WO2021181051A1 - Composition phytosanitaire comprenant des ulvanes et du silicium - Google Patents

Composition phytosanitaire comprenant des ulvanes et du silicium Download PDF

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WO2021181051A1
WO2021181051A1 PCT/FR2021/050420 FR2021050420W WO2021181051A1 WO 2021181051 A1 WO2021181051 A1 WO 2021181051A1 FR 2021050420 W FR2021050420 W FR 2021050420W WO 2021181051 A1 WO2021181051 A1 WO 2021181051A1
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ulvans
plant
composition
extract
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PCT/FR2021/050420
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Éric NGUEMA-ONA
Jean-Claude Yvin
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Agro Innovation International
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    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A01—AGRICULTURE; FORESTRY; ANIMAL HUSBANDRY; HUNTING; TRAPPING; FISHING
    • A01N—PRESERVATION OF BODIES OF HUMANS OR ANIMALS OR PLANTS OR PARTS THEREOF; BIOCIDES, e.g. AS DISINFECTANTS, AS PESTICIDES OR AS HERBICIDES; PEST REPELLANTS OR ATTRACTANTS; PLANT GROWTH REGULATORS
    • A01N43/00—Biocides, pest repellants or attractants, or plant growth regulators containing heterocyclic compounds
    • A01N43/02—Biocides, pest repellants or attractants, or plant growth regulators containing heterocyclic compounds having rings with one or more oxygen or sulfur atoms as the only ring hetero atoms
    • A01N43/04—Biocides, pest repellants or attractants, or plant growth regulators containing heterocyclic compounds having rings with one or more oxygen or sulfur atoms as the only ring hetero atoms with one hetero atom
    • A01N43/14—Biocides, pest repellants or attractants, or plant growth regulators containing heterocyclic compounds having rings with one or more oxygen or sulfur atoms as the only ring hetero atoms with one hetero atom six-membered rings
    • A01N43/16—Biocides, pest repellants or attractants, or plant growth regulators containing heterocyclic compounds having rings with one or more oxygen or sulfur atoms as the only ring hetero atoms with one hetero atom six-membered rings with oxygen as the ring hetero atom
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A01—AGRICULTURE; FORESTRY; ANIMAL HUSBANDRY; HUNTING; TRAPPING; FISHING
    • A01N—PRESERVATION OF BODIES OF HUMANS OR ANIMALS OR PLANTS OR PARTS THEREOF; BIOCIDES, e.g. AS DISINFECTANTS, AS PESTICIDES OR AS HERBICIDES; PEST REPELLANTS OR ATTRACTANTS; PLANT GROWTH REGULATORS
    • A01N59/00—Biocides, pest repellants or attractants, or plant growth regulators containing elements or inorganic compounds
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A01—AGRICULTURE; FORESTRY; ANIMAL HUSBANDRY; HUNTING; TRAPPING; FISHING
    • A01N—PRESERVATION OF BODIES OF HUMANS OR ANIMALS OR PLANTS OR PARTS THEREOF; BIOCIDES, e.g. AS DISINFECTANTS, AS PESTICIDES OR AS HERBICIDES; PEST REPELLANTS OR ATTRACTANTS; PLANT GROWTH REGULATORS
    • A01N65/00—Biocides, pest repellants or attractants, or plant growth regulators containing material from algae, lichens, bryophyta, multi-cellular fungi or plants, or extracts thereof
    • A01N65/03—Algae

Definitions

  • the invention relates to a phytosanitary composition
  • a phytosanitary composition comprising (i) ulvans and / or oligosaccharides derived from ulvans, for example in the form of an extract containing ulvans and / or oligosaccharides derived from ulvans; and (ii) silicon, the use of said composition for activating plant defense and resistance reactions against biotic stresses, as well as a method for activating plant defense and resistance reactions against. biotic constraints, comprising applying to said plant an effective amount of the composition.
  • Plants can be attacked by multiple pathogens (such as fungi, bacteria, viruses, viroids, protozoa, nematodes, herbivores) with the consequences of yield losses and a drop in the quality of production.
  • pathogens such as fungi, bacteria, viruses, viroids, protozoa, nematodes, herbivores
  • the defense mechanisms of the plant can involve a series of events triggered in or on the surface of plant cells when the plant is attacked by a pathogen, such as recognition of the pathogen, sending this information to the nucleus, induction of defense genes followed by synthesis of anti-microbial compounds and so-called PR proteins (Pathogenesis-Related), the transmission of the alarm signal to the whole plant and its neighbors.
  • a pathogen such as recognition of the pathogen
  • one of the possible strategies consists in inducing the pathogen's attack before the defense reactions by using signal molecules.
  • signal molecules which are of very varied chemical natures (proteins, peptides, glycoproteins, lipids and oligosaccharides) are capable of transmitting the information of an attack even at very low concentration.
  • microbial origin for example harpin
  • plant origin for example oligogalacturonic acids
  • chemically synthesized for example benzothiadiazole
  • mineral origin for example salts of phosphite
  • the plant responds by synthesizing structural proteins, which strengthen the plant cell wall, enzymes involved in the synthesis of anti ⁇ microbial compounds such as phytoalexins, hydrolases such as chitinases or glucanases and inhibitory enzymes which act against the hydrolytic enzymes of pathogens.
  • structural proteins which strengthen the plant cell wall
  • enzymes involved in the synthesis of anti ⁇ microbial compounds such as phytoalexins, hydrolases such as chitinases or glucanases and inhibitory enzymes which act against the hydrolytic enzymes of pathogens.
  • the establishment of these means of defense involves the activation, at the plant level of hormonal signaling (presence or increase in the concentration of phytohormones such as salicylic acid and / or its derivatives, and / or jasmonic acid and / or its derivatives), but also by the induction of defense genes, encoding defense enzymes (hydrolases, chitinases), encoding so-called "PR" proteins (Pathogenesis-Related), or of genes encoding enzymes for the biosynthesis of defense metabolites (phytoalexins), or for the reinforcement of structural barriers (ie wall reinforcement).
  • Activation of the plant immune system by signal molecules causes the synthesis and deposition of phenolic compounds and defense proteins in the cell wall, the accumulation of antimicrobial compounds and the synthesis of "PR" proteins.
  • Wall strengthening which can slow down or inhibit progression of the pathogen inside the plant results, for example, from the deposition of callose in the wall or the plasmodesmata, as well as from the synthesis of lignins. These mechanisms make it possible to slow down fungal or viral invasions.
  • HRGP extensins Hydroxyprolin Rich GlycoProtein
  • GRP Glycin Rich Protein
  • PR proteins intra- or extra cellular ⁇
  • PR proteins accumulate in the plants after their inoculation by pathogens and in the case of incompatible interactions, can constitute up to 10% of the soluble proteins of the sheet.
  • an active role in the degradation of the wall of fungal pathogens (b-glucanase, chitinase) has been shown.
  • the activation of the immune system of plants can also be accompanied by the synthesis of signaling molecules, such as salicylic acid and / or its derivatives, and / or jasmonic acid and / or its derivatives, phytohormones which are involved in the defense process of plants.
  • signaling molecules such as salicylic acid and / or its derivatives, and / or jasmonic acid and / or its derivatives, phytohormones which are involved in the defense process of plants.
  • oligosaccharides of marine origin have an eliciting effect on certain plant defense pathways.
  • document WO 99/03346 describes the use of oligosaccharides of type 6 (1-3) glucans, in particular extracted from the brown alga Laminaria digitata, for the potentiation and stimulation of the natural defenses of wheat infected by septoria.
  • PAL phenylammonialyase
  • OMT O-methyl transferase
  • carrageenan induces the expression of genes encoding sesquiterpene cyclase, chitinase and proteinase inhibitors.
  • a phytosanitary composition comprising:
  • ulvans and / or oligosaccharides derived from ulvans for example under the form of an extract containing ulvans and / or oligosaccharides derived from ulvans; and (ii) silicon made it possible to stimulate the expression of the defense genes of a plant, in particular to induce the production of salicylic acid and / or its derivatives, and / or jasmonic acid and / or its derivatives , and can therefore be used to activate plant defense and resistance reactions against biotic constraints.
  • Such a composition can be used alone or in combination with pesticides, for example fungicides. In association with pesticides, it allows to activate reactions of defense of a plant and resistance against biotic constraints with a reduced quantity of pesticides compared to pesticides alone.
  • the present invention which finds application in the agro-ecological and agricultural field, aims to provide a new phytosanitary composition, to activate reactions of defense of a plant and resistance against biotic constraints.
  • the invention relates to a phytosanitary composition
  • a phytosanitary composition comprising:
  • the invention relates to the use of the composition as defined above, for activating reactions of defense of a plant and of resistance against biotic constraints.
  • the invention relates to a method for activating the defense reactions of a plant and resistance against biotic constraints, comprising the application to said plant of an effective amount of the composition as defined. above. detailed description
  • phytosanitary composition is intended to denote any product the use of which is intended to treat or prevent diseases of a plant.
  • a phytosanitary composition makes it possible to activate the defense reactions of a plant and to induce resistance against biotic constraints.
  • the term “ulvans” is intended to denote water-soluble polysaccharides, present in particular in the cell walls of green algae of the genera Ulva and Enteromorpha. Ulvans are defined more precisely as highly sulphated acidic polysaccharides and are essentially composed of units derived from rhamnose 3-sulphate, xylose, xylose 2-sulphate, glucuronic acid and iduronic acid.
  • Formula (I) shows the group> 4) - beta-D-GIcA- (1> 4) - apha-L-Rha 3 sulfate (1>, again called ulvanobiouronic acid 3-sulfate type A:
  • Formula (II) shows the group> 4) - alpha-L-IdoA- (1> 4) - alpha -L- Rha 3 sulfate (l>, also called ulvanobiuronic acid 3-sulfate type B:
  • Formula (III) shows the group> 4) - beta-D-Xyl- (1> 4) - alpha-L-Rha 3 sulfate (l>, also called ulvanobiose 3-sulfate acid:
  • Formula (IV) shows the group> 4) - beta-D-Xyl 2 -sulfate- (1> 4) - alpha-L-Rha 3 sulfate (1>, also called ulvanobiose acid 2 ', 3- disulfate:
  • oligosaccharides derived from ulvans denotes, in the context of the invention, oligosaccharides obtained by acid hydrolysis of ulvans, for example by hot acid hydrolysis (eg at 85 ° C), or by enzymatic hydrolysis of ulvans , for example by using one or more glycosidases.
  • extract denotes the product resulting from an extraction from a source, for example, from a biological source, such as cells. When it comes to cells, the term “extract” therefore designates the product resulting from the extraction of the contents of cells.
  • Ulva extract refers to the product resulting from the extraction of the contents of Ulva cells.
  • extract containing ulvans and / or oligosaccharides derived from ulvans and "extract of ulvans and / or oligosaccharides derived from ulvans” are interchangeable and denote an extract obtained from a source of 'ulvans and / or oligosaccharides derived from ulvans.
  • An extract containing ulvans used in the context of the present invention is preferably an extract of algae containing ulvans, more preferably an extract of 'Ulva or an extract of' Enteromorpha, for example an extract of 'Ulva armoricana, an extract of 'Ulva rigida, an extract of' Ulva rotundata, an extract of Ulva lactuca, a extract ô! Enteromorpha intestinalis, or an extract of Enteromorpha compressa, preferably an extract of ô'Uiva armoricana, an extract of ô! Enteromorpha intestinalis or an extract ô! Enteromorpha compressa.
  • An extract containing oligosaccharides derived from ulvans can be obtained by acid hydrolysis or by enzymatic hydrolysis of an extract containing ulvans, for example an extract containing ulvans as defined above.
  • the extract containing ulvans and / or oligosaccharides derived from ulvans can be enriched in ulvans and / or in oligosaccharides derived from ulvans.
  • Techniques for enriching ulvans and / or oligosaccharides derived from ulvans are described in the literature and easy to implement by those skilled in the art, for example precipitation by addition of ammonium sulfate, by addition ethanol or by filtration.
  • the concentration of ulvans and / or oligosaccharides derived from ulvans in the extract is preferably at least 1 g / L, preferably at least 10 g / L, at least 11 g / L, at least 12 g / L, at least 13 g / L, at least 14 g / L, at least 15 g / L, at least 16 g / L, at least 17 g / L, at least 18 g / L, at least 19 g / L , for example between 1 and 200 g / L, preferably between 10 and 100 g / L, more preferably between 15 and 50 g / L, for example approximately 20 g / L.
  • the extraction conditions and the nature of the algae will be chosen such that the extract obtained has the desired concentration in the envisaged application.
  • concentration of ulvans and / or oligosaccharides derived from ulvans varies depending on the preparation process.
  • the concentration of ulvans can in particular vary depending on the quantity of fresh and / or dry algae used (for example, during an aqueous extraction, when the alga / water ratio is increased, the concentration of ulvans and / or oligosaccharides derived from ulvans of the extract obtained also increases), the extraction time (for example, an increase in the extraction time during an aqueous extraction generally makes it possible to increase the concentration of ulvans and / or of oligosaccharides derived from ulvans of the obtained extract) and / or the extraction temperature (for example, an increase in the extraction temperature during an aqueous extraction generally makes it possible to increase the concentration of ulvans and / or of oligosaccharides derived from ul
  • an extract of ulvans and / or oligosaccharides derived from ulvans does not present any particular difficulty, many extraction processes are described in the literature.
  • the extraction process is not limited to a particular process, and the conventional processes can be used to prepare an extract containing ulvans and / or oligosaccharides derived from ulvans, such as for example aqueous extraction.
  • An extract of ulvans and / or oligosaccharides derived from ulvans can for example be obtained by a process comprising the following steps: washing, grinding, extraction (solid-liquid separation) and optionally fractionation and concentration.
  • the extract obtained can be more or less concentrated depending on the intended use. Total dehydration of this extract makes it possible to obtain an extract in water-soluble pulverulent form which can be obtained, for example, by a tumble dryer or by atomization.
  • silica also known under the term “silicon oxide”
  • silicates eg Si0 3 2 and Si0 4 4
  • combined silicates Silica exists in the free state in crystalline or amorphous forms. In its crystalline form, silica is in the form of non-molecular crystals formed of tetrahedral Si0 4 units linked together by oxygen atoms in a regular manner, as in quartz. In its amorphous form, silica occurs as silica dioxide (S1O2), as in glass.
  • the silicon may for example be in the form of solid mineral silica, such as diatomaceous earth or sand, in the form of liquid mineral silica, such as orthosilicic acid, in the form of vitreous products based on silicon, such as as powders or glass fibers, in the form of organic silica and / or in the form of a soluble salt.
  • the silicon is in the form of a soluble salt.
  • soluble salt is understood to mean a salt which is soluble in a solvent such as water.
  • Silica is an acid oxide which reacts with basic oxides to give silicates, especially Si0 3 2 and Si0 4 4 .
  • the silicates are able to combine with other metal atoms, such as for example aluminum (Al), iron (Fe), Magnesium (Mg), calcium (Ca), sodium (Na), potassium ( K).
  • the combined silicates thus obtained are respectively aluminum silicate (Al 2 Si0 3 ), iron silicate (Fe 2 Si0 3 ), magnesium metasilicate (MgSi0 3 ), calcium silicate (Ca 2 Si0 3 ), sodium silicate (Na 2 Si0 3 ) and potassium silicate (K 2 Si0 3 ).
  • the silicates can also be in the form of derivatives, for example K 2 Si0 4 , Na 2 Si0 4 , Mg 2 Si0 4 .
  • the silicon is in the form of a soluble salt, preferably in the form of sodium silicate (Na 2 Si0 3 ), potassium silicate (K 2 Si0 3 ), metasilicate of magnesium (MgSi0 3 ) or a mixture of soluble salts.
  • the silicon is in the form of a soluble salt chosen from sodium silicate (Na 2 Si0 3 ), potassium silicate (K 2 Si0 3 ), and their mixture.
  • the potassium silicate marketed by the company Quaron, called “34.8% liquid potassium silicate” is particularly suitable for the implementation of the invention.
  • fertilizer designates a substance, or a mixture of substances, natural or of synthetic origin, used in agriculture, horticulture and forestry, to improve soils, in particular their structure, and to fertilize cultivated plants. Fertilizers include fertilizers and soil improvers.
  • pesticide denotes a substance used against one or more organisms considered harmful to the plant, called pathogens. This term includes in particular insecticides, fungicides, herbicides and parasiticides.
  • the term "pesticidal agent” designates the ability to fight against a pathogen, for example by eliminating said pathogen or by repelling it.
  • This term includes in particular insecticidal agents, fungicidal agents, herbicidal agents, parasiticidal agents. In the context of the present invention, it may be an ability to fight directly against the pathogen or indirectly against the pathogen, for example by activating the defense reactions of a plant and resistance against biotic constraints.
  • the pathogen is preferably fungus, for example an ascomycete fungus, such as Septoria tritici (responsible for septoria) or Venturia inaequalis (responsible for apple scab).
  • the expression “plant” is understood to mean the plant considered as a whole, including its root apparatus, its vegetative apparatus, seeds, seeds and fruits.
  • the present invention results from the surprising advantages demonstrated by the inventors of the effect of the phytosanitary composition according to the invention on a plant, to activate reactions of defense of the plant and of resistance against biotic constraints.
  • the invention relates to a phytosanitary composition
  • a phytosanitary composition comprising
  • the composition according to the present invention can be in the form of powder, granule or in liquid form, advantageously in liquid form.
  • the preparation of such a composition can be carried out by a person skilled in the art using his general knowledge.
