OA18998A - Utilisation d'un acide dicarboxylique pour lutter contre la croissance de plantes holoparasites ou hémiparasites - Google Patents
Utilisation d'un acide dicarboxylique pour lutter contre la croissance de plantes holoparasites ou hémiparasites Download PDFInfo
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Abstract
Description
Utilisation d'un acide dicarboxylique pour lutter contre la croissance de plantes holoparasites ou hémiparasîtesUse of a dicarboxylic acid to combat the growth of holoparasitic or hemiparasitic plants
La présente invention concerne le domaine technique de la protection des cultures agricoles (poaceae, solanaceae, brassicaceae, asteraceaë) vis-àvis de plantes holoparasites et hémiparasîtes épirhizes (c'est-à-dire qui se développent sur les racines de leur plante hôte), de l'ordre des Scrophulariales, et en particulier de Striga et Orobanche. Plus précisément, l'invention concerne l'utilisation d'un acide dicarboxyiique comportant de 2 à 5 atomes de carbone ou d'une souche Azospiriiïum brasiiense L4, déposée, sous le numéro 1-4830 auprès de la CNCM pour lutter contre la croissance de plantes holo ou hémiparasites.The present invention relates to the technical field of the protection of agricultural crops (poaceae, solanaceae, brassicaceae, asteraceaë) vis-à-vis holoparasitic and hemiparasitic plants (that is to say which develop on the roots of their host plant) , of the order of Scrophulariales, and in particular of Striga and Orobanche. More specifically, the invention relates to the use of a dicarboxyic acid comprising from 2 to 5 carbon atoms or to a strain Azospiriiïum brasiiense L4, registered under the number 1-4830 with the CNCM to combat the growth of holo plants or hemiparasites.
Les plantes holoparasites sont des plantes parasites non chlorophylliennes par nature et qui doivent donc prélever leur matière organique sur une plante hôte. Les plantes hémiparasites sont des plantes parasites chlorophylliennes qui assurant une partie seulement de la synthèse des substances carbonées nécessaires à leur développement. Ces plantes parasites se développent aux dépens de leur hôte en s'attachant à leurs racines via la formation d'un haustorium (suçoir) qui aboutit à l'établissement d'une connexion entre les vaisseaux conducteurs du xylème de la plante hôte et de la plante parasite (Bouwmeester et al., 2003, Curr. Opin. Plant Biol. 6:358-364). Une fois connectée, les plantes parasites vont pomper la sève de la plante hôte, ralentir le développement des parties aériennes, induire des chloroses et réduire la photosynthèse (Ejeta and Butler, 2000. Parasitic plants. Int R.A. Frederiksen and G.N. Odvody (eds). Compendium of Sorghum Diseases, 2nd édition. APS Press, The American Phytopathological Society, pp. 53-56). Pour survivre, ces plantes parasites doivent produire une grande quantité de graines. Ainsi, dès l'émergence des parties aériennes, la plante parasite fleurit et produit d'énormes quantités de graines qui pourront rester viables dans le sol pendant plusieurs années (Haussmann et al., 2000, Field Crop Res. 66:195-211). Les plantes des genres Striga et Orobanche appartiennent au même ordre, celui des Scrophulariales, mais n'appartiennent pas à la même famille (les piantes du genre Striga appartiennent à ia famille des Scropfwfariaceae et sont des hémiparasites, alors que ies plantes du genre Orobanche appartiennent à la famille des Orobanchaceae et sont des holoparasites). Ces plantes ont de nombreux points en commun : graines de petite taille facilitant leur dissémination, 5 germination dépendante de la présence d’éiiciteurs de type strigolactones, spoliation trophique de la plante hôte via le développement d'un haustorium. Par contre, leurs aires de répartition sont différentes : Striga dans toutes tes régions tropicales et subtropicales du monde et notamment en Afrique subsaharienne et Orobanche principalement dans les pays tempérés d'Asie et 10 d'Europe centrale et notamment du pourtour méditerranéen. Elles affectent la croissance d'une très iarge variété de plantes d'intérêt agronomique (maïs, riz, sorgho, millet, tournesol, colza, tabac, tomate, etc), que ce soit en zones tempérées (Orobanche), ou tropicales (Strlga). Elles occasionnent d'importantes pertes de rendement sur un grand nombre de cultures. Sur 1e 15 continent africain : environ 50 millions d'hectares sont infestés par Striga, résultant en la perte de pius de 10 millions de tonnes de céréales (Gressel et al., 2004, Crop Prot. 23:661-689). Les pertes de rendement en grains, du fait de l'infestation par Striga, peuvent varier de 5 à 100 %, en fonction des conditions agrodimatiques, du niveau d'infestation de la parcelle et de la 20 vulnérabilité de la céréale (Haussmann et aL, 2000, Held Crop Res. 66:195211). En Europe, notamment dans te bassin méditerranéen, 16 millions d’hectares sont infestés par l'Orobanche, avec des pertes annuelles estimées à 50 millions d'euros pour le tournesol, 175 millions d'euros pour te tabac, et 200 millions d'euros pour la tomate (Bülbül et al., 2009, Helia 32:141-152).Holoparasitic plants are non-chlorophyllous parasitic plants by nature and which must therefore take their organic matter from a host plant. Hemiparasitic plants are chlorophyll parasitic plants which only provide part of the synthesis of carbonaceous substances necessary for their development. These parasitic plants develop at the expense of their host by attaching to their roots via the formation of a haustorium (sucker) which leads to the establishment of a connection between the xylem conducting vessels of the host plant and the parasitic plant (Bouwmeester et al., 2003, Curr. Opin. Plant Biol. 6: 358-364). Once connected, the parasitic plants will pump the sap of the host plant, slow down the development of the aerial parts, induce chlorosis and reduce photosynthesis (Ejeta and Butler, 2000. Parasitic plants. Int RA Frederiksen and GN Odvody (eds). Compendium of Sorghum Diseases, 2nd edition. APS Press, The American Phytopathological Society, pp. 53-56). To survive, these parasitic plants must produce a large quantity of seeds. Thus, from the emergence of the aerial parts, the parasitic plant flowers and produces enormous quantities of seeds which can remain viable in the soil for several years (Haussmann et al., 2000, Field Crop Res. 66: 195-211) . Plants of the genera Striga and Orobanche belong to the same order, that of the Scrophulariales, but do not belong to the same family (the piantes of the genus Striga belong to the family of Scropfwfariaceae and are hemiparasites, while the plants of the genus Orobanche belong to the family of Orobanchaceae and are holoparasites). These plants have many points in common: small seeds facilitating their dissemination, 5 germination dependent on the presence of strigolactone-type elicitors, trophic spoliation of the host plant via the development of a haustorium. On the other hand, their distribution areas are different: Striga in all your tropical and subtropical regions of the world and in particular in sub-Saharan Africa and Orobanche mainly in the temperate countries of Asia and 10 of Central Europe and in particular around the Mediterranean. They affect the growth of a very wide variety of plants of agronomic interest (corn, rice, sorghum, millet, sunflower, rapeseed, tobacco, tomato, etc.), whether in temperate zones (Orobanche), or tropical (Strlga ). They cause significant yield losses on a large number of crops. On the African continent: around 50 million hectares are infested with Striga, resulting in the loss of more than 10 million tonnes of cereals (Gressel et al., 2004, Crop Prot. 23: 661-689). Grain yield losses, due to Striga infestation, can vary from 5 to 100%, depending on the agrodimatic conditions, the level of infestation of the plot and the vulnerability of the cereal (Haussmann and aL , 2000, Held Crop Res. 66: 195211). In Europe, especially in the Mediterranean basin, 16 million hectares are infested with Orobanche, with annual losses estimated at 50 million euros for sunflower, 175 million euros for tobacco, and 200 million euros for tomatoes (Bülbül et al., 2009, Helia 32: 141-152).
