WO2021186872A1 - ポリヒドロキシ酪酸系樹脂の製造方法 - Google Patents

ポリヒドロキシ酪酸系樹脂の製造方法 Download PDF

Info

Publication number
WO2021186872A1
WO2021186872A1 PCT/JP2021/001275 JP2021001275W WO2021186872A1 WO 2021186872 A1 WO2021186872 A1 WO 2021186872A1 JP 2021001275 W JP2021001275 W JP 2021001275W WO 2021186872 A1 WO2021186872 A1 WO 2021186872A1
Authority
WO
WIPO (PCT)
Prior art keywords
polyhydroxybutyric acid
producing
based resin
water
acid
Prior art date
Application number
PCT/JP2021/001275
Other languages
English (en)
French (fr)
Inventor
福本明日香
廣田翔悟
平野優
Original Assignee
株式会社カネカ
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by 株式会社カネカ filed Critical 株式会社カネカ
Priority to JP2022508089A priority Critical patent/JPWO2021186872A1/ja
Priority to CN202180021891.7A priority patent/CN115298318A/zh
Publication of WO2021186872A1 publication Critical patent/WO2021186872A1/ja
Priority to US17/818,379 priority patent/US20220380530A1/en

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C02—TREATMENT OF WATER, WASTE WATER, SEWAGE, OR SLUDGE
    • C02F—TREATMENT OF WATER, WASTE WATER, SEWAGE, OR SLUDGE
    • C02F9/00—Multistage treatment of water, waste water or sewage
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C08—ORGANIC MACROMOLECULAR COMPOUNDS; THEIR PREPARATION OR CHEMICAL WORKING-UP; COMPOSITIONS BASED THEREON
    • C08G—MACROMOLECULAR COMPOUNDS OBTAINED OTHERWISE THAN BY REACTIONS ONLY INVOLVING UNSATURATED CARBON-TO-CARBON BONDS
    • C08G63/00—Macromolecular compounds obtained by reactions forming a carboxylic ester link in the main chain of the macromolecule
    • C08G63/78—Preparation processes
    • C08G63/81—Preparation processes using solvents
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C02—TREATMENT OF WATER, WASTE WATER, SEWAGE, OR SLUDGE
    • C02F—TREATMENT OF WATER, WASTE WATER, SEWAGE, OR SLUDGE
    • C02F1/00—Treatment of water, waste water, or sewage
    • C02F1/44—Treatment of water, waste water, or sewage by dialysis, osmosis or reverse osmosis
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C08—ORGANIC MACROMOLECULAR COMPOUNDS; THEIR PREPARATION OR CHEMICAL WORKING-UP; COMPOSITIONS BASED THEREON
    • C08G—MACROMOLECULAR COMPOUNDS OBTAINED OTHERWISE THAN BY REACTIONS ONLY INVOLVING UNSATURATED CARBON-TO-CARBON BONDS
    • C08G63/00—Macromolecular compounds obtained by reactions forming a carboxylic ester link in the main chain of the macromolecule
    • C08G63/02—Polyesters derived from hydroxycarboxylic acids or from polycarboxylic acids and polyhydroxy compounds
    • C08G63/06—Polyesters derived from hydroxycarboxylic acids or from polycarboxylic acids and polyhydroxy compounds derived from hydroxycarboxylic acids
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C08—ORGANIC MACROMOLECULAR COMPOUNDS; THEIR PREPARATION OR CHEMICAL WORKING-UP; COMPOSITIONS BASED THEREON
    • C08G—MACROMOLECULAR COMPOUNDS OBTAINED OTHERWISE THAN BY REACTIONS ONLY INVOLVING UNSATURATED CARBON-TO-CARBON BONDS
    • C08G63/00—Macromolecular compounds obtained by reactions forming a carboxylic ester link in the main chain of the macromolecule
    • C08G63/88—Post-polymerisation treatment
    • C08G63/89—Recovery of the polymer
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12P—FERMENTATION OR ENZYME-USING PROCESSES TO SYNTHESISE A DESIRED CHEMICAL COMPOUND OR COMPOSITION OR TO SEPARATE OPTICAL ISOMERS FROM A RACEMIC MIXTURE
    • C12P7/00—Preparation of oxygen-containing organic compounds
    • C12P7/62—Carboxylic acid esters
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C02—TREATMENT OF WATER, WASTE WATER, SEWAGE, OR SLUDGE
    • C02F—TREATMENT OF WATER, WASTE WATER, SEWAGE, OR SLUDGE
    • C02F1/00—Treatment of water, waste water, or sewage
    • C02F1/001—Processes for the treatment of water whereby the filtration technique is of importance
    • C02F1/004—Processes for the treatment of water whereby the filtration technique is of importance using large scale industrial sized filters
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C02—TREATMENT OF WATER, WASTE WATER, SEWAGE, OR SLUDGE
    • C02F—TREATMENT OF WATER, WASTE WATER, SEWAGE, OR SLUDGE
    • C02F1/00—Treatment of water, waste water, or sewage
    • C02F1/44—Treatment of water, waste water, or sewage by dialysis, osmosis or reverse osmosis
    • C02F1/441—Treatment of water, waste water, or sewage by dialysis, osmosis or reverse osmosis by reverse osmosis
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C02—TREATMENT OF WATER, WASTE WATER, SEWAGE, OR SLUDGE
    • C02F—TREATMENT OF WATER, WASTE WATER, SEWAGE, OR SLUDGE
    • C02F1/00—Treatment of water, waste water, or sewage
    • C02F1/44—Treatment of water, waste water, or sewage by dialysis, osmosis or reverse osmosis
    • C02F1/442—Treatment of water, waste water, or sewage by dialysis, osmosis or reverse osmosis by nanofiltration
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C02—TREATMENT OF WATER, WASTE WATER, SEWAGE, OR SLUDGE
    • C02F—TREATMENT OF WATER, WASTE WATER, SEWAGE, OR SLUDGE
    • C02F2101/00—Nature of the contaminant
    • C02F2101/10—Inorganic compounds
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C02—TREATMENT OF WATER, WASTE WATER, SEWAGE, OR SLUDGE
    • C02F—TREATMENT OF WATER, WASTE WATER, SEWAGE, OR SLUDGE
    • C02F2103/00—Nature of the water, waste water, sewage or sludge to be treated
    • C02F2103/34—Nature of the water, waste water, sewage or sludge to be treated from industrial activities not provided for in groups C02F2103/12 - C02F2103/32
    • C02F2103/36—Nature of the water, waste water, sewage or sludge to be treated from industrial activities not provided for in groups C02F2103/12 - C02F2103/32 from the manufacture of organic compounds
    • C02F2103/38—Polymers
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C02—TREATMENT OF WATER, WASTE WATER, SEWAGE, OR SLUDGE
    • C02F—TREATMENT OF WATER, WASTE WATER, SEWAGE, OR SLUDGE
    • C02F2305/00—Use of specific compounds during water treatment
    • C02F2305/04—Surfactants, used as part of a formulation or alone
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C02—TREATMENT OF WATER, WASTE WATER, SEWAGE, OR SLUDGE
    • C02F—TREATMENT OF WATER, WASTE WATER, SEWAGE, OR SLUDGE
    • C02F3/00—Biological treatment of water, waste water, or sewage
    • C02F3/02—Aerobic processes
    • C02F3/12—Activated sludge processes
    • C02F3/1236—Particular type of activated sludge installations
    • C02F3/1268—Membrane bioreactor systems
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C02—TREATMENT OF WATER, WASTE WATER, SEWAGE, OR SLUDGE
    • C02F—TREATMENT OF WATER, WASTE WATER, SEWAGE, OR SLUDGE
    • C02F3/00—Biological treatment of water, waste water, or sewage
    • C02F3/30—Aerobic and anaerobic processes