  • ulvans and / or oligosaccharides derived from ulvans for example in the form of an extract containing ulvans and / or oligosaccharides derived from ulvans, may be in powder or liquid form and may be mixed with a solution of soluble salt (s) or silicon to form a liquid composition according to the invention.
  • a particular method of preparing the composition according to the invention is detailed in the examples.
  • the composition may comprise a concentration of ulvans and / or of oligosaccharides derived from ulvans of 0.01 to 100 g / L, for example of 0.1 g / L to 80 g / L, preferably from 0.1 g / L to 50 g / L, from 0.1 g / L to 40 g / L, from 0.1 g / L to 30 g / L, even more preferably from 1 g / L to 20 g / L, from 5 g / L to 15 g / L, for example from 8 g / L to 14 g / L.
  • the composition may comprise a silicon concentration of 0.01 g / L to 100 g / L, in particular in the form of a soluble silicon salt or in the form of a mixture of soluble silicon salts, preferably from 0.1 g / L to 50 g / L, even more preferably from 1.0 g / L to 30 g / L, from 10 g / L to 30 g / L, from 20 g / L to 30 g / L, from 5 to 10 g / L, from 5 to 8 g / L, for example approximately 21 g / L +/- 1 g / L or 6 g / L + / - 1 g / L.
  • the composition according to the invention can comprise from 10 to 90% (total v / v of the composition) of an extract containing ulvans and / or oligosaccharides derived from ulvans, preferably from 40 to 90%, for example from 40 to 80%, from 70 to 90% from 70 to 80%, said extract having a concentration of ulvans and / or oligosaccharides derived from ulvans of at least 1 g / L, preferably at least 10 g / L, at least 11 g / L, at least 12 g / L, at least 13 g / L, at least 14 g / L, at least at least 15 g / L, at least 16 g / L, at least 17 g / L, at least 18 g / L, at least 19 g / L.
  • an extract containing ulvans and / or oligosaccharides derived from ulvans preferably from 40 to 90%, for example from 40 to 80%,
  • said extract may have a concentration of ulvans and / or oligosaccharides derived from ulvans ranging from 1 to 200 g / L, preferably ranging from 10 to 100 g / L, more preferably ranging from 15 to 50 g / L. , for example a concentration of ulvans and / or oligosaccharides derived from ulvans of about 20 g / L +/- 2 g / L.
  • the composition according to the invention may comprise from 1 to 25% (total v / v of the composition) of a solution of silicon, in particular of a solution of soluble silicon salt. or of a mixture of soluble silicon salts, preferably from 1 to 10%, for example from 1 to 5%, said silicon solution having a silicon concentration ranging from 0.1 to 500 g / L, preferably from 1 to 500 g / L, even more preferably from 10 g / L to 300 g / L, from 100 g / L to 300 g / L, from 200 g / L to 300 g / L, for example around 240 g / L +/- 10 g / L.
  • the composition according to the invention is in liquid form and comprises:
  • a concentration of ulvans and / or oligosaccharides derived from ulvans of 0.01 to 100 g / L, preferably from 0.1 g / L to 50 g / L, even more preferably from 1 g / L to 20 g / L, for example from 8 g / L to 14 g / L, and
  • a silicon concentration of 0.01 g / L to 100 g / L in particular in the form of a soluble silicon salt or in the form of a mixture of soluble silicon salts, preferably 0.1 g / L to 50 g / L, even more preferably from 1.0 g / L to 30 g / L, from 10 g / L to 30 g / L, from 20 g / L to 30 g / L, from 5 to 10 g / L, from 5 to 8 g / L, for example approximately 21 g / L +/- 1 g / L or 6 g / L +/- 1 g / L.
  • composition according to the invention is in liquid form and comprises:
  • a silicon solution in particular of a solution of soluble silicon salt or of a mixture of soluble silicon salts, preferably from 1 to 10% , for example from 1 to 5%, said silicon solution having a silicon concentration ranging from 0.1 to 500 g / L, preferably from 1 to 500 g / L, even more preferably from 10 g / L to 300 g / L, from 100 g / L to 300 g / L, from 200 g / L to 300 g / L, for example approximately 240 g / L +/- 10 g / L, and possibly
  • the composition is in liquid form and comprises:
  • a silicon solution in particular of a solution of soluble silicon salt or of a mixture of soluble silicon salts, said silicon solution having a silicon concentration approximately 240 g / L, and
  • the composition is in liquid form and comprises:
  • a silicon solution in particular of a solution of soluble silicon salt or of a mixture of soluble silicon salts, said silicon solution having a silicon concentration of about 240 g / L, and
  • composition according to the invention may comprise one or more fertilizing materials, which may be of various types such as urea, ammonium sulfate, rock phosphate, potassium chloride, sodium sulfate. ammonium, magnesium nitrate, manganese nitrate, zinc nitrate, copper nitrate, phosphoric acid, and / or boric acid.
  • fertilizing materials may be of various types such as urea, ammonium sulfate, rock phosphate, potassium chloride, sodium sulfate. ammonium, magnesium nitrate, manganese nitrate, zinc nitrate, copper nitrate, phosphoric acid, and / or boric acid.
  • composition according to the invention can comprise one or more pesticides, which can be of various types.
  • the pesticide (s) can / can be chosen from insecticides, fungicides, herbicides and parasiticides.
  • the composition according to the invention can comprise one or more fungicide (s).
  • the fungicides which are suitable for the implementation of the invention are for example referenced in the catalog of plant protection products "e-phy” of the national agency for food, environmental and occupational health safety (ANSES) or in the catalog "list of EPPO Al and" EPPO A2 list ”from the European and Mediterranean Plant Protection Organization (EPPO).
  • the composition according to the invention may comprise one or more fungicide (s) chosen from chlorothalonil, fluxapyroxad, epoxiconazole, captan, dithlanon, fenbuconazole, pyradostrobin, dodine, prothioconazole , metconazole, propiconazole, cyproconazole, tebuconazole, bromuconazole, difenoconazole, propiconazole, tetraconazole, azoxystrobin, picoxystrobin, pyraclostrobin, picoxystrobin, fluystoboxinobastrofloxystrystoboxinobastrofloxystroboxze, mangoystroboxinobastro , penthiopyrad, bixafen, prochloraz, benzovindiflupyr, boscalid, fenpropidin, fluopyram, spiroxamine, flutriafol
  • the association of the composition according to the invention with a pesticide is particularly advantageous because it makes it possible to reduce the doses (or quantities) of pesticide normally used in agriculture.
  • a dose of pesticide normally used corresponds, for example, to a dose approved for a pesticide in question.
  • the combination of the composition according to the invention with a pesticide can make it possible to reduce by half (50%) the dose of pesticide normally used. This makes it possible to reduce the impact of phytosanitary products on the environment, which constitutes an ecological and economic advantage.
  • the invention also relates to the use of the phytosanitary composition described above for activating reactions for the defense of a plant and for resistance against biotic constraints.
  • the invention relates to the use of the phytosanitary composition described above for stimulating the expression of the genes involved. in the defense of a plant.
  • the phytosanitary composition according to the invention makes it possible to stimulate the expression by the plant of genes encoding:
  • the phytosanitary composition of the invention makes it possible to stimulate the expression by the plant of genes encoding salicylic acid and its derivatives and / or jasmonic acid and its derivatives.
  • the phytosanitary composition described above makes it possible to stimulate the expression of the ICSI, EDS1 (Disease resistance protein EDS1), WRKY (WRKY transcription factor 30), PR-1 and PR-3 genes, which induces the production of salicylic acid and / or its derivatives.
  • the phytosanitary composition described above also makes it possible to stimulate the expression of the LOX2 (Lipoxygenase) genes; JAR (Resistant Jasmonate) which induces the product of jasmonic acid and / or its derivatives.
  • the invention also relates to a method for activating the defense reactions of a plant and resistance against biotic constraints, characterized in that it comprises the application to said plant of an effective amount of the phytosanitary composition. according to the invention.
  • an effective amount or “effective dose” is meant an amount sufficient to activate defense reactions of a plant and resistance, in particular by stimulating the expression of genes involved in the defense of the plant, against biotic constraints of at least 5%, advantageously at least 10%, for example at least 15%, at least 20%, at least 25%, at least 30%, at least 35%, at least 40% , advantageously at least 30%.
  • the composition according to the invention is supplied to the plant in an amount sufficient to activate reactions of defense of a plant and of resistance against biotic constraints, in particular by stimulating the expression of the genes involved in the defense of the plant, by at least 5%, advantageously at least 10%, for example at least 15%, at least 20%, at least 25%, at least 30%, at least 35%, at least 40%, preferably at least 30%.
  • the composition can be supplied to the plant by the foliar route or by the root route, preferably by the foliar route.
  • the composition according to the invention is supplied to the plant in combination with one or more pesticides, preferably one or more fungicides.
  • pesticides preferably one or more fungicides.
  • the fungicides which are suitable for the implementation of the invention are for example referenced in the catalog of plant protection products “e-phy” of the national agency for food, environmental and occupational health safety (ANSES ) or in the catalog "EPPO A1 list and” EPPO A2 list "of the European and Mediterranean Plant Protection Organization (EPPO).
  • the composition according to the invention is supplied to the plant in combination with one or more fungicides, chosen from chlorothalonil, fluxapyroxad, epoxiconazole, captan, dithlanon, fenbuconazole, pyradostrobin, dodine, prothioconazole, metconazole, propiconazole, cyproconazole, tebuconazole, bromuconazole, difenoconazole, propiconazole, tetraconazole, azoxystrobox, pyroboxintroboxrobox , dimoxystrobin, fluoxastrobin maneb, mancozeb, penthiopyrad, bixafen, prochloraz, benzovindiflupyr, boscalid, fenpropidin, fluopyram, spiroxamine, flutriafol, folpet, fenpropimorph, sulphur
  • fungicides chosen from
  • the method of the invention can further comprise the application to said plant of one or more pesticides, preferably one or more fungicides.
  • pesticides preferably one or more fungicides.
  • the fungicides which are suitable for the implementation of the invention are for example referenced in the catalog of plant protection products "E-phy” from the national agency for food, environmental and occupational health safety (handles) or in the catalog “EPPO Al list and” EPPO A2 list "of the European Organization and Mediterranean for Plant Protection (EPPO).
  • the composition according to the invention is supplied to the plant in combination with one or more fungicides, for example chosen from chlorothalonil, fluxapyroxad, epoxiconazole, captan, dithlanon, fenbuconazole, pyradostrobin, dodine, prothioconazole, metconazole, propiconazole, cyproconazole, tebuconazole, bromuconazole, difenoconazole, propiconazole, tetraconazole, azoxystrobox, pyroboxintroboxrobox , dimoxystrobin, fluoxastrobin maneb, mancozeb, penthiopyrad, bixafen, prochloraz, benzovindiflupyr, boscalid, fenpropidin, fluopyram, spiroxamine, flutriafol, folpet, fenpropimorph, s
  • fungicides for example
  • composition according to the invention is also applied to the plant in combination with one or more pesticides, preferably one or more fungicides.
  • pesticides preferably one or more fungicides.
  • a person skilled in the art will know how to choose the pesticide (s) that are the most suitable (s) for the plant to be treated.
  • composition according to the invention and the pesticide (s) can be applied simultaneously or sequentially.
  • the composition according to the invention can be applied during a first treatment, and one or more pesticides can be applied during a second treatment of the plant.
  • Several successive treatments of the plant can thus be carried out.
  • a person skilled in the art adapts the number of treatments and the nature of the treatment depending on the variety of the plant, the type of pesticide, the nature of the biotic constraint, etc.
  • the amount (or dose) of pesticide applied to the plant may correspond to an amount normally used in agriculture (approved amount) or to a reduced amount.
  • the dose of pesticide is a reduced amount, for example reduced by 50% compared to an amount normally used in agriculture.
  • peas - protein crops
  • the plant can also belong to the order of the monocots, preferably to the family of the poaceae.
  • Poaceae commonly called grasses, include most of the species commonly called “grasses” and “cereals”. Cereals are widely cultivated, mainly for their grains, and are used as food and feed.
  • the plant is a poaceae, preferably chosen from wheat, rice, barley, oats, rye, sugar cane, meadow or corn, preferably wheat.
  • the composition according to the invention can be supplied to the plant in liquid form in foliar solutions in an amount ranging from 0.001 to 100 L / ha, preferably from 0, 01 to 25 L / ha, even more preferably from 0.1 to 10 L / ha, for example in a quantity of 1 L / ha.
  • the farmer generally uses 1 L of a stock solution which corresponds to the composition according to the invention which he dilutes, for example in water between 1/10 th and 1/1000 th , so as to obtain a daughter solution which is then sprayed on the plants to be treated according to the quantities defined above (ie from 0.001 to 100 L / ha of stock solution).
  • the invention relates to the use of the phytosanitary composition according to the invention for activating defense reactions of a plant (eg wheat or apple tree) and resistance against septoria and / or apple scab.
  • a plant eg wheat or apple tree
  • the composition according to the invention when the composition according to the invention comprises one or more pesticides, it can be used as a pesticidal agent against a pathogen.
  • This use is particularly advantageous because it makes it possible to reduce the dose of pesticide used compared to a use of pesticide (s) alone (s). This makes it possible to reduce the impact of phytosanitary products on the environment, which constitutes an ecological and economic advantage.
  • the composition according to the invention comprises one or more fungicides, it can be used as a fungicidal agent against a pathogen, for example chosen from Septoria tritici or Venturia inaequalis.
  • the invention also relates to a method of treating a plant intended to promote its growth by reducing the access of pathogens to said plant or by eliminating pathogens present in the soil, said method comprising applying to said plant. of a composition according to the invention comprising one or more pesticides.
  • the composition according to the invention comprising one or more fungicides is applied to said plant in order to promote the growth of a plant by reducing the access of Septoria tritici or Venturia inaequalis h said plant or by eliminating Septoria tritici or Venturia inaequalis present in the soil.
  • the invention also relates to the use of the composition according to the invention for potentiating the pesticidal effect of a pesticide.
  • the composition according to the invention is used to potentiate the fungicidal effect of a fungicide which can be chosen from chlorothalonil, fluxapyroxad, epoxiconazole, captan, dithlanon, fenbuconazole, pyradostrobin, dodine, prothioconazole, metconazole, propiconazole, cyproconazole, tebuconazole, bromuconazole, difenoconazole, propiconazole, tetraconazole, azoxystrobin, picoxystrobin, pyraclostrobin, fluinoboxinoboxystrobin, leproxinoboxystrobin the mancozeb, the penthiopyrad, bixafen, prochloraz, benzovindiflupyr, boscali
  • the extract of ulvans was prepared according to a 3-step process:
  • Step 1 50 kg of dry algae of Ulva spp type were crushed and passed through a 4 mm sieve in order to obtain fragments of size less than or equal to 4 mm, then mixed with 950 kg of water heated to 85 ° C. The mixture was maintained at a temperature of 85 ° C. for 3 hours with stirring, which made it possible to extract the ulvans.
  • Step 2 The mixture obtained in step 1 was filtered using a 50 ⁇ m filter.
  • Step 3 The filtered mixture was then acidified to pH 3.5 using a concentrated solution of sulfuric acid. This mixture corresponds to the extract of ulvans used in the examples, and which is used in particular for the preparation of the composition “ND” (composition according to the invention - Example IC).
  • composition composition according to the invention
  • the ND composition was prepared by mixing the extract obtained according to process described in Example IA with water, adjusting the pH of the mixture to 12, and slowly adding the silicon solution obtained in Example IB with vigorous stirring, according to the proportions shown in Table 1. [ 0083] [Table 1]
  • the "ND" composition comprises 8 g / L of ulvans and 21.6 g / L of silicon.
  • Example 2 Demonstration of the effects of the ND composition on the control of the development of septoria on wheat
  • Example 1 A) Experimental Protocol The test was carried out in the open field so as to evaluate the effectiveness of the ND composition (obtained in Example 1) against septoria in wheat.
  • the CAPO wheat variety Triticum aestivum which is a soft winter wheat with susceptibility to septoria was chosen.
  • the pathogen involved in Septoria disease, a fungal disease, is Septoria tritici.
  • the wheat was sown at a depth of 2 cm and at a sowing density of
  • ND composition 50% a program called “ND composition 50%”, which consisted in applying the ND composition at a time Ti at a dose of 0.5 L / ha, then in a second application of the ND composition at a time T 2 at the same amount as the dose applied to Ti,
  • composition ND 100% a program called "Composition ND 100%", which consisted in applying the composition ND at a time Ti at a dose of 1 L / ha, then in a second application of the composition ND at a time T 2 at the same dose as the dose applied to Ti.
  • the ND composition was applied once at the first knot stage, that is to say at the stage known as “stage 31”, corresponding to the elongation. of the main stem (phenological stage BBCH31, i.e. the first node is at most 1 cm above the tillering plateau), then once at the phenological stage BBCH39 (at this stage, the blade of the last leaf is fully spread , the ligule is visible).
  • Septoria is a leaf disease whose characteristic symptoms are brown spots in which black spots are observed, called “pycnidia”.
  • stage 75 brown spots in which black spots are observed.
  • milky seed content milky.
  • the F0 and Fl leaves contribute a very important part to the yield at the end of cultivation and the phytosanitary treatments against septoria mainly aim to protect these two leaves from the appearance and development of septoria ( Figure 1). .
  • the severity of septoria represents the level of manifestation of the symptoms of septoria, such as the presence of spots, presence of pycnidia, spread of spots and pycnidia on a single leaf observed. This severity is taken into account in a preponderant way for the evaluation of the presence and development of septoria.
  • the frequency represents the number of infected samples compared to the total number of samples observed (here 25 samples). The severity was measured according to the standards of EPPO (European and Mediterranean Organization for the Protection of Plants) n ° PP 1/26 (4) called “Leaf and ear diseases in cereals.