Les graines de ces piantes parasites sont de très petite taille ce qui favorise leur propagation sur de longues distances par le vent, tes animaux, ou par des machines agricoles contaminées. Le transport de semences de plantes hôtes contaminées est également une source de dissémination. La production de graines par une plante parasite étant énorme (jusqu'à 100 000 30 graines par plante), tes terrains infestés doivent généralement être abandonnés.The seeds of these parasitic plants are very small which favors their propagation over long distances by the wind, your animals, or by contaminated agricultural machinery. Transport of seeds from contaminated host plants is also a source of spread. Since the production of seeds by a parasitic plant is enormous (up to 100,000 seeds per plant), your infested land must generally be abandoned.
Jusqu'à présent, la protection des cultures contre ies plantes Orobanche ou Striga implique ''utilisation d'herbicides non-sélectifs, couplée à i'utHisation de variétés de céréales résistantes à ces herbicides (De Groote et al., 2008, Agric. Syst. 97:83-94). Ces moyens de lutte chimique, outre leur toxicité pour l'environnement, présentent un coût élevé. De plus, dans le cadre du plan Ecophyto 2018, i'usage des produits phytopharmaceutiques dont des herbicides va être fortement réduit.Until now, the protection of crops against Orobanche or Striga plants involves the use of non-selective herbicides, coupled with the use of cereal varieties resistant to these herbicides (De Groote et al., 2008, Agric. Syst. 97: 83-94). These chemical control means, in addition to their toxicity for the environment, have a high cost. In addition, as part of the Ecophyto 2018 plan, the use of plant protection products including herbicides will be greatly reduced.
Il est également possible de stimuler la germination des graines de Striga en absence de la plante hôte. Comme 5. hermonthica est un hémiparasite, cette stimulation en absence de la plante hôte peut conduire à la mort du parasite en 2-3 jours et in fine à la diminution des réserves de graines du parasite epirhize dans les sols. Ceci peut être obtenu grâce à l'utilisation d'éthylène (Logan et Stewart, 1991, Plant Physîol. 97:1435-1438). L'éthylène est une phytohormone qui peut induire la germination des graines de Striga, mais l'application d'éthylène sur les sols présente un coût prohibitif, ne permettant pas l'utilisation de cette technologie en agriculture (Berner et al., 1999, Bioiogical Control 15:274-282).It is also possible to stimulate the germination of Striga seeds in the absence of the host plant. As 5. hermonthica is a hemiparasite, this stimulation in the absence of the host plant can lead to the death of the parasite in 2-3 days and ultimately to the reduction of seed reserves of the epirhize parasite in the soil. This can be achieved through the use of ethylene (Logan and Stewart, 1991, Plant Physiol. 97: 1435-1438). Ethylene is a phytohormone which can induce the germination of Striga seeds, but the application of ethylene on the soil presents a prohibitive cost, not allowing the use of this technology in agriculture (Berner et al., 1999, Bioiogical Control 15: 274-282).
D'autres moyens de lutte existent tel l'arrachage manuel ou l'utilisation de rotations avec des plantes non-hôtes, mais leur efficacité est réduite. La sélection variétale de lignées de céréales résistantes aux plantes phytoparasites est également une solution alternative, mais les coûts sont élevés.Other control methods exist such as manual uprooting or the use of rotations with non-host plants, but their effectiveness is reduced. Variety selection of cereal lines resistant to phytoparasitic plants is also an alternative, but the costs are high.
Il n'y a, à i'heure actuelle, aucun produit de lutte alternative, comme l'utilisation de molécules d'origine naturelle, contre Striga ou Orobanche disponible sur le marché.There is currently no alternative control product, such as the use of molecules of natural origin, against Striga or Orobanche available on the market.
Dans la littérature, différents travaux ont révélé la capacité de différents agents biologiques à limiter la croissance des plantes parasites Striga ou Orobanche. Cela inclut des larves d'insectes herbivores monophages comme Phytomyza orpbanchia, Eulocastra argentisparsa, des champignons comme Fusarium oxysporwn f. sp. Orthoceras, F. oxysporum f. sp. Strigae, ou Fusarium artbrosporioides qui produisent des mycotoxines (i.e. l'acide fusarique, les fumonisines, et te déoxynivalénol (DON)) (Amseiîem et al., 2001, BioControl 46:211-228; Abueigasim et Kroschel, 2003, FAO plant production and protection. Paper No. 120. Addendum 1, 109-144; Lendzemo et al. 2004 Field Crop Res, 91:51-61; Venne et al., 2009, Pest. Manag. Sci. 65:572-580). Les mycotoxines (notamment le DON) sont capables d'inhiber !a germination des graines de Striga et dOrobanche, mais elles peuvent 5 déclencher des problèmes de santé chez les mammifères. En particulier, elles représentent un risque pour l'alimentation du bétail et humaine et ne peuvent donc pas être considérées comme des substances totalement inoffensives.In the literature, various studies have revealed the capacity of different biological agents to limit the growth of the Striga or Orobanche parasitic plants. This includes larvae of monophagous herbivorous insects like Phytomyza orpbanchia, Eulocastra argentisparsa, fungi like Fusarium oxysporwn f. sp. Orthoceras, F. oxysporum f. sp. Strigae, or Fusarium artbrosporioides which produce mycotoxins (ie fusaric acid, fumonisins, and deoxynivalenol (DON)) (Amseiîem et al., 2001, BioControl 46: 211-228; Abueigasim and Kroschel, 2003, FAO plant production and protection. Paper No. 120. Addendum 1, 109-144; Lendzemo et al. 2004 Field Crop Res, 91: 51-61; Venne et al., 2009, Pest. Manag. Sci. 65: 572-580). Mycotoxins (especially DON) are able to inhibit the germination of Striga and Orobanche seeds, but they can trigger health problems in mammals. In particular, they represent a risk for animal and human nutrition and therefore cannot be considered as completely harmless substances.
