8环烷基、3-8元杂环基、C1-C6杂烷基、C2-C6烯基、C2-C6炔基、C6-C14芳基、5-14元杂芳基、-OR 5、-O(C1-C6亚烷基)R 5、-SR 5、-N(R 5)(R 6)、-S(O) 2R 5、-S(O)R 5、-C(O)R 5、-OC(O)R 5、-C(O)OR 5、-OC(O)O-(C1-C6亚烷基)-C(O)R 5、-C(O)-N(R 5)(R 6)、-N(R 5)-C(O)R 6、-N(R 5)-C(O)OR 6、-N(R 5)-C(O)N(R 5)(R 6)、-(C1-C6亚烷基)-N(R 5)-C(O)R 6、-N(R 5)S(O) 2R 6、-P(O)(R 5)(R 6)；其中，所述的杂烷基是指烷基碳链上的一个或多个碳原子被选自下组的二价连接基取代：-O-、-S-、-NH-或-C(O)-；
    B独立地选自下组：氢、卤素、氰基、CHF 2、CF 3、-C(O)OR 5、C1-C6烷基、C3-C8环烷基；
    X 1、X 2和X 3各自独立地为CR或N；其中，各个R各自独立地选自下组：氢、取代或未取代的C1-C6烷基、卤素、或氰基，其中，所述的取代是指被独立选自下组的一个或多个基团取代：卤素、氰基、羟基、氨基；且X 1、X 2和X 3中有0、1、2或3个为N；
    R 2独立地选自下组：氢、C1-C6烷基、C3-C8环烷基、C1-C6杂烷基、3-8元环杂烷基；其中，所述的烷基、环烷基、杂烷基、环杂烷基是未取代或被一个或多个独立选自下组的基团取代：C1-C6烷基、C1-C6烷氧基、C3-C8环烷基、C3-C8环烷氧基、C1-C6杂烷基、3-8元环杂烷基、CHF 2、CF 3、卤素、氰基、羧基、羰基、羟基、巯基、氨基、甲酯、酰胺、甲基砜、磺酰胺、二甲基磷氧基；
    R 3和R 3’各自独立地选自下组：氢、卤素、氰基、羟基、巯基、氨基、CHF 2、CF 3、C1-C6烷基、C1-C6烷氧基、C3-C8环烷基、C1-C6杂烷基、3-8元环杂烷基；其中，所述的烷基、烷氧基、环烷基、杂烷基、环杂烷基是未取代或被一个或多个独立选自下组的基团取代：C1-C6烷基、C1-C6烷氧基、C3-C8环烷基、C3-C8环烷氧基、C1-C6杂烷基、3-8元环杂烷基、CHF 2、CF 3、卤素、氰基、羧基、羰基、羟基、巯基、氨基、甲酯、酰胺、甲基砜、磺酰胺、二甲基磷氧基；
    或者R 3和R 3’与其连接的C原子一起形成C3-C8环烷基、3-8元杂环基、羰基；其中，所述的环烷基、杂环基是未取代或被一个或多个独立选自下组的基团取代：C1-C6烷基、C1-C6烷氧基、C3-C8环烷基、C3-C8环烷氧基、C1-C6杂烷基、3-8元环杂烷基、 CHF 2、CF 3、卤素、氰基、羧基、羰基、羟基、巯基、氨基、甲酯、酰胺、甲基砜、磺酰胺、二甲基磷氧基；
    A独立选自下组：C3-C8环烷基、3-8元杂环基、C6-C14芳基或5-14元亚杂芳基；
    各R 4独立地选自下组：氢、卤素、硝基、氰基、羟基、羧基、巯基、C1-C6烷基、C3-C8环烷基、3-8元杂环基、C1-C6杂烷基、C2-C6烯基、C2-C6炔基、C6-C14芳基、5-14元杂芳基、-OR 5、-SR 5、-N(R 5)(R 6)、-S(O) 2R 5、-S(O)R 5、-C(O)R 5、-OC(O)R 5、-C(O)OR 5、-OC(O)O-(C1-C6亚烷基)-C(O)R 5、-C(O)-N(R 5)(R 6)、-N(R 5)-C(O)R 6、-N(R 5)-C(O)OR 6、-N(R 5)-C(O)N(R 5)(R 6)、-(C1-C6亚烷基)-N(R 5)-C(O)R 6、-N(R 5)S(O) 2R 6、-P(O)(R 5)(R 6)；其中，所述的烷基、环烷基、杂烷基、杂环基、烯基、炔基、芳基、杂芳基是未取代或被一个或多个独立选自下组的基团取代：C1-C6烷基、C1-C6烷氧基、C3-C8环烷基、C3-C8环烷氧基、C1-C6杂烷基、3-8元环杂烷基、CHF 2、CF 3、卤素、氰基、羧基、羰基、羟基、巯基、氨基、甲酯、酰胺、甲基砜、磺酰胺、二甲基磷氧基；