  • FIGS 2A and 2B show that in the absence of treatment (Control NT), septoria developed on wheat.
  • NT control In the absence of treatment (NT control), the F0 and Fl leaves were infected respectively at 25% and 55% in terms of severity, and at 100% in terms of frequency.
  • the treatment with the ND 50% composition made it possible to reduce the severity of septoria on the F0 and Fl leaves, respectively to 14% and 33% in terms of severity (compared to the 25% and 55% observed in the control NT).
  • the frequency was not impacted (100% of infected leaves) after treatment with the composition ND 50%.
  • the treatment with the 100% ND composition made it possible to reduce the severity of septoria on the F0 and Fl leaves, respectively to 10.5% and 25.5% in terms of severity (compared to 25% and 55% observed in the NT control, and compared to the 14% and 33% observed after the “ND 50%” treatment).
  • the frequency of septoria was not impacted (100% of infected leaves) after treatment with the composition ND 100%.
  • composition according to the invention makes it possible to significantly protect the wheat plants against wheat septoria.
  • Example 3 Demonstration of the effects of the ND composition in combination with a fungicide rOlOOIA " ) Experimental protocol
  • the test was carried out in the open field to evaluate the effectiveness of the ND composition (composition according to the invention, obtained in Example 1) in combination with a fungicide (preparation based on chlorothalonil).
  • the variety of wheat chosen to conduct this test was the variety OREGRAIN, a variety of soft winter wheat (Triticum aestivurri), which exhibits susceptibility to septoria as explained in Example 2.
  • the wheat was sown at a depth of 2 cm and at a sowing density of 250 plants / m 2 .
  • the experimental set-up in the plot was carried out according to a Fisher block design with four completely random replicates in the field. Wheat, grown in open fields, was naturally infested by septoria.
  • fungicide a program called “Classic fungicide” or “Pr. Fongi. "(Positive control), which corresponds to a program commonly implemented by those skilled in the art, which consisted in applying a first fungicide treatment (chlorothalonil at its approved dose, i.e. 500 g / ha) to a time Ti, and by applying a second fungicide treatment (combination of epoxiconazole and fluxapyroxad at their approved doses, ie 62.5 g / ha each) at a time T 2 ;
  • a first fungicide treatment chlorothalonil at its approved dose, i.e. 500 g / ha
  • second fungicide treatment combination of epoxiconazole and fluxapyroxad at their approved doses, ie 62.5 g / ha each
  • composition ND 50% + Pr. Fongi. al. » a program called “Composition ND 50% + Pr. Fongi. al. » Which consisted of a first application of 0.5 L / ha of composition ND (composition obtained in Example 1) in combination with chlorothalonil at half of its approved dose, ie 250 g / ha, at a time Ti, and in a second application of a fungicide treatment (combination of epoxiconazole and fluxapyroxad at half of their approved doses, ie 31.25 g / ha each) at a time T 2 ;
  • composition ND 100% + Pr. Fongi. al. » a program called “Composition ND 100% + Pr. Fongi. al. » Which consisted of a first application of 1 L / ha of composition ND (composition obtained in Example 1) in combination with chlorothalonil at half of its approved dose, ie 250 g / ha, at a time T and in a second application of a fungicide treatment (combination of epoxiconazole and fluxapyroxad at half of their approved doses, ie 31.25 g / ha each) at a time T 2 .
  • a fungicide treatment combination of epoxiconazole and fluxapyroxad at half of their approved doses, ie 31.25 g / ha each
  • the time Ti corresponds to stage 31, ie the stage of the first node, corresponding to the elongation of the main stem (phenological stage BBCH31, namely the first node is at most 1 cm above the tillering plateau. ), and the time T 2 corresponds to stage 33, called BBCH33, corresponding to an elongation of the main stem greater than 2 cm above the second node.
  • septoria 25 wheat samples were observed for each type of treatment. The presence of septoria on the samples was observed by observing the frequency and severity of septoria (cf. Example 2) on the F0 and Fl leaves at the stage known as stage 75, corresponding to the mid-milky stage ( milky seed content).
  • FIGS 3A and 3B The results obtained are shown in Figures 3A and 3B. [0110] They show that in the absence of treatment (Control NT), septoria has developed on wheat. In the absence of treatment (NT control), the F0 and Fl leaves were infected respectively at 25% and 55% in terms of severity, and at 100% in terms of frequency for the F0 and Fl leaves.
  • the treatment with Prof. Fongi. made it possible to reduce the severity of septoria on the F0 and Fl leaves, respectively to 3% and 5% in terms of severity (compared to the 25% and 55% observed in the control NT).
  • the frequency of septoria was also reduced to 55% and 82% respectively for the FO and F1 leaves, compared to the 100% frequency observed with the NT control.
  • the treatment with Prof. Fongi. al. reduced the severity of septoria on the F0 and Fl leaves, respectively to 4.5% and 12.5% in terms of severity (compared to the 25% and 55% observed in the non-control). treaty).
  • the frequency of septoria was reduced to 90% for the F0 leaf alone, compared to the 100% frequency observed in the untreated control.
  • the frequency of septoria on the F1 leaf remained unchanged (100%).
  • the ND composition when it is combined with a fungicide (Pr. Fongi. Al.), Gives the treated wheat plants better quality. protection against septoria of wheat than fungicide alone.
  • the ND composition made it possible to potentiate the phytosanitary effect of the fungicide.
  • Example 4 Demonstration of the effects of a composition according to the invention in comparison with an extract of ulvans or a solution of silicon applied individually
  • the test was carried out in the open field to evaluate the effectiveness of a composition according to the invention (ND) in comparison with an extract of ulvans at a concentration of 8 g / L alone or of a solution. of silicon alone (Si0 2 K 2 0) at a concentration of 21.6 g / L.
  • ND composition according to the invention
  • silicon alone Si0 2 K 2 0
  • a concentration of 21.6 g / L The variety of wheat chosen to conduct this trial was OREGRAIN, a variety of soft winter wheat (Triticum aestivum), which is susceptible to septoria.
  • the wheat was sown at a depth of 2 cm and at a sowing density of 250 plants / m 2 .
  • the experimental set-up in the plot was carried out according to a Fisher block design with four completely random replicates in the field. Wheat, grown in open fields, naturally infested with septoria.
  • composition ND 250 g / ha, at a time Ti, and in one second application of a dose of composition ND at 1 L / ha in combination with chlorothalonil at half of its approved dose, ie 250 g / ha, at a time T 2 ;
  • composition Ulvanes 8 g / L + Pr. Fongi. Al which consisted of a first application of a dose of 1 L / ha of the extract of ulvans at a concentration of 8 g / L (that is to say the composition ND without the silicon) in combination with chlorothalonil at half of its registered dose, i.e. 250 g / ha, at a time Ti, and in a second application of a dose of 1 L / ha of the extract of ulvans at a concentration of 8 g / Len association with chlorothalonil at half of its approved dose, i.e. 250 g / ha, at a time T 2 ; and
  • the time Ti corresponds to stage 31, ie the stage of the first node, corresponding to the elongation of the main stem (phenological stage BBCH31, namely the first node is at most 1 cm above the tillering plateau. ), and the time T 2 corresponds to stage 33, called BBCH33, corresponding to an elongation of the main stem greater than 2 cm above the second node.
  • the six treatments are summarized in Table 4. [0122] [Table 4]
  • the treatments were applied once (Ti) at the first node stage, that is to say the stage known as stage 31 corresponding to the elongation of the main stem (phenological stage BBCH31, namely the first node is at most 1 cm above the tillering plateau), then reapplied (T 2 ) at the third node stage, stage known as BBCH33, corresponding to an elongation of the main stem greater than 2 cm above the second knot. 25 wheat samples were observed for each type of treatment.
  • septoria was observed by observing the frequency and severity of septoria (see example 2) on the FO leaf at the stage known as stage 85 corresponding to the ripening of the seeds, more particularly the soft pasty stage, when the content of the seed is tender and dry (BBCH85 stage).
  • the fungicide program (Pr. Fongi.) Reduced the severity of septoria on the F0 leaf of the plants observed in terms of severity (40%) but not the frequency of the disease (100%).
  • Pr Fongi al. Made it possible to reduce septoria on the F0 leaf of the plants observed in terms of severity, to a lesser extent than Pr. Fongi (50% instead of 40% with Pr. . Fongi.) But not the frequency of the disease (100%).
  • Bion® 50 WG a commercial product called Bion® 50 WG, marketed by Syngenta, containing 50% benzolar-S-methyl acid, concentrated at 20 ⁇ g / ml.
  • Bion® 50 WG is a plant defense stimulator (SDP), hereinafter “SDP control” (positive control)
  • the 3rd spread sheet was used for gene expression analyzes by quantitative RT-PCR, 48 hours after treatment.
  • the ND composition makes it possible to activate the defense reactions of a plant and of resistance against biotic constraints.
  • Example 6 Demonstration of the effects of the ND composition on the control of the development of apple scab (“Apple scab”) [0142] A) Experimental protocol
  • Apple scab is caused by an ascomycete fungus called Venturia inaequalis which causes black or brown lesions on the surface of apple leaves, buds or fruits and sometimes even on wood.
  • the fruits and the lower part of the leaves are especially sensitive to it.
  • the disease is favored by a humid climate, especially when the buds are developing (bud burst). Apple scab can significantly reduce fruit quality and production if left untreated.
  • Trees of the Golden Delicious variety (Reinders clone, twelfth leaf) grafted onto M9-Emla rootstock, varieties very susceptible to apple scab were used.
  • four types of foliar spray treatment were compared:
  • PFI classic fungicide program
  • Lean Fungicide a program called “Lean Fungicide” (called “Lean PFI”), which consisted of the application of fungicides in integrated fruit production (PFI) at three different times and alternating the types of fungicides, as summarized in Table 5 below,
  • the percentage of scab fruit was calculated for each plot.
  • the spotted fruits are characterized by spots and can crack.
  • the "light PFI + ND composition” program made it possible to obtain improved protection of the orchard, compared with the light PFI, with less than 20% of the apples which were scabbed at the time of harvest.
  • Example 7 Demonstration of the Effects of the ND Composition on the Quality of the Apple Harvest
  • the "light PFI + ND composition" program made it possible to obtain a percentage of scab apples reduced to 20% with less than 3% of severely scab apples.
  • the ND composition effectively protects apples.
  • Example 8 Demonstration of the effects of the ND composition on the stimulation of defense reactions in apple trees
  • composition ND obtained in Example 1 diluted to l / 200th (v / v),
  • Example 1 - ND composition of Example 1 diluted to 1/66 (v / v).
  • the young plants were treated twice (on D-3 and on D-1) before the plant samples were taken.
  • the treated leaves were sampled 1 day (D 1) and 3 days (D3) post ⁇ treatment.
  • the samples were used for level analysis expression of the defense genes of the apple tree (analysis carried out by quantitative RT-PCR).
  • the list of apple genes, which were analyzed, can be found in Table 6, below.
  • the results were expressed as log2 of the sum of the defense genes induced, after normalization with respect to a control (control: treatment of the seedlings with water). This analysis made it possible to precisely measure the effect of the application of the ND composition on the expression of several apple defense genes, genes described in the literature to activate the defense reactions of plants.
  • Example 9 Demonstration of the effects of the ND composition on certain defense genes, very specific markers of defense reactions in apple trees
  • Example 1 - ND composition of Example 1 diluted to 1/66 (v / v).
  • the group of PR (Pathogenesis-Related) genes 1 to 14 are regularly used in the literature as markers for the activation of plant defenses.
  • the treated leaves were sampled 1 day (D 1) post-treatment.
  • the samples obtained were used for quantitative RT-PCR analysis.
  • the results are expressed in log 2 . This analysis made it possible to measure precisely the effect of the application of the ND composition on the expression of several PR genes.
  • results obtained are presented in FIG. 9 and show that the treatment of young apple plants with the composition ND activated the expression of the PR-1, PR-5, PR-8, PR-14 and PR genes. - 10. It has been observed for most of the PR genes an increase in the level of expression which is dose-dependent.
  • Figure 1 illustrates the numbering of foal fo F1, F2, F3, F4 wheat leaves.
  • FIG. 2A shows the severity of septoria (Figure left) on FO wheat leaves at stage 75 of wheat development and the frequency of septoria (Figure right) observed on leaves of FO wheat at stage 75 wheat development, for wheat plants which have not benefited from any fungicide treatment (Control NT), wheat plants having been treated with composition ND at 50% of its effective dose, i.e. 0.5 L / ha, and wheat plants having been treated with the ND composition at 100% of its effective dose, ie 1 L / ha.
  • FIG. 2B shows the severity of septoria (Figure left) on leaves of Fl wheat at stage 75 of wheat development and the frequency of septoria (Figure right) observed on leaves of Fl wheat at stage 75 wheat development, for wheat plants which have not benefited from any fungicide treatment (Control NT), wheat plants having been treated with composition ND at 50% of its effective dose, i.e. 0.5 L / ha and plants of wheat having been treated with composition ND at 100% of its effective dose, i.e. 1 L / ha.
  • Figure 3A represents the severity of septoria (left figure) and the frequency of septoria (right figure) observed on the leaves of FO wheat, for wheat plants which have not benefited from any fungicide treatment.
  • Control NT wheat plants having been treated with a fungicidal program (Pr. Fongi.)
  • Wheat plants having been treated with a light fungicidal program (Pr. Fongi. Al.)
  • wheat plants having been treated with an ND composition program applied at 100% of its effective dose ie 1 L / ha in combination with Pr. Fongi. al.
  • FIG. 3B represents the severity of septoria (left figure) and the frequency of septoria (right figure) observed on the leaves of wheat F1, for wheat plants which have not benefited from any fungicide treatment.
  • Control NT wheat plants having been treated with a fungicidal program (Pr. Fongi.)
  • Wheat plants having been treated with a light fungicidal program (Pr. Fongi. Al.)
  • Wheat plants having been treated with an ND composition program applied at 50% of its effective dose, ie 0.5 L / ha in combination with Pr. Fongi. AL wheat plants having been treated with an ND composition program applied at 100% of its effective dose, ie 1 L / ha in combination with Pr. Fongi. al.
  • Figure 4 represents the severity of septoria (left figure) and the frequency of septoria (right figure) observed on the leaves of F0 wheat, for wheat plants which have not benefited from any fungicide treatment.
  • Control NT wheat plants having been treated with a conventional fungicidal program (Pr. Fongi.), Wheat plants having been treated with a light fungicidal program (Pr. Fongi. Al.), Wheat plants having were treated with an ND composition program applied at its effective dose (ie 1 L / ha) in combination with Pr. Fongi. al (ND + Pr. Fongi. al.), wheat plants having been treated with an "ulvan extract" program at 8 g / L applied in combination with Pr. Fongi.
  • FIG. 5 shows the expression level of the ICSI gene, the PR-1 gene and PR-3 gene in wheat leaves BBCH13 stage (3rd leaf) measured by quantitative RT-PCR, for plants wheat which did not benefit from any treatment (NT control), wheat plants having been treated with a positive control (commercial product Bion® 50 WG), wheat plants having been treated with the ND composition diluted to l / 400 th (v / v) and wheat plants having been treated with the ND composition diluted to l / 100 th (v / v).
  • Figure 6 represents the percentage of scab fruit, obtained on apple trees of the Golden Delicious variety, for apple trees which have been treated with a reference program called integrated fruit production (PFI), a light fungicide program (PFI light ), a light PFI program + Bion® 50 WG, or a light PFI program + ND composition.
  • PFI integrated fruit production
  • PFI light light fungicide program
  • PFI program + Bion® 50 WG light PFI program + ND composition
  • Figure 7 represents the percentage of healthy fruits, weakly scabbed and severely scabbed, for apple trees which have benefited from a fungicide treatment carried out in a conventional integrated fruit production (PFI) program, for apple trees which have benefited from a treatment in light modality (light PFI), apple trees which have benefited from a light treatment + Bion ® 50 WG or apple trees which have benefited from a light treatment + ND composition.
  • PFI integrated fruit production
  • FIG. 8 represents the activation of the defense genes of the apple tree expressed in log 2 of the sum of the defense genes induced, after normalization with respect to a control (the control corresponds to the treatment of the seedlings with water), for apple tree leaves having been sampled on day 1 (D1) and day 3 (D3) post-treatment. The leaves were treated with the ND composition diluted to 1/200 (v / v) or with the ND composition diluted to 1/66 (v / v). [0191] [Fig. 9] FIG.

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Abstract

L'invention concerne une composition phytosanitaire comprenant (i) des ulvanes et/ou des oligosaccharides dérivés d'ulvanes, par exemple sous la forme d'un extrait contenant des ulvanes et/ou des oligosaccharides dérivés d'ulvanes; et (ii) du silicium, l'utilisation de ladite composition pour activer des réactions de défense d'une plante et de résistance contre des contraintes biotiques, ainsi qu'un procédé pour activer les réactions de défense d'une plante et de résistance contre des contraintes biotiques, comprenant l'application à ladite plante d'une quantité efficace de la composition phytosanitaire.

Description

Composition phytosanitaire comprenant des ulvanes et du silicium Domaine technique
[0001] L'invention concerne une composition phytosanitaire comprenant (i) des ulvanes et/ou des oligosaccharides dérivés d'ulvanes, par exemple sous la forme d'un extrait contenant des ulvanes et/ou des oligosaccharides dérivés d'ulvanes ; et (ii) du silicium, l'utilisation de ladite composition pour activer des réactions de défense d'une plante et de résistance contre des contraintes biotiques, ainsi qu'un procédé pour activer les réactions de défense d'une plante et de résistance contre des contraintes biotiques, comprenant l’application à ladite plante d’une quantité efficace de la composition.