On peut également citer les travaux de Dadon et al., 2004 (Isr. J. Plant 10 Sci. 52:83-86) intitulés « A factor from Azospiriiïum brasitense inhibits germination and radicle growth of Orobanche aegyptiaca Tikva », décrivant l'activité antagoniste d'un métabolite produit par une souche ù’AzospiriÎlum brasi/ense sur l'Orobanche, Dans cette publication, ia molécule active produite par cette souche (dont le nom n'est pas cité) a été identifiée comme 15 étant un oligopeptide présent dans une fraction éthanolique du surnageant.We can also cite the work of Dadon et al., 2004 (Isr. J. Plant 10 Sci. 52: 83-86) entitled "A factor from Azospiriiïum brasitense inhibits germination and radicle growth of Orobanche aegyptiaca Tikva", describing the activity antagonist of a metabolite produced by a strain z'AzospiriÎlum brasi / taught on the Orobanche, In this publication, the active molecule produced by this strain (whose name is not mentioned) has been identified as being an oligopeptide present in an ethanolic fraction of the supernatant.
De plus, seule une activité inhibitrice de la germination des graines dOrobanche a été mise en évidence pour cette souche. Par ailleurs, il a été rapporté par Bouillant et ak, 1997 (C. R. Acad. ΠΪ Sci, Vie 320:159-162) que toutes les souches d'Azospiriitum brasiïense ne présentent pas une telle 20 activité inhibitrice de la germination et de la croissance des plantes parasites.In addition, only an activity inhibiting the germination of Orobanche seeds has been demonstrated for this strain. Furthermore, it has been reported by Bouillant and ak, 1997 (CR Acad. ΠΪ Sci, Vie 320: 159-162) that not all strains of Azospiriitum brasiïense exhibit such an inhibitory activity on germination and growth. parasitic plants.
Dans cette dernière publication, il est également rapporté que sur ies deux souches d'Azospiriflum brasilense qui présentent une telle activité inhibitrice de la germination et la croissance de Striga en microcosmes, seule une de ces souches, Azospiriïum brasi/ense L4, présente un effet phytostimulateur 25 sur le sorgho.In this last publication, it is also reported that on two strains of Azospiriflum brasilense which have such an inhibitory activity on germination and the growth of Striga in microcosms, only one of these strains, Azospiriïum brasi / ens L4, has an effect phytostimulator 25 on sorghum.
ïl est donc urgent, étant donné la multiplication rapide de ces plantes parasites dans le monde, de développer de nouvelles solutions durables, respectueuses de l'environnement, pour lutter contre les plantes holo ou hémiparasites, de l'ordre des Scrophulariales, qui engendrent des ravages 30 importants sur les cultures agricoles et des plantes d'intérêt agronomique.It is therefore urgent, given the rapid multiplication of these parasitic plants worldwide, to develop new sustainable solutions, respectful of the environment, to combat holo or hemiparasitic plants, of the order Scrophulariales, which generate 30 significant havoc on agricultural crops and plants of agronomic interest.
Dans ce contexte, ia présente invention propose d'utiliser un acide dtcarboxylique, comportant de 2 à 5 atomes de carbone, pour lutter contre la croissance de plantes holo ou hémiparasites, et en particulier pour lutter contre la croissance de plantes du genre Striga et/ou de plantes du genre Orobanche. B est également possible d'utiliser des combinaisons de plusieurs acides dicarboxyliques, comportant de 2 à 5 atomes de carbone, pour lutter contre la croissance de plantes holo ou hémiparasites, pour obtenir l'effet souhaité.In this context, the present invention proposes to use a dtcarboxylic acid, comprising from 2 to 5 carbon atoms, to combat the growth of holo or hemiparasitic plants, and in particular to combat the growth of plants of the genus Striga and / or plants of the genus Orobanche. It is also possible to use combinations of several dicarboxylic acids, comprising from 2 to 5 carbon atoms, to combat the growth of holo or hemiparasitic plants, to obtain the desired effect.
Dans le cadre de l'invention, ies agents actifs proposés pour inhiber le développement de plantes holo ou hémiparasites, telles que des plantes Striga ou Orobanche, sont choisis parmi les acides dicarboxyliques (nommés dans la suite aussi diacides) comprenant de 2 à 5 atomes de carbone. De tels diacides comprennent deux fonctions acide carboxyiique soit directement liées entre elles, dans le cas de l'acide oxalique, soit liées par une chaîne carbonée saturée ou insaturée comprenant 1, 2 ou 3 atomes de carbone. Cette chaîne carbonée est, de préférence, linéaire et pourra être non substituée ou substituée par un ou plusieurs substituants, notamment de type OH, OCHs et CH2OCH3. A titre d'exemple de tels diacides, on peut citer, l'acide oxalique, l'acide malonique, l'acide maléique, l'acide malique, l'acide glutarique, et l'acide acétylène dicarboxylique. L'utilisation de l'acide malique sous forme L, qui s'est montré particulièrement actif sur l'inhibition de la croissance de plantes Striga ou Orobanche, est préférée.In the context of the invention, the active agents proposed for inhibiting the development of holo or hemiparasitic plants, such as Striga or Orobanche plants, are chosen from dicarboxylic acids (hereinafter also called diacids) comprising from 2 to 5 atoms of carbon. Such diacids comprise two carboxyic acid functions either directly linked to one another, in the case of oxalic acid, or linked by a saturated or unsaturated carbon chain comprising 1, 2 or 3 carbon atoms. This carbon chain is preferably linear and may be unsubstituted or substituted by one or more substituents, in particular of the OH, OCHs and CH2OCH3 type. By way of example of such diacids, mention may be made of oxalic acid, malonic acid, maleic acid, malic acid, glutaric acid, and acetylene dicarboxylic acid. The use of malic acid in L form, which has been shown to be particularly active in inhibiting the growth of Striga or Orobanche plants, is preferred.