Definitions

  • the present invention relates to a method for producing a polyhydroxybutyrate resin.
  • biodegradable plastics are completely biodegraded by microorganisms in the soil and water and incorporated into the natural carbon circulation process, they are proactive as environmentally friendly plastic materials that have almost no adverse effect on the ecosystem. It is desired to be used.
  • plant-derived biodegradable plastics such as polyhydroxybutyrate are attracting attention.
  • Polyhydroxybutyrate is an aliphatic polyester (thermoplastic polyester) produced by microorganisms using plant-derived natural organic acids and fats and oils as a carbon source and accumulated as an energy storage substance in cells.
  • Polyhydroxybutyrate produced by microorganisms is water-insoluble and usually accumulates in microbial cells as granules. Therefore, in order to use polyhydroxybutyrate as a plastic, polyhydroxybutyrate is separated from the microbial cells. The process of taking out is necessary.
  • Patent Document 1 reports a method in which alkali addition and high pressure fracturing are combined as a method for separating and purifying polyhydroxybutyrate.
  • Patent Document 2 reports a method of separating and purifying polyhydroxybutyrate by combining physical cell disruption and chemical treatment with an enzyme and a surfactant.
  • the polyhydroxybutyrate separated by the methods described in Patent Documents 1 and 2 has a problem of coloring and a problem of low thermal stability and a decrease in molecular weight when heated at a high temperature.
  • the present invention provides a method for producing a polyhydroxybutyrate resin, which can obtain a polyhydroxybutyrate resin having a good color tone and high thermal stability in order to solve the above problems.
  • the present invention relates to a method for producing a polyhydroxybutyric acid-based resin, which comprises the step (b) of separating the above, and in the step (a) and the step (b), water having a calcium ion concentration of 4.5 mg / L or less is used. ..
  • the inventors of the present invention crush or solubilize microbial cells containing a polyhydroxybutyrate resin (hereinafter, also simply referred to as "PHB").
  • PHB polyhydroxybutyrate resin
  • the poly obtained by using water having a calcium ion concentration in a specific range is used. It has been found that the color tone of the hydroxybutyrate resin is improved and the decrease in molecular weight is suppressed even when heated at a high temperature, for example, 160 ° C. Further, it is preferable to set the concentration of sodium ions in a specific range in the water used in the steps (a) and (b).
  • the concentration of calcium ions in water used in steps (a) and (b) is 4.5 mg / L or less, which is preferable from the viewpoint of improving color tone and thermal stability. Is 3.0 mg / L or less, more preferably 2.0 mg / L or less. In one or more embodiments of the present invention, the water used in steps (a) and (b) ideally does not contain calcium ions, but from the viewpoint of practicality, it is 0.001 mg / L or more. It may be 0.005 mg / L or more.
  • the concentration of sodium ions in water used in steps (a) and (b) is preferably 450 mg / L or less from the viewpoint of improving color tone and thermal stability. It is more preferably 250 mg / L or less, and even more preferably 220 mg / L or less. In one or more embodiments of the present invention, the water used in steps (a) and (b) ideally does not contain sodium ions, but from the viewpoint of practicality, it is 0.05 mg / L or more. It may be 0.1 mg / L or more.
  • the water used in the steps (a) and (b) may have a calcium ion concentration of 4.5 mg / L or less in water and is not particularly limited, but from the viewpoint of reducing the amount of water used and reducing the environmental load.
  • pretreatment filtration step by membrane separation active sludge method and calcium ion removal membrane It is preferable to use the treated water obtained by performing the filtration step.
  • the wastewater discharged in the production process of the polyhydroxybutyrate resin includes the wastewater discharged in any production process of the polyhydroxybutyrate resin such as steps (a) and (b).
  • the anaerobic treatment and aerobic treatment by microorganisms and the pretreatment filtration by the membrane separation activated sludge method are not particularly limited, and can be performed by a general method used in water treatment.
  • the anaerobic treatment device is, for example, an acid-producing tank that decomposes high-molecular-weight carbohydrates and lipids into organic acids and lower alcohols by the action of acid-producing bacteria, and organic acids and lower grades by the action of granule-like methane-producing bacteria. It can be composed of an EGSB type methane production reaction tank that decomposes alcohol into methane gas and carbon dioxide gas.
  • an apparatus composed of a denitrification tank (activated sludge treatment tank) and an aeration tank (activated sludge treatment tank) is used, and organic matter not decomposed by the anaerobic treatment is aerobic in the aeration tank. It can be done by decomposing by the action of bacteria.
  • the aerobic treatment equipment consists of a denitrification tank (activated sludge treatment tank), an aeration tank (activated sludge treatment tank), a second denitrification tank (activated sludge treatment tank), and a re-aeration tank (activated sludge treatment tank). May be done.
  • the MBR membrane bioreactor membrane separation activity
  • the UF membrane or the MF membrane is placed in an aeration tank (activated sludge treatment tank) or a re-aeration tank (activated sludge treatment tank). It can be done by installing a sludge method permeation membrane).
  • NF membrane and RO membrane as the calcium ion removing membrane because of its high calcium ion removing performance.
  • the NF film or RO film preferably has a Regular 4 inhibition rate of 60% or more and 100% or less when a pressure of 3000 kPa is applied at 20 ° C., more preferably 70. % Or more and 100% or less, and more preferably 90% or more and 100% or less. If MgSO 4 rejection of 60% or more, not a high calcium ion-permeable membrane, by using the treated water obtained in step (a) and (b), the color tone of polyhydroxybutyrate-based resin It tends to be good, and the decrease in molecular weight at high temperature is also likely to be suppressed.
  • the differential pressure between membranes during filtration by an NF membrane or RO membrane is not particularly specified, but from the viewpoint of calcium ion removal rate and sodium ion removal rate, 0.4 MPa or more and 4.14 MPa or less. It is preferably 0.5 MPa or more and 2.5 MPa or less.
  • the differential pressure between the membranes is 0.4 MPa or more, the amount of permeated water and the ion removal rate do not decrease, and when it is 4.14 MPa or less, the membrane is not easily damaged.
  • the permeation rate during filtration by the NF membrane or RO membrane is not particularly specified, but for example, 0.01 L / min or more and 2000 L / min or less is preferable, and 0.5 L / min is more preferable. It is 1500 L / min or less. Productivity is good when the permeation rate is 0.01 L / min or more.
  • the water temperature during filtration by the NF membrane or RO membrane is not particularly specified, but the water temperature is preferably 50 ° C. or lower, more preferably 45 ° C. or lower. If the water temperature is 50 ° C. or lower, the film is less likely to deteriorate.
  • microbial cells containing PHB In one or more embodiments of the present invention, microbial cells containing a polyhydroxybutyrate resin can be obtained by culturing a microorganism capable of producing PHB.
  • the polyhydroxybutyric acid-based resin is a general term for polymers having 3-hydroxybutyric acid (hereinafter, also referred to as 3HB) as a monomer unit.
  • PHB may be poly (3-hydroxybutyric acid) which is a homopolymer of 3-hydroxybutyric acid, or may be a copolymer of 3-hydroxybutyric acid and other 3-hydroxyalkanoic acid.
  • 3-hydroxyalkanoic acids include 3-hydroxyhexanoic acid (hereinafter, also referred to as 3HH), 3-hydroxyheptanic acid, 3-hydroxyoctanoic acid, 3-hydroxynonanoic acid, and 3-hydroxydecanoic acid.
  • poly (3-hydroxybutyric acid), poly (3-hydroxybutyric acid-co-3-hydroxyhexanoic acid), and poly (3-hydroxybutyric acid-co-3) are easy to produce industrially.
  • -Hydroxyoctanoic acid) and the like are preferable, and poly (3-hydroxybutyric acid-co-3-hydroxyhexanoic acid) is particularly preferable.
  • the composition ratio of each monomer unit constituting the two-component copolymer PHBH of 3HB and 3HH is not particularly limited, but when the total of all the monomer units is 100 mol%, the 3HH unit is 1 mol%. It may be 50 mol% or more, 1 mol% or more and 25 mol% or less, and 1 mol% or more and 15 mol% or less.
  • the microorganism capable of producing PHB is not particularly limited, and is a microorganism isolated from nature or a microorganism deposited with a strain depository (for example, IFO, ATCC, etc.), or , Variants and transformants that can be prepared from them can be used.
  • a strain depository for example, IFO, ATCC, etc.
  • Variants and transformants that can be prepared from them can be used.
  • the genus Cupriavidus the genus Alcaligenes, the genus Ralstonia, the genus Pseudomonas, the genus Bacillus, the genus Azotobacter, the genus Azotobacter, the genus Nocarda Bacteria and the like.
  • strains of Alcaligenes lipolytica, Alcaligenes latus, Aeromonas caviae, Aeromonas hydrophila, Cupriavidus necator, etc. Is preferable.
  • a transformant obtained by introducing the target PHB synthase gene and / or a variant thereof into the microorganism. Can also be used.
  • the PHB synthase gene used for producing such a transformant is not particularly limited, but the PHB synthase gene derived from Aeromonas cavier is preferable.
  • the culturing method is not particularly limited, and for example, the methods listed in JP-A-05-93049, International Publication No. 2008/010296, and the like can be used.
  • the PHB-containing microbial cells the bacterial cell culture solution containing the PHB-containing microbial cells after the completion of the culture is used as it is, or the cells are sterilized after the cells are killed by heating the bacterial cell culture solution.
  • a cell culture solution can be used.
  • the sterilization may be performed, for example, by heat treatment at a temperature of 50 ° C. or higher and 80 ° C. or lower for 5 minutes or longer and 120 minutes or shorter.
  • Step (a) PHB-containing microbial cells are disrupted or solubilized.
  • Step (a) can be performed, for example, by at least one treatment selected from the group consisting of chemical treatment and physical crushing treatment.
  • the chemical treatment can be carried out with at least one compound selected from the group consisting of alkaline compounds, proteolytic enzymes and cell wall degrading enzymes.
  • the alkaline compound is not particularly limited as long as it can destroy the cell wall of the PHB-containing microbial cell and allow the PHB in the cell to flow out of the cell.
  • sodium hydroxide, potassium hydroxide, lithium hydroxide and the like Alkali metal hydroxides, alkali metal carbonates such as sodium carbonate and potassium carbonate, alkali metal hydrogen carbonates such as sodium hydrogen carbonate and potassium hydrogen carbonate, and alkali metal salts of organic acids such as sodium acetate and potassium acetate.
  • Alkali metal borates such as borosand, alkali metal phosphates such as trisodium phosphate, disodium hydrogen phosphate, tripotassium phosphate, dipotassium hydrogen phosphate, alkaline earth such as barium hydroxide
  • alkali metal borates such as borosand, alkali metal phosphates such as trisodium phosphate, disodium hydrogen phosphate, tripotassium phosphate, dipotassium hydrogen phosphate, alkaline earth such as barium hydroxide
  • metal hydroxides and aqueous ammonia examples thereof include metal hydroxides and aqueous ammonia.
  • one or more selected from the group consisting of sodium hydroxide, sodium carbonate, potassium hydroxide, and lithium hydroxide is preferable from the viewpoint of being suitable for industrial production and reducing costs.
  • the proteolytic enzyme is not particularly limited, and examples thereof include alcalase, pepsin, trypsin, papain, chymotrypsin, aminopeptidase, and carboxypeptidase.
  • Specific proteolytic enzymes include, for example, “Protease A”, “Protease P”, “Protease N” (above, manufactured by Amano Enzymes), “Alcalase”, “Esperase”, “Zabinase”, “Evarase” (above). , Novozymes), etc. can be used industrially, and can be suitably used from the viewpoint of decomposition activity.
  • the cell wall degrading enzyme is not particularly limited, and examples thereof include lysozyme, amylase, cellulase, maltase, saccharase, ⁇ -glycosinase and ⁇ -glycosinase.
  • lysozyme manufactured by Huayuan Economics, Shandongzhou
  • biozyme A "cellulase A” Amano "3”
  • “cellulase T” Amano "4" " ⁇ -glucosidase”.
  • "Amano" aboveve, manufactured by Amano Enzymes
  • “Termamill” “Cellulase” (above, manufactured by Novozymes), etc. can be used industrially.
  • the above-mentioned treatment with an enzyme is preferably performed in the presence of a surfactant because a high separation and purification effect can be obtained.
  • a surfactant for example, an enzyme composition containing an enzyme and one or more additives selected from the group consisting of an enzyme stabilizer, a surfactant, a recontamination inhibitor and the like may be used.
  • the surfactant examples include anionic surfactant, cationic surfactant, amphoteric surfactant, and nonionic surfactant.
  • Anionic surfactants and / or nonionic surfactants are preferable from the viewpoint of having a high effect of removing residues by destroying the cell membrane. It is preferable to use an anionic surfactant for the purpose of removing proteins and the like, and it is preferable to use a nonionic surfactant for the purpose of removing fatty acids and fats and oils. Moreover, both anionic surfactant and nonionic surfactant can be used.
  • the weight ratio of the anionic surfactant / nonionic surfactant is preferably 1/100 to 100/10, more preferably 5/100 to 100/20, and further preferably 5/100 to 100/100.
  • 5/100 to 50/100 is particularly preferable.
  • anionic surfactants include alkyl sulfates, alkylbenzene sulfonates, alkyl sulfates, alkenyl sulfates, alkyl ether sulfates, alkenyl ether sulfates, ⁇ -olefin sulfonates, and ⁇ -.
  • anionic surfactants include alkyl sulfates, alkylbenzene sulfonates, alkyl sulfates, alkenyl sulfates, alkyl ether sulfates, alkenyl ether sulfates, ⁇ -olefin sulfonates, and ⁇ -.
  • examples thereof include a sulfo fatty acid salt, an ester of an ⁇ -sulfo fatty acid salt, an alkyl ether carboxylate, an alkenyl ether carboxylate, an amino acid type surfactant, and an N-acyl amino acid type surfact
  • an alkyl sulfate having 12 to 14 carbon atoms in an alkyl group a linear alkylbenzene sulfonate having 12 to 16 carbon atoms in an alkyl group, an alkyl sulfate ester salt having 10 to 18 carbon atoms in an alkyl group, or an alkyl group.
  • Alkyl ether sulfate ester salts having 10 to 18 carbon atoms are preferable.
  • an alkali metal such as sodium and potassium, an alkaline earth metal such as magnesium, and an alkanolamine such as monoethanolamine, diethanolamine, and triethanolamine are preferable.
  • nonionic surfactant examples include polyoxyethylene alkyl ether, polyoxyethylene alkyl phenyl ether, polyoxyalkylene alkyl ether, fatty acid sorbitan ester, alkyl polyglucoside, fatty acid diethanolamide, alkyl monoglyceryl ether and the like.
  • Polyoxyethylene alkyl ethers and polyoxyalkylene alkyl ethers are preferable because they have high hydrophilicity and relatively good biodegradability.
  • Examples of the cationic surfactant include an alkyltrimethylammonium salt and a dialkyldimethylammonium salt.
  • amphoteric surfactants examples include carbobetaine type and sulfobetaine type.
  • the anionic surfactants sodium dodecylsulfate, sodium dodecylbenzenesulfonate, sodium colate, sodium deoxycholate and sodium oleate, and nonionic surfactants polyoxyethylene alkyl ethers. And polyoxyalkylene alkyl ether and the like are preferable in terms of cost, amount used and addition effect.
  • the amount of the surfactant added is not particularly limited, but is preferably 0.001 part by weight or more and 10 parts by weight or less with respect to 100 parts by weight of the cell culture solution, and more preferably 5 parts by weight or less from the viewpoint of cost. ..
  • the surfactant one type may be used alone, or two or more types may be used in combination.
  • the enzyme treatment is preferably carried out, for example, by adding an alkaline compound and / or a surfactant to the cell culture solution and stirring the mixture.
  • the enzyme treatment conditions are preferably controlled under the optimum value of the enzyme to be used.
  • the required amount of enzyme depends on the type and activity of the enzyme. Although not particularly limited, 0.001 to 10 parts by weight is preferable with respect to 100 parts by weight of PHB100, and 0.001 to 5 parts by weight is more preferable from the viewpoint of cost.
  • the physical crushing treatment is preferably performed after adding an alkaline compound, or an alkaline compound and a surfactant, from the viewpoint of enhancing the crushing effect and easily recovering PHB.
  • the alkaline compound and the surfactant those described above can be appropriately used.
  • sodium hydroxide, sodium carbonate, potassium hydroxide, and lithium hydroxide are preferable from the viewpoint of being suitable for industrial production and reducing costs.
  • the anionic surfactants sodium dodecylsulfate, sodium dodecylbenzenesulfonate, sodium colate, sodium deoxycholate and sodium oleate, and nonionic surfactants polyoxyethylene alkyl ethers. And polyoxyalkylene alkyl ether and the like are preferable in terms of cost, amount used and addition effect.
  • the pH of the cell culture solution it is preferable to adjust the pH of the cell culture solution to 8.0 or more and 12.5 or less by adding an alkaline compound. It is easy to solubilize bacterial cell (microbial cell) residues, bacterial cell-forming organic substances, bacterial cell constituent organic substances, etc. without affecting PHB.
  • the alkaline compound After adding the alkaline compound to the cell culture solution, it may be treated at a temperature of 20 ° C. or higher and 80 ° C. or lower, preferably 20 ° C. or higher and 50 ° C. or lower for 30 minutes or longer and 2 hours or shorter.
  • the amount of the surfactant added is not particularly limited, but is preferably 0.001 part by weight or more and 10 parts by weight or less with respect to 100 parts by weight of the cell culture solution, and more preferably 5 parts by weight or less from the viewpoint of cost. ..
  • the surfactant one type may be used alone, or two or more types may be used in combination.
  • the device that performs the physical crushing treatment is not particularly limited, and examples thereof include a high-pressure homogenizer, an ultrasonic crusher, an emulsification disperser, and a bead mill.
  • a high-pressure homogenizer is preferable from the viewpoint of crushing efficiency, and a type in which the suspension is introduced into a pressure-resistant container having a minute opening and extruded from the opening by applying a high pressure is more preferable.
  • this type of crusher include a high-pressure homogenizer model “PA2K type” manufactured by Nirosoabi Co., Ltd.