Technique antérieure
[0002] Les plantes peuvent être attaquées par de multiples agents pathogènes (tels que champignons, bactéries, virus, viroïdes, protozoaires, nématodes, herbivores) avec pour conséquences des pertes de rendement et une baisse de qualité de la production.
[0003] Pour renforcer la protection des végétaux face à ces agents pathogènes, des agents chimiques, par exemple des pesticides, peuvent être utilisés. Cependant, les pesticides représentent aujourd'hui un danger potentiel pour l'homme et/ou pour l'environnement. Ainsi, de nouvelles stratégies de protection des végétaux ont été développées, grâce à l'étude des mécanismes de défense de la plante.
[0004] En effet, bien que dépourvues de système immunitaire analogue aux animaux supérieurs, les plantes disposent de leur propre arsenal de défense. La connaissance de ces mécanismes permet d'envisager leur exploitation pour lutter contre les maladies.
[0005] Les mécanismes de défense de la plante peuvent impliquer une série d’événements déclenchés dans ou à la surface des cellules végétales lorsque la plante est attaquée par un pathogène, telle que la reconnaissance de l'agent pathogène, l'envoi de cette information au noyau, l'induction de gènes de défense puis synthèse de composés anti-microbiens et de protéines dites PR (Pathogenesis-Related), la transmission du signal d'alarme à toute la plante et à ses voisines.
[0006]Ainsi, pour augmenter la capacité de réponse et donc de résistance d'une plante vis-à-vis de certains pathogènes, une des stratégies possibles consiste à induire préalablement à l'attaque du pathogène les réactions de défense par l'utilisation de molécules signaux. Ces molécules signaux, qui sont de natures chimiques très variées (protéines, peptides, glycoprotéines, lipides et oligosaccharides) sont capables de transmettre l'information d'une attaque même à très faible concentration.
[0007] Elles sont pour la plupart d'origine microbienne (par exemple la harpine) ou d'origine végétale (par exemple les acides oligogalacturoniques) ou synthétisées chimiquement (par exemple le benzothiadiazole) ou d'origine minérale (par exemple les sels de phosphite).
[0008] En réponse aux traitements par ces molécules signaux, la plante réagit en synthétisant des protéines structurelles, qui renforcent la paroi des cellules végétales, des enzymes impliquées dans la synthèse de composés anti¬ microbiens tels que des phytoalexines, des hydrolases comme des chitinases ou des glucanases et des enzymes inhibitrices qui agissent contre les enzymes hydrolytiques des agents pathogènes. La mise en place de ces moyens de défense passent par l'activation, au niveau de la plante d'une signalisation hormonale (présence ou augmentation de la concentration de phytohormones telles que l'acide salicylique et/ou ses dérivés, et/ou de l'acide jasmonique et/ou ses dérivés), mais également par l'induction de gènes de défense, codant pour des enzymes de défense (hydrolases, chitinases), codant pour des protéines dites "PR" (Pathogenesis-Related), ou de gènes codant pour des enzymes de biosynthèse des métabolites de défense (phytoalexines), ou encore du renforcement des barrières structurales (i.e. renforcement pariétal).
[0009] L'activation du système immunitaire des plantes par des molécules signaux provoque la synthèse et le dépôt de composés phénoliques et de protéines de défense dans la paroi, l’accumulation de composés antimicrobiens et la synthèse de protéines "PR". Le renforcement pariétal, qui peut ralentir ou inhiber la progression du pathogène à l'intérieur de la plante, résulte par exemple du dépôt de callose dans la paroi ou les plasmodesmes, ainsi que de la synthèse de lignines. Ces mécanismes permettent de ralentir les invasions fongiques ou virales. De même, les HRGP extensines (Hydroxyprolin Rich GlycoProtein) et les GRP (Glycin Rich Protein) peuvent, par leur rôle de renforcement de la paroi, rendre cette dernière plus difficile à dégrader.
[0010] Les phytoalexines, composés antimicrobiens de faible poids moléculaire, permettent dans certains cas de lutter directement contre les parasites, en raison de leur capacité à s'accumuler rapidement autour du point d'infection en empêchant ainsi la progression de l'invasion. Les protéines PR (intra- ou extra¬ cellulaires) s'accumulent dans les plantes après leur inoculation par des agents pathogènes et, dans le cas d'interactions incompatibles, peuvent constituer jusqu'à 10% des protéines solubles de la feuille. Pour certaines, un rôle actif dans la dégradation de la paroi d'agents pathogènes fongiques (b-glucanase, chitinase) a été montré.
[0011]II est à noter que les trois phénomènes précités (renforcement de la paroi, synthèse de phytoalexines et synthèse de protéines PR) accompagnent l'activation du système immunitaire des plantes sans en être exclusifs. En effet, la synthèse de protéines GRP et HRGP a aussi été détectée lors d’interactions compatibles, ainsi que consécutivement à une blessure.
[0012] L'activation du système immunitaire des plantes peut également être accompagnée de la synthèse de molécules de signalisation, telles que l'acide salicylique et/ou ses dérivés, et/ou de l'acide jasmonique et/ou ses dérivés, des phytohormones qui interviennent dans le processus de défense des plantes. [0013] Les algues marines constituent une ressource végétale abondante et sont, depuis longtemps, utilisées sur les régions côtières comme fertilisants du sol. La germination des graines, l'obtention de meilleurs rendements, une résistance aux maladies, une durée de conservation plus longue des fruits ont été mises en évidence par suite de traitements de plusieurs plantes par des extraits d'algues. Les conclusions en matière de santé des plantes avaient essentiellement été attribuées à la richesse en bétaïnes, en phytohormones et en oligo-éléments des algues utilisées.
[0014]II est aujourd'hui reconnu que certains oligosaccharides d’origine marine présentent un effet éliciteur sur certaines voies de défense des plantes. Ainsi, le document WO 99/03346 décrit l’utilisation d'oligosaccharides de type 6(1-3) glucanes notamment extraits de l'algue brune Laminaria digitata pour la potentialisation et la stimulation des défenses naturelles du blé infecté par la septoriose. Ces 6(1-3) glucanes induisent également chez les cellules de tabac quatre marqueurs de défense dont l'activité phénylammonialyase (PAL), qui est une enzyme clé pour la synthèse des phytoalexines, et l'activité O-méthyl transférase (OMT), qui est une enzyme impliquée dans la synthèse de lignine.
[0015] Dans le cas des algues rouges, il a été montré que le carraghénane induit l'expression des gènes codant pour la cyclase sesquiterpène, la chitinase et les inhibiteurs de protéinases.
[0016] Dans le cas des algues vertes, le document W02005094588 décrit quant à lui l'utilisation des ulvanes ou d’oligosaccharides dérivés d’ulvanes, comme activateurs des réactions de défense des plantes et de résistance contre des contraintes biotiques ou abiotiques. Cependant, il subsiste un besoin de trouver de nouvelles compositions, qui permettraient d'augmenter la capacité de réponse et donc de résistance d'une plante, par exemple en activant des mécanismes de protection supplémentaires et complémentaires de la plante, qui peuvent impliquer la stimulation de la production d'acide salicylique et/ou de ses dérivés, et/ou d'acide jasmonique et/ou de ses dérivés, mais également l'induction d'autres gènes de défense, codant pour des enzymes de défense (hydrolases, chitinases), codant pour des protéines dites "PR", ou de gènes codant pour des enzymes de biosynthèse des métabolites de défense (phytoalexines), ou encore de renforcement pariétal.
[0017] C'est dans ce contexte que le demandeur a mis en évidence, et ceci constitue le fondement de la présente invention, qu'une composition phytosanitaire comprenant :
(i) des ulvanes et/ou des oligosaccharides dérivés d'ulvanes, par exemple sous la forme d'un extrait contenant des ulvanes et/ou des oligosaccharides dérivés d'ulvanes ; et (ii) du silicium permettait de stimuler l'expression des gènes de défense d'une plante, notamment pour induire la production d'acide salicylique et/ou de ses dérivés, et/ou d'acide jasmonique et/ou de ses dérivés, et peut donc être utilisée pour activer des réactions de défense d'une plante et de résistance contre des contraintes biotiques. Une telle composition peut être utilisée seule ou associée à des pesticides, par exemple des fongicides. En association avec des pesticides, elle permet d'activer des réactions de défense d'une plante et de résistance contre des contraintes biotiques avec une quantité de pesticides réduite comparé à des pesticides seuls.
Résumé de l'invention
[0018] La présente invention, qui trouve application dans le domaine agro-écologique et agricole, vise à proposer une nouvelle composition phytosanitaire, pour activer des réactions de défense d'une plante et de résistance contre des contraintes biotiques.
[0019]Selon un premier aspect, l'invention concerne une composition phytosanitaire comprenant:
(i) des ulvanes et/ou des oligosaccharides dérivés d'ulvanes, par exemple sous la forme d'un extrait contenant des ulvanes et/ou des oligosaccharides dérivés d'ulvanes ; et
(ii) du silicium.
[0020]Selon un deuxième aspect, l'invention concerne l'utilisation de la composition telle que définie ci-dessus, pour activer des réactions de défense d'une plante et de résistance contre des contraintes biotiques.
[0021]Selon un troisième aspect, l'invention concerne un procédé pour activer les réactions de défense d'une plante et de résistance contre des contraintes biotiques, comprenant l’application à ladite plante d’une quantité efficace de la composition telle que définie ci-dessus. Description détaillée
[0022] Dans le cadre de la présente invention, on entend désigner par «composition phytosanitaire» tout produit dont l'emploi est destiné à soigner ou prévenir les maladies d'une plante. Dans le cadre de la présente invention, une composition phytosanitaire permet d'activer les réactions de défense d'une plante et d'induire une résistance contre des contraintes biotiques.
[0023] Dans le cadre de la présente invention, on entend désigner par « ulvanes », des polysaccharides hydrosolubles, présents notamment dans les parois cellulaires des algues vertes des genres Ulva et Enteromorpha. Les ulvanes se définissent plus précisément comme des polysaccharides acides fortement sulfatés et sont essentiellement composés d’unités dérivées de rhamnose 3- sulfate, de xylose, de xylose 2-sulfate, d’acide glucuronique et d’acide iduronique. Les quatre unités récurrentes suivantes sont notamment caractéristiques des ulvanes : [0024] La formule (I) montre le groupement >4)- bêta-D-GIcA- (1 >4)- apha-L-Rha 3 sulfate (1>, encore dénommé acide ulvanobiouronique 3-sulfate type A :
Figure imgf000007_0001
[0025]La formule (II) montre le groupement >4)- alpha-L-IdoA- (1>4)- alpha -L- Rha 3 sulfate(l>, encore dénommé acide ulvanobiuronique 3-sulfate type B :
Figure imgf000007_0002
[0026] La formule (III) montre le groupement >4)- bêta-D-Xyl- (1>4)- alpha-L-Rha 3 sulfate(l>, encore dénommé acide ulvanobiose 3-sulfate :
Figure imgf000008_0001
[0027] La formule (IV) montre le groupement >4)- bêta-D-Xyl 2 -sulfate- (1>4)- alpha-L-Rha 3 sulfate(l>, encore dénommé acide ulvanobiose 2',3-disulfate :
Figure imgf000008_0002
[0028] Le terme « oligosaccharides dérivés d'ulvanes » désigne dans le cadre de l'invention des oligosaccharides obtenus par hydrolyse acide des ulvanes, par exemple par hydrolyse acide à chaud (e.g. à 85°C), ou par hydrolyse enzymatique des ulvanes, par exemple en utilisant une ou plusieurs glycosidases.
[0029] Le terme « extrait » désigne le produit résultant d'une extraction à partir d'une source, par exemple, à partir d'une source biologique, comme des cellules. Lorsqu'il s'agit de cellules, le terme « extrait » désigne donc le produit résultant de l'extraction du contenu de cellules. Ainsi, par exemple, le terme « extrait d 'Ulva » désigne le produit résultant de l'extraction du contenu des cellules à'Ulva. [0030] Les termes « extrait contenant des ulvanes et/ou des oligosaccharides dérivés d'ulvanes » et « extrait d'ulvanes et/ou des oligosaccharides dérivés d'ulvanes » sont interchangeables et désignent un extrait obtenu à partir d'une source d'ulvanes et/ou des oligosaccharides dérivés d'ulvanes. Un extrait contenant des ulvanes mis en œuvre dans le cadre de la présente invention est de préférence un extrait d'algues contenant des ulvanes, plus préférentiellement un extrait à'Ulva ou un extrait à' Enteromorpha, par exemple un extrait à'Ulva armoricana, un extrait à'Ulva rigida, un extrait à'Ulva rotundata, un extrait d' Ulva lactuca, un extrait ô! Enteromorpha intestinalis, ou un extrait d 'Enteromorpha compressa, de préférence un extrait ô'Uiva armoricana, un extrait ô! Enteromorpha intestinalis ou un extrait ô! Enteromorpha compressa. Un extrait contenant des oligosaccharides dérivés d'ulvanes peut être obtenu par hydrolyse acide ou par hydrolyse enzymatique d'un extrait contenant des ulvanes, par exemple d'un extrait contenant des ulvanes tel que défini ci-dessus.
[0031] L'extrait contenant des ulvanes et/ou des oligosaccharides dérivés d'ulvanes peut être enrichi en ulvanes et/ou en oligosaccharides dérivés d'ulvanes. Des techniques d'enrichissement des ulvanes et/ou des oligosaccharides dérivés d'ulvanes sont décrites dans la littérature et faciles à mettre en œuvre par l'homme de l'art, par exemple la précipitation par addition de sulfate d'ammonium, par addition d'éthanol ou par filtration. La concentration en ulvanes et/ou en oligosaccharides dérivés d'ulvanes dans l'extrait est de préférence d'au moins 1 g/L, de préférence au moins 10 g/L, au moins 11 g/L, au moins 12 g/L, au moins 13 g/L, au moins 14 g/L, au moins 15 g/L, au moins 16 g/L, au moins 17 g/L, au moins 18 g/L, au moins 19 g/L, par exemple entre 1 et 200 g/L, de préférence entre 10 et 100 g/L, plus préférentiellement entre 15 et 50 g/L, par exemple environ 20 g/L.
[0032] Les conditions d'extraction et la nature des algues seront choisies de telle façon que l'extrait obtenu présente la concentration souhaitée dans l’application envisagée. Par exemple, la concentration en ulvanes et/ou en oligosaccharides dérivés d'ulvanes varie selon le procédé de préparation. La concentration en ulvanes peut notamment varier en fonction de la quantité d'algues fraîches et/ou sèches utilisée (par exemple, lors d'une extraction aqueuse, lorsqu'on augmente le ratio algue/eau, la concentration en ulvanes et/ou en oligosaccharides dérivés d'ulvanes de l'extrait obtenu augmente également), le temps d'extraction (par exemple, une augmentation du temps d'extraction lors d'une extraction aqueuse permet généralement d'augmenter la concentration en en ulvanes et/ou en oligosaccharides dérivés d'ulvanes de l'extrait obtenu) et/ou la température d'extraction (par exemple, une augmentation de la température d'extraction lors d'une extraction aqueuse permet généralement d'augmenter la concentration en en ulvanes et/ou en oligosaccharides dérivés d'ulvanes de l'extrait obtenu).
[0033] La préparation d'un extrait d'ulvanes et/ou d'oligosaccharides dérivés d'ulvanes ne présente aucune difficulté particulière, de nombreux procédés d'extraction sont décrits dans la littérature. Le procédé d'extraction n'est pas limité à un procédé particulier, et les procédés classiques peuvent être mis en œuvre pour préparer un extrait contenant des ulvanes et/ou des oligosaccharides dérivés d'ulvanes, comme par exemple l'extraction aqueuse. Un extrait d'ulvanes et/ou d'oligosaccharides dérivés d'ulvanes peut par exemple être obtenu par un procédé comportant les étapes suivantes : lavage, broyage, extraction (séparation solide-liquide) et éventuellement fractionnement et concentration. L'extrait obtenu peut être plus ou moins concentré selon l'utilisation envisagée. Une déshydratation totale de cet extrait permet d'obtenir un extrait sous forme pulvérulente hydrosoluble pouvant être obtenue, par exemple, par sécheur à tambour ou par atomisation.
[0034]Au sens de la l'invention, on entend par « silicium » l’élément chimique de symbole Si sous toutes ses formes. Cela comprend notamment la silice (également connue sous le terme « oxyde de silicium »), les silicates (e.g. Si03 2 et Si04 4 ) et les silicates combinés. La silice existe à l'état libre sous formes cristallines ou amorphes. Sous sa forme cristalline, la silice se présente sous forme de cristaux non-moléculaires formés de motifs tétraédriques Si04 liés entre eux par les atomes d'oxygène de façon régulière, comme dans le quartz. Sous sa forme amorphe, la silice se présente sous forme de dioxyde de silice (S1O2), comme dans le verre. Le silicium peut par exemple être sous la forme de silice minérale solide, telle que la terre de diatomée ou sable, sous la forme de silice minérale liquide, telle que l'acide orthosilicique, sous la forme de produits vitreux à base de silicium, telle que des poudres ou fibres de verres, sous la forme de silice organique et / ou sous la forme d'un sel soluble. Préférentiellement, le silicium est sous la forme d'un sel soluble. On entend par « sel soluble » un sel soluble dans un solvant tel que l'eau. La silice est un oxyde acide qui réagit avec les oxydes basiques pour donner les silicates, notamment Si03 2 et Si04 4 . Les silicates sont capables de se combiner à d'autres atomes métalliques, comme par exemple l'aluminium (Al), le fer (Fe), le Magnésium (Mg), le calcium (Ca), le sodium (Na), le potassium (K). Les silicates combinés ainsi obtenus sont respectivement le silicate d'aluminium (AI2Si03), le silicate de fer (Fe2Si03), le métasilicate de magnésium (MgSi03), le silicate de calcium (Ca2Si03), le silicate de sodium (Na2Si03) et le silicate de potassium (K2Si03). Les silicates peuvent également être sous la forme de dérivés, par exemple K2Si04, Na2Si04, Mg2Si04.