L'acide malique sous forme L a pu être isolé, par les inventeurs, à partir de surnageant de culture d'une souche bactérienne, AzospiriÎium brasilense L4, déposée, conformément au Traité de Budapest de 1977, sous le numéro 1-4830, le 18 décembre 2013, auprès de la CNCM, Collection Nationale de Cultures de Microorganismes, Institut Pasteur, 25 rue du Docteur Roux, 75724 Paris Cedex 15, FRANCE. Cette souche a été isolée, en 1995 à partir d'un champ de sorgho infesté par une plante parasite Striga au Mali. La souche AzospirïHum brasilense L4 qui a été rapportée comme ayant la capacité d'inhiber, in vitro, la croissance de Striga hermontica et de Orobanche ramosa et, en microcosmes de sol, de protéger le sorgho vis-à-vis du Striga et de stimuler la croissance de la céréale (Bouillant et al., 1997, C. R. Acad. III Sci. Vie 320:159-162; Miche et al., 2000, Eur. J. Plant Pathol.Malic acid in L form could be isolated, by the inventors, from culture supernatant of a bacterial strain, Azospiriium brasilense L4, deposited, in accordance with the Budapest Treaty of 1977, under number 1-4830, December 18, 2013, at the CNCM, National Collection of Cultures of Microorganisms, Institut Pasteur, 25 rue du Docteur Roux, 75724 Paris Cedex 15, FRANCE. This strain was isolated in 1995 from a field of sorghum infested by a Striga parasitic plant in Mali. The AzospirïHum brasilense L4 strain which has been reported to have the ability to inhibit, in vitro, the growth of Striga hermontica and Orobanche ramosa and, in soil microcosms, to protect sorghum from Striga and to stimulate the growth of the cereal (Bouillant et al., 1997, CR Acad. III Sci. Vie 320: 159-162; Miche et al., 2000, Eur. J. Plant Pathol.
106:347-351) a maintenant fait l'objet d'un dépôt, sous le numéro 1-4830, auprès de la CNCM (Collection Nationale de Cultures de Microorganismes, France). Cette souche produit en culture des métabolites bien spécifiques, par rapport à d'autres souches ü'Azospiriiïum brasiïense (et notamment par rapport à celui rapporté par Dadon et al., 2004: ïsr. J. Plant Sel. 52:83-86). En effet, au vu de l'activité constatée, les inventeurs ont analysé le surnageant de culture de la souche Azospîriiïum brasiïense L4, déposée sous le numéro 1-4830, auprès de la CNCM (Collection Nationale de Cultures de Microorganismes, France) et ont pu mettre en évidence que l'acide malique sous forme L est responsable de l'activité herbicide constatée vis-à-vis des plantes holo ou hémiparasites. ïl s'avère cependant que l'acide malique sous forme L n'est pas le composant majoritaire présent dans te surnageant de culture de la souche bactérienne, Azospîriiïum brasiïense L4, déposée, sous te numéro I-483Û auprès de la CNCM (Collection Nationale de Cultures de Microorganismes, France). Les inventeurs ont également mis en évidence que cette activité herbicide constatée vis-à-vis des plantes holo ou hémiparasites était généralisable à la classe chimique des acides dicarboxyliques comprenant de 2 à 5 atomes de carbone.106: 347-351) has now been the subject of a deposit, under the number 1-4830, with the CNCM (National Collection of Cultures of Microorganisms, France). This strain produces very specific metabolites in culture, compared to other strains ü'Azospiriiïum brasiïense (and in particular compared to that reported by Dadon et al., 2004: ïsr. J. Plant Sel. 52: 83-86) . In fact, in view of the activity observed, the inventors analyzed the culture supernatant of the Azospîriiïum brasiïense L4 strain, deposited under the number 1-4830, with the CNCM (National Collection of Cultures of Microorganisms, France) and have was able to demonstrate that malic acid in L form is responsible for the herbicidal activity observed with respect to holo or hemiparasitic plants. However, it turns out that malic acid in L form is not the majority component present in the culture supernatant of the bacterial strain, Azospîriiïum brasiïense L4, deposited under the number I-483Û at the CNCM (National Collection of Cultures of Microorganisms, France). The inventors have also demonstrated that this herbicidal activity observed with respect to holo or hemiparasitic plants was generalizable to the chemical class of dicarboxylic acids comprising from 2 to 5 carbon atoms.
L'invention propose donc d'utiliser des agents actifs d'origine naturelle, à faible impact environnemental, pour limiter, inhiber la croissance des plantes parasites. Contrairement à d'autres agents biologiques qui agissent principalement en inhibant la germination des graines d'Orobanche et de Striga, les acides dicarboxyliques comprenant de 2 à 5 atomes de carbone sont, de plus, capables d'inhiber l’allongement des procauiômes ou radicules à partir de graines germées de la plante parasite, et, par conséquent, de bloquer la croissance de la plante parasite, comme cela ressort notamment des données présentées dans te Tableau 1 ci-après. Ceci devrait permettre de diminuer de façon significative tes stocks de graines viables des holo ou hémiparasites dans les sols infestés, effet qui ne peut être complètement obtenu par la seule inhibition de l'étape de germination. En effet, en absence de conditions favorables à la germination des plantes parasites (notamment, en l'absence de strigolactones), les graines peuvent rester viables dans le sol pendant plusieurs années.The invention therefore proposes to use active agents of natural origin, with low environmental impact, to limit, inhibit the growth of parasitic plants. Unlike other biological agents which act mainly by inhibiting the germination of seeds of Orobanche and Striga, dicarboxylic acids comprising from 2 to 5 carbon atoms are, moreover, capable of inhibiting the lengthening of procauiomas or radicles from germinated seeds of the parasitic plant, and therefore to block the growth of the parasitic plant, as can be seen in particular from the data presented in Table 1 below. This should make it possible to significantly reduce your stocks of viable holo or hemiparasitic seeds in infested soils, an effect which cannot be completely obtained by inhibiting the germination stage alone. Indeed, in the absence of conditions favorable to the germination of parasitic plants (in particular, in the absence of strigolactones), the seeds can remain viable in the soil for several years.
Dans le cadre de l'invention, l'acide dicarboxyiique pourra être mis en contact avec au moins une graine de plante holo ou hémiparasite à éradiquer. L'acide dicarboxyiique sera utilisé en quantité suffisante pour obtenir l’effet souhaité, et en particulier pour bloquer la germination de graines et/ou pour inhiber rallongement des procautômes ou radicules à partir de graines germées de plantes holo ou hémiparasites, de l'ordre des Scrophulariales, et en particulier de Striga et/ou Orobanche. De préférence, on pourra utiliser de 30 à 300 kg d'acide dicarboxyiique par hectare de sol traité. Dans le cas, où l'acide dicarboxyiique est appliqué sous la forme d'une solution aqueuse, on pourra utiliser une solution comprenant de 1 à 20 g d'acide dicarboxyiique par litre de solution.In the context of the invention, the dicarboxyic acid may be brought into contact with at least one seed of a holo or hemiparasite plant to be eradicated. The dicarboxyic acid will be used in sufficient quantity to obtain the desired effect, and in particular to block the germination of seeds and / or to inhibit lengthening of procautomes or radicles from germinated seeds of holo plants or hemiparasites, of the order Scrophulariales, and in particular Striga and / or Orobanche. Preferably, 30 to 300 kg of dicarboxyic acid can be used per hectare of treated soil. In the case where the dicarboxyic acid is applied in the form of an aqueous solution, a solution comprising from 1 to 20 g of dicarboxyic acid per liter of solution may be used.