  • the cell culture solution is cooled by a general low-temperature constant temperature circulation tank to prevent the temperature from rising, and the temperature is 20 ° C. or higher. It is preferable to carry out the crushing treatment at ° C. or lower. By performing the treatment at 20 ° C. or higher and 40 ° C. or lower, the treatment can be performed with almost no decrease in the molecular weight of PHB.
  • the crushing pressure when performing high-pressure crushing is not particularly limited, but is preferably 30 MPa or more and 60 MPa or less from the viewpoint of crushing efficiency and cost.
  • the chemical treatment and the physical crushing treatment may be used in combination.
  • the physical crushing treatment after the chemical treatment.
  • the step (a) may be performed only by the physical crushing treatment.
  • water having a calcium ion concentration of 4.5 mg / L or less (preferably 3.0 mg / L or less, more preferably 2.0 mg / L or less) is used as water.
  • water having a calcium ion concentration of 4.5 mg / L or less (preferably 3.0 mg / L or less, more preferably 2.0 mg / L or less) is used when a surfactant, an alkaline compound or the like is added.
  • the water has a sodium ion concentration of 450 mg / L or less, more preferably 250 mg / L or less, and even more preferably 220 mg / L or less.
  • Step (b) In the step (b), the composition obtained in the step (a), for example, the polyhydroxybutyrate resin in the cell crushing solution is separated.
  • the separation is not particularly limited, and the polyhydroxybutyrate resin can be recovered as a water-insoluble component by performing solid-liquid separation using a method such as filtration, sedimentation separation, or centrifugation. Centrifugation is preferable from the viewpoint of industrial large-scale processing and continuous use.
  • the centrifuge is not particularly limited, but a centrifuge having a rotary container without holes is preferable, and the types include a separation plate type, a cylindrical type, a decanter type and the like. Since PHB particles have a small difference in specific gravity from water, a separation plate type (intermittent discharge type, nozzle discharge type) that has a large separation and sedimentation area and high acceleration is preferable, and when the PHB concentration contained in the crushing treatment liquid is high, it is preferable. Especially, the nozzle discharge type is preferable. As the decanter type, a model having a separation plate and a large separation sedimentation area is preferable.
  • step (b) 500 parts by weight or more and 1000 parts by weight or less of the aqueous medium may be added to 100 parts by weight of the composition obtained in the step (a), for example, the cell crushing solution, before the separation.
  • the aqueous medium may be water or a mixed solvent of water and a water-miscible organic solvent.
  • the content of water in the aqueous medium is preferably 50% by weight or more, more preferably 70% by weight or more, still more preferably 80% by weight or more, and particularly preferably 85% by weight or more.
  • water having a calcium ion concentration of 4.5 mg / L or less, preferably 3.0 mg / L or less, and more preferably 2.0 mg / L or less is used as water.
  • the water has a sodium ion concentration of 450 mg / L or less, more preferably 250 mg / L or less, and even more preferably 220 mg / L or less.
  • the water-miscible organic solvent is not particularly limited, and is, for example, alcohols such as methanol, ethanol, 1-propanol, 2-propanol, 1-butanol, 2-butanol, iso-butanol, pentanol, hexanol, and heptanol; Ketones such as acetone and methyl ethyl ketone; ethers such as tetrahydrofuran and dioxane; nitriles such as acetonitrile and propionitrile; amides such as dimethylformamide and acetamide; dimethylsulfoxide, pyridine, piperidine and the like.
  • alcohols such as methanol, ethanol, 1-propanol, 2-propanol, 1-butanol, 2-butanol, iso-butanol, pentanol, hexanol, and heptanol
  • Ketones such as acetone and methyl
  • methanol, ethanol, 1-propanol, 2-propanol, 1-butanol, 2-butanol, iso-butanol, acetone, methyl ethyl ketone, tetrahydrofuran, dioxane, acetonitrile, propionitrile and the like are preferable because they are easy to remove.
  • methanol, ethanol, 1-propanol, 2-propanol, butanol, acetone and the like are more preferable because they are easily available.
  • methanol, ethanol and acetone are particularly preferred.
  • the PHB may be purified by washing the separated PHB (water-insoluble component containing PHB) at least once with the above-mentioned aqueous medium.
  • aqueous medium for example, 500 parts by weight or more and 1000 parts by weight or less of the aqueous medium may be added to 100 parts by weight of the water-insoluble component containing the polyhydroxybutyrate resin.
  • an alkaline compound, a surfactant, a proteolytic enzyme and the like may be added to the aqueous medium.
  • the production method of one or more embodiments of the present invention may include a step (c) of drying the PHB separated in the step (b).
  • the PHB (dehydrated resin) washed with an aqueous medium and dehydrated can be dried as it is to obtain a powdery PHB.
  • the drying method can be appropriately selected and is not particularly limited, but for example, a general drying method such as spray drying, air flow drying, fluid drying, and band drying can be preferably used.
  • a powdery PHB can be obtained by washing with an aqueous medium, adding a dispersant to the concentrated PHB dispersion, adjusting the pH to 7 or less, and then drying.
  • a dispersant for example, highly water-soluble such as polyvinyl alcohol (PVA), methyl cellulose, ethyl cellulose, hydroxymethyl cellulose, hydroxyethyl cellulose, polyacrylic acid, sodium polyacrylate, potassium polyacrylate, polymethacrylic acid, and sodium polymethacrylate.
  • PVA polyvinyl alcohol
  • Nonionic surfactants such as polyethylene glycol, polypropylene glycol, block ether type (polyoxyethylene, polyoxypropylene, block polymer type) and the like can be mentioned.
  • Examples of the method of adjusting the pH to 7 or less include a method of adding an acid.
  • the acid is not particularly limited, and may be either an organic acid or an inorganic acid, and for example, sulfuric acid, hydrochloric acid, phosphoric acid, acetic acid and the like can be appropriately used.
  • the molecular weight of PHB is not particularly limited as long as it exhibits substantially sufficient physical properties for the intended purpose.
  • the weight average molecular weight of PHB is preferably 50,000 or more and 3,000,000 or less, and more preferably 60,000 or more and 1,500,000 or less.
  • the weight average molecular weight here refers to the one measured from the polystyrene-equivalent molecular weight distribution using gel permeation chromatography (GPC) using a chloroform eluent.
  • GPC gel permeation chromatography
  • a column suitable for measuring the molecular weight may be used.
  • PHB has high thermal stability, and the weight average molecular weight retention rate when heat-treated at 160 ° C. for 20 minutes is preferably 70% or more, more preferably 75% or more, and more preferably 80% or more. Even more preferably, it is even more preferably 85% or more, and particularly preferably 90% or more.
  • PHB has a good color tone
  • the yellowness index (YI value) of a sheet press-molded at 160 ° C. with a thickness of 5 mm is preferably 20 or less, and more preferably 17 or less.
  • PHB can be molded into various molded bodies such as fibers, threads, ropes, woven fabrics, knitted fabrics, non-woven fabrics, paper, films, sheets, tubes, boards, rods, containers, bags, parts, and foams.
  • the molded body can be suitably used in agriculture, fisheries, forestry, horticulture, medicine, hygiene, clothing, non-clothing, packaging, and other fields.
  • the above-mentioned calcium ion concentration is 4.5 mg / in the step of crushing or solubilizing microbial cells containing the biodegradable plastic and separating the biodegradable plastic.
  • Water of L or less can be used.
  • the thermal stability is determined to be good if the weight average molecular weight retention is 70% or more based on the weight average molecular weight retention of the polyhydroxybutyrate resin after heating at 160 ° C. for 20 minutes. If the weight average molecular weight retention rate was less than 70%, it was judged that the thermal stability was poor.
  • Weight average molecular weight retention rate (%) (weight average molecular weight of PHB after heating / weight average molecular weight of PHB before heating) ⁇ 100 ⁇ Weight average molecular weight of PHB before heating> Using 10 mg of polyhydroxybutyrate resin powder, the mixture was dissolved in 10 mL of chloroform, and then the insoluble material was removed by filtration.
  • composition of PHB before heating 2 mL of sulfuric acid-methanol mixed solution (15:85) and 2 mL of chloroform are added to about 20 mg of polyhydroxybutyrate resin powder, the mixture is sealed, and heated at 100 ° C. for 140 minutes to obtain a polyester decomposition product methyl ester. rice field. After cooling, 1.5 g of sodium hydrogen carbonate was added little by little to neutralize the mixture, and the mixture was left to stand until the generation of carbon dioxide gas stopped.
  • the mixture was centrifuged to analyze the composition of the hydroxyalkanoic acid methyl ester of the polyester decomposition product in the supernatant by capillary gas chromatography, and the composition of the obtained polyester monomer unit (the composition of the obtained polyester monomer unit ( Content rate) was determined.
  • a GC-17A manufactured by Shimadzu Corporation was used as the gas chromatograph, and a NEUTRA BOND-1 (column length 25 m, column inner diameter 0.25 mm, liquid thickness 0.4 ⁇ m) manufactured by GL Sciences was used as the capillary column.
  • the temperature conditions were such that the initial temperature was raised from 100 ° C. to 200 ° C. at a rate of 8 ° C./min, and further raised from 200 ° C. to 290 ° C. at a rate of 30 ° C./min.
  • a press sheet of a polyhydroxybutyrate resin was prepared, and the press sheet was used as a measurement sample.
  • the press sheet of polyhydroxybutyrate resin 3.0 g of polyhydroxybutyrate resin powder is sandwiched between metal plates of 15 cm square, and metal plates having a thickness of 0.5 mm are inserted into the four corners of the metal plate.
  • a small experimental press machine H-15 type manufactured by Takabayashi Rika Co., Ltd.
  • heated at 160 ° C for 7 minutes pressed at about 5 MPa for 2 minutes while heating at 160 ° C, and after pressing.
  • the YI value was measured with a color difference meter "SE-2000" (manufactured by Nippon Denshoku Co., Ltd.) by placing a press sheet on the measuring plate using a 30 mm measuring plate and covering it with a white standard plate. If the YI value is 20 or less, it is judged that the color tone is good, and if the YI value is more than 20, it is judged that the color tone is poor.
  • SE-2000 color difference meter
  • the aerobic treatment consists of a denitrification tank (activated sludge treatment tank), an aeration tank (activated sludge treatment tank), a second denitrification tank (activated sludge treatment tank), and a re-aeration tank (activated sludge treatment tank).
  • the organic matter that was not decomposed by the anaerobic treatment was decomposed by the action of aerobic bacteria.
  • Pretreatment filtration by the membrane separation activated sludge method is performed in a re-aeration tank (activated sludge treatment tank) with a UF membrane (hollow fiber membrane: PVDF, manufactured by Mitsubishi Chemical Co., Ltd., nominal pore size: 0.05 ⁇ m, at 20 ° C., 3000 kPa. It was carried out by installing a membrane 4 blocking rate of 0% when pressure was applied. In the UF membrane, water was permeated at a filtration line speed of 0.86 to 1.15 m / day.
  • UF membrane permeated water is collected, and RO membrane (material: composite polyamide, Nitto) at a water temperature of 30 ° C., intermembrane differential pressure (permeation pressure) 0.7 to 1.15 MPa, and permeation rate 0.75 to 0.85 L / min. made Denko, at 20 ° C., was fed to the MgSO 4 rejection 99.7%) with a pressure of 3000 kPa.
  • the water that did not permeate the RO membrane was returned to the water collecting tank, and the permeated water was used as washing water.
  • the RO membrane was permeated with UF membrane permeated water for 97 minutes, and 70% by weight of the UF membrane permeated water was permeated.
  • RO membrane permeated water from the initial stage of permeation to 13 minutes was collected to obtain wash water 1.
  • Washing water 2 was obtained in the same manner as in Production Example 1 except that the permeated water from 90 minutes to 97 minutes was collected from the water permeated by the RO membrane.
  • UF membrane permeated water is collected under the same conditions as in Production Example 1, and the NF membrane is collected at a water temperature of 20 ° C., a permeation pressure of 3 MPa, and a permeation rate of 30 to 300 g / hour. to obtain a wash water 5 NF membrane permeate was collected which was transmitted over MgSO 4 rejection 96.1%) when applying.
  • the amount of permeated water was 75% of the amount of UF membrane permeated water.
  • UF membrane permeated water is collected under the same conditions as in Production Example 1, and the NF membrane is collected at a water temperature of 20 ° C., a permeation pressure of 3 MPa, and a permeation rate of 100 to 550 g / hour. to obtain a MgSO 4 NF membrane permeate was collected washing water 7 is transmitted through the rejection 6.7%) when applying.
  • the amount of permeated water was 75% of the amount of UF membrane permeated water.
  • Table 1 shows the concentration of calcium ions, the concentration of sodium ions, and the chromaticity in the washing waters 1 to 7.
  • Example 1 (Preparation of bacterial cell culture solution)
  • the Ralstonia utrofa KNK-005 strain described in paragraph [0049] of International Publication No. 2008/010296 was cultured by the method described in paragraphs [0050] to [0053] of the same document, and the PHB (3HH content) was increased.
  • a cell culture solution containing cells containing 11.5 mol% of poly (3-hydroxybutyric acid-co-3-hydroxyhexanoic acid) was obtained.
  • Ralstonia eutropha is now classified as Cupriavidus necator.
  • the cell culture solution obtained above was heated and stirred at an internal temperature of 60 to 80 ° C. for 20 minutes to be sterilized.
  • Steps (a) and (b)) Sodium dodecyl sulfate was added to the sterilized cell culture solution obtained above in an amount of 0.2% by weight. Further, after adding washing water in which sodium hydroxide was dissolved so that the pH became 11.0, the temperature was kept at 50 ° C. for 1 hour. Then, using a high-pressure crusher (high-pressure homogenizer model PA2K type manufactured by Nirosoabi Co., Ltd.), high-pressure crushing was performed at a pressure of 44 to 54 MPa. The same weight of wash water was added to the cell crushing solution after high-pressure crushing obtained above. After centrifuging this, the supernatant was removed and concentrated twice.
  • high-pressure crusher high-pressure homogenizer model PA2K type manufactured by Nirosoabi Co., Ltd.
  • washing water pH 11.0 to which sodium hydroxide was added was added so as to have the same weight as the removed supernatant, and the mixture was centrifuged. Then, after removing the supernatant, wash water was added to suspend the suspension, and 0.2% by weight of sodium dodecyl sulfate and 1/100% by weight of a protease (Esperase manufactured by Novozymes) were added. The mixture was stirred for 2 hours while maintaining the pH at 10.0 at 50 ° C. Then, the supernatant was removed by centrifugation and concentrated 5 times.
  • washing water pH 11.0 to which sodium hydroxide was added to the concentrated aqueous suspension of PHB was added so as to have the same weight as the removed supernatant, and the mixture was centrifuged. After repeating the same operation 5 times, the supernatant was removed to adjust the concentration of the polyhydroxybutyrate resin to 52% by weight. In the steps (a) and (b), the washing water 1 was used as the washing water.
  • Step (c) A dispersant (polyethylene glycol, polypropylene glycol, block ether type nonionic surfactant, trade name "Pronon # 208", is added to the above-mentioned aqueous suspension of polyhydroxybutyrate resin (solid content concentration: 52% by weight). 1 phr (1 part by weight based on 100 parts by weight of the polyhydroxybutyrate resin present in the aqueous suspension) was added (manufactured by Nichiyu), and then the solid content concentration was adjusted to 30% by weight with distilled water. After stirring this solution for 30 minutes, sulfuric acid was added to adjust the pH until it stabilized at 4. The obtained aqueous suspension of the polyhydroxybutyrate resin was dried at 60 ° C. for 12 hours to prepare a polyhydroxybutyrate resin powder.
  • a dispersant polyethylene glycol, polypropylene glycol, block ether type nonionic surfactant, trade name "Pronon # 208"
  • Example 2 A polyhydroxybutyrate resin powder was obtained in the same manner as in Example 1 except that the washing water 2 was used as the washing water in the steps (a) and (b).
  • Example 3 A polyhydroxybutyrate resin powder was obtained in the same manner as in Example 1 except that the washing water 3 was used as the washing water in the steps (a) and (b).
  • Example 1 A polyhydroxybutyrate resin powder was obtained in the same manner as in Example 1 except that the washing water 4 was used as the washing water in the steps (a) and (b).
  • Example 4 In the preparation of the cell culture solution, a cell culture solution containing cells containing PHB (poly (3-hydroxybutyric acid-co-3-hydroxyhexanoic acid) having a 3HH content of 10.9 mol%) was used. A polyhydroxybutyric acid-based resin powder was obtained by the same operation as in Example 1 except that the washing water 2 was used as the washing water in the steps (a) and (b).
  • PHB poly (3-hydroxybutyric acid-co-3-hydroxyhexanoic acid
  • Example 5 A polyhydroxybutyrate resin powder was obtained in the same manner as in Example 4 except that the washing water 5 was used as the washing water in the steps (a) and (b).
  • Example 6 A polyhydroxybutyrate resin powder was obtained in the same manner as in Example 4 except that the washing water 6 was used as the washing water in the steps (a) and (b).
  • the thermal stability and YI value of the polyhydroxybutyrate resin powders obtained in Examples and Comparative Examples were measured and evaluated as described above, and the results are shown in Table 2 below.
  • the 3HH content before heating means the content of 3HH in the polyhydroxybutyrate resin before heating.
  • the polyhydroxybutyrate resin powder in the steps (a) and (b), by using the washing water having a calcium ion concentration of 4.5 mg / L or less, the polyhydroxybutyrate resin powder has high thermal stability and a good color tone. Become. Further, if the calcium ion concentration in the washing water is low, the polyhydroxybutyrate resin powder tends to be excellent in thermal stability and color tone. In Comparative Example 2, highly transparent water was used, but since the YI value exceeded the standard value, the calcium ion concentration had a stronger effect on the YI value of the polyhydroxybutyrate resin powder. It has been shown.
  • the water used in the steps (a) and (b) is subjected to anaerobic treatment and aerobic treatment by microorganisms on the wastewater discharged in the manufacturing step of the polyhydroxybutyric acid-based resin, and then has a membrane separation activity.