[0035] De préférence, le silicium est sous la forme d'un sel soluble, de préférence sous la forme de silicate de sodium (Na2Si03), de silicate de potassium (K2Si03), de méta-silicate de magnésium (MgSi03) ou d'un mélange de sels solubles. Encore plus préférentiellement, le silicium est sous la forme d'un sel soluble choisi parmi le silicate de sodium (Na2Si03),le silicate de potassium (K2Si03), et leur mélange. Par exemple, le silicate de potassium commercialisé par la société Quaron, appelé « Silicate de potassium liquide 34,8% », est particulièrement adapté à la mise en œuvre de l'invention.
[0036] Le terme «matière fertilisante » désigne une substance, ou un mélange de substances, naturelle ou d’origine synthétique, utilisée en agriculture, en horticulture et sylviculture, pour améliorer les sols, notamment leur structure, et fertiliser les plantes cultivées. Les matières fertilisantes comprennent les engrais et les amendements.
[0037] Le terme « pesticide » désigne une substance utilisée contre un ou plusieurs organismes considérés comme nuisibles pour la plante, appelés pathogènes. Ce terme rassemble notamment les insecticides, les fongicides, les herbicides, les parasiticides.
[0038] Le terme « agent pesticide » désigne la capacité à lutter contre un pathogène, par exemple en éliminant le dit pathogène ou en le repoussant. Ce terme rassemble notamment les agents insecticides, les agents fongicides, les agents herbicides, les agents parasiticides. Dans le cadre de la présente invention, il peut s'agir d'une capacité à lutter directement contre le pathogène ou indirectement contre le pathogène, par exemple en activant les réactions de défense d'une plante et de résistance contre des contraintes biotiques. Le pathogène est préférentiellement un champignon, par exemple un champignon ascomycète, tel que Septoria tritici (responsable de la septoriose) ou Venturia inaequalis (responsable de la tavelure du pommier).
[0039] Dans le cadre de la présente invention, on entend designer par l'expression « plante », la plante considérée dans son ensemble, incluant son appareil racinaire, son appareil végétatif, les graines, les semences et les fruits.
[0040] La présente invention découle des avantages surprenants mis en évidence par les inventeurs de l'effet de la composition phytosanitaire selon l'invention sur une plante, pour activer des réactions de défense de la plante et de résistance contre des contraintes biotiques.
[0041] Ainsi, l'invention concerne une composition phytosanitaire comprenant
(i) des ulvanes et/ou des oligosaccharides dérivés d'ulvanes, par exemple sous la forme d'un extrait contenant des ulvanes et/ou des oligosaccharides dérivés d'ulvanes ; et
(ii) du silicium.
[0042] La composition selon la présente invention peut être sous forme de poudre, de granule ou sous forme liquide, avantageusement sous forme liquide. La préparation d'une telle composition pourra être réalisée par l'homme du métier en utilisant ses connaissances générales. Par exemple, les ulvanes et/ou les oligosaccharides dérivés d'ulvanes, par exemple sous la forme d'un extrait contenant des ulvanes et/ou des oligosaccharides dérivés d'ulvanes, peuvent se présenter sous forme de poudre ou sous forme liquide et peuvent être mélangés à une solution de sel(s) soluble(s) ou de silicium pour former une composition liquide selon l'invention. Un mode de préparation particulier de la composition selon l'invention est détaillé dans les exemples.
[0043] Lorsque la composition selon l'invention est sous forme liquide, la composition peut comprendre une concentration en ulvanes et/ou en oligosaccharides dérivés d'ulvanes de 0,01 à 100 g/L, par exemple de 0,1 g/L à 80 g/L, préférentiellement de 0,1 g/L à 50 g/L, de 0,1 g/L à 40 g/L, de 0,1 g/L à 30 g/L, encore plus préférentiellement de 1 g/L à 20 g/L, de 5 g/L à 15 g/L, par exemple de 8 g/L à 14 g/L.
[0044] Lorsque la composition selon l'invention est sous forme liquide, la composition peut comprendre une concentration en silicium de 0,01 g/L à 100 g/L, en particulier sous la forme d'un sel soluble de silicium ou sous la forme d'un mélange de sels solubles de silicium, préférentiellement de 0,1 g/L à 50 g/L, encore plus préférentiellement de 1,0 g/L à 30 g/L, de 10 g/L à 30 g/L, de 20 g/L à 30 g/L, de 5 à 10 g/L, de 5 à 8 g/L, par exemple environ 21 g/L +/- 1 g/L ou 6 g/L+/- 1 g/L.
[0045] Lorsque la composition selon l'invention est sous forme liquide, elle peut comprendre de 10 à 90 % (v/v total de la composition) d'un extrait contenant des ulvanes et/ou des oligosaccharides dérivés d'ulvanes, préférentiellement de 40 à 90 %, par exemple de 40 à 80 %, de 70 à 90 % de 70 à 80 %, ledit extrait ayant une concentration en ulvanes et/ou en oligosaccharides dérivés d'ulvanes d'au moins 1 g/L, de préférence d'au moins 10 g/L, d'au moins 11 g/L, d'au moins 12 g/L, d'au moins 13 g/L, d'au moins 14 g/L, d'au moins 15 g/L, d'au moins 16 g/L, d'au moins 17 g/L, d'au moins 18 g/L, d'au moins 19 g/L. Par exemple, ledit extrait peut avoir une concentration en ulvanes et/ou en oligosaccharides dérivés d'ulvanes allant de 1 à 200 g/L, de préférence allant de 10 à 100 g/L, plus préférentiellement allant de 15 à 50 g/L, par exemple une concentration en ulvanes et/ou en oligosaccharides dérivés d'ulvanes d'environ 20 g/L +/- 2 g/L.
[0046] Lorsque la composition selon l'invention est sous forme liquide, elle peut comprendre de 1 à 25 % (v/v total de la composition) d'une solution de silicium, en particulier d'une solution de sel soluble de silicium ou d'un mélange de sels solubles de silicium, préférentiellement de 1 à 10%, par exemple de 1 à 5 %, ladite solution de silicium ayant une concentration en silicium allant de 0,1 à 500 g/L, préférentiellement de 1 à 500 g/L, encore plus préférentiellement de 10 g/L à 300 g/L, de 100 g/L à 300 g/L, de 200 g/L à 300 g/L, par exemple d'environ 240 g/L +/- 10 g/L. [0047]Selon un mode de réalisation particulier, la composition selon l'invention est sous forme liquide et comprend :
- une concentration en ulvanes et/ou en oligosaccharides dérivés d'ulvanes de 0,01 à 100 g/L, préférentiellement de 0,1 g/L à 50 g/L, encore plus préférentiellement de 1 g/L à 20 g/L, par exemple de 8 g/L à 14 g/L, et
- une concentration en silicium de 0,01 g/L à 100 g/L , en particulier sous la forme d'un sel soluble de silicium ou sous la forme d'un mélange de sels solubles de silicium, préférentiellement de 0,1 g/L à 50 g/L, encore plus préférentiellement de 1,0 g/L à 30 g/L, de 10 g/L à 30 g/L, de 20 g/L à 30 g/L, de 5 à 10 g/L, de 5 à 8 g/L, par exemple environ 21 g/L +/- 1 g/L ou 6 g/L+/- 1 g/L.
[0048]Selon un autre mode de réalisation particulier, la composition selon l'invention est sous forme liquide et comprend :
- de 10 à 90 % (v/v total de la composition) d'un extrait contenant des ulvanes et/ou des oligosaccharides dérivés d'ulvanes, préférentiellement de 40 à 90 %, par exemple de 40 à 80 %, de 70 à 90 % de 70 à 80 %, ledit extrait ayant une concentration en ulvanes et/ou en oligosaccharides dérivés d'ulvanes d'au moins 1 g/L, de préférence au moins 10 g/L, au moins 11 g/L, au moins 12 g/L, au moins 13 g/L, au moins 14 g/L, au moins 15 g/L, au moins 16 g/L, au moins 17 g/L, au moins 18 g/L, au moins 19 g/L, par exemple entre 1 et 200 g/L, de préférence entre 10 et 100 g/L, plus préférentiellement entre 15 et 50 g/L, par exemple environ 20,0 g/L,
- de 1 à 25 % (v/v total de la composition) d'une solution de silicium, en particulier d'une solution de sel soluble de silicium ou d'un mélange de sels solubles de silicium, préférentiellement de 1 à 10%, par exemple de 1 à 5 %, ladite solution de silicium ayant une concentration en silicium allant de 0,1 à 500 g/L, préférentiellement de 1 à 500 g/L, encore plus préférentiellement de 10 g/L à 300 g/L, de 100 g/L à 300 g/L, de 200 g/L à 300 g/L, par exemple environ 240 g/L +/- 10 g/L , et éventuellement
- de l'eau. [0049]Selon un mode de réalisation préféré de l'invention, la composition est sous forme liquide et comprend :
- 40 % (v/v total de la composition) d'un extrait contenant des ulvanes et/ou des oligosaccharides dérivés d'ulvanes, ledit extrait ayant une concentration en ulvanes et/ou en oligosaccharides dérivés d'ulvanes allant de 8 à 14 g/L,
- 9 % (v/v total de la composition) d'une solution de silicium, en particulier d'une solution de sel soluble de silicium ou d'un mélange de sels solubles de silicium, ladite solution de silicium ayant une concentration en silicium d'environ 240 g/L, et
- 51% d'eau.
[0050]Selon un autre mode de réalisation préféré de l'invention, la composition est sous forme liquide et comprend :
- de 70 à 80 % (v/v total de la composition) d'un extrait contenant des ulvanes et/ou des oligosaccharides dérivés d'ulvanes, ledit extrait ayant une concentration en ulvanes et/ou en oligosaccharides dérivés d'ulvanes allant de 8 à 14 g/L,
- de 2 à 3 % (v/v total de la composition) d'une solution de silicium, en particulier d'une solution de sel soluble de silicium ou d'un mélange de sels solubles de silicium, ladite solution de silicium ayant une concentration en silicium d'environ 240 g/L, et
- de 17 à 28 à % d'eau.
[0051] En outre, la composition selon l'invention peut comprendre une ou plusieurs matières fertilisantes, pouvant être de natures variées tel que l’urée, le sulfate d’ammonium, le phosphate naturel, le chlorure de potassium, le sulfate d’ammonium, le nitrate de magnésium, le nitrate de manganèse, le nitrate de zinc, le nitrate de cuivre, l’acide phosphorique, et/ou l’acide borique.
[0052] En outre, la composition selon l'invention peut comprendre un ou plusieurs pesticides, pouvant être de natures variées. Le ou les pesticide(s) peut/peuvent être choisi(s) parmi les insecticides, fongicides, herbicides, parasiticides. En particulier, la composition selon l'invention peut comprendre un ou plusieurs fongicide(s). Les fongicides qui conviennent à la mise en œuvre de l'invention sont par exemple référencés dans le catalogue de produits phytopharmaceutiques « e-phy » de l'agence nationale de sécurité sanitaire de l'alimentation, de l'environnement et du travail (ANSES) ou encore dans le catalogue « liste de EPPO Al et « liste de EPPO A2 » de l'Organisation européenne et méditerranéenne pour la protection des plantes (EPPO). De préférence, la composition selon l'invention peut comprendre un ou plusieurs fongicide(s) choisi(s) parmi le chlorothalonil, le fluxapyroxad, l'époxiconazole, le captan, le dithlanon, le fenbuconazole, le pyradostrobine, le dodine, le prothioconazole, le metconazole, le propiconazole, le cyproconazole, le tebuconazole, le bromuconazole, le difenoconazole, le propiconazole, le tetraconazole, l'azoxystrobin, le picoxystrobin, le pyraclostrobin, le picoxystrobin, le trifloxystrobin, le dimoxystrobin, le fluoxastrobin maneb, le mancozeb, le penthiopyrad, le bixafen, le prochloraz, le benzovindiflupyr, le boscalid, le fenpropidin, le fluopyram, le spiroxamine, le flutriafol, le folpet, le fenpropimorph, le metrafenone, le sulphur et le laminarin. L'Homme du métier saura choisir le ou les pesticide(s) le/les plus adapté(s) à la plante à traiter.
[0053] L'association de la composition selon l'invention avec un pesticide est particulièrement avantageuse car elle permet de diminuer les doses (ou quantités) de pesticide normalement utilisées en agriculture. Une dose de pesticide normalement utilisée correspond par exemple à une dose homologuée pour un pesticide considéré. L'association de la composition selon l'invention avec un pesticide peut permettre de diminuer de moitié (50%) la dose de pesticide normalement utilisée. Cela permet de réduire l'impact des produits phytosanitaires sur l'environnement, ce qui constitue un avantage écologique et économique.
[0054] L'invention concerne également l'utilisation de la composition phytosanitaire décrite ci-dessus pour activer des réactions de défense d'une plante et de résistance contre des contraintes biotiques.
[0055] En particulier, l'invention concerne l'utilisation de la composition phytosanitaire décrite ci-dessus pour stimuler l'expression des gènes impliqués dans la défense d'une plante. Par exemple, la composition phytosanitaire selon l'invention permet de stimuler l'expression par la plante de gènes codant :
- pour des enzymes de défense, telles que des hydrolases, des chitinases ;
- pour des protéines dites PR ;
- pour des enzymes de biosynthèse des métabolistes de défense, telles que des phytoalexines ;
- pour des protéines impliquées dans le renforcement pariétal ;
- pour stimuler la production d'acide salicylique et/ou de ses dérivés ; et/ou
- pour stimuler la production d'acide jasmonique et/ou de ses dérivés.
[0056]Avantageusement, la composition phytosanitaire de l'invention permet de stimuler l'expression par la plante de gènes codant pour l'acide salicylique et ses dérivés et/ou l'acide jasmonique et ses dérivés. En particulier, la composition phytosanitaire décrite ci-dessus permet de stimuler l'expression des gènes ICSI, EDS1 (Disease résistance protein EDS1), WRKY (WRKY transcription factor 30), PR-1 et PR-3, ce qui induit la production d'acide salicylique et/ou de ses dérivés. En particulier, la composition phytosanitaire décrite ci-dessus permet également de stimuler l'expression des gènes LOX2 (Lipoxygenase); JAR (Jasmonate résistant) ce qui induit la produit d'acide jasmonique et/ou de ses dérivés.
[0057] L'invention vise également un procédé pour activer les réactions de défense d'une plante et de résistance contre des contraintes biotiques, caractérisé en ce qu’il comprend l’application à ladite plante d’une quantité efficace de la composition phytosanitaire selon l'invention.
[0058] Par « quantité efficace » ou « dose efficace » on entend une quantité suffisante pour activer des réactions de défense d'une plante et de résistance, notamment en stimulant l'expression des gènes impliqués dans la défense de la plante, contre des contraintes biotiques d'au moins 5%, avantageusement d'au moins 10%, par exemple d'au moins 15%, au moins 20%, au moins 25%, au moins 30%, au moins 35%, au moins 40%, avantageusement d'au moins 30%. Ainsi, dans un mode de réalisation particulier, la composition selon l'invention est apportée à la plante dans une quantité suffisante pour activer des réactions de défense d'une plante et de résistance contre des contraintes biotiques, notamment en stimulant l'expression des gènes impliqués dans la défense de la plante, d'au moins 5%, avantageusement d'au moins 10%, par exemple d'au moins 15%, au moins 20%, au moins 25%, au moins 30%, au moins 35%, au moins 40%, avantageusement d'au moins 30%.
[0059] Dans le cadre de l'utilisation ou du procédé selon l'invention, la composition peut être apportée à la plante par voie foliaire ou par voie racinaire, de préférence par voie foliaire.
[0060] Dans un mode de réalisation de l'utilisation selon l'invention, la composition selon l'invention est apportée à la plante en combinaison avec un ou plusieurs pesticides, préférentiellement un ou plusieurs fongicides. Les fongicides qui conviennent à la mise en œuvre de l'invention sont par exemple référencés dans le catalogue de produits phytopharmaceutiques « e-phy » de l'agence nationale de sécurité sanitaire de l'alimentation, de l'environnement et du travail (ANSES) ou encore dans le catalogue « liste de EPPO Al et « liste de EPPO A2 » de l'Organisation européenne et méditerranéenne pour la protection des plantes (EPPO). En particulier dans un mode de réalisation de l'utilisation, la composition selon l'invention est apportée à la plante en combinaison avec un ou plusieurs fongicides, choisis parmi le chlorothalonil, le fluxapyroxad, l'époxiconazole, le captan, le dithlanon, le fenbuconazole, le pyradostrobine, le dodine, le prothioconazole, le metconazole, le propiconazole, le cyproconazole, le tebuconazole, le bromuconazole, le difenoconazole, le propiconazole, le tetraconazole, l'azoxystrobin, le picoxystrobin, le pyraclostrobin, le picoxystrobin, le trifloxystrobin, le dimoxystrobin, le fluoxastrobin maneb, le mancozeb, le penthiopyrad, le bixafen, le prochloraz, le benzovindiflupyr, le boscalid, le fenpropidin, le fluopyram, le spiroxamine, le flutriafol, le folpet, le fenpropimorph, le metrafenone, le sulphur et le laminarin. L'Homme du métier saura choisir le ou les pesticide(s) le/les plus adapté(s) à la plante à traiter.