L'acide dicarboxyiique peut être appliqué sur des graines et/ou plant des plantes ou cultures à protéger. Les compositions herbicides contenant un acide dicarboxyiique conforme à l'invention pourront notamment se présenter sous la forme de solutions aqueuses ou de granulés. Ces compositions pourront contenir, outre l'acide dicarboxyiique actif, des ions issus de KzHPCL ou KH^PO^, une ou plusieurs charges telles que la silice, l'argile, le kaolin ou le talc et un ou plusieurs agents tensioactifs comme le dodécylbenzène ou le lignosulfonate de calcium. Dans le cas de l'acide malique sous forme L, ce dernier pourra être produit par synthèse chimique ou directement par la souche bactérienne, Azospiriïlum brasitense L4, déposée, sous le numéro ï-4830 auprès de la CNCM (Collection Nationale de Cultures de Microorganismes, France). Dans ce cas, l'acide pourra être isolé ou la composition herbicide pourra directement contenir le surnageant de culture des bactéries. Le surnageant de culture peut être obtenu en plaçant les bactéries dans tout milieu de culture approprié. Les conditions de croissance de bactéries AzospiriHum brasitense connues de l'homme du métier et notamment décrites dans (Nelson et Knowles, 1978, Can J. Microbiol24:1395-1403) pourront être utilisées. En particulier, la croissance sera réalisée à une température de 26 à 32°C, typiquement à 28CC, dans un milieu aqueux tamponné, contenant des sets, des nutriments et une source de carbone pour la croissance de ia bactérie. A titre d'exemples de sels, on peut citer NaCi, K2HPO4, KH2PO4, MgSCb, NaCi, CaCh, NH4CL A titre d'exemples de nutriments, on peut citer Na2MoO4, MnSO4/ Η3δΟ3, CuSO4, ZnSO4, FeEDTA, de l'extrait de levure, de la biotine. A titre d'exemples de sources de carbone, on peut citer !e glucose, le malate et le fructose notamment A titre d'exemples de tels milieux, on peut citer les milieux Nfb et Nfb* notamment décrits dans Nelson et Knowles, 1978, Can. J. Microbiol, 24:1395-1403 et Vial et ak, 2006, J. Bacteriol. 188:5364-5373.Dicarboxyic acid can be applied to seeds and / or plants of plants or crops to be protected. The herbicidal compositions containing a dicarboxyic acid in accordance with the invention may in particular be in the form of aqueous solutions or of granules. These compositions may contain, in addition to the active dicarboxyic acid, ions from KzHPCL or KH ^ PO ^, one or more fillers such as silica, clay, kaolin or talc and one or more surfactants such as dodecylbenzene or calcium lignosulfonate. In the case of malic acid in L form, the latter can be produced by chemical synthesis or directly by the bacterial strain, Azospiriïlum brasitense L4, deposited, under the number ï-4830 with the CNCM (National Collection of Cultures of Microorganisms , France). In this case, the acid may be isolated or the herbicidal composition may directly contain the culture supernatant of the bacteria. The culture supernatant can be obtained by placing the bacteria in any suitable culture medium. The conditions for growth of AzospiriHum brasitense bacteria known to those skilled in the art and in particular described in (Nelson and Knowles, 1978, Can J. Microbiol24: 1395-1403) may be used. In particular, growth will be carried out at a temperature of 26 to 32 ° C, typically at 28 C C, in a buffered aqueous medium containing sets, nutrients and a carbon source for the growth of bacteria ia. Examples of salts that may be mentioned include NaCi, K 2 HPO 4 , KH 2 PO 4 , MgSCb, NaCi, CaCh, NH 4 CL. Examples of nutrients that may be mentioned are Na 2 MoO 4 , MnSO 4 / Η 3 δΟ 3 , CuSO 4 , ZnSO 4 , FeEDTA, yeast extract, biotin. By way of examples of carbon sources, mention may be made of glucose, malate and fructose in particular. As examples of such media, mention may be made of Nfb and Nfb * media, especially described in Nelson and Knowles, 1978, Can. J. Microbiol, 24: 1395-1403 and Vial et ak, 2006, J. Bacteriol. 188: 5364-5373.
Il est également possible d'appliquer des bactéries de ia souche Azospîriiïum brasiïense L4, déposée, sous le numéro 1-4830 auprès de la CNCM (Collection Nationale de Cultures de Microorganismes, France) et produisant un des acides dicarboxyliques actifs, directement sur les graines ou cultures de la plante à protéger ou sur les sols à protéger contre la croissance de plantes holo et hémiparasites, et ainsi produire directement in situ l'acide dicarboxylique. De plus, la souche Azospîriiïum brasiïense, déposée sous le numéro 1-4830, auprès de ia CNCM (Collection Nationale de Cultures de Microorganîsmes, France) et utilisée dans le cadre de l'invention pour inhiber la croissance de plantes holo ou hémiparasites, de l'ordre des Scrophuiariaîes, et en particulier de Striga et/ou Orobanche, présente un autre avantage pour l'améitoration des cultures, puisqu'elle est également capable de stimuler la croissance des plantes, et est capable de produire un agent phytostimulateur vis-à-vis des plantes d'intérêt agronomique (Bouillant et aL, 1997, C. R. Acad. Sel. 320: 159-162). Par conséquent, l'invention propose d'utiliser des bactéries de la souche Azospîriiïum brasiïense L4, déposée sous le numéro 1-4830, auprès de la CNCM (Collection Nationale de Cultures de Microorganismes, France) également pour produire un agent phytostimulateur vis-à-vis de cultures agricoles ou de plantes d'intérêt agronomique à protéger contre ia croissance de plantes holo ou hémiparasites. Par « agent phytostimulateur », on entend un agent favorisant la croissance des plantes d'intérêt. Un tel effet de la souche Azospîriiïum brasiïense 14, déposée sous le numéro ï-4830, auprès de laIt is also possible to apply bacteria of the Azospîriiïum brasiïense L4 strain, deposited under the number 1-4830 with the CNCM (National Collection of Cultures of Microorganisms, France) and producing one of the active dicarboxylic acids, directly on the seeds or crops of the plant to be protected or on soils to be protected against the growth of holo and hemiparasitic plants, and thus directly produce in situ dicarboxylic acid. In addition, the Azospîriiïum brasiïense strain, deposited under the number 1-4830, from ia CNCM (National Collection of Cultures of Microorganisms, France) and used in the context of the invention to inhibit the growth of holo or hemiparasitic plants, the order of Scrophuiariaîes, and in particular of Striga and / or Orobanche, presents another advantage for crop improvement, since it is also capable of stimulating plant growth, and is capable of producing a phytostimulatory agent vis- with respect to plants of agronomic interest (Bouillant et aL, 1997, CR Acad. Sel. 320: 159-162). Consequently, the invention proposes to use bacteria of the Azospîriiïum brasiïense L4 strain, deposited under the number 1-4830, with the CNCM (National Collection of Cultures of Microorganisms, France) also to produce a phytostimulatory agent vis-à-vis -vis agricultural crops or plants of agronomic interest to protect against ia growth of holo plants or hemiparasites. By "phytostimulatory agent" means an agent promoting the growth of plants of interest. Such an effect of the Azospîriiïum brasiïense 14 strain, deposited under the number ï-4830, with the
CNCM (Collection Nationale de Cultures de Microorganismes, France) a été mis en évidence par la modification de l'architecture du système racinaire de la plante d'intérêt, et est décrit dans la publication Bouillant et al., 1997, C. R. Acad. Sci. 320: 159-162. En particulier, l'effet phytostimulateur pourra être obtenu vis-à-vis de cultures agricoles ou de plantes d'intérêt agronomique choisies notamment parmi le maïs, le riz, le blé, le sorgho, le niébé, le tabac, le tournesol, le colza, le choux, la tomate, l'aubergine, la pomme de terre, le piment, le céleri, le haricot...CNCM (National Collection of Cultures of Microorganisms, France) was highlighted by the modification of the architecture of the root system of the plant of interest, and is described in the publication Bouillant et al., 1997, C. R. Acad. Sci. 320: 159-162. In particular, the phytostimulatory effect can be obtained with respect to agricultural crops or plants of agronomic interest chosen in particular from corn, rice, wheat, sorghum, cowpea, tobacco, sunflower, rapeseed, cabbage, tomato, eggplant, potato, chili, celery, bean ...