Landscapes

  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Polymers & Plastics (AREA)
  • Water Supply & Treatment (AREA)
  • Hydrology & Water Resources (AREA)
  • Environmental & Geological Engineering (AREA)
  • Wood Science & Technology (AREA)
  • Zoology (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • General Engineering & Computer Science (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)

Abstract

本発明は、１以上の実施形態において、ポリヒドロキシ酪酸系樹脂を含む微生物細胞を破砕又は可溶化する工程（ａ）、及び工程（ａ）で得られた組成物中のポリヒドロキシ酪酸を分離する工程（ｂ）を含み、工程（ａ）及び工程（ｂ）では、カルシウムイオンの濃度が４．５ｍｇ／Ｌ以下の水を用いるポリヒドロキシ酪酸系樹脂の製造方法に関する。工程（ａ）及び工程（ｂ）に用いる水は、ポリヒドロキシ酪酸系樹脂の製造工程にて排出された排水に対し、微生物による嫌気処理及び好気処理を行った後、膜分離活性汚泥法による前処理ろ過工程、並びにカルシウムイオン除去膜によるろ過工程を行うことで製造されることが好ましい。これにより、色調が良好であるとともに、熱安定性が高いポリヒドロキシ酪酸系樹脂の製造方法を提供する。

Description

ポリヒドロキシ酪酸系樹脂の製造方法
　本発明は、ポリヒドロキシ酪酸系樹脂の製造方法に関する。
　生分解性プラスチックは、土中や水中の微生物により完全に生分解され、自然界の炭素循環プロセスに取り込まれることになるため、生態系への悪影響がほとんどない環境調和型のプラスチック材料として積極的な使用が望まれている。代表的な生分解性プラスチックとして、ポリヒドロキシ酪酸等の植物由来の生分解性プラスチックが注目されている。ポリヒドロキシ酪酸は、微生物によって植物由来の天然の有機酸や油脂を炭素源として生産され、細胞内にエネルギー蓄積物質として蓄積される脂肪族ポリエステル（熱可塑性ポリエステル）である。
　微生物が生産するポリヒドロキシ酪酸は、水不溶性であり、通常顆粒体として微生物細胞内に蓄積されるため、ポリヒドロキシ酪酸をプラスチックとして利用するためには、微生物細胞内からポリヒドロキシ酪酸を分離して取り出すという工程が必要である。例えば、特許文献１には、ポリヒドロキシ酪酸の分離精製方法として、アルカリ添加と高圧破砕を組み合わせた方法が報告されている。例えば、特許文献２には、ポリヒドロキシ酪酸の分離精製方法として、物理的細胞破砕と酵素及び界面活性剤による化学的処理を組み合わせた方法が報告されている。
特開平０７－３１４８９号公報 特開２００８－１９３９４０号公報
　しかしながら、特許文献１及び２に記載の方法で分離したポリヒドロキシ酪酸は、着色する問題や、熱安定性が低く高温で加熱した際に分子量が低下する問題等があった。
　本発明は、上記の問題を解決するため、色調が良好であるとともに、熱安定性が高いポリヒドロキシ酪酸系樹脂が得られるポリヒドロキシ酪酸系樹脂の製造方法を提供する。
　本発明は、１以上の実施形態において、ポリヒドロキシ酪酸系樹脂を含有する微生物細胞を破砕又は可溶化する工程（ａ）、及び工程（ａ）で得られた組成物中のポリヒドロキシ酪酸系樹脂を分離する工程（ｂ）を含み、工程（ａ）及び工程（ｂ）では、カルシウムイオンの濃度が４．５ｍｇ／Ｌ以下の水を用いることを特徴とするポリヒドロキシ酪酸系樹脂の製造方法に関する。
　本発明の製造方法によれば、色調が良好であるとともに、熱安定性が高いポリヒドロキシ酪酸系樹脂を提供することができる。
　本発明の発明者らは、上述した課題を解決するために検討を重ねた結果、ポリヒドロキシ酪酸系樹脂（以下において、単に「ＰＨＢ」とも記す。）を含有する微生物細胞を破砕又は可溶化する工程（ａ）及び工程（ａ）で得られた組成物中のポリヒドロキシ酪酸系樹脂を分離する工程（ｂ）において、カルシウムイオンの濃度が特定の範囲の水を用いることで、得られたポリヒドロキシ酪酸系樹脂の色調が良好になるとともに、高温、例えば１６０℃で加熱した場合でも分子量の低下が抑制されることを見出した。さらに、工程（ａ）及び（ｂ）で用いる水において、ナトリウムイオンの濃度を特定の範囲にすることが好ましい。
　［低カルシウムイオン水］
　本発明の１以上の実施形態において、工程（ａ）及び（ｂ）で用いる水中のカルシウムイオンの濃度は４．５ｍｇ／Ｌ以下であり、色調及び熱安定性をより良好にする観点から、好ましくは３．０ｍｇ／Ｌ以下であり、より好ましくは２．０ｍｇ／Ｌ以下である。本発明の１以上の実施形態において、工程（ａ）及び（ｂ）で用いる水は、カルシウムイオンを含まないことが理想的であるが、実用性の観点から、０．００１ｍｇ／Ｌ以上であってもよく、０．００５ｍｇ／Ｌ以上であってもよい。
　本発明の１以上の実施形態において、色調及び熱安定性をより良好にする観点から、工程（ａ）及び（ｂ）に用いる水中のナトリウムイオンの濃度は４５０ｍｇ／Ｌ以下であることが好ましく、より好ましくは２５０ｍｇ／Ｌ以下であり、さらに好ましくは２２０ｍｇ／Ｌ以下である。本発明の１以上の実施形態において、工程（ａ）及び（ｂ）で用いる水は、ナトリウムイオンを含まないことが理想的であるが、実用性の観点から、０．０５ｍｇ／Ｌ以上であってもよく、０．１ｍｇ／Ｌ以上であってもよい。
　工程（ａ）及び（ｂ）で用いる水は、水中のカルシウムイオンの濃度は４．５ｍｇ／Ｌ以下であればよく、特に限定されないが、水使用量を削減して環境負荷を低減する観点から、ポリヒドロキシ酪酸系樹脂の製造工程にて排出された排水に対し、微生物による嫌気発酵処理及び好気発酵処理を行った後、膜分離活性汚泥法による前処理ろ過工程、並びにカルシウムイオン除去膜によるろ過工程を行うことで得られる処理水を用いることが好ましい。ポリヒドロキシ酪酸系樹脂の製造工程にて排出された排水は、工程（ａ）及び（ｂ）等のポリヒドロキシ酪酸系樹脂の任意の製造工程で排出された排水を含む。
　微生物による嫌気処理及び好気処理、並びに膜分離活性汚泥法による前処理ろ過は、特に限定されず、水処理で用いられる一般的な方法で行うことができる。嫌気処理装置は、例えば、酸生成菌の作用により、高分子量の炭水化物や脂質類を有機酸や低級アルコールに分解する酸生成槽と、グラニュール状のメタン生成菌の作用により、有機酸や低級アルコールをメタンガスと炭酸ガスに分解するＥＧＳＢ方式のメタン生成反応槽で構成することができる。好気処理は、例えば、脱窒槽（活性汚泥の処理槽）と曝気槽（活性汚泥の処理槽）で構成された装置を用い、嫌気処理で分解されなかった有機物を、曝気槽にて好気性菌の作用により分解することで行うことができる。好気処理装置は、脱窒槽（活性汚泥の処理槽）、曝気槽（活性汚泥の処理槽）、第２脱窒槽（活性汚泥の処理槽）、再曝気槽（活性汚泥の処理槽）で構成されてもよい。膜分離活性汚泥法による前処理ろ過工程は、例えば、曝気槽（活性汚泥の処理槽）又は再曝気槽（活性汚泥の処理槽）に、ＵＦ膜又はＭＦ膜のＭＢＲ（メンブレンバイオリアクター膜分離活性汚泥法浸透膜）を設置することで行うことができる。
　本発明の１以上の実施形態において、カルシウムイオン除去膜としては、カルシウムイオン除去性能が高いことから、ＮＦ膜及びＲＯ膜からなる群から選択される一つ以上を用いることが好ましい。
　本発明の１以上の実施形態において、ＮＦ膜又はＲＯ膜は、２０℃で、３０００ｋＰａの圧力をかけた時のＭｇＳＯ4阻止率が６０％以上１００％以下であることが好ましく、より好ましくは７０％以上１００％以下であり、さらに好ましくは９０％以上１００％以下である。ＭｇＳＯ4阻止率が６０％以上であれば、膜のカルシウムイオン透過性が高くならず、得られた処理水を工程（ａ）及び（ｂ）で用いることで、ポリヒドロキシ酪酸系樹脂の色調が良好になりやすく、高温における分子量の低下も抑制されやすい。
　本発明の１以上の実施形態において、ＮＦ膜又はＲＯ膜によるろ過時の膜間差圧は特に規定されないが、カルシウムイオン除去率及びナトリウムイオン除去率の観点から、０．４ＭＰａ以上４．１４ＭＰａ以下であることが好ましく、より好ましくは０．５ＭＰａ以上２．５ＭＰａ以下である。膜間差圧が０．４ＭＰａ以上であれば、透過水量及びイオン除去率が低下せず、４．１４ＭＰａ以下であれば、膜が破損しにくい。
　本発明の１以上の実施形態において、ＮＦ膜又はＲＯ膜によるろ過時の透過速度は特に規定されないが、例えば、０．０１Ｌ／分以上２０００Ｌ／分以下が好ましく、より好ましくは０．５Ｌ／分以上１５００Ｌ／分以下である。透過速度が０．０１Ｌ／分以上であると、生産性がよい。
　本発明の１以上の実施形態において、ＮＦ膜又はＲＯ膜によるろ過時の水温度は特に規定されないが、水温は５０℃以下が好ましく、より好ましくは４５℃以下である。水温が５０℃以下であれば、膜が劣化しくい。
　［ＰＨＢを含有する微生物細胞］
　本発明の１以上の実施態様において、ポリヒドロキシ酪酸系樹脂を含有する微生物細胞は、ＰＨＢ生産能を有する微生物を培養することで得ることができる。
　本発明の１以上の実施態様において、ポリヒドロキシ酪酸系樹脂は、３－ヒドロキシ酪酸（以下、３ＨＢとも記す。）をモノマーユニットとする重合体の総称である。ＰＨＢは、３－ヒドロキシ酪酸の単独重合体であるポリ（３－ヒドロキシ酪酸）であってもよく、３－ヒドロキシ酪酸と他の３－ヒドロキシアルカン酸の共重合体であってもよい。他の３－ヒドロキシアルカン酸としては、例えば、３－ヒドロキシへキサン酸（以下、３ＨＨとも記す。）、３-ヒドロキシヘプタン酸、３-ヒドロキシオクタン酸、３-ヒドロキシノナン酸、３-ヒドロキシデカン酸、３-ヒドロキシウンデカン酸、３-ヒドロキシドデカン酸、３-ヒドロキシトリデカン酸、３-ヒドロキシテトラデカン酸、３-ヒドロキシペンタデカン酸及び３-ヒドロキシへキサデカン酸からなる群から選ばれる１以上のモノマーを用いることができる。
　ＰＨＢとしては、工業的に生産が容易である点から、ポリ（３－ヒドロキシ酪酸）、ポリ（３－ヒドロキシ酪酸－ｃｏ－３－ヒドロキシへキサン酸）、ポリ（３－ヒドロキシ酪酸－ｃｏ－３－ヒドロキシオクタン酸）等が好ましく、ポリ（３－ヒドロキシ酪酸－ｃｏ－３－ヒドロキシへキサン酸）が特に好ましい。前記３ＨＢ及び３ＨＨの２成分共重合体ＰＨＢＨを構成する各モノマーユニットの組成比については特に限定されるものではないが、全モノマーユニットの合計を１００モル％とした時に、３ＨＨユニットが１モル％以上５０モル％以下であってもよく、１モル％以上２５モル％以下であってもよく、１モル％以上１５モル％以下であってもよい。