[0061] Le procédé de l'invention peut comprendre en outre l'application à ladite plante d'un ou plusieurs pesticides, préférentiellement d'un ou plusieurs fongicides. Les fongicides qui conviennent à la mise en œuvre de l'invention sont par exemple référencés dans le catalogue de produits phytopharmaceutiques « e-phy » de l'agence nationale de sécurité sanitaire de l'alimentation, de l'environnement et du travail (anses) ou encore dans le catalogue « liste de EPPO Al et « liste de EPPO A2 » de l'Organisation européenne et méditerranéenne pour la protection des plantes (EPPO). En particulier dans un mode de réalisation du procédé, la composition selon l'invention est apportée à la plante en combinaison avec un ou plusieurs fongicides, par exemple choisi parmi le chlorothalonil, le fluxapyroxad, l'époxiconazole, le captan, le dithlanon, le fenbuconazole, le pyradostrobine, le dodine, le prothioconazole, le metconazole, le propiconazole, le cyproconazole, le tebuconazole, le bromuconazole, le difenoconazole, le propiconazole, le tetraconazole, l'azoxystrobin, le picoxystrobin, le pyraclostrobin, le picoxystrobin, le trifloxystrobin, le dimoxystrobin, le fluoxastrobin maneb, le mancozeb, le penthiopyrad, le bixafen, le prochloraz, le benzovindiflupyr, le boscalid, le fenpropidin, le fluopyram, le spiroxamine, le flutriafol, le folpet, le fenpropimorph, le metrafenone, le sulphur et le laminarin. En d'autres termes, la composition selon l'invention est en outre appliquée à la plante en combinaison avec un ou plusieurs pesticides, préférentiellement un ou plusieurs fongicides. L'Homme du métier saura choisir le ou les pesticide(s) le/les plus adapté(s) à la plante à traiter.
[0062] La composition selon l'invention et le ou les pesticides peuvent être appliqués simultanément ou séquentiellement. Par exemple, la composition selon l'invention peut être appliquée lors d'un premier traitement, et un ou plusieurs pesticides peuvent être appliqués lors d'un second traitement de la plante. Plusieurs traitements successifs de la plante peuvent ainsi être réalisés. Généralement, l'homme du métier adapte le nombre de traitements et la nature du traitement en fonction de la variété de la plante, du type de pesticide, de la nature de la contrainte biotique, etc.
[0063] Lors de la mise en œuvre du procédé selon l'invention, la quantité (ou dose) de pesticide appliquée à la plante peut correspondre à une quantité normalement utilisée en agriculture (quantité homologuée) ou à une quantité réduite. Avantageusement, la dose de pesticide est une quantité réduite, par exemple réduite de 50% par rapport à une quantité normalement utilisée en agriculture. [0064] L'utilisation selon l'invention et le procédé selon l'invention trouvent application dans le traitement d’une très grande variété de plantes. Parmi celles-ci, on citera en particulier :
- les plantes de grande culture telles que les céréales (blé, maïs, orge),
- les protéagineux (pois),
- les oléagineux (soja, tournesol),
- les cultures de Solanacées (pomme de terre),
- les cultures d'Amaranthaceae (betterave),
- les cultures spécialisées telles qu’en particulier le maraîchage (laitue, épinard, oignon, échalote, tomate, melon), la vigne, l’arboriculture (poire, pomme, nectarine), ou l’horticulture.
[0065] La plante peut également appartenir à l'ordre des monocotylédones, de préférence à la famille des poacées. Les poacées, communément appelés les graminées, renferment notamment la plupart des espèces appelées communément « herbes » et « céréales ». Les céréales sont largement cultivées, principalement pour leurs grains, et sont utilisées dans l'alimentation humaine et animale. Avantageusement, la plante est une poacée, de préférence choisie parmi le blé, le riz, l'orge, l'avoine, le seigle, la canne à sucre, la prairie ou le maïs, de préférence le blé.
[0066] Dans le cadre de la présente utilisation et du présent procédé, la composition selon l'invention peut être apportée à la plante sous forme liquide dans des solutions foliaires en une quantité allant de 0,001 à 100 L/ha, préférentiellement de 0,01 à 25 L/ha, encore plus préférentiellement de 0,1 à 10 L/ha, par exemple en une quantité 1 L/ha. En pratique, l'agriculteur utilise généralement 1 L d'une solution mère qui correspond à la composition selon l'invention qu'il dilue, par exemple dans de l'eau entre l/10eme et l/1000eme, de façon à obtenir une solution fille qui est ensuite pulvérisée sur les plantes à traiter selon les quantités définies ci-dessus (i.e. de 0,001 à 100 L/ha de solution mère).
[0067] Dans un mode de réalisation tout à fait particulier, l'invention concerne l'utilisation de la composition phytosanitaire selon l'invention pour activer des réactions de défense d'une plante (ex. le blé ou le pommier) et de résistance contre la septoriose et/ou la tavelure du pommier.
[0068] Dans un mode de réalisation particulier, lorsque la composition selon l'invention comprend un ou plusieurs pesticides, elle peut être utilisée comme agent pesticide vis-à-vis d'un pathogène. Cette utilisation est particulièrement avantageuse car elle permet de diminuer la dose de pesticide utilisée par rapport à une utilisation de pesticide(s) seul(s). Cela permet de réduire l'impact des produits phytosanitaires sur l'environnement, ce qui constitue un avantage écologique et économique. De préférence, lorsque la composition selon l'invention comprend un ou plusieurs fongicides, elle peut être utilisée comme agent fongicide vis-à-vis d'un pathogène, par exemple choisi parmi Septoria tritici ou Venturia inaequalis.
[0069] L'invention concerne également un procédé de traitement d'une plante destiné à favoriser sa croissance en réduisant l'accès des pathogènes à ladite plante ou en éliminant les pathogènes présents dans le sol, ledit procédé comprenant l’application à ladite plante d'une composition selon l'invention comprenant un ou plusieurs pesticides. Dans un mode de réalisation particulièrement préféré du procédé de l'invention, la composition selon l'invention comprenant un ou plusieurs fongicides est appliquée à ladite plante afin de favoriser la croissance d'une plante en réduisant l'accès de Septoria tritici ou Venturia inaequalis h ladite plante ou en éliminant Septoria tritici ou Venturia inaequalis présents dans le sol.
[0070] L'invention concerne également l'utilisation de la composition selon l'invention pour potentialiser l'effet pesticide d'un pesticide. De préférence, la composition selon l'invention est utilisée pour potentialiser l'effet fongicide d'un fongicide pouvant être choisi parmi le chlorothalonil, le fluxapyroxad, l'époxiconazole, le captan, le dithlanon, le fenbuconazole, le pyradostrobine, le dodine, le prothioconazole, le metconazole, le propiconazole, le cyproconazole, le tebuconazole, le bromuconazole, le difenoconazole, le propiconazole, le tetraconazole, l'azoxystrobin, le picoxystrobin, le pyraclostrobin, le picoxystrobin, le trifloxystrobin, le dimoxystrobin, le fluoxastrobin maneb, le mancozeb, le penthiopyrad, le bixafen, le prochloraz, le benzovindiflupyr, le boscalid, le fenpropidin, le fluopyram, le spiroxamine, le flutriafol, le folpet, le fenpropimorph, le metrafenone, le sulphur et le laminarin. Dans un mode de réalisation particulièrement préféré, le pesticide est un fongicide choisi parmi le chlorothalonil, le fluxapyroxad, l'époxiconazole, le captan et le dithlanon.
[0071] La présente invention sera maintenant illustrée par les exemples non limitatifs suivants. Dans ces exemples, et sauf indication contraire, les pourcentages sont exprimés en poids et la température est la température ambiante.
[0072] Exemples
G00731 Exemple 1 : Procédé de préparation d'une composition selon l'invention
[0074]A) Procédé de préparation d'un extrait d'ulvanes.
[0075] L'extrait d'ulvanes a été préparé suivant un procédé en 3 étapes :
G00761 Etape 1 : 50 kg d'algues sèches de type Ulva spp ont été broyées et passées au travers d'un tamis de 4 mm afin d'obtenir des fragments de taille inférieure ou égale à 4 mm, puis mélangées à 950 kg d'eau chauffée à 85°C. Le mélange a été maintenu à une température de 85°C pendant 3 heures sous agitation ce qui a permis d'extraire les ulvanes.
G00771 Etape 2 : le mélange obtenu à l'étape 1 a été filtré à l'aide d'un filtre de 50 pm.
G00781 Etape 3 : le mélange filtré a ensuite été acidifié à pH 3,5 à l'aide d'une solution concentrée d'acide sulfurique. Ce mélange correspond à l'extrait d'ulvanes utilisé dans les exemples, et qui est notamment utilisé pour la préparation de la composition « ND » (composition selon l'invention - Exemple IC).
[0079] B) Procédé de préparation d'une solution de silicium
[0080] Une solution de silicium sous forme de silicate de potassium, commercialisée par la société « QUARON » sous le nom de « Silicate de potassium liquide 34,8% » a été utilisée. Cette solution contient 24 % w/w de S1O2 (24 % w/w, c'est-à-dire 240 g/L, de silicium) et 11 % w/w de K20.
[0081]C) Procédé de préparation d'une composition phytosanitaire selon l'invention, ci-après appelée composition « ND » [0082] La composition ND (composition selon l'invention) a été préparée en mélangeant l'extrait obtenu selon le procédé décrit à l'Exemple IA avec de l'eau, en ajustant le pH du mélange à 12, et en ajoutant lentement la solution de silicium obtenue à l'Exemple IB sous forte agitation, selon les proportions présentées dans le Tableau 1. [0083] [Table 1]
Figure imgf000023_0001
[0084] La composition « ND » comprend 8 g/L d'ulvanes et 21,6 g/L de silicium. [0085] Exemple 2 : Mise en évidence des effets de la composition ND sur le contrôle du développement de la septoriose sur le blé
[0086]A) Protocole expérimental [0087] L'essai a été réalisé en plein champ de façon à évaluer l'efficacité de la composition ND (obtenue à l'Exemple 1) contre la septoriose du blé. La variété de blé CAPO ( Triticum aestivum ) qui est un blé tendre d'hiver présentant une sensibilité à la septoriose a été choisie. Le pathogène impliqué dans la maladie de septoriose, une maladie fongique, est Septoria tritici. [0088] Les blés ont été semés à 2 cm de profondeur et à une densité de semis de
230 plants/m2. Le dispositif expérimental a été réalisé selon un plan en bloc de Fisher à quatre répétitions totalement aléatoires dans le champ. Le blé, cultivé en plein champs a été infesté naturellement par la septoriose. Le septoria tritici se propage généralement dans les cultures de blé grâce à l'humidité ambiante ou la pluie. Les spores se disséminent vers les feuilles supérieures de la base vers le haut de la plante. [0089] Pour cet essai, trois traitements foliaires ont été testés :
- un témoin négatif, qui n'a subi aucun traitement (Témoin non-traité, Témoin NT),
- un programme appelé « Composition ND 50% », qui a consisté en l'application de la composition ND à un temps Ti à une dose de 0,5 L/ha, puis en une seconde application de la composition ND à un temps T2 à la même quantité que la dose appliquée à Ti,
- un programme appelé « Composition ND 100% », qui a consisté en l'application de la composition ND à un temps Ti à une dose de 1 L/ha, puis en une seconde application de la composition ND à un temps T2 à la même dose que la dose appliquée à Ti.
[0090] Les trois traitements sont résumés dans le tableau 2 ci-dessous :
[0091] [Table 2]
Figure imgf000024_0001
[0092] La composition ND a été appliquée une fois au stade du premier nœud, c'est- à-dire au stade connu sous le nom de « stade 31 », correspondant à l'élongation de la tige principale (stade phénologique BBCH31, à savoir le premier nœud est au plus à 1 cm au-dessus du plateau de tallage), puis une fois au stade phénologique BBCH39 (à ce stade, le limbe de la dernière feuille est entièrement étalé, la ligule est visible).
[0093] 25 échantillons de blé ont été observés pour chacun des trois types de traitement. La septoriose est une maladie foliaire dont les symptômes caractéristiques sont des tâches marron dans lesquelles il est observé des points noirs, appelés « pycnides ». La présence de la septoriose sur les échantillons a été observée en analysant la présence de tâches et/ou points noirs sur les feuilles F0 et les feuilles Fl au stade de développement du blé connu sous le nom de « stade 75 » correspondant au stade mi-laiteux (contenu de la graine laiteux). En effet, les feuilles F0 et Fl contribuent pour une part très importante au rendement en fin de culture et les traitements phytosanitaires contre la septoriose ont principalement pour objectif de protéger ces deux feuilles de l'apparition et du développement de la septoriose (Figure 1). La sévérité de la septoriose représente le niveau de manifestation des symptômes de la septoriose, tels que la présence de tâches, présence de pycnides, propagation des tâches et des pycnides sur une seule feuille observée. Cette sévérité est prise en compte de façon prépondérante pour l'évaluation de la présence et du développement de la septoriose. La fréquence représente le nombre d'échantillons infectés par rapport au nombre total d'échantillons observés (ici 25 échantillons). La sévérité a été mesurée selon les standards de l'OEPP (Organisation Européenne et Méditerranéenne pour la Protection des Plantes) n°PP 1/26(4) appelés « Maladies des feuilles et des épis, chez les céréales.
[0094] B) Résultats
[0095] Les résultats obtenus sont présentés aux Figures 2A et 2B. Ils montrent qu'en absence de traitement (Témoin NT), la septoriose s'est développée sur le blé. En absence de traitement (Témoin NT), les feuilles F0 et Fl ont été infectées respectivement à 25% et 55% en termes de sévérité, et à 100 % en termes de fréquence. [0096] Le traitement avec la composition ND 50% a permis de réduire la sévérité de la septoriose sur les feuilles F0 et Fl, respectivement à 14% et 33% en terme de sévérité (comparativement aux 25% et 55% observés chez le témoin NT). La fréquence n'a pas été impactée (100% de feuilles infectées) après traitement avec la composition ND 50%.
[0097] Le traitement avec la composition ND 100% a permis de réduire la sévérité de la septoriose sur les feuilles F0 et Fl, respectivement à 10,5% et 25,5% en terme de sévérité (comparativement aux 25% et 55% observés chez le témoin NT, et comparativement aux 14% et 33% observés après le traitement « ND 50% »). La fréquence de la septoriose n'a pas été impactée (100% de feuilles infectées) après traitement avec la composition ND 100%.
[0098] Les résultats montrent que la composition ND seule (composition selon l'invention) permet de protéger significativement les plants de blé contre la septoriose du blé.
[0099] Exemple 3 : Mise en évidence des effets de la composition ND en combinaison avec un fongicide rOlOOIA") Protocole expérimental
[0101]L'essai a été réalisé en plein champ pour évaluer l’efficacité de la composition ND (composition selon l'invention, obtenue à l'Exemple 1) en association avec un fongicide (préparation à base de chlorothalonil). La variété de blé choisie pour conduire cet essai était la variété OREGRAIN, une variété de blé tendre d'hiver ( Triticum aestivurri), qui présente une sensibilité à la septoriose comme expliqué dans l'Exemple 2.
[0102] Les blés ont été semés à 2 cm de profondeur et à une densité de semis de 250 plants/m2. Le dispositif expérimental dans la parcelle a été réalisé selon un plan en blocs de Fisher à quatre répétitions totalement aléatoires dans le champ. Le blé, cultivé en plein champs, a été infesté naturellement par la septoriose.
[0103] Pour cet essai, cinq traitement foliaires ont été testés : - un témoin négatif, qui a consisté en l'application d'aucun traitement (Témoin NT) ;
- un programme appelé « Fongicide classique » ou « Pr. Fongi. » (témoin positif), qui correspond à un programme communément mis en œuvre par l'homme de métier, qui a consisté en l'application d'un premier traitement fongicide (chlorothalonil à sa dose homologuée, soit 500 g/ha) à un temps Ti, et en l'application d'un second traitement fongicide (combinaison d'époxiconazole et de fluxapyroxad à leurs doses homologuées, soit 62,5 g/ha chacun) à un temps T2;
- un programme appelé « Fongicide allégé » ou « Pr. Fongi. al. » (témoin de vraisemblance) qui a consisté en l'application de chlorothalonil à 250 g/ha à un temps Ti, et en l'application d'un deuxième traitement fongicide (combinaison d'époxiconazole et de fluxapyroxad à la moitié de leurs doses homologuées, soit 31,25 g/ha chacun) à un temps T2;
- un programme appelé « Composition ND 50% + Pr. Fongi. al. », qui a consisté en une première application de 0,5 L/ha de la composition ND (composition obtenue à l'Exemple 1) en association avec du chlorothalonil à la moitié de sa dose homologuée, soit 250 g/ha, à un temps Ti, et en une deuxième application d'un traitement fongicide (combinaison d' époxiconazole et de fluxapyroxad à la moitié de leurs doses homologuées, soit 31,25 g/ha chacun) à un temps T2;
- un programme appelé « Composition ND 100% + Pr. Fongi. al. », qui a consisté en une première application de 1 L/ha de la composition ND (composition obtenue à l'Exemple 1) en association avec du chlorothalonil à la moitié de sa dose homologuée, soit 250 g/ha, à un temps T et en une deuxième application d'un traitement fongicide (combinaison d'époxiconazole et de fluxapyroxad à la moitié de leurs doses homologuées, soit 31,25 g/ha chacun) à un temps T2.