En particulier, des bactéries de la souche Azospirilium bras/'/ense, déposée sous le numéro 1-4830, auprès de la CNCM (Collection Nationale de Cultures de Microorganismes, France) pourront être utilisées pour enrober des graines de telles cultures agricoles ou de plantes d’intérêt agronomique. Dans un tel cas, les bactéries sont incorporées dans une matrice constituant un enrobage des graines des cultures agricoles ou de plantes d'intérêt agronomique. Cet enrobage pourra contenir un ou plusieurs constituante tels que la tourbe, la perlite, fa gomme arabique, le carboxyméthyl cellulose, la polyvinylpyrrolidone, ie chitosan ou Laiginate. Les bactéries seront utilisées en quantité suffisante pour obtenir l'effet souhaité, et en particulier pour bloquer la germination de graines de plantes holo ou hémiparasites, de l'ordre des Scrophuiariaies, et en particulier de Striga et/ou Orobanche, et/ou pour inhiber l’allongement des procauiômes ou radicules à partir de graines germées de plantes holo ou hémiparasites, de l'ordre des Scrophuiariaies, et en particulier de Striga et/ou Orobanche, et/ou pour stimuler la croissance des cultures agricoles ou de plantes d'intérêt agronomique. On utilisera, de préférence 3.107 cellules bactériennes par gramme de graines des cultures agricoles ou de plantes d'intérêt agronomique à protéger et/ou phytostimuler.In particular, bacteria of the Azospirilium bras / '/ Ens strain, deposited under the number 1-4830, with the CNCM (National Collection of Cultures of Microorganisms, France) could be used to coat seeds of such agricultural crops or plants of agronomic interest. In such a case, the bacteria are incorporated into a matrix constituting a coating of the seeds of agricultural crops or plants of agronomic interest. This coating may contain one or more constituents such as peat, perlite, gum arabic, carboxymethyl cellulose, polyvinylpyrrolidone, ie chitosan or Laiginate. The bacteria will be used in sufficient quantity to obtain the desired effect, and in particular to block the germination of seeds of holo plants or hemiparasites, of the order of Scrophuiariaies, and in particular of Striga and / or Orobanche, and / or for inhibit the lengthening of procauiomas or radicles from germinated seeds of holo or hemiparasitic plants, of the order Scrophuiariaies, and in particular Striga and / or Orobanche, and / or to stimulate the growth of agricultural crops or plants agronomic interest. Use preferably 3.10 7 bacterial cells per gram of seeds of agricultural crops or plants of agronomic interest to protect and / or phytostimulate.
Les acides dicarboxyliques comprenant de 2 à 5 atomes de carbone proposés dans le cadre de l'invention pour lutter contre la croissance de plantes holo ou hémiparasites, de l'ordre des Scrophuiariaies, et en particulier de Striga et/ou Orobanche peuvent donc être utilisés, par les semenciers, pour enrober leurs graines, mais également pâr les entreprises de phytopharmacie, aussi bien dans le domaine de l'agriculture conventionnelle (synthèse des acides dicarboxyliques comprenant de 2 à 5 atomes de carbone par procédés chimiques) que dans ie domaine de l’agriculture biologique (production des agents actifs par des organismes vivants, dans le cas de l'acide manque sous forme L, notamment).The dicarboxylic acids comprising from 2 to 5 carbon atoms proposed in the context of the invention for combating the growth of holo or hemiparasitic plants, of the order of Scrophuiariaies, and in particular of Striga and / or Orobanche can be used , by seed companies, to coat their seeds, but also for plant protection companies, both in the field of conventional agriculture (synthesis of dicarboxylic acids comprising from 2 to 5 carbon atoms by chemical processes) as in the field of organic farming (production of active agents by living organisms, in the case of acid lacking in L form, in particular).
Les exemples de préparation et d'application ci-après mentionnés, en référence aux Figures annexées, permettent d'illustrer l'invention, mais n’ont aucun caractère limitatif.The preparation and application examples mentioned below, with reference to the appended Figures, make it possible to illustrate the invention, but are not in any way limiting.
La Figure 1 présente des photographies représentatives de l'effet obtenu sur la croissance de Striga hermonticaf en boîte de mîcrotitration, en présence du surnageant de la souche A. brasilense L4 cultivé dans du milieu Nfb* et de l'acide L-malique à 2mg/mL dans du tampon phosphate 50mM.Figure 1 presents photographs representative of the effect obtained on the growth of Striga hermontica f in a microtiter dish, in the presence of the supernatant of the strain A. brasilense L4 cultivated in Nfb * medium and of L-malic acid at 2mg / mL in 50mM phosphate buffer.