　本発明の１以上の実施形態において、ＰＨＢ生産能を有する微生物は、特に限定されず、天然から単離された微生物や菌株の寄託機関（例えばＩＦＯ、ＡＴＣＣ等）に寄託されている微生物、または、それらから調製し得る変異体や形質転換体等を使用できる。例えば、カプリアビダス（Ｃｕｐｒｉａｖｉｄｕｓ）属、アルカリゲネス（Ａｌｃａｌｉｇｅｎｅｓ）属、ラルストニア（Ｒａｌｓｔｏｎｉａ）属、シュウドモナス（Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ）属、バチルス（Ｂａｃｉｌｌｕｓ）属、アゾトバクター（Ａｚｏｔｏｂａｃｔｅｒ）属、ノカルディア（Ｎｏｃａｒｄｉａ）属、アエロモナス（Ａｅｒｏｍｏｎａｓ）属の菌等が挙げられる。特に、アルカリゲネス・リポリティカ（Ａ．ｌｉｐｏｌｙｔｉｃａ）、アルカリゲネス・ラトゥス（Ａ．ｌａｔｕｓ）、アエロモナス・キャビエ（Ａ．ｃａｖｉａｅ）、アエロモナス・ハイドロフィラ（Ａ．ｈｙｄｒｏｐｈｉｌａ）、カプリアビダス・ネカトール（Ｃ．ｎｅｃａｔｏｒ）等の菌株が好ましい。また、微生物が、本来ＰＨＢの生産能力を有しない場合、もしくは生産量が低い場合には、該微生物に目的とするＰＨＢの合成酵素遺伝子及び/又はその変異体を導入し、得られる形質転換体を用いることもできる。このような形質転換体の作製に用いるＰＨＢの合成酵素遺伝子としては特に限定はないが、アエロモナス・キャビエ由来のＰＨＢ合成酵素の遺伝子が好ましい。
　上述した微生物を適切な条件で培養することで、菌体内にＰＨＢを蓄積させた微生物を得ることができる。その培養方法については特に限定はないが、例えば特開平０５－９３０４９号公報、国際公開公報２００８／０１０２９６号等に挙げられる方法等を用いることができる。ＰＨＢを含有する微生物細胞としては、培養完了後の、ＰＨＢ含有微生物細胞を含む菌体培養液をそのまま用いるか、或いは、菌体培養液を加熱することで菌体を死滅した後の滅菌済みの菌体培養液を用いることができる。前記滅菌は、例えば、５０℃以上８０℃以下の温度下で５分以上１２０分以下熱処理することで行ってもよい。
　［工程（ａ）］
　工程（ａ）において、ＰＨＢを含有する微生物細胞を破砕又は可溶化する。工程（ａ）は、例えば、化学的処理及び物理的破砕処理からなる群から選択される少なくとも一つの処理で行うことができる。
　化学的処理は、アルカリ性化合物、蛋白質分解酵素及び細胞壁分解酵素からなる群から選択される少なくとも一つの化合物で行うことができる。
　アルカリ性化合物は、ＰＨＢ含有微生物細胞の細胞壁を破壊して細胞中のＰＨＢを細胞外に流出できるものであれば特に限定されるものではなく、例えば、水酸化ナトリウム、水酸化カリウム、水酸化リチウム等のアルカリ金属の水酸化物、炭酸ナトリウム、炭酸カリウム等のアルカリ金属の炭酸塩、炭酸水素ナトリウム、炭酸水素カリウム等のアルカリ金属の炭酸水素塩、酢酸ナトリウム、酢酸カリウム等の有機酸のアルカリ金属塩、ホウ砂等のアルカリ金属のホウ酸塩、リン酸三ナトリウム、リン酸水素二ナトリウム、リン酸三カリウム、リン酸水素二カリウム等のアルカリ金属のリン酸塩、水酸化バリウム等のアルカリ土類金属の水酸化物、アンモニア水等が挙げられる。この中でも、工業生産に適し、コストを低減する観点から、水酸化ナトリウム、炭酸ナトリウム、水酸化カリウム、及び水酸化リチウムからなる群から選択される一つ以上が好ましい。
　蛋白質分解酵素としては、特に限定されないが、例えば、アルカラーゼ、ペプシン、トリプシン、パパイン、キモトリプシン、アミノペプチダーゼ、カルボキシペプチダーゼ等が挙げられる。具体的な蛋白質分解酵素としては、例えば「プロテアーゼＡ」、「プロテアーゼＰ」、「プロテアーゼＮ」（以上、天野エンザイム社製）、「アルカラーゼ」、「エスペラーゼ」、「ザビナーゼ」、「エバラーゼ」（以上、ノボザイムズ社製）等が工業的に使用可能であり、分解活性の点からも好適に使用できる。
　細胞壁分解酵素としては、特に限定されないが、例えば、リゾチーム、アミラーゼ、セルラーゼ、マルターゼ、サッカラーゼ、α－グリコシナーゼ及びβ－グリコシナーゼ等が挙げられる。上記細胞壁分解酵素の内、溶菌効果の点からリゾチームの使用が好ましい。具体的な細胞壁分解酵素としては、例えば「リゾチーム」（山東省華源経貿製）、「ビオザイムＡ」、「セルラーゼＡ「アマノ」３」、「セルラーゼＴ「アマノ」４」、「α－グルコシダーゼ「アマノ」」（以上、天野エンザイム社製）、「ターマミル」、「セルソフト」（以上、ノボザイムズ社製）等が工業的に使用可能である。
　上述した酵素による処理は、高い分離精製効果が得られる点で界面活性化剤の存在下に行うことが望ましい。また、酵素としては、例えば酵素と、酵素の安定化剤、界面活性化剤及び再汚染防止剤等からなる群から選ばれる一つ以上の添加剤を含有する酵素組成物を用いてもよい。
　界面活性剤としては、陰イオン界面活性剤、陽イオン界面活性剤、両性界面活性剤、非イオン界面活性剤が挙げられる。細胞膜の破壊による残留物の除去効果が高い観点からは、陰イオン界面活性剤及び／又は非イオン界面活性剤が好ましい。蛋白質等を除去する目的においては、陰イオン界面活性剤を用いることが好ましく、また、脂肪酸や油脂の除去を目的とする場合、非イオン界面活性剤を用いることが好ましい。また陰イオン界面活性剤及び非イオン界面活性剤の両方を用いることができる。両方を用いる場合、陰イオン界面活性剤／非イオン界面活性剤の重量比は１／１００～１００／１０が好ましく、５／１００～１００／２０がより好ましく、５／１００～１００／１００がさらに好ましく、５／１００～５０／１００が特に好ましい。
　陰イオン界面活性剤としては、例えば、アルキル硫酸塩、アルキルベンゼンスルホン酸塩、アルキル硫酸エステル塩、アルケニル硫酸エステル塩、アルキルエーテル硫酸エステル塩、アルケニルエーテル硫酸エステル塩、α－オレフィンスルホン酸塩、α－スルホ脂肪酸塩、α－スルホ脂肪酸塩のエステル、アルキルエーテルカルボン酸塩、アルケニルエーテルカルボン酸塩、アミノ酸型界面活性剤、Ｎ－アシルアミノ酸型界面活性剤等が挙げられる。中でもアルキル基の炭素数が１２～１４のアルキル硫酸塩、アルキル基の炭素数が１２～１６の直鎖アルキルベンゼンスルホン酸塩、アルキル基の炭素数が１０～１８のアルキル硫酸エステル塩又はアルキル基の炭素数が１０～１８のアルキルエーテル硫酸エステル塩が好ましい。対イオンとしてはナトリウム、カリウム等のアルカリ金属、マグネシウム等のアルカリ土類金属、モノエタノールアミン、ジエタノールアミン、トリエタノールアミン等のアルカノールアミンが好ましい。
　非イオン界面活性剤としては、例えば、ポリオキシエチレンアルキルエーテル、ポリオキシエチレンアルキルフェニルエーテル、ポリオキシアルキレンアルキルエーテル、脂肪酸ソルビタンエステル、アルキルポリグルコシド、脂肪酸ジエタノールアミド、アルキルモノグリセリルエーテル等が挙げられる。親水性が高く、生分解性が比較的良好である点から、ポリオキシエチレンアルキルエーテルやポリオキシアルキレンアルキルエーテルが好ましい。
　陽イオン界面活性剤としては、例えば、アルキルトリメチルアンモニウム塩、ジアルキルジメチルアンモニウム塩等が挙げられる。
　両性界面活性剤としては、例えば、カルボベタイン型、スルホベタイン型等が挙げられる。
　上述した界面活性剤のうち、陰イオン界面活性剤であるドデシル硫酸ナトリウム、ドデシルベンゼンスルホン酸ナトリウム、コール酸ナトリウム、デオキシコール酸ナトリウム及びオレイン酸ナトリウム、非イオン界面活性剤であるポリオキシエチレンアルキルエーテル及びポリオキシアルキレンアルキルエーテル等がコスト、使用量や添加効果の点で好ましい。
　界面活性剤の添加量は、特に制限されないが、菌体培養液１００重量部に対して、０．００１重量部以上１０重量部以下が好ましく、さらにはコストの点から、５重量部以下が好ましい。界面活性剤は、１種を単独で用いてもよく、２種以上を併用してもよい。
　酵素処理は、例えば、菌体培養液にアルカリ化合物及び／又は界面活性剤を添加し、撹拌しながら行うことが好ましい。酵素処理条件については、使用する酵素の至適値のコントロール下で行うのが好ましい。酵素の必要量は、酵素の種類及び活性に依存する。特に制限はされないが、１００重量部のＰＨＢ１００に対して、０．００１～１０重量部が好ましく、コストの点から０．００１～５重量部がより好ましい。
　物理的破砕処理は、破砕効果を高め、ＰＨＢを回収しやすい観点から、アルカリ性化合物、又は、アルカリ性化合物及び界面活性剤を添加した後に行うことが好ましい。アルカリ性化合物及び界面活性剤としては、上述したものを適宜用いることができる。上述したアルカリ性化合物の中、工業生産に適し、コストを低減する観点から、水酸化ナトリウム、炭酸ナトリウム、水酸化カリウム、水酸化リチウムが好ましい。上述した界面活性剤の中、陰イオン界面活性剤であるドデシル硫酸ナトリウム、ドデシルベンゼンスルホン酸ナトリウム、コール酸ナトリウム、デオキシコール酸ナトリウム及びオレイン酸ナトリウム、非イオン界面活性剤であるポリオキシエチレンアルキルエーテル及びポリオキシアルキレンアルキルエーテル等がコスト、使用量や添加効果の点で好ましい。
　アルカリ性化合物を添加することで、菌体培養液のｐＨを８．０以上１２．５以下に調整することが好ましい。ＰＨＢに影響することなく、菌体（微生物細胞）残渣、菌体生成有機物、菌体構成有機物等を可溶化しやすい。菌体培養液にアルカリ性化合物を添加した後に、２０℃以上８０℃以下の温度、好ましくは２０℃以上５０℃以下の温度で３０分以上２時間以下処理してもよい。
　界面活性剤の添加量は、特に制限されないが、菌体培養液１００重量部に対して、０．００１重量部以上１０重量部以下が好ましく、さらにはコストの点から、５重量部以下が好ましい。界面活性剤は、１種を単独で用いてもよく、２種以上を併用してもよい。
　物理的破砕処理を行う装置としては、特に限定されないが、例えば、高圧ホモジナイザー、超音波破砕機、乳化分散機、ビーズミル等が挙げられる。中でも破砕効率の点から高圧ホモジナイザーの使用が好ましく、懸濁液が微小開口部を有する耐圧性容器に導入され高圧をかけられることにより開口部から押し出されるタイプがより好ましい。このタイプの破砕機としては、例えば、ニロソアビ社製の高圧ホモジナイザーモデル「ＰＡ２Ｋ型」等が挙げられる。高圧ホモジナイザーを用いると微生物細胞に大きな剪断力が働くため、微生物細胞は効率的に破壊されＰＨＢの分離性が向上する。このような機器は開口部で高圧がかかり、瞬間的に高温になるため、必要に応じて、一般の低温恒温循環槽により菌体培養液を冷却し、温度の上昇を防ぎ、２０℃以上４０℃以下での破砕処理を行うことが好ましい。２０℃以上４０℃以下で処理を行うことにより、ＰＨＢの分子量をほとんど低下させずに処理することができる。高圧破砕を行う際の破砕圧力は、特に限定されないが、破砕効率及びコストの観点から、３０ＭＰａ以上６０ＭＰａ以下が好ましい。