[0104]Le temps Ti correspond au stade 31, i.e. le stade du premier nœud, correspondant à l'élongation de la tige principale (stade phénologique BBCH31, à savoir le premier nœud est au plus à 1 cm au-dessus du plateau de tallage), et le temps T2 correspond au stade 33, appelé BBCH33, correspondant à une élongation de la tige principale supérieure à 2 cm au-dessus du deuxième nœud.
[0105] Les cinq types de traitements sont résumés dans le tableau 3 ci-dessous : [0106] [Table 3]
Figure imgf000028_0001
[0107] 25 échantillons de blé ont été observés pour chaque type de traitement. La présence de la septoriose sur les échantillons a été observée en observant la fréquence et la sévérité de la septoriose (cf. Exemple 2) sur les feuilles F0 et Fl au stade connu sous le nom de stade 75, correspondant au stade mi-laiteux (contenu de la graine laiteux).
[0108] B) Résultats
[0109] Les résultats obtenus sont présentés aux Figures 3A et 3B. [0110]Ils montrent qu'en absence de traitement (Témoin NT), la septoriose s'est développée sur le blé. En absence de traitement (Témoin NT), les feuilles F0 et Fl ont été infectées respectivement à 25% et 55% en terme de sévérité, et à 100 % en terme de fréquence pour les feuilles F0 et Fl.
[0111]Le traitement avec le Pr. Fongi. (Témoin positif) a permis de réduire la sévérité de la septoriose sur les feuilles F0 et Fl, respectivement à 3% et 5% en terme de sévérité (comparativement aux 25% et 55% observés chez le témoin NT). La fréquence de la septoriose a également été réduite à 55% et 82% respectivement pour les feuilles FO et Fl, comparativement aux 100 % de fréquence observés avec le témoin NT.
[0112] Le traitement avec le Pr. Fongi. al. (Témoin de vraisemblance) a permis de réduire la sévérité de la septoriose sur les feuilles F0 et Fl, respectivement à 4,5% et 12,5% en terme de sévérité (comparativement aux 25% et 55% observées chez le témoin non-traité). La fréquence de la septoriose a été réduite à 90% pour la seule feuille F0, comparativement aux 100 % de fréquence observés chez le témoin non-traité. La fréquence de la septoriose sur la feuille Fl est restée inchangée (100%).
[0113] L'application de la composition ND à 0,5 L/ha, en association avec le Pr. Fongi. al. a permis de réduire la sévérité de la septoriose sur les feuilles F0 et Fl, respectivement à 3,5% et 9,5% en terme de sévérité (comparativement aux 25% et 55% observées chez le témoin non-traité, et aux 4,5% et 12,5% observées suite au Pr. Fongi. al.). Cette association a également permis de réduire la fréquence de la septoriose sur la feuille F0 à 80% (comparativement au 100% observé avec le Témoin NT et au 90% observé suite au traitement Pr. Fongi. al.). La fréquence de la septoriose sur la feuille Fl est restée inchangée (100%).
[0114]Enfin, l'application de la composition ND à 1 L/ha, en association avec le Pr. Fongi. al. a permis de réduire davantage la sévérité de la septoriose sur les feuilles F0 et sur la Fl, respectivement à 2,5% et 7,5% en termes de sévérité (comparativement aux 25% et 55% observées chez le témoin non-traité, et aux 4,5% et 12,5% observées suite au traitement Pr. Fongi. al.). Cette association a également permis de réduire davantage la fréquence de la septoriose sur la feuille F0 à 75% (comparativement au 100% observé avec le témoin NT et au 90% observé suite au traitement Pr. Fongi. al.). La fréquence de la septoriose sur la feuille Fl est restée inchangée (100%).
[0115]II peut donc être conclu que la composition ND, lorsqu'elle est associée à un fongicide (Pr. Fongi. al.), confère aux plants de blé traités une meilleure protection contre la septoriose du blé que le fongicide seul. La composition ND a permis de potentialiser l'effet phytosanitaire du fongicide.
[0116] Exemple 4 : Mise en évidence des effets d'une composition selon l'invention en comparaison avec un extrait d'ulvanes ou une solution de silicium appliqués individuellement
[0117]A) Protocole expérimental
[0118] L'essai a été réalisé en plein champ pour évaluer l’efficacité d'une composition selon l'invention (ND) en comparaison avec un extrait d'ulvanes à une concentration de 8 g/L seul ou d'une solution de silicium seule (Si02 K20) à une concentration de 21,6 g/L. La variété de blé choisie pour conduire cet essai était la variété OREGRAIN, une variété de blé tendre d'hiver ( Triticum aestivum), qui présente une sensibilité à la septoriose.
[0119] Les blés ont été semés à 2 cm de profondeur et à une densité de semis de 250 plants/m2. Le dispositif expérimental dans la parcelle a été réalisé selon un plan en blocs de Fisher à quatre répétitions totalement aléatoires dans le champ. Le blé, cultivé en plein champs a infesté naturellement par la septoriose.
[0120] Pour cet essai, six traitements ont été testés en application foliaire :
- un témoin négatif, qui a consisté en l'application d'aucun traitement (Témoin NT) ;
- un programme appelé « Fongicide classique » ou « Pr. Fongi. » (témoin positif qui correspond à un traitement communément mis en œuvre par l'homme du métier) qui a consisté en une première application d'un fongicide, le chlorothalonil, à sa dose homologuée, soit 500 g/ha, à un instant Ti, et en une deuxième application de chlorothalonil à 500 g/ha également à un temps T2;
- un programme appelé « Fongicide allégé » ou « Pr. Fongi. al. » (témoin de vraisemblance) qui a consisté en une première application de chlorothalonil à la moitié de sa dose homologuée, soit 250 g/ha, à un instant Ti, et en une deuxième application de chlorothalonil à 250 g/ha également à un temps T2 ; - un programme appelé « Composition ND + Pr. Fongi. al »., qui a consisté en une première application d'une dose de la composition ND à 1 L/ha en association avec du chlorothalonil à la moitié de sa dose homologuée, soit 250g/ha, à un temps Ti, et en une deuxième application d'une dose de la composition ND à 1 L/ha en association avec du chlorothalonil à la moitié de sa dose homologuée, soit 250g/ha, à un temps T2 ;
- un programme appelé « Composition Ulvanes 8 g/L+ Pr. Fongi. Al »., qui a consisté en une première application d'une dose de 1 L/ha de l'extrait d'ulvanes à une concentration de 8 g/L (c'est-à-dire la composition ND sans le silicium) en association avec du chlorothalonil à la moitié de sa dose homologuée, soit 250 g/ha, à un temps Ti, et en une deuxième application d'une dose de 1 L/ha de l'extrait d'ulvanes à une concentration de 8 g/Len association avec du chlorothalonil à la moitié de sa dose homologuée, soit 250 g/ha, à un temps T2 ;et
- un programme appelé « composition Silicium 21,6 g/L + Pr. Fongi. Al. », qui a consisté en une première application d'une dose de 1 L/ha de la solution de Si02 K20 à une concentration de 21,6 g/L de silicium (c'est-à-dire la composition ND sans l'extrait d'ulvanes) en association avec du chlorothalonil à la moitié de sa dose homologuée, soit 250 g/ha, à un temps Ti, et en une deuxième application d'une dose de 1 L/ha de la solution de Si02 K20 à une concentration de 21,6 g/L de silicium en association avec du chlorothalonil à la moitié de sa dose homologuée, soit 250g/ha, à un temps T2.
[0121]Le temps Ti correspond au stade 31, i.e. le stade du premier nœud, correspondant à l'élongation de la tige principale (stade phénologique BBCH31, à savoir le premier nœud est au plus à 1 cm au-dessus du plateau de tallage), et le temps T2 correspond au stade 33, appelé BBCH33, correspondant à une élongation de la tige principale supérieure à 2 cm au-dessus du deuxième nœud. Les six traitements sont résumés dans le Tableau 4. [0122] [Table 4]
Figure imgf000032_0001
[0123] Les traitements ont été appliqués une fois (Ti) au stade du premier nœud, c'est-à-dire le stade connu sous le nom stade 31 correspondant à l'élongation de la tige principale (stade phénologique BBCH31, à savoir le premier nœud est au plus à 1 cm au-dessus du plateau de tallage), puis appliqués à nouveau (T2) au stade du troisième nœud, stade connu sous le nom de BBCH33, correspondant à une élongation de la tige principale supérieure à 2 cm au-dessus du deuxième nœud. [0124] 25 échantillons de blé ont été observés pour chaque type de traitement. La présence de la septoriose sur les échantillons a été observée en observant la fréquence et la sévérité de la septoriose (cf. exemple 2) sur la feuille FO au stade connu sous le nom stade 85 correspondant à la maturation des graines, plus particulièrement le stade pâteux mous, au moment du quel le contenu de la graine est tendre et sec (stade BBCH85).
[0125]B) Résultats
[0126] Les résultats obtenus sont présentés à la Figure 4.
[0127] Ils montrent qu'en l'absence de traitement (Témoin NT), la septoriose s'est développée sur du blé qui a été cultivé en plein champ. La feuille FO a été infectée (70% en termes de sévérité ; 100% en termes de fréquence).
[0128] Le Programme fongicide (Pr. Fongi.) a réduit la sévérité de la septoriose sur la feuille F0 des plants observés en termes de sévérité (40%) mais pas la fréquence de la maladie (100%).
[0129] Le Programme fongicide allégé (Pr Fongi al.) a permis de réduire la septoriose sur la feuille F0 des plants observés en termes de sévérité, dans une mesure inférieure au Pr. Fongi (50% au lieu de 40% avec le Pr. Fongi.) mais pas la fréquence de la maladie (100%).
[0130]Pour la composition ND appliqué en association dans un Pr. Fongi. al., il a été observé que la feuille F0 a été moins infectée que la feuille F0 des plants témoins (40%). La feuille F0 a également été mieux protégées que celle traitées avec le programme fongicide allégé et a présenté un niveau de protection vis-à-vis de la septoriose proche de celui obtenu avec le Pr. Fongi.
[0131] Enfin, les traitements avec l'extrait d'ulvanes et avec la solution de silicium, ont fourni un niveau de protection inférieur à la composition ND. En effet, on observe qu'avec le traitement « Ulvanes 8 g/L + Pr. Fongi. al »ou « Silicium 21,6 g/L + Pr. Fongi. al. », la sévérité était de 47% et 52% respectivement, en comparaison avec 50% pour le programme fongicide allégé. La composition ND a quant à elle permis de diminuer significativement la sévérité (40%).
[0132]II peut donc être conclu que la composition ND a une meilleure efficacité, par rapport à l'extrait d'ulvanes seul, à la solution de silicium seule ou même par rapport à un programme fongicide allégé. [0133] Exemple 5 : Etude de l'expression de gènes de défense chez du blé traité après traitement avec la composition D
[0134] A) Protocole expérimental
[0135] L'étude a été réalisée en serre expérimentale. De jeunes plantules de blé âgées de 28 jours ont été traitées avec les traitements suivants par pulvérisation foliaire au stade de la 3ème feuille étalée (stade BBCH13) :
- la composition ND de l'Exemple 1 diluée au l/400eme (v/v),
- la composition ND de l'Exemple 1 diluée au l/100eme (v/v),
- un produit commercial appelé Bion® 50 WG, commercialisée par Syngenta, contenant 50% d'acide benzolar-S-méthyl, concentré à 20pg/ml. Le Bion® 50 WG est un stimulateur de défense des plantes (SDP), ci-après « témoin SDP » (témoin positif),
- de l’eau distillée (témoin négatif).
[0136] La 3ème feuille étalée a été utilisée pour des analyses d’expression de gènes par RT-PCR quantitative, 48 heures après le traitement.
[0137] B) Résultats
[0138] Les résultats obtenus sont présentés à la Figure 5.
[0139] Ils montrent que le traitement des feuilles de blé avec la composition selon l'invention aux dilutions l/400eme et l/100eme a activé significativement l'expression des gènes ICSI, PR-1 et PR-3, trois gènes marqueurs de l'induction/activation des mécanismes de défense des plantes, en particulier de la voie d'activation de l'acide salicylique, en comparaison avec le témoin NT. Le témoin SDP (Bion®), témoin positif, présente également une augmentation de l'expression de ces gènes.
[0140]II peut donc être conclu que la composition ND permet d'activer les réactions de défense d'une plante et de résistance contre des contraintes biotiques.
[0141]Exemple 6 : Mise en évidence des effets de la composition ND sur le contrôle du développement de la tavelure du pommier (« Apple scab ») [0142] A) Protocole expérimental
[0143] Les essais agronomiques d'efficacité sur la tavelure du pommier par contamination naturelle ont été réalisés pendant la phase des contaminations primaires ; sur une période de mars à juin. La tavelure du pommier est causée par un champignon ascomycète nommé Venturia inaequalis qui provoque des lésions noires ou brunes à la surface des feuilles du pommier, des bourgeons ou des fruits et parfois même sur le bois. Les fruits et la partie inférieure des feuilles y sont spécialement sensibles. La maladie est favorisée par un climat humide, notamment lorsque les bourgeons se développent (débourrement). La tavelure de pommier peut réduire significativement la qualité et la production des fruits en l’absence de traitement.
[0144]. Des arbres de la variété Golden Delicious (clone Reinders, douzième feuille) greffés sur porte-greffe M9-Emla, variétés très sensibles à la tavelure du pommier ont été utilisés. Pour cet essai, quatre types de traitement en pulvérisation foliaire ont été comparés :
- un programme « Fongicide classique » (appelé « PFI »), qui a consisté en l'application de fongicides en production fruitière intégré (PFI) à 7 temps différents et en alternant les types de fongicides, comme résumé dans le Tableau 5 ci-dessous ;
- un programme appelé « Fongicide allégé » (appelé « PFI allégé »), qui a consisté en l'application de fongicides en production fruitière intégré (PFI) à trois temps différents et en alternant les types de fongicides, comme résumé dans le Tableau 5 ci-dessous,
- un programme appelé « Fongicide allégé + Bion® 50 WG » ou« PFI allégé + Bion ® 50 WG », qui a consisté en l'application du produit Bion®50 WG décrit à l'Exemple 5 à neuf temps différents et de fongicides à trois temps différents, comme résumé dans le Tableau 5 ci-dessous, et
- un programme appelé « Fongicide allégé + Composition ND » ou « PFI allégé + Composition ND », qui a consisté en l'application de la composition ND (obtenue à l'Exemple 1) à une dose de 3 L/ha à neuf temps différents et de fongicides à trois temps différents, comme résumé dans le Tableau 5 ci-dessous. [0145] Les différents temps correspondent à des stades de développement du pommier et sont mentionnés dans le tableau 5 ci-dessous.
[0146] [Table 5]
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[0147] Chaque traitement a été appliqué sur trois micro-parcelles représentées par un plan factoriel de trois blocs de trois micro-parcelles, chaque micro-parcelle étant constituée de cinq rangs comportant treize arbres (soit 195 arbres traités). Les pommes ont ensuite été récoltées en septembre.
[0148] B) Résultats
[0149] Le pourcentage de fruits tavelés a été calculé pour chaque parcelle. Les fruits tavelées se caractérisent par des tâches et peuvent se crevasser.
[0150] Les résultats obtenus sont présentés en Figure 6.
[0151]Ils montrent que le programme fongicide classique PFI a permis une protection optimale de la culture, et s'est traduit par une récolte de pomme très faiblement tavelées, voire complètement dépourvues de tavelure.
[0152] Le programme « PFI allégé » n'a permis qu'une protection partielle du verger, avec plus de 30 % de pommes tavelées au moment de la récolte.
[0153] Le programme « PFI allégé + composition ND » a permis d'obtenir une protection améliorée du verger, par rapport au PFI allégé, avec moins de 20% des pommes qui ont été tavelées au moment de la récolte.
[0154] Enfin, il a été observé que le programme « PFI allégé + composition ND » a apporté un niveau de protection du verger supérieur au programme « PFI allégé + Bion® 50 WG ».
[0155]Exemple 7 : Mise en évidence des effets de la composition ND sur la qualité de la récolte de pomme
[0156] A) Protocole expérimental
[0157]400 pommes (100 pommes par type de traitement : PFI, PFI allégé, PFI allégé + Bion 50 WG et PFI allégé + composition ND), échantillonnées aléatoirement, récoltées suite à l'essai de l'Exemple 6, ont été classées en fonction de leur aspect visuel. En l'absence de tavelure, le fruit a été considéré comme sain. Lorsqu'un fruit présentait une à trois tâches, il a été considéré comme ayant une faible présence de tavelure (appelé fruits faiblement tavelés). Lorsqu'un fruit présentait plus de trois tâches, il a été considéré comme ayant une forte présence de tavelure (appelé fruits sévèrement tavelés).
[0158]B) Résultats
[0159]Les résultats obtenus sont présentés à la Figure 7.
[0160] Ils montrent que le programme de référence (PFI) a eu une efficacité optimale contre la tavelure du pommier puisque tous les fruits observés étaient sains.
[0161] Le programme « PFI allégé » a montré une altération de la qualité visuelle des pommes avec près de 40% des pommes tavelées dont 10% sévèrement tavelées.
[0162] Le programme « PFI allégé + composition ND » a permis d'obtenir un pourcentage de pommes tavelées réduit à 20% avec moins de 3% de pommes sévèrement tavelées. Ainsi, la composition ND protège efficacement les pommes.
[0163] Enfin, il a été observé que le programme « PFI allégé + composition ND » a apporté un niveau de protection supérieur au programme « PFI allégé + Bion® 50 WG ».