    R 5和R 6各自独立地选自取代或未取代的下组基团：氢、C1-C6烷基、C3-C8环烷基、3-8元单杂环基、C6-C10芳基、5-10元杂芳基、C5-C12稠合双环、5-12元稠合杂双环、C5-C12元螺双环或5-12元螺杂双环；其中，所述取代是指被独立选自下组的一个或多个基团取代：C1-C6烷基、C1-C6烷氧基、C3-C8环烷基、C3-C8环烷氧基、C1-C6杂烷基、3-8元环杂烷基、CHF 2、CF 3、卤素、氰基、羧基、羰基、羟基、巯基、氨基、甲酯、酰胺、甲基砜、磺酰胺、二甲基磷氧基；
    或者R 5和R 6与其连接的N或P原子一起形成3-8元杂环基；
    如无特别说明，上述烷基、亚烷基、环烷基、杂烷基、烯基、炔基、芳基、杂芳基、杂环基是未取代或被一个或多个独立选自下组的基团取代：C1-C6烷基、C1-C6烷氧基、C3-C8环烷基、3-8元杂环基、C1-C6杂烷基、C2-C6烯基、C2-C6炔基、硝基、卤素、氰基、羟基、羧基、酯基、酰胺基、磺酰胺基、羰基、巯基、胺基、二甲基磷氧基；
    n为0、1、2或3。
  2. 如权利要求1所述的式Ⅰ化合物或其药学上可接受的盐、水合物、溶剂化物、立体异构体、同位素化合物或前药，其特征在于，R 2选自下组：氢、C1-C6烷基、C3-C8环烷基；其中，所述的烷基、环烷基是未取代或被一个或多个独立选自下组的基团取代：C1-C6烷基、CHF 2、CF 3、卤素、氰基、羟基、羧基、酯基、酰胺基、磺酰胺基、羰基、巯基、胺基、二甲基磷氧基。
  3. 如权利要求1或2所述的式Ⅰ化合物或其药学上可接受的盐、水合物、溶剂化物、立体异构体、同位素化合物或前药，其特征在于，R 3和R 3’各自独立地选自下组：氢、卤素、氰基、羟基、CHF 2、CF 3、C1-C6烷基、C1-C6烷氧基、C3-C8环烷基、C1-C6杂烷基；
    或者R 3和R 3’与其连接的C原子一起形成C3-C8环烷基、3-8元杂环基、羰基；
    其中，所述的烷基、烷氧基、环烷基、杂烷基、杂环基是未取代或被一个或多个独立选自下组的基团取代：C1-C6烷基、CHF 2、CF 3、卤素、氰基、羟基、羧基、酯基、酰胺基、磺酰胺基、羰基、巯基、胺基、二甲基磷氧基。
  4. 如权利要求1所述的式Ⅰ化合物或其药学上可接受的盐、水合物、溶剂化物、立体异构体、同位素化合物或前药，其特征在于，R 1独立地选自下组：-OR 5、-OC(O)R 5、-N(R 5)(R 6)、-C(O)-N(R 5)(R 6)、-N(R 5)-C(O)R 6、-N(R 5)-C(O)OR 6、-N(R 5)S(O) 2R 6；其中，R 5和R 6各自独立地选自取代或未取代的下组基团：氢、C1-C6烷基、C3-C8环烷基、3-8元杂环基、C6-C10芳基、5-10元杂芳基；其中，所述取代是指被独立选自下组的一个或多个基团取代：C1-C6烷基、氰基、卤素、羟基、C3-C8环烷基、3-8元杂环基、C6-C10芳基、5-10元杂芳基。
  5. 如权利要求1所述的式Ⅰ化合物或其药学上可接受的盐、水合物、溶剂化物、立体异构体、同位素化合物或前药，其特征在于，A独立选自下组：C6-C10芳基或5-10元杂芳基，其中，所述芳基、杂芳基是未取代或被一个或多个独立选自下组的基团取代：C1-C6烷基、C1-C6烷氧基、C3-C8环烷基、3-8元杂环基、C1-C6杂烷基、C2-C6烯基、C2-C6炔基、硝基、卤素、氰基、羟基、羧基、酯基、酰胺基、磺酰胺基、巯基、胺基、二甲基磷氧基。
  6. 如权利要求1所述的式Ⅰ化合物或其药学上可接受的盐、水合物、溶剂化物、立体异构体、同位素化合物或前药，其特征在于，R 4独立地选自下组：氢、C1-C6烷基、C3-C8环烷基、C1-C6杂烷基、C6-C10芳基、5-10元杂芳基、3-8元杂环基、-OR 5、-OC(O)R 5、-N(R 5)(R 6)、-C(O)-N(R 5)(R 6)、-N(R 5)-C(O)R 6、-N(R 5)-C(O)OR 6、-N(R 5)S(O) 2R 6；