　工程（ａ）において、化学的処理及び物理的破砕処理は併用してもよく、この場合、破砕効果を高める観点から、化学的処理を行った後に、物理的破砕処理を行うことが好ましい。コストの観点から、工程（ａ）は、物理的破砕処理のみで行ってもよい。
　工程（ａ）において、水として、カルシウムイオンの濃度が４．５ｍｇ／Ｌ以下（好ましくは３．０ｍｇ／Ｌ以下、より好ましくは２．０ｍｇ／Ｌ以下）の水を用いる。例えば、界面活性剤やアルカリ性化合物等の添加時にカルシウムイオンの濃度が４．５ｍｇ／Ｌ以下（好ましくは３．０ｍｇ／Ｌ以下、より好ましくは２．０ｍｇ／Ｌ以下）の水を用いる。該水は、ナトリウムイオンの濃度が４５０ｍｇ／Ｌ以下であることが好ましく、２５０ｍｇ／Ｌ以下であることがより好ましく、２２０ｍｇ／Ｌ以下であることがさらに好ましい。
　［工程（ｂ）］
　工程（ｂ）において、工程（ａ）で得られた組成物、例えば菌体破砕液中のポリヒドロキシ酪酸系樹脂を分離する。分離は、特に限定されず、ろ過、沈降分離、遠心分離等の方法を用いて、固液分離を行い、ポリヒドロキシ酪酸系樹脂を水不溶性成分と回収することができる。工業的に大量処理可能でかつ連続使用可能という観点から、遠心分離が好ましい。
　遠心分離機としては、特に限定されないが、孔なし回転容器をもつ遠心沈降機が好ましく、種類としては分離板型、円筒型、デカンター型等がある。ＰＨＢ粒子は水との比重差が小さいので、分離沈降面積が大きく、高い加速度が得られる分離板型（間欠排出型、ノズル排出型）が好ましく、破砕処理液に含まれるＰＨＢ濃度が高い場合は特にノズル排出型が好ましい。デカンター型としては、分離板を有し、分離沈降面積を大きくした機種が好ましい。
　工程（ｂ）において、分離の前に、工程（ａ）で得られた組成物、例えば菌体破砕液１００重量部に水系媒体を５００重量部以上１０００重量部以下添加してもよい。
　工程（ｂ）において、水系媒体は、水、又は水と水混和性有機溶媒の混合溶媒であってもよい。水系媒体中の水の含有量は、５０重量％以上が好ましく、より好ましくは７０重量％以上、さらに好ましくは８０重量％以上、特に好ましくは８５重量％以上である。工程（ｂ）において、水として、カルシウムイオンの濃度が４．５ｍｇ／Ｌ以下、好ましくは３．０ｍｇ／Ｌ以下、より好ましくは２．０ｍｇ／Ｌ以下の水を用いる。該水は、ナトリウムイオンの濃度が４５０ｍｇ／Ｌ以下であることが好ましく、２５０ｍｇ／Ｌ以下であることがより好ましく、２２０ｍｇ／Ｌ以下であることがさらに好ましい。
　水混和性有機溶媒としては、特に限定されないが、例えば、メタノール、エタノール、１－プロパノール、２－プロパノール、１－ブタノール、２－ブタノール、ｉｓｏ－ブタノール、ペンタノール、ヘキサノール、ヘプタノール等のアルコール類；アセトン、メチルエチルケトン等のケトン類；テトラヒドロフラン、ジオキサン等のエーテル類；アセトニトリル、プロピオニトリル等のニトリル類；ジメチルホルムアミド、アセトアミド等のアミド類；ジメチルスルホキシド、ピリジン、ピペリジン等が挙げられる。中でも、メタノール、エタノール、１－プロパノール、２－プロパノール、１－ブタノール、２－ブタノール、ｉｓｏ－ブタノール、アセトン、メチルエチルケトン、テトラヒドロフラン、ジオキサン、アセトニトリル、プロピオニトリル等が、除去しやすい点から好ましい。また、メタノール、エタノール、１－プロパノール、２－プロパノール、ブタノール、アセトン等が入手容易であることからより好ましい。さらに、メタノール、エタノール、アセトンが特に好ましい
　工程（ｂ）においては、分離したＰＨＢ（ＰＨＢを含む水不溶性成分）を少なくとも１回以上上述した水系媒体で洗浄することでＰＨＢを精製してもよい。水系媒体による洗浄は、例えば、ポリヒドロキシ酪酸系樹脂を含む水不溶性成分１００重量部に水系媒体を５００重量部以上１０００重量部以下添加して行ってもよい。また、微生物細胞由来の不純物を効果的に除去し、精製効果を高めるために、水系媒体にアルカリ性化合物、界面活性剤及び蛋白質分解酵素等を添加してもよい。
　［工程（ｃ）］
　本発明の１以上の実施形態の製造方法は、工程（ｂ）で分離したＰＨＢを乾燥する工程（ｃ）を含んでもよい。水系媒体で洗浄し、脱水したＰＨＢ（脱水樹脂）は、そのまま乾燥して粉体状のＰＨＢを得ることができる。乾燥方法は適宜選択でき、特に限定されないが、例えば、スプレー乾燥、気流乾燥、流動乾燥、バンド乾燥等の一般的な乾燥方法を好ましく用いることができる。
　或いは、水系媒体で洗浄し、濃縮したＰＨＢ分散液に、分散剤を添加し、ｐＨを７以下に調整した後に、乾燥して粉体状のＰＨＢを得ることができる。分散剤としては、例えば、ポリビニルアルコール（ＰＶＡ）、メチルセルロース、エチルセルロース、ヒドロキシメチルセルロース、ヒドロキシエチルセルロース、ポリアクリル酸、ポリアクリル酸ナトリウム、ポリアクリル酸カリウム、ポリメタクリル酸、ポリメタクリル酸ナトリウム等の水溶性高分子；ポリエチレングリコール・ポリプロピレングリコール・ブロックエーテル型（ポリオキシエチレン・ポリオキシプロピレン・ブロックポリマー型）等の非イオン界面活性剤等が挙げられる。ｐＨを７以下に調整する方法としては、例えば酸を添加する方法が挙げられる。酸は特に限定されず、有機酸、無機酸のいずれでもよく、例えば、硫酸、塩酸、リン酸、酢酸等を適宜使用できる。
　ＰＨＢの分子量は、目的とする用途で、実質的に十分な物性を示すものであれば、その分子量は特に制限されない。例えば、成形加工性や成形体の強度の観点から、ＰＨＢの重量平均分子量は、５０，０００以上３，０００，０００以下が好ましく、６０，０００以上１，５００，０００以下がより好ましい。なお、ここでの重量平均分子量は、クロロホルム溶離液を用いたゲルバーミエーションクロマトグラフィー（ＧＰＣ）を用い、ポリスチレン換算分子量分布より測定されたものをいう。当該ＧＰＣにおけるカラムとしては、前記分子量を測定するのに適切なカラムを使用すればよい。
　ＰＨＢは、熱安定性が高く、１６０℃で２０分間熱処理した場合の重量平均分子量保持率が７０％以上であることが好ましく、７５％以上であることがより好ましく、８０％以上であることがさらに好ましく、８５％以上であることがさらにより好ましく、９０％以上であることが特に好ましい。
　ＰＨＢは、色調が良好であり、１６０℃でプレス成形した厚みが５ｍｍのシートの黄色度指数（ＹＩ値）が２０以下であることが好ましく、１７以下であることがより好ましい。
　ＰＨＢは、繊維、糸、ロープ、織物、編物、不織布、紙、フィルム、シート、チューブ、板、棒、容器、袋、部品、発泡体等の各種成形体に成形できる。その成形体は、農業、漁業、林業、園芸、医学、衛生品、衣料、非衣料、包装、その他の分野に好適に用いることができる。
　微生物が生産した他の生分解性プラスチックの場合も、生分解性プラスチックを含む微生物細胞を破砕又は可溶化し、生分解性プラスチックを分離する工程において、上述したカルシウムイオンの濃度が４．５ｍｇ／Ｌ以下の水を用いることができる。
　以下、実施例により本発明をより具体的に説明するが、本発明はこれらの実施例により限定されるものではない。
　［測定及び評価方法］
　実施例及び比較例における測定・評価方法を、以下に示した。
　（色度）
　作製した洗浄水２００ｍＬを専用の測定容器に入れ、測定器（笠原理化工業社製 ＴＣＲ－５Ｚ）を気泡が付かないように静かに浸漬させて、洗浄水の色度を測定した。厚生労働省の「水道水質基準」で、水道水は、色度５度以下である。
　（熱安定性）
　熱安定性は、１６０℃で２０分間加熱した後のポリヒドロキシ酪酸系樹脂の重量平均分子量保持率に基づいて、重量平均分子量保持率が７０％以上であれば、熱安定性良好と判断し、重量平均分子量保持率が７０％未満であれば、熱安定性不良と判断した。
　重量平均分子量保持率（％）＝（加熱した後のＰＨＢの重量平均分子量／加熱する前のＰＨＢの重量平均分子量）×１００
　＜加熱する前のＰＨＢの重量平均分子量＞
　ポリヒドロキシ酪酸系樹脂粉体１０ｍｇを用い、クロロホルム１０ｍＬに溶解させた後、不溶物を濾過により除いた。この溶液（濾液）を、「Ｓｈｏｄｅｘ　Ｋ８０５Ｌ（３００ｘ８ｍｍ、２本連結）」（昭和電工社製）を装着した島津製作所製ＧＰＣシステムを用い、クロロホルムを移動相として分子量測定に付した。分子量標準サンプルには、市販の標準ポリスチレンを用いた。
　＜加熱した後のＰＨＢの重量平均分子量＞
　ポリヒドロキシ酪酸系樹脂粉体に対して１６０℃で７分間予熱処理した後、１６０℃で２０分間加熱してポリヒドロキシ酪酸系樹脂シートを作製した。該ポリヒドロキシ酪酸系樹脂シート１０ｍｇを用いた以外は、加熱する前のＰＨＢの重量平均分子量の測定の場合と同様の手順で加熱した後のＰＨＢの重量平均分子量を測定した。
　（加熱する前のＰＨＢの組成）
　ポリヒドロキシ酪酸系樹脂粉体約２０ｍｇに２ｍＬの硫酸－メタノール混合液（１５：８５）と２ｍＬのクロロホルムを添加して密栓し、１００℃で１４０分間加熱することでポリエステル分解物のメチルエステルを得た。冷却後、これに１．５ｇの炭酸水素ナトリウムを少しずつ加えて中和し、炭酸ガスの発生がとまるまで放置した。４ｍＬのジイソプロピルエーテルを添加してよく混合した後、遠心して、上清中のポリエステル分解物のヒドロキシアルカン酸メチルエステルの組成をキャピラリーガスクロマトグラフィーにより分析し、得られたポリエステルのモノマーユニットの組成（含有率）を求めた。ガスクロマトグラフは島津製作所社製ＧＣ－１７Ａ、キャピラリーカラムはＧＬサイエンス社製ＮＥＵＴＲＡ　ＢＯＮＤ－１（カラム長２５ｍ、カラム内径０．２５ｍｍ、液膜厚０．４μｍ）を用いた。温度条件は、初発温度１００℃～２００℃まで８℃／分の速度で昇温、さらに２００℃～２９０℃まで３０℃／分の速度で昇温した。
　（黄色度指数（ＹＩ値）の測定）
　ポリヒドロキシ酪酸系樹脂のプレスシートを作製し、該プレスシートを測定サンプルとした。ポリヒドロキシ酪酸系樹脂のプレスシートは、ポリヒドロキシ酪酸系樹脂粉体３．０ｇを、１５ｃｍ四方の金属板で挟み、さらに金属板の四隅に厚さ０．５ｍｍの金属板を挿入して、これを実験用小型プレス機（高林理化株式会社製Ｈ－１５型）にセットして、１６０℃にて７分間加温後、１６０℃にて加熱しながら約５ＭＰａにて２分間プレスし、プレス後は室温に放置してポリヒドロキシ酪酸系樹脂を硬化させることで作製した。ＹＩ値は、色差計「ＳＥ－２０００」（日本電色社製）にて、３０ｍｍ測定板を使って該測定板にプレスシートを載せ、その上に白色標準板を被せて測定した。ＹＩ値が２０以下であれば、色調良好と判断し、ＹＩ値が２０を超える場合、色調不良と判断した。
　（洗浄水の製造例１）