[0164]Exemple 8 : Mise en évidence des effets de la composition ND sur la stimulation des réactions de défense chez le pommier
[0165] A) Protocole expérimental
[0166] De jeune plants de pommiers de la variété Golden Delicious (6 semaines) cultivés sous serre et présentant des feuilles développées ont été traités par pulvérisation foliaire jusqu'à ruissellement avec :
- la composition ND (obtenue à l'Exemple 1) diluée au l/200eme (v/v),
- la composition ND de l'Exemple 1 diluée au l/66eme (v/v).
[0167] Les jeunes plants ont été traités deux fois (à J-3 et à J-l) avant le prélèvement des échantillons végétaux.
[0168] Les feuilles traitées ont été échantillonnées 1 jour (J 1) et 3 jours (J3) post¬ traitement. Les échantillons ont été utilisés pour une analyse du niveau d'expression des gènes de défense du pommier (analyse effectuée par RT-PCR quantitative). La liste des gènes du pommier, qui ont été analysés, se trouve dans le Tableau 6, ci-après. Les résultats ont été exprimés en log2 de la somme des gènes de défenses induits, après normalisation par rapport à un témoin (témoin : traitement des plantules avec de l'eau). Cette analyse a permis de mesurer précisément l'effet de l'application de la composition ND sur l'expression de plusieurs gènes de défense du pommier, gènes décrits dans la littérature pour activer les réactions de défense des plantes.
[0169] [Table 6]
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[0170]B) Résultats
[0171]Les résultats obtenus sont présentés en Figure 8 et montrent que la composition ND a activé de manière globale les gènes de défense du pommier.
[0172]Exemple 9 : Mise en évidence des effets de la composition ND sur certains gènes de défense, marqueurs très spécifiques des réactions de défenses chez le pommier
[0173] De jeune plants de pommiers de la variété Golden Delicious (6 semaines) cultivés sous serre et présentant des feuilles développées ont été traités avec :
- la composition ND de l'Exemple 1 diluée au l/200eme (v/v), ou
- la composition ND de l'Exemple 1 diluée au l/66eme (v/v).
Les jeunes plants ont été traités une seule fois à 6 semaines par pulvérisation foliaire. Une partie des jeunes plantes a été traitée avec de l'eau (Témoin H20). [0174] Le protocole expérimental est identique à celui présenté à l'Exemple 8.
L'expression d'une sélection de gènes, décrits dans la littérature comme marqueurs de l'activation des défenses des plantes, a été mesurée.
[0175] Le groupe de gènes PR (Pathogenesis-Related) 1 à 14 sont régulièrement utilisés dans la littérature comme marqueurs de l'activation des défenses des plantes.
[0176] Les feuilles traitées ont été échantillonnées 1 jour (J 1) post-traitement. Les échantillons obtenus ont été utilisés pour une analyse en RT-PCR quantitative. Les résultats sont exprimés en log2. Cette analyse a permis de mesurer précisément l'effet de l'application de la composition ND sur l'expression de plusieurs gènes PR.
[0177] B) Résultats
[0178] Les résultats obtenus sont présentés à la Figure 9 et montrent que le traitement des jeunes plants de pommier avec la composition ND a activé l'expression des gènes PR-1, PR-5, PR-8, PR- 14 et PR- 10. Il a été observé pour la plupart des gènes PR une augmentation du niveau d'expression qui est dose- dépendante.
[0179]Ces résultats confirment que la composition ND active les réactions de défenses des plantes, en particulier stimule l'expression des gènes de défense de la plante.
[0180] Brève description des dessins
[0181][Fig. 1] La Figure 1 illustre la numérotation des feuilles de blé FO Fl, F2, F3, F4.
[0182] [Fig. 2A] La Figure 2A représente la sévérité de la septoriose (Figure de gauche) sur les feuilles de blé FO au stade 75 du développement du blé et la fréquence de la septoriose (Figure de droite) observée sur les feuilles de blé FO au stade 75 du développement du blé, pour des plants de blé qui n'ont bénéficié d'aucun traitement fongicide (Témoin NT), des plants de blé ayant été traités avec la composition ND à 50% de sa dose efficace, soit 0,5 L/ha, et des plants de blé ayant été traités avec la composition ND à 100% de sa dose efficace, soit 1 L/ha.
[0183] [Fig. 2B] La Figure 2B représente la sévérité de la septoriose (Figure de gauche) sur les feuilles de blé Fl au stade 75 du développement du blé et la fréquence de la septoriose (Figure de droite) observée sur les feuilles de blé Fl au stade 75 du développement du blé, pour des plants de blé qui n'ont bénéficié d'aucun traitement fongicide (Témoin NT), des plants de blé ayant été traités avec la composition ND à 50% de sa dose efficace, soit 0,5 L/ha et des plants de blé ayant été traités avec la composition ND à 100% de sa dose efficace, soit 1 L/ha.
[0184] [Fig. 3A] La Figure 3A représente la sévérité de la septoriose (figure de gauche) et la fréquence de la septoriose (figure de droite) observée sur les feuilles de blé FO, pour des plants de blé qui n'ont bénéficiés d'aucun traitement fongicide (Témoin NT), des plants de blé ayant été traités avec un programme fongicide (Pr. Fongi.), des plants de blé ayant été traités avec un programme fongicide allégé (Pr. Fongi. al.), des plants de blé ayant été traités avec un programme composition ND appliquée à 50% de sa dose efficace, soit 0,5 L/ha en association avec le Pr. Fongi. al., des plants de blé ayant été traités avec un programme composition ND appliquée à 100% de sa dose efficace, soit 1 L/ha en association avec le Pr. Fongi. al.
[0185] [Fig. 3B] La Figure 3B représente la sévérité de la septoriose (figure de gauche) et la fréquence de la septoriose (figure de droite) observée sur les feuilles de blé Fl, pour des plants de blé qui n'ont bénéficiés d'aucun traitement fongicide (Témoin NT), des plants de blé ayant été traités avec un programme fongicide (Pr. Fongi.) ,des plants de blé ayant été traités avec un programme fongicide allégé (Pr. Fongi. al.), des plants de blé ayant été traités avec un programme composition ND appliquée à 50% de sa dose efficace, soit 0,5 L/ha en association avec le Pr. Fongi. AL, des plants de blé ayant été traités avec un programme composition ND appliquée à 100% de sa dose efficace, soit 1 L/ha en association avec le Pr. Fongi. al.
[0186] [Fig. 4] La Figure 4 représente la sévérité de la septoriose (figure de gauche) et la fréquence de la septoriose (figure de droite) observée sur les feuilles de blé F0, pour des plants de blé qui n'ont bénéficiés d'aucun traitement fongicide (Témoin NT), des plants de blé ayant été traités avec un programme fongicide classique (Pr. Fongi.), des plants de blé ayant été traités avec un programme fongicide allégé (Pr. Fongi. al.), des plants de blé ayant été traités avec un programme composition ND appliquée à sa dose efficace (soit 1 L/ha) en association avec le Pr. Fongi. al (ND + Pr. Fongi. al.), des plants de blé ayant été traités avec un programme « extrait d'ulvanes » à 8 g/L appliqué en association avec le Pr. Fongi. al (Extrait d'ulvanes + Pr.Fongi. al.), des plants de blé ayant été traités avec un programme « solution de silicium » à 21, 6 g/L appliqué en association avec le Pr. Fongi. Al (Silicium + Pr.Fongi. al.).
[0187][Fig. 5] La Figure 5 représente le niveau d'expression du gène ICSI, du gène PR-1 et du gène PR-3 des feuilles de blé au stade BBCH13 (3eme feuille étalée) mesuré par RT-PCR quantitative, pour des plants de blé qui n'ont bénéficiés d'aucun traitement (Témoin NT), des plants de blé ayant été traités avec un témoin positif (produit commercial Bion® 50 WG), des plants de blé ayant été traités avec la composition ND diluée au l/400eme (v/v) et des plants de blé ayant été traités avec la composition ND diluée au l/100eme (v/v).
[0188] [Fig. 6] La Figure 6 représente le pourcentage de fruits tavelés, obtenus sur des pommiers de la variété Golden Delicious, pour des pommiers qui ont été traités avec un programme de référence appelé production fruitière intégrée (PFI), un programme de fongicide allégé (PFI allégé), un programme PFI allégé + Bion® 50 WG, ou un programme de PFI allégé + composition ND.
[0189][Fig. 7] La Figure 7 représente le pourcentage de fruits sains, faiblement tavelés et sévèrement tavelés, pour des pommiers qui ont bénéficié d'un traitement fongicide effectué en programme production fruitière intégrée (PFI) classique, des pommiers qui ont bénéficié d'un traitement en modalité allégé (PFI allégé), des pommiers qui ont bénéficié d'un traitement en modalité allégé + Bion ® 50 WG ou des pommiers qui ont bénéficié d'un traitement en modalité allégé + composition ND.
[0190] [Fig. 8] La Figure 8 représente l'activation des gènes de défense du pommier exprimée en log2 de la somme des gènes de défenses induits, après normalisation par rapport à un témoin (le témoin correspond au traitement des plantules avec de l'eau), pour des feuilles de pommiers ayant été échantillonnées au jour 1 (Jl) et au jour 3 (J3) post-traitement. Les feuilles ont été traitées avec la composition ND diluée au l/200eme (v/v) ou avec la composition ND diluée au l/66ème (v/v). [0191][Fig. 9] La Figure 9 représente l'activation des gènes de défense du pommier PR1, PR5, PR8, PR14 et PR10 exprimée en log2 de la somme des gènes de défenses induits, après normalisation par rapport à un témoin (le témoin correspond au traitement des plantules avec de l'eau), pour des feuilles de pommiers ayant été échantillonnées au jour 1 (Jl) post-traitement. Les feuilles ont été traitées avec la composition ND diluée au l/200eme (v/v) ou avec la composition ND diluée au l/66eme (v/v).

Claims

Revendications
1. Composition phytosanitaire comprenant :
(i) des ulvanes et/ou des oligosaccharides dérivés d'ulvanes; et
(ii) (ii) du silicium.
2. Composition phytosanitaire selon la revendication 1, caractérisée en ce que les ulvanes et/ou les oligosaccharides dérivés d'ulvanes sont sous la forme d'un extrait contenant des ulvanes et/ou des oligosaccharides dérivés d'ulvanes, par exemple un extrait ù'Ulva ou un extrait d 'Enteromorpha.
3. Composition phytosanitaire selon la revendication 2, caractérisée en ce que l'extrait contenant des ulvanes et/ou des oligosaccharides dérivés d'ulvanes est un extrait ù'Ulva armoricana, un extrait ù'Ulva rigida, un extrait ù'Ulva rotundata, un extrait ù'Ulva lactuca, un extrait ù! Enteromorpha intestinalis, ou un extrait d' Enteromorpha compressa, de préférence un extrait ù'Ulva armoricana, un extrait ù'Enteromorpha intestinalis ou un extrait ù'Enteromorpha compressa.
4. Composition phytosanitaire selon l'une quelconque des revendications 2 ou 3, caractérisée en ce que l'extrait contenant des ulvanes et/ou des oligosaccharides dérivés d'ulvanes est un extrait enrichi en ulvanes et/ou en oligosaccharides dérivés d'ulvanes.
5. Composition phytosanitaire selon l'une quelconque des revendications 1 à 4, caractérisée en ce que les oligosaccharides dérivés d'ulvanes sont obtenus par hydrolyse acide ou enzymatique d'ulvanes.
6. Composition phytosanitaire selon l'une quelconque des revendications 1 à 5, caractérisée en ce que le silicium est sous la forme d'un sel soluble, de préférence choisi parmi le silicate de potassium (K2S1O3), le silicate de sodium (Na2SiC>3), ou leur mélange.
7. Composition phytosanitaire selon l'une quelconque des revendications 1 à 6, caractérisée en ce que ladite composition se présente sous forme liquide.
8. Composition phytosanitaire selon la revendication l'une quelconque des revendications 1 à 7, caractérisée en ce que ladite composition est sous forme liquide et qu'elle comprend :
- une concentration en ulvanes et/ou en oligosaccharides dérivés d'ulvanes de 0,01 à 100 g/L , et
- une concentration en silicium de 0,01 g/L à 100 g/L.
9. Composition phytosanitaire selon l'une quelconque des revendications 1 à 7, caractérisée en ce que ladite composition est sous forme liquide et qu'elle comprend :
- une concentration en ulvanes et/ou en oligosaccharides dérivés d'ulvanes de 0,1 g/L à 50 g/L, préférentiellement de 1 g/L à 20 g/L, par exemple de 8 g/L à 14 g/L, et
- une concentration en silicium de 0,1 g/L à 50 g/L, préférentiellement de 1,0 g/L à 30 g/L, de 10 g/L à 30 g/L, de 20 g/L à 30 g/L, de 5 à 10 g/L, de 5 à 8 g/L par exemple environ 21 g/L +/- 1 g/L ou 6 g/L +/- 1 g/L.
10. Composition phytosanitaire selon l'une quelconque des revendications 1 à 9, caractérisée en ce que ladite composition comprend un ou plusieurs pesticides.
11. Composition phytosanitaire selon la revendication 10, caractérisée en ce que le ou les pesticides est un ou des fongicides.
12. Composition phytosanitaire selon la revendication 11, caractérisée en ce que le ou les fongicides est choisi parmi le chlorothalonil, le fluxapyroxad, l'époxiconazole, le captan, le dithlanon, le fenbuconazole, le pyradostrobine, le dodine, le prothioconazole, le metconazole, le propiconazole, le cyproconazole, le tebuconazole, le bromuconazole, le difenoconazole, le propiconazole, le tetraconazole, l'azoxystrobin, le picoxystrobin, le pyraclostrobin, le picoxystrobin, le trifloxystrobin, le dimoxystrobin, le fluoxastrobin maneb, le mancozeb, le penthiopyrad, le bixafen, le prochloraz, le benzovindiflupyr, le boscalid, le fenpropidin, le fluopyram, le spiroxamine, le flutriafol, le folpet, le fenpropimorph, le metrafenone, le sulphur et le laminarin.
13. Composition phytosanitaire selon l'une quelconque des revendications 11 ou
12, caractérisée en ce que le ou les fongicides est choisi parmi le chlorothalonil, le fluxapyroxad, l'époxiconazole, le captan et le dithlanon.
14. Utilisation d'une composition telle que définie selon l'une quelconque des revendications 1 à 13, pour activer des réactions de défense d'une plante et de résistance contre des contraintes biotiques.
15. Utilisation selon la revendication 14, caractérisée en ce que la composition est apportée à la plante sous forme liquide dans des solutions foliaires, par exemple en une quantité allant de 0,001 à 100 L/ha, préférentiellement de 0,01 à 25 L/ha, encore plus préférentiellement de 0,1 à 10 L/ha, par exemple en une quantité 1 L/ha.
16. Utilisation selon l'une quelconque des revendications 14 ou 15, caractérisée en ce que la composition est apportée à la plante en combinaison avec un ou plusieurs pesticides, préférentiellement un ou plusieurs fongicides.
17. Utilisation d'une composition selon l'une quelconque des revendications 10 à
13, comme agent pesticide vis-à-vis d'un pathogène.
18. Procédé pour activer les réactions de défense d'une plante et de résistance contre des contraintes biotiques, caractérisé en ce qu’il comprend l’application à ladite plante d’une quantité efficace d'une composition selon l'une quelconque des revendications 1 à 13.
19. Procédé selon la revendication 18, caractérisé en ce que la composition est apportée à une plante dans une quantité suffisante pour activer les réactions de défense de ladite plante et de résistance contre des contraintes biotiques, en particulier pour stimuler l'expression des gènes impliqués dans la défense de la plante.
20. Procédé selon l'une quelconque des revendications 18 ou 19, caractérisé en ce que la composition est apportée à la plante sous forme liquide dans des solutions foliaires, par exemple en une quantité allant de 0,001 à 100 L/ha, préférentiellement de 0,01 à 25 L/ha, encore plus préférentiellement de 0,1 à 10 L/ha, par exemple en une quantité 1 L/ha.
21. Procédé selon l'une quelconque des revendications 18 à 20, caractérisé en ce qu'il comprend en outre l'application à ladite plante d'un ou plusieurs pesticides, préférentiellement d'un ou plusieurs fongicides.
22. Procédé de traitement d'une plante destiné à favoriser son développement en réduisant l'accès des pathogènes à ladite plante ou en éliminant les pathogènes présents dans le sol, ledit procédé comprenant l’application à ladite plante d'une composition selon l'une quelconque des revendications 10 à 13.
23. Utilisation d'une composition telle que définie selon l'une quelconque des revendications 1 à 13, pour potentialiser l'effet pesticide d'un pesticide.
24. Utilisation selon la revendication 23, caractérisée en ce que le pesticide est un fongicide, de préférence choisi parmi le chlorothalonil, le fluxapyroxad, l'époxiconazole, le captan, le dithlanon, le fenbuconazole, le pyradostrobine, le dodine, le prothioconazole, le metconazole, le propiconazole, le cyproconazole, le tebuconazole, le bromuconazole, le difenoconazole, le propiconazole, le tetraconazole, l'azoxystrobin, le picoxystrobin, le pyraclostrobin, le picoxystrobin, le trifloxystrobin, le dimoxystrobin, le fluoxastrobin maneb, le mancozeb, le penthiopyrad, le bixafen, le prochloraz, le benzovindiflupyr, le boscalid, le fenpropidin, le fluopyram, le spiroxamine, le flutriafol, le folpet, le fenpropimorph, le metrafenone, le sulphur et le laminarin.
25. Utilisation selon la revendication 24, caractérisée en ce que le fongicide est choisi parmi le chlorothalonil, le fluxapyroxad, l'époxiconazole, le captan et le dithlanon.
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