    其中，R 5和R 6各自独立地为取代或未取代的选自下组的基团：氢、C1-C6烷基、C3-C8环烷基、3-8元杂环基、C6-C10芳基、5-10元杂芳基；其中，所述取代是指被选自下组的一个或多个基团取代：C1-C6烷基、氰基、卤素、羟基、C3-C8环烷基、3-8元杂环基、C6-C10芳基、5-10元杂芳基；
    如无特别说明，所述的烷基、环烷基、杂烷基、杂环基、芳基、杂芳基是未取代或被一个或多个独立选自下组的基团取代：C1-C6烷基、CHF 2、CF 3、卤素、氰基、羟基、羧基、酯基、酰胺基、磺酰胺基、羰基、巯基、胺基、二甲基磷氧基。
  7. 如权利要求1-6中任一项所述的化合物或其药学上可接受的盐、水合物、溶剂化物、立体异构体、同位素化合物或前药，其特征在于，所述化合物具有式(II)所示的结构：
    Figure PCTCN2021089064-appb-100002
    其中，
    X选自下组：O、S、NR 8；
    m为0、1、2或3；
    R 7和R 8各自为取代或未取代的选自下组的基团：H、C1-C6烷基、C3-C8环烷基、3-8元单杂环基、C6-C10芳基、5-10元杂芳基、C5-C12稠合双环、5-12元稠合杂双环、C5-C12元螺双环或5-12元螺杂双环；
    其中，所述取代是指被独立选自下组的一个或多个基团取代：C1-C6烷基、氰基、卤素、羟基、C3-C8环烷基、3-8元单杂环基、C6-C10芳基、5-10元杂芳基、C5-C12稠合双环、5-12元稠合杂双环、C5-C12元螺双环或5-12元螺杂双环；
    B、R 2、R 3、A、R 4、n的定义如权利要求1所述。
  8. 如权利要求1-7中任一项所述的化合物或其药学上可接受的盐、水合物、溶剂化物、立体异构体、同位素化合物或前药，其特征在于，所述的化合物具有式(III)所示的结构：
    Figure PCTCN2021089064-appb-100003
    其中，B、R 2、R 3、R 4、R 7、m、n的定义如权利要求7所述。
  9. 如权利要求1-6中任一项所述的化合物或其药学上可接受的盐、水合物、溶剂化物、立体异构体、同位素化合物或前药，其特征在于，所述的化合物具有式(IV)所示的结构：
    Figure PCTCN2021089064-appb-100004
    其中，R 1选自下组：-OR 5、-N(R 5)(R 6)、C3-C8环烷基、3-8元杂环基、C2-C6烯基、C2-C6炔基、C6-C14芳基、5-14元杂芳基；
    R 2选自下组：氢、C1-C6烷基；
    R 3选自下组：氢、卤素、氰基、羟基、CHF 2、CF 3、C1-C6烷基、C1-C6烷氧基；
    R 4独立地选自下组：C3-C8环烷基、C6-C10芳基、5-10元杂芳基、3-8元杂环基、-OR 5、-OC(O)R 5、-N(R 5)(R 6)、-C(O)-N(R 5)(R 6)、-N(R 5)-C(O)R 6、-N(R 5)-C(O)OR 6、-N(R 5)S(O) 2R 6；
    其中，R 5和R 6各自独立地为取代或未取代的选自下组的基团：氢、C1-C6烷基、C3-C8环烷基、3-8元杂环基、C6-C10芳基、5-10元杂芳基；其中，所述取代是指被独立选自下组的一个或多个基团取代：C1-C6烷基、氰基、卤素、羟基、C3-C8环烷基、3-8元杂环基、C6-C10芳基、5-10元杂芳基；
    且所述的烷基、烯基、炔基、环烷基、芳基、杂芳基、杂环基是未取代或被一个或多个独立选自下组的基团取代：C1-C6烷基、C1-C6烷氧基、C3-C8环烷基、3-8元杂环基、C1-C6杂烷基、C2-C6烯基、C2-C6炔基、硝基、卤素、氰基、羟基、羧基、酯基、酰胺基、磺酰胺基、羰基、巯基、胺基、二甲基磷氧基。