　ポリヒドロキシ酪酸系樹脂の生産で排出される排水に対し、微生物による嫌気処理と好気処理を行った後、ＵＦ膜を用いた膜分離活性汚泥法にて前処理ろ過し、その後ＲＯ膜でろ過を行った。嫌気処理は、酸生成槽（ｐＨ７．１付近）にて、酸生成菌の作用により、高分子量の炭水化物や脂質類を有機酸や低級アルコールに分解し、次いで、ＥＧＳＢ方式のメタン生成反応槽（負荷量１５ｋｇ－ＣＯＤｃｒ／ｍ3／ｄ）にて、グラニュール状のメタン生成菌の作用により、有機酸や低級アルコールをメタンガスと炭酸ガスに分解することで行った。好気処理は、脱窒槽（活性汚泥の処理槽）、曝気槽（活性汚泥の処理槽）、第２脱窒槽（活性汚泥の処理槽）、再曝気槽（活性汚泥の処理槽）で構成された装置で、嫌気処理で分解されなかった有機物を好気性菌の作用により分解することで行った。膜分離活性汚泥法による前処理ろ過は、再曝気槽（活性汚泥の処理槽）に、ＵＦ膜（中空糸膜：ＰＶＤＦ、三菱ケミカル社製、公称孔径：０．０５μｍ、２０℃で、３０００ｋＰａの圧力をかけた時のＭｇＳＯ4阻止率０％）を設置して行った。ＵＦ膜ではろ過線速０．８６～１．１５ｍ/ｄａｙで水を透過させた。ＵＦ膜透過水を集水し、水温３０℃、膜間差圧（透過圧）０．７～１．１５ＭＰａ、透過速度０．７５～０．８５Ｌ/分でＲＯ膜（材質：複合ポリアミド、日東電工製、２０℃で、３０００ｋＰａの圧力をかけた時のＭｇＳＯ4阻止率９９．７％）に送液した。ＲＯ膜を透過しなかった水は、集水槽に戻し、透過した水を洗浄水として用いた。ＲＯ膜にＵＦ膜透過水を９７分間透過させ、ＵＦ膜透過水の７０重量％を透過させた。透過初期から１３分までのＲＯ膜透過水を採取して洗浄水１を得た。
　（洗浄水の製造例２）
　ＲＯ膜を透過した水の中、９０分から９７分までの透過水を採取した以外は、製造例１と同様にして、洗浄水２を得た。
　（洗浄水の製造例３）
　製造例１と同条件でＲＯ膜を透過させた水を、さらにＲＯ膜（材質：複合ポリアミド、日東電工製、２０℃で、３０００ｋＰａの圧力をかけた時のＭｇＳＯ4阻止率９９．７％）を水温３０℃、透過圧０．８ＭＰａ、透過速度１．２５Ｌ/分で透過させることで洗浄水３を得た。透過水量はＵＦ膜透過水の９０％量であった。
　（洗浄水の製造例４）
　製造例１と同条件でＵＦ膜を透過させたＵＦ膜透過水を採取して洗浄水４を得た。
　（洗浄水の製造例５）
　製造例１と同条件でＵＦ膜透過水を集水し、水温２０℃、透過圧３ＭＰａ、透過速度３０～３００ｇ/時間でＮＦ膜（材質：複合ポリアミド、Ｓｙｎｄｅｒ製、２０℃で、３０００ｋＰａの圧力をかけた時のＭｇＳＯ4阻止率９６．１％）を透過させたＮＦ膜透過水を採取して洗浄水５を得た。透過水量はＵＦ膜透過水の７５％量であった。
　（洗浄水の製造例６）
　工業用水（カネカ製）をイオン交換樹脂（オルガノ製、強酸性陽イオン樹脂と強塩基性陰イオン樹脂）で処理して洗浄水６を得た。
　（洗浄水の製造例７）
　製造例１と同条件でＵＦ膜透過水を集水し、水温２０℃、透過圧３ＭＰａ、透過速度１００～５５０ｇ/時間でＮＦ膜（材質：複合ポリアミド、Ｓｙｎｄｅｒ製、２０℃で、３０００ｋＰａの圧力をかけた時のＭｇＳＯ4阻止率６．７％）を透過させたＮＦ膜透過水を採取して洗浄水７を得た。透過水量はＵＦ膜透過水の７５％量であった。
　洗浄水１～７におけるカルシウムイオンの濃度、ナトリウムイオンの濃度及び色度を下記表１に示した。
Figure JPOXMLDOC01-appb-T000001
　［実施例１］
　（菌体培養液の調製）
　国際公開公報第２００８／０１０２９６号の段落［００４９］に記載のラルストニア・ユートロファＫＮＫ－００５株を、同文献の段落［００５０］～［００５３］に記載の方法で培養し、ＰＨＢ（３ＨＨ含有量が１１．５モル％のポリ（３－ヒドロキシ酪酸－ｃｏ－３－ヒドロキシへキサン酸））を含有する菌体を含む菌体培養液を得た。なお、ラルストニア・ユートロファは、現在では、カプリアビダス・ネカトールに分類されている。
　（滅菌処理）
　上記で得られた菌体培養液を内温６０～８０℃で２０分間加熱・攪拌処理し、滅菌処理を行った。
　（工程（ａ）及び（ｂ））
　上記で得られた滅菌済みの菌体培養液に、ドデシル硫酸ナトリウムを０．２重量％になるように添加した。さらに、ｐＨが１１．０になるように水酸化ナトリウムを溶解した洗浄水を添加した後、５０℃で１時間保温した。その後、高圧破砕機（ニロソアビ社製高圧ホモジナイザーモデルＰＡ２Ｋ型）を用いて、４４～５４ＭＰａの圧力で高圧破砕を行った。
　上記で得られた高圧破砕後の菌体破砕液に同じ重量の洗浄水を添加した。これを遠心分離した後、上清を除去して２倍濃縮した。この濃縮したＰＨＢの水性懸濁液に、水酸化ナトリウムを添加した洗浄水（ｐＨ１１．０）を除去した上清と同じ重量になるように添加し、遠心分離した。次いで、上清を除去してから洗浄水を添加して懸濁させ、０．２重量％のドデシル硫酸ナトリウムと、ＰＨＢの１／１００重量のプロテアーゼ（ノボザイム社製、エスペラーゼ）とを添加し、ｐＨ１０．０で５０℃に保持したまま、２時間攪拌した。その後、遠心分離により上清を除去して５倍濃縮した。この濃縮したＰＨＢの水性懸濁液に水酸化ナトリウムを添加した洗浄水（ｐＨ１１．０）を、除去した上清と同じ重量になるように添加し、遠心分離した。同様の操作を５回繰り返した後、上清を除去して、ポリヒドロキシ酪酸系樹脂濃度が５２重量％になるように調整した。
　工程（ａ）及び（ｂ）では、洗浄水として、洗浄水１を用いた。
　（工程（ｃ））
　上記で得られたポリヒドロキシ酪酸系樹脂水性懸濁液（固形分濃度５２重量％）に、分散剤（ポリエチレングリコール・ポリプロピレングリコール・ブロックエーテル型非イオン界面活性剤、商品名「プロノン♯２０８」、日油製）を１ｐｈｒ（水性懸濁液中に存在するポリヒドロキシ酪酸系樹脂１００重量部に対して１重量部）添加し、その後、固形分濃度を蒸留水で３０重量％に調整した。この液を３０分間撹拌した後、硫酸を添加してｐＨが４に安定するまで調整した。得られたポリヒドロキシ酪酸系樹脂の水性懸濁液を、６０℃で１２時間乾燥してポリヒドロキシ酪酸系樹脂粉体を作製した。
　［実施例２］
　工程（ａ）及び（ｂ）において、洗浄水として洗浄水２を用いた以外は、実施例１と同様にして、ポリヒドロキシ酪酸系樹脂粉体を得た。
　［実施例３］
　工程（ａ）及び（ｂ）において、洗浄水として洗浄水３を用いた以外は、実施例１と同様にして、ポリヒドロキシ酪酸系樹脂粉体を得た。
　［比較例１］
　工程（ａ）及び（ｂ）において、洗浄水として洗浄水４を用いた以外は、実施例１と同様にして、ポリヒドロキシ酪酸系樹脂粉体を得た。
　［実施例４］
　菌体培養液の調製でＰＨＢ（３ＨＨ含有量が１０．９モル％のポリ（３－ヒドロキシ酪酸－ｃｏ－３－ヒドロキシへキサン酸））を含有する菌体を含む菌体培養液を用いたことと、工程（ａ）及び（ｂ）において、洗浄水として洗浄水２を用いた以外は、実施例１と同じ操作により、ポリヒドロキシ酪酸系樹脂粉体を得た。
　［実施例５］
　工程（ａ）及び（ｂ）において、洗浄水として洗浄水５を用いた以外は、実施例４と同様にして、ポリヒドロキシ酪酸系樹脂粉体を得た。
　［実施例６］
　工程（ａ）及び（ｂ）において、洗浄水として洗浄水６を用いた以外は、実施例４と同様にして、ポリヒドロキシ酪酸系樹脂粉体を得た。
　［比較例２］
　工程（ａ）及び（ｂ）において、洗浄水として洗浄水７を用いた以外は、実施例４と同様にして、ポリヒドロキシ酪酸系樹脂粉体を得た。
　［比較例３］
　工程（ａ）及び（ｂ）において、洗浄水として洗浄水４を用いた以外は、実施例４と同様にして、ポリヒドロキシ酪酸系樹脂粉体を得た。
　実施例及び比較例で得られたポリヒドロキシ酪酸系樹脂粉体の熱安定性及びＹＩ値を上述したとおりに測定・評価し、その結果を下記表２に示した。下記表２において、加熱前の３ＨＨ含有量は、加熱前のポリヒドロキシ酪酸系樹脂における３ＨＨの含有量を意味する。
Figure JPOXMLDOC01-appb-T000002
　実施例では、工程（ａ）及び（ｂ）において、カルシウムイオンの濃度が４．５ｍｇ／Ｌ以下洗浄水を用いることで、ポリヒドロキシ酪酸系樹脂粉体の熱安定性が高く、色調が良好となる。また、洗浄水中のカルシウムイオン濃度が低ければ、ポリヒドロキシ酪酸系樹脂粉体の熱安定性及び色調に優れる傾向がある。比較例２では、透明度の高い水を利用したが、ＹＩ値は基準値を超えていることからも、ポリヒドロキシ酪酸系樹脂粉体のＹＩ値には、カルシウムイオン濃度がより強く影響を及ぼすことが示された。特に、洗浄水としてポリヒドロキシ酪酸系樹脂の製造工程にて排出された排水を処理した処理水を洗浄水として用いた実施例１～５では、ポリヒドロキシ酪酸系樹脂粉体の熱安定性が高く、色調が良好であることから、水使用量の削減が可能となり、環境負荷を低減しながら色調及び熱安定性が良好であるポリヒドロキシ酪酸系樹脂を製造することができた。
　本発明は、特に限定されないが、例えば、下記の１以上の実施形態を含む。
　［１］　ポリヒドロキシ酪酸系樹脂を含有する微生物細胞を破砕又は可溶化する工程（ａ）、及び
　工程（ａ）で得られた組成物中のポリヒドロキシ酪酸系樹脂を分離する工程（ｂ）を含み、
　工程（ａ）及び工程（ｂ）では、カルシウムイオンの濃度が４．５ｍｇ／Ｌ以下の水を用いることを特徴とするポリヒドロキシ酪酸系樹脂の製造方法。
　［２］　工程（ａ）及び工程（ｂ）に用いる水において、ナトリウムイオンの濃度が４５０ｍｇ／Ｌ以下である、［１］に記載のポリヒドロキシ酪酸系樹脂の製造方法。
　［３］　工程（ａ）及び工程（ｂ）に用いる水は、ポリヒドロキシ酪酸系樹脂の製造工程にて排出された排水に対し、微生物による嫌気処理及び好気処理を行った後、膜分離活性汚泥法による前処理ろ過工程、並びにカルシウムイオン除去膜によるろ過工程を行うことで得られる、［１］又は［２］に記載のポリヒドロキシ酪酸系樹脂の製造方法。
　［４］　前記カルシウムイオン除去膜は、ＮＦ膜及びＲＯ膜からなる群から選択される一つ以上である、［１］から［３］のいずれかに記載のポリヒドロキシ酪酸系樹脂の製造方法。
　［５］　前記ＮＦ膜又はＲＯ膜は、２０℃で、３０００ｋＰａの圧力をかけた時のＭｇＳＯ4阻止率が６０％以上１００％以下である、［４］に記載のポリヒドロキシ酪酸系樹脂の製造方法。
　［６］　工程（ａ）は、化学的処理及び物理的破砕処理からなる群から選択される少なくとも一つの処理を含む、［１］から［５］のいずれかに記載のポリヒドロキシ酪酸系樹脂の製造方法。
　［７］　前記化学的処理が、アルカリ性化合物、蛋白質分解酵素及び細胞壁分解酵素からなる群から選択される少なくとも一つによる化学的処理である、［６］に記載のポリヒドロキシ酪酸系樹脂の製造方法。
　［８］　前記ポリヒドロキシ酪酸系樹脂は、ポリ（３－ヒドロキシ酪酸－ｃｏ－３－ヒドロキシへキサン酸）である、［１］から［７］のいずれかに記載のポリヒドロキシ酪酸系樹脂の製造方法。
　［９］　前記ポリヒドロキシ酪酸系樹脂は、１６０℃で２０分間熱処理した場合の重量平均分子量保持率が７０％以上である、［１］から［８］のいずれかに記載のポリヒドロキシ酪酸系樹脂の製造方法。
　［１０］　前記ポリヒドロキシ酪酸系樹脂を１６０℃でプレス成形して得られた厚みが５ｍｍのシートの黄色度指数（ＹＩ値）が２０以下である、［１］から［９］のいずれかに記載のポリヒドロキシ酪酸系樹脂の製造方法。