La Figure 2 présente l'effet du surnageant de la souche A. brasilense L4 sur le pourcentage de germination des graines de Striga hermontica et Orobanche ramosa (A) et sur la longueur du procaulôme des graines de Striga hermontica et Orobanche ramosa (B).FIG. 2 shows the effect of the supernatant of the strain A. brasilense L4 on the percentage of germination of the seeds of Striga hermontica and Orobanche ramosa (A) and on the length of the procaulome of the seeds of Striga hermontica and Orobanche ramosa (B).
L'activité des diacides et du surnageant de culture de la souche bactérienne, Azospirilium brasilense, déposée, sous le numéro 1-4830 auprès de la CNCM (Collection Nationale de Cultures de Microorganismes, France), nommée L4 sur les Figures, a été démontrée in vitro et/ou en microcosmes de sol sur les plantes parasites Striga et Orobanche.The activity of the diacids and of the culture supernatant of the bacterial strain, Azospirilium brasilense, deposited, under the number 1-4830 with the CNCM (National Collection of Cultures of Microorganisms, France), named L4 in the Figures, has been demonstrated in vitro and / or in soil microcosms on the parasitic plants Striga and Orobanche.
• Préparation des produits:• Preparation of products:
Pour le surnageant de culture : culture de la souche AzospiriHum brasilense L4, déposée, sous le numéro 1-4830 auprès de la CNCM (Collection Nationale de Cultures de Microorganismes, France) dans le milieu de culture Nfo* (MgSO«, 7H2O 100 mg/L, CaCb, 2H2O 13 mg/L, NaCI 175 mg/L, Na2MoO4, 2H2O 1 mg/L, MnCI2, 4H2O 3,5 mg/L, KH2PO4 600 mg/L, K2HPO4 900 mg/L, biotine 1 mg/L, Fe-EDTA 65,6 mg/L, tryptone 250 mg/L, extrait de levure 125 mg/L) (Nelson et Knowies, 1978, Can J. Microbiol24:1395-1403, Vial et al., 2006, J. BacterioL 188:5364-5373) pendant 16 heures à 28°C; centrifugation de la culture, récupération du surnageant et stérilisation par filtration sur filtre à û,2pm. Une purification bioguidée (fractionnement par chromatographie couplé à un test biologique de l'activité herbicide des fractions vis-à-vis de Striga) du surnageant de ia souche A brasiïense L4 a été réalisée. Au sein de ia fraction présentant une activité herbicide, un acide dicarboxylique en C4 a été identifié par spectrométrie de masse en comparaison à un standard chimique. L'identité des spectres de masse du composé purifié et de l'acide maiîque (standard chimique) a permis d'identifier que la molécule active est de l'acide malique. Un détecteur à dichroïsme circulaire a révélé ia présence d'acide L-malique.For the culture supernatant: culture of the AzospiriHum brasilense L4 strain, deposited, under the number 1-4830 with the CNCM (National Collection of Cultures of Microorganisms, France) in the culture medium Nfo * (MgSO ", 7H 2 O 100 mg / L, CaCb, 2H 2 O 13 mg / L, NaCI 175 mg / L, Na 2 MoO 4 , 2H 2 O 1 mg / L, MnCI 2 , 4H 2 O 3.5 mg / L, KH 2 PO 4600 mg / L, K 2 HPO 4 900 mg / L, biotin 1 mg / L Fe-EDTA 65.6 mg / L, tryptone 250 mg / L, yeast extract 125 mg / L) (Nelson et Knowies, 1978, Can J. Microbiol24: 1395-1403, Vial et al., 2006, J. BacterioL 188: 5364-5373) for 16 hours at 28 ° C; centrifugation of the culture, recovery of the supernatant and sterilization by filtration on a filter at,, 2 pm. A bioguided purification (fractionation by chromatography coupled to a biological test of the herbicidal activity of the fractions vis-à-vis Striga) of the supernatant of the strain A brasiïense L4 was carried out. Within the fraction showing herbicidal activity, a C4 dicarboxylic acid was identified by mass spectrometry in comparison to a chemical standard. The identity of the mass spectra of the purified compound and of the maiic acid (chemical standard) made it possible to identify that the active molecule is malic acid. A circular dichroism detector revealed the presence of L-malic acid.
L'activité des diacides sur les plantes parasites Striga et Orobanche a été testée en préparant des solutions du diacide sélectionné dans de l’eau ou dans un tampon phosphate 50 mM pH 7 à des concentrations de 1 à 20 mg/mL • Effet herbicide testé sur les plantes hoio ou hémioasitaîres Striga hermonb'ca et Orobanche ramosa·.The activity of the diacids on the parasitic plants Striga and Orobanche was tested by preparing solutions of the selected diacid in water or in a 50 mM phosphate buffer pH 7 at concentrations of 1 to 20 mg / ml • Herbicidal effect tested on hoio or hemioasitaria plants Striga hermonb'ca and Orobanche ramosa ·.
1. Dans une boîte de microtitration 12 puits, des papiers filtres (Whatmann 3) sont déposés au fond des puits et sont imbibés avec de l'eau stérile. Une trentaine de graines stérilisées (rinçage avec de l'éthanol 70%, puis du CafCIOh 1% (m/v) et du tween® 20, puis abondamment à l'eau) des plantes hoio ou hémipasites est disposée, dans chaque puits, à la surface des papiers filtres. Après 10 jours d'incubation à 30°C et dans l'obscurité, des doses croissantes d'un diacide ou de surnageant de culture sont ajoutées, en présence d'un inducteur de germination, le GR24. Après 3 jours d'incubation à 30cC, le développement des plantes parasites en présence d'un diacide ou du surnageant de culture est comparé au témoin négatif (eau, tampon phosphate ou milieu de culture stérile), avec un macroscope couplé à une caméra. La longueur des procaulômes (radicules) des plantes hoio ou hémipasites est mesurée afin d'exprimer le pouvoir phytotoxique des produits testés. L'ensemble des résultats sont présentés dans le Tableau 1 ci-après.1. In a 12-well microtiter dish, filter papers (Whatmann 3) are placed at the bottom of the wells and are soaked with sterile water. About thirty sterilized seeds (rinsing with 70% ethanol, then 1% CafCIOh (m / v) and tween® 20, then abundantly with water) hoio plants or hemipasites are placed in each well, on the surface of the filter papers. After 10 days of incubation at 30 ° C and in the dark, increasing doses of a diacid or of culture supernatant are added, in the presence of a germination inducer, GR24. After 3 days of incubation at 30 c C, the development of plant pests in the presence of a diacid or the culture supernatant compared to the negative control (water, phosphate buffer or medium of sterile culture), with a macroscope coupled to a camera. The length of the procaulomas (radicles) of hoio or hemipasite plants is measured in order to express the phytotoxic power of the products tested. All the results are presented in Table 1 below.