  10. 如权利要求1-9中任一项所述化合物的前药或其药学上可接受的盐，其特征在于，其具有式(V)所示的结构：
    Figure PCTCN2021089064-appb-100005
    其中，R 8选自下组：
    Figure PCTCN2021089064-appb-100006
    Figure PCTCN2021089064-appb-100007
    R 9和R 10各自独立地选自：取代或未取代C1-C6烷基、羟基、OM；M为Na或K；
    R 11和R 12各自独立地选自：取代或未取代C1-C6烷基、取代或未取代C6-C10芳基、取代或未取代5-10元杂芳基；
    R 13和R 14各自独立地选自：取代或未取代C1-C6烷基、取代或未取代C6-C10芳基、取代或未取代5-10元杂芳基；
    p为1、2、3；
    其中，所述取代是指被独立选自下组的一个或多个基团取代：C1-C6烷基、C1-C6烷氧基、C3-C8环烷基、3-8元杂环基、C1-C6杂烷基、C2-C6烯基、C2-C6炔基、硝基、卤素、氰基、羟基、羧基、酯基、酰胺基、磺酰胺基、羰基、巯基、胺基；
    R 1、R 2、R 3和R 4的定义如权利要求4所述。
  11. 如权利要求1-10中任一项所述的化合物或其药学上可接受的盐、水合物、溶剂化物、立体异构体、同位素化合物或前药，其特征在于，所述化合物选自下组：
    Figure PCTCN2021089064-appb-100008
    Figure PCTCN2021089064-appb-100009
    Figure PCTCN2021089064-appb-100010
    Figure PCTCN2021089064-appb-100011
    Figure PCTCN2021089064-appb-100012
  12. 一种药物组合物，其特征在于，其包含如权利要求1-11中任一项所述的化合物或其药学上可接受的盐、水合物、溶剂化物、同位素化合物或前药；和药用载体或稀释剂。
  13. 一种如权利要求1至11中任一项所述的化合物或如权利要求12所述的药物组合物在制备治疗与RET相关疾病的药物中的用途。
  14. 如权利要求13所述的用途，其特征在于，所述药物用于治疗与RET相关疾病的下述失调：RET基因、RET激酶、或其中任何一者的表达或活性或水平失调。
  15. 如权利要求14所述的用途，其特征在于，RET基因、RET激酶、或其中任何一者的表达或活性或水平失调为所述RET基因中的一个或多个点突变，所述RET基因中的一个或多个点突变引起在一个或多个包括以下氨基酸位置具有一个或多个氨基 酸取代的RET蛋白质的翻译：378、385、618、620、630、631、633、804、810、883、918。
  16. 如权利要求14所述的用途，其特征在于，RET基因的表达或活性或水平失调为RET基因融合体，其中，所述RET基因融合体包括：KIF5B-RET、CDC6-RET、NCOA4-RET、CLIP1-RET、ERC1-RET、RUFY3-RET、TFG-RET、PRKAR1A-RET、KTN1-RET。
  17. 如权利要求13-16中任一项所述的用途，其特征在于，RET相关疾病包括肿瘤和肠应激综合征。
  18. 如权利要求13-17中任一项所述的用途，其特征在于，RET相关疾病包括：肺癌、乳头状甲状腺癌、髓质甲状腺癌、分化的甲状腺癌、复发性甲状腺癌、难治性分化甲状腺癌、2A或2B型多发性内分泌瘤、嗜铬细胞瘤、副甲状腺增生、乳腺癌、结肠直肠癌、乳头状肾细胞癌、胃肠道粘膜的神经节瘤病以及子宫颈癌。
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