Claims (10)

  1. 　ポリヒドロキシ酪酸系樹脂を含有する微生物細胞を破砕又は可溶化する工程（ａ）、及び
    　工程（ａ）で得られた組成物中のポリヒドロキシ酪酸系樹脂を分離する工程（ｂ）を含み、
    　工程（ａ）及び工程（ｂ）では、カルシウムイオンの濃度が４．５ｍｇ／Ｌ以下の水を用いることを特徴とするポリヒドロキシ酪酸系樹脂の製造方法。
  2. 　工程（ａ）及び工程（ｂ）に用いる水において、ナトリウムイオンの濃度が４５０ｍｇ／Ｌ以下である請求項１に記載のポリヒドロキシ酪酸系樹脂の製造方法。
  3. 　工程（ａ）及び工程（ｂ）に用いる水は、ポリヒドロキシ酪酸系樹脂の製造工程にて排出された排水に対し、微生物による嫌気処理及び好気処理を行った後、膜分離活性汚泥法による前処理ろ過工程、並びにカルシウムイオン除去膜によるろ過工程を行うことで得られる、請求項１又は２に記載のポリヒドロキシ酪酸系樹脂の製造方法。
  4. 　前記カルシウムイオン除去膜は、ＮＦ膜及びＲＯ膜からなる群から選択される一つ以上である請求項１から３のいずれかに記載のポリヒドロキシ酪酸系樹脂の製造方法。
  5. 　前記ＮＦ膜又はＲＯ膜は、２０℃で、３０００ｋＰａの圧力をかけた時のＭｇＳＯ4阻止率が６０％以上１００％以下である請求項４に記載のポリヒドロキシ酪酸系樹脂の製造方法。
  6. 　工程（ａ）は、化学的処理及び物理的破砕処理からなる群から選択される少なくとも一つの処理を含む請求項１から５のいずれかに記載のポリヒドロキシ酪酸系樹脂の製造方法。
  7. 　前記化学的処理が、アルカリ性化合物、蛋白質分解酵素及び細胞壁分解酵素からなる群から選択される少なくとも一つによる化学的処理である請求項６に記載のポリヒドロキシ酪酸系樹脂の製造方法。
  8. 　前記ポリヒドロキシ酪酸系樹脂は、ポリ（３－ヒドロキシ酪酸－ｃｏ－３－ヒドロキシへキサン酸）である請求項１から７のいずれかに記載のポリヒドロキシ酪酸系樹脂の製造方法。
  9. 　前記ポリヒドロキシ酪酸系樹脂は、１６０℃で２０分間熱処理した場合の重量平均分子量保持率が７０％以上である請求項１から８のいずれかに記載のポリヒドロキシ酪酸系樹脂の製造方法。
  10. 　前記ポリヒドロキシ酪酸系樹脂を１６０℃でプレス成形して得られた厚みが５ｍｍのシートの黄色度指数（ＹＩ値）が２０以下である請求項１から９のいずれかに記載のポリヒドロキシ酪酸系樹脂の製造方法。
PCT/JP2021/001275 2020-03-18 2021-01-15 ポリヒドロキシ酪酸系樹脂の製造方法 WO2021186872A1 (ja)

Priority Applications (3)

Application Number Priority Date Filing Date Title
JP2022508089A JPWO2021186872A1 (ja) 2020-03-18 2021-01-15
CN202180021891.7A CN115298318A (zh) 2020-03-18 2021-01-15 聚羟基丁酸酯系树脂的制造方法
US17/818,379 US20220380530A1 (en) 2020-03-18 2022-08-09 Method for production polyhydroxybutyric acid resin

Applications Claiming Priority (2)

Application Number Priority Date Filing Date Title
JP2020048183 2020-03-18
JP2020-048183 2020-03-18

Related Child Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
US17/818,379 Continuation US20220380530A1 (en) 2020-03-18 2022-08-09 Method for production polyhydroxybutyric acid resin

Publications (1)

Publication Number Publication Date
WO2021186872A1 true WO2021186872A1 (ja) 2021-09-23

Family

ID=77770814

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
PCT/JP2021/001275 WO2021186872A1 (ja) 2020-03-18 2021-01-15 ポリヒドロキシ酪酸系樹脂の製造方法

Country Status (4)

Country Link
US (1) US20220380530A1 (ja)
JP (1) JPWO2021186872A1 (ja)
CN (1) CN115298318A (ja)
WO (1) WO2021186872A1 (ja)

Citations (7)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JP2005348640A (ja) * 2004-06-09 2005-12-22 Asahi Breweries Ltd Ｐｈａ精製方法
JP2007260664A (ja) * 2006-02-28 2007-10-11 Toray Ind Inc 有機性廃水処理方法、有機性廃水用の膜分離活性汚泥処理装置、及び、ろ過摂食性微小動物製剤の製造方法
JP2008237182A (ja) * 2007-03-29 2008-10-09 Honda Motor Co Ltd ポリヒドロキシ酪酸の分離精製方法
JP2009195179A (ja) * 2008-02-22 2009-09-03 Honda Motor Co Ltd ポリヒドロキシアルカン酸抽出方法
JP2012115145A (ja) * 2009-03-30 2012-06-21 Kaneka Corp ポリヒドロキシアルカノエートの回収方法
JP2017531447A (ja) * 2014-10-01 2017-10-26 エッグプラント・エッセ・エッレ・エッレ バイオポリマーマトリックス複合体を製造する方法
WO2017221755A1 (ja) * 2016-06-23 2017-12-28 株式会社カネカ ポリヒドロキシアルカン酸の製造方法

Patent Citations (7)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JP2005348640A (ja) * 2004-06-09 2005-12-22 Asahi Breweries Ltd Ｐｈａ精製方法
JP2007260664A (ja) * 2006-02-28 2007-10-11 Toray Ind Inc 有機性廃水処理方法、有機性廃水用の膜分離活性汚泥処理装置、及び、ろ過摂食性微小動物製剤の製造方法
JP2008237182A (ja) * 2007-03-29 2008-10-09 Honda Motor Co Ltd ポリヒドロキシ酪酸の分離精製方法
JP2009195179A (ja) * 2008-02-22 2009-09-03 Honda Motor Co Ltd ポリヒドロキシアルカン酸抽出方法
JP2012115145A (ja) * 2009-03-30 2012-06-21 Kaneka Corp ポリヒドロキシアルカノエートの回収方法
JP2017531447A (ja) * 2014-10-01 2017-10-26 エッグプラント・エッセ・エッレ・エッレ バイオポリマーマトリックス複合体を製造する方法
WO2017221755A1 (ja) * 2016-06-23 2017-12-28 株式会社カネカ ポリヒドロキシアルカン酸の製造方法

Also Published As

Publication number Publication date
CN115298318A (zh) 2022-11-04
JPWO2021186872A1 (ja) 2021-09-23
US20220380530A1 (en) 2022-12-01

Similar Documents

Publication Publication Date Title
JP5334994B2 (ja) ポリ−３−ヒドロキシアルカン酸の製造方法およびその凝集体
WO2010116681A1 (ja) ポリヒドロキシアルカノエートの回収方法
EP1609868B1 (en) Method of collecting highly pure polyhydroxyalkanoate from microbial cells
US7141400B2 (en) Production of biodegradable thermoplastic materials from organic wastes
US11332612B2 (en) Polyhydroxyalkanoate particles and aqueous dispersion of same
US7435567B2 (en) Method for degradation of nucleic acids and use thereof
EP1705250B1 (en) A method for separating, extracting and purifying poly-beta-hydroxyalkanoates (phas) directly from bacterial fermented broth
JP2013521802A (ja) ポリヒドロキシアルカノエートの製造
JPWO2005085461A1 (ja) 核酸の分解方法及びその用途
JPWO2010067541A1 (ja) ポリ−３−ヒドロキシアルカン酸の生産方法
CA3123104A1 (en) Production of polyhydroxyalcanoates from pulp and paper waste streams
JPWO2015122190A1 (ja) ポリヒドロキシアルカン酸の分解方法、並びに微生物製剤
WO2021186872A1 (ja) ポリヒドロキシ酪酸系樹脂の製造方法
JP6864585B2 (ja) ポリヒドロキシアルカノエートの製造方法
WO2020100598A1 (ja) ポリヒドロキシアルカノエート水分散液の製造方法
WO2022215335A1 (ja) リサイクル水の製造方法
JPWO2003091444A1 (ja) ポリ−３−ヒドロキシアルカン酸の分離方法
JP2020139078A (ja) 生分解性プラスチックの製造方法
JP2000103843A (ja) 脂肪族ポリエーテルエステル系重合体の処理方法
Frühwirth-Smounig et al. Isolation of Polyhydroxyalkanoates from Fermentation Broth
Yu et al. Bacterial Cellulose Membrane as Carrier Support for High-Biomass Production of Polyhydroxyalkanoates from Food Waste in a Biofilm System
JPWO2008026619A1 (ja) ３−ヒドロキシアルカン酸共重合体の製造方法

Legal Events

Date Code Title Description
121 Ep: the epo has been informed by wipo that ep was designated in this application

Ref document number: 21771416

Country of ref document: EP

Kind code of ref document: A1

WWE Wipo information: entry into national phase

Ref document number: 2022508089

Country of ref document: JP

NENP Non-entry into the national phase

Ref country code: DE

122 Ep: pct application non-entry in european phase

Ref document number: 21771416

Country of ref document: EP

Kind code of ref document: A1