Tableau 1 : Impact de différents acides dicarboxyliques sur la croissance de Strigs herîTicntica en boîte de microtitradonTable 1: Impact of different dicarboxylic acids on the growth of Strigs herîTicntica in microtitradon dish
Composé et formuleCompound and formula
Concentration (mg/ml de tampon) inhibition de Striga1 Concentration (mg / ml buffer) inhibition of Striga 1
TamponBuffer
Acide oxaliqueOxalic acid
Acide maioniqueMaionic acid
Acide acétylène dicaborxyliqueAcetylene dicaborxylic acid
Acide maléiqueMaleic acid
Acide DL-maliqueDL-malic acid
2mg/ml2mg / ml
2mg/ml2mg / ml
Zmg/mlZmg / ml
2mg/mi2mg / mi
2mg/mi2mg / mi
Acide l-maftqueL-maftque acid
Acide glutariqueGlutaric acid
2mg/mt2mg / mt
2mg/ml 1 - : aucune inhibition (taille du prccaulôme >0,8 mm); +: faible inhibition (taille du procauiôme entre 0,2 et 0,8 mm); +-5-: forte inhibition (taille du procauiôme <0,2 mm)2mg / ml 1 -: no inhibition (size of prccaulôme> 0.8 mm); +: weak inhibition (size of the procauiôme between 0.2 and 0.8 mm); + -5-: strong inhibition (size of procauiôme <0.2 mm)
La Figure 1 présente les photographies représentatives des effets obtenus sur la croissance de Striga hermonb'ca en boite de microtitration en présence du surnageant de la souche A. brasiïense L4 cultivée en Nfb* et d'acide L-malique à 2mg/mL dans du tampon phosphate et met en évidence leur effet inhibiteur sur la croissance des procauiômes des plantes holo ou hémiparasites.Figure 1 presents the photographs representative of the effects obtained on the growth of Striga hermonb'ca in a microtiter dish in the presence of the supernatant of the strain A. brasiïense L4 cultivated in Nfb * and of L-malic acid at 2 mg / ml in phosphate buffer and highlights their inhibitory effect on the growth of procauiomas of holo or hemiparasitic plants.
La Figure 2 met en évidence l'impact du surnageant de la souche 4, brasilense L4 sur le pourcentage de germination des graines de Striga hermontica et Orobanche ramosa (A) et sur la longueur du procaulôme des graines de Striga hermontica et Orobanche ramosa (B),Figure 2 highlights the impact of the supernatant of the strain 4, brasilense L4 on the percentage of germination of the seeds of Striga hermontica and Orobanche ramosa (A) and on the length of the procauloma of the seeds of Striga hermontica and Orobanche ramosa (B ),
Conclusion : La capacité du surnageant de culture de la souche bactérienne, AzQSpiriîium brasilense L4, déposée, sous le numéro ï-4830 auprès de la CNCM (Collection Nationale de Cultures de Microorganîsmes, France), à stopper l'élongation des procaulômes des plantes holoparasites Striga et Orobanche in vitro (bioessais en boîtes de microtitration, Figures 1 et 2) et à inhiber ia croissance de Striga dans des cultures de sorgho dans des microcosmes en conditions contrôlées (Bouillant et al., 1997, C. R. Acad. Sci. 320: 159-162) a été observée. Les molécules impiiquées dans cet effet ont été isolées, par une méthode chromatographique appropriée, puis identifiées par spectrométrie de masse par comparaison à des standards chimiques. Il a également été démontré que différents acides dicarboxyliques sont efficaces, pour lutter contre la croissance de plantes holo ou hémiparasites, de l'ordre des Scrophulariales, et en particulier de Striga et/ou Orobanche (Tableau 1).Conclusion: The capacity of the culture supernatant of the bacterial strain, AzQSpiriium brasilense L4, deposited, under the number ï-4830 with the CNCM (National Collection of Cultures of Microorganisms, France), to stop the elongation of the procaulomas of holoparasite plants Striga and Orobanche in vitro (bioassays in microtiter boxes, Figures 1 and 2) and to inhibit the growth of Striga in sorghum cultures in microcosms under controlled conditions (Bouillant et al., 1997, CR Acad. Sci. 320: 159-162) has been observed. The molecules involved in this effect were isolated, by an appropriate chromatographic method, then identified by mass spectrometry by comparison with chemical standards. It has also been shown that different dicarboxylic acids are effective in combating the growth of holo or hemiparasitic plants, of the order Scrophulariales, and in particular Striga and / or Orobanche (Table 1).
2. Des graines de Striga hermontica (environ 100 graines/pot) et de sorgho (1 graine/pot) ont été introduites simultanément dans des mésocosmes de sol, en présence de doses croissantes d'acide malique (2 et 20 g/L) ou du surnageant de culture, puis mises en culture en serre ou sur parcelle.2. Seeds of Striga hermontica (about 100 seeds / pot) and sorghum (1 seed / pot) were introduced simultaneously into soil mesocosms, in the presence of increasing doses of malic acid (2 and 20 g / L) or culture supernatant, then cultured in a greenhouse or on a plot.
L'émergence des plants de Striga est estimée visuellement, après 2 mois dlncubation. Le pouvoir phytotoxique est estimé par comparaison avec un témoin sans apport d'acide malique ou de surnageant de culture. Une réduction de 22% du nombre de plants de Striga ayant émergé par rapport à ia condition témoin, est observée en présence d'acide malique 2 g/L et de 90% en présence d'acide malique 20 g/L. En présence du surnageant bactérien, une diminution de 58% du nombre de Striga par rapport à la condition témoin a été observée.The emergence of Striga plants is estimated visually, after 2 months of incubation. The phytotoxic power is estimated by comparison with a control without addition of malic acid or culture supernatant. A reduction of 22% in the number of Striga plants that emerged compared to the control condition is observed in the presence of malic acid 2 g / L and by 90% in the presence of malic acid 20 g / L. In the presence of the bacterial supernatant, a 58% decrease in the number of Striga compared to the control condition was observed.
3. RESULTATS SUR L'EFFET PHYTOSTIMULANT3. RESULTS ON THE PHYTOSTIMULATING EFFECT
L'effet phytostimulateur de la souche bactérienne, Azospiriilum brasitense L4, déposée, sous le numéro 1-4830 auprès de la CNCM (Collection Nationale de Cultures de Microorganismes, France) est présenté dans Souillant et al., 1997 C. R. Acad. ΙΠ ScL Vie 320:159-162.The phytostimulatory effect of the bacterial strain, Azospiriilum brasitense L4, filed under number 1-4830 with the CNCM (National Collection of Cultures of Microorganisms, France) is presented in Souillant et al., 1997 C. R. Acad. ΙΠ ScL Vie 320: 159-162.
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